Tarifname Yara ilerlemesi hali hazirda manuel olarak izlenmektedir. Ulusal Basinç Ulseri Danisma Paneli (The National Pressure Ulcer Advisory Panel) (NP-UAP), basinç ülserlerini karakterize etmek için bes asamali bir metodu özetleyen Sifa için Basinç Ulseri Olçegi (Pressure Ulcer Scale for Healing) (PUSH) aracini gelistirmistir. Bu araç, zamanla basinç ülseri izlemek için kullanilan nicel bir skoru belirlemek için üç parametre kullanir. Niteleyici parametreler, yara boyutlarini, doku tipini ve eksüda ya da akinti miktarini ve sarginin kaldirilmasindan sonra mevcut olan termal okumalari içerir. Bir yara ayrica kokusu ve rengi ile de karakterize edilebilir. Bu tür bir yara degerlendirmesi, hali hazirda yaranin kritik biyolojik ve moleküler bilgilerini içermemektedir. Bu nedenle, tüm yara tanimlari bir dereceye kadar özneldir ve uzman doktor ya da hemsire tarafindan elle belirtilir. Arzu edilen, biyolojik, biyokimyasal ve hücresel seviyelerdeki degisimler için yaralarin objektif olarak degerlendirilmesi ve yaralar içindeki bakterilerin/ mikro organizmalarin en erken mevcudiyetini hizli bir sekilde, hassasiyetle ve invazif olmayan bir sekilde tespit etmek için, bir saglam, uygun maliyetli, invazif olmayan ve hizli görüntüleme bazli metot ya da cihazdir. Yaralardaki kritik biyolojik doku degisikliklerinin tespiti için böyle bir metot veya cihaz, hasta bakiminda önemli klinikopatolojik kararlari yönlendirmek için geleneksel klinik yara yönetimi metotlari ile birlikte ek bir rol oynayabilir. Bu tür bir cihaz, kompakt, tasinabilir ve gerçek zamanli olarak invazif olmayan ve/ veya yaralarin güvenli ve rahat bir sekilde temas etmeden sorgulanmasina neden olabilir; bu, rutin yara yönetimi uygulamasina sorunsuzca uymasini ve klinisyen, hemsire ve yara uzmanina kullanici dostu bir sekilde kullanilmasini saglar. Bu ayni zamanda bu cihazin evde bakim ortaminda (bir hastanin kendi kendine kullanmasini içeren) ve askeri savas ortamlarinda kullanimini içerebilir. Ek olarak, böyle bir görüntü bazli cihaz, klinik olarak degerlendirme sürecine degerli 'biyolojik olarak bilgilendirilmis' görüntü kilavuzlugu ekleyerek yara tedavisi yanitini izleme ve gerçek zamanli olarak iyilesme yetenegi saglayabilir. Bu, sonuçta potansiyel yeni tani, tedavi planlamasi, tedavi yaniti izlemesi ve böylece bireysel hasta düzeyinde yara iyilesmesi yanitinin arttirilmasina izin verebilecek probleminin altinda yatan sistemik, lokal ve moleküler faktörlerin kesin olarak tanimlanmasi daha iyi özel tedaviye izin verebilir. Gelismis klinik tani ve hastaligin tedavisi için gereklilikleri yerine getirme potansiyeli sunan bir dizi görüntüleme teknolojisi ortaya çikmistir. Bunlardan floresan görüntülemenin klinik yara degerlendirmesi ve tedavisini iyilestirmek için umut verici oldugu görülmektedir .Kisa dalga boyunda isik (örnek olarak, ultraviyole ya da kisa görünür dalga boylari) tarafindan uyarildiginda, dokularin çogu endojen biyolojik bilesenleri (örnek olarak, kollajen ve elastinler gibi bag dokular, metabolik koenzimler, proteinler, ve benzerleri), ultraviyole, görünür, yakin kizilötesi ve kizilötesi dalga boyu araliklari içinde daha uzun bir dalga boyuna sahip floresan üretir [DaCosta et al., görüntüleme teknolojilerinden en olgun olani olan doku oto floresan görüntüleme, gastrointestinal sistemdeki erken kanserlerin ve diger hastaliklarin endoskopik bir asgari düzeyde invazif sekilde tespitini gelistirmek için kullanilmistir [Dacosta (2002) Doku oto floresan görüntüleme, normal ve hastalikli dokularin biyolojik olarak ilgili bilgisini gerçek zamanli olarak elde etmek için essiz bir yol saglar, böylece normal ve hastalikli doku durumlari arasinda ayirt etmeye izin verir [DaCosta, 2003; DaCosta seviyelerde meydana gelen dogal olarak farkli isik-doku etkilesimlerine (örnek olarak isigin alinmasi ve saçilmasi), doku morfolojisi ve dokularin kan içerigindeki degisimlere dayanir. Dokularda, kan, büyük bir isigi emen doku bilesenidir (yani bir kromofor).Bu teknoloji, içi bos organlarda (örnek olarak, GI trakt, agiz boslugu, akcigerler, mesane) ya da maruz kalan doku yüzeylerindeki (örnek olarak, Cilt) hastaliklarin görüntülenmesi için uygundur. Bu endikasyona ragmen, hali hazirdaki endoskopik floresan görüntüleme sistemleri büyüktür, karmasik tani algoritmalari içerir ve pahalidir ve bugüne kadar, bu tür araçlar esas olarak büyük klinik merkezlerinde bulunur ve çok az sistem ticari olarak temin edilebilirdir. Hali hazirda, böyle bir optik ya da floresan dayali görüntüleme cihazi, yara görüntüleme için mevcut degildir. Bununla birlikte, yaralara kolayca erisilebilir oldugundan, bir oto floresan görüntüleme cihazi, hali hazirdaki kisitlamalari asmak ve klinik bakim ve yönetimi iyilestirmek için, yaralarin zengin biyolojik bilgisini tespit etmek ve bunlardan faydalanmak için, yaralarin hizli, invazif olmayan ve temassiz gerçek zamanli görüntülemesi için yararli olabilir. Floresan bazli görüntüleme ve izleme için bir cihaz ve metot açiklanmaktadir. Cihazin bir yapilanmasi tasinabilir bir optik dijital görüntüleme cihazidir. Cihaz, beyaz isik, doku floresani ve yansima görüntülemenin bir kombinasyonunu kullanabilir ve gerçek zamanli yara görüntüleme, degerlendirme, kayit/ belgeleme, izleme ve/ veya bakim yönetimi saglayabilir. Cihaz elde tutulan, kompakt ve/ veya hafif olabilir. Bu Cihaz ve metot, Insanlarda ve hayvanlarda yaralarin izlenmesi için uygun olabilir. Cihazin diger kullanimlari sunlari içerebilir: 0 Küçük ve büyük (örnek olarak, veteriner) hayvanlarin klinik olarak ve arastirma bazli görüntülenmesi. 0 Et, kümes hayvani eti, süt ürünleri, balik, zirai sanayilerde gida/ hayvansal ürün hazirliginda kontaminasyonun (örnek olarak bakteriyel kontaminasyon) tespiti ve izlenmesi. o Halka açik (örnek olarak saglik hizmetleri) ve özel ortamlarda 'yüzey kontaminasyonunun' (örnek olarak bakteriyel ya da biyolojik kontaminasyon) 0 Insan ve/ veya veteriner hastalarda çok spektrumlu görüntüleme ve kanserlerin tespiti. 0 Insan hastaliklarinin deneysel hayvan modellerinde (örnek olarak, yara ve kanserler) kanserlerin çok spektrumlu görüntüleme ve izlenmesi için bir arastirma araci olarak. o Adli tespit, örnek olarak gizli parmak izleri ve biyolojik olmayan yüzeylerdeki biyolojik sivilar. o Agiz boslugunda dis plagi, tasiyici ve kanserlerin görüntülenmesi ve izlenmesi. o Klinik mikrobiyoloji Iaboratuvarlarinda görüntüleme ve izleme cihazi. 0 Antibakteriyel (örnek olarak, antibiyotik) dezenfektan maddeleri test etmek. Cihaz genel olarak sunlari içerebilir: i) bir ya da daha fazla uyarma/ aydinlatma isik kaynagi ve ii) bir ya da daha fazla optik emisyon filtresi ya da spektral filtreleme mekanizmasi ile birlestirilebilen ve bir görüntü/ kontrol ekranina (örnek olarak, bir dokunmatik ekran), görüntü yakalama ve yakinlastirma kontrollerine sahip olabilen detektör cihaz (örnek olarak bir dijital görüntüleme detektör cihazi). Cihaz ayni zamanda sunlari da içerebilir: iii) kablolu ve/ veya kablosuz bir veri aktarma portu/ modülü, iv) bir elektrik güç kaynagi ve güç/ kontrol anahtarlari ve/ veya v) kompakt ve/ veya hafif olabilen, ve detektör cihazinin ve bir tutamaç kulpunun baglanmasi için bir mekanizmaya sahip olabilecek olan bir kutu. Uyarma/ aydinlatma isik kaynaklari, yaklasik olarak 405 nm'de (örnek olarak +/- 5 nm) isik yayan LED dizileri olabilir ve kendi optik filtreleri ile görüntüleme detektöründe isik sizintisina neden olmamak için LED dizi çikisindan gelen isigin yan bant spektral bantlarini çikarmak/ en aza indirmek için yaklasik olarak 405 nm'de merkezlenmis ilave bant geçiren filtreler ile birlestirilebilir. Dijital görüntüleme detektörü, bir dijital kamera olabilir, örnek olarak en az bir ISO8OO hassasiyetine sahip olabilir, ancak daha tercihen bir I8032OO hassasiyetine sahip olabilir ve bir ya da daha fazla optik emisyon filtresi ya da esit derecede etkili (örnek olarak minyatürize edilmis) mekanize spektral filtreleme mekanizmalari ile birlestirilebilir (örnek olarak sesli isiksal ayarlanabilir filtre ya da likit kristal ayarlanabilir filtre).Dijital görüntüleme detektörü, dokunmaya duyarli bir görüntüleme ve/ veya kontrol ekranina, görüntü yakalama ve yakinlastirma kontrollerine sahip olabilir. Kutu, dijital görüntüleme detektörü cihazini saran, gerekli tüm cihaz kontrollerine kolayca erisilebilecek ve kullanici tarafindan manipüle edilebilecek dügmeler ile çevrilmis bir dis sert plastik ya da polimer kabuk olabilir. Eger gerekirse, fazla isinin uyarma isik kaynaklarindan uzaklastirilmasina imkan vermek için minyatür isi havuzlari ya da küçük mekanik fanlar ya da diger isi dagitma cihazlari cihaza gömülebilir. Tüm gömülü aksesuarlari ve ekleri içeren komple cihaz, standart AC/DC güç ve/ veya sarj edilebilir pil takimi kullanilarak çalistirilabilir. Komple cihaz ayrica, cihazin el baglantisiz çalismasi ile bir klinik odada hareket etmesine olanak taniyan harici bir mekanik cihaza (örnek olarak, tripod ya da hareketli kollu hareketli stand) takilabilir ya da monte edilebilir. Alternatif olarak, cihaz tasinabilir olacak sekilde bir mobil çerçeve ile saglanabilir. Cihaz, su ile islatilmis nemli gazli bez kullanilarak temizlenebilirken, sap, alkol ile islatilmis nemli gazli bez ile temizlenebilir. Cihaz, bir kullanicinin görüntüleme parametrelerinin kontrolü, görüntülerin görsellestirilmesi, görüntü verilerinin depolanmasi ve kullanici bilgilerinin, görüntülerin ve/ veya iliskili verilerin aktarilmasi ve/ veya ilgili görüntü analizi (örnek olarak, teshis algoritmalari) yapmasina imkan veren bir yazilim içerebilir. Cihazin bir örneginin sematik bir diyagrami Sekil 1'de gösterilmistir. Cihaz, bir hedef nesneyi (10) ya da hedef yüzeyi görüntüleyecek sekilde konumlandirilmistir. Gösterilen örnekte, cihaz, dijital kamera, video kaydedici, kamera, dahili dijital kamerali hücresel telefon, dijital kameraya sahip olan 'akilli' telefon, kisisel dijital asistan (PDA), bir dijital kamera ya da bir web kamerasina sahip olan dizüstü bilgisayar/ PC gibi dijital bir görüntü alma cihazina (1) sahiptir. Dijital görüntü alma cihazi (1), hedef nesneye (10) isaret edecek sekilde hizalanabilen ve nesneden (10) ya da yüzeyden çikan optik sinyali tespit edebilen bir lense (2) sahiptir. Cihaz, bir ya da daha fazla optik filtreyi (4) barindirabilen bir optik filtre tutucusuna (3) sahiptir. Her Optik filtre (4) farkli ayrik spektral bant genisliklerine sahip olabilir ve bant geçiren filtreler olabilir. Bu optik filtreler (4), isigin dalga boyuna bagli olarak belirli optik sinyalleri seçici bir sekilde tespit etmek için dijital kamera merceginden seçilebilir ve buraya getirilebilir. Cihaz, nesneyi (10) aydinlatmak için, birlikte görüntülenecegi bir optik sinyal üretmek (örnek olarak, floresan) için, örnek olarak mavi isik (örnek olarak, 400 ila 450 nm arasinda), ya da tekil ya da çoklu dalga boylarinin (örnek olarak, ultraviyole! görünür/ kizilötesine yakin/ kizil öteki araliklarindaki dalga boylari) herhangi baska bir kombinasyonunda uyarma isigi üreten isik kaynagini (5) içerebilir. filtrelenmis isiklar içerebilir. Cihaz, isiyi dagitmak ve aydinlatma isik kaynaklarini (5) sogutmak için bir metot veya ya da (6 )(örnek olarak bir sogutucu ya da sogutma fani) içerebilir. Cihaz, görüntülenen nesneyi (10) aydinlatmak için kullanilan isik kaynaklarindan (5) istenmeyen herhangi bir dalga boyunu çikarmak için bir metot ya da aparat (7) (örnek olarak, bir optik bant geçiren filtre) içerebilir. Cihaz, görüntüleme cihazi ile nesne (10) arasindaki mesafeyi ölçmek ve belirlemek için bir optik araç (örnek olarak, bir kosutlanmis isik isini yayan kompakt minyatür lazer diyotlarin kullanimi) kullanmak için bir metot ya da aparat (8) içerebilir. Ornek, cihaz, cihaz ile nesne (10) arasindaki sabit bir mesafeyi korumak için bir üçgenlestirme aparatinin parçasi olarak iki lazer diyot gibi iki isik kaynagi kullanabilir. Diger isik kaynaklari mümkün olabilir. Cihaz ayni zamanda, korunacak sabit bir mesafeyi belirlemek için ultrason ya da cetvel gibi fiziksel bir ölçü de kullanabilir. Cihaz ayni zamanda, degisen mesafeler için nesneye (10) çarpan isigin aydinlatma açisini degistirmek için bu kaynaklarin (5, 8) manevra yaptirilacagi sekilde uyarma isik kaynaklarinin (5, 8) elle çalistirilmasi ve yönlendirilmesine izin vermek için bir metot ya da bir aparat (9) (örnek olarak, bir mil) içerebilir. Hedef nesne (10), nesnenin birden fazla görüntüsünün alinmasini ve daha sonra analiz için birlikte kaydedilmesini saglamak için bir isaret (11) ile isaretlenebilir. Isaret (11), örnek olarak, isik kaynaklari (5) tarafindan aydinlatildiginda ve nesnenin (10) görüntüsü içinde tespit edilebildiginde, çok sayida farkli optik sinyal üretebilen ve farkli renklerde dissal floresan boyalarinin kullanilmasini içerebilir ve bu sayede farkli renkleri ve aralarindaki mesafeleri birlikte kaydederek ayni bölgenin birden fazla görüntüsünün (örnek olarak, zaman içinde alinmis) yönlendirilmesine izin verebilir. Dijital görüntü elde etme cihazi (1) sunlardan birini ya da daha fazlasini içerebilir: basa takilan bir ekran için bir ara yüz (12); harici bir yazici için bir ara yüz (13); bir tablet bilgisayar, dizüstü bilgisayar, masa üstü bilgisayar ya da baska bir bilgisayar cihazi için bir ara yüz (14); cihaza, görüntüleme verilerinin uzak bir siteye ya da baska bir cihaza kablolu ya da kablosuz aktarilmasina izin vermek için bir ara yüz (15); bir küresel konumlandirma sistemi (GPS) cihazi için bir ara yüz (16); ekstra bellek kullanimina izin veren bir cihaz için bir ara yüz (17); ve bir mikrofon için bir ara Cihaz, AC/DC güç kaynagi, kompakt bir pil sarj ünitesi ya da sarj edilebilir bir pil takimi gibi bir güç kaynagi (19) içerir. Alternatif olarak, cihaz harici bir güç kaynagina baglamak için uyarlanabilir. Cihaz, tüm bilesenleri bir varlikta barindiran bir mahfazaya (20) sahiptir. Mahfaza (20), içindeki herhangi bir dijital görüntüleme cihazini sabitleyen bir araç ile donatilmistir. Mahfaza (20) elde tutulan, küçük ve tasinabilir olacak sekilde dizayn edilmistir. 3Mahfaza (20) bir ya da daha fazla kutu olabilir. Halen Sekil 1'e atfen, b) tipik bir yara bakim tesisinde cihazin bir örnegini gösterir, a) muayene sandalyesini ve aksesuar masasini gösteren tipik bir klinik yara bakimi tesisini gösterir, b-C) Cihazin bir örnegi kendi sert kasa kabi içerinde gösterilmistir. Cihaz, hastanin gerçek zamanli görüntülemesini mümkün kilan rutin yara bakimi uygulamasina entegre edilebilir, d) Cihazin bir örnegi cihazin büyüklügünü göstermek için "yara bakim yük arabasina" yerlestirilmis olarak gösterilmistir, 9) Cihaz, beyaz isik aydinlatmasi altinda görüntü elde etmek için kullanilabilirken, f) aygitin soluk oda isiklari altinda bir yara floresan görüntülerini almak için kullanildigini gösterir, g) Cihaz, teletip/ telesaglik altyapilarinda kullanilabilir, örnek olarak hastanin yaralarinin floresan görüntüleri bir yara bakimi uzmanina, bir kablosuz/ WiFi internet baglantisi kullanana bir baska hastanedeki bir Akilli telefon gibi bir kablosuz iletisim cihazi araciligi ile elektronik posta vasitasi ile gönderilebilir. Bu cihazi kullanarak, yüksek çözünürlüklü floresan görüntüleri, uzman klinik yara bakim ve yönetim merkezlerinde klinik uzmanlar, mikrobiyologlar, ve benzeri ile derhal konsültasyon yapilmasi için uzak yara bakim sitelerinden yara bakimi uzmanlarina elektronik posta eki olarak gönderilebilir. Ornekler Floresan bazli izleme için bir cihazin bir örnegi asagida tarif edilmistir. Tüm örnekler sadece açiklama amaci ile verilmistir ve sinirlama amaci tasimamaktadir. Orneklerde açiklanan dalga boylari, boyutlar ve inkübasyon süresi gibi parametreler yaklasik olabilir ve sadece örnek olarak verilmistir. Bu örnekte, cihazlar, her biri uyarma ya da aydinlatma isik kaynaklari olarak görüntüleme detektör tertibatinin her iki yaninda yerlestirilmis olan, iki mor/ mavi isik (örnek olarak 405 nm +/- 10 nm emisyon, dar emisyon Spektrumu) LED dizileri (Opto Diode Corporation, Newbury Park, California) kullanir. Bu diziler, her biri yaklasik olarak1 Watt olan bir çikis gücüne sahiptir ve her biri 2.5 x 2.5 cm2'den yayilan ve 70 derecelik aydinlatici bir isin açisina sahiptir. LED dizileri, doku yüzeyini yaklasik 10 cm'lik bir mesafeden aydinlatmak için kullanilabilir; bu, cilt yüzeyindeki toplam optik güç yogunlugunun yaklasik 0.08 W/cm2 oldugu anlamina gelir. Bu kadar düsük güçlerde, ne hedef yara ya da cilt yüzeyine ne de gözlere uyarma isigindan gelen bilinen potansiyel hiçbir zarar yoktur. Bununlar birlikte, görüntüleme prosedürleri sirasinda isigi dogrudan herhangi bir kisinin gözüne dogrultmak tavsiye edilemez. Ayni zamanda, ayrica daha ayrintili olarak http://www.iec.ch/online_news/etech/arch_2006/etech_0906/focus.htm adresinde açiklandigi üzere, tarafindan formüle edilen uluslararasi standartlara göre saglik açisindan risk teskil Bir ya da daha fazla isik kaynagi, görüntülü yüzeydeki aydinlatma açisini ve spot boyutunu örnek olarak bir yerlesik mil kullanarak, degistirmek için (örnek olarak, elle) eklemlendirilebilir ve örnek olarak bir duvar prizine ve/ veya bir ayri tasinabilir sarj edilebilir pil takimi gibi elektriksel bir baglanti ile güçlendirilmislerdir. Uyarma/ aydinlatma isigi, halka ya da dizi formatlari, dalga boyu filtreli ampuller ya da lazerler de dahil olmak üzere herhangi bir düzende ayri ya da çoklu isik yayan diyotlar (LED'Ier) içeren ancak bunlar ile sinirli olmayan kaynaklar tarafindan üretilebilir. Ayni zamanda, Ultraviyole (UV), görünür (VIS), uzak kirmizi, yakin kizilötesi (NlR) ve kizilötesi (IR) araliklarinda belirli dalga boyu özelliklerine sahip seçilmis tek ve çoklu uyarma/ aydinlatma isik kaynaklari da kullanilabilir ve asagidakilerden olusabilir: bir LED dizisi, organik LED, lazer diyot ya da çesitli geometrilerde düzenlenmis filtrelenmis isiklar. Uyarma/ aydinlatma isik kaynaklari, görüntüleme sirasinda cihazdan yayilan isik yogunlugunun ayarlanmasina izin vermek için 'ayarlanabilir'. dagitmak için ayri sogutma fanlarina ya da isi havuzlarina takilabilir. LED dizileri, yayilan isigin detektör optiklerine potansiyel 'sizintisini' azaltmak için ticari olarak temin edilebilen bir bant geçis filtresi (Chroma Technology Corp, Rockingham, VT, USA) kullanilarak spektral olarak filtrelenebilen dar 405 nm isik yayabilir. Cihaz görüntülenecek bir doku yüzeyinin (örnek olarak, bir yara) üstünde tutuldugunda, aydinlatici isik kaynaklari dar bant genisliginde ya da genis bant genisliginde bir mor/ mavi dalga boyunda ya da doku/ yara üzerine baska bir dalga boyu ya da dalga boyu bandinda parlayabilir, yüzey bu sayede ilgilenilen bölge içerisinde düz ve homojen bir alan meydana getirir. Isik ayni zamanda dokuyu belirli bir sig derinlige kadar aydinlatabilir ya da uyarabilir. Bu uyarma/ aydinlatma isigi normal ve hastalikli dokular ile etkilesime girer ve doku içinde bir optik sinyalin (örnek olarak, absorpsiyon, floresan ve/ veya yansitma) üretilmesine neden olabilir. Uyarma ve emisyon dalga boylarini buna göre degistirmek sureti ile, görüntüleme cihazi, yüzeydeki ve doku (örnek olarak, bir yara) içindeki belirli derinliklerdeki doku bilesenlerini (örnek olarak, bir yaradaki bag dokular ve bakteriler) sorgulayabilir. geçis yapmak sureti ile, örnek olarak bir yarada daha derin doku/ bakteri floresan kaynaklarinin uyarilmasi saglanabilir. Benzer sekilde, daha uzun dalga boylarini saptamak sureti ile, doku yüzeyinde dokudan ve/ veya dokudaki daha derin bakteriyel kaynaklardan floresan emisyonu tespit edilebilir. Yara degerlendirmesi için, yüzey ve/ veya alt yüzey floresanini sorgulama yetenegii örnek olarak yüzeyde ve siklikla bir yara içinde (örnek olarak, kronik iyilesmeyen yaralarda) derinlikte meydana gelebilecek bakteriyel kontaminasyonun, kolonizasyonun, kritik kolonizasyonun ve/ veya enfeksiyonun tespit edilmesi ve potansiyel tanimlanmasinda faydali olabilir. Bir örnekte, Sekil 6'ya referansla, c) yara temizliginden sonra cilt yüzeyinin altindaki (yani derinlerde) bakteri tespitini gösterir. Bir yara içindeki yüzeyde ve derinlerde ve çevreleyen dokuda bakteri tespit edilmesi için cihazin bu kullanimi, yara bakim merkezlerinde geleneksel olarak kullanilan öteki klinik isaretler ve semptomlar baglaminda degerlendirilebilir. Cihazin örnek yapilanmalari, Sekil 2'de gösterilmistir. Cihaz, görüntü alma cihazi olarak herhangi bir standart kompakt dijital görüntüleme cihazi (örnek olarak, bir isiga hassas elektronik cihaz (CCD) ya da tamamlayici metal oksit yari iletken (CMOS) sensörleri) ile birlikte kullanilabilir. a)'da gösterilen örnek cihaz bir harici elektriksel güç kaynagina, görüntülenecek nesneyi/ yüzeyi aydinlatmak için iki LED dizisine ve görüntüleme için uygun bir tutamakla donatilmis hafif metal çerçeveye saglam bir sekilde sabitlenmis ticari olarak temin edilebilen bir dijital kameraya sahiptir. Dijital kameranin önünde, görüntülenen nesneden/ yüzeyden çikan tespit edilmis optik sinyalin dalga boyu filtrelemesini saglamak için çok bantli bir filtre tutulur. Kameranin video/ USB çikis kablolari, depolama ve ardindan analiz için görüntüleme verilerinin bir bilgisayara aktarilmasini saglar. Bu örnekte, piyasada satilan 8.1 mega piksel Sony dijital kamera kullanilmaktadir (Sony Cybershot DSC-T2OO Dijital Kamera, Sony Corporation, Kuzey Amerika). Bu kamera, i) kutu çerçevesine kolayca entegre edilebilecek ince dikey tasarimi, ii) kontrol kolayligi için genis 3,5 inç genis ekran dokunmatik LCD ekrani, iii) Carl Zeiss 5x optik zoom lensi ve iv) düsük isikta (örnek olarak, lSO 3200) kullanimi nedeni ile uygun olabilir. Cihaz, standart beyaz isik görüntülemesine (örnek olarak, yüksek çözünürlüklü fotograflar veya ses kayit çikisli videolar) izin veren dahili bir flasa sahip olabilir. Kamera ara yüzü baglanti noktalari, çesitli harici cihazlara hem kablolu (örnek olarak, USB) hem de kablosuz (örnek olarak, Bluetooth, WiFi ve benzer yöntemler) veri aktarimini ya da 3. taraf eklenti modüllerini destekleyebilir, örnek olarak: basa takilan bir ekran, harici bir yazici, bir tablet bilgisayar, dizüstü bilgisayar, kisisel masa üstü bilgisayar, görüntüleme verilerinin uzak bir siteye/ baska bir cihaza aktarilmasina izin veren kablosuz bir cihaz, global bir konumlandirma sistemi (GPS) cihazi, fazladan bellek kullanimina izin veren bir cihaz ve bir mikrofon. Dijital fotograf makinesine sarj edilebilir piller ya da AC/DC güç kaynagi ile güç verilir. Dijital görüntüleme cihazi, tümü bir dijital görüntüleme algilayicisina/ sensörüne sahip olan ya da bunlara bagli dijital kameralar, web kameralari, dijital SLR kameralar, kameralar/ video kaydediciler, gömülü dijital kameralara sahip cep telefonlari, SmartphonesTM, kisisel dijital asistanlar (PDA'lar) ve dizüstü bilgisayarlar/ tablet PC'ler ya da kisisel masa üstü bilgisayarlar içerebilir, ancak bunlar ile sinirli degildir. Uyarma/ aydinlatma isik kaynaklari tarafindan üretilen bu isik sinyali, uyarma isigini reddeden, ancak algilanacak dokudan yayilan isigin seçili dalga boylarina izin veren optik filtre (filtreler) (örnek olarak, Chroma Technology Corp, Rockingham, VT, ABD'den temin edilebilenler) kullanilarak görüntüleme cihazi tarafindan tespit edilebilir, bu sayede ekranda bir görüntü olusturur. Dijital kamera lenslerinin önünde kutu çerçevesine baglanmis olan, Sekil 2'nin b) ve c)'sinde gösterildigi sekilde farkli ayrik spektral bant genisliklerine sahip olan bir ya da daha fazla optik filtreleri barindiran bir optik filtre tutucusu mevcuttur. b), cihazi, yerinde tekil bir emisyon filtresine sahip olan, parlak mor/ mavi isik yaymak için açilmis olan LED dizileri ile birlikte gösterir, c), cihazi, arzu edilen dalga boyuna özgü görüntüleme için uygun filtreyi seçmek için kullanilan bir çoklu Optik filtre tutucuyu kullanirken gösterir, d), cihazi, bir ayagin cilt yüzeyini görüntülerken bir elle tutulurken gösterir. Bu bant geçiren filtreler, istenen isigin dalga boyuna bagli olarak doku/ yara yüzeyinden spesifik optik sinyalleri seçici olarak tespit etmek için seçilebilir ve dijital kamera merceginin önünde hizalanabilir. Tespit edilen optik sinyalin (örnek olarak, emme, floresan, yansima) spektral filtrelemesi, örnek olarak bir sivi kristalle ayarlanabilen filtre (LCTF) ya da bir elektronik olarak ayarlanabilen spektral bant geçiren filtre olan kati halli bir sesli isikli ayarlanabilir filtre (AOTF) kullanilarak da elde edilebilir. Spektral filtreleme ayni zamanda sürekli degisken filtrelerin ve/ veya manuel bant geçiren optik filtrelerin kullanimini da içerebilir. Bu cihazlar, dokularin çoklu spektral, hiper spektral ve/ veya dalga boyu seçici olarak görüntülenmesini saglamak için görüntüleme detektörünün önüne yerlestirilebilir. Cihaz, uyarma/ aydinlatma isik kaynaklarina ve görüntüleme detektör cihazina makul bir sekilde tutturulmus olan optik ya da degisken yönelimli polarizasyon filtreleri (örnek olarak, optik dalga plakalarinin kullanimi ile birlestirilmis olan dogrusal ya da dairesel) kullanilarak degistirilebilir. Bu sekilde, cihaz, doku yüzeyini, polarize isik aydinlatmasi ve polarize olmayan isik algilamasi ile ya da bunun tersi olarak, ya da polarize isik aydinlatmasi ve polarize isik algilamasi, ya da beyaz isik yansimasi ve/ veya floresan görüntülemesi ile görüntülemek için kullanilabilir. Bu, yaralarin en aza indirgenmis speküler yansimalarina (örnek olarak, beyaz isik görüntülemesinden parlama) ve ayrica yara içindeki ve normal