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Nouveaux dérivés de Coumermycine A1 et de Coumermycine A et leur procédé de préparation.
La présente invention concerne de nouveaux utile.% des substances antibiotiques du type Coumermycine A1 et Coumermycine A2 (décrites dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n 3. 201.386) et leur procédé de production,, Plus particulièrement, la présente invention concerne des di-, tri- et tétra-éthers tétrahydropyranyliques de Coumermycine A1 et A2 et leur procédé de préparation dans lequel on fait -t'agir la Coumermycine avec le dihydropyranne en présence d'un catalyseur acide.,
La Coumermycine A1 (dans laquelle R est un ra- dical méthyle) et la Coumermycine A2 (dans laquelle R
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a.'Eâ r=vi.l Ur ,t'i,
&
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n.t pour effet d'inhiber la développenciit des 1otéries Toutes deux sont non toxioues et ont un effet thérapeutique sur les souris infectées par des bac-
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té!'ies gl'am-posi tiVi38 0ependan'i, un inconviient iapor- tant des est leur faible pouvoir d'absorp- tion, et par suite de faibles taux sanguins.
Des tenta-
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tives pour oorrigor oes défauts. par la moc1ifioa'bion chimiquo des moldoulps apparent6es se sont traduites par la découverte de nouveaux éthers tétrahydropyr1yliques de ces conposés qui sont -utiles comie .n1jerH1.diaircs chiriiîques dans la synthèse finale de nouvelles subs-taiices anti'biotiques utiles, La, présente invention fournit un urooddd pour préparer des composés de formule :
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et R représente un atome d'hydrogôno ou un radical mdthy" le prooédd qui connifito à faire xsix un t'oripOD6 do
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formule !
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dans laquelle R représente un fttono cllyyrlxt;at3 a Uri groupe méthyle,, avec Lino quantitd on exos do dihydropy.ranne et une quantité no,talytiquo d'un acide.'
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Le procède est habituellement mis on couvre on
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mélangeant ensemble de la Comicrmycino A1 ou do la Coumennyoine Ap sensiblenent pure avco une quantité on oxcbs de dihydropyrannc en présence d'un catalyseur acide et d'un aolvant inerte pour obtenir des ri6lttnCos do Mono-, di-, tre- et tétra-6ther tetrahydropyranyliquo de Coiwiermyoïne A1 ou Ap rspcctivenent< Plus spécialcnent, on mélangc uie 001mio±lyeine avec du dihydropyranne dans diverses proportions moldoulaines,
Mais do prdf6renco à un rapport d'uno Mole do 00wnernyoine pour plus de 20 moles de dihydropyrannc, L'addition d'un acido approprie au ndiango de Cow.iermyoîne et de dillydropyrmmo corria aatc.lyctour, est indispensable. L'acide Utilia4 est habituollonent choisi
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dans l'un des groupes suivants
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1. io.a;cm.nn mmrcs:.,;,,.s,,. 1!tl:mmte :n.!1 ul'uriquo l'acide phlBphDriyp1eq .",1.: 'X lJOOi1. l'acido t3'i.3i'i2fi.j'1'0 '2 Lee tfieidas MlS!Q3Li)cmi?m@s myarà lla dflboeK> suivante 1
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dan,s laquelle A, B et C ISmit He!!\1:tt:1!.<pe$ <IOOl\ #li\jf(fi:bB catit représentent un atome dll't:J#" zin ibJnrnre <a.'ha3hsms un syoupc nlkyJ.c ;t.uf.1!';t \I.\1". /tü../li'IJj! 1IJl111f;'r'lIrlY,t:r" !Ii!U.t.\" 4aglàf#
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ou oyano.
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3, Des ?-c,ides i5o Lewrls CIM!mlmE ffiImt!1m.4\.1t "5' Zn.01g ou Fo013' 4. Des r.aaoa x lIOOroU$ 3j0ïtsp :ff'a#m!# ((mH- " 1 CO!:.lli1ê les acides phéooliqUIOS, m],;[#n:!!.1f km roro:ij#s Jl J- 7.ystyrèno suJ.:foniq1l.1eS, les acHes pù1p%A+ los soldes polystyrène ron9.u.:aa l<t3a 'aa3Ma:rst qucs carboxyliques, les noideis ]1XtD:n;w:m oeéOàq%xes dont le radical suJ..:fcniqulCl eoet :1':l\.'i:'.@) #IJD.ïr le E).t1.., 1"n±+B méthaorylique oarbo;x;yliqucit iIDW!.:#a- !L'6:ra1til.rem1li l'acide polystyrène ,oo.'l:ff'IO!n1'tl1JtG Ji1l:a11:tr#1 IIWmiw#'d; bzz, Rohm and Baas) 5.
