RS49980B - Polimorfni oblik antagonista tahikinin receptora 2-(r)-(1- (r)-(3,5-bis(trifluorometil)fenil)etoksi)-3-(s)-(4-fluoro)- fenil-4-(3-5(okso-1h,4h-1,2,4-triazolo)metilmorfolina - Google Patents

Abstract

Polimorfni oblik jedinjenja 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluc,ro)-fenil)-4-(3- (S)-(5-okso-1H,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolin označen kao Oblik I, naznačen time što je slika d i.f r a k c i.j e X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksija:na na: 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta). Prijava ima još 8 zahteva.

Description

PREGLED PRONALASKA

Ovaj pronalazak se odnosi na novi polimorfni oblik jedinjenja: 2- (R) - (1- (R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1, 2, 4-triazolo)metilmorfolina.

Ovaj pronalazak se takoje odnosi na farmaceutske formulacije koje sadrže ovaj novi polimorfni oblik jedinjenja kao aktivnu komponentu i upotrebu jedinjenja i njegovih formulacija u tretiranju izvesnih oboljenja.

Novi polimorfni oblik prema ovom pronalasku je antagonist tahikinin receptora koristan u tretiranju ili prevenciji oboljenja centralnog nervnog sistema, inflamatornih bolesti, bola ili migrene, astme i povraćanja.

Ovaj polimorfni oblik ima preimućstva nad drugim poznatim oblicima 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolin-a u pogdelu termodinamičke stabilnosti u pogodnosti za uključivanje u farmaceutske formulacije.

OSNOVA PRONALASKA

Neuropeptidni receptori za supstancu P (neurokinin-1; NK-1) su široko distribuirani kroz ceo nervni sistem sisara (naročito mozak i spinalne ganglije), cirkulatorni sistem i periferna tkiva (naročito duodenum i jejunum) i uključeni su u regulisanje jednog broja različitih bioloških procesa. Ovo uključuje čulno opažanje mirisa, moć vida, slušanja i bola, kontrolu pokreta, gastričnu pokretljivost, vazodilataciju, salivaciju i mokrenje. Supstanca P (takodje ovde nazvana "SP") je prirodni undekapeptid koji pripada tahikinin familiji peptida, ovi poslednji su tako nazvani zbog njihovog brzog kontraktilnog dejstva na tkivo ekstravaskularnih glatkih mišica. Tahikinini se razlikuju konzerviranom karboksil-terminalnom sekvencom Phe-X-Gly-Leu-Met-NH2. Pored SP, tahikinini sisara obuhvataju neurokinin A, i neurokinin B. Sadašnja nomenklatura označava receptore za SP, neurokinin A i neurokinin B kao NK-1, NK-2 i NK-3, respektivno.

Supstanca P je farmakološki aktivan neuropeptid koji se proizvodi u sisarima i deluje kao vazodilatator, depresant, stimuliše salivaciju i proizvodi povećanu kapilarnu permeabilnost. Takodje je sposoban da proizvede i analgeziju i hiperalgeziju kod životinja, u zavisnosti od doze i svojstva bola kod životinje.

Razmotrena je evidencija za korisnost antagonista tahikinin receptora kod bola, glavobolje, naročito migrene, Alzheimer-ove bolesti, multiple skleroze, umanjenja kod odvikavanja od morfijuma, kardiovaskularnih promena, edema, kao što je edem izazvan toplotnom ozledom, hroničnih inflamatornih' bolesti kao što su reumatoidni artritis, astma/bronhijalna hiperreaktivnost i druge raspiratorne bolesti uključujući alergijski rinitis, inflamatorne bolesti stomaka uključujući ulcerativni kolitis i Chrohn-ovu bolest, očne povrede i očne inflamatorne bolesti, proliferativnu vitreo-retinopatiju, nadražujući crevni sindrom i bolesti funkcije bešike uključujući cistitis i hiperrefleksiju istiskivača mokraćne bešike.

Osim toga, sugerisano je da su antagonisti tahikinin receptora korisni u sledećim bolestima: depresiji, distimičkim bolestima, hroničnim obstruktivnim bolestima disajnih puteva, bolestima hipersenzitivnosti kao što je osip izazvan jednom vrstom biljke{ Rhus radicans) ,vazospastičke bolesti kao što su angina i Reynauld-ova bolest, fibrozne i kolagenske bolesti kao što su skleroderma i eozinofilni fascioliazis, refleksna simpatetička distrofija, kao što je rame/šaka sindrom, bolesti zavisnosti kao što je alkoholizam, stresu srodne somatske bolesti, neuropatija, neuralgija, bolesti vezane za imuno povećanje ili supresiju kao što su sistemski lupus eritmatozus, očne bolesti kao što su konjuktivitis, vernalni konjuktivitis (prolećni katar), i slične, i kožne bolesti kao što su kontaktni dermatitis, atopični dermatitis, urtikarija, i drugi ekcematoidni deramitisi.

Učinjeni su pokušaji da se obezbede antagonisti za receptore supstance P i drugih tahikinin peptida u cilju efikasnijeg tretiranja različitih bolesti pomenutih gore. Posebno, PCT Publication No. W0 94/00440,EPO objava br. 0.577,394 i PCT objava br. W0 95/16679 opisuju izvesna morfolin i tiomorfolin jedinjenja kao antagoniste supstance P. Posebno, jedinjenje 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(tri-fluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH, 4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolin je opisan kao naslovno jedinjenje iz Primera 75 iz PCT Publication No. WO 9 5/16679. Ovo jedinjenje je naknadno identifikovano kao polimorfni oblik označen ovde kao "Oblik II".

Morfološki oblici farmaceutskih jedinjenja mogu da budu od interesa za one uključene u razvoj pogodnog oblika doze, pošto ako se morfološki oblik ne drži konstantnim tokom kliničkih i studija stabilnosti, tačna doza upotrebljena ili izmerena ne može se uporediti od jedne šarže do sledeće. Jednom kada je farmaceutsko jedinjenje proizvedeno za upotrebu, važno je da se prepozna morfološki oblik isporučen u svakom obliku doze da bi se osiguralo da se u produkcionom postupku upotrebi isti oblik i ista količina leka koja je uključena u svakoj dozi. Stoga je imperativ da se osigura da je prisutan jedan morfološki oblik ili neka poznata kombinacija morfoloških oblika. Pored toga, izvesni morfološki oblici mogu da pokazuju povećanu termodinamičku stabilnost i mogu da budu pogodniji od drugih morfoloških oblika za uključivanje u farmaceutske formulacije. Kao što je upotrebijeno ovde, polimorfni oblik hemijskog jedinjenja je isti hemijski entitet, ali u različitom kristalnom uredjenju.

OPIS CRTEŽA

Si. 1 je difrakciona slika X-zraka praškastog Oblika I 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil) etoksi)-3-(S) -(4-fluoro)- fenil-4-(3-(5- okso-lH, 4H-1, 2, 4-triazolo.) metilmorfolina.

SI. 2 je difrakciona slika x-zraka praškastog Oblika II 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)- (4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolina.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

Ovaj pronalazak je usmeren na novi polimorfni oblik jedinjenja 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolin i postupak za dobijanje ovog polimorfnog oblika.

Jedinjenje 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil) etoksi-3- (S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolin ima strukturu:

i on je antagonist tahikinin receptora koristan u tretiranju inflamatornih bolesti, bola ili migrene, astme, i povraćanja.

Ovaj specifičan polimorfni oblik (ovde označen kao "Oblik I") ima superiorne osobine nad drugim kristalnim oblicima jedinjenja u tome što je termodinamički mnogo stabilniji od drugih morfoloških oblika i mnogo korisniji za uključivanje u farmaceutske formulacije.

Ovaj pronalazak se takodje odnosi na postupak za dobijanje Oblika I 2-(R)-(l- (R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina koji obuhvata: uravnotežavanje Oblika II 2-(R) - (1-(R) - (3, 5-bis-(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S) -(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina u rastvaraču koji je odabran od: etanola, 2-propanola, acetonitrila i izopropil acetata.

Ovaj pronalazak se dalje odnosi na postupak za dobijanje Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro) fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina koji obuhvata: zagrevanje uzorka 2-(R)-1-(R)-(3,5-bis(trifluoro-metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro) fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina opcione morfološke smeše do temperaturne oblasti od 215 do 230°C; i zatim vraćanje uzorka do sobne temperature.

Naročito, zagrevanje 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-1H,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina može da se izvrši u diferencijalnoj skanirajućoj kalorimetrijskoj ćeliji u otvorenoj posudi pod atmosferom azota i 2-(R)-(1-(R)- (3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolin može da se zagreva do temperature od oko 215-230°C, i zatim da se ohladi do sobne temperature.

Prvenstveno morfološka kompozicija (smeša) polaznog 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2, 4-triazolo-metilmorfolina je Oblik II.

Pored toga, ovaj pronalazak se odnosi na alternativni postupak posebno koristan za dobijanje oblika I 2-(R)-Cl-(R)-C3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolina u velikom obimu koji obuhvata: suspendovanje 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil) fenil) etoksi)-3-(S)- (4-fluoro) fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina opcione morfološke kompozicije u rastvoru metanola/vode, koji rastvor je prvenstveno u odnosu 2/1 (v/v)

dodavanje klica kristala Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolina-;

mešanje dobijene smeše na oko 0-50°C u toku perioda dovoljnog da dođe do obrazovanja Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)-metilmorfolina; i

sakupljanje dobijenog Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-

(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina.

Slično, ovaj pronalazak se takođe odnosi na postupak za dobijanje morfološki homogenog 2-(R)-(1-(R)- (3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H,-1,2,4-triazolo)metilmorfolina, koji obuhvata bilo koji od gore pomenutih postupaka.

Jedinjenje prema ovom pronalasku, novi polimorfni oblik 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)-metilmorfolin, je antagonist tahikinin receptora koristan u tretiranju inflamatornih bolesti, bola ili migrene, astme i povraćanja. Prema tome, ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutske formulacije koje sadrže ovaj polimorfni oblik kao aktivnu komponentu, i upotrebu ovog polimorfnog oblika i njegovih formulacija u tretiranju izvesnih oboljenja

Oblik I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina je anhidrovan i ne-higroskopan i pokazuje visok stepen termičke stabilnosti kao čista čvrsta supstanca i u hidroalkoholnom rastvoru.

Oblik II je anhidrovani kristalni materijal koji se topi na 254°C, koji se dobija direktno iz prekristalizacije u hemijskoj sintezi 2-(R)-(1-(R)-(3, 5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina.

Difrakcija X- zraka praškastog uzorka ( XRPD) ( X- Ray Powder

Diffraction)

Studije difrakcije X-zraka praškastog uzorka su široko upotrebijene za rastvetljavanje molekularnih struktura, kristalnosti i polimorfizma. Slike difrakcije X-zraka sprašenog uzorka (XRPD) su beležene pomoću Philips moded APD 3720 difraktomerta za praškove snabdevenog sa 3 kw generatorom za X-zrake (CuKal radijacijom) i Nal (Ti) scintilacionim detektorom. Merenja su vršena od 3 do 45 (2 teta) sa uzorkom koji se održava na sobnoj temperaturi i predstavljena su na SI. 1 i SI. 2.

Oblik I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina se karakteriše pomoću difrakcione slike X-zraka sprašenog uzorka sa ključnim refleksijama na približno 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8, i 24.8° (2 teta).

Oblik II 2 (R)- (1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil) -fenil) - etoksi-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2, 4-triazolo)metilmorfolina se karakteriše pomoću difrakcione slike X-zraka sprašenog uzorka sa ključnim refleksijama na približno: 12.6, 16.7, 17.1, 17.2, 18.0, 20.1, 20.6, 21.1, 22.8, 23.9 i 24.8° (2 teta).

Ove XRPD slike potvrđuju da su oba uzorka posebna kristalna oblika. I Oblik I i Oblik II pokazuju intenzivne pikove karakteristične za kristalni materijal.

Diferencijalna skanirajuća kalorimetrijska ćelija / DSC/

Diferencijalna skanirajuća kalorimetrija Oblika I 2-(R)-(1-(R) -(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolina i Oblika II 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil) fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina ne pokazuju značajne razlike u njihovom termičkom ponašanju. Obe faze su proizvele termograme sa jednim endotermom topljenja na istoj temperaturi.

Posebno, DSC kriva Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil)-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina pokazuje jedan endoterm topljenja sa temperaturnim pikom od 255.8°C ekstrapolisanom temperaturom početka od 254.7°C i entalpijom od 105 J/g. DSC kriva Oblika II 2-(R)-(1(R)-(3,5-bis-

(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina isto tako pokazuje jedan endoterm topljenja sa temperaturnim pikom od 255,6°C, ekstrapolisanom temperaturom početka od 254.4°C i entalpijom od 107 J/g.

NMR

Protonski i ugljenični nuklearni magnetni rezonantni spektri Oblika I i Oblika II pokazuju da nema hemijske promene u jedinjenju u konverziji od Oblika II do Oblika I.

Rastvorij ivost

Određeno je da rastvorijivost Oblika I u 2/1 (zap./zap.) metanolu/vodi na 0°C iznosi 0.9 + 0.1 mg/ml. Rastvorijivost Oblika II u 2/1 (zap./zap) metanolu/vodi na 0°C određena je da iznosi 1,3 - 0.2 mg/ml. Odnos rastvorijivosti je 1.4 što ukazuje da je Oblik I stabilniji polimorf. Oblik I je stabilniji od Oblika II za 0.2 kcal/mol

Pritisak pare

Pritisci pare Oblika I i Oblika II na povišenim temperaturama su bili slični kada se ispituju sa Knudsen-ovim efuzionim tehnikama.

ANALIZA TAHIKINIM ANTAGONIZMA

Jedinjenje prema ovom pronalasku, polimorfni Oblik I 2-(R) - (1- (r)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro) -fenil-4- (3- (5-okso-lH, 4H-1, 2, 4-triazolo)metil-ruorfolin je korisno za antagoniziranje tahikinina, naročito supstance P i neurokinina A u tretiranju gastrointestinalnih oboljenja, oboljenja centralnog nervonog sistema, inflamatornih bolesti, bola ili migrene, astme i povraćanja kod sisara kojima je potrebno takvo tretiranje. Ova aktivnost može da se demonstrira sledećom analizom.

A. Ekspresija receptora u COS

Za ekspresiju kloniranog humanog neurokinin-1 receptora (NK1R) privremeno u COS, cDNK za humani NK1R se klonira u ekspresioni vektor pCDM9 koji je izveden iz pCDM8 (INVITROGEN) ubacivanjem gena rezistentnog na ampicilin (nukleotid 1973 do 2964 od BLUESCRIPT SK+) u Sac II položaj. Transfekcija 20 ug od plazmidne DNK u 10 miliona COS ćelija se postiže elektroporacijom u 800 ul transfektovanog pufera (135 mM NaCl, 1.2 mM CaCl2, 1.2 mM MgCl2, 2.4 mM K2HP04, 0. 6 mM KH2P04, 10 mM glukoza, 100 mM HEPES pH 7.4) na 260V i 950 uF upotrebljavajući IBI GENEZAPPER (IBI, New Haven, CT) . Ćelije su inkubirane u 10% fetalnog telećeg seruma, 2 mM glutamina, 100 U/ml penicilin-streptomicina, i 90% DMEM medijuma (GIBCO, Grand Island, NY) u 5% C02na 37°C u toku tri dana pre analize vezivanj a.

B. Stabilna ekspresija u CHO

Da bi se utvrdila stabilna ćelijska linija koja ekspresioniše klonirani .humani NK1R, cDNK se subklonira u vektor pRcCMV (INVITROGEN). Transfekcija 20 ug plazmidne DNK u CHO ćelije se postiže elektroporacij om u 800 ml transfektovanog pufera obogaćenog sa 0.625 mg/ml Herring-ovom spermnom DNK na 300 V i 950 uF upotrebljavajući IBI GENEZAPPER (IBI). Transfektovane ćelije se inkubiraju u CHO medijumu [10% fetalnog telećeg seruma, 100 U/ml penicilin-streptomicina, 2 mM glutamina, 1/500 hipoksantin timidina (ATCC), 90% IMDM medijuma (JRH BIOSCIENCES, Lenexa, KS), 0.7 mg/ml G418 (GIBCO))] u 5% C02na 37°C sve dok su kolonije vidljive. Svaka kolonija se odvaja i razvija. Ćelijski klonovi sa najvećim brojem humanih NK1R se selektuju za naredne primene kao što je pretraživanje leka.