dokular çevresindeki bag dokularindaki (örnek olarak, kollajen ve elastin) floresan polarizasyonunun ve/ veya anizotropiye bagli degisikliklerin görüntülenmesini mümkün kilabilir. Bu, iyilesme sirasindaki yara yeniden modellenmesi ile iliskili bag doku Iiflerinin mekansal yönelimi ve organizasyonu hakkinda yararli bilgiler verebilir [Yasuiet al., (2004) Görüntüleme cihazinin tüm bilesenleri, bir tutamaca sahip olan ergonomik olarak dizayn edilmis kapali yapi gibi tek bir yapiya entegre edilebilir, bu da bir ya da iki eli ile rahatça tutulmasini saglar. Cihaz ayni zamanda herhangi bir tutamaç olmadan da saglanabilir. Cihaz, hafif, tasinabilir olabilir ve beyaz isik, floresan ve/ veya yansima görüntüleme modlari kullanarak herhangi bir hedef yüzeyin (örnek olarak, ayni zamanda erisilebilir olan cilt ve/ veya agiz boslugunun) gerçek zamanli dijital görüntülemesini (örnek olarak, duragan görüntü ve/ veya video) saglayabilir. Cihaz, yüzeyden degisken mesafelerde tutulmak sureti ile görüntüleme için vücut yüzeyinde taranabilir ve beyaz isik yansimasini/ floresan isik yaymasini görüntülemek için aydinlatilmis bir ortamda/ odada kullanilabilir. Cihaz, doku floresan sinyallerini optimize etmek ve oda isiklarindan arka plan sinyallerini en aza indirmek için los ya da karanlik bir ortamda/ odada kullanilabilir. Cihaz, dogrudan (örnek olarak, çiplak göz ile) ya da dolayli (örnek olarak, dijital görüntüleme cihazinin görüntüleme ekrani araciligi ile) yaralarin ve çevresindeki normal dokularin görsellestirilmesi için kullanilabilir. Cihaz ayni zamanda, nesnelerin, malzemelerin ve yüzeylerin (örnek olarak, bir vücut) beyaz isik, floresan ve yansima görüntülemesi için nispeten sabit bir optik görüntüleme cihazi olarak kullanilmak üzere, bir montaj mekanizmasina (örnek olarak bir tripod ya da stand) tutturulmus olarak, elde tutulur olmadigi ya da tasinabilir olmadigi sekilde de yapilandirilabilir. Bu, cihazin, nesnelerin, malzemelerin ve yüzeylerin, bir sira ya da masa üstünde ya da 'montaj hatti' için görüntüleme yapmasina izin verir. Bazi yapilanmalarda, montaj mekanizmasi hareketli olabilir. Bu cihazin diger özellikleri, muhtemelen sesle birlikte dijital görüntü ve video kaydetme kabiliyetini, dokümantasyon için metotlari (örnek olarak, görüntü saklama ve analiz yazilimi ile birlikte) ve uzak teletip/ E-saglik ihtiyaçlari için kablolu ya da kablosuz veri iletimini içerebilir. Ornek olarak, Sekil 2'deki e) ve f), görüntü elde etme cihazinin hücresel telefon gibi bir mobil iletisim cihazi oldugu cihazin bir yapilanmasini göstermektedir. Bu örnekte kullanilan cep telefonu, 1,3 mega piksel dijital kamera ile donatilmis bir Samsung Model A-900'dür.Telef0n, uygun görüntüleme için tutma çerçevesine yerlestirilmistir, e), cihazin "Yara" kelimesini gösteren floresan mürekkepli bir kagidin görüntülenmesi için kullanimini gösterir, f), floresan mürekkep lekeli parmaklarin görüntülenmesini ve yaygin cilt bakterileri P. Aknelerin tespit edilmesini gösterir. Cep telefonundan gelen görüntüler, kablosuz olarak baska bir cep telefonuna ya da kablosuz olarak (örnek olarak, Bluetooth baglantisi araciligi ile) görüntü saklama ve analiz için bir kisisel bilgisayara gönderilebilir. Bu, cihazin bir teletip/ E-saglik yara bakimi altyapisinin bir parçasi olarak uzak bir siteye/ kisiye gerçek zamanli elde tutulan floresan görüntüleme ve kablosuz iletimi gerçeklestirme yetenegini göstermektedir. Görüntüleme cihazinin yara bakimi ve diger ilgili uygulamalardaki yeteneklerini göstermek için, açiklanan özel örnek kullanilarak bir dizi fizibilite deneyi yapilmistir. Tüm floresan görüntüleme deneyleri sirasinda, Sony kamera (Sony Cybershot DSC- T200 Dijital Kamera, Sony Corporation, Kuzey Amerika) ayarlarinin, resimlerin flassiz ve 'Makro' görüntüleme modu ayari ile çekilecegi sekilde ayarlandigi dikkate alinmalidir. Görüntüler 8 mega pikselde yakalanmistir. Flas, beyaz isik yansima görüntülerini yakalamak için kullanilmistir. Tüm görüntüler, daha sonra uzun süreli depolama ve görüntü analizi için bir kisisel bilgisayara aktarilmak üzere xD hafiza kartinda saklanmistir. Cihazla çekilen tüm beyaz isik yansimasi ve floresan görüntüleri/ filmler görüntü analizi için Adobe Photoshop'a aktarilmistir. Bununla birlikte, görüntü analizi yazilimi, çesitli görüntü tabanli spektral algoritmalarin (örnek olarak, kirmizidan yesile floresan oranlari ve benzeri) nicel aigilama/ teshis degeri için spektral veri için ilgili görüntü verilerini (örnek olarak, mekansal ve spektral) elde etmek için kullanilmasina izin vermek için MatLabTM (MathWorks) kullanilarak dizayn edilmistir. Ayni zamanda, görüntü isleme sonrasi görüntülerin matematiksel manipülasyonu da dahil edilmistir. Bakteriyoloiik Orneklerin Görüntülenmesi Görüntüleme cihazi, klinik mikrobiyoloji laboratuvarlarinda görüntüleme ve/ veya izleme için faydali olabilir. Cihaz, bakteriyel kolonilerin nicel olarak görüntülenmesi ve yaygin mikrobiyoloji deneylerinde koloni büyümesinin nicellendirilmesi için kullanilabilir. Büyüme kinetigini belirlemek için bakteriyel kolonilerin floresan ile görüntülenmesi kullanilabilir. Bakteriyel kolonilerin otomatik sayilmasini saglamak için yazilim kullanilabilir. Cihazin bir bakteriyoloji/ kültür laboratuvarinda kullanimini göstermek için koyun kani agar plaklarinda canli bakteriyel kültürler yetistirilmistir. Bakteriyel türler arasinda streptokok piyojenler, serratia marcescens, stafilokok aureus, stafilokok epidermidis, escherichia coli ve psödomonas aeruginosa (Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu, ATCC) bulunur. Bunlar, 37 cC'de standart inkübasyon kosullari altinda büyütülmüstür ve muhafaza edilmistir ve 'üssel büyüme fazi' sirasinda deney yapmak için kullanilmistir. Plakalarda koloniler tespit edildikten sonra (asilamadan ~ 24 saat sonra), cihaz karanlik bir odada ayri ayri bakteri türleri içeren agar plakalari görüntülemek için kullanilmistir. Mor/ mavi (yaklasik olarak 405 nm) uyarma isigi kullanarak, cihaz hem yesil hem de kirmizi oto floresan kombine (yaklasik olarak 490 ila 550 nm araliginda ve yaklasik olarak 610 ila 640 nm araliginda emisyon) ve her bir agar plakasinin sadece kirmizi oto floresani (yaklasik olarak 635 +/- 10 nm, floresan dissal porfirinler için tepe emisyon dalga boyu) görüntülemek için kullanilmistir. Karsilastirma ve koloni büyümesini izlemek için zaman içinde her bakteri türünün floresan görüntüleri alinmistir. Simdi Sekil 3'e atifta bulunulmaktadir. a), bakteriyel oto floresani tespit etmek için koyun kanli agar plakalari üzerinde büyüyen canli bakteri kültürlerinin görüntülenmesi için kullanilan cihazi gösterir, b), psödomonas aruginosa tarafindan yayilan oto floresan görüntüsünü gösterir. Cihaz ayni zamanda, c)'de inokülasyondan 24 saat sonra bir agar plakasinda otomatik floresan stafilokok aureus'un büyümesinin floresani ile görüntüleme ile birlikte gösterildigi gibi, floresan kullanilarak zaman içinde bakteriyel koloni büyümesini saptamak, ölçmek ve/ veya izlemek için kullanilabilir. Alt görüntüdeki farkli tek bakteri kolonilerinin varligina dikkat edilmelidir. Mor/ mavi (örnek olarak, 405 nm) uyarma isigi kullanarak, cihaz hem kombine yesil (örnek olarak, 635 +/- 10 nm, flüoresan endojen porfirinler için tepe emisyon dalga boyu), d)'de gösterilen streptokok piyojenleri, e)'de gösterilen serratia marcescens'i, f)'de gösterilen stafilokok aureus'u, g)'de gösterilen stafilokok epidermis'i, h)'de gösterilen escherichia coli'yi ve i)'de gösterilen psödomonas aeruginosa'yi içeren çok sayida bakteri türünden yayilan emisyon oto floresanini tespit etmek için kullanilmistir. Bakteriyel kolonilerin cihazi tarafindan elde edilen oto floresan görüntülerin, bakteriyel kolonizasyon ve büyüme kinetiginin basit uzunlamasina nicel ölçümleri için ve ayrica örnek olarak antibiyotikler ile, foto dinamik terapi (PDT) ile, düsük seviye isik tedavisi ile, hiperbarik oksijen tedavisi (HOT) ile, ya da gelismis yara bakim ürünleri ile terapötik müdahaleye yanitin potansiyel olarak izlenmesi için yararli resim kontrastlari saglayabilecegi unutulmamalidir. Kamera algilayicisinin yüksek mekansal çözünürlügü, cihaz ile birlikte önemli bakteriyel oto floresan sinyal- parazit görüntüleme ile birlestiginde, çok küçük (örnek olarak, <1 mm çapli) kolonilerin tespit edilmesini saglamistir. Cihaz, standart agar plakalarinda büyüyen münferit bakteri kolonilerini görüntülemek için portatif ve hassas bir araç saglamistir. Bu, c)'de görüldügü gibi bakteriyel koloni büyüme kinetigini ölçmek ve izlemek ve ayrica zamanla floresan kullanarak antibiyotik ya da foto dinamik terapi (PDT) ile terapötik müdahaleye yanit potansiyel olarak izlemek için bir araç saglamistir. Bu nedenle, cihaz mikrobiyoloji laboratuvarinda yararli bir araç olarak hizmet verebilir. Sekil SJ, görüntüleme cihazinin a) standart bakteriyoloji laboratuvari pratiginde kullaniminin bir örnegini göstermektedir, b) Burada, özel tescilli görüntü analiz yazilimi ile birlestirilmis Stafilokok aureus içeren bir Petri kabinin floresan görüntülemesi, bakteriyel kolonilerin hizla sayilmasini ve burada kültür tabaginin floresan görüntüsü, 37 °C'de agar üzerinde büyüyen -182 (+/- 3) kolonileri (parlak mavimsi yesil lekeler) gösterir. (yaklasik olarak 405 nm uyarilma, yaklasik olarak 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), yaklasik olarak 600 nm emisyon (kirmizi)). Bakteriyel suslarin tespit edilmesinin yani sira, cihaz, örnek olarak yaralarda ve çevre dokularda farkli bakteri suslarinin (örnek olarak, Stafilokok aureus ya da Psödomonas aeruginosa) varligini ve/ veya konumunu ayirt etmek için kullanilabilir. Bu, 405 nm civarindaki isik gibi mor/ mavi isik tarafindan uyarildiginda 490 ila 550 nm arasinda ve 610 ila 640 nm arasinda emisyon dalga boyu bantlarini içeren, farkli bakteri suslarinin farkli oto floresan emisyon imzalarina dayanabilir. Görüntülerdeki diger türler arasinda ayrim yapmak için diger dalga boyu kombinasyonlari da kullanilabilir. Bu bilgi, antibiyotik seçimi gibi uygun tedaviyi seçmek için kullanilabilir. Bu tür bakteriyoloji örneklerinin görüntülenmesi, yara bakiminin izlenmesi için uygulanabilir. Yara iyilesmesi Izlenmesinde Kullanim Cihaz, uyarma isiginin yara alanini aydinlatabilecek sekilde herhangi bir yaranin (örnek olarak, vücut yüzeyindeki) üzerinde taranabilir. Yara daha sonra, cihazin, örnek olarak görüntüleme cihazi üzerindeki bir görüntüleyici araciligi ile ya da bir dis görüntü cihazi (örnek olarak, bas üzeri göstergesi, bir televizyon ekrani, bir bilgisayar monitörü, LCD projektör ya da bir basa takilan gösterge) vasitasi ile yarayi gerçek zamanli olarak görüntüleyebilecegi sekilde kullanilmasi sureti ile incelenebilir. Cihazdan elde edilen görüntüleri ayni zamanda gerçek zamanli olarak (örnek olarak, kablosuz iletisim yolu ile), örnek olarak teletip amaciyla, uzaktaki bir görüntüleme sitesine aktarmak ya da görüntüleri dogrudan bir yaziciya ya da bir bilgisayar bellegine göndermek mümkün olabilir. Görüntüleme, yarasi olan hastanin rutin klinik degerlendirmesinde yapilabilir. Görüntülemeden önce, cildin yara kenarlarina ya da çevresine yakin yüzeyine güvenilir isaretleyiciler (örnek olarak, silinmez bir flüoresan mürekkep kalem kullanarak) yerlestirilebilir. Ornek olarak, klinik operatöre bir kit olarak saglanabilecek olan ayri ayri silinmez floresan mürekkep kalemlerinden farkli bir flüoresan mürekkep renginin her biri, normal cilt yüzeyindeki yara kenarina ya da sinirina yakin yerlestirilebilir. Bu renkler, uyarma isigi ve dört mürekkep Iekesinin emisyon dalga boyuna uyan çok spektralli bir bant filtresi kullanilarak cihaz tarafindan görüntülenebilir. Daha sonra görüntü içi hizalama için güvenilir kalemler birlikte kaydettirerek görüntü analizi yapilabilir. Bu nedenle, kullanicinin görüntüleme cihazini farkli görüntüleme oturumlari arasinda hizalamasi gerekmeyebilir. Bu teknik, yaralarin boylamasina (yani zamanla) görüntülenmesini kolaylastirabilir ve bu nedenle klinik operatör, her görüntü elde etme sirasinda görüntüleme cihazini hizalamaya gerek kalmadan zamanla bir yarayi görüntüleyebilir. Ek olarak, floresan görüntülerin yogunlugunun kalibrasyonuna yardimci olmak için, yara görüntüleme sirasinda görüs alanina tek kullanimlik basit bir floresan standart kullanarak) yerlestirilebilir. Serit, görüntü yogunlugu kalibrasyonu için tekli (örnek olarak, 405 nm) ya da çoklu floresan emisyon dalga boyuna ya da dalga boyu batlarina sahip olabilen uyarma isik kaynagi ile aydinlatildiginda daha önceden saptanmis ve kalibre edilmis olan floresan yogunluklari üretebilen farkli konsantrasyonlarda farkli konsantrasyonlarda floresan boyalar ile emprenye edilebilir. Tek kullanimlik serit ayni zamanda ayri ayri silinmez flüoresan mürekkep kalemlerinden yukarida tarif edildigi gibi dört lekeye de sahip olabilir (örnek olarak, her biri farkli çaplarda ya da boyutlarda olan ve her biri yanina yerlestirilmis benzersiz bir siyah noktaya sahip farkli bir flüoresan mürekkep renginin her biri). Normal cilt yüzeyindeki serit yaranin kenarina ya da sinirina yakin yerlestirildiginde, cihaz beyaz isik ve floresan görüntüleri almak için kullanilabilir. Serit, belirli bir yaranin zamanla birden fazla görüntüsünü almak ve ardindan görüntü analizini kullanarak görüntüleri hizalamak için uygun bir yol sunabilir. Ayni zamanda, floresan 'yogunluk kalibrasyonu' seridi, yaralarin mekansal mesafe ölçümlerine yardimci olmak için sabit uzunlukta bir cetvel gibi ek bir dogrusal ölçüm aparati da içerebilir. Bu tür bir serit, görüntü parametrelerinin kalibrasyonuna ya da ölçülmesine yardimci olmak için cihaz ile birlikte kullanilabilecek bir kalibrasyon hedefi örnegi olabilir (örnek olarak, yara büyüklügü, floresan yogunlugu, ve benzeri) ve diger benzer kalibrasyon hedefi kullanilabilir. Görüntüleme sonuçlarinin tutarliligini arttirmak ve cihaz ile yara yüzeyi arasindaki mesafeyi çogaltmak arzu edilebilir olabilir, çünkü doku floresan yogunlugu, çoklu görüntüleme seanslari sirasinda eger mesafe degisirse biraz degisebilir. Bu nedenle, bir yapilanmada, cihaz, cihaz ile yara yüzeyi arasindaki sabit ya da degisken bir mesafeyi belirlemek için cildin yüzeyine tek tek isinlarin üçgenlenmesi için kullanilabilen düsük güçlü lazer isinlari gibi iki isik kaynagina sahip olabilir. Bu, lazer isik kaynaklari arasindaki basit bir geometrik düzenleme kullanilarak yapilabilir ve klinik operatörün cilt yüzeyi üzerindeki lazer hedefleme noktalarini kolayca görüntülemesine ve çoklu görüntüleme seanslari sirasinda cihazin yaradan uzakligini ayarlamasina izin verebilir. Sabit bir mesafeyi korumanin diger metotlari, ultrason kullanimini ya da cetvel gibi fiziksel bir ölçüm kullanimini içerebilir. Beyaz lsik Görüntülemesinde Kullanim Cihaz, görüntüleme alani içine yerlestirilmis bir ölçüm aparati (örnek olarak bir cetvel) kullanarak normal çevre normal dokulara sahip toplam yaranin beyaz isik görüntülerini almak için kullanilabilir. Bu, yaranin görsel olarak degerlendirilmesine ve yara alani, çevre, çap ve topografik profil gibi nicel parametrelerin hesaplanmasina/ belirlenmesine izin verebilir. Yara iyilesmesi, yara bölgesinin planimetrik ölçümleri ile birden fazla zaman noktasinda (örnek olarak, klinik ziyaretlerde) yara iyilesmesine kadar degerlendirilebilir. Yara iyilesmesinin süresi, R = \/(A/Tr) (R, yariçap; A, planimetrik yara alani; 'IT, sabit 3.14) denklemini kullanarak birden fazla zaman noktasi ölçümü ile hesaplanan beklenen iyilesme süresi ile karsilastirilabilir. Yara hakkindaki bu nicel bilgi, dogal yollardan ya da herhangi bir terapötik müdahalenin neden oldugu yara iyilesmesinin derecesini degerlendirmek ve belirlemek için zaman içerisinde yara görünümündeki degisiklikleri takip etmek ve izlemek için kullanilabilir. Bu veriler ileride basvurmak üzere hastanin saglik karnesinde elektronik olarak saklanabilir. Beyaz isik görüntüleme, hastanin operatör tarafindan ilk klinik degerlendirmesi sirasinda yapilabilir. Otomatik Floresan Görüntülemede Kullanim Cihaz, doku oto floresaninin (AF) tümünü ya da bir çogunlugunu tespit etmek üzere dizayn edilebilir. Ornek olarak, bir çok spektralli bant filtre kullanilarak, cihaz, asagidaki doku biyolojik moleküllerinden yayilan doku oto floresanini ve ayrica 405 nm uyarilmada kan ile iliskili optik absorpsiyonu görüntüleyebilir: yesil görünen kollajen (Tip l, II, III, lV, V ve digerleri), yesilimsi sari turuncu görünen elastin, azalmis nikotinamid adenin dinükleotit (NADH), mavi yesil oto floresan sinyali yayan flavin adenin dinükleotit (FAD) ve çogu genis (örnek olarak, yesil ve kirmizi) bir oto floresan emisyonuna sahip gibi görünen bakteri/ mikro organizmalar. Görüntü analizi, görüntüdeki kirmizi/ yesil AF oraninin hesaplanmasini içerebilir. Yogunluk hesaplamalari, yara görüntüleri içindeki ilgilenilen bölgelerden elde edilebilir. Sözde renkli görüntüler, yaranin beyaz isik görüntülerine eslenebilir. Yara Ivilesmesindeki Ornekler Simdi Sekil 4'e atifta bulunulmaktadir. Cihaz bakteri ile kontamine edilmis yara modelinde test edilmistir. Bunun için derili domuz eti kasaptan satin alinmistir. Yaralari simüle etmek için, ciltte 1,5 cm2 ile 4 cm2 arasinda degisen, kas tabakasini görecek kadar derin, insizyonlar yapmak için bir nester kullanilmistir. Cihaz, simüle edilen yaralara bakteri ilave etmeden bazi et örneklerini görüntülemek için kullanilmistir. Bunun için et numunesi, ette bulunan bakterilerin büyümesi için 24 saat boyunca oda sicakliginda birakilmistir ve daha sonra görüntüleme için hem beyaz isik yansitmasi hem de oto floresan kullanilarak, cihaz ile görüntüleme yapilmistir. Cihazin bag dokulari ve tipik yaralarda bulunan bazi yaygin bakterileri tespit etme yetenegini test etmek için, cilt yüzeyindeki alti küçük 1.5 cm2'lik yara insizyon bölgesinden her birine alti bakteri türü uygulanarak, simüle edilmis yaralara sahip bir domuz eti örnegi hazirlanmistir: streptokok piyojenler, serratia marcescens, stafilokok aureus, escherichia coli ve psödomonas aeruginosa. Bakterinin ilave edilmedigi et derisinde kontrol olarak islev görmesi için küçük bir insizyon daha yapilmistir. Bununla birlikte, diger alti insizyon bölgesinden gelen bakterilerin bu bölgeyi zaman içerisinde kontamine etmesi beklenmektedir. Cihaz, et numunesinin 37 °C'de tutulmus oldugu üç gün boyunca, 24 saatlik araliklar ile, bir tekli bant filtresinin solunda, beyaz isik yansimasi kullanilarak bakteri yüklenmis et numunesinin ve hem emisyon filtresi hem de bir tekli bant (635 +/- 10 nm) emisyon filtresi kullanilarak, ve mor/ mavi isik indüklenmis oto floresan emisyonunun görüntülenmesi için kullanilmistir. Görüntüleme ayni zamanda, üç gün boyunca üzerinde et numunesinin depolanmis oldugu strafor kap üzerinde de gerçeklestirilmistir. Sekil 4, simüle edilmis bir hayvan yara modelindeki bakterilerin invazif olmayan oto floresan tespiti için kullanilan cihazin sonuçlarini göstermektedir. Standart beyaz isik görüntüleme altinda, a)!da gösterildigi gibi yara bölgesi içinde bakteri gizlenerek b)'de büyütülmüstür. Bununla birlikte, mor/ mavi uyarma isigi altinda, c)'de görüldügü ve d)'de büyütülmüs oldugu gibi, bag dokudan (örnek olarak kollajen ve elastinler) bir parlak yesil floresan arka planina karsi bakteriyel porfirinlerden kirmizi floresandaki çarpici artisa dayanarak yara bölgesi içindeki bakteri varliginin tanimlanmasina imkan verme yetenegini göstermistir. b) ve d)'nin karsilastirilmasi, bakteriyel porfirinlerden kirmizi floresanda bag dokusundan (örnek olarak, kollajen ve elastinler) parlak yesil floresan arka planina karsi çarpici bir artis gösterir. Oto floresan ile ayni zamanda, cilt yüzeyinde bakteri kolonilerinin de yesil floresan emisyonlarina dayanarak tespit edildigine, ayri ayri kolonilerin cilt üzerinde yesil lekeler gibi görünmesine neden olduguna dikkat edilmelidir. Bunlar beyaz isik muayenesinde görülmemistir. Bag dokularindaki floresan görüntüleme, e) ve f)'de görülen yara kenarlarinin belirlenmesinde yardimci olmustur ve cildin bazi bölgeleri (c'de' * 'ile isaretlenmistir), potansiyel olarak porfirin üreten bakterilerin deri alti enfeksiyonunu belirten diger alanlardan daha kirmizi floresan görünmüstür, e) ve f) ayni zamanda beyaz isik görüntüleme altinda gizli olan cerrahi yara içindeki kirmizi floresan bakterileri tespit eden cihazi gösterir. Cihaz, bakteri yara bölgesi içinde ve çevresindeki ciltte biyolojik dagilimini haritalamistir ve bu nedenle mikrobiyolojik testler için sivi örnegi alma ya da biyopsi gerektiren spesifik doku alanlarini hedeflemeye yardimci olabilir. Ayrica, görüntüleme cihazinin kullanilmasi, antibiyotikleri kullanimini ve foto dinamik terapi (PDT), hiperbarik oksijen terapisi (HOT), düsük seviye isik terapisi, ya da anti Matris Metalloproteinaz (MMP) gibi diger tibbi tedavileri içeren, tibbi tedavilerin bir çesitliligine bakteriyel olarak enfekte edilmis dokularin yanitin izlenmesine izin verebilir. Cihaz, yüzeyde ve yaranin doku derinligi içinde ve ayni zamanda normal normal dokulari çevreleyen bakteriyel biyolojik dagilimin görsellestirilmesi için faydali olabilir. Bu sayede, cihaz bir enfeksiyonun mekansal dagilimini göstermek için yararli olabilir. Cihazin Yara Izlemesinde Kontrast Madde ile Birlikte Kullanimi Cihaz dissal kontrast maddeleri, örnek olarak ön ilaç aminolaevulinik asit (ALA) ile birlikte düsük bir dozda kullanilabilir. ALA topikal olarak yaraya uygulanabilir ve görüntüleme, yara bakterilerinin daha fazla kirmizi floresan için 1 ila 3 saat sonra gerçeklestirilebilir. On ilaç aminolaevulinik asit (ALA), hemen hemen tüm canli hücrelerde porfirin olusumunu indükler. ALA'ya maruz kalan birçok bakteri türü, protoporfirin IX (PpIX) floresani indükleyebilir. Ultra düsük dozlu ALA'nin kullanilmasi, bakterilerde PpIX olusumunu indükleyebilir ve bu nedenle, cihaz ile görüntülenen bakterilerin kirmizidan yesile floresan kontrastini artirabilen kirmizi floresan emisyonunu arttirabilir. ALA kendiliginden floresan degildir, ancak PpIX yaklasik olarak 630 nm, 680 ve 710 nm'de floresan olup 630 nm emisyonu en güçlüdür. Görüntüleme cihazi daha sonra yaranin ve çevresindeki dokularin yesil ve kirmizi flüoresanini görüntülemek için kullanilabilir. ALA (~ 20 pg/mL) sonrasinda görüntüleme cihazini kullanarak kirmizi (örnek olarak, 630 nm'de zirve) floresaninda önemli/ kayda deger bir artis elde etmek için gereken zaman, yaraya 10 ila 30 dakika arasinda uygulanmistir, ancak bu zaman optimize edilebilir ve ayni zamanda optimize edilebilen ALA dozuna da baglidir. Bu nedenle, genellikle fizyolojik tuz ya da öteki ticari olarak temin edilebilir krem/ merhem/ hidrojel/ pansuman ve benzerinde Iiyofilize formda saglanmis olan, ALA'yi belirlenmis olan bir dozda daha önceden karistirabilir ve maddeyi, görüntüleme öncesinde yara alanina, püskürterek, dökerek ya da dikkatli bir sekilde uygulayarak verebilir. Yaklasik 10 ila 30 dakika sonra, bu sürenin degisebilmesine ragmen, floresan görüntüleme los isikli ya da karanlik bir odada gerçeklestirilebilir. Beyaz isik altinda ortaya çikan bakteriler ve belki de zayif oto floresan yaranin içinde ve çevresinde parlak kirmizi flüoresan alanlari olarak görünebilir. Floresan görüntüleri, essiz bakteri floresan sinyaline dayanarak bakteri kültürü için yaranin ince hedefli sivi örnegi alma, biyopsi ve/ veya ince igne aspiratlarini yönlendirmek için kullanilabilir ve bu yüzeysel ve derin yaralar için farkli derinliklerde yapilabilir. Cihaz ayni zamanda, cihazin algilama hassasiyetini ve spesifikligini arttirmak için, bakteriler/ mikro organizmalar içinde porfirinlerin dissal üretimini arttirmak ve bu sayede bu bakterilerden yayilan essiz 'porfirin' floresan sinyallerinin yogunluklarini arttirmak için FDA tarafindan klinik terapötik indikasyonlar için onaylanmis olan ALA'yi içeren ancak bunun ile sinirli olmayan, dissal 'ön ilaç' maddeleri ile birlikte kullanilabilir. Bu nedenle, cihaz, örnek olarak foto dinamik terapi (PDT) ya da hiperbarik oksijen tedavisi (HIT) kullanilarak, sonraki görüntü kilavuzlu hedefli sivi örnegi alma/ biyopsi ya da tedavi için, kültür içerisinde ya da hastanin yaralari içinde büyüyen, isik duyarli indüklenmis floresani (örnek olarak, PplX) uygun bir sekilde görüntülemek için kullanilabilir. Ornek olarak, tüketilebilir, ticari olarak temin edilebilir floresan kontrast maddeleri ile birlikte kullanildiginda cihaz, yaralarin içindeki ve etrafindaki hassas bakterilerin algilanmasi için arka plana sinyallemeyi arttirma yetenegine sahiptir. ALA'nin ticari olarak temin edilebilir olduguna dikkat edilmelidir. Bir örnekte, cihaz, mor/ mavi uyarma isigi kullanarak canli bakteri kültürünü (görüntüleme öncesinde 24 saat boyunca agar plakalari üzerinde büyütülmüs stafilokok aureus) görüntülemek için kullanilmistir. Stafilokok aureus -20 pg/mL ALA'nin 37 cC'de 30 dakika inkübe edildikten sonra, herhangi bir ALA almayan kolonilere kiyasla bakterilerden kirmizi floresaninda önemli bir artis tespit edilmistir. Bu yüzden, cihaz, örnek olarak yaralarda hassas bakterilerin tespiti için arka plana sinyali arttirmak için kontrast madde stratejilerinin kullanilmasindan yararlanabilir. ALA'nin kültürdeki bakterilerin PpIX floresanini anlamli seviyelere çikarmasi için gereken süre yaklasik olarak 0.5 saat olmustur; bu, bu yaklasimin klinik olarak pratik olabilecegini göstermektedir. Simüle edilmis bakteriyel olarak kontamine edilmis et numunelerindeki testler bakteri kültüründen elde edilenlere