RS55532B1 - Modulatori jetrenog x receptora - Google Patents

Description

REFERENCA NA SRODNE PRIJAVE

[0001]Patentni zahtevi iz ove prijave se pozivaju na prioritet datuma prvenstva datuma podnošenja iz provizorne američke prijave patenta (U.S. Provisional Application No.) broj 61/612,063, podnetu 16. marta 2012.

OBLAST PRONALASKA

[0002]Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koji moduliše aktivnost jetrenih X receptora.

STANJE TEHNIKE

[0003]Ateroskleroza je vodeći uzrok smrtnosti u razvijenom svetu, i ateroskleroza se predviđa da bude vodeći uzrok smrtnosti u razvijenom svetu u 21. veku. Jetreni X receptori (LXRs) su faktori transkripcije aktivirani ligandom koji igraju ključnu ulogu u regulisanju ispoljavanja gena uključenih u metabolizam liganda i ćelijske homeostaze holesterola. I_XR agonisti su prikazano tako da poboljšaju reverzni transport holesterola (RCT), olakšavanje saobraćaja iz pozadine perifernog u jetru za obradu i izlučivanje. RCT se javlja preko uzvodne regulacije transportera holesterola (ATP kasete za vezivanje: ABCA1 i ABCG1) u perifernim makrofagima. Aktivni RCT ima potencijal da se inhibira napredovanje ateroskleroza.

[0004]Postoje dve izoforme LXR, LXRct (NR1H3) i LXRp (NR1H2) koji se kodiraju odvoljenim genima. LXRa ispoljavanje je selektivno za tkiva, je moguće detektovati u jetri, creva, bubreg, adipozno tkivo i adrenalne žlezde, su svi važni za homeostaze lipida, pri čemu LXR[J se ispoljava kao sveprisutan. Oba LXR zahtevaju retinoidni (mrežnjača) X receptor (RXR) kao obavezni partner heterodimera da prepozna i veže kooperativno na LXR elemente odgovora (LXREs) koji se sastoje od dva direktna ponavljanja ključne heksamerne sekvence odvojene sa četiri nukleotida (DR4). Domeni vezivanja liganda ova dva LXR su prilično dobro očuvani (~78% homologije amino kiseline) i odgovara endogenim ligandima koji se sastoje od oksidizovanih derivata holesterola (oksisterola) koji služe kao intermedijeri u sintezi steroidnog hormona i žučne kiseline. Među tim, 22(R)-hidroksiholesterol, 24{S)-hidroksiholesterol, i 24(S), 25-epoksiholesterol su najjači. Ovi podaci nagoveštavaju da su LXR su verovatno igraju važnu ulogu u regulaciji holesterola, koji je kasnije potvrdio putem studija nokaut (knock-out) gena kod miševa. Nesteroidni ligandi su takođe identifikovani, i, korišćenje ovih kao hemijskih sondi velikog broja LXR regulisanih gena su otkriveni. Nekoliko LXRE gena koji sadrže obuhvaćene u mehanizmu holesterola, reverzni transport holesterola (RCT) i lipogenezu. Drugim genima obuhvaćeni u metabolizam upale i karbohidrata nedostaje LXRE, ali su potisnuti putem LXR na od liganda zavistan način. Na osnovu ovih otkrića, jetreni X receptori su se nedavno pojavili kao neprevaziđeni ciljevi koji deluju kao senzori intracelularnog holesterola, obezbeđuju bazu za tečenje raznovrsnih bolesti, uključujući aterosklerozu, dijabete, Alchajmerovu bolest, poremećaje kože, reproduktivne poremećaje i kancer (Viennois et al., 2011, Expert Opin. Ther. Targets, 15(2):219-232). Pored toga, utvrđeno je da LXR agonisti modulišu transportere crevnog i bubrežnog natrijum fosfata (NaPi) i, zauzvrat, nivoe fosfata seruma (Caldas et al., 2011, Kidnev International, 80:535-544). Dakle, LXR je takođe cilj za poremećaje bubrega, i posebno za sprečavanje hiperfosfatemije i povezanih kardiovaskularnih komplikacija. Najzad, LXR su identifikovani kao ciljevi u terapijama osteoporoze i srodnih bolesti (Klever et al., 2012, J. Bone Miner. Res., 27(12):2442-51).

[0005]Alchajmerova bolest je jedan od najčešćih oblika demencije, koji karakteriše akumulacija i taloženje amiloidnih-beta (Af3) peptida u mozu, što dovodi do toga da u mozgu, koji vodi do preturbacije sinaptičke funkcije i gubitka neurona u mozgovima pojedinaca koji su pogođeni ovom bolešću. Neuroni u ovom mozgu proizvode Ap peptide preko deljenja amiloidnog prekursor proteina (APP), i Ap peptidi se normalno brišu kroz efluks u perifernu cirkulaciju i razgradnjom proteinaza u mozgu.

[0006]Apolipoprotein E (apoE) se povezuje sa starosno uslovljenim rizikom od Aichajmerove bolesti i igra ključne uloge u A|} homeostazi. LXR povećava ispoljavanje apoE i povećava lipidaciju apoE. Razgradnja Ap i intra- i ekstraćelijski je povećana lipidovanim apoE. LXR terapija agonistom je stimulisala proteolitsku razgradnju Ap, smanjene patologije plaka, i poboljšala memoriju kod transgenskih miševa sa APP ekspresijom (Jiang et al., 2008, Neuron, 58:681-693).

[0007]U koži, keratinociti su ključčna komponenta epidermisa. Spoljni sloj, stratum corneum (rožnati sloj), je prvenstveno odgovoran kao barijera propusnosti za vodu i tranzit elektrolita. Keratinociti u epidermisu podležu diferencijaciji koja kulminira keratinizacijom (orožavanjem) keratinocita ("cigle") i formiranje vanćelijskih lipidom obogaćenih lamelarnih membrana ("cement") u stratum corneum. I LXRa i LXRp su ispoljeni u keratinocitima, i LXR ispoljavanje i aktivacija unapređuje funkciju barijere epidermisa. Aktivacija LXR je obuhvaćena diferencijacijom keratinocita, formiranjem lamelame membrane i ukupnim poboljšanjem funkcije epidermalne pregrade. Dakle, LXR aktivacija se očekuje da kao rezultat da povećanu diferencijaciju keratinocita, ovećano izlučivanje lipida (preko ABCA1, ABCA12), i povećano formiranje lamelarnog tela što vodi do zdravog epidermisa (glatke kože).

[0008]Potencijalna terapijska korisnost LXR agonista je dovela do rayvoja nekoliko visokoafinitetnih LXR liganda sa jakim agonizmom prema oba podtipa receptora. Terapijska korisnost LXR agonista je ograničena njihovim potencijalom da izazove lipogenske gene uključujući protein 1c za vezivanje elementa odgovora sterola (SREBPIc) i sintave masne kiseline (FAS). Prekliničke studije su pokazale da sintetički modulatori LXR smanjuju progresiju lezij na mišjim modelima ateroskleroze sa ograničenim povećanjem u lipogenezi jetre. Postoji jasna potreba za novim LXR hemotipovima koji zadržavaju efikasnost protiv ateroskleroze sadašnjih LXR agonista ali su lišeni lipogenske aktivnosti. Jedinjenja koja ispoljavaju farmakološki profil sa pozitivnim dejstvima na RCT pri čemu su neutralna ili supresivna na lipogenske gene biće vredni terapijski agensi kod pacijenata sa atersklerotičnom dislipidemijom. VVO2009/086129 opisuje na pirazolo [1,5-a] pirimidinu zasnovane modulatore jetrenog X receptora.

[0009]Ovaj pronalazak obezbeduje jedinjenja koja su agonisti jetrenog X receptora i korisna su kao terapijski agensi za unapređenje rezverznog transporta holesterola i potiskivanje lipogeneze jetre, i za sprečavanje, poboljšanje ili lečenje bolesti ili poremećaja uključujući aterosklerozu, Alchajmerovu bolest, dermatitis, i dislipidemiju kod pacijenta.

KRATAK OPIS PRONALASKA

[0010]Opisani su LXR modulatori korisni kao terapijski agensi za unapređenje rezverznog transporta holesterola i potiskivanje lipogeneze jetre, i za sprečavanje, poboljšanje ili lečenje bolesti ili poremećaja uključujući aterosklerozu i dislipidemiju kod ispitanika. Opisani LXR modulatori su selektivni za LXRp podtip preko LXRo. podtipa (videti npr., Primer6, izomer 1; Primer 7. izomer 1: i Primer 13, izomer 1).

[0011]Jedno izvođenje ovog pronalaska je jedinjenje predstavljeno strukturnom formulom I:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0012]XjeNiliCR<c>.

[0013]R1 je alkil ili -NRaRb.

[0014]R<2>je H; halogen; -CN; -NRC(0)R; -C(0)OR; -C(0)NR<a>R<b>: monociklični heteroaromatik opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, -CN, -NRC(0)R, -C(0)OR, -C(0)NR<a>R<D><i>halogen; monociskličnog nearomatskog heterocikla opciono supstituisanog jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, -CN i =0; ili alkila opciono supstituisanog jednom ili više grupa izabranih iz halogena, hidroksi, alkoksi, -NR<a>R<b>, -NRC(0)R, -NRC(0)O(alkil), -NRC(0)N(R)2, -C(0)OR, tiol,

alkiltiol, nitro, - CN, =0, -OC(0)H, -OC(0)(alkil), -OC(0)0(alkil), -OC(0)N(R)2i -C(0)NR<a>R<b>.

[0015]R3 je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil, monociklični nearomatični heterocikl, monociklični heteroaromatik ili fenil, pri čemu je fenil, monociklični nearomatični heterocikl i monociklična heteroaromatična grupa predstavljena pomoću R^ su opciono supstituisane jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, haloalkila, alkoksi, haloalkoksi, nitro i -CN;

[0016]R<4>i R<5>nezavisno su halogen, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR, -OC(0)0(alkil), - C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -C(0)N(R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, - S02N(R)2, -NRS(0)R, -NRSO2R -NRC(0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil, monociklični nearomatični heterocikl, monociklični heteroaromatik ili alkil, pri čemu taj alkil, monociklični nearomatični heterocikl i monociklični heteroaromatik grupa predstavljena pomoću R<4>ili R^ se opciono supstituiše sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N{R)2, =0, -C(0)R, -C(0)OR, -C{0)0(haloalkil), -OC(0)R, - OC(0)0{alkil), -C(0)N(R)2, OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, NRC(0)0{alkil), -S{0)R, -SO2R, -S02N{R)2, -

NRS(0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2i -NRS02N(R)2.

[0017]R<6>je H, halogen. -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR, -OC(0)0(alkil), -C(0)0(haloalkil),

-OC(0)R, -C(0)N(R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, - NRS(0)R, -NRSO2R -NRC(0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, ciksloalkil ili alkil, pri čemu je alkil grupa predstavljena pomoću R^ opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R>2. =0, -C(0)R, -C(0)0R, -C(0)0(haloalkil), -0C(0)R, -OC(0)0(alkil), - C(0)N(R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, -NRS(0)R, -

NRSO2R -NRC(0)N(R)2i -NRS02N(R)2; ili R<5>i R<6>, uzete zajedno sa atomima ugljentka na koje se vezuju, da formiraju monociklični nearomatični heterocikl opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, halogen, hidroksialkil, alkoksialkil, haloalkil i =0.

[0018]Svaki R nezavisno je H ili alkil.

[0019]R<a>i R<b><se><nez>avisnoh, alkil ili Ra i R<b>može da se uzme zajedno sa azotom na koji se oni spoje da formiraju monociklični nearomatični heterocikl.

[0020]Rcje H, alkil, ili halogen.

[0021]Još jedno varijantno rešenje pronalaska je farmaceutsko jedinjenje koje obuhvata jedinjenje prema ovom pronalasku i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

[0022]Ova prijava još opisuje postupak za lečenje ispitanika sa bolešću ili poremećajem koje je moguće lečiti pojačavanjem aktivnosti LXR. Postupak obuhvata primenu delotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku ili njegovoj farmaceutski prihvatljivoj soli na ispitaniku kome je potrebno.

[0023]Takođe je data u ovom pronalasku upotreba jedinjenja prema ovom pronalasku za proizvodnju leka za tečenje ispitanika sa bolešću ili poremećajem koji može da se leči pojačanom regulacijom LXR aktivnosti kod ispitanika kom je potrebna.

[0024]Ovde je opisano jedinjenje prema ovom pronalasku za upotrebu za lečenje bolesti ili poremećaja koji može da se leči pojačavanjem LXR aktivnosti kod ispitanika kom je potrebna.

[0025]Još jedno izvođenje ovog pronalaska je jedinjenje intermedijara korišćeno u pripremi LXR modulatora i predstavljeno strukturnom formulom la:

ili njegovom solju.

[0026]X je N ili CR<C>.

[0027]RlOje alkil ili -NRaRb.

[0028]R<20>je H: halogen; -CN; -NRC(0)R; -C(0)OR; -C(OINR<a>R<b>; monociklični heteroaromatik opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, -CN, -NRC(0)R, -C(0)OR, -C(0)NR<a>R<D>i halogena; monocikličnog nearomatskog heterocikla opciono supstituisanog jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, -CN i =0; ili alkila opciono supstituisanog jednom ili više grupa izabranih iz halogena, hidroksi, alkoksi, -NR<a>R<b>, -NRC(0)R, -NRC(0)O(alkil), -NRC(0)N(R)2, -C(0)OR, tiol,

alkiltiol, nitro, - CN, =0, -OC(0)H, -OC(0)(alkil), -OC(0)0{alkil>, -OC(0)N(R)2, -C(0)NR<a>R<b>, i - O (zaštitna grupa).

[0029]R<30>je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil ili fenil, pri čemu je fenil grupa predstavljena pomoću R^<O>se opciono supstituiše sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, halogen, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, azot i -CN.

[0030]Svaki R nezavisno je H ili alkil.

[0031]Ra i R<b><su><n>ezavisno h, alkil iliRa iRbmože da se uzme zajedno sa azotom na koji se oni spoje da formiraju monociklični nearomatični heterocikl.

[0032]R<C>je H, alkil, ili halogen.

DETALJAN OPIS OVOG PRONALASKA

A. JEDINJENJA

[0033]Jedinjenje(a) prema ovom pronalasku ponuđeno ovde (ili intermedijar koji se koristi za njegovu pripremu) obuhvata i neutralni oblik i njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0034]U jednom izvođenju, jedinjenje je predstavljeno strukturnom formulom II, III, IV, V, VI ili VII, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so pri čemu vrednosti za promenljive jesu kako je definisano za Formulu I iznad.

[0035]U prvom alternativnom izvođenju bilo koje jedinjenje prema formulama I do VII, promenljive se definišu kao u nastavku.

[0036]R<3>je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil ili fenil, pri čemu je fenil grupa predstavljena pomoć R<3>je opciono supstituisana sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, haloalkila, alkoksi, haloalkoksi, azot i -CN; R<4>i R<5>nezavisno su halogen, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, - C(0)R, -C(0)OR, -OC(0)O(alkyl), -CfO)O(haloalkil), -OC(0)R, -C(0)N(R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, - NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -S02R, -S02N(R)2, -NRS(0)R, -NRSO2R -NRC(0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil ili alkil, pri čemu je alkil predstavljen pomoću R4 ili R5 opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R)2, =0, -C(0)R, -C(0)OR,

-C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -OC(0)0(alkil), -C(0)N(R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -

S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, -NRS(0)R, -NRSO2R -NRC(0)N(R)2i -NRS02N(R)2; R<6>je H. halogen, - CN, -OR. -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR, -0C(0)0(alkil), -C(0)0(haloalkil), -0C(0)R, -C(0)N(R)2, - OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R>2, -NRS(0)R, -NRSO2R - NRC(0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil ili alkil, pri čemu je alkil grupa predstavljena putem R<6>je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, - N(R)2, =0, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -0C(O)0(alkil), -C(0)N(R)2, - OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, -NRS(0)R, -NRSO2R - NRC(0)N(R)2i -NRS02N(R)2-

[0037]U drugom alternativnom izvođenju bilo koje jedinjenje prema formulama I do VII, promenljive se definišu kao u nastavku.

[0038]R<1>je metil ili -NH2.

[0039]R2je H ili metil, pri čemu metil grupa predstavljena pomoću R<2>je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranih iz halogen, hidroksi, alkoksi, -NR<a>R<b>, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), - NRC(0)N(R)2, -C(0)OR, tiol, alkittiol, nitro, -CN, =0, -OC(0)H, -0C(O)(alkil), -0C(0)O(alkil), -

C(0)NR<a>R<b>i -0C(O)N(R)2. Preporučljivo, R<2>je H ili -CH2OH.

[0040]R<3>je metil, etil, propil, izopropil, tert-butil, sek-butil, izo-butil, -CH2CF3, -CH(CH2F)2, - CH(CHF2)2, -CH(CF3)2, -CF(CH3)2, -CF3, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil. -C(OH)(CH3)2, -CH{OH)(CH3), ili fenil, pri čemu fenil grupa predstavljena pomoću R<3>je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranih iz alkil, halogen, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, nitro i -CN.

[0041]Rc, gde je prisutan, jeste H.

[0042]Vrednosti za preostale promenljive su kako je definisano za Formulu I ili za prvo alternativno izvođenje.

[0043]U trećem alternativnom izvođenju bilo kog jedinjenja formule I do VII, R<1>je metil; R<2>je - CH2OH; i R3 je izopropil. Vrednosti za preostale promenljive su kao što su definisane za Formulu I ili za prvo, drugo ili treće alternativno izvođenje.

[0044]Učetvrtom alternativnom izvođenju nekog jedinjenja prema formulama I kroz VII, R^ i R5 je nezavisno halogen, hidroksi, alkil, cikloalkil, cikloalkoksi, alkoksi, haloalkoksi, haloalkil, -N(R)2, -C(0)OH, -C(0)0(alkil), -C(0)0(haloalkil), -C(0)(alkil), -C(0)N(R)2, -NRC(0)R. -S02N(R)2, -OC(0)N(R}2, -CN, hidroksialkil ili dihidroksialkil. Vrednosti za preostale promenljive su definisane za Formulu I ili za prvo, drugo ili treće alternativno izvođenje.

[0045]U petom alternativnom izvođenju bilo kog jedinjenja prema formulama I do VII, R<4>je alkil, haloalkil, cikloalkil, alkoksi, ili haloalkoksi. Vrednosti za preostale promenljive su definisane za Formulu I ili za prvo, drugo, treće ili četvrto alternativno izvođenje.

[0046]U šestom alternativnom izvođenju bilo kog jedinjenja formule I do VII, R<4>' R<5>nezavisno su metil, etil, hidroksi, -CF3, izopropil, ciklopropil, -CH2OH, -CH(OH){CH2)(OH), -C(OH)(CH3)2, - CH(OH)(CH3), -CH(OH)(CH2)(CH3), -CH(OH)(CH2)2(CH3), -C(0)NH2-C(0)N(CH3)2, -C(0)OH, -C(0)NH(CH3). -C(0)CH3. -C(0)CH2CH3, -C(0)0(CH2)(CH3), -C(0)0(tert-butil), C(0)0(C)(CH3)2(CF3), - NHC(0)CH3l -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH3l-OCH(CH3)2ili -OCH3.

Preporučljivo, R<4>je upravo kako je opisano i R^ j<e>-C(0H)(CH3)2. Vrednosti za preostale promenljive su definisane za Formulu I ili za prvo, drugo, treće, četvrto ili peto alternativno izvođenje.

[0047]Ušestom alternativnom izvođenju bilo kog jedinjenja formula I do VII, R<4>je metil, halogenisani metil, ciklopropil, -OCHF2 ili -OCH3. Preporučljivo, R<4>je CF3. Vrednosti za preostale promenljive su kako je definisano za Formulu I ili za prvo, drugo, treće, četvrto, peto ili šesto alternativno izvođenje.

[0048]Drugo izvođenje ovog pronalaska je jedinjenje predstavljeno formulama I, II, III, IV, V, VI ili VII ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, pri čemu su promenljive kao što je definisano za formulu I ili u prvom, drugom, trećem, četvrtom, petom, šestom ili sedmom alternativnom izvođenju, ukoliko to jedinjenje ne obuhvata grupe predstavljene pomoću -C(0)OR.

[0049]Još jedno izvođenje ovog pronalaska je jedinjenje predstavljeno formulom I, II, III, IV V, VI ili VII ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, pri čemu su promenljive kao što je definisano za formulu (I) ili u prvom, drugom, trećem, četvrtom, petom, Šestom ili sedmom alternativnom izvođenju, ukoliko to jedinjenje ne obuhvata grupe predstavljene -C(0)OR.

[0050]Jedinjenja prema ovom pronalasku (ili intermedijari korišćeni u njihovoj pripremi) obuhvataju barem jedan hiralni centar i, samim tim, postoje kao enantiomeri. Kada se jedinjenja prema ovom pronalasku pokažu ili nazivom navedu bez označavanja stereohemije, treba razumeti da enantiomerno čisti oblici i mešavine enantiomera, obuhvataju racemijske mešavine, su obuhvaćeni.

[0051]Kada je neko jedinjenje označeno imenom ili strukturom koja označava jedan enantiomer, osim ako nije drugačije navedeno, jedinjenje je barem 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, 99.5% ili 99.9% optički čisto (takođe se pominje kao "enantiomerno čisto"). Optička čistoća je težina u mešavini navedenog ili prikazanog enantiomera pođeljeno sa ukupnom težinom u mešavini oba enantiomera.

[0052]Kada je neko jedinjenje označeno imenom ili strukturom koja označava specifičnu stereohemiju u hiralnom centru, osim ako nije drugačije navedeno, jedinjenje je barem 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, 99.5% ili 99.9% stereoizomemo čisto. Stereoizomema čistoća je težina u mešavini u vidu naziva datog ili prikazanog stereoizomera, podeljena ukupnom težinom u mešavini svih stereoizomera.

[0053]U osmom alternativnom izvođenju, jedinjenje prema ovom pronalasku je prikazano putem strukturne formule u Tabeli 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U osmom alternativnom izvođenju, jedinjenje prema ovom pronalasku se bira iz bilo kog od jedinjenja E6a, E7a, 13a, E18 i E27a ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0054]Takođe je opisano u prijavi jedinjenje intermedijara korišćenog za pripremu LXR modulatori se predstavljen strukturnom formulom VIII, IX, ili X ili njegova so pri čemu se vrednosti za promenlive su kako je definisano za Formulu la gore.

[0055]U prvom alternativnom izvođenju jedinjenja intermedijara iz formule VIII do X, R<10>je -CH.aTe vrednosti za preostale promenljive se definišu za Formulu la.

[0056]U drugom alternativnom izvođenju jedinjenja intermedijara iz formula VIII do X, R20 je -CH20H, -CH2O (zaštitna grupa), -COOH, ili -C{0)0(alkil). Vrednosti za preostale promenljive se definiše za Formulu la ili za prvo ili treće alternativno izvođenje za formule VIII do X.

[0057]U trećem alternativnom izvođenju jedinjenja intermedijara iz formule VIII do X, R<30>je izopropil. Vrednosti za preostale promenljive su kao što se definiše za Formulu la ili prvo ili drugo alternativno izvođenje za formule VIII do X.

[0058]U četvrom alternativnom izvođenju jedinjenja intermedijara iz formula VIII do X, R20 je - CH20(TB-DPS) ili -C(0)OCH3. Vrednosti za preostale promenljive se definiše za Formulu la ili za prvo ili treće alternativno izvođenje bilo kog jedinjenja iz formula VIII do X.

[0059]U petom alternativnom izvođenju jedinjenja intermedijara iz formula VIII do X, jedinjenje intermedijar se bira iz

ili njegovom solju.

[0060]U šestom alternativnom izvođenju jedinjenje intermedijara iz formula VIII do X, jedinjenje intermedijara je

ili njegova so.

B. DEFINICIJE

[0061]Osim ako nije drugačije navedeno, donji pojmovi korišćeni ovde su definisani na sledeći način.

[0062]"Ispitanik", "pacijent" i "sisar" se ovde koriste ravnovravno. U jednom izvođenju, subjekat je nehumana životinja kao što je nehumani primat (npr. majmun, šimpanza), životinje sa farme (npr., konj, krava, svinja, pile, ili ovca), laboratorijska životinja (npr., pacov ili miš), ili životinje kućni ljubimci (npr., pas, mačka, gvinejsko prase ili zec). U preporučenom izvođenju, subjekat je čovek.

[0063]"Jedinjenja prema ovom pronalasku" se odnose na jedinjenja predstavljena strukturnom formulom I, II, III, IV, V, VI, VII; jedinjenje prikazano u Tabeli 1; jedinjenje navedeno nazivom ili prikazano u primerima ovde u tekstu kao finalna jedinjenja iz primera; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. "Jedinjenja prema ovom pronalasku" takođe obuhvataju neutralni oblik ovde prikazanog jedinjenja.

[0064]"Farmaceutski prihvatljivo" se odnosi na komponentu koja je, obuhvaćena meritornim medicinskim sudom, pogodnim za upotrebu u kontaktu sa tkivima ispitanika, kao što su ljudi i drugi sisari, bez bespotrebne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i sličnog, i srazmerna su razumnom odnosu koristi/rizika.

[0065]Obuhvaćene ovim pronalaskom su farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja opisanih ovde. Opisana jedinjenja imaju osnovne grupe amina i samim tim mogu da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama. Pogodne farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli jedinjenja prema ovom pronalasku uključujući soli neorganskih kiselina (kao što je hidrohlorna kiselina, hidrobromna, fosforna, metafosforna, azotna, i sumporna kiselina) i organske kiseline (kao što je, sirćetna kiselina, benzensulfonska, benzoična, limunska, etansulfonska, fumarna, glukonska, glikolna, izetionična, mlečna, laktobionska, maleinska, jabučna, metansulfonska, ćilibarna, p-toluensulfonska, i tartarna kiselina). Jedinjenja prema ovom pronalasku sa kiselinskim grupama kao što su karboksilne kiseline mogu da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa farmaceutski prihvatljivima bazama. Pogodne farmaceutski prihvatljive bazne soli obuhvataju soli amonijaka, soli alkalnih metala (kao što je so natrijuma i so kalijuma) i zemnoalkalne soli metala (kao što je magnezijum so i kalcijum so). Spiskovi pogodnih soli se nalaze u Remingtovom farmaceutskom priručniku (Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Companv, Easton, PA, 1990, p 1445).

[0066]"Jetreni X receptori ili LXRs" obuhvataju i a i p podtipove jetrenog X receptora. U jednom izvođenju, opisana jedinjenja se selektivno vezuju i pojačavaju aktivnost LXRp podtipa u odnosu na LXRa podtip. Pojam "modulisati" receptor znači da postoji promena ili prepravka u aktivnosti molekula koji je predmet interesa, npr., biološka aktivnost jetrenog X receptora. Modulacija može da bude pojačavanje (povećanje) ili oslabljenje (smanjenje) u magnitudi izvesne aktivnosti ili funkcije molekula od interesa. Primeri aktivnosti i funkcija nekog molekula obuhvataju, ali se ne ograničavaju na, karakteristike vezivanja, enzimsku aktivnost, aktivaciju receptora ćelije, transkripcionu aktivnost, i transdukciju signala. U jednom izvođenju, jedinjenja prema ovom pronalasku su LXR agonisti koji, na primer, pojačavaju ili oslabljuju gene koji su transkripcioni ciljevi LXR( t. j.,"LXR ciljni geni").

