RS58976B1 - Antiamiloidna jedinjenja koja sadrže benzofuran - Google Patents

Antiamiloidna jedinjenja koja sadrže benzofuran

Info

Publication number
RS58976B1
RS58976B1 RS20190884A RSP20190884A RS58976B1 RS 58976 B1 RS58976 B1 RS 58976B1 RS 20190884 A RS20190884 A RS 20190884A RS P20190884 A RSP20190884 A RS P20190884A RS 58976 B1 RS58976 B1 RS 58976B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
etoac
added
reaction
solution
Prior art date
Application number
RS20190884A
Other languages
English (en)
Inventor
Mark A Reed
Thomas K Wood
Scott C Banfield
Christopher J Barden
Arun Yadav
Erhu Lu
Fan Wu
Original Assignee
Treventis Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Treventis Corp filed Critical Treventis Corp
Publication of RS58976B1 publication Critical patent/RS58976B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/12—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/08—1,2,5-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,5-oxadiazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

Opis
OSNOV PRONALASKA
[0001] Nagomilavanje amiloidnih proteina u živom tkivu, stanje poznato kao amiloidoza, uzročnik je ili glavni faktor u patologiji mnogih takozvanih amiloidnih bolesti kao što su Alzheimerova, Parkinsonova, Huntingtonova, i prionska bolest, uključujući tu i poremećaje koji nisu vezani za CNS, na primer dijabetes melitus tipa 2. Tradicionalno, agregacije proteina klasifikuju se kao amiloid ukoliko posle bojenja bojama Congo crvenom ili tioflavinom T (Thioflavin T, ThT), pod polarizovanom svetlošću pokazuju svetlozelenu (jabuka-zelenu) birifringenciju (Sipe and Cohen, 2000, J. Struct. Biol. 130:88-98). Poslednjih godina je ova definicija amiloida proširena i sada se primenjuje na svaki polipeptid koji može da se polimerizuje u konformaciju unakrsnih beta-ploča in vitro ili in vivo, bez obzira na sekvencu (Xu, 2007, Amyloid 14:119-31). Određeni tipovi amiloidoza mogu se sresti uglavnom u centralnom nervnom sistemu, na primer agregacija beta-amiloidnog proteina u Alzheimerovoj bolesti, tau proteina u progresivnoj supranuklearnoj paralizi, alfa-sinukleina u Parkinsonovoj bolesti, proteina hantingtina u Huntingtonovoj bolesti, i prionskog proteina u Creutzfeldt-Jacobovoj i drugim prionskim bolestima. Drugi tipovi amiloidoza su sistemske prirode, kao što je to slučaj sa agregacijom transtiretina u senilnoj sistemskoj amiloidozi.
[0002] U uslovima današnje medicinske prakse, sve gore navedene bolesti su, bez razlike, fatalne. Ni za jednu od ovih bolesti nema široko prihvaćene terapije ili način lečenja, koji bi mogli da zaustave formiranje i/ili uklone agregacije amiloidnog depozita. Prema tome, postoji hitna potreba za načinima lečenja.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0003] U ovom tekstu objavljeni su antiamiloidi koji preveniraju ili smanjuju brzinu oligomerizacije ili agregacije amiloidnih proteina. Očekuje se da ovaj efekat ima korisno dejstvo u bolestima koje su pod uticajem amiloidoze.
[0004] Uopšteno, u aspektu, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, 3-(morfolin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)pirolidin-1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil) azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiofen opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkila, -CH2OH, 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-ila, 2-ol-propan-2-ila, i ciklopropila; i R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil, uz uslov da ako je A 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, onda on ne može biti spojen sa tiofenom.
[0005] Uopšteno, u aspektu, obezbeđeno je jedinjenje prema gornjoj formuli ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, i 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il; i R13se bira iz grupe koja sadrži tiofen opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkila, i -CH2OH, uz uslov da ako je A 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, onda on ne može biti spojen sa tiofenom.
[0006] Uopšteno, u aspektu, obezbeđeno je jedinjenje prema gornjoj formuli ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde se R11bira iz grupe koja sadrži 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)pirolidin 1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; i R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, oksetan-3-ol-3-il, 2-ol-propan-2-il, i ciklopropil.
[0007] Uopšteno, u aspektu, obezbeđeno je jedinjenje prema gornjoj formuli ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde se R13bira iz grupe koja sadrži 5-(2-ol-propan-2-il)oksadizol-3-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-5-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)tiazol-2-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-6-il, 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)-piridin-6-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-2-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-3-il, 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-5-il, 3-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, 3-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-6-il, i 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il.
[0008] Uopšteno, u aspektu, obezbeđeno je jedinjenje prema gornjoj formuli ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je R113-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il i R13se bira iz grupe koja sadrži 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il i 5-(2-ol-propan-2-il)oksadizol-3-il.
[0009] Uopšteno, u aspektu, opisani su metodi korisni u lečenju amiloidoze. Metodi uključuju primenu, kod subjekta, terapijskog jedinjenja predmetnog pronalaska, koje inhibira agregaciju ili oligomerizaciju amiloida. Amiloidoza može biti Alzheimerova bolest, progresivna supranuklearna paraliza, frontotemporalna demencija, Parkinsonova bolest, Huntingtonova bolest, prionska bolest, senilna sistemska amiloidoza, dijabetes melitus tipa 2, ili neka druga sistemska amiloidoza ili amiloidoza centralnog nervnog sistema.
[0010] Uopšteno, u aspektu, obezbeđene su farmaceutske kompozicije za lečenje amiloidoze. Farmaceutske kompozicije uključuju terapijsko jedinjenje predmetnog pronalaska u količini efikasnoj za inhibiranje agregacije amiloida, i farmaceutski prihvatljivi ekscipijent ili prenosnik. U nekim implementacijama, efikasna količina iznosi između oko 0.0003 i oko 50 mg/kg telesne težine osobe kojoj je potrebna.
[0011] U skladu sa gore navedenim, predmetni pronalazak se odnosi i na farmaceutski prihvatljive soli, stereoizomere, polimorfe, metabolite, analoge, i prolekove jedinjenja, i na bilo koju njihovu kombinaciju.
[0012] Uz gore navedene i druge prednosti i osobine pronalaska, koje će postati očigledne kasnije u ovom tekstu, priroda pronalaska se može jasnije razumeti upućivanjem na detaljni opis pronalaska i priložene patentne zahteve.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0013]
SL. 1 prikazuje test agregacije beta-amiloida za jedinjenje opisano u ovom tekstu. SL. 2 prikazuje test agregacije beta-amiloida za jedinjenje opisano u ovom tekstu. SL. 3 prikazuje test agregacije tau proteina za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
SL. 4 prikazuje test agregacije tau proteina za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
SL. 5 prikazuje test agregacije tau proteina za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
SL. 6 prikazuje test agregacije tau proteina za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
SL. 7 prikazuje test agregacije tau proteina za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
SL. 8 prikazuje test oligomerizacije biotinisanog beta-amiloida za jedinjenje opisano u ovom tekstu.
OPIS
[0014] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 3-(morfolin-1-ilmetil)pirolidin-1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, tiofen opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili više supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkila, -CH2OH, 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-ilom, oksetan-3-ol-3-ilom, 2-ol-propan-2-ilom, i ciklopropilom; i R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil, uz uslov da ako je A 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, onda on ne može biti spojen sa tiofenom.
[0015] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, i 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il; R13se bira iz grupe koja sadrži tiofen opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkila, i -CH2OH; i R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil, uz uslov da ako je A 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, onda on ne može biti spojen sa tiofenom.
[0016] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde se R11bira iz grupe koja sadrži 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-1-il)pirolidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)pirolidin-1-il, 4(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil; i R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, oksetan-3-ol-3-il, 2-olpropan-2-il, i ciklopropil.
[0017] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde se R11bira iz grupe koja sadrži 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil) azetidin-1-il; R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil; i R13se bira iz grupe koja sadrži 5-(2-ol-propan-2-il)oksadizol-3-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-5-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)tiazol-2-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-6-il, 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)-piridin-6-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-2-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-3-il, 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-5-il, 3-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, 3-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-6-il, i 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il.
[0018] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena su jedinjenja Formule I, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so:
gde je R113-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il; R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil; i R13se bira iz grupe koja sadrži 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il i 5-(2-ol-propan-2-il)oksadizol-3-il.
[0019] U jednom primeru izvođenja, obezbeđen je metod lečenja amiloidne bolesti kod subjekta, koji uključuje primenu, kod subjekta, terapijski efikasne količine jedinjenja predmetnog pronalaska. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je Alzheimerova bolest. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je Parkinsonova bolest. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je Huntingtonova bolest. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je frontotemporalna demencija. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je progresivna supranuklearna paraliza. U nekim primerima izvođenja, amiloidna bolest je dijabetes melitus tipa 2.
[0020] 13. Metod lečenja stanja koje je član odabran između gubitka pamćenja, gubitka kognicije i njihove kombinacije, pomenuti metod uključuje primenu, kod subjekta kojem je to potrebno, terapijski efikasne količine jedinjenja iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1-5.
[0021] U jednom primeru izvođenja, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja uključuje jedinjenje predmetnog pronalaska i farmaceutski prihvatljivi nosač.
[0022] U jednom primeru izvođenja, obezbeđen je metod lečenja stanja koje je član odabran između gubitka pamćenja, gubitka kognicije i njihove kombinacije, pomenuti metod uključuje primenu, kod subjekta kojem je to potrebno, terapijski efikasne količine jedinjenja objavljenog u ovom tekstu. U nekim primerima izvođenja, pomenuto stanje udruženo je sa Alzheimerovom bolešću. U nekim primerima izvođenja, pomenuto stanje udruženo je sa progresivnom supranuklearnom paralizom. U nekim primerima izvođenja, terapijski efikasna količina je ukupna dnevna doza od oko 0.0003 do oko 50 mg/kg telesne težine subjekta.
[0023] Veruje se da jedinjenja predmetnog pronalaska inhibiraju agregaciju amiloidnog proteina. Podaci koji podržavaju ovaj zaključak mogu se naći u Primerima, kasnije u ovom tekstu.
Definicije
[0024] Ukoliko nije drugačije definisano, izrazi upotrebljeni u specifikaciji odnose se na sledeće definicije, kako je detaljno opisano u nastavku.
[0025] Treba razumeti da izrazi "primena" ili "primenjivanje" jedinjenja označavaju davanje jedinjenja predmetnog pronalaska osobi, u formi u kojoj može biti uneto u telo te osobe, u količini efikasnoj za profilaksu, lečenje ili dijagnozu, po potrebi. Takve forme uključuju npr., oralne dozne forme, injektabilne dozne forme, transdermalne dozne forme, inhalacione dozne forme, i rektalne dozne forme.
[0026] Izraz "alkoksi", kako se koristi u ovom tekstu, označava alkil grupu, kako je ovde definisano, povezanu sa matičnom molekulskom komponentom preko atoma kiseonika. Reprezentativni primeri alkoksi uključuju, ali se ne ograničavaju na metoksi, etoksi, propoksi, 2-propoksi, butoksi, tert-butoksi, pentiloksi, i heksiloksi. Izraz "alktiolil", kako se koristi u ovom tekstu, označava analognu grupu koja sadrži sumpor umesto kiseonika.
[0027] Izraz "alkil", kako se koristi u ovom tekstu, označava linearni ili granati ugljovodonični lanac koji sadrži od 1 do 20 ugljenikovih atoma, poželjno od 1 do 10 ugljenikovih atoma, poželjnije 1, 2, 3, 4, 5, ili 6 ugljenika. Reprezentativni primeri alkila uključuju, ali se ne ograničavaju na metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sec-butil, izo-butil, tert-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, n-heksil, 3-metilheksil, 2,2-dimetilpentil, 2,3-dimetilpentil, n-heptil, n-oktil, n-nonil, i n-decil.
[0028] Izraz "karbonil", kako se koristi u ovom tekstu, označava -C(=O)- grupu.
[0029] Izraz "karboksi", kako se koristi u ovom tekstu, označava -COOH grupu koja može biti protektovana kao estarska grupa: -COO-alkil.
[0030] Izraz "fluoro", kako se koristi u ovom tekstu, označava -F.
[0031] Izraz "halo" ili "halogen", kako se koristi u ovom tekstu, označava Cl, Br, I, ili F.
[0032] Izraz "heteroaril", kako se koristi u ovom tekstu, odnosi se na aromatični prsten koji sadrži jedan ili više heteroatoma koji se nezavisno biraju između azota, kiseonika ili sumpora, ili njegov tautomer. Takvi prstenovi mogu biti monociklični ili biciklični kako će biti dodatno objašnjeno u ovom tekstu. Heteroaril prstenovi spojeni su sa matičnom molekulskom komponentom preko atoma ugljenika ili azota.
[0033] Izrazi "heteroaril" ili "5- ili 6-člani heteroaril prsten", kako se koriste u ovom tekstu, odnose se na 5- ili 6-člane aromatične prstenove koji sadrže 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma koji se nezavisno biraju između azota, kiseonika ili sumpora, ili njihove tautomere. Primeri takvih prstenova uključuju, ali se ne ograničavaju na prsten u kojem je jedan ugljenik zamenjen O ili
1
atomom; jedan, dva ili tri N atoma aranžirana na pogodan način da daju aromatični prsten; ili prsten u kojem su dva ugljenikova atoma u prstenu zamenjena jednim O ili S atomom i jednim N atomom. Takvi prstenovi mogu da uključuju, ali se ne ograničavaju na šestočlani aromatični prsten u kojem su jedan do četiri ugljenikova atoma prstena zamenjena atomima azota, petočlane prstenove koji sadrže sumpor, kiseonik ili azot u prstenu; petočlane prstenove koji sadrže jedan do četiri atoma azota; i petočlane prstenove koji sadrže kiseonik ili sumpor i jedan do tri atoma azota. Reprezentativni primeri 5- do 6-članih heteroaril prstenova uključuju, ali se ne ograničavaju na furil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, pirazinil, pirazolil, piridazinil, piridinil, pirimidinil, pirolil, tetrazolil, [1,2,3]tiadiazolil, [1,2,3]oksadiazolil, tiazolil, tienil, [1,2,3]triazinil, [1,2,4]triazinil, [1,3,5]triazinil, [1,2,3]triazolil, i [1,2,4]triazolil.
[0034] Heteroaril grupe pronalaska mogu biti supstituisane vodonikom ili alkilom. Monociklični heteroaril ili 5- ili 6-člani heteroaril prstenovi supstituisani su sa 0, 1, 2, 3, 4, ili 5 supstituenata. Heteroaril grupe predmetnog pronalaska mogu biti prisutne kao tautomeri.
[0035] Izraz "hidroksi", kako se koristi u ovom tekstu, označava -OH grupu.
[0036] Ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "prolek" obuhvata farmaceutski prihvatljive estre, karbonate, tiokarbonate, N-acil derivate, N-aciloksialkil derivate, kvaternarne derivate tercijarnih amina, N-Mannichove baze, Schiffove baze, aminokiselinske konjugate, fosfatne estre, soli metala i sulfonatne estre jedinjenja objavljenih u ovom tekstu. Primeri prolekova uključuju jedinjenja koja sadrže biohidrolizabilnu komponentu (npr., biohidrolizabilni amid, biohidrolizabilni karbamat, biohidrolizabilni karbonat, biohidrolizabilni estar, biohidrolizabilni fosfat, ili biohidrolizabilni ureido analog). Prolekove jedinjenja objavljenih u ovom tekstu lako može osmisliti i pripremiti prosečno obučeni stručnjak u oblasti. Vidi, npr., Design of Prodrugs, Bundgaard, A. Ed., Elseview, 1985; Bundgaard, hours., "Design and Application of Prodrugs," A Textbook of Drug Design and Development, Krosgaard-Larsen and hours. Bundgaard, Ed., 1991, Chapter 5, p.113-191; i Bundgaard, hours., Advanced Drug Delivery Review, 1992, 8, 1-38.
[0037] Ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz "protektujuća grupa" ili "protektivna grupa", kada se koristi da označi deo molekula podvrgnut hemijskoj reakciji, označava hemijsku komponentu koja nije reaktivna pod uslovima te hemijske reakcije, i koja može da bude uklonjena da bi obezbedila komponentu koja je reaktivna pod tim uslovima. Protektujuće grupe dobro su poznate u struci. Vidi, npr., Greene, T. W. and Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis (3 rd ed., John Wiley & Sons: 1999); Larock, R. C., Comprehensive Organic Transformations (2 nd ed., John Wiley & Sons: 1999). Neki primeri uključuju benzil, difenilmetil, tritil, Cbz, Boc, Fmoc, metoksikarbonil, etoksikarbonil, i ftalimido. Protektujuće grupe uključuju, na primer, azot-protektujuće grupe i hidroksiprotektujuće grupe.
[0038] Izraz "sulfonil", kako se koristi u ovom tekstu, označava -S(O)2- grupu.
[0039] Izraz "tioalkoksi", kako se koristi u ovom tekstu, označava alkil grupu, kako je ovde definisano, povezanu sa matičnom molekulskom komponentom preko atoma sumpora. Reprezentativni primeri tioalkoksi uključuju, ali se ne ograničavaju na metiltio, etiltio, i propiltio.
[0040] Jedinjenja pronalaska mogu da se koriste u obliku farmaceutski prihvatljivih soli izvedenih iz neorganskih ili organskih kiselina. Farmaceutski prihvatljiva so/soli dobro su poznate u struci. Da bi bilo jasnije, izraz "farmaceutski prihvatljive soli", kako se koristi u ovom tekstu, uopšteno se odnosi na soli pripremljene od farmaceutski prihvatljivih netoksičnih kiselina ili baza, uključujući neorganske kiseline i baze i organske kiseline i baze. Pogodne farmaceutski prihvatljive bazne adicione soli uključuju soli metala napravljene od aluminijuma, kalcijuma, litijuma, magnezijuma, kalijuma, natrijuma i cinka ili organske soli napravljene od lizina, N,N’-dibenziletilendiamina, hloroprokaina, holina, dietanolamina, etilendiamina, meglumin (N-metilglukamina) i prokaina. Pogodne netoksične kiseline uključuju neorganske i organske kiseline kao što su sirćetna, alginska, antranilna, benzensulfonska, benzoeva, kamforsulfonska, limunska, etensulfonska, mravlja, fumarna, furoinska, galakturonska, glukonska, glukuronska, glutaminska, glikolna, bromovodonična, hlorovodonična, izetionska, mlečna, maleinska, jabučna, mandelična, metansulfonska, mucinska, azotna, pamoinska, pantotenska, fenilsirćetna, fosforna, propionska, salicilna, stearinska, sukcinska, sulfanilinska, sumporna, vinska kiselina i p-toluensulfonska kiselina. Specifične netoksične kiseline uključuju hlorovodoničnu, bromovodoničnu, fosfornu, sumpornu i metansulfonsku kiselinu. Primeri specifičnih soli uključuju hidrohloridne i mezilatne soli. I druge su dobro poznate u struci. Vidi, npr., Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18 th ed. (Mack Publishing, Easton Pa.: 1990) i Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. (Mack Publishing, Easton Pa.: 1995). Pripremanje i korišćenje kiselih adicionih soli, karboksilatnih soli, aminokiselinskih adicionih soli i cviterjonskih soli jedinjenja predmetnog pronalaska takođe mogu da se smatraju za farmaceutski prihvatljive ako su, u okvirima pouzdane medicinske procene, pogodne za upotrebu u kontaktu sa tkivima čoveka i nižih životinja, a da pri tome ne izazivaju toksičnost, iritaciju, alergijski odgovor i slično, i daju razuman odnos koristi/rizika, i efikasne pri upotrebi za koju su namenjene. Takve soli mogu uključivati i različite solvate i hidrate jedinjenja predmetnog pronalaska.
[0041] Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti obeležena izotopom, npr., različitim izotopima ugljenika, fluora, ili joda, po potrebi, kada jedinjenje o kojem je reč sadrži najmanje jedan takav atom. U poželjnim primerima izvođenja, metodi dijagnostikovanja predmetnog pronalaska uključuju primenu takvog izotopom obeleženog jedinjenja.
[0042] Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati u vidu stereoizomera u kojima postoje asimetrični ili hiralni centri. Ovi stereoizomeri su "R" ili "S" u zavisnosti od konfiguracije supstituenata oko hiralnog ugljenikovog atoma. Izrazi "R" i "S" upotrebljeni u ovom tesktu predstavljaju konfiguracije kako je definisano u IUPAC 1974 Recommendations for Section E, Fundamental Stereochemistry, u Pure Appl. Chem., 1976, 45: 13-30. Pronalazak razmatra različite stereoizomere i njihove mešavine i svi oni su specifično obuhvaćeni okvirom ovog pronalaska. Stereoizomeri uključuju enantiomere i dijastereomere, i mešavine enantiomera ili dijastereomera. Pojedinačni stereoizomeri jedinjenja pronalaska mogu se pripremiti sintetskim putem iz komercijalno dostupnih polaznih materijala koji sadrže asimetrične ili hiralne centre, ili pripremanjem racemskih mešavina posle kojeg sledi razdvajanje, dobro poznato prosečno obučenom stručnjaku u oblasti. Primeri ovih metoda razdvajanja su (1) prikačinjanje mešavine enantiomera za pomoćno hiralno sredstvo, razdvajanje dobijene mešavine dijastereomera rekristalizacijom ili hromatografijom i opciono oslobađanje optički čistog proizvoda sa pomoćnog sredstva, kako je opisano u Furniss, Hannaford, Smith, and Tatchell, "Vogel’s Textbook of Practical Organic Chemistry", 5th edition (1989), Longman Scientific & Technical, Essex CM202JE, England, ili (2) direktno razdvajanje mešavine optičkih izomera na hiralnim hromatografskim kolonama ili (3) metod frakcione rekristalizacije.
[0043] Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati kao cis ili trans izomeri, gde supstituenti na prstenu mogu biti prikačeni na takav način da budu na istoj strani prstena (cis) jedan u odnosu na drugi, ili na suprotnim stranama prstena jedan u odnosu na drugi (trans). Takvi metodi dobro su poznati prosečno obučenim stručnjacima u oblasti i mogu uljučivati razdvajanje izomera rekristalizacijom ili hromatografijom. Treba razumeti da jedinjenja pronalaska mogu posedovati tautomerne oblike kao i geometrijske izomere, i da oni takođe čine aspekt pronalaska.
[0044] Treba napomenuti da hemijska komponenta koja formira deo većeg jedinjenja može biti opisana u ovom tekstu korišćenjem imena koje joj uobičajeno odgovara kada postoji kao pojedinačan molekul ili imena koje uobičajeno odgovara njenom radikalu. Na primer, izrazi "piridin" i "piridil" imaju isto značenje kada se koriste da opišu komponentu prikačenu za
1
druge hemijske komponente. Tako na primer, dva izraza "XOH, gde je X piridil" i "XOH, gde je X piridin" imaju isto značenje i obuhvataju jedinjenja piridin-2-ol, piridin-3-ol i piridin-4-ol.
[0045] Izraz "farmaceutski prihvatljivi ekscipijent ", kako se koristi u ovom tekstu, označava netoksičnu, inertnu čvrstu, polučvrstu ili tečnu potpornu supstancu, razblaživač, inkapsulirajući materijal ili formulaciono pomoćno sredstvo bilo kog tipa. Neki primeri materijala koji mogu služiti kao farmaceutski prihvatljivi nosači su šećeri kao laktoza, glukoza i saharoza; skrobovi kao kukuruzni skrob i krompirov skrob; celuloza i njeni derivati kao natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; tragant u prahu; slad; želatin; talk; kakao buter i supozitorijski voskovi; ulja kao ulje kikirikija, pamukovo ulje, ulje šafranike, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; glikoli; kao propilen glikol; estri kao etil oleat i etil laurat; agar; puferišuća sredstva kao magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; alginska kiselina; voda koja ne sadrži pirogene; izotonični slani rastvor; Ringerov rastvor; etil alkohol, i rastvori fosfatnog pufera, kao i drugi netoksični kompatibilni lubrikanti kao natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat, kao i sredstva za bojenje, oslobađajuća sredstva, sredstva za oblaganje, zaslađivači, sredstva za poboljšanje mirisa i ukusa, prezervansi i antioksidanti takođe mogu biti prisutni u kompoziciji, u skladu sa procenom stručnjaka u oblasti formulisanja.
[0046] Ukoliko nije drugačije naznačeno, izrazi "prevenira", "prevenirajući" i "prevencija" razmatraju delovanje koje se dešava pre nego što pacijent počne da boluje od specifikovane bolesti ili poremećaja, koje inhibira ili smanjuje jačinu bolesti ili poremećaja ili jednog ili više njihovih simptoma. Izrazi obuhvataju profilaksu.
[0047] Ukoliko nije drugačije naznačeno, "profilaktički efikasna količina" jedinjenja je količina dovoljna da prevenira bolest ili stanje, ili jedan ili više simptoma udruženih sa bolešću ili stanjem, ili da spreči njihovo vraćanje. Profilaktički efikasna količina jedinjenja je količina terapijskog sredstva, samog ili u kombinaciji sa drugim sredstvima, koja obezbeđuje profilaktičku korist u prevenciji bolesti. Izraz "profilaktički efikasna količina" može obuhvatiti količinu koja poboljšava ukupnu profilaksu ili pojačava profilaktičku efikasnost drugog profilaktičkog sredstva.
[0048] Ukoliko nije drugačije naznačeno, "dijagnostički efikasna količina" jedinjenja je količina dovoljna za dijagnostikovanje bolesti ili stanja. Uopšteno, primena jedinjenja u dijagnostičke svrhe ne traje onoliko dugo koliko terapijska upotreba jedinjenja i može se primeniti samo jednom ako je to dovoljno za postavljanje dijagnoze.
[0049] Ukoliko nije drugačije naznačeno, "terapijski efikasna količina" jedinjenja je količina dovoljna za lečenje bolesti ili stanja, ili jednog ili više simptoma udruženih sa bolešću ili stanjem. Pogodna količina zavisi, između ostalog, od stadijuma bolesti ili stanja; starosti pacijenta; pacijentove težine; bioraspoloživosti jedinjenja u odnosu na ciljno tkivo; koncentracije jedinjenja potrebne in vivo za postizanje korisnog efekta u odnosu na kontrolu, mereno ponašajnim, motornim, biohemijskim, anatomskim ili drugim očitavanjima; ili koncentracije jedinjenja potrebnog za ostvarivanje farmakodinamičkog efekta na ciljni amiloidni protein u ciljnom tkivu. U nekim primerima izvođenja, bolest je neurološki poremećaj, ciljni amiloidni protein je beta-amiloidni protein, a ciljno tkivo je mozak. U nekim primerima izvođenja, bolest je neurološki poremećaj, ciljni amiloidni protein je tau protein, a ciljno tkivo je mozak. U nekim primerima izvođenja, bolest je neurološki poremećaj, ciljni amiloidni proteini su i beta-amiloidni protein i tau protein, a ciljno tkivo je mozak. U nekim primerima izvođenja, bolest je metabolički poremećaj kao dijabetes tipa 2, ciljni amiloidni protein je amilin, a ciljno tkivo je pankreas. U odsustvu kliničkih podataka, koncentracija jedinjenja potrebna za ostvarivanje farmakodinamičkog efekta može se proceniti in vitro korelisanjem koncentracije potrebne za smanjenje oligomerizacije ili agregacije in vitro, u odnosu na koncentraciju ciljnog amiloidnog proteina in vitro, sa koncentracijom ciljnog amiloidnog proteina pretpostavljenom za ciljno tkivo, tako da potrebna koncentracija in vivo bude približno jednaka (in vitro koncentracija jedinjenja * in vivo koncentracija amiloida/in vitro koncentracija amiloida); iz čega se terapijski efikasna količina može dodatno proceniti na osnovu farmakokinetičkih podataka dobijenih u studijama na životinjama, kao što su bioraspoloživost, prolazak kroz krvno-moždanu barijeru i vezivanje sa proteinom.
[0050] Izraz "subjekt" treba da uključi žive organizme u kojima može doći do pojave bolesti. Primeri subjekata uključuju ljude, majmune, krave, ovce, koze, pse, mačke, miševe, pacove i njihove transgene vrste.
[0051] Izraz "suštinski čist" označava da čistoća izolovanog materijala iznosi najmanje 90%, poželjno čistoća iznosi 95%, još poželjnije čistoća iznosi 99%, kada se ispitivanje vrši analitičkim tehnikama poznatim u struci.
[0052] Farmaceutske kompozicije mogu da se formulišu za oralnu primenu u čvrstom ili tečnom obliku, za parenteralnu intravensku, subkutanu, intramuskularnu, intraperitonealnu, intraarterijsku, ili intradermalnu injekciju, ili za vaginalnu, nazalnu, površinsku ili rektalnu primenu. Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska pogodne za oralnu primenu mogu biti predstavljene zasebnim doznim formama, npr., tabletama, tabletama za žvakanje, kapletama, kapsulama, tečnošću i sirupima sa poboljšanim ukusom. Takve dozne forme
1
sadrže unapred određene količine aktivnih sastojaka, i mogu da se pripreme farmaceutskim metodima poznatim stručnjacima u oblasti. Vidi, uopšteno, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton Pa. (1990).
[0053] Parenteralne dozne forme mogu da se primene kod pacijenata različitim putevima uključujući subkutani, intravenski (uključujući bolusnu injekciju), intramuskularni, i intraarterijski. Zbog toga što njihova primena tipično zaobilazi pacijentove prirodne odbrambene mehanizme protiv kontaminanata, parenteralne dozne forme su posebno sterilne ili u stanju su da mogu da se sterilišu pre primene kod pacijenta. Primeri parenteralnih doznih formi uključuju rastvore spremne za injektiranje, suve proizvode spremne da se rastvore ili suspenduju u farmaceutski prihvatljivom prenosniku za injekciju, suspenzije spremne za injektiranje, i emulzije. Farmaceutske kompozicije za parenteralnu injekciju sadrže farmaceutski prihvatljive sterilne vodene ili nevodene rastvore, disperzije, suspenzije ili emulzije i sterilne praškove za rekonstituisanje u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama. Primeri pogodnih vodenih ili nevodenih nosača, razblaživača, rastvarača ili prenosnika uključuju vodu, etanol, poliole (propilen glikol, polietilen glikol, glicerol, i slično, i njihove pogodne mešavine), biljna ulja (kao što je maslinovo ulje) i injektabilne organske estre kao što je etil oleat, ili njihove pogodne mešavine. Pogodna fluidnost kompozicije može se održati, na primer, upotrebom oblažućih sredstava kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija, i upotrebom surfaktanata. Ove kompozicije mogu sadržati i adjuvanse kao što su prezervansi, sredstva za vlaženje, emulgujuća sredstva, i dispergujuća sredstva. Prevencija delovanja mikroorganizama može se osigurati različitim antibakterijskim i antigljivičnim sredstvima, na primer, parabenima, hlorobutanolom, fenolom, sorbinskom kiselinom, i slično. Uključivanje izotoničnih sredstava, na primer šećera, natrijum hlorida i slično, takođe može biti poželjno. Produženje apsorpcije injektabilne farmaceutske forme može se postići upotrebom sredstava koja odlažu apsorpciju, na primer aluminijum monostearata i želatina.
[0054] U nekim slučajevima, da bi se produžio efekat leka, često je poželjno usporiti apsorpciju leka posle subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo se može postići upotrebom tečne suspenzije ili kristalnog ili amorfnog materijala sa slabom rastvorljivošću u vodi. Stopa apsorpcije leka u tom slučaju zavisi od stope rastvaranja koja, dalje, može zavisiti od veličine kristala i kristalne forme. Alternativno, odložena apsorpcija parenteralno primenjenog oblika leka postiže se rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljanom prenosniku.
[0055] Suspenzije, pored aktivnih jedinjenja, mogu sadržati suspendujuća sredstva, na primer, etoksilisane izostearil alkohole, estre polioksietilen sorbitola i sorbitana, mikrokristalnu
1
celulozu, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar, tragant, i njihove mešavine. Po želji, i za efikasniju distribuciju, jedinjenja pronalaska mogu da se inkorporišu u sisteme sa sporim oslobađanjem ili sisteme za ciljanu dostavu kao što su polimerni matriksi, lipozomi, i mikrosfere. Oni mogu biti sterilisani, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije ili inkorporisanjem sterilišućih sredstava u obliku sterilnih čvrstih kompozicija, koje mogu da se neposredno pre upotrebe rastvore u sterilnoj vodi ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu.
[0056] Injektabilne depo-forme prave se formiranjem mikroinkapsuliranih matriksa leka u biodegradabilnim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. U zavisnosti od odnosa leka prema polimeru i prirode određenog upotrebljenog polimera, moguće je kontrolisati stopu oslobađanja leka. Primeri drugih biodegradabilnih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo-injektabilne formulacije takođe se pripremaju zatvaranjem leka u lipozome ili mikroemulzije, kompatibilne sa telesnim tkivima. Injektabilne formulacije mogu se sterilisati, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije ili inkorporisanjem sterilišućih sredstava u obliku sterilnih čvrstih kompozicija, koje mogu da se rastvore ili disperguju u sterilnoj vodi ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre upotrebe.
[0057] Injektabilni preparati, na primer, sterilne injektabilne vodene ili uljane suspenzije mogu da se formulišu prema poznatom stanju tehnike, korišćenjem pogodnih dispergujućih ili vlažećih sredstava i suspendujućih sredstava. Sterilni injektabilni preparat može biti i sterilan injektabilni rastvor, suspenzija ili emulzija u netoksičnom, parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču kao što je rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji se mogu upotrebiti su voda, Ringerov rastvor, U.S.P. i izotonični rastvor natrijum hlorida. Pored toga, sterilna neisparljiva ulja se konvencionalno koriste kao medijum za rastvaranje ili suspendovanje. U ovu svrhu može se upotrebiti svako blago, neisparljivo ulje, uključujući sintetske mono- ili digliceride. Pored toga, za pripremanje injektabilnih lekova koriste se masne kiseline kao što je oleinska kiselina.
[0058] Čvrste dozne forme za oralnu primenu uključuju kapsule, tablete, pilule, praškove i granule. U takvim čvrstim doznim formama, jedno ili više jedinjenja pronalaska meša se sa najmanje jednim inertnim farmaceutski prihvatljivim nosačem kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat i/ili a) potpornim supstancama ili ekstenderima kao što su skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol i salicilna kiselina; b) povezivačima kao što su karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinilpirolidinon, saharoza, i akacija; c) humektantima kao što je glicerol; d) dezintegrišućim sredstvima kao što su agar-agar,
1
kalcijum karbonat, krompirov ili tapiokin skrob, alginska kiselina, određeni silikati, i natrijum karbonat; e) sredstvima za usporavanje rastvorljivosti kao što je parafin; f) ubrzivačima apsorpcije kao što su kvaternarna amonijum jedinjenja; g) sredstvima za vlaženje kao što su cetil alkohol i glicerol monostearat; h) apsorbentima kao što su kaolin i bentonitna glina; i i) lubrikansima kao što su talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i njihove mešavine. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozne forme mogu sadržati i puferišuća sredstva.
[0059] Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu se upotrebiti kao punila u mekim i tvrdim punjenim želatinskim kapsulama uz korišćenje laktoze ili mlečnog šećera kao i polietilen glikola velike molekulske težine. Čvrste dozne forme u vidu tableta, dražeja, kapsula, pilula, i granula mogu se pripremiti tako da imaju obloge i omotače, na primer enterične obloge i druge obloge dobro poznate u stanju tehnike farmaceutskih formulacija. One opciono mogu sadržati sredstva za davanje neprozirnosti i mogu biti sačinjene od takve kompozicije da se aktivni sastojak/sastojci oslobađaju samo ili preferencijalno u određenom delu crevnog trakta, na odložen način. Primeri materijala koji mogu biti korisni za odlaganje oslobađanja aktivnog sredstva mogu uključivati polimerne supstance i voskove.
[0060] Kompozicije za rektalnu ili vaginalnu primenu su poželjno supozitorije koje se mogu pripremiti mešanjem jedinjenja ovog pronalaska sa pogodnim neiritirajućim nosačima kao što su kakao buter, polietilen glikol ili vosak za supozitorije, koji su čvrsti na ambijentalnoj temperaturi, ali tečni na telesnoj temperaturi i prema tome, tope se u rektumu ili vaginalnoj šupljini i oslobađaju aktivno jedinjenje.
[0061] Tečne dozne forme za oralnu primenu uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe, i eliksire. Pored aktivnih jedinjenja, tečne dozne forme mogu sadržati inertne razblaživače koji se obično koriste u struci kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solubilišuća sredstva i emulgatori kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, dimetilformamid, ulja (posebno pamukovo, ulje kikirikija, kukuruzno, ulje pšeničnih klica, maslinovo, ricinusovo, i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofurfuril alkohol, polietilen glikoli i masnokiselinski estri sorbitana, i njihove mešavine.
[0062] Pored inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu uključivati i adjuvanse kao što su sredstva za vlaženje, emulgujuća i suspendujuća sredstva, zaslađivači, sredstva za poboljšanje ukusa i mirisa. Dozne forme za površinsku ili transdermalnu primenu jedinjenja ovog pronalaska uključuju masti, paste, kremove. losione, gelove, praškove, rastvore, sprejove, inhalante ili flastere. Željeno jedinjenje pronalaska se pod sterilnim uslovima meša
1
sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i bilo kojim od potrebnih prezervansa ili pufera, po potrebi. Oftalmičke formulacije, kapi za uši, masti za oči, praškovi i rastvori takođe su u okviru ovog pronalaska. Masti, paste, kremovi i gelovi mogu sadržati, pored aktivnog jedinjenja ovog pronalaska, životinjske i biljne masti, ulja, voskove, parafine, skrob, tragant, celulozne derivate, polietilen glikole, silikone, bentonite, silicijumovu kiselinu, talk i cink oksid, ili njihove mešavine.
[0063] Pored jedinjenja ovog pronalaska, praškovi i sprejovi mogu sadržati, laktozu, talk, silicijumovu kiselinu, aluminijum hidroksid, kalcijum silikate i poliamidni prašak, ili mešavine ovih supstanci. Sprejovi mogu dodatno sadržati uobičajene propelante kao što su hlorofluorougljovodonici.
[0064] Jedinjenja pronalaska mogu se primeniti u obliku lipozoma. Kao što je poznato u struci, lipozomi se uobičajeno izvode iz fosfolipida ili drugih lipidnih supstanci. Lipozomi se formiraju od mono- ili multilamelarnih hidratisanih tečnih kristala koji su dispergovani u vodenom medijumu. Može se koristiti svaki netoksični, fiziološki prihvatljivi lipid koji može da se meatboliše i koji je sposoban da formira lipozome. Predmetne kompozicije u lipozomskoj formi mogu sadržati, pored jedinjenja pronalaska, stabilizere, prezervanse, i slično. Poželjni lipidi su prirodni i sintetski fosfolipidi i fosfatidilholini (lecitini), upotrebljeni zasebno ili zajedno. Metodi formiranja lipozoma poznati su u struci. Vidi, na primer, Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y., (1976), p 33 et seq.
[0065] Aktuelni dozni nivoi aktivnih sastojaka u farmaceutskim kompozicijama ovog pronalaska mogu da se menjaju tako da se dobije količina aktivnog/aktivnih jedinjenja koja je efikasna za postizanje željenog terapijskog odgovora za određenog pacijenta, kompozicije i način primene. Odabrani dozni nivo zavisiće od aktivnosti određenog jedinjenja, puta primene, jačine stanja koje se leči i stanja i prethodne medicinske istorije pacijenta koji se leči. Međutim, u praksi, doziranje se otpočinje doznim nivoima jedinjenja nižim od potrebnih za postizanje željenog terapijskog efekta i doze se postepeno povišavaju dok se ne postigne željeni efekat.
[0066] Efikasna količina jednog od jedinjenja pronalaska može se upotrebiti u čistoj formi ili u formi farmaceutski prihvatljive soli, kada takva forma postoji. Alternativno, jedinjenje se može primeniti kao farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje od interesa u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Treba razumeti, međutim, da će o ukupnoj dnevnoj upotrebi jedinjenja i kompozicija pronalaska odlučiti ordinirajući lekar u okvirima objektivne medicinske procene. Specifični efikasni dozni nivo za svakog
1
pojedinačnog pacijenta zavisiće od različitih faktora uključujući poremećaj koji se leči i jačinu poremećaja; aktivnost specifičnog upotrebljenog jedinjenja; specifičnu upotrebljenu kompoziciju; starost, telesnu težinu, opšte zdravstveno stanje, pol i način ishrane pacijenta; vreme primene, put primene, i stopu ekskrecije specifičnog upotrebljenog jedinjenja; dužinu trajanja tretmana; odnos rizika/koristi; lekove korišćene u kombinaciji ili istovremeno sa specifičnim upotrebljenim jedinjenjem; i slične faktore koji su dobro poznati u medicinskoj struci. Na primer, u praksi, doziranje se otpočinje doznim nivoima jedinjenja nižim od potrebnih za postizanje željenog terapijskog efekta i doze se postepeno povišavaju dok se ne postigne željeni efekat.
[0067] Ukupna dnevna doza jedinjenja predmetnog pronalaska kada se primenjuje kod čoveka ili niže životinje može biti u opsegu od oko 0.0003 do oko 50 mg/kg telesne težine. Za primenu oralnim putem, poželjnije doze mogu biti u opsegu od oko 0.0003 do oko 5 mg/kg telesne težine. Po želji, efikasna dnevna doza može da se radi primene podeli u više doza; posledično pojedinačne dozne kompozicije mogu sadržati te količine ili višestruko manje doze, kako bi se dostigla dnevna doza. Za oralnu primenu, kompozicije pronalaska su poželjno obezbeđene u vidu tableta koje sadrže oko 1.0, oko 5.0, oko 10.0, oko 15.0, oko 25.0, oko 50.0, oko 100, oko 250, ili oko 500 miligrama aktivnog sastojka.
PRIMERI
Metodi sinteze
[0068] Ukoliko nije drugačije rečeno, ID jedinjenja označena kao "TRV-", koja sadrže hiralne centre prisutne u
grupama sintetisana su i testirana kao racemske mešavine u odnosu na taj respektivni hiralni centar. Jedinjenja koja sadrže supstituisane pirolidine treba da obuhvate i R i S enantiomere, ili kao suštinski čiste enantiomere ili kao racemate.
[0069] U delovima opisa koji slede, određene primere izvođenja i jedinjenja, koji ne potpadaju pod priložene patentne zahteve, treba razmatrati samo kao referentne primere izvođenja i jedinjenja.
[0070] Za sintetisanje jedinjenja opisanih u ovom tekstu upotrebljene su sledeće šeme sinteze i opisani postupci:
2
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
[0071] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol 4 (0.9678 g, 3.48 mmol) i benzilamin (1.9 mL, 17.4 mmol) rastvore se u DMSO (10.5 mL) pod argonom i mešaju u hermetički zatvorenoj epruveti 3 dana, posle čega se epruveta greje na 60 °C 12 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog rastvora NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Tamna čvrsta supstanca se rekristalizuje iz EtOH i tamni kristali se sakupe filtracijom i suše da se dobije 0.4516 g (43% prinos) N-benzil-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amina. Materijal (0.1980 g, 0.651 mmol), benzoilpiperazin hidrohlorid (0.1771 g, 0.781 mmol) i Cs2CO3(0.6353 g, 1.95 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se zatim vakumira i prečisti argonom (3 ×). Zatim se u epruvetu dodaju toluen (2 mL) i NMP (1.2 mL) i njen sadržaj se oslobađa gasova tokom 15 minuta, kada se brzo dodaju Pd2(dba)3(0.0119 g, 0.0130 mmol) i BINAP (0.0162 g, 0.026 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksani) dajući 0.188 g (70% prinos) TRV-1256. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.46-7.43 (m, 5H), 7.39-7.36 (m, 4H), 7.34-7.31 (m, 1H), 6.13 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.32 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.90 (br s, 2H), 3.58 (br s, 2H), 3.29 (br s, 2H), 3.15 (br s, 2H).
