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La présente invention a pour objet, d'une part, des produits nouveaux de la série de la colchicéine qui résultent du remplacement du grou-
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pe -OCH 3, du cycle tropolonique C délia formule 1 par un groupe -S-alcoyle substitué ou non et qui correspondent à la formule générale II (R=H, alcoyle, acyle, radical osidique acylé ou non; R'=alooyle substitué ou non).
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et, d'autre part, leur procédé d'obtention. La formule générale I est écrite en conformité avec les formules
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admises pour la colchicine (R=CH ), la démétbyloolchioine (R=H; cf.
SANTAVY et REICHSTEIN, Helv. Chi.Acta. 195p,n 33, 1606) et le colchicoside (R=C H 10 ) dont la préparation a fait l'objet du brevet français de la socle e demanderesse n 1.049-755 du 22.1.1952 et dont la filiation avec la déméthylcolchicine (R=H) a été prouvée (brevet français r $.C53.179 du 28.3.1952.)
En accord avec les travaux de nomenclature de HOROWITZ et ULLTOT
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(J.Am.Chem.Soc., 1952, z, 597), on peut attribuer aux ôicoyi-thiocoichi- céines la formule II.
Les nouveaux composés trouvent leur application dans le domaine biologique et industriel de la colchicine, notamment dans les modificati ons de la mitose et la création de polyploides soit par épandage de solutions aqueuses ou de suspensions des produits sur des sols cultivés, soit par traitement prélable des semences avec les produits purs ou dilués dans un solvant ou sur support. Au point de vue physiologique, certains de ces nouveaux composés présentent une toxicité nettement inférieure à celle de dérivés colchiciques antérieurement utilisés.
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Pour obtenir ces composés, on fait réagir, en présence d'un cdctalyse= acide ou en milieu alcalin, un alcoylmercaptang substitué ou non, sur le dérivé colchicique correspondant de formule générale I dans laquelle R représente l'hydrogène, un groupement alcoyle ou acyle, un radical osi-
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dique acylé ou non, et ssole le composé obtenu. C'est ainsi par exemple qu'on peut préparer la méthylthio-colchi-
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céine (thiocolchicéine) (II, 9 R-CH ; 31- R'=CH ) et l'éthylthi,p-colcha:Wkime (II, R=CH , R'=C2H ) par action du fiê ou de l'éthYl4meroaptan sur la colchicine (I, =CH ).
Les composés faisant l'objet de la présente invention peuvent également être obtenus par l'action d'un alcoylmeroaptan, substitué ou non, sur la déméthyloolchieine (I, R=H), suivie d'alcoylation ou d'introduction d'un radical osidique acylé ou non par des procédés connus, étant bien entendu que la fonction -S-alcoyle ne doit pas être altérée au cours de cette transformation.
Suivant une variante, on peut obtenir les nouveaux composés à partir des dérivés de l'isocolchicéine correspondant à la formule III, (R=H, alcoyle, ose acylé ou non; R"=H, alcoyle, acyle aliphatique ou aromatique.)
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Lorsqu'on fait agir un alcoylmercaptan, substitué ou non, en pré- sence d'un catalyseur acide sur une isocolchicéine, la réaction ne procè- de pas par simple remplacement du groupe -OR" par le groupe -S-alcoyle; il y a simultanément transposition et, dans le produit final, le groupe cétonique et le groupe alcoylthio reprennent les positions indiquées dans la formule II.
Ainsi, l'isocolchicine, les éthers et esters de l'isocolchicé- ine conduisent aux alcoylthiocolchicéines, substituées ou non, correpon- dantes.
Si l'on opère en présence d'un catalyseur acide pouvant être de préférence l'acide paratoluène-sulfonique, l'acide benzène-sulfonique, un hydracide, le trifluorure de bore, etc.., la réaction entre le composé colchicique ou isocolchicique tel que décrit plus haut et le mercaptan se fait en présence d'un solvant ou sans solvant, à une température voisine de la température ordinaire ou un peu supérieure, de préférence entre 15 et 50 . Dans le cas du méthylmercaptan, on opère au laboratoire en tube scellé et industriellement en autoclave. Selon la réactivité du composé tropolonique et la température de réaction, le contact avec le mercaptan et le catalyseur est maintenu pendant un laps de temps s'échelonnant entre plusieurs heures et plusieurs jours.
Lorsqu'on utilise un solvant, on le choisit de préférentee de manière à mettre en solution le composé initial.
