TW201843152A - 治療細菌感染之化合物及方法 - Google Patents

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Abstract

本發明係提供一種由式I表示之抗菌化合物
Figure TW201843152A_A0001
；或其醫藥學上可接受的鹽，其中X、Y、R4、R5及R6係如本文中所定義。本發明亦提供包括有式I化合物之醫藥組成物。

Description

治療細菌感染之化合物及方法
根據疾病控制與預防中心(CDC)估計，僅在美國每年估計有51,000個與綠膿桿菌(P.aeruginosa )感染相關的醫療照護案例，其中在這些感染案例中有超過6,000例(13%)的感染係衍生自多重抗藥性菌株。這導致平均每年約有400個死亡案例。歐洲疾病控制與預防中心的數值甚至更高，估計2009年約有800,000個額外的住院日及10,000個額外的死亡案例是由抗藥性綠膿桿菌菌株所引起的。目前綠膿桿菌的多重抗藥率為約20%，且預計到2040年將上升至約30%。
目前對於綠膿桿菌的治療包含有b-內醯胺抗生素。雖然有一些b-內醯胺抗生素在體外表現出非常好的希望，但大多數（即便不是全部）在臨床環境中會受到高度抗藥性的困擾。由於持續性的抗藥性及預計感染增加，新抗菌劑（特別是目前在臨床中觀察到尚未或輕微受到抗藥性機制的影響之那些新抗菌劑）的開發是一項重要的醫療需求。
本文係提供一種在其他用途外有用於治療細菌感染之抗菌化合物。這類化合物係由式I 表示，(I )；或其醫藥學上可接受的鹽，其中X、Y、R4 、R5 及R6 係如本文中所定義。本文亦提供了包括有式I 化合物之醫藥組成物。
本文所揭露化合物的作用為盤尼西林結合蛋白3 (PBP3)抑制物，且在一些例子中，其亦為PBP1抑制物，並顯示出抗菌活性。參閱（例如）表 6 及7 。
所揭露之PBP3抑制物在活體內亦具有超過已知PBP2抑制物的顯著改善。參閱（例如）在例證段落中之「對於綠膿桿菌PBP抑制物之活體內剖析」部分以及圖 1 及2 ，其中本申請案之實例40係與一PBP2抑制物（比較物1）進行比較。實例40與比較物1之間的唯一結構差異在於胺甲基基團被N-甲基-醯胺肟基團取代。然而，比較物1在嗜中性白血球減少的鼠大腿模型中對於綠膿桿菌臨床分離株並不具有活性（在此研究中，即使暴露於超過其MIC 100%倍也未達到停滯），而本申請案之實例40則顯示出穩健的功效（在暴露於超過其MIC 57%倍時降低超過2 Log(CFU/g)）。
亦已發現到以羰基取代肟會對PBP3的生化活性提供改善，並降低了革蘭氏陰性病原體中的MIC。參閱（例如）表5-7中的數據，其係比較了比較物2與本發明的肟之結果。
[相關申請案]
本申請案主張2017年5月8日提交之美國臨時申請案第62/502,867號之優先權，其全部內容係以引用方式併入本文中。 [關於由聯邦政府贊助的研究與開發之聲明]
本發明是在美國衛生福利部之整備及應變助理國務卿辦公室授予之第IDSEP160030號計畫的政府資助下進行。美國政府享有本發明的某些權益。 1. 化合物之概述
在某些實施例中，本發明係提供一種式I 化合物：(I )；或其醫藥學上可接受的鹽，其中 X為H、CN、C(O)NR1 R2 、NR1 R2 、或可選地經NHC(O)Rg 或NHS(O)NH2 取代之(C1 -C6 )烷基； Y為NOR3 ；或R3 及X連同與其連接之原子一起形成4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其每一者係可選地經選自(C1 -C6 )烷基、C=O、C(O)OH及C(O)O(C1 -C6 )烷基之一或多個基團取代，其中所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自OH、(C1 -C6 )烷氧基、苯基及5至6員雜芳基之一或多個基團取代，其中所述5至6員雜芳基係可選地經NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 取代； R1 及R2 係各自獨立地為氫、氰基、C(O)NH2 、NH2 、OH、(C1 -C6 )烷氧基、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R3 為氫、C(O)(C1 -C6 )烷基、C(O)NRd Re 、SO2 NH2 、SO2 OH、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R4 、R5 及R6 係各自獨立地為氫、(C1 -C6 )烷基或C(O)NRa Rb ，其中R4 、R5 及R6 之(C1 -C6 )烷基係可選地經一或多個R7 取代，條件是R4 及R5 中之至少一者不是氫，且條件是當與R4 及R5 鍵結的對應氮原子係經由雙鍵而與相鄰的環原子連接時R4 及R5 不存在； 各個R7 係獨立地選自鹵基、OH、ORc 、(C1 -C6 )烷氧基、CN、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、苯基、C(=NH)NH2 、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)OH、C=NO(C1 -C6 )烷基NH2 、NHC(O)(C1 -C6 )烷基、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及S(O)Rf ，其中所述5至6員雜芳基係可選地經NH2 取代且所述苯基係可選地經NH2 取代； Ra 、Rb 、Rd 及Re 係各自獨立地為氫、OH、(C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷氧基、苯基、OSO2 OH、4至6員環烷基、4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基中之每一者係可選地且獨立地經選自OH、NH2 、C(O)OH、C(O)O(C1 -C6 )烷基、NHC(O)NH2 、NHC(O)NH(C1 -C6 )烷基、C(O)NH2 、NHC(O)N((C1 -C6 )烷基)2 、NHC(O)(C1 -C6 )烷基、NHC(O)鹵基(C1 -C6 )烷基、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述苯基、4至6員雜環基、4至6員環烷基及5至6員雜芳基中之每一者，及Ra 、Rb 、Rd 及Re 之(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基之所述5至6員可選的雜芳基係可選地且獨立地經選自(C1 -C6 )烷基、NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及–N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rc 為可選地經選自C(=NH)NH2 、C(=NH)NH(5至6員雜環基)、C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基、NHC(=NH)NH2 、-NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及SORf 之一或多個基團取代之苯基，其中於基團C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基中之所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rf 為氫或(C1 -C6 )烷基；以及 Rg 為可選地經選自C=O及(C1 -C6 )烷基之一或多個基團取代之4至6員雜環基。 2. 定義
當使用在關於描述可能有多個附接點的化學基團時，連字符(-)係指明該基團與所定義的變數的附接點。例如，-NRd Re 係表示此基團的附接點是在氮原子上。
本文中所使用術語「鹵基」及「鹵素」係指一選自氟（氟基，F）、氯（氯基，Cl）、溴（溴基，Br）及碘（碘基，I）之原子。
術語「烷基」（單獨使用或做為一個較大部分的一部分，諸如「烷氧基」、「鹵烷基」等）係指飽和的直鏈或分支鏈單價烴基。除非另有說明，否則烷基通常具有1至6個碳原子，即(C1 -C6 )烷基。如本文中所使用，「(C1 -C6 )烷基」基團係指一個具有以直鏈或分支鏈排列的1至6個碳原子的基團。
術語「鹵烷基」係包含單鹵、多鹵與全鹵烷基，其中該等鹵素係獨立地選自氟、氯、溴及碘。
「烷氧基」指一個經由氧連接原子附接的烷基基團，由「–O-烷基」表示。例如，「(C1 -C4 )烷氧基」包含甲氧基、乙氧基、丙氧基及丁氧基。
除非另有說明，否則術語「雜芳基」係指一個包含選自N、O與S之1至4個雜原子之5至12員芳香族基團。在一些例子中，雜芳基中的氮原子可以被季銨化。術語「雜芳基」可與術語「雜芳基環」、「雜芳基基團」或「雜芳香族」交換使用。雜芳基可為單環或雙環。單環雜芳基包含（例如）噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基等。雙環雜芳基包含其中單環雜芳基環與一或多個芳基或雜芳基環稠合之基團。非限制性的實例包含吲哚基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹唑啉基、喹噁啉基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、吡咯并吡啶基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吲哚嗪基(indolizinyl)、嘌呤基、萘啶基及喋啶基。應理解的是，於指定時，雜芳基上之可選的取代基可出現於任何可取代位置，包含（例如）連接該雜芳基的位置。
除非另有說明，術語「雜環基」意指包含選自N、O與S之1至4個雜原子之4員至12員飽和或部分不飽和雜環。本文中術語「雜環」、「雜環基」、「雜環基環」、「雜環狀基團」、「雜環狀部分基團」與「雜環性基團」係可交換使用。雜環基環可在產生穩定結構之任何雜原子或碳原子上附接其側接基團。雜環基可以是單環或雙環。單環的飽和或部分不飽和雜環性基團包含（但不限於）四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫哌喃基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、哌啶基、噁唑啶基、哌嗪基、二氧雜環己烷基、二氧雜環戊烷基、嗎啉基、二氫呋喃基、二氫哌喃基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、二氫嘧啶基、四氫嘧啶基、二氫噁二唑基及二氫異噁唑基。雙環雜環基基團包含(例如)與另一個不飽和雜環性基團、環烷基、芳基或雜芳基環融合之不飽和雜環性基團，諸如(例如)苯并二氧雜環戊烯基、二氫苯并二氧雜環己烯基、二氫苯并呋喃基等。應理解，於指明時，雜環基上之可選擇的取代基係存在於任何可取代的位置上，包含(例如)附接該雜環基的位置。
某些所揭示之化合物可以多種立體異構形式存在。立體異構體為不同之處僅在於其空間排列之化合物。對映異構體為鏡像不可重疊之立體異構體對，最常見的原因為其含有做為掌性中心之經非對稱取代之碳原子。「對映異構體」意謂互為鏡像且不可重疊之一對分子中之一者。非對映異構體為含有兩個或兩個以上經非對稱取代之碳原子的立體異構體。結構式中之符號「*」表示存在掌性碳中心。「R」及「S」表示一或多個掌性碳原子周圍之取代基的組態。因此，「R*」及「S*」表示一或多種掌性碳原子周圍之取代基的相對組態。
「外消旋體」或「外消旋混合物」意謂等莫耳量之兩種對映異構體的化合物，其中該等混合物未展現光學活性，亦即其不會旋轉偏振光之平面。
「幾何異構體」意謂不同之處在於與(例如)碳碳雙鍵、肟、肟醚、環烷基環或橋接雙環系統有關之取代基原子的定向之異構體。位於碳碳雙鍵之一側上的原子(除了H以外)可以呈E(取代基位於碳碳雙鍵之另一側上)或Z(取代基定向於同一側上)組態。「R」、「S」「S*」、「R*」、「E」、「Z」、「同側」(syn)、「對側」(anti)、「順式」及「反」指示與核心分子有關之組態。當所揭示之化合物由結構命名或描繪而不指示特定幾何異構體形式時，應理解該名稱或結構涵蓋一種幾何異構體而無其他幾何異構體、幾何異構體混合物或含所有幾何異構體的混合物。對於「肟」及「肟醚」，可使用代號「Z」或「E」，以及「同側」或「對側」。
當僅藉由結構繪示時，在肟的N-O鍵畫為實心鍵結的情況下，其表示所描繪幾何異構體的重量純度相對於全部其他異構體為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。相對於全部其他異構體的重量純度百分比係為一異構體的重量與其他異構體之重量比率。同樣地，在肟的N-O鍵的幾何異構體被命名時（即E或Z），其表示所命名的幾何異構體的重量純度相對於全部其他異構體為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。就所揭露的肟而言，波狀鍵()係表明該結構係涵蓋一種幾何異構體而無其他幾何異構體、幾何異構體混合物或含所有幾何異構體的混合物。同樣地，在肟的N-O鍵的幾何異構體未命名時，該化合物係涵蓋一種幾何異構體而無其他幾何異構體、幾何異構體混合物或含所有幾何異構體的混合物。
本發明之化合物可藉由對映特異性合成來製備成個別對映異構體或自對映異構體富集混合物拆分而得。習用拆分技術包含使用光學活性酸形成對映異構體對之每一異構體的游離鹼之鹽（隨後分步結晶並再生游離鹼），使用光學活性胺形成對映異構體對之每一對映異構體的酸形式之鹽（隨後分步結晶並再生游離酸），使用光學純酸、胺或乙醇形成對映異構體對之每一對映異構體的酯或醯胺(隨後層析分離並移除掌性輔助劑)，或使用多種熟知層析方法拆分起始物質或最終產物之對映異構體混合物。此外，該等化合物可藉由使用習用掌性層析技術分離出外消旋混合物而被製備成個別對映異構體。
當所揭示之化合物的立體化學由結構命名或描繪時，所命名或描繪之立體異構體的重量純度相對於所有其他立體異構體為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。相對於所有其他立體異構體之重量純度百分比係為一種立體異構體之重量相對於其他立體異構體之重量的比率。當單一對映異構體由結構命名或描繪時，所描繪或命名之對映異構體的光學重量純度為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。光學重量純度百分比為對映異構體之重量相對於對映異構體之重量加上其光學異構體之重量的比率。
所揭示之化合物的立體化學由結構命名或描繪，且所命名或描繪之結構涵蓋一種以上立體異構體(例如呈非對映異構體對)時，應理解包括所涵蓋之立體異構體中之一者或所涵蓋之立體異構體的任何混合物。進一步應理解所命名或描繪之立體異構體的立體異構純度相對於所有其他立體異構體以重量純度計為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%。在此情況下藉由將在由名稱或結構涵蓋之立體異構體的混合物中之總重量除以在所有立體異構體之混合物中之總重量來測定立體異構純度。
當所揭示之化合物由結構命名或描繪而不指示立體化學，且化合物具有一個掌性中心時，應理解名稱或結構涵蓋化合物之一種對映異構體而無對應光學異構體、化合物之外消旋混合物及一種對映異構體相對於其對應光學異構體富集之混合物。
當所揭示之化合物由結構命名或描繪而未指示立體化學，且(例如)該化合物具有一個以上的掌性中心（例如至少兩個掌性中心）時，應理解其名稱或結構涵蓋一種立體異構體而無其他立體異構體、立體異構體混合物、或其中相對於其他立體異構體富集於一或多個立體異構體之立體異構體混合物。例如，該名稱或結構可涵蓋一種不含有其他非對映異構體之立體異構體、立體異構體之混合物、或其中相對於其他非對映異構體富集於一或多個非對映異構體之立體異構體混合物。
除非如Int-29 、Int-30 、實例40 及實例 41 中的R及S符號後面有星號(*)，否則本發明中的全部立體異構體都是相對的（即為反式外消旋的）。例如，實例 1 中的名稱「硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯」意指該化合物是反式外消旋的。相反地，實例 40 中的名稱「(4R*,8S*)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯硫酸氫鈉」意指在掌性中心的立體化學是絕對的。
除非在諸如Int-29 、Int-30 、實例40 及實例 41 中畫出化合物時其立體中心是由R及S標示，否則本發明中的全部立體異構體都是相對的。例如，意指其立體化學是相對的且該化合物是反式外消旋的，而意指其立體化學是絕對的，如4R*,8S*。
除非另有說明，否則本文所述之該等化合物的全部互變異構形式皆落入本發明的範疇內。
本文中之該等化合物可以醫藥學上可接受的鹽形式存在。對於用於藥物中而言，本發明之化合物的鹽係指無毒性「醫藥學上可接受的鹽」。醫藥學上可接受的鹽形式包含醫藥學上可接受之酸性/陰離子性或鹼性/陽離子性鹽。
術語「個體」及「患者」可互換使用，且意指需要治療之哺乳動物，例如伴生動物（例如狗、貓等）、家畜（例如乳牛、豬、馬、綿羊、山羊等）及實驗動物（例如大鼠、小鼠、天竺鼠等）。通常，該個體為需要治療之人類。
術語「抑制(inhibit/inhibition/inhibiting)」包含生物活性或生物程序的基線活性降低。
如本文中所使用，術語「治療(treatment/treat/treating)」係指逆轉、緩解、延緩如本文所述之疾病或病症或其一或多種症狀發作，或抑制其的進展。在一些實施例中，治療可在已發展一或多種症狀之後施予，亦即治療性處理。在其他實施例中，治療可在無症狀之情況下施予。例如，治療可在症狀發作之前（例如鑒於症狀史及/或鑒於暴露於特定有機體下，或其他易感性因素）向易感個體給藥，亦即預防性處理。治療亦可在症狀已解決後繼續進行，例如預防或延緩其復發。
術語「有效量」或「治療有效量」係包含本文中所述之化合物將引發個體之例如以下生物或醫學反應的數量：與細菌感染有關之酶或蛋白質活性的降低或抑制、細菌感染症狀的改善、或細菌感染病程的減緩或延緩。在一些實施例中，用語「有效量」係包含本文中所述之化合物在當施予個體時，有效達成以下之數量：至少部分緩解、抑制及/或改善細菌感染或抑制PBP3，及/或降低或抑制細菌的生長、複製或細菌於個體中之細菌附著。
術語「醫藥學上可接受的載體」係指不會破壞一起調配之化合物之藥理學活性之非毒性載體、佐劑或媒劑。可用於本發明之組合物中之醫藥學上可接受的載體、佐劑或媒劑包括(但不限於)適用於醫藥應用之有機或無機載體、賦形劑或稀釋劑。 3. 例示性化合物之描述
在第一實施例中，本發明係提供式I 化合物(I )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文所述。
在第二實施例中，Y在式I 化合物中為NOR3 ，且R3 及X連同與其連接之原子一起形成4至6員雜環基，該4至6員雜環基係可選地經選自(C1 -C6 )烷基、C=O或C(O)OH之一或多個基團取代，其中該(C1 -C6 )烷基係可選地經OH、苯基或5至6員雜芳基取代，其中該5至6員雜芳基係可選地經NH2 取代，且其中其餘變數如上文關於式I 所述。替代性地，Y在式I 化合物中為NOR3 ，且R3 及X連同與其連接之原子一起形成4,5-二氫-1,2,4-噁二唑或4,5-二氫異噁唑，其每一者係可選地經選自(C1 -C4 )烷基、C=O或C(O)OH之一或多個基團取代，其中該(C1 -C4 )烷基係可選地經OH、苯基或噻唑基取代，其中該噻唑基係可選地經NH2 取代，其中其餘變數如上文關於式I 所述。
在第三實施例中，所述Ra 、Rb 、Rd 及Re 之4至6員環烷基在式I 化合物中為環己基且所述Rg 之4至6員雜環基為哌嗪基，其中其餘變數如上文關於式I 或第二實施例所述。
在第四實施例中，式I 化合物為式Ia ：(Ia )；或其醫藥學上可接受的鹽，其中 X為H、CN、C(O)NR1 R2 、NR1 R2 或(C1 -C6 )烷基； R1 及R2 各自獨立地為氫、氰基、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R3 為氫或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R4 、R5 及R6 係各自獨立地為氫、(C1 -C6 )烷基或C(O)NRa Rb ，其中R4 、R5 及R6 之(C1 -C6 )烷基係可選地經一或多個R7 取代，條件是R4 及R5 中之至少一者不是氫，且條件是當與R4 及R5 鍵結的對應氮原子係經由雙鍵而與相鄰的環原子連接時R4 及R5 不存在； 各個R7 係獨立地選自鹵基、OH、ORc 、(C1 -C6 )烷氧基、CN、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、苯基、C(=NH)NH2 、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及S(O)Rf ； Ra 、Rb 、Rd 及Re 係各自獨立地為氫、 (C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷氧基、苯基、4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基中之每一者係可選地且獨立地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代，且其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述苯基、4至6員雜環基及5至6員雜芳基中之每一者係可選地且獨立地經選自(C1 -C6 )烷基、NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rc 為可選地經選自C(=NH)NH2 、C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及SORf 之一或多個基團取代之苯基，其中於基團C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基中之所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代；以及 Rf 為氫或(C1 -C6 )烷基。
在第五實施例中，式I 化合物為式II ：(II )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文關於式I 或Ia 所述。
在第六實施例中，式I 化合物為式III ：(III )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文關於式I 或Ia 所述。
在第七實施例中，R3 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中為氫或可選地經胺基取代之(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 所述。在一替代實施例中，R3 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中為氫，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 所述。
在第八實施例中，R1 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中為氫且R2 為(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七實施例所述。在一替代實施例中，R1 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中為氫且R2 為甲基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七實施例所述。
在第九實施例中，R1 及R2 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中係各為(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七實施例所述。在一替代實施例中，R1 及R2 在式I 、Ia 、II 或III 之任一者中係各為甲基，其中變數如上文關於式I 或Ia 、或第七實施例所述。
在第十實施例中，式I 或Ia 化合物為式IV 或V ：(IV )；或(V )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文關於式I 或Ia 、或第七、八、九實施例所述。
在第十一實施例中，R6 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 或V 之任一者中係為氫、-C(O)NRa Rb 、或可選地經ORc 取代之(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七、八或九實施例所述。
在第十二實施例中，Ra 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 或V 之任一者中係為氫；Rb 為可選地經一或多個(C1 -C6 )烷基取代之5至6員雜芳基，或可選地經-ORc 取代之(C1 -C6 )烷基；而Rc 為可選地經-C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基NH2 取代之苯基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七、八、九或十一實施例所述。在一替代實施例中，Ra 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 或V 之任一者中係為氫，且Rb 為可選地經一或多個(C1 -C6 )烷基取代之吡唑基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第七、八、九或十一實施例所述。
在第十三實施例中，式I 或Ia 化合物為式VI ：(VI )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。
在第十四實施例中，R4 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、V 或VI 之任一者中係為C(O)NRa Rb 或可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基；Ra 為氫；而Rb 為可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。在一替代實施例中，R4 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、V 或VI 之任一者中為(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。在一替代實施例中，R4 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、V 或VI 之任一者中係為甲基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。
在第十五實施例中，式I 或Ia 化合物為式VII ：(VII )； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。
在第十六實施例中，R5 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、VI 或VII 之任一者中係為C(O)NRa Rb 或可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基；Ra 為氫；而Rb 為可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。在一替代實施例中，R5 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、VI 或VII 之任一者中為(C1 -C6 )烷基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。在另一替代實施例中，R5 在式I 、Ia 、II 、III 、IV 、VI 或VII 之任一者中為甲基，其中其餘變數如上文關於式I 或Ia 、或第八或九實施例所述。
化合物之特定實例係提供於範例中。醫藥上可接受的鹽及此等化合物之中性形式係包含於本文中。 4. 用途、調配物及給藥
本文中所述之該等化合物係可使用於治療由革蘭氏陰性或非典型細菌中之一或多種所引起的細菌感染。革蘭氏陰性細菌包含（但不限於）流行性感冒嗜血桿菌(Haemophilus influenzae )、鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii )、伯克霍爾德氏菌屬(Burkholderia spp.)、檸檬酸桿菌屬(Citrobacter spp.)、大腸桿菌(Escherichia coli )、腸內桿菌屬(Enterobacter spp. )、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa )、克雷白氏菌屬(Klebsiella spp. )、嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophila )、土拉文氏桿菌(Francisella tularensis )、耶氏桿菌屬(Yersinia spp.)、沙門氏桿菌屬(Salmonella spp.)、志賀氏桿菌屬(Shigella spp.)、退伍軍人桿菌屬(Legionella spp.)及淋病雙球菌(Neisseria gonorrhoeae )。非典型細菌包含（但不限於）肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae）、肺炎衣原體（Chlamydophila pneumoniae）、嗜肺軍團菌（Legionella pneumophila）。
在一些態樣中，細菌對除本文中所述之該等化合物外的一或多種抗細菌劑具有抗性。用語「抗性」及「抗細菌劑抗性」係指細菌在暴露於一或多種抗細菌劑的情況下能夠存活。在一態樣中，本文中所述之該等化合物係可使用於治療由革蘭氏陰性細菌或具抗性之革蘭氏陰性細菌所引起的細菌感染。在另一態樣中，本文中所述之該等化合物係可使用於治療由諸如大腸桿菌、克雷白氏肺炎菌(K. pneumoniae )及不動桿菌屬(Acinetobacter spp.)之腸內桿菌科細菌(Enterobacteriaceae )所引起的細菌感染。在又另一態樣中，本文中所述之該等化合物係可使用於治療由綠膿桿菌(P. aeruginosa )、鮑氏不動桿菌(A. baumannii )或腸內桿菌科細菌、以及抗細菌劑抗性型細菌所引起的細菌感染。在又另一態樣中，本文中所述之該等化合物係可使用於治療由綠膿桿菌以及抗細菌劑抗性型細菌所引起的細菌感染。例如，革蘭氏陰性細菌中的抗性機制包含（但不限於）超廣效性β-內醯胺酶的表現、金屬β-內醯胺酶的表現、碳青黴烯酶的表現、DNA旋轉酶突變、孔蛋白突變、排出系統的過度表現突變、脂多醣的修飾、以及16S rRNA修飾烷酶的表現。
在一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由革蘭氏陰性細菌所引起。在另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由綠膿桿菌、鮑氏不動桿菌、大腸桿菌或克雷白氏肺炎菌、以及其他腸內桿菌科細菌所引起。在又一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由綠膿桿菌所引起。在另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由抗細菌劑抗性革蘭氏陰性細菌所引起。在又另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由綠膿桿菌之抗細菌劑抗性菌株所引起。在又另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由腸內桿菌科細菌所引起。在又另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由大腸桿菌、克雷白氏肺炎菌或不動桿菌屬細菌所引起。在又另一態樣中，由本發明化合物所治療之細菌感染係由一選自伯克霍爾德氏菌屬、炭疽芽孢桿菌(B. anthracis )、鼠疫耶爾森氏菌(Y. pestis )及土拉文氏桿菌之病原菌所引起。
由本發明化合物所治療之細菌感染包含（但不限於）呼吸道（例如肺炎）、血流（例如菌血症）、心臟（例如心內膜炎）、CNS（例如腦膜炎、腦膿瘍）、耳朵（例如外耳炎）、眼睛（例如細菌性角膜炎, 眼内炎）、胃腸道（腹瀉、腸炎、小腸結腸炎）、泌尿道、皮膚、腹腔內、院內感染及傷口/燒傷感染。
在一態樣中，本文中所述之該等化合物係抑制盤尼西林結合蛋白3 (PBP3)。因此，在一態樣中，本發明提供一種抑制細菌PBP3的方法，包括向一有需要之個體施予一或多種本文中所述之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽。
在另一態樣中，本文中所述之該等化合物係抑制盤尼西林結合蛋白1（例如PBP1a及/或PBP1b）。因此，在一態樣中，本發明提供一種抑制細菌PBP1的方法，包括向一有需要之個體施予一或多種本文中所述之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽。在另一態樣中，本發明提供一種抑制細菌PBP1（例如PBP1a及/或PBP1b）及細菌PBP3之方法，包括向一有需要之個體施予一或多種本文中所述之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽。
又在另一態樣中，本文中所述之該等化合物並非是盤尼西林結合蛋白2 (PBP2)的特異性抑制劑。
根據其他態樣，本發明提供醫藥學上可接受的組成物，其包括本文中所述之化合物及一醫藥學上可接受的載體。這些組成物可使用於治療一或多種上述細菌感染，並抑制PBP3。
本文中所述之該等組成物係可經口、非經腸式、藉由吸入式噴霧、局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道或經由植入式儲存器給藥。本文中所使用術語「非經腸式」係包含皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、脊椎腔內、肝內、病灶內與顱內注射或輸注技術。液體劑型、注射用製劑、固體分散型以及用於局部或經皮施予化合物之劑型係包含在本文中。
可與載體材料組合而產生單一劑型組成物之所提供化合物的用量將視所治療患者與特定給藥模式而改變。
