UA65587C2

UA65587C2 - Method for preventing nephrotoxicity induced by cyclosporins or tacrolimus

Info

Publication number: UA65587C2
Application number: UA2000041980A
Authority: UA
Original assignee: Baker Norton Pharma; Us Health
Priority date: 1997-10-09
Filing date: 1998-09-10
Publication date: 2004-04-15
Also published as: HK1026845A1; CN1154492C; AU9794398A; DE69824619D1; CZ297440B6; KR100515196B1; ATE269098T1; EP1027053B1; NO20001828D0; AU748495B2; CA2304374A1; PL339774A1; NZ503493A; CZ20001274A3; WO1999018961A1; SK4672000A3; CN1275080A; EP1027053A1; PL191993B1; DK1027053T3

Description

1. Галузь винаходу

Винахід стосується способів і фармацевтичних композицій, використаних для попередження токсичного впливу на нирки, що завдається введенням циклоспорину або такролімусу. 2. Рівень техніки

Циклоспорини - це нейтральні, ліпофільні, циклічні ундекапептиди, що мають молекулярну масу приблизно 1200. Вони використовуються внутрішньовенно або орально як імунодепресанти для подовження виживаності алогенних трансплантатів, таких як трансплантати шкіри, кісткового мозку, серця, нирок, підшлункової залози та інших органів, а також при лікуванні аутоімунних хвороб.

Одною з головних побічних реакцій при терапії циклоспоринами, з якими доводиться мати справу, є ниркові розлади та токсичність, що обмежує клінічне застосування циклоспоринів. Незважаючи на подовження виживаності ниркових алотрансплантатів на один або два роки, середній період напіврозпаду, що становив вісім років для трупного ниркового трансплантата, який функціонує перший рік, трохи змінився протягом останнього часу завдяки використанню пригнічення імунної системи із застосуванням циклоспорину, і становить більш ніж 15 років. Побічний вплив циклоспоринів, зокрема найбільш широковикористовуваного циклоспорину - циклоспорину А (СУА), на структуру нирки та її функціонування протягом тривалого часу не був виключений як важливий фактор при синдромі хронічного відторгнення алотрансплантата. Див. Веппеї! еї аї.,

Кіапеу Іпі., 50:1089-1100 (1996).

Було встановлено, що СуА викликає дозозалежне зменшення функціонування нирок у експериментальних тварин і людини, та вважається, що це відбувається за рахунок впливу ліків, результатом чого є звуження артерій, і, зрештою, зменшена швидкість фільтрації в ниркових клубочках. Проте цей сильний вплив на гемодинаміку, що має чітко контролюватися шляхом точного моніторингу і встановленням доз пацієнтам, не є, очевидно, лише побічним наслідком уведення СуА для нирок. Виявилось, що не лише у пацієнтів, які зазнавали терапії СУА для попередження відторгнення трансплантата органа, але й також і у пацієнтів, що страждали на аутоімунні хвороби, з'являються морфологічні ураження, що складаються із зон, у яких смугами розташований тубулоінтерстиціальний фіброз, тубулярна атрофія й аферентна артеріопатія. Ознаками нефропатії СУА є ці ураження судин, що не обов'язково є дозозалежними, і які можна спостерігати у деяких пацієнтів, що отримували дози СУА, які складали від 2 до 4мг/кг. Див. Веппеїї єї аї., іріа; Рапкежмусл еї аї.,

Кіапеу Іпі)., 50:1634-1640 (1996).

У попередньому рівні техніки не було описано жодного ефективного способу хронічного введення СУА й інших циклоспоринів у терапевтичних дозах для виключення серйозних наслідків нефротоксичності. Було зроблено припущення, що антагоністи кальцію можуть модифікувати метаболізм СуА, що дозволяє використовувати менші дози для досягнення достатнього пригнічення імунної системи. Було також припущено, що дигідропіридинові блокатори кальцієвих каналів можуть уповільнювати інтерстиці«альний фіброз у реципієнтів ниркових трансплантатів без впливу на метаболізм циклоспоринів. Переваги цих запропонованих терапій не були виявлені, і, до того ж, може існувати протилежний вплив, викликаний хронічним уведенням антагоністів кальцію або блокаторів кальцієвих каналів, що зробило б корисним їх використання як додаткових агентів до циклоспоринів, навіть якщо вони були б ефективними для запобігання пошкодження нирок.

Короткий опис винаходу

Задачею цього винаходу є створення способу попередження або суттєвого зменшення нефротиксичності, викликаної уведенням циклоспоринів пацієнтам-ссавцям.

Також задачею цього винаходу є створення вищезгаданого способу, який не лише зупиняє процес хвороби, але й усуває прояви цього процесу й сприяє регресії ураження.

Іншою задачею винаходу є створення вищезгаданого способу, який дозволяє уводити відносно високі, терапевтично ефективні дози циклоспоринів пацієнтам, що потребують терапії циклоспоринами, уникаючи нефротоксичності та нефропатії, викликаних циклоспорином.

