BRPI0609677A2

BRPI0609677A2 - composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e, método para a preparação de um composto

Info

Publication number: BRPI0609677A2
Application number: BRPI0609677-8A
Authority: BR
Inventors: Amedeo A Failli; Dominick A Quagliato; Gavin Heffernan; Richard Coghlan; Emily S Chen
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2005-05-12
Filing date: 2006-05-11
Publication date: 2011-10-18
Also published as: US20060258645A1; JP2008540567A; WO2006124581A2; MX2007014085A; US7687623B2; EP1879898A2; WO2006124581A3; CN101213197A; CA2607882A1; AU2006247601A1

Abstract

COMIPOSTO OU UM SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITáVEL DO MESMO, E, MéTODO PARA A PREPARAçãO DE UM COMPOSTO. A invenção refere-se a compostos da fórmula (I), ou a um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R, R~1, R~2~, R~3~ e B são como definidos no relatório. Os métodos de fabricação de tais compostos são também fornecidos.

Description

"COMPOSTO OU UM SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEL DO MESMO5 E, MÉTODO PARA A PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO"

A presente invenção reivindica o benefício de prioridade do Pedido de Patente Provisório U.S. No. 60/880.235, depositado em 12 de maio de 2005, que é incorporado aqui como referência.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

A presente invenção se refere a pirrolobenzodiazepinas e seus derivados tendo atividade antagonística no receptor de FSH, e ao seu uso como contraceptivos.

A reprodução em mulheres depende da interação dinâmica de vários compartimentos do sistema reprodutor feminino. O eixo hipotalâmico- pituitário-gonadal orquestra uma série de eventos que afetam os ovários e o compartimento uterina-endometrial que leva à produção de óvulos maduros, ovulação, e condições ultimamente apropriadas necessárias para fertilização. Especificamente, a hormônio de luteneização - hormônio de liberação (LHRH), liberado do hipotálamo, inicia a liberação das gonadotropinas, de hormônio de luteneização (LH) e hormônio de estimulação de folículos (FSH) da pituitária. Estes hormônios agem diretamente no ovário para promover o desenvolvimento de folículos selecionados pela indução de folículos selecionados pela indução de proliferação e diferenciação de célula granulosa e theca. FSH estimula a aromatização de androgênios para estrogênios e aumenta a expressão de receptores de LH nas células theca. Os folículos, por sua vez, secretam esteróides (estradiol, progesterona) e peptídeos (inhibina, activina). Os níveis de estradiol e inhibina progressivamente aumentam durante a fase folicular do ciclo menstrual até a ovulação. Inhibina diminui a secreção de FSH da glândula pituitária, enquanto que estradiol age no hipotálamo e na pituitária para induzir o surgimento de LH no ciclo médio, que resulta em ovulação. Depois, a pós-ovulação, folículo rompido forma o corpus luteum, que produz progesterona. Os hormônios do ovário, por sua vez, regulam a secreção de gonadotropinas através de um mecanismo de realimentação negativo de anel longo clássico. A elucidação destes mecanismos de controle tem fornecido oportunidades para o desenvolvimento de estratégias efetivas para controlar fertilidade, incluindo o melhoramento de fertilidade e contracepção. Para revisões recentes da ação de FSH ver: ""FSH Action and Intraovarian Regulation", B.C.M. Fauser Editor, Parthenon Publishing Group, Vol. 6, 1997 and AJ. Hsueh, T. Bicsak, X.-C. Ja, K.D. Dahl, B.C.M. Fauser, A.B. Galway, N. Czwkala, S. Pavlou, H. Pakoff, J. Keene, 1. Boime, Granulosa "Cells as Hormone Targets: The Role of Biologically Active Follicle-Stimulati ng Hormone in Reproduction", Rec. Prog. Horm. Res., 45, 209-227, 1989.

Os métodos de contracepção hormonal atuais são esteroidais in natura (progestinas e estrogênios) e modulam a inibição de realimentação de anel longo de secreção de gonadotropina, bem como afetam os mecanismos periféricos, tais como migração de espermas e fertilização. O desenvolvimento de antagonistas específicos do receptor para FSH (FSH-R) forneceria uma estratégia alternativa para a contracepção hormonal. Tais antagonistas bloqueariam o desenvolvimento folicular mediado por FSH, levando a um bloqueio de ovulação, desta forma produzindo o efeito contraceptivo desejado. Suporte para a efetividade desta estratégia é fornecido pelo mecanismo que causa síndrome de ovário resistente, que resulta em infertilidade em mulheres. A infertilidade experimentada por estas mulheres é o resultado de receptores de FSH não-funcionais (K. Aittomaki, J.L.D. Lucena, P. Pakarinen, P. Sistonen, J. Tapainainnen, J. Gromoll, R. Kashikari, E.-M. Sankila, H. Lehvaslaiho, A.R. Engel, E. Nieschlag, I. Huhtaniemi, A. de Ia Chapelle "Mutations in the Follicle Stimulating Hormone Receptor Gene Causes Hereditary Hypergonadotropic Ovarian Failure" Cell, 82, 959- 968, 1995). Esta abordagem para contracepção pode ser aplicável a homens também, pois a infertilidade masculina idiopática parece ser relacionada com uma redução em sítios de ligação de F SH. Em adição, homens com deficiência de FSH seletivo são oligo- ou azoospérmicos com níveis de testosterona normais e apresentam virilidade normal (G. Lindstedt, E. Nystrom, C. Matthews, 1. Ernest, P.O. Janson, K. Chattaijee, Clin. Lab. Med., 36, 664, 1998). Portanto, antagonistas de FSH de baixo peso molecular, oralmente ativos, podem fornecer um novo método versátil de contracepção. Tal antagonista pode ser esperado interferir no desenvolvimento de folículos e, assim, ovulação, enquanto que mantém produção de estrogênio suficiente e efeitos benéficos na massa óssea.

As ações de FSH são mediadas pela ligação do hormônio a um receptor acoplado à proteína de transmembrana G específica exclusivamente expressada no ovário, levando à ativação do sistema de adenil ciclase e elevação de níveis intracelulares deste segundo cAMP mensageiro (A. Mukherjee, O.K. Park-Sarge, K. Mayo, Endocrinology, 137, 3234 (1996)).

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Algumas formas de realização da presente invenção incluem um composto da fórmula I:

<formula>formula see original document page 4</formula>

um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,

em que

R1 e R2 são independentemente selecionados de hidrogênio, (C1-C6) alquil, halogênio, ciano, trifiuorometila, hidroxila, (C1-C6) alcoxi, - OCF3, carboxi, (C1-C6 alcoxi)carbonil, -CONH2, -CONH[(C1-C6) alquil], - CON[(C1-C6) alquil]2, amino, (C1-C6) alquilamino ou -NHCO[(C1-C6) alquil];

R3 é um substituinte selecionado de hidrogênio, (C1-C6) alquil, (C1-C6) alcoxi, hidroxi, amino, (C1-C6) alquilamino, -C(0)(C1-C6)alquil, ou halogênio;

Bé

<formula>formula see original document page 5</formula>

onde Q é

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que R5, Ré, R7, Rs, R9 e Rio são independentemente selecionados do grupo que consiste de hidrogênio, alquil, (C1-C6)alquil, alcoxi, (C1-C6) alcoxi, hidroxialquil, Mdroxi(C1-C6) alquil, alquiloxialquil, (C1- C6)alcoxi(C1-C6)alquil, (C2-C7) aciloxi (Q-C6)alquil, (C1-C6alquil) carbonil, (C2-C6) alquenil, (C2-C6) alquinil, (C3-C8) cicloalquil, formil, (C3- C8)cicloalquilcarbonil, carboxi, (C1-C6)alcoxicarbonil, (C3C8-cicloalquil) oxicarbonil, aril(C1-C6)alquiloxicarbonil, carbamoil,-O-CH2- CH=CH2, (C1- C6)alquil substituído com 1-3 átomos de halogênio, trihalometil, trifluorometila, halogênio, OCF3, tioalquil, tio(C1-C6) alquil, -C(O) alquil, - C(0)aril opcionalmente substituído com alquil; hidroxi, -CH(OH)alquil, - CH(alcoxi)alquil, nitro, -S02alquil, (C1-C6) alquilsulfonil, aminosulfonil, (Cr C6) alquilaminosulfonil, -SO2NHR11, -SO2N(R11)2, - OC (O) N [(C1- C6)alquil]2, -CONH [(C1-C6) alquil], -CON [(C1-C6) alquil]2,-(CH2)pCN, (C1- C6) alquilamino, di-(C1-C6) alquilamino, (C1-C6) alquil di-(C1-C6) alquilamino, -(CH2)pNR13R14, -(CH2)pCONR13R14, -(CH2)pCOOR12, - CH=NOH, -CH=NO-(C1-C6) alquil, trifluorometiltio,

R11 e R12 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-C8 cicloalquil, ou (C1-C6) alquil;

R13 e Ri4 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-Cs cicloalquil, ou (C1-C6) alquil,

ou R13 e Ru podem ser tomados juntamente com o nitrogênio ao qual eles estão ligados para formar um anel saturado com de 4 a 6 membros contendo O, S ou N;

ρ é O ou 1;

R é a parte

R15 é hidrogênio ou (C1-C6) alquil;

Z tem a fórmula -L-M;

L tem a fórmula

-(CH)t-

em que t é um número inteiro de 1 a 2;

Ri6 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ou (Cr

C6) alquil,

M é selecionado do grupo que consiste de

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que

Ri7 e Ris são, opcionalmente, aril substituído;

R19, R2o, R21 e R22 são, cada um, independentemente, (C1-C6) alquil;

R23 é alquil, CrC6 alquil, ou um (C6-C20) aralquil opcionalmente substituído.

