SE459921B - Derivat av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin - Google Patents
Derivat av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicinInfo
- Publication number
- SE459921B SE459921B SE8304045A SE8304045A SE459921B SE 459921 B SE459921 B SE 459921B SE 8304045 A SE8304045 A SE 8304045A SE 8304045 A SE8304045 A SE 8304045A SE 459921 B SE459921 B SE 459921B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- morpholinyl
- deamino
- cyano
- doxorubicin
- daunorubicin
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
459 921 Ett fåtal av dessa derivat har varit inaktiva.
En stor del av historiken och tidigare tekniken avseende doxorubicin och dess antracyklinanaloger äterfinnes i artikeln "Adriamycin" av David W. Henry, ACS Symposium Series, nr. 30, Cancer ChemotheraPYf American Chemical Society, sid. 15-57 (1976) och i boken Doxorubicin av Federico Arcamone, Academic Press, 1981. AD32 innefattas i US-patentet 4 035 566. 5-iminodaunorubicin visas i vårt US-patent 4 109 076. Doxo- rubicinekvivalenten visas i "Synthesis and Preliminary Anti- tumor Evaluation of 5-Iminodoxorubicin", J. Medicinal Chem., gå, 669 (1981) av Edward M. Acton och George L. Tong. 5-imino- daunorubicin kvarhöll aktiviteten med reducerade biverkningar under det att 5-iminodoxorubicin visade ökad aktivitet men krävde högre doser. 3'-deamino-3'-(4-morfolinyl)daunorubicin, beskriven i vårt US- patent 4 301 277 var aktiv vid en fyrtiondel avrdosen av doxo- rubicin men gav ett huvudsakligen identiskt T/C-värde (166 % vs 160 % mot P388). Denna förening och dess framställning och egenskaper beskrives även i "Enhanced Antitumor Properties of 3'-(4-Morpholinyl) and 3'-(4-Methoxy-1-piperidinyl) Derivatives of 3'-Deaminodaunorubicin", J. Medicinal Chem., gå, sid. l8- 24 (1982) av Carol W- Mosher, Helen Y. Wu, Allan N. Fujiwara och Edward M. Acton.
Ett allmänt reducerande alkyleringsförfarande för att fram- .ställa nya, halvsyntetiska antracyklinderivat beskrives i "Adriamycin Analogs. 3. Synthesis of N-Alkylated Anthracyc- lines With Enhanced Efficacy and Reduced Cardiotoxicity", J.
Medicinal Chem., 2_2_, sid. 912-918 (1979) av 0.1.. Tang, my. Wu, T.H. Smith och D.W. Henry.
Innehâlhazi nämnda tidigare teknik upptages härmed i före- liggande text. 459 921 En grupp av nya daunorubicin- och doxorubicin-derivat har nu upptäckts. Dessa föreningar representeras av den allmänna formeln I (I) vari R är CO-CH3 eller CHOH-CH3 för daunorubicinderívaten eller CO-CHZOH eller CHOH-CHZOH för doxorubicinderivaten; X är 0 eller NH; och A är antingen en cyanogrupp (CN) eller väte, med begränsningen att när X är 0, mäste A vara en cyano- grupp. När A är väte kan dessa föreningar dessutom föreligga som syraadditionssalter. Dessa salter_utgör en ytterligare aspekt av föreliggande uppfinning.
Framställníng av föreningarna med den allmänna formeln I Framställningen av dessa föreningar kännetecknas av att de kända daunorubícin och doxorubicin med strukturen 459 921- ' vari R är -COCH3, -CO-CH20H får reagera i ett blandat, vatten~ haltigt, polärt och organiskt medium med en förening med struk- cH - cHo 2 0/ $\\CH2 - CHO varvid reaktionen genomföres i närvaro av ett cyanoborhydrid- turen: salt, som t.ex. en alkalimetallcyanoborhydrid, och att de önskade föreningarna isoleras och renas på i och för sig känt sätt. Dessa föreningar är relaterade till de etablerade anti- -cancerläkemedlen daunorubicin och doxorubicin (adriamycin), framställes av dessa enligt kemiska syntes- och derivatise- ringstekniker och är aktiva medel mot cancer. De synes kombi- nera tvâ gynnsamma och eftersökta egenskaper - hög anti-tumör- effektivitet och lågdos-krav. De uppfyller sålunda löftet av - hög effektivitet med reducerade, dossammanhängande biverkning- ar, säsom kardiotoxicitet, jämfört med tidigare beskrivna material.
Enligt andra aspekter av föreliggande uppfinning tillhandahål- les farmaceutiska beredningar innehållande dessa nya derivat.
Enligt föreliggande uppfinning tillhandahålles morfolínylderi- vat av iminodaunoruhicin och iminodoxorubicin och de farmaceu- tiskt godtagbara salterna därav såväl som cyanomorfolïnylderi- vat av daunorubicin, doxorubicin, iminodaunorubicin och imino- doxorubicin. Dessa föreningar är sammanställda i tabell I. 459 921 Tabell I Föreningar enligt uppfinningen IN NH NH NH NH NH NH NH E HV CN CN CN CN CN CN R CO-CH3 CHOH-CH3 CO-CH2OH CHOH-CHZOH CO-CH3 CHOH-CH3 ' CO-CH OH 2 CHOH~CH2OH CO-CH CHOH-CH3 _C0-CHZOH Föreningsnamn 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)~ -5-iminodaunorubicin och farma- ceutiskt godtagbara salter därav 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- 13-dehydro-5-iminodaunorubicin och farmaceutiskt godtagbara salter därav 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- 5-iminodoxorubicin och farmaceu- tiskt godtagbara salter därav 3'-deamino~3'~(4"-morfolinyl)- 13-dihydro-5-iminodoxorubicin och farmaceutiskt godtagbara salter därav 3'-deamino~3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-daunorubicin 3'-deamino-3'-(3"-cayno~4"- morfolinyl)-l3-dihydrodauno- rubicin 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-doxorubicin 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-l3-dihydrodoxorubi- cin 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-5-iminodaunorubi- cin 3'-deamino-3'-(3"fcyano-4"- morfolinyl)-l3-dihydro-5~imino- daunorubicin ¿- 3'~deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-5-iminodoxorubicin 459 921 E 6 Tabell I (forts.) § å g Föreningsnamn NH CN CHOH-CH OH 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- 2 morfolinyl)-l3-dihydro-5-imino- doxorubicin Fem av dessa föreningar föredrages på grund av deras utmärkta aktivitet som anti-tumörmedel. Dessa är: 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-doxorubicin; 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-l3-dihydrodoxorubi- cin; 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin; 3'-deamino-3'-(35'-cyano-4"-morfolinyl)-l3-dihydrodaunorubi- cin; och 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-5-iminodoxorubicin.
Det första av dessa fem material är det mest föredragna mate- rialet.
De första fyra föreningarna enligt uppfinningen uppställda i tabell I kan vara de fria baserna visade i tabell I eller kan utgöras av de farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalterna av dessa baser¿ Syraadditionssalterna erbjuder fördelen med att vara lösliga i vatten och vattenhaltiga blandade lösningsmedel såsom vatten-alkanoler eller vatten-alkandioler. Exempel på dessa blandade lösningsmedel är vatten-propylenglykol, vatten- etanol, vatten-etylenglykol, saltlösning, varjehanda andra vat- tenhaltiga injicerbara medier och liknande. De fria baserna är lösliga i mindre polära, organiska lösningsmedel såsom kloro- form, metylenklorid, blandade kloroform-metanol-lösningsmedel och liknande. De kan också användas som suspensioner.
Salterna år syraadditionsprodukterna av de fria baserna och en farmaceutiskt godtagbar syra. En “farmaceutiskt godtagbar' syra är en, som är icke-toxisk och allmänt användes i farma- ceutiska produkter. Exempel på dessa syror är oorganiska syror såsom saltsyra, bromvätesyra, svavelsyra och fosforsyra; och 459 921 organiska syror såsom karboxylsyrorna, t.ex. ättiksyra, glykol- syra, maleinsyra, äppelsyra, hydroximaleinsyra, vinsyra, cit- ronsyra, och salicylsyra jämte organosulfonsyrorna, såsom metan- sulfonsyra och p-tolüensulfonsyra. Blandningar av tvâ eller fler syror kan användas såväl som blandningar av en eller fler fria baser plus ett eller fler syraadditionssalt. Av enkelhets- och lättlöslighetsskäl föredrages additionssalterna av salt- syra och bromvätesyra.
Som tidigare angivits kan dessa föreningar också föreligga som derivat. Dessa derivat bildas i syfte att öka föreningarnas löslighet eller för att variera andra fysikaliska egenskaper hos föreningarna.
Framställning av vissa föredragna föreningar enligt upp- finningen Dessa föreningar kan framställas enligt följande allmänna sätt: Kommersiellt tillgänglig daunorubicin eller doxorubicin (i form av ett syraadditionssalt) bringas först att reagera under reducerande alkyleringsbetingelser med 2,2'-oxidiacetaldehyd O=çH çH=O. Denna alkylering ger en blandad produkt inne- CH2-0~CH2 hållande fyra huvudkomponenter. Med daunorubicin är dessa komponenter: 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)daunorubicin, 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-13-dihydroduanorubicin, 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfo1inyl)daunorubicin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-l3-dihydrodaunorubi- cin.