Також іншою задачею цього винаходу є створення вищезгаданого способу з використанням комерційно доступного фармацевтичного агента, який є нетоксичним і не чинить серйозного побічного впливу.

Виходячи з вищенаведених задач та інших, які стануть очевидними нижче, винахід стосується способу попередження, зменшення або усунення проявів нефротоксичності й, ниркового розладу, викликаних циклоспоринами, у пацієнтів-ссавців, що отримували терапію циклоспоринами, яка складається з уведення таким пацієнтам ефективної кількості полісульфату пентозану (РРБ5) або його фармацевтично прийнятної солі для зменшення нефротоксичності.

Оральне уведення РРБ5 є кращим шляхом уведення.

В іншому аспекті цей винахід стосується способу лікування пацієнтів-ссавців, що потребують імунопригнічуючої терапії для попередження відторгнення алотрансплантата або для лікування аутоімунної хвороби через спільне уведення ефективної кількості циклоспорину для пригнічення імунної системи та ефективної кількості РРО для зменшення нефротоксичності його фармацевтично прийнятної солі. Як альтернатива, ефективна кількість РРО може бути введена разом з ЕК-506 (Рцізамжа), також відомим як такролімус, який використовується для створення пригнічення імунної системи у пацієнтів з трансплантатами органів, зокрема у випадку печінкових трансплантатів.

Короткий опис малюнків

Фіг1А Мікрофотографія нирки щура, що протягом двох тижнів знаходився на дієті з низьким вмістом натрію й потім піддавався добовим ін'єкціям СУА протягом 45 днів.

Фіг1Б Мікрофотографія нирки щура, що протягом двох тижнів знаходився на дієті з низьким вмістом натрію й потім піддавався добовим ін'єкціям СУА і РР5 (ЕІ МІВОМЕУ) протягом 45 днів.

Фіг2 Стовбчаста діаграма, що відображає кількісне порівняння кількості інтерстиціальних фіброзів (що виражені у відносних одиницях), які були виявлені при морфометричному обстеженні нирок щурів та описані відповідно до Фіг1А і 1Б.

Фіг.3 Стовбчаста діаграма, яка відображає кількісне порівняння об'єму клубочків, що був виявлений при морфометричному обстеженні нирок щурів та описаний відповідно до Фіг.1А і 1Б.

Фіг.А4А Мікрофотографія нирки щура, що протягом двох тижнів знаходився на дієті з низьким вмістом натрію й потім піддавався добовим ін'єкціям СУА протягом 15 днів.

Фіг4АБ Мікрофотографія нирки щура, що протягом двох тижнів знаходився на дієті з низьким вмістом натрію й потім піддавався добовим ін'єкціям СУА і РР5 (ЕІ МІВОМЕУ) протягом 15 днів.

Фіг.5 Стовбчаста діаграма, що відображає кількісне порівняння кількості фібринових уражень, що були виявлені в нирках щурів, описаних відповідно до Фіг.4А (контроль) і 4Б (ЕІ МІВОМЄЕ), і групи щурів, яких не піддавали лікуванню, відповідно.

ФігбА Стовбчаста діаграма, що відображає кількість СУА в крові, визначену через 24-годинний термін часу, у групи щурів, яким уводили СУА в оливковій олії внутрішньошлунково.

Фігб6Б Стовбчаста діаграма, що відображає кількість СуА в крові, визначену через 24-годинний термін часу, у групи щурів, яким уводили СУА в оливковій олії і РР5 (ЕІ МІВОМЄ) у воді внутрішньошлунково.

Опис винаходу

Полісульфат пентозану (РРБ) - це високосульфатований, напівсинтетичний полісахарид з молекулярною масою від приблизно 1500 до 6000 Да залежно від способу виділення. РР5 знаходиться в тому ж загальному класі, що й гепарини та гепариноїди, але існує деяка різниця у хімічній структурі, способах утворення похідних і фізико-хімічних властивостях між РР5 і гепарином. Якщо гепарин зазвичай виділяють з тканин ссавців, таких як м'язи великої рогатої худоби й свиней, печінки та кишок, РР5 є напівсинтетичною сполукою, полісахаридну основу якої, ксилан, екстрагують з кори букового дерева або інших рослинних джерел і потім обробляють сульфатуючими агентами, такими як хлорсульфонова кислота або трихлорид сульфурилу з кислотою. Після сульфатування РРБ5 зазвичай обробляють гідроксидом натрію для одержання натрієвої солі.

Структурна формула РРБ5 наведена нижче:

Н ни я -о б. Ковони КОНК ,

Я

Н

КО о5090 нОБозМа

Як показано, РРО - це сульфатований лінійний полімер, що складається з одиничних мономерів, що повторюються, (0)-ксилози - 5-вуглецевого пентозного цукру в його піранозній кільцевій формі. Якщо гепарин повертає плоскополяризоване світло праворуч, то РР5 повертає світло ліворуч.