C. Analitički protokol koji upotrebljava COS ili CHO

Analiza vezivanja humanog NK1R ekspresionisanog bilo u COS ili CHO ćelijama baziranog na upotrebi125Isupstance P (<125>I-SPiz DU PONT, Boston, MA) kao radioaktivno obeleženi ligand koji konkuriše sa neobeleženom supstancom P ili bilo kojim drugim ligandom za vezivanje na humani NK1R. Monoslojne ćelijske kulture COS ili CHO su disocirane pomoću ne-enzimatskog rastvora (SPSCIALTY MEDIA, Lavallette, NJ) i ponovo suspendovane u pogodnoj zapremini vezujućeg pufera (50 mM Tris pH 7.5, 5 mM MnCl2, 150 mM NaCl, 0.04 mg/ml bacitracina, 0.004 mg/ml leupeptina, 0.2 mg/ml BSA, 0.01 mM fosforamidona) tako da će 200 ul ćelijske supsenzije dati do oko 10,000 cpm specifičnog<125>I-SP vezivanja (približno 50,000 do 200,000 ćelija) u analizi vezivanja, 200 ul ćelija se dodaje u epruvetu koja sdrži 20 ul 1.5 do 2.5 nM<125>I-SP i 20 ul neobeležene supstance P ili bilo kojeg drugog test jedinjenja. Epruvete se inkubiraju na 4°C ili na sobnoj temperaturi u toku 1 sata sa blagim mućkanjem. Vezana radioaktivnost se odvaja od nevezane radioaktivnosti pomoću GF/C filtra (BRANDEL, Gaithenburg, MD) koji je prethodno ovlažen sa 0.1% polietileniminom. Filter se pere sa 3 ml pufera za pranje (50 mM Tris pH 7.5, 5 mM MnCl2, 150 mM NaCl) tri puta i njegova radioaktivnost se odre]uje gama brojačem.

Aktivacija fosfolipaze C pomoću NK1R može takođe da se meri u CHO ćelijama koje ekspresionišu humanu NK1R pomoću određivanja akumulacije inozitol monofosfata koji je degradacioni proizvod IP3. CHO ćelije se zasejavaju u ploču sa 12 udubljenja pri 250,000 ćelija po udubljenju. Posle inkubacije u CHO medijumu u toku 4 dana, ćelije se pune sa 0.025 uCi/ml<3>H mioinozitol pomoću inkubacije preko noći. Ekstracelularna radioaktivnost se uklanja pranjem sa fosfatno puferovanim slanim rastvorom. Dodaje se LiCl u udubljenje pri finalnoj koncentraciji od 0.1 mM sa ili bez test jedinjenja, i inkubiranje se nastavlja na 37°C u toku 15 minuta. Dodaje se supstanca P u udubljenje pri finalnoj koncentraciji od 0.3 nM da bi se aktivirao humani NK1R. Posle 30 minuta inkubacije na 37°c, medijum se uklanja i dodaje se 0.1 N HC1. Svako udubljenje se tretira ultrazvukom na 4°C i ekstrahuje se sa CHCls/metanolom (1:1). Vodena faza se nanosi na 1 ml Dowex AG 1X8 jono izmenjivačku kolonu. Kolona se pere sa 0.1 N mravljom kiselinom, a posle sa 0.025 M amonijum formijat-0.1 N mravljom kiselinom. Inozitol monofosfat se eluira sa 0.2 M amonijum farmijatom-0.1 N mravljom kiselinom i određuje kvantitativno pomoću beta brojača.

Aktivnost ovog jedinjenja može takodje da se demonstrira pomoću analize opisane od strane Lei-a, i sarad., British J. Pharmacol., 105, 261-262 (1992).

Jedinjenje prema ovom pronalasku je od vrednosti u tretiranju različitih kliničkih stanja koja se karakteristišu prisustvom viška aktivnosti tahikinina, posebno supstance P.

Prema tome, na primer, višak aktivnosti tahikinina, i posebno supstance P je impliciran u različitim oboljenjima centralnog nervnog sistema. Takva oboljenja uključuju poremećaje raspoloženja kao što su depresija ili određenije depresivna oboljenja, na primer, jednostruka epizodna ili ponovljena glavna depresivna oboljenja i distimična oboljenja, ili bipolarna oboljenja, na primer, bipolarna I oboljenja, bipolarna II oboljenja i ciklotimična oboljenja; oboljenja anksioznosti, kao što su oboljenja paničnosti sa ili bez agorafobije, agorafobija bez istorije paničnih oboljenja, specifične fobije, na primer, specifične fobije od životinja, socijalne fobije, obsesivne-kompulsivne bolesti, stresni poremećaji uključujući post-treumatska stresna oboljenja i akutna stresna oboljenja, i opšta anksijalna oboljenja, šizofrenija i druga psihotična oboljenja, na primer šizofrenična oboljenja, šizoafektivna oboljenja, deluziona oboljenja, kratka psihotična oboljenja, podeljena psihotočna oboljenja i psihotična oboljenja sa obmanama ili halucijacijama; delirijumom, demencijom, i amnetičnim i drugim kognitivnim ili neurodegenerativnim oboljenjima, kao što su Alzheimer-ova bolest, senilna demencija, demencija Alzaheimero-vog tipa, vaskularna demencija, i druge demencije, na primer, usled HIV bolesti, traume glave, Parkinson-ove bolesti, Huntington-ove bolesti, Pick-ove bolesti, Creutzfeldt-Jakob-ove bolesti ili usled multiplih etiologija; Parkinson-ove bolesti i drugih ekstra-piramidalnih oboljenja pokreta kao što su lekovima izazvana oboljenja pokreta, na primer, neuroleptički izazvana parkinsonizam, neuroleptički maligni sindrom, neuroleptički izazvana akutna distonija, neuroleptički izazavana akutna akatizija, neuroleptički izazvana tardivna diskinezija i lekovima izazvani posturalni tremor; poremećaji povezani sa supstancama koji sa javljaju od upotrebe alkohola, amfetamina (ili amfeaminu sličnih supstanci), kafeina, kanabisa, kokaina, halucinogena, inhalanata i aerosol propelanata, nikotina, opioida, fenilglicidin derivata, sedativa, hipnotika i anksiolitika, pri čemu poremećaji vezani za supstance obuhvataju zavisnosti i zluopotrebu, intoksikaciju, odvikavanje od supstanci, intoksikacioni delirijum, delirijum koji se javlja prilikom odvikavanja, trajna demencija, psihotična oboljenja, poremećaji raspoloženja, poremećaji anksioznosti, seksualna disfunkcija i poremećaji sna; epilepsija; Down-ov sindrom, demielinaciona oboljenja kao što su MS i ALS i druga neuropatološka oboljenja kao što su periferna neuropatija, na primer, dijabetična i hemoterapijski izazvana neuropatija i postherpetična neuralgija, trigeminalna neuralgija, segmentalna ili interkostalna neuralgija i druge neuralgije; cerebralna vaskularna oboljenja usled akutnog ili hroničnog cerebrovaskularnog oštećenja kao što je cerebralni infarkt, subarahnoidna hemoragija ili cerebralni edem.

Aktivnost tahikinina, i naročito supstance P, je takođe uključena u nocicepciji i bolu. Jedinjenje prema ovom pronalasku će stoga biti od koristi u prevenciji ili tretiranju bolesti i stanja u kojima bol preovlađava, uključujući oštećenja mekih tkiva i periferna oštećenja, kao što su akutna trauma, osteoartritis, reumatoidni artritis, mišićno skeletalni bol, naorčito posle traume, spinalni bol, miofacijalni bolni sindromi, glavobolja, epiziotomni bol i opekotine; dubok i visceralni bol, kao što je srčani bol, mišićni bol, očni bol, orofacijalni bol, na primer, odontalgija, abdominalni bol, ginekološki bol, na primer, dismenoreja, i bol trudova, bol vezan sa oštećenjem nerava i korena, kao što je bol vezan sa peirfernim nervnim oštećenjima, na primer, uklještenjem nerva i brahijalnim pleksus avulzijama, amputacijom, perifernim neuropatijama, bolni tik, atipični facijalni bol, oštećenja korena nerva i arahnoiditis bol vezan sa karcinomom, često navođen kao bol povezan sa karcinomom; bol centralnog nervnog sistema, kao što je bol usled oštećenja kičmene moždine ili moždanog stabla; bol u krstima; skiatika; ankilozni spondilitis, giht; bol ožilj ka.

Antagonisti tahikinina, i naročito supstance P mogu da budu od koristi u tretiranju respiratornih bolesti, naročito onih povezanih sa viškom sekreta sluzi, kao što su hronične obstruktivne bolesti disajnih puteva, bronho-pneumonija, hronični bronhitis, cistična fibroza i astma, sindrom respiratornog bola kod odraslih, i bronhospazam; inflamatornih bolesti kao što su inflamatorne bolesti creva, psorijaza, fibroza, osteoartritis, reumatoidni artritis, pruritis, i opekotine od sunčanja; alergije kao što su ekcem i rinitis; oboljenja hipersenzitiviteta kao što je osip usled jedne vrste biljke( Rhus radicans) ;oftamoloških bolesti kao što su konjuktivitis, vernalni konjuktivitis, i slično; oftalmička stanja vezana sa ćelijskom prolif eraci jorn kao što je proliferativna vitreoretinopatija; kožnih bolesti, kao što je kontaktni dermatitis, atopični dermatitis, urtikarija i drugi ekcematoidni dermatitisi.

Antagonisti tahikinina, i naročito supstance P--- mogu takođe da budu korisni u tretiranju neoplazmi, uključujući tumore dojki, neuroganglioblastome i karcinome malih ćelija kao što je rak malih ćelija pluća.

Antagonisti tahikinina, i naročito supstance P mogu takođe da budu korisni u tretiranju gastrointestinalnih (GI) oboljenja, uključujući inflamatorna oboljenja i bolesti GI trakta kao što su gastritis, gastroduodenalni ulceri, karcinom želudca, limfomi želudca, poremećaji vezani sa neuronalnom kontrolom viscera, ulcerativnim kolitisom, Crohn-ovom bolešću, iritirajućim sindromom creva i povraćanjem uključujući akutno, odgođeno ili predviđeno povraćanje kao što je povraćanje izazvano hemoterapijom, radijacijom, toksinima, virusnim ili bakterijskim infekcijama, trudnoćom, vestibularnim poremećajima, na primer, bolešću od kretanja, vertigo, vrtoglavicom i Menier-ovom bolešću, usled operacija, migrene, varijacijama u interkranalnom pritisku, gastro-ezofagealna refluksna bolest, kiselinskim nevarenjem, usled indulgencije u hrani ili piću, stomačnoj kiselini, ispiranja vodom ili regurgitacijom, gorušicom, na primer, epizodnom, noćnom ili hranom izazvanom gorušicom i dispezijom.

Antagonisti tahikinina, i naročito supstance P, mogu takođe da budu korisni u tretiranju različitih drugih stanja uključujući stresu srodna somatična oboljenja; refleksna simpatetička distrofija kao što je rame/ruka sindrom; suprotne imunološke reakcije kao što je odbacivanje transplantiranih tkiva i poremećaji vezani sa imunim povećanjem ili supresijom kao što je sistemski lupus eritematozus; plazma ekstravazacija koja se javlja od citokin hemoterapije, poremećaji u funkciji mokraćne bešike kao što je cistitis, detruzor mokraćne bešike sa hiper-refleksijom i inkontinencijom; oboljenja fibroziranja i kolagena kao što su skleroderma i eozinofilna fascioliaza; obljenja protoka krvi izazvana vazodilatacijom i vazospastičnim oboljenjima kao što su angina, vaskularna glavobolja, migrena i Reynauds-ova bolest; i bol ili nocicepcija pripisana ili povezana sa bilo kojim od prethodnih stanja, posebno sa transmisijom bola kod migrene.

Jedinjenje prema ovom pronalasku može takodje da bude korisno u tretiranju kombinacije gornjih stanja, naročito u tretiranju kombinovanog post-operativnog bola i post-operativne mučnine i povraćanja.

Jedinjenje prema ovom pronalasku je naročito korisno u tretiranju povraćanja uključujući akutno, odloženo ili predviđeno povraćanje, kao što je povraćanje izazvano hemoterapijom, radijacijom, toksinima, trudnoćom, vestibularnim oboljenjima, pokretima, operacijama, migrenom, i varijacijama u interkranalnom pritisku. Jedinjenje prema ovom pronalasku naročito je korisno za upotrebu u tretiranju povraćanja izazvanog antineoplastičnim (citotoksičnim) sredstvima uključujući ona koja se rutinski upotrebljavaju u hemoterapiji raka.

Primeri takvih hemoterapeutskih sredstava obuhvataju alkilujuća sredstva, na primer, azotne slačice, etilen-iminska jedinjenja, alkil sulfonate i druga jedinjenja sa alkilujućim dejstvom kao što su nitrozouree, cisplatin i dekarbazin; antimetabolite, na primer, folna kiselina, purin ili pirimidin antagonisti; mitotični inhibitori, na primer, vinca alkaloidi i derivati podofilotoksina; i citotoksični antibiotici.

Naročiti primeri hemoterapeutskih sredstava su opisani, na primer, od strane D. J. Stewarts u "Nausea and Vomiting: Recent Research and Clinical Advances", Izd. J. Kucharczvk, i sarad., CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, USA (1991) strane 177-203, naročito strana 188. Uobičajeno upotrebljena hemoterapeutska sredstva uključuju cisplatin, dakarbazin (DTIC), daktinomicin, mehloretamin (azotna slačica), streptozocin, ciklofosfamid, karmustin (BCNU), lomustin (CCNU), doksorubicin (adriamicin), daunorubicin, prokarbazin, mitomicin, citarabin, etoposid, metotreksat, 5-fluorouracil, vinblastin, vinkristin, bleomicin i hlorambucil [R. J. Gralla, i sarad., Cancer Treatment Reports, 68(1), 163-172 (1984)].

Jedinjenje prema ovom pronalasku se takođe upotrebljava u tretiranju povraćanja izazvanog radijacijom uključujući radiacionu terapiju kao što je u tretiranju raka, ili radiacionu bolest i u tretiranju post-operativne mučnine i povraćanja.

Za tretiranje izvesnih stanja može da bude poželjno da se upotrebi jedinjenje prema ovom pronalasku zajedno sa jednim drugim farmakološki aktivnim sredstvom. Razumljivo je da se jedinjenje prema ovom pronalasku može ponuditi zajedno sa nekim drugačijim terapeutskim sredstvom kao kombinovani preparat za simultanu, odvojenu ili sekvencionalnu upotrebu za oslobađanje od povraćanja. Takvi kombinovani preparati mogu da budu, na primer, u obliku dvostrukog pakovanja.

Jedan drugi aspekt ovog pronalaska obuhvata jedinjenje prema ovom pronalasku u kombinaciji sa 5-HT3antagonistom, kao što je ondansetron, granisetron, tropisetron ili zatisetron, ili drugim anti-emetičnim lekovima, na primer deksametazon ili dopamin antagonistom kao što je metoklopramid. Pored toga, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se primenjuje u kombinaciji sa anti-inflamatornim kortikosteroidom, kao što je deksametazon. Osim toga, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se primenjuje u kombinaciji sa hemoterapeutskim sredstvom kao što je alkilujuće sredstvo, antimetabolit, mitotični inhibitor ili citotoksični antibiotik kao što je opisano gore. Uglavnom, sada dostupni oblici doza poznatih terapeutskih sredstava za upotrebu u takvim kombinacijama će biti pogodni.

Kada se testira na modelu lasice, cisplatinom izazvano povraćanje opisano od strane F. D. Tattrsall-a i sarad.Eur. J. Pharmacol.,(1993) 250, R5-R6 , nađeno je da jedinjenje prema ovom pronalasku umanjuje bljuvanje i povraćanje izazvano cisplatinom.

Jedinjenje prema ovom pronalasku je takođe naročito korisno u tretiranju bola ili nocicepcije i/ili inflamacije i oboljenja povezanih sa ovim kao što su, na primer, neuropatija, kao što je dijabetična ili hemoterapeutski izazvana neuropatija, postherpetična i druge neuralgije, astma, osteroartritis, reumatoidni artritis i glavobolja, uključujući migrenu, akutnu ili hroničnu tenzionu glavobolju, glavobolju sa stezanjem, temporomandibularni bol, i maksialarni sinusni bol. Ovaj pronalazak dalje obezbeđuje jedinjenje prema ovom pronalasku za upotrebu u terapiji.

Prema daljem ili alternativnom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema pronalasku za upotrebu u proizvodnji leka za tretiranje ili prevenciju fizioloških oboljenja vezanih sa viškom tahikinina naročito supstance P.

Za tretiranje izvesnih stanja može da bude poželjno da se upotrebu jedinjenje prema ovom pronalasku zajedno sa nekim drugim farmakološki aktivnim sredstvom. Na primer, za tretiranje respiratornih oboljenja kao što je astma jedinjenje prema ovom pronalasku može da se upotrebi zajedno sa bronhodilatatorom kao što je antagonist P2~adrenergičnog receptora ili antagonist tahikinina koji deluju kao NK-2 receptori. Jedinjenje prema ovom pronalasku i bronhodilatator mogu da se primenjuju na pacijenta simultano, sekvencionalno ili u kombinaciji. Za tretiranje stanja koja zahtevaju antagonizam i neurokinina-1 i neurokinina-2, uključujući oboljenja vezana sa bronhokonstrukcijom i/ili plazma ekstravazacijom u disajnim putevima, kao što je astma, hronični bronhitis, bolesti disajnih puteva, ili cistična fibroza, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se upotrebi zajedno sa antagonistom tahikinina koji deluje na receptore neurokinina-2, ili sa antagonistom tahikinin receptora koji deluje i na receptore neurokinina-1 i neurokinina-2.

