RS52077B - Aril i heteroaril urea chk1 inhibitori kao jedinjenja koja povećavaju osetljivost na radioterapiju i hemoterapiju - Google Patents

Aril i heteroaril urea chk1 inhibitori kao jedinjenja koja povećavaju osetljivost na radioterapiju i hemoterapiju

Info

Publication number
RS52077B
RS52077B YU69003A YUP69003A RS52077B RS 52077 B RS52077 B RS 52077B YU 69003 A YU69003 A YU 69003A YU P69003 A YUP69003 A YU P69003A RS 52077 B RS52077 B RS 52077B
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
compound
group
mmol
3alkylenen
Prior art date
Application number
YU69003A
Other languages
English (en)
Inventor
Edward A. Kesicki
Kathleen S. Keegan
John J. Gaudino
Adam Wade Cook
Scott Douglas Cowen
Laurence E. Burgess
Original Assignee
Icos Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Icos Corporation filed Critical Icos Corporation
Publication of YU69003A publication Critical patent/YU69003A/sh
Publication of RS52077B publication Critical patent/RS52077B/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/40—Acylated substituent nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/76—Nitrogen atoms to which a second hetero atom is attached
    • C07D213/77—Hydrazine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/24—Oxygen atoms attached in position 8
    • C07D215/26—Alcohols; Ethers thereof
    • C07D215/32—Esters
    • C07D215/34—Carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/38—Nitrogen atoms
    • C07D231/40—Acylated on said nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/47—One nitrogen atom and one oxygen or sulfur atom, e.g. cytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/36—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D241/38—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atoms
    • C07D241/40—Benzopyrazines
    • C07D241/44—Benzopyrazines with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/14—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrogen or carbon atoms directly attached to at least one ring carbon atom
    • C07D251/22—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrogen or carbon atoms directly attached to at least one ring carbon atom to two ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
    • C07D253/06—1,2,4-Triazines
    • C07D253/065—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D253/07—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms, or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C07D257/06—Five-membered rings with nitrogen atoms directly attached to the ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
    • C07D277/48—Acylated amino or imino radicals by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbonylguanidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Catalysts (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Referenca odnosne prijave
Ova prijava traži prioritet od U.S. privremene prijave serijski br. 60/273,124, podnete 2. marta 2001. godine.
Oblast pronalaska
Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja koja su korisna za inhibiciju enzima koji održavaju i obnavljaju integritet genetskog materijala. Posebno, predmetni pronalazak se odnosi na serije jedinjenja uree koja su supstituisana aril ili heteroaril grupom, na postupke dobijanja ovih jedinjenja i na njihovu upotrebu kao terapijskih sredstava, na primer, u lečenju kancera i drugih jedinjenja koja se karakterišu postojanjem defekata u replikaciji dezoksiribonukleinske kiseline (DNK), u segregaciji hromozoma ili u ćelijskoj deobi.
Stanje tehnike
Važan i značajan cilj zdravstvene zaštite je otkrivanje i stvaranje dostupnim sigurnijih
i efikasnijih lekova za lečenje kancera. Većina hemoterapijskih sredstava deluje ometanjem metabolizma DNK, sinteze DNK, transkripcije sa DNK ili funkcije mikrotubulamih vretena, ili svoje dejstvo ostvaruje narušavanjem strukturalnog integriteta hromozoma stvaranjem oštećenja DNK. Ovi procesi utiču i na normalne i na tumorske ćelije. Održavanje integriteta DNK je od osnovne važnosti za život normalnih ćelija, te stoga antikancerski lekovi poseduju najmanji terapijski indeks u odnosu na sve druge klase lekova.
Pojedinačna ćelija stvara tačnu kopiju svojih hromozoma, a zatim razdvaja svaku od kopija u dve ćelije u toku proces koji se naziva mitoza. Mitoza se može podeliti u tri glavne etape: replikacija DNK, razdvajanje hromozoma i ćelijska deoba. Ćelija poseduje kontrolne mehanizme kojima održava redosled ovih koraka i osigurava izvršavanje svakog od koraka sa visokom pouzdanošću. Kontrolni mehanizmi ovih procesa se označavaju kao »kontrolna mesta« (»chekpoints«) u radu L.H. Hartwell et al., Science, 3. novembar 1989, 246 (4930) : 629-34.
Navedeno je da kontrolna mesta ćelijskog ciklusa obuhvataju najmanje tri različite klase polipeptida. Svaka od ovih klasa polipeptida deluje u određenom redosledu, kao odgovor na signale ćelijskog ciklusa ili na defekte u hromozomskim mehanizmima (Carr,
(1996) Science, 271: 314 - 315). Jedna familija proteina detektuje ili je osetljiva na oštećenje DNK ili na nepravilnosti ćelijskog ciklusa. Pomenuti senzori uključuju ataksija - teleangiektazija mutirani (Atm) protein i ataksija - teleangiektazija sa Rad povezani (Ataxia - Teleangiectasia Rad - related - Atr) protein (Keegan et al., (1996) Genes Dev., 10 : 2423 - 2437). Druga klasa polipeptida pojačava i prenosi signal koji je otkriven detektorom i takavi su, na primer, Rad 53 polipeptid (Allen et al., (1994) Genes Dev., 8: 2416 - 2488) i Chkl polipeptid. Dodatno, efektori ćelijskog ciklusa, kao što je p53, posreduju u ćelijskom odgovoru, uključujući, na primer, zaustavljanje mitoze i/ili mejoze i apoptoze.
Oštećenje DNK se može indukovati lekovima, radijacijom ili se može spontano izazvati u toku normalnog metabolizma. Kontrolna mesta oštećenja DNK osiguravaju da ćelije sa nerepariranim DNK lezijama ne napreduju u fazu sinteze DNK ili u fazu mitoze, sve dok se ne uklone oštećenja hromozoma. Zaustavljanje ćelijskog ciklusa povećava mogućnost za popravku DNK, kao i pouzdanost ćelijske deobe. Oštećenje DNK se može prepoznati u svakoj fazi ćelijskog ciklusa. Kontrolna mesta osiguravaju da se rast ćelija može zaustaviti u mnogim fazama ćelijskog ciklusa. Kao rezultat toga, više signalnih puteva ćelijskog ciklusa može da bude aktivirano nakon izlaganja ćelija sredstvima koja oštećuju DNK.
Do mnogih činjenica iz tekućeg shvatanja funkcije kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa se došlo ispitivanjem ćelijskih linija izvedenih iz tumora. U mnogim slučajevima, tumorskim ćelijama nedostaju ključna kontrolna mesta ćelijskog ciklusa (Hartwell et al., Science, 16. decembar 1994; 266 (5192) : 1821 - 8). Saopšteno je daje ključni korak u evoluciji ćelija do neoplastičnog stanja sticanje mutacija koje inaktiviraju signalne puteve kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa, kao što je p53 (Weinberg, R. A. (1995), Cell, 81 : 323 -330; Levine, A.J.
(1997) Cell 88 : 3234 - 331). Gubitak funkcije ovih kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa dovodi do pogrešnog usmeravanja ciklusa tumorskih ćelija nakon izlaganja sredstvima koja oštećuju DNK. Kada su suočene sa ćelijskim stresovima, kao što je oštećenje DNK i kada su koraci ćelijskog ciklusa manje pouzdani, ćelije tumora pokazuju poteškoće u promeni kinetike progresije ćelijskog ciklusa. Stoga, inhibicija i narušavanje dodatnih signalnih puteva kontrolnih mesta za oštećenje DNK, mogu dalje da povećaju osetljivost ćelije tumora prema antikancerskim tretmanima, kao što su zračenje i hemoterapija.
Nekancersko tkivo, koje poseduje intaktna kontrolna mesta ćelijskog ciklusa, tipično je pošteđeno od privremenog narušavanja pojedinačnog signalnog puta kontrolnih mesta. Tumorske ćelije, međutim, imaju višestruke defekte u signalnim putevima koji kontrolišu progresiju ćelijskog ciklusa, tako da narušavanje funkcije dodatnih kontrolnih mesta, na primer, kontrolnih mesta za oštećenje DNK, čini posebno osetljivim na dejstvo sredstava koja oštećuju DNK. Na primer, tumorske ćelije koje poseduju mutantni p53 poseduju defekte i kontrolnog mesta za oštećenje DNK u Gl fazi, kao i defektnu sposobnost da očuvaju funkciju kontrolnog mesta za oštećenje DNK u G2 fazi (Bunz et al., Science, 20. novembar 1998; 282
(5393) : 1497 - 501; Levine). Smatra se da inhibitori kontrolnih mesta koji utiču na inicijaciju kontrolnog mesta u G2 fazi ili kontrolnog mesta u S fazi dodatno narušavaju sposobnost ovakvih tumorskih ćelija da poprave oštećenja DNK, te ih tako selektivno ubijaju u odnosu na normalne ćelije. Stoga, smatra se da inhibitori kontrolnih mesta povećavaju terapijski indeks, koji predstavlja meru verovatnoće kontrole tumora u odnosu na verovatnoću toksičnog dejstva na normalno tkivo pri radioterapiji i pri sistemskoj hemoterapiji. Sposobnost inhibitora kontrolnih mesta da povećaju terapijski indeks može da zavisi od tipa tumora. Tumori sa defektima ćelijskog ciklusa koji su komplementarni signalnim putevima kontrolnog mesta za oštećenja DNK mogu biti najosetljiviji na lečenje inhibitomim lekovima. Nasuprot tome, smatra se da DNK-PK inhibitori, koji predstavljaju različitu klasu potencijalnih terapijskih sredstava, čine tumore osetljivim nezavisno od ćelijskog tipa. Sistemski pristup primeni inhibitora kontrolnih mesta i DNK-PK inhibitora takođe može biti efikasan u lečenju metastatskih procesa koji su nedostupni radijacionoj terapiji. Pretpostavlja se da proteini kontrolnih mesta Atm i Atr iniciraju signalni put prevođenja signala, čime se zaustavlja progresija ćelijskog ciklusa u prisustvu oštećenja DNK ili u prisustvu bilo kog bloka u replikaciji DNK. Pokazano je da Atm igra važnu ulogu u funkciji kontrolnog mesta za oštećenja DNK pri odgovoru na jonizujuće zračenje. Pacijenti kojima nedostaje funkcionalni Atm razvijaju bolest koja se naziva ataksija - teleangiektazija (A-T). Simptomi A-T obuhvataju ekstremnu osetljivost na jonizujuće zračenje, cerebelarnu degeneraciju, okulokutane teleangiektazije, gonadne deficijencije, imunodeficijencije i povećani rizik za oboljevanje od kancera (Shiloh, eur. J. Hum. Genet., 1995; 3 (2) : 116 - 38). Smatra se da fibroblasti izolovani iz ovih pacijenata imaju defekte u funkciji kontrolnih mesta Gl, S i G2 faze i da su defektni u svom odgovoru na jonizujuće zračenje (Kastan et al.. Cell. 13. novembar 1992; 71 (4) : 587 - 97; Scott et al., Int. J. Radiat. Biol., decembar 1994; 66 (6 dodatak) : D157 - 63; i Beamish et al., J. Biol. Chem., 26. avgust 1993; 271 (34) : 20486 - 93). Stoga, Atm može da detektuje oštećenje dvolančane DNK koje je izazvano jonizujućim zračenjem i radiomimetskim lekovima i da signalizira ćelijskom ciklusu da se zaustavi, tako da oštećenje može da bude popravljeno. Atr je protein kontrolnog mesta stimulisan sredstvima koja izazivaju prekide oba lanca DNK ili prekide jednog od lanaca DNK, kao i sredstvima koja sprečavaju ozračivanje DNK. Prekomerna ekspresija Atr u mišićnim ćelijama na izohromozomu 3q dovodi do bloka u diferencijaciji, abnormalnom broju hromozoma, nestabilnosti hromozoma i sprečava zastoj u Gl fazi ciklusa kao odgovor na jonizujuće zračenje (Smith et al., Nat. Genet., maj 1998; 19 (1) : 39 - 46 . Prekomerna ekspresija kinaza-neaktivnog, dominantno negativnog mutanta Atr čini ćelije osetljivim na jonizujuće zračenje, ultraljubičastu svetlost (UV svetlost), MMS i cisplatin (Cliby et al., EMBO J., 2. januar 1998; 17 (1) : 159 - 69 i Wright et al, Proc. Nat'l Acad. Sci. U.S.A., 23. jun 1998; 95 (13) : 7445 - 50). Ćelije koje poseduju prekomerno eksprimiranu, mutantnu vrstu Atr takođe ne uspevaju da zaustave ciklus u G2 fazi u odgovoru na jonizujuće zračenje. Dodatno, Atr je povezan sa hromozomima u mejotskim ćelijama gde prekidi u DNK i abnormalne DNK strukture zaostaju kao rezultat procesa mejotske rekombinacije (Keegan et al., Genes Dev., 1. oktobar 1996; 10 (19) : 433 - 437). Atr, kao i Atm, takođe detektuje oštećenje DNK i sredstva koja blokiraju replikaciju DNK, a inicira i zastoj ćelijskog ciklusa u G2 i S fazama, čime se omogućava popravka DNK. Pretpostavlja se da se u redosledu reakcija Chkl nalazi distalno od protein kinaza Atm i/ili Atr u putu pevođenja signala kontrolnog mesta za oštećenja DNK (videti Sanchez et al., Science, 1997; 277 : 1497 - 1501; U.S. patent br. 6,218,109). U ćelijama sisara, Chkl se fosforiliše u odgovoru na sredstva koja izazivaju oštećenje DNK, uključujući jonizujuće zračenje, ultraljubičastu svetlost i hidroksiureu (Sanchez et al.. 1997: Lui et al., Genes Dev. 2000; 14 : 1448 - 1459). Fosforilacija i aktivacija Chkl u ćelijama sisara su zavisne od Atm (Chen et al., 1999) i Atr (Lui et al., 2000). Kod gljiviceS. pombe,izgleda daje Chkl takođe uključen u odgovoru na jonizujuće zračenje i da blokira replikaciju (Boddy et al., 1998; Walworth et al, 1993). Dalje, pokazano je da Chkl fosforiliše genske produkte weel
(O'Connell et al., EMBO J. 1997; 16 : 545 - 554) i Pdsl (Sanchez et al., Science 1999; 286 : 1166 - 1171), za koje je poznato da imaju važnu ulogu ukontroli ćelijskog ciklusa. Pomenute studije pokazuju da Chkl sisara ima određenu ulogu u funkciji Atm zavisnog kontrolnog mesta za oštećenja DNK i da vodi zaustavljanju ciklusa u S fazi. Međutim, uloga Chkl u funkciji kontrolnog mesta replikacije u S fazi kod ćelija sisara tek treba da se razjasni. Interesantno, kao dodatak ulozi u funkciji kontrolnih mesta za oštećenja DNK, utvrđeno je da Chkl knockout miševi umiru još kao embrioni, što sugeriše da Chkl poseduje određenu ulogu u razvoju organizma. Chkl može da izazove zastoj u G2 fazi fosforilacijom i inaktivacijom Cdc25C, fosfataze sa dvojnom specifičnošću, koja normalno defosforiliše kompleks ciklin B / cdc2, tokom progresije ćelije u mitozu (Fernerv et al.. Science, 5. septembar 1997; 277 (5331) : 1495 - 7; Sanchez et al.; Matsuoka et al.; i Blasina et al, Curr. Biol., 14. januar 1999; 9 (1) : 1-10). Ovaj mehanizam regulacije aktivnosti Cdc2 stimuliše zastoj ćelijskog ciklusa, čime se ćelije sprečavaju da uđu u mitozu u prisustvu oštećenja DNK ili onda kada izostane replikacija DNK.
Suština pronalaska
Predmetni pronalazak se odnosi na potentna i selektivna sredstva koja povećavaju osetljivost ćelije na hemoterapiju i koja se koriste u lečenju bolesti i stanja povezanih sa oštećenjem DNK ili defektima u replikaciji DNK. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su inhibitori Chkl kinaze kontrolnog mesta. Posebno, jedinjenja uree supstituisana aril i heteroaril grupom su pokazala značajnu aktivnost u inhibiciji Chkl.
U jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na postupak inhibicije Chkl kinaze kontrolnog mesta i obuhvata korak primene jedinjenja formula (I), ili preparata koji sadrži to jedinjenje, nekoj jedinki. Jedinjenja formule (I) poseduju sledeću strukturnu formulu:
pri čemu X<1>je ništa, -O-, -S-, -CH2- ili -N(P<J>)-; X<2>je -O-, -S- ili -N(P<J>)-; Y je O ili S; ili =Y predstavlja dva atoma vodonika koja su povezana na zajednički ugljenikov atom; W je izabrano iz grupe koju čine heteroaril, aril, heterocikloalkil, cikloalkil i C1-3alkil grupa supstituisana heteroaril ili aril grupom; i Z je izabrano iz grupe koju čine vodonik, aril i heteroaril grupa; pri čemu su pomenute aril grupe na W i Z opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenta predstavljenih sa R , a navedena heteroaril grupe na W i Z su opciono supstituisane sa jedriim do četiri supstituenta predstavljenih sa R<5>, a navedene heterocikloalkil i cikloalkil grupe na W su opciono supstituisane sa jednim do dva supstituenta predstavljenih saR<6>;
R<1>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C\.(, alkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil i aril grupa;
R<2>je izabrana iz grupe koju čine halogen, C1.6alkil, C2-6alkenil, OCF3, NO2, CN, NC, N(R<3>)2, OR<3>, C02R<3>, C(0)N(R<3>)2. C(0)R<3>, N(R')COR<3,>N(R')C(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)-C,_3alkilen-C(0)R<3>, N(R<3>)C(0)-C,.3alkilen-C(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)-C,_3alkilenOR<3>, N(R<3>)C(0)-C,.3alkilen-NHC(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)-C,.3alkilen-S02NR<3>, C,.3alkilen-OR<3>i SR<3>grupa;
R<J>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C]. e alkil, C2-6alkenil. cikloalkil, aril, heteroaril, S02R<4>, Cj-6alkil grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<4>)2i SO2R<4>grupom. Cj-3alkilenaril, Cj.3alkilenheteroaril, C1.3alkilen C3-g heterocikloalkil, Ci_3alkilen SO2aril, opciono supstituisane sa Ci-3alkilen-N(R<4>)2, OCF3, Ci.3alkilenN(R<4>)3+, C3.8heterocikloalkil i CH(C].3a]kilenN(R<4>)2)2grupa ili dve R<3>grupe zajedno stvaraju opciono supstituisani tročlani do šestočlani alifatični prsten;
R<4>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C)^ alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, C].3-alkilenaril i S02C].6alkil grupa, ili dve R<4>grupe zajedno Čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani prsten;
R'"1 je izabrana iz grupe koju čine Ci^alkil, aril, N(R<3>)2. OR"', halo, N3, CN, Ci^alkilenaril, Ci.3alki]enN(R<3>)2, C(0)R<3>grupa i
R<6>je izabrana iz grupe koju čine halo i Cj^alkil grupa,
kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja uree koja su disupstituisana aril ili heteroaril grupama i koja poseduju sledeću strukturnu formulu (II):
pri čemu Y' predstavlja O ili S; W je izabrano iz grupe koju čine opciono supstituisani sa jednom do četiri supstituenata izabranih iz grupe koju čine C)-6alkil, aril,N(R<7>)2, OR<7>, N3, CN, C(0)R<7>, C,.3alkilenaril, d.3alkilenN(R<I2>)2grupa, Z' je izabrano iz grupe koju čine
pri čemu Q' je izabrano iz grupe koju čine vodonik, OR', SR i N(R')2; J' je izabrano iz grupe koju čineC-R<8>, N-R<8>, 0 i S; K' je izabrano iz grupe koju čine C-R<9>, N-R<9>, 0 i S; L'je izabrano iz grupe koju čine C-R<10>, N-R<10>, 0 i S; M' je izabrano iz grupe koju čine C-R11, N-R",OiS;
pri čemu R7 je nezavisno izabrana iz grupe koju čine vodonik, Cj^alkil, C2-6alkenil. cikloalkil, aril, heteroaril, SO7R<12>, Ci.6alkil grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R12)2 i S02R<12>grupom, Ci.salkilenaril, Ci^alkilenheteroaril, d.jalkilen-Cs-sheterocikloalkil, Ci-3alkilenS02aril, opciono supstituisana Ci.3alkilenN(R<12>)2, OCF3, Ci.3alkilen-N(R<I2>)3+, C3.g heterocikloalkil i CH(Ci.3alkilen-N(R<l2>)2)2grupa ili dve R<7>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani alifatični prsten;
R<8>, R<9>i R<10>su nezavisno izabrane iz grupe koju čine ništa, vodonik, halo, opciono supstituisana C).6alkil, C^alkenil, OCF3, N02, CN. NC, N(R<7>)2, OR<7>, C02R<7>, C(0)N(R<7>)2, C(0)R<7>, N(R'<3>)C0R<7>, N(R<I3>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)0R<7>, N(R<7>)C(0)C,.3alkilenC(0)R<7>, N(R7)C(0)C, .3alkilen-C(0)0R7, N(R7)C(0)C, .3alkilen0R7, N(R7)C(0)C, .3alkilenNH-C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)Ci.3alkilenS02NR<7>, CF3, C1.3alkilen-N(R<I2>)S02aril, C,.3alkilenN(R<12>)-S02heteroaril, Ci-3alkilen-0-Ci-3alkilenaril, Ci.3alkilen-N(R<12>)Ci_3alkilenaril, Ci_3alkilen-NtR'^C^alkilenheteroaril, C,.3alkilen-N(R<I2>)C(0)R<7>, C,.3alkilen-N(R<12>)C(0)Ci.3alkilen-OR<2>, Ci.3alkilenN(R<12>)C(0)aril, C1.3alkilen-N(R<I2>)C(0)Ci.3alkilen-N(R<12>)2, C].3alkilen-N(R<12>)C(0)heteroaril, Ci-3alkilenOR<7>i SR<7>, pri čemu je R<7>prethodno definisana grupa;
R11 je izabrana iz grupe koji čine ništa, vodonik, Ci^alkil i halo grupa;
R<12>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Cj-6alkil, cikloalkil, aril i S02Ci_6alkil grupa ili dve R<12>grupe zajedno čine tročlani ili šestočlani prsten; i
R 13je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C1-6alkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil i aril grupa;
uz uslov da kada je Q' vodonik ili OCH3, barem jedna od grupaR8, R<9>i R<10>nije izabrana iz grupe koju čine vodonik, CH3, OCH3ili halo grupa,
kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.
Drugi aspekt predmetnog pronalaska se odnosi na karbamido-supstituisane heteroaril grupe koje poseduju sledeću strukturnu formulu (III):
pri čemu W " je izabrana iz grupe koju čine heteroaril, aril. heterocikloalkil, cikloalkil i C1.3alkil grupa supstituisana heteroaril ili aril grupom;
gde su pomenute aril grupe opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenta označenih sa R<14>, pri<č>emu su navedene heteroaril grupe su opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenta označenih sa R ] 8 i pri čemu su pomenute heterocikloalkil i cikloalkil grupe opciono supstituisane sa jednim do dva supstituenta označenih kao R<19>;
R<14>je izabrana iz grupe koju sačinjavaju halo, Q.6 alkil, C2-6alkenil, OCF3, NO2, CN, NC, N(R<16>)2, OR<16>, C02R<16>, C(0)N(R<16>)2, C(0)R<16>, N(R,5)COR<16>, N(R<!5>)C(0)OR<16>, N(R<16>)C(0)OR<16>, N(R16)C(0)C, .3alkilen-C(0)R16, N(R' 6)C(0)C, .3alkilen-C(0)OR! 6, N(R<16>)C(0)C,.3alkilenOR<16>, N(R,<6>)C(0)Ci.3alkilen-NHC(0)OR<16>, N(R<16>)C(0)C,.3alkilen-SO2-NR<16>, C,.3alkilenOR<16>i SR<16>grupa;
R15 je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C^alkil, C2-6alkenil, C2.6alkinil i aril grupa;
R<lć>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Cj_6alkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, SO2R17, Ct.6alkil grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<I7>)2i SO2R<17>grupom, C1.3alkilen.aril, Ci^alkilenheteroaril, Ci.3alkilenC3-gheterocikloalkil, Ci.3alkilenS02aril, opciono supstituisana C].3alkilenN(R<17>)2, OCF3, C1-3-alkilenN(R<I7>)3+, C3-8heterocikloalkil, CH(Ci.3alkilenN(R<17>)2)2grupa; ili dve R<16>grupe zajedno čine tročlani do šestočlani alifatični prsten;
R" je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci^alkil, cikloalkil, aril i SO2C1.5alk.il grupa ili dve R<17>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani prsten;
R18 je izabrana iz grupe koju čine Ci-6alkil, aril, N(R<1:>,)2, OR<1>"i halo grupa; i
R19 je izabrana iz grupe koju čine halo i Ci_6alkil grupa.
Predmetni pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske preparate koji sadrže jedno ili više jedinjenja strukturne formule (II), na korišćenje jedinjenja i preparata koji adrže ova jedinjenja u lečenju bolesti ili poremećaja, kao i na postupke dobijanja ovih jedinjenja i intermedijera koji su uključeni u sintezu jedinjenja strukturne formule (II).
Detaljan opis poželjnih rešenja
Radijacija i većina hemoterpijskih sredstava su terapijski delotvorni jer iskorišćavaju postojanje neodgovarajuće proliferacije tumorske ćelije. Ćelijski procesi, kao što su popravka oštećenja DNK i funkcija kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa, štite ćelije tumora od toksičnih dejstava fizičkih i hemijskih sredstava. Tretmani koji menjaju molekularne mehanizme koji su u osnovi progresije ćelijskog ciklusa i otpornosti na oštećenje DNK mogu da pospeše uništavanje tumorske ćelije i da povećaju terapijski indeks postojećih terapija.
Većina hemoterapijskih sredstava deluje narušavanjem metabolizam DNK. Usled toga što se ovi procesi koriste i od strane normalnih i od strane tumorskih ćelija i usled toga što je održavanje integriteta DNK od osnovne važnosti za život ćelije, antikancerski lekovi poseduju najmanji terapijski indeks u odnosu na bilo koju drugu klasu lekova. Identifikacijom i inhibiranjem ćelijskih procesa od kojih zavise tumorske ćelije, može se povećati efikasnost radij acionih i hemoterapijskih režima lečenja.
Prekidanje funkcije proteina kontrolnog mesta za oštećenja DNK predstavlja novi način ubijanja tumorskih ćelija u odnosu na normalne ćelije. Na primer, Chkl obezbeđuje da ćelije sa neispravljenim oštećenjima DNK, koje su izazvane dejstvom određenih lekova ili radijacije, ne napreduju kroz fazu sinteze DNK ili kroz mitozu, sve dok se oštećenja hromozoma ne uklone. Shodno tome, tumorska ćelija koja se tretira inhibitorom Chkl u kombinaciji sa sredstvom koje oštećuje DNK može da ubije tumorsku ćeliju korišćenjem manjih količina sredstva koje oštećuje DNK u odnosu na količinu istog sredstva koja je potrebno da se ubije tumorska ćelija kada se to sredstvo upotrebljava samo.
Odsustvo funkcije kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa u normalnim ćelijama predisponira pojedinca za razvoj ili direktno izaziva mnoge bolesti, kao što su kancer, ataksija
- teleangiektazija, nenormalnosti embrionalnog razvoja i mnogi imunološki defekti koji su
povezani sa aberantnim razvojem B i T ćelija. Ovo poslednje je povezano sa patološkim stanjima kao što su lupus, artritis i sa drugim autoimunim bolestima. Stoga, intenzivni istraživački napori su se fokusirali na identifikaciju kontrolnih mesta ćelijskog ciklusa i na proteine koji su od osnovne važnosti za funkciju kontrolnih mesta.
Tipično, nekancersko tkivo koje poseduje intaktna kontrolna mesta je pošteđeno tokom privremenog prekida pojedinačnog signalnog puta kontrolnog mesta ćelijskog ciklusa, kao što je, na primer, Chkl signalni put. Nasuprot tome, tumorske ćelije poseduju višestruke defekte u signalnim putevima koji kontrolišu progresiju ćelijskog ciklusa, tako da oštećenje kontrolnog mesta za oštećenje DNK može da učini ćelije posebno osetljivim na dejstvo sredstava za oštećivanje DNK. Stoga, očekuje se da inhibitori funkcije kontrolnih mesta povećaju terapijski indeks, koji predstavlja meru verovatnoće kontrole tumora u odnosu na verovatnoću toksičnog dejstva na normalno tkivo tokom radijacione ili sistemske hemoterapije. Nasuprot tome, druge klase inhibitora ne moraju biti podložne kombinovanoj hemoterapiji, jer i normalno i tumorsko tkivo mogu na sličan način da budu senzitivirani.
Jedan aspekt predmetnog pronalaska se odnosi na postupak inhibicije Chkl i obuhvata korak primene terapijski efikasne količine jedinjenja formule (I), ili preparata koji sadrži to jedinjenje, nekoj jedinki. Jedinjenja formule (I) poseduju sledeću strukturnu formulu:
pri čemu X<1>je ništa, -0-, -S-, -CH2- ili -N(R')-; X<2>je -0-, -S- ili -N(R')-; Y je O ili S; ili =Y predstavlja dva atoma vodonika koja su povezana na zajednički ugljenikov atom; W je izabrano iz grupe koju čine heteroaril, aril, heterocikloalkil cikloalkil i Ci_3alkil grupa supstituisana heteroaril ili aril grupom; i Z je izabrano iz grupe koju čine vodonik, aril i heteroaril grupa; pri čemu su pomenute aril grupe na W i Z opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituienta predstvaljenih sa R<2>, a navedene heteroaril grupe na W i Z su opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenta predstavljenih sa R\ a navedene heterocikloalkil i cikloalkil grupe na W su opciono supstituisane sa jednim do dva supstituenta predstavljenih sa R6; R<1>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci_6alkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil i aril grupa; R<2>je izabrana iz grupe koju čine halogen, Cj-6alkil, C2-6alkenil, OCF3, N02:CN, NC, N(R<3>)2. OR<3>, C02R<3>, C(0)N(R<3>)2. C(0)R<3>, N(R')COR<3>. N(R')C(0)0R<3.>N(R<3>)C(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)-C,.3alkilen-C(0)R<3>, N(R<3>)C(0)-C,.3alkilenC(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)C,.3alkilen-0R<3>, N(R<3>)C(0)-Ci.3alkilen-NHC(0)OR<3>, N(R<3>)C(0)-C1_3alkilen-S02NR<3>, C,.3alkilen-OR<3>i SR<3>grupa; R<3>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Cj-6alkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, S02R<4>, Ci_6alkil grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<4>)2i S02R<4>grupom, C).3alkilenaril C1.3alkilenheteroaril, Ct.3alkilen C3-8 heterocikloalkil, Ci_3alkilen-S02-aril, opciono supstituisane sa C].3alkilen-N(R<4>)2, OCF3, Ci_3alkilenN(R<4>)3+, C3.8heterocikloalkil i CH(C].3alkilenN(R<4>)2)2grupa ili dve R<3>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani alifatični prsten; R4 je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C]_6alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, C].3-alkilenaril i S02Ci_ćalkil grupa, ili dve R<4>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani prsten; R""* je izabrana iz grupe koju čine Ci_6alk.il. aril, N(R<J>)2, 0R<J>. halo, N3, CN, Ci_3alkilenaril, C,.3alkilenN(R<3>),, C(0)R<3>grupa i
R6 je izabrana iz grupe koju čine halo i Ci_ćalkil grupa,
kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.
Poželjna jedinjenja koja se koriste u postupku su ona kod kojih X<1>i X<2>predstavljaju - N(H)-; Y je 0 ili S: W je heteroaril grupa koja sadrži najmanje dva heteroatoma izabranih iz grupe koju čine N, O ili S, pri čemu je navedeni prsten opciono supstituisan sa jednim do četiri supstituenata, koji su izabrani iz grupe koju čine Ci_6alkil, aril, N(R<3>)2, OR<3>i halo grupa, pri čemu je R" ranije definisana grupa; Z je izabrano iz grupe koju čine:
pri čemu je Q izabrano iz grupe koju čine vodonik, OR<3>, SR<3>i N(R<J>)2; J je izabrano iz grupe koju čineCR20, NR<20>, O i S; K je izabrano iz grupe koju čine CR<21>, NR<21>, O i S; L je izabrano iz grupe koju čine CR , NR , O i S; M je izabrano iz grupe koju čine CR J, NR , O i S;
pri cemu su R<20>. R<21>i R22nezavisno izabrane iz grupe koju čine ništa, vodonik, halo, C]-6alkil, C2_6alkenil, OCF3, N02, CN, NC, N(R<25>)2, OR<25>, C02R<25>, C(0)N(R<25>)2, C(0)R<25>, N(R<24>)COR<25>, N(R<24>)C(0)OR<25>, N(R<25>)C(0)OR<25>, N(R<25>)C(0)C,.3alkilenC(0)R<25>, N(R<25>)C(0)C1.3alkilen-C(0)0R<25>, N(R<25>)C(0)C,.3alkilen0R<25>, N(R<25>)C(0)Ci.3alkilen-NH-C(0)OR<25>, N(R<25>)C(0)C,.3alkilenS02NR<25>, CF3, C,.3alkilen-N(R<25>)S02aril, C1.3alki.en-N-(R2:>)S02heteroaril, Ci.3alkilen-0-Ci.3alkilenaril, Ci_3alkilen-N(R2:,)C|.3alkilenaril, C].3alkilen-N(R<25>)Ci.3alkilenheteroaril, C,.3aIkilen-N(R<25>)C(0)R<7>, CK3alkilen-N(R<25>)C(0)C,.3alkilen-OR<2>, C,.3alkilenN(R<25>)C(0)aril, C,.3alkiien-N(R<25>)C(0)C1.3alkilen-N(R<25>)2, C|.3alkilen-N-(R<25>)C(0)heteroaril, C,.3alkilenOR<25>i SR25;
R<2j>je izabrana iz grupe koji čine ništa, vodonik, C^alkil i halo grupa;
R24 je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci^alkil, C2_6alkenil, C2_ćalkinil i aril grupa;
R<2*>je izabrano iz grupe koju čine vodonik, Ci-ćalkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, SCbR<26>i C).6alkil grupa supstituisana sa halo. hidroksi, aril. heteroaril, heterocikloalkil, N(R<2b>)2ili S02R<26>grupom; i
R<26>je izabrano iz grupe koju čine vodonik, Ci-ćalkil, cikloalkil, aril i S02C).6alkiI grupa ili dve R<26>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani prsten.
Poželjnija jedinjenja prema predmetnom pronalasku su ona koja poseduju strukturnu formulu (I), pri čemu je W ozabrano iz grupe koju čine piridazinil, pirimidinil, pirazinil i triazinil grupa, opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenata izabranih iz grupe koju čine Ci-6alkil, aril, N(R<3>)2, OR<3>, N3, CN, C(0)R<7>, C,.3alkilenaril, C,.3alkilen-N(R<4>).
i halo grupa, pri čemu su R , X , X , Y i Z prethodno defmisani za formulu (I).
Dodatna poželjna jedinjenja formule (I) su ona kod kojih je W izabrano iz grupe koju čine piridazin, pirimidin, pirazin i triazin, opciono supstituisani sa jednim do četiri supstituenata izabranih iz grupe koju čine opciono supstituisane Ci_ćalkil, aril, N(R<J>)2, OR<3>, C|.3alkilenaril, C].3alkilenheteroaril, Ci_3alkilen-C3.g heterocikloalkil.Ci.3alkilen-S02-aril, opciono supstituisana Ci.3alkilen-N(R<4>)2, OCF3, Ci-3alkilen-N(R<4>)3+, C3.gheterocikloalkil, CH(C,.3alkilen-N(R<4>)2)2, i halo grupa; X<1>i X<2>su -N(H)-; Y je O ili S; a Z je izabrano iz grupe koju čine:
pri čemu su R<3>, Q, J, K, L i M prethodno definisane grupe.
Jedinjenja koja su poželjna za korišćenje prema predmetnom pronalasku takođe obuhvataju ona jedinjenja formule (I) kod kojih je .1 izabrano iz grupe koju čine CR20iNR<20>, pri čemu je R<20>ništa, vodonik, Ci-6alkil i halo grupa; K je izabrano iz grupe koju čine CR21iNR<21>; L je izabrano iz grupe koju čine CR<22>i NR<22>; i jedna od grupa R<2>' ili R<22>je vodonik, a druga je supstituent izabran iz grupe koju čine C02R<25>, C(0)N(R<25>)2, C(0)R<25>, N(R24)COR<25>. N(R<24>)C(0)0R<25>, N(R<25>)C(0)OR<25>, N(R<25>)C(0)Ci.3alkilenC(0)R<25>, N(R<25>)C(0)C,.3alkilen-C(0)OR<25>, N(R<25>)C(0)Ci.3alkilenOR<25>!N(R<25>)C(0)Ci.3alkilen-NHC(0)OR<25>, N(R25)C(0)-C,-3alkilenS02NR<25>, Ci.3alkilenOR<25>i SR<25>, pri čemu su R<24>,R25,W,X<1>,X<2>, Y i M prethodno definisane grupe.
Jedinjenja koja us korisna u postupku prema predmetnom pronalasku obuhvataju strukture formule (I), pri čemu je X ništa, X je -N(H)-, Y je 0, Z je vodonik, a W je prethodno definisana grupa.
Postupak inhibicije Chkl se takođe može koristiti za senzitivizaciju ćelije tumora na dejstvo hemoterapijskog sredstva. Kao takav, predmetni pronalazak se takođe odnosi na postupak senzitivizacije ćelije tumora na dejstvo hemoterapijskog sredstva što obuhvata primenu jedinjenja formule (I), ili njegove soli, solvata ili derivata, ili farmaceutskog preparata koji sadrži iste, nekoj jedinki.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja uree koja su disupstituisana aril ili heteroaril grupama i koja poseduju sledeću strukturnu formulu (II):
pri čemu Y' predstavlja 0 ili S; W je izabrano iz grupe koju čine koje su opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenata izabranih iz grupe koju čine Ci.6alkil, aril, N(R<7>)2, OR<7>, N3, CN, C(0)R<7>, C,.3alkilenaril, C,.3alkilenN(R<l2>)2grupa,
Z' je izabrano iz grupe koju čine pri čemu Q' je izabrano iz grupe koju čine vodonik, OR<7>, SR<7>i N(R<7>)2; J' je izabrano iz grupe koju čineC-R<8>, N-R<8>, O i S; K' je izabrano iz grupe koju čine C-R<9>, N-R<9>, O i S; L<*>je izabrano iz grupe koju čine C-R<10>, N-R<10>, O i S; M'je izabrano iz grupe koju čine C-R", N-R<n>,OiS;
pri čemu R7 je nezavisno izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci^alkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, SO2R<12>, Ci-6alk.il grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hiroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<12>)2i S02R<12>grupom, Ci^alkilenaril, Ci.3alkilenheteroaril, Ci^alkilen-Cs-glieterocikloalkil, Ci.3arkilenS02aril, opciono supstituisana Ci.3alkilenN(R<12>)2, OCF3, Ci-3alkilen-N(R<12>)3+, C3.8heterocikloalkil i CH(C).3alkilen-N(R<12>)2)2grupa ili dve R<7>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani alifatični prsten;
R<8>, R<9>i R<10>su nezavisno izabrane iz grupe koju čine ništa, vodonik, halo, opciono supstituisana C,.6alkil, C2-6alkenil, OCF3, N02, CN, NC, N(R<7>)2, OR<7>, C03R<7>, C(0)N(R<7>)2, C(0)R<7>, N(R<13>)COR<7>, N(R,<3>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)C,.3alkilenC(0)R<7>, N(R<7>)C(0)Ci.3alkilen-C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)C,.3alkilenOR<7>, N(R<7>)C(0)C,.3alkilen-NH-C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)Ci.3alkilenS02NR<7>, CF3, C,.3alkilen-N(R<l2>)S02aril, Ci.3alkilen-N(R<12>)-S02heteroaril, Ci.3alkilen-0-C].3alkilenaril, Ci.3alkilen-N(R<12>)Ci_3alkilenaril, Ci.3alkilen-N-(R<12>)Ci.3alkilenheteroaril, C,.3alkilen-N(R<12>)C(0)R<7>, C1.3alkilen-N(R<12>)C(0)C,.3alkilenOR<2>;C,.3alkilenN(R<12>)C(0)aril, C,.3alkilen-N(R<12>)C(0)C,-3alkilen-N(R<12>)2, C,.3alkilenN(R<12>)-C(0)heteroaril, Ci.3alkilenOR<7>i SR<7>, pri čemu je R<7>prethodno definisana grupa;
R11 je izabrana iz grupe koji čine ništa, vodonik, Ci^alkil i halo grupa;
R<12>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, C|.6alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, Ci.3alkilenaril i S02Ci_6alkil grupa ili dve R<12>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani ili šestočlani prsten; i
R<13>je izabrana iz grupe koju čine vodonik. Ci-6 alkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil i aril grupa;
uz uslov da kada je Q' vodonik ili OCH3, barem jedna od grupa R<8>, R<9>i R<10>nije izabrana iz grupe koju čine vodonik, CH3, OCH3ili halo grupa,
kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati.
Poželjna jedinjenja strukturne formule (II) su ona kod kojih je W izabrano iz grupe koju čine: koja je opciono supstituisana sa jednim do četiri supstituenata izabarnih iz grupe koju čine C]_ćalkil, opciono supstituisana aril, N(R<7>)2, CF3, C(0)R<7>, N3, CN, Ci^alkilenaril, Ci.3alkilen-N(R,<2>)2, OR<7,><h>alo,
pri čemu su R<7>. Y i Z prethodno defmisane.
Još poželjnija jedinjenja formule (II) su ona kod kojih je J' izabrano iz grupe koju čine CR<8>i NR<8>, pri čemu je R<8>ništa, vodonik, Ci^alkil i halo grupa; K' je izabrano iz grupe koju čine CR<9>i NR<9>; L' je izabrano iz grupe koju čine CR<10>i NR<10>; i gde je jedna od grupa R<9>ili R<10>vodonik. a druga je supstituent izabran iz grupe koju čine C02R<7>, C(0)N(R<7>)2, C(0)R<7>, N(R<I3>)COR<7>, N(R<13>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)C1.3alkilenC(0)R<7>, N(R<7>)C(0)-C,.3alkilen-C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)Ci.3alkilenOR<7>, N(R<7>)C(0)Ci.3alkilen-NHC(0)OR<7>, N(R<7>)-C(0)C,.3alkilenS02NR<7>, Ci.3alkilenOR<7>, CF3;Ci.3alkilen-N(R<12>)S02aril, C,.3alkilen-N(R<12>)-S02heteroaril, C].3alkilen-0-Ci.3alkilenaril, C].3alkilen-N(R12)C].3alkilenariL C).3alkilen-N-(R<12>)C,.3alkilenheteroaril, Ci.3alkilen-N(R<l2>)C(0)R<7>, C].3alkilen-N(R,<2>)C(0)C).3alkilenOR<2>, CloalkilenN(RI2)C(0)aril, C)-3alkilen-N(R12)C(0)C,.3alkilen-N(R<12>)2!C,.3alkilenN(R<12>)-C(0)heteroaril i SR<7>, pri čemu su R<7>, R<13>, W, Y' i M' prethodno definisane grupe.
Još jedan aspekt predmetnog pronalaska odnosi se na jedinjenja i preparate koji ih sadrže, pri čemu jedinjenja poseduju strukturnu formulu (III):
pri čemu je W " izabrana iz grupe koju čine heteroaril, aril, heterocikloalkil, cikloalkil i C1-3alkil grupa supstituisana heteroaril ili aril grupom;
gde su pomenute aril grupe opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenta označenih sa R<14>, pri čemu su navedene heteroaril grupe opciono supstituisane sa jednim do četiri supstituenata označenih sa R i pri čemu su pomenute heterocikloalkil i cikloalkil grupe opciono supstituisane sa jednim do dva supstituenta označenih kao R<19>;
R<14>je izabrana iz grupe koju sačinjavaju halo, Ci_6alkil, C2.6alkenil, OCF3, N02, CN, NC, N(R<16>)2,OR<16>, C02R<16>, C(0)N(R<16>)2, C(0)R<16>, N(R<15>)COR<16>, N(R<15>)C(0)OR<16>, N(R<16>)C(0)OR<16>, N(R<16>)C(0)C,.3alkilen-C(0)R<16>, N(R<l6>)C(0)C,.3alkilen-C(0)OR<16>, N(R<16>)-C(0)C,.3alkilenOR16, N(R16)C(0)C,.3alkilen-NHC(0)OR16, N(R16)C(0)C,.3alkilenS02-NR16, C,.3alkilenOR16i SR16 grupa;
R<1>"' je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci-ćalkil, C2.6alkenil, C2.6alkinil i aril grupa;
R<16>je izabrana iz grupe koju čine vodonik. Ci^alkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, SO2R<17>i Ci-.alkil grupa supstituisana sa jednom ili sa više halo, hidroksi. aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R,<7>)2i SO2R<17>grupom, Ci-3alki]enaril, Ci^alkilenheteroaril, C1.3alk.ilen-Cs.gheterocikloalkil, Ci.3alkilenS02aril, opciono supstituisana Ci-3alkilenN(R<17>)2. OCF3, C].3-alkilenN(R<17>)3+, C3.8heterocikloalkil, CH(C,.3alkilenN(R17)2)2 grupa; ili dve R<16>grupe zajedno čine tročlani do šestočlani alifatični prsten;
R<17>je izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci-6alkil, cikloalkil, aril i SChCi-ealkil grupa ili dve R<17>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani do šestočlani prsten;
R<1S>je izabrana iz grupe koju čine C]_6alkil, aril, N(R<I5>)2, OR<15>i halo grupa; i
R19 je izabrana iz grupe koju čine halo i Ci-g alkil grupa.
Pojam »alkil, koji se koristi u ovom tekstu, obuhvata pravolanČane i razgranate ugljovodonične grupe koje sadrže naznačeni broj ugljenikovih atoma, i to su tipično metil, etil i pravolanČane i razgranate propil i butil grupe. Ukoliko nije drugačije naznačeno, ugljovodonične grupe mogu da sadrže do 20 ugljenikovih atoma. Pojam »alkil« obuhvata »premošćene alkil grupe«, tj. C6-C16 biciklične ili policiklične ugljovodonične grupe, na primer, norbornil. adamantil, biciklo[2,2,2]oktil, biciklo[2,2,l]heptil, biciklo[3,2,l]oktil ili dekahidronaftil grupu. Alkil grupe mogu biti supstituisane, na primer. sa hidroksi (OH), halo, aril, heteroaril, cikloalkil, heterocikloalkil, amino (N(R<a>)2) i sulfonil (S02R<a>) grupom, pri čemu je R<a>izabrano iz grupe koju čine vodonik, Ci-.alkil, cikloalkil. aril i SO2C1.6a.kil grupa ili dve R<a>grupe zajedno čine opciono supstituisani tročlani di šestočlani prsten.
Pojam »cikloalkil« je definisan kao ciklična C3_g ugljovodonična grupa, na primer, ciklopropil, ciklobutil, cikloheksil i ciklopentil grupa. Pojam »heterocikloalkil« je definisan na sličan način kao i pojam cikloalkil, a obuhvata biciklične i policiklične grupe, sa tim izuzetkom što prsten sadrži od jedan do tri heteroatoma koji su izabrani iz grupe koju čine kiseonik, azot i sumpor. Ckloalkil i heterocikloalkil grupe mogu biti sistemi zasićenih ili, posebno, nezasićenih prstenova, koji su supstituisani sa, na primer, jednom do tri grupe, nezavisno izabrane među d_4alkil, Ci.3alkilenOH, C(=0)NH2, NH2, okso (=0). aril, trifluoroetanoil i OH grupama. Heterocikloalkil grupe su opciono dalje N-supstituisane sa Ci.3alkilenaril ili C|.3alkilenheteroaril grupom.
Pojam »alkenil« je definisan identično pojmu »alkil«, s tim što supstituent sadrži dvostruku vezu između dva atoma ugljenika.
Pojam »alkinil« je definisan identično pojmu »alkil«, s tim što supstituent sadrži trostruku vezu između dva atoma ugljenika.
Pojam »alkilen« se odnosi na alkil grupu koja ima supstituent. Na primer, pojam »Cj.3alkilenC(0)OR« se odnosi na alkil grupu koja sadrži jedan do tri ugljenikova atoma koji su supstituisani sa -C(0)OR grupom. Alkilen grupa je opciono supstituisana sa jednom ili sa više aril, heteroaril i OR<7>grupa, pri čemu je R<7>ranije definisano.
Pojam »halo« ili »halogen« obuhvata fluor, brom, hlor i jod.
Pojam »aril«, sam ili u kombinaciji, označava monociklične ili policiklične aromatične grupe, poželjno monociklične ili biciklične aromatične grupe, na primer, fenil ili naftil grupe. Ukoliko nije drugačije naznačeno, »aril« grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana, na primer, sa jednom ili sa više. a posebno sa jednom do četiri, halo, Cugalkil, C2-6alkenil, OCF3, N02, CN, NC, N(R<a>)2, OR<b>, C02R<b>, C(0)N(R<b>)2, C(0)R<b>, N(R<a>)COR<b>, N(R<a>)C(0)OR<b>, N(R<a>)C(0)OR<b>, N(R<a>)C(0)C,.3alkilenC(0)R<b>, N(R<b>)C(0)C,.3alkilen-C(0)OR<b>, N(R<b>)-C(0)C,.3alkilenOR<b>, N(R<b>)C(0)C1.3alkilen-NHC(O)0R<b>, N(R<b>)C(0)C,.3alkilenS02NR<b>, C,.3-alkilenOR<b>i SR<b>, pri čemu je R<b>izabrana iz grupe koju čine vodonik, Ci_6alkil, C2.6alkenil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril, heteroaril, SOoR<1>i Ci.6alkil grupa supstituisana sa halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<a>)2ili S02R<a>grupom i sa R<a>, kao što je prethodno definisano. Primeri aril grupa obuhvataju fenil, naftil, tetrahidronaftil, 2-hlorofenil, 3-hlorofenil, 4-hlorofenil, 2-metilfenil, 4-metoksifenil, 3-trifluorometil fenil, 4-nitrofenil, 2-metoksifenil, 2,4-metoksihlorofenil i slično. Pojam »arilCi-3alkil« i »heteroarilCi_3alkil« su definisani kao aril ili heteroaril grupa kojaposeduje C|.3alkil supstituent.
Pojam »heteroaril« označava sistem monocikličnog ili bicikličnog prstena koji sadrži jedan ili dva aromatična prstena i koji sadrži najmanje jedan atom azota, kiseonika ili sumpora u okviru aromatičnog prstena i koji može biti nesupstitusan ili supstituisan, na primer, sa jednim ili sa više, posebno sa jednim do četiri, supstituenata, kao što su, na primer, vodonik, Ci_6alkil, C].6alkoksi, aril, N(R<a>)2, OR<b>i halo grupa, pri čemu su R<a>i R<b>grupe prethodno definisane. Primeri heteroaril grupa obuhvataju, bez ograničenja, tienil furil, piridil, oksazolil, kinolil. izokinolil, indolil, triazolil, izotiazolil, izoksazolil, imidazolil, benzotiazolil. pirazinil, pirimidinil, tiazolil i tiadiazolil grupu.
Pojam »hidroksi« označava -OH grupu.
Pojam »tročlani do šestočlani prsten« označava karbociklične ili heterociklične alifatične ili aromatične grupe, koje obuhvataju, bez ograničenja, morfolinil, piperidinil, fenil, tiofenil, furil, pirolil, imidazolil, pirimidinil i piridinil grupu, opciono supstituisanu sa jednom ili sa više, posebno sa jednom do tri grupe, koje su prethodno navedene kao primer »aril« grupa.
Broj ugljenikovih atoma ugljovodoničnih grupa je naznačen u spskriptu kojim se označavaju minimalni i maksimalni broj ugljenikovih atoma u toj grupi, na primer, pojam »Ci-ealkil« označava alkil grupu koja ima jedan do šest atoma, uključujući ove brojeve.
U strukturi koja je ovde navedena, na vezi na kojoj nedostaje supstituent, podrazumeva se da je supstituent metil grupa, na primer,
Kada je naznačeno da ni jedan supstituent nije povezan za ugljenikov atom ili za prsten, podrazumeva se da ugljenikov atom adrži odgovarajući broj atoma vodonika. dodatno, kada nije naznačeno da je neki supstituent povezan za karbonil grupu ili za atom azota, podrazumeva se da je supstituent vodonik, na primer,
Skraćenica »Me« označava metil grupu. Skraćenica CO i C(O) označava karbonil grupu (C=(0)).
Oznaka N(R<X>)2, pri čemu x predstavlja alfanumerički karakter, kao što su, na primer,Ra,Rb,R4,R1<2>i slično, se koristi da označi dve R<x>grupe koje su povezane za isti atom azota. Kada se koriste u takvoj oznaci, R<x>grupe mogu biti iste ili različite, a izabrane su iz grupe koje su definisane kao R<x>grupe.
Predmetni pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske preparate koji sadrže jedno ili više jedinjenja strukturnih formula (II) i (III), na korišćenje ovih jedinjenja i preparata koji ih sadrže u lečenju bolesti ili poremećaja, kao i na postupke dobijanja jedinjenja i intermedijera uključenih u sintezu jedinjenja strukturnih formula (II) i (III).
Jedinjenja koja su korisna za postupak prema predmetnom pronalasku pokazuju aktivnost u inhibiciji Chklin vitro.Jedinjenja prema predmetnom pronalasku pokazuju selektivnost prema Chkl, a ne prema drugim protein kinazama, uključujući Cdc2, Chk2, Atr,
DNK-PK, PKA i CaM KII.
Jedinjenja prema predmetnom pronalaksu se mogu koristiti za potenciranje terapijskih efekata radijacije i/ili hemoterapijskih sredstava, koji se koriste u lečenju kancera i drugih poremećaja proliferacije ćelija kod ljudi ili životinja. Na primer, jedinjenja prema predmetnom pronalasku se mogu koristiti da pospeše tretman tumora koji se uobičajeno lece antimetabolitima, na primer, metotreksatom ili 5-fluorouracilom (5-FU). Postupak prema predmetnom pronalasku obuhvata primenu Chkl inhibitora u kombinaciji sa hemoterapijskim sredstvom, koje može izazvati prekide jednog ili oba lanca DNK ili koje može da blokira replikaciju DNK ili proliferaciju ćelije.
Alternativno, postupak prema predmetnom pronalasku obuhvata primenu Chkl inhibitora u kombinaciji sa terapijama koje koriste primenu antitela, na primer, u kombinaciji sa terapijom herceptinom, koji poseduje aktivnost u inhibiciji proliferacije ćelija kancera. Shodno tome, kanceri, kao što su kolorektalni kanceri, kanceri glave i vrata, kanceri pankreasa, kanceri dojke, kanceri želuca, kanceri mokraćne bešike, kanceri vulve, leukemije, limfomi, melanomi, karcinomi renalnih ćelija, karcinomi jajnika, osetljivi su na pojačani tretman u kombinaciji sa inhibitorima Chkl prema predmetnom pronalasku.
Tumori i neoplazme podrazumevaju rast ćelija tkiva, pri čemu je umnožavanje ćelija nekontrolisano i progresivno. Neke od ovih novotvorina su benigne, ali se druge označavaju pojmom »maligni« i mogu voditi do smrti organizma. Maligne neoplazme ili »kanceri« se razlikuju od benignih novotvorina po tome što, kao dodatak ispoljavanju agresivne ćelijske proliferacije, mogu da izvrše invaziju okolnih tkiva i da metastaziraju. Staviše, maligne neoplazme se karakterišu ispoljavanjem izraženog gubitka diferencijacije (velike »dediferencijacije«) i organizacije u odnosu jednih na druge i na okolna tkiva. Ovo njihovo svojstvo se označava kao »anaplazija«.
Neoplazme koje se mogu lečiti jedinjenjima prema predmetnom pronalasku takođe obuhvataju solidne tumore, tj. karcinome i sarkome. Karcinomi obuhvataju maligne neoplazme koje su poreklom od epitelnih ćelija, koje infiltriraju (tj. invadiraju) okolna tkiva i metastaziraju. Adenokarcinomi su karcinomi koji su poreklom od žlezdanog tkiva, ili od tkiva koja stvaraju prepoznatljive žlezdane strukture. Druga široka kategorija kancera uključuje sarkome, koji predstavljaju tumore čije su ćelije uronjene u vlaknastu ili homogenu supstancu, sličnu embrionskom vezivnom tkivu. Predmetni pronalazak takođe omogućava lečenje kancera mijeloidnog ili limfoidnog sistema, uključujući leukemije, limfome i druge kancere koji nisu tipično prisutni kao tumorska masa, već su rasprostranjeni u vaskularnom ili limforetikularnom sistemu.
Aktivnost Chkl je povezana sa raznim oblicima kancera u onkologiji odraslih ili pedijatrijskoj onkologiji, sa rastom solidnih tumora/maligniteta, kao što su, na primer, miksoid i karcinom okruglih ćelija, tumori sa lokalnim napredovanjem, metastatski kanceri, sarkomi mekih tkiva kod ljudi, uključujući Juingov sarkom, kancerske metastaze, uključujući limfatične metastaze, karcinom skvamoznih ćelija, posebno glave i vrata, karcinom skvamoznih ćelija jednjaka, karcinom usne duplje, maligniteti krvnih ćelija, uključujući multipli mijelom, leukemije, uključujući akutnu limfatičnu leukemiju, akutnu nelimfatičnu leukemiju, hroničnu limfatičnu leukemiju, hroničnu mijeloidnu leukemiju i leukemiju vlasastih ćelija, efuzione limfome (limfome locirane u telesnim dupljama), limfom timusa, kancer pluća (uključujući karcinom malih ćelija), kutani limfom T ćelija, Hočkinov limfom, non-Hočkinov limfom, kancer adrenalnog korteksa, tumore koji proizvode ACTH, karcinom ne-malih ćelija, kancer dojke (uključujući karcinom malih ćelija i duktalni karcinom), gastrointestinalne kancere (uključujući kancer želuca, kancer kolona, kolorektalni kancer i polipe u vezi sa kolorektalnom neoplazijom), kancer pankreasa, kancer jetre, urološke kancere (uključujući kancere mokraćne bešike kao što su primarni tumori površnog epitela mokraćne bešike, invazivne karcinome prelaznog epitela mokraćne bešike i kancere mokraćne bešike koji invadiraju mišićni sloj), kancer prostate, malignitete ženskog genitalnog trakta (uključujući kancer jajnika, primarne neoplazme peritonealnog epitela, cervikalne karcinome, kancere endometrijuma, kancere vagine, kancere vulve, kancere materice i solidne tumore u folikulima jajnika), malignitete muškog genitalnog trakta (uključujući kancer testisa i kancer penisa), kancer bubrega (uključujući karcinom renalnih ćelija), kancer mozga (uključujući čisto moždane tumore, neuroblastome, astrocitne tumore mozga, gliome i metastatsku invaziju tumorskih ćelija u centralnom nervnom sistemu), kancere kosti (uključujući osteome i osteosarkome), kancere kože (uključujući melanom, tumorsku progresiju keratinocita kože kod ljudi i skvamocelularni karcinom), kancer štitaste žlezde, retinoblastom, neuroblastom, maligni peritonealni izliv, maligni pleuralni izliv, mezoteliom, Vilmsove tumore, kancer žučne bešike, trofoblastne neoplazme. hemangiopericitom i Kapošijev sarkom.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da potenciraju efikasnost lekova za lečenje inflamatornih bolesti. Primeri bolesti čije se lečenje može pospešiti kombinovanom terapijom sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku su reumatoidni artritis, psorijaza, vitiligo, Vegenerova granulomatoza i sistemski eritemski lupus (SLE). Lečenje artritisa, Vegenerove granulomatoze i SLE često obuhvata korišćenje imunosupresivnih terapija, kao što su jonizujuće zračenje, metotreksat i ciklofosfamid. Takvi tretmani tipično indukuju, bilo direktno ili indirektno, oštećenje DNK. Inhibicija aktivnosti Chkl u ćelijama imunog sistema koje izazivaju oštećenje čini ove ćelije osetljivijim na kontrolu putem ovih standardnih tretmana. Psorijaza i vitiligo se često leče ultraljubičastim zračenje (UV) u kombinaciji sa psoralenom. Sredstva za oštećivanje DNK prema predmetnom pronalasku indukuju smrt ćelija putem UV i psoralena i tako povećavaju terapijski indeks ovog režima lečenja. Generalno, jedinjenja prema predmetnom pronalasku potenciraju kontrolu ćelija inflamatorne bolesti kada se primenjuju u kombinaciji sa imunosupresivnim lekovima koji su trenutno u upotrebi.