La réaction terminée, on refroidit le mélange réactionnel, élimine le mercaptan en excès, généralement par distillation et peut ainsi le récu- pérer en l'utiliser à nouveau. Le solvant éventuel est séparé suivant les procédés habituels. Le thiodérivé résultant est purifié par cristallisation; on l'obtient avec un bon rendement. Lorsqu'on met en oeuvre des composés de la série de l'isocolchicéine, la réaction est conduite dans ces mêmes con- ditions, mais le rendement est en général inférieur et il ne faut parfois dans ce cas recourir à la phromatographie pour purifier le mélange réactionnel obtenu. La réaction peut également être effectuée en milieu alcalin.
On fait réagir pour cela une solution aqueuse du sel de sodium, de potas- sium ou de lithium d'un alaocoyle-mercaptan, substitué ou non sur un dérivé de la colchicéine tel que décrit plus haut, en absence ou présence d'un solvant organique tel quelle méthanol, l'éthanol, le tétra-hydrofuran, le dioxane, etc... Ce procédé présenteum certain avantage sur celui de la ca- talyse acide dans le ca s ou l'on utilise le méthylmercaptan. En effet, les sels alcalins du méthylmercaptan ne sont pas volatils et l'on peutopérer en vase ouvert. Le sel alcalin du mercaptan peut être préparé à part et introduit au moment de la réaction.
On peut encore préparer extemporanément une solution aqueuse ou alcoolique de ce sel en faisant réagir le mercaptan sur une solution titrée d'un alcali ou encore sur l'éthylate ou le méthyla- te de sodium, et utiliser directement cette solution. Après réaction, on acidifie, dilue par l'eau et extrait le thiodérivé fermé par un solvant -non miscible à l'eau et purifie par cristallisation fractionnée ou chromatohra- phie. Les rendements sont excellents et permettent l'obtention de composés très purs. Ce procédé rend notamment de grands services quand il s'agit d'opérer sur des hétérosides de la colchicéine , une hydrolyse acide de la
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liaison osidique étant toujours à craindre quand la réaction est effectuée en présence d'un catalyseur acide.
De plus, si R est un radical acyle facilement saponifiable, la réaction aboutit à une saponification simulta-
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née. C'est ainsi que l'acétate de déméthyloolchieine (I, R=CO-CH3) fournit la déméthylthiocolchicine (il, R=H).
On peut, suivant une autre variante faire réagir, dans les con-
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ditions précitées, un alooylmercaptan, substitué ou non, sur la déméthyl- colchicéine (I, R=H) pour obtenir la déméthyl-alcoylthiocolchicéine correspondante (II, R=H, R' = alcoyle substitué ou non) qui par action du
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diazométhane est méthylée en alcoylthiocolchicéine (II, R--CH 3y RI m alcoyl substitué ou non).
Si l'on désire obtenir un hétéroside d'une alcoylthiocolchicéine
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(II, R-radioal o.ique, R'=alcoyle substitué ou non), on fait réagir un sel alcalin d'un alcoylmercaptan substitué ou non sur l'hétéroside corres-
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pondant de la colohioéine ou sur son dérivé aoylé, ou bien encore, on condense un ose acétobromé suivant un procédé connu, sur la déméthyl-alcoylthiocolohioéine et saponifie les fonctions acylées de l'hétéroside de l'alooylthîooolohicéine obtenue.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Les points de fusion sont des points'de fusion lente. Les pouvoirs rotatoires ont été déterminés dans le chloroforme, à 0,5 % s'il n'est pas précisé autrement.
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Exemple 1 : Thiooolohioine (formule II, R=R' ç-CH3 ) à partir de la colchicine.
Dans un tube à sceller, on introduit 2,5 g de colchicine et 0,5 g d'acide p-toluène-sulfonique monohydraté. On plonge la partie inférieure du tube dans un mélange de neige carbonique et d'acétone et, lorsqu'il est bien refroidi, on introduit 15 g de méthylmercaptan refroidi à -30 . On scelle, sort le tube du mélange réfrigérant et lui laisse prendre la température ambiante (20 ) en l'agitant de temps en temps. La colchicine se dissout assez facilement tandis que l'acide toluène-sulfonique ne se dissout qu'au bout de deux heures environ. La solution homogène, d'abord jaune, vire au rouge sans qu'il se forme de dépôt. On abandonne six à douze jours à 20 , puis refroidit à -80 , ouvre le tube et distille le mercaptan par chauffage vers 20 à 40 .
Si l'on a en vue une nouvelle opération, il est avantageux de recueillir le mercaptan dans un autre tube à sceller refroidi à -50 ou -80 , d'y introduire à nouveau de la colchicine
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et de l'acide p-toluène-sulfonique en quantités voulues et de continuer l'opération comme il a été dit ci-dessus.
