RS51192B - Kombinovani meningokokni konjugati sa zajedničkim proteinom nosačem - Google Patents

Kombinovani meningokokni konjugati sa zajedničkim proteinom nosačem

Info

Publication number
RS51192B
RS51192B RSP-2009/0478A RSP20090478A RS51192B RS 51192 B RS51192 B RS 51192B RS P20090478 A RSP20090478 A RS P20090478A RS 51192 B RS51192 B RS 51192B
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
carrier
composition
conjugate
serogroup
unconjugated
Prior art date
Application number
RSP-2009/0478A
Other languages
English (en)
Inventor
Paulo Costantino
Original Assignee
Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=32482499&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS51192(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. filed Critical Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L.
Publication of RS51192B publication Critical patent/RS51192B/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/116—Polyvalent bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)

Abstract

Kompozicija za imunizovanje pacijenta na oboljenje izazvano Neisseria meningitidis, koja sadrži bar dva od: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe A N. meningitidis i (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe C N. meningitidis i (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe W135 N. meningitidis i (ii) protein nosač; (d) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe Y N. meningitidis i (ii) protein nosač, naznačena time, što (1) bar dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač') i (2) kompozicija sadrži zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 µg/ml.Prijava sadrži još 27 patentnih zahteva.

Description

KOMBINOVANI MENINGOKOKNI
KONJUGATI SA ZAJEDNIČKIM
PROTEINOM NOSAČEM
OBLAST PRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na vakcine protivNeisseria meningitidis.Konkretno, odnosi se na vakcine koje se zasnivaju na konjugovanim kapsularnim saharidima iz više meningokoknih serogrupa.
STANJE U STRUCI
[0002] Na osnovu kapsularnih saharida organizma, identifikovano je dvanaest serogrupaN. meningitidis(A, B, C, H, I, K, L, 29E, W135, X, Y i Z). Grupa A je patogen najčešće uključen u epidemijsko oboljenje u Africi južno od Sahare. Serogrupe B i C su odgovorne za veliku većinu slučajeva u SAD i u najrazvijenijim zemljama. Serogrupe W135 i Y su odgovorne za ostale slučajeve u SAD i razvijenim zemljama.
[0003] Dvovalentna vakcina sa kapsularnim poli saharidima iz serogrupa A+C je dostupna kao proizvod Mencevax AC™, a tetravalentne smese saharida iz serogrupa A+C+Y+W135 su dostupne kao proizvodi Mencevax ACWY™ i Menomune™ [1-3]. Iako su efektivne u adolescentima i odraslima, ove vakcine indukuju slab imuni odgovor i kratko trajanje zaštite, zato što su nekonjugovani polisaharidi antigeni nezavisni od T ćelija koji izazivaju slab imuni odgovor koji se ne može pojačati.
[0004] Da bi se popravio slab imunitet kapsularnih saharida, razvijene su konjugovane vakcine, u kojima su saharidi vezani za proteine nosače. Konjugovane vakcine protiv serogrupe C su odobrene za humanu upotrebu i uključuju Menjugate™ [4], Meningitec™ i NeisVac-C™. Smese konjugata iz serogrupa A+C sutakođe testirane [5,6] i objavljene su smese konjugata iz serogrupa A+C+W135+Y [7-10].
[0005] Mada su mešane konjugovane vakcine slične sa mešanim saharidnim vakcinama. postoje neke ključne razlike. Konkretno, inkluzija protein nosača u konjugovane smese predstavlja nove rizike, naročito u vezi epitopske supresije indukovane nosačem (ili "supresije nosačem", kao što se obično zove) tj. fenomena u kojem imunizacija životinje proteinom nosačem sprečava tu životinju da kasnije podigne imuni odgovor na antigenski epitop koji je izložen na tom nosaču [11J. Ovaj problem je naročito važan kad se simultano daje više konjugata sa istim proteinom nosačem [12].
[0006] Supresija nosačem je ispitivana za monovalentne meningokokni konjugate [13] i nešto je rađeno u vezi sa mešanim meningokoknim konjugatima. Na primer, referenca 14 predlaže da se fimbrije pertusisa koriste kao nosači da bi se izbegla supresija nosačem u multivalentnim konjugovanim vakcinama, a referenca 15 predlaže da se supresija nosačem rešava korišćenjem više od jednog tipa proteina nosača u vakcini, poželjno proteina DH. infliienzaei/ili tetanus toksoida (Tt).
[0007] Predmet pronalaska je obezbeđivanje još vakcinakoje sadrže konjugovane kapsularne saharide iz više meningokoknih serogrupa, ali koje izbegavaju rizik epitopske supresije indukovane nosačem.
OPIS PRONALASKA
[0008] Suprotno od pristupa za izbegavanje supresije nosačem predloženog u referenci 15, naime, upotrebe više od jednog tipa različitih proteina nosača, ovaj pronalazak koristi isti tip proteina nosača ('zajednički nosač') za više konjugata, što pojednostavljuje proizvodnju vakcine na komercijalnoj skali. Međutim, biranjem zajedničkog nosača, mogućnost za supresiju nosačem se povećava. Vakcine se uglavnom prave mešanjem pojedinačnih konjugata koji su pripremljeni u zasebnim koncentrovanim rastvorima i svaki takav rastvor obično sadrži zaostalu količinu nekonjugovanog proteina nosača iz reakcije konjugacije. Nekonjugovani nosač može da izazove supresiju nosačem i, ako svaki koncentrovani rastvor sadrži količinu x nekonjugovanog nosača, onda će tetravalentna smesa sadržati 4x nekonjugovanog nosača. Kad se supresija nosačem javlja samo kad je dostignut određen prag nosača (npr. samo kad je nivo nekonjugovanog nosača dovoljno visok da zasiti relevantne B ćelije i/ili T ćelije, ili samo kad je dovoljno visok da stimuliše relevantne supresorske T ćelije), onda 4x nivo može da dovede do supresije čak iako je nivo svakog pojedinačnog konjugata ispod praga i ne bi izazvao supresiju da se daje sam.
[0009] Izbor zajedničkog nosača za multivalentne vakcine zato znatno povećava rizike od supresije nosačem kad se poredi sa monovalentnom vakcinom ili kad se poredi sa
konjugatima koji koriste različite proteine nosače. Da bi se kompenzovao ovaj povećan rizik, pronalazak kontroliše količinu nekonjugovanog proteina nosača u vakcini. Dok se mogućnost supresije nosačem u referencama 13 do 15 rešava fokusiranjem na prirodu proteina nosača za meningokokni saharide, ovaj pronalazak se fokusira na količinu proteina nosača koja se koristi i, konkretnije, na količinu koja je prisutna u nekonjugovanom obliku. Minimiziranjem količine nekonjugovanog proteina nosača u vakcini može se izbeći supresija nosačem, čak i kad se koristi zajednički nosač.
[0010] Ubacivanje nekonjugovanog proteina nosača u konjugovane vakcine je razmatrano i ranije [16], ali je koncentracija nekonjugovanog proteina nosača (tetanus toksoida) u ovom prethodnom radu bila oko 10 Lf po dozi. Sa dozom od 0,5 ml i upotrebom faktora konverzije od 1 Lf = 3 ug [12], ove vakcine su sadržale oko 60 ug/ml nekonjugovanog proteina nosača. Referenca 16 se nije bavila izbegavanjem supresije nosačem.
[0011] Prema tome, pronalazak obezbeđuje kompoziciju za imunizovanjc pacijenta protiv oboljenja koje izazivaNeisseria meningitidis,koja sadrži najmanje dva od sledećih: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe AN. meniiigitidisi (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe CN. meningitidisi (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe W135N. mieningitidisi (ii) protein nosač; (d) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) protein nosač, i koja se odlikuje time što (1) najmanje dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač') i (2) kompozicija uključuje zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
[0012] Pronalazak takođe obezbeđuje postupak za dobijanje kompozicije za imunizovanje pacijenta na oboljenje koje izazivaNeisseria meningitidis,koji sadrži korake: (1) dobijanja bar dva od sledećih: (a) konjugata (i) kapsularnog saharida serogrupe A A<7>.
meningitidisi (ii) proteina nosača; (b) konjugata (i) kapsularnog saharida EMI3.1 serogrupe CN. meningitidisi (ii) proteina nosača; (c) konjugata (i) kapsularnog saharida serogrupe W135N. meningitidisi (ii) proteina nosača; (d) konjugata (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) proteina nosača, gde bar dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač'); i (2) mešanja bar dva konjugata dobijena u (1), da bi se dobila kompozicija koja uključuje
zajednički nosač u nekonjugovom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
[0013] Postupak može da uključi jedan ili više koraka merenja količine nekonjugovanog zajedničkog nosača. Takva merenja se mogu izvoditi na pojedinačnim konjugatima pred mešanje i/ili na kombinovanim konjugatima posle mešanja. Pojedinačni konjugat se može odbaciti ili odabrati za mešanje na osnovu rezultata takvih merenja i konačan sastav se slično može odbaciti ili odabrati za davanje lekarima za upotrebu na osnovu rezultata takvih merenja.
[0014] Pronalazak takođe obezbeđuje postupak za dobijanje kompozicije za imunizovanje pacijenta na oboljenje kojeizaziva Neisseria meningitidis,koji sadrži korake: (a) biranje n različitih meningokoknih serogrupa iz grupa koje sadrže A, C, W135 i Y, gde je vrednost n 2, 3 ili 4; (b) za svaku od n odabranih serogrupa, dobijanje konjugata (i) kapsularnog saharida iz te serogrupe i (ii) proteina nosača, gde svaki od n konjugata koristi isti protein nosač
('zajednički nosač') i (c) mešanje n konjugata, dobijenih u koraku (b), da bi se dobila kompozicija koja uključuje zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml. Poželjna vrednost nje 4, tako da pronalazak obezbeđuje postupak za dobijanje kompozicije za imunizovanje pacijenta na oboljenje koje izazivaNeisseria meningitidis,koji sadrži korake: (a) za svaku od meningokoknih serogrupa A, C, Wl 35 i Y, dobijanje konjugata (i) kapsularnog saharida iz te serogrupe i (ii) proteina nosača, gde svaki od četiri konjugata koristi isti protein nosač i (b) mešanje konjugata da bi se dobila kompozicija koja uključuje zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
[0015] Kao i ranije, ovaj postupak može da uključi jedan ili više koraka merenja količine nekonjugovanog zajedničkog nosača, pre i/ili posle mešanja u koraku (b).
Konjugati
[0016] Konjugacija se koristi da bi se povećala imunogenost saharida, jer ih ona konvertuje iz T-nezavisnih antigena u T-zavisne antigene, time omogućujući primovanje za imunološku memoriju. Konjugacija je naročito korisna za pedijatrijske vakcine [npr. ref. 17] i to je dobro poznata tehnika [npr. dat je pregled u referencama 18 do 27].
[0017] Kompozicija prema pronalasku uključuje bar dva (tj. 2, 3 ili 4) od sledećih meningokoknih konjugata: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupeA jV. meningitidisi (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe CN. meningitidisi (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe W135N. meningitidisi (ii) protein nosač; (d) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) protein nosač.
[0018] Od ovih konjugata, bar dva (tj. 2, 3 ili 4) koriste zajednički protein nosač. To ne znači da jedan molekul konjugata uključuje saharide iz više od jedne serogrupe (reference 28 i 29). Pre, jedan molekul konjugata nosi saharid iz jedne serogrupe, ali se isti tip proteina nosača koristi za svaku različitu serogrupu. Unutar jednog molekula konjugata, međutim, može biti više od jednog tipa saharida (npr. fragmenti različite dužine), ali će ovi biti izvedeni iz jedne jedine serogrupe. Kao prinier korišćenja zajedničkog nosača, uzorak proteina se može podeliti na četvrtine, od kojih se zatim svaka koristi za dobijanje konjugata upotrebom fragmenata kapsularnih saharida iz jedne jedine serogrupe i konjugati se zatim mogu mešati da bi se dobio tetravalentan konjugat sa zajedničkim nosačem.
[0019] Kapsularni saharidi se biraju od meningokoknih serogrupa A, C, W135 i Y, tako da kompozicije uključuju saharide iz 2. 3. ili sve 4 od ove četiri serogrupe. Specifični sastavi obuhvataju saharide iz: serogrupa A i C; serogrupa A i W 135: serogrupa A i Y; serogrupa C i W135; serogrupa C i Y; serogrupa VV135 i Y; serogrupa A i C i W135; serogrupa A i C i Y; serogrupa A i W135 i Y; serogrupa C i W135 i Y; serogrupa A i C i W135 i Y. Sastavi koji uključuju bar serogrupu C su poželjni (npr. A i C), a sastavi koji uključuju saharide iz sve četiri serogrupe su najpoželjniji.
[0020] Kapsularni saharidi svake od ove četiri serogrupe su dobro okrarakterisani. Kapsularni saharid meningokoka serogrupe A je homopolimer (al->6)-vezan N-acetil-D- manosamin-1 - fosfat, sa parcijalnom O-acetilacijom u C3 i C4 pozicijama. Acetil grupe se mogu zameniti blokirajućim grupama da se spreči hidroliza [30] i takvi modifikovani saharidi su još uvek saharidi serogrupe A unutar značenja iz sadašnjeg pronalaska. Kapsularni saharid serogrupe C je homopolimer (a2—»9)-vezana sijalinska kiselina (N-acetil neuraminska kiselina, ili
'NeuNAc').
[0021] Većina sojeva serogrupe C ima O-acetil grupe na C-7 i/ili C-8 ostacima sijalinske kiseline, ali oko 15% kliničkih izolata nema ove O-acetil grupe [31,32], Struktura saharida se piše kao ->9)-Neu p NAc 7/8 OAc-(a2-». Saharid serogrupe W135 je polimer disaharidnih jedinica sijalinska kiselina - galaktoza. Kao saharid serogrupe C, on ima varijabilnu O-acetilaciju, ali na pozicijama 7 i 9 sijalinske kiseline [33]. Struktura se piše kao: ->4)-D-Neu/?5Ac(7/90Ac)-a-(2—>6)-D-Gal-a-(l-». Saharid serogrupe Yje sličan saharidu serogrupe W135, osim što disaharidna jedinica koja se ponavlja uključuje glukozu umesto galaktoze.
Kao i serogrupa W135, on ima varijabilnu O-acetilaciju na pozicijama 7 i 9 sijalinske kiseline
[33]. Struktura serogrupe Y se piše kao: ->4)-D-Neup5Ac(7/90Ac)-a-(2->6)-D-Glc-a-(l->.
