WO1994001998A1 - Procede de production d'une substance inoculee a l'aide d'un champignon mycorhizien va - Google Patents

Description

明 細 書

V A菌根菌接種物の製造方法 技術分野

本発明 は、 農業や園芸等の分野で有用 な V A菌根菌、 特に ギガス ポ ラ （ Gigaspora) 属 に属す る V A菌根菌の 胞子密度が高い V A菌根菌接種物の製造方法に関す る 。 背景技術

V A菌根菌 ( Vesicular Arbuscular Mycorrhizae ) は、 植物の根に共生す る こ と に よ り 、 植物の生長を促進 した り 、 植物の酎病性等を向上 さ せ る働 き があ り 、 そ の 有用性は古 く か ら知 られて い る （小川 眞著 ： V A菌根 と そ の働 き ， 森林立地， 第 3 0 ( 2 ) 巻， 第 5 7 〜 6 5 頁， 1 9 8 8 年 . 小林紀彦著 ： V A菌根菌 と土壌病害へ の利用 ， 植物防疫， 第 4 2 巻， 第 2 5 9 〜 2 6 6 頁， 1 9 8 8 年な ど） 。

しか しなが ら、 V A菌根菌、 特にギガス ポ ラ （ G i ga - spora ) 属 に属す る V A菌根菌を人工的に増殖 さ せ、 V A菌根菌接種物 と して商業的 に使え る よ う な も の は こ れ ま で製造 さ れて いな い。

こ れ は、 V A菌根菌、 特に ギガス ボ ラ （ Gigaspora ) 属 に属す る V A菌根菌の大量培養が非常に難 し く 、 ま た 培養操作が煩雑であ り 、 コ ス ト がかか る こ と が主な原因 と さ れて い る 。

そ こ で特にギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A 菌根菌を商業的に使え る よ う にす る ため に、 培養操作が 簡単で、 かつ、 安価 に大量生産で き る 方法が望 ま れて い る 。

こ の た め、 V A菌根菌を増やす方法 と して、 幾つかの 提案が さ れて い る 。

例え ば、 休耕地の土か ら V A菌根菌を採取 した り 、 或 い は休耕地の土に V A菌根菌を接種 し、 適当 な宿主植物 をそ の土で栽培す る こ と に よ っ て V A菌根菌を増殖 さ せ る 土耕法が知 ら れてい る。

しか しな が ら、 こ の土耕法は、 V A菌根菌胞子を分離 す る操作が必要であ り 、 ま た、 生の土を使用す る と 、 土 着の V A菌根菌や病原菌の混入を招 く おそれがあ っ た。 こ れ は、 土を化学薬剤や蒸気な どで殺菌す る こ と に よ り 回避す る こ とがで き る が、 そ の手間が別途必要 と な る 。 ま た、 残留薬剤 に よ る V A菌根菌の生育阻害 と い う 新た な 問題点を生ず る 。

な お、 こ の土耕法において、 土壌中か ら V A 菌根菌胞 子を大量に分離す る方法 と して は、 土壌を篩で分別 し た 後、 比重差を利用 して分離す る 方法 （鈴木達彦著 ： V A 菌根 に 関す る 諸問題 5 , 農業お よ び園芸， 第 6 2 巻， 第 3 号， 第 2 8 〜 3 3 頁， 1 9 8 7 年） や、 遠心分離 に よ る 方法 （特開昭 6 3 — 3 0 9 1 7 8 号公報） な どが提案 さ れて い る が、 非常に煩雑な操作が必要であ り 、 商業規 摸での生産を困難な も の と して い る。

ま た、 V A菌根菌を増やす方法 と して、 多孔質で植物 の根が分配 さ れ る よ う にな る材料を用 いて行な う 栄養薄 膜培養法が提案 さ れてい る （特開昭 5 5 — 1 1 8 3 9 0 号公報） が、 こ れを接種源 と して用 いた場合に は、 根の 乾燥に よ っ て感染性が低下す る と い う 問題があ っ た。