Des id¯a¯¯j!a3?BjLmB. utlïll.w& /D'.G1mnw F,O-002H, F20H002H ou
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où A, B et 0 sont '-do,n1ïiqu1JoS - ti'ft'-a.'B #Ij mntt t#m
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groupes nitro, fluoro, oyano ou un atone a'hydrogène.
6. Des aoides alkyl aulfoniques ayant pour for- mule:
R- (CH2)xSO3H dans laquelle R est un groupe arylo, arylo substitue, alkyle inférieur ou alkyle inférieur substitué et dans laquollo X est un nombre entier de 0 à 6 inolusivement.
La quantité de l'aoido utilisé comme catalyseur est habituellement déterminée par les conditions réaction- nelles, le volume du catalyseur et la quantité avec la- , quelle on obtient le rendement optimum en produit.
Etant donné que le dihydropyranno est un liqui- de et qu'il agit comno solvant, on peut conduire la réac- tion avec ou sans co-solvant. Un co-solvant inerte est habituellement utilisé pour augmenter la solubilité des réactifs et pour réduire la viscosité du mélange. Des co- solvants inertes appropriés comprennent le tétra-hydro- furanne, 'le dioxanne, l'éther de diéthyle, les éthers de dipropyle, les éthers de dibutylo, le benzène, le xylène et le toluène.
La réaction est exothormique. On peut régler soigneusement sa température ou on peut la laisser attein- dre son propre niveau sans quo le résultat final diffère beaucoup. Le procédé est normalement mis en oeuvre à une température oonpriso entre 0 et 10000, et de préférence entre 10 et 60 C pendant un tenps qui dépend do.la ten- pératuro utilisée et du. degré do substitution voulu. La durée do la réaction peut varier entre 15 Minutes et 200 . heures environ.
Corme sus-mentionné, le procédé aboutit habi-
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tuellemont à la formation de <1L"@Uwm . 'ttbMM.-. dropyrauyliqucs nono-, éiz, 'tb)L- qti bstU!1.tb. tas 0ommermyéiÉeB. Cependant. le :rro.p:rlb gaz pmxi\l.1!.:ttw \mm le mélange r4actIonnel d6pmd es &XG". dina oetnmdi-t1ons réactionnelles et *1moe !!l7f'lrm#tt du pxw-. oed6 d '1solOl.1ont et de mx..C'ac' demallw 2ZO%ltew Lorsqu'on condul-t 2a a''MBËm & t&sa 'fBn;p&)!!a# turcs élevéos cODpriSCB entm tB;)# 01 m\m1tt quatre heures, ou à àc plue :Eedb2go 'taëffa#Bss uDerAne de plus longues périodes de 't'ac dams <9'.B<s #:omM.13 strictement anhydres;
en proe4diawat #JJID.-m:lhli) 1h 'mm gà1tWfication on l'absence de 8lmàDùt Dad3M3S an $ThrtJtl11Dntb mon produit oonsistant on de ie. 2',z'*4.4-n -#fia%'ùhydropyranylcounemycino d'orne 1J:I,l!rW é3e #. Ç9)E) <m.n trouve habituellement les autres tita,o,r.unmycines éventuelles dams l'<o:M5mB s'aiwam-t dm 2eQr oemm tra.on relative 2 la 2x x a n xxc-'.ü..âtm;p.y.'1 oow aerrcmyoiner. a r.tatmc.gr.Ilra,myoine ::>la 2'-fl-acaoytcü: >la ooumersycino.