[0072] N-benzil-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.2235 g, 0.735 mmol) i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.1566 g, 0.955 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(1.1 mL, 2.21 mmol) i DME (1.6 mL) i rastvor se oslobađa gasova 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0425 g, 0.0368 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću
2
H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u metanolu (15 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se NaBH4(0.0556 g, 1.47 mmol) i mešavina se meša na 0 °C 3 sata. Reakciona mešavina se gasi zasićenim NaHCO3. Gusta mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću DCM (5 ×). Ekstrakti se zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1412 g (56% prinos) TRV-1259. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.47 (s, 1H), 7.46-7.38 (m, 7H), 7.36-7.33 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.44 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.99-4.95 (m, 1H), 4.57 (d, J - 5.5 Hz, 2H), 1.88 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 1.54 (d, J = 7.0 Hz, 3H)
[0073] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3122 g, 1.12 mmol), pirolidin (0.10 mL, 1.12 mmol) i DIPEA (0.20 mL, 1.12 mmol) rastvore se u NMP (2 mL) pod argonom i mešaju u hermetički zatvorenoj epruveti na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući sirovi 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.2247 g, 75% prinos). Sirovi materijal (0.1964 g, 0.73 mmol) i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.1558 g, 0.95 mmol) se dodaju u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(1.1 mL, 2.21 mmol) i DME (1.6 mL) i rastvor se oslobađa gasova tokom 15 minuta. Pd(PPh3)4(0.0422 g, 0.0365 mmol) se brzo doda i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u metanolu (12 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se NaBH4(0.0552 g, 1.46 mmol) i mešavina se meša na 0 °C 3 sata. Reakciona mešavina se gasi zasićenim NaHCO3. Gusta mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću DCM (5 ×). Ekstrakti se zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2029 g (90% prinos, u 2 koraka) TRV-1310. 1H NMR (CDCl3) δ = 7.65 (s, 1H), 7.55 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.00-4.99 (m, 1H), 3.81 (s, 4H), 2.12-2.09 (m, 4H), 1.92 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[0074] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.5607 g, 2.0 mmol), N-metil-1-fenilmetanamin (0.28 mL, 2.2 mmol) i DIPEA (0.52 mL, 3.0 mmol) rastvore se u NMP (3 mL) pod argonom i mešaju u hermetički zatvorenoj epruveti na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući sirovi materijal (N-benzil-6-bromo-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin) u vidu ulja. Ovaj sirovi materijal i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.4263 g, 2.6 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(3.0 mL, 6.0 mmol) i DME (4.5 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.1156 g, 0.10 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u metanolu (33 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se NaBH4(0.1513 g, 4.0 mmol) i mešavina se meša na 0 °C, 3 sata. Reakciona mešavina se gasi zasićenim NaHCO3. Gusta mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću DCM (5 ×). Ekstrakti se zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.4843 g (67% prinos, tokom 3 koraka) TRV-1358 u vidu žutog ulja.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.60 (s, 1H), 7.51 (dt, J = 6.5, 2.0 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 7.35-7.32 (m, 2H), 7.29-7.28 (m, 3H), 7.24 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.01-4.96 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 1.85 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
4
[0075] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3765 g, 1.35 mmol), etil pirolidin-2-karboksilat hidrohlorid (0.2677 g, 1.49 mmol) i DIPEA (0.59 mL, 3.38 mmol) rastvore se u NMP (1.8 mL) pod argonom i mešaju u hermetički zatvorenoj epruveti na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući 0.1756 g (38% prinos) sirovog materijala. Ovaj sirovi materijal i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.1099 g, 0.67 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(0.8 mL, 1.55 mmol) i DME (1.2 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0298 g, 0.0258 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u DCM (0.3 mL) i toluenu (1.6 mL) i ovaj rastvor se ohladi na 0 °C. Doda se DIBAL (1.7 mL 1.0 M rastvor u heksanu) u kapima i reakcija se ostavi da se meša preko noći. Još 1.5 ekv. DIBAL (0.8 mL) se doda na 0 °C i reakcija se meša još 24 sata. Mešavina se gasi zasićenim rastvorom kalijum natrijum tartarata i ekstrahuje etil acetatom. Kombinovani ekstrakti se isperu pomoću H2O i zasićenog rastvora soli, suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti preko kolone, 60% EtOAc / heksan, da se dobije 0.1224 (70% prinos, 2 koraka) TRV-1359 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.64 (s, 1H), 7.54 (dt, J = 6.5, 2.0 Hz, 1H), 7.47-7.43 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.00-4.99 (br s, 1H), 4.74 (br s, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.80- 3.77 (m, 1H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.54-3.50 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 4H), 1.92-1.86 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 3H)
[0076] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.5385 g, 1.94 mmol), morfolin (0.17 mL, 1.94 mmol) i DIPEA (0.34 mL, 1.94 mmol) rastvore se u NMP (2.5 mL) pod argonom i mešaju u hermetički zatvorenoj epruveti na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući 0.5360 g (97% prinos) čvrste supstance braon boje. Ovaj sirovi materijal (0.5002 g, 1.76 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.3434 g, 2.29 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(2.6 mL, 5.3 mmol) i DME (3.9 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.1040 g, 0.09 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću DCM. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (1.8 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.3003 g, 2.11 mmol), posle čega sledi dodavanje TBAF (0.18 mL, 0.18 mmol) na 0 °C. Pošto se završi dodavanje, ukloni se ledeno kupatilo i reakcija se meša na sobnoj temperaturi nekoliko sati, kada se dodaju još 2 ekv. CF3TMS (0.52 mL) zajedno sa 0.1 ekv. TBAF (0.18 mL) na 0 °C. Ponovo se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 sata. U ovu mešavinu se zatim doda TBAF (7.6 mL, 7.6 mmol) na 0 °C i reakciona mešavina se meša preko noći. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu pomoću H2O (43), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Prečišćavanje fleš hromatografijom (30% EtOAc / heksan) daje 0.2303 g (34% prinos, tokom 3 koraka) TRV-1360 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.74 (s, 1H), 7.67-7.65 (m, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.17-5.12 (m, 1H), 3.97 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 3.65 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 2.75 (d, J = 4.5 Hz, 1H).
[0077] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.4244 g, 1.58 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.3149 g, 2.1 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(2.4 mL, 4.7 mmol) i DME (3.6 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0924 g, 0.08 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću etil acetata. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (1.6 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.2702 g, 1.9 mmol), što je praćeno dodavanjem TBAF (0.16 mL, 0.16 mmol) na 0 °C. Po završenom dodavanju, ukloni se ledeno kupatilo i reakcija se meša na sobnoj temperaturi nekoliko sati, kada se dodaju još 2 ekv. CF3TMS (0.47 mL) zajedno sa 0.1 ekv. TBAF (0.16 mL) na 0 °C. Ponovo se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 sata. U ovu mešavinu se zatim doda TBAF (7.0 mL, 7.0 mmol) na 0 °C i reakciona mešavina se meša preko noći. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu pomoću H2O (4 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Prečišćavanje fleš hromatografijom (20% EtOAc / heksan) daje 0.2749 g (48% prinos, tokom 3 koraka) TRV-1361 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.74 (s, 1H), 7.68 (dt, J = 7.0, 1.5 Hz, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.13 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.83-3.80 (m, 4H), 2.67 (brs, 1H), 2.14-2.09 (m, 4H).
[0078] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.1239 g, 0.46 mmol) i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.0984 g, 0.60 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(0.70 mL, 1.38 mmol) i DME (1.0 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0266 g, 0.023 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (25% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0391 g (28% prinos) TRV-1362 u vidu narandžaste čvrste supstance.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 8.22 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 3.82 (s, 4H), 2.68 (s, 3H), 2.13-2.11 (m, 4H).
[0079] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (1.00 g, 3.6 mmol) i izopropanol (0.31 mL, 4.0 mmol) rastvore se u THF (20 mL) pod argonom i ohlade na -78 °C. U kapima se doda NaHMDS (4.0 mL 1.0 M rastvor u THF) i reakcija se meša 30 minuta na -78 °C. kupatilo za hlađenje se zatim ukloni i reakcija se meša na sobnoj temperaturi nekoliko sati. Reakcija se zatim ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom NH4Cl (vod.). Ova suspenzija se ekstrahuje korišćenjem DCM (3 ×). Kombinovani ekstrakti se ispiraju pomoću H2O, zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije 0.9407 g sirovog crnog ulja. Sirovi materijal (0.6702 g, 2.6 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.5098 g, 3.4 mmol) dodaju se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se 2 M Na2CO3(3.9 mL, 7.8 mmol) i DME (5.8 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.1502 g, 0.13 mmol) i epruveta se greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli, zatim suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (20% EtOAc/ heksan) da se dobije 0.4836 g (66% prinos) aldehida. Ovaj aldehid (0.6702 g, 2.6 mmol) se rastvori u THF (2.0 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.23 mL, 1.56 mmol), zatim TBAF (0.1 mL, 0.1 mmol) na 0 °C. Pošto se dodavanje završi, ledeno kupatilo se ukloni i reakcija se meša na sobnoj temperaturi nekoliko sati. Mešavina se ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (2.8 mL, 2.8 mmol) se doda u reakciju koja se meša preko noći. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu pomoću H2O (4 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Prečišćavanje fleš hromatografijom (25% EtOAc / heksan) daje 0.1468 g (53% prinod, tokom 2 koraka) TRV-1363 u vidu žutog ulja.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.74 (s, 1H), 7.66 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.58-7.54 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.17-5.13 (m, 1H), 4.99 (sept, J = 6.0 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 1.52 (d, J = 6.0 Hz, 6H).
[0080] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3898 g, 1.45 mmol) i 5-formil-2-tienilboronska kiselina (0.2948 g, 1.89 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom 3 puta. Zatim se dodaju 2M Na2CO3(vod.) (2.2 mL) i DME (3.3 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0844 g, 0.073 mmol) i epruveta se hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, ustanovljeno je da reakcija nije završena. Doda se još jedan ekvivalent 5-formil-2-tienilboronske kiseline zajedno sa dodatnih 5 mol % Pd(PPh3)4i mešavina se ponovo greje preko noći. Bilo je potrebno dodati još boronske kiseline i katalizatora, još jednom, i grejati još 24 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i zatim se vodeni sloj ponovo ekstrahuje EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se preuzme u THF (3 mL) i doda se CF3TMS (0.43 mL, 2.9 mmol). Ovaj rastvor se ohladi na 0 °C, zatim mu se doda TBAF (0.15 mL, 0.145 mmol). Mešavina se meša preko noći i zatim se dodaju još 2 ekv. CF3TMS i 0.1 ekv. TBAF. Posle još 2 sata mešanja, reakcija se ohladi na 0 °C i doda se TBAF (8 mL, 8 mmol). Mešavina se meša preko noći, zatim se razblaži vodom. Vodeni sloj se ekstrahuje pomoću EtOAc (3 ×). Kombinovani ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni (15-20% EtOAc / heksan) dajući 0.1043 g (19% prinos, 3 koraka) TRV-1364 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.35 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.31 (q, J = 3.2 Hz, 1H), 3.80 (br s, 4H), 2.90 (br s, 1H), 2.11 (s, 4H).
[0081] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3948 g, 1.47 mmol) i 4-formilbenzenboronska kiselina (0.2864 g, 1.91 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom 3 puta. Zatim se dodaju 2M Na2CO3(vod.) (2.2 mL) i DME (3.3 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0855 g, 0.074 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i zatim se vodeni sloj ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se preuzme u THF (3 mL) i doda se CF3TMS (0.43 mL, 2.94 mmol). Ovaj rastvor se ohladi na 0 °C, zatim se doda TBAF (0.15 mL, 0.147 mmol). Posle 2 sata mešanja, reakcija se ohladi na 0 °C i doda se TBAF (5.1 mL, 5.1 mmol). Mešavina se meša preko noći, zatim se razblaži vodom. Vodeni sloj se ekstrahuje pomoću EtOAc (3 ×). Kombinovani ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.3795 g (71% prinos, 3 koraka) TRV-1365 u vidu narandžaste čvrste supstance. 1H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.11 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 3.81 (br s, 4H), 2.72 (br s, 1H), 2.13-2.09 (m, 4H).
[0082] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3856 g, 1.44 mmol) i 2-formilbenzenboronska kiselina (0.2804 g, 1.87 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom 3 puta. Zatim se dodaju 2M Na2CO3(vod.) (2.2 mL) i DME (3.3 mL) i rastvor se oslobađa gasa 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.0855 g, 0.074 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i zatim se vodeni sloj ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se preuzme u THF (3 mL) i doda se CF3TMS (0.43 mL, 2.94 mmol). Ovaj rastvor se ohladi na 0 °C, zatim se doda TBAF (0.15 mL, 0.147 mmol). Posle 2 sata mešanja, reakcija se ohladi na 0 °C i doda joj se TBAF (0.14 mL, 0.144 mmol). Posle 2 sata mešanja, reakcija se ohladi na 0 °C i doda se TBAF (5.0 mL, 5.0 mmol). Mešavina se meša preko noći, zatim se razblaži vodom. Vodeni sloj se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 ×). Kombinovani ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni (10% EtOAc / heksan) dajući 0.179 g (34% prinos, 3 koraka) TRV-1366 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.34 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.79 (s, 1H), 5.26 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.76 (br s, 4H), 2.55 (br s, 1H), 2.11-2.08 (m, 4H).
[0083] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.7754 g, 2.89 mmol) se rastvori u THF i ohladi na -78 °C. Doda se nBuLi (1.6 mL 2.0 M rastvor u cikloheksanu) u kapima i mešavina se ostavi da se meša 30 minuta. Tada se u rastvor koji se meša na -78 °C doda DMF
1
(0.25 mL, 3.18 mmol), odjednom, na -78 °C. Reakcija se meša 30 minuta i zatim se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se zatim gasi zasićenim NH4Cl (vod.), ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije 0.4779 g sirovog aldehida. Ovaj aldehid (0.1352 g, 0.622 mmol) se rastvori u THF (2 mL) i tretira pomoću CF3TMS (0.18 mL, 1.24 mmol). Rastvor se ohladi na 0 °C i zatim se doda TBAF (0.1 mL, 0.1 mmol). Posle 2 sata mešanja, mešavina se ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (2.2 mL, 2.2 mmol), reakcija se ostavi da se meša preko noći. Mešavina se zatim gasi vodom i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni (25% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0201 g (11% prinos) TRV-1368 u vidu crvenog ulja.1H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.06 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.01 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 3.78 (br s, 4H), 2.74 (br s, 1H), 2.12-2.08 (m, 4H).
[0084] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.5785 g, 2.16 mmol) i piridin-3-boronska kiselina (0.3442 g, 2.8 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom 3 puta. Zatim se dodaju 2M Na2CO3(vod.) (3.2 mL) i DME (4.8 mL) i rastvor se oslobađa gasova 15 minuta. Brzo se doda Pd(PPh3)4(0.1248 g, 0.108 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i zatim se vodeni sloj ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se prečisti na koloni (50% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1902 g kontaminiranog materijala i 0.2624 g čistog materijala, za kombinovani prinos od 79% TRV-1369 u vidu narandžaste čvrste supstance. 1H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 8.90 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 7.7, 4.6 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.05 (s, 1H), 3.82 (br s, 4 H), 2.14-2.10 (m, 4H).
2
[0085] 6-bromo-4-(pirolidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol 1 (0.7754 g, 2.89 mmol) rastvori se u THF i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (1.6 mL 2.0 M rastvor u cikloheksanu) i mešavina se ostavi da se meša 30 minuta. U tom trenutku, uzme se alikvot od 2.9 mL i doda u kapima u ledeno hladni rastvor zasićenog NH4Cl (vod.). Posle zagrevanja na sobnu temperature, mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se prečisti na koloni (5% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0654 g (46% prinos) TRV-1370 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.22 (dd, J = 8.5, 8.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.76-3.73 (m, 4H), 2.10-2.05 (m, 4 H).
[0086] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (1.0173 g, 3.66 mmol), 4-metilimidazol (0.3005 g, 3.66 mmol), NMP (5 mL) i DIPEA (0.64 mL, 3.66 mmol) stave se u hermetički zatvorenu epruvetu i greju na 150 °C 3 dana. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O, 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni 35% EtOAc / heksan da se dobije 0.5295 g (52% prinos) anilina. Anilin (0.2988 g, 1.07 mmol) i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2084 g, 1.39 mmol) se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.6 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.4 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0618 g, 0.0535 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se dodaju CF3TMS (0.24 mL, 1.61 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (3.2 mL, 3.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se onda ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.0616 g (15% prinos, 3 koraka) TRV-1375 kao 1:1 mešavina regioizomera.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 8.353 (s, 1H), 8.350 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.85 (s, 2H), 7.71-7.69 (m, 2H), 7.65-7.63 (m, 2H), 7.61-7.56 (m, 4H), 7.48 (s, 2H), 5.20 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 5.07 (br s, 2H), 2.332 (s, 3H), 2.331 (s, 3H).
[0087] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3327 g, 1.2 mmol), 1-metilpiperazin (0.13 mL, 1.2 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2338 g, 1.56 mmol) se hermetički zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) doda se zajedno sa DME (2.7 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se
4
doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0693 g, 0.06 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.4 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.1695 g (36% prinos, 4 koraka) TRV-1376.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.91 (s, 1H), 7.85-7.83 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 6.94 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.31-5.28 (m, 1H), 3.64 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 2.55 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 2.25 (s, 3H).
[0088] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3113 g, 1.12 mmol), N-izopropilmetilamin (0.12 mL, 1.12 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.20 mL, 1.12 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2189 g, 1.46 mmol) se hermetički zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa).2M Na2CO3(1.7 mL, vod. rastvor) doda se zajedno sa DME (2.5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0647 g, 0.056 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.33 mL, 2.24 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (4.0 mL, 4.0 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1283 g (31% prinos, 4 koraka) TRV-1377. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.74 (s, 1H), 7.68 (dt, J = 5.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.18 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.24 (sept, J = 6.5 Hz, 1H), 5.13 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.71 (br s, 1H), 1.30 (d, J = 6.5 Hz, 6 H).
[0089] N-benzil-6-bromo-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2293 g, 1.53 mmol) se zatvore hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.6 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0682 g, 0.059 mmol). ). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.36 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2683 g (55% prinos, 4 koraka) TRV-1378. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.69 (s, 1H), 7.64 (dt, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.35-7.32 (m, 2H), 7.29-7.26 (m, 3H), 7.23 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.11 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.68 (s, 1H).
[0090] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3414 g, 1.23 mmol), 2-metilpirolidin (0.13 mL, 1.23 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.23 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2398 g, 1.6 mmol) se hermetički zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.9 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.8 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0716 g, 0.062 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.36 mL, 2.46 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.3 mL, 4.3 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1319 g (28% prinos, 4 koraka) TRV-1379, 1:1:1:1 mešavina dijastereomera zbog dva hiralna centra. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.74 (s, 1H), 7.67 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.13 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.75-4.71 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.65-3.60 (m, 1H), 2.71 (br s, 1H), 2.24-2.08 (m, 3H), 1.85-1.81 (m, 1H), 1.29 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[0091] N-benzil-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2488 g, 1.66 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.9 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.9 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.074 g, 0.064 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (3 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.28 mL, 1.92 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (3.9 mL, 3.9 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0655 g (13% prinos, 4 koraka) TRV-1380. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.67 (s, 1H), 7.63 (dt, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 7.49-7.42 (m, 4H), 7.40-7.36 (m, 1H), 7.22 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.51 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 5.14 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.72 (br s, 1H).
[0092] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3095 g, 1.11 mmol), piperidin (0.11 mL, 1.11 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.19 mL, 1.11 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod.), zasićenog NaHCO3(vod.), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2159 g, 1.44 mmol) se hermetički zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.7 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0647 g, 0.056 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2,5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.33 mL, 2.22 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (3.9 mL, 3.9 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.3097 g (74% prinos, 4 koraka) TRV-1381. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.67-7.66 (m, 1H), 7.57-7.51 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.14 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.65 (t, J = 5.5 Hz, 4H), 2.70 (br s, 1H), 1.84-1.77 (m, 4H), 1.74-1.69 (m, 2H).
[0093] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3340 g, 1.2 mmol), dietilamin (0.13 mL, 1.2 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2338 g, 1.56 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0693 g, 0.06 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2,5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.4 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2184 g (50% prinos, 4 koraka) TRV-1382. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.65 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.11 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.13 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.81 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 2.76 (br s, 1H), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
[0094] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3322 g, 1.2 mmol), (2-metoksietil)metilamin (0.13 mL, 1.2 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2338 g, 1.56 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0693 g, 0.06 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2,5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.4 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2514 g (55% prinos, 4 koraka) TRV-1383. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.75 (s, 1H), 7.68 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.17 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.13 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.78 (br s, 1H).
1
[0095] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3327 g, 1.2 mmol), N-metiletanamin (0.10 mL, 1.2 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol) ) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2338 g, 1.56 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0693 g, 0.06 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2,5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.4 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2528 g (60% prinos, 4 koraka) TRV-1384. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.74 (s, 1H), 7.66 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.15 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.23 (s, 1H), 5.13 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.00 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.78 (br s, 1H), 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
2
[0096] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3373 g, 1.2 mmol), tiomorfolin (0.12 mL, 1.2 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2338 g, 1.56 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se doda odjednom Pd(PPh3)4(0.0693 g, 0.06 mmol). Epruveta se ponovo zatvori hermetički i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2,5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.35 mL, 2.4 mmol) i zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.2 mL, 4.2 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1863 g (39% prinos, 4 koraka) TRV-1385. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.65 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 7.34 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.14 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.06 (m, 4H), 2.86 (m, 4H), 2.76 (br s, 1H).
[0097] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (8.9 g, 32.0 mmol) i 3-formilbenzenboronska kiselina (5.037 g, 33.6 mmol) stave se u flakon. Flakon se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(48 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (72 mL). Rastvor se oslobađa gasa 15 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(1.85 g, 1.6 mmol). Flakon se greje na 100 °C 4 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući 13.3 g žute čvrste supstance koja je mešavina željenog proizvoda, neodreagovalog polaznog materijala, pogrešnog regioizomera i bis-kuplovanog proizvoda. Prečišaćvanje sirovog materijala hromatografijom (0, 5, 10, 15, 20% EtOAc / heksan, gradijentno eluiranje) daje 1.9412 g (20% prinos) 3-(7-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida. Ovaj materijal (1.7903 g, 5.91 mmol) se zatim rastvori u THF (12 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (1.75 mL, 11.8 mmol) i zatim TBAF (0.6 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (22 mL, 22 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u THF (15 mL) i ohladi na 0 °C. NaH (0.2836 g, 7.09 mmol) se doda u delovima i reakcija se meša 10 minuta na 0 °C, zatim se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 30 minuta. Rastvor se zatim ohladi i doda se TBSCl (1.336 g, 8.87 mmol). Reakcija se meša preko noći pod argonom. Ohladi se na 0 °C i gasi zasićenim NH4Cl (vod.) i zatim razblaži korišćenjem EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% EtOAc / heksan) da se dobije 1.2744 g (44% prinos, 3 koraka) odgovarajućeg silil etra u vidu čvrste braon supstance. Ovaj materijal (0.2732 g, 0.56 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na -78 °C.
4
U kapima se doda nBuLi (0.31 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu, 0.62 mmol) i rastvor se meša 30 minuta pre gašenja zasićenim NH4Cl (vod.) i ostavi se da se zagreje do sobne temperature. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se rastvori u THF (10 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se TBAF (1.2 mL, 1.0 M rastvor u THF) i rekacija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom soli. Mešavina se zatim razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se onda ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom.
[0098] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3832 g, 1.38 mmol), 4-(pirolidin-1-il)piperidin (0.2127 g, 1.38 mmol), NMP (2 mL) i DIPEA (0.24 mL, 1.38 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2698 g, 1.8 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(2.1 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (3.1 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0797 g, 0.069 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.8 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.41 mL, 2.76 mmol) a zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.8 mL, 4.8 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (10% MeOH / DCM) da se dobije 0.1349 g (22% prinos, 4 koraka) TRV-1387. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.08 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.34-4.28 (m, 2H), 3.05-3.00 (m, 2H), 2.65 (br s, 4H), 2.30-2.27 (m, 1H), 2.06-2.03 (m, 2H), 1.84 (br s, 4H), 1.77-1.66 (m, 3H); 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.91 (s, 1H), 7.83 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.55(t, J = 10 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.97 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.31-5.26 (m, 1H), 4.20 (d, J = 10 Hz, 2H), 3.16 (t, J = 10 Hz, 2H), 2.52 (s, 4H), 2.26-2.22 (m, 1H), 2.00 (d, J = 10 Hz, 2H), 1.67 (s, 4H), 1.63-1.56 (m, 2H).
[0099] U rastvor 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (0.3106 g, 1.12 mmol) i pirazola (0.0837 g, 1.23 mmol) u THF na -78 °C doda se NaHMDS (1.2 mL, 1.0 M rastvor u THF) u kapima. Rastvor se meša 30 minuta zatim se zagreje na sobnu temperaturu. Rastvor se oslobađa gasa 5 minuta, zatim greje na 50 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se gasi zasićenim NH4Cl (vod.) i razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2189 g, 1.46 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.7 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0647 g, 0.056 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.33 mL, 2.24 mmol), a zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (3.9 mL, 3.9 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0342 g (8.5% prinos, 4 koraka) TRV-1388. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 8.91 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.84-7.83 (m, 3H), 7.76 (dt, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.59-7.52 (m, 2H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.15-5.12 (m, 1H), 3.40 (d, J = 4.0 Hz, 1H).
[0100] U rastvor 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (0.3457 g, 1.24 mmol) i 4-metilpirazola (0.11 mL, 1.37 mmol) u THF na -78 °C doda se u kapima NaHMDS (1.3 mL, 1.0 M rastvor u THF). Rastvor se meša 30 minuta zatim zagreje na sobnu temperaturu. Rastvor se zatim oslobađa gasa 5 minuta, i onda greje na 50 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se gasi zasićenim NH4Cl (vod.) i razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2413 g, 1.61 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.9 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (2.8 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0716 g, 0.062 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (2.5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.37 mL, 2.48 mmol), a zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.3 mL, 4.3 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0365 g (7.9% prinos, 4 koraka) TRV-1389. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 8.68 (s, 1H), 8.28 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.81 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.60-7.54 (m, 2H), 5.16-5.14 (m, 1H), 3.06 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 2.23 (s, 3H).
[0101] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3688 g, 1.33 mmol), 4-fluoro-N-metilbenzilamin (0.18 mL, 1.39 mmol), NMP (3 mL) i DIPEA (0.26 mL, 1.5 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu i greju na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin. Sirovi anilin i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.2593 g, 1.73 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(2.0 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (3.0 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0768 g, 0.066 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i zagreva na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj sirovi materijal se zatim rastvori u THF (4.0 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.39 mL, 2.66 mmol) a zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (4.7 mL, 4.7 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i onda suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2675 g (47% prinos, 4 koraka) TRV-1390. 1H NMR (500 01MHz, CDC13) δ = 7.70 (s, 1H), 7.64 (dt, J = 7.0, 2.0 Hz, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.27-7.24 (m, 3H), 7.04-7.00 (m, 2H), 6.34 (s, 1H), 5.12-5.10 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.71 (s, 1H).
[0102] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (8.9 g, 32.0 mmol) i 3-formilbenzenboronska kiselina (5.037 g, 33.6 mmol) stave se u flakon. Flakon se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(48 mL, vod. rastvor) zajedno sa DME (72 mL). Rastvor se oslobađa gasa 15 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(1.85 g, 1.6 mmol). Flakon se greje na 100 °C 4 sata. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući 13.3 g žute čvrste supstance koja je mešavina željenog proizvoda, neodreagovalog polaznog materijala, pogrešnog regioizomera i bis-kuplovanog proizvoda. Prečišaćvanje sirovog materijala hromatografijom (0, 5, 10, 15, 20% EtOAc / heksan, gradijentno eluiranje) daje 1.9412 g (20% prinos) 3-(7-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida. Ovaj materijal (1.7903 g, 5.91 mmol) se zatim rastvori u THF (12 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (1.75 mL, 11.8 mmol) i zatim TBAF (0.6 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (22 mL, 22 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se rastvori u THF (15 mL) i ohladi na 0 °C. NaH (0.2836 g, 7.09 mmol) se doda u delovima i reakcija se meša 10 minuta na 0 °C pre nego što se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 30 minuta. Rastvor se zatim ohladi i doda se TBSCl (1.336 g, 8.87 mmol). Reakcija se meša preko noći pod argonom. Ohladi se na 0 °C i gasi zasićenim NH4Cl (vod.) i zatim razblaži korišćenjem EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% EtOAc / heksan) da se dobije 1.2744 g (44% prinos, 3 koraka) braon čvrste supstance. Ova čvrsta supstanca (0.2647 g, 0.543 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na -78 °C. u kapima se doda nBuLi (0.30 mL, 2.0 M M rastvor u cikloheksanu, 0.60 mmol) i rastvor se meša 30 minuta pre dodavanja DMF(0.050 mL, 0.652 mmol). Mešavina se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim NH4Cl (vod.). Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi aldehid. Aldehid se prečisti fleš hromatografijom (10% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0913 g (39% prinos). Ovaj aldehid se zatim rastvori u DCM (1 mL) i doda se pirolidin (0.026 mL, 0.313 mmol). U ovu mešavinu se onda doda NaHB(OAc)3(0.0886 g, 0.418 mmol) uz snažno mešanje i reakcija se meša preko noći. Reakcija se gasi zasićenim NaHCO3(vod.) i ekstrahuje DCM. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj materijal se zatim ponovo rastvori u THF (2 mL) i ohladi na 0 °C. TBAF (0.42 mL, 1.0 M rastvor u THF) se doda i mešavina se meša preko noći pod argonom. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.0181 g (23% prinos) TRV-1391. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.84 (t, J = 0.5 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.72-7.70 (m, 2H), 7.58-7.54 (m, 2H), 5.15 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 2.69 (s, 4H), 1.86-1.84 (m, 4H).
[0103] N-benzil-6-bromo-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.3720 g, 1.17 mmol) rastvori se u THF (6 mL) pod argonom, i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.65 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) čime se formira tamnocrveni rastvor. Mešavina se meša 30 minuta na -78 °C i zatim se brzo doda DMF (0.11 mL, 1.4 mmol). Mešavina se ostavi da se polako ugreje na sobnu temperaturu. Zatim se ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim NH4Cl (vod.). Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi aldehid. Aldehid se prečisti fleš hromatografijom (10% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1737 g (56% prinos) aldehida 4. Ovaj materijal (0.1737 g, 0.546 mmol) se zatim rastvori u THF (2.0 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.16 mL, 1.09 mmol) i zatim TBAF (0.06 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (2.0 mL, 2.0 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1094 g (60% prinos) TRV-1392. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.38-7.35 (m, 2H), 7.33-7.28 (m, 4H), 6.26 (s, 1H), 5.17 (s, 2H), 5.05 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.23 (s, 3H), 2.79 (br s, 1 H).
1
[0104] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.3753 g, 1.12 mmol) rastvori se u THF (6 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.62 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu, 1.23 mmol) i rastvor se meša 30 minuta pre dodavanja DMF (0.10 mL, 1.34 mmol). Mešavina se meša pod argonom na -78 °C. Posle 3 sata, zasićeni NH4Cl (vod.) se doda i zatim se mešavina ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi aldehid. Aldehid se prečisti fleš hromatografijom (10% EtOAc / heksan) dajući 0.1846 g (58% prinos). Ovaj materijal (0.1846 g, 0.647 mmol) se zatim rastvori u THF (3 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.19 mL, 1.3 mmol) i zatim TBAF (0.06 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se zatim ponovo ohladi na 0 °C i doda se TBAF (2.3 mL, 2.26 mmol), mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj materijal se prečisti hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0794 g (34% prinos) TRV-1397 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.26 (s, 1H), 7.24-7.22 (m, 2H), 7.03-6.99 (m, 2H), 6.23 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 5.02 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.67 (br s, 1H).
[0105] TRV-1378 (83 mg, 0.2 mmol) se rastvori u THF (2 mL) i u kapima doda u suspenziju NaH (50 mg) mešanog u THF (1 mL) na 0 °C. Kada se dodavanje završi, hladno kupatilo se ukloni i zameni vodenim kupatilom na sobnoj temperaturi. Posle 5 minuta reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i doda se MeI (100 μL, 0.8 mmol). Hladno kupatilo se ostavi na mestu i pusti se da reakcija dođe do sobne temperature preko noći. Posle standardnih i fleš hromatografije (9:1 Hex/EtOAc) proizvod se izoluje kao narandžasta čvrsta supstanca (54 mg, 63% prinos).
2
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.68 (m, 2H), 7.54 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.32 (m, 4H), 6.38 (s, 1H), 5.20 (s, 2H0, 4.61 (q, J = 7 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.29 (s, 3H).
[0106] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.9837 g, 3.53 mmol), etilamin (0.29 mL, 3.53 mmol), NMP (5 mL) i DIPEA (0.61 mL, 3.53 mmol) stave se u hermetički zatvorenu epruvetu i greju na 60 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću H2O, 1 N HCl (vod), zasićenog NaHCO3(vod), H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (3% EtOAc / heksan) da se dobije 0.3952 g (46% prinos). Ovaj materijal (0.1298 g, 0.54 mmol) se rastvori u Ac2O (5 mL) i greje na 140 °C 48 sati. Posle hlađenja do sobne temperature materijal se koncentruje da se dobije 4 sa prinosom 98%. Ovaj materijal (0.1499 g, 0.52 mmol) se doda u epruvetu zajedno sa 3-formilbenzenboronskom kiselinom (0.1013 g, 0.676 mmol) i epruveta se očisti i vakumira argonom (3 puta). Dodaju se Na2CO3(1.6 mL, 3.12 mmol, 2 M vodeni rastvor) i DME (2.3 mL) i rastvor se oslobađa gasa 10 minuta. Konačno, doda se Pd(PPh3)4(0.030 g, 0.026 mmol), epruveta se zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži pomoću EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3 ×). Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (4 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi aldehid 6. Ovaj aldehid se onda rastvori u THF (3 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (0.08 mL, 0.52 mmol) i zatim TBAF (0.05 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša još 2 sata. Rastvor se ponovo ohladi na 0 °C i TBAF (1.3 mL, 1.3 mmol) se doda, mešavina se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, preko noći. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ovaj materijal se prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksan) dajući 0.0327 g (17% prinos tokom 3 koraka) TRV-1399 u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.98 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.68-7.67 (m, 1H), 7.61-7.57 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 5.19-5.14 (m, 1H), 3.97 (q, J = 10 Hz, 2H), 3.33 (d, J = 5 Hz, 1H), 2.02 (br s, 3H), 1.21 (t, J = 10 Hz, 3H).
[0107] CsF (0.0052 g, 0.034 mmol) doda se u mešavinu TRV-1402 (0.1162 g, 0.34 mmol) i CF3TMS (0.10 mL, 0.68 mmol) u THF (3 mL) na sobnoj temperaturi. Ovaj rastvor se meša dok ne dođe do 100% konverzije polaznog materijala i zatim se doda TBAF (1.2 mL, 1.0 M rastvor u THF), to se meša još 16 sati. Reakcija se gasi zasićenim slanim rastvorom i razblaži pomoću EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 10% EtOAc / heksan, i zatim ponovo na koloni, 5% EtOAc / heksan, da se dobije 0.020 g (13% prinos) TRV-1400 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.24-7.21 (m, 2H), 7.17 (d, J = 15 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.03-6.99 (m, 2H), 6.23 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.30 (br s, 1H), 3.17 (s, 3H).
[0108] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (372 mg, 1.6 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli (oko 15 ml), dodaju se izoindolin (238 mg, 2 mmol) i trietilamin (400 μL, 2.9 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C preko noći (overnight, O/N). Reakcija se okonča razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4
4
filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (9:1 heks. / EtOAc) dajući 208 mg (41% prinos) 6-bromo-4-(izoindolin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.38 (m, 4H), 7.26 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.14 (s, 4H). U rastvor gore pomenutog materijala (200 mg, 0.6 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(0.9 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (134 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(35 mg). Flakon se zatim poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem pomoću EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(2 g) i prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:1 DCM / heks.) dajući 190 mg (92% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.18 (s, 1H), 8.24 (m, 1H), 7.99 (dm, J = 8 Hz, 2H), 7.70 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.44 (m, 4H), 7.26 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.25 (s, 4 H). U rastvor koji se meša, gore pomenutog materijala (190 mg, 0.55 mmol) i Rupertovog reagensa (150 mg, 1.1 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M
THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT (room temperature, sobna temperatura). Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše korišćenjem MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se propusti kroz filter od SiO2(DCM) i zatim prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:1 DCM / heks.).1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.84 (s, 1H), 7.77 (dt, J = 7 Hz, 2 Hz, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.43 (m, 4H), 7.23 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.31 (s, 4H), 5.2 (m, 1H), 2.68 (s, 1H).
[0109] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (1.5615 g, 4.65 mmol) rastvori se u THF (45 mL) i ohladi na -78 °C. u kapima se doda nBuLi (2.6 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) i rastvor se meša 30 minuta na -78 °C. Doda se DMF (0.54 mL, 7.0 mmol) i reakcija se meša na -78 °C 3 sata. Ova reakcija se zatim gasi zasićenim NH4Cl (vod.) i ostavi se da se polako zagreje do sobne temperature. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc i kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi aldehid Ovaj materijal se prečišćava na koloni 10% EtOAc / heksan dajući 0.7248 g (55% prinos) aldehida. Ovaj aldehid (0.5615 g, 1.97 mmol) u THF (5 mL) doda se u suspenziju koja se meša NaH (0.104 g, 2.6 mmol) i trimetil fosfonoacetata (0.31 mL, 2.17 mmol) u THF (20 mL) na 0 °C. Posle završenog dodavanja mešavina se meša preko noći uz zagrevanje do sobne temperature. Posle ponovnog hlađenja na 0 °C reakcija se gasi zasićenim NH4Cl (vod.). Ova mešavina se zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti preko 20% EtOAc / heksana dajući 0.5945 g (88% prinos) TRV-1402 u vidu transizomera.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.64 (d, J = 15 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.23-7.21 (m, 2H), 7.03-7.00 (m, 2H), 6.46 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.15 (s, 3H).
[0110] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (353 mg, 1.5 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli dodaju se 3-hidroksiazetidin hidrohlorid (180 mg, 1.65 mmol) i trietilamin (635 μL, 4.5 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se okonča razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (DCM) dajući 264 mg (65% prinos) 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.23(s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.59 (m, 2H), 4.15 (m, 2H), 2.20 (d, J = 6 Hz, 1H). U rastvor koji se meša na 0 °C, 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola (480 mg, 2 mmol) u NMP (12 mL) doda se MeI (1.4 g, 10 mmol), zatim NaH (200 mg, 8.5 mmol). Uz zadržavanje hladnog kupatila reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 16 sati reakcija se pažljivo gasi vodom, tretira zasićenim NH4Cl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću HCl (2M), što je praćeno zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Materijal se prečisti suvom sukcionom hromatografijom (1:1 DCM / heks.) dajući 46 mg (71% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.22 (d, J = 1 Hz, 1H), 5.92 (s, br, 1H), 4.44 (m, 3H), 4.16 (m, 2H), 3.37 (s, 3H). U rastvor TKW-I-92 (406 mg, 1.43 mmol) u DME (7 mL) / Na2CO3(2.1 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (322 mg, 2.1 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(80 mg). Flakon se poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i zagreva na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti suvom sukcionom filtracijom (DCM) dajući 411 mg materijala.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.11 (s, 1H), 8.12 (m, 1H), 7.93 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.88 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.21 (m, 1H), 6.08 (m, 1H), 4.56 (dd, J = 10 Hz / 5 Hz, 2H), 4.46 (m, 1H), 4.21 (dd, J = 10 Hz / 4 Hz, 2H), 3.39 (s, 3H). U rastvor koji se meša TKW-I-93 (411mg, 1.33 mmol) i Rupertovog reagensa (378 mg, 2.7 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata, doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM) dajući 477 mg (94% prinos).1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s, široko, 1H), 7.65 (dt, J = 7 Hz / 2 Hz, 2H), 7.51 (m, 2H), 7.17 (d, J = 1 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.53 (m, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.18 (dm, J = 10 Hz, 2H), 3.38 (s, 3H).
[0111] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (355 mg, 1.52 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se N-metil propargilamin (92 mg, 1.67 mmol) i trietilamin (635 μL, 4.5 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Zbog isparljive prirode SM sirovi materijal se konvertuje samo 50%.
Mešavina se koristi bez prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 8.03 (s, 1H, SM), 7.55 (s, 1H, SM), 7.41 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.27 (s, 1H). U rastvor TKW-I-81 (180 mg, 0.7 mmol) u DME (3 mL) / Na2CO3(1.0 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (152 mg, 1.0 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i zagreva na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (9:1 heks. / EtOAc) dajući 58 mg materijala.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.12 (s, 1H), 8.17 (m, 1H), 7.99 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.96 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.28 (s, 1H). U rastvor koji se meša TKW-I-87 (277 mg, 0.94 mmol) i Rupertovog reagensa (400 mg, 2.8 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata, doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50-80% DCM u heks.). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.76 (m, 1H), 7.69 (m, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.34 (d, J = 1 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 1 Hz, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.68 (d, J = 2 Hz, 2H), 3.30 (s, 3H), 2.69 (d, J = 4Hz, 1H), 2.29 (t, J = 2 Hz, 1H).
U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (388 mg, 1.66 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se ciklopropilamin (104 mg, 1.83 mmol) i trietilamin (694 μL, 4.9 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM) da se dobije 264 mg (65% prinos).1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.32 (m, 1H), 6.60 (m, 1H), 5.46 (s, široko, 1H), 2.65 (m, 1H), 0.94 (m, 2H), 0.74 (m, 2H). U rastvor TKW-I-88 (214 mg, 0.8 mmol) u DME (3 mL) / Na2CO3(1.0 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (240 mg, 1.6 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i zagreva na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(3 g) prečisti fleš hromatografijom na koloni (9:1 heks. / EtOAc) dajući 100 mg (42% prinos) materijala. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 10.13 (s, 1H), 8.19 (m, 1H), 7.94 (m, 2H), 7.69 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.32 (m, 1H), 6.83 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 2.77 (m, 1H), 1.01 (m, 2H), 0.76 (m, 2H). U rastvor koji se meša TKW-I-91 (277 mg, 0.94 mmol) i Rupertovog reagensa (400 mg, 2.8 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10-15% EtOAc u heks.) dajući 100 mg (80% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.77 (s, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.28 (m, 1H), 6.82 (d, J = 1 Hz, 1H), 5.13 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.67 (m, 2H), 0.96 (m, 2H), 0.75 (m, 2H).
[0112] U rastvor 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola (260 mg, 0.9 mmol) u DME (6 mL) / Na2CO3(1.5 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (225 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(45 mg). Flakon se poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i zagreva na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu dajući 277 mg. Sirovi materijal predstavlja jednu tačku na TLC i koristi se bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 10.12 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.98 (dm, J = 7 Hz, 1H), 7.93 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.63 (m, 2H), 4.19 (2H), 2.28 (m, 1H). U rastvor koji se meša aldehida (277 mg, 0.94 mmol) i Rupertovog reagensa (400 mg, 2.8 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (40% EtOAc u heks.) dajući 147 mg (42% prinos) TRV-1406.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.76 (s, 1H), 7.69 (dt, J = 7 Hz, 2 Hz, 1H), 7.57 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.16 (q, J = 6 Hz, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.65 (dd, J = 10 Hz / 6 Hz, 2H), 4.20 (dd, J = 10 Hz / 6 Hz, 2H), 2.71 (s, široko, 1H), 2.22 (s, široko, 1H).
[0113] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.2959 g, 0.88 mmol) rastvori se u THF (5 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.51 mL, 1.01 mmol, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) i rastvor se meša 20 minuta na -78 °C. Doda se I2(1.3 mL, 1.0 M rastvor u THF) i rastvor se ostavi da se polako zagreva do 0 °C preko noći. Reakcija se gasi zasićenim NH4Cl (vod) i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se ispiraju pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni 3% EtOAc / heksan dajući 0.1381 g (41% prinos, 89% c.p.) aril jodida 8. Aril jodid (0.1332 g, 0.348 mmol) i metil propiolat (0.12 mL, 1.39 mmol) se stave u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se Pd(PPh3)2Cl2(0.0122 g, 0.0174 mmol), CuI (0.0066 g, 0.0348 mmol) i K2CO3(0.0962 g, 0.696 mmol). Epruveta se zatvori i greje na 65 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ispere pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti na koloni 10% EtOAc / heksan da se dobije 0.0154 g (13% prinos) TRV-1408. 1H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.42 (s, 1H), 7.21-7.18 (m, 2H), 7.03-7.00 (m, 2H), 6.17 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.13 (s, 3H).
[0114] U rastvor koji se meša TRV-1402 (0.5283 g, 1.55 mmol) u DCM (10 mL) na -78 °C doda se DIBAL (3.6 mL, 1.0 M rastvor u heksanu) u kapima. Kada se završi sa dodavanjem reakcija se zagreje na -40 °C i meša pod argonom do potpunog utroška polaznog materijala. Gasi se zasićenim rastvorom Rochelleove soli i meša 30 minuta. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovo ulje se prečisti na koloni 50% EtOAc / heksan da se dobije 0.3740 g (77% prinos) TRV-1409 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.23-7.21 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 7.02-6.98 (m, 2H), 6.64 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.44 (dt, J = 15, 5 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.38 (dd, J = 5 Hz, 2H), 3.11 (s, 3H).
6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.1444 g, 0.43 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.23 mL, 0.45 mmol, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) i mešavina se meša 30 minuta. Metil hloroformat (0.050 mL, 0.65 mmol) se zatim doda i reakcija se ostavi da se polako zagreje do sobne temperature. Posle ponovnog hlađenja do 0 °C reakcija se gasi zasićenim NH4Cl (vod.). Ova mešavina se zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti pomoću 15% EtOAc / heksana da se dobije 0.0234 g (17% prinos) TRV-1410.<1>H
1
NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.88 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.22-7.19 (m, 2H), 7.03-6.98 (m, 2H), 6.75 (s, 1H), 5.12 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.17 (s, 3H).
[0115] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (396 mg, 1.7 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se 3-hidroksipirolidin hidrohlorid (230 mg, 1.83 mmol) i trietilamin (710 μL, 5.1 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem uz korišćenje 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se osuši pomoću MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi anilin se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor koji se meša, na 0 °C, anilina (480 mg, 1.7 mmol) u NMP (10 mL) doda se MeI (1.06 mL mg, 17 mmol) praćeno NaH (200 mg, 8.5 mmol). Uz zadržavanje hladnog kupatila ostavi se da reakcija dostigne RT. Posle 16 sati reakcija se pažljivo gasi vodom, tretira zasićenim NH4Cl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću HCl (2M) posle čega sledi zasićeni rastvor soli, i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Dobijeni materijal se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor gore pomenutog etra (1.7 mmol) u DME (8 mL) / Na2CO3(2.5 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (382 mg, 2.6 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(80 mg). Flakon se zatim poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem pomoću EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (4:1 heks. / EtOAc) dajući 415 mg materijala.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.11 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.91 (m, 2H), 7.64 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.94 (m, 1H), 3.95 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 2.17 (m, 2H). U rastvor koji se meša aldehida (415mg, 1.33 mmol) i Rupertovog reagensa (365 μL, 2.6 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl,
2
zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10-30% EtOAc u heks.) dajući 240 mg (48% prinos) TRV-1411, 1:1:1:1 mešavinu dijastereomera zbog postojanja dva hiralna centra.
