RS57401B1 - Terapeutski aktivna jedinjenja i postupci za njihovu upotrebu - Google Patents

Terapeutski aktivna jedinjenja i postupci za njihovu upotrebu

Info

Publication number
RS57401B1
RS57401B1 RS20180756A RSP20180756A RS57401B1 RS 57401 B1 RS57401 B1 RS 57401B1 RS 20180756 A RS20180756 A RS 20180756A RS P20180756 A RSP20180756 A RS P20180756A RS 57401 B1 RS57401 B1 RS 57401B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
acetic acid
cyclohexyl
methyl
hydrochloride salt
dimethyl
Prior art date
Application number
RS20180756A
Other languages
English (en)
Inventor
Giovanni Cianchetta
Byron Delabarre
Janeta Popovici-Muller
Francesco G Salituro
Jeffrey O Saunders
Jeremy M Travins
Shunqi Yan
Tao Guo
Li Zhang
Original Assignee
Agios Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48744984&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS57401(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Agios Pharmaceuticals Inc filed Critical Agios Pharmaceuticals Inc
Publication of RS57401B1 publication Critical patent/RS57401B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D251/00—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings
    • C07D251/02—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings
    • C07D251/12—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D251/14—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrogen or carbon atoms directly attached to at least one ring carbon atom
    • C07D251/16—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrogen or carbon atoms directly attached to at least one ring carbon atom to only one ring carbon atom
    • C07D251/18—Heterocyclic compounds containing 1,3,5-triazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrogen or carbon atoms directly attached to at least one ring carbon atom to only one ring carbon atom with nitrogen atoms directly attached to the two other ring carbon atoms, e.g. guanamines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/08—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

INHIBITORI AMINOTRANSFERAZE KOJA ZAVISI OD
AMINOKISELINA RAČVASTOG LANCA I NJIHOVA
UPOTREBA U TRETMANU DIJABETSKE RETINOPATIJE
Više od 14 milona ljudi u Sjedinjenim Američkim Državama ima dijabetes. Kod svih ljudi sa dijabetesom postoji rizik od retinalnih komplikacija. Međutim, ljudi sa tipom I, tj. dijabetesom koji zavisi od insulina, su suočeni sa većim rizikom od ozbiljnog gubitka vida, nego ljudi sa tipom II, tj. dijabetesom koji ne zavisi od insulina.
Retionpatija je ne-inflamatoma bolest retine. Dijabetska retionpatija je bilo koja retinopatija koja je povezana sa bilo kojom formom dijabetes melitusa.
Početni, visok sadržaj glukoze u krvi dijabetičara izaziva porast faktora rizika u njihovim očima. Ovo stanje je pozanto kao "faza pre-dijabetske retinopatije" i ukoliko se profilaktički ne tretira može da dovede do potpune dijabetske retinopatije.
Retinopatija u izvesnoj meri će se pojaviti kod većine dijabetičara tokom njihovog života. Ona je danas vodeći uzrok slepila Amerikanaca starosti od 20 do 74, i očekuje se da će oštetiti vid približno trećine dijabetičara u Sjedinjenim Državama. Svake godine u Sjedinjenim Državama registruje se među dijabetičarima i do 40.000 novih slučajeva slepila (CDC, neobjavljeni podaci, 1993). Za dijabetičare je 25 puta verovatnije da oslepe usled retinopatije, nego obično stanovništvo.
Dijabetska retinopatija ima dve faze, neproliferativnu fazu koja se tipično prva dešava, i proliferativnu fazu. Neproliferativna faza, koja se takođe naziva "osnovna dijabetska retinopatija", se karakteriše zadebljanjem osnove mebrane, gubitkom retinalnog pericitisa, mikrovaskulamim abnormalnostima, intraretinalnim mikroaneurizmama, retinalnim hemoragijama (poznatim takođe kao hemoragije u obliku "mestimične mrlje"), retinalnim edemima, naročito dijabetskim makularnim edemom, začepljenjem kapilara koje je povezano sa retinalnom ishemijom i slabom retinalnom perfuzijom (tj. slabom razvijenošću krvnih sudova) i mekim i tvrdim eksudatima. Proliferativnu fazu, za koju se procenjuje da ugrožava 700.000 Amerikanaca (Chen et al.,J. Miss. State Med. Assoc,1995, 36(7), 201-208), karakteriše neovaskularizacija i fibrovaskulami rast (tj. ožiljci koji sadrže glijalne i fibrozne elemente) iz retine ili optičkog nerva, sa unutrašnje površine retine ili diska, ili unutar staklastog kaviteta.
Proliferativna faza može da dovede do rubeotičkog ili neovasklarnog glaukoma. Do makularnog edema može doći u bilo kojoj fazi i on, zajedno sa komplikacijama usled retinalne neovaskularizacije, predstavlja dva glavna retinalna problema koji izazivaju gubitak vida povezan sa dijabetesom.
lako su patološke faze dijabetske retinopatije dobro opisane, događajina na molekulskom nivou, koja leže u osnovi dijabetske retinopatije, slabo se razumeju. Ovo je delom usled činjenice što bolest napreduje tokom deset do trideset godina, zavisno od posmatranog slučaja.
Striktna kontrola glikemije i hipertenzije i oftalmološko testiranje dijabetičara smatraju se korisnim u prevenciji ove bolesti. Današnji tretman se sastoji u redovnim pregledima kod oftalmologa, laserskoj fotokoagulaciji i vitrektomiji.
Opasnost od makularnog edema, ili postojanje makulamog centra, tretira se fokalnom makularnom fotokoagulacijom. Male (prečnika 50 pm), slabog intenziteta, laserske opekotine se usmeravaju na površine gde dolazi do izlivanja u makuli (Murphv,Amer. Family Physician,1995, 51.(4), 785-796). Ukoliko se makulami edem zadržava, neophodan može biti ponovni tretman.
Pacijenti sa ozbiljnom do vrlo ozbiljnom neproliferativnom retinopatijom i pacijenti koji poseduju visok rizik od proliferativne retinopatije, ili koji već imaju ranu ili uznapredovalu proliferativnu retinopatiju, tretiraju se rasejanom ili panretinalnom fotokoagulacijom. Panretinalna fotokoagulacija se sastoji od 1.500-2.000 laserskih opekotina prečnika 500 uM, u srednje-perifemom ili perifernom delu retine (Murphv, 1995, v. gore).
Najbolje dokumentovan biohemijski mehanizam razvoja mikrovaskulamih komplikacija usled dijabetesa je sorbitolski put. Kod sorbitolskog puta enzim aldoza reduktaza katalizuje konverziju glukoze u sorbitol i galaktoze u galaktitol. Aldoza reduktaza ima nizak afinitet prema glukozi. Prema tome, kada su normalne koncentracije glukoze, ovaj put je neaktivan. Kod retinalnog pericita značajno je aktiviranje sorbitolskog puta, na primer, kada ne zahteva insulin za penetraciju glukoze. Slično, ćelije retinalnih kapilara izgleda da sadže značajne količine aldoza reduktaze (Ferris,Hospital Practice,1993, 79-89, 15. maj).
Zbog rasprostranjenosti dijabetske retinopatije postoji potreba za efikasnim profilaktičkim i terapeutskim tretmanom ove bolesti. U skladu sa tim, glavni predmet ovog pronalaska je davanje postupka za profilaktički i terapeutski tretman dijabetske retinopatije, uključujući tretman faze pre-dijabetske retinopatije, faze neproliferativne dijabetske retinopatije i faze proliferativne dijabetske retinopatije. Ovaj i ostali predmeti ovog pronalaska će biti jasniji iz detaljnog opisa koji se ovde daje.
Ovaj pronalazak je usmeren na postupak za profilaktički i terapeutski tretman dijabetske retinopatije, uključujući tretman faze pre-dijabetske retinopatije, faze neproliferativne dijabetske retinopatije i faze proliferativne dijabetske retinopatije. Ovaj postupak se sastoji u ordiniranju inhibitora puta aminotransferaze koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca. Poželjno je da inhibitor puta aminotransferaze koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca (BCAT) predstavlja jedinjenje
Formule I, II i/ili III
gđe su:
R9je
Rg je H; alkil; cikloalkil; supstituisani alkil koji sadrži halogen, amin, alkoksi,
cikloalkil ili hidroksi; alil; alkinil; alkanoil; alkoksialkanoil; sulfonil; fenil;
benzil; ili arilakil;
m i n su nezavisno ceo broj 1 - 3;
Ri-Rs i R10-R14su nezavisno, H, alkil ili supstituisani alkil; i
X je NR14, 0 ili S
u kojima postoji više od jednog stereoizomera, a svaki hiralni centar može nezavisno biti R ili S;
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, estar, prolek ili amid.
Ova jedinjenja mogu da imaju jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika, a svaki asimetrični centar može biti racemski (R ili S), ili hiralni (R ili S).
Poželjna jedinjenja Formule I, II ili III su ona u kojima su m i n 1; Xje NR14; R9je H; R4je metil; R4i R5su metil; R8je metil; R10je metil; R7i R8su metil; R4i R8su metil; RrR8i R10-R13su H; R9je alkil; R9je benzil; R14je alkil; R9je arilakil; R9 je cikloalkil; RrRs su H; R^Rs i R10-R11 su H; RrR2 i R7-R8 su H; ili R2 je metil.
Poželjnija jedinjenja su Formule II, u kojima je R3alkil, RrR2i R4-R11i Ru su vodonik, m i n su 1, i X je NR14; R3i R11su alkil, R1-R2i R4-R10i R14su vodonik, m i n su 1, i X je NR14; R3i Rusu alkil, R1-R2i R4-R10i R14su vodonik, m i n su 1, a R9 je alkil i X je NR14; i R1-R-11 i R14 su vodonik, m i n su 1, i X je 0.
Naročito su poželjna jedinjenja koja se biraju između: (l-alilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; (1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; {1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; {1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-alilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3,3,3-trifIuoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-alilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-3-metil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-3-metil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-etilaminometil-3-metiI-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1 -butilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1 -hidroksimetil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5P41-[(hidroksimetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dietil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; trans-(1 R,3R)(1 -aminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (1-aminometil-2-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,hidrohlorid; (1-aminometil-3,3-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (±)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sircetna kiselina, hidrohlorid; (cis/trans)-(3R)-(1 -aminometil-3-metil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-<jimetil-ciklopentil)-sircetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-benzilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-dimetilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-butilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-{1-[(benzil-metil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksii}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(acetilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-[1-(izobutilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5<p>-[3,5-dimetil-1-(fenetilamino-rnetil)-cikloheksil]-sircetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p43,5-dimetil-1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklobutilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(izopropilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 -aminometil-1 -cikloheksan-sirćetna kiselina; 1 -aminometil-1 -ciklopentan-sirćetna kiselina;
1-aminometil-1-ciklopentan-sirćetna kiselina, natrijumova so; 1-(hidroksimetil)cikloheksan-sirćetna kiselina, natrijumova so; {1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(l-etilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-{(ciklopropilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1 -[(2-hidroksi-1 -metil-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
[1-(izobutilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izopropilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-cikloheksilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so;
((1 R,3R)-3-metil-1 -propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(terc-butoksikarbonilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; [1 -(acetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina;
((3R,5S)-1-ciklobutilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(3R,5S)-3,5-dimetil-1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(2-hidroksi-1-metil-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(ciklopentilmetil-amino)-meti
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
((3R,5S)-1-cikloheksilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
((3R,5S)-1-karboksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; rra/7s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so; c/s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(l-dimetilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-butilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(benzil-metil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, natrijumova so; ((3R,5S)-1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(1-aminometil-4-etil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-propil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so;
((3R,5S)-3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
[(1 R,3R)-1 -(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(1 R,3R)-1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so; i
((1 R,3R)-3-metil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so.
Nekoliko jedinjenja koje opisuju Formule I, II i III je poznato.
Jedinjenja Formule A
gde je Rivodonik ili niži alkil radikal, a n je 4, 5 ili 6, poznata su iz United States
Patent No 4,024,175, i priključenog United States Patent No 4,087,544. Opisane upotrebe su: zaštitni efekt protiv grčeva usled tiosemikarbazida; zaštitno dejstvo protiv kardiazolskog grča; cerebralne bolesti, epilepsija, napadi gubitka svesti, hipokinezija i kranijalne traume; i poboljšanje cerebralnih funkcija. Ova jedinjenja su korisna kod gerijatrijskih pacijenata. Ovi patenti su odve uključeni kroz citat.
Jedinjenja Formule B:
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, gde je Riravna ili račvasta alkil grupa koja ima od 1 do 6 atoma ugljenika, fenil ili cikloalkil koji ima od 3 do 6 atoma
ugljenika; R2je vodonik ili metil; i R3 je vodonik ili karboksil, poznata su iz United States Patent No 6,563,175 i raznih njemu priključenih. Ovi patenti su ovde uključeni kroz citat.
Ovaj pronalazak takođe opisuje nova jedinjenja Formule IV
gde su:
R1-R4predstavljaju vodonik ili alkil;
X je NR5ili 0;
R5je vodonik ili alkil,
R6je vodonik, alkil, benzil, alkanoil, alkoksialkanoil, arilalkil, alkoksi, cikloalkil,
alil, alkilcikloalkil, alkoksi, cikloalkil, alkilcikloalkil, trisupstituisani
halogenalkil, a ukoliko je svaki od R1-R4vodonik, Re nije vodonik ili metil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar, prolek ili amid.
Kao i jedinjenja Formule I, II i III, ova jedinjenja su korisna za profilaktički i terapeutski tretman dijabetske retinopatije, uključujući tretman faze pre-dijabetske retinopatije, faze neproliferativne retinopatije i faze proliferativne retinopatije.
Poželjna jedinjenja Formule IV su ona u kojima R2i R4predstavljaju vodonik, a Rii R3alkil; R2i R4su vodonik, a Rii R3metil; R1-R4su vodonik; Rtje alkil, a R2-R4 vodonik; Ri je metil, a R2-R4 vodonik; R5 je vodonik; XjeNR6; XjeO; Re je alkil; R6je benzil; R6je acetil; R6je fenilalkil; R6je cikloalkil; R6je trifluoroalkil; R6 je alkilcikloalkil; R6 je alkoksi; i R6jealil.
Ostala poželjna jedinjenja Formule IV su ona u kojima R2i R4predstavljaju vodonik, a Rii R3metil; RrR4su vodonik; Rtje metil, a R2-R4vodonik; R5je vodonik; X je NR6; Reje alkil; R6je benzil; R6je acetil; R6je fenilalkil; R6je cikloalkil; Re je trifluoroalkil; R6 je alkilcikloalkil; R6 je alkoksi; i R6jealil.
Naročito poželjna jedinjenja se biraju između: (l-alilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; (1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; {1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; {1-[(3,3,3-trilfuoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-alilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-[3,5-dimetil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-alilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-3-metil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-3-metil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1R)3R)-3-metil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3-metil-cikloh kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1 -etilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-butilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-hidroksimetil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{1-[(hidroksimetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dietil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-benzilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-dimetilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-butilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p41-[(benzil-metil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-[1 -(acetilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-[1-(izobutilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
1a,3p,5p-[3,5-dimetil-1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{1-[(ciklobutilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
1a,3p,5p-[1-(izopropilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(4i4i4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(l-etilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1 -[(2-hidroksi-1 -metil-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
[1-(izobutilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izopropilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-cikloheksilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((1 R,3R)-3-metil-1 -propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(terc-butoksikarbonilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; [1 -(acetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina;
((3R,5S)-1-ciklobutilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(3R,5S)-3,5-dimetil-1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(2-hidroksi-1-metil-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(2,2Hjimetoksi-etilamino)-metil]-3,5Hjimetil^ikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(ciklopentilmmetil-amino)-rnetil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
{(3R,5S)-1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna
kiselina, hidrohloridna so;
((3R,5S)-1-cikloheksilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
((3R,5S)-1-karboksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; frans-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so; c/s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(l-dimet'laminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-butilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(benzil-metil-amino)-metil]- cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, natrijumova so; ((3R,5S)-1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
(1-aminometil-4-etil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-propil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
[(1 R,3R)-1 -(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so;
{(1 R,3R)-1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so; ili
((1 R,3R)-3-metil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,
hidrohloridna so.
Ovaj pronalazak je takođe farmaceutski preparat koji sadrži terapeutski efikasnu količinu jednog ili više jedinjenja Formule IV i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Jedinjenja Formule II, kao što je gabapentin, su korisna za tretiranje raznih stanja, kao što su neurodegenerativni poremećaj (US 5.084.479), depresija (US 5,025,035), anksioznost/strah (US 5,792,796), manija/bipolarni poremećaji (US 5,510,381), anti-inflamatorne bolesti (WO 98 158641), gastrointestinalno oštećenje (WO 99 108670), glaukom i bol. Zato što jedinjenja Formule II i Formule IV oba deluju na put BCAT i utiču na sintezu glutamata, koja je uključena u svaku od gorepomenutih indikacija, jedinjenja Formule IV će takođe biti korisna u tretiranju tih indikacija. Dakle, ovaj pronalazak je takođe usmeren na upotrebu jedinjenja Formule IV za tretiranje jednog ili više neurodegenerativnih poremećaja (uključujući ali se ne ograničavajući sa ALS, Parkinson-ovu bolest i Alzheimer-ovu bolest), depresiju, anksioznost/strah, maniju/bipolarne poremećaje, anti-inflamatorne bolesti, glaukom, bol ili gastrointestinalna oštećenja.
Kratak opis crteža
Slika 1. Shema pokazuje transportni put BCAT u retini. Bitan transportni put je osenčen, pokazujući kako aminokiselina račvastog lanca u gliji može da transaminuje a-ketoglutarat uz formiranje glutamata. Proizvod, BCKA difunduje kroz intersticijum (prikazan sivo) do neurona, gde se konvertuje nazad u aminokiselinu račvastog lanca transaminovanjem sa glutamatom preko BCATc. Skraćenice su: BCAA = aminokiselina račvastog lanca; GLU = glutamat; GLN = glutamin; Gln'aza = glutaminaza; pir = piruvat; PC = piruvat karboksilaza; aKG = a-ketoglutarat; BCATm = aminotransferaza mitohondrijskog račvastog lanca; BCATc = aminotransferaza citosoličnog račvastog lanca; BCKA = ketokiselina račvastog lanca; GDH = glutamat dehidrogenaza.
Slika 2. Efekat koncentracije piruvata na ugrađivanje H<14>C03u glutamat i glutamin (A), i piruvat i laktat (B), u retinamaex vivo.Polovine retina se 20 min inkubiraju na 37°C, pod standardnim uslovima, sa 25 mM H14C03. Piruvat u medijumu je bio ili 0,2 ili 5 mM. Pokazane vrednosti su srednja±SEM (n=4, p<0,05). Skraćenice: gln+glu = zbir obeleženih glutamina i glutamata; pir+lakt = zbir obeleženih piruvata i laktata.
Slika 3. Izlučivanje izoenzima BCAT u retini pacova. Ekstratkt tkiva. SDS-PAGE i imunobloting analiza su obavljene koristeći komplet za detekciju ECL. Korišćeni su peptidno antitelo pacova anti-BCATc (1:1000) i antitelo humanog anti-BCATm (1:1000) pečišćeni imunoafinitetom.
Slika 4. Uticaj gabapentina (GBP) i aminokiselina račvastog lanca na ugrađivanje H<14>CC>3u glutamat i glutamin, u retinamaex vivo.Polovine retina su 20 min inkubirane na 37°C, pod standardnim uslovima, sa 25 mM H<14>C03i 0,2 mM piruvatom. U nekim slučajevima gabapentin (1mM) je dodat u inkubacioni medijum, a u drugim GBP ( 1 mM) i tri aminokiseline račvastog lanca (0,2 mM svaka). Pokazane vrednosti su srednjatSEM za HC03ugrađenu u glutamat i glutamin, tokom 20 min (n=4,<*>p<0,001,<**>p<0,01). Skraćenice: gln+glu = zbir obeleženih glutamina i glutamata.
Slika 5. Uticaj koncentracije gabapentina (GBP) na ugradnju H<14>C03u glutamat i glutamin, u retinamaex vivo.Uslovi su slični onima na Slici 4, izuzimajući koncentraciju GBP. Pokazane vrednosti su srednja±SEM (n=6-7,
<*>p<0,05). Skraćenice: GLN+GLU = zbir glutamina i glutamata; LAKT+TCA = zbir laktata i intermedijara ciklusa TCA.
Ovaj pronalazak je zasnovan na otkriću da intraokularna injekcija glutamata izaziva gubitak ćelije gangliona, koji je povezan sa ranim fazama dijabetske retinopatije (Vorwerk et al.IOVS,1996, 37, 1618-1624) i da je inhibitor puta aminotransferaze koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca, kao što je na primer gabapentin, efikasan u inhibiranju sinteze glutamata, sprečavajući tako dijabetsku retinopatiju. Prema tome, ovaj pronalazak daje postupak za profilaktički i terapeutski tretman dijabetske retinopatije, uključujući tretman faze pre-dijabetske retinopatije, faze neproliferativne dijabetske retinopatije i faze proliferativne retinopatije. Pod "profilaktički" podrazumeva se zaštita, celokupna ili delimična protiv dijabetske retinopatije, a naročito protiv dijabetskog makulamog edema. Pod "terapeutski" podrazuimeva se ublažavanje same dijabetske retinopatije, i zaštita celokupna ili delimična protiv dijabetske retinopatije, a naročito protiv dijabetskog makulamog edema.
Ovaj postupak se sastoji u ordiniranju inhibitora puta aminotransferaze, koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca, u dovoljnoj količini da se tretira retinopatija retine profilaktički ili terapeutski. Svaki inhibitor puta aminotransferaze koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca može da se koristi u ovom postupku iz sadašnjeg pronalaska, sve dok je siguran i efikasan. Ovde se koristi termin "inhibitor aminotransferaze zavisan od amino kiseline račvastog lanca (BCAT)" da označi takva jedinjenja i namera je da obuhvati sva jedinjenja koja utiču na put aminotrasferaze koji zavisi od aminokiseline račvastog lanca, u bilo kojoj tački ili u svim tačkama tog puta.
Poželjno je da je inhibitor BCAT jedinjenje Formule I, II i/ili III, kao što su opisana gore, ili farmaceutski prihvatljiv analog inhibiranja puta BCAT, ili njego prolek, ili farmaceutski prihvatljiva so, estar ili amid bilo kog od prethodnih.
Ukoliko se drugačije je kaže, sledeće definicije važe kroz čitav ovaj opis.
"Alkil" označava ugljovodonični radikal ravnog ili račvastog lanca koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika (ukoliko se drugačije ne naglasi), a to su, na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, sek-butil, izobutil, terc-butil, n-pentil, izopentil, n-heksil i slično.
"Halogen" označava fluoro, hloro, bromo i jodo.
"Alkenil" označava ugljovodonični radikal ravnog ili račvastog lanca koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika i jednu dvogubu vezu, a to su etenil, 3-buten-1-il, 2-etenilbutil, 3-heksen-1-il, i slično.
"Alkinil" označava ugljovodonični radikal ravnog ili račvastog lanca, koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika i jednu trogubu vezu, a to su etinil, 3-butin-1-il, propinil, 2-butin-1-il, 3-pentin-1-il i slično.
"Cikloalkil" označava monocikličnu ili policikličnu ugljovodoničnu grupu, kao što je ciklopropil, cikloheptil, ciklooktil, ciklodecil, ciklobutil, adamantil, norpinanil, dekalinil, norbomil, cikloheksil i ciklopentil. Ove grupe mogu biti supstituisane sa grupama kao što su hidroksi, keto i slično. Obuhvaćeni su takođe svi prstenovi u kojima 1 do 3 heteroatoma zamenjuju atome ugljenika. Takve grupe se nazivaju "heterocikličnim", što označava cikloalkil grupu koja takođe sadrži najmanje jedan heteroatom koji se bira između O, S ili NR2, a primeri su, supstituisani ili nesupstituisani, oksipiranil, pirolidinil, piperidil, tetrahidropiran, piperazinil, acilpiperazinil, pirolidinil i morfolin.
"Alkoksi" se odnosi na alkil grupe, koje su gore pomenute, vezane preko kiseonika, a primeri su metoksi, etoksi, izopropoksi, terc-butoksi i slično. Pored toga, alkoksi se odnosi na polietre, kao što su -0-(CH2)2-0-CH3i slične.
"Alkanoil" grupe su alkil vezan preko karbonil, tj. Ci-Cs-C(O)-. To su grupe formil, acetil, propionil, butini i izobutiril.
"Acil" označava alkil ili aril (Ar) grupu vezanu preko karbonil grupe, tj. R-C(O)-. Na primer, acil je d-Cealkanoil, uključujući supstituisani alkanoil, gde alkil deo može biti supstituisan sa NR<4>R<5>ili karboksilnom ili heterocikličnom grupom. Tipične acil grupe su acetil, benzoil i slične.
Alkil, alkenil, alkoksi i alkinil grupe koje su opisane gore, opciono su supstituisane, poželjno sa 1 do 3 grupe koje se biraju između NR<4>R<5>, fenil, supstituisani fenil, tio-Ci-C6alkil, CrCealkoksi, hidroksi, karboksi, C1-C6alkoksikarbonil, halo, nitril, cikloalkil i 5- do 6-člani karbociklični prsten ili heterociklični prsten koji ima 1 do 2 heteroatoma koji se biraju između azota, supstituisanog azota, kiseonika i sumpora. "Supstituisani azot" označava azot koji nosi d-Cealkil ili (CH2)nPh, gde je n 1, 2 ili 3. Obuhvaćena je perhalo i polihalo supstitucija.
Primeri supstituisanih alkil grupa su 2-aminoetil, pentahloroetil, trifluorometil, 2-dietilaminoetil, 2-dimetilaminopropil, etoksikarbonilmetil, 3-fenilbutil, metanilsulfanilmetil, metoksimetil, 3-hidroksipentil, 2-karboksibutil, 4-hlorobutil, 3- ciklopropilpropil, pentafluoroetil, 3-morfolinopropil, piperazinilmetil, i 2-(4-metilpiperazinil)etil.
Primeri supstituisanih alkinil grupa su 2-metoksietinil, 2-etilsulfaniletinil, 4-(1-piperazinil)-3-(butinil), 3-fenil-5-heksinil, 3-dietilamino-3-butinil, 4-hloro-3-butinil, 4- ciklobutil-4-heksenil i slično.
Tipične supstituisane alkoksi grupe su aminometoksi, trifluorometoksi, 2-dietilaminoetoksi, 2-etoksikarboniletoksi, 3-hidroksipropoksi, 6-karboksiheksiloksi 1 slično.
Ostali primeri supstituisanih alkil, alkenil i alkinil grupa su dimetilaminometil, karboksimetil, 4-dimetilamino-3-buten-1-il, 5-etilmetilamino-3-pentin-1-il, 4-morfolinobutil, 4-tetrahidropiridinilbutil, 3-imidazolidin-1-ilpropil, 4-tetrahidrotiazol-3-il-butil, fenilmetil, 3-hlorofenilmetil i slično.
Nazivi "Ar" i "aril" se odnose na nesupstituisane ili supstituisane aromatične grupe. Heteroaril grupe imaju od 4 do 9 atoma u prstenu, od kojih se 1 do 4 nezavisno biraju iz grupe koju čine O, S i N. Poželjne heteroaril grupe imaju 1 do 2 heteroatoma u 5- do 6-članom aromatičnom prstenu. Mono i biciklični aromatični prstenasti sistemi su obuhvaćeni definicijom aril ili heteroaril. Tipične aril ili heteroaril grupe su fenil, 3-hlorofenil, 2,6-dibromofenil, piridil, 3-metilpiridil, benzotienil, 2,4,6-tribromofenil, 4-etilbenzotienil, furanil, 3,4-dietilfuranil, naftil, 4,7-dihloronaftil, pirol, pirazol, imidazol, tiazol i slično.
Poželjne Ar gupe su fenil i fenil supstiuisan sa 1, 2 ili 3 grupe koje se nezavisno biraju iz grupe koju čine alkil, alkoksi, tio, tioalkil, hidroksi, karbonil grupe, amino formule -NR<4>R<5>, i T(CH2)mQR<4>ili T(CH2)mC02R<4>, gde je m 1 do 6, T je O, S, NR<4>, N(0)R<4>, NRVV ili CR<4>R<5>, a Q je 0; S, NR<5>, N(0)R<5>ili NR^V, gde su R<4>i R<5>opisani gore, a R<7>je alkil ili supstituisani alkil, na primer, metil, trihloroetil, difenilmetil i slično. Alkil i alkoksi grupe mogu biti supstituisane kao što je definisano gore. Na primer, tipične grupe su karboksialkil, alkoksikarbonilalkil, hidroksialkil, hidroksialkoksi i alkoksialkil.
Simbol "-" označava vezu.
Naziv "pacijent" označava sve životinje, uključujući humana bića. Primeri pacijenata su humana bića, krave, psi, mačke, koze, ovce i svinje.
Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da postoje u nesolvatizovanim oblicima kao i u solvatizovanim oblicima, uključujući hidratisane oblike. Obično, solvatizovani oblici su hidratisani oblici i ekvivalentni su nesolvatizovanim oblicima, i namera je da budu obuhvaćeni obimom ovogo pronalaska.
Neka od jedinjenja iz ovog pronalaska poseduju jedan ili više hiralnih centara, a svaki centra može da postoji u R (D) ili S (L) konfiguraciji. Ovaj pronalazak obuhvata sve enantiomerne i epimeme oblike, kao i odgovarajuće njihove smeše.