亦應理解，用於任何特定病患之特定劑量及治療方案係將取決於各種因素，包含年齡、體重、總體健康、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物組合、治療醫師之判斷及治療中之特定疾病之嚴重性。該組成物中之所提供化合物數量亦將視該組成物中之特定化合物而定。 範例
如繪示於下列實例中，在某些例示性實施例中，化合物係根據下列一般程序製備。應瞭解，儘管該等一般方法繪示本文中某些化合物之合成，但下列該等一般方法及本領域中具有通常技藝者已知的其他方法係可施用至所有化合物以及此等化合物中之每一者的子類及種類，如本文中所述。流程圖 1 Int-1
平行進行兩批具有相同規模的以下反應。向3,5-二側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(275 g, 1.29 mol)之甲苯(1.95 L)混合物添加1,1-二甲氧基-N,N-二甲基-甲胺(247.59 mL, 1.87 mol)。將該反應混合物在80°C下攪拌0.5小時，接著在50°C下攪拌3.5小時。該反應混合物係經減壓濃縮以得到呈黃色油狀物之4-((二甲胺基)亞甲基)-3,5-二側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(692 g, 99%)。MS: 269 ES+ (C13 H20 N2 O4 )。其係直接使用於下一步驟中。Int-2
平行進行兩批具有相同規模的以下反應。向4-((二甲胺基)亞甲基)-3,5-二側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(346 g, 1.29 mol)之乙醇(1.90L)及甲苯(1.90L)溶液添加甲肼(168.1 mL, 3.21 mol)。將該反應混合物在25°C下攪拌3小時。該反應混合物係經減壓濃縮以得到一殘餘物。該殘餘物係藉由管柱層析法(SiO2 , DCM/乙酸乙酯=1:0至1:1)純化以得到呈黃色油狀物之1-甲基-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(540g, 83%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ: 1.51 - 1.43 (m, 9H); 3.85 (s, 3H); 4.14 (s, 2H); 4.73 (br s, 2H); 7.88 (s, 1H)。Int-3
將1-甲基-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(50g, 0.199 mmol)溶解於THF (500 mL)中並放置在N2 環境下。將反應混合物冷卻降至-78°C並添加LDA (2M, 397.96 mL)。在 -78°C攪拌該反應混合物40分鐘。在1小時期間引入過量的二氧化碳，並接著擱置使混合物回到環境溫度並攪拌12小時。藉由添加10% H2 SO4 至pH = 2.5以使反應混合物淬滅，並用乙酸乙酯(3 x 500ml)萃取。將飽和碳酸氫鈉水溶液加入到合併之有機層中直至pH ＞7。分離水相並藉由添加檸檬酸溶液(10%)而酸化。接著用乙酸乙酯(4 x 500 mL)對其進行萃取。合併該有機萃取物，使其經無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮以得到呈白色固體之6-(第三丁氧基羰基)-1-甲基-4-側氧基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-羧酸(58 g, 95%)。其係直接使用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ: 1.48 (s, 9H); 4.02 (s, 3H); 4.12 (m, 1H); 4.65 - 4.52 (m, 1H); 6.16 (s, 1H); 7.90(s, 1H)。Int-4
向6-(第三丁氧基羰基)-1-甲基-4-側氧基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-羧酸( 58 g, 196.42 mmol)之DMF (300 mL)溶液添加硫酸二甲酯(196.42 mL, 245.52 mmol)並在25°C下攪拌2小時。添加碳酸鉀(10.86 g, 78.57 mmol)及硫酸二甲酯(196.42 mL, 39.28 mmol)並在25°C下攪拌12小時。添加額外的碳酸鉀(5.43 g, 39.28 mmol)並再攪拌該反應混合物1小時。將水(500 mL)加入到該反應混合物中，並用DCM (3 x 500 mL)萃取。合併之有機層係經以0.1N HCl (300 mL)洗滌，隨後用水(300 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物之1-甲基-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-(第三丁基)7-甲酯(50g, 82%)。其係直接使用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ: 1.49 (s, 9H); 3.03 - 2.82 (m, 1H); 3.80(s, 3H); 4.02 (s, 3H); 4.59 (d,J = 18.4 Hz, 1H); 6.16 (s, 1H); 7.91 (s, 1H)。Int-5
向1-甲基-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-(第三丁基)7-甲酯(50g, 161.64 mmol)之DCM (500 mL)溶液添加吡啶(25.57 g, 323.28 mmol)及O-苯甲基羥基胺鹽酸鹽(25.80g, 161.64 mmol)。在20°C下攪拌該反應混合物12小時。添加10%酒石酸(200 mL)。將有機層分離並用2%酒石酸(200 mL)洗滌。用DCM (500 mL)洗滌合併的水層。合併之有機物係用鹽水(200 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，以得到呈黃色油狀物之(Z)-4-((苯甲氧基)亞胺基)-1-甲基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-(第三丁基)7-甲酯(70g, 104%)。其未進一步純化即直接使用於下一步驟中。Int-6
在0°C下向(Z)-4-((苯甲氧基)亞胺基)-1-甲基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-(第三丁基)7-甲酯(60g, 144.77 mmol)之MeOH (240 mL)溶液添加HCl/二噁烷(4N, 36.16 mL, 144.77 mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。在0-2°C下添加硼烷吡啶複合物(13.45 g, 144.77 mmol)並攪拌1.5小時，隨後添加HCl/二噁烷(4M, 180.96 mL, 723.84 mmol)。在25°C下攪拌該反應混合物12小時。將HCl (31.67 g, 868.62 mmol)氣體鼓泡通過該反應混合物。添加乙腈(500 mL)並攪拌40分鐘。該反應混合物係經過濾，且濾餅係用乙腈(300 mL)洗滌，接著用MTBE (300ml)洗滌。將濾餅溶解在乙酸乙酯(500 mL)中並添加飽和碳酸氫鈉水溶液以調整到pH ＞7。用乙酸乙酯(3 x 500 mL)萃取水層。合併之有機層係經無水硫酸鈉乾燥及濃縮，以得到呈褐色油狀物之4-((苯甲氧基)胺基)-1-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(37 g, 81%)。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ: 2.01 - 1.70(m, 1H); 2.88 (dd,J = 2.8, 13.6 Hz, 1H); 3.32 (d,J = 13.4 Hz, 1H); 3.76 (s, 3H); 3.82 - 3.78 (m, 3H); 3.94 (br s, 1H); 4.56 (s, 1H); 4.70(s, 2H); 7.38 - 7.25 (m, 5H); 7.42 (s, 1H)。Int-7
平行進行兩批具有相同規模的以下反應。在0°C下向4-((苯甲氧基)胺基)-1-甲基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(18.5 g, 58.48 mmol)及三甲胺(130.4 mL, 935.68 mmol)之THF (360 mL)溶液添加三光氣(6.94 g, 23.39 mmol)之THF(80 mL)溶液。在0°C下攪拌該混合物並使其升溫至25°C歷時12小時。該反應混合物係經過濾，濾餅係溶解在DCM (200 mL)中並用1N HCl溶液調整至pH ＜7，接著用DCM (3 x 200 mL)萃取。合併之有機層係經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(12.00g)。該反應混合物濾液係經濃縮且其殘餘物係藉由管柱層析法(SiO2 ，石油醚/乙酸乙酯/DCM = 5/1 /0至1/1 /0.5)純化，以得到呈白色固體之另外的(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(13.00g)。合併這兩批次(25.00g, 62%)並直接使用於下一步驟中。1 H NMR (400MHz, CDCl3 ) δ: 3.23 (d,J = 11.2 Hz, 1H); 3.43 (dd,J = 2.9, 11.5 Hz, 1H); 3.77 (s, 3H); 3.86 (s, 3H); 3.98 (d,J = 2.4 Hz, 1H); 4.86 (d,J =11.8 Hz, 1H); 5.04 - 4.95 (m, 1H); 5.21 (s, 1H); 7.48 - 7.32 (m, 6H)。Int-8
在-10°C下將氫硼化鋰(2N於THF中, 146.04 mL, 292.1 mmol)溶液添加至(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(20g, 58.42 mmol)之甲醇(960 mL)及THF (480 mL)溶液。在-5°C下攪拌所得混合物1.5小時。接著用飽和氯化銨水溶液使其淬滅。大部分的溶劑係於減壓環境下除去。將粗製材料再溶解於DCM (1000 mL)中，並添加水(500 mL)。有機層係經分離，並經無水硫酸鈉乾燥及濃縮。用乙酸乙酯濕磨所得殘餘物以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(羥甲基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(12.5 g, 68%) 。其係直接使用於下一步驟中。MS: 315 ES+ (C17 H18 N4 O4 )。Int-9
在環境溫度下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(羥甲基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(12.36 g, 39.36 mmol)之二氯甲烷(500 mL)溶液添加戴斯-馬丁過碘烷(Dess-Martin periodinane, 20.06 g, 47.23 mmol)。攪拌該反應混合物1小時。將硫代硫酸鈉水溶液(1N, 300 mL)及飽和碳酸氫鈉水溶液(200 mL)加入到該反應混合物中並攪拌15分鐘。該雙相混合物係經分離並用二氯甲烷(500 mL)萃取水層。合併之有機層係經無水硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮，以得到粗產物。以急驟層析法(120g矽膠，0%-100%乙酸乙酯/己烷)得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(9.72 g, 79%)。MS: 313 ES+ (C16 H16 N4 O3 )。Int-10
在環境溫度下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(8.62 g, 27.6 mmol)之吡啶(120 mL)溶液添加羥基胺鹽酸鹽(2.11 g, 30.36 mmol)。攪拌該反應混合物20分鐘。添加氯化銨水溶液(500 mL)及乙酸乙酯(500 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以得到呈白色固體之(E)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(9.03g, 99%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 328 ES+ (C16 H17 N5 O3 )。Int-11
在室溫下向(E)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(9.03 g, 27.6 mmol)之DMF (300 mL)溶液添加N-氯琥珀醯亞胺(4.05 g, 30.36mmol)。在40°C下攪拌該反應混合物2小時，接著擱置在環境溫度下過夜。添加冰水(500 mL)及乙酸乙酯(500 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以得到呈淺黃色固體之(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(carbimidoyl chloride) (9.98 g, 99%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 362 ES+ (C16 H16 ClN5 O3 )。Int-12
在室溫下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(9.98 g, 27.6 mmol)之DCM (360 mL)溶液添加甲胺(2N於THF中, 2.02mL, 56.05 mmol)。在環境溫度下攪拌該反應混合物30分鐘。添加飽和氯化銨水溶液(300 mL)及DCM (200 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以得到粗產物。用DCM與丙酮混合物濕磨所得粗產物並過濾，以得到呈白色固體之(Z)-5-(苯甲氧基)-N'-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(7.27 g, 74%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 357 ES+ (C17 H20 N6 O3 )。Int-13
在室溫下向(Z)-5-(苯甲氧基)-N'-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(6.88 g, 19.31 mmol)之DCM (500 mL)溶液添加三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(4.88 mL, 21.24 mmol)及2,6-二甲吡啶(2.7 mL, 23.17 mmol)。在30°C下攪拌該反應混合物2小時。添加DCM (300 mL) 及飽和氯化銨水溶液(300 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以得到粗產物。用己烷與乙酸乙酯混合物濕磨粗產物並過濾，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(9.17g, 99%)。MS: 471 ES+ (C23 H34 N6 O3 Si)。Int-14
將(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(1.3 g, 2.76 mmol)之MeOH (60 mL)與乙酸乙酯(150 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (294 mg, 0.28 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌1小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-5-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(1.02 g, 97%)。MS: 381 ES+ (C16 H28 N6 O3 Si)。Int-15
在環境溫度下向(4R,8S,Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-5-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(400 mg, 1.05 mmol)之吡啶(20 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(1338 mg, 8.41 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。將該材料在短矽膠墊上純化，用己烷(100 mL)溶析，隨後用乙酸乙酯/己烷(1:1, 100 mL)、乙酸乙酯(100 mL)及丙酮(200 mL)溶析。將含有產物之分餾物匯集並濃縮，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(400 mg, 83%)。MS: 461 ES+ (C16 H28 N6 O6 SSi)。Int-16
在室溫下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(130 mg, 0.28 mmol)之乙酸乙酯(15 mL)溶液添加HF.吡啶(0.01 mL, 0.31 mmol)。將該反應混合物攪拌2小時，接著進行濃縮。所得固體係藉由逆相層析法(Sepabeads, 100%水)純化，以得到呈白色固體之吡啶鹽硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(71 mg, 59%)。MS: 345 ES- (C10 H14 N6 O6 S)。實例 1
吡啶鹽硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(71 mg, 0.17 mmol)係溶解於水(2 mL)中，並通過Dowex® 50WX8 Na+ 型離子交換樹酯濾筒且用水做為溶析液進行溶析。將含有產物之分餾物匯集並冷凍乾燥，以得到呈白色固體之(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯硫酸鈉(55 mg, 88%)。MS: 345 ES- (C10 H14 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.08 (s, 3H); 3.46 (m, 1H); 3.57 (m, 1H); 3.61 (s, 3H); 4.92 (m, 1H); 5.75 (s, 1H); 7.60(s, 1H)。實例 2
硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基-N,N-二甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯係藉由按照如實例1所示相似的反應順序，使用步驟12中之二甲胺的THF溶液而合成。實例2係如在步驟16中的游離硫酸酯般進行純化及提交。MS: 359 ES- (C11 H16 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.01 (s, 6H); 3.49 (m, 2H); 3.60(s, 3H); 4.90(m, 1H); 5.64 (s, 1H); 7.57 (s, 1H)。實例 3
(4R,8S)-8-((Z)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯硫酸鈉係藉由按照如實例 1 所示相似的反應順序，使用步驟12中之於THF中的氨溶液而合成。MS: 331 ES- (C9 H12 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d:3.17 (m, 2H); 3.64 (s, 1H); 4.96 (m, 1H); 5.38 (s, 1H); 7.59 (s, 1H)。流程圖 2 Int-17
在0o C下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 15 mg, 0.042 mmol)之DMF (2 mL)溶液添加NaH (2.53 mg, 0.063 mmol, 60%)。之後在0o C下攪拌該反應混合物10分鐘，並添加甲基碘(7.17 mg, 0.050mmol)。接著使其升溫至室溫並在室溫下攪拌10分鐘。添加乙酸乙酯及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中的丙酮)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S,Z )-5-(苯甲氧基)-N’ -甲氧基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(8 mg，產率51.3%)。MS: 371 ES+ (C18 H22 N6 O3 )。Int-18
將(4R,8S,Z )-5-(苯甲氧基)-N’ -甲氧基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-17 , 8 mg, 0.0216 mmol)之MeOH (3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (4.58 mg, 0.0043 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境下於室溫中攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(4R,8S,Z )-5-羥基-N’ -甲氧基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(4.5 mg, 74.3%)。MS: 281 ES+ (C11 H16 N6 O3 )。實例 4
在室溫下向(4R,8S,Z )-5-羥基-N’ -甲氧基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-18 , 4.5 mg, 0.016 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(25.5 mg, 0.16 mmol)。攪拌該反應混合物16小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。用DCM濕磨粗產物並過濾以除去固體。濾液係藉由逆相層析法(Sepabeads, 12g, ACN/水 0-50%)濃縮及純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N’ -甲氧基-N- 甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(2.2 mg, 30.4%)。MS: 359 ES- (C11 H16 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O-d2 ) d: 3.07 (s, 3H); 3.52-3.66 (m, 2H); 3.69 (m, 6H); 4.96 (s, 1H); 5.73 (s, 1H); 7.64 (s, 1H)。另外的 實例 之 分析數據
實例 6 及 7 係藉由按照如實例 4 所示相似的合成順序而合成。表 1 中的其他實例係以與流程圖1相似的方法，使用熟習該項技藝者容易知道的相似反應而合成。全部的化合物係經分離為反式外消旋的。表 1 流程圖 3 Int-19 及 Int 20
在室溫下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 229 mg, 0.64 mmol)之DCE (15 mL)溶液添加DIEA (0.11mL, 0.64 mmol)及(4-硝基苯基)氯甲酸酯(129.52 mg, 0.64 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物2小時，以得到溶液(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N,1-二甲基-N'-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int 19 )。
在室溫下向 上述溶液Int-19 添加DIEA (0.11mL, 0.64 mmol)及於THF中的氨溶液(0.64 mL, 0.64 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物1小時。將溶劑移除以得到粗產物。粗產物係經急驟層析法(20g矽膠，0%-100%乙酸乙酯/己烷)純化，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-(胺甲醯基氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(87 mg, 34%)。MS: 400ES+ (C18 H21 N7 O4 )。Int-21
將(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-(胺甲醯基氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-20 , 87 mg, 0.22 mmol)之丙酮(10 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (23 mg, 0.022 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之((4R,8S,Z)-N'-(胺甲醯基氧基)-5-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(66 mg, 67%)。MS: 310ES+ (C11 H15 N7 O4 )。實例 14
在環境溫度下向((4R,8S,Z)-N'-(胺甲醯基氧基)-5-羥基-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-21 , 66 mg, 0.21 mmol)之吡啶(5 mL)溶液添加三氧化硫吡複合物(271 mg, 1.71 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。將該粗產物在短矽膠墊上純化，用己烷(50 mL)溶析，隨後用乙酸乙酯/己烷(1:1, 50 mL)、乙酸乙酯(50 mL)及丙酮(100 mL)溶析，以得到呈白色固體之吡啶硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(胺甲醯基氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(13 mg, 14%)。MS: 388 ES- (C11 H15 N7 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.57 – 3.63 (m, 5H); 4.90(m, 1H); 5.72 (m, 1H); 7.58 (s, 1H); 8.01 (m, 2H); 8.58 (m, 1H); 8.74 (m, 2H) 化合物/吡啶比率(1:1)。另外的 實例 之 分析數據
表 2 中的全部化合物係根據流程圖3或使用熟習該項技藝者容易知道的相似反應 而合成。全部的化合物係經分離為反式外消旋的。表 2 流程圖 4 Int-22
在室溫下向(E)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(Int-10 , 88 mg, 0.27 mmol)之氯仿(10 mL)溶液添加NCS (52 mg, 0.30mmol)及吡啶(0.02 mL, 0.27 mmol)。在40°C下將其攪拌1小時並冷卻至室溫。添加丙-2-烯酸第三丁酯(0.04 mL, 0.30mmol)及DIEA (0.06 mL, 0.32 mmol)，並在室溫下攪拌30分鐘。添加DCM (10 mL)及飽和氯化銨溶液(10 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮以得到粗產物。藉由急驟層析法(12 g矽膠，0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(51 mg, 41%)。MS: 454 ES+ (C23 H27 N5 O5 )。Int-23
將3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(Int-22 , 41 mg, 0.094 mmol)之丙酮(10 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (1 mg, 0.001 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(32 mg, 97%)。MS: 364 ES+ (C16 H21 N5 O5 )。Int-24
在環境溫度下向3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(Int-23 , 32 mg, 0.088 mmol)之吡啶(5 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(112 mg, 0.70 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, 20g，乙腈/水 = 0/100至1/5)將其純化，以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(17 mg, 43%)。MS: 442 ES- (C16 H21 N5 O8 S)。實例 35
在0°C下向3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(Int-24 , 17 mg, 0.038 mmol)之DCM (1 mL)溶液添加TFA (1 mL, 13.05 mmol)。在0°C下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除以得到粗產物。將其溶解於水中並藉由逆相層析法(Sepabeads, 12 g, 100%水)純化，以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-羧酸(12 mg, 64%)。MS: 386 ES- (C12 H13 N5 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.26 – 3.34 (m, 2H); 2.52 – 3.68 (m, 5H); 4,72 (m, 1H); 4.85 – 5.02 (m, 1H); 5.55 (m, 1H); 7.53 (s, 1H)。另外的 實例 之 分析數據
表 3 中的全部化合物係根據流程圖4或使用熟習該項技藝者容易知道的相似反應而合成。全部的化合物係經分離為反式外消旋的。表 3 流程圖 5 Int-25
在-10°C下向3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,5-二氫異噁唑-5-甲酸第三丁酯(Int-22 , 90 mg, 0.198 mmol)之MeOH (3 mL)及THF (6 mL)溶液添加LiBH4 (5.94 mL, 5.94 mmol)之THF (1 N)溶液。在-10°C下攪拌該反應混合物2小時。添加DCM (50 mL)及飽和氯化銨溶液(50 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮，以得到粗產物。藉由急驟層析法(12 g矽膠，0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(5-(羥甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(40 mg, 52%)。MS: 384 ES+ (C19 H21 N5 O4 )。Int 26
在室溫下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(5-(羥甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-25 , 40 mg, 0.10mmol)之DCM (10 mL)溶液添加2,6-二甲吡啶(0.01 mL, 0.13 mmol)及三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.03 mL, 0.11 mmol)。在35°C下攪拌該反應混合物2小時。添加DCM (10 mL)及飽和氯化銨溶液(10 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮以得到粗產物。藉由急驟層析法(12 g矽膠，0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(50 mg, 96%)。MS: 498 ES+ (C25 H35 N5 O4 Si)。Int 27
將(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-26 , 50 mg, 0.10mmol)之丙酮(10 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (1 mg, 0.001 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(4R,8S)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-5-羥基-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(40 mg, 97%)。MS: 408 ES+ (C18 H29 N5 O4 Si)。Int-28