Lorsqu'on oonduit la r<Ss.c1bJL!m à li!l i tnppuatures inférieures ou pendant de plus courbaz jptëtdMt'BS fSa3 -temps ou dans des conditions qmJL me mat Pas aned #!JD1l:wdres, la proportion de la 2',2%4w4Mi!Mi.-hydropyranylo01.WlC!'33ycino dams le 1nI.:gtID c8i 2a proportion dos autres éthers Uitr!Í!l:!r\ID'.m.."1,1I iID #W(B}-
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mente,
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Le fragment tétrn.b1Jl.u ftivàl à :R."l1!.\tII(!1) au - l'autne ou aux deux positions 4H - 1J\1'!11 1 uü1.#3 - ontlormyoine est très laM.le en pr.l) m-# de s!!B2bMm'ta! 1PJ!>:n:d1:IIu:m...
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.Lorsqu'on cristallise ou rocristalliso la ' , 2 , ., ..0, 0, C, C.. tétratétrahydropyranylooQrmycin:9u la 2ruz',4-0,0,0- Â '1 trït6trahydropyranylcourierriyene dano un système solvant alcoolique chaud, los fonctions éther 4-0-tétrahydropy-
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ranylo sont scindées en fonctions 4-hydroxyle pour donner
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de la 2',2'-0,0-ditétrahydropyranylcoumoroyoino pure. Los fonctions éther 2'-0-tétrahydi'opyranyle sont G4nôraloment
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stables lorsqu'on conduit la cristallisation en l'absence
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do 1\1/.\ 1i:1.b'o noidoo,
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On peut séparer les vélangos dos éthers t6trahydropyranyliques en procédant à une purification par distribution à contre-courant.
En pratique, la matière
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convient sous forme d'un ri6lange de di-, tri- ot t'tra-tetrahydropyranyloouaernyoines, ou on peut la cristalliser dans un système solvant alouoliquo ohvucï pour oblonir do la 2',2' -0,0-ditétrahydropyranylcounornyoino pure convenant pour être utilisée ooume interrdd3.aire on vue do sa transformation finale on un agent biologiqucnent actif.
Los 2,2t-0,0-ditétrahydxopyrany7.aounoarycine, 2' , 2' , .-0, 0, 0-tritdtx,hydropyxanylcoumeraycino, et 2',2', - 4,4--o,o,o,o-tétratétrahydropyranylcouniorriyoine, sous forme de substances pures ou sous 'oxz7e de leurs ralanges, sont intéressantes comme 3ntor..6diaireo pour la préparatien do la Couaeraycine A ou A2 d'une très grande pureté.
Le mélange de l'un ou l'autre des conposda oi-dossus ou de leurs mélanges dans un systeno alcoolique en présence d'une quantité catalytique d'un acide (choisi pami ceux décrits plus haut) assure la alivace do toutos les liai- . sons tétrahydropyranyle de la t101écu.l0. L' iaolcl1ent ul-t6rieur du produit donne de la Counomyoim h' ou A2 puri-
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fiée, selon la Matière do départ utilisée.
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La 2 , 2 -0, Odit6trahydropyxanyJ.oouraoxcyoinv, la 2 , 2 , .-0, 0, O..tritdtxahydropyrany.otraoxnyoine ou la 2 ',?',4,4-0,Ô,0,o-tétra%étrahydropyranylcounernyoine, sous fonno do substances pures ou de leurs nélanges, sont egaloiaent intoressantos colite intermédiaires pour la pré- paration do nouveaux composta biologiquenont actifs.