Jedinjenja Formula I, II i III su u stanju da formiraju još i farmaceutski prihvatljive analoge koji se sastoje od soli, estara, amida i prolekova. Ovde se naziv "farmaceutski prihvatljive soli, estri, amidi i prolekovi" odnosi na one karboksilatne soli, adicione soli aminokiselina, estre, amide i prolekove jedinjenja ovog pronalaska koji su, unutar obima normalnog medicinskog prosuđivanja, podesni sa upotrebu u dodiru sa tkivom pacijenta, bez nepotrebne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i slično, srazmerno sa razumnim odnosom korist/rizik, a koji su efikasni u namenjenoj upotrebi, kao što su oblici cviterjona, gde je to moguće, jedinjenja ovog pronalaska. Naziv "soli" se odnosi na relativno netoksične neorganske i organske kisele adicione soli jedinjenja ovog pronalaska. Ove soli mogu da se dobijajuin situ,tokom finalnog izolovanja i prečišćavanja ovih jedinjenja ili odvojeno, reagovanjem prečišćenog jedinjenja u obliku njegove slobodne baze, sa podesnom organskom ili neorganskom kiselinom i izolovanjem tako formirane soli, i obuhvataju, ali se njima ne ograničavaju, kisele adicione i/ili bazne soli, solvate i N-okside jedinjenja Formule I, II i III. Ovaj pronalazak takođe daje farmaceutske formulacije koje sadrže jedinjenja Formule I, II ili III, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, razblaživačem ili dodatkom. Svi ovi oblici su unutar obima ovog pronalaska.
Farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli jedinjenja Fromule I, II i III su soli koje se izvode iz neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, azotna, fosforna, sumporna, bromovodonična, jodovodonična, fosforna i slične, kao i soli koje se izvode iz organskih kiselina, kao što su mono- i dikarboksilne kiseline, fenilsupstituisane alkanoinske kiseline, hidroksialkanoinske kiseline, alkandionske kiseline, aromatične kiseline, alifatične i aromatične sulfonske kiseline itd. Te soli obuhvataju sufat, pirosulfat, bisulfat, sulfit, bisulfit, nitrat, fosfat, monohidrogenfosfat, dihidrogenfosfat, metafosfat, pirofosfat, hlorid, bromid, jodid, acetat, propionat, kaprilat, izobutirat, oksalat, malonat, sukcinat, suberat, sebakat, fumarat, maleat, mandelat, benzoat, hlorobenzoat, metilbenzoat, dinitrobenzoat, ftalat, benzensulfonat, toluensulfonat, fenilacetat, citrat, laktat, maleat, tartarat, metansulfonat, i slično. Podrazumevaju se takođe i soli aminokiselina, kao što su arginat, glukonat, galaktouronat i slične; videti, na primer, Berge et al., "Pharmaceutical Salts",J. of Pharmaceutical Science,1977, 66, 1-19.
Kisele adicione soli baznih jedinjenja se dobijaju dovođenjem u kontakt oblika slobodne baze sa dovoljnom količinom željene kiseline da bi se dobila so na konvencionalan nači. Oblik slobodne baze se može regenerisati dovođenjem u kontakt ovog oblika soli sa bazom i izolovanjem slobodne baze na konvencionalan način. Oblici slobodne baze se donekle razlikuju od njihovih odgovarajućih soli po nekim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima, dok su inače soli ekvivalentne njihovoj odgovarajućoj slobodnoj bazi za svrhe ovog pronalaska.
Farmaceutski prihvatljive bazne adicione soli se formiraju sa metalima ili aminima, kao što su hidroksidi alkalnih i zemnoalkalnih metala, ili organski amini. Primeri metala koji se koriste kao katjoni, su natrijum, kalijum, magnezijum, kalcijum i slično. Primeri podesnih amina su N,N'-dibenziletilendiamin, hloroprokain, holin, dietanolamin, etilendiamin, N-metilglukamin i prokain; videti, na primer, Berge et al., v. gore.
Bazne adicione soli kiselih jedinjenja se dobijaju dovođenjem u kontakt oblika slobodne kiseline sa dovoljnom količinom željene baze, da bi se dobila so na konvencionalan način. Oblik slobodne kiseline se može regenerisati dovođenjem u kontakt oblika soli sa kiselinom i izolovanjem slobodne kiseline na konvencionalan način. Oblici slobodne kiseline se donekle razlikuju od njihovih odgovarajućih soli u nekim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima, ali su ove soli inače ekvivalentne njima odgovarajućim kiselinama za svrhe ovog pronalaska.
Primeri farmaceutski prihvatljivih, netoksičnih estara jedinjenja ovog pronalaska su Ci-C6alkil estri u kojima je alki grupa ravnog ili račvastog lanca. Prihvatljivi estri su takođe C5-C7cikloalkil estri, kao i arilakil estri, kao što je, ali ne ograničavajući se njime, benzil. Poželjni su Ci-C4alkil estri. Estri jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu dobiti u skladu sa konvencionalnim postupcima. Primeri farmaceutski prihvatljivih, netoksičnih amida jedinjenja ovog pronalaska su amidi koji se izvode iz amonijaka, primarnih Ci-Cealkilamina i sekundarnih Ci-Cedialkilamina, gde su alkil grupe ravnog ili račvastog lanca. U slučaju sekundarnih amina, amin takođe može biti u obliku 5- ili 6-članog heterocikla koji sadrži jedan atom azota. Poželjni su amidi koji se izvode iz amonijaka, d-C3alkil primarnih amina i Ci-C3dialkil sekundarnih amina. Amidi jedinjenja ovog pronalaska se mogu dobiti u skladu sa konvencionalnim postupcima.
Naziv "prolek" se odnosi na jedinjenja koja se brzo transformišuin vivo,dajući matično jedinjenje gornjih Formula, na primer hidrolizom u krvi. Potpuno razmatranje su dali T. Higuchi i V. Stella u "Pro-drugs as Novel Deliverv Systems", Vol. 14, u A.C.S. Symposium Series, i uBioneversible Carriers in Drug Design,urednik Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, koji su ovde priključeni kroz ove citate. Obično, prolek je lek koji je hemijski modifikovan i može na njegovom mestu delovanja biti biološki neaktivan, ali koji se može razgraditi ili modifikovati jednim ili više enzimatskih procesain vivou matični bioaktivni oblik.
Terapeutski efikasna količina jedinjenja Fromule I, II ili III, kada se ordinira pacijentu, ublažava simptom bolesti.
Inhibitor BCAT, koji je poželjno jedinjenje Formule I, II i/ili III, ili analog Formula I, II i/ili III koji inhibira put BCAT, prolek Formula I, II i/ili III koji inhibira put BCAT, ili farmaceutski prihvatljiva so bilo koga od prethodnih, može se ordinirati u skladu sa ovde pronađenim postupkom bilo kojim od podesnih načina. Podesni načini ordiniranja su sistemski, kao što je oralni ili injekcijama, površinski, intraokularno, periokulamo (npr. subTenonom), subkonjuktivalno, subretinalno, suprahoroidalno i retrobulbarno. Način na koji se ordiira inhibitor BCAT zavisi, delom od toga da li je tretiranje retinopatije profilaktičko ili terapeutsko. Način na koji se inhibitor BCAT ordinira pri terapeutskom tretmanu retinopatije zavisi, delom, od uzroka retinopatije.
Na primer, ako se uzme da je dijabetes vodeći uzrok retinopatije, inhibitor BCAT se može ordinirati profilaktički čim se otkrije faza pre-dijabetske retinopatije. Za prolfilaktički tretman retinopatije koja proizilazi iz dijabetesa, poželjno je da se inhibitor BCAT ordinira sistmski, npr. oralno ili injekcijama. Za terapeutski tretman ne-proliferativne dijabetske retinopatije inhibitor BCAT se može ordinirati sistemski, npr,. oralno ili injekcijama, ili intraokulamo. Proliferativna dijabetska retinopatija se može terapeutski tretirati ordiniranjem inhibitora BCAT, na primer intraokulamo, površinski, subkonjuktivalno ili periokulamo (npr. subTenonom). Poželjno je da se inhibitor BCAT ordinira intraokulamo, površinski, subkonjuktivalno ili periokulamo (npr. subTenonom) prilikom profilaktičkog ili terapeutskog tretmana retinopatije pre, za vreme ili posle hirurškog uklanjanja ožiljačnog tkiva iz oka koje je generisano tokom neovaskularizacije, u fazi proliferativnog dijabetesa.
Poželjno je da se inhibitor BCAT ordinira što je moguće pre nakon što je utvrđeno da je životinja, kao što je sisar, speficično, humano biće, pod rizikom retinopatije (profilaktički tretman) ili je počela da se razvija retinopatija (terapeutski tretman). Tretman će zavisiti, delom od posebnog inhibitora BCAT koji se koristi, količine inhibitora BCAT koja se ordinira, načina ordiniranja i uzroka i stepena retinopatije, ukoliko je ima, do koje je došlo.
Onaj ko je verziran u stanje tehnike podrazumeva da su na raspolaganju podesni postupci ordiniranja inhibitora BCAT, koji su od koristi u ovde pronađenom postupku. Mada se može koristi više od jednog načina za ordiniranje određenog inhibitora BCAT, određeni način može pružiti neposredniju i efikasniju reakciju nego neki drugi način. U skladu sa tim, opisani načini ordiniranja su samo za svrhu primera i ne ograničavaju na bilo koji način.
Doza koja se ordinira životinji, naročito humanom biću, u skladu sa ovim pronalaskom treba da bude dovoljna da ostvari željeni odgovor u životinji tokom razumnog vremenskog perioda. Onaj ko je verziran u stanje tehnike podrazumeva da doza zavisi od raznih faktora, uključujući jačinu određenog inhibitora BCAT koji se koristi, starost, vrstu, stanje ili stepen bolesti i telesnu težinu životinje, kao i od dela retine koji će biti napadnut ili je stvarno napadnut retinopatijom. Iznos doze biće takođe određen načinom, vrmenskim rasporedom i frekvencijom ordiniranja, kao i postojanjem, prirodom i iznosom bilo kakvih štetnih sporednih efekata koji mogu da prate ordiniranje određenog inhibitora BCAT, i željenim fiziološkim efektom. Onaj ko je verziran u stanje tehnike podrazumeva da različita stanja ili stepeni bolesti, naročito, hronična stanja ili stepeni bolesti, mogu zahtevati produžena višestruka ordiniranja.
Podesne doze i režimi doziranja se mogu odrediti konvencionalnim tehnikama pronalaženja opsega, koje su poznate onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike Obično, tretman se počinje sa manjim dozama, koje su manje od optimalnih doza jedinjenja. Nakon toga, doza se povećava u malim inkrementima, sve dok se ne postigne optimalni efekat u datim okolnostima. Ovde pronađeni postupak tipično obuhvata ordiniarnje od oko 1 mg/kg/dan do oko 100 mg/kg/dan, poželjno od oko 15 mg/kg/dan do oko 50 mg/kg/dan, ukoliko se ordinira sistemski. Intraokulamo ordiniranje tipično obuhvata ordiniranje od oko 0,1 mg ukupno do oko 5 mg ukupno, poželjno od oko 0,5 mg ukupno, do oko 1 mg ukupno. Poželjna koncentracija za površinsko ordiniranje je 100 uM.
Preparati za upotrebu u ovde pronađenom postupku poželjno je da sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač i količinu inhibitora BCAT dovoljnu za tretiranje retinopatije, proflikatički ili terapeutski. Nosač može da bude bilo koji od konvencionalno upotrebljavanih, i ograničen je samo hemijsko-fizičkim razmatranjima, kao što su rastvorljivost i nedostatak reaktivnosti sa jedinjenjem i način ordiniranja. Onaj ko je uobičajeno verziran u stanje tehnike podrazumeva da pored farmaceutskih preparata za koje sledi opis, inhibitor BCAT se može formulisati kao polimerni preparat, inkluzioni kompleksi, kao što su ciklodekstrinski inkluzioni komleksi, lipozomi, mikrosfere, mikrokapsule i slično (videti, npr. U.S. Patent No. 4,997,652, 5,185,152 i 5,718,922).
Inhibitor BCAT se može formulisati kao farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so. Primeri farmaceutski prihvatljivih kiselih adicionih soli za upotrebu u farmaceutskim preparatima, su oni koji se izvode iz minearinih kiselina, kao što su hlorovodonična, bromovodonična, fosforna, metafosfoma, azotna i sumporna kiselina, i organskih kiselina, kao što su vinska, sirćetna, limunksa, jabučna, mlečna, fumama, benzoeva, glikolna, glukonska, ćilibama i arilsulfonska kiselina, na primer, p-toluensulfonska kiselina.
Ovde opisani farmaceutski prihvatljivi dodaci, na primer, tečni nosači, adjuvanti, nosači ili razblaživači, dobro su poznati onima koji su verzirani u stanje tehnike, i javno su lako dostupni. Poželjno je da farmaceutski prihvatljiv nosač bude onaj koji je hemijski inertan prema inhibitoru BCAT i onaj koji nema štetne sporedne efekte ili toksičnost pod uslovima pod kojim se upotrebljava.
Izbor dodatka je određen delom određenim inhibitorom BCAT, kao i određenim postupkom koji se koristi za ordiniranje preparata. Prema tome, postoji širok izbor podesnih formulacija farmaceutskog preparata iz ovog pronalaska. Formulacije koje slede samo su primer, a nisu ograničenje ni u kome smislu.
Formulacije za ubrizgavanje su među onima koje su poželjne u skladu sa ovde pronađenim postupkom. Zahtevi sa efikasne farmaceutsek nosače preparata za ubrizgavanje su dobro poznati onima koji su uobičajeno verzirani u stanje tehnike (videti, "Pharmaceutsics and Pharmacv Practice", J.B. Lippincott Co, Philadelphia, Pa., urednici Banker i Chalmers, strane 238-250 (1982), i "ASHP Handbook on Injectable Drugs", Toissel, 4-to izdanje, strane 622-630 (1986)). Poželjno je da se ovi preparati za ubrizgavanje ordiniraju intramuskularno, intravenozno ili intraperitonealno.
Površinske formulacije su dobro poznate onima koji su verzirani u stanje tehnike. Te formulacije su podesne u kontekstu ovog pronalaska za nanošenje na kožu. Upotreba flastera, štitnika za ožilke (videti U.S.Pat. No. 5,185,152), oftalmoloških rastvora (videti U.S. Pat. No. 5,710,82), masti, npr. kapi za oči, takođe je unutar stanja tehnike.
Formulacije koje su podesne za oralno ordiniranje (a) tečnih rastvora, kao što je efikasna količina ovog jedinjenja rastvorena u razblaživačima, kao što su voda, slani rastvor ili sok od pomorandže; (b) kapsule, sakete, tablete, pastile i troheje, od kojih svaka sadrži predodređenu količinu aktivnog sastojka u obliku čvrste supstance ili granula; (c) prahovi; (d) suspenzije u odgovarajućoj tečnosti; i (e) podesne emulzije. Tečne formulacije mogu da sadrže razblaživače, kao što su voda i alkoholi, na primer, etanol, benzilakohol i polietilenski alkoholi, bilo sa ili bez dodavanja farmaceutski prihvatljivog surfaktanta, sredstva za suspendovanje ili sredstva za emulgovanje. Oblici kapsula mogu da budu uobičajene tvrdo- ili meko-obložene želatinske vrste, koje sadrže, na primer, surfaktante, lubrikante i inertne punioce, kao što su laktoza, saharoza, kalcijum-fosfat i škrob iz kukuruza. Oblici tableta mogu da sadrže jedan ili više između laktoze, saharoze, manitola, škroba iz kukuruza, škroba iz krompira, alginske kiseline, mikrokristalne celuloze, akacije, želatina, guar-gume, koloidnog silicijum-dioksida, natrijum-kroskarameloze, talka, magnezijum-stearata, kalcijum-stearata, cink-stearata, stearinske kiseline, i drugih dodataka, zatim sredstva za bojenje, razblaživače, sredstva za puferovanje, sredstva za dezintegraciju, sredstva za vlaženje, prezervative, sredstva za aromatizovanje i farmakološki kompatibilne dodatke. Oblici pastila mogu da sadrže aktivni sastojak u aromi, obično saharozi, akaciji ili tragantu, kao i pastile koje sadrže aktivni sastojak u inertnoj osnovi, kao što su želatin ili glicerin, ili saharoza ili akacija, emulzije, gelovi i slično, pored aktivnog sastojka, a ti dodaci su poznati u stanju tehnike.
Efikasnost oralno ordiniranog leka zavisi od efikasnosti transporta leka kroz mukozni epitel, a njegova stabilnost od entero-hepatičke cirkulacije. Lekovi koji se efikasni posle parenteralnog ordiniranja, a manje aktivni oralno, ili čije se poluvreme u plazmi smatra suviše kratkim, mogu se hemijski modifikovati u oblik proleka.
Formulacije koje su podesne za parenteralno ordiniranje su vodeni i nevodeni, izotonični sterilni rastvori za injekcije, koji mogu da sadrže antiksidante, pufere, bakteriostate i rastvorene supstance koje formulaciji daju izotoničnost sa krvlju pacijenta kome su namenjene, i vodene i nevodene sterilne suspenzije koje mogu da sadrže sredstva za suspendovanje, sredstva za rastvaranje, sredstva za zgušnjavanje, stabilizatore i prezervative. Inhibitor se može ordinirati u fiziološki prihvatljivom razblaživaču u farmaceutskom nosaču, kao što je sterilna tečnost ili smeša tečnosti, uključujući vodu, slani rastvor, vodeni rastvor dekstroze i srodne rastvore šećera, alkohol, kao što je etanol, izopropanol ili heksadecilakohol, glikole, kao što je propilenglikol ili polietilenglikol, dimetilsulfoksid, glicerinske ketale, kao što je 2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-metanol, etre, ako što je poli(etilenglikol) 400, ulje, masnu kiselinu, ili estar masne kiseline ili glicerid, ili acetilovani glicerid masne kiseline, sa ili bez dodatka farmaceutski prihvatljivog surfaktanta, kao što je sapun ili detrdžent, sredstvo za suspendovanje, kao što su pektin, karbomeri, metilceluloza, hidroksipropilmetil celuloza ili karboksimetilceluloza, ili sredstva za emulgovanje i druge farmaceutske adjuvante. Ulja, koja se mogu koristiti u parenteralnim formulacijama su petroleum, životinjska, biljna ili sintetska ulja. Specifični primeri ulja su kikirikijevo, sojino, susamovo, od semenki pamuka, kukuruzno, maslinovo, petrolatum i mineralno.
Podesne masne kiseline za upotrebu u parenteralnim formulacijama su oleinska kiselina, stearinska kiselina i izostearinska kiselina. Etiloleat i izopropilmiristat su primeri podesnih estara masnih kiselina.
Podesni sapuni za upotrebu u parenteralnim formulacijama su metali masnih kiselina, amonijumove i trietanolaminske soli i podesni deterdženti: a) katjonski deterdženti, kao što su na primer, dimetildialkilamonijum halidi i alkilpiridinijum halidi, (b) anjonski deterdženti, kao što su na primer, alkil aril i olefinski sulfonati, alkil, olefin, etar i monogliceridni sulfati i sulfosukcinati, (c) nejonski deterdženti, kao što su na primer, oksidi masnih amina, alkanolamidi masnih kiselina i polioksietilenpolipropilen kopolimeri, (d) amfotemi deterdženti, kao što su na primer, alkil-p-aminoproionati i 2-alkil-imidazolin kvaterneme amonijumove soli, i (e) njihove smeše.
Parenteralne formulacije tipično sadrže od oko 0,5 do oko 25 mas% aktivnog sastojka u rastvoru. Mogu se koristiti prezervativi i puferi. Da bi se svelo na minimum ili eliminisalo iritiranje na mestu injektiranja, ovi preparati mogu da sadrže jedan ili više nejonskih surfaktanata koji imaju hidrofilno-liofilni balans (HLB) od oko 12 do oko 17.
Količina surfaktanta u takvim formulacijama tipično je unutar opsega od oko 5 do oko 15 mas%. Podesni surfaktanti su polietilensorbitanski estri masnih kiselina, kao što je sorbitan monooleat i adukti visoke molame mase etilenoksida sa hidrofobnom bazom, koji se formiraju kondenzacijom propilenoksida sa propilenglikolom. Parenteralne formulacije se mogu dati kao jedinstvena doza ili multi-doza u zatvorenim sudovima, kao što su ampule i fiole, a mogu se čuvati u smrzavanjem osušenom (liofolizovanom) stanju, koje zahteva samo dodatak sterilnog tečnog dodatka, na primer, vode za injekcije, neposredno pred upotrebu. Ekstemporalni rastvori i suspenzije za injekcije se mogu dobiti iz sterilnih prahova, granula i tableta vrsta koje su ranije opisane.
Ovi preparati se mogu formulisati i kao intraokulame formulacije, formulacije ili naprave sa zadržanim oslobađanjem (videti, U.S. Pat. No. 5,378,475). Na primer, želatin, hodroitinsulfat, polifosfoestar, kao što je bis-2-hidroksietil-tereftalat (BHET), ili polilakto-glikolna kiselina (u različitim razmerama), mogu se koristiti prilikom formulisanja formulacija sa zadržanim oslobađanjem. Implantati (videti, U.S. Pat. No. 5,443,505, 4,853,224 i 4,997,652), naprave (videti U.S. Pat. No.
5,554,187, 4,863,457, 5,098,443 i 5,725,493) kao što su naprave za implantiranje, npr. mehanički rezervoar, intraokulana naprava ili ekstraokularna naprava sa intraokulamim uvođenjem (npr. prečnika 100 uM - 1 mm), ili se mogu koristiti implantat ili naprava koja sadrži polimemi preparat, kao što je opisano gore.
Ovde pronađeni postupak može takođe da sadrži i istovremeno ordiniranje drugih farmaceutski aktivnih jedinjenja. Pod "istovremenim ordiniranjem" podrazumeva se ordiniranje pre, paralelno sa, npr. u kombinaciji sa inhibitorom BCAT u istoj formulaciji ili u odvojenim formulacijama, ili posle ordiniranja inhibitora BCAT, kao što je opisano gore. Na primer, mogu se istovremeno ordinirati kortikosteroidi, npr. prednizon, metilprednizolon, deksametazon ili triacinalon acetinid, ili ne-kortikosteroidna anti-inflamatorna jedinjenja, kao što su ibuprofen ili flubiprofen. Slično, mogu se istovremeno ordinirati vitamini i minerali, npr. cink, antioksidanti, npr. karotenoidi (kao što je ksantofilni karotenoid, kao što je zeaksantin ili lutein) i mikronutrienti.
Opšte sintetske sheme za dobijanje jedinjenja Formule l-IV.
Primer 1
Hidrohlorid trans-( 1 R, 3R)( 1 - aminometil- 3- metil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
(i) Et02CCH2CN, NH4AC, toluen, 120°C
(ii) a. NaCN, EtOH (95%), H20, 115°C; b. HCI(g)
(iii) EtOH, HCI(g), toluen
(iv) HCI, H20
(v) H2, EtOH/NH3lRaney Ni, 30-50°C
(vi) HCI, H20, 140°C
Korak i: 2- ciiano-(( R)- 3- metil- cikloheksiliden)- sirćetna kiselina etilestar
Smeša 3-(R)-metilcikloheksanona (125 mmol), etilcijanoacetata (124 mmol), amonijum-acetata (12,5 mmol) i glacijalne sirćetne kiseline (24 mmol) se 24 h refluksuje sa Dean-Stark-ovim hvatačem. Smeša se ohladi i opere sa H2O. Voda od ispiranja se ekstrahuje toluenom. Toluenski ekstrakti se sjedine sa originalnim organskim slojem, osuše iznad MgSCMi ispari rastvarač. Sirovo ulje se prečisti Kugelrohr destilacijom, dajući ulje. (Temp. ključanja u sušnici, 150-160°C). Prinos 86%.
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 5: 1,01-1,05 (3H, m), 1,17-1,32 (3H, t, J=7Hz), 1,42-2,30 (6H, m), 2,98 (1H, d, J=13Hz), 3,74 (1H, d, J=13Hz), 4,27 (2H, q, J=7Hz).
MS (Cl) m/z: 208 (MH<+>)
Korak ii: trans-( 1 R, 3R)- 1 - ciianometil- 3- metil- cikloheksankarbonitril
U rastvor NaCN (40 mmol) u 6 ml_ H20 i 160 mL etanola (95%), doda se 2-cijano-((R)-3-metil-cikloheksiliden)-sirćetna kiselina etilestar (40 mmol). Posle 22 h pod refluksom, ohlađeni rastvor se filtrira, a filtrat zakiseli gasovitim HCI, pa ponovo filtrira. Ukloni se rastvarač, a sirovo ulje se prečisti hromatografijom na koloni, dajući svetložutu kristalnu supstancu. Prinos 88%.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,90 (1H, m), 0,98 (3H, d, J=6Hz), 1,11 (1H, t, J=12Hz), 1,38 (1H, d, J=4,9Hz), 1,60-1,90 (4H, m), 2,07 (2H, m), 2,68 (2H, s). MS (Cl) m/z: 163 (MH+)
Korak iii: trans- 2-(( 1R)- 1- ciiano- 3- metil- cikloheksil)- acetimidinska kiselina
etilestar
U rastvor trans-(1R,3R)-1-cijanometil-3-metil-cikloheksankarbonitrila (6,2 mmol) u 30 ml_ etanola (apsolutni), doda se 30 mL toluena. Ovaj rastvor se hladi ledom dok se zasićava sa gasovitim HCI. Zatvoreni rastvor se zatim ostavi sa stoji 24 h na sobnoj temperaturi. Ukloni se rastvarač, a čvrst ostatak triturira dietiletrom, dajući precipitat koji se osuši, dajući belu kristalnu supstancu. Prinos 50%.
Temp. toplj. 118-120°C
<1>H NMR (DMSO) 400 MHz 5: 0,8-0,89 (1H, m), 0,91 (3H, d, J=6,3Hz), 1,06-1,12 (1H, m), 1,24-1,35 (1H, m), 1,37 (3H, t, J=7Hz), 1,41-1,95 (6H, m), 3,02 (2H, s), 4,49 (2H, q, J=7Hz).
MS (Cl) m/z: 195 (MH-)
Korak iv: trans-(( 1R, 3R)- 1- ciiano- 3- metil- cikloheksil)- sirćetna kiselina etilestar
Rastvori se trans-2-((1R,3R)-1-cijano-3-metil-cikloheksil)-acetimidinska kiselina etilestar (1,1 mmol) u ledom ohlađenoj vodi (40 mL), pa se pH podesi na 1,5 sa 1M HCI. Ovaj rastvor se meša 20 h na sobnoj temperaturi. Doda se etilacetat (30 mL), pa se organski sloj opere vodom, osuši i rastvarač ukloni, ostavljajući bistro ulje. Prinos 82%.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,78-0,90 (1H, m), 0,93 (3H, d, J=6Hz), 0,97-1,00 (1H, m), 1,23-1,25 (1H, m), 1,29 (3H, t, J=7,2Hz), 1,59-1,80 (4H, m), 2,05-2,08 (2H, bt), 2,54 (2H, s), 4,20 (2H, q, J=7,2Hz)
MS (Cl) m/z: 210 (MH+)
Korak v: trans-( 5R. 7R)- 7- metil- 2- aza- spiro[ 4. 51dekan- 3- on
Rastvori se trans ((1R,3R)-1-cijano-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (8,9 mmol) u NH3/EtOH (7%, 40 mL), zajedno sa prethodno opranim Raney niklom (H20, a zatim EtOH) u Parr-ovom balonu od 250 mL. Ovaj rastvor se hidrogenuje 24 h na 30°C i pri 3,2 bar. Ohlađeni rastvor se filtrira kroz sloj Celite i opere etilacetatom. Ukloni se rastvarač iz filtrata, ostavljajući belu čvrstu supstancu. Prinos 30%.
Temp. toplj. 92-98°C
<1>H NMR (DMSO) 400 MHz 5: 0,75-0,82 (1H, m), 0,84 (3H, d, J=6,4Hz), 0,88-0,94 (1H, m), 1,14-1,19 (1H, m), 1,20-1,50 (2H, m), 1,50-1,63 (4H, m), 1,91 (2H, s), 3,03 (2H, s), 7,42 (1H, s).
MS (Cl) m/z: 168 (MH+)
Korak vi: hidrohlorid trans-(( 1R. 3R)- 1- aminometil- 3- metil- cikloheksin- sirćetne
kiseline
Rastvori se trans-(5R,7R)-metil-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (2,17 mmol) u rastvoru 10M HCI (5 mL) i H20 (5 mL), pa se smeša refuksuje 5 h na oko 140°C. Ohlađeni rastvor se razblaži sa 10 mL H20 i 10 mL DCM, a vodeni sloj se još opere sa 2x15 mL DCM. Vodeni sloj se zatim smanji do suva, ostavljajući belu čvrstu supstancu. Prinos 76%.
Temp. toplj. 148-155°C. [a]D= -2,5° (t=20°C, c=1, MeOH). Jedan izomer (R,R).<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,69-0,79 (1H, m), 0,82 (3H, d, J=6Hz), 0,87-0,90 (1H, m), 1,12-1,20 (1H, dt, J=4,5 i 13,3Hz), 1,34-1,50 (3H, m), 1,60-1,63 (3H, m), 2,30 (2H, s), 3,01 (2H, s), 7,93 (3H, bs).
MS (Cl) m/z: 186 (MH+)
Primer 2
Hidrohlorid ( 1 - aminometil- 2- metil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
(i) Et02CCH2CN, NH4AC, AcOH, toluen, 120°C
(ii) a. NaCN, EtOH (95%), H20, 115°C; b. HCI(g)
(iii) EtOH, HCI(g), toluen
(iv) HCI, H2o
(v) H2, EtOH/NH3, Raney Ni, 30-50°C
(vi) HCI, H20, 140°C
Korak i: 2- ciiano-( 2- metil- cikloheksiliden)- sirćetna kiselina etilestar
Reaguju (±)2-metilcikloheksanon (80 mmol), etilcijanoacetat (80 mmol), amonijum-acetat (8 mmol) i glacijalna sirćetna kiselina (16 mmol) u skladu sa opštim postupkom Primera 1, korak i, dajući bistro ulje. Prinos 76%.
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 6: 1,23 (3H, dd, J= 7 i 10Hz), 1,35 (3H, t, J=7Hz), 1,55-1,82 (5H, m), 1,93-2,05 (1H, m), 2,17 (1H, dt, J=5 i 14 Hz), 2,47 (1H, dt, J=5 i 9Hz), 2,92-2,97 (1H, bd, J=15Hz), 3,30-3,35 (1H, m), 3,81-3,86 (1H, bd, J=15Hz), 4,06^,14 (1H, m), 4,23-4,30 (3H, dq, J=1i 6Hz).