Стосовно біологічних властивостей РР5 подовжує частковий час дії тромбопластину й використовувався для попередження важкого тромбозу вен, але він має лише приблизно одну п'ятнадцяту антикоагулянтної активності гепарину (див. Умагаї!є, 9. Іпї Мед. Вев., 20:361-370,1992). РРО був також описаний, між іншим, як корисний при лікуванні інфекцій сечового каналу "та інтерстиціального цистіту (патент США Ме5180715); разом з ангіостатичним стероїдом, для затримки розвитку судин і капілярів, текучості клітин або мембран (патент

США Мо4820693); і для лікування хронічних прогресуючих хвороби судин (патент США Ме5643892), до яких належать фібротичні хвороби нирок, такі як гломерулосклероз.

Деякі дослідники показали, що РРО інгібує проліферацію гладеньком'язових клітин і зменшує гіперліпедемію, і завдяки цьому припустили, що РРО міг би бути корисним для профілактики утворення атеросклеротичних бляшок, для інгібування проліферації мезангіальних клітин і запобігання утворення колагену і гломерулосклерозу (Раші еї аї., Тиготб, Нез., 46:793-80, 1987; Магаіє, у цьому ж джерелі,). Проте жодне дослідження не було спрямоване на нирковий інтерстицій чи малі кров'яні судини (порівняно з інгібуванням проліферації клітин) або показало, що можна зупинити і/або усунути всі прояви гострого ушкодження судин і появи рубців у нирках, тобто РРО не розглядався у цьому контексті. Крім того, жодне можливе використання РРО при цих хворобах не було підтримано будь-якими ефективними науковими даними у інтактних тварин, але замість цього були основані на дослідженнях іп міо клітин, виділених з тканини(нин) тварини.

Хоча останнім часом і було описано використання РРБ в інгібуванні фіброзу і утворення рубців (див., наприклад, Ноша єї аІ., патент США Ме5605938), ці дослідження пов'язані з пригніченням проникнення фібробластів у зони шкіри і споріднених тканин, але не з гострими або хронічними хворобами, внаслідок яких утворюються рубці, гладеньком'зовими клітинами і/або інтерстицією нирок, які є дуже різними з погляду етіології та патології.

Цей винахід стосується, в одному аспекті або втіленні, способу попередження, зменшення або усунення проявів нефротоксичності, викликаної циклоспорином або такролімусом у пацієнтів-ссавців, що отримували терапію циклоспорином або такролімусом, вищезгаданий спосіб складається з уведення таким пацієнтам ефективної кількості полісульфату пентозану (РРБ5) або його фармацевтично прийнятної солі для зменшення нефротоксичності. У другому аспекті або втіленні винахід стосується способу лікування пацієнтів, що потребують терапії циклоспорином, наприклад, пацієнтів, що потребують пригнічення імунної системи для попередження відторгнення трансплантату або для лікування імунної хвороби, шляхом спільного введення принаймні однієї кількості циклоспорину й ефективної для зменшення нефротоксичності кількості РР.

Зараз циклоспорини використовуються або були описані як клінічно корисні для профілактики відторгнення органів у алогенних трансплантатах, наприклад, нирок, печінки, підшлункової залози, кісткового мозку й серця; лікування аутоїмунної хвороби, наприклад, ревматоїдного артриту, системного червоного вовчака, чисельних склерозів, міастеній, хвороби Крона й первинного жовчного цирозу (див., наприклад патент США Мое5,204,329); і імунозапальних хвороб шкіри, таких як псоріаз, атопічний дерматит, контактний дерматит, екзематозний дерматит, себорейний дерматит, звичайний лишай, пухирчатка, булозна пухирчатка, булозний епідермолізис, кропивниця, ангіоедеми, васкуліти, еритеми та шкірні еозинофілі) (див., наприклад, патент США Ме5286730).

Згідно з винаходом пацієнтам-ссавцям, що вже отримували або збираються отримувати терапію циклоспорином для лікування будь-яких з вищеперелічених хвороб або будь-яких інших клінічних проявів, уводять ефективну кількість РРО або його фармацевтично прийнятної солі для зменшення нефротоксичності.

Вираз "ефективна кількість для зменшення нефротоксичності", що використовується тут, стосується кількості

РРБ або його солі, що включена у фармацевтичну композицію, яка є ефективною при прийомі один або кілька разів на добу протягом призначеного терміну часу (цей термін може починатися перед, одночасно з або після початку терапії циклоспорином) для попередження або суттєвого зменшення нефротоксичного впливу уведеного циклоспорину.

Якщо пацієнт - людина, загальна добова доза РРБ5 або солі РР5 становить від приблизно 2 до приблизно мг/кг, а краще приблизно від 5 до приблизно Збомг/кг маси тіла пацієнта або приблизно від 140 до приблизно

З5ООмг на день у дорослих пацієнтів (і краще приблизно від 350 до приблизно 2000мг), уведена в кількості від одної до чотирьох доз на добу, є ефективною в досягненні терапевтичної мети попередження, зменшення або усунення проявів нефротоксичності й нефропатії, викликаних циклоспорином. У менших за розмірами ссавців доза має бути збільшена або зменшена відповідно до маси тіла, роду і та походження хвороби.