[0067]"Lečiti" ili "lečenje" obuhvata i terapijske i profilaktičke terapije i znači poboljšanje, smanjenje, potiskivanje ublažavanje, smanjenje dejstva, zaustavljanje, ili stabilizovanje razvoja ili progresije bolesti (npr., bolesti ili poremećaja navedenih ovde), smanjenje ozbiljnosti bolesti ili poboljšanje simptoma povezanih sa bolešću.

[0068]"Bolest" ili "poremećaj" znači bilo kakvo stanje koje se moduliše ili na koje se na drugi način utiče aktivnošću LXR ili u kom je implicirana LXR aktivnost. Bolesti ili poremećaji obuhvataju one koje su povezane sa, ili simptome koji potiču od komplikacija, izmenjenog transporta holesterola, reverznog transporta holesterola, metabolizma masne kiseline, apsorpvije holesterola, ponovne apsorpcije holesterola, izlučivanja holesterola, izlučivanja holesterola, ili metabolizma holesterola.

[0069]"Delotvorna količina" je količina jedinjenja koje je dovotjon za lečenje (terapijsko ili profilaktičko) ciljnog poremećaja ili u kom se postiže povoljan klinički ishod kada se jedinjenje primeni kao lek ispitaniku odgovarajućem režimu doze. Delotvorne doze će takođe varirati, kao što stručnjak u ovoj oblasti upoznat, zavisno od bolesti koja se leči, ozbiljnosti bolesti, rute primene leka, pola, starosti i opšteg zdravstvenog stanja pacijenta, upotrebe ekscipijenta, mogućnošću istovremene upotrebe sa drugim lekovitim terapijama kao što je upotreba drugih agenasa i procene lekara ili drugog pružaoca medicinske usluge. Na primer, delotvorna količina je dovoljna da se smanji ili poboljša ozbiljnost, trajanje ili napredovanje poremećaja koji se leči, sprečava napredovanje poremećaja koji se leči, prouzrokuje regresija poremećaja koji se leči, ili pojača ili poboljša profilaktička ili terapijska dejstva druge terapije. Na primer, kada se jedinjenje prema ovom pronalasku primeni kao lek ispitaniku sa kancerom, "pogodan klinički ishod" obuhvata smanjenje mase tumora, smanjenje metastaza, smanjenje ozbiljnosti simptoma povezanih sa kancerom i/ili povećanje dugovečnosti ispitanika u poređenju sa odsustvom terapije. Kada se jedinjenje prema ovom pronalasku primeni kao lek ispitaniku sa poremećajem kao što je ateroskleroza,, "pogodan klinički ishod" obuhvata smanjenje ozbiljnosti ili broja simptoma povezanih sa ovim poremećajem, niži holesterol, ili povećanje dugovečnosti ispitanika u poređenju sa odsustvom terapije. Preporučene doze agenasa koje se trenutno koriste za lečenje poremećaja moguće je dobiti iz raličitih referenci u ovoj oblasti uključujući, ali ne ograničavajući se na, Hardman et al., eds., 1996, Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics 9th Ed, Mc-Graw-Hill, New York; Phvsician's Desk Reference (PDR) 57th Ed., 2003, Medical Economics Co., Inc., Montvale, NJ. Kod nekih izvođenja, delotvorna količina jedinjenja prema ovom pronalasku je u opsegu od 0,5 mg do 2000 mg, ili od 0,5 mg do 1000 mg, ili od 0,5 mg do 500 mg, ili od 0,5 mg do 100 mg, ili od 100 mg do 1000 mg, ili od 20 mg do 2000 mg po tretmanu. Tretman se obično primeni od jednom do tri puta dnevno.

[0070]Pojam "halo" ili "halogen" znači hloro, bromo, fluoro. ili jodo. U jednom izvođenju, halo je fluoro.

[0071]"Alkil" znači pravolinijsku ili razgranatu grupu ugljovodonika sa 1 do 15 atoma ugljenika u ovom lancu. U jednom izvođenju, alkil grupe imaju 1 do 12 atoma ugljenika u svom lancu. U drugom izvođenju, alkil grupe imaju 1 do 6 atoma ugljenika. Primeri alkil grupa obuhvataju, ali se ne ograničavaju na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, fert-butil, sefc-butil, n-pentil, 3-pentil, heptil, oktil, nonil, decil, i dodecil.

[0072]"Alkoksi" je alkil grupa koja se spaja na drugi deo preko linkera kiseonika (-O(alkil)}. Neograničavajući primeri obuhvataju metoski, etoksi, propoksi, i butoksi.

[0073]"Haloalkil" ili "halogenizovani alkil" znači alkil grupu u kom jedan ili više, uključujući sve, radikale vodonika bivaju zamenjeni halo grupom, pri čemu je svaka halo grupa nezavisno izabrana iz - F, -Cl, -Br, i -I. Na primer, pojam, "halometil" ili "halogenisani metil" znači metil u kom se jedan do tri radikala vodonika zameni halo grupom. Haloalkil grupe uzete kao predstavnici obuhvataju fluorometil, difluorometil, trifluorometil, bromometil, 1,2-dihloroetil, 4-jodobutil, 2-fluoropentil, i slično. Drugi primeri obuhvataju grupe kao što su ali ne ograničavaju se na -CH2CF3,-CH(CH2F)2, -CH(CHF2)2, - CH(Cf 3)2, -CF(CH3)2, -CF3.

[0074]"Haloalkoksi" je haloalkil grupa koja se spaja na drugi deo preko linkera kiseonika kao što je ali se ne ograničava ograničeni na -OCHCF2ili -OCF3.

[0075]"Alkoksialkil" je alkoksi grupa koji se spaja na drugi deo preko alkil linkera. "Hidroksialkil" ili "dihidroksialkil" je jedna ili dve hidroksi grupe, respektivno, koje se spajaju na drugi deo preko alkil linkera. Predstavnik "hidroksialkil" ili "dihidroksialkil" obuhvata -CH2OH, -CH(OH)(CH2)(OH), - C(OH)(CH3)2, -CH(OH)(CH3), -CH(OH)(CH2)(CH3), -CH(OH)(CH2)2(CH3), -C(CH3)2(OH), i slično.

[0076]"Cikloalkil" znači sistem nearomatskog monocikličnog prstena od 3 do 10 atoma ugljenika. U jednom izvođenju, cikloalkil grupa ima 3 do 6 atoma ugljenika. Primeri cikloalkil prstenova obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, i cikloheksil.

[0077]"Cikloalkoksi" je cikloalkil grupa koja se spaja na drugi deo preko linkera kiseonika (-O(cikloalkil)).

[0078]"Monociklični nearomatični heterocikl" znači jedan zasićeni heterociklični prsten, najčešće sa 3- do 10- članova a uobičajenije 3 do 7 članova u prstenu, pri čemu je barem jedan atom u prstenu heteroatom kao što je, na primer, azot, kiseonik, sumpor, uključujući sulfoksid i sulfon. na primer, azot, kiseonik, sumpor, uključujući sulfoksid i sulfon. 3- do 4 člani element je monociklični nearomatični heterocikl može da sadrži i do 2 heteroatoma; 5-6 člani monociklični heterocikl može sadržati do 3 heteroatoma i 7- do 10-člani element monocikličnog ne-aromatskog heterocikla može da sadrži i do 4 heteroatoma. Monociklični nearomatični heterocikl može da bude spojen na drugu grupu preko bilo kog heteroatoma ili atoma ugljenika monocikličnog nearomatskog heterocikla. Elementi predstavnici monocikličnih nearomatskih heterocikla obuhvataju morfolinil, tiomorfolinil, pirolidinonil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, imidazolidinil, pirazolidinil, oksazolidinil, izotiazolidinil, hidantoinil, valerolactamil, oksiranil, oksetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, tetrahidropirindinil, tetrahidropirimidinil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiopiranil, i slično. U jednom izvođenju, monociklkični nearomatični heterocikl je heterociklični prsten od 4, 5, 6, ili 7 elemenata.

[0079]"Monociklični heteroaromatik" obuhvata elemente prstena atoma ugljenika i jedan ili više elemenata prsena heteroatoma. Svaki heteroatom se nezavisno bira iz azota, kiseonika, i sumpora, uključujući sulfokside i sulfone. Mesto spoja monocikličnog heteroaromatskog prsena na drugu grupu može da bude bilo atom ugljenika ili heteroatom heteroaromatika. U jednom izvođenju, monociklični heteroaromatični prsten se bira iz 5 do 8 članih monocikličnih heteroaromatskih prstenova. Prestavnici monocikličnih heteroaromatskih grupa obuhvataju piridil, 1-oksoo-piridil, furantl, tienil, pirolil, oksazolil, imidazolil, tiazolil, izoksazolil, pirazolil, izotiazolil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil, triazolil, tiadiazolil, i tetrazolil.

[0080]Zaštitna grupa je grupa koja se spaja na reaktivnu funkcionalnu grupu u jedinjenju da pretvori tu reaktivnu funkcionalnu grupu u drugu, nereaktivnu grupu da omogući, na primer, reakcije na drugom deiu molekula bez interfejsa iz reaktivne funkcionalne grupe. Jednom pošto se reakcija na drugom delu molekula završi, zaštitne grupe se uklanjaju da se regeneriše originalna reaktivna funcionalna grupa. Zaštitne grupe za hidroksi grupu (-OH) i reakcije i stanja za zaštitu i uklanjanje zaštite hidroksi grupe su dobro poznati u ovoj oblasti i opisuju ih, na primer, Greene and VVuts, "Protective Groups in Organic Svnthesis", John Wiley & Sons (2007), Poglavlje 2 i u tu citiranim referencama. Na primer, zaštitna grupa može štiti hidroksi grupu kao etar. Takve zašttne grupe obuhvataju, ali se ne ograničavaju na metil, metoksimetil, metiltiometil, (fenild- imetilsililjmetoksimetil, benziloksimetil, p-metoksibenziloksimetil, [3,4-dimetoksibenzil)oksi]metil, p-ni- trobenziloksimetil, o-nitrobenziloksimetil, [(R)-1-(2-nitrofenil)etoksi]metil, (4-metoksifenoksi)metil, gvajakolmetil, [(p-fenilfenil)oksi]metil, t-butoksimetil, 4-pentenitoksimetil, siloksimetil. 2-metoksietoksimetil, 2-cijanoetoksimetil, bis(2-hloroetoksi)metil, 2,2,2-trihloroetoksimetil, 2-(trimetilsilil)etoksimetil, mentoksimetil. 0-bis(2-acetoksietoksi)metil, tetrahidropiranil, fluor tetrahidropiranil, 3-bromotetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, 1-metoksicikloheksil, 4-metoksitetrahidropiranil, 4-metoksitetrahidrotiopiranil, 4-metoksitetrahidrotiopiranil, S.S-dioksid, 1-[(2-hloro-4-metil)fenil]-4-metoksipiperidin-4-il, 1-(2-fluorofenil)-4-met- oksipiperidin-4-il, 1 -(4-hlorofenil)-4-metoksipiperidin-4-il, 1,4-dioksan-2-il, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofuranil, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahirdo-7,8,8-trimetil-4.7-metanobenzofuran-2-il, 1-etoksietil, 1-(2-hloroetoksi)etil, 2-hidroksietil, 2-bromoetil, 1-[2-(trimettlsilil )etoksi]etil. 1-metil-1-metoksietil, 1-metil-1-benziloksietil, 1-me-til-1-benziloksi-2-fluoroetil, 1-metil-1-fenoksietil, 2,2,2-trihloroetil, 1,1,-dianisil-2,2,2,-trihloroetil, 1,l,1,3,3,3-heksafluoro-2-fenilizopropil, 1-(2-cijanoetoksi)etil, 2-trimetilsililetil, 2-(benziltio)etil, 2-(fenilselenil)etil, t-butil, cikloheksil, 1-metil-1'-ciklopropilmetil, alil, prenil, cinamil, 2-fenalil, propargil, p-hlorof- enil, p-metoksifenil, p-nitrofenil, 2,4-dinitrofenil, 2,3,5,6-tetrafluoro-4-(trifluorometil)fenil, benzil, p-metoksibenzil, 3,4-dimetoksibenzil, 2,6-dimetoksibenzil, o-nitrobenzil, p-nitrobenzil, pentadienilnitrobenzil, pentadienilnitropiperonil, halobenzil, 2,6-dihlorobenzil, 2,4-dihlorobenzil, 2,6-difluorobenzil, p-cijanobenzil,fluoros benzil, 4-fluorousalkoksibenzil, trimetilsililksilil, p-fenilbenzil, 2-fenil-2-propil (kumil), p-acilaminobenzil, p-azidobenzil, 4-azido-3-hlorobenzil, 2-i 4-trifluorometilbenzil, p-(metilsulfinil)benzil, p-siletanilbenzil, 4-acetoksibenzil, 4-(2-trimetilsilil)etoksimetoksibenzil, 2-naftilmetil, 2- i 4-pikolil, 3-metil-2-pikolil N-oksido, 2-hinolinilmetiI, 6-metoksi-2-(4-metilfeni)-4-hinolinmetil, 1-pirenilmetil, difenilmetil, 4-metoksidifenilmetil, 4- fenildifenilmetil, p.p'-dinitrobenzhidril, 5-dibenzosuberil, trifenilmetil, tris(4-t-butilfenil)metil, o.-naf- tildifenilmetil, p-metoksifenildifenilmetil, di(p-metoksifenil)fenilmetil, tri(p-metoksifenil)metil, 4-(4-bromofenaciloksi)fenildifenilmetil, 4,4',4"-tris(4,5-dichlorophthalimidofenil)metil, 4,4',4"-tris(levulinoiloksifenil)metil, 4,4',4"tris(benzoiloksifenil)metil, 4,4'-dimetoksi-3"-[N-(imidazolilmetil)tritil, 4,4'-dimetoksi3"-[N-(imidazoliletil)karbamoil]tritil, bis(4-metoksifenil)-T-pirenilmetil, 4-(17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenilme- til)-4,4"-dimetoksitritil, 9-antril, 9-(9-fenil)ksantenil, 9-feniltioksantil, 9-(9-fenil-10-okso)antril, 1,3-ben- zoditiolan-2-il, 4,5-bis(etoksikarbonil-[1,3]-dioksolan-2-il, benzizotiazolii S,S-dioksido, trimetilsilil, trietilsilil, tri- izoproptlsilil, dimetilizopropilsiit, dietilizopropilsilil, dimetilteksilsilil. 2-norbornildimetilsili, t-butildimetilsilil, t-butildifenilsilil (TBDPS), tribenzilsilil, tri-p-ksililsilil, trifenilsilil, difenilmetilsilil, di-t-butitmetilsiiil, bis(t-butil)-1-pirenilmetoksisilil, tris(trimetilsilil)silil, sisil, (2-hidroxistiril)dimetilsilil, (2-hidroxistiril)diizopropilsili, t-butilmetoksifenilsilil, t-butooksidifenilsilil, 1,1,3,3-tetraizopropil-3-[2-(trifenilmetoksi)etoksi]disilooksan-1-il, fluorous silii.

[0081]Alternativno, pogodne zaštitne grupe štite hidroksi grupu kao estre, na primer, format, benzoil-format, acetat, hloroacetat, dihloroacetat, trihloroacetat, trihloroacetamidat, trifluoroacetat, metoksiacetat, trifenilmetoksiacetat, fenoksiacetat, p-hlorofenoksiacetat, tenilacetat, p-H-tenilacetat, difenilacetat, 3-fenilpropionat, bisfluorni lanac tipa propanoil (Bfp-OR), 4-pentenoat, 4-oksopentanoat (levulinat), 4,4-(etileneditio)pentanoat, 5-[3-Bis(4-metoksifenil)hidroksimetilfenoksi]levuiinat, pivaloat, 1-adamantoat, krotonat, 4-metoksikrotonat, benzoat, p-fenilbenzoat. 2,4,6-trimetilbenzoat (mezitoat), 4-bromobenzoat, 2,5-difluorobenzoat, p-nitrobenzoat, pikolinat, nikotinat, 2-(aziđometil)benzoat, 4-azidobutirat, (2-azidometil)fenilacetat. 2-{[(tritiltio)oksi]metil}benzoat, 2-{[(4-metoksitritiltio)oksi]metil}benzoat,2-{[metil(tritiltio)amino]metil}benzoat, 2{{[4-metoksitritil)tio]metilamino}-metil}benzoat, 2-(aliloksi)fenilacetat, 2-(preniloksimetil)benzoat, 6-(levuliniloksimetil)-3-metoksi-2- i 4-nitrobenzoat, 4-benziloksibutirat, 4-trialkilsiloksibutrat, 4-acetoksi-2,2-dimetilbutirat, 2,2-dimetil-4-pentenoat, 2-jodobenzoat, 4-nitro-4-metilpentanoat, o-(dibromometil)benzoat, 2-formilbenzensulfonat, 4-metiltiometoksi)butirat, 2-metiltiometoksimetil)benzoat, 2-(hloroacetoksimetil)benzoat, 2[(2-hloroacetoksi)etil]benzoat, 2-[2-(benziloksi)etil]benzoat, 2-[2-(4-metoksibenziloksi)etil]benzoat, 2,6-dihloro-4-metilfenoksiacetat, 2,6-dihloro-4-(1,1,3,3-tetrametil- butil)fenoksiacetat, 2,4-bis(1,1-imetilpropil)fenoksiacetat, htorodifenilacetat, izobutirat, monosukcinoat, (E)-2-metil-2-butenoat tigloat), o-(metoksikarbonil)benzoat, p-P-benzoat, a-naftoat, nitrat, alkil N,N,N',N'-tetrametilfosforodiamidat, 2-hlorobenzoat, kao sulfonati, sulfenati i sulfinati kao što je sulfat, aiilsulfonat, etanesulfonat (mezilat), benzilsulfonat, tozilat, 2-[(4-nitrofenil)etil]sulfonat, 2-trifluorometilsulfonat, 4-monometoksitritilsulfenat, alkil 2,4-initrofenilsulfenat, 2,2,5,5-tetrametilpirolidin-3-on-1-sulfinat, borat, dimetilfosfinotioil, kao karbonate kao što je alkil metil karbonat, metoksimetil karbonat, 9-fluorenil-metil karbonat, etil karbonat, bromoetil karbonat, 2-(metiltiometoksi)etil karbonat, 2,2,2-trihloroetil karbonat, 1,1-dimetil-2,2,2-trihloroetil karbonat, 2-(trimetilsilil)etil karbonat, 2-[dimetil(2-naftilmetil)silil]etil karbonat, 2-(fenilsulfonil)etil karbonat, 2-(trifenilfosfonio)etil karbonat, cis-E4-[[(-metoksitritil)sulfenil]oksi] tetraidrofuran-3-il]oksi karbonat, izobutil karbonat, t-butil karbonat, vinil karbonat, alil karbonat, cinamil karbonat, propargil karbonat, p-hlorofenil karbonat, p-nitrofenil karbonat, 4-etoksil-1-naftil karbonat, 6-bromo-7-hidrokskikumarin-4-ilmetil karbonat, benzil karbonat, o-nitrobenzil karbonat, p-nitrobenzil karbonat, p-metoksibenzil karbonat, 3,4-dimetoksibenzil karbonat, antrahinon-2-ilmetil karbonat, 2-dansiletil karbonat, 2-(4-nitrofenil)etil, 2-(2,4-nitrofenil)etil, 2-(2-nitrofenil)propil, 2-(3,4-metilendi- oksi-6-nitrofenilpropil, 2-cijano-1-feniletil karbonat, 2-(2-piridii)amino-1-feniletil karbonat, 2-[N-metil- N-{2-piridil)]amino-1-feniletil karbonat, fenacil karbonat, 3',5'-dtmetoksibenzoin karbonat, metil ditiokarbonat, S-benzil tiokarbonat, i karbamate kao što je dimetiltiokarbamat, N-fenilkarbamat, i N-metil- N-(o-nitrofenil) karbamat.

C. FARMACEUTSKE SUPSTANCE, FORMULACIJE I DOZE

[0082]U jednom izvođenju, prikazanom ovde je farmaceutska supstanca koja obuhvata jedinjenje prema ovom pronalasku i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač.

[0083]U farmaceutskim supstancama prema ovom pronalasku, jedinjenje prema ovom pronalasku je prisutno u delotvornoj količini. Međuodnos doza za životinje i ljude (na osnovu miligrama o kvadratnom metru površine teta) je opisan kod Freireich et al., Cancer Chemother. Rep, 1966, 50: 219. Područje telesne površine može da se odredi približno na osnovu visine i težine pacijenta. Videti, npr., Scientific

Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, N.Y., 1970, 537.

[0084]LXR modulatori opisani ovde (npr., jedinjenja prema ovom pronalasu) mogu da budu formulisana kao farmaceutske supstance i data kao lek ispitaniku, kao što je čovek, u raznim oblicima prilagođenim da se izabere rua primene leka. Uobičajene rute primene kao što su farmaceutske supstance obuhvataju, bez ograničenja, oralnu, topikalnu, bukalnu, transdermalnu, inhalacionu, parenteralnu, sublingvalnu, rektalnu, vaginalnu, i intranzazalnu. Pojam parenteralna kako se ovde koristi obuhvata potkožne injekcije, intavenske, intramišićne, intratekalne, tehniku injekcije u grudnu kost ili tehniku infuzije. Postupci formulisanja farmaceutskih jedinjenja su dobro poznati u ovoj oblasti, na primer, kako je opisano u farmaceutskom priručniku "Remington: The Science and Practice of Pharmacy," University of the Sciences in Philadelphia , ed., 21 st edition, 2005, Lippincott, VVilliams & VVilkins, Philadelphia, PA. Svaki od LXR modulatora može da se koristi sam ili u kombinaciji kao deo farmaceutske supstance prema ovom pronalasku.

[0085]Farmaceutske supstance prema ovom pronalaska moguće je pripremiti kombinovanjem jedinjenja prema ovom pronalaka sa odgovarajućim farmaceutski prihvatljivim nosačem, razblaživač ili ekscipijent, i može da se formuliše u preparate u čvrstom, polučvrstom, tečnom ili gasnom obliku, takve

tablete, kapsule, prahovi, granule, masti, masti, rastvori, supozitorije, injekcije, inhalanti, gelovi, mikrosfere, i aerosoii. Dakle, ova jedinjenja mogu biti sistamatski primenjena kao tekovi, npr., oralno u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom kao što je inertni razblaživač ili jestivi nosač koji se može asimilovati. Oni mogu da budu obuhvaćeni u tvrdoj ili mekoj opni želatinastih kapsula, mogu da budu sabijeni u tablete ili mogu da budu inkorporirani direktno sa hranom u pacijentovoj dijeti. Za oralnu terapijsku primenu, aktivno jedinjenje može da se kombinuje sa jednim ili više ekscipijenata i koristi u obliku jestivih tableta, bukalnih tableta, troheja, kapsula, eliksira, suspenzija, sirupa, pločica nalik na napolitanke, i sličnog.

[0086]Pogodne tablete mogu da se dobiju, na primer, mešanjem jednog ili više jedinjenja prema ovom pronalasku sa poznatim ekscipijentima, na primer inertnim razblaživačima, nosačima, disintegrantima, ađuvansima, surfaktantima, vezivačima i/ili lubrikantima. Tablete mogu takođe da se sastoje od nekoliko slojeva.

[0087]Jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je pogodno formulisati u farmaceutske supstance za primenu leka ispitaniku, ispitaniku. Farmaceutske supstance prema ovom pronalasku opciono obihvataju jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili razblaživača. kao što je laktoza. škrob, celuloza i dekstroza. Drugi ekscipijenti, kao što su agensi za poboljšanje ukusa, zaslađivači, i konzervansi, kao metil, etil, propil i butil parabeni, mogu takođe da budu obuhvaćeni. Potpunije spiskove pogodnih ekscipijenata moguće je naći u priručniku farmaceutskih ekscipijenata Handbook of Pharmaceutical Excipients (5th Ed., Pharma- ceutical Press (2005)). Stručnjak u ovoj oblasti treba da zna kako da pripremi formulacije pogodne za različite tipove ruta primene leka. Uobičajeni postupci i sastojci za izbor i pripremu pogodnih formulacija su opisani, na primer, u farmaceutskom priručniku Remington (Remington's Pharmaceutical Sciences (2003 - 20th edition) and in The United States Pharmacopeia:) The National Formularv (USP 24 NF19) objavljeno 1999. Nosači, razblaživači i/ili ekscipijenti su "prihvatljivi" u smislu kompatibilnosti sa drugim sastojcima farmaceutske supstance i da nije štetan po njihovog primaoca.

[0088]Najčešće, za oralnu terapijsku primenu, jedinjenje prema ovom pronalasku može da bude obuhvaćeno sa ekscipijentom i korišćeno u obliku jestivih tableta, bukalnih tableta, troheja, kapsula, eliksira, suspenzija, sirupa, pločica nalik na napolitanke, i sličnog.

[0089]Uobičajeno za parenteralnu primenu leka, rastvori jedinjenja prema ovom pronalasku mogu generalno da budu pripremljeni u vodi pogodno pomešanoj sa surfraktantom kao što je hidroksipropilceluloza. Disperzije mogu takođe biti pripremljene u glicerolu, tečnim polietilenskim glikolima, DMSO i njihovim mešavinama sa ili bez alkohola, i u uljima. Pri običnim uslovima skladištenje i upotreba, ovih preparata sadrži konzervans da se spreči rast mikroorganizama.

[0090]Najčešće, za upotrebu sa ubrizgavanjem, sterilni vodeni rastvori ili disperzija, i sterilni prahovi, jedinjenja prema ovom pronalasku za improvizovanu pripremu sterilnih rastvora i disperzija koje se mogu ubrizgati.

[0091]Za nazalnu primenu, jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu formulisana kao aerosoli, kapi, gelovi i prahovi. Aerosolne formulacije najčešće obuhvataju rastvor ili finu suspenziju aktivne supstance u fiziološki prihvatljivom vodenom ili nevodenom rastvaraču i obično se predstavljaju u količinama od jedne ili više doza u sterilnom obliku u zaptivenoj posudi, koja može da poprimi oblik patrone za dopunu za upotrebu sa uređajem za raspršivanje. Alternativno, zaptivena posuda može da bude jedinstven uređaj za praženjenje kao što je nazalni inhalator za jednu dozu ili aerosolni dozator opremljen sa mernim ventilom koji je predviđen za odlaganje posle upotrebe. Kada dozni oblik obuhvata aerosolni dozator, on će sadržati potiskivač koji može da potisne gas kao stoje komprimovani vazduh ili organski potiskivač kao što je fluorohidrokarbon. Oblici doze aerosola mogu takođe da poprime oblik atomizera pumpe.

[0092]Za bukalnu ili sublingvalnu primenu leka, jedinjuenja prema ovom pronalasku moguće je formulisati sa nosačem kao što je šećer, akacija, tragakant, ili želatim i glicerin, kao tablete, lozenge ili pasttlje.

[0093]Za rektalnu primenu, jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu formulisana u obliku supozitorija koje sadrže uobičajenu bazu supozitorije kao što je kako puter.