Med doxorubicin innehåller reaktionsprodukten: 3'-deamino-3'1(4"-morfoliny1)doxorubicin, 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-13-dihydrodoxorubicin, 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)doxorubicin och 3'-deamino-3'-{3"-cyano-4"-morfolinyl)~l3-dihydrodoxorubi- cin.- 459 921 8 2,2'-oxidiacetaldehyd kan bildas genom syrahydrolys av 2,2'- oxídiacetaldehyd-bis(dietylacetal) (Et-o) z-cn ÉEH- (o-Et) 2 I CH2-0-CH2 enligt metoden av Field, et al, i belgiska patentet 655 436 eller genom spjälkning av 1,4-anhydroerytritol HO-CH--CH-OH I ' I CH2-0-CH2 enligt metoden av Barry, et al, Carbohydrate Research, Z, 299 (1968) och Greenberg, et al, Carbohydrate Research, åâ, 195 (1974).
Den reducerande alkyleringen kan genomföras med användning av ett överskott på dialdehyden i ett blandat vattenhaltigt- polärt, organiskt medium, såsom vatten-acetonitril, vanligen vid ett pH av cirka 7 i närvaro av ett reduktionsmedel såsom en alkalimetallcyanoborhydrid, t.ex. natrium- eller kalium- cyanoborhydrid. Detta utgör en tämligen enkel reaktion, som vanligen avslutas på en timme eller mindre vid rumstemperatur.
Den reducerande alkyleringen illustreras i exemplen och visas också i tidigare angivna US-patetet 4 301 27? och J. Medicinal Chem., åål sid. 18-24 (1982).
Upparbetningen av den blandade reaktionsprodukten kan genom- föras enligt vilken som helst metod, som åstadkommer önskad isolering och separering. Syraextraktion av reaktionsprodukten är effektiv för att separera de syraextraherbara icke-cyano- substituerade materialen från de syra-olösliga cyanosubstitue- rade materialen. Det resulterande materialparet kan sedan sepa- reras i individuella föreningar enligt olika kromatografiska metoder såsom preparativ skalskiktskromatografi, kolonnkromato- grafi eller preparativ skal-högupplösningsvätskekromatografi. 5-iminoföreningarna kan lätt ooh direkt framställas av de iso- F. 459 921 lerade 5-oxo-föreningarna med användning av metoden beskriven i ovan nämnda artikel i J. Medicinal Chem., gi, sid. 669 (1981).
Enligt denna metod bringas 5-oxo-materialen till kontakt med överskott på alkoholhaltig ammoniak vid låga till moderata temperaturer, som t.ex. från -25°C till +25°C i från cirka 0,5 till cirka 100 timmar. När det gäller 3'-deamino-3'-(4"- morfolinyl)doxorubicin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfo- linyl)doxorubicin är det nödvändigt att blockera hydroxylen pâ 14-kolatomen innan ammoniakbehandlingen sker. Vilken som helst mild syralabil, skyddande grupp kan användas. På grund av dess omfattande användning inom farmaceutisk kemi utgör metoxi- trityl en föredragen skyddande grupp. Tritylfunktionaliteten kan införas genom att behandla 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- doxorubicin eller 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- doxorubicin med överskott på p-anisyl-klordifenylmetan vid rumstemperatur eller liknande. När reaktionen med ammoniak av- slutats kan 14-hydroxylen regenereras genom att bringas till kontakt med en syra, såsom ättiksyra eller kall vattenhaltig trifluorättiksyra. u Föreliggande uppfinning beskrives närmare med hjälp av följan- de exempel. Dessa ges för att illustrera uppfinningen och be- gränsar sålunda inte uppfinningens ram.
Exempel 1 Framställning, isolering och identifiering av 3'-deamino-3'- -(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin A. Enligt metoden för att framställa -3'-deamino-3'-morfo1in- daunorubicin-hydrobromid visad i Mosher, et al., J. Medicinal Chem., gå, sid. 18-24 (1982) framställdes en rå reaktíonspro- dukt innehållande 3'~deamino-3'-(4"-morfolinyl)daunorubicin, 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-l3-dihydrodaunorubicin, 3'-de- amino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin och 3'-deamino~ -3'-(3"-cyano-4"-morfiolinyl)-13-dihydrodaunorubicin. (Innef hållet i denna artikel upptages härmed i föreliggande text.) Det råa materialet extraherades med CHCl3, som beskrivits däri, för att avlägsna de fyra primära produkterna i CHCI3-fasen. 459 921 10 Uttömmande extraktion av CHCI3-fasen med 0,0lN HCl avlägsnade de tvâ basiska morfolinoprodukterna, som heskrives i hänvis- ningen. Den neutrala, proddktrika CHCl3_tvättades med NaHCO3- lösning, torkades och indunstades. Prover löstes i 4:1 CHCI3- CH3OH och placerades pâ en Waters Radial-Pak C-18 högupplös- ningsvätskekromatografi-kolonn och eluerades med 2 ml/minut av en 65=35 0,05M pH 4 citrat-buffert:CH3CN-eluent. Ett material (vanligen l9-24 % totalt) eluerade vid 6,l-6,8 minuter, under det att ett annat material (vanligen 26-27 %) eluerade vid ll,9 minuter. Upptâckt med UV vid 254 nm. Som visas var 6,1- 6,8 minuters-materialet 3'-deamino-3'-(3"-cvano-4"-morfoli- nyl)-l3-dihydrodaunorubicin och ll,0 minuters-materialet var 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin.
B. I större skala löstes 5,41 g av den fasta biprodukten i 500 ml 9:1 CHCl3-CH3OH. Denna lösning tvättades med 0,0lN HCl (3 x lOO ml), H20 (l x lOO ml) och utspädd NaHCO3 (1 x 100 ml). Den organiska fasen torkades, indunstades till torr- het och återstoden vakuumtcrkades vid 0,1 mm och rumstempera- tur för att ge 5.10 g glasartad återstod. Även den vattenhal- tiga fasen kvarhölls.
C. Den glasartade återstoden från del B, 5,09 g, löstes i 50 ml 4:1 CH2Cl2-CH3OH. Lösningen omrördes samtidigt som 30 ml CH3CN tillsattes droppvis. Den resulterande grumliga lös- ningen indunstades till torrhet för att ge en halvfast åter- stod, som triturerades med 200 ml CH3CN i mörker. Den olösliga fasta substansen uppsamlades och triturerades en andra gång med 100 ml CH3CN. De flytande faserna från de två triture- ringarna innehöll den önskade produkten. De indunstades för att ge 2,23 g halvfast återstod. _ D. Den halvfasta återstoden från del C löstes 1 5 ml CH2Cl2 och pâfördes en kolonn med ytterdiameter 3,1 cm x 59 cm av CH2Cl-tvättad 200-325 mesh Mallinckrodt Silic AR CC-7 silika- gel. Kolonnen eluerades med CH2Cl2 (500 ml) och Sedan med CH Cl -CH OH (99:l, lS00.ml; 98:2, 1000 ml; 97:3, 1500 ml; 2 2 3 90:10, 500 ml). Efter uppsamling (10 ml-fraktioner,.kontrolle- 459 921 ll rade med TLC) av 2550 ml ursprungligt eluat, indunstades en fraktion om 190 ml för att ge 0,48 g produkt. Den primära komponenten bestämdes enligt jämförande high-performance-vätske- kromatografi och tunnskiktskromatografi att vara identisk med ett material, som senare visade sig vara 3'-deamino-3'-(3"- cyano-4"-morfolinyl)-daunorubicin.
E. Ett prov om 0,35 g av materialet enligt del D renades ytter- ligare, först i mörkret på fem 2 mm x 20 x 20 cm silikagel- plattor med tvâ CH2Cl2-CH30H 29:l framkallningar. Ett mitt- band innehållande 65 % av det påförda provets vikt skars ut, eluerades, filtrerades och indunstades till torrhet.
F. Produkten enligt del E, tillsammans med andra ekvivalent renade material utvunna från kromatografi-flankerande områden, (0,l8 g) gavs en slutlig rening på en kolonn med ytterdia- meter l,l cm x 27 cm av 200-400 mesh silikagel. Kolonnen elue- rades med CH2Cl2-Et0Ac (80:20, 30 ml; 60:40, 30 ml; 40:60, 30 ml; 20:80, 30 ml) och därefter med Et0Ac (175 ml). Efter uppsamling (2 ml-fraktioner kontrollerade med TLC) av 162 ml ursprungligt eluat, samlades en fraktion om 88 ml och indunsta- des för att ge 0,15 g produkt.
Grundämnes-analys av detta rena material verifierade strukturen som 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin såväl som 360 MHz NMR-, UV-, IR- och mass-spektroskopi.
Förekomsten av denna produkt såsom en diastereoisomer bland- ning indikerades av HPLC- och NMR-analys, 360 MHz. HPLC-analys på en Waters Radial-Pak C-18-kolonn med 0,05M pH 4 citratbuf- fert-CHSCN (60:40) vid 2 ml/minut visade tvâ nära åtskilda toppar (vid 9,6 minuter och 10,2 minuter) i förhållandet 53:44.