Le traitement de l'une des substances ci-dessus ou d'un mé- lango do doux des substances ou dos trois par un agent
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, c cvoyaw;lon DO ,n('o :l.t\ IngJ.1C\110 "0 Oo,rto,;yo,zA fJo:1..b t\ l'uno des liaisons alpha-amide ou aux deux entre les fragments coumarine et acide pyrroiedioarboxylique pour former des composés répondant aux formules
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où R est un atome d'hydrogène ou un groupe móthylo ot R4 ,est un groupe alkyle inférieur ou aryle,
Ainsi, un clivage par un agont d'aoylation des
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di-t tri- ou t6tra-thàrs 't6tr4ihydropyranyl:
tqxios do OoumeJyoine ,1 ou de leurs mélnngos, peut dtre .effectua en les faisant réagir avoQ'du ohloruio'do bonzoylot du bromure do bonzoylo ou de l'anhydride boiizolque dans de la pyridine, Le chauffage du m6lo.nge à des teT.:\)?âratul'Gs inférieures au point d'ébullition pondant plusieurs heures ou Bon,Maintien h la température anbinnte pendant plusieurs jours assure la production d'uno matière ayant pour foru@
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Dans les conditions rénotionnelles utilisées,
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tous fragments tétrahydropyranylo fixés dans lu position 4-0- sont scindes en groupes hydroxyle,
Un traitement supplémentairo du produit on le Mélangeant dans un solvant alcoolique en présence d'une quantitô oatalytique d'un acide (choisi parml ceux dócrite plus haut) assure
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le clivage de la liaison éther 2-a.-tétr:
hydxopyranyJ.ique pour donner la N-.bcnzoyl-3-arino-h-hydroxy f3.-bthyy-7-3- 0-5-radthyl-2-pyrrolyloa,xbonyz.)nov3osy.oxyoourzax3no 1
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qui a une action antibiotique chas les r1amr.1ifèr13s à l'en... contre du tanhyloo2cous a3àrous 'On essaye la Coumornyoinû hi 'classique dans des bottes de Petri préparées en utilisant 10 ml dtAgrr..A,rar de base de Balt3.noro Biologioal Lbortori0S (BBL) ot une couche supérieure de 4 1 d'Agar-Agar d t onsenonoo1.1!mt BEL inoculé avec âtLLLibyloco2ous aureus A.T.C.C, 6536 P. On incube les bottes pendant 18 heures à 30 C. On détornine
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une courbe d'activité standard pour la CounerMyoino Ai en utilisant dos concentrations comprises entro 0,07 et 1,5
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ioror^arar.o/n3..
Dans la présente invention, l'emploi du not CouMercnyoino sans préciser Comaomycino A ou ,A2 doit étro considéré comme indiquant la COUI.1er/;1yoine A, ou A2 ou leurs mélanges, lesdits composés étant chimiquement équivalents dans ce procédé.
Dans les formes do réalisation préférées do la présente invention, R est conme défini plus haut (et est plus spécialement un groupe !:\éthyle) ot R2 et R3 repré- sentent des atones d'hydrogène.
EXEMPLE 1
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2 ',2' -o ,o-Ditétrahydropyranylcowne1rlyoino A On set en suspension 5,5 5 g de CO\U'lol1JYoino A.. ' finement broyée (l'acide libre purifié par reoristallisa-
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tion sous fortne de col sodique) dans 50 1:11 do dihydropyranne (DIIP) et on ajoute uno très faible quantité (2-' ng) d'acide para-toluène sulfoniquo.
On asito 110.r;nÓtiquQT1ont le mélange dans un ballon bouché dans des conditions anhy-
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. dres à 25C pendant trois heures et dar.3.o Il solution du oolide est achevée au bout do deux heures.
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On évapore la solution à siooité sous vide à
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une température miniritui (intérieure à 40 0) et on dissout le résidu dans do l'acétone bouillant (30 ml). On ajoute lentomont de l'étho,nol chaud en agitant et en chauffant jusqu'à ce qu'on en ait ajouté 100 ml.
On cristallise le produit après l'avoir refroidi pondant 16 heures pour ob- tonir 5,3 g (84 %) de fins cristaux cubiques. On sépare
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810 mag supp16montaires (13 %) sous forme d'une seconde récolte à partir de la liqueur-mère en la laissant reposor à -5 C pondant 24 heures, . on recristallisc deux fois un échantillon de
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1,7 ce dans un mélange d'acotono ot d'ethanol pour obtenir un échantillon pur (1,5 g) ayant un point de fusion avec décomposition qui est supérieur à 200 0,
Analyse :
Calculé pour O65H75O22N5:
0, 61,06 ; H, 5,91 ; 1 Ne 5,47 Trouvé ! : 0, 61,00 : H, 5,83:
N, 5,56,
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ont nG.2 1 Trouvé 623 ; J Oa10ul6 6'4, x>rtPZr 2, 21921-090-Dit6trahydropyranylcoumernyoine A, On agite 5,5 g da 001kmernyoine A, avec 50 Lil de tétrahydrofuranno (THF) à la température ambiante jusqu'à compléte dissolution. On ajoute 25 ml do DIT, puis le @ catalyseur, la résine "Amberlyst 15" (H+) (oontenant moine de 0,5 % de H2O). A mesure qu'on poursuit l'agitation, on
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ajoute 25 ni supplénontaire3de DHP.
