PT97263B

PT97263B - Processo para a preparacao de monoamidas de dtpa e de composicoes farmaceuticas que as contem

Info

Publication number: PT97263B
Application number: PT97263A
Authority: PT
Inventors: Bernd Raduchel; Heribert Schmitt-Willich; Heinz Gries; Gabriele Schuhmann-Giampieri; Hubert Vogler; Jurgen Conrad; Hans-Joachim Weinmann; Erich Klieger
Original assignee: Schering Ag
Priority date: 1990-04-06
Filing date: 1991-04-05
Publication date: 1998-08-31
Also published as: DK0450742T3; IE65923B1; IE911155A1; US20030202943A1; EP0450742A1; ZA912550B; DE59102092D1; US5859214A; ES2057746T3; FI911646A0; FI911646A7; US7074387B2; FI911646L; DE4011684A1; AU7418691A; PT97263A; EP0450742B1; US6287538B1; JPH0665174A; NO180582B

Description

Descrição referente à patente de invenção de SCHERING AKTIENGESELLSCHAFT, alema, industrial e comercial, com sede em Berlim e Bergkamen (endereço postal: 170-178 Mullerstrasse, Berlim 65), Republica Federal Alema, (inventores: Dr. Heinz Gries, Dr. Erich Klieger, Dr. Bernd Raduchel, Dr. Heribert Schmitt-Willich, Dr. Hanns-Joachim Weinmann, Dr. Hubert Vogler, Dr. Gabriele Schuhmann-Giampieri e Dr. Jurgen Conrad, residentes na República Federal Alema), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE MONOAMIDAS DE DTPA E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTÊM

DESCRICÃO

A invenção refere-se aos objectivos definidos nas reivindicações da patente, isto e a novas monoamidas do ácido dietileno triaminopentaacetico (DTPA), a complexos de aminoamidas de DTPA, a meios de diagnóstico que contêm estes compostos, à sua utilização no diagnóstico por NMR, bem como a processos para a preparaçao destes compostos e meios de diagnóstico.

Os complexos metálicos têm sido utilizados, já desde o início dos anos 50, como meios de contraste para radiologia. Os compostos empregues nessa altura eram contudo de tal maneira tóxicos que a sua utilização em seres humanos nao era viável. Era assim surpreendente que determinados sais complexos se tenham revelado suficientemente

SB

assimiláveis de modo a tornar possível o seu emprego em seres humanos como método de rotina para fins diagnósticos. Como primeiro representante desta classe de compostos, revelou-se muito útil como meio de contraste para a tomografia de ressonância nuclear, o sal de dimegluminio de DTPA de Gd (complexo de gadolínio III do ácido dietilenotriaminopentaacético) descrito no registo de patente europeu com o n^e de publicação 71564. Encontra-se registado em todo o mundo com o nome MagneZ η λ vist^k , como primeiro meio de diagnóstico por NMR.

( R )

Magnevist' ' é particularmente bem adequado para o diagnóstico de áreas patológicas (por exemplo inflamações, tumores, enfartes, etc). Após injecção intravenosa o composto distribui-se extracelularmente e é eliminado por secreção glomerular nos rins. Nao se observam praticamente passagens de membranas celulares intactas nem eliminação extra-renal.

Em especial para pacientes com função renal diminuída, nos quais o Magnevist' ' apenas é eliminada muito lentamente e, em parte, apenas se pode eliminar do organismo com recurso a um aparelho de diálise, será desejável o emprego de meios de contraste que apresentem uma eliminação extra-renal pelo menos apenas parcial. Existe assim a necessidade de encontrar meios de diagnóstico para NMR que apresentam um comportamento farmacológico diferente do do

Z R \

Magnevist' '.

Foi por isso um objectivo da invenção o de pôr à disposição compostos deste tipo e meios de diagnóstico, bem como um processo para a sua preparaçao, o que foi conseguido com a presente invenção.

Verificou-se então que os compostos de acordo com a invenção apresentam surpreendentemente as propriedades desejados: tanto uma eliminação renal como ainda uma excreção por via fecal apos administraçao parenteral. Surpreendentemente a eliminação através de vesícula nao é contudo a unica eliminação extra-renal: em testes de NMR em

ratos verificou-se apos administraçao intravenosa dos compostos de acordo com a invenção um aumento inesperado de contraste no tracto gastrointestinal, isto é, estes compostos sao apropriados tanto para o diagnóstico por NMR de órgão específicos do sistema hepatobiliar como de estômago. Os rins bem como tumores implantados sao também contrastados.

Surpreendentemente, os compostos complexos de acordo com a invenção sao também absorvidos após aplicaçao oral sendo a seguir eliminados pelas vias hepatobiliares, isto e sao também apropriados para meios de contraste orais para o fígado.

Um fenómeno deste tipo nao foi até agora descrito para nenhum meio de contraste para tomografia de spin nuclear. A eliminação (secreção) através do estômago tem a vantagem de permitir uma limitaçao de estruturas abdominais (p. ex. pâncreas) do tracto gastro-intestinal com um aumento simultâneo de contraste dos processos patologicos (tumores, inflamações). Pode ainda conseguir-se uma representação do sistema renal, do fígado e de vesícula biliar e das vias biliares, bem como dos gânglios linfáticos. Para além de uma melhor representação de ulceras e carcinomas do estômago pode ainda efectuar-se um exame da secreção do estômago por meio de processos imagisticos.

Através da utilização dos compostos acima mencionados pode, para alem do diagnóstico do sistema hepatobiliar, ajudar-se pacientes com insuficiência renal ou sofrendo de doenças gastrointestinais (pelo menos 10% da populaçao dos países industrializados ocidentais) . A maior parte destes pacientes bem como um grande número de pacientes com suspeitas de tais doenças, necessitam de sujeitar-se a exames diagnósticos. Actualmente existem, para doenças gastrointestinais, principalmente dois métodos usuais adequados para esse fim, a endoscopia e o radio-diagnóstico com meis de contraste de bário.

Estes métodos de diagnóstico apre3

, sentam varias desvantagens: têm o risco de uma sobrecarga de radiaçao, sao traumáticos, apresentam riscos eventuais de rejeição para o paciente e podem por isso provocar stress fisiológico. Têm muitas vezes de se efectuar repetidamente, sao relativamente demoradas, necessitam de colaboração activo de paciente (por exemplo, tomado de uma determinada posição corporal) e nao sao muitas vezes aplicáveis a doentes débeis ou de alto risco.

objectivo de conseguir novos meios de diagnostico para o reconhecimento e localizaçao de doenças gastrointestinais, que nao possuam estas desvantagens, é assim completamente atingido com a utilização dos compostos complexos assim mencionados e dos respectivos meios de diagnósticos que os contêm.

Mesmo sem medidas específicas farmacocinética destes compostos permite o melhoramento do diagnóstico de numerosas doenças. Os complexos sao eliminados na maior parte inalterados e rapidamente de modo que, mesmo em particular no caso da utilização de ioes metálicos relativamente tóxicos e em elevadas doses nao se observam quaisquer efeitos prejudiciais.

A aplicaçao prática dos novos complexos e também facilitada pela sua conveniente estabilidade quimica.

Os compostos de acordo com invenção caracterizam-se pela fórmula geral I .2

XOOCCH, ch₂coox

CH„CON

NCH-CH ——N —CH,

CH, xoocch₂ ch₂coox (I)

na qual * *

Z e Z significam cada um um átomo de hidrogénio ou o grupo

-<^CH2>m-<^C6^H4>q-⁽⁰>k-<^CH2?n-<^C6^H4^:,l-^<:0:ir-^R· em que

V.

K, 1, q e r significam os numeros 0 e 1, e m e n significam os numeros 0 - 20,

R significa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo-C^C^ eventualmente substituído por 0R^, ou um grupo CH„COOR , , ^z significando R um atomo de hidrogénio, um grupo alquilo-C^C-C, ou um grupo benzilo,

R significa um grupo alquilo com ate 20 átomos de carbono, saturado ou insaturado, linear ou ramificado ou cíclico, substituído por um grupo carboxilo ou sulfono esterificado com um grupo benzilo ou alquilo -C^-Cg, ou um grupo arilo ou arilalquilo,

R significa um atomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com até 20 átomos de carbono, saturado ou insaturado, linear ou ramificado ou cíclico, eventualmente substituído por um grupo carboxilo ou sulfono esterificado por um grupo benzilo ou alquilo-C, ou um grupo arilo ou arilalquilo,

X significa um átomo de hidrogénio e/ou um equivalente íonico metálico de um elemento do número atómico 21-29, 31, 32,

37-40, 42-44, 49 ou 57-83, com a condição de pelo menos 12* um dos substituintes Z e Z ser um atomo de hidrogénio, de quando n e 1 significam cada um o número 0, k e r nao significam ao mesmo tempo o número 1 e, caso se deseja, os grupos ácidos se encontrarem na forma de ester ou de amida, bem como dos respectivos sais com bases inorgânicas e/ou orgânicas, aminoácidos ou amidas de aminoácidos.