NMR-spektrum vid 360 MHz för detta material uppvisade två resonanser för protonerna 6~0H, ll-OH, 1-H, 2-H, 3-H, l'-H, 7-H, 9~OH, lOA~H, 14-H3 Och 6-H3. 459 921 12 360 mnz NMR cnc13 §'13,99, 13,98 (25, 6-on), 13,25, 13,24 _ (zs, llfon), e,oz, a,oo ïza, 1-H), 7,79, 7,77 (zu, 2-H), 7,40, 7,38 (2d, 3-H), 5,59, 5,56 (2d, 1'-H), 5,29, 5,26 (2bs, 7-H), 4,47*, 4,34* (2s, 9-OH), 4,08 (s, OCH3), 3,97-4,07 (m, 2" B-H, 5'-H), 3,92 (t, J=l2Hz 3"-H), 3,74 (m, 2"A-H, 6"B-H), 3,68 (bs, 4'H), 3,58 (t, J=l2Hz, 6"A-H), 3,20 (d, J=l9Hz, 1OB-H), 2,91, 2,90 (zd, J=19Hz, len-H), 2,75-2,95 (m, 3'-H), 2,68 (m, 5"-H2), 2,43, 2,42 (2s, 14-H3), 2,35 (m, 8B-H), 2,13 (m, 8A-H), 1,70- 2,0 (m, 2'-H2), 1,86* (s, 4'-OH, H20), 1,37, 1,36 (2d, J=6,4Hz), 6-H3). 7 * Utbytbar med D20 Mass-spektrum: [som trimetylsilyl-(TMS)-derivatenf, m/e 910 [M(TMS)4], 895 ¿M(TMs)4-Me), 883 ¿R(TMs)4-Hcnj, 838 jM(TMs)37, 823 ¿M(¶Ms)3- Me], 8ll [M(TMS)3-HCNI, MS vid 70 ev. visade en bast0PP (HCN) vid m/e 27. ' Exemgel 2 Isolering av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-l3-di- hydrodaunorubicín I exempel 1, del D, kromatograferades en blandning av 3'-de- 2 amino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)daunorubicin och 3'-deamino- -3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-13-dihydrodaunorubicin och en serie fraktioner togs. Efter uppsamling av 3460 ml eluent samlades en fraktion om 430 ml innehållande 12,5 % av det ur- sprungligen satsade materialet huvudsakligen i form av en enkel förening och indunstades. Föreningen i denna fraktion bestämdes med HPLC vara identisk med ett material tidigare ' karaktäriserat genom NMRf och mass-spektroskopi som 3'-deamino- -3'-(3"-cyano-4'F-morfolinyl)-13-dihydrodaunorubicin} Detta material kunde Huvudsakligen renas enligt metoderna visade i exempel 1, delarna E och F, för att ge väsentligen rent 3'- deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-13-dihydrodaunorubicin. 459 921 13 360 MHz NMR CDCI3: liknande det för 3'-deamin0-3-(3"-cyano- 4"-morfqlinyl)-daunorubicin, med undantag av att l4-H3-reso- nansen (2,43, 2,46/ 25) är skiftad “upfiled" (l,32, 1,30, 2d, J=64 Hz). Masspektrum [som trimetylsilyl-(TMS)-derivatenl; m/e 957 Uvufrmms-HCN] ass lmvrmsu-Hcnl; TLc sicel cacl - 3 CH30H (l9:l volym/volym) Rf = 0,28.
Exemgel 3 Isolering av 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)daunorubicin och 3'-deamino-3'-(4"-mnrfolinyl)-13-dihydroduanorubicin.
I exempel 1, delarna A och B, isolerades 0,0lN HCI-fasen innehållande 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)daunorubicin och 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-13-dihydrodaunorubicin. Denna vattenhaltiga fas innehöll cirka 40 % av det satsade materia- let. Denna vattenhaltiga fas upparbetades därefter enligt metoden visad i den tidigare angivna hänvisningen J. Medici- nal Chem., gå, för att ge 3'-deamíno-3'-(4"-morfo1inyl)-dau- norubicin cch 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-13-dihydrodauno- rubicin som separat isolerade föreningar. 459 921 14 Exemgel 4 Framställning och isolering av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)doxorubicin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-13-dihydrodoxorubicin A. I en reaktion analog med den visad i J. Medicinal Chem., gå-artikeln sattes till en omrörd lösning av 6,25 g (60,0 mmol) 1,4-anhydroerytritol, gg OH F? 0 l 75 ml B20 kylt i vattenbad till 15-20°C, 6,42 g (30,0 mmol) natriummetaperjodat. Den resulterande klara lösningen om- rördes vid rumstemperatur i 17 timmar. Lösningens pH justera- des från 4,9 till 7,3 med NaHCO3 och utspäddes därefter under omröring med 75 ml CHBCN. En fällning bildades. Blandningen omrördes och 0,126 g (2,0 mmol) NaBH3CN i S ml l:l (volym) CH3CN-H20 tillsattes. Denna blandning försattes därefter med 1,16 g (2,0 mmol) doxorubicinhydroklorid i 30 ml l;l CH3CN- H20. Efter 10 minuter utspäddes reaktionsblandningen med 50 ml utspâdd NaHCO3 och extraherades 3 gånger med SO ml-portioner av CHCl3. Detta råa extrakt innehöll 3'-deamino-3'-{4"-morfo- linyl)-doxorubicin, 3'-deaminof3'-(4"-morfolinyl)-l3-dihydro- doxorubicin, 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-doxoru- bicin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano~4"-morfolinyl)-l3-di- hydrodoxorubicin. Kombinerade extrakt extraherades med O,lN ättiksyra (5 x 25 ml) och därefter med H20 och tvättades med utspädd Na2HC03 och mättad vattenhaltig NaCl. Den sura vatten- haltiga fasen kvarhölls. Kloroformfasen torkades över NaSO4, "filtrerades genom Celite diatomacëjord och koncentrerades för att ge en återstod. Denna återstod löstes i 25 ml CHCI3 och lösningsmedels-återindunstades under vakuum vid rums- temperatur. Detta gav O,5l8 g (40 %) av ett mörkrött, skummat glasartat material.
B. Ett prov av det skummade, glasartade materialet enligt del A löstes i CH3CN och sprutades indi en Waters Radial-pak »www-t 459 921 15 C-18-högupplösningsvätskekromatografi-kolonn och eluerades med pH 4,0 0,05M citratbuffert-CH3CN 55:45 vid 2 ml/minut. Elue- ringen av föreningarna upptäcktes vid 254 nm. Vid 2,3 minuter erhölls ett material identifierat som 3'-deamino-3'-(3"-cyano- -4"-morfolinyl)-l3-dihydrodoxorubicin i 13 % utbyte (beräknat på insprutad blandning) och vid 3,8 minuter erhölls 3'-deamino- -3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)doxorubicin i 69 % utbyte. Andra liknande samlade produkter erhölls och separerades med HPLC.
C. Isolering av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-doxo- rubicin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)~l3-di- hydrodoxorubicin upprepades därefter enligt följande: Ett prov om 0,424 g av det skummade, glasartade materialet en~ ligt del A löstes i 1,5 ml CH2Cl2 o h pâfördes en kolonn 1,5 x 35,5 cm av CH2Cl2-tvättad 200-400 mesh Bio-Sil A silikagel.
Kolonnen eluerades med CH2Cl2 (50 ml) och sedan med CHZCIZ- CH30H (99:l, 150 ml; 98:2, 150 ml; 97:3, 300 ml; 95:5, 100 ml och 90:10, 300 ml). Efter uppsamling av 445 ml ursprungligt eluat indunstades en fraktion om 80 ml för att ge 0,217 q produkt. Detta material kombinerades med 0,039 9 renad produkt från en tidigare framställning och blandningen löstes i 2 ml CH2Cl2, utspädd med 10 ml CH30H och indunstad till torrhet.
Triturering av denna återstod med 5 ml CH30H gav 0,218 g 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-doxorubicin.
HPLC- och 400 MHz NHR-analys indikerade att produkten var en diastereoisomerblandning. HPLC-analys på en Waters Radial-Pak C-18-kolonn med 0,05M pH 4 citratbuffert-CH3CN (65:35) vid 2 ml/minut visade tvâ nära åtskilda toppar (vid 14,4 minuter och 15,7 minuter) i förhananaet sæss. 4oo MHz-spektrum för detta material uppvisade tvâ resonanser för protonerna l-H, 2-H, 3-H, 1'-H, 7-H, 14-H2, 9-OH, OCH3, 10A-H Och 6'-H3. 400 MHz NHR CDCI3 S 14,02 (S, 6-OH), 13,26 (s, ll-OH), 8,05, 8,04 (2d, 1-H), 7,80, 7,79 (2t, 2-H), 7,41, 7,40 (2ä, 3-H), 459 921 16 5,61, 5,57 (2d, 1'~H), 5,34, 5,30 (Zm, 7-H), 4,79, 4,78 (2s, 14~H2), 4,54, 4,42 (25, 9-OH), 4,11, 4,10 (25, OCH3), 4,05 (m, 5'-H), 3,97 (m, 2"B-H, 3"-H, 6"B-H), 3,71 (m, 4'-H, 6"A- H), 3,58 (t, 2"A-H), 3,30 (d, J=19Hz, lOB-H), 3,07, 3,06 (2d, 10A-H), 3,03 (m, 3'-H), 2,69 (m, 5"-H2), 2,38 (m, 8B-H), 2,22 (m, 8A-H), 1,84 (m, 2'-H2), 1,61 (s, H20), 1,40, 1,39 (2d, J=6,SHz, 6'~H3). uv-vis (cn3oH) max 234 nm (5 4o.1oó), 252 (27.7oo), 289 (9.42o). 478 (13.ooo), 495 (12.9oo), 530 (7.19o). Mass-spekt- rum [šom trimetylsílyl-(TMS)-derivatetj, m/e 899 M(TMS)4-HCN.