[0022] Saharidi koji se koriste u skladu sa pronalaskom mogu da budu O-acetilovani kao što je opisano gore (npr. sa istim obrascem O-acetilacije koji se vidi u nativnim kapsularnim saharidima), ili mogu biti parcijalno ili potpuno de-O-acetilovani na jednoj ili na više pozicija saharidnih prstenova, ili mogu biti hiper-O-acetilovani u odnosu na nativne kapsularne saharide.
[0023] Poželjno je da saharidi koji se koriste u skladu sa pronalaskom budu kraći nego nativni kapsularni saharidi koji se nalaze u bakterijama. Prema tome, poželjno je da su saharidi depoiimerizovani, gde se depolimerizacija javlja posle prečišćavanja, ali pre konjugacije. Depolimerizacija smanjuje dužinu lanaca saharida. Poželjan metod za depolimerizaciju ukjlučujc upotrebu vodonik peroksida [7]. Vodonik peroksid se dodaje saharidu (npr. da bi se dobila konačna koncentracija H2O2od 1%) i smesa se zatim inkubira (npr. na oko 55°C) dok se ne postigne željeno smanjenje dužine lanaca. Jedan drugi metod za depolimerizaciju uključuje hidrolizu kiselinom [8], gde poželjni depolimerizovani saharidi u konjugatima iz pronalaska imaju sledeći opseg prosečnih stepena polimerizacije: A=10-20; 0=12-22; Wl 35—15-25; Y=15-25. Ostali metodi za depolimerizaciju su poznati stručnjaku. Saharidi koji se koriste za dobijanje konjugata za upotrebu prema pronalasku mogu se dobiti pomoću bilo kog od ovih metoda đepolimerizacije. Depolimerizacija se može koristiti da bi se obezbedila optimalna dužina lanaca za imunogenost i/ili da bi se smanjila dužina lanaca zbog fizičkog rukovanja saharidima.
[0024] Tipični proteini nosači za upotrebu u konjugatima su bakterijski toksini, kao stoje toksin difterije [npr. videti poglavlje 13 ref. 34; reference 35-38] (ili njegov mutant CRM197 [39-42]) i toksin tetanusa, obično u toksoidnom vidu (npr. dobijen tretiranjem inaktivirajućom supstancom, kao stoje formalin ili formaldehid). Ostali pogodni proteini nosači uključuju protein iz spoljne membraneN. meningitidis[43], sintetičke peptide [44,45], hit šok proteine [46,47], proteine pertusisa [48,49], citokine [50], limfokine [50], hormone [50], faktore rasta
[50], veštačke proteine koji sadrže više epitopa humanih CD4<+>T ćelija iz raznih antigena izvedenih iz patogena [51], protein D izH. influenzae[52-54], pneumolizin [55], pneumokokni površinski protein PspA [56], proteine za unos gvožđa [57], toksin A ili B iz C.difficile[58], itd.
[0025] Četiri naročito poželjna proteina nosača za upotrebu kao zajedničkih nosača su toksoid difterije (Dt), toksoid tetanusa (Tt), CRM197 i protein D izH. influenzae.Ovi proteini su poželjni zato što su oni glavni nosači koji se danas koriste u pedijatrijskim vakcinama, tako da su nosači sa najvećim rizikom od supresije nosačem npr. iz prethodno, paralelno, ili kasnije datih drugih vakcina. Dt i protein D su najpoželjniji zajednički nosači, zato što se ovi proteini koriste u postojećim pedijatrijskim vakcinama ređe nego CRM197 i Tt, npr. Hib konjugati iz GSK koriste Tt kao nosač, proizvod HibTITER™ koristi CRM197, pneumokokni konjugati u Prevenar-u™ koriste CRM197, proizvodi Menjugate™ i Meningitec™ koriste CRM197, a NeisVac-C™ koristi Tt. Dakle, da bi se dalje minimizovao rizik supresije nosačem, kao zajednički nosači koriste se Dt i proteinD H. influenzae.
[0026] Poželjno je da se konjugati mešaju tako da suštinski imaju proporcije 1:1:1:1 (masa saharida), npr., da masa saharida iz svake serogrupe bude u okviru ±10% svake druge. Tipična količina meningokoknog antigena po serogrupi u sastavu je između 1 ug i 20 ug npr. između 2 i 10 ug po serogrupi, ili oko 4 ug. Kao alternativa proporcijama 1:1:1:1, može da se koristi dupla doza serogrupe A (2:1:1:1).
[0027] Poželjni su konjugati sa težinskim odnosom saharid:protein od između 1:15 (tj. protein u višku) i 15:1 (tj. saharid u višku), poželjno između 1:5 i 5:1. Poželjno je da protein nosač bude u višku. Poželjni su konjugati sa težinskim odnosom saharid:protein od oko 1:12 ili oko 1:3, naročito kad je nosač Dt.
[0028] Može se koristiti bilo koja pogodna reakcija konjugacije. sa bilo kojim pogodnim linkerom kad je to potrebno.
[0029] Saharid će tipično biti aktiviran ili funkcionalizovan pred konjugaciju. Aktivacija može da uključi, na primer, reagense za cijanilaciju [59,60, itd.]). Ostale pogodne tehnike koriste aktivne estre, karbodiimide, hidrazide, norborane, p-nitrobenzojevu kiselinu, N-hidroksisukcinimiđ, S-NHS, EDC, TSTU; videti takođe uvod u referencu 24).
[0030] Veze preko linker grupa mogu da se prave korišćenjem bilo koje poznate procedure, na primer, procedura opisanih u referencama 61 i 62. Jedan tip veze uključuje redukcionu aminaciju polisaharida, kuplovanje dobijene amino grupe sa jednim krajem linker grupe adipinske kiseline, a zatim kuplovanje proteina sa drugim krajem linker grupe adipinske kiseline [22,63,64]. Ostali linkeri uključuju B-propionamido [65], nitrofenil-etilamin [66], haloacil halide [67], glikozidne veze [68], 6-aminokapronsku kiselinu [69], ADH [70], C4do C12grupe [71], itd. Kao alternativa upotrebi linkera, može da se koristi direktno vezivanje. Direktno vezivanje sa proteinom može da obuhvati oksidaciju polisaharida iza koje sledi redukciona aminacija proteinom, kao sto je opisano u, na primer, referencama 72 i 73.
[0031] Poželjan postupak konjugacije uključuje: uvođenje amino grupa u saharid (npr. zamenom terminalnih =0 grupa -Nfbgrupom), iza čega sledi derivatizacija adipinskim diestrom (npr. N-hidroksisukcinimid diestar adipinske kiseline) i reakcija sa proteinom nosačem (npr. CRM197). Još detalja ovog metoda konjugacije može da se nađe u referenci 8. Konjugati koji se mogu dobiti ovim metodom su poželjni konjugati za upotrebu u skladu sa pronalaskom.
[0032] U jednom drugom poželjnom postupku konjugacije, saharid reaguje sa dihidrazidom
adipinske kiseline. Za serogrupu A, može se dodati i karbodiimid (EDAC) u ovom stadijumu. Posle reakcionog perioda, dodaje se natrijum cijanoborohidrid. Derivatizovan saharid se zatim može dobiti npr. ultrafiltracijom. Derivatizovan saharid se zatim meša sa proteinom nosačem (npr. sa toksoidom difterije) i dodaje se karbodiimid. Posle reakcionog perioda, može se povratiti konjugat. Još detalja ovog metoda konjugacije može da se nađe u referenci 8. Konjugati koji se mogu dobiti ovim metodom su poželjni konjugati za upotrebu u skladu sa pronalaskom, npr. konjugati koji sadrže toksoid difterije kao nosač i linker adipinske kiseline.
[0033] U još jednom poželjnom postupku konjugacije, saharid se derivatizuje reagensom za cijanilaciju [60], iza čega sledi kuplovanje sa proteinom (direktno, ili posle uvođenja tiolne ili hidrazidne nukleofilne grupe u nosač), bez potrebe za korišćenjem linkera. Pogodni reagensi za cijanilaciju uključuju l-cijano-4-(dimetilamino)-piridinijum tetrafluoroborat ('CDAP'), p-nitrofenilcijanat i N-cijanotrietilamonijum tetrafluoroborat ('CTEA'). CDAP je poželjan, naročito kad je zajednički nosač protein DH. influenzae.Direktno kuplovanje je poželjno.
[0034] Poželjno je da se konjugati dobijaju odvojeno, a onda mešaju. Posle mešanja, koncentracija konjugata u smesi može da se podesi npr. sterilnim slanim rastvorom bez pirogena, puferisanim fosfatom.
[0035] Kao dodatak zajedničkom nosaču, konjugati sa drugim proteinima nosačima mogu da budu prisutni u kopozicijama iz pronalaska. U opštem slučaju je, međutim, poželjno da svi meningokokni konjugati u kompoziciji koriste isti zajednički nosač.
[0036] U kompozicijama prema pronalasku, poželjno je da količina nosača (konjugovanog i nekonjugovanog) iz svakog konjugata ne bude veća od 100 ug/ml, npr. <30 ug/ml proteina nosača iz svakog konjugata. Poželjni sastavi uključuju ukupnu koncentraciju zajedničkog nosača (bilo samo za kombinovane meningokokne konjugate, bilo, šio je poželjno, za kompoziciju kao celinu) manju od 500 ug/ml npr. manju od 400 ug/ml, manju od 300 ug/ml, manju od 200 ug/ml, manju od 100 ug/ml, manju od 50 ug/ml, itd.
Nekonjugovan zajednički protein nosač
[0037] Kompozicije prema pronalasku uključuju zajednički nosač u nekonjugovanom vidu, ali je nekonjugovan zajednički nosač prisutan u koncentraciji manjoj od 10 ug/ml.
[0038] Kontrolisanjem faktora kao što su uslovi konjugacije, prečišćavanje posle konjugacije. uslovi skladištenja posle konjugacije (temperatura. pH, vlažnost, itd.), moguće je, u skladu sa pronalaskom, osigurati da se količina nekonjugovanog zajedničkog nosača pouzdano održava ispod 10 ug/ml, a tipično se može držati čak i niže npr. ispod 9 ug/ml, ispod 8 ug/ml, ispod 7 ug/ml, ispod 6 ug/ml, ispod 5 ug/ml, ispod 4 ug/ml, ispod 3 ug/ml, ispod 2 ug/ml, ispod 1
ug/ml, ispod 0,5 ug/ml, itd.
[0039] Iz praktičnih razloga, međutim, pogodno je da se uključi nizak nivo nekonjugovanog zajedničkog nosača, da bi se obezbedio blag adjuvansni efekat koji ne bi doveo do problema supresije nosačem. Prema tome, poželjno je da koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača u kompoziciji prema pronalasku bude >aug/ml, ali <bug/ml, gde jeb > ai gde: (i) jeaodabran iz grupe koja obuhvata vrednosti 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4 i 5, a (ii)b jeodabran iz grupe koja obuhvata vrednosti 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 i 10.
[0040] Nekonjugovan nosač u kompozicijama prema pronalasku ima dva porekla. Prvo, može da potiče iz pojedinačnih konjugata koji su pomešani. Pojedinačni konjugati mogu da uključe neizreagovan zaostali nosač iz reakcije konjugacije i mogu da uključe nosač koji je oslobođen raspadom konjugovanog materijala. Drugo, može da potiče iz raspada konjugata posle mešanja npr. posle skladištenja kompozicije. Nekonjugovan nosač neće normalno biti dodat namerno, kao zaseban korak tokom proizvodnje. Koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača u kompoziciji može, prema tome, da se povećava tokom vremena. Poželjni sastavi su oni sa<<>10 ug/ml nekonjugovanog zajedničkog nosača, kad se meri 6 sati pošto su svi meningokokni konjugati pomešani. Ostali poželjni sastavi su oni koji imaju <10 ug/ml nekonjugovanog zajedničkog nosača tokom perioda od najmanje 1 meseca (npr. 2 meseca, 3 meseca, 6 meseci, ili duže) od vremena prvog mešanja konjugata.
[0041] U postupcima iz pronalaska, konjugati koji su pomešani mogu da sadrže nekonjugovan zajednički nosač, a nekonjugovan nosač prisutan posle mešanja će biti prenesen iz komponenata konjugata. Ako kompozicija prema pronalasku uključuje ukupnoxug nekonjugovanog zajedničkog nosača iz meningokoknih konjugata inrazličitih meningokoknih konjugata, onda, u prošeku, svaki konjugat doprinosisa. x/ nug nekonjugovanog zajedničkog nosača. U poželjnim postupcima iz pronalaska, gde kompozicija uključuje ukupnoxug nekonjugovanog zajedničkog nosača iz meningokoknih konjugata, onda je količina svakog odnpojedinačnih meningokoknih konjugata odabrana tako da obezbedi količinu nekonjugovanog zajedničkog nosača unutar ±15% odx/ n,na primer ± 10%, ±7,5% ili ±5%. Prevedeno u koncentracije, poželjno je da svaki pojedinačan konjugat doprinosi manje od 2 ug/ml nekonjugovanog nosača.
[0042] Nekonjugovan zajednički nosač u kompoziciji može da bude prisutan u rastvoru, može da bude prisutan kao precipitat, ili može da bude adsorbovan na bilo koji adjuvans koji može da bude prisutan.
[0043] Nivoi nekonjugovanog nosača mogu da se mere pomoću standardnih i poznatih metoda npr. onih prethodno korišćenih za određivanje nekonjugovanog nosača u Hib konjugovanim vakcinama.
[0044] Da bi se uporedio nivo nekonjugovanog nosača sa onim ukupnog nosača (ili konjugovanog nosača), obično je neophodno razdvojiti nekonjugovan nosač od konjugovanog nosača tako da se mogu odvojeno testirati. Postoje konjugovan nosač veći od nekonjugovanog, onda je jedan način da se to postigne razdvajanjem po veličini, npr. hromatografijom na hromatografskim sitima, elektroforezom, itd. Približne molekulske težine tipičnih nosača (u monomernom obliku) su: CRM197 = 58 kDa; Dt = 63 kDa: Tt = 150 kDa; protein D = 42 kDa.
[0045] Jedan metod merenja nivoa nekonjugovanog nosača obuhvata korak elektroforetskog razdvajanja, gde se nivo nekonjugovanog nosača upoređuje sa jednim ili više standarda koji sadrže poznatu količinu nosača. Posle kvantifikacije proteina (npr. bojenjem, kao što je bojenje srebrom), količina u odnosu na standard(e) može da se odredi. Treća analiza se takođe može sprovoditi paralelno, gde se uzorak nekonjugovanog nosača meša sa standardom, pa se ova smesa takođe poredi sa prethodne dve trake.
[0046] Ostali metodi za merenje nekonjugovanog proteina nosača mogu da uključe kapilarnu elektroforezu [74] (npr. u slobodnom rastvoru), ili micelarnu elektrokinetičku hromatografiju
[75], naročito kad je zajednički nosač toksoid difterije. Rezolucija konjugata i nosača se može poboljšati povećavanjem koncentracije borata tokom analize.
[0047] Testovi za merenje nivoa nekonjugovanog nosača se mogu vršiti u različitim stadijumima tokom postupaka iz pronalaska. Na primer, oni se mogu vršiti najednom ili više pojedinačnih konjugata pre nego što se pomešaju, i/ili se mogu vršiti posle mešanja. Pronalazak zahteva da kompozicija uključuje manje od 10 ug/ml nekonjugovanog zajedničkog meningokoknog nosača, kao što je gore opisano i ovaj nivo se može proveriti izvođenjem testa posle mešanja. Kao alternativa testiranju posle mešanja, međutim, test se može izvoditi na pojedinačnim konjugatima pre mešanja, gde se zatim pojedinačni rezultati koriste za računanje konačnog nivoa (uzimajući u obzir eventualna razblaženja, itd.), kad je mešanje rađeno u uslovima za koje se zna da ne izazivaju povećanje nekonjugovanog nosača.
