RS56313B1 - Derivati pirolo[2,3-d]pirimidina kao agonisti cb2 receptora - Google Patents

Description

OPIS

Ovaj pronalazak se odnosi na organska jedinjenja korisna za terapiju i/ili profilaksu kod sisara, a posebno na jedinjenja koja su preferencijalni agonisti kanabinoidnog receptora 2.

Pronalazak se odnosi naročito na jedinjenja formule (I)

naznačeno time što

A je CH2ili je odsutno;

R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju supstituisani pirolidinil ili 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptil, naznačeno time što je supstituisani pirolidinil, pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od halogena, hidroksila i alkilkarboniloksi; i R<3>je halofenil, alkilsulfonilfenil, haloalkilfenil, halopiridinil, alkiloksadiazolil, alkiltriazolil, alkiltetrazolil, oksolanil, cikloalkiltetrazolil ili haloalkil-1H-pirazolil;

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili estar.

Jedinjenje formule (I) je naročito korisno za lečenje ili profilaksu npr. bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemije-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa, pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa.

Jedinjenje formule (I) je posebno korisno u lečenju ili profilaksi dijabetičke retinopatije, okluzije retinalne vene ili uveitisa.

Kanabinoidni receptori su klasa receptora ćelijskih membrana koja pripada superfamiliji G protein spregnutih receptora. Trenutno postoje dva poznata podtipa, nazvana kanabinoidni receptor 1 (CB1) i kanabinoidni receptor 2 (CB2). CB1 receptor se uglavnom eksprimira u centralnom nervnom sistemu (tj. amigdala, mali mozak, hipokampus), a u manjoj meri u perifernom. CB2, koji je kodiran CNR2 genom, uglavnom se eksprimira periferijski, na ćelijama imunog sistema, kao što su makrofagi i T-ćelije (Ashton, J. C. i sar. Curr Neuropharmacol 2007, 5(2), 73-80; Miller, A. M. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 299-308; Centonze, D. i sar. Curr Pharm Des 2008, 14(23), 2370-42), i u gastrointestinalnom sistemu (Wright, K. L. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 263-70). CB2 receptor je takođe široko distribuiran u mozgu, gde se uglavnom nalazi na mikroglijama a ne neuronima (Cabral, G. A. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2): 240-51).

Tokom poslednje decenije sve više raste interesovanje za agoniste CB2 receptora (sada ima 30-40 patentnih prijava godišnje) usled činjenice da se za neka od ranih jedinjenja pokazalo da imaju povoljan učinak na pretkliničkim modelima za izvestan broj humanih bolesti, uključujući hronični bol (Beltramo, M. Mini Rev Med Chem 2009, 9(1), 11-25), aterosklerozu (Mach, F. i sar. J Neuroendocrinol 2008, 20 Suppl 1, 53-7), regulaciju koštane mase (Bab, I. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 182-8), neuroinflamaciju (Cabral, G. A. i sar. J Leukoc Biol 2005, 78(6), 1192-7), ishemiju/reperfuzione povrede (Pacher, P. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 252-62), sistemsku fibrozu (Akhmetshina, A. i sar. Arthritis Rheum 2009, 60(4), 1129-36; Garcia-Gonzalez, E. i sar. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6), fibrozu jetre (Julien, B. i sar. Gastroenterology 2005, 128(3), 742-55; Muñoz-Luque, J. i sar. J Pharmacol Exp Ther 2008, 324(2), 475-83).

Ishemija/reperfuziona (I/R) povreda je glavni uzrok oštećenja tkiva, i javlja se u stanjima kao što je moždani udar, infarkt miokarda, kardiopulmonalni bajpas i druge vaskularne operacije, kao i transplantacija organa, i predstavlja glavni mehanizam oštećenja krajnjeg organa, koje komplikuje tok cirkulatornog šoka različitih etiologija. Sva ova stanja odlikuju se narušavanjem normalnog dotoka krvi, što dovodi do nedovoljne oksigenacije tkiva. Reoksigenacija, npr. reperfuzija, predstavlja krajnju terapiju za ponovno uspostavljanje normalne oksigenacije tkiva. Međutim, nedostatak kiseonika i hranljivih sastojaka iz krvi stvara stanje u kojem obnova cirkulacije dovodi do daljeg oštećenja tkiva. Oštećenje reperfuzione povrede je delimično posledica inflamatornog odgovora oštećenih tkiva. Bela krvna zrnca, koja nova povratna krv nosi u to područje, oslobađaju niz inflamatornih faktora, kao što su interleukini i slobodni radikali, kao odgovor na oštećenje tkiva. Obnovljen protok krvi ponovo uvodi kiseonik u ćelije, koji oštećuje ćelijske proteine, DNK i plazma membranu.

Udaljeno ishemijsko prekondicioniranje (RIPC) predstavlja strategiju za iskorišćenje endogene zaštitne sposobnosti organizma protiv povreda nastalih usled ishemije i reperfuzije. Ono opisuje zanimljivu pojavu da prolazna nesmrtonosna ishemija i reperfuzija jednog organa ili tkiva prenosi otpornost na narednu epizodu "letalne" ishemijske reperfuzione povrede u udaljenom organu ili tkivu. Stvarni mehanizam putem kojeg prolazna ishemija i reperfuzija organa ili tkiva daje zaštitu je trenutno nepoznat, iako je predloženo nekoliko hipoteza.

Humoralna hipoteza predlaže da endogena supstanca (kao što je adenozin, bradikinin, opioidi, CGRP, endokanabinoidi, angiotenzin I ili drugi još neidentifikovani humoralni faktori) nastala u udaljenom organu ili tkivu ulazi u krvotok i aktivira odgovarajuće receptore u ciljnom tkivu, i tako angažuje različite intracelularne puteve kardioprotekcije uključene u ishemijsko prekondicioniranje.

