RS65272B1

RS65272B1 - Piridinil-(aza)indolsulfonamidi

Info

Publication number: RS65272B1
Application number: RS20240230A
Authority: RS
Inventors: Cécile Pegurier; Laurent Provins; Alvaro Cardenas; Marie Ledecq; Christa E Mueller; Joerg Hockemeyer; Ali El-Tayeb; Nader Boshta; Mahmoud Rashed
Original assignee: Ucb Pharma Gmbh
Priority date: 2018-06-19
Filing date: 2019-06-18
Publication date: 2024-03-29
Also published as: AU2019289788B2; ES2972491T3; PL4074703T3; TWI857957B; LT4074703T; ES2929992T3; SG11202012421TA; BR112020025618A2; MX2020012173A; EP4074703B1; CN112469710B; EP3810591A1; KR102799157B1; JP2021527690A; EP4074703A1; SI4074703T1; DK4074703T3; HUE060128T2; IL279428A; TW202016088A

Description

Opis pronalaska

Pozadina pronalaska

[0001] Receptori spregnuti s G proteinom (GPCR) čine najveću porodicu membranskih receptora u ćeliji. Oni prenose ekstracelularne signale u intracelularne efektorske sisteme i uključeni su u veliki broj fizioloških fenomena, stoga predstavljaju najčešće mete farmaceutskih lekova, iako je samo mali procenat GPCR-a ciljan trenutnim terapijama.

[0002] GPCR reaguju na širok spektar liganada. Zbog napretka u sekvenciranju ljudskog genoma, za oko 25% od više od 400 GPCR (ne uključujući mirisne GPCR) koji su identifikovani, još uvek nedostaje definisani fiziološki relevantan ligand. Ovi receptori su poznati kao "orfan GPCR". Očekuje se da će „de-orfanizacija“ i identifikacija njihovih in vivo uloga razjasniti nove regulatorne mehanizme i, prema tome, otkriti nove ciljeve za lekove. Još uvek je predmet rasprave da li je GPR17 takav receptor orfan. Filogenetski, GPR17 je blisko povezan sa nukleotidnim P2Y receptorima i cisteinileukotrienskim (CysLT1, CysLT2) receptorima, sa oko 30 i oko 35% identičnosti aminokiselinske sekvence, respektivno.

[0003] Northern blot analize višestrukih tkiva i RT-PCR analize ukazuju na dominantnu ekspresiju GPR17 u centralnom nervnom sistemu (CNS) (Ciana et al., 2006, EMBO J 25(19): 4615; Blasius et al., 1998, J Neurochem 70(4): 1357) i dodatno u srcu i bubrezima, odnosno organima koji su tipično podvrgnuti ishemijskom oštećenju. Identifikovane su dve ljudske GPR17 izoforme koje se razlikuju samo po dužini njihovog N-terminusa. Kratka izoforma GPR17 kodira protein od 339 aminokiselinskih ostataka sa tipičnim transmembranskim motivima rodopsina tipa sedam. Duga izoforma kodira receptor sa N-terminusom dužim od 28 aminokiselina (Blasius et al., 1998). GPR17 je visoko očuvan među vrstama kičmenjaka (~ 90% identičnosti aminokiselinske sekvence i kod ortologa miša i pacova), što može predstavljati prednost za razvoj malih molekulskih liganada i životinjskih modela u kontekstu otkrivanja lekova.

[0004] U originalnom izveštaju o de-orfaniranju, GPR17 je identifikovan kao dvostruki receptor za uracil nukleotide i cisteinileukotriene (cisLTs) LTC4 i LTD4, respektivno na osnovu 35SGTPγS vezivanja i cAMP inhibicionih testova, kao i jednoćelijskog snimanja kalcijuma (Ciana et al., 2006, ibid). Dokazi za GPR17 funkcionalnost su obezbeđeni u različitim ćelijskim sredinama kao što su ćelije 1321N1, COS7, CHO i HEK293 (Ciana et al., 2006, ibid). Nakon toga, nezavisna studija je potvrdila aktivaciju GPR17 uracil nukleotidima, ali nije uspela da rekapitulira aktivaciju CisLTs ((Benned-Jensen and Rosenkilde, 2010, Br J Pharmacol , 159(5): 1092). Ipak, nedavni nezavisni izveštaji (Qi et al., 2013, J Pharmacol Ther 347,1, 38; Hennen et al.,2013, Sci Signal 6, 298) ukazuju na nedostatak reakcije GPR17 na uracil nukleotide i CisLT u različitim ćelijskim pozadinama koje stabilno eksprimiraju GPR17 (1321N1, CHO, HEK293 ćelije). Predložena je i nova regulatorna uloga za GPR17: GPR17 - nakon koekspresije sa CisLT1 receptorom učinio je da CisLT1 receptor ne reaguje na njegove endogene lipidne medijatore LTC4 i LTD4. Potrebna su dodatna istraživanja da bi se dublje ispitala farmakologija i funkcija GPR17.

[0005] Lekovi koji moduliraju aktivnost GPR17 mogu imati neuroprotektivne, antiinflamatorne i antiishemične efekte i stoga mogu biti korisni za lečenje cerebralne, srčane i bubrežne ishemije i moždanog udara (WO 2006/045476) i/ili za poboljšanje oporavka od ovi događaji (Bonfanti et al, Cell Death and Disease, 2017, 8, e2871).

[0006] Takođe se smatra da su modulatori GPR17 uključeni u unos hrane, insulinske i leptinske odgovore i stoga se tvrdi da imaju ulogu u lečenju gojaznosti (WO 2011/113032).

[0007] Štaviše, postoje jaki dokazi da je GPR17 uključen u procese mijelinizacije i da negativni modulatori GPR17 (antagonisti ili inverzni agonisti) mogu biti korisni lekovi za lečenje ili ublažavanje poremećaja mijelinizacije kao što su multipla skleroza ili povreda kičmene moždine. (Chen et al, Nature neuroscience 2009, 12(11):1398-1406; Ceruti et al; Brain: a journal of neurology 2009 132(Pt 8):2206-18; Hennen et al, Sci Signal, 6, 2013, 298; Simon et al J Biol Chem 291, 2016, 705; Fumagalli et al, Neuropharmacology 104, 2016, 82). Nedavno su dve grupe pokazale da odrasli GPR17-/- nokaut miševi imaju bržu remijelinizaciju od legla divljeg tipa nakon što je LPC indukovao demijelinaciju u kičmenoj moždini (Lu et al., Scientific Reports, 2018, 8:4502) ili u korpus kalozumu (Ou et al., J. Neurosci., 2016, 36(41):10560). Nasuprot tome, pokazalo se da aktivacija GPR17 inhibira sazrevanje prekursora ćelija oligodendrocita (OPC), čime se sprečava efikasna mijelinizacija (Simon et al, supra). Ovo je ponovo potvrdilo potencijalnu ključnu ulogu GPR17 u procesu remijelinizacije i kao obećavajuću metu leka u demijelinizirajućim bolestima. Identifikacija moćnih i selektivnih GPR17 antagonista ili inverznih agonista bi stoga bila od značajnog značaja u lečenju poremećaja mijelinizacije.

[0008] Poznato je da su nekoliko ozbiljnih bolesti mijelinizacije uzrokovane poremećajima u mijelinizaciji, bilo gubitkom mijelina (koji se obično naziva demijelinizacija), i/ili neuspehom tela da pravilno formira mijelin (ponekad se naziva dismijelinizacija). Bolesti mijelinizacije mogu biti idiopatske ili sekundarne zbog određenih okidačkih događaja kao što je npr. traumatska povreda mozga ili virusna infekcija. Bolesti mijelinizacije mogu prvenstveno uticati na centralni nervni sistem (CNS), ali se mogu odnositi i na periferni nervni sistem. Bolesti mijelinizacije uključuju, između ostalog, multiplu sklerozu, neuromijelitis optički (takođe poznat kao Devičova bolest), leukodistrofije, Guillain-Barreov sindrom i mnoge druge bolesti koje su detaljnije opisane u nastavku. (takođe videti npr. Love, J Clin Pathol, 59, 2006, 1151, Fumagalli et al, supra). Neurodegenerativne bolesti kao što su Alchajmerova bolest, Hantingtonova bolest, Parkinsonova bolest, amiotropna lateralna skleroza (ALS) i multipla sistemska atrofija (MSA) takođe su u poslednje vreme snažno povezane sa smanjenom mijelinizacijom (videti npr. Ettle et al, Mol Neurobiol 53, 2016, 3046; Jellinger and Welling, Movement Disorders, 31, 2016; 1767; Kang et al, Nature Neurosci 6, 2013, 571; Bartzokis, Neurochem Res (2007) 32:1655).

[0009] Multipla skleroza (MS) je hronični progresivni poremećaj. To je inflamatorna autoimuna bolest koja izaziva oštećenje oligodendrocita, demijelinizaciju i na kraju gubitak aksona, što dovodi do širokog spektra znakova i simptoma teške neurološke bolesti, kao npr. umor, vrtoglavica, problemi sa pokretljivošću i hodanjem, teškoće u govoru i gutanju, bol i drugo. MS ima nekoliko oblika, sa novim simptomima koji se javljaju ili u izolovanim napadima (povratni oblici) ili se nagomilavaju tokom vremena (progresivni oblici). Dok određeni simptomi mogu potpuno nestati između izolovanih napada, teški neurološki problemi često ostaju, posebno kada bolest napreduje u progresivniji oblik. Prema Američkom udruženju za multiplu sklerozu, oko 400.000 osoba je dijagnostikovano sa MS u Sjedinjenim Državama i čak 2,5 miliona širom sveta, sa procenjenim 10.000 novih slučajeva dijagnostikovanih u Sjedinjenim Državama godišnje. Multipla skleroza je dva do tri puta češća kod žena nego kod muškaraca

[0010] Ne postoji poznati uzročni tretman ili lek za multiplu sklerozu ili mnoge druge bolesti mijelinizacije. Tretmani su obično simptomatski i pokušavaju da poboljšaju funkciju nakon napada i spreče nove napade, rešavanjem upalne komponente bolesti. Takvi imunomodulatorni lekovi su obično samo umereno efikasni, posebno ako je bolest uznapredovala, ali mogu imati neželjene efekte i slabo se tolerisati. Štaviše, većina dostupnih lekova, kao što su b-interferoni, glatiramer acetat ili terapijska antitela, dostupna je samo u obliku injekcija i/ili se bavi samo inflamatornom komponentom bolesti, ali ne i demijelinizacijom direktno. Drugi lekovi, poput kortikosteroida, pokazuju prilično nespecifične antiinflamatorne i imunosupresivne efekte, što potencijalno dovodi do hroničnih neželjenih efekata, kao što se manifestuje u Cushingovom sindromu, na primer.

[0011] Stoga postoji velika potreba za bezbednim i efikasnim lekom za lečenje bolesti mijelinizacije, kao što je MS, poželjno za lekom koji je pogodan za oralnu primenu. U idealnom slučaju, takav lek bi preokrenuo proces demijelinizacije smanjenjem demijelinizacije i/ili promovisanjem remijelinizacije pogođenih neurona. Hemijsko jedinjenje koje efikasno smanjuje aktivnost GPR17 receptora moglo bi da ispuni ove zahteve.

[0012] Međutim, poznato je samo nekoliko hemijskih jedinjenja koja efikasno moduliraju aktivnost GPR17

[0013] WO 2005/103291 predlaže endogene molekule 5 amino levulinske kiseline (5-ALA) i porfobilinogena (PBG) kao aktivirajuće ligande za GPR17, otkriva analgetičke efekte agonista GPR17 i predlaže upotrebu GPR17 agonista za lečenje neuropatskog bola i kao alata u GPR17 skrining testovima. Međutim, prijavljeni afinitet 5-ALA i PBG je prilično nizak i količine potrebne u testovima su značajne, naime u trocifrenom mikromolarnom opsegu za 5-ALA ili čak u mM opsegu za PBG, zbog čega oba jedinjenja nisu pogodna za upotrebu u rutinskim testovima skrininga ili čak za terapiju. Štaviše, PBG je hemijski nestabilno, reaktivno jedinjenje koje se brzo razlaže nakon izlaganja vazduhu i svetlosti, što ga čini nepraktičnim za rutinsko rukovanje. Dakle, ova jedinjenja ne nude obećavajuću polaznu tačku za razvoj terapeutski efikasnih negativnih GPR17 modulatora.

[0014] Montelukast i pranlukast su prvobitno razvijeni kao antagonisti leukotrienskih receptora i nedavno je otkriveno da deluju i na GPR17 receptor (Ciana et al, EMBO J. 2006, 25, 4615-4627). Međutim, kasniji rezultati u funkcionalnom testu bili su kontradiktorni za montekulast (Hennen et al, 2013, ibid), dok farmakološka inhibicija GPR17 sa pranlukastom promoviše diferencijaciju primarnih oligodendrocita miša (Hennen et al, 2013, ibid) i pacova (Ou et al., J. Neurosci. 36, 2016, 10560-10573). Pranlukast čak i fenokopira efekat depresije GPR17 u lizolecitinskom modelu fokalne demijelinacije jer i GPR17 nokaut miševi i miševi divljeg tipa tretirani pranlukastom pokazuju raniji početak remijelinacije (Ou, ibid). Ovi rezultati snažno podržavaju hipotezu da inhibitori GPR17 nude potencijal za lečenje demijelinizujućih bolesti kod ljudi.

[0015] Međutim, afinitet montekulasta i prankulasta prema GPR17 je samo u visokom mikromolarnom opsegu (Kose et al, ACS Med. Chem. Lett. 2014, 5, 326-330). S obzirom na visoko vezivanje za proteine oba jedinjenja i njihovu lošu penetraciju u mozak, malo je verovatno da bi oni mogli da dostignu dovoljno visoke slobodne koncentracije da se vežu za GPR17 receptore u količinama pogodnim za terapiju ljudi. Pored toga, rezultate dobijene in vivo sa ovim jedinjenjima je teško interpretirati zbog njihovog zbunjujućeg visokog afiniteta za CISLT1 receptore. Unakrsne reakcije na druge receptore dodatno komplikuje njihovo korišćenje za ciljanje GPR17.

[0016] US 8,623,593 otkriva određene indol-2-karboksilne kiseline kao GPR17 agoniste i njihovu upotrebu u testovima skrininga. Međutim, svi ovi derivati su snažni agonisti i nisu pogodni za smanjenje aktivnosti GPR17 po potrebi u lečenju poremećaja mijelinizacije kao što je MS. Štaviše, ova klasa aktivatora GPR17 ne prolazi u dovoljnoj meri krvno-moždanu barijeru zbog svojih karboksilnih grupa koje se lako jonizuju, pa stoga nisu bila pogodna jedinjenja olova za razvoj negativnih modulatora GPR17. Videti takođe Baqi et al, Med. Chem. Commun., 2014, 5, 86 and Köse et al, 2014, ibid.

[0017] WO 2013/167177 predlaže određena jedinjenja feniltriazola i benzodiazepina kao antagoniste GPR17. Međutim, otkrivena jedinjenja su odabrana isključivo na osnovu rezultata insiliko skrininga i nisu dati nikakvi biološki podaci. Pronalazači ove prijave nisu bili u mogućnosti da potvrde modulirajuću aktivnost antagonista GPR17 bilo kojeg od navodnih liganada koje su do sada predložili autori ove prethodne patentne prijave. Stoga postoji potreba da se identifikuju moćni modulatori, poželjno negativni modulatori, posebno inverzni agonisti GPR17 koji su sposobni da efikasno smanje aktivnost GPR17, poželjno nakon oralne primene.

Slike:

[0018] Slika 1 pokazuje efekat jedinjenja I-22 na ekspresiju mijelina u testu oligodendrocita/mijelinacije.

Opis pronalaska

[0019] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koja deluju kao negativni modulatori GPR17 receptora. U poželjnom izvođenju, jedinjenja deluju kao negativni agonisti GPR17 receptora, čime inhibiraju konstitutivno aktivan GPR17. Ovaj pronalazak se ogleda u patentnim zahtevima i ograničen je na jedinjenje koje ima formulu (III) pri čemu je X2 C(R12). Ostatak opisa, kad god X2 nije ograničen na C(R12), održava se samo u svrhu otkrivanja.

[0020] U jednom izvođenju, jedinjenja imaju strukturu formule I

pri čemu je X1 N ili C(R7),

R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro,

R4 je vodonik ili fluoro,

R5 je vodonik ili halogen,

R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkilmetoksi, feniloksi, benziloksi, benzilmetoksi, piridinilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, benziloksi, alkoksi, benzilkosil, sa jednim ili više supstituenata odabranih od halogena, cijano, C1-2alkoksi i fluoro C1-2alkoksi, ili R6 zajedno sa R7 i C-atomima za koje su vezani formiraju peto ili šestočlani aromatični ili nearomatični prsten koji može da sadrži jedan ili dva heteroatoma koji formiraju prsten, pri čemu je pomenuti prsten poželjno fenil ili piridil, i pri čemu je navedeni prsten nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do tri ostatka R13,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, ili

R7 formira prsten zajedno sa R6 kao što je gore opisano,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi, etoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi,

R10 je izabran između vodonika, cijano, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu je svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i jedan alkoksi supstituisan ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi, X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena,

R13, u svakom slučaju, je nezavisno izabran između halogena, hidroksi, cijano, metila, metoksi, fluorometila i fluorometoksi, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0021] U jednom izvođenja jedinjenja formule I, R6 zajedno sa R7 i atomima ugljenika za koje su R6 i R7 vezani formira nesupstituisani ili supstituisani fenil, nesupstituisani ili supstituisani piridil, ili nesupstituisani ili supstituisani C5-6cikloalkil, pri čemu je svaka supstitucija, ako je prisutna, prstena formiranog od R6 i R7, poželjno odabrana između fluoro, hloro, cijano, hidroksi, metil, fluorometil, metoksi i fluorometoks U svakom slučaju, pri čemu jedinjenja iz ovog pronalaska sadrže R6 i R7 grupu, koje, zajedno sa atomima koji formiraju prsten bicikličnog sistema prstena za koji su vezani, formiraju drugi ciklus izabran između fenila i piridila, ovaj ciklus zajedno sa bicikličnim delom na koji je anuliran formira triciklični deo koji je poželjno izabran između 1H-benzo[g]indol-3-il i 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-il, respektivno. U jednom aspektu, bilo koja supstitucija 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-il dela je poželjno na poziciji 8 tako da rezultira, na primer, 8-(fluorometil)-1H-pirolo[3, 2-h]hinolin.

[0022] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro,

R4 je vodonik ili fluoro,

R5 je vodonik ili halogen,

R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, benzila, benziloksi, piridinilmetoksi, C1-2alkoksi i C1-2alkila, pri čemu svaki ciklopropil, benzil, piridinil, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenta, odabranih od halogena, C1-2alkoksi i fluoroC1-2alkoksi, ili

R6 zajedno sa R7 i C-atomima za koje su vezani formiraju piridilni prsten, tako da piridil zajedno sa bicikličnim prstenastim sistemom na koji je anuliran formira 1H-pirolo[3,2-h]hinolin, pri čemu piridil prsten je supstituisan sa jednim ili dva ostatka R13 ili je, poželjno, nesupstituisan,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, ili R7 formira prsten zajedno sa R6 kao što je gore opisano,

R10 je izabran između vodonika, cijano, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu je svaki cikloalkil, cikloalkil, a alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena,

R13, u svakom slučaju, je nezavisno izabran između fluoro, hloro, cijano, hidroksi, metil, metoksi, fluorometil i fluorometoksi, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0023] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule I,

pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro,

R4 je vodonik ili fluoro,

R5 je vodonik ili halogen,

R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkil, C3-5cikloalkilmetoksi, benziloksi, benzilmetoksi, piridinilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkil, pri čemu svaki cikloalkil, benzil, piridinil, alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, cijano, C1-.2alkoksi i fluoro C1-.2alkoksi

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, posebno između vodonika i fluora,

R10 je izabran između vodonika, halogena, C3-5cikloalkila, C3- 5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkil, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0024] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro,

R4 je vodonik ili fluor,

R5 je vodonik ili halogen,

R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkil, C3-5cikloalkilmetoksi, benziloksi, benzilmetoksi, piridinilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkil, pri čemu je svaki cikloalkil, benzil, piridinil, alkil i supstituisan sa jednim ili više alkoksi grupa izabranih od jednog ili više alkoksi halogen, cijano, metoksi i fluorometoksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi i fluorometoksi,

R10 je izabran između vodonika, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu je svaki cikloalkil, cikloalkil i alkiloksi, a može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su izabrani između halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0025] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2, R4 i R5 se nezavisno biraju između vodonika i fluora, i poželjno su vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkil, benziloksi, piridin-3-ilmetoksi, piridin-4-ilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkil, pri čemu svaki cikloalkil, benzil, piridinil, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više halogenih supstituenata, izabran između metoksi i fluorometoksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena,

R8 je izabran između vodonika, halogena i metoksi,

R10 je izabran između halogena, C3-4cikloalkila, C3-4cikloalkiloksi, C1-3alkoksi i C1-3alkil, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabran između halogena, C1-2alkoksi, fluoro(C1-2)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0026] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik,

R4 je vodonik ili fluoro,

R5 je vodonik ili fluoro,

R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkila, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, metoksi i fluorometoksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi i fluorometoksi,

R10 je izabran između halogena, C3-4cikloalkila, C3-4cikloalkiloksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12)

[0027] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik,

R4 je vodonik ili fluor, poželjno vodonik,

R5 je vodonik ili fluor, poželjno vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, C1-2alkoksi i C1-2alkila, pri čemu svaki alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, metoksi i fluorometoksi, R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi i fluorometoksi,

R10 je izabran između halogena, C3-4cikloalkila, C3-4cikloalkiloksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1- 3alkoksi, fluoro C1-3alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0028] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule I, gde

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik

R4 i R5 se nezavisno biraju između vodonika i fluora,

R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, metoksi i metila, pri čemu svaki metoksi i metil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih između halogena, metoksi i fluorometoksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi i fluorometoksi,

R10 je izabran između halogena, C3-4cikloalkila, C3-4cikloalkiloksi, C1-2alkoksi i C1-2alkila, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-2alkoksi, fluoro C1-2alkoksi i cijano,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa

[0029] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2 je vodonik

R4 i R5 se nezavisno biraju između vodonika i fluora,

R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki alkoksi i alkil mogu biti nesupstituisani ili supstituisani sa jednim ili više halogena, poželjno sa jednim ili više atoma fluora, R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, poželjno od vodonika i fluora,

R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi,

R10 je izabran između halogena, ciklo C3-5alkila, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-2alkoksi i halogenovanog C1-2alkoksi,

R11 je izabran između vodonika, halogena i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa

[0030] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, metoksi, metila i izopropila, pri čemu svaki metoksi i metil mogu biti nesupstituisani ili supstituisani sa jednim ili više fluora,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između vodonika, fluora, metoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi,

R10 je izabran između halogena, metila, ciklopropila, ciklopropiloksi i C1-3alkoksi, pri čemu svaki alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, C1-2alkoksi i fluoro C1-2alkoksi,

R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

[0031] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, pri čemu

X1 je N ili C(R7),

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, metila, fluorometila, metoksi i fluorometoksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora, a poželjno je od vodonika i fluora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena, ciklopropila i C1-2alkoksi, pri čemu alkoksi može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između fluoro, metoksi, etoksi i fluoro C1-2alkoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12), i

pri čemu je R12, ako je prisutan, izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i izotopa.

[0032] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, pri čemu

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena i C1-2alkoksi, pri čemu alkoksi može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između fluoro, cijano i fluoro C1-2alkoksi, R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12), i

pri čemu je R12, ako je prisutan, izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i izotopa.

[0033] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između fluoro, hloro, cijano, metil, metoksi, fluorometoksi i fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i fluora,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo, ciklopropil i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan ili sa do tri fluoro atoma ili sa jednim supstituentom izabranim između metoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12),

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika ili fluora, poželjno vodonika,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i izotopa.

[0034] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, pri čemu

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili difluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora, poželjno vodonika,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan sa do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12), i

pri čemu je R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika ili fluora, poželjno vodonika, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i izotopa.

[0035] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R2 vodonik. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je R4 vodonik. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je R5 vodonik. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je R5 halogen, poželjno bromo.

[0036] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde su R2, R4 i R5 svi vodonik.

[0037] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R6 izabran između halogena, cijano, fluorometoksi i fluorometila.

[0038] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R6 izopropil. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R6 izabran između hloro ili fluorometila, poželjno između hloro i difluorometila.

[0039] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R6 fluorometoksi.

[0040] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R6 metoksi. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je R6 cijano. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde R6 i R7 formiraju zajedno sa C-atomima za koje su vezani fenil ili piridil prsten, koji je ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim ili više ostataka R13 kako je ovde definisano. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde R6 i R7 formiraju zajedno sa C-atomima za koje su vezani nesupstituisani piridil prsten; u jednom izvođenju, pomenuti piridil prsten formira zajedno sa bicikličnim sistemom na koji je anuliran, 1H-pirolo[3,2-h]hinolin grupu.

[0041] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R7 vodonik. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R7 izabran između fluora i hlora.

[0042] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R7 vodonik ili fluoro.

[0043] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R8 izabran između vodonika, fluora, metoksi i fluorometoksi, poželjno između fluora i metoksi. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R8 metoksi. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde R10 nije vodonik.

[0044] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R10 izabran između halogena, C3-4cikloalkiloksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki alkil ili alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata odabranih od cijano, fluoro, C1-2alkoksi i fluoro C1-2alkoksi.

[0045] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, R10 je izabran između halogena, ciklopropila i C1-2alkoksi, pri čemu alkoksi može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, metoksi, etoksi i fluoro C1-2alkoksi. Jedna poželjna varijanta se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R10 izabran između halogena, ciklopropila, metoksi, fluorometoksi, metoksietoksi, fluoroetoksi i fluoroetoksimetoksi.

[0046] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R10 izabran između halogena, metoksi, etoksi, fluorometoksi, fluoroetoksi i fluorometoksietoksi. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je R10 izabran između hloro, bromo, metoksi, difluorometoksi, monofluoroetoksi i difluoroetoksi. Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R11 vodonik ili fluoro, poželjno fluor.

[0047] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je R11 metoksi, a R8 je fluoro.

[0048] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je X2 C(R12) a R12 je vodonik.

[0049] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je X2 C(R12) i R12 je vodonik, R8 je metoksi i R11 je fluoro.

[0050] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je X2 C(R12) i R12 je fluoro.

[0051] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je X2 N, tako da ima strukturu Formule II,

gde su svi supstituenti kao što je prethodno opisano za Formulu I.

[0052] U jednom izvođenju, u jedinjenjima Formule II.

X1 je N ili C(R7)

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, metila, fluorometila, metoksi, fluorometoksi i benziloksi,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hloro, a poželjno je izabran između vodonika i fluora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena, ciklopropila, C1-2alkila i C1-2alkoksi, pri čemu alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, cijano, metoksi i fluoro C1-2alkoksi, R11 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, poželjno između vodonika i fluora, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0053] U jednom izvođenju, u jedinjenjima formule II.

