RS67656B1 - Formulacije koje sadrže visoke koncentracije fuzionog proteina vegf receptora - Google Patents

Formulacije koje sadrže visoke koncentracije fuzionog proteina vegf receptora

Info

Publication number
RS67656B1
RS67656B1 RS20251325A RSP20251325A RS67656B1 RS 67656 B1 RS67656 B1 RS 67656B1 RS 20251325 A RS20251325 A RS 20251325A RS P20251325 A RSP20251325 A RS P20251325A RS 67656 B1 RS67656 B1 RS 67656B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
formulation
fusion protein
vegf receptor
microliters
receptor fusion
Prior art date
Application number
RS20251325A
Other languages
English (en)
Inventor
Kenneth S Graham
Saurabh Wadhwa
Original Assignee
Regeneron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=66669104&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS67656(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Regeneron Pharma filed Critical Regeneron Pharma
Publication of RS67656B1 publication Critical patent/RS67656B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/179—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/71—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

[0001] Opis
[0003] OBLAST TEHNIKE
[0005] Predmetni pronalazak se odnosi na fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno. Ovde opisani primeri izvođenja se generalno odnose na formulacije koje sadrže visoku koncentraciju fuzionog proteina VEGF receptora, pri čemu je fuzioni protein VEGF receptora - aflibercept, pogodan za upotrebu u okularnoj primeni. Naročito, ovde opisani primeri pružaju tečne farmaceutske formulacije za upotrebu u intravitrealnoj primeni, pri čemu formulacije sadrže visoku koncentraciju aflibercepta i pokazuju farmaceutski prihvatljivu potenciju, stabilnost, viskoznost i pH vrednost.
[0007] SPISAK SEKVENCI
[0009] Zvanična kopija spiska sekvenci se podnosi istovremeno sa specifikacijom elektronskim putem EFS-Web kao spisak sekvenci u ASCII formatu sa nazivom datoteke „10430P1-US_SEQ_LIST_ST25.txt“, datumom kreiranja 9.5.2018. i veličinom od oko 7 KB. Spisak sekvenci sadržan u ovom ASCII formatiranom dokumentu je deo specifikacije i ovde je uključen referencom u celini.
[0011] OSNOVA PRONALASKA
[0013] [0003] Razvoj terapeutski korisne tečne formulacije zahteva kombinaciju sastojaka, u različitim količinama, kako bi se obezbedio funkcionalan i stabilan vehikulum za isporuku leka od interesa. Ovo je posebno tačno kada je lek protein, i pored toga, antitelo. Formulacije antitela dugo predstavljaju izazove za stručnjake koji razvijaju lekove i proizvođače lekova, jer aktivnost i primena antitela obično zahtevaju farmaceutski prihvatljivu potenciju, osmolalnost, stabilnost proteina, viskoznost i odgovarajuću pH. Ovi izazovi se pogoršavaju kada je antitelo u višim koncentracijama u formulaciji, na primer, iznad 20 do 40 mg/ml, što je koncentracija većine farmaceutski prodavanih antitela.
[0014] Formulacije antitela veće koncentracije omogućavaju kraće vreme injektiranja, manje injekcione zapremine, manju učestalost primene antitela i efikasniju proizvodnju i skladištenje. Međutim, kao što je gore navedeno, što je veća koncentracija antitela ili proteina, to je teže održati odgovarajuće parametre aktivnosti i isporuke formulacije. Naročito, formulacije antitela i proteina visoke koncentracije često se suočavaju sa povećanom agregacijom proteina i viskozitetom, što rezultira nižom ukupnom potencijom antitela ili proteina, kao i nižom proizvodnjom i lošijom stabilnošću pri skladištenju. Zbog problema vezanih za formulacije proteina ili antitela visoke koncentracije, razvijeno je malo takvih farmaceutski prihvatljivih formulacija. U tehnici postoji potreba za pripremom formulacija antitela i proteina visoke koncentracije i visoke stabilnosti koje uključuju odgovarajuću potenciju, stabilnost, viskozitet, osmolalnost i pH.
[0015] Jedan takav protein kome su potrebne formulacije visoke koncentracije je fuzioni protein receptora vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF). Fuzioni proteini VEGF receptora se koriste za blokiranje funkcije VEGF u brojnim oftalmološkim formulacijama, na primer, EYLEA<®>(Regeneron Pharmaceuticals, Inc.). Formulacije koje sadrže fuzioni protein VEGF receptora visoke koncentracije mogle bi omogućiti kraća vremena okularne injekcije, manje zapremine injekcija, manje mogućih injekcija po ciklusu primene i efikasniju proizvodnju i skladištenje.
[0016] Predmetni pronalazak je usmeren ka prevazilaženju jednog ili više gore navedenih problema.
[0018] KRATAK OPIS PRONALASKA
[0020] Predmetni pronalazak obezbeđuje fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno, pri čemu navedeni tretman sadrži primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg navedenog fuzionog proteina VEGF receptora u oko subjekta, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara.
[0021] Različiti ovde opisani primeri izvođenja obuhvataju formulacije koje sadrže aflibercept visoke koncentracije (npr. koje su pogodne za intravitrealnu primenu) za takvu upotrebu. Formulacije koje sadrže visoku koncentraciju aflibercepta pružaju brojne terapeutske i ekonomske prednosti, uključujući farmaceutski prihvatljivu potenciju, dugoročnu stabilnost u proizvodnji i skladištenju, kao i viskoznost i pH vrednost kompatibilne sa okularnom injekcijom. Formulacije koje sadrže visoku koncentraciju aflibercepta takođe omogućavaju smanjenje zapremine za okularnu primenu, što je prednost za izbegavanje neželjenih efekata na ograničenoj zapremini oka.
[0022] Ovde opisani primeri izvođenja pružaju formulacije za upotrebu koje sadrže aflibercept, pufer, termički stabilizator, sredstvo za smanjenje viskoznosti i surfaktant. U drugim primerima izvođenja, formulacije ne uključuju sredstvo za smanjenje viskoznosti. Formulacije za upotrebu ovog pronalaska imaju pH i viskoznost pogodne za injekcije, a posebno za terapeutske okularne injekcije.
[0023] U jednom primeru izvođenja pronalaska, obezbeđena je farmaceutska formulacija za upotrebu ovog pronalaska koja ima jednu dozu od oko 8 mg aflibercepta (koja je ovde razmatrana) u manje od oko 100 µl, manje od oko 50 µl, oko 50 µl, oko 57 µl, oko 60 µl, oko 70 µl ili oko 75 µl, pufera, opciono termički stabilizator i/ili sredstvo za smanjenje viskoznosti i surfaktant, pri čemu formulacija ima pH od oko 5,0 do oko 6,8 (npr., 5,8).
[0024] U jednom primeru izvođenja pronalaska, koncentracija aflibercepta je oko 114 mg/ml, 120 mg/ml ili 140 mg/ml.
[0025] U jednom primeru izvođenja pronalaska, surfaktant može biti nejonski surfaktant (npr., oko 0,02% do oko 0,1%; ili oko 0,03% (tež./zapr.)). U jednom primeru izvođenja pronalaska, surfaktant je nejonski surfaktant koji ima polioksietilenski ostatak, na primer, polisorbat 20 (PS20), polisorbat 80 (PS80), poloksamer 188, polietilen glikol 3350 ili njihove smeše.
[0026] U jednom primeru izvođenja pronalaska, pufer je pufer na bazi histidina (npr.10 mM ili 20 mM), kao što je histidin, histidin HCl ili histidin acetat; pufer na bazi fosfata, kao što je natrijum fosfat (npr., 10 mM); pufer na bazi acetata, kao što su natrijum acetat i sirćetna kiselina, ili pufer na bazi citrata, kao što su natrijum citrat ili limunska kiselina. U jednom primeru izvođenja pronalaska, ako je pufer fosfatni pufer, pH je od oko 5,7 do oko 8,0, oko 5,8 do oko 8,0, oko 5,7 do oko 7,0, oko 5,8 do oko 7,0, oko 5,9 do oko 7,0 ili oko 6,0 do oko 7,0; ako je pufer histidinski pufer, pH je od oko 5,5 do oko 6,5; ako je pufer citratni pufer, pH je od oko 3,0 do oko 6,2 ili oko 5,0 do oko 6,0; i ako je pufer acetatni pufer, pH je od oko 3,7 do oko 5,6 ili oko 5,0 do oko 6,0.
[0027] U jednom primeru izvođenja pronalaska, termički stabilizator je šećer, kao što je saharoza (npr., oko 2,5%, 5% ili 8%, 10% ili 20% (tež./ zapr.), npr., oko 2-20%), manitol, sorbitol ili trehaloza; L-prolin (npr., oko 2%, 3% ili 4% (tež./ zapr.)); glicin (npr., oko 50 mM), glicerol, taurin (npr., oko 50 mM) ili propan sulfonska kiselina (npr., oko 50 mM) ili bilo koja kombinacija gore navedenog.
[0028] U nekim primerima izvođenja pronalaska, farmaceutske formulacije za upotrebu ovog pronalaska uključuju sredstvo za smanjenje viskoznosti, na primer, arginin hidrohlorid (npr., L-arginin monohidrohlorid) (npr., 50 mM), lizin, natrijum hlorid (npr., 40 mM ili 50 mM), ili magnezijum hlorid. Alternativno, u drugim primerima izvođenja, formulacije za upotrebu ovog pronalaska posebno isključuju u suštini sva, ako ne i sva, sredstva za smanjenje viskoznosti.
[0029] U jednom primeru izvođenja pronalaska, farmaceutske formulacije za upotrebu ovog pronalaska sadrže, sastoje se ili se u suštini sastoje od sastojaka u bilo kojoj od formulacija A-KKKK, kako su ovde navedeni, koji sadrže aflibercept.
[0030] U ovde navedenim aspektima, farmaceutske formulacije ovog pronalaska mogu da sadrže aflibercept u koncentraciji od oko 80 mg/ml do oko 275 mg/ml, oko 140 mg/ml do oko 150 mg/ml, oko 140 mg/ml do oko 159 ili 160 mg/ml; uključujući oko 60 mg/ml, oko 80 mg/ml, oko 100 mg/ml, oko 113,3 mg/ml, oko 114,3 mg/ml, oko 120 mg/ml, oko 133,3 mg/ml, oko 140 mg/ml, oko 150 mg/ml, oko 200 mg/ml ili oko 250 mg/ml.
[0031] Neki aspekti farmaceutskih formulacija za upotrebu ovog pronalaska uključuju termički stabilizator u koncentraciji od oko 2% (tež./zapr.) do oko 9% (tež./zapr.) ili od oko 4% (tež./zapr.) do oko 9% (tež./zapr.), pod uslovom da kada je termički stabilizator taurin ili propan sulfonska kiselina, stabilizator je u koncentraciji od oko 25 mM do oko 100 mM, surfaktant je u koncentraciji od oko 0,02% (tež./zapr.) do oko 0,1% (tež./zapr.) (npr., oko 0,03%) i pufer je od oko 5 mM do oko 15 mM.
[0032] Fuzioni protein VEGF receptora može, na primer:
[0034] • biti kodiran sekvencom nukleinske kiseline SEQ ID NO:1 ili nukleotidima 79-1374 ili 79-1371 iz SEQ ID NO: 1;
[0035] • sadržati aminokiseline SEQ ID NO: 2 ili aminokiseline 27-457 ili 27-458 iz SEQ ID NO: 2;
[0036] • sadržati:
[0038] (1) VEGFR1 komponentu koja sadrži aminokiseline od 27 do 129 iz SEQ ID NO:2; (2) VEGFR2 komponentu koja sadrži aminokiseline od 130 do 231 iz SEQ ID NO:2; (3) multimerizacionu komponentu („FcΔC1(a)“) koja sadrži aminokiseline 232 do 457 ili 458 iz SEQ ID NO:2 (C-terminalne aminokiseline SEQ ID NO:2, tj., K458, može, ali i ne mora biti uključen u fuzione proteine VEGF receptora). Treba napomenuti da su aminokiseline od 1 do 26 iz SEQ ID NO:2 signalna sekvenca;
[0040] • sadrže imunoglobinu sličan (Ig) domen 2 prvog VEGF receptora (npr., VEGFR1) i Ig domen 3 drugog VEGF receptora (npr., VEGFR2), opciono dodatno uključujući Ig domen 4 drugog VEGF receptora (npr., VEGFR2) i multimerizujuću komponentu (npr., Fc domen IgG); • biti konbercept; ili
[0041] • biti aflibercept.
[0043] Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema predmetnom pronalasku je aflibercept.
[0045] VEGF trap
[0046]
[0049] AA 1-26 = Signalna sekvenca
[0050] AA 27-129 = FIt1-D2 (VEGFR1-D2)
[0051] AAs 130-231 = Flk1-D3 (VEGFR2-D3)
[0052] AA 232-458 = FcΔC1
[0054] U sledećem primeru izvođenja ovog pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema ovom pronalasku, koji je aflibercept, oebzbeđen je u kontejneru koji sadrži vodeni rastvor od oko 5 mM do oko 25 mM farmaceutski prihvatljivog pufera, od oko 4% (tež./zapr.) do oko 9% (tež./zapr.) farmaceutski prihvatljivog termičkog stabilizatora, od oko 0,02% (tež./zapr.) do oko 0,1% (tež./zapr.) farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i od oko 80 mg/ml do oko 275 mg/ml aflibercepta. Kada termički stabilizator uključuje ili taurin ili propan sulfonsku kiselinu, taurin ili propan sulfonska kiselina su u koncentraciji od oko 25 mM do oko 100 mM. Vodeni rastvor ima pH vrednost od oko 5,0 do oko 6,8, i može biti od oko 5,5 do oko 6,2 (npr. 5,8). U nekim aspektima, kontejner je bočica ili špric. U drugim aspektima, vodeni rastvor ne sadrži neorgansku so. Kada je termički stabilizator šećer, to može biti saharoza, manitol, sorbitol ili trehaloza, i može biti prisutan između oko 4% (tež./zapr.) i 9% (tež./zapr.); surfaktant može biti nejonski surfaktant i može uključivati polioksietilenski ostatak, kao što je polisorbat 20, polisorbat 80, poloksamer 188 ili polietilen glikol 3350, u koncentraciji od oko 0,02% do oko 0,1% težine po zapremini (tež./zapr.), a tipičnije, 0,02% do oko 0,04% (tež./zapr.). U jednom primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora je kodiran sekvencom nukleinske kiseline SEQ ID NO:1 ili nukleotidima 79-1374 ili 79-1371 iz SEQ ID NO: 1.
[0055] [0022] U drugim primerima izvođenja, obezbeđene su farmaceutske formulacije za upotrebu prema predmetnom pronalasku koje sadrže aflibercept u vodenom rastvoru, pri čemu vodeni rastvor ima viskoznost od oko 0,010 Pa·s (oko 10 cP) do oko 0,015 Pa·s (oko 15 cP) na 20°C, tipičnije od oko 0,010 Pa·s (oko 10 cP) do oko 0,013 Pa·s (oko 13 cP) na 20°C, i najčešće od oko 0,011 Pa·s (oko 11 cP) do oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP) na 20°C (npr., oko 0,006 Pa·s (6,0 cP), 0,0073 Pa·s (7,3 cP), 0,0115 Pa·s (11,5 cP) ili 0,012 Pa·s (12,0 cP) na 20°C). U jednom primeru izvođenja pronalaska, viskoznost je od oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP) do oko 0,0115 Pa·s (oko 15 cP) na 20°C. pH vrednost formulacije može biti od oko 5,8 do oko 6,5 (npr., oko 5,8). U nekim slučajevima, formulacije ne sadrže sredstvo za smanjenje viskoznosti, na primer, ne sadrže arginin hidrohlorid, lizin, natrijum hlorid ili magnezijum hlorid. U drugim slučajevima, formulacije sadrže 10 mM histidin hidrohlorida ili 10 mM histidin-acetata. Šećer može biti saharoza, manitol, sorbitol ili trehaloza i može biti prisutan između oko 4% (tež./zapr.) i 9% (tež./zapr.) (npr., oko 5%); surfaktant može biti nejonski surfaktant i može da sadrži polioksietilenski ostatak, kao što je polisorbat 20, polisorbat 80, poloksamer 188 ili polietilen glikol 3350, u koncentraciji od oko 0,02% do oko 0,1% težine po zapremini (tež./zapr.) i tipičnije, 0,02% do oko 0,04% (tež./zapr.) (npr., 0,03%). Pored toga, formulacija može dodatno da sadrži termički stabilizator izabran od taurina ili propan sulfonske kiseline u koncentraciji između oko 25 mM i oko 100 mM i tipičnije oko 50 mM do oko 70 mM. U jednom primeru izvođenja pronalaska, formulacija sadrži aflibercept, (npr., pri koncentraciji od oko 100 mg/ml, oko 115 mg/ml, oko 125 mg/ml, oko 150 mg/ml, oko 200 mg/ml ili bilo kojoj od „visokih“ koncentracija o kojima se ovde govori), oko 10 mM pufera na bazi histidina, oko 5% (tež./zapr.) saharoze, oko 0,03% (tež./zapr.) nejonskog surfaktanta kao što je polisorbat npr., polisorbat 20 i oko 50 mM arginina, L-arginina ili L-arginin monohidrohlorida, sa pH vrednošću od oko 5,8. U jednom primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora je kodiran sekvencom nukleinske kiseline SEQ ID NO:1 ili nukleotidima 79-1374 ili 79-1371 iz SEQ ID NO: 1.
[0056] [0023] U sledećem primeru izvođenja, farmaceutska formulacija za upotrebu ovog pronalaska uključuje aflibercept u koncentraciji od oko 80 mg/ml do oko 275 mg/ml u farmaceutski prihvatljivom puferu. U nekim slučajevima, stabilne farmaceutske formulacije mogu takođe da sadrže taurin ili propan sulfonsku kiselinu. Formulacije mogu biti stabilne na temperaturi od oko 2°C do oko 8°C tokom oko 24-36 meseci. U nekim slučajevima, aflibercept pokazuje manje od oko 5% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine i tipičnije, manje od oko 4,5% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, manje od oko 4,0% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, manje od oko 3,5% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, manje od oko 3,0% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, manje od oko 2,5% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, manje od oko 2,0 povećanja kod vrsta visoke molekulske težine i/ili manje od oko 1,5% povećanja kod vrsta visoke molekulske težine, kada se čuva na ovim temperaturama i tokom ovog vremenskog perioda. U drugim slučajevima, aflibercept pokazuje manje od 2,0% do 3,0% povećanja količine vrsta visoke molekulske težine kada se formulacije čuvaju na ovim temperaturama i tokom ovog vremenskog perioda.
[0057] Ovde opisani primeri mogu takođe uključivati farmaceutske formulacije ovog pronalaska koje uključuju aflibercept, pH puferovani rastvor, šećer i surfaktant, pri čemu je aflibercept u koncentraciji od oko 80 mg/ml do oko 275 mg/ml. Takođe su otkrivene stabilne tečne farmaceutske formulacije koje uključuju konbercept, pH puferovani rastvor, šećer i surfaktant, gde je konbercept u koncentraciji od 41 mg/ml do oko 275 mg/ml. Stabilne tečne farmaceutske formulacije mogu takođe da sadrže taurin ili propan sulfonsku kiselinu. U nekim aspektima, aflibercept ili konbercept su u koncentraciji od 80 mg/ml ili 150 mg/ml. U drugim aspektima, formulacije ne uključuju neorgansku so, na primer natrijum hlorid.
[0058] [0025] Neki primeri izvođenja se odnose na sterilne špriceve prethodno napunjene fuzionim proteinom VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu ovog pronalaska, tako da su špricevi prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM histidin hidrohlorida, histidin acetata ili natrijum fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, manitola, sorbitola ili trehaloze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350 i 40 mM natrijum hlorida. Aspekti ovde uključuju dalje dodavanje od oko 25 mM do oko 100 mM, a tipičnije od oko 50 mM do oko 70 mM, bilo taurina ili propan sulfonske kiseline. U nekim aspektima, špricevi su prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM histidin HCl, histidin acetata ili natrijum fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze, manitola, sorbitola ili trehaloze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350. Aspekti ovde uključuju dalje dodavanje od oko 25 mM do oko 100 mM, a tipičnije od oko 50 mM do oko 70 mM, bilo taurina ili propan sulfonske kiseline. U još nekim aspektima, špricevi su prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM histidin hidrohlorida, histidin acetata ili natrijum fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, manitola, sorbitola ili trehaloze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od oko 6,2. Aspekti ovde mogu uključivati dalje dodavanje taurina ili propan sulfonske kiseline. U još nekim aspektima, špricevi su prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM histidin hidrohlorida, histidin acetata ili natrijum fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze, manitola, sorbitola ili trehaloze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350, sa pH vrednošću od oko 6,2, a vodeni rastvor ne sadrži neorgansku so. Aspekti mogu dalje uključivati od oko 25 mM do oko 100 mM i tipičnije, od oko 50 mM do oko 70 mM, bilo taurina ili propan sulfonske kiseline. U još nekim aspektima, špricevi su prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM natrijum acetata ili sirćetne kiseline, 5% (tež./zapr.) glicerola i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od oko 6,2. U još nekim aspektima, špricevi su prethodno napunjeni vodenim rastvorom koji sadrži 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM natrijum acetata ili sirćetne kiseline, 8% (tež./zapr.) glicerola i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, polisorbata 80, poloksamera 188 ili polietilen glikola 3350 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od oko 6,2.
[0059] Takođe je otkriven postupak za pripremu bilo koje formulacije navedene ovde koji sadrži korak kombinovanja svake komponente formulacije u jednu kompoziciju. Takav postupak može da uključuje korak dodavanja dobijene formulacije u bočicu ili uređaj za injekcije. Bilo koja kompozicija koja je proizvod takvog postupka takođe može biti kompozicija za upotrebu ovog pronalaska. Na primer, takođe su otkriveni postupci za pripremu formulacije kombinovanjem pufera na bazi histidina, citrata, acetata ili fosfata, sa saharozom, polisorbatom 20 i afliberceptom; i, opciono, jednom ili više dodatnih komponenti, npr., kao što su ovde razmatrane. U nekim slučajevima, formulacija je pripremljena tako da sadrži i taurin ili propan sulfonsku kiselinu, ali tamo gde ne sadrži taurin ili propan sulfonsku kiselinu, možda neće sadržati ni neorgansku so. U ovde navedenim aspektima, saharoza je u težini po zapremini od oko 4% do oko 10%, polisorbat 20 ima težinu po zapremini od oko 0,02% do oko 0,1%, a aflibercept je u koncentraciji od oko 80 mg/ml do oko 275 mg/ml. Tamo gde formulacija sadrži taurin ili propan sulfonsku kiselinu, on/ona je prisutan/prisutni, na primer, u količini od oko 25 mM do oko 100 mM, ali može biti uključen/uključena i u količini od 50 mM do 70 mM. Postupak može uključivati unošenje unapred određene zapremine pripremljene formulacije u sterilni špric, tako da zapremina sadrži dozu aflibercepta od oko 8 mg.
[0060] Takođe je otkriven postupak za primenu formulacije za upotrebu ovog pronalaska na subjekta (npr., čoveka) koji sadrži intraokularno injektiranje (npr., intravitrealnom injekcijom) formulacije u oko subjekta. Takođe je otkriven postupak za primenu formulacije ovog otkrića na subjekta (npr., čoveka) koji sadrži implantaciju intravitrealnog implantata koji sadrži formulaciju ovog otkrića u staklasto telo subjekta.