在環境溫度下向(4R,8S)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-5-羥基-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-27 , 40 mg, 0.098 mmol)之吡啶(5 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(125 mg, 0.785 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。藉由急驟層析法(矽膠，4g, 0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(5 mg, 10%)。MS: 486 ES- (C18 H29 N5 O7 SiS)。實例 38
在環境溫度下向硫酸氫(4R,8S)-8-(5-(((第三丁基二甲矽基)氧基)甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-28 , 5 mg, 0.0103 mmol)之乙酸乙酯(2 mL)及THF (1 mL)溶液添加HF.吡啶(0.001 mL, 0.09 mmol)。攪拌該反應混合物2小時，接著進行濃縮。將所得固體溶解於水中，並藉由逆相層析法(Sepabeads, 4 g, 100%水)純化以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-(5-(羥甲基)-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(0.8 mg, 19%)。MS: 372 ES- (C12 H15 N5 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: (300MHz, D2 O) d: 3.25 – 3.30(m, 3H); 3.59 – 3.65 (m, 5H); 3.62 – 3.79 (m, 1 H); 4.93 (m, 2H); 5.60(m, 1H); 7.60(s, 1H); 7.98 (m, 1H); 8.48 (m, 0.5H); 8.72 (m, 1H) 化合物/吡啶比率(2:1)。實例 39
吡啶硫酸氫(4R,8S)-8-(5-(羥甲基)-4-甲基-4,5-二氫異噁唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯係藉由按照如實例 38 所示相似的反應順序，使用流程圖4的步驟1中之(E)-丁-2-烯酸甲酯及KF.2H2 O而合成。MS: 386 ES- (C13 H17 N5 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d:1.42 (d, 3H); 3.25 (m, 1H); 3.56 (m, 1H); 3.60(m, 2H); 3.65 (s, 3H); 3.81 (m, 1H); 4.50(m, 1H); 4.93 (m, 1H); 5.65 (m, 1H); 7.61 (s, 1H); 8.04 (m, 2H); 8.61 (m, 1H); 8.77 (m, 2H) 化合物/吡啶比率(1:1)。流程圖 6 Int-29 及 Int-30
藉由SFC使用Chiralpak AD-H管柱而分離出反式外消旋的(Z)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-13 , 8 g)，其分離係以25%異丙醇為CO2 共溶劑，條件為75 g/min、系統壓力120巴、管柱溫度為25°C，以得到以下各物：
Int-29 : (4R*,8S*,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(對掌性，3.06g, 34%)。MS: 471 ES+ (C23 H34 N6 O3 Si)1 H NMR (300MHz, MeOD) d: 0.01 (s, 6H); 0.81 (s, 9H); 3.07 (s, 3H); 3.32 (m, 1H); 3.47 (m, 1H); 3.62 (s, 3H); 4.31 (m, 1H); 4.95 (m, 2H); 5.48 (m, 1H); 7.35 - 7.44 (m, 6H). ee ＞99%。
Int-30 : (4S*,8R*,Z)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(對掌性，2.38 g, 26%)。MS: 471 ES+ (C23 H34 N6 O3 Si)1 H NMR (300MHz, MeOD) d: 0.01 (s, 6H); 0.81 (s, 9H); 3.07 (s, 3H); 3.32 (m, 1H); 3.47 (m, 1H); 3.62 (s, 3H); 4.31 (m, 1H); 4.95 (m, 2H); 5.48 (m, 1H); 7.35 - 7.44 (m, 6H). ee ＞99%。實例 40
(4R*,8S*)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯硫酸氫鈉（對掌性）係藉由按照如實例1所示相似的反應順序，使用流程圖1步驟14中之Int-29 而合成。MS: 345 ES- (C10 H14 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d:3.08 (s, 3H); 3.52 (m, 2H); 3.61 (s, 3H); 4.93 (m, 1H); 5.69 (s, 1H); 7.60(s, 1H)。絕對立體化學係通過結晶學確認。實例 41
(4S*,8R*)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯硫酸氫鈉（對掌性）係藉由按照如實例1所示相似的反應順序，使用流程圖1步驟14中之Int-30 而合成。MS: 345 ES- (C10 H14 N6 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d:3.05 (s, 3H); 3.52 (m, 2H); 3.60(s, 3H); 4.92 (m, 1H); 5.68 (s, 1H); 7.58 (s, 1H)。實例 42
在0°C下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(((2-胺乙基)胺甲醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(實例 18 , 8.3 mg, 0.0192 mmol)之吡啶(0.5 mL)溶液添加異氰酸三甲矽酯(2.35 mg, 0.0192 mmol)。在0°C下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除以得到粗產物。將其溶解於水中並藉由逆相層析法(Sepabeads, 4 g, 100%水)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-甲基-8-((Z)-N-甲基-N'-(((2-脲基乙基)胺甲醯基)氧基)甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(2 mg, 19%)。MS: 474 ES- (C14 H21 N9 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.05 (s, 3H); 3.14 (m, 4H); 3.57 (m, 2H); 3.63 (s, 3H); 4.90(m, 1H); 5.72 (m, 1H); 7.59 (s, 1H)。實例 43
實例 43 係藉由按照如實例 42 中的相似反應條件而合成。取硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(((2-胺乙基)胺甲醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(實例 18 , 8.3 mg, 0.0192 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-胺甲醯基-N-甲基-N'-(((2-脲基乙基)胺甲醯基)氧基)甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(0.7 mg, 6%)。MS: 517 ES- (C15 H22 N10 O9 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.05 (s, 3H); 3.24 (m, 4H); 3.56 (m, 2H); 3.62 (s, 3H); 4.90(m, 1H); 5.71 (m, 1H); 7.58 (s, 1H)。實例 44
實例 44 係藉由按照如實例 42 中的相似反應條件而合成。取硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(((2-胺乙基)胺甲醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(實例 18 , 8 mg, 0.0185 mmol)做為受質，且用氯化乙醯(0.001 mL, 0.0185 mmol)做為試劑，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(((2-乙醯胺基乙基)胺甲醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(4 mg, 41%)。MS: 473 ES- (C15 H22 N8 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 1.88 (s, 3H); 3.05 (2, 3H); 3.19 (m, 4H); 3.57 (m, 2H); 3.62 (s, 3H); 4.90(m, 1H); 5.71 (m, 1H); 7.59 (s, 1H); 8.01 (m, 1H); 8.55 (m, 0.5H); 8.72 (m, 1H) 化合物/吡啶比率(2:1)。實例 45
在0°C下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-(((4-胺基丁基)胺甲醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-19 , 70 mg, 0.125 mmol)之DCM (10 mL)溶液添加TFA (0.956 mL, 12.48 mmol)。在0°C下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除。將殘餘物溶解於水中並藉由逆相層析法(40g Sepabeads, 100%水)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-甲基-8-((Z)-N-甲基-N'-(((4-(2,2,2-三氟乙醯胺基)丁基)胺甲醯基)氧基)甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(48 mg, 59%)。MS: 555 ES- (C17 H23 F3 N8 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 1.47 (m, 4H); 3.05 – 3.25 (m, 7H); 3.57 – 3.69 (m, 5H); 4.95 (m, 1H); 5.75 (m, 1H); 7.59 (s, 1H)。流程圖 7 Int-31
在10分鐘的過程內於0°C下向第三丁醇(1.9 mL, 20mmol)之DCM (12 mL)攪拌溶液逐滴添加異氰酸氯磺醯酯(1.4 mL, 15 mmol)。在0°C下攪拌5分鐘之後，使反應混合物升溫至室溫並攪拌20分鐘。將其真空濃縮至三分之一體積。將燒瓶放回到0°C浴槽中，使產物從溶液中結晶出來。在50分鐘之後，過濾產物並用己烷(20 mL)洗滌，以得到呈白色固體之(氯磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(1.41 g, 40%)。將其立即使用於下一步驟中。Int-32
在0°C下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 248 mg, 0.696 mmol)之DCM (30 mL)攪拌溶液添加(氯磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-31 , 225 mg, 1.044 mmol)，隨後添加DIEA (0.36 mL, 2.09 mmol)。在0°C下攪拌該反應混合物16小時。將飽和氯化銨水溶液(20 mL)及DCM (20 mL)添加至反應混合物中。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。粗產物係經急驟層析法(4g, 0-100% 於己烷中的EtOAc)純化，以得到呈白色固體之(((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(88 mg, 24%)。MS: 536 ES+ (C22 H29 N7 O7 S)。Int-33
將(((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-32 , 88 mg, 0.164 mmol)之丙酮(20 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (1.7 mg, 0.0016 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(((((Z)-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(60 mg, 82%)。MS: 446 ES+ (C15 H23 N7 O7 S)。Int-34
在環境溫度下向(((((Z)-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-33 , 60 mg, 0.135 mmol)之吡啶(10 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(172 mg, 1.078 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。粗產物係經急驟層析法(矽膠，4 g，0-100%於己烷中之EtOAc，接著用丙酮)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((N-(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(70 mg, 99%)。MS: 524 ES- (C15 H23 N7 O10 S2 )。實例 46
在0°C下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((N-(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-34 , 50 mg, 0.095 mmol)之DCM (0.5 mL)攪拌溶液添加TFA (2.7 mL, 36.3 mmol)。在0°C下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除以得到粗產物。將其溶解於水中並藉由逆相層析法(Sepabeads, 12 g, 100%水)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-甲基-8-((Z)-N-甲基-N'-(胺磺醯基氧基)甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(8 mg, 17%)。MS: 424 ES- (C10 H15 N7 O8 S2 )1 H NMR (300MHz, D2 O) d: (300MHz, D2 O) d: 3.14 (s, 3H); 3.65 – 3.76 (m, 5H); 4.98 (m, 1H); 5.85 (m, 1H); 7.67 (s, 1H); 8.11 (m, ,4H); 8.63 (m, 2H); 8.82 (m, 4H) 化合物/吡啶/TFA比率(1:2:1)。流程圖 8 Int-35
於2000 mL圓底燒瓶中裝填4-[(二甲胺基)亞甲基]-3,5-二側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(Int-1 , 170g, 633.60mmol)及乙醇 (675 mL)。添加2-肼基乙-1-醇(48 g, 630.77 mmol)。在室溫下將所得的反應混合物攪拌過夜。將其真空濃縮。用乙酸乙酯(2000 mL)稀釋有機層，並用鹽水(2 x 500 mL)洗滌。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並真空濃縮以得到粗產物。將其施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈淺黃色油狀物之1-(2-羥乙基)-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(95 g, 53%)。MS: 282 ES+ (C13 H19 N3 O4 )。Int-36
在0°C下於2000-mL圓底燒瓶中裝填1-(2-羥乙基)-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-35 , 95 g, 337.71 mmol)、咪唑(46 g, 676.47 mmol)及DCM (1000 mL)。逐滴添加(氯)二甲基第三丁矽烷(66 g, 437.89 mmol)之DCM (100 mL)溶液。在室溫下將該反應混合物攪拌過夜。用鹽水(2 x 500 mL)洗滌該反應混合物。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈白色固體之1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(130g, 97%)。MS: 396 ES+ (C19 H33 N3 O4 Si)。Int-37
在0°C下於2000-mL圓底燒瓶中裝填1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-36 , 73 g, 184.54 mmol)、MeOH (365 mL)及THF (730 mL)。添加NaBH4 (7 g, 185 mmol)。在0°C下將所得的反應混合物攪拌2小時。接著藉由添加水(1000 mL)以使其淬滅。用EtOAc (3 x 1000 mL)萃取所得溶液。合併的有機層係經用鹽水(2 x 500 mL)洗滌、分離、經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮，以得到呈淺黃色油狀物之1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4-羥基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(77.5 g，定量產率)。MS: 398 ES+ (C19 H35 N3 O4 Si)。Int-38
在0°C下於2000-mL圓底燒瓶中裝填1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4-羥基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-37 , 51 g, 128 mmol)、N-(苯甲氧基)-2-硝基苯-1-磺胺(59 g, 191 mmol)、PPh3 (67 g, 255 mmol)及THF (1000 mL)。逐滴添加DIAD (52 g, 255 mmol)之THF (100 mL)溶液。在室溫下將所得的反應混合物攪拌過夜並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈淺黃色油狀物之4-((N-(苯甲氧基)-4-硝基苯基)磺醯胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(68 g, 77%)。MS: 688 ES+ (C32 H45 N5 O8 SSi)。Int-39
於2000-mL圓底燒瓶中裝填4-((N-(苯甲氧基)-4-硝基苯基)磺醯胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-38 , 68 g, 98.85 mmol)、DCM (680 mL)及ZnBr2 (67 g, 296.55 mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌2天。將固體過濾出。接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(500 mL)以使反應物淬滅，並用DCM (3 x 500 mL)萃取。有機層係經合併，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈淺黃色油狀物之N-(苯甲氧基)-N-(1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-4-硝基苯磺胺(55 g, 94.7%)。MS: 588 ES+ (C27 H37 N5 O6 SSi)。Int-40
在0°C下於2000-mL圓底燒瓶中裝填N-(苯甲氧基)-N-(1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-4-硝基苯磺胺(Int-39 , 53 g, 90.17 mmol)及DCM (530 mL)。添加NCS (15.7 g, 117.22 mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌1.5小時並接著冷卻至0°C。添加DBU (20.6 g, 135.25 mmol)，使反應混合物升溫至室溫並另外攪拌3小時。所得溶液係未進一步純化即直接使用於下一步驟中。MS: 586 ES+ (C27 H35 N5 O6 SSi)。Int-41
將TMSCN (35.7 g, 360.7 mmol)添加至N-(苯甲氧基)-N-(1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5-二氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-4-硝基苯磺胺(Int-40 )中。在室溫下將該反應混合物攪拌過夜。用飽和碳酸氫鈉水溶液(500 mL)將其稀釋，並用DCM (2 x 500 mL)萃取。有機萃取物係經合併，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈淺褐色油狀物之N-(苯甲氧基)-N-(1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-7-氰基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-4-硝基苯磺胺(46 g, 83%)。MS: 613 ES+ (C28 H36 N6 O6 SSi)。Int-42
在0°C下於1000-mL圓底燒瓶中裝填N-(苯甲氧基)-N-(1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-7-氰基-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-4-硝基苯磺胺(Int-41 , 44.7 g, 72.95 mmol)及甲醇(450 mL)。逐滴添加氯化乙醯(148 g, 1896 mmol)。在室溫下將所得的反應混合物攪拌1小時，接著在55°C下攪拌2小時。將其冷卻至室溫。用飽和碳酸氫鈉水溶液將該反應混合物的pH值調整到9，並用乙酸乙酯(3 x 50 mL)萃取。有機萃取物係經合併，經無水硫酸鈉乾燥，並真空濃縮以得到呈褐色油狀物之4-((N-(苯甲氧基)-4-硝苯基)磺醯胺基)-1-(2-羥乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(38 g, 98%)。MS: 532 ES+ (C23 H25 N5 O8 S)。Int-43
在0°C下於1000-mL圓底燒瓶中裝填4-((N-(苯甲氧基)-4-硝苯基)磺醯胺基)-1-(2-羥乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(Int-42 , 38 g, 71.49 mmol)、DCM (380 mL)及咪唑(9.7 g, 142.98 mmol)。逐滴添加TBSCl (14 g, 92.94 mmol)之DCM (50 mL)溶液。在室溫下將所得的反應混合物攪拌過夜。將其用鹽水(2 x 500 mL)洗滌。有機萃取物係經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈黃色油狀物之4-((N-(苯甲氧基)-4-硝苯基)磺醯胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(39 g, 85%)。MS: 646 ES+ (C29 H39 N5 O8 SSi)。Int-44
於250 mL圓底燒瓶中裝填4-((N-(苯甲氧基)-4-硝苯基)磺醯胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-羥酸酯(Int-43 , 10g, 15.48 mmol) )、DMF (100 mL)、硫代羥乙酸(3.56 g, 30.96 mmol)及LiOH (1.86 g, 77.40mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物1小時，並用EtOAc (200 mL)稀釋。將其用鹽水(200 mL)洗滌。用EtOAc (100 mL)萃取水層，並合併有機層。有機萃取物係經用鹽水(5 x 100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於矽膠管柱上並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到呈黃色油狀物之4-((苯甲氧基)胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(5.4 g, 76%)。MS: 461 ES+ (C23 H36 N4 O4 Si)。Int-45
在0°C下於2000-mL圓底燒瓶中裝填4-((苯甲氧基)胺基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(Int-44 , 27 g, 58.61 mmol)、乙腈(540 mL)及DIEA (30g, 234.44 mmol)。將三光氣(7 g, 23.44 mmol)之乙腈(100 mL)溶液逐滴添加至該反應混合物中並攪拌2小時，隨後添加4-二甲胺基吡啶(1.4 g, 11.72 mmol)。在室溫下將所得的反應混合物攪拌過夜，並真空濃縮。用EtOAc (500 mL)稀釋並用鹽水洗滌(2 x 100 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。將粗產物施於矽膠管柱上，並用乙酸乙酯/石油醚溶析，以得到(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基) 氧基)乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(16 g, 56%)。MS: 487 ES+ (C24 H34 N4 O5 Si)。流程圖 9 Int 46
於250-mL圓底燒瓶中裝填(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-((二甲基第三丁矽基)氧基)乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-45 , 3820 mg, 7.85 mmol)、HF.吡啶(0.32 mL, 8.63 mmol)及EtOAc (100 mL)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時。添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)及EtOAc (100 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。用EtOAc (20 mL)將其濕磨。沉澱物係經過濾並用EtOAc (5 mL)洗滌，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-羥乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(2724 mg, 93%)。MS: 373 ES+ (C18 H20 N4 O5 )。Int-47
在0°C下於100-mL圓底燒瓶中裝填(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-羥乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-46 , 1910 mg, 5.13 mmol)及DCM (30 mL)。添加甲磺醯氯(0.48 mL, 6.16 mmol)之DCM (5 mL)溶液，隨後添加DIEA (1.34 mL, 7.69 mmol)。在0°C下將該反應混合物攪拌20分鐘。添加水(100 mL)。藉由添加0.5N HCl溶液而將該混合物的pH調整至約3。用EtOAc (3 x 100 mL)萃取該混合物。有機萃取物係經匯集，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到呈白色黏性泡沫之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-((甲磺酸基)氧基)乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(2070 mg, 89%)。MS: 451 ES+ (C19 H22 N4 O7 S)。Int-48
於100-mL圓底燒瓶中裝填(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-((甲磺酸基)氧基)乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-47 , 2070 mg, 4.6 mmol)及DMF (50 mL)。添加疊氮化納(3584 mg, 55.14 mmol)，在40°C下攪拌該反應混合物4小時，接著在室溫下攪拌過夜。將該反應混合物分配於水(200 mL)及EtOAc (200 mL)之間。有機層係經分離，用水(100 mL)、鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(40g，用EtOAc/己烷溶析)將其純化以得到呈灰白色固體之(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(1810 mg, 99%)。MS: 398 ES+ (C18 H19 N7 O4 )。Int-49
在-10°C下向(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-48 , 354 mg, 0.89 mmol)之甲醇(60 mL)及THF (30 mL)溶液添加LiBH4 (4.46 mL, 8.90mmol)之THF溶液。在-10°C下攪拌該反應混合物2小時。添加DCM(100 mL)及飽和氯化銨水溶液(100 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(40g矽膠，用0-100%溶於己烷中之EtOAc溶析，接著用丙酮溶析)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-8-(羥甲基)-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(310 mg, 94%)。MS: 370ES+ (C17 H19 N7 O3 )。Int-50
在室溫下向(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-8-(羥甲基)-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-49 , 310 mg, 0.84 mmol)之DCM (60 mL)溶液添加戴斯-馬丁過碘烷(427 mg, 1.01 mmol)。攪拌該反應混合物2小時。添加水(10 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(30 mL)及2N Na2 S2 O3 溶液(50 mL)並攪拌5分鐘。該雙相混合物係經分離並用DCM (100 mL)萃取水層。合併之有機層係經無水硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮以得到呈無色油狀物之(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(300 mg, 97%)。MS: 368 ES+ (C17 H17 N7 O3 )。Int-51
Int-51 係藉由按照如關於Int-10 （流程圖1，步驟10）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(Int-50 , 300 mg, 0.816 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(E)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(283 mg, 91%)。MS: 383 ES+ (C17 H18 N8 O3 )。Int-52
Int-52 係藉由按照如關於Int-11 （流程圖1，步驟11）所示的相似反應條件而合成，使用(E)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(Int-51 , 283 mg, 0.74 mmol)做為受質，以得到呈黃色固體之(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(308 mg, 99%)。MS: 417 ES+ (C17 H17 ClN8 O3 )。Int-53