Uno oortaino quantité do Oo\ayo1no se sépare sous fomo d'un 601i On Maintient la réaction oxothomiquo à 30-3500 en utilisant un bain d'eau @lacéo ot au bout do uno à deux
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heures le gel est graduellement remis en solution, Lors- qu'on n obtenu uno solution, la réaction exothermique s'apaise. On poursuit l'agitation pendant doux à trois heures supplémentaires (durée totale de la réaction do 4 heures environ) pendant lesquelles la couleur de la solu- tion se fonce pour devenir brun orange.
On enlève la résine "Amborlyst" par filtration, et on concentre la solution sous vide pour obtenir un sirop. La dilution du sirop avec 500 ml de méthanol assura , la formation d'un solide cristallin qu'on lave avec un pou do méthanol, puis sèche, pour obtenir 6,06 g (93 %) de produit.
On dissout le produit brut dans un mélango de
20 ml de méthanol et de 20 ml de chlorure do méthylène,
On chauffe la solution à ébullition ot on ajoute du métha- nol jusqu'à ce qu'on atteigne le point de trouble (30 ml environ sont nécessaires). A assure que le mélengo se re- froidit, on ajoute du chlorure de méthylène en une quan- tité qui est juste suffisante pour maintonir une solu- tion limpide à la températire ambiante (22.5 C). En le laissant reposer, le produit cristallise lentement sous forme de minces aiguilles, Le rendement est de 3,96 g (62 %), On obtiont une autre récolte do 1,26 g (20 %) à partir do la liqueur-mére par dilution avec du méthanol.
On peut laisser la tompérature réactionnelle augmenter sans refroidissement et sans qu'il en résulte un effet nuisible ; on fait, dans des réactions à plus grande échelle la chaleur de la réaction peut être avan- .
tagouse. Au cours d'opérations effectuées à grande échel- le, on a agite le mélange réactionnel pondant 24 heures
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au cours dosquolloa le mélange réactionnel est revenu à
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la tonip4ratur0 ambiante (habituel10men% au coure des six premières heures), Dans la plupart des cas, après la pre-
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niéno précipitation, avec du 6hanQl, on a utilisé la mas tibro en vuo d'un traitement ultóriour, Si cette nattera
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a une activité supérieure à 2 mioro-Srannes/ng, oonno déton,nin6 par l'essai do la OoumarrJyoina A1 ou si l'on oons" tata la prdoonce do quantités importantes de 00ucieimyoine (Rf- Op 5) et/ou dv ses d6rîv6a monotétrahydropyranyléa (Rf = 0,5 0,50),
on la recycle dans 10 procéder Les valeurs do Rf sont obtenues en utilisant des plaques chro-
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natographiques b, couche ninoo préparées à partir d'un gel de silioe dans un système solvant comprenant de l'acétate do t1éthylo, du 2..propanol et du NH40H concentre , un rap- port de 9\21 la (part;Les on volume).
EXEMPLE 3
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t1,g,1JJnl3E:1,9,,0 s'li-. t;:""....Qt téttI,,ltr,C\ld.r.oJ?,rU1..YÂÇI..oW'1e:t!ax- ,oi,n,../1. et leur séparation On agite do la OO\U'loX'r.1yoine AI avec THF a la tonpàrnttiro anbianto jusqu'à ou quo la dissolution soit achevée. On ajoute du DHD, puis de la résine "Aoborlyst 15" (11+) (oonten±\nt moins de 0,5 % do H20): En poursuivant l'asitation, on ajoute une quantité supplenontaire de DHP, Il so forme un gel qui se dissout do nouveau au bout de uno à doux heures.
On poursuit l'agitation à la tompórature ambiante pendant seize houros au cours desquolles la coulour de la solution se fonce pour devenir brun orange.
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4xen7.bvca la résine "Araborlyst" par filtration et on concentre la solution sous vide jusqu'à ce qu'elle ait la consistance d'un sirop, La dilution du sirop avec
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une quantité minimum do méthanol donne un solide brut
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(85-95 % du rendeMent théorique)< 'On obeho le solide sous vide, La chromatographie on couche mince indique que le solide présente au moins trois zonos (Rf = 0,6 " 0,7).