Beräknat för C32H34N2Ol2.2H2O C 56,97 H 5,68 N 4,15 Funnet: _ C 57,07 H 5,37 N 4,17 Ytterligare eluering av ovanstående kolonn gav 0,041 g 3'- deamíno-3'-(3"-cyano-4"-morfolínyl)-13-dihydrodoxorubicin.
UV~Vis (CHSOH) max 234 nm (S 37.400), 252 (28.000), 289 (9.390), 475 (l2.700), 496 (l2.800), 530 (7.4l0). Mass- spektrum [šom trimetylsilyl-(TMS)-derivatet], m/e 985 M(TMS)5-CH3, 973 M(TMS)5-HCN.
Beräknat för C32H36N2Ol2-l,5H2O C 57,57 H 5,89 N 4,20 Funnet: V C 57,35 H 5,94 N 3,82 Exemgel 5 Isolering av 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-doxorubicin och 3'~deamino-3'-(4"-morfclinyl)-13-dihydrodoxorubicin A. Den sura vattenhaltiga fasen erhâllen enligt del A i exempel 4 gjordes basisk med NaHCÖ3 och extraherades med CHCl3. CHCI3-fasen tvättadee med mättad NaCl, torkades över Na2SO4,7fi1trerades genom Celíte , koncentrerades samt torkades för att ge 0,828 U av ett rött skum, vilket med HPLc, 90 MHz man, Boo MHz man, uv-vm-spektroskopi och mass-spektroskopi visade sig innehålla tvâ primära kcmponen- ter, 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyll-doxorubicin och 3'-de- amino-3'-(4f'-morfo11ny1)-13-aihyarøaoxørubicin. 459 921 17 B._En samling av 0,98 g av det skummade, glasartade materialet framställt enligt del A bereddes. Detta material löstes i 3 ml CH2Cl2 och kromatograferades på en kolonn av silikagel 2,2 x 33 cm. Kolonnen eluerades med CH2Cl2 (50 ml) och därefter med CH2Cl2-CH30H (99:l, 300 ml; 98:2, 300 ml; 97:3, 900 ml och 90:10, 700 ml). Efter uppsamling av en ursprunglig mängd av 1170 ml eluent, isolerades en fraktion om 490 ml och in- dunstades för att ge en återstod. Denna återstod innehöll 45 % av det satsade provet och befanns med HPLC utgöras av väsentligen rent (99+%) 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-doxo- rubicin. 90 MHz NMR CDCl3$ 13,88 (S, 6-OH), 13,07 (S, ll-OH), 7,9O (d, J=8Hz, l-H), 7,72 (t, J=8Hz, 2-H), 7,38 (d, J=8Hz, 3-H), 5,51 (bs, l'-H), 5,20 (bs, 7-H), 4,75 (S, 14-H2), 4,68 (S, 9-OH), 4,07 (s, OCH3), 3,98 (m, 5'-H), 3,67 (m, 4'-H, 2"- H2, 6"-H2), 3,09 (d, J=l9Hz, l0B-H), 2,83 (d, J=l9Hz, 10A-H), 2,80-3,20 (m, 3'-H), 2,50~3OO (bs, 4'-OH, 14-OH), 1,95-2,65 (m, 8-H2, 3"~H2, 5"-H2), 1,80 (m, 2'-H2), 1,38 (d, J=6,5Hz, 6'-H3). Mass-spektrum [som trímetylsilyl-(TMS)-derivatenj, m/e 973 M{TMS)5, 901 M(TMS)4.
Den fria basen suspenderades i H20 och surgjordes till pH 4,4 med 0,lN HCl. Den resulterande lösningen lyofiliserades och produkten löstes i CH3OH och fälldes med 10 volymer eter för att ge hydrokloriden.
Beräknat för C3lH35NOl2'HCl-2H2O c 54,27 n 5,85 cl" 5,17 N 2,04 Funnet; c 54,08 n 5,35 cl' 4,78 n 2,oo UV-Vis (CH3OH) max 234 nm (¿,39.000), 252 (26.300), 290 (8.990): 480 (l2.600), 495 (l2.500), 530 (6.700).
En fraktion om 190 ml togs åtföljt av en fraktion om 160 ml.
Den senare fraktionen indunstades och befanns innehålla 19,5 % av det satsade materialet som 97 % rent 3'~deamino-3'-(4"~ 459 921 18 morfolinyl)-13-dihydrodoxorubicin. zoo »m2 NMR cnc13 S 13.9s,'13,9s (zs, s-om, 13,34, 13,32 (Zs, ll-OH), 8,03 (d, l-H), 7,79 (t, 2-H), 7,40 (d, 3-H), 5,56 (bs, l'-H), 5,29 (bs, 7-H), 4,64, 4,59 (2s, 9-OH), 4,09 (s, OCH3), 4,03 lm, 5'-H), 3,82-4,05 (m, 4'-H, 13-H), 3,68 (m, 2“-H2, 6"-H , 145-H), 3,54 (bs, 14A-H), 3,30 (m, l0B-H), 2,98 (bs, OH), 2,87 (bs, OH), 2,77 (m, 10A-H, 3'-H), 2,30- 2,70 (m, 8B-H, 3"-H2, 5"-H2), 1,99 (m, 8A-H), 1,78 (m, 2'- H2), 1,41 (d, 6'-H3). Mass-spektrum [som trimetylsi1y1-(TMS)- derivatet], m/e 975 M(TMS)5.
Exempel 6 Framställning av 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-S-iminodoxo- rubicin A. Till en lösning av 0,396 g 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- doxorubicin, framställd enligt exempel 5, i 5 ml torr pyridin sattes 0,990 g p-anisylklordifenylmetan. Blandningen fick reagera vid rumstemperatur i mörker under cirka 2 dagar. Lös- ningen kyldes i isvatten och 0,5 ml CH30H tillsattes. Bland- ningen omrördes i två timar och sattes till 50 ml utspädd NaHCO3 samt extraherades med CH2Cl2. Extrakten koncentrerades för att ge en gummiartad återstod, som löstes i toluen, kon- centrerades, löstes i CHZCIZ och fälldes genom att långsamt tillsätta 35-600 petroleumeter. Denna fällning utvanns, åter- upplöstes i CH2Cl2 och fälldes med 2:1 petroleumeter:dietyl- eter för att ge 14-O~p-anisyldifenylmetyl-3'-deamino-3'-(4"- morfolinyl)doxorubicin, (III), som en amorf, fast substans i 94 % utbyte, 459 921 0 OH E) co-cazo-ç CH3 ~~oH å: (III) 1 _ H3CO O OH O _ 0 CH3 HO NB O Detta material identífieraäes med 90 MHz NR i CDCI3.
B. En lösning av 0,532 g l4-O-p-anisyldífenylmetyl-3'-deamino- -3'-(4"-morfolinyl)-doxorubicin l 10 ml CH2Cl2 sattes till 30 ml CHBOH mättad med ammoniak vid O°C. Blandníngen omrördes vid O°C i en timme och fick sedan stå vid 3°C i 27 timmar.
Lösningsmedlet i reaktionsprodukten indunstades. Återstoden löstes i 4:1 CH2Cl2-CH30H och koncentrerades. Detta upprepa- des två gånger och den fasta substansen löstes l CH2Cl filtrerades genom Celíte CH2Cl2-CH3OH och koncentrerades ånyo samt torkades för att ge ø,s2 g (97 s; av 'en violett återstoa. 2! , koncentrerades, löstes i 1:2 C. Aterstoden enligt del B löstes i 2 ml CH2Cl2 och påfördes en silikagelkolonn 1,5 x 40 cm samt eluerades med CH2Cl2 (50 ml) och därefter med CH2Cl2-CH3OH (99:l, 150 ml; 98:2, ;459 921 20 150 ml; 97:3, 500 ml; 95:5, 100 ml; S3:7, 100 ml; och 90:10 200 ml). Efter 565 ml eluent avskildes en fraktion om 335 ml filtrerades samt'indunstades för att innehålla 59.9 % av det pâförda provet som ett enkelmaterial- Detta material identi- fierades som 14-0-p-anisyldifenylmetyl-3'-deamino-3'-(4"- morfolinyl)-5-iminodoxorubicin vid 90 NHZ NR.
D. Ett prov om 0,341 g av produkten enligt steg C löstes i 20 ml 80%-ig ättíksyra och lösningen omrördes i mörker under 7 timmar. Lösningen utspäddes därefter med 50 ml vatten och extraherades tre gånger med CHCI3. Den vattenhaltiga fasen innehöll den önskade produkten och lyofiliserades i mörker för att ge 0,294 g fast substans. Den fasta substansen löstes i O,lN ättiksyra. Lösningen tvättades med CHI3, gjordes basisk med NaHC03 och extraherades med CH13. Den önskade produkten gick över i den organiska fasen, som tvättades, torkades, filtrerades samt koncentrerades för att ge en återstod. Denna återstod löstes i CHCl3-CH3OH (l:l0), koncentrerades och torka- des för att ge 0,228 g 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-5-imino- doxorubicin. Materialets identitet verifierades med 300 MHz NMR- och grundämnesanalys. 2 Exempel 7 Framställning av syraadditionssalt Den fria basprodukten enligt exempel 6 suspenderades i 20 ml vatten. Blandningen omrördes och 3,2 ml O,lN HCl tillsattes långsamt för att ge ett pH av 4,5. Den suspenderade fasta sub- stansen löstes gradvis. Lösningen lyofiliserades i mörker för att ge syraadditionssaltet 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-5- iminodoxorubicin-hydroklorid l 97+%_renhet enligt HPLC-ana- lys.