[0094]Topikalna i/ili lokalna primena jedinjenja prema ovom pronalasku može biti ostavarena na razne načine uključujući ali ne ograničavajući se na masti, losione, paste, kreme, gelove, prahove, kapi, sprejeve, rastvore, inhalante, flastere, supozitorije, klistiri sa zadržanim dejstvom, tablete koje se žvaću ili sisaju ili peleti i aerosoli. Topikalna i/ili lokalna primena mogu takođe da obuvhate upotrebu transdermalne primene kao što su transdermalni flasteri ili jontoforezni uređaji. Za topikalnu i/ili lokalnu primenu leka, jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je formulisati kao masti, kreme, mleka, meleme, prahove, impregnirane jastučiće, sindete, rastvore, gelove, sprejeve, pene, suspenzije, losione, štapiće, šampone ili baze za pranje, Jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je takođe primeniti kao lek u obliku suspenzija lipida ili polimernih vesikula ili nanosfera ili mikrosfera ili polimernih flastera i hidrogelova za kontrolisano otpuštanje,

D. POSTUPCI LEČENJA I UPOTREBE LXR MODULATORA

[0095]Prijava ilustruje postupak za lečenje ispitanika sa bolešću ili poremećajem koje je moguće lečiti modulacijom LXR. U jednom izvođenju, l..XR se moduliše pojčavanjem aktivnosti LXR. Ovaj postupak obuhvata primenu delotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku. Takođe je data ovde upotreba jedinjenja prema ovom pronalasku za proizvodnju leka za lečenje ispitanika sa bolešću ili poremećajem koji može da se leči pojačanom regulacijom LXR aktivnosti kod ispitanika kom je potrebna.

[0096]Ovde objašnjeni postupci mogu biti korisni za poremećaje koji se mogu lečiti LXR modulacijom, posebon LXR agonizmom.

[0097]Jedinjenja prema ovom pronalasku su korisna za lečenje ili sprečavanje bolesti ili poremećaja povezanih sa izmenjenih transportom holesterola, reverznim transportom holesterola, metabolizmom masne kiseline, apsorpcijom holesterola, ponovnom apsorpcijom holesterola, lučenjem holesterola, izlučivanjem holesterola, ili metabolizmom holesterola. Reprezentativne bolesti ili poremećaji obuhvataju, ali se ne ograničavaju na, poremećaj lipida, kancer, posebno ne na kancere zavisne od hormona, uključujući kancer jajnika, dojke i prostate; stanje kože u obliku akni; zapaljensku bolest kože; imunološki poremećaj; stanje koje karakteriše ometena (uznemirenje) funkcija epidermne barijere; stanje poremećene diferencijacije ili viška proliferacije epidermisa ili membrane sluznice; kardiovaskularne bolesti; poremećaja reproduktivnog trakta; optičkog nerva i patologije mrežnjače; degenerativne neuropatije koja se javlja kod bolesti; autoimune bolesti; traumatskog oštećenja na centralnom ili perifernom nervnom sistemu; neurodegenerativne bolesti; degenerativnog procesa usled starenja; bolesti ili poremećaja bubrega; i osteoporoe i srodnih bolesti.

[0098]U drugom izvođenju, bolest ili poremećaj je hiperlipidemija, hiperholesterolemija, hiperlipoproteinemija, hipertrigliceridemija, lipodistrofija, steatoza jetre (bolest masne jetre), nealkoholni steatohepatitis (NASH), nealkoholna steatoza jetre (NAFLD), hiperglicemija, otpornost na insulin, dijabetes melitus, dislipidemija, ateroskleroza, bolest kamena u žuči, akne vulgaris, dermatitis (uključujući ali se ne ograničavajući na, psorijazu, kontaktni dermatitis, atopični dermatitis, i ekcem), rane na koži, starenje kože, starenje usled izloženosti zracima, stvaranje bora, dijabetes, Nieman-Pikova bolest tipa C, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, upala, ksantom, gojaznost, metabolički sindrom, X sindrom, moždani udar, periferna bolest začepljenja, gubitak memorije, dijabetesne neuropatije, proteinurije, glomerulopatije (uključujući ali ne ograničavajući se na, dijabetesnu nefropatiju, hipertenzivna nefropatija, IGA nefropatiju, žarišnu segmentnu glomerulosklerozu), hiperfosfatemiju, kardiovaskularne komplikacije hiperfosfatemije, kancer, multipla sklerozu, ili osteoporozu.

[0099]U drugom izvođenju, bolest ili poremećaj je često akne; komedoni; polimorfi; rozacea; nodulocistične akne; akne konglobate; senilne akne; sekundarne akne, uključujući ali ne ograničavajući se na solarne, medicinske i profesionalne akne; ihtioza; ihtioziformna stanja; Darierova bolest; palmoplantarna keratoderma; leukoplakija; leukoplakiformna stanja; lišajeve kože i mukusa (oralne); deramtološka stanja ili probleme sa inflamatomom imunoalergijskom komponentom, sa ili bez poremećaja ćelijske proliferacije, uključujući ali ne ograničavajući se na kutanu psorijazu, psorijazu mukusa, ungualnu psorijazu, psorijazni reumatizam, kutana atopija, uključujući ekceme, respiratorna atopija i gingivalna hipertrofija; bengine ili maligne dermalne ili epidermalne proliferacije, virusnog ili nevirusnog porekla, uključujući ali ne ograničavajući se na obične bradavice, obične bradavice, ravne bradavice, Levandovski-Luc displazija (epidermodvsplasia verruciformis), oralne ili fioridne papilomatoze, i T limfoma ili limfom kutane T-ćelije; proliferacije koje mogu biti izazvane ultaljubičastim svetlom, uključujući ali ne ograničavajući se na bazoćeljiski epiteliom i spinoćelijski epiteliom; prekancerne lezije kože, uključujući ali ne ograničavajući se na keratoakantome; imuni dermatititide, uključujući ali ne ograničavajući se na lupus eritematozus; bulozne bolesti imunog sistema; kolagene bolesti, uključujući ali ne ograničavajući se na skleroderm; dermatološka ili sistemska stanja ili probleme sa imunološkom komponentom; poremećaje kože usled izloženosti UV zračenju; foto-izazvano ili hronološko starenje kože, aktinična pigmentacija; keratoza; patologija povezana sa hronološkim ili aktiničnim starenjem, uključujući ali ne ograničavajući se na kserozu; poremećaje funkcije lojne žlezde, uključujući ali ne ograničavajući se na preteranu suvoću, poremećaje seboreične funkcije, uključujući ali ne ograničavajući se na hiperseboreju akne, jednostavnu seboreju i seboreični dermatitis; poremećaje zalečenja rana, uključujući ali ne ograničavajući se na strije; poremećaje pigmentacije, uključujući ali ne ograničavajući se na hiperpigmentaciju, hloazma, hipopigmentacija, i vitiligo (leukodermija); i alopecija uključujući, ali ne ograničavajući se na alopeciju povezanu sa hemoterapijom i alopeciju povezanu sa radijacijom.

[0100]U jednom izvođenju, bolest ili poremećaj je hiperholesterolemija, ateroskleroza ili dislipidemija. U drugom izvođenju, bolest ili poremećaj je ateroskleroza ili dislipidemija. U još jednom izvođenju, bolest ili poremećaj je ateroskleroza, Alchajmerova bolest ili dermatitis.

[0101]Primena još ilustruje postupak za povećanje reverznog transporta holesterola i/ili za inhibiranje progresije ili pospešivanje regresije ateroskleroze.

[0102]U ovoj prijavi se još ilustruje postupak za lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa potrebom za povećanjem visoke gustine nivoa lipoproteina (HDL)-holesterola koji obuhvataju primenu delotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku na sisaru (posebno čoveku) kome je potrebno.

[0103]Primena ilustruje postupak za lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa potrebom za smanjenjem niske gustine nivoa lipoproteina (HDL)-holesterola koji obuhvataju primenu delotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku na sisaru (posebno čoveku) kome je potrebno.

[0104]Pored toga, ovde data primena ilustruje postupak za povećanje ispoljavanja na ABC proteini (ATP-vezujući kasetni protein) u ćelijama ispitanika, čime se povećava reverzni transport holesterola kod ispitanika korišćenjem jedinjenja prema ovom pronalasku opisanih jedinjenja.

[0105]Standardni fiziološki, farmakološki i biohemijski postupci su poznati u ovoj oblasti i dostupni za procenu jedinjenja prema ovom pronalasku za sposobnost da modulišu LXR aktivnost. Takvi ogledi obuhvataju, na primer, oglede za vezivanje, oglede za polarizaciju fluorescenceije, FRET (bazitransfer energije fluorescentom rezonancom) ogled zasnovan na regrutovanju ko-aktivatora, i ogledima za ko-transfekcijuna na bazi ćelije. Jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu procenjena na sposobnost da modulišu ispoljavanje gena poznatih da se modulišu pomoću LXR. Uspostavljeni modeli životinja mogu da budu korišćeni za proučavanje profila jedinjenjaj prema ovom pronalasku u vezi sa parametrima direktno relevantnim za bolesti ili poremećaje, uključujući aterosklerozu, Alchajmerovu bolest, i oboljenja kože. Dakle, jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu testirana in vivo na modelima životinja putem različtiih ruta primene, na primer, oralne gavaže. Najčešće, in vivo izloženost jedinjenju može da bude ispitana u plazmi i u tkivima koja su predmet interesovanja. LXR aktivnost (kako se detektuje ispoljavanjem gena gena koja daju odgovor na X receptor u ćelijama jetre (LXR)) mogu biti ispitana u celoj krvi i tkivima od interesa. Lipidi mogu biti kvantifikovani u plazmi i jetri.

[0106]Preciznije, jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je testirati za njihovu aktivnost na ATP kasetu za vezivanje (ABC) transportera holesterol, kao što je ABCA1 i ABCG1, i na lipogenim markerima, kao što je SREBPIc na genu i nivou ekspresije proteina. Funkcionalne posledice uvođenja ABC transportera moguće je ispitati na modelima ćelije za isticanje holesterola i na modelima životinja za reverznu putanju holesterola i atersklerozu. Lipogene markere moguće je ispitati na modelima životinja merenjem nivoa plazme i triglicerida u jetri.

[0107]Jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je koristiti sama (t.j., kao monoterapiju) ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapijskih agenasa delotvornih za lečenje bilo koje od gornjih indikacija. Farmaceutske supstance mogu obuhvatiti opisana jedinjenja sama kao jedini farmaceutski aktivan agens ili mogu obuhvatiti jedan ili više dodatnih farmaceutki aktivnih agenasa.

[0108]Primena još obuhvata kombinovanu terapiju za lečenje ili poboljšanje bolesti ili poremećaja opisanog ovde. Kod nekih izvođenja, kombinovana terapija obuhvata primenu barem jednog jedinjenja predstavljenog strukturnom formulom I, II, III, IV, V, ili V) u kombinaciji sa jednim ili više agenasa za lečenje ili poboljšanje bolesti ili ovde opisanog poremećaja. Kod nekih izvođenja, kombinovana terapija obuhvata primenu barem jednog jedinjenja predstavljenog strukturnom formulom I, II, Hl, IV, V, ili VI u kombinaciji sa jednim ili više agenasa za lečenje bolesti gde su obuhvaćene hiperlipidemija, hiperholesterolemija, hiperlipoproteinemija, hipertrigliceridemija, lipodistrofija, steatoza jetre (bolest masne jetre), nealkoholni steatohepatitis (NASH), alkoholna bolest masne jetre (NAFLD), hiperglicemija, otpornost na insulin, dijabetes melitus, dislipidemija, ateroskleroza, bolest kamena u Žuči, akne vulgaris, dermatitis, psorijaza, kontaktni dermatitis, atoptčni dermatitis, i ekcem, rane na koži, starenje kože, starenje usled izloženosti zracima, stvaranje bora, dijabetes, Nieman-Pikova bolest tipa C, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, upala, ksantom, gojaznost, metabolički sindrom, X sindrom, moždani udar. periferna bolest začepljenja, gubitak memorije, dijabetesne neuropatije, proteinuriju, glomerulopatije (uključujući ali ne ograničavajući se na, dijabelesnu nefropatiju, hipertenzivnu nefropatiju, IGA nefropatiju, žarišna segmentna glomerulosklerozu), hiperfosfatemija, kardiovaskularne komplikacije hiperfosfatemija, kancer, multipla skleroza, ili osteoporoza.

[0109]Kod nekih izvođenja, jedinjenja prema ovom pronalasku se koriste u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih agenasa za lečenje dijabetesa, dislipidemije, kardiovaskularne bolesti, hipertenzije, ili gojaznosti. Agenski za lečenje dijabetesa obuhvataju insuline, kao što je Huniulin® (Eli Ully), Lantus®

(Sanofi Aventis), Novolin® (Novo Nordisk), i Eksubera® (Pfizer); PPAR gama agonisti, kao što je Avandia® (rosiglitazon maleat, GSK) i Aktos® (pioglitazon hidrohlorid, Takeda/Eli Lilly); sulfoniluree, kao što je Amaril® (glimepiride, Sanofi Aventis), Diabeta® (gliburid, Sanofi Aventis), Mikronaze® /Glinaze® (gliburid, Pfizer), i Glukotrol® /Glukotrol XL® i (glipizid, Pfizer); meglitinide, kao što je Prandin®/NovoNorm® (repaglinid, Novo Nordisk), Starliks® (nategiinid, Novartis), i Glufast®

(mitiglinid, Takeda); biguanidi, kao što je Glukofag®/Glukofag XR® (metformin HCI, Bristol Myers Sguibb) i Glumetza® (metformin HCI tablete sa produženim ispuštanjem, Depomed); tiazolidinedioni;

amilin analozi, GLP-1 analozi ili agonisti (uključujući Bvetta® (eksenatid, Amilin/Eli Lilly) i Victoza®

(rekombinantni liraglutid, Novo Nordisk)); DPP-IV inhibitori uključujući Tradjenta™ (Eli Lilly/Boehringer Ingelheim), Januvia® (Merck), Galvus® (Novartis), i Ongliza® (Bristol-Myers Squibb/AstraZeneca); PTB-1 B inhibitore; inhibitore protein kinaze (uključujući AMP-aktivirane inhibitore protein kinaze); giukagon antagoniste, glikogen sintaze kinaze-3 beta inhibitore; glukoze-6-fosfataze inhibitore; inhibitore glikogen fosforilaze; inhibitore ko-transportera natrijum glukoze, i inhibitore alfa-glukozidaze, kao što je Precose®/Glukobay®/Prandaze®/Glukor® (akarboze, Bayer) i Gliset® (miglitol, Pfizer). Agense za tretiranje dislipidemije i kardiovaskularne bolesti obuhvataju statine, fibrate, i ezetimbe. Agensi za lečenje hipertenzije obuhvataju alfa-blokatore, beta-blokatore, blokatore kanala kalcijuma, diuretike, inhibitore enzima pretvaranja angiotenzina (ACE), inhibitore dualne ACE i neutralne endopeptidaze (NEP), blokatore receptora angiotenzina (ARBs), inhibitore sintaze aldosterona, antagoniste receptora aldosterona, ili antagoniste receptora endotelina. Agensi za lečenje gojaznosti obuhvataju orlistat,, fentermin, sibutramin i rimonabant.

[0110]Izvođenje ovog pronalaska obuhvata primenu LXR modulatora jedinjenja prema ovom pronalasku ili njegove supstance u kombinovanoj terapiji sa kombinovanim proizvodima, kao što je Avandamet<®>(metformin HCI i rosigli- tazon maleat, GSK); Avandaryl<®>(glimepirid i rosiglitazon maleat, GSK); Metaglip<®>(glipizid i metformin HCI, Bristol Myers Squibb); i Glucovance® (gliburid i metformin HCI, Bristol Myers Squibb).

[0111]Kod nekih izvođenja, kombinovana terapija obuhvata primenu barem jednog jedinjenja prema ovom pronalasku u kombinaciji sa jednim ili više jedinjenja izabranih iz grupe, na primer, beta sekretaze (BACE1) inhibitora, inhibitora gama sekretaze; inhibitora agregacija amiloida (npr., ELND-005); koji direktno ili indirektno deluje neurozaštitno i/ili supstance koje modifikuju bolest; antioksidansi (npr., vitamin E ili ginkolid), supstance protiv zapaljenja (npr., Cox inihibitore, NSAID); inhibitore HMG-CoA reduktaze (statini); inhibitore acetilhotinesteraze (npr., donepezil, rivastigmin, takrin, galantamin, memantin; takrin); antagoniste NMDA receptora (npr., memantin); agoniste AMPA receptora ; pozitivne modulatore AMPA receptora, AMPAkine, monoaminske inhibitore preuzimanja receptora, supstance koje modulišu koncentraciju ili otpuštanje neurotransmitera; supstance koje podstiču izlučivanje hormona rasta (npr., ibutamoren mezilat i kapromorelin); antagonisti CB-1 receptora ili inverzni agonisti; antibiotici (npr., minociklin ili rifampicin); PDE2, PDE4, PDE5, PDE9, PDE10 inhibitori, GABAA agonisti inverznog receptoa, GABAA antagonisti receptora, agonisti nikotinskog receptora ili delimični agonisti ili pozitivni modulatori, agonisti alpha4beta2 nikotinskog receptora ili delimični agonisti ili pozitivni modulatori, agonisti alfa7 nikotinskog receptora ili delimični agonisti ili pozitivni modulatori; H3 antagonisti histamina, 5 HT-4 agonisti ili delimični agonisti, 5HT-6 antagonisti, antagonisti alpha2 adrenoreceptora, antagonisti kalcijuma, M1 agonisti muskarinskog receptora ili delimični agonistili ili pozitivni modulatori, M2 antagonisti muskarinskog receptora, M2 antagonisti muskarinskog receptora, muskarinski receptor M4 antagonista, pozitivni modulatori metabotropnog glutamatnog receptora 5, antidepresivi, kao što je citalopram, fluoksetin, paroksetin, sertralin i trazodon; anksiolitici, kao što je lorazepam i oksazepam; antipsihotici, kao što je aripiprazol, klozapin, haloperidol, olanzapin, kvetijapin, risperidon i ziprasidon, i druge supstance koje modulišu receptore ili enzime na način da se efikasnost i/ili sigurnost jedinjenja prema ovom pronalasku povećava i/ili neželjena prateća dejstva smanjuju. Jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je takođe koristiti u kombinaciji sa imunoterapijama za lečenje ovde opisane bolesti ili poremećaja.

[0112]Kombinovana terapija obuhvata zajedničku primenu jedinjenja prema ovom pronalasku i jednog ili više agenasa, uzastopnu primenu jedinjenja prema ovom pronalasku i jednog ili više drugih agenasa, primenu jedinjenja koje sadrži jedinjenje prema ovom pronalasu i jednog ili više drugih agenasa,, ili istovremenu primenu odvojenih jedinjenja koja sadrže jedinjenje prema ovom pronalasku i jednog ili više drugih agenasa.

E. PRIMER SINTEZE

OPŠTI OPIS POSTUPAKA SINTEZE

[0113]Jedinjenja prema ovom pronalasku moguće je lako pripremiti u skladu sa sledećim šemama reakcije i njihovim primerima, ili modifikacijama, korišćenjem lako dostupnih početnih materijala, reagenasa i standardnih procedura sinteze.Veliki broj ovih reakcija mogu takođe da budu izvedene u uslovima mikrotalasa ili korišćenjem uobičajenog grejanja ili korošćenja drugih tehnologija kao što su reagensi čvrste faze/čistači ili protočna hernija. U ovim reakcijama, moguće je koristiti varijantna rešenja koja su kao takva poznata prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti, ali nisu detaljnije pomenuta. u većoj meri Pored toga, drugi postupci za pripremu jedinjenja prema ovom pronalasku će biti lako očigledni prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti u svetlu sledećih reakcionih šema i primera. U slučajevima gde sintetički intermedijari. U slučajevima gde sintetički intermedijari i finalni proizvodi sadrže potencijalno reaktivne funkcionalne grupe, na primer amino, hidroksi, tiol grupu i grupu karboksilne kiseline, koje mogu da ometaju željenu reakciju, može biti prednost da se koriste zaštićeni oblici intermedijara. Postupci za selekciju, uvođenje i naknadno uklanjanje zaštitnih grupa su dobro poznati stučnjacima u ovoj oblasti. U diskusiji u daljem tekstuX,R<1>,R<2>, R3>R4>R5'<R6>imaju značenja navedena iznad osim ako nije drugačije navedeno. Skraćenice korišćene u ovim eksperimentalnim detaljima su navedene u nastavku a dodatne treba da su poznate stručnjaku za sintezu. Pored toga, za više detalja moguće je pogledati sledeće reference za pogodne postupke sinteze opisane u priručniku: March, Advanced Organic Chemistr/, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1985, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Svnthesis, 2nd edition, John Wiley & Sons, 1991, i Richard Larock, Comprehensive Organic Transformations, 4th edition, VCH publishers Inc., 1989.

[0114]Generalno, reagensi u ovim reakcionim šemama se koriste u ekvimolamim šemama; međutim, u izvesnim slučajevima može biti poželjno koristiti višak jednog reagensa da se reakcija dovede do završetka. Ovo je posebno slučaj kada višak reagensa može lako da se ukloni isparavanjem ili ekstrakcijom. Baze korišćene da se neutrališe HCI u reakcionim mešavinama se generalno koriste u blagom do znatnom višku {1,05 - 5 ekvivalenata).

[0115]Tamo gde su predstavljeni NMR podaci, dobijeni su spektri za Varian 400 (400 MHz) ili 300 (300 MHz) i prijavljeni su kao ppm polje iz tetrametilsilana sa brojem protona, umnožaka i konstanti spojeva navedenim parenteralno zajedno sa referencom na deuterisani rastvarač.

[0116]LC-MS podaci su dobijeni korišćenjem jednog ili više sledećih hromatografskih uslova:

Eoalupak 4

[0117]HPLC sistem: VVaters ACQUITY; Kolona: VVaters ACQUITY CSH™ C18 1.7 uM Zaštitna kolona: VVaters Assy. Frit, 0,2 uM, 2,1 mm; Temperatura kolone 40 °C mobilna faza: A: TFA: Voda (1:1000, v:v) Mobilna faza B: TFA: ACN (1:1000, v:v); Brzina protoka; 0,65 mUmin; Injekcija: Zapremina: 2 ml_; Vreme akvizicije: približno 1,5 minut.

Program gradijenta:

Postupak 4

[0117] HPLC sistem: VVaters ACQUITY; Kolona: VVaters ACQUITY CSH™ C18 1.7 uM Zaštitna kolona: VVaters Assy. Frit, 0,2 uM, 2,1 mm: Temperatura kolone 40 "C mobilna fa2a: A: TFA: Vođa (1:1000, v:v) Mobilna faza B: TFA: ACN (1:1000, v;v); Brzina protoka: 0,65 mL/min; Injekcija: Zapremina; 2 mL; Vreme akvizicije: približno 1,5 minut.

Program gradijenta:

Parametri masene spektrometrije

[0118]Spektrometar mase: VVaters SQD; Jonizacija: Pozitivna elektrosprej jonizacija (ESI); režim skeniranja (100-1400 m/z na svake 0,2 sekunde); ES kapilarni napon: 3,5 kv; ES kupasti napon: 25 v temperatura izvora : 120 °C; temperatura otapanja Temperatura: 500 °C; protok gasa otapanja: postavka azota 650 (L/hr); kupasti protok gasa: postavka azota 50 (L/sat).

[0119]SFC separacija jedinjenja prema ovom pronalasku je izvedena pod sledećim postupcima,

Postupak A:

Instrument: Thar SFC 80; Kolona: AD 250mm"30mm, 5mm; Mobilna faza: A: Superkritično CO2, B: IPA (0,05% DEA), A: B =80:20na 60ml/min; Temp. stuba: 38 °C; Pritisak mlaznice: 100 Bar; Temp. mlaznice: 60 °C; Temp. isparivača: 20 °C; Temp. trimera (rezača): 25 °C; Talasna dužina: 220nm.

Postupak B:

Instrument: SFC MG2; Kolona: OJ 250 mm<*>30 mm, 5 mm; Mobilna faza; A: Superkritično CO2, B: MeOH(0,05% DEA), A:B =90:10na 70ml/min; Temp kolone: 38" C;Pritisak mlaznice: 100 Bar, Temp. mlaznice: 60 °C; Temp. isparivača: 20 "C: Temp. trimera (rezača): 25 °C; Talasna dužina: 220 nm

Analitička hlralna HPLC

[0120]Hiralna čistoća jedinjenja prema ovom pronalasku se određuje analitičkom hiralnom HPLC, koja je izvedena korišćenjem Chiralcel<®>ili Chiralpak<®>kolona, korišćenjem CO2, zajedno sa od 5% do 40% metanola, etanola ili izopropanola, koji sadrži 0,05% DEA kao eluente.

[0121]Ovaj pronalazak je ilustrovan sledećim primerima, na kojima sledeće skraćenice mogu da se koriste:

[0122]U prvom postupku, jedinjenje prema Formuli I moguće je pripremiti pomoću Sf\jAr ili paladijumski katalizovanih reakcija reagenasa 1, gde G<1>J<este>Cl, Br, I, OTf ili OTs, sa intermedijarima iz Formule 2. Reagensi 1 su bilo komercijalno Reagensi 1 su bilo komercijalno dostupni ili ih je moguće lako pripremiti iz komercijalno dostupnih prekursora (supstanci prethodnica) na osnovu presedana u stručnoj literaturi.

[0123] Intermedijari 2 mogu biti pripremljeni prema jednim od nekoliko različitih postupaka prikazanih dole.

[0124] Kada je moguće prirpemiti X = N, intermedijari iz Formule 2 ciklizacijom intermedijara iz Formule 3a posle čega je usledilo uklanjanjemG2 ka<da>G<2>nije vodonik. G2 j*> amin zaštitna gru<pa,><kao><što>J<e>Boc, Cbz i trifluoroacetamid, itd.

[0125]Intermedijari iz Formule3amogu biti pripremljeni jednim od dva postupka: 1) bakrom posredovano spajanje piperazinona 4a i anilina 5a, gde G<3>jeste Br, I, Cl ili OTf; 2) StsjAr reakcija između4ai fluorinisanog nitrobenzena6ada se dobije intermedijar prema Formuli7aposle čega je sledilo smanjenje grupe azota. Intermedijar7amože takođe biti pripremljen iz intermedijara Formule8azamenom fluora sa bilo natrijum alkansulfinata (R<1>S02Na) ili natrijum alkilsulfida (R<1>SNa) posle kega sledi oksidacija tioetra koji se dobije kao rezultat. Intermedijar8azauzvrat moguće je dobiti iz piperazinona4ai difluoro nitrobenzena 9a, koji su bilo komercijalno dostupni ili ih je moguće lako pripremiti iz komercijalnih prekursora na osnovu postupaka opisanih u stručnoj literaturi, a koji su dobro poznati proseČnom stručnjaku u ovoj oblasti. Na primer, kada je R<3>= izopropil, piperazinon4amoguće pripremiti jednim od dole opisanih postupaka.

[0126]Kada je X = CH, intermedijaree iz Formule 2 moguće pripremiti iz intermedijara iz Formule3buklanjanjem zaštite G<2>posle čega sledi reduktivna aminacija. G2 Je amin zaštitne grupe, kao što i<e>Boc, Cbz i trifluoroacetamid, itd.