On effectue une séparation par distribution à opntre-courant selon Craig avec un échantillon de 15 g du mélange, En utilisant 0,5volume do la phase supérieure
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pour 1 volxvie do la phase inf6rioure ot 1001 transferts à partir d'un système do 5:1!5:1 de 14 ' CH01, : t 0113OH H20, on récupère 97,5 % du solide... Los récupérations à partir des concentrations principales, oonao détermine par absorption de lumièzo ultra-violette à z.5 nillinicrons, sont los suivantes 2 s, 2 s , , 4-0, 0, 0, 0-tétrattrahydropyrccnylcouuazyo.ne A.
On récupère l'éther t 6 trahydropyranyli que titrasubstitué de Couneruyoino A1 à partir dos tubos 21 à 40 sous forms d'un solide cristallin pur, 3,68 g, point do fusion supérieur à 200 0 avec décomposition*
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ÂJ.1fJ,Xa..C? : Calcule pour C?5H91N502 0, 62,27 3 H, Q,34 ; 3 n 4,64 ; Trouvé 1 C, 62,03 : H, 6,il ;
N, 4,94.'
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2 s , 2 s , h.0, 0, 0-tritétrahyctropyranylcouerr.,yo.nc Ai On récupère l'éther tétrahydropyranylique trisubstitué de COUtl0Inyoino A1 partir des tubes 41 à 'tu .', sous forme d'un solide cristallin pur, 3,8 g, point do
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fusion supérieur à 200 C avec déco!:1posi tiol1
Analyse :
Calculé pour C70H83N5O23 :
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C, 61,71 ; il, 6, in ; 1 1.1, 5,14 Trouvé 1 C, 61, 65 ; it, 6,19 ;
n, 5t34.
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2', 2 0, 0-ditdtrahydropyrv.ny7.oounexsnyaino , On r6oupèro l'éther t6txahydxopyxanyl.iqub di- ,. substitué de Coumermyàeine A1 à partir dos tubes 71 à 100 BOUS forme d'un solide cristallin pur, 1,8 g, point de
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fusion.supérieur à 200 C avec deoompositiont Les oarao- t6ristiquos physiques du produit sont identiques à colles do la natiéne 'pr6o6doriment oaraotériséoi 2 ' "O-nonotëtrahydropyyanylooumamycine AI 0 rl,o\\pb),l" :1,' Ó 102' '\H5t\hy\:l.l011Y'tny:l.:t.q"f,) Rona" substitue do Counemyoine A1 à partir dos tubes 101 à 130 sous tome d'un solide cristallin pur; 1,6 g, point de fusion supérieur à 200 0, avec décomposition:
Analyse : Calcule pour O60H65N5O2:
0, 60,35 H, 5,66 ;
N, 5,86
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Trouvé t C, 60,42 f H, 5,bi ; N, 5t83, On rdoupbre la Oounernyoine A1à l'état inohangé à partir des tubes 300 499, 1,5 5 B, point do fusion avec àéoonpoeilion 1 240 - 245 0, les ouraot6riatiques physi" quon do 00 produit s'a,n'4 identiques a colles do la matière pr6oddocment caraetdris6e. , ' EXEMPLE 4
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2 , 2' 0, 0-d.tatxa,hßdxopyrany.oourerrvyo.no A On agite la Counorcyaino A1 avec du 'HP' à la tonp6raturo unbiante jusqu'à ooiaplète dissolution. On ajoute du DHP et quelquos gouttes de H2SO4 concentre et on poursuit l'agitation pondant 4 heuros environ. On ajou-
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te 5 g do Na2003 finoaont divisé pour détruire Ilacidc4 .
Uno décantation suivie par 7,' dlirination du solvant sous vido donne un sirop qui, après dilution avec du méthanol,
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cristallise sous forrle d'un solide. La rooristallisation
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du solide dans du méthanol, un n11ango do l;'J0thanol ot d'hydrocarbure halogend ou un nclanse de 1:16tlw.nol et d'acétone donne un produit pur ayant un point do fusion avec décomposition supérieur à 200 0, qui ost identique
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à la natière prcdoMrent caractérisée.