Slično, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se upotrebi sa leukotrien antagonistima, kao što je leukotrien D4antagonist kao što je jedinjenje odabrano od onih opisanih u Evropskim patentnim specifikacijama brojevi 0 480 717 i 0 604 114 i u US patentima brojevi 4,859,692 i 5,270,324. Ova kombinacija je naročito korisna u tretiranju respiratornih oboljenja kao što su astma, hronični bronhitis i kašalj.

Razumljivo je da se za tretirenje ili prevenciju migrene, jedinjenje prema ovom pronalasku može upotrebiti zajedno sa drugim anti-migrenoznim sredstvima, kao što su ergotamini ili 5-HTiagonisti, naročito sumatriptan ili rizatriptan. Isto tako, za tretitranje bijevioralne hiperalgezije, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se upotrebi zajedno sa antagonistom N-metil D-aspartatom (NMDA) kao što je dizocilpin. Za tretiranje ili prevenciju inflamatornih stanja u nižem urinarnom traktu, naročito cistitisa, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se upotrebi zajedno sa anti-inflamatornim sredstvom kao što je antagonist bradikinin receptora.

Razumljivo je da se za tretiranje ili prevenciju bola ili nocicepcije, jedinjenje prema ovom pronalasku može upotrebiti zajedno sa drugim analgeticima, kao što je acetaminofen (paracetamol), aspirin i drugi NSAID i naročito, opioidnim analgeticima, naročito morfijumom. Specifična anti-inflamatorna sredstva obuhvataju diklofenak, ibuprofen, indometacin, ketoprofen, naproksen, piroksikam sulindak. Pogodni opioidni analgetici za upotrebu zajedno sa jedinjenjem prema ovom pronalasku uključuju morfijum, kodein, dihidrokodein, diacetilmorfin, hidrokodon, hidromorfon, levorfanol, oksimorfon, afenantil, buprenorfin, butorfanol, fentanil, sufentanil, meperidin, metadon, nalbufin, propoksifen i pentazocin; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so. Poželjne soli ovih opoidnih analgetika uključuju morfin sulfat, morfin hidrohlorid, morfin tartarat, kodein fosfat, kodein sulfat, dihidrokodein bitartarat, diacetilmorfin hidrohlorid, hidrokodon bitartarat, hidromorfin hidrohlorid, levorfanol tartarat, oksimorfon hidrohlorid, afenantil hidrohlorid, buprenorfin hidrohlorid, butorfanol tartarat, fenantril citrat, meperidin hidrohlorid, metadon hidrohlorid, nalbufin hidrohlorid, propoksifen hidrohlorid, propoksifen napsilat (2-naftalinsulfonska kiselina (1:1) monohidrat) i pentazocin hidrohlorid.

S toga u daljem aspektu ovog pronalaska, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku i analgetik, zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatijvim nosačem ili ekscipijentom.

U daljem ili alternativnom aspektu ovog pronalaska obezbeđen je proizvod koji sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku i analgetik kao kombinovani preparat za simultanu, odvojenu ili sekvencionalnu upotrebu u tretiranju ili prevenciji bola ili nocicepcije.

Dalje će biti prihvatljivo da se za tretiranje ili prevenciju depresije i/ili anksioznosti jedinjenje prema ovom pronalasku može upotrebiti u kombinaciji sa antidepresantnim sredstvom ili anti-anksioznim sredstvom. Pogodne klase antidepresivnih sredstava koje se upotrebljavaju u ovom pronalasku uključuju: inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina, selektivni serotin uključuje inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina, selektivne inhibitore ponovnog preuzimanja serotinina, inhibitore monoamin oksidaze, inhibitore reverzibilne monoamin oksidaze, inhibitore ponovnog preuzimanja serotinina i noradrenalina, antagoniste kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF), antagoniste a-adrenoreceptora i atipične antidepresante. Jedna druga klasa antidepresantnih sredstava za upotrebu u ovom pronalasku su noradrenergični i specifični serotonergični antidepresanti, kao što je mirtazapin. Pogodni primeri inhibitora ponovnog preuzimanja norepinefrina uključuju amitripdilin, klomipramin, doksepin, imipramin, trimipramin, amoksapin, desipramin, maprotilin, nortriptilin, reboksetin i protriptilin i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina uključuju fluoksetin, fluvoksamin, paroksetin i sertralin i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri inhibitora monoamin oksidaze uključuju izokarboksazid, fenelzin, tranilcipromain i selegilin, i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri inhibitora reverzibilne monoamin oksidaze uključuju moklobemid, i njegove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri inhibitora ponovnog preuzimanja serotinina i noradrenalina uključuju venlafaskin i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri antagonista kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF) uključuju ona jedinjenja opisana u Internacionalnim Patentnim Specifikacijama brojeva W0 94/13643, W0 94/13644, W0 94/13661, W0 94/13676 i W0 94/13677. Pogodni primeri atipičnih antidepresanata uključuju bupropion, litijum, nefazoedin, sibutramin, trazodon i viloksazin i njihove faramaceutski prihvatljive soli. Drugi antidepresanti za upotrebu u ovom pronalasku uključuju adinozolam, alaproklat, amineptin, amitriptilin/hlor-diazepoksid kombinaciju, atipamezol, azamianeserin, bazimaprin, fefuralin, bifemelan, binodalin, bipenamol, brofaromin, buprion, karoksazon, ceriklamin, cianopramin, cimoksatom, citalpram, klemeprol, klovoksamin, desepinil, deanol, demeksiptilin, dibenzepin, dotiepin, droksidopa, enefeksin, setazolam, etoperidon, femoksetin, fengabin, fazolamin, fluotracen, idazoksan, indalpin, indeloksazin, iprindol, levoprotilin, litoksetin, lofepramin, medifoksamin metapramin, matralindol, mianserin, milnacipran, minaprin, mirtazepin, montirelin, nebracetam, nefopam, nialamid, nomifensin, norfluoksetin, orotirelin, oksaflozan, pinazepa, pirindol, pizotilin, ritaserin, rolipram, serokloremin, setiptilin, sibutramin, sulbutiamin, sulprid, teniloksazin, tozalinon, timoliberin, tianeptin, tiflukarbin. tofenacin, tofisopam, toloksaton, toraoksetin, veraliprid, vikvalin, zimelidin i zimetapin i njihove farmacutski prihvatljive soli, i St. John-ova biljka, iliHypericum perforatum,ili njihovi ekstrakti. Poželjna antidepresantna sredstva uključuju selektivne inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina, naročito fluoksetin, fluvoksamin, paroksetin i sertralin i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Pogodne klase anti-anksioznih sredstava koji se upotrebljavaju u ovom pronalasku uključuju benzodiazepine i 5-HTiaagoniste ili antagoniste, naročito 5-HTiAparcijalne agoniste, i antagoniste kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF). Pored benzodiazepina, druge pogodne klase anti-anzietinskih sredstava su nonbenzodiazepinski sadativni-hipnotički lekovi kao što su zolpidem; lekovi koji stabilišu raspoloženje kao što su klobazam, gabapentin, lamo-trigin, loreklezol, okskarbamezepin, stiripentol i vigabatrin; i barbiturati. Pogodni benzodiazepini za upotrebu u ovom pronalasku uključuju alprazolam, hlordizepoksid, klonazepam, hlorazepat, diazepam, halazepam, lorezepam, oksazepam i prazepam, i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri 5-HT1Aagonista ili antagonista za upotrebu u ovom pronalasku uključuju naročito 5-HTiAdelimične agoniste buspirona, fleksinoksan, gepiron, ipsapiron i pindolol i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodni primeri antagonist kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF) uključuju ona jedinjenja opisana u Internacionalnim Patentnim Specifikacijama brojeva W0 94/13643, W0 94/13644, W0 94/13661, W0 94/13676 i W0 94/13677. Jedna druga klasa anti-anksioznih sredstava za upotrebu u ovom pronalasku su jedinjenja koja imaju muskarinsku holinergičnu aktivnost. Pogodna jedinjenja u ovoj klasi uključuju m 1 muskarinske holinergične receptor antagoniste kao što su ona jedinjenja opisana u Evropskim Patentnim Specifikacijama brojeva 0 709 093, 0 709 094 i 0 773 021 i u Internacionalnoj Patentnoj Specifikaciji br. WO 96/12711. Jedna druga klasa anti-anksioznih sredstava koja su od upotrebe u ovom pronalasku su jedinjenja koja deluju na jonske kanale. Pogodna jedinjenja u ovoj klasi uključuju karbamazepin, lamotriain i valproat, i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Stoga, u daljem aspektu ovog pronalaska, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema ovom pronalsku i antidepresant ili anti-anksiozno sredstvo zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijentom.

Pogodna antipsihotička sredstva koja se upotrebljavaju u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku uključuju fenotiazin, tioksanten, heterociklični dibenzazepin, butirofenon, difenilbutilpiperadin i indolon klase antipsihotičnih sredstava. Pogodni primeri fenotiazina uključuju hlorpromazin, mesoridazin, tioridazin, acetofenazin, fluofenazin, perfenazin i trifluoroperazin. Pogodni primeri tioksantena uključuju hlorprotiksen i tiotiksen. Pogodni primeri dibenzazepina uključuju klozapin i olanzepin. Primer butirofenona je haloperidol. Primer difenilbutilpiperidina je pimozid. Primer indolona je molindolon. Druga antipsihotička sredstva uključuju loksapin, sulpirid i ripseridon. Prihvatljivo je da kada se antipsihotička sredstva upotrebljavaju u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku, mogu da budu u obliku farmaceutski prihvatljive soli, na primer, kao hlorpromazin hidrohlorid, mesoridazin besilat, tioridazin hidrohlorid, acetofenazin maleat, fluofenazin hidrohlodid, fluorfenazin enatat, flufenazin dekanoat, trifluoperazin hidrohlorid, tiotiksen hidrohlorid, haloperidol dekanoat, loksapin sukcinat i molindon hidrohlorid. Perfenazin, hlorprotiksen, klozapin, olanzapin, haloperidol, pimozid i risperidon se obično upotrebljavaju u obliku koji nisu soli.

Druge klase antipsihotičkih sredstava koja se upotrebljavaju u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku uključuju antagoniste dopamin receptora, naročito D2, D3 i D4 antagoniste dopamin receptora i agoniste muskarinskog ml receptora. Primer D3 dopamin receptor antagonista je jedinjenje PNU-99194A. Primer D4 dopamin receptor antagonista je PNU-101387. Primer muskarinskog ml receptor agonista je ksanomelin.

Jedna druga klasa antipsihotičkih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku je 5-HT2Areceptor antagonist, čiji primeri uključuju MDL100907 i fananserin. Takođe od upotrebe u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku su antagonisti serotinin dopamina (SDAs) za koje se veruje da sjedinjavaju aktivnosti 5-HT2ai antagonista dopamin receptora, primeri koji uključuju olanzapin i ziperasidon.

Stoga, u daljem aspektu ovoa pronalaska je obezbeđena farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku i antipsihotičko sredstvo, zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijentom.

Jedinjenje prema ovom pronalasku i drugo faramakološki aktivno sredstvo mogu da se primenjuju na pacijenta simultano, sekvencionalno ili u kombinaciji. Razumljivo je da kada se upotrebljava kombinacija prema ovom pronalasku, jedinjenje prema ovom pronalasku i drugo farmakološki aktivno sredstvo mogu da budu u istom farmaceutski prihvatljivom nosaču i stoga se primenjuju simultano. Oni mogu da budu u odvojenim farmaceutski prihvatljivim nosačima kao što su uobičajeni za oralne oblike doza koje se uzimaju simultano. Izraz "kombinacija" se dalje odnosi na slučaj kada se jedinjenja obezbeđuju u odvojenim oblicima doze i primenjuju se sekvencionalno.

Farmakološki profil jedinjenja prema ovom pronalasku pruža mogućnost za njihovu upotrebu u terapiji pri niskim dozama time omogućavajući smanjenje na minimum rizika od neželjenih sporednih efekata.

Jedinjenje prema ovom pronalasku može da se primenjuje na pacijente (životinje i ljude) kojima je potreban takav tretman u dozama koje će obezbediti optimalnu farmaceutsku efikasnost. Razumljivo je da će doza potrebna za upotrebu kod bilo koje određene primene varirati od pacijenta do pacijenta, ne samo od određenog jedinjenja ili kompozicije koji su odabrani, već i od načina primene, prirode stanja koje se tretira, starosti i stanja pacijenta, istovremenog lečenja ili specijalnih režima ishrane kojih se pridržava pacijent, i drugih faktora koje će oni koji su upoznati sa tehnikom raspoznati, sa pogodnim doziranjem koje načelno zavisi od slobode odlučivanja dežurnog lekara.

U tretiranju stanja vezanih sa viškom tahikinina, pogodan nivo doze će uglavnom biti oko 0.001 do 50 mg po kg telesne težine pacijenta na dan koja se može primenjivati u jednoj ili višestrukim dozama. Prvenstveno će nivo doze biti oko 0.0.1 do oko 25 mg/kg na dan; pogodnije oko 0.05 do oko 10 mg/kg na dan. Na primer, u tretiranju stanja koja uključuju neurotransmisiju senzacije bola, pogodan nivo doze je oko 0.001 do 25 mg/kg na dan, prvenstveno oko 0.005 do 10 mg/kg na dan, i naročito oko 0.01 do 5 mg/kg na dan. Jedinjenje može da se primenjuje režimom od 1 do 4 puta na dan, prvenstveno jednom ili dva puta na dan. U tretiranju povraćanja, pogodan nivo doze je oko 0.001 do 10 mg/kg na dan, prvenstveno oko 0.005 do 5 mg/kg na dan, i naročito oko 0.01 do 1 mg/kg na dan. Jedinjenje može da se primenjuje pri režimu od 1 do 4 puta na dan, prvenstveno jednom ili dva puta na dan. U tretiranju ili prevenciji oboljenja centralnog nervnog sistema, pogodan nivo doze je oko 0.001 do 10 mg/kg na dan, prvenstveno oko 0.005 do 5 mg/kg na dan, a naročito oko 0.01 do 1 mg/kg na dan. Jedinjenje može da se primenjuje režimom od 1 do 4 puta na dan, prvenstveno jednom ili dva puta na dan.

Razumljivo je da će količina jedinjenja prema ovom pronalasku potrebna za upotrebu u bilo kojem tretiranju zavisiti ne samo od određenih jedinjenja ili kompozicije koji su odabrani, već takođe od načina primene, prirode i stanja koje se tretira, i od starosti i stanja pacijenta, i načelno će zavisiti od slobode odlučivanja dežurnog lekara.

Farmaceutske kompozicije prema ovom pronalasku mogu da se upotrebe u obliku farmaceutskog preparata, na primer, u čvrstom, polučvrstom ili tečnom obliku, koji sadrži jedno ili više jedinjenja prema ovom pronalasku, kao aktivnu komponentu, u smeši sa organskim ili neorganskim nosačem ili ekscipijentom pogodnim za spoljašnje, unutrašnje ili parenteralne primene. Aktivna komponenta može da se pomeša, na primer, sa uobičajenim ne-toksičnim, farmaceutski prihvatljivim nosačima za tablete, pelete, kapsule, supozitorije, rastvore, emulzije, suspenzije i bilo kojim oblikom pogodnim za upotrebu. Nosači koji se mogu upotrebiti su voda, glukoza, laktoza, guma arabika, želatin, manitol, škrobna pasta, magnezijum trisilikat, talk, kukuruzni škrob, keratin, koloidni silicijum dioksid, škrob od krompira, urea i drugi nosači pogodni za proizvodnju preparata, u čvrstom, polučvrstom, ili tečnom obliku, i dodatne pomoćne supstance, stabilizaciona sredstva, sredstva za zgušnjavanje i sredstva za bojenje i parfemi. Aktivno predmetno jedinjenje se uključuje u farmaceutsku kompoziciju u količini dovoljnoj da prozvede željeni efekat na postupak ili stanje bolesti.