Outras formas de realização da presente invenção fornecem métodos de fabricação de tais compostos ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Outras formas de realização da presente invenção vão ser aparentes para aqueles versados na técnica, na leitura do resto deste relatório e reivindicações.

DESC1IÇÃO DETELHADA DA INVENÇÃO

Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece compostos da fórmula (I):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que

R1 e R2 são independentemente seleC1onados de hidrogênio, (C1-C6) alquil, halogênio, C1ano, trifluorometila, hidroxil, (C1-C6) alcoxi, - OCF3, carboxi, (C1-C6 alcoxi)carbonil, -CONH2, -CONH[(C1-C6) alquil], - CONf(C1-C6) alquiljz, amino, (C1-C6) alquilamino ou -NHCO[(C1C6) alquil];

R3 é um substituinte seleC1onado de hidrogênio, (CpC6) alquil, (C1-C6) alcoxi, hidroxi, amino, (C1-C6) alquilamino, -C(0)(C1C6)alquil, ou halogênio;

<formula>formula see original document page 7</formula>

em que R5, R6, R7, Rs, R9 e Rjo são independentemente selecionados do grupo que consiste de hidrogênio, alquil, (C1-C6)alquil, alcoxi, (C1-C6) alcoxi, hidroxialquil, Iiidroxi(C1-C6) alquil, alquiloxialquil, (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alquil, (C2-C7) aciloxi (C1-C6)alquil, (C1-C6alquil) carbonil, (C2-C6) alquenil, (C2-C6) alquinil, (C3-C8) cicloalquil, formil, (C3- C8)cicloalquilcarbonil, carboxi, (Ci-C6)alcoxicarbonil, (C3-C8cicloalquil) oxicarbonil, aril(C1-C6)alquiloxicarbonil, carbamoil,-O-CH2- CH=CH2, (C1- C6)alquil substituído com 1-3 átomos de halogênio, trihalometil, trifluorometila, halogênio, OCF3, tioalquil, tio(C1-C6) alquil, -C(O) alquil, - C(0)aril opcionalmente substituído com alquil; hidroxi, -CH(OH)alquil, - CH(alcoxi)alquil, nitro, -S02alquil], (C1-C6) alquilsulfonil, aminosulfonil, (C1-C6) alquilaminosulfonil, -SO2NHRii, -SO2N(Rn)2, - OC(O)N [(C1- C6)alquil]2, -CONH [(CfC6) alquil],-CON [(C1-C6) alquil]* -(CH2)pCN, (C1- C6) alquilamino, di-(C1-C6) alquilamino, (C1-C6) alquil di-(C1-C6) alquilamino, -(CH2)pNRi3R14, -(CH2)pCONRi3Ri4, -(CH2)pCOORi2, - CH=NOH, -CH=NO-(CrC6) alquil, trifluorometiltio,

<formula>formula see original document page 8</formula>

R1 1 e Rj2 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-C8 cicloalquil, ou (C1-C6) alquil;

Ri3 e R14 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-C8 cicloalquil, ou (C1-C6) alquil,

ou R13 e Ri4 podem ser tomados juntamente com o nitrogênio

ao qual eles estão ligados para formar um anel saturado com de 4 a 6 membros opcionalmente contendo O, S ou N;

ρ é O ou 1;

R é a parte

—N—Z

R15 é hidrogênio ou (C1-C6) alquil;

Z tem a fórmula -L-M; L tem a fórmula

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que t é um número inteiro de 1 a 2;

R16 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ou (C1-C6) alquil,

M é selecionado do grupo que consiste de

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que R17 e R18 são, opcionalmente, aril substituído;

R19, R20, R21 e R22 são, cada um, independentemente, (C1-C6) alquil;

R23 é alquil, C1-C6 alquil, ou um aralquil opcionalmente substituído (C6 - C20).

Acil, como usado aqui, se refere ao grupo R-C(=0), onde R é um grupo alquil com de 1 a 6 átomos de carbono. Por exemplo, um grupo acil C2 a C7 se refere ao grupo R-C(=0)-, onde R é um grupo alquil com de 1 a 6 átomos de carbono. Um acil adequado é acetil.

Alquenil, como usado aqui, se refere a um grupo alquil tendo uma ou mais ligações duplas carbono-carbono. Grupos alquenil exemplares incluem, mas não estão limitados a, etenil, propenil, butenil, pentenil, hexenil, butadienil, pentadienil, e hexadienil. Em algumas formas de realização, os grupos alquenil podem ser substituídos com até quatro grupos substituintes, como descrito abaixo. Adequadamente, o alquenil é uma parte com de 2 a 6 átomos de carbono.

Alcoxi, como usado aqui, se refere a um grupo -O-alquil. Grupos alcoxi exemplares incluem metoxi, etoxi, propoxi (por exemplo, n- propoxi e isopropoxi), t-butoxi, e semelhantes. Um grupo alcoxi pode conter de 1 a cerca de 20, de 1 a cerca de 10, de 1 a cerca de 8, de 1 a cerca de 6, de 1 a cerca de 4, ou de 1 a cerca de 3 átomos de carbono. Em algumas formas de realização, os grupos alcoxi podem ser substituídos com até quatro substituintes, como descrito abaixo.

Alcoxialquil, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, se refere a um alcoxi, como aqui anteriormente definido, que é também covalentemente ligado a um hidrocarboneto de cadeia reta não substituído (C1-C10) ou de cadeia ramificada não substituído (C2-C10). Exemplos de partes alcoxialquil incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como metoximetil, CEkCH(CH3)OCH2CHs, e homólogos, isômeros, e semelhantes. Em certas formas de realização, a parte alcoxialquil é uma parte (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alquil ou uma parte (C1-C4)alcoxi(C1-C4alquil.

Alcoxicarbonil, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, é definido aqui como, a não ser que de outra forma estabelecido, um grupo alcoxi, como aqui definido, que é também ligado a um grupo carbonil para formar uma parte éster. Exemplos de partes alcoxicarbonil incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como metoxicarbonil, etoxicarbonil, isopropoxicarbonil, sec-butoxicarbonil, tercbutoxicarbonil, decanoxicarbonil, e homólogos, isômeros, e semelhantes.

Alquil é entendido se referir como um grupo hidrocarboneto saturado que tem cadeia reta ou ramificada. Grupos alquil exemplares incluem, mas não estão limitados a, metal (Me), etil (Et), propil (por exemplo, n-propil e isopropil), butil (por exemplo, n-butil, isobutil, s-butil, t-butil), pentil (por exemplo, n-pentil, isopentil, neopentil) e semelhantes. Os grupos alquil podem conter de 1 a cerca de 20, de 1 a cerca de 10, de 1 a cerca de 8, de 1 a cerca de 6, de 1 a cerca de 4, ou de 1 a cerca de 3 átomos de carbono.

Em algumas formas de realização, os grupos alquil podem ser substituídos com até quatro grupos substituintes, como descrito abaixo. Alquil inferior é pretendido se referir a grupos metil tendo até seis átomos de carbono. Alquilamino, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, se refere a uma parte com um grupo alquil, em que o grupo alquil tem uma cadeia reta (C1-C6) não substituída aqui antes definida, ou um grupo cicloalquil antes definido (C3-C8) não substituído. Exemplos de partes alquilamino incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como NH(CH3), -NH(CH2CH3), -NH-ciclopentil, e homólogos, e semelhantes.

Alquilaminosulfonil empregado aqui, ou a não ser que de outra forma estabelecido, é uma parte alquilamino, como definida aqui, que é também ligada a um grupo sulfonil.

Alquilsulfonil, como usado aqui, se refere ao grupo R-S(O)2-, onde R é um grupo alquil, como aqui definido.

Alquinil, como usado aqui, se refere a um grupo alquil tendo uma ou mais ligações triplas carbono-carbono. Exemplos de grupos alquinil incluem, mas não estão limitados a, etinil, propilnil, butilnil, pentilnil, e semelhantes. Em algumas formas de realização, grupos alquinil podem ser substituídos com até quatro grupos substituintes, como descrito abaixo. A parte alquinil é adequadamente um alquinil com de 2 a 6 átomos de carbono.

Aroil, como usado aqui, se refere ao grupo Ar-C(=0)-, onde Ar é aril, como definido abaixo. Por exemplo, uma parte C8-Ci4 se refere ao grupo Ar-C(=0)-, onde Ar é um anel carbocíclico com de 6 a 14 ou de 5 a 13 membros.