1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 7.90 (s, 1H), 7.82 (dm, J = 7 Hz, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.93 (d, J = 6 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.28 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.87 (m, 3H), 3.77 (m, 1H), 2.15 (m, 2H).
U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (355 mg, 1.52 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se N-metil-N-(2-piridinilmetil)amin (204 mg, 1.67 mmol) i trietilamin (400 μL, 2.9 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem korišćenjem 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se osuši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (4:1 heks. / EtOAc) dajući 293 mg (60% prinos) anilina. U rastvor ovog anilina (293 mg, 0.91 mmol) u DME (5 mL) / Na2CO3(1.4 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (202 mg, 1.4 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(50 mg). Flakon se onda poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(3 g) i prečisti fleš hromatografijom na koloni (4:1 heks. / EtOAc) dajući 280 mg aldehida. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.01 (s, 1H), 8.60 (dm, J = 4 Hz, 1H), 8.09 (t, J = 2 H, 1H), 7.93 (dt, J = 7 Hz / 2 Hz, 1H), 7.87 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.64 (m, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.28 (s, 2H), 3.37 (s, 3H). U rastvor koji se meša aldehida (280 mg, 0.81 mmol) i Rupertovog reagensa (230 mg, 1.63 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C, doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% EtOAc u heks.) da se dobije 120 mg (35% prinos) TRV-1412. 1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 8.51 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.80 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.74 (td, J = 8 Hz / 2 Hz, 1H), 7.57 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.32 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.26 (m, 1H), 6.95 (d, J = 5 Hz, 1H), 5.27 (m, 3H), 3.36 (s, 3H).
U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (360 mg, 1.54 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se N-metil-N-(3-piridinilmetil)amin (207 mg, 1.69 mmol) i trietilamin (400 μL, 2.9 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% EtOAc u DCM) da se dobije 247 mg (50% prinos) anilina. 1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 8.50 (d, J = 2 Hz, 1H), 8.48 (dd, J = 5 Hz / 1 Hz, 1H), 7.64 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 8 Hz / 5 Hz, 1H), 6.35 (m, 1H), 5.17 (s, 2H), 3.21 (s, 3H). U rastvor anilina (247 mg, 0.77 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(1.1 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (173 mg, 1.2 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se zatim poveže sa refluksnim kondenzotom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem uz korišćenje EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu dajući 312 mg sirovog aldehida. U rastvor koji se meša aldehida (0.77 mmol) i Rupertovog reagensa (400 mg, 2.8 mmol) u DCM (8 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži korišćenjem DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2% MeOH u DCM).1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 8.51 (m, 2H), 7.70-7.55 (m, 3H), 7.50-
4
7.45 (m, 2H), 7.28 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.14 (m, 3H), 4.24 (s, široko, 1H), 3.19 (s, 3H).
[0116] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (357 mg, 1.5 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se 4-metoksibenzilamin (230 mg, 1.65 mmol) i trietilamin (400 μL, 2.9 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi anilin se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor koji se meša anilina (220 mg, 0.6 mmol) u NMP (5 mL) doda se NaH (151 mg, 6.3 mmol). Pošto prestane razvijanje gasa, u kapima se doda MeI (446 mg, 3.1 mmol). Uz zadržavanje hladnog kupatila reakcija se pusti da dostigne RT. Posle 16 sati reakcija se pažljivo gasi vodom, tretira zasićenim NH4Cl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Dobijeni anilin se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor anilina (0.6 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(1.0 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (142 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(45 mg). Flakon se zatim poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem uz korišćenje EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu dajući 220 mg sirovog materijala. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 10.1 (s, 1H), 8.1 (s, 1H), 7.9 (m, 2H), 7.7 (m, 1H), 7.2 (m, 2H), 6.9 (d, J = 6 Hz, 2H), 6.4 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 3.8 (s, 3H), 3.2 (s, 3H). U rastvor koji se meša aldehida (220 mg, 0.59 mmol) i Rupertovog reagensa (168 mg, 1.2 mmol) u DCM (6 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi, hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20% EtOAc u heksanu).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.7 (s, 1H), 7.6 (dt, J = 7 Hz, 1 Hz, 1H), 7.5 (m, 2 H), 7.19 (m, 3H), 6.8 (d, J= 8 Hz, 2 H), 6.3 (s, 1H), 5.1 (m, 1H), 5.0 (s, 2H), 3.8 (s, 3H), 3.2 (s, 3H).
[0117] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (345 mg, 1.5 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se 3,5-dimetoksibenzilamin (272 mg, 1.6 mmol) i trietilamin (600 μL, 4.3 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor koji se meša anilina (1.5 mmol) u NMP (5 mL) doda se NaH (211 mg, 8.8 mmol). Pošto prestane razvijanje gasa, u kapima se doda MeI (570 mg, 4 mmol). Uz zadržavanje hladnog kupatila reakcija se pusti da dostigne RT. Posle 16 sati, reakcija se pažljivo gasi vodom, tretira zasićenim NH4Cl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2i izloži fleš hromatografiji (10% EtOAc u heks.) da se dobije 163 mg materijala. U rastvor anilina (165 mg, 0.44 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(0.7 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (98 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se zatim poveže sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu dajući 277 mg. Sirovi materijal se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor koji se meša aldehida (277 mg, 0.4 mmol) i Rupertovog reagensa (125 mg, 0.8 mmol) u DCM (4 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi, hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(3 g) prečisti fleš hormatografijom na koloni (10-20% EtOAc u heks.). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.7 (s, 1H), 7.6 (dt, 7 Hz, 1 Hz, 2H), 7.5 (m, 2H), 7.2 (s, 1H), 6.4 (m, 1H), 6.3 (m, 2H), 5.1 (m, 1H), 5.0 (s, 2H), 3.7 (s, 3H), 3.3 (s, 3H), 2.7 (s, široko, 1H).
[0118] TRV-1397 (0.0768 g, 0.22 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se NaH (0.0132 g, 0.33 mmol) i suspenzija se meša 30 minuta. Zatim se doda jodometan (0.03 mL, 0.44 mmol) i reakcija se meša preko noći uz zagrevanje do sobne temperature. Mešavina se zatim ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 10% EtOAc / heksan da se dobije 0.0259 g (32% prinos) TRV-1416 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.30-7.27 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.07-7.04 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.52 (q, J = 5 Hz, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.20 (s, 3H).
[0119] U rastvor oksalil hlorida (0.032 mL, 0.37 mmol) u DCM (1 mL) na -78 °C doda se rastvor DMSO (0.024 mL, 0.34 mmol) u DCM (1.1 mL). Rastvor se meša 5 minuta i zatim se doda rastvor TRV-1397 (0.1097 g, 0.31 mmol) u DCM (1.0 mL) i mešavina se meša još 15 minuta. TEA (0.22 mL, 1.55 mmol) se doda odjednom, reakcija se meša 10 minuta na -78 °C i zatim se ostavi da se zagreje do sobne temperature. Mešavina se zatim razblaži vodom i etil acetatom. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski slojevi se isperu zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi trifluoroketon. Ovaj materijal se zatim prečisti fleš hromatografijom (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0356 g (32% prinos) TRV-1417 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.93 (s, 1H), 7.23-7.20 (m, 2H), 7.04-7.00 (m, 2H), 6.67 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 3.23 (s, 3H).
[0120] TRV-1421 (0.3511 g, 1.17 mmol) se rastvori u DCM (50 mL) i doda se Dess-Martinov reagens (1.4845 g, 3.5 mmol). Reakcija se meša 40 minuta i zatim dasi zasićenim NaHCO3(vod.) i viškom Na2S2O3. Mešavina se meša dok se sve čvrste supstance ne rastvore i zatim se ekstrahuje nekoliko puta pomoću DCM. Kombinovani organski ekstrakti se isperu zasićenim NaHCO3, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 10% EtOAc / heksan, da se dobije 0.2322 g (66% prinos) TRV-1418 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.74 (s, 1H), 7.22-7.19 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 2H), 6.74 (s, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.65 (s, 3H).
[0121] U rastvor koji se meša 6-bromo-4-(izoindolin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (158 mg, 0.3 mmol) u THF (5 mL) na -78 °C doda se n-BuLi (0.25 mL, 2 M). Posle 30 min mešanja na niskoj temperaturi doda se oksatenanon (72 mg, 1 mmol) rastvoren u THF (4 mL). Hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT i prati se pomoću TLC. Reakcija se završava razblaženom HCl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(3 g) i prečisti fleš hromatografijom (DCM modifikovan pomoću MeOH) da se dobije 40 mg materijala.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-D6) δ = 7.5 (m, 2H), 7.4 (m, 2H), 7.2 (s, 1H), 6.6 (s, 1H) 6.5 (s, 1H), 6.5 (s, 1H), 5.1 (s, 4H), 4.8 (m, 4H).
[0122] U rastvor koji se meša 6-bromo-4-(izoindolin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (98 mg, 0.3 mmol) u THF (3 mL) na -78 °C doda se n-BuLi (0.15 mL, 2 M). Posle 30 min mešanja na niskoj temperaturi doda se suvi DMF (0.5 mL) i reakcija se meša još jedan sat pre nego što se gasi pomoću MeOH, pa zatim HCl (4 M). Reakcija se ostavi da dostigne RT, razblaži vodom i ekstrahuje u DCM (3 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(3 g) i prečisti fleš hromatografijom (1:1 DCM/heks.) dajući 71 mg materijala. U rastvor koji se meša aldehida (71 mg, 0.26 mmol) i Rupertovog reagensa (74 mg, 0.52 mmol) u DCM (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi, hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata, doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM). 1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 7.50 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.27 (s, 1H),7.11 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.29 (m, 1H), 5.09 (s.4H).
[0123] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.8514 g, 2.53 mmol) se rastvori u THF (25 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (1.3 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) na -78 °C i reakcija se meša 15-20 minuta. Zatim se doda acetaldehid (0.21 mL, 3.8 mmol) i reakcija se ostavi da se polako zagreje do sobne temperature. Rastvor se ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 40% EtOAc / heksan, da se proizvede 0.5340 g (70% prinos) TRV-1421 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.24-7.21 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 7.02-6.98 (m, 2H), 6.16 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.87 (q, J = 5 Hz, 1H), 3.11 (s, 3H), 1.90 (s, 1H), 1.51 (d, J = 5 Hz, 3H).
[0124] TRV-1421 (0.1381 g, 0.458 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se NaH (0.0275 g, 0.687 mmol) i suspenzija se meša 30 minuta. Zatim se doda jodometan (0.06 mL, 0.916 mmol) i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature. Rastvor se ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 10% EtOAc / heksan, dajući 0.1243 g (86% prinos) TRV-1422 u vidu žutog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.25-7.23 (m, 2H), 7.02 (s, 1H), 7.02-6.98 (m, 2H), 6.14 (s, 1H), 5.07 (d, J - 15 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.27 (q, J = 5 Hz, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 1.44 (d, J = 5 Hz, 3H).
[0125] U rastvor 6-bromo-4-(izoindolin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (647 mg, 2.0 mmol) u DME (10 mL) / Na2CO3(3 mL) dodaju se 3-acetil-fenilboronska kiselina (500 mg, 0.9
1
mmol) i Pd(P(Ph)3)4(90 mg). Flakon se spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem pomoću EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se rastvori u DCM i eluira kroz kratki filter od SiO2dajući 456 mg materijala koji je pogodan za sledeće reakcije.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 8.3 (m, 1H), 8.0 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.8 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.6 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.4 (m, 4H), 7.2 (s, 1H), 6.2 (s, 1H), 5.1 (s, 4H), 2.7 (s, 3H). U rastvor koji se meša ketona (222 mg, 0.6 mmol) rastvorenog u THF (4 mL) na 0 °C doda se MeMgBr (0.9 mL, 0.9 mmol). Posle 30 minuta na niskoj temperaturi reakcija se zagreje na RT i gasi razblaženom HCl i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.8 (m, 1H), 7.5 (m, 2H0, 7.4-7.3 (m, 5H), 7.2 (s, 1H), 5.1 (s, 4H), 1.0 (s, 1H), 1.6 (s, 6H).
[0126] U rastvor 6-bromo-4-(izoindolin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (647 mg, 2.0 mmol) u DME (10 mL) / Na2CO3(3 mL) dodaju se 3-acetil-fenilboronska kiselina (500 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(90 mg). Flakon se spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem pomoću EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se rastvori u DCM i eluira kroz kratki filter od SiO2dajući 456 mg materijala koji je pogodan za sledeće reakcije.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 8.3 (m, 1H), 8.0 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.8 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.6 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.4 (m, 4H), 7.2 (s, 1H), 6.2 (s, 1H), 5.1 (s, 4H), 2.7 (s, 3H). U rastvor koji se meša ketona (230 mg, 0.65 mmol) rastvorenog u MeOH/THF na 0 °C doda se NaBH4(80 mg, 2 mmol). Kada opadne inicijalna egzotermna reakcija, hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Reakcija se meša na RT 1 sat i zatim se sipa u vodu, posle 30 minuta reakcija se acidifikuje i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se suši
1 1
pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM).1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ = 7.7 (s, 1H), 7.6 (dt, J = 10 Hz, 1 Hz), 7.5-7.3 (m, 6H), 7.1 (s, 1H), 6.2 (s, 1H), 5.2 (s, 4H), 5.0 (m, 1H), 1.9 (m, 1h), 1.5 (d, J = 6 Hz, 3H).
[0127] TRV-1418 (0.1195 g, 0.399 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se MeMgBr (0.52 mL, 1.0 M rastvor u Bu2O) u kapima i reakcija se meša do okončanja, prema TLC. Rastvor se ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filriraju i koncentruju. Sirovi materijal se zatim prečisti dva puta uzastopno na kolonama, 30% EtOAc / heksan, da se dobije 0.0626 g (50% prinos) TRV-1425 u vidu narandžastog ulja, sa približno 90% cp (chemically pure, hemijski čisto).<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.23-7.20 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.02-6.95 (m, 2H), 6.33 (s, 1H), 5.04 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 1.59 (s, 6H).
[0128] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (347 mg, 1.49 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se benzentiol (104 mg, 1.83 mmol) i trietilamin (400 μL, 2.8 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM)
1 2
dajući 264 mg (65% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.8 (m, 1H), 7.6 (m, 2H), 7.5 (m, 3H), 6.7 (m, 1H). U rastvor tioetra (220 mg, 0.7 mmol) u DME (6 mL) / Na2CO3(1.5 mL) dodaju se 3-acetil-fenilboronska kiselina (185 mg, 1.1 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(75 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (40 mL) i ekstrahovanjem pomoću EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti proterivanjem kroz SiO2filter, uz DCM. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 8.0 (s, 1H), 7.9 (m, 1H), 7.7 (s, 1H), 7.6 (m, 3H), 7.5 (m, 1H), 7.5 (m, 3H), 7.1 (m, 1H), 2.6 (s, 3H). U rastvor koji se meša ketona rastvorenog u MeOH/THF na 0 °C doda se NaBH4(80 mg, 2 mmol). Kada početna egzotermna reakcija opadne hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Reakcija se meša na RT 1 sat i zatim se sipa u vodu, posle 30 min reakcija se acidifikuje i ekstrahuje u EtOAc (3 × 20 mL). Organska faza se suši korišćenjem MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM).1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.7 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.6 (m, 2H), 7.5-7.3 (m, 7H), 7.1 (d, J = 1 Hz, 1H), 4.9 (m, 1H), 1.8 (d, J = 3 Hz, 1H), 1.5 (d, J= 6 Hz, 3H).
[0129] TRV-1409 (0.2077 g, 0.663 mmol) se rastvori u DCM (37 mL) i zatim se u jednoj porciji doda DMP (0.8436 g, 1.99 mmol). Reakcija se meša 3 sata i zatim gasi zasićenim NaHCO3(vod.) i viškom Na2S2O3. Ova mešavina se meša dok se ne rastvore sve čvrste supstance i zatim ekstrahuje korišćenjem DCM. Kombinovani organski slojevi se suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi aldehid. Prečišćavanje fleš hromatografijom (20% EtOAc / heksan) daje 0.0556 g (27% prinos) aldehida 4. Ovaj aldehid (0.0532 g, 0.171 mmol) se razblaži u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. MeMgBr (0.19 mL, 1.0 M rastvor u Et2O) doda se u kapima i reakcija se meša do okončanja, prema TLC. Reakcija se zatim gasi pomoću NH4Cl i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se ispiraju vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi
1
materijal se zatim prečisti fleš hromatografijom da se dobije 0.0262 g (47% prinos) TRV-1427 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.23-7.21 (m, 2H), 7.03-6.99 (m, 3H), 6.59 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.34 (dd, J = 15, 5 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 4.54 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 1.62 (d, J = 5 Hz, 1H), 1.40 (d, J = 10 Hz, 3H).
[0130] U hermetički zatvorenoj fioli, 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (2.2 g, 8 mmol) se kombinuje sa, (888 mg, 8.8 mmol), Et3N (3.3 mL, 24 mmol), i NMP (13 mL). Mešavina se greje na 85 °C 2 dana. Tada se reakcija razblaži pomoću 1 M NaOH (150 mL) i nerastvorljivi materijal se ukloni filtracijom. Željeno jedinjenje precipitira dodavanjem HCl (konc.) u vodeni sloj i izoluje se vakuumskom filtracijom dajući 1-(6-bromobenzo[c] [1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-karboksilnu kiselinu (1.7 g), koja se koristi bez daljeg prečišćavanja. Kiselina (1.5 g, 5 mmol) se rastvori u THF (50 mL) i ohladi na 0 °C. U ovo se doda BH3-THF (10 mL, 10 mmol). Reakcija se ostavi da dostigne sobnu temperaturu preko noći. Sledećeg dana reakcija se gasi pomoću AcOH i ekstrahuje u EtOAc. Organski sloj se ispira pomoću 1 M NaOH dok ispirci ne ostanu litmus plavi i zatim koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2i prečisti fleš hromatografijom na koloni (3:2 heks.:EtOAc) dajući 800 mg (1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)metanola (56% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.05 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.11 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.85 (m, 4H), 3.00 (m, 1H). U rastvor gore pomenutog alkohola (400 mg, 1.4 mmol) u DME (7 mL) / Na2CO3(2.1 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (315 mg, 2.1 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(50 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci vakuumskom filtracijom. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(50% EtOAc u heks.) dajući 350 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša aldehida (400 mg, 1.4 mmol) i Rupertovog reagensa (483 mg, 3.3 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle mešanja preko
1 4
noći doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heks.) dajući 150 mg (34% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72-7.66 (m, 2H), 7.5 (m, 2H), 7.14 (s, 1H0, 6.04 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.41 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.15 (dd, 2H), 3.93 (d, J = 5 Hz, 2H), 3.061H), 2.82 (s, široko), 1.63 (s, široko).
[0131] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ol (574 mg, 2.1 mmol) se rastvori u DCM (25 mL) i ohladi na -78 °C i u kapima se doda DAST (421 uL, 3.2 mmol), i ukloni se hladno kupatilo. Posle 2 h na sobnoj temperaturi reakcija se ohladi na 0 °C i gasi pomoću MeOH. Reakciona mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću DCM. Kombinovani ekstrakti se suše (MgSO4) i koncentruju u vakuumu. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50% DCM u heks.) da se dobije proizvod u vidu žute čvrste supstance (160 mg, 27% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.27 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 5.51 (dm, 2JHF = 57 Hz, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.42 (dm, 3JHF = 23Hz, 2H). U rastvor anilina (330 mg, 1.2 mmol) u DME (7 mL) / Na2CO3(1.8 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (270 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(50 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(20% EtOAc u heks.) i koristi se bez daljeg prečišćavanja. U rastvor koji se meša aldehida (oko 1.0 mmol) i Rupertovog reagensa (348 mg, 2.0 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle mešanja preko noći doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (25% EtOAc u heks.) dajući 300 mg (80% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s,
1
1H), 7.66 (dm, J = 10 Hz, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.53 (dm, 2JHF = 56 Hz, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.64 (m, 2H), 4.42 (ddm, J = 23 Hz / 10 Hz, 2H), 2.73 (s, 1H).
[0132] TRV-1402 (0.1992 g, 0.58 mmol) rastvori se u THF (10 mL) i ohladi na - 78 °C. MeLi (0.80 mL, 1.6 M rastvor u Et2O) se doda u kapima i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se zatim ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Mešavina se ekstrahuje tri puta korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi alkohol. Ovaj materijal se zatim prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0843 g (43% prinos) narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDC13) δ = 7.23-7.21 (m, 2H), 7.03 (s, 1H), 7.02-6.98 (m, 2H), 6.61 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 15 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.08 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.45 (s, 6H).
[0133] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.2771 g, 0.82 mmol) rastvori se u THF (10 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.43 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) i mešavina se meša 30 minuta pre nego što joj se doda N,N-dimetilkarbamil hlorid (0.10 mL, 1.1 mmol) u kapima. Mešavina se ostavi da se greje do sobne temperature preko noći. Mešavina se zatim ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim amonijum hloridom. Ova mešavina se ekstrahuje tri puta korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi amid. Završno prečišćavanje ovog materijala vrši se na koloni, 50% EtOAc / heksan da se dobije 16.6 mg (6.2% prinos) narandžastog ulja.<1>H NMR (500 MHz,
1
CDC13) δ = 7.23-7.20 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.03-6.99 (m, 2H), 6.12 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.14 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 3.01 (s, 3H).
[0134] U hermetički zatvorenoj fioli 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (834 mg, 3 mmol) se kombinuje sa azetidin hidrohloridom (309 mg, 3.3 mmol), Et3N (1.25 mL, 9 mmol), i NMP (6 mL). Mešavina se zagreva na 85 °C 2 dana. Sirovi materijal precipitira pošto se reakciona mešavina izlije u vodu (150 mL). Sirovi materijal se propusti kroz filter od SiO2(10% EtOAc u heksanu) dajući (540 mg) narandžaste čvrste supstance za koju se primenom NMR pokazuje da je 2:1 mešavina polaznog materijala i 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola.
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.05 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.33 (m, 4H), 2.53 (m, 2H). U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (322 mg, 1.27 mmol) u DME (7 mL) / Na2CO3(2.0 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (286 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(50 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(DCM) dajući 280 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša aldehida (411mg, 1.33 mmol) i Rupertovog reagensa (378 mg, 2.7 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata, doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži pomoću DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM) dajući 477 mg (94% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s, 1h), 7.66 (m, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.12 (q, J = 7 Hz, 1H), 4.35 (t, J = 8 Hz, 4H), 2.74 (s, br, 1H), 2.53 (p, J = 7 Hz, 2H).
1
[0135] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-karboksilna kiselina (≈600 mg, 2 mmol) rastvori se u MeOH (100 mL) i doda se H2SO4(2 kapi). Pričvrsti se refluksni kondenzor i reakcija se blago refluktuje 24 h. Tada se reakcija razblaži pomoću EtOAc (200 mL) i ekstrahuje vodom (3 × 100 mL). Sirovi materijal se spoji sa SiO2i prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM) dajući suštinski kvantitativni prinos (2.08 mmol). Estar (650 mg, 2.08 mmol) se rastvori u THF (20 mL) i ohladi na 0 °C. U to se doda MeMgBr (6 mL, 6 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT, i prati se pomoću TLC. Kada se misli da je reakcija završena mešavina se ponovo ohladi na 0 °C i pažljivo gasi vodenim rastvorom NH4Cl. Mešavina se onda ekstrahuje u EtOAc (3 × 100 mL), suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2i prečisti fleš hromatografijom na koloni (20% aceton u heks.) dajući 474 mg 2-(1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)propan-2-ola (73% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.20 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.26 (m, 4H), 2.87(m, 1H), 1.38 (s,1H), 1.26 (s, 6H). U rastvor koji se meša tercijarnog alkohola (223 mg, 0.71 mmol) rastvorenog u THF (10 mL) i ohlađenog na 0 °C doda se NaH (600 mg, 20 mmol). Kada se smanji početno pravljenje mehurića doda se u kapima MeI (1.14 g, 8 mmol) i reakciona mešavina se ostavi da dostigne RT. Posle 18 h reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i pažljivo se doda NH4Cl. Reakciona mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 × 50 mL), ispere zasićenim rastvorom soli, (1 × 50 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% aceton u heks.). U rastvor etra (193 mg, 0.6 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(2M, 0.9 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (133 mg, 0.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 115 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi aldehid se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(20% EtOAc u heks) dajući 184 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša aldehida (400 mg, 1.4 mmol) i Rupertovog reagensa (483 mg, 3.3 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle
1
30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se uklonii ostavi se da reakcija dostigne RT. Posle mešanja preko noći doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži korišćenjem DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heks.) dajući 90 mg (41% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.50 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.25 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.96 (m, 1H).
[0136] U rastvor koji se meša (1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)metanola (427 mg, 1.58 mmol) u NMP (10 mL), ohlađen na 0 °C, doda se NaH (758 mg, 20 mmol). Kada se smanji početno pravljenje mehurića doda se u kapima MeI (2.24 g, 10 mmol) i reakciona mešavina se ostavi da dostigne RT. Posle 18 h, reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i pažljivo se doda NH4Cl. Reakciona mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 × 50 mL), ispere zasićenim rastvorom soli, (1 × 50 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% aceton u heks.).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.16 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.3 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.6 (d, J = 6 Hz 2H), 3.40 (s, 3H), 3.08 (m, 1H). U rastvor metil etra (245 mg, 0.8 mmol) u DME (5 mL) / Na2CO3(2M, 1.2.0 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (184 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 110 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(DCM) dajući 214 mg aldehida koji se koristi kao takav. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.11 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.42 (m, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.65 (d, J = 6 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.11 (m, 1H). U rastvor koji se meša aldehida (214 mg, 1.33 mmol) i Rupertovog reagensa (298 mg, 2.1 mmol) u DCM (13 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i ostavi se da reakcija dostigne RT. Posle 3 sata doda se
1
TBAF u višku i reakcija se razblaži korišćenjem DCM. Organske faze se isperu zasićenim NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heks.) dajući 150 mg (94% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (m, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.11 (m 1H), 4.38 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.11 (m, 2H), 3.64 (d, J = 7 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.09 (m, 1H).
[0137] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-karboksilnoj kiselini (250 mg, 0.8 mmol) u DME (5 mL) / Na2CO3(2M, 1.2 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (181 mg, 1.2 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(50 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 110 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(30% EtOAc u heks.) dajući 211 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša aldehida (211 mg, 0.63 mmol) i Rupertovog reagensa (266 mg, 1.88 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se uklonii ostavi se da reakcija dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži korišćenjem DCM. Organske faze se isperu zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20-40% EtOAc gradijent u heks.) dajući 70 mg (27% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (s, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.49 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.12 (s, br, 1H), 4.33 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.25 (m, 2H), 2.91 (m, 1H), 2.74 (d, J = 4 Hz, 1H), 1.43 (s, 1H), 1.27 (s, 6H).
11
[0138] U rastvor koji se meša 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola (280 mg, 1.04 mmol) u DCM (10 mL) doda se Dess-Martinov reagens (571 mg, 1.3 mmol) rastvoren u DCM (4 mL). Posle 1 sata reakcija postaje zamućena i formira se precipitat. Materijal se sipa u 1 M NaOH i ekstrahuje pomoću TBME, dobijeni keton se koristi kao takav. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.40 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.10 (s, 4H). U rastvor koji se meša ketona (275 mg, 1.03 mmol) u THF (10 mL), ohlađen na 0 °C, doda se MeMgBr (1M THF, 3 mL). Hladno kupatilo se zadrži i reakcija se ostavi da dostigne RT tokom 8 sati. Tada se mešavina ponovo ohladi i gasi korišćenjem NH4Cl (vod.) i ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 × 20 mL), suši pomoću MgSOi i koncentruje u vakuumu. Sirovi tercijarni alkohol se propusti kroz filter od SiO2(DCM) dajući žutu čvrstu supstancu. U rastvor tercijarnog alkohola (284 mg, 1 mmol) u DME (6 mL) / Na2CO3(2M, 1.5 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (225 mg, 1.5 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 110 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz filter od SiO2(10-30% gradijent EtOAc u heks.) dajući 250 mg aldehida koji se koristi kao takav.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.11 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.30 (d, J = 9 Hz, 2H), 4.24 (d, J = 8 Hz, 2H), 2.19 (s, Br, 1H), 1.71 (s, 3H). U rastvor koji se meša aldehida (250 mg, 0.81 mmol) i Rupertovog reagensa (344 mg, 2.4 mmol) u DCM (10 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i ostavi se da reakcija dostigne RT. Posle 3 sata doda se TBAF u višku i reakcija se razblaži korišćenjem DCM. Organske faze se isperu zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli i zatim suše pomoću MgSO4i koncentruju u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20-40% EtOAc gradijent u heksanu) dajući 185 mg (60% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (s, 1H), 7.64 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.29 (d, J = 9 Hz, 2H), 4.22 (d, J = 9 Hz, 2H), 2.71 (s, br, 1H).2.10 (s, br, 1H), 1.70 (s, 3H).
[0139] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ol (0.500 g, 1.85 mmol) se rastvori u NMP (2 mL) i ohladi na 0 °C. NaH (0.096 g, 2.4 mmol) se zatim doda u porcijama i mešanje se nastavi dok ne prestane stvaranje mehurića, kada se dodaje etil jodid (0.16 mL, 2.0 mmol). Reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se tada ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom NH4Cl (vod.). Ova mešavina se zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x) zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi etil etar. Ovaj etar i 3-formilfenilboronska kiselina (0.2908 g, 1.94 mmol) sakupe se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (4.1 mL) i 2M Na2CO3(2.8 mL, 5.6 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.1075 g, 0.093 mmol). Epruveta se zatim hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (5.6 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.41 mL, 2.8 mmol), posle čega sledi dodavanje TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se onda meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C. Doda se TBAF (5.6 mL, 1.0 M rastvor u THF) i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se gasi zasićenim rastvorom soli i zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromaotgrafijom na koloni (20% EtOAc / heksan) dajući 0.3755 g (51% prinosa tokom 3 koraka) TRV-1437. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.72 (s, 1H), 7.66-7.64 (m, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.14-5.11 (m, 1H), 4.56-4.54 (m, 3H), 4.18 (d, J = 5 Hz, 2H), 3.54 (q, J = 5 Hz, 2H), 2.67 (d, J = 5 Hz, 1H), 1.26 (t, J = 5 Hz, 3H).
[0140] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (2.085 g, 6.20 mmol) stavi se u epruvetu, koja se zatim vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). U ovu fiolu se zatim dodaju dietilmalonat (1.9 mL, 12.4 mmol), P(tBu)3(4 mL, 1.98 mmol) i toluen (18 mL), zatim se dodaju Pd2(dba)3(0.4542 g, 0.496 mmol) i K3PO4(4.6063 g, 21.7 mmol). Epruveta se zatim zatvori i greje na 100 °C 16 sati. Reakcija se ohladi i filtrira kroz filter od celita i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 1.257 g (49% prinos) supstituisanog malonata. Ovaj materijal (1.2572 g, 3.03 mmol) se rastvori u DMSO (30 mL) i zatim se dodaju NaCl (0.3536 g, 6.05 mmol) i H2O (1.8 mL, 97 mmol). Ova mešavina se greje na 150 °C 8 sati. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere pomoću H2O (6 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi etil estar. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom (10% EtOAc / heksan) da se dobije 0.7641 g (73% prinos) narandžaste čvrste supstance. Etil estar (0.5873 g, 1.71 mmol) se onda rastvori u DCM (20 mL) i ohladi na -78 °C. DIBAL (4.0 mL, 1.0 M rastvor u heksanu) doda se u kapima. Reakcija se meša na -78 °C 5 minuta i onda zagreje na -30 °C. Posle mešanja na toj temperaturi tokom 3 sata, reakcija se gasi metanolom i ostavi se da se zagreje do sobne temperature. Dodaju se voda (5 mL) i Na2SO4, mešavina se meša 30 minuta i zatim filtrira dajući mešavinu aldehida i alkohola. Ova mešavina se preuzme u DCM (50 mL) i zatim se doda DMP (0.7253 g, 1.71 mmol) uz snažno mešanje. Posle 60 minuta reakcija se gasi zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i viškom Na2S2O3, mešanje se nastavlja dok se ne rastvori sva čvrsta supstanca. Mešavina se zatim ekstrahuje pomoću DCM. Kombinovani organski slojevi se suše pomoću Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Rezidua se zatim prečisti fleš hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0726 g (14% prinos, 2 koraka) aldehida 9. Ovaj aldehid (0.0726 g, 0.243 mmol) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.05 mL), pa zatim TBAF (0.03 mL, 1.0 M rastvor u THF). Mešavina se meša 60 minuta i zatim se doda TBAF (0.46 mL, 1.0 M rastvor u THF) i reakcija se meša preko noći. Reakcija se zatim gasi zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0349 g (39% prinos) TRV-1438. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.23-7.21 (m, 2H), 7.03-6.99 (m, 3H), 6.01 (s, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.23 (br s, 1H), 3.11 (s, 3H), 3.03 (dd, J = 14, 2.5 Hz, 1H), 2.87 (dd, J = 14, 10 Hz, 1H), 2.21 (s, 1H).
11
[0141] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (2.085 g, 6.20 mmol) stavi se u epruvetu koja se zatim vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). U ovu fiolu se zatim dodaju dietilmalonat (1.9 mL, 12.4 mmol), P(tBu)3(4 mL, 1.98 mmol) i toluen (18 mL), zatim se dodaju Pd2(dba)3(0.4542 g, 0.496 mmol) i K3PO4(4.6063 g, 21.7 mmol). Epruveta se zatim zatvori i greje na 100 °C 16 sati. Reakcija se ohladi i filtrira kroz filter od celita i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 1.257 g (49% prinos) jedinjenja 2. Ovaj materijal (1.2572 g, 3.03 mmol) se rastvori u DMSO (30 mL) i zatim se dodaju NaCl (0.3536 g, 6.05 mmol) i H2O (1.8 mL, 97 mmol). Ova mešavina se greje na 150 °C 8 sati. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere pomoću H2O (6 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi etil estar. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom (10% EtOAc / heksan) da se dobije 0.7641 g (73% prinos) narandžaste čvrste supstance. Ovaj materijal (0.1736 g, 0.506 mmol) se rastvori u THF (10 mL) i ohladi na -78 °C. MeLi (0.70 mL, 1.6 M rastvor u Et2O) doda se u kapima, i reakcija se ostavi da se polako zagreje do sobne temperature. Zatim se ponovo ohladi na 0 °C i gasi amonijum hloridom. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc i kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovu reziduu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0288 g (17% prinos) tercijarnog alkohola TRV-1439. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.24-7.21 (m, 2H), 7.05-6.99 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.02 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.76 (s, 2H), 1.40 (s, 1H), 1.27 (s, 6H).
[0142] U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (480 mg, 0.6 mmol) u DME (11 mL) / Na2CO3(2M, 2.8 mL) dodaju se 3-karboksi-fenilboronska kiselina (470 mg, 2.8 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(93 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 100 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M HCl (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirova kiselina se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM 1% AcOH) dajući 330 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ove kiseline (110 mg, 0.37 mmol) u NMP (2 mL) dodaju se DIPEA (130 μL, 0.74 mmol) i piperazin (230 mg, 0.37 mmol). Pošto se mešavina homogenizuje doda se HATU (140 mg, 0.37 mmol) i reakcija se ostavi da se meša. Posle 1 sata na RT reakcija se razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i vode. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50-100% EtOAc u heks.) dajući (20 mg) 14% prinos.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.66 (m, 2H), 7.50 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.34 (t, J = 7 Hz, 4H), 3.79 (s, široko, 2H), 3.43 (s, široko, 2H), 2.97 (s, široko, 2H), 2.82 (s, široko, 2H), 2.61 (s, 1H), 2.53 (p, J = 7 Hz, 2H).
[0143] U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (480 mg, 0.6 mmol) u DME (11 mL) / Na2CO3(2M, 2.8 mL) dodaju se 3-karboksi-fenilboronska kiselina (470 mg, 2.8 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(93 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 100 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M HCl (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM 1% AcOH) dajući 330 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ove kiseline (165 mg, 0.56 mmol) rastvoren u NMP (2 mL) dodaju se DIPEA (300 μL, 1.7 mmol) i ciklopropilamin (55 mg, 0.59 mmol). Pošto se mešavina homogenizuje doda se HATU (213 mg, 0.56 mmol) i reakcija se ostavi da se meša. Posle 1 sata na RT reakcija se razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i vode. Organska faza se ispere kiselinom (1 M HCl, 1 × 100 mL), bazom (1M NaOH, 1 × 100 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (EtOAc) dajući (120 mg) 64% prinos. 1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 7.91 (m, 2H), 7.66 (d, J = 8 Hz, 1H),
11
7.57 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.33 (m, 6H), 4.07 (t, J = 7 Hz, 2H), 2.45 (p, J = 7 Hz, 2 H), 2.27 (p, J = 7 Hz, 2H).
[0144] U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (480 mg, 0.6 mmol) u DME (11 mL) / Na2CO3(2M, 2.8 mL) dodaju se 3-karboksi-fenilboronska kiselina (470 mg, 2.8 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(93 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 100 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M HCl (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM 1% AcOH) dajući 330 mg materijala mkoji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ove kiseline (110 mg, 0.37 mmol) rastvoren u NMP (2 mL) dodaju se DIPEA (130 μL, 0.74 mmol) i morfolin (32 μL, 0.37 mmol). Pošto se mešavina homogenizuje doda se HATU (140 mg, 0.37 mmol) i reakcija se ostavi da se meša. Posle 1 sata na RT reakcija se razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i vode. Organska faza se ispere kiselinom (1 M HCl, 1 × 100 mL), bazom (1M NaOH, 1 × 100 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50-100% EtOAc u heks.) dajući (40 mg) 29% prinos. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.67 (m, 2H), 7.52 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.35 (t, J = 7 Hz, 4H), 3.81 (m, br, 4H), 3.65 (m, br, 2H), 3.49 (m, br, 2H), 2.54 (p, J = 7 Hz, 2H).
[0145] U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (480 mg, 0.6 mmol) u DME (11 mL) / Na2CO3(2M, 2.8 mL) dodaju se 3-karboksi-fenilboronska kiselina (470 mg, 2.8 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(93 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 100 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M HCl (150 mL) i
11
izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM 1% AcOH) dajući 330 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ove kiseline (165 mg, 0.56 mmol) rastvoren u NMP (2 mL) dodaju se DIPEA (300 μL, 1.7 mmol) i azetidin hidrohlorid (55 mg, 0.59 mmol). Pošto se mešavina homogenizuje doda se HATU (213 mg, 0.56 mmol) i reakcija se ostavi da se meša. Posle 1 sata na RT reakcija se razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i vode. Organska faza se ispere kiselinom (1 M HCl, 1 × 100 mL), bazom (1M NaOH, 1 × 100 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (EtOAc) dajući (120 mg) 64% prinos. 1H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 7.91 (m, 2H), 7.66 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.33 (m, 6H), 4.07 (t, J = 7 Hz, 2H), 2.45 (p, J = 7 Hz, 2 H), 2.27 (p, J = 7 Hz, 2H).
[0146] U rastvor 4-(azetidin-1-il)-6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (480 mg, 0.6 mmol) u DME (11 mL) / Na2CO3(2M, 2.8 mL) dodaju se 3-karboksi-fenilboronska kiselina (470 mg, 2.8 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(93 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 100 °C O/N. Reakcija se završava izlivanjem u 1 M HCl (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (DCM 1% AcOH) dajući 330 mg materijala koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ove kiseline (165 mg, 0.56 mmol) rastvoren u NMP (2 mL) dodaju se DIPEA (300 μL, 1.7 mmol) i 3-hidroksiazetidin hidrohlorid (64 mg, 0.59 mmol). Pošto se mešavina homogenizuje doda se HATU (212 mg, 0.56 mmol) i reakcija se ostavi da se meša. Posle 1 sata na RT reakcija se razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i vode. Organska faza se ispere kiselinom (1 M HCl, 1 × 100 mL), bazom (1M NaOH, 1 × 100 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (EtOAc) dajući (60 mg) 30% prinos.<1>H NMR (500 MHz, , DMSOD6) δ = 7.89 (m, 2H), 7.67 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.50 (m 2H), 4.29 (m, 5H), 4.08 (m, 1H), 3.80 (dd, J = 10 Hz, 2 Hz, 1H), 2.45 (p, J = 7 Hz, 2H).
11
[0147] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.3010 g, 0.895 mmol) i 3-acetilfenilboronska kiselina (0.1542 g, 0.940 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.1 mL) i 2M Na2CO3(1.4 mL, 2.69 mmol), posle čega sledi Pd(PPh3)4(0.0518 g, 0.0448 mmol). Epruveta se zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (10 mL) i ohladi na 0 °C. MeMgBr (1.2 mL, 1.0 M rastvor u Bu2O) doda se u kapima i reakcija se zatim ostavi da se polako zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Ova mešavina se onda ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Ulje se prečisti fleš hromatografijom (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0841 g (24% prinos, 2 koraka) TRV-1445. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.75 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.25-7.24 (m, 3H), 7.02 (t, J = 7 Hz, 2H), 6.38 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.18 (s, 3H), 1.78 (s, 1H), 1.64 (s, 6H).
[0148] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (0.3207 g, 0.954 mmol) i 3-bromofenilboronska kiselina (0.164 g, 1.00 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.1 mL) i 2M Na2CO3
11
(1.4 mL, 2.86 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0551 g, 0.0477 mmol). Epruveta se zatim hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Sirovo ulje se prečisti fleš hromatografijom (5% EtOAc / heksan) da se dobije 0.3037 g (77% prinos) odgovarajućeg aril bromida. Ovaj aril bromid (0.3037 g, 0.74 mmol) se rastvori u THF (7.5 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se doda nBuLi (0.39 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu). Rastvor se meša 30 minuta na ovoj temperaturi i onda se u kapima doda oksetan-3-on (0.0692 g, 0.962 mmol) u THF (1 mL). Rastvor se zatim meša i ostavi se da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se ohladi na 0 °C i gasi se zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju u sirovo ulje. Ulje se zatim prečisti fleš hromatografijom (45% EtOAc / heksan) dajući 0.0587 g (19% prinos) TRV-1446.1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.83 (s, 1H), 7.70 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.53 (t, J = 10 Hz, 1H), 7.25-7.24 (m, 3H), 7.02 (t, J = 10 Hz, 2H), 6.36 (s, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.96 (s, 4H), 3.18 (s, 3H), 2.62 (s, 1H).
[0149] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ol (0.500 g, 1.85 mmol) se rastvori u NMP (2 mL) i ohladi na 0 °C. NaH (0.096 g, 2.4 mmol) se onda doda u porcijama i mešanje se nastavi dok ne prestane stvaranje mehurića, kada se doda 2-bromopropan (0.19 mL, 2.0 mmol). Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Mešavina se tada ponovo ohladi na 0 °C i dodaju se NaH (0.192 g, 4.8 mmol), 2-bromopropan (1.8 mL, 19 mmol) i NaI (1 ekv.). Reakcija se zagreva na 50 °C preko noći. Mešavina se tada ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom NH4Cl (vod.). Mešavina se zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x) zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi izopropil etar. Ovaj etar (0.1942 g, 0.622 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.0979 g, 1.94 mmol) sakupe se u
11
epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (1.4 mL) i 2M Na2CO3(0.93 mL, 1.87 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0359 g, 0.0311 mmol). Epruveta se zatim hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Sirovo ulje (0.1047 g, 0.31 mmol) se rastvori u THF (1.0 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.092 mL, 0.62 mmol), što je praćeno dodavanjem TBAF (0.03 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta, zatim se ponovo ohladi na 0 °C. TBAF (1.0 mL, 1.0 M rastvor u THF) se doda i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se gasi zasićenim rastvorom soli i zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20% EtOAc / heksan) da se dobije 0.073 g (58% prinos tokom 3 koraka) TRV-1447.1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.71 (s, 1H), 7.65 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.54-7.50 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.13-5.12 (m, 1H), 4.60-4.55 (m, 3H), 4.16-4.14 (m, 2H), 3.70 (sept, J = 5 Hz, 1H), 2.71 (s, 1H), 1.21 (d, J = 5 Hz, 6H).
[0150] U rastvor 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (396 mg, 1.7 mmol) u NMP (3 mL) u 4-dramskoj fioli, dodaju se 3-hidroksipirolidin hidrohlorid (230 mg, 1.83 mmol) i trietilamin (710 μL, 5.1 mmol). Poklopac se dobro zatvori i reakcija se greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću EtOAc (60 mL) i ispiranjem pomoću 1M HCl (3 × 20 mL) i zasićenog rastvora soli (1 × 20 mL). Organska faza se suši pomoću MgSO4, filtrira i koncentruje u vakuumu. Sirovi anilin se koristi bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor anilina (820 mg, 2.9 mmol) u DME (12 mL) / Na2CO3(2M, 4.4 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (645 mg, 4.3 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(110 mg). Flakon se zatim spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 110 °C O/N. Reakcija se završava
12
izlivanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(EtOAc) dajući 680 mg materijala koji se koristi kao takav. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.11 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.42 (m, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.65 (d, J = 6 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.11 (m, 1H). U rastvor koji se meša aldehida (680 mg, 2.2 mmol) i Rupertovog reagensa (937 mg, 6.6 mmol) u DCM (20 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50% EtOAc u heks.) dajući 380 mg (38% prinos) TRV-1448, 1:1:1:1 mešavinu dijastereomera zbog postojanja dva hiralna centra. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.66 (dt J = 7Hz, 2 Hz, 2H), 7.51 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.1 (m, 1H), 4.7 (s br, 1H), 3.96 (m, 4H), 2.81 (d, J = 3 Hz, 1H), 2.20 (m, 2H), 1.75 (d, J = 3 Hz, 1H).