benzer sonuçlar ortaya koymustur. Domuz derisi üzerindeki yaralara püskürterek 0.2 pg/mL'Iik ALA'nin topikal uygulanmasi, ALA uygulamasindan yaklasik olarak 2 saat sonra bakteriyel porfirin kirmizi floresaninin çarpici bir sekilde artmasina neden olmustur. Bu, cihazin, daha önce beyaz isik görüntüleme altinda gizlenmis olan yara bölgelerinde ve cilt yüzeyinde baska bir yerde floresan görüntüleme ile bakteriyel kontaminasyon tespitine izin verebilecegini göstermektedir. Dissal Moleküler Hedefli ve Aktif Görüntüleme Maddeleri ile Birlikte Kullanim Ticari olarak temin edilebilir floresan moleküler bakteriyolojik tespit ve canlilik kitlerinin mevcudiyeti, yara bakiminda cihaz için baska bir kullanim sunabilir. Bu kitler, bir dizi bakteri türü içeren karisik bir popülasyonda bile canli ve ölü bakterileri nicel olarak ayirt etmek için kullanilabilir. Bakteriyel canliligin geleneksel direkt sayim analizleri tipik olarak metabolik özelliklere ya da zar bütünlügüne dayanir. Bununla birlikte, metabolik özelliklere dayanan metotlar genellikle sadece sinirli bir bakteri grubu alt grubu için çalisir ve bakteri zari bütünlügünü degerlendirme metotlari genellikle yüksek seviyelerde arka plan flüoresanina sahiptir. Her iki tip belirleme de ayni zamanda büyüme ve boyama kosullarina karsi çok hassas olma durumlarindan muzdariptir. Uygun dissal optik moleküler hedefleme problari, Alexa Fluor aktif esterleri ve kitleri (örnek olarak, Zenon Antikor Etiketleme Kitleri ve EnzChek Proteaz Test Kitleri, (lnvitrogen) etiketlemek gibi ticari olarak temin edilebilen floresan etiketleme kitleri kullanilarak hazirlanabilir. Ornek olarak, bu floresan boya biyolojik konjugatlari, asagidaki dalga boyu araliklarini kapsar: Alexa Flour 350, Alexa Flour 405, Alexa Fluor 700 ve Alexa Fluor 750 boyalari, burada belirtilen sayi boyanin uyarma dalga boyuna karsilik gelir. Bu kitler, görüntüleme cihazi ile uygun floresan emisyon filtreleri seçimine dayanarak çok renkli floresan tespiti ve floresan rezonans enerji transferi için birçok seçenek sunan, iyi ayirt edilmis floresan emisyon spektrumlari sunabilir. Floresan boyalar, ortak uyarma kaynaklarinin azami çiktisinin dalga boylarinda yüksek emicilik saglar, bunlar parlaktir ve biyolojik konjugatlarinin floresani alisilmadik bir sekilde foto stabildir ve klinik muayene odasindaki konjugasyonun kolayligi ve konjugatlarin terleme ve toplanmaya karsi dirençleri için reaktif boyalarin iyi su çözünürlügünü sunarlar. Boyanin floresan spektrumlari, genis bir aralikta pH'a karsi duyarsizdir; bu, yara pH'i degisebilecegi için onlari özellikle görüntüleme için faydali kilar. Ek olarak, yaralarin biyolojik olarak görüntülenmesi için uygun olabilecek ticari ya da ticari olmayan diger floresan maddeler mevcuttur ve floresan kan biriktirici maddeler ve örnek olarak, VisEn Medical'den gelen (Boston, Mass., ABD) proteaz aktive edilmis problari içeren tarif edilmis olan cihaz ile birlestirilebilir. Bu floresan biyolojik konjugatlari hedeflemeler, floresan modunda görüntüleme cihazini kullanarak yaranin klinik muayenesinden önce bu tür etiketleme kitleri kullanilarak hazirlanabilir ve isik ile agartmayi önlemek için isik geçirmez kaplarda saklanabilir. Bu tür floresan biyoloji konjugatlar, cihazin kullanilmasi ile yaranin floresan görüntülenmesinden önce bilinen ve uygun bir konsantrasyondaki bir solüsyon içinde hazirlanabilir, ve daha sonra ya yerel olarak (örnek olarak, aerosol/ sprey vasitasi ile) yaranin ve normal dokunun çevresine dogrudan ya da bir içecek içinde agiz yolu ile ya da sistematik olarak istemi yapilan metot tarafindan kapsanmamis olan bir örnege göre damar içi enjeksiyon vasitasi ile verilebilir/ uygulanabilir. Bu tür boyalar hedefleme moduna bagli olarak belirli biyolojik bilesenleri hedefleyebilir ve bakteri, mantar, maya, spor, virüs, mikrop, parazit, eksüdalar, PH, kan damari, azaltilmis nikotinamid adenin dinükleotit (NADH), falvina denine dinükleotit (FAD), mikro organizmalar, bag dokunun belirli türleri (örnek olarak, kollajenler, elastin), doku bileseni, vasküler endotel büyüme faktörü (VEGF), endotel büyüme faktörü (EGF), epitel büyüme faktörü, epitel hücre membran antijeni (ECMA), hipoksi indüklenebilir faktör (HlF-1), karbonik anhidraz IX (CAlX), laminin, fibrin, fibronektin, fibroblast büyüme faktörü, transforme büyüme faktörleri (TGF), fibroblast aktivasyon proteini (FAP), enzimler (örnek olarak, kaspazlar, matris metalloproteinazlari (MMP'Ier, ve benzeri), metalloproteinazlarin doku inhibitörleri (örnek olarak, TIMP'Ier), nitrik oksit sentazlar (NOS), uyarilabilir ve endotel NOS, hücrelerde lizozomlar, makrofajlar, nötrofiller, Ienfositler, hepatosit büyüme faktörü (HGF), anti nöropeptitler, nötr endopeptidaz (NEP), granülosit makrofaj koloni uyarici faktör (GM-GSF), nötrofil elastazlar, katepsinler, arginazlar, fibroblastlar, endotel hücreleri ve keratinositler, keratinosit büyüme faktörü (KGF), makrofaj enflamatuvar protein-2 (MIP-2), makrofaj enflamatuar protein-2 (MIP-2) ve makrofaj kemoatraktant protein-1 (MCP-1), polimorfonükleer PMP (nötroil) ve makrofajlar, miyofibroblastlar, interlökin-1 (IL-1) ve tümör nekroz faktörü (TNF), nitrik oksit (NO) (Calbiochem Model DAF-2 DA'dan gelen kit) ve c-myc ve beta-katenin, kemik iliginden sirküle eden endotel progenitör hücreleri (EPC'Ier) içerebilir. Dissal optik maddeler asagidakilerden herhangi birini içerebilir, ancak bunlar ile sinirli degildir: aktive edilmis moleküler fenerler (örnek olarak, hedeflenmis), floresan maddelere sahip nanopartiküller (örnek olarak, yüzeyde etiketli ve/ veya floresan maddeleri içeren ya da tasiyan) ve saçilan ya da emen nanopartiküller (örnek olarak, altin, gümüs). LIVE/DEAD BacLightTM Bakteriyel Canlilik Kitleri (lnvitrogen, Moleoular Probes'dan) tahlili, bu floresan boyalar, diger mevcut ya da diger gelismekte olan floresan maddeler için degistirilebilse de, SYTO® 9 yesil floresan nükleik asit lekesi ve kirmizi floresan nükleik asit lekesi, propidyum iyodür karisimlarini kullanir. Bu lekeler hem spektral özelliklerinde hem de saglikli bakteri hücrelerine nüfuz etme yeteneklerinde farklilik gösterir. Tek basina kullanildiginda, SYTO 9 lekeler hem saglam hem de hasar görmüs membranlara sahip olan bakterileri etiketler. Aksine, propidyum iyodür her iki boya mevcut oldugunda nükleik asit baglama bölgeleri için SYTO 9 lekesi ile yarisan sadece hasarli membranlara sahip bakterilere nüfuz eder. Onerilen oranlarda karistirildigi zaman, SYTO 9 lekesi ve propidyum iyodür, bozulmamis hücre membranlarina sahip bakterilerin yesil floresan Iekelemesini ve hasarli membranlara sahip bakterilerin kirmizi floresan Iekelemesini üretir. Böylece, saglam membranlara sahip canli bakteriler yesil floresan isigi yayarken hasarli membranlara sahip ölü bakteriler kirmizi floresan floresan isigi yayar. Arka plan neredeyse hiç floresan isigi yaymaz. Sonuç olarak, yesilin kirmizi floresan yogunluklarinin orani, bakteriyel canliligin nicel bir indeksini saglayabilir. Canli ve ölü bakteriler, uygun optik filtre setleri ile görüntüleme cihazi tarafindan ayri ayri ya da ayni anda görüntülenebilir. Ayni zamanda, benzer floresan deney kitleri, yara tedavi planlamasinda yararli bir parametre olan bakterilerin Gram isareti (yani pozitif/ negatif) tanimlamasi için mevcuttur ve görüntüleme cihazi ile birlikte kullanilabilir. Bu tür floresan maddeler geneldir ve çogu bakteri tipine uygulanabilir ve görüntüleme cihazini kullanarak gerçek zamanli nicel degerlendirme için yaranin üzerinde veya içinde ya da yara bölgesinden elde edilen ex vivo örnek sivi ya da doku biyopsi türevli kültür örneklerinde bakteri canliligi ve/ veya Gram isaretini belirlemek için kullanilabilir (örnek olarak yüzeysel ya da derinlemesine).Bu tür floresan isigi yayan floresan maddeler, daha önceden, cihazin kullanilmasi ile yaranin floresan görüntülenmesinden önce bilinen ve uygun bir konsantrasyondaki bir solüsyon içinde hazirlanabilir, ve daha sonra ya yerel olarak (örnek olarak, aerosol/ sprey, Iavaj teknikleri vasitasi ile) yaranin ve normal dokunun çevresine dogrudan ya da muhtemelen sistematik olarak damar içi enjeksiyon vasitasi ile verilir/ uygulanir. Görüntüleme daha sonra maddelerin hedefler ile reaksiyona girmesi için belirli bir süreden sonra uygun sekilde gerçeklestirilebilir. Cihazla görüntülemeden önce etiketlenmemis maddelerin yikanmasi gerekebilir. Bunun için fizyolojik tuzlu su kullanilabilir. Hedefe bagli floresan madde floresan görüntüleme için yara ve çevresindeki dokularin içinde kalabilir. Bu nedenle, floresan raportör sistemleri ile kullanildiginda, görüntüleme cihazi, antimikrobiyal maddelere maruz kalmanin ardindan bakteriyel canliligi degerlendirmek için nispeten hizli bir yol saglayabilir. Ayni hastalari veya hayvanlari tekrar tekrar ölçebilme yetenegi, tedavi deneyleri içindeki degiskenligi azaltabilir ve tedavi etkinliginin belirlenmesinde esit ya da daha fazla güven saglamasina izin verebilir. Bu invazif olmayan ve tasinabilir görüntüleme teknolojisi, bu tür çalismalar sirasinda kullanilan hayvan sayisini azaltabilir ve ilaç kesfi sirasinda test bilesiklerinin degerlendirilmesi için uygulamalara sahiptir. Ticari olarak temin edilebilen bir dizi organik florofor, hidrojen iyonu konsantrasyonuna bagli olan, bunlari pH'i ölçmek için problar olarak yararli hale getiren ve tipik olarak pH'a duyarli UV/ görünür emme özelliklerine sahip olan özelliklere sahiptirler. Hücre içi çalismalarda kullanilan ticari olarak temin edilebilen pH'a duyarli floresan boyalarin çogu asidik ortamda ya da alternatif olarak boyanin pKa'si 5 ila 8 pH birimleri arasinda kritik hücre içi pH penceresinin disinda oldugu için azaltilmis bir flüoresan sinyali saglar. Bununla birlikte, diger pH duyarli floresan maddeler, floresan yogunluklarini arttirarak cevap verir. Ornegin, Invitrogen/ Molecular Problar, biyolojik sistemlerde pH ölçümleri için çesitli floresan pH göstergeleri, bunlarin konjugatlarini ve diger reaktifleri sunar. Bunlar arasinda benzersiz optik tepkiye ve özel lokalizasyon özelliklerine sahip birkaç prob bulunur: örnek olarak, görünür isik ile uyarilabilen SNARF pH göstergeleri, arastirmacilarin fizyolojik araliktaki hücre içi pH'i çift emisyonlu ya da çift uyarim oranli teknikler kullanarak belirleyebilmelerini saglayarak konfokal lazer tarama mikroskobu ve akis sitometrisi için yararli araçlar saglar. Bir hücrenin asidik organellerinde pH degerini tahmin etmek için LysoSensor problari ve Oregon Green floroforuna dayanan göstergeler kullanilabilir. Ayni zamanda, kullanilabilecek dekstranlara bagli floresan pH göstergeleri de vardir. Hücrelere yüklendikten sonra, gösterge dekstranlari iyi tutulabilir, hücresel proteinlere baglanamayabilir ve bölümlere ayrilma egiliminde bir azalma olabilir. Yine, bu tür floresan isigi yayan floresan maddeler, daha önceden, cihazin kullanilmasi ile yaranin floresan görüntülenmesinden önce bilinen ve uygun bir konsantrasyondaki bir solüsyon içinde hazirlanabilir, ve daha sonra ya yerel olarak (örnek olarak, aerosol/ sprey, lavaj teknikleri vasitasi ile) yaranin ve normal dokunun çevresine dogrudan ya da muhtemelen sistematik olarak ya da örnek olarak damar içi enjeksiyon vasitasi ile ya da oral olarak verilir/ uygulanir. Örnekler Simdi Sekil 24'e atifta bulunulmaktadir. Ornek olarak görüntüleme cihazi, kronik bir yaranin iyilesme durumunu ve yara debridmaninin basarisini belirlemek için klinik olarak kullanilabilir. Ornek olarak, diyabetli bir insandaki tipik bir ayak ülseri, sekilde (i) iyilesme bozuklugunun göstergesi olan moleküler isaretleyicilere sahip ülserojen hücreleri içeren iyilesmeyen kenar (yani, nasir) ile ve (il) fenotip olarak normal olan fakat fizyolojik olarak bozulmus olan, iyilesmek için sitimüle edilebilecek olan, hücreler ile birlikte gösterilmistir. Debridman sonrasi bir yaranin görünümüne ragmen, iyilesmeyebilir ve spesifik inhibisyon ve/ veya hiperkeratotik doku moleküler isaretleyicilerinin (örnek olarak, c-myc ve ß-katenin) varligi açisindan degerlendirilmesi gerekebilir. Görüntüleme cihazini, bu tür moleküler hedeflere karsi dissal floresan etiketli moleküler problar ile kombinasyon halinde kullanarak, klinisyen moleküler biyolojik isaretleyicileri yerinde ekspresyonunu belirleyebilir. Cihaz ile, bir yara debride edildiginde, yara alaninin floresan görüntülemesi ve görüntü analizleri sonraki immünohistokimya için biyopsi hedeflemesine izin verebilir ve bu debridman miktarinin yeterli olup olmadigini belirleyebilir. Eger debridman miktari yetersizse, sol alt diyagramda gösterildigi gibi, c-myc (yesil görünür) ve nükleer ß-katenin (mor görünür) için pozitif olan hücreler, floresanlarinin varligina isaret ederek yaranin düzgün iyilesmesini engelleyen ve ilave debridmanin gerekli oldugunu gösteren ülserojenik hücrelerin varligini gösterir. iyilesme eksikligi ayrica daha kalin bir epidermis, daha kalin bir boynuzlasmis katman ve boynuzlasmis katmandaki çekirdeklerin varligi ile ayrilabilir. Eger debridman basarili olursa, sag alt diyagramda oldugu gibi, ülserojenik hücrelerin bulunmadigini ve basarili debridman oldugunu gösteren c-myc ya da ß-katenin için boyama bulunamamistir. Bu inhibisyon isaretleri faydali olabilir, ancak amaç, yeni epitel, yaranin azalmis alani ve drenajin ortaya çikmamasi ile tanimlanan gerçek iyilesmedirBu bilgi, floresan görüntüleme cihazi kullanilarak toplanabilir ve patoloji ve mikrobiyoloji raporlari ile birlikte objektif bir analiz saglayabilen hastanin saglik karnesinde elektronik olarak saklanabilir. Beklenen iyilesme süresini, görüntüleme cihazini kullanarak gerçek iyilesme (yani, iyilesme ilerlemesi) süreleri ile karsilastirarak, uyarlamali tedavi stratejileri hasta bazinda uygulanabilir. Sekil 248, bir basinç ülserinin yara iyilesmesini görüntüleme için cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a) Bir diyabet hastasinin sag ayaginin bir basinç ülseri ile sag ayagin cihaz ile alinan beyaz isik görüntüsü gösterilir, b) Ilgili floresan görüntüsü, standart beyaz isik incelemesi (sari oklar) sirasinda görünür olmayan bakterilerin parlak kirmizi floresanini (bakteriyoloji sonuçlari Stafilokok aureus'un agit büyümesinin varligini dogrulamistir) göstermektedir. Stafilokok aureus bakterilerinin iyilesmeyen yaranin (uzun sari ok) çeperi etrafindaki agir büyümesine dikkat edilmelidir, c-d), b)'deki ham floresan görüntünün spektral olarak ayrilmis olan, matematiksel algoritmalar kullanilarak hesaplanmis olan ve renk skalasinda sahte renk ile gösterilmis olan yesil (örnek olarak, kollajen) ve kirmizi (örnek olarak, bakteri) floresan yogunluklarinin spektral olarak kodlanmis görüntü haritalarini üretmek için kullanilan, (karistirilmamis) kirmizi- yesil- mavi görüntülerini göstermektedir, f-g), açik yaranin içindeki ve etrafindaki bakterinin (kirmizi- turuncu- sari) bakterinin varligini biyolojik dagilimini ortaya koymak için kirmizi/ yesil floresan yogunluk oranini hesaplanmasi sureti ile dissal bakteriyel oto floresan sinyalinin kontrastini iyilestirmek için kullanilan görüntü isleme metotlarinin örneklerini göstermektedir. Bu veriler, cihaz tarafindan elde edilen floresan görüntülerini matematiksel olarak analiz etmek ve bunlari klinik kullanim için anlamli bir sekilde göstermek için özel ya da ticari olarak temin edilebilen görüntü analiz yazilimini kullanma yetenegini göstermektedir ve bu gerçek zamanli olarak yapilabilir. (Olçek çubugu 1 cm). Sekil 24C, bir kronik iyilesmeyen yaranin görüntülenmesi için cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a) Kangrenli piyodermaya sahip olan bir kadin hastanin sol gögsü ile çekilen beyaz isik görüntüsü, kronik iyilesmeyen bir yarayi (mavi ok) ve iyilesmis bir yara (kirmizi ok) gösterir. Bakteriler tipik olarak, yaralarin geleneksel klinik muayenesinde kullanilan standart beyaz isik görsellestirmesi ile görsellestirilemez, b) Ayni yaralarin karsilik gelen floresan görüntüsü (bu örnekte, 405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi) gösterilir. Iyilesmemis yaranin floresan altinda koyu renkte göründügüne dikkat edilmelidir (esas olarak uyarma ve floresan emisyon isiginin kan emilimi nedeni ile), bakteri, iyilesmis yaradaki parlak kirmizi lekeleri (kirmizi ok) olarak görünür. Floresan altinda, normal çevre cildi, endojen kollajen floresanina (405 nm uyarma) bagli olarak mavi yesil görünür. Bunun aksine, Stafilokok aureus'un agir bir büyümesinin oldugu (mikroskopi ile dogrulanmis olan az miktarda Gram pozitif basil ve nadir Gram pozitif koksi) örnek sivi kültürleri ile dogrulanmis olan, iyilesmemis yara (mavi ok), yara siniri etrafinda çok parlak kirmizi floresanin bir bandina sap sekilde görülür. 0) a, b)'deki iyilesmis yaranin beyaz isik görüntüsüdür ve d), beyaz isik altinda gizli olan bakterilerden (pembe oklar) gelen parlak kirmizi floresani gösteren karsilik gelen floresandir, e) Beyaz isiktir ve f) iyilesmemis meme yarasinin karsilik gelen floresan görüntüleridir. Bakterilerin (Stafilokok aureus) esas olarak yaranin kenari/ siniri çevresinde (sari ok) lokalize göründügüne dikkat edilmelidir, bununla birlikte daha az bakteri, floresan görüntüleme kullanilarak dogrudan görsellestirilen bakterilerin biyolojik olarak dagitilmasi ile belirlenen, yara (X) içine yerlestirilir fakat beyaz isik altinda görünmez (siyah ok, e). (Olçek çubugu cm olarak). Sekil 24D, ilave olarak, görüntüleme cihazinin bir örnegi kullanilarak bir kronik iyilesmeyen yaranin görüntülenmesini gösterir, c) Kangrenli piyodermaya sahip olan, kronik iyilesmeyen yarayi (mavi ok) ve iyilesmis yarayi (mavi ok) gösteren, bir kadin hastanin sol memesinin cihaz ile çekilmis olan beyaz isik görüntüsüdür. Bakteriler , yaralarin geleneksel klinik muayenesinde kullanilan standart beyaz isik görsellestirmesi ile görsellestirilemez, b) Ayni yaralarin (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)) karsilik gelen floresan görüntüsüdür. Meme basi, bakterilerin belirgin sekilde kontaminasyonu olmadan beyaz altinda normal gibi görünmekle birlikte, floresan görüntüleme, meme kanallarindan çikan bakteri varligini gösterir. Meme ucu örnek sivilari, bakterilerin Stafilokok epidermis oldugunu (kültür üzerinde ara sira ortaya çikan büyümü bulunmustur) göstermistir. ( Olçek çubugu cm olarak). Sekil 24E, görüntüleme Cihazi kullanilarak görüntülenen kronik iyilesmeyen bir yaranin bir merkezi alanini ve sinirini gösterir, a) Kangrenli piyodermaya sahip olan kadin hastanin sol memesi ile çekilen, kronik bir iyilesmeyen yaranin merkez alanini ve sinirini gösteren beyaz isik görüntüsü, 8) Beyaz isiktir ve b) iyilesmemis meme yarasinin ilgili floresan görüntüleridir (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)).BakteriIerin (Stafilokok aureus; bakteriyel örnek sivi alma ile gösterilmistir) esas olarak yaranin kenari/ siniri çevresinde lokalize göründügüne dikkat edilmelidir, bununla birlikte daha az bakteri, floresan görüntüleme kullanilarak dogrudan görsellestirilen bakterilerin biyolojik dagitilmasi ile belirlenen, yara (X) içine yerlestirilir fakat beyaz isik altinda görünmez. (Olçek çubugu cm olarak). Sekil 24F, ilave olarak, görüntüleme cihazi kullanilarak bir kronik iyilesmeyen yaranin görüntülerini gösterir, a) Kangrenli piyodermaya sahip olan bir kadin hastanin sol memesinin cihaz ile çekilmis, kronik iyilesmeyen yarayi gösteren, beyaz isik görüntüsüdür. Bakteriler, yaralarin klinik muayenesinde kullanilan standart beyaz isik görsellestirmesi ile görsellestirilemez, b) Ayni yaralarin (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)) karsilik gelen floresan görüntüsüdür. Floresan görüntüleme, yara kenari/ sinir ön temizligi (b) ve temizleme sonrasi (0) etrafindaki bakteri varligini gösterir. Bu örnekte temizlik, yaranin yüzeyini (içinde ve olmadan) 5 dakika boyunca silmek için standart gazli bez ve fosfat tamponlu tuzlu su kullanilmasini içermistir. Temizlendikten sonra, bakterilerin kirmizi floresani, kirmizi floresan bakterilerin bir kisminin yaranin kenari çevresinde doku yüzeyinin altinda kalabilecegini gösteren, belirgin sekilde azalir. Temizlemeden sonra yara merkezinde az miktarda bakteri (kirmizi floresan) kalmistir. Bu, yara temizliginin etkilerini gerçek zamanli olarak izlemek için görüntüleme cihazinin kullanimini göstermektedir. Ek bir örnek olarak, d) ayni hastadaki, sol baldirda bulunan iyilesmeyen kronik bir yaranin beyaz isik görüntüsünü gösterir, e) Temizleme öncesi (e) ve temizleme sonrasi (f) karsilik gelen floresan görüntülerini gösterir. Yaranin merkez bölgesinden sivi örnegi alinmasi, arada Stafilokok aureus'un (gri ok) yogun bir sekilde büyümesi ile birlikte Stafilokok aureus'un büyümesini ortaya çikarmistir. Temizleme, elde tutulan optik görüntüleme cihazi kullanilarak belirlenen sekilde yara yüzeyindeki floresan bakterilerin (Stafilokok aureus) azalmasina neden olmustur. Görüntüleme cihazinin kullanimi, beyaz isikta bulunan bakterilerin gerçek zamanli olarak algilanmasi ile sonuçlanmistir ve bu, hastanin tedavi edilme seklinin, floresan görüntülemesinden sonra, yaralarin ve etrafinin (kontamine olmus bakteriler) ya iyice yeniden temizlenmesi ya da bakterilerin yeniden tespit edilmesi nedeni ile ilk defa temizlenmesi seklinde degistirilmesine imkan vermistir. Ayrica, görüntüleme odaklanmasina yardimci olmak için tek kullanimlik bir yapiskan ölçüm kalibrasyonu vermek için vücut yüzeyinin herhangi bir yerine (örnek olarak, bir yara yakinina) yapistirilabilir. Kalibrasyon seridi ayni zamanda, belirgin bir sekilde floresan olabilir ve "barkodlama" amaçlari için çoklu dissal floresan boyalarin kullanimi da dahil olmak üzere, görüntülere hastaya özel bilgiler eklemek için kullanilabilir - bilgiler dogrudan yaralarin floresan görüntülerine entegre edilebilir .(Olçek çubugu cm Sekil 24G, zamanla yara iyilesmesini izlemek için görüntüleme cihazinin kullanimini göstermektedir. Görüntüleme cihazi, iyilesme durumundaki degisiklikleri ve Kangrenli piyodermaya sahip olan kadin hastanin sol memesinden iyilesmeyen kronik bir yaradaki bakteriyel biyolojik dagilimi (örnek olarak, kontaminasyonu) izlemek için kullanilir. Beyaz isik görüntüleri (a ila m arasindakiler) ve iyilesmis yaranin karsilik gelen floresan görüntüler (b ila n arasindakiler) ve kronik iyilesmeyen yaranin karsilik gelen floresan görüntüleri (0 ila 0 arasindakiler) alti hafta boyunca gösterilmistir. Görüntüleme cihazi kullanilarak hem beyaz isik hem de floresan modlarinda emisyon (kirmizi)). b ila n) arasindakilerde, parlak kirmizi flüoresans bakteriyel kolonilerin küçük varligi saptanir (sari oklar) ve bunlarin lokalizasyonu iyilesmis yara içerisinde zamanla degisir. Bakteriyel örnek sivilar, mikroskopide bakteri tespit edilmedigini ve kültürde bakteri üremesi olmadigini dogrulamistir. Bunun aksine, 0 ila 0) arasindakilerde, iyilesmemis yara, yara siniri çevresinde, Stafilokok aureus'un (mikroskopi tarafindan dogrulanmis olan, az miktarda Gram pozitif basil ve nadir Gram pozitif koksi) bir agir büyümesini içerdigi örnek sivi kültürleri (bakteriyoloji) ile dogrulanmis olan, çok parlak kirmizi floresanin bir bandina sahiptir. Bu veriler, görüntüleme cihazinin zaman içinde yaralardaki morfolojik ve moleküler degisiklikleri izlemek için kullanilmasinin yani sira gerçek zamanli biyolojik ve moleküler bilgi saglayabilecegini göstermektedir. Sekil 24H, zaman içinde yara durumunu izlemek için cihazin kullanimina iliskin bir baska örnegi göstermektedir. Görüntüleme cihazi, iyilesme durumundaki degisiklikleri ve Kangrenli piyodermaya sahip olan 21 yasindaki kadin hastanin sol baldirindan bir yaradaki bakteriyel biyolojik dagilimi (örnek olarak, kontaminasyonu) izlemek için kullanilir. Hiperbarik oksijen tedavisi (HOT) kullanilarak tedavi edilen bir (b ila j arasindakiler) yaranin beyaz isik görüntüleri (3 ila i arasindakiler) ve karsilik gelen floresan görüntüleri alti hafta boyunca gösterilmektedir.