Aril, como usado aqui, se refere a grupos carbocíclicos aromáticos incluindo hidrocarbonetos aromáticos monocíclicos ou policíclicos, tais como, por exemplo, fenil, 1-naftil, 2-naftil, antracenil, fenantrenil, e semelhantes. Em algumas formas de realização, os grupos aril têm de 5 a cerca de 20 átomos de carbono. Em algumas formas de realização, os grupos aril têm de 5 a cerca de 20 átomos de carbono. Em algumas formas de realização, os grupos aril são grupos fenil ou naftil que opcionalmente contêm até quatro, preferivelmente até 2, grupos substituintes, como descrito abaixo. A parte aril é adequadamente uma parte com de 6 a 14 átomos de carbono.

Arilalquil ou aralquil, como usado aqui, se refere a um grupo da fórmula -alquil-aril, em que aril é como definido anteriormente.

Preferivelmente, a porção alquil do grupo arilalquil é um grupo alquil inferior, i.e., um grupo C1-C6 alquil, mais preferivelmente, um C1-C3 alquil. Exemplos de grupos aralquil incluem, mas não estão limitados a, grupos benzil e naftilmetil. Em algumas formas de realização preferidas, os grupos arilalquil podem ser opcionalmente substituídos com até quatro, preferivelmente até 2, grupos substituintes.

Ariloxi, como usado aqui, se refere a um grupo -O-aril, em que aril é, como definido aqui, por exemplo, e sem limitação, fenoxi.

Carbamoil, como usado aqui, se refere ao grupo -C(=0)N<. Carbonil, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, é definido aqui como, a não ser que de outra forma estabelecido, uma parte de um carbono bivalente também ligada a um átomo de oxigênio com uma ligação dupla. Um exemplo é

Carboxi, como empregado aqui, se refere a -COOH.

Ciano, como usado aqui, se refere a CN.

Cicloalquil, como usado aqui, se refere a grupos carbocíclicos não-aromáticos incluindo grupos alquil, alquenil e alquinil ciclizados. Os grupos cicloalquil podem ser sistemas de anel monocíclicos (por exemplo, ciclo-hexil) ou policíclicos (por exemplo, 2, 3, ou 4 anéis fundidos). Exemplos de grupos cicloalquil incluem, mas não estão limitados a, ciclopropil, cilciobutil, cicloheptil, ciclohexil, cicloheptil, ciclopentenil, cilciohexenil, ciclohexadienil, cicloheptatrienil, norbornil, norpinili, norcarenil, adamantil, e semelhantes. Também incluídas na definição de cicloalquil são partes que têm um ou mais anéis aromáticos fundidos (i.e., tendo uma ligação em comum com) ao anel cicloalquil, por exemplo, derivados benzo de ciclopentano (indanil), ciclo-hexano (tetraidronaftil), e semelhantes.

Cicloalquilalquil, como usado aqui, se refere a um grupo da fórmula -alquil-cicloalquil, por exemplo, um grupo ciclopropil. O grupo alquil é adequadamente um C1-C6 alquil como definido acima e o grupo cicloalquil é como definido acima.

Cicloalquilcarbonil, como usado aqui, se refere a um grupo da fórmula - carbonil-cicloalquil, por exemplo, ciclo-hexilcarbonil. A parte cicloalquil é como definida acima.

Dialquilamino, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, ou a não ser que de outra forma estabelecido, é uma parte com dois grupos alquil independentes, em que os grupos alquil são aqueles que têm cadeia reta (C1-C6) não substituída antes definidos ou grupos cicloalquil não substituídos (C3-C6) antes definidos. Os dois grupos podem ser ligados juntos para formar um grupo alquileno (C1-C6) não substituído. Exemplos de partes dialquilamino incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, -NCH3(CH2CH3),

<formula>formula see original document page 13</formula>

e homólogos e semelhantes.

Dialquilaminoalquil empregado sozinho ou em combinação com outros termos, ou a não ser que de outra forma estabelecido, é uma parte dialquilamino, como definido acima, que é também covalentemente ligado a um grupo alquil de cadeia reta de 1 a 6 átomos de carbono. Exemplos de partes dialquilaminoalquil incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como CH2N(CH3)2, -CH2CH2N(CH2CH3)2, -CH2CH2CH2NCH3(CH2CH3), e homólogos, e semelhantes. Halo ou halogênio inclui flúor, cloro, bromo e iodo.

A base de Hünig é N,N,diisopropiletilamina, também indicada aqui como i-Pr2NEt.

Hidroxi ou hidroxil, como usado aqui, se refere a OH.

Hidroxialquil, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, é definido aqui como, a não ser que de outra forma estabelecido, um hidrocarboneto de cadeia reta (C1-C10), por exemplo, um Cr Ce alquil substituído no terminal com um grupo hidroxil. Exemplos de partes hidroxialquil incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos, tais como -CH2OH5 - CH2CH2OH, -CH2CH2CH2OH5 e homólogos superiores.

Nitro5 empregado sozinho ou em combinação com outros termos, é definido aqui como -NO2.

Substituído, como usado aqui, se refere a uma parte, tal como um aril ou heteroaril, tendo de 1 a cerca de 5 substituintes, e, mais preferivelmente, de 1 a cerca de 3 substituintes independentemente selecionados dentre um átomo de halogênio, um grupo ciano, um grupo nitro, um grupo hidroxila, um grupo C1-C6 alquil, ou um grupo C1-C6 alcoxi. Substituintes preferidos são um átomo de halogênio, um grupo hidroxila, ou um grupo C1-C6 alquil.

Tioalquil, empregado sozinho ou em combinação com outros termos, é definido aqui como enxofre covalentemente ligado a um grupo alquil, por exemplo, um grupo Ci-Có alquil como definido acima.

Em vários locais no relatório, substituintes de compostos da presente invenção são descritos em grupos ou em faixas. E especificamente pretendido que a presente invenção inclua cada uma das subcombinações individuais dos membros de tais grupos e faixas. Por exemplo, o termo CrC6 alquil é especificamente voltado para descrever individualmente metil, etil, propil, isopropil, n-butil, sec-butil, isobutil, etc.

Algumas formas de realização fornecem tais compostos em que R15 e R16 são, cada um, hidrogênio; e t é 1. Ainda outras formas de realização fornecem compostos em que M é selecionado do grupo que consiste de:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Em outras formas de realização, a presente invenção fornece tais compostos, em que M é selecionado do grupo que consiste de:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Em algumas formas de realização, Q é

<formula>formula see original document page 15</formula>

e, assim, B tem a fórmula:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece compostos em que Ri, R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece compostos da fórmula I tendo a Fórmula: <formula>formula see original document page 16</formula>

formas de realização, R5 é selecionado dentre H ou C1-C3 alquil. Em algumas formas de realização, Rg e R9 são independentemente selecionados de H, C1- C3 alquil, ou C1-C3 alcoxi.

Em outras tais formas de realização, R5 é selecionado dentre H ou C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, C1-C3 alquil, ou C1-C3 alcoxi. Em algumas formas de realização, M é

<formula>formula see original document page 16</formula>

em que R17 é aril opcionalmente substituído. Em algumas formas de realização, R17 é fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi, e halogênio. Em algumas formas de realização, C1-C3 alcoxi é metoxi.

Em algumas formas de realização, R5 é selecionado dentre H, ou C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, C1-C3 alquil, ou C1-C3 alcoxi, e M é

em que R18 é aril opcionalmente substituído. Em algumas formas de realização, R18 é fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi, e halogênio. Em algumas formas de realização, o halogênio é cloro.

Em algumas formas de realização, R5 é selecionado dentre H, ou C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, CrC3 alquil, ou C1-C3 alcoxi, e M é

<formula>formula see original document page 17</formula>

em que R19 é CrC6 alquil, preferivelmente metil.

Em algumas formas de realização, R5 é selecionado dentre H, ou C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, CrC3 alquil, C1-C3 alcoxi, e M é

<formula>formula see original document page 17</formula>

em que R2O é CrC6 alquil, preferivelmente metil.

Em algumas formas de realização, R5 é selecionado dentre H, ou C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, Ci-C3 alquil, ou C1-C3 alcoxi, e M é

<formula>formula see original document page 17</formula>

em que R21 e R22 são, cada um, independentemente, C1-C6 alquil. Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece tais composto onde R2I e R22 são iguais. Em algumas formas de realização, R2I e R22 são metil.

<formula>formula see original document page 17</formula>

Em algumas formas de realização, R5 é selecionado dentre H, e C1-C3 alquil; e R8 e R9 são independentemente selecionados de H, C1-C3 alquil, ou C1-C3 alcoxi, e M é

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que R23 é C6-C20 aralquil opcionalmente substituído, preferivelmente benzil.

Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece compostos de acordo com a reivindicação 1, em que M é

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que R17 é um aril opcionalmente substituído. Em algumas formas de realização, a presente invenção também fornece tais compostos, em que R17 é um fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi, e halogênio. Em algumas formas de realização, o C1-C3 alcoxi do dito R17 é metoxi.

Em algumas tais formas de realização, M é

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que R18 é um aril opcionalmente substituído. Em algumas formas de realização, R18 é um fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi, e halogênio, preferivelmente cloro.

Em outras formas de realização, a presente invenção fornece compostos da fórmula I, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, M é

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que R19 é C1-C6 alquil, preferivelmente metil.