X1 je N ili C(R7)

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena, C1-2alkila i C1-2alkoksi, pri čemu alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, cijano i fluoro C1-2alkoksi,

R11 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, poželjno između vodonika i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0054] U jednom izvođenju jedinjenja formule II,

X1 je N ili C(R7)

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hloro, a poželjno je vodonik,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo, metoksi, fluorometoksi, fluoroetoksi, fluorometoksietoksi i fluoroetoksimetoksi,

R11 je fluor i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0055] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja koja imaju formulu II, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili difluorometil,

X1 je C(R7),

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora, a poželjno je vodonik,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan sa do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi ili fluoroetoksi,

R11 je vodonik ili fluor i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0056] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I, gde je X2 C(R12), tako da ima formulu III

pri čemu su svi supstituenti kao što je ranije opisano za jedinjenja Formule I

[0057] U jednom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između halogena, cijano, metila, metoksi, fluorometoksi, fluorometila i benziloksi,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, a poželjno je vodonik ili fluoro,

R8 je izabran između vodonika, fluora, C1-2alkoksi i fluoroC1-2alkoksi

R10 je izabran između halogena, ciklopropila, C1-2alkila i C1-2alkoksi, pri čemu svaki ciklopropil, alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata odabranih od fluoro, metoksi i fluoro C1-2alkoksi,

[0058] U jednom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je vodonik ili fluor,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi, poželjno između fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena, ciklopropila i C1-2alkoksi, pri čemu alkoksi može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, metoksi i fluoro C1-2alkoksi,

R12 je izabran između vodonika i fluora, i poželjno je fluor, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0059] U jednom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlor-hlor-a,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena C1-2alkil i C1-2alkoksi, pri čemu alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, cijano i fluoro C1-2alkoksi,

[0060] U poželjnom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik

R6 je izabran između hloro, metoksi, fluorometoksi i fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i fluora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo, ciklopropil, metoksi, fluorometoksi, fluoroetoksi, fluorometoksietoksi i fluoroetoksimetoksi,

R11 je vodonik ili fluoro, poželjno fluoro, i

R12 je izabran između vodonika i fluora, i poželjno je vodonik,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0061] U poželjnom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik

R6 je hloro ili fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hloro, hlor,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R11 je vodonik ili fluoro, poželjno fluoro, i

R12 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, poželjno vodonika,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0062] U poželjnom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između hloro, cijano, metil, metoksi, fluorometoksi i fluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, bira se između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R11 je vodonik ili fluoro, i

R12 je vodonik ili fluor, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati, izotopi i ko-kristali.

[0063] U poželjnom izvođenju, u jedinjenjima formule III,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili difluorometil,

X1 je N ili C(R7),

R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hloro, poželjno vodonika,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan ili sa do tri fluoro atoma ili sa jednim fluorometoksi,

R11 je vodonik ili fluoro, i

R12 je vodonik ili fluor, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0064] Jedno konkretno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde je X1 -C(R7)-, tako da ima formulu IV,

pri čemu su drugi supstituenti kao što je prethodno opisano za Formulu I.

[0065] U jednom izvođenju, u jedinjenjima Formule IV,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R7 je izabran između vodonika i halogena, a poželjno je vodonik ili fluoro,

X2 je N ili C(R12),

R8 je izabran između vodonika, fluora, C1-2alkoksi i fluoroC1-2alkoksi

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0066] U jednom izvođenju, u jedinjenjima Formule IV,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena C1-2alkila i C1-2alkoksi, pri čemu alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od fluoro, cijano i fluoro C1-2alkoksi,

R11 je izabran između vodonika, metoksi i fluora, poželjno između vodonika i fluora, X2 je N ili C(R12),

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih solvata i izotopa.

[0066] U jednom izvođenju, u jedinjenjima Formule IV,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R10 je izabran između halogena C1-2alkil i C1-2alkoksi, pri čemu alkil i alkoksi mogu biti opciono supstituisani sa jednim ili više

supstituent izabran između fluoro, cijano i fluoro C1-2alkoksi,

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih solvata i izotopa.

[0068] Jedna poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule IV, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik

R6 je hloro ili fluorometil,

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R11 je vodonik ili fluor, a X2 je N ili C(R12),

R12, ako je prisutan, je vodonik, metoksi ili fluor, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0069] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule IV, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je izabran između hloro, metoksi, fluorometoksi, metil ili fluorometil,

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora i poželjno je vodonik,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R10 je izabran između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi opciono i poželjno supstituisan sa jednim do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi,

R11 je vodonik ili fluor, poželjno fluor,

X2 je N ili C(R12), i

gde je R12, ako je prisutan, vodonik ili fluor, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0070] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule IV, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili difluorometil,

R7 je izabran između vodonika, fluora i hlora, poželjno vodonika,

R8 je izabran između fluora i metoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12), i

gde je R12, ako je prisutan, vodonik ili fluoro, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0071] Jedna poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, II, III ili IV, gde je R7 vodonik.

[0072] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule I, gde je X1 N, tako da ima Formulu V

pri čemu su svi supstituenti kao što je prethodno opisano za Formulu I.

[0073] U jednom izvođenju, u jedinjenjima Formule V,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

X2 je N ili C(R12),

R8 je izabran između vodonika, fluora, C1-2alkoksi i fluoroC1-2alkoksi

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0074] U jednom izvođenju, u jedinjenjima formule V,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili fluorometil,

R8 je izabran između vodonika, fluora i metoksi,

R12 je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0075] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule V, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik

R6 se bira između hloro, cijano, metoksi, fluorometoksi, metil i fluorometil,

R8 se bira između fluora i metoksi,

R10 se bira između halogena, ciklopropil, metoksi, fluorometoksi, fluoroetoksi, fluorometoksietoksi i fluoroetoksimetoksi,

R11 je vodonik ili fluoro, i

X2 je N ili C(R12),

R12, ako je prisutan, je vodonik, metoksi ili fluor, poželjno vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.

[0076] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja Formule V, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik

R6 je hloro ili fluorometil,

R8 je metoksi,

R10 se bira između hloro, bromo, metoksi, fluorometoksi, fluoroetoksi, fluorometoksietoksi i fluoroetoksimetoksi, R11 je vodonik ili fluor, poželjno fluor,

X2 je N ili C(R12),

pri čemu je R12, ako je prisutan, izabran između vodonika, metoksi i fluora i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0077] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule V, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 se bira između hloro, metoksi, fluorometoksi i fluorometil,

R8 se bira između fluora i metoksi,

R10 se bira između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi opciono i poželjno supstituisan sa jednim do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi ili fluoroetoksi, R11 je vodonik ili fluor, poželjno fluor, X2 je C(R12) gde je R12 vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi

[0078] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule V, gde

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R6 je hloro ili difluorometil, poželjno hloro,

R8 se bira između fluora i metoksi,

R10 se bira između hloro i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan ili sa do tri fluoro atoma ili sa jednim fluorometoksi, R11 je vodonik ili fluor

X2 je C(R12) gde je R12 izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0079] U jednom poželjnom izvođenju jedinjenja formule I, II, III, IV ili V,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R8 je vodonik ili fluoro, poželjno fluoro,

R11 je metoksi, X2 je C(R12) i R12 je vodonik, a X1, R6 i R10 su kao što su definisani u prethodnim izvođenjima.

[0080] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenja formule I, gde R6 i R7 zajedno sa C-atomima za koje su vezani formiraju 5 ili 6-člani prsten kao što je prikazano u Formuli VI:

pri čemu

n je 0 do 3, poželjno 0 ili 1,

X3 je CH ili N,

R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro,

R4 je vodonik ili fluoro,

R5 je vodonik ili halogen,

R8 se bira između vodonika, halogena, metoksi, etoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi,

R10 se bira između vodonika, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituent izabran između halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano,

R11 se bira između vodonika, fluora i metoksi,

X2 je N ili C(R12),

R12 se bira između vodonika, metoksi i halogena,

R13, u svakom slučaju, je nezavisno izabran između halogena, cijano, hidroksi, metila, metoksi, fluorometila i fluorometoksi, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0081] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule VI, gde

n je 0

X3 je N ili CH,

R2 je vodonik,

R4 je vodonik,

R5 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik,

R8 se bira između vodonika, fluora i metoksi,

R10 se bira između halogena, ciklopropila i C1-2alkoksi, pri čemu alkoksi može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih između fluoro, metoksi, etoksi i fluoro C1-2alkoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N ili C(R12), i

R12, ako je prisutan, je izabran između vodonika, metoksi i fluora,

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0082] Jedno izvođenje se odnosi na jedinjenje formule VI, gde

n je 0, 1 ili 2, poželjno 0 ili 1,

X3 je N,

R2, R4 i R5 su svi vodonik,

R8 se bira između vodonika, fluora i metoksi,

R11 je vodonik ili fluoro

X2 je N,

R13 je u svakom slučaju izabran između halogena, hidroksi, metoksi, fluorometoksi, metila i fluorometila, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0083] U jednom posebnom izvođenju jedinjenja formule VI, n je 0, a X3 je N.

[0084] U jednom posebnom izvođenju jedinjenja formule I, II, III, IV, V ili VI, R11 je izabran između vodonika i fluora.

[0085] U jednom posebnom izvođenju jedinjenja Formule I, II, III, IV, V ili VI, R11 je fluoro.

[0086] U jednom posebnom izvođenju jedinjenja formule I, II, III, IV, V ili VI, R8 je metoksi, R11 je fluor i R12, ako je prisutan, je vodonik.

[0087] U jednom posebnom poželjnom izvođenju jedinjenja Formule I, II, III, IV, V ili VI, R2, R4 i R5 su svi vodonik, R8 je metoksi, R11 je fluor i R12, ako je prisutan, je vodonik, a ostali supstituenti su kao što je ovde opisano.

[0088] U jednom posebnom poželjnom izvođenju jedinjenja Formule I, II, III, IV ili V, R2, R4, R5 i R7, ako su prisutni, su svi vodonik, R8 je metoksi, R11 je fluor i R12, ako je prisutan je vodonik, a ostali supstituenti su kao što je ovde opisano.

[0089] U jednom aspektu jedinjenja Formule I, II, III, IV, V ili VI, R12 je metoksi, R8 je fluoro i R11 je izabran između vodonika i fluora.

[0090] U jednom poželjnom izvođenju jedinjenja formule I, II, III, IV, V ili VI, R12 je vodonik.

[0091] Jedno izvođenje se odnosi na bilo koji specifični GPR17 modulator koji je ovde otkriven, uključujući, ali ne ograničavajući se na one opisane u eksperimentalnom delu i u tabeli 7 ovde.

[0092] Jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenje koje se bira između

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonamid

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonamid

5-bromo-6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid 6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-7-fluoro-1H-indol-3-sulfonamid

6-cijano-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-ciklopropil-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metoksi-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metoksi-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metil-1H-indol-3-sulfonamid

6-cijano-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

6-(difluorometil)-N-(2,5-difluoro-6-metilpiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-(difluorometil)-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-(difluorometil)-N-[5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid 6-hloro-N-(6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid 6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid 6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-4-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

[0092] Jedna poželjna varijanta se odnosi na jedinjenje koje se bira između

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid 6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-2-metoksi-3-piridil]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-[5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-(5-hloro-3-metoksipirazin-2-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid

N-(5-bromo-3-metoksipirazin-2-il)-6-hloro-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metilpiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

6-hloro-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-hloro-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-jodopiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

6-hloro-N-(6-hloro-4-fluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid

i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i izotopa.

[0093] Još jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja koja imaju strukturu Formule I, II, III, IV, V ili VI kako je ovde definisana, ili bilo koje jedinjenje pojedinačno otkriveno ovde, posebno bilo koje od Jedinjenja I-1 do I-72, i koji sadrži najmanje jedan izotop 18F, poželjno na poziciji atoma fluora kao što je naznačeno u jednom od jedinjenja koja su ovde otkrivena. Kao neograničavajući primer, u jedinjenju 6-hloro-N-(6-hloro-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamidu, ovde otkrivenom, najmanje jedan od dva fluora mogu biti predstavljeni izotopom<18>F. Ovo se takođe odnosi i na druga ovde opisana jedinjenja koja sadrže fluor. Ova jedinjenja koja sadrže<18>F mogu se poželjno koristiti kao PET markeri.

[0094] Još jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja koja imaju strukturu Formule I, II, III, IV, V ili VI kako je ovde definisano, ili bilo koje jedinjenje pojedinačno otkriveno ovde, posebno bilo koje od Jedinjenja I-1 do I-72 i koji sadrži najmanje jedan<11>C izotop, poželjno na poziciji atoma ugljenika kao što je ovde naznačeno. Ova jedinjenja koja sadrže<11>C mogu se poželjno koristiti kao PET markeri.

[0095] Još jedno poželjno izvođenje se odnosi na jedinjenja koja imaju strukturu Formule I, II, III, IV, V ili VI kako je ovde definisano, ili bilo koje jedinjenje pojedinačno otkriveno ovde, posebno bilo koje od Jedinjenja I-1 do I-72 i koji sadrži najmanje jedan izotop<123>I,<125>I ili<131>I, poželjno na poziciji atoma joda kao što je ovde naznačeno. Kao neograničavajući primer, u jedinjenju 6-hloro-N-(6-jodopiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamidu, koji je ovde otkriven, jod može biti predstavljen sa<123>I,<125>I ili<131>I izotopa. Jedinjenja koja sadrže<123>I,<125>I ili<131>I mogu se poželjno koristiti kao SPECT markeri

Terapijska i dijagnostička primena.

[0096] U jednom izvođenju, pronalazak se odnosi na bilo koje od ovde opisanih jedinjenja, za upotrebu u terapiji ili dijagnozi, posebno u terapiji životinja, posebno ljudi.

[0097] Zbog svojih GPR17 modulacionih svojstava, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu koristiti kao lekovi i mogu se koristiti za lečenje i/ili prevenciju različitih bolesti CNS sistema.

[0098] Jedno izvođenje sadašnjeg pronalaska je stoga jedinjenje kako je ovde opisano za upotrebu kao lek, posebno za upotrebu kao lek za lečenje i/ili prevenciju bolesti povezane sa GPR17.

[0099] Bolest ili poremećaj povezan sa GPR17 je bolest koja je povezana sa disfunkcijom GPR17 signalnog sistema kao što je, na primer, prekomerna ekspresija i/ili prekomerna aktivnost GPR17 receptora. Bez želje da budemo vezani bilo kakvom teorijom, aktivnost GPR17 može biti povećana, proširena ili na neki drugi način izmenjena u određenim tkivima, na primer u oligodendrocitnim progenitorskim ćelijama (OPC) ili tokom sazrevanja oligondendrocita, potencijalno zbog aktiviranja endogenih stimulusa kao što su, za na primer, faktori upale. Visoka aktivnost GPR17 može sprečiti diferencijaciju oligodendrocita i efikasnu mijelinizaciju, čime se promoviše nastanak ili dalji razvoj bolesti mijelinizacije (videti Chen et al, supra). Negativni GPR17 modulatori mogu tako da promovišu mijelinizaciju tako što smanjuju ili isključuju aktivnost GPR17 i podržavaju sazrevanje OPC u oligondendrocite koji proizvode mijelin (videti npr. Simon et al, supra).

[0100] U jednom poželjnom izvođenju, pronalazak se odnosi na bilo koje od jedinjenja opisanih ovde, za upotrebu u terapiji ili dijagnozi za upotrebu u prevenciji ili lečenju poremećaja ili sindroma odabranih i/ili povezanih sa poremećajem mijelinizacije, posebno poremećajem demijelinizacije, kao što je centralni nervni sistem. U jednom izvođenju, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u promovisanju, stimulaciji i/ili ubrzavanju remijelinizacije kod životinje kojoj je to potrebno. U jednom izvođenju, remijelinizacija povezana sa primenom jedinjenja iz ovog pronalaska će sprečiti ili lečiti bolest demijelinacije kao što je, ali nije ograničena na, multiplu skleroza.

[0101] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe biti korisna u lečenju ili prevenciji poremećaja ili sindroma povezanih sa oštećenjem moždanog tkiva, cerebrovaskularnim poremećajem i određenim neurodegenerativnim bolestima.

[0102] Neurodegenerativni poremećaji su nedavno bili snažno povezani sa gubitkom mijelinizacije. Shodno tome, veruje se da je očuvana oligodendroglijalna i mijelinska funkcionalnost ključni preduslov za prevenciju aksonalne i neuronske degeneracije (videti npr. Ettle et al, supra). Negativni GPR17 modulatori stoga mogu predstavljati odličnu opciju za lečenje bilo koje neurodegenerativne bolesti povezane sa demijelinizacijom i/ili pogođenom mijelinizacijom, kao što je npr. ALS, MSA, Alchajmerova bolest, Hantingtonova bolest ili Parkinsonova bolest.

[0103] U posebnom poželjnom izvođenju, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se tako koristiti u prevenciji i/ili lečenju poremećaja periferne ili centralne mijelinizacije, posebno poremećaja mijelinizacije centralnog nervnog sistema. U jednom izvođenju, jedinjenja iz ovog pronalaska se koriste u lečenju i/ili prevenciji i/ili dijagnozi poremećaja mijelinizacije oralnom primenom. U poželjnom izvođenju, poremećaj mijelinizacije koji se leči jedinjenjima iz ovog pronalaska je poremećaj demijelinizacije.

[0104] Primeri takvih poremećaja mijelinizacije koje treba lečiti i/ili sprečiti pomoću jedinjenja koja su sada otkrivena su, posebno,

- multipla skleroza (MS) uključujući njene različite podforme

neuromijelitis optica (takođe poznat kao Devičova bolest),

- hronični relapsirajući inflamatorni optički neuritis, akutni diseminovani encefalomijelitis,

- akutni hemoragični leukoencefalitis (AHL),

- periventrikularna leukomalacija

- demijelinizacija usled virusnih infekcija, npr. HIV-om ili progresivnom multifokalnom leukoencefalopatijom, - centralna pontinska i ekstrapontinska mijelinoliza,

- demijelinizacija usled traumatskog oštećenja moždanog tkiva, uključujući demijelinizaciju izazvanu kompresijom, npr. tumorima

- demijelinizacija kao odgovor na hipoksiju, moždani udar ili ishemiju ili druge kardiovaskularne bolesti, - demijelinizacija usled izlaganja ugljen-dioksidu, cijanidu ili drugim CNS toksinima

- Šilderova bolest,

- Balo koncentrična skleroza,

- Perinatalna encefalopatija, i

- Neurodegenerativne bolesti uključujući, posebno,

o Amiotrofična lateralna skleroza (ALS).

o Alchajmerova bolest (AD).

o Višestruka atrofija sistema

o Parkinsonova bolest

o Spinocerebelarna ataksija (SCA), takođe poznata kao spinocerebelarna atrofija

o Hantingtonova bolest

- hronični relapsirajući inflamatorni optički neuritis, akutni diseminovani - psihijatrijski poremećaji kao što su šizofrenija i bipolarni poremećaj).

- bolesti periferne mijelinizacije kao što su leukodistrofije, periferne demijelinizirajuće neuropatije, Dejerine-Sottasov sindrom ili Charcot-Marie-Tooth bolest

[0105] Lečenje ili prevencija CNS bolesti kao što je demijelinizaciono oboljenje, takođe uključuje lečenje znakova i simptoma povezanih sa takvom bolešću.

[0106] Na primer, upotreba jedinjenja iz ovog pronalaska za lečenje i/ili prevenciju MS takođe uključuje lečenje i/ili prevenciju znakova i simptoma povezanih sa MS, kao što su negativni efekti na optičke nerve (gubitak vida, dvostruki vid), gornje (dorzalne) stubove (gubitak senzacije), kortikospinalni trakt (spastična slabost), cerebelarne puteve (nekoordinacija, dizartrija, vrtoglavica, kognitivno oštećenje), medijalni longitudinalni fascikulus (dvostruki vid pri bočnom pogledu), kičmeni trigeminalni trakt ili bol u licu slabost mišića (poremećeno gutanje, kontrola bešike ili creva, grčevi) ili psihološki efekti povezani sa osnovnom bolešću kao što su depresija, anksioznost ili drugi poremećaji raspoloženja, opšta slabost ili nesanica.

[0107] Prema tome, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u lečenju znakova i simptoma bolesti mijelinizacije, posebno bolesti demijelinacije kao što je multipla skleroza; takvi znaci i simptomi MS uključuju, ali nisu ograničeni na grupu gubitak vida, oštećenje vida, dvostruki vid, gubitak ili oštećenje senzacije, slabost kao što je spastična slabost, motorička nekoordinacija, vrtoglavica, kognitivno oštećenje, utrnulost lica, bol u licu, oštećeno gutanje, poremećen govor, poremećena kontrola bešike i/ili creva, grčevi, depresija, anksioznost, poremećaji raspoloženja, nesanica i umor.

[0108] U jednom poželjnom izvođenju, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u lečenju multiple skleroze. MS je heterogena bolest mijelinizacije i može se manifestovati u različitim oblicima i stadijumima, uključujući, ali ne ograničavajući se na relapsno-remitentnu MS, sekundarno-progresivnu MS, primarnu progresivnu MS, progresivno relapsnu MS, svaku u zavisnosti od aktivnosti i progresije bolesti. Prema tome, u jednom izvođenju, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u lečenju multiple skleroze u njenim različitim stadijumima i oblicima, kao što je ovde opisano.

[0109] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u lečenju/ili prevenciji Neuromielitis optica (takođe poznatog kao Devicova bolest ili Devicov sindrom). Neuromielitis optica je složen poremećaj koji karakteriše upala i demijelinizacija optičkog nerva i kičmene moždine. Mnogi povezani simptomi su slični MS i uključuju slabost mišića, posebno udova, smanjen osećaj i gubitak kontrole bešike.

[0110] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju ALS. ALS je nedavno povezan sa degeneracijom oligodendrocita i povećanom demijelinizacijom, što sugeriše ALS kao ciljnu bolest za negativne GPR17 modulatore (Kang et al, supra; Fumagalli et al, Neuropharmacology 104, 2016, 82).

[0111] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju Hantingtonove bolesti. Dobro je opisano da je Huntington povezan sa impaktiranom mijelinizacijom (Bartzokis et al, supra; Huang et al, Neuron 85, 2015, 1212).

[0112] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju višestruke sistemske atrofije. MSA je nedavno bila snažno povezana sa demelinacijom (Ettle supra, Jellinger supra) što sugeriše strategije remijelinacije za lečenje ili prevenciju MSA.

[0113] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska su za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju Alchajmerove bolesti. Nedavno je primećeno da je AD povezan sa povećanom smrću ćelija oligodendronocita i fokalnom demijelinizacijom i da predstavlja patološki proces u AD (Mitew et al, Acta Neuropathol 119, 2010, 567)

[0114] Jedan aspekt ovog pronalaska se odnosi na metod lečenja bilo koje od bolesti ili poremećaja opisanih ovde, posebno bolesti mijelinizacije kao što je MS, Neuromieltis optica, ALS, Chorea Huntington, Alchajmerova bolest ili drugi, davanjem subjektu kome je to potrebno, uključujući i pacijenta, terapeutski efikasne količine jedinjenja iz ovog pronalaska.

[0115] U drugom aspektu, jedinjenje ovog pronalaska može da se koristi u prevenciji i lečenju povrede kičmene moždine, perinatalne encefalopatije, moždanog udara, ishemije ili cerebrovaskularnog poremećaja.

[0116] U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na postupak za prevenciju i/ili lečenje sindroma ili poremećaja povezanog sa poremećajem mijelinizacije, ili sa poremećajem ili sindromom povezanim sa oštećenjem moždanog tkiva, koji obuhvata davanje pacijentu kada je to potrebno, terapeutski efikasne količine jedinjenja kao što je ovde opisano. Pacijent kome je potreban takav tretman može biti svaki pacijent koji je pretrpeo oštećenje moždanog tkiva kao što je mehanička, hemijska, virusna ili druga povreda.

[0117] U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na postupak za prevenciju i/ili lečenje sindroma ili poremećaja povezanog sa poremećajem mijelinacije, ili sa poremećajem ili sindromom povezanim sa moždanim udarom ili drugom ishemijom mozga, koji obuhvata davanje pacijentu kome je potrebna terapeutski efikasna količina jedinjenja kao što je ovde opisano. Pacijent kome je to potrebno može biti svaki pacijent koji je nedavno doživeo cerebralnu ishemiju/šlog koji je mogao biti uzrokovan, na primer, okluzijom cerebralne arterije bilo embolijom ili lokalnom trombozom.

[0118] GPR17 je takođe nedavno doveden u vezu sa unosom hrane, kontrolom insulina i gojaznošću. Prema različitim izveštajima, negativni modulatori GPR17 mogu biti od pomoći za kontrolu uzimanja hrane i za lečenje gojaznosti (videti npr. Ren et al, Diabetes 64, 2015; 3670.) Dakle, jedna izvođenje ovog pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja za prevenciju i/ili lečenje gojaznosti i metode lečenja gojaznosti.

[0119] Štaviše, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se koristiti za lečenje prevencije tkiva gde je GPR17 eksprimiran, kao što su npr. tkiva srca, pluća ili bubrega. U jednom izvođenju, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu koristiti za lečenje ili prevenciju ishemijskih poremećaja bubrega i/ili srca.

[0120] GPR17 je takođe povezan sa zapaljenjem pluća i astmom koji su, na primer, izazvani grinjama kućne prašine (Maekawa, J Immunol 2010, 185(3), 1846-1854). Stoga, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje astme ili drugih vrsta zapaljenja pluća.

[0121] Tretman prema ovom pronalasku može da obuhvata primenu jednog od ovde predstavljenih jedinjenja kao "samostalnog" tretmana CNS bolesti, posebno bolesti ili poremećaja mijelinizacije kao što je MS ili ALS. Alternativno, jedinjenje koje je ovde predstavljeno može se primenjivati zajedno sa drugim korisnim lekovima u kombinovanoj terapiji.

[0122] U neograničavajućem primeru, jedinjenje prema ovom pronalasku je kombinovano sa drugim lekom za lečenje bolesti mijelinizacije, kao što je MS, koji ima drugačiji način delovanja, kao što je npr. antiinflamatorni ili imunosupresivni lek. Takva jedinjenja uključuju, ali nisu ograničena na: (i) kortikosteroide kao što su prednizon, metilprednizon ili deksametazon, (ii) beta interferone kao što su interferon beta-1a, interferon beta-1b ili peginterferon beta1a, (iii) anti-CD20 antitela kao što su okrelizumab rituksimab i ofatumumab, (iv) soli glatiramera kao što je glatiramer acetat, (v) dimetil fumarat, (vi) fingolimod i drugi modulatori receptora sfingozin-1-fosfata kao što su ponesimod, siponimod, ozanimod ili lakvinimod dihidro-vioirot, inhibitori dehidrogenaze kao što su teriflunomid ili leflunomid, (viii) anti-integrin alfa4 antitela kao što je natalizumab, (ix) anti-CD52 antitela kao što je alemtuzumab, (x) mitoksantron, (xi) anti Lingo1 antitela kao što je opicinumab, ili (xii) imunomodulatorne terapije kao što je masitinib

[0123] Slično, jedinjenje iz ovog pronalaska može se kombinovati sa analgetičkim lekom ako se bolno stanje mijelinizacije treba lečiti. Takođe, jedinjenje prema ovom pronalasku može da se koristi u kombinaciji sa antidepresivom za ko-lečenje psiholoških efekata povezanih sa osnovnom bolešću mijelinizacije koja se leči.

[0124] U kombinovanim terapijama, dva ili više aktivnih principa se mogu obezbediti preko iste formulacije ili kao "komplet delova", tj. u odvojenim galenskim jedinicama. Takođe, dva ili više aktivnih principa, uključujući jedinjenja iz ovog pronalaska, mogu se davati pacijentu u isto vreme ili naknadno, npr. u intervalnoj terapiji. Dodatni lek se može primeniti na isti način ili na drugačiji način primene. Na primer, GPR17 modulator ovog pronalaska se može primeniti oralno, dok se drugi lek može primeniti subkutanom injekcijom.