Os compostos de formula geral I em que X significa hidrogénio designam-se por complexantes e quando pelo menos dois dos substituintes X significam um equivalente iónico metálico designam-se por complexos metálicos.

elemento de número atómico acima

,7 ,«>' indicado, que forma o iao central do sal complexo fisiologicamente assimilável, pode naturalmente, para as finalidades mencionadas dos meios de diagnóstico de acordo com a invenção, ser também um elemento radioactivo.

Se o meio de diagnóstico de acordo com a invenção se destinar a aplicaçao em diagnóstico por NMR, o ião central do sal complexo deve ser paramagnético. É em particular os caso dois ioes di-ou tri-valentes dos elementos de numero atomico 21-29, 42, 44 e 58-70. Ioes adequados sao, por exemplo, crómio (III), manganês (II), ferro (II), cobalto (II), níquel (II), cobre (II), praseodimio (II), neodímio (III), samário (III) e itérbio (III). Devido ao seu forte momento magnético preferem-se em especial os ioes gadolínio (III), térbio (III), hólmio (III), érbio (III) e ferro (III).

Para utilização dos meios de diagnóstico de acordo com a invenção em medicina nuclear o iao central deve ser radioactivo. Sao apropriados por exemplo os radioisótopos dos elementos cobre, cobalto, gálio, germânio, ítrio, estrônico, tecnécio, índio, itérbio, gadolínio, samário e irídio.

Se o meio de diagnostico de acordo com a invenção se destina a aplicaçao em diagnóstico radiológico, o iao central deve ser derivado de um elemento de número atómico elevado, de modo a garantir uma absorçao suficiente dos raios X. Descobriu-se que os meios de diagnóstico para este fim, que contêm um sal complexo fisiologicamente assimilável com ioes centrais dos elementos de números atómicos entre 21-29, 42, 44 e 57-83, sao adequados; é por exemplo o caso do iao lantânio (III) e dos ioes da série dos lantamídeos acima mencionados.

Os números men sao, de preferência, de 0 a 5.

Como substituintes alquilo R, R^· ·* e R , referem-se grupos lineares ou ramificados com ate 6, de preferência até 4, átomos de carbono, que, no caso de R,

podem estar eventualmente substituídos por um ou mais, de preferência 1 a 3, grupos hidroxilo ou alcooxilo-C^-C^, de preferência C-^-C^.

Como grupos alquilo, eventualmente substituídos, referem-se, po exemplo, os grupos metilo, hidroximetilo, etilo, 2-hidroxietilo , 2 ,-hidroxi-1-(Hidroximetil) etilo, l-(hidroximetil)-etilo, propilo, isopropilo, 2- e 3hidroxipropilo , 2,3-di-hidroxipropilo , n-, sec- e ter-butilo , 2,3- e 4-hidroxibutilo,, 2-, e 3-hidroxi-isobutilo , pentilo, 2-, 3- e 4-hidroxi-2-metilbutilo, 2,3,4-tri-hidroxibutilo ,

1,2,4-tri-hidroxibutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, 2,3,4,5,6-penta-hidroxi-hexilo, bem como, no caso dos grupos hidroxialquilo, os respectivos derivados alquilados-C^-C^, de preferência C C ₄ *

Como grupos arilo e arilalquilo

3

R e R preferenciais refererem-se os grupos fenilo, benzilo e isopropilfenilo.

2

Substituintes Z ou Z preferenciais sao os grupos -CI^-CgH^-OH-, -CI^-CgH^-OCHg-, C^-C^H^-,

-ch₂-c₆h₄-o-ch₂-c₆h₄-och₃-, -ch₂-o-ch₂-c₆h₅-, -ch₂-c₆h₄-o-CH₂-C00H-, -CH₂-C₆H₄-OC₂H₅-, -CH₂-C₆H₄-OC₄H_g-, -CH^-CgH^-o-ch₂-c₆h₅.

3

Como grupos R e R eventualmente substituídos por um grupo carboxilo ou sulfono esterificado com um grupo benzilo ou alquilo-C^-C^, de preferência C|-C₄(R^), ou por um destes grupos ácidos esterifiçados (R^), referem-se grupos alquilo com até 20 átomos de carbono, de preferência com 5 a 18 átomos de carbono, saturados ou insaturados lineares, ramificados ou ciclicos, e grupos arilo e arilalquilo .

Referem-se por exemplo os grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, pentilo, hexilo, fenilo, benzilo, 4-carboxifenileno, 1-ciclo-hexil-l-carboxílico, 1-ciclopentil-l-carboxilico , 2-carboxifenileno, 11-carboxi-1-undecilo, 10-carboxi-l-decilo, 7-carboxi-l-heptilo, 6-carbo7 xi-l-hexilo, 5-carboxi-l-pentilo, 4-carboxibenzilo, 4-carboxi-1-ciclo-hexilmetilo , 4-carboximetilfenileno, 4(1,1-dimetilcarboximetileno)-fenileno, 4-sulfofenileno, 10-sulfo-l-decilo, 8-sulfo-l-octilo, 17-carboxi-7-heptadecilo, 7-carboxi-2-heptilo l-carboxi-4-fenil-2-propilo, 2-carboxietilo, 4-carboxi-4-buteno-l-ilo.

Os restantes átomos de hidrogénio ácidos, isto é, aqueles que nao foram substituídos pelo iao central, podem, conforme o caso, ser total ou parcialmente substituídos por catiões de bases inorgânicas e/ou orgânicas ou de aminoácidos. Os grupos ácidos correspondentes podem também estai total ou parcialmente transformados em ésteres ou amidas.

Catiões inorgânicos apropriados sao por exemplo os ioes lítio, potássio, cálcio, magnésio e, em especial, sodio. Catiões adequados de bases orgânicas sao, entre outros, os de aminas primárias, secundárias ou terciárias, como por exemplo etanoamina, dietanolamina, morfolina, glucamina, N, N-dimetilglucamina e, em especial, N-metilglucamina. Catiões adequados de aminoácidos sao por exemplo os de lisina, arginina e ornitina bem como as amidas de outras aminoácidos ácidos ou neutros.

Ésteres apropriados sao de preferência aqueles que têm um grupo alquilo -C^-Οθ; referem-se por exemplo os que têm um grupo metilo, etilo e butilo terciário, benzilo e 4-metoxibenzilo.

No caso dos grupos carboxilo existirem pelo menos parcialmente como amidas, referem-se os que têm grupos alquilo com até 5 átomos de carbono, saturado ou insaturados, lineares, ramificados ou cíclicos, que podem estar eventualmente substituidos por 1 a 3 grupos hidroxiio ou alcooxllo-C^-C^. Referem-se por exemplo os grupos metilo etilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxi-l-(hidroximetil)-etilo, 1-(hidroximetil)-etilo, propilo, isopropenilo, 2-hidroxipropilo,

3-hidroxipropilo, 2,3-di-hidroxipropilo, butilo, isobutilo,

-«/ί/¹·*· isobutenilo, 2-hidroxibutilo, 3-hidroxibutilo, 4-hidroxibutilo, 2-,3- e 4-hidroxi-2-metilbutilo, 2- e 3-hidroxi-isobutilo,

2,3,4-tri-hidroxibutilo, 1,2,4-tri-hidroxibutilo, pentilo, ciclopentilo e 2-metoxietilo. 0 grupo amido pode também ser um anel heterocíclico de 5 ou 6 membros que inclui o átomo de azoto da amida. Referem-se por exemplo o anel de pirrolidinilo, piperidilo, pirazolidinilo, pirrolinilo, pirazolinilo, piperazinilo, morfolinilo, imidazolinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo.

Os compostos de acordo com a invenção apresentam as propriedades desejadas referidas no início. Além disso, a assimilibilidade das monoamidas de acordo com a invenção é surpreendentemente maior do que a das bisamidas correspondentes. Assim, por exemplo, o valor LD^q (^em ratazanas) do composto do exemplo lb) é superior por um factor 3 ao valor correspondente da bisamida ja conhecida (DE-OS 34 01 052.1, exemplo 2). De acordo com o estado da técnica era de esperar pelo contrário uma diminuição do valor de assim, por exemplo, o valor LD^g(rato) ou LD^(ratazana) da bisamida do complexo de gadolínio do ácido N -carboximetil3 9

-N ,N -bis(2,3-di-hidroxipropil-N-metil-carbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecanodicarboxilico [jPatente Europeia, n^e de publicação 0 130 934, exemplo 6a] desce de 50% ou 30% no caso da

2 monoamida correspondente (fórmula I, Z =Z =H, R = -CI^CHCOH) ch₂oh, r³ = ch₃).