Beräknat för C3lH36N2Oll'HCl'2H2O _g c 54,35 n 5,03 cl' 5,17 N 4,09 funnet; c 54,24: n 5,96 cl' 4,33 N 4,03 459 921 21 Exempel 8 -Framställning och isolering av 3'-deamino-3'-(4"-morfo1inyl}- -5-imino-13-dihydrodoxorubicin A. En lösning av 0,186 g 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)-l3- dihydrodoxorubicin, framställd enligt exempel 5, i 6 ml l:l CH2Cl2-CH3OH sattes till 20 ml CHSOH mättad med ammoniak vid OOC. Blandningen omrördes i en timme och lagrades därefter vid 3°C i cirka 27 timmar, koncentrerades och den återstående produkten löstes i CH2Cl2-CH3OH (4:l) och koncentrerades tre gånger för att fullständigt avlägsna ammoniak. Den resul- terande återstoden renades genom preparativ tunnskiktskromato- grafi på silikagelplattor 2 mm x 20 cm x 20 cm med framkall- ning användande CHCI3-CH3OH 9:1. Band innehållande väsent- ligen rent 3'-deamino-3'~(4"-morfolinyl)-5-imino-l3-dihydro- doxorubicin separerades, eluerades och eluenten torkades för att ge 0,139 g av den fria basprodukten identifierad genom 300 MHz NMR.' B. Den fria basen enligt del A omvandlades till hydrokloriden enligt metoden i exempel 7. Med HPLC-analys visade sig hydro- kloriden vara 97-98 % ren.
Beräknat för C H N 0 -HCl.2H O 31 ss 2 11 2 c 54,19 H 6,31 cl' 5,16 N 4,os funnen c 54,17 H 5,95 cl' 4,88 u 3,87 Exemgel 9 Framställning av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- -S-iminodaunorubicin En lösning av 0,031 g 3'~deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfoli- nyl)-daunorubicin i 1,0 ml CH2Cl2 sattes till 5 ml ammoniak- mättad metanol vid O°C. Blandningen omrördes i 30 minuter och lagrades därefter vid 3°C i 45 timmar. Produkten från denna reaktion indunstades till torrhet för att ge en åter- stod, som löstes i 5 ml l9:l CHCI3-CH3OH och koncentrerades. 459 921 22 Detta steg upprepades. Återstoden löstes i CHCl3-CH30H och påfördes en silikagelplatta 2 mm x 20 cm x 20 cm och fram- kallades med användning av 9:1 CHCl3-CH3OH. Huvudbandet eluerades och analyserades. Mass-spektroskopi verifierade föreningen som 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-5- iminodaunorubícin. Masspektrum |som trimetylsilyl-(TMS)-deri- vateni. m/e 882 |M(TMS)4-HCNI, 810 |M(TMS)3-HCNI. MS vid 70 ev visade en bastopp (HCN) vid m/e 27; TLC SíGel CHCl3- CH3QH (l9:l volym/volym) Rf = 0,32.
Exempel lO Framställingen enligt exempel 6 upprepades med användning av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)doxorubicin, fram- ställd enligt exempel 4, som tillfört material i stället för 3'~deamino-3'-(4"-morfolinyl)doxorubicin. Den blockerande- aminerande-avblockerande-isolerings-sekvensen enligt exempel 6 användes för att ge 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- -S~iminodoxorubicin som slutprodukt.
Mer detaljerat skedde framställningen enligt följande: A. Till en lösning av 0,241 g 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)doxorubicin, framställd enligt exempel 4, i 4 ml torr pyridin sattes 0,587 g p-anisylklordifenylmetan. Lös- ningen omrördes vid rumstemperatur i mörker under 44 timmar.
Reaktionsblandningen kyldes, ntspäddes med 0,5 ml CH3OH, omrördes vid rumstemperatur i 3 timmar och sattes därefter till 50 ml utspädd NaHCO3 samt extraherades med CH2Cl2. Extrakten koncentrerades, återstoden löstes i 3 ml CH2Cl2 och fälldes ”genom långsam tillsats av 40 ml dietyleter för att ge 0,333 g (97 %) 14-O-p-anisyldifenylmetyl-3'-deamíno-3'-(3"~cyano- -4"-morfolinyl)-doxorubicin. 90 MHz NMR CDCI3 §l3,84 (s, 6-OH}, 12,99-(s, ll-OH), 7,82 id, l-H), 6,70-7,75 (m, 2-H, 3-H, tri- -tyl-aryl), 5,42 (bs, l'-H), 5,08 (bs, 7-H), 4,45 (bs, 2, 14- H2), 4,19 (s, 9-OH), 4,00 (s, OCH3), 3,79 (s, OCH3), 3,30- 4,l5 (m, 4'-H, 5'-H, 2"-H2, 3"-H, 6"-H2), 1,60-3,10 (m, 2'-" H2, 8-H2,a5“-H2, 10-H2, 3'-H), l,l3 (d, 6'-H3). 'A 459 921 23 B- EH lösning av 0.369 g 14-o-p-anisyiaifenyimetyl-aHaeamino- -3'-(3"-Cyano-4"-morfolinyl)-doxorubicin i 8 ml CH2Cl2 sattes till 25 ml CH3OH mättad med ammoniak vid 0°C. Blandningen om- röraes vid o°c i en timme och fick sedan stå vid 3°c i 26 timmar. Reaktionsblandningen indunstades för att fullständigt avlägsna ammoniak och gav 0,376 9 av en violett återstod.
C. Aterstoden enligt del B i 1,5 ml CH2Cl2 pâfördes en silika- gelkolonn 1,5 x 28 cm (200-400 mesh) och eluerades med CH2Cl2 (50 ml) och därefter med CH2Cl2~CH30H (99:l, 200 ml; 98:2, 300 ml; 97:3, 100 ml; 95:5, 100 ml; och 90:10, 200 ml). Efter uppsamling av 360 ml ursprungligt eluat indunstades en frak- tion om 125 ml för att ge 0,203 g 14-0-p-anisyldifenylmetyl- -3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-5-iminodoxorubicin.
D. Ett prov om 0,158 g av återstoden enligt del C kyldes till 0°C och löstes i 8 ml iskyld 50 % trifluorättiksyra. Lösningen omrördes vid 0°C i 2 minuter och hälldes sedan i 100 ml is- vatten. Den vattenhaltiga blandningen extraherades med CHCl3 (4 x l0 ml) och de kombinerade extrakten tvättades med ut- spädd NaHC03 och H20, torkades över Na2S04, filtrerades genom Celite och indunstades._Återstoden löstes i 3 ml CHC13-CH30H (4:1); lösningen omrördes och 25 ml eter tillsattes droppvis.
'Den resulterande fällningen uppsamlades för att ge 0,093 g 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-5-iminodoxorubicin.
HPLC- och 300 MHz NMR-analys indikerade att detta material var en diastereoisomer blandning. HPLC-analys på en Waters Radial-Pak C-18-kolonn med 0,05M pH 4 citratbuffert-CH30H (40:60) visade toppar vid 18,4 minuter och 25,0 minuter i för- hållandet 69:3l. 300 MHz-spektrum för denna produkt hade tvâ resonanser för protonerna 1-H, 2-H, 3-H, l'-H, 7~H, 14-H2, 9~OH, OCH3, lOA~H och 6'-H3. 459 921 24 soo MHz NMR cncls S 15,61 (s, 11-071), 13,74 (d, a-oa), 9,27 (a, NH), 8,21 (za, 1-HL, 7,73, 7,72 (za, 2-H), 7,33, 7,32 (za, 3-H), 5,77, 5,72 (za, 1--H), 5,41. s,ss (zm, 7-H), 4,79, 4,77 (25, 14-H2), 4,72, 4,66 (25, 9-on), 4,15, 4,14 (zs, ocH3), 4,04 (m, 5'-H), 3,97 (m, 3"-H, 2“B-H), 3,75 (m, 6"-H2, 4'-H), 3,59 (m, 2"A-H), 3,23 (d, lOB-H), 3,03 (m, 10A-H, 3'-H), 2,72 (m, 5"-H2), 2,33 (m, 8B~H), 2,14 (m, 8A-H), 1,85 (m, 2'-H2), 1,38, 1,37 (Zd, 6'~H3).
UV-Vis (CH30H) max 221 nm (8 31.000), 252 (32.900), 307 (7-llO), S20 sh (9.llO), 551 (l7.400), 592 (20.700). DCI-MS m/e 638 (M + H), 611 (M + H-HCN).