[0125] U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska se mogu koristiti za dijagnozu i/ili praćenje bolesti povezane sa GPR17, kao što je dalje opisano ovde, posebno demijelinizirajuće bolesti, kako je ovde predstavljeno, poželjno u dijagnostici i praćenju bolesti multiple skleroze.

izU jednom aspektu, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu koristiti za dijagnozu i/ili praćenje ekspresije, distribucije i/ili aktivacije GPR17 receptora bilo in-vivo, npr. direktno u subjektu, kao što je korišćenje tehnika molekularne slike, ili in-vitro, kao što je npr. ispitivanjem bilo kog uzorka kao što su telesne tečnosti ili tkiva uzeti od subjekta. Svako takvo određivanje aktivnosti, ekspresije i/ili distribucije GPR17 može se koristiti za predviđanje, dijagnozu i/ili praćenje (a) statusa i progresije bolesti povezane sa GPR17 kao što je ovde opisano, posebno bolesti mijelinizacije uključujući, ali ne ograničavajući se na, na primer, multipla sklerozu, i (b) efikasnosti i/ili primenljivosti i/ili pravilnog doziranja tretmana povezanog sa bilo kojom takvom bolešću povezanom sa GPR17.

[0127] U jednom aspektu, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste kao PET ili SPECT markeri, kao što je ovde dalje otkriveno, da bi se izvršila dijagnoza in vivo i/ili praćenje bolesti. Ovim se ekspresija, aktivacija i/ili distribucija GPR17 receptora može direktno meriti kod subjekta, npr. snimanjem ljudskog pacijenta nakon primene GPR17 PET ili SPECT markera ovog pronalaska. Ovo može olakšati pravilnu dijagnozu bolesti, može pomoći u određivanju primenljivih opcija lečenja i/ili se može koristiti za praćenje progresije bolesti i/ili za praćenje ili predviđanje uspeha medicinske intervencije, uključujući izbor i pravilnu administraciju i/ili doziranje terapijskog leka.

[0128] U jednom izvođenju, PET ili SPECT markeri iz ovog pronalaska mogu se koristiti zajedno sa terapijskim lekom, tj. kao prateća dijagnostika, u cilju praćenja i/ili predviđanja efikasnosti i/ili bezbednosti pomenutog terapijskog leka kod određenog subjekta, ili radi procene odgovarajuće doze leka.

[0129] Jedno izvođenje se odnosi na PET ili SPECT marker ovog pronalaska za upotrebu kao prateći lek u kombinaciji sa terapeutskim lekom. Terapeutski lek koji će se koristiti sa PET ili SPECT markerom ovog pronalaska može biti izabran iz grupe (a) neobeleženog jedinjenja ovog pronalaska, (b) GPR17 modulirajućeg jedinjenja koje se razlikuje od jedinjenja sadašnjeg pronalaska i (c) lek za lečenje bolesti mijelinizacije, uključujući ali ne ograničavajući se na lek za upotrebu u lečenju multiple skleroze, koji nije modulator GPR17, kao što je dalje opisano ovde.

[0130] Jedno izvođenje se odnosi na komplet koji sadrži (a) kao prvu komponentu, PET ili SPECT marker ovog pronalaska, posebno PET ili PET marker zasnovan na jedinjenju koje ima strukturu prema bilo kojoj od Formula I, II, III, IV, V ili VI, kako je dalje definisano ovde, ili imaju strukturu bilo kog od jedinjenja koja su ovde otkrivena, ali imaju inkorporiran najmanje jedan radionuklid koji je pogodan za PET ili SPECT snimanje, poželjno radionuklid izabran između<18>F,<11>C,<123>I ,<125>I i<131>I,

(b) kao druga komponenta, terapeutski lek izabran između

i. jedinjenja ovog pronalaska koje ima strukturu u skladu sa bilo kojom od Formula I, II, III, IV, V ili VI, kako je dalje definisano ovde, ili ima strukturu bilo kog od pojedinačnih jedinjenja koja su ovde otkrivena, i koja nemaju inkorporiran radionuklid,

ii. GPR17 modulirajuće jedinjenje koje se razlikuje od jedinjenja ovog pronalaska kako je definisano u (i), i iii. lek za lečenje bolesti mijelinizacije, uključujući ali ne ograničavajući se na lek za upotrebu u lečenju multiple skleroze, ali koji nema aktivnost modulacije GPR17; takva jedinjenja su poznata stručnjaku u ovoj oblasti, uključujući one primere koji su dalje opisani gore.

[0131] Alternativno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se koristiti u in-vitro dijagnostičkom testu, na primer za ispitivanje pogodnih telesnih tečnosti subjekta kao što je npr. krv, plazma, urin, pljuvačka ili cerebrospinalna tečnost za bilo koji nivo ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17.

[0132] Jedno izvođenje se odnosi na metod lečenja bolesti povezane sa GPR17, posebno bolesti mijelinizacije uključujući, ali ne ograničavajući se na multiplu sklerozu, pri čemu pomenuta metoda uključuje korake (a) određivanja ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17 receptora subjekta, (b) upoređivanje ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17 receptora kod navedenog subjekta sa ekspresijom, aktivnošću i/ili distribucijom GPR17 receptora kod jednog ili više zdravih subjekata ili populacije, (c) određivanje potreba za medicinskim tretmanom ili profilaksom navedenog subjekta na osnovu odstupanja ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17 navedenog subjekta od zdravih subjekata ili populacije i (d) tretman subjekta sa devijacijom ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17 receptora davanjem terapeutskog leka navedenoj osobi, koji lek je pogodan za lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa GPR17, posebno primenom GPR17 modulatora, poželjno davanjem jednog od više jedinjenja ovog pronalaska. U jednom izvođenju, određivanje (a) ekspresije, aktivnosti i/ili distribucije GPR17 biće sprovedeno korišćenjem jednog od jedinjenja ovog pronalaska, posebno pomoću PET ili SPECT markera, ili in vitro pregledom telesnih tečnosti ili tkiva pomenutog subjekta korišćenjem PET ili SPECT markera ovog pronalaska.

[0133] U jednom poželjnom aspektu, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje kako je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0134] Za primenu kao medicinski lek, jedinjenja se mogu koristiti u farmaceutskoj kompoziciji koja sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku i farmaceutski prihvatljiv nosač, kao što je dalje definisano ovde. Takva farmaceutska kompozicija može biti prilagođena na primer za oralnu, intravensku, intramuskularnu, subkutanu, nazalnu, rektalnu, intrakranijalnu, oftalmičku, bukalnu ili transdermalnu primenu i može da sadrži farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvanse, razblaživače, stabilizatore i slično.

[0135] Na primer, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti rastvorena u uljima, propilen glikolu ili drugim rastvaračima koji se obično koriste za proizvodnju injekcija. Pogodni primeri nosača uključuju, ali ne ograničavajući se na, fiziološki rastvor, polietilen glikol, etanol, biljna ulja, izopropil miristat, itd. Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti formulisana u obliku injekcija rastvaranjem, suspendovanjem ili emulgovanjem u rastvaraču rastvorljivom u vodi kao što su fiziološki rastvor i 5% dekstroza, ili u rastvaračima nerastvornim u vodi kao što su biljna ulja, sintetički glicerid masnih kiselina, estri viših masnih kiselina i propilen glikol. Formulacije pronalaska mogu uključiti bilo koji od uobičajenih aditiva kao što su agensi za rastvaranje, izotonični agensi, agensi za suspendovanje, emulgatori, stabilizatori i konzervansi.

[0136] U jednom izvođenju, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu davati oralno, npr. u obliku tablete, kapsule, dražeja, praha, granulata, ili u obliku tečnosti ili polučvrste supstance, uključujući npr. sirupe, suspenzije, emulzije ili rastvore.

[0137] Oralne formulacije mogu da sadrže, bez ograničenja, agense za produženo oslobađanje, dezintegrante, punila, lubrikante, stabilizatore, antioksidante, arome, disperzione agense, elektrolite, pufere, boje ili konzervanse. Pogodni ekscipijenti i formulacije su poznati stručnjacima i otkriveni su u standardnim monografijama, kao što je Remington ("The science and practice of pharmacy", Lippincott, Williams & Wilkins, 2000) ili otkriveni u drugim izvorima koji su dobro poznati stručnjacima.

[0138] Tableta se, na primer, može pripremiti mešanjem najmanje jednog jedinjenja ovog pronalaska sa najmanje jednim netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, kao što je npr. vezivo, punilo/razređivači, sredstva za dezintegraciju, plastifikator i slično, i opcioni rastvarač (vodeni ili nevodeni), i naknadnom preradom smeše u tabletu postupkom koji uključuje, ali nije ograničen na, suvu kompresiju, suvu granulaciju, vlažnu granulaciju, sušenje raspršivanjem ili ekstruziju rastopa. Tableta može biti neobložena ili obložena poznatim tehnikama da bi se ili prikrio loš ukus leka neprijatnog ukusa, ili odložila dezintegracija i apsorpcija aktivnog sastojka u gastrointestinalnom traktu.

[0139] Tableta može da obezbedi trenutno ili produženo oslobađanje jedinjenja ovog pronalaska.

[0140] Tipični agensi za produženo oslobađanje su na primer oni koji bubre u kontaktu sa vodom, kao što su polivinilpirolidon, hidroksietilceluloza, hidroksipropilceluloza, drugi etri celuloze, skrob, preželatinizovani skrob, polimetakrilat, polivinil acetat, mikrokristalna celuloza, dekstrane i njihova mešavina. Neograničavajući primeri dezintegranata uključuju preželatinizovani skrob, natrijum skrob glikolat, mikrokristalnu celulozu, natrijum karboksimetilcelulozu (CMC-Na), umreženi CMC-Na i nisko supstituisanu hidroksipropilcelulozu, kao i njihove smeše. Pogodna punila i veziva uključuju bez ograničenja mikrokristalnu celulozu, celulozu u prahu, laktozu (bezvodnu ili monohidrat), kompresibilni šećer, skrob (npr. kukuruzni skrob ili krompirov skrob), preželatinizirani skrob, fruktozu, saharozu, dekstrozu, dekstrane, druge šećere, maltitol, sorbitol, laktitol i saharozu, silikonizovana mikrokristalna celuloza, kalcijum hidrogen fosfat, kalcijum hidrogen fosfat dihidrat, dikalcijumfosfat dihidrat, trikalcijum fosfat, kalcijum laktat ili njihove smeše. Maziva, sredstva protiv prianjanja i/ili glidanti uključuju stearinsku kiselinu, magnezijum stearat, kalcijum stearat, natrijum lauril sulfat, hidrogenizovano biljno ulje, hidrogenizovano ricinusovo ulje, natrijum stearil fumarat, makrogole, glicerol dibehenat, talk, silikon dioksid, skrob, kukuruzni skrob, uključujući mešavine.

[0141] Jedinjenje iz ovog pronalaska se takođe može formulisati za parenteralnu primenu injekcijom, npr. bolus injekcijom ili infuzijom. Kompozicije za injekcije se mogu obezbediti spremne za upotrebu i mogu imati takve oblike kao što su suspenzije, rastvori ili emulzije u uljnim ili vodenim nosačima, i mogu sadržati ekscipijente kao što su agensi za suspendovanje, stabilizaciju, konzervaciju i/ili disperziju. Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku praha za konstituisanje sa odgovarajućim nosačem, npr. sterilna voda ili fiziološki rastvor bez pirogena, pre upotrebe.

[0142] Za nazalnu primenu ili primenu inhalacijom, jedinjenja u skladu sa ovim pronalaskom mogu se prikladno dati u obliku aerosolnog spreja za pakovanja pod pritiskom ili nebulizatora, uz upotrebu pogodnog potisnog gasa, npr. dihlorodifluorometan, fluorotriklorometan, dihlorotetrafluoroetan, ugljen-dioksid ili drugi pogodan gas ili smeša gasova.

[0143] Za oftalmičku primenu jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku mogu se pogodno formulisati kao mikronizovane suspenzije u izotoničnom sterilnom fiziološkom rastvoru sa podešenim pH, bilo sa ili bez konzervansa kao što je baktericidno ili fungicidno sredstvo, na primer fenilmerkur nitrat, benzilalkonijum hlorid ili hlorheksidin acetat. Alternativno, za oftalmičku primenu jedinjenja mogu biti formulisana u obliku masti kao što je vazelin.

[0144] Za rektalnu primenu, jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku mogu se pogodno formulisati kao supozitorije. Oni se mogu pripremiti mešanjem aktivne komponente sa odgovarajućim neiritirajućim ekscipijensom koji je čvrst na sobnoj temperaturi, ali tečan na rektalnoj temperaturi i tako će se istopiti u rektumu da bi oslobodio aktivnu komponentu. Takvi materijali uključuju, na primer, kakao puter, pčelinji vosak i polietilen glikole.

[0145] U jednom izvođenju, jedinjenja se mogu davati transdermalno. Ovaj način primene sprečava takozvani efekat prvog prolaza oralne primene i štaviše omogućava obezbeđivanje konstantnijih nivoa u plazmi, što je u nekim slučajevima od posebne prednosti. Dizajn transdermalnih oblika kao što su masti ili kreme ili drugi transdermalni sistemi kao što su npr. flasteri ili elektroforetski uređaji su opšte poznati u oblasti, vidi npr. Venkatraman and Gale, Biomaterials 1998, Vol 19, p1119; Prausnitz and Langer, Nat Biotechnology 2008, Vol 26.11 p1261; WO 2001/47503; WO2009/000262; WO99/49852; WO 07/094876.

[0146] Poželjni nivo doze jedinjenja prema ovom pronalasku zavisi od niza faktora uključujući stanje i telesnu težinu pacijenta, ozbiljnost određene bolesti, oblik doze, način i period primene, ali može biti na odgovarajući način izabran od strane oni koji su stručni u ovoj oblasti. U različitim izvođenjima, jedinjenja se primenjuju u količini koja se kreće od 0,001 do 10 mg/kg telesne težine dnevno, ili od 0,03 do 1 mg/kg telesne težine dnevno. Pojedinačne doze mogu da se kreću od oko 0,1 do 1000 mg aktivnog sastojka dnevno, od oko 0,2 do 750 mg/dan, od oko 0,3 do 500 mg/dan, od 0,5 do 300 mg/dan, ili od 1 do 100 mg/dan . Doze se mogu davati jednom dnevno ili nekoliko puta dnevno u podeljenim segmentima.

[0147] Drugi aspekt ovog pronalaska je komplet koji sadrži lek ili farmaceutsku kompoziciju kako je ovde opisano, i uputstva za njegovu upotrebu.

[0148] Drugi aspekt ovog pronalaska je pakovanje koje sadrži najmanje jednu jedinicu leka ili farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje kao što je ovde opisano, i uputstva za njegovu upotrebu. DEFINICIJE

[0149] Bilo koja referenca na jedinjenje prema ovom pronalasku takođe uključuje farmaceutski prihvatljive soli, solvate, izotope i ko-kristale takvih jedinjenja osim ako nije drugačije naznačeno.

[0150] Izraz "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na bilo koje soli koje jedinjenja mogu da formiraju i koje su pogodne za primenu subjektima, posebno ljudskim subjektima, u skladu sa ovim pronalaskom. Takve soli uključuju, ali nisu ograničene na, kisele adicione soli, formirane ili sa neorganskim kiselinama kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično, ili formirane sa organskim kiselinama kao što su sirćetna kiselina, propionska kiselina, heksanska kiselina, ciklopentanpropionska kiselina, glikolna kiselina, piruvinska kiselina, mlečna kiselina, malonska kiselina, sukcinska kiselina, jabučna kiselina, maleinska kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, benzoeva kiselina, 3-(4-hidroksibenzoil) benzoeva kiselina, cinaminska kiselina, mandelinska kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, 1,2-etan-disulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina, 4-hlorobenzensulfonska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, 4-toluetil-ciklosulfonska kiselina, 4-toluenciklosulfonska kiselina [2.2.2]okt-2-en-1-6 arboksinska kiselina, glukoheptonska kiselina, 3-fenilpropionska kiselina, trimetilsirćetna kiselina, tercijarna butil-sirćetna kiselina, lauril sumporna kiselina, glukonska kiselina, glutaminska kiselina, hidroksinaftoinska kiselina, salicilna kiselina, i mukonska kiselina. Ostale soli uključuju 2,2-dihloroacetat, adipat, alginat, askorbat, aspartat, 2-acetamidobenzoat, kaproat, kaprat, kamforat, ciklamat, laurilsulfat, edisilat, esilat, izetionat, format, galaktarat, gentisat, gluceptat, glukuronat, oksoglutarat, hipurat, laktobionat, napadisilat, ksinafoat, nikotinat, oleat, orotat, oksalat, palmitat, embonat, pidolat, p-aminosalicilat, sebakat, tanat, rodanid, undecilenat i slično; ili soli nastale kada se kiseli proton prisutan u matičnom jedinjenju zameni, kao što je sa amonijakom, argininom, benetaminom, benzatinom, kalcijumom, holinom, deanolom, dietanolaminom, dietilaminom, etanolaminom, etilendiaminom, megluminom, glicinom, hidrabaminom, imidazolom, lizinom i magnezijumom, hidroksietilmorfolinom, piperazinom, kalijumom, epolaminom, natrijumom, trolaminom, trometaminom ili cinkom.

[0151] Ovaj pronalazak obuhvata u okviru svog obima solvate jedinjenja kako su ovde definisana. "Solvati" su kristali formirani od aktivnog jedinjenja i druge komponente (rastvarača) koja je, u izolovanom obliku, tečna na sobnoj temperaturi. Takvi solvati se mogu formirati sa uobičajenim organskim rastvaračima, npr. ugljovodonični rastvarači kao što su benzen ili toluen; hlorovani rastvarači kao što su hloroform ili dihlorometan; alkoholni rastvarači kao što su metanol, etanol ili izopropanol; etarski rastvarači kao što su dietil etar ili tetrahidrofuran; ili estarski rastvarači kao što je etil acetat. Alternativno, solvati jedinjenja ovde mogu da se formiraju sa vodom, u kom slučaju će oni biti hidrati.

[0152] Pronalazak takođe uključuje sve pogodne izotopske varijacije jedinjenja pronalaska. "Izotopska varijacija", ili ukratko "izotop" jedinjenja pronalaska je definisana kao ona u kojoj je najmanje jedan atom zamenjen atomom koji ima isti atomski broj, ali atomsku masu različitu od atomske mase koja se obično nalazi u prirodi, pri čemu se preferira najzastupljeniji izotop. Primeri izotopa koji se mogu inkorporirati u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, sumpora, fluora i hlora kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<35>S,<18>F, i<36>Cl, respektivno. Određene izotopske varijacije pronalaska, na primer, one u koje je inkorporiran radioaktivni izotop kao što je<3>H ili<14>C, korisne su u studijama distribucije leka i/ili supstrata u tkivu. Izotopi sa tricijatom, tj.<3>H, i ugljenik-14, tj.,<14>C, su posebno poželjni zbog njihove lakoće pripreme i detekcije. Dalje, supstitucija sa izotopima kao što je deuterijum, tj.,<2>H, može dati određene terapeutske prednosti koje su rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer, produženi in vivo poluživot, smanjeni zahtevi za dozom i stoga može biti poželjniji u nekim okolnostima. Izotopske varijacije jedinjenja pronalaska se generalno mogu pripremiti konvencionalnim postupcima korišćenjem odgovarajućih izotopskih varijacija pogodnih reagenasa.

[0153] Takođe deo pronalaska su ona jedinjenja u kojima je najmanje jedan atom zamenjen radioaktivnim izotopom (radioizotopom) istog ili drugog atoma koji se mogu koristiti in vivo tehnikama snimanja kao što je jednofotonska emisiona kompjuterska tomografija (SPECT) ili pozitron emisiona tomografija (PET).

[0154] Primeri za takve izotopske varijacije GPR17 modulatora koji se mogu koristiti u SPECT studijama (takva jedinjenja ovde "SPECT markeri") su jedinjenja u kojima su<99>mTc,<111>In,<82>Rb,<137>Cs,<123>I,<125>I,<131>I,<67>Ga,<192>Ir ili<201>TI, i poželjno<123>I su uvedena. Na primer, da bi se jedinjenja iz ovog pronalaska koristila kao SPECT markeri, izotop<123>I se može uvesti u GPR17 modulator kao što je ovde otkriveno. Kao neograničavajući primer, da bi se jedinjenje koristilo kao SPECT marker, radionuklid izabran između<123>I,<125>I i<131>I može biti uveden u jedinjenje iz ovog pronalaska. U jednom izvođenju, SPECT marker ovog pronalaska može biti zasnovan na strukturi modulatora GPR17 koji sadrži halogen koji je ovde otkriven, pri čemu je jedan od radionuklida<123>I,<125>I i<131>I uveden u položaj halogena, poželjno, atom joda.

[0155] Shodno tome, izraz "SPECT marker ovog pronalaska" odnosi se na jedinjenja kako su opisana u ovoj patentnoj prijavi i koja imaju strukturu prema bilo kojoj od Formula I, II, III, IV, V ili VI kao što je dalje definisano ovde, ili kako je na drugi način ovde pojedinačno otkriveno, gde je uveden najmanje jedan radioizotop koji je pogodan za SPECT imidžing. Ovo uključuje, ali nije ograničeno na<99>mTc,<111>In,<82>Rb,<137>Cs,<123>I,<125>I,<131>I,<67>Ga,<192>Ir ili<201>TI.

[0156] Primeri derivata GPR17 modulatora koji se mogu koristiti u PET aplikacijama (ovde "PET markeri") su jedinjenja u koja su uvedeni<11>C,<13>N,<15>O,<18>F,<76>Br ili<124>I. Na primer, da bi se jedinjenje koristilo kao PET marker,<18>F izotop se može uvesti u jedinjenje iz ovog pronalaska. U jednom izvođenju, PET marker može biti zasnovan na strukturi GPR17 modulatora koji sadrži fluor koji je ovde otkriven, gde je odgovarajući radionuklid<18>F uveden u položaj atoma fluora. Ovo se takođe odnosi na uvođenje najmanje jednog atoma<11>C,<13>N,<15>O,<76>Br ili<124>I, umesto "neobeleženog" atoma ugljenika, azota, kiseonika, broma ili joda (videti npr. Pimlott i Sutherland, Chem Soc Rev 2011). , 40, 149; van der Born et al, Chem Soc Rev 2017, 46, 4709).

[0157] Shodno tome, izraz "PET marker ovog pronalaska" se odnosi na jedinjenja kako je opisana u ovoj prijavi patenta i koja imaju strukturu prema bilo kojoj od Formula I, II, III, IV, V ili VI kao što je dalje definisano ovde, ili kako je na drugi način ovde pojedinačno otkriveno, pri čemu je uveden najmanje jedan radioizotop koji je pogodan za PET snimanje. Ovo uključuje, ali nije ograničeno na<11>C,<13>N,<15>O,<76>Br ili<124>I.

[0158] U zavisnosti od obrasca supstitucije, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu, ali ne moraju imati jedan ili više optičkih stereocentra, i mogu, ali ne moraju postojati kao različiti enantiomeri ili dijastereomeri. Svi takvi enantiomeri, dijastereomeri ili drugi optički izomeri obuhvaćeni su obimom pronalaska.

[0159] Jedinjenje iz ovog pronalaska može takođe postojati u različitim kristalnim oblicima, tj. kao polimorfi, od kojih su svi obuhvaćeni ovim pronalaskom.

[0160] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti uključena u farmaceutsku kompoziciju koja takođe može uključivati farmaceutski prihvatljiv nosač. "Farmaceutski prihvatljiv nosač" se odnosi na razblaživač, adjuvans, ekscipijent ili nosač ili drugi sastojak sa kojim se daje jedinjenje pronalaska i za koji bi stručnjak za ovu oblast razumeo da je farmaceutski prihvatljiv.

[0161] Jedinjenja iz ovog pronalaska su korisna u prevenciji i/ili lečenju određenih bolesti ili poremećaja kod životinja, posebno kod ljudi, kao što je ovde opisano. „Sprečavanje“ ili „prevencija“ se odnosi na smanjenje rizika od sticanja bolesti ili poremećaja (tj. uzrokujući da se najmanje jedan od kliničkih simptoma bolesti ne razvije kod subjekta, posebno kod čoveka, koji može biti izložen bolesti ili predisponiran na bolest, ali još ne doživljava niti pokazuje simptome bolesti).

[0162] "Lečenje" ili "tretman" bilo koje bolesti ili poremećaja uključuje, u jednom aspektu, poboljšanje bolesti ili poremećaja (tj. zaustavljanje ili smanjenje razvoja bolesti ili barem smanjenje jednog od kliničkih simptoma bolesti). U drugom izvođenju, "lečenje" ili "tretman" se odnosi na poboljšanje najmanje jednog fizičkog parametra, koji subjekt, posebno čovek, može ili ne mora da uoči, ali koji je zasnovan na ili je povezan sa bolešću ili poremećajem koji treba da bude tretirani. U još jednom izvođenju, "lečenje" ili "tretman" se odnosi na modulaciju ili ublažavanje bolesti ili poremećaja, bilo fizički (npr. stabilizacija simptoma koji se mogu uočiti na neuočljivim simptomima), fiziološki (npr. stabilizacija fiziološkog parametra), ili oboje. U još jednom izvođenju, "lečenje" ili "tretman" se odnosi na odlaganje početka ili progresije bolesti ili poremećaja. Shodno tome, „lečenje“ ili „tretman“ uključuje bilo koji uzročni tretman osnovne bolesti ili poremećaja (tj. modifikaciju bolesti), kao i svaki tretman znakova i simptoma bolesti ili poremećaja (bilo sa ili bez modifikacije bolesti), kao i svako ublažavanje ili poboljšanje bolesti ili poremećaja, ili njegovih znakova i simptoma.

[0163] "Dijagnoza", "dijagnoze” ili "postavljanje dijagnoze" bolesti ili poremećaja obuhvataju, u jednom izvođenju, identifikaciju i merenje znakova i simptoma koji su povezani sa navedenom bolešću. "Dijagnoza", "dijagnoze” ili "postavljanje dijagnoze" obuhvataju, ali se ne ograničavaju na otkrivanje i/ili merenje smanjenih, povećanih ili na drugi način netačno (npr. u pogledu vremena ili mesta) izraženih, aktiviranih ili distribuiranih GPR17 receptora kao indikatora bolesti ili poremećaja povezanih sa GPR17, u poređenju sa zdravim subjektima. U jednom primeru, GPR17 ligandi se mogu koristiti u obliku PET ili SPECT markera za takvu dijagnozu, uključujući dijagnozu bolesti mijelinizacije.

[0164] Termini "bolest(i)" i "poremećaj(i)" se ovde uglavnom koriste naizmenično.

[0165] "Praćenje" se odnosi na posmatranje bolesti, stanja ili najmanje jednog medicinskog parametra tokom određenog vremenskog perioda. „Praćenje“ takođe uključuje zapažanja efekata terapeutskog leka uz pomoć „leka pratioca“.

[0166] "Dijagnostika pratioca" kako se ovde koristi odnosi se na jedinjenje koje se može koristiti zajedno sa terapijskim lekom sa ciljem da se utvrdi primenljivost (npr. u smislu bezbednosti i efikasnosti) navedenog terapeutskog leka na određenog pacijenta. Upotreba „Dijagnostike pratioca“ može uključivati dijagnostičke i nadzorne korake.