Predmetni pronalazak obuhvata sve moguće stereoizomere i geometrijske izomere jedinjenja prema predmetnom pronalasku strukturnih formula (I), (II) i (III). Predmetni pronalazak obuhvata ne samo racemska jedinjenja, već i optički aktivne izomere. Kada je poželjno da se jedinjenje strukturne formule (I), (II) ili (III) koristi kao čist enantiomer, on se može dobiti ili razlaganjem konačnog proizvoda ili primenom stereospecifične sinteze korišćenjem izomerno čistog početnog materijala ili korišćenjem pomoćnog hiralnog reagensa (na primer, videti Z. Ma et al, Tetrahedron: Asymmetry, 8 (6), strane 883 - 888 (1997)). Rezolucija konačnog proizvoda, intermedijer ili početni materijal se mogu dobiti bilo kojim pogodnim postupkom koji je poznat u struci. Dodatno, u situacijama kada su mogući tautomeri jedinjenja strukturnih formula (I), (II) i (III), predmetni pronalazak obimom zaštite obuhvata sve tautomerne oblike jedinjenja. Kao što je ovde pokazano, specifični stereoizomeri mogu da pokažu izrazitu sposobnost da inhibiraju Chkl u kombinaciji sa hemoterapijom ili radijacionom terapijom, uz smanjenje neželjenih dejstava koja su tipični pratioci hemoterapijskih ili radijacionoterapijskih tretmana.
Prekursori lekova preparata strukturnih formula (I), (II) i (III) mogu se takođe koristiti kao i jedinjenja prema predmetnom pronalasku i obuhvaćeni su obimom zaštite predmetnog pronalaska. Dobro je poznato da se pristup koji koristi prekursore lekova, pri čemu je jedinjenje prevedeno u oblik koji je pogodan za pravljenje formulacije i/ili je pogodan za primenu, a zatim se otpušta kao lekin vivo,uspešno koristi da bi prolazno (npr. bioreverzibilno) izmenio fizičkohemijska svojstva jedinjenja (videti, H. Bundgaard, Ed., Design of Prodrugs, Elsevier, Amsterdam, (1985); R. B. Silverman, The Organic Chemistrv of Drug Design and Drug Action, Academic Press, San Diego, poglavlje 8, (1992); K. M. Hillgren et al., Med. Res. Rev., 15, 83 (1995)).
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da sadrže nekoliko funkcionalnoh grupa. Uvedene funkcionalne grupe, ukoliko je to poželjno ili potrebno, mogu se zatim modifikovati, čime se dobija prekursor leka radi potreba formulacije i/ili primene. Odgovarajući prekursori lekova obuhvataju, na primer, derivate kiselina, kao što su amidi, estri i slični. Stručnjacima je takođe poznato da se kao prekursori lekova mogu koristiti i N-oksidi.
Pojam farmaceutski prihvatljive soli, koji se koristi u ovom tekstu, označava jedinjenja strukturnih formula (I), (II) i (III) koja sadrže kiselinske funkcionalne grupe i grade soli sa odgovarajućim katjonima. Farmaceutski prihvatljivi katjoni obuhvataju jone alkalnih metala (npr. natrijuma ili kalijuma) i jone zemnoalkalnih metala (npr. kalcijuma ili magnezijuma). Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja strukturnih formula (I), (II) i (III), koje sadrže bazni centar, predstavljaju adicione soli kiselina dobijene sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama. Primeri ovih soli obuhvataju hlorovodonične, bromovodonične, sulfatne ili bisulfatne, fosfatne ili vodonik fosfatne, acetatne, benzoatne, sukcinatne, fumaratne, maleatne, laktatne, citratne, tartaratne, glukonatne, metansulfonatne, benzensulfonatne i p-toluen sulfonatne soli. U svetlu teksta koji sledi, svaka referenca koja se odnosi na jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvata jedinjenja strukturne formule (I), (II) i (III), kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu se terapijski primeniti u obliku čistih supstanci, ali poželjno je da se jedinjenja sa strukturnim formulama (I), (II) i (III) primene u obliku farmaceutskih preparata ili formulacija. Shodno tome, predmetni pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutske formulacije koje sadrže neko jedinjenje strukturne formule (I), (II) i/ili (III), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa jednim ili sa više farmaceutski prihvatljivih nosilaca i, opciono, sa drugim terapijskim i/ili profilaktičkim sastojcima. Nosioci su »prihvatljivi« u smislu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i da nisu štetni po onoga koji ih koristi.
Inhibicija kinaze kontrolnog mesta se tipično kvantifikuje korišćenjem testa odgovora na dozu u kome sistem osetljivog testa stupa u kontakt sa jedinjenjem koje se ispituje u nizu razblaženja, uključujući i one koncentracije pri kojima nema ili se primećuje minimalni efekat, preko viših koncentracija pri kojima se efekat primećuje delimično, do koncentracija zasićenja pri kojima se primećuje maksimalni efekat. Teorijski, pomenuti testovi jačine efekta kao odgovora na dozu inhibitornog jedinjenja se mogu opisati putem sigmoidne krive koja izražava stepen inhibicije u ftinkciji koncentracije. Teorijski, kriva takođe prolazi kroz tačku pri kojoj je koncentracija dovoljna da smanji aktivnost enzima kontrolnog mesta do nivoa koji odgovara aktivnosti od 50% raspona između maksimalne i minimalne aktivnosti enzima. Ova koncentracija se definiše kao inhibitorna koncentracija (50%), tj. kao IC50vrednost. Poželjno je da se za određivanje IC50vrednosti koriste konvencionalne biohemijske (acelularne) tehnike ili tehnike koje koriste ćelije.
Poređenje efikasnosti inhibitora se često sprovodi u odnosu na uporedne IC50vrednosti, pri čemu veća IC50vrednost označava da je testirano jedinjenje manje potentno, a manja IC5ovrednost označava da je testirano jedinjenje potentnije u odnosu na referentno jedinjenje. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku pokazuju IC50vrednost od najmanje 0,1 nM kada se ova vrednost određuje korišćenjem testa odgovor na dozu. Poželjna jedinjenja pokazuju IC50vrednost koja je manja od 10 u.M. Poželjnija jedinjenja imaju IC50vrednost koja je manja od 500 nM. Još poželjnija jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju IC50vrednosti manje od 250 nM, manje od 100 nM ili manje od 50 nM.
Jedinjenja i farmaceutski preparati koji su pogodni za upotrebu prema predmetnom pronalasku obuhvataju one kod kojih se aktivni sastojak primenjuje u efikasnoj količini da bi se postigao željeni cilj. Specifičnije, pojam »terapijski efikasna količina« označava količinu koja je efikasna u inhibiciji razvoja ili u smanjenju postojećih simptoma kod jedinke koja se leči. Određivanje efikasne količine je dobro poznato stručnjacima, posebno u svetlu detaljnog opisa koji je ovde izložen.
Pojam »terapijski efikasna doza« se odnosi na količinu jedinjenja koja dovodi do postizanja željenog efekta. Toksičnost i terapijska efikasnost takvih jedinjenja može da se odredi standardnim farmaceutskim postupcima u ćelijskoj kulturi ili na eksperimentalnim životinjama, i tako se, na primer, određuju LD50(doza koja je letalna kod 50% populacije) i ED50(doza koja je terapijski efikasna kod 50% populacije). Odnos između toksičnih i terapijski efikasnih doza predstavlja terapijski indeks i on se izražava kao odnos LD50i ED50. Poželjna su ona jedinjenja koja poseduju veći terapijski indeks (tj. jedinjenja kod kojih je toksična doza značajno veća od efektivne doze). Podaci koji su ovako dobijeni mogu se koristiti u formulisanju doznog opsega prilikom korišćenja kod ljudi. Doze ovih jedinjenja se poželjno nalaze u opsegu koncentracija u cirkulaciji što obuhvata ED50, uz postojanje male toksičnosti ili uz odsustvo toksičnosti. Doza može da varira u okviru ovog opsega što zavisi od doznog oblika koji se koristi i puta primene koji se upotrebljava.
Preciznu formulaciju, put primene i dozu bira određeni lekar na osnovu stanja pacijenta. Veličina doze i dozni interval se mogu individualno prilagoditi u cilju obezbeđivanja nivoa aktivnog jedinjenja u plazmi koji je dovoljan da održi željene terapijske efekte.
Farmaceutski preparat prema predmetnom pronalasku se može formulisati tako da obuhvati jedan ili više citokina, limfokina, faktora rasta ili drugih hematopoetskih faktora koji mogu da umanje negativna sporedna dejstva nastala zbog primene ili koja se udružena sa primenom samog farmaceutskog preparata. Citokini, limfokini, faktori rasta ili drugi hematopoetski faktori koji su posebno korisni u farmaceutskim preparatima prema predmetnom pronalasku obuhvataju, bez ograničenja, M-CSF, GM-CSF, TNF, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8. IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15. IL-16, IL-17, IL-18, IFN, TNF, G-CSF, Meg-CSF, GM-CSF, trombopoetin, faktor matične ćelije, eritropoetin, angiopoetine, uključujući Ang-1, Ang-2, Ang-4, Ang-Y i/ili humane angipoetinu slične polipeptide, faktor rasta vaskularnog endotela (VEGF), angiogenin, morfogenetski protein kosti- 1 (BMP - bone morphogenic protein), BMP-2, BMP-3, BMP-4, BMP-5, BMP-6, BMP-7, BMP-8, BMP-9, BMP-10, BMP-11, BMP-12, BMP-13, BMP-14, BMP-15, BMP receptor I A, BMP receptor IB, neurotrofni faktor moždanog porekla, cilijami neutrofni faktor, receptor cilijarnog neutrofnog faktora, citokinom indukovani faktor hemotakse neutrofila 1, citokinom indukovani faktor hemotakse neutrofila 2, faktor rasta endotelnih ćelija, endotelin 1, epidermalni faktor rasta, atraktant neutrofila poreklom iz epitela, faktor rasta fibroblasta (FGF - fibroblast growth factor) 4, FGF 5, FGF 6, FGF 7, FGF 8, FGF 8b, FGF 8c, FGF 9, FGF 10, kiseli FGF, bazni FGF, receptor tip 1 za neutrofni faktor poreklom iz linije glijalnih ćelija, receptor tip 2 za neutrofni faktor poreklom iz linije glijalnih ćelija, protein povezan sa rastom, epidermalni faktor rasta koji se vezuje sa heparinom, faktor rasta hepatocita, receptor faktora rasta hepatocita, insulinu sličan faktor rasta I, receptor za insulinu sličan faktor rasta, insulinu sličan faktor rasta II, vezujući protein za insulinu sličan faktor rasta, faktor rasta keratinocita, faktor inhibicije leukemije, receptor za faktor inhibicije leukemije, faktor rasta nerava, receptor za faktor rasta nerava, neutrofm-3, neutrofin-4, faktor rasta placente, faktor rasta placente 2, faktor rasta endotela poreklom iz trombocita, faktor rasta poreklom iz trombocita, A lanac faktora rasta poreklom iz trombocita, AA faktor rasta poreklom iz trombocita, AB faktor rasta poreklom iz trombocita, B lanac faktora rasta poreklom iz trombocita, BB faktor rasta poreklom iz trombocita. receptor za faktor rasta poreklom iz trombocita, faktor stimulacije rasta pre-B ćelija, faktor matične ćelije, receptor za faktor matične ćelije, transformišući faktor rasta (TGF - transformating grovvth factor), TGF, TGF 1, TGF 1.2, TGF 2, TGF 3, TGF 5, latentni TGF 1, TGF vezujući protein I, TGF vezujući protein II, TGF vezujući protein III, receptor tipa I za faktor nekroze tumora, urokinaza-tip receptora za aktivator plazminogena. vaskularni endotelni faktor rasta i himerični proteini, kao i njihovi biološki ili imunološki aktivni fragmenti.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti konjugovana ili povezana sa pomoćnim funkcionalnim podjedinicama koje pospešuju bilo koje svojstvo tih jedinjenja korisno u postupku prema predmetnom pronalasku. Pomenuti konjugati mogu da pospeše dopremanje jedinjenja do određenog anatomskog mesta ili regije od interesa (npr. do tumora), mogu da omoguće zadržavanje terapijskih koncentracija jedinjenja u ciljnim ćelijama, mogu da izmene farmakodinamska i farmakokinetska svojstva jedinjenja i/ili mogu da poboljšaju terapijski indeks ili sigurnosni profil jedinjenja. Odgovarajuće pomoćne funkcionalne podjedinice obuhvataju, na primer, aminokiseline, oligopeptide ili polipeptide, npr. antitela kao što su monoklonska antitela i druga sintetisana antitela; kao i prirodne ili sintetske ligande receptora u ciljnim ćelijama ili tkivima. Druge pogodne pomoćne podjedinice obuhvataju masnokiselinske ili lipidne podjedinice, kojima se pospešuje biodistribucija ili pruzimanje jedinjenja od strane ciljnih ćelija (videti, na primer, Bradlev et al., Clin. Cancer Res. (2001) 7 : 3229).
Terapijski indeks preparata koji sadrže jedno ili više jedinjenja prema predmetnom pronalasku se može povećati konjugacijom jedinjenja sa antitumorskim antitelima, na način koji je ranije opisan (videti, na primer, Pitersz et al., Science (1993) 261 : 212; Rowlison - Busza & Epenetos, Curr. Opin. Oncol. 1992; 4 : 1142). Dopremanje jedinjenja prema predmetnom pronalasku koje je usmereno ka tumoru može da poveća korist od terapije minimalizovanjem potencijalnih nespecifičnih toksičnih efekata nastalih primenom zračne ili hemoterapije. U dugom aspektu, Chkl inhibitori i radioizotopi ili hemoterapijska sredstva mogu da se konjuguju sa istim molekulom antitela. Alternativno, za tumor specifična antitela konjugovana sa Chkl inhibitorom mogu da se primene pre, tokom ili nakon primene antitumorskih antitela konjugovanih sa hemoterapijskim sredstvom ili pre, tokom ili nakon primene radioimunoterapije.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da povećaju terapijsku korist zračne ili hemoterapije, što obuhvata indukciju hemoterapije, primarnu (neoadjuvantnu) hemoterapiju, kao i adjuvantnu radio i adjuvantnu hemoterapiju. Dodatno, radijaciona i hemoterapija često su indikovane kao dodatne terapije hirurškom lečenju kancera. Cilj radijacione i hemoterapije u ovom slučaju je smanjenje rizika ponovne pojave bolesti i pospešivanje preživljavanja u odsustvu bolesti, kada je primarni tumor pod konrolom. Hemoterapija se koristi kao dodatak lečenju za kancere debelog creva, pluća i dojke, često onda kada je bolest u metastatskoj fazi. Adjuvantna radioterapija je indikovana u nekoliko slučajeva, kao kod kancera debelog creva, pluća i dojke, što je ranije opisano. Na primer, radijaciona terapija se često koristi i pre i posle hirurškog tretmana, kao deo strategije lečenja kod karcinoma rektuma. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su stoga posebno korisna nakon hirurškog tretmana u lečenju kancera u kombinaciji sa zračnom i/ili hemoterapijom.
Jedinjenje prema predmetnom pronalasku takođe može da učini ćeliju osetljivom na dejstvo zračenja. Pojam »radiosenzibilizacija« označava da molekul, poželjno molekul male molekulske mase, primenjen kod čoveka ili neke životinje u terapijski efikasnoj količini povećava osetljivost ćelija, tako da one postaju osetljive na elektromagnetno zračenje, i/ili da pospešuje lečenje bolesti koje se mogu lečiti primenom elektromagnetnog zračenja. Bolesti koje se mogu lečiti elektromagnetnim zračenjem obuhvataju neoplastične bolesti, benigne i maligne tumore i ćelije kancera.
Lečenje bolesti koje nisu ovde nabrojane elektromagnetnim zračenjem takođe je obuhvaćeno obimom zaštite predmetnog pronalaska. Pojmovi »elektromagnetno zračenje« i »radijacija« obuhvataju, bez ograničenja, zračenje talasnih dužina od IO"<20>do 100 metara. Poželjna rešenja prema predmetnom pronalasku koriste sledeća elektromagnetna zračenja: gama zračenje (IO"<20>do 10"<13>m), zračenje X zracima (IO"<12>do IO'<9>m), ultraljubičastu svetlost (10 nm do 400 nm), vidljivu svetlost (400 nm do 700 nm), infracrveno zračenje (700 nm do 1,0 mm) i mikrotalasno zračenje (1 mm do 30 cm).
Mnogi savremeni protokoli za lečenje kancera koriste supstance koje povećavaju osetljivost na zračenje, a koje se same aktiviraju elektromagnetnim zračenjem, na primer, X zracima. Primeri supstanci koje povećavaju osetljivost na zračenje, a koje se same aktiviraju X zračenjem, obuhvataju, bez ograničenja: metronidazol, mizonidazol, desmetilmizonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicin C, RSU 1069, SR 4233, E09, RB 6145, nikotinamid, 5-bromodeoksiuridin (BUdR), 5-jododeoksiuridin (IUdR), bromodeoksicitidm, fluorodeoksiuridin (RUdR), hidroksiureu, cisplatin i terapijski efikasne analoge i derivate istih,
Fotodinamička terapija (PDT - photodvnamic therapv) kancera koristi vidljivu svetlost kao radijacioni aktivator osetljivog sredstva. Primeri fotodinamičkih radiosenzibilizatora obuhvataju, bez ograničenja: derivate hematoporfirina. PHOTO-FRIN<®>, derivate benzoporfirina, NPe6, kalaj etioporfirin (SnRT2), feoborbid-a, bakteriohlorofil-a, naftalocijanine, ftalocijanine, cink ftalocijanine i terapijski efikasne analoge i derivate istih.
Radiosenzibilizatori se mogu primeniti zajedno sa terapijski efikasnom količinom jednog ili više jedinjenja kao dodatak Chkl inhibitoru i takva jedinjenja obuhvataju, bez ograničenja, jedinjenja koja pospešuju inkorporaciju rediosenzibilizatora u ciljne ćelije, jedinjenja koja kontrolišu protok terapeutika, hranljivih sastojaka i/ili kiseonika do ciljnih ćelija, hemoterapijska sredstva koja deluju na tumor uz primenu ili bez dodatne radijacije ili druga terapijski efikasna jedinjenja za lečenje kancera ili drugih bolesti. Primeri dodatnih terapijskih sredstava koja se mogu koristiti zajedno sa radiosenzibilizatorima obuhvataju, bez ograničenja, 5-fluorouracil (5-FU), leukovorin, kiseonik, ugljenik, transfuzije eritrocita, perfluorougljenike (npr. FLUOSOLW<®->DA), 2,3-DPG, BW12C, blokatore kalcijumskih kanala, pentoksifilin, jedinjenja koja sprečavaju angiogenezu, hidralazin i L-BSO.
Hemoterapijska sredstva koja se mogu koristiti obuhvataju, bez ograničenja, alkilirajuće agense, antimetabolite, antitela, kao i prirodne proizvode i njihove kombinacije. Na primer, inhibitorno jedinjenje prema predmetnom pronalasku se može primeniti sa antibioticima, kao što su doksorubicin i drugi analozi antraciklina, sa azotnim iperitima, kao što je ciklofosfamid, sa analozima pirimidina, kao što je 5-fluorouracil, sa cisplatinom, hidroksiureom, taksolom i njegovim prirodnim i sintetskim derivatima i sa sličnim jedinjenjima. Kao drugi primer, u slučaju mešanih tumora, kao što je adenokarcinom dojke, gde tumori sadrže ćelije koje su zavisne i ćelije koje su nezavisne od gonadotropina, jedinjenje se može primeniti zajedno sa leuprolidom ili goserelinom (sintetski peptidni analozi LH-RH). Drugi antineoplastični protokoli obuhvataju korišćenje inhibitornog jedinjenja sa drugim modalitetima lečenja, npr. sa hirurgijom ili sa zračenjem, što se ovde takođe označava pojmom »dodatni antineoplastični modaliteti«. Primeri bemoterapijskih sredstava korisnih u postupku prema predmetnom pronalasku su dati u tabeli koja sledi.
Primeri hemoterapijskih sredstava koja su posebno korisna u kombinaciji sa radiosenzibilizatorima obuhvataju, na primer, adriamicin, kampotecin, karboplatin, cisplatin, daunorubicin, doksorubicin, interferon (a, p\ y), IL-2, irinotekan, docetaksel, paklitaksel, topotekan i terapijski efikasne analoge i derivate istih.
Kao što je poznato stručnjacima, referenciranje na terapiju se odnosi i na profilaksu i na lečenje uspostavljene bolesti ili simptoma. Dalje, podrazumeva se da količina jedinjenja prema predmetnom pronalasku, koju je potrebno koristiti tokom lečenja, varira u zavisnosti od prirode stanja koje se leči, kao i od starosne dobi i stanja pacijenta i da je konačno određena od strane nadležnog lekara ili veterinara. Međutim, generalno, doze koje se koriste u lečenju odraslih ljudi se tipično nalaze u opsegu od 0,001 mg/kg do oko 100 mg/kg dnevno. Željena doza se može prikladno primeniti u obliku pojedinačne doze ili u obliku višestrukih doza koje se primenjuju u odgovarajućim intervalima, na primer, u obliku dve, tri, četiri ili više subdoza na dan. U praksi, lekar određuje dozni režim koji najbolje odgovara određenom pacijentu, a doza zavisi od starosne dobi, mase i odgovora datog pacijenta. Gore navedene doze služe kao primer za prosečni slučaj, ali postoje slučajevi kada su poželjne veće ili manje doze, a i takve situacije su obuhvaćene obimom zaštite predmentog pronalaska.
Formulacije prema predmetnom pronalasku mogu da se primenjuju na način koji je uobičajen za lečenje naznačenih bolesti i obuhvata oralnu, parenteralnu, transmukoznu (npr. sublingvalnu ili bukalnu), topijsku, transdermalnu, rektalnu primenu, primenu putem inhalacije (npr. nazalno ili dubinsku plućnu inhalaciju). Parenteralna primena obuhvata, bez ograničenja, intravensku, intraarterijsku, intraperitonealnu, subkutanu, intramuskularnu, intratekalnu i intraartikularnu primenu. Parenteralna primena takođe može da se sprovede korišćenjem tehnike visokog pritiska, kao što je POWDERJECT™.
Za oralnu primenu, uključujući bukalnu primenu, preparat može biti u obliku tableta ili bombona, koje su formulisane na uobičajeni način. Na primer, tablete i kapsule za oralnu upotrebu mogu da sadrže konvencionalne ekscipijente, kao što su sredstva za vezivanje (na primer, sirup, akacija, gelatin, sorbitol, tragakant, sluz škroba ili polivinilpirolidon), punioci (na primer, laktoza, šećer, mikrokristalna celuloza, kukuruzni škrob, kalcijum fosfat ili sorbitol), lubrikanti (na primer, magnezijum sterat, steannska kiselina, talk, polietilen glikol ili silicijum), dezintegranti (na primer, škrob krompira ili natrijum škrob glikolat) ili sredstva za vlaženje (na primer, natrijum lauril sulfat). Tablete mogu biti obložene primenom postupka koji je poznat u struci.
Alternativno, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti inkorporirana u tečne preparate za oralnu upotrebu, kao što su, na primer. vodene ili uljne suspenzije, rastvori, emulzije, sirupi ili eliksiri. Staviše, formulacije koje sadrže ova jedinjenja mogu da budu u obliku suvih proizvoda koji se mešaju sa vodom ili sa drugim pogodnim vehikulumom pre upotrebe. Ovakvi tečni preparati mogu da sadrže konvencionalne aditive, na primer, sredstva za suspendovanje, kao što su sorbitol, sirup, metil celuloza, sirup glukoze i šećera, gelatin, hidroksietilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, karboksimetilceluloza, aluminijum stearat gel i hidrogenirane jestive masti; sredstva za emulgovanje, kao što su lecitin, sorbitan monooleat ili akacija; nevodeni vehikulumi (koji sadrže jestiva ulja), kao što su ulje badema, frakcionirano ulje kokosovog oraha, uljasti estri, propilen glikol i etil alkohol; kao i konzervanse, kao što su metil ili propil p-hidroksibenzoat i sorbinska kiselina.
Pomenuti preparati mogu takođe da budu formulisani kao supozitorije, tj. da sadrže konvencionalne osnove za supozitorije, kao što su kakao buter i drugi gliceridi. Preparati namenjeni inhalaciji se tipično obezbeđuju u obliku rastvora, suspenzije ili emulzije koji se mogu primeniti u vidu suvog praha ili u obliku aerosola korišćenjem konvencionalnih propelanata, kao što su dihlorodifiuorometan ili trihlorofluorometan. Tipične topijske i transdermalne formulacije obuhvataju konvencionalne vodene ili nevodene vehikulume i to su kapljice za oči, kremovi, masti, losioni i paste ili su u obliku medicinskih zavoja, flastera ili membrana.
Dodatno, preparati prema predmetnom pronalsku mogu biti formulisani za parenteralnu primenu putem injekcija ili kontinuiranih infuzija. Formulacije za injekcije mogu biti u obliku suspenzija, rastvora ili emulzija u uljnim ili u vodenim vehikulumima i mogu da sadrže sredstva za formulisanje, kao što se sredstva za suspendovanje, stabilizaciju i/ili đispergovanje. Altrnativno, aktivni sastojak može biti u obliku praška koji se neposredno pre upotrebe rastvara u odgovarajućem vehikulumu (npr. sterilnoj vodi u kojoj nema pirogena).
Preparati prema predmetnom pronalasku takođe mogu biti formulisani u obliku depo preparata. Ovakve dugodejstvujuće formulacije mogu da se primene implantiranjem (na primer, subkutano ili intramuskularno) ili intramuskularnom injekcijom. Shodno tome, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti formuhsana sa odgovarajućim polimernim ili hidrofobnim materijalima (npr. kao emulzija u prihvatljivom ulju), jonoizmenjivačkim smolama ili u obliku umereno rastvorljivih derivata (npr. u vidu umereno rastvorljive soli).
Pri upotrebi u veterini, jedinjenje formule (I), (II) ili (III) ili njegova netoksična so. primenjuje se u obliku odgovarajuće prihvatljive formulacije shodno uobičajenoj veterinarskoj praksi. Veterinar određuje dozni režim i put primene koji su najpogodniji za određenu životinju.
Stoga, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutski preparat koji sadrži jedinjenje formule (I), (II) ili (III), zajedno sa farmaceutski prihvatljivim diluentom ili nosiocem. Takođe, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za dobijanje farmaceutskog preparata koji sadrži jedinjenje formule (I), (II) ili (III) i podrazumeva mešanje jedinjenja formule (I), (II) ili (III) sa farmaceutski prihvatljivim diluentom ili nosiocem.
Specifično, u tekstu koji sledi su navedeni, bez ograničenja, primeri jedinjenja sa strukturnom formulom (I), (II) i (III), čija sinteza se odvija prema postupcima koji su takođe navedeni u tekstu koji sledi.
Radi lakšeg razumevanja, jedinjenje koje poseduje određenu strukturu identifikovano je odgovarajućim brojem koji se nalazi u tabelama koje slede i koje sumiraju neka od jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Na primer, struktura koja je identifikovana kao Jedinjenje 1 predstavlja jedinjenje strukturne formule (IV), pri čemu je R<27>vodonik, a R28je - C(0)NH(CH2)2(2-N-metilpropildiil).
Jedinjenja koja su pogodna za primenu prema postupku predmetnog pronalaska obuhvataju, bez ograničenja:
Supstituent! heteroprstena :
Tiourea jedinjenja :
Razne klase :
Neka poželjna jedinjenja obuhvataju Jedinjenja br. 2, 4, 6, 12, 71, 76, 83, 84, 88, 89 i 90.
Generalno, jedinjenja sa strukturnim formulama (I), (II) i (III), uključujući i ona sa formulama (IV). (V), (VI) i (VII), mogu da se dobiju prema šemama sinteze koje slede. U šemi koja je dole opisana, u struci se podrazumeva da se mogu primeniti protektivne grupe kada je to potrebno i u skladu sa opštim principima sintetičke hernije. Ove protektivne grupe se uklanjaju u završnom koraku sinteze u baznim, kiselim ili hidrogenolitičkim uslovima, što je poznato stručnjacima. Korišćenjem odgovarajuće manipulacije koja nije specifično navedena u tekstu koji sledi, kao i zaštitom nekih hemijskih funkcionalnih grupa, postiže se sinteza jedinjenja strukturnih formula (I), (II) i (III) postupcima koji su analogi dole predstavljenim šemama.
Ukoliko drugačije nije navedeno, svi početni materijali su nabavljeni od strane komercijalnih snabdevača i korišćeni su bez daljeg prečišćavanja. Sve reakcije i hromatografske frakcije su analizirane putem hromatografije na tankom sloju na pločama sa silika gelom od 250 mm, uz vizuelizaciju sa ultraljubičastim svetlom i I2(jodnom) bojom. Hromatografija za rektifikaciju lakih frakcija je izvođena korišćenjem Biotage 40M silika gela (230 - 400 mreža). Proizvodi i intermedijeri su prečišćeni korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija ili HPLC reverzne faze.
Kao što je dole ilustrovano, jedinjenja opšte strukturne formule (I) i (II) se mogu dobiti u skladu sa sledećim sintetičkim šemama.
Generalno, aril amin koji je predstavljen formulom Ar-NH2raguje sa oko 0,75 - 1,25 molarnih ekvivalenata 4-nitrofenil hloroformata. Reakcija se poželjno izvodi u inertnoj atmosferi, na primer, u atmosferi azota (N2), i tipično se održava niska temperatura (oko 0 °C). Rezultujući proizvod se tretira sa oko 0,75 - 1,25 molarnih ekvivalenata heteroarilamina predstavljenog formulom HetAr-NH2, poželjno u inertnoj atmosferi i na sobnoj temperaturi (oko 25 °C), čime se dobija sirovo aril pirazin - disupstituisano jedinjenje uree.
Još preciznija ilustracija za dobijanje jedinjenja standardnih formula (I) i (II) obuhvata, na primer, postupak prema Opštoj šemi 2.
Korak 1: Esterifikacija TMS diazometana
U ohlađeni (temperatura oko 0 °C), mešani rastvor 4-amino-3-metoksibenzojeve kiseline (5,0 g, 30 mmol) u suvom metanom (150 ml), lagano, tokom 1 časa, dodavan je trimetilsilil diazometan (60 ml 2,0 M rastvora u heksanima, 120 ml). Nakon 4 časa mešanja, reakciona smeša je koncenrovana pri smanjenom pritisku, rastvorena u etil acetatu (200 ml), isprana sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata i slanom vodom, a zatim sušena (MgSCv), filtrirana i koncentrovana u vakuumu, čime je dobijen željeni estar u vidu sivkaste čvrste supstance (prinos 94%).
Korak 2: Postupak p- nitrofenil karbamata
U mešani, hladni (temperatura oko 0 °C) rastvor metil-3-amino-4-metoksi benzoata (5,0 g, 27,6 mmol) u suvom dihlorometanu (175 ml) dodat je piridin (2.34 ml, 29 mmol), a zatim i 4-nitrofenil hloroformat (5,8 g, 29 mmol) u atmosfri azota (N2). Nakon mešanja tokom 8 časova, reakciona smeša je isprana sa 2 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (2 * 200 ml), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 200 ml) i slanom vodom (200 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Filtrirani rastvor je razblažen etil acetatom i heksanima (oko 800 ml) sve do stvaranja taloga. Čvrsta supstanca je prikupljena u Bihnerovom levku sa sukcijom i isušena navazduhu, čime je dobijen željeni karbamat u vidu bele čvrste supstance (prinos 70%).
Korak 3: Procedura vezivanja karbamata
U mešani rastvor metil estra 4-metoksi-3-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-benzojeve kiseline (30 g, 8,7 mmol) u suvom N-metil pirolidinu (50 ml) dodat je amino pirazin (0,84 g, 8,8 mmol) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 80 °C tokom 6 časova, a zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Rastvaranjem sa etil acetatom (200 ml) i vodom (200 ml) dobijena je željena urea u vidu bele čvrste supstance (prinos 54%).
Korak 4: Postupak hidrolize Iitijum hidroksi da
U mešani rastvor metil estra 4-metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline (1,0 g, 3,3 mmol) u metanom (35 ml) dodat je vodeni rastvor Iitijum hidroksida (5 ml 2 N rastvora, 10 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 65 °C tokom 15 časova, a zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Reakciona smeša je potomrazblažena vodom (100 ml) i isprana etil acetatom (2 * 100 ml). pH vrednost vodenog sloja je podešena do5,2 korišćenjem 2 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline, a dobijeni precipitat je sakupljen na Bihnerovom levku sa sukcijom i isušen na vazduhu čime je dobijena željena kiselina u vidu bele čvrste supstance.
Korak 5: Postupak vezivanja HBTU
U mešani rastvor kiseline (30 mg, 0,11 mmol) u suvom N-metil pirolidinonu (2 ml) dodati su uronijum heksafluorofosfat (HBTU; 45 mg, 0,12 mmol), 4-(2-aminoetil)-morfolin (15,7 1, 0,12 mmol) i diizopropil etil amin (34 1, 0,2 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan tokom 5 časova, a zatim razblažen sa etil acetatom (30 ml) i sa 10%o vodenim rastvorom natrijum karbonata (30 ml). Nakon energičnog mešanja na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta, sakupljen je precipitat na Bihnerovom levku sa sukcijom i isušen na vazduhu, čime je dobijen željeni amid u vidu bele čvrste supstance (prinos 59%).
Sledeća jedinjenja su dobijena korišćenjem generalne procedure koja je opisana uz OpŠtu šemu 2, ali uz supstituciju R grupe ispod sa R grupom prikazanoj na Opštoj šemi 2:
Postupak sa izocijanatom
U mešani rastvor 2-metoksi-5-metil-fenilizocijanata (43 ml, 0,3 mmol) u suvom dihloroetanu (0,4 ml) dodat je 2-aminokinoksalin (43,5 mg, 0,3 mmol) u atmosferi azota. reakcioni sud je zatim zatvoren i zagrevan na temperaturi od 80 °C preko noći (14 časova). Reakciona smeša je zatim filtrirana, a ostatak je ispran dihlorometanom, čime je dobijena željena urea u vidu bele čvrste supstance (prinos 91%).
Sledeća jedinjenja su pripremljena korišćenjem postupka koji prati Opštu šemu 3, uz supstituciju Ar grupe u tabeli ispod sa Ar grupom iz Opšte šeme 3:
Primeri Primer 1 Dobijanje Jedinjenja 115
2-(Difluorometoksi)fenilizocijanat (1,0 g, 5,4 mmol) i aminopirazin (0,51 g, 5,4 mmol) su reagovali tokom 6 časova u refluktujućem dimetoksietanu (20 ml). Reakciona smeša je potom ohlađena da sobne temperature radi precipitacije proizvoda, koji je sakupljen filtracijom, ispran etil acetatom i isušen u vakuumu (765 mg, 50%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 6: 10.49 (br s, IH), 10.26 (s, IH), 8.83 (s, IH), 8.35 - 8.24 (m, 3H), 7.53-7.00 (m, 4H).
Primer 2
Dobijanje Jedinjenja 165
2-(Metiltiofenil)-izocijanat (1,0 g, 6,1 mmol) i aminopirazin (0,58 g. 6,1 mmol) su reagovali tokom 16 časova u refluktujućem dimetoksietanu (40 ml). Proizvod je precipitiran iz ohlađene reakcione smeše i prikupljen filtracijom, ispran dimetoksietanom i isušen u vakuumu (715 mg, 45%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 6: 10.35 (br s, IH), 10.29 (s, IH),
8.84 (s, IH), 8.33 (s, IH), 8.27 (s, IH), 8.09 (d, IH), 7.45 (d, IH), 7.29, (t, IH), 7.10 (t, IH), 2.43 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, d6-DMSO) 6: 151.8, 149.2, 140.5, 137.5, 137.3, 135.2, 130.1, 127.1, 126.9, 123.7, 121.4,16.5.
Primer 3
Dobijanje Jedinjenja 159
Smeša 2-metoksi-5-nitrofenil izocijanata (5,0 g, 25 mmol) i aminopirazina (2,5 g, 26 mmol) u tetrahidrofuranu (THF, 250 ml) mešana je na temperaturi refluksa tokom 24 časa. Proizvod je precipitiran iz ohlađene reakcione smeše i prikupljen filtracijom, ispran etil acetatom i isušen u vakuumu (4,3 g, 57%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) (smeša rotamera) 5: 10.38 (br, s, IH), 10.27 (s, IH), 9.39, 8.88 (2 singleti, IH), 9.10 (d, IH), 8.33 (s, IH), 8.26 (d, IH), 7.98 - 8.25 (m, IH), 7.97 - 7.84 (m, IH), 4.05, 4.03 (2 singleti, 77:28 odnos, 3H).
Primer 4
Dobijanje Jedinjenja 14
Rastvor (2-metoksi-5-nitrofenil)-3-pirazin-2-il uree (edinjenje 159, Primer 3) (16,9 g, 55 mmol) u dimetilformamidu (DMF, 320 ml) mešan je u atmosferi H2u prisustvu katalizatora paladijuma na ugljeniku (Pd/C) (1,6 g, 10% Pd) na temperaturi 80 °C tokom 12 časova. Drugi deo katalizatora je dodat (1,6 g), a mešanje je nastavljeno tokom dodatnih 8 časova na istoj temperaturi. Rastvor je filtriran kroz jastuče celita korišćenjem dodatnih 200 ml DMF. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je sprašen u metanolu (100 ml). Čvrsta supstanca je prikupljena, mešana u ključajućem metanolu, a prisutne čvrste supstance su isfiltrirane i odbačene. Filtrat je ohlađen do temperature od 4 °C i tako držan tokom noći. Čvrste supstance (1,4 g) su uklonjene filtracijom, a filtrat je koncentrovan u vakuumu čime je dobijena mrka čvrsta supstanca (2,6 g). Sirovi proizvod je sprašen sa THF (200 ml), prikupljen filtracijom i isušen u vakuumu, čime je dobijen proizvod u vidu mrke čvrste supstance (1,85 g, 13%).<*>H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 5: 10.10 (s, IH), 9.94 (br s, IH), 8.89 (s, IH), 8.32 (s, IH), 8.22 (s, IH), 7.58 (s, IH), 7.75 (d, IH), 6.21 (d, IH), 4.70 (s, 2H), 3.76 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, d6-DMSO) 5: 151.4, 149.4, 142.6, 140.9, 139.8, 137.2, 135.2, 128.7, 112.8, 107.7, 106.0,56.8.
Primer 5
Dobijanje Jedinjenja 48
Rastvor l-(5-amino-2-metoksifenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 14, Primer 4) (260 mg, 1 mmol) i anhidrida poluamida ćilibarne kiseline (131 mg, 1,3 mmol) u suvom piridinu (10 ml) je mešan tokom 16 časova na sobnoj temperaturi. Nastala čvrsta supstanca je prikupljena filtracijom, sprašena u hloroformu i isušena u vakuumu, čime je dobijen sivkasti proizvod (175 mg, 50%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 10.15 (s, IH), 10.05 (s, IH), 9.87
(s, IH), 8.90 (s, IH), 8.33 (s, 2H), 8.24 (s, IH), 7.42 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, IH), 6.96 (d, J = 8.8 Hz, IH), 3.87 (s, 3H), 2.54 (br s, 4H).
Primer 6
Dobijanje Jedinjenja 36
Rastvor l-(5-amino-metoksifenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 14, Primer 4) (105 mg, 0,4 mmol) u suvom piridinu (2 ml) na temperaturi od 0 °C je tretiran rastvorom N-trifluoroacetil-(S)-prolil hlorida (0,1 M u dihlorometanu, 4,5 ml, 0,45 mmol), pa je reakciona smeša mešana tokom 2 časa na sobnoj temperaturi. Reakcija je obustavljena dodavanjem 1 N HCL (50 ml), a reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani sa 1 N HC1 (2 x 20 ml), vodom (20 ml), slanom vodom (20 ml), isušeni prevođenjem preko natrijum sulfata i koncentrovani u vakuumu do čvreste supstance oker boje (60 mg). Rekristalizacijom iz acetonitrila je dobijen konačni proizvod (30 mg, 17%). 'HNMR (300 MHz, d5-DMSO) 5: (10.16 - 10.06, m, 3H), 8.90 (s, IH), 8.36 - 8.30 (m, 2H), 8.25 (d, J = 2.6 Hz, IH), 7.42 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, IH), 6.98 (d, J = 8.8 Hz, IH), 4.57 (dd, J = 8.5, 4.4 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3H), 3.73 (t, J = 6.5 Hz, IH), 2.27 - 2.21 (m, IH), 2.06 - 1.90 (m, 3H). LRMS (ESI, pozitivan) m/e 453.1 (M + 1).
Primer7
DobijanjeJedinjenja 16
[4-metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)fenil]-amid (S)-pirolidin-2-karboksilne kiseline
Suspenzija [4-metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)fenil]-amida (S)-l -(2,2,2-trifluoroetanoil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (Jedinjenje 36, Primer 6) (22 mg, 0,05 mmol) u smeši metanola (MeOH, 5 ml) i vode (oko 0,25 ml) je tretirana sa KOH (100 mg, u velikom višku). Za deset minuta, svi sastojci su se rastvorili. Reakciona smeša je potom tretirana sa vodom (20 ml) i ekstrahovana je sa etil acetatom (2 * 20 ml). Organski slojevi su kombinovani i isprani vodom (10 ml) i slanom vodom (10 ml), isušeni sa natrijum sulfatom i koncentrovani do mrke čvrste supstance (13 mg, 75%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 10.13 (s, IH), 10.03 (s, IH), 9.85 (s, IH), 8.90 (s, IH), 8.38-8.28 (m, 2H), 8.25 (d, J = 2.6 Hz, IH), 7.41 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz), 6.98 (d, J = 8.8 Hz, IH), 3.88 (s, 3H, 3.69 (dd, J = 8.7, 5.6 Hz, IH), 2.94 - 2.87 (m, 2H), 2.10 - 1.97 (m, IH), 1.81 - 1.60 (m, 3H). LRMS (ESI, pozitivan) m/e 357.1 (M + 1).
Primer 8
Dobijanje Jedinjenja 42
Rastvor l-(5-amino-2-metoksifenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 14, Primer 4) (260 mg, 1 mmol) u suvom piridinu (15 ml) je tretiran sa metansulfonil hloridom (0,08 ml, 1 mmol), pa je reakciona smeša mešana tokom 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakcuiona smeša je zatim koncentrovana u vakuumu, a čvrsti ostatatak je sprašen u etanolu, prikupljen filtracijom i isušen u vakuumu, čime je dobijen proizvod (205 mg, 61%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 10.16 (s, IH), 10.07 (s, IH), 9.40 (s, IH), 8.92 (s, IH), 8.35 (s, 1 H), 8.27 (s, IH), 8.19 (d, J = 2.2 Hz, IH), 7.04 (d, J = 8.8 Hz, IH), 6.91 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, IH), 3.91 (s, 3H), 2.91 (s, 3H).
Primer 9
Dobijanje Jedinjenja 65
Smeša 2-metoksi-4-nitrofenil izocijanata (15.0 g, 77 mmol) i aminopirazina (7,35 g, 77 mmol) u THF (600 ml) je mešana na temperaturi refluksa tokom 24 časa. Proizvod je precipitiran iz ohlađene reakcione smeše i prikupljen filtracijom, ispran etil acetatom, sprašen u vrućem etanolu i isušen u vakuumu (16,3 g, 73%).<]>H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 10.50 (br s, IH), 10.42 (s, IH), 8.94 (s, IH), 8.48 (d, IH), 8.39 (s, IH), 8.32 (d, IH), 7.95 (dd, J = 9.1, 2.4 Hz, IH), 7.84 (d, J = 2.4 Hz, IH), 4.08 (s, 3H).
Primer 10
Dobijanje Jedinjenja 32
Rastvor (2-metoksi-4-nitrofenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 65, Primer 9) (7,9 g, 27 mmol) u DMF (300 ml) je mešan u atmosferi H2u prisustvu katalizatora Pd/C (1,6 g, 10% Pd) na temperaturi od 110 °C tokom 4 časa. Smeša je filtrirana krozjastuče celita korišćenjem dodatnih 200 ml DMF. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, a ostatak je rekristalizovan iz etanola (sa korakom vruće filtracije), čime je dobijen svetio zeleni proizvod (2,9 g, 41%).<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 9.83 (s, IH), 9.50 (s, IH), 8.86 (s, IH), 8.28 (s, IH), 8.19 (d, J = 2.5 Hz, IH), 7.64 (d, J = 8.5 Hz, IH), 6.31 (d, J = 2.0 Hz, IH), 6.13 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, IH), 4.92 (s, 2H), 3.79 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, d6-DMSO) 8: 151.6, 150.0, 149.6, 145.2, 140.9, 136.9, 135.1, 121.6, 116.8, 105.5, 98.0, 55.4.
Primer 11
Dobijanje Jedinjenja 3
Rastvor N,N-dimetilglicina (124 mg, 1,2 mmol) i trietilamina (0,33 ml, 2,4 mmol) u suvom acetonitrilu (5 ml) na temperaturi od 0 °C tretiran je ukapavanjem izobutil hloroformata (0,16 ml, 1,2 mmol) i mešan tokom 15 minuta. Ova smeša je tretirana ukapavanjem rastvora l-(4-amino-2-metoksifenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 32, Primer 10) (100 mg, 0,4 mmol) u dimetil sulfoksidu (DMSO, 1 ml). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 časa, a zatim je reakcija prekinuta dodavanjem vode (20 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2x15 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (10 ml) i slanom vodom (10 ml), isušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je rastvoren u DMSO (1 ml) i prečišćen korišćenjem HPLC (YMC 20 * 50 mm Cl 8 CombiPrep kolona, 20 ml/min, 2-50% CHsCN/voda tokom 6 minuta, svi rastvarači sadrže 0,05%) trifluorosirćetnu kiselinu (TFA), 0,35 ml injekcije, detektor na 254 nm, dužina staze detektora 0,2 mm). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu, čime je dobijen proizvod kao so trifluorosirćetne kiseline (24 mg, 17%).
Primer 12
Dobijanje Jedinjenja 8
Rastvor l-(4-amino-2-metoksifenil)-3-pirazin-2-il uree (Jedinjenje 32, Primer 10) (259 mg, 1 mmol) u piridinu (3 ml) na temperaturi od 0 °C tretiran je hloroacetil hloridom (0,29 ml, 3 mmol). Suspenzija je zagrevana na temperaturi od 80 °C sve dok veći deo čvrstih supstanci nije rastvoren, a potom je reakciona smeša ohlađena do sobne temperature, a proizvod je precipitiran etrom (10 ml). Ovaj sirovi proizvod je korišćen bez prečišćavanja za dalje reakcije, ali je deo (30 mg) prečišćen korišćenjem HPLC (Luna 10 x 250 mm Cl8 kolona, 4,7 ml/min, 2-80% CH3CN/voda tokom 15 min, svi rastvarači sadrže 0,05% trifluorosirćetnu kiselinu (TFA), 0,25 ml injekcije, detektor na 254 nm, dužina staze detektora 0,3 mm). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu, čime je dobijen proizvod.<*>H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 5: 10.00 (s, 2H), 9.94 (s, IH), 8.87 (s, IH), 8.32 (dd, J = 2.5, 1.5 Hz, IH), 8.23 (d, J = 2.6 Hz, IH), 8.05 (d, J = 8.7 Hz, IH), 7.49 (d, J = 2.1 Hz, IH), 7.07 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, IH), 3.90 - 3.80 (m, 5H), 2.80 (t, J = 6.2 Hz, 2H). LRMS (ESI, pozitivan) m/e 350, 352 (M + 1).
Primer 13
Dobijanje Jedinjenja 4
Smeša 3-hloro-N-[3-metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)fenil]-propionamida (Jedinjenje 8, Primer 12) i N-cikloheksil-metilamina (0,5 ml, u velikom višku) je zagrevana na temperaturi od 80 °C tokom 1 časa, a zatim ohlađena do sobne temperature. Sirovi proizvod je precipitiran iz etra (10 ml), prikupljen filtracijom i rastvoren u DMSO (0,5 ml). Jednake količine (oko 0,25 ml) su prečišćene korišćenjem HPLC (Luna 10 * 250 mm C18 kolona, 4,7 ml/min, 2-80% CHsCN/voda tokom 15 min, svi rastvarači sadrže 0,05% trifluorosirćetne kiseline (TFA), detektor na 254 nm, dužina staze detektora 0,3 mm). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu, čime je dobijen proizvod u vidu TFA soli (4,7 mg, 11%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 8: 10.18 (s, IH), 10.07 (s, IH), 9.98 (s, IH), 9.04 (brs, IH), 8.88 (s, IH), 8.33 (dd, J = 2.6, 1.5 Hz, IH), 8.24 (d, J = 2.6 Hz, IH), 8.08 (d, J = 8.7 Hz, IH), 7.43 (d, J = 2.1 Hz, IH), 7.09 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, IH), 3.90 - 3.83 (m, IH), 3.30 - 3.16 (m, 2H), 2.81 (t, J = 6.7 Hz, IH), 2.74 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.03-1.89 (m, 2H), 1.89 - 1.75 (m, 2H), 1.70 - 1.53 (m, IH), 1.46-1.10 (m, 5H). LRMS (ESU, pozitivan) m/e 427.2 (M + 1).
Primer 14
Dobijanje Jedinjenja 2
Smeša 3-hloro-N-[3-metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)fenil]-propionamid (Jedinjenje 8, Primer 12) i ciklopentilamin (0,5 ml, u velikom višku) zagrevani su na temperaturi od 80 °C tokom 1 časa, a potom su ohlađeni do sobne temperature. Proizvod je precipitiran iz etra (10 ml), prikupljen filtracijom, ispran etrom i isušen u vakuumu (24 mg, 60%). 'H NMR (300 MHz, d6-DMSO) 6: 10.14 (s, IH), 10.03 (s, IH), 9.93 (s, IH), 8.87 (d, J = 1.1 Hz, IH), 8.31 (dd. J = 2.6, 1.5 Hz, IH), 8.23 (d, J = 2.7 Hz, IH), 8.03 (d, J = 8.7 Hz, IH), 7.47 (d, J - 2.1 Hz, IH), 7.04 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, IH), 3.87 (s, 3H), 3.05 (kvintet, J = 6.3 Hz, IH), 2.80 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 1.80 - 1.67 (m, 2H), 1.65 - 1.56 (m, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 2H), 1.37 - 1.27 (m, 2H). LRMS (ESI, pozitivan) m/e 399.1 (M + 1).
Jedini enje 166:
Korak 1: Metil-3-amino-4-metoksi benzoat. U ohlađeni (temperatura oko 0 °C), mešani rastvor 4-amino-3-metoksibenzojeve kiseline (5,0 g, 30 mmol) u suvom metanolu (150 ml) polako je dodavan trimetilsilildiazometan (60 ml 2M rastvora u heksanima, 120 mmol) tokom 1 časa. Nakon mešanja tokom 4 časa, reakciona smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom, rastvorena u etil acetatu (200 ml) isprana sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata i slane vode, a zatim osušena (MgSCU), filtrirana i koncentrovana u vakuumu, čime je dobijen željeni estar u vidu sivkaste čvrste supstance (prinos 94%).
Korak 2: Meti estar 4-metoksi-3-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-benzojeve kiseline. U mešani, hladni (oko 0 °C) rastvor metil-3-amino-4-metoksi benzoata (5,0 g, 27,6 mmol) u suvom dihlorometanu (90 ml) dodat je piridin (2,34 ml, 29 mmol), a zatim i 4-nitrofenil hloroformat (5,8 g, 29 mmol) u atmosferi azota. Nakon mešanja tokom 1 časa, reakciona smeša je razblažena sa 200 ml dihlorometana i isprana sa 2 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (2 x 200 ml), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 x 200 ml), a zatim je isušena (MgSCu) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan do bele čvrste supstance koja odgovara željenom karbamatu (prinos 98 %).
Korak 3: Metil estar 3-metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 4-metoksi-3-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-benzojeve kiseline (10,64 g, 30,7 mmol) u suvom N-metil pirolidinonu (31 ml) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je aminopirazin (2,92 g, 30,7 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 85 °C. Nakon 6 časova, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sprašena u etil acetatu (200 ml). Nastali precipitat je uklonjen filtracijom, ispran etil acetatom i isušen, čime je dobijena željena urea u vidu mrke Čvrste supstance (prinos 66%).
Korak 4: 3-Metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeva kiselina. U mešanu suspenziju metil estra 3-metoksi-4-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline (6,07 g, 20 mmol) u 200 ml smeše 3:1 MeOH i vode na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, dodat je Iitijum hidroksid monohidrat (8,4 g, 200 mmol), pa je reakciona smeša zagrevana na temperaturi od 65 °C tokom noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, a najveći deo metanola je uklonjen rotacionom evaporizacijom. Preostala suspenzija je neutralizovana do pH vrednosti od oko 4 primenom koncentrovane HC1. Nastali precipitat je izolovan filtracijom i ispiranjem vodom, a zatim isušen u vakuumu, čime je dobijena željena kiselina u vidu bele čvrste supstance (5,34 g, 93%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.89 (br s, IH), 8.34 (s, IH), 8.24 (s, IH), 8.16 (d, IH), 7.56 (s, IH), 7.50 (d, IH), 3.91(s, 3H)
Jedinjenje 167:
U mešanu suspenziju Jedinjenja lxx (32 mg, 0,11 mmol) u 1 ml NMP na sobnoj temperaturi u zatvorenom reakcionom sudu dodat je HBTU (0,4 M u NMP, 300 u.1, 0,12 mmol), pa je suspenzija mešana tokom 15 minuta. N-Butil amin (0,4 M u NMP, 300 ul, 0,12 mmol) je zatim dodat, a onda i DIEA (38 pl, 0,22 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći, a zatim je razblažena sa EtOAc (20 ml) i sa 10% Na2CC>3 (20 ml) i brzo mešana tokom 5 minuta. Dobijeni precipitat je zatim izolovan filtracijom i ispran vodom i sa EtOAc. Nakon sušenja, amid je izolovan u vidu sivkaste čvrste supstance (12,2 mg, 32%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.92 (br s, IH), 8.37 (br s, 2H), 8.23 (d, IH), 8.21 (s, IH). 7.53 (s. IH), 7.47 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.23 (q, 2H), 1.52 (m, 2H), 1.35 (m, 2H), 0.92 (t, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 344.1 (M+l).
Jedinjenje 168:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem benzil amina (prinos 39%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.96 (t, IH), 8.91 (s, IH), 8.56 (s, IH), 8.50 (s, IH), 8.44 (m, IH), 7.58 (s, IH), 7.56 (d, IH), 7.35 (m, 4H), 7.23 (m, IH), 4.46 (d, 2H), 3.97, (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 378.1 (M+l).
Jedinjenje 169:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem fenetil amina (prinos 49%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.92 (br s, IH), 8.51 (t, IH), 8.36 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.22 (d, IH), 7.52 (s, IH), 7.45 (d, IH), 7.36 - 7.20 (m, 5H), 3.98 (s, 3H), 3.46 (m, 2H), 2.84 (dd, 2H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 392.1 (M+l).