Кращим втіленням нового способу лікування є уведення пацієнту фармацевтичної композиції, що складається з ефективної кількості РР5 або солі РРБ і принаймні однієї фармацевтично прийнятної інертної складової. Композиція може бути в будь-який звичайній фармацевтичній дозованій формі, але краще, якщо дозована форма вводиться орально.

До дозованих форм для орального введення можуть належати загальноприйнятні таблетки, таблетки, капсули або каплети (пігулки) з покриттям, таблетки, капсули або каплети з тривалим вивільненням, ромбічні таблетки, рідини, еліксири або будь-які інші оральні дозовані форми, відомі у фармацевтиці.

Фармацевтично прийнятними інертними складовими можуть бути наповнювачі, зв'язувачі, розчинники і т. ін., які не заважають бажаній активності РРО. Наповнювачі, такі як глини або кремнеземи, можуть бути використані за бажанням для регулювання розміру дозованої форми.

Наступні складові, такі як наповнювачі та носії, можуть бути необхідними для створення бажаних фізичних властивостей дозованої форми. Такими фізичними властивостями є, наприклад, швидкість вивільнення, структура та розмір. Прикладами наповнювачів та носіїв, корисних для оральних дозованих форм, є воски, такі як бджолиний віск, касторовий віск, гліковіск і карнаубський віск, сполуки целюлози, такі як метилцелюлоза, етилцелюлоза, карбоксиметилцелюлоза, фталат целюлозоацетату, гідроксипропілцелюлоза Й гідроксипропілметилцелюлоза, полівінілхлорид, полівінілпіролідон, стеариловий спирт, гліцерин моностеарат, метакрилатні сполуки, такі як поліметакрилат, метилметакрилат і етиленгліколь диметакрилат, поліетиленгліколь і гідрофільні смоли.

У композиціях цього винаходу бажано, щоб РРО - активна складова, була присутня в кількості між приблизно 50 і приблизно З00мг на дозовану одиницю. Точна доза, уведена кожному пацієнтові, буде функцією стану, що піддають лікуванню, і фізичних показників пацієнта, такі як вік і маса тіла.

Активними фармацевтичними складовими можуть бути РР5 або його фармацевтично прийнятна сіль, наприклад, натрієва сіль. Однією з кращих оральних дозованих форм для використання в способі винаходу є

ЕІтігюпФ желатинові капсули (ВаКкег Мопоп РНаптасеціїса!5, Іпс., Міаті, Ріогіда), які містять 100мг РР5 натрію і, як наповнювачі, мікрокристалічну целюлозу та стеарат магнію.

Хоча оральний шлях уведення є кращим, цей спосіб лікування також стосується уведення РР5 або його солі парентеральним, крізьшкірним шляхом та крізь слизові оболонки чи будь-якими іншими шляхами уведення, що є відомими й загалом використовуються у медичній та фармацевтичній галузі. Окрім цього, композиції винаходу можуть містити РР5 у фармацевтично прийнятній парентеральній, крізьшкірній формі та формі, придатній для застосування крізь слизові оболонки, або у інших загальноприйнятих носіях і дозованих формах разом з придатними інертними розчинниками, наповнювачами і додатками. Багато прикладів таких фармацевтично прийнятних носіїв можна знайти у Кетіпдіоп'є Рпаптасешіса! Зсіепсез (17 видання, 1985) й інших звичайних посібниках. Яким би шляхом не вводили або тип фармацевтичної дозованої форми не використовували, добова доза активної складової РРО становить від приблизно 2 до приблизно 50мг/кг маси тіла пацієнта або приблизно від 140 до приблизно 3500мг у дорослих людей-пацієнтів, і краще приблизно від 5 до приблизно ЗОмг/кг або приблизно 350 до приблизно 2000мг, хоча доза, зменшена до нижчої границі даного діапазону, може бути використана для парентерального введення.

Фармацевтичні композиції, що використовуються у способі винаходу, можуть містити інші активні складові, ніж РРО або сіль РР5, наприклад, інші агенти, які можуть бути корисними в попередженні викликаного циклоспорином ушкодження нирок або токсичності.

Згідно з різними втіленнями способу цього винаходу РРБ5 (або сіль РРБ5), що містить композицію, може бути введений пацієнту перед початком терапії циклоспорином або такролімусом (наприклад, починаючи за кілька днів перед), разом з терапією циклоспорином або такролімусом і/або протягом придатного терміну часу після закінчення терапії циклоспорином або такролімусом. У кращому втіленні принаймні одну дозу РР5 або солі РРО уводять пацієнту протягом 24 годин перед, разом з або протягом 24 годин після введення циклоспорину або такролімусу. Композиція РРО може бути введена пацієнту водночас з композицією циклоспорину або такролімусу, але в окремій дозованій формі, або вона може бути введена пацієнту в інший час протягом дня, а не одночасно з композицією циклоспорину або такролімусу.