[0048] Uz testove za merenje i maksimalnu dozvoljenu količinu nekonjugovanog proteina nosača (npr. 10 ug/ml, kao što je gore pomenuto), stručnjak može da proveri da li neki određeni sastav upada u opseg pronalaska. Štaviše, stručnjak može da prihvati ili odbaci (a) pojedinačni konjugat pre mešanja i/ili (b) kombinovane konjugate posle mešanja, na osnovu toga da li je nivo nekonjugovanog proteina nosača iznad ili ispod maksimalne dozvoljene količine. Prema tome, pronalazak obezbeđuje postupak za dobijanje kompozicije, koji obuhvata korake mešanja definisane gore i koji obuhvata i korak: merenja koncentracije nekonjugovanog zajedničkog nosača u kompoziciji i (i) ako je koncentracija nekonjugovanog nosača <10 ug/ml, prihvatanja kompozicije za dalju proizvodnju vakcine i/ili za davanje ljudima ili (ii) ako je koncentracija nekonjugovanog nosača<>>10 g/ml, odbacivanja kompozicije.
[0049] Pored toga što sadrže samo male količine zajedničkog nosača, poželjne kompozicije prema pronalasku slično sadrže samo male količine nekonjugovanih meningokoknih kapsularnih saharida. Tako sastav poželjno uključuje ne više od 2 ug/ml (mereno kao saharid) nekonjugovanog saharida, npr. < 1,5 ug/ml, < 1 ug/ml, < 0,5 ug/ml, itd.
Kompozicija
[0050] Pored toga što sadrže meningokokne konjugate i nekonjugovan protein nosač, kompozicije prema pronalasku tipično sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač. Takvi nosači uključuju sve nosače koji sami ne indukuju stvaranje antitela štetnih za osobu koja prima kompoziciju. Pogodni nosači su tipično veliki makromolekuli koji se sporo metabolišu, kao što su proteini, polisaharidi, polilaktičke kiseline, poliglikolne kiseline, polimerne amino kiseline, aminokiselinske kopolimere, saharoza, trehaloza, laktoza i lipidni agregati (kao što su uljne kapljice ili lipozomi). Takvi nosači su dobro poznati stručnjacima uobičajenog nivoa. Vakcine mogu da sadrže i razblaživače, kao što su voda, slani rastvor, glicerol, itd. Pored toga mogu biti prisutne pomoćne supstance, kao što su sredstva za kvašenje ili emulzifikatori, agensi za puferisanje pH i slične. Sterilan fiziološki rastvor bez pirogena sa fosfatnim puferom je tipičan nosač. Temeljna diskusija o farmaceutski prihvatljivim nosačima i ekscipijentima je data u referenci 76.
[0051] Kompozicije koje se koriste prema pronalasku mogu da uključe i antimikrobik, naročito ako su u pakovanju od više doza.
[0052] Kompozicije koje se koriste prema pronalasku mogu da obuhvate deterdžent npr. Tvveen (polisorbat), kao što je Tween 80. Deterdženti su uglavnom prisutni u malim količinama, npr. <0,01%.
[0053] Kompozicije koje se koriste prema pronalasku mogu da uključe natrijumove soli (npr. natrij um hlorid) da daju toničnost. Koncentracija od 10±2 mg/ml NaCI je tipična.
[0054] kompozicije koje se koriste prema pronalasku će uglavnom uključiti pufer, npr. fosfatni pufer.
[0055] Bakterijske infekcije mogu da pogode različite oblasti tela, tako da kompozicije mogu da se prave u različitim oblicima. Na primer, kompozicije mogu da se prave za injektiranje, bilo kao tečni rastvori, bilo kao suspenzije. Čvrsti oblici pogodni za rastvaranje ili suspendovanje u tečnim nosačima pred injektiranje se takođe mogu praviti (npr. liofilizovan sastav). Kompozicija može da se pravi za topičko davanje, npr. kao mast, krem ili prah. Kompozicija može da se pravi za oralno davanje, npr. kao tableta ili kapsula, ili kao sirup (sa opcionim dodatkom nekog ukusa). Kompozicija može da se pravi za pulmonarno davanje, npr. za inhaliranje, korišćenjem finog praha ili spreja. Kompozicija može da se pravi kao supozitorija ili pesarija. Kompozicija može da se pravi za nazalno, auralno ili okularno davanje, npr. kao sprej, kapi, gel ili prah [npr. reference 77 i 78]. U opštem slučaju, međutim, meningokokni konjugati se formulišu za intramuskulamo injektiranje.
[0056] Kompozicije koje se koriste prema pronalasku mogu, a ne moraju da uključe adjuvans za vakcinu. Adjuvansi koji se mogu koristiti u kompozicijama iz pronalaska uključuju, ali nisu ograničeni na sledeće sastave:
A. Sastavi koji sadrže minerale
[0057] Sastavi koji sadrže minerale, pogodni za upotrebu kao adjuvansi u pronalasku, uključuju mineralne soli, kao što su soli aluminijuma i soli kalcijuma. Pronalazak uključuje mineralne soli kao što su hidroksidi (npr. oksihidroksidi), fosfati (npr. hidroksifosfati, ortofosfati), sulfati, itd. [npr., videti poglavlja 8 i 9 reference 79], ili smese različitih mineraln ih jedinjenja, gde su jedinjenja u bilo kom pogodnom vidu (npr. gel, kristalan, amorfan, itd.). Sastavi koji sadrže minerale mogu da budu formulisani i kao čestice metalnih soli [80],
[0058] Aluminijum fosfati su naročito poželjni, a tipičan adjuvans je amorfan aluminijum hidroksifosfat sa molarnim odnosom P04/AI između 0,84 i 0,92, uključen sa oko 0,6 mg Al<3>7ml. Adsorpcija malom dozom aluminijum fosfata se može koristiti npr. između 50 i 100 ug Al3+ po konjugatu po dozi.
[0059] Konjugati mogu, a ne moraju da budu adsorbovani (ili mogu biti delimično adsorbovani) na bilo koju aluminijumovu so koja je prisutna. Kad sastav uključuje konjugate iz više bakterijskih vrsta, onda nije potrebno da svi konjugati budu adsorbovani.
B. Uljne emulzije
[0060] Sastavi u vidu uljnih emulzija, pogodni za upotrebu kao adjuvansi u pronalasku, uključuju emulzije skvalen-voda, kao što je MF59 [poglavlje 10 reference 79; videti i ref. 81]
(5% skvalen, 0,5% Tvveen 80 i 0,5% Span 85, formulisani u submikronske čestice pomoću mikrofluidizera). Kompletan Freund-ov adjuvans (CFA) i nekompletan Freund-ov adjuvans (IFA) se takođe mogu koristiti.
C. Saponinske formulacije [ poglavlje 22 reference 79]
[0061] Saponinske formulacije se takođe mogu koristiti kao adjuvansi u pronalasku. Saponini su heterologna grupa sterol glikozida i triterpenoid glikozida koji se nalaze u stablu, lišću, stabljikama, korenu, pa čak i cveću širokog spektra biljnih vrsta. Saponini iz stabla drvetaQuillaia saponariaMolina se naširoko proučavaju kao adjuvansi. Saponin se može i komercijalno dobiti izSmilax ornata(sarsaprilla),Gypsophilla paniculata(šlajer) iSaponaria ojficianalis(sapunjača). Saponinske adjuvansne formulacije uključuju prečišćene formulacije, kao što je QS21, kao i lipidne formulacije, kao stoje ISCOMs. QS21 se prodaje kao Stimulon™.
[0062] Saponinski sastavi se prečišćavaju upotrebom f IPLC i RP-HPLC. Identifikovane su specifične prečišćene frakcije korišćenjem ovih tehnika, uključujući QS7, QS17, QS18, QS21, QH-A, QH-B i QH-C. Poželjno, saponin je QS21. Metod proizvodnje QS21 je opisan u ref.
82. Saponinske formulacije mogu da sadrže i sterol. kao stoje holesterol [83].
[0063] Kombinacije saponina i holesterola se mogu koristiti za formiranje jedinstvenih čestica, koje se zovu imunostimulišući kompleksi (ISCOMS) [poglavlje 23 reference 79]. ISCOM-i tipično uključuju i fosfolipid, kao sto je fosfatidiletanolamin ili fosfatidilholin. Svaki poznat saponin se može koristiti za ISCOM-e. Poželjno, ISCOM uključuje jedan ili više QuilA, QHA i QHC. ISCOM-i su detaljnije opisani u ref. 83-85. Opciono, ISCOM-i mogu da ne sadrže dodatan deterdžent [86].
[0064] Pregled razvoja adjuvanata na bazi saponina se može naći u ref. 87 i 88.
D. Virozomi i virusoidne čestice
[0065] Virozomi i virusoidne čestice (VLP) se takođe mogu koristiti kao adjuvansi u pronalasku. Ove strukture uglavnom sadrže jedan ili više proteina iz virusa, po želji kombinovanih ili formulisanih sa fosfolipidom. Oni su uglavnom nepatogeni, ne repliciraju se i uglavnom ne sadrže ništa od nativnog virusnog genoma. Virusni proteini se mogu rekombinantno proizvoditi ili izolovati iz celih virusa. Ovi virusni proteini, pogodni za upotrebu u virozomima ili VLP, uključuju proteine izvedene iz virusa influence (kao što je HA ili NA), virus hepatitisa B (kakvi su sržni ili kapsidni proteini), virus hepatitisa E, virus malih boginja, virus Sindbis, rotavirus, virus slinavke i šapa, retrovinis, virus Norvvalk, humani papiloma virus, HIV, RNK-fazi, QJ3-fag (kakvi su proteini omotača), GA-fag, fr-fag, AP205 fag i Ty (kakav je protein pl retrotranspozona Ty). VLP-i su diskutovane detaljnije u ref. 89-94. Virozomi su diskutovani detaljnije u, na primer, ref. 95.
E. Bakterijski ili mikrobski derivati
[0066] Adjuvansi pogodni za upotrebu u pronalasku uključuju bakterijske ili mikrobske derivate kao što su netoksični derivati enterobakterijskih lipopolisaharida (LPS), derivati Lipida A, imunostimulatorski oligonukleotidi i ADP-ribozilujući toksini i njegovi detoksifikovani derivati.
[0067] Netoksični derivati LPS uključuju monofosforil lipid A (MPL) i 3-O-deaciIovan MPL (3dMPL). 3dMPL je smesa 3 de-O-acilovanog monofosforil lipida A sa 4,5 ili 6 acilovanih lanaca. Poželjan vid 3 de-O-acilovanog monofosforil lipida A - "male čestice" - je opisan u ref. 96. Takve "male čestice" 3dMPL su dovoljno male da budu sterilno profiltrirane kroz membranu od 0,22 um [96]. Ostali netoksični derivati LPS uključuju mimike monofosforil lipida A, kakvi su derivati aminoalkil glukozaminid fosfata, npr. RC-529 [97, 98].
[0068] Derivati Lipida A uključuju derivate lipida A izEscherichia coli,kao stoje OM-174. OM-174 je opisan, na primer, u referencama 99 i 100.
[0069] Imunostimulatorni oligonukleotidi pogodni za upotrebu kao adjuvansi u pronalasku uključuju nukleotidne sekvence koje sadrže CpG motiv (dinukleotidna sekvenca koja sadrži nemetilovan citozin vezan fosfatnom vezom za guanozin). Pokazano je da su dvolančane RNK i oligonukleotidi koji sadrže palindromske ili poli(dG) sekvence takođe imunostimulativne.
[0070] CpG-ovi mogu da uključuju nukleotidne modifikacije/analoge kao što su fosforotioatne modifikacije i mogu da budu dvolančane ili jednolančane. Reference 101, 102 i 103 opisuju moguće analogne supstitucije, npr. zamena guanozina 2'-dezoksi-7-deazaguanozinom. Adjuvansni efekat CpG oligonukleotida se detaljnije diskutuje u ref. 104-109.
[0071] CpG sekvenca se može usmeriti na TLR9, kao što je motiv GTCGTT ili TTCGTT
[110]. CpG sekvenca može da bude specifična za indukovanje imunog odgovora Thl, kao što je CpG-A ODN, ili može da bude specifičnija za indukovanje odgovora B ćelija, kao što je CpG-B ODN. CpG-A i CpG-B ODN su diskutovani u ref. 111-113. Poželjno, CpG je CpG-A
ODN.
[0072] Poželjno, CpG oligonukleotid je konstruisan tako daje 5' kraj dostupan za receptorsko prepoznavanje. Po želji, dve CpG oligonukleotidne sekvence se mogu spojiti svojim 3' krajevima da formiraju "imunomere". Videti, na primer, ref. 110 i 114-116.
[0073] Bakterijski ADP-ribozilujući toksini i njihovi detoksikovani derivati se mogu koristiti kao adjuvansi u pronalasku. Poželjno, protein je izveden izE. coli(termolabilan enterotoksin "LT"E. coli),kolere ("CT"), ili pertusisa ("PT"). Upotreba detoksikovanih ADP-ribozilujućih toksina kao mukoznih adjuvanata je opisana u ref. 117, a kao parenteralnih adjuvanata u ref. 118. Poželjno je daje toksin ili toksoid u vidu holotoksina koji sadrži i A i B podjedinice. Poželjno je da A podjedinica sadrži detoksikujuću mutaciju; poželjno je da B podjedinica ne bude mutirana. Poželjno je daje adjuvans detoksikovan LT mutant kao što su LT-K63, LT-R72 i LT-G192. Upotreba ADP-ribozilujućih toksina i njihovih detoksikovanih derivata, naročito LT-K63 i LT-R72, kao adjuvanata, može se naći u ref. 119-126. Numerička referenca za aminokiselinske supstitucije se poželjno zasniva na uređenju podjedinica A i B ADP-ribozilujućih toksina datih u ref. 127, specifično u celini ovde ugrađeni referencom.
F. Humani imunomodulatori
[0074] Humani imunomodulatori pogodni za upotrebu kao adjuvansi u pronalasku uključuju citokine, kao što su interleukini (npr. IL-1, IL-2, IL-4, IL-5"IL-6, TL-7, IL-12 [128], itd.)
[129], interferone (npr. interferon-y), faktor koji stimuliše kolonije makrofaga i faktor nekroze tumora.
G. Bioadhezivi i mukoadhezivi
[0075] Bioadhezivi i mukoadhezivi mogu takode da se koriste kao adjuvansi u pronalasku. Pogodni bioadhezivi uključuju mikrosfere esterifikovane hijaluronskc kiseline [130] ili mukoadhezive kao što su unakrsno spojeni derivati poliakrilne kiseline, polivinil alkohol, polivinil pirolidon, polisaharide i karboksimetilcelulozu. Hitosan i njegovi derivati se takođe mogu koristiti kao adjuvansi u pronalasku [131].
H. Mikročestice
[0076] Mikročestice se takođe mogu koristiti kao adjuvansi u pronalasku. Mikročestice (tj. čestica od -100 nm do~150 um u prečniku, poželjnije -200 nm do -30 um u prečniku i najpoželjnije -500 nm do -10 pm u prečniku) formirane od materijala koji su biodegradabilni i netoksični (npr. poli(a-hidroksi kiselina), polihidroksibuterna kiselina, poliortoestar, polianhidrid, polikaprolakton, itd.), sa poli(laktid-ko-glikolidom) su poželjne, po želji obrađene da imaju negativno naelektrisanu površinu (npr. pomoću SDS) ili pozitivno naelektrisanu površinu (npr. katjonskim deterdžentom, kao što je CTAB).
I. Lipozomi ( poglavlja 13 i 14 reference 79)
[0077] Primeri lipozomskih formulacija pogodnih za upotrebu kao adjuvansi su opisani u referencama 132-134.
j. Polioksietilen etarske i polioksietilen estarske formulacije
[0078] Adjuvansi pogodni za upotrebu u pronalasku uključuju polioksietilen otre i polioksietilen estre [135], Takve formulacije uključuju i polioksietilen sorbitan estarske surfaktante u kombinaciji sa oktoksinolom [136], kao i polioksietilen alkil etarske ili estarske surfaktante u kombinaciji sa bar jednim dodatnim nejonskim surfaktantom, kao stoje oktoksinol [137]. Poželjni polioksietilen etri su odabrani iz sledeće grupe: polioksietilen-9-lauril etar (lauret 9), polioksietilen-9-steoril etar, polioksietilen-8-steoril etar, polioksietilen-4-lauril etar, polioksietilen-35-lauril etar, i polioksietilen-23-lauril etar.
K. Polifosfazen ( PCPP)
[0079] PCPP formulacije su opisane, na primer, u referencama 138 i 139.
L. Muramil peptidi
[0080] Primeri muramil peptida pogodnih za upotrebu kao adjuvansi u pronalasku uključuju N-acetil-muramil-L-treonil-D-izoglutamin (thr-MDP), N-acetil-normuramil-L-alanil-D-izoglutamin (nor-MDP) i N-acetilmuramil-L-alanil-D-izoglutaminil-L-alanin-2-(r-2'-đipalmitoil-5/?-glicero-3- hiđroksifosforiloksi)-etilamin MTP-PE).
M. Imidazokinolon ska jedinjenja