[0167] Izraz "životinja(e)" i "subjekt(i)" uključuje ljude. Termini "čovek", "pacijent" i "ljudski subjekt" se ovde obično koriste naizmenično, osim ako nije jasno naznačeno.

[0168] Pronalazak se takođe odnosi na postupke lečenja bolesti ili poremećaja kod životinja, kao što je detaljnije opisano ovde, posebno bolesti ili poremećaja kod ljudi, što uključuje primenu jedinjenja iz ovog pronalaska u terapeutski efikasnim količinama. "Terapeutski efikasna količina" označava količinu jedinjenja koja je, kada se daje subjektu, posebno ljudskom subjektu, za lečenje bolesti, dovoljna da izvrši takav tretman bolesti. "Terapeutski efikasna količina" može da varira u zavisnosti od jedinjenja, bolesti i njene težine, i stanja, starosti, težine, pola itd. subjekta, posebno čoveka, koji se leči.

[0169] Termin „multipla skleroza“ kako se ovde koristi odnosi se na bolest klasifikovanu u odeljku G35 dijagnostičkog koda ICD-10-CM američkog izdanja iz 2018.

[0170] Izraz "GPR17 modulatori" kako se ovde koristi su namenjeni da opišu jedinjenja koja su sposobna da modulišu aktivnost GPR17 receptora, posebno jedinjenja koja su sposobna da smanje aktivnost GPR17. Takvi "negativni GPR17 modulatori" uključuju GPR17 antagoniste koji su sposobni da blokiraju efekte GPR17 agonista, kao i GPR17 inverzne agoniste koji su takođe sposobni da inhibiraju konstitutivno aktivne GPR17 receptore ili varijante receptora. Poželjni GPR17 modulatori ovog pronalaska su inverzni GPR17 agonisti.

[0171] Kad god se brojevi pojavljuju u indeksu iza "C", ovi brojevi (bilo u zagradama ili ne) odnose se na opseg atoma ugljenika koje sadrži odgovarajuća grupa direktno iza brojeva. Na primer, "C1-3" i "(C1-3)" se odnose na grupu, kao što je ovde dalje specificirano, koja sadrži između 1 i 3 C-atoma.

[0172] "Alkil" uključuje zasićene alifatične hidrokarbil grupe. Lanac ugljovodonika može biti ravnolančani ili razgranati. Primeri "alkila" uključuju one sa 1-5 atoma ugljenika ("C1-5alkil"), 1-4 atoma ugljenika ("C1-4alkil"), 1-3 atoma ugljenika ("C1-3alkil"), ili 1-2 atoma ugljenika ("C1-2alkil"). Ovaj termin je ilustrovan grupama kao što su metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, sek-butil, izobutil, terc-butil, t-amil i slično. Bilo koji broj C atoma u alkilima ili drugim grupama može biti naznačen ovde u zagradama ili bez zagrada.

[0173] "Alkiloksi" i "alkoksi", kako se ovde koriste naizmenično (zajedno alk(il)oksi), uključuju grupu -OR gde je R "alkil" kao što je definisano i dalje prikazano kao primer. Posebne alk(il)oksi grupe uključuju, na primer, met(il)oksi, et(il)oksi, n-prop(il)oksi, izoprop(il)oksi, n-but(il)oksi, terc- but(il)oksi, sek-but(il)oksi, izobut(il)oksi i slično.

[0174] „Halogen“ uključuje atome fluora, hlora, broma i joda.

[0175] "Cijano" se odnosi na -C≡N.

[0176] Termin "fluoroalkif" kako se koristi odnosi se na "alkil" kao što je ovde opisano, koji je supstituisan sa jednim ili više atoma fluora. Reprezentativni primeri fluoro(C1-3)alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na -CF3, -CHFCHF2i –CH2CF3. Posebno poželjna fluoroalkil grupa je difluorometil –CHF2.

[0177] Izrazi "fluoroalkiloksi" ili "fluoroalkoksi" koji se ovde naizmenično koriste odnose se na "alk(il)oksi" kako je ovde opisano, koji je supstituisan sa jednim ili više atoma fluora. Reprezentativni primeri fluoro(C1-3)alk(il)oksi grupa uključuju, ali nisu ograničeni na -OCF3, -OCHFCH2F i –OCH2CF3.

[0178] Termin "fluorometoksi" kako se ovde koristi odnosi se na metoksi grupu koja je supstituisana sa jednim do tri atoma fluora. Termin "monofluorometoksi" se odnosi na metoksi grupu koja je supstituisana sa jednim atomom fluora. Termin "difluorometoksi" kako se ovde koristi odnosi se na metoksi grupu koja je supstituisana sa dva atoma fluora. Termin "trifluorometoksi" se odnosi na metoksi grupu koja je supstituisana sa tri atoma fluora.

[0179] Termin "fluoroetoksi" kako se ovde koristi odnosi se na etoksi grupu koja je supstituisana sa jednim do tri atoma fluora. Termin "monofluoroetoksi" kako se ovde koristi odnosi se na etoksi grupu koja je supstituisana sa jednim atomom fluora. Posebno poželjan monofluoroetoksi je grupa –OCH2CH2F. Termin "difluoroetoksi" kako se ovde koristi odnosi se na etoksi grupu koja je supstituisana sa dva atoma fluora. Posebno poželjan difluoroetoksi je grupa -OCH2CHF2. Termin "trifluoroetoksi" se odnosi na etoksi grupu koja je supstituisana sa tri atoma fluora. Poželjna trifluoroetoksi grupa je grupa –OCH2CF3.

[0180] Termin "fluorometoksietoksi" se odnosi na terminalnu fluorometoksi grupu kako je dalje definisana ovde koja je vezana za etoksi grupu. Poželjni "fluorometoksietoksi" je difluorometoksietoksi, koji je predstavljen sa – OCH2CH2OCHF2.

[0181] Termin "cikloalkil" kako se ovde koristi odnosi se na monovalentnu grupu izvedenu iz zasićenog ugljovodonika, koja može biti nesupstituisana ili supstituisana sa jednim ili više supstituenata kao što je dalje naznačeno ovde. "Cikloalkil" se sastoji od najmanje tri do, na primer, 5 atoma ugljenika koji formiraju prsten ("C3-5cikloalkil"), ili 4 atoma koji formiraju prsten ("C3-4cikloalkil"). Pogodne cikloalkil grupe uključuju ciklopropil, ciklobutil i ciklopentil.

[0182] Izrazi "benziloksi" ili "fenilmetoksi" kako se ovde koriste odnose se na grupu, u kojoj je fenil prsten vezan za metoksi da bi predstavljao grupu -O-CH2-fenil.

[0183] Termini "benzilmetoksi" kako se ovde koriste odnose se na feniletoksi grupu u kojoj je fenil prsten vezan za etoksi grupu da bi predstavljao grupu -O-CH2-CH2-fenil.

[0184] Izraz "pirid(in)ilmetoksi" se odnosi na grupu u kojoj je pirid(in)il grupa vezana za metoksi da predstavlja grupu -O-CH2-piridil, pri čemu piridil može biti bilo koja piridil grupa. Poželjne piridilmetoksi grupe u vezi sa ovim pronalaskom su piridin-3-ilmetoksi

i piridin-4-ilmetoksi

Eksperimentalni deo:

A. HEMIJA

[0185] Jedinjenja ovog pronalaska i njihovi putevi sinteze su detaljnije opisani u nastavku.

A-I Opšte metode pravljenja jedinjenja

[0186] Jedinjenja formule I prema pronalasku mogu da se pripreme analogno konvencionalnim metodama koje razume stručnjak u oblasti sintetičke organske hemije.

[0187] Svako pozivanje na sintezu jedinjenja opšte formule I ovde se takođe odnosi na primenljiva jedinjenja subgeneričke formule II, III, IV i V, kao i na specifična jedinjenja iz Primera koja su ovde otkrivena.

[0188] Prema jednom izvođenju, neka jedinjenja opšte Formule I mogu se dobiti reakcijom jedinjenja Formule KSI sa anilinom Formule Ks prema jednačini:

[0189] Ova reakcija se može izvesti sa hlorosulfonskom kiselinom da bi se formirao neizolovani sulfonil hlorid intermedijer KSII na temperaturi u rasponu od 60 do 120°C u polarnom rastvaraču kao što je acetonitril. Intermedijer KSII zatim direktno reaguje sa anilinom Ks u prisustvu baze kao što je piridin sa ili bez katalitičke količine 4-dimetilaminopiridina (DMAP), u polarnom rastvaraču kao što je acetonitril na temperaturi koja se poželjno kreće od 60 do 80° C.

[0190] Alternativno, sulfonil hlorid intermedijer KSII može da se formira počevši od jedinjenja KSI, u prisustvu kompleksa piridin-sumpor trioksid u piridinu, na temperaturi refluksa. Intermedijerna so sulfonske kiseline može se hlorisati u prisustvu agensa za hlorisanje kao što je trifenilfosfin/trihloroacetonitril u rastvaraču kao što je dihlorometan na temperaturi refluksa.

[0191] Alternativno, neka jedinjenja opšte Formule I mogu se dobiti reakcijom sulfonil hlorida Formule KSII sa anilinom Formule Ks prema jednačini:

[0192] Ova reakcija se može izvesti u prisustvu baze kao što je piridin koja se koristi kao rastvarač na sobnoj temperaturi.

[0193] Alternativno, neka jedinjenja opšte formule I mogu se pripremiti uklanjanjem zaštite jedinjenja formule I-P gde je P zaštitna grupa kao što je fenilsulfonil (PhSO2) prema jednačini:

[0194] Ova reakcija se može izvesti u prisustvu slabe baze kao što je kalijum karbonat ili cezijum karbonat polarnoj smeši rastvarača kao što je metanol ili dioksan i voda na sobnoj temperaturi ili pod zagrevanjem na temperaturi koja se poželjno kreće od 80 do 120°C. Ova reakcija se može izvesti u prisustvu tetrabutilamonijum fluorida u rastvaraču kao što je THF uz zagrevanje na temperaturi koja se poželjno kreće od 60 do 90°C.

[0195] Jedinjenja formule I-P mogu se dobiti reakcijom sulfonil hlorida formule KSII-P sa anilinom formule Ks. Ova reakcija se može izvesti u prisustvu baze kao što je piridin koji se koristi kao rastvarač na sobnoj temperaturi.

[0196] Jedinjenja Formule KSII mogu se dobiti hlorisanjem jedinjenja Formule IKS prema jednačini:

[0197] Ova reakcija se može izvesti u prisustvu agensa za hlorisanje kao što je fosfor oksihlorid u polarnom rastvaraču kao što je acetonitril na temperaturi u rasponu od 50 do 100°C.

[0198] Jedinjenja formule IKS u kojima se mogu dobiti sulfonilacijom jedinjenja formule KSI prema jednačini:

[0199] Ova reakcija se može izvesti u prisustvu agensa za sulfonilaciju kao što je kompleks piridin-sumpor trioksid u prisustvu baze kao što je piridin koji se koristi kao rastvarač na temperaturi refluksa.

[0200] Jedinjenja formule KSII-P u kojima je P zaštitna grupa kao što je fenilsulfonil mogu se dobiti hlorosulfonilacijom jedinjenja formule KSI-P prema jednačini:

[0201] Ova reakcija se može izvesti u prisustvu hlorosulfonske kiseline u polarnom rastvaraču kao što je acetonitril na sobnoj temperaturi.

[0202] Jedinjenja formule KSI-P u kojima je P zaštitna grupa kao što je fenilsulfonil mogu se dobiti zaštitom jedinjenja formule KSI prema jednačini:

[0203] Ova reakcija se može izvesti prema bilo kom postupku poznatom stručnjaku.

[0204] Anilini Formule X su komercijalno dostupni ili se mogu dobiti prema bilo kom postupku poznatom stručnjaku ili korišćenjem procedura opisanih u literaturi.

[0205] Alternativno, neki anilini Formule X mogu se dobiti redukcijom jedinjenja VIII prema jednačini:

[0206] Ova reakcija se može izvesti korišćenjem bilo kog redukcionog sredstva kao što je gvožđe u prisustvu kiseline kao što je sirćetna kiselina ili vodonik u prisustvu katalitičke količine paladijuma na drvenom uglju u polarnom rastvaraču kao što je etil acetat ili metanol ili prema bilo kom postupku poznatom stručnjaku.

[0207] Jedinjenja formule VIII su komercijalno dostupna ili se mogu pripremiti prema procedurama iz literature ili bilo kojim drugim metodama poznatim stručnjacima.

[0208] Jedinjenja formule XI su komercijalno dostupna ili se mogu dobiti odgovarajućim postupcima dobro poznatim stručnjacima.

A-II. Skraćenice/ reagensi za recidiv

[0209]

Ac: acetil

ACN: acetonitril

AcOH: sirćetna kiselina

Rastvor soli: zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida

Boc: terc-butoksikarbonil

nBu: n-butil

tBu: terc-butil

Ci: cikloheksil

DAST: Dietilaminosumpor fluorid

dba: dibenzilidenaceton

DCM: Dihlorometan

DMAP: 4-dimetilaminopiridin

DMF: N,N-dimetilformamid

DMSO: Dimetilsulfoksid

Dppf: 1,1’-bis(difenilfosfanil) ferocen

ES+: elektrosprej pozitivna jonizacija

ES-: elektrosprej negativna jonizacija

ESI: elektrosprej jonizacija

EtOAc: Etil acetat

h: Sat

LC: Tečna hromatografija

LCMS: tečna hromatografija masena spektrometrija

Me: Metil

MeOH: Metanol

min.: minuta

mv: mikrotalasna pećnica

NBS: N-bromosukcinimid

NCS: N-hlorosukcinimid

NMR: Nuklearna magnetna rezonanca

rt: sobna temperatura

TBAHSA: Tetrabutilamonijum hidrogen sulfat

TBAF: Tetrabutilamonijum fluorid

TEA: trietilamin

TFAA: Trifluorosirćetni anhidrid

THF: Tetrahidrofuran

TLC: Tankoslojna hromatografija

Ksanfos: 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten

A-III. Analitičke metode

[0210] Komercijalni rastvarači i reagensi su generalno korišćeni bez daljeg prečišćavanja, uključujući anhidrovane rastvarače po potrebi (generalno Sure-Seal™ proizvodi kompanije Aldrich Chemical Company ili AcroSeal™ kompanije ACROS Organics). Generalno, reakcije su praćene tankoslojnom hromatografijom ili analizom pomoću tečne hromatografije masene spektrometrije.

[0211] Masena spektrometrijska merenja u LCMS režimu se izvode korišćenjem različitih metoda i instrumenata na sledeći način:

- Bazna LCMS metoda 1:

[0212] QDA Waters simple kvadrupolni maseni spektrometar se koristi za LCMS analizu. Ovaj spektrometar je opremljen sa ESI izvorom i UPLC Acquity Hclass sa detektorom od niza dioda (DAD)(200 do 400 nm). Podaci se dobijaju u punom MS skeniranju od m/z 70 do 800 u pozitivnom/negativnom režimu sa osnovnom elucijom. Razdvajanje reverzne faze je izvedeno na 45°C na koloni Waters Acquity UPLC BEH C181,7 mm (2,1±50 mm) za osnovno eluiranje. Gradijentno eluiranje se vrši sa voda/ACN/amonijum format (95/5/63 mg/L) (rastvarač A) i ACN/voda/amonijum format (95/5/63 mg/L) (rastvarač B) prema tabeli 1. Zapremina injektovanja: 1 mL. Pun protok u MS.

Tabela 1:

- Bazna LCMS metoda 2:

[0213] Spektri masene spektrometrije (MS) su snimljeni na LCMS-2010EV masenom spektrometru (Shimadzu) sa elektrosprej jonizacijom (ESI) spojenom na HPLC modularnu Prominence (Shimadzu) korišćenjem Xbridge C18-2.1x30µm, 2.5mm (Waters) kolone. Zapremina od 3mL rastvora uzorka sa koncentracijom od približno 1mg/mL je injektovana. Mobilna faza za osnovne uslove bila je smeša A) 5 mM amonijum formata 0,1% amonijaka u vodi B) 5% mobilne faze A+ 0,1% amonijaka u acetonitrilu. Korišćeni gradijent je bio sledeći - 5:95 (B/A) do 95:5 (B/A) za 4 minuta i vreme zaustavljanja 95:5 (B/A) sledećih 1 minut.

- Neutralni LCMS metod 3:

[0214] Spektri masene spektrometrije (MS) su snimljeni na LCMS instrumentu (Applied Biosystems API 2000 LC/MS/MS, HPLC Agilent 1100) korišćenjem sledeće procedure: rastvaranje jedinjenja u koncentraciji od 1,0 mg mL-1 u ACN (rastvarač A) ili vodi (koja sadrži 2 mM amonijum acetata) : MeOH 90:10 (rastvarač B), i ako je potrebno postaviti na ultrazvučno kupatilo dok se potpuno ne rastvori. Zatim je 10 µL rastvora injektovano na Phenomenex Luna C18 HPLC kolonu (50 x 2,00 mm, veličina čestica 3 µm) i eluiranje je izvedeno sa gradijentom vode: ACN (Gradijent A) ili voda: MeOH (Gradijent B) od 90:10 do 0:100 u roku od 10 min, započinjanje gradijenta nakon 1 min, nakon čega sledi eluiranje u čistom organskom rastvaraču tokom 10 min pri brzini protoka od 300 µL min-1. UV apsorpcija je detektovana od 220 do 400 nm pomoću detektora sa nizom dioda (DAD).

- Kiseli LCMS metod 4:

[0215] HPLC-MS je izveden na Agilent 1200-6120 LC-MS sistemu spojenom na UV detekciju (230 do 400 nm i 215 nm) i detekciju masenih spektra Agilent 6120 maseni spektrometar (ES) m/z 120 do 800 koristeći X-Bridge C18 Waters 2,1±20 mm, 2,5 µM kolonu. Eluiranje je izvedeno sa gradijentom prikazanim u tabeli 2 mobilne faze A (10 mM amonijum formata u vodi 0,1% mravlja kiselina) i mobilne faze B (acetonitril 5% vode 0,1% mravlja kiselina) sa protokom od 1 mL /min.

Tabela 2

[0216] Sirovi materijali se mogu prečistiti hromatografijom normalne faze, (kiselom ili baznom) hromatografijom reverzne faze ili rekristalizacijom.

[0217] Hromatografija normalne faze je izvedena korišćenjem kolona silika gela (100:200 mesh silika gela ili kertridža za sisteme fleš hromatografije kao što su Isolera™ Four from Biotage® or Teledyne Isco CombiFlash®).

[0218] Preparativna hromatografija reverzne faze je izvedena sa dva različita instrumenta i prema sledećim metodama:

Osnovna preparativna LCMS metoda 1:

[0219] LCMS prečišćavanje koristi SQD ili QM Vaters jednostruki kvadrupolni maseni spektrometar za MS detekciju. Ovaj spektrometar je opremljen sa ESI izvorom, binarnom pumpom Waters 2525 u kombinaciji sa 2767 Manager za uzorka i detektorom niza dioda (210 do 400 nm).

[0220] MS parametri: ESI kapilarni napon 3 kV. Napon konusa i ekstraktora 10. Temperatura izvornog bloka 120°C. Temperatura desolvatacije 300°C. Protok konusnog gasa 30 Uh (azot), Protok gasa desolvatacije 650 Uh. Podaci se dobijaju u punom MS skeniranju od m/z 100 do 850 u pozitivnom/negativnom režimu.

[0221] LC parametri: Reverzno fazno odvajanje se izvodi na sobnoj temperaturi na XBridge prep OBD C18 koloni (5 µm, 30 x 50 mm). Gradijentno eluiranje se vrši rastvaračem A1 (H2O NH4HCO310mM 50ml/L NH4OH) i rastvaračem B1 (100% ACN) (pH ~8.5). HPLC brzina protoka: 35 ml/min do 45 ml/min, zapremina ubrizgavanja: 990 ml. Odnos razdvajanja je podešen na /-1/6000 do MS (tabela 3).

Tabela 3

- Neutralna RP-HPLC metoda 2:

[0222] HPLC prečišćavanje finalnih proizvoda je izvedeno na Knauer Smartline 1050 HPLC sistemu korišćenjem RP-HPLC kolone (Knauer 20 mm i.d., Eurospher-100 C18). Proizvod je rastvoren u metanolu (20 mg po 8 mL) i podvrgnut reverzno faznom HPLC-u primenom gradijenta metanol/voda (70:30 do 100:0 tokom 24 min).

[0223] NMR spektri su snimljeni na različitim instrumentima:

BRUKER AVANCEIII 400 MHz-Ultrashield NMR spektrometar opremljen Windows 7 Professional radnom stanicom koja koristi Topspin 3.2 softver i 5 mm Double Resonance Broadband sondom (PABBI 1H/19F-BB Z-GRD Z82021/0075) ili 1 mm Pro Triple Resonance (PATXI 1H/ D-13C/15N Z-GRD Z868301/004). - Varian 400 MHz NMR spektrometar sa vremenom akvizicije (at) =2.0 sec, kašnjenjem relaksacije (d1) = 2.0 sec i proširenjem linije (lb)=0.5 Hz. - Bruker Avance DRX 500 MHz NMR spektrometar - Bruker Avance III 600 MHz NMR spektrometar

[0224] Hemijski pomaci se odnose na signale koji potiču od zaostalih protona deuterisanih rastvarača (DMSO-d6, benzen-d6ili CDCl3). Hemijski pomaci su dati u delovima na milion (ppm) i konstante spajanja (J) u hercima (Hz). Multipliciteti spinova su dati kao široki (br), singlet (s), dublet (d), triplet (t), kvartet (k) i multiplet (m).

[0225] Proizvodi su generalno sušeni pod vakuumom pre finalne analize i podvrgavanja biološkom testiranju.

A-IV: PRIMER JEDINJENJA I SINTEZA

[0226] Imena sledećih jedinjenja su IUPAC imena generisana od strane Biovia Draw verzije 16.1 za intermedijare Formule X, XI, XII i Pipeline Pilot 2018 korišćenjem OpenEie oemetachem verzije 1.4.5 za Primer jedinjenja Formule!.

Intermedijeri

[0227] Kada su komercijalno dostupni, početni materijali su identifikovani njihovim CAS registarskim brojevima. A. Sinteza intermedijera formule X A.1. Sinteza 2,5-difluoropiridin-3-amina X-1:

[0228]

[0229] U rastvor 2,5-difluoro-3-nitro-piridina (0,30 g, 1,87 mmol) u EtOAc (40 mL) dodat je Pd/C (0,13 g, 1,27 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 8 h pod pritiskom vodonika. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz celit, isprana sa EtOAc (40 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoropiridin-3-amin X-1 (0,19 g) kao žuta čvrsta supstanca.

[0230] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 71%.

Osnovna LCMS metoda 2 (ES+): 131 (M+H)+, 90% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.81 (brs, 2H), 6.94-6.98 (m, 1H), 7.23 (t, J=2.69 Hz, 1H)

A.2. Sinteza 6-hloro-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-2:

Korak-1: Sinteza 2,5-difluoro-1-oksido-piridin-1-ijuma X-2a:

[0232] U rastvor 2,5-difluoropiridina (3,00 g, 26,1 mmol) u DCM (120 mL) dodat je urea vodonik peroksid (7,36 g, 78,2 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, a zatim je u kapima dodavan anhidrid trifluorosirćetne kiseline (12 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena vodenim rastvorom NaHCO3(120 mL) i ekstrahovana sa DCM (3380 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-1-oksido-piridin-1-ijum X-2a (1,00 g) kao sivo-bela čvrsta supstanca.

[0233] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 29%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,39-7,47 (m, 1H), 7,50 (m, 1H), 8,48-8,57 (m, 1H).

Korak 2: Sinteza 2-hloro-3,6-difluoro-piridina X-2b:

[0234] U rastvor 2,5-difluoro-1-oksido-piridin-1-ijuma X-2a (0,95 g, 7,25 mmol) u DCM (30 mL) dodat je POCl3(1,33 mL, 14,5 mmol) u kapima na 0° C. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 5 min, a zatim je dodavan DMF (0.60 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena zasićenim rastvorom NaHCO3(50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 X 50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2-hloro-3,6-difluoro-piridin X-2b (0,65 g) kao bledo braon tečnost. Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 60%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,35-7,39 (m, 1H), 8,15-8,23 (m, 1H).

Korak 3: Sinteza 2-hloro-3,6-difluoro-5-nitro-piridina X-2c:

[0235] U rastvor 2-hloro-3,6-difluoro-piridina X-2b (0,60 g, 4,01 mmol) u pušljivoj HNO3(4,19 mL, 100 mmol) dodat je koncentrovani H2SO4(3,21 mL, 60,2 mmol) u kapima uz održavanje temperature ispod 40 °C. Reakciona smeša je zatim zagrevana na 60 °C tokom 30 min. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena i izlivena u usitnjeni led i ekstrahovana sa DCM (2 x 50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 10% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 2-hloro-3,6-difluoro-5-nitropiridin X-2c (0,185 g) kao bledo žuti tečnost.

Prinos: 24%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,10-9,14 (m, 1H).

Korak 4: Sinteza 6-hloro-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-2

[0236] U rastvor 2-hloro-3,6-difluoro-5-nitro-piridina X-2c (0,18 g, 0,93 mmol) u sirćetnoj kiselini (9 mL) dodato je gvožđe (0,05 g, 0,93 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EtOAc (40 mL) i ispran sa zasićenim NaHCO3(25 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom do 6-hloro-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-2 (0,28 g) kao bledo braon čvrsta supstanca.

[0237] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 42%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 163 (M-H)-, 23% čistoće.

A.3. Sinteza 6-hloro-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-3:

[0238]

Korak 1: Sinteza 2-hloro-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridina X-3a:

[0239] U rastvor 2-hloro-3,6-difluoro-5-nitro-piridina X-2c (0,67 g, 3,44 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je NaOMe (0,82 mL, 3,79 mmol) u kapima na -40 °C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 20 min. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladan 1N HCl (10 mL) i ekstrahovana heksanom (2 X 15 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2-hloro-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridin X-3a (0,40 g) kao žuta čvrsta supstanca.

[0240] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 56%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,03 (s, 3H), 8,82 (d, J=7,83 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 6-hloro-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-3:

[0241] U mešani rastvor 2-hloro-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridina X-3a (0,20 g, 0,97 mmol) u sirćetnoj kiselini (4 mL) dodato je gvožđe (0,22 g, 3,87 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladan zasićeni NaHCO3(25 mL). Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (2 x 15 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 15 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 4% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-hloro-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amin X-3 (0,11 g, 63% ) kao bela čvrsta supstanca.

Prinos: 63%.

Osnovi LCMS Metod 2 (ES+): 177 (M+H)+, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.84 (s, 3H), 5.49 (brs, 2H), 6.90 (d, J=9.78 Hz, 1H).

A.4. Sinteza 6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-piridin-3-amina X-4:

[0242]

Korak 1: Sinteza 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-piridina X-4a:

[0243] U rastvor 5-bromo-6-fluoro-piridin-3-ola (0,80 g, 4,17 mmol) i NaH (0,33 g, 8,33 mmol) u DMF (15 mL) dodat je CH3I (0,31 mL, 5,00 mmol) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u hladnu H2O (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 X 30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (20 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-piridin X-4a (0,80 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

Prinos: 93%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 206 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.85 (s, 3H), 7.92 (t, J=2.20 Hz, 1H), 7.99 (dd, J=7.34, 2.20 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-1-oksido-piridin-1-ijum X-4b:

[0244] U rastvor 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-piridina X-4a (0,30 g, 1,35 mmol) u DCM (15 mL) dodat je urea vodonik peroksid (0,38 g, 4,05 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana 10 min. Trifluorosirćetni anhidrid (0,96 mL, 6,76 mmol) je dodat kap po kap na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu H2O (15 mL), bazifikovana sa zasićenim NaHCO3(15 mL) do pH 8 i ekstrahovana sa DCM (2±15 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (10 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-1-oksido-piridin-1-ijum X-4b (0,16 g, 37%) kao sivobela čvrsta supstanca.