A introdução de grupos amido para a preparaçao de complexantes, isto é, de compostos de fórmula geral I, em que X significa hidrogénio, efectua-se por transformação parcial de grupos carboxilo activados em grupos amido, dos ácidos pentacarboxílicos apropriados, de acordo com o produto final pretendido. Para este processo podem utilizar-se todos os métodos de sintese conhecidos do especialista.

Um exemplo de síntese é a reacçao de anidridos ou ésteres de fórmulas gerais II e III

HOOCCH₂

I

N I

HOOCCH₂ ζ¹ ζ² CH₂COOH ch₂cor⁴III I

CH-CH-N CH^—CHj—N

I

CH₂COOH

II

HOOCCH, z¹

I

CH

Z

-CHCH₂C00H /\ .N._CH₂_CH₂_N O

R OOCCH,

III nas quais 1 2

Z e Z possuem os significados acima mencionados,

R e o substituinte de um grupo carbonilo activado ou significa OR⁵ e

R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo~^C1^_C6;

com aminoácidos de fórmula geral IV

HN

IV γ

na qual

3

R e R possuem o's significados acima mencionados.

Como exemplos de um grupo carbonilo activado referem-se anidridos mistos (como p.ex. ésteres do ácido clorofórmico) e o produto de adiçao a carbodiimidas, p.ex. diciclohexilcarbodiimida (DCC).

Como aminoácidos apropriados referem-se por exemplo os seguintes:

acido 4-aminobenzóico, ácido 1-aminociclo-hexano-l-carboxílico, ácido 1-aminociclopentano-l-carboxílico, ácido 2-aminobenzóico, ácido 12-aminododecanóico, ácido 11-aminoundecanóico, ácido 8-aminooctanóico, acido 7-amino-heptanóico, acido 6-amino-hexanóico, ácido 4-aminometilbenzóico, ácido trans-4-(aminoetil)-ciclo-hexano-carboxílico, ácido ácido x,x-dimetil-p-aminofenilacético, ácido 10-aminodecano-l-sulfónico, ácido 8-aminooctano-l-sulfónico, acido 12-aminooctadecanóico, ácido 2-aminooctanóico, ácido 2-amino-4-fenilbutírico, ácido iminodietanóico, ácido N-metilaminobenzeno-4-sulfónico, ácido 12-metilaminododecanóico, acido 2-amino-4-pentanóico.

p-aminofenilacetico, ácido sulfanílico,

A saponificaçao de grupos ester eventualmente ainda presentes efectua-se de acordo com processos conhecidos do especialista, por exemplo através de hidróise alcalina.

A preparaçao dos monoanidridos de fórmula geral III com R = alquilo -C^-C^, encontra-se descrito no exemplo de monoanidrido do éster etílico do ácido dietilenotriaminopentaacético, a partir do éster monoetílico da DTPA (J. Pharm. Sei. 68, 1979, 194).

A preparaçao dos monoanidridos de fórmula geral III com R = H efectua-se de acordo com métodos conhecidos do especialista (vide também as partes experimentais) por meio de saponificaçao parcial dos bisanidridos correspondentes, nao sendo necessário o isolamento dos monoanidridos assim formados.

l·· ,“'' ^e'^;íS!aÍ*«aBi>

-N -(etoxicarbonilmetil)-3,5-diazaoctanodióco ' '^-fcrsjrT ,:*'-

Ácido N -(2,6-dioxomorfolinoetil)Deixa-se em repouso a temperatura ambiente durante 3 dias uma suspensão de 21,Ig (50 mMol) de 3 6 9 ácido N ,N -bis-(carboximetil)-N-(etoxicarbonilmetil)-3,6,9-triazaundecanodióico em 250 ml de anidrido acético, após adiçao de 42,2 ml de piridina. Filtra-se depois o precipitado, lava-se 3 vezes com 50 ml de anidrido acético de cada vez e agita-se em seguida durante várias horas com éter dietílico absoluto. Após filtraçao, lavagem com éter dietílico absoluto e secagem em vácuo a 40°C, obtêm-se 18,0 g (=89% do rendimento teórico) de um pó branco de ponto de fusão 195-196°C.

Análise (relativa à substância anidra):

Calculado: C47,64 H 6,25 N 10,42 Encontrado:C47,54 H 6,30 N 10,22

A transformaçao dos anidridos de ácido em amidas efectua-se em fase líquida. Meios reaccionais apropriados sao por exemplo água, solventes dipolares aproticos como acetonitrilo, N-metilpirrolidona, dimetilformamida, dimetilacetamida e compostos análogos ou misturas destes. As temperaturas de reacçao situam-se cerce de 0°C e 100°C, preferindo-se temperaturas entre 20 e 80°C. Os tempos de reacçao variam de 0,5 horas a 2 dias, de preferência de 1 hora a 36 horas.

A preparaçao dos ésteres de fórmula geral II efectua-se de modo conhecido, p.ex. de acordo com o método descrito por A.A. Guilmette et al. , J. Pharm. Sei. 68, 194 (1979).

A aminólise dos ésteres efectua-se em fase líquida, p.ex. num solvente de alto ponto de ebulição adequado com dimetilformamida, dimetilacetamida ou sulfóxido dimetílico. As temperaturas de reacçao situam-se entre cerca de 20°C e 200°C, preferindo-se temperaturas de 100°C a 180°C. Os tempos de reacçao situam-se entre 2 horas e 2

dias, preferindo-se tempos de reacçao entre 4 horas e 36 horas.

Além disso podem utilizar-se todos os métodos conhecidos do especialista para a transformaçao de grupos carboxilo em grupos amido, para a síntese dos agentes complexantes de fórmula geral I de acordo com a invenção, como p. ex. o método de Krejcarek e Tucker, Biochem. Biophys. Res. Commun 77 , 581 (1977), respeitante a anidridos mistos. Outros métodos para a transformaçao de grupos carbonilo activados encontram-se descritos p.ex. no J. Nucl. Med. 24, H58 (1983), Bioconjugate Chem. 1_, 65 (1990), Org. Prep. Proc. Int, 7, 215 (1975), Adv. Org. Chem. Part B, 472 e Fieser, Reagents or Organic Synthesis 10, 142 (carbodiimidas).

A preparaçao dos compostos necessário como substâncias de partida para os anidridos ou ésteres

12C-substituídos (isto é um dos substituintes Z e Z £ hidrogénio), de fórmulas gerais II e III, efectua-se transformando de um modo em si conhecido compostos de fórmula geral V r⁶oocch2 z³ z⁴ ch2coor⁶

I I I I

N-CH-CH-N-—CH₂~ r⁶oocch₂ ch₂coor⁶

I .CH₂_N ch₂coor⁶ (V), na _n6 qual e um grupo protector de ácido 4 e Ζ representam cada um deles um atomo um grupo -(CH₂) -(C^-H^) -OH, com um dos substituintes Z e Z ser um nio e o outro o grupo mencionado.

de hidrogénio ou a condição de átomo de hidrogenum composto em que Z e Z sao o grupo indicado, e removendo depois o grupo protector de ácido, R^, ;75VE7a^;_T;_ra;_

Como grupos protectores de ácido β

R referem-se grupos alquilo, arilo e arilalquilo de cadeia pequena, por exemplo o grupo metilo, etilo, propilo, n-butilo, t-butilo, fenilo, benzilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, bis-(p-nitrofenil)-metilo, bem como grupos trialquilsililo.

A remoção dos grupos protectores r6 efectua-se de acordo com os processos conhecidos do especialista [p. ex. E. Wunsch, Methoden der Org. Chemie (Houben-Weyl) , Bd. XV/l, 4. Aufl. 1974, S 315 ff3 , por exemplo por hidrólise, hidrogenólise ou saponificaçao alcalina dos ésteres em solução aquosa-alcoólica básica, a temperatura de 0 a 50°C. Para a removaçao dos ésteres ter-butílicos partícularmente vantajosos para as presentes reacções, utilizam-se ácidos orgânicos ou inorgânicos: 0 ester dissolvido num solvente orgânico anidro adequado, de preferência contudo a substância seca em po, faz-se reagir com uma solução de halogeneto de hidrogénio em acido acético, com ácido trifluoroacético ou ainda com dietileterato de trifluoreto de boro em ácido acético, e cinde-se a temperaturas de - 20°C a 60°C, de preferência à temperatura ambiente.

Os compostos de fórmula geral V utilizados como eductos para a preparaçao dos compostos complexos de acordo com a invenção sao conhecidos (DOS 3 710 730 ou literatura aqui citada) ou podem sintetizar-se de acordo com os processos de preparaçao aí descritos.