(FIoresan parametreleri: 405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)), a ila i arasindakiler) Beyaz isik görüntüleri, 1. haftadan (~ 2 cm uzunlugunda çap çapi) ila 6. haftaya (~ 0.75 cm uzunlugunda eksen çapi) kadar zaman içinde boyuttaki küçülme ile belirtilen yara iyilesirken belirgin makroskobik degisiklikler gösterir (örnek olarak, kapanma).b ila j) arasindakilerde, yara içindeki ve etrafindaki endojen bakteriyel floresanin (oto floresan) gerçek zamanli floresan görüntülemesi, zaman içinde izlenebilir ve beyaz isik görüntüleri ve yara kapanma ölçümleri (a ila i arasindakiler) ile korele edilebilir. b), yaranin hemen sinirinda (sari ok; Stafilokok aureus'un agir büyümesinin kontamine oldugu gösterilmistir) belirgin bir yesil floresan bandi gösterir ve bu bant, yara iyilestikçe zaman içinde degisir. Kirmizi floresan bakterileri de yaradan daha uzakta görülür (turuncu ok) ve biyolojik dagilimlari zaman içinde degisir (b ila j arasindakiler). Yaradan yara çevresine oradan normal dokuya olan sinirlar, görüntü j)'deki floresan ile açikça görülebilir. Normal derideki bag dokusu (bu örnekte, kollajen) soluk yesil floresan (j) olarak görünür ve yara iyilesmesi sirasinda yeniden sekillenme, kronik yaralarin hiperbarik oksijen tedavisi de dahil olmak üzere çesitli yara tedavileri sirasinda zaman içinde izlenebilir. Sekil 24I, klinikte rutin yara degerlendirmesi sirasinda bakteriyel örnek sivilari hedef almak için görüntüleme cihazinin kullanimini göstermektedir. Floresan görüntüleme altinda, örnek sivi, gerçek zamanli olarak floresan görüntü kilavuzlugu kullanilarak belirli bakteriyel kontaminasyon/ enfeksiyon alanlarina yönlendirilebilir ya da hedeflenebilir. Bu, geleneksel yaradan örnek sivi alma metotlarinda sorun olabilen rutin örnek sivi alma prosedürleri sirasinda bakteri yayilimini azaltarak enfekte olmayan dokularin kontaminasyon potansiyelini azaltabilir. Bu numuneden örnek sivi sonuçlarinin Stafilokok aureus ( mikroskopi ile dogrulanmis olan az sayida Gram pozitif basil ve nadir Gram pozitif koksi) oldugu belirlenmistir. Sekil 24J, diyabet ile iliskili iyilesmeyen ayak ülserine sahip olan bir hastada görüntüleme cihazi ile yapilan a) beyaz isigin ve b) karsilik gelen floresan görüntülerinin birlikte kaydedilmesinin bir örnegini göstermektedir. Temassiz sicaklik ölçüm probunun (a)'da çapraz lazer nisanlamasi ile araya eklenmis olan, dogrudan sicaklik ölçümleri normal cilt üzerinde (sari "3 ve 4") ve ayak ülseri içinde (sari "1 ve 2") (bakteriyolojik kültür tarafindan dogrulanmis oldugu sekilde, Psödomonas aeruginosa ile enfekte olmus) yapilmistir, bu klinik muayene sirasinda yara degerlendirmesine sicaklik bazli bilgileri ekleme kabiliyetini gösterir. Enfekte olmus yaralar, normal deri yüzeyindeki 30.75° C'ye kiyasla enfekte olmus yaralarda ortalama 34.45 °C'de görüldü gü gibi yüksek sicakliklara sahiptir ve bu veriler, gerçek zamanli olarak yara sagligi/ bulasiciligi degerlendirmeleri için beyaz isik, floresan ve yara için termal bilgileri içeren çoklu mod ölçümleri olasiligini göstermektedir. Bu hastanin sag ayagindaki iyilesmeyen her iki yaranin, bu örnekte yaranin (b) içindeki parlak yesil floresan alanlari olarak görünen agir Psödomonas aeruginosa (Gram pozitif koksi ve Gram negatif basile ek olarak) büyümesi içerdigine dikkat edilmelidir. Sekil 24K, bir basinç ülserinin yara iyilesmesini görüntüleme için görüntüleme cihazinin kullanimina bir örnek gösterir, a) Bir Beyaz diyabet hastasinin sag ayaginin bir basinç ülseri ile sag ayagin görüntüleme cihaz ile alinan beyaz isik görüntüsü gösterilir, b) Ilgili floresan görüntüsü, standart beyaz isik incelemesi (sari oklar) sirasinda görünür olmayan bakterilerin parlak kirmizi floresanini (bakteriyoloji sonuçlari Stafilokok aureus'un agit büyümesinin varligini dogrulamistir) göstermektedir. Olü cilt beyaz/ soluk açik yesil renkte (beyaz oklar) görünür. Iyilesmeyen açik yaralarin çeperi etrafindaki Stafilokok aureus bakterilerinin agir büyümesine dikkat edilmelidir (sari oklar), c), topikal olarak uygulanan bir gümüs antimikrobiyal sarginin floresan görüntüsünü gösterir. Görüntüleme cihazi, gelismis yara bakim ürünlerinden (örnek olarak, hidrojeller, yara sargilari, ve benzeri) gelen endojen floresan sinyalini veya cihaz üzerindeki görüntüleme detektörünün algilama hassasiyeti içindeki bir emisyon dalga boyuna sahip olan bir floresan boya ile hazirlanmis olan bu tür ürünlerden gelen floresan sinyallerini tespit etmek için kullanilabilir. Cihaz, ileri yara bakimi tedavi ürünlerinin görüntü kilavuzlu teslimi/ uygulamasi için ve daha sonra zaman içindeki dagilimlarini ve açikliklarini izlemek için kullanilabilir. Sekil 24L, bir basinç ülserinin izlenmesinde cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a) Bir basinç ülseri olan bir Beyaz diyabet hastasinin sag ayaginin cihaz ile alinan beyaz isik görüntüsü, b) Ilgili floresan görüntü, bakteri alaninin, her ikisi de standart beyaz isik muayenesi altinda görünmez olan, yara kenarindaki parlak kirmizi floresanini (bakteriyoloji sonuçlari Stafilokok aureus'un, SA, agir büyümesinin varligini dogrulamistir) ve bakterilerin parlak yesil floresanini (bakteriyoloji sonuçlari Psödomonas aeruginosa'nin, PA, agir büyümesinin varligini dogrulamistir) gösterir, c) Yaranin çekilen floresan spektroskopisi bu iki bakteri türleri için benzersiz spektral farkliliklari ortaya koymustur: SA, karakteristik bir kirmizi (yaklasik olarak 630 nm) oto floresan emisyon zirvesine sahipken, PA kirmizi floresandan yoksundur, ancak yaklasik olarak 480 nm'de güçlü bir yesil oto floresan zirvesine sahiptir. Sekil 24M, kronik iyilesmeyen bir yaranin izlenmesi için cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a) Tip II diyabeti olan 44 yasindaki siyah erkek hastada kronik iyilesmeyen yaralarin görüntüleme cihazi ile alinan beyaz isik görüntüsü gösterilir. Bakteriler , yaralarin geleneksel klinik muayenesinde kullanilan standart beyaz isik görsellestirmesi (a ila 9 arasindakiler) ile görsellestirilemez, b ila h) arasindakiler, emisyon (kirmizi)) karsilik gelen floresan görüntüsüdür. Bu hasta birçok açik iyilesmeyen yara ile basvurmustur. Floresan görüntü kilavuzlugunu kullanarak her yara bölgesinden alinan örnek sivi kültürleri, parlak yesil floresan görünen Psödomonas aeruginosa'nin (sari ok) ve kirmizi floresan görünen Serratia marcescens'in (dairelerin) agir büyümesini ortaya koymustur.(Olçek çubugu cm Sekil 24N, görüntüleme cihazi ile yara görüntüleme sirasinda kullanilmak üzere özel olarak dizayn edilmis olan, çok amaçli ve/ veya tek kullanimlik olabilen "kalibrasyon" hedeflerinin kullaniminin bir örnegini gösteren sematik bir diyagramdir. Bu örnekte yapiskan olan serit, asagidakilerden bir ya da daha fazlasinin bir kombinasyonunu içerebilir: mekansal ölçüm araçlarinin (örnek olarak, uzunluk ölçegi), hastaya özgü tibbi bilgilerin entegrasyonu için bilgi barkodu ve floresan boyalarinin emprenye edilmis konsantrasyon gradyanlari görüntüleme sirasinda gerçek zamanli floresan görüntü kalibrasyonu. Sonuncusu için, çok sayida dissal floresan boya ya da diger floresan maddelerinin (örnek olarak, kuantum noktalarinin) çoklu konsantrasyonlari, örnek olarak, birden çok sayida dissal floresan olarak etiketli prob yaralarin doku/ hücre/ moleküler hedefli moleküler görüntülenmesi için kullanildigi zaman, çok sayida floresan yogunluk kalibrasyonu için kullanilabilir. Sekil 240, görüntüleme cihazinin bir uygulamasinin, bakterilerin izlenmesi için, örnek olarak bir tedavi tepkisinin izlenmesi için kullanilmasinin bir örnegini göstermektedir, a) Invitrogen Corp. (yani, BacLight ürünü) tarafindan satilan canli/ ölü bakteri boyasinin floresan mikroskopi görüntüsü, b) Invitrogen Corp. tarafindan satilan bir Gram boyama bakteri etiketleme Iekesini gösteren floresan mikroskopi görüntüsü. Görüntüleme cihazi (0) bu tür ürünler ile kullanilarak, canli (yesil) ve ölü (kirmizi) bakteriler, (e) bir yaranin, ya da bir baska vücut yüzeyinin, bakteriyel örnek sivi alinmasini, örnek olarak d)'deki gibi oral yanaginin örnek sivisi alinmasini, takiben ex vivo gerçek zamanli olarak (örnek olarak örnek sivi ya da doku biyopsisi) ayirt edilebilir. Bu gerçek zamanli bakteriyel Gram boyama ya da canli/ ölü görüntü bazli degerlendirme, antibiyotik ya da diger dezenfekte edici tedaviler gibi rafinaj tedavilerinde ya da tedavi yanitini izlemek için kullanilan gerçek zamanli ya da nispeten hizli bakteriyoloji sonuçlari için faydali olabilir. Sekil 24P, ayak parmagi tirnak enfeksiyonunun görüntülenmesi için kullanilan cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a) Beyaz isik ve b) bir hastanin sag ayak parmaginin oto floresanina karsilik gelen, floresan görüntülemenin beyaz isiga kiyasla sagladigi enfeksiyonun gelismis kontrastini gösteren görsellestirme (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Sekil 24Q, bakteri ile enfekte edilmis etin bir dezenfektana (örnegin, hidrojen peroksit (Virox5TM)) tepkisini izlemek için cihazi kullanarak görüntüleme ve örneklemesini göstermektedir. a) Petri kaplarinda bir ex vivo domuz dokusu örnegi hazirlanmistir ve b) Virox5TM'nin topikal verilmesinden ve (elde tutulan cihaz ile) o) floresan görüntülemeden önce Stafilokok aureus ile kontamine edilmistir. Dezenfektandan dolayi dokunun parçalanmasi hizli bir sekilde ortaya çikmaya baslar, bakteri floresan özelliklerinde bir degisiklik, özellikle numunenin yumusak bir uyarilmasindan sonra ve zaman içinde, burada yaklasik olarak 5 dakika Virox5TM ile inkübasyon, belirginlesir (örnek olarak, d'de görüldügü gibi, kirmizi floresan rengi, özellikle hafifçe çalkalandiktan sonra turuncu floresan rengine dönüsmeye baslar).Bu veriler, örnek olarak klinik ve klinik olmayan ortamlarda (405 nm uyarma; 490 ila 550 nm arasinda ve 600 nm emisyon) bakteriyel dezenfeksiyonun izlenmesinde cihazin kullanilmasini önerir. Floresan arttirici ön ilaçlara ek olarak, tiptaki gelismeler, moleküler seviyede hastaligi teshis etmek için floresan biyolojik isaretleyicilerin yaygin sekilde kullanilmasini saglamistir. Biyolojik dokulardaki floresan biyolojik isaretleyici sinyalinin dogru ölçümü, hastaligin ilerlemesi ve tedavi tepkisi hakkinda biyomoleküler bilgi edinmeye yönelik kritik bir parametre olabilir, ancak tarihsel olarak önemli bir zorluk teskil etmistir. Bugüne kadar, bu tip gelismis moleküler görüntüleme yara bakimi için rapor edilmemistir. Burada tarif edilen cihaz ayni zamanda, pasif olarak ve/ veya bir yara içindeki essiz ve spesifik moleküler hedeflere yara enfeksiyonunun tespit edilmesini ve teshisini iyilestirmek için hedeflenebilen, floresan, isik saçan, ya da isik emen dissal floresan kontrast maddeleri ile kombinasyon halinde kullanilabilir. Bu hedefler, yara içindeki ya da normal çevre dokulari içindeki, bilinen bir tespit ve/ veya teshis degerine sahip herhangi bir biyolojik ve/ veya moleküler bilesen (örnek olarak normal doku ve yara biyolojik isaretleyicileri) olabilir. Tüm dissal maddeler yaraya topikal ve/ veya sistemik olarak verilebilir ve bunlarla sinirli olmamak üzere, sunlari içerebilir: uygun bir dalga boyu seçilmis floresan/ saçilma modu ile eslestirilebilen/ konjuge edilebilen (örnek olarak, organik floresan boyalar, kuantum noktalari ve öteki floresan yari iletken nanopartiküller, kolodial metaller (örnek olarak, altin, gümüs, ve benzeri)) herhangi bir dissal madde/ ilaç (örnek olarak, kapsüllenmis Iipozomlar, boncuklar ya da öteki biyolojik olarak uyumlu tasiyici maddeler).FIoresan ve/ veya isik saçan maddeler/ problar ve/ veya kromojenik (yani absorpsiyon) maddeler! boyalar, spesifik biyolojik isaretleyicileri hedeflemek için kisimlari içerecek sekilde standart biyolojik konjugasyon teknikleri kullanilarak hazirlanabilir. Bu tür kisimlar, monoklonal antikorlari (örnek olarak, bütün ve/ veya parçalar) ve diger dokuya özgü kisimlari (bunlarla sinirli olmamakla birlikte, peptitler, oligomerler, aptamerler, reseptör baglayici moleküller, enzim inhibitörleri, toksinler, ve benzeri) içerebilir. Cihaz ayni zamanda, klinik öncesi yara modellerinde in situ aktivasyonlu, promotör kontrollü isik üreten proteinlerin ekspresyonunu görüntülemek için de kullanilabilir. Ayrica, görüntüleme cihazi kullanilarak ayni zamanda yara enfeksiyonlari da tespit edilebilir ve daha sonra spesifik olarak bakterileri hedef alan spesifik antikorlarla konjuge edilmis isik emici altin nanopartiküller gibi foto termal tedaviler kullanilarak tedavi edilebilir. Sekil 24R, biyolojik dokularda floresan boyalarin/ problarin/ maddelerin görüntülenmesi için kullanilan görüntüleme cihazinin kullanimina bir örnek gösterir, a) Bir et parçasinin (ex vivo) beyaz isik ile görüntülenmesi floresan boya varligini ortaya çikarmaz, halbuki b)'de cihaz, floresan boyanin biyolojik dagiliminin dogru floresan saptamasina ve izlenmesine izin verir. Ex vivo doku için gösterilmis olmasina ragmen, bu yetenekler, bunlarla sinirli olmamak üzere, örnek olarak, yaralarin, kanserin, enfeksiyonun, ya da diger hastaliklarin foto dinamik tedavisi (PDT) için dokularin içinde floresan isiga duyarlilastiricilarin biyolojik dagiliminin görüntülenmesini içeren in vivo uygulamalara çevrilebilirler. Beyaz isik görüntüleme, floresan görüntüleme için anatomik baglam saglayabilir. Bu yetenekler ayni zamanda, floresan maddelerin (isiga duyarlilastiricilari içeren) foto agartmasini izlemek ve çoklu PDT islemlerinin (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)) görüntü kilavuzlu dagitimini izlemek için kullanilabilir. Cihaz, PDT'de farmakokinetik, biyolojik dagilim ve/ veya foto agartmanin izlenmesini saglayabilir. Benzer sekilde, cihaz düsük seviyeli isik tedavilerinin izlenmesi için yararli olabilir. Cihaz, ayni zamanda, sadece benzersiz ve spesifik biyolojik hedeflerin varliginda (örnek olarak, yara sagligi ile baglantili enzimler) floresan üreten "moleküler isaretler" ya da "akilli problar" gibi diger moleküler algilayici maddeler ile birlikte kullanilabilir. Bu problar, örnek olarak spesifik bakteri türlerini ya da GRAM isaretini tanimlamak için faydali olabilir. Ornek olarak, kutanöz yara iyilesmesi, matris metalloproteinazlarin (MMP'ler) ve bunlarin inhibitörlerinin, TIMP'ler, hareketi için gerekli olduguna inanilan bir dizi göçer ve yeniden modelleme olaylari ile iliskili olan bes üst üste binen fazi (inflamasyon, granülasyon doku gelisimi, epitelizasyon, matris üretimi ve yeniden modelleme) oldukça karmasik bir islemdir. Insan akut ve kronik yaralarinin yani sira çesitli farkli yara iyilesme modellerinin in vivo analizleri, normal yara onarimi sirasinda MMP'lerin ve TIMP'lerin fonksiyonel bir rol oynadigini gösterirken, etkinliklerinin serbestlesmesinin yara iyilesmesine de katkida bulundugu düsünülmektedir. Hücre disi matrislerin bozunmasi, hasarli doku ve geçici matrisleri çikarmak ve damar olusumunu ve yeniden epitelizasyonunu saglamak için gereklidir. Buna karsilik, kronik ya da iyilesmeyen yaralarda, aktif olmayan formlarinda proteinazlarin asiri ekspresyonunun, altta yatan patolojiye katkida bulundugu ve normal doku tamir islemlerini inhibe ettigi düsünülmektedir. Moleküler isaretçiler, belirli biyolojik uyaranlara cevap olarak floresan emisyonunu kontrol etmek için floresan rezonans enerji transferi (FRET) prensibini kullanan aktiflestirilebilir floresan raportörlerdir. Genellikle, floresanini susturmak için florofora yakin bir söndürücü getiren hastaliga özgü bir baglayici içerir. Spesifik baglayici- hedef etkilesimleri üzerine (örnek olarak, nükleik asit hibridizasyonu, prostat spesifik peptit bölünmesi, fosfolipaza özgü fosfolipid bölünmesi), söndürücü floresanini geri kazanmak için florofor çevresinden uzaklastirilir. Bu akilli problar, floresan olmayandan yüksek floresana yerlesik yüksek dereceli sinyal amplifikasyonu nedeni ile, hedeflenen problardan birkaç büyüklük hassasiyeti derecesi sunabilir. Spesifik baglayici- hedef etkilesimlerine bagli olarak, ayni zamanda, protein ya da gen ekspresyon seviyelerinde spesifik moleküler anormallikleri sorgulayabilme yetenegine sahip olabilirler. Bu avantajlar nedeni ile, akilli problar yakin zamanda erken kanser tespiti için geleneksel problara göre "kuantum siçramasi" olarak takdir edilmistir. Bu tür dissal maddeler, örnek olarak yara enfeksiyonlarinin nispeten hizli, invazif olmayan, hassas ve spesifik optik tespiti için yaranin saglik durumunu izlemek ve tedavi ve bakimin etkinligini gerçek zamanli olarak bildirmek üzere mevcut ve yerinde mikrobiyal teshisi tanimlamak için kullanilabilir. Ek olarak, dissal optik maddeler ile kombinasyon halinde kullanildiginda, cihaz, tedavi içinde zamaninda degisiklikler yapmak ve bu sayede tedavi çiktilarini optimize etmek için, tedavi yanitinin hizli invazif olmayan ya da temassiz görsel nicel degerlendirmesine imkan taniyan, çesitli yerlesik ve deneysel tedavilere asgari düzeyde yanit veren hastalari tanimlamak için kullanilabilir. Ayrica, görüntüleme cihazini kullanarak in vitro ve hayvan modeli test sistemlerinde antimikrobiyal etkilerin gerçek zamanli olarak izlenmesi, antibiyotiklerin etkisinin temel anlayisini artirabilir ve in vivo olarak essiz hastalik çalismalarini kolaylastirabilir. Örnekler Sekil 5, kollajenin invazif olmayan oto floresan tespiti için kullanilan cihazin bir örnegini göstermektedir ve bir domuz eti numunesinin cilt yüzeyindeki bakteri türlerini degistirmektedir. Beyaz isik görüntülemenin aksine, oto floresan görüntüleme, deride yapilan küçük insizyonlara topikal olarak uygulandiktan 24 saat sonra birkaç bakteri türünün varligini tespit edebilmistir (yani, streptokok piyojenler, serratia marcescens, stafilokok aureus, stafilokok epidermidis, escherichia coli ve psödomonas aeruginosa), a), test için kullanilan domuz etinin beyaz isik görüntülerini gösterir.0. günde deride yapilan küçük insizyonlara birkaç bakteri türü uygulanmistir ve su sekilde etiketlenmistir: 1) streptokok piyojenler, 2) serratia marcescens, 3) stafilokok aureus, 4) streptokok epidermidis, 5) escherichia coli ve 6) psödomonas aeruginosa. Görüntüleme cihazi zaman içinde kollajen ve bakteriyel oto floresani tespit etmek için kullanilmistir. Bag dokusu floresan yogun olmustur ve kolayca tespit edilmistir. Bazi bakteri türleri (örnek olarak, psödomonas aeruginosa), cihazin kamerasini doygun hale getiren önemli yesil oto floresan (450 ila 505 nm arasinda) üretir, b) 0. günde oto floresan görüntüsünü gösterir, c)'de bunun büyütülmüs hali gösterilir. Cihaz ayni zamanda bakterilerin etin yüzeyine zaman içinde yayildigini tespit edebilmistir, d) 1. günde bir görüntü gösterir ve f) et numunesinin 37 "C'de tutuldu gu halde 3. günde bir görüntü gösterir. Kirmizi floresan, yara bölgelerinin bazilarinda (5, 6) e)'de görülebilir. d)'de gösterildigi ve e)'de büyütüldügü gibi, 24 saat sonra, cihaz, yara yerinden 5) escherichia coli ve 6) psödomonas aeruginosa bakteriyel oto floresaninda çarpici bir artis tespit etmis olup, ikincisi önemli ölçüde yesil ve kirmizi oto floresan üretmistir, c) ve e), cihazi, yara yüzeyinin sol tarafinda bir çiftli bant (450 ila 505 arasinda yesil ve 590 ila 650 nm arasinda) ve sag tarafinda bir tekli bant filtresi (635 +/- 10 nm) kullanarak floresani tespit ederken göstermektedir. f)'de gösterildigi gibi, 3. günde göre, cihaz bakteri oto floresanindaki (yesil ve kirmizi) önemli bir artisi diger yara alanlarindan ve ayni zamanda et numunesinin tutuldugu strafor kabindaki (f'de ile okla gösterilen) bakteriyel kontaminasyondan tespit eder. Cihaz, ayni zamanda, bakterilerin etin yüzeyine yayildigini da tespit edebilmistir. Bu, simüle edilmis yaralar üzerindeki bakteri türlerinin gerçek zamanli olarak tespit edilmesini, bu bakterilerin zaman içinde büyümesini ve cihazin yaralardaki büyümenin uzunlamasina izlenmesini saglama yetenegini göstermektedir. Cihaz, bakteriyel sivi örnegi alma ve doku biyopsilerini hedeflemede yararli olabilecek yara yüzeyindeki bakterilerin biyolojik dagitimi hakkinda kritik bilgiler saglayabilir. d) ve f)'de, domuz eti numunesinin kenarindaki endojen kollajenden gelen yogun yesil floresan sinyalinin olduguna dikkat edilmelidir. Bu örnek, cihazin bag dokusundaki biyolojik degisikliklerin gerçek zamanli olarak tespit edilmesi ve cihazin sadece oto floresana dayanarak bakteri üremesi için kullanildigini göstermektedir, yaralarin içindeki bakteriyel büyümenin uzunlamasina izlenmesini saglamak için cihazin bir pratik yetenegini önermektedir. Simdi, bir domuz eti numunesinin kas yüzeyindeki bag dokularin (örnegin kollajen, elastin) ve bakterilerin oto floresan tespiti için kullanilan cihazin örneklerini gösteren Sekil 6'ya atifta bulunulmaktadir, a), bakteriyel/ mikrobiyal kontaminasyonun ya da bozulmanin hiçbir belirgin isaretini göstermeyen test için kullanilmis olan domuz etinin beyaz isik görüntüsünü göstermektedir. Bununla birlikte, b)'de görüldügü üzere, cihaz ile ayni alanin mavi/ mor isik uyarma altinda görüntülenmesi, kasin bitisik tarafina kiyasla bakteriyel kontaminasyon potansiyelini gösteren kasin parlak kirmizi bir floresan alani ortaya çikarmistir. Ayni zamanda, derinin kenarinda son derece parlak yesil kollajen oto floresani da görülebilir. e)'de, cihaz sonraki patoloji ya da bakteriyoloji için hedeflenmis bir biyopsi saglamak üzere ayrica süpheli kirmizi floresani cerrahi olarak sorgulamak için kullanilmistir. Ayni zamanda, cihazin cerrahi islem sirasinda cerrahi cihazin (örnek olarak, forseps) kontaminasyonunu (ok) floresan araciligi ile tespit etme yetenegine de dikkat edilmelidir. d)'de, cihaz, bakteriler tarafindan enfekte edileceginden süphelenilen bir alanin bir fiber optik prob kullanilarak floresan spektroskopisinin koleksiyonunu hedeflenmesi için kullanilmistir (ekli küçük resim, cihazi b, c'deki kirmizi floresan kasin ayni alani içindeki spektroskopi probunu hedefler halde göstermektedir). e), et numunesinin üzerinde tutuldugu strafor kabin yüzeyi üzerindeki bakterilerin çesitli ince filmleri tarafindan olusturulan kontaminasyonunu tespit etmek için kullanilan cihazin bir örnegini göstermektedir. Bakterilerin oto floresani, daha önce ete uygulanan çesitli bakteri türlerinden mor/ mavi uyarma isigi altinda yesil ve kirmizi floresan çizgileri olarak görünür. Böylece cihaz, standart beyaz isik görüntüleme altinda (a'da oldugu gibi) gizli olduklari biyolojik olmayan yüzeylerde bakteri tespit edebilmektedir. Yaralardaki ve cilt yüzeyindeki bakterilerin tespitine ek olarak, cihaz ayni zamanda kas dokusunun süpheli alanlarini da belirleyebilmistir, bu daha sonra, cerrahi islem ya da patolojik dogrulama için hedeflenen biyopsi ya da bir fiber optik prob kullanan floresan spektroskopi gibi diger optik araçlar ile sorgulanabilir. Ayni zamanda, et numunesinin tutuldugu strafor kabinin yüzeyindeki çesitli bakteriler tarafindan olusturulmus olan kontaminasyon tespit edilmistir. Bakterilerin oto floresani, daha önce ete uygulanan çesitli bakteri türlerinden mor/ mavi uyarma isigi altinda yesil ve kirmizi floresan çizgileri olarak görünür. Kültürde ve simüle edilmis cilt yaralarinda büyüyen bakterilerin oto floresan özelliklerini belirlemek için, mor/ mavi isik uyarimi altinda bulunan bakterilerden floresan yogunlugu spektrumlarini nicel olarak ölçmek için hiperspektral/ çoklu spektral floresan görüntüleme kullanilmistir. Simdi Sekil 7'e atifta bulunulmaktadir. Sekil 7'de, yukarida Sekil 4 ve 5'te bahsedildigi gibi, agar plakalarinda ve domuz eti üzerinde simüle edilmis bir yara yüzeyinde büyüyen bakterilerden floresani tespit etmek için kullanilmistir. Kültürde (a) ve et örneklerinde (d) cihaz kullanilarak yesil ve kirmizi dalga boyu araliklarinda bakteriyel oto floresan tespit edilmistir. Kültürdeki (b) bakterileri (E. Coli) görüntülemek ve bakterilerden (kirmizi çizgi - porfirinler, yesil - sitoplazma, mavi - agar arka plan) (c) nicel floresan yogunlugu spektrumunu ölçmek için hiperspektral/ çoklu spektral görüntüleme kullanilmistir. Kirmizi ok, bakterilerde tespit edilen 635 nm'lik porfirin floresani zirvesini gösterir.Hiperspektral/ çoklu sprektral görüntüleme, ayni zamanda, önemli ölçüde porfirin kirmizi floresanin tespit edilmis oldugu E. Coli'ye (d'de sol kare) kiyasla, P. aeuginosa'dan gelen (az miktarda porfirin floresan ile birlikte, f'de sari çizgi) güçlü yesil floresani (*, d'de sag kare) dogrulamistir, e) ve g), 2 günlük büyümeden sonra (37 cC'de inkübe edilmistir) et yüzeyinden gelen, sirasi ile P. aeruginosa ve E. coli'ye karsilik gelen renk kodlanmis hiperspektral/ çoklu spektral görüntüleri göstermektedir; ve f) ve h), karsilik gelen renk kodlanmis floresan spektroskopisini göstermektedir. i)'de, uyarma emisyon matrisleri (EEM), ayni zamanda, solüsyondaki çesitli bakteri türleri için de ölçülmüstür, görüntüleme cihazinda optik filtreler ile kullanim için optimum uyarma ve emisyon dalga boyu bant genisliklerini seçebilme yetenegini göstermistir. E. coli için EEM, güçlü yesil floresanin yani sira endojen bakteriyel porfirinlerden (ok) önemli kirmizi floresani gösterir. Bu örnek, bakterilerin yesil ve kirmizi oto floresan yaydigini, bazi türlerin (örnek olarak, psödomonas aeruginosa) eskisinden daha fazlasini ürettigini göstermektedir. Escherichia coli, endojen porfirinden önemli kirmizi oto floresan üretmistir. Bakteriyel türler arasindaki bu tür içsel spektral farkliliklar önemlidir, çünkü yalnizca oto floresan kullanarak farkli bakteri türleri arasinda ayirt etme araçlari saglayabilir. Ayni zamanda, bu pilot çalismalarda kullanilan bakteriyel türlerin her biri için uyarma emisyon matrisleri (EEM'ler) de ölçülmüstür, bunlar, mor/ mavi isik uyarimi altinda, bütün türlerin, porfirinler tarafindan üretilen önemli yesil ve/ veya kirmizi floresan ürettigini dogrulamistir. Uyarma emisyon matrislerinden türetilen spektral bilgiler, ex vivo ve in vivo farklilasan bakteriyel türlerin ayirt edilmesini saglamak için görüntüleme cihazindaki optik filtrelerle kullanim için uyarma ve emisyon dalga boyu bant genisligi seçiminin optimize edilmesine yardimci olabilir. Bu sekilde, cihaz, maya, mantar ve küf gibi yara içindeki ve normal doku çevresindeki bakteriler ve/ veya öteki mikro organizmalarin yani sira, endojen bag dokularin (örnek olarak, kollajenler ve elastinler) mevcudiyetindeki ve miktarindaki ince farklari, bu biyolojik bilesenlerin benzersiz oto floresan imzalarina dayanarak tespit etmek için kullanilabilir. Floresan arttirici ön ilaçlara ek olarak, tiptaki gelismeler, moleküler seviyede hastaligi teshis etmek için floresan biyolojik isaretleyicilerin yaygin sekilde kullanilmasini saglamistir. Biyolojik dokulardaki floresan biyolojik isaretleyici sinyalinin dogru ölçümü, hastaligin ilerlemesi ve tedavi tepkisi hakkinda biyomoleküler bilgi edinmeye yönelik kritik bir parametre olabilir, ancak tarihsel olarak önemli bir zorluk teskil etmistir. Bugüne kadar, bu tip gelismis moleküler görüntüleme yara bakimi için rapor edilmemistir. Burada tarif edilen cihazin kullanimi ile, bu biyolojik isaretleyicilerin teshis amaçli görüntüleme ve izlenmesi