Beräknat för C32H35N30ll-H20 C 58,62 H 5,69 N 6,41 Funnet: C 58,79 H 5,47 N 6,30 Exemgel ll Framställningen enligt exempel 8 upprepas fyra gånger, varje gång med användning av en ekvivalent molmängd av ett annat utgângsmaterial i stället för 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- -13-dihydrodoxorubicin. I den första upprepningen användes 3'- deamíkno-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-13-dihydrodoxorubicin som tillfört material för att ge 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"- morfolinyl)-5-ímino-13-dihydrodoxorubicin som slutprodukt. I den andra upprepningen användes 3'-deamino-3'-(4"-morfolinyl)- daunorubícin som tillfört material för att ge 3'-deamino-3'- -(4"-morfolinyl)-5-iminoduanorubícin som slutprodukt. I den tredje upprepningen användes 3'-deamino-3'-(4f'-morfolinyl)- -13-dihydrodaunorubícin som tillfört material för att ge 3'- deamino-3'-(4'f-morfolinyl}-5-imíno-13-dihydrodaunorubicin som slutprodukt. I den fjärde upprepningen anrändes 3'-deamino- -3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-13-dihydrodaunorubioln som till- fört material för att ge 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfo- linyl)-5-imino-l3-dihydrodaunorubicin som slutprodukt. 459 921 25 Föreningarna enligt föreliggande uppfinning har användbarhet som anti-tumörmedel i däggdjur. Denna aktivitet påvisas av studier in vivo och in vitro. I ett in vivo-test, genomfört i enlighet med protokollet beskrivet i Cancer Chemotherapy Reports, National Cancer Institute, Q, nr. 2, del 3, september 1972, ympades friska möss i.p. med Lymphocyte Leukemia P-388 ascitisvätska. De ympade mössen behandlades därefter på dagar- na 5, 9 och l3 i den efterföljande perioden med varierande mängder föreningar enligt föreliggande uppfinning. Som jäm- förelser förblev andra möss obehandlade och ytterligare möss behandlades med daunorubicin eller doxorubicin; 3'-deamino- -3'-(4"-morfolinyl)daunorubicin eller 3'-deamino-3'-(4"- morfolinyl)-13-dihydrodaunorubicin enligt US-patentet 4 301 277 eller 3'-deamino-3'-(4-metoxi-1-piperidinyl)-daunorubi- cin eller dess 13-dihydroekvivalent visade i US-patentet 4 314 054.
Den genomsnittliga överlevandetiden för de olikbehandlade mössen bestämdes och jämfördes med den för mössen ympade med leukemi-ascitisvätska men utan behandling med testföreningar~ na. I följande tabell A presenteras så erhållna data. Data ~ presenteras som % T/C-värden, vilka utgör överlevandetiden för de behandlade mössen dividerat med överlevandetiden för kontrollmössen multiplicerat med 100. I tabell A ges även dosnivåerna för de olika föreningarna, vilka observerades ge de starkaste förbättringarna av överlevandetíd. 459 921 26 Tabell A Aktivitet mot leukemi Leukemi P-388 i möss L-l2l0 celler Överle- Optimal dos Inhibering av vandetid (q4d 5,9,l3) syntes ED5o,/.1M Förening NSC nr* % T/C mg/kg DNA RNA 3'~deamin0-3'- 332,304 197 0,4 0,012 0,002 (3"-cyano-4"- morfolinyl)-dau- norubicin r-deamiho-r- 332,3o5 143 0,1 0,019 o,oo2 (3"-cyano-4"- morfolinyl)-l3- dihydrodaunoru- bicin 3'-deamin0-3'- 357,704 187 0,075 0,003 0,0005 (3"-cyano-4"- morfolinyl)-doxo- rubicin I 3'-deamino-3'- 360,29l 150 0,2 0,021 0,003O (3"-cyano-4"- 0 ' morfolinyl)-l3- dihydrodoxorubi- cin af-deæninø-au- 3ss,4ss 161 so >1oo 24 (4"-morfolinyl)- -l3-dihydro-5- iminodoxorubicín För jämförelse: daunorubicin 82,151 130 8 0,66 0,33 doxorubicin 123,12? 160 8 1,5 0,58 *NSC nr. = National Service Center of US National Cancer Institute registreringsnummer. 459 921 27 Tabell A (forts.) 3'-deamino-3'- 327,45l 166 0,2 0,76 0,10 (4"-morfolinyl)- daunorubicin 3'-deamino-3'- 327,450 132 0,2 2,2 0,67 (4"-morfolinyl)- l3-dihydrodauno- rubicin 3'-deamino-3'- 334,353 l99 6,25 0,63 0,12 (4"-metoxi-l"- piperidinyl)- daunorubicin 3'-deamino-3'- 334,354 199 12,5 0,58 0,08 (4-metoxi-l- piperidinyl)- l3~dihydrodauno- rubicin ...__-___-_-_-------_-__ Dessa resultat visar att föreningarna enligt föreliggande upp- finning har god till överlägsen in vivo-antitumöraktivitet vid låga optimala doser. Föreningen NSC 357704 visade en opti- mal dosnivå cirka 1/150 av den, som krävs med moderföreningen.
Andra material enligt uppfinningen visar mycket lägre optimala dosnivâer än daunorubicin och doxorubicin. Detta ger löften om ett aktivt anti-tumörmedel med avsevärt minskad kardio- toxicitet.
In vitro-test av 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- daunorubícin och 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- -13-dihydrodaunorubicin visade även den ökade aktiviteten ' i denna_klass av föreningar. När dessa material testades som inhibitorer för DNA- och RNA-syntes i L 1210-celler enligt metoden beskriven av G. Tong, W.W. Lee, D.R. Black och D.W.
Henry, J. Medicinal Chem., lg, 395 (1976), var de aktiva vid doser, som var så mycket som 600 gånger lägre än doserna för daunorubicin, doxorubicin eller tidigare analoger. De ob- serverades även vara mycket mer inhibitoriska jämte mot RNA- 459 921 28 syntes än mot DNA-syntes (EDSO-förhållande DNA/RNA = 10 till ll). Det har föreslagits av S.T. Crooke, et al, Mol. Pharmacol., lg, 290 (1978) att ett sådant förhållande indikerar klass II- antracykliner med förbättrade terapeutiska egenskaper. Dessa data visas i tabell A.
Data i tabell A, visande ökad anti~tumörpotens med morfolino- strukturen och ytterligare ökning av effekt med cyanomorfolino- strukturen, utgör exempel på aktivitet med denna klass av föreningar.
Ytterligare test genomfördes för att verifiera den biologiska aktiviteten hos föreningarna enligt föreliggande uppfinning.
Dessa var in vivo-test i möss mot P-388- och Ll2l0-leukemi och B-16 melanom genomförda väsentligen enligt metoden i ovannämnda Cancer Chemotherapy Reports, 1972. Olika doserings- mönster och i.p., i.v. och orala administrationssätt testa- des. Dessa resultat ges i tabell B. 29 n 921 fißßw How w wo fl N >mux mw. nfluflnønocsmofAfiænfiflowuoaa..«.:.m|o:flsmuvL.m ñw.
Acmxßwcm møcmmmflamunw fl ß :oo w cmfimeoxm wmv nfloflnsuoxoøoaflñflxmzAfiæcfifiowuoša..v.|.m|o:«Emwfl1.m Am. äw Aßßw Hon v wa fl w >mux mm. cHøflnønoxon.H>:fl~owuos|..w.|_m|o:flEømw|.m AN.
Aw .ßßm How v mn « v >mnx wwv cfluflnøuocømøouwænflwnmflu_H>c«~owuoas..w.x.m|ocfiEmwv«.m AH. mwawunwëwm Hmm 4 ummcflcmumw mflcwx mummflflfia « .m»n=.=.-n. .m_.°.w- .w~.=.-. .m~.=.mn_ .v.~m~ .v.mm_ md _. u @_m mq .m~°.=._- .m~.°.=,n- .~.wv. .m~. nu .~_.m.m new _m~=.°.@«_ .~@==.=.wfl_^ .°~.>m.^ Q. .pnw @w_m m« .m~=.=.>@~ .n@=°.=,=wm^ .m~.°.=~@=~ .~.mm~^ mfl .m|_ vv ...c.=m.^ .m°.°.m»_ om .m.m.. ”vv _m°.=.«- .«.>m~ mfi .m.m_. www .m=.°.~m. .m.~.@w. .~w=.=.n«-A _m~=.>m. .m.°.~m- .=..mm- >« __ u .mo.=.mm- .m~.=.ov~w~ .~.n@.^ _m=.°v~m- _m~.°.mß_ .m~.°.mm@ .m.ß.~m~ m« ._ u ¶ ømnm m« _m~Q.=.@<_^ .flw°°.°.@m. .m~=.=._v_^ ...«>_ mfi .m«- av .m°.=.@~.^ .m~.=.°.«@.^ m«.@_m.. vvv .m~=.°.~m. .m~=.°.v@. ^m°.=.~m_ .m.mw. xmwxßwfw ||::°-_q mfi «@~=@~ qoßßmn .m.»>~mm~ «.~.@«@«m~ m°n~fi~ «=-nm ....=mv>~n .fivrnvfifln .-.@«.. -.m-flw .hah moz .m m mcflcwumm c . .m w.