Le résidu de la distillation du mercaptan et. éventuellement du solvant, se présente' sous forme d'une résine épaisse, rouge, très malo-
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dorante. 0+la reprend par un mélange de-50 om3 de chloi orme ou d'acétate d'éthyle et de 20 cm3 d'eau, ajoute du bicarbonate de soude jusqu'à réaction neutre et épuise avec de nouvelles quantités du solvant choisi qu'on lave ensuite à l'eau.
AZprès séchage de l'extrait sur sulfate de magnésium et distillation à sec, on obtient 2,6 g d'un résidu cireux, jaune-brun, que l'on recristallise en acétated'éthyle. Le poids de produit obtenue est de 2,1 g soit 80 % de la théorie. La condensation avec le méthylmercaptan peut également être effectuée en présence de 5 volumes environ d'un solvant comme le .chloroforme ou le tétrahydrofuran, que l'on chasse dès que le mercaptan a distillé. La thiocolchicine se présente en cristaux cubiques, jaunes, F.
192-194 ; [alpha]/D20 = 221 . Elle est très soluble dans le chloroforme, bien soluble dans l'alcool, soluble dans l'acétone. Elle se dissout dans 15
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volumes d'acétate d'éthyle chaud et est insoluble dans l'éther. Elle est stable en milieu alcalin aqueux jusqu'à 100 . L'acidee chlorhydrique 0,2 N ne l'attaque pas à 100 , ce qui la distingue de la colchicine. La tendanoe à la solvatation est aussi marquée que pour cette dernière.
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Analyse : C 22H250 5NS Calculé : C% 63,6 Il% 6,1 N% 3,4 S% 7,7 Trouvé : 63,7 6,0 3, 2 8,1
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Exemple 2 : Thiocolchieine (form.le II, R=Rtt--CH3l à partir de la colchi- aine.-
On dissout 20 g de soude en pastilles dans l'eau de façon à obtenir un volume total de 80 cm3, introduit en glaçant 25 g de méthylmer- oaptan, abandonne quatre heures à 0 et essore le sel de sodium du méthylmercaptan formé. 2,5 g de ce sel de sodium du méthylmercaptan sontintroduits dans une solution de.:5 g de colchicine dans 100 cm3 d'eau. On agite mécaniquement pour dissoudre, abandonne seize heures à 20 , verse dans l'eau
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et extrait au chloroforme.
Les extraits olloroformiques réunis sont lavés jusqu'à neutralité et, après avoi séché la solution chloroformique sur sulfate de magnésium, on distille à sec. On reprend par le benzène. La chromatographie sur alumine fournit un éluat chloroformique contenant 2,1 g
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de thiocolchieine, F. 192 , c.D= 2i identique au composé décrit dans l'exemple 1. On récupère d'abord d'autre .''part 50% de la oolohioine mise en oeuvre qui rebute retenue plus fortement sur la colonne d'absorption que la thiocolchicinè;' Le rendement global en thiocolchicine atteint ainsi 80% de la théorie.
Exemple 3 Thiocolchicine (formule II, R=R'CH:3) à partir de la colchicine.
Variante a) :
5 g de colchicine sont ,dissous dans 100 cm3 d'eau et additionnés d'une solution obtenus par réaction de 15 g de méthylmercaptan sur 12 g de soude dissous dans 50 cm3 d'eau. On traite comme dans l'exemple 2 et
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obtint la thiocolchieine avec des rendements identiques.
Variante b) :
5 g de colchicine dissous dans 100 cm3 d'eau sont additionnés d'une solution obtenue en faisant réagir 15 g de méthylmercaptan sur 17 g de potasse dissous dans 50 cm3 d'eau. Après un traitement identique à celui de
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l'exemple 2, on obtient z du rendement théorique en thiocolchieine et récupère 55% de la colchicine mise en oeuvre.
Variante c) :
5 g de colchicine sont dissous dans un mélange de 50 cm3 d'eau et de 50 cm3 de méthanol ou d'éthanol. Après avoir porté à 30 , on introduit sous forte agitation une solution préparée par réaction de 15 g de méthylmercaptan sur 7,5 g de lithine dissous dans 60 cm3 d'eau. Après douze heures d'abandon à 30 , on obtient, après un traitement identique à celui de l'exemple 2, 23% de thiocolchicine et récupère 60% de colchicine non transformée pouvant servir à une nouvelle réaction.