[0061] [0028] Ovde opisani primeri izvođenja takođe uključuju fuziju VEGF receptora, odnosno aflibercept, za upotrebu ovog pronalaska za lečenje angiogenog poremećaja oka, npr., makularne degeneracije povezane sa starenjem (vlažne), makularnog edema nakon okluzije retinalne vene, okluzije retinalne vene (RVO), okluzije centralne retinalne vene (CRVO) i grane retinalne vene (BRVO), dijabetičkog makularnog edema (DME), horoidalne neovaskularizacije (CNV), neovaskularizacije dužice, neovaskularnog glaukoma, postoperativne fibroze kod glaukoma, proliferativne vitreoretinopatije (PVR), neovaskularizacije optičkog diska, neovaskularizacije rožnjače, neovaskularizacije mrežnjače, neovaskularizacije staklastog tela, panusa, pterigijuma, vaskularne retinopatije ili dijabetičke retinopatije (npr., neproliferativne dijabetičke retinopatije i/ili proliferativne dijabetičke retinopatije) kod subjekta kome je to potrebno intraokularnim ubrizgavanjem najmanje oko 8 mg aflibercepta u oko subjekta kome je to potrebno, na primer, bilo koje formulacije navedene ovde, pri čemu se aflibercept primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara. U jednom primeru izvođenja pronalaska, zapremina injekcije je 100 mikrolitara ili manje (npr., 100 mikrolitara, 50 mikrolitara ili 57 mikrolitara). Postupak sadrži intravitrealnu injekciju prethodno pomešanog vodenog rastvora koji sadrži aflibercept u koncentraciji od 80 mg/ml do oko 275 mg/ml, farmaceutski prihvatljiv šećer, farmaceutski prihvatljiv pufer i farmaceutski prihvatljiv surfaktant. Postupci lečenja koji koriste prethodno pomešani vodeni rastvor ne zahtevaju razblaživanje. U ovde navedenim aspektima, prethodno pomešani vodeni rastvor ima pH od oko 6,0 do oko 6,5 i ima viskoznost između oko 10 cP i 13 cP.
[0062] Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu u ovom pronalasku je aflibercept.
[0063] Drugi primeri izvođenja u skladu sa ovde navedenim otkrićem postaće očigledni iz pregleda sledećeg detaljnog opisa.
[0065] KRATAK OPIS CRTEŽA
[0067] Gore navedeni i drugi aspekti, karakteristike i prednosti ovde opisanih primera izvođenja postaće očigledniji onima koji su stručnjaci u ovoj oblasti uz pomoć pratećih crteža.
[0068] Slika 1A je grafikon koji određuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora (aflibercepta) u četiri različite formulacije (B, H, D i G) tokom 36 meseci na 2 °C do 8 °C. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem ultra-performansne tečne hromatografije sa isključivanjem po veličini (SE-UPLC) kako bi se identifikovalo formiranje vrsta visoke molekulske težine (HMW) (znak razgradnje proteina).
[0069] Slika 1B je takođe grafikon koji određuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora (aflibercepta) u četiri formulacije (B, H, D i G) tokom 36 meseci na 2 °C do 8 °C. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem SE-UPLC da bi se identifikovao procenat glavnih vrsta u svakoj formulaciji.
[0070] Slika 1C je histogram koji prikazuje formiranje varijanti naelektrisanja fuzionog proteina VEGF receptora u četiri formulacije (B, H, D i G) tokom 36 meseci na 2 °C do 8 °C. Nivo kiselih vrsta je testiran u proizvodnji (0,0), 12 meseci, 24 meseca i 36 meseci korišćenjem snimajućeg kapilarnog izoelektričnog fokusiranja (iCIEF).
[0071] Slika 1D je histogram koji prikazuje formiranje varijanti naelektrisanja fuzionog proteina VEGF receptora u četiri formulacije (B, H, D i G) tokom 36 meseci na 2 °C do 8 °C. Identifikacija glavnih vrsta je testirana u proizvodnji (0,0), 12 meseci, 24 meseca i 36 meseci korišćenjem iCIEF.
[0072] Slika 2A je grafikon koji prikazuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora (aflibercepta) od 150 mg/ml u formulaciji od 10 mM natrijum fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% polisorbata 20 (tež./zapr.) pH 6,2 sa i bez L-arginin monohidrohlorida tokom 28 dana na 37°C. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem SE-UPLC radi identifikacije formiranja HMW vrsta.
[0073] Slika 2B je grafikon koji prikazuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora od 150 mg/ml u formulaciji od 10 mM natrijum fosfata, 8% saharoze (tež./zapr.) i 0,03% polisorbata 20 (tež./zapr.) pH 6,2 sa i bez L-arginin monohidrohlorida tokom 28 dana na 37°C. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem SE-UPLC da bi se identifikovao procenat glavnih vrsta u svakoj formulaciji.
[0074] Slika 3A je histogram koji prikazuje viskoznost formulacija puferovanih natrijum fosfatom od 10 mM koje sadrže 155 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora i nemaju so, 100 mM arginina, 200 mM arginina, 50 mM lizina, 200 mM lizina, 50 mM natrijum hlorida ili 100 mM natrijum hlorida. Viskoznost je merena u cP na 20 °C.
[0075] Slika 3B je histogram koji prikazuje viskoznost formulacija puferovanih histidinom od 10 mM koje sadrže 155 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora i nemaju so, 100 mM arginina, 200 mM arginina, 50 mM lizina, 200 mM lizina, 50 mM natrijum hlorida ili 100 mM natrijum hlorida. Viskoznost je merena u cP na 20 °C.
[0076] Slika 3C je grafikon koji prikazuje viskoznost različitih koncentracija fuzionog proteina VEGF receptora pod različitim uslovima formulacije (sa ili bez 50 mM arginin hidrohlorida). Viskoznost je merena u cP na 20 °C.
[0077] Slika 4A je grafikon koji prikazuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora od 150 mg/ml u 10 mM natrijum fosfatu, 8% (tež./zapr.) saharozi i 0,03% (tež./zapr.) polisorbatu 20, pH 6,2 sa i bez 50 mM L-arginin monohidrohlorida tokom 12 meseci na 5°C. Fuzioni protein VEGF receptora bio je na 150 mg/ml. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem SE-UPLC da bi se identifikovalo formiranje HMW vrsta.
[0078] Slika 4B je grafikon koji prikazuje stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora od 150 mg/ml u 10 mM natrijum fosfatu, 8% (tež./zapr.) saharozi i 0,03% (tež./zapr.) polisorbatu 20, pH 6,2 sa i bez 50 mM L-arginin monohidrohlorida tokom 12 meseci na 5 °C. Fuzioni protein VEGF receptora bio je na 150 mg/ml. Stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora testirana je korišćenjem SE-UPLC da bi se identifikovao procenat glavnih vrsta u svakoj formulaciji. Slika 5 je grafikon koji prikazuje viskoznost formulacija pod dva puferska uslova na 20°C, 10 mM fosfatnim puferom ili 10 mM histidinskim puferom. Koncentracija fuzionog proteina VEGF receptora varirala je od 10 mg/ml do 170 mg/ml. Viskoznost je merena u mPa-S.
[0079] Slika 6 prikazuje dinamički skrining rasejanja svetlosti za niz različitih uslova formulacije, od kojih svaki ima od 2 do 10 mg/ml proteina. Parametar difuzione interakcije je pokazao da taurin i PSA (propan sulfonska kiselina) poboljšavaju Kd.
[0080] Slika 7 je grafikon koji prati procenat vrsta visoke molekulske težine (HMW) u formulacijama F1-F9 (formulacije WW-EEE) tokom vremena, mereno ultra-performansnom tečnom hromatografijom sa isključivanjem po veličini (SE-UPLC) nakon skladištenja na 5°C tokom 6 meseci. Formulacije F1-F9 su navedene u Tabeli 7-1 ovde.
[0081] Slika 8 (A-B) meri procenat vrsta visoke molekulske težine, pomoću SE-UPLC, nakon skladištenja na 5°C tokom 3 meseca (A) ili inkubacije na 37°C tokom 28 dana (B). Formulacije F1-F4 (EEE, SSS, CCC (140 mg/ml) i TTT) su navedene u Tabeli 8-1 ispod.
[0082] Slika 9 prikazuje viskoznost (cp) za formulacije F1-F12, na 20°C, u početnoj vremenskoj tački. Formulacije F1-F12 su navedene u Tabeli A ispod.
[0084] Tabela A. Formulacije F1-F12.
[0087]
[0088]
[0090] Slika 10 prikazuje osmolalnost (mmol/Kg) formulacija F1-F12 (navedenih u Tabeli A ovde).
[0091] Slika 11 (A-B) meri procenat vrsta visoke molekulske težine u formulacijama F1-F6 (formulacije GGG, HHH, III, JJJ, LLL i KKK) tokom vremena, pomoću SE-UPLC, nakon skladištenja na 37°C do 28 dana (A) ili 5 °C do 3 meseca (B) tokom vremena.
[0092] Slika 12 prikazuje dinamičko rasejanje svetlosti (koeficijent difuzije (cm<2>/sekundi), poluprečnik (nm) i %Pd) u početnoj vremenskoj tački formulacija prikazanih u Tabeli 9-3 (GGG-RRR).
[0093] Slika 13 prikazuje osnovne FA slike i OCT (sočivo od 30 stepeni) za dva različita zeca (326-OS i 329-OD) pre primene aflibercepta (OD = oculus dexter (desno oko); OS = oculus sinister (levo oko)). (A) FA slika za zeca 326, levo oko; (B) OCT slika za zeca 326, levo oko; (c) FA slika za zeca 329, desno oko; (D) OCT slika za zeca 329, desno oko.
[0094] Slika 14 (A-F) prikazuje vremenski tok slika FA zeca 1. (A), 7. (B) i 14. (C) dana i OCT 1. (D), 7. (E) i 14. (F) dana za jednog zeca (326-OS) na koga je primenjena formulacija histidinskog pufera (sočivo od 30 stepeni) (7 mg/oko).
[0095] Slika 15 (A-H) prikazuje vremenski tok slika FA zeca nakon 3 nedelje (A), 4 nedelje (B), 7 nedelja (C) i 8 nedelja (D); i OCT nakon 3 nedelje (E), 4 nedelje (F), 7 nedelja (G) i 8 nedelja (H) za jednog zeca (326-OS) na koga je primenjena formulacija histidinskog pufera (sočivo od 55 stepeni) (7 mg/oko).
[0096] Slika 16 (A-F) prikazuje vremenski tok slika FA zeca 1. dana (A), 1. nedelje (B) i 2. nedelje (C) i OCT 1. dana (D), 1. nedelje (E) i 2. nedelje (F) za jednog zeca (329-OS) na koga je primenjena formulacija fosfatnog pufera (sočivo od 30 stepeni) (7 mg/oko).
[0097] Slika 17 (A-H) prikazuje vremenski tok slika FA zečeva u 3. nedelji (A), 4. nedelji (B), 7. nedelji (C) i 8. nedelji (D) i OCT u 3. nedelji (E), 4. nedelji (F), 7. nedelji (G) i 8. nedelji (H) za jednog zeca (329-OS) na koga je primenjena formulacija fosfatnog pufera (sočivo od 55 stepeni) (7 mg/oku).
[0098] Slika 18 (A-B) prikazuje čistoću (procenat autohtonih vrsta) (A) i procenat vrsta visoke molekulske težine (HMW) (B) u formulacijama UUU-BBBB tokom vremena na 37°C (do jednog meseca) (videti Tabelu 11-1) analizirano pomoću SE-UPLC.
[0099] Slika 19 (A-E) prikazuje analizu stabilnosti i čistoće formulacije koja sadrži 114,3 mg/ml VEGF trap (aflibercept) formulisane u 10 mM histidinu, pH 5,8, 5% saharoze, 0,03% polisorbata 20, 50 mM arginin monohidrohlorida pomoću određivanja procenta (i) vrsta velike molekulske težine (HMW) nakon inkubacije na 5°C ili 37°C do 2 meseca (A) i (ii) glavnih vrsta (glavni pik) nakon inkubacije na 5°C ili 37°C do 2 meseca (B); kao i „microflow“ snimanjem radi određivanja prisustva čestica ispod granice vidljive detekcije nakon inkubacije na 37°C do 28 dana (C), analizom zatamnjenja svetlosti čestica radi određivanja prisustva čestica materije ispod granice vidljive detekcije nakon inkubacije na 37°C do 28 dana (D), i mikroskopskim određivanjem čestica materije ispod granice vidljive detekcije nakon inkubacije na 37°C do 28 dana (E).
[0100] Slika 20 prikazuje analizu stabilnosti i čistoće formulacije CCC, koja sadrži 80, 100, 120 ili 140 mg/ml aflibercepta, pomoću SE-UPLC određivanja procenta vrsta visoke molekulske težine (HMW) nakon inkubacije na 2-8°C do 6 meseci (A) ili 37°C do 28 dana (B).
[0101] Slika 21 prikazuje procenat očiju kod zečeva testiranih sa potpunom supresijom curenja tokom vremena, kada je primenjeno 500 mikrograma ili 2 mg aflibercepta, tokom vremena (Gehan-Breslow-Wilcoxon test (P < 0,0453)).
[0103] DETALJAN OPIS
[0105] [0032] Predmetni pronalazak je fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno, pri čemu navedeni tretman sadrži primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg navedenog fuzionog proteina VEGF receptora u oko subjekta, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara. Predmetni pronalazak obezbeđuje formulacije za takvu upotrebu koje imaju visoke koncentracije aflibercepta, pri čemu formulacije pokazuju odlična funkcionalna svojstva i svojstva skladištenja koja su razvijena uprkos značajnim tehničkim preprekama. Na primer, uobičajeni postupak za identifikaciju odgovarajućih ekscipijenasa za formulaciju koja uključuje polipeptidni lek (kao što je fuzioni protein VEGF receptora) je procena stabilnosti polipeptida pod uslovima ubrzanog stresa, kao što je visoka temperatura (npr., 37°C). Pomoćne supstance koje nisu pogodne u uslovima bez stresa (npr., niska temperatura kao što je 5°C), obično će izazvati neželjeni efekat, u kratkom vremenskom periodu, dok je pod stresom, npr., agregaciju proteina. Ovaj pristup je uobičajen u biotehnološkoj i farmaceutskoj industriji u meri u kojoj ubrzava eliminaciju ekscipijenasa za koje je malo verovatno da će stabilizovati lek. Videti npr., Magari, Assessing Shelf Life Using Real-Time and Accelerated Stability Tests, Biopharm Intl. 16(11): 36-48 (2003). U nekim slučajevima, proizvod može biti pušten u prodaju na osnovu ubrzanih podataka o stabilnosti, ali to se mora uraditi paralelno sa analizom roka trajanja u realnom vremenu (neubrzano). Magari (2003) and FDA, Guidelines for Submitting Documentation for the Stability of Human Drugs and Biologics, Rockville, MD (1987). Međutim, ovde je, na 5°C, prisustvo arginina u formulacijama histidina bilo stabilizujuće, mada se činilo da arginin ima tendenciju da smanji stabilnost kada je pod temperaturnim stresom (37°C). Videti sliku 8 (A-B). Ovo svojstvo formulacija ovde navedenih predstavljalo bi tehničku poteškoću koja bi odvratila praktičara od izbora arginina; stoga je malo verovatno da bi praktičar izabrao arginin kao pomoćno sredstvo. Ipak, formulacije ovde navedene su rezultat prevazilaženja tehničkih prepreka kao što je ova, kako bi se postigla formulacija sa visokom stabilnošću. Formulacija VEGF trap u histidinskom puferu takođe je dovela do korisnog smanjenja viskoznosti u odnosu na onu koja je primećena kod formulacije sa fosfatnim puferom. Pošto su mali otvori igle poželjni za izvođenje intravitrealnih injekcija (zbog smanjene nelagodnosti kod pacijenta i traume oka), poželjna je relativno niska viskoznost. Formulacija niže viskoznosti zahteva manju silu za guranje formulacije kroz iglu, što olakšava nadležnom lekaru ubrizgavanje formulacije kroz iglu. Pored toga, formulacija koja sadrži histidin i arginin dobro je tolerisana u očima zečeva.
[0106] Sada će se detaljno razmotriti reprezentativni primeri izvođenja. Podrazumeva se da sledeći opisi nisu namenjeni da ograniče primere izvođenja na jedan poželjan primer izvođenja.
[0107] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto značenje kao što ga obično razume stručnjak u oblasti na koju se otkriće odnosi. Kako se ovde koristi, termin „oko“, kada se koristi u odnosu na određenu navedenu numeričku vrednost, znači da se vrednost može razlikovati od navedene vrednosti za najviše 1%. Tako, na primer, kako se ovde koristi, izraz „oko 100“ uključuje 99 i 101 i sve vrednosti između (npr., 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, itd.).
[0108] U jednom primeru izvođenja pronalaska, farmaceutska formulacija za upotrebu predmetnog pronalaska je u skladu sa USP<789> za injekciju male zapremine (SVP) oftalmoloških rastvora, npr., sadrži manje od oko 50 čestica prečnika ≥10 µm po ml; sadrži manje od oko 5 čestica prečnika ≥25 µm po ml; ili sadrži manje od oko 2 čestice prečnika ≥50 µm po ml.
[0109] Treba napomenuti da se u ovde navedenim svrhama „intravitrealna injekcija“ odnosi na injekciju u staklasto telo oka (blizu mrežnjače na zadnjem delu oka). Izrazi „pogodna za intravitrealnu primenu“, „pogodna za intravitrealnu injekciju“ i slično znače da se dotična formulacija može bezbedno injektirati u staklasto telo oka subjekta bez izazivanja bilo kakvih neželjenih reakcija osim onih za koje se zna da su povezane sa intravitrealnom injekcijom EYLEA.
[0110] Termin „farmaceutska formulacija“ ovde se odnosi na formulacije koje uključuju farmaceutski prihvatljive nosače, npr., koristi se za primenu aflibercepta na subjekta u terapeutske/medicinske svrhe.
[0111] Termin „farmaceutski prihvatljiva“ odnosi se na formulaciju koja je, u okviru racionalne medicinske procene, pogodna za primenu na oko.
[0112] Termin „subjekt“ ovde se odnosi na bilo kog sisarskog (npr., zeca, miša, pacova ili majmuna) subjekta, posebno čoveka, npr., za koga je potrebna dijagnoza, prognoza ili terapija sa formulacijama kao što su ovde opisane.
[0113] Termin „vodena“ formulacija odnosi se na formulaciju koja sadrži vodu.
[0114] Termin „lečenje“ ili „tretman“ odnosi se na terapijsku meru koja preokreće, stabilizuje ili eliminiše neželjenu bolest ili poremećaj (npr., angiogeni poremećaj oka ili kancer), na primer, izazivanjem regresije, stabilizacije ili eliminacije jednog ili više simptoma ili indikacija takve bolesti ili poremećaja u bilo kom klinički merljivom stepenu, npr., u vezi sa angiogenim poremećajem oka, izazivanjem smanjenja ili održavanjem rezultata težine dijabetičke retinopatije (DRSS), poboljšanjem ili održavanjem vida (npr., u najboljoj korigovanoj oštrini vida npr., mereno povećanjem ETDRS slova), povećanjem ili održavanjem vidnog polja i/ili smanjenjem ili održavanjem centralne debljine mrežnjače i, u vezi sa kancerom, zaustavljanjem ili obrtanjem rasta, preživljavanja i/ili metastaza ćelija kancera kod subjekta. Tipično, terapijska mera je primena jedne ili više doza terapeutski efikasne količine fuzionog proteina VEGF receptora na subjekta sa bolešću ili poremećajem.
[0115] „Sprečavanje“ ili „prevencija“ se odnosi na profilaktičku meru za zaustavljanje razvoja neželjene bolesti ili poremećaja (npr., angiogenog poremećaja oka).
[0116] SE-UPLC se može koristiti u ovom pronalasku za kvantitativno određivanje prisustva vrsta visoke molekulske težine u formulaciji. SE se odnosi na hromatografiju isključivanja po veličini. UPLC se odnosi na ultra-performansnu tečnu hromatografiju. Pogodne SE kolone, koje se mogu koristiti u UPLC sistemu, za karakterizaciju takvih HMW vrsta fuzionih proteina VEGF receptora (npr., aflibercept ili konbercept) u formulaciji, sposobni su da razdvoje molekule u opsegu molekulskih težina od oko 10 000-450 000 daltona. Videti na primer, ACQUITY UPLC proteinsku BEH SEC 200Å kolonu. U jednom primeru izvođenja pronalaska, dve takve kolone su povezane tandemski prilikom kvantitativnog određivanja HMW vrsta u formulaciji. UPLC donosi poboljšanja u odnosu na HPLC (tečnu hromatografiju visokih performansi) u osetljivosti i rezoluciji. UPLC koristi instrumentaciju koja radi na visokim pritiscima i koristi finije čestice (obično manje od oko 2,5 µm) od onih koje se koriste u HPLC. Pored toga, mobilne faze UPLC rade na visokim linearnim brzinama od HPLC.
[0117] [0044] Ovde opisani primeri obuhvataju formulacije za upotrebu ovog pronalaska koje sadrže visoku koncentraciju (npr., oko 80 mg/ml, oko 90 mg/ml, oko 100 mg/ml, oko 113,3 mg/ml, oko 114,3 mg/ml, oko 120 mg/ml, oko 133,3 mg/ml, oko 140 mg/ml, oko 150 mg/ml, oko 200 mg/ml ili oko 250 mg/ml) aflibercepta. Ovde obuhvaćene pogodne formulacije sadrže visoku koncentraciju aflibercepta, pufer, termički stabilizator i surfaktant. U nekim aspektima, pogodna formulacija dalje uključuje sredstvo za smanjenje viskoznosti. U drugim aspektima, pogodna formulacija u suštini isključuje sva sredstva za smanjenje viskoznosti. Tipične formulacije imaju pH od oko 5,0 do oko 6,8 (npr., 5.8), ali mogu uključivati bilo koji pH koji je koristan za primenu aflibercepta u oko subjekta.
[0118] Predmetni pronalazak uključuje formulacije za upotrebu koje uključuju aflibercept u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava (npr., inhibitor Ang-2 (npr., anti-ANG2 antitelo ili njegov antigen-vezujući fragment ili nesvakumab), aktivator Tie-2 receptora, anti-PDGF, PDGF receptor ili beta antitelo PDGF receptora ili njegov antigen-vezujući fragment i/ili dodatni antagonist VEGF kao što je bevacizumab, ranibizumab, pegaptanib ili rastvorljivi oblik receptora-3 humanog vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGFR-3) koji sadrži ekstracelularne domene 1-3, eksprimirane kao Fc-fuzioni protein), kao i formulacije za upotrebu u postupcima prevencije ili lečenja koji sadrže primenu takvih formulacija kao što su ovde diskutovane. U jednom primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu ovog pronalaska uključuje aflibercept, ali isključuje bilo koje dodatno terapeutsko sredstvo (npr., koje je antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen).
[0119] Termin „zajedno sa“ ukazuje na to da formulacija i dodatno terapeutsko sredstvo mogu biti formulisani u jednoj kompoziciji, npr., za istovremenu isporuku ili formulisani odvojeno u dve ili više kompozicija (npr., komplet). Dodatno terapeutsko sredstvo može, samo po sebi, biti formulisano u sopstvenoj farmaceutskoj formulaciji. Svako se može primeniti na subjekta istovremeno sa drugim ili u različito vreme od primene drugog; na primer, svaka primena može se dati neistovremeno (npr., posebno ili uzastopno) u intervalima tokom datog vremenskog perioda. Pored toga, formulacija i dodatno terapeutsko sredstvo mogu se primeniti na subjekta istim ili različitim putem.
[0120] U jednom primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu prema predmetnom pronalasku sadrži jedan ili više natrijum sulfata (npr., 50 mM); natrijum tiocijanat (npr., 50 mM); natrijum citrat (npr., 40 mM); glicin (npr., 50 mM); natrijum hlorid (npr., 50 mM); lizin (npr., 50 mM); natrijum aspartat (npr., 50 mM); i/ili natrijum glutamat (npr., 50 mM). Na primer, u jednom primeru izvođenja formulacija sadrži kombinaciju natrijum citrata (npr., 50 mM) i arginin hidrohlorid (npr., 50 mM); glicin (npr., 50 mM) i arginin hidrohlorid (npr., 50 mM); natrijum aspartat (npr., 50 mM) i arginin hidrohlorid (npr., 50 mM); ili natrijum glutamat (npr., 50 mM) i arginin hidrohlorid (npr., 50 mM).
[0121] Fuzioni proteini VEGF receptora i drugi inhibitori VEGF
[0123] Fuzija VEGF receptora za upotrebu u ovom pronalasku je aflibercept.