Za dobijanje čvrstih kompozicija kao što su tablete, glavna aktivna komponenta se pomeša sa farmaceutskim nosačem, npr., uobičajenim komponentama za tabletiranje kao što su kukuruzni škrob, laktoza, saharoza, sorbit, talk, stearinska kiselina, magnezijum stearat, dikalcijum fosfat ili gume i drugim farmaceutskim razblaživačima, npr. vodom, pri čemu se obrazuje čvrsta prethodno formulisana kompozicija koja sadrži homogenu smešu jedinjenja prema ovom pronalasku, ili njegovu ne-toksičnu farmaceutski prihvatljivu so. Kada se navode ove prethodno formulisane kompozicije kao homogene, smatra se da je aktivna komponenta ravnomerno raspoređena kroz kompoziciju tako da se kompozicija može odmah podeliti u jednake efikasne pojedinačne oblike doza kao što su tablete, pilule i kapsule. Ova prethodno formulisana kompozicija se zatim deli na manje pojedinačne oblike doza, tipa opisanog gore, koje sadrže od 0.1 do oko 500 mg aktivne komponente prema ovom pronalasku. Tablete ili pilule nove kompozicije mogu da se oblažu ili na drugi način kompaundiraju da obezbede oblike doza koji daju poboljšano ili produženo delovanje. Na primer, tableta ili pilula može da sadrži komponentu unutrašnje doze i spoljašnje doze, gde je ova poslednja u obliku koverte oko prethodne. Dve komponente mogu da se odvoje pomoću sloja koji se ne rastvara u stomaku i koji služi da spreči dezintegraciju u stomaku i omogućava da unutrašnja komponenta prođe intaktna u duodenum ili se oslobadja usporeno. Različiti materijali mogu da se upotrebe za takve slojeve ili obloge, koji se ne rastvaraju u stomaku (enterički), takvi materijali obuhvataju jedan niz polimernih kiselina i smeša polimernih kiselina sa takvim materijalima kao što su šelak, cetil alkohol i acetat celuloze.

Tečni oblici u kojima se nove kompozicije prema ovom pronalasku mogu inkorporirati za oralnu primenu ili pomoću injektiranja uključuju vodene rastvore pogodno začinjene sirupe, vodene ili uljane suspenzije, i emulzije sa prihvatljivim uljima kao što su ulje pamučnog semena, susamovo ulje, kokosovo ulje ili kikiriki ulje, ili sa sredstvom za rastvaranje ili emulgovanje pogodnim za intravensku primenu, kao i elkisirima i sličnim farmaceutskim prenosiocima. Pogodna disperziona ili suspenziona sredstva za vodene suspenzije uključuju sintetske gume kao što su tragant guma, akacija guma, alginat, dekstran, natrijum karoksimetilceluloza, metilceluloza, polivinilpirolidon ili želatin.

Kompozicije za inhalaciju ili insuflaciju obuhvataju rastvore i suspenzije u farmaceutski prihvatljivim, vodenim ili organskim rastvaračima, ili njihovim smešama, i praškove. Tečne ili čvrste kompozicije mogu da sadrže pogodne farmaceutski prihvatljive ekscipijente kao što je izneto gore. Prvenstveno kompozicije se primenjuju oralnim ili nazalnim respiratornim putevima radi lokalnog ili sistemskog efekta. Kompozicije u prvenstveno sterilnim farmaceutski prihvatljivim rastvaračima mogu da se raspršavaju pomoću upotrebe inertnih gasova. Raspršeni rastvori mogu da se udišu direktno iz uređaja za raspršavanje ili uređaj za raspršavanje može da se spoji za masku za lice, šator ili mašinu za disanje sa naizmeničnim pozitivnim pritiskom. Rastvori, suspenzije ili praskaste kompozicije- mogu da se primenjuju, prvenstveno oralno ili nazalno, iz uređaja koji oslobađaju formulaciju na pogodan način.

Za tretiranje kliničkih stanja i oboljenja navedenih gore, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se primenjuje oralno, lokalno, parenteralno, inhalacijom spreja ili rektalno u formulacijama jediničnih doza koje sadrže uobičajene ne-toksične farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvanse i prenosioce. Izraz parenteralni kao što je upotrebljen ovde obuhvata subkutane injekcije, intravenske, intramuskularne, intrasternalne injekcione i infuzione tehnike.

PRIMER 1

( S)-( 4- Fluorofenil) glicin

Preko hiralne sinteze:

Stupanj A: 3-( 4- Fluorofenil) acetil- 4-( S)- benzil- 2- oksazo-

lidinon

U sušnici osušeni trogrli balon od 1 litra snabdeven sa pregradom, ulazom za azot, termometrom i magnetnim uređajem za mešanje, ispere se azotom i šaržira se sa rastvorom od 5.09 g (33.0 mmola) 4-fluoro-fenilsirćetnom kiselinom u 100 ml anhidrovanog etra. Rastvor se ohladi do -10°C i tretira se sa 5.60 ml (40.0 mmola) trietilamina, a zatim sa 4.30 ml. (35,0 mmola) trimetilacetil hlorida. Odmah se obrazuje beo talog. Dobijena smeša se meša na -10°C 40 minuta, zatim se ohladi do - 78°C.

U sušnici osušeni balon sa okruglim dnom od 250 ml koji je snabdeven pregradom i uređajem za magnetno mešanje, ispere se azotom i šaržira se sa rastvorom od 5.31 g (30.0 mmola) 4-(S)-benzil-2-oksazolidinona u 40 ml suvog THF. Rastvor se meša u kupatilu od suvog leda/acetona 10 minuta, zatim se lagano dodaje 18.8 ml 1.6 M n-butil-litijum rastvora u heksanima. Posle 10 minuta, dodaje se litijumom obrađeni oksazolidinonski rastvor, kroz cevčicu, u smešu u trogrlom balonu. Kupatilo za hlađenje se uklanja od dobijene smeše i dopusti se da se temperatura poveća do 0°C. Reakcija se zaustavlja sa 100 ml zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida, prebacuje u balon od 1 1, i etar i THF se uklanjaju u vakuumu. Koncentrovana smeša se raspodeljuje između 300 ml metilen hlorida i 50 ml vode i odvoje se slojevi. Organski sloj se pere sa 200 ml 2N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, 300 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata, suši se preko magnezijum sulfata i koncentruje u vakumu. "Flash" hromatografija na 400 g silika gela upotrebljavajući 3:2 v/v heksana/etra kao eluanta daje 8.95 g ulja koje sporo očvršćava pri stajanju. Prekristalizacija iz 10:1 heksana/etra daje 7.89 g (83%) naslovnog jedinjenja kao bele čvrste supstance, t.t. 64-66°C. Maseni spektar (FAB): m/Z 314 (M+H, 100%), 177 (M-ArCH2CO+H, 85%).<X>H-NMR (400 MHz, CDC13) : 5 2.16 (dd, 1 H, J=13.2, 9.2), 3.26 (dd, J = 13.2, 3.2), 4.16-4.34 (m, 4 H) , 4.65-4.70 (m, 1 H) , 7.02-7.33 (m, 9H) . Analiza: Izračunato za Ci8Hi6FN03: C, 69.00; H, 5.15; N, 4.47; F, 6.06; Nađeno: C, 68.8 6; H, 5.14; N, 4.48; F, 6.08.

Stupanj B: 3-(( S)- Azido-( 4- fluorofenil)) acetil- 4-( S)-benzil- 2- oksazolidinon

U sušnici osušen trogrli balon od 1 litra snabdeven sa pregradom, ulazom za azot, termometrom, i magnetnim uređajem za mešanje, ispere se azotom i šaržira se sa rastvorom od 58.0 ml IM rastvora kalijum bis(trimetilsilil)amida u toluolu i 85 ml THF, i ohladi se do -78°C. U sušnici osušeni balon sa okruglim dnom od 250 ml, snabdeven sa pregradom i magnetnim uređajem za mešanje ispere se azotom i šaržira se sa rastvorom od 7.20 g (23.0 mmola) 3-(4-fluorofenil)acetil-4-(S)-benzil-2-oksazolidinonom u 40 ml THF. Acil oksazolidinonski rastvor se meša u kupatilu od suvog leda/acetoma 10 minuta, zatim se prebaci pomoću cevčice u rastvor kalijum bis (trimetilsilil)amida takvom brzinom da se unutrašnja temperatura održava ispod -70°C. Acil oksazolidinonski balon se ispere sa 15 ml THF i THF od ispiranja se preko cevčice dodaje u reakcinu smešu i dobijena smeša se meša na -78°C 30 minuta. U sušnici osušeni balon sa okruglim dnom od 250 ml, koji je snabdeven sa pregradom magnetnim uređajem za mešanje, ispere se azotom i šaržira se sa rastvorom od 10.89 g (35.0 mmola) 2,4,6-tri-izopropilfenilsulfonil azida u 40 ml THF. Rastvor azida se meša u kupatilu od suvog leda/acetona 10 minuta, zatim se prebaci pomoću cevčice, u reakcionu smešu takvom brzinom da se unutrašnja temperatura smeše održava ispod - 70°C. Posle 2 minuta, reakcija se zaustavlja sa 6.0 ml glacijalne sirćetne kiseline, kupatilo za hlađenje se uklanja i smeša se meša na sobnoj temperaturi 18 sati. Zaustavljena reakciona smeša se raspodeljuje izmedju 300 ml etil acetata i 300 ml 50% zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj se odvaja, suši preko magnezijum sulfata, i koncentruje u vakumu. Flash hromato-grafija na 500 g silika gela upotrebljavajući 2:1 v/v, a zatim 1:1 v/v heksana/metilen hlorida kao eluanta, daje 5.45 g (67%) naslovnog jedinjenja kao ulje. IR Spektar (čist, cm"<1>): 2104, 1781, 1702.<1>H-NMR(400 MHz, CDC13) : 5 2.86 (dd, 1 H, J = 13.2, 9.6), 3.40 (dd, 1 H, J= 13.2, 3.2), 4.09-4.19 (m, 2 H), 4.62-4.68 (m, 1 H), 6.14 (s, 1 H), 7.07-7.47 (m, 9 H) . Analiza: Izračunato za C18Hi5FN403: C, 61.01; H, 4.27; N, 15.81; F, 5.36; Nađeno: C, 60.99; H, 4.19; N, 15.80; F, 5.34.

Stupanj C: ( S)- Azido-( 4- fluorofenil) sirćetna kiselina

Rastvor od 5.40 g (15.2 mmola), 3-( (S)-azido-(4-fluorofenil))acetil-4-(S)-benzil-2-oksazolidinona u 200 ml 3:1 v/v THF/vode se meša u kupatilu od leda 10 minuta. U jednoj porciji se dodaje litijum hidroksid monohidrat (1.28 g, 30.4 mmol) i dobijena smeša se meša na hladno 30 minuta. Reakciona smeša se raspodeljuje izmedju 100 ml metilen hlorida i 100 ml 25% zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i slojevi se odvajaju. Vodeni sloj se pere sa 2 x 100 ml metilen hlorida i zakišeljava se do pH 2 sa 2 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline. Dobijena smeša se ekstrahuje sa 2 x 100 ml etil acetata; ekstrakti se sjedinjavaju, peru se sa 50 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suše se preko magnezijum sulfata i kon-centruje u vakumu, pri čemu se dobija 2.30 (77%) naslovnog jedinjenja kao ulja koje se upotrebljava u sledećem stupnju bez daljeg prečišćavanja. IR Spektar (čist, cm-1): 2111, 1724.<1>H NMR (400 MHz, CDC13) : 5 5.06 (s, 1 H) , 7.08-7.45 (m, 4 H), 8.75 (br. s, IH).

Stupanj D: ( S)-( 4- Fluorofenil) glicin

Smeša od 2.30 g (11.8 mmola) (S)-azido-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline, 250 mg 10% paladijuma na uglju kao katalizatora i 160 ml 3:1 vode/sirćetne kiseline meša se pod atmosferom vodonika u toku 18 sati. Reakciona smeša se filtrira kroz Celit i balon i filter kolač se dobro ispiraju sa oko 1 litrom 3:1 v/v vode/sirćetne kiseline. Filtrat se koncentruje u vakumu do oko 50 ml zapremine. Dodaje se 300 ml THF i smeša se koncentruje pri čemu se dobija čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se suspenduje u 1:1 v/v metanola/etra, filtrira i suši, pri čemu se dobija 1.99 g (100%) naslovnog jedinjenja.<1>H-NMR (400 MHz, D20 + NaOD): 5 3.97 (s, 1 H), 6.77 (app t, 2 H, J = 8.8), 7.01 (app t, 2 H, J = 5.6).

Preko rezolucije

Stupanj A' : 4- Fluorofenilacetil hlorid

Rastvor od 150 g (0.974 mola) 4-florofenil sirćetne kiseline i 1 ml N,N-dimetilformamiđa u 500 ml toluola na 40°C se tretira sa 20 ml tionil hlorida i zagreva se do 40°C. Dodatnih 61.2 ml tionil hlorida se dodaje ukapavanjem u toku 1.5 sati. Posle dodavanja, rastvor se zagreva na 50°C 1 sat, rastvarač se uklanja u vakuumu i preostalo ulje se destiluje na smanjenom pritisku (1.5 mm Hg), pri čemu se dobija 150.4 g (89.5%) naslovnog jedinjenja, t.klj. = 68-70°C.

Stupanj B': Metil 2- bromo- 2-( 4- fluoro) fenilacetat

Smeša od 150.4 g (0.872 mola) 4-fluorofenil-acetil hlorida i 174.5 g (1.09 mola) broma se ozračuje na 40-50°C sa kvarcnom lampom u toku 5 sati. Reakciona smeša se dodaje ukapavanjem u 400 ml metanola i rastvor se meša 16 sati. Rastvarač se uklanja u vakumu i preostalo ulje se destiluje na smanjenom pritisku (1.5 mm Hg) , pri čemu se dobija 198.5<g>(92%)naslovnog jedinjenja, t.klj. = 106-110°C.

Stupanj C: Metil ( ±)-( 4- fluorofenil) glicin

Rastvor od 24.7 g (0.1 mola) metil 2-brom-2-(4-fluoro)fenilacetata i 2.28 g (0.01 mola) trietilamonijum hlorida u 25 ml metanola se tretira sa 6.8 g (0.105 mola) natrijum azida i dobijena smeša se meša 20 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se filtrira; filtrat se razblažuje sa 50 ml metanola i hidrogenuje u prisustvu 0.5 g 10% Pd/C na 50 psi 1 sat. Rastvor se filtrira i rastvarač uklanja u vakumu. Ostatak se raspodeljuje izmedju 10% vodenog rastvora natrijum karbonata i etil acetata. Organska faza se pere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suši se preko magnezijum sulfata i koncentruje u vakumu, pri

čemu se dobija 9.8 naslovnog jedinjenja kao ulje.

Stupanj D': Metil ( S)-( 4- fluorofenil) glicinat

Rastvor od 58.4 g metil (±)-4-fluorofenil-glicinata u 110 ml 7:1 v/v etanola/vode se meša sa rastvorom od 28.6 g (0.0799 mola) 0,0'-(+)-dibenzoilvinske kiseline ((+)-DBT) (28.6 g, 0.0799) u 110 ml 7:1 v/v etanola:vode i dobijeni rastvor se ostavi da stari na sobnoj temperaturi. Etil acetat (220 ml) se dodaje pošto je kristalizacija završena i dobijena smeša se ohladi do -20°C i filtrira se, pri čemu se dobija 32.4 g metil (S)-(4-fluorofenil)glicinat, (+)-DBT soli (ee = 93,2%). Matične lužine se koncentruju u vakuumu i slobodna baza se oslobađa raspodeljivanjem izmedju etil acetata i vodenog rastvora natrijum karbonata. Rastvor slobodne baze, tako dobijen, u 110 ml 7:1 v/v etanola/vode se meša sa rastvorom od 28.6 g (0.0799 mola) 0,0'-(-)-dibenzoilvinske kiseline ((-)-DBT) (28.6 g, 0.0799 mola) u 110 ml 7:1 v/v etanola:vode i dobijeni rastvor se ostavi da stari na sobnoj temperaturi. Etil acetat (220 ml) se dodaje pošto je kristalizacija završena i dobijena smeša se ohladi do -20°C i filtrira se, pri čemu se dobija 47.0 g metil (R)-(4-fluorofenil)glicinata,

(-)-DBT soli (ee = 75.8%). Reciklovanjem matičnih lužina i dodavanjem (+)-DBT dobija se druga šarža od 7.4 g (S)-(4-fluorofenil)glicinata, (+)-DBT soli (ee = 96.4%). Dve šarže (S)-amino estra (39.8 g) se sjedinjavaju u 200 ml 7:1 v/v etanola/ vode, zagrevaju se 30 minuta i hlade do sobne temperature. Dodavanje etil acetata, hlađenje i filtracija daju 31.7 g (S)-(4-fluorofenil) glicinata, (+)-DBT soli (ee>98%). Enantiomerni višak je određen pomoću hiralne HPLC (Crownnpak CR(+) 5% MeOH u agHC104pH2 1.5 ml/min 40°C 200 nm). Smeša od 17.5 g (S)-(4-fluorofenil) glicinata, (+)-DBT soli i 32 ml 5.5 N HC1 (32 ml) se zagreva pri refluksu 1.5 sati. Reakciona smeša se koncentruje u vakumu i ostatak se rastvara u 40 ral vode. Vodeni rastvor se pere sa 3 x 30 ml etil acetata

i odvoje se slojevi. pH vodenog sloja se podesi do 7 upotrebljavajući amonijum hidroksid i staložena čvrsta supstance se profiltrira, pri čemu se dobija 7.4 g naslovnog jedinjenja (ee=8.8%).