Para a reacçao dos compostos hidroxilados alifáticos ou aromáticos conhecidos transformandoos nos eteres arilalquílicos ou dialquílicos correspondentes existe uma serie de métodos conhecidos da literatura (p. ex. J. March. Advanced Organic Chemistry, third edition 1985, S, 342 ff).

Para tal dissolvem-se os compostos de fórmula V, em que é um grupo protector de acido estável em meio básico, num solvente aprótico apoiar, como p. ex.

tetra-hidrofurano, dimetoxietano ou sulfóxido dimetílico,

e fazem-se reagir com uma base, p.ex. hidreto de sódio, hidróxido de sódio ou carboneto alcalinos ou alcalino terrosos, a temperaturas entre -30°C e o ponto de ebulição do solvente empregue, de preferência contudo entre 0°C e 60°C.

Para tal utiliza-se um composto de fórmula geral VI

Y-(CH₂)_n-(^c6^H4)i-(°)_r-^E (VI) na qual Y é um grupo nucleófogo, como p.ex. Cl, Br, I, CH^-C^H^SOg ou CFgSOg e os restantes indices têm o mesmo significado que na formula geral I.

Os tempos de reacçao variam, conforme o impedimento estereoquímico dos grupos participantes, de 30 minutos a 8 horas.

Em alternativa as condiçoes reaccionais acima descritas podem preparar-se ésteres arialalquílicos ou dialquilicos vantajosamente por catálise de transferência de fase (starks and Liotta, Phase Transfer Catalysis, Academic Press, N.Y. 1978, S. 128-138).

Para tal efectua-se a reacçao numa mistura bifasica de uma base aquosa, de preferência hidróxido de sódio a 30%, e um solvente aprotico orgânico nao miscivel com água. Como catalisadores de transferência de fase referem-se compostos conhecidos do especialista, de preferência contudo sais de tetraalquilamónio ou tetraalquilfosfónio.

Se se pretender sintetisar compostos de formula geral I com k, η, 1, e r = 0(zero) e R significando um atomo de hidrogénio, é possível efectuar a síntese de modo análogo aos métodos descritos na literatura, a partir dos aminoâcidos nao substituintes correspondentes (p.ex. fenilalamina).

Contudo, para a síntese de uma série de compostos análogos, é aconselhável a preparaçao dos derivados fenólicos descrita na DOS 3710 730 e a remoção redutiva da função fenólica de acordo com processos conhecidos da literatura. Refere-se principalmente a redução de fosfatos aril-dietílicos com titânio, que se pode também efectuar muito vantajosamente na presença de grupos ésteres [S.C. Welch et al. , J.Org. Chem. 43 4797-99 (1978) e literatura ai citada^. Neste processo forma-se em primeiro lugar o fosfato aril-dietílico correspondente, a partir de educto fenolico por reacçao com cloreto de éster dietílico do ácido fosforico, com um rendimento de 70 a 100%, de preferência utilizando hidreto de sódio como base num solvente aprotico polar. Em seguida efectua-se a redução com titânio metálico recentemente preparado. De preferência, para a preparaçao de titânio altamente reactivo, reduz-se cloreto de titânio (III) anidro com magnésio ou potássio em tetrahídrofurano anidro sob atmosfera de gás inerte.

A uma mistura deste tipo adiciona-se o fosfato dietílico acima descrito e aquece-se sob refluxo durante 2 a 24 horas, de preferência durante 6 a 18 horas. Terminada a reacçao trata-se eventualmente a mistura por cromatografia. Também se pode empregar a redução catalisada por paládio dos triflatos arilicos correspondentes, de acordo com S Cacchi et al., Tetr. Lett. 27 , 5541-44 (1986).

Os compostos finalmente assim obtidos, de fórmula geral I com X significando um átomo de hidrogénio, sao os agentes complexantes. Podem isolar-se e purificarse ou podem transformar-se, sem isolamento, em complexos metálicos de fórmula geral 1 com pelo menos dois dos substituintes X significando um equivalente ionico metálico.

A preparaçao dos complexos metálicos de acordo com a invenção efectua-se do modo descirto no registo de patente alemao 34 01 052, dissolvendo ou suspendendo o oxido metálico ou um sal metálico (por exemplo o nitrato, acetato, carbonato, cloreto ou sulfato) do elemento de número ,t*i' atomico 21-29, 42, 44, 57-83, em água e/ou num álcool de baixo peso molecular (como metanol, etanol, ou isopropanol) e fazendo-o reagir com a solução ou suspensão da quantidade equivalente do ligando complexante e, em seguida, caso se deseje, substituindo os átomos de hidrogénio ácidos presentes por catiões de bases inorgânicos e/ou orgânicos ou de aminoácidos.

A neutralizaçao de grupos ácido livres eventualmente ainda presentes efectua-se por meio de bases inorgânicos (por exemplo hidróxidos, carbonatos ou bicarbonatos) de, por exemplo, sódio, potássio, lítio, magnésio ou cálcio e/ou bases orgânicas como, entre outras, aminas primárias, secundárias e terciárias, como por exemplo etanolamina, morfolina, glucamina, N-metil - e Ν,N-dimetil-glucamina, bem como aminoácidos básicos, como por exemplo lisina, arginina e ornitina ou amidas de aminoácidos originalmente neutros ou ácidos.

Para a preparaçao do compostos complexos neutros pode por exemplo adicionar-se aos sais complexos ácidos, em solução aquosa ou suspensão, a base desejada em quantidade tal que se atinja a neutralidade. A solução obtida em seguida concentrar-se em vácuo até à secura. É frequentemente vantajoso precipitar os sais neutros formados por adiçao de solventes misciveis com água, como por exemplo álcoois de baixo peso molecular (metanol, etanol, isopropanol e outros), cetonas de baixo peso molecular (acetona e outras), éteres polares (tetra-hidrofurano, dioxano, 1,2-dimetoxietano e outros) , para se obterem cristais fáceis de isolar e de purificar. Revelou-se particularmente vantajoso adicionar a base desejada a mistura reaccional logo durante a formaçao do complexo, poupando-se assim um passo do processo.

No caso de os compostos complexos ácidos conterem vários grupos ácido livres, é muitas vezes conveniente preparar sais mistos neutros que contenham como contra-ioes catiões tanto inorgânicos como orgânicos.

Isto pode acontecer-se por exemplo ,Χ' ,/misturando os ligandos complexantes em suspensão ou solução aquosa com o óxido ou o sal do elemento que fornece o iao central e com metade da quantidade de uma base orgânica necessária para a neutralizaçao, isolando o sal complexo formado, purificando-o conforme o caso, e misturando-o depois com a quantidade de uma base inorgânica necessária para a neutralizaçao completa. A ordem da adiçao de bases pode também ser a inversa.

Uma outra possilibidade de obter compostos complexos neutros consiste em transformar parcial ou totalmente os grupos ácido restantes no complexo em, por exemplo, ésteres ou amidas. Isto pode conseguir-se por reacçao subsequente no complexo pronto (p.ex. por reacçao total dos grupos carboxilo livre com sulfato dimetilico).

A preparaçao das composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção efectua-se também de modo em si conhecido, suspendendo ou dissolvendo os compostos complexos de acordo com a invenção - eventualmente com adiçao de aditivos usuais em galénica - em meio aquoso e esterilizando, conforme o caso, em seguida a suspensão ou solução. Aditivos apropriados sao por exemplo tampões fisiologicamente inofensivos (como por exemplo trometamina), aditivos complexantes (como por exemplo ácido dietilenotriaminopentaacético) ou, caso seja necessário, electrolitos como por exemplo cloreto de sódio ou, caso seja necessário, anti-oxidantes como por exemplo acido ascorbico.

Caso se pretendam, para administração enteral ou para outros fins, suspensões ou soluçoes dos agentes de acordo com a invenção em água ou em soro fisiológico, misturam-se estas com um ou mais adjuvantes usuais em galénica (por exemplo metilcelulose, lactose, manite) e/ou agentes tensíoactivos (por exemplo lecitina, Tween' Myrj^ ') e/ou aromatizantes para corecçao de sabor (por exemplo óleos etéricos).

É em princípio ainda possível prepa18 .fc.f-·:

rar as composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção mesmo sem isolar os sais complexos. Em qualquer caso, deve ter-se particular cuidado em efectuar a formaçao dos quelatos de modo a que os sais e soluçoes salinas de acordo com a invenção estejam praticamente livres de ioes metálicos nao complexados de acçao tóxica.

Isto pode garantir-se por exemplo com a ajuda de indicadores corados como xilenorange, por titulação de controle durante o processo de preparaçao. A invenção refere-se por isso também a processos para a preparação dos »

compostos complexos e dos seus sais. Gomo ultima medida de segurança efectua-se uma purificação do sal complexo isolado.

As composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção contêm de preferência 0,1 ^íMol - 1 jiMol de sal complexo e doseiam-se em geral em quantidades de o,l jiMol - 5mMol/kg. Destinam-se a aplicaçao enteral ou parenteral. Os compostos complexos de acrodo com a invenção podem utilizarse para:

1. Diagnostico por NMR em raios X na forma dos seus complexos com ioes dos elementos de numero atómico 21-29, 42, 44 e 57-83;

2. Radiodiagnóstico e radio terapia na forma dos seus complexos com radioisótopas dos elementos de número atómico 21, 27, 29, 31, 32, 37-40,

43, 49, 62-64, 70, 75 e 77.

As composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção preenchem os vários requisitos necessário a sua utilização como meios de contraste a tomografia de spin nuclear. Sao extraordinariamente adequados, após aplicaçao oral ou parenteral, para melhorar, por aumento da intensidade do sinal, a imagem obtida por tomografia de spin nuclear, aumentando assim o nivel de informação. Além disso, apresentam uma elevada eficacia, necessária para sobrecarga o corpo com uma quantidade tao pequena quanto possível de substâncias estranhas, e uma boa assimilibilidade desejável para manter

um carácter nao invasivo dos exames.

A boa solubilidade em agua e a baixa osmolalidade das composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção permite preparar soluçoes altamente concentradas que mantêm a sobrecarga de volume na circulação dentro de limites aceitáveis e aguentam a diluição pelos líquidos corporais, isto é, os meis de diagnóstico por NMR têm de ser 100 a 1000 vezes mais solúveis em água do que para espectroscopia > *» *·» de NMR. Alem disso, os composiçoes de acordo com a invenção apresentam nao só uma elevada estabilidade in vitro, mas também uma extraordinária estabilidade in vivo, de maneira que uma libertação ou permuta dos ioes nao covalentemente ligados aos complexos, que sao por si tóxicos, ao longo do tempo durante o qual os meios de contraste sao completamente eliminados, apenas ocorre muito lentamente.

Em geral os meios de diagnóstico de acordo com a invenção, para aplicaçao como diagnostico para NMR, doseiam-se em quantidades de 0,0001 - 5mMol de complexo de acordo com a invenção /Kg de peso corporal, de preferência 0,005 -0,5 mMol/Kg de peso corporal. Em injecção intravenosa utilizam-se formulações aquosas de concentrações 50 jimol/1 a 2 mol/1 de preferência 100 mmol/1 a 1 mol/1. Para aplicaçao rectal ou oral utilizam-se de preferência soluçoes de concentrações 0,1 mmol/1 a 100 mmol/1 ou utiliza-se o composto solido na gama de concentrações correspondente. Os volumes a aplicar variam conforme a finalidade do diagnóstico entre 5 ml e 2 1. Os detalhes de aplicaçao encontram-se discutidos por exemplo em H.J. Weinmann et al., Am. J. of Roentgenology 142 619 (1984).

Podem empregar-se dosagens especialmente baixas (abaixo de 1 mg/kg de peso corporal) de meios de diagnóstico para NMR específicos de órgãos, por exemplo para a detecçao de tumores e de enfartes cardíacos.

Além disso podem utilizar-se com vantagem os compostos complexos de acordo com a invenção como li ή_ fí' r/Mn·* ·.*· ⁿ -

reagentes de susceptibilidade ou como reagentes de marcaçao (shift) para a espectroscopia de NMR in vivo.

As composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção sao também apropriadas para radiodiagnóstico devido às suas boas propriedades radioactivas e à boa estabilidade dos compostos complexos nelas contidos. Os detalhes da sua aplicaçao e dosagem encontram-se descritos por exemplo em Radiotracers for Medicai Application, CRC-Press, Boca Raton, Florida,

Um outro método imagístico com radioisótopos é a tomografia de emissão de positroes, que

- ~ 43 utiliza isotopos emissores de positroes como p.ex. Sc, ^Sc, 52p_e, 55^0 _e ^®Ga (Heiss, W.D.; Phelps, M.E.; Positron

EEmission Tomography of Brain, Springer Verlag, Berlim, Heidelberg, New York, 1983).

Os compostos de acordo com a invenção podem ainda utilizar-se radioimunoterapia e na terapia por radiaçao. Estas distinguem-se dos meios de diagnostico correspondentes apenas pela quantidade e tipo de isótopo utilizado. 0 objectivo é nesse caso a destruição de células de tumores por meio de radiaçao de onda curta e alta energia numa área tao pequena quando possível. Ioes emissores β apro. , . 46_q 47 _Q 48_q 72_p 73_P 90_Y pnados sao por exemplo Sc, Sc, Sc, La, La, e Y. Ioes emissores eí com tempos de vida média baixos adequados sao por exemplo Bi, Bi, Bi, Bi, prefermdo-se

212 — — — z o Bi. Um iao adequado emissor de fotoes e electrões é o Gd que se pode preparar a partir do Gd por captura de neutrões.

No caso de a composição farmacêutica de acordo com a invenção se destinar à terapia com radiaçao na variante proposta por R.L. Mills et al. ^Nature Vol. 336, (1988), S. 787], o iao central deve ser derivado de um isótopo de MoÇsbauer como por exemplo ^^Fe ou ^^^Eu.

Na aplicaçao in vivo das composiçoes terapêuticas de acordo com a invenção, estes podem administrar21

-se juntamente com um veículo adequado como por exemplo soro ou solução salina fisiológica e/ou juntamente com uma outra proteína como por exemplo albumina de soro humano. A dosagem é nestes casos dependente do tipo da perturbação celular, do iao metálico utilizado e do tipo do método, p.ex. braquiterapia.

As composiçoes terapêutica de acordo com a invenção aplicam-se por via parentral e, de preferência, intravenosa (i.v.).

Os detalhes da aplicaçao de agentes radioterapêuticos encontram-se discutidos p.ex. em R.W. Kozak et al., TIBTEC, Outubro 1986, 262.

As composiçoes de acordo com a invenção sao extraordinariamente adequadas como meio de contraste para radiologia, sendo de assinalar que, com elas, nao se observam quaisquer sinais das reacções tipo anafilaxia típicas dos meios de contraste contendo iodo, em testes bioquímico-farmacológicas. Sao particularmente valiosas, devido às suas boas propriedades de absorçao, na gama das altas tensões de raios X em técnicas de subtraçao digital.

Em geral, as composiçoes farmacêuticas de acordo com a invenção, para aplicaçao como meios de contraste para radiologia, em analogia como por exemplo o diatrizoato de meglumínio, doseiam-se em quantidades de 0,1-5 mMol/kg, de preferência o,25-1 mMol/kg.

Os detalhes de aplicaçao de meios de contraste para radiologia encontram-se discutidos por exemplo em Barke, Rontgenkontrastmittel, G. Thieme, Leipzig (1970) e P. Thurn, E. Bucheler - Einfuhrung in die Rontgendiagnostik G. Thieme, Stuttgart, New York (1977).

Em suma, conseguiram sintetizar-se novos agentes complexantes, complexos metálicos e sais de complexos metálicos, que abrem novas possibilidades à medicina de diagnostico e terapêutica. Principalmente, o desenvolvimento de um novo tipo de processos imagisticos no diagnóstico ^;iA '·>· - yKywji&w.wts:*

médico torna-o bastante importante.

Os exemplos seguintes destinam-se a ilustrar em pormenor os objectivos da invenção.

Exemplo 1

a) Ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoil-metil)-3,6,9-triazaundecanodióico

Suspendem-se 15,33g (38 mmol) de acido N -(2,6-dioxomor£olinoetil)-N -(etoxicarbonilmetil)-3,6-diazaoctanodióico (exemplo 13a da EP 0331 616) em dimetilformamida (DMF) e misturam-se, sob arrefecimento em banho de gelo, com 21,07 ml (152 mmol) de trietilamina e 7,65 g (38 mmol) de acido 11-aminoundecanóico . Deixa-se atinger a temperatura ambiente e agita-se a mistura reaccional durante a noite. Terminada a reacçao filtra-se a solução ainda eventualmente ligeiramente turva e evapora-se o filtrado em vácuo. Agita-se o resíduo com éter e recristaliza-se em seguida de água (17,8 g). Dissolve-se o éster etílico em NaOH 2N e ajusta-se o pH a 7, após 3 horas, por adiçao de Amberlite IR 120 (H+) . Filtra-se o permutador iónico, liofiliza-se o filtrado (20,1 g) e cromatografa-se em seguida com H₉0/metanol (2:1) R com lOOml de Amberlite IR 120 (H+) concentra-se o eluído ácido e recristaliza-se de água.