Em outras formas de realização, a presente invenção fornece compostos da fórmula I, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, em que M

<formula>formula see original document page 18</formula> em que R2O é C1-C6 alquil, preferivelmente metil.

<formula>formula see original document page 19</formula>

em que R21 e R22 são independentemente selecionados de C1- C6 alquil. Em algumas formas de realização, R21 e R22 são iguais. Em algumas tais formas de realização, R2I e R22 são, cada um, metil.

e

<formula>formula see original document page 19</formula>

e

em que R23 é C7-C2O aralquil opcionalmente substituído, preferivelmente benzil.

Em algumas formas de realização, Q é

<formula>formula see original document page 19</formula>

e, assim, B tem a fórmula: <formula>formula see original document page 20</formula>

Outras formas de realização serão prontamente verificadas por aqueles versados na técnica na leitura deste relatório e das reivindicações.

Compostos exemplares de acordo com a Fórmula I incluem, mas não estão limitados a, aqueles na seguinte tabela:

<table>table see original document page 20</column></row><table> <table>table see original document page 21</column></row><table> <table>table see original document page 22</column></row><table>

Entende-se que alguns dos compostos da presente invenção, dependendo da definição dos vários substituintes, podem conter um ou mais centros assimétricos, e podem fazer surgir enanciômeros e diastereômeros. A presente invenção inclui todos os estereoisômeros incluindo diastereômeros individuais e resolvidos, estereoisômeros ReS enanciomericamente puros; bem como racematos, e todas as outras misturas de estereoisômeros ReSe seus sais farmaceuticamente aceitáveis, que possuem a atividade indicada. Os isômeros ópticos podem ser obtidos na forma pura por procedimentos padrão conhecidos por aqueles versados na técnica. É também entendido que a presente invenção engloba todos os possíveis regioisômeros, isômeros E-Z, isômeros endo-exo, e misturas destes que possuem a atividade indicada. Tais isômeros podem ser obtidos em forma pura por procedimentos padrão conhecidos por aqueles versados na técnica.

E entendido pelos versados na técnica que alguns dos compostos da presente invenção, dependendo da definição de B, podem ser quirais devido à rotação impedida, e podem fazer surgir atropisômeros que podem ser resolvidos e obtidos na forma pura por procedimentos padrão conhecidos por aqueles versados na técnica. Também incluídos na presente invenção são todos os polimorfos e hidratos dos compostos da presente invenção.

A presente invenção também inclui sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da Fórmula I. Por "sal farmaceuticamente aceitável" entende-se qualquer composto formado pela adição de uma base farmaceuticamente aceitável e um composto da Fórmula I para formar o sal correspondente. Pelo termo "farmaceuticamente aceitável" entende-se uma substância que é aceitável para uso em aplicações farmacêuticas de uma perspectiva toxicológica e não interagem adversamente com o ingrediente ativo. Os sais farmaceuticamente aceitáveis, incluindo mono- e bi-sais, incluem, mas não estão limitados a, aqueles derivados de tais ácidos orgânicos e inorgânicos, tais como, mas não limitados a, acético, láctico, cítrico, cinâmico, tartárico, succínico, fumárico, maleico, malônico, mandélico, málico, oxálico, propiônico, clorídrico, bromídrico, fosfórico, nítrico, sulfurico, glicólico, pirúvico, metanosulfônico, etanosulfônico, toluenosulfônico, salicílico, benzóico, e ácidos aceitáveis similarmente conhecidos.

Outras formas de realização da presente invenção fornecem métodos para preparar um composto da Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, descrito acima, em que o método compreende reagir um composto de tricloroacetil da fórmula (2)

<formula>formula see original document page 24</formula>

RH

(3)

em que R é definido acima,

sob condições suficientes para produzir um composto da

(1)

em que R1, R2, R3, e B são definidos acima com uma amina primária ou secundária da fórmula (3)

Fórmula (I). Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de 1,4-dioxano, sulfóxido de dimetil ou ambos. Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de uma base orgânica. Em algumas formas de realização, a base orgânica é amina terciária, preferivelmente trietil amina ou Ν,Ν-diisopropiletilamina. Em algumas formas de realização, a reação é realizada em um solvente, tal como, mas não limitado a, acetonitrila. Quando o solvente estiver presente, a reação é realizada em uma temperatura de cerca de temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente.

<formula>formula see original document page 24</formula>

Em algumas formas de realização, o composto de tricloroacetil da fórmula (2) é preparado pela reação de uma azepina tricíclica da fórmula <formula>formula see original document page 25</formula>

em que R1, R2, R3, e B são definidos acima,

com haleto de perhaloalcanoil sob condições suficientes para fornecer o composto de tricloroacetil da fórmula (2). Em algumas formas de realização, o haleto de perhaloalcanoil é cloreto de tricloroacetil. Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, Ν,Ν-diisopropiletilamina em um solvente orgânico aprótico. O solvente orgânico pode ser qualquer solvente aprótico adequado, tal como, mas não limitado a diclorometano ou 1,4-dioxano. Em tais formas de realização, a reação é realizada em temperaturas de cerca de -10°C a cerca da temperatura ambiente.

Algumas formas de realização da presente invenção fornecem métodos para a fabricação de um composto da Fórmula I que compreende acoplar um composto da Fórmula (4)

<formula>formula see original document page 25</formula>

em que R1, R2, R3, e B são definidos acima, onde W é OH ou halogênio, com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3)

<formula>formula see original document page 25</formula> em que R é definido acima,

sob condições suficientes para produzir um composto da Fórmula (I) da reivindicação 1. Em algumas formas de realização, W é Cl ou Br. Em algumas formas de realização, o acoplamento do halogeneto de acila da fórmula (4) com a amina substituída da fórmula (3) é realizado na presença de uma amina terciária em um solvente aprótico. Os solventes apróticos adequados incluem, mas não estão limitados a, diclorometano, N,N- dimetilformamida e tetraidrofurano. Uma amina terciária exemplar é N,N- diisopropiletilamina. Em algumas formas de realização, o acoplamento do halogeneto de acila da fórmula (4) com a amina substituída da fórmula (3) é realizado em uma temperatura de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente.

Em outras formas de realização, W é OH.

AMIDAÇÂO

Em algumas formas de realização, o acoplamento compreende a reação do ácido carboxílico (4) com uma amina primária ou secundária da fórmula (3) na presença de pelo menos um dentre um reagente de ativação e um reagente de acoplamento sob condições suficiente para produzir um composto da fórmula (I). Os agentes de ativação adequados incluem, mas não estão limitados a, trifosgênio em um solvente aprótico, N3N- diciclohexilcarbodiimida, hidrocloreto de 1-etil-3-(3dimetilamino- propil)carbodiimida na presença de 1-hidroxi benzotriazol; ou N,N'- carbonildiimidazol em um solvente aprótico. Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de uma base orgânica, tal como mas não limitada a aminas terciárias. A base orgânica pode ser, mas não está limitada a, N,N-diisopropiletilamina.

Em algumas formas de realização, a reação é realizada na presença de um catalisador, tal como, mas não limitado a, 4- (dimetilamino)piridina. Em algumas formas de realização, o reagente de acoplamento

é selecionado dentre hidroxibenzotriazol tetrametilurônio hexafluorofosfato, difenilfosforil azida, dietil ciano fosfonato, ou benzotriazol-l-il-oxi-tris- (dimetilamino) fosfônio hexafluorofosfato.

ACILACÂO

Algumas formas de realização da presente invenção fornecem métodos para a fabricação de um composto da Fórmula I compreendendo o acoplamento de um composto da Fórmula (4)

<formula>formula see original document page 27</formula>

em que R1, R2, R3, e B são definidos acima,

em que W é Cl ou Br, que é preparado pela conversão de um

composto da Fórmula 4, em que W é OH, com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3)

<formula>formula see original document page 27</formula>

em que R é definido acima, sob condições suficientes para produzir um composto da Fórmula (I). Em algumas formas de realização, o processo de conversão compreende reagir um composto da Fórmula 4 em que W é OH com halogeneto de tionila ou um halogeneto de oxalila. Em algumas formas de realização, a conversão ocorre na presença de pelo menos um dentre uma base inorgânica, tal como mas não limitada a carbonato de potássio, e uma base orgânica em um solvente aprótico. Em algumas formas de realização, a base orgânica inclui mas não está limitada a, piridina, 4-(dimetilamino)piridina, ou uma amina terciária, tal como mas não limitada a trietilamina.

Solventes apróticos adequados incluem, mas não estão limitados a, diclorometano, N5Ndimetilformamida5 e tetraidrofurano. Em algumas formas de realização, a conversão é realizada em uma temperatura de cerca de -5°C a cerca de 50°C.