[0127]Intermedijari iz Formule 3b moguće je pripremiti N-aikilacijom indola4bsa komercijalno dostupnim alkil halidom 5b, gde G<3>j<este><g>r {\\ |, intermedijare iz Formule4bmoguće je pripremiti uklanjanjem G<4>iz intermedijara iz Formule 6b, pri čemu G<4>jeste metansulfonat ili fenilsulfonat.

[0128] Intermedijare iz Formule 6b moguće je pripremiti an be prepared by uzastopnom Sonogashira reakcijom spajanja između aril halida 7b (gde G<5>je Br ili I) i propargil alkohola 8b, posle čega je usledila ciklizacija, da se dobiju intermedijari iz Formule 9b, posle čega je usledila oksidacija alkohola.

[0129]Intermedijare iz Formule 7b moguće je pripremiti iz komercijalno dostupan anilin 10b preko sledećih transformacija: 1) izmeštanje fluorina sa natrijumom alkil sulfida R<1>SNa (prinos 11b); 2) Halogenacija (prinos 12b); 3) Zaštita anilina (prinos 13b); 4) Oksidacija sulfida (prinos 7b).

[0130]U drugom procesu, jedinjenje iz Formule I, pri čemu R<1>= alkil, R<2>= H i X = CH, može da se pripremi oksidacijom grupe tioetra u intermedijarima iz Formule 1c. Intermedijar 1c zauzvrat može da se pripremi iz spajanja reagenasa 1 i intermedijara iz Formule 2c preko SfgAr ili paladijumski katalizovane reakcije.

[0131]Intermedijare 2c moguće je pripremiti u skladu sa sledećom Šemom.

[0132]Ovaj pronalazak će još biti opisan sa pozivom na sledeće detaljne primere. koji se daju kao ilustracija ovog pronalaska, i nisu predviđene da budu ograničenje.

Preparat 1

Tert-butil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilat

[0133]

Do racemizacije Je došlo u toku sinteze

Korak 1

[0134]U rastvor (R)-2-((tert-butoksikarbonil)amino)-3-metilbuterne kiseline {2,0 g, 9,20 mmol) u CH2CI2(40 mL) su dodati 2-(benzilamino)etanol (1,3 g, 8,80 mmol), HATU (5,30 g, 13,8 mmol) i Et^N (2,80 g, 27,6 mmol) pod N2. Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x30 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (20 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2S04, filtriran, koncentrovani i zatim prečišćeni hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu da se dobije (R)-tert-butil (1-(benzil(2-hidroksietil)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (2,80 g, 88% prinos) kao belačvrsta supstanca.LC-MSm/z 351.2 [M+H]+.LC-MSmtz 351,2 [M+H]<+>.

Korak 2

[0135]U rastvor (R)-tert-butil (1-(benzil(2-hidroksietil)amtno)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamata (2,80 g, 8,0 mmol) u CH2CI2(20 mL) je dodat Et3N (1.60 g, 16 mmol) i MsCl (1,40 g, 12,0 mmol) ukapavanjem na -10 °C pod atmosferom N2. Ova mešavina je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Mešavina je brzo ohlađena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa CH2CI2(3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom (20 mL) i osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani da se dobije (R)-tert-butil (1-(benzil(2-h!oroetil)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (3,0 g, 100% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena za sledeći

korak bez daljeg prečišćavanja.

LC-MSm/z 369,2 [M+H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): S 7.37-7.28 (m, 3H), 7.22-7.20 (m, 2H), 5.27-5.18 (m, 1H), 4.93-4.86 (m, 1H), 4.64-4.39 (m, 2H), 3.85-3.66 (m, 2H), 3.61-3.39 (m, 2H). 2.03-1.97 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.98 (d.J =6.8 Hz, 3H), 0.93 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Korak 3

[0136] U rastvor (R)-tert-butil (1-(benzil(2-hloroetil)amino)-3-m9til-1-oksobutan-2-il)karbamata (2,0 g, 5,40 mmol) u DMF (30 mL) je dodat NaH (1,0 g, 27,0 mmol, 60 % u mineralnom ulju) na 0 °C pod N2. Ova je mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Ova mešavina je brzo ohlađena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (20 mL), osušen iznad anhidrovane Na2S04, kompletn, koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na koloni da se dobije (R)-tert-butil 4-benzil-2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (1,13 g, 63% prinosa) kao bela Čvrsta supstanca. LC-MS m/z 277.1 (M-56+HJ+<1>HNMR(CDCI3400MHz): 5 7.38-7.29 (m, 3H), 7.29-7.22 (m, 2H), 5.02-4.86 (m, 1H), 4.49-4.39 (m, 1H). 4.31-4.06 (m, 2H), 3.41-3.18 (m, 3H), 2.42-2.31 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.12 (d,J =6.8 Hz,

3H), 1.00(d, J = 6. 8 Hz, 3H).

SteD4:

Korak 4

[0137]U Iboratorijskoj posudi sa tri vrata koja sadrži THF (10 mL) su pravljeni mehurići sa NH3(gas) na -78 °C tokom 5 min. Na (300 mg, 13,0 mmol) u ovu mešavinu lagano na -78 °C. Posle mešanja tokom 30 min, (R)-tert-butil 4-benzil-2- izopropil3-oksopiperazin-1-karboksilat (700 mg, 2,11 mmol) je dodat ukapavanjem na -78 °C, Ova je mešavina mešana tokom 30 min. Mešavina je brzo ohlađena sa zas. vod NH4CI(10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3310 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pripremnom TLC sa PE / EtOAc 1/1 da se dobije tert-butil 2-izopropil-3-oksopiperazin~1-karboksilat (300 mg, 59% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Utvrđeno je da je proizvod racemijska mešavina. Uzrok racemizacije nije ispitivan.LC- MSm/z 187.1 [M-56+H]<+>, 265.1 [M+Na]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 8 6.29 (s. 1H), 4.55-3.99 (m, 2H), 3.51-3.36 (m, 1H), 3.32-3.12 (m, 2H), 2.34-2.29 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.09 (d,J=6.8 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 7.2 Hz, 3H).

Korak 5

[0138]U rastvor tert-butil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0,83 mmol) u NMP (3 mL) su dodati 2-bromo-4-(metilsulfonil)anilin (207 mg, 0,83 mmol), (1R,2S)-N1,N2-dimetilcikloheksan-1,2-diamin (12,0 mg, 0,08 mmol), K3PO4.3H2O (660 mg, 2,48 mmol) i Cul (16 mg, 0,08 mmol). Ova mešavina je mešana na 150 °C tokom 1 sat pod mikrotalasnom. Mešavina je razblažena vodom (10 mL) t ekstrahovana sa EtOAc (3X10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pripremnom TLC sa CH2CI2/ MeOH 35/1 da se dobije tert-butil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imi-dazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilat (110 mg, 34% prinos) kao bela čvrsta supstanca.LC-MSm/z 394,1 [M+H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 5 7.94 (s, 1H), 7.83-7.76 (m, 2H), 5.35-5.17 (m, 1H), 4.73-4.42 (m, 1H), 4.22-4.12 (m, 1H), 4.11-3.99 (m, 1H), 3.53-3.37 (m, 1H), 3.03 (s, 3H), 2.38-2.27 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.19 (d,J= 6.8 Hz. 3H), 0.97 (d,J =6.8 Hz. 3H).

Preparat 2

(R)-2-(2-(8-(hidroksimetil)1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-

2,8(1 H)-il)-

[0139]

Korak 1:

[0140]

[0141] Rastvor Cbz-D-Valine (500 g, 1,99 mol) i N-metilmorfolina (201,8 g, 1,99 mol) u anhidrovanom THF (8 L) je ohlađen na -15 °C i i-butil hlorofomat (299 g, 2,19 mol) je dodat ukapavanjem pod mešanjem. Posle 30 min, rastvor 1-amino-2,2-dimetioksipropana (209,5 g, 1,99 mol) u THF (1 L)je dodat lagano i temperatura je održavana na -15 °C tokom 2 h. Reakciona mešavina je oprana slanim rastvorom (2 L) i organska faza je koncentovana da se ukioni THF. Ostatak je razblažen sa EtOAc (4 L), opran sa 1N vodenim HCI (2X2 L), opran zas. vod. (sat. aq.) NaHC03(2 L) i Na2C03(2 L), i opran slanim rastvorom (1,5 L). Posle sušenja iznad Na2S04, organski rastvaračje uklonjen pod smanjenim uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije (R)-benzil (1-((2,2-dimetoksietil)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat kao bela čvrsta supstanca (670 g, prinos 99,5%), koja je korišćena za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LC-MS m/z 360,9 [M+Na]<+>.<1>HNMR(CD3OD 300MHz): 6 7.35-7.30 (m,5H), 5.08 (s, 2H), 4.45-4.35 (m. 1H), 3.95-3.85 (m, 1H), 3.34-3.25 (m, 8H), 2.10-1.90 (m, 1H), 0.94-0.91 (m, 6H).

Korak 2:

[0142]

[0143](R)-benzil (1-((2,2-dtmetoksietil)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (335 g, 0,99 mol) je dodat u delovima u ohlađen TFA-H2O (temperatura < 5 X, VjFA/VH20=7I3, 2 L), i ovaj rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Rastvor je dodat lagano u mešanu ohlađenu zas. vod. Na2C03(2,5 L) da se održi pH > 8. Zatim je mešavina ekstrahovana sa EtOAc (5X2 L). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (2 L). osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i isparavani uvakuumuda se dobije (R)-benzil 2-izopropil-3-okso-3,4-dihidropirazin-1(2H)-karbokslat kao bela čvrsta supstanca (259 g, 95,4%), koja je korišćena za sledeći korak bez prečišćavanja. LC-MS m/z 274,9 [M+H]<+>.<1>H NMR(CD3OD3OOMHZ): 57.36-7.34 (m, 5H), 6.33-6.30 (m, 1H), 5.79-5.68 (m, 1H), 5.26-5.13 (m, 2H), 4.38-4.29 (m, 1H), 2.01-1.96 (m, 1H), 1.00-0.84 (m, 6H).

Korak 3:

[0144]

[0145]Uz mešanje rastvor (R)-benzil 2-izopropil~3-okso-3,4-dihidropirazin-1(2H)-karboksilata (400 g, 1,46 mol) u DCE (2 L) je dodat Et3SiH (424 g, 3,65 mol) i TFA (665 g, 5,8 mol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana pod refluksom tokom 36 sati. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, rastvor je koncentrovan da se ukloni rastvarač. Ostatak je razblažen sa EtOAc (2 L), i dodat je lagano uz mešanje ohlađenog zas. vod. (sat. aq.) NaHC03(2 L) da se osigura da je pH>8. Ova mešavina je ekstrahovanog sa EtOAc (2 X 2,5 L). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani da se dobije (R)-benzil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karbokslat (402 g, 99,75%), koja je korišćena za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.LC-MSm/z 276,9 [M+H]<+>. 1hNMR(DMSO-d6400MHz): 5 7.93 (s, 1H), 7.39-7.31 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.06-4.01 (m, 1H), 3.99-3.92 (m, 1H), 3.23-3.14 (m, 3H), 2.20-2.12 (m, 1H), 0.96-0.94 (m, 3H), 0.85(d, J =Q. O Hz,3H).

Korak 4:

[0146]

[0147]U 1 L laboratorijsku posudu okruglog dna koja sadrži (R)-benzil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (50 g, 0,181 mol) u MeOH (800 mL) je dodat Pd/C (suv, w/w 15%, 5 g). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi pod H2(1 atm) tokom noći. Kada je TLC i LCMS pokazao da je potrošen početni materijal, (Boc)20 (76,74 g, 0,352 mol) je dodat u reakcionu mešavinu, i ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći sve dok intermedijar (R)-3-izopropilpiperazin-2-ona nije potrošen. Mešavina je filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni hromatografijom na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE : EtOAc = 3:1) da se dobije (R)-tert-butil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1- karboksilat kao bela Ćvrsa supstanca (26 g, prinos 61%). Za (R)-3-izopropil-piperazin-2-on:LC-MSm/z 143,2 [M+H]<+>.<1>H NMR(HCI so, CD3OD 400 MHz): 5 3.95 (d, J = 3.6 Hz,1H), 3.65-3.39 (m, 4H), 2.63-2.54 (m, 1H),1.15 ( ć, J = 6.8 Hz, 3H),1.09 (d,J =7.2 Hz, 3H). Za (R)-tert-butil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat:LC-MSm/z 186.9 [M-56+H]<+>.<1>H NMR(DM- SO-đ6 400MHz): 5 7.93 (s, 1H), 4.02-3.82 (m, 2H), 3.17-3.15 (m, 3H), 2.16 (s, 1H), 1.41 (s, 9H), 0.98 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.89(d, J =6.4 Hz, 3H).

Korak 5:

[0148]

[0149]Pod N2atmosferom, NaH (8,8 g, 0,22 mol, 60 % u mineralnom ulju, 1,1 ekv.) je dodat u delovima na - 10°C u 1 L laboratorijsku posudu sa tri grla koja sadrži (R)-tert-butil 2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (26,7 g, 0,11 mol) u DMF (300 mL). Ova mešavina je mešana na - 10°C tokom 30 min. Ova mešavina dodata ukapavanjem u 1 L laboratorijsku posudu sa tri glrakoja sadrži metil 2,4-difluoro-5-nitrobenzoat (26,3 g, 0,121 mol, 1,1 ekv. (eq.)) u DMF (200 mL) na - 20 "C tokom 10 min. Posledodavanja, mešavina dobijena kao rezultat je mešana između - 20 "C i - 30 "CjoŠ 10 min. Reakcija je brzo ohlađena sa zas. vod. (sat. aq.) amonijak hlorida (200 mL) i zatim je voda (800 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 X 1L). Ovi kombinovani organski slojevi su oprani vodom (3 X 1 L) i slanim rastvorom, i zatim osušeni iznad anhidrovane Na2S04. Postoje mešavina filtrirana i filter ja ispario pod vakuumom, ostatak je prečišćen hromatografijom u koloni na silicijumskom gelu eluacijom sa PE : EtOAc 8:1~4:1 da se dobije (R)-tert-butil 4-(5-fluoro-4-(metoksikarbonil)-2-nitrofenil)-2- izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (32 g, 66,3% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.LC-MSMS (ESI) m/z 384.1 [M - 56 +H]<+>, 462.1 [M + Naj<+>. "<<>HNMR(CDCI3300MHz): 8 8.63 (d,J= 6.9 Hz, 1H), 7.16 (d.J =10.2 Hz, 1H), 4.61-4.30 (m, 2H), 3.97-3.89 (m, 4H), 3.62-3.48 (m, 2H), 2.40-2.34 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.08 (d, J= 6.9 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.9 Hz, 3H).

Korak 6:

[0150]

[0151]U 1 L laboratorijsku posudu okruglog dna koja sadrži (R)-tert-butil 4-(5-fluoro-4-(metoksikarbonil)-2-dodat NaSMe (14,3 g, 0,204 mmol, 3 ek.). Ova je mešavina mešana na sobnoj temepraturi tokom 1 sat. Voda (500 mL) je dodata i ova mešavina je koncentrovana pod vakuumom da se ukloni THF. pod vakuumom da se ukloni THF. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 800 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovnai pod vakuumom da se dobije (R)-tert-butil 2-izopropil-4-(4-(metoksikarbonil)-5-(metiltio)-2-nitro-žuta Čvrsta supstanca. Ostatak je korišćen direktno za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.LC-MSMS (ESI) m/z 412.1 [M - 56 + Hj<+>, 490.2 [M + Na]<+>.

Korak7:

[0152]

[0153]U laboratorijsku posudu okruglog dna za 2 L koja sadrži (R)-tert-butil 2-izopropil-4-(4-(metoksikarbonil)-5-(metittio)-2-ni trofenil)-3-oksopiperazin-1-karboksilat (sirovi 91,7 g, 0,196 mol) u CH2CI2(1 L) je dodato m-CPBA (84,6 g, 0,49 mmol, 2,5 ekv. mmol, 2.5 eq). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Zas. (sat.) N32S203je dodat lagano da se brzo ohladi ova reakcija. Ova mešavina je ekstrahovana sa CH2CI2(4x3 L). Kombinovani organski slojevi su oprani uzastopno sa Na2S203rastvorom (500 mL), NaHC03rastvorom (500 mL) i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ovaj ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa dihlorometanom da se da (R)-tert- butil 2-izopropil-4-(4-(metoksikarbonil)-5-(metilsulfonil)-2-nitrofenil)-3-oksopiperazin-1-karboksilat (83,7 g, 85,4% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.LC-MSMS (ESI) m/z 444.0 [M - 56 + H]<+>, 522.1 [M + Na]<+.><1>HNMR(CDCI3300MHz): 5 8.29 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.61-4.17 (m, 2H), 4.00-3.94 (m, 4H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.51-3.43 (m, 4H), 2.39-2.32 (m, 1H),1.50 (s, 9H), 1.07 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.9 Hz,3H).

Korak 8:

[0154]

[0155] U laboratorijsku posudu okruglog dna za 1 L koja sadrži (R)-tert-butil 2-izopropil-4-(4-(metoksikarbonil)-5-(metilsulfonil)-2-nitrofenil)-3-oksopiperazin-1-karboksilat (26.3 g. 0.0526 mol) u THF (200 mL) i metanolu (200 mL) je dodat Raney Nickel (u H2O, 4 g). Mešavina je mešana pod H2(30 psi) na sobnoj temperaturi tokom noći. Mešavina je filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da se dobije (R)-tert-butil 4-(2-amino-4-(metoksikarbonil)-5-(meti!sulfonil)fenil)-2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (24.7 g, 100% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. Ostatak je korišćen direktno za siedeći korak bez daljeg prečišćavanja. LC-MS MS (ESI) m/z 414.0 [M - 56 + H]<+>, 492.0 [M + Na]<+.><1>HNMR(CDCI3300MHz): 6 7.77 (brs, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.68-4.45 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.70-3.58 (m, 1H), 3.58-3.41 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.49-2.25 (m,1H), 1.50 (s, 9H), 1.12 (d,J = 6.9Hz, 3H), 1.05 (d, J=6.9 Hz, 3H).

Korak 9:

[0156]

[0157]U 1 L laboratorijsku posudu okruglog dna koja sadrži (R)-tert-buti! 4-(2-amino-4-(metoksikarbonil)-5-(metilsulfonil)fenil)-2-izopropil-3-oksopiperazin-1-karboksilat (25 g, 0,0532 mol) u dihlorometanu (500 mL) je dodat Et3N (64,5 g, 0,638 mol, 12 ekv.) i SO4 (27,1 g, 0,160 mol, 3 ekv.). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je dodata ukapavanjemuaq. NaHC03rastvor (54,1 g u 1 L vode, 0,644 mol, 12,1 ekv.) na 0 °C lagano i podešena na pH = 8. Mešavina je filtrirana i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (3 X 600 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i zatim osušeni iznad anhidrovane Na2S04. Mešavina je filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ovaj ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE: EtOAc 2:1 da se dobije (R)-2-tert-butil 8-metil 1-izopropil-7-{metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin- 2,8(1H)-dikarboksilat (13,2 g, 55% prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 9,03 min u 15 min hromatografija (Postupak: OD-3_3_5 40_2.5ML).LC-MSMS (ESI) m/z 452.2 [M + H]<+>.<1>H NMR(CD3OD4OOMHZ): 5 8.31 (s. 1H), 8.01 (s, 1H), 5.30-5.18 (m, 1H), 4.70-4.52 (m, 1H), 4.47(dd, J =3.2 and 12.4 Hz, 1H), 4.18 (dt,J=5.2 i 11.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.70-3.52 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 2.50-2.38 (m.1 H), 1.53 (s, 9H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.06 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Preparat 3

1-izopropil-7-(metiltio)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indola

[0158]

Korak 1:

[01591

[0160]U rastvor 6-bromo-1H-indola (5 g. 25,50 mmol) u anhidrovanom THF (60 mL) na 0 "C je dodat KH (6,80 g, 51,00 mmol, 30% wt u mineralnom ulju). Posle mešanja tokom 30 min i hlađenja na -78 °C, t-BuLi (39,23 mL, 51,0 mmol, 1,3 M) je dodat da se formira mešavina pod azotom. Posle 30 min, 1,2-dimetildisulfan (4,80 g, 51,0 mmol) je dodat u ovu formirana mešavina. Reakciona mešavina je mešana na -78 "C tokom 1 sat. Mešavina je brzo ohlađena sa zas. NH4CI (30 mL) na -78 °C lagano (Oprez: plamen), podešena pH = 7 sa 1 N vodene fosforne kiseline i ekstrahovan sa EtOAc (50 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni hormatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluirani sa PEIEtOAc 10:1) da se dobije 6-(metiltio)-IH-indol (3,9 g, 93,67% prinos) kao siva čvrsta supstanca.LC-MSMS (ESI) m/z 164.1 [M + H]<+>. "<I>hNMR (CDCI3 400MHz):S8.14 (brs, 1H), 7.56 (d.J=8.0 Hz. 1H). 7.37 (s, 1H), 7.18-7.11 (m, 1H), 6.56-6.51 (m. 1H), 2.52 (s, 3H).

Korak 2:

[0161]

[0162]U rastvor 6-(metiltio)-1H-indola (1 g, 6,13 mmol), NaOH (4,90 g, 122,6 mmol) i BU4NHSO4(207,8 mg, 0,613 mmol) u dihiorometanu (20 mL) je dodat benzensulfonil hlorid (1,29 g, 7,36 mmol). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je brzo ohlađena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa dihiorometanom (30 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni hormatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluirani sa (PE / EtOAc 10:1) da se dobije 6-(metiltlo)-1-(feniisulfonil)-1H-indol (1,1 g, 59,18% prinos) kao beia čvrsta supstanca.LC-MSMS (ESI) m/z 304.0 [M + H]<+>.<1>HNMR(CDCI3400MHz): 6 7.93-7.75 (m, 3H), 7.58-7.41(m, 5H), 7.17 (dd, J?= 8.0 Hz,J2 =1.6 Hz, 1H), 6.63-6.60 (m, 1H), 2.53 (s,3H).

Korak 3:

[0163]

[0164]Rastvoru 6-(metiltio)-1-(fenilsulfonil)-1 H-indola (890 mg, 2,93 mmol) u anhidrovanom THF (10 mL) na 0 °C pod azotom je dodat n-BuLi (5,86 mL, 14,65 mmol, 2,5 M). Posle mešanja tokom 30 min, izobutiraldehid (1,05 g, 14,65 mmol) je dodat u formiranu mešavinu. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sat. Mešavina je brzo ohlađena sa zas. NH4CI (10 mL) na 0 °C i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana, koncentrovana i prečišćena hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluirana sa PE / EtOAc 20:1 da se dobije 2-metil-1-(6-(metitio)-1H-indol-2-il)propan-1-on (440 mg, 64,26% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 234.1 [M + H]<+>.<1>HNMR(CDCI3400 MHz): 5 8.86 (brs, 1H), 7.52 (d,J =8.4 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.14-7.11 (m, 1H), 7.01 (dd,J1 =8.4 Hz,J2 =1.6, 1H), 3.42-3.38 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 1.20 {d,J= 6.8 Hz, 6H).

Korak 4:

[0165]

[[0166]U rastvor 2-metil-1-(6-(metiltio)-1H-indol-2-il)propan-1-ona (600 mg, 2,57 mmol) i Bu4NBr (4,12 g, 12,85 mmol) u 9 N NaOH (10 mL, ohlađeno) je dodat tert-butil (2-bromoeti!)karbamat (2,87 g, 12,85 mmol). Reakciona mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 72 sata. Ova mešavina je razblažena vodom (20 mL) na 0 °C, ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni hormatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluacijom sa PE / EtOAc 10:1 da se dobije tert-butil (2-(2-izobutiril-6-(metiltio)-1H-indoI-1-il)etil)karbamat (200 mg, 20,66% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 321.1 [M -56 + H]<+>, 277.1 [M - 100 + H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400 MHz): § 7.57 (d.J =8.4 Hz, 1H), 7.38 (s. 1H), 7.29 (s, 1H), 7.10 (d,J= 8.4 Hz, 1H), 4.80 (brs, 1H), 4.62 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 3.58-3.42 (m, 3H), 2.58 (S, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.24 (d,J =6.8 Hz. 6H).

Korak 5:

[0167]

[[0168]U rastvor prinosa tert-butil (2-(2-izobutiril-6-(metiltio)-1H-indol-1-il)eti))karbamata (200 mg, 0,53 mmoi) u dihlorometanu (9 mL) na 0 °C je dodat TFA (1 mL). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Mešavina je koncentrovana (T < 25<*>C), tretirana vodom (5 mL), podešena na pH=11 sa zas.( sat)NaHC03i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Ovi kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani da se dobije 1-(1-(2-aminoetil)-6-(metiltio)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on (210 mg, 100% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 258.8 [M-18+H]<+>.

Korak 6:

[0169]

[0170]U rastvor 1-(1-(2-aminoetil)-5-(metiltio)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on (200 mg, 0,724 mmol) u MeOH (5 mL) je dodat Et3N (219,3 mg, 2,172 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 60 °C tokom 1 sat. NaBH4(82,53 mg, 2,172 mmol) je dodato u formiranu mešavinu. Ova mešavina je mešana na 60 "C tokom još 1 sat. Ova mešavina je koncentrovana, tretirana vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluirani sa PE / EtOAc 1:1 da se dobije 1-izopropil-7-(metiltio)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indoI (80 mg, 42,46% prinos, čuvati na 0 °C) kao bezbojno ulje.LC-MS1-lzopropil-7-metilsulfanil-3,4-dihidro-pirazino[1,2-a]indol MS (ESI) m/z 259.1 [M + H]<+>.LC-MSof 1-izopropil-7-(metiltio)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indol MS (ESI) m/z 261.2 [M + H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400 MHz): 6 7.41 (d,J =8.4 Hz. 1H), 7.20 (s, 1H), 7.05 (dd,Jt= 8.4 Hz,J2=1.6 Hz, 1H), 6.12 (s. 1H), 4.02-3.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.16-3.10 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.32-2.27 (m, 1H), 1.09 (d, J = 6.8 Hz, 3H),0.86 (d, J = 6.8Hz, 3H).