[0151] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3765 g, 1.35 mmol), etil pirolidin-2-karboksilat hidro hlorid (0.2677 g, 1.49 mmol) i DIPEA (0.59 mL, 3.38 mmol) rastvore se u NMP (1.8 mL) pod argonom i mešaju u zatvorenoj epruveti na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija se razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (5 ×), 1 N HCl (vod.), zasićenog rastvora NaHCO3(vod.) i zasićenog rastvora soli pre sušenja pomoću Na2SO4, filtriranja i koncentrovanja da se dobije 0.1756 g (38% prinos) sirovog materijala. Anilin (0.4346 g, 1.28 mmol) se zatim rastvori u THF (12 mL) i ohladi na 0°C. MeMgBr (3.2 mL, 1.0 M rastvor u Bu2O) doda se u kapima i reakcija se ostavi da se polako zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi pomoću NH4Cl (vod.) i zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ulje se zatim prečisti fleš hromatografijom (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1293 g (31% prinos) tercijarnog alkohola. Tercijarni alkohol (0.1293 g, 0.316 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.0624 g, 0.416 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (1.0 mL) i 2M Na2CO3(0.6 mL, 1.19 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0229 g, 0.0198 mmol). Epruveta se zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (3 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.12 mL, 0.792 mmol), što je praćeno dodavanjem TBAF (0.05 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se onda meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C. TBAF (1.4 mL, 1.0 M rastvor u THF) se doda i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Mešavina se gasi zasićenim rastvorom soli i zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečišćava fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.0748 g (45% prinos tokom 2 koraka) TRV-1449. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.73 (s, 1H), 7.67-7.65 (m, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 5.12-5.10 (m, 1H), 4.92 (d, J = 5 Hz, 1H), 3.99-3.95 (m, 1H), 3.73-3.68 (m, 1H), 2.83 (s, 1H), 2.77-2.21 (m, 1H), 2.11-2.02 (m, 3H), 1.82 (s, 1H), 1.31 (s, 3H), 1.24 (s, 3H).
[0152] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (2.013 g, 7.24 mmol) i (S)-etil pirolidin-2-karboksilat hidrohloridna so (1.43 g, 7.96 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom u tri ciklusa. Tada se dodaju NMP (10 mL) i DIPEA (3.5 mL, 19.9 mmol) i epruveta se zatvori i greje na 50 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Sirovo ulje se zatim prečišćava fleš hromatografijom na koloni (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.6105 g (25% prinos) anilina. Anilin (1.696 g, 4.9 mmol) se rastvori u DCM (20 mL) i ohladi na -78 °C. DIBAL (12.5 mL, 1.0 M rastvor u heksanima) se doda u kapima i zatim se reakcija ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi pomoću MeOH i zatim se doda Na2SO4i mešavina se meša 30 minuta pre nego što se filtrira kroz celit. Organska faza se razblaži pomoću EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i organski sloj se ispere pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) dajući 1.294 g (87% prinos) primarnog alkohola. Ovaj alkohol (0.2926 g, 0.98 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.1544 g, 1.03 mmol) sakupe se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Onda se dodaju DME (2.2 mL) i 2M Na2CO3(1.5 mL, 2.94 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0566 g, 0.049 mmol). Epruveta se zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (10 mL) i ohladi na 0 °C. CF3TMS (0.29 mL, 1.96 mmol) se doda, što je praćeno dodavanjem TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se onda meša 60 minuta, zatim se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se zatim ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečišćava fleš hromatografijom na koloni (35% EtOAc / heksan) da se dobije 0.2158 g (56% prinos, 2 koraka) TRV-1450. 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.87 (s, 1H), 7.79 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.57-7.54 (m, 2H), 7.21 (s, 1H), 6.96 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.34 (t, J = 5 Hz, 1H), 5.29-5.25 (m, 1H), 4.91-4.89 (m, 1H), 4.55 (br s, 1H), 3.82-3.81 (m, 1H), 3.58-3.57 (m, 3H), 2.12-2.11 (m, 2H), 2.02-1.97 (m, 2H).
12
[0153] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-karboksilna kiselina (1.5 g, 5 mmol) rastvori se u THF (50 mL) i ohladi na 0 °C. Ovome se doda BH3-THF (10 mL, 10 mmol). Reakcija se ostavi da dostigne sobnu temperaturu preko noći. Sledećeg dana reakcija se gasi pomoću AcOH i ekstrahuje u EtOAc. Organski sloj se ispira 1 M NaOH dok ispirci ne ostanu litmus plavi i zatim koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2i prečisti fleš hromatografijom na koloni (3:2 heks.:EtOAc) dajući 800 mg primarnog alkohola (56% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.05 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.11 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.85 (m, 4H), 3.00 (m, 1H). U rastvor koji se meša alkohola (500 mg, 1.76 mmol) u DCM (20 mL) doda se Dess-Martinov perjodan (1.1 g, 2.64 mmol) i rastvor se ostavi da se meša 1 sat. Tada se reakcija razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i ispere natrijum karbonatom (zas.).Organski sloj se suši pomoću MgSO4, i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(DCM) dajući 420 mg (1.49 mmol, 84% prinos) aldehida. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 9.96 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.47 (m, 4H), 3.7 (m, 1H). U rastvor koji se meša na 0 °C ovog aldehida (420 mg, 1.5 mmol) u THF (10 mL) doda se metilmagnezijum bromid (1M, 1.8 mL). Posle 10 min na sniženoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 1 sata reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i pažljivo se doda zasićeni rastvor NH4Cl. Reakciona mešavina se zatim razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i faze se razdvoje. Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(4 g) i podvrgne fleš hromatografiji na gradijentu (0-2% MeOH u DCM) da se dobije 380 mg (1.27 mmol, 85% prinos) sekundarnog alkohola. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.18 (s, 1H), 5.898 (s, 1H), 4.36-4.08 (m, 5H), 2.85 (m, 1H), 1.25 (d, 3H). U rastvor sekundarnog alkohola (380 mg, 1.28 mmol) u DME (8 mL) / Na2CO3(2 M, 1.9 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (286 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(70 mg). Flakon se tada spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi razblaživanjem pomoću 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(50% EtOAc u heks.) da se dobije 356 mg materijala koji se koristi kao takav. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.1 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.63 (d J = 7 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.40 (m, 2H), 4.27 (m, 1H), 4.15-4.05 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6 Hz, 3H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (356 mg, 1.1 mmol) ) i Rupertovog reagensa (488 μL, 3.3 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL).
U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (20 - 40% EtOAc u heks.) dajući 100 mg (23% prinos) TRV-1451, 1:1:1:1 mešavina dijastereomera, zbog postojanja dva hiralna centra.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (s, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.24(m, 1H), 4.10 (m, 2H), 2.85 (m, 1H), 2.74 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6 Hz, 3H).
[0154] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (2.013 g, 7.24 mmol) i (S)-etil pirolidin-2-karboksilat hidrohloridna so (1.43 g, 7.96 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom u tri ciklusa. NMP (10 mL) i DIPEA (3.5 mL, 19.9 mmol) se tada dodaju i epruveta se zatvori i greje na 50 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Sirovo ulje se zatim prečišćava fleš hromatografijom na koloni (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.6105 g (25% prinos) anilina. Anilin (1.696 g, 4.9 mmol) se rastvori u DCM (20 mL) i ohladi na -78 °C. DIBAL (12.5 mL, 1.0 M rastvor u heksanima) se doda u kapima i zatim se reakcija ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi pomoću MeOH i zatim se doda Na2SO4i mešavina se meša 30 minuta pre nego što se filtrira kroz celit. Organska faza se razblaži pomoću EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i organski sloj se ispere pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) dajući 1.294 g (87% prinos) primarnog alkohola. Primarni alkohol (0.9956 g, 3.34 mmol) se rastvori u DCM (100 ml) i doda se DMP (2.1249 g, 5.0 mmol). Reakcija se meša 2 sata i onda gasi zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.) i doda se Na2SO4(8.0 g) u višku i mešavina se meša dok se sve čvrste supstance ne rastvore. Mešavina se onda ekstrahuje korišćenjem DCM i kombinovani organski sloj se suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje.
12
Prečišćavanje (20% EtOAc / heksan, kolona) daje 0.6471 g (65% prinos) aldehida. Ovaj aldehid (0.200 g, 0.675 mmol) i pirolidin (0.06 mL, 0.743 mmol) rastvore se u DCM (3.1 mL) i zatim tretiraju pomoću NaBH(OAc)3(0.2003 g, 0.945 mmol) i mešavina se meša 2 sata. Rastvor se ohladi na 0 °C i gasi 1N NaOH. Mešavina se zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi amin. Ovaj amin i 3-formilfenilboronska kiselina (0.1063 g, 0.709 mmol) se sakupe u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). DME (1.5 mL) i 2M Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol) se onda dodaju, što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0389 g, 0.033 mmol). Epruveta se tada zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Ovo sirovo ulje se tada rastvori u THF (3 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.20 mL, 1.35 mmol), zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.1537 g (51% prinos) TRV-1452. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.76-7.74 (m, 2H), 7.68-7.65 (m, 2H), 7.51-7.47 (m, 4H), 7.08 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 6.21 (s, 1H), 5.11-5.05 (m, 2H), 64.65 (br s, 1H), 4.52 (br s, 1H), 3.94-3.89 (m, 2H), 3.65-3.59 (m, 2H), 2.70-2.52 (m, 12 H), 2.28-2.25 (m, 2H), 2.14-2.05 (m, 6H), 1.81 (br s, 8H).
[0155] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (1.00 g, 2.97 mmol) i 3-karboksifenilboronska kiselina (0.5176 g, 3.12 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3x). DME (8.9 mL) i 2M Na2CO3(6.0 mL, 11.9
12
mmol) se zatim dodaju, posle čega sledi dodavanje Pd(PPh3)4(0.1733 g, 0.15 mmol). Epruveta se zatim zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi materijal. Ovaj materijal se prečišćava na koloni, 5% MeOH / DCM, da se dobije 1.0873 g (97% prinos, 90% hemijska čistoća) kiseline. Mešavina kiseline (0.200 g, 0.529 mmol), ciklopropilamina (0.04 mL, 0.529 mmol) i TEA (0.18 mL, 1.32 mmol) meša se u EtOAc (6 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Rastvor T3P (0.4040 g, 50% tež./tež. u EtOAc) doda se u kapima. Kada se završi sa dodavanjem reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se tada gasi vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se tada prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksan) dajući 0.1109 g (50% prinos) TRV-1453.<1>H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 8.01 (s, 1H), 7.72 (dd, J = 8, 1.6 Hz, 2H), 7.51 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.26-7.23 (m, 3H), 7.02 (t, J = 8 Hz, 2H), 6.35 (s, 1H), 6.32 (br s, 1H), 5.13 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.94-2.92 (m, 1H), 0.92-0.85 (m, 2H), 0.67-0.64 (m, 2H).
[0156] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (1.00 g, 2.97 mmol) i 3-karboksifenilboronska kiselina (0.5176 g, 3.12 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3x). DME (8.9 mL) i 2M Na2CO3(6.0 mL, 11.9 mmol) se zatim dodaju, posle čega sledi Pd(PPh3)4(0.1733 g, 0.15 mmol). Epruveta se zatim zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi materijal. Ovo se prečišćava na koloni, 5% MeOH / DCM, da se dobije 1.0873 g (97% prinos, 90% hemijska čistoća) kiseline. Mešavina kiseline (0.200 g, 0.529 mmol), morfolina (0.05 mL, 0.529 mmol) i TEA
12
(0.18 mL, 1.32 mmol) meša se u EtOAc (6 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Rastvor T3P (0.4040 g, 50% tež./tež. u EtOAc) doda se u kapima. Kada se završi sa dodavanjem reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se tada gasi vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (3 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se tada prečisti hromatografijom (65% EtOAc / heksan) dajući 0.1331 g (56% prinos) TRV-1454.<1>H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.67 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.52 (t, J = 10 Hz, 1H), 7.44-7.41 (m, 2H), 7.26-7.23 (m, 2H), 7.02 (t, J = 10 Hz, 2H), 6.33 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 3.81 (br s, 4H), 3.63 (br s, 2H), 3.48 (br s, 2H), 3.17 (s, 3H).
[0157] U rastvor koji se meša (1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)metanola (500 mg, 1.76 mmol) u DCM (20 mL) doda se Dess-Martinov perjodan (1.1 g, 2.64 mmol) i rastvor se ostavi da se meša 1 sat. Tada se reakcija razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i ispere natrijum karbonatom (zas.). Organski sloj se osuši pomoću MgSO4, i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(DCM) da se dobije 420 mg (1.49 mmol, 84% prinos) aldehida. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 9.96 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.47 (m, 4H), 3.7 (m, 1H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (316 mg, 1.1 mmol) u DCM (5 mL) doda se morfolin (105 μL, 1.21 mmol), što je praćeno dodavanjem natrijum triacetoksiborohidrida (326 mg, 1.54 mmol). Kada se misli da je reakcija završena (prati se pomoću TLC), ona se razblaži korišćenjem DCM (100 mL) i ispere vodom (50 mL), natrijum hidroksidom (1M, 50 mL), zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu da se dobije 406 mg amina. Materijal se koristi bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.16 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.39 (m 2H), 3.97 (m, 2H), 3.70 (m, 4H), 3.05 (m, 1H), 2.68 (d, J = 8 Hz, 2H), 2.45 (m, 4H). U rastvor ovog amina (406 mg, 1.15 mmol) u DME (7 mL) / Na2CO3(2M, 1.7 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (259 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(60 mg). Flakon se tada spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi sipanjem u 1 M NaOH (150 mL) i
12
izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(50% acetona u EtOAc) da se dobije 380 mg (1 mmol, 85% prinos) aldehida koji se koristi kao takav.1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.1 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.66 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.04 (m, 2H), 3.72 (t, J = 4 Hz, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.72 (d, J = 7 Hz, 2H), 2.47 (m, 4H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (380 mg, 1.0 mmol) i Rupertovog reagensa (220 mL, 1.5 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (80% EtOAc, 2% TEA, balans heks.) dajući 100 mg (22% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (s, 1H), 7.65 (dm, J = 8Hz, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.13 (q, J = 5 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.01(m, 2H), 3.72 (t, J = 6 Hz, 4H), 3.09 (m, 1H), 2.92 (s, br, 1H), 2.71 (d, j = 8 Hz, 2H), 2.47 (m, 4H).
[0158] U rastvor koji se meša 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola (280 mg, 1.04 mmol) u DCM (10 mL) doda se Dess-Martinov reagens (Oakwood) (571 mg, 1.3 mmol) rastvoren u DCM (4 mL). Posle 1 sata reakcija postaje zamućena i precipitat se formira. Materijal se sipa u 1 M NaOH i ekstrahuje pomoću TBME dajući odgovarajući keton. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.40 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.10 (s, 4H). U rastvor koji se meša ketona (226 mg, 0.8 mmol) u DCM (4 mL) dodaju se pirolidin (75 μL, 0.9 mmol), glacijalna sirćetna kiselina (45 μL, 0.9 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (250 mg, 1.26 mmol). Kada se misli da je reakcija gotova (TLC) ona se razblaži korišćenjem EtOAc (100 mL) i ispere natrijum hidroksidom (1M vod.). Organska faza se zatim ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi amin se prečisti fleš hromatografijom (EtOAc) dajući 216 mg (0.7 mmol, 79% prinos) materijala.<1>H NMR (500
12
MHz, CDCl3) δ = 7.18 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 3.53 (m, 1H), 2.57 (m, 4H), 1.58 (m, 4H). U rastvor ovog amina (216 mg, 0.7 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(2M, 1.05 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (158 mg, 1.05 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(60 mg). Flakon se tada spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi sipanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(EtOAc 1% MeOH) dajući 212 mg aldehida koji se koristi kao takav.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.1 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.63 (m 1H), 7.17 (s, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.43 (m, 2H), 4.24 (m, 2H), 3.53 (m, 1H), 2.58 (m, 4H), 1.85 (m, 4H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (212 mg, 0.6 mmol) i Rupertovog reagensa (266 μL, 1.8 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2% MeOH u DCM) dajući 16 mg (6.2% prinos). 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.89 (s, 1H), 7.81 (dm, J = 8 Hz, 1H), 7.56 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 6.96 (d, J = 6 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.28 (m 1H), 4.38 (m, 2H), 4.16 (m, 2H), 3.52 (m, 1H), 2.51 (m, 4H), 1.73 (m, 4H).
[0159] U rastvor koji se meša (1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)metanola (500 mg, 1.76 mmol) u DCM (20 mL) doda se Dess-Martinov perjodan (1.1 g, 2.64 mmol) i rastvor se ostavi da se meša 1 sat. Tada se reakcija razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i ispere natrijum karbonatom (zas.). Organski sloj se suši pomoću MgSO4, i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(DCM) dajući 420 mg (1.49 mmol, 84% prinos) aldehida.1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 9.96 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.47 (m, 4H), 3.7 (m, 1H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (316 mg,
1
1.1 mmol) u DCM (5 mL) doda se pirolidin (118 μL, 1.45 mmol) što je praćeno dodavanjem natrijum triacetoksiborohidrida (385 mg, 1.82 mmol). Kada se misli da je reakcija završena (što se prati preko TLC), razblaži se pomoću DCM (100 mL) i ispere vodom (50 mL), natrijum hidroksidom (1M, 50 mL), zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu da se dobije 425 mg. Materijal se koristi bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.14 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.40 (m, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.04 (m, 1H), 2.76 (d, J = 8 Hz, 2H), 2.51 (m, 4H), 1.79 (m, 4H). U rastvor amina (425 mg, 1.26 mmol) u DME (8 mL) / Na2CO3(2M, 1.9 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (283 mg, 1.9 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(66 mg). Flakon se tada spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi sipanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(50% acetona u EtOAc) da se dobije 274 mg (0.75 mmol, 75% prinos) aldehida koji se koristi kao takav. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 10.10 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8 Hz, 1H), 717 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.10 (m, 1H), 2.81(d, J = 8 Hz, 2H), 2.54 (m, 4H), 1.80 (m, 4H). U rastvor koji se meša ovog aldehida (274 mg, 0.75 mmol) i Rupertovog reagensa (166 μL, 1.1 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.1 mL, 1 M THF, 0.1 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (50% EtOAc, 49% heks, 1% TEA) dajući 70 mg (22% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-D6) δ = 7.88 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.59 (dm, J = 7 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.96 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.28 (m, 1H),4.38 (m, 2H), 3.97 (m, 2H), 3.00 (m, 1H), 2.74 (d, J = 7 Hz, 2H), 2.45 (m, 4H), 1.68 (m, 4H).
1 1
[0160] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (2.013 g, 7.24 mmol) i (S)-etil pirolidin-2-karboksilat hidrohloridna so (1.43 g, 7.96 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom u tri ciklusa. NMP (10 mL) i DIPEA (3.5 mL, 19.9 mmol) se zatim dodaju, i epruveta se zatvori i greje na 50 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Sirovo ulje se prečišćava fleš hromatografijom na koloni (15% EtOAc / heksan) da se dobije 0.6105 g (25% prinos) anilina. Anilin (1.696 g, 4.9 mmol) se rastvori u DCM (20 mL) (20 mL) i ohladi na -78 °C. DIBAL (12.5 mL, 1.0 M rastvor u heksanima) se doda u kapima i zatim se reakcija ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi pomoću MeOH i zatim se doda Na2SO4i mešavina se meša 30 minuta pre nego što se filtrira kroz celit. Organska faza se razblaži pomoću EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i organski sloj se ispere pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suši (Na2SO4), filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (30% EtOAc / heksan) dajući 1.294 g (87% prinos) primarnog alkohola. Primarni alkohol (0.9956 g, 3.34 mmol) se rastvori u DCM (100 ml) i doda se DMP (2.1249 g, 5.0 mmol). Reakcija se meša 2 sata i onda gasi zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.) i doda se Na2SO4(8.0 g) u višku i mešavina se meša dok se sve čvrste supstance ne rastvore. Ova mešavina se onda ekstrahuje pomoću DCM i kombinovani organski slojevi se suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Prečišćavanje (20% EtOAc / hekssan, kolona) daje 0.6471 g (65% prinos) aldehida. Ovaj aldehid (0.206 g, 0.696 mmol) i ciklobutilamin hidrohlorid (0.0794 g, 0.738 mmol) se rastvore u metanolu (3 mL) i TEA (0.19 mL, 1.39 mmol) se doda. Ovaj materijal se meša 24 sata i zatim se ohladi na 0 °C. U ovu mešavinu se zatim doda NaBH4(0.0685 g, 1.81 mmol) u porcijama. Mešavina se meša 60 minuta i zatim gasi pomoću 1N NaOH (vod.). Mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc (3 ×) i kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi amin. U rastvor ovog amina u THF (5 mL) na 0 °C doda se TEA (0.19 mL, 1.39 mmol), DMAP (kristal) i zatim BOC2O (0.1822 g, .835 mmol). Reakcija se meša na 0 °C uz praćenje pomoću TLC. Zatim se gasi korišćenjem H2O i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi karbamat. Ovaj karbamat i 3-formilfenilboronska kiselina (0.1094 g, 0.73 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). DME (1.6 mL) i 2M Na2CO3(1.1 mL, 2.09 mmol) se tada dodaju posle
1 2
čega sledi Pd(PPh3)4(0.0402 g, 0.0348 mmol). Epruveta se tada zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Sirovo ulje se zatim rastvori u THF (4 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.21 mL, 1.39 mmol) što je praćeno dodavanjem TBAF (0.07 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se zatim meša 60 minuta pre ponovnog hlađenja na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije trifluorokarbinol, kao mešavina dijastereomera. Ovaj sirovi materijal se rastvori u DCM (15 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se TFA (0.53 mL) i mešavina se meša 36 sati pre gašenja zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.). Ova mešavina se ekstrahuje korišćenjem DCM (5 ×) i kombinovani organski slojevi se suše pomoću Na2SO4, filtriraju i zatim koncentruju. Ovaj sirovi materijal se prečisti na koloni, 5% MeOH / DCM da se dobije 0.130 g slobodnog amina. Ovaj materijal se zatim rastvori u MeOH na 0 °C i tretira metanolnom HCl u velikom višku. Reakciona mešavina se meša 30 minuta i zatim koncentruje da se proizvede 0.081 g (24% prinos, 8 koraka) TRV-1458. 1H NMR (MeOD, 700 MHz) δ = 7.83 (s, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 5.16 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.78-3.77 (m, 1H), 3.52-3.50 (m, 1H), 3.30 (s, 2H), 3.25 (dd, J = 12.5, 2.1 Hz, 1H), 3.05 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.36-2.20 (m, 9H), 1.99-1.90 (m, 2H).
[0161] 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (1.1509 g, 4.14 mmol) i N-metil-1-(tiazol-2-il)metanamin (4.97 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom u tri ciklusa. NMP (6 mL) i DIPEA (0.94 mL, 5.38 mmol) se zatim dodaju, i epruveta se zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc.
1
Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Sirovo ulje se prečišćava fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1872 g (14% prinos) anilina. Ovaj anilin (0.1872 g, 0.58 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.0899 g, 0.60 mmol) sakupe se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (1.5 mL) i 2M Na2CO3(0.9 mL, 1.74 mmol), [to je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0335 g, 0.029 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i greje na 85 °C preko noći. Posle hlađenja mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu pomoću H2O (5 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (4 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.17 mL, 1.16) što je praćeno dodavanjem TBAF (0.06 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se zatim meša 60 minuta pre ponovnog hlađenja na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni uz korišćenje stepenastog gradijenta (100% DCM do 0.5% MeOH / DCM) da se dobije 0.0339 g (14% prinos, 3 koraka) TRV-1459. 1H NMR (CDC13, 700 MHz) δ = 7.77 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.66 (dt, J = 7.2, 1.6 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.30 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 5.46 (s, 2H), 5.13 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H).
[0162] 6-bromo-N-(4-fluorobenzil)-N-metilbenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-amin (1.00 g, 2.97 mmol) i 3-karboksifenilboronska kiselina (0.5176 g, 3.12 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (8.9 mL) i 2M Na2CO3(6.0 mL, 11.9 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(0.1733 g, 0.15 mmol). Epruveta se onda hermetički
1 4
zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi materijal. On se prečisti na koloni, 5% MeOH / DCM dajući 1.0873 g (97% prinos, 90% hemijske čistoće) kiseline. Mešavina kiseline (0.3774 g, 1.0 mmol), pirolidina (0.083 mL, 1.0 mmol) i TEA (0.35 mL, 2.5 mmol) meša se u EtOAc (10 mL) i hladi u ledenom kupatilu. Rastvor T3P (0.7636 g, 50% tež./tež. u EtOAc) dodaje se u kapima. Kada se završi sa dodavanjem reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature. Reakcija se onda gasi vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu pomoću H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti sukcesivno na dve kolone (75% EtOAc / heksan i zatim 70% EtOAc / heksan) da se dobije 0.1436 g (33% prinos, 96% c.p.) TRV-1460. 1H NMR (CDC13, 500 MHz) δ = 7.75 (s, 1H), 7.65 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.52-7.48 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 3H), 7.01 (t, J = 10 Hz, 2H), 6.35 (s, 1H), 5.12 (s, 2H), 3.68 (t, J = 5 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 5 Hz, 2H), 2.02-1.95 (m, 2H), 1.92-1.86 (m, 2H).
[0163] 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-karboksilna kiselina (1.5 g, 5 mmol) rastvori se u THF (50 mL) i ohladi na 0 °C. U ovo se doda BH3-THF (10 mL, 10 mmol). Reakcija se ostavi da dostigne sobnu temperaturu preko noći. Sledećeg dana reakcija se gasi korišćenjem AcOH i ekstrahuje u EtOAc. Organski sloj se ispere pomoću 1 M NaOH dok ispirci ne ostanu litmus plavi i zatim koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2i prečisti fleš hromatografijom na koloni (3:2 heks.:EtOAc) dajući 800 mg primarnog alkohola (56% prinos). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.05 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.11 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.85 (m, 4H), 3.00 (m, 1H). U rastvor koji se meša alkohola (500 mg, 1.76 mmol) u DCM (20 mL) doda se Dess-Martinov perjodan (1.1 g, 2.64 mmol) i rastvor se ostavi da se meša 1 sat. Tada se reakcija razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i ispere natrijum karbonatom (zas.). Organski sloj se suši pomoću MgSO4, i koncentruje u vakuumu.
1
Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(DCM) dajući 420 mg (1.49 mmol, 84% prinos) aldehida.1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 9.96 (d, J = 2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.47 (m, 4H), 3.7 (m, 1H). U rastvor koji se meša, na 0 °C, ovog aldehida (420 mg, 1.5 mmol) u THF (10 mL) doda se metilmagnezijum bromid (1M, 1.8 mL). Posle 10 min na sniženoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 1 sata reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i oprezno se doda zasićeni rastvor NH4Cl. Onda se reakciona mešavina razblaži pomoću EtOAc (100 mL) i faze se razdvoje. Organska faza se ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se spoji sa SiO2(4 g) i izloži fleš hromatografiji na gradijentu (0-2% MeOH u DCM) da se dobije 380 mg (1.27 mmol, 85% prinos) sekundarnog alkohola. U rastvor sekundarnog alkohola (pribl.190 mg, 0.65 mmol) u THF (5 mL) i ohlađenom na 0 °C doda se NaH 60% u ulju (100 mg, 3 mmol). Kada opadne početno stvaranje mehurića doda se u kapima MeI (200 μL, 3 mmol) i reakciona mešavina se ostavi da dostigne RT. Posle 18 h reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i pažljivo se doda NH4Cl. Reakciona mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc (3 × 50 mL), ispere zasićenim rastvorom soli (1 50 mL) i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(80%DCM u heks.) dajući 160 mg (78% prinos) metil etra. U rastvor metil etra (160 mg, 0.5 mmol) u DME (4 mL) / Na2CO3(2 M, 0.75 mL) dodaju se 3-formil-fenilboronska kiselina (113 mg, 1.5 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(40 mg). Flakon se spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi sipanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(DCM/5% EtOAc) dajući 150 mg aldehida koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša aldehida (150 mg, 0.4 mmol) i Rupertovog reagensa (98 μL, 0.7 mmol) u THF (2 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heksanu) dajući 37 mg (23% prinos) TRV-1461, 1:1:1:1 mešavine dijastereomera, zbog postojanja dva hiralna centra.1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.72 (s, 1H), 7.65 (d, J = 7 Hz, 1 H), 7.52 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.13 (m, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.19 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.55 (p, J = 6 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.71 (s, br, 1H), 1.78 (d, J = 6 Hz, 3H).
1
[0164] U rastvor koji se meša 1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-ola (730 mg, 2.7 mmol) u DCM (10 mL) doda se Dess-Martin reagens (Oakwood) (1.26 g, 2.97 mmol) rastvoren u DCM (10 mL). Posle 1 sata reakcija postaje zamućena i formira se precipitat. Materijal se sipa u 1 M NaOH i ekstrahuje pomoću TBME dajući odgovarajući keton.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 7.40 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.10 (s, 4H). U rastvor koji se meša ketona (300 mg, 1.1 mmol) u DCM (4 mL) dodaju se morfolin (160 μL, 1.23 mmol), glacijalna sirćetna kiselina (65 μL, 1.1 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (360 mg, 1.68 mmol). Kada se misli da je reakcija gotova (TLC) ona se razblaži korišćenjem EtOAc (100 mL) i ispere natrijum hidroksidom (1M vod.). Organska faza se zatim ispere zasićenim rastvorom soli, suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi amin se prečisti fleš hromatografijom (EtOAc) dajući 470 mg (1.4 mmol, 52% prinos materijala. U rastvor ovog amina (470 mg, 1.4 mmol) u DME (5 mL) / Na2CO3(2M, 2 mL) dodaju se 3-formilfenilboronska kiselina (180 mg, 1.05 mmol) i Pd(P(Ph)3)4(80 mg). Flakon se tada spoji sa refluksnim kondenzorom, očisti argonom i greje na 85 °C O/N. Reakcija se završi sipanjem u 1 M NaOH (150 mL) i izolovanjem dobijenih čvrstih supstanci pomoću vakuuma. Sirovi materijal se prečisti propuštanjem kroz SiO2(EtOAc 1% MeOH) dajući 300 mg aldehida koji se koristi kao takav. U rastvor koji se meša ovog aldehida (300 mg, 0.8 mmol) i Rupertovog reagensa (240 μL, 1.6 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C doda se TBAF (0.2 mL, 1 M THF, 0.2 mmol). Posle 30 min na niskoj temperaturi hladno kupatilo se ukloni i reakcija se ostavi da dostigne RT. Posle 3 sata reakcija se koncentruje u vakuumu i flakon se napuni THF (20 mL). U ovo se doda TBAF u višku i reakcija se ostavi da se meša. Kada se deprotekcija završi doda se EtOAc (100 mL) i reakcija se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl, zasićenim rastvorom soli, i zatim suši pomoću MgSO4i koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2% MeOH u DCM) dajući 40 mg (9% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.71 (s, 1H), 7.63 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.13 (m, 1H), 4.41 (t, J = 8 Hz, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.77 (m, 4H), 3.42 (p, J = 6 Hz, 1H), 2.87 (s, široko, 1H), 2.48 (m, 4H).
1
[0165] 6-bromo-4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3366 g, 0.958 mmol) i 2-formiltiofen-4-boronska kiselina (0.1794 g, 1.15 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.1 mL) i 2M Na2CO3(1.4 mL, 2.87 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0554 g, 0.048 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Ovo sirovo ulje se onda rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.21 mL, 1.44 mmol), zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% MeOH / DCM) dajući 0.067 g (15% prinos, 3 koraka) TRV-1463 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 700 MHz) δ = 8.29 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.37 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.52-5.48 (m, 1H), 4.22 (br s, 2H), 3.13 (t, J = 12 Hz, 2 H), 2.59 (br s, 4 H), 2.32-2.30 (m, 1H), 2.02-2.01 (m, 2H), 1.71 (s, 4H), 1.62-1.61 (m, 2H).
1
[0166] 6-bromo-4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.3368 g, 0.958 mmol) i 5-formil-2-tienil-boronska kiselina (0.1793 g, 1.15 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.1 mL) i 2M Na2CO3(1.4 mL, 2.87 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0554 g, 0.048 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Ovo sirovo ulje se onda rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.28 mL, 1.92 mmol), zatim TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% MeOH / DCM). Čistoća posle prvog prolaska kolone nije odgovarajuća tako da se razdvajanje ponavlja pomoću 5% MeOH / DCM kolone da se dobije 0.060 g (14% prinos, 3 koraka) TRV-1464. 1H NMR (DMSO, 700 MHz) δ = 7.77 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.59-5.55 (m, 1H), 4.24 (d, J = 10 Hz, 2H), 3.17 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.60 (br s, 4H), 2.37 (br s, 1H), 2.05-2.02 (m, 2H), 1.72 (br s, 4H), 1.64-1.62 (m, 2H).
[0167] Mešavina dibromobenzofurazana (0.500 g, 1.8 mmol), N1,N1,N3-trimetilpropan-1,3-diamina (0.28 mL, 1.9 mmol) i DIPEA (0.31 mL, 1.8 mmol) u NMP (2 mL) greje se na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Pošto se slojevi razdvoje, vodeni sloj se bazifikuje i ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi anilin. Ovaj materijal se prečisti na koloni, 10% MeOH /
1
DCM, da se dobije 0.3988 g anilina. Ovaj anilin (0.3988 g, 1.27 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.2488 g, 1.66 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.8 mL) i 2M Na2CO3(1.9 mL, 3.8 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(0.074 g, 0.064 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju da se dobije ulje. Ovo sirovo ulje se onda rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.38 mL, 2.54 mmol), zatim TBAF (0.13 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% MeOH / DCM) da se dobije 0.061 g (12% prinos, 2 koraka) TRV-1465. 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.89 (s, 1H), 7.81 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.59-7.53 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.95 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.31-5.25 (m, 1H), 3.92 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.24 (t, J = 10 Hz, 2H), 2.08 (s, 6H), 1.77-1.71 (m, 2H).
[0168] Mešavina dibromobenzofurazana (0.4669 g, 1.68 mmol), N,N-dimetilpiperidin-4-amina (0.2263 g, 1.76 mmol) i DIPEA (0.29 mL, 1.68 mmol) u NMP (3 mL) greje se na 95 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Pošto se slojevi razdvoje, vodeni sloj se bazifikuje i ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi anilin. Ovaj materijal se prečisti na koloni, 5% MeOH / DCM da se dobije 0.2221 g anilina. Ovaj anilin (0.2221 g, 0.68) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.1334 g, 0.89 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom
14
(3 ×). Zatim se dodaju DME (3.0 mL) i 2M Na2CO3(2.0 mL, 4 mmol), praćeno Pd(PPh3)4(0.039 g, 0.034 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se onda rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.20 mL, 1.36 mmol), zatim TBAF (0.07 mL, 1.0 rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (10% MeOH / DCM) da se dobije 0.061 g (24% prinos, 2 koraka) TRV-1466. 1H NMR (DMSO, 700 MHz) δ = 7.90 (s, 1H), 7.83 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 3 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 3 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.30-5.27 (m, 1H), 4.33 (d, J = 7 Hz, 2H), 3.05 (t, J = 14 Hz, 2H), 2.41-2.39 (m, 1H), 2.23 (s, 6H), 1.93 (d, J = 14 Hz, 2H), 1.61-1.54 (m, 2H).
[0169] 6-bromo-4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (1 g, 2.8 mmol) i (2-formilfenil)boronska kiselina (0.554 g, 3.6 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (6 mL) i 2M Na2CO3(4.2 mL, 8.4 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.160 g, 0.14 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju, koncentruju i podvrgavaju fleš hromatografiji na koloni (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.95 g 2-(7-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida. Ovaj aldehid se onda rastvori u THF (15 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.738 mL, 5.06 mmol), zatim TBAF (0.25 mL, 1.0 M rastvor u THF). Hladno kupatilo se ukloni i reakcija meša 30 min. Reakcija se tada ponovo ohladi i doda se TBAF (0.30 mL, 1.0 M rastvor u THF) i hladno kupatilo se ukloni. Reakcija se tada meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.550 g (44% prinos, 2 koraka) TRV-1467 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58-7.48 (m, 2H), 7.36 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H) 6.91 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.13-5.11 (m, 1H), 4.16 (br s, 2H), 3.15- 3.09 (m, 2 H), 2.53-2.49 (m, 4 H), 2.26 (br s, 1H), 1.99-1.97 (m, 2H), 1.68 (s, 4H), 1.59-1.57 (m, 2H).
[0170] 6-bromo-4-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.5 g, 1.4 mmol) i (2-formilfenil) boronska kiselina (0.277 g, 1.8 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (6 mL) i 2M Na2CO3(4.2 mL, 8.4 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.080 g, 0.07 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju, koncentruju i podvrgavaju fleš hromatografiji na koloni (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.53 g 4-(7-(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida. Ovaj aldehid se onda rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.392 mL, 2.8 mmol), zatim TBAF (0.140 mL, 1.0 M rastvor u THF). Hladno kupatilo se ukloni i reakcija se meša 30 min. Reakcija se zatim meša 60 min pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.270 g (43% prinos, 2 koraka) TRV-1468 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.56 (s, 1H), 6.94 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 5.29-5.23 (m, 1H), 4.23 (br s, 2H), 2.49 (brs, 3 H), 2.25 (br s, 1H), 2.01 -1.99 (m, 2H) 1.69 (br s, 4H), 1.61-1.59 (m, 2H).
[0171] Mešavina 4,6-dibromobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (1.6246 g, 5.8 mmol), N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amina (približno 7.6 mmol) i DIPEA (1.1 mL, 5.8 mmol) u NMP (6 mL) greje se na 90 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Pošto se slojevi razdvoje, vodeni sloj se bazifikuje i ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi anilin. Ovaj materijal se prečisti na koloni, 10% MeOH / DCM, da se dobije 0.5651 g anilina. Ovaj anilin (0.5651 g, 1.67 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.3253 g, 2.17 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (3.7 mL) i 2M Na2CO3(2.5 mL, 5 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.0965 g, 0.084 mmol). Epruveta se zatim hermetički zatvori i greje na 100 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se onda isperu vodom (5x), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se zatim rastvori u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.49 mL, 3.34 mmol), zatim TBAF (0.17 mL,, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se zatim meša 60 minuta, zatim se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša se 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli,
14
suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5% MeOH / DCM sa 6 ml NH4OH) da se dobije 0.465 g (64% prinos, 2 koraka) TRV-1469 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 700 MHz) δ = 7.72 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 3 Hz, 1H), 6.21 (s, 1H), 5.05 (q, J = 7 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 7 Hz, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.59 (br s, 6 H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.81 (br s, 4H).
[0172] Mešavina 6-bromo-4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (3.1436 g, 13.4 mmol), 3-azetidinkarboksilne kiseline (1.76 g, 17.4 mmol) i DIPEA (7.0 mL, 40.2 mmol) u NMP (15 mL) greje se na 90 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži korišćenjem EtOAc i 2N HCl. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi materijal. Ovaj materijal se zatim rastvori u EtOAc i ekstrahuje pomoću 2 N NaOH (3x). Kombinovani organski ekstrakti se acidifikuju do pH 1-2 pomoću koncentrovane HCl. Suspenzija se zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući 3.0657 g narandžaste čvrste supstance. Ova sirova mešavina (3.066 g, 10.3 mmol) se rastvori u THF i ohladi na -10 °C uz korišćenje MeOH / ledenog kupatila. 1M rastvor BH3-THF u THF (21 mL, 21 mmol) doda se u kapima, čime nastaje jarkocrveni rastvor. Rastvor se snažno meša 10 minuta i zatim se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se gasi dodavanjem 10 mL AcOH/H2O (1:1 zapr./zapr.) u kapima. Kada opadne efervescencija, mešavina se koncentruje da se ukloni THF. Vodena mešavina se zatim bazifikuje korišćenjem 2N NaOH i ekstrahuje pomoću EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Materijal se prečisti hromatografijom (40-50% EtOAc / heksan) da se dobije 1.942 g primarnog alkohola. Ovaj alkohol (0.9217 g, 3.2 mmol) se suspenduje u DCM (40 mL) i zatim se doda Dess-Martinov reagens (1.789 g, 4.2 mmol) u porcijama i mešavina se meša 2.5 sata. Reakcija se zatim gasi zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.) i viškom Na2S2O3, mešanje se nastavlja dok se čvrste supstance ne rastvore. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću DCM (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.) i zatim suše pomoću MgSO4, pre filtriranja i koncentrovanja rastvora. Sirovi aldehid se zatim prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksan) da se dobije 0.7704 g aldehida. Aldehid (0.7411 g, 2.63 mmol) se rastvori u DCE (10 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Morfolin (0.30 mL, 3.42 mmol) se doda u kapima i reakcija se meša 5 minuta pre nego što se NaBH(OAc)3doda u porcijama, i reakcija se ostavi da se meša preko noći. Reakcija se gasi zasićenim rastvorom NaHCO3i zatim ekstrahuje pomoću DCM. Kombinovani organski ekstrakti se suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (80% EtOAc / heksan) da se dobije 0.7662 g TRV-1470.<1>H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.19 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.41 (br s, 2H), 4.00 (br s, 2H), 3.73 (br s, 4H), 3.09 (s, 1H), 2.71 (s, 2H), 2.48 (br s, 4H).
[0173] TRV-1470 (0.4092 g, 1.16 mmol) i 3-formilfenilboronska kiselina (0.1829 g, 1.22 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Zatim se dodaju DME (2.6 mL) i 2M Na2CO3(1.8 mL, 3.48 mmol), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.067 g, 0.058 mmol). Epruveta se onda hermetički zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se tada isperu vodom (5 ×), zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući ulje. Ovo sirovo ulje se onda rastvori u THF (10 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.34 mL, 2.32 mmol), zatim TBAF (0.12 mL, 1.0 M rastvor u THF). Reakcija se meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša 60 minuta. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se bazifikuje. Vodeni sloj se
14
ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovo ulje. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom na koloni (3% 7 N NH3rastvor u MeOH / DCM) da se dobije 0.125 g TRV 1471 (24% prinos, 2 koraka). 1H NMR (CDC13, 700 MHz) δ = 7.78 (d, J = 7 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 7 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 1H), 6.90 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 5.21 (br s, 1H), 4.42-4.38 (m, 2H), 3.98 (br s, 2H), 3.71 (br s, 4H), 3.09-3.06 (m, 1H), 2.92 (s, 1H), 2.72 (d, J = 7 Hz, 2H), 2.48 (br s, 4H).
[0174] (1-(6-bromobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-il)azetidin-3-il)metanol(1.9573 g, 6.89 mmol) se suspenduje u DCM (85 mL) i doda se Dess- Martin reagens (3.799 g, 8.9 mmol) odjednom i meša dok se potpuno ne potroši polazni materijal, približno 90 minuta. Mešavina se zatim ohladi na ledu i dodaju se zasićeni rasvor NaHCO3(vod.) i Na2S2O3(4.2 g) i meša se do rastvaranja svih čvrstih supstanci. Rastvor se onda ekstrahuje pomoću DCM (3x) i kombinovani organski ekstrakti se isperu zasićenim rastvorom NaHCO3(vod.), suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni (20-100% EtOAc / heksan, gradijent) da se dobije 2.0355 g aldehida. Aldehid se zatim rastvori u DCE (0.28 M rastvor) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se pirolidin (0.20 mL, 2.4 mmol) i meša 5 minuta, posle čega se doda NaHB(OAc)3(0.7630 g, 3.6 mmol) odjednom. Mešavina se ostavi da se zagreje do sobne temperature preko noći. Posle ponovnog hlađenja u ledenom kupatilu, reakcija se gasi zasićenim rastvorom NaHCO3i meša dok ne prestane efervescencija. Ova mešavina se zatim ekstrahuje pomoću DCM (3x). Kombinovani organski slojevi se suše (MgSO4), filtriraju i koncentruje. Na kraju se sirovi materijal prečisti hromatografijom (63-69% MeCN / DCM gradijent sa 1% TEA aditivom) da se dobije TRV-1472. 1H NMR (CDC13, 700 MHz) δ = 7.18 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.13 (s, 1H), 2.87 (br s, 2H), 2.61 (br s, 4H), 1.86 (s, 4H).
14
[0175] TRV-1472 (0.1350 g, 0.40 mmol) rastvori se u THF (10 mL) pod argonom, i ohladi na -78 °C. nBuLi (0.23 mL, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) doda se u kapima i mešavina se meša 20 minuta. Metanol (0.16 mL, 4 mmol) se doda na -78 °C i mešavina se ostavi da se zagreje do 0 °C, kada se gasi zasićenim rastvorom NH4Cl (vod). Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc (3x) i kombinovani organski ekstrakti se isperu korišćenjem H2O, zasićenog rastvora soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (10-100% EtOAc / heksan, gradijent sa 5% TEA aditivom) da se dobije 0.0585 g (57% prinos) TRV-1473 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (CDC13, 700 MHz) δ = 7.21 (dd, J = 8.4, 7.7 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.84 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.42 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.13 (br s, 1H), 2.90 (br s, 2H), 2.62 (br s, 4H), 1.88 (s, 4H).