Jedini enje 170:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem fenpropil amina (prinos 71%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.92 (br s, IH), 8.40 (t, IH), 8.36 (br s, IH), 8.25 (d, IH), 8.23 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.46 (d, IH), 7.32 - 7.18 (m, 5H), 3.97 (s, 3H), 3.25 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 1.82 (m, 2H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 406.1 (M+l).
Jedinjenje 171:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 2-benzensulfonil-etilamina (prinos 57%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.90 (br s, IH), 8.43 (br m, IH), 8.35 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.22 (d, IH), 7.96 (s, IH), 7.93 (s, IH), 7.72 (m, IH), 7.63 (m, 2H), 7.38 (s, IH), 7.33 (d, IH), 3.95 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 3.55 (m, 2H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 456.0 (M+l).
Jedinjenje 172:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 4-jodo benzil amina (prinos 66%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.97 (t, IH), 8.90 (s, IH), 8.36 (s, IH), 8.26 (d, IH), 8.24 (s, IH), 7.69 (d, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.16 (d, 2H), 4.41 (d, 2H), 3.97 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 504.0 (M+l).
Jedinjenje 173:
Dobijeno prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 2-piridin-2-il-etilamina (prinos 57%). 1 H-NMR (400 MHz. d6-DMSO) 5 8.90 (br s, IH), 8.51 (br m, 2H), 8.36 (s, IH), 8.22 (m, 2H), 7.71 (t, IH), 7.48 (s, IH), 7.43 (d, IH), 7.26 (d, IH), 7.21 (m, IH), 3.97 (s, 3H), 3.60 (m, 2H), 3.00 (dd, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 393.3 (M+l).
Jedinjenje 174:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 2-piridin-4-il-etilamina (prinos 45%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.93 (s, IH), 8.63 (d, 2H), 8.51 (t, IH), 8.37 (s, IH), 8.27 (s, IH), 8.24 (d, IH), 7.60 (d, 2H), 7.43 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.01 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 393.1 (M+l).
Jedinjenje 175:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem C-(1H-benzoimidazol-2-il)-metilamina (prinos 53%). 'H-NMR (400 MHz, oVDMSO) 8 8.90 (s, IH), 8.35 (s, IH), 8.32 (d, IH), 8.22 (s, IH), 7.61 (m, 3H), 7.47 (m, 2H), 7.12 (m, 2H), 4.66 (s, 2H), 3.98 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 418.2 (M+l).
Jedinjenje 176:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem triptamina (prinos 74%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.92 (s, IH), 8.55 (br t, IH), 8.26 (s, IH), 8.24 (d, IH), 8.23 (s, IH), 7.60 (d, IH), 7.53 (s, IH), 7.50 (d, IH), 7.26 (d, IH), 7.19 (s, IH), 7.05 (dd, IH), 6.98 (dd, IH), 3.97 (s, 3H), 3.56 (m, 2H), 2.96 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 431.2 (M+l).
Jedinjenje 177:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem Nl-metil-Nl-fenil-propan-l,3-diamina (prinos 68%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.89 (s, IH), 8.41 (br s, IH), 8.36 (s, IH), 8.23 (d, IH), 8.22 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.49 (d, IH), 7.16 (m, 2H), 6.70 (d, 2H), 6.59 (dd, IH), 3.96 (s, 3H), 3.38 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 1.77 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 435.2 (M+l).
Jedinjenje 178:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 3-amino-l-benzil pirolidina (prinos 62%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.88 (br s, IH), 8.36 (br m, 2H), 8.24 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.51 (s, IH), 7.50 (d, IH), 7.32 (m, 4H), 7.22 (m, IH), 4.39 (br m, IH), 3.96 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.79 (m, IH), 2.62 (m, IH), 2.40 (m, IH), 2.16 (m, IH), 1.81 (m. 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 447.2 (M+l).
Jedinjenje 179:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 3-(R)-amino-l-benzil pirolidina (prinos 57%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.83 (br s, IH), 8.36 - 8.24 (m, 3H), 8.15 (m, IH), 7.48 (m, 2H), 7.32 (m, 4H), 7.22 (m, IH), 4.37 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.78 (m, IH), 2.63 (m, IH), 2.41 (m, IH), 2.17 (m, IH), 1.80 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 447.1 (M+l).
Jedinjenje 180:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 3-(S)-amino-l-benzil pirolidina (prinos 57%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.85 (s, IH), 8.34 (br s, IH), 8.30 (s. IH), 8.25 (d, IH). 8.19 (s, IH), 7.50 (m, 2H), 7.32 (m, 4H). 7.22 (m, IH), 4.39 (m, IH). 3.97 (s, 3H). 3.59 (s, 2H), 2.79 (m, IH), 2.62 (m, IH), 2.41 (m, IH), 2.16 (m, IH), 1.81 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 447.1 (M+l).
Jedinjenje 181:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem N,N,N'-trimetil-etan-U-diamina (prinos 57%). 1 H-NMR (400 MHz, D20) 8 8.17 (s, IH), 8.05 (s, IH), 7.94 (s, IH), 7.76 (d, IH), 6.92 (m, 2H), 3.79 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.36 (m, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.88 (s, 6H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.2 (M+l).
Jedinjenje 182:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem Nl-metil-propan-1,3-diamina (prinos 25%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.93 (s, IH), 8.38 - 8.25 (m, 4H), 7.59 (d, IH), 7.52 (m, IH), 3.98 (s, 3H), 3.92 (m, 2H), 2.92, (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 1.82 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 359.1 (M+l).
Jedinjenje 183:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem N,N-dimetil propildiamina (prinos 81%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.93 (s, IH), 8.56 (t, IH), 8.37 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.23 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.50 (d, IH), 4.10 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.35 (s, 6H), 3.05 (m, 2H), 1.84 (m. 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.1 (M+l).
Jedinjenje 184:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem N,N,N'-trimetil-propildiamina (prinos 88%).<!>H-NMR (400 MHz, CDCI3/CD3OD) 8 8.60 (s, IH), 8.33 (d, IH), 8.23 (s, IH), 8.19 (s, IH), 7.01 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 2.78 (m, 2H), 2.59 (s, 6H), 2.22 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 387.1 (M+l).
Jedinjenje 185:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 3-morfolin-4-il-propilamina (prinos 53%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.92 (s, IH), 8.57 (t, IH), 8.36 (s, IH), 8.28 (d, IH), 8.24 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.50 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 3.61 (m, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.32 (m, 4H), 3.10 (m, 4H), 1.90 (m,2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 415.1 (M+l).
Jedinjenje 186:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 3-(4-metil-piperazin-l-il)-propilamina (prinos 63%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.92 (s, IH), 8.41 (m, IH), 8.36 (s, IH), 8.24 (m, 2H), 7.52 (s, IH), 7.49 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.31 (m, 11H), 2.70 (m, 2H), 2.41 (m, 2H), 1.72 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 428.1 (M+l).
Jedinjenje 187:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 167 korišćenjem 2-N,N,N-trimetilamonijum etilamina (prinos 46%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.92 (s, IH), 8.77 (m, IH), 8.36 (s, IH), 8.30 (d, IH), 8.24 (s. IH), 7.53 (s, IH), 7.51 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.70 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.15 (s, 9H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.1 (M+).
Jedinjenje 188:
Korak 1: Metil estar 4-metoksi-3-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-benzojeve kiseline. U mešani, hladni (0 °C) rastvor metil-3-amino-4-metoksi benzoata (5,0 g, 27,6 mmol) u metilen hloridu (100 ml) dodat je piridin (2,34 ml, 29 mmol), a zatim i 4-nitrofenil hloroformat (5,8 g, 29 mmol). Nakon mešanja tokom 8 časova, reakciona smeša je razblažena metilen hloridom (100 ml), isprana sa 1 N hlorovodoničnom kiselinom (2 * 125 ml), 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 x 125 ml), slanom vodom (1 * 125 ml), a zatim isušena (MgSCU) i filtrirana. Filtrirani materijal je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran etil acetatom (100 ml), a zatim heksanim (700 ml). Dobijeni precipitat je filtriran, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 80%).
Korak 2: Metil estar 4-metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline. U mešani rastvor karbamata (1,0 g, 2,9 mmol) u N-metil pirolidinonu (5 ml) dodat je amino pirazin (285 mg, 3,0 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 85 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i razblažena je etil acetatom (50 ml) i vodom (50 ml). Nastali precipitat je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 55%).
Korak 3: 4-Metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeva kiselina. U mešani rastvor metil estra 4-metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline (1,0 g, 3,3 mmol) u metanolu (25 ml), dodat je Iitijum hidroksid (5 ml 2 M vodenog rastvora). Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 60 °C i mešana tokom 12 časova. Ostavljena je da se ohladi do sobne temperature a pH vrednost je podešena na 5,5 dodavanjem hlorovodonične kiseline (1N). Dobijeni precipitat je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 58%).
Jedinjenje 189:
U mešani rastvor 4-metoksi-3-(3-pirazin-2-il-ureido)-benzojeve kiseline (32 mg, 0,11 mmol) u N-metil pirolidinonu (1 ml) dodati su 0-benzotrazol-l-il-N,N,N',N'-tetrametil-uronijum heksafluorofosfat (HBTU; 45 mg, 0,12 mmol), butil amin (12 u.1, 0,12 mmol) i diizopropiletilamin (35 u.1, 0,20 mmol). reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 časova. Zatim je razblažena etil acetatom (20 ml) i 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (20 ml) i mešana tokom 5 minuta. Dobijeni precipitat je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (49%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.90 (s, IH), 8.63 (s, IH), 8.35 (s, IH), 8.23 (m, IH), 8.21 (s, IH), 7.52 (d, IH), 7.06 (d, IH), 3.95 (s, 3H), 3.22 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.33 (m, 2H), 0.90 (t, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 344.1 (M+l).
Jedinjenje 190:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem benzilamina (prinos 70%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.92 (s, IH), 8.90 (br s, IH), 8.73 (s, IH), 8.33 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.60 (d, IH), 7.33 (m, 4H), 7.23 (m, IH), 7.12 (d, IH), 4.44 (s, 2H), 3.96 (s, 3H). LRMS (apci pozitivan) m/e 378.1 (M+l).
Jedinjenje 191:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem fenetil amina (prinos 68%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.92 (s, IH), 8.64 (s, IH), 8.40 (m, IH), 8.35 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.52 (d, IH), 7.33 - 7.18 (m, 5H), 7.08 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 3.44 (m, 2H), 2.82 (m, 2H). LRMS (apci pozitivan) m/e 392.1 (M+l).
Jedinjenje 192:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem fenpropil amina (prinos 65%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.92 (s, IH), 8.64 (s, IH), 8.36 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.56 (d, IH), 7.32 - 7.22 (m, 5H), 7.18 (m, IH), 7.10 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.24 (m, 2H), 2.62 (dd, 2H), 1.82 (m, 2H). LRMS (apci pozitivan) m/e 406.1 (M+l).
Jedini enje 193:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 2-benzensulfonil etilamina (prinos 42%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.90 (s, IH), 8.58 (s, IH), 8.38 (br s, IH), 8.32 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.94 (d, 2H), 7.74 (m, IH), 7.65 (d, 2H), 7.38 (d, IH), 7.05 (d, IH), 3.95 (s, 3H), 3.57 (m, 2H), 3.51 (m, 2H). LRMS (apci pozitivan) m/e 456.0 (M+l).
Jedinjenje 194:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 2-piridin-2-il-etilamina (prinos 16%). 'H-NMR (400 MHz, d5-DMSO) 8 8.90 (s, IH), 8.64 (s, IH), 8.52 (d, IH), 8.41 (m, IH), 8.32 (s, IH), 8.21 (s, IH), 7.72 (m, IH), 7.50 (d, IH), 7.28 (d, IH), 7.22 (m, IH), 7.08 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 2.98 (m, 2H). LRMS (esi pozitivan) m/e 415.2 (M+l).
Jedinjenje 195:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 2-piridin-4-il-etilamina (prinos 41%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.91 (s, IH), 8.63 (s, IH), 8.46 (d, 2H), 8.40 (m, IH), 8.35 (s, IH), 8.24 (s, IH), 7.47 (d, IH), 7.26 (d, 2H), 7.08 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 3.50 (m, 2H), 2.84 (m, 2H). LRMS (esi pozitivan) m/e 415.2 (M+l).
Jedinjenje 196:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem C-(1H-benzoimidazol-2-il)-metilamina (prinos 26%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.99 (t, IH), 8.91 (s, IH), 8.77 (s, IH), 8.36 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.66 (d, IH), 7.56 (d, IH), 7.44 (d, IH), 7.15 (m, 3H), 4.65 (d, 2H), 3.97 (s, 3H). LRMS (esi pozitivan) m/e 418,1 (M+l).
Jedini enie 197:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem triptamina (prinos 51%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.92 (s, IH), 8.69 (s, IH), 8.43 (t, IH), 8.33 (s, IH), 8.24 (s, IH), 7.60 (d, IH), 7.56 (d, IH), 7.35 (d, IH), 7.17 (s, IH), 7.11 (d, IH), 7.07 (m, IH), 6.97 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 3.54 (m, 2H), 2.95 (m, 2H). LRMS'(esi pozitivan) m/e 431.1 (M+l).
Jedinjenje 198:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem N-metil-N-fenil propildiamina (prinos 81%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.92 (s, IH), 8.64 (s, IH), 8.37 (m, IH), 8.35 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.55 (d, IH). 7.14 (m, 3H), 6.70 (d, 2H), 6.58 (t, IH), 3.96 (s, 3H), 3.37 (m, 2H), 3.25 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 1.77 (m, 2H). LRMS (esi pozitivan) m/e 435.2 (M+l).
Jedinjenje 199:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 3-amino-l-benzil pirolidina (prinos 48%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.90 (s, IH), 8.62 (s, IH), 8.36 (s, IH), 8.30 (d, IH), 8.22 (s, IH), 7.56 (d, IH), 7.32 (m, 4H), 7.22 (m, IH), 7.15 (d, IH), 4.37 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 2.79 (m, IH), 2.60 (m, IH), 2.39 (m, IH), 2.14 (m, IH), 1.80 (m, 2H). LRMS (esi pozitivan) m/e 447.2 (M+l).
Jedinjenje 200:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem N,N,N'-trimetil etildiamina (prinos 93%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 9.39 (br s, IH), 8.91 (s, IH), 8.35 (s, IH), 8.33 (d, IH), 8.23 (s, IH), 7.16 - 7.09 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.76 (m, 2H), 3.37 (m, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.85 (br s, 6H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.2 (M+l).
Jedinjenje 201:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem N-metil propildiamina (prinos 15%). 'H-NMR (400 MHz, D20) 5 7.98 (m, 2H), 7.91 (s, IH), 7.82 (s, IH), 7.17 (d, IH), 6.73 (d, IH), 3.73 (s, 3H), 3.29 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.88 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 359.2 (M+l).
Jedinjenje 202:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem N,N-dimetil propildiamina (prinos 51%). 'H-NMR (400 MHz, D20) 5 7.98 (s, IH), 7.96 (s, 2H), 7.81 (s, IH), 7.16 (d, IH), 6.72 (d, IH), 3.73 (s, 3H), 3.29 (m, 2H), 3.09 (m, 2H), 2.80 (s, 6H), 1.93 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.2 (M+l).
Jedinjenje 203:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem N,N,N'-trimetil propildiamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, D20) 5 8.37 (s, IH), 8.19 (s, IH), 8.04 (s, IH), 7.80 (d, IH), 7.13 (m, IH), 7.01 (m, IH), 3.82 (s, 3H), 3.51 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.80 (s, 6H), 2.01 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 387.1 (M+l).
Jedinjenje 204:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 3-(4-metil-piperazin-l-il)-propilamina (prinos 57%). 'H-NMR (400 MHz, D20) 6 8.18 (s, IH), 8.06 (s, IH), 8.04 (s, IH), 7.96 (s, IH), 7.32 (d, IH), 6.85 (d;IH), 3.79 (s, 3H), 3.48 (br s, 8H), 3.36 (m, 2H), 3.17 (m, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.96 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 428.2 (M+l).
Jedini enje 205:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 2-trimetilamonijum etil amina (prinos 63%). 'H-NMR (400 MHz, D20) 6 8.17 (s, IH), 8.05 (s, IH), 8.03 (s, IH), 7.93 (s, IH), 7.32 (d, IH), 6.84 (d, IH), 3.80 (s, 3H), 3.76 (m, 2H), 3.44 (m, 2H), 3.11 (s, 9H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 373.0 (M+).
Jedinjenje 206:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 189 korišćenjem 3-morfolin-4-il-propilamina (prinos 69%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.91 (s, IH), 8.63 (s, IH), 8.36 (s, IH), 8.35 (m, IH), 8.23 (s, IH), 7.54 (d, IH), 7.10 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 3.57 (m, 4H), 3.26 (m, 2H), 2.34 (m, 4H), 2.32 (m, 2H), 1.66 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 415.2 (M+l).
Jedinjenje 207:
Korak 1: Terc-butil estar (5-metil-pirazin-2-il)-karbaminske kiseline. U mešani rastvor 5-metil-pirazin karboksilne kiseline (13,8 g, 100 mmol) u 300 ml toluena na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je trietil amin (14 ml, 100 mmol), a nakon toga i difenil fosforil azid (21,6 ml, 100 mmol). Nakon 30 minuta, na sobnoj temperaturi, dodat je 2-metil-2-propanol (19 ml, 200 mmol), a rastvor je potopljen u uljno kupatilo na temperaturi od 90 °C. Nakon 2 časa, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena do zapremine od 600 ml sa EtOAc i isprana sa 10% rastvorom Na2C03(3*60 ml) i sa zasićenim rastvorom NaCl (1 * 600 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do žute čvrste supstance (17,5 g, 83%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 9.16 (s, IH), 8.05 (s, IH), 7.56 (br s, IH), 2.50 (s, 3H), 1.55 (s, 9H).
Korak 2: 5-Metil-2-aminopirazin. U mešani rastvor terc-butil estra (5-metil-pirazin-2-il)-karbaminske kiseline (2,1 g, 10 mmol) u 30 ml CH2CI2na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodata je trifluorosirćetna kiselina (30 ml). Rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature tokom noći. Rastvor je rotaciono evaporisan da bi se uklsonila TFA, a ostatak je ponovo rastvoren u 200 ml CH2CI2i mešan zajedno sa 100 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata. Organske materije su izolovane, a vodeni rastvor je ekstrahovan sa CH2Cl2(3*100 ml). Organski slojevi su kombinovani, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani čime je dobijena narandžasta čvrsta supstanca (1 g, 92%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.46 (s, IH), 7.70 (s, IH), 2.49 (s, 3H).
Korak 3: Metil estar 3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 3-metoksi-4-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-benzojeve kiseline (11,7 g, 33,8 mmol) u 34 ml NMP na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je 5-metil-2-aminopirazin (3,69 g, 33,8 mmol), pa je reakciona smeša potopljena u uljno kupatilo na temperaturi od 85 °C. Nakon 6 časova reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i nastao je precipitat. Dodat je EtOAc (200 ml), a precipitat je izolovan filtracijom (4,7 g, 44%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.79 (br s, IH), 8.36 (d, IH), 8.23 (s, IH), 7.60 (d, IH), 7.52 (s. IH), 3.98 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.42 (s, 3H).
Korak 4: 3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeva kiselina. U mešanu suspenziju metil estra 3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline (7,15 g, 22,6 mmol) u smeši metanola i vode u odnosu 3:1 (226 ml) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, dodat je Iitijum hidroksid monohodrat (9,5 g, 22,6 mmol) u vidu čvrste supstance, pa je smeša zagrejana do temperature od 65 °C. Nakon dostizanja navedene temperature, suspenzija je postepeno postala svetio žuti rastvor. Nakon oko 4 časa nastao je precipitat, ali je reakcija nastavila da se odvija tokom noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, MeOH je uklonjen korišćenjem rotovapa, a vodena suspenzija je razblažena sa 100 ml vode i neutralizovana do pH vrednosti od 5 primenom koncentrovane HC1. Kako se pH vrednost rastvora približavala vrednosti od 5, suspenzija je promenila boju iz žute u belu. Nakon toga, suspenzija je filtrirana kroz papir na velikom keramičkom levku. Filtracija se odvijala veoma sporo, tokom nekoliko časova. Filtrat je dvaput ispran vodom. Kada je najveći deo vode uklonjen, ostatak je isušen pod visokim vakuumom u desikatoru tokom noći, čime je dobijena slobodna kiselina u vidu bele čvrste supstance (6 g, 88%). 1 H-NMR (400 MHz, de-DMSO) 8 8.79 (br s, IH), 8.36 (d, IH), 8.22 (s, IH), 7.57 (d, IH), 7.51 (s, IH), 3.97 (s, 3H), 2.42 (s, 3H).
Jedinjenje 208:
U mešani rastvor 3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline (30 mg, 0,1 mmol) u 1 ml NMP na sobnoj temperaturi u zatvorenom reakcionom sudu dodat je HBTU (42 mg, 0,11 mmol). Suspenzija je mešana tokom 15 minuta, a zatim je tretirana sa 2-etilaminopiridinom (13,2 u.1, 0,11 mmol), a potom i Hunigovom bazom (35 u.1, 0,2 mmol). Nakon mešanja tokom noći, NMP je uklonjen prenosom iz balona u balon, na temperaturi od 70 °C u visokom vakuumu, a ostatak je mešan zajedno sa smešom CH2CI2(10 ml) i 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (10 ml) do potpunog rastvaranja. Organske materije su izolovane, isušene (magnezijum sulfat), filtrirane i koncentrovane. Ostatak je sprašen sa EtOAc čime je dobijena čvrsta supstanca koja je izolovana filtracijom (prinos 71%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.90 (s, IH), 8.58 (d, IH), 8.50 (t, IH), 8.23 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.82 (t, IH), 7.48 - 7.31 (m, 4H), 3.97 (s, 3H), 3.62 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.42 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 407.1 (M+l).
Jedinjenje 209:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 4-amino-l-benzil piperidina, sa izuzetkom što je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2C12i MeOH u odnosu 92,5 : 7,5 (prinos 61%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3/CD3OD) 5 8.44 (br s, IH), 8.32 (d, IH), 8.09 (s, IH), 7.47 (s, IH), 7.38 - 7.28 (m, 6H), 7.09 (d, IH), 4.00 (m, IH), 3.99 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.25 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 1.64 (m, 2H).LRMS (esi, pozitivan) m/e 475.2 (M+l).
Jedinjenje 210:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem N,N-dimetil propildiamina (prinos 70%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.90 (br s, IH), 8.55 (t, IH), 8.26 (d, IH), 8.22 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.50 (d, IH), 3.98 (s, 3H), 3.32 (m, 2H), 3.07 (m, 2H), 2.77 (s, 6H), 2.41 (s, 3H), 1.89 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 387.1 (M+l).
Jedinjenje 211:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 3-morfolin-4-il propilamina (prinos 79%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.90 (br s, IH), 8.57 (t, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.51 (s, IH), 7.50 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.62 (m, 2H), 3.31 (m, 8H), 3.12 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 1.92 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 429.1 (M+l).
Jedinjenje 212:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem N-(2-dimetilamino)-2-fenil etil amina, sa tim izuzetkom što je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2CI2i MeOH u odnosu 92,5 : 7,5 (prinos 12%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.05 (s, IH), 8.88 (s, IH), 8.20 (m, 3H), 7.41 - 7.19 (m, 7H), 3.96 (s, 3H), 3.78 (m, IH), 3.70 (m, IH), 3.57 (m, IH), 3.38 (m, IH), 2.50 (s, 6H), 2.40 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 448.9 (M+l).
Jedinjenje 213:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem N-(2-dimetilamino)-1-fenil etil amina, sa tim izuzetkom što je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2O2 i MeOH u odnosu 92,5 : 7,5 (prinos 27%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 11.61 (br s, IH), 9.71 (br s, IH), 8.42 (d, IH), 8.36 (s, IH), 8.09 (s, IH), 7.52 - 7.21 (m, 7H), 5.05 (br s, IH), 3.93 (s, 3H), 2.80 (m, IH), 2.52 (s, 3H), 2.37 (s, 6H), 1.79 (br s, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 449.0 (M+l).
Jedinjenje 214:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 1-aza-biciklo[2,2,2]okt-3-ilamina (prinos 27%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.17 (br s, IH), 8.90 (br s, IH), 8.24 (d, IH), 8.23 (s, IH), 8.17 (d, IH), 7.53 (d, IH), 7.50 (s, IH), 3.98 (s, 3H), 3.95 (m, IH), 3.10 (m, IH), 2.90 (m, IH), 2.64 (m, 4H), 2.42 (s, 3H), 1.87 (m, IH), 1.80 (m, IH), 1.59 (m, 2H), 1.31 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 411.0 (M+l).
Jedinjenje 215:
Korak 1: Terc-butil estar (3-R-l-piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-il)-karbaminske kiseline. U mešani rastvor (R)-boc-3-aminopirolidina (372,5 mg, 2 mmol) u dihloretanu (6 ml) na sobnoj temperturi u atmosferi azota dodat je piridin-2-karboksaldehid (190 p.1, 2 mmol), a zatim i natrijum triacetoksiborohidrid (593 mg, 2,8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći, a zatim je reakcija prekinuta dodavanjem zasićenog rastvora NaHC03(6 ml) uz mešanje tokom 15 minuta. Reakciona smeša je zatim podeljena između CH2CI2(25 ml) i 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (25 ml). Organski slojevi su izolovani, isušeni (magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do čistog proizvoda (526 mg, 95%).
Korak 2: 3-R-l-Piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-ilamin dihidrohlorid. Mešani rastvor terc-butil estra (3-R-l-piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-il)-karbaminske kiseline (277 mg, 1 mmol) u 10 ml 4 n HCl u dioksanu na sobnoj temperaturi ostavljen je da reaguje u zatvorenom reakcionom sudu tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana rotacionom evaporizacijom i pod visokim vakuumom, čime je dobijena di-HCl so (250 mg, kvantitativno).
Korak 3: Konačni proizvod dobijen shodno postupku opisano kod Jedinjenja 208, sa tim izuzetkom što je 3-R-l-piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-ilamin dihidrohloridna so pomešana sa DIEA u višku (70 pl, 0,4 mmol) u 500 pl NMP, čime je dobijen rastvor koji je dodat u smešu kiseline i HBTU. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2C12i MeOH u odnosu 9 : 1 (prinos 60%). 1 H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.57 (s, IH), 8.51 (d, IH), 8.39 (d, IH), 8.17 (s, IH), 8.09 (s, IH), 7.92 (s, IH), 7.64 (d, IH), 7.50 (s, IH), 7.30 (d, IH), 6.70 (d, IH), 4.69 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.66 (dd, 2H), 2.98 (m, IH), 2.80 (m, IH), 2.70 (m, IH), 2.53 (s, 3H), 2.39 (m, 3H), 1.76.(m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 462.3 (M+l).
Jedinjenje 216:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 3-(R)-amino-l-metil pirolidina (prinos 29%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.78 (br s, IH), 8.36 (d, IH), 8.22 (d, IH), 8.20 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.50 (d, IH), 4.39 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 2.64 (m, IH), 2.61 (m, IH), 2.43, (s, 3H), 2.39 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.17 (m, IH), 1.76 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 385.3 (M+l).
Jedinjenje 217:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 3-(R)-amino-l-benzil pirolidina, s tim izuzetkom što je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2C12i MeOH u odnosu 92,5 : 7,5 (prinos 54%). 1 H-NMR (400 MHz, CDCl3) 5 9.09 (br s, IH), 8.43 (d, IH), 8.09 (s, IH), 8.02 (s, IH), 7.57 (m, IH), 7.53 (s, IH), 7.46 (d, IH), 7.33 - 7.22 (m, 4H), 4.79 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.78 (dd, 2H), 3.13 (m, 2H), 2.76 (m, IH), 2.55 (s, 3H), 2.44 (m, IH), 1.79 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 461.1 (M+l).
Jedinjenje 218
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem l-(R)-piridin-4-ilmetil-pirolidin-3-ilamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.56 (d, 2H), 8.41 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.20 (s, IH), 8.08 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.32 (d, IH), 7.25 (d, 2H), 6.71 (d, IH), 4.73 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.66 (dd, 2H), 2.97 (m, IH), 2.82 (m, IH), 2.71 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.39 (m, 2H), 1.78 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 462.3 (M+l).
Jedinjenje 219:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem (R)-l-tiofen-2-ilmetil-pirolidin-3-ilamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.96 (br s, IH), 8.43 (d, IH), 8.09 (d, 2H), 7.57 (s, IH), 7.50 (d, IH), 7.10 (d, IH), 6.91 (m, 2H), 4.80 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.96 (dd, 2H), 3.17 (m, IH), 3.08 (m, IH), 2.71 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.42 (m, 2H), 1.80 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 467.2 (M+l).
Jedinjenje 220:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem (1-cikloheksilmetil-pirolidin-3-R-iIamina (prinos 71%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.89 (br s, IH), 8.32 (d, IH), 8.23 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.51 (s, IH), 7.49 (d, IH), 4.38 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 2.76 (m, IH), 2.56 (m, IH), 2.42 (s, 3H), 2.38 (m, IH), 2.25 - 2.06 (m, 3H), 1.77 (ni, 3H), 1.61 (m, 3H), 1.40 (m, IH), 1.19 (m, 3H), 0.83 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 467.3 (M+l).
Jedi njenje 221:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-metil-pirolidin-3-R-ilamina (prinos 51%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.78 (br s, IH), 8.35 (d, IH), 8.22 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.49 (d, IH), 4.39 (m, IH), 3.96 (s, 3H), 2.66 (m, IH), 2.61 (m, IH), 2.43 (s, 3H), 2.39 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.17 (m, IH), 1.75 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 385.4 (M+l).
Jedini enje 222:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-benzil-pirolidin-3-S-ilamina, s tim izuzetkom što je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na Biotage 12S koloni uz eluiranje smešom CH2C12i MeOH u odnosu 92,5 : 7,5 (prinos 54%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) S 8.81 (br s, IH), 8.43 (d, IH), 8.06 (d, 2H), 7.53 (s, IH), 7.42 (d, IH), 7.35 - 7.20 (m, 5H), 4.78 (m, IH), 3.99 (s, 3H), 3.78 (dd, 2H), 3.15 (m, IH), 3.04 (m, IH), 2.77 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.44 (m, IH), 1.79 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 461.1 (M+l).
Jedinjenje 223:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1 -piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.56 (d, IH), 8.38 (s, IH), 8.32 (d, IH), 8.06 (s, IH), 7.68 (t, IH), 7.51 (s, IH), 7.40 (d, IH), 7.35 (d, IH), 7.21 (m, IH), 4.72 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.79 (dd, 2H), 3.40 (m, IH), 3.03 (m, IH), 2.86 (m, IH), 2.64 (m, IH), 2.53 (s, 3H), 2.35 (m, IH), 1.78 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 462.1 (M+l).
Jedinjenje 224:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem l-piridin-3-ilmetil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.56 (s, IH), 8.51 (m, IH), 8.39 (d, IH), 8.18 (s, IH), 8.08 (s, 2H), 7.64 (d, IH), 7.50 (s, IH), 7.33 (d, IH), 6.77 (d, IH), 4.72 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.66 (dd, 2H), 2.97 (m, IH), 2.82 (m, IH), 2.71 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.40 (m, 2H), 1.76 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 462.3 (M+l).
Jedinjenje 225:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem l-piridin-4-ilmetil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 60%).<*>H-NMR(400 MHz, CDC13) 5 8.56 (d, 2H), 8.41 (d, IH), 8.24 (s, IH), 8.20 (s, IH), 8.08 (s, IH), 7.53 (s, IH), 7.32 (d, IH), 7.24 (d, 2H), 6.75 (d, IH), 4.72 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.67 (dd, 2H), 2.98 (m, IH), 2.82 (m, IH), 2.71 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.40 (m, 2H), 1.79 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 462.3 (M+1).
Jedinjenje 226:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-tiofen-2-ilmetil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 55%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.71 (br s. IH), 8.42 (d, IH), 8.11 (d, 2H), 7.55 (s, IH), 7.44 (d, IH), 7.39 (d, IH), 7.20 (d, IH), 6.91 (m, 2H), 4.78 (m, IH), 4.00 (s, 3H), 3.94 (dd, 2H), 3.17 (m, IH), 3.05 (m, IH), 2.69 (m, IH), 2.53 (s, 3H), 2.42 (m, 2H), 1.80 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 467.2 (M+l).
Jedinjenje 227:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-cikloheksilmetil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 60%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.78 (s, IH), 8.31 (d, IH). 8.23 (d, IH), 8.20 (s, IH), 7.51 (s, IH), 7.48 (d. IH), 4.37 (m, IH), 3.96 (s, 3H). 2.76 (m, IH), 2.56 (m, IH), 2.42 (s, 3H), 2.38 (m, IH), 2.25 - 2.06 (m, 3H), 1.77 (m, 3H), 1.61 (m, 3H), 1.40 (m, IH), 1.19 (m, 3H), 0.83 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 467.3 (M+l).
Jedinjenje 228:
Korak 1: Metil estar 4-amino-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline. U mešani rastvor 4-amino-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline (1,2 g, 5,4 mmol) u 16 ml smeše THF i MeOH u odnosu 4:1 na temperaturi od 0 °C dodat je ukapavanjem TMS-diazometan (2 M rastvor u heksanu, 6 ml, 12 mmol), a konverzija je posmatrana putem TLC u smeši EtOAc i heksana u odnosu 2:3. Nakon okončanja reakcije, reakciona smeša je koncentrovana do bele čvrste supstance koja odgovara metil estru (1,27 g, kvantitativno).
Korak 2: Metil estar 4-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 4-amino-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline (1,38 g, 5,9 mmol) u 18 ml CH2C12 na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodat je piridin (521 jul, 6,4 mmol), a nakon toga i p-nitrofenilhloroformat (1,18 g, 5,9 mmol). Nakon 4 časa na temperaturi od 0 °C, reakciona smeša je razblažena do zapremine od 60 ml sa CH2CI2i isprana sa 2 N HC1 (2 x 60 ml), vodom (1 x 60 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (1 x 60 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do bele čvrste supstance koje odgovaraju karbamatu (2,1 mg, 89%).
Korak 3: Metil estar 4-[3-(5-Metil-pirazin-2il)-ureido]-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 4-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline (400 mg, 1 mmol) u 1 ml NMP u zatvorenom reakcionom sudu na sobnoj temperaturi dodat je 2-amino-5-metil-pirazin (109 mg, 1 mmol), pa je rastvor zagrevan na temperaturi od 90 °C tokom 6 časova. Nakon hlađenja do sobne temperature, rastvor je razblažen do zapremine od 30 ml sa EtOAc i ispran sa 10% vodenim rastvorom NaHC03(4 x 30 ml) kako bi se uklonio fenolni nusproizvod, a zatim je ispran i sa zasićenim rastvorom NaCL (1 x 30 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane. Sprašicanjem i filtracijom sa EtOAc dobijena je čvrsta supstanca oker boje koja odgovara željenom estru (136 mg, 37%).
Korak 4: 4-[3-(5-Metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-trifluorometoksi-benzojeva kiselina. U mešanu suspenziju metil estra 4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline (136 mg, 0,37 mmol) u 4 ml smeše MeOH i vode u odnosu 3:1 u atmosferi azota dodat je Iitijum hidroksid monohidrat (154 mg, 3,7 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 65 °C. Reakciona smeša je promenila boju u žućkasto-zelenu i konačno postala rastvor. Nakon mešanja tokom noći, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i delimično koncentrovana rotacionom evaporacijom kako bi se uklonio najveći deo MeOH. Ostatak suspenzije je neutralizovan sa 2 N HC1 do pH vrednosti od 6. Reakcijom je dobijen flokulentni precipitat, koji je isfiltriran vodom i isušivan tokom noći pod visokim naponom čime je dobijena kiselina u vidu bele čvrste supstance (102 mg, 78%).
Korak 5: U mešanu suspenziju 4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-trifluorometoksi-benzojeve kiseline (102 mg, 0,29 mmol) u 2,9 ml NMP u zatvorenom reakcionom sudu na sobnoj temperaturi dodat je HBTU (109 mg, 0,29 mmol). Nakon 15 minutadodat je 3-S-l-benzil-pirolidin-3-ilamin dihidrohlorid (dobijen analogno l-piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-ilaminu koji je korišćen u sintezi Jedinjenja 215) (73 mg, 0,29 mmol), a zatim i DIEA (200 u.1, 1,2 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom noći, a onda je uklonjen NMP u vakuumu na temperaturi od 70 °C. Ostatak je podeljen između 30 ml CH2CI2i 30 ml 10% rastvora Na2C03. Organski slojevi su izolovani i isprani zasićenim rastvorom NaCl (1 x 30 ml), isušeni i koncentrovani do žute pene koja odgovara željenom amidu(103 mg, 70%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3/CD3OD) 8 8.56 (d, IH), 8.37 (br s, IH), 8.08 (s, IH), 7.84 (s, IH), 7.66 (d, IH), 7.40 - 7.28 (m, 6H), 4.73 (m, IH), 3.68 (dd, 2H), 2.77 (dd, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.43 (m, IH), 2.37 (dd, 2H), 1.78 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 514.9 (M+l).
Jedinjenje 229:
Korak 1: N-benzilizonipekotamid. U suspenziju izonipekotamida (12,3 g, 96 mmol) u 200 ml dohlorometana dodati su benzaldehid (10,6 g, 100 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (29,7 g, 140 mmol), pa je smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 dana. Gusta bela smeša je razblažena sa 100 ml vode i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 ml). Vodena faza je bazifikovana sa 1 N NaOH do pH vrednosti >12. nastali beli precipitat je sakupljen sukcionom filtracijom. Bela čvrsta supstanca je posle toga pomešana sa 50 ml EtOAc i isprana sa 20 ml slane vode, a zatim isušena (MgSO,*), filtrirana i koncentrovana, čime je dobijeno 10,84 g (50%) željenog proizvoda. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.85 (m, 5H), 5.45 (s, IH), 5.34 (s, IH), 3.5 (s, 2H), 2.93 (d,J=10.96 Hz, 2H), 2.16(t, J=12.13 Hz, IH), 2.01 (t, J= 11.74 Hz, 2H),1.87 ( d, J=12.52 Hz, 2H), 1.76( q, J=12.52 Hz, 2H).
Korak 2: 4-Aminometil-benzil piperidin. U rastvor N-benzilizonipekotamida (7,34 g, 34 mmol) u 60 ml anhidrovanog THF, dodat je LiAlHj(1,9 g, 51 mmol), a smeša je potom mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta, a nakon toga je zagrevana na temperaturi refluksa tokom 3 časa. Reakcija je prekinuta dodavanjem 100 ml zasićenog rastvora natrijum kalijum tartarata, a reakciona smeša je ekstrahova sa EtOAc (3 x 50 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani sa 20 ml vode i sa 20 ml slane vode, a zatim isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani, čime je dobijen željeni proizvod. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.13 (m, 5H), 3.42 (s, 2H), 2.91 (m, 2H), 2.59 (m, 2H), 1.97 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 2.21 (m, 5H).
Korak 3: N-( 1 -Benzil-piperidin-4-ilmetil)-3-metoksi-4- [3 -(5 -metil-pirazin-2-il)-ureidoj-benzamid. Dobijen iz 4-aminometil-l-benzil piperidina, prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208. 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 10.1 (s, 2H), 8.81 (s, IH), 8.48 (s, IH), 8.26 (m, 2H), 7.52 (m, 7H), 3.97 (s, 5H), 3.33 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.44 (s, 2H). MS APCI-pozitivan, M+l = 489.1.
Jedinjenje 230:
Korak 1: (3S)-3-(terc-Butoksikarbonilamino)-l-(4-fluoro-benzil)-pirolidin. U rastvor (3S)-(+)-3-(terc-butoksikarbonilamino)-pirolidina (410 mg, 2,20 mmol) u 22 ml EtOH dodati su 4-fluorobenzil bromid (288 u.1, 2,31 mmol) i cezijum karbonat (788 mg, 2,42 mmol) u vidu finog praha. Uz mešanje, reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 80 °C u atmosferi azota tokom 3 časa, nakon čega je TLC pokazala daje reakcija okončana. Reakciona smeša je zatim koncentrovana u vakuumu do zapremino od oko 5 ml, a zatim je razblažena sa 30 ml EtOAc i isprana sa 20 ml 5% vodenog rastvora NH4OH. Vodena frakcija je ekstrahovana dietil etrom (3 x 20 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani sa 20 ml slane vode, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani. Sirova bela čvrsta supstanca je sprašena smešom etra i heksana u odnosu 1:1, čime je dobijeno 501 mg (77%) željenog proizvoda u vidu bele čvrste supstance. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.2 - 7.3 (m, 2H), 6.9 - 7.1 (m, 2H), 4.85 (br. s, IH, zamene), 4.18 (br. s, IH), 3.55 (s, 2H), 2.65 (br. m, IH), 2.58 (m, IH), 2.50 (m, IH), 2.2 - 2.4 (m, 2H), 1.5 - 1.7, (ra, IH), 1.4 (s, 9H).
Korak 2: (3S)-3-Amino-l-(4-fluoro-benzil)-pirolidin. Rastvor (3S)-3-(terc-butoksikarbonilamino)-l-(4-fluoro-benzil)-pirolidina (400 mg, 1,36 mmol) je mešan u 15 ml mravlje kiseline na sobnoj temperaturi. Nakon 3 časa bistri bezbojni rastvor je koncentrovan do suvog ostatka, a ostatak je pomešan sa 20 ml EtOAc i ispran sa 10 ml 5% NH4OH, a zatim sa 10 ml slane vode. Rastvor je zatim isušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan, čime je dobijeno 240 mg (91%) proizvoda, u vidu žutog ulja. 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.28 (m, 2H), 6.99 (m, 2H), 3.56 (d,J=6.2 Hz, 2H), 3.47 - 3.53 (m, IH), 2.67 - 2.71 (m, 2H), 2.42 - 2.48 (m, IH), 2.28-2.31 (m, IH), 2.21 -2.28 (m, IH), 1.59 (s, 2H, NH2), 1.43 - 1.52 (m, IH).
Korak 3: N-[(3S)-1 -(4-Fluoro-benzil)-pirolidin-3-il]-3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzamid. Dobijen iz (3S)-3-amino-l-(4-fluoro-benzil)-pirolidina, prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 10.8 (s, 2H), 8.8 (s, IH), 8.38 (s, IH), 8.27 (s, IH), 8.24 (s, 2H), 7.51 (s, IH), 7.49 (s, IH), 7.37 (s, 2H), 7.15 (m, 2H), 4.4 (br.s, IH), 3.98 (s, 3H), 3.6 (br.s, 2H), 3.06 (br.s, IH), 2.65 (br.s, IH), 2.81 (br.s, IH), 2.43 (s, 3H), 2.16 (s, IH), 1.83 (s, IH). MS APCI-pozitivan M+l = 479.2.
Jedinjenje 231:
Korak 1: 3-Metoksi-4-nitro-benzoil hlorid. Tionil hlorid (3,7 ml, 50 mmol) je ukapavanjem dodat na sobnoj temperaturi u mešani rastvor 3-metoksi-4-nitro-benzojeve kiseline (1,0 g, 5,07 mmol) u 15 ml dioksana u atmosferi azota. Nakon okončanja dodavanja, reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 časa. Reakcioni sud je zatim prikačen za aparat za destilaciju, pa su tionil hlorid u višku i oko polovina rastvarača uklonjeni destilacijom na temperaturi od 120 °C u uljanom kupatilu. Ostatak rastvarača je uklonjen rotacionom evaporacijom, a ostatak je pomešan sa 20 ml toluena, pa je ponovo oko polovine rastvarača uklonjeno destilacijom. Ostatak rastvora je zatim ohlađen do temperature od 0 °C bela čvrsta supstanca je precipitirala, a zatim je sakupljena sukcionom filtracijom i isprana smešom Et20 i heksana u odnosu 1:1. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.87 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.82 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.77 (s, IH), 4.04 (s, 3H).
Korak 2: (3S)-l-Benzil-pirolidin-3-ol. Rastvor (3S)-3-hidroksipirolidina (2,0 g, 25 mmol) u 50 ml CH2CI2ohlađen je do temperature od 0 °C u atmosferi azota, pa je dodat benzaldehid (2,92 g, 27,5 mmol), a zatim i 1 g 4 A molekularnih sita u vidu praha. Iz nekoliko delova je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (7,4 g, 35 mmol) tokom 30 minuta, pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 časova. Reakciona smeša je ponovo ohlađena do temperature od 0 °C, a reakcija je prekinuta dodavanjem 10 ml metanola, a zatim i 5 ml 1 N HC1. Molekularna sita u vidu čvrste supstance su uklonjena filtracijom kroz papir od staklenih vlakana, a filtrat je ekstrahovan sa 20 ml dietil etra. Organska faza je odbačena, a vodena faza je prvo bazifikovana dodavanjem koncentrovanog amonijum hidroksida, a zatim ekstrahovana sa EtOAc (3 * 20 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani sa 20 ml slane vode, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani u vakuumu, čime je dobijeno 3,2 g (73%) bistrog žutog ulja, koje nije trebalo dalje prečišćavati. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 6 7.2 - 7.4 (m, 5H), 4.33 (m, IH), 3.63, (s, 2H), 2.83 - 3.89 (m, IH), 2.67 (d,J=9.9 Hz, IH), 2.53 - 2.55 (m, IH), 2.23 - 2.34 (m, IH), 2.14 - 2.20 (m, 2H), 1.70 - 1.77 (m, IH).
Korak 3: (3S)-l-Benzil-pirolidin-3-il estar 3-metoksi-4-nitro-benzojeve kiseline. Rastvor 3-metoksi-4-nitro-benzoil hlorida (608 mg, 2,82 mmol) u 10 ml CH2C12 dodat je u mešani rastvor 500 mg (2,82 mmol) (3S)-l-benzil-pirolidin-3-ola i 1 ml piridina u 15 ml CH2C12 na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja tokom 18 časova, reakciona smeša je razblažena sa 20 ml zasićenog vodenog rastvora NaHC03 i ekstrahovana sa CH2C12 (2x10 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani sa 20 ml slane vode, isušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani u vakuumu, čime je dobijeno 780 mg (71%) željenog estra u vidu žutog ulja, koje je očvrsnulo nakon sušenja u visokom vakuumu. Dobijena čvrsta supstanca je dalje prečišćena sprašivanjem u smeši etra i heksana u odnosu 1:1. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7.83 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.74 (s, IH), 7.68 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.2 - 7.4 (m, 5H), 5.44 (br.m, IH), 4.02 (s, 2H), 3.69 (dd,J=30 Hz,J=13 Hz, IH), 2.8 - 3.0 (m, 2H), 2.5 - 2.6 (m, IH), 2.3 - 2.45 (m, IH), 2.0 - 2.1 (m, IH).
Korak 4: (3S)-1 -Benzil-pirolidin-3-il estar 4-amino-3-metoksi-benzojeve kiseline. Anilin je pripremljen redukcijom (3S)-1 -benzil-pirolidin-3-il estra 3-metoksi-4-nitro-benzojeve kiseline sa nikl boridom analogno dobijanju 4-[(benzil-metil-amino)-metil]-2-metoksi-fenilamina koji je korišćen u sintezi Jedinjenja 340. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.54 (d,J=8.21 Hz, IH), 7.44 (s, IH), 7.2 - 7.4 (m, 5H), 6.65 (d,J =8.21 Hz, IH), 5.38
(br.m, IH), 4.22 (s, IH), 3.90 (s, 3H), 3.69 (q, 7 = 24.63 Hz, IH), 3.0 (m, IH), 2.7 - 2.9 (m, 2H), 2.5 - 2.6 (m, IH), 2.3 - 2.4 (m, IH), 1.9-2.1 (m, IH). MS apci-pozitivan M+l = 327.2.
Korak 5: (3S)-l-Benzil-pirolidin-3-il estar 3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline. Dobijen iz (3S)-l-benzil-pirolidin-3-il estra 4-amino-3-metoksi-benzojeve kiseline prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.15 (s, 2H), 8.8 (s, IH), 8.35 (d,J=8.61 Hz, IH), 8.25 (s, IH), 7.58 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.5 (s, IH), 7.30 - 7.35 (m, 4H), 7.26 -7.24 (m, IH), 5.28 (s, IH), 3.99 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 2.82 (m, IH), 2.74 (m, IH), 2.67 (m, IH), 2.44 (s, 3H), 2.28 (m, IH), 1.91 (m, IH). MS apci-pozitivan M+l = 462.2.
Jedinjenje 232:
Korak 1: Metil estar 3-metoksi-4-[3-(5-trifluorometil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline. U mešani rastvor 5-trifluorometilaminopirazina (326 mg, 2 mmol) na sobnoj temperaturi u NMP (2 ml) u zatvorenom reakcionom sudu dodat je metil estar 4-metoksi-3-(4-nitrofenilkarbonilamino)-benzojeve kiseline (692 mg, 2 mmol), pa je rastvor zagrevana na temperaturi od 85 °C tokom 6 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sprašen sa EtOAc (5 ml), pa je mrka čvrsta supstanca koja je nastala izolovana filtracijom i isprana sa EtOAc (213 mg, 28%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 10.78 (s, IH), 10.16 (br s, IH), 9.07 (s, IH), 8.84 (s, IH), 8.37 (d, IH), 7.63 (d, IH), 7.56 (s, IH), 4.01 (s, 3H), 3.83 (s, 3H).
Korak 2: 3-Metoksi-4-[3-(5-trifluorometil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeva kiselina. U mešani rastvor metil estra 3-metoksi-4-[3-(5-trifluorometil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline (213 mg, 0,575 mmol) u 5,75 ml smeše MeOH i vode u odnosu 3:1 na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je Iitijum hidroksid monohidrat (240 mg, 5,8 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 65 °C. nakon dostizanja pomenute temperature, suspenzija je postepeno postajala svetio žuti rastvor. Nakon oko 4 časa nastao je precipitat, ali je reakcija nastavljena tokom noći. Nakon hlađenje do sobne temperature, MeOH je uklonjen rotacionom evaporizacijom, a voden suspenzija je neutralizovana do pH vrednosti od 5 sa koncentrovanom HC1. Kako se pH vrednost od primicala vrednosti od 5, suspenzija je pormenila boju iz žute u belu. Suspenzija je zatim filtrirana kroz fliter papir na keramičkom levku. Kada je uklonjen najveći deo vode, ostatak je isušen pod visokim vakuumom tokom noći u desikatoru (133 mg, 55%).
Korak 3: U mešani rastvor 3-metoksi-4-[3-(5-trifluorometil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline (35 mg, 0,1 mmol) u 0,5 ml NMP u zatvorenom reakcionom sudu na sobnoj temperaturi dodat je HBTU (41 mg, 0,11 mmol), pa je reakciona smeša mešana tokom 15 minuta. Zatim je dodat l-benzil-pirolidin-3-ilamin dihidrohlorid (dobijen analogno 1-piridin-2-ilmetil-pirolidin-3-ilaminu koji je korišćen u sintezi Jedinjenja 215) (sirov, 0,1 mmol) u vidu rastvora u 0,5 ml NMP sa DIEA (69 u.1, 0,4 mmol). Nakon mešanja tokom noći na sobnoj temperaturi, NMP je uklonjen destilacijom u visokom vakuumu na temperaturi od 70 °C. Ostatak je rastvoren u 25 ml CH2CI2sa malom količinom MeOH i ispran sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 * 25 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do ostatka koji je podvrgnut hromatografiji na Biotage 12S koloni smešom MeOH i CH2CI2u odnosu 5:95. Ovaj materijal je koncentrovan do suvog ostatka i triturated / filtriran sa Et20, čime je dobijen čist proizvod u vidu bele čvrste supstance (9,5 mg, 19%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.53 (s, IH), 9.86 (br s, IH), 8.57 (s, IH), 8.40 (d, IH), 8.12 (s, IH), 7.56 (s, IH), 7.46 (m, 2H), 7.25 (m, 4H), 4.79 (m, IH), 4.01 (s, 3H), 3.73 (dd, 2H), 3.22 (m, 2H), 2.76 (m, IH), 2.47 (m, 2H), 1.76 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 515.1 (M+l).
Jedinjenje 233:
Korak 1: Smeša 5-fluoro-4-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline i 5-fTuoro-3-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor 3-fluoro-6-trifluorometilbenzojeve kiseline (3,58 g, 15,2 mmol) u 17 ml koncentrovane H2SO4na temperaturi od 0 °C pažljivo je ukapavanjem dodata 70% HNO3(17 ml). Reakciona smeša je zatim zagrevana na temperaturi od 100 °C tokom noći, a potom je ohlađena do sobne temperature i izlivena u 250 ml vode sa ledom uz mešanje. Dodat je EtOAc (250 ml) i smeša je mešana. Slojevi su razdvojeni, a organske supstance isprane vodom (1 * 250 ml) i slanom vodom (1 * 250 ml). Organske supstance su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do ulja koje je stajanjem očvrslo. Čvrsta supstanca predstavlja smešu 1:1 regioizomera i dalje je korišćena u sirovom obliku.