Int-53 係藉由按照如關於Int-12 （流程圖1，步驟12）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(Int-52 , 308 mg, 0.74 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-羥基-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(247 mg, 81%)。MS: 412 ES+ (C18 H21 N9 O3 )。Int-54
Int-54 係藉由按照如關於Int-13 （流程圖1，步驟13）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-羥基-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-53 , 247 mg, 0.60mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(308 mg, 97%)。MS: 526 ES+ (C24 H35 N9 O3 Si)。Int-55
在-10°C下向(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-54 , 308 mg, 0.586 mmol)之甲醇(20 mL)及THF (10 mL)溶液添加LiBH4 (1.46 mL, 2.93 mmol)及CuSO4 (93.52 mg, 0.59 mmol)溶液。在-10°C下將其攪拌1小時。添加Boc2 O (127.87 mg, 0.59 mmol)及DIEA (0.1 mL, 0.59 mmol)並在0°C下攪拌2小時。添加飽和氯化銨溶液(100 mL) 並攪拌5分鐘。去除大部分有機溶劑。 加入DCM（100 mL）和飽和氯化銨溶液（100 mL）。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(20g矽膠，0-50%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈無色油狀物之(2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(86 mg, 24%)。MS: 600ES+ (C29 H45 N7 O5 Si)。Int-56
Int-5 6 係藉由按照如關於Int-1 4 （流程圖1，步驟14）所示的相似反應條件而合成，使用(2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(Int-55 , 86 mg, 0.14 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(68 mg, 93%)。MS: 510ES+ (C22 H39 N7 O5 Si)。Int-57
Int-5 7 係藉由按照如關於Int-1 5 （流程圖1，步驟15）所示的相似反應條件而合成，使用(2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(Int-56 , 68 mg, 0.13 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(78 mg, 99%)。MS: 588 ES- (C22 H39 N7 O8 SSi)。Int-58
Int-58 係藉由按照如關於Int-16 （流程圖1，步驟16）所示的相似反應條件而合成，使用硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-57 , 78 mg, 0.13 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)基酯(31 mg, 49%)。MS: 474 ES- (C16 H25 N7 O8 S)。實例 47
在0°C下向硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)基酯(Int-58 , 31 mg, 0.07 mmol)之DCM (10 mL)溶液添加TFA (0.25 mL, 3.28 mmol)。在0°C下將其攪拌6小時，並真空濃縮。將粗製材料溶解於水，並藉由逆相層析法(sepabeads 12 g, 100%水)純化以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(2-胺乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(7 mg, 25%)。MS: 376 ES+ (C11H17N7O6S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d:3.05 (s, 3H); 3.42 (m, 2H); 3.57 (m, 2H); 4.17 (m, 2H); 4.91 (m, 1H); 5.71 (m, 1H); 7.70(s, 1H)。流程圖 10 Int-59
Int-5 9 係藉由按照如關於Int- 55 （流程圖9，步驟10）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S,Z)-1-(2-疊氮基乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-54 , 89 mg, 0.17 mmol)做為受質，且不添加Boc2 O，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-1-(2-胺乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(84 mg, 99%)。MS: 500ES+ (C24 H37 N7 O3 Si)。Int-60
在-10°C下向(4R,8S,Z)-1-(2-胺乙基)-5-(苯甲氧基)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-59 , 84 mg, 0.17 mmol)之吡啶(5 mL)溶液添加乙酸酐(0.01 mL, 0.17 mmol)。在-10°C下將其攪拌1小時。添加飽和氯化銨溶液(20 mL)及DCM (20 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。粗產物係經急驟層析法(20g矽膠，0-50%於己烷中之EtOAc)純化，以得到呈無色黏性油狀物之N-(2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)乙醯胺(74 mg, 81%)。MS: 542 ES+ (C26 H39 N7 O4 Si)。Int-61
Int- 61 係藉由按照如關於Int- 56 （流程圖9，步驟11）所示的相似反應條件而合成，使用N-(2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)乙醯胺(Int-60 , 74 mg, 0.136 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之N-(2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)乙醯胺(50 mg, 81%)。MS: 452 ES+ (C19 H33 N7 O4 Si)。Int-62
Int- 6 2 係藉由按照如關於Int- 5 7 （流程圖9，步驟12）所示的相似反應條件而合成，使用N-(2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙基)乙醯胺(Int-61 , 50 mg, 0.11 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(2-乙醯胺基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(57 mg, 97%)。MS: 530ES- (C19 H33 N7 O7 SiS)。實例 48
實例 48 係藉由按照如關於Int-16 （流程圖1，步驟16）所示的相似反應條件而合成，使用硫酸氫(4R,8S)-1-(2-乙醯胺基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-62 , 57 mg, 0.107 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(2-乙醯胺基乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(10 mg, 20%)。MS: 416 ES- (C13 H19 N7 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 1.93 (s, 3H); 3.08 (s, 3H); 3.55 (m, 4H); 4.01 (m, 2H); 4.94 (m, 1H); 5.45 (m, 1H); 7.68 (s, 1H); 8.02 (m, 0.5H); 8.61 (m, 0.25H); 8.79 (0.5H) 化合物/吡啶比率(1:0.25)。流程圖 11 Int-63
Int-63 係藉由按照如關於Int-9 （流程圖1，步驟9）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-羥乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-46 , 234.3 mg, 0.63 mmol)做為受質，以得到呈淺黃色油狀物之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2,2-二羥乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(244.3 mg, 100%)。MS: 389 ES+ (C18 H20 N4 O6 )。Int-64
在0°C下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2,2-二羥乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-63 , 244.3 mg, 0.63 mmol)之吡啶(0.5 mL)溶液添加(2-(胺氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(110.84 mg, 0.63 mmol)之吡啶(0.5 mL)溶液。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌15分鐘，接著用乙酸乙酯(50 mL)稀釋，且用飽和氯化銨溶液(20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌。有機層係經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉矽膠層析法(0%-80%乙酸乙酯/己烷)而得到呈灰白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(241.1 mg, 73%)。MS: 529 ES+ (C25 H32 N6 O7 )。Int-65
在0°C下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-64 , 248.5 mg, 0.47 mmol)之THF (4 mL)及水(1 mL)溶液添加氫氧化鋰(0.66 mL, 0.66 mmol)。在0˚C下攪拌該反應混合物15分鐘，接著用1N HCl中和。將THF移除並將水溶液冷凍並凍乾以得到白色固體。將該固體溶解於水中以得到一混濁溶液。將pH調整到約3至4並用乙酸乙酯(2 x 100 mL)萃取產物。有機層係經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以得到呈灰白色泡沫之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羧酸(236.4 mg, 98%)。MS: 515 ES+ (C24 H30 N6 O7 )。Int-66
在室溫下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羧酸(Int-65 , 236.4 mg, 0.46 mmol)之DCM (4 mL)懸浮液添加O-(第三丁基二甲矽基)羥胺(87.98 mg, 0.59 mmol)及EDC (105.63 mg, 0.55 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物約2小時，接著用二氯甲烷稀釋，且用1:1的鹽水：水洗滌一次。有機層係經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。藉矽膠層析法(0%-50%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色泡沫之(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(148.2 mg, 50%)。MS: 644 ES+ (C30 H45 N7 O7 Si)。Int-67
在-78°C下向(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(Int-66 , 141 mg, 0.22 mmol)及三乙胺(0.06 mL, 0.44 mmol)之DCM (3 mL)溶液添加三氟甲磺酸酐(0.07 mL, 0.44 mmol)。攪拌該反應混合物5分鐘。向該溶液逐滴添加甲胺(0.05 mL, 1.31 mmol)。接著使該反應混合物升溫至室溫並攪拌1.5小時。用DCM稀釋該反應混合物並用飽和氯化銨洗滌一次。有機層係經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。藉矽膠層析法(0%-50%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色泡沫之(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(60.6 mg, 42%)。MS: 657 ES+ (C31 H48 N8 O6 Si)。Int-68
向(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(Int-67 , 60.6 mg, 0.09 mmol)之乙酸乙酯(3 mL)溶液用氮氣脫氣，並添加Pd/C (9.82 mg, 0.01 mmol)。使該混合物再次脫氣並置於氫氣球形瓶下。攪拌該反應混合物2小時。觀察到有微量的產物。用氮氣沖洗該反應混合物，並添加甲醇(1 mL)。使該反應混合物脫氣。添加更多的Pd/C (9.82 mg, 0.01 mmol)，並使該反應混合物脫氣並再置於氫氣球形瓶下。攪拌該反應混合物約40分鐘，接著用氮氣沖洗，並過濾，以移除催化劑。將濾液濃縮以得到呈無色油狀物之(2-((((E)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(52.28 mg, 100%)。MS: 567 ES+ (C24 H42 N8 O6 Si)。Int-69
在室溫下向(2-((((E)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)亞乙基)胺基)氧基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(Int-68 , 52.2 mg, 0.09 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(87.96 mg, 0.55 mmol)。攪拌該反應混合物過夜，接著用DCM稀釋，並過濾以移除固體。濾液係經濃縮及真空乾燥。用DCM及丙酮濕磨所得的油狀物，並過濾以移除固體。濾液係經濃縮以得到呈灰白色泡沫之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(59.57 mg, 100%)。MS: 645 ES- (C24 H42 N8 O9 SiS)。Int-70
在室溫下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-69 , 59.57 mg, 0.09 mmol)之乙酸乙酯(2 mL)及THF (1 mL)溶液添加HF.吡啶(0.0026 mL, 0.10mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。添加更多的HF.吡啶(0.0026 mL, 0.10mmol)。再過30分鐘之後，添加另外的HF.吡啶(0.0026 mL, 0.10mmol)。在30分鐘之後，將反應混合物濃縮以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(49 mg, 100%)。MS: 533 ES+ (C18 H28 N8 O9 S)。實例 49
在0˚C下向硫酸氫(4R,8S)-1-((E)-10,10-二甲基-8-側氧基-4,9-二氧雜-3,7-二氮雜十一-2-烯-1-基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-70 , 49 mg, 0.09 mmol)之DCM (2 mL)懸浮液添加三氟乙酸(0.14 mL, 1.84 mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。添加更多的三氟乙酸(0.14 mL, 1.84 mmol)，並使該反應混合物升溫至室溫歷時15分鐘。用DCM將該反應混合物濃縮數次以移除過剩的TFA。將所得的油狀物進行真空乾燥。藉由C18 ISCO (100%水，4分鐘，0%-50% ACN/水，3分鐘)純化以得到呈白色固體之硫酸氫1-((E)-2-((2-胺乙氧基)亞胺基)乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(14.8 mg, 37%)，其為E/Z異構體約3:2之混合物。MS: 431 ES- (C13 H20 N8 O7 S).1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 2.89 (m, 3H); 3.03 (m, 2H); 4.13 (m, 2H); 4.70(m, 3H); 5.44 (d, 1H); 5.75 (m, 1H); 6.95 (m, 0.4H); 7.35 (m, 1H); 7.51 (m, 0.6H); 7.74 (bs, 3H); 9.45 (m, 1H)。流程圖 12 Int-71
於1000-mL圓底燒瓶中裝填4-[(二甲胺基)亞甲基]-3,5-二側氧基哌啶-1-甲酸第三丁酯(Int-1 , 63 g, 234.80mmol)、乙醇(600 mL)、NH2 NH2 .H2 O (62 g, 992 mmol)。在53o C下於油浴中攪拌所得溶液過夜。將所得的混合物進行真空濃縮。添加MTBE (500 mL)，將所形成的固體過濾收集。在減壓情形下於烤箱中將該固體烘乾，以得到呈黃色固體之(E)-4-亞甲基肼基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(40g, 68%)。MS: 252 ES+ (C11 H17 N5 O2 )。Int-72
於2000-mL圓底燒瓶中裝填4-亞甲基肼基-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-71 , 80g, 318.36 mmol)、丙酮(800 mL)及氯化氫(1M) (800 mL)。在室溫下攪拌所得溶液2小時。添加水(700 mL)，並用乙酸乙酯(3 x 500 mL)萃取該反應混合物。有機層係經合併、用鹽水(3 x 2 L)洗滌、經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮，以得到呈黃色油狀物之4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-甲酸第三丁酯(75 g, 99%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 182 ES+ (C11 H15 N3 O3 )。Int-73
於2000-mL圓底燒瓶中裝填4-側氧基-1,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-甲酸第三丁酯(Int-72 , 75 g, 316.12 mmol)、二氯甲烷(750 mL)、(氯二苯基甲基)苯 (97 g, 347.95 mmol)及三乙胺(38 g, 375.53 mmol)。在室溫下攪拌所得溶液過夜。接著藉由添加水(6000 mL)使反應物淬滅。用二氯甲烷(2 x 400 mL)萃取該反應混合物。有機萃取物係經合併，用鹽水(3 x 100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於使用乙酸乙酯/石油醚(1:10)之矽膠管柱上。將收集到的分餾物合併並真空濃縮，以得到呈白色固體之4-側氧基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(50g, 33%)。1 H NMR (400MHz, 氯仿-d) δ 7.96 (s, 1H); 7.41 – 7.30(m, 9H); 7.20– 7.12 (m, 6H); 4.76 (s, 2H); 4.22 (s, 2H); 1.50(s, 9H)。Int-74
用氮氣惰性環境將1000-mL三頸圓底燒瓶沖淨並保持在該環境中。添加4-側氧基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-73 , 46 g, 95.92 mmol)、四氫呋喃(460 mL)及甲醇(230 mL)，隨後在10o C下於5分鐘內以數個批次添加NaBH4 (3.65 g, 96.48 mmol)。在10o C下於水/冰浴中攪拌所得溶液1小時，並藉由添加水(500 mL)使其淬滅。用乙酸乙酯(3 x 500 mL)萃取所得溶液，並將有機層合併。有機萃取物係經用鹽水(3 x 1000 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於使用乙酸乙酯/石油醚(1:10-1:0)之矽膠管柱上。將收集到的分餾物合併並真空濃縮，以得到呈白色固體之4-羥基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(33 g, 71%)。1 H NMR (300MHz, 氯仿-d) δ 7.41 (s, 1H); 7.37 – 7.28 (m, 9H); 7.21 – 7.11 (m, 6H); 4.81 (d, J = 28.0Hz, 2H); 4.34 (d, J = 16.5 Hz, 1H); 3.96 (dd, J = 13.7, 4.3 Hz, 1H); 3.50(dd, J = 13.7, 3.4 Hz, 1H); 1.49 (s, 9H)。Int-75
用氮氣惰性環境將1000-mL三頸圓底燒瓶沖淨並保持在該環境中。添加4-羥基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6-甲酸第三丁酯(Int-74 , 18 g, 37.38 mmol)及四氫呋喃(360 mL)，隨後在 -30o C下於5分鐘內在攪拌下逐滴添加n-BuLi (22.5 mL, 56.13 mmol)。在 -20o C下攪拌該溶液20分鐘。在-30o C下於5分鐘內在攪拌下逐滴添加三甲基氯矽烷(4.5 g, 41.42 mmol)。在-20o C下攪拌該溶液30分鐘。在-50o C下於10分鐘內在攪拌下向該混合物逐滴添加n-BuLi (45 mL, 112.3 mmol)。在-50o C下攪拌該溶液2小時。接著在-50o C下於20分鐘內用CO2 吹洗到反應內。在室溫下攪拌所得溶液20分鐘。接著藉由添加水(1000 mL)使反應物淬滅。用氯化氫(1 mol/L)將溶液的pH值調整到3。用乙酸乙酯(3 x 1000 mL)萃取所得溶液，並將有機層合併。有機萃取物係經用鹽水(2 x 2000 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。用石油醚(200 mL)將殘餘物濕磨。將固體過濾出並乾燥，以得到呈黃色固體之6-(第三丁氧基羰基)-4-羥基-2-三苯甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-羥酸(19 g, 96.7%)。將其直接使用在下一步驟中。Int-76
於500-mL圓底燒瓶中裝填6-(第三丁氧基羰基)-4-羥基-2-三苯甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-羥酸(Int-75 , 19 g, 36.15 mmol)、丙酮(190 mL)、碳酸鉀(7.5 g, 54.27 mmol)及硫酸二甲酯(4.9 g, 38.85 mmol)。在室溫下攪拌所得溶液過夜。將固體過濾出，並用EtOAc (500 mL)洗滌。將濾液真空乾燥。將殘餘物施於使用乙酸乙酯/石油醚(1:10-1:3)之矽膠管柱上。將收集到的分餾物合併並真空濃縮，以得到呈白色固體之4-羥基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-第三丁酯7-甲酯(13.24 g, 68%)。MS: 562 ES+1+Na (C32 H33 N3 O5 )。Int-77
用氮氣惰性環境將500-mL三頸圓底燒瓶沖淨並保持在該環境中。添加4-羥基-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-第三丁酯7-甲酯(Int-76 , 8 g, 14.83 mmol)及二氯甲烷(160 mL)，隨後在-60o C下於2分鐘內在攪拌下逐滴添加三乙胺(3 g, 29.65 mmol)。在-60o C下於30分鐘內在攪拌下向其逐滴添加甲磺醯基甲磺酸酯(5.2 g, 29.85 mmol)之二氯甲烷(35 mL)溶液。在-60o C下攪拌該溶液2小時。在 -60o C下於30分鐘內在攪拌下向該混合物逐滴添加O-苯甲基羥基胺(5.5 g, 44.66 mmol)之二氯甲烷(35 mL)溶液。在-60o C下攪拌該溶液30分鐘。在室溫下攪拌所得溶液過夜，並接著添加水(500 mL)使其淬滅。用二氯甲烷(2 x 500 mL)萃取所得溶液，並將有機層合併。有機萃取物係經用鹽水(3 x 1000 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮。將殘餘物施於使用乙酸乙酯/石油醚(1:30-1:10)之矽膠管柱上。將收集到的分餾物合併並真空濃縮。得到呈白色固體之4-((苯甲氧基)胺基)-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-第三丁酯7-甲酯(5.6 g, 58.6%)。MS: 645 ES+ (C39 H40 N4 O5 )。Int-78
用氮氣惰性環境將250-mL圓底燒瓶沖淨並保持在該環境中。添加4-((苯甲氧基)胺基)-2-三苯甲基-2,4,5,7-四氫-6H-吡唑并[3,4-c]吡啶-6,7-二甲酸6-第三丁酯7-甲酯(Int-77 , 7 g, 10.86 mmol)及二噁烷(28 mL)，隨後在0o C下於20分鐘內在攪拌下逐滴添加氯化氫(4M於二噁烷中) (105 mL)。在室溫下攪拌所得溶液2小時。藉由過濾而收集沉澱物。固體係經真空乾燥以得到呈白色固體之4-((苯甲氧基)胺基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(2.81 g, 85.8%)。MS: 303 ES+ (C15 H18 N4 O3 )。Int-79
用氮氣惰性環境將3000-mL三頸圓底燒瓶沖淨並保持在該環境中。添加4-((苯甲氧基)胺基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-甲酸甲酯(Int-78 , 4.5 g, 12.03 mmol)及乙腈(1350 mL)。隨後在0o C下於5分鐘內在攪拌下逐滴添加三乙胺(7.3 g, 72.14 mmol)之乙腈(36 mL)溶液。在0o C下攪拌該溶液30分鐘。在0o C下於5小時內在攪拌下向其逐滴添加碳酸二三氯甲酯(1.25 g, 4.21 mmol)之乙腈(125 mL)溶液。在室溫下攪拌所得溶液過夜。該反應混合物係經真空濃縮，並用EtOAc (1000 mL)稀釋。其係經鹽水(2 x 1000 mL) 洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並真空濃縮以得到粗產物。將其從比率為1:10之EtOAc:MTBE中再結晶，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(1.3 g, 33%)。MS: 329 ES+ (C16 H16 N4 O4 )1 H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 7.80(s, 1H); 7.49-7.34(m, 5H); 5.02(s, 1H); 4.94-7.88(m, 2H); 4.57(s, 1H); 3.75(s, 3H); 3.44-3.35(m, 2H)。流程圖 13 Int-80 及 Int-81
在室溫下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯之DMF (210 mL)溶液添加溴乙酸第三丁酯(33.89 mL, 229.34 mmol)。在100˚C下加熱該反應混合物約3小時。用乙酸乙酯稀釋該反應混合物並用水洗滌兩次。有機層係經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。藉矽膠層析法(0%-5%丙酮/DCM)而一起得到兩個位向異構體(Int-80 及Int-81 )。將其在純化及分離(0%-5%丙酮/DCM)。首先溶析出：(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-80 , 2.928 g, 29%)，MS: 443 ES+ (C22 H26 N4 O6 )。其次溶析出：(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-2-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-6-側氧基-2,5,6,8-四氫-4H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-81 , 0.47 g, 5%)，MS: 443 ES+ (C22 H26 N4 O6 )。Int-82
在0˚C下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-80 , 2928 mg, 6.62 mmol)之THF (40 mL)及水(20 mL)溶液添加1M氫氧化鋰(6.62 mL, 6.62 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物1小時。在0˚C下另外添加0.5當量的氫氧化鋰。在室溫下攪拌該反應混合物2小時。其仍然只是起始材料。每小時添加0.2當量的氫氧化鋰直到再添加1當量。將反應混合物保持在冰箱中過夜。早上仍然只有50%的產物。再加入0.2當量的LiOH，於30分鐘後該反應完成約70-80%。在室溫下繼續攪拌1小時。將反應混合物冷卻至0˚C，用0.5N HCl酸化至約pH 4，並用乙酸乙酯萃取4次。將水層進一步酸化至約pH 2並用乙酸乙酯萃取四次。有機層係經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以得到呈淺黃色泡沫之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羥酸(1.953 g, 69%)。MS: 429 ES+ (C21 H24 N4 O6 )。Int-83
在室溫下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羥酸(Int-82 , 1453 mg, 3.39 mmol)之DCM (30 mL)溶液添加O-(第三丁基二甲矽基)羥胺(599.42 mg, 4.07 mmol)及EDC (780.15 mg, 4.07 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物1.5小時。再添加0.4當量的NH2 OTBS並攪拌3小時。該反應混合物係經濃縮並藉由矽膠層析法(0%-30%乙酸乙酯/己烷)純化兩次，以得到呈白色泡沫之2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸第三丁酯。MS: 558 ES+ (C27 H39 N5 O6 Si)。Int-84
在-78 ˚C下向2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸第三丁酯(Int-83 , 616.4mg, 1.11 mmol)及三乙胺(0.15 mL, 1.11 mmol)之DCM (12 mL)溶液添加三氟甲磺酸酐(0.19 mL, 1.11 mmol)。在-78 ˚C下攪拌該反應混合物5分鐘。向該反應混合物添加甲胺(6.63 mL, 13.26 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌6小時。其係經濃縮並藉由急驟層析法(20g矽膠，0%-30%乙酸乙酯/己烷)純化，以得到2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸第三丁酯(138.5 mg, 22%)。MS: 571 ES+ (C28 H42 N6 O5 Si)。Int-85