[0176] TRV-1472 (0.2281 g, 0.68 mmol) i 2-formilbenzenboronska kiselina (0.1070 g, 0.71 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.0 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.6 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0393 g, 0.0034 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi aldehid se prečisti hromatografijom (10-
14
100% EtOAc / heksan, gradijent, 5% TEA aditiv) da se dobije 0.0753 g sirovog materijala. Aldehid se zatim rastvori u THF (5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. U ovaj rastvor se doda CF3TMS (61 μL, 0.415 mmol) i zatim TBAF (∼20 μL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 5 minuta, ledeno kupatilo se ukloni i mešavina se meša do potpune konverzije polaznog materijala, mešavina se ohladi u ledenom kupatilu i gasi pomoću 2N HCl (vod.). Posle 30 minuta, mešavina se bazifikuje korišćenjem 2N NaOH i ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se onda prečisti hromatografijom (63% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.0357 g (40% prinos) TRV-1474. 1H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.80 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.49 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.43-7.41 (m, 1H), 7.29-7.27 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.24 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.47 (br s, 1H), 4.38 (s, 1H), 4.13 (br s, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.15 (br s, 1H), 2.98 (br s, 2H), 2.74 (br s, 4H), 1.91 (br s, 4H).
[0177] TRV-1472 (0.2750 g, 0.82 mmol) i (2,4-dihlorofenil)boronska kiselina (0.1643 g, 0.86 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.8 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0474 g, 0.041mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi aldehid se prečisti hromatografijom (10-100% EtOAc / heksan, gradijent, 5% TEA aditiv) da se dobije 0.1821 g (55% prinos) TRV-1475 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 7.51 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 1.4, 8.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.19 (br s, 1H), 2.95 (br s, 2H), 2.64 (br s, 4H), 1.91 (br s, 4H).
14
[0178] TRV-1472 (0.2707 g, 0.80 mmol) i piridin-3-ilboronska kiselina (0.1033 g, 0.84 mmol)
zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zahedno sa DME (1.8 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0462 g, 0.04 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi aldehid se prečisti hromatografijom (10-100% MeOH / DCM, gradijent, 1% TEA aditiv) da se dobije 0.106 g (40% prinos) TRV-1476 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (CDCl3, 700 MHz) δ = 8.87 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.66 (dd, J = 4.9, 2.1 Hz, 1H), 7.90 (dt, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.4, 4.9 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.19 (br s, 1H), 2.93 (br s, 2H), 2.63 (br s, 4H), 1.89 (br s, 4H).
[0179] TRV-1472 (0.3402, 1.0 mmol) se rastvori u THF (10 mL) i ohladi na -78 °C pod argonom. nBuLi (0.60 mL, 1.16 mmol, 2.0 M rastvor u cikloheksanu) doda se u kapima i dobijeni tamni rastvor se meša 20 minuta pre nego što mu se doda trifluoro Weinrebov amid (0.16 mL, 1.26 mmol). Mešavina se ostavi da se meša preko noći uz zagrevanje do sobne
14
temperature, zatim se ohladi na 0 °C i gasi pomoću 2 N HCl (vod.), uz mešanje 60 minuta. Ova mešavina se zatim bazifikuje dodavanjem 2 N NaOH (vod.) u kapima i zatim ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Materijal se prečisti (10-100% EtOAc/heksan, gradijent i zatim 1-10% MeOH / EtOAc gradijent uz 5% TEA aditiv sve vreme) da se dobije 0.108 g (30% prinos) TRV-1477 u vidu mešavine ketona i hidratisanog ketona. 1H NMR (CDCl3, 700 MHz) keton: δ = 7.77 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.47 (br s, 2H), 4.05 (br s, 2H), 3.13-3.06 (m, 1H), 2.81 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 2.54 (br s, 4H), 1.81-1.78 (m, 4H); hidratisani keton: δ = 7.40 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 4.43-4.38 (m, 2H), 4.01-3.99 (m, 2H), (preostali pikovi se preklapaju sa ketonom); 1H NMR (DMSO, 700 MHz) hidratisani keton: δ = 7.85 (s, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.32 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.88 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.03-2.95 (m, 1H), 2.69 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.44-2.43 (m, 4H), 1.68-1.66 (m, 4H); keton: δ = 7.83 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.42 (br s, 2H), 3.99 (br s, 2H), (preostali pikovi se preklapaju sa hidratisanim ketonom).
[0180] TRV-1472 (0.1584 g, 0.47 mmol) i (3,5-dihlorofenil)boronska kiselina (0.0.0941 g, 0.49 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.71 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.1 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0272 g, 0.024 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% MeOH / DCM) dajući 0.0348 g (18% prinos) TRV-1478.<1>H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.87 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.69 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.38 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.99-3.96 (m, 2H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.71 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.46 (br s, 4H), 1.68 (br s, 4H).
1
[0181] TRV-1472 (0.1987 g, 0.59 mmol) i 3-metilsulfonilfenilboronska kiselina (0.1240 g, 0.62 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.9 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.3 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.034 g, 0.03 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (1-10% MeOH / DCM, gradijent) da se dobije 0.1103 g (45% prinos) TRV-1479. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 8.17 (s, 1H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.68 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.51 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 4.11-4.09 (m, 2H), 3.22 (br s, 1H), 3.12 (s, 3H), 2.98 (br s, 2H), 2.75 (br s, 4H), 1.91 (br s, 4H).
[0182] TRV-1472 (0.2075 g, 0.615 mmol) i 3-acetilbenzenboronska kiselina (0.1059 g, 0.65 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.92 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.4 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.036 g, 0.031 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature,
1 1
mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-10% MeOH / DCM, gradijent) dajući 0.1307 g (56% prinos) TRV-1480.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 8.19 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 4.07-4.04 (m, 2H), 3.15 (br s, 1H), 2.90 (br s, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.64 (br s, 4H), 1.85 (br s, 4H).
[0183] TRV-1472 (0.2009 g, 0.60 mmol) i 2-metilsulfonilfenilboronska kiselina (0.1260 g, 0.63 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.9 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.3 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.034 g, 0.03 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-100% EtOAc / heksan, gradijent, uz 5% TEA) dajući 0.0257 g (10% prinos) TRV-1481. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 8.21 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.68 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.62 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.07 (br s, 2H), 3.23 (br s, 1H), 3.05-3.01 (m, 2H), 2.91 (s, 3H), 2.77 (br s, 4H), 1.93 (br s, 4H).
1 2
[0184] TRV-1472 (0.2039 g, 0.60 mmol) i (4-acetilaminofenil)boronska kiselina (0.1128 g, 0.63 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.9 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.3 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.036 g, 0.03 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-10% MeOH / DCM gradijent, uz 1% TEA) da se dobije 0.1350 g (57% prinos) TV-1482. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.06-4.04 (m, 2H), 3.19 (br s, 1H), 3.00 (br s, 2H), 2.77 (br s, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.93 (br s, 4H).
[0185] TRV-1472 (0.1910 g, 0.57 mmol) i 3,4-dimetoksibenzenboronska kiselina (0.1092 g, 0.60 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.90 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.3 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.034 g, 0.029 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog
1
rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-8% MeOH / DCM) da se dobije 0.0471 g (21% prinos) TRV-1483. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.18 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.20 (br s, 1H), 2.98 (br s, 2H), 2.74 (br s, 4H), 1.92 (br s, 4H).
[0186] TRV-1472 (0.2297 g, 0.68 mmol) i 3-trifluorobenzenboronska kiselina (0.1367 g, 0.72 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.0 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.5 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.039 g, 0.034 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-8% MeOH / DCM) da se dobije 0.0377 g (14% prinos) TRV-1484. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.84 (s, 1H), 7.78 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.59 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.51 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.10 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.22 (br s, 1H), 3.00 (br s, 2H), 2.75 (br s, 4H), 1.92 (br s, 4H).
1 4
[0187] TRV-1472 (0.2067 g, 0.61 mmol) i benzofuran-2-ilboronska kiselina (0.1042 g, 0.64 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.92 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.4 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.035 g, 0.031 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-8% MeOH / DCM) da se dobije 0.1032 g (45% prinos) TRV-1485. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56-7.54 (m, 2H), 7.37-7.33 (m, 1H), 7.28-7.25 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 4.50 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.08 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.16 (br s, 1H), 2.93 (br s, 2H), 2.67 (br s, 4H), 1.88 (br s, 4H).
[0188] TRV-1472 (0.2044 g, 0.61 mmol) i fenilboronska kiselina (0.0776 g, 0.63 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(0.92 mL, 2.0 M, vod. rastvor), zajedno sa DME (1.4 ml). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.036 g, 0.031 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu korišćenjem H2O (3 ×), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (0-8% MeOH / DCM) da se dobije 0.0702 g (34% prinos) TRV-1486. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.62 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.47 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.16 (br s, 1H), 2.94 (br s, 2H), 2.69 (br s, 4H), 1.88 (br s, 4H).
1
[0189] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-(tertbutil)fenil) boronskom kiselinom (139 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Posle oslobađanja od gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 200 mg (85% prinos) TRV-1487 u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.42 (s, 4H), 1.95 (br, s, 4H), 2.76 (br, s, 4H), 3.01 (br, s, 2H), 3.23 (br, s, 1H), 4.08-4.11 (m, 2H), 4.52 (t, J=8.2, 2H), 6.16 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.55 (d, J=8.4, 2H), 7.62 (d, J=8.4, 2H).
[0190] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-metoksi-3-metilfenil) boronskom kiselinom (130 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 190 mg (84% prinos) TRV-1488 u vidu crvenog ulja. 1H
1
NMR (500 MHz, CDCl3) 1.88 (t, J=3.1, 4H), 2.34 (s, 3H), 2.64 (br, s, 4H), 2.90 (d, J=7.4, 2H), 3.13-3.16 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.05-4.08 (m, 2H), 4.50 (t, J=8.2, 2H), 6.11 (s, 1H), 6.95 (d, J=8.4, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.49 (d-d, J=8.4, J=2.2, 1H).
[0191] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-izopropilfenil) boronskom kiselinom (128 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 165 mg (73% prinos) TRV-1489 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.35 (d, J=7.0, 6H), 1.88 (t, J=3.1, 4H), 2.63 (br, s, 4H), 2.89 (d, J=7.5, 2H), 3.01-3.05 (m, 1H), 3.12-3.18 (m, 1H), 4.05-4.08 (m, 2H), 4.50 (t, J=8.2, 2H), 6.13 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.38 (d, J=8.2, 2H), 7.60 (d, J=8.2, 2H).
[0192] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (3-hloro-4-metilfenil) boronskom kiselinom (133 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se
1
proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 165 mg (73% prinos) TRV-1490 u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.88 (t, J=3.1, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.64 (br, s, 4H), 2.90 (d, J=7.4, 2H), 3.15-3.18 (m, 1H), 4.06-4.09 (m, 2H), 4.51 (t, J=8.2, 2H), 6.03 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.36 (d, J=7.9, 1H), 7.45 (d-d, J=7.9, J=1.7, 1H), 7.64 (d, J=1.7, 1H).
[0193] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-fenoksifenil) boronskom kiselinom (167 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 215 mg (84% prinos) TRV-1491 u vidu crvene čvrste supstance. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.97 (br, s, 4H), 2.80 (br, s, 4H), 3.04 (br, s, 2H), 3.5 (br, s, 1H), 4.11-4.13 (m, 2H), 4.54 (t, J=8.2, 2H), 6.12 (s, 1H), 7.12-7.14 (m, 4H), 7.18 (s, 1H), 7.21 (t, J=7.5, 1H),7.44 (t, J=7.8, 2H), 7.63 (d, J=8.6, 2H).
1
[0194] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-fenoksifenil) boronskom kiselinom (145 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 178 mg (74% prinos) TRV-1492 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.98 (br, s, 4H), 2.83 (br, s, 4H), 3.06 (s, 2H), 3.27 (br, s, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.12-4.14 (m, 2H), 4.4 (t, J=8.2, 2H), 6.06 (s, 1H), 7.06 (d, J=8.6, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.55 (d-d, J=8.6, J=2.3, 1H), 7.69 (d, J=2.3, 1H).
[0195] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (3-cijanofenil) boronskom kiselinom (115 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 6 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 159
1
mg (73% prinos) TRV-1493 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.87-1.89 (br, s, 4H), 2.63 (br, s, 4H), 2.90 (d, J=7.5, 2H), 3.15-3.18 (m, 1H), 4.09-4.12 (m, 2H), 4.53 (t, J=8.3, 2H), 5.97 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.63 (t, J=7.8, 1H), 7.74 (d, J=7.7, 1H), 7.88 (d, J=7.9, 1H), 7.93 (s, 1H).
[0196] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-metilnaftalen-1-il) boronskom kiselinom (145 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 204 mg (85% prinos) TRV-1494 u vidu crvene čvrste supstance. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.85-1.86 (m, 4H), 2.61 (br, s, 4H), 2.81 (s, 3H), 2.89 (d, J=7.4, 2H), 3.11-3.14 (m, 1H), 4.03-4.06 (m, 2H), 4.45-4.48 (m, 2H), 6.01 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.43 (s, 2H), 7.52 (t, J=7.3, J=7.9, 1H), 7.62 (t, J=7.7, J=7.4, 1H), 8.01 (d, J=7.4, 1H), 8.13 (d, J=7.5, 1H).
[0197] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (2-(trifluorometoksi) fenil) boronskom kiselinom (161 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03
1
mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 211 mg (84% prinos) TRV-1495 u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 2.06 (br, s, 4H), 2.97 (br, s, 4H), 3.19 (br, s, 2H), 3.37 (br, s, 1H), 4.12-4.14 (m, 2H), 4.53-4.56 (m, 2H), 6.01 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.42-7.46 (m, 2H), 7.49-7.51 (m, 2H).
[0198] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (6-hloropiridin-3-il) boronskom kiselinom (161 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (6:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 167 mg (75% prinos) TRV-1496 u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 1.92 (br, s, 4H), 2.17 (br, s, 4H), 2.97 (d, J=5.8, 2H), 3.21-3.22 (m, 1H), 4.13 (br, s, 2H), 4.53-4.54 (m, 2H), 5.97 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.49 (d, J=8.1, 1H), 7.92 (d, J=7.8, 1H), 8.69 (s, 1H).
1 1
[0199] Rastvor 3-azeditinkarboksilne kiseline (3.4889 g, 34.5 mmol) u vodi (60 mL) ohladi se u ledenom kupatilu i doda se DIPEA (18 mL, 103.5 mmol). Mešavina se meša 5 minuta i zatim se u kapima doda rastvor 6-bromo-4- fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola 3 (7.4877 g, 34.5 mmol) u THF (60 mL). Reakcija se meša 30 minuta na 0 °C, onda se skloni iz ledenog kupatila i ostavi se da se zagreje do sobne temperature preko noći. Reakcija se razblaži vodom i zatim bazifikuje pomoću 2N NaOH (vod.).Vodeni sloj se zatim ispere korišćenjem DCM (3x) i zatim acidifikuje pomoću 2N HCl (vod.). Dobijeni precipitat se sakupi filtracijom da se dobije 4.8909 grama (48% prinos) fine braon čvrste supstance. Mešavina ovog materijala, pirolidina (1.36 mL, 16.4 mmol) i TEA (5.7 mL, 41 mmol) u THF (140 mL) ohladi se u ledenom kupatilu. U kapima se doda rastvor T3P (12.54 g, 19.7 mmol, 50% tež./tež. u EtOAc) i zatim se reakcija ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se zatim razblaži vodom i ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se zatim isperu vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući 3.4558 g (60% prinos, < 95% c.p.).85 mg ovog materijala prečisti se na koloni, 3% MeOH / DCM. Ovo daje približno 60 mg (71% preuzimanja) fine narandžaste čvrste supstance TRV-1497. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.40 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.45 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 4.35 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.86-3.81 (m, 1H), 3.35-3.30 (m, 4H), 1.90-1.85 (m, 2H), 1.81-1.75 (m, 2H).
[0200] TRV-1497 (0.4031 g, 1.15 mmol) i 3-formilbenzenboronska kiselina (0.1810 g, 1.21 mmol) stave se u epruvetu i epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). Dodaju se DME (2.8
1 2
ml) i Na2CO3(1.7 mL, 3.4 mmol, 2 N vodeni rastvor), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.069 g, 0.06 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i greje na 85 °C preko noći. Reakcija se ohladi i zatim razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3 ×) , zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi aldehid. Ovaj aldehid se rastvori u THF (10 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se CF3TMS (0.19 mL) i zatim katalizator TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor). Posle 30 minuta reakcija se ukloni iz ledenog kupatila i ostavi se da se ugreje do sobne temperature. Kada se, prema TLC, reakcija završi, ponovo se ohladi na 0 °C i doda se 2 N HCl (vod.), meša 40 minuta i onda bazifikuje pomoću 2NNaOH. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.261 g (51% prinos) TRV-1498 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.91 (s, 1H), 783 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.93 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.32-5.26 (m, 1H), 4.51-4.49 (m, 2H), 4.40 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.92-3.86 (m, 1H), 3.39 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.35 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.94-1.88 (m, 2H), 1.84-1.78 (m, 2H).
[0201] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (2-(hidroksimetil) fenil) boronskom kiselinom (119 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 3 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (6:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) dajući 142 mg (64% prinos) TRV-1499 u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.78-1.81 (m, 4H), 1.83-1.87 (m, 1H), 2.51-2.55 (m, 4H), 2.81 (d, J=7.5, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H),3.97-4.01 (m, 2H), 4.42 (t, J=8.3, 2H), 4.67 (s, 2H), 5.84 (s, 1H), 6.95
1
(s, 1H), 7.32 (d-d, J=7.6, J=1.5, 1H), 7.38 (t-d, J=7.5, J=1.5, 1H), 7.45 (t-d, J=7.4, J=1.7, 1H), 7.59 (d, J=8.0, 1H).
[0202] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (2,3-dimetoksifenil) boronskom kiselinom (142 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 2 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:5:100:500 MeOH/ TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 141 mg (72% prinos) TRV-1500 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.79-1.82 (m, 4H), 2.52-2.55 (m, 4H), 2.81 (d, J=7.5, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H),3.68 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.96-4.00 (m, 2H), 4.42 (t, J=8.3, 2H), 6.08 (s, 1H), 6.98-7.00 (m, 2H), 7.11-7.16 (m, 2H).
[0203] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-(metilsulfonil)fenil) boronskom kiselinom (156 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se
1 4
proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (4:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 163 mg (66% prinos) TRV-1501 u vidu crvene čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.79-1.83 (m, 4H), 2.53-2.57 (m, 4H), 2.83 (d, J=7.6, 2H), 3.09-3.13 (m, 1H),4.04-4.08 (m, 2H), 4.49 (t, J=8.4, 2H), 5.98 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.81 (d, J=8.0, 2H), 8.05(d, J=8.3, 1H).
[0204] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-(trifluorometil)fenil) boronskom kiselinom (148 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 205 mg (85% prinos) TRV-1502 u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.80-1.83 (m, 4H), 2.53-2.57 (m, 4H), 2.83 (d, J=7.5, 2H), 3.07-3.13 (m, 1H),4.03-4.07 (m, 2H), 4.48 (t, J=8.3, 2H), 6.00 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.73 (s, 4H).
1
[0205] LDA (6 ml, 12 mmol, 2 M rastvor u THF) doda se u kapima u rastvor koji se meša 1-Boc-4-piperidona (1.99 g, 10 mmol) u THF (30 mL) na -78 °C u atmosferi azota. Posle 20 minuta, u mešavinu se doda THF rastvor (10 ml) N-fenilbis(trifluometansulfonimida) na -78 °C, i viskozni svetložuti rastvor se meša preko noći, a temperatura se pusti da dostigne RT. U mešavinu se doda 30 ml heksana i ispere se zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se osuši i koncentruje. tert-butil 4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (2.02 g, 61%) dobija se hromatografijom (5:95 EtOAc / heksan).
[0206] Flakon sa okruglim dnom napuni se tert-butil 4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (2.02 g, 6.1 mmol), bis(pinakolato)diboronom (2.32 g, 9.15 mmol), kalijum acetatom (1.79 g, 18.3 mmol), i PdCl2(dppf) (223 mg, 0.31 mmol). Pošto se oslobodi gasa, doda se dioksan (15 mL). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 2 h. Posle završetka reakcije, mešavina se ohladi na rt. Doda se 40 ml EtOAc, i reakciona mešavina se ispere vodom 3 puta. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (1:10 EtOAc/ heksan). Dobija se 1.55 g (82%) tert-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata u vidu čvrste supstance.
[0207] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (1.422 g, 4.22 mmol), tert-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (1.500 g, 4.85 mmol), i Pd(PPh3)4(195 mg, 0.169 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (12 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (6 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 2.5 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 50 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 1.80 g (97% prinos) tert-butil 4-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata.
[0208] tert-butil 4-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (1.80 g, 4.09 mmol) meša se u rastvoru DCM/CF3COOH (2:1, 21 ml) 1 sat na 0 °C. Posle završetka, što se proverava pomoću TLC, mešavina se pažljivo neutrališe zasićenim rastvorom K2CO3dok ne prestane oslobađanje gasa na 0 °C. U rastvor se doda 50 ml DCM i mešavina se ispere vodom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Sirovi (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol) se koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
1
[0209] TEA (3.06 ml, 22 mmol) i sirćetni anhidrid (1.04 ml, 11 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola) (250 mg, 0.735 mmol) u THF (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 3 sata. Posle završetka, što se proverava pomoću TLC, reakcija se gasi heksanima/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (6:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1503 (210 mg 75%) u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.77-1.84 (m, 4H), 2.16 (s, 1.28H), 2.19 (s, 1.72H), 2.51-2.56 (m, 4H), 2.57-2.64 (m, 2H), 2.80 (d, J=7.5, 2H), 3.03-3.10 (m, 1H),3.69 (t, J=5.6, 0.85H), 3.83 (t, J=5.8, 1.15H), 3.96-4.00 (m, 2H), 4.17 (d, J=3.0, 0.85H), 4.28 (d, J=2.4, 1.15H), 4.42 (t, J=7.7, 2H), 5.87 (s, 0.43H), 5.90 (s, 0.57H), 6.15 (s, 0.43H), 6.24 (s, 0.57H), 6.90 (s, 0.57H), 6.94 (s, 0.43H).
[0210] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.19 g, 0.56 mmol), (2-fenoksifenil)boronskom kiselinom (0.14 g, 0.67 mmol), i Pd(PPh3)4(0.032 g, 0.028 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (5 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (2% trietilamina i 2% metanola u 5:1 mešavini rastvarača heksan i etil acetat) da se dobije 0.20 g (84% prinos) TRV 1504 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.52 (dt, J1 = 1.51 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 7.38 (dt, J1 = 1.75 Hz, J2 = 7.80 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 8.54 Hz, 2H), 7.24 (t, J = 7.53 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.05 (t, J = 7.40 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 6.03 (s, 1H), 4.32 (t, J = 8.16 Hz, 2H), 3.87 (dd, J1 = 6.12 Hz, J2 = 8.03 Hz,
1
2H), 3.01 (septet, J = 7.28 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.56 - 2.46 (m, 4H), 1.85 - 1.75 (m, 4H).
[0211] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.16 g, 0.48 mmol), (3-hlorofenil)boronskom kiselinom (0.10 g, 0.64 mmol), i Pd(PPh3)4(0.028 g, 0.024 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (5 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (3 mL, 2.0 M, 6.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (2% trietilamina i 2% metanola u 5:1 mešavini rastvarača heksana i etil acetata) da se dobije 0.15 g (85% prinos) TRV 1505 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.60 (s, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.29 Hz, 2H), 4.04 (dd, J1 = 5.90 Hz, J2 = 8.66 Hz, 2H), 3.10 (septet, J = 6.97 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.59 - 2.51 (m, 4H), 1.86 - 1.78 (m, 4H).
[0212] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (3,5-dimetilfenil)boronskom kiselinom (0.15 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.086 g, 0.074 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (5 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo
1
napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (5% trietilamina i 1.5% metanola 5:1 mešavini heksana i etil acetata kao rastvarača) da se dobije 0.20 g (75% prinos) TRV 1506 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.24 (s, 2H), 7.14 (d, J = 0.75 Hz, 1H), 7.07(s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.02 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 7.66 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.59 - 2.51 (m, 4H), 2,41 (s, 6H), 1.86 - 1.77 (m, 4H).
[0213] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (4-propilfenil)boronskom kiselinom (0.16 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.086 g, 0.074 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (5% trietilamina i 1.5% metanola 5:1 mešavini heksana i etil acetata kao rastvarača) da se dobije 0.25 g (90% prinos) TRV 1507 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.55 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 0.75 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.88 Hz, 2H), 4.02 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.08 (septet, J = 6.78 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 7.66 Hz, 2H), 2.59 - 2.50 (m, 4H), 1.87 - 1.78 (m, 4H), 1.70 (sekstet, J = 7.28 Hz, 2H), 0.99 (t, J = 7.28 Hz, 3H).
1
[0214] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), tiofen-3-ilboronskom kiselinom (0.13 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (5% trietilamina i 1% metanola 5:1 mešavini heksana i etil acetata kao rastvarača) da se dobije 0.20 g (79% prinos) TRV 1509 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.58 (t, J = 2.13 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.01 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.41 Hz, 2H), 4.03 (dd, J1 = 5.90 Hz, J2 = 8.46 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 6.59 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.62 -2.48 (m, 4H), 1.89 - 1.76 (m, 4H).
[0215] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), furan-3-ilboronskom kiselinom (0.15 g, 1.30 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i
1
koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (5% trietilamina i 1% metanola 5:1 mešavini heksana i etil acetata kao rastvarača) da se dobije 0.18 g (75% prinos) TRV 1510 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.81 (s, 1H), 7.52 (t, J = 1.63 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.75 (t, J = 0.87 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.45 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.01 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.54 Hz, 2H), 3.08 (septet, J = 6.72 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.59 - 2.51 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 4H).
[0216] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (2,6-dimetoksifenil)boronskom kiselinom (0.18 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (5% trietilamina i 1% metanola 5:1 mešavini heksana i etil acetata kao rastvarača) da se dobije 0.21 g (72% prinos) TRV 1511 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.33 (t, J = 8.26 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.68 (d, J = 8.28 Hz, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.39 (t, J = 8.16 Hz, 2H), 3.96 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.04 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.58 - 2.48 (m, 4H), 1.85 - 1.75 (m, 4H).
1 1
[0217] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (4-acetilfenil) boronskom kiselinom (128 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (3:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 199 mg (88% prinos) TRV-1512 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.80-1.83 (m, 4H), 2.53-2.56 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.82 (d, J=7.5, 2H), 3.07-3.13 (m, 1H), 4.03-4.07 (m, 2H), 4.48 (t, J=8.3, 2H), 6.03 (s, 1H), 7.19(d, J=1.0, 1H), 7.70-7.73 (m, 2H), 8.04-8.07 (m, 2H).
[0218] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (2-(trifluorometil)fenil) boronskom kiselinom (148 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 4 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (1:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 190 mg (79% prinos) TRV-1514 u vidu narandžastog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 1.78-1.82 (m, 4H), 2.52-2.55 (m, 4H), 2.81 (d, J=7.3, 2H), 3.03-3.10 (m, 1H),3.98-4.02 (m, 2H), 4.42 (t, J=8.3, 2H), 5.77 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.39 (d, J=7.8, 1H), 7.52 (t, J=7.4, 1H), 7.60 (t, J=7.5, 1H), 7.77 (d, J=7.5, 1H).
1 2
[0219] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (202 mg, 0.6 mmol), (2,4-dimetoksifenil) boronskom kiselinom (142 mg, 0.78 mmol), i Pd(PPh3)4(35 mg, 0.03 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 2 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) dajući 190 mg (61% prinos) TRV-1515 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.78-1.82 (m, 4H), 2.55 (s, br, 4H), 2.81 (d, J=7.3, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.95-3.99 (m, 2H), 4.41 (t, J=8.2, 2H), 6.04 (s, 1H), 6.58-6.60 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 7.30-7.32 (m, 1H).
[0220] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (250 mg, 0.742 mmol), (4-(dimetilkarbamoil)fenil) boronskom kiselinom (172 mg, 0.89 mmol), i Pd(PPh3)4(43 mg, 0.037 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 2.5 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 10 mL vode i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom na koloni (5:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 207 mg (85% prinos) TRV-1516 u vidu crvene čvrste
1
supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.80-1.84 (m, 4H), 2.54-2.56 (m, 4H), 2.82 (d, J=7.3, 2H), 3.05 (s, 3H), 3.07-3.13 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 4.02-4.06 (m, 2H), 4.47 (t, J=8.2, 2H), 6.03 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.53 (d, J=8.3, 1H), 7.66 (d, J=8.3, 2H).
[0221] TEA (2.05 ml, 14.7 mmol) i metil jodid (0.46 ml, 7.35 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola) (250 mg, 0.735 mmol) u DCM (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 5 sati. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispira pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (7:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1517 (120 mg, 46%) u vidu crvenog ulja.1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.79-1.83 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 2.52-2.55 (m, 4H), 2.58-2.63 (m, 2H), 2.67-2.71 (m, 2H), 2.79 (d, J=7.5, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.13-3.17 (m, 2H), 3.94-3.98 (m, 2H), 4.40 (t, J=8.2, 2H), 5.95 (s, 1H), 6.22 (t, J=3.6, 1H), 6.95 (s, 1H).
[0222] TEA (0.41 ml, 2.94 mmol) i metansulfonil hlorid (0.11 ml, 1.47 mmol) se dodaju u kapima u rastvor sirovog (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola) (250 mg, 0.735 mmol) u DCM (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 5 sati. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje.
1 4
Rezidua se prečisti hromatografijom (5:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1518 (250 mg, 81%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.80-1.82 (m, 4H), 2.52-2.57 (m, 4H), 2.66-2.71 (m, 2H), 2.80 (d, J=7.3, 2H), 2.89 (s, 3H), 3.04-3.11 (m, 1H), 3.54 (t, J=5.6, 2H), 3.97-4.01 (m, 4H), 4.42 (t, J=8.2, 2H), 5.80 (s, 1H), 6.21 (s, br, 1H), 6.93 (s, 1H).
[0223] Kalijum karbonat (203 mg, 1.47 mmol) i 2-bromo-etil metil etar (0.316 ml, 3.3 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazola) (250 mg, 0.735 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša preko noći. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (5:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1519 (180 mg, 61%) u vidu crvenog ulja.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.78-1.82 (m, 4H), 2.52-2.55 (m, 4H), 2.60 (s, br, 2H), 2.73 (d, J=5.6, 2H), 2.77-2.80 (m, 4H), 3.02-3.08 (m, 1H), 3.26-3.29 (m,2H), 3.58 (s, 3H), 3.60 (t, J=5.6, 2H), 3.94-3.97 (m, 2H), 4.40 (t, J=8.2, 2H), 5.95 (s, 1H), 6.21 (t, J=4.0, 1H), 6.93 (s, 1H).
[0224] U dvogrli flakon osušen plamenom stavi se TRV-1472 (0.2336 g, 0.69 mmol). Flakon se vakumira i očisti argonom (3x). Doda se THF (9.2 mL) i rastvor se ohladi na -78 °C.
1
Dodaje se nBuLi (0.52 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) tokom 5 minuta, i reakcija se meša još 15 minuta. Čisti DMF (0.08 mL) se zatim doda, meša na -78 °C 60 minuta. Tada se doda MeOH (1 mL) na -78 °C i reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature. Mešavina se razblaži vodom i EtOAc i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi aldehid se zatim rastvori u THF (10 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se CF3TMS (0.20 mL, 1.38 mmol), što je praćeno dodavanjem TBAF (70 μL). Reakcija se meša na 0 °C 5 minuta i zatim se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se završava posle 90 minuta. Gasi se pomoću 10 mL 2 N HCl, zatim razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše pomoću MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti na koloni, 10% MeOH / DCM, da se dobije 0.0525 g (21% prinos) TRV-1520. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.22 (s, 1H), 7.04 (d, J = 6 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.23-5.18 (m, 1H), 4.33 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.91 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.02-2.97 (m, 1H), 2.76 (br s, 2H), 2.49-2.48 (m, 4H, preklapanje sa DMSO signalom), 1.69 (s, 4H).
[0225] LDA (18 ml, 23 mmol, 2 M rastvor u THF) doda se u kapima u rastvor koji se meša 1-Boc-3-piperidona (5.97 g, 30 mmol) u THF (80 mL) na -78 °C u atmosferi azota. Posle 20 minuta, doda se THF rastvor (30 ml) N-fenilbis(trifluometansulfonimida) u mešavinu na -78 °C, i viskozni svetložuti rastvor se meša preko noći, a temperatura se pusti da dostigne RT. Posle dodavanja zasićenog rastvora NH4Cl (80 ml), mešavina se razblaži vodom (100 ml). Mešavini se doda 150 ml EtOAc i ispere se zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje, tert-butil 5-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (4.02 g, 40.5%) i tert-butil 5-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (2.5 g, 25.2%) dobije se hromatografijom (5:95 EtOAc/heksan).
1
[0226] Flakon sa okruglim dnom napuni se tert-butil 5-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin 1(2H)-karboksilatom (2.5 g, 7.55 mmol), bis(pinakolato)diboronom (2.88 g, 11.33 mmol), kalijum acetatom (2.22 g, 22.7 mmol), i PdCl2(dppf) (276 mg, 0.38 mmol). Posle oslobađanja od gasa, doda se dioksan (40 mL). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 3 h. Pošto se reakcija završi, mešavina se ohladi na rt. Doda se 40 mL EtOAc, i reakciona mešavina se ispere vodom 3 puta. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (1:8:12 EtOAc/DCM/heksan). Dobije se 1.5 g (64.3%) tert-butil 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata u vidu čvrste supstance.
[0227] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (1.36 g, 4.05 mmol), tert-butil 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (1.5 g, 4.85 mmol), i Pd(PPh3)4(280 mg, 0.24 mmol). Pošto se oslobodi gasa, dodaju se dioksan (16 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (8 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 3 h. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 20 mL vode, i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (1:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije tert-butil 5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (1.7 g, 94.4%).
[0228] tert-butil 5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (1.7 g, 3.86 mmol) meša se u rastvoru DCM/CF3COOH (2:1, 21 ml) 1 sat na 0 °C. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, mešavina se pažljivo neutrališe zasićenim rastvorom K2CO3dok ne prestane izdvajanje gasa na 0 °C. Doda se 15 ml NaOH (2N) u rastvor, i ekstrahuje se pomoću DCM (3 x 30 ml). Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Sirovi 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[0229] TEA (1.02 ml, 7.35 mmol) i sirćetni anhidrid (0.341 ml, 3.62 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (250 mg, 0.735 mmol) u THF (10 ml) na rt respektivno. Mešavina se meša 3 sata. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, reakcija se gasi korišćenjem heksana/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (6:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1521 (230 mg 82%) u vidu čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.81 (s, br, 4H), 2.19 (s, 3H),
1
2.36-2.43 (m, 2H), 2.54 (s, br, 4H), 2.79-2.81 (m, 2H), 3.03-3.10 (m, 1H), 3.61 (t, J=5.8, 1.2H), 3.77 (t, J=5.8, 0.8H), 3.96-4.02 (m, 2H), 4.31-4.47 (m, 4H), 5.87 (s, 1H), 6.32-6.34 (m, 0.6H), 6.42-6.44 (m, 0.4H), 6.87 (s, 0.4H), 6.97 (s, 0.6H).
[0230] TEA (0.41 ml, 2.94 mmol) i metansulfonil hlorid (0.11 ml, 1.47 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (250 mg, 0.735 mmol) u DCM (10 ml) na rt respektivno. Mešavina se meša 5 sati. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (6:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1522 (240 mg, 78%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.79-1.83 (m, 4H), 2.48-2.55 (m, 6H), 2.80 (d, J=7.3, 2H), 2.90 (s, 3H), 3.04-3.11 (m, 1H), 3.47 (t, J=5.8, 2H), 3.97-4.01 (m, 2H), 4.14-4.16 (m, 2H), 4.43 (t, J=8.2, 2H), 5.83 (s, 1H), 6.35-6.37 (m, 1H), 6.89 (s, 1H).
[0231] Kalijum karbonat (507 mg, 3.68 mmol) i 2-bromo-etil metil etar (0.316 ml, 3.3 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (250 mg, 0.735 mmol) u acetonitrilu (10 ml) na rt respektivno. Mešavina se meša preko noći. Reakcija se gasi EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (4:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan)
1
dajući Jedinjenje TRV-1523 (210 mg, 72%) u vidu crvenog ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3):_1.80-1.82 (m, 4H), 2.41-2.42 (m, 2H), 2.54 (s, br, 2H), 2.71 (d, J=5.6, 2H), 2.77-2.81 (m, 4H), 3.02-3.08 (m, 1H), 3.40-3.41 (m, 5H), 3.62 (t, J=5.6, 2H), 3.94-3.98 (m, 2H), 4.40 (t, J=8.0, 2H), 5.91 (s, 1H), 6.28 (s, br, 1H), 6.87 (s, 1H).
[0232] TEA (1.23 ml, 8.82 mmol) i metil jodid (0.11 ml, 1.76 mmol) dodaju se u kapima u rastvor sirovog 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (300 mg, 0.882 mmol) u DCM (10 ml) na rt respektivno. Posle mešanja mešavine u trajanju od 2 sata, doda se metil jodid (0.11 ml, 1.76 mmol) u rastvor i mešavina se meša još 3 h. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti hromatografijom (4:5:100:500, MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1524 (150 mg, 48%) u vidu crvenog ulja.1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.81-1.86 (m, 4H), 2.42-2.45 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.58-2.62 (m, 6H), 2.82 (d, J=7.3, 2H), 3.04-3.11 (m, 1H), 3.29-3.31 (m, 2H), 3.95-3.99 (m, 2H), 4.41 (t, J=8.2, 2H), 5.92 (s, 1H), 6.28-6.30 (m, 1H), 6.88 (s, 1H).
[0233] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (1H-pirazol-3-il)boronskom kiselinom (0.10 g, 0.90 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum
1
karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan:EtOAc 5:3: 75:15 do TEA: MeOH: heksan:EtOAc 5: 8: 75: 15) da se dobije 0.050 g (21% prinos) TRV 1525 u vidu crvene čvrste supstance. 1H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 13.11 (široko, 1H), 8.43 (široko, 1H), 8.13 (široko, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.34 (t, J = 8.29 Hz, 2H), 3.92 (dd, J1 = 5.53 Hz, J2 = 8.54 Hz, 2H), 2.98 (septet, J = 6.86 Hz, 1H), 2.71 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.53 - 2.37 (m, 4H), 1.76 - 1.62 (m, 4H).
[0234] Reakciona fiola se napuni TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazolom (0.18 g, 0.90 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 3: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 10: 75: 15) da se dobije 0.080 g (33% prinos) TRV 1526 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.66 (d, J = 2.51 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.73 (d, J = 2.26 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.02 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.08 (septet, J = 6.99 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.61 - 2.51 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 4H).
1
[0235] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazolom (0.18 g, 0.90 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje graduijenta eluiranja (TEA: MeOH:heksan: EtOAc 5: 3: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 8: 75: 15) da se dobije 0.25 g (100% prinos) TRV 1527 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.81 (d, J = 0.75 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.05 (d, J = 1.00 Hz,1H), 5.95 (s, 1H), 4.44 (t, J = 8.29 Hz, 2H), 4.01 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.66 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.08 (septet, J = 7.03 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.62 - 2.49 (m, 4H), 1.88 - 1.76 (m, 4H).
[0236] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.32 g, 0.95 mmol), piridin-4-ilboronskom kiselinom (0.15 g, 1.20 mmol), i Pd(PPh3)4(0.055 g, 0.048 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 1: 1: 15: 3) da se dobije 0.26 g (82% prinos) TRV 1528 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR
1 1
(CDCl3, 400 MHz) δ = 8.71 (dd, J1 = 1.64 Hz, J2 = 6.27 Hz, 1H), 7.52 (dd, J1 = 1.26 Hz, J2 = 6.27 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.49 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.06 (dd, J1 = 5.66 Hz, J2 = 8.66 Hz, 2H), 3.10 (septet, J = 6.99 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 4H).
[0237] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), tiofen-2-ilboronskom kiselinom (0.13 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1.2: 75: 15) da se dobije 0.21 g (83% prinos) TRV 1529 u vidu braon čvrste supstance. δ = 7.54 (dd, J1 = 1.13 Hz, J2 = 3.64 Hz, 1H), 7.38 (dd, J1 = 1.13 Hz, J2 = 5.15 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 1.00 Hz,1H), 7.13 (dd, J1 = 3.64 Hz, J2 = 5.15 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 1.00 Hz,1H), 4.47 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.03 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.66 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 6.90 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.60 - 2.53 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 4H).
1 2
[0238] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), furan-2-ilboronskom kiselinom (0.11 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1.2: 75: 15) da se dobije 0.18 g (75% prinos) TRV 1530 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.54 (dd, J1 = 0.75 Hz, J2 = 1.76 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.29 (dd, J1 = 0.75 Hz, J2 = 3.76 Hz, 1H), 6.53 (J1 = 1.76 Hz, J2 = 3.51 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.45 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.02 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.08 (septet, J = 6.99 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.61 - 2.49 (m, 4H), 1.88 - 1.76 (m, 4H).
[0239] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (3-(dimetilkarbamoil)fenil)boronskom kiselinom (0.18 g, 0.91 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc: DCM 5: 4: 60: 20: 20) da se dobije 0.24 g (80% prinos) TRV 1531 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.69 - 7.65 (m, 2H), 7.51 (dt, J1 = 1.25 Hz, J2 = 7.78 Hz, 1H), 7.46 (dt, J1 = 1.25 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.03 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.09 (septet, J = 6.78 Hz, 1H), 3.04 (s, 3H), 2.81 (d, J1 = 7.53 Hz, 2H), 2.59 - 2.51 (m, 4H), 1.86 - 1.77 (m, 4H).
1
[0240] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (2-(metiltio)fenil)boronskom kiselinom (0.11 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15) da se dobije 0.20 g (71% prinos) TRV 1532 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.39 (dt, J1 = 2.01 Hz, J2 = 7.66 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.78 Hz, 1H), 7.27 (dt, J1 = 2.01 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 7.23 (dt, J1 = 1.00 Hz, J2 = 7.03 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.44 (t, J = 8.29 Hz, 2H), 4.01 (dd, J1 = 5.78 Hz, J2 = 8.79 Hz, 2H), 3.06 (septet, J = 6.78 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.59 - 2.49 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 1.63 - 1.53 (m, 4H).
[0241] Flakon sa okruglim dnom napuni se tert-butil 5-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (4.02 g, 12.15 mmol), bis(pinakolato)diboronom (4.63 g, 18.22 mmol), kalijum acetatom (3.57 g, 36.44 mmol), i PdCl2(dppf) (445 mg, 0.61 mmol). Posle oslobađanja od gasa, doda se dioksan (60 mL). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 3 h. Pošto se reakcija završi, mešavina se ohladi na rt. Doda se 40 mL EtOAc, i reakciona mešavina se ispere vodom 3 puta. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i
1 4
zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (1:19, EtOAc/heksan). Dobije se 2.27 g (60.5%) tert-butil 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata u vidu čvrste supstance.
[0242] Flakon sa okruglim dnom napuni se TRV-1472 (2.06 g, 6.12 mmol), tert-butil 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (2.27 g, 7.35 mmol), i Pd(PPh3)4(354 mg, 0.306 mmol). Posle oslobađanja od gasa, dodaju se dioksan (16 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (8 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 90 °C 3 h. Po završetku reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, doda se 20 mL vode, i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom da se dobije tert-butil 5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (2.65 g, 98.4%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.55 (s, 9H), 1.79-1.83 (m, 4H), 1.96-2.02 (m, 2H), 2.47 (t, J=5.9, 2H), 2.54 (s, br, 4H), 2.78-2.82 (m, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.63 (s, br, 2H), 3.94-3.97 (m, 2H), 4.40 (t, J=8.2, 2H), 5.90 (s, 0.44H), 6.03 (s, 0.6H), 6.86 (s, 1H), 7.43 (s, 0.4H), 7.66 (s, 0.6H).
[0243] tert-butil 5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-3,4-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (440 g, 1.0 mmol) meša se u rastvoru DCM/CF3COOH (2:1, 6 ml) 6 sati na 0 °C. Po završetku reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, mešavina se pažljivo neutralizuje zasićenim rastvorom K2CO3dok ne prestane oslobađanje gasa na 0 °C. Doda se 15 ml NaOH (2N) u rastvor i ekstrahuje pomoću DCM (3 x 10 ml). Organski sloj se osuši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Sirovi 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,4,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol se koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
[0244] TEA (1.39 ml, 10 mmol) i kiseli anhidrid (0.471 ml, 5 mmol) dodaju se u kapima u rastvor 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,4,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (sirovi, 1 mmol) u DCM (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 3 sata. Po završetku reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti uz gradijentno eluiranje (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1533 (65 mg, 17%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.79-1.83 (m, 4H), 1.96-2.02 (m, 1.1H), 2.04-2.10 (m, 0.9H), 2.26 (s, 1.35H), 2.31 (s, 1.65H), 2.50-2.55 (m, m, 6H), 2.79-2.82 (m, 2H), 3.02-3.11 (m, 1H), 3.66-3.69 (m, 0.9H), 3.76-3.78
1
(m, 1.1H), 3.96-4.01 (m, 2H), 4.42 (t, J=8.2, 2H), 5.84 (s, 0.55H), 6.02 (s, 0.45H), 6.90-6.91 (m, 1H), 7.15 (s, 0.55H), 7.93 (s, 0.45H).