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Exemple 4 : Thiocolchieine(formule II, R-R'=-CH3J à partir de l'isocolchi- cine.-
Selon le mode opératoire de l'exemple 1, on fait réagir lg d'iso- colchicine avec 10 g de méthylmercaptan en présence de 0,2 g d'acide p-
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toluène-sulfonique pendant cinq jours. La dissolution se produit asef ,,fra- pidement et la solution, d'abord jaune, vire ensuite au rouge. Après avoir
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distillé le mercaptan, on extrait le résidu par 50 cm3 de chloroforme.
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L'extrait çhlDrMormique est évaporera sec, diss@â!Sls dans l'acétate d'éthyle puis chowmatographi6 sur alumine neutre. L'élution s'opére par fractions de 100 cm3 du même solvant. Les premières 400 cm3 fournissent 680 mg d'un produit amorphe incristallisable.
Les 800 cm3 suivants abandonnent, après évaporation du solvant, 370 mg d'un résidu qui, après recris-tallisation en 2 cm3 d'acétate d'éthyle, fond à 187-190 . Mélangé à de la thiocolchicine, F. 192 , il n'en abaisse pas le point de fusion. La substance obtenue présente tous les caractères énumérés pour la thiocolchicine.
Exemple 5 : Thiocolchicine (formule II, R=R'=-CH) à'partir de l'acétate
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de colchicéine..- On fait réagir selon le mode opératoire décrit dans l'exemple 1, 2,5 g d'acétate de co1chtcéine avec 10 g de méthylmeroaptan en présence de 0,5 g d'acide Z-toluèn4sulfonique. Il y a dissolution au bout d'une heure et demie et, après trois jours de contact à 20 , on distille le mercaptan. L'extrait chloroformique, débarrassé de la fracti on acide par lavage à la soude, fournit 730 mg d'une fraction neutre, non cristallisée que l'on chromatographie en solution dans l'acétate d'éthyle sur un colonne de 100 g d'alumine neutre, mise en suspension dans l'éther. On élue avec 11 fractions de 100 cm3 d'acétate d'éthyle.
Les fractions 4, 5 et 6 réunies fournissent, après évaporation du solvant, 360 mg de produit cristallisé fondant en tube à 192-194 et ne donnant pas de dépression du point de fusion avec la thiocolchicine préparée selon l'exemple 1, et dont il possède le pouvoir rotatoire et les solubilités.
La solution sodique aqueuse contient de la colchicéine qui provient d'une saponification du produit in@tial au cours de la réaction. On
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sépare ainsi 1,7 g de colchicéinee ce qui correspond à 1,85 g d'acétate de colchicéine, soit 74 % du produit mis en oeuvre.
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Exemple 6 : Déméthyl-thiocolchieine(formule II, R=R', R'=-CH3) à partir de l'acétate de démèthyl-coljshicine.#
La déméthyl-colchicine n'étant pas asse soluble dans le méthylmercaptan, on effectue la réaction sur son acétate et l'on saponifie en-
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suite l'acétate de déméthyl-thiocolchicine formé.
Dans untube à sceller, on introduit 3,6 g d'acéate de déméthylcolchicine et 0,4 g d'acide -toluène-sulfonique monohydraté, refroidit à -80 et verse environ 12 g de méthylmercaptan. On scelle le tube et laisse monter sa température à +20 . La dissolution est plus lente que dans
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le cas de la colchicineo fl agite le mélange qui est d'abord pâteux et obtient une liqueur homogène au bout de douze heures.
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Après sept jours de repos, il se forme un préaipjfib rouge, collant aux parois. On laisse encore quatre jours à 20 , ce qui augmente considé- ra#lement le dépôt rouge.
Après ce onze jours, on récupère le mercaptan comme précédemment et reprend le résidu rouge par 300 cm3 de chloroforme.
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La solution cbloroformique est lavée d'abord au bicarbonate de soude pour éliminer l'acide to1uène-sulfonique et ensuite à l'eau. Après séchage du solvant, on le distille à sec et obtient un résidu d'acétate de démé- thyl-thiocolchicine solvaté pesant 32 g . Cet acétate brut solvaté est
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dissous dans 500m3 d'éthanol à 95%; on ajoute 15 cm3 de soude normale aqueuse et abandonne dix minutes à 20 . On dilue alors avec 200 cm3 d'eau et extrait avec 50 cm3 de chloroforme pour éliminer les substances non phénoliques. La couche alcaline rouge renfermant la déméthyl-thiocolchicine est acidifiée par l'acide chlorhydrique jusqu'à virage au bleu du papier
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congo.