Preparat 4

S-(({tert-butildIfenilsili1)oksi)metiO-1 -izopropil-7-(metilsu1fonil>-1,2,3,4-tetrahfdropirazino[1,2-a]lndol

[0171]

Korak 1:

[01721

[0173]U rastvor etil 4-amino-2-fluorobenzoata (12 g, 65,5 mmol) u DMF (100 mL) je dodat NaSMe (9,17 g, 131 mmol) l ova mešavina je mešana na 60 °C tokom 20 sati. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, reakcija je razbtažena sa H2O iekstrahovana sa EtOAc (3 X 100 mL). Kombinovane organske faze su oprane slanim rastvorom, i osušene iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovaneu vakumuda se dobije etil 4-amino-2-(metiltio)benzoat. [0171] U prethodno zagrejani, 60 °C rastvor etil 4-amino-2-(metiltio)benzoata (65 mmol) u sirćetnoj kiselini (150 mL) dodatje dodat ICI/AcOH rastvor (1M, 72 mL, 72 mmol) ukapavanjem tokom 40 min i temperatura je održavana na 60 °C tokom 3 sata. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi reakcija je razblažena sa EtOAc (500 mL) i oprana sa 5%-rastvorom natrijum tiosulfata (3 x 100 mL) i slanog rastvora (200 mL), i osušena iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filterirana i koncentrovana in vakuumu.. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silicijumskom gelu (0-20% EtOAc/Heksana) da se dobije etil 4-amino-5-jodo-2-(metltio)benzoat (13,67 g, 53% prinos). Za etil 4-amino-2-(metiltio)benzoat:LC-MSm/z 212 [M+H]<+>. Za etil 4-amino-5-jodo-2-(metiltio)benzoat:LC-MSm/z 338 [M+H]+.1H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 8.29 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.49 (br s, 2H), 4.31 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

Korak 2:

[0174]

[0175]U rastvor etil 4-amino-5-jodo-2-(metiltio)benzoata (13,6 g, 40 mmol) u DCM (100 mL) je dodat Et3N (13,8 mL, 100 mmol), posle čega je usledilo MsCI (7,7 mL, 100 mmol) na 0°C. Posle dodavanja ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. 1N HCI rastvor (50 mL) je dodat u mešvinu i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (1 x 100 mL). Organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovanu vakuumu.Za etil 5-jodo-4-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-2-(metiltio)benzoat: Sirova reakciona mešavina gore je rastvorena u 100 mL THF. U ovaj rastvor je dodat TBAF THF rastvor (1 M, 100 mL) i ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. H2O je dodata u mešavinu i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x 100 mL). Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, i osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, i koncentrovanu vakumuda se dobije etil 5-jodo-4-(meti!sulfonamido)-2-(metiltio)benzoat. korišćen je za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. Za etil 5-jodo-4-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-2-(metiltio)benzoat:LC-MSm/z 494 [M+HJ<+>. Za etil 5-jodo-4-(metilsulfonamid)-2-(metiltio)benzoat:LC-MSm/z 415 [M+H]<+>.

Korak 3:

[0176]

[0177]U rastvor etil 5-jodo-4-(metilsulfonamido)-2-(metiltio)benzoata (sirov, iz koraka 2) u suvom toluenu (200 mL) na 0°C je dodat diizobutilaluminijum hidrid (1,0 M u toluenu, 100 mL, 100 mmol) polako. Posle dodavanja, ova mešavina je mešana na 0<J>C tokom 3 h i brzo ohlađena sa metanolom/H20 (1/1). Reakciona mešavina je sipana u energično mešan rastvor kalijum natrijum tartarata (1M, 300 mL) i mešana energično tokom 2 sata, posle tog vremena je postavljena na dve bistre faze. Organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x200 mL). Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovanu vakuumu.Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na silicijumskom gelu (0-40% EtOAc/Heksani) da se dobije N-(4-(hidroksimetil)-2-jodo-5-(metiltio)fenil)metanesulfonamida (11,9 g, 80% prinos za dva koraka).LC-MSm/z 356 (M+H)+<1>HNMR(400 MHz, CDCI3): 5 7.82 (s, 1H), 7.49 (s, IH), 4.67 (s, 2H), 2.99 (S, 3H), 2.50 (S, 3H).

Korak 4:

[0178]

[0179]U mešani rastvor N-(4-(hidroksimetil)-2-jodo-5-(metiltio)fenil)metanesulfonamid (6,4 g, 17,2 mmol) i imidazol (1,76 g, 25,8 mmol) u CH2CI2(100 mL) i DMF (50 mL) na 0 °C je dodat tert-butildifenilsilil hlorid (5,8 mL, 22,4 mmol). Mešavina je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi je ostavljena da se meša tokom noći. Mešavina je razblažena sa CH2CI2(100 mL), oprana sa 1N HCI rastvorom, zas. vod. NaHC03i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2S04, filtriran i koncentrovanu vakuumuda se dobije N-(4-(((tert-butitdifenilsilil)oksi)metil)-2-jodo-5-(metiltio)fenil)metansulfonamid. Korišćeno je u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Suspenzija sirovog N-(4-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-2-jodo-5-(metil-tio)fenil)metanesulfonamida, mCPBA (8,9 g, 51,6 mmol) u CH2CI2(100 mL)je mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Zas. vod. NaHC03(50 mL) i Na2S203(50 mL) su dodati i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2(2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen svetlećom hromatografijom iznad silicijumskog gela eluiranjem sa EtOAc/heksana (3/7) da se dobije N-(4-(((tert-butildifenilsilil)oksi) metil-2-jodo-5-(metilsulfonil)fenil)metansulfonamid (8,8 g, 80% prinos u dva koraka). Za N-(4-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-2-jodo-5-(metiltio)fenil)metanesulfonam]d:LC-MSm/z 612 [M+H]<+>. Za N-(4-

(((tert-butild- ifenilstlil)oksi)metil)-2-jodo-5-(metilsulfonil)fenil)metanesulfonamid:LC-MSm/z 644 [M+H]<+>.<t>H NMR (400MHz, CDCI3): 5 8.25 <s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.67 - 7.65 (m, 4H), 7.46 - 7.37 (m, 6H),6.77 (S, 1H), 5.05 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 1.12 (s, 9H).

Korak 5:

[0180]

[0181]PdCl2(PPh3)2(277 mg, 0,38 mmol) i Cul (73 mg, 0,38 mmol) su dodati u rastvor N-(4-(((tert-buti!difenilsilil)oksi)metil)-2-jodo-5-(metilsulfonil)fenil)metanesulfonamid (2,45 g, 3,8 mmol) u THF (20 mL) i Et3N (10 mL). i Et3N (10 mL). Mešavina je isprana azotom tokom 10 min posle toga usledilo je dodavanje 4-metilpent-1-in-3-ol (745 mg. 7,6 mmol) i mešano 65°C tokom 8 sati. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (50 mL) i oprana sa 1N HCI (50 mL). Organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x50 mL). Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovane Na2S04, filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen svetlećom hromatografijom iznad silicijumskog gela eluiranjem sa EtOAc/heksanima (3/7) da se dobije 1-{5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1,6-bis(metilsulfonil)-1 H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol (2.1 g, 90% prinos).LC-MSm/z 614 [M+H]<+>. ?HNMR(400 MHz, CDCI3): 5 8.68 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.71 - 7.67 (s, 4H), 7.46 -7.35 (m, 6H), 6.77 (s, 1H), 5.21 (d,J= 3.2 Hz, 2H), 6.94 (t,J= 6.8 Hz, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.61 (d,J= 6.8 2.37 - 2.32 (m, 1H), 1.12 (s. 9H), 1.05 (d. J = 6.8 Hz. 3H), 1.03 (d,J =6.8 Hz, 3H).<13>c NMR(100 MHz, CDCI3): 5 147.25, 135.54, 135.28, 135.00, 133.66, 133.00, 132.89, 129.96, 127.85, 121.68, 115.96, 108.69. 72.30, 62.98, 44.33, 41.59, 32.88, 26.89, 20.23, 19.30, 17.61.

Korak 6:

[0182] U mešani rastvor 1-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1,6-bis(metilsuifonil)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol (2,3 g, 3,8 mmol) u suvom CH2CI2(25 mL) je dodat Dess-Martin periodian (1.94 g, 4.56 mmol) u jednom komadu. Ova mešavina se meša na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona mešavina je brzo ohlađena sa rastvorom Na2S203(5 g u 30 mL H2O) i sat. NaHC03rastvorom (40 mL). Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 80 mL), Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2S04, komplet i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen svetlećom hromatografijom nad siiicijumskim gelom eluiranjem sa EtOAc/heksana (278) da se dobije 1-(5-(((tertbutildifenilsilil)oksi)metil)-1,6-bis(metilsulfonil)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on {2,0 g, 86% prinos).LC-MSm/z 612 [M+H]<+>.<1>HNMR(400 MHz, CDCI3): 5 8.69 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 4H), 7.46 - 7.36 (m, 6H), 7.22 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.36 (m, 1H), 2.89 (s, 3H),1.29 (d, J= 6.8 Hz, 6H),1.13 (s, 9H).™ C NMR (100 MHz, CDCI3): 5 197.83, 141.53, 136.69, 136.05,135.50, 135.04, 132.81, 131.14, 129.99, 127,88, 123.17, 117.12, 114.21, 62.87, 44.19, 44.03, 39.09, 26.88,19.30, 18.41.

Korak 7:

[0183]

[0184]U mešani rastvor 1-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1,6-bis(metilsulfonil)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan- 1-on (780 mg, 1,27 mmol) u THF / metanol (15 mL /15 mL) je dodat CS2CO3(1,25 g, 3,83 mmol) u jednom delu.. Ova mešavina je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 4 h i koncentrovanau vakuumuda se dobije sirovi proizvod 1-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-6-(metilsulfonil)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on. KoriŠćeno je za sledeći korak reakcije bez daljeg prečišćavanja. U rastvor sirovog 1-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-6-(metilsulfonil)- 1 H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on, 2-(Boc-amino)etil bromid (2,8 g, 12 mmol) i tetrabutilamonijak jodid (235 mg, 0,63 mmol) u CH2CI2/toluen (2 mL / 4 mL) je dodato 40% NaOH vod. rastvor (20 mL). Mešavina je mešana na soboj temperaturi tokom 20 sati. Reakciona mešavina je razblažena sa CH2CI2(40 mL) i oprana sa H2O (50 mL). Organski organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2 (4 x 50 mL). Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2S04, filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen svetlećom hromatografijom iznad silicijumskog gela eluiranjem sa CH2CI2/metanom (95/5) da se dobije (2-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-2-izobutiri!-6-(metilsulfonil)-1H-indol-1-il)etil)karbamat (300 mg, 35% prinosa za dva koraka). Za 1-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-6-(metilsulfonil)-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-on:LC-MSm/z 556 [M+Na]<+>. Za tert-butil (2-(5-(((tert-butildifenilsi!il)oksi)metil)-2-izobutiril-6-(metilsulfonil)-1H-indol-1- il)etil)karbamat:LC-MSm/z 699 [M+Na]<+>.<1>HNMR(400 MHz, CDCI3): 5 8.20 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7,72 (dd,J- j =8.0 Hz,J2= 1.6 Hz, 4H), 7.47 - 7.35 (m, 7H), 5.21 (s, 2H), 4.72 (d,J =6.8 Hz, 2H), 3.55 (d,J =6.8 Hz, 2H), 3.33 - 3.26 <m, 1H), 3.00 (s, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.30 (d,

J = 6.4 Hz, 3H), 1.28 {d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.11 (s, 9H).

Korak 8:

10185]

[0186J U rastvor tert-butil (2-(5-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-2-izobutiri!-6-(metilsulfonil)-1H-indol-1-il)etil)karbamat (250 mg, 0,37 mmol) u CH2CI2(5,0 mL) je dodat trifluorosirćetna kiselina (1,0 mL) i ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Višak količine TFA je uklonjen azeotropskim isparavanjem sa toluenom pod smanjenim pritiskom. Ostatak je ponovo rastvoren u CH2CI2(5 mL) i Et3N (05 mL) je dodato. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 minuta i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen svetlećom hromatografijom iznad silicijumskog gela eluiranjem sa CH2CI2/Metanol (98/2) da se dobije 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol (135 mg, 65% prinos).LC-MSm/z 559 [M+H]<+.>

Korak 9:

[0187]

[0188]Rastvor 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-ajindola (140 mg, 0,25 mmol), 10% paladijum na drvenom ugtju (37 mg, 0,025 mmol) i metanol (5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi pod 1 atmosferom vodonika tokom 3 sata. Ova mešavina je filtrirana kroz Celite<®>i Celite<®>je detaljno opran sa metanolom. Kombinovani rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom da se dobije 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)- 1-izopropil-7-(rnetilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidropyrazino[1,2-a]indol. Korišćeno je direktno bez daljeg prečišćavanja. Mali deo proizvoda je prečišćen hromatografijom za karakterizaciju. LC-MS m/z 561 [M+H]<+>.<1>hNMR(400 MHz, CD3OD): 5 8.00 (s, 1H), 7.73 - 7.70 (m, 5H), 7.47 - 7.40 (m, 6H), 6.36 (s, 1H), 5.20 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 4.24 - 4.19 (m, 1H), 4.11 - 4.00 (m, 2H), 3.52 - 3.47 (m, 1H), 3.20 - 3.13 (m, 1H), 3.03 (5, 3H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 1.18 (d.J= 6.8 Hz, 3H), 1.09 (s, 9H), 0.96 (d,J =6.8 Hz, 3H).<13>cNMR(100 MHz, CDCI3): 5 143.06, 135.68, 134.04, 133.31, 131.52, 130,26, 129,79, 129,51, 127,77, 121,39, 111,22, 97,14, 63,76, 59,28, 45,00,42,94. 42,47, 31,55, 26,94, 19.72, 19,31, 16,49.

Preparat 5

1-(2-hloro-4-(thf!uorometil)pirimidin-5-il)etanon

Postupak1:

[0189]

[0190]Na -78 °C, u rastvor 2-hioro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karbonii hlorida (2,45 g, 10 mmol) u suvom THF (50 mL) je dodat MeMgCI THF rastvor (3,0 M, 4 mL, 12 mmo!) polako i reakciona mešavina je mešana na -78°C tokom 45 min. Zas. vod. NH4CI (2 mL) i voda (4 mL) su dodati. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2X10 mL), i kombinovani ekstrakti su osušeni sa Na2S04i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ovaj sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijumskom gelu eluiranjem sa EtOAc/heksanima (1/9) da bi se dobio 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (675 mg, 30% prinosa).LC-MSm/z 225 [M+H]<+>.<1>HNMR(400 MHz, CDCI3): S 8.86 (s, 1H). 2,65 (s, 3H).

Postupak 2:

[0191]

[0192]U rastvor 1,1,1-trifluoropentan-2.4-diona (200 g, 1,30 mol) u etanolu (200 mL) su dodati urea (78 g, 1,30 mol) i CH(OEf)3(211,5 g, 1,43 mol). Ova mešavina je mešana na 80 °C tokom 4 sata. Kašasta mešavina dobijena kao rezultat je filtrirana. Pogača iz filtra je držana u suspenziji metanola {300 mL) i MeONa (77,2 g, 1,43 mol) je dodat. Ova mešavina je mešana na refluksu tokom 5 sati, posle čega je usledilo sporo dodavanje HCI (4N) u pH 3 na sobnoj temperaturi. Dobijena kašasta mešavina i filter pogača je osušena pod vakuumom da se dobije jedinjenje (E)-1-(2-acetil-4,4,4-trifluoro-3-oksobut-1-en-1-il)urea (196 g, 67,3% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>HNMR(DMSO-dg 300 MHz):( ZIE)510.15-10.13 (m, 1H), 8.64 (s, 1H), 7.69-7.66 (m, 2H), 2.25 (s, 3H).LC-MSMS (ESI) m/Z 206.8 [M - 18 + HJ+

[0193] Meševaina jedinjenja (E)-1-(2-acetil-4,4,4-trifluoro-3-oksobut-1-en-1-il)urea (55 g, 0,25 mol) i POCI3(240,7 g, 1,57 mol) je mešano na 100 °C tokom 3 sata. Mešavina je dodataka ukapavanjem u vodu (1,5 L) na sobnoj temperaturi i ekstrahovana sa EtOAc (3 X 500 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (500 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2S04, kompletn, koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom u koloni eluiranjem sa PE / EtOAc 3/1 da se dobije jedinjenje 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (23,5 g, 42,7% prinos) kao svetio žuto ulje.1H NMR (CDCI3 300 MHz):.58.80 (s, 1H), 2.58 (s, 3H).19F NMR (920-083-1A CDCI3 400 MHz):<5-65,5 ppm.<13>CNMR(903-158-1A CDCI3400 MHz):6195.9,162.3, 160.1, 153.8 (dd,J =50 Hz), 130.9,119.5(dd, J = 366Hz), 30.7.

1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-1-on i 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)butan-1-on

[0194]

[0195] Jedinjenja iz naslova su pripremljeni postupkom " korišćenjem odgovarajućih Grignard reagenasa.

Preparat 6

5-bromo-2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin

[0196]Jedinjenje iz naslova je pripremljeno korišćenjem modifikovanog postupka na osnovu Ondi, L. etai., Eur. J. Org. Chem. 2004, 3714.

[0197]Mešavina 4-(tiifluorometil)pirimidin-2-ol (6,05 g, 36,9 mmol), KOAc (10,85 g, 3 ekv.), sirćetna kiselina (80 mL), i bromin (5,9 g, 1 ekv.) je zagrejan za 2 sati na 80°C.Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, ova mešavina je koncentrovana. Ostatak je podeljen između EtOAc i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad anhidrovane Na2S04. Posle filtracije i koncentracije, sirovi beli proizvod u obliku čvrste supstance (9,38 g, kvant. prinos) je korišćen za sledeće korake bez daljeg prečišćavanja.

[0198]Mešavina 5-bromo-4-(trifluorometil)pirimidin-2-ol (1,35 g, 5,56 mmol), POCI3(15 mL), i DMF(2 kapi, kat. količina) je zagrejana tokom 2 sata na 80 °C. Mešavina je ohlađena na 0 °C u kupki led/voda. Neki ledeni peleti su dodati u mešanu mešavinu (eksoterm). Posle mešanja tokom 20 min. (led koji je dodat je trebalo otopiti), neki zas. vod. NaHC03(c.a. 15 mL) je dodat pažljivo da se neutrališe neka kiselina. Ova mešavina je ekstrahovana sa heksanima EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad Na2S04. Posle filtracije i koncentracije (samo pomoću rotavapora! Ovaj proizvod je isparljiv), 5-bromo-2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin, kao bistro ulje (1,32 g, 91% prinos) je korišćen kao sirovina za sledeće korake bez daljeg prečišćavanja.

Primer 1

1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon

[0199]

[0200]U rastvor tert-butil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin- 2(1H}-karboksilat (30.mg, 0,08 mmol, iz pripreme 1) u CH2CI2(1 mL) je dodat TFA (0,2 mL) pod N2. Ova je mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Ova je mešavina koncentrovana da se dobije prinos 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo [4,5]imidazo[1,2-a]pirazin (30 mg, TFA so) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.

[0201]U rastvor 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazina (7,50 mg, 0,03 mmol) u DMSO (1 mL) su dodati 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (11,5 mg, 0,05 mmol) i DIEA (9,90 mg, 0,08 mmol) pod N2. Mešavina je mešana na 100 °C tokom 2 sata. Mešavina je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani, koncentrovani i zatim prečišćeni pripremnom HPLC da se dobije racemijska mešavina 1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5- il)etanona (2,40 mg, 20% prinosa) kao bela čvrsta supstanca.LC-MSm/z 482,1 [M+H]<+>.<1>H NMR(CD3OD 400MHz): 58.76 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.91 (d,J =8.4 Hz, 1H), 7.84-7.83 (m, 1H), 6.15 (d,J =8.0 Hz, 1H), 5.45 (d,J =13.6 Hz, 1H), 4.42-4.36 (m, 1H), 4.20 (brs, 1H), 3,91-3,80 (m, 1H), 3,09 (s, 3H), 2,60-2,46 (m, 4H), 1,34 (d,J= 6,8 Hz, 3H), 1,09 (d,J= 6,0 Hz, 3H).

Primer 2

2-(2-(1-izopropil-7-(metitsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]im^

(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol

[0202]

[0203]U rastvor 1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona (20 mg, 0,04 mmol, pripremljenom prema primeru 1) u THF (5 mL) je dodat MeMgBr (0,6 mL, 0,20 mmol) ukapavanjem na 0 °C pod N2. Mešavina je mešana na 0 °C tokom 2 sata. Mešavina je brzo ohlađena zasić. vod. NH4CI(10 mL) i ekstrahovana sa CH2CI2(3 310 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani i zatim prečišćeni pripremnom TLC da se dobije racemijska mešavina 2-{2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ola (6,90 mg, 33% prinos) kao bela čvrsta supstanca.LC-MSm/z 498,2 [M+H]<+>.<i>H NMR(CDCI3400MHz): ,58.79 (s, 1H), 7.99 (đ,J =1.2 Hz, 1H), 7.90-7.81 (m,2H), 6.08 (d, J = 8..0 Hz,1H), 5.35 (dd,J =4.4 and 14.0 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 1H), 4.25-4.12 (m, 1H), 3.88-3.73 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.57-2.48 (m, 1H), 1.99 (s, 1H), 1.66 (s, 6H), 1.32 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.09 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Primer 3

Etil 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[i,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimi-din-5-karboksiIat

[0204]

[0205]Urastvor 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazina (5.0 mg, 0,02 mmol, pripremljen prema primeru 1) u DMSO (1 mL) je dodat etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (8,7 mg, 0,03 mmol), DIEA (6,6 mg, 0,05 mmol) pod N2. Ova je mešavina mešana na 100 °C tokom 2 sata. Ova mešavina je razblažena vodom (5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3X5 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (5 mL), osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani i zatim prečišćeni pripremnom TLC da se dobije racemijska mešavina etil 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (5,6 mg, 64% prinos) kao bela čvrsta supstanca.LC-m/z 512.2 [M+H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 58.98 (s, 1H), 8.07-7.98 (m, 1H), 7.93-7.83 (m. 2H), 6.16 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.53-5.41 (m, 1H). 4.43-4.32 (m, 3H). 4.28-4.16 (m, 1H), 3.92-3.79 (m, 1H). 3.09 (s, 3H), 2.61-2.46 (m. 1H), 1.40 (s, 3H), 1.38-1.32 (m, 3H), 1.08 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Primer 4

(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5- il)metanol

[0206]

[0207]U rastvor etil 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H}-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (10 mg, 0,02 mmol, pripremljen prema primeru 3) u anhidrovanom toluenu (0,5 mL) je dodat DIBAL-H (0,2 mL, 0,20 mmol, 1M u THF) ukapavanjem na -78°Cpod N2. Ova mešavina je mešana na -78 °C tokom 2 sata. Zas. NH4CI (5 mL) na -78 °C je dodat u mešavinu, koja je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3 3 5 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (5 mL), osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filterirani, koncentrovani i zato, prečišćeni osnovnim pripremnim HPLC da se dobije racemijska mešavina (2-(1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo [4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanola (5,80 mg, 63% prinos) kao bela čvrsta supstanca.LC-MSm/z 470.1 [M+H]<+>'<1>H NMR(CDCI3 400MHz): 58.68 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.93-7.81 (m,2H), 6.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.38 (dd, J = 5.2Hz, J=14.4 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.38-4.30 (m, 1H), 4.25-4.15 (m, 1H), 3.86-3.76 (m, 1H), 3.10 (S, 3H), 2.56-2.47 (m, 1H), 1.32 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J= 6.8 Hz. 3H).

Primer 5

2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid

[0208]

[0209]U rastvor etil 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (20 mg, 0,04 mmol, pripremljenog u skladu sa primerom 3) u MeOH (3 mL), H2O (1 mL) je dodat NaOH (4,7 mg, 0,12 mmol). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je razblažena vodom (10 mL), acidifikovana sa 1N HCI u pH=3-4 i ekstrahovana sa EtOAc (3X10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2S04, kompletn, i koncentrovani da se dobije 2<*>(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(tirfluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina (20 mg, 100% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.

[0210]U rastvor 2-{1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometii)piirmidin-5-karboksilne kiseline (50 mg, 0,10 mmol) u DMF (10 mL) je dodato HATU (59 mg, 0,16 mmol), NH4CI (100 mg, 1,97 mmol), Et3N (30 mg, 0,31 mmol) pod N2. Ova je mešavina mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Ova mešavina je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 3 15 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom (15 mL), osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni osnovnom pripremnom HPLC da se dobije racemijska mešavina 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamida (13,4 mg, 27% prinos) kao bela čvrsta supstanca.LC-MSm/z483,1 [M+HJ<+>. ?HNMR(CDCI3400MHz): 58.77 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.92-7.83 (m, 2H), 6.12 (d,J= 8.4 Hz, IH), 8.78 (brs, 2H), 5.48-5.38 (m, 1H), 4.41-4.34 (m, 1H), 4.25-4.12 (m, 1H), 3.87-3.77 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.52 (brs, 1H), 1.34 (d,J= 6.8 Hz, 3H),1.10 ( d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 6

(R)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifIuorometil)pirimidin-5-il)etanon i (S)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin- -5-il)etanon

[0211]

Korak 1

[0212]

[0213]To a 50 mL laboratorijsku posudu sa tri grla koja sadrži (R)-2-tert-butil 8-metil 1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihid- robenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2,8(1H)-dikarboksilat (250 mg, 0,554 mmol, iz pripreme 2) u DCM (5 mL) je dodat DIBAL-H (1,70 mL, 1,67 mmol, 1,0 M u toluenu) ukapavanjem na - 78 °C pod N2- Ova mešavina je mešana na 78 "C tokom 3 sata. Reakcija je brzo ohlađena sa zasić. vod. amonijak hloridom (10 mL) na - 78 °C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (15 mL) i slanim rastvorom, i zatim osušeni iznad anhidrovane Na2S04 Mešavina je filtrirana i filtrat je isparavan pod smanjenim pritiskom. Ovaj ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE: EtOAc 8:1-2:1 da se dobije (R)-tert-butil 8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilat (175 mg, 74,1% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

Korak 2

[0214]

[0215]U 50 mL laboratorijsku bocu okruglog dna koja je sadržala (R)-tert-butil 8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a3pirazin-2(1H)-karboksilata (238 mg, 0,558 mmol) u CH2CI2(5 mL) je dodat Et3N (169 mg, 1,67 mmol) i AcCI (87 mg, 1,12 mmol) pod N2. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Reakcija je brzo ohlađena vodom (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (25 mL) i slanim rastvorom, i zatim osušeni iznad anhidrovane Na2S04. Mešavina je filtrirana i filtrat je isparavan pod smanjenim pritiskom. Ovaj ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE: EtOAc 8:1-4:1 da se dobije (R)-2-tert-butil 8-(acetoksimetil)-1-izopropil-7-(metilsuifonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a] pirazin-2(1H)-karboksilat (210 mg, 81,1% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

Korak 3

[0216]

[0217]TFA (1 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor koji sadrži (R)-tert-butil 8(acetometil)-1-izopropil-7-(metilsul- fonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imtdazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilat (210 mg, 0,452 mmol) u DCM (5 mL) na sobnoj temperaturi. Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. TLC je pokazao da je jedinjenje 3 bilo u potpunosti potrošeno. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom na 30 °C i zatim DCM (10 mL) je dodato. Mešavina je neutralisana zas. vod. (aq.) NaHC03rastvorom u pH=8. Mešavina je ekstrahovana sa DCM (3 x 20 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da se dobije (R)-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tet- rahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetat (160 mg, 97,1% prinos) kao bela čvrsta supstanca, koja je korišćena direktno za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.

Korak 4

[0218]

[0219]U rastvor (R)-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetata (160 mg, 0,456 mmol) u 'PrOH (4 mL) i DCM (2 mL) je dodat 1 -(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (306 mg, 1,37 mmol) i DIEA (353 mg, 2,74 mmol). Ova mešavina je mešana na 60 °C tokom noći. Voda (5 mL) je dodata u mešavinu i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (2X10 mL) i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2S04, kompletn i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-(2-(5-acetil-4-(trifluorometil)pirimidin -2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetat (150 mg, 44,4% prinos) kao žuto ulje.