[0124] Za potrebe ovog teksta, „fuzioni protein VEGF receptora“ odnosi se na molekul koji sadrži jedan ili više VEGF receptora ili njihovih domena, fuzionisanih sa drugim polipeptidom, koji ometa interakciju između VEGF i prirodnog VEGF receptora, npr., pri čemu su dva takva fuziona polipeptida povezana, čime se formira homodimer ili drugi multimer. Takvi fuzioni proteini VEGF receptora mogu se označiti kao „VEGF-trap“ ili „VEGF trap“. Fuzioni proteini VEGF receptora u kontekstu ovog otkrića koji spadaju u ovu definiciju uključuju himerne polipeptide koji sadrže dva ili više imunoglobulinskih (Ig)-sličnih domena VEGF receptora kao što je VEGFR1 (takođe poznat kao Flt1) i/ili VEGFR2 (takođe poznat kao Flk1 ili KDR), a mogu sadržati i multimerizacioni domen (na primer, Fc domen).
[0125] Primer fuzionog proteina VEGF receptora je molekul koji je označen kao VEGF1R2-FcΔC1(a) i koji je kodiran sekvencom nukleinske kiseline SEQ ID NO:1 ili njenim nukleotidima 79-1374 ili 79-1371.
[0126] VEGF1R2-FcΔC1(a) sadrži tri komponente:
[0128] (1) VEGFR1 komponentu koja sadrži aminokiseline od 27 do 129 iz SEQ ID NO:2; (2) VEGFR2 komponentu koja sadrži aminokiseline od 130 do 231 iz SEQ ID NO:2; i (3) multimerizacionu komponentu („FcΔC1(a)“) koja sadrži aminokiseline od 232 do 457 iz SEQ ID NO:2 (C-terminalne aminokiseline SEQ ID NO:2, tj., K458, može, ali i ne mora biti uključen u fuzione proteine VEGF receptora, videti U.S. Patent br.
[0129] 7,396,664 ili 7,354,579). Treba napomenuti da su aminokiseline od 1 do 26 iz SEQ ID NO:2 signalna sekvenca.
[0131] U jednom primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora sadrži aminokiseline 27-458 ili 27-457 iz SEQ ID NO: 2.
[0132] Fuzioni protein VEGF receptora može da sadrži
[0134] (1) imunoglobinu sličan (Ig) domen 2 prvog VEGF receptora (npr., VEGFR1) i (2) Ig domen 3 drugog VEGF receptora (npr., VEGFR2),
[0135] (3) i, opciono, dalje uključivanje Ig domena 4 drugog VEGF receptora (npr., VEGFR2) i
[0136] (4) multimerizujuću komponentu (npr., Fc domen IgG).
[0137] Na primer, fuzioni protein VEGF receptora ima sledeći raspored navedenih domena:
[0139] • [VEGFR1 Ig domen 2]-[VEGFR2 Ig domen 3]-[MC] (npr., njegov homodimer) ili • [VEGFR1 Ig domen 2]-[VEGFR2 Ig domen 3]-[VEGFR2 Ig domen 4]-[MC] (npr., njegov homodimer).
[0141] Takođe je otkriven fuzioni protein VEGF receptora, koji je VEGF mini-trap, što je molekul VEGF trap sa skraćenom multimerizujućom komponentom (npr., Fc), npr., pri čemu mini-trap i dalje uključuje Fc zglobni region. Videti npr., WO2005/00895 ili U.S. Patent br.
[0142] 7,396,664.
[0143] Takođe su otkrivene formulacije visoke koncentracije koje uključuju, umesto fuzionih proteina VEGF receptora, molekule koji vezuju VEGF i anti-VEGF antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen,
[0145] • bevacizumab (npr., u koncentraciji od oko 80-90 ili 88 mg/ml),
[0146] • ranibizumab (npr., u koncentraciji od oko 20-40 mg/ml, npr., 21-35, 21 ili 35 mg/ml), • anti-VEGF aptamer kao što je pegaptanib (npr., pegaptanib natrijum),
[0147] • jednolančano (npr., V<L>-V<H>) anti-VEGF antitelo kao što je brolucizumab (npr., u -*-*-- ------- koncentraciji od oko 200-400 ili 200, 210, 400 ili 420 mg/ml),
[0148] • anti-VEGF DARPin kao što je Abicipar Pegol DARPin (npr., u koncentraciji od oko 70-140, 70 ili 140 mg/ml), ili
[0149] • bispecifično anti-VEGF antitelo, npr. koje se takođe vezuje za ANG2, kao što je RG7716 (npr., u koncentraciji od oko 100-400, 100, 105, 400 ili 420 mg/ml).
[0151] Takođe je otkrivena formulacija koja sadrži 35 ili 80 mg/ml ranibizumaba, pufer, termički stabilizator, sredstvo za smanjenje viskoznosti i surfaktant.
[0152] DARPin su dizajnirani proteini sa ankirinskim ponovcima. DARPin generalno sadrže tri do četiri čvrsto upakovana ponovka od približno 33 aminokiselinska ostatka, pri čemu svaki ponovak sadrži β-petlju i dve antiparalelna α-heliksa. Ovaj kruti okvir obezbeđuje stabilnost proteina, a istovremeno omogućava prezentaciju varijabilnih regiona, koji obično sadrže šest aminokiselinskih ostataka po ponovku, za prepoznavanje ciljnog mesta.
[0153] „Anti-VEGF“ antitelo ili fragment antitela koji vezuje antigen odnosi se na antitelo ili fragment koji se specifično vezuje za VEGF.
[0154] Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu u ovom pronalasku je aflibercept (EYLEA<®>, Regeneron Pharmaceuticals, Inc.). Takođe je otkriven fuzioni protein VEGF receptora (komercijalno ga prodaje Chengdu Kanghong Biotechnology Co., Ltd.). Videti objavu međunarodne patentne prijave br. WO2005/121176 ili WO2007/112675. Termini „aflibercept“ i „konbercept“ uključuju bioslične verzije istog. Bioslična verzija referentnog proizvoda (npr., aflibercepta) se generalno odnosi na proizvod koji sadrži identičnu aminokiselinsku sekvencu, ali uključuje i proizvode koji su bioslični prema Zakonu o konkurenciji cena i inovacijama bioloških proizvoda SAD-a.
[0155] [0058] Farmaceutske formulacije za upotrebu prema ovom pronalasku su „visoke koncentracije“. Farmaceutske formulacije visoke koncentracije prema ovom pronalasku uključuju aflibercept u koncentraciji od najmanje 80 mg/ml, od najmanje 100 mg/ml, od najmanje 125 mg/ml, od najmanje 140 mg/ml, od najmanje 150 mg/ml, od najmanje 175 mg/ml, od najmanje 200 mg/ml, od najmanje 225 mg/ml, od najmanje 250 mg/ml ili od najmanje 275 mg/ml. Alternativno, „visoka koncentracija“ može se odnositi na formulacije koje uključuju koncentraciju aflibercepta od oko 140 mg/ml do oko 160 mg/ml, najmanje oko 140 mg/ml, ali manje od 160 mg/ml, od oko 41 mg/ml do oko 275 mg/ml, od oko 70 mg/ml do oko 75 mg/ml ili od oko 80 mg/ml do oko 250 mg/ml. U nekim aspektima, koncentracija aflibercepta u formulaciji je oko bilo koje od sledećih koncentracija: 80 mg/ml; 81 mg/ml; 82 mg/ml; 83 mg/ml; 84 mg/ml; 85 mg/ml; 86 mg/ml; 87 mg/ml; 88 mg/ml; 89 mg/ml; 90 mg/ml; 91 mg/ml; 92 mg/ml; 93 mg/ml; 94 mg/ml; 95 mg/ml; 96 mg/ml; 97 mg/ml; 98 mg/ml; 99 mg/ml; 100 mg/ml; 101 mg/ml; 102 mg/ml; 103 mg/ml; 104 mg/ml; 105 mg/ml; 106mg/ml; 107 mg/ml; 108 mg/ml; 109 mg/ml; 110 mg/ml; 111 mg/ml; 112 mg/ml; 113 mg/ml; 113.3 mg/ml; 114 mg/ml; 114,1 mg/ml; 114,2 mg/ml; 114,3 mg/ml; 114,4 mg/ml; 114,5 mg/ml; 114,6 mg/ml, 114,7 mg/ml, 114,8 mg/ml; 114,9 mg/ml; 115 mg/ml; 116 mg/ml; 117 mg/ml; 118 mg/ml; 119 mg/ml; 120 mg/ml; 121 mg/ml; 122 mg/ml; 123 mg/ml; 124 mg/ml; 125 mg/ml; 126 mg/ml; 127mg/ml; 128 mg/ml; 129 mg/ml; 130 mg/ml; 131 mg/ml; 132 mg/ml; 133 mg/ml; 133.3 mg/ml; 133.4 mg/ml, 134 mg/ml; 135 mg/ml; 136 mg/ml; 137 mg/ml; 138 mg/ml; 139 mg/ml; 140 mg/ml; 141 mg/ml; 142 mg/ml; 143 mg/ml; 144 mg/ml; 145 mg/ml; 146 mg/ml; 147 mg/ml; 148 mg/ml; 149 mg/ml; 150 mg/ml; 151 mg/ml; 152 mg/ml; 153 mg/ml; 154 mg/ml; 155 mg/ml; 156 mg/ml; 157 mg/ml; 158 mg/ml; 159 mg/ml; 160 mg/ml; 161 mg/ml; 162 mg/ml; 163 mg/ml; 164 mg/ml; 165 mg/ml; 166 mg/ml; 167 mg/ml; 168 mg/ml; 169 mg/ml; 170 mg/ml; 171 mg/ml; 172 mg/ml; 173 mg/ml; 174 mg/ml; 175 mg/ml; 176 mg/ml; 177 mg/ml; 178 mg/ml; 179 mg/ml; 180 mg/ml; 181 mg/ml; 182 mg/ml; 183 mg/ml; 184 mg/ml; 185 mg/ml; 186 mg/ml; 187 mg/ml; 188 mg/ml; 189 mg/ml; 190 mg/ml; 191 mg/ml; 192 mg/ml; 193 mg/ml; 194 mg/ml; 195 mg/ml; 196 mg/ml; 197 mg/ml; 198 mg/ml; 199 mg/ml; 200 mg/ml; 201 mg/ml; 202 mg/ml; 203 mg/ml; 204 mg/ml; 205 mg/ml; 206 mg/ml; 207 mg/ml; 208 mg/ml; 209 mg/ml; 210 mg/ml; 211 mg/ml; 212 mg/ml; 213 mg/ml; 214 mg/ml; 215 mg/ml; 216 mg/ml; 217 mg/ml; 218 mg/ml; 219 mg/ml; 220 mg/ml; 221 mg/ml; 222 mg/ml; 223 mg/ml; 224 mg/ml; 225 mg/ml; 226 mg/ml; 227 mg/ml; 228 mg/ml; 229 mg/ml; 230 mg/ml; 231 mg/ml; 232 mg/ml; 233 mg/ml; 234 mg/ml; 235 mg/ml; 236 mg/ml; 237mg/ml; 238 mg/ml; 239 mg/ml; 240 mg/ml; 241 mg/ml; 242 mg/ml; 243 mg/ml; 244 mg/ml; 245 mg/ml; 246 mg/ml; 247 mg/ml; 248 mg/ml; 249 mg/ml; 250 mg/ml; 251 mg/ml; 252 mg/ml; 253 mg/ml; 254 mg/ml; 255 mg/ml; 256 mg/ml; 257 mg/ml; 258 mg/ml; 259 mg/ml; 260 mg/ml; 261 mg/ml; 262 mg/ml; 263 mg/ml; 264 mg/ml; 265 mg/ml; 266 mg/ml; 267 mg/ml; 268 mg/ml; 269 mg/ml; 270 mg/ml; 271 mg/ml; 272 mg/ml; 273 mg/ml; 274 mg/ml; ili 275 mg/ml. Ovde su razmatrane i druge koncentracije fuzionog proteina VEGF receptora, sve dok koncentracija funkcioniše u skladu sa ovde navedenim primerima izvođenja.
[0156] U primeru izvođenja pronalaska, farmaceutska formulacija za upotrebu prema predmetnom pronalasku je takve koncentracije da sadrži oko 8 mg aflibercepta u oko 100 µl ili manje, oko 75 µl ili manje ili oko 70 µl ili manje, npr., oko 50 µl; 51 µl; 52 µl; 53 µl; 54 µl; 55 µl; 56 µl; 57 µl; 58 µl; 59 µl; 60 µl; 61 µl; 62 µl; 63 µl; 64 µl; 65 µl; 66 µl; 67 µl; 68 µl; 69 µl; 70 µl; 71 µl; 72 µl; 73 µl; 74 µl; 75 µl; 76 µl; 77 µl; 78 µl; 79 µl; 80 µl; 81 µl; 82 µl; 83 µl; 84 µl; 85 µl;86 µl; 87 µl; 88 µl; 89 µl; 90 µl; 91 µl; 92 µl; 93 µl; 94 µl; 95 µl; 96 µl; 97 µl; 98 µl; 99 µl; ili 100 µl.
[0157] Predmetni pronalazak uključuje bilo koju od formulacija za upotrebu ovde navedenih u nastavku pod naslovom „Ilustrativne formulacije“, ali pri čemu je koncentracija aflibercepta zamenjena koncentracijom koja je navedena u ovom odeljku („Fuzioni proteini VEGF receptora i drugi inhibitori VEGF“).
[0159] Puferi
[0161] Puferi za upotrebu ovde se odnose na rastvore koji su otporni na promenu pH vrednosti upotrebom kiselinsko-baznih konjugata. Puferi su sposobni da održavaju pH vrednost u opsegu od oko 5,0 do oko 6,8, a tipičnije, od oko 5,8 do oko 6,5, a najtipičnije, od oko 6,0 do oko 6,5. U nekim slučajevima, pH vrednost formulacije ovog pronalaska je oko 5,0, oko 5,1, oko 5,2, oko 5,3, oko 5,4, oko 5,5, oko 5,6, oko 5,7, oko 5,8, oko 5,9, oko 6,0, oko 6,1, oko 6,2, oko 6,3, oko 6,4, oko 6,5, oko 6,6, oko 6,7 ili oko 6,8. Primeri pufera za uključivanje u formulacije ovde uključuju pufere na bazi histidina, na primer, histidin, histidin hidrohlorid i histidin acetat.
[0162] Puferi za uključivanje u formulacije ovde mogu alternativno biti puferi na bazi fosfata, na primer, natrijum fosfat, puferi na bazi acetata, na primer, natrijum acetat ili sirćetna kiselina, ili mogu biti na bazi citrata, na primer, natrijum citrat ili limunska kiselina. Takođe je poznato da puferi mogu biti mešavina gore navedenih, sve dok pufer funkcioniše tako da puferuje formulacije u gore opisanim pH opsezima. U nekim slučajevima, pufer je od oko 5 mM do oko 25 mM, ili tipičnije, od oko 5 mM do oko 15 mM. Puferi mogu biti oko 5 mM, oko 6 mM, oko 7 mM, oko 8 mM, oko 9 mM, oko 10 mM, oko 11 mM, oko 12 mM, oko 13 mM, oko 14 mM, oko 15 mM, oko 16 mM, oko 17 mM, oko 18 mM, oko 19 mM, oko 20 mM, oko 21 mM, oko 22 mM, oko 23 mM, oko 24 mM ili oko 25 mM.
[0163] U primeru izvođenja pronalaska, pufer na bazi histidina se priprema korišćenjem histidina i histidin monohidrohlorida.
[0165] Surfaktanti
[0167] Surfaktant koji se ovde koristi odnosi se na sastojke koji štite veću koncentraciju aflibercepta od različitih površinskih i međupovršinskih stresova. Kao takvi, surfaktanti se mogu koristiti za ograničavanje ili minimiziranje agregacije aflibercepta i za podsticanje rastvorljivosti proteina. Pokazalo se da su pogodni surfaktanti ovde nejonski i mogu uključivati surfaktante koji imaju polioksietilenski ostatak. Ilustrativni surfaktanti u ovoj kategoriji uključuju: polisorbat 20, polisorbat 80, poloksamer 188, polietilen glikol 3350 i njihove smeše. Surfaktanti u formulacijama mogu biti prisutni u od oko 0,02% do oko 0,1% težine po zapremini (tež./zapr.), a tipičnije, oko 0,02% do oko 0,04% (tež./zapr.). U nekim slučajevima, surfaktant je oko 0,02% (tež./zapr.), oko 0,03% (tež./zapr.), oko 0,04% (tež./zapr.), oko 0,05% (tež./zapr.), oko 0,06% (tež./zapr.), oko 0,07% (tež./zapr.), oko 0,08% (tež./zapr.), oko 0,09% (tež./zapr.) ili oko 0,1% (tež./zapr.).
[0169] Termički stabilizatori
[0171] Termički stabilizatori koji se ovde koriste odnose se na sastojke koji pružaju termičku stabilnost protiv termičke denaturacije aflibercepta, kao i štite od gubitka potencije ili aktivnosti aflibercepta. Pogodni termički stabilizatori uključuju šećere i mogu biti saharoza, trehaloza, sorbitol ili manitol, ili mogu biti aminokiseline, na primer L-prolin, L-arginin (npr., L-arginin monohidrohlorid) ili taurin. Pored toga, termički stabilizatori mogu takođe da uključuju supstituisane akrilamide ili propan sulfonsku kiselinu, ili mogu biti jedinjenja poput glicerola.
[0172] U nekim slučajevima, formulacije ovde uključuju i šećer i taurin, šećer i aminokiselinu, šećer i propan sulfonsku kiselinu, šećer i taurin, glicerol i taurin, glicerol i propan sulfonsku kiselinu, aminokiselinu i taurin ili aminokiselinu i propan sulfonsku kiselinu. Pored toga, formulacije mogu da sadrže šećer, taurin i propan sulfonsku kiselinu, glicerol, taurin i propan sulfonsku kiselinu, kao i L-prolin, taurin i propan sulfonsku kiselinu.
[0173] Ovde opisani primeri izvođenja obično imaju termičke stabilizatore prisutne pojedinačno, svaki nezavisno prisutan u koncentraciji od, ili prisutne u kombinaciji u ukupnoj koncentraciji od, od oko 2% (tež./zapr.) do oko 10% (tež./zapr.) ili 4% (tež./zapr.) do oko 10% (tež./zapr.), ili oko 4% (tež./zapr.) do oko 9% (tež./zapr.), ili oko 5% (tež./zapr.) do oko 8% (tež./zapr.). Termički stabilizatori u formulaciji mogu biti u koncentraciji od oko 2% (tež./zapr.), oko 2,5% (wtež.v), oko 3% (tež./zapr.), oko 4% (tež./zapr.), oko 5% (tež./zapr.), oko 6% (tež./zapr.), oko 7% (tež./zapr.), oko 8% (tež./zapr.), oko 9% (tež./zapr.), oko 10% (tež./zapr.) ili oko 20% (tež./zapr.).
[0174] Što se tiče taurina i propan sulfonske kiseline, u primeru izvođenja pronalaska, ovi termički stabilizatori mogu biti prisutni u formulacijama u količini od oko 25 mM do oko 100 mM, a tipičnije od oko 50 mM do oko 75 mM (u poređenju sa drugim termičkim stabilizatorima).
[0176] Sredstva za smanjenje viskoznosti
[0178] Sredstva za smanjenje viskoznosti se obično koriste za smanjenje ili sprečavanje agregacije proteina. Sredstva za smanjenje viskoznosti koja se ovde uključuju obuhvataju: natrijum hlorid, magnezijum hlorid, D- ili L-arginin (npr., L-arginin monohidrohlorid), lizin ili njihove smeše. Kada su ovde prisutna, sredstva za smanjenje viskoznosti mogu biti prisutna u količini od oko 10 mM do oko 100 mM, a tipičnije od oko 30 mM do oko 75 mM, a još tipičnije od oko 40 mM do oko 70 mM. U nekim slučajevima, sredstvo za smanjenje viskoznosti je prisutno u količini od oko 10 mM, oko 15 mM, oko 20 mM, oko 25 mM, oko 30 mM, oko 35 mM, oko 40 mM, oko 45 mM, oko 50 mM, oko 55 mM, oko 60 mM, oko 65 mM, oko 70 mM, oko 75 mM, oko 80 mM, oko 85 mM, oko 90 mM, oko 95 mM ili oko 100 mM.
[0180] Viskozitet formulacije
[0182] Formulacije u skladu sa ovde navedenim primerima izvođenja takođe mogu imati farmaceutski prihvatljiv viskozitet za okularnu primenu, na primer, intravitrealnu injekciju.
[0183] Viskozitet se generalno odnosi na meru otpora tečnosti koja se deformiše bilo smicajnim naponom ili zateznim naponom (tipično se meri tehnikama poznatim u struci, na primer viskozimetrom ili reometrom). Tipični viskoziteti formulacija u skladu sa ovde navedenim primerima izvođenja su od oko 0,005 Pa·s (oko 5,0 cP (centipoaz)) do oko 0,015 Pa·s (oko 15 cP), od oko 0,011 Pa·s (oko 11 cP) do oko 0,014 Pa·s (oko 14 cP), od oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP) do oko 0,001 Pa·s (oko 15 cP) ili od oko 0,011 Pa·s (oko 11 cP) do oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP). Kao takav, viskozitet formulacije ovde može biti oko 0,050 Pa·s (oko 5,0 cP), oko 0,006 Pa·s (oko 6,0 cP), oko 0,071 Pa·s (oko 7,1 cP), oko 0,072 Pa·s (oko 7,2 cP), oko 0,073 Pa·s (oko 7,3 cP), oko 0,074 Pa·s (oko 7,4 cP), oko 0,075 Pa·s (oko 7,5 cP), oko 0,076 Pa·s (oko 7,6 cP), oko 0,010 Pa·s (oko 10 cP), oko 0,015 Pa·s (oko 10,5 cP), oko 0,011 Pa·s (oko 11,0 cP), oko 0,0115 Pa·s (oko 11,5 cP), oko 0,012 Pa·s (oko 12,0 cP), oko 0,0125 Pa·s (oko 12,5 cP), oko 0,013 Pa·s (oko 13,0 cP), oko 0,0135 Pa·s (oko 13,5 cP), oko 0,014 Pa·s (oko 14,0 cP), oko 0,0145 Pa·s (oko 14,5 cP) ili oko 0,015 Pa·s (oko 15,0 cP) (npr., kada se meri na 20°C).
[0184] Različiti primeri izvođenja ovde ne zahtevaju uključivanje neorganske soli ili drugog sredstva za smanjenje viskoznosti da bi se održale ove veoma korisne viskoznosti. Tipično, rastvori proteina visoke koncentracije zahtevaju sredstva za smanjenje viskoznosti kako bi se izbegla agregacija proteina i veći viskozitet, što otežava intravitrealnu injekciju formulacija i smanjuje potenciju aflibercepta. Kao takvi, primeri izvođenja ovde uključuju formulacije koje suštinski nisu imale, ili nisu imale dodat, natrijum hlorid (NaCl), magnezijum hlorid (MgCl<2>), D- ili L-arginin hidrohlorid, lizin ili drugo sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0186] Osmolalnost formulacije
[0188] Osmolalnost je kritična osobina za injekcione formulacije. Poželjno je da proizvodi odgovaraju fiziološkim osmotskim uslovima. Pored toga, osmolalnost pruža potvrdu rastvorljivog sadržaja u rastvoru. U primeru izvođenja pronalaska, osmolalnost formulacije za upotrebu ovog pronalaska je manja ili jednaka oko 506 mmol/kg ili od oko 250 do oko 506 mmol/kg. npr., oko 250, 260, 270, 280, 290, 299, 300, 310, 314, 315, 316, 324, 343, 346, 349, 369, 384, 403, 426, 430 ili 506 mmol/kg. U primeru izvođenja pronalaska, osmolalnost je niža od oko 250 mmol/kg.