On extrait au chloifoforme à deux reprises. Les extraits chlorofor- miques réunis sont séchés et évaporés à sec. Le résidu, qui pèse 5 g, est
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constitué par la déméthyl-thiocolchioine fortement solvatée . On le dissout dans 20 cm3 d'acétate d'éthyle chaud, ce qui détruit le solvant chloroformique. Après refroidissement, la déméthyl-thiocolchieine cristallise. On essore, lave à l'acétate d'éthyle, essore à nouveau esèche. On obtient ainsi 1,93 g (soit un rendement de 79%) de produit fondant à 305 . Le produit, jaune, est soluble dans l'alcool, l'acétone et le diméthylformamide; il se dissout dans environ 200 parties de chloroforme froid.
Il est insoluble dans l'eau, les acides dilués aqueux, l'éther et le benzène. Il se dissout dans les alcalis dilués aqueux en fournissant une solution rouge.
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On purifie la déméthyl-thiocolbhioine en en dissolvant 600 mg dans 3 cm3 de diméthylformamide à 100 ; on ajoute alors 15 cm3 d'acétate d'éthyle, filtre, et laisse cristalliser lentement. On obtient ainsi 400 mg de thio- dérivé pur, fondant 308 ; ce/2 =-249 ¯ 2 . Ces constantes ne changent plus par de nouvelles cristallisations.
Analyse : C21H2305NS
Calculé : C% 62, 8 H% 5, 8 N% 3, 5 S% 8,0 trouvé : 62,9 5,8 3,3 7,5
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Exemple Démét 1-thiocolchieine (formuel II, R=H, R'=-CH3) à partir de la déméthyl-colchicine.-
200 mg de déméthyl-colchicine sont additionnés d'une solution de 200 mg de sel de sodium du méthylmercaptan préparé selon l'exemple 1 dans 4cm3 d'eau. On agite jusqu'à obtention d'une solution homogène. Après une
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nuit d'abandon, on verse lasolution dans l'eau, acidifie par l'acide chlo- rhydrique, extrait au chloroforme, lave au carbonate soude et à l'eau, sèche les extraits chloroformiques réunis et distille à sec.
Le résidu fournit, par recristallisations successives en acétate
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d'éthyle et acétone, 145 mg de àéméthyl-thioaolahiaine pure, soit un rendement de 70 %, F. 3080, lai 20 = -249 .
Exemple 8 : Déméthyl-thiocolchicine (formule II, R=H, R'=-CH3) à partir de l'acétate de déméthyl-colchicine.
220 mg d'acétate de cléméthyl-colchieine sont traités par le méthylmeroaptide dans du sodium dans les conditions de l'exemple 7. Au cours de la réaction il y a saponification et après extraction au chloroforme et purification dans les conditions précédentes, on obtient la déméthyl-thiooolchicine pure ne donnant pas de dépression du point de fusion avec le produit obtenu selon le mode opératoire de l'exemple 7.
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Bien entendu, on peut, tout comme pour lattiooolohicine, préparer la déméthyl-thiocolchieine selon les variantes décrites dans les exemples 3 a), b) et c).
Exemple 9 : Thiocolchicine (formule II, R=R'=-CH4) à partir de ls, démétb..plthiooolchicine..- On dissout 1,6 g de démêthyl#thiocolohBa préparée selon l'exem- ple 6, dans 40 cm3 de méthanol et ajoute une solution toluénique de diazométhane à 0@6% (30 cm3). La réaction est assez vive au début et on maintient la température entre 10 et 20 en refroidissant extérieurement.Lorsque la réaction s'est calmée, on ajoute un excès de diazométhane et abandonne encore deux heures. La solution orangée est additionnée de 2 cm3 d'acide acétique pour détruire l'excès de réactif. La méthylation est quantitative car un lavage de la solution toluénique par la soude n'extrait aucune substance phénolique. On lave ensuite le toluène à l'eau, sèche et distille à sec sous vide.
On obtient ainsi 1,640 g de thiooolchicine brute qui, par recristallisation en acétate d'éthyle addition±d'un volume égal d'éther,
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fond à 188-190 et ne donne pas de dépression du point de fusion avec une
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thiocolchiine préparée selon l'exemple la , Exemple 10 Tétraoétate de thiocolchicoside formule II R=tétracét 1 1 - cosyl, R'=-CH3 à artir de tétraoétate de colchicoside.-
Le colchicoside étant insoluble dans le méthylmercaptan, on utilise son dérivé tétracétyle (préparé seon le brevet français 1.053.179) qui s'y dissout bien.