Як альтернатива, у ще одному втіленні цього винаходу комбінація Р-В5 (або солі РРБ) і дозованих форм циклоспорину (або такролімусу) може бути введена пацієнтам-ссавцям, що потребують імунопригнічуючої терапії. Така комбінація дозованих форм містить ефективну для пригнічення імунної системи кількість циклоспорину або такролімусу, наприклад, приблизно від 25 до приблизно 200мг циклоспорину, краще СУА.

Комбінація дозованих форм також містить ефективну для зменшення нефротиксичності кількість, наприклад, приблизно від 50 до приблизно 500мг РРБ5 або солі РРБ.

Такі дозовані форми можуть бути в будь-який придатній формі для оральної або парентеральної доставки або уведення, як описано вище, і можуть містити будь-які фармацевтично прийнятні наповнювачі, зв'язувачі,

розчинники, носії та інші наповнювачі або інертні складові, які вважаються придатними з точки зору фахівців у фармацевтичній галузі.

Циклоспорином, який зараз є найбільш широковикористовуваним в клінічному застосуванні для створення пригнічення імунної системи або для лікування аутоімунної або імунозапальної хвороби, СуА, також відомий як циклоспорин. Проте уведення композиції РРО згідно з цим винаходом спільно з циклоспорином для попередження нефротиксичності може бути виконано з будь-яким циклоспорином, наприклад, циклоспорином

А--йоя і їх похідними. Крім того, будь-який з циклоспоринів А--2 або будь-який інший циклоспорин може бути використаний в комбінації з дозованою формою разом з РРО або сіллю РРБ у новій комбінації дозованих форм винаходу. Також, завдяки тому, що внутрішньоклітинні шляхи сигналізації і тип ниркової токсичності ЕК- 506 або такролімусу нагадує такі самі ж шляхи для СуА, ймовірно, що токсичність завдяки уведенню такролімусу має також бути знижена спільним уведенням РР5 або солі РРБ.

Структури циклоспоринів А--2 (усі є циклічними ундекапептидами) показані в Таблиці.

Таблиця

Циклоспорини А 27 су | 1 |21з1| 41516178 9 | лю | м

Мерті

Наступні приклади показують ефективність нового способу попередження або суттєвого зменшення й усунення проявів викликаної циклоспорином нефротоксичності, зокрема артеріольних некрозних уражень в нирках. Ці приклади є лише ілюстративними і не мають наміру визначити матеріали, композиції або діапазон доз як такі, що мають бути використані виключно для того, щоб здійснити цей винахід.

Приклад 1

Дві групи щурів лінії Зргадие-бамієу знаходились на дієті з низьким вмістом солі протягом двох тижнів перед початком цього експериментального дослідження, і утримувались на цій дієті протягом дослідження.

Першій групі (контрольній) уводили 15мг/кг/день СуА за допомогою ін'єкцій протягом 45 днів. Другій групі уводили таку саму дозу СуА, як і першій групі, але також вони отримували добові ін'єкції ТОмг/кг РР5 (ЕГМІВОМУ) протягом 45 днів. Наприкінці дослідження тварин забивали й їхні нирки досліджували за допомогою мікроскопу і шляхом морфометричних досліджень.

Як зображено на мікрофотографіях Фіг.1А і 1Б, у нирках контрольної групи щурів виявили великі зони інтерстиціального фіброзу. Спостерігали малу кількість запальних клітин, що знаходились всередині зон фіброзу. Нирки щурів, що отримували СуА і ЕІ МІВОМУ, виявили, що більшість канальців були щільно розташовані поруч, як за нормальних умов, і виявили чітке зменшення кількості фіброзів або клітинного інфільтрату між канальцями.

Кількість інтерстиціального фіброзу в кожній з тестових груп перевіряли кількісно морфометричним обстеженням нирок. Як показано на Фіг.2, приблизно 5095 зменшення інтерстиціального фіброзу спостерігали у щурів, яким уводили ЕІ .МІВОМЕ.

Розмір клубчків у нирках щурів у контрольній групі й групі що отримувала ЕІ МІВОМУ вимірювали візуальним аналізом. П'ятдесят клубочків послідовно досліджували звичайним морфометричним способом. Як зображено на Фіг.3, середній об'єм клубочків у групі, що отримувала ін'єкції СУА і ЕІ МІВОМУ був значно більше, ніж об'єм клубочків у контрольній групі, що отримувала лише СуА. Це вказує на те, що РР5 захищав клубочки щурів у групі, яку піддавали лікуванню від ішемічного звуження, викликаного СУА.

Приклад 2

Дві групи щурів лінії Зргадие-бамієу знаходились на дієті з низьким вмістом солі протягом двох тижнів перед початком цього експериментального дослідження і утримувались на цій дієті протягом дослідження.

Першій групі (контрольній) уводили 15мг/кг/ідень СуА за допомогою ін'єкцій протягом 15 днів. Другій групі уводили таку саму дозу СуА, як і першій групі, але вони також отримували добові ін'єкції тОмг/кг РР5 (ЕГМІВОМУ) протягом 15 тижнів. Наприкінці дослідження тварин забивали й їхні нирки досліджували за допомогою мікроскопу.