Najnoviji podaci ukazuju da endokanabinoidi i njihovi receptori, naročito CB2, mogu da budu uključeni u prekondicioniranje i mogu da doprinose prevenciji reperfuzione povrede, snižavanjem inflamatornog odgovora (Pacher, P. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 252-62). Konkretno, novije studije koje koriste CB2 alatke agonista pokazale su efikasnost ovog koncepta za smanjenje I/R povreda u srcu (Defer, N. i sar. Faseb J 2009, 23(7), 2120-30), mozgu (Zhang, M. i sar. J Cereb Blood Flow Metab 2007, 27(7), 1387-96), jetri (Batkai, S. i sar. Faseb J 2007, 21(8), 1788-800) i bubregu (Feizi, A. i sar. Exp Toxicol Pathol 2008, 60(4-5), 405-10).

Osim toga, u poslednjih nekoliko godina, sve veći korpus literature ukazuje da CB2 receptor može biti od interesa u sub-hroničnim i hroničnim okruženjima. Pokazalo se da je specifični porast CB1 i CB2 povezan u životinjskim modelima hroničnih bolesti vezanih za fibrozu (Garcia-Gonzalez, E. i sar. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6; Yang, Y. Y. i sar. Liver Int 2009, 29(5), 678-85) sa odgovarajućom ekspresijom CB2 u miofibroblastima, ćelijama koje su odgovorne za progresiju fibroze.

U stvari, pokazalo se da aktivacija CB2 receptora od strane selektivnog CB2 agonista ima antifibrotični efekat u difuzno sistemskoj sklerozi (Garcia-Gonzalez, E. i sar. Rheumatology (Oxford) 2009, 48(9), 1050-6) i CB2 receptor je postao kritični cilj u eksperimentalnoj dermalnoj fibrozi (Akhmetshina, A. i sar. Arthritis Rheum 2009, 60(4), 1129- 36) i u patofiziologiji jetre, uključujući fibrogenezu povezanu sa hroničnim bolestima jetre (Lotersztajn, S. i sar. Gastroenterol Clin Biol 2007, 31(3), 255-8; Mallat, A. i sar. Expert Opin Ther Targets 2007, 11(3), 403-9; Lotersztajn, 8. i sar. Br J Pharmacol 2008, 153(2), 286-9).

Dodatne osnovne informacije mogu se naći u WO 2008/141239 i WO 2004/058767. Jedinjenja iz ovog pronalaska se vezuju za receptor CB2 i moduliraju ga, i imaju nižu aktivnost CB1 receptora.

U ovom opisu pojam "alkil", sam ili u kombinaciji, označava alkil grupu ravnog niza ili razgranatog niza sa 1 do 8 atoma ugljenika, konkretno alkil grupu ravnog niza ili razgranatog niza sa 1 do 6 atoma ugljenika, konkretnije alkil grupu ravnog niza ili razgranatog niza sa 1 do 4 atoma ugljenika. Primeri C1-C8alkil grupa ravnog niza ili razgranatog niza su metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, tert-butil, izomerne pentil, izomerne heksil, izomerne heptil i izomerne oktil, naročito metil, etil, propil, butil i pentil. Poseban primer alkila je metil.

Termin "cikloalkil", sam ili u kombinaciji, označava cikloalkil prsten sa 3 do 8 atoma ugljenika, a naročito cikloalkil prsten sa 3 do 6 atoma ugljenika. Primeri cikloalkila su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil. Poseban primer "cikloalkila" je ciklopropil.

Termin "alkoksi", sam ili u kombinaciji, označava grupu formule alkil-O-, gde termin "alkil" ima prethodno dato značenje, kao što je metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, nbutoksi, izobutoksi, sec-butoksi i tert-butoksi. Poseban primer za "alkoksi" je metoksi.

Termini "halogen" ili "halo", sami ili u kombinaciji, označavaju fluor, hlor, brom ili jod, a naročito fluor, hlor ili brom, konkretnije fluor i hlor. Termin "halo", u kombinaciji sa drugom grupom, označava supstituciju navedene grupe najmanje jednim halogenom, naročito supstituisane sa jednim do pet halogena, naročito jednim do četiri halogena, tj. jedan, dva tri ili četiri halogena. Naročito, "halogen" je fluor i hlor. U definicijif R<1>i R<2>, fluor je konkretni halogen.

Termini "hidroksil" i "hidroksi", sami ili u kombinaciji, označavaju -OH grupu.

Termin "karbonil", sam ili u kombinaciji, označava -C(O)- grupu.

Termin "oksi", sam ili u kombinaciji, označava -O- grupu.

Termin "amino", sam ili u kombinaciji, označava primarnu amino grupu, (-NH2), sekundarnu amino grupu (-NH-), ili tercijarnu amino grupu (-N-). Naročito, amino je -NH-.

Termin “sulfonil”, sam ili u kombinaciji, označava -S(O)2- grupu.

Termin "farmaceutski prihvatljive soli" se odnosi na one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih baza ili slobodnih kiselina, koje nisu biološki ili drugačije nepoželjne. Soli se formiraju sa neorganskim kiselinama, kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina, posebno hlorovodonična kiselina, i organskim kiselinama, kao što je sirćetna kiselina, propionska kiselina, glikolna kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, malonska kiselina, ćilibarna kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, benzojeva kiselina, cimetna kiselina, bademova kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, ptoluensulfonska kiselina, salicilna kiselina, N-acetilcistein. Pored toga, ove soli mogu biti pripremljene dodavanjem neorganske baze ili organske baze u slobodnu kiselinu. Soli izvedene iz neorganskih baza obuhvataju, ali nisu ograničene na, soli natrijuma, kalijuma, litijuma, amonijuma, kalcijuma, magnezijuma. Soli izvedene iz organskih baza obuhvataju, ali nisu ograničene na, soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, supstituisanih amina, uključujući i supstituisane amine koji se nalaze u prirodi, cikličnih amina i baznih jonoizmenjivačkih smola, kao što je izopropilamin, trimetilamin, dietilamin, trietilamin, tripropilamin, etanolamin, lizin, arginin, N-etilpiperidin, piperidin, poliaminske smole. Jedinjenje formule (I) takođe može biti prisutno u obliku cviterjona. Naročito poželjne farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) su soli hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, sumporne kiseline, fosforne kiseline i metansulfonske kiseline.