Korak 2: Smeša metil estra 5-fluoro-4-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline i metil estra 5-fluoro-3-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor nitro kiselina (sirovih, 17,2 mmol) u 60 ml smeše THF i MeOH u odnosu 4:1 ukapavanjem je dodat 2 M rastvor TMS-diazometana u heksanu sve dok je postojala žuta boja. Nakon 30 minuta reakciona smeša je koncentrovana do sirovog ulja i direktno korišćena u sledećem koraku.
Korak 3: Smeša metil estra 5-metoksi-4-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline i metil estra 5-metoksi-3-nitro-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor fluoro nitro estara (sirovih, 17,2 mmol) u 22 ml MeOH na sobnoj temperaturi dodato je 150 ml 0,5 M rastvora natrijum metoksida u MeOH. Crveni rastvor je mešan tokom 30 minuta, a zatim je podeljen između CH2CI2(500 ml) i vode (500 ml). Organske materije su isprane vodom (2 * 500 ml), isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do bele čvrste supstance.
Korak 4: Metil estar 5-metoksi-4-amino-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metoksi nitro estara (sirovih, 17,2 mmol) u 172 ml MeOH na sobnoj temperaturi u koji je propušten azot, pažljivo je dodat 10% Pd na ugljeniku (1 g). Suspenzija je tretirana u ciklusu izlaganja vakuumu i propuštanja vodonikom tri puta, a zatim je držana u vodoniku pod pritiskom od 1 atmosfere, nakon mešanja tokom noći, suspenzija je filtrirana korz GF/F filter papir i koncentrovana do bistrog ulja. Ovaj materijal je direktno postavljen na Biotage 40M kolonu sa CH2CI2i eluiran prvo smešom heksana i EtOAc u odnosu 9:1 čime su eluirani neželjeni regioizomeri visoke Rf, a zatim smešom hekasna i EtOAc u odnosu 85:15 čime su eluirani željeni regioizomeri niže Rf. Nakon koncentrisanja, regioizomeri niže Rfsu očvrsli do prozirne čvrste supstance (1,75 g, 41%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.33 (s, IH), 6.98 (s, IH), 3.92 (s, 3H), 3.85 (s, 3H).
Korak 5: Metil estar 5-metoksi-4-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 5-metoksi-4-amino-2-trifluorometil-benzojeve kiseline (552 mg, 2,22 mmol) u 6,6 ml CH2Cl2na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodat je piridin (180 u.1, 2,22 mmol), a zatim i p-nitrofenil hloroformat (448 mg, 2,22 mmol) u vidu čvrste supstance. Nakon mešanja tokom 1 časa, reakciona smeša je razblažena do zapremine od 30 ml sa CH2CI2i isprana sa 2 N HC1 (2x30 ml) i vodom (1 x 30 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do p-nitrofenil karbamata koji je izolovan u vidu bele pene (878 mg, 96&). 1 H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.57 (br s, IH), 8.30 (d, 2H), 7.77 (br s, IH), 7.40 (d, 2H), 7.37 (s, IH), 4.03 (s, 3H), 3.94 (s, 3H).
Korak 6: Metil estar 5-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-2-trifluorometil-benzojeve kiseline. U mešani rastvor metil estra 5-metoksi-4-(4-nitro-fenoksikarbonilamino)-2-trifluorometil-benzojeve kiseline (878 mg, 2,1 mmol) u 4,2 ml NMP na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodatje 2-amino-5-metilpirazin (232 mg, 2,1 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 85 °C. Nakon 6 časova, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i nastao je pecipitat. Precipitat je sprašen sa EtOAc (25 ml), a dobijena urea je izolovana filtracijom u vidu mrke čvrste supstance (470 mg, 58%).
Korak 7: 5-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-2-trifluorometil-benzojeva kiselina. U mešanu supsenziju metil estra 5-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-2-trifluorometil-benzojeve kiseline (257 mg, 0,67 mmol) u 6,7 ml smeše MeOH i vode u odnosu 3:1 na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je Iitijum hidroksid monohidrat (281 mg, 6,7 mmol), a smeša je zagrejana do temperature od 85 °C. Nakon mešanja tokom noći, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, MeOH je uklonjen na rotavapu, a ostatak suspenzije je neutralizovan koncentrovanom HC1 do pH vrednosti od oko 5. Suspenzija je filtrirana i isprana vodom, a dobijeni materijal je isušen u visokom vakuumu čime je dobijena kiselina u vidu bele čvrste supstance (161 mg, 61%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.90 (br s, IH), 8.63 (s, IH), 8.22 (s, IH), 7.38 (s, IH), 4.00 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). LRMS (esi, negativan) m/e 369.0 (M-l).
Korak 8: 5-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-N-(2-piridin-2-il-etil)-2-trifluorometil-benzamid. U mešani rastvor 5-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-2-trifluorometil-benzojeve kiseline (37 mg, 0,1 mmol) u 1 ml NMP na sobnoj temperaturi u zatvorenom reakcionom sudu dodat je HBTU (42 mg, 0,11 mmol), pa je suspenzija mešana tokom 15 minuta. Dodat je 2-aminoetilpiridin (13 u.1, 0,11 mmol), a zatim i DIEA (35 u.1, 0,2 mmol), a reakciona smeša je mešana tokom noći. Zatim je NMP uklonjen prenosom iz balona u balon u visokom vakuumu na temperaturi od 70 °C, a ostatak je sprašen i filtriran sa EtOAc čime je dobijen željeni amid u vidu mrke čvrste supstance (32 mg, 68%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.90 (br s, IH), 8.66 (d, IH), 8.61 (s, IH), 8.52 (t, IH), 8.23 (s, IH), 8.10 (br m, IH), 7.61 (br d, IH), 7.57 (br m, IH), 7.07 (s, IH), 4.00 (s, 3H), 3.62 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 2.42 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 475.1 (M+l).
Jedinjenje 234:
Korak 1: Metil estar 3-(3-Dimetilamino-propoksi)-4-nitro-benzojeve kiseline. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor metil estra 3-hidroksi-4-nitro benzojeve kiseline (394 mg, 2,0 mmol), trifenil fosfina (525 mg, 2,0 mmol) i 3-(dimetilamino)-propanola (237 u.1, 2,0 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je diizopropil azodikarboksilat (394 ul, 2,0 mmol u 1 ml tetrahidrofurana). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa hlorovodoničnom kiselinom (30 ml 1 M rastvora) i ekstrahovana sa etil acetatom (2 * 50 ml). Vodeni rastvor je bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (50 ml) i proizvod je ekstrahovan etil acetatom (3 x 100 ml). Etil acetat je ispran slanom vodom (1x30 ml), a zatim isušen (MgS04) i filtriran. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni sirovi proizvod (86%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.81 (d, IH), 7.78 (s, IH), 7.65 (d, IH), 4.23 (t, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.44 (t, 2H), 2.22 (s, 6H), 2.05 (m, 2H).
Korak 2: Metil estar 4-amino-3-(3-dimetilamino-propoksi)-benzojeve kiseline. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvoru metil estra 3-(3-dimetilamino-propoksi)-4-nitro benzojeve kiseline (282 mg, 1,0 mmol) u metanolu (2 ml) i zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (1 ml) dodat je prah cinka (2,0 mmol). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 x 30 ml), slanom vodom (1x30 ml), a zatim je isušena (MgS04) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni proizvod u vidu mrke čvrste supstance (prinos 88%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.52 (d, IH), 7.48 (s, IH), 7.25 (s, IH), 6.65 (d, IH), 4.29 (br s, IH), 4.09 (t, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.49 (t, 2H), 2.25 (s, 6H), 2.00 (m, 2H).
Korak 3: Metil estar 3-(3-dimetilamino-propoksi)-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeve kiseline. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor metil estra 4-amino-3-(3-dimetilamino-propoksi)-benzojeve kiseline (252 mg, 1,0 mmol) u toluenu (3,0 ml) dodati su trietilamin (139 u.1, 1,0 mmol) i trifosgen (98 mg, 0,33 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je 5-metil-2-amino pirazin (109 mg, 1,0 mmol), pa je raekciona smeša zagrejana do temperature od 65 °C. Zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i razblažena etil acetatom (50 ml) i vodom (50 ml). Dobijen je precipitat koji je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom, čime je dobijen željeni materijal u vidu bele čvrste supstance (prinos 40%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.62 (br s, IH), 8.41 (d, IH), 8.19 (s. IH), 7.59 (d, IH), 7.49 (s, IH), 4.15 (t, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.42 (m, 5H), 2.18 (s, 6H), 2.01 (m, 2H).
Korak 4: 3-(3-Dimetilamino-propoksi)-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzojeva kiselina. U mešani rastvor metil estra 3-(3-dimetilamino-propoksi)-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureidoj-benzojeve kiseline (1,0 g, 3,3 mmol) u metanolu (25 ml) dodat je Iitijum hidroksid (5 ml 2 M vodenog rastvora). Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 60 °C tokom 12 časova. Zatim je ostavljena da se ohladi od sobne temperature, a pH vrednost je podešena do 5,5 dodavanjem 1 N rastvora hlrovodonične kiseline. Dobijen je precipitat koji je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom, čime je dobijen željeni proizvod u vidu mrke čvrste supstance (prinos 52%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.62 (br s, IH), 8.39 (d, IH), 8.21 (s, IH), 7.59 (d, IH), 7.43 (s, IH), 4.15 (t, 2H), 2.42 (m, 5H), 2.18 (s, 6H), 2.01 (m, 2H).
Jedinjenje 235:
Korak 1: Metil estar 4-nitro-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor metil estra 3-hidroksi-4-nitro benzojeve kiseline (394 mg, 2,0 mmol), trifenil fosfina (525 mg, 2,0 mmol) i 3-piridilkarbinola (194 pl, 2,0 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (5 ml) dodat je diizopropil azodikarboksilat (394 ul, 2,0 mmol u 1 ml THF). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena hlorovodoničnom kiselinom (30 ml 1 M rastvora) i ekstrahovana etil acetatom (2 * 50 ml). Vodeni rastvor je bazifikovan sa 10%o vodenim rastvorom natrijum karbonata (50 ml) i proizvod je ekstrahovan etil acetatom (3 * 100 ml). Etil acetat je ispran slanom vodom (1*30 ml), a zatim isušen (MgSC>4) i filtriran. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, čime je dobijen željeni sirovi proizvod u vidu sivkaste čvrste supstance (prinos 76%). 1 H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8.71 (s, IH), 8.62 (d, IH), 7.88 (m, 3H), 7.79 (d, IH), 7.39 (m, IH), 5.31 (s, 2H), 3.98 (s, 3H).
Korak 2: Metil estar 4-amino-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline. U mešani ohlađeni (oko 0 °C) rastvor metil estra 4-nitro-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline (288 mg, 1,0 mmol) u metanolu (2 ml) i zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (1 ml) dodat je prah cinka (131 mg, 2,0 mmol). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 x 30 ml), slanom vodom (1 x 30 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni proizvod u vidu žute čvrste supstance (prinos 97%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.78 (s, IH), 8.61 (d, IH), 7.79 (d, IH), 7.59 (m, 2H), 7.39 (m, IH), 6.71 (d, IH), 5.18 (s, 2H), 4.28 (br s, 2H), 3.85 (s, 3H).
Korak 3: Metil estar 4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor metil estra 4-amino-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline (258 mg, 1,0 mmol) u toluenu (3,0 ml) dodati su trietilamin (139 p.1, 1,0 mmol) i trifosgen (98 mg, 0,33 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je 5-metil-2-amino pirazin (109 mg, 1,0 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 65 °C. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a zatim razblažena etil acetatom (50 ml) i vodom (50 ml). Dobijeni precipitat je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni materijal u vidu bele čvrste supstance (prinos 47%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 10.29 (s, IH), 8.79 (s, IH), 8.68 (d, IH), 8.59 (br s, IH), 8.48 (d, IH), 7.70 (s, IH), 7.62 (d, IH), 7.51 (m, IH), 5.32 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.32 (s, 3H).
Korak 4: 4-[3-(5-Metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeva kiselina. U mešani rastvor metil estra 4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-3-(piridin-3-ilmetoksi)-benzojeve kiseline (1,3 g, 3,3 mmol) u metanolu (25 ml) dodat je Iitijum hidroksid (5 ml 2 M vodenog rastvora). Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 60 °C tokom 12 časova. Zatim je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i pH vrednost rastvora je podešena do 5,5 sa 1 N hlorovodoničnom kiselinom. Dobijen je precipitat koji je filtriran i isušen pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni proizvod u vidu mrke čvrste supstance (prinos 90%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 10.29 (s, IH), 8.79 (s, IH), 8.68 (d, IH), 8.59 (br s, IH), 8.48 (d, IH), 7.70 (s, IH), 7.62 (d, IH), 7.51 (m, IH), 5.32 (s, 2H), 2.32 (s, 3H).
Jedinienje 236:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem amonijaka (prinos 33%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 10.18 (s, IH), 8.56 (br s, IH), 8.20 (d, IH), 8.11 (s. IH), 7.43 (d, IH), 7.40 (s, IH), 4.03 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.05 (s, 6H), 1.91 (m, 2H). LRLCMS (esi, pozitivan) m/e 374.2 (M+l).
Jedinjenje 237:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem dimetilamina (prinos 97%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.30 (br s, IH), 8.39 (d, IH), 8.29 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.78 (br s, IH), 7.07 (s, IH), 7.04 (d, IH), 4.16 (t, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.53 (m, 2H), 2.26 (s, 6H), 2.10 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 401.1 (M+l).
Jedinjenje 238:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem benzilamina (prinos 65%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.43 (d, IH), 8.26 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.91 (br s, IH), 7.56 (s, IH), 7.38 (m, 4H), 7.31 (m, IH), 6.41 (m, IH), 4.64 (d, 2H), 4.20 (t, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.52 (m, 2H), 2.24 (s, 6H), 2.14 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 463.2 (M+l).
Jedinjenje 239:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem N-metil benzilamina (prinos 68%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.37 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.18 (s, IH), 7.37 (m, 4H), 7.31 (m, IH), 7.18 (m, 2H), 4.67 (br m, 2H), 4.07 (br m, 2H), 2.99 (br s. 3H), 2.53 (s, 3H), 2.50 (br m, 2H), 2.24 (s, 6H), 2.06 (br m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 477.2 (M+l).
Jedinjenje 240:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-morfolin-4-il-etilamina (prinos 69%). 'H-NMR (400 MHz. CDC13) 8 8.44 (d, IH), 8.31 (s, IH), 8.21 (s, IH), 7.90 (br s, IH), 7.55 (s, IH), 7.24 (d, IH), 6.76 (m, IH), 4.20 (t, 2H), 3.76 (m, 4H), 3.56 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 2.53 (m, 7H), 2.24 (s, 6H), 2.13 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 486.2 (M+l).
Jedinjenje 241:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-(l-metil-pirolidin-2-il)-amina (prinos 68%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.35 (br s, IH), 8.42 (s, IH), 8.40 (s, IH), 8.24 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.57 (s, IH), 7.46 (br s, IH), 7.20 (m, IH), 4.19 (m, 2H), 3.76 (m, IH), 3.44 (m, IH), 3.15 (m, IH), 2.54 (s, 3H), 2.42 (m, IH), 2.37 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 2.22 (m, IH), 2.13 (m, 2H), 1.90 (m, 2H), 1.77 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 484.3 (M+l).
Jedinjenje 242:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-dimetilamino-etilamina (prinos 37%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.38 (br s, IH), 8.42 (d, IH), 8.30 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.96 (br s, IH), 7.53 (s, IH), 7.27 (d, IH), 6.79 (m, IH), 4.20 (m, 2H), 3.53 (m, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.26 (m, 2H), 2.24 (s, 6H), 2.22 (s, 6H), 2.12 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 444.2 (M+l).
Jedinjenje 243:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-benzil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 20%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.61 (br s, IH), 8.45 (d, IH), 8.20 (s, IH), 8.16 (m, IH), 7.51 (s, IH), 7.39 (d, IH), 7.31 (m, 4H), 7.16 (m, IH), 4.72 (m, IH), 4.18 (m, 2H), 3.72 (dd, 2H), 3.04 (m, IH), 2.96 (m, IH), 2.69 (m. IH), 2.53 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.40 (m, 2H), 2.25 (s, 6H), 2.11 (m, 2H), 1.76 (m, IH). LRMS (esi, pozitivan) m/e 532.2 (M+l).
Jedinjenje 244:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem amonijaka (prinos 99%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.27 (s, IH), 8.82 (s, IH), 8.66 (d, IH), 8.60 (br s, IH), 8.29 (d, IH), 8.03 (m, IH), 8.00 (s, IH), 7.76 (s, IH), 7.56 (d, IH), 7.50 (m, IH), 7.37 (br m, IH), 7.26 (br s, IH), 5.32 (s, 2H), 2.32 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 379.1 (M+l).
Jedinjenje 245:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem metilamina (prinos 99%).
'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 10.25 (s, IH), 8.80 (s, IH), 8.60 (m, 3H), 8.26 (d, IH), 8.03 (d, IH), 7.78 (s, IH), 7.52 (m, 2H), 7.37 (m, IH), 5.34 (s, 2H), 2.79 (d, 3H), 2.36 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 393.2 (M+l).
Jedinjenje 246:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem dimetilamina (prinos 88%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.16 (s, IH), 8.80 (s, IH), 8.66 (d, IH), 8.58 (s, IH), 8.28 (d, IH), 7.96 (d, IH), 7.50 (m, IH), 7.37 (br s, IH), 7.25 (s. IH), 7.03 (d, IH), 5.30 (s, 2H), 2.95 (s, 6H), 2.33 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 407.4 (M+l).
Jedinjenje 247:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem benzilamina (prinos 41%). 'H-NMR (400 MHz, dć-DMSO) 6 10.23 (s, IH), 9.05 (t, IH), 8.82 (s, IH), 8.67 (d, IH), 8.58 (br s, IH), 8.33 (d, IH), 8.00 (d, IH), 7.78 (s, IH), 7.59 (d, IH), 7.50 (m, IH), 7.33 (m, 4H), 7.25 (m, IH), 5.32 (s, 2H), 4.50 (d, 2H), 2.32 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 469.1 (M+l).
Jedinjenje 248:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem N-metil benzilamina (prinos 71%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.16 (s, IH), 8.76 (br s, IH), 8.64 (d, IH), 8.57 (m, IH), 8.28 (br m, IH), 7.95 (br m, IH), 7.48 (m, IH), 7.40 - 7.23 (br m, 7H), 7.06 (m, IH), 5.23 (br m, 2H), 4.62 (br m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 483.3 (M+l).
Jedinjenje 249:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-morfolin-4-il-etilamina (prinos 99%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.27 (s, IH), 8.81 (s, IH), 8.66 (d, IH), 8.61 (br s, IH), 8.52 (t, IH), 8.29 (d, IH), 8.03 (d, IH), 7.76 (s, IH), 7.52 (m, 2H), 7.36 (m, IH), 5.33 (s, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.40 (m, 2H), 2.48 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.34 (s, 3H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 492.4 (M+l).
Jedinjenje 250:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-(l-metil-pirolidin-2-il)-etilamina (prinos 99%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.21 (s, IH), 8.81 (s, IH), 8.64 (d, IH), 8.58 (br s, IH), 8.49 (m, IH), 8.33 (d, IH), 8.00 (d, IH), 7.70 (s, IH), 7.52 (m, 2H), 7.34 (m, IH), 5.33 (s, 2H), 3.28 (m, 2H), 2.95 (m, IH), 2.36 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.04 (m, 2H), 1.90 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.44 (m, 2H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 490.3 (M+l).
Jedinjenje 251:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 208 korišćenjem 2-dimetilamino-etilamina (prinos 99%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.24 (s, IH), 8.82 (s, IH), 8.66
(d, IH), 8.60 (br s, IH), 8.43 (t, IH), 8.30 (d, IH), 8.02 (d, IH), 7.74 (s, IH), 7.52 (m, 2H), 7.35 (br m, IH), 5.32 (s, 2H), 3.36 (m, 2H), 2.39 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.18 (s, 6H). LRMS (apci, pozitivan) m/e 450.2 (M+l).
Jedinjenje 252:
Dobijen prema postupku opisanom kod Jedinjenja 215 korišćenjem 1-benzil-pirolidin-3-S-ilamina (prinos 99%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 10.26 (s, IH), 8.82 (s, IH), 8.66 (d, IH), 8.60 (br s, IH), 8.47 (d, IH), 8.28 (d, IH), 8.02 (d, IH), 7.74 (s, IH), 7.55 (d, IH), 7.51 (m, IH), 7.32 (m, 4H), 7.24 (m, IH), 5.31 (s, 2H), 4.40 (m, IH), 3.60 (s, 2H), 2.80 (m, IH), 2.64 (m, IH), 2.45 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.15 (m, IH), 1.85 (m, IH). LRMS (apci, pozitivan) m/e 538.2 (M+l).
Jedinjenje 253:
Korak 1: Terc-butil estar (2-hidroksi-5-metil-fenil)-karbaminske kiseline. U mešani rastvor 2-amino-4-metil-fenola (6,15 g, 50 mmol) u dioksanu (100 ml) dodat je di-terc-butil estar ugljene kiseline (9,8 g, 45 mmol), a zatim i natrijum bikarbonat (12,6 g, 150 mmol) u 75 ml vode. Nakon mešanja tokom 8 časova, reakciona smeša je razblažena sa 100 ml etil acetata i isprana sa 1 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (2 x 100 ml), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (1 * 100 ml) i slanom vodom (100 ml), a zatim isušena (MgSCU) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni terc-butil estar (2-hidroksi-5-metil-fenil)-karbaminske kiseline u vidu braon čvrste supstance (prinos 95%).
Korak 2: Terc-butil estar [2-(3-Dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenil]-karbaminske kiseline. U mešani ohlađeni (oko 0 °C) rastvor terc-butil estra (2-hidroksi-5-metil-fenil)-karbaminske kiseline (447 mg, 2,0 mmol), trifenilfosfma (525 mg, 2,0 mmol) i 3-(dimetilamino)-l-propanola (237 u.1, 2,0 mmol) u suvom THF (5 ml) dodat je diizopropil azodikarboksilat (394 jal, 2,0 mmol) u 1 ml THF. Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 x 30 ml), slane vode (1 x 30 ml), a zatim isušena (MgSC^) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni sirovi proizvod.
Korak 3: 2-(3-Dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenilamin. U mešani rastvor terc-butil estra [2-(3-dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenil]-karbaminske kiseline (617 mg, 2,0 mmol) u 5 ml dioksana dodata je hlorovodonična kiselina (2 ml, 4 N u dioksanu). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 20 ml 1 N hlorovodonične kiseline i isprana etil acetatom (2 x 30 ml). Vodeni sloj je bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (50 ml) i ekstrahovan etil acetatom (3 x 50 ml). Etil acetat je ispran slanom vodom (1 x 30 ml), a zatim isušen (MgSC^) i filtriran. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen odgovarajući anilin.
Korak 4: l-[2-(3-Dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenil]-3-pirazin-2-il urea. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor 2-(3-dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenilamina (208 mg, 1,0 mmol) u toluenu (3,0 ml) dodati su trietilamin (140 pl, 1,0 mmol) i trifosgen (98 mg, 0,33 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je amino pirazin (95 mg, 1,0 mmol), pa je reakciona smeša zagrejana do temperature od 65 °C. Nakon mešanja tokom 4 časa, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i mešana tokom 8 časova. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran toluenom (2 x 1 ml) i isušen pod smanjenim pritiskom (prinos 35%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.45 (s, IH), 8.39 (br s, IH), 8.22 (s, IH), 8.21 (d, IH), 8.19 (d, IH), 4.09 (t. 2H), 2.55 (t, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.26 (s, 6H), 2.05 (m. 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 330.10 (M+l).
Jedinjenje 254:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem N,N-dimetil etanolamina (prinos 36%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.79 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.95 (d, IH), 6.80 (d, IH), 4.15 (t, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.31 (t, 2H), 2.26 (s, 6H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 316.21 (M+l).
Jedinjenje 255:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-hidroksimetil piridina (prinos 10%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.82 (s, IH), 8.65 (d, IH), 8.35 (s, IH), 8.30 (s, IH), 8.21 (s, 2H), 8.05 (s, IH), 7.81 (m, 2H), 7.35 (m, IH), 6.9 (dd, 2H), 5.15 (s, 2H), 2.39 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 336.21 (M+l).
Jedinjenje 256:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-(2-okso-pirolidin-l-il)-propanola (prinos 10%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.79 (s, IH), 8.29 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.92 (d, IH), 6.79 (d, IH), 3.99 (t, 2H), 3.38 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.20 (t, 2H), 2.00 (t, 2H), 1.91 (t, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 392.2 (M+Na).
Jedinjenje 257
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 2-morfolin-4-il-etanola (prinos 39%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.79 (s, IH), 8.29 (d, IH), 8.25 (d, IH), 8.05 (s, IH), 6.95 (d, IH), 6.79 (d, IH), 4.19 (t, 2H), 3.59 (m, 4H), 2.80 (t, 2H), 2.49 (m, 4H), 2.22 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 358.2 (M+l).
Jedinjenje 258:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-morfolin-4-il-propanola (prinos 8%).<!>H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 9.01 (s, IH), 8.62 (br s, IH), 8.22 (s, IH), 8.19 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.91 (d, IH), 6.79 (d, IH), 4.05 (t, 2H), 3.59 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.45 (t, 2H), 2.35 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.00 (t, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 386.31 (M+l).
Jedinjenje 259:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-dimetilamino-propanola (prinos 40%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.37 (s, IH), 8.19 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.09 (br s, IH), 6.80 (dd, 2H), 4.05 (t, 2H), 2.55 (t, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.26 (s. 6H), 2.05 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 344.20 (M+l).
Jedinjenje 260:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 2-morfolin-4-il-etanola (prinos 10%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.79 (br s, IH), 8.82 (s, IH), 8.59 (s, IH), 8.19 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.81 (dd, 2H), 4.20 (t, 2H), 3.75 (m, 4H), 2.91 (t, 2H), 2.61 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 372.1 (M+l).
Jedinjenje 261:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 2-hidroksimetil piridina (prinos 21%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.61 (d, IH), 8.29 (s, IH), 8.11 (s, IH), 7.61 (t, IH), 7.31 (d, IH), 7.18 (t, IH), 6.88 (d, IH), 6.75 (d, IH), 5.18 (s, 2H), 2.30 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 372.2 (M+Na).
Jedinjenje 262:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 4-hiđroksimetil piridina (prinos 18%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.84 (s, IH), 8.55 (d, 2H), 7.91 (s, IH), 7.47 (d, 2H), 6.88 (d, IH), 6.72 (d, IH), 5.28 (s, 2H), 2.22 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 350.21 (M+l).
Jedinjenje 263:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-hidroksimetil piridina (prinos 10%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.82 (s, IH), 8.68 (m, 2H), 8.25 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.84 (d, IH), 7.38 (m, IH), 6.99 (s, IH), 6.88 (d, IH), 6.80 (d, IH), 5.10 (s, 2H), 2.38 (s, 3H). 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 350.21 (M+l).
Jedinjenje 264:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem N,N-dimetil etanolamina (prinos 11%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.69 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.03 (s, IH), 6.95 (d, IH), 6.79 (d, IH), 4.11 (t, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.22 (s, 6H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 330.20 (M+l).
Jedinjenje 265:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253 korišćenjem 3-hidroksimetil piridina i 2-hidroksi-5-trifluorometil anilina (prinos 40%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 8 8.81 (s, IH), 8.69 (s, IH), 8.65 (s, IH), 8.59 (br s, IH), 8.01 (d, IH), 7.45 (t, IH), 7.3 (br s, IH), 5.39 (s, 2H), 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 404.10 (M+l).
Jedinjenje 266:
Korak 1: (6-metil-piridin-3-il)-metanol. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor 6-metil nikotinske kiseline (5,0 mmol) u THF (10 ml) ukapavanjem je dodat Iitijum aluminijum hidrid (20 mmol; 20 ml 1 M rastvora u THF). Reakciona smeša je mešana tokom 4 časa, sekvencijalno tretirana sa 1 ml vode, 1 ml 15% vodenog rastvora natrijum hidroksida i 3 ml vode. Zatim je filtrirana i isprana sa THF (3 * 50 ml). Filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen alkohol u vidu bistrog viskoznog ulja.
Korak 2 i 3: Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 4: U mešani rastvor 5-metil-pirazin-2-karboksilne kiseline (138 mg, 1,0 mmol) u toluenu (3,0 ml) dodati su difenilfosforil azid (216 u.1, 1,0 mmol) i trietilamin (140 u.1, 1,0 mmol). Reakciona smeša je ostavljena u atmosferi azota uz tagrevanje na temperaturi od 90 °C tokom 15 minuta. Temperatura je smanjena na 65 °C i dodat je 5-metil-2-(6-metil-piridin-3-ilmetoksi)-fenilamin (228 mg, 1,0 mmol). Na toj temperaturi je reakciona smeša mešana tokom 4 časa, pa je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 8 časova. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran toluenom (2 * 1 ml) i isušen pod smanjenim pritiskom (prinos 36%).<!>H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.45 (br s, IH), 8.65 (s, IH), 8.29 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.70 (d, IH), 7.19 (d, IH). 6.9 (m, 3H), 5.05 (s, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.4 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 364.16 (M+l).
Jedinjenje 267:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 2-(2-piridil)-etanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(2-piridin-2-il-etoksi)-fenilamina (prinos 37%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.70 (br s, IH), 8.65 (d, IH), 8.45 (br s, IH), 8.21 (s, IH), 7.85 (s, IH), 7.59 (t, IH), 7.29 (t, IH), 6.80 (dd, 2H), 4.49 (t, 2H), 3.39 (t, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.39 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 364.14 (M+l).
Jedinjenje 268:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 3-(2-piridil)-propanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(3-piridin-2-il-propoksi)-fenilamina (prinos 5%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 10.89 (br s, IH), 8.59 (d, IH), 8.49 (s, IH), 8.45 (br s, IH), 8.22 (s, IH), 8.15 (s, IH), 7.59 (t, IH), 7.15 (d, 2H), 6.88 (dd, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.10 (t, 2H), 2.45 (s. 3H), 2.40 (t. 2H), 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 378.10 (M+l).
Jedinjenje 269:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 3-(4-piridil)-propanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(4-piridin-2-il-propoksi)-fenilamina (prinos 28%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.15 (br s, IH), 8.51 (d, 2H), 8.25 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.79 (s, IH), 7.75 (s, IH), 7.15 (d, 2H), 6.82 (d, IH), 6.75 (d, IH), 4.05 (t, 2H), 2.91 (t, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.25 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 378.16 (M+l).
Jedinjenje 270:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem N-metil-N-benzil etanolamina i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-[2-(benzil-metil-amino)-etoksi]-5-metil-fenilamina (prinos 17%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 10.70 (br s, IH), 8.49 (s, IH), 8.20 (s, IH), 7.95 (s, IH), 7.85 (s, IH), 7.32 (m, 5H), 6.85 (s, 2H), 4.15 (t, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.92 (t, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 406.01 (M+l).
Jedinjenje 271:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 3-hidroksimetil-l-metil piperidina i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(l-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenilamina (prinos 16%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 11.25 (brs, IH), 8.45 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.22 (s, 2H), 6.80 (d, IH), 6.74 (d, IH), 3.80 (m, 2H), 3.15 (br d, IH), 2.80 (br d, IH), 2.51 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (m, IH), 2 22 (s, 3H), 1.50 - 2.00 (m, 6H), 1.00 - 1.25 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 370.01 (M+l).
Jedinjenje 272:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 2-(4-dimetilamino-fenil)-etanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-[2-(4-dimetil-amino-fenil)-etoksi]-5-metil-fenilamina (prinos 10%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13)6 11.15 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.25 (s, IH), 7.80 (m, 2H), 7.25 (m, 2H), 6.82 (s, 2H), 6.75 (d, 2H), 4.25 (t, 2H), 3.20 (t, 2H), 2.99 (s, 6H), 2.55 (s, 3H), 2.41 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 405.90 (M+l).
Jedinjenje 273:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem 3-(3-piridil)-propanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(3-piridin-3-il-propoksi)-fenilamina (prinos 16%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.95 (br s, IH), 8.51 (m, 2H), 8.35 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.15 (s, IH), 7.80 (s, IH), 7.50 (d, IH). 7.21 (t, IH), 6.79 (d, IH), 6.75 (d, IH), 4.09 (t. 2H), 2.90 (t. 2H). 2.45 (s, 3H). 2.35 (s. 3H), 2.25 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 377.91 (M+l).
Jedinjenje 274:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem l,3-bis-dimetilamino-propan-2-ola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-(2-amino-4-metil-fenoksi)-N,N,N',N'-tetrametil-propan-l,3-diamina (prinos 4%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 9.69 (br s, IH), 8.95 (br s, IH), 8.19 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.80 {dd, 2H), 4.19 (m, IH), 4.09 (m, IH), 3.05 (m, IH), 2.65 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 6H), 2.38 (s, 6H), 2.35 (s, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 386.92 (M+l).
Jedinjenje 275:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem l-metil-pirolidin-2-S-ilmetanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(l-metil-pirolidin-2-S-ilmetoksi)-fenilamina (prinos 12%). 1 H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.10 (s, IH), 9.85 (br s, IH), 9.65 (br s, IH), 8.78 (s, IH), 8.25 (s, IH), 6.90 (s, IH), 7.02 (d, IH), 6.85 (d, IH), 4.33 (br s, 2H), 3.88 (m, IH), 3.59 (m, IH), 3.19 (m, IH), 2.99 (d, 2H) 2.70 - 2.85 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.80-2.10 (m, 3H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 355.91 (M+l).
Jedinjenje 276:
Korak 1 i 2: Mitsunobu reakcija korišćenjem l-benzil-pirolidin-2-S-ilmetanola i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 5-metil-2-(l-benzil-pirolidin-2-S-ilmetoksi)-fenilamina (prinos 3%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 9.95 (s, IH), 9.90 (br s. IH), 9.59 (br s, IH), 8.69 (s, IH), 8.10 (s, IH), 7.89 (s, IH), 7.25 - 7.50 (m, 6H), 6.96 (d, IH), 6.90 (d, IH), 4.75 (d, 2H), 4.33 (m, 4H), 4.10 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.80 - 2.10 (m, 3H), 1.10 - 1.30 (m, 2H). LRMS (esi, pozitivan) m/e 432.31 (M+l).
Jedinjenje 277:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-pirolidin-l-il-etanola (prinos 28%).<]>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) S 10.01 (s, IH), 9.85 (br s, IH), 9.72 ,(br s, IH), 8.75 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.01 (s, IH), 7.01 (d, IH), 6.80 (d, IH), 4.40 (t, 2H), 3.62 (m, 4H), 3.21 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.00 (m, 2H), 1.88 (m, 2H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 356.2 (M+l).
Jedinjenje 278:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-(l-metil-pirolidin-2-il)-etanola (prinos 28%).<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.01 (s, IH), 9.85 (br s, IH), 9.72 (br s, IH), 8.75 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.01 (s, IH), 7.01 (d, IH), 6.80 (d, IH), 4.20 (m, 3H), 3.00 - 4.00 (m, 1 IH), 2.80 (d, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.25 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 370.2 (M+l).
Jedinjenje 279:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem (3H-imidazol-4-il)-metanola (prinos 24%). 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 8.51 (br s, IH), 8.01 (s, IH), 7.69 (s, IH), 7.20 - 7.50 (m, 2H), 7.10 (d, IH), 6.75 (d, IH), 4.99 (s, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.25 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan m/e 339.1 (M+l).
Jedinjenje 280:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 2-piridin-3-il-etanola (prinos 16%).<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.98 (br s, IH), 8.65 (s, IH), 8.49 (d, IH), 8.35 (s, 2H) 8.20 (s, IH), 7.75 (s, IH), 7.65 (d, IH), 7.19 (m, IH), 6.82 (dd, 2H), 4.31 (t, 2H), 3.21 (t, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 364.2 (M+l).
Jedinjenje 281:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 3-piperidin-l-il-propan-l-ola (prinos 33%). 'H NMR (400 MHz., CDC13) 5 11.21 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.25 (s, 2H), 8.15 (s, IH), 6.80 (dd, 2H), 4.15 (t, 2H), 2.53 (t, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.45 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.61 (m, 4H), 1.45 (m, 2H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 384.2 (M+l).
Jedinjenje 282:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 1-metil-piperidin-4-ola (prinos 4%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.22 (br s, IH), 8.43 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.20 (s, IH), 8.10 (s, IH), 6.81 (dd, 2H), 4.25 (m, IH), 2.8 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.19 (m, 4H), 1.90 (m, 2H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 355.9 (M+l).
Jedinjenje 283:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 korišćenjem 1-benzil-piperidin-4-ola (prinos 1%). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 432.0 (M+l).
Jedinjenje 284:
Korak 1: (l-Metil-piperidin-3-(S)-il)-metanol. U mešani, hladni rastvor (S).(+)-N-boc-nipekotinske kiseline (5,0 mmol) u THF (10 ml) ukapavanjem je dodat Iitijum aluminijum hidrid (20 ml, 20 mmol, 1 M u THF). Reakciona smeša je refluksovana tokom 12 časova, a zatim ohlađena do temperature od 0 °C. Reakcija je prekinuta sekvencijalnim dodavanjem 1 ml vode, 1 ml 15% vodenog rastvora natrijum hidroksida i 3 ml vode. Reakciona smeša je potom filtrirana, a dobijeni materjal je ispran sa THF (3 x 50 ml). Filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijeno bistro viskozno ulje.
Korak 2 i 3: 5-Metil-2-(l-metil-piperidin-3-(S))-ilmetoksi-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 4: Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 266 (prinos 33%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.25 (br s, IH), 8.45 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.22 (s, 2H), 6.80 (d, IH), 6.74 (d, IH), 3.80 (m, 2H), 3.15 (br d, IH), 2.80 (br d, IH), 2.51 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (m, IH), 2.22 (s, 3H), 1.50 - 2.00 (m, 6H), 1.00 - 1.25 (m, 2H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 370.0 (M+l).
Jedinjenje 285:
Korak 1-3: 5-Metil-2-(l-metil-piperidin-3-(R)-ilmetoksi)-fenilamin. Dobijen postupkom opisanim kod Jedinjenja 284 korišćenjem (R)-(+)-N-boc nipekotinske kiseline.
Korak 4: 5-Metilpirazin-2-karboksilni azid (1,2 ekvivalenata) je rastvoren u anhidrovanom toluenu (0,1 M koncentracija) i zagrevan na temperaturi od 90 °C. Nakon 20 minuta prestala je evolucija N2, pa je reakciona smeša karamel boje ohlađena do temperature od 60 °C pre dodavanja gore navedenog anilina u vidu rastvora u toluenu (1 Eq). Nakon mešanja tokom 4 časa na temperaturi od 60 °C, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature tokom noći. Nastali precipitat je izolovan filtracijom (prinos 49%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) § 11.25 (br s, IH), 8.45 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.22 (s, 2H), 6.80 (d, IH), 6.74 (d, IH), 3.80 (m, 2H), 3.15 (br d, IH), 2.80 (br d, IH), 2.51 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (m, IH), 2.22 (s, 3H), 1.50 - 2.00 (m, 6H), 1.00 - 1.25 (m, 2H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 370.0 (M+l).
Jedinjenje 286:
Korak 1: l-Piridin-3-il-etanol. U mešani, ohlađeni (oko 0 °C) rastvor piridin-3-karbaldehida (15 mmol) u THF (40 ml) dodat je metil magnezijum bromid (5 ml, 15 mmol, 3 M rastvor u dietil etru). Nakon mešanja tokom 2 časa, reakcija je prekinuta dodavanjem zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (5 ml). pH vrednost rastvora je podešena na oko 5,0 dodavanjem vodenog rastvora natrijum karbonata, pa je proizvod ekstrahovan etil acetatom (3 x 100 ml). Etil acetat je ispran slanom vodom (1 * 100 ml), isušen (MgSCU) i filtriran. Filtrirani materijal je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, čime je dobijeno žuto ulje.
Korak 2-3: 5-Metil-2-(l-piridin-3-il-etoksi)-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 4: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 17%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.49 (br s, IH), 8.81 (s, IH), 8.73 (s, IH), 8.52 (d, IH), 8.35 (s, IH), 8.25 (s, IH), 8.18 (s, IH), 7.80 (s, IH), 7.72 (d, IH), 7.20 (t, IH). 6.70 (d, IH), 6.65 (d, IH), 5.49 (q, IH), 2.50 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.75 (d, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 363.8 (M+l).
Jedinjenje 287:
Korak 1-2: 5-Metil-2-(l-metil-piperidin-2-ilmetoksi)-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 11%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 6 10.90 (br s, IH), 8.45 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.18 (s, IH), 7.80 (s, IH), 6.80 (s, 2H), 4.51 (m, IH), 2.58 - 3.00 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.50 - 2.25 (m, 7H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 369.9 (M+l).
Jedinjenje 288:
Korak 1-2: 5-Metil-2-(tetrahidro-furan-2-ilmetoksi)-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 12%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.25 (br s, IH), 8.49 (s, IH), 8.40 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.18 (s, IH), 6.8 (s, 2H), 4.42 (m, IH), 3.80 - 4.10 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.20 - 2.20 (m, 4H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 342.9 (M+l).
Jedinjenje 289:
Korak 1: (l-Metil-piperidin-4-il)-metanol. U mešani, ohlađeni rastvor 1-metil-piperidin-4-karboksilne kiseline (5,0 mmol) u THF (10 ml) ukapavanje je dodat Iitijum aluminijum hidrid (20 ml, 20 mmol, 1 M rastvor u THF). Reakciona smeša je mešana tokom 4 časa, a onda je reakcija prekinuta sekvencijalnim dodavanjem 1 ml vode, 1 ml 15% vodenog rastvora natrijum hidroksida i 3 ml vode. Reakciona smeša je filtrirana i isprana sa THF (3 x 50 ml). Filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, čime je dobijeno bistro viskozno ulje.
Korak 2-3: 5-Metil-2-(l-metil-piperidin-4-ilmetoksi)-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 4: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 54%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.18 (br s, IH), 8.62 (br s, IH), 8.38 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.18 (s, IH), 6.82 (d, IH), 6.78 (d, IH), 3.85 (d, 2H), 2.90 (br d, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.35 (m, 6H), 1.50-2.10 (m, 7H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 369.2 (M+l).
Jedinjenje 290:
Korak 1-2: 5-Metil-2-(l-metil-piperidin-3-iloksi)-fenilamin. Mitsunobu reakcija i deprotekcija anilina prema postupku opisanom kod Jedinjenja 253.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 3%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 10.75 (br s, IH), 8.59 (br s, IH), 8.18 (s, IH), 8.05 (s, IH), 7.62 (s, IH), 6.90 (d, IH), 6.80 (d, IH), 4.40 (m, IH), 2.58 (s, 3H), 2.39 (s, 6H), 1.60 - 2.80 (m, 8H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 356.1 (M+l).
Jedinjenje 291:
Korak 1: Metil estar hinolin-3-karboksilne kiseline. U mešani rastvor hinolin-3-karboksilne kiseline (346 mg, 2 mmol) u smeši THF i MeOH u odnosu 4:1 (6 ml) na temperaturi od 0 °C dodat je TMS-diazometan (2 M u heksanu) u delovima, sve dok se održavala žuta boja diazometana. reakciona smeša je koncentrovana, čime je dobijen metil estar u vidu mrke čvrste supstance (244 mg, 65%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 9.44 (s, IH), 8.85 (s, IH), 8.17 (d, IH), 7.96 (d, IH), 7.84 (dd, IH), 7.62 (dd, IH), 4.02 (s, 3H).
Korak 2: Metil estar l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-karboksilne kiseline i metil estar 1-etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-karboksilne kiseline. U mešani rastvor metil estra hinolin-3-karboksilne kiseline (244 mg, 1,3 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (13 ml) na sobnoj temperaturi dodat je NaBH4(345 mg, 9,1 mmol) u delovima (izražena reakcija). Nakon kompletnog dodavanja reakciona smeša je postala tamno žuta. Nakon mešanja tokom 3 časa bojaje postala bledo žuta. Reakciona smeša je izlivena u 50 ml vode i 50 ml CH2CI2i brzo mešana tokom 15 minuta. Slojevi su razdvojeni, a organske materije su koncentrovane do žutog ulja. TLC u smeši EtOAc i heksana u odnosu 15:85 je pokazala potpunu potrošnju početnog materijala i postojanje dve mrlje niže Rf. Jedinjenje je podvrgnuto hromatografiji korišćenjem Biotage 12M kolone (ispunjene sa CH2CI2) i eluirano smešom EtOAc i heksana u odnosu 15:85. Mrlja sa višom Rfodgovara N-etiliranom proizvodu (123 mg, 43%). Mrlja niže Rfodgovara željenom metil estru tetrahidrohinolin-3-karboksilne kiseline (93 mg, 37%).
'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.08 (dd, IH), 6.99 (d, IH), 6.60 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.42 (m, 3H), 3.27 (m, IH), 2.98 (m, 3H), 1.14 (t, 3H) N-H derivat: 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 6.98 (m, 2H), 6.62 (dd, IH), 6.47 (d, IH), 3.71 (s, 3H), 3.52 (m, IH), 3.34 (m, IH), 3.00 (m, 2H),2.90 (m, IH).
Korak 3: (l,2,3,4-Tetrahidro-hinolin-3-il)-metanol. U mešani rastvor metil estra l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-karboksilne kiseline (93 mg, 0,49 mmol) u 1,5 ml Et20 na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota, ukapavanjem je dodat LiAlHt(1 M rastvor u Et20) uz jaku evoluciju gasa i formiranje belog precipitata. Nakon 30 minuta, rakcija je pažljivo prekinuta dodavanjem 15% NaOH (3 ml), a zatim je dodato 3 ml Et20, pa je smeša energično mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan (1 * 10 ml) sa Et20. Organski slojevi su kombinovani, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani do alkohola (64 mg, 80%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) S 6.97 (m, 2H), 6.62 (dd, IH), 6.47 (d, IH), 3.66 (m, IH), 3.58 (m, IH), 3.40 (m, IH), 3.08 (m, IH), 2.82 (m, IH), 2.53 (m, IH), 2.18 (m, IH).
Korak 4: Terc-butil estar [5-metil-2-( 1,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-fenil]-karbaminske kiseline. U mešani rastvor 2-N-boc-amino-4-metilfenola (88 mg, 0,39 mmol), (l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-il)-metanola (64 mg, 0,39 mmol) i trifenilfosfina (103 mg, 0,39 mmol) u 850 pl THF na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodat je rastvor DIAD (77 pl, 0,39 mmol) u 850 pl THF. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom noći, koncenrovana je i direktno postavljena na Biotage 12M kolonu sa CH2CI2i eluirana smešom heksana i EtOAc u odnosu 96:4. Proizvod je izolovan u vidu žutog ulja (129 mg, 89%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 7.92 (br s, IH), 7.06 (br s, IH), 6.99 (m, 2H), 6.81 (m, IH), 6.73 (s, 2H), 6.65 (dd, IH), 6.51 (d, IH), 3.96 (m, 2H), 3.37 (ddd, 2H), 2.79 (ddd, 2H); 2.56 (m, IH), 2.28 (s, 3H), 1.54 (s, 9H).
Korak 5: Benzil estar 3-(2-terc-Butoksikarbonilamino-4-metil-fenoksimetiI)-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline. U mešani rastvor terc-butil estra [5-metil-2-(l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-fenil]-karbaminske kiseline. U mešani rastvor 2-N-boc-amino-4-metilfenola (129 mg, 0,35 mmol) u CH2C12(1,5 ml) na temperaturi od 0 °C dodat je DIEA (61 pl, 0,35 mmol), a nakon toga i benzil hloroformat (50 pl, 0,35 mmol) u DMAP (4 mg, 0,035 mmol). Nakon 24 časa, reakciona smeša je razblažena sa CH2C12i isprana sa 2 N HC1 (2 x 30 ml) i sa zasićenim rastvorom NaHCCb(2*30 ml). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do braon ulja, za koje se ispostavilo a je smeša proizvoda i početnih materija.
Korak 6: Benzil estar 3-(2-amino-4-metil-fenoksimetil)-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline. Rastvor sirovog benzil estra 3-(2-terc-butoksikarbonilamino-4-metil-fenoksimetil)-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline (sirov, 0,35 mmol) u 4 N HC1 u dioksanu (2 ml) na sobnoj temperaturi mešan je u tubi za sušenje tokom noći. Suspenzija je koncentrovana korišćenjem rotovapa, razblažena do zapremine od 30 ml sa CH2C12i mešana sa 10% rastvorom Na2C03(30 ml). Organski slojevi su izolovani, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani do braon ulja koje odgovara sirovom anilinu, koji je dalje korišćen bez prečišćavanja u reakciji dobijanja uree.
Korak 7: Benzil estar 3-{4-metil-2-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-fenoksimetil}-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline. Rastvor azida 5-metil-pirazin-2-karboksilne kiseline u koncentraciji od 0,5 M (204 pl) je razblažen toluenom (408 pl) u zatvorenom reakcionom sudu sa pregradom u atmosferi azota i uz mešanje je potopljen u uljano kupatilo na temperaturi od 90 °C. Nakon oko 20 minuta je prestala evolucija gasovitog azota, pa je reakciona smeša ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a zatim je tretirana rastvorom sirovog benzil estra 3-(2-amino-4-metil-fenoksimetil)-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline (oko 0,101 mmol) u toluenu (620 pl). Smeša je mešana na temperaturi od 65 °C tokom 2 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature tokom noći i dobijen je precipitat. Precipitat je otfiltriran toluenom i ispostavilo se da predstavlja smešu Cbz-zaštićenog i nezaštićenog proizvoda.