На Фіг.4А і 4Б зображені мікрофотографії зрізів клубочків нирок щура з контрольної групи (Фіг.4А) і з групи, де уводили ЕЇМІВОМУ (фіг.АВ), відповідно. На Фіг4А можна побачити (привідну) артеріолу, яка має "фібриновий" некроз разом з повною стінкою праворуч від клубочка (у центрі знімка).

Для порівняння, жодних уражень немає в привідних та відвідних артеріолах у клубочковій судинній ніжці, що показано на Фіг.АБ.

Кількість "фібринових" уражень у привідних артеріолах перевіряли в нирках контрольної групи та груп, яким уводили ЕЇМІВОМФ, а також у групі нормальних щурів Зргадое-Оамеу, яких не піддавали жодній процедурі.

П'ятдесят послідовних ділянок судинних ніжок перевіряли в кожній нирці. Як зображено на фіг.5, кількість уражень, виявлених у групі, який уводили ЕІ МІВОКМЕ, була значно меншою, ніж у групі тварин, що отримували лише СуА.

Приклад З

Це дослідження виконували для визначення того, чи мав РРО вплив на шлунково-кишкове поглинання

СУА, яке впливало на вміст у крові кількості СУА.

Одна група з 10 щурів лінії бргадие-Оамжмеу отримувала СуА (1Омг/кг-у в оливковій олії внутрішньошлунково. Повну кількість крові збирали з кожної тварини на 30 хвилині, 1 годині, 2 годині, З годині, 4 годині, 5 годині, 6 годині, 8 годині, 12 годині та 24 годині після уведення СуА. Кількість СуА у зразках вимірювали методом ЕГІ5А.

Середня кількість СУА для цієї групи відображена на фіг.бА. Пік кількості в крові досягався на 5-8 годині після введення і повертався на вихідний рівень до 24 години. Значна різниця спостерігалась між тваринами, що є звичайним для цієї форми СУА.

Друга група з 10 щурів лінії Зргадие-Самєеу отримували СуА (1Омг/кг) в оливковій олії, а також РР5 (ЕГМІВОМЄ) 5мг/кг у воді внутрішньошлунково. Повні зразки крові збирали у тварин у ті ж терміни часу, що й в контрольній групі, і вимірювали кількість СуА. Середні значення для групи в кожному проміжку часу зображені на Фіг.6Б.

Треба відмітити, що крива, показана на фіг.б6Б нагадує ту, що зображена на Фіг.бА, хоча різниця між тваринами була значно зменшена. Ці результати показують, що спільне введення орально РР5 з оральним

СУА не порушує поглинання СуА в кишках або зменшує кількість в крові. Таким же чином, спільне уведення РРО не вплинуло на зникнення СУА з плазми крові.

Таким чином було показано, що були створені способи та композиції, які досягають різних цілей винаходу, і які добре пристосовані до задоволення умов практичного використання.

Оскільки можливі різні втілення вищезгаданого винаходу і оскільки різні зміни можуть бути внесені у вищезгадані втілення, є зрозумілим те, що усе, що тут описано, розглядається як ілюстративний матеріал, а не з метою обмеження.

Усе, що вважається новим і має бути захищеним патентним законодавством, наведено в наступній формулі.

чем, дує за «й! о М р п р з ід рі У ; сдех лу Спад Ті

Мой КА НА Ге дае и СОМ с - й ж Ку с з. з тар оо Сл 5 щи у, Я А Кез 47 дит й. у й У че сеї ) ЖК ней с ї - пт т щь ди і о Си ка . у к - У. Сеуео г У Кб у оду ї, ДЯ ит Ох ізн Шх Ж. ей ай 4 У 3; вита ви. й ; | СТІ Меч. Я

КОНТРОЛЬ

ФІГ. 1А

АК и ;

Ок ун і. чу т с Я лова в (й У жу: жа: ї край рішут Бо Уві І сь ре : 5, -кв д ув. о в й: я чо я є х я Га, - 7 Ан ли Ж з ех що фл ох Я й с ей СОКИ Є-Яв Ядчею СЕК. ав МИ о рис зе, в сскі і -; 5» й сей я що ситу Ех вх а га дет;

М ун тири Й ва Дрнваттк Меси ва й и ЗВ

ОНИ я перу Я рекув Я усе чо, і. ух в. й. 2.4 Ж: ста їв

СК ріс Ся

ЕІ! МІКОМ

ФІГЛБ

ФІГ. 2

КОНТРОЛЬ ЕСМІКО М

ФІГ.

І5О 4 1.85 2 У оо

Й й о 0.75 0.50 сз АЗ (7с3, свА Б МГКГІ я ЕІМІВОМ (ОМгКГІ 45 ДНІВ

Гдз, свЗА (П5МІКГІ 45 ДНІВ

--т вм ж Ши а и та їх кр: А т

НОЇ фа ласо В о км Ем з

Б: ЧА с ВИЯВ АЕН а ар ря, о ока

Я ет 4) лива ор ИМЯ копа в и с ро пер: Сов шу осн Кс ки Кк

СМ І чо 5

Зо са им а Кх ! БИ веду кр рент звіх: НУ

НИ аес, я уч щу БА ков, ж ще ве Б у ау І су л з з ви Ха пак щи ДК, с» у В - УНІ ча - З ни А в вони х І аг кох ги с д с

Я АКВА тя о й ж ваф: и і сих чи

Ж Ай» і тя, ЮРЕ іс др во.