"Farmaceutski prihvatljivi estri" znači da jedinjenje opšte formule (I) može biti derivatizovano na funkcionalnim grupama, dajući derivate koji mogu in vivo da se konvertuju u matična jedinjenja. Primeri takvih jedinjenja su fiziološki prihvatljivi i metabolički labilni estarski derivati, kao što su metoksimetil estri, metiltiometil estri i pivaloiloksimetil estri. Dodatno, bilo koji fiziološki prihvatljivi ekvivalenti jedinjenja opšte formule (I), nalik na metabolički labilne estre, koji su sposobni za proizvodnju matičnog jedinjenja opšte formule (I) in vivo, su unutar obima ovog pronalaska.

Ako jedna od polaznih supstanci ili jedinjenja formule (I) sadrži jednu ili više funkcionalnih grupa koje su nestabilne ili su reaktivne pod reakcionim uslovima jednog ili više reakcionih koraka, odgovarajuće zaštitne grupe (kao što je opisano npr. u “Protective Groups in Organic Chemistry”, T. W. Greene i P. G. M. Wuts, 3. izd., 1999, Wiley, New York) mogu se uvesti pre kritičnog koraka, primenom metoda koje su dobro poznate u struci. Takve zaštitne grupe mogu biti uklonjene u kasnijoj fazi sinteze korišćenjem standardnih metoda opisanih u literaturi. Primeri zaštitnih grupa su tert-butoksikarbonil (Boc), 9-fluorenilmetil karbamat (Fmoc), 2-trimetilsililetil karbamat (Teoc), karbobenziloksi (Cbz) i p-metoksibenziloksikarbonil (Moz).

Jedinjenje formule (I) može da sadrži više asimetričnih centara, i može biti prisutno u obliku optički čistih enantiomera, smeše enantiomera, kao što su, na primer, racemati, smeše dijastereoizomera, dijastereomernih racemata ili smeše dijastereomernih racemata.

Termin "asimetrični atom ugljenika" označava atom ugljenika sa četiri različita supstituenta. Prema Kan-Ingold-Prelogovoj konvenciji, asimetrični atom ugljenika može biti konfiguracije "R" ili "S".

Pronalazak se odnosi naročito na:

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što je A, CH2;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju supstituisani pirolidinil, naznačeno time što je supstituisani pirolidinil, pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od halogena i hidroksila;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju supstituisani pirolidinil, naznačeno time što je supstituisani pirolidinil, pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od fluora i hidroksila;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju difluoropirolidinil ili hidroksipirolidinil;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju difluoropirolidinil, 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptil, hidroksipirolidinil ili metilkarboniloksipirolidinil;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što je R<3>halofenil, haloalkilfenil, alkilsulfonilfenil, halopiridinil ili alkiloksadiazolil;

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što je R<3>dihlorofenil, hlorofluorofenil, trifluorometilfenil, metilsulfonilfenil, hloropiridinil ili metiloksadiazolil; i

Jedinjenje formule (I), naznačeno time što je R<3>hlorofenil, dihlorofenil, hlorofluorofenil, metilsulfonilfenil, trifluorometilfenil, hloropiridinil, metiloksadiazolil, dimetiltriazolil, metiltetrazolil, ciklopropiltetrazolil, oksolanil ili trifluorometil-1H-pirazolil.

Pronalazak se dalje odnosi na jedinjenja formule (I) izabrana od sledećih:

2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il])metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il])metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

5-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-3-metil-1,2,4-oksadiazol;

3-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-4-metil-1,2,5-oksadiazol;

2-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-5-metil-1,3,4-oksadiazol;

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(4,5-dimetil-1,2,4]triazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(3S)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

6-[2-tert-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan;

1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

[1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat;

[1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat;

[1-[2-tert-butil-7-(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat;

1-[2-tert-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

1-[2-tert-butil-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

6-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; i

6-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan.

Pronalazak se dalje odnosi na jedinjenja formule (I) izabrana od sledećih:

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin;

2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il])metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin;

3-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-4-metil1,2,5-oksadiazol;

1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol;

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metiil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; i

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol.

Sinteza jedinjenja formule (I) može, na primer, da se izvede prema sledećim šemama. Ako nije drugačije naznačeno, A i R<1>do R<3>imaju značenje kao što je gore definisano. Dobijanje jedinjenja formule I iz predmetnog pronalaska može se izvesti putem sekvencijalne ili konvergentne sinteze. Sinteza jedinjenja iz pronalaska prikazana je na sledećoj šemi. Potrebne veštine za izvođenje reakcija i prečišćavanje dobijenih proizvoda poznate su stručnjacima za ovu oblast. Supstituenti i indeksi korišćeni u narednim opisima postupaka imaju napred navedeno značenje, osim ako nije drugačije naglašeno. Detaljnije, jedinjenja formule I mogu se proizvesti dolenavedenim postupcima, postupcima datim u primerima ili analognim postupcima. Odgovarajući reakcioni uslovi za pojedinačne reakcione korake poznati su stručnjacima za ovu oblast. Takođe, reakcione uslove opisane u literaturi koji se odnose na opisane reakcije potražite, na primer, u: Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2. izdanje, Richard C. Larock. John Wiley & Sons, New York, NY.1999). Našli smo da je pogodno da se reakcije izvode u prisustvu rastvarača ili bez njega. Ne postoje naročita ograničenja u vezi sa prirodom rastvarača koji će se koristiti, pod uslovom da nema neželjeni efekat na reakciju ili upotrebljene reagense, i da može da rastvori reagense, bar u izvesnoj meri. Opisane reakcije mogu da se odigraju u širokom opsegu temperatura, i precizna reakciona temperatura nije kritična za pronalazak. Pogodno je da se opisane reakcije izvode u temperaturnom opsegu između -78°C i refluksa. Vreme potrebno za reakciju takođe može mnogo da varira, i zavisi od mnogih faktora, a naročito od temperature reakcije i prirode reagenasa. Međutim, period od 0,5 h do nekoliko dana obično će biti dovoljan da se dobiju opisani intermedijeri i jedinjenja. Reakciona sekvenca nije ograničena na onu koja je prikazana na šemama, međutim, u zavisnosti od polaznih supstanci i njihove reaktivnosti, sekvenca reakcionih koraka može da se menja po nahođenju. Polazne supstance su ili komercijalno dostupne, ili se mogu pripremiti postupcima analognim onima koji su dole opisani, postupcima opisanim u referencama navedenim u opisu ili u primerima, ili postupcima poznatim u struci.