Algumas formas de realização da presente invenção fornecem métodos de preparação de um composto da Fórmula I compreendendo uma diazepina tricíclica da Fórmula I que compreende reagir uma diazepina tricíclica da Fórmula (1)

<formula>formula see original document page 28</formula>

em que R1, R2, R3, é B definido acima, com difosgenio e uma amina primaria ou secundaria da formula (3)

RH (3)

em que R é definido acima, em um solvente aprótico sob condições suficientes para produzir um composto de acordo com a fórmula (I). Qualquer solvente aprótico adequado pode ser usado, incluindo, mas não limitado a, diclorometanol. Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de uma base orgânica, tal como mas não limitada a trietilamina. ESOUEMA(S) SINTÉTICOfS) GERAIS PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS

Os compostos da presente invenção podem ser preparados de acordo com um ou mais dos processos gerais mostrados abaixo. Os compostos da fórmula geral (I), em que B é

<formula>formula see original document page 29</formula>

e pode ser convenientemente preparado como mostrado no

Esquema I.

Esquema I

<formula>formula see original document page 29</formula>

De acordo com o processo preferido acima, uma azepina tricíclica da fórmula (1), em que Ri, R2, R3, e B são definidos acima, é reagida com haleto de per-haloalcanoil, preferivelmente cloreto de tricloroacetil, na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, N,N- diisopropiletil amina (base de Hünig) em um solvente orgânico aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano ou 1,4-dioxano, em temperaturas que variam de cerca de -IO0C a cerca da temperatura ambiente, para fornecer o intermediário de tricloroacetil desejado da fórmula (2). A reação subseqüente do intermediário da fórmula (2) com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) no refluxo de 1,4- dioxano ou com sulfóxido de dimetila opcionalmente na presença de uma base orgânica tal como trietilamina, em um solvente tal como, mas não limitado a, acetonitrila, em temperaturas que variam desde cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente, produz os compostos desejados da fórmula (I), em que Rj, R2, R3, e B são definidos acima.

Outro processo preferido é mostrado no Esquema II abaixo. Esquema II

<formula>formula see original document page 31</formula>

De acordo com o processo preferido acima, o intermediário de tricloroacetil da fórmula (2) é hidrolisado com base aquosa, tal como, mas não limitada a, hidróxido de sódio, em um solvente orgânico, tal como, mas não limitado a, tetraidrofurano ou acetona em temperaturas que variam de cerca de -10°C até a temperatura ambiente, para produzir o ácido intermediário da fórmula (4). A ativação requerida do ácido carboxílico (4) para o acoplamento subseqüente com a amina primária ou secundária da fórmula (3) pode ser realizada em vários dias. Assim, o intermediário da fórmula (4) pode ser convertido em um halogeneto de acila, preferivelmente um cloreto ou brometo da fórmula (5), onde J é COCl ou COBr, pela reação com cloreto de tionila, brometo de tionila, cloreto de oxalila, ou brometo de oxalila ou reagentes similares conhecidos na técnica, puros ou na presença de uma base inorgânica, tal como, mas não limitada a, carbonato de potássio, ou na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, piridina, 4- (dimetilamino)piridina, ou uma amina terciária, tal como, mas não limitada a, trietilamina em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, Ν,Ν-dimetilformamida ou tetraidrofurano, em temperaturas que variam de cerca de -50C a cerca de 5O0C para produzir o derivado acilado intermediário (5). O acoplamento subseqüente do cloreto de acila ou brometo de acila da fórmula (5), onde J é COCl ou COBr, com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) na presença de uma quantidade estequiométrica de base de Hünig, em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, ,N-dimetilformamida ou tetraidrofurano em temperaturas que variam desde cerca a temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente, fornece os compostos desejados da fórmula (I), em que Rj, R2, R3, e B são definidos acima.

Alternativamente, as espécies de acilação podem ser um anidrido misturado do ácido carboxílico correspondente, tal como, mas não limitado a, aquele preparado pelo tratamento do dito ácido da fórmula (4) com cloreto de 2,4,6-triclorobenzoil em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano de acordo com o procedimento de Inanaga et al., Buli. Chem. Soe. Jpn. 52, 1989 (1979). O tratamento do dito anidrido misturado da fórmula (5) com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, em temperaturas que variam desde cerca a temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente, fornece os compostos desejados da fórmula (I), em que R1, R2, R3, e B são definidos acima.

Alternativamente, a amidação dos ácidos carboxílicos da fórmula (4) pode ser efetivamente realizada pelo tratamento do dito ácido com trifosgênio em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, seguida pela reação do intermediário ativado com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, base de Hünig em temperaturas que variam de cerca de -IO0C até a temperatura ambiente.

Outro processo preferido para a preparação dos compostos da presente invenção da fórmula (I), em que Rj, R2, R3, e B são definidos acima, consiste do tratamento do ácido da fórmula (4) com um reagente de ativação, tal como, mas não limitado a Ν,Ν-diciclohexilcarbodiimida ou hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida na presença de 1- hidroxibenzotriazol, seguido pela reação do intermediário ativado com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3), preferivelmente de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, base de Hünig e uma quantidade catalítica de 4-(dimetilamino)piridina em um solvente aprótico tal como, mas não limitado a, diclorometano, N,N- dimetilformamida ou tetraidrofurano em temperaturas que variam de cerca de -100°C até cerca da temperatura ambiente.

Em outro processo preferido, o dito ácido da fórmula (4) pode ser ativado pelo tratamento com outros agentes de ativação, tal como, mas não limitado a, Ν,Ν'-carbonildiimidazol em um solvente aprótico, tal como,mas não limitado a, diclorometano ou tetraidrofurano, em temperaturas que variam de cerca de -IO0C até a temperatura de refluxo do solvente. A reação subseqüente da imidazolida intermediária ativada com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) fornece os compostos desejados da fórmula (I), em que Ri, R2, R3, e B são definidos acima.

Alternativamente, o acoplamento da amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) com o dito ácido da fórmula (4) pode ser efetivamente realizado usando-se hidroxibenzotriazol tetrametilurônio hexafluorofosfato como o reagente de acoplamento na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, base de Hünig e em um solvente, tal como, mas não limitado a, Ν,Ν-dimetilformamida em temperaturas que variam de cerca de -IO0C até a temperatura ambiente, para fornecer e purificar os compostos desejados da fórmula (I), em que Rj, R2, R3, e B são definidos acima.

Os reagentes de acoplamento relacionados, tais como, mas não limitados a, difenilfosforil azida, dietil ciano fosfonato, benzotriazol-l-il-oxi- tris-(dimetilamino) fosfônio hexafluorofosfato e todos os outros conhecidos na literatura que foram usados na formação de ligações de amida na síntese de peptídeo podem também ser usados para a preparação dos compostos da fórmula (I), em que Ri, R2, R3, e B são definidos acima.

O método usado para a preparação de compostos da fórmula (I) a partir do ácido carboxílico intermediário da fórmula (4) é finalmente escolhido na base de sua compatibilidade com os grupos Ri, R2, R3, e B, e sua reatividade com a diazepina tricíclica da fórmula (1).

Outro processo preferido para a preparação de (I) é mostrado no Esquema III. Uma diazepina tricíclica da fórmula (1) é reagida com difosgênio em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diçlorometanol, preferivelmente na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a trietilamina, seguida pela reação do intermediário acilado resultante com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3), para fornecer os compostos desejados da fórmula (I), em que Ri, R2, R3 e B são definidos acima. Esquema III

<formula>formula see original document page 35</formula>

As diazepinas tricíclicas da fórmula (1) do Esquema I, em que B e

<formula>formula see original document page 35</formula>

Q e

<formula>formula see original document page 35</formula>

pode ser convenientemente preparado como mostrado no Esquema IV

Esquema IV

<formula>formula see original document page 35</formula>

Assim, uma diazepina tricíclica da fórmula (6) é tratada com um agente de acilação apropriadamente substituído, tal como, mas não limitado a, um halogeneto de aroil, preferivelmente um cloreto de acil apropriadamente substituído ou acilbrometo da fórmula (7), onde J é COCl ou COBr, em que B é finalmente escolhido na base de sua compatibilidade com o esquema da presente invenção, na presença de uma base inorgânica, tal como, mas não limitada a, carbonato de potássio, ou na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitado a, piridina, 4-(dimetilamino)piridina, ou uma terc-aril amina tal como, mas não limitada a, trietilamina, N,N- diisopropiletil amina ou Ν,Ν-dimetilanilina, em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, N,N-dimetilformamida, tetraidrofurano ou 1,4-dioxano, em temperaturas que variam de cerca de -5°C a cerca de 50°C para fornecer intermediários da fórmula geral (1).

Alternativamente, as espécies de acilação da fórmula (7) podem ser um anidrido misturado do ácido carboxílico correspondente, tal como, mas não limitado a, aquele preparado pelo tratamento do dito ácido com cloreto de 2,4,6-triclorobenzoil em um solvente orgânico aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano de acordo com o procedimento de Inanaga et al., Buli. Chem. Soe. Jpn., 52, 1989 (1979). O tratamento do dito anidrido misturado da fórmula geral (7) com uma diazepina tricíclica da fórmula (6) em um solvente, tal como, mas não limitado a, diclorometano, e na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, 4- (dimetil)piridina, em temperaturas que variam de cerca de 0°C até a temperatura de refluxo do solvente, produz o derivado acilado intermediário da fórmula (1) do Esquema IV.

O intermediário de acilação da fórmula (7) é finalmente escolhido na base de sua compatibilidade com os grupos B, e sua reatividade com a diazepina tricíclica da fórmula (6).