Он ль ноя - у «а ее Й, дя ж КЕ - ІА - ай тк се як на

Б Со з вас Ст у ор

Героя в ол дав дк ВОРОН Я А жй ! с т А Я я Ко У Па ' Сх сову» са фі вбхти в и ГЬ зі ДН Ро КІ ще СД са сп, а

Ше оду БИ А «М а я зас пе. З УЗ чо ка і уд» де Як. Ся ОЙ

І вань РЕЖ к-ть ДВ о

С ак ен Гу з я. оо ЧК вед о ВА Ока - Кі ми ню Я Я БИК с Овну тину я

І не си НЯ а а АХ з Ь ох тт; єр : А КОД раки в ав

І и т Ай у, а я о и днини ко Ку ! В ків і Ки ! ОДУ ния

І , НЯ і дурне и ОНИ ска о МИ ШИ и рату кити да нео вк

Дунай Ко Й дЕтАшН ти

Ме я и и КВ ен. дьКОЯ з. Са (ря у МмОйт юЮрх сх оС в я я с ве фи Лех си С. насе, вт оон Др - - и В ад в АЛЬО, зв) у, УА Ки ил ноя ува сиди и вн екв я естюнии нн мні ви ьу их и и в ко авіа: мив ца» , я. СЕН но и

Я я Я яд В В АВ, а и АН ВИ ба А н,

Же и З; еще фут й ка пе АК -й і а а бр еехнвк й не а ної а уки дер путь ШИ ї ее Ве щи Фут шо

Я (уся в в А М у леї ов ша

Б дк Лв іч ла Кокс у КЕ у |! ак о а мені кг

АС Ан Мр ! ре а

К- аа Я йо Ся тлдаки ст Ж нан ІЙ гі р ворог віра ана чуття Ду Я

БК рам пак й ев

І лі: А ж вій тав А коня ЧА ЩО Дами ау и "М,

С он вк А Ж Бе

ВОК у лом м, «аа ря сон ВМ ТУ В

ПОЛ І кео у дення р-н БАКУ г А ув и Я че її вл ї од и дик о. й БИ тал тех,

Б : А «лк ве ку ах а «Ск М тує г ьо Я» Май

СудяЕ - ІЗ ДНІВ

ФІГ. 5

КОНТРОЛЬ ЕМІКОМ НОРМАЛЬН.

ФІГ. бА -о0о 2

В

Е щ 1000 ді г) о зЗО1г ого Згаг аг бгВгО12гоЯг

ЧАС

ГЗсудД ОРАЛЬНО

ФІГ. 6Б

Я осо в У І . : т оо я 8)

ЗУ1го о Згаго г егагія о 4г .

ЧАС

СПОУАЗЕСМІВОМ ОРАЛЬНО

Claims

1.Спосіб попередження нефротоксичності або ниркового розладу, що включає фібротичні ураження або рубцювання в інтерстиції нирки, викликані введенням циклоспорину або такролімусу пацієнтам-ссавцям, який відрізняється тим, що вказаний спосіб включає додаткове введення пацієнту, який отримує терапію циклоспорином або такролімусом або збирається отримувати терапію циклоспорином або такролімусом, фармацевтичної композиції, яка містить ефективну для зменшення нефротоксичності кількість полісульфату пентозану (РРБ) або його фармацевтично прийнятної солі.

2.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що дозу вищезгаданої фармацевтичної композиції, що містить РРБ5 або сіль РРБ, вводять пацієнту протягом 24 годин перед, разом з або протягом 24 годин після введення циклоспорину або такролімусу.

З.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгаданий циклоспорин або такролімус уводять пацієнту орально або парентерально.

4.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію, що містить РРб5 або сіль РР5, уводять пацієнту орально або парентерально.

5.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгаданим циклоспорином є циклоспорин, вибраний з групи, що складається з циклоспоринів А--7.

б.Спосіб за п. 5, який відрізняється тим, що вищезгаданим циклоспорином є циклоспорин А.

7.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що достатню кількість вищезгаданої фармацевтичної композиції вводять пацієнту для створення загальної добової дози приблизно від 2 до приблизно 50 мг/кг маси тіла пацієнта або приблизно від 140 до приблизно 3500 мг РР5 або його фармацевтично прийнятної солі.

8.Спосіб за п. 7, який відрізняється тим, що вищезгаданою добовою дозою є приблизно доза від 5 до приблизно З0 мг/кг або приблизно від 350 до приблизно 2000

МГ.

9.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію вводять орально.