[0081] Primeri imidazokinolonskih jedinjenja pogodnih za upotrebu kao adjuvanata u pronalasku uključuju imikvamod i njegove homologe (npr. "Resiquimod 3M"), opisane detaljnije u referencama 140 i 141.
[0082] Pronalazak može da sadrži i kombinacije aspekata jednog ili više adjuvanata identifikovanih gore. Na primer, sledeći adjuvansski sastavi se mogu koristiti u pronalasku: (1) saponin i emulzija voda u ulju [142]; (2) saponin (npr. QS21) + netoksičan derivat LPS (npr. 3dMPL) [143]; (3) saponin (npr. QS21) + netoksičan derivat LPS (npr. 3dMPL) - holesterol; (4) saponin (npr. QS21) + 3dMPL + IL-12 (opciono + sterol) [144]; (5) kombinacije 3dMPL sa, na primer, QS21 i/ili emulzijama voda u ulju [145]; (6) SAP, koji sadrži 10% skvalan, 0,4% Tvveen 80™, 5% pluronik blok polimer LI 21 i thr-MDP, bilo mikrofluidizovan u submikronsku emulziju, bilo vorteksovan da da emulziju sa većim česticama; (7) adjuvanski sistem Ribi™ (RAS), (Ribi Immunochem) koji sadrži 2% skvalen, 0,2% Tvveen 80 i jednu ili više komponenata bakterijskog ćelijskog zida iz grupe koja obuhvata monofosforilipid A (MPL), trehalozu dimikolat (TDM) i skeleton ćelijskog zida (CWS), poželjno MPL + CWS (Detox™) i (8) jednu ili više mineralnih soli (kao stoje aluminijumova so) + netoksičan derivat LPS (kao što je 3dMPL).
[0083] Ostale supstance koje se ponašaju kao imunostimulišući agensi su opisane u poglavlju 7 reference 79.
[0084] Upotreba aluminijum hidroksidnog ili aluminijum fosfatnog adjuvansa je naročito poželjna [npr. primeri 7 i 8 ref. 7; primer J ref. 8], sa ili bez adsorpcije. Može se koristiti i kompozicija bez adjuvansa sa aluminij urno vom solju [ref. 15]. Kalcijum fosfat je još jedan poželjan adjuvans. Konjugati se mogu mešati sa adjuvansima (i po želji adsorbovati na njih) odvojeno, a onda se konjugati pomešati, ili se konjugati mogu pomešati, a zatim se pomešati sa adjuvansima.
[0085] Poželjan pH kompozicija koje se koriste prema pronalasku je između 6 i 8, poželjno oko 7. Stabilan pH se može održavati upotrebom pufera. Kad kompozicija sadrži so aluminijum hidroksida, poželjno je koristiti histidinski pufer 1146J. Sastav može biti sterilan t/ili bez pirogena. Sastavi mogu biti izotonični u odnosu na ljude.
[0086] Kompozicije mogu da uključuju konzervans (npr. tiomersal, 2-fenoksietanol), ili mogu biti bez konzervansa. Poželjne kompozicije orema pronalasku ne uključuju materijale na bazi žive, npr., oni su bez tiomersala.
[0087] Kompozicije se mogu pakovati u flašice ili se mogu pakovati u već napunjene špriceve. Uz špriceve mogu i ne moraju biti igle. Špric će uključiti jednu dozu kompozicije, dok flašica može da uključi pojedinačnu ili višestruku dozu. Injektabilni sastavi će obično biti tečni rastvori ili suspenzije. Alternativno, oni se mogu praviti u čvrstom stanju (npr. liofilizovani) za rastvaranje ili suspendovanje u tečnim nosačima pred injektiranje.
[0088] Kompozicije se mogu pakovati u vidu pojedinačnih doza ili u vidu višestrukih doza. Za oblike sa višestrukim dozama, bočice su poželjnije od već napunjenih špriceva. Zapremine efektivnog doziranja se mogu rutinski utvrditi, ali tipična humana doza kompozicije za injektiranje ima zapreminu od 0,5 ml.
[0089] Kompozicije će sadržati imunološki efektivnu količinu meningokoknih konjugata, kao i bilo koje druge komponente, po potrebi. Pod 'imunološki efektivna količina' podrazumeva se da davanje te količine osobi, bilo u pojedinačnoj dozi, bilo kao deo niza, podiže protektivan anti-meningokokni imuni odgovor u pacijentima. Ova količina varira u zavisnosti od zdravlja i fizičkog stanja osobe koja se tretira, starosti, taksonomske grupe pojedinca koji se tretira (npr. nehumani primat, primat, itd.), kapaciteta imunog sistema pojedinca da sintetiše antitela, željenog stepena zaštite, formulacije vakcine. lekarevc procene zdravstvene situacije i drugih relevantnih faktora. Očekuje se da će količina upasti u relativno širok opseg koji se može odrediti kroz rutinske pokušaje, a tipična količina svakog meningokoknog antigena po dozi je između 1 ug i 20 ug po serogrupi (mereno kao količina saharida), npr. između 2 i 10 ug po serogrupi, ili između 3 i 8 ug po serogrupi. Poželjna doza je oko 4 ug po serogrupi (tj. ukupno 16 ug u tetravalentnoj smesi), ili of about 5 ug po serogrupi (tj. ukupno 20 ug u tetravalentnoj smesi).
Liofilizacija
[0090] Vakcine se tipično daju injekcijom, naročito intramuskularnom injekcijom. Kompozicije prema pronalasku su obično u vidu vodenih rastvora ili suspenzija u vreme upotrebe. U nekim oblicima iz pronalaska, kompozicije su u vodenom stanju od stadijuma pakovanja do stadijuma davanja ('potpuno tečna' vakcina). U drugim oblicima, međutim, jedna ili više komponenata kompozicije može da bude pakovana u liofilizovanom vidu, a vakcina se u trenutku davanja može rekonstituisati kad je potrebno. Tako se kompozicije prema pronalasku mogu pripremati u stadijumu pakovanja, ili se mogu pripremati eks tempore pred upotrebu. Liofilizacija meningokoknih konjugata je poznata u struci, npr. proizvod Menjugate™ se predstavlja u liofilizovanm obliku, dok su NeisVac-C™ i Meningitec™ potpuno tečne vakcine.
[0091] U nekim oblicima su, dakle, kompozicije prema pronalasku u liofilizovanoj formi. Pojedinačni meningokokni konjugati mogu biti liofilizovan pred mešanje, ili se mogu pomešati u vodenoj formi, a zatim liofilizovati.
[0092] Pronalazak takođe obezbeđuje komplet za pravljenje kompozicija prema pronalasku, gde komplet sadrži bar jedan meningokokni konjugat u liofilizovanoj formi i bar jedan meningokokni konjugat u vodenoj formi. Komplet može da sadrži dve flašice (jednu u kojoj je vodeni materijal ijednu u kojoj je liofilizovan materijal), ili može da sadrži jedan već napunjen špric ijednu flašicu, gde se, npr., sadržaj šprica koristi za rekonstituisanje sadržaja flašice pred injektiranje. Za kompozicije koje uključuju konjugat serogrupe A, saharid serogrupe A može biti liofilizovan, dok konjugati drugih serogrupa mogu biti prisutni u tečnom vidu.
[0093] Pronalazak takođe obezbeđuje komplet za pravljenje vodenog sastava iz pronalaska, gde komplet sadrži (i) liofilizovan sastav iz pronalaska i (ii) vodeni materijal, gde je komponenta (ii) za rekonstituisanje komponente (i) da bi se obezbedio vodeni sastav. Poželjno je da komponenta (ii) bude sterilna, bez pirogena, itd., kao što je opisano gore.
[0094] Prema tome, pronalazak obuhvata kompozicije u potpuno liofilizovanom obliku, potpuno vodenom obliku i u obliku spremnom za rekonstituisanje da bi se dobi la vodena formulacija.
[0095] Da bi se konjugati stabilisali tokom liofilizacije, poželjno je da sadrže šećerni alkohol (npr. manitol) ili disaharid (npr. saharozu ili trehalozu), npr. u koncentraciji od između 1 mg/ml i 30 mg/ml (npr. oko 25 mg/ml) u sastavu. Poželjna je liofilizacija u prisustvu saharoze. Kompozicije prema pronalasku tako mogu da uključuju šećerni alkohol ili disaharid, naročito kad su oni ili u liofilizovanom vidu ili su rekonstituisani iz liofilizovanog materijala.
[0096] Kad je kompozicija u liofilizovanoj formi (ili uključuje liofilizovanu komponentu), onda je poželjno da liofilizovan materijal ne uključuje aluminijumski adjuvans. Ako se želi konačan vodeni sastav sa aluminijumskim adjuvansom, onda bi adjuvans trebalo da bude prisutan u materijalu koji se koristi za rekonstituisanje liofilizovanog materijala (v. Menjugate™).
Pacijent
[0097] Kompozicije prema pronalasku su za zaštitu pacijenata od meningokoknog oboljenja, npr. od meningitisa, poželjnije bakterijskog meningitisa, a najpoželjnije od meningokoknog meningitisa.
[0098] Pacijent koga treba imunizovati će tipično biti čovek. Covek će obično biti najmanje 1 mesec star, npr. bar 2 meseca star, bar 4 meseca star, bar 6 meseci star, bar 2 godine star, bar 5 godina star, bar 11 godina star, bar 17 godina star, bar 40 godina star, bar 55 godina star, itd. Poželjan skup pacijenata je u starosnoj grupi od 2-55 godina, a drugi poželjan skup pacijenata je u starosnoj grupi od 11-55 godina. Sledeći poželjan skup pacijenata su oni sa manje od 11 godina starosti, npr. 2-11 godina. Sledeći poželjan skup pacijenata je ispod 2 godine starosti, npr. ispod 1 godine. Kompozicije prema pronalasku su naročito korisne za imunizovanje pacijenata koji su već dobili zajednički protein nosač u prethodnoj imunizaciji.
[0099] Pre ili otprilike u isto vreme sa primanjem kompozicija orema pronalasku, pacijent može biti imunizovan još jednom ili sa više vakcina. Druge vakcine koje su mogle biti date ili koje se mogu dati uključuju, ali nisu ograničene na: antigene difterije, kao što je toksoid difterije; antigene tetanusa, kao što je tetanus toksoid; antigen(e) pertusisa, kao ćelijska/iz celih ćelija pertusis vakcina ('Pw') ili, poželjno, nećelijska pertusis vakcina ('Pa'); kapsularni saharidHaemophilus influenzaetipa B, tipično konjugovan; površinski antigen hepatitisa B (HBsAg); poliovirus, kao što je inaktivirana polioviras vakcina (IPV) ili oralna poliovirus vakcina (OPV); kapsularni saharidStreptococcus pneumoniae,tipično multivalentan i konjugovan; virus influence; BCG; virusni antigeni hepatitisa A; virus malih boginja; virus zauški; virus rubeole; virus varičele; itd. Više detalja o nekim od ovih vakcina je dato niže.
[0100] Poželjan rezultat davanja kompozicija prema pronalasku je da, za svaku datu serogrupu, pacijent podiže odgovor od serumskih bakctericidnih antitela (SBA), sa povećanjem SBA titra (u poređenju sa prethodno imunizovanim pacijentom pre dobijanja kompozicije) bar 4 puta, a poželjno bar 8 puta. SBA test je standardni korelat meningokokne zaštite. Još detalja o serološkim korelatima meningokoknih vakcina je dato u referenci 147.
Još aiitigenskih komponenata kompozicija koje se koriste prema pronalasku
[0101] Kompozicije prema pronalasku se mogu koristiti za imunizovanje pacijenata na meningokokno oboljenje i može se koristiti odvojeno od drugih komponenata vakcinacije. Pored toga, međutim, kompozicije prema pronalasku se mogu koristiti u sprezi sa drugim komponentama vakcine. Ove druge komponente se mogu davati odvojeno od kompozicija prema pronalasku, ali suštinski u isto vreme, ili kompozicije prema iz pronalasku mogu da uključe ove druge komponente kao deo kombinovane vakcine.
[0102] Pored antigena meningokoknih konjugata, dakle, kompozicije prema pronalasku mogu opciono da uključe jedan ili više sledećih antigena: 1. Konjugovan kapsularni saharid izH. influenzaetipa B ('Hib') [npr. poglavlje 14 ref.
34].
Protein nosač za konjugat može biti CRM197, toksoid difterije, tetanus toksoid ili kompleks iz spoljne membraneN. meningitidis.Saharidna grupa konjugata može da bude polisaharid (npr. cela dužina poliribosilribitol fosfata (PRP)), ali je poželjno depolimerizovati kapsularne polisaharide da obrazuju oligosaharide (npr. molekulske težine od~1 do~5 kDa). Poželjan Hib konjugat sadrži oligosaharid kovalentno vezan za CRM197 preko linker adipinske kiseline [148,149]. Davanje Hib antigen pacijentu poželjno dovodi do koncentracije antitela na PRP od >0,15 ug/ml i poželjnije, > 1 ug/ml. Kad kompozicija uključuje Hib saharidni antigen, poželjno je da ne uključi i aluminijum hidroksidni adjuvans. Ako kompozicija uključuje aluminijum fosfatni adjuvans, onda se Hib antigen može adsorbovati na adjuvans [150] ili se može ne adsorbovati [15]. Prevencija adsorpcije se može postići odabiranjem pravog pll tokom mešanja antigena i adjuvansa, adjuvansa sa odgovarajućom izoelektricnom tačkom i odgovarajućim redom mešanja za različite antigene u kompoziciji [151]. 2. Konjugovan kapsularni saharid iz ,S'.pneumoniae[npr. poglavlje 23 ref. 34; reference 152-154].
Poželjno je uključiti saharide iz više od jednog serotipaS. pneumoniae.Na primer, smese polisaharida iz 23 različita serotipa se široko upotrebljavaju, kao što su konjugovane vakcine sa polisaharidima iz između 5 i 11 različitih serotipova [155]. Na primer, PrevNar™ [156] sadrži antigene iz sedam serotipova (4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F i 23F), gde je svaki saharid pojedinačno konjugovan sa CRM197 reduktivnom aminacijom, sa 2 ug svakog saharida na 0,5 ml doze (4 ug serotipa 6B) i sa konjugatima adsorbovanim na aluminijum fosfatni adjuvans. Kad su pneumokokni konjugati uključeni u kompozicije za upotrebu prema pronalasku, kompozicija poželjno sadrži bar serotipove 6B, 14, 19F i 23F.
3. Proteinski antigen izNeisseria meningitidisserogrupe B [npr. ref. 157].
4. Antigen difterije, kao stoje toksoid difterije [npr. poglavlje 13 ref. 34].
5. Antigen tetanusa, kao stoje tetanus toksoid [npr. poglavlje 27 ref. 34].
6. Ćelijski/iz celih ćelija antigen pertusisa ('Pw') [npr. poglavlje 21 ref. 34].
7. Jedan ili više nećelijskih antigena pertusisa ('Pa') [npr. poglavlje 21 ref. 34].
A Pa komponenta će u opštem slučaju uključiti jedan, dva ili tri od sledećih dobro okarakterisanih antigenaB. pertussis:(1) pertusis toksoid ('PT'), detoksifikovan bilo hemijskim sredstvima, bilo specifičnom (site-directed) mutagenezom, npr. '9K/129G' mutant [158]; (2) filamentozni hemaglutinin ('FHA'); (3) pertaktin (poznat i kao 'protein spoljne membrane od 69 kiloDaltona'). Pa komponente mogu da sadrže i aglutinogen 2 i/ili aglutinogen 3. 8. Antigen iz virusa hepatitisa B, kao što su površinski ('HBsAg') i/ili sržni antigeni [npr. rel. 159 i 164; poglavlje 16 ref. 34], gde je poželjno da površinski antigen bude adsorbovan na aluminijum fosfat [160]. 9. Jedan ili više antigena poliovirusa [npr. 161,162; poglavlje 24 ref. 34] kao što je 1PV. Uključivanje Mahonev soja, MEF-1 soja i Saukett soja je normalno. 10. Antigen iz virusa hepatitisa A, kao što je inaktiviran virus [npr. 163, 164; poglavlje 15
ref. 34].
Kompozicija može da sadrži jedan ili više (tj. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,8, 9 ili 10) od ovih drugih antigena. U drugim oblicima, kompozicija može specifično da ne sadrži jedan ili više od ovih drugih antigena.