[0190] Čistoća i stabilnost formulacija
[0191] Formulacije koje sadrže aflibercept visoke koncentracije, opisane ovde, stabilne su tokom proizvodnje i skladištenja. Termin „stabilan“ ovde se odnosi na formulacije koje sadrže aflibercept i koje zadržavaju i hemijsku i fizičku stabilnost tokom perioda proizvodnje i skladištenja formulacije, npr., koje održavaju integritet i imaju minimalnu degradaciju, denaturaciju ili rasklapanje. Stabilnost aflibercepta može se odrediti korišćenjem analitičkih tehnika dostupnih u struci na različitim temperaturama i tokom različitih vremenskih perioda. Konkretno, hemijska stabilnost (potencija) aflibercepta može se odrediti korišćenjem različitih bioloških testova (na primer, ćelijska linija BAF/3 VEGFR1/EPOR koja se koristi za određivanje vezivanja VEGF<165>za fuzione proteine VEGF receptora), i fizička stabilnost, analizom hromatografije isključivanjem po veličini (SE), UPLC (ultra-performansna tečna hromatografija) hromatografijom isključivanjem po veličini (SE), vizuelnim izgledom, optičkom gustinom (OD), pH vrednostima, formiranjem varijanti naelektrisanja i brzinom formiranja vrsta velike molekulske težine (HMW). Stabilan fuzioni protein VEGF receptora je onaj koji pokazuje ograničene promene u svojoj OD, pH vrednosti, formiranju varijanti naelektrisanja i formiranju HMW vrsta.
[0192] Vrste „visoke molekulske težine“ (HMW), kako se ovde koriste, u vezi sa formulacijom koja sadrži dati VEGF trap (npr., aflibercept), odnosi se na bilo koju vrstu polipeptida ili polipeptidnog kompleksa u formulaciji koja eluira iz kolone za isključivanje po veličini (npr., SE-UPLC) ispred (npr., sa većom molekulskom težinom od) polipeptida VEGF trap i/ili njegovog homodimera. Procenat HMW vrsta odnosi se na procenat takvih vrsta u odnosu na ukupnu količinu polipeptida u formulaciji, npr., pomoću SE-UPLC analize.
[0193] U primeru izvođenja pronalaska, kao što je detaljnije objašnjeno u dole navedenim primerima, stabilne formulacije za upotrebu predmetnog pronalaska pokazuju značajnu potenciju fuzionog proteina VEGF receptora i fizičku stabilnost u periodu do 12 meseci, do 24 meseca i/ili do 36 meseci kada se čuvaju na temperaturi od oko 2°C do oko 8°C.
[0194] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija predmetnog pronalaska za upotrebu pronalaska je ona koja:
[0196] • Nakon oko 28 dana na oko 37°C ima oko 3, 5, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 20, 30, 35 ili 37% (ili 10-15% ili 15-20% ili 10-20%) povećanja u vrstama visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0197] • Nakon oko 28 dana na oko 37°C ima oko 5, 6, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 ili 22% (ili 5-20% ili 5-10% ili 10-15% ili 15-20%) smanjenja u glavnim vrstama (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0198] • Nakon oko 28 dana na oko 37°C, ima oko 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86 ili 87% (ili oko 80-85%) ili više proteina kao glavne vrste (npr., mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0199] • Nakon oko 28 dana na oko 37°C ima oko 1 ili 1,5 ili 2% (ili 1-2%) povećanja u vrstama niske molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0200] • Nakon oko jednog meseca na oko 37°C, ima oko 16% povećanja vrsta visoke molekulske težine; i/ili oko 17% smanjenje glavnih vrsta i/ili oko 0,5% ili <1% povećanja vrsta male molekulske težine; i/ili nakon oko dva meseca na oko 5°C, ima 1% smanjenja glavnih vrsta, i/ili oko 1% povećanja vrsta visoke molekulske težine i/ili nema značajnih ili detektabilnih količina vrsta niske molekulske težine (LMW); i/ili nakon oko 2 meseca na oko 5°C, ima oko 97% glavnih vrsta (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0201] • Nakon oko 12 meseci na temperaturi od oko 2-8°C, ima oko 3-3,5% povećanja vrsta visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0202] • Nakon oko 12 meseci na oko 2-8°C ima manje od oko 1% ili 1, 2, 3 ili 4% (npr., 1-4% ili 3-4%) smanjenja glavnih vrsta (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC) • Nakon oko 12 meseci na temperaturi od oko 2-8°C, ima oko 94 ili 95% ili više proteina kao glavne vrste (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0203] • Nakon oko 3 meseca na oko 2-8°C ima oko 1 ili 2% povećanja vrsta visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0204] • Nakon oko 6 meseci na oko 2-8°C ima oko <1, 1 ili 2% povećanja vrsta visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0205] • Posle oko 5<1>/<2>ili 6 meseci na oko 5°C ima oko 2,5, 3,0 ili 3,5 (ili oko 2,5-3,5%) ukupnih vrsta visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC).
[0206] • Nakon oko 6 meseci na oko 2-8°C ima manje od oko 1% ili 1 ili 2% (ili oko 0,5-2% ili 1-2%) smanjenja glavnih vrsta (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0207] • Nakon oko 6 meseci na oko 2-8°C, ima oko 96 ili 97 ili 98% (ili 96-98%) ili više proteina kao glavne vrste (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0208] • Nakon oko 24 meseca ili 36 meseci na oko 2-8°C, imalo je manje od oko 5 ili 6 ili 7% (npr., oko 1,5, 2, 3, 4 ili 5%) (ili 1,5-5% ili 1,5-2,5%) povećanja vrsta visoke molekulske težine; i/ili ima oko 3,0, 3,25, 3,5, 4,0, 4,5 ili 5% ukupnih vrsta visoke molekulske težine; i/ili smanjenje od oko 2 ili 3% (ili 2-3%) glavnih vrsta; i/ili ukupna količina glavnih vrsta od oko 95 ili 96% ili više (ili 95-96%) (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0209] • Nakon oko 1 meseca na oko 37°C, ima oko 97, 98, 99 ili 100% (ili 97-100%) aflibercepta u formulaciji koja se može izolovati pomoću RP-HPLC.
[0210] • Odmah nakon proizvodnje i prečišćavanja, ima manje od oko 1,5, 2, 2,5, 3,0 ili 3,5% vrsta visoke molekulske težine (npr., kao što je mereno pomoću SE-UPLC ili SEC)
[0211] • Nakon oko 6 meseci na oko 37°C, ima najmanje oko 70% ili 75% (npr., 70-75%) aflibercepta kao glavne vrste/glavnog pika (npr., kao što je mereno kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem (clEF) ili snimljenim kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem) (nekisele i nebazne vrste)
[0212] • Nakon oko 36 meseci na oko 2-8°C, ima oko 1 ili 2% (ili 1-2%) povećanja kiselih vrsta (npr., kao što je mereno kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem (clEF) ili snimljenim kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem)
[0213] • Nakon oko 36 meseci na oko 2-8°C, ima oko 1% ili manje smanjenja u glavnim vrstama/glavnom piku (npr., kao što je mereno kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem (clEF) ili snimljenim kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem)
[0214] • Nakon oko 36 meseci na oko 2-8°C, ima oko 78-79% glavnih vrsta/glavnog pika (npr., kao što je mereno kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem (clEF) ili snimljenim kapilarnim izoelektričnim fokusiranjem)
[0215] i/ili
[0216] • Kada se primenjuje intravitrealno kod sisara, kao što je čovek, zec ili miš (npr., sa angiogenim poremećajem oka kao što je vlažna AMD), ne izaziva nikakve neželjene događaje koji se klinički razlikuju od onih primećenih kod EYLEA (npr., kada se EYLEA dozira intravitrealno u dozi od 0,5 ili 2,0 mg); ili ne izaziva klinički značajnu upalu u oku, produženo povećanje intraokularnog pritiska (IOP), produženo povećanje ili smanjenje krvnog pritiska i/ili odvajanje mrežnjače.
[0217] Dalje, u jednom primeru izvođenja pronalaska, fuzioni proteini VEGF receptora visoke koncentracije su stabilni jer pokazuju malo ili nimalo formiranja kiselih varijanti naelektrisanja tokom proizvodnje i skladištenja, na primer, malo ili nimalo formiranja varijanti naelektrisanja kako je testirano, na primer, pomoću imadžing kapilarnog izoelektričnog fokusiranja.
[0218] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu ovog pronalaska pokazuje manje od ili jednako oko 8% vrsta niske molekulske težine (LMW).
[0219] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu ovog pronalaska ima manje od oko 0,2, 0,4 ili 0,5 EU (jedinica endotoksina)/ml endotoksina;
[0220] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu ovog pronalaska je u suštini bez čestica ili čestica veličine oko 1, 2, 5, 10, 25 ili 50 mikrometara (ili više).
[0221] U primeru izvođenja pronalaska, kada se formulacija za upotrebu ovog pronalaska analizira neredukovanom CE-SDS (SDS kapilarnom gel elektroforezom), najmanje 97% ukupne površine pika je glavni pik.
[0222] U primeru izvođenja pronalaska, kada se formulacija za upotrebu ovog pronalaska analizira pomoću UPLC sa isključivanjem po veličini (SE-UPLC), najmanje 93, 94 ili 95% ukupne površine pika je glavni pik i manje od ili jednako 3,5, 4, 5 ili 6% je agregat.
[0223] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija za upotrebu ovog pronalaska je na oko 2°C, 3°C, 4°C, 5°C, 6°C, 7°C ili 8°C, 2-8°C (npr., prosečna temperatura od 5°C), 23°C, 25°C, 30°C ili 37°C.
[0225] Ilustrativne formulacije
[0227] Ilustrativne formulacije koje sadrže fuzioni protein VEGF receptora visoke koncentracije uključuju sledeće, pri čemu one koje sadrže aflibercept mogu biti formulacije za upotrebu prema ovom pronalasku:
[0229] Formulacija A: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija B: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija C: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija D: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 6,2.
[0230] Formulacija E: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija F: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija G: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0231] Formulacija H: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0232] Formulacija I: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0233] Formulacija J: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0234] Formulacija K: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0235] Formulacija L: 80 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0236] Formulacija M: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0237] Formulacija N: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija O: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija P: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 6,2. Formulacija Q: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija R: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija S: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0238] Formulacija T: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2 (npr.6,2), i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0239] Formulacija U: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0240] Formulacija V: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0241] Formulacija W: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0242] Formulacija X: 150 mg/ml aflibercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0243] Formulacija Y: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija Z: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija AA: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija BB: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 6,2. Formulacija CC: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija DD: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2. Formulacija EE: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0244] Formulacija FF: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0245] Formulacija GG: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0246] Formulacija HH: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0247] Formulacija II: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0248] Formulacija JJ: 80 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0249] Formulacija KK: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0250] Formulacija LL: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0251] Formulacija MM: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0252] Formulacija NN: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 6,2. Formulacija OO: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0253] Formulacija PP: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80 i 40 mM natrijum hlorida, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2.
[0254] Formulacija QQ: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0255] Formulacija RR: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0256] Formulacija SS: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0257] Formulacija TT: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi histidina, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0258] Formulacija UU: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0259] Formulacija VV: 150 mg/ml konbercepta, 10 mM pufera na bazi citrata, 8% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 80, sa pH vrednošću od 5,8 do 6,2, i, opciono, posebno isključujući sredstvo za smanjenje viskoznosti.
[0260] Formulacija WW: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM taurina, sa pH vrednošću od 5,8.
[0261] Formulacija XX: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 4% (tež./zapr.) prolina, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM arginin hidrohlorida, sa pH vrednošću od 5,8.
[0262] Formulacija YY: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 2,5% (tež./zapr.) saharoze, 2,0% (tež./zapr.) prolina, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM taurina, sa pH vrednošću od 5,8.
[0263] Formulacija ZZ: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10 mM pufera na bazi histidina, 2,5% (tež./zapr.) saharoze, 2,0% (tež./zapr.) prolina, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM arginin hidrohlorida, sa pH vrednošću od 5,8.
[0264] Formulacija AAA: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM PSA, sa pH vrednošću od 5,8.
[0265] Formulacija KBB: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 2,5% (tež./zapr.) saharoze, 2,0% (tež./zapr.) prolina, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM PSA, sa pH vrednošću od 5,8.
[0266] Formulacija CCC: 80, 100, 120 ili 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM arginin hidrohlorida, sa pH vrednošću od 5,8.
[0267] Formulacija DDD: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10 mM pufera na bazi histidina, 4% (tež./zapr.) prolina, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM PSA, sa pH vrednošću od 5,8.
[0268] Formulacija EEE: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i, opciono, bez termičkog stabilizatora, sa pH vrednošću od 5,8.
[0269] Formulacija FFF: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10 mM natrijum fosfata, 5% (tež./zapr.) saharoze i 0,03% polisorbata 20 sa pH vrednošću od 6,2. Formulacija GGG: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum sulfata Formulacija HHH: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum tiocijanata Formulacija III: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze, 0,03% polisorbata 20; 40 mM natrijum citrata Formulacija JJJ: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze, 0,03% polisorbate 20; 50 mM glicina
[0270] Formulacija KKK: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze, 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum hlorida Formulacija LLL: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM lizina
[0271] Formulacija MMM: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum aspartata Formulacija NNN: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum glutamata Formulacija OOO: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum citrata; 50 mM arginin hidrohlorida
[0272] Formulacija PPP: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM glicina; 50 mM arginin hidrohlorida
[0273] Formulacija QQQ: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum aspartata; 50 mM arginin hidrohlorida
[0274] Formulacija RRR: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM histidina, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 50 mM natrijum glutamata; 50 mM arginin hidrohlorida
[0275] Formulacija SSS: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM His, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 10 mM L-arginin hidrohlorida Formulacija TTT: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta); 20 mM His, pH 5,8; 5% saharoze; 0,03% polisorbata 20; 100 mM L-arginin hidrohlorida Formulacija UUU: 30 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0276] Formulacija VVV: 30 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0277] Formulacija WWW: 60 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0278] Formulacija XXX: 60 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0279] Formulacija YYY: 120 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0280] Formulacija ZZZ: 120 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, pH 6.2
[0281] Formulacija AAAA: 120 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, 50 mM NaCl, pH 6.2
[0282] Formulacija BBBB: 120 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20% saharoze, 10 mM fosfata, 0,03% polisorbata 20, 50 mM NaCl, pH 6.2
[0283] Formulacija CCCC: 140 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 10 mM natrijum fosfata, 5% saharoze, 40 mM natrijum hlorida, 0,03% PS20, pH 6.2 Formulacija DDDD: 80 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta), 20 mM pufera na bazi histidina, 5% (tež./zapr.) saharoze, 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 i 50 mM L-arginin monohidrohlorida, sa pH vrednošću od 5,8.
[0284] Formulacija EEEE: 120,0 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta) (npr., ± 12 mg/ml), 20 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 2 mM), 5 % (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03 % (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1).
[0285] Formulacija FFFF: 113,3 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta) (npr., 102-125 mg/ml), 20 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 2 mM), 5 % (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03 % (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1).
[0286] Formulacija GGGG: 114,3 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta) (npr., 103-126 mg/ml), 10 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 1 mM), 5 % (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03 % (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1).
[0287] Formulacija HHHH: 100,0 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta) (npr., ± 10 mg/ml), 20 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 2 mM), 5 % (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03 % (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1).
[0288] Formulacija IIII: 133,3 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (npr., aflibercepta) (npr., ± 13 mg/ml), 20 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 2 mM), 5 % (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03 % (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1).
[0289] Formulacija JJJJ: 150 mg/ml aflibercepta (npr., aflibercept) (npr., ± 15 mg/ml), 10 mM natrijum fosfata, 8% (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,8%), 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%) i 50 mM L-arginin hidrohlorida, pH 6,2 (npr., 6.0-6.4 ili 5,9-6,5).
[0290] Formulacija KKKK: 114,3 mg/ml VEGF receptorskog fuzionog proteina (npr., aflibercept) (npr., ± 14 mg/ml), 20 mM pufera na bazi histidina (npr., ± 2 mM), 5% (tež./zapr.) saharoze (npr., ± 0,5%), 0,03% (tež./zapr.) polisorbata 20 (npr., 0,02-0,04%), i 50 mM L-arginin monohidrohlorida (npr., ± 5 mM), sa pH vrednošću od 5,8 (npr., 5.6-6.0 ili 5.5-6.1);
[0291] ili bilo koja formulacija koja je ovde navedena.
[0293] U primeru izvođenja pronalaska, koncentracija bilo kog sastojka formulacije (npr., svi sastojci) navedeni u prethodnom tekstu (npr., bilo koja od formulacija A-KKKK) ili koja je ovde razmatrana je ± oko 3%, 5% ili oko 10% od posebno pomenute koncentracije.
[0295] Postupci proizvodnje
[0297] Takođe su ovde otkriveni postupci proizvodnje farmaceutske formulacije koja uključuje fuzioni protein VEGF receptora (npr., bilo koja od formulacija A-KKKK kako je ovde navedena koja sadrži aflibercept) koja sadrži kombinovanje komponenti formulacije u jednu kompoziciju i, opciono, unošenje formulacije u posudu ili uređaj npr., bočicu ili uređaj za isporuku, npr., napunjeni špric. Formulacije, bočice ili uređaji koji su proizvod takvih postupaka mogu biti za upotrebu u ovom pronalasku tamo gde sadrže aflibercept.
[0298] U jednom slučaju, postupak proizvodnje farmaceutske formulacije koja sadrži fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu ovog pronalaska (npr., bilo koja od formulacija A-KKKK kako je ovde navedena koja sadrži aflibercept) sadrži korake kultivacije ćelije domaćina (npr., ćelija jajnika kineskog hrčka) koji sadrži jedan ili više polinukleotida koji kodiraju aflibercept u medijumu za kultivaciju i pod uslovima u kojima se protein eksprimira; i prečišćavanje proteina iz ćelije domaćina i/ili medijuma za kultivaciju i kombinovanje dela proteina sa ekscipijensima farmaceutske formulacije kao što je ovde navedena. Ponovo, formulacije, bočice ili uređaji koji su proizvod takvih postupaka mogu biti za upotrebu u ovom pronalasku.
[0299] U jednom slučaju, određuje se količina aflibercepta potrebna u formulaciji da bi se postigla visoka koncentracija i za njenu krajnju upotrebu. Ista odluka se vrši u vezi sa količinom i vrstom pufera, količinom i vrstom surfaktanta, količinom i vrstom termičkog stabilizatora i uključivanjem, ili specifičnim isključivanjem, sredstva za smanjenje viskoznosti. Ove komponente se kombinuju i mešaju, vodeći računa da je pH formulacije na željenoj vrednosti, npr., između oko 5,0 i oko 6,8 (npr., 5.8), i/ili da je viskoznost na željenoj vrednosti, npr., oko 0,006 Pa·s (6,0 cP), 0,0073 Pa·s (7,3 cPa), 0,0115 Pa·s (11,5 cP) ili 0,012 Pa·s (12,0 cP) na 20°C. U primeru izvođenja pronalaska, formulacije koje sadrže aflibercept visoke koncentracije mogu se sterilisati i čuvati u stabilnom stanju, npr., do 24 ili 36 meseci na 2 °C do 8 °C (npr., 5°C).
[0300] Videti, npr., Hardman, et al. (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, N.Y.; Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams, and Wilkins, New York, N.Y.; Avis, et al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Marcel Dekker, NY; Weiner and Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity and Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y.
[0302] Angiogeni poremećaji oka i kancer
[0304] [0089] Farmaceutske formulacije za upotrebu ovog pronalaska sadrže aflibercept (npr., bilo koju od farmaceutskih formulacija A-KKKK koje sadrže aflibercept) i koje su obezbeđene za upotrebu u lečenju ili prevenciji bilo kog angiogenog poremećaja oka primenom terapeutski efikasne količine aflibercepta u formulaciji na subjekta kome je to potrebno, npr., intravitrealnom injekcijom. Angiogeni poremećaji oka ovde se odnose na bilo koju bolest oka koja je uzrokovana ili povezana sa rastom ili proliferacijom krvnih sudova i/ili curenjem iz krvnih sudova. Neograničavajući primeri angiogenih poremećaja oka koji se mogu lečiti ili sprečiti korišćenjem ovde datih formulacija i postupaka, uključuju:
[0306] • makularnu degeneraciju (vlažnu) povezanu sa starenjem,
[0307] • makularni edem,
[0308] • makularni edem nakon okluzije retinalne vene,
[0309] • okluziju retinalne vene (RVO),
[0310] • okluziju centralne retinalne vene (CRVO),
[0311] • okluziju grana retinalne vene (BRVO),
[0312] • dijabetički makularni edem (DME),
[0313] • horoidalnu neovaskularizaciju (CNV),
[0314] • neovaskularizaciju dužice,
[0315] • neovaskularni glaukom,
[0316] • postoperativnu fibrozu kod glaukoma,
[0317] • proliferativnu vitreoretinopatiju (PVR),
[0318] • neovaskularizaciju optičkog diska,
[0319] • neovaskularizaciju rožnjače,
[0320] • neovaskularizaciju mrežnjače,
[0321] • neovaskularizaciju staklastog tkiva,
[0322] • panus,
[0323] • pterigijum,
[0324] • vaskularnu retinopatiju,
[0325] • dijabetičke retinopatije (npr., neproliferativnu dijabetičku retinopatiju (npr., okarakterisanu nivoom skale težine dijabetičke retinopatije (DRSS) od oko 47 ili 53) ili proliferativnu dijabetičku retinopatiju; npr., kod subjekta koji ne pati od DME) i
[0326] • Dijabetičku retinopatiju kod pacijenta koji ima dijabetički makularni edem (DME).
[0328] [0090] Takođe su otkrivene farmaceutske formulacije koje sadrže aflibercept (npr., bilo koja od farmaceutskih formulacija A-KKKK koje sadrže aflibercept) za upotrebu u lečenju ili prevenciji bilo kog kancera primenom terapeutski efikasne količine aflibercepta u formulaciji na subjektu kome je to potrebno, npr., intramuskularnom, intratumoralnom, potkožnom ili intravenskom injekcijom. Kanceri uključuju one čiji rast, proliferacija, preživljavanje i/ili metastaze zavise, do određene mere, od angiogeneze. U jednom slučaju, kancer je kolorektalni kancer, kancer pluća, kancer kože, kancer dojke, kancer mozga, kancer želuca, kancer bubrega, kancer prostate, kancer jetre ili kancer pankreasa.
[0329] Dakle, ovaj pronalazak pruža fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno, pri čemu navedeni tretman sadrži primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg ± 0,08 mg navedenog fuzionog proteina VEGF receptora u oko subjekta, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara. Lečenje angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno sadrži primenu oko 8 mg aflibercepta, npr., oko 8,0, 8,1 mg, npr., u farmaceutskoj formulaciji kako je ovde opisana, intraokularno, npr., u staklasto telo oka subjekta. U primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema ovom pronalasku se primenjuje u oba oka. U primeru izvođenja pronalaska, oko 8 mg aflibercepta se primenjuje oko svake 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 7 nedelja, 8 nedelja, 9 nedelja, 10 nedelja, 11 nedelja, 12 nedelja, 13 nedelja, 14 nedelja, 15 nedelja, 16 nedelja, 17 nedelja, 18 nedelja, 19 nedelja, 20 nedelja, 21 nedelja, 22 nedelje, 23 nedelje ili 24 nedelje. U primeru izvođenja pronalaska, takav tretman ili prevencija se sprovode u odsustvu značajnog povećanja krvnog pritiska (sistolnog i/ili dijastolnog) i/ili razvoja hipertenzije (npr., stepen 1, stepen 2 ili stepen 3) i/ili abnormalno visokog intraokularnog pritiska kod subjekta. U primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora je namenjen za upotrebu u postupku koji uključuje korak, nakon navedene primene, praćenja subjekta zbog značajnog povećanja krvnog pritiska (sistolnog i/ili dijastolnog) i/ili razvoja hipertenzije (npr., stepen 1, stepen 2 ili stepen 3) i/ili abnormalno visokog intraokularnog pritiska.
[0331] Načini primene
[0333] Farmaceutske formulacije ili upotreba ovog pronalaska koje uključuju aflibercept mogu se primenjivati u skladu sa poznatim medicinski odobrenim sistemima za isporuku. Formulacije za upotrebu ovog pronalaska se primenjuju na pacijenta intraokularnom injekcijom, kao što je intravitrealna injekcija. Takođe su opisane okularna, intrahoroidalna i subkonjunktivalna injekcija. Takođe su opisani topikalni putevi primene, npr., kapi za oči, gelovi za oči, masti za oči i slično. Drugi mogući putevi primene uključuju intradermalni, intramuskularni, intraperitonealni, intravenski, potkožni, intranazalni, epiduralni i oralni.