Tmuïmffi U\.H w mom. flmëflumø vf, uxmwmwlumâsufiunmxmßä m .w o r m ïwnå.. m o d m .a S06 36 nåd 36 m... mwï m... 34 :aa H86 o; å? 5A mä WS .mä ca 82 må wä 0 I 3 om GX å S? m4. SN w 8: mmå må w 02 26 .36 @x\m= w oxe m«\@= W u>B ÅH w mv Hmm .omm wow “än man ÉU mwucæm Hfifiumo :mflmšwfiuwå Hmšflumo :mcøšmåumšo >m mcflwmfiwmw mås fl 33 Emšwfi mm? fl wæÉ ëmäwfi uwfiwouoäflnq nos »mfišwuë un.. »wfimñyå uääwq 459 921 .HOMWÜFIO>M> CA.. B00 IOHQH.) EH i U AHQDNH. cåäåhoâëocëfllm» Bsåuàm A åahfiñoïsvš Jmöåæwøßm CfiOMQDHOXQm. ñ öë>në|mfi.onëfi|måoâä-._m _ . à>5ñHowG2r_.3J möcwää- . m A Euflåuoxomïonëfilmffivâäßæ . .A>=SO$.QF_..« V .. _ möcëæß.. . m A ñfiåhoäwb=ëflà Al A .H%Ca....m0urHgr:fi v I . MIÖEfi-.GMUÜI _ m A cfiuflånoxâocëfl|möä>nfimrmfl T Säflfiofiöfâ . l _ möåäå» _ m CfiUMQfl-.HOXOD CMUMÉOCSMD 459 921 31 Föreningarna enligt föreliggande uppfinning, inkluderande salterna därav, kan administreras enligt vilket som helst sätt, innefattande oral och parenteral (intravenös, intra- peritoneal, subkutan och intramuskulär) administration. Paren- teral administration, särskilt intravenös administration, har historiskt utgjort det valda sättet och detta före- drages. Doseringsmönster och administrerad mängd är tillräck- lig för att lindra leukemi eller annan typ av cancer mot vilka föreliggande föreningar är effektiva. T.ex. vid behand- ling av lägre försöksdjur bör en dos av en förening enligt föreliggande uppfinning liggande inom intervallet från cirka 0,00lO mg/kg till ungefär 25 mg/kg per dag vara tillräcklig för att lindra leukemi. Den övre doseringsgränsen är den, som ges av toxiska biverkningar och kan bestämmas genom "trial and error" för djuret som skall behandlas. Doseringen med föreningarna enligt föreliggande uppfinning är i allmänhet lägre än (t.ex. 1/20 till l/200 gånger) den, som krävs med moderföreningarna. Doseringsmönster med en dos varannan till var sjunde dag är effektiva, samtidigti som kortare intervall, t.ex. en dag eller mindre, mellan doserna också kan användas.
För att underlätta administrationen kan föreningarna enligt föreliggande uppfinning, inkluderande salterna därav, till- handahâllas i farmaceutisk kompositionsform, och särskilt i enhetsdosform. Även om föreningarna kan administreras per se, är det vanligare att administrera dem i kombination med en farmaceutiskt godtagbar bärare, som utspäder före- ningen och underlättar hantering. Uttrycket “farmaceutiskt godtagbar” betyder att bäraren (såväl som den resulterande kompositionen) är steril och icke-toxisk.
För oral dosering kan bäraren eller utspädningsmedlet vara fast, halvfast eller flytande, och kan tjäna som en vehikel, excipient eller medium för medlet som beskrives i farmakolo- giska texter. För parenteral administration löses eller sus- penderas föreningen i ett lämpligt, injicerbart flytande medium som är känt inom tekniken på området, 459 921 32 Vid beredningen av dessa doseringsformer kan man använda inom området accepterade tekniker för att bereda vattenlösliga farmaceutiska medel (vid användning av salter) och i vatten olösliga medel (vid användning av de fria baserna)- Så kan exempelvis injicerbara material beredas enligt följande: Beredning A: Steril suspension i vattenhaltig vehikel för injektion Förening enligt exemplen l, 2, 3, 4, S, 6, 9 eller 10 som ett suspenderbart pulver Natriumoitrat Natriumkarboximetylcellulosa (lågviskosítets-kvalitet) Metyl-para-hydroxíbensoat Propyl-para-hydroxibensoat Vatten för injektion till 1,0 ml Beredning A': Steril suspension i vattenhaltig vehikel för injektion 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)-doxo- rubícin enligt exempel 4 Natriumcitrat Natriumkarboximetylcellulosa e(lågviskosltets-kvalitet) Mety1-para-hydroxibensoat Propy1-para-hydroxibensoat Vatten för injektion till 1,0 ml Beredning B: Steril lösning i vattenhaltigt bärarsystem för injektion " Förening enligt exempel 7 Natriumcitrat Natriumkarboximetylcellulosa (lägviskosítets-kvalitet) 0,5 5,7 2,0 1,5 012 ešfl 5,7 2,0 459 921 Lä' Metyl-para-hydroxibensoat O H ä N w Propyl-para-hydroxibensoat Vatten för injektion till 1,0 ml På liknande sätt kan tabletter för oral administration beredas enligt följande: Beredning C: Tablettberedning mg Förening enligt exempel 7 l 5,0 Laktos 91 Majsstärkelse (torkad) 51,5 Gelatin 2,5 Magnesiümstearat 1,0 Föreningen enligt exempel 7 pulvriseras och passeras genom en mesh-sikt och blandas väl med laktos och 30 mg av majs- stärkelsen, båda passerade genom en sikt.
De blandade pulvren beredes till en massa med en varm gelatin- lösning, framställd genom att omröra gelatin i vatten och uppvärma för att bilda en 10 % vikt/vikt-lösning. Massan granuleras genom att föras genom en sikt, och de fuktiga granulerna torkas vid 40°C.
De torkade granulerna återgranuleras genom att föras genom en sikt och resten av stärkelsen och magnesiumstearatet till- sättes och noggrann blandning sker.
Granulerna komprimeras för att ge tabletter, var och en vägan- de l5O mg.
Kapslar kan beredas enligt följande: 459 921 34 Beredning D: Kagselberedning gg Förening enligt exempel 8 l0 Laktos 190 Beredning D': Kagselberedning gg 3'-deaminø-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- doxorubicin enligt exempel 4(C) 1 Laktos 199 Föreningen enligt exempel 8 eller 4(C) och laktos föres genom en sikt øch pulvren blandas väl samman innan de fylles i härdgelatinkapslar av lämplig storlek, så att varje kapsel innehåller 200 mg blandade pulver.
Claims (10)
1. Förening, k ä n n e t e c k n a d av att den har strukturen: - ' m O. vari R väljes bland -CO-CH3, -CHOH-CH3, -CO-CHZOH och -CHOH- -CHZOH, X väljes bland =0 och =NH och A väljas bland -H och -CN, med det förbehållet att när Xgär =0, är A -CN.
2. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamíno-3'-(3"-cyano-4“-morfolinyl)-dauno- rubicin.
3. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)- 13-dihydrødaunorubicin.
4. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'~(3"-cyano-4"-morfolinyl)- 13-dihydrodoxorubicin.
5. S. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n'a d' av att den är 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfolinyl)~doko- 459 921 36 rubicin;
6. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'-(3“-cyano-4"-morfolinyl)-5-deoxo- -5-imíno-dannorubicin. ¿r
7. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morfølinyl)~5-deoxo~ -5-imíno-13-dihydro-daunorubícin.
8. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'-(3“-cyano-4”-morfolinyl)~5~deoxo- -5-imino-doxorubicin.
9. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d av att den är 3'-deamino-3'-(4“-morfolinyl)~5-deoxo-5-imino- -13-díhydro-daunorubicin.