[0103] Kad su prisutni, ovi drugi antigeni mogu, a ne moraju da budu adsorbovani na aluminijumovu so.
[0104] Kad je antigen difterije uključen u smesu, poželjno je takođe uključiti antigen tetanusa i antigene pertusisa. Slično, kad je antigen tetanusa uključen, poželjno je takođe uključiti antigene difterije i pertusisa. Slično, kad je antigen pertusisa uključen, poželjno je takođe uključiti antigene difterije i tetanusa.
[0105] Antigeni u smesi će tipično biti prisutni u koncentraciji od bar 1 ug/ml svaki. U opštem slučaju, koncentracija bilo kog datog antigena će biti dovoljna da podigne imuni odgovor na taj antigen. Poželjno je da se efikasnost zaštite svakog pojedinačnog saharidnog antigena ne ukloni njihovim kombinovanjem, mada se realna imunogenost (npr. ELISA titri) može smanjiti.
[0106] Ako se meningokokni konjugati daju u nizu doza, onda nijedna, neke ili sve doze mogu da sadrže ove dodatne antigene.
[0107] Kao alternativu kompozicijama koje uključuju jednu ili više od ovih 10 dodatnih komponenti, pronalazak obezbeđuje komplet koji obuhvata: (i) kompoziciju prema pronalasku, bilo u vodenoj, bilo u liofilizovanoj formi i (ii) kompoziciju koja sadrži jednu ili više od ovih 10 dodatnih komponenti. Kad je komponenta (i) liofilizovana, onda je poželjno da komponenta (ii) bude u vodenoj formi i da se može upotrebiti za rekonstituisanje (i).
[0108] Tako se kompozicije prema pronalasku mogu prodavati za samostalnu upotrebu, mogu prodavati za upotrebu u sprezi sa drugim materijalima za vakcine, ili se mogu prodavati kao deo kompleta za vakcinaciju.
Medicinski tretmani
[0109] Kompozicija prema pronalasku može da se koristi u metodu za lečenje pacijenta, koji se sastoji od davanja pacijentu imunološki efektivne količine kompozicije prema pronalasku. Pacijent može da bude ili sam pod rizikom od oboljenja ili može da bude trudna žena ('materinska imunizacija').
[0110] Pronalazak takođe obezbeđuje kompoziciju prema pronalasku, za upotrebu kao lek (npr. kao imunogena kompozicija ili kao vakcina).
[0111] Pronalazak takođe obezbeđuje upotrebu bar dva od: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe AN. meningitidisi (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe CN. meningitidisi (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe W135N. meningitidisi (ii) protein nosač: (đ) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) protein nosač, u proizvodnji leka za imunizovanje pacijenta na oboljenje izazvanoNeisseria- om meningitidis,koja se odlikuje time što (1) bar dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač') i (2) lek uključuje zajednički nosač u nekonjugovanom vidu u koncentraciji manjoj od 10 ug/ml.
[0111 ] Kad je vakcina za profilaktičku upotrebu, poželjno je daje pacijent dete (npr. beba ili dete do oko 3 godine (toddler)); kad je vakcina za terapijsku upotrebu, poželjno je da je pacijent odrasla osoba. Vakcina namenjena deci se može dati i odraslima, npr. da bi se procenili bezbednost, doziranje, imunogenost, itd.
[0113] Jedan način da se proveri efikasnost terapijskog tretmana uključuje praćenje meningokokne infekcije posle davanja kompozicije prema pronalasku. Jedan način da se proveri efikasnost profilaktičkog tretmana uključuje praćenje imunih odgovora na dat polipeptiđ posle davanja. Imunogenost kompozicije prema pronalasku se može odrediti njihovim davanjem ispitanicima, a serološki korelati za meningokokne vakcine su dati u referenci 147.
[0114] Kompozicije će se u principu davati direktno pacijentu. Direktno davanje može da bude postignuto parenteralnom injekcijom (npr. subkutano, intraperitonealno, intravenozno, intramuskulamo, ili u intersticijalni prostor tkiva), ili rektalnom, oralnom, vaginalnom, topičnom, transdermalnom, intranazalnom, okularnom, auralnom, pulmonarnom ili nekom drugom mukoznom administracijom. Intramuskularna administracija (npr. u butinu ili nadlakticu) je poželjna. Injekcija može biti putem igle (npr. hipodermalne igle), ali alternativno se može koristiti injekcija bez igle. Tipična intramuskularna doza je 0,5 ml.
[0115] Meningokokni konjugati iz više serogrupa se daju u smesi unutar jedne kompozicije. Kompozicija se može davati kao pojedinačna doza ili se može davati više puta u programu sa više doza. Više doza se može koristiti u rasporedu za primarnu imunizaciju i/ili u programu za pojačavanje imunizacije. Program za primarnu dozu može da bude praćen programom za buster doze meningokoknih konjugata. Pogodno vreme između prvih doza (npr. između 4-16 nedelja) i između prvih i buster doza, se može rutinski odrediti.
[0116] Pronalazak se može koristiti da podigne sistemski i/ili mukozni imunitet.
Specifični sastavi iz pronalaska
[0117] Poželjni oblici pronalaska uključuju: 1. Vodeni sastav koji sadrži meningokokne konjugate iz serogrupa C, W135 i Y, gde je
CRM197 nosač za svaki. Saharidi su vezani za nosač pomoću linkera adipinske kiseline. Koncentracija nekonjugovanog CRM197 je < 5 ug/ml. Koncentracija svakog konjugata (merena preko saharida) je oko 10 ug/ml. Sastav uključuje aluminijum fosfatni adjuvans, bez koraka adsorpcije na adjuvans tokom pripreme. Sastav uključuje natrijum hlorid, natrijum fosfat (monobazni i dvobazni, za puferisanje) i male količine polisorbata 80. Sastav je za intramuskularnu injekciju ili se može koristiti za rekonstituisanje
liofilizovanih konjugata serogrupe A.
2. Vodeni sastav koji nastaje iz rekonstituisanja liofilizovanog konjugata serogrupe A
sastavom oblika 1 gore. Konjugat serogrupe A ima i CRM197 nosač. Posle rekonstituisanja, konjugat serogrupe A može biti prisutan u koncentraciji od oko 10 ug/ml ili oko 20 ug/ml (u zavisnosti od faktora razblaženja). Posle rekonstituisanja, koncentracija nekonjugovanog CRM197 ostaje < 5 ug/ml.
3. Vodeni sastav koji sadrži meningokokne konjugate iz serogrupa A i C, sa proteinom D
H. influenzaekao nosačem za oba i sa saharidima vezanim za nosač pomoću CDAP hernije. Koncentracija nekonjugovanog proteina D je <10 ug/ml. Sastav takođe sadrži konjugatH. influenzaetipa b, gde je Hib saharid konjugovan sa tetanus toksoiđom proteinom nosačem. Koncentracija svakog od tri konjugata (merena preko saharida) je oko 10 ug/ml. Sastav ne sadrži aluminijumovu so kao adjuvans. Sastav sadrži saharozu. pH sastava je između 6 i 6,5, npr. oko 6,1. Sastav je za liofilizaciju.
4. Liofilizovan sastav koji sadrži meningokokne konjugate iz serogrupa A i C, gde je
protein D//. influenzaenosač za oba. a saharidi su vezani za nosač pomoću CDAP hernije. Koncentracija nekonjugovanog proteina D je <10 ug/ml. Sastav takođe sadrži konjugatH. influenzaetipa b, gde je Hib saharid konjugovan sa tetanus toksoiđom proteinom nosačem. Sastav ne sadrži aluminijumovu so kao adjuvans. Sastav sadrži
saharozu. Sastav je rekonstituisan drugim komponentama vakcine, naročito nemeningokoknim komponentama vakcine.
5. Vodeni sastav koji nastaje iz rekonstituisanja sastava oblika 4 gore, sa sastavom
vakcine koji sadrži antigene difterije, tetanusa i pertusisa i opciono sadrži i HBsAg. Rekonstituišuća vakcina će sadržati aluminijum hidroksidni i/ili fosfatni adjuvans.
6. Vodeni sastav koji sadrži meningokokne konjugate iz serogrupa A, C, W135 i Y, sa
toksoiđom difterije kao nosačem za svaki. Saharidi mogu biti vezani za nosač korišćenjem linkera adipinske kiseline. Koncentracija nekonjugovanog Dt je <5 ug/ml. Koncentracija svakog od tri konjugata (merena preko saharida) je oko 8 ug/ml. Sastav ne sadrži aluminijumove soli. Sastav je za intramuskularnu injekciju.
Opšte
[0118] Termin"koji sadrži" obuhvata "koji uključuje", kao i "koji obuhvata", npr. sastav "koji obuhvata" X može da se sastoji isključivo od X ili može da sadrži i nešto dodatno, npr. X + Y.
[0119] Termin"oko" u vezi sa numeričkom vrednošću x znači, na primer, x ± 10%.
[0120] Reč "suštinski" ne isključuje "potpuno", npr. sastav koji je " suštinski bez" Y može da bude potpuno bez Y. Kad je neophodno, reč "suštinski" može da se izbaci iz definicije u pronalasku.
[0121] Koncentracije zajedničkog nosača su date gore u jedinicama "ug/ml" (mikrogrami po mililitru), ali, u alternativnom i paralelnom skupu definicija, ove koncentracije u ug/ml se mogu zameniti koncentracijama merenim u jedinicama "Lf/ml" (flokulacione jedinice, ili "granice flokulacije" [165]), stoje funkcionalna jedinica za kvantifikovanj e toksoida tetanusa i difterije. Numeričke vrednosti će se deliti sa 3 (tj. 3 ug/ml bi postalo 1 Lf/ml) i, kad je neophodno, biće zaokružene na najbliži ceo broj (tj. 10 ug/ml bi postalo 4 Lf/ml) u ovom alternativnom skupu definicija. Ova alternativa je data ovde isključivo zbog pogodnosti i ne treba da ima ikakav uticaj na pronalazak kad su koncentracije nosača date u ug/ml
NAČINI ZA SPROVOĐENJE PRONALASKA
Smanjenje odgovora na serogrupu C u prisustvu nekonjugovanog proteina nosača
[0122] NeisVac-C™ sadrži kapsularni saharid serogrupe C (OAc-) konjugovan sa nosačem toksoiđom tetanusa, sa aluminijum hidroksidnim adjuvansom i sa težinskim odnosom protein: saharid -2:1. Ova vakcina je data deci uzrasta 3-6 ili 13-18 godina, ili sama, ili sa simultanom administracijom nekonjugovanih toksoida tetanusa i difterije, kao stoje opisano u referenci 13. Specifična IgG GMC su merena pomoću OAc+ ELISA, pomoću OAc- ELISA i pomoću ELISA visokog aviditeta i rSBA GMT su takođe mereni (u odnosu na soj Cl 1) [13]. Rezultati u dve grupe pacijenata su sledeći, u odnosu na rezultate u pacijentima koji nisu primili Tt/Dt vakcinu u isto vreme:
[0123] Efekat nekonjugovanog Tt na imuni odgovor je jasan iz ovih rezultata. Da bi se izbegao ovaj efekat u vakcinama koje sadrže više od jednog meningokoknog konjugata, prema pronalasku, nivo nekonjugovanog nosača se održava ispod pražnog nivoa.
Kombinovani meningokokni konjugati
[0124] Smese meningokoknih konjugata za serogrupe A+C, C+W+Y ili A+C+W+Y se mogu praviti kao što je opisano u referencama 7, 8 i 15. Ove vakcine imaju CRM197, protein DH. influenzaeili toksoid difterije (Dt) kao protein nosač, kovalentno vezan za saharide. Sa konjugatima proizvedenim koristeći suštinski metod iz reference 8, urađeno je sledeće.
[0125] Za serogrupu A, prečišćen osušen polisaharid je hidrolizovan da da prosečan stepen polimerizacije (avDP) od 10-11. Da bi se uklonili dugi polisaharidi, korišćena je ultrafiltracija za 30kDa. Hromatografija sa Q sepharose-om je zatim korišćena da bi se odstranili kratki fragmenti saharida. Saharidi su podvrgnuti reduktivnoj aminaciji, a zatim ultrafiltraciji za 30kDa da bi se odstranile nečistoće male molekulske težine. Aminovani saharidi su koncentrovani, a zatim aktivirani pomoću bis N-hidroksisukcinimid estra adipinske kiseline. Ovaj materijal je pogodan za dobijanje konjugata. Aktiviran estar se mesa sa prečišćenim nosačem CRM197 uz molarni višak saharida od 13: 1, sa koncentracijom nosača od 45 mg/ml u 0,lM-nom natrijum fosfatnom puferu (pH 7,2). Konjugacija se vrši na sobnoj temperaturi uz mešanje na magnetnoj mešalici između 8 i 24 sata. Reakcija se zaustavlja dodavanjem NH4CI (konačne koncentracije 0,1 M) i rastvor se zatim razblažuje 10 mM natrijum fosfatom, pH 7,2. Ovi uslovi obezbeđuju efikasnu konjugaciju i minimizuju nivo neizreagovanog proteina nosača koji ostaje. Prema pronalasku, svaki zaostali neizreagovan materijal se savesno uklanja, gde se dalji koraci izvode u okviru 2 sata od razblaživanja pomenutog gore. Vrši se ultrafiltracija sa kasetom od 30 kDa, sa 10 mM natrijum fosfatom (pH 7.2), do 4 sata.
[0126] Za serogrupu C, koristio se suštinski isti postupak osim što: je izvršena početna hidroliza da bi dala avDP između 7 i 16; konjugaciona reakcija je trajala 14-22 sati na sobnoj temperaturi;
[0127] dodatan korak je ubačen između konjugacije i koraka ultrafiltracije, gde je konjugat prečišćen hidrofobnom hromatografijom (brzoprotočna kolona sa Phenvl Sepharose-om; 1M amonijum sulfat, 10 mM fosfatni pufer pH 7,2; spiranje dodavanjem pufera bez amonijuma sulfata), a granična vrednost (cutoff) ultrafdtracije je bila 10 kDa.
[0128] Za serogrupe W135 i Y, koristio se suštinski isti postupak kao za serogrupu A, osim što je: početna hidroliza dala avDP od 20; molarni višak saharida 12:1.
[0129] Ovim postupcima se mogu rutinski postići nivoi nekonjugovanog nosača ispod 1 ug (mereni u odnosu na ukupan sadržaj CRM197 od 50 ug) za svaki konjugat.
[0130] Četiri osnovna konjugata se mogu kombinovati da bi se dobile kompozicije prema pronalasku.
[0131] U kliničkom testu V59P2, rađenom u Finskoj i Nemačkoj sa 620 subjekata uzrasta 12-16 meseci, testirano je pet formulacija ovih mešanih konjugata. Doze za saharid svake serogrupe, izražene kao masa saharida u ug na 0,5ml doze, su sledeće, posle mešanja i razblaživanja:
[0132] Vakcine sadrže aluminijum fosfatni adjuvans [8]. Nekonjugovan CRM197 je bio prisutan sa manje od 2 ug/ml u vakcinama.
[0133] Subjekti su primili injekciju u nultoj vremenskoj tački. a 25% subjekata je zatim primilo drugu dozu vakcine 4 nedelje kasnije.
[0134] Serumi pacijenata su sakupljeni 1 mesec posle davanja vakcine i ispitani SBA testom naN. meningitidisiz svake serogrupe, uz upotrebu humanog komplementa. Određivano je povećanje SBA titra u odnosu na serum u nultoj tački, po kriterijumu > 1: 4 i > 1: 8. Titri na kapsule (GMT) su takođe mcreni za svaku serogrupu. Rezultati su prikazani u Tabeli 1 niže.
[0135] Tako su i trivalentna i tetravalentna vakcina bile imunogene u deci do 3 godine (toddlers). Konjugati su imunogeni i u tako malim dozama saharida kao što je 2,5 ug po konjugatu. Imuni odgovor se može pojačati, sa velikim povećanjima SBA titra posle druge doze. Nema dokaza o supresiji nosačem u ovoj studiji.
[0136] Podrazumevaće se daje pronalazak opisan gore samo kroz primer i modifikacije se mogu praviti ostajući unutar opsega pronalaska, koji je definisan pridruženim zahtevima.