Šema 1

a) 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin II je komercijalno dostupan, i može na pogodan način da reaguje sa aminom (komercijalno dostupnim, ili poznatim u struci) u prisustvu ili odsustvu baze, dajući intermedijer III.

b) Intermedijer III može na pogodan način da reaguje sa elektrofilom (komercijalno dostupnim, ili poznatim u struci) u prisustvu ili odsustvu baze, dajući naslovno jedinjenje (I).

Bilo koja zaštitna grupa upotrebljena u sekvenci može da se ukloni nakon koraka a) ili b). Pronalazak se tako odnosi na postupak za dobijanje jedinjenja formule (I), koji sadrži reakciju jedinjenja formule (A)

u prisustvu X-A-R<3>, naznačen time što je X odlazeća grupa, i naznačen time što su A i R<1>do R<3>kao što je gore definisano.

U postupku iz pronalaska, pogodne odlazeće grupe su, na primer, hlor ili brom.

Postupak iz pronalaska može se sprovesti u prisustvu baze. Primeri pogodnih baza su NaH ili KOtBu.

Postupak iz pronalaska može se sprovesti, na primer, u sledećim rastvaračima: NMP (N-metil-2-pirolidon), DMF (dimetilformamid) ili THF (tetrahidrofuran).

Pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje formule (I) kada je proizvedeno prema gorenavedenom postupku.

Pronalazak se takođe odnosi naročito na:

Primenu jedinjenja formule (I) za lečenje ili profilaksu bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemije-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa, pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa;

Primenu jedinjenja formule (I) za pripremu leka za lečenje ili profilaksu bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemije-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa, pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa;

Jedinjenje formule (I) za lečenje ili profilaksu bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemijske-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa, pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa; i

Metodu za lečenje ili profilaksu bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemije-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa, pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa, pri čemu metoda sadrži davanje efikasne količine jedinjenja formule (I) pacijentu kome je to potrebno.

Pronalazak se posebno odnosi na jedinjenje formule (I) za lečenje ili profilaksu ishemije, reperfuzione povrede, fibroze jetre ili fibroze bubrega, a naročito ishemije ili reperfuzione povrede.

Pronalazak se posebno odnosi na jedinjenje formule (I) za lečenje ili profilaksu infarkta miokarda.

Pronalazak se dalje posebno odnosi na jedinjenje formule (I) za lečenje ili profilaksu starosne makularne degeneracije, dijabetične retinopatije, glaukoma, retinalne venske okluzije, retinopatije nedonoščadi, okularnog ishemijskog sindroma, geografske atrofije ili uveitisa.

Pronalazak se dalje posebno odnosi na jedinjenje formule (I) za lečenje ili profilaksu amiotrofične lateralne skleroze ili multiple skleroze.

Pronalazak je dalje usmeren na jedinjenje formule (I), kada je proizvedeno postupkom prema pronalasku.

Drugo otelotvorenje pronalaska daje farmaceutsku kompoziciju ili lek koji sadrže jedinjenje iz pronalaska i terapeutski inertan nosač, razblaživač ili ekscipijens, kao i postupak korišćenja jedinjenja prema pronalasku za pripremanje takve kompozicije i leka. U jednom primeru, jedinjenje formule (I) može se formulisati mešanjem na sobnoj temperaturi na odgovarajućem pH, i na željenom stepenu čistoće, sa fiziološki prihvatljivim nosačima, tj. nosačima koji su netoksični za primaoca u dozama i koncentracijama primenjenim u datom galenskom obliku. pH formulacije zavisi uglavnom od specifične upotrebe i koncentracije jedinjenja, ali je poželjno u opsegu od oko 3 do oko 8. U jednom primeru, jedinjenje formule (I) je formulisano u acetatnom puferu, na pH 5. U sledećem otelotvorenju, jedinjenje formule (I) je sterilno. Jedinjenje se može čuvati, na primer, kao čvrsta ili amorfna kompozicija, kao liofilizovana formulacija ili kao vodeni rastvor.

Kompozicija je formulisana, dozirana i primenjena na način usklađen sa dobrom medicinskom praksom. Faktori za razmatranje u ovom kontekstu uključuju naročit poremećaj koji se leči, naročitog sisara koji se leči, kliničko stanje pojedinačnog pacijenta, uzrok poremećaja, mesto isporuke agensa, metodu primene, raspored primene, i druge faktore poznate lekarima.

Jedinjenja iz pronalaska mogu se primeniti bilo kojim pogodnim načinom, uključujući oralni, topikalni (uključujući bukalni i sublingvalni), rektalni, vaginalni, transdermalni, parenteralni, subkutani, intraperitonealni, intrapulmonarni, intradermalni, intratekalni i epiduralni i intranazalni, i, ako se želi lokalna terapija, intralezioni. Parenteralne infuzije uključuju intramuskularnu, intravensku, intraarterijsku, intraperitonealnu ili subkutanu primenu.

Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu primeniti u bilo kom pogodnom obliku za primenu, npr. tablete, praškovi, kapsule, rastvori, disperzije, suspenzije, sirupi, sprejevi, supozitorije, gelovi, emulzije, flasteri, itd. Takve kompozicije mogu da sadrže komponente uobičajene u farmaceutskim preparatima, npr. razblaživače, nosače, pH modifikatore, zaslađivače, sredstva za zgušnjavanje, i druge aktivne agense.

Tipična formulacija se dobija mešanjem jedinjenja iz predmetnog pronalaska i nosača ili ekscipijensa. Pogodni nosači i ekscipijensi su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti, i opisali su ih detaljno npr. Ansel, Howard C, i sar, Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., i sar. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; i Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005. Formulacije takođe mogu da sadrže jedan ili više pufera, stabilizatora, surfaktanata, kvašljivaca, lubrikanasa, emulgatora, suspendujućih agenasa, konzervanasa, antioksidanasa, zamućivača, glidansa, pomoćnih sredstava za obradu, boja, zaslađivača, mirisa, aroma, razblaživača i drugih poznatih aditiva, kako bi se dobio elegantan oblik leka (tj. jedinjenja iz predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije) ili da bi pomogli u izradi farmaceutskog proizvoda (tj. leka).

Pronalazak će sada biti ilustrovan sledećim primerima koji nemaju ograničavajući karakter.

Primeri

Primer 1

2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin

a) 2-tert-butil-1,7-dihidro-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-on

U rastvor natrijum etoksida (210 ml, 563 mmol; 21% u EtOH) u apsolutnom EtOH (290 ml) dodati su etil-2-cijano-4,4-dietoksibutanoat (45 g, 281 mmol) i 2,2-dimetil-propionamidin (59 g, 256 mmol), i zagrevani uz refluks tokom 12 h. Smeša je koncentrovana, ostatak je razblažen vodom (100 ml) i zakiseljen (pH 6-7) vodenim rastvorom 2N HCl. Talog je filtriran, osušen pod vakuumom i rastvoren u EtOH (100 ml). H2SO4(10 ml) je dodata na 0°C, i smeša je zagrevana uz refluks tokom 2 h. Nakon hlađenja na 25°C, rastvor je preveden u bazni (pH~8-9) dodatkom vodenog NH3. Talog je filtriran i osušen pod vakuumom, dajući 2-tert-butil-1,7-dihidro-pirolo [2,3-d]pirimidin-4-on (18g, 47%) kao belu čvrstu supstancu koja je bez daljeg prečišćavanja upotrebljena u narednom koraku. MS (m/e): 192 (M+H).

b) 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin

Smeša 2-tert-butil-1,7-dihidro-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (2,5 g, 13 mmol) i POCl3(10 ml) zagrevana je uz refluks 3 h. Nakon hlađenja na 25°C, dodata je ledena voda (40 ml), i vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 75 ml). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (4 x 50 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (40 ml), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela (50% EtOAc/heksan), dajući, nakon uparavanja frakcija koje sadrže proizvod, naslovno jedinjenje (1,2 g, 44%) kao svetložutu čvrstu supstancu. MS (m/e): 210,4 (M+H).

c) 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin

Rastvor 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (1 g, 4,7 mmol), 3,3-difluoropirolidin hidrohlorida (1,1 g, 7,18 mmol) i DIPEA (3 ml, 14,1 mmol) u EtOH (15 ml) mešan je na 100°C u zatvorenoj epruveti 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, i ostatak je rastvoren u DCM-u (20 ml). Smeša je isprana vodom (2 x 10 ml), zasićenim rastvorom NaCl (10 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i uparena pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem smešom 20% EtOAc/heksan, dajući naslovno jedinjenje (1 g, 74%) kao beličastu čvrstu supstancu. MS (m/e): 280,8 (M+H).

d) 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin Rastvor 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (50 mg, 0,17 mmol), kalijum tert-butoksida (31 mg, 0,268 mmol) i 2-hlorobenzil bromida (55 mg, 0,268 mmol) u NMP-u (1 ml) zagrevan je na 150°C 30 min uz mikrotalasno zračenje. Smeša je ohlađena na 25°C, razblažena sa EtOAc (15 ml), isprana vodom (2 x 10 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i uparena pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom [Xterra-RP18, 10µ, 19x250 mm/acetonitril/10mM primenom amonijum acetata u vodi kao sistema rastvarača], dajući, nakon uparavanja frakcija koje sadrže proizvod, naslovno jedinjenje (30 mg, 41%) kao bezbojnu lepljivu čvrstu supstancu. MS (m/e): 405 (M+H).

Primer 2

2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 423 (M+H).

Primer 3

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 449 (M+H).

Primer 4

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 439 (M+H).

Primer 5

2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 439 (M+H).

Primer 6

2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 406 (M+H).

Primer 7

2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 406 (M+H).

Primer 8

5-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-3-metil-1,2,4-oksadiazol

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 377 (M+H).

Primer 9

3-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-4-metil-1,2,5-oksadiazol

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 377 (M+H).

Primer 10

2-[[2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-5-metil-1,3,4-oksadiazol

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 377 (M+H).

Primer 11

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(4,5-dimetil-1,2,4-triazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 390 (M+H).

Primer 12

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 377 (M+H).

Primer 13

2-tert-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il) metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 403 (M+H).

Primer 14

6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

a) 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin

Rastvor 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (1 g, 4,7 mmol), soli 2-oksa-6-aza-spiro[3.3]heptan oksalata (2 g, 7,18 mmol) i DIPEA (3 ml, 14,1 mmol) u EtOH (15 ml) mešan je na100°C u zatvorenoj epruveti 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, i ostatak je rastvoren u DCM-u (20 ml). Organski sloj je ispran vodom (2 x 10 ml) i zasićenim rastvorom NaCl (10 ml), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem smešom 20% EtOAc/heksan, dajući naslovno jedinjenje (750 mg, 57%) kao belu čvrstu supstancu. MS (m/e): 273 (M+H).

b) 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Rastvor 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (30 mg, 0,11 mmol), NaH (10 mg, 0,132 mmol) i bromometil-2-hloro-benzena (30 mg, 0,143 mmol) u DMF-u (5 ml) mešan je na 25°C tokom 12 h. Dodat je vodeni rastvor NH4Cl, i rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u vodi (10 ml) i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 25 ml). Kombinovani organski sloj je ispran zasićenim rastvorom NaCl, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom, dajući naslovno jedinjenje (14 mg, 32%) kao beličastu lepljivu čvrstu supstancu. MS (m/e): 397 (M+H).