MS (Cl) m/z: 208 (MH<+>)
Korak ii. 1- ciianometil- 2- metil- cikloheksankarbonitril
Reaguje 2-cijano-(2-metil-cikloheksiliden)-sirćetna kiselina etilestar (37 mmol) i NaCN (37 mmol) u skladu sa opštim postupkom Primera 1, korak ii. Sirova čvrsta supstanca se prečisti hromatografijom na koloni (3:1 heptan:etilacetat) dajući bisro ulje. Prinos 76%.
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 6: 1,06 (3H, d, J=6,8Hz), 1,11 (3H, d, J=6,8Hz), 1,20-2,20 (18H, m), 2,77 (2H, dd, J=16,8 Hz), 2,63 (2H, dd, J=16,8Hz).
MS (Cl) m/z: 163 (MH+)
Korak iii: 2-( 1- ciiano- 2- metil- cikloheksil)- acetimidinska kiselina etilestar
Reaguje 1-cijanometil-2-metil-cikloheksankarbonitril (7,3 mmoL) po opštem postupku Primera 1, korak iii, dajući belu čvrstu supstancu. Prinos 70%. Temp. toplj. 107-114°C
<1>H NMR (DMSO) 400 MHz 5: 1,00-1,06 (3H, 2xt, J=6,4Hz), 1,10-1,38 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=6,8Hz), 1,40-2,10 (7H, m), 2,86, 2,92, 31,0, 3,28 (2H, 4xd, J=14, 14,4, 14,8 i 14Hz, respektivno), 4,48 (2H, q, J=6,8Hz).
MS (Cl) m/z: 209 (MH<+>)
Korak iv: ( 1- ciiano- 2- metil- cikloheksil)- sirćetna kiselina etilestar
Reaguje 2-(1-cijano-2-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar po opštem postupku Primera 1, korak iv, dajući bistro ulje. Prinos 82%.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 6: 1,03, 109 (3H, 2xd, J=7Hz), 1,27-1,30 (3H, m), 1,32-2,00 (8H, m), 2,10-2,20 (1H, m), 2,44, 2,82 (3H, 2xd, J=14,8Hz), 2,54 (1H, m), 4,16-4,22 (2H, m).
MS (Cl) m/z: 210 (MH<+>)
Korak v: 6- metil- 2- aza- spirof4. 51dekan- 3- on
Reaguje (1-cijano-2-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (8,4 mmol) u skladu sa opštim postupkom Primera 1, korak v, tokom 24 h na 10°C i pod 4,1 bar. Sirovo ulje se prečisti hromatografijom na koloni (etilacetat), dajući belu čvrstu supstancu. Prinos 34%.
Temp. toplj. 85-90°C
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,88-0,91 (3H, dd, J=4 i 6,8Hz), 1,41-1,78 (9H, m), 2,00-2,30 (2H, m), 3,06-3,23 (2H, m), 7,27 (1H, bs).
MS (Cl) m/z: 168 (MH+)
Korak vi: hidrohlorid ( 1- aminometil- 2- metil- cikloheksi0- sirćetne kiseline
Reaguje 6-metil-2-aza-spiro]4.5]dekan-3-on (2,5 mmol) u skladu sa opštim postupkom Primera 1, korak vi, dajući belu čvrstu supstancu. Prinos 42%. Temp. toplj. 108-110°C
[a]D= 0° (t=25°C, c=1, MeOH). Dva dijastereomera 3:1.
<1>H NMR (DMSO + D20) 400 MHz 5: 0,79, 0,85 (3H, 2xd, J=6,8Hz), 1,21-1,65 (9H, m), 2,22, 2,43 (1H, 2><d, J=15Hz), 2,46, 2,49 (1H, 2xd, J=15Hz), 2,83-2,92 (1H, 2xd, J=13m6Hz), 3,05, 3,15 (1H, 2xd, J=13,6Hz).
MS (Cl) m/z: 186 (MH+)
Primer 3
Hidrohlorid ( 1- aminometil- 3, 3- dimetil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
i) Cul, MeLi, NH2CI, NH3(92%)
ii) NCCH2C02Et, NH4OAc, AcOH, toluen (83%)
iii) NaCN, EtOH, H20 (57%)
iv) HCI, EtIH, toluen (93%)
v) H2, Raney Ni, EtOH, NH3(84%)
vi) HCI, H20 (64%)
Korak i: 3. 3- dimetil- cikloheksanon
Sintetizuje se u skladu sa postupkom Pelletier S.W., Mody, N.V.,J. Ong. Chem.1976, 41, 1069. Rastvor litijum-dimetilkuprata se dobija dodavanjem metil-litijuma (1,4 M u etru, 77,25 mL, 2,45 mmol) u bakar(l)jodid (8,8 g, 0,046 mol), pod argonom. Rastvor se ohladi na 0°C, pa se u kapima, uz mešanje, dodaje 3-metil-cikloheksen-1-on (5 mL, 44 mmol), uz stvaranje tamnožutog taloga. Ova suspenzija se 1 h meša na sobnoj temperaturi pre nego što se prespe u vodeni rastvor amonijaka (100 mL) i amonijum-acetata oko 5 g). Slojevi se razdvoje, a vodeni sloj opere dietiletrom (3*50 mL). Sjedinjeni organski rastvori se operu zasićenim rastvorom soli (3x100 mL), osuše (MgS04), a rastvarač ukloni pod vakuumom, dajući žutu tečnost.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,98 (6H, s), 1,59 (2H, m), 2,14 (2H, m), 2,26 (2H, m).
IR (film) vmax, cm"<1>, 2956, 1711 (C=0), 1457, 1368, 1226, 1076
Korak ii: 2- ciiano- 5, 5- dimetil- 3- propil- heks- 2- enoinska kiselina etilestar
U rastvor 3,3-dimetilcikloheksanona (4 g, 32 mmol) u toluenu (25 mL) doda se etilcijanoacetat (3,37 mL, 32 mmol), amonijum-acetat (0,24 g, 3 mmol, 0,1 ekv.) i sirćetna kiselina (0,36 mL, 32 mmol, 0,2 ekv.). Žuti rastvor se zagreva pod refluksom sa priključenim Dean-Stark-ovim hvatačem, pa se sa zagrevanjem nastavi sve dok ne prestane kondenzovanje vode u hvataču. Posle hlađenja, nastali oranž rastvor se opere vodom (3x25 mL), pa se organski sloj osuši (MgSCM). Filtriranje i uklanjanje rastvarača pod vakuumom daje sirovi proizvod kao tečnost tamno-oranž boje. Prečišćavanje se obavlja Kugelrohr destilacijom, dajući smešuc/sitransproizvoda, kao svetlo-žutu tečnost, temp. klj. 160-170°C na 4 mbar (5,83 g, 83%).
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 8: 0,96 (6H, s, 2xMe), 0,99 (6H, s, 2xMe), 1,34 (6H, m, 2xMe iz estra), 1,49 (4H, m), 1,75 (2H, kvintet, J=6,4Hz), 1,82 (2H, kvintet, J=6,4Hz), 2,60 (2H, t, J=6,4Hz), 2,80 (2H s), 2,93 (2H, t, J=6,4Hz), 4,27 (4H, m).
MS (Cl) m/z: 222 (M+1)
IR (film) vmax, cm"<1>2958, 2870, 2224 (CN), 1731 (C=0), 1606 (C=C=, 1277, 1223.
Korak iii: 1- ciianometil- 3. 3- <jimetil- cikloheksankarbonitril
U rastvor 2-cijanoi-5,5-dimetil-3-propil-heks-2-enoinska kiselina etilestra (1,26 g, 6 mmol) u etanolu (100 mL) i vodi (4 mL) doda se natrijum-cijanid (0,28 g, 6 mmol, 1 ekv.). Žućkasti rastvor se 8 h zagreva pod refluksom, pa zatim ohladi, pri čemu se formira beličasti talog. Ova suspenzija se filtrira pod vakuumom, a filtrat zakiseli sa gasovitim HCI sve dok pH ne bude približno 2. Ova smeša se zatim drugi put filtrira, pa se rastvarač ukloni pod vakuumom, ostavljajući sirovi proizvod kao svetlo-zelenu čvrstu supstancu. Fleš hromatografija na koloni, posle adsorpcije sirovog proizvoda na silicijum-dioksidu i eluiranja sa 0-50% EtOAc u heptanu, daje binitril kao bezbojnu čvrstu supstancu (0,57 g, 57%).
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,99 (3H, s), Me), 1,13 (1H, td, J=13,2 i 4,2Hz), 1,21 (3H, s, Me), 1,32 (2H, m), 1,54 (1H, m), 1,82 (3H, m), 2,15 (1H, m), 2,65 (2H, s, CH2CN).
<13>C NMR (CDCI3, 400 MHz) 19,61, 25,17, 30,79, 31,18, 33,77, 34,79, 35,37, 37,92, 46,26, 115,06, 122,19.
MS (Cl) m/z: 177 (M++1)
IR (film) vmax, cm"<1>2988, 2937, 2869, 2237 (2*CN), 1749, 1456, 1423, 1369, 1202, 1180, 1031, 972.
Korak iv: ( 1- ciiano- 3. 3- dimetil- cikloheksil)- sirćetna kiselina etilestar
Rastvori se 1-cijanometil-3,3-dimetil-cikloheksankarbonitril (0,50 g, 2,84 mmol) u apsolutnom etanolu (20 mL), na sobnoj temperaturi, pa se zatim ohladi na 0°C. Doda se u rastvor toluen (20 mL), pa se reakciona smeša zakiseli propuštanjem tokom oko 45 min gasovitog HCI, malom brzionom. Balon se zatim zatvori i ostavi da 24 h stoji na sobnoj temperaturi. Žuti rastvor se raspodeli između etilacetata i vode, pa se slojevi razdvoje. Vodeni sloj se ekstrahuje etilacetatom (3x30 mL), a sjedinjeni organski slojevi se operu zasićenim vodenim rastvorom natrijum-karbonata (3x50 mL), zasićenim rastvorom soli (3x50 mL), osuše (MgSCu), pa rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom, ostavljajući svetložutu tečnost (0,59 g, 93%).
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,94 (3H, s, Me), 1,16 (3H, m), 1,21 (3H, s, Me), 1,29 (3H, t; J=7,2Hz, CH2CH3), 1,50 (1H, m), 1,65 (1H, dt, J=14,4 i 7,6Hz), 1,84 (1H, qt, J=13,3 i 3,2Hz), 1,96 (1H, dt, J=13,7 i 2,2Hz), 2,16 (1H, m), 2,48 (1H, d, J=15,6Hz, C-2H), 2,54 (1H, d, J=15,6Hz, C-2H), 4,20 (2H, q, J=7,2Hz, CH2CH3).<13>C NMR (CDCI3) 400 MHz 14,21, 19,65, 25,42, 31,03, 34,04, 34,14, 36,08, 38,44, 46,14, 46,80, 61,02, 123,67, 169,00.
MS (Cl) m/z: 224 (M++1)
IR (film) vmax, cm"<1>2998, 2937, 2868, 2234 (CN), 1738 (C=0), 1457, 1372, 1217, 1181, 1154, 1026.
Korak v: 7, 7- dimetil- 1- aza- spiror4. 51dekan- 3- on
Hidrogenuje se 48 h (1-cijano-3,3-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (0,5 g, 2,23 mmol) u etanolskom amonijaku (60 mL), sa Raney niklom kao katalizatorom (oko 0,25 g), na 50°C i 4,2 bar. Posle toga katalizator se ukloni filtriranjem kroz Celite, a rastvarač se ukloni pod vakuumom, ostavljajući zelenkasto kristalnu supstancu. Fleš hromatografija na koloni i eluiranje sa 0-100% etilacetatom u heptanu, daje čisti laktam kao bezbojnu čvrstu supstancu.
(340 mg, 84%).
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,89 (3H, s, Me), 0,92 (3H, s, Me), 1,25 (2H, m), 1,36 (2H, m), 1,51 (3H, m), 1,68 (1H, s), 2,18 (d, J=16,4Hz, CH2NH), 2,24 (1H, d, J=16,8Hz, CH2NH), 3,15 (2H, s, CH2CO).
<13>C NMR (CDCI3, 400 MHz) 19,16, 29,88, 30,36, 31,28, 36,57, 39,05, 39,61, 44,58, 49,54, 54,79, 177,72.
MS (Cl) m/z: 182 (MH++1)
IR (film) vmax, cm"<1>3203, 3100 (NH), 2914, 2860, 1698 (C=0), 1486, 1374, 1317, 1289, 1257, 1076.
Korak vi: hidrohlorid ( 1- aminometil- 3, 3- dimetil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Rastvori se 7,7-dimetil-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (0,3 g, 1,66 mmol) u smeši HCI (konc, 5 mL) i code (5 mL), pa se nastali bezbojni rastvor 20 h zagreva pod refluksom. Rastvor se ohladi, pa raspodeli između vode i dihlorometana, a slojevi razdvoje. Vodeni sloj se opere dihlorometanom (3x20 mL), a voda/HCI se uklone na rotacionom uparivaču, ostavljajući sirovi proizvod kao beličastu čvrstu supstancu. Trituriranje ove supstance sa etilacetatom i filtriranje proizvoda daje (1-aminometil-3,3-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina hidrohloridnu so, kao bezbojnu čvrstu supstancu (140 mg, 42%, 64% zasnovano na regenerisanom početnom materijalu).
<1>H NMR (DMSO) 400 MHz 5: 0,90 (3H, s, Me), 0,92 (3H, s, Me), 1,15-1,49 (8H, m), 2,45 (2H, s, CH2C02H), 2,09 (2H, bq, J=13,5Hz, CH2NH3), 7,96 (3H, bs, NH3), 12,36 (1H, bs, OH).
IR (film) vmax, cm"<1>2930, 1728 (C=0), 1272, 1123.
Primer 4
Hidrohlorid ( ±)-( trans)-( 1 - aminometil- 3, 4- dimetil- ciklopentil)- sirćetne kiseline
Reagensi: (i) trietilfosfoacetat
(ii) MeN02, Bu4N<+>F
(iii) H2, Ni
(iv) HCI
Korak i: Sinteza ( ±)-( transH3, 4- dimetil- ciklopentiliden)- sirćetna kiselina etilestra
(4b)
Suspenduje se NaH (60% disperzija u ulju, 737 mg, 18,42 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (50 mL), pa se ohladi na 0°C. Doda se trietilfosfonoacetat (3,83 mL, 19,30 mmol), pa se smeša na 0°C meša 15 min. Zatim se doda keton (±)-(4a) (1,965 g, 17,54 mmol) u THF (10 mL), pa se smeša ostavi da se zagreje do sobne temperature. Posle 2 h smeša se raspodeli između dietiletra (200 mL) i vode (150 mL). Odvoji se organska faza, opere zasićenim rastvorom soli, osuši (MgS04) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom na koloni (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan 1:9), dajući 3,01 g (94%) (4b) kao bezbojno ulje.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 1,01 (3H, d, J=6Hz), 1,03 (3H, d, J=6Hz), 1,26 (3H, t, J=7Hz); 1,49 (2H, m), 2,07 (1H, m), 2,24 (1H, m), 2,61 (1H, m), 4,13 (2H, q, J=7Hz), 5,72 (1H, s).
MS (CI+) m/z: 183 (M+1)
Korak ii: Sinteza ( ±)( trans)-( 3, 4- dimetil- 1- nitrometil- ciklopentil)- sirćetna kiselina
etilestra ( 4c)
Rastvori se (±)(trans)-(3,4-dimetil-ciklopentiliden)-sirćetna kiselina etilestar (4b)
(2,95 g, 16,2 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL), pa se meša na 70°C sa nitrometanom (1,9 mL, 35,2 mmol) i tetrabutilamonijumfluoridom (1,0M u tetrahidrofuranu, 22 mL, 22,0 mmol). Posle 6 h smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži etilacetatom (50 mL) i opere 2M HCI (30 mL), pa zasićenim rastvorom soli (50 mL). Sakupi se organska faza, osuši (MgS04) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 1:9), dajući 1,152 g (29%) bistrog ulja.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,98 (6H, d; J=6Hz), 1,10-1,39 (5H, m), 1,47 (2H, m), 1,87 (1H, m), 2,03 (1H, m), 2,57 (2H, ABq, J=15, 38Hz), 4,14 (2H, q, J=7Hz), 4,61 (2H, ABq, J=12 i 60 Hz).
MS (ES+) m/z: 244 (M+1)
IR (film) vmax, cm"<1>1186, 1376, 1549, 1732 2956.
Korak iii: sinteza ( ±)-( trans)- 7. 8- dimetil- spirof4. 41nonan- 2- ona ( 4d)
Rastvori se (±)-(3,4-dimetil-1-nitrometil-ciklopentil)-sirćetna kiselina etilestar (4c)
(1,14 g, 4,7 mmol) u metanolu (50 mL), pa se mućka iznad Raney nikla kao
katalizatora, u atmosferi vodonika (2,8 bar), na 30°C. Posle 5 h katalizator se odvoji filtriranjem kroz Celite. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, dajući 746 mg (95%) svetložutog ulja, koje očvrsne pri stajanju.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,98 (6H, d, J=6Hz), 1,32 (2H, m), 1,46 (2H, m), 1,97 (2H, m), 2,27 (2H, ABq, J=16 i 27Hz), 3,23 (2H, s), 5,62 (1H, bs).
MS (ES+) m/z: 168 (M+1)
IR (film) vmax, cm"<1>1451, 1681, 1715, 248, 3196.
Korak iv: sinteza hidrohlorida ( ±)-( trans)-( 1- aminometil- 3. 4- dimetil- ciklopentil)-sirćetne kiseline ( 4)
Zagreva se pod refluksom (±)-(trans)-7,8-dimetil-spiro[4.4]nonan-2-on (4d) (734 mg, 4,40 mmol) u smeši 1,4-dioksana (5 mL) i 6M HCI (15 mL). Posle 4 h ova smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži vodom (20 mL) i opere dihlorometanom (3x30 mL). Sakupi se vodena faza i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se triturira etilacetatom, dajući 675 mg (69%) bele čvrste supstance, posle sakupljanja i sušenja.
<1>H NMR (d6-DMSO) 400 MHz 5: 0,91 (6H, d, J=6Hz), 1,18 (2H, m), 1,42 (2H, m), 1,72 (1H, m), 1,87 (1H, m), 2,42 (2H, ABq, J=16i 24 Hz), 2,90 (2H, ABq, J=12 i 34 Hz), 8,00 (3H, bs), 12,34 (1H, bs).
MS (ES<+>) m/e: 186 (M+1, za slobodnu bazu).
Primer 5
Hidrohlorid ( cis/ trans)-( 3R)-( 1- aminometil- 3- metil- ciklopentil)- sirćetne kiseline ( 5)
Reagenti: (i) trietilfosfonoacetat, NaH; (ii) MeN02, BU4N<+>F; (iii) H2, Ni;
(iv) HCI
Korak i: sinteza ( R)-( 3- metil- ciklopentiliden)- sirćetna kiselina etilestra ( 5b)
Suspenduje se NaH (60% disperzija u ulju, 1,86 g, 46,5 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (40 mL), pa se ohladi na 0°C. Doda se trietilfosfonoacetat (9,69 mL, 48,8 mmol), pa se meša 15 min meša na 0°C. Zatim se doda (R)-3-metil-ciklopentanon (5a) (5 mL, 46,5 mmol) u THF (10 mL), pa se smeša ostavi da se zagreje do sobne temperature. Posle 2 h smeša se raspodeli između dietiletra (200 mL) i vode (150 mL). Odvoji se organska faza, opere zasićenim rastvorom soli, osuši (MgS04) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 1:9), dajući 5,45 g (70%) (2) kao bezbojno ulje.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 1,04 (3H, m), 1,27 (3H, t, J=7Hz), 1,80-2,74 (7H, m), 2,90-3,15 (1H, m), 4,13 (2H, q, J=7Hz), 5,76 (1H, s).
MS (CI+) m/e: 169 (M+1)
IR (film) vmax, cm"<1>1205, 1371, 1653, 1716, 2955.
Korak ii: sinteza ( cis/ trans)-( 3R)-( 3- metil- 1- nitrometil- ciklopentil)- sirćetna kiselina
etilestra ( 5c)
Rastvori se (R)-(3-metil-ciklopentiliden)-sirćetna kiselina etilestar (5b) (3,0 g, 17,8 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL), pa se meša na 70°C sa nitrometanom (1,92 mL, 35,6 mmol) i tetrabutilamonijum-fluoridom (1,0 M u tetrahidrofuranu, 25 mL, 25,0 mmol). Posle 18 h smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži etilacetatom (50 mL) i opere sa 2M HCI (30 mL), zatim zasićenim rastvorom soli (50 mL). Sakupi se organska faza, osuši (MgSCM) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 1:9), dajući2,00 g (49%) bistrog ulja.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 1,02 (3H, d, J=6Hz), 1,08-1,37 (5H, m), 1,59-2,17 (5H, m), 2,64 (2H, m), 4,15 (2H, q, J=7Hz), 4,64 (2H, m).
MS (ES+) m/e: 230 (M+1)
IR (film) vmax, cn<T1>1183, 1377, 1548, 1732, 2956.
Korak iii: sinteza ( cis/ trans)-( 7R)- 7- metil- spirof4. 41nonan- 2- ona ( 5d)
Rastvori se (cis/trans)-(3R)-(3-metil-1-nitrometil-ciklopentil)-sirćetna kiselina etilestar (5c) (1,98 g, 8,66 mmol) u metanolu (50 mL), pa se mućka iznad Raney nikla kao katalizatora, u atmosferi vodonika (2,8 bar) na 30°C. Posle 18 h katalizator se ukloni filtriranjem kroz Celite. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a ostatak prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 1:1), dajući 1,05 g (78%) bele čvrste supstance.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 1,03 (3H, m), 1,22 (2H, m), 1,60-2,15 (5H, m), 2,22 (2H, m), 3,20 i 3,27 (2H ukupno, 2xs, cis i trans), 6,18 (1H, bs).
MS (ES+) m/e: 154 (M+1).
IR (film) vmax, cm'<1>1695, 2949, 3231.
Korak iv: sinteza hidrohlorida ( cis/ trans)-( 3RH1- aminometil- 3- metil- ciklopentil)-sirćetne kiseline ( 5)
Zagreva se pod refluksom (cis/trans)-(7R)-7-metil-spiro[4.4]nonan-2-on (5d) (746 mg, 4,88 mmol) u smeši 1,4-dioksana (5 mL) i 6M HCI (15 mL). Posle 4 h smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži vodom (20 mL) i opere dihlorometanom (3x30mL). Vodena faza se sakupi i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se triturira etilacetatom, dajući belu čvrstu susptancu koja se sakupi i osuši. Ova se kristališe iz etilacetat/metanola, dajući 656 mg (65%) (5), posle sakupljanja i sušenja.
<1>H NMR (de-DMSO) 400 MHz 5: 0,96 (3H, m), 1,01-1,24 (2H, m), 1,42-2,10 (5H, m), 2,41 i 2,44 (2H ukupno, 2xS, cis/trans), 2,94 (2H, m), 7,96 (3H, bs), 12,35 (1H, bs).
MS (ES+) m/e: 172 (M+1, za slobodnu bazu).
Primer 6
Hidrohlorid (+)-( trans)-( 1 - aminometil- S^- dimetil- ciklopentiD- sirćetne kiseline
Reagensi: (i) trietilfosfonoacetat, NaH; (ii) MeN02, Bu4N<+>F; (iii) H2Ni; (iv) HCI
Korak i: sinteza ( cis)-( 3, 4- dimetil- ciklopentiliden)- sirćetna kiselina etilestra ( 6b)
Suspenduje se NaH (60% disperzija u ulju, 519 mg, 12,96 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (30 mL), pa se ohladi na 0°C. Doda se trietilfosfonoacetat (2,68 mL, 13,5 mmol), pa se smeša 15 min meša na 0°C. Zatim se doda (3S,4R)-3,4-dimetil-ciklopentanon (6a) (1,21 g, 10,80 mmol) u THF (10 mL), a smeša se ostavi da se zagreje do sobne temperature. Posle 2 h smeša se raspodeli između dietiletra (200 mL) i vode (150 mL). Odvoji se organska faza, opere zasićenim rastvorom soli, osuši (MgS04) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 5:95), dajući 1,40 g (71%) (2), kao bezbojno ulje.
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 8: 0,84 (3H, d, J=6Hz), 0,91 (3H, d, J=6Hz), 1,26 (3H, t, J=7Hz), 2,01-2,95 (6H, m), 4,13 (2H, q, J=7Hz), 5,76 (1H, s).
MS (CI+) m/e: 183 (M+1).
IR (film) vmax, cm"<1>1043, 1125, 1200, 1658, 2959.
Korak ii: sinteza ( trans)-( 3, 4- dimetil- 1- nitrometil- ciklopentil)- sirćetna kiselina
etilestra ( 6c)
Rastvpri se (cis)-(3,4-dimetil-ciklopentiliden)-sirćetna kiselina etilestar (6b) (1,384 g, 7,60 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL), pa se na 70°C meša sa nitrometanom (0,82 mL, 15,2 mmol) i tetrabutilamonijum-fluoridom (1,0M u tetrahidrofuranu, 11,4 mL, 11,4 mmol). Posle 6 h smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži etilacetatom (50 mL), pa opere 2M HCI (30 mL) i zatim zasićenim rastvorom soli (50 mL). Sakupi se organska faza, osuši (MgS04) i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (silicijum-dioksid, etilacetat:heptan, 5:95), dajući 0,837 g (45%) bistrog ulja.
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 8: 0,91 (6H, d, J=6Hz), 1,21-1,39 (5H, m), 1,98 (2H, m), 2,18 (2H, m), 2,64 (2H, s), 4,15 (2H, q, J=7Hz), 4,61 (2H, s). MS (ES+) m/e: 244 (M+1).
IR (film) vmaflcm"<1>1184, 1377, 1548, 1732, 2961.
Korak iii: sinteza ( trans)- 7, 8- dimetil- spiro[ 4. 41nonan- 2- ona ( 6d)
Rastvori se (trans)-(3,4-dimetil-1-nitrometil-ciklopentil)-sirćetna kiselina etilestar (6c) (0,83 g,3,4 mmol) u metanolu (30 mL), pa se mućka sa Raney niklom kao katalizatorom u atmosferi vodonika (2,8 bar), na 30°C. Posle 4 h katalizator se odvoji filtriranjem kroz Celite. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, dajući 567 mg (99%) svetložutog ulja, koje očvrsne pri stajanju.
<1>H NMR (CDCb) 400 MHz 6: 0,89 (6H, d, J=6Hz), 1,38 (2H, m), 1,91 (2H, m), 2,10 (2H, m), 2,32 (2H, s), 3,18 (2H, s), 5,61 (1H, bs).
MS (ES+) m/e: 168 (M+1).
IR (film) vmax, cm-<1>1304, 1450, 1699, 2871, 3186.
Korak iv: sinteza hidrohlorida ( trans)-( 1- aminometil- 3, 4- dimetil- ciklopentil)-sirćetne kiseline ( 6)
Zagreva se pod refluksom (trans)-7,8-dimetil-spiro[4.4]nonan-2-on (6d) (563 mg, 4,40 mmol) u smeši 1,4-dioksana (5 mL) i 6M HCI (15 mL). Posle 4 h smeša se ohladi do sobne temperature, razblaži vodom (20 mL) i opere dihlorometanom (3x30mL). Sakupi se vodena faza i rastvarač ukloni pod vakuumom. Ostatak se triturira etilacetatom, dajući belu čvrstu susptancu koja se sakupi i osuši. Ova se rekristališe iz etilacetat/metanola, dajući 440 mg /59%) (6), posle sakupljanja i sušenja.
<1>H NMR (de-DMSO)400 MHz 5: 0,84 (6H, d, J=6Hz), 1,21 (2H, m), 1,81 (2H, m), 2,06 (2H. M), 2,47 (2H, s), 2,89 (2H, s), 7,94 (3H, bs), 12,30 (1H, bs).
MS (ES+) m/e: 186 (M+1, za slobodnu bazu).
Primer 7
Hidrohlorid (+)-( trans)-( 1- aminometil- 3. 4- dimetil- ciklopentil)- sirćetne kiseline
Reagensi: (i) trietilfosfonoacetat, NaH; (ii) MeN02, Bu4N<+>F<->; (iii) H2, Ni;
(iv) HCI
U literaturi je (3S,4S)-3,4-dimetil-ciklopentanon (7a) poznat i može se sintetizovati postupcima koji se tamo daju: Y.Kato,Chem. Pharm. Bull.,1966, 14, 1438-1439 i srodne reference: VV.C.M.C. Kokke, F.A. Varkervisser,J. Org. Chem.1974, 39^1535; R.Barker, D.C.Billington, N. Eranayake,JCS Chem. Comm.,1981, 1234, K.Furuta, K.lvvanaga, H.Yamamoto,Tet. Lett,1986, 27, 4507; G. Solladie, 0. Lohse,Tet. Asymm.,1993, 4, 1547; A.Rosenquist, I. Kvarnstrom, S.C.T. Svensson, B. Classon, B. Samuelson,Acta Chem. Scand.,1992, 46, 1127; E.J.Corev, W. Su,Tet. Lett.,1988, 29, 3423; D.VV.Knight, B.Ojhara,Tet. Lett.,1981, 22, 5101.
Korak i: sinteza ( trans)-( 3, 4- dimetil- ciklopentiliden)- sirćetna kiselina etilestra ( 7b)
U suspenziju natrijum-hidrida (1,3 g, 32,5 mmol) u THF (60 mL), pod azotom i na 0°C, dodaje se tokom 5 min trietilfosfonoacetat (6,5 mL, 32,7 mmol). Posle 10 min mešanja u bistar rastvor se doda rastvor (3S,4S)-3,4-dimetil-ciklopentanona (7a) (približno 2,68 g, pribl. 30 mmol) u THF (2^10 mL), pa se ukloni ledeno kupatilo. Posle 4 h reakcija se prekine sipanjem u vodu (100 mL), pa se smeša ekstrahuje etrom (400 mL). Organska faza se opere zasićenim rastvorom soli (100 mL), osuši i koncentriše pod vakuumom. Hromatografija na koloni (10:1 heptan/etilacetat) daje proizvod u obliku ulja (4,53 g) (pribl. 91% prinos).