さ ら に、 毛状根を使 っ て V A菌根菌をイ ン ビ ト 口で培 養す る 方法が提案 さ れてい る （特公昭 6 2 — 4 9 0 4 7 号公報， 特開平 3 — 8 3 5 2 2 号公報な ど） 。

こ の方法は、 無菌的な方法であ る ので、 病原菌等の混 入 は防 ぐ こ と はで き る も のの、 操作が非常に煩雑にな る と い う 欠点があ る 。

ま た、 一 ラ イ ト ， ミ キ ユ ラ イ ト ， 粘土な どの多 孔質体を、 植物お よ び V A菌根菌の増殖培地 と して使用 し、 こ の多孔質体の上で、 V A菌根菌を増殖 さ せ る方法 ( Methods and Principles of Mycorrhizal Research, N. Schenck 編， The American Phy t opatho 1 og i ca 1 Society, P 6 1 , 1 9 8 2 年 ：)や、 植物 と して麦， コ シ ョ ウ ， ト ウ モ ロ コ シ， モ ロ コ シ， ネ ギ， ァ ノレ フ ア ル フ ァ ， ピー ナ ツ な どを用 い、 バー ミ キ ユ ラ イ ト ， ピー ト ， パー ラ イ ト ， ピ ュ ミ ス等の担体上で栽培 して V A菌根菌 を増殖 さ せ る 方法 ( VA Mycorrhi za Conway LI, Powel l D. Joseph Bagyara j , CRC Press, p 1 9 0 , 1 9 8 4 年） な どが知 ら れてレ、 る。

しか しなが ら、 こ れ ら の方法に よ っ て、 ギガス ポ ラ ( Gigaspora )虜 に属す る V A菌根菌を高密度で増殖 さ せた例 は示 さ れて いな い。

さ ら に、 V A菌根菌の胞子形成を誘導す る 方法 と して も 、 幾つか提案 さ れてお り 、 例え ば植物を 日 長調節す る こ と に よ り 、 強制開花 さ せ、 胞子形成を誘導す る 方法 (特開平 2 — 2 2 7 0 6 8 号公報） や、 水切 り な どを行 な っ て強制的 に植物を枯 らす こ と に よ り 、 胞子形成を誘 導す る 方法な どが知 られてい る が、 いずれ も 胞子形成 さ せ る 度に植物を捨てな ければな らず、 連続的に胞子形成 さ せ る こ と が難 しい。

ま た、 V A菌根菌の接種物を作 る 方法 と して は、 大 き く 次の 2 つに分 け られ る が、 V A菌根菌接種物 と して実 用 的な も の は こ れ ま で得 られていな い。

すな わち、 第 1 に、 土壌な どで増や した V A菌根菌の 胞子を分離回収 し、 そ の胞子をバー ミ キ ユ ラ イ ト ， ァ 夕 ノ ル ジ ャ イ ト ， ケ イ ソ ゥ 土等の担体に、 カ ル ボキ シ メ チ ルセ ル ロ ー ス等の接着物 と共に混ぜ、 粒状化 さ せて得た 接種物 （特開平 1 一 1 6 5 3 6 9 号公報） や、 上記担体 と炭 と の混合物を用 い る こ と以外は同様に して得 ら れ た 接種物 （特開平 3 — 1 0 3 1 2 4 号公報） が知 ら れて い しか しなが ら、 こ の場合 に は、 胞子を分離す る過程や 粒状化過程で、 胞子に損傷が与え られた り 、 粒状化過程 で強制乾燥す る ために、 高頻度で胞子が死滅す る こ と が あ り 、 良質の接種物を作る こ と は困難であ っ た。