[0334] U primeru izvođenja pronalaska, fuzioni protein VEGF receptora je za upotrebu pri čemu intravitrealna injekcija farmaceutske formulacije ovog pronalaska uključuje korak probijanja oka špricem i iglom (npr., igla za injekcije kalibra 30) koja sadrži formulaciju i injektira formulaciju (npr., manje ili jednako oko 100 mikrolitara; oko 40, 50, 55, 56, 57, 57,1, 58, 60, 70 ili 75 mikrolitara) u staklasto telo oka (npr., sa dovoljnom zapreminom da isporuči oko 8 mg aflibercepta, npr., oko 8,0 ili 8,1 mg aflibercepta). Opciono, postupak uključuje korake primene lokalnog anestetika (npr., proparakain, lidokain ili tetrakain), antibiotika (npr., fluorokinoloni), antiseptika (npr., povidon-jod) i/ili sredstva za širenje zenica u oko koje se injektira. U primeru izvođenja pronalaska, sterilno polje oko oka u koje se injektira se uspostavlja pre ubrizgavanja. U primeru izvođenja pronalaska, nakon intravitrealne injekcije, subjekt se prati zbog povećanja intraokularnog pritiska i/ili krvnog pritiska. U primeru izvođenja pronalaska, u drugo oko se takođe injektira istim postupkom.
[0336] Količine fuzionog proteina VEGF receptora koje treba primeniti
[0338] U ovom pronalasku, obezbeđen je fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno, pri čemu navedeni tretman sadrži primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg navedenog fuzionog proteina VEGF receptora u oko subjekta, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara.
[0339] Svaka doza fuzionog proteina VEGF receptora visoke koncentracije koja se primenjuje na subjekta tokom tretmana može da sadrži istu ili suštinski istu količinu fuzionog proteina. Alternativno, količina bilo koje doze može biti različita ili promenljiva tokom tretmana.
[0340] [0096] Efikasna ili terapeutski efikasna količina fuzionog proteina VEGF receptora za lečenje ili sprečavanje angiogenog poremećaja oka odnosi se na količinu fuzionog proteina VEGF receptora dovoljnu da izazove regresiju, stabilizaciju ili eliminaciju angiogenog poremećaja oka, npr., regresijom, stabilizacijom ili eliminisanjem jednog ili više simptoma ili indikacija angiogenog poremećaja oka u bilo kom klinički merljivom stepenu, npr., u vezi sa angiogenim poremećajem oka, izazivanjem smanjenja ili održavanjem rezultata težine dijabetičke retinopatije (DRSS), poboljšanjem ili održavanjem vida (npr., u najboljoj korigovanoj oštrini vida npr., mereno povećanjem ETDRS slova), povećanjem ili održavanjem vidnog polja i/ili smanjenjem ili održavanjem centralne mrežnjače. Efikasna ili terapeutski efikasna količina VEGF receptorskog fuzionog proteina za lečenje ili sprečavanje angiogenog poremećaja oka je oko 8 mg, npr.,7.9 mg; 8,0 mg ili 8,1 mg. Ova doza se može primenjivati, na primer, svake 2 nedelje.
[0341] U ovom pronalasku, fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, je namenjen za upotrebu pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u zapremini dovoljnoj da isporuči željenu dozu fuzionog proteina, posebno u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara. U primeru izvođenja pronalaska, isporučena zapremina (za lečenje ili sprečavanje angiogenog poremećaja oka, npr., intravitrealnom injekcijom) je manja ili jednaka oko 100 mikrolitara (npr., oko bilo koje od sledećih zapremina: 25 mikrolitara; 26 mikrolitara; 27 mikrolitara; 28 mikrolitara; 29 mikrolitara; 30 mikrolitara; 31 mikrolitar; 32 mikrolitra; 33 mikrolitra; 34 mikrolitara; 35 mikrolitara; 36 mikrolitara; 37 mikrolitara; 38 mikrolitara; 39 mikrolitara; 40 mikrolitara; 41 mikrolitar; 42 mikrolitra; 43 mikrolitra; 44 mikrolitara; 45 mikrolitara; 46 mikrolitara; 47 mikrolitara; 48 mikrolitara; 49 mikrolitara; 50 mikrolitara; 51 mikrolitar; 52 mikrolitra; 53 mikrolitra; 54 mikrolitra; 55 mikrolitara; 56 mikrolitara; 57 mikrolitara; 58 mikrolitara; 59 mikrolitara; 60 mikrolitara; 61 mikrolitar; 62 mikrolitra; 63 mikrolitra; 64 mikrolitara; 65 mikrolitara; 66 mikrolitara; 67 mikrolitara; 68 mikrolitara; 69 mikrolitara; 70 mikrolitara; 71 mikrolitar; 72 mikrolitra; 73 mikrolitra; 74 mikrolitara; 75 mikrolitara; 76 mikrolitara; 77 mikrolitara; 78 mikrolitara; 79 mikrolitara; 80 mikrolitara; 81 mikrolitar; 82 mikrolitra; 83 mikrolitra; 84 mikrolitara; 85 mikrolitara; 86 mikrolitara; 87 mikrolitara; 88 mikrolitara; 89 mikrolitara; 90 mikrolitara; 91 mikrolitar; 92 mikrolitra; 93 mikrolitra; 94 mikrolitara; 95 mikrolitara; 96 mikrolitara; 97 mikrolitara; 98 mikrolitara ili 99 mikrolitara).
[0342] U primeru izvođenja pronalaska, formulacija je namenjena za upotrebu pri čemu se primenjuje intraokularnom injekcijom (za lečenje ili sprečavanje angiogenog poremećaja oka, npr., intravitrealnom injekcijom) u zapremini koja je oko 60 mikrolitara ili manje, oko 70 mikrolitara ili manje ili oko 75 mikrolitara ili manje ili oko 100 mikrolitara ili manje. Na primer, u primeru izvođenja pronalaska, oko 8,0, 8,1 ili 8,0-8,1 aflibercepta se primenjuje u oko 50, 60, 70 ili 75 mikrolitara.
[0343] Takođe su otkriveni postupci za isporuku 0,5 ili 2 mg aflibercepta (za lečenje ili sprečavanje angiogenog poremećaja oka, npr., intravitrealnom injekcijom) u farmaceutskoj formulaciji opisanoj ovde u maloj zapremini, kao što je manje od 50 µl (npr., oko 1, 5, 10, 17, 17,5, 18, 18,5, 20, 30, 40 ili 45 µl).
[0344] [0100] Predmetni pronalazak takođe uključuje kompoziciju za upotrebu prema ovom pronalasku koja uključuje ili se sastoji ili se u suštini sastoji od „jedne zapremine doze“ farmaceutske formulacije ovog pronalaska, tj., zapremine koja sadrži jednu dozu od oko 8 mg aflibercepta u farmaceutskoj formulaciji ovog pronalaska (npr., oko 50 µl ili 60 µl, 70 µl ili 75 µl ili bilo koja zapremina koja sadrži oko 8 mg aflibercepta). Kao što je objašnjeno u nastavku, takođe je obezbeđen kontejner (npr., bočica ili uređaj za injekciju) koja sadrži zapreminu jedne doze, opciono uključujući i malu zapreminu formulacije za prepunjavanje, za upotrebu ovog pronalaska.
[0346] Kontejneri i uređaji za injekciju
[0348] Formulacije aflibercepta visoke koncentracije za upotrebu u skladu sa ovde navedenim primerima izvođenja (npr., bilo koja od formulacija A-KKKK (koja sadrži aflibercept) mogu biti prethodno upakovane ili prethodno napunjene u različite korisne kontejnere i uređaje za injekcije. Stoga su obezbeđeni kontejneri i uređaji za injekcije koji sadrže takve formulacije za upotrebu ovog pronalaska. U ovde datom primeru izvođenja, kontejner je bočica koja može biti sterilna. U sledećem ovde datom primeru izvođenja, kontejner je epruveta koja može biti sterilna. U primeru izvođenja pronalaska, uređaj za injekcije (koji može biti sterilan) je špric (npr., napunjeni špric ili autoinjektor). Takođe je kao uređaj za injekciju opisan intravitrealni implantat, npr., intravitrealni implantat koji se može ponovo puniti.
[0349] „Prethodno napunjen“ špric je špric koji je napunjen formulacijom za upotrebu ovog pronalaska pre prodaje ili upotrebe od strane lekara ili pacijenta.
[0350] „Sterilno“ ovde se odnosi na aseptično ili bez suštinski svih, ili svih, živih mikroorganizama i njihovih spora.
[0351] Špricevi, kako se ovde koriste, uključuju cevi napravljene, na primer, od stakla ili polimera, na primer, cikloolefina kao što je opisano u U.S. Patentnoj objavi br.2017/0232199, klip i igla.
[0352] Kontejneri i uređaji za injekciju mogu biti obloženi silikonom (npr., silikonsko ulje ili pečeni silikon (npr., ≤40 µg ili ≤100 µg)).
[0353] U primeru izvođenja pronalaska, kontejner ili uređaj za injekciju za upotrebu pronalaska je u suštini bez metala ili u suštini bez volframa ili sa niskim sadržajem volframa.
[0354] U primeru izvođenja pronalaska, špric za upotrebu prema ovom pronalasku sadrži jednu ili više linija za gradaciju doze i/ili je sistem za merenje doze.
[0355] [0108] Kontejneri u skladu sa ovde navedenim primerima izvođenja mogu da sadrže formulacije aflibercepta visoke koncentracije. U nekim aspektima, kontejner ili uređaj za injekciju može da sadrži etiketu sa indikacijama za upotrebu. U nekim slučajevima, kontejner ili uređaj za injekciju ovde može da sadrži uputstva za upotrebu kao što je opisano u ovoj specifikaciji.
[0356] U drugim primerima izvođenja, zapremina koja sadrži jednu dozu ili više doza (npr., 2 ili više od 2) aflibercepta visoke koncentracije (gde je doza oko 8 mg aflibercepta), kao što je gore opisana, može biti prethodno upakovana u kontejner ili uređaj za injekcije, npr., sterilni špric, na primer, za skladištenje do upotrebe. U jednom primeru, zapremina u kontejneru uključuje jednu dozu aflibercepta, opciono dodatno uključuje malu količinu prepune zapremine. Sterilni, prethodno napunjeni špricevi mogu se održavati u uslovima skladištenja (npr., 2°C-8°C), na primer, do 12 meseci, 24 meseca ili 36 meseci. Prepunjenje je višak zapremine koji je namenjen da bude dovoljan da omogući povlačenje i/ili primenu odgovarajuće zapremine. U primeru izvođenja pronalaska, kontejner ima zapreminu jedne doze ili više zapremina doza i oko 5%-10% zapremine prepunjenja.
[0357] Veličine špriceva mogu biti, na primer, 0,3 cc, 0,5 cc ili 1 cc. Sterilni špricevi obično uključuju iglu korisnu za očne injekcije, obično oko ½ inča, ili dužine od 12,5 mm do 16 mm, i mogu biti kalibra 29, 30, 31, 32 ili 33, u zavisnosti od želje pacijenta i specijaliste zdravstvene zaštite. Mogu se koristiti i druge dužine i veličine igala, sve dok je igla efikasna u postizanju intravitrealne injekcije.
[0359] Dodatne formulacije
[0361] Predmetni pronalazak uključuje sledeće formulacije koje sadrže više od 80 mg/ml aflibercepta i:
[0363] (a) pufer koji sadrži histidinsku so (npr., histidin-HCl ili histidin-acetat, na primer, 10 mM do 50 mM) i sa pH vrednošću u rasponu od 5,7 do 6,2; šećer (npr., više od 6%, ali ne više od 10%) kao što su saharoza, trehaloza, manitol ili glukoza; surfaktant izabran iz grupe koja se sastoji od polisorbata 20 i polisorbata 80 (npr., 0% do 0,1%);
[0364] (b) pufer koji sadrži histidin, kao što je L-histidin/histidin hidrohlorid (npr., 10 mM); nejonski surfaktant kao što je polisorbat 20 (npr., 0,03%), neorganska so kao što je NaCl (npr., 40 mM) i ugljeni hidrat kao što je saharoza (npr., 5%), npr. pH 6,0-6,5 (npr., 6,2 ili 6,5);
[0365] (c) limunsku kiselinu (npr., 5 mM, 10 mM, 15 mM, 20 mM, 25 mM ili 30 mM), saharozu (npr., 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9% ili 10%), arginin (npr., 5 mM, 10 mM, 15 mM, 20 mM, 25 mM, 30 mM, 35 mM, 40 mM, 45 mM ili 50 mM ili 100 mM) i polisorbat 20 (npr., 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09% ili 0,10%);
[0366] (d) pufer kao što je fosfat, histidin, acetat, sukcinat, citrat, glutamat i/ili laktat (npr., na 5-20 ili 5-50 mM); nejonski surfaktant kao što je polisorbat (npr., PS20 ili PS80), polietilen glikol dodecil etar, poloksamer, 4-(I,I,3,3-tetrametilbutil)fenil-polietilen glikol, alkilsaharid ili alkilglikozid, sredstvo za toniranje kao što je poliol ili aminokiselina, na primer, saharoza, trehaloza, sorbitol, manitol, glicerol, prolin, arginin, metionin, glicin ili lizin, gde formulacija ima konačnu osmolalnost od oko 300 mOsm/kg, i pri čemu je koncentracija hloridnog anjona manja od oko 10 mM; pH 5,0-6,5; ili
[0367] (e) 10 mM natrijum fosfat, 40 mM natrijum hlorid, 0,03% polisorbat 20 i 5% saharoza, pH 6,2.
[0369] PRIMERI
[0371] Sledeći primeri su dati samo u ilustrativne svrhe i nisu namenjeni da ograniče obim pronalaska. Uloženi su napori da se osigura tačnost u pogledu korišćenih brojeva, ali treba uzeti u obzir neke eksperimentalne greške i odstupanja. Bilo koje formulacije navedene u ovim primerima su date za upotrebu u ovom pronalasku pod uslovom da sadrže aflibercept i da omogućavaju primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg pomenutog aflibercepta u oko subjekta, pri čemu se aflibercept primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara.
[0372] U ovim primerima, kada se eksperiment sprovodi na 2-8°C, ciljana temperatura je 5°C sa tolerancijom varijacije od ±3°C.
[0374] Primer 1: 80 mg/ml formulacija fuzionih proteina VEGF receptora održava potenciju, fizičku stabilnost i naelektrisanje tokom perioda od 36 meseci.
[0376] Serija od četiri različite formulacije sa 80 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora (aflibercept) testirana je na dugoročnu efikasnost, fizičku stabilnost i razvoj varijanti naelektrisanja. Spisak sastojaka svake od četiri formulacije prikazan je u Tabeli 1-1. Svaka formulacija je procenjena na formiranje HMW vrsta fuzionog proteina VEGF receptora tokom skladištenja na 2 °C do 8 °C tokom 36 meseci, kao i za procenat glavnih vrsta pomoću SEUPLC. Svaka formulacija koja sadrži fuzioni protein VEGF receptora takođe je procenjena korišćenjem snimljenog kapilarnog izoelektričnog fokusiranja tokom istog vremenskog perioda i temperature. Konačno, potencija svake formulacije je testirana biološkim testom tokom istog vremenskog perioda i temperature.
[0378] Tabela 1-1. Formulacije koje sadrže fuzioni protein VEGF receptora
[0380]
[0383] Tabela 1-2. %HMW vrsta
[0386]
[0387] Tabela 1-3. %Glavnog pika
[0389]
[0391] Tabela 1-4. %Kiselih vrsta
[0393]
[0395] Tabela 1-5. %Glavnih vrsta
[0396]
[0397]
[0400] Podaci su prikazani na slikama 1A, 1B, 1C i 1D. Slika 1A prikazuje procenat HMW vrste fuzionog proteina VEGF receptora formirane za svaku od četiri formulacije. VEGF TRAP pokazuje nešto sporiju brzinu formiranja HMW vrste kada je formulacija na bazi histidina, u poređenju sa natrijum fosfatom. Kao što je prikazano na slici 1A, %HMW vrste nakon skladištenja na 2 °C do 8 °C tokom 36 meseci povećalo se za 2,6% u formulacijama natrijum fosfata (Formulacije 1 i 2), u poređenju sa povećanjem od 1,6 do 1,9% u histidinskim puferima (Formulacije 3 i 4). Podaci su potvrđeni, kao što je prikazano na Slici 1B, gde je SE-UPLC korišćen za identifikaciju procenta glavnih vrsta fuzionog proteina VEGF receptora prisutnih u istom vremenskom okviru i temperaturnom opsegu. Kao poređenje, testovi su sprovedeni na trenutnoj EYLEA<®>formulaciji (40 mg/ml) koja ima 10 mM natrijum fosfata, koja je pokazala povećanje od 1,2% u %HMW vrsta nakon skladištenja na 2 °C do 8 °C tokom 36 meseci (nije prikazano). Pored toga, svaka od četiri formulacije VEGF TRAP od 80 mg/ml je testirana na potenciju i upoređena sa aktivnošću EYLEA<®>(nije prikazana). Jačina je održavana biološkim testom za sve četiri formulacije, kao i za EYLEA<®>. Ovi podaci pokazuju da su ovde date formulacije sposobne da održe stabilnost fuzionog proteina VEGF receptora uporedivu sa EYLEA.<®>.
[0401] Pozivajući se na slike 1C i 1D, procenat varijanti naelektrisanja VEGF TRAP formiranih nakon skladištenja na 2 °C do 8 °C tokom 36 meseci je takođe testiran. Slika 1C pokazuje da VEGF TRAP u formulacijama 1-4 nije pokazao značajnu promenu u procentu kiselih vrsta tokom 36 meseci, a Slika 1D prikazuje isti nalaz za procenat glavnih vrsta tokom 36 meseci. Nalaz da je VEGF TRAP zadržao varijantne vrste naelektrisanja tokom skladištenja pokazuje da je kvalitet VEGF TRAP održan, i da su se održali procesi poput deaminacije, formiranja N-terminalnog piroglutamata, izomerizacije, agregacije, itd. nije se dogodio tokom trajanja parametara skladištenja.
[0402] [0117] Podaci u Primeru 1 pokazuju da formulacije sa dvostrukom koncentracijom VEGF TRAP u odnosu na EYLEA<®>, može održati fizičku stabilnost, kvalitet i potenciju tokom 36 meseci na 2 °C do 8 °C. Dalje, iako su sve četiri formulacije pokazale sličnu potenciju tokom perioda, formulacije koje sadrže histidin dovele su do nešto manjeg povećanja formiranja HMW vrsta (znak razgradnje proteina), što pokazuje da pod određenim okolnostima histidin može biti pufer po izboru. Međutim, nalazi za pufere na bazi histidina i fosfata pokazali su odličnu stabilnost tokom trajanja studije.
[0404] Primer 2: Stabilnost 150 mg/ml VEGF TRAP u formulacijama natrijum-fosfatnog pufera/saharoze.
[0406] Dve formulacije natrijum fosfata testirane su na fizičku stabilnost VEGF Trap (aflibercepta) od 150 mg/ml na 37°C tokom 28 dana. Spisak sastojaka svake od dve formulacije prikazan je u Tabeli 2-1. Svaka formulacija je procenjena na formiranje HMW vrsta tokom skladištenja na 37°C tokom 28 dana, kao i na procenat glavnih vrsta pomoću SE-UPLC.
[0408] Tabela 2-1. Formulacije koje sadrže fuzioni protein VEGF receptora (aflibercept) za primer 2
[0411]
[0414] Tabela 2-2. %HMW vrsta
[0417]
[0418]
[0421] Tabela 2-3. %Glavnog pika
[0424]
[0427] Slika 2A pokazuje da nije bilo značajne razlike u % formiranih HMW vrsta između dve formulacije tokom skladištenja na 37°C tokom 28 dana, što je potvrđeno procentom glavnih vrsta pomoću SE-UPLC (Slika 2B). Nije bilo promene u izgledu, zamućenosti ili pH vrednosti dve formulacije tokom 28 dana (nije prikazano).
[0428] Rezultati su zatim upoređeni sa formulacijama koje su sadržale 40 mg/ml EYLEA<®>, i Formulacijom 1 iz Primera 1 (80 mg/ml VEGF TRAP u natrijum fosfatnom puferu). Kao što se očekivalo, formulacije VEGF TRAP od 150 mg/ml pokazale su veći procenat formiranja HMW vrsta u poređenju sa EYLEA<®>formulacijom i nešto veći procenat formiranja HMW vrsta u poređenju sa formulacijom 1 iz primera 1.
[0429] Dalja ispitivanja su sprovedena na formulacijama koje sadrže VEGF TRAP visoke koncentracije, a formulacije koje sadrže histidin pokazale su bolju zaštitu ovih molekula nego formulacije na bazi natrijum fosfata. Dalje, uključivanje natrijum hlorida u svaku od testiranih formulacija zapravo je izazvalo destabilizaciju VEGF TRAP na 37°C. Podaci u Primeru 2 pokazuju da čak i pri visokim koncentracijama od 150 mg/ml fuzionog proteina VEGF receptora i prilično ekstremnim temperaturama skladištenja, formulacije ovde pružaju odličnu zaštitu za fizičku stabilnost.
[0430] Primer 3: Farmaceutski prihvatljiva formulacija može se postići za VEGF TRAP od 150 mg/ml.
[0432] Više formulacija koje sadrže VEGF Trap (aflibercept) testirano je na viskoznost. Formulacije koje su imale koncentraciju od 10 mg/ml do 160 mg/ml VEGF Trap testirane su u prisustvu i odsustvu različitih sredstava za smanjenje viskoznosti.
[0433] Slika 3A prikazuje formulacije koje sadrže 155 mg/ml VEGF Trap u 10 mM natrijum fosfatnom puferu, 5% saharoze i pH vrednosti 6,2 u kombinaciji bez neorganske soli, arginina, lizina, natrijum hlorida i magnezijum hlorida, što je pokazalo malu razliku u viskoznosti. U svakom slučaju, viskoznost je merena u cP na 20°C. Primećen je opseg viskoznosti između oko 17 cP (bez neorganske soli) i 15 cP (100 mM magnezijum hlorida), sa malim varijacijama između korišćenog sredstva za smanjenje viskoznosti ili sa prisustvom sredstva za smanjenje viskoznosti uopšte. Slika 3B prikazuje sličnu seriju formulacija, osim što je osnovni pufer 10 mM histidin i pH vrednost 5,8. Ovde je odsustvo bilo kakve neorganske soli obezbedilo formulaciju sa viskoznošću od 11,5 cP i 50 mM lizina je dalo viskoznost od 14 cP. Pufer koji sadrži histidin obezbedio je odličnu viskoznost, u skladu sa drugim biološkim injekcijama niske koncentracije.
[0434] Slika 3C prikazuje viskoznost VEGF Trap između koncentracija od 10 mg/ml i 160 mg/ml, sa 10 mM natrijum fosfata, 5% saharoze pri pH vrednosti 6,2 u odsustvu arginina i u 50 mM arginin hidrohlorida. Uključivanje sredstva za smanjenje viskoznosti rezultiralo je sličnim viskoznostima za sve testirane koncentracije VEGF Trap. Kao što je prikazano na slikama 3A i 3B, sredstvo za smanjenje viskoznosti imalo je mali pozitivan efekat na viskoznost formulacije, čak i pri višim koncentracijama proteina. Ovo je iznenađujući rezultat, jer je prethodno pokazano da arginin i druga sredstva za smanjenje viskoznosti imaju korisna svojstva na viskoznost proteina visoke koncentracije.
[0436] Tabela 3-1. Viskozitet fosfatnih formulacija (cP na 20 °C)
[0439]
[0440]
[0443] Tabela 3-2. Viskozitet - formulacije histidina (cP na 20 °C)
[0446]
[0449] Primer 4: Arginin hidrohlorid poboljšava stabilnost 150 mg/ml VEGF TRAP u formulacijama natrijum fosfatnog pufera/saharoze.
[0451] Dve formulacije natrijum fosfata testirane su na fizičku stabilnost 150 mg/ml VEGF Trap (aflibercepta) na 2-8°C tokom 12 meseci. Spisak sastojaka svake od dve formulacije prikazan je u Tabeli 4-1. Formulacija 2 dodatno sadrži 50 mM arginin hidrohlorida. Svaka formulacija je procenjena na formiranje HMW vrsta tokom skladištenja na 37°C tokom 12 meseci, kao i na procenat glavnih vrsta pomoću SE-UPLC.