Claims (28)

1. Kompozicija za imunizovanje pacijenta na oboljenje izazvanoNeisseria meningitidis,koja sadrži bar dva od: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe AN. meningitidisi (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe CN. meningitidisi (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe W135N. meningitidisi (ii) protein nosač; (d) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) protein nosač,naznačena time,što (1) bar dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač') i (2) kompozicija sadrži zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
2. Kompozicija prema zahtevu 1, koja sadrži konjugat iz obe serogrupe A i C.
3. Kompozicija prema zahtevu 1 ili zahtevu 2, koja sadrži konjugat iz sve tri serogrupe A, C, W135 i Y.
4. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde je svaki od meningokoknih konjugata konjugovan sa zajedničkim nosačem odabranim iz grupe koju čine: toksoid difterije; toksoid tetanusa; CRM197 i protein D iz//. influenzae.
5. Kompozicija prema zahtevu 4, gde je zajednički nosač toksoid difterije.
6. Kompozicija prema zahtevu 4, gde je zajednički nosač protein DH. influenzae.
7. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde je masa saharida iz svake serogrupe između 2 i 10 ug.
8. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde je masa saharidaizsvake serogrupe u okviru +10% svake druge.
9. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 2 ug/ml.
10. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde je ukupna koncentracija zajedničkog nosača u sastavu manja od 100 ug/ml.
11. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, formulisan za intramuskularno injektiranje.
12. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji sadrži i aluminijum hidroksidni i/ili aluminijum fosfatni adjuvans.
13. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, gde sastav ne sadrži materijale na bazi žive.
14. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji još sadrži jedan ili više ođ sledećih dodatnih antigena: (i) konjugovan kapsularni saharid izHaemophilus influenzaetipa B; (ii) konjugovan kapsularni saharid izStreptococcuspneumoniae;(iii) proteinski antigen izN. meningitidisserogrupe B; (iv) antigen difterije; (v) antigen tetanusa; (vi) antigen pertusisa ćelijski ili iz celih ćelija; (vii) jedan ili više nećelijskih antigena pertusisa; (viii) antigen iz virusa hepatitisa B; (ix) jedan ili više antigena poliovirusa (x); antigen iz virusa hepatitisa A.
15. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, u vodenom obliku.
16. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, u liofilizovanom obliku.
17. Kompozicija prema bilo kom od prethodnih zahteva, koji sadrži šećerni alkohol ili saharozu.
18. Bočica koja sadrži kompoziciju prema bilo kom od prethodnih zahteva.
19. Špric koji sadrži kompoziciju prema bilo kom od prethodnih zahteva.
20. Komplet za dobijanje kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 15, gde komplet sadrži bar jedan meningokokni konjugat u liofilizovanom obliku i bar jedan meningokokni konjugat u vodenom obliku.
21. Komplet za dobijanje kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 15, gde komplet obuhvata (i) liofilizovan sastav iz zahteva 15 i (ii) vodeni materijal, gde je komponenta (ii) za rekonstituisanje komponente (i) da bi se obezbedio vodeni sastav.
22. Komplet koji sadrži: (i) kompoziciju prema bilo kom od zahteva 1 do 17 i (ii) kompoziciju koja sadrži jedan ili više antigena od (i) do (x) kao što je definisano u zahtevu 14.
23. Postupak za dobijanje kompozicije za imunizovanje pacijenta na oboljenje izazvanoNeisseria meningitidis,koji sadrži korake: (1) dobijanja bar dva od: (a) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe A/V.meningitidisi (ii) protein nosač; (b) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe C A<r>.meningitidisi (ii) protein nosač; (c) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe VVT 35N. meningitidisi (ii) protein nosač; (d) konjugat (i) kapsularnog saharida serogrupe YN. meningitidisi (ii) protein nosač, gde bar dva od navedenih konjugata (a), (b), (c) i (d) koriste isti protein nosač ('zajednički nosač'); i (2) mešanja bar dva konjugata dobijena u (1), da bi se dobila kompozicija koja sadrži zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
24. Postupak dobijanje kompozicije za imunizovanje pacijenta na oboljenje izazvanoNeisseria meningitidis,koji sadrži korake: (1) odabiranja n različitih meningokoknih serogrupa iz grupe koja se sastoji od A, C, W135 i Y, gde je vrednost n 2, 3 ili 4, a zatim, za svaku od n odabranih serogrupa, dobijanje konjugata (i) kapsularnog saharida iz te serogrupe i (ii) proteina nosača, gde svaki od n konjugata koristi isti protein nosač ('zajednički nosač'); i (2) mešanja n konjugata, dobijenih u koraku (1) da bi se dobila kompozicija koja sadrži zajednički nosač u nekonjugovanom obliku, gde je koncentracija nekonjugovanog zajedničkog nosača manja od 10 ug/ml.
25. Postupak iz zahteva 24, gde je vrednost n 2 ili 4.
26. Postupak iz bilo kog od zahteva 23 do 25, koji dalje sadrži jedan ili više koraka merenja količine nekonjugovanog zajedničkog nosača.
27. Postupak iz zahteva 26, koji sadrži korak merenja pre mešanja konjugata i/ili korak merenja posle mešanja konjugata.
28. Postupak za ocenjivanje pogodnosti kompozicije za proizvodnju vakcina i/ili za davanje ljudima, koji sadrži izvođenje koraka (1) i (2) iz bilo kog od zahteva 23 do 27 i koji još sadrži korak: (3) merenja koncentracije nekonjugovanog zajedničkog nosača u kompoziciji i ili (4-i), ako je koncentracija nekonjugovanog nosača < 10 ug/ml, prihvatanja kompozicije za dalju proizvodnju vakcine, i/ili za davanje ljudima; ili, (4-ii) ako je koncentracija nekonjugovanog nosača > 10 ug/ml, odbacivanja kompozicije.
RSP-2009/0478A 2004-04-30 2005-04-29 Kombinovani meningokokni konjugati sa zajedničkim proteinom nosačem RS51192B (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0409745.7A GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-04-30 Compositions including unconjugated carrier proteins
PCT/IB2005/001536 WO2005105141A2 (en) 2004-04-30 2005-04-29 Combined meningococcal conjugates with common carrier protein