ま た、 第 2 に、 担体 と して、 土壌 （特開平 3 — 5 8 7 1 5 号公報， 同 3 — 7 6 5 7 2 号公報） ， 発泡 さ せた粘 土， 軽石等の多孔質構造を有す る 物 （特開昭 6 0 - 2 3 7 9 8 7 号公報， 同 5 5 - 1 1 8 3 9 0 号公報） 、 或い は多孔質両性イ オ ン交換体 （特開昭 6 3 - 8 7 9 7 3 号 公報） を用 いて、 植物根 と V A 菌根菌を共生 さ せて増や し、 こ れ ら担体に付着 した V A菌根菌をそ の ま ま 接種物 と して使用す る方法が知 ら れてい る。

しか しなが ら、 こ の方法において は、 例えば特開平 3 - 5 8 7 1 5 号公報に記載さ れてい る よ う に、 天然の土 壌を使 っ た場合 に は、 病原菌に よ る 汚染が問題 と な る 。

ま た、 特開平 3 — 7 6 5 7 2 号公報に記載さ れて い る よ う に、 細粒土を V A菌根菌の担体 と し、 粗粒土 と深 さ 方向の界面に充塡 して、 植物を栽培す る方法では、 0. 1 〜 l m m の細粒土に、 増えた V A菌根菌を回収 し、 使用 す る 。 こ のため、 製造過程 （ 2 〜 4 ヶ月 ） で細粒土が砕 け、 目 詰 り を生ず る 。 こ の状態では、 酸素の供給が充分 に行なわれず、 V A菌根菌の増殖に好 ま しい と は言えな い。 さ ら に、 病原菌等の雑菌汚染の危険性が高い。

さ ら に、 特開昭 6 3 - 8 7 9 7 3 号公報に記載 さ れて レ、 る よ う に、 多孔質両性イ オ ン交換体を担体 と し、 ィ モ 類を宿主植物 と して V A菌根菌を増やす方法の場合 に は . 宿主植物がィ モ類に限定 さ れ る こ と と 、 担体 自 体が D E A E セ ル ロ ー ス等、 高価で実際的でな く 、 ま た胞子密度 も 不充分であ る。

本発明者等は、 こ の よ う な従来の問題点を解消すべ く 鋭意研究を重ねた結果、 驚 く べ き こ と に、 基材 と して焼 成赤玉土、 或いは焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジ ャ ィ ト と の混合物を用 い る こ と に よ り 、 上記問題点をすベて解消 す る こ と がで き る こ と を見出 し、 こ の知見に基づいて本 発明 を完成す る に到 っ た。 発明 の開示

すなわ ち本発明 は第 1 に、 ギガス ポ ラ （ Gi gasp or a ) 属 に属す る V A菌根菌を感染 さ せた植物を、 焼成赤玉土 を基材 と して栽培 し、 V A菌根菌を増殖 さ せ る こ と を特 徵 と す る V A 菌根菌接種物の製造方法を提供す る も の で あ る 。

ま た、 本発明 は第 2 に、 ギガス ボラ （ Gigaspora) 属 に属す る V A菌根菌を感染 さ せた植物を、 焼成赤玉土 と 焼成ァ タ パル ジ ャ ィ ト と の混合物を基材 と して栽培 し、， V A菌根菌を増殖 さ せ る こ と を特徴 とす る V A菌根菌接 種物の製造方法を提供す る も のであ る 。

な お、 本発明の第 1 と第 2 と は、 焼成赤玉土を単独で 基材 と して用 い る か、 或いは焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジャ ィ ト と の混合物を基材 と して用 い る かの点で相違 し て い る 。 発明を実施す る ための最良の形態

V A菌根菌は、 土壌中 に存在す る接合菌の一種であ り . そ の菌糸が様 々 な植物の根について菌根を形成 し、 両者 が共生す る こ と が知 ら れて い る。

本発明の方法に おいて は、 種 々 の V A菌根菌の 中で も 特に、 従来、 高密度で増殖 さ せ る こ と が困難であ っ た ギ ガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌を選択的 に用 レ、 る 。