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 1,01 (3H, d, J=6Hz), 1,03 (3H, d, J=6Hz), 1,26 (3H, t, J=7Hz), 1,49 (2H, m), 2,07 (1H, m), 2,24 (1H, m), 2,61 (1H, m), 4,13 (2H, q, J=7Hz), 5,72 (1H, s).
MS (CI+) m/e: 183 (M+1).
Korak ii: sinteza ( trans)-( 3. 4- dimetil- 1- nitrometil- ciklopentil)- sirćetna kiselina
etilestra ( 7c)
U rastvor (trans)-(3,4-dimetil-ciklopentiliden)-sirćetna kiselina etilestra (7b) (4,24 g, 23,3 mmol) u THF (15 mL) dodaju se TBAF (32 mL 1M rastvor u THF, 32 mmol), a zatim nitrometan (3 mL), pa se reakcija 8 h zagreva na 60°C. Posle hlađenja reakciona smeša se razblaži etilacetatom (150 mL), opere 2M HCI (40 mL) i zatim zasićenim rastvorom soli (50 mL). Hromatografija na koloni (10:1 heptan/etilacetat) daje proizvod u obliku ulja (2,24 g) (40% prinos).
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 6: 0,98 (6H, d, J=6Hz), 1,10-1,39 (5H, m), 1,47 (2H, m), 1,87 (1H, m), 2,03 (1H, m), 2,57 (2H, ABq, J= 16 i 38 Hz), 4,14 (2H, q, J=7Hz), 4,61 (2H, ABq, J=12 i 60 Hz).
MS (ES+) m/e: 244 (M+1)
IR (film) vmax, cm'<1>: 1186, 1376, 1549, 1732, 2956.
Korak iii: sinteza hidrohlorida (+ HtransH1- aminometil- 3, 4- dimetil- ciklopentiO-
sirćetne kiseline ( 7)
Rastvor (trans)-(3,4-dimetil-1nitrometil-ciklopentil)-sirćetna kiselina etilestra (7c)
(3,5 g, 14,4 mmol) u metanolu (100 mL), u prisustvu niklenog sunđera, se hidrogenuje 4 h na 30°C pod 3,4 bar. Katalizator se odvoji filtriranjem, a koncentrisanje pod vakuumom daje smešu 2:1 laktama i aminoestra, 2,53 g, računato kao 96%, koja se koristi bez daljeg prečišćavanja. Ova smeša (2,53 g, 13,8 mmol) u dioksanu (15 mL) i 6M HCI (45 mL) zagreva se 4 h pod refluksom (uljano kupatilo, 110°C). Posle hlađenja i rablaživanja vodom (60 mL), smeša se opere dihlorometanom (3x50mL), pa koncentriše pod vakuumom. Dobijeno ulje se opere etilacetatom, zatim dihlorometanom, dajući lepljivu penu, koja se osuši dajući beli prah (2,32 g) (76% prinos).
cxd(23°C) (H20) (c=1,002) = +28,2°.
<1>H NMR (ds-DMSO) 400 MHz 5: 0,91 (6H, d, J=6Hz), 1,18 (2H, m), 1,42 (2H, m), 1,72 (1H, m), 1,87 (1H, m), 2,42 (2H, ABq, J=16 i 24Hz), 2,90 (2H, ABq, J=12i 34Hz), 8,00 (3H, bs), 12,34 (1H, bs).
MS (ES+) m/e: 186 (M+1, za slobodnu bazu).
Primer 8
Hidrohlorid 1a, 3B, 5B-( 1- aminometil- 3. 5- dimetil- cikloheksin- sirćetne kiseline
Korak i: sinteza 2- ciiano-(( 3R, 5S)- 3. 5- dietil- cikloheksiliden)- sirćetna kiselina
etilestra ( 8b)
Rastvori se cis-3,5-dimetilcikloheksanon (8a, 15,78 g, 125,0 mmol) u toluenu (150 mL), pa se tretira amonijum-acetatom (0,96 g, 0,099 mmol), sirćetnom kiselinom (1,4 mL, 0,195 mmol) i etilcijanoacetatom (14,04 g, 99,2 mmol). Reakcija se preko noći zagreva pod refluksom, sa Dean-Stark-ovim hvatačem, zatim ohladi do sobne temperature i opere vodom (3*50 mL). Vodeni sloj se ponovo opere toluenom (2x50 mL). Sjedine se organski slojevi, osuše iznad Na2SC>4 i koncentrišu. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 5% EtOAc/heksanom, dajući 22,0 g (80%) željenog proizvoda u obliku bistrog ulja.
MS: 222,1 (M+1, za C13H19NO2); ulje; TLC: Si02, Rf 0,40 (9:1 heksan/EtOAc); Analiza: Ci3Hi9N02Izrač.: C 70,56 H 8,68 N 6,33
Nađeno: C 70,74 H 8,68 N 6,33
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 5: 0,83-0,95 (1H, m), 1,01 (6H, t, J=6,1Hz), 1,32 (3H, t, J=7,3Hz), 1,48-1,85 (5H, m), 2,97-3,02 (1H, m), 3,92 (1H, dd, J=12,2 i 2,2Hz), 4,24 (2H, q, J=7,1Hz).
Korak ii: sinteza 1a, 3B, 5P- 1- cijanometil- 3, 5- di^ ( 8c)
Rastvori se 2-cijano-((3R,5S)-3,5-dimetil-cikloheksiliden)-sirćetna kiselina etilestar (8b, 6,64 g, 30,0 mmol) u EtOH (60 mL), pa se doda suspenziji NaCN (1,47 g, 30,0 mmol) u EtOH/H20 (100 mL/8mL). Reakcija se preko noći zagreva pod refluksom, a zatim ohladi do sobne temperature, filtrira i koncentriše pod vakuumom, dajući bistro ulje koje očvrsne pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 4:1 heksan/EtOAc, dajući 4,05 g (77%) željenog proizvoda u obliku lepljive bele čvrste supstance.
MS: nije opažen jon M+1 (CnHi6N2); ulje; TLC: Si02, Rf0,31 (4:1 heksan/EtOAc);
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 8: 0,58 (1H, dd, J=24,9 i 12,2Hz), 0,96 (6H, d, J=6,6Hz), 1,03 (2H, t, J=12,9Hz), 1,75-1,90 (3H, m), 2,01 (2H, d, J=11,5Hz), 2,65 (2H, s).
Korak iii: sinteza hidrohlorida 1a, 3B, 53-( 1- aminometil- 3, 5- dimetil- cikloheksiO-
sirćetne kiseline ( 8d)
Rastvori se 1a,3p,5p-1-cijanometil-3,5-dimetil-cikloheksankart3onitril (8c, 5,51 g, 31,26 mmol) u EtOH (80 mL) i toluenu (80 mL), ohladi na 0°C i zasiti gasovitim HCI. Rastvor se zatvori i meša preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentriše pod vakuumom, dajući sirovi iminoestar kao belu čvrstu susptancu. Ovaj sirovi materijal se triturira sa Et20 (150 mL), osuši pod vakuumom, pa tretira sa H20 (100 mL) i 1M HCI (4 mL). Reakcija se preko noći meša na sobnoj temperaturi, zatim ekstrahuje sa EtOAc (3x100mL). Organski slojevi se sjedine, operu zasićenim rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i koncentrišu. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 6:1 heksan/EtOAc, dajući 5,78 g (83%) željenog proizvoda u obliku bistrog ulja.
MS: 224,1 (M+1, za Ci3H2iN02); ulje; TLC: Si02, Rf 0,32 (6:1 heksan/EtOAc);
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 8: 0,53 (1H, dd, J=24,9 i 12,0Hz), 0,91 (6H, d, J=6,6Hz), 1,27 (3H, t, J=7,1Hz), 1,70-1,76 (1H, m), 1,80-1,90 (2H, m), 2,02 (2H, d, J=12,9Hz), 2,51 (2H, s), 4,18 (2H, q, J=7,1Hz).
Korak iv: sinteza 5a, 7p, 9B- 7, 9- dimetil- 2- aza- spiro[ 4. 5] dekan- 3- ona ( 8c)
Rastvori se 1a,3p,5p-(1-cijano-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (8d, 5,82 g, 26,1 mmol) u MeOH (150 mL), tretira sa 10% Rh/2%Pd/C (1,0 g) i mućka 28 h u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, pa koncentriše pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa gradijentom 2:3 heksan/EtOAc, EtOAc, 5% MeOH/EtOAc, dajući 2,21 g (47%) željenog proizvoda.
MS: 182,0 (M+1, za C11H19NO); Temp. toplj. 116-118°C; TLC: Si02, Rf0,36 (6% MeOH/CH2CI2);
<1>H NMR (CDCI3) 400 MHz 8: 0,49 (1H, dd, J=24,4 i 12,0Hz), 0,86-0,93 (8H, m), 1,38-1,48 (2H, m), 1,60-1,71 (3H, m), 2,09 (2H, s), 3,16 (2H, s), 5,79 (1H, br).
Korak v: sinteza hidrohloridne soli 1a, 3B, 5B-( 1- aminometil- 3, 5- dimetil-
cikloheksiD- sirćetne kiseline ( 8)
Tretira se 5a,7p,9p-7,9-dimetil-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (8c, 0,52 g, 2,87 mmol) sa 6M HCI (19 mL), pa zagreva preko noći pod refluksom. Reakcija se ohladi do sobne temperature, nakon čega se formira beli talog. Talog se odvoji filtriranjem, a filtrat ohladi do 0°C, dajući drugu žetvu kristala, koji se ponovo odvoje filtriranjem. Taloži se sjedine i osuše pod vakuumom, dajući 0,46 g (68%) željenog proizvoda.
MS: 200,1 (M+1 za CnH2iN02); Temp. toplj. 179-180°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,46-0,53 (1H, m), 0,77 (1H, t, J=12,5Hz), 0,85-0,91 (7H, m), 1,55-1,67 (5H, m), 2,11 (2H, d, J=13,4Hz), 2,36 (2H, s), 2,44 (1H, s), 3,14 (2H, s).
Primer 9
Hidrohloridna so 1a, 3B, 5B-( 3. 5- dimetil- 1- pripilaminometil- cikloheksil)- sirćetne
kiseline
Rastvori se hidrohloridna so 1a,3B,5p-(1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (8, 1,0 g, 4,2 mmol) u EtOH (100 mL), tretira rastvorom natrijum-hidroksida (1M, 5 mL), propionaldehidom (0,9 mL, 12,6 mmol) i 10% Pd/C (0,3 g), pa se mućka 3 h u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, tretira sa HCI/Et20 (1M, 10 mL) i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se tretira vrućim izopropanolom (100 mL), NaCI odvoji filtriranjem, a bistar rastvor koncentriše pod vakuumom. Sirovi proizvod se rekristališe iz i-PrOH/aceton/heksana (14:200:225 mL) i osuši pod vakuumom, dajući 0,136 g (12%) željenog proizvoda. MS: 242,1 (M+1 za Ci4H27N02); Temp. toplj. 178-180°C;
<1>H NMR (CD3OD) 6: 0,52 (1H, dd, J=24,2 i 12,0Hz), 0,83-0,90 (8H, m), 1,00 (3H, t, J=7,6Hz), 1,61-1,80 (7H, m), 2,43 (2H, s), 2,98 (2H, t, J=7,8Hz), 3,20 (2H, s)-
Primer 10
Hidrohloridna so 1a, 3p, 5p-( 1- etilaminometil- 3, 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetne
kiseline
Primer 10 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišten acetaldehid umesto propionaldehida, a za rekristalizaciju je korišćen etilacetat/heptan (30% prinos).
MS: 228 (M+1 za C15H29NO2); Temp. toplj. 188-190°C;
<1>H NMR (DMSO) 5: 0,83 (8H, bd), 1,24 (3H, t, J=7,1Hz), 1,60 (6H, m), 2,38 (d, s), 2,98 (2H, m), 3,10 (2H, bs), 8,33 (2H, bs), 12,42 (1H, bs).
Primer 11
Hidrohloridna so 1a, 3p, 5p-( 1- benzilamino- metil- 3, 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetne
kiseline
Primer 11 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen benzaldehid umesto propionaldehida, a za rekristalizaciju je korišćen Et20 (30% prinos).
MS: 290,1 (M+1 za C18H27NO2); Temp. toplj. 162-163°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48 (1H, dd, J=12,5Hz), 0,79-0,90 (8H, m), 1,46 (2H, br), 1,64 (3J, d, J=13,4Hz), 2,42 (2H, s), 3,19 (2H, s), 4,23 (2H, s), 7,43-7,50 (5H, m).
Primer 12
Hidrohloridna so la. ap. Sp- d- dimetilaminometil- S. S- dimetil- ciklorieksin- sirćetne
kiseline
Rastvor hidrohloridne soli 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (8, 0,20 g, 0,59 mmol) u EtOH (15 mL), rastvoru NaOH (1M, 0,59 mmol) i H20 (1 mL) tretira se sa 20% Pd/C (50 mg) i 15 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, tretira sa 1M HCI/Et20 (1 mL), pa koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem i-PrOH (4 mL), razblaži acetonom (100 mL) i Et20 (350 mL), pa ohladi na 0°C. Talog se odvoji filtriranjem u suši pod vakuumom, dajući 103 mg (70% prinos) željenog proizvoda.
MS: 228,1 (M+1 za Ci2H23N02); Temp. toplj. 195-196°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,56 (1H, dd, J=24,4i 12,0Hz), 0,89-0,92 (8H, m), 1,58-1,75 (8H, m), 2,51 (2H, s), 2,95 (6H, s), 3,44 (2H, s).
Primer 13
Hidrohloridna so 1a, 3p, 5p-( 1- butilaminometil- 3, 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetne
kiseline
Primer 13 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen butiraldehid umesto propionaldehida (48% prinos).
MS: 256,1 (M+1 za C15H29NO2); Temp. toplj. 184-185°C;
<1>H NMR (CD3OD) 6: 0,53 (1H, dd, J=24,4i 12,0Hz), 0,86-0,99 (11H, m), 1,37-1,47 (2H, m), 1,60-1,75 (7H, m), 2,43 (2H, s), 3,02 (2H, t, J=8,1Hz), 3,20 (2H, s).
Primer 14
Hidrohloridna so 1a, 3p, 5p-{ 1- f( benzil- metil- amino)- metin- 3, 5- dimetil- cikloheksil)-sirćetne kiseline
Primer 14 je dobijen u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što su kao polazni materijali korišćeni N-benzil analog (11) i fomnaldehid, a Pt02umesto Pd/C kao katalizator (70% prinos).
MS: 304,1 (M+1 za C19H29NO2); Temp. toplj. 209-210°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,51 (1H, dd, J=24,4i 12,0Hz), 0,79-0,92 (9H, m), 1,29 (1H, br), 1,56-1,82 (4H, m), 2,51 (2H, dd, J=18,8 i 16,3 Hz), 2,85 (2H, s), 3,23-3,49 (2H, m), 4,37 (2H, dd, J=31,7 i 12,7Hz), 7,45-7,54 (5H, m).
Primer 15
Hidrohloridna so 1a, 3B, 5B-( 3, 5- dimetil- 1 - metilaminometil- cikloheksiO- sirćetne
kiseline
Rastvori se Primer 14 (0,14 g, 1,21 mmol) u 95% EtOH (50 mL), tretira sa rastvorom NaOH (1M, 1,21 mmol) i 20% Pd/C (0,1 g), pa 45 min mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, tretira sa HCI/Et20 (1M, 1 mL) i koncentriše pod vakuumom. Sirovi proizvod se rekristališe iz iPrOH/aceton/ heksana (7:150:110 mL) i osuši pod vakuumom, dajući 0,189 g (63%) željenog proizvoda.
MS: 214,1 (M+1 za Ci2H23N02); Temp. toplj. 182-183°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,52 (1H, dd, J=24,2i 12,2Hz), 0,84-0,98 (8H, m), 1,57-1,72 (5H, m), 2,38 (2H, s), 2,72 (3H, s), 3,21 (2H, s).
Primer 16
1 g, 3p, 5p- f 1 -( acetilamino- metiD- S. S- dimetil- cikloheksill- sirćetna kiselina
Tretira se Primer 8 (0,5 g, 2,1 mmol) sa H20 (10 mL) i NaOH (0,56 g, 14,0 mmol), ohladi na 0°C, pa tretira sa anhidridom sirćetne kiseline. Reakcija se preko noći meša, zatim razblaži sa EtOAc (100 mL) i opere sa 1M HCI (100 mL). Organski sloj se osuši iznad Na2S04i koncentriše pod vakuumom. Sirovi materijal se hromatografira na silikagelu i eluira sa 4% MeOH/CH2CI2, dajući 0,138 g (27%) željenog proizvoda u obliku ulja, koje očvrsne pod vakuumom.
MS:241,1 (M+1 za C13H23NO3); Temp. toplj. 122-124°C;
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,46 (1H, dd, J=23,7 i 11,7Hz), 0,81-0,87 (9H, m), 1,56 (2H, d, J=13,4Hz), 1,65-1,76 (3H, m), 1,98 (3H, s), 2,18 (2H, s), 3,30 (3H, s).
Primer 17
Hidrohloridna so 1a, 3B, 5B-( 1-( izobutilamino- metil)- 3, 5- dimetil- cikloheksil1- sirćetne
kiseline
Primer 17 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen izobutiraldehid umesto propionaldehida (53% prinos).
MS: 256 (M+1 za C15H29NO2); Temp. toplj. 193-194°C;
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,53 (1H, dd, J=24,3i 12,5Hz), 0,81-0,90 (2H, m), 0,89 (6H, d, J=6,4Hz), 1,03 (6H, d, J=6,8Hz), 1,57-1,71 (5H, m), 2,09 (1H, m), 2,49 (2H, s), 2,88 (2H, d, J=7,1Hz), 3,19 (2H, s).
Primer 18
Hidrohloridna so 1a, 3B, 5B-( r3, 5- dimetil- 1-( fenetilamino- metil)- cikloheksill- sirćetne
kiseline
Primer 18 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen fenilacetaldehid umesto propionaldehida (16% prinos).
MS: 303 (M+1 za C19H29NO2); Temp. toplj. 188-189°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,46 (1H, dd, J=24,6i 12,3Hz), 0,81-0,91 (8H, m), 1,58-1,72 (5H, m), 2,50 (2H, s), 3,04-3,08 (2H, m), 3,26-3,30 (4H, m), 7,23-7,74 (5H, m).
Primer 19
Hidrohloridna so 1a, 3B. 5B-( 3, 5- dimetil- 1- f( 3- fenil- propilamino)- metin- cikloheksil}-
sirćetne kiseline
Primer 19 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen hidrocinamaldehid umesto propionaldehida (50% prinos).
MS: 318 (M+1 za C20H31NO2); Temp. toplj. 171-172°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,53 (1H, dd, J=24,6 i 12,1 Hz), 0,80-0,90 (2H, m), 0,90 (6H, d, J=6,0Hz), 1,60-1,72 (5H, m), 2,03-2,11 (2H, m), 2,45 (2H, s), 2,73 (2H, t, J=7,5Hz), 3,06 (2H, t, J=7,7Hz), 3,3 (2H, s), 7,20-7,18 (5H, m).
Primer 20
Hidrohloridna so ( 1-[( ciklobutilmetil- amino)- metil]- cikloheksil}- sirćetne kiseline
Primer 20 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen ciklobutanon umesto 2-metilbutiraldehida (70% prinos).
MS: 226 (M+1 za C13H23NO2); Temp. toplj. 176-177°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,16-1,60 (10H, br), 1,80-1,96 (2H, m), 2,21-2,40 (4H, m), 2,53 (2H, s), 2,97 2H, s), 3,73 1H, m).
Primer 21
Hidrohloridna so 1a, 3B. 5( 3- f1- n- izopropilamino- metil)- 3. 5- dimetil- cikloheksin-
sirćetne kiseline
Primer 21 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 9, izuzev što je korišćen aceton umesto propionaldehida (50% prinos).
M: 242 (M+1 za C14H27NO2); Temp. toplj. 206-207°C;
<1>H NMR (CD3OD) 6: 0,53 (1H, dd, J=24,8i 12,5Hz), 0,80-0,90 (2H, m), 0,99 (6H, d, J=6,1Hz), 1,35 (6H, d, J=6,6Hz), 1,55-1,78 (5H, m), 2,45 (2H, s), 3,18 (2H, s), 3,41 (1H, m).
Primer 22
1 - aminometil- 1 - cikloheksan- sirćetna kiselina
Ranije je objavljena, Satzinger et al., US 4,087,544, 2. maja 1978.
Primer 23
1 - aminometil- 1 - ciklopentan- sirćetna kiselina
Ranije je objavljena, Satzingeret al., US 4,087,544, 2. maja 1978.
Primer 24
Natrijumova so 1- aminometil- 1- ciklopentan- sirćetne kiseline
Ranije je objavljena, Satzingeret al., US 4,087,544, 2. maja 1978.
Primer 25
Natrijumova so 1 - midroksimetiOcikloheksan- sirćetne kiseline
Ranije je objavljena, Satzingeret al., US 4,087,544, 2. maja 1978.
Primer 26
Sinteza hidrohloridne soli ( 1-[( 2- metil- butilamino)- metil|- cikloheksil}- sirćetne
kiseline
Rastvor (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (Primer 22, 2,0 g, 11,7 mmol) u EtOH (100 mL) se tretira sa 2-metil-butiraldehidom (4 mL, 35,1 mmoL) i Pt02(0,5 g), pa se 2 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, tretira sa 1M HCI/Et20 (12 mL) i koncentriše pod vakuumom, pa rastvori u vrućem i-PrOH (10 mL), razblaži acetonom (600 mL), ohladi na 0°C i filtrira, dajući 1,58 g (49%) željenog proizvoda.
MS: 242,1 (M+1 za Ci4H27N02); Temp. toplj. 162-163°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,95 (3H, t, J=7,3Hz), 1,02 (3H, d, J=6,6Hz), 1,20-1,31 (1H, m), 1,42-1,56 (11H, m), 1,81-1,89 (1H, m), 2,63 (2H, dd, J=18,3 i 16,1Hz), 2,82 (1H, dd, J=12,5 i 8,3Hz), 2,99 (12,5 i 6,1Hz), 3,07 (2H, dd, J=25,6 i 12,9Hz).
Primer 27
Hidrohloridna so { 1- f( 4, 4, 4- trifluoro- butilamino)- metil1- cikloheksil}- sirćetne kiseline
Sintetizovana je u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen 4-trifluorobutiraldehid umesto 2-metil-butiraldehida (19% prinos).
MS: 282,1 (M+1 za C13H22NO2F3); Temp. toplj. 163-164°C.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,40-1,54 (11H, m), 1,96-2,04 (2H, m), 2,26-2,38 (2H, m), 2,57 (2H, s), 3,09-3,13 (4H, m).
Primer 28
Hidrohloridna so ( 1- etilaminometil- cikloheksiD- sirćetne kiseline
Primer 28 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen acetaldehid umesto 2-metilbutiraldehida (30% prinos).
MS: 200,1 (M+1 za C11H21NO2); Temp. toplj. 160-166°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,31-1,54 (13H, m), 2,54-2,56 (2H, m), 3,96-3,13 (4H, m).
Primer 29
Hidrohloridna so ( 1- r( ciklopropilmetil- amino)- metin- cikloheksil>- sirćetne kiseline
Primer 29 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen ciklopropankarboksaldehid umesto 2-metilbutiraldehida (62% prinos). MS: 226 (M+1 za C13H23NO2); Temp. toplj. 177-178°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,50-0,56 (2H, m), 0,71-0,74 (2H, m), 1,05-1,30 (1H, m), 1,42-1,54 (10H, m), 2,52 (2H, s), 2,94 (2H, d, J=7,3Hz), 3,10 (2H, s).
Primer 30
Hidrohloridna so ( 1 - f( 2- hidroksi- 1 - metil- etilamino)- metil]- cikloheksil}- sirćetne
kiseline
Primer 30 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen 1-hidroksi-propanon umesto 2-metilbutiraldehida (60% prinos).
MS: 230 (M+1, za Ci2H23N03); Temp. toplj. 164-165°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,30-1,32 (3H, m), 1,44-1,55 (10H, m), 2,60 (2H, s), 3,11 (2H, m), 3,28 (2H, br), 3,37 (1H, br), 3,57-3,61 (1H, m), 3,78-3,81 (1H,m).
Primer 31
Hidrohloridna so H-( izobutilamino- metil)- cikloheksill- sirćetne kiseline
Primer 31 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen ciklopropankarboksaldehid umesto 2-metilbutiraldehia (35% prinos). MS: 228 (M+1 za C13H25N02); Temp. toplj. 175-176°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,03 (6H, d, J=6,9Hz), 1,37-1,60 (10H, m), 2,10-2,17 (1H, m), 2,63 (2H, s), 2,87 (2H, d, J=7,4Hz), 3,07 (2H, s).
Primer 32
Hidrohloridna so ( 1- propilaminometil- cikloheksiO- sirćetne kiseline
Primer 32 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen propionaldehid umesto 2-metilbutiraldehida.
MS: 214,1 (M+1, za C12H23N02); Temp. toplj. 174-177°C;
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,93 (1H, t, J=6,3Hz), 0,99-1,03 (4H, m), 1,40-1,54 (13H; m), 1,72-1,78 (2H, m), 2,96-3,29 (2H, m).
Primer 33
Hidrohloridna so f1-( izopropilamino- metil)- cikloheksin- sirćetne kiseline
Primer 33 je sintetizovan u skladu sa postupkim Primera 26, izuzev što je korišćen aceton umesto 2-metilbutiraldehida.
MS: 214,1 (M+1, za C12H23NO2); Temp. toplj. 193-194°C;
<1>H NMR (CD3OD) 8: 1,29-1,57 (18H, m), 2,59 (2H, s), 3,07 (2H, s), 3,38-3,42 (1H, m).
Primer 34
Hidrohloridna so ( l- cikloheksilaminometil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Primer 34 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen cikloheksanon umesto 2-metilbutiraldehida (48% prinos).
MS: 254 (M+1, za C15H27NO2); Temp. topli. 198-199°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,20-1,60 (16H, m), 1,63-1,76 (1H, m), 1,88 (2H, br), 2,13 (2H, br), 2,60 (2H, m), 3,09 (3H, m).
Primer 35
Hidrohloridna so H- fbenzilamino- metill- cikloheksillsirćetne kiseline
Primer 35 je sintetizovan u skladu sa postupkom Primera 26, izuzev što je korišćen benzaldehid umesto 2-metilbutiraldehida.
MS: 262,0 (M+1, za Ci6H23N02); Temp. toplj. 125-135°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,38-1,49 (11H, m), 2,55 (2H, s), 3,07 (2H, s), 4,23 (2H, s), 7,43-7,49 (5H, m).
Primer 36
Hidrohloridna so (( 1R. 3R)- 3- metil- 1- propilaminometil- cikloheksil) sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((1R,3R)-1-aminometil-3-metil-cikloheksil)sirćetne kiseline (Primer 1, 1,1 g, 4,9 mmol) u etanolu (95 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (5 mL). Doda se propionaldehid (4,9 mL), a zatim 10% Pd/C (0,5 g), pa se reakcija 15,75 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se rastvor koncentriše pod vakumom. Ostatak se zatim rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), filtrira i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u izopropanolu (10 mL), pa rekristališe iz acetona. Talog se filtrira, a filtrat hladi preko noći, dajući drugu žetvu kristala. Taloži se sjedine, dajući željeni proizvod (0,78 g, 66%).
MS: 228,1 (M+1, za C13H25NO2); Temp. toplj. 179-179,5°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2029 (br), 1717, 1188.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,84-1,03 (8H, m), 1,12-1,17 (1H, m), 1,46-1,79 (8H, m), 2,43 (2H, s), 3,00 (2H, t, J=7,8Hz), 3,22 (2H, s).
Primer 37
Hidrohloridna so ( 1-[( ciklopentilmetil- amino) metil1- cikloheksil}- sirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (3,0 g, 17,5 mmol) u etanolu (45 mL). Doda se ciklopentankarbaldehid (5 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,25 g). Reakcija se zatim 16,5 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, zatim doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se reakcija koncentiše pod vakuumom. Ostatak se rekristališe iz vrućeg izopropanola i acetona, dajući željeni proizvod (2,32 g, 52%).
MS: 254,1 (M+1 za Ci5H27N02); Temp. toplj. 172-173°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2930, 2854, 2509, 1689, 1455, 1211.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,23-1,32 (2H, m), 1,41-1,73 (16H, m), 1,90 (1H, m), 2,63 (2H, s), 3,01 (2H, d, J=7,6Hz), 3,09 (2H, s).
Primer 38
Hidrohloridna so ( l- r( cikloheksilmetil- amino)- metin- cikloheksilVsirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (3,0 g, 17,5 mmol) u etanolu (45 mL). Doda se cikloheksankarbaldehid (5 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,25 g). Reakcija se zatim 16,5 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rekristališe iz vrućeg izopropanola i etra, dajući željeni proizvod (3,57 g, 67%).
MS: 268,1, za C16H29NO2); Temp. toplj. 167,5-168°C;
IR (KBr, cm'<1>): 2926, 2851, 1718, 1684
<1>H NMR (CD3OD) 8: 1,03 (1H, m), 1,20-1,85 (20H, m), 2,63 (2H, s), 2,88 (2H, d, J=6,8Hz), 3,07 (2H, s).
Primer 39
[ 1-( terc- butoksikarbonilamino- metil)- cikloheksil1- sirćetna kiselina
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (10,0 g, 58,4 mmol) u THF (280 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (128,5 mL). Reakcija se ohladi na 0°C, pa se u porcijama, uz snažno mešanje, dodaje 14,0 g (1,1 ekv.) di-ter-butildikarbonata. Reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature, pa se meša preko noći. Ispari se THF, a vodeni sloj opere etilacetatom (3x50mL). Vodeni sloj se zakiseli sa KH2PO4(44 g), pri čemu se zapaža pena. Postepeno ova pena se zameni belim talogom. Smeša se 2 h meša, dok se tokom tog vremena lagano dodaje KH2P04(1 g). Talog se filtrira i opere vodom, dajući željeni proizvod (15,2 g, 96%).