[0245] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 93%.

Osnovni LCM3S metod 2 (ES+): 222 (M+H)<+>, 69% čistoće.

Korak 3: Sinteza 5-bromo-2-hloro-6-fluoro-3-metoksi-piridina X4-c:

[0246] U rastvor 3-bromo-2-fluoro-5-metoksi-1-oksido-piridin-1-ijum X-4b (0,40 g, 1,45 mmol) u DCM (10 mL) dodat je POCl3(0,35 mL, 3,88 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje DMF (0,1 mL) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je sipan u ledeno hladnu H2O (15 mL), alkalizovan sa zasićenim NaHCO3(15 mL) do pH 8 i ekstrahovan sa EtOAc (2 ± 15 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (15 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 5-bromo-2-hloro-6-fluoro-3-metoksi-piridin X4-c (0,26 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

Prinos: 74%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,93 (s, 3H), 8,16 (d, J=6,85 Hz, 1H).

Korak 4: Sinteza N-(6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-3-piridil)-1,1-difenil-metanimina X4-d:

[0247] U rastvor 5-bromo-2-hloro-6-fluoro-3-metoksi-piridina X4-c (0,25 g, 1,04 mmol), dodat je benzofenon imin (0,21 g, 1,14 mmol) u dioksanu (15 mL) Cs2CO3(1,02 g, 3,12 mmol) i Ksanfos (0,12 g, 0,21 mmol). Reakciona smeša je propuhana argonom 20 min, a zatim je dodat Pd2(dba)3(0,10 g, 0,10 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (15 mL), filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (2 ± 15 mL). Organski sloj je kasnije odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio N-(6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-3-piridil)-1,1-difenil-metanimin X4-d (0,25 g, 50%) kao sivobela čvrsta supstanca.

Prinos: 93%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 341 (M+H)<+>, 71% čistoće.

Korak 5: Sinteza 6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-piridin-3-amina X-4:

[0248] U rastvor N-(6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-3-piridil)-1,1-difenil-metanimina X4-d (0,24 g, 0,51 mmol) u MeOH (15 mL) dodat je 1N. HCl (0,5 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u H2O (15 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 ± 20 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (20 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-hloro-2-fluoro-5-metoksi-piridin-3-amin X-4 (0,06 g) kao beličasta čvrsta supstanca.

Prinos: 62%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 177 (M+H)<+>, 93% čistoće.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,79 (s, 3H), 5,64 (s, 2H), 6,99 (d, J=8,80 Hz, 1H)

A.5. Sinteza 2,5-difluoro-6-metoksi-piridin-3-amina X-5:

[0249]

Korak 1: Sinteza 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridina X-5a:

[0250] U mešani rastvor 2,3,6-trifluoropiridina (2,00 g, 15,0 mmol) u pušljivoj HNO3(12,5 mL, 301 mmol) dodat je u kapima koncentrovana H2SO4 (12,0 mL, 225 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 1 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je izlivena na usitnjeni led (40 mL) i ekstrahovana heksanom (2 ± 30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran zasićenim NaHCO3(40 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridin X-5a (1,20 g) kao žuto ulje.

[0251] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 45%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,20-9,26 (m, 2H).

Korak 2: Sinteza 2,5-difluoro-6-metoksi-3-nitro-piridina X-5b:

[0252] U mešani rastvor 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridina X-5a (0,20 g, 1,12 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je NaOMe (0,93 mL, 4,32 mmol) u kapima na -78 °C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena zasićenom HCl (10 mL) na -78 °C i ekstrahovana heksanom (2 ± 15 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-6-metoksi-3-nitro-piridin X-5b (0,136 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

[0253] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 64%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,06 (s, 3H), 8,76 (dd, J= 8,80, 7,34 Hz, 1H).

Korak 3: Sinteza 2,5-difluoro-6-metoksi-piridin-3-amina X-5:

[0254] U mešani rastvor 2,5-difluoro-6-metoksi-3-nitro-piridina X-5b (0,13 g, 0,68 mmol) u sirćetnoj kiselini (4 mL) dodato je gvožđe (0,15 g, 2,74 mmol) u delovima na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 25 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-6-metoksi-piridin-3-aminX-5 (0,104 g, 94%) kao braon čvrsta supstanca.

[0255] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 62%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 161 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,77 (s, 3H), 5,04 (brs, 2H), 7,17 (dd, J=10,76, 8,31, 1H).

A.6. Sinteza 5-fluoro-2,6-dimetoksi-piridin-3-amina X-6:

[0256]

Korak 1: Sinteza 3-fluoro-2,6-dimetoksi-5-nitro-piridina X-6a:

[0257] U mešani rastvor 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridina X-5a (0,30 g, 1,68 mmol) u MeOH (4 mL) dodat je NaOMe (0,36 mL, 1,68 mmol) u kapima na -40 °C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena sa 2 N HCl (6 mL) na 0 °C i ekstrahovana heksanom (2 ± 10 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i uparen pod vakuumom da bi se dobio 3-fluoro-2,6-dimetoksi-5-nitro-piridin X-6a (0,32 g, 94%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

[0258] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 94%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,06 (s, 3H), 4,09 (s, 3H), 8,52 (d, J= 9,29 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 5-fluoro-2,6-dimetoksi-piridin-3-amina X-6:

[0259] U mešani rastvor 3-fluoro-2,6-dimetoksi-5-nitro-piridina X-6a (0,25 g, 1,24 mmol) u sirćetnoj kiselini (8 mL) dodato je gvožđe (0,28 g, 4,95 mmol) u delovima na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je izlivena na ledeno hladan zasićeni NaHCO3(25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ±20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 5-fluoro-5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-amin X-6 (0,19 g) kao braon čvrsta supstanca.

[0260] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 89%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 173 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,82 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 4,58 (brs, 2H), 6,92 (d, J=11,25 Hz, 1H).

A.7. Sinteza 2,5-difluoro-6-metil-piridin-3-amina X-7:

[0262] U rastvor 6-hloro-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-2 (0,24 g, 1,38 mmol) u dioksanu (12 mL) dodaju se metilborna kiselina (0,25 g, 4,15 mmol) i Cs2CO3( 1,13 g, 3,46 mmol) rastvora u H2O (4 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je isprana argonom 20 min. Dodat je PdCl2(dppf) (0,10 g, 0,14 mmol) i reakciona smeša je pročišćena argonom 10 min. Reakciona smeša je zagrevana na 120 °C tokom 6 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (2 ± 60 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (60 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 3 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (70 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-6-metil-piridin-3-amin X-7 (0,32 g) kao bledo braon tečnost .

[0263] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 51%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 145 (M+H)<+>, 31% čistoće.

A.8. Sinteza 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-8:

[0264]

Korak 1: Sinteza 3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ola X-8a:

[0265] U rastvor 2-hloro-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridina X-3a (0,90 g, 4,36 mmol) u H2O (6 mL) dodat je KOH (0,61 g, 10,9 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3380 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 3-fluoro-6-metoksi5-nitro-piridin-2-ol X-8a (0,30 g sirovog) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

[0266] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

[0267]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,99 (s, 3H), 8,42 (d, J=9,60 Hz, 1H), 12,12 (s, 1H).

Korak 2: Sinteza 2-(difluorometoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridina X-8b:

[0268] U rastvor 3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ola X-8a (0,29 g, 1,54 mmol) u CH3CN (4 mL) dodat je KOH (0,87 g, 15,4 mmol) rastvor u H2O (1 mL) i bromodifluorometil dietilfosfonat (2,74 mL, 15,4 mmol) na 40 °C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (2 do 5% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 2-(difluorometoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridin X-8b (0,24 g) kao bledo žuta tečnost.

[0269] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 65%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,04 (s, 3H), 7,90 (t, J=70,8 Hz, 1H), 8,80 (d, J=9,60 Hz, 1H).

Korak 3: Sinteza 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-8:

[0270] U rastvor 2-(difluorometoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridina X-8b (0,23 g, 0,97 mmol) u CH3COOH (8 mL) je polako dodat Fe (0,27 g, 4,83 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (80 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je sipan u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(80 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 3 70 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin3-amin X-8 (0,18 g) kao smeđa tečnost.

[0271] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 77%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 207 (M-H)-, 85% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,84 (s, 3H), 5,18 (brs, 2H), 6,95 (d, J=10,8 Hz, 1H), 7,39 (t, J=74 Hz, 1H).

A.9. Sinteza 5-bromo-3-metoksi-pirazin-2-amina X-9:

[0272]

Korak 1: Sinteza 3,5-dibromopirazin-2-amina X-9a:

[0273] U rastvor pirazin-2-amina (0,50 g, 5,26 mmol) u DMSO (10 mL) i H2O (0,3 mL) je dodat NBS (1.97 g, 11.0 mmol) u delovima, pri temperaturi ispod 15 °C tokom perioda od 10 min. Reakcija je mešana u odsustvu svetlosti na sobnoj temperaturi 5 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Reakciona smeša je sipana u ledenu H2O (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 70 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 5% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 3,5-dibromopirazin-2-amin X-9a (0,612 g) kao prljavo-bela čvrsta supstanca.

Prinos: 46%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 252 (M+H)<+>, 100% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,97 (brs, 2H), 8,13 (s, 1H).

Korak 2: Sinteza 5-bromo-3-metoksi-pirazin-2-amina X-9:

[0274] Rastvor 3,5-dibromopirazin-2-amina X-9a (0,60 g, 2,37 mmol) i NaOMe (0.15 g, 2.78 mmol) u MeOH (15 mL) je zagrevan do refluksa tokom 1 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature. Istaložena čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 10% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 5-bromo-3-metoksi-pirazin-2-amin X-9 (0,295 g) kao bela čvrsta supstanca.

Prinos: 61%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 204 (M+H)+, 100% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,87 (s, 3H), 6,52 (brs, 2H), 7,57 (s, 1H)

A.10. Sinteza 5-hloro-3-metoksipirazin-2-amina X-10:

[0275]

Korak 1: Sinteza 3,5-dihloropirazin-2-amina X-10a:

[0276] U mešani rastvor pirazin-2-amina (2.00 g, 21.0 mmol) u CHCl3(25 mL) dodat je NCS (3.65 g, 27.3 mmol) u delovima i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu H2O (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (25 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom (20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 3,5-dihloropirazin-2-amin X-10a (1,50 g) kao sivo-bela čvrsta supstanca.

Prinos: 37%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,02 (brs, 2H), 8,06 (s, 1H).

Korak 2: Sinteza 5-hloro-3-metoksipirazin-2-amina X-10.

[0277] U mešani rastvor 3,5-dihloropirazin-2-amina X-10a (0,80 g, 4,15 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je NaOMe (0,90 g, 16,6 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 ± 25 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom (20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 5-hloro-3-metoksipirazin-2-amin X-10 (0,53 g) kao sivobela čvrsta supstanca.

Prinos: 69%.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 83,89 (s, 3H), 6,52 (brs, 2H), 7,53 (s, 1H).

A.11. Sinteza 5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-piridin-3-amina X-11:

[0278]

Korak 1: Sinteza 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)-3-nitropiridina X-11a:

[0279] U mešani rastvor 2-fluoroetanola (1,19 g, 18,5 mmol) u THF (30 mL) ) je dodat NaH (0,81 g, 20,2 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je ohlađena na -78 °C, a zatim sporo dodavanje 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridina X-5a (3,00 g, 16,8 mmol) na istoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 2h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)-3-nitropiridin X-11a (3,10 g) kao smeđa lepljiva tečnost.

[0280] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 83%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,64-4,69 (m, 1H) 4,73-4,76 (m, 2H) 4,86-4,89 (m, 1H) 8,79-8,83 (m, 1H). Korak 2: Sinteza 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)piridin-3-amina X-11b:

[0281] U rastvor 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)-3-nitropiridina X-11a (2,70 g, 12,2 mmol) u CH3COOH (25 mL) dodat je Fe (6,79 g, 122 mmol) na 0° C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana sa Et2O (500 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(380 mL) i ekstrahuje sa Et2O (2 ± 500 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)piridin-3-amin X-11b (2,00 g) kao braon čvrsta supstanca.

[0282] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 70%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 193 (M+H)<+>, 82% čistoće.

Korak 3: Sinteza 5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-piridin-3-amina X-11

[0283] U rastvor 2,5-difluoro-6-(2-fluoroetoksi)piridin-3-amina X-11b (1,00 g, 4,27 mmol) u MeOH (10 mL) polako je dodat NaOMe (25% rastvor u MeOH, 1,85 mL, 8,55 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnim vodenim rastvorom 1N HCl (50 mL) i ekstrahovana heksanom (2 ± 500 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio 5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-piridin-3-amin X-11 (0,46 g) kao braon čvrsta supstanca.

Prinos: 50%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 205 (M+H)+, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,83 (s, 3H) 4,41-4,43 (m, 1H) 4,48-4,50 (m, 1H) 4,65 (brs, 3H) 4,76-4,78 (m, 1H) 6,90-6,98 (m, 1H).

A.12. Sinteza 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amina X-12:

[0284]

Korak 1: Sinteza 2,6-difluoro-3-nitropiridina X-12a:

[0285] U rastvor 2,6-difluoropiridina (5,00 g, 43,4 mmol) u koncentrovanoj HNO3(36,3 mL, 869 mmol) je polako dodavana koncentrovana H2SO4(34.7 mL, 652 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 3 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi, sipana u usitnjeni led (120 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(120 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,6-difluoro-3-nitropiridin X-12a (3,20 g sirovog) kao žuto ulje.

[0286] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

[0287]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,47 (dd, J=8,80, 2,45 Hz, 1H) 8,91-9,00 (m, 1H).

Korak 2: Sinteza 6-fluoro-2-metoksi-3-nitropiridina X-12b i 2-fluoro-6-metoksi-3-nitropiridina X-12c:

[0288] U rastvor 2,6-difluoro-3-nitropiridina X-12a (2,90 g, 18,1 mmol) u THF (25 mL) dodat je NaOMe (25% rastvor u MeOH, 4,31 mL, 19,9 mmol) polako na -78 °C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 1 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (60 mL) i ekstrahovana sa Et2O (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobili 6-fluoro-2-metoksi-3-nitropiridin X-12b i 2-fluoro-6-metoksi-3-nitropiridin X-12c (2,51 g, smeša dva regio izomera) kao smeđa tečnost.

[0289] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

[0290]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6, 1H NMR je pokazao mešavinu regio izomera) δ 3,97 (s, 3H), 4,02 (s, 3H) 6,97-7,00 (m, 2H) 8,58-8,71 (m ).

Korak 3: Sinteza 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-12d i 2-(2-fluoroetoksi)-6-metoksi-3-nitropiridina X-12e:

[0291] U rastvor 2-fluoroetanola (1,12 g, 17,5 mmol) u DMF (40 mL) dodat je Cs2CO3(9,51 g, 29,2 mmol) i 6-fluoro-2-metoksi-3-nitropiridin X-12b i 2-fluoro- Smeša 6-metoksi-3-nitropiridina X-12c (2,51 g, 14,6 mmol, smeša dva regio izomera). Reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena hladnom H2O (80 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 80 mL). Organski sloj je odvojen, ispran hladnom H2O (2 ± 50 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 5 do 12% EtOAc u heksanu) i ponovo prečišćen prep HPLC da bi se dobio 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridin X-12d ( 0,98 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca i 2-(2-fluoroetoksi)-6-metoksi-3-nitropiridin X-12e (1,10 g) kao sivobela čvrsta supstanca.

6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridin X-12d:

[0292]

Prinos: 31%.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,12 (s, 3H) 4,63 (t, J=4 Hz, 1H) 4,69-4,74 (m, 2H) 4,84 (t, J=4 Hz, 1H) 6,47 (d, J =8,8 Hz, 1H) 8,39 (d, J=8,8 Hz, 1H).

2-(2-fluoroetoksi)-6-metoksi-3-nitropiridin X-12e:

Prinos: 35%.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,01 (s, 3H) 4,75-4,78 (m, 2H) 4,80-4,84 (m, 1H) 4,85-4,91 (m, 1H) 6,43 (d, J=8,8 Hz) 8,37 (d, J=8,8Hz, 1H)

Korak 4: Sinteza 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amina X-12:

[0293] U rastvor 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-12d (0,97 g, 4,49 mmol) u CH3COOH (15 mL) je polako dodat Fe (1,25 g, 22,4 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (80 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen zasićenim rastvorom NaHCO3(150 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (10 do 20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amin X-12 (0,67 g) kao bledo braon tečnost.

Prinos: 79%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 187 (M+H)+, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,84 (s, 3H) 4,28-4,34 (m, 1H) 4,36 (s, 2H) 4,38-4,41 (m, 1H) 4,62-4,66 (m, 73-) (m, 1H) 6,20 (d, J=8,31 Hz, 1H) 6,96 (d, J=7,83 Hz, 1H).

A.13. Sinteza 2,5-difluoro-6-metoksi-piridin-3-amina X-13:

[0294]

Korak 1: Sinteza 2-(2,2-difluoroetoksi)-3,6-difluoro-5-nitro-piridina X-13a:

[0295] U mešani rastvor 2,2-difluoroetanola (0,79 g, 11,2 mmol) u THF (20 mL) dodat je NaH (1,35 g, 33,7 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h. Reakciona smeša je ohlađena na -78 °C, a zatim je sporo dodavan 2,3,6-trifluoro-5-nitro-piridina X-5a (2,00 g, 11,2 mmol) na istoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 2h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 2% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 2-(2,2-difluoroetoksi)-3,6-difluoro-5-nitro-piridin X-13a (0,86 g) kao smeđa tečnost.

Prinos: 32%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,78 (td, J=14,92, 2,93 Hz, 2 H), 6,32 - 6,62 (m, 1 H), 8,87 (dd, J=8,80, 7,34 Hz, 1 H).

Korak 2: Sinteza 6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-13:

[0296] U rastvor 2-(2,2-difluoroetoksi)-3, 6-difluoro-5-nitro-piridin X-13a (0,85 g, 3,5 mmol) u CH3COOH (17 mL) je dodat Fe (1,98 g, 35 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana sa Et2O (500 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(380 mL) i ekstrahuje sa Et2O (2 ± 500 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je ispran pentanom da bi se dobio 6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoro-piridin-3-amin X-13 (0,51 g) kao braon čvrsta supstanca.

[0297] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 67%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES<+>): 211 (M+H)<+>, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,43 (td, J=14,92, 3,42 Hz, 2 H), 5,20 (s, 2 H), 6,20 - 6,50 (m, 1 H), 7,21 (dd, J= 10,76, 8,31 Hz, 1 H).

A.14. Sinteza 6-(difluorometoksi)-2-metoksi-piridin-3-amina X-14:

Korak 1: Sinteza 6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ol X-14a i 6-metoksi-3-nitro-piridin-2-ol X-14b:

[0299] U rastvor mešavine 6-fluoro-2-metoksi-3-nitropiridina X-12b i 2-fluoro-6-metoksi-3-nitropiridina X-12c (0,60 g, 3,5 mmol, smeša dva regio izomera) u vodi (20 mL) je dodat KOH (0,78 g, 13,9 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 3 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena na 0 °C i zakiseljena do pH 4-5 sa 1N HCl (6 mL). Istaložena čvrsta supstanca je filtrirana i osušena pod vakuumom da bi se dobila smeša 6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ol X-14a i 6-metoksi-3-nitro-piridin-2-ol X-14b (0,45 g, smeša dva regio izomera) kao žuta čvrsta supstanca.

Prinos: 29%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES<+>): 171 (M+H)<+>, čistoća 99% (smeša 40/60).

Korak 2: Sinteza 6-(difluorometoksi)-2-metoksi-3-nitro-piridina X-14c i 2-(difluorometoksi)-6-metoksi-3-nitropiridina X-14d:

[0300] U rastvor smeše 6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ol X-14a i 6-metoksi-3-nitro-piridin-2-ol X-14b (1,2 g, 5,06 mmol, smeša dva regio izomera ) u CH3CN (32 mL) i vodi (8 mL) je dodat KOH (1,42 g, 25,3 mmol) i bromodifluorometil dietilfosfonat (6,75 g, 25,3 mmol) i reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 ± 50 mL) i osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (2% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-2-metoksi-3-nitro-piridin X-14c (0,24 g) i 2-(difluorometoksi)-6-metoksi- 3-nitro-piridin X-14d (0,07 g) kao prljavo-bela čvrsta supstanca.

6-(difluorometoksi)-2-metoksi-3-nitro-piridin X-14c

Prinos: 22%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,12 (s, 3 H), 6,60 (d, J=8,80 Hz, 1H), 7,41 (t, J=72 Hz, 1 H), 8,47 (d, J= 8,80 Hz, 1 H).

2-(difluorometoksi)-6-metoksi-3-nitro-piridin X-14d

Prinos: 7%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,03 (s, 3 H), 6,65 (d, J=9,29 Hz, 1H), 7,51 (t, J=72 Hz, 1 H), 8,41 (d, J= 9,29 Hz, 1 H).

Korak 3: Sinteza 6-(difluorometoksi)-2-metoksi-piridin-3-amina X-14:

[0301] U rastvor 6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-12d (50 mg, 0,22 mmol) u MeOH (3 mL) dodat je Pd/C (10 mg) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h pod pritiskom vodonika. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz celit, isprana sa MeOH (2 ± 30 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-2-metoksipiridin-3-amin X-14 (30 mg) kao smeđa tečnost.

[0302] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 68%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 191 (M+H)<+>, 97% čistoće.

A.15. Sinteza 6-hloro-4-metoksi-piridin-3-amina X-15:

[0303]

[0304] U rastvor 2-hloro-4-metoksi-5-nitro-piridina (2,0 g, 10,6 mmol) u CH3COOH (15 mL) dodat je Fe (2,96 g, 53 mmol) na 0 °C i reakcija smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana sa EtOAc (2 ± 30 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(100 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2 ± 60 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je ispran etrom da bi se dobio 6-hloro-4-metoksipiridin-3-amin X-15 (0,95 g) kao sivobela čvrsta supstanca.

Prinos: 55%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 159 (M+H)<+>, 100% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,85 (s, 3 H), 5,01 (s, 2 H), 6,88 (s, 1 H), 7,60 (s, 1 H).

A.16. Sinteza 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amina X-16 i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksipiridin-3-amina X-17:

Korak 1: Sinteza 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-16a i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksi-3-nitropiridina X-17a:

[0306] U rastvor mešavine 6-fluoro-2-metoksi-3-nitropiridina X-12b i 2-fluoro-6-metoksi-3-nitropiridina X-12c (4,00 g, 23,2 mmol, smeša dva regio izomera) u DMF ( 40 mL) je dodat Cs2CO3(15,1 g, 46,5 mmol) i 2-fluoroetanol (1,79 g, 27,9 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 300 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom do 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-16a i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksi- 3-nitropiridin X-17a (4,20 g sirovog, mešavina dva regio izomera) kao smeđa gumena tečnost.

[0307]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6,<1>H NMR je pokazao mešavinu regio izomera) δ 3,99 (s, 3H) 4,69-4,76 (m, 2H) 6,64-6,68 (m, 1H) 8,46 (d, j=3,91 Hz, 1H) 8,48 (d, J=3,91 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amina X-16 i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksipiridin-3-amina X-17:

[0308] U rastvor 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksi-3-nitropiridina X-16a i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksi-3-nitropiridina X-17a (0,50 g, 2,14 mmol, smeša dva regio izomera) u CH3COOH (10 mL) je polako dodato gvožđe (1,19 g, 21,4 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (500 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(380 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2 ± 500 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo 6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-amin X-16 i 2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksipiridin-3-amin X-17 (0,32 g sirovog, mešavina dva regio izomera) kao braon čvrsta supstanca.

[0309]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6,<1>H NMR je pokazao mešavinu regio izomera) δ 3,99 (s, 3H) 4,69-4,76 (m, 2H) 6,64-6,68 (m, 1H) 8,46 (d, d 3,91 Hz, 1H) 8,48 (d, J=3,91 Hz, 1H). (NH2protoni se ne vide).

A.17. Sinteza 6-hloro-4-metoksi-piridin-3-amina X-15:

Korak 1: Sinteza 4-metoksi-5-nitropiridin-2-ola X-18a:

[0311] U rastvor 2-hloro-4-metoksi-5-nitro-piridina (1,00 g, 5,30 mmol) u H2O (25 mL) dodat je KOH (1,49 g, 26,5 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C za 3h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi, sipana u ledenu H2O (100 mL), zakiseljena sa 1 N HCl (8 mL) do pH 4 na 0 °C i ekstrahovana sa EtOAc (3370 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 4-metoksi-5-nitropiridin-2-ol X-18a (0,71 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

[0312] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 61%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 171 (M+H)<+>, 77% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,83 (s, 3H) 5,87 (s, 1H) 8,48 (s, 1H) 12,17 (brs, 1H).

Korak 2: Sinteza 2-(difluorometoksi)-4-metoksi-5-nitropiridina X-18b:

[0313] U rastvor 4-metoksi-5-nitropiridin-2-ola X-18a (0,60 g, 2,73 mmol) u CH3CN (20 mL) i H2O (5 mL) dodat je KOH (0,77 g, 13,6 mmol) i bromodifluorometil dietilfosfonat (3,64 g, 13,6 mmol) polako na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 4 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 ± 50 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Reakciona smeša je ponovljena na 2,70 g i sirovina dobijena iz 2 reakcije je razmućena i rastvorena u DCM (150 mL), a dobijena sirova je prečišćena hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 10% EtOAc u heksanu) da bi se dobilo 2-(difluorometoksi)-4-metoksi-5-nitropiridin X-18b (1,55 g, 36%) kao bledo žuta tečnost.

Prinos: 36%

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 221 (M+H)+, 82% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4,05 (s, 3H) 6,53 (s, 1H) 7,52 (t, J=72 Hz, 1H) 8,76 (s, 1H).

Korak 3: Sinteza 6-(difluorometoksi)-4-metoksipiridin-3-amina X-18:

[0314] U rastvor 2-(difluorometoksi)-4-metoksi-5-nitropiridina X-18b (1,50 g, 5,62 mmol) u MeOH (50 mL) dodat je 20% Pd/C (50% vlage, 0,18 g) u sobnoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h pod pritiskom vodonika. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa MeOH (2 ± 60 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-4-metoksipiridin-3-amin X-18 (0,805 g, 75%) kao beli čvrsta supstanca.

Prinos: 36%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 191 (M+H)<+>, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,85 (s, 3H) 4,72 (s, 2H) 6,56 (s, 1H) 7,44 (s, 1H) 7,49 (t, J= 74 Hz, 1H).

A.18. Sinteza 6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-amina X-19:

[0315]

[0316] U rastvor 6-hloro-2,5-difluoro-piridin-3-amina X-2 (0,25 g, 1,52 mmol) u dioksanu (8 mL) dodata je ciklopropil borna kiselina (0,27 g, 3,18 mmol) i Cs2CO3( 1,24 g, 3,80 mmol) u rastvoru u H2O (2 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je isprana argonom 10 min. Dodat je PdCl2(dppf) (0,11 g, 0,15 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 120 °C tokom 18 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (2 ± 60 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (60 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (70 mL), osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirov je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 8% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-ciklopropil- 2,5-difluoropiridin-3-amin X-19 (0,10 g) kao bezbojna tečnost.