こ こ でギガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根 菌 と して は、 例え ばギガス ボラ · ア ル ビ ダ （ Gigaspora alb i da ) ， ギガス ポ ラ ' マ ノレガ リ 夕 （ Gigaspora ma- rgarita ) ， ギガス ポ ラ · ギガ ン タ （ Gigaspora g i - gantea) ， ギガス ポ ラ · 力 ロ ス ボ ラ （ Gigaspora calo - spora ) , ギガス ポ ラ ， ヘテ ロ ガマ ( Gigaspora he- terogama) 等を挙 げ る こ と がで き る 。 こ れ ら ギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根 菌は、 自 然界か ら篩等を用 いて集めた り （鈴木達彦著， V A 菌根に関す る諸問題 5 ， 農業お よ び園芸， 第 6 2 巻， 第 3 号， p 2 8 〜 3 3 ， 1 9 8 7 年） 、 遠心分離に よ り 集めた （特開昭 6 3 - 3 0 9 1 7 8 号公報） も のを用 い る こ と がで き る 。 さ ら に、 栄養薄膜培養法 （特開昭 5 5 一 1 1 8 3 9 0 号公報） や器官培養 した根を使用す る方 法 （特公昭 6 2 - 4 9 0 3 7 号公報） 等に よ り 増殖 さ せ た も のを用 い る こ と がで き る 。 ま た、 無機質や有機質の 担体に付着 さ せた V A菌根菌 も使用す る こ と がで き る 。

本発明でギガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌 根菌を感染 さ せ る 植物、 すなわち V A菌根菌培養のた め の宿主植物 と して は、 ギガス ポ ラ （ Gigaspora ：)属 に属 す る V A菌根菌が感染す る植物であれば特に制限はな い が、 生長が速 く 、 根が よ く 張 る 植物であ っ て、 かつ、 ギ ガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌が感染 し やすい植物が好適であ る 。

具体的 に は例え ば、 ト ウ モ ロ コ シ ， メ ヒ シ ノく ， ソ ノレ ゴ ― (別名 ソ ルガム又はモ ロ コ シ） ， ム ギ， 芝草， ス ダ ン グラ ス， バ ヒ ア グ ラ ス， ギニァ グラ ス等の イ ネ科植物、 ナ ス， ト マ ト ， ピー マ ン， シ シ ト ウ 等のナ ス科植物、 赤 ク ロ ー ノく ―， ダイ ズ， カ ラ ス ノ エ ン ド ウ ， マ ン グ ビ ー ン

, ピ ー ナ ッ ツ ， ア ル フ ア ル フ ァ 等 の マ メ 科植物、 ネ ギ， 玉ネ ギ等のユ リ 科植物な どが挙 げ られ る 。

こ れ ら の植物は、 種や実生苗を用 い る 他、 播種 して育 苗後、 移植 して栽培 した り 、 栄養繁殖 した り 、 挿 し芽， 挿 し木， 接木， 球根等に よ り 増殖， 栽培 した り して用 い ら れ る 。

上記の如 き 宿主植物に、 ギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌を感染 さ せ る 場合 に用 い る 基材 （培 地） と して は、 宿主植物が生育す る 基材な ら ば特に制限 はな く 、 様 々 な も のを挙げる こ とができ 、 有機物であ る と、 無機物であ る と を問わな い。 無機物 と して は例え ば、 ゼォ ラ イ ト ， 発泡粘土 （ブ レ ー粘土） ， タ ノレ ク ， バー ラ イ ト ， バ一 ミ キ ユ ラ イ ト ， （焼成） 赤玉土， 軽石， 石灰 岩， 土， 砂， コ ー ク ス等を挙 げる こ と ができ る 。 ま た、 有機物 と して は例え ば、 ピー ト モスな どを挙 げ る こ と が で き 、 こ れ ら を複数併用 した混合基材を用 いて も よ い。

但 し、 土着の雑菌の混入防止 と い う 観点か ら は、 滅菌 処理 （焼成処理 も 含む） した基材が好 ま し く 、 例え ば滅 菌土壌， 焼成赤玉土等を好適に用 い る こ と がで き る 。

ギガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌の宿 主植物への接種 ' 感染方法について述べ る と、 施用 時期 と して は、 宿主植物の発根前後のいずれであ っ て も よ い が、 特に播種時や挿 し芽の前処理時、 播種や挿 し芽 と 同 時、 或い は苗の移植時な どが好 ま し い。 ま た、 施用方法 と して は、 V A菌根菌を前記の基材 と 混合 した り 、 根元 に入れた り 、 種子や芽の下層 に層状に施用 した り 、 或い は定植時の植え穴の 中 に施用 した り す る こ と が好 ま し い ,

V A菌根菌を植物へ感染 さ せ る 場合、 通常、 1 植物体 に対 し、 1 〜 100, 000 個、 好 ま し く は 5 〜 10, 000個の ギ ガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌胞子を植 物へ接種すればよ い。

V A菌根菌を接種 した植物を、 常法にて栽培す る こ と に よ り 、 例え ば温度 5 〜 6 0 °C、 好 ま し く は 1 0 〜 4 5 て にて、 基材の p H 3 〜 9 . 5 、 好 ま し く は 4 〜 7 . 5 の条件で栽培す る こ と に よ り 、 V A菌根菌が植物の根に 感染す る 。

こ の よ う に宿主植物の発根 と共に、 ギガス ボ ラ （ Gigaspora ) 属 に属す る V A菌根菌の感染が成立す る 。

本発明の方法は、 こ の よ う に して V A菌根菌を感染 さ せた植物を、 赤玉土 （赤褐色系壌土） を加熱処理 した も の、 即 ち焼成赤玉土、 或いは好 ま し く は こ の焼成赤玉土 と焼成ァ 夕 パ ル ジ ャ ィ ト （加熱処理 した ァ タ ノ、。ル ジ ャ ィ ト ） と の混合物を基材 と して栽培す る 点に特徴があ る 。 すな わ ち 、 宿主植物であ る V A 菌根菌感染植物を、 焼 成赤玉土、 或い は焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジ ャ ィ 卜 と の混合物を基材 と す る 培地に植え替え、 V A 菌根菌を増 殖 さ せ る と共に、 V A 菌根菌感染植物を充分に生育 さ せ る 。 な お、 場合に よ っ て は、 当初か ら、 こ の よ う な基材 中で感染 · 栽培 して も よ い。

こ こ で用 い る 焼成赤玉土は赤玉土を 2 0 0 〜 1 0 0 0 で、 好 ま し く は 2 5 0 〜 8 5 0 °Cで焼成 した も のであ る （ そ の粒径は特に制限はな いが、 通常、 0 . 3 〜 5 m m 、 好 ま し く は 0 . 5 〜 3 m m の も のであ る 。

ま た、 焼成ァ 夕 パル ジ ャ イ ト と して は、 ァ タ ノ、。ル ジ ャ イ ト を 2 0 0 〜 1 0 0 0 。C、 好 ま し く は 3 0 0 〜 6 5 0 でで焼成 した も のであ る。 そ の粒径は特に制限はな いが - 通常、 0 . 3 〜 5 m m、 好 ま し く は 0 . 5 〜 3 m m の も のであ る 。

焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジ ャ ィ ト と の混合物におい て は、 焼成赤玉土を 5 〜 9 5 容量 、 好 ま し く は 4 0 〜 8 0 容量 の割合で混合すれ ばよ い。

培地に は、 こ の よ う な基材の他に、 炭， 軽石， 発泡粘 土等を混合す る こ と が可能であ る が、 こ の場合に は、 焼 成赤玉土、 或いは焼成赤玉土 と焼成ァ 夕 パル ジ ャ ィ ト と の混合物の合計が、 培地全体の 8 0 容量％以上 と な る よ う にす る 。