Korak 5

[0220]

[0221]U rastvor (R}-(2-(5-acetil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetat (100 mg, 0,181 mmol) u THF (2 mL) i H2O (2 mL) je dodato LiOH (38 mg, 0,905 mmol). Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Ova mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (3X10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom. Ostatak je prečišćen osnovnom pripremnom HPLC da se dobije sirovi proizvod (53,1 mg, 55,9% prinos). Sirovi proizvod je odvojen SFC da se dobije (R)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropiI-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo(4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon

(32,90 mg,izomer 1)kao bela čvrsta supstanca i (S)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin- 2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (16,90 mg,izomer 2)kao bela čvrsta supstanca.Izomer 1(R)-1-(2-(8-(hi droksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon.Analitička

hiralna HPLCtR= 7,280 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AS-H_5_5 40_2,35 ML).LC-MSm/z 512.1 [M + H]<+>.<1>H NMR(CD3OD 400 MHz): 59.00 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 6.11-6.07 (m, 1H), 5.49-5.32 (m, 1H), 5.10 (s. 2H), 4.54 (dd,J= 3.6 Hz and 12.4 Hz, 1H), 4.24 (dt,J= 4.8 and 12.0 Hz, 1H), 3.98-3.90 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.61-2.57 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 1.29 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 6.8 Hz,3H). Izomer2:(S)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2 -a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanonAnalitička hiralna HPLCtR= 8,485 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AS-H_5_5 40_2.35ML).LC-MSm/z 512,1 [M+H]<+>.<1>H NMR{CD3OD 400 MHz): 59.00 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.12-6.08 (m, 1H), 5.48-5.31 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.56 (dd,J -3.6 Hz i 12.4 Hz, 1H), 4.24 (dt,J = 4.8i 12.0 Hz, 1H), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.61-2.58 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 1.29 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.07 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Primer 7

(R)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropii-7-(metiisulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-o! i (S)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(mett)sulfonil)-3,4-dihid robenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol

[0222]

[0223](R)-(2-(5-acetil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3.4-tetrahidroben-zo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetat (150 mg, 0,271 mmol, delimično racemizovan) je dodat MeMgCI (3,0 M u toluenu, 0,50 mL, 1,36 mmol) na -10 °C. Ova mešavina je mešana na -10 °C tokom 3 sata. Zas. NH4CI rastvor (10 mL) je dodat na - 10 °C i ova mešavina je filtrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije racemijska mešavina (65,0 mg, 45,5% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Ova racemijska mešavina je prečišćena SFC odvajanjem da se dobije (R)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4- dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol (16,20 mg, izomer 1) i (S)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-ii)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol (9,10 mg, izomer 2) kao bele čvrste supstance. Izomer 1: (R)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin- 2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol.Analitička hiralna HPLCtR= 8,600 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-H_3_5 40_2.35ML).

LC-MSMS (ESI) m/z 528.2 [M + H]+<1>HNMR(CD3OD 400MHz): 58.87 (s, 1H), 8.20 (s. 1H), 7.93 (s, 1H), 6.02 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 5.2 and 14.4 Hz, 1H), 5.09 (s. 2H), 4.50-4.46 (m, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 1H), 3.24 (s. 3H), 2.59-2.51 (m, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.26 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3H).

[0224] Izomer 1može da se rekristališe kao so hidrohlorne kiseline prema sledećem postupku: U rastvor (R}-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-{metilsuifonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol (52 mg, 0,1 mmol) u metanol (2 mL) je dodat acetil hlorid (7 mL, 0,1 mmol) i ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Metanol je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Sirova rezultanta je rastvorena na mešavini acetona i EtOAc (2,5 mL / 2,5 mL) posle čega je usledila filtracija. U filtrat, heksani (0,4 mL) su lagano dodati uz povremeno zagrevanje. Ostavite rastvor da stoji na sobnoj temperaturi sve dok se ne formiraju kristali. Kristal je prikupljen filtracijom. m.p. 176-179 °CLC-MSm/z 528 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8.95 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 6.28 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.43 (dd, J-j = 14.4 Hz,J2= 4.8 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.70 (dd,J-\= 12.8 Hz,J2= 3.6 Hz, 1H), 4.34 (td,J-\= 12.0 Hz, J2= 4.8 Hz, 1H), 3.92 (dddd,J1= 14.4 Hz,Jz= 12.8 Hz, J3= 4.8 Hz, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.70 - 2.62 (m, IH), 1.60 (s, 6H), 1.31 (d, J=6.8 Hz, 3H),1.13 (d, J = 6.8 Hz, 3H).Izomer2:(S)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imi-dazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-yl)-4-(trifluorometll)plrimidin-5-ll)propan-2-ol.Analitička hiralna HPLCtR= 6,680 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 528.2 [M + H]<+>.^H NMR(CD3OD 400MHz): 58.87 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 6.03 (d,J =8.0 Hz, 1H), 5.31 (dd,J- 4.4 and 14.0 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.60-2.51 (m, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

[0225]Alternativno, racemijska mešavina 2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol su pripremljeni prema sledećem postupku.

(rac)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-

2(1 H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol

[0226]

[0227](R)-metil -1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (224 mg, 0,639 mmol) i 2-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol(192 mg, 0,799 mmol) su kombinovani u maloj bočici i azetropirani sa benzenom da se ukloni zaostala voda. Mešavina dioksana (1 mL) i iPr2NEt (0,22 mL, 1,28 mmol) je oslobođena gasa sa N2tokom1° minuta. Ova mešavina je zatim dodata u reakcionu bočicu i zaptivena sa Teflon<®>obloženim zatvaračem koj je zatim obmotan Teflon<®>trakom. Dobijena suspenzija je zatim postavljena u 165 °C silicijumsku uljnu kupku u toj tački je mešavina postala homogenena. Dobijeni rastvor je mešan na 165°C tokom 21 sat. Pošto su uklonjeni rastvarači obrtnim isparivačem, mešavina je prečišćena korišćenjem iSCO FCC, eluacijom sa 50% EtOAc u Heksantma da se dobije 219 mg (R)-metil-2-(5-(2-hidroksipropan-2-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil- 7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat kao belu čvrstu supstancu (62% prinos, 40% ee).LC-MSMS (ESI) m/z 556.0 [M + H]<+>.<1>h NMR(CD3OD, 400 MHz): 58.88 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.05 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.32 (dd,J= 4.8 and 14.0 Hz, 1H), 4.53 (dd,J= 3.2 and 12 Hz, 1H), 4.27-4.20 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90-3.83 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.61-2.52 (m, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.27 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 1.06 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

[0228]U rastvor (R)-metil-2-(5-(2-hidroksipropan-2-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (109 mg, 0,196 mmol) u DCM (4 mL) je dodat rastvor DIBAL-H u DCM (0,98 mL 1,0 M rastvora, 0,98 mmol) ukapavanjem na - 78°C. Ova reakcija je lagano zagrejana do -10 "C tokom približno 1 sat, u toj tački 1 mL MeOH je dodato da se brzo ohladi višak DIBAL-H. zas. vod. Rochelle so (kalijum natrijum tartrat (KNaC4H406)) rastvor (5 mL) i DCM (5 mL) su dodati i ova mešavina je energično mešana tokom 15 min. DCM sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x5 mL). DCM slojevi su kombinovani, osušeni korišćenjem Na2S04i isparavani da i se dobio sirovi proizvod. Prečišćavanje korišćenjem ISCO FCC eluacije sa 70% EtOAc u heksanima je dalo 71 mg 2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsuffonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-yl)-4-(trifluorometii)piirmidin-5-il)propan-2-ola kao racemijske mešavine (69%).LC-MSMS (ESI) m/z 528.25 [M + H]<+>.1|H NMR(CDCI3, 400 MHz): 58.72 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.01 (d,J= 7.6 Hz, 1H), 5.27 (d,J =4.4 and 14.0 Hz, 1H), 5.00-4.86 (m, 2H), 4.26-4.08 (m, 2H), 3.74-3.67 (m, 1H), 3.15(s, 3H), 3.15-3.10 (m, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 1.96 (b, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.23 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.10 (đ,J =6.8 Hz, 3H).

2-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol je pripremljen na sledeći način:

[0229]

[0230]U 1,0 M rastvor TiCU u toluenu (6,67 mL, 6,67 mmol) je dodat 1,6 M rastvor MeLi u Et20 (4,18 mL, 6,69 mmol) ukapavanjem -78 °C (kupka koju čini suvi led / aceton). Dobijeni tamni rastvor je mešan na -78 °C tokom 30 minuta. Rastvor 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona (500 mg, 2,23 mmol) u Et20 (3 mL) je dodat ukapavanjem na -78 °C. Reakcija je lagano ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi u termosu tokom perioda od 15 sati. TLC analiza je pokazala potpuno pretvaranje u polarniji tercijarni alkoholni proizvod. Mešavina je zatim ohlađena na 0 °C i gašenjem brzo ohlađena sa zas. vod. NH4CI (10 mL) posle čega je usledilo EtOAc (10 mL) za izradu. EtOAc sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x10 mL). EtOAc slojevi su kombinovani, osušeni korišćenjem Na2S04i ispareni da se dobije sirov proizvod. Prečišćavanje korišćenjem ISCO FCC eluiranjem sa 20% EtOAc u heksanima je dalo 459 mg 2-(2-hloro- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol (86% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 241.12 [M + H]<+>.<1>HNMR(CDCI3, 400 MHz): 59.05 (s, 1H), 1.99 (s, 1H). 1.67 (s, 6H).

Primer 8

1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trif- luorometil)pirimidin-5-il)etanol (4 izomeri)

[0231]

[0232]U rastvor (R)-metil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (220 mg, 0,627 mmol) u 'PrOH (4 mL) i DCM (2 mL) je dodat 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimiđin- 5-il)etanona (421 mg, 1,88 mmol) i DIEA (485 mg, 3,76 mmol). Ova mešavina je mešana na 60 °C tokom noći. Voda (5 mL) je dodata u mešavinu i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (2X10 mL) i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 2-(5-acetil-4-(trifluorometil)piri- midin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (150 mg, 44,4% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

[0233]U 50 mL laboratorijsku posudu sa tri grla koja sadrži (R)-metil 2-(5-acetil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,44etrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (150 mg, 0,278 mmol) u DCM (3 mL) je dodat DIBAL-H (1,10 mL, 1,11 mmol, 1,0 M u toluenu) ukapavanjem na - 78 °C pod N2- Ova mešavina je mešana na - 78 °C tokom 3 sata. Zas. NH4CI rastvor (10 mL) je dodat na -78 °C i ova mešavina je filtrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije racemijska mešavina (81,0 mg, 56,7% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Racemijska mešavina je prečišćena SFC separacijom da se dobije izomer 1 (10,60 mg, 47,1 % prinos) kao bela čvrsta supstanca, izomer 2 (7,10 mg, 31,6% prinos) kao bela čvrsta supstanca,izomer3 (4,70 mg, 26,1% prinos) kao bela čvrsta supstanca i izomer 4 (6,00 mg, 33,3% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

Izomer 1

[0234]Analitičkahiralna HPLC:tR= 8,397 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_5_5

40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 514.1 [M + H]<+>.<1>HNMR(CD3OD 400MHz): £8.89 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.03 (d,J =8.0 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 4.4 and 14.4 Hz, IH), 5.11-5.08 (m, 3H), 4.50-4.46 (m, 1H), 4.28-4.16 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.72-2.39 (m, 1H), 1.42 (d,J= 6.4 Hz, 3H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.04 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2

[0235] Analitička hiralna HPLC: tR= 6,700 min za 15 min hromatografiju (Postupak: AS-H_5_5

40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 514.1 (M + H]<+>.<1>HNMR(CD3OD 400MHz): 58.89 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.03 (d,J =8.0 Hz, 1H), 5.32 (dd,J= 4.4 and 14.4 Hz, 1H), 5.11-5.08 (m, 3H), 4.50-4.46 (m, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 3.95-3.79 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.59-2.51 (m, 1H), 1.42 (d,J =6.0 Hz, 3H), 1.26 (d,J= 6.4 Hz, 3H), 1.04 (d,J= 6.4 Hz, 3H).

Izomer 3

[0236] Analitička hiralnaHPLC:tR= 7,666 min za 15 min hromatografiju (Postupak: AS-H_5_5

40_2.35ML).LC-MSMS (ESI)m/z 514.2 [M + H]<+>. ''HNMR(CD3OD 400MHz): 58.89 (s, 1H),

8.22 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 6.03 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.32 (dd,J =4.0 and 14.0 Hz, 1H), 5.11-5.08 (m, 3H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.24-4.15 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.61-2.43 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.0 Hz, 3H),1.26 (d, J = 6.8 Hz,3H), 1.05 (d, J= 6.8 Hz, 3H).

Izomer 4

[0237] Analitička hiralna HPLC: tR= 9,621 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-H_5_5

40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 514.1 [M + H]<+>.<1>HNMR(CD3OD 400MHz): 58.89 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.03 (d,J =8.0 Hz, 1H), 5.32 (dd,J = 4.0 and14.0 Hz, 1H), 5.11-5.08 (m, 3H), 4.50-

4.23 (m, 1H), 4.23-4.15 (m, 1H), 3.91-3.80 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.59-2.51 (m, 1H), 1.42 {d,J =6.4 Hz, 3H), 1.26(d, J= 6.8 Hz, 3H),1.05 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 9

(R)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izo ii)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propari-1-on i (S)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(meti!sulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4>5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5^il)propan-1-on

[0238]

[0239]Jedinjenja iz naslova su pripremljena prema postupku analognom onim koja su opisana u Primeru 6 korišćenjem 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-1-on umesto 1 -(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona.

Izomer 1:(R}-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izoproptl-7-(metilsuifonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-ajpirazin- 2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidtn-5-il)propan-1-on.Analitička hiralna HPLCtR= 6,87 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.5ML).LC-MSm/z 526,1 [M+H]<+>.<1>H NMR(CD3OD 400MHz): 58.94 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.17-6.02 (m, 1H), 5.43-5.32 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.54 (dd,J= 4.0 and 12.0 Hz, 1H), 4.24 (dt,J =4.8 and 12.0 Hz, 1H), 3.98-3.90 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.93 (q,J =6.8 Hz, 2H), 2.61-2.55 (m, 1H), 1.29 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.15 (t,J= 7.2 Hz, 3H),

1.07 (d, J- 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2:(S)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin- 2(1H}-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-1-on.Analitička hiralna HPLCtR= 8,40 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.5ML).LC-MSm/z 526,1 [M+H]<+>.<1>HNMR(CD3OD 400MHz): 58.93 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.15-6.01 (m, 1H), 5.47-5.31 (m, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.53 (dd,J=4.0 and 12.0 Hz, 1H), 4.24 (dt,J =4.8 and 12.0 Hz, 1H), 3.97-3.90 (m, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.92 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.60-2.55 (m, 1H), 1.28 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.14 (t,J= 7.2 Hz, 3H),

1.07 (d, J=6. 8 Hz, 3H).

Primer 10

1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trif- luorometil)pirimidin-5-il)propan-1-ol (4 izomeri)

[0240]

[0241]Jedinjenja iz naslova su pripremljena prema postupku analognom onim koja su opisana u Primeru 8 korišćenjem 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-1-on umesto 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona.Izomer1: bela čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 6,529 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSm/z 528,2 [M+H]+<1>HNMR(CDCI3400MHz): 58.81 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.10 (d,J= 7.6 Hz, 1H), 5.38-5.34 (m, 1H), 5.05-5.02 (m, 2H), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, IH), 3.23 (s, 3H), 3.06(t, J =7.2 Hz, 1H), 2.52-2.50 (m, 1H), 1.94-1.93 (m, 1H), 1.80-1.76 (m, 2H), 1.31(d, J =6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J = 6.8Hz, 3H), 0.99 (t,J= 7.2 Hz, 3H).Izomer 2:bela čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 7,502 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSm/z 528.2 [M+H]<+>.^H NMR(CDCI3400MHz): 58.82 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.88 (s, 1H),6.10 (d, J= 7.6 Hz,1H), 5.39-5.34 (m. 1H). 5.05-5.02 (m, 2H), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, IH), 3.22 (s, 3H), 3.10 (t,J= 6.8 Hz, 1H), 2.52-2.49 (m, 1H), 2.01-2.00 (m, 1H), 1.80-1.75 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.99 (t,J =7.2 Hz, 3H).Izomer 3:bela čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 5,173 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSm/z 528.2 [M+H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 58.81 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.10(d, J= 7.6 Hz, 1H),5.38-5.34 (m, 1H), 5.05-5.02 (m, 2H), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.07 (t,J= 6.8 Hz, 1H), 2.52-2.50 (m, 1H), 1.94-1.93 (m, 1H), 1.80-1.75 (m, 2H), 1.31 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.99 (t,J= 7.2 Hz, 3H).Izomer 4:bela čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 5,817 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSm/z 528.2 [M+H]+<1>H NMR(COCI3400MHz): 58.81 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.10 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.38-5.35 (m, 1H), 5.05-5.04 (m, 2H), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.21-4.18 (m, 1H), 3.81-3.76 (m, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.06 (t,J=6. 4Hz, 1H), 2.52-2.50 (m, 1H), 1.94-1.93 (m, 1H), 1.81-1.75 (m, 2H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.99 (t, J=7.2 Hz, 3H).

Primer 11

(R)-1-(2-((R)-8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazoj1,2-a]pi ražin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)butan-1-ol i (S)-1-(2-((R)-8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-di-hidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)butan-1-ol

[0242]

[0243]Jedinjenja iz naslova su pripremljena pridržavajući se postupka analognog onom koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)butan-1-on umesto 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona.

Izomer 1 Anatitiička hiralna HPLC:tR= 8,450 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_3_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 542.1 [M + H]<+>.?H NMR(CD3OD 400 MHz): 5 8.87 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.06 (d,J = 8.0Hz, 1H), 5.36-5.33 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.54-4.51 (m, 1H), 4.27-4.20 (m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 2.60-2.52 (m, IH), 1.78-1.71 (m, IH), 1.60-1.49 (m, 2H), 1.43-1.26 (m, 5H), 1.08 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.96 (t,J= 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2: AnalitiiĆka hiralna HPLC:tR= 10,264 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_3_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 542.1 [M + H]<+>. 1|HNMR(CD3OD 400

MHz): 6 8.87 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.06 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 5.36-5.33 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.54-4.51 (m, 1H), 4.27-4.20 (m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 2.60-2.52 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 1H), 1.60-1.49 (m, 2H), 1.43-1.26 (m, 5H), 1.08 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 0.96 (t,J =6.8 Hz, 3H).

Primer 12

(R)-etil 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidine-5-karboksilat

[0244]

[0245]U rastvor (RHl-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metanol (30 mg, 0,093 mmol) u CH2CI2(0,5 mL) i 'PrOH (0,5 mL) je dodat etil 2-hloro-4-(trifluorometil)piirmidin-5-karboksilat (36 mg, 0,14 mmol) i DIEA (36 mg, 0,28 mmol). Ova mešavina je mešana na 70 °C tokom noći. Mešavina je koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Voda (5 mL) je dodata u mešavinu i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani podvakuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-etil 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (42,0 mg, 83,7% prinos) kao belu čvrstu supstancu.Analitička hiralna HPLCtR= 9,927 min tokom 15 min hromatografskim postupkom, 96,74% ee (Postupak: OD-H_5_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/2 542.1 [M + H]+.1H NMR (CD3OD 300MHz): ,5 8.96 (s,1H)t 8.12 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 6.12-6.00 (m, 1H), 5.45-5.29 (m, 1H), 5.01 (S, 2H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.33-4.18 (m, 3H), 3.91 (t,J= 10.8 Hz, 1H), 3.18 (s, 3H), 2.63-2.47 (m, 1H), 1.35-1.26 (m, 6H), 1.05(d, J = 6.6 Hz, 3H).

Primer 13

(R)-(2-(8-(hidroksimetil)-l-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo{4,5]imiđazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-i 4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol i (S)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidroben- zo[4,5]imidazo[1,2-a]ptrazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol

[0246]

[0247]U rastvor (R)-metil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (80 mg, 0.228 mmol) u 'PrOH (2 mL) i DCM (1 mL) je dodat etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (174 mg, 0,684 mmol) i DlEA (177 mg, 1,37 mmol). Ova mešavina je mešana na 60 °C tokom noći. Voda (5 mL) je dodata u mešavinu i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (2 X 10 mL) i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 2-(5-(etoksikarbonil)-4-(trifluorometil) pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (75 mg, 57,8% prinos) kao žutu Čvrstu supstancu.

[0248]U rastvor (R)-metil 2-(5-(etoksikarbonil)-4-(tiifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahtdrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin-8-karboksilata (75 mg, 0,132 mmol) u DCM (3 mL) je dodat DIBAL-H (1M u toluenu, 0,50 mL, 0,528 mmol) na - 78 " C Mešavina je mešana na - 78 °C tokom 3 sata. Zas. NH4CI rastvor (10 mL) je dodat na - 78 °C i ova mešavina je filtrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom. smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije racemijska mešavina (56,0 mg, 85,1% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Racemijska mešavina je odvojena SFC separacijom da se dobije (R)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4- dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol (38,10 mg, izomer 1) i (S)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-

(metilsulfonil)-3,4-dihidro (11,90 mg,izomer 2)kao bele čvrste supstance.

Izomer 1:(R)-(2-(8-(hidroksimetil)-1"izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLCtR= 10,281 min u 15-min-hromatografiji (Postupak: AD-H_5_5._40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 500.1 [M + H]<+>.<1>HNMR(CD3OD 400MHz): S 8.73 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 6.04 (d,J= 8.0Hz, 1H), 5.33 (dd,J =4.4 and 14.0 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.50-4.46 (m, 1H), 4.28-4.06 (m, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.59-2.47 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.04 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2:(S)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,53imidazo[1,2-a]pirazin- 2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLCtR= 8,340 min u 15 min hromatografija (Postupak: AD-H_5_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 500.1 [M + H]<+>.<1>h NMR(CD3OD 400MHz): 8 8.73 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 6.04 (d,J = 8.4Hz, 1H), 5.33 (dd,J= 4.8 and 14.4 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.52-4.45 (m, 1H), 4.24-4.17 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.68-2.46 (m, 1H), 1.26 (d, J=6.8Hz, 3H), 1.05(d, J=6.8Hz, 3H).

Primer 14

(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometiI)pirimidin-5-karboksilna kiselina i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo(1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina

[0249]

[0250]Mešavina (R)-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)metil acetat (284 mg, 0,8 mmol), etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (296 mg, 1,2 mmol, 1,5 ekv.) i DIEA (310 mg, 2,4 mmol, 3 ekv.) u CH2CI2//-PrOH (3 mL / 3 mL) je mešan na 80 °C tokom 16 sati. TLC je pokazao da je jedinjenje bilo potpuno potrošeno PE : EtOAc =1:1. Rastvarači su uklonjeni podvacuumi ostatak je rastvoren u EtOAc (10 mL). Voda (10 mL) je dodata u mešavinu. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (10 mL X 3). Organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovan podvakuumom.Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE : EtOAc 5:1 da se dobije (R)-etil 2-(8-(acetoksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (0,41 g, 87% prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

[0251](R)-etil 2-(8-(acetoksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]ptrazin- 2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (0,1 g, 0,17 mmol) u MeOH / H2O (5 mL / 1 mL) je dodat Li- OH H2O (86 mg, 2 mmol). Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Višak metanola je uklonjen pomoćuvakuumana 40°C. Voda (5 ml) je dodata i mešavina je neutralisana pomoću 1N HCI na 0 °C lagano na pH = 6. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2(4x10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću SFC da se dobije (R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina (34,50 mg, 40% prinos,izomer1) kao bela čvrsta supstanca i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1 -izopropil- 7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina (6,40 mg, 7% prinos,izomer2) kao bela čvrsta supstanca.Izomer 1:(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-yl)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina.Analitička hiralna HPLCtR= 6,474 min u 15 min hromatografija (Postupak: OJ-H_3_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 514.0 [M + H]<+>.<1>H NMR(CD3OD400 MHz): 8 9.05 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 6.20-6.15 (m, 1H), 5.50-5.35 (m, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.35-4.20 (rn, 1H), 4.03-3.89 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.70-2.53 (m, 1H), 1.30 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.08 (d,J= 6.8 Hz, 3H).Izomer 2(S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-tzopropil-7-(metilsulfonil)-3.4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina.Analitička hiralna HPLCtR= 8,468 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5_40_2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 514.0 [M + H]<+.><1>H NMR(CD3OD 400 MHz): 5 9.02 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.00 (s 1H), 6.20-6.15 (m, 1H), 5.50-5.35 (m, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.35-4.20 (m, 1H), 4.03-3.89 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.70-2.50 (m, 1H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 15

(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfoniI)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil) pirimidin-5-karboksamid i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidroben- zo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid

[0252]

[0253]U rastvor -2-(8-(-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- -4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona (100 mg, 0,19 mmol, pripremljenom prema primeru 1) u THF (2 mL) je mL) je dodat HATU (97 mg, 0,25 mmol) i Et3N (52 mg, 0,51 mmol). Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. NH4CI (19 mg, 0,34 mmol) je dodat u jednom delu. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Voda (10 mL) je dodata i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (4x10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom (3X10 mL) i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC i SFC separacijom da se dobije (R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid (55,2 mg, 56,7% prinos,izomer1) kao bela čvrsta supstanca i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifIuorometil)pirimidin 5-karboksamid (10,5 mg, 10,8% prinos,izomer 2)kao bela čvrsta supstanca.

Izomer 1(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metiisulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin- 2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid.Analitička hiralna HPLCtR= 6,084 min u 15-min-hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 513.0 [M + Hj<+>.<1>HNMR(CD3OD 400 MHz): 8 8.71 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.13-6.01 (m, 1H), 5.45-5.30 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.59-4.50 (m, 1H), 4.31-4.18 (m, 1H), 4.00-3.86 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.65-2.50 (m,

1H), 1.28 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2(S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin5-karboksamid.

Analitička hiralna HPLC:tR= 7,218 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.35ML).

LC-MSMS (ESI) m/z 513.1 [M + H]<+>.<1>h NMR(CD3OD 400 MHz): 5 8.71 (s, 1H), 8.25 (s. 1H), 7.97 (s, 1H), 6.13-6.02 (m. 1H), 5.45-5.30 (m, 1H). 5.12 (s, 2H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.32-4.18 (m, 1H), 4.00-3.86 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.65-2.50 (m, 1H), 1.28 (d,

J =6.8 Hz, 3H), 1.06 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Primer 16

(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo;i4,5]imidazo[1.2-a]pirazin-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-N-metil-4-(trifiuorometil)pirimidin-5-karboksamid

[0254]

[0255]Jedinjenja iz naslova su pripremljena postupkom analognim onom opisanom u Primeru 15 korišćenjem soli metilamin hidrohlorne kiseline umesto amonijak hlorida kao reagensa.