Korak 8: l-(5-Metil-pirazin-2-il)-3-[5-metil-2-(l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-fenil]-urea. Mešana suspenzija sirovog benzil estra 3-{4-metil-2-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-fenoksimetil}-3,4-dihidro-2H-hinolin-l-karboksilne kiseline (6,6 mg, 12 u.1) zagrevana je u 5 ml EtOAc na gorioniku do rastvaranja. Bistri rastvor je ohlađen do sobne temperature i tretiran je trietilaminom (3,4 pl, 24 pmol), a zatim i Pearlman-ovim katalizatorom (20% paladijum hidroksid na ugljeniku, 9 mg), smeša je izložena ciklusu izlaganja vakuumu i propuštanja vodonika tri puta, a zatim je držana u vodoniku pod pritiskom od 1 atmosfere tokom 1 časa. Reakciona smeša je filtrirana kroz GF/F filter papir sa EtOAc i koncentrovana do bele čvrste supstance koja odgovara željenom proizvodu (4,7 mg, 100%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3/CD3OD) 8 8.23 (s, IH), 8.18 (s, IH), 7.96 (s, IH), 7.04 (t, IH), 6.97 (d, IH), 6.81 (m, 2H), 6.67 (t, IH), 6.58 (d, IH), 4.04 (m, 2H), 3.57 (d, IH), 3.26 (t, IH), 2.92 (ddd, 2H), 2.64 (m, IH), 2.34 (s, 3H), 2.31 (s, 3H). LRMS (APCI, Pozitivan) m/e 404.2 (M+l).
Jedinjenje 292:
Korak 1: (l-Etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-il)-metanol. U mešani rastvor metil estra l-etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-karboksilne kiseline (123 mg, 0,56 mmol) u 1,5 ml Et20 na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodat je ukapavanjem LAH (1 M u Et20) uz izraženu evoluciju gasa i formiranje belog precipitata. Nakon 30 minuta, TLC u mseši EtOAc i heksana u odnosu 3:7 je pokazala potpunu potrošnju početnih supstanci i pojavljivanje čiste mrlje niže Rf. Reakcija je pažljivo prekinuta doavanjem 15% NaOH (3 ml), pa je dodato 3 ml Et20, a smeša je brzo mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa Et20 (1><10 ml). Organske materije su kombinovane, isušene
(MgS04), filtrirane i koncentrovane do bistrog ulja koje odgovara željenom alkoholu (105 mg, 95%).
Korak 2: Terc-butil estar [2-(l-etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-5-metil-fenilj-karbaminske kiseline. U mešani rastvor (1 -etil-1,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-il)-metanola (105 mg, 0,55 mmol, dobijen u koraku 2, Jedinjenje 126xx), 2-N-boc-amino-4-metilfenola (123 mg, 0,55 mmol) i trifenilfosfma (144 mg, 0,55 mmol) u 850 Ml THF na temperaturi od 0 °C u atmosferi azota dodat je rastvor DIAD (108 u.1, 0,55 mmol) u 850 pl THF. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom noći, koncentrovana je i postavljena direktno na Biotage 12M kolonu sa CH2C12 i eluirana smešom heksana i EtOAc u odnosu 96:4, čime je dobijen željeni alkilirani fenol u vidu bele pene (40 mg, 18%>).<*>H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.92 (br s, IH), 7.08 (dd, IH), 7.02 (m, IH), 6.99 (d, IH), 6.75 (s, 2H), 6.62 (d, IH), 6.59 (dd, IH), 3.98 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 3.20 (m, IH), 2.79 (ddd, 2H), 2.58 (m, IH), 2.28 (s, 3H), 1.56 (s, 9H), 1.16 (t, 3H).
Korak 3: 2-(l-Etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-5-metil-fenilamin. Rastvor terc-butil estra [2-(l-etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-5-metil-fenil]-karbaminske kiseline (40 mg, 0,1 mmol) je mešan sa 4 N HC1 u dioksanu (2 ml) na sobnoj temperaturi u tubi za isušivanje tokom noći. Suspenzija je koncentrovana na rotovapu, razblažena do zapremine od 30 ml sa CH2CI2i mešana sa 10% Na2C03(30 ml). Organske materije su izolovane, isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do braon ulja, koje je dalje korišćeno bez prečišćavanja.
Korak 4: l-[2-(l-Etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-5-metil-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Rastvor 0,5 M acil azida (182 pl) je razblažen sa 364 pl toluena u reakcionom sudu koji je zatvoren u atmosferi azota i uz mešanje je potopljen u uljano kupatilo na temperaturi od 90 °C. Nakon oko 20 minuta prestala je evolucija gasovitog azota, pa je reakciona smeša ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a zatim je tretirana sa rastvorom 2-(l-etil-l,2,3,4-tetrahidro-hinolin-3-ilmetoksi)-5-metil-fenilamina (27 mg, 0,91 mmol) u 550 pl toluena. Smeša je mešana tokom 2 časa na temperaturi od 65 °C. Zatim je ohlađena do sobne temperature tokom noći uz formiranje precipitata. Precipitat je isfiltriran sa toluenom, čime je izolovana željena ureau vidu mrke čvrste supstance (7 mg, 18%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 11.34 (br s, IH), 8.25 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.11 (br s, IH), 7.83 (s, IH), 7.25 (m, IH), 7.18 (d, IH), 7.12 (t, IH), 6.97 (d, IH), 6.80 (m, 2H), 6.70 (d, IH), 6.61 (t, IH), 4.05 (m, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.32 (t, IH), 3.17 (m, IH), 2.91 (ddd, 2H), 2.69 (m, IH), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.04 (t, 3H). LRMS (APCI, Pozitivan) m/e 431.9 (M+l).
Jedinjenje 293:
Korak 1: Kinoksalin-2-karbonil azid. Mešani rastvor kinoksalin-2-karboksilne kiseline (348 mg, 2 mmol) u THF (6 ml) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tretiran je sa diizopropiletilaminom (365 u.1, 2,1 mmol), a zatim i sa difenilfosforil azidom (410 u.1, 1,9 mmol). nakon mešanja tokom noći reakciona smeša je razblažena do zapremine od 60 ml sa Et20 i isprana zasićenim rastvorom NaCl (2 * 60 ml). Nastalo je nerastvorno braon ulje, koje je izdrenirano sa vodenim slojem i za koje se pretpostavlja da je nečistoća (difenil fosfat). Organske materije su isušene (MgS04), filtrirane i koncentrovane do mrke čvrste supstance, koja odgovara acil azidu (350 mg, 92%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.58 (s, IH), 8.32 (d, IH), 8.21 (d, IH), 7.94 (m, 2H).
Korak 2: l-[5-Metil-2-(l-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-kinoksalin-2-il-urea. Rastvor kinoksalin-2-karbonil azida (66 mg, 0,33 mmol) u toluenu (1,7 ml) mešan je u atmosferi azota i potopljen je u uljano kupatilo na temperaturi od 90 °C. Nakon 20 minuta, reakciona smeša je ohlađena do temperature od 65 °C i dodat je čvrsti 5-metil-2-(l-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenilamin (70 mg, 0,3 mmol). Reakciona smeša je mešana na temperaturi od 65 °C tokom 4 časa, a zatim je ostavljena da se ohladi tokom noći do sobne temperature. Dobijeni precipitat je prikupljen filtracijom i ispran toluenom (62 mg, 51%).<!>H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.58 (br s, IH), 9.27 (br s, IH), 8.63 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.03
(d, IH), 7.91 (d, IH), 7.76 (t, IH), 7.61 (t, IH), 6.86 (m, 2H), 4.03 (m, 2H), 2.91 (d, IH), 2.61 (d, IH), 2.37 (s, 3H), 2.25 (m, IH), 2.09 (s, IH), 1.81 (m, 3H), 1.57 (m, 2H), 1.05 (m, IH). LRMS (APCI, Pozitivan) m/e 405.9 (M+l).
Jedinjenje 294:
Korak 1: l-[5-Metil-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-kinoksalin-2-il-urea. Mešani rastvor kinoksalin-2-karbonil azida (92 mg, 0,46 mmol, dobijenog kao što je gore opisano) u 1,5 ml toluena u atmosferi azota potopljeno je u uljano kupatilo na temperaturi od 90 °C. Nakon 20 minuta, reakciona smeša je ohlađena do temperature od 65 °C i dodat je čvrsti 5-metil-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenilamin (90 mg, 0,42 mmol). Reakciona smeša je mešana na temperaturi od 65 °C tokom 4 časa, a zatim je ostavljena da se ohladi tokom noći do sobne temperature. Dobijeni precipitat je prikupljen filtracijom. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na Biotage 12M koloni smešom EtOAc i heksana u odnosu 2:3, čime je dobijena čista urea u vidu mrke čvrste supstance (20 mg, 12%). 1 H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 11.99 (br s, IH), 9.64 (br s, IH), 8.76 (s, IH), 8.61 (s, IH), 8.48 (d, IH), 8.24 (s, IH), 7.98 (d, IH), 7.79 (d, IH), 7.55 (t, IH), 7.42 (t, IH), 7.17 (d, IH), 7.12 (m, IH), 6.93 (m, 2H), 5.26 (s, 2H), 2.41 (s, 3H). LRMS (APCI, Pozitivan) m/e 385.9 (M+l).
Jedinjenje 295:
Korak 1: Mitsunobu postupak.
1- [2-(4-Metil-2-nitro-fenoksi)-etil]-aziridin. Rastvor 2-nitro-4-metilfenola (505 mg, 3,3 mmol, 1,1 Eq) i 2-aziridin-l-il-etanola (3,0 mmol, 1 Eq) u 10 ml THF mešan je na temperaturi od 0 °C. Dodati su trifenilfosfin (0,87 g, 3,30 mmol, 1,1 Eq) i diizopropilazodikarboksilat (0,67 g, 3,30 mmol, 1,1 Eq), pa je rastvor ostavljen da se zagreje do sobne temperature. Nakon 18 časova, reakciona smeša je razblažena sa 100 ml EtOAc i isprana vodom (3 * 20 ml). Organska faza je isprana ponovo sa 1 N HC1 (3 x 20 ml). Vodeni sloj je bazifikovan sa 3 N NaOH do pH vrednosti koja je veća od 12 i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 50 ml), čime je dobijen sirovi proizvod. Konačni proizvod je prečišćen hromatografijom za rektifikaciju lakih frakcija eluiranjem sa 5 - 10% MeOH u dihlorometanu. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 5 7.66 (s, IH), 7.32 (d, 7=8.61 Hz, IH), 7.01 (d, 7=8.61 Hz, IH), 4.26 (t, 7-5.09 Hz, 2H), 2.67 (t, 7= 5.48 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.79 (m, 2H), 1.34 (m, 2H).
Korak 2: Nitro redukcija.
2- (2-Aziridin-l-il-etoksi)-5-metil-fenilamin. Rastvor 3-nitro-4-alkoksi toluena (1,0 mmol) u 20 ml EtOH je hidrogeniran pri pritisku od 2 atmosfere preko 300 mg 10% Pd na ugljeniku tokom 30 minuta. Katalizator je uklonjen filtracijom kroz filter od staklenih vlakana, a filtrat je koncentrovan čime je dobijen željeni proizvod, koji dalje direktno korišćen bez prečišćavanja.
Korak3: Dobijanje uree.
1 -[2-(2-Aziridin-1 -il-etoksi)-5-metil-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Rastvor azida 5-metilpirazin-2-karboksilne kiseline (196 mg, 1,2 mmol, 1,2 Eq) u 20 ml anhidrovanog toluena je zagrejan do temperature od 90 °C. Nakon 20 minuta je prestala evolucija N2, a reakciona smeša je ohlađena do 60 °C pre dodavanja anilina (1,0 mmol, 1 Eq) u vidu rastvora u 2 ml toluena. Nakon mešanja tokom 4 časa na temperaturi od 60 °C, reakciona smeša je podeljena između 50 ml EtOAc i zasićenog rastvora NaHC03. Organska faza je isprana slanom vodom, isušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija, eluiranjem sa 5% MeOH u dihlorometanu.<5>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 10.80 (s, IH), 8.64 (s, IH), 8.53 (s, IH), 8.15 (s, IH), 8.07 (s, IH), 6.82 (m, 2H), 4.2 (M, 2H), 2.7 (m, 2H), 2.5 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.89 (s, 2H), 1.30 (m, 2H). MS APCI-Pozitivan, M/e 328.0 (M+l).
Jedinjenje 296:
Dobijena iz (3-dimetilamino-fenil)-metanola, na način koji je opisan kod Jedinjenja 295. 'HNMR (400 MHz, CDCI3): 5 11.69 (s, IH), 8.26 (s, IH), 8.11 (s, IH), 7.93 (s, IH), 7.26 (m, IH), 6.87 (m, 6H), 5.01 (s, 2H), 2.93 (s, 6H), 2.35 (s, 6H). MS APCI-Pozitivan, M/e 391.9 (M+l).
Jedinjenje 297:
Dobijena iz 3-hidroksi-l-izopropil-pirolidina, na način koji je opisan kod Jedinjenja 295. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 10.08 (s, 2H), 8.65 (s, IH), 8.14 (s, IH), 8.03 (s, IH), 6.81 (d, 7=7.83 Hz, IH), 6.74 (d,.7=8.61 Hz, IH), 4.85 (s, IH), 2.91 (m, IH), 2.75 (m, 2H), 2.48 (m, IH), 2.4 (s, 3H), 2.36 (m, IH), 2.27 (m, IH), 2.21 (s. 3H), 1.85 (m, IH), 1.01 (m, 6H). MS APCI-Pozitivan, M/e 369.9 (M+l).
Jedinjenje 298:
Dobijena iz (l-metil-pirolidin-3-il)-metanola, na način koji je opisan kod Jedinjenja295. lHNMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 10.13 (s, 2H), 8.67 (s, IH), 8.15 (s, IH), 8.06 (s, IH), 6.81 (d,7= 8.61 Hz, IH), 6.75 (d, J= 7.83 Hz, IH), 4.88 (s, IH), 2.75 (m, 4H), 2.5 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.3 (s, 3H), 2.24 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M/e 341.9 (M+l).
Jedinjenje 299:
Korak 1: Terc-butil estar 3-hidroksimetil-piperidin-l-karboksilne kiseline. U mešani rastvor 3-hidroksimetil piperidina (403 mg, 3,5 mmol, 1 Eq) u 20 ml CH2CI2i 5 ml zasićenog rastvora NaHCCb, na temp. od 0 °C dodat je di-terc-butil dikarbonat (803 mg, 3,68 mmol, 1,05 Eq) u nekoliko delova. Nakon mešanja na temp. od = °C tokom 2 časa, rastvor je razblažen sa 10 ml vode i ekstrahovan sa CH2C12(2 * 20 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani vodom, a zatim slanom vodom i isušeni preko MgSCU. filtrirani i koncentrovani, čime je dobijen Boe zaštićeni amin koji je korišćen u sledećem koraku sinteze.
Korak 2-4: Terc-butil estar 3-{4-Metil-2-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-fenoksimetil}-piperidin-l-karboksilne kiseline je dobijen iz terc-butil estra 3-hidroksimetil-piperidin-l-karboksilne kiseline, kao što je opisano kod Jedinjenja 295. Prečišćen je hromatografijom za rektifikaciju lakih frakcija eluiranjem sa 5% MeOH u CH2CI2.
Korak 5: l-[5-Metil-2-(piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Uklanjanje Boe grupe je postignuto tretiranjem rastvora zaštićenog derivata (180 mg, 0,395 mmol) u 15 ml CH2C12na temp. od 0 °C sa 2 ml TFA. Nakon mešanja tokom 18 časova na sobnoj temp., reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je pokupljen sa 20 ml EtOAc i ispran sa 10 ml NaHC03. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 ml), a kombinovani ekstrakti su isprani sa 20 ml slane vode, isušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani, čime je dobijeno 128 mg (91%) željenog amina, 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 10.16 (s, IH), 10.09 (s, IH), 8.53 (s, IH), 8.11 (s, IH), 7.97 (s, IH), 6.8 (d,J=7.8 Hz, IH), 6.69 (d,J=8.6 Hz, IH), 3.77 (s, 2H), 3.09 (m, IH), 2.82 (m, IH), 2.34 (m, 2H), 2.3 (s, 3H), 2.27 (m, IH), 2.15 (s, 3H), 1.92 (m, IH), 1.75 (m, IH), 1.53 (m, IH), 1.37 (m, IH), 1.11 (m, IH). MS APCI-Pozitivan, M/e 356.0 (M+l).
Jedinjenje 300:
Korak 1: 3-(4-Fluoro-2-nitro-fenoksimetil)-piridin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor l,4-difluoro-2-nitro-benzena (3,0 mmol) i 3-piridilkarbinola (3,1 mmol) u THF (8 ml) dodat je Iitijum bis(trimetilsilil)amid (3,2 mmol, 3,2 ml 1,0 M rastvora u THF). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2x30 ml), slanom vodom (1 x 30 ml), a zatim isušena (MgSC^) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni sirovi proizvod.
Korak 2: 5-Fluoro-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenilamin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor 3-(4-fluoro-2-nitro-fenoksimetil)-piridina (1,0 mmol) u metanolu (2 ml) i zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (1 ml) dodat je prah cinka (2,0 mmol). nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 x 30 ml), slanom vodom (1 x 30 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, čime je dobijen željeni sirovi proizvod.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 23%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.62 (br s, IH), 8.80 (s, IH), 8.75 (d, IH), 8.43 (br s, IH), 8.25 (d, IH), 8.15 (s, IH), 7.85 (d, IH), 7.43 (m, IH), 6.95 (m, 2H), 6.68 (m, IH), 5.15 (s, 2H), 2.43 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e354.10 (M+l).
Jedinjenje 301:
Korak 1-2: Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 300, korišćenjem 1,4-difluoro-2-nitrobenzena i l-metil-3-hidroksimetil piperidina.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 285 (prinos 62%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.22 (m, 3H), 7.21 (m, 2H), 6.78 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.21
(m, IH), 2.85 (m, IH), 2.52 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 1.50 - 2.30 (m, 8H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 374.21 (M+l).
Jedinjenje 302:
Korak 1-2: Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 300, korišćenjem 1,4-difluoro-2-nitrobenzena i 1 -metil-4-hidroksipiperidina.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 78%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.49 (br s, IH), 8.89 (br s, IH), 8.35 (s, IH), 8.22 (d, IH), 8.10 (s, IH), 6.80 (m, IH), 6.70 (m, IH), 4.25 (m, IH), 2.90 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.80 - 2.30 (m, 6H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 359.91 (M+l).
Jedinjenje 303:
Korak 1:3-(5-Fluoro-2-nitro-fenoksimetil)-piridin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor 2-nitro-5-fluoro-fenola (2,0 mmol), trifenil fosfina (2,0 mmol) i 3-hidroksimetilpiridina (2,0 mmol) u suvom THF (5 ml) dodat je diizopropil azodikarboksilat (2,0 mmol u 1 ml THF). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 * 30 ml), slanom vodom (1 x 30 ml), a zatim isušena (MgSC^) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čim eje dobijen željeni sirovi proizvod.
Korak 2: 4-Fluoro-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenilamin. Nitro redukcija prema postupku opisanom kod Jedinjenja 300.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 60%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.41 (br s, IH), 8.85 (s, IH), 8.75 (d, IH), 8.40 (t, IH), 8.18 (s, IH), 7.88 (s, IH), 7.80 (d, IH), 7.43 (t, IH), 7.00 (s, IH), 6.80 (m, 2H), 5.12 (s, 2H), 2.43 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 354.21 (M+l).
Jedinjenje 304:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 303 korišćenjem 2-nitro-5-fluorofenola i l-metil-3-hidroksimetil piperidina. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.50 (br s, IH). 8.19 (m, 2H), 6.65 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.80 - 3.20 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 1.60 - 2.10 (m 5H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 373.95 (M+l).
Jedinjenje 305:
Dobijena prema postupku opisanom kod Jedinjenja 303 korišćenjem 2-nitro-5-fluorofenola i l-metil-4-hidroksipiperidina. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.35 (br s, IH), 9.49 (s, IH), 8.35 (m, 2H), 8.05 (s, IH), 6.65 (m, 2H), 4.35 (m, IH), 2.90 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.80 - 2.30 (m, 6H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 359.93 (M+l).
Jedinjenje 306:
Korak 1: 3-(2,3-Difluoro-6-nitro-fenoksimetil)-piridin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor 2,3-difluoro-6-nitrofenola (2,0 mmol), trifenil fosfina (2,0 mmol) i 3-hidroksimetilpiridina (2,0 mmol) u suvom THF (5 ml) dodat je diizopropil azodikarboksilat (2,0 mmol u 1 ml THF). Nakon mešanja tokom 12 časova reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 x 30 ml), slanom vodom (1 * 30 ml), a zatim isušena (MgSO.4) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijen željeni proizvod.
Korak 2: 3,4-Difluoro-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenilamin. Nitro redukcija prema postupku opisanom kod Jedinjenja 300.
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 20%).
'H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 11.49 (br s, IH), 8.89 (s, IH), 8.85 (s, IH), 8.65 (d, IH), 8.25 (s, IH), 8.10 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.35 (t, IH), 7.18 (s, IH), 6.98 (m, IH), 5.25 (s, 2H), 2.52 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 372.10 (M+l).
Jedinjenje 307:
Korak 1: 5-Metil-2-(piridin-4-iloksi)-fenilamin. U mešani rastvor 2-amino-4-metil fenola (616 mg, 5,0 mmol) i 4-hloro piridina (625 mg, 5,5 mmol) u dimetil sulfoksidu (5 ml) dodat je natrijum hidroksid (600 mg, 15,0 mmol u 1 ml vode), reakciona smeša je zagrevana na temp. od 100 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana sa vodenim rastvorom 10% natrijum karbonata (1 * 50 ml) i slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgSO,*) i filtrirana. Sirovi prozvod je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kretridž uz eluiranje smešom metilen hlorida, metanola i amonijaka (90 : 8 : 2). čime je dobijeno žuto ulje (prinos 10%).
Korak 2: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 36%).
<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.41 (br s, IH), 8.52 (m, 3H), 8.33 (s, IH), 8.22 (s, IH), 7.61 (s, IH), 6.80 - 7.00 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.45 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 335.91 (M+l).
Jedinjenje 308:
Korak 1: 3-(4-Metil-2-nitro-fenoksi)-piridin. U mešani rastvor l-hloro-4-metil-2-nitrobenzena (686 mg, 4,0 mmol) i piridin-3-ola (418 mg, 4,40 mmol) u dimetilformamidu (5 ml) dodat je kalij um karbonat (1,22 g, 8,80 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na tmep. od 50 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana vodenim 10% rastvorom natrijum karbonata (1 * 50 ml) i slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgSCM) i flitrirana. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kartridža uz eluiranje heksanima i etil acetatom (1:1), čim e je dobijeno svetio žuto ulje (prinos 27%).
Korak 2: 5-Metil-2-(piridin-3-iloksi)-fenilamin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor 3-(4-metil-2-nitro-fenoksi)-piridina (1,0 mmol) u metanolu (2 ml) i zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (1 ml) dodat je prah cinka (2,0 mmol). Nakon mešanja tokom 12 časova reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 * 30 ml), slanom vodom (1 * 30 ml), a zatim isušena (MgSO,}) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijeno braon ulje (prinos 95%).
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 45%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.49 (br s, IH), 8.55 (s, IH), 8.39 (d, IH), 8.35 (s, IH), 8.15 (s, IH), 8.05 (br s, IH), 7.21 (m, 2H), 6.92 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.45 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 335.91 (M+l).
Jedinjenje 309:
Korak 1: 2-(4-Metil-2-nitro-fenoksi)-piridin. U mešani rastvor l-hloro-4-metil-2-nitrobenzena (686 mg, 4,0 mmol) i piridin-2-ola (418 mg, 4,40 mmol) u dimetilformamidu (5 ml) dodat je kalijum karbonat (1,22 g, 8,80 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na temp. od 50 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana vodenim 10% rastvorom natrijum karbonata (1<*>50 ml) i slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgSCu) i filtrirana. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kartridža uz eluiranje heksanima i etil acetatom (1:1), čim e je dobijeno svetio žuto ulje (prinos 11%).
Korak 2: 5-Metil-2-(piridin-2-iloksi)-fenilamin. U mešani hladni (temp. oko 0 °C) rastvor 2-(4-metil-2-nitro-fenoksi)-piridina (1,0 mmol) u metanolu (2 ml) i zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (1 ml) dodat je prah cinka (2,0 mmol). Nakon mešanja tokom 12 časova reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 30 ml 10% vodenog rastvora natrijum karbonata (2 * 30 ml), slanom vodom (1 * 30 ml), a zatim isušena (MgSCM) i filtrirana. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijeno braon ulje (prinos 77%).
Korak 3: Dobijanje uree prema postupku opisanom kod Jedinjenja 295 (prinos 43%).
'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.51 (br s, IH), 8.42 (br s, IH), 8.00 (s, IH), 7.80 (s, IH), 7.51 (t, IH), 7.29 (d, IH), 7.05 (d, IH), 6.95 (d, IH), 6.75 (d, IH), 6.35 (t, IH), 2.49 (s, 3H), 2.45 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 335.91 (M+l).
Supstituisane aminopirazin uree. Opšti postupak:
U mešani rastvor aminopirazinskog derivata koncentracije 0,3 M (1 Eq) u dihloroetanu na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je 2-metoksi-5-metilfenilizocijanat (1 Eq). Reakciona smeša se zagreva do temp. od 80 °C tokom noći, a zatim ohladi do sobne temperature. U većini slučajeva, proizvod precipitira i izoluje se filtracijom. Alternativno, proizvod može da se izoluje hromatografijom na silika gelu korišćenjem smeše EtOAc i heksana ili smeše CH2CL i MeOH kao eluenta.
Jedinjenje 310
Korak 1: 2-Metilaminopirazin. U mešani rastvor 2 M metilamina u 1 ml metanola, na sobnoj temperaturi, dodat je 2-hloropirazin. Reakciona smeša je zatvorena i zagrevana na temp. od 60 °C tokom 24 časa. Zatim je koncentrovana do smeše početnog materijala i željenog 2-metilaminopirazina u odnosu 1:2. Materijal je korišćen kao sirov u reakciji dobijanja uree. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.97 (d, IH), 7.85 (s, IH), 7.73 (d, IH), 2.96 (s, 3H).
Korak 2: U 0,3 M mešani rastvor 2-metilaminopirazina (1 Eq) u dihloroetanu na sobnoj temp. u atmosferi azota dodat je 2-metoksi-5-metilfenilizocijanat (1 Eq). reakciona smeša je zagrevana tokom noći na temp. od 80 °C, a zatim ohlađena do sobne temp. U većini slučajeva, proizvod precipitira i izoluje se filtracijom. Alternativno, proizvod može da se izoluje hromatografijom na silika gelu korišćenjem smeše EtOAc i heksana ili smeše CH2CI2i MeOH kao eluenta. 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.57 (s, IH), 8.32 (s, IH), 8.31 (s, IH), 8.17 (s, IH), 6.80 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.32 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 273.2 (M+l).
Jedinjenje 311:
Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-4-metilpirazina. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.12 (br s, IH), 8.28 (s, IH), 8.17 (s, IH), 8.09 (s, IH), 6.81 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 273.2 (M+l).
Jedinjenje 312:
Korak 1: 2-Amino-5,6-dimetilpirazin. Glicin amidin dihidrobromid (620 mg, 2,64 mmol) je mešan u 6 ml MeOH na temp. od -30 °C (kupatilo sa acetonitrilom i CO2) u zatvorenom reakcionom sudu. Odvojeno je mešan butandion (232 pl, 2,64 mmol) u 6 ml vode sa natrijum acetatom (700 mg) do homogenizacije. Dodat je diketon u rastvor amidina putem pipete, a zatim i 2,5 ml rastvora NaOH koncentracije 3,6 M. Žuto rastvor je ostavljen da se zagreje polako do sobne temp., a zatim je mešan tokom noći. MeOH je uklonjen rotacionom evaporacijom, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 30 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani do žute čvrste supstance koja je sadržala neke nečistoće. Čvrsta supstanca je sprašena sa smešom EtOAc i Et20 i filtrirana čime je dobijen čisto jedinjenje (55 mg, 17%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.76 (s, IH), 4.25 (br s, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).
Korak 2: Urea dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5,6-dimetilpirazina. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 11.43 (br s, IH), 8.23 (s, IH), 8.00 (s, IH), 7.64 (br s, IH), 6.81 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (APCI, Pozitivan) m/e 287.1 (M+l).
Jedinjenje 313:
Korak 1: 2-Amino-5-trifluorometilpirazin. Dobijen prema postupku autora Miesel, J. U.S. patent br. 4,293,552 (1981).
Korak 2: Urea dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5-trifluorometilpirazina. 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.59 (s, IH), 9.78 (br s, IH), 9.06 (s, IH), 8.80 (s, IH), 8.00 (s, IH), 6.96 (d, IH), 6.81 (d, IH), 3.87 (s, 3H), 2.22 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 327.1 (M+l).
Jedinjenje 314:
Korak 1: 2-Hidroksi-5,6-difenilpirazin. U mešanu suspenziju glicinamid hidrohlorida (1,1 g, 10 mmol) u 20 ml MeOH na 0 °C dodata je 20% NaOH (10 ml, 50 mmol). Nastao je bistar rastvor, koji je polako tretiran benzilom (2,1 g, 10 mmol) u vidu čvrste supstance. Žuti rastvor je mešan na 0 °C tokom 2 časa, a zatim je neutralizovan do pH vrednosti od oko 7 sa koncentrovanom HC1. Bledo žuta boja je nestala i nastao je mrki precipitat. Materijal je izolovan filtracijom sa MeOH i sprašen sa EtOAc čime je dobijen 2-hidroksi-5,6-difenilpirazin (2 g, 80%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.24 (s, IH), 7.42 - 7.31 (m, 4H), 7.39-7.21 (m, 6H).
Korak 2: 2-Hloro-5,6-difenilpirazin. Mešani rastvor 2-hidroksi-5,6-difenilpirazina (430 mg, 1,7 mmol) u 5,2 ml POCI3u zatvorenom reakcionom sudu je zagrevan do 100 °C tokom 4 časa. Narandžasti rastvor je ohlađen do sobne temperature i brzo mešan u smeši CH2CI2(100 ml) i ledeno hladnog 10% rastvora Na2C03(100 ml) tokom 15 ml. Organski sloj je izolovan i ispran 10% rastvorom Na2C03(2 x 100 ml). Organski sloj je izolovan, isušen (MgS04), filtriran i koncentrovan do hloropirazina, koji se nalazi u obliku bele čvrste supstance (450 mg, kvantitativno). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.59 (s, IH), 7.45 - 7.39 (m, 4H), 7.36 - 7.24 (m, 6H).
Korak 3: 2-Azido-5,6-difenolpirazin. U mešani rastvor 2-hloro-5,6-difenilpirazina (45 mg, 0,17 mmol) u 500 pl DMF na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je natrijum azid (11 mg, 0,17 mmol) i reakciona smeša je zagrejana do temp. od 100 °C. Nakon mešanja tokom noći, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc (30 ml) i isprana vodom (4 x 30 ml) i slanom vodom (1 * 30 ml). Organski slojevi su izolovani, isušeni (MgSO-O, filtrirani i koncentrovani do 2-azidopiridina, koji je u vidu žute čvrste supstance (45 mg, kvantitativno). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 9.73 (s, IH), 7.58 - 7.42 (m, 6H), 7.36 - 7.23 (m, 4H).
Korak 4: 2-Amino-5,6-difenilpirazin. U mešani rastvor 2-azido-5,6-difenilpirazina (45 mg, 0,17 mmol) u 50 ml EtOAc na sobnoj temperaturi dodat je trietilamin (100 pl), a zatim i Pearlman-ov katalizator (50 mg). Suspenzija je tretirana tri puta ciklusu izlaganja vakuumu i propuštanja vodonika, a zatim je držana u vodoniku pod pritiskom od 1 atmosfere tokom 2 časa. Suspenzija je zatim filtrirana kroz GF/F filter papir sa EtOAc i koncentrovana. Sirovi proizvod je eluiran korz Biotage 12S kolonu smešom EtOAc i heksana u odnosu 1:1, čime je dobijen proizvod u vidu bistrog ulja (25 mg, 59%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.04 (s, IH), 7.42 - 7.20 (m, 10H), 4.62 (br s, 2H).
Korak 5: Dobijen korišćenjem opšteg postupka opisanog kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5,6-difenilpirazina. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.34 (s, IH), 8.13 (s, IH), 7.80 (s, IH), 7.46 (d, 2H), 7.37 - 7.23 (m, 10H), 6.81 (d, IH), 6.66 (d, IH), 3.17 (s, 3H), 2.33 (s, 3H).
Jedinjenje 315:
Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-3-benzil-4-(4-metoksifenil)pirazina. 'H-NMR(400 MHz, CDC13) 5 8.51 (s, IH), 8.11 (s, IH), 7.96 (d, 2H), 7.34 (m, 5H), 7.03 (d, 2H), 6.80 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 2.30 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 477.2 (M+l).
Jedinjenje 316:
Korak 1: Tetrazol[l,5-a]pirazin-5-ilamin. Dobijen prema postupku koji je opisao Shaw, J.T. et al, J. Heterocvclic Chem. 1980, 17, 11.
Korak 2: Dobijen korišćenjem p-nitrofenil karbamata i tetrazol[l,5-a]pirazin-5-ilamin prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 166 (korak 2). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 6 9.72 (brs, IH), 8.23 (s, IH), 7.97 (s, IH), 7.87 (s, IH), 7.80 (br s, IH), 6.88 (d, IH), 6.80 (d, IH), 3.84 (s, 3H), 2.36 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 300.0 (M+l).
Jedinjenje 317:
U mešani rastvor l-(6-azido-pirazin-2-il)-3-(2-metoksi-5-metil-fenil)-uree (8 mg, 27 pmol) u 95% EtOH (2 ml) na sobnoj temperaturi dodati su koncentrovani NH4OH (10 pl) i 10% Pd na ugljeniku (25 mg). Suspenzija je tretirana tri puta ciklusu izlaganja vakuumu i propuštanja vodonika, a zatim je držana u vodoniku pod pritiskom od 50 psi i mešana na Parr mešaču. Nakon 2 časa, ponovljen je ciklus izlaganja vakuumu i propuštanja vodonika, pa je reakciona smeša držana u vodoniku još 2 časa. Suspenzija je zatim filtrirana kroz GF7F filter papir sa EtOH i koncentrovana do žutog filma (3 mg, 41%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.19 (s, IH), 7.61 (s, IH), 7.56 (s, IH), 6.83 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 274.2 (M+l).
Jedinjenje 318:
U mešani rastvor 2-amino-6-hloropirazina (130 mg, 1 mmol) u 3 ml THF na temp. od 0 °C u atmosferi azota dodat je metil magnezijum jodid (3 M rastvor u ET2O, 330 pl, 1 mmol), čime je dobijena žuta suspenzija, koja je mešana na temp. od 0 °C tokom 15 minuta. Suspenzija je tretirana čistim izocijanatom (147 pl, 1 mmol) i ostavljena je da se zagreje do sobne temperature. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc (30 ml) i 10% rastvora Na2C03(30 ml). Organski slojevi su izolovani i isprani sa 10% Na2C03(1 * 30 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (1 x 30 ml). Organski slojevi su isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani do sirovog ostatka koji je sprašen sa EtOAc, čime je, nakon filtracije, dobijen urea proizvod u vidu bele čvrste supstance (27 mg, 9%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 8.26 (s, IH), 8.23 (s, IH), 8.17 (s, IH), 8.09 (br s, IH), 6.84 (d, IH), 6.81 (d, IH), 3.96 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 293.0 (M+l).
Jedinjenje 319:
Korak 1: 2-Amino-5-bromopirazin. U mešani ohlađeni (temp oko 0 °C) rastvor aminopirazina (5,0 g, 52,6 mmol) u metilen hloridu (200 ml) dodat je N-bromosukcinimid (9,39 g, 52,8 mmol). Nakon mešanja tokom 24 časa, reakciona smeša je isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (3 x 50 ml), vodom (50 ml), a zatim isušena (MgSCu) i filtrirana. Filtrirani materijal je koncentrovan pod smanjenim pritiskom, rastvoren u minimalnoj količini etil acetata (5 ml), a zatim u heksanima (200 ml), nastali su žuti kristali koji su filtrirani i isušeni (prinos 56%>).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-4-bromopirazina. 'H-NMR (400 MHz, CDC13/CD30D) 5 8.55 (s, IH), 8.32 (s, IH), 8.03 (s, IH), 6.81 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.34 (s, 3H).
Jedinjenje 320:
Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-4,6-dibromopirazina. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.98 (s, IH), 7.13 (s, IH), 6.79 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.32 (s, 3H).
Jedinjenje 321:
l-[5-(l,3-Diokso-l,3-diMdro-izoindol-2-ilmetil)-pirazin-2-il]-3-(2-metoksi-5-metil-fem
Korak 1: Terc-butil estar (5-bromometil-pirazin-2-il)-karbaminske kiseline. U mešani rastvor 2-Boc-amino-5-metil pirazina (1,34 g, 6,4 mmol) u 20 ml CCU na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je N-bromosukcinimid (1,14 g, 6,4 mmol), a zatim i benzoil peroksid (125 mg). Rastvor je ozračen sa sijalicom od 100 W, koja je dovela do izraženog refluktovanja reakcione smeše. Nakon 2 časa, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena do zapremine od 125 ml sa CH2C12 i isprana sa 10% rastvorom natrijum bisulfita (1 x 125 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (1 x 125 ml). Organski slojevi su isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani do braon ulja, koje je direktno postavljeno na Biotage 40S kolonu sa CH2C12 uz eluiranje smešom EtOAc i heksana u odnosu 15:85, čime je dobijen željeni benzil bromid u vidu žute čvrste supstance (954 mg, 51%). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 9.22 (s, IH), 8.29 (s, IH), 7.37 (br s, IH), 4.54 (s, 2H), 1.55 (s, 9H).
Korak 2: Terc-butil estar [5-(l,3-diokso-l,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-pirazin-2-il]-karbaminske kiseline. U mešani rastvor ftaiimida (971 mg, 6,6 mmol) i K2CO3u prahu (1,37 mg, 9,9 mmol) u acetonitrilu (9,9 ml) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota dodat je bromid (954 mg, 3,3 mmol) u vidu čvrste supstance. Suspenzija je zagrevana na temp. od 65 °C tokom 4 časa. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je podeljena između EtOAc (60 ml) i vode (60 ml). Organski slojevi su izolovani i isprani vodom (2 x 50 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (1 x 50 ml). Organski slojevi su isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je sprašen sa CH2CI2i filtriran kako bi se uklonio ftalimid u vidu čvrste supstance, a zatim je filtrirani i delom koncentrovani proizvod postavljen na Biotage 40S kolonu i eluiran smešom EtOAc i heksana u odnosu 3:7, čime je dobijen željeni ftalimid u vidu bele čvrste supstance (495 mg, 42%). 1 H-NMR (400 MHz, CDC13) 8 9.17 (s, IH), 8.23 (s, IH), 7.85 (m, 2H), 7.71 (m, 2H), 7.39 (br s, IH), 4.97 (s. 2H), 1.52 (s, 9H).
Korak 3: 2-(5-Ainino-pirazin-2-ilmetil)-izoindol-l,3-dion. U mešani rastvor ftaiimida (495 mg, 1,4 mmol) u 7 ml CH2CI2na sobnoj temp. u zatvorenom reakcionom sudu dodata je trifluorosirćetna kiselina (7 ml). Nakon mešanja tokom noći, reakciona smeša je koncentrovana kako bi se uklonio višak TFA, a zatim je rastvorena u 200 ml smeše CH2CI2i MeOH u odnosu 10:1, mešana brzo i tretirana rastvorom 10% Na2C03(200 ml). Organski slojevi su izolovani, isušeni (MgS04), filtrirani i koncentrovani čime je dobijen slobodni aminopirazin u vidu žute čvrste supstance (260 mg, 73%).<l>H-NMR (400 MHz, CDCI3) 8 8.25 (s, IH), 7.85 (m, 2H), 7.77 (s, IH), 7.74 (m, 2H), 4.83 (s, 2H).
Korak 4: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-(5-Amino-pirazin-2-ilmetil)-ozoindol-l,3-diona. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.38 (s, IH), 8.29 (s, IH), 8.03 (s, IH), 7.86 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 6.81 (m, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.31 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 418.1 (M+l).
Jedinjenje 322:
U mešani rastvor l-[5-(l,3-diokso-l,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-pirazin-2-il]-3-(2-metoksi-5-metil-fenil)-uree (16 mg, 38 pmol) u 380 pl 95% EtOH i 100 pl DMF na sobnoj temp. u zatvorenom reakcionom sudu dodat je hidrazin monohidrat (3,8 pl, 76 pmol). nakon mešanja tokom noći na sobnoj temp., formirao se beli precipitat. Precipitat je odfiltriran, isušen i sprašen sa EtOAc kako bi se uklonile nečistoće bazirane na ftalimidu, čime je dobijen proizvod u vidu bele čvrste supstance (7,9 mg, 72%). 'H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 9.54 (s, IH), 8.80 (s, IH), 8.46 (s, IH), 8.02 (s, IH), 6.93 (d, IH), 6.79 (d, IH), 4.51 (d, 2H), 4.39 (br s, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.23 (s, 3H). LRLCMS (ESI, Pozitivan) m/e 288.2 (M+l).
Jedinjenje 323:
Korak 1: 2-Amino-6-metoksipirazin. U mešani rastvor metanola (89 pl, 2,2 mmol) u dioksanu (1 ml) dodat je natrijum hidrid (53 mg, 2,2 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je 2-amino-6-hloropirazin (258 mg, 2,0 mmol), pa je reakciona smeša zagrevana do temp. od 90 °C. Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 x 30 ml) i slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgSC^) i filtrirana. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 121 kertridža uz eluiranje heksanom i etil acetatom (3: 1), čime je dobijena bela čvrsta supstanca (prinos 11%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-6-metoksipirazina (prinos 8%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.15 (s, IH), 8.05 (br s, IH), 7.92 (s, IH), 7.82 (s, IH), 6.89 (d, IH), 6.80 (d, IH), 4.05 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 289.10 (M+l).
Jedinjenje 324:
Korak 1: 2-Amino-6-benziloksipirazin. U mešani rastvor benzil alkohola (432 pl, 4,0 mmol) u dioksanu (2 ml) dodat je natrijum hidrid (96 mg, 4,0 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, dodat je 2-amino-6-hloropirazin (258 mg, 2,0 mmol), pa je reakciona smeša zagrevana do temp. od 90 °C. Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana 10%> vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 30 ml) i slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgSC>4) i filtrirana. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 121 kertridža uz eluiranje heksanom i etil acetatom (3: 1), čime je dobijena bela čvrsta supstanca (prinos 33%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-6-benziloksipirazina (prinos 34%). 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 9.99 (s, IH), 9.18 (s, IH), 8.62 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.95 (s, IH), 7.52 (d, 2H), 7.41 (m, 3H), 6.92 (d, IH), 6.80 (d, IH), 5.39 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.21 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 365.10 (M+l).
Jedinjenje 325:
U mešani rastvor l-(5-bromo-pirazin-2-il)-3-(2-metoksi-5-metil-fenil)-uree (47 mg, 0,14 mmol) u N-metil pirolidinonu (300 pl) dodat je natrijum metoksid (0,5 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do temp. od 100 °C. Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 x 30 ml), slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Sirovi prozvod je prečišćen korišćenjem 0,5 mm preparativne ploče eluiranjem heksanom i etil acetatom (1:1), čime je dobijena žuta čvrsta supstance (13%).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.12 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.91 (s, IH), 6.80 (dd, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 289.10 (M+l).
Jedinjenje 326:
Korak 1: 2-Amino-5-alkinilpirazin. U mešani rastvor 5-bromo-2-aminopirazina (432 mg, 2,5 mmol), Pd(Ph3P)2Cl2(91 mg, 0,13 mmol), Cul (1,2 g, 6,5 mmol) u trietilaminu (8 ml) dodat je TMS-acetilen. Reakciona smeša je mešana na temp. od 60 °C tokom 12 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa 30 ml acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 30 ml), slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgSO-4) i filtrirana. Sirovi proizvod je razblažen sa 1 ml metanola i natrijum hidroksida (10 ml 1 N vodenog rastvora). Nakon mešanja tokom 12 časova reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana sa 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 x 30 ml), slanom vodom (30 ml), a zati isušena (MgS04) i filtrirana. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 12L kolone uz eluiranje metilen hloridom i metanolom (98 : 2), čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (40%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5-alkinilpirazina (prinos 20%).<!>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 10.25 (s, IH), 9.80 (br s, IH), 8.90 (s, IH), 8.50 (s, IH), 8.00 (s, IH), 6.95 (d, IH), 6.82 (d, IH), 4.42 (s, IH), 3.82 (s, 3H), 2.22 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 283.10 (M+l).
Jedinjenje 327:
Korak 1: 2-Amino-5-etilpirazin. U mešani rastvor 5-etinil-2-aminopirazina (18 mg, 0,151 mmol) u etil acetatu (500 pl) dodat je trietilamin (63 pl, 0,45 mmol) i Pd(OH)2(0,01 mmol, 20%) w/w na ugljeniku). Reakciona smeša je ostavljena u atmosferi vodonika pod pritiskom od 45 psi i mešana tokom 6 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 84%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5-etilpirazina (prinos 27%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.65 (s, IH), 8.38 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.08 (s, IH), 6.80 (dd, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.81 (q, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.39 (t, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 287.21 (M+l).
Jedinjenje 328:
Korak 1: 2-Amino-5-cijanopirazin. U mešani rastvor 5-bromo-2-aminopirazina (1,0 g, 5,8 mmol), Cul (2,76 g, 14,5 mmol), 18-crown-6 (121 mg, 0,46 mmol), kalijum cijanida (943 mg, 14,5 mmol) u dimetilformamidu (20 ml) dodat je Pd(PPfi3)4 (196 mg, 0,17 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta, reakciona smeša je ostavljena u uljanom kupatilu na temperaturi od 155 °C tokom 2 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a zatim je izlivena u hloroform (300 ml). Dobijen je precipitat koji je filtriran i sprašen u heksanima, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 60%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5-cijanopirazina (prinos 30%). 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 6 8.89 (s, IH), 8.79 (s, IH), 8.05 (s, IH), 6.91 (d, IH), 6.80 (d, IH), 3.85 (s, 3H), 2.22 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 283.91 (M+l).
Jedinjenje 329:
Korak 1: 5-Benzoil-pirazin-2-karboksilna kiselina. U mešani hladni (temp. 0 °C) rastvor 2-pirazin-karboksilne kiseline (3,0 g, 24,2 mmol) i benzaldehida (7,4 ml, 73 mmol) u 50% vodenom rastvoru sumporne kiseline (40 ml) i 25 ml sirćetne kiseline simultano su dodati FeS04x 7 H20 (20,3 g, 73 mmol rastvoreno u 50 ml vode) i t-butil peroksid (9,2 ml, 73 mmol). Nakon mešanja tokom 1 časa, reakciona smeša je tretirana sa 200 ml vode. Dobijen je precipitat koji je filtriran i ispran metilen hloridom (3 * 100 ml), čime je dobijena mrka čvrsta supstanca (prinos 36%).
Korak 2: l-(5-Benzoil-pirazin-2-il)-3-(2-metoksi-5-metil-fenil)-urea. U mešani rastvor 5-benzoli-pirazin-2-karboksilne kiseline (912 mg, 4,0 mmol) i trietilamina (584 pl, 4,2 mmol) u toluenu (12 ml) dodat je difenil fosforil azid (860 pl, 4,0 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 30 minuta, a zatim je dodat t-butanol (764 pl, 8,0 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do temp. od 90 °C i mešana tokom 3 časa. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 30 ml), slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgSCu) i filtrirana. Materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kertridža uz eluiranje heksanom i etil acetatom (1:1), čime je dobijen sivkasti proizvod (prinos 14%). 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5 9.41 (s, IH), 9.01 (s, IH), 8.45 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.08 (d, 2H), 7.61 (t, IH), 7.52 (t, 2H), 6.90 (d, IH), 6.82 (d, IH), 3.92 (s, 3H), 2.39 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 363.21 (M+l).
Jedinjenje 330:
U mešani rastvor l-(5-benzoil-pirazin-2-il)-3-(2-metoksi-5-metil-fenil)-uree (22 mg, 0,061 mmol) u metanolu (1 ml) dodat je natrijum borhidrid (10 mg, 0,3 mmol). Nakon mešanja tokom 12 časova, reakciona smeša je razblažena sa 30 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 30 ml), slanom vodom (30 ml), a zatim isušena (MgSC>4) i filtrirana. Filtrirani materijal je koncentrovan pod smanjenim pritiskom čime je dobijena bela čvrsta supstanca (prinos 91%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.48 (br s, IH), 8.39 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.12 (s, IH), 7.25 - 7.45 (m, 5H), 6.89 (d, IH), 6.80 (d, IH), 5.85 (d, IH), 3.88 (s, 3H), 2.37 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 365.24 (M+l).
Jedinjenje 331:
Suzukijev postupak
Korak 1: U mešani rastvor 2-amino-6-hloro pirazina (400 mg, 3,1 mmol) i fenil bome kiseline (415 mg, 3,4 mmol) u dioksanu (6 ml) i etanolu (3 ml) dodat je cezijum karbonat (2,28 g, 7,0 mmol u 3 ml vode), a zatim je dodat Pd(PPh3)4(185 mg, 0,16 mmol). reakciona smeša je zagrejana do temp. od 75 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 x 50 ml), slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgSC^) i filtrirana. Materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 40M kertridža uz eluiranje etil acetatom, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 84%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-6-fenilpirazina (prinos 33%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 11.11 (br s, IH), 8.612 (s, IH), 8.29 (s, IH), 8.24 (s, IH), 8.14 (s, IH), 8.03 (m, 2H), 7.51 (m, 3H), 6.87 (d, IH), 6.77 (d, IH). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 355.6 (M+l).
Jedinjenje 332:
Korak 1: 2-Amino-3-bromo-5-fenilpirazin. U mešani rastvor 3,5-dibromo-2-aminopirazina (200 mg, 0,79 mmol) i fenil borne kiseline (106 mg, 0,87 mmol) u dioksanu (4 ml) i etanolu (2 ml) dodat je cezijum karbonat (571 mg, 1,75 mmol u 2 ml vode), a zatim je dodat Pd(PPh3)4(46 mg, 0,04 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do temp. od 75 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 x 50 ml), slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 12L kertridža uz eluiranje heksanima i etil acetatom (3:1), čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 88%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-3-bromo-5-fenilpirazina (prinos 18%).<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.36 (s, IH), 8.09 (s, IH), 7.63 (d, 2H), 7.59 (m, 3H), 6.85 (dd, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.39 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 413.2 415.2 (M+l).
Jedinjenje 333:
Korak 1: 2-Amino-5-fenilpirazin. U mešani rastvor 3-bromo-5-fenil-2-amino pirazina (80 mg, 0,32 mmol) u etil acetatu (1 ml) dodat je trietilamin (139 pl, 1,0 mmol) i Pd(OH)2(10 mg, 20%o w/w na ugljeniku). Reakciona smeša je ostavljena u atmosferi vodonika na pritisku od 45 psi i mešana je tokom 6 časova. Zatim je filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Proizvod je prečišćen korišćenjem Biotage 12L kolone uz eluiranje etil acetatom čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 75%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-5-fenilpirazina (prinos 25%).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.36 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.18 (s, IH), 7.63 (m, 2H), 7.59 (m, 3H), 7.28 (br s, IH), 6.82 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 335.21 (M+l).
Jedinjenje 334:
Korak 1: U 2-hlorokinoksalin (1,0 g, 6 mmol) dodat je amonijak u metanolu (8 ml 2 M rastvora). Reakciona smeša je stavljena u reakcioni sud, zagrejana do temp. od 80 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp. i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pomešan sa metilen hloridom i filtriran. Heksan je dodavan dok nije nastao precipitat, koji je filtriran i koji odgovara željenom proizvodu, (prinos 5%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem kinoksalin-2-ilamina (prinos 26%). 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO) 5 11.63 (br s, IH), 10.59 (br s, IH), 8.80 (s, IH), 8.15 (s, IH), 7.97 (d, IH), 7.81 (m, 2H), 7.64 (m, IH), 6.98 (d, IH), 6.82 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 2.23 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 309.4 (M+l).
Jedinjenje 335:
Korak 1: 2-Azido-3,6-dimetilpirazin. U mešani rastvor 2-hloro-3,5-dimetil pirazina (1,0 ml, 8,3 mmol) u dimetilformamidu (10 ml) dodat je natrijum azid (539 mg, 8,3 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do temp. od 100 °C i mežana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 50 ml), slanom vodom (50 ml), a zatim isušena (MgS04) i filtrirana. Materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 12L kertridža sa heksanim ai etil acetatom (3:1), čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 42%).
Korak 2: 2-Amino-3,6-dimetilpirazin. U mešani rastvor 3-azido-2,5-dimetil pirazina (100 mg, 0,66 mmol) u metanolu (800 pl) dodat je 12 N rastvor HC1 (100 pl) i kalaj hlorid dihidrat (149 mg, 0,66 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do temp. od 60 °C i mešana tokom 12 časova. Zatim je ohlađena do sobne temp., razblažena sa 50 ml etil acetata i isprana 10%o vodenim rastvorom natrijum karbonata (1 * 50 ml), slanom vodom (50 ml), pa isušena (MgS04) i filtrirana. Materijal je prečišćen korišćenjem Biotage 12i kertridža uz eluiranje etil acetatom, čime je dobijena sivkasta čvrsta supstanca (prinos 38%).
Korak 2: Dobijena prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 310 korišćenjem 2-amino-3,6-dimetilpirazina (prinos 15%).<]>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8.22 (br s, IH), 8.01 (s, IH), 6.82 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). LRMS (ESI, Pozitivan) m/e 287.20 (M+l).