On fait réagir, selon le mode opératoire décrit dans les
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exemples 1 et 6, 3 g de tétracétate de aolahicéside et 3p g de méthylmer- captan en présence de 0,4 g d'acide -toluène-sulfonique monohydraté pendant cinq jours au cours desquels un dépôt apparaît. Après distillation du méthylmercaptan, on reprend le résidu par 100 cm3 d'acétate d'éthyle ou de chloroforme, lave la solution au bicarbonate de soude, psui à l'eau, sèche sur sulfate de sodium et distille le solvant. On obtient un résidu d'aspect résineux, pesant 2,82 g, qui ne cristallise pas dans les solvants usuels, maisqui est assez pur pour être hydrolysé en déméthyl-thiocolchicine ou saponifié en thiocolchicoside.
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Exemple 11 : Thiocolchicoside (formule II, R=C6H1105' R'=-OH3) à partir du tétracétate de thiocolchicoside.- 11 5 ,7 g de tétracétate de thiocolchicoside sont dissous dans 42 cm3
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d'éthainol et additionnés de 7 cm3 de soude normale. On abandonne vingtquatre heures à 20 , neutralise et extrait avec un mélange o3.baforme-,", éthanol (8:2)o L'extrait est lavé à l'eau, séché et évaporé à sec. Le résidu est constitué par le thiocolchicoside. Après l'avoir tritufidans 10 volumes d'éther, on l'essore et obtient, après séchage, 1,2 g de thio- colchicoside, sous forme de poudre refusant de cristalliser dans les solvants usuels.
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Exemple 12 : s Dêmêthyl-thiocolchicine (formule II, R=Ht R'=-CB-) à partir du tétracétate de thiocolchicoside.- On dissout dans 30 cm3 de méthanol 1,5 g de tétracétate de thio-
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colchicoside brut, préparé selon l'exemple 10 et ajoute 120 em3.dlaoîde chlorhydrique 0,2 No On évapore le méthanol et chauffe au bain-marie pendant deux heures au cours desquelles un précipité noir se forme.(9n refroidit, ajoute de la soude jusqu'à ce que le pH soit supérieur à 10 et extrait la solution alcaline par le chloroforme pour la débarrasser des substances non phénoliques. La solution sodique rouge est acidifiée par de l'acide chlorhydrique et épuisée au chloroforme.
Après séchage,et évaè poration à sec, celui-ci laisse un résidu de 480 mg de déméthyl-thiocolchicine brute, correspondant à un rendement de 58% de la théorie. Par recristallisation dans 2 à 3 cm3 de diméthylformamide, auxquels on ajoute 15 cm3
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d'acétate d'éthyle, on obtient 420 mg de déméthyl-thiocolchîcine fondant à 305 . Le mélange avec le produit purissime obtenu selon l'exemple 6, F. 308 , fond à 306 , ce qui prouve l'identité des deux substances.
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Au lieu de partir du tétracétate de thiocolchiooside, on peut, bien entendu, hydrolyser, selonèmode opératoire du présent exemple, le thiocolchicoside obtenu selon l'exemple 11, ce qui fournit également la déméthyl-thiocolchieine.
Exemple 13 : Thiocolchicoside (formule II, R=C6H1105' RI--CH3) à partir du colchicoside.-
400 mg de colchicoside sont introduit dans une solution de 400 mg de méthylmercaptide de sodium dans 2 cm3 d'eau sous vive agitation. Après seize heures d'abandon à 23 , on acidifie la solution orangée par l'acide acétique et l'extrait à plusieurs reprises par le mélange chloroforme-
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éthanol 1 : 1. Les extraits réunis sont séchés sur carbonate de potassium puis distillés à sec. Le thiocolchicoside brut ainsi obtenu est purifié par recristallisations successives en éthanol et acétate d'éthyle. Obtenu avec un rendement de 50%, il se présente sous forme de petits carrés ou
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de prismes octogonaux jaune clair fondant à 215 y /a/20 . -550 z 10 (c=0,5% d'eau).
Le thiocolchicoside est soluble dans un volume d'eau, ou d'acides ou alcalis aqueux. Soluble dans vingt volumes d'éthanol avec lequel il donne un solvant renfermant 1 mol. d'éthanol. Insoluble dans l'éther, l'acétone et le benzène.
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Analyse : C27H33010N' = 563,6 Calculé : C% 57,54 H% 5,9 0% 28,39 N% 2,48 S% 5,69 Trouvé : 57, 6 6,1 28, 5 2,3 4, 7
Bien entendu, ce composé peut également être préparé selon les variantes décrites pour la thiocolchicine dans les exemples 3a), b),etc).
La constitution du thiocolchicoside est prouvée par sa synthèse
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au départ de la déméthyl-thiocolchieine (formule II, R=H, R'=-CH3 ) par réaction avec l'acétobromoglucose et saponification du tétracétylglucoside formé (II, R=tétracétylglucosyl, R'CH3).