本発明の方法では、 こ の よ う に特定の基材を用 いて い る ため、 ギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根 菌が盛んに増殖 し、 V A菌根菌の菌糸が基材を満た し た 容器全体に効率 よ く 伸長す る 。 V A菌根菌感染植物に肥料等を与えて、 栄養生長を維 持 しなが ら、 胞子形成を誘導す る。 こ の よ う に して植物 は栄養生長を続けなが ら も 、 V A菌根菌は胞子を形成 し 始め る 。 宿主植物の栽培は通常の条件で行なえ ばよ く 、 温度は通常、 5 〜 6 0 'Cであ る 。

な お、 植物を旺盛に生育 さ せ る ため に肥料を与え る が . 肥料は調製 した も のであ っ て も よ レ、 し、 或い は市販の も のであ っ て も よ い。 ま た、 固形肥料であ っ て も よ い し、 施肥を調節 しやすい よ う に、 液体肥料 （液肥） を与えて も よ い。

ま た、 肥料中 に含 ま れ る リ ン の濃度は高す ぎな い よ う にす る こ と が望 ま し く 、 好 ま し く は 3 0 O p p m以下 と す る 。

こ の よ う に して V A菌拫菌感染植物の栄養生長を維持 す る が、 適当 な時期に、 ギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に 属す る V A菌根菌の胞子形成を誘導す る 。

通常、 栽培 し始めてか ら、 2 〜 7 ヶ月 程度経過 して、 植物が充分 に生育 し、 V A菌根菌 も 増殖 し た と こ ろ で、 水， 栄養等の供給を絶ち、 暫 く 放置す る と 、 V A菌根菌 は胞子を形成す る 。

すなわ ち、 胞子密度が充分に上が っ た と こ ろ で、 焼成 赤玉土、 或い は焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジ ャ ィ 卜 と の 混合物を回収 して、 V A菌根菌接種物 （製剤） を得、 必 要に応 じて乾燥 して製品化す る 。

こ の よ う に して胞子密度が高 く 、 活性に優れた V A菌 根菌接種物が得 ら れ る。 なお、 乾燥は胞子や菌糸が ダ メ ー ジ を受 けな い程度の温度、 例えば 7 0 °C以下、 好 ま し く は 2 0 〜 5 0 °Cの温度で行なえ ば良い。

本発明の方法に よ り 製造 して得 られた V A菌根菌接種 物を、 野菜 · 果樹苗の育苗時や鑑賞用植物の栽培時に接 種す る こ と に よ り 、 こ れ ら植物に V A菌根菌を感染 さ せ . 植物の良好な生育を図 る こ とがで き る。

本発明の方法では、 こ の よ う に して、 充分な量の V A 菌根菌の胞子を回収 し う る と共に、 V A菌根菌感染植物 を別の新たな基材 （焼成赤玉土、 或い は焼成赤玉土 と 焼 成ァ タ パル ジ ャ イ ト と の混合物か ら な る 基材） に移植す る こ と に よ り 、 再度 V A菌根菌の胞子形成を誘導す る こ と がで き る 。 ま た、 所望 しな い土着の V A菌根菌や病原 菌の混入を防止す る こ とがで き る 。

すなわ ち、 新たな基材 （焼成赤玉土、 或い は焼成赤玉 土 と焼成ァ タ パル ジ ャ イ ト と の混合物か ら な る 基材） に 移植 さ れた V A菌根菌感染植物 に、 上記 と 同様に して、 肥料等を与えて、 栄養生長を維持 しなが ら、 胞子形成を 誘導 し、 胞子密度が充分に上が っ た と こ ろで、 基材を回 収 し、 乾燥 して製品化す る と と も に、 V A菌根菌感染植 物を分離 し、 こ れを再度別の新たな基材に移植す る こ と に よ り 、 1 本の V A菌根菌感染苗か ら繰 り 返 し、 複数回， にわた り 、 充分な量の V A 菌根菌の胞子を得る こ と が可 能 と な る 。