Jedinjenje 336:
Korak 1: 2-Metoksi-4-metoksimetil-l-nitro-benzen. U reakcioni sud oblika flaše sa okruglim dnom od 250 ml u kome se nalazi 5,4 g (39 mmol) 3-metoksi-4-nitrobenzil alkohola u 30 ml THF i 30 ml DMF dodato je 38 g (117 mmol, 3 Eq) fino usitnjenog cezijum karbonata, a zatim i 24 ml (390 mmol, 10 Eq) jodometana. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 časova, a zatim je podeljena između 100 ml vode i 100 ml dietil etra. Vodena faza je ekstrahovana etrom (2 * 100 ml), pa su kombinovani organski ekstrakti isprani slanom vodom (2 * 50 ml), isušeni preko MgSC>4, filtrirani kroz kratki čep silika gela i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom za rektifikaciju lakih frakcija, uz eluiranje smešom EtOAc i heksana (1:1), čime je dobijeno 6,76 g (88%>) metil etra u vidu žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 5 7.84, (d, 7= 8.2 Hz, IH) 7.10 (s, IH), 6.94(d, J =9.1 Hz, IH). 4.51 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.44 (s, 3H).
Korak 2: 2-Metoksi-4-metoksimetil-fenilarnin. U Parr aparat od 250 ml, 2,1 g (10,6 mmol) 2-metoksi-4-metoksimetil-l-nitro-benzena u 40 ml etanola je hidrogenirano pod pritiskom od 2 atmosfere preko 300 mg 10% Pd na ugljeniku tokom 2,5 časova. Katalizator je uklonjen filtracijom kroz filter od staklenih vlakana, a filtrat je koncentrovan čime je dobijeno 6,1 g (91%) proizvoda u vidu svetio žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 6 6.80 (s, IH), 6.74 (d,J=7.8 Hz, IH), 6.67 (d,J=7.8 Hz), 4.35 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.78 (br d, 2H), 3.35 (s, 3H). MS ESI-pozitivan, M+l = 168.1.
Korak 3: l-(2-Metoksi-4-metoksimetil-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Opšti postupak za vezivanje difenilfosforil azida. U rastvor 5-metilpirazin-2-karboksilne kiseline (365 mg, 2,64 mmol) u 20 ml anhidrovanog toluena dodat je diizopropiletilamin (483 pl, 2,77 mmol), pa je smeša mešana na sobnoj temperaturi do rastvaranja čvrstih supstanci. Tada je dodat difenilfosforil azid, pa je rastvor zagrejan do temp. od 90 °C. Nakon 20 minuta je prestala evolucija N2, pa je reakciona smeša karamel boje ohlađena do temp. od 60 °C pre dodavanja 2-metoksi-4-metoksimetilanilina u visu rastvora u 4 ml toluena. Nakon mešanja tokom 6 časova na temp. od 60 °C, smeša je ohlađena do sobne temp. i razblažena sa 20 ml 5%> rastvora NH4OH i ekstrahovana sa EtOAc (3 * 50 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani sa 20 ml vode i sa 20 ml slane vode, a zatim isušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani. Braon ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija (uz eluiranje sa 5% MeOH u CH2CI2), čime je dobijeno 219 mg (27%) željenog proizvoda.<!>H NMR (400 MHz, CDC13): 5 11.36 (s, IH), 9.47, (s, IH) 8.40, (s, IH), 8.31 (s, IH), 8.08 (s, IH), 6.95 (s, IH), 6.94 (d,7=7.8 Hz, IH), 4.45 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 2.52 (s, 3H). MS ESI-pozitivan M+l = 303.2.
Jedinjenje 337:
Korak 1: 4-Benziloksimetil-2-metoksi-l-nitro-benzen. U mešanu suspenziju fino usitnjenog cezijum karbonata (8,0 g, 24,5 mmol) dodat je 3-metoksi-4-nitrobenzil alkohol
(1.5 g, 8,18 mmol), a zatim i benzil bromid (2 ml, 16,4 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temp. tokom 18 časova, suspenzija je razblažena sa 100 ml dietil etra i isprana sa 3 x 50 ml vode, a zatim sa 50 ml slane vode. Organska faza je isušena preko MgS04, filtrirana korz sloj silika gela i koncentrovana. Nastalo narandžasto ulje je prečišćeno korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija uz eluiranje smešom heksana i EtOAc (2:1), čime je dobijeno 1,87 g (84%) benzil etra.<*>H NMR (400 MHz, CDCh): 5 7.85 (d, J = 8.2 Hz, IH) 7.3 - 7.4 (m, 5H), 7.26 (s, IH), 6.97 (d,J =8.2 Hz, IH), 4.61 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.96 (s, 3H).
Korak 2: 4-Benziloksimetil-2-metoksi-fenilamin. Rastvor 4-nitro-3-metoksibenzil-benzil etra (2,2 g, 8,1 mmol) i amonijum acetata (2,46 g, 32 mmol, 4 Eq) u 30 ml MeOH mešano je na temp. od 0 °C, pa je dodato 1,3 g (20 mmol, 2,5 Eq) cinka u prahu iz nekoliko delova. Nakon 1 časa, reakciona smeša je podeljena između 40 ml vode i 40 ml etil acetata. Organska faza je isušena preko MgS04i koncentrovana. Ostatak je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<*>H NMR (400 MHz, CDC13): 8 7.35 (m, 5H), 6.82 (s, IH), 6.77(d, J=6.3 Hz, IH), 6.67 (d,J=7.8 Hz, IH), 4.51 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.79 (s, 2H). MS ESI-pozitivan, M+l = 244.2.
Korak 3: l-(4-Benziloksimetil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Dobijena prema opštem postupku vezivanja difenilfosforil azida opisanom kod Jedinjenja 336. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 6 11.36, (s, IH), 9.23 (s, IH), 8.39 (s, IH), 8.32 (d,J=7.8 Hz, IH), 8.09 (s, IH), 7.38 (m, 5H), 6.97 (s, 2H), 4.56 (s, 4H), 3.96 (s, 3H), 2.53 (s, 3H). MS APCI-pozitivan, M+l = 379.3.
Jedinjenje 338:
Korak 1: 3-Metoksi-4-nitro-benzil bromid. U reakcioni sud oblika flaše sa okruglim dnom od 250 ml u kome se nalazi 10 g (54,6 mmol) 4-nitro-3-metoksibenzil alkohola u 30 ml THF dodato je 36 g (109 mmol, 2 Eq) ugljen tetrabromida, a zatim i 15,9 g (60 mmol, 1,1 Eq) trifenilfosfma na temp. od 0 °C. Smeša je mešana na temp. od 0 °C tokom 3 časa. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija uz eluiranje smešom EtOAc i heksana (10:90), čime je dobijeno 11 g (82%) proizvoda u vidu žute čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 8 7.86 (s, IH), 7.84 (m, IH), 7.12 (s, IH), 7.07 (m, IH), 4.47 (s, 2H), 4.00 (s, 3H).
Korak 2: N-Benzil-N-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-amin. U reakcioni sud oblika flaše sa okruglim dnom od 150 ml u kome se nalazi 1,97 g (8,0 mmol) 3-metoksi-4-nitro-benzil bromida u 20 ml THF dodato je 2,4 g (24 mmol, 3 Eq) trietilamina, a zatim i 2,5 g (24 mmol, 3 Eq) benzilamina. Smeša je mešana na sobnoj temp. tokom 2 časa, a zatim je podeljena između 50 ml etil acetata i slane vode. Organska faza je isušena preko MgS04i koncentrovana. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija uz eluiranje sa 1-4%) MeOH u dihlorometanu, čime je dobijeno 1,6 g (73%) benzil amina u vidu žutog ulja. !HNMR (400 MHz, CDC13):8 7.84 (d, J= 8.61Hz, IH), 7.34 (m, 5H), 7.16 (s, IH), 6.99 (d,J =8.61 Hz, IH), 3.97 (s, 3H), 3.86 (s, 2H), 3.81 (s, 2H).
Korak 3: Terc-butil estar benzil-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-karbaminske kiseline. U reakcioni sud oblika flaše sa okruglim dnom od 150 ml u kome se nalazi 0,92 g (3,4 mmol, 1 Eq) N-benzil-N-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-amina u 2 ml dihlorometanu, dodat je Boe anhidrid (0,74 g, 3,4 mmol, 1 Eq), a zatim je smeša mešana na sobnoj temp. tokom 18 časova. Smeša je potom podeljena između 40 ml vode i 40 ml etil acetata. Organska faza je isušena preko MgS04i koncentrovana. Dalje prečišćavanje nije bilo potrebno. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 5 'H NMR (400 MHz, CDC13): 5 7.81 (d.J=8.61 Hz, IH), 7.2 - 7.3 (m, 6H), 6.93 (m, IH), 6.82 (s, IH), 4.39 (m, 4H), 3.88 (s, 3H), 1.53 (s, 9H).
Korak 4-6: 1 -{4-[(Benzil-metil-amino)-metil]-2-metoksi-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Terc-butil estar benzil-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-karbaminske kiseline je redukovan do odgovarajućeg anilina prema opštem postupku hidrogenizacije detaljno opisanom kod Jedinjenja 336. Sirovi anilin je korišćen u koraku vezivanja na sledeći način: U rastvor 5-metilpirazin-2-karboksilne kiseline (34 mg, 0,25 mmol) dodat je trietilamin (28 mg, 0,275 mmol) u 5 ml anhidrovanog toluena, pa je smeša mešana na sobnoj temp. do rastvaranja čvrste supstance. Dodat je difenilfosforil azid (62 mg, 0,225 mmol), pa je rastvor zagrevan na temp. od 90 °C tokom 20 minuta. Reakcioni sud je zatim prebačen u uljano kupatilo na temp. od 60 °C, pa je dodat anilin (0,25 mmol) u vidu rastvora u 2 ml toluena. Nakon mešanja tokom 4,5 časova na temp. od 60 °C smeša je ohlađena do sobne temp., razblažena sa EtOAc, isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03, a zatim i slanom vodom. Organska faza je isušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen preparativnom TLC, uz eluiranjesa 5% MeOH u CH2CI2, čime je dobijena željena urea. Boe grupa je uklonjena tretiranjem Boe zaštićenog amina u 15 ml CH2C12sa 3 ml TFA i mešanjem na sobnoj temp. tokom 3 časa. Smeša je razblažena sa EtOAc (50 ml), isprana sa 20 ml zasićenog rastvora NaHC03, a zatim i sa 20 ml slane vode. Organska faza je zatim isušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana,čime je dobijen slobodni amin.<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 11.35 (s, IH), 9.68 (s, IH), 8.41 (s, IH), 8.28 (d,J =8.21 Hz, IH), 8.06 (s, IH), 7.36 (s, 6H), 6.96 (s, IH), 6.94 (d,J=8.21 Hz, IH), 3.95 (s, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.13 (s, IH). MS APCI-pozitivan, M+l = 377.9.
Jedinjenje 339:
Korak 1-2: Terc-butil estar (3-metoksi-4-nitro-benzil)-rnetil-karbaminske kiseline. Na način koji je sličan onom koji je gore opisan za analogni benzil derivat kod Jedinjenja 338, 3-metoksi-4-nitro-benzil bromid je alkiliran sa metilaminom, a nastali sekundarni amin je zaštićen u vidu Boe derivata. 'H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 7.84 (d.J=8.61 Hz. IH), 6.98 (s, IH), 6.87 (d, J= 8.61 Hz, IH), 4.46 (s, 2H), 3.95 (s, 7H), 2.85 (s, 3H), 1.53 (s, 9H).
Korak 3: Terc-butil estar (4-amino-3-metoksi-benzil)-metil-karbaminske kiseline. U Parr aparatu od 250 ml, 0,98 g (3,5 mmol) terc-butil estar (3-metoksi-4-nitro-benzil)-metil-karbaminske kiseline u 40 ml etanola je hidrogeniran pod pritiskom od 2 atmosfere preko 300 mg 10% Pd na ugljeniku tokom 15 minuta. Katalizator je uklonjen filtracijom kroz filter od staklenih vlakana, a filtrat je koncentrovan čime je dobijen sirovi proizvod u vidu svetio žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 6.69 (m, 3H), 3.95 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.8 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 1.51 (s,9H).
Korak 4-5: 1 -(2-Metoksi-4-metilaminometil-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. Rastvor terc-butil estra (4-amino-3-metoksi-benzil)-metil-karbaminske kiseline je konvertovan u ureu prema opštem postupku vezivanja difenilfosforil azida koji je detaljno opisan kod Jedinjenja 336. Boe grupa je uklonjena na način koji je opisan kod Jedinjenja 228.
'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.91 (s, 2H), 8.78 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.07 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.01 (s, IH), 6.85 (d,J=8.61 Hz, IH), 3.89 (s, 3H), 3.59 (s, IH), 2.42 (s, 3H), 2.26 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 301.8.
Jedinjenje 340:
Korak 1: N-Benzil-N-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-metil-amin. Rastvor N-metil-benzil amina je alkiliran sa 3-metoksi-4-nitro-benzil bromidom na način koji je opisan kod Jedinjenja 338. 'H NMR (400 MHz, CDCI3): 8 7.83 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.35 (s, 4H), 7.26 (s, IH), 7.17 (s, IH), 7.01( d, J=7.04 Hz, IH), 3.97 (s, 3H), 3.55 (s, 4H), 2.22 (s, 3H).
Korak 2: 4-[(Benzil-metil-amino)-metil]-2-metoksi-fenilamin.
Opšti postupak redukcije nikl borida: U mešani rastvor nikl hlorid heksahidrata (820 mg, 3,45 mmol) u 12 ml EtOH i 3 ml THF na temp. od 0 °C dodat je NaBH4(130 mg, 3,45 mmol). Nastala crna suspenzija je mešana na temp. od 0 °C dok je N-benzil-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-metil-amin dodavan u vidu rastvora u 5 ml THF. Nakon nekoliko minuta, dodato je 260 mg NaBH4u nekoliko delova tokom 10 minuta, pa je reakciona smeša ostavljena da se zagreje do sobne temp. Nakon 2 časa je TLC pokazala kompletnu konverziju u novi, polarniji proizvod. U ovom tenutku, dodato je 1,5 ml 5% rastvora NH4OH, pa je reakciona smeša mešana tokom oko 10 minuta, dok crne čvrste supstance nisu dobile granuliranu konzistenciju. Reakciona smeša je filtrirana kroz filter od staklenih vlakana, uz ispiranje sa THF. Bistri bezbojni filtrat je koncentrovan na oko četvrtinu originalne zapremine, razblažen sa 30 ml vode i ekstrahovan sa EtOAc (3 * 30 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani slanom vodom, isušen preko MgS04i filtriran kroz tanki sloj silika gela i koncentrovan u vakuumu, čime je dobijeno 575 mg (65%) željenog proizvoda u vidu sivkaste čvrste supstance.<l>H NMR (400 MHz, CDC13): 8 7.2 - 7.4 (m, 5H), 7.85 (s, IH), 6.85 (s, IH), 6.74 (d,J=8.2 Hz, IH), 6.66 (d,J=8.2 Hz, IH), 3.87 (s, 3H), 3.73 (br. s, 2H) 3.49 (s, 2H), 3.45 (s, 2H), 2.18 (s, 3H). MS (APCI-pozitivan) M+l = 256.9.
Korak 3: l-{4-[(Benzil-metil-amino)-metil]-2-metoksi-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. U reakcionom sudu oblika flaše sa ravnim dnom zapremine od 50 ml mešani su 5-metilpirazin-2-karboksilna kiselina (250 mg, 1,8 mmol) i diizopropiletilamin (330 pl, 1,9 mmol) u 20 ml toluena, u atmosferi azota, do rastvaranja kiseline. Difenilfosforil azid (523 mg, 1,9 mmol) je dodat, pa je rastvor zagrevan na temp. od 90 °C. Nakon 20 minuta, prestala je evolucija azota, a rastvor je potamneo do karamel boje. Reakciona smeša je ohlađena do temp. od 65 °C, pa je dodat 4-[(benzil-metil-amino)-metil]-2-metoksi-fenilamin (486 mg, 1,9 mmol) u vidu rastvora u 5 ml toluena. Reakciona smeša je mešana na temp. od 65 °C tokom 6 časova, pa je zatim ohlađena do sobne temp., razblažena sa 30 ml EtOAc i isprana sa 15 ml 5% NH4OH. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2 * 20 ml), a kombinovani organski slojevi su isprani sa 30 ml slane vode, isušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom za rektifikaciju lakih frakcija, čime je dobijeno 285 mg (40%o) željenog proizvoda, koji je dalje prečišćen putem sprašivanja u dietil etru. T.t. 142 - 143 °C.<]>H NMR (400 MHz, CDC13): 6 11.33 (s, IH), 9.51 (s, IH), 8.41 (s, IH), 8.27 (d,J= 8.61 Hz, IH), 8.08 (s, IH), 7.2 - 7.4 (m, 5H), 6.96 (d,J= 7.83 Hz, IH) 3.97 (s, 3H), 3.53 (s, 4H), 2.53 (s, 3H), 2.22 (s, 3H).<13>C NMR (400MHz, CDC13): 5 153.70, 149.03, 147.48, 147.4, 145.99, 138.73, 137.38, 134.81, 129.19, 128.42, 127.16, 121.89, 119.81, 111.05, 104.49, 94.98, 87.22, 61.81, 56.37, 42.5. MS (APCI-pozitivan) M+l = 392.0.
Jedinjenje 341:
Korak 1: (3-Metoksi-4-nitro-benzil)-dimetil-amin. 3-Metoksi-4-nitro-benzil bromid je tretiran dimetil aminom prema postupku koji je opisan kod Jedinjenja 338, čime je. dobijen željeni proizvod.<!>H NMR (400 MHz, CDC13): 5 7.86( d, J=7.8 Hz, IH), 7.3 (s, IH), 6.98 (d,J=8.6 Hz, IH), 4.01 (s, 3H), 3.5 (s, 2H), 2.3 (s, 6H).
Korak 2: 4-Dimetilaminometil-2-metoksi-fenilamin. (3-Metoksi-4-nitro-benzil)-dimetil-amin je redukovan do odgovarajućeg anilina prema nikl-bor postupku opisanom kod Jedinjenja 340 i korišćen je u sledećem koraku bez prethodne karakterizacije.
Korak 3: l-(4-Dimetilaminometil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. 4-Dimetilaminometil-2-metoksi-fenilamin je konvertovan do (5-metil-pirazin-2-il)-uree prema postupku difenilfosforil azida koji je opisan kod Jedinjenja 336. Sirovi proizvod je prečišćen korišćenjem preparativne TLC, uz eluiranje sa 5% MeOH u CH2C12. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 11.21 (s, IH), 8.95 (s, IH), 8.39 (s, IH), 8.21 (d,J=7.83 Hz, IH), 8.04 (s, IH), 7.01 (s, IH), 6.89 (d,J =7.83 Hz, IH), 3.98 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.24 (s, 6H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 316.0.
Jedinjenje 342:
Korak 1: 2-(3-Metoksi-4-nitro-benzil)-izoindol-l,3-dion. U reakcioni sud oblika flaše sa okruglim dnom u kome se nalazi 10 g (55 mmol) 4-nitro-3-metoksibenzil alkohola u 150 ml THF dodati su dietilazodiakarboksilat (8,03 g, 54,6 mmol, 1 Eq) i trifenilfosfin (15,0 g, 57,3 mmol), a zatim i 11,6 g ftaiimida (57,3 mmol) na temp. od 0 °C. Reakciona smeša je zatim ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temp. tokom noći. Dobijen je beli precipitat, koji je sakupljen sukcionom filtracijom. Rekristalizacijom iz acetonitrila je dobijeno 13,8 g (81%) željenog proizvoda. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 7.79 (m, 5H), 7.19 (s, IH), 7.08(d, J=8.80 Hz, IH), 4.91 (s, 2H), 3.87 (s, 3H).
Korak 2: 2-(4-Amino-3-metoksi-benzil)-izoindol-l,3-dion. U Parr sudu od 500 ml delimično rastvorena suspenzija 2-(3-metoksi-4-nitro-benzil)-izoindol-l,3-diona (1,50 g, 4,80 mmol) u 100 ml EtOH i 30 ml THF su hidrogenirani preko 250 mg 10% Pd na ugljeniku pod pritiskom od 2,5 atmosfera tokom 1 časa. katalizator je uklonjen filtracijom kroz filter od staklenih vlakana, pa je bistri svetio žuti filtrat koncentrovan u vakuumu. Proizvod je ispran sa 30 ml dietil etra i sakupljen je sukcionom filtracijom, čime je dobijeno 1,28 g (95%) anilina u vidu finih, svetio zelenih iglica. 'H NMR (400 MHz, CDC13): 8 7.82 (m, 2H), 7.81 (m, 2H), 6.93 (s, IH), 6.9 (d, J= 7.8 Hz, IH), 6.63(d, 7=7.8 Hz, IH), 4.74 (s, 2H), 3.84 (s, 3H).
Korak 3: Opšti postupak reakcije sa acil azidom. l-[4-(l,3-Diokso-l,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-2-metoksi-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. U reakcionom sudu oblika flaše sa okruglim dnom zapremine od 50 ml, u atmosferi azota je mešan 5-metil-pirazin-2-karbonil azid (510 mg, 3.15 mmol) u 15 ml anhidrovanog toluena. Reakcioni sud je potopljen u uljano kupatilo na temp. od 90 °C, a kako je temperatura dostizala navedenu vrednost, oslobađanje N2je postalo evidentno, a rastvor je počeo da tamni. Nakon 20 minuta, oslobađanje gasa je prestalo, a rastvor je potamneo do karamel boje. Reakcioni sud je premešten u uljano kupatilo na 65 °C, pa je dodat 2-(4-amino-3-metoksi-benzil)-izoindol-l,3-dion (884 mg, 3,15 mmol) suspendovan u toluenu (5 ml). Reakciona smeša je mešana na temp. od 65 °C tokom 6 časova, a zatim je ohlađena do sobne temperature. Proizvod je precipitirao iz rastvora nakon hlađenja do sobne temperature i sakupljen je sukcionom filtracijom.
U slučajevima gde proizvod nije precipitirao iz reakcione smeše, braon rastvor je razblažen sa 5% vodenim rastvorom NH4OH i ekstrahovan je sa EtOAc (3x). Kombinovani ekstrakti su isprani slanom vodom, isušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je zatim prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija u odgovarajućem sistemu rastvarača.
Korak 4: l-(4-Aminometil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. U reakcionom sudu oblika flaše sa okruglim dnom zapremine od 100 ml, u atmosferi azota, uz mešanje, do temperature od 70 °C je zagrevana suspenzija l-[4-(l,3-dihidro-izoindol-2-ilmetil)-2-metoksi-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea (620 mg, 1,48 mmol) u 22 ml EtOH. Dodat je hidrazin monohidrat (1,4 ml), pa je reakciona smeša mešana na temp. od 70 °C. Nakon 10 minuta, smeša je postala potpuno homogeni rastvor karamel boje. nakon još nekoliko minuta, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a beli čvrsti proizvod je sakupljen sukcionom filtracijom. Sirovi proizvod, koji sadrži neke ftalhi draži dne nusproizvode je pomešan sa 80 ml EtOAc i ispran vodom (3 x 20 ml). Isprani materijal je obrnuto ekstrahovan sa 30 ml EtOAc, a kombinovane organske faze su isprane slanom vodom, a zatim isušene preko MgS04, filtrirane i koncentrovane u vakuumu, čime je dobojeno 400 mg (94%) željenog amina. T.t. 168-169 °C. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.88 (br.s, 2H), 8.78 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.05 (d,J=8.2 Hz, IH), 7.05 (s, IH), 6.85 (d,J =8.1 Hz, IH), 3.89 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 2.42 (s, 3H) 1.80 (br.s, 2H, NH2). MS (APCI-pozitivan) M-17 (-NH3) = 270.1 apci-negativan M-l = 285.8.
Alkil derivati Jedinjenja 342
Jedini enje 343:
Rastvor l-(4-aminometil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea (0,25 mmol, 1,0 Eq) i 1 ml trimetilortoformata u 4 ml MeOH je mešan na sobnoj temp., a zatim je dodat tiofen-2-karboksaldehid (2,5 mmol, 10 Eq), pa je smeša zagrevana na temp. od 80 °C. Nakon 18 časova reakciona smeša jeohlađena do sobne temp. i koncentrovana u vakuumu. Nastali imin je pomešan sa 5 ml anhidrivanog MeOH i mešan na temp. od 0 °C. Dodat je natrijum borhidrid (0,75 mmol, 3 Eq), pa je reakciona smeša mešana na temp. od 0 °C tokom 30 minuta, a zatim je razblažena sa 2 ml vode i podeljena između 50 ml EtOAc i 30 ml slanog rastvora. Organska faza je isprana slanom vodom, isušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana. Ukoliko je potrebno, proizvod se prečišćava korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija, uz eluiranje sa odgovarajućom smešom MeOH i CH2CI2. l-(2-Metoksi-4-{[(tiofen-2-ilmetil)-amino]-metil}-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea.
<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 10.01 (s, 2H), 8.79 (s, IH), 8.23 (s, IH), 8.17 (d, J= 8.61 Hz, IH), 7.59 (d,J=6.26 Hz, IH), 7.33 (s, IH), 7.15 (m, 2H), 7.05 (s, IH), 6.97 (d,J=8.61 Hz, IH), 4.02 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.88 (s, IH), 3.78 (s, IH), 2.43 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan bez detektabilnog jona molekula.
Jedinjenje 344:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem tiofen-3-karboksaldehida.
l-(2-Metoksi-4-{[(tiofen-3-ilraetil)-amino]-metiI}-fenil)-3-(5-metil-piraz^
'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.92 (s, 2H), 8.78 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.07 (d,J=7.81 Hz, IH), 7.47 (s, IH), 7.3 (s, IH), 7.11 (d,J=4.88 Hz, IH), 7.04 (s, IH), 6.87 (d,J=7.81 Hz, IH), 3.9 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Negativan. M-l = 382.0.
Jedinjenje 345:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem mrfurala. l-(4-{[(Furan-2-ilmetil)-amino]-metil}-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea.
'H NMR (400 MHz, MeOD): 6 8.57 (s, IH), 8.2 (s, IH), 8.1 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.46 (s, IH), 7.03 (s, IH), 6.88 (d, J = 8.61 Hz, IH), 6.36 (s, IH), 6.27 (s, IH), 3.96 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 2.48 (s, 3H). MS APCI-Negativan, M-l = 366.0.
Jedinjenje 346:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem furan-3-karboksaldehida. l-(4-{[(Furan-3-ilmetil)-amino]-metil}-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea.
'H NMR (400 MHz, MeOD): 6 8.58 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.13 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.49 (s, IH), 7.05 (s, IH), 6.91 (d,J=7.04 Hz, IH), 6.5 (s, IH), 3.97 (s, 3H), 3.78 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 2.49 (s, 3H). MS APCI-Negativan, M-l = 366.0.
Jedinjenje 347:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem 2-metoksibenzaldehida. l-{2-Metoksi-4-[(2-metoksi-benzilamino)-metil]-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea.
'H NMR (400 MHz, CDC13): 8 11.3 (s, IH), 9.97 (s, IH), 8.44 (s, IH), 8.22 (d,J =7.83 Hz, IH), 7.98 (s, IH), 7.28 (m, 2H), 7.06 (s, IH), 6.88 (m, 3H), 4.08 (s, IH), 3.93 (s, 5H), 3.81 (s, 5H), 2.5 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 407.8.
Jedinjenje 348:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem 3-metoksibenzaldehida. l-{2-Metoksi-4-[(3-metoksi-benzilamino)-metil]-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea. "HNMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 8.57 (s, IH), 8.20 (s, IH), 8.11( d, J=8.61 Hz, IH), 7.22 (t,J=7.83 Hz, IH), 7.04 (s, IH), 6.91 (m, 3H), 6.83 (d,J=8.61 Hz, IH), 3.96 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (s, 4H), 2.48 (s, 3H). MS APCI-Negativan, M-l = 406.0.
Jedinjenje 349:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 343 korišćenjem 4-metoksibenzaldehida.
l-{2-Metoksi-4-[(4-metoksi-benzilamino)-metil]-fenil^
'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.91 (s, 2H), 8.78 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.07 (d, J= 7.81 Hz, IH), 7.25 (d,J=8.78 Hz, 2H), 7.03 (s, IH), 6.88 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.6 (s, 2H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 407.9.
Acilderivati
Jedinjenje 350:
Rastvor l-(4-aminometil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-uree (100 mg, 0,35 mmol) u 30 ml THF i 15 ml vodenog rastvora NaHCC>3 su tretirani sa 3,7 mmol (1,05 Eq) acetil hlorida. Bifazna reakciona smeša je energično mešana na sobnoj temp., pa je nakon 2 časa razblažena sa 10 ml vode i ekstrahovana sa EtOAc (3 * 20 ml). Kombinovani ekstrakti su isprani slanom vodom, isušeni preko MgS04i filtrirani kroz kratki čep silika gela. Filtrat je koncntrovan, a dobijeni ostatak je sprašen sa dietil etrom. Ukoliko je potrebno, dalje prečišćavanje se postiže korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija, uz eluiranje sa odgovarajućom smešom MeOH i CH2O2.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-acetamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.92 (s, 2H), 8.75 (s, IH), 8.28 (t, J= 5.87 Hz, IH), 8.19 (s, IH), 8.07 (d,J=8.61 Hz, IH), 6.92 (s, IH), 6.78 (d,J=8.61 Hz, IH), 4.19 (s, IH), 4.18 (s, IH), 3.87 (s, 3H), 2.4 (s, 3H), 1.85 (s, 3H). MS ESI-pozitivan, M+l = 330.2.
Jedinjenje 351:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem metoksiacetil hlorida.
2-Metoksi-N-{3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-acetamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.51 (s, 2H), 8.34 (s, IH), 7.89 (t,J=6.26 Hz, IH), 7.78 (s, IH), 7.65 (d,J=7.83 Hz, IH), 6.54 (s, IH), 6.38(d, J=7.83 Hz, IH), 4.2 (s, IH), 4.19 (s, IH), 3.82 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 3.29 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 359.9.
Jedinjenje 352:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem dimetilamino-acetil hlorida.
2-Dimetilamino-N-{3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-acetamid.<l>UNMR (400 MHz, MeOD): 8 8.56 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.09 (d,J=7.83 Hz, IH), 6.97 (s, IH), 6.86 (d,J =7.83 Hz, IH), 4.37 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.03 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.3 (s, 6H). MS APCI-Negativan, M-l = 370.9.
Jedinjenje 353:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem 2-(2-piridil)-acetil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-2-piridin-2-il-acetamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.94 (s, 2H), 8.77 (s, IH), 8.63 (t,J=5.87 Hz, IH), 8.49 (s, IH), 8.44(d, J= 6.26Hz, IH), 8.22 (s, IH), 8.08( d, J=7.83 Hz,IH), 7.7 { d, J =10.17 Hz, IH), 7.35 (q,J=5.74 Hz, IH), 6.87 (s, IH), 6.79 (d,J=9.39 Hz, IH), 4.25 (s, IH), 4.24 (s, IH), 3.82 (s, 3H), 3.53 (s, 2H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan M+l = 407.1.
Jedinjenje 354:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem 2-(4-metoksifenil)-acetil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-2-(4-metoksi-fenil)-acetamid.<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.94 (s, 2H), 8.77 (s, IH), 8.54 (t,J =4.7 Hz, IH), 8.21 (s, IH), 8.08 (d,J=7.83 Hz, 2H), 7.89 (m, IH), 7.22 (t,J=7.83 Hz, IH), 6.89 (s, 3H), 4.25 (s, IH), 4.23 (s, IH), 3.8 (s, 3H), 3.73 (s, 2H), 3.45 (s, 2H), 2.42 (s, 3H). MS (APCI-Pozitivan) M+l = 436.2.
Jedinjenje 355:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem benzoil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-benzamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.95 (s, 2H), 9.02 (t,J=5.48 Hz, IH), 8.77 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.1(d, J= 8.61 Hz, IH), 7.9 (d,J =7.83 Hz, 2H), 7.48 (m, 3H), 7.04 (s, IH), 6.88 (d,J =10.17 Hz, IH), 4.46 (s, IH), 4.44 (s, IH), 3.89 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 391.9.
Jedinjenje 356:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem 2-karbonil hlorida.
3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzilamid piridin-2-karboksilne kiseline.<!>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.94 (s, 2H), 9.29 (t,J=6.26 Hz, IH), 8.77 (m, IH), 8.65 (m, IH), 8.21 (s, IH), 8.05 (m, 3H), 7.61 (m, IH), 7.07 (s, IH), 6.89 (d,J=8.61 Hz, IH), 4.47 (s, IH), 4.45 (s, IH), 3.88 (s, IH), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan bez detektabilnog jona molekula.
Jedinjenje 357:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem nikotinoil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-nikotinamid.<*>H NMR (400MHz, d6-DMSO): 5 10 (s, 2H), 9.26 (t, J= 5.87 Hz,IH), 9.11 (s,IH), 8.82 (s, IH), 8.77 ( d, J= 4.7 Hz, IH), 8.27 (s, 2H), 8.16(d, J=7.83Hz, IH), 7.58 (m, IH), 7.09 (s,IH), 6.95 ( d, J =8.61 Hz, IH), 4.53 (s, IH), 4.51 (s, IH), 3.95 (s, 3H), 2.47 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M-l = 397.9.
Jedinjenje 358:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem izonikotinoil hlorida.
N- { 3-Metoksi-4- [3 -(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil} -izonikotinamid.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.92 (s, 2H), 9.27 (t,J=5.87 Hz, IH), 8.74 (s, IH), 8.71 (d,J=6.3 Hz, 2H), 8.18 (s, IH), 8.08(d, J=8.6 Hz, IH), 7.77(d, J=6.3 Hz, 2H), 7 (s, IH), 6.86 (d,J = 8.6 Hz, IH), 4.44 (s, IH), 4.43 (s, IH), 3.86 (s, 3H), 2.39 (s, 3H). MS APCI-pozitivan bez detektabilnog jona molekula.
Jedinjenje 359:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem tiofen-2-karbonil hlorida.
3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzilamid tiofen-2-karboksilne kiseline. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 9.96 (s, 2H), 9.03 (t,J =6.26 Hz, IH), 8.78 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.11(d, J = 7.83 Hz, IH), 7.82 (d, .7=4.7 Hz, IH), 7.77 (d, J= 3.91Hz, IH), 7.16 (d,J =3.91 Hz, IH), 7.03 (s, IH), 6.88 (d,J =10.17 Hz, IH), 4.43 (s, IH), 4.42 (s, IH), 3.89 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-pozitivan, M-l = 397.9.
Jedinjenje 360:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem 4-dimetilamino-2-karbonil hlorida.
3-Dimetilamino-N- {3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil} -benzamid.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.94 (s, 2H), 8.9 (t,J=5.87 Hz, IH), 8.77 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.09 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.26 (t,J=7.83 Hz, IH), 7.2 (s, 2H), 7.02 (s, IH), 6.87(d, J=8.61 Hz, 2H), 4.44 (s, IH), 4.42 (s, IH), 3.88 (s, 3H), 2.93 (s, 6H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-pozitivan, M+l =434.9.
Jedinjenje 361:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 350 korišćenjem l-fenil-4-trifluorometil-lH-pirazol-3-karbonil hlorida.
3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzilamid l-fenil-4-trifluorometil-lH-pirazoI-3-karboksilne kiseline. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 9.96 (s, 2H), 9.09 (t,J =6.26 Hz, IH), 8.78 (s, IH), 8.22 (s, IH), 8.19 (s, IH), 8.12(d, J=7.83 Hz, IH), 7.59 (m, 6H), 7.02 (s, IH), 6.89 (d,J=8.61 Hz, IH), 4.43 (s, IH), 4.42 (s, IH), 3.9 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). MS TIC-pozitivan M+l = 526.2.
Sulfonilovani derivati
Jedinjenje 362:
Napravljen je rastvor l-(4-aminometil-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-uree (0,25 mmol, 1,0 Eq), 4-dimetilaminopiridina (5 mg), diizopropiletilamina (36 mg, 0,275 mmol, 1,1 Eq) u THF (5 ml), pa je dodat tiofen-2-sulfonil hlorid (0,275 mmol, 1,1 Eq). Smeša je mešana na sobnoj temp. tokom 24 časa. Zatim je podeljena između EtOAc (75 ml) i zasićenog rastvora NaHC03. Nakon podele slpjeva, organski sloj je ispran vodom, zasićenim slanim rastvorom, pa je isušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen korišćenjem hromatografije za rektifikaciju lakih frakcija uz eluiranje sa 5% MeOH u dihlorometanu i sprašivanje u etru, čime su dobijeni čisti proizvodi.
3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzilamid tiofen-2-sulfonske kiseline.
'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 9.96 (s, 2H), 8.77 (s, IH), 8.33 (t,J=7.04 Hz, IH), 8.31 (s, IH), 8.07 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.93 (d,J=4.7 Hz, IH), 7.59 (s, IH), 7.18 (t,J=3.91 Hz, IH), 6.9 (s, IH), 6.8 (t,J=7.04 Hz, IH), 4.05 (s, IH), 4.03 (s, IH), 3.85 (s, 3H), 2.51 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 433.9.
Jedinjenje 363:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 362 korišćenjem benzensulfonil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-benzensulfonamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 6 9.95 (s, 2H), 8.77 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.13( i, J=6.26 Hz, IH), 8.05 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.81 (d,J=7.04 Hz, 2H), 7.58 (m, 3H), 6.85 (s, IH), 6.77 (d,J=8.61 Hz, IH), 3.96 (s, IH), 3.95 (s, IH), 3.81 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 428.2.
Jedinjenje 364:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 362 korišćenjem 2-trifluorometoksibenzensulfonil hlorida.
N-{3-Metoksi-4-[3-(5-metiI-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-2-trifluorometoksi-benzensulfonamid. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.94 (s, 2H), 8.77 (s, IH), 8.38 (s, IH), 8.21 (s, IH), 8.02 (d, J= 8.61 Hz, IH), 7.89 (m, IH), 7.72 (t,J=7.83 Hz, IH), 7.51 (d,J =7.83 Hz, 2H), 6.88 (s, IH), 6.75 (d, 7=10.17 Hz, IH), 4.11 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.42 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 512.0.
Jedinjenje 365:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 362 korišćenjem 3-metoksibenzensulfonil hlorida.
3-Metoksi-N-{3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzil}-benzensulfonamid.<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 9.92 (s, 2H), 8.73 (s, IH), 8.17 (s, IH), 8.08 (s, IH), 8.01 (d,J = 7.83 Hz, IH), 7.45 (t,J=7.83 Hz, IH), 7.34 (d,J=7.83 Hz, IH), 7.24 (s, IH), 7.14 (m, IH), 6.81 (s, IH), 6.74 (d, J= 7.83 Hz, IH), 3.93 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 458.0.
Jedinjenje 366:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 362 korišćenjem 4-metoksibenzensulfonil hlorida.
4-Metoksi-N- {3 -metoksi-4- [3 -(5-metil-pirazin-2-il)-ureido] -benzil} -benzensulfonamid.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.93 (s, 2H), 8.74 (s, IH), 8.18 (s, IH), 8.02 (d,J=8.61 Hz, IH), 7.92 (s, IH), 7.69( d, J=8.61 Hz, 2H), 7.05(d, J=9.39 Hz, 2H), 6.81 (s, IH), 6.74(d, J= 7.83 Hz, IH), 3.88 (s, 2H), 3.79 (s, 6H), 2.39 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 458.2.
Jedinjenje 367:
Dobijeno prema opštem postupku opisanom kod Jedinjenja 362 korišćenjem piridin-2-sulfonil hlorida.
3-Metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzilamid piridin-2-sulfonske kiseline. 'H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 9.91 (s, 2H), 8.74 (s, IH), 8.68 (d,J=4.7 Hz, IH), 8.17 (s, IH), 7.99 (m, 2H), 7.86( d, J=7.83 Hz, IH), 7.6 (s, IH), 6.86 (s, IH), 6.74(d, J=8.61 Hz, IH), 4.1 (s, 2H). 3.80 (s, 3H), 3.32 (s, IH), 2.38 (s, 3H). MS APCI-Pozitivan, M+l = 428.9.
Dodatna poželjna jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju: N-(2-dimetilamino-l-fenil-etil)-3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzamin; N-(l-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzamid; N-(3-R-l-cikloheksilmetil-pirrolidin-3-il)-3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzamid;
l-[2-(2-dimetilamino-etoksi)-5-metil-fenil]-3-pirazin-2-il-urea; l-[2-(3-dimetilamino-propoksi)-5-metil-fenil]-3- (5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-(5-metil-pirazin-2-il)-3-[5-metil-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenil]-urea; l-[2-(2-dimetilamino-l-dimetilaminometil-etoksi)-5-metil-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-metil-2-(2-S-l-metil-pirolidin-2-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-{5-metil-2-[2-(l-metil-pirrolidin-2-il)-etoksi]-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-{5-metil-2-(l-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-metil-2-(3-(S)-l-metil-piperidin-3-ilmet-oksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-metil-2-(3-(R)-l-metil-piperidin-3-ilmet-oksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-metil-2-(l-metil-piperidin-2-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-metil-2-(l-metil-piperidin-3-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1 -[5-metil-2-( 1 -metil-piperidin-3 -ilmetoksi)-fenil] -3 -hinoksalin-2-il-urea; l-[5-metil-2-(piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-fluoro-2-(l-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[5-fluoro-2-(l-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-[4-fluoro-2-(l-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-(2-metoksi-4-metilaminometil-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; l-(4-{[(furan-3-ilmetil)-amino]-metil}-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; i
l-(2-metoksi-4-[(4-metoksi-benzilamino)-metil]-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea.
Primer 15
Identifikacija Chkl inhibitora
Humana cDNK Chkl proteina je identifikovana i klonirana, kao što je prethodno opisana u međunarodnoj prijavi br. PCT/US98/18558, podnetoj 04.09.1998. godine. FLAG<®>marker je ubačen u okvir čitanja zajedno sa amino terminalom Chkl proteina pune dužine. Prajmer 5' kraja sadrži EcoRI mesto, Kozak sekvencu, a takođe kodira i FLAG<®>marker za prečišćavanja prema afinitetu korišćenjem M2 antitela (Sigma, Saint Louis, IL). Prajmer 3' kraja sadrži Sali mesto. PCR-amplifikovani fragment je kloniran u pCI-Neo kao EcoRI-SalI fragment (Invitrogen, Carlsbad, CA), a zatim je subkloniran kao EcoRI-NotI fragment u pFastBacI (Gibco-BRL, Bethesda, MD). Rekombinantni bakulovirus je pripremljen kao što je opisano u Gibco-BRL Bac-to-Bac priručniku i korišćen je da inficira Sf-ćelije koje su uzgajane u CCM3 podlozi (HvClone Laboratories, Logan, UT) radi ekspresije FLAG ( S)-markiranog Chkl proteina.
FLAG<®->markirani Chkl protein je prečišćen iz zamrznutih granula Sf9 ćelija inficiranih bakulovirusom. Zamrznute granule ćelija su pomešane sa jednakom zapreminom 2X pufera za liziranje koji sadrži 100 mM Tris-HCl pH vrednosti od 7,5, 200 mM NaCl, 50 mM B-glicerofosfat, 25 mM NaF, 4 mM MgCl2, 0,5 mM EGTA, 0.2% TWEEN<®->20, 2 mM natrijum vanadat, 2 mM DTT i koktel inhibitora proteaza (Complete mini, Boehringer Mannheim 2000 katalog #1836170). Ćelije su zatim izgnječene 20 puta sa slobodnim tučkom homogenizatora koji gnječi i centrifugirane su pri ubrzanju od 48400 G tokom jednog časa. Kolona za ispitivanje afiniteta prema M2 antitelima je prethodno isprana sa 10 zapremina kolone 50 mM rastvora glicina pH vrednosti 3,5, a zatim sa 20 mM Tris pH vrednosti 7,5, sa 150 mM NaCl iz tri puta i na kraju sa Tris NaCl. Nakon toga je kolona isprana 25 zapremina kolone rastvora 20 mM Tris pH vrednosti od 7,5, sa 150 mM NaCl, sa 0,1% TWEEN<®->20, sa 1 mM EGTA, sa 1 mM EDTA i IX Complete mini<®>tableta proteaza. Bistri lizat je zatim vezan za smolu sa afinitetom prema M2 antitelima na temp. od 4 °C tokom 4 časa. Smeša smole i lizata je zatim izlivena u kolonu, a propuštena tečnost je sakupljena. Smola je isprana sa 10 zapremina kolone 20 mM rastvora Tris pH vrednosti 7,5, sa 150 mM NaCl i sa 3 mM N-oktil glukozida. Nakon toga je FLAG -markirani Chkl protein eluiran iz kolone sa 6 zapremina hladnog 20 mM Tris pH vrednosti 7,5, sa 150 mM NaCl, sa 3 mM N-oktil glukozida koji sadrži 0,5 mg/ml FLAG<®>peptida (Sigma, 2000 katalog # F-3290). Tri frakcije su sakupljene i analizirane na prisustvo FLAG®-markiranog Chkl proteina.
Protein kinaza je korišćena za razvoj testa aktivnosti Chkl kinaze koji sadrži 100 ng prečišćenog FLAG®-Chkl (150 pmol ATP/min), 20 pM Cdc25C peptida (H-leu-tyr-arg-ser-pro-ser-met-pro-glu-asn-leu-asn-arg-arg-arg-arg-OH) (SEQ ID broj: 1), 400 pM ATP, 2 pCi [<32>P]-gATP, 20 mM Hepes pH vrednosti 7,2, 5 mM MgCl2, 0,1% NP40 i 1 mM DTT. Ovaj test je korišćen za ispitivanje približno 100000 malih molekula inhibitora. Reakcije su pokrenute dodavanjem reakcione smeše koja sadrži ATP i izvođene su na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Reakcije su zasutavljane dodavanjem fosforne kiseline (konačna koncentracija 150 mM), a reakciione smeše su prebacivane na diskove fosfoceluloze. Diskovi fosfoceluloze su pet puta isprani sa 150 mM rastvorom fosforne kiseline i sušeni su na vazduhu. Dodata je tečnost za scintilaciju, pa je aktivnost diskova određivana u "VVallac scintilacionom brojaču. Test je otkrio broj Chkl inhibitora koji poseduju IC5ovrednosti u opsegu od 1 do 100<p>M.
Primer 16
Inhibitori Chkl kinaze su selektivni
Ispitivana je selektivnost Chkl inhibitora prema predmetnom pronalasku koju ispoljavaju prema jednoj ili prema više protein kinaza, tj. prema DNK-PK, Cdc2, kazein kinazi I (CKI), Chk2, p38 MAP kinazi, protein kinazi A (PKA) i kalcijum - kalmodulin protein kinazi II (CaM KII). Postupak testiranja za sve ove kinaze, izuzev za Chk2 kinazu, bio je prethodno opisan u literaturi, uključujući US privremenu patentnu prijavu 60/229,899, podnetu 01.09.2000. godine, kao i US patentnu prijavu 08/184,605, podnetu 21.01.1994. godine, koje su ovde uključene po referenci. Aktivnost jedinjenja prema Chk2 je testirana na sledeći način: 128 ng prečišćenog His-markiranog Chk2 proteina je inkubirano zajedno sa 100 mM Chkl inhibitorom u prisustvu 4 mM ATP, 1 mCi [<32>P] g-ATP, 20 mM Hepes pH vrednosti 7,5, 5 mM MgCl2i 0,25% NP40 tokom 20 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcije su zasutavljene krajnjom koncentracijom od 150 mM fosforne kiseline, pa je 5/8 reakcione smeše prebačeno na diskove fosfoceluloze. Diskovi su isprani pet puta sa 150 mM rastvorom fosforne kiseline i isušeni su na vazduhu. Dodat je scintilant, a radioaktivnost je merena korišćenjem Wallac beta brojača. p38 MAP kinaza, PKA, CaM KII i Cdc2 su nabavljeni od kompanije New England Biolabs, a testovi su sprovedeni prema uputstvu proizvođača korišćenjem 4-50 pM ATP i testiranjem koncentracija Chkl inhibitora do vrednosti od 100 pM. Svi ispitivani inhibitori su pokazali najmanje 5 puta veću selektivnost za Chkl u odnosu na druge enzime.
Primer 17
Inhibitori Chkl blokiraju funkciju Chkl proteina u ćelijama
Chkl je aktiviran u odgovoru na jonizujuće zračenje i određene hemijska sredstva koja oštećuju DNK. U prisustvu oštećenja DNK, Chkl se aktivira i izaziva zastoj ćelijskog ciklusa. U ćelijama sisara, najbolje opisani zastoj ćelijskog ciklusa koji izaziva Chkl je zastoj u G2 fazi. Aktivacija Chkl putem oštećenja DNK vodi fosforilaciji i inaktivaciji Cdc25C, fosfataze dvojne specifičnosti koja normalno defosforiliše kompleks ciklin B/Cdc2 kada ćelija napreduje ka mitozi (Funari et al., Science, 05.09.1997; 277 (5331) 1495 - 7; Sanchez et al.; Matsuoka et al.; i Blasina et al.). Ova negativna regulacija aktivnosti Cdc2 izaziva zastoj ćelijskog ciklusa u cilju sprečavanja ćelija od ulaska u mitozu u prisustvu oštećenja DNK ili u uslovima kada DNK nije replikovana. Stoga, inhibicija Chkl omogućava ćeliji da napreduje kroz ćelijski ciklus u prisustvu oštećenja DNK ili u slučaju kada DNK nije replikovana.
U cilju potvrđivanja da inhibitori Chkl sprečavaju funkciju Chkl u ćelijama, inhibitori su ispitivani molekularnim testovima na ćelijama. Pošto je pokazano da Chkl sisara fosforiliše Cdc25Cin vitro,što sugeriše da negativno reguliše ciklin B / Cdc2 u odgovor na oštećenje DNK, analizirana je sposobnost Chkl inhibitora da pojačaju aktivnost kompleksa ciklin B/Cdc2. Eksperiment je dizajniran na sledeći način: HeLa ćelije su ozračene sa 800 rad i inkubirane su tokom 7 časova na temperaturi od 37 °C. Pošto su ove ćelije funkcionalno p53 negativen, one se isključivo zasutavljaju u G2 fazi. Zatim je dodat nokodazol u koncentraciji od 0,5 pg/ml i smeša je inkubirana tokom 15 časova na temperaturi od 37 °C. Dodavanjem nokodazola se postiže zaustavljanje svake ćelije koja je produžila kroz G2 fazu da se zaustavi u M fazi. Konačno, dodat je Chkl inhibitor tokom 8 časova, pa su ćelije prikupljene, lizirane, pa su imunoprecipitirale jednake količine proteina sa antitelom specifičnim za ciklin BI (New England Biolabs), što je proizvođač i sugerisao. Zatim su inhibitorni proteini analizirani na aktivnost ciklina B udruženu sa cdc2 kinazom ispitivanjem aktivnosti histon Hl kinaze (Yu et al., J. Biol. Chem., 1.12.1998; 273 (50) : 33455-64). rezultati pokazuju da Jedinjenje 29 dovodi do prevazilaženja inaktivacije kompleksa ciklin B/Cdc2 koje je indukovano zračenjem.
Dodatno, ispitivano je da li inhibitori Chkl prekidaju G2 kontrolno mesto oštećenja DNK izazvanog zračenjem što se ocenjuje na osnovu eksperimenata mitotskog indeksa, HeLa ćelije (oko 1 * 10<6>) su tretirane na način koji je dole opisan. Ćelije su prikupljene centrifugiranjem, isprane jednom sa PBS, a zatim resuspendovane u 2,5 ml 75 mM KC1, pa su ponovo centrifugirane. Zatim su ćelije fiksirane u 3 ml sveže pripremljene, hladne smeše sirćetne kiseline i metanola (1:1) i inkubirane su u ledu tokom 20 minuta. Ćelije su usitnjene u granule, rastvor za fiksaciju je aspiriran, pa je materijal resuspendovan u 0,5 ml PBS. Mitotski razmazi su dobijeni pipetiranjem 100 pl fiksiranih ćelija na staklenu mikroskopsku pločicu i kvašenjem uzorka sa 1 ml rastvora za fiksaciju. Razmazi su zatim osušeni na vazduhu, bojeni su bojom po Wright-u (Sigma) tokom 1 minuta, a zatim su isprani vodom i 50% metanolom. Prisustvo kondenzovanih hromozoma i nedostatak omotača jedra ukazuje na mitotske ćelije. Primena Jedinjenja 12 i Jedinjenja 29 je dovela do povećanja broja mititskih ćelija u prisustvu zračenja, što pokazuje nedostatak zastoja u G2 fazi koji je indukovan zračenjem.
Nedostatak G2 kontrolnog mesta indukovanog zračenjem dozvoljava ćeliji da nastavi progresiju kroz ćelijski ciklus, uprkos prisustvu oštećenja DNK, što je pokazano analizom DNK sadržaja putem FACS profila. 293T ćelije su tretirane jonizujućim zračenjem od 800 rad i rastućim koncentracijama (do 80 mM) nekih inhibitora Chkl. Ćelije su zatim prikupljene i fiksirane sa 5 ml hladnog 10% etanola na temp. od -20 °C tokom noći. Onda su ćelije usitnjene u granule centrifugiranjem pri 1000xg tokom 10 minuta i obojene su sa 1 ml rastvora koji sadrži 50 mg/ml propidijum jodida i 250 mg/ml RNK-aze tokom 30 minut na sobnoj temperaturi. Obojene ćelije su zatim analizirane pomoću FACS na FL2 korišćenjem Becton-Dickinson aparata. Ovi eksperimenti su pokazali da dok se ćelije tretiraju zračenjem i samim vehikulumom ostaju zadržane u G2 fazi, a ćelije koje su tretirane sa inhibitorima Chkl se nalaze u Gl i S fazi. Ovi podaci, zajedno sa gore navedenim podacima, sugerišu da inhibitori Chkl dozvoljavaju ćelijama progresiju kroz ćelijski ciklus u prisustvu jonizujućeg zračenja.
Primer 18
Inhibitori Chkl proteina pojačavaju ubijanje ćelija pomoću tretmana za kancer
Da bi se testirala hipoteza da inhibicija Chkl potencira letalno dejstvo sredstava koja pštećuju DNK, ćelije su inkubirane u prisustvu selektivnih inhibitora Chkl i bilo zračenja, bilo hemijskih sredstava koja oštećuju DNK. Ćelije su postavljene na ploču za mikrotitraciju od 96 polja sa gustinom od 1000 - 2000 ćelija po polju i uzgajane su u RMPI 1640 medijumu koji sadrži 10% FBS, 100 U/ml penicilina i 100 pg/ml streptomicina tokom 18 časova na temp. od 37 °C u inkubatoru sa povišenom vlažnošću u atmosferi sa 5% CO2. Ćelije koje su testirane obuhvataju HeLa, ACHN, 786-0, HCT116, SW620, HT29, Colo205, SK-MEL-5, SK-MEL-28, A549, H322, OVCAR-3, SK-OV-3, MDA-MB-231, MCF-7, PC-3, HL-60, K562 i MOLT4 ćelije. Sve oznake ćelijskih linija se odnose humane ćelijske linije i njihovo značenje sledi:
Ćelije su tretirane podlogama koje sadrže same hemoterapijske lekove ili hemoterapijske lekove i Jedinjenja 12 i 29. Ćelije su inkubirane tokom oko 5 dana pre nego što je njihov rast izmeren određivanjem nivoa preuzimanja<3>H-timidina. Hemoterapijski lekovi obuhvataju etoposid, doksorubicin, cisplatin, hlorambucil, 5-fluorouracil (5-FU). Koncentracija leka koja je potrebna da se ćelijski rast inhibira do 90% kod netretiranih kontrolnih ćelija je definisan kao GL90. Pri koncentracijama koje su manje od 100 pM, Jedinjenja 12 i 29 su pojačavala letalno dejstvo 5-FU od dvostruko do desetostruko.
Ispitivana je sposobnost Jedinjenja 2 i 12 da pojačaju letalno dejstvo dodatnih antimetabolita u koje spadaju metotreksat, hidroksiureu, 2-hloroadenozin, fludarabin, azacitidin i gemcitibin. Otkriveno je da ovi inhibitori Chkl pospešuju letalno dejstvo hidroksiuree, fludarabina, 5-azacitidina i metotreksata na ćelije, što sugeriše da kombinovanje inhibitora Chkl i blokiranje sinteze DNK vodi povećanju smrti ćelija koja je indukovana ovim sredstvima.
Dodatno, ispitivana je sposobnost Chkl inhibitora dapospeše letalno dejstvo zračenja. Kod HeLa ćelija, za Jedinjenja 12 i 29 je nađen da povećavaju letalno dejstvo zračenja za 2 - 3 puta.
Primer 19
Modeli animalnih tumora
Kako bi se ispitivala sposobnost Chkl inhibitora da pospeše letalno dejstvo 5-FU na tumore kod miševa, uspostavljeni su modeli ksenograftskih tumora korišćenjem ćelijskih linija tumora debelog creva. Korišćene su Colo205 i HT29 ćelije (humani karcinom kolona) za propagaciju ksenograftskih tumora kod ženki timusnih Balb/c (nu/nu) miševa starih 6-8 nedelja. Miševi su čuvani u kavezu sa laminarnim protokom vazduha u uslovima bez prisustva patogena i hranjeni sustrilnom hranom i vodom po slobodnom nahođenju. Ćelijske linije su uzgajane do subkonfluiranja u RMPI 1640 podlozi koja dodatno sadrži 10% FBS, 100 U/ml penicilina, 100 pg/ml streptomicina i 1,5 mM L-glutamina u atmosferi sa sa povišenom vlažnošću i 5% C02. Suspenzije pojedinačnih ćelija su dobijene u CMF-PBS, a koncentracija ćelija je podešena do 1 x 10 ćelija/ml. Miševima je subkutano ubrizgano u desni bok ili desnu nogu totalno 1 x IO7 ćelija (100 pl).
Miševi su randomizirani (5 miševa po grupi) u četiri grupe za tretman i korišćeni su kada su tumori dostigli masu od 75 - 100 mg (obično 7-11 dana nakon ubrizgavanja). Tumori su mereni nonijus šestarom, a masa tumora je procenjivana korišćenjem empirijski izvedene formule: masa tumora (mg) = dužina tumora (mm) x širina tumora (mm)<2>/ 3,3 . Tretman se sastojao od 100 pl intraperitonealnog (i.p.) ubrizgavanja 5-FU u koncentracijama od 50 mg/kg, 100 mg/kg ili 150 mg/kg. Posmatrano je dozno zavisno usporavanje tumorskog rasta kod miševa koji su tretirani sa 5-FU. Veličina tumora je praćena svakog drugog dana tokom trajanja eksperimenta.
Očigledno, mogu se načiniti mnoge modifikacije i varijacije ovde izloženog predmetnog pronalaska, bez odstupanja od duha i obima zaštite predmetnog pronalaska, te je stoga obima zaštite i ograničen samo onim što je navedeno u patentnim zahtevima.