Exemple 14 : Thiocolchicoside -formule II, R=C6H1105' R'=-CH3) à partir de la déméthyl-thiooolohicineo-
500 mg de déméthyl-thiocolchicine (formule II, R=H, R'=-CH3) préparés selon la technique de l'exemple 7, sont dissous dans 2,5 cm3 de soude normale. La solution refroidie à 0 est additionnée de 700 mg de tétracétylbromoglucose orsitallisé dissous dans 3,5 cm3 d'acétone. La solution rouge est abandonnée pendant quinze heures puis additionnée de 25 cm3
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d'eau faiblement alcalinisée. On extrait au4hZon4*rçb lave à l'eau et sèche sur sulfate de magnésium. Le tétracétate de colchicoside obtenu est directement saponifié par 0,03 cm3 de potasse alcoolique après dissolution dans 3 cm3 d'éthanol par abandon d'une nuit à froid. Le thiocolchicoside formé est essoré et purifié comme dans l'exemple 13.
Le produit obtenue ne donne pas de dépression du point de fusion avec le thiocolchicoside décrit dans le précédent exemple et montre les mêmes constantes et solubilités.
Exemple 15 @ Préparation de l'éthyl-thiocolchicéine (formule II, R=-CH3, R'=C2H5) à partir de la colchicine.-
On dissout 2 g de colchicine dans 5 em3 de chloroforme et ajoute à cette solution une suspension de 300 mg d'acide paratoluène-sulfonique dans 4 cm3 d'éthylmercaptan (Eb. 37 C)o On agite jusqu'à dissolution et abandonne en récipient fermé, pendant plusieurs jours, à 20 C. On évapore à sec et reprend par le chloroforme qu'on lave, sèche et évapore à sec.
Le résidu-est cristallisé en acétate d'éthyle et fournit 1,2 g (54%) d'éthyl
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thiocolchicéine, Fo 207-208 , la/± =-226 . Le produit, qui n'a pas encore été décrit, se présente sous forme de cristaux jaunes insolubles dans l'eau, l'éther et l'éther de pétrole, solubles dans le chloroforme, le mé-
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thanol, 1'.méthanol, l'acétone et le diméthylformamide.
Analyse : C23H2705RS = 429,52 Calculé : C% 64,3 H% 6,3 0% 18,6 N% 3,3 S% 7,5 Trouvé : 64,1 6, 2 18,4 3, 3 7,6
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Exemple 16 ; Préparation de l'éthyl-thiocolchicéine (formule II, R=-CH3' Rt=-C2H5) à partir de la colchicine.-.
On dissout 2 g de colchicine dans 4 cm3 d'éthylmercaptan, ajoute
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300 mg d'acide benzène sulfonique et abandonne en récipient fermé, pendant une semaine, à 20 C. Le précipité est essoré et cristallisé dans un mélange
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d'acétone et d'eau. On obtient ainsi ltéthyl-thiocolchicéine identique à celle décrite à l'exemple 15 avec un rendement de 35%" Exemple 17 : Préparation de ltéthyl-thiocolchicéine (formule II, R=-C , R'=-C2H5) à partir de la colchicine.-
On dissout 2 g de colchicine dans 10 am3 de tétrahydrofurant, ajoute 4 cm3 d'éthylmercaptan puis quelques gouttes d'acide chlorhydrique concentré et abandonne en récipient fermé, six jours, à la température ambiante.
Après traitement comme indiqué dans l'exemple 15, on obtient l'éthyl-thio- colchicéine avec un rendement de 25%.
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Exemple 18 : Préparation de l'éthyl-thiooolohioéine (formule II, 8.=-CH; Ip'=-C2H5) à partir de la colchicine.-
On dissout 2 g de colchicine dans 40 em3 d'eau, ajoute une solution de 1,5 g d'éthylmercaptan dans 30 am3 de soude normale et abandonne, pendant deux jours, à la température ambiante. On extrait au chloroforme et obtient, après traitement comme indiqué dans l'exemple 15, l'éthyl-thiocolchicéine avec un -rendement de 35%.
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Exemple 1 : Pré aration de l'éth 1-thiocolchicéine formule II R=-CH3e
R'=-C2H5)à partir de la colchicine .=
On dissout 2 g de colchicine dans 40 cm3 d'éthanol à 50% d'eau, ajoute une solution de 1,5 g d'éthylmercaptan dans 30 am3 de soude normale et abandonne, deux jours à la température ambiante. On extrait au chloroforme et obtint, après traitement comme indiqué dans l'exemple 15, l'éthyl-
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thMcolohioéine avec un rendement de 35%.