Primer 15

6-[2-tert-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 369 (M+H).

Primer 16

6-[2-tert-butil-7-[(3S)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 343 (M+H).

Primer 17

6-[2-tert-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 343 (M+H).

Primer 18

6-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 415 (M+H).

Primer 19

6-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 441 (M+H).

Primer 20

6-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 398 (M+H).

Primer 21

6-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 430,8 (M+H).

Primer 22

6-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 369 (M+H).

Primer 23

6-[2-tert-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 369,6 (M+H).

Primer 24

1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

a) Sirćetna kiselina 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estar

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-l-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina i sirćetne kiseline pirolidin-3-il estra. MS (m/e): 303 (M+H).

b) 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

U rastvor sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (100 mg, 0,33 mmol) u suvom DMF-u (5 ml) dodat je NaH (60% u ulju; 40 mg; 0,99 mmol) na 0°C, i reakciona smeša je mešana na 25°C 1 h. Dodat je 1-bromometil-2-hloro-benzen (135,3 mg, 0,66 mmol) na 0°C, i reakciona smeša je mešana na 25°C 12 h. Reakcija u smeši je prekinuta dodatkom vodenog rastvora NH4Cl (10 ml), i smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 x 20 ml). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (10 ml), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom [Xterra-RP18, 10µ, 19x250 mm/acetonitril/10mM primenom amonijum acetata u vodi kao sistema rastvarača], dajući naslovno jedinjenje (60 mg, 46%) kao bezbojnu lepljivu čvrstu supstancu. MS (m/e): 385 (M+H).

Primer 25

1-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 403 (M+H).

Primer 26

1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 429 (M+H).

Primer 27

1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 419 (M+H).

Primer 28

1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 419 (M+H).

Primer 29

1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline l-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 386 (M+H).

Primer 30

1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 386 (M+H).

Primer 31

1-[2-tert-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 357 (M+H).

Primer 32

1-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 357 (M+H).

Primer 33

1-[2-tert-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 357 (M+H).

Primer 34

1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 357 (M+H).

Primer 35

1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il] pirolidin-3-il] acetat

U rastvor sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a) (50 mg, 0,16 mmol) u suvom DMF-u (5 ml) dodat je NaH (60% u ulju; 10 mg; 0,192 mmol) na 0°C, i reakciona smeša je mešana na 25°C 1 h. U ovaj rastvor je zatim dodat 5-hlorometil-1-metil-1H-tetrazol (28 mg, 0,20 mmol) na 0°C, i reakciona smeša je mešana na 25°C 12 h. Reakcija u smeši je prekinuta dodatkom vodenog rastvora NH4Cl (10 ml), i smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 x 10 ml). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (10 ml), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom [Xterra-RP18, 10µ, 19x250 mm/acetonitril/10mM primenom amonijum acetata u vodi kao sistema rastvarača], dajući naslovno jedinjenje (32 mg, 48%) kao beličastu čvrstu supstancu. MS (m/e): 399,2 (M+H).

Primer 36

[1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat

Analogno postupku opisanom za sintezu [1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il] acetata (primer 35), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra i 1-bromometil-2,3-dihloro-benzena. MS (m/e): 460,8 (M+H).

Primer 37

[1-[2-tert-butil-7-(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-pirolidin-3-il] acetat

Analogno postupku opisanom za sintezu [1-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il] acetata (primer 35), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra i 3-hlorometil-4-metil-furazana. MS (m/e): 399 (M+H).

Primer 38

1-[2-tert-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 383 (M+H).

Primer 39

1-[2-tert-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 331,2 (M+H).

Primer 40

1-[2-tert-butil-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline 1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 24, korak a). MS (m/e): 409,2 (M+H).

Primer 41

2-tert-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c). MS (m/e): 428,8 (M+H).

Primer 42

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Preparativnim HPLC razdvajanjem na stacionarnoj fazi reprosil Chiral NR 1-[2-tert-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 28) dobijeno je naslovno jedinjenje kao bela pena. MS (m/e): 419,1 (M+H).

Primer 43

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Preparativnim HPLC razdvajanjem na stacionarnoj fazi reprosil Chiral NR 1-[2-tert-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 25) dobijeno je naslovno jedinjenje kao bezbojna pena. MS (m/e): 403,1 (M+H).

Primer 44

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Preparativnim HPLC razdvajanjem na stacionarnoj fazi reprosil Chiral NR 1-[2-tert-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 27) dobijeno je naslovno jedinjenje kao bela pena. MS (m/e): 419,2 (M+H).

Primer 45

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Preparativnim HPLC razdvajanjem na stacionarnoj fazi reprosil Chiral NR 1-[2-tert-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 26) dobijeno je naslovno jedinjenje kao bela pena. MS (m/e): 429,2 (M+H).

Primer 46

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

a) Sirćetna kiselina (S)-1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estar

Analogno postupku opisanom za sintezu 2-tert-butil-4-(3,3-difluoro-pirolidin-1-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 1, korak c), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-hloro-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina i sirćetne kiseline pirolidin-3-il estra. MS (m/e): 303 (M+H).

b) (3S)-1-[2-tert-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline (S)-1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 46, korak a). MS (m/e): 386 (M+H).

Primer 47

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline (S)-1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 46, korak a). MS (m/e): 386 (M+H).

Primer 48

(3S)-1-[2-tert-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol

Analogno postupku opisanom za sintezu 1-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ola (primer 24), naslovno jedinjenje je dobijeno iz sirćetne kiseline (S)-1-(2-tert-butil-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-pirolidin-3-il estra (primer 46, korak a). MS (m/e): 357,2 (M+H).