Claims (16)

1. Jedinjenje formule ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, gde Y" je O ili S; W je odabran iz grupe koju čine po izboru supstituisan sa jedan do četiri supstituenta odabrana iz grupe koju čine C^alkil, aril, N(R<7>)2, OR<7>, N3, CN, C(0)R<7>, C^alkilenaril, C1.3alkilenN(R<12>)2, i halo; Z" je odabran iz grupe koju čine: gde: Q' je odabran iz grupe koju čine vodonik, OR<7>, SR<7>, i N(R<7>)2, pod uslovom da Q' je vodonik kada bar jedan od J', K', L\ i M' predstavlja N, O, ili S; J'je odabran iz grupe koju čine CR<8>,NR<8>, O, i S; K' je odabran iz grupe koju čine CR<9>, NR<9>, O, i S; L'je odabran iz grupe koju čine CR<10>, NR<10>, O, i S; M'je odabran iz grupe koju čineCR<11>, NR<11>,O, i S; pri čemu: R<7>, nezavisno, je odabran iz grupe koju čine vodonik, C^alkil, C2-6alkenil, cikloalkil, aril, heteroaril, SO2R<12>, Ci-6alkil supstituisan jednim ili više halo, hidroksi, aril, heteroaril, heterocikloalkil, N(R<12>)2, i S02R<12>, d-salkilenaril, C1-3alkilenheteroaril, Ci-3atkilenC3.8heterocikloalkil, Ci-3alkilenS02aril, po izboru supstituisan Ci_3alkilenN(R<12>)2, OCF3, Ci-3alkilenN(R12)3\ d-sheterocikloalkil, i CH(Ci-3alkilenN(R<12>)2)2, ili dve R<7>grupe zajedno obrazuju po izboru supstituisan 3- do 6-člani alifatični prsten; R<8>, R<9>, i R<10>su svaki nezavisno odabrni iz grupe koju čine: ništa, vodonik, halo, po izboru supstituisan d-ealkil, C2-6alkenil, OCF3, N02, CN, NC, N(R<7>)2, OR<7>, C02R<7>, C(0)N(R<7>)2, C(0)R7, N(R<13>)COR<7>, N(R<13>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)OR<7>, N(R7)C(0)C1.3alkilenC(0)R7, N(R7)C(0)C1.3alkilenC(0)OR7, N(R7)C(0)d_3alkilenOR<7>, N(R7)C(0)Ci.3alkilenNHC(0)OR7, N(R7)C(0)d-3alkilenS02NR7, CF3, Ci.3alkilenN(R<12>)S02aril, C1.3alkilenN(R<12>)S02heteroaril, d.3alkilenOd. 3alkilenaril, Ci-3alkilenN(R12)d-3alkilenaril, Ci.3alkilenN(R12)Ci.3alkilenheteroaril, d.3alkilenN(R12)C(0)R7, Ci.3alkilenN(R12)C(0)d.3alkilenOR2, d. 3alkilenN(R12)C(0)aril, Ci.3alkilenN(R12)C(0)Ci.3alkilenN(R12)2, d-3alkilenN(R<12>)C(0)heteroaril, Ci-3alkilenOR<7>, i SR<7>, pri čemu je R<7>kao što je prethodno definisano; R<11>je odabran iz grupe koju čine ništa, vodonik, po izboru supstituisan d-6alkil, i halo; R12 je odabran iz grupe koju čine odonik, Ci^alkil, cikloalkil, aril, heteroaril, d.3alkilenaril, i S02Ci.6alkil, ili dve R<12>grupe zajedno formriraju po izboru supstituisan 3- do 6-člani prsten; i R13 je odabran iz grupe koju čine vodonik, d.6alkil, C2.6alkenil, C2-66alkinil, i aril; pod uslovom da kada Q' je vodnik ili OCH3, bar jedan od R<8>, R<9>, i R<10>se razlikuje od vodonika, CH3, OCH3, i halo; i pod uslovom da jedinjenje nije N-[6-(benzilpirid-2-il)]-N'-(2-pirazinil)tiourea.
2.Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što W" je odabran iz grupe koju čine
3. Jedinjenje prema zahtevu 2, naznačeno time, što W" je supstituisan sa jednim ili četiri supstituenta izabranih iz grupe koju čine metil, CF3, po izboru supstituisan aril, N3, benzil, C(0)R<7>, Ci.3alkilenN(R<12>)2, OR<7>, N(R<7>)2, halo, i
4. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što Q' je OR<7>
5. Jedinjenje prema zahtevu 4 , naznačeno time, što Q' je OCH3.
6. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što R<13>je vodonik.
7. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što J'je odabran iz grupe koju čine CR8 i NR<8>, pri čemu R8 je ništa, vodonik, Ci-6alkil, i halo; K' je odabran iz grupe koju čine CR<9>i NR<9>; U je odabran iz grupe koju čine CR<10>i NR10;i jedan od R<9>i R<10>je vodonik i drugi je supstituent odabran iz grupe koju čine C02R7, C(0)N(R<7>)2, C(0)R<7>, N(R<13>)COR<7>, N(R<13>)C(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)OR<7>, N(R7)C(0)C1.3alkilenC(0)R7, N(R7)C(0)C1.3alkilenC(0)OR7, N(R7)C(0)d-3alkilenOR<7>, N(R<7>)C(0)C1.3alkilenNHC(0)OR<7>, N(R<7>)C(0)C1.3alkilenS02NR<7>, d-3alkilen-OR<7>, CF3, Ci^alkilenN(R12)S02aril, C1.3-alkyteneN(R<12>)S02heteroaril, d.3alkilenOCi-3alkilenaril, Ci.3alkilenN(R<12>)Ci.3alkilenaril, Ci.3alkilenN(R<12>)Ci. 3alkilenheteroaril, C1.3alkilenN(R12)C(0)R7, d-salkilenNfR^jC^d-aalkilenOR2, d-3alkilenN(R12)C(0)aril, d-3alkilenN(R12)C(0)d-3alkilenN(R12)2, d-3alkilenN(R<12>)C(0)heteroaril, i SR<7>.
8. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što Z' je odabran iz grupe koju čine: gde: Q'je odabran iz grupe koju čine OR<7>, SR<7>, i N(R<7>)2; J'je CR8; K'jeCR<9>; L'je CR10; M'je CR11.
9. Jedinjenje prema zahtevu 1, strukture naznačeno time, što R27rR<28>su što R29 je
10.Jedinjenje prema zahtevu 1, odabrano iz grupe: N-(2-dimetilamino-1-fenil-etil)-3-metoksi-4-[3-(5-metil-pirazin-2-il)-ureido]-benzamin; N-(1-aza-biciklo[2.2.2]oct-3-il)-3-metok^^ benzamid; 1-[2-(2<limetilamino-etoksi)-5-metil-fenil]-3-pirazin-2-il-<y>rea; 1-[2-(3-dimetilamino-propoksi)-5-metil4enil]-3-(5-rnetil-pirazin-2-il)-urea; 1-(5-metil-pirazin-2-il)-3-t5-metil-2-(piridin-3-ilmetoksi)-fenil]-urea; 1-[2-(2-dimetilamino-1-dimetilamiriom il)-urea; 1-[5-metrl-2-(2-S-1-metil-pirolidin-2-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-{5-metil-2-[2-(1-metil-pirolidin-2-il)-etoksi]-fenil}-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-{5-metil-2-(1-metil-piperidin^ 145-metil-2-(3-(S)-1-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin
1 -[5-metil-2-(3-(R)-1 -metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-[5-metil-2-(1-metil-piperidin-2-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-i 1-[5-metil-2-(1-metil-piperidin-3-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-u^ 1-[5-metil-2-(1-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-quinoxalin-2-il-urea; 1-[5-metil-2-(piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-[5-fluoro-2-(1-metil-piperidin-3-ilmetoksi)-fenil]-3-(5-metil-piraa 1-[5-fluoro-2-(1-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-iO^ 1-[4-fluoro-2-(1-metil-piperidin-4-iloksi)-fenil]-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-(2-metoksi-4-metilaminometil-fenil)-3-(5-metil-pirazin-2-il)-urea; 1-(4-{[(furan-3-ilmetil)-amino]-metil}-2-metoksi-fenil)-3-(5-metil-piraz i 1-{2-metoksi-4-[(4-metoksi-benzilamino)-metil]-fenil}-3-(5-metil-pira^
11.Kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 10 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
12.Jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 10 za upotrebu u lečenju.
13.Upotreba jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 10 za proizvodnju leka za upotrebu u kombinaciji sa hemoterapeutskim agensom, radioterapeutskim agensom, ili njihovom smešom, u metodi senzitacije ćelija kod osoba koje su pod hemoterapeutskim ili radioterapeutskim tretmanom medicinkog stanja.
14.In vitro metod za inhibiranje kinaze 1 kontrolne tačke (Chkl) u ćeliji, koji obuhvata fazu stavljanja u kontakt ćelije sa efikasnom količinom jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 10.
15.Jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 10 za upotrebu u lečenju kancera kod ljudi.
16.Upotreba jedinjenJA prema jednom od zahteva 1 do 10 za proizvodnju leka za lečenje kancera kod ljudi.
YU69003A 2001-03-02 2002-03-01 Aril i heteroaril urea chk1 inhibitori kao jedinjenja koja povećavaju osetljivost na radioterapiju i hemoterapiju RS52077B (sr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US27312401P 2001-03-02 2001-03-02