[0453] Tabela 4-1. Formulacije koje sadrže fuzioni protein VEGF receptora (aflibercept) za primer 3
[0456]
[0457] Slika 4A pokazuje da je uključivanje 50 mM arginin hidrohlorida u formulaciju poboljšalo fizičku stabilnost VEGF TRAP. Ovo stabilizujuće svojstvo VEGF TRAP je potvrđeno na slici 4B, pri čemu procenat glavnih vrsta ostaje veći za VEGF TRAP u prisustvu 50 mM arginin hidrohlorida. Ovi podaci pokazuju da postoje situacije u kojima dodavanje arginin hidrohlorida pruža stabilizujući efekat uskladištenom VEGF TRAP. Tabelarni podaci hromatografije isključivanja po veličini prikazani su u tabeli 4-2 i 4-3.
[0459] Tabela 4-2. %HMW vrsta
[0462]
[0465] Tabela 4-3. %Glavnog pika
[0468]
[0469]
[0472] Primer 5: Viskozitet od 10 mg/ml do 170 mg/ml VEGF TRAP u histidinskim i fosfatnim puferima
[0474] Slika 5 je pokazala da su i fosfatni pufer od 10 mM i histidinski pufer od 10 mM imali veoma korisne viskozitete za različite koncentracije VEGF Trap (aflibercepta). Pri višim koncentracijama VEGF Trap, histidinski pufer je pokazao poboljšanje viskoziteta (u odnosu na fosfat). Viskozitet je meren na 20°C.
[0476] Primer 6: Taurin i propan sulfonska kiselina pružaju poboljšanu stabilnost formulacijama VEGF trap (aflibercept) visoke koncentracije.
[0478] Sproveden je eksperiment kako bi se utvrdio efekat na stabilnost proteina sa brojnim kombinacijama formulacija. Slika 6 prikazuje dijagram dinamičkog rasejanja svetlosti za formulacije koje imaju od 2 mg/ml proteina do 10 mg/ml proteina (aflibercept). Formulacije koje su sadržale 70 mM taurina ili 70 mM PSA pokazale su smanjenu samointerakciju pri višim koncentracijama. Ovi podaci ukazuju da taurin i PSA mogu biti korisni dodaci u formulacije proteina visoke koncentracije, poput onih o kojima je reč u ovom slučaju.
[0480] Primer 7: Dugoročna studija stabilnosti različitih formulacija koje sadrže histidin.
[0482] Ukupno je testirano 9 različitih formulacija aflibercepta sa različitom koncentracijom pufera, termičkim stabilizatorima i hidrofobnim solima. 9 formulacija, F1-F9, sumirane su u nastavku u Tabeli 7-1.
[0483] Tabela 7-1. Formulacije F1-F9.
[0484]
[0485] Četrnaest (14) ml svake formulacije je pomešano u Falkon epruvetama od 15 ml. Formulacija je zatim sterilno filtrirana korišćenjem špric filtera od 0,22 µM i napunjena u sterilne staklene bočice tipa 1 od 2 ml. Osam (8) bočica je napunjeno za svaku formulaciju sa zapreminom od 0,4 ml u laminarnoj komori.
[0486] SE-UPLC (molekularna težina vrsta) je sprovedena na svim uzorcima da bi se utvrdila hemijska stabilnost svake formulacije.
[0487] Procenat HMW vrsta tokom vremena za svaku od formulacija F1-F9 prikazan je na slici 7 (videti takođe Tabelu 7-2). Formulacije F4 i F7 pokazale su najniži procenat HMW vrsta nakon 4 meseca na 5°C. Rezultati su pokazali da je dodavanje ekscipijenasa poput arginina i prolina značajno smanjilo brzinu formiranja %HMW vrsta u formulacijama VEGF Trap.
[0489] Tabela 7-2. SE-UPLC analiza (2-8 °C)
[0491]
[0495]
[0496]
[0500]
[0503] Primer 8: Studija stabilnosti 140 mg/ml VEGF trap sa različitim koncentracijama arginina.
[0505] Proučavan je uticaj variranja koncentracije arginin-HCl na stabilnost četiri formulacije leka za oči VEGF Trap (aflibercept) od 140 mg/ml. Procena stabilnosti je izvršena pri uslovima skladištenja na 2-8°C. Lek (DP) je takođe inkubiran pod stresnim uslovima (37°C). Četiri formulacije koje se procenjuju u ovoj studiji stabilnosti (F1-F4) opisane su u Tabeli 8-1 koja je navedena u nastavku.
[0507] Tabela 8-1. Formulacije F1-F4
[0510]
[0511]
[0514] Približno 145 ml formulacija VEGF Trap histidina sa koncentracijom od 187 mg/ml je odmrznuto. Pripremljeno je trideset šest (36) ml svake formulacije, sa izuzetkom F3; pripremljeno je 39 ml F3 u rasutom stanju. Svaka formulacija je sterilisana filtracijom u LFH (laminaru) koristeći Durapore PVDF sterilišući filter od 0,22 µm pre punjenja. Čiste depirogenizovane bočice od 2 ml Schott stakla tipa I, zatvorene serumskim čepovima od 13 mm (S2-F451 4432/50B2-40), korišćene su za sprovođenje studija stabilnosti.
[0515] SE-UPLC analiza formulacija je sprovedena kao što je gore navedeno. Merenja %HMW, korišćenjem SE-UPLC, u svakoj formulaciji tokom vremena su prikazana na slici 8 (A-B). Videti takođe tabele 8-2 i 8-3.
[0516] Kada su se skladištile na 5°C, ove formulacije su pokazale smanjenje brzine formiranja %HMW vrsta koje je bilo proporcionalno koncentraciji arginin-HCl. Međutim, pod stresom je ovaj efekat bio obrnut. Formulacije, na 37°C, pokazale su očigledno povećanje %HMW vrsta proporcionalno koncentraciji arginin-HCl. Ovo svojstvo je učinilo otkriće korisnih efekata arginina na aflibercept u prisustvu histidinskog pufera veoma malo verovatnim. Tipično, za razvoj formulacija u biotehnološkoj industriji, efekat različitih pomoćnih supstanci na lek se prvobitno ispituje pod stresom (npr., na povišenoj temperaturi kao što je 37°C) tokom kratkog vremenskog perioda. Svrha ovog pristupa je brzo eliminisanje ekscipijenasa koji verovatno neće dobro funkcionisati u odsustvu stresa (npr., na nižoj temperaturi kao što je 5°C) tokom dužeg vremenskog perioda. Ovde je arginin identifikovan kao koristan ekscipijens uprkos njegovom uticaju na stabilnost na 37°C. Pošto se formulisani lek obično čuva mesecima na 4-5°C nakon proizvodnje, aflibercept u argininu i histidinskom puferu bio bi veoma vredna formulacija za dugoročno, stabilno skladištenje leka.
[0518] Tabela 8-2. SE-UPLC analiza (2-8°C)
[0521]
[0522]
[0524] Tabela 8-3. SE-UPLC analiza (37°C)
[0526]
[0528] Primer 9: Stabilnost VEGF trap u prisustvu kontrajona iz Hofmajsterove serije i drugih pomoćnih supstanci.
[0529] Utvrđen je efekat različitih kontrajona i drugih pomoćnih supstanci na stabilnost nekoliko formulacija.
[0531] A. Skrining kontrajona
[0533] Kontrajoni (npr., sulfat, tiocijanat i citrat) su testirani u obliku natrijumovih soli sa formulacijama VEGF Trap (aflibercept) visoke koncentracije (140 mg/ml). Pored toga, drugi aminokiselinski pomoćni sastojci (npr., glicin i lizin) su takođe testirani.
[0534] Odmrznuto je približno 42 ml leka za oči VEGF Trap od 187 mg/ml. Pripremljeno je 50 ml intermedijarno formulisanog leka (155,56 mg/ml), sa koncentracijom od 110% formulisanog leka od 140 mg/ml i ciljnom koncentracijom pomoćnog sredstva (isključujući kontrajone, glicin i lizin).
[0535] Intermedijerno formulisani lek je dalje razblažen sa 0,5 M rastvorima pomoćnih supstanci (protivjoni, glicin ili lizin) da bi se dobile formulacije lekovite supstance od 140 mg/ml navedene u Tabeli 9-1 ispod. Svaka konačna formulacija je sterilisana filterom sa 0,22 µm PVDF špric filterom unutar laminarne komore pre punjenja u čiste depirogenizovane staklene bočice tipa I od 2 ml, začepljene serumskim čepovima od 13 mm S2-F451 4432/50 82-40 (ELN artikal# 19700004 Wash# 0000078949). Šezdeset (60) bočica je napunjeno sa 0,5 ml svake formulacije. Šest (6) bočica je napunjeno sa 1,5 ml.
[0537] Tabela 9-1. Formulacije za skrinig kontrajona
[0539]
[0540]
[0543] B. Skrining glutamata i aspartata
[0545] Testirana je stabilnost formulacija VEGF Trap (aflibercept) visoke koncentracije (140 mg/ml) u prisustvu organskih kontrajona u kombinaciji sa arginin hidrohloridom. Pored toga, dva nova kontrajona (glutamat i asparat) su testirana na kompatibilnost sa VEGF Trap visoke koncentracije (u kombinaciji i bez arginin hidrohlorida). Testirane formulacije su sumirane u nastavku u Tabeli 9-2.
[0546] Odmrznuto je približno 50 ml leka VEGF Trap koncentracije od 187 mg/ml. Pripremljeno je 60 ml intermedijarno formulisanog leka (155,56 mg/ml) sa 110% koncentracije formulisanog leka od 140 mg/ml i ciljnog pomoćnog sastojka (isključujući kontrajone, citrat, glicin, glutamat i aspartat). Intermedijerno formulisani lek je dalje razblažen sa 1M osnovnim rastvorima pomoćnih materija (arginin hidrohlorid, natrijum citrat, glicin, natrijum glutamat i natrijum aspartat) da bi se dobile formulacije leka od 140 mg/ml navedene u tabeli ispod. Svaka konačna formulacija je sterilisana filtracijom sa PVDF špric filterom od 0,22 μm unutar laminarne komore pre punjenja u čiste depirogenizovane bočice od stakla tipa I Schott od 2 ml, zatvorene serumskim čepovima od 13 mm S2-F4514432/50 B2-40 (ELN artikal# 19700004 Wash# 0000078949). Šezdeset (60) bočica je napunjeno sa 0,5 ml svake formulacije. Šest (6) bočica je napunjeno sa 1,5 ml.
[0548] Tabela 9-2. Formulacije za skrinig glutamata i aspartata
[0550]
[0551]
[0554] Testiranje viskoznosti je izvršeno upotrebom RHEOSENSE m-VROC<®>viskozimetra. Približno 0,5 ml nerazblaženog uzorka je stavljeno na stakleni špric. Uzorak je uravnotežen na željenu temperaturu i ubrizgan u čip ili mernu ćeliju. Viskozitet je izračunat merenjem pada pritiska od ulaza do izlaza, što je u korelaciji sa naponom smicanja na zidu čipa. Rezultati su izraženi kao mPas-1 ili cp. Videti sliku 9 i tabelu 9-3.
[0555] Testiranje osmolalnosti je izvršeno pomoću VAPRO osmometra za pritisak pare. Približno 10 µL nerazblaženog uzorka je inokulisano na papirni disk. Sniženje temperature do temperature kondenzacije, funkcija pritiska pare rastvora, mereno je pomoću osetljivog termopara i prijavljeno kao osmolalnost rastvora. Rezultati su izraženi kao mmol/kg ili mOsm. Videti sliku 10 i tabelu 9-3.
[0556] Veličina molekulske težine jedinjenja u određenim formulacijama tokom vremena, nakon skladištenja na 37°C ili 5°C, takođe je procenjena pomoću SE-UPLC. Videti sliku 11 (A-B) i tabele 9-4 i 9-5.
[0557] Eksperimenti dinamičkog rasejanja svetlosti su izvedeni korišćenjem DynaPro<®>čitača ploča II. Približno 100 µL nerazblaženog uzorka je naneto na ploču sa 96 bunarčića. Trideset pet snimaka je dobijeno za svaki bunarčić na 25°C. Analiza funkcije autokorelacije korišćenjem regularizacije je izvršena na softveru DYNAMICS v7.1. Grafikoni poluprečnika (nm) u odnosu na % intenziteta i grafikoni % mase u odnosu na poluprečnik (nm) su generisani da bi se dobile prosečne vrednosti molekularnog poluprečnika i % polidisperzije (%Pd) za svaki uzorak. Videti sliku 12.
[0559] Tabela 9-3. Viskozitet i osmolalnost različitih formulacija
[0562]
[0565] Tabela 9-4. SE-UPLC analiza; %HMW (37°C)
[0566]
[0569] Tabela 9-5. SE-UPLC analiza; %HMW (5°C)
[0572]
[0575] Primer 10: Tolerancija IVT isporuke visoke doze VEGF trap (140 mg/ml) kod normalnih zečeva.
[0577] Anti-VEGF terapija, koja se primenjuje putem intravitrealne injekcije, trenutno je standard nege za lečenje neovaskularne makularne degeneracije povezane sa starenjem, dijabetičkog makularnog edema i okluzivne bolesti retinalnih krvnih sudova. Međutim, mesečne ili dvomesečne intravitrealne injekcije predstavljaju značajno opterećenje za pacijente, negovatelje i lekare. Postoji hitna potreba za efikasnijim i trajnijim terapijama u kliničkoj praksi. Ova studija ima za cilj da istraži podnošljivost stabilno formulisanog VEGF Trap visoke doze (140 mg/ml, što je ekvivalentno 14 puta većoj od kliničke doze) u normalnim očima novozelandskog belog zeca.
[0578] Testirane su dve formulacije visoke doze VEGF-Trap (aflibercepta) u histidinskom puferu ili u fosfatnom puferu. Tri zeca po kohorti primila su 7 mg VEGF Trap u 50 μL jednom bilateralnom intravitrealnom injekcijom svake formulacije. Znaci upale oka praćeni su pomoću prorezne lampe, optičke koherentne tomografije (OCT) i fundus angiografije 1. dana, 4. dana, 1. nedelje, a zatim nedeljno do 12 nedelja nakon intravitrealne primene. Intraokularni pritisak je meren Tonopenom pre i 10 minuta i 30 minuta nakon intravitrealne injekcije, a zatim u svakom vremenskom trenutku praćenja. Životinje su eutanazirane u 12. nedelji.
[0579] Zečje oči su tretirane sa:
[0581] (1) 140 mg/ml aflibercepta, 20 mM histidina, 5% saharoze, 50 mM arginin hidrohlorida, 0,03% PS20, pH 5,8;
[0582] ili
[0583] (2) 140 mg/ml aflibercepta, 10 mM natrijum fosfata, 5% saharoze, 40 mM natrijum hlorida, 0,03% PS20, pH 6,2.
[0585] Dva od šest oka iz grupe sa histidinskim puferom pokazivala su tamne senke u staklastom telu do 8 nedelja nakon intravenske terapeutske terapije (IVT), koje su pregledom proreznom lampom potvrđene kao lokalna katarakta usled povrede zadnjeg sočiva, povezano sa procedurom. Jedno od 6 oka iz grupe sa fosfatnim puferom pokazalo je tamne senke u staklastom telu do 8 nedelja nakon IVT, koje su pregledom proreznom lampom potvrđene kao lokalna katarakta usled povrede zadnjeg sočiva (povezano sa procedurom).
[0586] Testirane formulacije visoke doze VEGF Trap (140 mg/ml) bile su dobro tolerisane u normalnim očima novozelandskih belih zečeva u roku od 12 nedelja nakon jedne intravitrealne primene. Nakon jedne intravitrealne injekcije od 7 mg VEGF Trap, nisu primećeni znaci abnormalnosti ili upale u fundusu. Staklasto telo je bilo bistro, a vaskularni obrazac mrežnjače je izgledao normalno. Nije primećeno odvajanje mrežnjače, krvarenje ili promene na glavi očnog nerva. Nije bilo promene intraokularnog pritiska u poređenju sa početnim nivoom. Početni rezultati fluoresceinske angiografije (FA) i OCT snimaka zečjih očiju su prikazani na slici 13(A-D). Vremenski tok FA i OCT snimaka zečjih očiju u svakoj grupi lečenja tokom 8 nedelja je prikazan na slikama 14, 15, 16 i 17. Prikazani su podaci iz levog oka (OS) ili desnog oka (OD) zečeva 326 i 329.
[0588] Primer 11: Procena stabilnosti formulacija UUU-BBBB
[0589] Ova studija je ispitala stabilnost VEGF Trap (aflibercepta) od 60 mg/ml i 120 mg/ml u 10 mM fosfatu, 10% ili 20% saharozi (Suc.), 0 ili 50 mM NaCl, 0,03% polisorbatu 20, pH 6,2, kada se inkubira na 37°C do 6 meseci. Formulacije za ovu studiju stabilnosti su navedene u Tabeli 11-1.
[0591] Tabela 11-1. Formulacije UUU-BBBB
[0594]
[0597] Formulacija je sterilisana sa PVDF 0,2 µm filterom u laminarnoj kutiji pre doziranja.
[0598] Bočice koje sadrže svaku formulaciju čuvane su na 37°C tokom 1 meseca.
[0600] Tabela 11-2. Rezultati reverzno-fazne tečne hromatografije visokih performansi (RP-
[0601] HPLC)
[0604]
[0605]
[0607] Tabela 11-3. Rezultati ultraperformansne tečne hromatografije sa isključivanjem po veličini (SE-UPLC)
[0609]
[0610]
[0613] Sve formulacije su bile u suštini bez čestica vizuelnim pregledom i merenjem optičke gustine. Nije bilo značajnog gubitka proteina u izolaciji pomoću RP-HPLC nakon 1 meseca na 37µC (Tabela 11-2) i ovaj trend se nastavio do 6 meseci.
[0614] Glavni put razgradnje za VEGF Trap bila je agregacija pod ovim uslovima (Slika 18 (A-B); Tabela 11-3). Stabilnost VEGF Trap zavisila je od koncentracija proteina i saharoze. Formulacije sa nižim koncentracijama VEGF Trap i višom koncentracijom saharoze bile su stabilnije. Održavanje istog odnosa proteina:saharoze nije rezultiralo istom brzinom razgradnje.
[0615] Na primer, F1 i F4 imaju isti odnos proteina:saharoze od 3:1, ali je F4 bio manje stabilan od F1 zbog veće koncentracije proteina. Slični trendovi su primećeni do 6 meseci.
[0617] Primer 12: Studija toksikologije ponovljene doze intravitrealne primene kod majmuna sa različitim formulacijama aflibercepta.
[0619] Bezbednost različitih formulacija kod makaki majmuna procenjena je u ovom primeru. Ukupno 7 intravitrealnih doza je primenjeno u oba oka približno svake 4 nedelje grupama 1-3; ukupno 3 intravitrealne doze su primenjene u oba oka približno svake 4 nedelje grupama 4-9. Terminalna nekropsija se vrši približno nedelju dana nakon poslednje doze (N=3/polu/grupi), a nekropsija u fazi oporavka (2/polu/grupi) približno 12 nedelja nakon poslednje doze.
[0620] Vrše se sledeće procene:
[0622] • Procena bezbednosti na osnovu kliničkih znakova, telesne težine, vitalnih znakova, elektrokardiografskih podataka (pre doze, kraj lečenja i kraj oporavka), merenja krvnog pritiska (preko repne manžetne), kliničke i anatomske patologije
[0623] • Sveobuhvatni očni pregledi u redovnim intervalima tokom doziranja i intervala oporavka, uključujući mikroskopiju sa proreznom lampom, indirektnu oftalmoskopiju i merenje intraokularnog pritiska
[0624] • Fotografija fundusa, fluoresceinska angiografija i elektroretinografija pre tretmana, tokom 9. nedelje studije (sve grupe), 26. nedelje (samo grupe 1-3) i na kraju perioda oporavka • Uzorci krvi i staklastog tela (na kraju) za bioanalitičku, ADA analizu i toksikokinetičku procenu
[0626] Tabela 13. Rezime proučavane grupe*
[0628]
[0629]
[0630] Očekuje se da će formulacije testirane u jednoj ili više od Grupa 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 i/ili 9 biti utvrđene kao da imaju bezbednosni profil uporediv sa EYLEA kod makaki majmuna, kako je mereno u gore navedenim procenama.
[0632] Primer 13: Studija stabilnosti sa VEGF Trap proizvodom.
[0634] Formulacija koja sadrži 114,3 mg/ml VEGF Trap (aflibercept) i 10 mM histidina, pH 5,8, 5% saharoze, 0,03% polisorbata 20, 50 mM arginin monohidrohlorida pripremljena je u LFH (laminarnoj komori) koristeći 0,22 µm Durapore PVDF sterilišući filter pre punjenja. Čiste depirogenizovane bočice od 3 ml Schott stakla tipa I napunjene su sa 0,3 ml leka i zatvorene serumskim čepovima od 13 mm (S2-F451 4432/50B2-40). Uzorci su analizirani u različitim vremenskim tačkama nakon skladištenja na 37°C ili 5°C radi utvrđivanja čistoće pomoću hromatografije isključivanja po veličini (SEC) kako bi se odredilo prisustvo (%) vrsta visoke molekulske težine (HMW), vrsta male molekulske težine (LMW) i glavnog pika (glavni); kao i „microflow“ snimanja, brojanja tečnih čestica HIAC (pomoću zamračenja svetlosti) i mikroskopski za određivanje prisustva čestica različitih veličina.
[0635] Podaci o stabilnosti i čistoći nakon skladištenja na 37°C, 25°C i 2-8°C prikazani su na slici 19 (A-E). Videti takođe tabele 13-1 - 13-4.
[0637] Tabela 13-1. Analiza čistoće hromatografije isključivanjem po veličini (SEC)
[0640]
[0641] Tabela 13-2. „Microflow“ snimanje/čestice ispod granice vidljive detekcije
[0644]
[0647] Tabela 13-3. Čestice ispod granice vidljive detekcije merene pomoću metode zatamnjenja svetlosti (HIAC)/čestice ispod granice vidljive detekcije
[0650]
[0653] Tabela 13-4. Mikroskopska analiza čestica ispod granice vidljive detekcije
[0656]
[0659] Primer 14: Studija stabilnosti sa različitim koncentracijama VEGF trap.
[0661] Proučavan je uticaj variranja koncentracije VEGF Trap na stabilnost četiri formulacije leka za oči VEGF Trap (aflibercept). Koncentracije su se kretale između 80 i 140 mg/ml. Procena stabilnosti je izvršena u uslovima skladištenja na 2-8°C. Lek (DP) je takođe inkubiran pod uslovima stresa (37°C). Četiri formulacije (od kojih je svaka ovde označena kao „CCC“) koje se procenjuju u ovoj studiji stabilnosti opisane su u Tabeli 14-1 koja je navedena u nastavku.
[0662] [0163] Približno 27 ml svake formulacije je pripremljeno u LFH (laminarnoj komori) koristeći sterilišući filter Durapore PVDF od 0,22 µm pre punjenja. Čiste depirogenizovane bočice od 2 ml Schott stakla tipa I su napunjene i zatvorene serumskim čepovima od 13 mm (S2-F451 4432/50B2-40). Uzorci su analizirani u različitim vremenskim tačkama nakon skladištenja na 37°C ili 2-8°C radi utvrđivanja čistoće pomoću ultraperformansne tečne hromatografije sa isključivanjem po veličini (SE-UPLC) kako bi se odredilo prisustvo (%) vrsta visoke molekulske težine (HMW) i glavni pik (glavni).
[0663] Podaci koji prikazuju procenat HMW nakon inkubacije na 2-8°C ili 37°C tokom perioda do 6 meseci prikazani su na slici 20 (A-B). Videti takođe tabele 14-2 i 14-3. Kada se čuvaju na 37°C i 5°C, ove formulacije su pokazale pozitivnu korelaciju brzine formiranja HMW sa koncentracijom VEGF Trap. Formulacija od 140 mg/ml pokazala je najveću stopu formiranja %HMW vrsta.
[0665] Tabela 14-1. Testirane formulacije.