在0˚C下向2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸第三丁酯(Int-84 , 138.5 mg, 0.24 mmol)之DCM (2 mL)溶液添加TFA (1.02 mL, 13.35 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌3小時。用DCM將該反應混合物濃縮兩次，所得的黃色油狀物係經真空乾燥2小時以得到黃色固體。將其溶解於約2 mL的1:1 ACN/pH 7磷酸鹽緩衝劑之中，藉由C18 ISCO (100%水，3分鐘，接著至50% ACN, 4分鐘)純化以得到呈淡黃色固體之2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸(67.9 mg, 70%)。MS: 401 ES+ (C18 H20 N6 O5 )。Int-86
在室溫下向2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙酸(Int-85 , 67.9 mg, 0.17 mmol)之DMF (2 mL)溶液添加氯化銨(36.29 mg, 0.68 mmol)、HATU (128.96 mg, 0.34 mmol)及DIEA (0.12 mL, 0.68 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物15分鐘，接著用乙酸乙酯稀釋，並用飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水/水(1:1)洗滌。用乙酸乙酯萃取水層兩次。有機萃取物係經匯集，經無水硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(0%-90%丙酮/DCM)得到2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙醯胺(48.9 mg, 72%)。MS: 400ES+ (C18 H21 N7 O4 )。Int-87
在0˚C下向2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙醯胺(Int-86 , 48.9 mg, 0.12 mmol) (純度為~50-60%)之DCM溶液添加三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.03 mL, 0.12 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.01 mL, 0.12 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。觀看到單與雙TBS保護的起始材料混合物。添加更多的三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.03 mL, 0.12 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.01 mL, 0.12 mmol)。在1小時後，主要產物為雙TBS保護的。再添加更多的三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.03 mL, 0.12 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.01 mL, 0.12 mmol)。又過一個小時後，用二氯甲烷稀釋該反應混合物，並用飽和氯化銨溶液洗滌。有機層係經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析法(0%-100%乙酸乙酯/己烷)得到2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)-N-(第三丁基二甲矽基)乙醯胺(23.9 mg, 31%). MS: 628 ES+ (C30 H49 N7 O4 Si2 )。Int-88
將2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)-N-(第三丁基二甲矽基)乙醯胺(Int-87 , 31.1 mg, 0.05 mmol)之甲醇(1 mL)及乙酸乙酯(1 mL)溶液用氮氣沖淨。添加鈀碳(5.27 mg, 0.005 mmol)且再用氮氣沖淨並置於氫氣球形瓶下攪拌1小時45分鐘。使該反應混合物通過0.45 µm過濾器過濾濃縮，以得到N-(第三丁基二甲矽基)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙醯胺(24.5 mg, 92%)。MS: 538 ES+ (C23 H43 N7 O4 Si2 )。Int-89 及 Int-90
在室溫下向N-(第三丁基二甲矽基)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)乙醯胺(Int-88 , 24.5 mg, 0.05 mmol)之吡啶(1 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(43.5 mg, 0.27 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時，接著濃縮及真空乾燥。藉由矽膠層析法(0%-100%丙酮/二氯甲烷)而得到以下之1:1混合物：硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁基二甲矽基)胺基)-2-側氧基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-89 )，MS: 618 ES+ (C23 H43 N7 O7 Si2 S)；與硫酸氫(4R)-1-(2-胺基-2-側氧基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-90 ) (16.4 mg, 64%)，MS: 504 ES+ (C17 H29 N7 O7 SiS)。實例 50
在室溫下向硫酸氫(4R,8S)-1-(2-((第三丁基二甲矽基)胺基)-2-側氧基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-89 )與硫酸氫(4R)-1-(2-胺基-2-側氧基乙基)-8-((Z)-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-90 ) (16.4 mg, 0.03 mmol)之DCM (1 mL)溶液添加四丁基銨二氟三苯基矽酸鹽(21.49 mg, 0.04 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物35分鐘，接著裝填到4 g矽膠管柱上純化(0%-100%丙酮/DCM)。將產物溶析於100%丙酮中。將分餾物合併並濃縮以得到無色薄膜。將所得的薄膜溶解在水/乙腈(1:1)中，冷凍並凍乾，以得到呈白色固體之TBA鹽硫酸(4R,8S)-1-(2-胺基-2-側氧基乙基)-8-((Z)-N'-羥基-N-甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(11.9 mg, 70%)。MS: 390ES+ (C11 H15 N7 O7 S)1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 0.85 (m, 9H); 1.23 (m, 6H); 1.47 (m, 6H); 2.82 (m, 3H); 3.09 (m, 6H); 3.30(m, 2H); 4.41 (m, 2H); 4.61 (m, 1H); 5.47 (s, 1H); 7.17 (bs, 1H); 7.28 (s, 1H); 7.39 (bs, 1H); 9.50(s, 1H). 化合物:TBA = 1:0.75。流程圖 14 Int-91
在-16 ˚C下向(2-甲醯基噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(500 mg, 2.19 mmol)之甲醇(100 mL)及THF (50 mL)懸浮液逐滴添加LiBH4 (5.48 mL, 10.95 mmol)之THF溶液。在-16 ˚C下攪拌2小時後，用飽和氯化銨溶液(100 mL)使反應物淬滅。將溶劑移除。將殘餘物分配於DCM (100 mL)及飽和氯化銨溶液(100 mL)之間。將有機層收集，用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。用EtOAc濕磨殘餘物以得到呈白色固體之(2-(羥甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(504 mg, 99%)。MS: 231 ES+ (C9 H14 N2 O3 S)。Int-92
在0˚C下向(2-(羥甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-91 , 500 mg, 2.18 mmol)之DCM (50 mL)溶液添加DIEA (0.76 mL. 4.36 mmol)，隨後添加甲磺醯氯(0.19 mL, 2.4 mmol)。在0˚C下攪拌該反應混合物2小時。添加DCM(50 mL)及飽和氯化銨溶液(100 mL)。有機層係經分離，用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以得到呈白色固體之甲磺酸(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲酯(673 mg, 99%)。MS: 309 ES+ (C10 H16 N2 O5 S2 )。Int-93
在0˚C下向甲磺酸(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲酯(Int-92 , 606 mg, 1.96 mmol)之DMF (20 mL)溶液添加疊氮化納(255 mg, 3.93 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物16小時。添加DCM(100 mL)及飽和氯化銨溶液(100 mL)。有機層係經分離，用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以得到粗產物。將其用EtOAc濕磨以得到呈白色固體之(2-(疊氮基甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(501 mg, 99%)。MS: 255 ES+ (C9 H13 N5 O2 S)。Int-94
Int-94 係藉由按照如Int-14 (流程圖1，步驟14)中的相似反應條件而合成，使用(2-(疊氮基甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-93 , 501 mg, 01.96 mmo)做為受質，用EtOH作為溶劑，以得到呈白色固體之(2-(胺甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(380 mg, 84%)。MS: 230ES+ (C9 H15 N3 O2 S)。流程圖 15 Int-95
Int-95 係藉由按照如關於Int-14 （流程圖1，步驟14）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-7 , 2298 mg, 6.71 mmol)做為受質，以得到(4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(722 mg, 42%)。MS: 253 ES+ (C10 H12 N4 O4 )。Int-96
向(4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-95 , 406 mg, 1.61 mmol)之DMF (5 mL)懸浮液添加碳酸銫(629.34 mg, 1.93 mmol)及溴丙烯(0.14 mL, 1.61 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時。添加水(20 mL)及EtOAc (50 mL)。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(20g矽膠, 0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(350 mg, 74%)。MS: 293 ES+ (C13 H16 N4 O4 )。Int-97
Int-97 係藉由按照如關於Int-8 （流程圖1，步驟8）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-96 , 350 mg, 1.19 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-8-(羥甲基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(106 mg, 33%)。MS: 265 ES+ (C12 H16 N4 O3 )。Int-98
Int-98 係藉由按照如關於Int-9 （流程圖1，步驟9）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-8-(羥甲基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-97 , 106 mg, 0.40mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(105 mg, 99%)。MS: 263 ES+ (C12 H14 N4 O3 )。Int-99
Int-99 係藉由按照如關於Int-10 （流程圖1，步驟10）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(Int-98 , 647 mg, 2.467 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(E)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(684 mg, 99%)。MS: 278 ES+ (C12 H15 N5 O3 )。Int-100
Int-100 係藉由按照如關於Int-11 （流程圖1，步驟11）所示的相似反應條件而合成，使用(E)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛肟(Int-99 , 614 mg, 2.21 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-5-(烯丙氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(690 mg, 99%)。MS: 312 ES+ (C12 H14 ClN5 O3 )。Int-101
Int-101 係藉由按照如關於Int-12 （流程圖1，步驟12）所示的相似反應條件而合成，使用(4R,8S,Z)-5-(烯丙氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(Int-100 , 470 mg, 1.51 mmol)及(2-(胺甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-94 , 380 mg, 1.66 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(2-(((4R,8S,Z)-5-(烯丙氧基)-N'-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒)甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(115 mg, 15%)。MS: 505 ES+ (C21 H28 N8 O5 S)。Int-102
Int-102 係藉由按照如關於Int-13 （流程圖1，步驟13）所示的相似反應條件而合成，使用(2-(((4R,8S,Z)-5-(烯丙氧基)-N'-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒)甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-101 , 58 mg, 0.11 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(2-((Z)-3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6,6,7,7-四甲基-5-氧雜-2,4-二氮雜-6-矽雜辛-3-烯-1-基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(65 mg, 92%)。MS: 619 ES+ (C27 H42 N8 O5 SiS)。Int-103
在室溫下向(2-((Z)-3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6,6,7,7-四甲基-5-氧雜-2,4-二氮雜-6-矽雜辛-3-烯-1-基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-102 , 65 mg, 0.10mmol)之MeOH (5 mL)溶液添加1,3-二甲基巴比妥酸(32.8 mg, 0.21 mmol)及四(三苯基膦)鈀(0) (121.38 mg, 0.11 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物1小時並濃縮。
在環境溫度下向上述粗製材料添加吡啶(5 mL)及三氧化硫吡啶複合物(132 mg, 0.83 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。將其在短矽膠墊上純化，用己烷(100 mL)溶析，隨後用乙酸乙酯/己烷(1:1, 100 mL)、乙酸乙酯(100 mL)及丙酮(200 mL)溶析，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(54 mg, 79%)。MS: 659 ES+ (C24 H38 N8 O8 SiS2 )。Int-104
Int-104 係藉由按照如關於Int-16 （流程圖1，步驟16）所示的相似反應條件而合成，使用硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-103 , 54 mg, 0.082 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(38 mg, 85%)。MS: 545 ES+ (C18 H24 N8 O8 S2 )。實例 51
在0˚C下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-104 , 25 mg, 0.046 mmol)之DCM (2 mL)溶液添加TFA (1.2 mL, 15.6 mmol)。在0˚C下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除。將殘餘物溶解於水中並藉由逆相層析法(12 g sepabeads, 100%水)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-胺基噻唑-2-基)甲基)-N'-羥基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯TBA鹽(4 mg, 15.6%)。MS: 445 ES+ (C13 H16 N8 O6 S2 )1 HNMR (300MHz, D2 O) d: 3.39 – 3.49 (m, 5H); 4.35 (m, 1H); 4.56 (m, 1H); 4.86 (m, 1H); 5.51 (m, 1H); 6.56 (s, 1H); 7.54 (s, 1H). 化合物/TBA=1:1。流程圖 16 Int-105 及 Int-106
Int-105 及 Int-106 係藉由按照如關於Int-20 （流程圖3，步驟1及2）所示的相似反應條件而合成，使用(2-(((4R,8S,Z)-5-(烯丙氧基)-N'-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒)甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-101 , 52.3 mg, 0.10mmol)做為受質，以得到(Z)-3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)-8,8-二甲基-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜壬-3-烯-9-酸第三丁酯(Int-105 , 18 mg, 25%)，MS: 690ES+ (C30 H43 N9 O8 S)；及(2-((3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-5-側氧基-1,2,4-噁二唑-4(5H)-yl)甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-106 , 27 mg, 49%)，MS: 531 ES+ (C22 H26 N8 O6 S)。Int-107
Int-107 係藉由按照如關於Int-103 （流程圖15，步驟7）所示的相似反應條件而合成，使用(Z)-3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)-8,8-二甲基-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜壬-3-烯-9-酸第三丁酯(Int-105 , 18 mg, 0.03 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(Z)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)-8,8-二甲基-3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜壬-3-烯-9-酸第三丁酯(15 mg, 95%)。MS: 730ES+ (C27 H39 N9 O11 S2 )。實例 52
實例 52 係藉由按照如關於實例 51 （流程圖15，步驟9）所示的相似反應條件而合成，使用(Z)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)-8,8-二甲基-3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜壬-3-烯-9-酸第三丁酯(Int-107 , 15 mg, 0.02 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之(Z)-1-(4-胺基噻唑-2-基)-8,8-二甲基-3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜壬-3-烯-9-酸(1.5 mg, 10%)。MS: 574 ES+ (C18 H23 N9 O9 S2 )1 HNMR (300MHz, D2 O) d: 1.48 (s, 3H); 1.54 (s, 3H); 3.56 (m, 2H); 3.63 (s, 3H); 4.67 (m, 2H); 4.92 (m, 1H); 5.66 (m, 1H); 6.65 (s, 1H); 7.60(s, 1H)。流程圖 17 Int-108
Int-108 係藉由按照如關於Int-107 （流程圖16，步驟2）所示的相似反應條件而合成，使用(2-((3-((4R,8S)-5-(烯丙氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-5-側氧基-1,2,4-噁二唑-4(5H)-yl)甲基)噻唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-106 , 27 mg, 0.05 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-(4-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-5-側氧基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(13 mg, 99%)。MS: 571 ES+ (C19 H22 N8 O9 S2 )。實例 53
實例 53 係藉由按照如關於實例 52 （流程圖16，步驟3）所示的相似反應條件而合成，使用硫酸氫(4R,8S)-8-(4-((4-((第三丁氧基羰基)胺基)噻唑-2-基)甲基)-5-側氧基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-108 , 13 mg, 0.02 mmol)做為受質，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-(4-((4-胺基噻唑-2-基)甲基)-5-側氧基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(1 mg, 8.2%)。MS: 471 ES+ (C14 H14 N8 O7 S2 )1 HNMR (300MHz, D2 O) d: 3.31 (m, 1H); 3.52 (m, 1H); 3.59 (s, 3H); 4.95 (m, 3H); 5.92 (m, 1H); 6.78 (s, 1H); 7.64 (s, 1H)。實例 54
在0˚C下向硫酸氫(4R,8S)-1-甲基-8-((Z)-N-甲基-N'-((((1-甲基-1H-吡唑并-4-基)甲基)胺甲醯基)氧基)甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(實例 15 , 18 mg, 0.04 mmol)之DMF (0.3 mL)溶液分批添加四氟硼酸三甲基氧鎓(27 mg, 0.19 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌15分鐘。將大部分的DMF移除以得到粗產物。經由逆相層析法(12 g Sepabeads，用0-15%乙腈/水溶析)將其純化，以得到呈白色固體之1,2-二甲基-4-((Z)-3-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-6-側氧基-5-氧雜-2,4,7-三氮雜辛-3-烯-8-基)-1H-吡唑并-2-鎓(5 mg, 27%)。MS: 498 ES+ (C17 H23 N9 O7 S)1 HNMR 300MHz, DMSO-d6) d: 2.99 (d, 3H); 3.36 (m, 2H); 3.63 (s, 3H); 4.05 (s, 6H); 4.08 (m, 2H); 4.70(s, 1H); 5.64 (s, 1H); 4.80(d, 1H); 7.20(t, 1H); 7.36 (s, 1H); 8.31 (s, 2H)。流程圖 18 Int-109
在室溫下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(Int-11 , 500 mg, 1.38 mmol)之DCM (8 mL)溶液添加三甲矽基氰化物(0.21 mL, 1.66 mmol)及DIEA (0.36 mL, 2.07 mmol)。在環境溫度下攪拌該反應混合物30分鐘。添加飽和氯化銨溶液及DCM。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥及濃縮以得到粗產物。藉由矽膠層析法(0%-50%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色固體之(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氰(150 mg，產率30.8%)。MS: 353 ES+ (C17 H16 N6 O3 )。Int-110
在室溫下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氰(Int-109 , 150 mg, 0.43 mmol)之DCM (50 mL)溶液添加三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.21 mL, 0.64 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.074 mL, 0.64 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。添加DCM及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥及濃縮。藉由矽膠層析法(0%-50%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色固體之(4R,8S,Z )-5-(苯甲氧基)-N -((第三丁基二甲矽基)氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氰(120 mg，產率60.4%)。MS: 467 ES+ (C23 H30 N6 O3 Si)。Int-111
在0o C下向(4R,8S,Z )-5-(苯甲氧基)-N -((第三丁基二甲矽基)氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氰(Int-110 , 120 mg, 0.26 mmol)及六水合氯化鎳(II) (50.0 mg, 0.39 mmol)之MeOH (10 mL)溶液添加NaBH4 (77.8 mg, 2.06 mmol)。在0o C下攪拌該反應混合物30分鐘。添加飽和氯化銨溶液。接著用乙酸乙酯萃取該混合物。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥且濃縮得到呈白色固體之粗產物(4R,8S)-8-((E )-2-胺基-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基-5-(苯甲氧基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(80 mg，產率66.1%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 471 ES+ (C23 H34 N6 O3 Si)。Int-112
向(4R,8S)-8-((E )-2-胺基-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基-5-(苯甲氧基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-111 , 80 mg, 0.17 mmol)之吡啶(3 mL)溶液添加4-乙基-2,3-二側氧基-哌嗪-1-羰基氯(41.7 mg, 0.20mmol)及TEA (34.4 mg, 0.34 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物20分鐘。添加飽和氯化銨溶液。接著用乙酸乙酯萃取該混合物。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，並經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。藉由矽膠層析法(0%-100%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色固體之N -((E )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-羧醯胺(20 mg，產率18.4%)。MS: 639 ES+ (C30 H42 N8 O6 Si)。Int-113
將N -((E )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-羧醯胺(Int-112 , 20 mg, 0.031 mmol)之MeOH (2 mL)及乙酸乙酯(4 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (9.02 mg, 0.0094 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之N -((E )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)-2-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)乙基)-4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-羧醯胺(15 mg，產率87.3%)。MS: 549 ES+ (C23 H36 N8 O6 Si)。Int-114
在環境溫度下向N -((E )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)-2-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)乙基)-4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-羧醯胺(Int-113 , 15 mg, 0.0273 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(13.0 mg, 0.082 mmol)。攪拌該反應混合物3小時，接著減壓濃縮。用DCM濕磨該材料並藉由過濾將固體移除。將濾液濃縮以得到粗產物。將其溶解於pH約7的緩衝液中並藉由逆相層析法(Sepabeads, 12g, ACN/水 0-50%)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((E)-1-(4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-基)-7,7,8,8-四甲基-1-側氧基-6-氧雜-2,5-二氮雜-7-矽壬-4-烯-4-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(10 mg，產率58.2%)。MS: 627 ES- (C23 H36 N8 O9 SiS)。實例 55