10. Förening enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k n a d fw av att den är 3'-deamino-3'-(4'-morfolinyl)-5~deoxo-5-imino- -13-díhydrodoxorubicin.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US40012082A | 1982-07-20 | 1982-07-20 | |
| US06/496,122 US4464529A (en) | 1982-07-20 | 1983-05-24 | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8304045D0 SE8304045D0 (sv) | 1983-07-19 |
| SE8304045L SE8304045L (sv) | 1984-01-21 |
| SE459921B true SE459921B (sv) | 1989-08-21 |
Family
ID=27016900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8304045A SE459921B (sv) | 1982-07-20 | 1983-07-19 | Derivat av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4464529A (sv) |
| KR (1) | KR880002461B1 (sv) |
| AT (1) | AT381319B (sv) |
| AU (1) | AU555902B2 (sv) |
| BE (1) | BE897312A (sv) |
| CA (1) | CA1239396A (sv) |
| CH (1) | CH655729A5 (sv) |
| DE (1) | DE3325816A1 (sv) |
| DK (1) | DK158269C (sv) |
| ES (2) | ES524271A0 (sv) |
| FI (1) | FI75174C (sv) |
| FR (1) | FR2530640B1 (sv) |
| GB (1) | GB2124224B (sv) |
| GR (1) | GR78885B (sv) |
| IE (1) | IE55795B1 (sv) |
| IL (1) | IL69260A (sv) |
| IT (1) | IT1163818B (sv) |
| NL (1) | NL188905C (sv) |
| NO (1) | NO157146C (sv) |
| NZ (1) | NZ204911A (sv) |
| PH (1) | PH21860A (sv) |
| PT (1) | PT77060B (sv) |
| SE (1) | SE459921B (sv) |
| YU (2) | YU155083A (sv) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4826964A (en) * | 1982-07-20 | 1989-05-02 | Sri International | Bridged oxygen analogs of daunorubcin and doxorubicin |
| JPS59212499A (ja) * | 1983-05-13 | 1984-12-01 | アドリヤ・ラボラトリ−ズ・インコ−ポレ−テツド | 抗腫瘍性抗生物質アントラサイクリンの４−デメトキシ−３′−デアミノ−３′（４−モリホリニル）誘導体 |
| GB2140006A (en) * | 1983-05-17 | 1984-11-21 | Erba Farmitalia | Anthracycline derivatives |
| US4585859A (en) * | 1983-05-24 | 1986-04-29 | Sri International | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin |
| FR2560876B1 (fr) * | 1984-03-09 | 1987-01-16 | Hoechst Lab | Nouvelles anthracyclinones, leur procede de preparation, nouveaux glycosides (anthracyclines) obtenus a partir de ces anthracyclinones, utilisation de ces glycosides en tant que medicaments |
| FR2565982B1 (fr) * | 1984-06-15 | 1988-01-15 | Hoechst Lab | Nouveaux amino-3-tridesoxy-3,4,6-glycals, leurs procedes de preparation et anthracyclines obtenues a l'aide de ces glycals |
| GB8426672D0 (en) * | 1984-10-22 | 1984-11-28 | Erba Farmitalia | Pharmaceutical compositions |
| US4705850A (en) * | 1984-10-25 | 1987-11-10 | Sri International | C-glycosidic adriamycin analogs |
| US4591637A (en) * | 1985-01-17 | 1986-05-27 | Sri International | Open chain-morpholino adriamycins |
| US4710564A (en) * | 1985-01-18 | 1987-12-01 | Microbial Chemistry Research Foundation | Anthracycline compounds |
| GB2172594B (en) * | 1985-03-22 | 1988-06-08 | Erba Farmitalia | New morpholino derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
| US5124317A (en) * | 1985-08-02 | 1992-06-23 | Farmitalia Carlo Erba S.P.A. | Injectable ready-to-use solutions containing an antitumor anthracycline glycoside |
| GB8519452D0 (en) * | 1985-08-02 | 1985-09-11 | Erba Farmitalia | Injectable solutions |
| US5137877B1 (en) * | 1990-05-14 | 1996-01-30 | Bristol Myers Squibb Co | Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production |
| GB9019933D0 (en) * | 1990-09-12 | 1990-10-24 | Erba Carlo Spa | 13-dihydro-3'-(2-alkoxy-4-morphlinyl)anthracyclines |
| US5196522A (en) * | 1990-11-01 | 1993-03-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents |
| US5843903A (en) * | 1995-11-27 | 1998-12-01 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Targeted cytotoxic anthracycline analogs |
| AU767394C (en) * | 1999-12-29 | 2005-04-21 | Immunogen, Inc. | Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use |
| WO2005086951A2 (en) * | 2004-03-10 | 2005-09-22 | Threshold Pharmaceuticals, Inc. | Hypoxia-activated anti-cancer agents |
| US20070060534A1 (en) * | 2005-06-30 | 2007-03-15 | Threshold Pharmaceuticals, Inc. | Anthracycline analogs |
| CA2721140C (en) * | 2008-04-11 | 2016-02-09 | Tianjin Hemay Bio-Tech Co. Ltd. | Tetracyclic anthraquinone antibiotic derivatives with high activity, process for preparing the same and use thereof |
| JP2013530993A (ja) | 2010-07-02 | 2013-08-01 | アンジオケム インコーポレーテッド | 治療用コンジュゲートのための短く且つｄ−アミノ酸を含有するポリペプチドおよびその使用 |
| WO2016040825A1 (en) | 2014-09-12 | 2016-03-17 | Genentech, Inc. | Anthracycline disulfide intermediates, antibody-drug conjugates and methods |
| EP4180061A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-17 | Nerviano Medical Sciences S.r.l. | Anthracycline derivative linker reagents, antibody-drug conjugates and methods |
| WO2025168481A1 (en) | 2024-02-05 | 2025-08-14 | Nerviano Medical Sciences S.R.L. | Imino-anthracycline derivatives and methods |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4109076A (en) * | 1977-09-08 | 1978-08-22 | Sri International | 5-iminodaunomycin |
| US4202967A (en) * | 1978-10-02 | 1980-05-13 | Sri International | N,N-pentamethylene derivatives of daunomycin and adriamycin |
| US4301277A (en) * | 1980-10-20 | 1981-11-17 | Sri International | 3-Deamino-3-(4-morpholinyl) derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
| US4314054A (en) * | 1981-03-23 | 1982-02-02 | Sri International | 3'-Deamino-3'-(4-methoxy-1-piperidinyl) derivatives of daunorubicin and doxorubicin |
-
1983
- 1983-05-24 US US06/496,122 patent/US4464529A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-07-15 NZ NZ204911A patent/NZ204911A/en unknown
- 1983-07-15 GB GB08319165A patent/GB2124224B/en not_active Expired
- 1983-07-15 AT AT0260883A patent/AT381319B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-07-18 AU AU16946/83A patent/AU555902B2/en not_active Ceased
- 1983-07-18 DE DE19833325816 patent/DE3325816A1/de active Granted
- 1983-07-18 BE BE0/211190A patent/BE897312A/fr not_active IP Right Cessation
- 1983-07-18 FR FR8311803A patent/FR2530640B1/fr not_active Expired
- 1983-07-18 NO NO832610A patent/NO157146C/no unknown
- 1983-07-18 PH PH29236A patent/PH21860A/en unknown
- 1983-07-18 YU YU01550/83A patent/YU155083A/xx unknown
- 1983-07-18 IL IL69260A patent/IL69260A/xx unknown
- 1983-07-19 DK DK332983A patent/DK158269C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 GR GR71976A patent/GR78885B/el unknown
- 1983-07-19 ES ES524271A patent/ES524271A0/es active Granted
- 1983-07-19 IE IE1680/83A patent/IE55795B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 NL NLAANVRAGE8302586,A patent/NL188905C/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 FI FI832637A patent/FI75174C/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 SE SE8304045A patent/SE459921B/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 KR KR1019830003323A patent/KR880002461B1/ko not_active Expired
- 1983-07-19 CH CH3949/83A patent/CH655729A5/de not_active IP Right Cessation
- 1983-07-19 CA CA000432737A patent/CA1239396A/en not_active Expired
- 1983-07-19 PT PT77060A patent/PT77060B/pt not_active IP Right Cessation
- 1983-07-20 IT IT22143/83A patent/IT1163818B/it active
-
1984
- 1984-03-14 ES ES530593A patent/ES8602032A1/es not_active Expired
-
1985
- 1985-09-09 YU YU01405/85A patent/YU140585A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE459921B (sv) | Derivat av morfolinyl-daunorubicin och morfolinyl-doxorubicin | |
| US4585859A (en) | Analogues of morpholinyl daunorubicin and morpholinyl doxorubicin | |
| JPS59108786A (ja) | ブリオスタチン類 | |
| DE69710573T2 (de) | Morpholinyl-anthracyclinderivate | |
| DK170752B1 (da) | Cytostatisk aktive anthracyclinderivater samt anvendelse deraf | |
| ABE et al. | 3'-epi-19-Norafraside and 12β-Hydroxycoroglaucigenin from Asclepias curassavica | |
| Smith et al. | Adriamycin analogs. 2. Synthesis of 13-deoxyanthracyclines | |
| WO1986004332A1 (en) | Open chain-morpholino adriamycins | |
| WO2000056267A2 (en) | Methods and compositions for the manufacture of c-3' and c-4' anthracycline antibiotics | |
| EP0329108A2 (en) | Epipodophyllotoxin glucoside lactam derivatives | |
| KR920010226B1 (ko) | 새로운 bbm-1675c 및 d 항종양성 항생물질 및 그 제조방법 | |
| AU7304096A (en) | Novel amine derivatives of epipodophyllotoxin 2", 3"-dideoxyglycosides, preparation method therefor and use thereof as a drug and for treating cancer | |
| Acton et al. | New cyanomorpholinyl byproduct of doxorubicin reductive alkylation | |
| SU1402257A3 (ru) | Способ получени 3 @ -цианоморфолинопроизводного доксорубицина | |
| EP2229055B1 (en) | Method of (ar)alkylation of 4'-hydroxyl group of anthracyclins | |
| HU195518B (en) | Process for production of derivatives of morphinildaunorubicin and morphinil-doxorubicin and their analogues | |
| EP0989989B1 (en) | 13-dihydro-3'aziridino anthracyclines | |
| IE921764A1 (en) | Preparation of 6-0-alkylelsamicin a derivatives | |
| Hermentin et al. | Synthesis and Structure Elucidation of p-Methoxybenzoyl Derivatives of Rhodomycins1 | |
| HU193879B (en) | Process for preparing morpholinyl-daunorubicin and morpholinyl-doxurubicin derivatives and pharmaceuticals comprising such compounds as active substance | |
| CS268514B2 (en) | Method of daunorubicine's and doxorubicine's nes morpholine derivatives production | |
| MXPA98002933A (en) | Novedous derivatives of amina of 2", 3" -didesoxiglicosidos of epipodofilotoxina, method of preparation of the same and use of them with a drug and for treatments antican | |
| WO1989008655A1 (en) | Isolation and structural elucidation of cephalostatins 1-4 | |
| ABE et al. | 3’-epi-19-Norafroside and 1213-Hydroxycoroglaucigenin from Asclepias curassavica | |
| JPS6328437B2 (sv) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8304045-1 Effective date: 19940210 Format of ref document f/p: F |