[0668]
[0671] Tabela 14-2. SE-UPLC analiza (2-8°C)
[0674]
[0677] Tabela 14-3. SE-UPLC analiza (37°C)
[0678]
[0681] Primer 15: Visoka doza Eylea ima produženo dejstvo u D,L-AAA modelu trajnog neovaskularnog curenja.
[0683] U ovom primeru je određen efekat četvorostrukog povećanja doze na trajanje dejstva aflibercepta u inhibiranju hroničnog vaskularnog curenja mrežnjače u D,L-AAA modelu.
[0684] Korišćene životinje su bili novozelandski beli zečevi 3 meseca nakon indukcije bolesti DL-AAA (DL-α-aminoadipinska kiselina). Grupe za lečenje su bile:
[0686] • Placebo (pufer za formulaciju) 50 mcl/oku; n= 6 očiju
[0687] • Aflibercept 500 mcg/oku u 50 mcl; n = 7 očiju
[0688] • Aflibercept 2 mg/oku u 50 mcl; n = 8 očiju
[0690] Formulacija koja je korišćena u svakoj grupi za lečenje bila je: 10 mM histidina, 8% saharoze, 0,03% PS20, pH 5,8. Oftalmološki pregledi, koji su obavljeni na početku i u 1., 2., 4., 6., 7., 9., 10., 11., 13. i 18. nedelji, bili su intraokularni pritisak (IOP), snimanje bez crvene boje (RF) (za određivanje morfologije krvnih sudova), fluoresceinska angiografija (FA; za određivanje vaskularnog curenja), optička koherentna tomografija (OCT; za identifikaciju upale staklastog tela). Serum (ADA) i plazma (nivoi leka) su prikupljeni na početku i u 1., 2., 4., 6. i 9. nedelji.
[0691] [0168] Podaci iz FA pregleda svake grupe prikazani su na slici 21. Ovi podaci su pokazali da je inhibicija vaskularnog curenja u mrežnjači životinja koje su primale veće doze aflibercepta trajala duže nego kod životinja koje su primale niže doze. Broj tretiranih očiju kod kojih je vaskularna permeabilnost potpuno inhibirana bio je značajno veći u grupi sa dozom od 2 mg u svim vremenima uzorkovanja do 18 nedelja nakon doziranja.

Claims (10)

1. Patentni zahtevi
1. Fuzioni protein VEGF receptora, koji je aflibercept, za upotrebu u lečenju angiogenog poremećaja oka kod subjekta kome je to potrebno, pri čemu navedeni tretman sadrži primenu intraokularne injekcije od oko 8 mg navedenog fuzionog proteina VEGF receptora u oko subjekta, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u oko 100 mikrolitara ili manje, oko 90 mikrolitara, oko 80 mikrolitara, oko 75 mikrolitara, oko 70 mikrolitara, oko 60 mikrolitara ili oko 50 mikrolitara.
2. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu, intraokularna injekcija je intravitrealna injekcija.
3. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu se fuzioni protein VEGF primenjuje u zapremini injekcije od 100 mikrolitara ili manje.
4. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu se fuzioni protein VEGF primenjuje u zapremini injekcije od oko 50 mikrolitara, oko 60 mikrolitara, oko 70 mikrolitara ili oko 75 mikrolitara.
5. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u formulaciji sa viskozitetom od oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP) do oko 0,015 Pa·s (oko 15 cP) na 20°C.
6. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu je pH formulacije oko pH 5,8 do oko pH 6,5 (npr., oko pH 5,8).
7. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu se fuzioni protein VEGF receptora primenjuje u formulaciji sa viskozitetom od oko 0,012 Pa·s (oko 12 cP) do oko 0,015 Pa·s (oko 15 cP) na 20°C i pH formulacije je oko pH 5,8 do oko pH 6,5 (npr., oko pH 5,8).
8. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, pri čemu je pH formulacije oko pH 5,8.
9. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu, angiogeni poremećaj oka je degeneracija makule povezana sa starenjem (vlažna), makularni edem, makularni edem nakon okluzije retinalne vene, okluzija retinalne vene (RVO), okluzija centralne retinalne vene (CRVO), okluzija grane retinalne vene (BRVO), dijabetički makularni edem (DME), neovaskularizacija horoidee (CNV), neovaskularizacija dužice, neovaskularizacija glaukoma, postoperativna fibroza kod glaukoma, proliferativna vitreoretinopatija (PVR), neovaskularizacija optičkog diska, neovaskularizacija rožnjače, neovaskularizacija mrežnjače, neovaskularizacija staklastog tela, panus, pterigijum, vaskularna retinopatija, dijabetička retinopatija, neproliferativna dijabetička retinopatija i/ili proliferativna dijabetička retinopatija.
10. Fuzioni protein VEGF receptora za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu intraokularna injekcija sadrži bušenje oka subjekta špricem i iglom kalibra 30 i injektiranje fuzionog proteina VEGF receptora, koji je u formulaciji, u staklasto telo oka.
RS20251325A 2018-05-10 2019-05-10 Formulacije koje sadrže visoke koncentracije fuzionog proteina vegf receptora RS67656B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862669506P 2018-05-10 2018-05-10
US201862752127P 2018-10-29 2018-10-29
US201862769876P 2018-11-20 2018-11-20
US201962813882P 2019-03-05 2019-03-05
EP24156902.9A EP4364724B1 (en) 2018-05-10 2019-05-10 High concentration vegf receptor fusion protein containing formulations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS67656B1 true RS67656B1 (sr) 2026-02-27

Family

ID=66669104

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20251325A RS67656B1 (sr) 2018-05-10 2019-05-10 Formulacije koje sadrže visoke koncentracije fuzionog proteina vegf receptora

Country Status (28)

Country Link
US (4) US11103552B2 (sr)
EP (3) EP4364724B1 (sr)
JP (3) JP7235770B2 (sr)
KR (1) KR20210021299A (sr)
CN (5) CN116585466A (sr)
AU (3) AU2019265005B2 (sr)
BR (1) BR112020022610A2 (sr)
CA (2) CA3099551C (sr)
CL (3) CL2020002872A1 (sr)
CO (1) CO2020014427A2 (sr)
DK (1) DK4364724T3 (sr)
ES (1) ES3056525T3 (sr)
FI (1) FI4364724T3 (sr)
HR (1) HRP20260001T1 (sr)
IL (2) IL278375B2 (sr)
JO (1) JOP20200275A1 (sr)
LT (1) LT4364724T (sr)
MA (1) MA52570A (sr)
MX (3) MX421310B (sr)
MY (1) MY204232A (sr)
NZ (1) NZ770284A (sr)
PH (1) PH12020551839A1 (sr)
PL (1) PL4364724T3 (sr)
PT (1) PT4364724T (sr)
RS (1) RS67656B1 (sr)
SG (1) SG11202010684YA (sr)
SI (1) SI4364724T1 (sr)
WO (1) WO2019217927A1 (sr)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101482483B1 (ko) 2006-04-07 2015-01-15 에르피오 세러퓨틱스 인코포레이티드 인간 단백질 타이로신 포스파타아제 베타(ｈｐｔｐ베타)에 결합하는 항체 및 그의 용도
CA2838246C (en) 2011-06-13 2018-07-10 Csl Limited Antibodies against g-csfr and uses thereof
CA2850830A1 (en) 2011-10-13 2013-04-18 Aerpio Therapeutics, Inc. Methods for treating vascular leak syndrome and cancer
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
KR20250057128A (ko) 2015-12-30 2025-04-28 코디악 사이언시스 인코포레이티드 항체 및 이의 접합체
DK3619324T3 (da) 2017-05-05 2025-09-22 Trefoil Therapeutics Inc Rekombinante modificerede fibroblast-vækstfaktorer og terapeutiske anvendelser heraf
MA50908A (fr) 2017-11-17 2020-09-23 Amgen Inc Formulations de protéines de fusion vegfr-fc
JP7465210B2 (ja) 2017-11-29 2024-04-10 シーエスエル リミティド 虚血－再灌流障害の治療又は予防方法
AU2018375398C1 (en) 2017-11-30 2026-01-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Use of a VEGF antagonist to treat angiogenic eye disorders
EP3730126B1 (en) * 2017-12-22 2025-05-14 Samsung Bioepis Co., Ltd. Liquid composition comprising vegf antagonist
US11524053B2 (en) 2018-01-26 2022-12-13 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treatment of angiogenic disorders using anti-VEGF agents
WO2019154776A1 (en) 2018-02-06 2019-08-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of ophthalmologic diseases
US12071476B2 (en) 2018-03-02 2024-08-27 Kodiak Sciences Inc. IL-6 antibodies and fusion constructs and conjugates thereof
JP7235770B2 (ja) 2018-05-10 2023-03-08 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 高濃度ｖｅｇｆ受容体融合タンパク質を含む製剤
US10894824B2 (en) 2018-09-24 2021-01-19 Aerpio Pharmaceuticals, Inc. Multispecific antibodies that target HPTP-β (VE-PTP) and VEGF
SG11202103064YA (en) 2018-10-29 2021-05-28 Hoffmann La Roche Antibody formulation
SG11202108627SA (en) 2019-02-18 2021-09-29 Lilly Co Eli Therapeutic antibody formulation
MA54325A (fr) 2019-06-05 2022-05-11 Regeneron Pharma Dispositifs et procédés pour l'administration précise de doses
AU2020364071A1 (en) 2019-10-10 2022-05-26 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
AU2020393842A1 (en) * 2019-11-25 2022-06-16 The Regents Of The University Of California Long-acting VEGF inhibitors for intraocular neovascularization
KR20240007293A (ko) 2019-12-06 2024-01-16 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항-vegf 단백질 조성물 및 이를 생산하는 방법
CN115698245A (zh) * 2020-01-27 2023-02-03 百时美施贵宝公司 等电聚焦样品基质
AU2021262609A1 (en) 2020-05-01 2022-12-22 Kashiv Biosciences, Llc An improved process of purification of protein
MX2022013812A (es) 2020-05-08 2022-12-15 Regeneron Pharma Trampas y mini-trampas de vegf y metodos para el tratamiento de trastornos oculares y cancer.
CN115768475A (zh) 2020-06-04 2023-03-07 Csl创新私人有限公司 治疗或预防急性呼吸窘迫综合征的方法
JP2023532046A (ja) * 2020-06-26 2023-07-26 トレフォイル セラピューティクス，インク． 組換え修飾線維芽細胞増殖因子およびそれを使用した治療
KR20220001106A (ko) * 2020-06-29 2022-01-05 (주)메디톡스 고농도 항-ｖｅｇｆ 항체 제제 및 이에 사용하기 위한 항-ｖｅｇｆ 항체
JP7560185B2 (ja) * 2020-07-07 2024-10-02 カナプ セラピューティクス インコーポレイテッド 補体経路阻害剤及び血管新生阻害剤を含む融合タンパク質並びにその使用
US20230340529A1 (en) * 2020-09-03 2023-10-26 University Of Massachusetts Adeno-associated virus for delivery of kh902 (conbercept) and uses thereof
EP4225330A1 (en) 2020-10-06 2023-08-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022125788A1 (en) * 2020-12-10 2022-06-16 Stemline Therapeutics, Inc. Improved lyophilized formulation
JP2023554087A (ja) * 2020-12-16 2023-12-26 シーエスエル イノベーション プロプライアタリー リミティド タンパク質製剤及びその使用
CN114681592A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 天境生物科技(杭州)有限公司 包含可溶性gp130二聚体的制剂和使用方法
CN116867481A (zh) * 2021-02-17 2023-10-10 艾瑞克有限公司 包含Fc结构域的工程化蛋白质构建体的水性组合物
CA3213505A1 (en) * 2021-03-16 2022-09-22 Kashiv Biosciences, Llc Novel formulation of fusion protein
WO2022199603A1 (en) * 2021-03-25 2022-09-29 Nanjing GenScript Biotech Co., Ltd. Antibody fusion proteins and uses thereof
PL4185318T3 (pl) 2021-05-17 2026-01-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Rozszerzone schematy leczenia dużymi dawkami antagonistów vegf w leczeniu angiogennych zaburzeń oka
CN113289029B (zh) * 2021-05-20 2023-09-05 上海赛金生物医药有限公司 一种单克隆抗体-细胞因子融合蛋白制剂
EP4398877A1 (en) * 2021-09-06 2024-07-17 LEK Pharmaceuticals d.d. Formulations for vegf receptor fusion proteins
JP2023135646A (ja) 2022-03-15 2023-09-28 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 血管新生性眼障害の処置のための長期高用量ｖｅｇｆアンタゴニストレジメン
AU2023234355A1 (en) * 2022-03-15 2024-09-19 Bayer Healthcare Llc Extended, high dose vegf antagonist regimens for treatment of angiogenic eye disorders
WO2023206134A1 (en) * 2022-04-27 2023-11-02 Beijing Sightnovo Medical Technology Co., Ltd Compositions and methods for eye diseases
US11723955B1 (en) 2022-05-13 2023-08-15 Allgenesis Biotherapeutics Inc. VEGFR fusion protein pharmaceutical composition
CA3265082A1 (en) * 2022-09-01 2024-03-07 Vegenics Pty Limited PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND METHOD OF USE
TW202412840A (zh) * 2022-09-16 2024-04-01 大陸商齊魯製藥有限公司 一種穩定的高濃度自緩衝藥物組合物
USD1120314S1 (en) 2022-11-30 2026-03-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Dose delivery device
AU2024218755A1 (en) * 2023-02-10 2025-09-11 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pharmaceutical preparation containing anti-vegfa and anti-vegfc bispecific binding protein
JP2025003405A (ja) 2023-06-23 2025-01-09 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 眼内血管新生性疾患の治療のための、ｖｅｇｆアンタゴニストの延長された高用量レジメン
WO2025122670A1 (en) * 2023-12-05 2025-06-12 Kodiak Sciences Inc. Formulations for dual vegf/il-6 inhibitors, anti-vegf antibodies, and conjugates thereof
WO2025177156A1 (en) * 2024-02-20 2025-08-28 Lupin Limited Stable ophthalmic pharmaceutical formulation of aflibercept
WO2025217334A1 (en) * 2024-04-09 2025-10-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Low concentration vegf receptor fusion protein containing formulations
WO2025217676A1 (en) * 2024-04-15 2025-10-23 CSL Innovation Pty Ltd Protein formulations and uses thereof
WO2025219484A1 (en) 2024-04-16 2025-10-23 Alvotech Hf High concentration aflibercept formulations
CN118108862B (zh) * 2024-04-29 2024-08-09 上海鼎新基因科技有限公司 抗血管新生的融合蛋白及其应用

Family Cites Families (210)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5580856A (en) 1994-07-15 1996-12-03 Prestrelski; Steven J. Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof
KR19980703876A (ko) 1995-04-14 1998-12-05 스티븐 엘. 허스트 분산성이 개선된 분말화된 약학적 조성물
US6685940B2 (en) 1995-07-27 2004-02-03 Genentech, Inc. Protein formulation
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
CA2226575C (en) 1995-07-27 2011-10-18 Genentech, Inc. Stabile isotonic lyophilized protein formulation
IL132240A0 (en) 1997-04-07 2001-03-19 Genentech Inc Anti-vegf antibodies
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
AUPP494798A0 (en) 1998-07-29 1998-08-20 Pacific Biolink Pty Limited Protective protein formulation
US6833349B2 (en) 1999-06-08 2004-12-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating inflammatory skin diseases
US7396664B2 (en) 1999-06-08 2008-07-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. VEGF-binding fusion proteins and nucleic acids encoding the same
US7087411B2 (en) 1999-06-08 2006-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fusion protein capable of binding VEGF
US7070959B1 (en) 1999-06-08 2006-07-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Modified chimeric polypeptides with improved pharmacokinetic properties
US7303746B2 (en) 1999-06-08 2007-12-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating eye disorders with modified chimeric polypeptides
MXPA01012630A (es) 1999-06-08 2002-07-22 Regeneron Pharma Polipeptidos quimericos modificados con propiedades farmacocineticas mejoradas.
US7306799B2 (en) 1999-06-08 2007-12-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Use of VEGF inhibitors for treatment of eye disorders
US6586574B1 (en) 1999-08-17 2003-07-01 Nn A/S Stabilization of freeze-dried cake
US8703126B2 (en) 2000-10-12 2014-04-22 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
JP4340062B2 (ja) 2000-10-12 2009-10-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 粘度の減少した濃縮タンパク質製剤
AU2002324556A1 (en) 2001-07-25 2003-02-17 Protein Design Labs, Inc. Stable lyophilized pharmaceutical formulation of igg antibodies
AU2002335046A1 (en) 2001-10-19 2003-05-06 Inhale Therapeutic Systems, Inc. The use of proton sequestering agents in drug formulations
US20050123509A1 (en) 2001-10-19 2005-06-09 Lehrman S. R. Modulating charge density to produce improvements in the characteristics of spray-dried proteins
ES2392073T3 (es) 2001-11-08 2012-12-04 Abbott Biotherapeutics Corp. Formulación farmacéutica líquida estable de anticuerpos IGG
SI1478394T1 (sl) 2002-02-27 2008-12-31 Immunex Corp STABILIZIRAN TNFR-Fc SESTAVEK Z ARGININOM
AU2004229335C1 (en) 2003-04-04 2010-06-17 Genentech, Inc. High concentration antibody and protein formulations
US7399612B2 (en) 2003-06-30 2008-07-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. VEGF-binding fusion proteins and nucleic acids encoding the same
AR046510A1 (es) 2003-07-25 2005-12-14 Regeneron Pharma Composicion de un antagonista de vegf y un agente anti-proliferativo
US20050112061A1 (en) 2003-08-06 2005-05-26 Jocelyn Holash Use of a VEGF antagonist in combination with radiation therapy
US20050196340A1 (en) 2003-08-06 2005-09-08 Jocelyn Holash Use of a VEGF antagonist in combination with radiation therapy
NZ592039A (en) 2003-08-27 2013-03-28 Ophthotech Corp Combination therapy for the treatment of ocular neovascular disorders
PL1767546T3 (pl) 2004-06-08 2012-07-31 Chengdu Kanghong Biotechnologies Co Ltd Hamujące angiogenezę białka chimeryczne i ich zastosowanie
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
EP1802334B1 (en) 2004-10-21 2012-08-29 Genentech, Inc. Method for treating intraocular neovascular diseases
HUE034109T2 (en) 2005-03-25 2018-01-29 Regeneron Pharma VEGF antagonist formulations
WO2006138181A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
EP2377554A1 (en) 2005-07-22 2011-10-19 Amgen, Inc Concentrated protein lyophilates, methods and uses
AU2006272714A1 (en) 2005-07-25 2007-02-01 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for protein deaggregation
KR20080071192A (ko) 2005-11-22 2008-08-01 와이어쓰 면역글로불린 융합 단백질 제형
JP5405122B2 (ja) 2005-12-21 2014-02-05 ワイス・エルエルシー 低粘度のタンパク質製剤およびその用途
FR2895258B1 (fr) 2005-12-22 2008-03-21 Aventis Pharma Sa Combinaison comprenant de la combretastatine et des agents anticancereux
JP2009525986A (ja) 2006-02-03 2009-07-16 メディミューン，エルエルシー タンパク質製剤
TW200806317A (en) 2006-03-20 2008-02-01 Wyeth Corp Methods for reducing protein aggregation
US8216575B2 (en) 2006-03-31 2012-07-10 Chengdu Kanghong Biotechnologies Co., Ltd. Inhibition of neovascularization with a soluble chimeric protein comprising VEGF FLT-1 and KDR domains
CN100502945C (zh) 2006-03-31 2009-06-24 成都康弘生物科技有限公司 Vegf受体融合蛋白在治疗眼睛疾病中的应用
SI2944306T1 (sl) 2006-06-16 2021-04-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Formulacije antagonista VEGF, primerne za intravitrealno dajanje
WO2009015345A1 (en) 2007-07-25 2009-01-29 Amgen Inc. Pharmaceutical compositions comprising fc fusion proteins
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
ES2968301T3 (es) 2008-08-05 2024-05-08 Wyeth Llc Liofilización por encima del colapso
US8623395B2 (en) 2010-01-29 2014-01-07 Forsight Vision4, Inc. Implantable therapeutic device
WO2010148321A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Wyeth Llc Slow dissolution method for reconstitution of lyophilized material
CA2764180A1 (en) 2009-06-18 2010-12-23 Wyeth Llc Lyophilized formulations for small modular immunopharmaceuticals
EP2453874A2 (en) 2009-07-14 2012-05-23 Biogen Idec MA Inc. Methods for inhibiting yellow color and peroxide formation in a composition
EP2458990B1 (en) 2009-07-28 2016-03-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Methods for producing high concentration lyophilized pharmaceutical formulations
WO2011017330A1 (en) 2009-08-04 2011-02-10 Genentech Inc Concentrated polypeptide formulations with reduced viscosity
US20130029909A1 (en) 2009-09-15 2013-01-31 John Ryan Treatment of cancer
EP3409289B1 (en) 2010-02-26 2020-09-30 Novo Nordisk A/S Stable antibody containing compositions
BR112012022223B1 (pt) 2010-03-01 2022-08-09 Cytodyn Inc Formulação de proteína concentrada, uso e método de preparação da mesma
CN102958538A (zh) 2010-05-03 2013-03-06 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于降低含有蛋白质的制剂的粘度的组合物和方法
MX2012014523A (es) 2010-07-02 2013-01-29 Genentech Inc Tratamiento de desprendimiento epitelial de pigmento vascularizado con terapia anti-vegf.
WO2012019047A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Forsight Vision4, Inc. Subconjunctival implant for posterior segment drug delivery
CN103816115B (zh) * 2010-08-31 2017-06-27 成都康弘生物科技有限公司 一种含有抑制血管增生的融合蛋白的药物组合物及用途
CN102380096B (zh) 2010-08-31 2014-04-30 成都康弘生物科技有限公司 一种含有抑制血管增生的融合蛋白的药物组合物及用途
CN103533950A (zh) 2011-01-13 2014-01-22 瑞泽恩制药公司 Vegf拮抗剂在治疗血管生成眼病中的用途
DK2701773T3 (da) 2011-04-25 2019-05-20 Icon Bioscience Inc Dosisstyredele til injektionssprøjte
JO3283B1 (ar) 2011-04-26 2018-09-16 Sanofi Sa تركيب يتضمن أفليبيرسيبت, حمض فولينيك, 5- فلورويوراسيل (5- Fu) وإرينوسيتان (FOLFIRI)
WO2013012022A1 (ja) 2011-07-19 2013-01-24 中外製薬株式会社 アルギニンアミドまたはその類似化合物を含む安定なタンパク質含有製剤
WO2013063510A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Integritybio Inc. Protein formulations containing amino acids
GB201122408D0 (en) 2011-12-23 2012-02-08 Univ Strathclyde Method for preparing dry protein formulations
NZ627859A (en) 2012-01-23 2015-09-25 Regeneron Pharma Stabilized formulations containing anti-ang2 antibodies
TWI775096B (zh) 2012-05-15 2022-08-21 澳大利亞商艾佛蘭屈澳洲私營有限公司 使用腺相關病毒(aav)sflt-1治療老年性黃斑部退化(amd)
PT3858405T (pt) 2012-06-01 2023-06-26 Novartis Ag Seringa
US20130323242A1 (en) 2012-06-01 2013-12-05 Ophthotech Corp. Compositions comprising an anti-pdgf aptamer and a vegf antagonist
EA201492289A1 (ru) 2012-06-01 2015-05-29 Офтотек Корпорейшн Композиции, содержащие аптамер против pdgf и антагонист vegf
US20150150982A1 (en) 2012-06-12 2015-06-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical formulation for a therapeutic antibody
DE202013000688U1 (de) 2012-07-03 2013-03-05 Novartis Ag Glas-Spritze
US9592297B2 (en) 2012-08-31 2017-03-14 Bayer Healthcare Llc Antibody and protein formulations
KR102467714B1 (ko) 2012-11-08 2022-11-16 클리어사이드 바이오메디컬, 인코포레이드 인간 대상체에서 안구 질병을 치료하기 위한 방법 및 장치
US9474803B2 (en) 2012-11-27 2016-10-25 Alteogen Inc. Composition for stabilizing fusion protein in which protein and FC domain are fused
EP2956468B1 (en) 2013-02-12 2020-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Tangential flow filtration based protein refolding methods
US10274503B2 (en) 2013-05-08 2019-04-30 Vegenics Pty Limited Methods of using VEGF-C biomarkers for age-related macular degeneration (AMD) diagnosis
EP3003369A4 (en) 2013-05-28 2017-04-26 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising pyrophosphate
KR102465025B1 (ko) 2013-07-18 2022-11-09 맨카인드 코포레이션 열-안정성 건조 분말 약제학적 조성물 및 방법
EP3628324A1 (en) 2013-11-05 2020-04-01 Allergan, Inc. Method of treating conditions of the eye with an anti-vegf darpin
RU2702748C2 (ru) 2014-05-12 2019-10-11 Формикон Аг Предварительно заполненный пластиковый шприц, содержащий антагонист vegf
US10478498B2 (en) 2014-06-20 2019-11-19 Reform Biologics, Llc Excipient compounds for biopolymer formulations
CA2952609A1 (en) 2014-06-26 2015-12-30 Amgen Inc. Solid protein formulations comprising stabilizer, sugar alcohol, sugar and surfactant
WO2016008975A1 (en) 2014-07-18 2016-01-21 Sanofi Method for predicting the outcome of a treatment with aflibercept of a patient suspected to suffer from a cancer
CN105435222B (zh) 2014-09-25 2018-05-29 信达生物制药(苏州)有限公司 重组融合蛋白制剂
CN104940926B (zh) 2014-09-25 2017-09-22 信达生物制药(苏州)有限公司 重组融合蛋白制剂
TWI738632B (zh) 2014-11-07 2021-09-11 瑞士商諾華公司 穩定的含有高濃度抗vegf抗體之蛋白質溶液調配物
US20160144025A1 (en) 2014-11-25 2016-05-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and formulations for treating vascular eye diseases
HUE057653T2 (hu) 2014-12-11 2022-05-28 Bayer Healthcare Llc Kis aktív choroidális neurovaszkularizáció lézióval jellemzett idõskori makuladegeneráció kezelése
BR112017020948A2 (pt) * 2015-03-31 2018-07-10 Ildong Pharm Co., Ltd. composição farmacêutica, método para preparar um agente, método para tratar uma doença ocular e uso de uma proteína de fusão
RU2766890C2 (ru) 2015-06-16 2022-03-16 Мерк Патент Гмбх Комбинированные способы лечения антагонистами pd-l1
KR101808234B1 (ko) * 2015-06-23 2017-12-12 (주)알테오젠 IgG Fc 도메인을 가지는 융합 단백질의 안정한 액상 제제
MX2018000869A (es) 2015-07-22 2018-07-06 Iconic Therapeutics Inc Metodos para tratar trastornos asociados con la angiogenesis y la neovascularizacion.