[0245] TEA (0.7 ml, 5 mmol) i metansulfonil hlorid (0.39 ml, 5 mmol) dodaju se u kapima u rastvor 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(1,4,5,6-tetrahidropiridin-3-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (sirovi, 1 mmol) u DCM (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 3 sata. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1534 (105 mg, 25%) u vidu crvene čvrste supstance.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.80-1.83 (m, 4H), 2.06-2.12 (m, 2H), 2.50-2.55 (m, 6H), 2.79 (d, J=7.5, 2H), 2.97 (s, 3H), 3.03-3.09 (m, 1H), 3.64 (t, J=5.5, 2H), 3.96-4.00 (m, 2H), 4.42 (t, J=8.2, 2H), 5.87 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 7.19 (s, 1H).
[0246] TRV-1472 (0.4 g, 1.15 mmol) i 2-formiltiofen-4-boronska kiselina (0.188 g, 1.21 mmol) dodaju se u epruvetu i epruveta se vakumira i ispere argonom (3x). Dodaju se DME (2.8 mL) i Na2CO3(1.7 mL, 3.4 mmol, 2 N vodeni rastvor), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.069 g, 0.06 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i zatim greje na 85 °C preko noći. Reakcija se ohladi i zatim razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi
1
aldehid. Aldehid se prečisti korišćenjem hromatografije na koloni i koristi se u sledećem koraku direktno. Aldehid 4-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)tiofen-2-karbaldehid se rastvori u THF (10 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se CF3TMS (0.19 mL) i zatim katalizator TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor). Posle 30 minuta reakcija se ukloni iz ledenog kupatila i ostavi se da se zagreje do sobne temperature. Kada se reakcija završi, prema TLC, ponovo se ohladi na 0 °C i doda se 2 N HCl (vod.), meša se 40 minuta i zatim bazifikuje pomoću 2N NaOH. Ova mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (heksana: etilacetat: trietilamin: metanol, 5:1:0.3:0.1) da se dobije 0.210 mg (58%) TRV 1535 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.59 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.13 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.97 (s,1H), 5.32-5.28 (m, 1H), 4.44-4.39 (m, 2H), 4.02-3.98 (m, 2H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.81-2.83 (d, J = 8Hz, 2H), 2.58 (m, 4H), 1.85 (m, 4H).
[0247] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.67 g, 2.00 mmol), 1-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazolom (0.50 g, 2.40 mmol), i Pd(PPh3)4(0.12 g, 0.10 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (6 mL) i vod. rastvor natrijum karbonata (3 mL, 2.0 M, 6.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 5: 75: 15) da se dobije 0.67 g (99% prinos) TRV 1536 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.55 (d, J = 2.00 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 0.76 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 2.01 Hz, 2H), 5.82 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.29 Hz, 2H), 4.03 (dd, J1
1
= 5.40 Hz, J2 = 8.67 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.09 (septet, J = 7.09 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.60 - 2.49 (m, 4H), 1.87 - 1.76 (m, 4H).
[0248] Rastvor 6-bromo-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (0.38 g, 1.13 mmol) u 6 mL anhidrovanog THF ohladi se na -78 °C u atmosferi azota. U rastvor se doda n-butillitijum (0.55 mL, 2.5 M, 1.38 mmol) u kapima. Po završenom dodavanju, reakciona mešavina se meša 30 minuta na istoj temperaturi, i zatim se doda tributilkalaj hlorid (0.46 mL, 1.70 mmol). Reakcija se meša 1 h na -78 °C pre gašenja metanolom. Mešavina se razblaži zasićenim rastvorom soli, ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromaografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (TEA: heksan: EtOAc 2: 100: 0 do TEA: heksan: EtOAc 2: 95: 5) da se dobije 0.48 g (77% prinos) 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-n-butilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazola u vidu tamnonarandžastog ulja. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.14 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.40 (t, J = 8.03 Hz, 2H), 3.96 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.28 Hz, 2H), 3.06 (septet, J = 7.53 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.61 - 2.49 (m, 4H), 1.88 - 1.76 (m, 4H), 1.61-1.51 (m, 6H), 1.35 (sekstet, J = 7.28 Hz, 6H), 1.09 (t, J = 8.09 Hz, 6H), 0.91 (t, J = 7.28 Hz, 9H).
[0249] Reakciona fiola se napuni 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-nbutilstanil)benzo[c][1,2,5] oksadiazolom (0.33 g, 0.60 mmol), 1-(4-bromotiofen-2-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-olom (0.16 g, 0.60 mmol), Pd(PPh3)4(0.035 g, 0.030 mmol), CuI (0.011 g, 0.06 mmol), i CsF (0.18 g, 1.20 mmol). Fiola se oslobodi gasa i ponovo napuni azotom. U fiolu se doda DMF (4 ml). Reakcija se ponovo oslobodi gasa i napuni azotom, hermetički zatvori i greje na 50º do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 ml 2N NaOH i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 5: 75: 15) da se dobije 0.080 g (31% prinos) TRV 1537 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR
1
(CDCl3, 400 MHz) δ = 8.23 (d, J = 1.51 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (d, J = 5.52 Hz,1H), 6.35 (s, 1H), 5.50 (pentet, J = 6.52 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 8.03 Hz, 2H), 3.96 (dd, J1 = 6.02 Hz, J2 = 8.28 Hz, 2H), 2.99 (septet, J = 7.53 Hz, 1H), 2.71 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.48 -2.41 (m, 4H), 1.73 - 1.63 (m, 4H).
[0250] TRV-1472 (2.0095 g, 5.96 mmol) rastvori se u THF (60 mL) i ohladi na - 78 °C. nBuLi (4.5 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) dodaje se u kapima tokom 10 minuta i meša dodatnih 10 minuta. CO2gas uvede se u reakcionu mešavinu kanilom, uz postepeno zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se koncentruje dajući 2.12 grama tamne čvrste supstance. Ovaj materijal se zatim rastvori u NMP (70 mL) i 20 mL-ski alikvoti ove mešavine se koriste u HATU koraku kuplovanja. Litijum karboksilat 1 u NMP (20 mL, 0.6068 g 1) ohladi se na 0 °C i doda se DIPEA (1.0 mL, 5.91 mmol); posle čega sledi HATU (0.8239 g, 2.16 mmol). Ova mešavina se meša 5 minuta pre dodavanja morfolina (0.52 mL, 5.91 mmol) i reakcija se meša dok se ne završe, prema TLC. Reakcija se razblaži zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem DCM (3x). Kombinovani lsojevi se suše korišćenjem MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom, prvi pokušaj bio je sa 10% MeOH/DCM, koji nije dao hemijsku čistoću >95%. Prečišćavanje je ponovljeno uz korišćenje EtOAc:heksan:TEA (6:4:0.5) dajući 0.0803 g (11% prinos) TRV-1538 u vidu čvrste voštane supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.06 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.34 (t, J = 5 Hz, 2H), 3.92 (t, J = 5 Hz, 2H), 3.65 (br s, 2H), 3.60 (br s, 2H), 3.54 (br s, 2H), 3.35 (br s, 2H), 3.03-2.95 (m, 1H), 2.70 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.44 (br s, 4H), 1.67 (br s, 4H).
1
[0251] TRV-1520 (0.3249 g, 0.91 mmol) rastvori se u NMP (10 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. NaH (0.0401 g, 1.00 mmol, 60% u mineralnom ulju) doda se u porcijama i meša 20 minuta, posle čega se u reakciju doda jodometan (0.056 mL, 0.91 mmol) i mešavina se meša preko noći. Reakcija se ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Mešavina se ekstrahuje pomoću DCM (3x) i kombinovani organski slojevi se suše pomoću MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirova rezidua se prečisti uz korišćenje 8% MeOH / DCM i zatim još jednom EtOAC/heksan/TEA (6:4:0.5) da se dobije 0.0602 g (18% prinos) TRV-1539. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.20 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.10 (q, J = 7 Hz, 1H), 4.36-4.32 (m, 2H), 3.93-3.89 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.01-2.96 (m, 1H), 2.71 (d, J = 5 Hz, 2H), 2.44 (br s, 4 H), 1.70-1.64 (m, 4H).
[0252] TRV-1472 (2.0095 g, 5.96 mmol) rastvori se u THF (60 mL) i ohladi na - 78 °C. nBuLi (4.5 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) dodaje se u kapima tokom 10 minuta i meša još 10 minuta. CO2gas uvede se u reakcionu mešavinu kanilom, uz postepeno zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se koncentruje dajući 2.12 grama tamne čvrste supstance. Ovaj materijal se zatim rastvori u NMP (70 mL) i 20 mL-ski alikvoti ove mešavine se koriste u HATU koraku kuplovanja. Litijum karboksilat 1 u NMP (20 mL, 0.6068 g 1) ohladi se na 0 °C i doda se DIPEA (1.0 mL, 5.91 mmol); posle čega sledi HATU (0.8239 g, 2.16 mmol). Ova mešavina se meša 5 minuta pre dodavanja dietilamina (1.0 mL, 5.91 mmol) i reakcija se meša dok se ne završi, prema TLC. Reakcija se razblaži zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem DCM (3x). Kombinovani slojevi se suše korišćenjem MgSO4, filtriraju i
1
koncentruju. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom, prvi pokušaj bio je sa EtOAc: Hexane:TEA (6:4:0.5) koji nije dao hemijsku čistoću >95%. Prečišćavanje je ponovljeno uz korišćenje 10% MeOH/DCM dajući 0.0823 g (12% prinos) TRV-1540 u vidu voštane čvrste supstance. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 6.99 (s, 1H), 5.81 (s, 1H), 4.35 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.42 (d, J = 10 Hz, 2H), 3.21 (d, J = 10 Hz, 2H), 3.00-2.97 (m, 1H), 2.72 (br s, 2H), 2.46 (br s, 4H), 1.68 (br s, 4H), 1.19-1.13 (m, 3H), 1.10-1.03 (m, 3H).
[0253] TRV-1472 (2.0095 g, 5.96 mmol) rastvori se u THF (60 mL) i ohladi na - 78 °C. nBuLi (4.5 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) dodaje se u kapima tokom 10 minuta i meša još 10 minuta. CO2gas uvede se u reakcionu mešavinu kanilom, uz postepeno zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se koncentruje dajući 2.12 grama tamne čvrste supstance. Ovaj materijal se zatim rastvori u NMP (70 mL) i 20 mL-ski alikvoti ove mešavine se koriste u HATU koraku kuplovanja. Litijum karboksilat 1 u NMP (20 mL, 0.6068 g 1) ohladi se na 0 °C i doda se DIPEA (1.0 mL, 5.91 mmol); posle čega sledi HATU (0.8239 g, 2.16 mmol). Ova mešavina se meša 5 minuta pre dodavanja ciklopropilamina (0.41 mL, 5.91 mmol) i reakcija se meša dok se ne završi, prema TLC. Reakcija se razblaži zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem DCM (3x). Kombinovani slojevi se suše korišćenjem MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom, prvi pokušaj bio je sa EtOAc: Hexane:TEA (6:4:0.5) koji nije dao >95% hemijske čistoće. Prečišćavanje je ponovljeno uz korišćenje 10% MeOH/DCM da se dobije 0.0459 g (6.8% prinos) TRV-1541 u vidu voštane čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 8.57 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.29 (s, 1H), 4.35 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.01-2.96 (m, 1H), 2.86-2.81 (m, 1H), 2.71 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.45 (br s, 4H), 1.68 (br s, 4 H), 0.72-0.69 (m, 2H), 0.59-0.56 (m, 2H).
1 1
[0254] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (2-(dimetilkarbamoil)fenil)boronskom kiselinom (0.18 g, 0.91 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 3: 75: 15) da se dobije 0.23 g (77% prinos) TRV 1542 u vidu crvenog ulja.1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.52 - 7.38 (m, 4H), 7.02 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.42 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 3.99 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.06 (septet, J = 7.03 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.79 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.58 - 2.46 (m, 4H), 1.86 - 1.72 (m, 4H).
[0255] TRV-1472 (0.4 g, 1.15 mmol) i 5-formiltiofen-2-boronska kiselina (0.188 g, 1.21 mmol) dodaju se u epruvetu i epruveta se vakumira i očisti argonom (3x). Dodaju se DME (2.8 mL) i Na2CO3(1.7 mL, 3.4 mmol, 2 N vodeni rastvor), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.069 g, 0.06 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i zatim greje na 80°C preko noći. Reakcija se ohladi i onda razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi aldehid. Aldehid se prečisti korišćenjem hromatografije na koloni i koristi se u sledećm koraku direktno. Aldehid 2 se rastvori u THF (5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se
1 2
CF3TMS (0.19 mL) i onda katalizator TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor). Posle 30 minuta reakcija se ukloni iz ledenog kupatila i ostavi se da dostigne sobnu temperaturu. Kada se okonča, prema TLC, ponovo se ohladi na 0 °C i doda se 2 N HCl (vod.) meša 40 minuta i zatim bazifikuje pomoću 2N NaOH. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (heksan: etil acetat: trietilamin: metanol, 5:1:0.3:0.1) da se dobije 40 mg (28%) TRV 1543 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33(d, J=3.6 Hz, 1H), 7.20-7.20 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.31-5.25 (m, 1H), 4.45-4.40 (m, 2H), 4.02-3.99 (m, 2H), 3.09-3.03 (m,1H), 2.83-2.81(d, J=8Hz, 2H), 2.57 (m,4H), 1.83 (m,4H).
[0256] 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tributilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.4 g, 0.73 mmol), 1-(5-bromopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-ol (0.230 g, 0.9 mmol), CsF (0.45 g, 2.19 mmol), CuI (14 mg, 0.073 mmol), Pd(PPh3)4, (0.042 g, 0.0365 mmol) stave se u staklenu epruvetu koja se hermetički zatvori, oslobodi se gasa i ispere pomoću N2. DMF (10 ml) se doda i reakciona mešavina se greje na 45°C preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, reakciona mešavina se ohladi i zatim razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi proizvod koji se prečišćava korišćenjem hromatografije na koloni da bi dao TRV-1544 (0.120g, 42%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 9.03 (d, J=3.6 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.19 (d, J=4.0 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.37-5.45 (m, 1H), 4.40 (m, 2H), 3.99 (m, 2H), 2.97-3.04 (m, 1H), 2.72 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.45 (s, 4H), 1.68 (s, 4H).
1
[0257] 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tributilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.4 g, 0.73 mmol), 1-(6-bromopiridin-3-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-ol (0.230 g, 0.9 mmol), CsF (0.45 g, 2.19 mmol), CuI (14 mg, 0.073 mmol), Pd (PPh3)4, (0.042 g, 0.0365 mmol) stave se u staklenu epruvetu koja se hermetički zatvori, oslobodi se gasa i ispere pomoću N2. DMF (10 ml) se doda i reakciona mešavina se greje na 45°C preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, reakciona mešavina se ohladi i zatim razblaži pomoću EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi proizvod koji se prečišćava korišćenjem hromatografije na koloni da bi dao TRV-1545 (0.108 g, 36%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.80 (s, 1H), 8.22 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 5.40 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.0 (m, 1H), 2.72 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.45 (s, 4H), 1.68 (s, 4H).
[0258] Reakciona fiola se napuni 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-nbutilstanil)benzo[c][1,2,5] oksadiazolom (0.33 g, 0.60 mmol), 1-(4-bromotiofen-2-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-olom (0.16 g, 0.60 mmol), Pd(PPh3)4(0.035 g, 0.030 mmol), CuI (0.011 g, 0.06 mmol), i CsF (0.18 g, 1.20 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda DMF (4 mL). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 50 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan:
1 4
EtOAc 5: 5: 75: 15) da se dobije 0.14 g (42% prinos) 2-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-karbaldehida u vidu žute čvrste supstance.
[0259] 2-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-karbaldehid (0.14g, 0.38 mmol) rastvori se u THF (5 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se CF3TMS (0.085 mL, 0.57 mmol) posle čega sledi TBAF (0.050 mL, 1.0 M rastvor u THF, 0.050 mmol). Reakcija se zatim meša 60 minuta pre nego što se ponovo ohladi na 0°C i doda se 4N HCl (vod.) i meša se 60 minuta, i zatim se bazifikuje pomoću 3 N vod. rastvora NaOH i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se suši preko anhidrovanog Na2SO4, filtrira i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 5: 75: 15) da se dobije 0.090 g (54% prinos) TRV 1546 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.54 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 5.20 (q, J = 6.53 Hz, 1H), 4.49 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.30 (široko, 1H), 4.11 - 4.03 (m, 2H), 3.10 (septet, J = 7.19 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 4H).
[0260] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (4-fluorofenil)boronskom kiselinom (0.14 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda dioksan (4 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15) da se dobije 0.20 g (77% prinos) TRV 1547 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.63 - 7.56 (m, 2H), 7.20 - 7.13 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.03 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 4H), 1.86 - 1.77 (m, 4H).
1
[0261] Metil 7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-karboksilat (0.2146 g, 0.68 mmol) se rastvori u metanolu (2 mL) i u epruvetu se doda 7N NH3u metanolu (12 mL). Epruveta se hermetički zatvori i greje na 50 °C 48 sati, uz postavljanje štita protiv eksplozije. Mešavina se koncentruje da se dobije sirovi amid. Sirovi amid se prečisti hromatografijom (10% MeOH / DCM sa NH4OH slojem) da se proizvede 0.1439 g (70% prinos) TRV-1548 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 8.10 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 4.35 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.92 (q, J = 5 Hz, 2H), 3.02-2.94 (m, 1H), 2.70 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.44 (br s, 4H), 1.68-1.65 (m, 4H).
[0262] TRV-1551 (0.1830 g, 0.54 mmol) rastvori se u DCM (10 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se TEA (0.75 mL, 5.4 mmol), što je praćeno dodavanjem MeSO2Cl (0.21 mL, 2.7 mmol) u kapima. Reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature i meša se dok se ne završi, prema TLC. Reakcija se zatim koncentruje i rezidua se bazifikuje dodavanjem 2N NaOH (vod.). Ova bazna rezidua se zatim ekstrahuje pomoću DCM (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi amid. Materijal se prečisti hromatografijom, EtOAC:heksan:TEA (9:1:0.5) da se dobije 0.1417 g (63% prinos) TRV-1549. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 6.98 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.17 (q, J = 10 Hz, 1H), 4.39 (q, J = 10 Hz, 2H), 3.99-3.95 (m, 2H), 3.05 (br s, 1H), 2.97 (s, 3H), 2.81 (br s, 2H), 2.54 (br s, 4H), 2.30-2.26 (m, 1H), 1.81 (br s, 4H), 1.73 (d, J = 10 Hz, 3H), 1.02-0.96 (m, 1H), 0.81-0.75 (m, 1H), 0.57-0.52 (m, 2H).
1
[0263] TRV-1551 (0.2133 g, 0.62 mmol) rastvori se u DCM (10 mL) i ohladi na 0 °C. Doda se TEA (0.86 mL, 6.2 mmol) što je praćeno dodavanjem AcCl (0.22 mL, 3.1 mmol) u kapima. Reakcija se ostavi da se zagreje do sobne temperature i meša se dok se ne završi, prema TLC. Reakcija se zatim koncentruje i rezidua se bazifikuje dodavanjem 2N NaOH (vod.). Ova bazna rezidua se zatim ekstrahuje pomoću DCM (3x). Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi amid. Materijal se prečisti hromatografijom, EtOAC:heksan:TEA (9:1:0.5) da se dobije 0.1858 g (78% prinos) TRV-1550. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ = 6.87 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.68-5.67 (m, 1H), 4.37 (t, J = 10 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 10 Hz, 1H), 3.95-3.89 (m, 2H), 3.05-2.97 (m, 1H), 2.78-2.73 (m, 2H), 2.56-2.52 (m, 5H), 2031 (s, 3H), 1.79 (s, 4H), 1.67 (d, J = 10 Hz, 3H), 0.82-0.75 (m, 1H), 0.69-0.60 (m, 3H).
[0264] TRV-1472 (1.7789 g, 5.28 mmol) rastvori se u toluenu (25 mL) u epruveti i doda se tributil(1-etoksivinil)kalaj (2.4789 g, 6.86 mmol). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta propuštanjem argona kroz rastvor. Tada se doda Pd(PPh3)4(0.6125 g, 0.53 mmol), epruveta se hermetički zatvori i mešavina se greje na 110 °C 16 sati. Alikvot za<1>H NMR pokazuje da je reakcija dostigla 100% konverzije. Materijal se filtrira kroz celit i zatim koncentruje. Rezidua se rastvori u DCM i ispere vodenim rastvorom KF, što za rezultat ima formiranje precipitata. Ovaj materijal se ukloni filtracijom. Organski sloj se zatim ispere vodom, zasićenim
1
rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se delimično rastvori u THF (80 mL) i doda se EtOH (6 mL) da se postigne potpuno rastvaranje. Rastvor se zatim ohladi na 0 °C i 2N HCl (vod) (11 mL) se doda u kapima. Meša se na 0 °C 5 minuta pre nego što se ukloni ledeno kupatilo. Meša se dok okončanja reakcije, što se prati pomoću TLC (60 minuta), zatim se koncentruje da se ukloni THF. Rezidua se ohladi na 0 °C i zatim se bazifikuje korišćenjem 2N NaOH (vod.). Ova bazna mešavina se ekstrahuje pomoću DCM (3x) i kombinovani organski ekstrakti se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju da se dobije sirovi keton 8. Ovaj keton se zatim rastvori u metanolu (50 mL) i dodaju se ciklopropil amin (0.76 mL, 11 mmol) i Ti(OiPr)4(2.1 mL, 6.9 mmol) stvarajući braon precipitat. Ova mešavina se ohladi u ledenom kupatilu i doda se NaBH4(0.2989 g, 7.9 mmol) u porcijama i meša do okončanja reakcije, prema TLC. Reakcija se zatim gasi dodavanjem NH4Cl i zatim razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4) filtriraju i koncentruju. Sirovi amin se prečisti hromatografijom (10% MeOH / DCM) da se dobije 0.8689 g (48% prinos iz TRV-1472) TRV-1551. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 6.99 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.29 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.73 (s, 1H), 3.00-2.91 (m, 1H), 2.75 (s, 1H), 2.69 (d, J = 10 Hz, 2H), 2.44 (s, 4H), 1.88-1.84 (m, 1H), 1.70-1.64 (m, 4H), 1.23 (d, J = 5 Hz, 3H), 0.29-0.19 (m, 4H).
[0265] TRV-1472 (0.7014 g, 2.08 mmol) ) rastvori se u THF (20 mL) i ohladi na - 78 °C. nBuLi (1.8 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) dodaje se u kapima tokom 10 minuta i meša još 10 minuta. CO2gas uvede se u reakcionu mešavinu kanilom, uz postepeno zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se koncentruje dajući 800 mg tamne čvrste supstance. Ovaj materijal se zatim rastvori u NMP (30 mL) i 15 mL-ski alikvoti ove mešavine se koriste u HATU koraku kuplovanja. Litijum karboksilat 1 u NMP (15 mL, 1.04 mmol 1) ohladi se na 0 °C i doda se DIPEA (0.54 mL, 3.12 mmol); posle čega sledi HATU (0.4349 g, 1.14 mmol). Ova mešavina
1
se meša 5 minuta pre dodavanja piperidina (0.31 mL, 3.13 mmol) i reakcija se meša dok se ne završi, prema TLC. Reakcija se razblaži zasićenim rastvorom soli i ekstrahuje korišćenjem DCM (3x). Kombinovani slojevi se suše korišćenjem MgSO4, filtriraju i koncentruju. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom, prvi pokušaj bio je sa EtOAc: Hexane:TEA (6:4:0.5) koji nije dao >95% hemijske čistoće. Prečišćavanje je ponovljeno uz korišćenje 10% MeOH/DCM da se dobije 0.081 g (21% prinos) TRV-1552 u vidu čvrste voštane supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.00 (s, 1H), 5.84 (s, 1H), 4.34 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.92 (t, J = 10 Hz, 2H), 3.56 (br s, 2H), 3.29-3.24 (m, 2H), 2.98-2.97 (m, 1H), 2.72 (br s, 2H), 2.49 (preklapanje sa DMSO signalom, br s, 4H), 1.68 (s, 4H), 1.61-1.59 (m, 2H), 1.56 (s, 2H), 1.46 (s, 2H).
[0266] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1472 (600 mg, 1.78 mmol), benziltrietilamonijumom (406 mg, 1.78 mmol) i Pd(OAc)2(40 mg, 0.178 mmol). Flakon se očisti azotom nekoliko puta, i zatim se dodaju suvi DMF (8 ml) alil alkohol (0.181 ml, 2.67 mmol) i TEA (2.47 ml, 17.8 mmol) u mešavoinu, zasebno. Dobijena mešavina se zatim greje na 55-60 °C, i proverava pomoću TLC. Kada se reakcija završi, doda se 50 ml EtOAc u mešavinu. Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli 3 puta. Organski slojevi se suše i koncentruju. 3-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)propanal (340 mg, 60.7%) se dobije gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.78-1.83 (m, 4H), 2.52 (s, br, 4H), 2.78-2.84 (m, 4H), 2.91-2.94 (m, 2H), 3.01-3.07 (m, 1H), 3.95-3.97 (m, 2H), 4.38 (t, J=8.2, 2H), 5.63 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 9.85 (s, 1H).
[0267] Gornji aldehid (250 mg, 0.79 mmol) ohladi se na 0 °C u rastvoru suvog THF (6 ml) u atmosferi azota. U mešavinu se polako dodaju TMSCF3(140 ul, 0.95 mmol) i TBAF (0.08 ml, 0.08 mmol, 1M rastvor), jedan po jedan. Boja se menja od crvene do purpurne i ponovo do crvene, tokom dodavanja. Rastvor se meša 2 sata na 0 °C. Po okončanju, što se proverava pomoću TLC, mešavini se doda 5 ml vode i meša se 1 h. Ovoj mešavini se doda 50 ml EtOAc i ispere se pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši preko
1
anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Proizvod (TRV-1553, 220 mg, 72.6%) se dobija gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.85 (s, br, 4H), 1.92-2.08 (m, 2H), 2.54 (s, br, 4H), 2.70-2.78 (m, 1H), 2.80 (d, J=7.6, 2H), 2.86-2.93 (m, 1H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.92-3.97 (m, 3H), 4.40 (t, J=8.2, 2H), 5.67 (s, 1H), 6.82 (s, 1H).
[0268] n-BuLi (0.96 ml, 2.4 mmol, 4 M rastvor) doda se u kapima u rastvor koji se meša TRV-1472 (674 mg, 2 mmol) u THF (10 mL) na -78 °C u atmosferi azota. Posle 20 minuta, THF rastvor (5 ml) 1-Boc-2-piperidona (440 mg, 2.2 mmol) doda se u mešavinu na -78 °C, i crni rastvor se meša 1 sat i zatim gasi pomoću MeOH. Posle dodavanja EtOAc (50 ml), mešavina se ispere pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje, tert-butil (5-okso-5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)pentil)karbamat (360 mg, 39.3%) se dobija gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.45 (s, 9H), 1.56-1.60 (m, 2H), 1.74-1.82 (m, 6H), 2.53 (s, br, 4H), 2.79 (d, J=7.6, 2H), 3.00-3.09 (m, 3H), 3.17-3.20 (m, 2H), 4.00-4.04 (m, 2H), 4.45 (t, J=8.2, 2H), 4.63 (s, br, 1H), 6.34 (s, 1H), 7.61 (s, 1H).
[0269] tert-butil (5-okso-5-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)pentil) karbamat (280 mg, 1.0 mmol) se meša u rastvoru DCM/CF3COOH (2:1, 3 ml) 1 sat na 0 °C. Posle okončanja, što se proverava korišćenjem TLC, mešavina se pažljivo neutrališe zasićenim rastvorom K2CO3dok ne prestane odavanje gasa, na 0 °C. U rastvor se doda 15 ml NaOH (2N) i izvrši se ekstrahovanje pomoću DCM (3 x 10 ml). Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua (4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(3,4,5,6-tetrahidropiridin-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol) se koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. NaBH4(114 mg, 1.83 mmol) doda se u mešani rastvor 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(3,4,5,6-tetrahidropiridin-2-
2
il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (210 mg, 0.61 mmol) u MeOH (8 ml) 2 sata na rt. Posle završetka, što se proverava pomoću TLC, mešavina se koncentruje. Rezidui se doda 15 ml NaOH (2N) i ekstrahuje se pomoću DCM (3 x 10 ml). Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua (jedinjenje 3) se koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TEA (0.51 ml, 3.66 mmol) i metansulfonil hlorid (0.14 ml, 1.83 mmol) dodaju se u kapima u rastvor 6-(piperidin-2-il)-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (sirovi, 0.61 mmol) u DCM (10 ml) na rt respektivno. Mešavina se meša 3 sata. Posle završetka, što se proverava pomoću TLC, reakcija se gasi korišćenjem EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije Jedinjenje TRV-1554 (192 mg 75%) u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.56-1.76 (m, 4H), 1.81 (s, br, 4H), 1.95-2.02 (m, 1H), 2.34 (d, J=8.0, 1H), 2.54 (s, br, 4H), 2.80 (d, J=7.6, 2H), 2.9 (s, 3H), 3.02-3.16 (m, 2H), 3.85 (d, J=7.2, 1H), 3.97-4.00 (m, 2H), 4.39-4.43 (m, 2H), 5.01 (d, J=4.8, 1H), 5.88 (s, 1H), 7.00 (s, 1H).
[0270] TEA (0.81 ml, 5.84 mmol) i sirćetni anhidrid (0.276 ml, 2.92 mmol) dodaju se u rastvor 6-(piperidin-2-il)-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (200 mg, 0.584 mmol) u DCM (10 ml) na rt, respektivno. Mešavina se meša 2 sata. Po završetku, što se proverava korišćenjem TLC, reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1555 (205 mg 91%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.52-1.89 (m, 9H), 2.13-2.34 (m, 4H), 2.53 (s, br, 4H), 2.73-2.80 (m, 2.31H), 3.04-3.12 (m, 1.69H), 3.69-3.72 (m, 0.69H), 3.95 (s, br, 2H),
2 1
4.34-4.41 (m, 2H), 4.63-4.65 (m, 0.31H), 4.95 (s, br, 0.31H), 5.61-5.67 (m, 1H), 5.88 (s, 0.69H), 6.88 (s, 1H).
[0271] Kalijum karbonat (828 mg, 6 mmol) i 2-bromo-etil metil etar (0.432 ml, 4.5 mmol) dodaju se u rastvor 6-(piperidin-2-il)-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (513 mg, 1.5 mmol) u acetonitrilu (10 ml), respektivno. Zatim se mešavina greje na 50 °C preko noći i doda se još jedna partija 2-bromo-etil metil etra (0.144 ml, 1.5 mmol) i greje se 8 h na 50 °C. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1556 (280 mg, 46%) u vidu crvenog ulja. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.31-1.42 (m, 1H), 1.59-1.82 (m, 9H), 2.09-2.18 (m, 2H), 2.54 (s, br, 4H), 2.71-2.78 (m, 1H), 2.80 (d, J=7.6, 2H), 3.03-3.07 (m, 2H), 3.23 (d, J=7.6, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.34-3.39 (m, 1H), 3.46-3.52 (m, 1H), 3.95-3.99 (m, 2H), 4.41 (q, J=8.0, J=6.0, 2H), 6.04 (s, 1H), 6.91 (s, 1H).
[0272] n-BuLi (0.48 ml, 2.5 M, 1.2 mmol) doda se u kapima u rastvor 6-(piperidin-2-il)-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (342 mg, 1.0 mmol) u THF (10 ml) na -78 °C. Pošto se mešavina meša 5 minuta, u rastvor se doda metil jodid (0.125 ml, 2.0 mmol) i mešavina se meša 1 h na -78 °C. Reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml).
2 2
Mešavina se ispere pomoću 2 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV-1557 (156 mg, 44%) u vidu crvenog ulja. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.31-1.41 (m, 1H), 1.55-1.72 (m, 4H), 1.77-1.82 (m, 5H), 2.03-2.13 (m, 4H), 2.54 (s, br, 4H), 2.75-2.81 (m, 3H), 3.00-3.08 (m, 2H), 3.94-4.00 (m, 2H), 4.39-4.44 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 6.90 (s, 1H).
[0273] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.25 g, 0.74 mmol), (2,4,6-trimetilfenil)boronskom kiselinom (0.16 g, 1.00 mmol), i Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15) da se dobije 0.21 g (75% prinos) TRV 1558 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 6.96 (d, J = 0.50 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 0.75 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.40 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 3.97 (dd, J1 = 5.90 Hz, J2 = 8.16 Hz, 2H), 3.05 (septet, J = 7.06 Hz, 1H), 2.82 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.58 - 2.49 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.10 (s, 6H), 1.85 - 1.76 (m, 4H).
2
[0274] Reakciona fiola se napuni sa TRV 1472 (0.16 g, 0.47 mmol), (2,5-dimetilfenil)boronskom kiselinom (0.085 g, 0.57 mmol), Pd(PPh3)4(0.030 g, 0.026 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 1: 75: 15) da se dobije 0.17 g (100% prinos) TRV 1559 u vidu crvenog ulja. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.18 (d, J = 7.78 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.78 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.90 (d, J = 0.75 Hz, 1H), 5.79 (s, 1H), 4.42 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 3.99 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.06 (septet, J = 7.15 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 4H).
[0275] Reakciona fiola se napuni 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-nbutilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.33 g, 0.60 mmol), 2-bromotiazolom (0.081 mL, 0.90 mmol), Pd(PPh3)4(0.035 g, 0.030 mmol), CuI (0.011 g, 0.06 mmol), i CsF (0.18 g, 1.20 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda NMP (4 ml). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, zatvori i zatim greje na 50 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 0: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 3: 75: 15) da se dobije 0.086 g (42% prinos) TRV 1560 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.93 (d, J = 3.26 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.44 (d, J = 3.26 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.50 (t, J = 8.53 Hz, 2H), 4.07 (dd, J1 = 6.02 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 7.53 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.58 - 2.50 (m, 4H), 1.85 - 1.77 (m, 4H).
2 4
[0276] Reakciona fiola se napuni 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-nbutilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.41 g, 0.75 mmol), 4-bromotiazolom (0.10 mL, 1.13 mmol), Pd(PPh3)4(0.043 g, 0.037 mmol), CuI (0.014 g, 0.076 mmol), i CsF (0.28 g, 1.86 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda DMF (4 ml). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, zatvori i zatim greje na 50 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 0: 75: 15 do TEA: MeOH: heksan: EtOAc 5: 3: 75: 15) da se dobije 0.11 g (43% prinos) TRV 1561 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.91 (d, J = 2.01 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 2.01 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.05 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 7.00 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.59 - 2.49 (m, 4H), 1.85 - 1.75 (m, 4H).
[0277] 6-bromo-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.427 g, 2.0 mmol) i 5-formiltiofen-2-boronska kiselina (0.340 g, 2.2 mmol) stave se u staklenu epruvetu i epruveta se vakumira i očisti argonom (3x). Dodaju se DME (2.8 mL) i Na2CO3(3.0 mL, 6 mmol, 2 N vodeni rastvor), što je praćeno dodavanjem Pd(PPh3)4(0.115 g, 0.1 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i greje na 80°C preko noći. Reakcija se ohladi i razblaži korišćenjem EtOAc i vode.
2
Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući 5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-karbaldehid koji se prečisti korišćenjem hromatografije na koloni i koristi u sledećem koraku.
[0278] 5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-karbaldehid (0.2g) se rastvori u THF (5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se CF3TMS (0.19 mL) a zatim katalizator TBAF (0.1 mL, 1.0 M rastvor). Posle 30 minuta reakcija se skloni iz ledenog kupatila i ostavi se da se zagreje do sobne temperature. Kada se reakcija završi, prema TLC, ponovo se ohladi na 0 °C i doda se 2 N HCl (vod.), meša se 40 minuta i zatim bazifikuje pomoću 2N NaOH. Ova mešavina se ekstrahuje pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (heksan: etil acetat, 80:20) da se dobije 0.2 mg (80%) 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-il)etan-1-ola u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H), 7.42 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 5.33-5.38 (m, 1H), 2.88 (d, J=8.0 Hz, 1H).
[0279] 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-il)etan-1-ol (0.172 g, 0.54 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin hidrohloridna so (0.185 g, 0.81 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.3 ml, 2.16 mmol) i mešavina se greje na 80°C 2 h. Posle završetka reakcije, što se prati pomoću TLC, ona se gasi korišćenjem Na2CO3(2M) i ekstrahuje pomoću EtOAC dajući 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-il)etan-1-ol TRV1562. 1H NMR (DMSO, 700 MHz) δ = 7.77 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.42 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 5 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.59-5.55 (m, 1H), 4.38 (m, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.54 (m, 4H), 3.08 (m, 1H), 2.64 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.39 (m, 4H).
[0280] 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i
2
mešavina se greje na 80°C 2 h. Posle završetka reakcije, što se prati pomoću TLC, gasi se korišćenjem Na2CO3(2M) i ekstrahuje pomoću EtOAC dajući 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo [c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol TRV-1563. Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0.105 g, 80%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.70 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.13 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.28 (m, 1H), 4.37(m, 2H), 3.94 (m, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.05 (m, 1H), 2.63 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.37 (m, 4H).
2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 1-(azetidin-3-ilmetil) pirolidin hidrohloridna so (0.102 g, 0.48 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80°C 2 h. Posle završetka reakcije, što se prati pomoću TLC, ona se gasi korišćenjem Na2CO3(2M) i ekstrahuje pomoću EtOAC dajući 2, 2, 2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il) piridin-3-il)etan-1-ol TRV1564. Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0.103 g, 78%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.70 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.13 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.27 (m, 1H), 4.37 (m, 2H), 3.94 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.72 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.43 (m, 4H), 1.67 (m, 4H).
2
[0281] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.33 g, 1.25 mmol), 2-bromotiazol-4-karbaldehidom (0.19 g, 1.00 mmol), Pd(PPh3)4(0.058 g, 0.050 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (2 mL, 2.0 M, 5.0 mmol). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc:heks. 0: 100 do 10: 90) da se dobije 0.13 g (51% prinos) 2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)tiazol-4-karbaldehida u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0282] U rastvor 2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-karbaldehida (0.13 g, 0.51 mmol) u THF (5 mL) doda se natrijum borohidrid (0.15 g, 4.07 mmol). Reakciona mešavina se meša na rt do završetka reakcije. Reakcija se ohladi u kupatilu led/voda, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0: 100 do 20: 80) da se dobije 0.070 g (53% prinos) (2-(7-fluorobenzo[c] [1, 2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-il)metanola u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0283] U rastvor 2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-il)metanola (0.070 g, 0.27 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)morfolin dihidrohlorid (0.093 g, 0.41 mmol) pa zatim TEA (0.14 mL, 1.03 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C do okončanja. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 5: 0: 25: 75 do 5: 10: 25: 75) da se dobije 0.086 g (80% prinos) TRV 1565 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.55 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.48 (t, J = 8.28
2
Hz, 2H), 4.07 (dd, J1 = 5.52 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.10 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.49 (t, J = 4.39 Hz, 4H), 2.40 (široko, 1H).
[0284] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.33 g, 1.25 mmol), 4-bromotiazol-2-karbaldehidom (0.19 g, 1.00 mmol), hloro(2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’-bifenil)[2-(2’-amo-1,1’-bifenil)]paladijumom(II) (0.016 g, 0.020 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (3 mL) i vodeni rastvor K3PO4(3 mL, 0.68 M, 2.0 mmol). Reakciona fiola se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 80 °C preko noći. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc:heks 0: 100 do 10: 90) da se dobije 0.15 g (59% prinos) 4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-karbaldehida u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0285] U rastvor 4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-karbaldehida (0.15 g, 0.59 mmol) u THF (5 mL) doda se natrijum borohidrid (0.067 g, 1.77 mmol). Reakciona mešavina se meša na rt do završetka reakcije. Reakcija se ohladi u kupatilu led/voda, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se rastvori u acetonitrilu (5 ml). U rastvor se doda 1-(azetidin-3-ilmetil) morfolin dihidrohlorid (0.17 g, 0.74 mmol), što je praćeno dodavanjem TEA (0.26 mL, 1.87 mmol). Reaklcija se zatim greje na 50 °C dok se ne završi. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: Heks. 5: 1: 25: 75 do 5: 10: 25: 75) da se dobije 0.15 g (66% prinos u dva koraka) TRV1566 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.60 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.04 (s, 2H), 4.45 (t, J = 8.16 Hz, 2H), 4.07 (dd, J1 = 5.52 Hz, J2 = 8.28 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.09
2
(septet, J = 6.86 Hz, 1H), 2.78 (široko, 1H), 2.72 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.39 (t, J = 4.39 Hz, 4H).
[0286] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.29 g, 1.08 mmol), 1-(4-bromotiazol-2-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-olom (0.22 g, 0.83 mmol), Pd(PPh3)4(0.048 g, 0.042 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se dodaju dioksan (4 mL) i vod. rastvor Na2CO3(2 mL, 2.0 M, 5.0 mmol). Reakciona fiola se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom i zatim greje na 90 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom dodaju joj se 3 ml 2N NaOH i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc:heks. 0: 100 do 15: 85) da se dobije 0.050 g (19% prinos) 2,2,2- trifluoro-1-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-il)etan-1-ola u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0287] U rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-il)etan-1-ola (0.050 g, 0.16 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)pirolidin dihidrohlorid (0.050 g, 0.24 mmol), što je praćeno dodavanjem TEA (0.09 mL, 0.62 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C do završetka reakcije. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks 5: 1: 25: 75 do 5: 5: 25: 75) da se dobije 0.050 g (72% prinos) TRV 1567 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.73 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.29 (s, 1H), 5.38 (q, J = 7.27 Hz, 1H), 4.47 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.07 - 4.00 (m, 2H), 3.09 (septet, J = 7.03 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.61 - 2.52 (m, 4H), 1.87 - 1.78 (m, 4H).
21
[0288] 2,2,2-trifluoro-1-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiofen-2-il)etan-1-ol (0.1, 0.31 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin hidrohloridna so (0.108 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.25 mmol) i mešavina se greje na 80 °C 2 h. Posle završetka reakcije, što se prati pomoću TLC, gasi se korišćenjem Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC dajući 2,2,2-trifluoro-1-(4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il) tiofen-2-il)etan-1-ol TRV 1568. Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0.118 g, 83%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 8.23 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.35 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.36 (s, 1H), 5.50 (m, 1H), 4.37 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.06 (m, 1H), 2.64 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.39 (m, 2H).
[0289] 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80 °C 2 h. Posle završetka reakcije, što se prati pomoću TLC, gasi se korišćenjem Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC dajući 2,2,2-trifluoro-1-(3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il) piridin-2-il)etan-1-ol TRV1569.
Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0.105 g, 80%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.72 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.48 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 5.33 (m, 1H), 4.98 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.43 (m, 2H), 4.02 (m, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.73 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
[0290] CuCN (594 mg, 6.6 mmol) i TRV1470 (1.06 g, 3.0 mmol) dodaju se u suvi NMP (8 ml). Fiola se očisti azotom nekoliko puta. Mešavina se greje na 150 °C i meša 10 sati. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, reakcija se gasi vodenim rastvorom amonijum hidroksida (5 ml), i EtOAc (50 ml) se doda u rastvor. Mešavina se ispere pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-karbonitril TRV1570 (708 mg, 79%) u vidu crvene čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.44-2.49 (m, 4H), 2.72 (d, J=7.6, 2H), 3.08-3.15 (m, 1H), 3.69-3.76 (m, 4H), 4.05-4.11 (m, 2H), 4.45-4.49 (m, 2H), 5.83 (s, 1H), 7.40 (s, 1H).
[0291] n-BuLi (2.22 ml, 2.5 M, 5.56 mmol) doda se u kapima u rastvor TRV1470 (1.51 mg, 4.28 mmol) u THF (20 ml) na -78 °C u atmosferi azota. Pošto se mešavina meša 10 minuta, u rastvor se doda DMF (0.46 ml, 6.0 mmol) i mešavina se meša 1 h na -78 °C. Reakcija se gasi pomoću MeOH (1 ml), i u rastvor se doda EtOAc (50 ml). Mešavina se ispere pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-karbaldehid (980 mg, 76%) u vidu crvene čvrste supstance.
[0292] NaBH4(370 mg, 9.73 mmol) doda se u rastvor 7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-karbaldehida (980 mg, 3.24 mmol) u MeOH (10 ml) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja mešavine 1 sat, reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 10:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije (7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)metanol TRV1571 (560 mg, 56%) u vidu žute čvrste supstance. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.94 (s, br, 1H), 2.46-2.48 (m, 4H), 2.70 (d, J=7.6, 2H), 3.03-3.10 (m, 1H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.95-3.98 (m, 2H), 4.39 (t, J=8.2, 2H), 4.68 (s, 2H), 5.81 (s, 1H), 7.01 (s, 1H).
[0293] Reakciona fiola se napuni 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (1.20 g, 3.40 mmol), (2-formilfenil)boronskom kiselinom (0.76 g, 5.07 mmol), Pd(PPh3)4(0.20 g, 0.17 mmol). Posle oslobađanja od gasa i punjenja azotom, fiola se napuni dioksanom (15 mL) i vod. rastv. Na2CO3(6 mL, 2.0 M, 12.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobađa gasa, puni azotom, hermetički zatvori i onda greje na 100 °C do okončanja reakcije. Mešavina se razblaži vodom, doda se 5 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks.5: 0: 15: 75 do 5: 2: 15: 75) da se dobije 0.93 g (73% prinos) 2-
21
(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida u vidu žute polučvrste supstance.