Primer 49

6-[2-tert-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a). MS (m/e): 398 (M+H).

Primer 50

6-[2-tert-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan

Analogno postupku opisanom za sintezu 6-[2-tert-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptana (primer 14), naslovno jedinjenje je dobijeno iz 2-tert-butil-4-(2-oksa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-il)-7H-pirolo[2,3-d]pirimidina (primer 14, korak a).

MS (m/e): 369 (M+H).

Primer 51

Farmakološki testovi

Sledeći testovi su izvedeni u cilju određivanja aktivnosti jedinjenja formule I:

Test vezivanja radioaktivnog liganda

Afinitet jedinjenja iz pronalaska prema kanabinoidnom CB1 receptoru je određen korišćenjem preporučenih količina membranskih preparata (PerkinElmer) ćelija bubrega humanih embriona (HEK) koje eksprimiraju humane CNR1 ili CNR2 receptore u kombinaciji sa 1,5, odnosno 2,6 nM [3H]-CP-55,940 (Perkin Elmer) kao radioliganda. Vezivanje je izvršeno u puferu za vezivanje (50 mM Tris, 5 mM MgC12, 2,5 mM EDTA i 0,5% (w/V) BSA bez masnih kiselina, pH 7,4 za CB1 receptor, i 50 mM Tris, 5 mM MgCl2, 2,5 mM EGTA, i 0,1% (w/V) BSA bez masnih kiselina, pH 7,4 za CB2 receptor) u ukupnoj zapremini od 0,2 ml mešanjem u šejkeru l h na 30°C. Reakcija je dovršena brzom filtracijom kroz ploče za mikrofiltraciju prevučene 0,5% polietileniminom (UniFilter GF/B filter plate; Packard). Vezana radioaktivnost je analizirana za Ki korišćenjem nelinearne regresione analize (Activity Base, ID Business Solution, Limited), sa Kd vrednostima za [3H]CP55,940 određenim iz eksperimenata zasićenja. Jedinjenja formule (I) pokazuju odličan afinitet prema CB2 receptoru, sa afinitetima ispod 10 µM, poželjnije od 1 nM do 3 µM, a najpoželjnije od 1 nM do 100 nM.

cAMP test

CHO ćelije koje eksprimiraju humani CB1 ili CB2 receptor su zasejane 17 sati do 24 sata pre eksperimenta sa 50.000 ćelija po bazenu na crnoj ploči sa 96 bazena sa ravnim providnim dnom (Corning Costar br. 3904) u DMEM (lnvitrogen br. 31331), 1x HT suplement sa 10% fetalnog goveđeg seruma, i inkubirane su na 5% CO2 i 37°C u vlažnom inkubatoru. Medijum za uzgajanje zamenjen je Krebs Ringer bikarbonatnim puferom sa 1 mM IBMX, i inkubiran na 30°C 30 min. Jedinjenja su dodata u zapreminu za finalni test od 100µl, i inkubirana 30 min na 30 °C. Upotrebom cAMP-Nano-TRF kompleta za detekciju, test (Roche Diagnostics) je prekinut dodavanjem 50 ¡a 1 reagensa za lizu (Tris, NaCl, 1,5% Triton X100, 2,5% NP40, 10% NaN3) i 50µl rastvora za detekciju (20µM mAb Alexa700- cAMP 1:1, i 48 µM rutenijum-2-AHA-cAMP), i mešan je u šejkeru 2h na sobnoj temperaturi. Vremenski razdvojen prenos energije je izmeren uz pomoć TRF čitača (Evotec Technologies GmbH), opremljenog ND:YAG laserom kao izvorom ekscitacije. Ploča se meri dva puta sa ekscitacijom na 355 nm i pri emisiji sa kašnjenjem od 100 ns i izlazom od 100 ns, pri čemu je ukupno vreme izloženosti 10 s na 730 (širina trake 30 nm), odnosno 645 nm (širina trake 75 nm). Signal FRET se izračunava na sledeći način: FRET = T730-Alexa730-P(T645- B645) sa P = Ru730-B730/Ru645-B645, gde je T730 ispitivani bazen meren na 730 nM, T645 je ispitivani bazen meren na 645 nm, B730 i B645 su kontrolna merenja sa puferom na 730 nm, odnosno 645 nm. Sadržaj cAMP određuje se iz funkcije standardne krive u opsegu od 10µM do 0,13 nM cAMP.

EC50vrednosti su određene korišćenjem Analize zasnovane na aktivnosti (ID Business Solution, Limited). EC50vrednosti za širok spektar kanabinoidnih agonista dobijene ovim testom su u saglasnosti sa vrednostima objavljenim u naučnoj literaturi.

Jedinjenja iz pronalaska su agonisti CB2 receptora sa EC50ispod 1µM i selektivnošću u odnosu na CB1 u odgovarajućem testu od najmanje 10 puta. Konkretna jedinjenja iz pronalaska su agonisti CB2 receptora sa EC50ispod 0,05µM i selektivnošću u odnosu na CB1 u odgovarajućem testu od najmanje 500 puta.