Prinos: 37%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 171 (M+H)<+>, 95% čistoće.

A.19. Sinteza 6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amina X-20:

[0318] U rastvor 6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-amina X-13 (1,00 g, 4,76 mmol) u THF (15 mL) dodat je NaOMe (25% u MeOH, 1,13 g, 5,23 mmol) polako na 0 °C i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 5 do 10% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amin X-20 (0,55 g) kao smeđa tečnost.

Prinos: 50%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 223 (M+H)+, 91% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,85 (s, 3H) 4,50 (td, J=14,89, 3,69 Hz, 2H) 4,74 (s, 2H) 6,23-6,54 (m, 1H) 6,96 (m, 1H), J=96. 11,32 Hz, 1H).

A.20. Sinteza 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-21:

[0319]

Korak 1: Sinteza 2-(2-(difluorometoksi)etoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitropiridina X-21a:

[0320] U rastvor 3-fluoro-6-metoksi-5-nitro-piridin-2-ola X-8a (0,10 g, 0,53 mmol) u DMF (4 mL) dodat je K2CO3(0,22 g, 1,59 mmol) i 1- bromo-2-(difluorometoksi)etan (0,09 g, 0,53 mmol) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 90 °C tokom 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi, sipana u H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 ± 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 ± 50 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2-(2-(difluorometoksi)etoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitropiridin X- 21a (0,09 g) kao smeđa tečnost.

[0321] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja

Prinos: 64%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,05 (s, 3H) 4,22-4,27 (m, 2H) 4,70-4,76 (m, 2H) 6,75 (t, J=74 Hz, 1H) 8,57 (d, J=). 9,78 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 6-(2-(difluorometoksi)etoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amina X-21:

[0322] U rastvor 2-(2-(difluorometoksi)etoksi)-3-fluoro-6-metoksi-5-nitropiridina X-21a (0,09 g, 0,32 mmol) u CH3COOH (2 mL) dodato je gvožđe (0,18 g, 3,19 mmol) polako na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita, isprana sa EtOAc (50 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(10 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2 ± 50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen ispiranjem pentanom (3 ± 70 mL) da bi se dobio 6-(2-(difluorometoksi)etoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amin X-21 (0,08 g, 77%) kao smeđa čvrsta supstanca.

[0323] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

MS (ESI) m/e [M+H]+/ Rt/%: 253,00/1,72/77,7%

Prinos: 77%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 253 (M+H)<+>, 78% čistoće.

A.21. Sinteza 6-hloro-4-metoksi-piridin-3-amina X-22:

[0324]

[0325] U rastvor 6-hloro-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amina X-3 (2,0 g, 11,33 mmol) u MeOH (38 mL) dodat je Pd/C (20%, 0,43 g) pod atmosferom argona 5 min i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h u atmosferi vodonika. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana sa EtOAc (3 ± 100 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 4 do 10% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amin X-22 (0,48 g) kao braon čvrsta supstanca.

Prinos: 30%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 143 (M+H)+, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,83 (s, 3H) 5,32 (br s, 2H) 6,72 (dd, J=2,8, 9,6 Hz, 1H) 7,24

A.22. Sinteza 6-ciklopropil-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amina X-23:

[0327] U rastvor 6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-amina X-19 (1,50 g, 8,75 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je NaOMe (25% u MeOH, 3,78 mL, 17,5 mmol) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 24h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 ± 25 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombinovanom fleš hromatografijom (20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-ciklopropil-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amin X-23 (1,10 g) kao smeđe ulje.

Prinos: 69%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 183 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,76 - 0,86 (m, 4H) 1,94-2,03 (m, 1H) 3,75 (s, 3H) 4,94 (s, 2H) 6,68 (d, J=10,16).

B. Sinteza intermedijera formuleXI

B.1. Sinteza 6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridina XI-1:

[0328]

[0329] U rastvor 1H-pirolo[2,3-b]piridin-6-karbaldehida (196 mg, 1,26 mmol) u dihlorometanu (4 mL) dodat je, na 0 °C, dietilaminosumpor trifluorid (260 µL, 1,91 mmol). Reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Sipati reakciju na smešu leda i NaHCO3i ekstrahovati 3 puta sa DCM. Osušiti organsku fazu na Na2SO4i koncentrovati rastvarače da bi se dobio 6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin XI-1 (96 mg) kao braon čvrsta supstanca.

Prinos: 45%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES+): 169 (M+H)+, 82% čistoće.

B.2. Sinteza 6-(difluorometoksi)-1H-indola XI-2:

Korak 1: Sinteza terc-butil 6-((terc-butoksikarbonil)oksi)-1H-indol-1-karboksilata XI-2a:

[0331] U rastvor 1H-indol-6-ola (5,00 g, 37,6 mmol) u CH3CN (50 mL) dodat je Di-terc-butil dikarbonat (25,9 mL, 113 mL), DMAP (2,29 g, 18,8 mmol) i trietilamin (15,7 mmol, 113 mmol). Reakciona smeša je mešana na 25°C tokom 16h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio terc-butil 6-((terc-butoksikarbonil)oksi)-1H-indol-1-karboksilat XI-2a (10.0 g) kao bledožuta tečnost.

Prinos: 80%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 332 (M-H)-, 99% čistoće.

Korak 2: Sinteza terc-butil 6-hidroksi-1H-indol-1-karboksilata XI-2b:

[0332] U rastvor terc-butil 6-((terc-butoksikarbonil)oksi)-1H-indol-1-karboksilata XI-2a (9,90 g, 29,6 mmol) u DCM (100 mL) dodat je morfolin (51,8 mL, 592 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 ± 100 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 ±100 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 15% EtOAc u heksanu) da bi se dobio terc-butil 6-hidroksi-1H-indol-1-karboksilat XI-2b (6,70 g) kao bezbojno ulje.

Prinos: 97%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,61 (s, 9H) 6,55 (d, J=3,94 Hz, 1H) 6,71 (dd, J=8,37, 1,97 Hz, 1H) 7,36 (d, J=8,86 Hz) 1H) 7,43 (d, J=3,45 Hz, 1H) 7,51 (s, 1H) 9,41 (s, 1H).

Korak 3: Sinteza terc-butil 6-(difluorometoksi)-1H-indol-1-karboksilata XI-2c:

[0333] U rastvor terc-butil 6-hidroksi-1H-indol-1-karboksilata XI-2b (2,00 g, 8,57 mmol) u CH3CN (20 mL) i H2O (20 mL) dodat je KOH (9,62 g, 171 mmol) i bromodifluorometil dietilfosfonat (3,05 mL, 17,1 mmol) polako na -78 °C. Posle 15 min, reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 3 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 200 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 x 30 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 15% EtOAc u heksanu) da bi se dobio terc-butil 6-(difluorometoksi)-1H-indol-1-karboksilat XI-2c (0,68 g) kao žuto ulje.

Prinos: 21%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 282 (M-H)-, 74% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,63 (s, 9H) 6,73 (d, J=3,91 Hz, 1H) 7,09 (dd, J=8,80, 1,47 Hz, 1H) 7,23 (t, J=76 Hz, 1H) 7,66 (d, J=8,31 Hz, 1H) 7,69 (d, J=3,42 Hz, 1H) 7,86 (s, 1H).

Korak 4: Sinteza 6-(difluorometoksi)-1H-indola XI-2:

[0334] U rastvor terc-butil 6-(difluorometoksi)-1H-indol-1-karboksilata XI-2c (0,67 g, 1,76 mmol) u DCM (25 mL) je dodata TFA (40 mL) na 0 °C i reakcija smeša je mešana na istoj temperaturi 5 min, zatim na sobnoj temperaturi 1 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (100 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 ± 200 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-1H-indol XI-2 (0,31 g) kao smeđe ulje.

Prinos: 76%.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 182 (M-H)-, 79% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,42-6,44 (m, 1H) 6,83 (dd, J=8,56, 1,71 Hz, 1H) 7,14 (t, J=74 Hz, 1H) 7,18 (s, 1H) (t, J=2,45 Hz, IH) 7,54 (d, J=8,80 Hz, 1H) 11,17 (brs, 1H).

B.3. Sinteza 6-hloro-7-fluoro-1H-indola XI-3:

[0335]

[0336] U rastvor 1-hloro-2-fluoro-3-nitro-benzena (2,50 g, 14,2 mmol) u THF (50 mL) dodat je vinil magnezijum bromid (5,61 g, 42,7 mmol) na -78 °C i reakcija smeša je mešana na istoj temperaturi 1 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena sa zasićenim NH4CI (100 mL), razblažena sa H2O (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (500 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 5% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-hloro-7-fluoro-1H-indol KSI-3 (0,60 g) kao crvena tečnost.

Prinos: 17%

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 168,00 (M-H)-, 66 % čistoće.

B.4. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridina KSI-4:

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-pirolo[2,3-b]piridina XI-4a

[0338] Rastvor 6-metoksi-1H-pirolo[2,3-b]piridina (998 mg, 5,4 mmol) u 10 mL DMF tretiran je natrijum hidridom (60% u parafinu, 238 mg, 6 mmol) i mešan tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat hlorid benzensulfonske kiseline (0,8 mL, 6,5 mmol). Reakciona smeša je mešana 18 h na sobnoj temperaturi, dodata je voda (100 mL) i suspenzija je ekstrahovana etil acetatom (3 x 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem (petroletar: etil acetat 80 : 20). Sakupljene frakcije su uparene da bi se dobilo 980 mg 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-pirolo[2,3-b]piridina XI-4a kao beli prah.

Prinos: 63%

Neutralna LCMS metoda 3 (ES+): 289 (M+H)+, 100% čistoće.

<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 3,89 (s, 3H), 6,71 (dd, J = 6,2, 2,3 Hz, 2H), 7,67 - 7,61 (m, 3H), 7,75 - 7,70 (m, 1H), 7,91 (d, J = 8,5 Hz, IH), 8,13 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 2H).

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-6-ola XI-4b.

[0339] U rastvor 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-pirolo[2,3-b]piridina XI-4a (800 mg, 2,7 mmol) u dihlorometanu (35 mL), rastvor bor tribromida 1,0 M u dihlorometanu (5 mL, 5 mmol) je dodato na 0 °C, zatim je zagrejano do sobne temperature i mešano 95 h na istoj temperaturi. Reakciona smeša je hidrolizovana dodavanjem zasićenog rastvora NaHCO3(40 mL). Dodata je voda i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (3 x 35 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem (petroletar: etil acetat 80 : 20). Sakupljene frakcije su uparene da bi se dobilo 580 mg 1-(benzensulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-6-ola XI-4b kao beli prah.

Prinos: 79%

Neutralna LCMS metoda 3 (ES+): 275 (M+H)+, 93% čistoće.

<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 6,58 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,64 - 7,58 (m, 2H), 7,75-7,69 (m, IH), 7,84 (d, J = 8,4 Hz, IH), 8,20-8,14 (m, 2H), 10,92 (s, 1H).

Korak 3: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridina XI-4

[0340] Mešavina 1-(benzensulfonil)pirolo[2,3-b]piridin-6-ol XI-4b (767 mg, 2,8 mmol), benzilbromida (0,29 mL, 205 mmol, 0,89 ekviv.) i kalijum karbonata (967,2 mg, 7 mmol, 2,5 ekviv.) u suvom acetonitrilu (20 mL) je zagrevan na 50 °C tokom 22 h u atmosferi argona. Posle hlađenja, reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonio neizreagovani kalijum karbonat i dobro isprana etil acetatom (100 mL). Posle uparavanja organskog rastvarača, 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridin XI-4 je dobijen kao bela čvrsta supstanca (600 mg).

[0341] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 59%

Neutralna LCMS metoda 3 (ES+): 365 (M+H)+ sirov proizvod.

C. Sinteza intermedijera formule XII

C.1. Sinteza 6-hloro-1H-indol-3-sulfonil hlorida XII-1

[0342]

Korak 1: Sinteza 6-hloro-1H-indol-3-sulfonske kiseline XII-1a:

[0343] U rastvor 6-hloroindola (1,00 g, 6,62 mmol) u piridinu (10 mL) dodat je kompleks piridin sumpor trioksida (1,57 g, 9,93 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na refluksu tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (100 mL) i ekstrahovana sa Et2O (250 mL). Vodeni sloj je odvojen i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirov je ko-evaporiran sa toluenom da bi se dobila 6-hloro-1H-indol-3-sulfonska kiselina XII-1a (2,30 g sirovog proizvoda) kao braon polučvrsta materija.

[0344] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 230 (M-H)-, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.98-7.04 (m, 1H), 7.12 - 7.26 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.69 - 7.75 (m, 1H), 11.13 (brs, 1H).

Korak 2: Sinteza 6-hloro-1H-indol-3-sulfonil hlorida XII-1:

[0345] U rastvor 6-hloro-1H-indol-3-sulfonske kiseline XII-1a (2,00 g, 6,45 mmol) u sulfolanu (5 mL) i CH3CN (5 mL) dodat je POCl3(1,30 mL, 14,2 mmol) u kapima na 0 °C i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 3 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledeno hladnom H2O (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 ± 50 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-hloro-1H-indol-3-sulfonil hlorid XII-1 (1,00 g) kao svetloružičasta čvrsta supstanca.

Prinos: 62%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.32 (dd, J=8.56, 1.22 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 8.03 (d, J=8.80 Hz, 1H), 8.45 (d, J=2.93 Hz, 1H), 12.38 (brs, 1H).

C.2. Sinteza 6-bromo-1H-indol-3-sulfonil hlorida XII-2:

[0346]

[0347] U rastvor 6-bromo-1H-indola (5 g, 25.5 mmol) u CH3CN (60 mL) je dodat ClSO3H (1 mL) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 h. Napredak reakcije je praćen TLC. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu H2O (200 mL) i mešana 30 minuta. Čvrsta supstanca je istaložena, filtrirana i osušena pod vakuumom da bi se dobio 6-bromo-1H-indol-3-sulfonil hlorid XII-2 (5 g) kao braon čvrsta supstanca.

[0348] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 66%

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.38-7.48 (m, 1H) 7.85 (s, 1H) 7.97 (d, J=8.37 Hz, 1H) 8.44 (d, J=3.45 Hz, 1H) 12.55 (brs,1H).

C.3. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indol-3-sulfonil hlorida XII-3

[0349]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indola XII-3a

[0350] Suspenzija finog praškastog natrijum hidroksida (24,5 g, 613 mmol) u dihlorometanu (300 mL) je mešana u ledenom kupatilu i u jednom delu je dodat 6-hloroindol (30 g, 197 mmol), a zatim tetrabutilamonijum hidrogen sulfat (1,75 g, 5,15 mmol). Zatim je ukapavanjem dodat benzensulfonil hlorid (2.2 mL, 218 mmol) tokom 20 min i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Ledeno kupatilo je zatim uklonjeno i smeša je mešana još 1 h na sobnoj temperaturi. Kada je LC/MS pokazao završetak reakcije, reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana je sa DCM, kombinovani filtrati su isprani i upareni do suva. Proizvod je triturisan u etru, filtriran, ispran sa malom količinom etra, zatim heksanom i osušen, filtrat je koncentrovan da bi se dobio druga količina sa ukupno 50,54 g 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indola XII-3a kao svetlosmeđa čvrsta supstanca.

Prinos: 88%.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (dd, J = 1.8, 0.9 Hz, 1H), 7.91 (t, J= 1.4 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 7.67-7.54 (m, 2H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.48-7.42 (m, 1H), 7.23 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 3.7, 0.9 Hz, 1H).

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indol-3-sulfonil hlorida XII-3

[0351] Rastvor 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indola XII-3a (50 g, 171,4 mmol) u acetonitrilu (500 mL) je mešan u ledenom kupatilu i hlorosulfonska kiselina (100,8 g, 856,8 mmol) je dodavana u kapima. 20 min i reakciona smeša je mešana 5 dana na sobnoj temperaturi. Zatim je polako sipana uz mešanje u ledenu vodu (2,2 L) tokom 20 minuta, filtrirana, isprana nekoliko puta vodom i osušena usisavanjem da bi se dobilo 63,77 g 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indol-3-sulfonil hlorida XII-3 kao svetlo braon čvrsta supstanca.

Prinos: 95%.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 8.07 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.04 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.79-7.70 (m, 1H), 7.68-7.59 (m, 2H), 7.47 (dd, J = 8.6, 1.8 Hz, 1H). C.4. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-4

[0352]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridina XII-4a

[0353] U rastvor 6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridina (1,37 g, 8,97 mmol) u DMF (100 mL), dodat je natrijum hidrid (60 % u parafinu, 1 g, 41 mmol). Rastvor je mešan 30 min i ostavljen da se zagreje od 0 °C do sobne temperature. Zatim je u kapima dodat hlorid benzensulfonske kiseline (1,5 mL, 11,8 mmol). Suspenzija je mešana 3 h na sobnoj temperaturi i hidrolizovana sa ledenom vodom. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana pod sniženim pritiskom, dobro isprana vodom (75 mL) i na kraju petrol-etrom (15 mL). Dobijeni materijal je osušen na 60 °C i prečišćen hromatografijom na koloni (eluent: čisti dihlorometan) dajući 856 mg 1-(benzensulfonil)-6-hloropirolo[2,3-b]piridina XII-4a kao braonkastu čvrstu supstancu

Prinos: 32%

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-4

[0354] Dobijeni 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridin XII-4a (150 mg, 0,51 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL) i tretiran sa hlorosulfonskom kiselinom (2 mL, 2,91 mmol ) u kapima. Smeša je refluksovana 3 h, hlađena do sobne temperature, hidrolizovana sa ledenom vodom (50 mL) i neutralizovana zasićenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata. Sirovi proizvod je ekstrahovan dihlorometanom (3 puta, po 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (eluent: čisti dihlorometan) dajući 163 mg 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-4 kao žućkastu čvrstu supstancu.

Prinos: 81%

<1>H NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 8.48 (s, 1H), 8.32 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.18 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.71 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H).

C.5. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-5

[0355]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)pirolo[2,3-b]piridina XII-5a

[0356] Suspenzija natrijum hidroksida (76 mg, 1,88 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je mešana u ledenom kupatilu i dodat je 6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin XI-14 (125 mg, 0,74 mmol), a zatim tetrabutilamonijum hidrogen sulfat (7,5 g, 0,022 mmol). Zatim je u kapima dodat benzensulfonil hlorid (105 mL, 0,81 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Po završetku reakcije, smeša je filtrirana kroz sloj celita i isprana sa DCM, kombinovani filtrati su ispirani i upareni do suva. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom (SiO2, eluiranje sa dihlorometanom) da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)pirolo[2,3-b]piridin XII-5a (200 mg) kao svetlo braon čvrsta supstanca.

Prinos: 70%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES+): 309 (M+H)+, 100% čistoće.

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-5

[0357] Rastvor 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)pirolo[2,3-b]piridina XII-5a (76 mg, 0,24 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je mešan u ledenom kupatilu i hlorosulfonskoj kiselini (54 mL, 0,78 mmol) je dodato u kapima i reakciona smeša je mešana 4 dana na 50 °C. Zatim je dodat fosfor oksihlorid (100 mL, 1,06 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C preko noći. Posle hlađenja, polako je sipana u ledenu vodu i ekstrahovana hloroformom (3x). Organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i upareni do suva da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-hloro-indol-3-sulfonil hlorid XII-5 (100 mg) kao čvrsta supstanca.

[0358] Sirovi proizvod je korišćen za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja:

Prinos: 95%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 387 (M-H)<->(odgovarajuća masa sulfonske kiseline), 88% čistoće.

C.6. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indol-3-sulfonil hlorida XII-6

[0359]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)indol-6-karbaldehida XII-6a

[0360] U mešanu suspenziju finog praškastog natrijum hidroksida (8,26 g, 206,7 mmol) u dihlorometanu (130 mL) koji je prethodno ohlađen na površini ledenog kupatila je dodat 1H-indol-6-karbaldehid (10,0 g, 68,89 mmol) odjenom, a zatim tetrabutilamonijum hidrogen sulfat (1,754 g, 5,17 mmol). Mešanje je nastavljeno još 10 minuta, zatim je rastvor benzensulfonil hlorida (9.67 mL, 75.78 mmol, 1.1 ekv.) u dihlorometanu (20 mL) dodat u kapima tokom 20 minuta i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Kupatilo za hlađenje je uklonjeno i smeša je mešana još 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana preko sloja kiselgura, ostatak na filter papiru je ispran sa dihlorometanom (2 ± 100 mL) i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je zatim triturisan u dietil etru (100 mL) i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, ispiranjem ostatka na filter papiru dietil etrom (2 ± 50 mL). Čvrsta supstanca je zatim osušena pod vakuumom da bi se dobilo 17,5 g jedinjenja iz naslova (kontaminiranog sa tetrabutilamonijum hidrogen sulfatom, ~8% v/v). Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu (350 mL) i rastvor je ispran vodom (150 mL) i slanim rastvorom (100 mL), osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i rastvarač koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 1-(benzensulfonil)indol-6-karbaldehid XII-6a (15,29 g) kao tamno bež čvrsta supstanca.

Prinos: 70%.

Kisela LCMS metoda 4 (ES+): 286 (M+H)+, 84% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.74 (dd, J = 3.6, 0.7 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.60-7.53 (m, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.81 - 7.75 (m, 2H), 7.98 - 7.88 (m, 2H), 8.54-8.45 (m, 1H), 10.09 (s, 1H).

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indola XII-6b.

[0361] U mešani rastvor 1-(benzensulfonil)indol-6-karbaldehida XII-6a (3,58 g, 12,55 mmol) u dihlorometanu (55 mL) dodat je dietilaminosulfur fluorid (7,5 mL, 56,77 mmol) u kapima. Mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 21 sat. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogenkarbonata (100 mL), a zatim ekstrahovana dihlorometanom (2 ± 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i rastvarač je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen korišćenjem fleš hromatografije (340 g KP-SIL kolona) korišćenjem gradijenta etil acetata u heptanu (5% do 30%) da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indol XII-6b (2,91 g ) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 75%.

Kisela LCMS metoda 4 (ES+): 308 (M+H)+, 100% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.70 (dd, J = 3.7, 0.7 Hz, 1H), 6.76 (t, J = 56.5 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.2, 0.8 Hz, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 7.59 - 7.51 (m, 1H), 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.66 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.93 - 7.85 (m, 2H), 8.17 (d, J = 0.8 Hz, 1H).

Korak 3: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indol-3-sulfonil hlorida XII-6

[0362] U mešani rastvor 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indola XII-6b (5,7 g, 18,55 mmol) u acetonitrilu (57 mL) koji je prethodno ohlađen na površini ledenog kupatila, dodata je hlorosulfonska kiselina (10,8 g, 92,74 mmol) u kapima tokom 20 minuta i reakciona smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je polako sipana uz mešanje u ledenu vodu (220 mL) tokom 20 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, ispiranjem ostatka na filter papiru sa ledenom vodom (3 ± 25 mL). Ostatak na filter papiru je zatim sušen u struji azota 1 sat, ispran cikloheksanom (25 mL) i sušen u struji azota još 2 sata da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indol3-sulfonil hlorid XII-6 (7,51 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 99%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.20 (t, J = 55.9 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.75-7.57 (m, 3H), 7.76 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.11 - 8.01 (m, 2H), 8.14 (s, 1H).

C.7. Sinteza 6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-7:

[0363]

[0364] Smeša 6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0,50 g, 3,28 mmol) u ClSO3H (10 mL) je zagrevana na 90 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je ugašena ledom H2O (30 mL), filtrirana, isprana sa H2O (30 mL) i osušena pod vakuumom da bi se dobio 6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorid XII-7 (0,45 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

[0365] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 55%

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 230 (M-H)- (odgovarajuća sulfonska kiselina), 98 % čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.16 (d, J=7.98 Hz, 1H) 7.50 (d, J=2.99 Hz, 1H) 8.08 (d, J=8.48 Hz, 1H) 11.88 (brs, 1H)

C.8. Sinteza 6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonil hlorida KSII-8:

[0366]

Korak 1: Sinteza 6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonske kiseline XII-8a:

[0367] U rastvor 6-(difluorometoksi)-1H-indola XI-2 (0,30 g, 1,30 mmol) u CH3CN (15 mL) je dodat ClSO3H (0,13 mL, 1,95 mmol) polako na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu H2O (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (100 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (20 mL) i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila 6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonska kiselina XII-8a (0,33 g sirove) kao braon polu čvrsta supstanca.

Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 262 (M-H)-, 75% čistoće.

Korak 2: Sinteza of 6-(difluorometoski)-1H-indol-3-sulfonil hlorid XII-8:

[0368] U rastvor 6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonske kiseline XII-8a (0,15 g, 0,43 mmol) u DCM (5 mL) dodat je oksalil hlorid (0,15 mL, 1,70 mmol) na 0°C praćeno dodavanjem DMF (0,007 mL, 0,09 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio 6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonil hlorid XII-8 (0,13 g sirovog) kao braon polučvrsta materija.

[0369] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja. Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 262 (M-H)-(odgovarajuća sulfonska kiselina), 80% čistoće.

C.9. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-7-fluoro-indol-3-sulfonil hlorida XII-9

[0370]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-7-fluoro-indola XII-9a

[0371] U mešanu suspenziju finog praškastog natrijum hidroksida (3,54 g, 0,088 mol) u dihlorometanu (60 mL) koja je prethodno ohlađena na ledenom kupatilu dodat je 6-hloro-7-fluoro-1H-indol XI-3 ( 5 g, 0,029 mol) odjednom, a zatim tetrabutilamonijum hidrogen sulfat (0,501 g, 0,001 mol). Mešanje je nastavljeno još 10 minuta, a zatim je tokom 20 minuta dodat rastvor benzensulfonil hlorida (4,2 mL, 0,033 mol) u dihlorometanu (15 mL) i reakciona smeša je mešana na 0 °C 1 sat. Ledeno kupatilo je uklonjeno i smeša je mešana još 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana preko sloja kiselgura, isprajući ostatak na filter papiru sa dihlorometanom (2 x 50 mL). Filtrat je ispran vodom (4 x 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i rastvarač je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-hloro7-fluoro-indol XII- 9a (8,57 g) kao tamno bež čvrsta supstanca.

Prinos: 90%.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.95 (dd, J = 3.7, 2.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 8.4, 6.2 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.66 (tt, J = 6.9, 1.9 Hz, 2H), 7.80 - 7.71 (m, 1H), 7.98-7.91 (m, 2H), 7.99 (d, J = 3.7 Hz, 1H). Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-hloro-7-fluoro-indol-3-sulfonil hlorida XII-9

[0372] U mešani rastvor 1-(benzensulfonil)-6-hloro-7-fluoro-indola XII-9a (8,50 g, 0,027 mol) u acetonitrilu (85 mL) koji je prethodno ohlađen na površini leda, dodata je hlorosulfonska kiselina ( 9,12 mL, 0,137 mol) u kapima tokom 20 min i reakciona smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je polako sipana uz mešanje u ledenu vodu (340 mL) tokom 20 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, ispiranjem ostatka na filter papiru sa ledenom vodom (3 x 50 mL) i cikloheksanom (50 mL). Ostatak na filter papiru je zatim sušen u struji azota tokom 2 sata, a zatim u vakuum pećnici na 40 °C tokom 16 sati da bi se dobio 1-(benzensulfonil)-6-hloro-7-fluoro-indol-3-sulfonil hlorid XII-9 (7,82 g) kao svetloružičasta čvrsta supstanca.