[0294] Rastvor 2-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida (0.20 g, 0.53 mmol) u THF (5 mL) ohladi se u kupatilu led/voda. U ohlađeni rastvor doda se natrijum borohidrid (0.060 g, 1.60 mmol) u porciji. Reakciona mešavina se meša dok se reakcija ne završi, zatim se gasi pomoću 1N vod. rastv. HCl, basifikuje pomoću 1N NaOH, i zatim ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 5: 0: 25: 75 do 5: 5: 25: 75) da se dobije 0.12 g (60% prinos) TRV1572 u vidu crvenog ulja.1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.59 (d, J = 7.53 Hz, 1H), 7.45 (dt, J = 1.25 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 7.39 (dt, J1 = 1.25 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 7.33 (dd, J1 = 1.51 Hz, J2 = 7.53 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.68 (d, J = 4.27 Hz, 2H), 4.41 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 3.99 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.72 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.07 (septet, J = 6.59 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.47 (t, J = 4.39 Hz, 4H), 1.67 (široko, 1H).
[0295] TRV1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i 3, 4-dimetoksibenzenboronska kiselina (0.155 g, 0.85 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (3% MeOH / DCM) da se dobije 0.238 g (82% prinos) 6-(3, 4-dimetoksifenil)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1, 2,5]oksadiazola TRV1573. 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ = 7.22 (dd, J = 4.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.07 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.74 (d,J=8.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0296] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV1470 (250 mg, 0.7 mmol), (4-cijanofenil) boronskom kiselinom (125 mg, 0.85 mmol), i Pd (PPh3)4(42 mg, 0.035 mmol). Posle oslobađanja od gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (1.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 80 °C 3 h. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, doda se 10 mL vode, i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti na koloni ISCO hromatografskog sistema (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 219 mg (83% prinos) 4-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c][1, 2, 5] oksadiazol-5-il)benzonitrila TRV1574 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.78 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.73 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.16 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.49 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.07 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.15 (m, 1H), 2.74 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
[0297] TRV-1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i (3,5-dihlorofenil) boronska kiselina (0.162 g, 0.85 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa).
21
Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (2% MeOH / DCM) da se dobije 0.255 g (86% prinos) 6-(3,5-dihlorofenil)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola TRV1575. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.49 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.06-4.03 (m, 2H),3.74 (m, 4H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.74 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0298] 3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid (0.102 g, 0.4 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin hidrohloridna so (0.137 g, 0.6 mmol) rastvore se u NMP (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.22 ml, 1.6 mmol) i mešavina se greje na 80°C 2h. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije 3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il) benzamid TRV1576. Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao sistema rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0.128 g, 80%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.22 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.59 (t, J=8.0 Hz, 1H),7.51 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.40 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.63 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.38 (m, 2H).
21
[0299] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV-1470 (250 mg, 0.7 mmol), (3-cijanofenil) boronskom kiselinom (125 mg, 0.85 mmol), i Pd(PPh3)4(42 mg, 0.035 mmol). Posle oslobađanja od gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (1.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 80 °C 3 h. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, doda se 10 mL vode, i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti na ISCO kolonskom hromatografskom sistemu (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 250 mg (94% prinos) 3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)benzonitrila TRV1577 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.87 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.61 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.49 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.07 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.12 (m, 1H), 2.74 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.50 (m, 4H),
[0300] TRV1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i (3-hloro-4-metoksifenil) boronska kiselina (0.158 g, 0.85 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo
21
ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (2% MeOH / DCM) da se dobije 0.225 g (78% prinos) 6-(3-hloro-4-metoksifenil)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazola TRV1578. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.65 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.52-7.49 (dd, J=4.0 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.03 (d, J=8Hz, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.04-4.01 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.13-3.06 (m, 1H), 2.74 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0301] 4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid (0.102 g, 0.4 mmol) i 1-(azetidin-3-il metil) pirolidin-hidrohloridna so (0.128 g, 0.6 mmol) rastvore se u NMP (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.22 ml, 1.6 mmol) i mešavina se greje na 80°C 2h. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije 4-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c] [1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid TRV1579. Prečišćavanje se obavi na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao sistema rastvarača da se dobije Jedinjenje iz naslova (0. 110 g, 73%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.08 (bs, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.88 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.46 (bs, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.41 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.0 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.04-2.99 (m, 1H), 2.80 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.69 (m, 4H).
21
[0302] Reakciona fiola se napuni 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tri-nbutilstanil)benzo[c][1,2,5] oksadiazolom (0.25 g, 0.74 mmol), 2-bromopiridinom (0.90 mmol), Pd(PPh3)4(35 mg, 0.030 mmol), CuI (11.4 mg, 0.06 mmol), i Cs2CO3(182 mg, 1.20 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda NMP (4 mL). Reakcija se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, hermetički zatvori i greje na 50 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom (Combi-Flash RF200 sistem) da se dobije 6-(piridin-2-il)-4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1580. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.73 (d, J = 4.52 Hz, 1H), 7.83 - 7.78 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.35 -7.30 (m, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.50 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.07 (dd, J1 = 5.90 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.09 (septet, J = 6.90 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.58 - 2.50 (m, 4H), 1.85 - 1.77 (m, 4H).
[0303] TRV1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i (4-fluoro-3-metoksifenil) boronska kiselina (0.145 g, 0.85 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (2% MeOH / DCM) da se dobije 0.248 g (88% prinos) 6-(4-fluoro-3-metoksifenil)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c][1, 2,5]oksadiazola TRV1584.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.20-7.15 (m, 3H), 7.10 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.47 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.04-4.01 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.13-3.07 (m, 1H), 2.74 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
21
[0304] TRV1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i (3-fluoro-4-metoksifenil) boronska kiselina (0.145 g, 0.85 mmol) zatvore se hermetički u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (2% MeOH / DCM) da se dobije 0.260 g (92% prinos) 6-(3-fluoro-4-metoksifenil)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c][1, 2, 5]oksadiazola TRV1585.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.38-7.36 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 7.07-7.03 (t, J=8 Hz, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.46 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.04-4.02 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.75 (m, 4H), 3.13-3.06 (m, 1H), 2.73 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0305] Flakon sa okruglim dnom napuni se sa TRV1470 (250 mg, 0.7 mmol), (2-cijanofenil) boronskom kiselinom (125 mg, 0.85 mmol), i Pd (PPh3)4(42 mg, 0.035 mmol). Posle odlobađanja od gasa, dodaju se dioksan (5 mL) i vodeni rastvor natrijum karbonata (1.5 mL, 2M). Reakciona mešavina se greje na 80 °C 6 h. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, doda se 10 mL vode, i reakciona mešavina se ekstrahuje etil acetatom.
22
Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti na koloni ISCO hromatografskog sistema (2:5:100:500 MeOH / TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 150 mg (57% prinos) 2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-l-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzonitrila TRV1586 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.84 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.71 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.49-7.59 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.49 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.07 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.12 (m, 1H), 2.74 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
[0306] 4-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)-6-(tributilstanil)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.4 g, 0.73 mmol), 1-(2-bromopiridin-4-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-ol (0.230 g, 0.9 mmol), CsF (0.45 g, 2.19 mmol), CuI (14 mg, 0.073 mmol), Pd(PPh3)4, (0.042 g, 0.0365 mmol) stave se u staklenu epruvetu i hermetički zatvore, ona se zatim oslobodi gasa i očisti pomoću N2. Doda se DMF (10 ml) i reakciona mešavina se greje na 45ºC preko noći. Posle završetka reakcije, što se proverava korišćenjem TLC, reakcija se ohladi i zatim razblaži korišćenjem EtOAc i vode. Organski sloj se ispere vodom (3x), zasićenim rastvorom soli, suši (MgSO4), filtrira i koncentruje dajući sirovi proizvod koji se prečišćava korišćenjem hromatografije na koloni dajući 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-4-il)etan-1-ol TRV1587 (0.08 g, 26%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.74 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.43 (d, J=4.0 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.42 (m, 2H), 3.99 (m, 2H), 3.05 (m, 1H), 2.83 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.57 (m, 4H), 1.84 (m, 4H).
[0307] TRV1470 (0.250 g, 0.7 mmol) i (3, 5-difluorofenil) boronska kiselina (0.135 g, 0.85 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.2 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa dioksanom (5 mL). Rastvor se oslobađa gasa 10 minuta i onda se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.041 g, 0.035 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 80 °C 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na ISCO (2% MeOH / DCM) da se dobije 0.240 g (88% prinos) 6-(3, 5-difluorofenil)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c] [1, 2, 5] oksadiazola TRV1588. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.15-7.13 (m, 3H), 6.89 (t, J=8.0 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.48 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.74 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0308] TRV-1470 (0.5571 g, 1.58 mmol) i 4-formilfenilboronska kiselina (0.2606 g, 1.74 mmol) odmere se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). U epruvetu se dodaju DME (3.5 ml) i vodeni rastvor Na2CO3(2.4 mL, 2 N vod. rastvor). Epruveta se oslobađa gasa 5 minuta propuštanjem argona kroz rastvor. Odjednom se doda Pd(PPh3)4(0.0924 g, 0.08 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 95 °C 4 h. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži pomoću DCM i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću DCM (2 ×). Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu vodom, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovu braon čvrstu supstancu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (60% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.5709 g (95% prinos) aldehida 3 u vidu narandžaste čvrste supstance. Aldehid 3 (0.2852 g, 0.75 mmol) se rastvori u mešavini MeOH (12.5 mL) i THF (5 mL) i zatim ohladi u ledenom kupatilu. NaBH4(0.0567 g, 1.5 mmol) se zatim doda, odjednom, i mešavina se meša preko noći uz zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se zatim ponovo ohladi na 0 °C i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Vodena mešavina se zatim bazifikuje pomoću 2N NaOH (vod.) pre nego što se ekstrahuje korišćenjem DCM. Kombinovani organski ekstrakti se suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi benzil alkohol. Ovaj materijal se prečisti fleš hromatografijom (5% MeOH / DCM) da se dobije 0.1551 g (54% prinos) TRV1592 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.74 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.37 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.97-3.94 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.09-3.01 (m, 1H), 2.63 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H).
[0309] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.40 g, 1.50 mmol), (2-bromotiazol-5-il)metanolom (0.23 g, 1.19 mmol), Pd(PPh3)4 (0.068 g, 0.059 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (4 mL) i vod. Na2CO3(2 mL, 2.0 M, 5.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 100 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc:heks. 0: 100 do 15: 85) da se dobije 0.20 g (68% prinos) (2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)metanola u vidu bezbojne čvrste supstance.
22
[0310] U rastvor (2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)metanola (0.20 g, 0.80 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)pirolidin dihidrohlorid (0.28 g, 1.20 mmol), što je praćeno dodavanjem TEA (0.42 mL, 3.00 mmol). Reakcija se greje na 50 °C dok okončanja. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 5: 0: 25: 75 do 5: 10: 25: 75) da se dobije 0.050 g (72% prinos) TRV1594 u vidu narandžaste čvrste supstance. 1H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 7.82 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.72 (t, J = 5.65 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 5.52 Hz, 2H), 4.39 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.00 - 3.91 (m, 2H), 3.57 (t, J = 74.52 Hz, 4H), 3.06 (septet, J = 6.71 Hz, 1H), 2.63 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.42 - 2.34 (m, 4H).
[0311] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.16 g, 0.61 mmol), 1-(2-bromotiazol-5-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-olom (0.16 g, 0.61 mmol), Pd(PPh3)4(35 mg, 0.030 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda dioksan (4 ml) i vod. Na2CO3(2 mL, 2.0 M, 4.0 mmol). Reakciona fiola se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, hermetički zatvori, i zatim greje na 90 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc:heks. 0: 100 do 15: 85) da se dobije 0.082 g (42% prinos) 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)etan-1-ola u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0312] U rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)etan-1-ola (0.082 g, 0.26 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)pirolidin dihidrohlorid (0.082 g, 0.39 mmol), praćeno TEA (0.14 mL, 1.0 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks.5: 1: 25: 75 do 5: 10: 25: 75) da se dobije 0.10 g (88% prinos) TRV1597 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 8.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.54 (d, J = 5.77 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.74 (pentet, J = 6.40 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 3.98 (dd, J1 = 5.77 Hz, J2 = 8.28 Hz, 2H), 3.00 (septet, J = 6.71 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.48 - 2.38 (m, 4H), 1.74 - 1.61 (m, 4H).
[0313] Reakciona fiola se napuni 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (1.20 g, 3.40 mmol), (3-formilfenil)boronskom kiselinom (0.63 g, 4.25 mmol), Pd(PPh3)4(0.20 g, 0.17 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (10 mL) i vod. Na2CO3(6 mL, 2.0 M, 12.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 100 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, doda joj se 5 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 5: 0: 15: 75 do 5: 2: 15: 75) da se dobije 1.20 g (93% prinos) 3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida u vidu crvenog ulja.
[0314] Rastvor 3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzaldehida (0.26 g, 0.69 mmol) u THF (5 mL) ohladi se u kupatilu led/voda. U ovaj ohlađeni rastvor doda se natrijum borohidrid (0.040 g rastvoreno u 2 mL 1N vod. NaOH, 1.06 mmol), polako. Reakciona mešavina se meša dok se reakcija ne završi, zatim se gasi 1N vod. HCl, bazifikuje pomoću 1N NaOH, i zatim ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 5: 0: 25: 75 do 5: 5: 25: 75)
22
da se dobije 0.086 g (80% prinos) TRV1598 u vidu braon čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.64 (s, 1H), 7.56 (d, J = 7.53 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.53 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.53 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.44 (t, J = 8.16 Hz, 2H), 4.02 (dd, J1 = 5.52 Hz, J2 = 8.53 Hz, 2H), 3.73 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.09 (septet, J = 6.59 Hz, 1H), 2.72 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.47 (t, J = 4.27 Hz, 4H), 1.90 (široko, 1H).
[0315] n-BuLi (0.64 ml, 2.5 M, 1.6 mmol) se doda u kapima u rastvor TRV1470 (435 mg, 1.23 mmol) u THF (10 ml) na -78 °C u atmosferi azota. Pošto se mešavina meša 10 minuta, u rastvor se doda metil jodid (0.153 ml, 2.46 mmol), i mešavina se meša 1 h na -78 °C. Reakcija se gasi korišćenjem MeOH (1 ml), i EtOAc (50 ml) se doda u rastvor. Mešavina se ispere pomoću 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 6-metil-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1599 (205 mg, 57%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.35 (s, 1H), 2.46-2.49 (m, 4H), 2.70 (d, J=7.6, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.94 (d-d, J=5.6, J=8.4, 2H), 4.37 (t, J=8.2, 2H), 5.68 (s, 1H), 6.79 (s, 1H).
22
[0316] NaH (52 mg, 1.32 mmol) se doda u rastvor TRV1571 (200 mg, 0.658 mmol) u THF (10 ml) na 0 °C. Zatim se u rastvor doda metil jodid (0.122 ml, 3.0 mmol), i mešavina se meša 5 h od 0 °C do sobne temperature. Posle završetka, reakcija se gasi pomoću EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere korišćenjem 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 6-(metoksimetil)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1600 (170 mg, 81%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.46-2.48 (m, 4H), 2.70 (d, J=7.6, 2H), 3.03-3.09 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.97 (d-d, J=5.6, J=8.3, 2H), 4.38-4.42 (m, 4H), 5.83 (s, 1H), 6.97 (s, 1H).
[0317] (2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-4-il)metanol (0.150 g, 0.64 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.218 g, 0.95 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.3 ml, 1.92 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije (2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol-5-il)oksazol-4-il)metanol TRV1606. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografiji uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije TRV 1606 (0.210 g, 86%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 7.72 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.48 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.06 (t, J=4.0,8.0 Hz, 2H), 3.75 (m, 4H), 3.11 (m, 1H), 2.73 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H)
22
[0318] (2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-5-il)metanol (0.236 g,1.0 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.343 g, 1.5 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.4 ml, 3.0 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 6 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije (2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-l-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-5-il)metanol TRV1607 (0.260 g, 70%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 7.65 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.47 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.05 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.75 (m, 4H), 3.12 (m, 1H), 2.73 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
[0319] 2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c] [1,2,5] oksadiazol-5-il) oksazol-4-karbaldehid (0.08 g, 0.217 mmol) rastvori se u THF (5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se CF3TMS (0.062 g, 0.434 mmol), zatim katalizator TBAF (0.05 mL, 1.0 M rastvor u THF). Posle 30 minuta reakcija se ukloni iz ledenog kupatila i ostavi se da se zagreje do sobne temperature. Kada se reakcija završi, prema TLC, ponovo se ohladi na 0ºC i doda se 2 N HCl (vod.) meša se 40 minuta i onda bazifikuje pomoću 2N NaOH. Ova mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani ekstrakti se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, filtriraju i koncentruju. Sirovi materiijal se prečisti hromatografijom (heksan: etil acetat:
22
MeOH: Et3N, 5:1:0.3:0.3) da se dobije 0.07 mg (75%) 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-4-il)etan-1-ola TRV 1608 u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 7.85 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 6.50 (s, 1H), 5.16 (m, 1H), 4.51 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.09 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.75 (m, 4H), 3.15 (m, 1H), 2.74 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.49 (m, 4H).
[0320] 3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid (0.102 g, 0.4 mmol) i 1-(azetidin-3-ilmetil) pirolidin hidrohloridna so (0.128 g, 0.6 mmol) rastvore se u NMP (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.22 ml, 1.6 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (90:10) sistema rastvarača da se dobije 3-(7-(3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il)benzo[c] [1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid TRV1609 (0.118 g, 78%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.22 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.94 (m, 2H), 7.60 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.42 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.0 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.73 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.45 (m, 4H), 1.68 (m, 4H).
[0321] 4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid (0.102 g,0.4 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.137 g, 0.6 mmol) rastvore se u NMP (5 ml) na sobnoj
22
temperaturi, doda se trietilamin (0.22 ml, 1.6 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije 4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)benzamid TRV1610 (0.068 g, 51%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.08 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.41 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.99 (m, 2H), 3.58 (m, 4H), 308 (m, 1H), 2.64 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.39 (m, 4H).
[0322] H2O2(30% u H2O, 2.65 ml) doda se u kapima u rastvor 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (700 mg, 2.65 mmol) i NaOH (1 N, 2.65 ml) u EtOH (10 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto se mešavina meša 20 minuta, reakcija se gasi pomoću HCl (1 N) i pH se podesi na 2. Reakciona mešavina se koncentruje, i 20 ml EtOAc se doda rezidui. Mešavina se zatim ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (1:10, EtOAc/heksan do 1:5 EtOAc/heksan) da se dobije 7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-ol (330 mg, 81%) u vidu bledožute čvrste supstance.
[0323] MeI (0.25 ml, 4 mmol) se doda u suspenzioni rastvor 7-fluorobenzo[c] [1, 2,5]oksadiazol-5-ola (154 mg, 1.0 mmol) i K2CO3(276 mg, 2.0 mmol) u MeCN (10 ml) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja mešavine preko noći, reakcija se koncentruje do suvog. Rezidui se doda još jedna partija K2CO3(518 mg, 3.75 mmol), 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin 2 HCl so (344 mg, 1.5 mmol) i 10 ml MeCN. Mešavina se greje na 55 °C 6 sati. Posle hlađenja mešavine do sobne temperature, u rastvor se doda EtOAc (30 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 6-metoksi-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-
2
il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1611 (210 mg, 69%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.44-2.46 (m, 4H), 2.68 (d, J=7.5, 2H), 2.98-3.06 (m, 1H), 3.69-3.72 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 3.89 (d-d, J=5.5, J=8.3, 2H), 4.33 (t, J=8.2, 2H), 5.51 (d, J=1.3, 1H), 6.20 (d, J=1.8, 1H). i 5-metoksi-4-metil-7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1613 (45 mg, 14%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.32 (s, 3H), 2.46-2.48 (m, 4H), 2.70 (d, J=7.5, 2H), 3.03-3.09 (m, 1H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.93 (d-d, J=5.5, J=8.0, 2H), 4.36 (t, J=8.0, 2H), 5.73 (s, 1H).
[0324] n-BuLi (1.0 ml, 2.5 M, 2.5 mmol) doda se u kapima u rastvor TRV1470 (706 mg, 2.0 mmol) u THF (20 ml) na -78 °C u atmosferi azota. Posle mešanja mešavine 10 minuta, u rastvor se doda dimetil disulfid (0.233 ml, 2.5 mmol) i mešavina se meša 1 h na -78 °C. Reakcija se gasi pomoću MeOH (1 ml), i EtOAc (50 ml) se doda u rastvor. Mešavina se ispere korišćenjem 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 6-(metiltio)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazol TRV1612 (550 mg, 86%) u vidu crvenobraon čvrste supstance.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.46-2.49 (m, 4H), 2.53 (s, 3H), 2.69 (d, J=7.5, 2H), 3.02-3.09 (m, 1H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.95 (d-d, J=5.5, J=8.4, 2H), 4.38 (t, J=8.2, 2H), 5.66 (s, 1H), 6.61 (s, 1H).
2 1
[0325] Za detalje o eksperimentu vidi [00822] i [00823]
[0326] Reakciona fiola se napuni 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.44 g, 1.25 mmol), (2-(dimetilkarbamoil)fenil)boronskom kiselinom (0.30 g, 1.55 mmol), Pd(PPh3)4(0.072 g, 0.063 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (7.5 mL) i vod. Na2CO3(3 mL, 2.0 M, 6.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 90 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (TEA: MeOH: EtOAc: heks. 2: 0: 15: 75 do 2: 5: 15: 75) da se dobije 0.52 g (100% prinos) TRV1615 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.52 - 7.37 (m, 4H), 7.03 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.40 (t, J = 8.16 Hz, 2H), 3.98 (dd, J1 = 5.65 Hz, J2 = 8.41 Hz, 2H), 3.72 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.06 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.70 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.46 (t, J = 4.27 Hz, 4H).
2 2
[0327] TRV1470 (0.4179 g, 1.18 mmol) i (4-(metoksikarbonil) fenil) boronska kiselina (0.2772 g, 1.54 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). U epruvetu se dodaju DME (2.7 ml) i vodeni rastvor Na2CO3(1.8 mL, 2 N vod. rastvor). Epruveta se oslobađa gasa 5 minuta propuštanjem argona kroz rastvor. Odjednom se doda Pd(PPh3)4(0.069 g, 0.06 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 95 °C 16 h. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži pomoću DCM i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću DCM (2 ×). Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu vodom, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovu braon čvrstu supstancu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (60% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.4752 g (99% prinos) metil estra 5. Ovaj materijal se rastvori u THF (15 mL) i ohladi na 0 °C. U kapima se doda MeMgBr (1.2 mL, 3.0 M rastvor u Et2O) i reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Reakcija se zatim ponovo ohladi i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Ovo se ekstrahuje pomoću EtOAc (3x) i kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi alkohol. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (60% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.2202 g (46% prinos) TRV1616. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.70 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.37 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.97-3.94 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.09-3.01 (m, 1H), 2.62 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H), 1.45 (s, 6H).
2
[0328] TRV1470 (0.4044 g, 1.14 mmol) i (3-(metoksikarbonil) fenil) boronska kiselina (0.2664 g, 1.48 mmol) stave se u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ×). U epruvetu se dodaju DME (2.6 ml) i vodeni rastvor Na2CO3(1.7 mL, 2 N vod. rastvor). Epruveta se oslobađa gasa 5 minuta propuštanjem argona kroz rastvor. Odjednom se doda Pd(PPh3)4(0.069 g, 0.06 mmol), epruveta se hermetički zatvori i greje na 95 °C 16 h. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži pomoću DCM i vode. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću DCM (2 ×). Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu vodom, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovu braon čvrstu supstancu. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (70% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.4769 g (99% prinos) metil estra. Ovaj materijal se rastvori u THF (15 mL) i ohladi na 0 °C. U kapima se doda MeMgBr (1.2 mL, 3.0 M rastvor u Et2O) i reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu preko noći. Reakcija se zatim ponovo ohladi i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Ovo se ekstrahuje pomoću EtOAc (3x) i kombinovani organski slojevi se isperu vodom, zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju dajući sirovi alkohol. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (60% EtOAc / heksan uz 5% TEA aditiv) da se dobije 0.2507 g (53% prinos) TRV1617. 1H NMR (500 MHz, DMSO) δ = 7.82 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.38 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.97-3.94 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.10-3.01 (m, 1H), 2.63 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H), 1.48 (s, 6H).
2 4
[0329] 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-2-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1618. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje sistema rastvarača dihlorometan: metanol (95:5) da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-2-il)etan-1-ol TRV1618 (0.115 g, 85%) u vidu čvrste supstance narandžaste boje.<1>H NMR(DMSO-d6, 400MHz): δ 9.0 (s, 1H), 8.32 (dd, J=4.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.15 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 5.24 (m, 1H), 4.41 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.98 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.64 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.38 (m, 4H).
[0330] 2,2,2-trifluoro-1-(6-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-2-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1569. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje sistema rastvarača dihlorometan:
2
metanol (95:5) da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(6-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-2-il)etan-1-ol TRV1619 (0.105 g, 80%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.18 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.06 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J=4.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.33 (m, 1H), 4.38 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.97 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.64 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.38 (m, 4H).
[0331] 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-4-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1569. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-4-il)etan-1-ol TRV1620 (0.110 g, 82%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.78 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.58 (d, J=4.0 Hz, 1H),7.23 (d, J=4.0 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.39 (m, 1H), 4.42 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.99 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.09 (m, 1H), 2.65 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.39 (m, 4H).
2
[0332] 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1569. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje sistema rastvarača dihlorometan: metanol (95:5) da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol TRV-1621 (0.099 g, 75%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 9.04 (d, J=4.0 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.42 (s, 1H) ,7.21 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.43 (m, 1H), 4.98 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.43 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.01 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.11 (m, 1H), 2.64 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.39 (m, 4H).
[0333] 2,2,2-trifluoro-1-(6-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol (0.1, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1569. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje sistema rastvarača dihlorometan: metanol (95:5) da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(6-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-3-il)etan-1-ol TRV1622 (0.095 g, 73%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.80 (s, 1H), 8.22 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.03 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 5.41 (m, 1H), 4.43 (m, 2H), 4.02 (m, 2H), 3.96 (m, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.64 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.38 (m, 4H).
2
[0334] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.35 g, 1.34 mmol), 1-(2-bromotiazol-5-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-olom (0.28 g, 1.07 mmol), Pd(PPh3)4(0.090 g, 0.080 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (5 mL) i vod. Na2CO3(3 mL, 2.0 M, 6.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 90 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0: 100 do 20: 80) da se dobije 0.20 g (60% prinos) 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)etan-1-ola u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0335] 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-5-il)etan-1-ol (0.20 g, 0.64 mmol) dobijen gore i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin dihidrohlorid (0.23 g, 1.00 mmol) suspenduju se u MeCN (5 mL). U suspenziju se doda TEA (0.35 mL, 2.55 mmol). Dobjeni rastvor se greje na 50 °C preko noći, hladi do sobne temperature, razblaži etil acetatom, i ispere zasićenim rastvorom soli. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (MeOH: DCM 0: 100 do 5: 95) da se dobije 0.25 g (86% prinos) TRV1625 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.06 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.55 (d, J = 5.77 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.74 (pentet, J = 6.60 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 8.15 Hz, 2H), 3.97 (t, J = 6.90 Hz, 2H), 3.57 (t, J = 4.27 Hz, 4H), 3.07 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.63 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.44 - 2.33 (m, 4H).
2
[0336] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.29 g, 1.10 mmol), 2-bromotiazol-4-karbaldehidom (0.19 g, 1.00 mmol), XPhos Pd G2 (0.024 g, 0.030 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda dioksan (3 mL) i vod. K3PO4(3.3 mL, 0.62 M, 2.05 mmol). Reakciona fiola se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, hermetički zatvori i onda greje na 60 °C 24 h. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0: 100 do 20: 80) da se dobije 0.120 g (48% prinosa) 2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-karbaldehida u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0337] 2-(7-fluorobenzo[c] [1, 2, 5] oksadiazol-5-il) tiazol-4-karbaldehid (0.22 g, 0.88 mmol) i trimetil (trifluorometil) silan (0.20 mL, 1.30 mmol) rastvori se u anhidrovanom THF (7.5 mL). Ovaj rastvor se ohladi u kupatilu led/voda pre nego što se u kapima doda TBAF (0.080 mL, 1M, 0.080 mmol). Dobijeni tamni rastvor se meša na temperaturi kupatila led/voda dok se reakcija ne završi, a zatim se gasi pomoću 2N vod. HCl. Reakciona mešavina se greje do sobne temperature, meša 0.5 h, zatim razblaži vodom, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: DCM: heks. 0: 30: 50 do 20: 30: 50) da se dobije 0.060 g (21% prinos) 2, 2, 2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-il)etan-1-ola u vidu bele čvrste supstance.
[0338] U rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-4-il)etan-1-ola (0.060 g, 0.19 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)morfolin dihidrohlorid (0.060 g, 0.26 mmol), praćeno dodavanjem TEA (0.10 mL, 0.72 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja
2
(MeOH: DCM 0: 100 do 5:100) da se dobije 0.065 g (76% prinos) TRV1626 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 7.98 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.09 (d, J = 6.27 Hz, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.40 (pentet, J = 6.90 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 8.15 Hz, 2H), 3.98 (dd, J1 = 6.02 Hz, J2 = 8.03 Hz, 2H), 3.57 (t, J = 4.40 Hz, 4H), 3.07 (septet, J = 6.65 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.44 - 2.34 (m, 4H).
[0339] Reakciona fiola se napuni 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.58 g, 2.20 mmol), 4-bromotiazol-2-karbaldehidom (0.38 g, 2.00 mmol), XPhos Pd G2 (0.047 g, 0.060 mmol). Fiola se oslobodi gasa i napuni azotom. U fiolu se doda dioksan (6.5 mL) i vod. K3PO4(6.5 mL, 0.62 M, 4.00 mmol). Reakciona fiola se ponovo oslobodi gasa, ponovo napuni azotom, hermetički zatvori i onda greje na 60 °C 24 h. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0: 100 do 10: 90) da se dobije 0.36 g (72% prinos) 4-(7-fluorobenzo[c] [1,2,5] oksadiazol-5-il) tiazol-2-karbaldehida u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0340] 4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-karbaldehida (0.36 g, 1.44 mmol) i trimetil(trifluorometil) silan (0.35 mL, 2.28 mmol) rastvore se u anhidrovanom THF (10 mL). Ovaj rastvor se ohladi i kupatilu led/voda pre nego što se u kapima doda TBAF (0.15 mL, 1M, 0.15 mmol). Dobijeni tamni rastvor se meša na temperaturi kupatila led/voda dok se reakcija ne završi, a zatim se gasi pomoću 2N vod. HCl. Reakciona mešavina se greje do sobne temperature, meša 0.5 h, zatim razblaži vodom, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: DCM: heks. 0: 30: 50 do 20: 30: 50) da se dobije 0.050 g (11% prinos) 2,2,2-trifluoro-1-(4-(7-fluorobenzo[c] [1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-il)etan-1-ola u vidu bele čvrste supstance.
24
[0341] U rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)tiazol-2-il)etan-1-ola (0.050 g, 0.16 mmol) u acetonitrilu (5 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)morfolin dihidrohlorid (0.045 g, 0.20 mmol), praćeno dodavanjem TEA (0.080 mL, 0.58 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: DCM 0: 100 do 5:100) da se dobije 0.060 g (84% prinos) TRV1627 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 8.57 (s, 1H), 7.94 (d, J = 6.02 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.67 (pentet, J = 6.65 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 7.78 Hz, 2H), 3.96 (dd, J1 = 6.27 Hz, J2 = 8.03 Hz, 2H), 3.58 (t, J = 4.15 Hz, 4H), 3.07 (septet, J = 6.75 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.44 - 2.34 (m, 4H).
[0342] CuCN (594 mg, 6.6 mmol) i TRV1470 (1.06 g, 3.0 mmol) dodaju se u suvi NMP (8 ml). Fiola se očisti azotom nekoliko puta. Mešavina se greje na 150 °C i meša 10 sati. Posle završetka, što se proverava pomoću TLC, reakcija se gasi vodenim rastvorom amonijum hidroksida (5 ml), i EtOAc (50 ml) se doda u rastvor. Mešavina se ispere korišćenjam 1 N NaOH i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV- 1570 (708 mg, 79%) u vidu crvene čvrste supstance.
[0343] Hidroksilamin hidrohlorid (167 mg, 2.4 mmol) i natrijum hidroksid (96 mg, 2.4 mmol) dodaju se u rastvor TRV-1570 (598 mg, 2 mmol) u metanolu na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina se meša dva dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač ispari i rezidua se koristi u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0344] N,N-diizopropiletilamin (0.9 mL, 5.2 mol) se doda u N-hidroksi-7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-karboksimidamid (664 mg, 2.0 mol) u DMF (15 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Mešavina se ohladi na 0 °C i u kapima se doda etil oksalil hlorid (0.29 mL, 2.6 mmol). Posle mešanja na 0 °C 10 min, mešavina se zagreje na sobnu temperaturu i zatim na 50 °C i meša 3 h. Mešavina se razblaži pomoću EtOAc (50 mL) i ispere zasićenim rastvorom soli (3 X 50 mL). Rastvor se suši (Na2SO4) i evaporiše u vakuumu. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 2:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije etil 3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1,2,4-oksadiazol-5-karboksilat (397 mg, 48%) u vidu crvenog ulja.
[0345] MeMgBr (0.50 ml, 1.5 mmol) se doda u rastvor etil 3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c] [1,2,5]oksadiazol-5-il)-1,2,4-oksadiazol-5-karboksilata (200 mg, 0.48 mmol) THF (10 ml) na 0 °C. Posle 2 h mešanja mešavine, reakcija se gasi EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije TRV1628 (130 mg, 67%) u vidu crvene čvrste supstance.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.71 (s, 6H), 2.47-2.49 (m, 4H), 2.72 (d, J=7.5, 2H), 3.05-3.11 (m, 1H), 3.72-3.75 (m, 4H), 4.04 (d-d, J=5.5, J=8.5, 2H), 4.46 (t, J=8.3, 2H), 6.44 (s, 1H), 7.81 (s, 1H).
[0346] NaBH4(46 mg, 1.21 mmol) doda se u rastvor etil 3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1,2,4-oksadiazol-5-karboksilata (250 mg, 0.604 mmol) u THF (10 ml) na 0 °C. Posle 2 h mešanja mešavine, reakcija se gasi EtOAc/H2O (1:1, 50 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metanol TRV1629 (40 mg, 18%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.48-2.50 (m, 4H), 2.73 (d, J=7.3, 2H), 3.06-3.11 (m, 1H), 3.73-3.75 (m, 4H), 4.03 (d-d, J=5.6, J=8.4, 2H), 4.46 (t, J=8.3, 2H), 4.99 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 7.79 (s, 1H).
[0347] 2,2,2-trifluoro-1-(3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)piridin-2-il)etan-1-ol (0.1 g, 0.32 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.110 g, 0.47 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.18 ml, 1.28 mmol) i mešavina se greje na 80ºC 2 h. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-l-il) benzo [c][1, 2, 5] oksadiazol-5-il) piridin-4-il) etan-1-ol TRV1636 (0.080 g, 75%) u vidu narandžaste čvrste supstance. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.74 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.70 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.24 (m, 1H), 4.40 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.09 (m, 1H), 2.64 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.37 (m, 4H).
[0348] TRV1470 (0.4197 g, 1.19 mmol) i 3-bromofenilboronska kiselina (0.2510 g, 1.25 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). U epruvetu se doda 2M Na2CO3(1.8 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 ml). Zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0690 g, 0.059 mmol). Epruveta se hermetički zatvori i greje na 95 °C 5 h. Posle hlađenja do sobne temperature mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli, i zatim suše (MgSO4), filtriraju i
24
koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (50% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije 0.3918 g (75% prinos) arilbromida 2. Arilbromid (0.3881 g, 0.90 mmol) se rastvori u THF (10 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se dodaje nBuLi (0.74 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) tokom 5 minuta. Reakcija se ostavi da se meša 15 minuta i zatim se u kapima doda rastvor 3-oksetanona (0.1042 g, 1.45 mmol) u THF (1 mL). Reakcija se zatim meša preko noći uz sporo zagrevanje do sobne temperature. Reakcija se zatim ponovo ohladi u ledenom kupatilu i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i zatim razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani slojevi se isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se na kraju prečisti hromatografijom na koloni (70% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije TRV1638 (0.1406 g, 37% prinos). 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.90 (s, 1H), 7.69 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.52 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 4.81-4.77 (m, 4H), 4.38 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.98-3.95 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.09-3.01 (m, 1H), 2.64 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H).
[0349] TRV1470 (0.4054 g, 1.15 mmol) i 4-bromofenilboronska kiselina (0.2430 g, 1.21 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.8 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa DME (2.7 mL). Zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0670 g, 0.058 mmol). Epruveta se ponovo hermetički zatvori i greje na 95 °C 5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se zatim isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije 0.3273 g (66% prinos) arilbromida 1. Arilbromid (0.3054 g, 0.71 mmol) se rastvori u THF (10 mL) i hladi na -78 °C. nBuLi (0.50 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) dodaje se u kapima 5 minuta. Reakcija se ostavi da se meša 15 minuta i zatim se rastvor 3-oksetanona (0.0793 g, 1.1 mmol) u THF (1 mL) doda u kapima. Reakcija se meša preko noći uz sporo zagrevanje na sobnu temperaturu. Ponovo se ohladi u ledenom kupatilu i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i zatim razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i zatim se vodeni sloj ponovo ekstrahuje pomoću EtOAc (3x). Kombinovani slojevi se onda isperu vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se konačno prečisti hromatografijom na koloni (85% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije TRV1639 (0.1084 g, 36% prinos). 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.82 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.33 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.80 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 4.71 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 4.38 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.97 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H)3.09-3.01 (m, 1H), 2.63 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H).
[0350] Diizopropiletilamin (1.043 ml, 6.0 mmol) i trifluorosirćetni anhidrid (0.42 ml, 3.0 mmol) zasebno se dodaju u rastvor N-hidroksi-7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-karboksimidamida (500 mg, 1.50 mmol) u THF (20 ml) i DMF (30 ml) na sobnoj temperaturi. Posle 2 h mešanja mešavine, reakciji se doda EtOAc (60 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:5:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)-6-(5-(trifluorometil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)benzo[c] [1,2,5]oksadiazol TRV1643 (350 mg, 57%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.48-2.50 (m, 4H), 2.73 (d, J=7.5, 2H), 3.07-3.16 (m, 1H), 3.73-3.75 (m, 4H), 4.09 (d-d, J=5.3, J=8.5, 2H), 4.51 (t, J=8.2, 2H), 6.45 (s, 1H), 7.88 (s, 1H).
24
[0351] DCC (618 mg, 3.0 mmol) doda se u rastvor N-hidroksi-7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c] [1,2,5]oksadiazol-5-karboksimidamida (500 mg, 1.5 mmol) i 3,3,3-trifluoromlečne kiseline (432 mg, 3.0 mmol) u THF (20 ml) i DMF (30 ml) na sobnoj temperaturi. Posle 3 h mešanja mešavine, reakcija se greje na 70 °C preko noći. Još jedan ekvivalent DCC (309 mg, 1.5 mmol) i 3,3,3-trifluoro-mlečne kiseline (216 mg, 1.5 mmol) doda se u reakcionu mešavinu i reakcija se meša 8 sati na toj temperaturi. Reakciji se doda EtOAc (60 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (1:99, MeOH/DCM do 3:97, MeOH/DCM) da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)etan-1-ol TRV1644 (350 mg, 53%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 2.50-2.52 (m, 4H), 2.74 (d, J=7.5, 2H), 3.07-3.14 (m, 1H), 3.74-3.77 (m, 4H), 4.05 (d-d, J=5.5, J=8.5, 2H), 4.47 (t, J=8.3, 2H), 5.43 (q, J=5.9, 1H), 6.41 (s, 1H), 7.82 (s, 1H).
[0352] Flakon sa okruglim dnom napuni se 6-bromo-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazolom (3.255 g, 15.0 mmol), dppp (371 mg, 0.9 mmol) i Pd(OAc)2(101 mg, 0.45 mmol). Flakon se očisti azotom nekoliko puta i zatim se u mešavinu zasebno dodaju suvi DMF (30 ml), etil akrilat (4.9 ml, 45.0 mmol) i TEA (6.26 ml, 45 mmol). Dobijena mešavina se onda greje na 80 °C. Pošto se reakcija završi za 2 h, u mešavinu se doda 100 ml EtOAc. Mešavina se ispere
24
zasićenim rastvorom soli 3 puta. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:95, EtOAc/heksan do 6:85 EtOAc/heksan) da se dobije etil (E)-3-(7-fluorobenzo[c] [1,2,5] oksadiazol-5-il) akrilat (3.3 g, 93%) u vidu narandžaste čvrste supstance. [0353] MeMgBr (10 mg, 30 mmol) doda se u rastvor dobijenog etil (E)-3-(7-fluorobenzo[c] [1, 2,5] oksadiazol-5-il) akrilata (1.652 g, 7.0 mmol) u THF (35 ml) na -5 °C. Posle mešanja mešavine 4 h, reakcija se gasi pomoću 3 ml MeOH. U mešavinu se doda EtOAc (80 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom NH4Cl i zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (5:95, EtOAc/heksan do 15:85 EtOAc/heksan) da se dobije (E)-4-(7-fluorobenzo[c] [1, 2, 5] oksadiazol-5-il)-2-metilbut-3-en-2-ol (1.0 g, 64%) u vidu svetložute čvrste supstance.
[0354] TEA (0.50 ml, 3.6 mmol) se doda u rastvor (E)-4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-2-metilbut-3-en-2-ola (200 mg, 0.90 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin 2HCl soli (309 mg, 1.35 mmol) u MeCN (10 ml). Mešavina se greje na 70 °C 36 sati. Pošto se mešavina ohladi na sobnu temperaturu, EtOAc (30 ml) se doda u rastvor. Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije (E)-2-metil-4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)but-3-en-2-ol TRV1645 (230 mg, 72%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1.46 (s, 6H), 2.47-2.49 (m, 4H), 2.71 (d, J=7.3, 2H), 3.05-3.11 (m, 1H), 3.72-3.75 (m, 4H), 3.97 (d-d, J=5.8, J=8.2, 2H), 4.41 (t, J=8.2, 2H), 5.96 (s, 1H), 5.43 (d, J=16.1, 1H), 6.59 (d, J=16.1, 1H), 6.92 (s, 1H).
[0355] Reakciona fiola se napuni 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.71 g, 2.00 mmol), 1-metil-4-(3,3,4,4-tetrametilborolan-1-il)-1H-pirazolom (0.47 g, 2.30 mmol), Pd(PPh3)4(0.070 g, 0.061 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni argonom, dodaju se dioksan (6 mL) i vod. Na2CO3(4.0 mL, 2.0 M, 8.0 mmol).
24
Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni argonom, hermetički zatvori i zatim greje na 90 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, dodaju joj se 3 mL 2N NaOH, i ekstrahuje se etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks. 0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije 0.70 g 6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazola u vidu narandžaste čvrste supstance (99% prinos).
[0356] Reakciona fiola se napuni 6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) benzo[c][1, 2, 5] oksadiazolom (0.29 g, 0.82 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni argonom, doda se THF (5 mL). Dobijeni rastvor se ohladi na -78 °C u suvom ledenom kupatilu. U kapima se doda n-BuLi (0.40 mL, 2.5 M, 1.00 mmol). Posle mešanja 1h na -78 °C, doda se etil 2,2,2-trifluoroacetat (0.36 mL, 3.00 mmol). Reakcija se meša na -78 °C 2h pre gašenja metanolom. Mešavina se razblaži vodom, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks.0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije 0.20 g (55% prinos) 2,2,2-trifluoro-1-(1-metil-4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1H-pirazol-5-il)etan-1-ona u vidu narandžaste čvrste supstance.
[0357] Rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(1-metil-4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo [c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1H-pirazol-5-il)etan-1-ona (0.050 g, 0.16 mmol) u metanolu (5 mL) ohladi se u kupatilu od mešavine leda i vode. Doda se natrijum borohidrid (0.025 g, 0.66 mmol). Reakciona mešavina se zagreje na rt, i meša do završetka reakcije. Reakcija se gasi pomoću 1N vod. HCl, razblaži vodom, bazifikuje vod. NaOH, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks. 0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije 0.18 g (90% prinos) TRV1647 u vidu narandžaste čvrste supstance. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.55 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.44 (q, J = 7.27 Hz, 1H), 5.08 (široko, 1H), 4.34 (t, J = 8.03 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 8.16 Hz, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.96 - 3.86 (m, 2H), 3.71 (t, J = 4.52 Hz, 4H), 3.01 (septet, J = 6.90 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 7.53 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 4.27 Hz, 4H).