在環境溫度下向硫酸氫(4R,8S)-8-((E)-1-(4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-基)-7,7,8,8-四甲基-1-側氧基-6-氧雜-2,5-二氮雜-7-矽壬-4-烯-4-基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(Int-114 , 8 mg, 0.0127 mmol)之乙酸乙酯(1 mL)及THF (0.5 mL)溶液添加HF.吡啶(1.27 mg, 0.0383 mmol)。攪拌該反應混合物3小時，接著濃縮。藉由逆相層析法(Sepabeads, 12g, ACN/水 0-50%)純化所得的固體，以得到呈白色固體之吡啶鎓鹽硫酸氫(4R,8S)-8-((E)-2-(4-乙基-2,3-二側氧基哌嗪-1-甲醯胺基)-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯(4.5 mg, 61.9%)。MS: 513 ES- (C17 H22 N8 O9 S)1 H NMR (300MHz, D2O) d: 1.20(m, 3H); 3.26-3.85 (m, 9H); 4.12 (m, 2H); 4.53 (m, 2H); 4.97 (m, 1H); 5.51 (s, 1H); 7.65 (s, 1H); 7.90(m, 0.8H); 0.41 (m, 0.4H); 8.74 (m, 0.8H). 化合物/吡啶比率(1:0.4)。流程圖 19 Int-115
在0°C下向(4R,8S)-8-((E )-2-胺基-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基-5-(苯甲氧基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-111 , 200 mg, 0.42 mmol)之DCM (10 mL)攪拌溶液添加TEA(86.2 mg, 0.849 mmol)及(氯磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-29 , 109.9 mg, 0.509 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物20分鐘。向該反應混合物添加飽和氯化銨溶液及DCM。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於己烷中的EtOAc)將其純化，以得到呈白色固體之(N -((E )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)胺磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(50 mg，產率18.1%)。MS: 648 ES- (C28 H43 N7 O7 SiS)。Int-116
將(N -((E )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)胺磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-115 , 50 mg, 0.0769 mmol)之乙酸乙酯(8 mL)及甲醇(4 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (22.2 mg, 0.023 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(N -((E )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基-2-(4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-)乙基)胺磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(38 mg, 88.2%)。MS: 560ES+ (C21 H37 N7 O7 SiS)。Int-117
在環境溫度下向(N -((E )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基-2-(4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-)乙基)胺磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(Int-116 , 38 mg, 0.0679 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(32.4 mg, 0.204 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時，接著減壓濃縮。用DCM濕磨該材料並藉由過濾將固體移除。將濾液濃縮。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將所得的固體純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8- ((E )-2-((N -(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)胺基)-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(30 mg, 69.1%)。MS: 638 ES- (C21 H37 N7 O10 SiS2 )。Int-118
向硫酸氫(4R,8S)-8- ((E )-2-((N -(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)胺基)-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-117 , 20 mg, 0.0313 mmol)之DCM (2 mL)攪拌溶液添加TBAT (20.2 mg, 0.0375 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時。將溶劑移除。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將所得的固體純化，以得到四丁基銨鹽硫酸氫(4R,8S)-8- ((E )-2-((N -(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)胺基)-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(20 mg, 83.3%)。MS: 524 ES- (C15 H23 N7 O10 S2 )。實例 56
向硫酸氫(4R,8S)-8- ((E )-2-((N -(第三丁氧基羰基)胺磺醯基)胺基)-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-118 , 20 mg, 0.026 mmol)之DCM (2 mL)攪拌溶液添加TFA (297 mg, 2.60mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除以得到粗產物。將其溶解於pH約7的緩衝液中並藉由逆相層析法(Sepabeads, 12g, ACN/水 0-50%)純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8- ((E )-1-(羥胺基)-2-(胺磺醯基)胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(4.0 mg, 28.9%)。MS: 424 ES- (C10 H15 N7 O8 S2 )1 H NMR (300MHz, D2 O) d: (300MHz, D2 O) d: 3.37 (m, 1H); 3.51-3.72 (m, 4H); 4.03 (m, 1H); 4.53 (m, 1H); 4.96 (m, 1H); 5.70(s, 1H); 7.65 (s, 1H)。流程圖 20 Int-119
在0o C下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 70 mg, 0.2 mmol)之DMF (1 mL)溶液添加NaH (11.8 mg, 0.29 mmol, 60%)並攪拌10分鐘，添加2-溴乙醯胺(32.5 mg, 0.24 mmol)。接著使其升溫至室溫並攪拌10分鐘。添加乙酸乙酯及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中的丙酮)將其純化以得到呈白色固體之2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(58 mg，產率71%)。MS: 414 ES+ (C19 H23 N7 O4 )。Int-120
將2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(Int-119 , 58 mg, 0.14 mmol)之MeOH (5 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (29.9 mg, 0.03 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於室溫下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之2-((((Z)-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(40 mg, 88.1%)。MS: 324 ES+ (C12 H17 N7 O4 )。實例 57
在室溫下向2-((((Z)-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(Int-120 , 40 mg, 0.12 mmol)之吡啶(1 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(59.1mg, 0.38 mmol)。攪拌該反應混合物6小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。該材料係藉由逆相層析法(Sepabeads, 12g, ACN/水0-50%)純化以得到呈白色固體之吡啶硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N' -(2-胺基-2-側氧基乙氧基)-N -甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(15 mg, 27%)。MS: 402 ES- (C12 H17 N7 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.00(s, 3H); 3.31 (m, 2H); 3.57 (s, 3H); 4.07 (m 2H); 4.67(m, 1H); 5.50(s, 1H); 6.48 (b, 1H); 7.25 (m, 2H); 7.31 (s, 1H); 7.90(m, 1.4H); 8.39 (m, 0.7H); 8.86 (m, 1.4H) 化合物/吡啶比率(1:0.7)。流程圖 21 Int-121 及 Int-122
在0o C下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 150 mg, 0.42 mmol)之DMF (2 mL)溶液添加NaH (25.2 mg, 0.63 mmol, 60%)。之後在0o C下攪拌10分鐘，並添加溴乙酸第三丁酯(0.014 mL, 0.51 mmol)。接著使其升溫至室溫並攪拌10分鐘。添加乙酸乙酯及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中的丙酮)將其純化以得到兩種產物。Int-121 ：呈白色固體之2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(120 mg，產率60%)。MS: 471 ES+ (C23 H30 N6 O5 )。Int-122 ：呈白色固體之3- ((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(30 mg，產率17.9%)。MS: 397 ES+ (C19 H20 N6 O4 )。流程圖 22 Int-123 及 Int-124
2-((((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)-2-甲基丙酸第三丁酯(Int-123 )及3- ((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,6,6-三甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(Int-124 )係藉由按照如關於Int-121 及Int-122 於流程圖21，步驟1所示的相似反應而合成，使用2-溴-2-甲基-丙酸第三丁酯。流程圖 23 Int-125
向2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(Int-121 , 100 mg, 0.21 mmol)之DCM (3 mL)溶液添加TFA (0.81 mL, 10.63 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物2小時。將TFA移除以得到呈白色固體之2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸(88 mg，產率99%)。MS: 415 ES+ (C19 H22 N6 O5 )。Int-126
向2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸(Int-125 , 30 mg, 0.07 mmol)之DMF (1.5 mL)溶液添加HATU (55.1 mg, 0.14 mmol)、(2-胺乙基)胺基甲酸第三丁酯(17.4 mg, 0.11 mmol)及胡氏鹼(Hunig’s base, 0.03 mL, 0.14 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。添加乙酸乙酯及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100% EtOAc/己烷)將其純化，以得到呈白色固體之((Z )-3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-7-側氧基-5-氧雜-2,4,8-三氮雜癸-3-烯-10-基)胺基甲酸第三丁酯(35 mg, 86.7%)。MS: 557 ES+ (C26 H36 N8 O6 )。Int-127
將((Z )-3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-7-側氧基-5-氧雜-2,4,8-三氮雜癸-3-烯-10-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-126 , 35 mg, 0.06 mmol)之MeOH (3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (13.1 mg, 0.126 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之((Z )-3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-7-側氧基-5-氧雜-2,4,8-三氮雜癸-3-烯-10-基)胺基甲酸第三丁酯(25 mg, 85%)。MS: 467 ES+ (C19 H30 N8 O6 )。Int-128
在室溫下向((Z )-3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-7-側氧基-5-氧雜-2,4,8-三氮雜癸-3-烯-10-基)胺基甲酸第三丁酯(Int-127 , 25 mg, 0.05 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(25.6 mg, 0.16 mmol)。攪拌該反應混合物6小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將該材料純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N' -(2-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)胺基)-2-側氧基乙氧基)-N -甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(20 mg, 68.2%)。MS: 545 ES- (C19 H30 N8 O9 S)。實例 58
在室溫下向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N' -(2-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)乙基)胺基)-2-側氧基乙氧基)-N -甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-128 , 20 mg, 0.04 mmol)之DCM (2 mL)溶液添加TFA (0.14 mL, 1.83 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。將溶劑移除以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將其純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N' -(2-((2-胺乙基)胺基)-2-側氧基乙氧基)-N -甲基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(10 mg, 55.1%)。MS: 447 ES+ (C14 H22 N8 O7 S)1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 2.82 (m, 2H); 3.01 (m, 3H); 3.31 (m, 2H); 3.58 (s, 3H); 4.14 (m 2H); 4.70(m, 1H); 5.52 (s, 1H); 6.37 (m, 1H); 7.25 (m, 2H); 7.31 (s, 1H); 7.60(m, 2H); 7.92 (m, 1H)。另外的 實例 之 分析數據
表 4 中的全部化合物係根據上文或使用熟習該項技藝者容易知道的相似反應而合成。全部的化合物係經分離為反式外消旋的。表 4 流程圖 24 Int-129
將2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(Int-121 , 30 mg, 0.0638 mmol)之MeOH (3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (10 mg, 0.094 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於室溫下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之2-((((Z )-((4R,8S)-5-苯甲氧基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(23 mg, 94.8%)。MS: 381 ES+ (C16 H24 N6 O5 )。Int-130
在室溫下向2-((((Z )-((4R,8S)-5-苯甲氧基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(Int-129 , 23 mg, 0.0605 mmol)之吡啶(1 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(28.87 mg, 0.181 mmol)。攪拌該反應混合物16小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將其純化，以得到呈白色固體之2-((((Z )-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(18 mg, 58.2%)。MS: 459 ES- (C16 H24 N6 O8 S)。實例 62
在室溫下向2-((((Z )-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸第三丁酯(Int-130 , 14 mg, 0.030mmol)之DCM (3 mL)溶液添加TFA (0.12 mL, 1.52 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物2小時。將溶劑移除以得到粗產物。接著將其溶解於水(2 mL)中，並通過Dowex® 50WX8 Na+ 型離子交換樹酯濾筒且用水做為溶析液進行溶析。將含有產物之分餾物匯集並冷凍乾燥，以得到呈灰白色固體。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將該固體純化，以得到呈白色固體之鈉鹽2-((((Z )-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸(2.0 mg, 13.8%)。MS: 405 ES+ (C12 H16 N6 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.13 (s, 3H); 3.60(m, 2H); 3.67 (s, 3H); 4.27 (m, 2H); 4.98 (m, 1H); 5.73 (s, 1H); 7.63 (s, 1H)。實例 63
實例 63 係藉由按照如關於實例 62 所示的相似反應條件而合成。使用2-((((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)-2-甲基丙酸第三丁酯(Int-123 )做為流程圖24步驟1中的受質。MS 433 (C14 H20 N6 O8 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 1.38 (m, 6H); 3.05 (s, 3H); 3.10(m, 5H); 4.93 (m, 1H); 5.68 (s, 1H); 7.59 (s, 1H); 8.10(m, 0.6H); 8.61 (m, 0.3H); 8.80(m, 0.6H) 化合物/吡啶比率(1:0.3)。流程圖 25 Int-131
將3- ((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(Int-122 , 30 mg, 0.0757 mmol)之MeOH (3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (8.05 mg, 0.0076 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於室溫下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之3- ((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(20 mg, 86.3%)。MS: 307 ES+ (C12 H14 N6 O4 )。實例 64
在室溫下向3- ((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(Int-131 , 20 mg, 0.0653 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(31.18 mg, 0.196 mmol)。攪拌該反應混合物3小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將該材料純化，以得到呈白色固體之硫酸氫((4R,8S)-1-甲基-8-(4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫-4H -1,2,4-噁二嗪-3-基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基)酯(15 mg, 56.5%)。MS: 387 ES+ (C12 H14 N6 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.45-3.57 (m, 4H); 3.61-3.78 (m, 4H); 4.41-4.69 (m, 2H); 4.99 (m, 1H); 6.02 (s, 1H); 7.69 (s, 1H); 8.08 (m, 1.4H); 8.64 (m, 0.7H); 8.79 (m, 1.4H) 化合物/吡啶比率(1:0.7)。實例 65
實例 65 係藉由按照如關於實例 64 所示的相似反應條件而合成，使用3- ((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4,6,6-三甲基-4H -1,2,4-噁二嗪-5(6H )-酮(Int-124 )做為流程圖25步驟1中的受質。MS: 415 (C14 H18 N6 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: d: 1.41 (s, 3H); 1.52 (s, 3H); 3.53 (m, 4H); 3.73 (m, 4H); 5.02 (m, 1H); 6.02 (s, 1H); 7.69 (s, 1H); 8.10(m, 2H); 8.67 (m, 1H); 8.80(m, 2H) 化合物/吡啶比率(1:1)。流程圖 26 Int-132
於0o C下向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 50 mg, 0.143 mmol)之DCM (25 mL)攪拌溶液添加胡氏鹼(0.029 mL, 0.168 mmol)。逐滴添加三光氣(20.8 mg, 0.701 mmol)之DCM (15 mL)溶液。添加之後，使反應物升溫至室溫並在室溫下攪拌30分鐘。用DCM稀釋該反應物。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100% EtOAc/己烷)將其純化，以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-1,2,4-噁二唑-5(4H )-酮(30 mg, 55.9%)。MS: 383 ES+ (C18 H18 N6 O4 )。Int-133
將3-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-1,2,4-噁二唑-5(4H )-酮(Int-132 , 15 mg, 0.0392 mmol)之甲醇(3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (4.17 mg, 0.0039 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-1,2,4-噁二唑-5(4H )-酮(8 mg, 69.8%)。MS: 293 ES+ (C11 H12 N6 O4 )。實例 66
向3-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-4-甲基-1,2,4-噁二唑-5(4H )-酮(8 mg, 0.027 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(43.57 mg, 0.27 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物16小時，接著減壓濃縮。用DCM濕磨該材料，並藉由過濾將固體移除。濾液係經濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將其純化，以得到呈白色固體之硫酸氫((4R,8S)-1-甲基- 8-(4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(5 mg, 41.7%)。MS: 371 ES- (C11 H12 N6 O7 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.41 (m, 1H); 3.51 (s, 3H); 3.67 (m, 1H); 3.72 (s, 3H); 5.01 (m, 1H); 6.15 (s, 1H); 7.71 (s, 1H); 8.09 (m, 4H); 8.66 (m, 2H); 8.79 (m, 4H) 化合物/吡啶比率(1:2)。流程圖 27 Int-134
於0o C下向((4-羥基丁基)胺基甲酸第三丁酯(1.4 g, 7.4 mmol)之DCM (50 mL)攪拌溶液添加TEA (2.04 mL, 14.6 mmol)。逐滴添加甲磺醯氯(0.69 mL, 8.88 mmol)。添加之後，使反應物升溫至室溫並在室溫下攪拌3小時。添加DCM。有機層係經用HCl稀釋溶液、水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到呈黃色油狀物之Int-134 甲磺酸4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁酯(1.8 g，產率91%)。1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 1.30(s, 9H); 1.40-1.50(m, 2H); 1.60-1.70(m, 2H); 2.92 (m, 2H), 3.15 (s, 3 H); 4.25 (m, 2H); 6.79 (m, 1H)。流程圖 28 Int-135
甲磺酸2-(第三丁氧基羰基)胺基)乙酯係藉由按照如關於Int-134 所示的相似反應而合成，使用(2-羥乙基)胺基甲酸第三丁酯做為受質。1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 1.39 (s, 9H); 3.15 (s, 3 H); 3.35 (m, 2H); 4.25 (m, 2H); 7.12 (m, 1H)。流程圖 29 Int-136
向(4R,8S,Z )-5-(苯甲氧基)-N -((第三丁基二甲矽基)氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氰(Int-110 , 100 mg, 0.214 mmol)之甲苯(5 mL)溶液添加乙醛肟(101.3 mg, 1.71 mmol)及InCl3 (47.4 mg, 0.214 mmol)。在60˚C下加熱該反應混合物8小時。使該反應混合物冷卻至室溫。向該反應混合物添加飽和氯化銨溶液及乙酸乙酯。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於己烷中之EtOAc)將其純化，以得到呈白色固體之(Z )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基l)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙醯胺(32 mg，產率30.8%)。MS: 485 ES+ (C23 H32 N6 O4 Si)。Int-137
將(Z )-2-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基l)-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙醯胺(Int-136 , 32 mg, 0.066 mmol)之乙酸乙酯(5 mL)及甲醇(2.5 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (19.02 mg, 0.0198 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌30分鐘。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(Z )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)-2-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)乙醯胺(25 mg, 95.9%)。MS: 395 ES+ (C16 H26 N6 O4 Si)。Int-138
向(Z )-2-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)-2-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)乙醯胺(Int-137 , 25 mg, 0.063 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(30.3 mg, 0.19 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時，接著減壓濃縮。用DCM濕磨該材料，並藉由過濾將固體移除。濾液係經濃縮以得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中之丙酮)將其純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-2-胺基-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基亞胺基)-2-側氧基乙基-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(20 mg, 66.5%)。MS: 473 ES- (C16 H26 N6 O7 SiS)。實例 67
向硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-2-胺基-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基亞胺基)-2-側氧基乙基-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-138 , 20 mg, 0.042 mmol)之DCM (5 mL)攪拌溶液添加TBAT (27.3 mg, 0.051 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。將溶劑移除。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中之丙酮)將所得的固體純化，以得到四丁基銨鹽硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-2-胺基-1-(羥基亞胺基)-2-側氧基乙基-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(14 mg, 71.1%)。MS: 359 ES- (C10 H12 N6 O7 S)1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 0.94 (m, 10H); 1.30(m, 7H); 1.58 (m, 7H); 3.04-3.40(m, 9 H); 3.56 (s, 3H); 4.70(m, 1H); 5.47 (s, 1H); 7.36 (s, 1H); 7.79 (m, 2H); 11.86 (s, 1H) 化合物/四丁基銨比率(1:0.9)。流程圖 30 Int-139
向((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-79 , 700 mg, 2.13 mmol)之DMF (8 mL)攪拌溶液添加甲磺酸4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁酯(Int-134 , 1424 mg, 2.13 mmol)及Cs2 CO3 (4.17 g, 12.8 mmol)。在80˚C下加熱該反應混合物20分鐘，並冷卻至室溫。向該反應混合物添加乙酸乙酯及水。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於己烷中之EtOAc)將其純化，以得到呈白色固體之((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(230 mg，產率21.6%)。MS: 500ES+ (C25 H33 N5 O6 )。Int-140
在0˚C下向((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲酸甲酯(Int-139 , 230 mg, 0.46 mmol)之THF (5 mL)及水(1 mL)溶液添加氫氧化鋰(0.48 mL, 0.48 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌1小時。將THF移除。向該水溶液添加1N HCl以調整pH為約3-4，並用乙酸乙酯萃取產物。有機層係經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，以得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羥酸(200 mg, 89.5%)。MS: 486 ES+ (C24 H31 N5 O6 )。Int-141
在室溫下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-羥酸(Int-140 , 200 mg, 0.41 mmol)之DCM (5 mL)溶液添加O-(第三丁基二甲矽基)羥胺(78.9 mg, 0.54 mmol)及EDC (94.8 mg, 0.49 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物40分鐘。將該反應混合物直接裝填至矽膠上並藉由急驟層析法(20g矽膠，0%-50%乙酸乙酯/己烷)純化，以得到呈白色泡沫之(4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(103 mg, 40.6%)。MS: 615 ES+ (C30 H46 N6 O6 Si)。Int-142
在-78˚C下向(4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(((第三丁基二甲矽基)氧基)胺甲醯基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(Int-141 , 100 mg, 0.16 mmol)及三乙胺(0.090 mL, 0.65 mmol)之DCM (2 mL)溶液添加三氟甲磺酸酐(0.055 mL, 0.33 mmol)。攪拌該反應混合物5分鐘。向該溶液逐滴添加甲胺(0.36 mL, 0.72 mmol, 2N於THF中)。接著使該反應混合物升溫至室溫並攪拌2小時。用DCM稀釋該反應混合物並用飽和氯化銨溶液洗滌一次。有機層係經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。藉矽膠層析法(0%-50%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色泡沫之(4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z )-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(18 mg, 17.7%)。MS: 628 ES+ (C31 H49 N7 O5 Si)。Int-143
向(4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((Z )-N'-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(Int-142 , 18 mg, 0.0287 mmol)之乙酸乙酯(3 mL)溶液用氮氣脫氣，並添加Pd/C (3.6 mg, 0.0057 mmol)。使該混合物再次脫氣並置於氫氣球形瓶下。攪拌該反應混合物2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈無色油狀物之(4-((4R,8S)-8-((Z )-N '-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(14 mg，產率90.8%)。MS: 538 ES+ (C24 H43 N7 O5 Si)。Int-144
在室溫下向(4-((4R,8S)-8-((Z )-N '-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-5-羥基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-1-基)丁基)胺基甲酸第三丁酯(Int-143 , 14 mg, 0.03 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(33.15 mg, 0.21 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物3小時，接著用DCM稀釋並過濾以將固體移除。將濾液濃縮。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中之丙酮)將殘餘物純化，以得到呈無色油狀物之硫酸氫(4R,8S)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-8-((Z)-N '-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(13 mg, 80.8%)。MS: 616 ES- (C24 H43 N7 O8 SiS)。Int-145
在室溫下向硫酸氫(4R,8S)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-8-((Z)-N '-((第三丁基二甲矽基)氧基)-N -甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-144 , 13 mg, 0.021 mmol)之乙酸乙酯(1 mL)及THF (0.5 mL)溶液添加HF.吡啶(0.0006 mL, 0.023 mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。在30分鐘後，將該反應混合物濃縮以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-8-((Z)-N '-羥基-N -甲基甲脒基l)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(11 mg, 100%)。MS: 504 ES+ (C18 H29 N7 O8 S)。實例 68
在0˚C下向硫酸氫(4R,8S)-1-(4-((第三丁氧基羰基)胺基)丁基)-8-((Z)-N '-羥基-N -甲基甲脒基l)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-145 , 10 mg, 0.0199 mmol)之DCM (1 mL)溶液添加三氟乙酸(0.076 mL, 0.99 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。用DCM將該反應混合物濃縮數次以移除過剩的TFA。將殘餘物溶解於pH約7的緩衝液中，並藉由逆向層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)純化以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-1-(4-胺丁基)-8-((Z)-N '-羥基-N -甲基甲脒基)-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(3.5 mg, 37.1%)。MS: 404 ES+ (C13 H21 N7 O6 S)1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 1.42-1.75 (m, 2H); 1.79-2.04 (m, 2H); 2.94 (m, 2H); 3.10(s, 3H); 3.51-3.72 (m, 2H); 3.88-4.14 (m, 2H); 4.99 (m, 1H); 5.62 (s, 1H); 7.69 (s, 1H)。流程圖 31 Int-146
向(4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N '-羥基-N ,1-二甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-12 , 110 mg, 0.31 mmol)之DCM (10 mL)溶液添加TEA (0.064 mL, 0.46 mmol)及乙醯氯(0.029 mL, 0.37 mmol)。在室溫下攪拌該反應物30分鐘。添加飽和氯化銨溶液使該反應物淬滅。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%於DCM中的丙酮)將其純化以得到呈白色固體之(4R,8S,Z )-N’ -乙醯氧基-5-(苯甲氧基)-N ,1-二甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(70 mg，產率56.9%)。MS: 399 ES+ (C19 H22 N6 O4 )。Int-147
將(4R,8S,Z )-N’ -乙醯氧基-5-(苯甲氧基)-N ,1-二甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(Int-146 , 70 mg, 0.175 mmol)之甲醇(5 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (12.9 mg, 0.012 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌30分鐘。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(4R,8S,Z )-N’ -乙醯氧基-5-羥基-N ,1-二甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲脒(50 mg, 92.3%)。MS: 309 ES+ (C12 H16 N6 O4 )。實例 69
向(4R,8S,Z )-N’ -乙醯氧基-5-羥基-N ,1-二甲基- 6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲(Int-147 , 50 mg, 0.16 mmol)脒之吡啶(1 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(77.4 mg, 0.49 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物6小時，接著減壓濃縮。用DCM濕磨該材料並藉由過濾將固體移除。將濾液濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將其純化，以得到呈白色固體之吡啶硫酸氫(4R,8S)-8-((Z )-N’ -乙醯氧基-N -甲基甲脒基)-1-甲基- 6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-酯(35 mg, 55.6%)。MS: 387 ES- (C12 H16 N6 O7 S)1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 2.03 (s, 3H); 3.00(m, 2H); 3.36 (m, 2H); 3.65 (s, 3H); 4.71(m, 1H); 5.62 (s, 1H); 6.84 (b, 2H); 7.31 (s, 1H); 7.90(m, 2H); 8.39 (m, 1H); 8.86 (m, 2H) 化合物/吡啶比率(1:1)。實例 70
吡啶硫酸氫(4R,8S)-8-((Z)-N'-乙醯氧基甲脒基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H)-基酯係藉由按照如關於實例 69 所示的相似反應而合成，使用流程圖1步驟12中之在THF中的氨溶液。MS 373 ES- (C11 H14 N6 O7 S)1 H NMR 300MHz, DMSO-d6 ) d: 2.03 (s, 3H); 3.34 (m, 2H); 3.68 (s, 3H); 4.67 (m, 1H); 5.22 (s, 1H); 6.84 (bs, 2H); 7.31 (s, 1H); 7.90(m, 3 H); 8.39 (m, 1.5H); 8.86 (m, 3H) 化合物/吡啶比率(1:1.5)。流程圖 32 Int-148
在0o C下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H-4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-甲醛(Int-9 , 200 mg, 0.64 mmol)之THF (10 mL)攪拌溶液逐滴添加MeMgBr (0.38 mL, 1.15 mmol, 3N 於Et2 O中)。在0o C下攪拌該反應物4小時。添加飽和氯化銨溶液使該反應物淬滅。添加乙酸乙酯。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到呈白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((R)-1-羥乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(100 mg, 47.6%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 329 ES+ (C17 H20 N4 O3 )。Int-149
在環境溫度下向(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-((R)-1-羥乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-148 , 100 mg, 0.30mmol)之二氯甲烷(10 mL)溶液添加戴斯-馬丁過碘烷(155 mg, 0.37 mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。向該反應混合物添加硫代硫酸鈉水溶液(1N)及飽和碳酸氫鈉水溶液並攪拌15分鐘。該雙相混合物係經分離並用二氯甲烷淬取水層。合併之有機層係經無水硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮以得到粗產物。藉由急驟層析法(0%-100%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色固體之(4R,8S)-8-乙醯基-5-(苯甲氧基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(40 mg, 40.2%)。MS: 327 ES+ (C17 H18 N4 O3 )。Int-150
在環境溫度下向(4R,8S)-8-乙醯基-5-(苯甲氧基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-149 , 40 mg, 0.12 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加羥胺鹽酸鹽(10.2 mg, 0.15 mmol)。攪拌該反應混合物30分鐘。添加氯化銨水溶液及乙酸乙酯。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮得到呈白色固體之(4R,8S)-5-苯甲氧基)-8-(E )-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(30 mg, 71.7%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 342 ES+ (C17 H19 N5 O3 )。Int-151
在0˚C下向(4R,8S)-5-苯甲氧基)-8-(E )-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-150 , 30 mg, 0.088 mmol)之DCM (5 mL) 溶液添加三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.022 mL, 0.097 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.012 mL, 0.11 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並攪拌2小時。添加DCM及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮。藉由急驟層析法(0-100% EtOAc/己烷)將該殘餘物純化，以得到呈灰白色固體之(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(25 mg, 62.4%)。MS: 456 ES+ (C23 H33 N5 O3 Si)。Int-152
將(4R,8S)-5-(苯甲氧基)-8-(E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-151 , 25 mg, 0.055 mmol)之MeOH (10 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (5.84 mg, 0.0055 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌1小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體之(4R,8S)-8-((E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-5-羥基-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(17 mg, 84.7%)。MS: 366 ES+ (C16 H27 N5 O3 Si)。Int-153
在環境溫度下向(4R,8S)-8-((E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-5-羥基-1-甲基-1,4,5,8-四氫-6H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-6-酮(Int-152 , 17 mg, 0.047 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(1338 mg, 8.41 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。用DCM濕磨該材料並藉由過濾將更多的固體移除。將濾液濃縮。藉由急驟層析法(0-100%丙酮/DCM)將該殘餘物純化，以得到呈白色固體之硫酸氫(4R,8S)-8-((E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(18 mg, 86.9%)。MS: 446 ES+ (C16 H27 N5 O6 SSi)。Int-154 及實例 71
在環境溫度下向(4R,8S)-8-((E )-1-(((第三丁基二甲矽基)氧基)亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(Int-153 , 18 mg, 0.040mmol)之THF (2 mL)溶液添加TBAF (0.014 mL, 0.049 mmol, 1N於THF中)。攪拌該反應混合物2小時，接著濃縮。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將殘餘物純化，以得到呈白色固體之四丁基銨鹽硫酸氫(4R,8S)-8-((E )-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯Int-154 。接著將其溶解於水(2 mL)中，並通過Dowex® 50WX8 Na+ 型離子交換樹酯濾筒且用水做為溶析液進行溶析。將含有產物之分餾物匯集並冷凍乾燥，以得到呈白色固體之鈉鹽(4R,8S)-8-((E )-1-(羥基亞胺基)乙基)-1-甲基-6-側氧基-4,8-二氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-5(6H )-基酯(10 mg, 67.2%)。MS: 332 ES+ (C10 H13 N5 O6 S)1 H NMR (300MHz, DMSO-d6 ) d: 3.04 (m, 1H); 3.25 (m, 1H); 3.30(s, 3H); 3.54 (s, 3H); 4.62 (m, 1H); 5.23 (s, 1H); 7.30(s, 1H); 11.16 (s, 1H)。流程圖 33 Int-155
在室溫下向((4R,8S,Z)-5-(苯甲氧基)-N -羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-亞胺甲醯氯(Int-11 , 80 mg, 0.221 mmol)之DCM (10 mL)溶液添加N -(甲胺基)胺基甲酸第三丁酯(48.5 mg, 0.332 mmol)及胡氏鹼(85.7 mg, 0.66 mmo)。在環境溫度下攪拌該反應混合物30分鐘。添加飽和氯化銨溶液及DCM。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，並濃縮得到呈白色固體之2–((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(羥基亞胺基)甲基)-2-甲肼-1-甲酸第三丁酯(60 mg, 57.5%)。其係直接使用於下一步驟中。MS: 357 ES+ (C22 H29 N7 O5 )。Int-156
在0˚C下向2–((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(羥基亞胺基)甲基)-2-甲肼-1-甲酸第三丁酯(Int-155 , 60 mg, 0.127 mmol)之DCM (8 mL)添加三氟甲磺酸第三丁基二甲矽酯(0.064 mL, 0.28 mmol)及2,6-二甲吡啶(0.037 mL, 0.32 mmol)。使該反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌1小時。添加DCM及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥並濃縮。藉由矽膠層析法(0-100%乙酸乙酯/己烷)而得到呈白色固體之(Z )-4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-3,7,7,8,8-五甲基-6-氧雜-2,3,5-三氮雜-7-矽壬-4-烯酸第三丁酯(30 mg，產率40.2%)。MS: 586 ES+ (C28 H43 N7 O5 Si)。Int-157 及 Int-158
將(Z )-4-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-3,7,7,8,8-五甲基-6-氧雜-2,3,5-三氮雜-7-矽壬-4-烯酸第三丁酯(Int-156 , 28 mg, 0.0478 mmol)之MeOH (2 mL)及乙酸乙酯(4 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (10.1 mg, 0.0096 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於環境溫度下攪拌1小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體(18 mg)之混合物(Z )-4-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)-3,7,7,8,8-五甲基-6-氧雜-2,3,5-三氮雜-7-矽雜辛-4-烯酸第三丁酯(Int-157 )（MS: 496 ES+ (C21 H37 N7 O5 Si)）及2-((Z )-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(羥基亞胺基)甲基)-2-甲肼-1-甲酸第三丁酯(Int-158 )。MS: 382 ES+ (C15 H23 N7 O5 )。Int-159
在環境溫度下向(Z )-4-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-yl)-3,7,7,8,8-五甲基-6-氧雜-2,3,5-三氮雜-7-矽雜辛-4-烯酸第三丁酯(Int-157 )及2-((Z )-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(羥基亞胺基)甲基)-2-甲肼-1-甲酸第三丁酯(18 mg)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(17.3 mg, 0.11 mmol)。將該反應混合物攪拌過夜，接著減壓濃縮以得到粗產物。用DCM將其濕磨並藉由過濾將固體移除。將濾液濃縮。用逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將殘餘物純化，以得到呈白色固體之((((Z )-(2-(第三丁氧基羰基)-1-甲肼基)((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)亞甲基)胺基)氧基)磺酸(18 mg, 86.9%)。MS: 539 ES- (C15 H23 N7 O11 S2 )。實例 72
在室溫下向((((Z )-(2-(第三丁氧基羰基)-1-甲肼基)((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)亞甲基)胺基)氧基)磺酸(Int-159 , 2 mg, 0.037 mmol)之DCM (2 mL)溶液添加三氟乙酸(0.0283 mL, 0.369 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。用DCM將該反應混合物濃縮數次以移除過剩的TFA。將殘餘物溶解於ACN/水中，並在冷凍乾燥機中乾燥以得到呈白色固體之TFA鹽((((Z )-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(1-甲肼基)亞甲基)胺基)氧基)磺酸(2.2 mg, 100%)。442 ES+ (C10 H15 N7 O9 S2 )1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.23-4.95 (m, 8H); 5.02 (m, 1H); 5.99 (m, 1H); 7.67 (s, 1H); 8.09 (m, 1.36H); 8.66 (m, 0.68H); 8.80(m, 1.36H) 化合物/吡啶比率(1:0.68)。流程圖 34 Int-160
在0o C下向2-((((Z)-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙酸(Int-125 , 60 mg, 0.14 mmol)之DMF (3 mL)溶液添加HATU (110 mg, 0.29 mmol)、O -(第三丁基二甲矽基)羥胺(31.9 mg, 0.22 mmol)及胡氏鹼(0.050 mL, 0.299 mmol)。使反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌30分鐘。添加乙酸乙酯及飽和氯化銨溶液。有機層係經分離，用水及鹽水洗滌，經無水硫酸鎂乾燥，並濃縮得到粗產物。藉由急驟層析法(0-100%丙酮/DCM)將其純化，以得到呈白色固體之2-((((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)-N -羥基乙醯胺(30 mg，產率48.3%)。MS: 430ES+ (C19 H27 N3 O5 )。Int-161
將2-((((Z )-((4R,8S)-5-(苯甲氧基)-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)-N -羥基乙醯胺(Int-160 , 25 mg, 0.058 mmol)之MeOH (3 mL)溶液用氮氣沖淨3次，並添加10% Pd/C (6.19 mg, 0.0058 mmol)。該反應混合物係用氮氣沖淨3次，並接著在氫氣環境中於室溫下攪拌2小時。該反應混合物係通過矽藻土過濾。濾液係經濃縮以得到呈白色固體(18 mg)之N -羥基-2-((((Z )-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(16 mg, 80.9%)。MS: 338 ES- (C12 H17 N7 O5 )。實例 73
在室溫下向N -羥基-2-((((Z )-((4R,8S)-5-羥基-1-甲基-6-側氧基-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺(Int-161 , 16 mg, 0.047 mmol)之吡啶(2 mL)溶液添加三氧化硫吡啶複合物(22.5 mg, 0.14 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物6小時，接著減壓濃縮以得到粗產物。用DCM濕磨該材料並藉由過濾將固體移除。濾液係經濃縮以得到粗產物。藉由逆相層析法(Sepabeads, ACN/水0-50%)將其純化，以得到呈白色固體之吡啶((2-((((Z )-((4R,8S)-1-甲基-6-側氧基-5-(磺醯氧基)-4,5,6,8-四氫-1H -4,7-甲橋吡唑并[3,4-e][1,3]二氮呯-8-基)(甲胺基)亞甲基)胺基)氧基)乙醯胺基)氧基)磺酸(6 mg, 21.6%)。MS: 498 ES- (C12 H17 N7 O11 S2 )1 H NMR (300MHz, D2 O) d: 3.13 (s, 3H); 3.58 (m, 2H); 3.64 (s, 3H); 4.50(m, 2H); 4.98 (m, 1H); 5.72 (s, 1H); 7.67 (s, 1H); 8.11 (m, 2H); 8.67 (m, 1H); 8.82 (m, 2H) 化合物/吡啶比率(1:1)。
以下之另外的化合物係可根據與本文中所述程序相似的程序或於文獻中找到的程序而製作。,,,.綠膿桿菌 PBP1a 、 PBP2 及 PBP3 之醯化速率常數之量測
來自綠膿桿菌(P. aeruginosa )之PBP1a、PBP2及PBP3之二階醯化速率常數係使用 BOCILLIN FL盤尼西林螢光各向異性測定法(Anal. Biochem. 463, 15-22 (2014))測量。在每個案例中BOCILLIN FL (Thermo-Fisher Scientific, Waltham, MA)的濃度為30nM。綠膿桿菌PBP1a及PBP3的PBP濃度為60nM，而綠膿桿菌PBP2的濃度為300nM。測定緩衝液為0.1 M磷酸鈉及0.01% Triton X-100。除綠膿桿菌PBP2的pH為6.2外，全部PBP的pH皆為7.0。將化合物連續稀釋2倍，使綠膿桿菌PBP的濃度範圍為328至0.02 µM。結果係顯示於下面表 5 中。表 5 關於PBP1a的醯化速率，*係表示k(on) ＜ 100M-1 .s-1 ，**係表示k(on) 為100至10,000M-1 .s-1 ，而***係表示k(on) ＞ 10,000M-1 .s-1 ；關於PBP2的醯化速率，*係表示k(on) ＜ 100M-1 .s-1 ，**係表示k(on) 為100至5,000M-1 .s-1 ，而***係表示k(on) ＞ 5,000M-1 .s-1 ；關於PBP3的醯化速率，*係表示k(on) ＜ 100M-1 .s-1 ，**係表示k(on) 為100至10,000M-1 .s-1 ，而***係表示k(on) ＞ 10,000M-1 .s-1 。 NT：未測試對於革蘭氏陰性臨床分離株之 MIC
對於綠膿桿菌之最低抑制濃度(MIC)值及化合物係使用臨床與實驗室標準協會準則(CLSI)培養液微量稀釋法(CLSI M07-A10)來判定。結果係顯示於下面表 6 中。表 6 *係表示MIC ＞ 16 mg/L，**係表示MIC為8至16 mg/L，而***係表示MIC ＜ 8 mg/L.