Os intermediários desejados da fórmula (7) do Esquema IV, em que B é (a), pode ser convenientemente preparado por um processo no Esquema V. Assim, um iodeto de aril, cloreto de aril, ou aril trifluorometano sulfonato apropriadamente substituído da fórmula (8), em que Pg é um grupo de proteção de ácido carboxílico, preferivelmente Pg é alquil ou benzil, M é I, Br, Cl, OTf e R5, RgeR7 são definidos acima, é reagido com um derivado de tri(alquil)estanho(IV) da fórmula (9), onde T é Sn(alquil)3, preferivelmente Sn(Ii-Bu)3, em que R8, R9 e Ri0 são definidos acima, na presença de um catalisador de Pd(O), e na presença ou ausência de sais inorgânicos (por exemplo, sais de LiCl ou cobre(I)) para fornecer o éster intermediário da fórmula (10). O desmascaramento subseqüente da função carboxílica por hidrólise, hidrogenólise ou métodos similares conhecidos na técnica, seguidos por ativação do ácido intermediário da fórmula (11) fornece os compostos desejados da fórmula (7), em que R5, R6, R7, Rs, R9 e Ri0 são definidos acima, adequados para acoplamento com a diazepina tricíclica da fórmula (6).

Esquema V

<formula>formula see original document page 37</formula>

Os intermediários desejados da fórmula (7) do Esquema IV, em que Q é (b), podem ser preparados por um processo análogo àquele exemplificado no Esquema V pela substituição de intermediários da fórmula (9) com intermediários de naftila apropriadamente substituídos.

Alternativamente, os intermediários desejados da fórmula (10) do Esquema V, em que Q é (a), podem ser preparados pelo acoplamento do iodeto, brometo, cloreto ou sulfonato de trifluorometano da fórmula (8), onde M é I, Br, Cl ou OTf, com um derivado de aril boro apropriadamente substituído da fórmula (9), onde preferivelmente T é B(OH)2, na presença de um catalisador de paládio, tal como, mas não limitado a, acetato de paládio (II) ou tetracis (trifenilfosfina)paládio(O) e uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, trietilamina ou uma base orgânica, tal como, mas não limitado a, carbonato de sódio, potássio ou césio com ou sem brometo de tetrabutilamônio ou iodeto de tetrabutilamônio, em uma mistura de solventes, tais como, mas não limitados a, tolueno-etanol-água, acetona-água, água ou água-acetonitrila, em temperaturas que variam de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente (Suzuki, Pure & Appl. Chem. 66, 213-222 (1994), Badone et al., J. org Chem. 62, 7170-7173 (1997), Wolfe et al. J. Am. Chem. Soe. 121, 9559 (1999), Shen, Tetr. Letters 38, 5575 (1997)). As condições exatas para o acoplamento de Suzuki do halogeneto e dos intermediários de ácido borônico são escolhidas na base da natureza do substrato e dos substituintes. Os intermediários desejados da fórmula (10) do Esquema V podem ser similarmente preparados a partir de brometo da fórmula (8), onde M é Br, e o ácido borônico da fórmula (9) em um solvente, tal como, mas não limitado a, dioxano na presença de fosfato de potássio e um catalisador de Pd(O).

Alternativamente, uma reação de acoplamento cruzado catalisada por paládio de um halogeneto de aril, ou sulfonato de trifluorometano da fórmula (9), onde T é Br, I ou OTf, com um derivado de pinacolato da fórmula (8), onde M é B(OH)2, ou SnBu3 produz o intermediário desejado da fórmula (10) que é convertido em um composto da fórmula (1) na maneira do esquema V.

Os intermediários desejados da fórmula (10) do esquema V, em que Q é (b), podem ser preparados em um modo análogo pela substituição dos intermediários da fórmula (9) com intermediários de naftil apropriadamente substituídos.

Os halogenetos de aril apropriadamente substituídos requeridos da fórmula (8), onde M é Br ou I, do Esquema V são comercialmente disponibilizados, ou são conhecidos na técnica, ou podem ser prontamente avaliados em rendimentos quantitativos e alta pureza por diazotização das anilinas substituídas correspondentes da fórmula (8), onde Pg é H, alquil ou benzil, e M é NH2, seguido pela reação do sal de diazônio intermediário com iodo e iodeto de potássio em um meio ácido aquoso essencialmente de acordo com os procedimentos de Street et ai. J. Med. Chem. 36, 1529 (1993) and Coffen et al., J. org. Chem. 49, 296 (1984) ou com brometo de cobre (I), respectivamente (March, Advanced ouganic Chemistry, 3a. Ed., p.647-648, John Wiley & Sons, New York (1985)).

Alternativamente, os intermediários desejados da fórmula (11) do Esquema V, em que Q é (a), podem ser convenientemente preparados como mostrado no Esquema VI por reação de acoplamento cruzado de um boronato de pinacolato apropriadamente substituído da fórmula (13), em que R8, R9 e Ri0 são definidos acima, com um triflato de aril da fórmula (14), onde W é OTf, ou um halogeneto de aril, onde o halogeneto Br, ou I, em que R5, Ré e R7 são definidos acima, de acordo com os procedimentos gerais de Ishiyama et al., Tetr. Lett. 38, 3447-3450 (1997) e Giroux et al. Tetr. Lett. 38, 3841- 3844 (1997), seguido por hidrólise básica ou ácida da nitrila intermediária da fórmula (15) (cf. March, Advanced organic Chemistry, 3a Ed., John Wileil & Sons, New York, p. 788 (1985)). Esquema VI

<formula>formula see original document page 40</formula>

Alternativamente, a reação de um iodeto, brometo, cloreto ou trifluorometano da fórmula (12), onde L é Br, Cl, I ou OTf, com um ácido borônico ou derivado de trialquil estanho (IV) da fórmula (14), onde W é B(OH)2 ou SnBu3, produz o intermediário desejado da fórmula (15), que é convertido em um composto da fórmula (11) na maneira do Esquema VI.

Os intermediários desejados da fórmula (15) do Esquema VI, onde Q é (b), podem ser preparados em uma maneira análoga pela substituição da fórmula (13) com intermediários de nafitila apropriadamente substituídos.

Os ésteres fenil borônicos desejados da fórmula (13) do Esquema VI podem ser convenientemente preparados pela reação de acoplamento cruzado catalisada por paládio de bis(pinacolato) diboro da fórmula (16) com um halogeneto de aril apropriadamente substituído da fórmula (12), preferivelmente um brometo ou iodeto, onde L é Br, I ou um triflato de aril, onde L é OTf, de acordo com os procedimentos publicados de Ishiyama et al., J. org Chem. 60, 7508-7510 (1995) e Giroux et al., Tetr. Lett. 38,3841-3844(1997).

Os compostos desejados da fórmula (1) do Esquema IV, em que Q é (a), podem ser alternativamente preparados por um processo mostrado no Esquema VII Esquema Vll

<formula>formula see original document page 41</formula>

Assim, uma diazepina tricíclica da fórmula (6) é tratada com um agente de acilação apropriadamente substituído, tal como, mas não limitado a, um halogeneto de halo aroil, preferivelmente um cloreto de iodo aroil ou brometo de bromo aroil da fórmula (17), onde J é COCl ou COBr; e K é I, Br, em que R5, R6 e R7 são definidos acima, usando qualquer dos procedimentos descritos acima, para fornecer o intermediário acilado da fórmula geral (18) do Esquema VII.

Alternativamente, a espécie de acilação da fórmula (17) pode ser um anidrido misturado do ácido carboxílico correspondente. O tratamento do dito anidrido misturado da fórmula geral (17) com uma diazepina tricíclica da fórmula (6) de acordo com o procedimento descrito acima produz o derivado acilado intermediário da fórmula (18).

O intermediário de acilação da fórmula (17) é finalmente escolhido na base de sua compatibilidade com os grupos R5, R6 e R7, e sua reatividade com a diazepina tricíclica da fórmula (6).

Uma reação de acoplamento de Stille de um composto da fórmula (18), onde K é I, com um reagente de organoestanho apropriadamente substituído, tal como, mas não limitado a, um derivado de trialquilestanho (IV), preferivelmente um derivado de tri-n-butilestanho (IV) da fórmula (9), onde T é SnBu3, onde R8, R9 e Ri0 são definidos acima, na presença de um catalisador tal como, mas não limitado a, (trifenilfosfina) paládio (0), em um solvente orgânico aprótico, tal como, mas não limitado a, tolueno e Ν,Ν-dimetilformamida, em temperaturas que variam de cerca da temperatura ambiente até cerca de 150°C (cf. Farina et al., J. org Chem, 59, 5905 (1994) e referências citadas aí), produz os compostos desejados da fórmula (1) em que R1, R2, R3, R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são como definidos acima.

Alternativamente, a reação de um composto da fórmula (18), onde K é Cl, Br ou I, com um ácido borônico apropriadamente substituído da fórmula (9), onde T é T é B(OH)2, em que R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são definidos acima, em uma mistura de solventes, tais como, mas não limitados a, tolueno-etanol-água, na presença de um catalisador de Pd(O) e uma base, tal como mas não limitada a, carbonato de sódio, em temperaturas que variam de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente, produz os compostos desejados da fórmula (1), onde R1, R2, R3, R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são como definidos acima.