PRIMER 2

3-( S)-( 4- Fluorofenil)- 4- benzil- 2- morfolinon

Stupanj A: N- Benzil ( S)-( 4- fluorofenil) glicin

Rastvor od 1.87 g (11.05 mmola) (S)-(4-fluorofenil) glicina i 1.12 ml (11.1 mmola) benzaldehida u 11.1 ml IN vodenog rastvora natrijum hidroksida i 11 ml metanola na 0°C se tretira sa 165 mg (4.4 mmola) natrijum borhidrida. Kupatilo za hlađenje se uklanja i dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta. Druge porcije benzaldehida (1.12 ml (11.1 mmola)) i natrijum borhidrida 165 mg (4.4 mmola) se dodaju u reakcionu smešu i mešanje se nastavlja 1.5 sati. Reakciona smeša se raspodeljuje izmedju 100 ml etra i 50 ml vode i odvoje se slojevi. Vodeni sloj se odvaja i filtrira da bi se uklonila mala količina nerastvornog materijala. Filtrat se zakiseli do pH 5 sa 2 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline i čvrsta supstance koja se staloži se filtrira, ispere sa dobro sa vodom, zatim sa etrom, i suši se, pri čemu se dobija 1.95 g naslovnog jedinjenja.<1>H-NMR (400 MHz , D20 + NaOD): 5 3.33 (AB q, 2 H, J = 8.4), 3.85 (s, 1 H), 6.79-7.16 (m, 4 H) .

Stupanj B: 3-( S)- 4-( Fluorofenil)- 4- benzil- 2- morfolinon

Smeša od 1.95 g (7.5 mmola) N-benzil (S)-(4-fluorofenil)glicina, 3.90 ml (22.5 mmola) N,N-diizopropiletilamina, 6.50 ml (75.0 mmola) 1,2-dibrometana i 40 ml N, N-dimetilf ormamida se meša na 100°C 20 sati (rastvaranje svih čvrstih supstanci se događa pri zagrevanju). Reakciona smeša se ohladi i koncentruje u vakumu. Ostatak se raspodeljuje izmedju 250 ml etra i 100 ml 0.5 N rastvora kalijumbisulfata i odvoje se slojevi. Organski sloj se pere sa 100 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata, 3 x 150 ml vode, suši se preko magnezijum sulfata i koncentruje u vakumu. Flash hromatografija na 125 g silika gela upotrebljavajući 3:1 v/v heksana/etra kao eluenta daje 1.58 g (74%) naslovnog jedinjenja kao ulje.<X>H-NMR (400 MHz, CDC13) : 5 2.65 (dt, 1 H, J = 3.2, 12.8), 3.00 (dt, 1 H, J = 12.8, 2.8), 3.16 (d, 1 H, J = 13.6), 3.76 (d, 1 H, J = 13.6), 4,24 (s, IH), 4.37 (dt, 1 H, J = 13.2, 3.2), 4.54 (dt, 1 H, J = 2.8, 13.2), 7.07-7.56 (m, 9 H).

PRIMER 3

2-( R)- 3, 5- Bis( trifluorometil) benziloksi)- 3-( S)-( 4- fluoro)

fenil- 4- benzil morfolin

Rastvor od 2.67 g (10.0 mmola) 3-(R)-{4-fluoro)-fenil-4-benzil-2-morfolinona u 40 ml suvog THF se ohladi do -78°C. Hladan rastvor se tretira sa 12.5 ml 1.0 M L-Selectrid<®>rastvora u THF, održavajući unutrašnju reakcionu temperaturu ispod -70°C. Dobijeni rastvor se meša na hladno 45 minuta i reakcija se šaržira sa 3.60 ml (20.0 mmola) 3,5-bis(trifluorometil) benzoil hlorida. Dobijena žuta smeša se meša na hladno 30 minuta i reakcija se zaustavlja sa 50 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Zaustavljena smeša se raspodeljuje između 300 ml etra i 50 ml vode i odvoje se slojevi. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata. Vodeni sloj se ekstrahuje sa 300 ml etra; ekstrakt se suši i sjedinjava sa originalnim organskim slojem. Sjedinjeni organski slojevi se koncentruju u vakumu. Flash hromatografija na silika gelu upotrebljavajući 37:3 v/v heksan /etar kao eluent daje naslovno jedinjenje kao čvrstu supstancu (83% prinos). Maseni spektar (F7AB) : m/Z 528 (M+H, 25%), 270 (100%).<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz, ppm): 5 2.50 (dt, J = 3.2, 12.0, IH), 2.96 (app d, J = 12.0, IH), 2.98 (d, J = 13,6, IH), 3.74-3.78 (m, IH), 3,81 (d, J=2.8, IH), 3.94 (d, J = 13.6, IH), 4.19 (dt, J = 2.0, 12.0), 6.20 (d, J =2.8, IH), 6.99 (t, J = 8.4, 2H), 7.27-7.38 (m, 5H), 7.52-7.56 (m, 2H), 8.09 (s, IH), 8.46 (s, 2H).

PRIMER 4

Dimetil titanocen

Rastvor od 2,49 g (10.0 mmola) titanocen dihlorida u 50 ml etra u tami na 0°C se tretira sa 17.5 ml 1.4 M rastvorom metillitijuma u etru održavajući unutrašnju temperaturu ispod 5°C. Dobijena žuto/narandžasta smeša se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta i reakcija se zaustvlja laganim dodavanjem 25 g leda. Zaustavljena reakciona smeša sa razblažuje sa 50 ml etra i 25 ml vode i odvoje se slojevi. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata i koncentruje u vakumu, pri čemu se dobija 2.03 g (98%) naslovnog jedinjenja kao svetla osetljiva čvrsta supstanci. Dimetil titanocen može da se lageruje kao rastvor u toluolu na 0°C najmanje 2 nedelje bez očigledne hemijske degradacije.<1>H NMR (CDCI3, 200 MHz, ppm): 5-0.15 (s, 6H), 6.06 ts, 10H).

PRIMER 5

2-( R)-( 1-( 3, 5- Bis( trifluorometil) fenil) eteniloksi)- 3-( S)-( 4-fluoro)- fenil- 4- benzil morfolin

Rastvor od 4,9 mmola 2-(R) - (3,5-bis(trifluorometil) banziloksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-benzil morfolina i 2,50. g (12.0 mmola) dimetil titanocena u 35 ml 1:1 v/v THF/toluola se meša u uljanom kupatilu na 80°C 16 sati. Reakciona smeša se ohladi i koncentruje u vakumu. Flash hromatografija na 150 g silika gela upotrebljavajući 3:1 v/v heksana/metilen hlorida kao eluenta daje naslovno jedinjenje kao čvrstu supstancu (60% prinos). Maseni spektar (FAB): m/Z 526 (M+K, 75%), 270 (100%).

<a>H NMR (CDC13, 400 MHz, ppm): 5 2.42 (dt, J=3.6, 12.0), 2.90 (app d, J=12.0, IH), 2.91 (d, J=13.6, IH), 3.62-3.66 (m, IH), 3.72 (d, J=2,6), 3,94 (d, J=13.6, IH), 4.09 (dt, J=2.4, 12.0, IH), 4.75 (d, J=3,2, IH), 4.82 (d, J= 3.2, IH), 5.32 (d, J=2.6, IH), 7.09 (t, J=8.8, 2H) , 7.24-7.33 (m, 5H), 7.58-7.62 (m, 2H), 7.80 (s, IH), 7.90 (s, 2H).

PRIMER 6

2-( R)-( 1-( S)-( 3, 5- bis( trifluorometil) fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4-fluoro) fenil morfolin i 2( S)-( 1-( R)-( 3, 5- Bis( trifluoro- metil)-fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil morfolin

Smeša od 1.83 g (3.5 mmola) 2-(R)-(1-(3,5-bis(trifluorometil)fenil)eteniloksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-benzil

morfolina i 800 mg 5% rodijuma na alumina katalizatoru u 40 ml apsolutnog etanola se meša pod atmosferom vodonika 24 sata. Katalizator se filtrira na komadu Celita; reakcioni balon i filter kolač se peru sa 200 ml etil acetata. Filtrat se koncentruje u vakumu i ostatak se pumpa pod visokim vakumom (1 mm Hg, sobna temperatura) do suva.

Ostatak se ponovo rastvara u 40 ml izopropanola; 800 mg 10% paladijuma na uglju kao katalizatora se dodaje i dobijena smeša se meša pod atmosferom vodonika u toku 24 sata. Katalizator se filtrira na komadu Celita; reakcioni balon i filter kolač se peru sa 200 ml etil acetata. Filtrat se koncentruje u vakumu. Flash hromatografija na 50 g silika gela upotrebljavajući 2:1 v/v heksana/etra zatim 3:2 v/v etra/heksana kao eluenta daje 283 mg 2-(R)-(1-(S)-(3, 5-bis(trifluorometil)fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil morfolina i 763 mg 2-(R)-(3,5-bis (trifluorometil) fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil morfolina, oba kao ulja (ukupni prinos 68%). Za 2-(R)-1-(S)-(3,5-bis(trifluorometil)fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil morfolin: maseni spektar (FAB) m/Z 438 (M+H, 65%), 180 (100%).<X>HNMR (CDC13, 400 MHz, ppm): 5 1.47 (d, J= 6.8, 3H), 1.87 (br s, IH), 3.03 (dd, J=2.8, 12.8), 3.17 (dt, J=4.0, 12.4, IH), 3.43-3.47 (m, IH), 3.80 (dt, J=3.2, 11.6), 4.10 (d, J=2,2, IH), 4.70 (q, J=6.8, IH), 4.87 (d, J=2.2, IH), 6.99-7.03(m, 2H), 7.23-7.27 (m, 2H), 7.63 (s, 2H) , 7.66 (s, IH). Za 2-(R) - (1-(R) - (3, 5-bis (trifluorometil) fenil) etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil morfolin: Maseni spektar (FAB) m/Z 438 (M+H, 75%), 180 (100%) .<X>H NMR (CDCI3, 400 MHz, ppm): 5 1.16 (d, J=6.8), 1.80 (br s, IH), 3.13 (dd, J=3.2, 12.4), 3.23 (dt, J=3.6, 12.4), 3.63 (dd, J=2.4, 11.2), 4.01 (d, J=2.4, IH), 4.13 (dt, J=3.2, 12.0), 4.42 (d, J=2.4, IH), 4.19 (q, J=6.8, IH), 7.04-7.09 (m, 2H) , 7.27-7.40 (m, 4H), 7.73 (s, IH).

PRIMER 7

2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- Bis( trifluorometil) fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4-fluoro)- fenil- 4-( 3-( 5- okso- l, 2, 4- triazolo) metilmorfolin

Stupanj A: N- Metilkarboksi- 2- hloracetamidrazon

Rastvor od 5.0 g (66.2 mmola) hloracetonitrila u 35 ml suvog metanola se ohladi do 0°C i tretira se sa 0.105 g (1.9 mmola) natrijum metoksida. Kupatilo od leda se uklanja i smeša se ostavi da se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta. Tada se u reakciju dodaje 0.110 ml (1.9 mmola) sirćetne kiseline i zatim 5,8 g (64.9 mmola) metil hidrazinkarboksilata. Posle mešanja 30 minuta na sobnoj temperaturi, suspenzija se koncentruje u vakumu, i preko noći stavi na visoko vakuumsku liniju, pri čemu se dobija 10.5 g (98%) žutog praha, od koga se jedna porcija upotrebljava u stupnju C niže.

Stupanj B: 2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- Bis( trifluorometil) fenil)-etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 2-( N- metilkarboksi- acetami-

drazono) morfolin

Rastvor od 945 mg (2.3 mmola) (2-(R)-(1-(R)-3,5-bis(trifluorometil)fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro) fenil morfolina, 447 mg (2.7 mmola) N-metilkarboksi-2-hlor-acetamidrazona i 0.78 ml (4.5 mmola) N,N-diizopropiletil-amina u 17 ml acetonitrila se meša na sobnoj temperaturi 20 sati. Reakcija se koncentruje u vakuumu i ostatak se raspodeljuje izmedju 50 ml metilen hlorida i 25 ml vode. Organski sloj se odvaja, suši preko magnezijum sulfata i koncentruje u vakuumu. Flash hromatografijom na 50 g silika gela upotrebljavajući 50:1:0.1 metilen hlorida/metanola/ amonijum hidroksida kao eluenta dobija se 1.12 g (90%) naslovnog jedinjenja kao pena.

Stupanj C: 2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- Bis( trifluorometil) fenil)

etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 3-( 5- okso- l, 2, 4- triazolo)

metil- morfolin

Rastvor od 1.01 g (1.8 mmola) 2-(R)-(1(R)-(3,5-bis(trifluorometil)fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(2-(N-metil-karboksiacetamidrazono)morfolina u 15 ml ksilola se zagreva na refluksu 2 sata. Reakcija se ohladi i koncentruje u vakuumu. Flash hromatografija na 50 g silika gela upotrebljavajući 50:1:0.1 metilen hlorida/metanola/ amonijum hidroksida kao eluenta daje naslovno jedinjenje kao čvrstu supstancu (79% prinos). Maseni spektar (FAM): m/Z 535 (M+H, 100%), 277 (60%).<2>H NMR (CDC13+ CD30D, 400 MHz, ppm): 5 1.48 (d, J=6.8, 3H), 2.52 (app t, J=10.4, IH), 2.85-2.88 (m, 2H), 3.47 (d, J=2.8, IH), 3.63 (d, J=14.4, IH), 3.70 (dd, J=2.9, 11.6, IH), 4.24 (app t, J=10.8, IH),4.35 (d, J=2.8, IH), 4.91 (q, J=6.8, IH), 7.07 (app t, J=8.4, 2H) , 7.15 (s, 2H) , 7.37-7.40 (m, 2H) , 7.65 (s, IH). Analiza: Izračunato za 023^^7^03: C, 51.69; H, 3.96; N, 10.48; F, 24.88, Nađeno: C, 51,74; H, 4.04; N, 10.50; F, 24.59. Uzorak dobijen ovim postupkom se zatim identifi kuje kao polimorfni Oblik II. Karakteriše se pomoću difrakcione slike X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na približno: 12.6, 16.7, 17.1, 17.2, 18.0, 20.1, 20.6, 21.1, 22.8, 23.9 i 24.8°(2 teta).

PRIMER 8

Dimetil titanocen

U dobro mešanu suspenziju titanocen dihlorida (Cp2TiCl2)

(249 g, 1.00 mola) u toluolu (2.75 litara) ohlađenog na -5°C (unutrašnja temperatura) dodaje se metil magnezijum hlorid (CH3MgCl) (750 ml, 3.0 M u THF, 2.25 mola) u toku 1 sata, održavajući temperaturu ispod 8°C. Dobijena narandžasta suspenzija se ostavi da stari na 0-5°C 1 sat, ili sve dok se ne rastvori nerastvorni purpurni Cp2TiCl2. NMR se uzima da bi se potvrdio završetak reakcije (videti niže), zatim se reakcija zaustavlja u rastvoru 6% vodenog amonijum hlorida (700 ml) , održavajući temperaturu na 0-5°C. Odvajaju se slojevi i organska faza se pere sa hladnom vodom (3 x 575 ml) i slani rastvor (575 ml) se tada suši sa Na2S04(220 g) . Filtrirani organski sloj se uparava do 1.5 kg (održavajući unutrašnju temeparturu od 25° ili manju). Analiza težinskog % pomoću<1>H NMR pokazuje da rastvor sadrži 187 g proizvoda (90%, 12.5 tež % rastvora u toluolu/THF). Tipično materijal je bio više od 95% čist, sa samo tragovima polaznog materijala i monometil intermedijara. Rastvor može da se dalje koncentruje do 1.0 Kg, dajući 18 tež% rastvor u toluolu, što omogućava lakšu analizu. Međutim, prisustvo male količine THF povećava stabilnost jedinjenja. Materijal se lageruje pod azotom u zatopljenom staklenom balonu za kiseline na 0°C.<1>HNMRCp2Ti(CH3)2: 5 6.05 (s, 10H) , -0.05 (s,6H). Cp2TiCl (CH3) : 6 6.22 (s, 10H), 0.80 (s, 3H) . Cp2TiCl2: 5 6.56 (s, 10H) . 13CNMR Cp2Ti(CH3)2: 8 113.20 (Cp2), 4 5.77 ((CH3)2). Cp2TiClCH3: 5 115.86 (Cp2) , 50.37 (CH3) . Cp2TiCl2: 5 120.18.