Rendimento: 13,0 g P.fusão: 168°C	(59,3%)
Análise (em relaçao	à substância	anidra):
Calculado: C 52,07	H 7,69	N 9,7
C 51,98	H 7,61	9,75

b) Complexo de gadolínio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecanodicarboxílico

Suspendem-se 8,65 g (15 mmol) do acido complexante descrito no exemplo la em 200 ml de H2O, misturam-se com 27,2 g (7,5 mmol) de Gd20g e mantem-se durante minutos em banho maria a 90°c. Filtra-se a solução através de um filtro de membranas, congela-se e liofiliza-se. Rendimento: 11,9 g (quantitativo)

Teor em H^O: 9,2% (Karl-Fischer)

Análise (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 41,08 H 5,65 Gd 21,52 N 7,67

C 41,12 H 5,69 Gd 21,37 N 7,59

c) Complexo de európio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3-,6,9-triazaundecanodicarboxílico

Obtêm-se o composto do título de modo análogo, a partir do ácido complexante descrito no exemplo la, com oxido de europio, Eu20g, com rendimento quantitativo, na forma de um pó branco, com um ponte de decomposição incaracterístico.

Analise (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 40,52 H 5,58 N 7,56 Eu 22,58

C 40,60 H 5,65 N 7,63 Eu 22,51

d) Complexo de ferro III do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9'' -triazaundecanodicarboxilico

Obtêm-se o composto do titulo de modo análogo, a partir do acido complexante descrito no exemplo la, com óxido de ferro III, Ρθ2θβ, com rendimento quantitativo, na forma de um po castanho, com um ponte de decomposição incaracterístico .

Análise (em relaçao a substância anidra):

Calculado: C 63,19 H 9,33 N 11,79 Fe 11,75

C 63,04 H 9,42 N 11,68 Fe 11,79

e) Complexo de bismute III do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9triazaundecanodicarboxílico

Obtêm-se o composto do título de modo análogo, a partir do ácido complexante descrito no exemplo la, com óxido de bismuto III, BÍ20g, com rendimento quantitativo, na forma de um pó castanho, com um ponto de decomposição incaracteristico.

Análise (em relaçao á substância anidra):

Calculado: C 47,79 H 7,06 N 8,92 Bi 33,26

C 47,83 H 7,11 N 8,88 Bi 33,10

Exemplo 2

a) Ácido 6-carboximetil-g-(4-carboximetilfenil)-carbamoilmetil-3-etoxicarbonilmetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

A uma suspensão de 8,07 g (20 mmol) 3 6 de ácido N -(2,6-dioxomorfolinoetil)-N -(etoxicarbonilmetil)3,6-diazaoctano dicarboxílico em 100 ml de dimetilformamida adiciona-se, sob agitaçao a 45°C, 3,02 g (20 mmol) de ácido p-aminofenilacético, agita-se em seguida durante a noite à temperatura ambiente, e agita-se vai-se evaporando solvente em vacuo o residuo com 100 ml de eter metil-ter-butilico, filtra-se e seca-se o resíduo em vácuo a 50°C, 0 produto bruto assim obtido suspende-se em 10 ml de água. Adiciona-se hidróxido de sódio 11N até pH 7 ocorrendo a dissolução da substância. Ã solução adiciona-se lo g de sílica gel, evapora-se a suspensão no evaporador rotativo e coloca-se o resíduo numa coluna com 700 g de sílica gel instalada com uma mistura de clorofórmio/metanol/ácido acético/água (18/10/4/4). Elui-se com o mesmo solvente e isola-se, após evaporaçao do eluído, 8,3g de um produto oleoso, que se dissolve em 75 ml de água e se aplica a uma coluna de 75ml de permutador catiónico IR 120, para a remoção dos ioes sódio. Eluiu-se a coluna com 150 ml deagua e evapora-se a solução aquosa em vácuo.

resíduo com 50 ml de éter dietílico, filtra-se, vácuo e obtêm-se 6,2 g do composto do título na forma de um pó branco.

Analise: (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 51,98 H 6,18 N 10,10

C 51,81 H 6,33 N 10,18

b) Ãcido 3,6-bis(carboximetil)-9-(4-carboximetil Agita-se o seca-se em * : .Τ’ΡΤ'ΤΓίττ,-.^’·^·'·)—”-J—^Ρ w™? //ííSS^á^^^-íu^·^ ·*

M*»»ft'_i<,ⁱ.'f!<:rs^,!)^,í'·-'-¹·' fenil)-carbamoil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

A uma solução de 5 g do éster preparado de acordo com a parte a) em 20 ml de água, adiciona-se 90 ml de hidróxido de sódio IN, deixa-se em repouso durante 3 horas à temperatura ambiente e adiciona-se à solução, sob agitaçao, cerca de 200 ml de permutador catiónico IR 120, tomando solução após isso um valor de pH de 2,3. Após filtraçao liofiliza-se a solução. Obtêm-se 3,90 g do composto do título na forma de um pó branco.

Analise (em relaçao ã substância anidra):

Calculado:	C	50,19	H	5,74	N	10,64
	C	50, 03	H	5,71	N	10,72
a) Complexo	de	gadolínio	do	acido 3,6-	-bis(carboxime

til)-9-(4-carboximetilfenil)-carbamoilmetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Aquece-se 1,053 g (2 mmol) da substância preparada de acordo com a parte b), em 50 ml de agua com 362 mg (1 mmol) de áxido de gadolínio, durante 1 hora a 80-85°C. Verifica-se a dissolução do óxido. Filtra-se através de um filtro membrana de 0,1 μ e isola-se a substância por liofilizaçao. Obtêm-se 1,35 g do composto do título na forma de um po branco.

Analise (em relaçao á substância anidra):

Calculado: C 38,82 H 4,00 Gd 23,10 N 8,23

C 38,57 H 4,40 Gd 22,95 N 8,33

Exemplo 3

a) Acido 6-carboximetil-9-f*4-(carboxiisopropil)-fenil^-carbamoilmetil-3-epoxicarbonilmetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Em analogia com o exemplo 2a) obtêmf 3 se o composto do título a partir de ácido N -(2,6-dioxomorfolinoetil)-N -(etoxicarbonilmetil)-3,6-diazaoctano dicarboxílico e de acido sk ,ς^-dimetil-p-aminofenilacetico.

aoEnm^ ^('7 -- ...... ’ s··⁴·

Análise (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 53,60 H 6,57 N6,92

C 53,44 H 6,88 N 9,49

b) Ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-[4-(carboxiisopropil)-fenil2-carbamoilmetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Em analogia com o exemplo 2b) obtêmse o composto do título por saponificaçao alcalina do ácido 6-carboximetil-9-[4-(carboxiisopropil)-fenil]-carbamoilmetil-3-etoxicarbamoiletil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico.

Análise: (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C	51,98	H	6,18	N	10,10
C	51,79	H	6,35	N	10,01
c) Complexo de	gadolínio	do	ácido 3,6-	-bis(carboxime

metil)-9-[4-(carboxiisopropil)-fenil^-carbamoilmetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Em analogia com o exemplo 2c) obtêmse o composto do título por complexaçao do ligante com óxido de gadolínio.

Análise (em relaçao a substância anidra):

Calculado: C 40,64 H 4,41 Gd 22,19 N 7,90

C 40,47 H 4,60 Gd 22,01 N 7,80

Exemplo 4

a) Ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(11-carboxi-l-n-hexilundercilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Suspendem-se 15,33 g (38 mmol) de ácido N^-(2,6-dioxomorfolinoetil)-N^-(etoxicarbonilmetil)-3,6-diazaoctano dicarboxílico (exemplo 13a da EP 0331 616) em 100 ml de dimetilformamida e adiciona-se-lhe, em banho de gelo, 21,07 ml (152 mmol) de trietilamina e 11,36 g (38 mmol) de ácido 12-aminooctadecanóico. Após agitaçao durante a noite à temperatura ambiente concentra-se em vacuo e agita27

-se o resíduo com 50 ml de éter dietílico. Filtra-se e dissolve-se o produto reaecional seco em 50 ml de hidróxido de sódio 2N. Após agitaçao de 3 horas neutraliza-se a mistura com ácido clorídrico diluído, concentra-se em vácuo até à secura e recristaliza-se de água. Obtêm-se 15,64 g (61% do rendimento teórico) de um pó cinzento.