MS: 271,1 (M+1, za C14H25NO4); Temp. toplj. 181°C (razlag.);
IR (KBr, cm'<1>): 2933(br), 1709, 1666, 1531, 1248
<1>H NMR (CDCI3) 8: 1,27-1,58 (19H, m), 2,29 (2H, s), 3,12 (2H, d, J=6,8Hz), 4,97 (1H, br).
Primer 40
f 1 -( acetilamino- metil)- cikloheksill- sirćetna kiselina
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (2,0 g, 11,7 mmol) u H20 (20 mL), pa se zatim dodaju NaOH (3,1 g, 77,5 mmol, 6,6 ekv.) i anhidrid sirćetne kiseline (1,8 mL, 19,3 mmol, 1,7 ekv.). Reakcija se ostavi da se meša na sobnoj temperaturi 2 dana. Doda se 1M HCI (125 mL), pa se reakcija ekstrahuje sa EtOAc (125 mL). Odvoji se organski sloj, osuši iznad Na2S04i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u H20 (100 mL), tretira sa NaOH (0,12 g) i koncentriše pod vakuumom. Uzorak se zatim podvrgne fleš hromatografiji, sa 6% MeOH/CH2CI2, dajući željeni proizvod (0,31 g, 12%).
MS: 214,1 (M+1, za CnH19N03); Temp. toplj. 107-108°C;
TLC 0,31, 6% MeOH/CH2CI2; IR (KBr, cm"<1>): 3286, 3120, 2932, 2440, 1714, 1576, 1419, 131, 1208.
<1>H NMR (CDCb) 6: 1,25-1,51 (10H, m), 2,06 (3H, s), 2,28 (2H, s), 3,26-3,29 (2H, m), 6,32 (1H, br).
Primer 41
Hidrohloridna so (( 3R. 5S)- 1- ciklobutilaminometil- 3, 5- dimetil- cikloheksin- sirćetne
kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (0,76 g, 3,2 mmol) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (3,2 mL). Doda se ciklobutanon (1 mL, 6 ekv.), a zatim Pt02(0,2 g). Reakcija se 16 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira, doda 1M HCI u etru (35 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (150 mL) i filtrira. Zatim se ovom rastvoru dodaju aceton (100 mL) i etar (600 mL) koji su bili ohlađeni na 0°C. Rastvor se ostavi da stoji 2 h na 0°C i nakon tog vremena zapaze se kristali. Kristali se sakupe i operu etrom i acetonm (0,38 g, 41 %).
MS: 254,1 (M+1, za Ci5H27N02); Temp. toplj. 200-201 °C;
IR (KBr, cm"<1>): 2926, 1720, 1189
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,85-0,92 (8H, m), 1,60-1,73 (5H, m), 1,78-1,93 (2H, m), 2,22-2,38 (4H, m), 2,42 (2H, s), 3,11 (2H, s), 3,72-3,78 (1H, m).
Primer 42
Hidrohloridna so (( 3R, 5S)- 3, 5- dimetil- 1 - r( 2- metil- butilamino)- metil]- cikloheksil}- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (1,0 g, 4,4 mmol) u etanolu (47 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (4,4 mL). Doda se izobutiraldehid (1 mL, 3 ekv.), a zatim Pt02(0,17 g). Reakcija se 3 h mućka u amtosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira, doda 1M HCI u etru (10 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvoru u vrućem izopropanolu (100 mL) i filtrira. Zatim se koncentriše pod vakuumom, pa rekristališe iz acetona i heksana. Kristali se sakupe i operu heksanom, dajući željeni proizvod (0,89 g, 75%).
MS: 270,1 (M+1, za Ci6H3iN02); Temp. toplj. 171-173°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2964 (br), 1721, 1485, 1186, 840.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,81-1,07 (12H, m), 1,23-1,27 (1H, m), 1,45-1,72 (6H, m), 1,83-1,91 (1H, m), 2,50 (2H, s), 2,83 (1H, dd, J=8,3 i 12,5Hz), 3,00 (1H, dd, J=6,1i 12,5Hz), 3,13-3,29 (4H, m).
Primer 43
Hidrohloridna so f( 3R, 5S)- 1-[( 2- hidroksi- 1- metil- etilamino)- metil]- 3, 5- dimetil-
cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (1,0 g, 4,3 mmoL) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH
(4,3 mL). Doda se 1-hidroksi-propan-2-on (1 mL, 3 ekv.), a zatim Pt02(0,15 g). Reakcija se 82 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Dodaju se Pt02(0,1 g) M-hidroksi-propan-2-on (1 mL), pa se reakcija još 24 h mućka u atmosferi H2. Reakcija se zatim filtrira, doda 1M HCI u etru (35 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (150 mL) i filtrira. Zatim se koncentriše pod vakuumom, i rekristališe iz vrućeg izopropanola, acetona i etra. Sakupe se kristali, operu etrom i acetonom i osuše (0,30 g, 1,04 mmol, 24%).
MS: 258,1 (M+1, za Ci4H27N03); Temp. toplj. 178-179°C;
IR (KBr, cm"<1>): 3349, 2897, 1704, 1419, 1194.
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,48-0,57 (1H, m), 0,82-0,90 (8H, m), 1,25-1,32 (4H, m), 1,60-1,75 (5H, m), 2,47 (2H, s), 3,23 (2H, d, J=5,1Hz), 3,38 (1H, dd, J=12,0 i 7,1Hz), 2,79 (1H, dd, J=12,0 i 4,2Hz).
Primer 44
Hidrohloridna so (( 3R, 5S)- 1 - f( 2, 2- dimetoksi- etilamino)- metin- 3, 5- dimetil-
cikloheksin- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (1,0 g, 4,3 mmol) u etanolu (47 mL). Doda se glioksal 1,1-dimetilacetal (3,7 mL, 3,0 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,17 g). Reakcija se zatim 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (10 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL) i filtrira. Zatim se filtrat koncentriše i ostatak rekristališe iz acetona i heksana, dajući željeni proizvod (0,92 g, 75%).
MS: 288,1 (M+1, za C15H29NO4); Temp. toplj. 125°C (razlag.);
IR (KBr, cm"<1>): 2949, 1715, 1457, 1191, 1134, 1077.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,47-0,56 (1H; M), 0,81-0,90 (8H, m), 1,59-1,71 (5H, m), 2,46 (2H, s), 3,18 (2H, d, J=5,1Hz), 3,26-3,29 (2H, m), 3,45-3,47 (6H, m), 4,73 (1H, t, J=5,1Hz).
Primer 45
Hidrohloridna so {( 3R. 5SH- f( ciklopentilmetil- amino)- metil]- 3, 5- dimetil-
cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (1,0 g, 4,1 mmol) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (4,2 mL). Doda se ciklopentankarbaldehid (1,5 mL, 3 ekv.), a zatim Pt02(0,2 g). Reakcija se 12 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira, doda 1M HCI u etru (35 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (150 mL), pa filtrira. Zatim se rastvor koncentriše pod vakuumom i rekristališe iz vrućeg izopropanola, acetona i etra. Sakupe se kristali i operu etrom i acetonom (0,40 g, 27%).
MS: 282,1 (M+1, za C17H31NO2); Temp. toplj. 187-188°C;
IR (KBr, cn<T1>): 2952, 1720, 1452, 1185.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,81-0,90 (8H, m), 1,25-1,32 (2H, m), 1,60-1,71 (9H, m), 1,89-1,93 (2H, m), 2,25-2,29 (1H, m), 2,49 (2H, s), 3,01 (2H, d, J=7,6Hz), 3,20 (2H, s).
Primer 46
Hidrohloridna so |( 3R, 5S)- 1 - r( cikloheksilmetil- amino)- metin- 3, 5- dimetil-
cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (1,0 g, 4,2 mmol) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (4,3 mL). Doda se cikloheksankarbaldehid (1,5 mL, 3 ekv ), a zatim Pt02(0,15 g). Reakcija se 17 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira, doda se 1M HCI u etru (35 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (150 mL) i filtrira. Zatim se rastvor koncentriše pod vakuumom i rekristališe iz vrućeg izopropanola, acetona i etra. Sakupe se kristali i operu etrom i acetonom. (0,46 g, 34%).
MS: 296,2 (M+1, za C18H33NO2); Temp. toplj. 176-177°C;
IR (KBr, cm"1): 2919,2851, 1721, 1453, 1192.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,81-0,90 (8H, m), 1,00-1,36 (5H, m), 1,60-1,71 (11H, m), 2,49 (2H, s), 2,88 (2H, d, J=6,8Hz), 3,18 (2H, s).
Primer 47
Hidrohloridna so (( 3R, 5S)- 1- cikloheksilaminometil- 3, 5- dimetil- cikloehksil)- sirćetne
kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (0,99 g, 4,2 mmoL) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (4,2 mL). Doda se cikloheksanon (1,5 mL, 3 ekv.), a zatim Pt02(0,2 g). Reakcija se 17 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira, doda 1M HCI u etru (35 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (150 mL) i filtrira. Zatim se rastvor koncentriše pod vakuumom i rekristališe iz vrućeg izopropanola, acetona i etra. Sakupe se kristali i operu etrom i acetonom. (0,33 g, 25%).
MS: 282,1 (M+1, za Ci7H3iN02); Temp. toplj. 210°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2921, 1691, 1452, 1216.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,47-0,57 (1H, m), 0,82-0,90 (8H, m), 1,30-1,46 (5H, m), 1,57-1,63 (2H, m), 1,69 (4H, d, J=12,9Hz), 1,86 (2H, d, J=12,5Hz), 2,13 (2H, d, J=10,3Hz), 2,46 (s, 2H), 3,04-3,10 (1H, m), 3,21 (2H, s).
Primer 48
(( 3R15S)- 1- karboksimetil- 3, 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetna kiselina
Korak i: sinteza amonijumove soli ( 8R. 10S)- 8. 10- dimetil- 2, 4- diokso- 3- aza-
spiro[ 5, 5lundekan- 1, 5- dikarbonitrila ( 48a)
Ohladi se rastvor apsolutnog etanola (40 mL) na 0°C, pa se zasiti gasovitim NH3, i zatim tretira sa cis-3,5-dimetil-cikloheksanonom (5,0 g, 39,62 mmol) i etil cijanoacetatom (8,43 mL, 79,24 mmoL). Balon se zatvori, ostavi da se zagreje do sobne temperature i meša preko noći. Talog se dovoji filtriranjem, opere sa Et20 i osuši pod vakuumom, dajući 6,4 g (59%) željenog proizvoda u obliku svetle čvrste supstance.
MS: 260,1 (M+1, za C14H17N3O2);
IR (KBr, crn"1): 3298, 2954, 2172, 1700, 1575.
<1>H NMR (CDCb) 6: 0,46-0,50 (1H, m), 0,82-1,17 (11H, m), 1,65-1,98 (3H, m), 3,58 (2H, dd, J=13,8 i 6,8 Hz).
Korak ii: sinteza Primera 48
Tretira se (8S, 10R)-8,10-dimetil-2,4-diokso-3-aza-spiro[5.5]undekan-1,5-dikarbonitril (481, 25,36 g, 97,8 mmol) sa koncenrovanom H2SO4(102 mL) i vodom (30 mL). Reakcija se 5 h zagreva na 150°C, a zatim se ostavi da se ohladi do sobne temperature i meša preko noći. Reakcija se filtrira, sakupi talog i rastvori u 1M NaOH. Ovaj rastvor se filtrira, a filtrat zakiseli koncentrovanom HCI (40 mL). Sakupi se talog i preko noći suši pod visokim vakuumom. Jedinjenje se zatim rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), pa rekristališe iz vode, dajući željeni proizvod (13,21 g, 59%).
MS: 229,1 (M+1, za C12H20O4); IR (KBr, cm-<1>): 2950, 2913, 1698.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,40-0,48 (1H, m), 0,77-0,85 (8H, m), 1,57-1,77 (5H, m), 2,41 (2H,S), 2,56 (2H, s).
Primer 49
Hidrohloridna so frans-(( 3R, 5S)- 1 - hidroksimetil- 3, 5- dimetil- cikloheksin- sirćetne
kiseline
Koraci/i // : sinteza ( cis/ trans)-( 7S. 9R)- 7. 9- dimetil- 2- oksa- spirof4. 51dekan- 3-
ona ( 49a)
(i) : Suspenduje se di-kiselina (48, 6,36 g, 27,9 mmol) u H20 (93 mL), pa se tretira sa amonijum-hidroksidom (3,5 mL) i srebro-nitratom (4,73 g, 27,9 mmol), i 20 min meša na sobnoj temperaturi. Reakcija se filtrira, a talog resuspenduje tri puta u H20, zatim 2 dana suši pod vakuumom, u mraku na 50°C, dajući 6,41 g di-soli srebra, koja se odmah iskoristi. ( ii) : Di-so srebra (1,24 g, 2,81 mmol) se stavi u tamno žuti balon, tretira sa CCU (50 mL) i jodom (0,72 g, 2,81 mmol), pa se preko noći zagreva na 75°C. Reakcija se filtrira, koncentriše pod vakuumom, hromatografira na silikagelu i eluira sa 4:1 heksani/EtOAc, dajući 0,37 g (72%) željenog proizvoda u obliku svetlog ulja (49a). MS: 183,0 (M+1, za CnHi802);
IR (KBr, cm"<1>): 3298, 2954, 2172, 1700, 1575, 1450, 1337.
<1>H NMR (CDCb, -1:1 smeša cis/trans dijastereomera) 5: 0,49-0,59 (1H, m), 0,82-1,02 (10H, m), 1,42-1,53 (2H, m), 1,58-1,72 (3H, m), 2,30 (1H, s, za jedan
izomer), 2,39 (1H, s, za drugi izomer), 3,96 (1H, s, za jedan izomer), 4,10 (1H, s, za drugi izomer).
Korak iii: sinteza ( cis/ trans)- A/- benzil- 2-(( 3R, 5S)- 1- hidroksimetil- 3, 5- dimetil-
cikloheksiD- acetamid ( 49b i 49c)
Rastvori se lakton (49a, 0,85 g, 4,66 mmol) u THF (18 mL), tretira sa benzilaminom (0,61 mL, 5,60 mmol), pa se 2 dana zagreva pod refluksom. Reakcija se ohladi do sobne temperature, razblaži sa EtOAc, opere zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata i zasićenim rastvorom soli, osuši iznad Na2SC>4 i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 1:1 heksan/EtOAc, dajući0,79 g (59%) željenog proizvoda u obliku bistrog ulja (smeša cis i trans izomera, 49b i 49c).
MS: 290,1 (M+1, za Ci8H27N02); ulje; TLC: Si02, Rf 0,16 (2:1 heksan/EtOAc);
Korak iv: razdvajanje 49b i 49c
Smeša cis i trans izomera (49b i 49c) se razdvaja preparativnom HPLC (kolona C18, eluiranje sa gradijentom 60%CH3CN/40%H2O 5 min, zatim 45%CH3CN/ 55%H20 35 min; sve mobilne faze su sa 0,05% TFA).
trans-izomer (49b): sobna temperatura = 23,600 min; 54 mg prinos;
<1>H NMR (CDCI3) 5: 0,36-0,62 (3H, m), 0,82 (6H, d, J=6,3Hz), 1,39-1,70 (5H, m), 2,14 (2H, s), 2,58 (1H, bs), 3,60 (2H, s), 4,43 (2H, d, J=5,9Hz), 5,97 (1H, br), 7,26-7,37 (5H, m).
cis-izomer (49c): sobna temperatura = 25,828 min; Prinos 87 mg;
<1>H NMR (CDCI3) 5: 0,47-0,56 (1H, m), 0,65 (2H, t, J=13,2Hz), 0,85 (6H, d, J=6,3Hz), 1,47-1,68 (5H, m), 2,38 (2H, s), 2,58 (1H, br), 3,40 (2H, s), ,4,45 (2H, d, J=5,9Hz), 6,03 (1H, br), 7,28-7,36 (5H, m).
Korak v: sinteza Primera 49
Rastvori se trans-izomer /V-benzil-2-(1-hidroksimetil-cikloheksil)-acetamida (49b, 87 mg, 0,303 mmol), dobijen sa HPLC, u 5 mL vode, pa se tretira sa 24 mg NaOH. Reakcija se 3 dana zagreva pod refluksom. Zatim se ohladi do sobne temperature, razblaži sa 1M NaOH i ekstrahuje sa EtOAc. Vodeni sloj se zakiseli sa konc. HCI (5 mL), pa se zatim razblaži sa 1M HCI, a proizvod ekstrahuje sa EtOAc. Organski sloj se opere zasićenim rastvorom soli i osuši iznad Na2S04. rastvor se koncentriše, dajući 23 mg (61%) željenog proizvoda.
MS: 201 (M+1, za C11H20O3);
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,88-1,00 (8H, m), 1,40-1,49 (2H, m), 1,68-1,70 (3H, m), 2,28 (2H, s), 4,11 (2H, s).
Primer 50
Hidrohloridna so c/ s-(( 3R, 5S)- 1- hidroksimetil- 3, 5- dimetil- cikloheksin- sirćetne
kiseline
Rastvori se cis izomer A/-benzil-2-(1-hidroksimetil-cikloheksil)-acetamida dobijenog pomoću HPLC (49c, 87 mg, 0,303 mmol) u 5 mL vode, pa se tretira sa 24 mg NaOH. Reakcija se 3 dana zagreva pod refluksom, zatim ohladi do sobne temperature, razblaži sa 1M NaOH i ekstrahuje sa EtOAc. Vodeni sloj se zakiseli sa koncentrovanom HCI (5 mL), zatim razblaži sa 1M HCI, a proizvod ekstrahuje sa EtOAc. Organski sloj se opere zasićenim rastvorom soli i osuši iznad Na2S04. Rastvor se koncentriše, dajući 43 mg (71%) željenog proizvoda.
MS: 201,1 (M+1,zaCiiH2o03);
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,48-0,57 (1H, m), 0,88-0,96 (8H, m), 1,42-1,50 (2H, m), 1,59-1,69 (3H, m), 2,37 (2H, s), 3,94 (2H, s).
Primer 51
Hidrohloridna so ( 1- dimetilaminometil- cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (0,51 g, 3,0 mmol) u etanolu, pa se doda formaldehid (3 mL, 2 ekv.). Doda se 10% Pd/C (1,6 g), pa se reakcija 12 h mućka na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika, pod 1 bar. Zatim se reakcija tretira sa HCI sve dok pH ne bude oko 2, pa se rekristališe iz acetona i etra, dajući 1,62 g (87%) željenog proizvoda.
MS: 200,1 (M+1, za C11H21NO2); Temp. toplj. 140-142°C;
<1>H NMR (CD3OD) 6: 1,42-1,59 (10H, m), 2,63 (2H, s), 2,96 (6H, s), 3,26-3,29 (2H, m).
Primer 52
Hidrohloridna so ( 1 - butilaminometil- cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (0,86 g, 5,0 mmol) u etanolu (100 mL), pa se dodaju Pd/C (10%, 0,86 g) i butiraldehid (1,44 g, 3 ekv.). Reakcija se drži pod 1 bar vodonika na sobnoj temperaturi dok se ne završi. Zatim se filtrira, zakiseli i koncentriše. Ostatak se rastvori u izopropanolu, filtrira, rekristališe iz acetona i etra, dajući konačni proizvod.
MS: 228,1 (M+1, za C13H25NO2); Temp. toplj. 142-154°C
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,98 (3H, t, J=7,3Hz), 1,39-1,54 (12H, m), 1,66-1,72 (2H, m), 2,57 (2H, s), 3,01 (2H, t, J=9,3Hz), 3,09 (2H, s).
Primer 53
Hidrohloridna so { 1- r( 2, 2- dimetoksi- etilamino)- meti[|- cikloheksilVsirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (2,0 g, 11,7 mmol) u etanolu (100 mL). Doda se glioksal 1,1-dimetilacetal (3,7 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,5 g). Reakcija se zatim 4 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (15 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rekristališe iz vrućeg izopropanola (25 mL) i acetona (700 mL), dajući 0,44 g (52%) željenog proizvoda.
MS: 260,1 (M+1, za Ci3H25N04); Temp. toplj. 128-129°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2926, 1693, 1457, 1208, 1087
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,40-1,55 (10H, m), 2,60 (2H, s), 3,13 (2H, s), 3,17 (2H, d, J=4,9Hz), 3,45 (6H, s), 4,72 (1H, t, J=5,1Hz).
Primer 54
Hidrohloridna so ( 1- metilaminometil- cikloheksiD- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so {1-[(benzil-metil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetne kiseline (Primer 55, 4,1 g, 13,2 mmol) u 95% etanolu (250 mL). Doda se 10% Pd/C (1 g), pa se reakcija 1 h mućka, na sobnoj temperaturi, u atmosferi vodonika pod 1 bar. Reakcija se filtrira i koncentriše, a zatim rekristališe iz acetona i etra, dajući 2,69 g (92%) željenog proizvoda.
MS: 186,0 (M+1, za C10H19NO2); Temp. toplj. 158-162°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,42-1,54 (10H, m), 2,50-2,53 (2H, m), 2,71-2,74 (3H, m), 3,09-3,11 (2H, m).
Primer 55
Hidrohloridna so ( 1-[( benzil- metil- amino)- metil]- cikloheksil}- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetne kiseline (0,49 g, 1,7 mmol) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (1,8 mL). Doda se formaldehid (1 mL, 5 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,2 g). Reakcija se zatim 30 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (10 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom, dajući 0,31 g (1,14 mmol, 67%) željenog proizvoda.
MS: 274,1 (M-1, za Ci7H25N02); ulje; IR (KBr, cm-<1>): 3205, 2930, 2261, 1684, 1451, 1198. HRMS: (izrač.) 276,1963, (nađeno) 276,1973 (M+1, za Ci7H25N02);<1>H NMR (CD3OD) 6: 1,33-1,63 (13H, m), 2,28 (2H, s), 3,06 (2H, s), 7,21-7,34 (5H, m).
Primer 56
Hidrohloridna so [ 1-( fenetilamino- metil)- cikloheksil]- sirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (2,0 g, 11,7 mmol) u etanolu (100 mL). Doda se fenil-acetaldehid (4 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa 10% Pd/C (0,5 g). Reakcija se zatim 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rekristališe iz vrućeg izopropanola i etra, dajući 0,15 g (4,1%) željenog proizvoda.
MS: 276,1 (M+1, za C17H25N02); Temp. toplj. 182-183°C;
IR (KBr, cm"<1>): 2929, 2855, 2813, 1693, 1455, 1220.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,38-1,58 (10H, m), 2,56 (2H, s), 3,01-3,06 (2H, m), 3,14 (2H, s), 3,23-3,29 (2H, m), 7,21-7,34 (5H, m).
Primer 57
Hidrohloridna so ( 1- r( 3- fenil- propilamino)- metill- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Rastvori se (l-aminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina (2,00 g, 11,7 mmol) u etanolu (100 mL). Doda se 3-fenil-propionaldehid (4,6 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa 10% Pd/C (0,5 g). Reakcija se zatim 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rekristališe iz vrućeg izopropanola i etra, dajući 0,46 g (12%) željenog proizvoda.
MS: 290,1 (M+1, za Ci8H27N02); Temp. toplj. 168-169C;
IR (KBr, cm"<1>): 2932, 2854, 1686, 1454, 1217.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 1,38-1,58 (10H, m), 2,00-2,04 (2H, m), 2,56 (2H, s), 2,71 (2H, t, J=7,6Hz), 3,01-3,08 (4H, m), 7,21-7,34 (5H, m).
Primer 58
Natrijumova so (( 3R. 5S)- 1- hidroksimetil- 3. 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Rastvori se (7S,9R)-7,9-dimetil-2-oksa-spiro[4,5]dekan-3-on (49a, 1,04 g, 5,71 mmol) u vodi (25 mL), pa tretira sa NaOH (2,5 g). Reakcija se 4 h zagreva pod refluksom (115°C). Rastvor se zatim ohladi do sobne temperature, opere sa Et20, a vodeni sloj koncentriše pod vakuumom, dajući čvrstu supstancu (8 g). Ostatak se opere sa 1M sirćetnom kiselinom i ekstrahuje sa EtOAc, koji se zatim koncentriše. Ostatak se zatim rekristališe iz EtOA, MeOH i heksana, dajući 0,75 g (3,75 mmol, 66%).
MS: 199,0 (M-1, za C11H20O3); HRMS: (izrač.) 199,1334; (nađeno) 199,1333 (M-1, za C11H20O3); Temp. toplj. >250°C; IR (KBr, cm'<1>): 2953, 2910, 1777, 1458, 1168, 1012.
Primer 59
Hidrohloridna so (( 3R, 5S)- 1- etilaminometil- 3, 5- dimetil- cikloheksil)- sirćetne
kiseline
Hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (59a, 0,418 g, 1,8 mmol, jedinjenje 59a, se dobija u skladu sa procedurom iz literature: Brvans,J. Bioonganic and Medicinal Chemistry Letters,1997, 7(19), 2481), rastvori se u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (1,8 mL). Doda se acetaldehid (0,5 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,2 g). Reakcija se zatim 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (2 mL), pa se reakcija koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL) i filtrira. Filtratu na 0°C se dodaju heksani (100 mL), pa se sakupi talog, dajući 31 mg (0,14 mmol, 8%) željenog proizvoda.
MS: 228,1 (M+1, za Ci3H25N02); Temp. toplj. 167-168°C; IR (KBr, cm"<1>): 2954 (br), 2502, 1685, 1459, 1223.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,47-0,56 (1H, m), 0,78-0,89 (8H, m), 1,30-1,36 (3H, m), 1,61-1,79 (5H, m), 2,58 (2H, s), 2,99-3,10 (4H, m).
Primer 60
Hidrohloridna so ( 1- aminometil- 4- etil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Korak i: sinteza 2- cijano-( 4- etil- cikloheksiliden)- sirćetna kiselina etilestra ( 60a)
Rastvori se 4-etilcikloheksanon (13,0 g, 103,0 mmol) u toluenu (150 mL), pa se tretira sa amonijum-acetatom (0,79 g, 10,3 mmol), glacijalnom sirćetnom kiselinom (1,2 mL) i etilcijanoacetatom (11,65 g, 103,0 mmol). Reakcija se 56 h zagreva pod refluksom, sa Dean-Stark-ovim hvatačem, pa se zatim ohladi do sobne temperature i opere sa H20 (2*100 mL). Vodeni sloj se reekstrahuje toluenom (2x150 mL). Organski slojevi se sjedine i osuše iznad Na2S04, pa koncenetrišu pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 5:1 heksani/etilacetat, dajući 19,81 g (87%) željenog proizvoda u obliku bistrog žutog ulja (60a).
MS: 222,1 (M+1, za Ci3H19N02); ulje; TLC: Si02Rf0,93 (1:1 heksan/EtOAc);
IR (KBr, cm-<1>): 2931, 2225, 1728, 1602, 1233.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,82 (3H, t, J=7,4Hz), 1,11-1,38 (7H, m), 1,39-1,45 (1H, m), 1,90-2,09 (3H, m), 2,20-2,28 (1H, m), 2,91-2,98 (1H, m), 3,75-3,79 (1H, m), 4,15-4,20 (2H, m).
Korak ii: sinteza c/ s- 1- ciianometil- 4- etil- cikloheksankarbonitrila ( 60b)
Rastvori se 2-cijano-(4-etil-cikloheksiliden)-sirćetna kiselina etilestar (60a, 16,57 g, 74,86 mmol) u EtOH (100 mL), pa doda suspenziji NaCN (3,67 g, 74,86 mmol) u EtOH/H2o (300 mL/16 mL). Reakcija se preko noći zagreva pod refluksom, zatim ohladi do sobne temperature i filtrira da se ukloni so koja se istaložila (4,58
g). Filtrat se koncentriše pod vakuumom, dajući bistro, veoma viskozno, žuto ulje. Ovaj ostatak se fleš-hromatografira na silicijum-dioksidu i eluira sa 16:1
heksani/EtOAc, dajući 11,82 g (77%) (smeša 81% cis- i 19% trans-izomera), proizvoda, u obliku žutog ulja (60c).
MS: nije opažen M+1 jon (CnHi6N2); ulje; TLC: Si02, Rf0,55 (2:1 heksan/EtOAc); IR (KBr, crn"1): 2934, 2240, 1453.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,90 (3H, t, J=7,6Hz), 1,18-1,47 (7H, m), 1,83-1,87 (2H, m), 2,07-2,10 (2H, m), 2,85 (2H, s).
Korak iii: sinteza c/ s-( 1- ciiano- 4- etil- cikloheksil)- sirćetna kiselina etilestra ( 60c)
Rastvori se c/s-1-cijanometil-4-etil-cikloheksankarbonitril (60b, 6,16 g, 34,96 mmol) u EtOH (92 mL) i toluenu (92 mL), ohladi na 0°C, pa se zasiti gasovitim HCI. Rastvor se zatvori i ostavi da se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Zatim se koncentriše pod vakuumom, dajući žućkasto-belu čvrstu supstancu. Ostatak se triturira etiletrom (200 mL) i osuši pod vakuumom, pa zatim tretira sa H20 (90 mL) i doda 1M HCI (4 mL). Reakcija se ostavi da se preko noći meša na sobnoj temperaturi, a posle 18 h se opaze žute kapljice ulja u rastvoru. Ovo jedinjenje se ekstrahuje sa EtOAc (3x100 mL), organski slojevi sjedine, operu zasićenim rastvorom soli, osuše iznad Na2S04i koncentrišu. Ostatak se fleš-hromatografira, sa 16:1 heksani/EtOAc, dajući 4,40 g (56%) željenog proizvoda (60c).
MS: 224,1 (M+1, za C13H21NO2); ulje; TLC: Si02lRf 0,38 (CH2CI2);
IR (KBr, cm"<1>): 2930, 2236, 1736, 1187.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,87-0,90 (3H, m), 1,18-1,46 (10H, m), 1,77-1,80 (2H, m), 2,05-2,09 (2H, m), 2,59 (3H, s), 4,13-4,15 (2H, m).