10.Спосіб за п. 9, який відрізняється тим, що вищезгаданою дозованою формою є форма, вибрана з групи, що складається з загальноприйнятих таблеток або таблеток з тривалим вивільненням, таблеток з оболонкою, капсул, каплетів, ромбічних таблеток, рідин та еліксирів.

11.Спосіб за п. 9, який відрізняється тим, що вищезгадана дозована форма містить принаймні одну фармацевтично прийнятну інертну складову.

12.Спосіб за п. 11, який відрізняється тим, що вищезгаданою інертною складовою є наповнювач, зв'язувач, розчинник або носій.

13.Спосіб за п. 9, який відрізняється тим, що вищезгадана дозована форма містить приблизно від 50 до приблизно 300 мг на одиницю РР5 або його фармацевтично прийнятної солі.

14.Спосіб за п. 12, який відрізняється тим, що вищезгадана фармацевтична композиція знаходиться у формі желатинової капсули, яка містить РР5 натрію, мікрокристалічну целюлозу та стеарат магнію.

15.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію вводять парентерально.

16.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгаданою фармацевтично прийнятною сіллю є натрієва сіль.

17.Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що вищезгаданим пацієнтом є людина.

18.Спосіб імунопригнічуючої терапії для пацієнтів-ссавців що потребують такої терапії, попереджаючи або зменшуючи розвиток нефротоксичності або ниркового розладу, включаючи фіброзні ураження або рубцювання в інтерстиції нирки, вищезгаданий спосіб, що складається із спільного введення пацієнту ефективної для пригнічення імунної системи кількості циклоспорину або такролімусу й ефективної для зменшення нефротоксичності кількості полісульфату пентозану (РРБ) або його фармацевтично прийнятної солі.

19.Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що дози фармацевтичної композиції, що містить РР5 або сіль РР5, уводять пацієнту протягом 24 годин перед, разом або протягом 24 годин після уведення циклоспорину або такролімусу.

20.Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що вищезгаданий циклоспорин або такролімус уводять пацієнту орально або парентерально.

21.Спосіб за п. 19, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію, яка містить РР5 або сіль РР5, уводять пацієнту орально або парентерально.

22.Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що вищезгаданий циклоспорин вибраний з групи, яка складається з циклоспоринів А--2.

23.Спосіб за 22, який відрізняється тим, що вищезгаданим циклоспорином є циклоспорин А.

24.Спосіб за п. 19, який відрізняється тим, що достатню кількість вищезгаданої фармацевтичної композиції вводять пацієнту для створення дози приблизно від 2 до приблизно 50 мг/кг маси тіла пацієнта або приблизно від 140 до приблизно 3500 мг РРБ5 або його фармацевтично прийнятної солі.

25.Спосіб за п. 24, який відрізняється тим, що вищезгадана доза становить приблизно від 5 до приблизно 30 мг/кг або приблизно від 350 до приблизно 2000 мг.

26.Спосіб за п.19, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію уводять орально.

27.Спосіб за п.19, який відрізняється тим, що вищезгадану фармацевтичну композицію уводять парентерально.

28.Спосіб за п.18, який відрізняється тим, що вищезгаданою фармацевтично прийнятною сіллю є натрієва сіль.

29.Спосіб за п. 18, який відрізняється тим, що вищезгаданим пацієнтом є людина.

З0.Фармацевтична композиція, що містить ефективну для пригнічення імунної системи кількість агента, що пригнічує імунну систему, який вибраний з групи, що складається з циклоспорину або такролімусу й ефективної для зменшення нефротоксичності кількості полісульфату пентозану (РР5) або його фармацевтично прийнятної солі.

З1.Фармацевтична композиція за п. ЗО, яка відрізняється тим, що вищезгаданим агентом, що пригнічує імунну систему, є циклоспорин.

32.Композиція по п. 31, яка відрізняється тим, що вищезгаданий циклоспорин вибраний з групи, яка складається з циклоспоринів А--7.

33.Композиція за п. 32, яка містить приблизно від 25 до приблизно 250 мг циклоспорину і приблизно від 50 до приблизно 500 мг РР5 або солі РР5Б.

34.Композиція за п. 33, яка відрізняється тим, що вищезгаданим циклоспорином є циклоспорин А.

35.Композиція за п. ЗО, яку вводять орально.

З6б.Композиція за п. 35, яка відрізняється тим, що вищезгадана дозована форма вибрана з групи, що складається з загальноприйнятих таблеток або таблеток з тривалим вивільненням, таблетки з оболонкою, капсул, каплетів, ромбічних таблеток, рідин та еліксирів.

З37.Композиція за п. 35, яка відрізняється тим, що вищезгадана дозована форма містить принаймні одну фармацевтично прийнятну інертну складову.

З8.Композиція за п. З/, яка відрізняється тим, що вищезгаданою інертною складовою є наповнювач, зв'язувач, розчинник або носій.

39.Композиція за п. ЗО, яку вводять парентерально.

40.Композиція за п. ЗО, яка відрізняється тим, що вищезгаданою фармацевтично прийнятною сіллю РР5Б є натрієва сіль.