Analise (em relaçao a substância anidra):

Calculado: C 56,95 H 8,66 N 8,30

C 56,87 H 8,77 N 8,35

b) Complexo de gadolinio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(ll-carboxi-l-n-hexilundecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Suspendem-se 10,12 g (15 mmol) do composto acima descrito em 200 ml de agua e adiciona-selhe 2,72 g (7,5 mmol) de áxido de gadolinio. Aquece-se durante 60 minutos a 90°C, deixa-se arrefecer até à temperatura ambiente, filtra-se e liofiliza-se a solução. Obtêm-se 12,43 g (quan-

tidade	quantitativa)	do	composto do título na	forma	de um
pá branco.
	Analise (em	relaçao a	substância	anidra):
	Calculado:	C	46,36	H 6,69	N 6,76	Gd	18,97
		C	46,31	H 6,75	N 6,68	Gd	18,95
			A	substância	forma,	em	solução
aquosa,	associaçao com a	albumina de soro	humano.

Exemplo 5

a) Ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carbetoxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Agitam-se 17,85 g (50 mmol) de

1,5-bis(2,6-dioxomorfolino)-3-carboximetil-3-azapentano em

200 ml de dimetilformamida e adicionam-se-lhe 9 ml (50 mmol) de água. Aquece-se a solução durante 3 horas a 70°C, arrefecese até o°C e adiciona-se 36,07 ml (260 mmol) de trietilamina e 10,8 g (50 mmol) de éster etílico do ácido 11-aminoundecanói28 co. Após agitaçao durante a noite à temperatura ambiente concentra-se a solução em vácuo até â secura. Toma-se o resíduo em 100 ml de agua e adiciona-se gota a gota a solução ácido cloridrico concentrado até se formar uma turvaçao. Após agitaçao durante a noite em banho de gelo filtra-se o fino precipitado cristalino formado, lava-se com água e seca-se em vácuo a 50°C. Obtêm-se 14,9 g (65% do rendimento teórico) do composto do título na forma de um pó branco de ponto de fusão 155-157°C,

Análise (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 53,63 H 8,00 N 5,27

C 53,58 H 8,22 N 9,41

b) Complexo de gadolínio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carbetoxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxilico

Suspendem-se 9,08 g (15 mmol) do composto descrito no exemplo 5a) em 200 ml de água, adiciona-se-lhe 2,72 g (7,5 mmol) de Gd20g e agita-se à temperatura ambiente até se obter uma solução clara. Por liofilizaçao obtêm-se o complexo de gadolínio com rendimento quantitativo, na forma de um pó branco.

Análise (em relaçao á substância anidra):

Calculado: C 42,73 H 5,98 N 7,38 Gd 20,72

C 42,80 H 5,87 N 7,51 Gd 20,63

Exemplo 6

a) l,5-bis(2,6-dioxomorfolino)-2-(4-etoxibenzil)-3-carboximetil-3-azapentano

Suspendem-se 52,8 g (100 mmol) de ácido 3,6,9-triaza-3,6,9-tris(carboximetil)-4-(4-etoxibenzil)undecano dicarboxilico, preparado de acordo com a EP n^ede publicação 0 405 704 [exemplo 8b)^ em 75 ml de anidrido acético. Adiciona-se 38 ml de piridina e aqueceu-se durante horas a 50°C. Após arrefecimento até a temperatura ambiente durante a noite, filtra-se o precipitado, lava-se 3 vezes com 200 ml de eter dietílico de cada vez e seca-se em vacuo

a 30 C. Obtêm-se 40,3 g (82% do rendimento teórico) do composto do título, na forma de um pó branco de ponto de fusão 172-174°C.

Análise

Calculado: C 56,21 H 5,95 N 8,55

C 56,35 H 5,88 N 8,60

b) Ácido 3,6-bis(carboximetil)-4-(4-etoxibenzil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico e Ácido 6,9-bis-(carboximetil)-4-(4-etoxibenzil)-3-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Agitam-se 24,6 g (50 mmol) do composto obtido de acordo com o exemplo 6a) em 200 ml de dimetilformamida e adicionam-se 9 ml (50 mmol) de água. Aquece-se a solução durante 3 horas a 70°C, arrefece-se a 0°C e adiciona-se 36,07 ml (260 mmol) de trietilamina e 10,0 g (50 mmol) de ácido 11-aminoundecanóico. Após agitaçao durante a noite a temperatura ambiente concentra-se a solução em vácuo até á secura. Toma-se o resíduo em 50 ml de água e adiciona-se gota a gota ácido cloridrico concentrado até se observar turvaçao. Após agitaçao durante a noite em banho de gelo filtra-se o precipitado, lava-se com água e seca-se em vácuo a 50°C. Obtêm-se 21,3 g (60% do rendimento teórico) da mistura de isómeros, na forma de um pó branco de ponto de fusão 184-186°C.

Análise (em relaçao à substância anidra):

Calculado: C 57,45 H 7,66 N 7,88

C 57, 38 H 7,80 N 7,95

c) Complexo de gadolinio do acido 3,6-bis(carboximetil)-4-(4-etoxibenzil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico e do

Ácido 6,9-bis(carboximetil)-4-(4-etoxibenzil)-3-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Suspendem-se 10,65 g (15 mrnol) do agente complexante descrito no exemplo 6b) em 200 ml de água e adicionam-se 2,72 g (7,5 mrnol) de Gd^O^. Aquece-se durante 1 hora a 90°C, passa-se a solução através de um filtro de membranas e isolam-se os complexos por liofilização, com rendimento quantitativo, na forma de um pó branco.

Análise (em relaçao à Calculado: C 47,20

C 47,15

Exemplo 7 substância anidra): H 5,94 N 6,48

H 5,73 N 6,39

Gd 18,18 Gd 18,30

a) N-metil-N'-(4-carboxifenil)monoamida do ácido 3,6,9-triscarboximetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Suspendem-se 15,33 g (38 mrnol) 3 6 de ácido N -(2,6-dioxomorfolinoetil)-N -(etoxicarbonilmetil)-3,6-diazaoctano dióico [exemplo 13a) da Ep o 331 61óJ em 100 ml de dimetilformamida e adiciona-se-lhe, a οθϋ, 21 ml de trietilamina e 5,74 g (38 mrnol) de acido 4-N-metilaminobenzóco. Após agitaçao durante a noite à temperatura ambiente concentra-se em vácuo até à secura e agita-se o resíduo com 500 ml de eter dietílico. Filtra-se e obtêm-se, após recristalizaçao de etanol, 11,9 g (60% do rendimento teórico) do composto do título, na forma de um pó branco.

Análise

Calculado: C 50,28 H 5,66 N 10,66

C 50,35 H 5,61 N 10,58

b) Complexo de gadolínio de N-metil-N'-(4-carboxifenil)monoamida do ácido 3,6,9-triscarboximetil-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Suspendem-se 7,88 g (15 mrnol) do composto descrito em 200 ml de água e adicionam-se-lhe 2,72 g (7,5 mrnol) de ^20^. Aquece-se durante 60 minutos a 90°C, deixa-se arrefecer até ã temperatura ambiente e liofiliza-se a solução. Obtêm-se o composto do título na forma de um po branco, com um produto de decomposição incaracterístico, em rendimento quantitativo.

Analise (em relaçao ã substância anidra):

Calculado: C 38,.87 H 3,86 N 8,24 Gd 23,13

C 38,81 H 3,94 N 8,31 Gd 23,25 Exemplos para as formas de administraçao

Preparaçao de uma solução do complexo de gadolínio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxílico

Dissolvem-se 365,43 g (0,5 mol) do composto descrito no exemplo 1b, adicionando-se 195,22 g (1 mol) de N-metil-glucamina, em 600 ml de água para injecçoes (p.i.). Apos adiçao de 3,22 g de mono-hidrato do sal tri-sódico de cálcio de DTPA, CaNa^ DTPA, e de 1,21 g de tris-hidroximetilaminometano, ajusta-se o pH a 7,0 com ácido clorídrico diluído e preenche-se o volume com ãgua até 1000 ml. Submete-se a solução a ultrafiltraçao, coloca-se em frascos e esteriliza-se termicamente.

Composição de um pé para aplicaçao oral

12,8 g (35 mmol) do composto descrito no exemplo lb

12,0 g de sacarose

0,5 g de polímero de polioxietileno-polioxipropileno 0,001 g de aromatizantes

Exemplo para um diagnóstico por NMR in vivo

Injectou-se a um animal de laboratório (ratazana, estirpe Lew/Mol, +, 155 g), 2 semanas antes de teste, uma suspensão de células de tumor de Brown-Pearce, no fígado. Com o método utilizado, foram necessárias cerca de 2 semanas até o tumor a testar antingir o tamanho desejado de 0,5-1 cm³.