EX1JIliPIJE ,5 2 , 2 .-4, 0 ditétrahydxopyrany.e ourierrayoino On net en suspension 1 i i 0, 06 (1,0 noie) ,1e Couaoraycine A1 dans un Délange de 11,2 litres de THF anhydre et de il,2 litres de DHP anhydre. On ajoute 22,2 g d'acide para-toluène sulfonique monohydraté et on agite
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la solution pendant 20 heures à la teDpÓraturo anbianto, On ooncontre la solution jusqu'à 1/3 du volume sous vide à noins de 40 C, on la filtre et on verso le filtrat dans
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134 litres de nethanol anhydre . OOC. Le produit oristallioe après une agitation de 30 minutes à 0" 5aC et on . le recuoille par filtration.
Le gâteau de filtre ost tou- jours recouvert par un solvant anhydre pendant qu'on le lave avec 10 litres de méthanol froid ot anhydre, puis avec 5 litres d'éthor do pétrole.
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La recrista.lisation dans le n6thanol chaud donne l'ether de 2' , 2' -.0, 0dittxuh,ydropyx,nyl.e voulu, ayant un point do fusion avec ddconposition sUlï0riGur b.
200 0. Les caractéristiques du produit sont idontiquos à celles do la natiero precddennent oaractorisco, 3XIIRPLB 6 ................,.r..
':-Q.., Q-d:l. t±:r;:.f.th.1ldronYrmwlcoJ.1!lo,rr:xpj,D.9...A1...J?Ar..,;t..:.J':te- -
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. j,f1.i:t:o de, J..r>. 2 f . 2' . 4 .-O..1.o. O. O-tétrr""'.tJ;'!.\b.Y\X'.o:!?Y:J:r.\.1Jx..J.- ' il, cotulernyaine 1 ..!I ÎÉÎi±ÉÉiÎi,,É,1 On dissout la 2f,2',4,4-0,O,O,o-tétrat6trfl.hYdrri! pyrMylooul1ornyoinc pure, obtenue dans l' oxcr.lplo ;. 1 pyr=yloowioxy.,yoine pure, obtenue dans l'oxonpio ;" ,la
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du mthanol chaude on concentre la solution sous Vide et
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on lnisl30 cristalliser le solide au cours .du refroidisse" Ment pour obtenir cio la 2;
2'-OcOditdtralydxapyanyl-. oom'.iertyoino A, puro, ayant un point de fusion supérieur' à 200 0 avec décomposition,''et qui est identique à la ma-
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i;ibxa pr6oédeMoent onraotérisâel X]]IPI 1 2' , 2'-0, 0-ditetxs,hydropyrany.oourorryo.fi4 A par l'inter- .p,é",d,Ln.:l r. e do 7. ¯ . ? . 4-0. 0. 0-tritétrhxM n;,nout,,ar.. mycino ,au.
On dissout .a 2' , Z' , .-0, 0, 0 tr.t6txnhydxopyxa YlooumorrnYoino A, pure, obtenue dans l'exemple 3, dans du méthanol ohaud, on concentre la solution sous vide et on laisse cristalliser le solide au cours du refroi-
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dissecent pour obtenir la 2',2'-0,0-<lit4"raiiyànopyranylcoui-iaxiiyoino A1 pure, ayant un point do fusion aveo dé- conposition supérieur à 200 0 ot qui est identique à la matière précédemment caractérisée.
, EXEMPLEB
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2' , 2' -0, 0-di.ttrchydropyxanylaowxorraya.no A On suit le processus général de l'exeple 1, excapté que l'on remplace In Oouuorayoino A utilis6e dans oot oxeyolo 1 par la Counoruyoino A2 pour obtenir la 2',2'" O,O.d.t6trahydropyxs,nyl,oouoriyo.no A2 ' point do fusion eupcrieur à 200 0 avec c160 0!'11> 0 si tion.