Na primer, sledeća jedinjenja pokazala su sledeće vrednosti humanog EC50u funkcionalnom cAMP testu opisanom gore:

Primer EC50:CB2 Ec50:CB1 Primer EC50:CB2 Ec50:CB1 1 0,0101 >10 26 0,0168 >10

2 0,0265 >10 27 0,0069 >10

3 0,0116 >10 28 0,014 >10

4 0,0074 >10 29 0,0036 >10

5 0,0125 >10 30 0,0084 >10

6 0,012 >10 31 0,3157 >10

7 0,0042 >10 32 0,0189 >10

8 0,0496 >10 33 0,3498 >10

9 0,0095 >10 34 0,1344 >10

10 0,0296 >10 35 0,2775 >10

11 0,0308 >10 36 0,0853 >10

12 0,014 >10 37 0,0887 >10

13 0,023 >10 38 0,1727 >10

14 0,0153 >10 39 0,035 >10

15 0,7473 >10 40 0,0356 >10

0,0787 >10 41 0,0135 1,8447

0,0618 >10 42 0,0035 >10

0,0425 >10 43 0,0063 >10

0,0146 >10 44 0,0033 >10

0,0242 >10 45 0,0042 >10

0,0914 >10 46 0,0051 >10

0,0484 >10 47 0,0058 >10

0,4682 >10 48 0,0085 >10

0,4114 >10 49 0,0107 0,3068

0,0102 0,8953 50 0,5313 >10

Primer A

Film tablete koje sadrže sledeće sastojke mogu se proizvesti na uobičajeni način:

Aktivni sastojak je prosejan i pomešan sa mikrokristalnom celulozom, i smeša je granulisana sa rastvorom polivinilpirolidona u vodi. Granulat je zatim pomešan sa natrijum skrob glikolatom i magnezijum stearatom i komprimovan, dajući jezgra od 120, odnosno 350 mg. Jezgra su lakirana vodenim rastvorom / suspenzijom gore pomenute film obloge.

Primer B

Kapsule koje sadrže sledeće sastojke mogu se proizvesti na uobičajeni način:

Komponente se prosejavaju i mešaju, i pune u kapsule veličine 2.

Primer C

Injekcioni rastvori mogu imati sledeći sastav:

Aktivni sastojak je rastvoren u smeši polietilen glikola 400 i vode za injekcije (deo). pH je podešen na 5,0 dodavanjem sirćetne kiseline. Zapremina je podešena na 1,0 ml dodatkom preostale količine vode. Rastvor je filtriran, sipan u ampule uz odgovarajući višak i sterilisan.

Claims (13)

1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje formule (I)

   pri čemu A je CH2ili je odsutno; R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju supstituisani pirolidinil ili 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptil, pri čemu supstituisani pirolidinil je pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno odabranim od halogena, hidroksila i alkilkarboniloksi; i R<3>je halofenil, alkilsulfonilfenil, haloalkilfenil, halopiridinil, alkiloksadiazolil, alkiltriazolil, alkiltetrazolil, oksolanil, cikloalkiltetrazolil ili haloalkil-1H-pirazolil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili estar.
2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu A je CH2.
3. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili 2, pri čemu R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju supstituisani pirolidinil, pri čemu supstituisani pirolidinil je pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno odabranim od halogena i hidroksila.
4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 3, pri čemu R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju supstituisani pirolidinil, pri čemu supstituisani pirolidinil je pirolidinil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno odabranim od fluora i hidroksila.
5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 4, pri čemu R<1>i R<2>, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, formiraju difluoropirolidinil ili hidroksipirolidinil.
6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 5, pri čemu R<3>halofenil, haloalkilfenil, alkilsulfonilfenil, halopiridinil ili alkiloksadiazolil.
7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 6, pri čemu R<3>je dihlorofenil, hlorofluorofenil, trifluorometilfenil, metilsulfonilfenil, hloropiridinil ili metiloksadiazolil.
8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 7 odabrano od sledećih: 2-terc-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 5-[[2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-3-metil-1,2,4-oksadiazol; 3-[[2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-4-metil-1,2,5-oksadiazol; 2-[[2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-5-metil-1,3,4-oksadiazol; 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(4,5-dimetil-1,2,4-triazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il)metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 6-[2-terc-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(3S)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 6-[2-terc-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; 1-[2-terc-butil-7-[(2-hlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; [1-[2-terc-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat; [1-[2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat; [1-[2-terc-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-il]acetat; 1-[2-terc-butil-7-[(1-ciklopropiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(3R)-oksolan-3-il]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[3-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 6-[2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan; i 6-[2-terc-butil-7-[(1-metiltetrazol-5-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan.
9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva od 1 do 8 odabrano od sledećih: 2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin; 2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il])metil]-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin; 3-[[2-terc-butil-4-(3,3-difluoropirolidin-1-il)pirolo[2,3-d]pirimidin-7-il]metil]-4-metil-1,2,5-oksadiazol; 1-[2-terc-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; 1-[2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2,3-dihlorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[[2-(trifluorometil)fenil]metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-metilsulfonilfenil)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(2-hloropiridin-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(3-hloropiridin-2-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol; i (3S)-1-[2-terc-butil-7-[(4-metil-1,2,5-oksadiazol-3-il)metil]pirolo[2,3-d]pirimidin-4-il]pirolidin-3-ol.
10. 10. Postupak za pripremu jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 9 koji obuhvata reakciju jedinjenja formule (A)

    u prisustvu X-A-R<3>, pri čemu X je odlazeća grupa, i pri čemu A i R<1>do R<3>su onakvi kao što su definisani u bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 7.
11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 9 za primenu kao terapeutski aktivna supstanca.
12. 12. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 9 i terapeutski inertan nosač.
13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 9 za primenu u lečenju ili profilaksi bola, ateroskleroze, starosne degeneracije makule, dijabetičke retinopatije, glaukoma, okluzije retinalne vene, retinopatije nedonoščadi, sindroma ishemije oka, geografske atrofije, dijabetesa melitusa, zapaljenja, inflamatorne bolesti creva, ishemije-reperfuzione povrede, akutne insuficijencije jetre, fibroze jetre, fibroze pluća, fibroze bubrega, sistemske fibroze, akutnog odbacivanja alografta, hronične nefropatije alografta, dijabetičke nefropatije, glomerulonefropatije, kardiomiopatije, srčane insuficijencije, ishemije miokarda, infarkta miokarda, sistemske skleroze, termalnih povreda, opekotina, hipertrofičnih ožiljaka, keloida, gingivitisa pireksije, ciroze ili tumora jetre, regulisanja koštane mase, amiotrofične lateralne skleroze, multiple skleroze, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada ili uveitisa.