Os aroil cloretos(brometos) substituídos preferidos da fórmula (17) do Esquema VII, onde K é I, Br; e J é COCl ou COBr, em que R5, R6 e R7 são como definidos acima, são comercialmente disponibilizados, ou são conhecidos na técnica, ou podem ser prontamente preparados por procedimentos análogos àqueles na literatura para os compostos conhecidos.

Os intermediários da fórmula (9), onde T é Sn(alquil)3, e alquil é preferivelmente n-butil, do Esquema VII são comercialmente disponibilizados, ou podem ser convenientemente preparados como mostrado no Esquema VII dos materiais iniciais de bromo correspondentes da fórmula (19), em que R8, R9 e Ri0 são como definidos acima, primeiramente os reagindo com n-butil lítio, seguido pela reação da espécie litiada intermediária com um trialquil (preferivelmente, trimetil ou tri-n-butil)estanho(IV) cloreto, preferivelmente trimetil estanho(IV) cloreto ou tri-n-butil estanho(IV) cloreto.

Esquema Vlll

<formula>formula see original document page 43</formula>

Os ácidos borônicos substituídos preferidos da fórmula (9), onde T é B(OH)2 são ou comercialmente disponibilizados ou são conhecidos na técnica, ou podem ser prontamente preparados por procedimentos análogos àqueles na literatura para os compostos conhecidos.

Os compostos desejados da fórmula (1) do esquema VII, em que B é (b), podem ser preparados em uma maneira análoga pela substituição de intermediários da fórmula (9) com intermediários de naftil apropriadamente substituídos.

Alternativamente, como mostrado no Esquema IX, os halogenetos de aroil apropriadamente substituídos, preferivelmente cloreto de aroil da fórmula (20), onde J = COC1, onde R5, R6 e R7 são definidos acima, são reagidos com uma diazepina tricíclica da fórmula (6) para fornecer os brometos intermediários da fórmula (21). Uma reação subseqüente de (21) com um hexa alquil-di-estanho (preferivelmente hexa-n-butil-di-estanho (IV)) na presença de um catalisador de Pd(O), tal como tetracis(tri- fenilfosfina)paládio(O) e cloreto de lítio ou sais de cobre (I), fornece o intermediário estanano da fórmula (22). Outra reação do derivado de tri-n- butil estanho (IV) (22) com o halogeneto de aril apropriadamente substituído da fórmula (23), onde M = bromo ou iodo, em que R8, R9, e R10 são definidos acima, na presença de um catalisador de Pd(O), tal como tetracis(tri- fenilfosfina)paládio(O), produz os compostos desejados da fórmula (1), em que Q é (a), e Ri, R2, R3, R5, R^, R7, Rs, R9 e Rio são como definidos acima.

Esquema IX

<formula>formula see original document page 44</formula>

Os compostos desejados da fórmula (1) do esquema IX, em que Q é (b), podem ser preparados em uma maneira análoga pela substituição dos intermediários da fórmula (23) com intermediários de naftil apropriadamente substituídos.

Alternativamente, os compostos desejados da fórmula (1) do

Esquema IX, em que Q é (a), podem ser preparados como mostrado no Esquema X.

<formula>formula see original document page 44</formula> Assim, uma bifenila apropriadamente substituída da fórmula (24), em que R5, R6, R7, Rs, R9 e Ri0 são como definidos acima, é tratada com monóxido de carbono na presença de uma diazepina tricíclica da fórmula (6), um catalisador de paládio(O), preferivelmente PdBr2(Ph3P)2 e uma amina terciária, preferivelmente, n-tributilamina, em um solvente tal como, mas não limitado a, anisol ou dioxano, em temperaturas que variam de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente (cf. Schoenberg et al. J. Org. Chem. 39, 3327 (1974)) para fornecer os compostos desejados da fórmula (1) em que R1, R2, R3, R5, R6, R7, Rs, R9 e R10 sao definidos acima.

Em uma maneira análoga, alguém pode preparar os compostos da fórmula (1) do Esquema X, em que Q é (b) contanto que os intermediários da fórmula (24) sejam substituídos pelos intermediários de naftil apropriadamente substituídos.

Um processo preferido para a preparação dos compostos desejados da fórmula geral (I) do esquema I, em que B é selecionado do grupo (a) ou (b) definido anteriormente é mostrado no Esquema XI Esquema XI

<formula>formula see original document page 46</formula>

Assim, uma diazepina tricíclica da fórmula (25), em que Ri, R2 e R3 são definidos acima, portando um grupo de proteção (Pg), tal como, mas não limitado a, grupo fluorenilalcoxicarbonil, preferivelmente um grupo fluorenilmetiloxicarbonil (Pg é Fmoc), ou um grupo de proteção de alcoxicarbonil, preferivelmente um grupo terc-butiloxicarbonil (Pg é Boc) é reagido com um halogeneto de per-haloalcanoil, preferivelmente cloreto de tricloroacetil, na presença de uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, N,Ndiisopropiletil amina (base de Hünig) ou uma amina terciária, tal como, mas não limitada a, trietilamina, opcionalmente na presença de quantidades catalíticas de 4-(dimetilamino) piridina, em um solvente orgânico aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometano, em temperaturas que variam de cerca de -10°C até a temperatura ambiente para fornecer o intermediário de tricloroacetil desejado da fórmula (26). A reação subseqüente com uma amina primária ou secundária da fórmula (3) sob as condições do Esquema I produz a amida intermediária da fórmula (27), onde Pg é Boc, que é então desprotegida (intermediário 28) e acilada para o produto desejado da fórmula (I). Alternativamente, a conversão de (26) no intermediário da fórmula (28) pode ser realizada em uma etapa única pelo tratamento do intermediário da fórmula (26), onde Pg é Fmoc, com uma amina primária da fórmula (3) na presença de dimetilsulfóxido em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, acetonitrila, na temperatura de refluxo do solvente.

Alternativamente, a hidrólise do intermediário de tricloroacetato (26) com base aquosa, tal como, mas não limitada a, hidróxido de sódio em um solvente orgânico, tal como, mas não limitado a, acetona, em temperaturas que variam de cerca de -IO0C até a temperatura ambiente, é realizada pela remoção simultânea do grupo de proteção (Pg é Fmoc) e produz o ácido intermediário da fórmula (29) como mostrado no Esquema XII. A amidação requerida do ácido carboxílico da fórmula (29) pode ser efetivamente realizada pelo tratamento do ácido carboxílico da fórmula (29) com um reagente de ativação, tal como, mas não limitado a, N,N- diciclohexilcarbodiimida ou l-etil-3-(3-dimetilamino-propil) carbodiimida hidrocloreto na presença de 1-hidroxibenzotriazol, seguido pela reação do intermediário ativado com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) preferivelmente na presença de uma base de Hünig ou uma quantidade catalítica de 4-(dimetilamino)piridina, em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, diclorometanol, N,N- dimetilformamida ou tetraidrofurano, em temperaturas que variam de cerca de -10°C até a temperatura ambiente. Acilação subseqüente da amina da fórmula (28) sob as condições do Esquema IV fornece os compostos desejados da fórmula (I). Esquema Xll

Outros reagentes de acoplamento conhecidos na literatura que foram usados na formação de ligações amida na síntese de peptídeos podem também ser usados para a preparação dos compostos da fórmula (28). O método de escolha para a preparação dos compostos da fórmula (28) a partir de ácido carboxílico intermediário da fórmula (29) é finalmente escolhido na base de sua compatibilidade com os grupos Ri, R2 e R3.

Alternativamente, os ácidos intermediários da fórmula (29) do Esquema XII, em que Rj, R2 e R3 são definidos acima, podem ser obtidos pela reação de uma diazepina tricíclica da fórmula (6) com um excesso de agente de acilação preferivelmente anidrido trifluoroacético ou cloreto de tricloroacetila na presença de uma base inorgânica, tal como, mas não limitada a, carbonato de potássio ou uma base orgânica, tal como, mas não limitada a, Ν,Ν-diisopropiletilamina, em um solvente aprótico, tal como, mas não limitado a, ,Ndimetilformamida, seguida pela hidrólise básica para o intermediário bis-trifluoroacetil (tricloroacetil) da fórmula (3), preferivelmente com hidróxido de sódio aquoso em um solvente orgânico prótico, tal como, mas não limitado a, etanol, em temperaturas que variam desde a temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente, como exemplificado no Esquema XIII. Esquema XIII

<formula>formula see original document page 49</formula>

Os processos preferidos para a preparação dos compostos da fórmula (I) do Esquema I, em que Q é (a), e Rj, R2, R3, R5, R^5 R7, Rsj R9 e Rio são como definidos acima, também utilizam acilação do intermediário (28) do Esquema XII com um agente de acilação da fórmula (17) do Esquema VII, como mostrado no Esquema XIV. O acoplamento subseqüente do intermediário da fórmula (31), onde K é Br ou I, com um ácido aril borônico apropriadamente substituído da fórmula (9), onde T é B(OH)2, em uma mistura de solventes, tais como, mas não limitados a, dimetoxietano e água ou acetonitrila e água, na presença de um catalisador de Pd(O), tal como, mas não limitado a, tetracis(tri-fenilfosfina)paládio(0) ou um catalisador de Pd(II), tal como, mas não limitado a, [l.r-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro paládio(II), e uma base, tal como, mas não limitado a, carbonato de potássio ou sódio, em temperaturas que variam desde cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo, produz o composto (I) desejado. Esquema XIV

Alternativamente, os compostos preferidos da fórmula (I) do esquema I, em que Q é (a), e R1, R2, R3, R5, R^, R7, R«, R9 e R1O são definidos acima, podem ser preparados como mostrado no Esquema XV pela acilação do intermediário (28) do esquema XII com um agente de acilação da fórmula (20) do Esquema IX. Esquema XV

<formula>formula see original document page 51</formula>

Alternativamente, os compostos preferidos da fórmula (I) do Esquema (I), em que Q é (a), e R1, R2, R3, R5, R6 R7, R8, R9 e R10 são definidos acima, podem ser preparados pela acilação do intermediário de amida da fórmula (28) do esquema XII com um agente de acilação da fórmula (7) do Esquema V, em que J é definido acima, como mostrado no Esquema XVI.