對於大腸桿菌、克雷白氏肺炎菌及鮑氏不動桿菌之最低抑制濃度(MIC)值係顯示於下面表 7 中。表 7 *係表示MIC ＞ 16 mg/L，**係表示MIC為8至16 mg/L，而***係表示MIC ＜ 8 mg/L。對於類鼻疽伯克氏菌、鼻疽伯克氏菌、土倫病菌、鼠疫耶爾森氏菌及炭疽芽孢桿菌之 MIC
實例40 係顯示出其對於類鼻疽伯克氏菌(B. pseudomallei )、鼻疽伯克氏菌(B. mallei )、土倫病菌(F. tularensis )、鼠疫耶爾森氏菌及炭疽芽孢桿菌展現了抑制活性(MIC ＜4 mg/L)。對於綠膿桿菌 PBP 抑制物之活體內剖析
已在嗜中性白血球減少的鼠大腿模型中評估比較物1（一種PBP2靶向化合物）及本發明實例40對於綠膿桿菌臨床分離株(ARC6347, AmpC+, PoxB+)的活體內功效。參閱圖 1 及2 。實例40與比較物1之間的唯一結構差異在於胺甲基基團被N-甲基-醯胺肟基團取代。然而，該PBP2靶向化合物（比較物1）不具有活性（在此研究中，即使暴露於超過其MIC 100%倍也未達到停滯），而PBP3的抑制化合物（實例40）則顯示出穩健的功效（在暴露於超過其MIC 57%倍時降低超過2 Log(CFU/g)）。
在開始研究之前將來自Charles River Laboratories公司的雌性CD-1小鼠馴養5天。每個籠子安置5隻動物並讓其自由取用食物及水。為了誘發嗜中性白血球減少症的暫態，使小鼠分別在第4天及第1天以腹腔注射給藥的方式接受150 mg/kg及100 mg/kg之兩劑環磷醯胺。所有程序均配合動物福利政策之IACUC程序與準則以及OLAW標準。綠膿桿菌菌株ARC 6347 (AmpC+, PoxB+)係從一個隔夜平盤培養基製備以供感染之用。將一部分的平盤培養基重新懸浮於無菌生理食鹽水中並調整OD 625 nm為0.1。調整後的細菌懸浮液係進一步稀釋以用約5.0x105 CFU/鼠的量靶向感染接種物。進行接種物的盤中細菌計數以確認接種濃度。以100uL的細菌製備接種物感染小鼠左右兩側的大腿肌肉。感染2小時後開始給小鼠服用測試品、陽性對照抗生素（左旋氧氟沙星）或載體。接受實例40、或比較物1、或載體之小鼠係以10 mL/kg皮下給藥，間隔3小時共8劑。接受左旋氧氟沙星之小鼠係於感染2小時後以160 mg/kg單一口服劑量給藥。
每組/每個濃度中對三隻動物給藥。於開始治療(T-Rx)時將三隻一組的小鼠安樂死，並判定CFU。感染26小時後將所有剩餘的小鼠安樂死。在無菌條件下移除兩隻大腿，稱重，勻漿成一致稠度，連續稀釋並塗抹在細菌生長培養基上。隔夜培養後計算CFU。
整個本申請案中所引用之所有參考文獻（包括文獻參考、已發證之專利案、已公開之專利申請案及共待決之專利申請案）之內容係以全文引用之方式明確併入本文中。除非另有定義，否則本文中使用之所有技術及科學術語係符合本領域中一般技術者通常已知的含義。
第1圖係顯示PBP2化合物（比較物1）在嗜中性白血球減少的鼠大腿模型中對於綠膿桿菌(P. aeruginosa )臨床分離株(ARC6347, AmpC+, PoxB+)之活體內功效。
第2圖係顯示本申請案之PBP3化合物（實例40）在嗜中性白血球減少的鼠大腿模型中對於綠膿桿菌臨床分離株(ARC6347, AmpC+, PoxB+)之活體內功效。

Claims (30)

  1. 一種下式化合物，； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中 X為H、CN、C(O)NR1 R2 、NR1 R2 、或可選地經NHC(O)Rg 或S(O)NH2 取代之(C1 -C6 )烷基； Y為NOR3 ；或R3 及X連同與其連接之原子一起形成4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其每一者係可選地經選自(C1 -C6 )烷基、C=O、C(O)OH及C(O)O(C1 -C6 )烷基之一或多個基團取代，其中所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自OH、(C1 -C6 )烷氧基、苯基及5至6員雜芳基之一或多個基團取代，其中所述5至6員雜芳基係可選地經NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 取代； R1 及R2 係各自獨立地為氫、氰基、C(O)NH2 、NH2 、OH、(C1 -C6 )烷氧基、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R3 為氫、C(O)(C1 -C6 )烷基、C(O)NRd Re 、SO2 NH2 、SO2 OH、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R4 、R5 及R6 係各自獨立地為氫、(C1 -C6 )烷基或C(O)NRa Rb ，其中R4 、R5 及R6 之(C1 -C6 )烷基係可選地經一或多個R7 取代，條件是R4 及R5 中之至少一者不是氫，且條件是當與R4 及R5 鍵結的對應氮原子係經由雙鍵而與相鄰的環原子連接時R4 及R5 不存在； 各個R7 係獨立地選自鹵基、OH、ORc 、(C1 -C6 )烷氧基、CN、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、苯基、C(=NH)NH2 、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)OH、C=NO(C1 -C6 )烷基NH2 、NHC(O)(C1 -C6 )烷基、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及S(O)Rf ，其中所述5至6員雜芳基係可選地經NH2 取代且所述苯基係可選地經NH2 取代； Ra 、Rb 、Rd 及Re 係各自獨立地為氫、OH、(C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷氧基、苯基、OSO2 OH、4至6員環烷基、4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基中之每一者係可選地且獨立地經選自OH、NH2 、C(O)OH、C(O)O(C1 -C6 )烷基、NHC(O)NH2 、NHC(O)NH(C1 -C6 )烷基、C(O)NH2 、NHC(O)N((C1 -C6 )烷基)2 、NHC(O)(C1 -C6 )烷基、NHC(O)鹵基(C1 -C6 )烷基、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述苯基、4至6員雜環基、4至6員環烷基及5至6員雜芳基中之每一者，及Ra 、Rb 、Rd 及Re 之(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基之所述5至6員可選的雜芳基係可選地且獨立地經選自(C1 -C6 )烷基、NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及–N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rc 為可選地經選自C(=NH)NH2 、C(=NH)NH(5至6員雜環基)、C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基、NHC(=NH)NH2 、-NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及SORf 之一或多個基團取代之苯基，其中於基團C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基中之所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rf 為氫或(C1 -C6 )烷基；以及 Rg 為可選地經選自C=O及(C1 -C6 )烷基之一或多個基團取代之4至6員雜環基。
  2. 如請求項1之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽，其中 X為H、CN、C(O)NR1 R2 、NR1 R2 或(C1 -C6 )烷基； R1 及R2 各自獨立地為氫、氰基、或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R3 為氫或可選地經一或多個R7 取代之(C1 -C6 )烷基； R4 、R5 及R6 係各自獨立地為氫、(C1 -C6 )烷基或C(O)NRa Rb ，其中R4 、R5 及R6 之(C1 -C6 )烷基係可選地經一或多個R7 取代，條件是R4 及R5 中之至少一者不是氫，且條件是當與R4 及R5 鍵結的對應氮原子係經由雙鍵而與相鄰的環原子連接時R4 及R5 不存在； 各個R7 係獨立地選自鹵基、OH、ORc 、(C1 -C6 )烷氧基、CN、4至6員雜環基、5至6員雜芳基、苯基、C(=NH)NH2 、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及S(O)Rf ； Ra 、Rb 、Rd 及Re 係各自獨立地為氫、 (C1 -C6 )烷基、(C1 -C6 )烷氧基、苯基、4至6員雜環基或5至6員雜芳基，其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述(C1 -C6 )烷基及(C1 -C6 )烷氧基中之每一者係可選地且獨立地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代，且其中Ra 、Rb 、Rd 及Re 之所述苯基、4至6員雜環基及5至6員雜芳基中之每一者係可選地且獨立地經選自(C1 -C6 )烷基、NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代； Rc 為可選地經選自C(=NH)NH2 、C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基、NHC(=NH)NH2 、NRd Re 、C(O)NRd Re 、SO2 Rf 及SORf 之一或多個基團取代之苯基，其中於基團C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基中之所述(C1 -C6 )烷基係可選地經選自NH2 、NH(C1 -C6 )烷基及N((C1 -C6 )烷基)2 之一或多個基團取代；以及 Rf 為氫或(C1 -C6 )烷基。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中R3 為氫或可選地經胺基取代之(C1 -C6 )烷基。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物，其中R3 為氫。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中R1 為氫且R2 為(C1 -C6 )烷基。
  8. 如請求項1至7中任一項之化合物，其中R1 為氫且R2 為甲基。
  9. 如請求項1至8中任一項之化合物，其中該化合物為下式：；或； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  10. 如請求項1至9中任一項之化合物，其中R6 為氫、C(O)NRa Rb 、或可選地經ORc 取代之(C1 -C6 )烷基。
  11. 如請求項1至10中任一項之化合物，其中Ra 為氫；Rb 為可選地經一或多個(C1 -C6 )烷基取代之5至6員雜芳基，或可選地經ORc 取代之(C1 -C6 )烷基；而Rc 為可選地經C(=NH)NH(C1 -C6 )烷基NH2 取代之苯基。
  12. 如請求項1至11中任一項之化合物，其中Ra 為氫而Rb 為可選地經一或多個(C1 -C6 )烷基取代之吡唑基。
  13. 如請求項1至9中任一項之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  14. 如請求項1至9及13中任一項之化合物，其中R4 為C(O)NRa Rb 或可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基；Ra 為氫；而Rb 為可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基。
  15. 如請求項1至9及13及14中任一項之化合物，其中R4 為(C1 -C6 )烷基。
  16. 如請求項1至9及13至15中任一項之化合物，其中R4 為甲基。
  17. 如請求項1至9中任一項之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  18. 如請求項1至9及17中任一項之化合物，其中R5 為C(O)NRa Rb 或可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基；Ra 為氫；而Rb 為可選地經NH2 取代之(C1 -C6 )烷基。
  19. 如請求項1至9及17及18中任一項之化合物，其中R5 為(C1 -C6 )烷基。
  20. 如請求項1至9及17至19中任一項之化合物，其中R5 為甲基。
  21. 如請求項1之化合物，其中該化合物係選自下式：,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, , ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,及；或前述任一者之醫藥學上可接受的鹽。
  22. 如請求項1之化合物，其中該化合物為下式：； 或其醫藥學上可接受的鹽。
  23. 一種醫藥組成物，其包括如請求項1至22中任一項之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽；以及一醫藥學上可接受的載體。
  24. 一種治療有需要之個體之細菌感染的方法，其包括向該個體施予有效量之如請求項1至22中任一項之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽，或如請求項23之組成物。
  25. 如請求項24之方法，其中該細菌感染係由革蘭氏陰性細菌所引起。
  26. 如請求項24或25之方法，其中該細菌感染係由綠膿桿菌(P. aeruginosa )所引起。
  27. 如請求項24或25之方法，其中該細菌感染係由腸內桿菌科細菌(Enterobacteriaceae )所引起。
  28. 如請求項24或25之方法，其中該細菌感染係由大腸桿菌(E. coli )、克雷白氏肺炎菌(K. pneumoniae )或不動桿菌屬細菌(Acinetobacter spp.)所引起。
  29. 如請求項24之方法，其中該細菌感染係由一選自伯克霍爾德氏菌屬(Burkholderia spp. )、炭疽芽孢桿菌(B. anthracis )、鼠疫耶爾森氏菌(Y. pestis )及土拉文氏桿菌(F. tularensis )之病原菌所引起。
  30. 一種抑制有需要之個體之細菌盤尼西林結合蛋白3 (PBP3)且可選地抑制細菌PBP1a/b的方法，其包括向該個體施予有效量之如請求項1至22中任一項之化合物，或其醫藥學上可接受的鹽，或如請求項23之組成物。
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11905286B2 (en) 2018-08-09 2024-02-20 Antabio Sas Diazabicyclooctanones as inhibitors of serine beta-lactamases
EP3833665B1 (en) 2018-08-09 2023-07-19 Antabio SAS Diazabicyclooctanones as inhibitors of serine beta-lactamases
CN111675641B (zh) * 2020-06-04 2023-09-08 宁夏农林科学院农业资源与环境研究所（宁夏土壤与植物营养重点实验室） 单环β-内酰胺类化合物、单环内酰胺类化合物盐及其制备方法
CN115605480B (zh) 2021-05-07 2024-04-05 宁夏农林科学院 磺酰脒取代的化合物及其作为β-内酰胺酶抑制剂的用途
US11814385B2 (en) 2021-06-25 2023-11-14 University Of South Florida Small molecule inhibitors targeting Clostridioides difficile sporulation
AU2024346059A1 (en) * 2023-09-19 2026-04-02 Entasis Therapeutics Inc. Compounds and methods for treating bacterial infections

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ282567B6 (cs) 1993-12-29 1997-08-13 Pfizer Inc. Diazabicyklické sloučeniny a farmaceutické prostředky na jejich bázi
FR2812635B1 (fr) 2000-08-01 2002-10-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, preparation et utilisation comme medicaments notamment comme anti- bacteriens
FR2825705B1 (fr) 2001-06-08 2005-05-20 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens
FR2835186B1 (fr) 2002-01-28 2006-10-20 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, actifs comme inhibiteurs de beta-lactamases
FR2848210B1 (fr) 2002-12-06 2007-10-19 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens et inhibiteurs de beta-lactamases
US7439253B2 (en) * 2002-12-06 2008-10-21 Novexel Heterocyclic compounds, their preparation and their use as medicaments, in particular as antibacterials and beta-lactamase inhibitors
US7507727B2 (en) * 2003-04-07 2009-03-24 Cylene Pharmaceuticals, Inc. Substituted quinobenzoxazine analogs and methods of using thereof
FR2914923B1 (fr) 2007-04-12 2013-06-14 Novexel Nouveaux composes heterocycliques azotes,leur preparation et leur utilisation comme medicaments antibacteriens.
WO2009091856A2 (en) 2008-01-18 2009-07-23 Merck & Co., Inc. Beta-lactamase inhibitors
FR2930553B1 (fr) 2008-04-29 2010-05-21 Novexel Composes azabicycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment inhibiteurs de beta-lactamases
EP2921559A1 (en) 2008-06-19 2015-09-23 Astra Zeneca Holding France Use of (1r,2s,5r) 1,6-diazabicyclo [3.2.1]octane-2-carboxamide, 7-oxo-6-(sulfooxy)-, monosodium salt as a diagnostic reagent for detecting serine beta-lactamases
FR2936798B1 (fr) 2008-10-03 2012-09-28 Novexel Nouveaux composes heterocycliques azotes, leur preparation et leur utilisation comme medicaments antibacteriens.
FR2937034B1 (fr) * 2008-10-10 2012-11-23 Novexel Nouveaux composes heterocycliques azotes, leur preparation et leur utilisation comme medicaments antibacteriens
FR2936951B1 (fr) 2008-10-10 2010-12-03 Novexel Nouvelles combinaisons de composes heterocycliques azotes antibacteriens avec d'autres composes antibacteriens et leur utilisation comme medicaments
FR2951171A1 (fr) 2009-10-09 2011-04-15 Novexel Nouveau sel de sodium d'un compose azabicyclique sous forme enantiomere cristallisee et nouvelles formes polymorphes et pseudopolymorphes ainsi que leur preparation
WO2013014497A1 (en) 2011-07-26 2013-01-31 Wockhardt Limited Pharmaceutical compositions comprising beta-lactam antibiotic, sulbactam and beta-lactamase inhibitor
NZ616806A (en) 2011-07-26 2015-03-27 Wockhardt Ltd Pharmaceutical compositions comprising sulbactam and beta-lactamase inhibitor
MX348974B (es) 2011-08-27 2017-07-04 Wockhardt Ltd Derivados 1,6 - diazabiciclo [3,2,1] octan-7-ona y su uso en el tratamiento de infecciones bacterianas.
CA2845108C (en) * 2011-08-30 2015-06-16 Wockhardt Limited 1,6-diazabicyclo[3,2,1]octan-7-one derivatives and their use in the treatment of bacterial infections
CA2846107C (en) 2011-09-13 2016-06-21 Wockhardt Limited Nitrogen containing compounds and their use
US8796257B2 (en) 2011-12-02 2014-08-05 Naeja Pharmaceutical Inc. Bicyclic compounds and their use as antibacterial agents and β-lactamase inhibitors
EP2814483A2 (en) 2012-02-15 2014-12-24 Rempex Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating bacterial infections
WO2013149136A1 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Cubist Pharmaceuticals, Inc. ISOXAZOLE β-LACTAMASE INHIBITORS
US8969570B2 (en) 2012-03-30 2015-03-03 Cubist Pharmaceuticals, Inc. Beta-lactamase inhibitors
US8916709B2 (en) 2012-03-30 2014-12-23 Cubist Pharmaceuticals, Inc. 1,2,4-oxadiazole and 1,2,4-thiadiazole β-lactamase inhibitors
US8940897B2 (en) 2012-03-30 2015-01-27 Cubist Pharmaceuticals, Inc. 1,3,4-oxadiazole and 1,3,4-thiadiazole β-lactamase inhibitors
AR090539A1 (es) * 2012-04-02 2014-11-19 Astrazeneca Ab COMPUESTOS INHIBIDORES DE b LACTAMASA
HUE046893T2 (hu) 2012-05-30 2020-04-28 Meiji Seika Pharma Co Ltd Új ß-laktamáz inhibitor és eljárás elõállítására
RU2614418C2 (ru) 2012-08-25 2017-03-28 Вокхардт Лимитед Производные 1,6-диазабицикло[3.2.1]октан-7-она и их применение для лечения бактериальных инфекций
US20150258072A1 (en) 2012-09-03 2015-09-17 Wockhardt Limited Antibacterial compositions
EP2953626A1 (en) 2013-02-06 2015-12-16 Astrazeneca AB Combination therapy for the treatment of nosocomial pneumonia
WO2014141132A1 (en) * 2013-03-14 2014-09-18 Naeja Pharmaceutical Inc. NEW HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE AS ANTIBACTERIAL AGENTS AND β-LACTAMASE INHIBITORS
JP6764862B2 (ja) 2014-11-17 2020-10-07 エンタシス・セラピューティックス・リミテッド 耐性細菌感染症の治療のための併用療法
DK3512851T3 (en) 2016-09-16 2022-10-17 Entasis Therapeutics Ltd Beta-lactamase inhibitor compounds

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