Exemple 20 : Préparation de l'ét 1-thioaolahioéine formule II R=-CH, '=-C2H5 à partir de la colchicine.-
On dissout -2 g de colchicine dans 40 cm3 d'eau, ajoute une solution de 1,5 g d'éthylmercaptan dans 30 cm3 de potasse normale et abandonne, pendant deux jours, à la température ambiante. On extrait au chloroforme et obtient, après traktement comme indiqué dans l'exemple 15, l'éthyl- thiocolchicéine avec un rendement de 35%.
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Exemple 21 : Préparation de l' ét 1,' thiocolch.icéine (formule II, R=-CH
R'=-C2H5) à partir de la colchicine.On dissout 2 g de colchicine dans 40 cm3 d'eau, ajoute une solution
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de 1,5 g d'éthylmercaptan imans 30 cm3 daelithine normale et abandonne, pen- dant deux jours, à la température ambiante, on extrait au chloroforme et obtient, après traitement comme indiqué dans l'exemple 15, l'éthyl-thioool- chicéine avec un rendement de 30 %.
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Exemple 22 : s L-oMét)iyl-thiooolchîoéîne. (formule II, R=-CH3' R'=-CH2-CHEO à partir de la colchicine.-
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On dissout 8 g de colohioine dans 16 cm3 de chloroforme sec et ajoute 16 cm3 de mercaptoéthanol puis 1,2 g d'acide para-toluène-sulfonique.
Après sept jours de repos à la température ambiante, on verse dans l'eau, extrait au chloroforme, sèche la solution obtenue, évapore à sec et reprend le résidu dans 80 cm3 d'acétate d'éthyle bouillant et laisse cristalliser.
On obtient 5,1 g (55%) de 2-oxyéthyl-thiocolchicéine, F. 225-228 . Le produit est recristallisé dans le mélange éthanol-étheroil est insoluble dans l'eau l'éther, l'éther de pétrole, soluble dans l'éthanol, le méthanol, le chloroforme, le diméthylformamide, F.234 ; /[alpha]/ D20 = -214 .
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AnalyseC23H27O6NS Calculé : C% 62, 0 H% 6,11 N% 3,14 S% 7, 2 Trouvé : 61, 9 6, 3 @,1 7,5
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Exemple 2> 2-ogyéthYl-thiocolchieéine (formule II, R=-CH3,R'=-CH-CH (3H à partir de la colchieine.On dissout 500 mg de colchicine dans 10 cm3 d'eau, ajoute 1 om3 de morcaptoéthanol et 2 cm3 de soude à 25 % et abandonne, quarante huit heures, à la température ambiante. On extrait au chloroforme comme indiqué dans l'exemple 22. La purification chpvmatographique du résidu fournit 55 mg (10 %) de 2-oxyéthyl-thiocolchicéine pure, identique à celle obtenue dans l'exemple précédent.
REVENDICATIONS.
1. A titre de produits industriels nouveaux, les dérivés de la colchicéine présentant la formule suivante
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dans laquelle R=H, alcoyle, acyle, un radical osidique acylé ou non; R'= alcoyle substitué ou non.
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2. La méthyl-thiocolohicéine (thiocolchicine) 30 3 L'éthyl-thiocolchicéineg R=CH3, t=-C2H.
4. La 2-oxyéthyl-thiocolohioéine, R=CH3, R3CH2 CH20H.
5. La déméthyl méthyltiocolchicéine (déméthyl-thiocolchioine) et ses esters, R=H, acyle ; R=CH3).
6. Le glucoside de la cléméthyl-thiocolchicine (thiocolohicoside) et son dérivé tétracétyle (R=C6H1105' tétracétyl glucosyl; R'=CH3).
7. Un procédé de préparation des alcoylthiocolchicéines (R=H, alcoyle, acyle, un radical osidique acylé ou non; R'=alcoyl substitué ou non) qui consiste essentiellement à faire réagir sur une colchicéine ou sur une
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isocolchicéine un alcoylmercaptan, substitué ou non, la réaotion étant ef- fectuée à la température ordinaire ou à une température supérieure, de préférence comprise entre 10 et 50 C et à isoler le produit de réaction par cristallisation ou par chromatographie.
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8. Un procédé de préparation des alcoylthiocolchicéines suivant la revendication 7, dans lequel la réaction avec un alcoyl-mercaptant substitué ou non, est effectuée en présence d'un catalyseur acide tel que l'acide para#toluënecsulfonique, l'acide benzène sulfonique; le trifluorure de bore ou l'acide chlorhydrique concentré et en présence ou ab tice d'un solvant tel que le chloroforme ou le tétràhydrofuran.
9. Un procédé de préparation des alcoylthiocolchicéines (R=H,