24
[0358] Reakciona fiola se napuni 6-bromo-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.65 g, 3.00 mmol), 1-metil-5-(3,3,4,4-tetrametilborolan-1-il)-1H-pirazolom (0.72 g, 3.46 mmol), Pd(PPh3)4(0.10 g, 0.090 mmol). Posle oslobađanja od gasa i punjenja argonom, dodaju se dioksan (8 mL) i vod. Na2CO3(6.0 mL, 2.0 M, 12.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni argonom, hermetički zatvori i zatim greje na 90 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, i ekstrahuje se etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks.: DCM 0: 50: 30 do 8: 50: 30) da se dobije 0.45 g 4-fluoro-6-(1-metil-1H-pirazol-5-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (69% prinos) u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0359] Rastvor 4-fluoro-6-(1-metil-1H-pirazol-5-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazola (0.23 g, 1.04 mmol) u DCM (5.0 mL) ohladi se u kupatilu led/voda. Polako se doda brom (0.65 mL, 2.0 M u DCM, 1.30 mmol). Reakciona mešavina se polako zagreje do sobne temperature i meša do završetka reakcije. Reakcija se koncentruje i sirovi proizvod se koristi u sledećem koraku direktno, bez dodatnog prečišćavanja.
[0360] Rastvoru 6-(4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola (0.42 g, 1.41 mmol) u acetonitrilu (10 mL) doda se 1-(azetidin-3-ilmetil)morfolin dihidrohlorid (0.40 g, 1.75 mmol), što je praćeno dodavanjem TEA (1.10 mL, 7.91 mmol). Reakcija se zatim greje na 50 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom.
Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se koristi u sledećem koraku direktno, bez dodatnog prečišćavanja.
[0361] Reakciona fiola se napuni 6-(4-bromo-1-metil-1H-pirazol-5-il)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (0.11 g, 0.25 mmol). Posle oslobađanja od gasa i punjenja argonom, doda se THF (3 mL). Rezultantni rastvor se ohladi na -78 °C u suvom ledenom kupatilu. U kapima se doda n-BuLi (0.13 mL, 2.5 M, 0.31
24
mmol). Posle mešanja 1 h na -78 °C, doda se etil 2, 2, 2-trifluoroacetat (0.12 mL, 1.00 mmol). Reakcija se meša na -78 °C 2 h pre gašenja metanolom. Mešavina se razblaži vodom, i ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks.0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije 0.040 g 2,2,2-trifluoro-1-(1-metil-5-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1H-pirazol-4-il)etan-1-ona.
[0362] Rastvor 2,2,2-trifluoro-1-(1-metil-5-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-1H-pirazol-4-il)etan-1-ona (0.13 g, 0.28 mmol) u THF (5 mL) ohladi se u kupatilu led/voda. Doda se natrijum borohidrid (0.016 g, 0.42 mmol) u vod. NaOH (0.80 mL, 1 M, 0.80 mmol). Reakciona mešavina se meša na temperaturi kupatila od leda i vode dok se reakcija ne završi. Reakcija se razblaži etil acetatom i ispere zasićenim rastvorom soli. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: DCM 0: 100 do 5: 95) da se dobije 0.11 g (88% prinos) TRV1651 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.75 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.84 (q, J = 7.03 Hz, 1H), 4.54 - 4.44 (m, 2H), 4.08 - 3.98 (m, 2H), 3.86 -3.82 (m, 3H), 3.76 - 3.70 (m, 4H), 3.11 (septet, J = 6.53 Hz, 1H), 2.74 (d, J = 7.28 Hz, 2H), 2.52 - 2.45 (m, 4H).
[0363] 6-(2-metoksipiridin-3-il)-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.150 g,0.612 mmol) i 4-(azetidin-3-il metil) morfolin hidrohloridna so (0.140 g, 0.612 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.3 ml, 1.85 mmol) i mešavina se greje na 50ºC preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) sistema rastvarača da se dobije 6-(2-metoksipiridin-3-il)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-lil)benzo[c][1,2,5] oksadiazol TRV1658 (0.208 g, 90%) u vidu čvrste supstance crvene boje.
2
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.23 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H) 7.14 (s, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.44 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.98 (m, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.11 (m, 1H), 2.73 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H)
[0364] 6-(2-metoksipiridin-4-il)-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.150 g, 0.612 mmol) i 4-(azetidin-3-il metil) morfolin hidrohloridna so (0.140 g, 0.612 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.3 ml, 1.85 mmol) i mešavina se greje na 50ºC preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije 6-(2-metoksipiridin-4-il)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il) benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1659 (0.2180 g, 92%) u vidu čvrste supstance crvene boje.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.26 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.12 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.47 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.05 (m, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.14 (m, 1H), 2.73 (d, J=4.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
2 1
[0365] 6-(4-ciklopropil-3-metoksifenil)-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.142 g, 0.5 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.114 g, 0.5 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.2 ml, 1.5 mmol) i mešavina se greje na 50ºC preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) kao rastvarača da se dobije 6-(4-ciklopropil-3-metoksifenil)-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol TRV1660 (0.1780 g, 85%) u vidu narandžaste čvrste supstance.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 7.30 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.05 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.0 (s, 1H), 5.96 (s,1H), 4.42 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.99 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.74 (m, 4H), 3.10 (m, 1H), 2.72 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.47 (m, 4H) 1.85 (m, 1H), 1.51 (m, 2H), 1.26 (m, 2H).
[0366] TRV1470 (0.4480 g, 1.27 mmol) i 2-bromofenilboronska kiselina (0.2678 g, 1.33 mmol) hermetički se zatvore u epruvetu. Epruveta se vakumira i očisti argonom (3 ciklusa). Doda se 2M Na2CO3(1.9 mL, 2.0 M vod. rastvor) zajedno sa DME (2.8 mL). Zatim se odjednom doda Pd(PPh3)4(0.0734 g, 0.064 mmol). Epruveta se ponovo zatvori i greje na 95 °C 5 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, mešavina se razblaži vodom i EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje. Kombinovani organski ekstrakti se onda isperu pomoću H2O (3x), zasićenog rastvora soli i zatim suše (Na2SO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom (40% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije 0.4642 g (85% prinos) arilbromida. Ovaj arilbromid (0.4642 g, 1.08 mmol) se rastvori u THF (10 mL) i ohladi na -78 °C. U kapima se dodaje nBuLi (0.90 mL, 1.6 M rastvor u heksanu) tokom 5 minuta. Reakcija se ostavi da se meša 15 minuta i zatim se u kapima doda rastvor 3-oksetanona (0.1247 g, 1.73 mmol) u THF (1 mL). Reakcija se zatim meša preko noći uz polako zagrevanje do sobne temperature. Ponovo se ohladi u ledenom kupatilu i gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i zatim razblaži pomoću EtOAc. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3x). Kombinovani slojevi se isperu
2 2
vodom (2x), zasićenim rastvorom soli, suše (MgSO4), filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (85% EtOAc / heksan 5% TEA) da se dobije TRV1663 (0.3337 g, 73% prinos). 1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ = 7.46-7.38 (m, 3H), 7.30 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.61 (br s, 1H), 6.15 (s, 1H), 4.62 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 4.34 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.94-3.91 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.07-3.01 (m, 1H), 2.63 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 2.38 (br s, 4H).
[0367] DIBA1 (25.76 ml, 25.76 mmol) se doda u rastvor dobijenog etil (E)-3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)akrilata (1.52 g, 6.44 mmol) u THF (35 ml) na -5 °C. Posle mešanja mešavine preko noći na sobnoj temperaturi, reakcija se gasi pomoću 3 m MeOH. U mešavinu se doda EtOAc (40 ml). Mešavina se ispere pomoću 1 N HC1 i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (10:90, EtOAc/heksan do 15:85 EtOAc/heksan) da se dobije (E)-3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)prop-2-en-1-ol (340 mg, 28%) u vidu svetložute čvrste supstance.
[0368] TEA (0.98 ml, 7.08 mmol) se doda u rastvor (E)-3-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)prop-2-en-1-ola (340 mg, 1.77 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin 2HCl soli (608 mg, 2.66 mmol) u MeCN (10 ml). Mešavina se greje na 70 °C 48 sati. Pošto se mešavina ohladi do sobne temperature, u rastvor se doda EtOAc (30 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:2:100:500 MeOH/TEA/EtOAc/heksan) da se dobije (E)-3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)prop-2-en-1-ol (450 mg, 77%) u vidu žute čvrste supstance.
[0369] Dess-Martinov perjodinan (694 mg, 1.64 mmol) se doda u rastvor (E)-3-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)prop-2-en-1-ola (450 mg, 1.36 mmol) u DCM (15 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto se mešavina meša 1 h, reakcija se gasi zasićenim natrijum tiosulfatom (10 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom natrijum
2
bikarbonata i zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 3:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije (E)-3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)akrilaldehid (360 mg, 81%) u vidu narandžaste čvrste supstance.
[0370] (E)-3-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)akrilaldehid (360 mg, 1.1 mmol) ohladi se na 0 °C u suvom THF rastvoru (10 ml) u atmosferi azota. Polako i zasebno u mešavinu se dodaju TMSCF3(0.195 ml, 1.32 mmol) i TBAF (0.22 ml, 0.22 mmol, 1M rastvor). Rastvor se meša 2 sata na 0°C. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, u mešavinu se doda 5 ml vode. U ovu mešavinu se doda 50 ml EtOAc i ispere se zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:100:500, TEA/EtOAc/heksan do 4:2:100:500 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije (E)-1,1,1-trifluoro-4-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)but-3-en-2-ol (280 mg, 64%) TRV1665 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDC13): 2.48-2.50 (m, 4H), 2.72 (d, J=7.5, 2H), 3.06-3.12 (m, 1H), 3.73-3.75 (m, 4H), 3.99 (d-d, J=5.6, J=8.2, 2H), 4.42 (t, J=8.2, 2H), 4.67-4.74 (m, 1H), 5.92 (s, 1H), 6.26 (d-d, J=6.0, J=16.1, 1H), 6.86 (d, J=16.1, 1H), 6.98 (s, 1H).
[0371] 250 mL-ski jednogrli flakon sa okruglim dnom napuni se sa 45 mL suvog dihlorometana i 1.60 mL (15.0 mmol) 1,2-dimetoksietana (DME). Rastvor se ohladi na -30°C doda se 1.50 mL (15.0 mmol) dietilcinka. U ovaj promešani rastvor dodaje se 2.40 mL (30.0 mmol) dijodometana tokom preioda od 20 min uz održavanje temperature između -20°C i -30°C. Posle završetka dodavanja, dobijeni bistri rastvor se meša 1 sat na -10°C. Rastvor od 500 mg (2.25 mmol) (E)-4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-2-metilbut-3-en-2-ola u 10 mL dihlorometana doda se kanilom, u atmosferi argona. Reakciona mešavina se ostavi da
2 4
se zagreje do sobne temperature i meša se 24 sata. Posle završetka reakcije, što se proverava pomoću TLC, u mešavinu se doda 5 ml vode. Ova mešavina se ispere korišćenjem 1 M HCl i zasićenog rastvora soli. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (10:90, EtOAc/heksan do 20:80 EtOAc/heksan) da se dobije 2-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)ciklopropil)propan-2-ol (120 mg, 23%).
[0372] TEA (0.28 ml, 2.0 mmol) se doda u rastvor 2-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)ciklopropil)propan-2-ola (120 mg, 0.51 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil)morfolin 2HCl soli (175 mg, 0.76 mmol) u MeCN (10 ml). Mešavina se greje na 70 °C 30 sati. Pošto se mešavina ohladi do sobne temperature, u rastvor se doda EtOAc (30 ml). Mešavina se ispere zasićenim rastvorom soli. Organski sloj se suši i koncentruje. Rezidua se prečisti gradijentnim eluiranjem (2:25:75, TEA/EtOAc/heksan do 4:2:25:75 MeOH /TEA/EtOAc/heksan) da se dobije 2-(2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)ciklopropil)propan-2-ol TRV1666 (150 mg, 79%) u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl 1
3): H NMR (400 MHz, CDCl3): 0.93-0.98 (m, 1H), 1.07-1.24 (m,1H), 1.32 (s, 6H), 1.42-1.47 (m, 1H), 1.92-1.97 (m, 1H), 2.47 (s, br, 4H), 2.70 (d, J=7.3, 2H), 3.01-3.08 (m, 1H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.92-3.95 (m, 2H), 4.36 (t, J=8.0, 2H), 5.59 (s, 1H), 6.67 (s, 1H).
[0373] Oksazol (0.50 mL, 7.60 mmol) se rastvori u anhidrovanom THF (20 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu suvi led/aceton. U rastvor se u kapima doda n-BuLi (3.5 mL, 2.5 M, 8.8 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda trimetilsilil triflat (3.0 mL, 11.2 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0:100 do 5: 95) da se dobije 1.36 g 2-triizopropilsililoksazola (79%).
2
[0374] 2-triizopropilsililoksazol (0.45 g, 2.0 mmol) se rastvori u anhidrovanom THF (10 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu koje sadrži suvi led / aceton. U rastvor se u kapima doda n-BuLi (1.0 mL, 2.5 M, 2.5 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda 2-izopropoksi-4, 4, 5, 5-tetrametil-1, 3, 2-dioksaborolan (0.6 mL, 2.94 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se direktno koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
[0375] Reakciona fiola se napuni 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(triizopropilsilil)oksazolom, gore, 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il) benzo [c] [1,2,5] oksadiazolom (0.70 g, 2.0 mmol), Pd(PPh3)4(0.070 g, 0.060 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (7.5 mL) i vod. Na2CO3(4.0 mL, 2.0 M, 8.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i greje na 95 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se razblaži vodom, ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks. 0: 2: 25: 75 do 1.5: 2: 25: 75) da se dobije 0.60 g (61% prinos u dva koraka) 4-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il) -6-(2-(triizopropilsilil) oksazol-5-il) benzo [c] [1, 2, 5] oksadiazola u vidu crvene čvrste supstance.
[0376] 4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)-6-(2-(triizopropilsilil)oksazol-5-il)benzo[c] [1,2,5] oksadiazol (0.48 g, 0.97 mmol) se rastvori u anhidrovanom THF (7.5 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu suvi led/aceton. U rastvor se u kapima doda LDA (10.65 mL, 2.0 M, 1.30 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda etil trifluoroacetat (0.24 mL, 2.0 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (TEA: EtOAc: heks. 0.5: 10: 90 do 0.5: 80: 20) da se dobije 0.26 g proizvoda u vidu crvene čvrste supstance.
[0377] 2,2,2-trifluoro-1-(5-(7-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)-2-(triizopropilsilil)oksazol-4-il)etan-1-on (0.26 g, 0.44 mmol) se rastvori u THF (5 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu koje sadrži led i vodu. Doda se natrijum borohidrid (0.025 g, 0.66 mmol) u 0.5 mL 0.5 N vodenog rastvora NaOH. Rastvor se meša 10 min, i zatim zagreje do sobne temperature. Reakcija se meša dok se ne završi. Reakciona mešavina se ohladi u kupatilu koje sadrži led i vodu, gasi 1N vodenim rastvorom HCl, meša 1 h, bazifikuje
2
zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i zatim ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks.0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije 0.20 g TRV1667 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.03 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.27 (q, J = 6.19 Hz, 1H), 4.46 (t, J = 7.53 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 6.78 Hz, 2H), 3.79 (široko, 1H), 3.74 (t, J = 4.52 Hz, 4H), 3.12 (septet, J = 6.90 Hz, 1H), 2.73 (t, J = 7.53 Hz, 2H), 2.49 (t, J = 4.14 Hz, 4H).
[0378] 6-(6-metoksipiridin-3-il)-4-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.150 g,0.612 mmol) i 4-(azetidin-3-il metil) morfolin hidrohloridna so (0.140 g, 0.612 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.3 ml, 1.85 mmol) i mešavina se greje na 80ºC preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometan: metanol (95:5) kao rastvarača da se dobije 6-(6-metoksipiridin-3-il)-4-(3-(morfolinometil) azetidin-l-il) benzo [c][1,2,5] oksadiazol TRV1670 (0.218 g, 93%) u vidu crvene čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400MHz): δ 8.45 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.86 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.47 (t, J=8.0 Hz, 2H), 4.04 (m, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.75 (m, 4H), 3.13 (m, 1H), 2.74 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.48 (m, 4H).
2
[0379] Oksazol (0.50 mL, 7.60 mmol) se rastvori u anhidrovanom THF (20 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu suvi led/aceton. U rastvor se u kapima doda n-BuLi (3.5 mL, 2.5 M, 8.8 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda trimetilsilil triflat (3.0 mL, 11.2 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 0:100 do 5: 95) da se dobije 1.36 g 2-triizopropilsililoksazola (79%).
[0380] 2-triizopropilsililoksazol (0.45 g, 2.0 mmol) se rastvori u anhidrovanom THF (10 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu suvi led/aceton. U rastvor se u kapima doda n-BuLi (1.0 mL, 2.5 M, 2.5 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.6 mL, 2.94 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi zasićenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se direktno koristi u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
[0381] Reakciona fiola se napuni 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(triizopropilsilil)oksazolom, gore, 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il) benzo [c] [1,2,5] oksadiazolom (0.76 g, 2.0 mmol), Pd(PPh3)4(0.070 g, 0.060 mmol). Pošto se oslobodi gasa i napuni azotom, fiola se napuni dioksanom (7.5 mL) i vod. Na2CO3(4.0 mL, 2.0 M, 8.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni azotom, hermetički zatvori i greje na 95 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se ohladi na rt, reakcija se završi pomoću 1N HCl, meša se 1 h i zatim ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks.0: 2: 25: 75 do 7.5: 2: 25: 75) da se dobije 0.55 g (62% prinos u dva koraka) 4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)-6-(oksazol-5-il)benzo[c][1,2,5] oksadiazola u vidu crvene čvrste supstance.
[0382] 4-(3-( morfolinometil) azetidin-1-il)-6-(oksazol-5-il) benzo[c] [1,2,5]oksadiazol (0.36 g, 1.06 mmol) rastvori se u anhidrovanom THF (7.5 mL). Rastvor se ohladi u kupatilu suvi led/aceton. U rastvor se u kapima doda LDA (1.60 mL, 2.0 M, 3.20 mmol). Po završenom dodavanju, rastvor se ostavi 1 h na -78 °C da sazri, i zatim se doda etil trifluoroacetat (0.54 mL, 4.54 mmol). Reakciona mešavina se prirodno zagreje do sobne temperature, gasi vodom, ponovo ohladi u kupatilu led/voda pre nego što se doda natrijum borohidrid (0.17 g, 4.54 mmol). Rastvor se meša 10 min, i zatim zagreje do sobne temperature i meša do završetka reakcije. Reakciona mešavina se ohladi u kupatilu led/voda, gasi 1N vodenim rastvorom HCl,
2
meša 1 h, bazifikuje zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i zatim ekstrahuje etil acetatom. Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAc: heks. 0: 2: 25: 75 do 7.5: 2: 25: 75) da se dobije 0.27 g (prinos 58%) TRV 1677 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 8.07 (s, 1H), 7.58 (d, J = 7.03 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 5.62 - 5.52 (m, 1H), 4.38 (t, J = 8.28 Hz, 2H), 4.03 -3.88 (m, 2H), 3.58 (t, J = 8.28 Hz, 4H), 3.07 (septet, J = 6.78 Hz, 1H), 2.63 (t, J = 7.53 Hz, 2H), 2.43 - 2.34 (m, 4H).
[0383] 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-5-il)etan-1-ol (0.152 g, 0.5 mmol) i 4-(azetidin-3-ilmetil) morfolin hidrohloridna so (0.114 g, 0.5 mmol) rastvore se u acetonitrilu (5 ml) na sobnoj temperaturi, doda se trietilamin (0.2 ml, 1.5 mmol) i mešavina se greje na 50ºC preko noći. Posle završetka reakcije, prema TLC, gasi se pomoću Na2CO3(2M) i ekstrahuje korišćenjem EtOAC da se dobije sirovi TRV-1660. Prečišćavanje se obavlja na ISCO fleš hromatografskom sistemu uz korišćenje dihlorometana: metanola (95:5) kao rastvarača da se dobije 2,2,2-trifluoro-1-(2-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)oksazol-5-il)etan-1-ol TRV1686 (0.1400 g, 68%) u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz): δ 7.59 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.36 (d, J=4.0 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.57 (m, 1H), 4.41 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.08 (m, 1H), 2.65 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.38 (m, 4H).
2
[0384] 6-bromo-4-(3-(morfolinometil)azetidin-1-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazol (0.353g, 1.0 mmol) rastvori se u suvom THF (5ml) i ohladi na -78°C u atmosferi argona. U kapima se doda 2.5M n-BuLi (0.48 ml, 1.2 mmol) i mešavina se ostavi da se meša 20 min na - 78°C. Onda se u rekacionu mešavinu doda 3-(benziloksi)ciklobutan-1-on i mešanje se nastavlja još 30 min i dovede se na rt posle čega sledi još 30 min mešanja, zatim gašenje amonijum hloridom i ekstrahovanje dihlorometanom. Evaporacija rastvarača daje sirovi proizvod koji se prečisti na ISCO da se sintetiše 3-(benziloksi)-1-(7-(3-(morfolinometil) azetidin-l-il) benzo[c] [1, 2, 5] oksadiazol-5-il) ciklobutan-1-ol TRV1692 (47%). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 7.36 (m, 5H), 7.01 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.40 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.73 (m, 4H), 3.08 (m, 1H), 2.94 (m, 2H), 2.71 (d, J=8.0 Hz, 2H), 2.47 (m, 6H).
[0385] 1, 4-dibromobenzen (4.72 g, 20.00 mmol) rastvori se u anhidrovanom THF (50 mL) pod argonom. Rastvor se ohladi na -78 °C i u kapima se doda n-BuLi (2.5 M, 8.8 mL, 20.5 mmol). Rastvor se meša na -78 °C 0.5 h pre nego što mu se doda oksetan-3-on (1.2 mL, 20.5 mmol). Rastvor se meša na -78 °C 1 h, zatim se gasi zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se ispere zasićenim rastvorom soli, suši anhidrovanim natrijum sulfatom i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks.10:90 do 50: 50) da se dobije 3.94 g 3-(4-bromofenil) oksetan-3-ola u vidu bele čvrste supstance (86% prinos).
2
[0386] Reakciona fiola se napuni 3-(4-bromofenil)oksetan-3-olom (1.72 g, 7.5 mmol), 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (2.28 g, 8.64 mmol), Pd(PPh3)4(0.26 g, 0.23 mmol). Posle oslobađanja od gasa i punjenja azotom, u fiolu se stave dioksan (15 mL) i vod. Na2CO3(10.0 mL, 2.0 M, 20.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni ponovo azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 95 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom, i zatim ekstrahuje etil acetatom.
Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks.10: 90 do 50: 50) da se dobije 1.95 g (91% prinos) 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ola u vidu bele čvrste supstance.
[0387] 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ol (0.43 g, 1.50 mmol), 4-(piperidin-4-il)morfolin (0.30 g, 1.80 mmol), Hunigova baza (0.78 mL, 4.49 mmol) u MeCN (10 mL) greju se na 80 °C preko noći. Reakciona mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom i ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: EtOAC: heks.: 0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije ukupno 0.63 g (96% prinos) TRV1717 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ = 7.75 (d, J = 8.53 Hz, 2H), 7.69 (d, J = 8.53 Hz, 2H), 7.35 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.98 (d, J = 7.03 Hz, 2H), 4.96 (d, J = 7.03 Hz, 2H), 4.43 (d, J = 12.80 Hz, 2H), 3.76 (t, J = 4.65 Hz, 4H), 3.05 (dt, J1 = 1.76 Hz, J2 = 12.30 Hz, 2H), 2.71 (široko, 1H), 2.62 (t, J = 4.52 Hz, 4H), 2.49 (tt, J1 = 1.76 Hz, J2 = 11.04 Hz, 1H), 2.05 (d, J = 12.80 Hz, 2H), 1.78 (dq, J1 = 3.51 Hz, J2 = 12.05 Hz, 2H).
[0388] 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ol (0.29 g, 1.00 mmol), 4-(pirolidin-3-il) morfolin (0.19 g, 1.20 mmol), Hunigova baza (0.52 mL, 3.00 mmol) u MeCN (7.5 mL) greju se na 80 °C preko noći. Reakciona mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom i
2 1
ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: THF: heks.: 0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije ukupno 0.36 g (85% prinos) TRV1719 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 7.84 (d, J = 8.53 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 8.53 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.81 (d, J = 6.53 Hz, 2H), 4.71 (d, J = 6.53 Hz, 2H), 4.05 - 3.92 (m, 2H), 3.75 (q, J = 9.20 Hz, 1H), 3.61 (t, J = 4.40 Hz, 4H), 3.52 (t, J = 9.29 Hz, 1H), 3.00 (pentet, J = 7.91 Hz, 1H), 2.55 - 2.45 (m, 4H, preklapanje sa DMSO pikovima), 2.31 - 2.22 (m, 1H), 1.91 (pentet, J = 9.98 Hz, 1H).
[0389] 1,4-dibromobenzen (4.72 g, 20.00 mmol) rastvori se u anhidrovanom THF (50 mL) pod argonom. Rastvor se ohladi na -78 °C i u kapima se doda n-BuLi (2.5 M, 8.8 mL, 20.5 mmol). Rastvor se meša na -78 °C 0.5 h pre nego što mu se doda oksetan-3-on (1.2 mL, 20.5 mmol). Rastvor se meša na -78 °C 1 h, zatim se gasi zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, i ekstrahuje etil acetatom. Organski sloj se ispere zasićenim rastvorom soli, suši anhidrovanim natrijum sulfatom i zatim koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom uz korišćenje gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks.10:90 do 50: 50) da se dobije 3.94 g 3-(4-bromofenil)oksetan-3-ola u vidu bele čvrste supstance (86% prinos).
[0390] Reakciona fiola se napuni 3-(4-bromofenil)oksetan-3-olom (1.72 g, 7.5 mmol), 4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[c][1,2,5]oksadiazolom (2.28 g, 8.64 mmol), Pd(PPh3)4 (0.26 g, 0.23 mmol). Posle oslobađanja od gasa i punjenja azotom, u fiolu se stave dioksan (15 mL) i vod. Na2CO3(10.0 mL, 2.0 M, 20.0 mmol). Reakciona fiola se dodatno oslobodi gasa, napuni ponovo azotom, hermetički zatvori i zatim greje na 95 °C dok se reakcija ne završi. Mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom, i zatim ekstrahuje etil acetatom.
Etil acetatna faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (EtOAc: heks. 10: 90 do 50:
2 2
50) da se dobije 1.95 g (91% prinos) 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ola u vidu bele čvrste supstance.
[0391] 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ol (0.29 g, 1.00 mmol), N-(4-piperidinil)acetamid hidrohlorid (0.22 g, 1.25 mmol), Hunigova baza (0.80 mL, 4.60 mmol) u MeCN (7.5 mL) greju se na 100 °C 48h. Reakciona mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom i onda ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: THF: heks.: 0: 2: 25: 75 do 7.5: 2: 25: 75) da se dobije ukupno 0.25 g (82% prinos) TRV1735 u vidu žute čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 7.89 (d, J = 7.78 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.56 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.81 (d, J = 6.78 Hz, 2H), 4.71 (d, J = 6.53 Hz, 2H), 4.31 -4.21 (m, 2H), 3.90 - 3.78 (m, 1H), 3.24 - 3.11 (m, 2H), 1.96 - 1.86 (s, 2H), 1.80 (s, 3H), 1.63 -1.49 (m, 2H).
[0392] 3-(4-(7-fluorobenzo[c][1,2,5]oksadiazol-5-il)fenil)oksetan-3-ol (0.21 g, 0.75 mmol), 4-(piperidin-4-ilmetil) morfolin dihidrohlorid (0.26 g, 1.00 mmol), Hunigova baza (0.80 mL, 4.60 mmol) u MeCN (7.5 mL) greju se na 100 °C 48h. Reakciona mešavina se ohladi na rt, razblaži vodom i onda ekstrahuje etil acetatom. Organska faza se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje. Rezidua se prečisti fleš hromatografijom korišćenjem gradijentnog eluiranja (MeOH: TEA: THF: heks.: 0: 2: 25: 75 do 5: 2: 25: 75) da se dobije ukupno 0.30 g (88% prinos) TRV1736 u vidu narandžaste čvrste supstance.<1>H NMR (DMSO, 400 MHz) δ = 7.85 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 8.28 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.81 (d, J = 6.53 Hz, 2H), 4.71 (d, J = 6.53 Hz, 2H), 4.38 - 4.28 (m, 2H), 3.57 (t, J = 4.40 Hz, 4H), 3.02 (t, J = 12.30 Hz, 2H), 2.43 - 2.25 (m, 4H), 2.18 (d, J = 6.78 Hz, 2H), 1.92 - 1.77 (m, 3H), 1.37 - 1.25 (m, 2H).
BIOLOŠKI PODACI
2
[0393] Korišćene su sledeće metodologije:
Pripremanje Aβ40 stok rastvora
[0394] Aβ40 (1.0 mg) se prethodno tretira u 1.5 mL-skom ependorfu korišćenjem HFIP (1 mL) i sonifikuje 20 min da se razlože prethodno formirani Aβ agregati. HFIP se ukloni strujom argona i Aβ rastvori u Tris bazi (5.8 mL, 20 mM, pH ∼10). pH se podesi na 7.4 koncentrovanom HCl (∼ 10 μL) i rastvor se pre korišćenja filtrira korišćenjem filtera za špric (0.2 μm).
[0395] Aβ42 i tau proteini pripreme se na način analogan gore opisanom postupku.
ThT test agregacije Aβ
[0396] Kinetika ThT testa za agregaciju Aβ slična je kao u Chalifour et al (Chalifour et al, 2003, J. Biol. Chem. 278:34874-81). Ukratko, prethodno tretirani Aβ40 ili Aβ42 (40 μM u 20 mM Tris, pH 7.4) razblaži se jednakom zapreminom od 8 μM tioflavina T (Thioflavin T, ThT) u Tris (20 mM, pH 7.4, 300 mM NaCl). Alikvoti Aβ/ThT (200 μL) dodaju se u bunarčiće crne ploče sa 96 bunarčića, što je praćeno dodavanjem 2 μL jedinjenja u DMSO (varijabilna koncentracija), ili samog DMSO (kontrole). Inkubacije se izvode u triplikatima i sadrže 20 μM Aβ, različite koncentracije jedinjenja u 20 mM Tris, pH 7.4, 150 mM NaCl, 1% DMSO. Ploče se prekriju čistim polistirenskim poklopcima i inkubiraju na 37°C u Tecan Genios čitačima mikroploča.
ThS test agregacije tau
[0397] Kinetika ThS testa za agregaciju tau uopšteno prati gornji postupak, osim što se tioflavin S (Thioflavin S, ThS) koristi umesto ThT i tau protein se koristi umesto Aβ.
Analiza ThT i ThS testova agregacije
[0398] Očitavanja fluorescence (λex = 450 nm, λem = 480 nm) vrše se svakih 15 min, posle prvog šejkiranja visokog intenziteta u trajanju od 15 s i sleganja u trajanju od 10 s pre svakog očitavanja. Aktivna jedinjenja smanjila su rast fluorescence tokom vremena, do kojeg je dolazilo u kontrolama. Na sl. 1-7, vreme izvođenja ovog postupka produženo je na 80 sati (krajnji desni deo X-ose), što je tačka kada porast fluorescence dostiže asimptotu. Primenom definicije DMSO kontrole na 80 h kao 100% agregacije (0% inhibicije) i DMSO kontrole na 0 h kao 0% agregacije (100% inhibicije), % inhibicioni skor, gde je više bolje, može se
2 4
izračunati za datu koncentraciju jedinjenja. Ponavljanjem postupka za nekoliko koncentracija, može se izmeriti srednja inhibitorna koncentracija (IC50), kao što je dato u tabeli u nastavku teksta, za neka jedinjenja.
Aβ42 test biotinisanja
[0399] Terminalno biotinisani beta-amiloid (biotin-AB) rastvori se u HFIP u koncentraciji od 1 mg/ml i alikvotira, 50 μl/ependorfu, u 0.65 ml-ske obojene ependorfe (Fisher 02-681-248). Alikvoti se odmah razblaže dodavanjem 450 μl HFIP u 0.1 mg/ml. Približno 46 ul (sadrži približno 4.6 ug biotin-AB) uzme se iz epruvete, doda se 100 μl HFIP, vorteksuje i suši u tanak film pod strujom N2.100 μl trifluorosirćetne kiseline (trifluoroacetic acid, TFA) doda se i vorteksuje. Posle 10 minute inkubacije na sobnoj temperaturi u digestoru, što rezultuje disagregacijom zametaka, uzorak se ponovo vorteksuje i ponovo suši do tankog filma pod strujom N2.100 μl HFIP se doda, pomeša, i biotin-AB uzorak se suši treći put pod strujom N2da se ukloni rezidualna TFA. Tretirani biotin-AB rastvori se u DMSO do finalne koncentracije peptida od 2.3 μg/ml (50X).
[0400] ELISA ploča "zadržavanje" (Costar 9018) obloži se sa 50 μl 1 μg/ml NeutrAvidin™ (NA) u 10 mM natrijum fosfatnom puferu, pH 7.5. (NeutrAvidin može da se pripremi kao 1 mg/ml (1000X) u milliQ vodi/10% glicerolu i skladišti na -80 °C pre upotrebe.) Ploča se zatvori adhezivnim filmom i uskladišti na 4 °C preko noći, zatim blokira 2 sata (nezatvorena) na sobnoj temperaturi sa 200 μl/bunarčiću OFB 0.1% zapr./zapr. Tween 20. Ploča "zadržavanje" se ostavi da dostigne sobnu temperaturu.
[0401] Nekoliko razblaženja testnog jedinjenja pripremi se sa 100% DMSO, u skladu sa koncentracijama čije testiranje se želi.2.5 μl razblaženog testnog jedinjenja pipetira se na dno svakog bunarčića polipropilenske ploče "razblaženje" sa 96 bunarčića (Costar 3365), gde se doda 250 ul oligomer-formirajućeg pufera (oligomer formation buffer, OFB: 20 mM natrijum fosfat, pH 7.5 - 150 mM NaCl). Da bi počela oligomerizacija, 2 μl/bunarčiću biotin-AB doda se na dno svakog bunarčića polipropilenske ploče "reakcija" sa 96 bunarčića (Costar 3365) i 100 ul iz svakog bunarčića ploče "razblaženje" prenese se na ploču "reakcija" (finalna koncentracija DMSO je do 1%). Reakciona ploča se hermetički zatvori i inkubira 1 h na sobnoj temperaturi bez šejkiranja. Reakcija se zatim zaustavi dodavanjem 50 ul 0.3% Tween 20 u vodi.
[0402] Blokirajući rastvor ploče "zadržavanje" se ukloni, i 50 ul iz svakog bunarčića ploče "reakcija" prenese se u svaki bunarčić ploče "zadržavanje". Ploča "zadržavanje" se hermetički zatvori i inkubira 2 h na sobnoj temperaturi uz šejkiranje na 150 rpm. Ploča "zadržavanje" se
2
tada ispere na ispiraču ploča (3x) sa 200 ul/bunarčiću TBST (20 mM Tris-HCL, pH 7.5/150 mM NaCl / 0.1% Tween 20). 50 ul streptavidin-peroksidaza rena konjugat (1:20.000 razblaženje) u OFB 0.1% Tween 20 doda se u svaki bunarčić, ploča "zadržavanje" se hermetički zatvori i inkubira 1 h uz šejkiranjena 150 rpm. Kao i ranije, ploča se ispere, zatim se doda 100 ul TMB/H2O2supstratnog rastvora u svaki bunarčić. Posle 5-10 minuta, doda se 100 ul 1% zapr./zapr. sumporne kiseline i apsorbanca svakog bunarčića se očitava na 450 nm uz korišćenje standardnog čitača ploča.
[0403] Podaci su zbirno prikazani u tabeli u nastavku ovog teksta; brojevi dati u zagradi za tioflavin T testove Aβ 40 predstavljaju vrednosti u tom posebnom eksperimentu za jedinjenje ID 1027, dato kao prvi unos u ovu tabelu za strukturno poređenje. "IC50 Aβ 42-bio" kolona odnosi se na približnu IC50vrednost u mikromolima/L u Aβ42 testu biotinisanja.
2
�
�
�
�
21
22
�
��
�
�
�
�
�
�
21
22
�
��
�
�
�
�
�
�
21
22
�
��
�
�
�
�
�
�
�
�
�
11
��
�
��
�
�
�
�
�
�
21
22
�
��
�
�
�
�
�
�
�

Claims (16)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje Formule I:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil) azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, 3-(morfolin- 4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)pirolidin-1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin-4-ilmetil) piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2-il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiofen opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem 4 supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkila, -CH2OH, 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-ila, 2-ol-propan-2-ila, i ciklopropila; i R12i R14su svaki nezavisno vodonik ili alkil; uz uslov da ako je A 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, onda on ne može biti spojen sa tiofenom.
  2. 2. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R11bira iz grupe koja sadrži 4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il, N-metil-3-(pirolidin-1-il)propan-1-amino, N1 ,N1 ,N3-trimetilpropan-1,3-diamino, N,N-dimetilpiperidin-4-amino, 3-(pirolidin-1-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(pirolidin-1-ilmetanon)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-ilmetil)pirolidin-1-il, i 3-(morfolin-4 ilmetil)azetidin-1-il; i R13se bira iz grupe koja sadrži tiofen opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, tiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, furan opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, pirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, N-metilpirazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 2-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 4-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde je A odabrano iz grupe koja sadrži alkil, alkoksi, alktiolil, izopropil, t-butil, trifluorometil, hloro, cijano, CF3O-, metanonil, metilsulfonil, trifluorometilsulfonil, amid (spojen u oba smera) opciono supstituisan jednim ili većim brojem alkil, i -CH2OH.
  3. 3. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R11bira iz grupe koja sadrži 3-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il, 3-(2-etanolamino-N-metil)azetidin-1-il, 3-(morfolin-4-il)pirolidin-1-il, 4-(etilamido)piperidin-1-il, 3-(aminometil)azetidin-1-il, 4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il, 4-(morfolin- 4-ilmetil)piperidin-1-il, 3-amidoazetidin-1-il, 3-(propan-2-ol-2il)azetidin-1-il, 3-(metilsulfonamid-N-metil)azetidin-1-il, 3-(metilamido-N-metil)azetidin-1-il, i 3-(metilamino-N-metil)azetidin-1-il; i R13se bira iz grupe koja sadrži oksazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, oksadiazol opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, i 3-piridin opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata A, gde se A bira iz grupe koja sadrži 1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il, 2-ol-propan-2-il, i ciklopropil.
  4. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R13bira iz grupe koja sadrži 5-(2-ol-propan-2-il)oksadizol-3-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-5-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, 4-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-2-il, 5-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)oksazol-3-il, 3-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-2-il, i 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il.
  5. 5. Jedinjenje iz patentnog zahteva 4 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R113-(morfolin-4-ilmetil)azetidin-1-il i R13se bira iz grupe koja sadrži 2-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)piridin-3-il i 5-(2-olpropan-2-il)oksadizol-3-il.
  6. 6. Jedinjenje za upotrebu u metodu lečenja amiloidnog oboljenja kod subjekta, koji uključuje primenu, kod subjekta, terapijski efikasne količine jedinjenja iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1-5.
  7. 7. Jedinjenje za upotrebu iz patentnog zahteva 6, naznačeno time, što je amiloidna bolest Alzheimerova bolest.
  8. 8. Jedinjenje za upotrebu iz patentnog zahteva 6, naznačeno time, što je amiloidna bolest Parkinsonova bolest.
  9. 9. Jedinjenje za upotrebu iz patentnog zahteva 6, naznačeno time, što je amiloidna bolest frontotemporalna demencija.
  10. 10. Jedinjenje za upotrebu iz patentnog zahteva 6, naznačeno time, što je amiloidna bolest progresivna supranukleusna paraliza.
  11. 11. Jedinjenje za upotrebu iz patentnog zahteva 6, naznačeno time, što je amiloidna bolest dijabetes melitus tipa 2.
  12. 12. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži jedinjenje iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1-5 i farmaceutski prihvatljivi nosač.
  13. 13. Jedinjenje za upotrebu u metodu lečenja stanja koje je član odabran između gubitka pamćenja, gubitka kognicije i njihove kombinacije, pomenuti metod uključuje primenu, kod subjekta kojem je to potrebno, terapijski efikasne količine jedinjenja iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1-5.
  14. 14. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, naznačeno time, što je pomenuto stanje udruženo sa Alzheimerovom bolešću.
  15. 15. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, naznačeno time, što se primenjuje ukupna dnevna doza od 0.0003 mg/kg telesne težine.
  16. 16. Jedinjenje iz patentnog zahteva 3 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R134-(1-ol-2,2,2-trifluoroetan-1-il)tiazol-2-il.
RS20190884A 2014-02-27 2015-02-27 Antiamiloidna jedinjenja koja sadrže benzofuran RS58976B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461945697P 2014-02-27 2014-02-27
EP15755943.6A EP3110812B1 (en) 2014-02-27 2015-02-27 Anti-amyloid compounds containing benzofurazan
PCT/US2015/017939 WO2015131021A2 (en) 2014-02-27 2015-02-27 Anti-amyloid compounds containing benzofurazan

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58976B1 true RS58976B1 (sr) 2019-08-30

Family

ID=54009787

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190884A RS58976B1 (sr) 2014-02-27 2015-02-27 Antiamiloidna jedinjenja koja sadrže benzofuran

Country Status (19)

Country Link
US (1) US9938249B2 (sr)
EP (1) EP3110812B1 (sr)
JP (1) JP6663361B2 (sr)
AU (1) AU2015222903B2 (sr)
CA (1) CA2977360C (sr)
CY (1) CY1121827T1 (sr)
DK (1) DK3110812T3 (sr)
ES (1) ES2734432T3 (sr)
HR (1) HRP20191150T1 (sr)
HU (1) HUE044999T2 (sr)
IL (1) IL247428B (sr)
LT (1) LT3110812T (sr)
PL (1) PL3110812T3 (sr)
PT (1) PT3110812T (sr)
RS (1) RS58976B1 (sr)
SI (1) SI3110812T1 (sr)
SM (1) SMT201900387T1 (sr)
TR (1) TR201910291T4 (sr)
WO (1) WO2015131021A2 (sr)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19643037A1 (de) 1996-10-18 1998-04-23 Boehringer Ingelheim Kg Neue Oxadiazole, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie deren Verwendung als Arzneimittel
PL369674A1 (en) * 2001-11-14 2005-05-02 Merck Patent Gmbh Pyrazole derivatives as psychopharmaceuticals
WO2006002284A1 (en) * 2004-06-22 2006-01-05 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Ubiquitin ligase inhibitors
EP2651405A2 (en) 2010-12-14 2013-10-23 Electrophoretics Limited Casein kinase 1 (ck1 ) inhibitors
CN104768949A (zh) * 2012-08-24 2015-07-08 特温蒂斯公司 苯并呋咱抗淀粉样蛋白化合物和方法

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20191150T1 (hr) 2019-10-04
EP3110812A2 (en) 2017-01-04
DK3110812T3 (da) 2019-07-08
JP6663361B2 (ja) 2020-03-11
ES2734432T3 (es) 2019-12-05
SI3110812T1 (sl) 2019-08-30
US9938249B2 (en) 2018-04-10
EP3110812A4 (en) 2017-07-05
EP3110812B1 (en) 2019-04-10
HUE044999T2 (hu) 2019-12-30
IL247428A0 (en) 2016-11-30
WO2015131021A2 (en) 2015-09-03
PT3110812T (pt) 2019-07-10
PL3110812T3 (pl) 2019-10-31
TR201910291T4 (tr) 2019-07-22
LT3110812T (lt) 2019-07-10
AU2015222903A1 (en) 2016-10-06
JP2017506674A (ja) 2017-03-09
AU2015222903B2 (en) 2018-02-01
IL247428B (en) 2020-01-30
WO2015131021A3 (en) 2015-11-19
CA2977360C (en) 2022-09-27
SMT201900387T1 (it) 2019-09-09
US20170174641A1 (en) 2017-06-22
CY1121827T1 (el) 2020-07-31
CA2977360A1 (en) 2015-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021202065B2 (en) Hepatitis B core protein modulators
AU2017382360B2 (en) Compounds, compositions and methods of use
CA2988147C (en) 4-hydroxy-3-(heteroaryl)pyridine-2-one apj agonists for use in the treatment of cardiovascular disorders
CA3018185C (en) Allosteric modulators of nicotinic acetylcholine receptors
EP4132650B1 (en) Difluorocyclohexyl derivatives as il-17 modulators
TW202332674A (zh) Tlr7/8拮抗劑及其用途
CA2938311A1 (en) Dihydropyrrolopyridine inhibitors of ror-gamma
AU2014219075B2 (en) Cis-morpholinone and other compounds as MDM2 inhibitors for the treatment of cancer
BR112020014516A2 (pt) Aminopirrolotriazinas como inibidores de quinase
JP2022508953A (ja) Ｈｂｖの処置のための５員のヘテロアリールカルボキサミド化合物
JP6998204B2 (ja) Ｒｏｒγｔのモジュレーターとしてのトリフルオロメチルアルコール
ES2923790T3 (es) Piperidinas halosustituidas como moduladores de receptores de orexina
TW202206415A (zh) 用於治療hbv之5員雜芳基羧醯胺化合物
KR20180100573A (ko) 환상 아민 유도체 및 그 의약용도
KR102046499B1 (ko) 벤조푸라잔 항아밀로이드 화합물 및 방법
EP3110812B1 (en) Anti-amyloid compounds containing benzofurazan
CN114450005A (zh) 用于治疗神经障碍的化合物
HK40106673B (zh) 取代哌啶化合物及其制备方法和应用
HK40106673A (zh) 取代哌啶化合物及其制备方法和应用
HK1231864A1 (en) Heterocyclic compounds as nav channel inhibitors and uses thereof
WO2010126167A1 (ja) チオフェン誘導体