次に本発明を実施例に よ り 、 さ ら に詳 し く 説明す る 。 実施例 1 , 2 及び比較例 1 , 2

1 5 0 ミ リ リ ッ ト ル （ m l ) 容の ビニ ー ル ポ ッ ト に、 赤玉土 （関東 ロ ー ム 由来の赤褐色系壌土） を 8 0 0 °Cで 焼成 した焼成赤玉土 （粒径 0. 5 〜 4 mm) を基材 と して、 ポ ッ 卜 の容量の 3 分の 2 ま で充塡 し、 そ の上に種菌 と し て、 休耕地よ り 採取 した V A菌根菌 〔ギガス ポ ラ · マ ル ガ リ 夕 （ Gigaspora margari ta )〕 （な お、 本菌は工業 技術院微生物工業技術研究所に おいて、 受託を拒否 さ れ た。 本出願人は、 本菌の提供を要請す る者に対 して、 本 菌を提供す る 用意があ る 。 ） の胞子を 5 0 個接種 し、 さ ら に上記 と 同 じ焼成赤玉土を l cmの厚 さ に充塡 した。 そ の上に、 ア ル フ ァ ノレ フ ァ の種子を 3 粒播 き 覆土 した。

こ の よ う に セ ッ ト した ポ ッ ト を計 1 2 個用意 し、 各ポ ッ ト の 中 を充分濡 ら し た後、 2 5 〜 3 0 での ガ ラ ス温室 内で 4 週間栽培 して V A菌根菌を感染 さ せた後、 1 2 鉢 の 5 号 プ ラ ス チ ッ ク 鉢 （ 1. 5 リ ッ ト ル容） に移植 し た。 そ の際に、 基材 と して、 8 0 0 でで焼成 した赤玉土 （粒 径 0 . 5 〜 4 mm) (実施例 1 ) 、 6 0 0 °Cで焼成 した ァ タ ノ ル ジ ャ ィ 卜 に 8 0 0 °Cで焼成 した赤玉土 （粒径 0. 5 〜 4 mm) を 1 ： 1 (容積比） の割合で混合 した基材 （実 施例 2 ) 、 市販の非焼成赤玉土 （粒径 0. 5 〜 4 mm) (比 較例 1 ) 、 或レ、 はバー ミ キ ユ ラ イ ト （粒径 1 〜 4 mm) (比較例 2 ) を、 各 3 ポ ッ ト ずつ充填 した。 な お、 基材 の 中 に化成肥料 （ 8 — 8 — 8 ) を、 用土 1 リ ツ ト ル当 り 5 g の割合で混合 した。

移植後、 2 5 〜 3 5 ての ガラ ス温室内で、 1 4 週間に わた り 植物を栽培 しなが ら、 V A菌根菌 〔ギガス ポ ラ · マ ノレ ガ リ 夕 （ Gigaspora margarita )〕 を増殖 さ せ、 そ の後、 水の供給を中止 し、 2 週間放置 した。 こ の よ う に して得 られた V A菌根菌接種物を回収 し、 付着 してい る V A菌根菌 〔ギガス ボ ラ ' マ ルガ リ タ （ Gigaspora ma - rgari ta ) 〕 の胞子数を測定 した。 各区 3 ポ ッ ト 毎の平 均値を第 1 表に示 した。 な お、 非焼成赤玉土使用 区 （比 較例 1 ) に お いて は、 グ ロ ム ス （ Glomus ) 属 と思われ る 、 別の V A菌根菌の胞子の混入が観察 さ れた。