Publications (2)

Publication Number Publication Date
YU69003A YU69003A (sh) 2006-05-25
RS52077B true RS52077B (sr) 2012-06-30

Family

ID=23042649

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YU69003A RS52077B (sr) 2001-03-02 2002-03-01 Aril i heteroaril urea chk1 inhibitori kao jedinjenja koja povećavaju osetljivost na radioterapiju i hemoterapiju

Country Status (27)

Country Link
US (3) US7067506B2 (sr)
EP (1) EP1379510B1 (sr)
JP (1) JP4222833B2 (sr)
KR (2) KR20080046228A (sr)
CN (1) CN100374425C (sr)
AT (1) ATE511503T1 (sr)
AU (1) AU2002258451B2 (sr)
BR (1) BR0207811A (sr)
CA (1) CA2439709C (sr)
CY (1) CY1111590T1 (sr)
DK (1) DK1379510T3 (sr)
EA (1) EA014954B1 (sr)
ES (1) ES2365504T3 (sr)
GE (1) GEP20053659B (sr)
HR (1) HRP20030688B1 (sr)
IL (1) IL157563A0 (sr)
IS (1) IS6935A (sr)
MX (1) MXPA03007920A (sr)
NO (1) NO326776B1 (sr)
NZ (1) NZ527787A (sr)
PL (1) PL212707B1 (sr)
PT (1) PT1379510E (sr)
RS (1) RS52077B (sr)
SI (1) SI1379510T1 (sr)
UA (1) UA76977C2 (sr)
WO (1) WO2002070494A1 (sr)
ZA (1) ZA200306721B (sr)

Families Citing this family (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8124630B2 (en) 1999-01-13 2012-02-28 Bayer Healthcare Llc ω-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
ATE538794T1 (de) 1999-01-13 2012-01-15 Bayer Healthcare Llc Gamma carboxyarylsubstituierte diphenylharnstoffverbindungen als p38 kinasehemmer
UA76977C2 (en) * 2001-03-02 2006-10-16 Icos Corp Aryl- and heteroaryl substituted chk1 inhibitors and their use as radiosensitizers and chemosensitizers
US7838541B2 (en) 2002-02-11 2010-11-23 Bayer Healthcare, Llc Aryl ureas with angiogenesis inhibiting activity
US20060235035A1 (en) * 2002-04-09 2006-10-19 7Tm Pharma A/S Novel methoxybenzamibe compounds for use in mch receptor related disorders
US7202244B2 (en) 2002-05-29 2007-04-10 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Chk-1 inhibitors
AU2003243921B2 (en) 2002-06-27 2009-05-07 Novo Nordisk A/S Aryl carbonyl derivatives as therapeutic agents
KR101124245B1 (ko) 2002-06-27 2012-07-02 노보 노르디스크 에이/에스 치료제로서 아릴 카르보닐 유도체
CA2493458A1 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Ptc Therapeutics, Inc. Ureido substituted benzoic acid compounds, their use for nonsense suppression and the treatment of diseases caused by such mutations
US20040034038A1 (en) * 2002-08-13 2004-02-19 Goaquan Li Urea kinase inhibitors
US7056925B2 (en) * 2002-08-13 2006-06-06 Abbott Laboratories Urea kinase inhibitors
WO2004048319A1 (en) * 2002-11-25 2004-06-10 7Tm Pharma A/S Novel benzamide compounds for use in mch receptor related disorders
DK1585749T3 (da) 2003-01-09 2008-09-22 Pfizer Diazepinoindol-derivater som kinaseinhibitorer
NZ589793A (en) * 2003-02-21 2011-12-22 Resmed Ltd Nozzle configuration of nasal cushion for respiratory assistance mask
UY28213A1 (es) 2003-02-28 2004-09-30 Bayer Pharmaceuticals Corp Nuevos derivados de cianopiridina útiles en el tratamiento de cáncer y otros trastornos.
US7320986B2 (en) 2003-03-07 2008-01-22 Abbott Labortories Fused tri and tetra-cyclic pyrazole kinase inhibitors
GB2400101A (en) * 2003-03-28 2004-10-06 Biofocus Discovery Ltd Compounds capable of binding to the active site of protein kinases
WO2004113274A2 (en) 2003-05-20 2004-12-29 Bayer Pharmaceuticals Corporation Diaryl ureas with kinase inhibiting activity
US7297709B2 (en) 2003-05-22 2007-11-20 Abbott Laboratories Indazole, benzisoxazole, and benzisothiazole kinase inhibitors
WO2005028474A2 (en) * 2003-05-29 2005-03-31 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Pyrazoloquinoline derivatives as chk-1 inhibitors
RS52625B (sr) 2003-07-23 2013-06-28 Bayer Healthcare Llc Fluoro supstituisana omega-karboksiaril difenil urea za lečenje i prevenciju bolesti i stanja bolesti
EP1660474B1 (en) * 2003-08-15 2008-10-29 AstraZeneca AB Substituted thiophenes and uses thereof
US7338957B2 (en) * 2003-08-28 2008-03-04 Irm Llc Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
EP1660504B1 (en) 2003-08-29 2008-10-29 Pfizer Inc. Thienopyridine-phenylacet amides and their derivatives useful as new anti-angiogenic agents
CA2539320A1 (en) * 2003-09-17 2005-03-31 Icos Corporation Use of chk1 inhibitors to control cell proliferation
WO2005046683A1 (en) 2003-10-07 2005-05-26 Renovis, Inc. Amide derivatives as ion-channel ligands and pharmaceutical compositions and methods of using the same
US7163939B2 (en) * 2003-11-05 2007-01-16 Abbott Laboratories Macrocyclic kinase inhibitors
US20050096324A1 (en) * 2003-11-05 2005-05-05 Zhi-Fu Tao Macrocyclic kinase inhibitors
WO2005066145A1 (en) 2004-01-06 2005-07-21 Novo Nordisk A/S Heteroaryl-ureas and their use as glucokinase activators
WO2005072733A1 (en) * 2004-01-20 2005-08-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Dyarylurea compounds as chk-1 inhibitors
ES2551293T3 (es) 2004-03-24 2015-11-17 Abbvie Inc. Inhibidores de quinasas de pirazol tricíclicos
US7625949B2 (en) 2004-04-23 2009-12-01 Roche Palo Alto Llc Methods for treating retroviral infections
US7166738B2 (en) 2004-04-23 2007-01-23 Roche Palo Alto Llc Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors
US20050276765A1 (en) * 2004-06-10 2005-12-15 Paul Nghiem Preventing skin damage
GB0512324D0 (en) * 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
BRPI0512593A (pt) * 2004-06-25 2008-03-25 Icos Corp composto ou um sal ou pró-droga ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição, e, métodos de inibir a quinase 1 de ponto de verificação em uma célula, de sensibilizar células em um indivìduo e de inibir a proliferação de célula aberrante
CN101010316A (zh) 2004-07-02 2007-08-01 艾科斯有限公司 用于抑制chk1的化合物
CN101115727A (zh) * 2004-08-19 2008-01-30 艾科斯有限公司 用于抑制chk1的化合物
DE102004055582A1 (de) 2004-11-18 2006-05-24 Bayer Cropscience Ag N-Heterocyclyl-phthalsäurediamide
CA2589271A1 (en) * 2004-12-07 2006-06-15 Locus Pharmaceuticals, Inc. Urea inhibitors of map kinases
EP1824843A2 (en) * 2004-12-07 2007-08-29 Locus Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of protein kinases
US7576099B2 (en) 2005-02-28 2009-08-18 Renovis, Inc. Amide derivatives as ion-channel ligands and pharmaceutical compositions and methods of using the same
WO2006105262A1 (en) * 2005-03-29 2006-10-05 Icos Corporation HETEROARYL UREA DERIVATIVES USEFUL FOR INHIBITING CHKl
BRPI0617720A2 (pt) 2005-10-19 2011-08-02 Hoffmann La Roche compostos inibidores de nnrt de fenil-acetamida, usos dos referidos compostos e composição farmacêutica que os contém
US8014957B2 (en) 2005-12-15 2011-09-06 Fred Hutchinson Cancer Research Center Genes associated with progression and response in chronic myeloid leukemia and uses thereof
MEP3808A (xx) 2005-12-21 2010-02-10 Novartis Ag Derivati pirimidinil aril uree kao fgf inhibitori
JP2009522363A (ja) * 2006-01-04 2009-06-11 ローカス ファーマシューティカルズ、インク． プロテインキナーゼの阻害剤
JP2009541323A (ja) * 2006-06-22 2009-11-26 マリンクロット インコーポレイテッド 拡張された共役を有するピラジン誘導体およびその使用
EP1882475A1 (en) * 2006-07-26 2008-01-30 Novartis AG Method of treating disorders mediated by the fibroblast growth factor receptor
US9056136B2 (en) * 2006-10-06 2015-06-16 Natural Pharmacia International, Inc. Weakly basic 2-nitroimidazoles for the non-invasive detection of tissue hypoxia
UA95310C2 (ru) 2006-10-20 2011-07-25 Айкос Корпорейшен Композиция, содержащая ингибитор chk1 и циклодекстрин, для лечения рака
EP2086644A2 (en) * 2006-11-17 2009-08-12 Schering Corporation Combination of an inhibitor of dna polymerase-alpha and an inhibitor of a checkpoint kinase for proliferative disorders
EP2409700A1 (en) 2007-05-08 2012-01-25 Schering Corporation Methods of treatment using intravenous formulations comprising temozolomide
EP2247953A2 (en) * 2008-02-04 2010-11-10 Dana-farber Cancer Institute, Inc. Chk1 suppresses a caspase-2 apoptotic response to dna damage that bypasses p53, bcl-2 and caspase-3
ES2378513T3 (es) 2008-08-06 2012-04-13 Pfizer Inc. Compuestos 2-heterociclilamino piracinas sustituidas en posición 6 como inhibidores de CHK-1
US8314108B2 (en) 2008-12-17 2012-11-20 Eli Lilly And Company 5-(5-(2-(3-aminopropoxy)-6-methoxyphenyl)-1H-pyrazol-3-ylamino)pyrazine-2-carbonitrile, pharmaceutically acceptable salts thereof, or solvate of salts
EP2241557A1 (de) * 2009-04-02 2010-10-20 Æterna Zentaris GmbH Chinoxalin-Derivate und deren Anwendung zur Behandlung gutartiger und bösartiger Tumorerkrankungen
CN101857575A (zh) * 2009-04-07 2010-10-13 上海合全药业有限公司 2-氨基-5-甲基吡嗪的工业化制备方法
CN101560175B (zh) * 2009-05-08 2012-10-10 南京大学 一类硫脲类衍生物及其制备方法与用途
EP2448938B9 (en) 2009-06-29 2015-06-10 Incyte Corporation Pyrimidinones as pi3k inhibitors
EP2305643A1 (en) * 2009-10-02 2011-04-06 Ikerchem, S.L. New histone deacetylase inhibitors based simultaneously on trisubstituted 1h-pyrroles and aromatic and heteroaromatic spacers
WO2011075643A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Incyte Corporation Substituted heteroaryl fused derivatives as pi3k inhibitors
AR079529A1 (es) * 2009-12-18 2012-02-01 Incyte Corp Derivados arilo y heteroarilo sustituidos y fundidos como inhibidores de la pi3k
EP2558463A1 (en) 2010-04-14 2013-02-20 Incyte Corporation Fused derivatives as i3 inhibitors
JP5585822B2 (ja) * 2010-05-11 2014-09-10 東レ・ファインケミカル株式会社 光学活性ニペコチン酸誘導体の製造方法
GB201008005D0 (en) 2010-05-13 2010-06-30 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
US9062055B2 (en) 2010-06-21 2015-06-23 Incyte Corporation Fused pyrrole derivatives as PI3K inhibitors
TW201249844A (en) 2010-12-20 2012-12-16 Incyte Corp N-(1-(substituted-phenyl)ethyl)-9H-purin-6-amines as PI3K inhibitors
US8716246B2 (en) 2011-01-03 2014-05-06 The Regents Of The University Of California Azuvirin peptides
WO2012125629A1 (en) 2011-03-14 2012-09-20 Incyte Corporation Substituted diamino-pyrimidine and diamino-pyridine derivatives as pi3k inhibitors
US9126948B2 (en) 2011-03-25 2015-09-08 Incyte Holdings Corporation Pyrimidine-4,6-diamine derivatives as PI3K inhibitors
KR102030609B1 (ko) 2011-09-02 2019-10-11 인사이트 홀딩스 코포레이션 Ｐｉ３ｋ 억제제로서 헤테로시클릴아민
GB201119799D0 (en) 2011-11-16 2011-12-28 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
AR090548A1 (es) 2012-04-02 2014-11-19 Incyte Corp Azaheterociclobencilaminas biciclicas como inhibidores de pi3k
CA2938626A1 (en) 2013-07-26 2015-01-29 John Rothman Compositions to improve the therapeutic benefit of bisantrene
GB201402277D0 (en) 2014-02-10 2014-03-26 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
WO2015191677A1 (en) 2014-06-11 2015-12-17 Incyte Corporation Bicyclic heteroarylaminoalkyl phenyl derivatives as pi3k inhibitors
DK3831833T3 (da) 2015-02-27 2022-11-14 Incyte Holdings Corp Fremgangsmåder til fremstillingen af en pi3k-inhibitor
WO2016183063A1 (en) 2015-05-11 2016-11-17 Incyte Corporation Crystalline forms of a pi3k inhibitor
US9732097B2 (en) 2015-05-11 2017-08-15 Incyte Corporation Process for the synthesis of a phosphoinositide 3-kinase inhibitor
KR102768838B1 (ko) 2015-09-17 2025-02-14 시티 오브 호프 Pcna 억제제
DK3411036T3 (da) 2016-02-04 2022-01-17 Pharmaengine Inc 3,5-disubstituerede pyrazoler, der er nyttige som checkpoint-kinase 1 (chk1)-hæmmere, samt fremstilling og anvendelse deraf
CN106632093A (zh) * 2016-11-23 2017-05-10 山东友帮生化科技有限公司 一种2‑溴‑5,6‑二苯基吡嗪的制备方法
AU2018243667A1 (en) 2017-03-31 2019-10-17 Seagen Inc. Combinations of Chk1- and Wee1 - inhibitors
EP3461480A1 (en) 2017-09-27 2019-04-03 Onxeo Combination of a dna damage response cell cycle checkpoint inhibitors and belinostat for treating cancer
CN119258070A (zh) 2018-06-01 2025-01-07 因赛特公司 治疗pi3k相关病症的给药方案
KR20210020866A (ko) 2018-06-12 2021-02-24 브이티브이 테라퓨틱스 엘엘씨 인슐린 또는 인슐린 유사체와 조합된 글루코키나제 활성제의 치료적 용도
EP3818044A1 (en) * 2018-07-03 2021-05-12 IFM Due, Inc. Compounds and compositions for treating conditions associated with sting activity
GB201813060D0 (en) * 2018-08-10 2018-09-26 Artios Pharma Ltd Novel compounds
CN111377874A (zh) * 2018-12-28 2020-07-07 南京艾德凯腾生物医药有限责任公司 一种制备赛乐西帕中间体的方法
EP3904352A4 (en) * 2018-12-28 2022-09-07 Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. SUBSTITUTED ARYL COMPOUND, METHOD OF MANUFACTURE THEREOF AND USE THEREOF
CN111377873B (zh) * 2018-12-28 2023-03-28 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 氨基嘧啶化合物及其制备方法和用途
CN112457306A (zh) 2019-09-06 2021-03-09 上海瑛派药业有限公司 3,5-二取代吡唑化合物作为激酶抑制剂及其应用
ES3014705T3 (en) 2019-11-29 2025-04-24 Novaonco Js Therapeutics Co Ltd Diazaindole derivative and use thereof as chk1 inhibitor
WO2021119236A1 (en) 2019-12-10 2021-06-17 Seagen Inc. Preparation of a chk1 inhibitor compound
WO2021167840A1 (en) 2020-02-18 2021-08-26 Vtv Therapeutics Llc Sulfoxide and sulfone glucokinase activators and methods of use thereof
EP4161640A4 (en) 2020-06-08 2024-01-17 vTv Therapeutics LLC Salts or co-crystals of {2-[3-cyclohexyl-3-(trans-4-propoxy-cyclohexyl)-ureido]-thiazol-5-ylsulfanyl}-acetic acid and uses thereof
GB202107924D0 (en) 2021-06-03 2021-07-21 Sentinel Oncology Ltd A pharmaceutical salt
GB202107932D0 (en) 2021-06-03 2021-07-21 Sentinel Oncology Ltd Preparation of a CHK1 Inhibitor Compound
CN115353512B (zh) * 2021-07-30 2025-07-08 上海翊石医药科技有限公司 一种杂环脲类化合物及其制备方法和用途
CN113717115A (zh) * 2021-08-27 2021-11-30 湖北石河医药科技有限公司 一种赛乐西帕中间体的制备方法及其在制备赛乐西帕中的应用
KR20240158305A (ko) * 2022-03-07 2024-11-04 시티 오브 호프 Pcna 억제제 및 이의 용도
WO2024229406A1 (en) 2023-05-04 2024-11-07 Revolution Medicines, Inc. Combination therapy for a ras related disease or disorder
US20250049810A1 (en) 2023-08-07 2025-02-13 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
TW202530228A (zh) 2023-10-12 2025-08-01 美商銳新醫藥公司 Ｒａｓ抑制劑
WO2025171296A1 (en) 2024-02-09 2025-08-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025217307A1 (en) 2024-04-09 2025-10-16 Revolution Medicines, Inc. Methods for predicting response to a ras(on) inhibitor and combination therapies
TW202547461A (zh) 2024-05-17 2025-12-16 美商銳新醫藥公司 Ｒａｓ抑制劑
WO2025255438A1 (en) 2024-06-07 2025-12-11 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
WO2025265060A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Revolution Medicines, Inc. Therapeutic compositions and methods for managing treatment-related effects
WO2026006747A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026015825A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitor for treating pancreatic cancer
WO2026015796A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015790A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015801A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026050446A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2762743A (en) * 1953-03-11 1956-09-11 Merck & Co Inc 1-phenyl-3(3-as-triazinyl) urea compositions for the treatment of coccidiosis and method for preparing the same
US4609659A (en) * 1985-01-16 1986-09-02 Merck & Co., Inc. 2,6-disubstituted derivatives of 3-nitropyrazines useful as adjuncts to radiation therapy
US5215738A (en) * 1985-05-03 1993-06-01 Sri International Benzamide and nicotinamide radiosensitizers
US5041653A (en) * 1985-05-03 1991-08-20 Sri International Substituted benzamide radiosensitizers
SU1624949A1 (ru) 1987-12-15 1996-02-27 И.И. Красильников м,N-БУТИРИЛАМИНОБЕНЗАМИД, ОБЛАДАЮЩИЙ РАДИОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ
SU1621447A1 (ru) 1989-06-29 1996-02-27 О.В. Арапов м,-(N-ТРИФТОРАЦЕТИЛАМИНО)БЕНЗАМИД, ОБЛАДАЮЩИЙ РАДИОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ
US5212738A (en) * 1991-04-12 1993-05-18 Martin Marietta Magnesia Specialties Inc. Scanning laser measurement system
HU221816B1 (hu) 1991-10-11 2003-01-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Gyűrűs karbonil vegyületek, és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények
WO1994026715A1 (en) * 1993-05-11 1994-11-24 Smithkline Beecham Plc Amidine derivatives as gastric acid secretion inhibitors
US5547966A (en) * 1993-10-07 1996-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Aryl urea and related compounds
GB9420999D0 (en) * 1994-10-18 1994-12-07 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
US6033582A (en) * 1996-01-22 2000-03-07 Etex Corporation Surface modification of medical implants
US6051218A (en) * 1996-02-02 2000-04-18 The Regents Of The University Of California Tumor radiosensitization using gene therapy
US6093742A (en) * 1997-06-27 2000-07-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of p38
WO1999011621A2 (en) * 1997-09-03 1999-03-11 American Home Products Corporation Thiourea for increasing hdl-cholesterol levels, which are useful as anti-atherosclerotic agents
US6218109B1 (en) * 1997-09-05 2001-04-17 Baylor College Of Medicine Mammalian checkpoint genes and proteins
TR200001645T2 (tr) * 1997-12-11 2000-12-21 Janssen Pharmaceutica N.V. Retinoyik asit taklidi anilürler.
DE69839735D1 (de) 1997-12-15 2008-08-28 Astellas Pharma Inc Pyrimidin-5-carboxamid-derivate
IL136737A0 (en) 1997-12-22 2001-06-14 Bayer Ag Inhibition of p38 kinase using symmetrical and unsymmetrical diphenyl ureas
EP1449834A3 (en) 1997-12-22 2004-12-22 Bayer Corporation Inhibition of raf kinase using symmetrical and unsymmetrical substituted diphenyl ureas
CA2300197A1 (en) * 1997-12-23 1999-07-01 Warner-Lambert Company Thiourea and benzamide compounds, compositions and methods of treating or preventing inflammatory diseases and atherosclerosis
US6383744B1 (en) 1998-07-10 2002-05-07 Incyte Genomics, Inc. Human checkpoint kinase
EP1115707B1 (en) * 1998-09-25 2003-11-12 AstraZeneca AB Benzamide derivatives and ther use as cytokine inhibitors
GB9823873D0 (en) * 1998-10-30 1998-12-30 Pharmacia & Upjohn Spa 2-ureido-thiazole derivatives,process for their preparation,and their use as antitumour agents
FR2787322B1 (fr) 1998-12-18 2002-10-18 Galderma Res & Dev Emulsion huile-dans-eau comprenant un agent actif micronise et un systeme emulsionnant approprie
EP1165531A1 (en) * 1999-03-19 2002-01-02 Du Pont Pharmaceuticals Company N-adamant-1-yl-n'- 4-chlorobenzothiazol-2-yl] urea useful in the treatment of inflammation and as an anticancer radiosensitizing agent
UA71971C2 (en) 1999-06-04 2005-01-17 Agoron Pharmaceuticals Inc Diaminothiazoles, composition based thereon, a method for modulation of protein kinases activity, a method for the treatment of diseases mediated by protein kinases
US6958333B1 (en) 1999-07-26 2005-10-25 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Biarylurea derivatives
US6670167B1 (en) 1999-11-01 2003-12-30 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Catalytic domain of the human effector cell cycle checkpoint protein kinase materials and methods for identification of inhibitors thereof
EP1268472B1 (en) 2000-02-07 2004-10-13 Bristol-Myers Squibb Company 3-aminopyrazole inhibitors of cyclin dependent kinases
US6211164B1 (en) * 2000-03-10 2001-04-03 Abbott Laboratories Antisense oligonucleotides of the human chk1 gene and uses thereof
UA76977C2 (en) * 2001-03-02 2006-10-16 Icos Corp Aryl- and heteroaryl substituted chk1 inhibitors and their use as radiosensitizers and chemosensitizers

Also Published As

Publication number Publication date
JP2004523568A (ja) 2004-08-05
US20030069284A1 (en) 2003-04-10
US7067506B2 (en) 2006-06-27
YU69003A (sh) 2006-05-25
EA014954B1 (ru) 2011-04-29
CY1111590T1 (el) 2015-10-07
PL364564A1 (en) 2004-12-13
SI1379510T1 (sl) 2011-10-28
PL212707B1 (pl) 2012-11-30
CA2439709A1 (en) 2002-09-12
ATE511503T1 (de) 2011-06-15
EP1379510A1 (en) 2004-01-14
CN100374425C (zh) 2008-03-12
PT1379510E (pt) 2011-07-15
DK1379510T3 (da) 2011-08-29
US7608618B2 (en) 2009-10-27
CA2439709C (en) 2011-05-03
MXPA03007920A (es) 2003-12-04
EA200300947A1 (ru) 2004-04-29
US20100105683A1 (en) 2010-04-29
UA76977C2 (en) 2006-10-16
CN1507436A (zh) 2004-06-23
HRP20030688A2 (en) 2005-10-31
NO20033858L (no) 2003-10-10
ES2365504T3 (es) 2011-10-06
KR20080046228A (ko) 2008-05-26
AU2002258451B2 (en) 2006-08-31
JP4222833B2 (ja) 2009-02-12
US20050245525A1 (en) 2005-11-03
NO20033858D0 (no) 2003-09-01
HK1062438A1 (en) 2004-11-05
NO326776B1 (no) 2009-02-16
WO2002070494A1 (en) 2002-09-12
GEP20053659B (en) 2005-11-10
IL157563A0 (en) 2004-03-28
IS6935A (is) 2003-08-29
HRP20030688B1 (hr) 2013-12-06
BR0207811A (pt) 2005-02-01
NZ527787A (en) 2005-12-23
ZA200306721B (en) 2004-05-03
EP1379510B1 (en) 2011-06-01
KR20030078957A (ko) 2003-10-08
KR100861829B1 (ko) 2008-10-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS52077B (sr) Aril i heteroaril urea chk1 inhibitori kao jedinjenja koja povećavaju osetljivost na radioterapiju i hemoterapiju
AU2002258451A1 (en) Aryl and Heteroaryl Urea CHK1 Inhibitors for Use as Radiosensitizers and Chemosensitizers
US7560462B2 (en) Compounds useful for inhibiting CHK1
CN101151259B (zh) 可用于抑制chk1的杂芳基脲衍生物
US20080318974A1 (en) Compounds Useful for Inhibiting Chk1
CN101006075A (zh) 可用于抑制chk1的双芳基脲衍生物
HK1062438B (en) Aryl and heteroaryl urea chk1 inhibitors for use as radiosensitizers and chemosensitizers
HK1119670B (en) Heteroaryl urea derivatives useful for inhibiting chk1