Izomer 1:(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-yl)-N-metil-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksarnid.Analitička hiralna HPLC tR= 6,355 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AS-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 548.9 [M + Na]+. 1HNMR (CD3OD400 MHz): 5 8.68 (s, 1H), 8.27 (5, 1H), 7.99 (s, 1H), 6.14-6.00 (m, 1H), 5.45-5.30 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.30-4.18 <m, 1H), 4.00-3.86 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.66-2.51 (m, 1H), 1.31(d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2:(S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-{metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-N-metil-4-(trifluorometil)pirirnidin-5-karboksamid.Analitička hiralna HPLCtR= 6,486 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AS-H_3_5 40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 549.0 [M +Naj+. 1H NMR (CD3OD4OO MHz): 58.68 (s. 1H),8.29 (s, 1H), 8.00 (s, 1H). 6.14-6.00 (m, 1H),5.45-5.30 (m, 1H). 5.13 (s, 2H), 4.62-4.52 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 4.02-3.87 (m, 1H), 3.30 (s, 3H). 2.91 (s, 3H), 2.67-2.51 (m, 1H), 1.31(d.^6.8 Hz, 3H),1.11(d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 17

(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonii)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-N,N-dimetil-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-l-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)-N,N-dimetil-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid

[0256]

[0257]Jedinjenja iz naslova su pripremljena postupkom analognim onom opisanom u Primeru 15 korišćenjem soli dimetilamin hidrohlorne kiseline umesto amonijak hlorida kao reagensa.

Izomer 1:(R)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsuifonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il)-N,N-dimetil-4-(trifluorometil)pirimidtn-5-karboksamid.Analitička hiralna HPLCtR= 3,649 min za 8 min hromatografiju (Postupak: AS-H_S_3_5 40_3ML).LC-MSMS (ESI) m/z 563.1 [M + Na]<+>.1H NMR (CD3OD 400 MHz): 8 8.62 (s,1H), 8.23(d, J=6.4 Hz, 1H), 7.95 (d,J = 5.2Hz, 1H), 6.09-5.98 (m, 1H), 5.50-5.26 (m, 1H). 5.10 (d,J =4.4 Hz, 2H), 4.59^.50 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 4.03-3.87 (m, 1H), 3.30-3.25 (m,3H). 3.11 (s, 3H), 2.95 (s, 3H), 2.67-2.51 (m, 1H), 1.31(d, J =6.8 Hz, 3H), 1.09 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

lzomer2:(S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin- 2(1H)-il)-N,N-dimetil-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid.Analitička hiralna HPLCtR= 4,502 min u 8 min hromatografiji (Postupak: AS-H_S_3_5_40_3ML).LC-MSMS (ESI) m/z 563.1 [M + Na]<+>.

<1>H NMR(CD3OD 400 MHz): 8 8.62 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 6.09-5.98 (m, 1H), 5.49-5.28 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.59-4.50 (m, 1H), 4.33-4.20 (m, 1H), 4.05-3.90 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.95 (S, 3H), 2.68-2.52 (m, 1H), 1.32 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.10 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Primer 18

(R)-(1-izopropil-2-(4-meloksi-5-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(metilsulfonii)-1,2,3,^ tetrahidrobenzo[4,5]imida- zo[1,2-a]pirazin-8-il)metanol

[0258]

[0259]U rastvor 2,4-dihloro-5-(trifluorometil)pirimidin (20,0 mg, 0,092 mmol) u DCE (1 mL) i t-BuOH (1 mL) je dodat ZnCl2(1M u dietil etar, 0,2 mL, 0,2 mmol) na 0 °C. Ova mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sat. Zatim je rastvor (R)-metil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksi-lata (31 mg, 0,09 mmol) u DCE (1 mL) i t-BuOH (1 mL) je dodat u mešavinu reakcije preko šprica tokom 1 min na 0 °C. Posle dodavanja, dobijena mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona mešavina je koncentrovana pod vakuumom. Voda (5 mL) i EtOAc su dodati u mešavinu. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 2-(4-hloro-5-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (20 mg, 42,6% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

[0260]U rastvor (R)-(2-(4-acetil-5-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5Jimidazo[1.2-a)pirazin-8-il)metil acetat (15 mg, 0,028 mmol) u THF (2 mL) i H4O (2 mL) je dodato LiOH (25 mg, 0,29 mmol). Mešavina je mešana na 60 °C tokom 20 sati. Mešavina je koncentrovana pod vakuumom. Voda (5 mL) i EtOAc (5 mL) su dodati u ovu mešavinu. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani podvakuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 1izopropil-2-(4-metoksi-5-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (13,0 mg, 87,2% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

[0261]U rastvor (R)-metil 1-izopropil-2-(4-metoksi-5-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(metifsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[l,2-a]pirazin-8-karboksilata (15 mg, 0,028 mmol) u CH2CI2(2 mL) je dodat DiBAL H (1M u toluenu, 0,1 mL, 0,1 mmol) na - 78 °C. Ova mešavina je mešana na - 78 °C tokom 2 sata i zagrejana na sobnoj temperaturi tokom 6 sati. Zas. NH4CI rastvor (1 mL) je dodat i mešavina je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Voda (5 mL) i EtOAc su dodati u mešavinu. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x5 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-{1-izopropil-2-(4-metoksi-5-

(trifluoromettl)pinmidin-2-il)-7-(metiIsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzoE4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-i!)metanol (3,50 mg, 24,6% prinos) kao bela čvrsta supstanca.Analitička hiralna HPLCtR= 6,598 min u 15 min hromatografiji, 94,60% ee (Postupak: OD -H_3_5_40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 500.1 [M + Hj<+>.1h NMR(CDCI3300MHz): 5 8.31 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.02-5.98 (m, 1H), 5.43-5.38 (m, 1H), 5.04-4.98 (m, 2H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.16 (dt,J= 5.1 i 12.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.77-3.68 (m, 1H). 3.21 (s, 3H), 3.11-3.06 (m, 1H), 2.50-2.47 (m. 1H), 1.30 (d.J= 6.6 Hz. 3H). 1.07 (d, J=6.6 Hz, 3H).

Primer 19

(R)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a)pirazin-2(1H)-il)-4- metilpirimidin-5-il)metanol

[0262]

[0263]Rastvor metil 2,4-dihloropirimidin-5-karboksilata (27 mg, 0,13 mmol) u dihloroetanu / t-butanol (1:1, 2mL) je ohlađen na 0°C. ZnCl2rastvor (1,0 M u etru, 0,29 mL, 0,29 mmol, 2,2 ekv.) je dodat. Posle mešavanja tokom 1 sat, rastvor (R)-metil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (30 mg, 0,09 mmol) u dihloroetanu / f-butanol (1:1, 2 mL) je dodat lagano na 0°C. Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Voda (10 mL) je dodata i mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (10 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovan podvakuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 2-(4-hloro-5-(metoksikarbonil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1T2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (34 mg, 77,3% prinos) kao čvrsta supstanca.

[0264]U rastvor (R)-metil 2-(4-hloro-5-(metoksikarbonil)pilimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (20 mg, 0,04 mmol) i 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioksatriborinana (50 mg, 0,4 mmol) u 5 mL dioksana je dodat K2CO3(54 mg, 0,4 mmol) posle čega je usledila Pd(PPh3)4(5 mg, 0,004 mmol) pod N2uz mešanje. Ova mešavina je refluksovana tokom 2 sata sve dok materijal nije nestao. Reakciona mešavina je ohlađena na do sobne temperature. Dioksan je uklonjen pod vakuumom. Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (10 mL X 3). Organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod va/cuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 1-izopropil-2-(5-(metoksikarbonil)- 4-metilpirimidin-2-il)-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazol1,2-a]pirazin-8-karboksilat (15 mg, 75% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 502.1 [M + H]+

[0265]U rastvor (R)-metil 1-izopropil-2-(5-(metoksikarbonil)-4-metilpirimidin-2-ilj-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (15 mg, 0,03 mmol) u toluenu (2 mL) je dodat u toluenu, 0,3 mL, 0,3 mmol) na - 78 °C. Ova mešavina je mešana na - 78 °C tokom 2 sata. Zas. Zas. (sat.) NH4CI rastvor (5 mL) je dodat lagano na 0 °C i ova mešavina je filtrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3X10 L). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin-2(1H)-il)-4- metilpirimidin-5-il)metanol (1,6 mg, 12,3% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z446.2 [M + H]<+>.<1>h NMR(CD3OD 400 MHz): 88.26 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 6.00 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.90-4.79 (m, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.45-4.44 (m, 1H), 4.25-4.18 (m, 1H), 4.15-4.04 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.58-2.49 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.25 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.12 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Primer 20

(R)-(4-ciklopropil-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin- 2(1H)-il)pirimidin-5-il)metanol i (S)-(4-ciklopropil-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihid- robenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-it)pirimidin-5-il)metanol

[0266]

[0267]U rastvor metil 2,4-dihloropirimidin-5-karboksilata (352 mg, 4 mmol) i ciklopropilboronske kiseline (344 mg, 4 mmol) u THF (10 mL) je dodat K3PO4(3,1g, 12 mmol) posle čega je usledilo Pd(dppf)Cl2(292 mg, 0,4 mmol) pod N2. Ova mešavina je refluksovana tokom 4 sata sve dok materijal nije nestao. Reakciona mešavina je ohlađena na do sobne temperature. THF je uklonjen pod vakuumom. Voda (20 mL) je dodata i mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL X 3). Organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovan podvakuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije metil 2-hloro-4-ciklopropilpirimidin-5-karboksilat (220 mg, 26% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

[0268]Mešavina (R)-metil 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (77 mg, 0,22 mmol), metil 2-hloro-4-ciklopropilpirimidin-5-karboksilat (57 mg, 0,26 mmol, 1,2 ekv.) i DIEA (172 mg, 1,3 mmol, 6 ekv.) u CH2CI2//-PrOH (1 mL / 1 mL) je mešan na 120 °C tokom 16 sati. TLC je pokazao (R)-metii 1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat je potrošen u potpunosti (PE : EtOAc = 1:1). Voda (10 mL) je dodata i mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (10 mL X 3). Organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovan podvakuumom.Ostatak je prečišćen pripremnom TLC da se dobije (R)-metil 2-(4-ciklopropil-5-(metoksikarbonil)pirimidin-2-il)-1-izopropil- 7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (50 mg, 43% prinos) kao bezbojno ulje.

[0269]U rastvor (R)-metil 2-(4-ciklopropil-5-(metoksikarbonil)pirimiđin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat (50 mg, 0,1 mmol) u CH2CI2(2 mL) je dodat DIBAL H (1M u toluenu, 1 mL, 1 mmol) na - 78 °C. Mešavina je mešana na - 78 °C tokom 1 sat na zatim na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Zas. NH4CI rastvor (5 mL) je dodat lagano na 0 "C i ova mešavina je filtrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x5 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani i koncentrovani pod vacuumom. Ostatak je prečišćen pripremnom TLC i zatim SFC separacijom da se dobije (R)-(4-ciklopropil- 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropii-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)pirimidin-5- il)metanol (11,50 mg, 24,5% prinos,izomer 1)kao bezbojno ulje i (S)-(4-ciklopropil-2-(8-(hidroksimetil)-1 -izopropil- 7-{metilsutfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)pirimidin-5-il)metanol (7,10 mg, 15,1% prinos,izomer 2)kao bezbojno ulje.

Izomer 1(R)-(4-ciklopropil-2-(8-(hidroksimetil)-l-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imida-zo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)pirimidin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLCtR= 9,898 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-H_3_5_40^2,35 ML).LC-MSMS (ESI) m/z 472.2 [M + H]<+>.<1>hNMR(CD3OD 400 MHz): 8 8.23 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 6.00 (d,J=8.0 Hz, 1H), 5.27-5.18 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.48-4.39 (m, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H). 3.85-3.73 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.58-2.42 (m, 1H), 2.35-2.22 (m, 1H), 1.28 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.21-1.09 (m, 4H), 1.05 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Izomer 2:(S)-(4-ciklopropil-2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropi!-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo [1,2-a]pirazin-2(1H)-il)pirimidin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLCtR= 10,770 min u 15 min hromatog- rafiji (Postupak: OD-H 3 5 40_2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 472.2 [ M + H]<+>.<1>HNMR(G000237343 901-086-P1 CD3OD 400 MHz): 8 8.23 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 6.02(d, J=8.0 Hz, 1H), 5.27-5.22 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.47-4.40 (m, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.85-3.74 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.57-2.44 (m, 1H), 2.32-2.20 (m, 1H), 1.27 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.21-1.09 (m, 4H), 1.05 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Primer 21

(R)-(1-izopropil-2-(5-metil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imida- zo[1,2-a]pirazin-8-il)metanol

[0270]

[0271]Mešavina (R)-metil 1-izopropit-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin-8- karboksilata (45 mg, 0,128 mmol), 5-bromo-2-hIoro-4-(trifluorometil)pirimidin (40 mg, 1,2 ekv.), DIPEA (90 mL, 4 ekv.) i DMF(1,5 mL)je stavljena u mikrotalasnu peć i zagrevana 90 min. na 130 °C. Mešavina je učestvovala između EtOAc i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan dvaput pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad Na2S04. Posle filtracije i koncentracije, ostatak je prečišćen ISCO (12 g stubom, 10-40% EtOAc u heksanima) da se dobije 34,4 mg (47% prinos) (R)-metil 2-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenif)-1-izopropil-7-(metilsulfoniil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilat.

[0272]Mešavina (R)-metil 2-(5-bromo-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpirazin-8-karboksilata (7 mg, 0,012 mmol), Pd(PPh3)4(1mg, kat. količina), 2M vod. K2CO3rastvora(100 mL, višak), i suvi 1,4-dioksan (700 mL) je oslobođen gasa i ponovo dopunjen azotnim gasom tokom 3 puta. Rastvor 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-tiioksatiiborinan (5 mg, viška) u suvom 1,4-dioksanu (100 mL) je dodat. Mešavina je zagrejana u mikrotalasnoj peći tokom 30 minuta na 120 °C. Posle koncentracije, ostatak je filtriran i prečišćen pomoću Gilson da se dobije 3,5 mg (R)-metil 1-izopropil-2-(5-metil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(meti!sulfo- nil)-1.2.3,4-tetrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8-karboksilata (56% prinos).LC-MS:m/z 512,3 [M+H]<+.>

[0273]A solution of (R)-methyl 1-isopropyl-2-(5-methyl-4-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)-7-(methylsulfonyl)-l,2,3,4-tet- rahydrobenzo[4,5]imidazo[1,2-ajpyrazine-8-carboxylate (3.5mg, 0.007mmol) in dry toluene (3mL) was cooled to -78 °C. A solution of DIBAL-H in toluene (1M, 35mL, 5equiv.) was added, Mešavina je mešana tokom 3 sata. LC-MS je pokazao da je reakcija završena. Mešavina je brzo ohlađena zas. NH4CI rastvorom (200mL) i metanolom (200mL), pre nego što je zagrejana na sobnu temperaturu. Posler koncentracije, ostatak je filtriran i prečišćen korišćenjem Gilsonovim uređajem da se dobije 1,53mg (R)-(1-izopropil-2-(5-metil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrobenzo[4,5jimidazo[1,2-a]pirazin-8- il)metanol (46% prinos).LC-MS:m/z 484,3 [M+H]<+>.<1>H NMR(CD3OD, 400MHz): 5 8.52(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.99(s, 1H), 6.05(d,J= 8.0Hz, 1H), 5.30(dd,J= 14.4Hz, 4.8Hz, 1H), 5.12(s, 2H), 4.51(dd,J= 12.0Hz, 3.2Hz, 1H), 4.22(td, 12.0Hz, 5.2Hz, 1H), 3.88(m, 1H), 3.26(s, 1H), 2.57(m, 1H), 2.29(s, 3H), 1.27(d, 6.4Hz, 3H), 1.06(d, 6.4Hz, 3H).

Primer 22

{R)-1-(2-( 1-izopropil-7-{meti!sulfo^ il)etanonom i (S)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3.4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimi- din-5-il)etanonom

[0274]

[0275]U rastvor 1-izopropil-7-(metiltio)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indola (100 mg, 0,38 mmol) iDIPEA (246,72 mg, 1,91 mmol) u /'-PrOH (2 mL) je dodat 1-(2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (172,50 mg, 0,76 mmol). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je koncentrovana i prečišćena pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluacijom sa PE / EtOAc 1:1 da se dobije 1-(2-(1-izopropil-7-(metiltio)-3,4-dihidropirazi- n[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (120 mg, 69,67% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 449.2 [M + Hj<+>.<1>HNMR(CDCI3400MHz): 5 8.66 (s, 1H), 7.44-7.40 (m, 1H), 7.06 (d,J=8.4 Hz, 1H), 6.27-6.25 (m, 1H), 5.79-577 (m, 1H), 5.13-5.02 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.97-3.91 (m, 1H), 3.82-3.71 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.21-2.15 (m, 1H), 1.12-1.08 (m, 3H), 0.96-0.93 (m, 3H).

[0276]U rastvor 1-{2-(1-izopropil-7-(metiltio)-3l4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanona (110 mg, 0,23 mmol) u metanolu (3 mL) na 0 °C je dodat NaMo04-2H2O (107,61 mg, 0,49 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0 " C tokom 10 min. Zatim H2O2(5 mL, 30% wt) je dodato da se formira mešavina. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Ova mešavina je ekstrahovana sa rastvaračem mešavine od dihlorometana (30 mL) //-PrOH (10 mL) tri puta. koncentrovani, prečišćeni pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluacijom sa PE / EtOAc 1:1 i zatim SFC separacijom da se dobije (R)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (26,90 mg, 22,38% prinos, izomer 1) kao bezbojno ulje i (S)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon (23,80 mg, 20,20% prinos,izomer2) kao bezbojno ulje.

Izomer1: (R)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon.Analitička hiralna HPLCtR= 7,972 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AD- H_5_A_40_2.35ML).LC-MS (ESI) m/z 481.2 [M + Hj<+>, 503.1 [M + Na]<+>.<1>HNMR(CDCI3 400MHz): 5 8.75-8.73 (m, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.72(d, J =8.4 Hz, 1H), 7.65(d, Jf =8.4 Hz, J2 =1.6 Hz, 1H), 6.51-6.48 (m, 1H), 5.94-5.92 (m, 1H), 5.25-5.22 (m, 1H), 4.41-4.36 (m, 1H), 4.15-4.10 (m, 1H), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.34-2.27 (m, 1H), 1.21-1.18 (m, 3H), 1.06-1.05 (m, 3H).

Izomer 2:(R)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-

(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon.Analitička hiralna HPLCtR= 11,077 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AD- H_5_5_40„2.35ML).LC-MSMS (ESI) m/z 481.1 [M + Hj<+>, 503.1 [M + Na]<+>. ^HNMR(CDCI3400MHz): 6 8.75-8.73 (m, 1H), 7.95 (s, IH), 7.73-7.70 (m, 1H), 7.65 (d,J1=8.4 Hz,J2= 1. 6Hz, 1H), 6.51-6.48 (m, 1H), 5.94-5.92 (m, 1H), 5.25-5.22 (m, 1H), 4.41-4.36 (m, 1H), 4.15-4.10 (m, 1H), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.34-2.27 (m, 1H), 1.21-1.18 (m. 3H), 1.07-1.05 (m, 3H).

Primer 23

(R)-2-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trif(uorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol i (S)-2-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifIuorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol

[0277] U rastvor (R)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-ajindoi-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)piirmidin-5-il)etanona (5 mg, 0,01 mmol) u THF (1 mL) je dodato LaCI3-2LiCI (0,2 mL, 0,12 mmol, 0,6 M) na 0 °C pod azotom. Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sat. MeMgCI (0,3 mL, 0,9 mmol, 3M) je dodato u formiranu mešavinu i zatim je reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 1 sat. Reakcija je brzo ohlađena zas. NH4CI (5 mL) na 0 °C i zatim je ekstrahovana sa EtOAc (30 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovane Na2S04, filtrirani i koncentrovani, prečišćeni pripremnom TLC eluiranjem sa PE / EtOAc 1:1 i zatim sa SFC separacijom da se dobije (R)-2-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol (1,20 mg, 24,68% prinos, Izomer 1) kao bezbojno ulje.Analitička hiralna HPLCtR= 6,394 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OJ-H_3_5 40_2.35ML).LC-MS m/z497.3 [M + H]<+>.^H NMR (CDCI3 400MHz):5 8.75 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 (d,J= 8.4 Hz,1H), 7.62 (d,J1- 8.4 Hz,J2=1.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.16-5.12 (m, 1H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 1H), 3.86-3.77 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.68 (S. 6H),1.18 (d, J = 7.2 Hz, 3H),1.06(d, J =7.2 Hz, 3H)

[0278](S)-2-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol(Izomer 2) jepripremljen na sličan način iz (S)-1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4- dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)piirmidin-5-il)etanon.Analitička hiralna HPLCtR= 7,631 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AS-H_3_5 40._2.35ML).

LC-MSm/z 497.2 [M + H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz):

58.75 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 (d,J =8.4 Hz, 1H), 7.62 (d,J1= 8.4 Hz,J2 =1.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.89 (d,J =8.8 Hz, 1H), 5.16-5.12 (m, 1H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 1H), 3.86-3.77 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.68 (S, 6H), 1.18 (d,J= 7. 2 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 7.2Hz, 3H).

Primer 24

1-(2-(1-izopropil-7-(metilsuIfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indoI-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin il)etano! (4 izomeri)

[0279]

[0280]U rastvor 1-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidro<p>irazino{1,2-a]iridol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimiđin-5-il)etanona (10 mg, 21 mmol) u metanolu (2 mL) je dodat NaBH4(7,8 mg, 0,21 mmol) na 0 °C. Reakciona mešavina je mešana na refluksu tokom 2 sata. Ova mešavina je brzo ohlađena vodom (5 mL) i koncentrovana da se ukloni metanol da se dobije strovi proizvod koji je ekstrahovan sa EtOAc (30 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2S04, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE / EtOAc 1:1 i zatim SFC separacijom da se dobijeIzomer 1(0,80 mg, 7,97% prinos) kao bezbojno ulje,Izomer 2(0,90 mg, 8,96% prinos) kao bezbojno ulje,Izomer 3 (1,20mg, 11.95% prinos) kao bezbojno ulje iIzomer 4(1,30 mg, 12,94% prinos) kao bezbojno ulje.

Izomer 1: Analitička hiralna HPLCtR= 3,16 min za 15 min hromatografiju (Postupak: AD-H_3_30%_2.35ML).LC- MSm/z 483.0 [M + H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 58.83 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.68 (d,J= 7.2 Hz, 1 H), 7.52 (d,J =7.2 Hz, IH), 6.47 (s, IH), 5.89 (d,J =8.8 Hz,IH), S.24-5.14 (m, 2H), 4.33-4.31 (m, IH), 4.16-4.09 (m, IH), 3.85-3.81 (m, IH), 3.08 (s, 3H), 2.36-2.29 (m, IH), 1.53-1.S1 (m, 3H), 1.19 (d,J =6.4 Hz, 3H), 1.07(d, J -6.8 Hz, 3H).

Izomer 2 Analitička hiralna HPLCtR= 4,04 min za 15 min hromatografiju (Postupak: AD-H_3_30%_2.35ML).LC- MSm/z 483.0 [M + H]<+>.<*>H NMR(CDCI3400 MHz): 5 8.83 (s, IH), 7.93 (s, IH), 7.68 (d,J= 7.2 Hz, IH), 7.52 (d,J= 7.2 Hz, IH), 6.47 (s, IH), 5.89 (d,J= 8.8 Hz, IH), 5.24-5.14 (m, 2H), 4.33-4.31 (m, IH), 4.16-4.09 (m, IH), 3.85-3.81 (m, IH), 3.08 (s, 3H), 2.36-2.29 (m, IH), 1.53-1.51 (m, 3H), 1.19 (d,J= 6.4 Hz, 3H), 1.07 (d,J = 6.8 Hz, 3H).

Izomer 3 Analitička hiralna HPLCtR= 6,08 min za 15 min hromatografiju (Postupak: AD-

H_3_30%_2.35ML).LC- MSm/Z 483.0 [M + H]<+>.<1>H NMR(CDCI3400MHz): 58.83 (s, 1H), 7.93 (S, 1H), 7.68 (d,J =7.2 Hz, 1H), 7.61 (d,J= 7.2 Hz, IH), 6.47 (s, IH), 5.89 (d,J= 8.8 Hz, IH), 5.24-5.14 (m, 2H), 4.33-4.31 (m, IH), 4.16-4.09 (m, IH), 3.85-3.81 (m, IH), 3.08 (s, 3H), 2.36-2.29 (m, IH), 1.53-1.51 (m, 3H), 1.19(d, J= 6.4 Hz, 3H), 1.07(d, J =6.8 Hz, 3H).

Izomer 4 Analitička hiralna HPLCtR= 10,21 min u 15 min hromatografiji (Postupak: AD-H_3_30%_2.35ML).LC-MSm/z 483.0 [M + H]<+>.<1>H NMR(CDCis 400MHz): 58.84 (s, IH), 7.93 (S, 1H), 7.68 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.61 (d,J = 7.2 Hz,1H), 6.47 (s.1H), 5.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.24-5.14 (m, 2H), 4.33-4.31 (m, 1H), 4.16-4.09 (m, 1H), 3.85-3.81 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.36-2.29 (m, 1H), 1.53-1.51 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H),1.07 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 25

(R)-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol i (S)-(2-(1-izopropil-7-(iiietilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometii)pirimidin-5- iljmetanol

[0281]

[0282]U rastvor 1-izopropil-7-(metiltio)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indola (100 mg, 0,38 mmol) i DIPEA (248,3 mg, 1,921 mmoi) u /'-PrOH (3 mL) je dodat etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (196 mg, 0,77 mmol). Ova mešavina je mešana na rt (sobnoj temperaturi) tokom noći. Mešavina je koncentrovana i prečišćena pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluiranjem sa PE / EtOAc 1:1 da se dobije etil 2-(1-izopropil-7-(metiltio)-3,4-dihidropirazino [1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (60 mg, 32,6% prinos) kao bezbojno ulje.LC-MSMS (ESI) m/z 478.7 [M + H]<+.>

[0283]U rastvor etil 2-(1-izopropil-7-(metiltio)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (54 mg, 0,11 mmol) u metanolu (2 mL) na 0 °C je dodat NaMo04-2H2O (54 mg, 0,24 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 10 min. H2O2(2 mL, 30% vrt) je dodato da se formira mešavina. Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Ova mešavina je ekstrahovana sa rastvaračem mešavine od dihlorometana (30 mL) //-PrOH (10 mL) tri puta. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani, prečišćeni pripremnom TLC eluacijom sa PE / EtOAc 1:1 da se dobije etil 2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (25 mg, 43,39% prinos) kao bela Čvrsta supstanca.LC-MS MS

(ESI) m/z 511.1 {M + H]+.

[0284]U rastvor 2-(1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]inđol-2(1H)-ilH-(Wluorometil) pirimidin-5-karboksilat (25 mg, 0,05 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je dodat DIBAL-H (0,25 mg, 0.25 mmol, 1M u toluenu) na -78 "C pod azotom. Reakciona mešavina je mešana na -78 °C tokom 1 sat. Reakcija je brzo ohlađena zas. NH4CI (5 mL) na -78 °C i zatim je ekstrahovana sa dihlorometanom (30 mL X 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani, prečišćeni pripremnom TLC na silicijumskom gelu eluacijom sa PE / EtOAc 1:1 i zatim SFC separacijom da se dobije (R)-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometit)pirimidin-5-il)metanol (1,80 mg, 7,84% prinos,izomer 1)kao bezbojno ulje i (S)-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidro-pirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)metanol (1,60 mg, 6,97% prinos,izomer2) kao bezbojno ulje.