Para o teste narcotizou-se o animal •rí (Rompun + Ketavit) e em seguida introduziu-se-lhe um catéter na veia de cauda para aplicaçao do meio de contraste.

exame imagístico efectuou-se num aparelho experimental MRI da firma General Electric (intensidade de campo 2 Tesla). A primeira imagem tirou-se sem meio de contraste com uma sequência Spin-Echo (TR = 400 msec, espessura da camda 3 mm) . 0 fígado aparece com a intensidade de sinal esperada (normal); o tumor é isodenso e nái limitável. Em seguida administrou-se o meio de contraste [complexo de gadolínio do ácido 3,6-bis(carboximetil)-9-(10-carboxidecilcarbamoilmetil)-3,6,9-triazaundecano dicarboxilico; exemplo lb)J , através do cateter da veia, com um dose de 0,1 mmol de Gd/kg (concentração da solução 0,05 mmol/ml em NaCl a 0,9%, isto e, p.ex. uma dose clinica habitual do preparado comercial Magnevist^v . A imagem n^e 2 tirou-se 60 minutos após a administraçao de meio de contraste, mantendo-se constantes as outras condiçoes como na imagem n^s 1. 0 parênquima hepático aparece agora muito claro e reconhece-se claramente o tumor, nitidamente mais escuro em comparaçao com o tecido que o rodeia. Isto significa que o meio de contraste se concentra altamente no fígado mas nao no tumor. Deste modo, o meio de contraste de acordo com a invenção tem uma enorme vantagem para o diagnóstico de tumores do fígado, em relaçao ao unico meio de contraste até agora disponível no mercado, Magnevist^ para a tomografia de spin nuclear.

Além disso, verifica-se que, pelo forte contraste de estômago na imagem n^a 2, a substância também é eliminada pelo estômago. Isto oferece novas possibilidades de diagnóstico no que se refere a uma melhor definição do fígado e do extômago.

A um outro animal (ratazana, estirpe

Lew/Mol, $ , 200 g) administram-se o mesmo meio de contraste por via oral por meio de uma sonda p.o. numa dose de 0,5 mmol de Gd/Kg (concentração da solução 0,033 mmol de Gd/ml, em

NaCl a 0,5%). 30 minutos após a aplicaçao narcotizou-se o .|Ç ....... ;·,·χ_Γ. .

animal e examinou-se nas mesmas condiçoes, como descrito no primeiro caso. Logo 45 minutos após a aplicação (imagem 3) verificou-se um ligeiro aumento de sinal no fígado. 180 minutos após a aplicaçao (imagem 4) reconhece-se um nítido contraste do figado, o que significa que a substância, após aplicaçao oral, e eliminada pelo intestino delgado e, em grande parte, imediatamente retomada pelo fígado. Este resultado está de acordo com os dados farmacocineticos. Daqui resulta que também e possível um diagnóstico de tumores do fígado com uma administração oral do meio de contraste.

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Claims

REIVINDICAÇÕES _ ia _

Processo para a preparaçao compostos de fórmula geral I _π2 z¹ Z^R xoocch₂ Z² ch₂coox CH_oC0N 1 1 1 1 I 1 ^R N CH CH N CH₂ CH₂ N

xoocch₂ ch₂coox (I) na qual

Z¹ e Z² significam, cada um deles, um átomo de hidrogénio ou o grupo

-(^CH2)_m-(^c6^H4)_q-(0)k-(C^H2)_n-(^c6^H4)_r(°)-R, em que men sao números de 0 a 20, k, 1, q e r sao números 0 ou 1, e

R significam um atomo de hidrogénio, um grupo alquilo

-C,-C. conforme o caso substituído por 0r\ ou um grupo ^{1 0} 1 1

CH₂C00R , significando R um atomo de hidrogénio, um grupo.alquilo C^-C^ ou um grupo benzilo,

R significa um grupo alquilo, saturado, insaturado, linear ramificado ou cíclico, com até 20 átomos de carbono, substituido por um grupo carboxili ou sulfono, eventualmente esterificado por um grupo alquilo-C^-Cg ou benzilo, ou significa um grupo arilo ou arilalquilo,

3 R significa um atomo de hidrogénio, ou um grupo alquilo saturado, insaturado, linear, ramificado ou cíclico, com até 20 átomos de carbono, conforme o caso substituído por um grupo carboxili ou sulfono, ou significa um grupo arilo ou arilalquilo,

1, significa um átomo de hidrogénio e/ou um equivalente ionico metálico de um elemento com numero atomico 21-29, 31, 32, 37-40, 42-44, 49 ou 57-83, com a condição de pelo menos um dos substituintes 21 e 22 ser um átomo de hidrogénio, quando n e 1 representarem cada um deles o N^s 0, k e r nao representarem ao mesmo tempo o N^a.

se desejar o grupo acido carboxilico existir se na forma de estere ou de amida, bem como dos respectivos sais como bases inorgânicas e/ou orgânicas, caracterizado por se fazer reagir, de um modo conhecido, compostos de fórmula II e III hoocch₂ zch₂cooh ch₂cor

CH

CH

N .—CH^-“CH₂-—N

HOOCCH, ch₂cooh (II) hoocch₂ z¹

I I

N-CH

I

R⁵OOCCH₂ (III) na quais 1 2

Z e Z possuem os significados acima mencionados,

4 5

R significa um grupo carbonilo activado ou significa OR , e

R³ significa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo-C^-Cg, com aminoáeidos de fórmula geral IV (IV) na qual 2 3

R R possuem os significados acima mencionados, se fazerem reagir os ácidos complexantes assim obtidos, de formula geral I com X significando um átomo de hidrogénio, com pelo menos um óxido metálico ou um seu sal metálico do elementos de número atómico 21-29, 31, 32, 37-40, 42-44 ou

57-83, e em seguida, se se desejar, se substituírem os átomos de hidrogénio ácidos ainda presentes por catiões de bases inorgânicas e/ou orgânicas, aminoácidos e amidas de aminoácidos, ou se transformarem grupos ácidos respectivos, total ou parcialmente, em ésteres ou amidas.

- 2^â Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem compostos de formula I em que pelo menos dois dos substituintes X sao equivalentes ionicos metálicos de pelo menos um elemento de número atómico 21-29, 42, 44, ou 57-83, ou pelo menos de um radionuclido de um elemento de número atómico 27, 29, 31, 37-39, 43, 49,

62, 64, 70 ou 77.

- 3^â Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem composto de fórmula

I em que Z e Z representa cada um deles um átomo de hidrogénio .

- 4ã Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem compostos de fórmula

I em que Z representa um átomo de hidrogénio e l representa o grupo

- 5» Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem compostos de fórmula
2 - i

I em que Z representa um átomo de hidrogénio e Z representa o grupo

-<^CH2’n,-(^C6^H4\-<°\-(^CH2\-(^C6^H4h-<0)_r-^R·

- 6‘ Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem compostos de fórmula I

1 2 em que Z ou Z representam os grupos

-CH„-C_AH.-OH, -CH„-C_ftH,-OCH„, CH^-C.H,,

264 264
3’ 265’

-ch₂-c₆h₄-o-ch₂-c₆h₄-och₃, -ch₂-o-ch₂-c₆h₅, ch₂-c₆h₄-O-CH₂-COOH, -CH₂-C₆H₄-OC₂H₅, -CH₂-C₆H₄-OC₄H₉,

-ch₂-c_A-o-ch₂-c₆h₅

- 7“ Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se prepararem compostos de formula

2 3

I em que R ou R representam grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, pentilo, hexilo, fenilo, benzilo, 4-carboxifenileno, 1-ciclohexil-l-carboxilo, 1-ciclopentil-l-carboxilo, 2-carboxifenileno, 11-carboxi-l-undecilo, 10-carboxi-l-decilo, 7-carboxi-l-heptilo, 6-carboxi-l-hexilo, 5-carboxi-1-pentilo, 4-carboxi-benzilo, 4-carboxi-l-ciclo-hexilmetilo,
4-carboximetilfenileno, 4-(1,1-dimetilcarboximetileno)-fenileno , 4-sulfofenileno, 10-sulfo-l-decilo, 8-sulfo-l-octilo, 17-carboxi-7-heptadecilo , 7-carboxi-2-heptilo, l-carboxi-4-fenil-2-propilo, 2-carboxietilo, 4-carboxi-4-buteno-l-ilo.

- 8^ _

Processo para a preparaçao de uma composição farmacêutica para o diagnóstico por NMR, raios

- 42 X e radiodiagnóstico do tracto gastro-intestinal e dos sistemas renal e hepatobiliar, bem como para radioterapia, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto de fórmula I quando preparado de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, na forma de solução ou de suspensão em água, soro fisiológico ou solução proteica, conjuntamente com veículos e aditivos farmacêuticos usuais em galenica, de modo a obter-se uma forma de aplicaçao enteral ou parenteral adequada.

reivindica a prioridade Abril de 1990, sob o

Abril de 1991

A requerente do pedido alemao apresentado em 6 de N^e. p 40 11 684.0.