第 1 表

実施例 3 , 4 及び比較例 3 , 4

実施例 1 ， 2 及び比較例 1 ， 2 にお いて用 いた ア ル フ ァ ノレ フ ァ の代わ り に、 白 ク ロ ーノく ー を用 レ、 、 かつ、 5 号 プ ラ ス チ ッ ク 鉢の基材 と して、 焼成赤玉土のみか ら な る 基材 （実施例 3 ) 、 焼成ァ タ パ ル ジ ャ ィ ト と焼成赤玉土 と を、 1 ： 2 (容積比） の割合で混合 した基材 （実施例 4 ) 、 非焼成赤玉土のみか ら な る 基材 （比較例 3 ) 、 或 い は天然の黒ポ ク 土をオ ー ト ク レ ー プ （ 1 2 0 °C , 1 時 間殺菌） 処理 した土か ら な る 基材 （比較例 4 ) を用 いた, こ と 以外は、 実施例 1 , 2 及 び比較例 1 ， 2 と 同様に行 な っ た。 各区 3 ポ ッ ト 中 に含 ま れた胞子数の平均値を第 2 表 に示 した。 な お、 非焼成赤玉土使用 区 （比較例 3 ) に おいて は、 グ ロ ム ス （ Glomus ) 属 と思われ る 、 別の V A 菌根菌の混入が観察 さ れた。 第 2 表

実施例 5 , 6 及び比較例 5

実施例 1 ， 実施例 2 , 比較例 1 にお いて、 ギガス ポ ラ ' マ ル ガ リ タ （ Gigaspora margarita )の代わ り に、 ギ ガス ボ ラ · ア ル ビダ （ G i g a s p 0 r a alb i da ) (な お、 本 出願人は、 本菌の提供を要請す る者に対 して、 本菌を提 供す る 用意があ る 。 ） を用 いた こ と以外は、 実施例 1 , 実施例 2 ， 比較例 1 と 同様に して行な っ た。 結果を第 3 表 に示す。 第 3 表 実施例 5 実施例 6 比較例 5 焼成 焼成ァ 夕 バ 非焼成

赤玉土 ル ジ ャ ィ ト 赤玉土

+

焼成赤玉土 胞子数

(個 / 9, 218 11, 004 6， 059

ポ ッ ト ） 本発明 の方法では、 焼成赤玉土、 或い は好 ま し く は焼 成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジ ャ ィ ト と の混合物を基材 と し て用 い る こ と に よ っ て、 土着の V A菌根菌， 病原菌等の 混入を防 ぐ こ と がで き 、 純粋に種菌 と して用 いた ギガス ボ ラ （ Gigaspora) 属 に属す る V A菌根菌を増殖す る こ と がで き る 。

ま た、 本発明の方法に よれば、 こ れ ま で V A菌根菌の 中で も 増殖が困難であ っ たギガス ボ ラ （ Gigaspora) 属 に属す る V A菌根菌を効率よ く 増殖さ せ る こ と ができ る ， さ ら に、 本発明の方法に よ れば、 取扱が容易であ っ て . 胞子密度が高 く 、 しか も 活性を安定に保持す る V A菌根 菌接種物 （製剤） を安価に作成す る こ と がで き る 。

ま た、 本発明の方法に よ れば、 V A菌根菌増殖基材を そ の ま ま 商品 とす る こ と がで き る ため に、 胞子分離の手 間 をか けずに済み、 操作が簡便であ る 。 産業上の利用可能性

本発明の方法に よ れば、 こ れ ま で V A 菌根菌の 中で も 増殖が困難であ っ たギガス ボ ラ （ Gigaspora) 属 に属す る V A菌根菌を効率 よ く 増殖 さ せ る こ と がで き る た め、 農業， 園芸業等の分野に おいて極めて有効 に利用す る こ と がで き る 。

Claims

言青 求 の 範 囲

(1) ギガス ポ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌を 感染 さ せた植物を、 焼成赤玉土を基材 と して栽培 し、 V A菌根菌を増殖 さ せ る こ と を特徵 とす る V A菌根菌接種 物の製造方法。

(2) ギガス ボ ラ （ Gigaspora )属 に属す る V A菌根菌を 感染 さ せた植物を、 焼成赤玉土 と焼成ァ タ パル ジャ ィ ト と の混合物を基材 と して栽培 し、 V A菌根菌を増殖 さ せ る こ と を特徴 とす る V A菌根菌接種物の製造方法。