AU2016329034B2 (en) 2015-09-22 2019-05-23 Pfizer Inc. Method of preparing a therapeutic protein formulation and antibody formulation produced by such a method
JP6959912B2 (ja) 2015-09-23 2021-11-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｖｅｇｆ抗体の最適化変異体
CA3001346A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable protein compositions
HK1257422A1 (zh) 2015-10-30 2019-10-18 豪夫迈‧罗氏有限公司 抗-因子d抗体变体缀合物及其用途
RU2734958C2 (ru) 2015-11-18 2020-10-26 Формикон Аг Предварительно заполненная фармацевтическая упаковка, содержащая жидкий состав на основе антагониста vegf
WO2017085253A1 (en) 2015-11-18 2017-05-26 Formycon Ag Pre-filled plastic syringe containing a vegf antagonist
EP3383435A4 (en) 2015-11-30 2019-07-10 Medimmune, LLC OPTIMIZED RATES OF AMINO ACIDS AND SUGARS AS AMORPHOUS STABILIZING COMPOUNDS IN PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS HAVING HIGH CONCENTRATIONS IN PROTEIN-BASED THERAPEUTICS
PT3384049T (pt) 2015-12-03 2023-08-18 Regeneron Pharma Método de associação de variantes genéticas com um resultado clínico em doentes que sofrem de degeneração macular relacionada à idade tratados com anti-vegf
EP3400014A1 (en) 2016-01-08 2018-11-14 Clearside Biomedical, Inc. Methods and devices for treating posterior ocular disorderswith aflibercept and other biologics
ES2824574T3 (es) 2016-01-25 2021-05-12 Sanofi Sa Método de predicción del resultado de un tratamiento con aflibercept de un paciente que se sospecha que padece un cáncer midiendo el nivel de un biomarcador de plasma
WO2017129685A1 (en) * 2016-01-26 2017-08-03 Formycon Ag Liquid formulation of a vegf antagonist
EP3443346B1 (en) 2016-04-13 2023-08-30 Medimmune, LLC Use of amino acids as stabilizing compounds in pharmaceutical compositions containing high concentrations of protein-based therapeutic agents
SI3471780T1 (sl) 2016-06-16 2021-03-31 Adverum Biotechnologies, Inc. Zdravljenje SDM-ja z uporabo različice AAV2 z afliberceptom
CA3030422C (en) 2016-07-13 2021-10-26 Reform Biologics, Llc Stabilizing excipients for therapeutic protein formulations
SG11201901081XA (en) 2016-08-17 2019-03-28 Boehringer Ingelheim Int Process for the preparation of highly concentrated liquid formulations containing biomolecules
IL264640B2 (en) 2016-08-18 2024-03-01 Regeneron Pharma Assay for determining potential to self-association of a protein using concentration-dependent self-interaction nanoparticle spectroscopy
CN109689042B (zh) 2016-08-24 2022-07-12 北京生命科学研究所 用于治疗黄斑变性的与恩他卡朋相关的化合物
WO2018063963A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody and protein therapeutic formulations and uses thereof
IL310367A (en) * 2016-10-07 2024-03-01 Regeneron Pharma A stable protein at room temperature that has been lyophilized
CA3043487A1 (en) 2016-11-21 2018-05-24 Just-Evotec Biologics Inc Aflibercept formulations and uses thereof
CN108778336A (zh) 2016-12-01 2018-11-09 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种vegfr抑制剂与parp抑制剂联合在制备治疗胃癌的药物中的用途
US20200368331A1 (en) 2016-12-08 2020-11-26 Gary E. Borodic Novel Method of Treating Macular Degeneration Using Botulinum Toxin-Based Pharmaceuticals
US11123411B2 (en) 2016-12-08 2021-09-21 Gary E. Borodic Method of treating macular degeneration using botulinum toxin-based pharmaceuticals
GEAP202315128A (en) 2016-12-23 2023-02-10 Serum Institute Of India Pvt Ltd Improved methods for enhancing antibody productivity in mammalian cell culture and minimizing aggregation during downstream, formulation processes and stable antibody formulations obtained thereof
US10617756B2 (en) 2017-01-05 2020-04-14 Shimojani, LLC Drug regimen for treatment of cerebral ischemia
US10426817B2 (en) 2017-01-24 2019-10-01 Macregen, Inc. Treatment of age-related macular degeneration and other eye diseases with apolipoprotein mimetics
KR101861163B1 (ko) 2017-04-26 2018-05-25 삼천당제약주식회사 안과용 약학 조성물
WO2018201007A2 (en) 2017-04-27 2018-11-01 The Johns Hopkins University Dendrimer compositions for use in angiography
WO2018211517A1 (en) 2017-05-16 2018-11-22 Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. High concentration protein formulations with reduced viscosity
EP3630043A1 (en) 2017-05-24 2020-04-08 Formycon AG Sterilizable pre-filled pharmaceutical packages comprising a liquid formulation of a vegf-antagonist
US20200108064A1 (en) 2017-06-08 2020-04-09 Eye Therapies, Llc Low-dose brimonidine combinations and uses thereof
TW201904610A (zh) 2017-06-14 2019-02-01 德商拜耳製藥公司 用於治療新生血管型青光眼之非抗體vegf拮抗劑
WO2019023392A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 Elektrofi, Inc. FORMATION OF PARTICLES COMPRISING AGENTS
WO2019020777A1 (en) 2017-07-26 2019-01-31 Formycon Ag LIQUID FORMULATION OF A VEGF ANTAGONIST
WO2019036619A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Reform Biologics, Llc STABILIZING EXCIPIENTS FOR FORMULATIONS OF THERAPEUTIC PROTEIN
IT201700101582A1 (it) 2017-09-12 2019-03-12 Milano Politecnico Dispositivo per rilascio intraoculare
KR20250093620A (ko) 2017-09-15 2025-06-24 암젠 인크 치료 단백질의 동결건조된 약학적 제형을 위한 방법
EP3684332A1 (en) 2017-09-18 2020-07-29 Amgen Inc. Vegfr-fc fusion protein formulations
JP2020535199A (ja) 2017-09-29 2020-12-03 ハンミ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド 効力が向上した持続性タンパク質結合体
US11246846B2 (en) 2017-10-23 2022-02-15 Michael S. Tempesta Trisodium citrate compositions having enhanced uptake across digestive mucosa
WO2019099786A1 (en) 2017-11-16 2019-05-23 Ophthotech Corporation A method for treating or preventing idiopathic polypoidal choroidal vasculopathy (ipcv)
MA50908A (fr) 2017-11-17 2020-09-23 Amgen Inc Formulations de protéines de fusion vegfr-fc
WO2019099965A1 (en) 2017-11-20 2019-05-23 Just Biotherapeutics, Inc. Aflibercept formulations containing a lysine salt as tonicifying agent and uses thereof
AU2018375398C1 (en) 2017-11-30 2026-01-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Use of a VEGF antagonist to treat angiogenic eye disorders
CN111093706B (zh) 2017-12-06 2022-06-21 江苏恒瑞医药股份有限公司 Parp抑制剂用于治疗化疗耐药的卵巢癌或乳腺癌的用途
EP3730126B1 (en) 2017-12-22 2025-05-14 Samsung Bioepis Co., Ltd. Liquid composition comprising vegf antagonist
US11524053B2 (en) 2018-01-26 2022-12-13 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treatment of angiogenic disorders using anti-VEGF agents
US11426446B2 (en) 2018-03-08 2022-08-30 Coherus Biosciences, Inc. Stable aqueous formulations of aflibercept
WO2019173767A1 (en) 2018-03-08 2019-09-12 Coherus Biosciences Inc. Stable aqueous formulations of aflibercept
MA52204A (fr) 2018-04-12 2021-02-17 Amgen Inc Procédés de préparation de compositions protéiques stables
US20210379012A1 (en) 2018-04-30 2021-12-09 Indiana University Research And Technology Corporation Antiangiogenic chromane derivative and uses thereof
CN108671229B (zh) 2018-05-08 2022-03-25 华博生物医药技术（上海）有限公司 一种重组人血管内皮生长因子受体-抗体融合蛋白的药物组合制剂
JP7235770B2 (ja) 2018-05-10 2023-03-08 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 高濃度ｖｅｇｆ受容体融合タンパク質を含む製剤
US11519020B2 (en) 2018-05-25 2022-12-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of associating genetic variants with a clinical outcome in patients suffering from age-related macular degeneration treated with anti-VEGF
TW202011995A (zh) 2018-07-03 2020-04-01 比利時商葛萊伯格有限公司 高濃度液體抗體配製物
EP3851096A4 (en) 2018-09-10 2022-07-06 Samsung Bioepis Co., Ltd. LIQUID COMPOSITION WITH PROTEIN
EP3636657A1 (en) 2018-10-08 2020-04-15 Ablynx N.V. Chromatography-free antibody purification method
WO2020087003A1 (en) 2018-10-26 2020-04-30 Amgen Inc. Formulations comprising a tris buffer and a protein
CN110664757B (zh) 2018-11-19 2022-08-02 成都瑞沐生物医药科技有限公司 纳米晶滴眼剂、其制备方法及其应用
WO2020106948A1 (en) 2018-11-21 2020-05-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High concentration protein formulation
EP3897595B1 (fr) 2018-12-20 2023-03-15 Laboratoires THEA Composition ophtalmique nutraceutique pour le traitement de pathologies retiniennes a composante neovasculaire
US20220098279A1 (en) 2019-01-30 2022-03-31 Amgen Inc. Aflibercept attributes and methods of characterizing and modifying thereof
WO2020167848A1 (en) 2019-02-11 2020-08-20 Surrozen, Inc. Modulation of wnt signalling in ocular disorders
EP3923907B1 (en) 2019-02-13 2024-09-25 Novaliq GmbH Compositions and methods for the treatment of ocular neovascularization
US20200390725A1 (en) 2019-06-17 2020-12-17 Sol-Gel Technologies Ltd. Treatment of ocular diseases with ophthalmic tapinarof compositions
WO2020255135A1 (en) 2019-06-17 2020-12-24 Sol-Gel Technologies Ltd. Treatment of ocular inflammatory diseases with topical ophthalmic tapinarof compositions
US20200390724A1 (en) 2019-06-17 2020-12-17 Sol-Gel Technologies Ltd. Treatment of ocular diseases with ophthalmic tapinarof compositions
CN112203642B (zh) 2019-03-25 2025-03-07 阿特根公司 用于皮下注射的包含人透明质酸酶ph20变体和药物的药物组合物
AU2020254582B2 (en) 2019-04-01 2025-12-18 Genentech, Inc. Compositions and methods for stabilizing protein-containing formulations
CA3134538A1 (en) 2019-04-03 2020-10-08 Denali Therapeutics Inc. Formulations of protein molecules comprising iduronate 2-sulfatase
US12599669B2 (en) 2019-04-23 2026-04-14 Amgen Inc. Use of low molecular weight polyvinylpyrrolidone (PVP) to reduce viscosity of high concentration protein formulations
EP3736574A1 (en) 2019-05-07 2020-11-11 Atlas Antibodies AB A formulation comprising an isotope labeled fusion polypeptide
WO2020239051A1 (zh) 2019-05-30 2020-12-03 江苏恒瑞医药股份有限公司 Cdk4/6抑制剂与vegfr抑制剂联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途
JP2022540148A (ja) 2019-07-10 2022-09-14 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 低減したレベルの宿主細胞タンパク質を含む方法および組成物
MX2022001433A (es) 2019-08-06 2022-02-22 Hoffmann La Roche Tratamiento personalizado de enfermedades oftalmologicas.
US20210100856A1 (en) 2019-09-11 2021-04-08 Adverum Biotechnologies, Inc. Methods of treating ocular neovascular diseases using aav2 variants encoding aflibercept
AU2020345174A1 (en) 2019-09-12 2022-03-31 Lupin Limited Modified dosing of VEGF inhibitors for ophthalmic use
US20220340630A1 (en) 2019-09-13 2022-10-27 National Science And Technology Development Agency Composition of renaturation buffer solution for dimeric proteins and method of renaturation dimeric proteins using the composition thereof
US20220331430A1 (en) 2019-09-17 2022-10-20 Merck Patent Gmbh Camphorsulfonic acid and combinations thereof with cationic excipients as viscosity reducing agents in high concentrated protein formulations
EP4057980A1 (en) 2019-11-15 2022-09-21 F. Hoffmann-La Roche AG Prevention of visible particle formation in aqueous protein solutions
JP2023504821A (ja) 2019-12-03 2023-02-07 四川弘合生物科技有限公司 エレメンを含む医薬組成物、その調製方法、及びその使用
KR20220110555A (ko) 2019-12-06 2022-08-08 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Vegf 미니-트랩 및 그의 사용 방법
KR20240007293A (ko) 2019-12-06 2024-01-16 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 항-vegf 단백질 조성물 및 이를 생산하는 방법
KR20210077645A (ko) 2019-12-17 2021-06-25 주식회사 프로젠 신규 주사제 제형
WO2021146328A1 (en) 2020-01-13 2021-07-22 Aptevo Research And Development Llc Formulations for protein therapeutics
CN115697333A (zh) 2020-02-19 2023-02-03 科尼尔赛德生物医学公司 包含阿西替尼的组合物和治疗眼部疾病的方法
PT3884929T (pt) 2020-03-25 2023-08-09 Ocular Therapeutix Inc Implante ocular contendo um inibidor da tirosina cinase
WO2021203769A1 (zh) 2020-04-10 2021-10-14 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种抗pd-1抗体在制备治疗肢端黑色素瘤的药物中的用途
EP4138778A1 (en) 2020-04-22 2023-03-01 Dragonfly Therapeutics, Inc. Formulation, dosage regimen, and manufacturing process for heterodimeric fc-fused proteins
CA3180401A1 (en) 2020-06-11 2021-12-16 Bartosz SIKORSKI Methods of improving retina-associated disease outcome using ccr3-inhibitors
US11944663B2 (en) 2020-06-18 2024-04-02 Chengdu Kanghong Biotechnologies Co. Ltd. Method for treating angiogenic eye disorders using VEGF antagonists
CN115803010A (zh) 2020-07-09 2023-03-14 豪夫迈·罗氏有限公司 浓缩的蛋白质组合物、它们的制备及其用途
WO2022011323A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Iconic Therapeutics, Inc. Ocular disease treatment using anti-tissue factor antibodies
IL299671A (en) 2020-07-13 2023-03-01 Merck Patent Gmbh Viscosity-reducing excipients and their combinations for high-concentration protein formulations
US11524998B2 (en) 2020-07-16 2022-12-13 Novartis Ag Anti-betacellulin antibodies, fragments thereof, and multi-specific binding molecules
KR20230047359A (ko) 2020-07-29 2023-04-07 시아겐 인크. 트라스투주맙, 탁산 및 vegfr-2 길항제와 병용하여 투카티닙을 이용하는 her2 양성 암의 치료 방법
KR20220015976A (ko) 2020-07-31 2022-02-08 (주)셀트리온 안정한 약제학적 제제
DE102020005002A1 (de) 2020-08-17 2022-02-17 Epo Experimentelle Pharmakologie & Onkologie Berlin-Buch Gmbh Mittel zur Therapie von Tumorerkrankungen
WO2022056326A1 (en) 2020-09-11 2022-03-17 Elixir Medical Corporation Anticoagulant compounds, methods and devices for ophthalmic use
MX2023004839A (es) 2020-10-30 2023-06-29 Eluminex Biosciences Suzhou Ltd Inhibidores de factores angiogenicos.
US20240024416A1 (en) 2020-10-30 2024-01-25 Gemini Therapeutics Sub, Inc. Methods for treating inflammatory ocular diseases with complement factor h
EP4243780A1 (en) 2020-11-13 2023-09-20 AstraZeneca UK Limited Pharmaceutical formulation
US20220151920A1 (en) 2020-11-18 2022-05-19 Bend Research, Inc. Inhalable dry powder formulations comprising angiogenesis inhibitors
FI20215186A1 (en) 2021-02-19 2022-08-20 Rebio Tech Oy Compositions for ophthalmic treatment
CA3213505A1 (en) 2021-03-16 2022-09-22 Kashiv Biosciences, Llc Novel formulation of fusion protein
WO2022201084A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Novartis Ag Methods for treating ocular diseases
KR20230167100A (ko) 2021-04-09 2023-12-07 에이버맥스 바이오파마 인크. 안구 트랜스진 발현을 위한 조성물 및 방법
BR112023019056A2 (pt) 2021-04-27 2024-01-16 Adverum Biotechnologies Inc Métodos para tratar doenças oculares usando variantes de aav2 que codificam aflibercepte
WO2022229932A1 (en) 2021-04-29 2022-11-03 Einar Stefansson Hypoxia inducible factor (hif) inhibitors for treatment of atrophy associated with retinal hypoxia
PL4185318T3 (pl) 2021-05-17 2026-01-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Rozszerzone schematy leczenia dużymi dawkami antagonistów vegf w leczeniu angiogennych zaburzeń oka
WO2023001288A1 (zh) 2021-07-23 2023-01-26 百奥泰生物制药股份有限公司 整合素GPIIb/IIIa拮抗剂及其和抗VEGF抗体联合用药的应用
WO2023023278A2 (en) 2021-08-18 2023-02-23 University Of Utah Research Foundation Multigene constructs for treatment of age-related macular degeneration and other complement dysregulation-related conditions
EP4398877A1 (en) 2021-09-06 2024-07-17 LEK Pharmaceuticals d.d. Formulations for vegf receptor fusion proteins
EP4147709A1 (en) 2021-09-14 2023-03-15 The Provost, Fellows, Foundation Scholars, and The Other Members of Board, of The College of The Holy and Undivided Trinity of Queen Elizabeth A composition comprising il-36 and/or il-18 for use in treating ocular disorders
US20250009850A1 (en) 2021-10-29 2025-01-09 Alteogen, Inc. Pharmaceutical composition comprising human hyaluronidase ph20 and drug

Also Published As

Publication number Publication date
CA3099551C (en) 2025-08-19
US20210353714A1 (en) 2021-11-18
AU2024100037B4 (en) 2025-04-10
AU2025204229A1 (en) 2025-06-26
HRP20260001T1 (hr) 2026-02-27
MX421310B (es) 2025-03-14
AU2024100037A4 (en) 2024-10-24
EP4684776A3 (en) 2026-04-22
JP2026058347A (ja) 2026-04-03
CN118948760A (zh) 2024-11-15
JP7235770B2 (ja) 2023-03-08
PT4364724T (pt) 2025-12-16
US20250121030A1 (en) 2025-04-17
AU2019265005A1 (en) 2020-12-17
US11103552B2 (en) 2021-08-31
EP4364724B1 (en) 2025-11-26
IL278375B2 (en) 2025-07-01
FI4364724T3 (fi) 2026-01-05
MX2020011848A (es) 2021-03-29
JP2021523162A (ja) 2021-09-02
CN121421956A (zh) 2026-01-30
IL278375A (sr) 2020-12-31
JP7791125B2 (ja) 2025-12-23
EP3790532A1 (en) 2021-03-17
ES3056525T3 (en) 2026-02-23
CN112739323A (zh) 2021-04-30
CN121570417A (zh) 2026-02-27
PH12020551839A1 (en) 2021-06-28
KR20210021299A (ko) 2021-02-25
SG11202010684YA (en) 2020-11-27
MY204232A (en) 2024-08-16
MA52570A (fr) 2021-03-17
CA3281979A1 (en) 2026-03-02
LT4364724T (lt) 2026-01-12
IL318714A (en) 2025-03-01
CL2020002872A1 (es) 2021-03-26
SI4364724T1 (sl) 2026-01-30
PL4364724T3 (pl) 2026-02-23
US20190343918A1 (en) 2019-11-14
BR112020022610A2 (pt) 2021-02-09
EP4364724A3 (en) 2024-08-07
IL278375B1 (en) 2025-03-01
CN116585466A (zh) 2023-08-15
CN112739323B (zh) 2025-11-25
AU2019265005B2 (en) 2025-03-13
WO2019217927A1 (en) 2019-11-14
CL2021001957A1 (es) 2022-04-08
NZ770284A (en) 2025-11-28
CA3099551A1 (en) 2019-11-14
JOP20200275A1 (ar) 2020-11-02
EP4364724A2 (en) 2024-05-08
US20240058418A1 (en) 2024-02-22
DK4364724T3 (da) 2025-12-22
EP4684776A2 (en) 2026-01-28
CO2020014427A2 (es) 2020-12-21
MX2024014765A (es) 2025-01-09
CL2023003448A1 (es) 2024-07-19
US12168036B2 (en) 2024-12-17
JP2023071798A (ja) 2023-05-23
MX2025001448A (es) 2025-03-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12168036B2 (en) Methods for treating angiogenic eye disorders with high doses of VEGF receptor fusion proteins
US20190117767A1 (en) Methods and formulations for treating vascular eye diseases
AU2025226774A1 (en) Extended, high dose VEGF antagonist regimens for treatment of angiogenic eye disorders
CA3097061A1 (en) Viscosity reduction of highly concentrated protein formulations
EP4245312A1 (en) Extended, high dose vegf antagonist regimens for treatment of angiogenic eye disorders
US20230270670A1 (en) Ophthalmic liquid composition
HK40106296B (en) High concentration vegf receptor fusion protein containing formulations
HK40106296A (en) High concentration vegf receptor fusion protein containing formulations
EA046718B1 (ru) Составы, содержащие слитый белок рецептора фрэс в высокой концентрации
HK40052983A (zh) 含有高浓度vegf受体融合蛋白的制剂
HK40052983B (zh) 含有高浓度vegf受体融合蛋白的制剂
AU2024284015A1 (en) Clec9a-based chimeric protein formulations
WO2023281367A1 (en) Stable liquid formulations of aflibercept