Esquema XVI

<formula>formula see original document page 51</formula>

Um processo preferido para a preparação do intermediário de amida da fórmula (31) do Esquema XIV é mostrado no esquema XVII. Uma benzodiazepina tricíclica da fórmula (6) é acilada com um agente de acilação da fórmula (17), onde K é Br ou I, para fornecer o intermediário da fórmula (34). Este é, por sua vez, reagido com halogeneto de per-haloalcanoil preferivelmente cloreto de tricloroacetil, sob as condições do Esquema I para fornecer o intermediário de tricloroacetil da fórmula (35). Uma reação subseqüente do intermediário da fórmula (35) com uma amina primária ou secundária também sob as condições do Esquema I fornece o produto desejado da fórmula (31).

Esquema XVII

<formula>formula see original document page 52</formula>

BREVE DESCRIÇÃO DO(S) PROCEDIMENTO(S) DE TESTE BIOLÓGICO E SUMÁRIO DE TEXTO DOS RESULTADOS FARMACOLOGIA

As atividades antagonistas de FSH dos compostos da presente invenção foram demonstradas pela avaliação dos compostos representativos da presente invenção nos seguintes procedimentos de teste. ENSAIO DE GENE REPÓRTER DE CRE-LUCIFERASE DEPENDENTE DE RECEPTOR DE HORMÔNIO DE ESTIMULACÂO DE FOLÍCULOS PARA A IDENTIFICAÇÃO DE ANTAGONISTAS DE HORMÔNIO DE ESTIMULACÂO DE FOLÍCULOS (FSH)

Este procedimento foi usado para identificar e determinar as potências relativas de antagonistas de receptor de FSH humano usando uma linhagem celular de ovário de hamster Chinês que produz estavelmente o receptor de FSH humano e um gene repórter de luciferase regulado por elementos de resposta de cAMP.

MATERIAIS E MÉTODOS: REAGENTES

VEICULO COMPOSTO: Os compostos de carga foram solubilizados em um veículo apropriado, preferivelmente solução salina tamponada com fosfato (PBS) ou sulfóxido de dimetila (DMSO), a 30 nM. Os compostos foram subseqüentemente diluídos em DMSO para soluções de trabalho de 1 a 20 ou 30 mM para formato de teste de 2 doses e 1 μΜ - 10 mM para formato de resposta de dose. As diluições de DMSO foram diluídas 500 vezes em um meio de crescimento estéril [DMEM/F-12 (GIBCO/BRL; Grand Island NY) contendo 15 mM HEPES, 2 mM I-glutamina, hidrocloreto de piridoxina, vermelho de fenol e 5% FetalClone II (HyClone Laboratories, Inc; Logan, UT), 0,2% DMSO, 100 unidades de penicilina G/ml, e 100 μg sulfato de estreptomicina /ml (GIBCO/BRL)]. As concentrações do veículo em cada uma das diluições de composto foram iguais.

CONTROLES POSITIVOS: FSH humano positivo (>98%) foi comprado da Cortex Biochem, Inc. (San Leandro, CA) e um antagonista de FSH-R tiazolidinona foi obtido do recipiente de composto de Wyeth Research.

PREPARAÇÃO DE CÉLULAS

As células de CHO FSH-R 6CRE-Luc (célula 1D7) foram obtidas da Affilmax (Pato Alto, CA). Estas células de ovário de hamster Chinês (CHO-Kl) foram geneticamente engenheiradas para estavelmente expressar o gene receptor de FSH humano recombinante e um gene repórter de luciferase sob a regulação de 6 cópias de um elemento de resposta de cAMP. As células foram colocada em placas um dia antes do tratamento em placas opacas brancas com 96 poços em uma densidade de 50.000 células / 100 μl / poço no meio de crescimento. No dia de tratamento, o meio de crescimento foi removido dos poços por aspiração e 50 μΐ de meio de crescimento fresco foram adicionados a cada poço. As células foram incubadas a 37°C em uma incubadora umedecida com 5% de CO2 / 95% de ar.

ENSAIO

Os compostos de teste diluídos até 2X a concentração final em um meio de crescimento contendo FSH purificado com 2X EC50 (0,8 ng/ml) foram adicionados aos poços para alcançar um volume final de 100 μΐ de meio contendo 0,25% (v/v) de veículo. As células tratadas foram incubadas por 4 horas a 37°C em uma incubadora umedecida com 5% CO2 / 95% ar. No final do período de incubação, a atividade de luciferase foi medida por quimioluminescência usando um kit comercialmente disponibilizado (LucScreen, Tropix, Inc., Bedford, MA) de acordo com as especificações do fabricante, com a exceção de que o Tampão Ieo Tampão 2 foram misturados juntos em proporção igual antes da adição de 100 μΐ dos reagentes combinados em cada poço. Quimioluminescência foi detectada usando um luminômetro (EG & G Bertold Microlumat LB 96 P, Wallac, Gaitersburg, MD) com quimioluminescência medida por 1 s/poço.

A luminescência de fundo foi medida para cada poço antes da adição do reagente de LucScreen.

GRUPOS EXPERIMENTAIS

No formato de 2 doses e 96 poços, cada composto foi testado em duplicata em cada dose. Os controles foram também testados em duplicata em cada placa e consistiam de controle de veículo e 3 controles positivos (EC50 de phFSH (0,4 ng/ml), EC100 de phFSH (1000 ng/ml), e IC50 de 3- [(2S*,5R*)-5-{[2-(l H-Indol-3 -il)-etilcarbamoil] -metil} -4-oxo-2-(5 -feniletinil- tiofen-2-il)-tiazolidin-3-il]-benzamida (2 μΜ) na presença de EC50 de FSH humano purificado). Uma placa foi usada para testar um máximo de 22 compostos.

No formato de resposta de dose de 96 poços, cada composto foi testado em triplicata em cada uma das 6 doses na presença da EC50 de FSH humano purificado. A EC5O de FSH humano purificado sozinho foi testada em triplicata com cada composto de teste. As doses escolhidas para testar cada composto foram extrapoladas do processo de triagem de 2 doses inicial. Junto com os compostos de teste, FSH humano purificado foi também testado em uma resposta de dose (0,03, 0,1, 0,3, 1, 3, 10, e 30 ng/ml) para um controle positivo e controle de qualidade. Uma placa foi usada para 3 compostos de teste e o controle positivo de FSH.

ANÁLISE DOS RESULTADOS

A atividade de luciferase é expressada como unidades de luz relativa/s/poço. A atividade de luciferase em antagonista foi comparada com os controles negativos e positivos apropriados.

Para o teste de 2 doses, os resultados são relatados como atividade de luciferase e são expressados como % de inibição da resposta obtida da EC5O de FSH. Para o teste de resposta de dose, os resultados são relatados como valores de IC5o- Os dados foram analisados estatisticamente por uma análise de uma via de variância com ponderação e transformação apropriadas e teste emparelhado relevante como determinado por Biometrics (Wylet Research, Princeton, NJ). Os valores de IC5o foram calculados usando o programa Stat/Excel desenvolvido pela Biometrics com ponderação e transformação apropriadas.

COMPOSTOS DE REFERÊNCIA

Os compostos de teste foram comparados ao efeito de FSH humano purificado e 3-[(2S*,5R*)-5-{[2-(lH-Indol-3-il)-etilcarbamoil]- metil} -4-oxo-2-(5 -feniletiniltiofen-2-il)-tiazolidin-3 -il] -benzamida em formato de 2 doses e concentração EC5O de FSH humano purificado em um formato de resposta de dose. REFERÊNCIAS

1. Kelton, C.A., Cheng, S.V.IL., Nugent, N.P., Schweickhardt, R.L., Rosental, IL., Overton, S.A., Wands, G.D., Kuzeja, J.B., Luchette, C.A., e Chappel, S.C. (1992). Te cloning of te human follicle stimulating hormone receptor e its expression in COS-7, CHO, e IL-I cells. Mol. Cell. Endocrinol. 89:141-151.

2. Tilly, J.L., