BE464967A

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Publication number: BE464967A
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Description

Procédé de fabrication d'une préparation d'insuline.

Cette invention se rapporte à un procédé de fabrication d'une préparation d'insuline, notamment pour injections, destinée à produire par une action rapide un abaissement prolongé de la teneur en sucre du sang.

Suivant la présente invention, ce procédé consiste essentiellement à combiner l'insuline avec de la globine, c'est-à-dire la protéine animale existant dans l'hémoglobine, pour former des composés ou des compositions labiles d'où l'insuline est libérée lentement.

La globine humaine est préférable, bien que celle provenant d'autres sources, comme la globine du boeuf ou du lapin, puisse être utilisée. On mélange l'insuline et la globine en proportions susceptibles de produire les résultats les plus avantageux et on peut employer le mélange tel quel ou sous la forme d'un précipité dispersé ou réparti dans un électrolyte approprié.

On peut régler le degré d'activité de l'insuline en faisant varier le rapport de globine et d'insuline et le pH de l'électrolyte, l'action étant d'autant plus rapide que la proportion d'insuline est plus élevée et vice versa. La valeur du pH est déterminée pour que la dissociation ou la décomposition de la composition et la libération de l'insuline se fassent à l'allure désirée.

Dans certains cas, du zinc peut être combiné avec la composition insuline-globine pour augmenter l'activité de l'insuline et favoriser la production de la combinaison désirée entre l'insuline et la globine.

La composition insuline-globine peut être obtenue en

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dissolvant l'insuline dans un acide dilué tel que le H Cl et en dissolvant la globine dans un acide faible dilue et/ou un tampon, comme le KH2 P04 , le Na H P04, un tampon d'acétate, le H Cl ou d'autres acides ayant une valeur pH supérieure à 2.

On mélange ces solutions pour former une solution claire dans laquelle se forme la composition insuline-globine. On peut employer la solution mélangée telle quelle ou bien on peut. précipiter la composition insuline-globine par addition de
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Na H P0'i ou autre base faible pour augmenter le pH de l'élf:ctrolytE> jusqu'au point où la précipitation se produit.. Cette solution, contEnant le précipité blanc, peut être employée
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telle quelle ou être diluée dans de l'epu ou dans une solution d'un sel de zinc et/ou de crésol. Le zinc est utile pour augmenter l'activitf de l'insuline et r=p.noi la composition insuline-globina plus stable. Le erésol contribue a mf-intenir la stabilité de la solution Gt agit:, en même temps comme désirfectant.

Cette préparation offre une st3bil' té suffis;u1 J'.,;:> nour se conserver pendant une longue durée, ce qui constitue une qualité importante au point de vue commercial. On a constaté
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que lorsque cette solution est injectée dans le corps ii?.i,,,1¯n on obtient une action rapide et un e['fet prolongé de telle sorte qu'une seule injection peut remplacer plusieurs injec- tions d'insuline ordinaires. Bien que cette préparation ait un effet plus prolongé que l'insuline pure, son action abaissant;
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la teneur en sucre au Sc'ng est considérable et comparable a celle produite par l'insuline ordinaire dont l'effet ae dure que peu da temps.

On suppose que l'insuline et la globine se combinent',
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pour forcer un composé relativement labile qu'on peut dénomr insulina te de globine. L2 combinaison a lieu en différentes proportions et on peut régler la stabilité du composé au d' l? combinaison qui en résulte en faisant varier la valeur DH de l'électrolyte dans lequel le précipité se trouva en JvsîJinJi.;j'1.

L'action avantageuse est attribuée au fait qvm l'insutl2te de globine se dissocie probablement assez lif=1t= e=at pour libér-r gTa.î1J±-llh=-e#1t l'inst¯IlinE. Toutefois cette explication n'est nss limitative, car il est possible que l'insuline et la globine ne ferment pas un véritable composé chimique.

En générale on a obtenu de bons résultats en adoptent une proportion de globine variant de 0,2 à 2,0 fois celle de l'insuline pure ou son équivalent et une concentration totale
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en sel inférieure à celle correspondant a 1/8 N Na Ci et avec une valeur du pH comprise entre 5 et 8. Il est habituellement avantageux d'utiliser Jour 1a préparation une globine qui est
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homologue ( non antigénique) de l'espèce dans laquelle elle <,st destinée 3. être utilisée.

Des précautioris doivent 4T,: prises dan? la préparation de la globine pour empêcher un excès de denaturation, bien que des préparations faites avec de la globine
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dénE-turée permettent d'atteindre en partie l'effet désiré.

EXEMPLE
A titre d'exemple typique, on peut dissoudre 50 mg. d'insuline pure ou son équivalent dans environ 10 c.c. de N/100 H Cl.O peut mélanger cette solution avec environ 5 c.c. d'une solution de globine contenant environ 64 mg, de globine et 22.5 mg de KH2 P04. L'insulinate de globine est précipité de cette solution sous forme d'un précipité blanc par additiion d'environ
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2.5 c, c. d'une solution de ¯Na HP04 renfermant environ 30 mg. de Na HPO Lû solution contenant le. précipité d'insulinate de globine peut être diluée jusqu'à 25 c.c. environ avec de l'eau @

ou une solution contenant un sel de zinc et de crésol en quantité suffisante pour obtenir une concentration finale d'environ 0,3% de crésol et 0,01% de zinc.

Après quelques minutes de repos, le pH se stabilise à environ 6.

Dans l'exemple donné ci-dessus, il doit être entendu que chacun des électrolytes cités peut être remplacé par d'autres combinaisons convenables d'électrolytes, telles que des solutions de sels de calcium, magnésium, cuivre, cadmium, cobalt, nickel et manganèse et/ou un tampon ayant un pouvoir tampon dans la même gamme de valeurs du pH que les systèmes tampons mentionnés précédemment. D'autres substances ou dissolvants miscibles avec de l'eau, tels que l'alcool, le glycérol, la triacétine, l'éthylèneglycol, l'éthanolamine et autres substances analogues, peuvent être ajoutés en différentes proportions pour répondre à des buts spéciaux. En outre, on peut faire varier les proportions dans des limites relativement étendues pour régler le rapport de l'insuline, de la globine et du zinc dans la gamme des valeurs mentionnée ci-dessus.

REVENDICATIONS ---------------------------
1. Procédé de fabrication d'une préparation d'insuline, caractérisé en ce qu'on mélange une solution d'insuline avec une solution de globine pour former une composition d'insulinate de globine.

Claims

2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la préparation est ensuite précipitée.

3. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on dissout l'insuline et la globine dans un électrolyte.

4. Procédé suivant les revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'on effectue la précipitation en réglant le pH de la solution entre 5 et 8.

5. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on dissout l'insuline et la globine dans un acide faible et on les mélange pour former une solution claire contenant la gomposition d'insulinate de globine.

6. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la globine est présente dans la solution en quantités variant de 0.2 à 2.0 fois la quantité d'insuline pure en poids EMI3.1 ou s on équivalent.

7. Procédé suivant les revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'on dissout l'insuline dans un acide faible et on la mélange avec une solution de globine dans une substance EMI3.2 acide' telle que le KH2 P04, le Na H2 PO un tampon d'acétate , et l'H Cl pour former une solution claire, après quoi on ajoute une base pour précipiter l'insulinate de globine.

8 Procédé suivant la revendication 7, caractérisé en ce qu'on ajoute au.mélange un sel de zinc en quantité telle que la teneur résultante en zinc est inférieure à c/3mg par 2 mg. d'insuline pure. , n,1 EMI3.3 'n¯.....11. - -- ,nAa