Prinos: 66%.

Kisela LCMS metoda 4 (ES+): 388 (M+H)+, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.44 (dd, J = 8.5, 6.3 Hz, 1H), 7.72 - 7.61 (m, 3H), 7.80-7.72 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 8.05 - 7.98 (m, 2H).

C.10. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metil-indol-3-sulfonil hlorida XII-10

[0373]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metil-indola XII-10a

[0374] U rastvor 6-metil-1H-indola (1g, 7,39 mmol) u THF (20 mL), dodat je natrijum hidrid (60 % u parafinu, 0,35 g, 8,9 mmol) na 0 °C. Rastvor je mešan 30 min i ostavljen da se zagreje od 0 °C do sobne temperature. Nakon toga, u kapima je dodat hlorid benzensulfonske kiseline (1,1 mL, 8,9 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i hidrolizovana sa vodom. Zatim je ekstrahovan sa EtOAc. Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom, osušen preko MgSO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (eluent: 25-40% AcOEt u heptanu) dajući 1,97 g 1-(benzensulfonil)-6-metil-indola XII-10a kao bezbojnog ulja.

Prinos: 70%

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 270 (M-H)-, 71% čistoće.

Korak 2: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metil-indol-3-sulfonil hlorida XII-10

[0375] Dobijeni 1-(benzensulfonil)-6-metil-indol XII-10a (0,9 g, 3,15 mmol) je razblažen u acetonitrilu (9 mL) i tretiran sa hlorosulfonskom kiselinom (0,32 mL, 4,72 mmol) u kapima. Posle 2 h, dodat je fosforni oksihlorid (0,65 mL, 6,93 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature i razblaživanja hloroformom, organski sloj je odvojen i ispran vodom, a zatim slanim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo 1,4 g 1-(benzensulfonil)-6-metil-indol-3-sulfonil hlorida XII-10 kao braonkasta čvrsta supstanca.

[0376] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 419 (M-H)-, nakon gašenja alikvota morfolinom pre analize

C.11. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-indol-3-sulfonil hlorida XII-11

[0377]

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-indola XII-11a

[0378] U rastvor 6-metoksiindola (2,5 g, 17 mmol) u DMF (50 mL), dodat je natrijum hidrid (60 % u parafinu, 1,7 g, 71 mmol) na 0°C. Suspenzija je mešana 30 min, a zatim zagrejana do sobne temperature. Zatim je rastvor tretiran sa benzensulfonil hloridom (2,8 mL, 3,70 g, 22 mmol) u kapima uz mešanje. Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2,5 h, u reakcionu smešu je dodata ledena voda uz snažno mešanje. Dobijeni talog je filtriran pod sniženim pritiskom, dobro ispran vodom (100 mL), a zatim petroleterom (10 mL). Posle sušenja na 60 °C °C, 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-indol XII-11a je dobijen kao bezbojna čvrsta supstanca (3,2 g).

Prinos: 65%

<1>H NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 7.87-7.81 (m, 2H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.45-7.39 (m, 3H), 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 8.6/2.3 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 3.7/0.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H).

Korak-2: Sinteza 1-(benzenesulfoiyl)-6-metoski-indol-3-sulfonil hlorid XII-11

[0379] Rastvor 1-(benzensulfonil)-6-metoksiindola XII-11a (500 mg, 1,74 mmol) u dihlorometanu (15 mL) je tretiran sa SO3DMF kompleksom (1,2 g, 7,8 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 2 h ( TLC kontrola). Očekivani intermedijer indolsulfonske kiseline nije izolovan. Zatim je dodat tionil hlorid (1 mL, 14 mmol) i smeša je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša je hidrolizovana zasićenim rastvorom NaHCO3(50 mL) i ekstrahovana dihlorometanom (3 puta, po 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani uparavanjem u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel 60, eluent, dihlorometan/petrol etar = 1:1) dovodeći do 1-(benzensulfonil)-6-metoksi-indol-3-sulfonil hlorida XII-11 kao bezbojne čvrste supstance (504 mg).

Prinos: 75%

<1>H NMR (600 MHz, CDCl3) δ: 8.23 (s, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 2H), 7.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 7.47 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H).

C.12. Sinteza 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonil hlorida XII-12

[0380]

Korak 1: Sinteza 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonske kiseline XII-12a

[0381] U rastvor 1H-pirolo[3,2-H]hinolina (400 mg, 2,3 mmol) u piridin (6 mL) na 0°C, dodat je kompleks piridin sumpor trioksida (1,2 g, 3,5 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana na 120°C uz mešanje tokom 2h, ohlađena do sobne temperature i uparena do suva. Bež čvrsta supstanca je rastvorena u vodi i vodena faza je isprana hloroformom (3x). Talog je formiran stajanjem u vodenoj frakciji i filtriran, ispran vodom i osušen pod vakuumom na 35°C da bi se dobilo 470 mg 1H-pirolo[3,2-H]hinolin-3-sulfonske kiseline XII-12a kao bež čvrsta.

Prinos: 79%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES+): 249 (M+H)<+>, 100 % čistoće.

Korak 2: Sinteza 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonil hlorida XII-12

[0382] U rastvor 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonske kiseline XII-12a (855 mg, 3,44 mmol) u acetonitrilu (8,5 mL), pod argonom, ohlađen na 0°C, je dodat je u kapima fosfor oksihlorid (1,06 g, 6,88 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana na 70°C uz mešanje preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, pažljivo je dodata ledena voda uz snažno mešanje. Čvrsta supstanca je istaložena i filtrirana, isprana vodom i osušena pod vakuumom na 35°C, dajući 284 mg 1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonil hlorida XII-12 kao bež čvrstu supstancu.

Prinos: 27%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES+): 275 (M+H)+, nakon gašenja alikvota sa etilaminom pre analize.

C.13. Sinteza 1H-benzo[g]indol-3-sulfonil hlorida XII-13

[0383]

Korak 1: Sinteza 1H-benzo[g]indol-3-sulfonske kiseline XII-13a

[0384] U rastvor 1H-benzo[g]indola (1 g, 5,8 mmol) u piridinu (16 mL) na 0 °C, dodat je kompleks piridinsumpor trioksida (1,38 g, 8,7 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana na 125°C uz mešanje tokom 5h, ohlađena do sobne temperature i uparena do suva. Smeđe ulje je razblaženo u vodi. Nakon stajanja, formiran je talog i filtriran, ispran vodom i osušen pod vakuumom na 35°C da bi se dobilo 1,4 g 1H-benzo[g]indol-3-sulfonske kiseline XII13a kao bež čvrsta supstanca.

Prinos: 98%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 246 (M-H)-Korak 2: Sinteza 1H-benzo[g]indol-3-sulfonil hlorida XII-13

[0385] U rastvor 1H-benzo[g]indol-3-sulfonske kiseline XII-13a (100 mg, 0,4 mmol) u acetonitrilu (1 mL), pod argonom, ohlađen na 0°C, dodat je u kapima fosfor oksihlorid (76 mL, 0,8 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana na 70°C tokom 1 h. Posle hlađenja do sobne temperature, pažljivo je dodata ledena voda uz snažno mešanje. Čvrsta supstanca je istaložena i filtrirana, isprana vodom i osušena pod vakuumom na 35°C, dajući 65 mg 1H-benzo[g]indol3-sulfonil hlorida XII-13 kao braon čvrstu supstancu.

Prinos: 60%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 246 (M-H)- (odgovarajuća sulfonska kiselina).

C.14. Sinteza 5-bromo-6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-14:

[0386]

[0387] U rastvor 5-bromo-6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridina (0,50 g, 2,16 mmol) u CH3CN (10 mL) je dodat CISO3H (5 mL) na 0°C i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 12h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je sipana u hladnu H2O (150 mL), talog je filtriran i osušen u vakuumu da bi se dobio 5-bromo-6-hloro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3- sulfonil hlorid (0,605 g sirovog) kao braon čvrsta supstanca.

[0388] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

[0389] Bazna LCMS metoda 2 (ES-): 309 (M-H)-(odgovarajuća sulfonska kiselina), 97% čistoće.

C.15. Sinteza 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida XII-15:

[0390]

[0391] Rastvor 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridina XSI-4 (570 mg, 2 mmol) u dihlorometanu je tretiran kompleksom sumpor trioksid/DMF (1224 mg, 8 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 0,5 h (TLC kontrola nije pokazala nikakav dalji početni materijal već potpunu konverziju u očekivanu sulfonsku kiselinu, eluent: čisti dihlorometan). Zatim je dodat tionil hlorid (1,4 mL, 20 mmol) i formirana suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 22 h. Dobijeni bistri rastvor je kontrolisan pomoću TLC (uočeno je jedno mesto za očekivani proizvod, eluent: petrolej etar: etil acetat 80 : 20). Smeša je hidrolizovana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(75 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 920 mg 1-(benzensulfonil)-6-benziloksi-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorida KSII-15.

[0392] Ovo jedinjenje je korišćeno kao takvo za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

Prinos: 64%

<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 5.42 (s, 2H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.31 (m, 3H), 7.49 (d, J = 9.1 Hz, 3H), 7.55 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.70 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 8.01 - 7.96 (m, 1H), 8.07 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 2H).

PRIMER JEDINJENJA D.

Sinteza jedinjenja opšte formule I

[0393] Sva jedinjenja ovog pronalaska koja su ovde posebno otkrivena su označena kao "I-x" pri čemu se bilo koje "x" odnosi na broj koji identifikuje pojedinačna jedinjenja. Shodno tome, jedinjenja iz Primera su označena kao I-1, I-2, I-3 itd. Ovo je nezavisno od toga da li se bilo koje jedinjenje takođe može opisati bilo kojom podgeneričkom Formulom ovde, npr. po formuli II, III ili IV i slično.

D.1. Metod A. Sinteza 6-hloro-N-(2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-1

[0394]

[0395] U rastvor XII-1 (0,50 g, 1,97 mmol) u piridinu (10 mL) dodat je X-1 (0,18 g, 1,25 mmol) i DMAP (0,012 g, 0,09 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa H2O (100 mL), 1 N HCl (50 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (100 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 40% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-hloro-N-(2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-1 (0,05 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 7%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 342 (M-H)-, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (dd, J=8.31, 1.47 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.71-7.81 (m, 2H), 7.89 (s, 1H), 8.16 (d, J=2.93 Hz, 1H), 10.73 (brs, 1H), 12.22 (brs, 1H).

[0396] Sledeća jedinjenja u Tabeli 4 mogu se sintetisati prema postupku analognom Metodi A.

Tabela 4:

6-hloro-N-(6-hloro-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-2

[0397]

Osnovna LCMS metoda 2 (ES+): 378 (M+H)+, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.75-7.84 (m, 1H), 7.94 (t, J=7.58 Hz, 1 H), 8.16 (brs, 1H), 10.86 (brs, 1H), 12.22 (brs, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-3

[0398]

Osnovna LCMS Metoda 2 (ES-): 388 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.53 (s, 3H), 7.23 (dd, J= 8.56, 1.71 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.96 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 9.29 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 8.80 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 2.93 Hz, 1H), 10.14 (brs, 1H), 12.12 (brs, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-2-fluoro-5-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-4

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 388 (M-H)-, 94% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.82 (s, 3H), 7.22-7.28 (m, 1H), 7.51-7.59 (m, 2H), 7.76 (d, J=8.80 Hz, 1H), 8.06 (d, J=2.93 Hz, 1H), 10.51 (s, 1H), 12.17 (brs, 1H).

6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-5

[0400]

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 372 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.79 (s, 3H), 7.19 (d, J=8.80 Hz, 1H), 7.55-7.60 (m, 2H), 7.61-7.65 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 12.09 (brs, 1H).

6-hloro-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-6

[0401]

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 384 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 7.19 (dd, J=8.56, 1.71 Hz, 1H), 7.47 (d, J=10.27 Hz, 1H), 7.51 (d, J=1.47 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.78 (s, 1 H), 9.44 (s, 1H), 11.95 (brs, 1H). 6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metilpiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-7

[0402]

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 356 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.24 (d, J=2.8 Hz, 3H), 7.24 (dd, J= 8.8 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.64 (t, J=8.8Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J=2.4 Hz, 1H), 10.50 (s, 1H), 12.15 (brs, 1H).

6-hloro-N-(2-hloro-6-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-8

[0403]

Neutralna LCMS metoda 3 (ES+): 372 (M+H)+, 95% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3.75 (s, 3H), 6.77 (d, J=8.51 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=1.89, 8.51 Hz, 1H), 7.48-7.56 (m, 2H), 7.65 (d, J=8.51 Hz, 1H), 7.77 (d, J=1.89 Hz, 1H), 10.90 (s, 1H), 12.10 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-9

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 420 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.39 (s, 3H), 7.22 (dd, J=1.2, 8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.58 (t, J=72.8 Hz, 1H), 7.70-7.77 (m, 2H), 7.94 (d, J=2.4Hz, 1H), 9.85 (brs, 1H), 12.06 (brs, 1H).

N-(5-bromo-3-metoksipirazin-2-il)-6-hloro-1H-indol-3-sulfonamid I-10

[0405]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 417 (M+H)+, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.84 (s, 3H), 7.21 (dd, J=8.37, 1.97 Hz, 1H), 7.54 (d, J=1.48 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.89 (d, J=8.37 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 10.93 (brs, 1H), 12.14 (brs, 1H).

6-hloro-N-(5-hloro-3-metoksipirazin-2-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-11

[0406]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 373 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.89 (s, 3H), 7.24 (dd, J=8.56, 1.71 Hz, 1H), 7.53 (d, J=1.47 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.31 Hz, 1H), 8.14 (d, J=2.94 Hz, 1H), 10.97 (s, 1H), 12.15 (brs, 1H).

6-hloro-N-[5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-12

[0407]

Bazna LCMS metoda 2 (ES- ): 416 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 4.42-4.46 (m, 1H), 4.50-4.55 (m, 1H), 4.62-4.66 (m, 1H), 4.75 4.78 (m, 1H), 7.20 (dd, J=8.80, 1.96 Hz, 1H), 7.49-7.54 (m, 2H), 7.68 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.81 (d, J=2.45 Hz, 1H), 9.48 (s, 1H), 11.97 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-13

[0408]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 400 (M+H)+, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 4.31-4.36 (m, 1H), 4.40-4.43 (m, 1H), 4.60-4.63 (m, 1H), 4.71-4.76 (m, 1H), 6.34 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=8.56, 1.71 Hz, 1H), 7.44 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.65 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 11.92 (brs, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-4-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-14

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 372 (M+H)+, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.01 (s, 1 H), 7.21 (d, J=8.31 Hz, 1 H), 7.52 (s, 1 H), 7.72 (d, J=8.31 Hz, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 9.68 (br s, 1 H), 12.04 (br s, 1 H) (3H spojeni u piku rastvarača).

6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-33

[0410]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 373 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.84 (s, 3H), 7.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 9.9, 7.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 10.12 (s, 1H), 12.83 (s, 1H).

6-hloro-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-34

[0411]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 385 (M-H)- , 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 9.59 (s, 1H), 12.69 (s, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-2-metoksipiridin-3-yl)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-35

[0412]

Bazna LCMS metoda 1 (ES- ): 417 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 4.45 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 4.53 (t, J = 4.1 Hz, 1H), 4.68 - 4.62 (m, 1H), 4.80 - 4.74 (m, 1H), 7.35 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 10.4, 1.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H), 9.8 (s, 1H), 12.6 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-2-metoksi-3-piridil]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-37

[0414]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 403 (M-H)-, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.34 (s, 3H), 6.58 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.58 (t, 1H), 7.65 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 9.68 (s, 1H), 12.72 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-38

[0415]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 418 (M+H)+, 94% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.28 (s, 3H) 4.43 (td, J=14.92, 3.91 Hz, 2H) 6.17-6.46 (m, 1H) 6.39 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.18 (dd, J=8.56, 1.71 Hz, 1H) 7.46 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.51 (d, J=1.96 Hz, 1H) 7.66 (d, J=8.80 Hz, 1H) 7.74 (s, 1H) 9.28 (brs, 1H) 11.93 (brs, 1H).

6-hloro-N-[2-(2,2-difluoroetoksi)-6-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-39

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 418 (M+H)+, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.74 (s, 3H) 4.05 (td, J=14.31, 4.16 Hz, 2H) 5.61-5.95 (m, 1H) 6.39 (d, J=8.31Hz, 1H) 7.12-7.21 (m, 1H) 7.48 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.52 (s, 1H) 7.65 (d, J=8.80 Hz, 1H) 7.77 (s, 1H) 9.36 (brs, 1H) 11.95 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-4-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-40

[0417]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 404 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.28 (s, 3H) 6.56 (s, 1H) 7.20 (dd, J=8.61, 1.72 Hz, 1H) 7.52 (d, J=1.48 Hz, 1H) 7.63 (t, J=74 Hz, 1H) 7.69 (d, J=8.37 Hz, 1H) 7.79 (d, J=2.46 Hz, 1H) 7.85 (s, 1H) 9.49 (s, 1H) 11.99 (brs, 1H)

6-hloro-N-(6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-41

[0418]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 384 (M+H)+, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0.77-0.79 (m, 2H) 0.93-1.00 (m, 2H) 2.11-2.14 (m, 1H) 7.22 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.53 (s, 1H) 7.59-7.65 (m, 1H) 7.73 (d, J=8.31 Hz, 1H) 8.04 (d, J=2.93 Hz, 1H) 10.40 (s, 1H) 12.16 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-42

[0419]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 436 (M+H)+, 94% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.30 (s, 3H) 4.54 (td, J=14.92, 3.42 Hz, 2H) 6.20-6.51 (m, 1H) 7.20 (dd, J=8.31, 1.96 Hz, 1H) 7.52 (d, J=1.96 Hz, 1H) 7.55 (d, J=10.27 Hz, 1H) 7.70 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.83 (s, 1H) 9.55 (brs, 1H) 11.99 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-43

[0420]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 466 (M+H)+, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.23 (s, 3H) 4.09-4.15 (m, 2H) 4.37-4.44 (m, 2H) 6.68 (t, J=76 Hz, 1H) 7.18 (dd, J=8.37, 1.48 Hz, 1H) 7.45-7.51 (m, 2H) 7.66 (d, J=8.86 Hz, 1H) 7.80 (s, 1H) 9.54 (brs, 1H) 11.96 (brs, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-44

Bazna LCMS metoda 1 (ES- ): 423 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.52 (td, J = 15.0, 3.3 Hz, 2H), 6.36 (tt, J = 54.1, 3.3 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 9.8, 7.4 Hz, 1H), 8.21 - 7.92 (m, 2H), 10.24 (s, 1H), 12.85 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-45

[0422]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 417 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.28 (s, 3H), 4.45 (td, J = 14.9, 3.6 Hz, 2H), 6.51 - 6.12 (m, 2H), 7.34 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 12.66 (s, 1H), 9.47 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-46

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 435 (M-H)-, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.28 (s, 3H), 4.56 (td, J = 14.8, 3.5 Hz, 2H), 6.37 (t, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 9.71 (s, 1H), 12.72 (s, 1H). 6-hloro-N-(6-ciklopropil-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-47

[0424]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 383 (M-H)-, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.12 - 0.64 (m, 4H), 2.24 - 2.02 (m, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 9.5, 7.5 Hz, 1H), 8.25 - 8.11 (m, 2H), 10.46 (s, 1H), 12.89 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-48

[0425]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 465 (M-H)-, 94% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 4.30 (d, J = 122.2 Hz, 4H), 6.71 (s, 1H), 8.25 - 7.18 (m, 4H), 9.65 (s, 1H), 12.63 (s, 1H).

6-hloro-N-(5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-49

[0426]

Bazna LCMS metoda 1 (ES- ): 355 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.51 (s, 3H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 9.4, 2.8 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.31 - 8.16 (m, 2H), 10.07 (s, 1H), 12.83 (s, 1H).

6-hloro-N-(6-ciklopropil-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-50

[0427]

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 396 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0.81-0.87 (m, 2H) 0.89-0.94 (m, 2H) 2.08-2.10 (m, 1H) 3.36 (s, 3H) 7.20 (dd, J=8.80, 1.47 Hz, 1H) 7.41 (d, J=10.27 Hz, 1H) 7.51 (s, 1H) 7.75 (d, J=8.80 Hz, 1H) 7.95 (d, J=2.45 Hz, 1H) 9.68 (s, 1H) 12.04 (brs, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometoksi)-1H-indol-3-sulfonamid I-51

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 468 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.29 (s, 3H) 4.50-4.60 (m, 2H) 6.22-6.52 (m, 1H) 7.00-7.05 (m, 1H) 7.20 (t, J=74, 1H) 7.25 (s, 1H) 7.55 (d, J=10.34 Hz, 1H) 7.71 (d, J=8.86 Hz, 1H) 7.83 (d, J=2.46 Hz, 1H) 9.54 (s, 1H) 11.95 (brs, 1H).

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonamid I-68

[0429]

Bazna LCMS metoda 1 (ES- ): 437 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.32 (s, 3H) under solvent peak, 8.04 - 7.30 (m, 6H), 8.45 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.92 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 9.91 (s, 1H), 13.17 (s, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[3,2-h]hinolin-3-sulfonamid I-69

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 451 (M-H)-, 94% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.25 (s, 3H), 4.51 (td, J = 14.8, 3.5 Hz, 2H), 6.33 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 7.71 -7.54 (m, 3H), 7.80 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.45 (dd, J = 8.3, 1.6 Hz, 1H), 8.92 (dd, J = 4.3, 1.6 Hz, 1H), 9.63 (s, 1H), 13.10 (s, 1H).

N-(2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-benzo[g]indol-3-sulfonamid I-70

[0431]

Neutralna LCMS metoda 3 (ES+): 384 (M+H)+, 98% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3.21 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 6.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.52 - 7.38 (m, 2H), 7.65 - 7.54 (m, 2H), 7.83 - 7.69 (m, 2H), 8.01 - 7.86 (m, 1H), 8.45 - 8.32 (m, 1H), 9.13 (s, 1H), 12.71 (s, 1H).

5-bromo-6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-71

Bazna LCMS metoda 2 (ES+): 515 (M+H)+, 94% čistoće.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.29 (s, 3H) 4.55 (td, J=14.80, 3.18 Hz, 2H) 6.22 - 6.54 (m, 1H) 7.64 (d, J=10.27 Hz, 1H) 8.08 (s, 1H) 8.47 (s, 1H) 9.80 (brs, 1H) 12.90 (brs, 1H).

D.2. Sinteza 6-hloro-N-(6-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-15

[0433]

[0434] U viali, rastvor 6-hloro-indola (630 mg, 4,1 mmol) u acetonitrilu (25,2 mL) je mešan u ledenom kupatilu i dodata je u kapima hlorosulfonska kiselina (714 ml, 10,7 mmol) i reakciona smeša je mešana 30 min. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 1,5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, dodat je piridin (54,6 mL) i rastvor je postao žut. U drugoj zatvorenoj viali, 6-metoksipiridin-3-amin (37,2 mg, 0,3 mmol) je izmeren i dodat je alikvot prethodnog rastvora (2,8 mL, 0,15 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 2 h, zatim uparena u centrifugalnom uparivaču. Ostatak je prečišćen hromatografijom reverzne faze u baznom režimu sa MS detekcijom da bi se dobilo 21,8 mg 6-hloro-N-(6-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-15.

D.3. Metod B. Sinteza N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamida I-16

Korak 1: Sinteza 1-(benzensulfonil)-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-3-piridil]-6 (difluorometil)indol-3-sulfonamida I-16a

[0436] U zatvorenoj viali, 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amin X-8 (150 mg, 0,49 mmol) je rastvoren u piridinu (3 mL) pod argonom. 1-(benzensulfonil)-6-(difluorometil)indol-3-sulfonil hlorid XII-6 (290 mg, 0.71 mmol) je dodat na 0 °C, a zatim mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana etil acetatom (tri puta). Organske faze su osušene preko MgSO4i uparene. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranjem sa gradijentom DCM i metanola od 100/0 do 95/5) da bi se dobilo 310 mg 1-(benzensulfonil)-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-3-piridil]-6-(difluorometil)indol-3-sulfon-amid I-16a kao bela čvrsta supstanca.

Prinos: 75%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 576 (M-H)-, 100% čistoće.

Korak 2: Sinteza N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamida I-16.

[0437] U zatvorenoj epruveti, 1-(benzensulfonil)-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-3-piridil]-6-(difluorometil)indol-3-sulfonamid I-16a (310 mg, 0,54 mmol) je rastvoreno u THF (4 mL). Dodat je tetrabutilamonijum fluorid (1.3 mL, 1M rastvor u vodi, 1.3 mmol) i reakciona smeša je mešana na 90 °C preko noći. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana etil acetatom (tri puta). Organske faze su osušene preko MgSO4i uparene. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa DCM/metanolom 95/5) da bi se dobilo 170 mg N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil )-1H-indol-3-sulfonamid I-16 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.

Prinos: 58%.

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 436 (M-H)-, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.37 (s, 3H), 7.12 (t, J = 56.0 Hz, 1H), 7.80 - 7.32 (m, 4H), 7.89 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 12.22 (s, 1H).

[0438] Sledeća jedinjenja u Tabeli 5 mogu se sintetisati prema metodama analognim metodi B.

Tabela 5:

[0439]

Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 370 (M-H)-, 100% čistoće.

N-(5-bromopirazin-2-il)-6-hloro-1H-indol-3-sulfonamid I-18

[0441]

[0442] Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 385 (M-H)-, 98% čistoće.

6-hloro-N-(6-cijanopiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-19

[0444] Osnovni LCMS metod 1 (ES-): 331 (M-H)-, 98% čistoće. N-(6-bromopiridin-3-il)-6-hloro-1H-indol-3-sulfonamid I-20

[0445]

[0446] Osnovni LCMS metod 1 (ES-): 384 (M-H)-, 98% čistoće.

6-hloro-N-(6-jodopiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-21

[0447]

[0448] Osnovni LCMS metod 1 (ES-): 432 (M-H)-, 100% čistoće.

6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-22

[0449]

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 421 (M-H)-, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.37 (s, J = 1.2 Hz, 3H), 7.37 (d, J = 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.77 - 7.40 (t, 1H), 7.77 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.09 (s, J = 2.1 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.3, 1.2 Hz, 1H), 9.95 (s, 1H), 12.77 (s, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-23

[0450]

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 360 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (dd, J = 1.93, 8.53 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.83 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 2.38, 10.09 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.62 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 2.38 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.93 Hz, 1H), 10.97 (br s, 1H),12.22 (br s, 1H).

6-hloro-N-(6-hloropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-24

[0451]

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 342 (M+H)+, 95% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.23 (dd, J = 1.83, 8.62 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.62 Hz, 1H), 7.46 - 7.57 (m, 2H), 7.76 (d, J = 8.44 Hz, 1H), 8.01 - 8.14 (m, 2H), 10.62 (br s, 1H), 12.15 (br s, 1H).

6-hloro-N-(6-hloro-4-fluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-25

[0452]

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 360 (M+H)+, 97% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.22 (dd, J = 1.93, 8.53 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.83 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.54 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.62 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 2.75 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 9.90 Hz, 1H), 10.35 (br. s., 1H), 12.14 (br. s., 1H).

6-hloro-N-(4,6-dihloropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-26

[0453]

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 376 (M+H)+, 96% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.90 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 12.13 (s, 1H).