PRIMER 9

4- Fluoro- g- f ( fenilmetil) aminolbenzolsirćetna kiselina

4-Fluorobenzaldehid (7.0 kg, 56.4 mola) se dodaje u rastvor natrijum metabisulfita (5.76 kg, 30.3 mola) u vodi (50 litara) i ispira se sa metanolom (5 litara). Dodaje se natrijum cijanid (2,83 kg, 57.7 mola) i ispira se sa vodom (3 litra) . Šarža se meša na 25°C 15 minuta pre hlađenja do 8°C. Rastvor benzilamina (6.04 kg, 56.4 mola) u metanolu (11 litara) se dodaje. Šarža se zagreva do 34°C i meša 2 sata. Dodaje se voda (23 litra) i šarža se ekstrahuje sa izopropil acetatom (30 litara) . Organski sloj se pere sa vodom (2 x 10 litara), a zatim sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (10 litara), zatim se uparava pod smanjenim pritiskom, pri čemu se dobija nitrilno jedinjenje. Šarža se rastvara u dimetilsulfoksidu (50 litara). Dodaje se kalijum karbonat (3.27 kg, 23.7 mola) i pere sa dimetil-sulfoksidom (6 litara). Rastvor vodonik peroksida u vodi (30%, 9.43 litara, 83.2 mola) se dodaje u šaržu i šarža se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Šarža se razblaži sa vodom (120 litara) i ohladi se do 13°C. Šarža se filtrira i filter kolač se pere sa vodom (50 litara). Dobijeno amidno jedinjenje se suši na filtru, zatim se suspenduje u industrijskim metilovanim alkoholima (38 litara). Dodaje se rastvor natrijum hidroksidnih peleta (3.27 kg, 81.75 mola) u vodi (11 litara) u šaržu i pere se sa industrijskim metilovanim alkoholima (6 litara).

Posle zagrevanja na refluksu (80 C) 3.5 sati, šarža se destiluje do niske zapremine, ukljanjajući industrijske metilovane alkohole. Šarža se razblažuje sa vodom (100 1) i ekstrahuje se sa izopropil acetatom (30 litara). Odvajaju se slojevi i vodeni sloj se zakišeljava do pH 5-6 sa koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom. Staložena čvrsta supstanca se pere sa vodom (2 x 10 litara) , zatim se sakuplja i suši pod vakumom pri čemu se dobija 12.3 kg (84% prinos iz 4-f luorobenzaldehida) 4-f luoro-a-[ (fenilmetil) amino] benzol-sirćetne kiseline.

PRIMER 10

Metil estar hidrohlorid 4- Fluoro- a-[( fenilmetil) aminol benzol-

sirćetne kiseline

4-Fluoro-a-[ (fenilmetil) amino] benzolsirćetna kiselina (12.2 kg, 47.1 mola) se suspenduje u metanolu (37 litara), zatim se nad smešom provodi gasoviti hlorovodonik. Dobijena suspenzija se meša na 35-45°C 3 sata, zatim se koncentruje do 30-35 litara destilacijom. Dodaje se metil-t-butil etar (20 litara) i šarža se zasejava sa metil estar hidrohloridom 4-fluoro-a-[(fenilmetil) amino] benzolsirćetne kiseline. Posle razvijanja sloja klica, dodaje se metil-t-butil etar (20 litara).Suspenzija se ostavi da stari 1 sat, i zatim se filtrira. Filter kolač se pere sa metil-t-butil etrom:metanolom (95:5, 8.0 L), zatim se suši pod vakumom na 30°C, pri čemu se dobija 12.2 kg (84 % prinos) metil estar hidrohlorida 4-fluoro- <x-[ (fenilmetil) amino]-benzolsirćetne kiseline.

PRIMER 11

Metil estar g- Amino- 4- fluorobenzolsirćetne kiseline

Metil estar hidrohlorid 4-Fluoro-a-[ (fenilmetil) amino]benzolsirćetne kiseline (12.2 kg, 39.4 mola) se dodaje u suspenziju 10% paladijuma na uglju (1.2 kg) u izopropanolu (50 litara). Dodaje se amonijum formijat (5.0 kg, 79.4 mola) i šarža se zagreva do 50°C. Tok reakcije se prati pomoću HPLC. Šarža se filtrira kroz Hyflo Supercel i filter kolač se pere sa izopropanolom (25 litara). Filtrat se uparava do male zapremine i ispira sa izopropil acetatom (50 litara). Ostatak se rastvara u izopropil acetatu (30 litara) i pere se sa 5% vodenim rastvorom kalijum fosfata (40 litara), a zatim sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (10 litara). Rastvor se uparava pod vakumom, pri čemu se dobija 5.79 kg (87% prinos) racemskog metil estra a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline. HPLC uslovi - Kolona: Zorbax Rx-C8, 25 cm x 4.6 mm; temperatura kolone: 40°C; Mobilna faza: acetonitril:0.1% vodene fosforne kiseline (70:30 v/v)/protok: 1 ml/minut; Detekcija: UV na 220 nm; Približna retenciona vremena: metil estar a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline: 2.2 minuta; metil estar 4-fluoro-ot-[(fenilmetil) aminojbenzolsirćetne kiseline 2.6 minuta. Ako neizreagovani metil estar 4-fluoro-a-[ (fenilmetil)amino] benzolsirćetne kiseline (>2%) ostane posle 1 sata, može da se napravi druga šarža 10% paladijuma na uglju (300 g) suspendovanog u izopropanolu (2.0 litara), a zatim se dodaje amonijum formijat (1.0 kg). Zagrevanje se tada nastavlja sve dok se ne završi reakcija.

PRIMER 12

( S)- a- Amino- 4- fluorobenzolsirćetna kiselina

Rastvor racemskog metil estra a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline (3.32 hg, 18.2 mola) u 96% etanolu (5 litara) se filtrira, a zatim se u njega dodaje voda (500 ml) . Zatim se dodaje rastvor di-O-benzoil-D-vinske kiseline (DBT, 1.31 kg, 3.7 mola) u vodi: etanolu (1:7, 2.86 litara). Smeša koja kristališe se hladi do 5°C i ostavi se da stari 1.5 sati. Proizvod se sakuplja filtracijom, pere se vodom:etanolom (1:7, 1.1 litrom), suši na vazduhu, zatim se suši pod vakumom na 50°C, pri čemu se dobija 1.91 kg metil estra a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, DBT soli (95,8% ee) .

Rastvarač (6.6 litara) se uklanja iz lužina uparavanjem pod smanjenim pritiskom. Dodaje se benzaldehid (120 ml) i rastvor se meša i zagreva na 50°C 4 dana. Rastvor se filtrira i čvrste supstance se peru sa vodom:etanolom (1:7, 2 x 150 ml)

(hiralna HPLC pokazuje da filtrat sadrži racemski metil estar a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline. Rastvor di-O-benzoil-D-vinske kiseline (439 g, 1.23 mola) u vodi:etanolu (1:7, 960 ml) se dodaje u filtrat, koji se zatim ohladi do 5°C i ostavi da stari 1.5 sati. Proizvod se sakuplja filtracijom, pere se sa vodom: etanolom (1:7, 2 x 1.1 litara), suši na vazduhu i zatim suši u vakumu na 50°C, pri čemu se dobija 1.05 kg metil estra a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, DBT soli (95.4% ee) . Sjedinjeni prinosi metil estra a-amino-fluorobenzol sirćetne kiseline, DBT soli su bili 2.96 kg (95% ee). Razdvojeni metil estar a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, DBT so se raspodeljuje izmedju metil-t-butil etra (5 litara) i 5.5 M hlorovodonične kiseline (6.2 litara). Vodena faza se pere sa metil-t-butil etrom (5 litara) i zatim filtrira.

Metil estar a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, DBT so (2899 g, >95% ee) se raspodeljuje između 5.5 M hlorovodonične kiseline (6.2 litara) i drugog metil-t-butil etarskog ekstrakta iz gornjeg. Vodena faza se reekstrahuje sa metil-t-butil etrom (5 litara ) i filtrira. Vodeni filtrati se sjedinjavaju i koncentruju sporom destilacijom rastvarača. Šarža se ohladi i ostavi da stari na 5°C 2 sata. Proizvod se sakuplja filtracijom i suši na vazduhu 30 minuta pri čemu se dobija 4.055 kg (S)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, hidrohloridne soli (98,7% 22). Rekristalizacija iz 5.5 M hlorovodonične kiseline daje (S)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline, hidrohloridne soli kao mokrog kolača (3.28 kg, 99.8% ee). Ovaj mokar filter kolač se zagreva u smeši voda (12 litara) i koncentrovane hlorovodonične kiseline (375 ml). Dodaju se koncentrovani vodeni rastvor amonijaka (1.2 litara) i voda (4 litra) , zatim se šarža ohladi do 20°C i ostavi da stari preko noći. Proizvod se sakuplja filtracijom, pere se sa vodom (6x4 litara), suši na vazduhu, zatim se suši pod vakuumom na 50°C 24 sati, pri čemu se dobija 1.905 kg (S)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline kao slobodne baze (>99.7% ee, 48% prinos iz racemskog metil estra a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline). Hiralna HPLC Uslovi: Kolona: Crownpak CR(+), 15 cm x 4.5 mm; Kolona temperatura: 40°C. Mobilna faza: pH 2.0 vodena perhlorna kiselinatmetanol (95:5 v/v) . Protok 1 ml/min, Detekcija: UV na 220 nm; Približna retenciona vremena: (R)-a-Amino-4-fluorobenzolsirćetna kiselina: 2.9 minuta; (S)-a-Amino-4-fluorobenzolsirćetna kiselina: 5.6 minuta; metil estar (R)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline: 7.7 minuta; metil estar (S)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline: 14.0 minuta.

PRIMER 13

( S) - 4- Fluoro- a-[ ( fenilmetil) amino] benzolsirćetna kiselina

natrijumova so

Ratvor od (S)-a-amino-4-fluorobenzolsirćetne kiseline (1.00 kg, 5.91 mola) u vodenom rastvoru natrijum hidroksida (IM, 5.91 litara) se filtrira i dodaje u 10% paladijuma na uglju (25 g) . Dodaje se rastvor benzaldehida (941 g, 8.87 mola) i šarža se meša pod vodonikom (50 psi) 4 sata. Šarža se filtrira i filtrat se uparava do ostatka pod vakumom, zatim se ispere sa etanolom (2x3 litra). Ostatak se suspenduje u ključalom etanolu (1.5 litara), i zatim se ohladi do 15°C. Suspenzija se filtrira i filter kolač se pere sa hladnim etanolom (2 x 500 ml), zatim se suši pod vakuumom na 55°C, pri čemu se dobija 1.83 kg (92% prinos) (S)-4-f luoro-a-[ (fenilmetil) amino]-benzolsirćetna kiselina natrijumova so.

PRIMER 14

( S)- 3-( 4- Fluorofenil)- 4-( fenilmetil)- 2- morfolinon hidrohlorid

(S)-4-Fluoro-a-[(fenilmetil) amino]benzolacetat natriju-mova so (850 g, 3.02 mola) se dodaje u 1,2-dibrom-etana (4.85 kg,

25.8 mola) i diizopropiletilamina (419 g, 3.25 mola) u dimetilformamidu (14.7 litara). Šarža se zagreva na 90°C 5 sati, zatim se koncentruje destilacijom pod vakumom da bi se uklonio dimetilformamid. Ostatak se raspodeljuje između etil acetata (3.2 litara) i vode (3.2 litara). Vodeni sloj se ekstrahuje sa drugom porcijom etil acetata (2.0 litara). Rastvor se suši preko natrijum sulfata, zatim se filtrira kroz čep od silicijum dioksida (1.6 kg). Sloj silicijum dioksida se ispira sa etil acetatom (8.0 litara) i filtrat se uparava pod vakuumom. Dobijeni ostatak se rastvara u smeši izopropanola (1.35 litara) i etil acetata (400 ml) i zatim filtrira. Dodaje se rastvor gasovitog hlorovodonika u etil acetatu (2.44 M, 1.34 litara) i suspenzija se ostavi da stari u kupatilu sa ledom 1 sat. Suspenzija se filtrira i filter kolač se pere sa 1:1 izopropanolom:etil acetatom (600 ml), a zatim sa metil-t-butil etrom (60 ml) . Čvrsta supstanca se suši pod vakuumom, pri čemu se dobija 749 g (77% prinos, 98% ee) (S)-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolonon hidro-hlorida. Hiralna HPLC Uslovi: Kolona (D)-Dinitro-benzoilfenil-glicin (kovalento) normalna faza, 25 cm x 4,6 mm; Temperatura kolone: 35°C; Mobilna faza: heksan:etanol (99:1 v/v); Protok: 1 ml/minut; Detekcija: UV na 220 nm. Približna retenciona vremena: (R)-3-(4-Fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinon: 16 minuta; (S)-3-(4-Fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinon: 17 minuta.

PRIMER 15

Racemizacija/ razdvajanje 3-( 4- Fluorofenil)- 4- fenilmetil- 2-

morfolinona

U rastvor 3-(4-fluorofenil)-4-fenilmetil-2-morfo-linona (tj., N-benzil-4-fluorofenil-1,4-oksazin-2-ona) (10 g) u izopropil acetatu (110 ml na sobnoj temperaturi dodaje se rastvor (-)-3-bromkamfor-8-sulfonske kiseline ((-)-3BCS) (12

g) u acetonitrilu (24 ml) . Kristalizacija započinje posle 2-3 minuta. Suspenzija se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Dodaje

se trifluosirćetna kiselina (7 ml) i smeša se meša na 65°C 3 dana. Smeša se ohladi do 0-5°C, ostavi da stari 1 sat i sakuplja se čvrst materijal, pere se sa izopropil acetatom i suši pod vakumom na 40°C, pri čemu se dobija N-benzil-3-(D)-(4-fluorofenil)1,4-oksazin-2-on (-)-3BCS so: prinos 17.24 g, ee 98.6% (S) izomera. Hiralni sastav preostalih likvora je određen kao 79% (R) , 21% (S) . Likvori se mešaju na 65°C 3 dana, zatim se ohlade do 0-5°C. Čvrsta supstanca se sakuplja, pere se sa izopropil acetatom i suši u vakuumu, pri čemu se dobija dalja šarža N-benzil-3-(S)-(4-fluorofenil)-1,4-oksazin-2-ona (-)-3BCS so: prinos 0.84 g, ee 98.6% (S) izomera. Hiralni sastav preostalih lužina je odredjen kao 64% (R) , 36%

(S) . Lužine se izdvajaju u vakumu i ostatak se rastvara u izopropil acetatu (20 ml) koji sadrži trifluorosirćetnu kiselinu (1 ml) i meša se na 65°C 20 sati. Smeša se ohladi do 0-5°C 1 sat i sakuplja čvrsta supstanca, pere se sa izopropil acetatom i suši u vakumu, pri čemu se dobija dalja šarža N-benzil-3-(S)-(4-fluorofenil)-1,4-oksazin-2-ona (-)-3BCS so: prinos 2.2 g, 22 99.2% (S) izomer. Ukupna težina (-)-3BCS soli: 20.28 g, 97% prinos. Uzorak (0.5 g) (-)-3BCS soli je zadržan i ostatak je konvertovan nazad do slobodne baze. So se raspodeljuje između izopropil acetata (50 ml) i vode (200 ml) koja sadrži amonijačni rastvor (3 ml) . Odvajaju se slojevi i vodena faza se ekstrahuje sa izopropil acetatom (25 ml). Sjedinjene organske faze se ekstrahuju sa izopropil acetatom (25 ml) . Sjedinjenje organske faze se peru sa vodom (25 ml) . Organska faza se koncentruje do ostataka i ispere se sa izopropil acetatom, pri čemu se dobija 3-(S)-4-(fluorofenil)-4-fenilmetil-2-morfolinona (tj. N-benzil-3-(S)-4-fluorofenil) -l/4-oksazin-2-ona) kao slobodne baze: prinos 8.7 g, 93% regeneracija, ee 98.4% (S) izomera.

Dalja šarža N-benzil-3-(S)-(4-fluorofenil)-1,4-oksazin-2-ona (-)-3BNS soli se dobija suštinski prema prethodnom postupku, osim što se upoterbljavaju sledeće količine i reakcioni uslovi: N-benzil-3-(4-fluorofenil)-1,4-oksazin-2-on (racemat) (4.96 g); (-)-3BCS u acetonitrilu (1.85 M, 9.4 ml); trifluorosirćetna kiselina (2.1 ml); i izopropil acetat (55 ml). Smeša se meša na 90°C 6 dana i zatim se ohladi do 0-5°C i ostavi da stari 1 sat. Čvrsta N-benzil-3-(S)-(4-fluorofenil)-1.4- oksazin-2-on (-)-3BCS so se sakuplja i pere sa izopropil acetatom (20 ml). Prinos 9,40 g (90%); ee 99.6% (S) izomer. Hiralna kompozicija preostalih lužina je određena kao 88% (R) , 12% (S).