EXEMPLE 9 2' , 2 , -0, 0, 0 tritétxchydropyranyl.counoxaya.no et
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2' r 2' , , . 0, 0, 0, 0.-,ttrrù6trahydropyranylaour.:owlyoin On suit le proooosus gnérn,i.e 1' oxorplo 3, ex- 00l>tÓ qu'on r 1,ipInoo la OO\U1ornyoino à utilisée dans cet
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¯,exemple par la Coumoruyoino ,A2 pour obtenir .La 2',2',4- 0,0,0-tr.ttxo,hydxopßxamyl.couraoxryaina A2 (point de fusion supérieur à 20000 avec dôoompoxition) et la 2 , 2 , , dC, 0, 0,0-t6tratétrahydropyranyloovr.iernycine A2 (point de fusion supérieur à 200 0 avec ddooraposition), ;
processus 1 donnd à titre il.lx.ti Purification do la Counornyoino A. 1- on Passant par ses éthers 'té'brrthvdrofvranviiaue s On sommet un mèlange de 2,2--0,0.-ditétrahydropyranylcoumernycine A,, de 2',2',4-o,0,o-tnitétrahydropyranyloouroernyoine A1 et de 2' , 2 , , .-0, 0, 0, 0 tdtrtdl;rnhydropyr.anylooumernyoino À 1 à un clivage pour obtenir la Cour4rr.yo.ne 111 purifiée on dissolvant 10 éJ.r.ayo dos éthers dans de l'alcool réthy7.iquo avec uno quantït6 captalytique d'acide pera-toluèno suifoniquop puis en agitant pondant plusieurs heures. lin Counemycino 11 purifide oh.. tonne par le Pl'OOEH'J/3Ua cet do qualité supdriouro ot se compare favorablement avec la Counemyoino AI préparée par d'autres prooÓd6s do purification.
.s.o.g....Q}l 4 U,.9.!.w..cLQ....tiyt,r.sJ.J...:J.:.l.GjJ}.'! ..r t d,¯,, o"lY.",.vdxo...w ':l laÎ.µ=0=(¯szm¯µ±?iy±-2-n¯yrtalxono=,i@à,g¯ jz% %±# On dissout 16 g d'un nélongo de di-, tri- ot t6tratétxa,hydropyxany.aourea:yo.no A1dins 35 r.a1 do pyi<1dino :t'ra1cheont distillée. On ajoute 6,6 ni due chlorure de bonzoylo direoteont ot avoô préor.utiol1 à la solution agitée à 2500 pondant 10 minutes et on agite In solution à la température ambiante pendant 124 1wuroo au total.
.. On concentre la solution do couleur orangée i)1JQnso soun 4 vide jusqu'à 50 nl environ ot on la verso (hna 2000 ni z '
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d'eau glao6o 6narsiquernent agîtdeb On règle le pli 4 5,0 avoo'500 .ra. d'acide chlorhydrique 6N, puis on agite n 0-
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oO pondant une heure,.On filtre sous vide les golidos
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amorphes de couleur rosé ainsi obtenus, on les lave avec
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de l'eau et los obohe sous vide pour obtenir 19,6 g de solides la détermination du dosage avec des bottes contenant do 1.'Aga,r Agar inooulé avec f3tn.pqyl..Q..9.9.9-cUS aureus équivaut a 0, 51 W .aro-.rra,eue/rg (on oonparaioon do la Counernyoino classique Â1)
'
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Le traitement du solide en utilisant la réac-
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tion par olivago do 1'6thor tetrahydropyranyliquo décrite fifiS lé PVQQOPMO 1 donnd 4 titre illustratit donne 19 g d'un résidu cristallin rouge ; In d6terminatïoii du dosage dans des bottes inoculées avec 8twnhvlooo,ous, ureus équi-. vaut à 8,5 5 ciioro-grv,meg/ng. Une cristallisation fraotionn6o dans un ndiange d'acétate d'éthyle et d'éther de p 6'\;ro10 donno 5,6 6 t1 un produit orietallin jaune clair point de fusion ! 1 devient riarron et se rlJU.ïo11i t à 19000 ne d6compose fortenant à 2õ-2µ5 0 j la deterninaticn du dosage avec dos boitos inocul6es avoo f!:b.rwP.9.qS?OP.l\ f1.ure\!s.
ÓquivC1.ut à 54. bioro-grar,ll',1GS/t1S.
M±1g±± o(tloul6 pour O,1H,2010N2 0, 62,E3 1 lit 5,h5 Nui 4p73 Trouvé 1 0, É3#49 i Hr 5r?$ Nui zon3
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lies études initiales effectuées avec des animaux do laboratoire indiquent qu'une administration par voie
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orale ou intrn-nusoul±\1ro se traduit par des taux sanguins ddtvxr.iin6o OO!:\!'1±1 ôtant d'une officacitc thérapeutique.
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Naturollenent, l'invention n'est pas lioiteo aux fonien do réalisation décrites et est ausoop.l7.o de recevoir diverses variantes rentrant dans le cadre et l'esprit de 1'invention,