Izomer 1(R)-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)piri-midin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLCtR- 8,1 min u 15 min hromatografiji (Postupak: OD-3_5_5 40_2.5ML).LC-MSm/z 469.0 [M + H]<+>.<1>H NMR (CDCI3400MHz): 5 8.63 (s. 1H), 7.94 (s, 1H), 7.70 (d,J = 8.4Hz, 1H),7.63 (d,J1= 8.4 Hz,J2 =1.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.89 (d,J=8.8 Hz, 1H), 5.19-5.14 (m, 1H), 4.71 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.86-3.82 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 1H), 3.86-3.77 (m, 1H). 3.07 (s. 3H), 2.34-2.25 (m, 1H), 1.82-1.78 (m, 1H),1.18 (d, J = 7.2Hz. 3H). 1.04 (d,J -7, 2 Hz, 3H).

Izomer 2:(S)-(2-(1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazinoi1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)piri-midin-5-il)metanol.Analitička hiralna HPLC:tR= 11,33 min u 15 min hromatografiji (Postupak: optička gustina (OD)- 3_5_5_40_2.5ML).LC-MSm/z 469.1 [M + H]<+>.<1>HNMR (CDCI3 400MHz): 5 8.63 (s,1H), 7.94 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.4Hz, 1H), 7.63 (d, Jf = 8.4Hz, J2 =1.6 Hz, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.89(d, J =8.8 Hz, 1H), 5.19-5.14 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.86-3.82 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 1H), 3.86-3.77 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 1H), 1.82-1.78 (m, 1H), 1.18 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.04 (d,J =7.2 Hz, 3H).

Primer 26

(6)-1-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil) pirimidin-5-il)etanon

[0285]

[0286]Intermedijar 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidro-pirazino[1,2-a]indol je pripremljen poštujući postupak analogan onom koji je opisan za Pripremu 4. Mešavina jedinjenja 8-(((tert-butildifeniisilil)oksi)metil)-1-i2opropit-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidropirazinop ,2-a]indol (0,22 mmol),1-(2-hloro-4-(trif]uorometil)pirimidin-5-il)etanon (100 mg, 0,44 mmol) i DIEA (115 mL, 0,66 mmol) u /-PrOH / CH2CI2(2 mL / 1 mL) je mešan na 60°C tokom 15 sati. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom u koloni na silicijumskom gelu eluacijom sa EtOAc/heksanima (1/1) da se dobije racemijski 1-(2-(8-(hidroksimetiI)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)etanon.LC-MSm/z 510 [M+H]+.<1>H NMR(400 MHz, CD3OD): 58 97 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.01 - 5.90 (m, 1H), 5.25 - 5.15 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.52 - 4.47 (m, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 1H), 4.00-3.93 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.41 -2.32 (m, 1H),1.18 (d, J = 6. 8 Hz, 3H),1.03 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 27

(R)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonii)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorome-til)pirimidin-5-il)propan-2-ol i (S)-2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-đihidropirazino[1,2- a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol

[0287]

[0288]To a solution of 1-(2-(8-(hydroxymethy[)-1-isopropyl-7-(methylsulfonyl)-3,4-đihydropyrazino[1,2-a]indol- 2(1H)-yl)-4-(trifluoromethyl)pyrimidin-5-yl)ethanone (132 mg, 0.26 mmol) in CH2CI2(5 mL) was added pyridine (1 mL) and AcCI (130 mL, 1.3 mmol). Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 sati. Mešavina je brzo ohlađena vodom (5 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, i osušeni iznad anhidrovane Na2S04. Mešavina je filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćena hromatografija u koloni na silicijumskom gelu eluiranjem sa heksanima/EtOAc (1/1) da se dobije (2-(5-acetil-4-(trifluorome- til)pirimidin-2-il)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indol-8-il)metil acetat.LC-MSm/z 553 [M+Hj<+>.

[0289]U rastvor (R)-(2-(5-acetil-4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-1 -izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indol-8-il)metil acetat (37 mg, 67 mmol) u suvom THF (2 mL) je dodat LaCI3-2 LiCI THF rastvor (0,12 mL, 70 mmol). Mešavina dobijena kao rezultat je mešana tokom 20 min na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina je ohlađena do 0 °C, MeMgCI u THF rastvoru (3,0 M, 0,15 mL) je dodat lagano i reakciona mešavina se meša na istoj temperaturi tokom 0,5 sati. Zas. vod. NH4CI

(1 mL) i voda (2 mL) su dodati. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (4 x 10 mL). Kombinovane organske faze su osušene (Na2S04) i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen silicijumskom hromatografijom i SFC separacijom da se dobiju izomeri 2-(2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-{trifluorometil)pirimidin-5-il)propan-2-ol.

Izomer 1 Analitička hiralna HPLCtR= 12.31 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_5_5_40_2,35 ML).

LC-MSm/z 527 [M+HJ<+>.<1>HNMR(400 MHz, CD3OD): 5 8.83 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 6.50 (s, 1H), 5.87 (d,J= 8.4 Hz, 1H), 5.10 (m, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.44 - 4.40 (m, 1H), 4.09 - 4.02 (m, 1H), 3.91 - 3.84 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 2.36-2.29 (m, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.16 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.02 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Izomer 2 Analitička hiralna HPLCtR= 8,65 min za 15 min hromatografiju (Postupak: OD-H_5_5

40_2.35ML).LC- MSm/z 527 [M+H]<+>. "<>>HNMR(400 MHz, CD3OD): 5 8.83 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.77 (S,1H),6.50 (S, 1 H), 5.87 (d,J =8.4 Hz, IH), 5.10 (m, IH), 5.06 (s, 2H), 4.44 - 4.40 (m, IH), 4.09 - 4.02 (m, IH), 3.91- 3.84 (m, IH), 3.26 (S, 3H), 2.3b - 2.29 (m, IH), 1.59 (s, 6H), 1.16 (d,J =6.8 Hz, 3H),3 1.02{ Ć, J =6.8 Hz, 3H).

Primer 28

(6)-Etil 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorome- til)pirimidin-5-karboksilat

10290]

[0291]Intermedijar 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)metil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidro-pirazino[1,2-a]indol je pripremljen prema postupku analognom onom koji je opisan za Preparat 4, Mešavina jedinjenja 8-(((tert-butildifenilsilil)oksi)meiil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidropirazino[1,2-a]indol (0,19 mmol), etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat (97 mg, 0,38 mmol) i DIEA (100 mL, 0,57 mmol) u/-PrOH / CH2CI2(1 mL / 0.5 mL)je mešan na 50°C tokom 8 sati. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom u koloni na silicijumskom gelu eluacijom sa EtOAc/heksanima (1/1) da se dobije racemijski etil 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat.LC-MSm/z 563 [M+Na]<+>.<1>HNMR(400 MHz, CD3OD): 5 9.31 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.80 (S, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.02 -5.92 (m, 1H), 5.23-5.17 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.52-4.47 (m, 1H), 4.34 (q,J=7.2 Hz, 2H), 4.19 - 4.06 (m, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 1.36 (t,J =7.2 Hz, 3H),1.18 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.03 (d. J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 29

(R)-2-(8-(hidroksimetil}-1-izopropil-7-(metilsu}foni))-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)pirirnidin-5-karboksamid i (S)-2-(8-(hidroksimetil)-1-!zopropil-7-(metilsuifoniI)-3.4-dihidropirazino[1,2- ajindol-2(1 H)-il)-4-(trifluorometil)<p>irimtdin-5-karboksamiđ

[0292]

[0293]U rastvor etil 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(rnetilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluororrietil)pirirriidin-5-karboksilata (30 mg, 55 mmol) u THF (1 mL) je dodat 1 N NaOH vodeni rastvor (1 mL). Mešavina dobijena kao rezultat je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona mešavina je acidifikovana sa 1 N HCI rastvorom (1,5 mL). Mešavina je ekstrahovana sa CH2CI2(4x5 mL). Kombinovani organski rastvor je opran sa slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovane Na2S04, filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom da se dobije 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-ajindol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina. Korišćeno je direktno bez daljeg prečišćavanja.

[0294]U mešani rastvor 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihtdropirazino[1,2-a]indol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilne kiseline (55 mmol) u anhidrovanom DMF (1 mL) je dodat HATU (42 mg, 0,11 mmol). NH4CI (30 mg, 0,55 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (100 uL, 0,55 mmol). Ova mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 sati. Razblažena je sa CH2CI2(10 mL) i oprana sa H2O. Organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2CI2 (3x10 mL). Kombinovani organski rastvor je opran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2S04, komplet i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen silicijumskom hromatografijom i SFC separacijom da se dobiju izomeri 2-(8-(hidroksimetil)-1-izopropil-7-(metilsutfonil)-3,4-dihidropirazino[1,2-ajindol-2(1H)-il)-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid.

Izomer1: Analitičkahiralna HPLC: tR= 2,92 min za 8 min hromatografiju (PostupakPostupak: ASH_S_3_40_3ML).LC-MSm/z 494 [M+H-18]<+>, 512 [M+H]<+>. 1hNMR(400 MHz, CD3OD): 88.68 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6. 00 - 5.87 (m, 1H), 5.20-5.08 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.50 - 4.46 (m, 1H), 4.14 - 4.08 (m, 1H), 3.98 - 3.90 (m,1H), 3.27 (s, 3H), 2.39 - 2.32 (m, 1H), 1.29 (s, 2H), 1.18 (d,J =6.8 Hz, 3H). 1.04 (d,J =6.8 Hz, 3H).

Izomer 2: Analitička hiralna HPLC:zomer 2Analiti.04 (d,-2,32(mtR= 4.91 min za 8 min hromatografiju (Postupak: ASH_S_3_40_3ML).LC-MSm/z 494 (M+H-18]+ 512 [M+H]+<1>HNMR(400 MHz, CD3OD): 8 8.68 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6. 00 - 5.87 (m, 1H), 5.20-5.08 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.50 - 4.46 (m, 1H), 4.14 - 4.08 (m. IH), 3.98 - 3.90 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.39 - 2.32 (m, 1H), 1.29 (s, 2H), 1.18 <d,J =6.8 Hz, 3H), 1.04 (d,J= 6.8 Hz, 3H).

Primer 30

(R)-metil 2-(8-(hidrokstmetil)-1-izopropil-7-(metilsulfonil)-3,4-dihidrobenzo[4,5]imidazo[1,2-a]pirazin-2(1H)-il)- 4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat

[0295]

[0296]Jedinjenja iz naslova su pripremljena prema postupku analognom opisanom u Primeru 12 upotrebom metil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata umesto etil 2-hloro-4-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksi!ata kao reagensa.LC-MSm/z 528 [M+H]<+>.<1>HNMR(400 MHz, CD3OD):6 9.04 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.12-6.06 (m, 1H), 5.46-5.34 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.54 (dd, Ji = 12.4 Hz. J2= 3.2 Hz. 1H), 4.24 (td, J"i = 12.0 Hz,J2= 5.2 Hz, 1H), 3.95 (dddd,J-\= 14.4 Hz, J2= 12.0 Hz, J3= 4.4 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 1.29 (d,J =6.8 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Primer 31

LXR ot/p vezivanje radioliganda, ogled

[0297]Jedinjenja prema ovom pronalasku su procenjena u ogledu sa konkurentnim vezivanjem gde su različite koncentracije jedinjenja inkubirana sa LXR domenom za vezivanje liganda (LBD) u prisustvu radio-obeleženog LXR liganda [<3>H]TO901317. Količina LXR-LBD koja je usložnjena sa [<3>H]T0901317 je izmerena ispitivanjem scintilacionog merenja (SPA) korišćenjem ne specifičnog vezivanja LXR-LBD na polilizin obložen itrijumovim silicijumskim perlicama. Delimično prečišćen LXRaili 0 LBD protein (15-45 nM} je inkubiran na sobnoj temperaturi tokom 30 min sa 15 nM [<3>H]TO901317 (25-40 Ci/mmol) i različite koncentracije koncentracije jedinjenja koja se ispituju u 80 pL fosfatnom puferskom puferisanom slanom rastvoru (PBS) koji je sadržao 2,5% DMSO. 1% glicerol, 2 mM EDTA, 2 mM CHAPS i 5 mM DTT u ploče sa 96 pregrada. Poiiltzin SPA perlice (50 ug) su dodate u svaku pregradu i ukupna zapremina je podešena na 120 pL. Ploče su mućkane energično na orbitalnom mešaču tokom 20 min i zatim su ostavljene da stoje tokom još 10 minuta na sobnoj temperaturi pre kratkog centrifugiranja na 2.000 ob./min tokom 1 min. SPA signal je izmeren na MicroBeta<®>tečnom čitaču scintilacije (Perkin Elmer, VValtham, MA), i izračunavanje IC50 vrednosti na osnovu ukupnog vezivanja (DMSO kontrole) i nespecifično vezivanje (5 uM neoznačenih T0901317) kontrola. K/vrednosti su izračunate u skladu sa jednačinom 1, gde [RL] je finalna koncentracija [<3>H]TO901317 u ovom ispitivanju, i Ko* vrednosti 20 nM i 10 nM od TO901317 za LBDs LXRa i LXRB, respektivno, su određene direktnom titracijom radioliganda sa ovim proteinima.

Primer 32

LXR ispitivanje reporter gena transkripcione luciferaze

[0298]lspitivanje transkripcionog reporter gena lucieraze LXR meri sposobnost LXR liganda da promovišu transkripcionu transkripciona aktivacija preko jetrenog X receptora (LXR) domena za vezivanje liganda (LBD). HEK293 ćelije su porasle u DMEM podlozi koja sadrži 10% FBS {Gibco<®>, #11995-065) i 1xPenStrep (Gibco<®>, #15140) na 37°C u 5% CO2atmosferi. 90% konfluentne ćelije iz 150 mm posude su zasejane u šest 100 mm posuda. Ćelije su šaržno transfektovane plazmidom ekspresije koji sadrži Gal4 DNK vezujući domen spojen na bilo LBD LXRa ili LXRp i plazmid reporter luciferaze pG5-Luc (Promega, Madison, Wl), koji ima Gal4 pojačane elemente odgovora gena luciferaze svitaca (luc+). Transfekcija je izvedena sa Lipofectamine™ 2000 (Gibco<®>) u skladu sa protokolom koji je predložio proizvođač. Pet sati posle transfekcije, 15 mL 10% drvenim ugijem tretiranog FBS (Hvclone, #SH30070.03) u DMEM je dodato u transfektovane posude bez uklanjanja transfekcione podloge, i zatim su inkubirane ćelije na 37°C tokom noći. Sledećeg dana, ove ćelije iz transfektovane posude su tripsinizovane, oprane sa PBS, vraćene u suspenziju u 10% DMEM tretiranog drvenim ugijem tretiranih DMEM podloga i raspoređeno na ploče sa 96 pregrada sa 60.000 ćelija/100 pL po pregradi. Ćelije su inkubirane na 37°C tokom -4 sata pre dodavanja 100 \ iL ispitnog jedinenja ili kontrolnog liganda u različitim koncentracijama (fnalna DMSO koncentracija na 0,2%). Posle inkubacije ćelija tokom 16 h sa supstancama, podloga kulture je odbačena i Bright-Glo™ reagens luciferaze (Promega, Cat. #E2610) je dodata lizi i ćelijama i pokrenuta je reakcija luciferaze. Luminescencija, kao mera aktivnosti luciferaze, je detektovana na čitaču ploče (Victor2, PE-VVallac). Transkripciona aktivacija u prisustvu ispitivane supstance je izražena ko preokret-promena u luminiscenciji u poređenju sa ćelijama inkubiranim u odsustvu ove supstance. EC50 vrednosti su izračunate korišćenjem XLfit™ program (IDBS, Guilford, UK).

Primer 33

[0299] Jedinjenja prema ovom pronalasku su testirana kako je opisano u Primerima 31 i 32. Biološki podaci su predsavljeni u tabeli dole.

Claims (18)

1. Jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom:: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde X je N ili CRC, R1 je alkil ili-NRaRb; R<2>je H: halogen; -CN; -NRC(0)R; -C(0)OR; -C(0)NRaRb; monociklik heteroaromatik npcinno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, - CN, -NRC(0)R, -C(0)OR, -C(0)NR<a>R<b>i halogena; monocikličnog nearomatičnog heterocikla opciono supstituisanog sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, halogen, -CN i =0; ili alkil opciono supstituisan jednom ili više grupa izabranih iz halogena, hidroksija, alkoksija, -NR<a>R<b>, -NRC(0)R,-NRC(0)0<alkll), -NRC(0)N(R)2, -C(0)OR, tiol, alkiltiol, nitro, -CN, =0, -OC(0)H, -OC(0)(alkil), -OC(0)0(alkil), -0C(0)N(R)2i -C(0)NR<a>R<b>; R<3>je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil, monociklični nearomatični heterocikl, monociklični heteroaromatik ili fenil, pri čemu je fenil, monociklični nearomatični heterocikl i monociklična heteroaromatična grupa predstavljena pomoću R<3>su opciono supstituisane jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, haloalkila, alkoksi, haloalkoksi, nitro i -CN; R<4>' R<5>nezavisno su halogen, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR, -OC(0)0(alkil), - C(O)OChaloalkil), -OC(0)R, -C(0)N(R)2, -0C(0)N(R)2, -NRC( 0)R, -NRC(OJO(alkil), -S(0)R, - SO2R, -S02N(R)2, -NRS(0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil, monociklični nearomatični heterocikl, monociklični heteroaromatik ili alkil, pri Čemu alkil, monociklični nearomatični heterocikl i monociklični heteroaromatik grupa predstavljeni pomoću R<4>ili R5 se opciono supstituišu sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R)2, =0, -C(0)R, -C(O)0R, -C(0)0(haloa!kil), -OC(0)R, -OC(0)0(alkil), -C(0)N(R )2, -0C(0)N(R)2, - NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, -NRS (0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2i - NRS02N(R)2; R<6>je H, halogen, -CN, -OR, -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR. -0C(0)0(alkil), -C(0)O(haloalkil), - OC(0)R, -C(0}N(R)2, -0C(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC{0)0( alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, - NRS(0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2. -NRSO2N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil ili alkil, pri čemu alkil grupa predstavljena pomoću R^ je opciono supstituisana sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R)2, =0, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -0C(0)O(alkil), -C(0)N(R)2. -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0{alkil), -S(0)R, -SO2R, -S02N(R)2, -NRS( 0)R, - NRSO2R, -NRC(0)N(R)2 i -NRS02N(R)2; ili R<5>i R<6>, uzeti zajedno sa atomima ugljenika na koje se oni vezuju, formiraju monociklični nearomatični heterocikl opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, hidroksialkil, alkoksi alkil, haloalkil i =0; i svaki R nezavisno je H ili alkil; R<a>i R<b>se nezavisno H, alkil ili R<a>i R<b>moguće je uzeti zajedno sa azotom na koji se oni spoje da formiraju monociklični nearomatični heterocikl; i Rc je H, alkil, ili halogen

2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je: R<3>je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil ili fenil, pri čemu fenil grupa predstavljena pomoću R<3>je opciono supstituisana sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena, haloalkila, alkoksi, haloalkoksi, azot i -CN; R<4><i>R5 nezavisno su halogen, -CN. -OR, -SR, -N(R)2, -C(0)R, -C(0)OR, -OC(0)0(alkil), - C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -C(0)N(R)2, -0C(O)N(R)2, -NRC( 0)R, -NRC(0)0(alkil), -S(0)R, - S02R, -S02N(R)2, -NRS(OJR, -NRSO2R, -NRC( 0)N(R)2, -NRS02N(R)2, haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil ili alkil, pri čemu je alkil predstavljen pomoćuR4 iljR5 opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R>2, =0, -C(0)R. -C(0)0R, -C(0)0(haloalkil), - OC(0)R, -OC(0)0(alkil), -C(0)N(R )2, -0C(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0}0(alkil). -S(0)R. -SO2R, - S02N(R)2,-NRS (0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2i -NRS02N(R)2; R<6>J<e>H, halogen. -CN, -OR, -SR, -N(R)2. -C(0)R, -C(0)OR, -0C(0)0(alkil), -C(0)0(haloalkil), - OC(0)R, -C(0)N(R)2, -0C(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0 (alkil), -S(0)R, -S02R. -S02N(R)2, - NRS(0)R, -NRSO2R, -NRC(0)N(R)2, -NRSO2N(R)2. haloalkil, haloalkoksi, cikloalkoksi, cikloalkil ili alkil, pri čemu alkil grupa predstavljena pomoću R^ se opciono supstituiše sa jednom ili više grupa izabranih iz -CN, -OR, -SR, -N(R)2, =0, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)0(haloalkil), -OC(0)R, -OC(0)0(alkil), -C(0)N{R)2, -OC(0)N(R)2, -NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil). -S(0)R. -S02R. -S02N(R)2, -NRS( 0)R, - NRSO2R, -NRC(0)N(R)2j -NRS02N(R)2.

3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde je jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

4.Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde je jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

5. Jedinjenje iz bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu: R1 je metil ili -NH2 ; R2 je H ili metil, pri čemu metil grupa predstavljena pomoću R^ se opciono supstituiše sa jednom ili više grupa izabranih iz halogena. hidroksi, alkoksi, -NR<a>R<b>,-NRC(0)R, -NRC(0)0(alkil), - NRC(0)N(R)2, -C(O)0R, tiol, alkiltiol, nitro, -CN, =0,-OC(0)H, -OC(0)(alkil), -OC(0)0(alkil), - C(0)NRaRD i -OC(0)N(R)2; R3 je metil, etil, propil, izopropil, ferf-butil, sek-butil, /zo-butil, -CH2CF3, -CH(CH2F)2, -CH(CHF2)2. - CH(CF3)2, -CF(CH3)2, -CF3, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, -C(OH)(CH3)2, - CH(OH)(CH3), ili fenil, pri čemu fenil grupa predstavljena pomoću R<3>se opciono supstituiše sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, halogen. haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, nitro i -CN; i R<c>, gde je prisutan, je H.

6. Jedinjenje iz bilo kod od prethodnih patentnih zahteva, gde: R<1>je metil; R2je -CH2OH; R<3>je izopropil; 1 R<4>' R<5>nezavisno su halogen, hidroksi, alkil, cikloalkil, cikloalkoksi, alkoksi, haloalkoksi, haloalkil, - N(R)2, -C(0)OH, -C(0)0(alkil), -C(0)0(haloalkil), -C(0)(alkil), -C(O) N(R)2, -NRC(0)R, - S02N(R)2.-OC(O)N(R)2, -CN, hidroksialkil ili dihidroksialkil.

7. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu R<4>i R^ nezavisno su metil, etil, hidroksi, CF3, izopropil, ciklopropil, -CH2OH, -CH(OH)(CH2)(OH), -C(OH){CH3)2, -CH(OH)(CH3), -CH(OH)(CH2){CH3), - CH(OH)(CH2)2(CH3), -C(0)NH2, -C(0)N(CH3)2, -C(0)OH, -C(0)NH(CH3), -C(0)CH3, -C (0)CH2CH3, -C(0)0(CH2)(CH3), -C(0)0(tert-butil), -C(0)0(C)(CH3)2(CF3), -NHC(0)CH3,-OCHF2, -OCF3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2iti -OCH3.

8. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu R4 jeste alkil, haloalkil, cikloalkil, alkoksi, ili haloalkoksi

9. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu R<4>jeste metil, halogenisani metil, ciklopropil, -OCHF2ili -OCH3,

10. Jedinjenje iz bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, gde R<4>jesta CF3.

11. Jedinjenje iz bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu R? jeste -C(OH)(CH3)2-

12. Jedinjenje iz patentnug zahteva 1, pri čemu je jedinjenje predstavljeno strukturnom formulom izabranom iz ili njegove farmaceutski prihvatljive soli

13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

14. Farmaceutska supstanca koja obuhvata farmaceutski nosač ili razblaživač i jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13.

15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 -13 za upotrebu u lečenju ispitanika sa bolešću ili poremećajem koji se leči pojačavanjem aktivnosti jetrenog X receptora (LXR).

16. Upotreba iz patentnog zahteva 15, pri čemu je bolest ili poremećaj hiperlipidemija, hiperholesterolemija, hiperlipoproteinemija, hipertrigliceridemija, lipodistrofija, steatoza jetre (bolest masne jetre), nealkoholni steatohepatitis (NASH). nealkoholna bolest masne jetre (NAFLD), hiperglicemija, otpornost na insulin, dijabetes melitus, dislipidemija, ateroskleroza, bolest kamena u žuči, akne vulgaris, dermatitis, psorijaza, kontaktni dermatitis, atopični dermatitis, ekcem, rane na koži, starenje kože, starenje usled izloženosti zracima, stvaranje bora, dijabetes, Nieman-Pikova bolest tipa C, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, upala, ksantom, gojaznost, metabolički sindrom, X sindrom, moždani udar, periferna bolest začepljenja, gubitak memorije, dijabetesne neuropatije, proteinurije, glomerulopatije, dijabetesna nefropatija, hipertenzivna nefropatija IGA nefropatija, fokalna segmentalna glomeruloskleroza, hiperfosfatemija, kardiovaskularne komplikacije hiperfosfatemije, kancer ili multipla skelroza.

17. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 16 pri čemu je bolest ili poremećaj ateroskleroza, Alchajmerova bolest, kardiovaskularna bolest, kardiovaskularne komplikacije hiperfosfatemije, ili dermatitisa.

18. Jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom: ili njegova so, pri čemu: X je N iii CRC. R10je alkil ili -NRaRb; R<20>je H; halogen; -CN; -NRC(0)R: -C(0)OR; -C(0)NR<a>R<b>; monociklični heteroaromatik opciono supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih iz alkila, -CN, -NRC(0)R, -C(O)0R, -C(0)NR<a>R<b>i halogena; monocikličnog nearomatičnog heterocikta opciono supstituisanog jednom ili više grupa izabranih iz alkila, halogena. -CN i =0; ili alkil opciono supstituisan jednom ili više grupa izabranih iz halogena, hidroksija. alkoksija. -NRaRD, -NRC(0)R,-NRC(0)0(alki), -NRC(0)N(R)2, -C(0)OR, tiol, alkitiol, nitro, -CN, =0, -OC(0)H, -OC(0)(alkil), -OC(0)0(alkil), -0C(0)N(R)2, -C(0)NR<a>R<b>, i-0(zaštitna grupa); R<30>je alkil, haloalkil, hidroksialkil, alkoksialkil, cikloalkil ili fenil, pri čemu fenil grupa predstavljena pomoću R<30>je opciono supstituisana sa jednom ili više grupa izabranih iz alkil, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, nitro i -CN; svaki R nezavisno je H ili aikil; R<a>i R<b>su nezavisno H, alkil ili R<a>i Rb može da se uzme zajedno sa azotom na koji se oni spoje da formiraju monociklični nearomatični heterocikl; i R<c>je H, aikil, ili halogen.