Korak iv: sinteza 8- etil- 2- aza- spirof4. 51dekan- 3- ona ( 60d)
Rastvori se c/s-( 1-cijano-4-etil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (60c, 2,7 g, 12,1 mmol) u MeOH (250 mL), pa se tretira sa 10% Pd/C (0,5 g) i 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se zatim filtrira i koncentriše pod vakuumom, pa hromatografira na silikagelu i eluira sa 3% MeOH/CH2CI2, dajući 1,13 g (52%) željenog proizvoda u obliku bele čvrste supstance (60d).
MS: 181,0 (M+1, za CnH19NO); Temp. toplj. 131-133°C; TLC: Si02, Rf0,22 (4% MeOH/CH2CI2); IR (KBr, cm"1): 3197,2918,1680.
<1>H NMR (CDCI3) 5: 0,83-0,97 (5H, m), 1,06-1,23 (3H, m), 1,31-1,39 (2H, m), 1,63-1,67 (4H, m), 2,09-2,11 (2H, m), 3,15-3,17 (2H, m), 5,73 (1H, br).
Korak v: sinteza Primera 60
Tretira se 8-etil-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (60d, 3,8 g, 21,1 mmol) sa koncentrovanom HCI (141 mL), pa se 24 h zagreva na 110°C. Reakcija se zatim koncentriše i rekristališe iz vrućeg izopropanola (20 mL) i acetona, dajući 3,3 g (16,6 mmol, 78%) proizvoda.
MS: 200,1 (M+1, za CnH21N02); IR (KBr, cm"<1>): 2916 (br), 1698, 1526, 1281.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,89 (3H, t, J=7,3Hz), 1,02-1,40 (8H, m), 1,68 (4H, t, J=16,1Hz), 2,38 (3H, s), 3,13 (2H, s).
Primer 61
Hidrohloridna so ( 1- aminometil- 4- propil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Korak i: sinteza 2- ciiano-( 4- propil- cikloheksiliden)- sirćetna kiselina etilestra ( 61a)
Rastvori se 4-n-propil-cikloheksanon (14,0 g, 99,8 mmol) u toluenu (145 mL), pa se tretira sa amonijum-acetatom (0,77 g, 9,98 mmol), glacijalnom sirćetnom kiselinom (1,1 mL) i etilcijanoacetatom (11,3 g, 99,8 mmol). Reakcija se preko noći zagreva pod refluksom sa Dean-Stark-ovim hvatačem, pa zatim ohladi do sobne temperature i opere sa H20 (2x200 mL). Vodeni sloj se reekstrahuje toluenom (3x200mL). Sjedine se organski slojevi, osuše iznad Na2S04i koncentrišu pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 8:1 heksan/etilacetat, dajući 21,58 g (92%) željenog proizvoda u obliku bistrog žutog ulja (61a).
MS: 236,1 (M+1, za Ci4H2iN02); ulje; TLC: Si02, Rf 0,57 (8:1 heksan/EtOAc);
IR (KBr, cm"<1>): 2929, 2225, 1728, 1603, 1227.
<1>H NMR (CDCI3) 5: 0,83 (3H, t, J=7,3Hz), 1,07-1,30 (9H, m), 1,51-1,56 (1H, m), 1,91-2,00 (2H, m), 2,04-2,12 (1H, m), 2,23-2,30 (1H, m), 2,95-3,01 (1H, m), 3,77-3,83 (1H, m), 4,20 (2H, q, J=7,1Hz).
Korak ii: sinteza c/ s- 1- ciianometil- 4- propil- cikloheksankarbonitrila ( 61b)
Rastvori se cijano-(4-n-propil-cikloheksiliden)-sirćetna kiselina etilestar (61a, 19,46 g, 82,70 mmol) u EtOH (100 mL) i doda suspenziji NaCN (4,053 g, 82,70 mmol) u EtOH/H20 (340 mL/20 mL). Reakcija se preko noći zagreva pod refluksom, zatim ohladi do sobne temperature i filtrira da se ukloni istaložena so. Filtrat se koncentriše pod vakuumom, dajući bistro, veoma viskozno, žuto ulje. Ovo ulje se ponovo rastvori u EtOAc, pa opere zasićenim rastvorom soli (2x150mL), osuši iznad Na2S04i koncentriše. Ostatak se fleš-hromatografira na silikagelu i eluira sa 19:1 heksan/EtOAc, dajući 4,69 g 61b. (74% prinos).
MS: nije opažen M+1 jon (Ci2H18N2); ulje; TLC: Si02, Rf0,38 (3:1 heksan/EtOAc);
IR (KBr, cm'<1>): 2931, 2239, 1453, 758.
<1>H NMR (CDCI3) 8: 0,86 (3H, t, J=7,1Hz), 1,18-1,34 (7H, m), 1,42-1,61 (2H, m), 1,81-1,83 (2H, m), 2,06-2,09 (2H, m), 2,65 (2H, s).
Korak iii: sinteza c/ s-( 1- ciiano- 4- propil- cikloheksil)- sirćetna kiselina etilestra ( 61c)
Rastvori se c/s-1-cijanometil-4-/?-propil-cikloheksankarbonitril (61b, 3,87 g, 20,34 mmol) u EtOH (50 mL) i toluenu (50 mL), ohladi na 0°C, pa se 20 min zasićava gasovitim HCI. Rastvor se zatvori, pa se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Zatim se koncentriše pod vakuumom, dajući žućkasto-belu čvrstu susptancu. Ovaj ostatak se triturira etiletrom (200 mL), osuši pod vakuumom, a zatim rastvori u H20 (80 mL). Doda se 1M HCI (4 mL). Posle 4 h mešanja, reakcija se izbistri, pa se ostavi da se preko noći meša na sobnoj temperaturi. Posle 18 h u rastvoru se zapažaju kapljice žutog ulja. Ovo jedinjenje se ekstrahuje sa EtOAc (4x200mL), organski slojevi sjedine, operu zasićenim rastvorom soli (2x200 mL), osuše iznad Na2S04i koncentrišu. Ostatak se fleš-hromatografira, sa 19:1 heksani/EtOAc, pa se dobije 3,27 g proizvoda (61c, 68%).
MS: 238,1 (M+1, za Ci3H2iN02); ulje; TLC: Si02, Rf 0,38 (CH2CI2);
IR (KBr, crrf1): 2929, 2236, 1736, 1185.
<1>H NMR (CDCI3) 6: 0,85 (3H, t, J=7,1Hz), 1,19-1,55 (10H, m), 1,71-1,74 (2H, m), 2,08-2,21 (2H, m), 2,59 (2H, s), 4,16 (2H, q, J=7,1Hz).
Korak iv: sinteza c/ s- 8- propil- 2- aza- spirof4. 51dekan- 3- ona ( 61 d)
Rastvori se c/s-(1-cijao-4-propil-cikloheksil)-sirćetna kiselina etilestar (61c, 8,27 g, 34,8 mmol) u metanolu (90 mL), tretira sa trietilaminom i 10%Rh/2%Pd/C, pa se 55 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se hromatografira na silikagelu i eluira sa 5:1 heksanl/EtOAc, dajući 6,41 g (61 d, 94%) željenog prozivoda.
MS. 196,1 (M+1, za C12H2iNO); ulje; TLC: Si02, Rf 0,38 (heksan/EtOAc);
IR (KBr, cm"<1>): 3192, 2914, 1704, 1678.
<1>H NMR (CDCI3) 5: 0,83-1,17 (5H, m), 1,18-1,39 (7H, m), 1,61-1,65 (2H, m), 1,71-1,74 (2H, m), 2,11 (2H, s), 3,16 (2H, s), 5,85 (1H, br).
Korak v: sinteza Primera 61: hidrohloridne soli ( 1- aminometil- 4- propil-
cikloheksiP- sirćetne kiseline
Tretira se 8-propil-2-aza-spiro[4.5]dekan-3-on (61 d, 5,8 g, 29,75 mmol) sa koncentrovanom HCI (150 mL), pa se preko noći zagreva na 115°C. Reakcija se zatim ostavi da se ohladi do sobne temperature, kada se opazi talog. Ovaj se filtrira, dajući 3,47 g bele čvrste supstance, a filtrat se ohladi, pa ponovo filtrira dajući ukupno 6,24 g (99%) željenog proizvoda.
MS: 214,1 (M+1, za Ci2H23N02); Temp. toplj. 142-144°C;
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,86-0,90 (3H, m), 0,97-1,41 (10H, m), 1,61-1,75 (4H, m), 2,37 (2H, s), 3,13 (2H, s).
IR (KBr, cm"<1>): 2919, 1702, 1525, 1461, 1188.
Primer 62
Hidrohloridna so (( 3R. 5S)- 3, 5- dimetil- 1 - propilaminometil- cikloheksiO- sirćetne
kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((3R,5S)-1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetne kiseline (59a, 0,50 g, 2,12 mmol) u etanolu (45 mL), pa se tretira sa 1,8 mL 1M NaOH. Doda se propionaldehid (0,5 mL, 3 ekv.), pa se reakcija tretira sa Pt02(0,2 g). Reakcija se zatm 3 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru ( 5 mL), pa se koncentriše pod vakuumom. Ostatak se ponovo rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), pa se filtrira. Filtrat se koncentriše i rekristališe iz vrućeg izopropanola (4 mL), Et20 (225 mL) i heksana (150 mL), dajući 200 mg (0,83 mmol, 39%) proizvoda.
MS: 242,1 (M+1, za Ci4H27N02); IR (KBr, cm"<1>): 2952 (br), 1686), 1457, 1218.
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,48-0,57 /1H, m), 0,78-1,05 (11H, m), 1,61-1,78 (7H, m), 2,60 (2H, s), 2,93-3,00 (4H, m).
Primer 63
Hidrohloridna so f( 1 R, 3R)- 1-( benzilamino- metin- 3- metil- cikloheksil1- sirćetne
kiseline
Rastvori se hidrohloridna so ((1R,3R)-1-aminometil-3-meti-cikloheksil)-sirćetne kiseline (Primer 1, 3,0 g, 13,5 mmol) u etanolu (80 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (14 mL, 1+ekvivalent). Doda se benzaldehid (4,5 mL), a zatim 10% Pd/C (1,0 g), pa se reakcija 2,75 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (20 mL), pa se rastvor koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), filtrira i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u minimalnoj zapremini vrućeg izopropanola koja je neophdona za rekristalisanje iz etra. Talog se filtrira, a filtrat se preko noći hladi, dajući drugu žetvu kristala. Taloži se sjedine, dajući 1,35 g (36%) željenog proizvoda.
MS: 276,1 (M+1, za C17H25NO2); HPMS: (izrač.) 176,1863, (nađeno) 276,1962 (M+1, za C17H25NO2); Temp. toplj. 157-158°C; IR (KBr, cm-<1>): 2932(br), 1691, 1450, 1201.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,77-1,69 (12H, m), 2,42 (2H, s), 3,21 (2H, s), 4,25 (2H, s), 7,43-7,52 (5H, m).
Primer 64
Hidrohloridna so {( 1R, 3R)- 1- f( benzil- metil- amino)- metin- 3- metil- cikloheksil)-sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so [(1R,3R)-1-(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetne kiseline (Primer 63, 1,02 g, 3,27 mmol) u etanolu (40 mL), pa se tretira sa 1M NaOH (3,3 mL, 1+ekv.). Doda se formaldehid (2,5 mL), a zatim Pt02(0,1
g), pa se reakcija 8 h mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (10 mL) i rastvor koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim
rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), filtrira i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u minimalnoj zapremini vrućeg izopropanola neophodnoj za rekristalisanje iz etra i heksana. Sakupi se talog, dajući 0,704 g (2,16 mmol, 66%) željenog proizvoda.
MS: 290,1 (C18H27NO2); HRMS: 290,2128 (Ci8H27N02); Temp. toplj. 204-205°C; IR (KBr, cm"<1>): 2926(br), 1720, 1457, 1387, 1203.
<1>H NMR (CD3OD) 8: 0,82-0,98 (5H, m), 1,24-1,91 (7H, m), 2,38-2,58 (2H, m), 2,91 (3H, d, J=11,2Hz), 3,43-3,54 (2H, m), 4,33-4,49 (2H, m), 7,50-7,56 (5H, m).
Primer 65
Hidrohloridna so (( 1R. 3R)- 3- metil- 1- metilaminometil- cikloheksil)- sirćetne kiseline
Rastvori se hidrohloridna so {(1R,3R)-1-[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetne kiseline (Primer 64, 0,60 g, 1,84 mmol) u etanolu (50 mL). doda se 20% Pd/C (0,1 g), pa se reakcija 7 min mućka u atmosferi H2(3,4 bar). Reakcija se filtrira, doda 1M HCI u etru (5 mL), pa se rastvor koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u vrućem izopropanolu (100 mL), filtrira i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se zatim rastvori u minimalnoj zapremini vrućeg izopropanola, neophodnoj za rekristalisanje iz etra i heskana, dajući kristale, 0,15 g (35%) željenog proizvoda.
MS: 200,1 (M+1, za CnH2iN02); HRMS: (izrač.) 200,1650, (nađeno) 200,1646 (M+1, za CnH2iN02); Temp. toplj. 160-161°C; IR (KBr, cm-<1>): 2025(br), 1719, 1457.
<1>H NMR (CD3OD) 5: 0,83-0,97 (5H, m), 1,20-1,28 (1H, m), 1,42-1,74 (6H,m), 2,38 (2H, s),2,73 (3H, s), 3,23 (2H, s).
Primer 66
Rezime
Koristećiex vivomodel sveže isečenih retina pacova, ispitivani su mehanizmi po kojima se održavaju nivoi glutamata u mozgu, u neuronskom tkivu unutar normalnih granica. Od značaja može da bude sintetaza anaplerotičkog glutamata za dopunjavanje oksidisanog glutamata u gliji posle neuraotransmisije. Tačke kontrolisanja brzine na ovomde novoputu identifikovane su preko karboksilovanja piruvata i transaminacije račvaste aminokiseline. Da bi se testirala relacija između sinteze glutamata i aktivnosti piruvat karboksilaze, merena je sinteza<14>C-glutamata i<14>C-glutamina iz H<14>C03, kao funkcija piruvata u medijumu. Povećanje piruvata od 0,2 na 5 mM je povećalo sintezu<14>C-aminokiseline za 66±15%. Specifična radiokativnost glutamina u odnosu na H<14>C03, posle 20 min unkubacije, pokazuje da je približno 30% glutamina u retini nastalo iz vezivanja bikarbonata. Da bi se testirala zavisnost sinteze glutamata u odnosu na raspoložive račvaste aminokiseline (BCAA), kao izvor azota, meren je efekat inhibicije neuronske aminotransfraze račvastog lanca (BCATc). Gabapentin (GBP) (1mM), kao selektivni inhibitor BCATc u neuronima, inhibira sintezu<14>C-glutamata i<14>C-glutamina iz H14C03za 31%, bez pokazivanja ugradnje H<14>C03u intermedijare laktata i ciklusa limunske kiseline. Inhibicijade novosinteze glutamata se suzbija dodavanjem 0,6 mM BCAA. Podaci pokazuju sa piruvat karboksilaza i aminotransfraza račvastog lanca zajednički kontrolišu brzinude novosinteze glutamata u retini i da jede novosinteza glutamata kvantitativno od značaja za održavanje sadržaja glutamata u retini.
Postupci
Eksperimentalne životinje
U svim eksperimentima korišćeni su pacovi Sprague Dawley (200-400 g). Pacovi se drže pod ciklusom svetio/mrak od 12 h, a hrane se i pojead libidum.Posle anesteziranja pacova sa nembutalom (IP), oči se vade enukleacijom, a retine isecaju u puferu ohlađenom ledom.
Fiksiranje CO?
Sveže izolovane polovine retina se preinkubiraju 3 min na 37°C u puferu A (pH 7,4), koji sadrži 118 mM NaCI 4,7 mM KCI, 2,5 mM CaCI2, 1,2 mM KH2P04, 1,17 mM MgS04, 20 mM HEPES, 5 mM glukoza, 0,05 mM NH4CI i 25 mM NaH14C03. U puferu se takođe sadrži piruvat (ili 0,2 ili 5 mM). Uravnoteži se 1 mL pufera sa 95% O2i 5% CO2, kao i gasovita faza unutar fiola od 20 mL. Inkubacije se počinju dodavanjem 10 uCi/mL H14CC>3. Sudovi se odmah zatvore u odnosu na atmosferu. Većina inkubacija se nastavi 20 min, mada u nekim preliminarnim studijama, vremena su varirana od 10-60 min. Reakcije se zaustavljaju uklanjanjem polovina retine iz pufera i stavljanjem istih u 2% perhlornu kiselinu. Pufer se odvojeno zakiseli perhlornom kiselinom (konačna koncentracija 2%), pa se neizreagovali 14C02 ostavi da difunduje iz zakišeljenih uzoraka.
Ukupna količina proizvoda (metaboliti sa neisparljivim ugljenikom 14) određuje se merenjem radiokativnosti u alikvotima medijuma i uzorcima tkiva. Metaboliti u ovim ekstraktima se izdvajaju hromatografijom na Dowex-1 acetatu, kao što je ranije opisano u: Vvllliamson, J.R. i Corkev, B. (1969), "Methods in Enzimologv", Vol. 13, uredn. Lovvenstein, J.M. (Academic Press), str. 434.513, a kvantitativno određuju scintilacionim brojanjem. U većini slučajeva, podaci za pojedine metabolite ugljenika 14 su dati kao zbir radioaktivnosti u medijumu i u ekstraktu tkiva. Kompletno kvantitativno određivanje količina metabolita<14>C i u retini i u medijumu se može naći u nastavku u Tabelama I i II.
Podaci koji nisu pokazani u odeljcima rezultata i u diskusije, sakupljeni su tokom obavljanja vrednovanja uticaja piruvata na vezivanje H<14>C03u retini. Slika 2 pokazuje samo efekat piruvata na zbir glutamata i glutamina i na zbir piruvata i laktata. Tabela I daje vrednosti za sve metabolite koji su postali obeleženi sa H<14>CC>3i njihovu podelu.
Slično, dodatni podaci, koji nisu prikazani u odeljicma rezultata i diskusije, sakupljeni su pri vrednovanju uticaja gabapentina. Tako, Tabela II predstavlja podatke prikazane na Slici 4 i daje vrednosti za sve metabolite obeležene sa H<14>CC>3i njihovu podelu. Postupak hromatografije, koji se koristi u ovom primeai, razdvaja glutamin, glutamat, asparaginat i mlečnu kiselinu. Intemredijari ciklusa limunske kiseline ostaju na Dowex kolonama i određuju se iz razlike između ukupnog broja impulsa u uzorku i broja impulsa u delu koji je eluiran. Dokaz valjanosti ove procedure je ranije objavljen. Pre podvrgavanja uzoraka hromatografiji,<14>C-piruvinska kiselina u uzorcima se stehiometrijski konvertuje u laktat, tretiranjem uzoraka sa viškom NADH i laktat dehidrogenazom. Stoga, jedini pik laktata koji se daje sadrži sav ugljenik 14 i u laktatu i u piruvatu. Da bi se odredila posebno aktivnost glutamata i glutamina u uzorcima retine, količina mase glutamata je merena fluorometrijski, koristeći standardnu enzimsku proceduru: Patel, M.S.
(1989), u "Neuromethods: Carbohvdrate and Energv Metabolism", Vol. II, uredn. Boulton, A.A. i Baker, G.D. (The Humana Press, Ine), str. 309-340. Sadržaj mase glutamina se meri hromatografskim razdvajanjem od glutamata, posle luminometrijskog određivanja koje je ranije opisano. ATP i kreatinfosfat se mere fluorometrijski, koristeći enzimski test.
Protein iz retine se određuje korišćenjem DC proteinskog testa (Bio-Rad, Richmond, CA, USA). Svaka polovina retine sadrži oko 0,4 mg proteina.
Test piruvat karboksilaze
Aktivnost piruvat karboksilaze se testira u svežim uzorcima celokupng mozga i isečcima retine. Postupak su opisali Patel, M.S. (1989) u "Neuromethods: Carbohvdrate and Energv Metabolism", Vol. II, uredim. Boulton, A.A. i Baker, G:D. (The Humana Press, Ine), str. 309-340, koji obuhvata merenje vezivanja<14>C02u sonifikovanom tkivu, pod optimalnim uslovima.
VVestem Blot analiza
SDS-PAGE je obavljan kao što je opisao Patel, M.S. (1989) u "Neuromethods: Carbohvdrate and Energv Metabolism", Vol. II, uredm. Boulton, A.A. i Baker, G.D. (The Humana Press, Ine), str. 309-340, koristeći 10% gelove. Za imunobloting analizu, proteini se prenose na membrane Immobilion P. Membrane se blokiraju sa 5% BSA, pa se inkubiraju sa zečjim anti-pacovskim BCATc peptidnim anitelom prečišćenim imunnoafinitetom (razblaženje 1:1000), ili zečjim anti-humanim BCATm peptidnim antitelom prečišćenim imunoafinitetom (razblaženje 1:1000). Trake imunoreaktivnog proteina se vizualizuju korišćenjem ECI sistema, u skladu sa instrukcijama proizvođača (Amersham, Arlington Heights, IL, USA).
Izračunavanja i statistika
Podaci u tekstu i na slikama, odnose se na određivanja dpm/mg za određeni metabolit, podeljeni sa specifičnom aktivnošću medijuma HCO3. Stoga, svi podaci su dati u nmol H<14>C03/mg proteina za bilo koji dati metabolit.
Rezultati se daju kao srednjavrednost ± standardna greška srednje vrednosti. Statistički značaj je ocenjivan na osnovu parova t-testom i za p<0,05. Brojevi nezavisnih određivanja (n) su dati na slici i u legendi tabela.
Rezultati
Sadržaji piruvat karboksilaze su slični u retini i celokupnom mozgu
Patel je pokazao da je piruvat karboksilaza glavni enzim za vezivanje CO2u mozgu odraslih glodara. Da bi se procenilo da li ovo može da bude isto tako i u retini, poređena je aktivnost piruvat karboksilaze na 37°C u sonikatima iz neokorteksa sa istima iz retine. Sadržaji u neokorteksu (2,9±0,1 nmolH14CC>3vezanog/min/mg), pokazuju da je piruvat karboksilaza isto aktivna u retini kao i u celokupnom mozgu.
Brzine vezivanja 14CO? i pojave 14C- qlutamata u funkciji sadržaja piruvata u retini
U preliminarnim eksperimentima retine su inkubirane sa 0,2 mM piruvata, kao što je opisano u postupcima za 10, 20, 40 i 60 min. Praćen je ukupan<14>C02, kao i sadržaji ATP i kreatinfosfata. Sadržaji ATP i kreatinfosfata su ostali konstantni u zavisnosti od vremena, što pokazuje da su sve vreme oksigenacija i kontrola pH bili adekvatni. Vezivanje ukupnog CO2(5,50±0,14 nmol/mg proteina) dostiže maksimum između 20 i 40 min, ali je u 10 min već 76% od maksimalne vrednosti (4,2±0,1 nmol/mg). Pošto su sadržaji ATP (20±0,2 nmol/mg) i kreatinfosfata (16±1,1 nmol/mg) bili visoki i nisu se menjali sa vremenom, maksimum pokazuje da je brzina vezivanja CO2konstantna, ali i da je kontinualni raspad proizvoda neisparljivog ugljenika 14 u C02i H20 dovodio do skoro stacionarnog sadržaja specifične radioaktivnosti glutamata i glutamina nakon 20 min.
Da bi se testirala kontrola karboksilovanja piruvata preko sinteze glutamata, retine su inkubirane ili sa 0,2 ili sa 5 mM piruvatom u medijumu, pa su analizirani unutarćelijski i vanćelijski metaboliti. Ukupni<14>C02vezan za 20 min, u prisustvu 0,2 mM piruvata je bio 5,27±0,45 nmol H<14>C03/mg, dok je isti, vezan u prisustvu 5 mM piruvata, bio 9,50±0,74 nmol H<14>CC>3/mg. Slika 2 pokazuje da je porast neobeleženog piruvata, od 0,2 na 5 mM, povećao zbir<14>C-glutamata i14C-glutamina (od 1,74±0,19 na 2,90±0,31 nmol/mg, p<0,005). Slika 2 takođe pokazuje da inkubacija sa više piruvata povećava vrednosti za<14>C-laktat i14C-piruvat. Dakle, u stacionarnom stanju, povećanje koncentracije piruvata od 0,2 na 5 mM povećava ugradnju H<14>CC>3u glutamat i glutamin za 66%, dok je kod piruvata povećanje porasta ugradnje H<14>C03u piruvat i laktat za 111%. Ugljenik 14, koji je ciklusom ušao u piruvat i laktat, predstavlja glijalno recikliranje preko piruvat karboksilaze, jabučnog enzima i fosfenolpiruvat karboksikinaze, i po prvi put demonstrira da je ciklus dekarboksilacije limunske kiseline aktivan u nedirnutom neuronskom tkivu.
Ovi podaci pokazuju da porast fluksa preko piruvat karboksilaze indukuje porastde novosinteze glutamata u retini. Istovremeno se dešava nešto veći porast recikliranja piruvata.
Veliki udeo ukupne sinteze glutamina proističe iz karboksilovanja piruvata
Značaj karboksilovanja piruvata kao izvora za dopunjavanje glutamata oslobođenog sa krajeva nerava retine tokom neuronske transmisije, testira se određivanjem specifične radioaktivnosti glutamina u tkivu retine, inkubiranom u medijumu koji sadrži H<14>C03. Fiksan odnos sinteze glutaima u retini potiče od neobeleženog glutamata koji se oslobađa iz neurona i biva apsorbovan u Milerovoj gliji. Ostatak dolazi iz glijalnog a-ketoglutarata sintetizovanog anaplerotički iz piruvata i<14>C02. Stoga, specifična radiokativnost glutamata u odnosu na specifičnu radioaktivnost H<14>C03predstavlja minimalnu vrednost za odnos glutamina koji potiče iz anapleroze. Proizvod piruvat karboksilaze u gliji je [1,4-<14>C]-oksaloacetat. Položaji 1 i 4 su obeleženi, zato što se ugljenik 14 koji se prvobitno ugradi u 4-C položaj oksaloacetata biva usrednjen između položaja 1 i 4, preko u ravnoteža vanja oksaloacetata sa simetričnim fumaratom. Obeleženi oksaloacetat se kondenzuje sa piruvatom formirajući citrat, koji zatim izomerizuje u izocitrat. Potom se [1,4-<14>C]-izocitrat oksidiše i dekarboksiluje u [5-<14>C]-a-ketoglutarat pomoću izocitrat dehidrogenaze. Prema tome, a-ketoglutarat sintetizovan anaplerotički ima približno polovinu specifične radioaktivnosti prvobitnog supstrata H<14>C03, zavisno od stepena usrednjavanja obeleženog oksaloacetata. Ovo je takođe slučaj sa glutaminom sintetizovanim iz [5-<14>C]-a-ketoglutarata.
Specifična aktivost glutamina se meri u ekstraktima tkiva retine koji su inkubirani sa 0,2 mM piruvatom i H<14>C03, tokom 10, 20, 40 i 60 min. Saopštava se samo glutamin iz tkiva (ne iz medijuma). Specifična radioaktivnost glutamina u tkivu je konstantna između 10. i 60. minuta. Posle 20 min inkubiranja specifična količina glutamina u tkivu je 4,50±0,44 nmol/mg, a njegova posebna radioaktivnost je 1970±115 dpm/nmol ili 0,158±0,009 dpm/nmol specifične aktivnosti bikarbonata. Ovo pokazuje da je oko 32% glutamina nastalo anaplerozom i piruvat karboksilazom.
Specifična radioaktivnost glutamata iz retine (269±8 dpm/nmol) je niža od glutamina i takođe je konstantna funkcija vremena od 10-60 min. Ona predstavlja samo 14% specifične aktiovnosti glutamina. Ovo ukazuje da je metabolički obrt glutamata u neuronima brz, u odnosu na anaplerotičku sintezu. Međutim, pošto neuronski obrt glutamata ne može da dopuni ugljenični skelet glutamata koji se gubi prilikom neurotransmisije, anaplerotički put je od primarnog značaja u održavanju neuronskih sadržaja glutamata. Ovi podaci pokazuju nedvosmisleno da anaplerotički put daje veliki deo (oko 32%) glutamina neophodnog za dopunjavanje glutamata.
Sinteza glutamata i glutamina u retini delimično zavisi od transaminovanja
aminokiseline račvastog lanca
Nedavna proučavanja sinteze glutamata u kultivisanim astrocitima ukazuju da konverzija a-ketoglutarata u glutamin može da deluje kao korak koji određuje brzinu anaplerotičke sinteze glutamata. Nekoliko grupa je pokazalo da a-amino grupa glutamata ne može da se dobije iz amonijaka, pa stoga mora da se dobije transaminovanjem a-ketoglutarata sa drugom aminokiselinom: Kanamori, K., Ross, B.D. i Kondrat, R.W.,J. Neurochem.,1988, 70, 1304-1315; Laemmli, U.K.,Nature,1970, 227, 680-885, uključujući naš vlastiti: Haberg, A., Qu, H., Bakken, I.J., Sande, LM., VVhite, L.R., Haraldseth, O., Unsgard, G., Asslev, J., Sonnewald, U.,Dev. Neurosci.,1998, 20, 389-398. Aminokiseline račvastog lanca su verovatni donosioci azota, pošto mogu efikasno da prelaze barijere krv-mozak i krv-retina. Hutson i saradnici su predložili transportni put azota između neurona i glije, koji sadrži aminokiseline račvastog lanca i dva BCAT izoenzima, jedan u neuronskom citozolu (BCATc) i jedan u glijalnim mitohondrijama (BCATm), koji takođe mogu dati potrebni azot: Hutson, S.M., Berkich, D., Down, P., Xu, B., Aschner, M. i LaNoue, K.F.,J. Nuerochem.,1998, 71, 863-874. U skladu sa ovim hipotetičkim putem, neuronski BCATc olakšava glijalnom BCATm konverziju a-ketoglutarata u glutamin, dajući BCAA koji se regeneriše u neuronima (v. Sliku 1).