N-(6-hloro-2-metoksipiridin-3-il)-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid I-27

[0454]

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 386 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.26 - 6.95 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 1H), 3.43 (s, 3H), 7.61 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.90 (dd, J = 8.4, 0.8 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 9.78 (s, 1H), 12.21 (s, 1H). N-(6-hloro-2-metoksipiridin-3-il)-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-28

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 387 (M-H)-, 97% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.40 (s, 3H), 7.27 - 6.63 (m, 2H), 7.77 - 7.35 (m, 2H), 8.27 (d, J = 73.6 Hz, 2H), 9.90 (s, 1H), 12.89 (s, 1H).

N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-29

[0456]

[0457] Bazna LCMS metoda 1 (ES-): 405 (M-H)-, 97% čistoće.

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoro-3-piridil]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-30

[0459] Osnovni LCMS metod 1 (ES-): 439 (M-H)-, 99% čistoće.

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-31

[0460]

[0461] Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 437 (M-H)-, 99% čistoće.

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid I-52

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 438 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.51 (td, J = 15.1, 3.3 Hz, 2H), 6.53-6.17 (m, 1H), 7.14 (t, J = 56.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.80 - 7.65 (m, 2H), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 10.17 (s, 1H), 12.31 (s, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-53

[0463]

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 433 (M-H)-, 100% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.21 (s, 3H), 4.43 (td, J = 14.9, 3.6 Hz, 2H), 6.48 - 6.13 (m, 2H), 7.10 (d, J = 55.1 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 14.9, 8.2 Hz, 2H), 8.03 (s, 1H), 8.21 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 9.46 (s, 1H), 12.77 (s, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-54

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 451 (M-H)-, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.23 (s, 3H), 4.54 (td, J = 14.8, 3.5 Hz, 2H), 6.36 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 7.04 (t, J = 55.1 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 17.0, 9.2 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 9.72 (s, 1H), 12.83 (s, 1H).

6-(difluorometil)-N-[5-fluoro-6-(2-fluoroetoksi)-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-55 [0465]

[0466] Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 433 (M-H)-, 99% čistoće.

6-(difluorometil)-N-(5-fluoro-2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-56

[0468] Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 401 (M-H)-, 100% čistoće.

6-(difluorometil)-N-(2,5-difluoro-6-metilpiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I-57

[0469]

[0470] Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 373 (M-H)-, 98% čistoće.

N-[6-[2-(difluorometoksi)etoksi]-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid I- 58

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 481 (M-H)-, 99% čistoće.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.18 (s, 3H), 4.28 (d, J = 120.0 Hz, 4H), 7.24 - 6.35 (m, 2H), 7.57 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 8.11 (s, 1H), 8.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 9.66 (s, 1H), 12.81 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-7-fluoro-1H-indol-3-sulfonamid I-59

[0472]

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 452 (M-H)-, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.31 (s, 3H), 4.78 - 4.42 (m, 2H), 6.60 - 6.09 (m, 1H), 7.30 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.58 (dt, J = 22.5, 9.7 Hz, 2H), 7.92 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 12.7 (s, 1H).

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metil-1H-indol-3-sulfonamid I-60

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 400 (M-H)-, 98% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.39 (s, 3H), 3.45 (s, 3H), 7.00 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.74-7.56 (m, 3H), 7.84 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 9.71 (s, 1H), 11.82 (s, 1H).

6-hloro-N-(2,6-dimetoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid I-61

[0474]

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 368 (M+H)+, 99% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3.24 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 6.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 11.89 (s, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid I-62

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 450 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.25 (s, 3H), 4.52 (td, J = 14.8, 3.6 Hz, 2H), 6.35 (tt, J = 54.5, 3.5 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 56.1 Hz, 1H), 7.86 - 7.29 (m, 4H), 7.95 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 9.56 (s, 1H), 12.17 (s, 1H).

N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metoksi-1H-indol-3-sulfonamid I-63

[0476]

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 414 (M-H)-, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.45 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 6.87 - 6.76 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.76 - 7.33 (m, 3H), 7.78 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 9.73 (s, 1H), 11.74 (s, 1H).

N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-metoksi-1H-indol-3-sulfonamid I-64

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 430 (M-H)-, 95% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.36 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 4.54 (td, J = 14.9, 3.6 Hz, 2H), 6.36 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 19.8, 9.6 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 9.42 (s, 1H), 11.67 (s, 1H).

6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-2,5-difluoropiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamid I-67

[0478]

Bazna LCMS Metoda1 (ES- ): 422 (M-H)-, 99% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.49 (t, J = 14.8 Hz, 2H), 6.34 (t, J = 54.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.88 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 12.03 (s, 1H).

N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-6-fenilmetoksi-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid

Neutralna LCMS Metoda 3 (ES+): 463 (M+H)+, 96% čistoće.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3.56 (s, 3H), 5.36 (s, 2H), 6.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.30 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 10.07 (s, 1H), 12.40 (s, 1H).

D.4. Sinteza 6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamida I-32

[0480]

[0481] U zatvorenoj viali, 1-(benzensulfonil)-6-hloro-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonil hlorid XII-4 (100 mg, 0,26 mmol) je rastvoren u piridinu (4 mL). 6-hloro-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amin X-3 (67 mg, 0.38 mmol) je dodat i zatim mešan na 70 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana etil acetatom (dva puta). Organske faze su osušene preko MgSO4i uparene. Ostatak je prečišćen baznom preparativnom LCMS Metodom 1 da bi se dobilo 11 mg 6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-pirolo[2,3-b]piridina -3-sulfonamid I-32 kao bledo žuta čvrsta supstanca.

Prinos: 11%.

Bazna LCMS Metoda1 (ES-): 389 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.63 (s, 3H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 18.4, 5.6 Hz, 2H), 11.17 (s, 1H), 12.87 (s, 1H).

D.5. Sinteza 6-cijano-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamida I65

[0482]

Korak 1: Sinteza 6-bromo-N-(6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-65a [0483] U rastvor 6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-amina X-20 (0,30 g, 1,34 mmol) u piridinu (8 mL) dodat je 6-bromo-1H-indol -3-sulfonil hlorid XII-2 (1,58 g, 5,35 mmol) u porcijama na 0 °C tokom 10 minuta nakon čega je usledilo dodavanje DMAP (0,02 g, 0,13 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je zagrevana na 90 °C za 20h. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa 2 N HCl (10 mL), razblažen sa H2O (70 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 35 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 x 60 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 30% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-bromo-N-(6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3 -il)-1H-indol-3-sulfonamid I-65a (0,42 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 62%.

Bazna LCMS Metoda2 (ES+): 481 (M+H)+, 95% čistoće.

Korak 2: Sinteza 6-cijano-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamida I-65 [0484] U rastvor 6-bromo-N-(6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-65a (0,20 g, 0,40 mmol) u DMF (6 mL) dodat je Zn(CN)2 (0,14 g, 1,19 mmol) i reakciona smeša je pročišćena argonom 15 min. Dodati su Pd2(dba)3(0,02 g, 0,02 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfanil) ferocen (0,02 g, 0,04 mmol) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 110 °C tokom 3 sata. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (80 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 40 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 x 60 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 35% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-cijano-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3 -il]-1H-indol-3-sulfonamid I-65 (0,077 g, 45%) kao sivobela čvrsta supstanca.

Prinos: 45%. Bazna LCMS Metoda2 (ES- ): 425 (M-H)-, 99% čistoće

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.21 (s, 3H) 4.53 (td, J=14.67, 3.42 Hz, 2H) 6.20-6.50 (m, 1H) 7.54 (dd, J=8.31, 0.98 Hz, 1H) 7.59 (d, J=10.27 Hz, 1H) 7.86 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.99 (s, 1H) 8.04 (s, 1H) 9.68 (brs, 1H) 12.41 (brs, 1H).

D.6. Sinteza 6-cijano-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamida I-66

Korak 1: Sinteza 6-bromo-N-(6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-66a:

[0486] U rastvor 6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksi-piridin-3-amin X-8 (0,10 g, 0,47 mmol) u piridinu (2 mL) je dodat 6-bromo-1H-indol-3-sulfonil hlorid XII -2 (0,44 g, 1,50 mmol) u porcijama na 0 °C tokom 20 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje DMAP (0,006 g, 0,05 mmol) na istoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 18 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa 2 N HCl (5 mL), razblažen sa H2O (10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3325 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (2 x 30 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 40% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-bromo-N-(6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)- 1H-indol-3-sulfonamid I-66a (0,15 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 63%.

Bazna LCMS Metoda2 (ES-): 46 (M-H)-, 92% čistoće.

Korak 2: Sinteza 6-cijano-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-indol-3-sulfonamida I-66:

[0487] U rastvor 6-bromo-N-(6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamida I-66a (0,09 g, 0,18 mmol) u DMF (2 mL) ) je dodat CuCN (0,03 g, 0,36 mmol) i reakciona smeša je isprana argonom 20 min, a zatim je dodat Pd(PPh3)4(0,02 g, 0,02 mmol). Reakciona smeša je pročišćena argonom 5 min i zagrevana na 110 °C tokom 16 h. Napredak reakcije je praćen TLC i LCMS. Nakon završetka, reakciona smeša je razblažena sa H2O (20 mL) i EtOAc (20 mL), filtrirana kroz sloj celita. Organski sloj je odvojen, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 x 20 mL), osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silicijum dioksid, 100-200 mesh, 50% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 6-cijano-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]- 1H-indol-3-sulfonamid I-66 (0,025 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca.

Prinos: 33%.

Bazna LCMS Metoda2 (ES- ): 411 (M-H)-, 96% čistoće.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53-7.55 (m, 1H) 7.55 (t, J=72 Hz, 1H) 7.73-7.77 (m, 1H) 7.91 (d, J=8.31Hz, 1H) 7.99 (s, 1H) 8.13 (s, 1H) 9.94 (brs, 1H) 12.45 (brs, 1H) (3H spojeni u piku rastvarača).

[0488] Primeri su testirani i aktivnosti u Ca2+ i cAMP testovima su prikazane u tabeli 6 dalje u nastavku.

B. BIOLOGIJA/FARMAKOLOGIJA:

B-I. Ćelijske kulture

GPR17 Rekombinantna ćelijska linija:

[0489] Flp-ln T-REx CHO ćelije koje stabilno eksprimiraju ljudski GPR17 receptor (CHO hGPR17) iz laboratorije Evi Kostenis (Univerzitet u Bonu, Nemačka) uzgajane su na 37 °C u vlažnoj atmosferi od 5% CO2. Ćelije su uzgajane u DMEM-u sa smešom hranljivih materija F-12 sa dodatkom higromicina B (500 mg/ml) i blasticidina (30 mg/ml). Ekspresija iz Flpln lokusa je indukovana tretmanom sa doksiciklinom (1 mg/ml) tokom 16-20 h pre testova.

Primarni oligodendrociti:

[0490] Primarne progenitorne ćelije oligodendrocita (OPC) su izolovane iz prednjeg mozga štenaca Wistar pacova postnatalnog dana 0 do 2. Cerebra je mehanički odvojena špricem i dve različite šuplje igle (prvo 1,2 x 40, a zatim 0,60 x 30). Suspenzija ćelija bez grudvica je filtrirana kroz cediljku od 70 mm i stavljena u posude za kulturu od 75 cm<2>obložene poli-D-lizinom u DMEM sa dodatkom 10% (v/v) fetalnog telećeg seruma inaktiviranog toplotom, penicilina (100 jedinica/ ml), i streptomicina (0,1 mg/ml) sa medijumom koji se menja svakog drugog dana. Posle 8 do 11 dana na 37 °C u vlažnoj atmosferi od 5% CO2, mešane kulture su mućkane na 240 rpm tokom 14-24 h da bi se OPC odvojili od astrocita i mikroglije. Za dalje obogaćivanje za OPC, suspenzija je postavljena na neobložene Petrijeve posude tokom 45 minuta. Zatim, OPC su zasejane u ploče obložene poli-L-ornitinom i održavane na 37 °C u vlažnoj atmosferi od 5% CO2u proliferirajućem Neurobasal mediju dopunjenom sa 2% (v/v) B27, 2 mM GlutaMAX, 100 jedinica/ ml penicilina, 0,1 mg/ml streptomicina, 10 ng/ml PDGF-AA i 10 ng/ml osnovnog FGF menjajući medijum svakog drugog dana.

B-II: Funkcionalni in vitro GPR17 testovi

B-II-A: Funkcionalni test mobilizacije kalcijuma

[0491] GPR17 je receptor povezan sa G-proteinom. Aktivacija GPR17 pokreće signalizaciju G-proteina Gk-tipa, što dovodi do oslobađanja deponija kalcijuma u endoplazmatskom retikulum (Ca<2+>) u citosolu što se može meriti korišćenjem Kalcijum 5 boje, fluorescentne indikatorske boje za nivoe Ca<2+>u citosolu. Jedinjenja iz ovog pronalaska su procenjena ili u Ca<2+>+ testu ili u GPR17 cAMP testu, opisanom dalje u nastavku. Neki reprezentativni primeri su izmereni u oba testa aktivnosti kao što je prikazano u tabeli 6 u nastavku.

Opis Ca<2+>testa:

[0493] Kada se testiraju u testu mobilizacije Ca<2+>, jedinjenja iz Primera obično pokazuju vrednosti plCso veće ili jednake 6,5; poželjnije veće ili jednake 7,5, a još poželjnije veće ili jednake 8,5. Aktivnosti testiranih jedinjenja iz Primera su prikazane u tabeli 6 u odeljku B-IIB ispod. Opsezi aktivnosti A, B i C odnose se na vrednosti plCso u Ca<2+>testu na sledeći način: „A“: plC506,5 ≤ x <7,5, „B“: plC507,5 ≤ x < 8,5, „C“: 8,5 ≤ plC50.

B-IIB. funkcionalni test akumulacije cAMP

[0494] Aktivacija GPR17 takođe može da regrutuje Gi-tip G-protein signalizacije, što dovodi do smanjenja intracelularnog cikličnog adenozin monofosfata (cAMP). Intracelularne promene cAMP se mogu meriti korišćenjem kompleta za dinamičku analizu HTRF cAMP kompanije CisBio (Codolet, Francuska). Koristeći homogenu fluorescentnu tehnologiju sa vremenskim razrešenjem (HTRF), test se zasniva na konkurenciji između prirodnog cAMP koji proizvode ćelije i cAMP obeleženog bojom d2. Vezivanje tragača je određeno anti-cAMP antitelom obeleženim kriptatom.

Opis cAMP testa

[0495] CHO hGPR17 je odvojen sa PBS-om koji sadrži EDTA i poslat u crnim pločama sa 384 bunarićia sa 5.000 ćelija po otvoru. Ćelije su prvo inkubirane 30 minuta na sobnoj temperaturi u HBSS Hepes (pH 7,4) koji sadrži nosač ili različite koncentracije test GPR17 jedinjenja antagonista/inverznog agonista. Zatim, kriva doze odgovora MDL29,951 GPR17 agonista (tipično od 10-5M do 10-10M) je dodata na nosač i na svaku testiranu koncentraciju GPR17 antagonista/inverznog agonista u konačnoj zapremini od 20 mL HBSS Hepes pufera (pH 7.4) koji sadrži 1 % DMSO, 5 mM forskolina i 0,1 mM IBMKS. Posle 60 minuta inkubacije na sobnoj temperaturi, reakcija se prekida i ćelije se liziraju dodavanjem d2 reagensa za detekciju i kriptatnog reagensa u po 10 mL pufera za lizu prema uputstvima proizvođača. Posle 60 minuta inkubacije, promene u koncentracijama cAMP se mere u skladu sa uputstvima proizvođača korišćenjem Envision čitača ploča sa laserskom ekscitacijom. Sve inkubacije su obavljene u duplikatu. Podaci su analizirani korišćenjem softvera GraphPad Prism korišćenjem 4-parametarske logističke jednačine za merenje MDL29,951 pECsos u odsustvu i prisustvu test GPR17 jedinjenja antagonista/inverznog agonista. Odnos doze (DR) je ucrtan u odnosu na koncentracije antagonista i Schild analiza je dala procenjeni afinitet pA2 test GPR17 jedinjenja antagonista/inverznog agonista.

Rezultati cAMP testa:

[0496] Kada se testiraju u cAMP testu, jedinjenja iz Primera obično pokazuju vrednosti pA2 veće ili jednake 6,5; poželjno veće ili jednake 7,5; poželjnije veće ili jednake 8,5. Aktivnosti testiranih jedinjenja iz Primera su prikazane u tabeli ispod. Opsezi aktivnosti A, B i C odnose se na vrednosti pA2 u cAMP testu na sledeći način: „A“: pA26,5 ≤ x <7,5, „B“: pA27,5 ≤ x < 8,5, „C“: 8,5 ≤ pA2.

[0497] Sledeća tabela 6 prikazuje vrednosti plCso i pA2 jedinjenja iz Primera testiranih u Ca<2+>i cAMP testu. Prazni delovi u kolonama pA2 ili Ca<2+>testa ukazuju na to da odgovarajuće jedinjenje još nije testirano u odgovarajućem testu ili da rezultat još nije bio dostupan.

Tabela 6.

B-IIC: Testovi sazrevanja/mijelinacije oligodendrocita

[0498] Efekti negativnih modulatora GPR17 na sazrevanje/mijelinaciju primarnih oligodendrocita mogu se proceniti in vitro imunotestovima korišćenjem antitela usmerenih protiv baznog proteina mijelina (MBP), kao markera za zrele oligodendrocite.

Opis testa MBP vestern blot/oligodendrocita/mijelinacije

[0499] Posle 3-4 dana u medijumu za proliferaciju, primarni OPC pacova su zasejani u količini od 25.000 ćelija po cm2 u ploče za kulturu tkiva sa 12 bunarića i prebačeni na Neurobasal medijum bez faktora rasta da bi se indukovala spontana in vitro diferencijacija i ekspresija GPR17 proteina. Za terminalnu diferencijaciju i kvantifikacione analize ekspresije proteina, nakon 24-48 h, medijum bez faktora rasta je dopunjen sa 0,20 ng/mL trijodotironina (T3) i 10 ng/mL cilijarnog neurotrofičnog faktora zajedno sa 1µM GPR17 antagonistom/inverznim agonistima test jedinjenja ili nosačem za dodatna 3 dana. Nakon tretmana jedinjenjem, ćelije su dva puta isprane ledeno hladnim PBS i lizirane u puferu za lizu na ledu (25 mM Tris, pH 7,4, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% Triton X100, 1% IGEPAL) sa dodatkom smeša inhibitora proteaze. Lizati su rotirani 20 min na 4 °C i centrifugirani na 15,000 xg na 4 °C tokom 10 min. Koncentracija proteina je određena korišćenjem Pierce BCA testa proteina prema uputstvima proizvođača. 7,5-15 mg proteina je odvojeno elektroforezom u 10% SDS poliakrilamidnom gelu i preneto na nitroceluloznu membranu elektroblotiranjem. Posle pranja, membrane su blokirane sa Roti-Block tokom 1 h na sobnoj temperaturi i inkubirane preko noći na 4 ° C u Roti-Block sa MBP antitelom (1: 5000, LifeSpan BioSciences). Membrane su isprane 3 puta sa PBS koji sadrži 0,1% Tween-a, a zatim inkubirane 1 h na sobnoj temperaturi sa kozjim anti-mišjim IgG antitelom konjugovanim sa peroksidazom rena u RotiBlock-u. Imunoreaktivni proteini su vizuelizovani hemiluminiscencijom korišćenjem Amersham Biosciences ECL Prime Vestern blotting reagensa za detekciju i kvantifikovani denzitometrijom korišćenjem Gelscan softvera. Da bi se normalizovao za jednako opterećenje i transfer proteina, membrane su ponovo ispitane antitelom protiv β-aktina (1:2500, BioLegend; sekundarno antitelo kozjeg anti-zečjeg IgG antitela HRP (ABIN)). Promene u nivou ekspresije MBP u prisustvu test jedinjenja su upoređene sa ekspresijom MBP u kontrolnim uslovima.

[0500] Rezultat dodavanja 1 µM jedinjenja 1-22 (6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3 -sulfonamid) na ekspresiju mijelina prikazana je na slici 1 (n=4, srednja vrednost i SD).

Opis MBP vlaknastih ploča/testa sazrevanja oligodendrocita/mijelinizacije

[0501] Aktivnost jedinjenja iz ovog pronalaska se takođe može testirati u testu ploča sa vlaknima na sledeći način: OPC se zaseju na 16,000-22,000 ćelija po cm<2>u Mimetik Aligned pločama od vlakana sa 96-bunarića (Electrospining company). Posle 2 dana u medijumu za proliferaciju i 2 dana u neurobazalnoj sredini bez faktora rasta da bi se izazvala spontana in vitro diferencijacija i ekspresija proteina GPR17, nosač ili 1 mM antagonist/inverzni agonist test jedinjenja se dodaju u medijum za terminalnu diferencijaciju sa dodatkom 0,20 ng/mL trijodotironina i 10 ng/mL cilijarnog neurotrofičnog faktora tokom 6 dana, menjajući medijum nakon 3 dana. Zatim se ćelije fiksiraju u 4% paraformaldehida, nakon čega sledi ispiranje PBS-a, permeabilizacija u 0,1% TritonX-100 u PBS-u i blokiranje sa 10% kozjeg seruma i 1% goveđeg serumskog albumina u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom. MBP antitelo će biti razblaženo u puferu za blokiranje (1:2000) i inkubirano 1 h na 37 °C. Ćelije su ponovo isprane u PBS i inkubirane 1 h sa Ci2-konjugovanim sekundarnim antitelima protiv mišjeg IgG (Millipore, 1:500). Nakon ispiranja PBS, ćelije će biti obojene sa 0,2 mg/mL DAPI, ponovo isprane i montirane Moviolom. Fluorescentne slike su napravljene korišćenjem Zeiss AxioObserver.Z1 mikroskopa sa ApoTome Imaging System i Plan-Apochromat 20x/0.8 objektivnom, sa eGFP filterom (ekscitacija 470/40 nm; emisija 525/50 nm) i DAPI filterom (ekscitacija 365 nm, emisija 445/50 nm). Najmanje 15 nasumičnih oblasti za kontrolu (terminalni medijum za diferencijaciju sa 0,1% DMSO) i za testna jedinjenja je snimljeno korišćenjem istih podešavanja obrađenih softverom Zeiss ZEN2.3. Promene u broju mijelinizovanih vlakana mogu se izvesti prema grupi dužina vlakana (0 do 40 mm, 41 do 60 mm, 61 do 80, 81 do 100, 101 do 120 i >120 mm)) u odsustvu ili prisustvu GPR17 negativnih modulatora koji su ovde otkriveni.

Claims

Patentni zahtevi: 1. Jedinjenje koje ima formulu III

pri čemu je X1 N ili C(R7), R2 je vodonik ili halogen, R4 je vodonik ili fluoro, R5 je vodonik ili halogen, R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkilmetoksi, feniloksi, benziloksi, benzilmetoksi, piridinilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, benzil, piridinil, alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata odabranih od halogena, cijano, C1-2alkoksi i fluoro C1-2alkoksi, ili R6 zajedno sa R7 i C-atomima za koje su vezani formiraju peto ili šestočlani aromatični ili nearomatični prsten koji može da sadrži jedan ili dva heteroatoma koji formiraju prsten, pri čemu je pomenuti prsten poželjno fenil ili piridil, i pri čemu je navedeni prsten nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do tri ostatka R13, R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, ili R7 formira prsten zajedno sa R6 kao što je gore opisano, R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi, etoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi, R10 je izabran između vodonika, cijano, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu je svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano, R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi, R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena, R13, u svakom slučaju, je nezavisno izabran između halogena, hidroksi, cijano, metila, metoksi, fluorometila i fluorometoksi, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu X1 je N ili C(R7), R2 je vodonik ili halogen, poželjno vodonik ili fluoro, R4 je vodonik ili fluoro, R5 je vodonik ili halogen, R6 je izabran između halogena, cijano, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkilmetoksi, benziloksi, benzilmetoksi, piridinilmetoksi, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki cikloalkil, benzil, piridinil, alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata odabranih od halogena, cijano, C1-2alkoksi i fluoro C1-2alkoksi, ili R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi, etoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi, R10 je izabran između vodonika, halogena, C3-5cikloalkila, C3-5cikloalkiloksi, C3-5cikloalkilmetoksi, C1-4alkoksi i C1-4alkila, pri čemu je svaki cikloalkil, cikloalkiloksi, alkil i alkoksi mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-3alkoksi, fluoro(C1-3)alkoksi i cijano, R11 je izabran između vodonika, fluora i metoksi, R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu X1 je N ili C(R7), R2 je vodonik R4 i R5 je nezavisno izabran između vodonika i fluora, R6 je izabran između halogena, cijano, ciklopropila, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki alkoksi i alkil mogu biti nesupstituisani ili supstituisani sa jednim ili više halogena, poželjno sa jednim ili više atoma fluora, R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i halogena, R8 je izabran između vodonika, halogena, metoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi, R10 je izabran između halogena, ciklo C3-5alkila, C1-3alkoksi i C1-3alkila, pri čemu svaki hcikloalkil, alkil i alkoksi može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halogena, C1-2alkoksi i halogenovanog C1-2alkoksi, R11 je izabran između vodonika, halogena i metoksi, R12 je izabran između vodonika, metoksi i halogena, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu R2, R4 i R5 su svi vodonik, R6 je izabran između fluoro, hloro, cijano, metil, metoksi, fluorometoksi i fluorometila, X1 je N ili C(R7), R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika i fluora, R8 je izabran između fluora i metoksi, R10 je izabran između hloro, bromo, ciklopropila i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan ili sa do tri fluoro atoma ili sa jednim supstituentom izabranim između metoksi, fluorometoksi i fluoroetoksi, R11 je vodonik ili fluoro R12, ako je prisutan, je vodonik ili fluoro, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu R2, R4 i R5 su svi vodonik, R6 je hloro ili difluorometil, X1 je N ili C(R7), R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora, hlora, i fluorometila, poželjno vodonika, R8 je izabran između fluora i metoksi, R10 je izabran između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan sa do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi, R11 je vodonik ili fluoro, R12, je vodonik ili fluoro, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu R2, R4 i R5 su svi vodonik, R6 je izabran između hlora, cijano, metila, metoksi, flouorometoksi i fluorometila, X1 je N ili C(R7), R7, ako je prisutan, je izabran između vodonika, fluora i hlora, R8 je izabran između fluora i metoksi, R10 je izabran između hloro, bromo i C1-2alkoksi, pri čemu je alkoksi supstituisan sa do tri atoma fluora ili sa jednim fluorometoksi ili fluoroetoksi, R11 je vodonik ili fluoro, R12, je vodonik ili fluoro, i farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi od njih.
7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje 6-hloro-N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje 6-hloro-N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje 6-hloro-N-(6-hloro-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje 6-hloro-N-(6-hloro-2,5-difluoropiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje 6-hloro-N-(2,5-difluoro-6-metilpiridin-3-il)-1H-indol-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje N-[6-(2,2-difluoroetoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-indol-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje N-[6-(difluorometoksi)-5-fluoro-2-metoksipiridin-3-il]-6-(difluorometil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-sulfonamid i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i izotopi.
15. Jedinjenje prema bilo kojem od prethodnih patentnih zahteva za upotrebu u terapiji.
16. Jedinjenje prema bilo kojem od prethodnih patentnih zahteva za upotrebu u lečenju ili prevenciji poremećaja demijelinizacije uključujući, ali ne ograničavajući se na multiplu sklerozu.
17. Terapeutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kojem od prethodnih patentnih zahteva i farmaceutski prihvatljiv nosač.