PRIMER 16 •

3-( 4- Fluorofenil)- 4-( fenilmetil)- 2- morfolinil estar( 2R- cis)-3. 5- bis( trifluorometil) benzolsirčetne kiseline

Suspenzija koja se meša od (S)-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinon hidrohlorida (2.30 kg, 7.15 mola) u etil acetatu (22 litara) se tretira sa 10% vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (22 litara). Dobijeni organski rastvor se sekvencionalno pere sa 10% vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (11 litara) i vodom (2 x 11 litara), zatim se suši preko noći sa 4A molekularnim sitima (1 litar). Rastvor se uparava, zatim se ispira sa tetra-hidrofuranom (2x3 litara) u cilju da se uklone tragovi etil acetata. Dobijena slobodna baza (S)-3(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinona se rastvara u tetrahidrofuranu (19 litara) i ohladi se do -75°C. L-Selektrid (litijum tri-sek-butilborhidrid, 6.74 litara, 1.06 M, 7.15 mola) se dodaje u šaržu dok se održava temperatura na manje od -70°C. Šarža se ostavi da stari 15 minuta, a zatim se dodaje 3,5-bis(trifluorometil)benzoil hlorid (2.57 kg, 9.29 mola), održavajući temperaturu na manje od -70°C. Reakcija se prati pomoću HPLC. Reakcija se zaustavlja sa sirćetnom kiselinom (205 ml) u tetrahidrof uranu (80 0 ml) i šarža se ostavi da se zagreje preko noći do sobne temperature. Rastvor se koncentruje u vakuumu i dobijeno ulje se razblažuje sa heksanima (36 litara) . Šarža se pere jedno za drugim sa vodom (17 litara), 10% vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 x 8.5 litara), i vodom (2 x 8.5 litara), zatim se suši preko noći koristeći 4A molekularna sita (1 litar). Šarža se analizira pomoću HPLC i utvrđeno je da sadrži 2,44 kg (65% prinos) 3 (4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra ((2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil)-benzolsirćetne kiseline. Ova šarža se sjedinjuje se jednom drugom šaržom 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra (2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil)benzol-sirćetne kiseline (0.59 kg analize u 7 litara heksana) koja se dobija neposredno pre tekuće šarže. Sjedinjeni rastvori šarži se filtriraju kroz 20 pm linijski filtar koji se razblažuje zatim sa heksanima (9 litara). Rastvor sirovog 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra (2R-cis)-3,5-bis(trifluo-metil)benzolsirćetne kiseline (3.03 kg analize, 5.74 mola) se tretira sa hlorovodoničnom kiselinom u dietil etru (9.6 litara, 1.0 M) , dajući beo talog 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estar hidrohloridne soli (2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil)benzolsirćetne kiseline (hidro-hloridna so se obrazuje u cilju da se ukloni tri-sek-butil boran ostatak iz tz L-Selektrida)). Čvrsta supstanca se sakuplja filtracijom, pere se sa heksanima (2x8 litara), zatim se suši pod azotom. Hidrohloridna so se usitni pretvaranjem u suspenziju, u smeši toluola (36 litara) i 10% vodenog rastvora natrijum bikarbonata (13 litara) i vode (1 x 18 litara) . Analizom je utvrđeno da toluolski rastvor sadrži 3.00 kg 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra (2R-cis)-3,5-(trifluorometil)-benzol-sirćetne kiseline (80% površinom, korigovano za toluol). Šarža se lageruje nad 4A molekularnim sitima (1 litar). HPLC uslovi: Kolona: Zorbax RX-C8, 25 cm x 4.6 mm; Mobilna faza: acetonitril:0.1% vodeni rastvor fosforne kiseline (75:25, v/v). Protok: 1.5 ml/minut; Detekcija: UV na 220 nm Približna retenciona vremena: Redukovani (S)-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinon: 1.6 minuta; (S)-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinon: 3.3 minuta; 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estar (2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil)benzolsirćetne kiseline: 9.2 minuta.

RIMER 17

( 2R- cis) - 2-[[ l-[ 3, 5- bis ( Trif luorometil) fenilletenil] oksi]- 3- ( 4-fluorofenil)- 4-( fenilmetil) modfolin

Toluolski rastvor 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra (2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil)-benzolsirćetne kiseline (1.6 litara, 3.02 mola) se uparava, i zatim prečišćava sa azotom. Dodaje se tetrahidrofuran (1.6 litara), a zatim rastvor dimetil titanocena u toluolu (8.35 tež.%, 1.73 kg, 8.31 mola) (dobijenog kao što je navedeno niže). Šarža se ubrizgava sa azotom 25 minuta, zatim se zagreva do 80°C. Šarža se ostavi da stari u mraku 5 sati na 80°C, zatim se ohladi do sobne temperature i ostavi da stari preko noći. Kod šarže se izvrši promena rastvarača do heptana vakum destilacijom, održavanjem temperature ispod 20°C (126 litara heptana se dodaje sa pratećom destilacijom od 120 litara) (kod reakcione smeše se izvrši promena rastvarača na heptan i tretira se sa bikarbonatom puferovanim peroksidom u cilju da se stalože titanijum ostaci). U ohlađenu (7°C) smešu dodaju se voda (22 litra), natrijum bikarbonat (2.0 kg), zatim 30% vodonik peroksid (3.5 litra). Šarža se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Faze se razdvoje, pri čemu mnogo titanijum ostatka ostaje u vodenoj fazi. Vodena faza se ponovo ekstrahuje sa heptanom (10 litara) i sjedinjene organske faze se filtriraju, peru se sa vodom (2x4 litra) i zatim koncentruju. Sirovi proizvod se prekristališe rastvaranjem u toplom metanolu (17 litara), hlađenjem do sobne temperature i zatim dodavanjem vode (1.8 litara). Materijal se izoluje filtracijom na 0°C. Filter kolač se pere sa 10% vodenim metanolom (2 litra, 0°C) , zatim se čvrsta supstanca suši na sobnoj temperaturi pod azotom (1.45 kg, 94 tež.% čistog (2R-cis) -2-[[l-[3, 5-bis (Trif luorometil) f enil]etenil]oksi]-3- (4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)modfolina).

Dimetil titanocen reagens se priprema na sledeći način. Metil litijum (590 g, 12.9 mola) u rastvoru dietil etra (4.38 tež/tež, 13.5 kg) se dodaje u ohlađenu (-8°C) suspenziju, koja se dobro meša, titanocen dihlorida (3.35 kg, 13,5 mola) u metil-t-butil etru (13.4 litara) dok se temperatura održava ispod 5°C. Dobijena suspenzija se ostavi da stari na 0-5°C 1 sat. Reakcija se zaustavlja dodavanjem vode (8 litara) dok se temperatura održava izmedju 0 i 8°C. Organska faza se pere sa hladnom vodom (4x3 litra). Kod organskog sloja se zatim zamenjuje rastvarač sa toluolom destilacijom sa pratećim dodavanjem toluola (24 litara), dok se temperatura održava na 25°C ili manje. Analiza težinskog procenta pomoću<X>H NMR pokazuje da rastvor sadrži 1.75 kg dimetil titanocena (63% prinos, 8.35 tež% rastvora u toluolu). Materijal se lageruje pod azotom na 0°C. Tok reakcije se prati pomoću<1>H NMR (250 MHz, CDC13, 10 sekundi kašnjenje između impulsa). Cp2TiMe2: 6 (ppm) 6.05 (s, 10H), -0.05 (s, 6H) ; Cp2TiClMe: 6.22 (s, 10H) , 0.80 (s, 3H); Cp2TiCl2: 6.56 (s, 10H).

Dimetil titanocen reagens može alternativno da se dobije na sledeći način. U suspenziju koja se dobro meša od titanocen dihlorida (Cp2TiCl2) (6.0 g, 24,1 mmola) u toluolu (72 ml) ohlađenu do -5°C, dodaje se ukapavanjem metil magnezijuum hlorid (CH3MgCl) (19,8 g, 19,2 ml, 3. OM u THF, 57.6 mmola, 2.4 ekv) u toku od 10 minuta, održavajući temperaturu ispod 5°C. Obrazuje se viskozna suspenzija kada se taloži magnezijum hlorid. Dobijena suspenzija se ostavi da stari na 0-5°C 50 minuta, tokom kog vremena se rastvori nerastvoran crveni CP2T1CI2. NMR analiza na zaustavljenom uzorku se uzima da bi se potvrdio završetak reakcije. Uzorak od 0.2 ml se zaustavlja u 1 ml vode i 1 ml CDC13. Hloroformski sloj se upotrebljava direktno za NJR analizu. Dimetil titanocen ima rezonance na 6.0 ppm (Cp) grupa i -0.2 ppm (CH3grupa). Monometil jedinjenje ima rezonance na 0.2-0.3 ppm na niže, a titanocen dihlorid ima rezonancu na 6.5 ppm. Reakcija se tada zaustavlja dodatkom rastvora od 10% vodenog amonijum hlorida (20 ml) u toku 10 minuta, održavajući temperaturu ispod 10°C. Odvoje se slojevi i organska faza se pere sa hladnom vodom (3 x 20 ml) i slanim rastvorom (20 ml), tada se suši sa Na2S04, (20 g) . Profiltirani organski sloj se koncentruje pod vakuumom do približno polovine zapremine. Ukupna težina rastvora je bila 43 g, i NMR analiza je pokazala 11.2 tež.% dimetil titanocena (4., 8 g, 96% prinos). THF nivo je bio 2%, međutim, prisustvo male količine THF povećava stabilnost reagensa. Materijal se lageruje pod azotom na 0°C.

Alternativno, dimetil titanocen reagens može da se dobije na sledeći način. U suspenziju koja se dobre meša, titanocen dihlorida (249 g, 1.00 mola) u toluolu (2.75 litara) ohlađenu do -5°C (unutrašnja temperatura), dodaje se MeMgCl (750 ml, 3. OM u THF, 2.25 mola) u toku 1 sata održavajući temperaturu ispod 8°C. Dobijena narandžasta suspenzija se ostavi da stari na 0-5°C 1 sat, ili dok se ne rastvori purpurni Cp2TiCl2- NMR se uzima da bi se potvrdio završetak reakcije (videti niže), zatim se reakcija zaustavlja u rastvoru 6% vodenog amonijum hlorida (70.0 ml),koji se održava na 0-5°C. Organska faza se pere sa hladnom vodom (3 x 575 ml) i slanim rastvorom (575 ml) , zatim se suši sa Na2S04(220 g) . Profiltrirani organski sloj se uparava do 1.5 kg (održavajući unutrašnju temperaturu od 25°C ili niže). Analiza tež. % pomoću<1>H NMR pokazuje da rastvor sadrži 187 g proizvoda (90%, 12.5 tež% rastvora u toluolu/THF). Tipično, materijal je bio više od 95% čistoće, sa samo tragovima polaznog materijala i monometil intermedijera. Rastvor može dalje da se koncentruje do 1.0 kg, pri čemu se dobija 18 tež% rastvor u toluolu, što dopušta lakšu analizu. Međutim, prisustvo male količine THF povećava stabilnost reagensa. Materijal se lageruje pod azotom u zatopljenom staklenom balonu za kiseline na 0°C.<X>H NMRCp2TiMe2: 5 6.05 (s, 10H), -0.05 (s, 6H) . Cp2TiClMe: 5 6.22 (s,10H), 0.80 (s, 3H) . Cp2TiCl2: 5 6.56 (s, 10H) .<13>C NMR Cp2TiMe2: 6 113.20 (Cp2), 45.77 (Me2) . Cp2TiClMe: 6 115.86 (Cp2) , 50.37 (Me). Cp2TiCl2: 5 120.18.

HPLC uslovi: kolona: Zorbax RX-C8, 25 cm x 4.6 mm; Mobilna faza: acetonitril:0.1 % vodene fosforne kiseline (65:35, v/v); Protok: 1.5 ml/min; Detekcija: UV na 220 nm; Približna reteciona vremena: (2R-cis)-2-[[l-[3,5-bis (Trifluorometil) f enil]etenil]oksi]-3- (4-f luorof enil) -4-(fenilmetil)mofolin: 17.2 minuta; 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estar (2R-cis)-3,5-bis(trifluorometil) benzolsirćetne kiseline: 18.9 minuta.

PRIMER 18

( 2R- cis) - 2-[[ l-[ 3, 5- bis ( Trifluorometil) fenil1etenil] oksi]- 3- ( 4-fluorofenil)- 4-( fenilmetil) mofolin

Toluolski rastvor 3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinil estra (2R-cis)-3,5-bis (trifluorometil) benzolsirćetne kiseline [t j. (4-benzil-2-(R)-3,5-bis(trifluorometil)benzoiloksi)-3-(S)-(4-fluorofenil)-1,4-oksazin)rastvora koji sadrži 2,99 kg, 5.67 mola) se uparava u balonu od 100 litara. Balon se pročisti sa azotom, zatim se dodaje tetrahidrofuran (25 litara) i potom rastvor od dimetil titanocena u toluolu/THF (12.5 tež %, 4.2 kg koji sadrži reagens, 201 mola). Narandžasti rastvor se ispira sa azotom 25 minuta, zatim se zagreva do 80°C. Rakcija se ostavi da stari u mraku 4 sata na 80°C, i ohladi se do sobne temperature. Dodaju se metanol (11.6 litara) i voda (1.9 litara i smeša se zagreva na 40°C u toku noći, taložeći titanijum ostatke kao zelenu čvrstu supstancu. Posle hlađenja do sobne temperature, čvrsta supstanca se uklanja filtracijom, filter kolač se pere sa toluolom, i dobijene matične lužine se uparavaju. Sirovi proizvod se prekristališe rastvaranjem u toplom metanolu (30 litara), hlađenjem do sobne temperature, zatim dodavanjem vode (3.4 litara) u toku 3 sata. Materijal se izoluje filtracijom na 0°C 10% vodenog rastvora metanola (2 litra), i čvrsta supstanca se suši na sobnoj temperaturi pod azotom, izoluje se 2.55 kg (2R-cis)-2-[[l-[3, 5-bis (Trifluorometil) fenil] etenil] oksi]-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)mofolina (85%).

PRIMER 19

[ 2R-[ 2a ( R*) , 3a]]- 2- rri- r3, 5- bis ( Trifluorometil) fenil] etoksi]- 3- ( 4-fluorofenil) morfolin 4- metilbenzolsulfonat ( so)

Rastvor (2R-cis)-2-[[l-[3, 5-bis (Trifluorometil) fenil] etenil]oksi]-3-(4-fluorofenil)-4-(fenilmetil)mofolina (1082 g, 94% čist, 1.94 mola) u 1:1 etil acetatu:etanolu (13 litara) se meša sa 10% paladijumom na uglju (165 g) . Dobijena suspenzija se tretira sa vodonikom (40 psi, 20-25°C) 12 sati. Reakcija se prati pomoću preuzimanja vodonika i HPLC. Balon se izduvava, i katalizator se uklanja filtracijom. Posle pranja katalizatora sa 1:1 etil acetatom:etanolom (6 litara), a zatim etil acetatom (2 litra), sjedinjene organske faze koje su sadržale sirovi [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)morfolin su vakuum koncentrovane. Druga šarža se dobija polazeći od 1078 g (2R-cis)-2-[[l-[3,5-bis (trifluorometil) fenil]etenil]oksi]-3- (4-fluorofenil) -

(fenilmetil)morfolina (1.93 mola). Dobijeni sirovi [2R-[2a (R<*>) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil]etoksi]-3- (4-fluorofenil)morfolin se koncentruje u vakuumu i sjedinjava se sa prvom šaržom. Sjedinjene šarže sirovog [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trif luorometil) fenil] etoksi]-3- (4-f luorof enil) morfolina

se ispiraju sa metil-t-butil etrom (2x3 litra) u cilju da se ukloni preostali etil acetat i etanol, zatim se rastvaraju u metil-t-buril etru (3 litra). Rastvor se analizira i utvrđeno je da sadrži 1348 g (3.09 mola, 80% prinos) [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3- (4-fluorofenil)morfolina (kao slobodna baza). Alternativno, 60 g vinil etra, 650 ml metil-t-butil etra (MTBR) i 18 g 5% Pd na aluminijum oksidu se meša pod 40 psi pritiska vodonika na 40°C za 12 sati. Analizirani prinos je bio 87% sa 91:9 odnosom diatereoizomera. Na kraju reakcije, katalizator se uklanja filtracijim kroz Solka-Floc, zatim se filtrat koncentruje do 140 ml.

Prva šarža se tretira sa toplim (4 0°C) rastvorom p-toluol sulfonske kiseline monohidrata (575 g, 3.03 mola) u metil-t-butil etru (3.2 litra). So p-toluol sulfonske kiseline i [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3- (4-fluorofenil)morfolina počinje da kristališe tokom dodavanja. Šarža se hladi do sobne temperature i dodaje se heksan (24 litara). Šarža se ostavi da stari 2 sata, zatim se proizvod sakuplja filtracijom. Čvrsta supstanca se pere sa 4:1 heksanom:metil-t-butil etrom (2 x 2.5 litara), zatim se suši pod azotom (1761 g (1655 g korigovano za čistoću) [2R-[2a (R<*>) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trif luorometil) fenil] etoksi]-3- (4-fluorofenil)morfolin 4-metilbenzolsulfonata (so), 94 tež% čistoće, 70% prinos. Alternativno, u drugi rastvor se dodaje rastvor od 16,0 g p-TsOH monohidrata u 64 ml MTBE na 35°C u toku perioda od 25 minuta. Tozilatna so kristališe kao gusta suspenzija. Zatim se u toku 1 sata, dodaje 520 ml heksana, i suspenzija se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Suspenzija se filtrira, pere se sa 2 x 60 ml 1:4 MTBE:heksanima, i suši se usisavanjem na vazduhu pri čemu se dobija 51.9 g tozilatne soli (75% prinos) koja sadrži 0.9% nepoželjnog diastereoizomera. HPLC uslovi: Kolona: Zorbax RX-C18, 25 cm x 4,6 mm; Mobilna faza: acetonitril:vodeni O.005 M natrijum heptan sulfonat, 0.002 M kalijum bifosfat, 0.0005 M dinatrijum bifosfat (75:25, v/v); Protok: 1.5 ml/min; Detekcija: UV na 220 nm; Približna retenciona vremena: [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis(trifluorometil)fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)morfolin: 4 . 5 minuta; N-benzil [2R-[2a(R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil]-etoksi]-3- (4-fluorofenil) morfolin: 25.0 minuta; (2R-cis) -2-[[l-[3, 5-bis (trif luorometil) fenil] etenil]oksi]-3-(4-fluorofenil) morfolin: 30.0 minuta. HPLC uslovi: Kolona: Zorbax RX-C18, 25 cm x 4.6 mm; Mobilna faza: acetonitril: vodeni 0.005 M natrijum heptan sulfonat, 0.002 M primarni kalijum fosfat, 0.0005 dinatrijum-fosfat (60:40, v/v); Protok: 1.5 ml/min; Detekcija: UV na 220 nm; Približna retenciona vremena: [2R-[2a (R*), 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)morfolin: 9.0 minuta; Diastereomer [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)morfolina: 110.0 minuta (epimerno na metil grupi).