Kao prvi korak u ispitivanu uloge BCAT izoenzima ude novosintezi glutamata u retini, koristi se imunobloting sa BCATm i BCATc specifičnim antitelima da se odredi da li se BCAT izoenzimi izlučuju u retini u sadržajima koji su uporedivi sa onima koji se nalaze u homogenatima celokupnog mozga. Stoga, sveže isečena retina pacova je pravi nedirnut neuronski sistem u kome se može testirati koncept transportnog puta azota između neurona i glije.
Leucinski analog gabapentin (GBP) je neuroaktivni lek koji inhibira BCATc, ali ne i BCATm: Su.T.Z., Lunnev, E., Campbell, G., Oxender, DL,J. Neurochem.,1995, 64, 2125-2131. Potvrđeno je da GBP inhibira sintezu leucina u sveže isečenim retinama pacova (podaci nisu pokazani). Zatim je meren efekat GBP na sintezu<14>C-glutamata i<14>C-glutamina iz H14CC>3uex vivoretinama pacova. Kao što je pokazano na Slici 4, 1mM GBP snižava stvaranje14C-glutamata i14C-glutamina za 71% u odnosu na kontrolne vrednosti (2,26±0,05 u odnosu na 3,18±0,12 nmol/mg, p<0,001). Dodatak 200 uM leucina, izoleucina i valina preokrenuo je inhibiciju na 89% u odnosu na kontrolu (2,84±1,15 nmol/mg, p<0,01 u odnosu na sam GBP). Nije bilo efekta GBP niti na ATP ni na kreatinfosfat, što pokazuje da GBP ne utiče na bioenergetske procese u retini. Ovaj mali porast ugradnje ugljenika 14 u intermedijare laktata i ciklusa limunske kiseline (od 1,93±0,06 na 2,12±0,13) usled prisustva 1 mM GBP, nije značajan. Ugrađivanje obeleženih u sve metabolite je pokazano u Tabeli II.
Obavljeni su i drugi eksperimenti da se ispitaju svojstva doza/odgovor za GBP. Sveže isečene retine se inkuibiraju 20 min u puferu A, koji sadrži ili 0, 0,2, 1 ili 5 mM GBP. Kao što pokazuje slika 5, porast koncentracije GBP iznad 1 mM ne povećava značajno iznos inhibicije u sintezi<14>C-glutamata i<14>C-glutamina iz H<14>C03. Ponovo, GBP nema uticaja na stvaranje intermedijara ciklusa limunske kiseline, laktata i piruvata (Slika 6). Ovo potvrđuje predlog da je mesto GBP inhibicije u sintezi glutamata BCAT, koji posreduje u konverziji a-ketoglutarata u glutamat.
Diskusija
Opisane studije su potvrdile mehanizme održavanja nivoa glutamata u CNS. Ranije studije su pokazivale da je u retinama i hipokampalnim režnjevima neophodna sinteza glutamina za održavanje sadržaja neuronskog glutamata: Su, T.Z., Lunney, E., Cambell, G., Oxender, D.L.,J. Neurochem.,1995, 64, 2125-2131.
Imunocitohemijska merenja pokazuju da je 90% ili više glutamata u retini i celokupnom mozgu neuronsko i da inhibicija glutamin sintaze za 90 min snižava zalihu neuronskog glutamata na zanemarijive sadržaje: Ottersen, O.P., Zhang, N. i VValberg, F:,Neurosci.,1992, 46, 519-534. Ovo pokazuje da je za održavanje neurosnkog glutamata neophodna glutamin sintetaza. Mada se glutamat može sintetizovati u neuronima iz a-ketoglutarata, nedostatak piruvat karboksilaze ili drugog anaplerotičkog enzima sprečava dopunjavanje a-ketoglutarata i tako sprečava sintezu ukupnog glutamata unutar neurona, izuzev iz glutamina preko glutaminaze.
U ovom primeru izvori i kontrola sinteze glutamina su ispitivani inkubiranjem isečaka retine sa H<14>C03i merenjem pojave i specifične radioaktivnosti14C-glutamina i<14>C-glutamata. U prisustvu 5 mM piruvata sintetizovano je više14C-glutamina nego u prisustvu 0,2 mM. Ovo ukazuje da aktivnost piruvat karboksilaze utiče na brzinu sinteze glutamina. Međutim, nedostatak osetljivosti ove kontrole pokazan je opažanjem da kada piruvat poraste od 0,2 mM na 5 mM, da se iznos porasta fluksa piruvat karboksilaze (80,3%) ne prenosi direktno na ekvivalentan porast<14>C-glutamata i<14>C-glutamina (69,0%). Fleksibilnost kontrole je obezbeđena potencijalom dekarboksilacije ciklusa limunske kiseline i recikliranjem piruvata. Zavisnost piruvata od ukupnog vezivanja H<14>C03u tkivu retine je slična onoj koja je opažena u kultivisanim izolovanim astrocitima: Gamberino, W.C, Berkich, D.A., Lynch, C.J., Xu, B. I LaNoue, K.F.,J. Neurochem.,1997, 69, 2312-2315. Međutim, kod astrocita, za koje nema načina da regenerišu endogeni BCAA, koji se koristi za transaminovanje a-ketoglutarata, porasti u vezivanju C02indukovani piruvatom se ne prenose na porast sadržaja<14>C-glutamata i<14>C-glutamina. Umesto toga, ugljenik 14 se lagano akumulira u intermedijarima ciklusa limunske kiseline i u "recikliranom" piruvatu.
U studijama na retini koje su ovde pomenute, specifična radioaktivnost glutamina u stacionarnom stanju bila je 0,158 od specifične aktivnosti bikarbonata. Pošto je približno polovina<14>C ugrađenna u oksaloacetat zadržana u a-ketoglutaratu, rezultati pokazuju da približno 32% glutamina dodalzi iz H<14>C03. Ovo je prva direktna procena doprinosa anapleroze u sintezi glutamina u neuronskom tkivu. Ranije procene su bile indirektne i sadržale su analizu izotopomera u spektru NMR, nakon infuzije<13>C glukoze (3-5, 11-13) u nedirnuti mozak. Procene doprinosa karboksilovanja piruvata u sintezi glutamina korišćenjem ovih NMR metoda su bile niže nego ova sadašnja, i kretale su se ispod 1% (3) od 5-10%
(4,5), pa do 20-25%: Shank, R.P., Bennet, G.S., Frevtag, S.O. i Cambell G.L.,Brain Res.,1985, 325, 364-367, Griffen, J.L., Rae, C, Radda, G.K. i Matthevvs, P.M.,Biochim. Biophys. Acta,1999, 1450, 297-307, većinom zavisno od polaznih predpostavki u matematičkim modelima koji su korišćeni. Sadašnji rezultati ukazuju da su glijalno karboksilovanje piruvata i konverzija intermedijara ciklusa limunske kiseline u glutamat i glutamin, verovatno kvantitativno značajni za funkcionisanje retine, a moguće i celokupne funkcije mozga.
Opažanje da GBP usporava konverziju intermedijara limunske kiseline u glutamat i glutamin ozbiljno ukazuje da je za optimalne brzine aminovanja a-ketoglutarata u glutamat neophodna neuronska sinteza BCAA pomoću BCATc. Razumna shema njihovog učešća u ovom procesu je pokazana na Slici 1.
Rezultati koji pokazuju inhibiciju sinteze<14>C-glutamatai14C-glutamina iz H14C03pomoću GBP, i poništavanje inhibicije sa BCAA, su saglasni sa opisanim putem transporta. Ova hipoteza takođe daje moguće objašnjenje anti-epileptičkog dejsta GBP: Tavlor, C.P., Doolev, D.J., Boden, P., Singh, L,Epilepsy Res.,1998, 29, 233-249. Zaista, smanjena sinteza glutamata je uobičajeno dejstvo GBP i anti-epileptičnih inhibitora ugljenične anhidraze: Hazen, S.A., VVaheed, A., Sly, W.S., LaNoue, K.F., Lynch, C.J.,Dev. Neurosci.1997, 19, 162-171. Takođe bolest uriniranja od javorovog sirupa, nasledna bolest izazvana mutacijom gena dehidrogenaze ketokiseline račvastog lanca, ukoliko se ne tretira izaziva visok sadržaj BCAA u serumu kod pacijenata i naknadne neurološke abnormalnosti: Chuang, D.l. i Shih, V.E. (1995), u "The Metabolic Basis of Inherited Disease", uredn. Schriver, C.R., Beaudet, A.L., Sly, S. i Vaile, D. (McGraw-Hill), str. 1239-1277, koje se mogu povezati sa abnormalnom regulacijom sinteze glutamata. Konačno, implikacije puta transporta azota tokom sinteze glutamata se moraju dalje proučavati, u svetlu efikasnosti GBP u tretmanu neuropatskog bola: Ottersen, O.P., Zhang, N, i VValberg, F.,Neurosci.,1992, 46, 519-534, i neurodegenracije., Chuamg, D.l. i Shih, V.E. (1995), u "The Metabolic Basis of Inherited Disease", uredn. Schriver, C.R., Beaudet, A.L., Sly, S. i Vaile, D.
(McGraw-Hill), str. 1239-1277, Rothsetin, J.D. i Kunci, R:W.,J. Neurochem.,1995, 65, 643-651.
Primer 67
Priprema enzima
Smrznuti mozgovi pacova se otope u ledu i iseku u sitne komadiće. Na svaki mozak se dodaje 5 mL izotoničnog pufera [225 mM manitol, 75 mM saharoza, 5 mM MOPS (pH 7,1), 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT koji sadrži leupeptin, pepstatin i PMSF]. Ovi uzorci se homogenizuju u Potters-ovom homogenizatoru (B. Bran Biotech International) sa deset udara pri 500 o/min, i zatim sa još deset udara pri 800 o/min. Ovi homogenati se 1 h centrifugiraju u centrifugi Bekman J2-M1, sa rotorom JA-20, pri 19.000 o/min. Bistri sloj se dijalizuje 24 h, sa najmanje tri izmene pufera za dijalizu (225 mM manitol, 75 mM saharoza, 5 mM MOPS pH 7,1, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA i 1 mM DTT). Dobijeni enzim se čuva na -80°C do testova koji slede.
Test BCAT
Reakcija se obavlja u Eppendorf-ovim epruvetama od 1,5 mL, u zapremini od 100 uL, koja sadrži 50 mM Tris-HCI (pH 8,3), 25 uM [<14>C]-L-leucin, 10 mM 2-oksoglutarat, 15 pM piridoksalfosfat, 1 mM DTT i enzim. Rastvori za reakcionu smešu se pripremaju sa 10-strukim koncentracijama. Posle 10 min inkubacije na sobnoj temperaturi (22°C) reakcija se zaustavlja dodavanjem 100 pL 15 mM p-nitrofenilhidrazina u 2M HCI. Posle nekoliko minuta doda se 1 mL scintilacione tečnosti na bazi toluena (4,5 g PPO i 0,5 g bis-MSB u 1 L toluena), epruvete se začepe i dobro izmešaju u mikseru Vortex. Zatim se epruvete 10 min centrifugiraju pri 13.500 o/min (centrifuga Eppendorf 5415C). Stavi se 600 pL organskog sloja iz svake epruvete u fiole za scintilaciju, i zatim doda 10 mL scintilacionog koktela za brojanje impulsa.

Claims (15)

1. Jedinjenje formule IV naznačeno time, što R1-R4predstavljaju vodonik ili alkil; X jeNR5iliO; R5je vodonik ili alkil, R6je alkif, benzil, alkoksialkanoil, arilalkil, alkoksi, cikloalkil, alil, alkilcikloalkil, alkoksi, cikloalkil, alkilcikloalkil, trisupstituisani halogenalkil, a ukoliko je svaki od R1-R4vodonik, R6nije vodonik ili metil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar, prolek ili amid.
2. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što R2i R4predstavljaju vodonik, a Rii R3alkil; R2i R4su vodonik, a Rii R3metil; R1-R4su vodonik; Rije alkil, a R2-R4 vodonik; Ri je metil, a R2-R4 vodonik; R5 je vodonik; XjeNR6; X je O; R6je alkil; R6je benzil; R6 je fenilalkil; R6je cikloalkil; R6je trifluoroalkil; R6 je alkilcikloalkil; R6 je alkoksi; i Rejealil.
3. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što R2i R4predstavljaju vodonik, a Rii R3metil; R1-R4su vodonik; Rije metil, a R2-R4vodonik; R5je vodonik; XjeNR6; R6 je alkil; R6 je benzil; R6 je fenilalkil; R6 je cikloalkil; R6 je trifluoroalkil; R6 je alkilcikloalkil; R6 je alkoksi; i R6jealil.
4. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što R2i R4predstavljaju vodonik, a Rii R3metil, RrR4su vodonik.
5. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što se bira iz grupe koju čine: (1 -alilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; (1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; {1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; {1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5|3-(1-alilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1 a,3B,5B-(3,5-dimetil-1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3.5-dimetil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-alilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5B-{3,5-dimetil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-etilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-butilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-benzilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-dimetilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-butilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-{1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-(3,5-dimetil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(izobutilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-[3,5-dimetil-1 -(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklobutilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(izopropilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-etilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izobutilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izopropilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-cikloheksilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((1 R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(ferc-butoksikarbonilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; ((3R,5S)-1-ciklobutilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-3,5-dimetil-1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(ciklopentilmmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-cikloheksilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-dimetilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-butilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(benzil-metil-amino)-metil]- cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, natrijumova so; ((3R,5S)-1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [(1R,3R)-1-(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(1 R,3R)-1-[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ili ((1 R,3R)-3-metil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so.
6. Upotreba jedinjenja formule I, II i/ili III gde Rg je H; alkil; cikloalkil; supstituisani alkil koji sadrži halogen, amin, alkoksi, cikloalkil ili hidroksi; alil; alkinil; alkanoil; alkoksialkanoil; sulfonil; fenil; benzil; ili arilakil; m i n su nezavisno ceo broj 1-3; RrR8 i R10-R14su nezavisno, H, alkil ili supstituisani alkil; i X je NR14, O ili S u kojima postoji više od jednog stereoizomera, a svaki hiralni centar može nezavisno biti R ili S; ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, estra, proleka ili amida u proizvodnji leka za tretiranje dijabetske retinopatije,
7. Upotreba prema Zahtevu 6, naznačen time, što su m i n jednaki 1; X je NR14; R9je H; R4je metil; R4i R5su metil; R8je metil; R10je metil; R7i Rssu metil; R4 iR8 su metil; RrR8 i R10-R13 su H; R9 je alkil; R9 je benzil; R14 je alkil; R9 je arilakil; R9 je cikloalkil; RrR8 su H; RrR8 i Rio-Rn su H; RrR2 i R7-R8 su H; ili R2 je metil.
8. Upotreba prema Zahtevu 6, naznačen time, što je R3alkil, Rt-R2i R4-Rn i Ri4su vodonik, m i n su 1, i X je NRi4; R3i R,, su alkil, RrR2i R4-R10 i R14su vodonik, m i n su 1, i X je NRi4; R3i Ru su alkil, RrR2 i R4-R10i R14su vodonik, a m i n su 1, a R9je alkil i X je NR14; i RrRni R14su vodonik, m i n su 1, i X je O.
9. Upotreba prema Zahtevu 6, naznačen time, što se jedinjenje bira iz grupe koju čine: (l-alilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; (1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; {1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; {1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3B,5B-(1-alilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3B,5B-(3,5-dimetil-1-prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3B,5B-{3,5-dimetil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3B,5B-{3,5-dimetil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-alilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1 -[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksi!}-sirćetna kiselina; 1a,3B,5B-{3,5-dimetil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-etilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-butilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-hidroksimetil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1 a,3p,5p-{1 -[(hidroksimetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dietil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; trans-(1 R,3R)(1-aminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (1-aminometil-2-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,hidrohlorid; (1-aminometil-3,3-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (±)-(trans)-(1-aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (cis/trans)-(3R)-(1-aminometil-3-metil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1 -benzilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-(1 -dimetilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-butilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-{1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-[1 -(acetilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-[1-(izobutilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-[3,5-dimetil-1 -(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-{3,5-dimetil-1 -[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklobutilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(izopropilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1-aminometil-1-cikloheksan-sirćetna kiselina; 1-aminometil-1-ciklopentan-sirćetna kiselina; 1-aminometil-1-ciklopentan-sirćetna kiselina, natrijumova so; 1-(hidroksimetil)cikloheksan-sirćetna kiselina, natrijumova so; {1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-etilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1 -[(2-hidroksi-1 -metil-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izobutilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izopropilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-cikloheksilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((1 R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(ferc-butoksikarbonilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; [1 -(acetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; ((3R,5S)-1-ciklobutilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-3,5-dimetil-1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(2-hidroksi-1-metil-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-cikloheksilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-karboksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; frans-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; c/s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-dimetilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-butilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(benzil-metil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, natrijumova so; ((3R,5S)-1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-etil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-propil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [(1 R,3R)-1-(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(1 R,3R)-1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ili ((1 R,3R)-3-metil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so.
10. Upotreba jedinjenja formule I, II i/ili III gde R9je H; alkil; cikloalkil; supstituisani alkil koji sadrži halogen, amin, alkoksi, cikloalkil ili hidroksi; alil; alkinil; alkanoil; alkoksialkanoil; sulfonil; fenil; benzil; ili arilakil; m i n su nezavisno ceo broj 1 - 3; RrR8 i R10-R14su nezavisno, H, alkil ili supstituisani alkil; i X je NR14, 0 ili S u kojima postoji više od jednog stereoizomera, a svaki hiralni centar može nezavisno biti R ili S; ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, estra, proleka ili amida u postupku za proizvodnju leka za inhibiranje aminotransferaze zavisne od aminokiseline račvastog lanca.
11. Upotreba prema Zahtevu 10, naznačen time, što su m i n jednaki 1; X je NRi4; R9 je H; R4 je metil; R4 i R5 su metil; R8 je metil; Rio je metil; R7 i R8 su metil; R4 iR8 su metil; RrRs i R10-R13 su H; R9 je alkil; R9 je benzil; R14 je alkil; R9 je arilakil; R9 je cikloalkil; RrR8 su H; RrRs i R10 R11 su H; RrR2 i R7-R8 su H; ili R2 je metil.
12. Upotreba prema Zahtevu 10, naznačen time, što je R3alkil, R1-R2 i R4-R11i Ru su vodonik, m i n su 1, i X je NR14; R3i Ru su alkil, RrR2i R4-R10i Ru su vodonik, m i n su 1, i X je NR14; R3i R-nsu alkil, R1-R2i R4-R10i R14su vodonik, m i n su 1, a R9 je alkil i X je NR14; i RrRn i Ru su vodonik, m i n su 1, i X je O.
13. Upotreba prema Zahtevu 10, naznačen time, što se jedinjenje bira iz grupe koju čine: (l-alilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; (1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; {1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; {1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1 a,3p,5p-(1 -alilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1 a,3p,5p-(3,5-dimetil-1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-alilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -prop-2-inilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-{(1R,3R)-3-metil-1-[(2,2,2-trifluoro-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-3-metil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(4,4,4-trifluoro-butilarnino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-{1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3l5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-{(1 R,3R)-1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1 -metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-etilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1R,3R)-1-butilaminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; trans-((1 R,3R)-1-hidroksimetil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; 1a,3<p>,5p-{1 -[(hidroksimetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dietil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; trans-(1 R,3R)(1-aminometil-3-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (1-aminometil-2-metil-cikloheksil)-sirćetna kiselina,hidrohlorid; (1-aminometil-3,3-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (±)-(trans)-(1-aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (cis/trans)-(3R)-(1-aminometil-3-metil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1 -aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; (+)-(trans)-(1-aminometil-3,4-dimetil-ciklopentil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(1-aminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohlorid; 1a,3p,5p-(3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-benzilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-(1 -dimetilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-(1-butilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5B-{1-[(benzil-metil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3B,5B-(3,5-dimetil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 a,3p,5p-[1 -(acetilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina; 1a,3p,5p-[1-(izobutilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[3,5-dimetil-1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-{3,5-dimetil-1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklobutilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1a,3p,5p-[1-(izopropilamino-metil)-3,5-dimetil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; 1 -aminometil-1 -cikloheksan-sirćetna kiselina; 1-aminometil-1-ciklopentan-sirćetna kiselina; 1-aminometil-1-ciklopentan-sirćetna kiselina, natrijumova so; 1-(hidroksimetil)cikloheksan-sirćetna kiselina, natrijumova so; {1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(4,4,4-trifluoro-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-etilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopropilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(2-hidroksi-1-metil-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izobutilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(izopropilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-cikloheksilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(benzilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((1R,3R)-3-metil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(ferc-butoksikarbonilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; [1-(acetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina; ((3R,5S)-1-ciklobutilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-3,5-dimetil-1-[(2-metil-butilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(2-hidroksi-1-metil-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(ciklopentilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(3R,5S)-1-[(cikloheksilmetil-amino)-metil]-3,5-dimetil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-cikloheksilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-karboksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina; frar)s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; c/s-((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, . hidrohloridna so; (l-dimetilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-butilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-[2,2-dimetoksi-etilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (l-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(benzil-metil-amino)-rnetil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [1-(fenetilamino-metil)-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {1-[(3-fenil-propilamino)-metil]-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-1-hidroksimetil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, natrijumova so; ((3R,5S)-1-etilaminometil-3,5-dimetil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-etil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; (1-aminometil-4-propil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ((3R,5S)-3,5-dimetil-1-propilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; [(1R,3R)-1-(benzilamino-metil)-3-metil-cikloheksil]-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; {(1 R,3R)-1 -[(benzil-metil-amino)-metil]-3-metil-cikloheksil}-sirćetna kiselina, hidrohloridna so; ili ((1 R,3R)-3-metil-1-metilaminometil-cikloheksil)-sirćetna kiselina, hidrohloridna so.
14. Jedinjenja Formule IV, gde R1-R4predstavljaju vodonik ili alkil; X je NR5 ili O; R5je vodonik ili alkil; R6vodonik, alkil, benzil, alkanoil, alkoksialkanoil, arilalkil, alkoksi, cikloalkil, alkil, alkilcikloalkil, alkoksi, cikloalkil, alkilcikloalkil, trisupstituisani halogenalkil, a ukoliko je svaki od R1-R4vodonik, RGnije vodonik ili metil; ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, estra, proleka ili amida za primenu kao lek za tretiranje neuroloških poremećaja, depresije, anksioznosti, straha, manije, bipolarnih poremećaja, anti-inflamatornih bolesti, glaukoma, bola ili gastrointestinalnih oštećenja.
15. Upotreba jedinjenja Formule IV, gde R1-R4predstavljaju vodonik ili alkil; X je NR5 ili O; R5je vodonik ili alkil; R6vodonik, alkil, benzil, alkanoil, alkoksialkanoil, arilalkil, alkoksi, cikloalkil, alkil, alkilcikloalkil, alkoksi, cikloalkil, alkilcikloalkil, trisupstituisani halogenalkil, a ukoliko je svaki od R1-R4vodonik, R6nije vodonik ili metil; ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, estra, proleka ili amida u postupku proizvodnje leka za tretiranje neuroloških poremećaja, depresije, anksioznosti, straha, manije, bipolarnih poremećaja, anti-inflamatornih bolesti, glaukoma, bola ili gastrointestinalnih oštećenja.
RS20180756A 2012-01-06 2013-01-05 Terapeutski aktivna jedinjenja i postupci za njihovu upotrebu RS57401B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261584214P 2012-01-06 2012-01-06
EP13733752.3A EP2800743B1 (en) 2012-01-06 2013-01-05 Therapeutically active compounds and their methods of use
PCT/CN2013/000009 WO2013102431A1 (en) 2012-01-06 2013-01-05 Therapeutically active compounds and their methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57401B1 true RS57401B1 (sr) 2018-09-28

Family

ID=48744984

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180756A RS57401B1 (sr) 2012-01-06 2013-01-05 Terapeutski aktivna jedinjenja i postupci za njihovu upotrebu

Country Status (39)

Country Link
US (7) US9732062B2 (sr)
EP (4) EP3406608B8 (sr)
JP (2) JP6411895B2 (sr)
KR (1) KR101893112B1 (sr)
CN (6) CN108912066B (sr)
AR (1) AR090411A1 (sr)
AU (2) AU2013207289B2 (sr)
BR (1) BR112014016805B1 (sr)
CA (1) CA2860623A1 (sr)
CL (1) CL2014001793A1 (sr)
CO (1) CO7030962A2 (sr)
CR (1) CR20140377A (sr)
CY (1) CY1120506T1 (sr)
DK (1) DK2800743T3 (sr)
EA (1) EA030187B1 (sr)
EC (1) ECSP14012726A (sr)
ES (3) ES2901430T3 (sr)
HR (1) HRP20180844T1 (sr)
HU (1) HUE038403T2 (sr)
IL (1) IL233503B (sr)
LT (1) LT2800743T (sr)
MX (1) MX358940B (sr)
MY (1) MY185206A (sr)
NI (1) NI201400073A (sr)
NO (1) NO2897546T3 (sr)
NZ (2) NZ627096A (sr)
PE (1) PE20142098A1 (sr)
PH (1) PH12014501561B1 (sr)
PL (1) PL2800743T3 (sr)
PT (1) PT2800743T (sr)
RS (1) RS57401B1 (sr)
SG (2) SG10201602862RA (sr)
SI (1) SI2800743T1 (sr)
SM (1) SMT201800334T1 (sr)
TR (1) TR201809228T4 (sr)
TW (1) TWI653228B (sr)
UA (1) UA117451C2 (sr)
WO (1) WO2013102431A1 (sr)
ZA (1) ZA201405163B (sr)

Families Citing this family (102)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2010223919B2 (en) 2009-03-13 2016-03-31 Les Laboratoires Servier Methods and compositions for cell-proliferation-related disorders
RU2561132C2 (ru) 2009-06-29 2015-08-20 Аджиос Фармасьютикалз, Инк. Производные хинолинсульфонамидов и их применение для модулирования пкм2 активности
EP3561077B1 (en) 2009-10-21 2022-12-21 Les Laboratoires Servier Methods for cell-proliferation-related disorders
WO2011050211A2 (en) 2009-10-21 2011-04-28 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for cell-proliferation-related disorders
SG194697A1 (en) 2011-05-03 2013-12-30 Agios Pharmaceuticals Inc Pyruvate kinase activators for use in therapy
CN102827073A (zh) 2011-06-17 2012-12-19 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性组合物和它们的使用方法
CN102827170A (zh) 2011-06-17 2012-12-19 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性组合物和它们的使用方法
PE20141702A1 (es) 2012-01-06 2014-11-19 Abide Therapeutics Inc Compuestos de carbamato y preparacion y uso de los mismos
NZ627096A (en) 2012-01-06 2017-02-24 Agios Pharmaceuticals Inc Triazinyl compounds and their methods of use
US9474779B2 (en) 2012-01-19 2016-10-25 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compositions and their methods of use
WO2014062511A1 (en) 2012-10-15 2014-04-24 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and compositions
WO2015003355A2 (en) * 2013-07-11 2015-01-15 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compounds and their methods of use
CN111087353B (zh) * 2013-07-11 2023-10-24 法国施维雅药厂 治疗活性化合物及其使用方法
MY185687A (en) 2013-07-11 2021-05-30 Agios Pharmaceuticals Inc N,6-bis(aryl or heteroaryl)-1,3,5-triazine-2,4-diamine compounds as idh2 mutants inhibitors for the treatment of cancer
CN105593215B (zh) 2013-07-11 2019-01-15 安吉奥斯医药品有限公司 用于治疗癌症的作为idh2突变体抑制剂的2,4-或4,6-二氨基嘧啶化合物
US9579324B2 (en) 2013-07-11 2017-02-28 Agios Pharmaceuticals, Inc Therapeutically active compounds and their methods of use
WO2015003360A2 (en) * 2013-07-11 2015-01-15 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compounds and their methods of use
US20150031627A1 (en) 2013-07-25 2015-01-29 Agios Pharmaceuticals, Inc Therapeutically active compounds and their methods of use
TWI666208B (zh) * 2013-08-02 2019-07-21 美商阿吉斯藥品有限公司 治療活性化合物及其使用方法（三）
KR102316886B1 (ko) * 2013-08-02 2021-10-19 아지오스 파마슈티컬스 아이엔씨. 치료학적 활성 화합물 및 이의 사용방법
WO2015018060A1 (en) * 2013-08-09 2015-02-12 Agios Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutically active compounds and use thereof
TWI651310B (zh) * 2014-02-20 2019-02-21 日商日本煙草產業股份有限公司 三化合物及其醫藥用途
BR122023021436A2 (pt) * 2014-03-14 2023-12-12 Les Laboratoires Servier Formas cristalinas e composição farmacêutica de compostos terapeuticamente ativos
KR20240010105A (ko) * 2014-03-14 2024-01-23 아지오스 파마슈티컬스 아이엔씨. 치료적으로 활성인 화합물의 약제학적 조성물
US20170101383A1 (en) * 2014-03-28 2017-04-13 Basf Se Diaminotriazine derivatives as herbicides
WO2015155129A1 (en) * 2014-04-07 2015-10-15 Basf Se Diaminotriazine compound
EP2930174A1 (en) * 2014-04-07 2015-10-14 Basf Se Diaminotriazine derivatives as herbicides
ES2768694T3 (es) 2014-09-19 2020-06-23 Forma Therapeutics Inc Composiciones de quinolinona pirimidinas como inhibidores de isocitrato dehidrogenasa mutante
CA2961807A1 (en) * 2014-09-19 2016-03-24 Forma Therapeutics, Inc. Phenyl quinolinone derivatives as mutant-isocitrate dehydrogenase inhibitors
WO2016044789A1 (en) 2014-09-19 2016-03-24 Forma Therapeutics, Inc. Pyridin-2(1h)-one quinolinone derivatives as mutant-isocitrate dehydrogenase inhibitors
CA2961811C (en) 2014-09-19 2021-11-02 Forma Therapeutics, Inc. Pyridinyl quinolinone derivatives as mutant-isocitrate dehydrogenase inhibitors
AU2015324158A1 (en) 2014-09-29 2017-04-13 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compounds and their methods of use
CN107531675A (zh) 2015-02-04 2018-01-02 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性化合物及其使用方法
JP2018513119A (ja) 2015-03-18 2018-05-24 アビデ セラピューティクス，インク． ピペラジンカルバメート、およびピペラジンカルバメートを製造ならびに使用する方法
EA038574B1 (ru) * 2015-04-21 2021-09-16 Форма Терапьютикс, Инк. Хинолиноновые производные пиридин-2(1h)-она и фармацевтические композиции на их основе
US10294206B2 (en) 2015-04-21 2019-05-21 Forma Tm2, Inc. Fused-bicyclic aryl quinolinone derivatives as mutant-isocitrate dehydrogenase inhibitors
US10407419B2 (en) 2015-04-21 2019-09-10 Forma Therapeutics, Inc. Quinolinone five-membered heterocyclic compounds as mutant-isocitrate dehydrogenase inhibitors
WO2016177347A1 (en) * 2015-05-07 2016-11-10 Teligene Ltd Heterocyclic compounds as idh2 inhibitors
CN113413387A (zh) 2015-05-11 2021-09-21 H.隆德贝克有限公司 治疗炎症或神经性疼痛的方法
FI3307271T3 (fi) 2015-06-11 2023-10-17 Agios Pharmaceuticals Inc Pyruvaattikinaasin aktivaattorien käyttämisen menetelmä
TWI722004B (zh) 2015-07-30 2021-03-21 大陸商正大天晴藥業集團股份有限公司 1,3,5-三嗪衍生物及其使用方法
CA2993615A1 (en) * 2015-08-05 2017-02-09 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods of preparing 6-(aryl or heteroaryl)-1,3,5-triazine-2,4-diols and 6-(aryl or heteroaryl)-1,3,5-triazine-2,4-diamines
CN108366980A (zh) 2015-10-15 2018-08-03 安吉奥斯医药品有限公司 用于治疗恶性肿瘤的组合疗法
PT3362066T (pt) 2015-10-15 2021-11-16 Celgene Corp Terapia de combinação para tratar malignidades
SG11201803088PA (en) 2015-10-15 2018-05-30 Agios Pharmaceuticals Inc Combination therapy for treating malignancies
US10695352B2 (en) 2015-10-15 2020-06-30 Celgene Corporation Combination therapy for treating malignancies
US9688659B2 (en) * 2015-10-21 2017-06-27 NeuForm Pharmaceuticals, Inc. Deuterated compounds for treating hematologic malignancies, and compositions and methods thereof
IL298663A (en) * 2015-12-04 2023-01-01 Agios Pharmaceuticals Inc Methods for treating acute myeloid leukemia characterized by the presence of a mutant allele of idh2 and the absence of a mutant allele of nras
CN105399695B (zh) * 2015-12-11 2019-04-19 浙江大学 三嗪类化合物及其制备方法和用途
CN105503754B (zh) * 2015-12-11 2017-11-17 浙江大学 2‑氨基‑4‑苄基‑6‑吗啉‑1,3,5‑三嗪及其制备和应用
CN105384702B (zh) * 2015-12-11 2018-04-10 浙江大学 三取代均三嗪类化合物及其制备方法
WO2017140758A1 (en) 2016-02-19 2017-08-24 Debiopharm International S.A. Derivatives of 2-amino-4-(2-oxazolidinon-3-yl)-pyrimidine fused with a five-membered heteroaromatic ring in 5,6-position which are useful for the treatment of various cancers
US10463753B2 (en) 2016-02-19 2019-11-05 Lundbeck La Jolla Research Center, Inc. Radiolabeled monoacylglycerol lipase occupancy probe
ES2912909T3 (es) 2016-02-26 2022-05-30 Celgene Corp Enasidenib para su uso en el tratamiento de la leucemia mieloide aguda recidivante o refractaria
CN105820133B (zh) * 2016-03-25 2018-06-05 浙江工业大学 多取代均三嗪类化合物及其制备方法和应用
CN105753801B (zh) * 2016-03-25 2018-06-01 浙江工业大学 一种均三嗪类化合物的制备方法
CN109890806B (zh) * 2016-07-21 2022-04-26 南京圣和药业股份有限公司 作为异柠檬酸脱氢酶抑制剂的化合物及其应用
EP3493809B1 (en) 2016-08-03 2023-08-23 Celgene Corporation Enasidenib for treatment of myelodysplastic syndrome
MX392941B (es) 2016-09-07 2025-03-24 Celgene Corp Composiciones para comprimidos.