mümkün olabilir. Dissal Kontrast Maddeleri Kullanarak Yara Modellerinin Görüntülenmesi Yaralari degerlendirmek için kullanildigi zaman, doku oto floresani görüntüleme, yara iyilesmesi sirasinda bag doku yeniden modellenmesindeki göreceli degisikliklerin yani sira, yaralari kontamine eden, kolonize olan ve/ veya enfekte eden (yara eksüdasinin bakteriyel olarak indüklenmis olan üretimini ve inflamasyonu içeren, ancak bunlar ile sinirli olmayan) bakterilerin erken varligini tespit edebilir. Yaralarin çogu mor/ mavi isik ile aydinlatildigi zaman, bag dokusu matrisindeki (örnek olarak, kollajen ve elastin) endojen dokular karakteristik güçlü bir yesil floresan sinyali yayarken endojen bakteriler, endojen porfirinin üretimi nedeni ile benzersiz bir kirmizi floresan sinyali yayar. Bu bakteriler, bunlarla sinirli olmamak üzere, tipik olarak yara bölgelerinde (örnek olarak stafilokok, streptokokus, e. cli ve psödomonas türleri) bulunan yaygin türleri içerir. Otomatik floresan kullanilmasi sureti ile, hastalari optimize edilmis yara bakimi ve tedavisi için katmanlastirmaya yardimci olabilecek, yara sagligi durumunun temel biyolojik belirleyicilerinin erken tespitinin bir yolunu saglamak için gerçek zamanli olarak kritik yara bilgileri elde edilir. On ilaç aminolaevulinik asit (ALA), hemen hemen tüm canli hücrelerde porfirin olusumunu indükler. ALA'ya maruz kalan birçok bakteri türü, protoporfirin IX (PplX) floresani indükleyebilir [Dietel et al., (2007). Journal of Photochemistry and Photobiology B:Biology.86:77-86]. Görüntüleme cihazi ile bakterilerin kirmizidan- yesile floresan kontrastini iyilestirmek için, PplX olusumunu indüklemek ve bu sayede kirmizi floresan emisyonunu arttirmak için ultra düsük dozlu ALA kullanimi arastirilmistir. Cihaz, cihazin bir bakteriyoloji/ kültür laboratuvarinda kullanildigini gösteren, Sekil 8'de görüldügü gibi, mor/ mavi uyarma isigi kullanarak canli bakteriyel kültürü (görüntüleme öncesi 24 saat boyunca agar plakalarinda yetistirilen stafilokok aureus) görüntülemek için kullanilmistir. a)'da, cihaz, beyaz isik (daireler) altinda, canli bakteri kültürünü (görüntüleme öncesinde 24 saat boyunca agar plakalari üzerinde büyütülmüs stafilokok aureus) görüntülemek için kullanilmistir .b)'de, mor/ mavi uyarma isigi, agar büyüme ortamindan arka plandaki zayif yesil oto floresandan ayirt edilebilen bakteriyel kirmizi oto floresani ortaya çikarir. c)'de, stafilokok aureus'un arka plan agarina karsi kirmizidan yesile floresan kontrastini arttirmak için, foto dinamik tedavide (PDT) yaygin olarak kullanilan isik duyarli aminolaevulinik asidin (ALA, fosfat tamponlu tuzlu su içinde) ultra düsük bir dozu (~20 pg/mL), agar plakasinin geri kalani ALA negatif iken, agar plakasi içindeki bazi kolonilere (dairelerde 'ALA+' olarak gösterilmistir) topikal olarak eklenmistir.37 cC'de 30 dakika inkübasyondan sonra, cihaz, tekrar agar plakasini mor/ mavi isik uyarimi altinda görüntülemek için kullanilmistir, bu sayede, stafilokok aureus bakterisinden gelen kirmizi floresanda ALA kaynakli protoporfirin lX, PplX, ALA almayan kolonilerle (kare) karsilastirildiginda, önemli bir artis ortaya çikarilmistir. b)'nin c) ile karsilastirilmasi, ALA ilavesinin, artan bakteriyel floresan için faydali olabilecegini gösterir, d), c)'den gelen RBG görüntüsünü, agar plakasindan yesil floresan çikarilmis, bu sayede ALA ile tedavi edilmis s. aureus içindeki arttirilmis kirmizi bakteriyel floresani ortaya çikarir halde gösterir. Bu, cihazin, örnek olarak yaralarda hassas bakterilerin tespiti için arka plana sinyali arttirmak için kontrast madde stratejilerini kullanma kabiliyetini gösterir. ALA'nin kültürdeki bakterilerin PplX floresanini anlamli seviyelere çikarmasi için gereken süre yaklasik olarak 30 dakika olmustur; bu, teknik yaklasimin ayni zamanda klinik olarak pratik olabilecegini göstermektedir. Ayrica, bu ayni zamanda, Cihazin, PDT kullanilarak bir sonraki tedavi için, kültür içerisinde ya da hastanin yaralari içerisinde büyüyen bakteri içindeki isik duyarli floresanin (örnek olarak, PplX) uygun bir sekilde görüntülenmesi için de kullanilabilecegini gösterir. Stafilokok aureus'un -20 pg/mL ALA'nin 37 °C'de 30 dakika inkübe edilmesinden sonra, herhangi bir ALA almayan kolonilere (kare) kiyasla bakterilerden kirmizi floresaninda önemli bir artis tespit edilmistir. Bu, cihazin, örnek olarak yaralarda hassas bakterilerin tespiti için arka plana sinyali arttirmak için kontrast madde stratejilerini kullanma kabiliyetini gösterir. ALA'nin kültürdeki bakterilerin PplX floresanini anlamli seviyelere çikarmasi için gereken süre yaklasik olarak 0.5 saat olmustur; bu, bu teknik yaklasimin ayni zamanda klinik olarak pratik olabilecegini göstermektedir. Simüle edilmis bakteriyel olarak kontamine edilmis et numunelerindeki testler bakteri kültüründen elde edilenlere benzer sonuçlar ortaya koymustur. Domuz derisi üzerindeki yaralara püskürterek 0.2 pg/mL'Iik ALA'nin topikal uygulanmasi, ALA uygulamasindan yaklasik olarak 2 saat sonra bakteriyel porfirin kirmizi floresaninin çarpici bir sekilde artmasina neden olmustur. Bu, cihazin, Sekiller 9 ve 10'a atif yapilarak gösterildigi gibi, daha önce beyaz isik görüntüleme altinda gizlenmis olan yara bölgelerinde ve cilt yüzeyinde baska bir yerde floresan görüntüleme ile bakteriyel kontaminasyon tespitine izin verebilecegini göstermektedir. Sekil 9, bir domuz eti numunesinin Cilt yüzeyi üzerindeki bakteriyel türlerin bag dokularinin ve çesitliliklerinin oto floresan tespiti için cihazin kullaniminin örneklerini göstermektedir. Bakteriyel flüoresansin yogunlugunun cihaz ile görüntüleme için arttirilip arttirilmayacagini belirlemek için, toksik olmayan ön ilaç aminolaevulinik asit (ALA) (~ cilt yüzeyine genel bir pulverizatör sise kullanilarak spreyieme vasitasi ile topikal olarak uygulanir Et numunesi daha sonra 37 °C`de yaklasik 3-4 saat boyunca isik geçirmez bir inkübatöre yerlestirilmistir, beyaz isik ve floresan görüntüleme, görüntüleme cihazi kullanilarak yapilmistir. Sekil 9'a atif yapilarak, a), test için kullanilan domuz etinin beyaz isik görüntülerini gösterir. b)'de, cilt içinde yapilmis olan küçük insizyonlara çesitli bakteri türleri uygulanmistir [(1) streptokok piyojenler, 2) serratia marcescens, 3) stafilokok aureus, 4) streptokok epidermidis, 5) escherichia coli ve 6) psödomonas aeruginosa)]. Mor/ mavi uyarma isigi altinda, cihaz bakteriyel oto floresan (yara bölgelerinde yesil ve kirmizi floresan) gösterir. Endojen porfirin kirmizi floresanin varligi cilt yüzeyinin diger alanlarinda da görülebilir (kirmizi ok). Parlak kollajen floresani ayni zamanda numunenin kenarinda da görülebilir (mavi ok). Ayni zamanda, et numunesini tutan strafor kabinin yüzeyi üzerindeki bakteriler de cihaz ile birlikte oto floresan ile tespit edilir, ancak bunlar beyaz isik altinda gizli kalir (sol panel). Bu, cihazin, hastanelerde, kronik bakim tesislerinde, huzur evlerinde ve kontaminasyonun önde gelen enfeksiyon kaynagi olabilecegi diger saglik bakimi çevrelerinde, çesitli yüzeyler, malzemeler, enstrümanlar (örnek olarak, cerrahi enstrümanlar) üzerindeki bakterilerin ya da mikroplarin ve öteki patojenlerin varliginin tespit edilmesi ve görüntülenmesi için kullanilabilecegini gösterir. Cihaz, gösterge organizmalarin ve patojenlerin stratejilerinin standart tespiti, tanimlanmasi ve numaralandirilmasi ile birlikte kullanilabilir. C)'de, bakteriyel floresanin arttirilip arttirilmayacagini belirlemek için, deri yüzeyine topikal olarak toksik olmayan ön ilaç aminolaevulinik asit (ALA) (0.2 mg/mL) uygulanmistir. ALA uygulamasindan yaklasik 1 saat sonra elde edilen sonuç, hem deri dokusu hem de yara bölgelerinde ve üzerinde et numunesinin tutuldugu strafor kabinin yüzeyi üzerinde bakteriyel porfirin floresaninda (parlak kirmizi floresan) çarpici bir artis olmustur (oklar). Bu, floresan görüntü kilavuzlugu ile biyopsi hedefleme olasiliklarini ve örnek olarak PDT kullanarak enfekte olmus alanlarin tespit edilmesi ve ardindan tedavi edilmesi için cihazin kullanilmasini göstermektedir. Sekil 10, bir domuz eti numunesinde bakteriyel enfeksiyonun floresan kontrastli iyilestirilmis tespit için cihazin kullaniminin örneklerini göstermektedir, a), domuz etinin beyaz isik görüntüsünü göstermektedir. Derideki küçük insizyonlara çok sayida bakteri türü uygulanmistir (ok).b)'de, toksik olmayan ön ilaç aminolaevulinik asit (ALA) (0.2 ug/mL), bir genel pulverizatör sisesi kullanilarak spreyleme vasitasi ile cilt yüzeyine topikal olarak uygulanmistir ve ortaya çikan ALA indüklü protoporfirin lX'i (PpIX) görüntülemek için kullanilmistir. Mor/ mavi isik (405 nm) kullanarak cilt yüzeyinin (ALA uygulamasindan ~ 2 saat sonra) görüntüleri, daha önce beyaz isik görüntülemesi (a ve b'deki daire) altinda gizli olan, simüle edilmis cerrahi yara insizyonlari (oklar) ve cilt yüzeyi üzerindeki baska yerler içindeki bakteriyel kontaminasyonun varliginin floresan görüntüleme ile tespit edilmesini gösteren bakteriyel kirmizi floresan kontrastin çarpici bir artisi ile sonuçlanmistir. Numunenin kap içerisinde 'yüz üstü' yerlestirilmesi nedeni ile oksijene maruz kalmayan bazi alanlarinin, muhtemelen PplX`in bakteriyel üretimin oksijene süphelenilen bagimliligi nedeni ile, parlak kirmizi floresan yaymadigina dikkat edilmelidir. Bazi bakteriler, ayni zamanda cihaz tarafindan da algilanan parlak yesil bir oto floresan sinyali üretir. c)'de, bir baska domuz eti örneginde, beyaz isik görüntüleme (daire) altinda gizli olan bakteriler, sadece oto floresan görüntüleme kullanilarak (küçük resim) kolaylikla tespit edilir. Bununla birlikte, d)'de gösterildigi üzere, düsük dozlu ALA'nin topikal uygulamasi, 2 saat sonra bakteriyel floresanda dramatik bir artisa neden olmustur; bu, dissal ilaçlarin, bakteriyel kontaminasyonun daha iyi tespiti için floresan görüntüleme kontrast arttirici maddeler olarak kullanildigini göstermistir. Ornekteki bag dokularinda endojen kollajen ve elastinlerin parlak yesil oto floresanina dikkat edilmelidir. e) ve f)'de, ALA indüklü floresan, görüntü kilavuzlu biyopsi hedeflemesinin olanagini ve örnek olarak PDT kullanilarak, enfekte edilmis alanlarin tespiti ve sonraki tedavisi için cihazin kullanimini saglayarak cilt yüzeyi (daireler) üzerindeki gizli bakterilerin tespitine imkan vermistir. Cihaz ayni zamanda, cihazin algilama hassasiyetini ve spesifikligini arttirmak için, bakteriler/ mikro organizmalar içinde porfirinlerin dissal üretimini arttirmak ve bu sayede bu bakterilerden yayilan essiz 'porfirin' floresan sinyallerinin yogunluklarini arttirmak için FDA tarafindan klinik terapötik indikasyonlar için onaylanmis olan ALA'yi içeren ancak bunun ile sinirli olmayan, dissal 'ön ilaç' maddeleri ile birlikte kullanilabilir. Bu nedenle, cihaz, sonraki görüntü kilavuzlu hedeflenmis sivi örnegi alma ya da biyopsi, ya da foto dinamik tedavi (PDT) kullanan tedavi için, kültür içerisinde ya da hastanin yaralari içerisinde büyüyen bakteri içinde uygun sekilde isik duyarli floresan (örnek olarak, PpIX) görüntülemesi için kullanilabilir [Jori et al.Lasers DermatoI.Clin.15, 507-519].PDT, hali hazirdaki antibiyotik tedavisine bir tamamlayici ya da antibiyotiklerin artik çalismadigi (örnek olarak, ilaç dirençli suslar) durumlarda bir alternatif saglayabilir. Mevcut kanitlar, çoklu antibiyotige dirençli suslarin, PDT tarafindan saf suslar kadar kolayca öldürüldügünü ve bakterilerin PDT'ye kolayca direnç gelistirmeyebilecegini göstermektedir. Bu, kanser tedavisi gören hastalarda, antibiyotiklere direnç gösteren HIV hastalarinda ve sürekli oral enfeksiyonlari olan yaslilarda yaralarin tedavisi için hayati olabilir [Hamblin et al.(2004) Photochem Photobiol Sci.3:436-50]. Cihaz, düsük güç uyarma/ aydinlatma mavi / mor isigi kullanarak, yara ve çevresindeki normal dokulardaki bakteri ya da mikro organizmalari tespit etmek için kullanilabilir, fakat ayni zamanda hemen sonra örnek olarak PDT ya da diger tedaviler kullanilarak bunlari yok etmek için de kullanilabilir. Yüksek güçlü kirmizi uyarma/ aydinlatma isigi kullanilarak, PDT tarafindan bakteri ya da mikro organizmalardaki endojen porfirinler yara bölgesi içinde yok edilebilir. Bu nedenle, bu cihaz, klinik yara bakimi için hepsi bir arada bir invazif olmayan ya da temassiz "bul ve tedavi et" araci olarak hizmet edebilir. Ayrica, bakteri ya da mikro organizmalar tespit edildiginde, cihaz, yara bölgesini PDT ile tedavi etmek ve/ veya dezenfekte etmek için kullanilabilir ve daha sonra, bölge PDT isleminin etkinligini belirlemek için, kisa süre sonra tekrar görüntülenebilir. Bazi yapilanmalarda, cihaz sadece tespit/ teshis amaçli kullanilabilir ve herhangi bir terapötik tedaviyi kendisi gerçekletirmeyebilir. Cihaz, tüm yara ve çevresindeki normal doku dezenfekte edilinceye kadar Sürekli olarak kullanilabilir ve daha sonra standart klinik takibin bir parçasi olarak, uzunlamasina bir sekilde izlenebilir. Cihazdan alinan floresan görüntüler, PDT isiga duyarli hale getirici ya da foto ürünlerin biyolojik dagilimini belirlemek için kullanilabilir [Gudgin et al.(1995) J. Photochem. 287-290], çünkü bunlarin çogu içsel olarak floresandir ve dolayisiyla cihaz, PDT tedavi isigini hedefleme araci olarak hizmet edebilir. Bu nedenle cihaz, görüntüleme yolu ile PDT tedavisinin bütünlügüne kilavuzluk edebilir. Benzer sekilde, cihaz diger tedavileri yönlendirmek için kullanilabilir. Bazi isiga duyarlilastiricilarin foto agartici olarak bilindigi için [Jongen et al.(1997) 67], cihazin floresan görüntüleme kabiliyeti, isiga duyarli hale getiricinin foto agartma derecesini ya da oranini belirlemek için kullanilabilir. Bu bilgi, hastaligin yeterli sekilde tedavi edilmesini saglamak için, ayni zamanda çevre normal dokulara verilen zarari en aza indirmek için, PDT dozimetrisinin optimize edilmesi için faydali olabilir belirli uyarma dalga boylari ve yogunluklari için seçilebilen uyarma isik kaynaklarina sahip cihaz, ayni zamanda, ticari olarak temin edilebilir ve/ veya deneysel PDT isiga karsi duyarlilastiricilar ile birlestirilmis olan PDT için isik saglayabilir. Bu nedenle, mevcut klinik PDT endikasyonlarinda (örnek olarak, cilt yüzeyi ya da içi bos organlar için) ve/ veya ticari/ akademik arastirma ve gelecekteki PDT isiga duyarli maddelerin hem klinik öncesi olarak hem de klinik olarak gelistirilmesi alaninda yararli olabilir. Sekil 1OG, bakterilerin foto dinamik tedaviye (PDT) tepkisini izlemek için cihazin kullanimina bir örnek göstermektedir. Ex vivo domuz dokulari Petri kaplarinda hazirlanmistir ve BL'den ve cihazin kullanilmasi ile numunelerin floresan görüntülenmesinden 24 saat önce biyolojik isildayan (BL) Stafilokok aureus ile kontamine edilmistir. Biyolojik isildayan ve karsilik gelen floresan görüntüleme PDT öncesinde ve sonrasinda a, d) kontamine edilmemis olan, ve b, e) SA ile kontamine edilmis olan kas dokusu üzerinde gerçeklestirilmistir. Stafilokok aureus'un, kirmizi floresan rengini (e'de beyaz ok) ürettigine dikkat edilmelidir. PDT, bakteriyel olarak kontamine edilmis olan et numunesi (sari bir daire ile isaretlenmistir) üzerinde, metilen mavisi (MB) olarak adlandirilan bir genel isiga duyarlilastirici ile yaklasik olarak 30 dakika boyunca numunenin inkübe edilmesi, ardindan fazla MB'nin kaldirilmasinin (ve PBS ile durulama) ve foto dinamik tedaviye neden olmak için yaklasik olarak 10 dakika boyunca ~ 10 J/cm2'de yaklasik olarak 670 nm'lik isik kaynagina (burada bir LED dizisidir) maruz birakilma sureti ile gerçeklestirilmistir. b) ve c)'deki BL yogunlugu ölçeklerinin karsilastirilmasi, PDT'yi takiben islem görmüs et numunesindeki BL yogunlugunda belirgin bir azalma göstermektedir (örnek olarak, PDT, biyolojik isildayan bakterilerin ölçülebilir bir bölümünü öldürmüstür, böylece BL sinyal yogunlugunu azaltmistir) ve Stafilokok aureus bakterilerinin (kirmizi renk) floresan özellikleri (örnek olarak, yogunluk ve biyolojik dagilim) PDT'yi takiben elde tutulan görüntüleme cihazi kullanilarak görülebilir. Et numunesindeki yogun yesil floresanina (e'deki pembe ok), deney sirasinda (bakteriyoloji tarafindan dogrulanmistir) et numunesinin BL olmayan Psödomonas aeruginosa tarafindan istemeden yapilan çapraz kontaminasyonu tarafindan neden olundugunu ve cihazin bunu tespit ettigine dikkat edilmelidir. Bu veriler, biyolojik (ve biyolojik olmayan) numunelerde bakteriyel kontaminasyon tedavisi için PDT'nin kullanimini izlemek için nm emisyon). Bu cihaz, klinik mikrobiyoloji Iaboratuvarlarinda bir görüntüleme ve/ veya izleme cihazi olarak kullanilabilir. Örnek olarak, cihaz, bakteriyel kolonilerin nicel olarak görüntülenmesi ve yaygin mikrobiyoloji deneylerinde koloni büyümesinin nicellendirilmesi için kullanilabilir. Büyüme kinetigini belirlemek için bakteriyel kolonilerin floresan ile görüntülenmesi kullanilabilir. Yaralardaki Kanin Görüntülenmesi Yeni kan damarlarinin büyümesi olan anjiyojenez, yaralari iyilestirmek ve yaralanma ya da travmadan sonra dokulara kan akisini geri kazanmak için gereken önemli bir dogal süreçtir. Yeni kilcal büyümeyi "açmak" için dizayn edilmis olan anjiyojenez tedavileri, sakatlanma ve yasami tehdit edici durumlarin tedavisi için birlesik bir yaklasim saglayarak tipta devrim yaratmaktadir. Anjiyojenez, yara iyilesmesi için gerekli fizyolojik bir islemdir. Hasarin hemen ardindan, anjiyojenez hemostatik faktörler, inflamasyon, sitokin büyüme faktörleri ve hücre matris etkilesimleri dahil olmak üzere çoklu moleküler sinyaller ile baslatilir. Yeni kilcal damarlar, yara yataginda granülasyon dokusu olusturmak için bir dizi biyolojik olay yolu ile çogalirlar. Bu islem, iyilesmenin son asamalarina, anjiyojenezin büyüme faktörlerinin, inflamasyonun çözünürlügünün, stabilize doku matrisinin ve endojen anjiyojenez inhibitörlerinin azalmis seviyeleri tarafindan durduruldugu zaman, kadar devam ettirilebilir. Anjiyojenez yolundaki bozukluklar granülasyonu bozar ve iyilesmeyi geciktirir ve bunlar kronik yaralarda belirgindir [Tonnesen et al.(2000) J lnvestig Dermatol Symp Proc.5(1):40-6]. Doku yüzeyini, seçilen dar dalga boyu bantlari (örnek olarak mavi, yesil ve kirmizi bilesenler) isik ile aydinlatilmasi ya da görünür spektrumun birkaç dar bant genisligi içinde (örnek olarak, beyaz isigin kan absorpsiyon spektrumundan seçilmis olan pik absorpsiyon dalga boylari) beyaz isigin yansimasinin tespit edilmesi sureti ile, cihaz, ayni zamanda, yaranin içinde ve etrafinda, normal doku çevresi dahil olmak üzere, kanin ve mikro vasküler aglarin varligini, dolayisi ile eritem ve inflamasyonun ortaya çiktigi alanlari görüntülemek için kullanilabilir. Simdi Sekil 11'e atifta bulunulmaktadir. Cihaz, yaralarda kan ve mikro vasküler yapiyi görüntüleme imkanini göstermek için bireysel optik filtreler (örnek olarak, 405 nm, 546 nm, 600 nm, +/- 25 nm) kullanabilir. Bir yaranin beyaz isik görüntüleri cihaz ile toplanabilir ve daha sonra cihazin önüne yerlestirilmis olan üçlü bant geçiren bir filtre görüntüleme detektörü, mavi (B), yesil (G) ve kirmizi (R) ayri dar bant genisliklerini yaradan yansiyan isik bilesenlerini görüntüleyebilir. Bu dalga boyu bantlari, görünür isik dalga boyu araliginda, hem oksijenlendirilmis hem de oksijenden arindirilmis hemoglobini içeren kanin pik absorpsiyon dalga boylarina dayanarak seçilebilir. Sonuçta ortaya çikan görüntüler görüs alaninda kan ile görülebilen isigin nispi absorpsiyon ve dolayisi ile yansimasini saglayabilir. Elde edilen "kan absorpsiyon" görüntüsü, yara ve çevresindeki normal dokularda kan ve/ veya mikro vasküler aglarin varliginin yüksek kontrastli bir görüntüsünü verir. Klinisyen, yara içindeki kan ve/ veya mikro vasküler dagilim görüntülerini elde etmek için cihaz ile kullanim için uygun optik filtre kümesini seçebilir ve bu bilgileri oto floresan görüntüleme ve dissal kontrast maddeleri ile görüntülemenin biri ya da her ikisi ile birlestirebilir. Bu, hali hazirda geleneksel yara bakimi uygulamasinda mümkün olamayacak olan morfolojik, topografik, anatomik, fizyolojik, biyolojik ve moleküler seviyelerde yaranin ve etrafindaki normal dokularin kapsamli bir bilgi kümesini saglayabilir. Sekil 11, yaralarda kan ve mikro vasküler yapinin görüntülenmesi Için kullanilan cihazin örneklerini göstermektedir. Cihaz, cerrahi islem sirasinda (a) kan ile lekelenmis bir filtre kagidi parçasini (b) ve farenin kulaginin görüntülemek için kullanilmistir. Beyaz isik görüntüleri, numunelerin her birinden, floresan olmayan bir modda görüntüleme cihazinin kullanilmasi sureti ile toplanmistir, ve daha sonra cihaz, numunelerden gelen mavi (B), yesil (G), ve kirmizinin (R) ayri dar bant genisliklerini görüntülemek için, görüntüleme detektörünün önünde yerlestirilmis olan donatilmistir. Bu dalga boyu bantlari, gözle görülebilir isik dalga boyu araligindaki kanin pik absorpsiyon dalga boylarina dayanarak seçilmistir (a'da küçük resim), kandaki oksijenlenmis ve oksijenden arindirilmis hemoglobin için absorpsiyon spektral profilini gösterir. Bu, basit bir çok bantli iletim filtresi kullanarak, üç B, G, R görüntüsünü, görüs alanindaki kanin isigin absorpsiyonunu ölçen tek bir "beyaz isik esdeger" görüntüsünde birlestirmenin mümkün oldugunu göstermektedir. Elde edilen hemoglobin içeren kan varliginin yüksek kontrastli bir görüntüsünü verir. Cihaz, örnek olarak yaralarda kan absorpsiyonunun daha yüksek kontrastli görüntüleri elde etmek için daha dar bant genisligi filtreleri ile birlikte kullanilabilir. Yara onarimi sirasinda in vivo olarak anjiyojenezin düzenlenmesi, kan damarlarindaki olaylari gözlemlemedeki zorluklar nedeni ile büyük ölçüde kesfedilmemistir. Her ne kadar görüntüleme cihazinin baslangiç testleri kesfedici olsa da, mevcut prototip cihazinin basit modifikasyonu, kanin ve mikro vasküler aglardaki dinamik degisikliklerin in vivo olarak yara iyilesme sürecinde uzunlamasina görüntülenmesine izin verebilir. Deri ve Agiz Boslugunun Görüntülenmesi Bu cihaz cildi, agzi ve agiz boslugunu görüntülemek için uygun olabilir. Cihaz, küçük deri kutanöz (örnek olarak, kesikler, siyriklar) ve genellikle normal ciltte bulunan endojen bakteriler (örnek olarak, Propiyonibakterium akneler ya da P. akneler) nedeni ile bag dokusu degisikliklerinin tespitine izin verebilir. Bu cihaz ayni zamanda, agiz boslugu içerisindeki dental plaklarin, tasiyicilarin ve/ veya kanserlerin çoklu spektral görüntüleme ve/ veya izlenmesi için uygun olabilir. Cihaz, anormal ya da kanserli dokularda benzersiz oto floresan imzalarinin varligina bagli olarak plaklarin, periyodontal hastaliklarin, tasiyicilarin ve kanserlerin yani sira lokal oral enfeksiyonlarin varligini tespit etmek için kullanilabilir. Cihaz, agiz boslugundaki periyodontal hastaliklarin, plaklarin, ve tasiyicilarin ve kanserlerin gerçek zamanli olarak tespit ve teshisini saglamak için beyaz isigi, oto floresan ya da dissal floresan maddelerin ile ya da onlarsiz floresani, ve yansima görüntülemesini kullanabilir. Cihaz, tibbi kayit kataloglamasi için görüntüleri kaydedebilir. VELscope Sistemi, Vancouver merkezli LED Medical Diagnostics lnc. (LED-MD) firmasina ait, gibi mevcut bir ürünün kullandigi dogrudan (yani çiplak gözle) görüntüleme yaklasimindan farkli olarak, mevcut cihaz dokunun beyaz isik floresan ve yansima bilgilerinin dijital görüntülenmesini ve kaydedilmesini saglayabilir. Dermatolojide, cihaz normal ciltteki bakterileri tespit etmek için kullanilabilir. Ornek olarak, Sekil 12, yaygin Propiyonibakterium akneden belirgin kirmizi floresanin tespit edildigi, hastalarin yüzlerinin normal cildinin yüksek çözünürlüklü oto floresan görüntülemesini göstermektedir. Sekil 12, hastalarda agiz boslugunun ve cilt yüzeyinin invazif olmayan yüksek çözünürlüklü dijital hareketsiz ya da video görüntülemesi için cihazin kullaniminin örneklerini göstermektedir. a) 'da gösterildigi üzere, cihaz agiz ve agiz boslugunun görüntülenmesi için kullanilabilir. Mor/ mavi isik uyarma, kan bakimindan zengin sakizlara kiyasla, dislerden gelen, bir yogun yesil floresan olarak ortaya çikan oto floresani uyarir. Periyodontal hastalik ve dis çürügü, bu cihazi kullanarak dislerin ve dis eti dokularinin oto floresani temelinde kolayca tespit edilebilir. Dudaklarin kenarindaki kirmizi floresan, cilt gözeneklerinde yaygin olarak bulunan Propiyonibakterium aknelerden (P. akneler) tespit edilir. Kirmizi floresan, endojen bakteriyel porfirinler tarafindan üretilir. Dudaktaki tekli gözeneklerdeki P. aknelerin (kirmizi ok) tespit edildigine dikkat edilmelidir. Benzer sekilde, b)'de, dilin normal bakteri faunasindaki endojen porfirilerden kirmizi floresan, dil yüzeyinde parlak kirmizi floresan 'battaniye' olarak kolayca algilanir. Cihaz, ayni zamanda, normal ve preplastik ve neoplastik dokular arasindaki optik özelliklerdeki (örnek olarak, absorpsiyon, saçilma, oto floresan) farkliliklara dayanarak agiz boslugundaki erken kanserleri tespit etmek için de kullanilabilir. Cihaz, mukozal kanserlerin agiz boslugunu 'taramak' ya da PDT gibi anti kanser terapötiklerin etkilerini ya da diger teknikleri belirlemek için kullanilabilir. Cihaz, ayni zamanda, cilt yüzeyini görüntülemek için de kullanilabilir. 0) ila e) arasindakilerde, cihaz, cildin yüzeyinin mor/ mavi isik uyarimi tarafindan üretilen oto floresani tespit ederek hastanin yüzündeki cildi görüntüler. P. aknelerden kirmizi floresan yüz bölgelerinde kolayca tespit edilebilir (e). Cihaz, dermatolojik müdahalelerin (örnek olarak topikal kremler, ilaçlar ve diger antibiyotikler, ve benzeri) hastanin cildi üzerindeki potansiyel etkilerini görüntülemek ve/ veya izlemek için kullanilabilir. f) ve g)'de, cihaz ayni zamanda, küçük kesikler (ok, h), hastanin cildindeki siyriklar ve siyriklar ile parmaktaki sedef hastaligi (ok, i) görüntülemesi için de kullanilmistir. Mor/ mavi isik altinda, cihaz, cilt bölgelerinin yüksek çözünürlüklü görüntülerini elde etmek için, yara bölgesinden ve normal deriyi çevreleyen bag dokusu bilesenlerinden (örnek olarak kollajen ve elastin) doku oto floresani tespit etmistir. P. akneler, akne vulgaris'in (yani sivilce) etken maddesidir ve insan derisinin pilosebasöz bezlerinin ortak bir sakinidir ve beyaz isikta görsellestirme altinda gizlidir. Bu oto floresan görüntüler, dissal maddelere/ ilaçlara ihtiyaç duyulmadan elde edilmistir ve cihazin, tekli cilt gözeneklerinde bakteri porfirin floresanini tespit etme kabiliyetini kanitlamistir. Sekil 12J, görüntüleme cihazinin ciltte ortak bakteriyel floranin gerçek zamanli floresan tespiti için kullanimina bir örnek gösterir, a) Burun ve çevresinde kirmizi floresan, cilt gözenekleri içinde yaygin olarak bulunan Pr0piyonibakterium aknelerden (P. akneler) tespit edilir, b) Floresan görüntüleme ayni zamanda cilt üzerinde birden fazla bakteri türünü ayni anda tespit etmek ve izlemek için kullanilabilir, örnek olarak Psödomonas Aeruginosa parlak yesil (yesil oklar) görünürken Pr0piyonibakterium akneler kirmizi floresan (kirmizi ok) olarak görünür. Bu veriler, çesitli bakteri türlerinin nispi konsantrasyonlarini/ seviyelerini ayirt etmek, vücut yüzeyindeki biyolojik dagilimlarini belirlemek ve dermatoloji ve kozmetoloji uygulamalarinda antibakteriyel tedavilere yaniti izlemek için cihazin kullanilmasini önermektedir, c), Agar üzerinde, saglikli bir gönüllünün burnunda normal deriden alinan bir sivi örneginde yetistirilen bir kültürdür. Bakteriyoloji sonuçlari Psödomonas aeruginosa'nin varligini göstermistir. Cilt yüzeyindeki bakterilerin mevcudiyeti ve biyolojik dagilimini görüntüleme ve belgeleme gibi bir yetenek, cihazin dermatoloji ve kozmetik alanlarinda potansiyel olarak faydali olmasini saglar. Ornek olarak, floresan görüntüleme, dermatolojik tedavi ve/ veya farmasötik/ kozmetik formülasyonlarin (örnek olarak topikal kremler, ilaçlar ve diger antibiyotikler, cilt dezenfekte edici maddeler, akne tedavileri, ve benzeri) normal ve skarlasma, hiper pigmentasyon, akne, sedef hastaligi, egzama, döküntüler ve benzerini içeren ancak bunlarla sinirli olmayan anormal cilt kosullarina uygulanmasinin öncesinde, sirasinda ve sonrasinda gerçeklestirilebilir. Floresan/ yansima görüntü kilavuzlu dövme çikarma (örnek olarak, ameliyat ya da mevcut lazer tedavileri kullanarak), ayni zamanda cihaz ile bir seçenek olabilir. Cihaz ayni zamanda, hastanin cildi üzerindeki küçük kesikler, siyriklar ve abrazyonlar için kullanilmistir ve mor/ mavi isik altinda, yara bölgesinden ve normal cildin etrafindan bag doku bilesenlerinden (örnek olarak, kollajen ve elastin) gelen doku oto floresani (Sekil 12 h, i'de görüldügü gibi) küçük kutanöz yara iyilesmesi sirasinda bag dokudaki beyaz isik gizli degisikliklerin tespit edilmesinde yardim etmistir. Ek olarak, cihaz ayni zamanda gizli cilt kanserlerinin ve kanserli olmayan (yani, iyi huylu) lezyonlarin invazif olmayan bir sekilde erken teshisi için pratik, uygun maliyetli ve hassas bir görüntü tabanli araç olarak hizmet edebilir [Chwirot et al.(1998) Eur J Cancer.34(11):1730-4]. Daha sonra cihaz, Iezyonlarin cerrahi olarak çikarilmasi ya da PDT için görüntü kilavuzlugu saglamak için kullanilabilir. Sonuncusu için, floresan görüntüleme, PDT yanitini izleyebilir ve etkilenen bölgenin birden fazla uzunlamasina görüntü taramasi ile zaman içinde tedavinin bütünlügünü belirleyebilir. Cihaz, PDT isiga duyarli hale getirici lokalizasyonunu ve biyolojik dagilimini ve foto agartmayi belirlemek için gerçek zamanli olarak kullanilabilir ve bu, anatomik karsilastirma için tedavi edilecek alanin beyaz isik görüntüsü ile eslenebilir. Normal ve hastaliklar ya da yanmis dokular arasindaki optik özelliklerdeki degisiklikler, cihazin beyaz isik ve floresan görüntüleme yetenekleri kullanilarak tespit edilebilir. Cihaz ayrica yaniklarda iyilesme sürecini görüntülemek, degerlendirmek ve boyuna izlemek ya da yanik hastalarinin tedavisinde cilt greftlerinin ya da geçici cilt yerine geçen maddelerin yanitini belirlemek için kullanilabilir [Bishop (2004) Crit Care Nurs Clin North tedavisi sirasinda geç radyasyon indüklü cilt hasarini tespit etmeye ve izlemeye de Ek olarak, cihaz, özellikle cihazin küçük ve kompakt oldugu yapilanmada agiz ve agiz boslugunu görüntülemek için kullanilabilir. Pilot görüntüleme çalismalari, cihazin agiz boslugundaki endojen bakterileri (örnek olarak, dil yüzeyinde ve dis eti çizgisindeki disler arasinda) tespit edebilecegini, çürügün ve periyodontal hastaligin 39]. Ek olarak, doku oto floresaninin oral kanserlerin tespitinde faydali oldugu normal ve preplastik ve neoplastik oral dokular arasindaki optik özelliklerdeki (örnek olarak, absorpsiyon, saçilma, oto floresan) farkliliklara dayanarak agiz boslugundaki erken kanserleri tespit etmek için de kullanilabilir. Ek olarak, cihaz mukozal kanserlerin agiz boslugunu 'taramak' ve tedaviye yaniti izlemek için kullanilabilir. Genel olarak, cihaz, bir cilt hedefi, bir oral hedef, bir kulak burun bogaz hedefi, bir oküler hedef, bir genital hedef, bir anal hedef ve diger uygun hedefler gibi bir denek üzerindeki hedeflerin görüntülenmesi ve/ veya izlenmesinde kullanilabilir. Maliqn yaralarda Kullanim Bir malign yara ayni zamanda tümör nekrozu, bir mantar yara, ülserli kanserli yara ya da malign kutanöz yara olarak da bilinir. Malign bir yara, hastalar, aileler ve hatta deneyimli klinisyenler için duygusal ve fiziksel bir zorluk olabilir. Mantarlanan ve ülserli yaralar, çirkin, kötü kokulu ve agrili olabilir. Bu yaralar hastaligin ilerleyisinin göstergeleri olabilir ve gecikmis / engelli iyilesmeye ve buna bagli hastaliga yol açan ve bu nedenle de hastalar için yasam kalitesinin azalmasina neden olabilir. Birçok kanser hastasi, hastaliklarinin hem ilerleyici hem de tedavi edilemez oldugu bilgisi ile yasar. Bu insanlarin önemli bir azinligi için bu gerçek, hastaligin ilerlemesinin sabit bir fiziksel hatirlaticisi olabilecek kötü kokulu, sizinti yapan, nekrotik bir Cilt Iezyonu seklinde olabilir (Mortimer PS. ln: Doyle et al. editors. Oxford Textbook of Palliative Medicine (2nd ed). Oxford: Oxford University Press, 1998, 617- 27; Englund F. RON Contact 1993; Winter: 2-3). Bu lezyonlar yaygin olarak proliferatif büyümenin kötü huylu bir sürecini belirtir (Grocott P. J Wound Care 1995; 4(5): 240-2).Çogunlukla proliferatif bir büyüme modeline sahip olan lezyonlar, nodüler bir "mantar" ya da "karnabahar" seklinde bir lezyona dönüsebilir, oysa ülserli olan bir lezyon krater benzeri bir görünüme sahip bir yara üretecektir (Grocott P. J Wound ayni zamanda, hem çogalan hem de ülserli alanlarin karisik bir görünümü ile de ortaya çikabilir (Young T. Community Nurse 1997; 3(9): 41-4). Malign bir yara, asagidaki yollardan biri ile gelisebilir: o Yapiskan hücreli karsinom ya da melanom gibi primer cilt tümörü sonucu. . Cildin yapilarinin altta yatan bir tümör, örnek olarak meme kanseri ya da deri alti T hücreli lenfom (mikoz fungoidleri gibi hematolojik maliniteler) tarafindan dogrudan istila edilmesi. o Uzak bir tümörün metastatik yayilimindan. Metastaz, doku düzlemleri, kilcal damarlar ya da lenf damarlari boyunca olusabilir. Malign yaralarin yerleri, kokulari, asiri sizintilari ve kanama egilimleri ile ilgili olarak basa çikmalari genellikle zordur. Her malign yara, görünümü ve semptomlari göstermesi bakimindan benzersiz olabilir. Malign yaralar ile iliskili ortak semptomlar arasinda kötü koku, asiri eksüdalar, enfeksiyon, kanama, maserasyon ve yara çevresi derisinin deri siyirmasi, prurit, agri, kötü estetik ve sargilarin kozmetik etkileri bulunur. Hali hazirda, bakima yaklasim, esas olarak bütünsel ve temel olarak yara bölgesindeki semptomlari kontrol altina almak ve yaranin birincil olarak bakteriyel/ mikrobik enfeksiyonun (enfeksiyonlarin) tespit edilmesi ve iyilesme belirtilerinin izlenmesi ile hastanin günlük yasami üzerindeki etkisini azaltmak amaci ile palyatiftir. Patoloji kontrol edilmedikçe, bu yaralarin iyilesmesi beklenmez. Açiklanan cihaz, bu tür yaralarin klinik degerlendirmesini (örnek olarak fiziksel ve biyolojik inceleme) yapmak için yararli olabilir. Cihaz, alt çizgide ve tedavi boyunca düzenli araliklarda eksiksiz görüntü bazli yara degerlendirmesi için bir araç (yani, uzunlamasina izleme), konum, yaranin boyutu, renk, tip ve herhangi bir bosaltim ya da drenaj miktarini içeren yara degerlendirmesi, kronik malign yaralarin seri beyaz isik (örnek olarak, renk degisimleri için) ve floresan (örnek olarak, doku yapisi, hücresel, biyolojik ve moleküler degisimler için) görüntüleri saglayabilir, ve tedavi planlamasini ve etkinligi etkileyebilecek olan enfeksiyonun herhangi bir isaretinin ya da semptomlarinin degerlendirmesini gerçek zamanli olarak saglayabilir. Cihaz, bu tür malign yaralarin degerlendirilmesi ve bakimi için mevcut klinik uygulamaya entegre edilebilir. Dissal Floresan Kontrast Maddelerinin Görüntülenmesi Biyolojik sistemleri sistem düzeyinde problama kabiliyetine sahip yüksek verimli analitik metotlarin gelistirilmesi, ortaya çikan sistem biyolojisi alaninin gereksinimlerini karsilamak için gerekli olan önemli bir görevdir. Optik moleküler görüntüleme, spesifik biyolojik moleküllerin zamansal ve mekansal dinamiklerini ve etkilesimlerini in vivo gerçek zamanli olarak incelemek için çok güçlü bir araçtir. Görüntülemeyi daha parlak, daha kararli ve biyolojik olarak daha bilgilendirici kilan (örnek olarak, FP'ler ve yari iletken nanokristaller, ayni zamanda kuantum noktalari olarak da adlandirilir) moleküler problarin gelistirilmesi daha yüksek çözünürlük ve daha fazla doku penetrasyonu ve molekülden organizma seviyesine kadar biyolojik olaylari ölçmek için uygulamalar saglayan görüntüleme yaklasimlarini gelismesi gibi bazi ilerlemeler son zamanlarda ortaya çikmistir. Bu ilerlemeler ayni zamanda hastalik teshisine (örnek olarak yara bakimi) ve farmasötik taramaya da uygulanabilir. Bununla birlikte, mevcut floresan görüntüleme cihazlari büyük, karmasiktir ve pahali optik bilesenleri ve bu sistemleri çok pahali yapan çok hassas kamera detektörlerini içerir. Burada gelistirilen cihaz, klinik öncesi ya da arastirma çalismalari için bu sinirlandirici sistemlere ve bu tür metotlarin olasi klinik tercümelerine alternatif sunar. Simdi Sekil 13'e atifta bulunulmaktadir. Cihaz ayni zamanda, cilt yüzeyi boyunca BPD isiga karsi duyarlilastiricidan floresan derecesini belirlemek için floresan altinda genel gözlem için hayvanin görüntülenmesi için kullanilmistir. Sekil 13, cihazin in vivo (örnek olarak, kuantum noktalari, QDotrlar) gerçek zamanli görüntüleme ve dissal floresan kontrast maddelerinin hassas tespiti için kullanimini göstermektedir. a)'da, cihaz, arka bacaktaki kemige metastazlanmis insan gögüs tümör hücrelerini tasiyan kurban edilmis bir siçanda dissal floresan kontrast maddelerini görüntülemek için kullanilmistir. Siçan daha önce iliskisiz bir foto dinamik tedavi deneyi için benzo- porfirin türevi (BPD) olarak adlandirilan bir floresan isiga karsi duyarlilastirici ile enjekte edilmistir. Siçana, her biri 540 (+/-) nm ve 600 (+/-) nm'de floresan yayan iki floresan yari iletken nanopartikül solüsyonlari (burada Qdot'lar) sol arka bacagindan subkütanöz yoldan verilmistir. Enjeksiyonlar yaklasik 1 cm aralikta olmustur. Cihaz daha sonra mor/ mavi uyarma isigi kullanarak siçan vücudunun tamamini görüntülemek için kullanilmistir. Siçan derisi kirmizi renkte görülmüstür, ve muhtemelen bu, siçanin tutuldugu kafesten gelen toz ve gida kontaminasyonunun yani sira, PDT sonrasinda olan, siçana deney öncesinde verilen benzo-profirin türevi (BPD) isiga karsi duyarlilastiricidan gelen floresanin kombinasyonu nedeni ile olmustur. Yine Sekil 13'e atfen, b)'de, yesil ve kirmizi QDot'Iardan (küçük resim) floresan, enjeksiyon bölgesinde cildin altinda kolayca tespit edilmistir, burada kirmizi QDot'Iar, kirmizi isigin daha fazla daha büyük deri penetrasyonu nedeni ile daha parlak sinyal yaymaktadir, c), b)'deki arka bacagin bir büyütülmüs görüntüsünü göstermektedir. Cihaz, klinik öncesi ve çok sayidaki moleküler olarak hedeflenmis olan floresan kontrast maddelerinin in vivo beklenilen klinik floresan görüntülemesinde kullanimina imkan verecek sekilde, çoklu floresan kontrast maddesini yeterli miktarda sinyalden gürültüye (yesil ve kirmizi oklar) sahip olan arka plan doku oto floresan ile birlikte ayni anda tespit etme yetenegine sahiptir. Yesil floresanin kirmizidan daha zayif olduguna dikkat edilmelidir çünkü hem mor mavi uyarma isigi hem de takip eden yesil QDot floresani tercihen kan tarafindan absorbe edilir ve kirmizi QDot floresan isigi doku boyunca daha fazla penetrasyon derinligine sahiptir. d)'de, cihaz ayni zamanda, cilt yüzeyi boyunca BPD isiga karsi duyarlilastiricidan floresan derecesini belirlemek için floresan altinda genel gözlem için hayvanin görüntülenmesi için kullanilmistir. Cihaz ayni zamanda, derinin altindaki yüzey kan damarlarini tespit etmek sureti ile, igneler kullanarak intravenöz enjeksiyonlari yönlendirmek için de faydali olabilir. Böylece cihaz, floresan proteinleri ile transfekte edilen ve bir ksenograft ya da ortotopik modelde subkütanöz olarak büyütülenler gibi floresan tümörlerini saptamak için kullanilabilir. Bu nedenle, cihaz, çok katli dissal floresan moleküler hedefleme maddeleri (örnek olarak in situ görüntü tabanli bakteriyoloji için) kullanarak çoklu yara iyilesmesini ve/ veya bulasici biyolojik isaretleyicileri görsellestirmek için kullanilabilir. Floresan kontrast maddelerinin klinik öncesi arastirmada ve nihayetinde optik moleküler görüntüleme teknolojilerinin klinik çevirisi için kullanimini gelistirmek için, çesitli floresan maddeleri nispeten hizli bir sekilde ayirt edebilmek ve tanimlayabilmek arzu edilir. e) ve f)'de, cihaz ayni zamanda, hangi floresan kontrast maddesinin enjeksiyon önce siringalarin içinde oldugunu, hangisinin standart beyaz isik altinda mümkün olmadigini göreceli olarak hizli bir sekilde belirlemek, cihazin kullaniminin, floresan bilesiklerin yaygin bir sekilde kullanildigi, hatta muhtemelen yeni ortaya çikan yara bakimi teknolojilerinde bile, floresan görüntü kilavuzlu cerrahi ve/ veya PDT islemleri sirasinda hizli bir sekilde faydali bilgi saglamak için, bir uygun maliyetli floresan görüntü kilavuzlu teknoloji oldugunu göstermek için bir araç olarak kullanilabilir. Floresan görüntü Kilavuzlu Cerrahi Ortaya çikan bir alan, teshis taramasi ve görüntü kilavuzlugunda cerrahi için floresan görüntüleme kullanimidir. Beyaz isik kullanarak standart cerrahi sinirlamalarinin üstesinden gelme, floresana (örnek olarak, ya oto floresan ya da dissal hedefli/ hedefsiz kontrast maddelerinden gelen floresan) dayanan tümörlerin in vivo cerrahi rezeksiyonunda yardim etmenin yani sira tümör çikarmanin tam olup olmadiginin (örnek olarak, temiz sinirlar) kontrol edilmesi için de kullanilabilir. Floresan görüntü kilavuzlugunda yapilan cerrahi, klinik ve klinik olarak sagkalimda iyilesmeler siçan üzerinde yapilan kesif ameliyati sirasinda, cihaz cerrahi alanin standart beyaz isik görüntülemesini saglayabilir. Simdi Sekil 14'e atifta bulunulmaktadir. Küçük hayvanlarda floresan görüntü kilavuzlu cerrahi için cihazin faydasini göstermek için çesitli testler yapilmistir. Görüntüleme cihazi kullanilarak ötenazi bir disi siçan üzerinde kesif ameliyati yapilmistir. Sekil 14, görüntüleme kontrast maddeleri kullanilarak floresan görüntü kilavuzlu cerrahi için cihazin kullanimina ait örnekleri gösterir. Kesif ameliyati sirasinda, cihaz, cerrahi alanin, burada bir disi siçanin abdomeni (a), standart beyaz isik görüntülemesini saglamistir. Cerrah, beyaz isik ve floresan modu arasinda kolayca ve hizla geçis yaparak, prosedürü yönlendirmek için cihazin görüntüleme ekranini kullanmistir. b)'de, mor/ mavi uyarma isigi kullanilarak, cihaz, beyaz isik görüntüleme sirasinda mümkün olmayan, farkli dokular arasinda ilave kontrast saglamistir. Ornek olarak, bag dokular parlak yesil floresan (yesil ok) olarak ortaya çikarken, cilt yüzeyi (kirmizi floresan isiga karsi duyarlilastirici BPD ile) kirmizi olarak ortaya çikmistir (kirmizi ok), ve arka bacaga daha önce enjekte edilmis olan QDot'lar bir parlak kirmizi (mavi ok) olarak ortaya çikmistir. Cerrahi islem sirasinda, cerrahi aletlerin ve ekipmanin (örnek olarak, gazli bez, bant, battaniyeler, ve benzeri) kontaminasyonunu tespit etmek için floresan görüntüleme kullanilmistir. c)'de, cihaz, ayni zamanda islem sirasinda lekelenmis/ kontamine edilmis cerrahi gazli bezi tespit etmek sureti ile fayda saglamistir. Tüm gazli bezlerin temiz göründügü standart beyaz isik ile karsilastirildiginda, cildi temizlemek ve ameliyat sirasinda cerrahi alani temizlemek için kullanilan gazli bez, temiz gazli bez (sag) ile kiyaslandiginda, kirmizi floresan Cihaz ayni zamanda, bir hayvan modelinde dissal floresan kontrast maddelerinin (örnek olarak, etiketli hücre takibi ve fate in vivo deneyler için, rejeneratif tipta doku mühendisligi çalismalari ve benzeri için) gerçek zamanli tespiti için kullanilmistir. Bunun için, ameliyat sirasinda cihaz, kalp kasi ve farenin akcigerleri içine enjekte edilen kirmizi floresan QDot'larinin varligini görüntülemek için floresan modunda kullanilmistir. Mor/ mavi uyarma isigi altinda, kirmizi QDot'lar, kalp (e) ve bu organlardaki yüksek kan konsantrasyonu nedeni ile koyu görünen akcigerler (f) içerisinde kolayca tespit edilebilir ve bu, biyopsilerin ve mikro cerrahi prosedülerin, özellikle kanserlerin tespit edilmesini ve çikarilmasini hedefleyenler (örnek olarak, oto floresan ya da floresan kontrast arttirma kullanarak), kilavuzlanmasi ve hedeflenmesi için cihazin yararliligini gösterir. Kolonda sindirilmis gida malzemesinden cihaz tarafindan tespit edilen parlak kirmizi oto floresana dikkat edilmelidir. g)`de, Cihaz, küçük hayvan görüntüleme arastirmalarinda yaygin olarak kullanilan floresan tümör fantomlarini görüntülemede faydasini göstermistir. Floresan boya ile katkili kati küresel polimer tümör fantomlari, çesitli boyutlarda hazirlanmistir ve cihazin küçük hayvan kanseri modellerinde hizli 'yüksek kontrastli' floresan görüntülemesi saglama kabiliyetini göstermek için cerrahi alana yerlestirilmistir. Bu sonuçlar, cihazin, biyopsileri ya da mikro cerrahi prosedürleri, özellikle kanserlerin tespit edilmesini ve çikarilmasini hedefleyen (örnek olarak, oto floresan ya da floresan kontrast arttirma kullanarak) hedefleyen floresan rehberligi ile mm alti büyüklükteki Iezyonlarin tespitinde faydali olabilecegini göstermektedir. Cihaz, ayni zamanda, küçük hayvan görüntüleme arastirmalarinda yaygin olarak kullanilan floresan tümör fantomlarini görüntülemede faydaya sahip olabilir. Sekil 15, Sekil 9'daki siçanin yüksek çözünürlüklü floresan görüntü kilavuzlu ameliyatinin video kaydi için kullanilan cihazin örneklerini göstermektedir. Cihaz, standart beyaz isik (WL) (a) ve floresan (FL) (b) ile çekilen ve kolayca degistirilebilen hem hareketsiz dijital görüntüleri hem de videolari saglayabiliyor olabilir. Burada, cihaz, cerrahi bir prosedürün dijital videolarini, hem beyaz isik hem de floresan görüntüleme kullanarak bir siçan üzerinde yakalamak için kullanilmistir. Cerrah, beyaz isigin yeterli bilgi saglamadigi durumda, floresani kullanarak tüm cerrahi prosedürü yönlendirmek için cihazin dijital ekranini kullanmistir. c) ila e) arasindakilerde, örnek olarak mor/ mavi isik uyarimi altinda, floresan görüntüleme, cerraha farkli dokular arasinda belirgin görüntü kontrasti saglamistir. Kan damarlari floresan altinda açikça görülebilir ve bag dokulari gastrointestinal sistemden ayirt edilebilir. Ayni zamanda, sindirilmis gida maddesi de ayirt edilebilir. Cihaz, görüntü kilavuzlu cerrahi müdahale ya da biyopsi için cerrahin islem sirasinda kritik kararlar vermesine izin veren gerçek zamanli bir görüntüleme çözümü saglayabilir. Cerrahi islemin dijital hareketsiz görüntüsünün ya da videosunun yakalanmasi, hasta saglik kayitlari için prosedürün geriye dönük analizine ve tibbi personelin gelecekteki yetenek egitimlerine imkan saglar. Cihaz ayrica cerrahi islem sirasinda ses kaydi yapabilir, böylece her islem için tam bir kayit toplanabilir. Cihazin kullanimi, ayni zamanda hayvanlarda ve potansiyel olarak insan prosedürlerinde görüntü kilavuzlu asgari düzeyde invazif mikro cerrahi için oldukça faydali bir araç olarak gösterilmistir. Sekil 16, bir fare kardiyak enfarktüs modelinde dokularin otomatik floresan görüntü kilavuzlu cerrahi rezeksiyonlari için kullanilan cihazin örneklerini göstermektedir (a). Kesif ameliyati sirasinda, cihaz, açik cerrahi alanin, burada bir farenin abdomeni, standart beyaz isik (WL) görüntülemesini saglamistir (b). Cerrah, beyaz isik ve floresan modu arasinda kolayca ve hizla geçis yaparak, prosedürü yönlendirmek için cihazin görüntüleme ekranini kullanmistir. Mor/ mavi uyarma isigi kullanilarak, cihaz, beyaz isik görüntüleme sirasinda mümkün olmayan, farkli dokular arasinda yüksek kontrast saglamistir (c). Ornek olarak, çesitli iç organlar, yüksek çözünürlüklü oto floresan görüntüleme kullanilarak görsellestirilmistir. d)'de, intakt hayvan, cerrahi islem öncesi ve sirasinda floresan ile görüntülenebilir (e). Sekil 17, bir fare beyninin invazif olmayan gerçek zamanli oto floresan görüntü kilavuzlu ameliyati için kullanilan cihazin örneklerini göstermektedir. Kesif ameliyati sirasinda, cihaz, açik cerrahi alanin (a), burada farenin kafatasi, standart beyaz isik (WL) görüntülemesini saglamistir. Cerrah, cerrahi prosedürü yönlendirmek için cihazin görüntüleme ekranini kullanmistir, WL ve floresan (FL) modu arasinda kolayca ve hizli bir sekilde geçis yapmistir, b), doku oto floresani altinda görüntüleme cihazi tarafindan saglanan cerrahi alanin (burada, intakt kafatasi) görüntüsünü gösterir. Cerrahi alanin, esas olarak mor/ mavi uyarma isiginin absorpsiyonundan ve sonuçta kanin neden oldugu oto floresan nedeni ile koyu olduguna dikkat edilmelidir. Hayvan burnu ve gözler, tüydeki parlak yesil floresan ile karsilastirildiginda parlak kirmizi floresan görünür. c), kafatasi kapagi WL altinda çikarilmis olan cerrahi alani gösterirken, d), mor/ mavi uyarma isigi olan görüntüleme cihazini kullanarak beyin yüzeyinin oto floresan görüntüsünü gösterir. Dogrudan bir beynin sag yarim küresine dissal kontrast madde (burada, kirmizi floresan kuantum noktalari) enjeksiyonu, parlak kirmizi bir floresan (oklar) üretir (e). Bu, özellikle yüksek çözünürlüklü floresan görüntü kilavuzlu cerrahi islem için, floresan kontrast maddelerinin görüntülenmesi için cihazin faydasini göstermektedir. Klinik Bakimda Kullanim Mevcut yara metodu uygulamasi, hastalarda yaralarin hastalik ve ölüm oranini azaltmayi amaçlasa da, bir sinirlama, saglik hizmetleri kaynaklarinin mevcudiyetidir. Teletip teknolojisini yara bakimi gereksinimlerine dahil etme potansiyeli hali hazirda arastirilmaktadir. Yara bakimi, uzun süreli özel bakim gerektiren kronik ve zayiflatici kosullarin bakiminin bir temsilidir. Gelisen yasam kosullarinin ve dünyadaki saglik hizmetlerinde kaydedilen ilerlemelerin ana etkisi, insanlarin daha uzun yasamalarina neden olmustur. Bu nedenle, dünyadaki yaslilarin ve tibbi müdahale gerektiren kronik tibbi kosullari olanlarin yüzdesi artmaktadir. Saglik hizmetlerinin artan maliyetleri ve endüstrinin ayakta tedavi hizmetine dogru itilmesi ile bu, acil bakim gerektiren saglik hizmetleri krizinin bir parçasidir. Mevcut cihaz, yaralar hakkinda biyolojik olarak ilgili bilgiler saglayabilir ve mobil yara bakim teknolojisi için bir çözüm saglamak üzere ortaya çikan teletip (örnek olarak, E- saglik) altyapisindan yararlanabilir ve yara sagligi bakimi tedavisini büyük ölçüde etkileyebilir. Yara bakimi, hemsireler ve saglik çalisanlari tarafindan yapilan ev ziyaretlerinin büyük bir kismini olusturmaktadir. En iyi uygulamalara ragmen, bazi yaralar beklendigi gibi iyilesmez ve bir klinik uzmaninin hizmetlerini gerektirir. Burada açiklanan cihaz, müsterilerin seyahat süresini azaltan, klinik yara uzmanlarina ulasilabilirligi artiran ve saglik hizmeti maliyetlerini azaltabilen, hastanin ev ya da kronik bakim tesisinin rahatligindan kaynaklanan yaralari tedavi etmeye yardimci olmak için özel klinik kaynaklara erisim saglayabilir. Görüntüleme cihazinin farkli kullanimlari yara degerlendirmesi, izlenmesi ve bakim yönetimi için açiklanmistir. Cihaz, yara iyilesme sürecinde bag dokularindaki (örnek olarak, kollajen, elastin) ve kan/ vasküler beslenmedeki degisiklikleri tespit etmek ve izlemek, yaralardaki doku nekrozu ve eksüdasinin floresana dayali olarak izlenmesi, bakterilerin ya da mikro organizmalarin yaralar içindeki yüzeyde ve derinlerdeki varliginin (örnek olarak, kontaminasyonu, kolonizasyonu, kritik kolonizasyonu ve enfeksiyonu tespit etmek için) kritik 'klinik olarak önemli' kategorilerini potansiyel olarak gösterenler dahil olmak üzere yara enfeksiyonlarini tespit etmek ve teshis etmek [Kingsley, Ostomy Wound Manage.2003 Jul; 49(7A Suppl):1-7], yaranin topografik bilgilerini saglamak ve yara sinirlarinin ve normal dokularin çevrelerini tanimlamak için kullanilabilir. Doku floresani ve yansima görüntüleme verileri, yaranin beyaz isik görüntülerine 'eslenebilir', bu sayede, bugüne kadar mümkün olmayan, yara içinde ve normal doku çevresinde önemli yara biyokimyasal ve foto biyolojik (örnek olarak, floresan) bilgilerin görsellestirilmesine izin verebilir. Yaralarin gerçek zamanli görüntülenmesi, yara iyilesmesindeki degisikliklerin izlenmesi, ve potansiyel olarak tedavinin etkinliginin doku/ hücresel seviyede olan (örnek olarak, matris yeniden modellemesi, inflamasyon, enfeksiyon ve nekroz) altta yan biyolojik degisiklikler hakkinda faydali bilgi saglanmasi sureti ile izlenmesi için zaman içinde gerçeklestirilebilir. Bu, hastalarda tespit, tani ve tedavi izlemesi için nicel ve objektif yara bilgileri saglayabilir. Ozel olarak, cihaz, terapinin etkinligini biyolojik seviyede (örnek olarak bakteriyel bir seviyede) izlemek ve/ veya takip etmek için kullanilabilir; bu, beyaz isik kullanarak yalnizca makroskobik/ morfolojik görünümü izlemekten Cihaz, gerçek zamanli olarak invazif olmayan görüntü kilavuzlu biyopsi hedeflemesi, klinik prosedür kilavuzlugu, doku karakterizasyonu saglayabilir ve geleneksel ve yeni yaklasimlar kullanarak (örnek olarak PDT) görüntü kilavuzlu tedaviyi saglayabilir. Ek olarak, görüntüleme cihazinin kullanimi, Sibbald et al. tarafindan önerilmis olan NERDS ve STONES rehberler gibi mevcut olan ve yeni gelistirilen kliniksel yara bakimi degerlendirme ve tedavi rehberleri ile birlikte floresan (doku oto floresan ve/ veya dissal moleküler biyolojik isaretleyici hedefli floresan kontrast maddesi eklenmesi) kullanilmasi sureti ile elde edilmis kritik biyolojik ve moleküler yara bilgisini iliskilendirmek için kullanilabilir.(Sibbald et al. Increased Bacterial Burden and yara seviyelerinde bakteriyel dengeyi ve yükü mekansal ve spektral olarak karakterize etmek için kullanilabilir. Cihaz, gerçek zamanli olarak invazif olmayan görüntü kilavuzlu biyopsi hedeflemesi, klinik prosedür kilavuzlugu, doku karakterizasyonu saglayabilir ve geleneksel ve yeni yaklasimlar kullanarak (örnek olarak, foto dinamik tedavi, PDT) görüntü kilavuzlu tedaviyi saglayabilir. Cihaz klinik ortamda kullanilabilir ve konvansiyonel klinik yara bakimi rejimlerine entegre edilebilir ve bulasici hastalik alanlarinda belirgin bir rol oynayabilir. Bu cihazin ayni zamanda geleneksel veteriner bakimi yolu ile hayvanlarda ve evcil hayvanlarda kronik ve akut yaralarin gerçek zamanli analizi, izlenmesi ve bakimi için de kullanilabilecegine dikkat edilmelidir. Bu cihaz büyük bir hasta kohort tabani için gerçek zamanli yara iyilesme degerlendirmesine izin verebilir. Ozellikle, yasli insanlar, seker hastalari, immüno bastirilmis ve hareketsiz hale getirilmis bireyler, zayif dolasim ve hareketsizlikten kaynaklanan kronik yaralar ve diger dermal etkilenme, örnek olarak yatak yaralari, venöz staz ülserleri, ve diyabetik ülserler gibi basinç ülserleri, oranlarinda artisa sahiptir. Bu kronik durumlar bakim maliyetini büyük ölçüde arttirir ve hastanin yasam kalitesini azaltir. Bu gruplar sayica arttikça, gelismis yara bakim ürünlerine duyulan ihtiyaç artacaktir. Bu cihaz, hastaneler, ayakta tedavi klinikleri, kronik bakim tesisleri, ev ziyareti saglik bakimi, acil servis odalari ve saglik tesislerindeki diger kritik alanlar dahil olmak üzere bir dizi ortamda kronik ve akut yaralari izlemek için uygun maliyetli bir araç; saglayarak hasta bakimini etkileyebilir. Ayrica, böyle bir 'elde tutulan' ve tasinabilir görüntüleme cihazi, bakim ve ambulans personeli tarafindan kolaylikla tasinabilir ve kullanilabilir. Hali hazirda zor bir sey olan, bag dokusu üretimi ve yaranin yeniden modellenmesi ile ilgili olan skarlanmanin ve bakteriyel enfeksiyonlarin erken teshisi, tespit edilebilir ve tedavi edilebilir. Ek olarak, çoklu pansuman türleri (örnek olarak, film, hidrokolloid, köpük, anti mikrobiyal, aljinat, yapiskan olmayan, emprenye edilmis), hidrojeller, yara temizleyiciler ve karar verici maddeler, doku mühendisligi ürünleri (örnek olarak, sentetik polimer bazli biyolojik doku ve büyüme faktörleri gibi deri degistirmeleri, ikame maddeleri ve doku yapimi ürünler), yara temizleyicileri, farmakolojik ürünleri ve fiziksel tedaviler, bu tür tedavilerin etkinliginin görüntü tabanli uzunlamasina izlemeye izin verebilecegi için burada gelistirilen cihazdan da faydalanabilir. Fiziksel tedaviler arasinda hidroterapi, elektrik stimülasyonu, elektromanyetik stimülasyon cihazlari, ultraviyole tedavisi, hiperbarik oksijen terapisi, ultrason cihazlari, lazer/ isik yayan diyot (LED) cihazlari ve yara görüntüleme/ dokümantasyon bulunabilir. Yara dokusu analizi, cilt yaralarinin iyilesmesinin degerlendirilmesi için tipik olarak gereklidir. Granülasyon dokusu, yaradaki fibrin ve nekrozun yüzdesi ve tedavi sirasindaki degisimleri, yara tedavisine rehberlik edebilecek faydali bilgiler saglayabilir. Görüntü analizi, yaranin ve çevresindeki normal dokunun optik bilgilerine dayanarak cihaz ile toplanan floresan yara görüntülerinde ayri pikselleri tanimlamak için gelismis istatistiksel model tanima ve siniflandirma algoritmalarini içerebilir. Bu nedenle, görüntü analizi, yara görüntülerinin, toplam yara alani, epitelizasyon, granülasyon, kangren, nekrotik, hiper granülasyon, enfekte olmus, zedelenen ve çevreleyen doku sinirlari dahil olmak üzere, yaranin çesitli bilesenlerine eslenmesini saglayabilir. Bu, yara iyilesme oranlarinin nispeten hizli bir sekilde belirlenmesini saglamanin yani sira, kilavuz hasta yönetimi kararlarini bilgilendirmenin de bir avantajina sahiptir. Sekil 25, görüntüleme cihazi için öngörülen yönetim is akisini klinik yara bakimi ortaminda göstermektedir. Cihaz, rutin yara degerlendirmesi, teshis, tedavi ve yanitin boyuna izlenmesi ile kolayca entegre edilebilir ve uyarlanabilir müdahaleler sirasinda hizli karar verebilmek için yaranin gerçek biyolojik ve moleküler bilgilerini gerçek zamanli olarak saglayabilir. Bu cihaz, geleneksel klinik ortamdaki hasta yara yönetimi için uzunlamasina görüntü kataloglamasi için mevcut saglik bakim bilgisayar altyapilarina (örnek olarak, artan sayida doktor ya da diger saglik uzmanlari tarafindan kullanilan masaüstü ve cep bilgisayarlari) kolayca entegre edilebilir. Cihazin kablosuz veri alma ve aktarma yetenekleri, mevcut ve gelecekteki kablosuz teletip altyapisi ile yara bakiminin ve iyilesmenin uzaktan izlenmesini saglayabilir. Cihaz, savas alani yara yönetimi için ilave bir fayda ile birlikte askeri tibbi uygulamalar için, internet üzerinden ya da hücresel telefon, PDA ya da Akilli telefon servisleri gibi kablosuz servisler araciligi ile temel tibbi verileri (örnek olarak, yara sagligi durumu), baska bir yardimci program ile birlikte uzak tibbi müdahalelere izin verebilecek uzak sitelere aktarmak için kullanilabilir. Cihaz, yara bölgelerinin gerçek zamanli yüzey görüntülemesini saglayabilir ve klinik ortamlarda bakim personeli tarafindan kolayca tasinabilir. Görüntü yakalama ya da kayit bileseni olarak, dijital kameralar, cep telefonlari, PDA'Iar, dizüstü bilgisayarlar, tablet PC'Ier, web kameralari ve Akilli telefonlar ve benzerleri gibi uygun maliyetli yüksek hassasiyete sahip ticari olarak piyasada bulunan dijital görüntüleme cihazlarini kullanarak, cihaz yara iyilesmesinin görüntü bazli dokümantasyonunu ve tedavi etkinliginin takip edilmesini saglayabilir. Ayni zamanda, bu teknoloji, ticari olarak piyasada bulunan hücresel telefonlara gömülü yüksek çözünürlüklü dijital kameralar ile kullanim için potansiyel olarak adapte edilerek uzaktan tibbi müdahalelere izin vermek için 'kablosuz' modda da çalismak üzere uyarlanabilir. Web tabanli teletip ve uzak tibbi izleme altyapisi kullanarak, görüntüleme cihazi görüntüler saglamanin yani sira, böyle bir sistem klinik uygulama kilavuzunun önerilerini karsilayan kapsamli bir klinik veri kümesi sunabilir. Hali hazirda açiklanan cihaz, mevcut klinik veri tabanlarini gelistirmek ve kanita dayali uygulama kilavuzlarinin uygulanmasini desteklemek için bir saglik kurulusu tarafindan kullanilacak olan bilgisayar tabanli bir yara degerlendirme sistemine (örnek olarak, görüntü analiz yazilimi ile) entegre olabilir. Bu tür bir entegre teletip altyapisi, evde ya da uzun süreli bakim tesislerinde, uzman klinisyenler tarafindan rutin izlemeden yararlanabilecek, ancak hali hazirda bu bakima erisimi olmayan hastalari izlemek için kullanilabilir. Bu cihaz, gelismis ve gelismekte olan dünyadaki bulasici hastaliklarin tespit edilmesinde, izlenmesinde, tedavisinde ve önlenmesinde büyük bir ilerlemeyi temsil edebilen tasinabilir bir elle tasinir bakim noktasi tani sistemi olarak gelistirilebilir. Bu bilgi, nicel kültürlerin erisilemedigi ortamlarda kronik yaralari tedavi eden uygulayicilar için mevcut olan tani araçlarini önemli ölçüde gelistirebilir. Cihaz, optik ve dijital yakinlastirma özelliklerine sahip dijital görüntülemeye izin verebilir (örnek olarak, yaygin olarak bulunan dijital görüntüleme aygitlarina gömülü olanlar gibi). Duragan ya da video görüntü kalitesi, doku yüzeyinin yüksek mekansal çözünürlügünde görüntülenmesini saglamak için 'yüksek çözünürlüklü' formatta olabilir. Görüntüler sabit dondurulmus kare ve/ veya video/ film formatinda kaydedilebilir ve kisisel bir bilgisayar gerektiren (örnek olarak, USB ile bagli) ya da gerektirmeyen (örnek olarak, PictBridge) standart görüntüleme baski protokolleri kullanilarak basilabilir. Görüntüler] video verileri, veri arsivleme ve/ veya görüntü izleme ve/ veya analiz/ isleme için kisisel bir bilgisayara aktarilabilir. Cihaz ayni zamanda, kablolu ya da kablosuz özellikleri kullanarak (örnek olarak, Bluetooth) bir yaziciya ya da kisisel bir bilgisayara veri aktarabilir. Elde tutulan cihaz ekraninda ve/ veya standart çikisli video kablolari kullanarak bir video ekraninda/ monitörde (örnek olarak, basa takilan ekranlar ve gözlükler) ayni anda izlemeye ek olarak görüntüleme yapilabilir. Bu cihaz, zaman içinde mesafelerin nicel ölçümlerine izin vermek için (örnek olarak, doku morfolojisi/ topografyasindaki degisikliklerin izlenmesi gibi), optik dalga boyu ve floresan/ yansima yogunlugu bilgisini görüntülenen sahnenin mekansal boyutlari ile birlikte gösterebilir. Cihaz ayni zamanda, örnek olarak görüntüleme analizi özelliklerine ve/ veya teshis algoritmalarina sahip özel bir yazilim kullanarak dijital görüntü/ video depolama/ görüntülerin ve ilgili hasta tibbi verilerinin kataloglanmasina izin verebilir. Görüntü analizi Görüntü analizi, yara ve çevresindeki normal dokulardaki dissal optik moleküler hedefleme problarinin floresan yogunluklarini ve çoklu floresan spektrumlarindaki (örnek olarak, çoklu görüntüleme) nicel olarak ölçmek için cihaz ile birlikte kullanilabilir. Floresan problarin biyolojik dagilimlari, toplanan floresan görüntülerine dayanarak belirlenebilir ve bunlar, degisim için bireysel klinik yara görüntüleme oturumlari arasinda zaman içinde izlenebilir. Varligin ve nicel olarak çokluktaki göreceli degisimin belirlenmesi sureti ile, klinik operatör, belirli bir yaranin zaman içinde saglik durumunu ve/ veya iyilesme durumunu ve tedaviye yanitini gerçek zamanli neredeyse gerçek zamanli olarak, örnek olarak, içinde spesifik doku, hücresel ve moleküler sinyallerinin yaranin saglik, iyilesme ve yanit durumu ile iliski halinde gösterildigi bir aramali tabloyu kullanmak sureti ile belirleyebilir, bunun bir Örnegi Sekil 21'de gösterilmektedir (Bauer et al., Vase&Endovasc Surg 2005, 39:4'dan uyarlanmistir). Bu, klinisyenin mevcut teknolojilerde baska türlü mümkün olmayan biyolojik ve moleküler bilgilere dayanarak bir yaranin iyilesip iyilesmedigini belirlemesine izin verebilir. Ayrica, bakteri/ mikro organizmalarin varligi ve çoklugu ve tedaviye yanitlari, yara kültürlerinin geleneksel bakteriyolojik testleri ile yanit degerlendirmesinde gecikmeler yerine, tedaviyi gerçek zamanli olarak uyarlamak için bir araç sunabilir. Cihaz ile görüntüleme sirasinda görüs alani içine yerlestirilmis portatif bir floresan standardi kullanarak yaranin ilk ya da birinci görüntülerini kalibre etmek için görüntü analiz teknikleri kullanilabilir. Görüntü analizi ayni zamanda, oto floresan ile tanimlanan biyolojik isaretleyiciler ve dissal hedefli ya da hedefsiz floresan/ absorpsiyon kontrast maddelerin kullanimi ile tanimlananlar da dahil olmak üzere, yaranin ve çevreleyen normal dokunun farkli biyolojik (örnek olarak, doku, hücresel ve moleküler) bilesenlerinin ayirt edilmesi için bir monitör üzerinde sahte ya da sözde renk gösterimine izin verebilir. Bu tür biyolojik isaretleyicilerin örnekleri, Sekil 22'de listelenmistir (Brem ve arkadaslari, Brem et al. Journal of Clinical Investigation, 117z5, 2007'den uyarlanmistir) ve Sekil 23'te gösterilmektedir. Sekil 23'te, diyagram, diyabetik yaralara sahip insanlara karsi saglikli insanlarda yara iyilesme mekanizmalarini göstermektedir. Saglikli bireylerde (solda) akut yara iyilesme süreci, keratinositler, fibroblastlar, endotel hücreleri, makrofajlar ve trombositler tarafindan salinan çoklu moleküler sinyallerin (örnek olarak, sitokinler ve kemokinler seklinde) entegrasyonu yolu ile yönlendirilir ve saglanir. Yara ind'uklü hipoksi sirasinda, makrofajlar, fibroblastlar ve epitelyal hücreler tarafindan salinan vasküler endotel büyüme faktörü (VEGF), kemik iliginde ENOS'un fosforilasyonunu ve aktivasyonunu tetikleyerek, kemik iligi EPC'Ierinin bosaltima mobilizasyonunu tetikleyen NO seviyelerinde bir artisa neden olur. Ornek olarak, kemokin SDF-1a, bu EPC'lerin neo-vasculo genezisinde yer aldigi yaralanma bölgesine yönlendirilmesini tesvik eder. Bir murin diyabet modelinde (sagda), kemik iliginde eNOS fosforilasyonu bozulur ve bu, EPC'nin kemik iliginden dolasim içine dogrudan mobilizasyonunu sinirlar.SDF-1oi ekspresyonu, diyabetik yaradaki epitel hücrelerinde ve miyofibroblastlarda azalir, bu da EPC'nin yaralara yuvalanmasini önler ve bu nedenle yara iyilesmesini sinirlar. Yara dokusunda hiperoksi kurulmasinin (örnek olarak, HBO tedavisi yolu ile) birçok NOS izoformunu aktive ettigi, NO düzeylerini arttirdigi ve dolasima EPC mobilizasyonunu arttirdigi gösterilmistir. Bununla birlikte, bu hücrelerin yara bölgesine yuvalanmasini tetiklemek için lokal SDP-1d uygulamasina ihtiyaç duyulmustur. Bu sonuçlar, SDF-10i uygulamasi ile birlikte HBO terapisinin, tek basina ya da mevcut klinik protokoller ile kombinasyon halinde diyabetik yara iyilesmesini hizlandirmak için potansiyel bir terapötik seçenek olabilecegini düsündürmektedir. Onceden atanmis renk haritalari, ayni zamanda floresan etiketli ilaçlar/ farmakolojik maddelerin yani sira, bag dokular, kan, mikro vaskülarite, bakteri, mikro organizmalar vs. dahil olmak üzere yaranin ve çevresindeki normal dokularin biyolojik bilesenlerini ayni anda görüntülemek için kullanilabilir. Bu, yara bölgesinin sagliginin, iyilesmesinin ve enfeksiyöz durumunun gerçek zamanli olarak ya da gerçek zamanliya yakin (örnek olarak, 1 dakikadan daha az) görsellestirilmesine izin verebilir. Görüntü analizi algoritmalari, asagidaki özelliklerden bir ya da daha fazlasini saglayabilir: - Çesitli görüntü elde etme cihazlarinin entegrasyonu 0 Tüm dissal floresan kontrast maddeleri içeren tüm görüntüleme parametrelerini kaydeder . Çoklu ölçek ve kalibrasyon ayarlari 0 Doku/ bakteri oto floresani ve dissal madde floresan sinyallerinin nicel tespiti için dahili spektral görüntü karistirma ve hesaplama algoritmalari o Uygun ek açiklama araçlari . Dijital arsivleme 0 Web yayinlamasi Temel Görüntü Isleme ve Analizi o Komple görüntü isleme ve nicel analiz fonksiyonlari paketi Görüntü dikis algoritmalari, otomatik ya da manuel modda, bir yaranin panoramik ya da kismen üst üste binen görüntülerinin tek bir görüntü halinde dikilmesini saglar. 0 Kullanimi kolay ölçüm araçlari - Sezgisel islem parametreleri kurulumu o Uygun manuel editör Rapor olusturma 0 Mevcut klinik rapor altyapilarina ya da teletip/ e-saglik hasta tibbi veri altyapilarina entegre edilebilecek profesyonel sablonlara sahip güçlü görüntü rapor üreteci. Raporlar örnek olarak, PDF, Word, Excel'e aktarilabilir. Büyük Otomatik Çözümler Kütüphanesi 0 Nicel görüntü analizi de dahil olmak üzere çesitli yara degerlendirme alanlari için özellestirilmis otomatik çözümler. Her ne kadar görüntü analizi algoritmasi, teknikleri ya da yazilimi tanimlanmis olsa da, bu açiklama ayni zamanda bir hesaplama cihazina, bir sisteme ve bu görüntü analizini gerçeklestirmek için bir metoda da uzanmaktadir. Kök hücre tedavisi ve kanser izleme Cihaz, insanlarda ve/ veya hayvanlarda kanserlerin görüntülenmesi ve tespit edilmesi için kullanilabilir. Cihaz, hastalarda bu tür kanserler ve çevre normal dokular arasindaki floresan özelliklerinde dogal farkliliklar bazinda kanserleri tespit etmek için kullanilabilir. Bu cihaz ayni zamanda evcil hayvanlarda, örnek olarak veteriner ortamlarinda, görüntü bazli kanser teshisi için de kullanilabilir. Cihaz ayni zamanda, insan hastaliklarinin deneysel hayvan modellerinde (örnek olarak, yara ya da kanserler) kanserlerin çok spektrumlu görüntüleme ve izlenmesi için bir arastirma araci olarak da kullanilabilir. Cihaz, özellikle floresan (örnek olarak, görünür ve NlR dalga boyu araliklarinda) protein transfekte edilmis tümör hücre hatlari kullanilarak kanser modellerinde kanserlerin varligini tespit etmek ve/ veya görüntülemek ve tümör büyümesini izlemek için kullanilabilir. Görüntüleme cihazi, kronik yaralarin yenilenmesi ve iyilesmesini hizlandirmak için faydali olan hem mevcut hem de ortaya çikan hücre tedavileri ile birlikte kullanilabilir. Bunun için, flüoresan etiketli kök hücreler, cihaz ile görüntülemeden önce yara bölgesine uygulanabilir. Ozellesmis kök hücrelerin öncüleri olan Pluripotansiyel kök hücreler (PSC'Ier), hepsi iyilesme için kritik hücresel bilesenler olan fibroblastlar, endotelyal hücreler ve keratinositler dahil olmak üzere çesitli hücre tiplerine farklilasabilmektedir. Kontrolsüz bir klinik arastirmaya iliskin son bir rapor, otolog kemik iligi ve bunun kültürlenmis hücrelerinin dogrudan uygulanmasinin, iyilesmeyen kronik yaralarin iyilesmesini hizlandirabilecegini göstermektedir ((Badiavas et al. anormallikler göz önüne alindiginda, kök hücrelerin optimal iyilesme için gereken dermal, vasküler ve diger bilesenleri yeniden olusturma potansiyeli vardir. Cihaz zaman içinde yara bölgesinde etiketli kök hücreleri görsellestirmek ve izlemek ve zaman içinde biyolojik dagilimlarini ve terapötik etkilerini belirlemek için kullanilabilir. Dissal floresan moleküler hedefli maddelerin kullanilmasi, örnek olarak, yukarida tarif edildigi gibi, kök hücrelerin in vivo farklilasmasini dogrulayabilir ve ayni zamanda bu tedaviye yaranin tepkisinin belirlenmesinde yardimci olabilir. Ornek olarak, kanser tümör kök hücrelerini ve genel olarak kök hücrelerini tanimlamak, takip etmek ve/ veya izlemek için kullanilabilir (örnek olarak, kanserlerin klinik öncesi küçük hayvan deneysel modellerinde ve diger klinik modellerde) Sekillerde bir örnek gösterilmistir. Cihaz ayrica kök hücreleri kullanan hastaliklarin tedavisi de dahil olmak üzere klinik hücre tedavilerinin görüntülenmesi için faydali olabilir. Simdi Sekil 18'e atifta bulunulmaktadir. a)'da, beyaz isik kullanilarak bir fare modeli gösterilir. b)'de farenin bireysel organlari, floresan görüntüleme cihazi kullanilarak açikça görülür, c), cihaz ile görüntülenen farenin karacigerini gösterir ve floresan görülmez, d), farenin karacigerlerini beyaz isikta gösterir, e) cihaz ile görüntülenen farenin akcigerlerini gösterir, kanser tümörü kök hücreleri parlak floresan noktalari olarak açikça görülür. Simdi Sekil 19'a atifta bulunuldugunda, a)'da, Sekil 18'deki fare modelinin karacigeri, floresan görüntüleme altinda görünür degildir, b), d) ve f), beyaz isik altindaki fare akcigerlerinin farkli görünümlerini gösterir, 0), e) ve g), cihaz kullanilarak görüntülenen fare akcigerlerinin karsilik gelen görüntüsünü gösterir, kanser tümörü kök hücrelerini parlak floresan lekeleri olarak açikça gösterir. Sekil 19H, insan yumurtalik tümörü tasiyan çiplak farelerin tespiti için cihazin kullanimina bir örnek gösterir, a), Virüs ile tedavi edilmis ve tedavi edilmemis kontrol farelerinin beyaz isik görüntüsüdür, açik karin boslugunu gösterir, b), Karsilik gelen, tedavi edilmis ve kontrol farelerinin floresan görüntüsü, kontrol ile kiyaslandiginda, mezanter içindeki tümör nodülleri içindeki (yesil oklar) optik olarak isaretlenmis virüsten gelen turuncu kirmizi floresani gösterir, c), d) kontrol faresi ile kiyaslandiginda, milimetre alti tümör nodüllerini (mavi ok) tespit etme yeteneginin yani sira, tümör nodülleri içinde virüs optik probunun biyolojik dagilimini gösteren, mezanterin bir büyütülmüs görüntüsünü gösterir. Prob floresaninin, arka plan bagirsak dokusu oto floresanindan farkli olabilecegine dikkat edilmelidir. Bu veriler, floresan tümör numunelerinin görüntü kilavuzlu cerrahi (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)) yani sira, örnek olarak, bunlarla sinirli olmamak üzere, virüs tedavileri ve hücre tedavileri için tedavi yaniti görüntülemesi için cihazin potansiyel kullanimini göstermektedir. Sekil 19I, post operatif olarak ayri dissal yesil ve kirmizi tümör hücresi hedefli problarin bir floresan karisimi verilmis olan fare kolon tümörü tasiyan çiplak farelerin tespiti/ görsellestirilmesi için cihazin kullaniminin bir örnegini göstermektedir, a), açik karin boslugunun beyaz isik ve b), karsilik gelen çoklu spektral floresan görüntüsü olup, spektral ayirma yazilimi ile analiz edilebilir olan, hem yesil (yesil ok) hem de kirmizi (kirmizi ok) moleküler problarin es zamanli tespit edilmesini göstermektedir. Cihaz endoskopik görüntülemeye de izin verecek sekilde modifiye edilebilir. Bu örnekte, c), elde tutulan görüntüleme cihazina sert bir endoskopik sonda takilmistir ve d), beyaz isik ve e), floresan görüntüleri, a, b) görüntüsünde fareden cerrahi olarak rezeke edilen dokudan elde edilmistir. Bu veriler, insan ve veteriner hastalarinda in vivo tasinabilir endoskopik gerçek zamanli floresan görüntüleme için endoskopik prob aksesuarlari ile cihazin çesitli tespit, teshis ya da tedavi izleme uygulamalari (klinik ve arastirma bazli), için kullanilmasini önermektedir. f) Cihaz (örnek olarak, endoskopik özellikler ile), in vivo olarak kullanilabilecek (405 nm uyarma; 490 ila 550 nm arasinda ve 600 nm emisyon kanallari), çok sayida spektral olarak benzersiz "sonda"nin floresan görüntülemesini yapabilmektedir. Bu cihaz, insanlarda ve/ veya hayvanlarda kanserlerin çoklu spektral görüntülenmesi ve tespit edilmesi için kullanilabilir. Bu cihaz, ayni zamanda, hastalarda bu tür kanserler ve çevre normal dokular arasindaki floresan özelliklerinde dogal farkliliklar bazinda kanserleri tespit etmek için kullanilabilir. Bu cihaz ayni zamanda evcil hayvanlar ve çiftlik hayvanlari gibi hayvanlarda, örnek olarak veteriner ortamlarinda, görüntü bazli kanser teshisi için de kullanilabilir. Bu cihaz ayni zamanda, insan hastaliklarinin deneysel hayvan modellerinde (örnek olarak, yara ve kanserler) kanserlerin çok spektrumlu görüntüleme ve izlenmesi için bir arastirma araci olarak da uygundur. Cihaz, kanserlerin varligini belirlemek ve/ veya görüntülemek için kullanilabilir ve özellikle floresan (örnek olarak, görünür ve NIR dalga boyu araliklarinda) protein transfekte edilmis tümör hücre hatlari kullanilarak hayvanlarda kanser modellerinde tümör büyümesini izlemek için kullanilabilir. Görüntü Kilavuzlugu Cihaz ayni zamanda, örnek olarak, cerrahi prosedürlerde, boyalar ya da isaretleyiciler kullanilmadan bile floresan görüntü kilavuzlugu saglamak için faydali olabilir. Belirli dokular ve/ veya organlar, görüntüleme cihazi kullanilarak ya da belirli bazi uyarma isik kosullarinda örnek olarak incelendiginde, farkli flüoresan spektrumlarina (örnek olarak, endojen floresan) sahip olabilir. Sekil 20, cihazin floresan görüntüleme yardimli cerrahi islem için kullanisliligini göstermektedir. Cihazi kullanarak floresan görüntüleme yardimi ile, bir fare modelinin farkli organlari, beyaz isiktan daha belirgin bir sekilde ayirt edilebilir, b, c ve g, fare modelini beyaz isik altinda gösterir, 3, d ila f arasindakiler ve h ila j arasindakiler, fare modelini cihaz ile görüntülenmis sekilde gösterir. Sekil 208, küçük hayvan modellerinde görüntülemede floresan bazli izleme için cihazin kullaniminin bir örnegini göstermektedir. Burada, fare dorsal deri katlama pencere odasi, beyaz isik (a, 0) ve floresan (b, d) altinda görüntülenmektedir. Cihaz tarafindan elde edilen yüksek çözünürlüklü beyaz isik ve floresan görüntülerine dikkat edilmelidir. Ayaklar ve yüz, kafes yataklarindan ve gida tozu malzemelerinden endojen oto floresan nedeni ile parlak kirmizi floresan görünür (405 nm uyarma; 490 ila 550 nm arasi ve 600 nm emisyon kanallari). Biyomühendislik cilt Birçok biyomühendislik ürünü cilt ürünü ya da cilt esdegeri, akut ve kronik yaralarin yani sira yanik yaralarinin tedavisi için ticari olarak temin edilmistir. Bunlar, gelistirilmis ve insan yaralarinda test edilmistir. Deri esdegerleri, fibroblastlar ya da keratinositler gibi canli hücreler içerebilir ya da her ikisini de içerebilir, digerleri hücre içermeyen malzemelerden ya da canli hücre özütlerinden yapilirlar (Phillips.J neyin olusturdugu konusunda tartismalar vardir. Biyomühendislik cilt, 'akilli malzeme' olarak bilinen canli hücreleri saglayarak ise yarayabilir çünkü bunlar kendi ortamlarina uyum saglayabilmektedir. Bu canli yapilardan bazilarinin büyüme faktörlerini ve sitokinleri serbest birakabildigine dair kanitlar vardir (Falanga et al. J yamanma bütünlügünü ve ayni zamanda yaranin tedaviye biyolojik yanitini belirlemek için bu tür deri ikameleri ile birlikte kullanilabilir. Tam kalinliktaki cilt defektlerinin iyilesmesi dermal ve epidermal bilesenlerin kapsamli bir sekilde sentezlenmesini ve yeniden modellenmesini gerektirebilir. Fibroblastlar, bu süreçte önemli bir rol oynar ve en yeni nesil yapay dermal ikamelere dahil edilirler. Burada tarif edilen görüntüleme cihazi, cilt ikamesi içerisinde tohumlanmis fibroblastlarin fate'ini belirlemek için kullanilabilir ve tohumlanmis fibroblastlarin, hücre bölgesine göç ve dermal ikamenin yara bölgesine nakledilmesinden sonra bozunmasi üzerindeki etkisi belirlenebilir. Yaralar, otolog fibroblastlar ile tohumlanan dermal ikameler ya da hücre içermeyen ikameler ile tedavi edilebilir. Bir floresan hücre isaretleyici ile etiketlenmis tohumlanmis fibroblastlar daha sonra floresan görüntüleme cihazi ile yaralarda tespit edilebilir ve daha sonra örnek olarak yukarida tarif edildigi gibi görüntü analizi kullanilarak nicel olarak degerlendirilebilir. Polimer Bazli Terapötik Maddeler Yara bakimi için üretilmis çok sayida ticari olarak temin edilebilen tibbi polimer ürünleri vardir. Ornek olarak, Rimon Therapeutics, ilaç kullanmadan kendi içinde biyolojik aktiviteye sahip tibbi polimerler olan TheramersTM (www.rimontherapeuticscom) üretir. Rimon Therapeutics, 405 nm uyarma isigi ile uyarildiginda benzersiz bir sekilde floresan olabilen asagidaki yara bakim ürünlerini üretir: Yaralarda ya da diger iskemik dokularda yeni kan damari gelisimini (yani anjiyojenez) indükleyen Angiogenic TheramerTM; dokunun zayifladigi ya da tahrip oldugu birçok durumda yer alan her yerde bulunan bir enzim grubu olan matris metalloproteazlarin (MMP'Ier) aktivitesini inhibe eden Ml TheramerTM; memeli hücrelerine zarar vermeden gram+ ve gram- bakterileri öldüren bir termoplastik olan AM TheramerTM; ve bir sividan güçlü bir jele dönüsen vücut isisi çevresinde degisen bir polimer olan ThermaGeITM. Bunlarin her biri, örnek olarak uzun dalga boyu floresan emisyonuna sahip 405 nm isikta uyarilmak üzere seçilen floresan boyalari ya da floresan nanopartiküllerinin eklenmesi ile floresan yapilabilir. Görüntüleme cihazi kullanilarak, bu tür floresan polimer maddelerin uygulanmasi, gerçek zamanli olarak floresan görüntüleme ile yönlendirilebilir. Bu, Theramer maddesinin yara bölgesine dogru bir sekilde iletilmesine/ uygulanmasina (örnek olarak topikal olarak) izin verebilir. Maddenin yaraya uygulanmasinin ardindan, floresan görüntüleme Cihazi daha sonra, Theramers'in yara üzerindeki terapötik etkilerini nicel olarak belirlemek ve ayrica bunlarin fazla zaman içinde, in vivo ve invazif olmayan biyolojik dagilimini izlemek için kullanilabilir. Muhtemelen baska bir floresan emisyon dalga boyuna sahip olan bir moleküler fener, MI TheramerTM'e, yara enzimleri varliginda floresan olabilen (örnek olarak, MMP'Ier) eklenmesi de mümkün olabilir ve bu, yaranin MI TheramerTM'e gerçek zamanli yanitini gösterebilir. Yara bölgesine görüntü kilavuzlu Theramer uygulanmasi için bir floresan emisyonu ve terapötik yanit izlemesi için bir baska farkli floresan emisyonu, ve öteki ölçümler için öteki floresan emisyonlarinin kullanilmasi mümkün olabilir. MMP inhibisyonunun ve anti mikrobiyal tedavilerin nispi etkinligi, zaman içinde ayni anda belirlenebilir. Görüntü analizi kullanilarak, yaradaki bu sinyallerin floresanindaki degisikliklerin gerçek zamanli olarak karsilastirilmasi mümkün olabilir. Bu, cihaza nicel bir görünüm kazandirir ve klinik yararina katkida bulunur. Diger özel biyolojik olarak güvenli floresan maddelerinin, hali hazirda yara bakimi için kullanilan asagidaki maddelere eklenebilecegine dikkat edilmelidir. Floresan malzeme daha sonra cihaz kullanilarak görüntülenebilir ve izlenebilir. o Nemli Yara Pansumanlari: Bu, geleneksel pansumanlar ile karsilastirildiginda daha iyi iyilesme oranlari için nemli, iletken bir ortam saglar. Ureticilerin bu sargilar için hedefledigi birincil tüketici tabani, 65 yasin üzerindeki, basinç ülseri ve venöz staz ülseri gibi kronik yaralardan muzdarip insanlardir. Diyabet hastasi olanlar ve bunun sonucu olarak, gelismis ülserler hedef popülasyonun bir parçasini olusturur. Hidrojeller: Bu, kuru yaralara nem ekleyerek daha hizli iyilesme için uygun bir ortam yaratir. Eklenen özellikleri, enfekte olmus yaralarda kullanilabilecek olmalaridir. Bunlar ayrica kuru ila hafif eksüdatif yaralar için de tasarlanmistir. Hidrokolloid Pansumanlar: Hidrokolloidler yara yatagini kapatir ve nem kaybini önler. Nemli bir iyilesme ortami saglamak için eksüdalari absorbe ederek jel olustururlar. Bunlar, enfeksiyon olmayan hafif ila orta derecede eksüdatif yaralarda kullanilir. Aljinat Pansumanlar: Bunlar, iyilesmek için nemli bir ortam saglayan bir jel olusturmak üzere yara sizintilarini absorbe ederler. Genel olarak yüksek eksüdatif yaralar için kullanilirlar. Köpük Pansuman: Bunlar, yara drenajini absorbe eder ve nemli bir yara yüzeyini korur, böylece yara iyilesmesi için elverisli bir ortam saglar. Orta derecede eksüdatif yaralarda kullanilirlar. Seffaf Film Pansuman: Bunlar absorbe edici degildir, ancak nem buhari geçirgenligine izin verir, böylece nemli bir yara yüzeyi saglar. Kuru ila hafif eksüdatif yaralar için tasarlanmistir. Ornekler aljinat köpügü seffaf film pansumanlari içerir. Antimikrobiyaller: Bunlar yarayi dezenfekte etmek için antibakteriyel etki saglar. Ozellikle ilgi çekici olan nanokristal gümüs pansumanlarin kullanilmasidir. Biyolojik yükü, özellikle iyilesmeyi engelleyen ve agri ve eksüdasyona neden olan bakterilerin salgiladigi birikmis proteazlar ve toksinler, uzun gümüs salinimi ile önemli ölçüde azalir. Aktif Yara Pansumanlari: Bunlar oldukça gelismis doku tasarimli ürünler içerir. Biyolojik malzemeler ve cilt ikameleri bu kategoriye girer; bunlar tamamen hiyalüronik asit ve kollajen gibi biyolojik polimerlerden ya da naylon gibi sentetik polimerler ile birlikte biyolojik polimerlerden olusur. Bu pansumanlar, yara dokulari ile dogrudan ya da dolayli olarak etkilesime girerek yara iyilesmesini aktif olarak destekler. Cilt ikameleri, cildin yapisini ve fonksiyonunu taklit eden biyolojik mühendislik amaçli cihazlardir. i Hiyalüronik asit: Bu, ekstra hücresel matrisin dogal bir bilesenidir ve granüler doku olusumunda, yeniden epitelizasyonunda ve yeniden modellenmesinde önemli bir rol oynar. Cilde nem saglar ve absorban olarak islev görür. Açiklanan cihaz kullanilarak görüntülenebilecek diger yara bakim ürünleri arasinda Theramers, gümüs içeren jeller (örnek olarak, hidrojeller), suni deri, ADD kök hücreleri, anti matris metalloproteinazlar ve hiyalüronik asit bulunur. Floresan maddeler, cihazi kullanan görüntülemeye imkan vermek için öteki ürünlere eklenebilir. Bazi durumlarda, ürünler zaten isik yayan olabilir ve floresan maddelerin eklenmesini gerektirmeyebilir. Cihaz, ayni zamanda, bu tür tedavilerin zaman içindeki etkilerini izlemek için de kullanilabilir. Gida ürünleri için uyqulama Görüntüleme cihazi ayni zamanda, kontaminasyona karsi gida ürünlerinin (örnek olarak et ürünlerinin) izlenmesi için faydali olabilir. Bu, örnek olarak et, kümes hayvanlari, süt ürünleri, balik ve ziraat endüstrisinde gida/ hayvansal ürün hazirliginda faydali olabilir. Cihaz, bu sektördeki analitik laboratuvar hizmetlerine entegre disiplinler arasi bir yaklasimin parçasi olarak kullanilabilir; bu, görüntü bazli kontaminasyon tespiti ve test için numune almak için rehberlik içeren yetenekler saglayabilir. Cihaz, gida ürünlerinin bakteri ve diger mikrobiyal et kontaminasyonun/ karistirilmasinin gerçek zamanli tespiti, tanimlanmasi ve izlenmesinde kullanilabilir. Gida isleme tesisi ortaminda bakteriyel kontaminasyon takibi için kullanilabilir ve bu nedenle gida güvenligi ve kalitesini belirlemek için görüntü bazli bir metot saglayabilir. Cihazin elle tutulan, kompakt ve tasinabilir oldugu yapilanmalarda, görüntüleme cihazi gida ürünlerinin bakteriyel/ mikrobiyal kontaminasyondan güvenligini belirlemek için gida hazirlama alanlarinda yararli olabilir. Cihaz ayni zamanda, örnek olarak gida güvenligi ve kalite düzenlemeli inceleme isleminin bir parçasi olarak, isleme sirasinda ve bitmis gida ürünlerinde toplanan ya da örneklenen et numunelerinde (ve hazirlama yüzeylerinde) bakterilerin/ mikroplarin nispeten hizli tespiti ve analizi için kullanilabilir. Bu cihaz, et, bahçecilik ve su ürünleri endüstrisinde, gida güvenligi ve kalitesi gereksinimlerini karsilayan gida güvenligi denetim/ tespit prosedürlerinin uygulanmasinda kullanilabilir. Cihaz, örnek olarak, et, kümes hayvanlari, süt ürünleri ve balik endüstrisinde bulunan kirleticiler gibi gida kirleticilerini tespit etmek için kullanilabilir. Bu teknoloji bir fekal kirletici tespit sistemi olarak faydali olabilir, çünkü fekal bakteriler cihaz tarafindan kolayca tespit edilebilen porfirinler üretir. Listeria monocytogenes (LM) gibi gida kaynakli patojenlerin gida örneklerinde ve isleme hatlarinda tespiti ve dogru tanimlanmasi, hem gida kalitesi güvencesini saglamak hem de gida kaynagi içindeki bakteri patojen salginlarinin izlenmesinde kritik öneme sahip olabilir. Gida üretim ve isleme tesislerinde kullanilan hali hazirdaki tespit metotlari, tipik olarak, ekipmanin çoklu rasgele yüzey örneklemesine (örnek olarak, sivi örnegi alma) ve daha sonra, nicel dogrulama saglayabilen moleküler bazli teshis deneylerine (örnek olarak, gerçek zamanli polimeraz zincir reaksiyonu, RT- PCR) dayanmaktadir, bu, LM'nin varliginin, tipik olarak 24 ila 72 saat içinde nicel dogrulamasini saglayabilir. Bununla birlikte, zaman ve maliyet kisitlamalari nedeni ile, tipik olarak belirli bir gida üretim tesisinin bir seferde yalnizca rastgele seçilmis bölgeleri patojen kontaminasyonu için test edilir ve ekipmanin "ilk geçisi" sirasindaki düsük numune alma potansiyeli, yikici saglik ve ekonomik sonuçlara neden olan tespit edilmeyen patojenlere neden olabilir. Ek olarak, i) yüksek enfeksiyon olasiligi olan alanlari tanimlamak için "ilk geçis" örnek sivi alma sirasinda tüm yüzey alanlarinin hizli bir sekilde örneklenememesi, ii) bu ilk tarama islemini görsel olarak belgelemek (örnek olarak su ana kadar görüntüleme metodu mevcut degildir), iii) Laboratuvar sonuçlarinin alinmasinda gecikme, iv) hali hazirdaki metotlar ile iliskili yüksek maliyetler ve v) daha önemlisi, ölümcül patojen enfeksiyonlarinin eksik olma potansiyeli, gida kaynakli patojenlerin erken ve dogru tespitini uygun maliyetli bir sekilde iyilestirme çabalarina yol açmistir. Cihaz, bu gibi patojenleri tespit etmenin nispeten hizli ve dogru bir yolunu saglamada faydali olabilir. Cihaz, çok renkli bir floresan sondasi 'kokteyli' (örnek olarak, iki ya da daha fazla kontrast maddenin bir kombinasyonu) deneyi ile birlikte kullanilabilir; bu, yüksek derecede spesifik gen probu teknolojisi kullanilarak, diger Listeria türlerinden sadece canli Listeria monocytogenes'i kesin olarak tanimlayabilir (ve görünür kilabilir).Bu, gerçek zamanli olarak yasayan LM'nin spesifik olarak tespit edilmesine izin vererek, potansiyel olarak standart zaman alan zenginlestirme metotlarina olan ihtiyaci asgariye indirir. Bu metot ayni zamanda, Enterobakter sakazakii, Camylobakter türleri (C. coli, C. jejuni ve C. lari), koliform bakteri ve E. coli türünün bakteri ve laktoz (Iaktoz- ve indoI-negatif Escherichia coIi- suslarini içeren), Salmonella, Stafilokok aureus türüne ait tüm bakteriler ve ayri olarak Stafilokok ve Psödomonas aeruginosa cinsine ait tüm bakterileri içeren ilgi alanindaki diger patojenlerin tespit edilmesini içerecek sekilde genisletilebilir. Diger bakteriler, uygun bir prob ya da problarin kombinasyonu seçilerek tespit edilebilir. Ornek olarak, iki ya da daha fazla kontrast maddesinin bir kombinasyonu, belirli bir bakteriye özgü olacak sekilde tasarlanabilir ve görüntüleme cihazi kullanilarak görüntülendiginde benzersiz bir tespit edilebilir floresan imzasi ile sonuçlanabilir. Görüntüleme cihazi (örnek olarak, çok hedefli bir prob ya da problarin bir kombinasyonu içeren uygulanan dissal bakteriye özgü kontrast maddeleri ile birlestirildiginde), gida hazirlama ve isleme yüzeyleri için hedeflenmis sivi örnegi alma ve mikrobiyal test için kullanilabilir. Bu cihaz, ekipman ve gida ürünlerinin herhangi bir yüzeyinin nispeten hizli bir sekilde görüntü bazli gözetimine izin verebilir ve gida kaynakli bakterilerin/ patojenlerin floresan isaretini gerçek zamanli olarak yakalayabilir. Cihaz, çok renkli bir floresan sondasi 'kokteyli' (ve bunun kombinasyonlari) deneyi ile kombinasyon halinde kullanilabilir; bu, yukarida belirtildigi üzere, yüksek derecede spesifik gen probu teknolojisi kullanilarak, diger Listeria türlerinden sadece canli Listeria monocytogenes'i kesin olarak tanimlayabilir (ve görünür kilabilir). Böyle bir prob 'kokteyli', bu patojenlere duyarli oldugu bilinen ve bir imza floresan yaniti verdigi bilinen spesifik bir prob kombinasyonuna dayanarak belirli patojenleri spesifik olarak hedeflemek için dizayn edilebilir. Bu gibi patojenlerin tespitine ek olarak, cihaz farkli suslarin varliginin ve/ veya konumunun, farkli imza floresan yanitlarina dayanarak, ayirt edilmesine izin verebilir, Sekil 26, görüntüleme cihazinin, gida tedarikinde bulunan et ürünlerinin gerçek zamanli olarak incelenmesi için kullanilmasinin bir örnegini göstermektedir. Burada, a), bir beyaz domuz eti parçasinin beyaz isik ve b), karsilik gelen oto floresan görüntülemesi, kemik ve tendon (beyaz ok), yag ve kas gibi çesitli dokular arasindaki farki gösterir, 0), Beyaz isik ve b) bir Kikirdak (mavi ok) floresan isigi altinda kollajen oto floresani nedeni ILE floresan isigi altinda parlak yesil göründügü kemigin 'kesme kenari', kemik iligi (kirmizi ok) gibi çesitli iç kemik dokulari floresan kullanilarak ayirt edilebilir. Son gözlem, ek olarak yukarida bahsedildigi gibi insan ve veteriner hastalarda ortopedik cerrahi islem sirasinda gerçek zamanli floresan görüntü kilavuzlugu için elle tutulan optik görüntüleme cihazinin kullanilmasini önerebilir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Sekil 27, görüntüleme cihazinin, gida tedarikinde bulunan et ürünlerinin gerçek zamanli olarak incelenmesi için kullanilmasinin bir baska örnegini göstermektedir. Burada, a) beyaz isik ve b), karsilik gelen 37 "C'de 2 gün tutulan bir parça domuz etinin oto floresan görüntülemesi. Oto floresan görüntüleme, örnek olarak, Stafilokok aureus ve E. Coli'yi içeren et yüzeyinde (kirmizi floresan alanlari; sari oklar) karisik bakteriyel bir kontaminasyonun varligini gösterir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Yüzey Kontaminasvonu Görüntüleme cihazi, saglik hizmeti ortamlarinda 'yüzey bakteriyel kontaminasyon' tespit edilmesi gibi yüzey kontaminasyonunun tespiti için faydali olabilir. Bu cihazi, hastanelerde, kronik bakim tesislerinde, huzur evlerinde ve kontaminasyonun önde gelen enfeksiyon kaynagi oldugu diger saglik bakimi çevrelerinde, çesitli yüzeyler/ malzemeler! enstrümanlar (özellikle cerrahi islem ile alakali olanlar) üzerindeki bakterilerin! mikroplarin ve öteki patojenlerin varliginin tespit edilmesi ve görüntülenmesi için kullanilabilir. Cihaz, gösterge organizmalarin ve patojenlerin stratejilerinin standart tespiti, tanimlanmasi ve numaralandirilmasi ile birlikte kullanilabilir. Sekil 28, çevresel örnekleme/ kirleticilerin tespiti örneginde, toprak ve alg örneklerinin gerçek zamanli incelenmesi için görüntüleme cihazinin kullanimina bir örnek göstermektedir. a) Beyaz isik ve b), karsilik gelen, bir toprak ve mineral örnegi içeren bir Petri kabinin oto floresan görüntülerini, c), floresan toprak kirleticileri/ tehlikeli maddeleri tespit etmek için kullanilan görüntüleme cihazinin bir örnegi. Burada, örnek olarak, bir floresan etiketli sivi, çevresel kirleticilerin ve kirletici maddelerin tespit edilmesi ve izlenmesi için görüntüleme cihazinin potansiyel kullanimini göstermek için floresan görüntüleme öncesinde topraga eklenmistir, d), beyaz isik elde etmek için kullanilan görüntüleme cihazinin bir örnegi, ve e), su kosullarinin (örnek olarak, içme suyu aritma/ güvenlik testleri, ya da büyük ölçekli üretim tesislerinde alg büyümesi) gerçek zamanli floresan görüntü bazli izlenmesi için görüntüleme cihazinin potansiyel faydasini gösteren, laboratuvar kosullari altinda büyütülmüs bir yesil alg kültürünün oto floresan görüntüleridir. Bitkilerde hastaligi tespit etmek için kullanilan görüntüleme cihazinin bir örnegi olarak, f) yaygin bir ev bitkisinin beyaz isik görüntüsünü gösterirken, g) parlak kirmizimsi kahverengi görünen saglikli yaprak dokusu ile karsilastirildiginda, bitkilerin yapraklarini etkileyen parlak yesil (sari oklar) görünen bir mantar enfeksiyonunun ilgili oto floresan görüntüsünü gösterir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Bu nedenle, cihaz bitki materyallerini görüntülemek için yararli olabilir. Sekil 28B, genel ve özel ortamlarda biyolojik sivilarin beyaz isikta gizli kontaminasyonunu saptamak için kullanilan görüntüleme cihazinin kullanimina bir örnek göstermektedir, bir tuvalet kapagini ve banyo makyaj tezgahi kirleten biyolojik sivilarin a) bir beyaz isik ve b), karsilik gelen oto floresanidir. Bu veriler, görüntüleme cihazinin, görüntü kilavuzlu örnekleme, temizleme ya da izleme için potansiyel olarak tehlikeli biyolojik/ enfeksiyöz sivilar/ numuneler ile yüzey kontaminasyonunu tespit etmek için kullanilabilecegini göstermektedir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Sekil 28C, floresan görüntüleme kullanarak cerrahi aletlerin (bs yesil ok) bakteriyel kontaminasyonunun tespiti için cihazin kullanimina bir örnek göstermektedir. (405 nm uyarma; 490 ila 550 nm arasi ve 600 nm emisyon kanallari). Adli kullanimlar Görüntüleme cihazinin yüzey kirleticileri ve hedefleri görüntülemede kullanilmasi, adli uygulamalarda yararli olabilir. Ornek olarak, cihaz, biyolojik olmayan yüzeyler üzerindeki gizli parmak izlerinin ve biyolojik sivilarin adli tespit için faydali olabilir. Cihaz, dijital olarak (örnek olarak, beyaz isik, floresan ve/ veya yansitma ile) gizli parmak izleri ve biyolojik sivilar ve diger adli olarak ilgilenilen maddeleri içeren, dijital olarak görüntülememin nispeten ucuz, kompakt ve tasinabilir bir aracini sunabilir. Ilki, ticari olarak temin edilebilir parmak izi floresan boyalari kullanilarak floresan yapilabilir ve ikincisi, ya sivilarin oto floresani ya da dissal olarak uygulanan 'hedefli' floresan boya maddeleri (Luminol gibi) kullanilarak tespit edilebilir. Görüntüler dijital olarak kaydedilebilir. Cihaz ayni zamanda, morarma tespit etmek için otopsi islemleri sirasinda da kullanilabilir Sekil 29, bir dissal floresan kaçak izleyici boya kullanarak, sivi kaçaklarinin gerçek zamanli tespiti için görüntüleme cihazinin kullaniminin bir örnegini göstermektedir. a), bir tipik muslugun beyaz isik görüntüsüdür, b), karsilik gelen floresan görüntüdür (kaçak yapan sivinin varligini (eklenmis olan floresan boya ile birlikte)), ve beyaz isik ve floresanin birlesik görüntüsünü gösterir. Kaçagin (bu örnekte su) beyaz isik altinda görünmedigine, ancak floresan kullanilarak kolayca tespit edilebildigine dikkat edilmelidir. Bu veriler görüntüleme cihazinin nispeten hizli görüntü bazli izleme ve sivi/ sivi kaçaklarinin tespiti için yararli olabilecegini göstermektedir (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Sekil 30, yüzey kirleticilerin gerçek zamanli floresan tespiti için görüntüleme cihazinin kullanimina bir örnek göstermektedir, a) Tipik bir laboratuvar tezgah yüzeyinin beyaz isik görüntüsüdür ve b), görüntüleme cihazi kullanilarak görüntülenecek bir alandir, c), floresan görüntüleme, beyaz isik altinda kolayca görüntülenemeyen kirleticileri tespit etmek için kullanilabilir (a, b). Görüntüleme cihazi ayni zamanda, gizli parmak izlerini saptamak için, örnek olarak, bir masa yüzeyinde parmak izi çikintilarini arttirmak için bir floresan boya kullanarak da kullanilabilir. Bu, örnek olarak, arka plan yüzeylerine karsi parmak izi kontrasti gelistirmek için süper yapistirici (örnek olarak siyanoakrilat) ile birlestirilmis floresan boya dahil edilerek yapilabilir. Arka plandaki otomatik floresan potansiyelini azaltmak için uzak kirmizi ve yakin kizilötesi floresan boyalar kullanilabilir. Bu veriler, örnek olarak adli uygulamalarda, parmak izlerinin yani sira, biyolojik olmayan ve biyolojik kirleticilerin ve görece hizli görüntü bazli tespiti için görüntüleme cihazinin kullanilmasini önerir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Cihaz, ayni zamanda, sahtecilige karsi uygulamalarda da faydali olabilir. Sekil 31, a) beyaz isik ve b, 0) oto floresan modlari altinda yaygin para biriminin görüntülenmesi için kullanilan görüntüleme cihazinin bir örnegini göstermektedir (bu örnekte, bir 20 Kanada dolari). Beyaz isik altinda görünmez (a), floresan altinda sahtecilige karsi özel önlemler görülebilir: yani gömülü floresan elyaflari (b) ve banknotlarin (c) gömülü filigrani spektral olarak ayirt edilebilir (oklar). Bu veriler, cihazin sahtecilige karsi koruma amaçli kullanilabilecegini göstermektedir. (405 nm uyarma, 500 ila 550 nm arasinda emisyon (yesil), 600 nm emisyon (kirmizi)). Kataloglama Görüntüleme cihazi, laboratuvar hayvanlari gibi hayvanlarin floresan bazli kataloglanmasina izin verebilir. Sekil 32, görüntüleme cihazinin laboratuvar hayvanlari için etiketleme "barkodunun" tanimlanmasinin gerçek zamanli floresan tespiti için kullanimina bir örnek göstermektedir. Sekil, a) tipik bir laboratuvar faresinin beyaz isik görüntüsünü ve b) bir floresan barkodu ile isaretlenmis farenin bir floresan görüntüsünü gösterir. Barkod desenleri/ çubuklar ile birlikte çoklu flüoresan boyalarin/ renklerin kullanimi, hayvanlarin çok katli kataloglanmasi için, örnek olarak uzunlamasina arastirma çalismalari için kullanilabilir. Bu veriler, görüntüleme cihazinin nispeten hizli yüksek verimli görüntü bazli laboratuvar hayvanlarinin c)'de kullanim için laboratuvar hayvanlarinin "patojen içeren" hayvan kolonilerinde ve arastirma genotiplerinde (örnek olarak, transjenik hayvanlar, c'deki küçük resim ). (kirmizi)). Cihaz, ayni zamanda, envanter takibi ve satis noktasi takibi gibi diger uygulamalarda floresan bazli barkodlama ya da diger kodlama sistemlerinin görüntülenmesi için de kullanilabilir. Cihaz için kitler Görüntüleme cihazi, örnek olarak cihaz ve bir floresan kontrast maddesi içeren bir kit içerisinde saglanabilir. Kontrast maddesi yukarida açiklananlardan herhangi biri ya da daha fazlasi olabilir. Ornek olarak, kontrast maddesi, kitin yara izleme uygulamalari için oldugu bir yarada bir biyolojik isaretleyici etiketlemek için olabilir. Sekil 33, görüntüleme cihazi içeren bir kit örnegini göstermektedir, a) tutamaci ve dokunmaya duyarli görüntüleme ekranini ve b) dis mahfaza ve uyarma isik kaynaklarini göstermektedir. Görüntüleme cihazi, hem insan hem de veteriner hastalarinin vücut yüzeyini görüntü bazli yara degerlendirmesi için ya da yara olmayan görüntüleme uygulamalari için taramak için kullanilabilir. Cihaz ve herhangi bir aksesuar (örnek olarak, elektrik/ batarya güç kaynaklari, potansiyel dissal floresan kontrast maddeleri ve benzeri)klinik ve klinik olmayan ortamlarda (uzak yerler, evde bakim ve arastirma laboratuvari ayarlari dahil) tasinmasi için sert kaplara rahatlikla yerlestirilebilir. Kozmetik ya da dermatoloii kullanimlari Görüntüleme cihazi ayni zamanda kozmetik ya da dermatolojik ürünlerin görüntülenmesi için de kullanilabilir. Sekil 34, kozmetik ürünlerin görüntülenmesi için cihazin kullanimina bir örnek göstermektedir. Ornek olarak, ticari olarak temin edilebilen dört kozmetik krem, a) beyaz isik ve b) floresan görüntüleme modlari altinda gösterilmekte olup, kremler ve arka plan cildi arasindaki floresan kontrastini göstermektedir. Bu veriler, elde tutulan görüntüleme cihazinin, kozmetik varliginin ve potansiyel biyolojik etkilerinin (örnek olarak, cildin rehidrasyonu, kollajen yeniden modelleme, günes yanigi hasarinin onarilmasi, cilt dökülmesi) ve/ veya dermatolojik maddelerin ya da ilaçlarin onariminda kullanim için potansiyel kullanimini gösterir (405 nm uyarma; 490 ila 550 nm arasinda ve 600 nm emisyon kanallari) Görüntüleme cihazi, bu tedavilerin uygulanmasini iyilestirmenin yani sira, zaman içindeki etkilerini invazif olmayan ve nicel olarak izlemek için beyaz isik ve floresan modlarinda kullanilabilir. Cihaz digerleri arasinda, örnek olarak termal görüntüleme metotlari gibi diger görüntüleme yaklasimlari ile birlikte kullanilabilir. Bu cihaz ayni zamanda antibakteriyel, antibiyotik ya da dezenfektan maddeleri test etmek için de kullanilabilir. Bu cihaz tarafindan saglanan floresan görüntüleme, örnek olarak beyaz isik görüntüleme ile kombinasyon halinde, örnek olarak ilaç tedavisi, optimizasyon ve degerlendirme sirasinda, örnek olarak yara tedavisi için, bakteri kültürlerinde ve diger model sistemlerdeki farmasötik tedavilerin etkinligini nicel olarak belirlemek için kullanilabilir. Tüm örnekler ve burada tarif edilen yapilanmalar sadece açiklama amaci ile verilmistir ve sinirlama amaci tasimamaktadir. Teknikte uzman bir kisi, diger varyasyonlarin mümkün oldugunu anlayacaktir. TR TR TR TR TR TR TR TR TR