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS51192B true RS51192B (sr) 2010-10-31

Family

ID=32482499

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP-2009/0478A RS51192B (sr) 2004-04-30 2005-04-29 Kombinovani meningokokni konjugati sa zajedničkim proteinom nosačem

Country Status (22)

Country Link
US (1) US9492558B2 (sr)
EP (2) EP2108374A1 (sr)
JP (4) JP2007535531A (sr)
CN (1) CN1976716B (sr)
AT (1) ATE439144T1 (sr)
AU (1) AU2005237308B2 (sr)
BR (1) BRPI0510440A (sr)
CA (1) CA2564366C (sr)
CY (1) CY1109582T1 (sr)
DE (1) DE602005015961D1 (sr)
DK (1) DK1755662T3 (sr)
ES (1) ES2329059T3 (sr)
GB (1) GB0409745D0 (sr)
HR (1) HRP20090607T8 (sr)
MX (1) MXPA06012330A (sr)
NZ (1) NZ550601A (sr)
PL (1) PL1755662T3 (sr)
PT (1) PT1755662E (sr)
RS (1) RS51192B (sr)
RU (1) RU2385737C2 (sr)
SI (1) SI1755662T1 (sr)
WO (1) WO2005105141A2 (sr)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2371994C (en) * 1999-02-26 2010-09-28 Guido Grandi Enhancement of bactericidal activity of neisseria antigens with oligonucleotides containing cg motifs
GB0115176D0 (en) * 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0505518D0 (en) 2005-03-17 2005-04-27 Chiron Srl Combination vaccines with whole cell pertussis antigen
PE20110072A1 (es) * 2005-06-27 2011-02-04 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicion inmunogenica
EP1940462A2 (en) * 2005-12-23 2008-07-09 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Conjugate vaccines
US10828361B2 (en) 2006-03-22 2020-11-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Regimens for immunisation with meningococcal conjugates
PL2004225T3 (pl) 2006-03-22 2012-09-28 Novartis Ag Schematy immunizacji koniugatami meningokokowymi
AR064642A1 (es) 2006-12-22 2009-04-15 Wyeth Corp Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi
ES2555786T3 (es) * 2007-06-04 2016-01-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Formulación de vacunas contra la meningitis
AU2013204315B2 (en) * 2007-10-19 2016-02-18 Glaxosmithkline Biologicals Sa Meningococcal vaccine formulations
BR122016015627A2 (pt) * 2007-10-19 2018-10-30 Novartis Ag kit, composição antigênica liofilizada e método para preparação de uma composição imunogênica
GB0822633D0 (en) * 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
CN107913396B (zh) 2010-08-23 2022-03-08 惠氏有限责任公司 脑膜炎萘瑟氏菌rLP2086抗原的稳定制剂
AU2011300409B2 (en) 2010-09-10 2015-03-26 Wyeth Llc Non-lipidated variants of Neisseria meningitidis ORF2086 antigens
MY198910A (en) 2012-03-09 2023-10-02 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
KR102057217B1 (ko) 2012-06-20 2020-01-22 에스케이바이오사이언스 주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
KR20140075196A (ko) 2012-12-11 2014-06-19 에스케이케미칼주식회사 다가 폐렴구균 다당류-단백질 접합체 조성물
WO2014138290A1 (en) * 2013-03-05 2014-09-12 Trudeau Institute, Inc. Compositions and methods for treating bacterial infections
WO2014136064A2 (en) 2013-03-08 2014-09-12 Pfizer Inc. Immunogenic fusion polypeptides
DK2976101T3 (da) * 2013-03-18 2020-11-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Behandlingsfremgangsmåde
RU2662968C2 (ru) 2013-09-08 2018-07-31 Пфайзер Инк. Иммуногенная композиция против neisseria meningitidis (варианты)
WO2016132294A1 (en) 2015-02-19 2016-08-25 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
BR112019003992A2 (pt) 2016-09-02 2019-05-28 Sanofi Pasteur Inc vacina contra neisseria meningitidis
CN110366428B (zh) 2016-12-30 2024-05-17 Vaxcyte公司 具有非天然氨基酸的多肽-抗原缀合物
US11951165B2 (en) 2016-12-30 2024-04-09 Vaxcyte, Inc. Conjugated vaccine carrier proteins
AU2018215585B2 (en) 2017-01-31 2022-03-17 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2021059181A1 (en) 2019-09-27 2021-04-01 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof

Family Cites Families (91)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB323103A (en) 1928-12-07 1929-12-24 Fred Cunningham Firth Improvements relating to shaper mechanism for winding yarn on weft bobbins in spinning mules
US4057685A (en) 1972-02-02 1977-11-08 Abbott Laboratories Chemically modified endotoxin immunizing agent
US4356170A (en) 1981-05-27 1982-10-26 Canadian Patents & Development Ltd. Immunogenic polysaccharide-protein conjugates
US4673574A (en) 1981-08-31 1987-06-16 Anderson Porter W Immunogenic conjugates
SE8205892D0 (sv) 1982-10-18 1982-10-18 Bror Morein Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin
US4459286A (en) 1983-01-31 1984-07-10 Merck & Co., Inc. Coupled H. influenzae type B vaccine
US4663160A (en) 1983-03-14 1987-05-05 Miles Laboratories, Inc. Vaccines for gram-negative bacteria
US4761283A (en) 1983-07-05 1988-08-02 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
US6090406A (en) 1984-04-12 2000-07-18 The Liposome Company, Inc. Potentiation of immune responses with liposomal adjuvants
US5916588A (en) 1984-04-12 1999-06-29 The Liposome Company, Inc. Peptide-containing liposomes, immunogenic liposomes and methods of preparation and use
US4695624A (en) 1984-05-10 1987-09-22 Merck & Co., Inc. Covalently-modified polyanionic bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers, and methods of preparing such polysaccharides and conjugates and of confirming covalency
US4882317A (en) 1984-05-10 1989-11-21 Merck & Co., Inc. Covalently-modified bacterial polysaccharides, stable covalent conjugates of such polysaccharides and immunogenic proteins with bigeneric spacers and methods of preparing such polysaccharides and conjugataes and of confirming covalency
US4808700A (en) 1984-07-09 1989-02-28 Praxis Biologics, Inc. Immunogenic conjugates of non-toxic E. coli LT-B enterotoxin subunit and capsular polymers
US4709017A (en) 1985-06-07 1987-11-24 President And Fellows Of Harvard College Modified toxic vaccines
IT1187753B (it) 1985-07-05 1987-12-23 Sclavo Spa Coniugati glicoproteici ad attivita' immunogenica trivalente
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
NL8802046A (nl) 1988-08-18 1990-03-16 Gen Electric Polymeermengsel met polyester en alkaansulfonaat, daaruit gevormde voorwerpen.
AU631377B2 (en) 1988-08-25 1992-11-26 Liposome Company, Inc., The Affinity associated vaccine
DE3841091A1 (de) 1988-12-07 1990-06-13 Behringwerke Ag Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US7118757B1 (en) * 1988-12-19 2006-10-10 Wyeth Holdings Corporation Meningococcal class 1 outer-membrane protein vaccine
CA2006700A1 (en) 1989-01-17 1990-07-17 Antonello Pessi Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines
CA2017507C (en) 1989-05-25 1996-11-12 Gary Van Nest Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion
KR920703114A (ko) 1989-07-14 1992-12-17 원본미기재 접합체 백신을 위한 시토킨 및 호르몬 운반체
IT1237764B (it) 1989-11-10 1993-06-17 Eniricerche Spa Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici.
SE466259B (sv) 1990-05-31 1992-01-20 Arne Forsgren Protein d - ett igd-bindande protein fraan haemophilus influenzae, samt anvaendning av detta foer analys, vacciner och uppreningsaendamaal
ATE128628T1 (de) 1990-08-13 1995-10-15 American Cyanamid Co Faser-hemagglutinin von bordetella pertussis als träger für konjugierten impfstoff.
US5153312A (en) 1990-09-28 1992-10-06 American Cyanamid Company Oligosaccharide conjugate vaccines
IT1262896B (it) 1992-03-06 1996-07-22 Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini.
SG48365A1 (en) 1992-05-23 1998-04-17 Smithkline Beecham Biolog Combined vaccines comprising hepatitis b surface antigen and other antigens
PT652758E (pt) 1992-06-18 2000-04-28 Harvard College Vacinas de toxina da difteria
CA2138997C (en) 1992-06-25 2003-06-03 Jean-Paul Prieels Vaccine composition containing adjuvants
IL102687A (en) 1992-07-30 1997-06-10 Yeda Res & Dev Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them
PL175595B1 (pl) 1992-08-31 1999-01-29 North American Vaccine Inc Antygenowy/immunogenny koniugat do wytwarzania szczepionki przeciwko infekcji N.meningitidis, sposób wytwarzania antygenowego/immunogennego koniugatu oraz szczepionka przeciwko infekcji N.meningitidis
US5425946A (en) 1992-08-31 1995-06-20 North American Vaccine, Inc. Vaccines against group C Neisseria meningitidis
RU2068270C1 (ru) * 1993-01-13 1996-10-27 Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова Антиген менингококков группы в
US5776468A (en) 1993-03-23 1998-07-07 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccine compositions containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid A
WO1995008348A1 (en) 1993-09-22 1995-03-30 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Method of activating soluble carbohydrate using novel cyanylating reagents for the production of immunogenic constructs
GB9326174D0 (en) 1993-12-22 1994-02-23 Biocine Sclavo Mucosal adjuvant
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US6455673B1 (en) 1994-06-08 2002-09-24 President And Fellows Of Harvard College Multi-mutant diphtheria toxin vaccines
US5917017A (en) 1994-06-08 1999-06-29 President And Fellows Of Harvard College Diphtheria toxin vaccines bearing a mutated R domain
US6429199B1 (en) 1994-07-15 2002-08-06 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules for activating dendritic cells
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
AUPM873294A0 (en) 1994-10-12 1994-11-03 Csl Limited Saponin preparations and use thereof in iscoms
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
FR2734484B1 (fr) 1995-05-24 1997-06-27 Pasteur Merieux Serums Vacc Composition vaccinale liquide et procede de fabrication
TR199701547T1 (xx) 1995-06-07 1998-03-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Polisakarit antijen protein e�leni�i i�eren a��.
PL184872B1 (pl) 1995-06-23 2003-01-31 Smithkline Beecham Biolog Kombinowana szczepionkaĆ zestaw do przygotowania kombinowanej szczepionkiĆ sposób wytwarzania kombinowanej szczepionki i jej zastosowanie
GB9513261D0 (en) 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US6248334B1 (en) * 1997-01-08 2001-06-19 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Process for preparing conjugate vaccines including free protein and the conjugate vaccines, immunogens, and immunogenic reagents produced by this process
DK1005368T3 (da) 1997-03-10 2010-01-04 Ottawa Hospital Res Inst Anvendelse af nukleinsyrer, der indeholder ikke-metyleret CpG dinukleotid i kombination med alun som hjælpestoffer
US6818222B1 (en) 1997-03-21 2004-11-16 Chiron Corporation Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants
US6299881B1 (en) 1997-03-24 2001-10-09 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Uronium salts for activating hydroxyls, carboxyls, and polysaccharides, and conjugate vaccines, immunogens, and other useful immunological reagents produced using uronium salts
FR2763244B1 (fr) 1997-05-14 2003-08-01 Pasteur Merieux Serums Vacc Composition vaccinale multivalente a porteur mixte
GB9712347D0 (en) 1997-06-14 1997-08-13 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9713156D0 (en) 1997-06-20 1997-08-27 Microbiological Res Authority Vaccines
AU1145699A (en) 1997-09-05 1999-03-22 Smithkline Beecham Biologicals (Sa) Oil in water emulsions containing saponins
GB9725084D0 (en) 1997-11-28 1998-01-28 Medeva Europ Ltd Vaccine compositions
AU763349B2 (en) * 1998-02-05 2003-07-17 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Simplified method for removing free protein during preparation of protein-polysaccharide conjugates and vaccines using restricted-access media
IL137809A0 (en) 1998-02-12 2001-10-31 American Cyanamid Co Pneumococcal and meningococcal vaccines formulated with interleukin-12
US7018637B2 (en) 1998-02-23 2006-03-28 Aventis Pasteur, Inc Multi-oligosaccharide glycoconjugate bacterial meningitis vaccines
US6303114B1 (en) 1998-03-05 2001-10-16 The Medical College Of Ohio IL-12 enhancement of immune responses to T-independent antigens
WO1999052549A1 (en) 1998-04-09 1999-10-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvant compositions
US6562798B1 (en) 1998-06-05 2003-05-13 Dynavax Technologies Corp. Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof
GB9817052D0 (en) 1998-08-05 1998-09-30 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
DE69941574D1 (de) 1998-08-19 2009-12-03 Baxter Healthcare Sa Immunogenes beta-propionamido-gebundenes polysaccharid-protein konjugat geeignet als impfstoff und hergestellt bei verwendung von n-acryloyliertem polysaccharid
KR100629028B1 (ko) 1998-10-16 2006-09-26 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 애쥬번트 시스템 및 백신
US6585973B1 (en) * 1998-10-29 2003-07-01 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Method for preparing solid phase conjugated vaccine
ATE459373T1 (de) 1999-03-19 2010-03-15 Glaxosmithkline Biolog Sa Impfstoff gegen kapsulare polysaccharide von streptococcus pneumoniae
JP2002541808A (ja) 1999-04-09 2002-12-10 テクラブ， インコーポレイテッド ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア
TR200200777T2 (tr) 1999-09-24 2002-09-23 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Polioksietilen alkil eteri veya esteriyle en az bir iyonik olmayan yüzey aktif maddeli adjuvant.
HUP0202885A3 (en) 1999-09-24 2004-07-28 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
GB9928196D0 (en) * 1999-11-29 2000-01-26 Chiron Spa Combinations of B, C and other antigens
DE60039450D1 (de) 1999-12-02 2008-08-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Zusammensetzungen und methoden zur stabilisierung von biologischen molekülen nach lyophilisierung
US20010044416A1 (en) 2000-01-20 2001-11-22 Mccluskie Michael J. Immunostimulatory nucleic acids for inducing a Th2 immune response
GB0007432D0 (en) 2000-03-27 2000-05-17 Microbiological Res Authority Proteins for use as carriers in conjugate vaccines
CZ20024224A3 (cs) 2000-06-29 2003-05-14 Glaxosmithkline Biologicals S. A. Farmaceutický prostředek
GB0108364D0 (en) 2001-04-03 2001-05-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine composition
AU2001294750C1 (en) 2000-09-26 2008-09-18 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory activity of immunostimulatory oligonucleotide analogs by positional chemical changes
SI21352A (sl) * 2001-01-23 2004-06-30 Aventis Pasteur Multivalentno meningokokno cepivo iz konjugata polisaharida-proteina
WO2002091998A2 (en) 2001-05-11 2002-11-21 Aventis Pasteur, Inc. Novel meningitis conjugate vaccine
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
RU2323002C2 (ru) 2001-07-26 2008-04-27 Чирон Срл. Вакцины, содержащие алюминиевые адъюванты и гистидин
DE60234375D1 (de) 2001-09-14 2009-12-24 Cytos Biotechnology Ag VERPACKUNG VON IMMUNSTIMULIERENDEM CpG IN VIRUSÄHNLICHEN PARTIKELN: HERSTELLUNGSVERFAHREN UND VERWENDUNG
CA2492823A1 (en) 2001-09-14 2003-03-27 Cytos Biotechnology Ag In vivo activation of antigen presenting cells for enhancement of immune responses induced by virus like particles
WO2003035836A2 (en) 2001-10-24 2003-05-01 Hybridon Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5' ends
ES2616180T3 (es) 2002-03-26 2017-06-09 Glaxosmithkline Biologicals Sa Sacáridos modificados con estabilidad mejorada en agua para su uso como medicamento
HUE031886T2 (en) 2002-10-11 2017-08-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Polypeptide vaccines for extensive protection against hypervirulent meningococcal lines
EP2172213B1 (en) * 2003-01-30 2013-04-03 Novartis AG Injectable vaccines against multiple meningococcal serogroups
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides

Also Published As

Publication number Publication date
CN1976716A (zh) 2007-06-06
WO2005105141A3 (en) 2006-03-23
MXPA06012330A (es) 2007-01-31
PT1755662E (pt) 2009-11-17
US20080254057A1 (en) 2008-10-16
RU2385737C2 (ru) 2010-04-10
BRPI0510440A (pt) 2007-10-30
ES2329059T3 (es) 2009-11-20
CA2564366C (en) 2020-01-14
HRP20090607T1 (hr) 2009-12-31
CN1976716B (zh) 2014-07-09
CY1109582T1 (el) 2014-08-13
EP1755662A2 (en) 2007-02-28
JP2012214498A (ja) 2012-11-08
GB0409745D0 (en) 2004-06-09
PL1755662T3 (pl) 2010-01-29
DK1755662T3 (da) 2009-09-14
DE602005015961D1 (de) 2009-09-24
JP6035293B2 (ja) 2016-11-30
RU2006142156A (ru) 2008-06-10
WO2005105141A2 (en) 2005-11-10
JP2016053088A (ja) 2016-04-14
CA2564366A1 (en) 2005-11-10
EP2108374A1 (en) 2009-10-14
HK1100428A1 (en) 2007-09-21
JP2007535531A (ja) 2007-12-06
NZ550601A (en) 2009-03-31
JP2014218516A (ja) 2014-11-20
AU2005237308A1 (en) 2005-11-10
US9492558B2 (en) 2016-11-15
ATE439144T1 (de) 2009-08-15
SI1755662T1 (sl) 2010-01-29
HRP20090607T8 (en) 2010-01-31
EP1755662B1 (en) 2009-08-12
AU2005237308B2 (en) 2011-08-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6035293B2 (ja) 共通キャリアタンパク質を有する混合型髄膜炎菌結合体
US10064932B2 (en) Integration of meningococcal conjugate vaccination
US8529908B2 (en) Meningococcal conjugate vaccination
US10286055B2 (en) Immunogenic composition
JP4954056B2 (ja) 低用量のＨｉｂ結合体との組合せワクチン
HK1100428B (en) Combined meningococcal conjugates with common carrier protein