US10899737B2 (en) 2016-09-19 2021-01-26 Lundbeck La Jolla Research Center, Inc. Piperazine carbamates and methods of making and using same
JOP20190106A1 (ar) 2016-11-16 2019-05-09 Lundbeck La Jolla Research Center Inc مثبطات أحادي أسيل جليسرول ليباز (magl)
JOP20190105A1 (ar) 2016-11-16 2019-05-09 Lundbeck La Jolla Research Center Inc مثبطات أحادي أسيل جليسرول ليباز (magl)
WO2018133856A1 (zh) * 2017-01-22 2018-07-26 正大天晴药业集团股份有限公司 1，3，5-三嗪衍生物的盐及其晶体、它们的制备方法、药物组合物和用途
WO2018204787A1 (en) * 2017-05-05 2018-11-08 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Methods of treatment of myeloproliferative neoplasm
EP4201399A3 (en) 2017-06-30 2023-08-09 Celgene Corporation Compositions and methods of use of 2-(4-chlorophenyl)-n-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindolin-5-yl) methyl) -2,2-difluoroacetamide
CN109265444B (zh) * 2017-07-17 2022-03-11 南京圣和药业股份有限公司 取代的三嗪类idh抑制剂的光学异构体及其应用
CN109467538A (zh) 2017-09-07 2019-03-15 和记黄埔医药（上海）有限公司 环烯烃取代的杂芳环类化合物及其用途
CN110054616B (zh) * 2018-01-19 2021-11-23 南京圣和药业股份有限公司 三嗪类idh抑制剂的制备方法
CN110054617A (zh) * 2018-01-19 2019-07-26 南京圣和药业股份有限公司 三嗪类化合物、其制备方法及用途
CN110051673B (zh) * 2018-01-19 2022-03-11 南京圣和药业股份有限公司 一种包含三嗪类idh抑制剂的药物组合物及其用途
CN110054615B (zh) * 2018-01-19 2021-06-15 南京圣和药业股份有限公司 三嗪类idh抑制剂甲磺酸盐的晶型
GEP20227443B (en) 2018-05-15 2022-11-25 H Lundbeck As Magl inhibitors
US11013734B2 (en) 2018-05-16 2021-05-25 Forma Therapeutics, Inc. Treating patients harboring an isocitrate dehydrogenase-1 (IDH-1) mutation
US10532047B2 (en) 2018-05-16 2020-01-14 Forma Therapeutics, Inc. Solid forms of ((S)-5-((1-(6-chloro-2-oxo-1,2-dihydroquinolin-3-yl)ethyl)amino)-1-methyl-6-oxo-1,6-dihydropyridine-2-carbonitrile
US11013733B2 (en) 2018-05-16 2021-05-25 Forma Therapeutics, Inc. Inhibiting mutant isocitrate dehydrogenase 1 (mlDH-1)
US11311527B2 (en) 2018-05-16 2022-04-26 Forma Therapeutics, Inc. Inhibiting mutant isocitrate dehydrogenase 1 (mIDH-1)
WO2019222553A1 (en) 2018-05-16 2019-11-21 Forma Therapeutics, Inc. Inhibiting mutant idh-1
US10980788B2 (en) 2018-06-08 2021-04-20 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapy for treating malignancies
KR102328682B1 (ko) 2018-08-27 2021-11-18 주식회사 대웅제약 신규한 헤테로사이클릭아민 유도체 및 이를 포함하는 약학 조성물
WO2020092894A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 Celgene Corporation Solid forms of 2-methyl-1-[(4-[6-(trifluoromethyl) pyridin-2-yl]-6-{[2-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]amino}-1,3,5-triazin-2-yl) amino]propan-2-ol
WO2020092915A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 Celgene Corporation Solid dispersions for treatment of cancer
WO2020092906A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 Celgene Corporation Co-crystals of 2-methyl-1 -[(4-[6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]-6-{[2-(trifluoromethyl) pyridin-4-yl]amino}-1,3,5-triazin-2-yl)amino]propan-2-ol, compositions and methods of use thereof
CN111662275B (zh) * 2019-03-08 2023-08-22 中国药科大学 苯磺酰胺类idh突变体抑制剂、其制备方法和用途
CN111662271B (zh) * 2019-03-08 2023-11-14 中国药科大学 具有idh突变体抑制活性的化合物及其制备方法与应用
WO2020239759A1 (en) 2019-05-27 2020-12-03 Sandoz Ag Amorphous enasidenib in a stabilized form
CN114502537A (zh) * 2019-09-29 2022-05-13 贝达药业股份有限公司 突变型idh2抑制剂及其应用
KR102333854B1 (ko) 2019-10-24 2021-12-06 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해 활성을 갖는 신규한 피리디닐트리아진 유도체 및 이를 포함하는 암의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물
WO2021097160A1 (en) 2019-11-14 2021-05-20 Celgene Corporation Pediatric formulations for treatment of cancer
WO2021214550A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 H. Lundbeck A/S Synthesis of a monoacylglycerol lipase inhibitor
CN111592524B (zh) * 2020-05-20 2023-11-17 温州市天聚万迅信息科技有限公司 恩西德尼的制备方法
WO2022074587A1 (en) * 2020-10-06 2022-04-14 Kures, Inc. Mu-opioid receptor agonists and uses therefor
WO2022173961A1 (en) * 2021-02-12 2022-08-18 Servier Pharmaceuticals Llc Therapeutically active compounds and their methods of use
US11865079B2 (en) 2021-02-12 2024-01-09 Servier Pharmaceuticals Llc Therapeutically active compounds and their methods of use
CN113461660B (zh) * 2021-06-11 2022-08-02 浙江大学 2,4,6-三取代-1,3,5-均三嗪类化合物及制备和应用
US20250051301A1 (en) * 2022-03-15 2025-02-13 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd Mutant idh1 and idh2 inhibitor and application thereof
EP4499625A4 (en) 2022-03-24 2026-03-18 A2A Pharmaceuticals Inc CANCER COMPOSITIONS AND TREATMENT METHODS
CN114773320A (zh) * 2022-05-29 2022-07-22 重庆医科大学 1,3,5-三嗪化合物及其制备方法和用途
CN115536637B (zh) * 2022-10-24 2025-03-18 陕西中医药大学 一种均三嗪类衍生物及其合成方法与用途
CN115819363B (zh) * 2022-12-16 2025-04-01 浙江工业大学 酮酰胺类化合物及其制备方法和应用
TW202530204A (zh) * 2023-09-27 2025-08-01 美商Ａ２Ａ製藥公司 用於治療與轉化酸性捲曲螺旋蛋白相關的癌症的方法
CN117586228A (zh) * 2023-12-01 2024-02-23 上海彩迩文生化科技有限公司 一种三嗪类药物的制备方法
CN118745158B (zh) * 2024-06-06 2026-02-03 四川省医学科学院·四川省人民医院 三嗪环衍生物、其制备方法及其应用和pdgfr激酶抑制剂

Family Cites Families (93)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2390529A (en) 1942-02-03 1945-12-11 Ernst A H Friedheim Hydrazino-1,3,5-triazino derivatives of substituted phenylarsenic compounds
BE754242A (fr) 1970-07-15 1971-02-01 Geigy Ag J R Diamino-s-triazines et dinitro-s-triazines
US3867383A (en) 1971-03-29 1975-02-18 Ciba Geigy Corp Monoanthranilatoanilino-s-triazines
CH606334A5 (sr) 1974-06-21 1978-10-31 Ciba Geigy Ag
JPS58186682A (ja) 1982-04-27 1983-10-31 日本化薬株式会社 セルロ−ス又はセルロ−ス含有繊維材料の染色法
DE3512630A1 (de) 1985-04-06 1986-10-23 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren zum faerben oder bedrucken von cellulosefasern oder cellulosemischfasern
US5041443A (en) 1989-02-21 1991-08-20 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. Medicament for treating cerebral insufficiency diseases, novel 2-(1-piperazinyl)-4-phenylcycloalkanopyrimidine derivatives, and process for the production thereof
ES2058630T3 (es) 1989-03-03 1994-11-01 Dainippon Pharmaceutical Co Derivados de 2-(1-piperazinil)-4-fenilcicloalcanopiridinas, procedimientos de preparacion y composiciones farmaceuticas que los contienen.
EP0466647B1 (de) * 1990-07-12 1995-11-29 Ciba-Geigy Ag Verfahren zur photochemischen und thermischen Stabilisierung von Polyamid-Fasermaterialien
JPH0499768A (ja) 1990-08-17 1992-03-31 Dainippon Pharmaceut Co Ltd ４―（４―フェニルピリジン―２―イル）ピペラジン―１―オキシド誘導体
CA2131004A1 (en) 1992-02-28 1993-09-02 Hideshi Kobayashi S-triazine derivative and remedy for estrogen-dependent disease containing said derivative as effective component
IL115420A0 (en) 1994-09-26 1995-12-31 Zeneca Ltd Aminoheterocyclic derivatives
WO1998021191A1 (en) 1995-05-16 1998-05-22 Nissan Chemical Industries, Ltd. Cyanoethylmelamine derivatives and process for producing the same
FR2735127B1 (fr) 1995-06-09 1997-08-22 Pf Medicament Nouvelles piperazines heteroaromatiques utiles comme medicaments.
GB9602166D0 (en) 1996-02-02 1996-04-03 Zeneca Ltd Aminoheterocyclic derivatives
JPH09291034A (ja) 1996-02-27 1997-11-11 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd 縮合ピリジン化合物およびその医薬としての用途
EP0912519A1 (en) 1996-05-20 1999-05-06 Darwin Discovery Limited Quinoline sulfonamides as tnf inhibitors and as pde-iv inhibitors
US5984882A (en) 1996-08-19 1999-11-16 Angiosonics Inc. Methods for prevention and treatment of cancer and other proliferative diseases with ultrasonic energy
US6399358B1 (en) 1997-03-31 2002-06-04 Thomas Jefferson University Human gene encoding human chondroitin 6-sulfotransferase
JPH11158073A (ja) * 1997-09-26 1999-06-15 Takeda Chem Ind Ltd アデノシンａ３拮抗剤
US7517880B2 (en) 1997-12-22 2009-04-14 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of p38 kinase using symmetrical and unsymmetrical diphenyl ureas
UY25842A1 (es) 1998-12-16 2001-04-30 Smithkline Beecham Corp Antagonistas de receptores de il-8
WO2000075129A1 (en) 1999-06-07 2000-12-14 Shire Biochem Inc. Thiophene integrin inhibitors
DE60023920T2 (de) 1999-08-27 2006-07-20 Sugen, Inc., South San Francisco Phosphatmimetika und Verfahren zur Behandlung mit Phosphataseinhibitoren HIBITOREN
DE10196405B4 (de) 2000-07-03 2008-01-24 Kansai Paint Co., Ltd., Amagasaki Gasbarrierefolie
JP2004525071A (ja) 2000-07-20 2004-08-19 ニューロジェン コーポレイション カプサイシン受容体リガンド
JP2005500294A (ja) 2001-06-19 2005-01-06 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー ホスホジエステラーゼ７に対するピリミジン阻害剤
DE60238066D1 (de) 2001-08-17 2010-12-02 Basf Se Triazinderivate und deren verwendung als sonnenschutzmittel
JP4753336B2 (ja) 2001-09-04 2011-08-24 日本化薬株式会社 新規アリル化合物及びその製法
US7291616B2 (en) * 2001-10-31 2007-11-06 Cell Therapeutics, Inc. Aryl triazines as LPAAT-β inhibitors and uses thereof
US6878196B2 (en) 2002-01-15 2005-04-12 Fuji Photo Film Co., Ltd. Ink, ink jet recording method and azo compound
US20040067234A1 (en) 2002-07-11 2004-04-08 Paz Einat Isocitrate dehydrogenase and uses thereof
EP1546121B1 (en) 2002-07-18 2012-08-29 Janssen Pharmaceutica NV Substituted triazine kinase inhibitors
JP2004107220A (ja) 2002-09-13 2004-04-08 Mitsubishi Pharma Corp ＴＮＦ−α産生抑制剤
CL2003002353A1 (es) 2002-11-15 2005-02-04 Vertex Pharma Compuestos derivados de diaminotriazoles, inhibidores d ela proteina quinasa; composicion farmaceutica; procedimiento de preparacion; y su uso del compuesto en el tratamiento de enfermedades de desordenes alergicos, proliferacion, autoinmunes, condic
EP1575580A4 (en) 2002-12-02 2009-06-10 Arqule Inc METHOD FOR TREATING CARCINOMA
US7282568B2 (en) 2002-12-16 2007-10-16 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies against interleukin 8 (IL-8)
MXPA05007382A (es) 2003-01-10 2005-11-23 Threshold Pharmaceuticals Inc Tratamiento de cancer con 2-desoxiglucosa.
US7358262B2 (en) 2003-01-29 2008-04-15 Whitehead Institute For Biomedical Research Identification of genotype-selective anti-tumor agents
WO2004073619A2 (en) 2003-02-14 2004-09-02 Smithkline Beecham Corporation Ccr8 antagonists
WO2004074438A2 (en) 2003-02-14 2004-09-02 Smithkline Beecham Corporation Ccr8 antagonists
EP1689722A2 (en) 2003-10-10 2006-08-16 Bayer Pharmaceuticals Corporation 4-aminopyrimidine derivatives for treatment of hyperproliferative disorders
WO2005060956A1 (en) 2003-12-12 2005-07-07 University Of Maryland, Baltimore IMMUNOMODULATORY COMPOUNDS THAT TARGET AND INHIBIT THE pY+3 BINDING SITE OF TYROSENE KINASE p56 LCK SH2 DOMAIN
CN1921864A (zh) 2003-12-24 2007-02-28 西奥斯公司 使用TGF－β抑制剂治疗神经胶质瘤
US7820654B2 (en) 2004-09-23 2010-10-26 Dr. Reddy's Laboratories Ltd. Pyrimidine compounds, process for their preparation and compositions containing them
US20100160324A1 (en) 2004-12-30 2010-06-24 Astex Therapeutics Limited Pyrazole derivatives as that modulate the activity of cdk, gsk and aurora kinases
AU2006208834A1 (en) 2005-01-25 2006-08-03 Astrazeneca Ab Chemical compounds
CA2611728A1 (en) 2005-06-08 2006-12-14 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Methods for the identification, assessment, and treatment of patients with cancer therapy
AU2006283846B2 (en) 2005-08-26 2012-04-05 Merck Serono Sa Pyrazine derivatives and use as PI3K inhibitors
US8133900B2 (en) 2005-11-01 2012-03-13 Targegen, Inc. Use of bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
TW200815426A (en) 2006-06-28 2008-04-01 Astrazeneca Ab New pyridine analogues II 333
CN101679371A (zh) 2006-12-04 2010-03-24 艾美罗股份公司 作为腺苷受体拮抗剂的取代的嘧啶
WO2008076883A2 (en) 2006-12-15 2008-06-26 Abraxis Bioscience, Inc. Triazine derivatives and their therapeutical applications
JP5450381B2 (ja) 2007-04-30 2014-03-26 プロメティック・バイオサイエンスィズ・インコーポレーテッド 化合物、そのような化合物を含有する組成物、及びそのような化合物を用いるがん及び自己免疫疾患の治療法
AU2008262291A1 (en) 2007-06-11 2008-12-18 Miikana Therapeutics, Inc. Substituted pyrazole compounds
PH12013501594A1 (en) 2007-07-20 2014-05-12 Nerviano Medical Sciences Srl Substituted indazole derivatives active as kinase inhibitors
WO2009027736A2 (en) * 2007-08-27 2009-03-05 Astrazeneca Ab 2,4 diaminopyrimid'lnes for the treatment of myeloproliferative disorders and cancer
TW200924778A (en) 2007-10-10 2009-06-16 Takeda Pharmaceutical Amide compound
CA2709784A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
GB0805477D0 (en) 2008-03-26 2008-04-30 Univ Nottingham Pyrimidines triazines and their use as pharmaceutical agents
JP5277685B2 (ja) 2008-03-26 2013-08-28 富士ゼロックス株式会社 電子写真感光体、画像形成装置、プロセスカートリッジ及び画像形成方法
CN101575408B (zh) 2008-05-09 2013-10-30 Mca技术有限公司 用作阻燃剂和光稳定剂的聚三嗪基化合物
FR2932483A1 (fr) 2008-06-13 2009-12-18 Cytomics Systems Composes utiles pour le traitement des cancers.
TW201028381A (en) 2008-07-14 2010-08-01 Shionogi & Co Pyridine derivative having ttk inhibition activity
MX2011002409A (es) 2008-09-03 2011-09-06 Univ Johns Hopkins Alteraciones geneticas en isocitrato-deshidrogenasa y otros genes en glioma maligno.
WO2010028179A1 (en) 2008-09-03 2010-03-11 Dr. Reddy's Laboratories Ltd. Heterocyclic compounds as gata modulators
JP2010079130A (ja) 2008-09-29 2010-04-08 Fuji Xerox Co Ltd 電子写真感光体、プロセスカートリッジ、及び画像形成装置
JP2010181540A (ja) 2009-02-04 2010-08-19 Fuji Xerox Co Ltd 電子写真感光体、プロセスカートリッジ、及び画像形成装置
JP5263304B2 (ja) * 2009-02-06 2013-08-14 日本新薬株式会社 アミノピラジン誘導体及び医薬
AU2010223919B2 (en) 2009-03-13 2016-03-31 Les Laboratoires Servier Methods and compositions for cell-proliferation-related disorders
US8261872B2 (en) * 2009-06-08 2012-09-11 Clark Equipment Company Work machine having modular ignition switch keypad with latching output
KR101460095B1 (ko) 2009-06-08 2014-11-10 캘리포니아 캐피탈 에쿼티, 엘엘씨 트리아진 유도체와 이들의 치료적 용도
AU2010258825B2 (en) 2009-06-09 2014-08-21 Nantbio, Inc. Ureidophenyl substituted triazine derivatives and their therapeutical applications
CN102573487A (zh) 2009-06-09 2012-07-11 加利福尼亚资本权益有限责任公司 Hedgehog信号传导的吡啶基-三嗪抑制剂
WO2011005209A1 (en) 2009-07-10 2011-01-13 Milux Holding S.A. Knee joint device and method
JP5473851B2 (ja) 2009-09-30 2014-04-16 富士フイルム株式会社 高分子フィルム、位相差フィルム、偏光板及び液晶表示装置
EP3561077B1 (en) 2009-10-21 2022-12-21 Les Laboratoires Servier Methods for cell-proliferation-related disorders
WO2011050211A2 (en) 2009-10-21 2011-04-28 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for cell-proliferation-related disorders
JP5967827B2 (ja) 2009-12-09 2016-08-10 アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｉｄｈ変異体をもつことを特徴とする癌治療用の治療的活性化合物
WO2011123618A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Agios Pharmaceuticals, Inc. Methods of identifying a candidate compound
ES2704862T3 (es) 2010-07-16 2019-03-20 Agios Pharmaceuticals Inc Composiciones terapéuticamente activas y su método de uso
AU2011336764B2 (en) 2010-11-29 2017-02-23 Galleon Pharmaceuticals, Inc. Novel compounds as respiratory stimulants for treatment of breathing control disorders or diseases
TW201636330A (zh) 2011-05-24 2016-10-16 拜耳知識產權公司 含有硫醯亞胺基團之４－芳基－ｎ－苯基－１，３，５－三氮雜苯－２－胺
CN102827073A (zh) 2011-06-17 2012-12-19 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性组合物和它们的使用方法
CN102827170A (zh) 2011-06-17 2012-12-19 安吉奥斯医药品有限公司 治疗活性组合物和它们的使用方法
CN102659765B (zh) 2011-12-31 2014-09-10 沈阳药科大学 嘧啶及三嗪类化合物的制备方法和应用
NZ627096A (en) 2012-01-06 2017-02-24 Agios Pharmaceuticals Inc Triazinyl compounds and their methods of use
PE20141702A1 (es) 2012-01-06 2014-11-19 Abide Therapeutics Inc Compuestos de carbamato y preparacion y uso de los mismos
US9474779B2 (en) 2012-01-19 2016-10-25 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compositions and their methods of use
EP2804850B1 (en) 2012-01-19 2018-08-29 Agios Pharmaceuticals, Inc. Therapeutically active compounds and their methods of use
WO2013133367A1 (ja) 2012-03-09 2013-09-12 カルナバイオサイエンス株式会社 新規トリアジン誘導体
US9579324B2 (en) 2013-07-11 2017-02-28 Agios Pharmaceuticals, Inc Therapeutically active compounds and their methods of use
US20150031627A1 (en) 2013-07-25 2015-01-29 Agios Pharmaceuticals, Inc Therapeutically active compounds and their methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
IL233503A0 (en) 2014-08-31
CO7030962A2 (es) 2014-08-21
CR20140377A (es) 2014-11-13
EP3406608A1 (en) 2018-11-28
US20220348554A1 (en) 2022-11-03
US20200079755A1 (en) 2020-03-12
SI2800743T1 (en) 2018-08-31
SG11201403878QA (en) 2014-08-28
MX358940B (es) 2018-09-10
PT2800743T (pt) 2018-07-04
US9732062B2 (en) 2017-08-15
US20170044139A1 (en) 2017-02-16
ES3043635T3 (en) 2025-11-25
EP2800743B1 (en) 2018-04-04
TR201809228T4 (tr) 2018-07-23
UA117451C2 (uk) 2018-08-10
CN108912066A (zh) 2018-11-30
KR101893112B1 (ko) 2018-08-30
MY185206A (en) 2021-04-30
ES2675760T3 (es) 2018-07-12
EA201491330A1 (ru) 2015-04-30
AR090411A1 (es) 2014-11-12
US20130190287A1 (en) 2013-07-25
KR20140113712A (ko) 2014-09-24
NO2897546T3 (sr) 2018-01-13
JP6409081B2 (ja) 2018-10-17
US20230250078A1 (en) 2023-08-10
US20160318903A1 (en) 2016-11-03
CN115521264A (zh) 2022-12-27
US11505538B1 (en) 2022-11-22
EP4647076A3 (en) 2026-01-14
JP2017075193A (ja) 2017-04-20
BR112014016805B1 (pt) 2019-07-30
AU2017265096B2 (en) 2019-08-08
PL2800743T3 (pl) 2018-09-28
EP3984997A1 (en) 2022-04-20
NI201400073A (es) 2014-12-22
EP4647076A2 (en) 2025-11-12
ZA201405163B (en) 2018-05-30
JP2015503571A (ja) 2015-02-02
HK1203942A1 (en) 2015-11-06
TW201329054A (zh) 2013-07-16
ECSP14012726A (es) 2016-01-29
NZ722582A (en) 2018-02-23
CA2860623A1 (en) 2013-07-11
AU2017265096A1 (en) 2017-12-14
CN107417667B (zh) 2020-04-10
US20170298045A1 (en) 2017-10-19
CN115536635A (zh) 2022-12-30
HUE038403T2 (hu) 2018-10-29
EP3984997B1 (en) 2025-07-30
CN114933585A (zh) 2022-08-23
EP2800743A1 (en) 2014-11-12
CN108912066B (zh) 2022-06-24
ES2901430T3 (es) 2022-03-22
IL233503B (en) 2018-07-31
SMT201800334T1 (it) 2018-09-13
AU2013207289A1 (en) 2014-07-31
JP6411895B2 (ja) 2018-10-24
US9512107B2 (en) 2016-12-06
US9656999B2 (en) 2017-05-23
US10294215B2 (en) 2019-05-21
CL2014001793A1 (es) 2014-11-07
NZ627096A (en) 2017-02-24
HRP20180844T1 (hr) 2018-08-24
CN107417667A (zh) 2017-12-01
CY1120506T1 (el) 2019-07-10
TWI653228B (zh) 2019-03-11
CN104114543B (zh) 2019-03-15
AU2017265096B9 (en) 2019-09-05
AU2013207289A2 (en) 2014-07-31
CN104114543A (zh) 2014-10-22
EP3406608B8 (en) 2022-01-19
MX2014008350A (es) 2014-10-06
DK2800743T3 (en) 2018-06-14
LT2800743T (lt) 2018-06-25
PH12014501561A1 (en) 2014-10-08
BR112014016805A8 (pt) 2017-07-04
BR112014016805A2 (pt) 2017-06-13
PE20142098A1 (es) 2015-01-08
WO2013102431A1 (en) 2013-07-11
EP3406608B1 (en) 2021-09-15
EP2800743A4 (en) 2015-08-26
AU2013207289B2 (en) 2017-09-21
EA030187B1 (ru) 2018-07-31
SG10201602862RA (en) 2016-05-30
PH12014501561B1 (en) 2014-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS57401B1 (sr) Terapeutski aktivna jedinjenja i postupci za njihovu upotrebu
EP1157000B1 (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy
JP5840133B2 (ja) スピロラクタム誘導体およびその使用
CA2661085A1 (en) Combination faah inhibitor and analgesic, anti-inflammatory or anti-pyretic agent
MXPA04004105A (es) Metodo de tratamiento de tinnitus.
AU2019314323B2 (en) Sulfopropanoic acid derivatives for treating neurodegenerative disorders
ZA200106260B (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy.
US20130190370A1 (en) Novel Tetrahydronaphalene Antagonists to the Thromboxane A2 (TP) Receptor
UA75572C2 (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy
EP1314426B1 (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of neurodegenerative diseases
JP2025511181A (ja) アザスピロノナンコアを含むｔ型カルシウムチャネル調節因子及びその使用方法
JP2025511208A (ja) アザスピロヘプタンコアを含むｔ型カルシウムチャネル調節因子及びその使用方法
HK40105684B (en) Sulfopropanoic acid derivatives for treating neurodegenerative disorders
JP2024520758A (ja) Ｔｔｂｋ１の阻害剤
HK40056251B (en) Sulfopropanoic acid derivatives for treating neurodegenerative disorders
HK40056251A (en) Sulfopropanoic acid derivatives for treating neurodegenerative disorders
HK1073775A (en) Branched chain amino acid-dependent aminotransferase inhibitors and their use in the treatment of diabetic retinopathy