PRIMER 20

[ 2R-[ 2a( R*), 3a]]- 5-[[ 2-[ 1-[ 3, 5- bis( trifluorometil) fenil]

etoksi]- 3-( 4- fluorofenil) morfolinil] metil]- 1, 2- dihidro- 3ff-1, 2, 4- triazol- 3- on

Sprašeni kalijum karbonat (682 g, 4.93 mola) se dodaje u rastvor [2R-[2a (R*) , 3a]]-2-[l-[3, 5-bis (trifluorometil) fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)morfolin 4-metilbenzolsulfonata (so)

(1254 g, 2.06 mola), N-metilkarboksi 2-hlor-acetamidrazona (375 g, 2.26 mola) i dimetilformamida (10 litara). Reakcija se održava između 15 i 25°C i ostavi se da stari 2.5 sata. Šarža se razblažuje sa 1:1 heksanom:metil-t-butil etrom (10 litara) i 10.9% vodenog amonijum hlorida (11 litara). Faze se raspodeljuju i vodena faza se ponovo ekstrahuje sa 1:1 heksanom:metil-t-butil etrom (2x8 litara), a zatim sa 1:2

heksanom:metil-t-butil etrom (8 litara). Sjedinjene organske faze se peru sa vodom (2 x 15 litara), zatim se koncentruju u vakumu. Dobijeni materijal sa rastvara u ksilolima (20 litara) i zagrevaju se do refluksa (137°C). Rastvor se održava na refluksu 3 sata, a zatim se ohladi do sobne temperature, posle čega kristališe [2R-[2a(R<*>),3a]]-5-[[2-[1-[3,5-bis(trifluorometil)fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil) morfolinil]metil]-1,2-dihidro-3H-l, 2, 4-triazol-3-on. Šarža se ostavi da stoji preko noći, zatim se filtrira. Filter kolač se pere sa ksilolima (2 litra), zatim heksanima (2x2 litra) i zatim se suši pod vakumom na 30°C tri dana (696 g, 63% prinos [2R-[2a(R<*>),3a]]-5-[[2-[1-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]

etoksi] -3-(4-fluorofenil) morfolinil]metil]-1,2-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-on, tj., 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil) fenil) etoksi) -3- (S) - (4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metil-morfolin.

Alternativno, naslovni proizvod može da se dobije na sledeći način iz amin TsOH soli, (1.90 kg, 3.12 mola); N-metilkarboksil-2-hloracetamidrazina (516 g, 3,12 mola); K2CO3(1.08 kg, 2.5 ekv.); i DMSO (15.6 litara). U suspenziju aminske soli i sprašenog K2CO3u DMSO (7.8 litara) na 20°C dodaje se rastvor N-metilkarboksil-2-hloracetamidrazona u DMSO (7.8 L). Prva polovina rastvora se doda brzo, (uz slabo hladjenje sa kupatilom ledene vode), zatim se preostala polovina dodaje u toku perioda od 1 sata. Posle dodavanja reakcija se proverava pomoću LC, i reakcija se zaustavlja sa hladnom vodom (15 litara) i metil-t-butil etrom (MTBE) (30 litara) rastvorom. Organski sloj se odvaja i pere se sa vodom, zasićenim NaHC03, slanim rastvorom i vodom (20 litara svakim). Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje sa dodatnim MTBE (15 litara). Sjedinjeni MTBE rastvori se konventruju do ulja. Dobijeni sirovi proizvod se rastvara u ksilolu (25 litara) i diizopropiletilaminu (6.25 litara) i zagreva se do refluksa (oko 135°C) i reakcija se prati pomoću LC. Za reakciju je potrebno 4-6 sati da se završi, reakcioni rastvor se ohladi do sobne temperature preko noći i filtrira pri čemu se dobija naslovni proizvod (očekivanih 1.33 kg, oko 80%, tipične čistoće 98.5A%). Dobijeni sirovi proizvod se rastvara u toplom metanolu (13.3 litara), dodaje se aktivni ugalj 133 g, zatim se filtrira i ugalj se pere sa toplim metanolom (3.3 litara). Metanolski rastvor se ohladi do sobne temperature i dodaje se ukapavanjem voda (7 litara). Posle mešanja na sobnoj temperaturi 2 sata, suspenzija se profiltrira da bi se izolovao prečišćeni proizvod (tj., 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-l,2,4-triazolo)metil morfolin) kao belo kristalno jedinjenje (očekivano 1.20 kg, 90% regeneracije, tipična čistoća, 99.5A%). HPLC uslovi: Kolona: Zorbax RX-C8, 25 cm x 4,6 mm; Mobilna faza: (A) acetonitril, (B) 0.1% vodena fosforna kiselina; Linearni gradijent: 40:60 A:B do 70:30 A:B u 10 minuta. Protok: 1.5 ml/min; Detekcija: UV na 220 nm; Približna retenciona vremena: Alkilovani intermedijer: 5.7 minuta; [2R-[2a(R<*>),3a]]-5-[[2-[1-[3,5-bis(trifluorometil)fenil] etoksi]-3-(4-fluorofenil)-4-morfolinil]metil]-1,2-đihidro-3ff-l,2,4-triazol-3-on: 8.2 minuta. Uzorak dobijen ovim postupkom je identifikovan kao polimorfni OblikII. Karakteriše se pomoću difrakcione slike X zraka praškastog uzorka sa ključnim reflekcijama na približno: 12.6, 16.7, 17.1, 17.2, 18.0, 20.1, 20.6, 21.1, 22.8, 23.9, i 24.8° (2 teta).

PRIMER 21

Dobijanje Oblika I 2-( R)-( 1-( R)- 3, 5- bis( trifluorometil)-fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 3-( 5- okso- lH, 4H- 1, 2, 4-

trazolo) metilmorfolina

Oblik I 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil) etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina se dobija pomoću vrtloženja (mešanja) Oblika II 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis(trifluoro-metil)-fenil)-etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina u izopropil acetatu na 25°C, a zatim izolovanjem dobijene čvrste supstance filtriranjem.

Slično, Oblik I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluoro-metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-trazolo)metilmorfolina se takođe dobija vrtloženjem Oblika II 2- (R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil) -fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(-(5-okso-lH,4H-l,2,4-triazolo)metilmorfolina u etanolu, 2-propanolu, vodi, metanol/vodi smešama ili acetonitrilu na 25°C, a zatim izolovanjem dobijene čvrste supstance filtracijom.

PRIMER 22

Dobijanje kristala semena Oblika I 2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- bis-

trifluorometil)- fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 3-( 5-

okso- lH, 4H- 1, 2, 4- triazolo) metilmorfolina

Uzorak Oblika II 2- (R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluoro metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH, 4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina se stavi u malu aluminijumsku posudu i nezatopljena posuda se stavlja u Diferencijalnu skanirajuću kalorimetrijsku ćeliju (DSC) datog instrumenta. Uzorak se zagreva od sobne temperature do 230°C, zatim se ponovo hladi do sobne temperature. Dobijena čvrsta supstanca je pogodna za upotrebu kao kristali semena i za dobijanje u velikom obimu Oblika I 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3- (S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2, 4-triazolo)

metil-morfolina

PRIMER 23

Pobijanje Oblika I 2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- bis( trifluorometil)- fenil) etoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 3-( 5- okso- lH, 4H- 1, 2, 4-triazolo) metilmorfolina

Balon od 22 litra se šaržira sa Oblikom II 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi-3-(S)-(4-fluoro) fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolina (566 g) i 5.7 litara metanola. Smeša se zagreva do refluksa (65°C) za koje vreme se sve čvrste supstance rastvore u rastvoru. Rastvor se ostavi da se ohladi do 50°C i zaseje se sa približno 200 mg Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4-(3-(5-okso-lH, 4H-1,2,4-triazolo) metilmorf o-lina i ostavi se da se ohladi do 45°C za koje vreme se obrazuje sloj klica semena. Smeša se ohladi do 26°C za koje vreme se dodaje 2.8 litara vode u toku perioda od sata. Smeša se ostavi da stari na sobnoj temperaturi 2 sata, zatim se zagreva do 70°C 2 sata da bi se osigurao završetak konverzije celokupnog materijala Oblika II u Oblik I. Smeša se ostavi da se ohladi preko noći, zatim se hladi do 0°C, ostavi se da stari na 0°C 70 minuta, i tada se filtrira na -3°C. Sakupljeni materijal se suši na filter tiglu sa slojem azota preko noći i pakuje suv pri prinosu od 549 g (97%).

PRIMER 24

Dobijanje Oblika I 2-( R)-( 1-( R)-( 3, 5- bis( trifluorometil)-feniletoksi)- 3-( S)-( 4- fluoro) fenil- 4-( 3-( 5- okso- lH, 4H- 1, 2, 4-triazolo) metilmorfolina

Polu-pogonski balon se šaržira sa 2-(R) -(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolinom (Oblik II) (14.5 kg) i 158 litara metanola. Smeša se zagreva do 50°C za koje vreme se rastvara svo jedinjenje. Aktivni ugalj (Darco G-60)

(1,5 kg) se dodaje kroz manipulacioni otvor kao suspenzija u 6 kg metanola i ispere se sa dodatnih 2 litra metanola. Šarža se zagreva do refluksa (62°C) i ostavi se da stari 1 sat. Šarža se

zatim ohladi do 60°C i filtrira kroz 14" SS "sparkler" filter. Posle reciklovanja od 10 minuta, posmatra se proboj kroz staklo za posmatranje, tako da se linija reciklovanja vraća u reaktor. Šarža se tada pumpa kroz cevovod, zatim kroz lOu i 0.6u unutrašnji uređaj za filtriranje, i zatim u prihvatni balon. Cevovod se tera napred, i zatim se dodaje 50 litara metanola u toku 10 minuta da bi se očistio cevovod i zagrejao iznad sobne temperature. Zatim se propušta kroz filtre do reakcionog balona. Šarža se zatim koncentruje od oko 210 litara do 170 litara destilacijom na atmosferskom pritisku. Uzorak pokazuje željenu koncentraciju, 88 g/litar (14.9 kg, bez gubitaka). Šarža se ohladi do 50°C i zasejava (pelcuje) sa 300 grama čistog, Oblika I 2-(R) - (1-(R-(3, 5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro) fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolina. Obrazuje se ekstremno lak sloj semena (klica), i kristali su se jedva mogli detektovati čak na 45°C. Tanka suspenzija se ostavi da stari na 4 5°C jedan sat, i ipak je pokazivala malo promene u izgledu. Tanka suspenzija sa ostavi da se ohladi do 25°C preko noći, i dobija se suspenzija sa 60.5 g/litru rastvorenog jedinjenja. Uzorak mokrog filter kolača pokazuje samo kristale Oblika I. 83.6 kilograma vode se tada dodaje (33 vol% u metanol) u toku 3 sata kroz cevovod iznad površine. Uzorci pokazuju 0.1 tež % 030 u gornjem sloju tečnosti, i svi kristali su ponovo bili Oblik I. Šarža se ohladi do 0°C u toku 2 sata. Šarža se ukapava tada na filter velikog obima u jednoj kapi. Približno 15 kg 2:1 MeOH/Vode rastvora za pranje se upotrebljava za pranje balona, ipak je zaostalo još proizvoda (verovatno 500 -1000 grama). Preostalih 15 kg filter kolača se šaržira na filter pomoću spreja. 217.8 kg matičnih lužina i rastvora od pranja se sakuplja (0.1 tež% 030). Mokar kolač

(14.8 kg) se tada suši preko noći na 50°C pod 27,5" vakumom sa 0.2 SCFM ispiranja. Posle 12 sati, TG analiza pokazuje 0.0% težinski gubitak. Ukupna težina pakovanja šarže je bila 12.82

kg naslovnog jedinjenja.

PRIMER 25

Tipične farmaceutske kompozicija koje sadrže jedinjenje prema

pronalasku

A: Suvo punjene kapsule koje sadrže 5 mg aktivne komponente

po kapsuli

Aktivna komponenta može da se smanji na br. 60 prašak i laktoza i magnezijum stearat mogu da se tada propuste kroz br. 60 filter tkaninu na prašku. Sjedinjene komponente mogu tada da se mešaju 10 minuta i pune u br. 1 suvu želatinsku kapsulu.

B: Tableta

Tipična tableta će sadržavati aktivnu komponentu (5 mg), preželatinizirani škrob USP (82 mg) , mikrokristalnu celulozu (82 mg) i magnezijum stearat (1 mg).

Claims (9)

1. Polimorfni oblik jedinjenja 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil)-4-(3-(S)-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolin označen kao Oblik I, naznačen time što je slika difrakcije X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na: 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta).

2. Farmaceutska kompozicija naznačena time što sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i efikasnu količinu polimorfnog oblika prema zahtevu 1.

3. Postupak za dobijanje Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluoro-metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil -4-(3-(5-okso-lH, 4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolina koji se karakteriše pomoću slike difrakcije X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na: 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta), naznačen time što sadrži: uravnotežavanje Oblika II 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis-(trifluorometil)-fenil)etoksi-3-(S)-(4-fluoro)fenil-4- (3- (5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metil-morfolina u rastvaraču koji je odabran od: etanola, 2-propanola, acetonitrila i izopropil acetata.

4. Postupak za dobijanje Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluoro-metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil -4-(3-(5-okso-lH, 4H-1, 2,4-triazolo)metil-morfolina koji se karakteriše pomoću slike difrakcije X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na: 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta), naznačen time što sadrži: zagrevanje uzorka 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina optičke morfološke kompozicije do temperaturne oblasti od 215 do 230°C; i zatim vraćanje uzorka do sobne temperature.

5. Postupak prema zahtevu 4, naznačen time što je morfološki sastav polaznog 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil) -fenil) etoksi) -3- (S) - (4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H -1,2,4-triazolo)metilmorfolina Oblik II.

6. Postupak za dobijanje Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1, 2, 4-triazolo)metilmorfolina koji se karakteriše pomoću slike difrakcije X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na: 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta), naznačen time što sadrži: suspendovanje 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis (trifluoro-metil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina optičke morfološke kompozicije u rastvoru metanola/vode; dodavanje klica kristala Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina; mešanje dobijene smeše na oko 0-50°C u toku perioda dovoljnog da dovede do obrazovanja Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4 - (3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metilmorfolina; i sakupljanje dobijenog Oblika I 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina.

7. Postupak prema zahtevu 6, naznačen time što je morfološka kompozicija polaznog 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina Oblik II.

8. Polimorfni oblik jedinjenja 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina, naznačen time što ima difrakcionu sliku X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na približno 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta) koji je suštinski bez polimorfnog oblika jedinjenja 2-(R)-(1-(R)-(3, 5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-1H,4H-1,2,4-triazolo) metil-morfolina koji se karakteriše difrakcionom slikom X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na približno: 12.6, 16.7, 17.1, 17.2, 18.0, 20.1, 20.6, 21.1, 22.8, 23.9 i 24.8° (2 teta).

9. Farmaceutska kompozicija naznačena time što sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i polimorfni oblik 2-(R)-(l-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)- (4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo) metil-morfolina koji se karakteriše difrakcionom slikom X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na približno 12.0, 15.3, 16.6, 17.0, 17.6, 19.4, 20.0, 21.9, 23.6, 23.8 i 24.8° (2 teta) koji je suštinski bez polimorfnog oblika jedinjenja 2-(R) - (1-(R)-(3,5-bis(trifluorometil)-fenil)etoksi)-3-(S)-(4-fluoro)-fenil-4-(3-(5-okso-lH,4H-1,2,4-triazolo)metilmorfolina koji se karakteriše difrakcionom slikom X zraka praškastog uzorka sa ključnim refleksijama na približno: 12.6, 16.7, 17.1, 17.2, 18.0, 20.1, 20.6, 21.1, 22.8, 23.9 i 24.8° (2 teta).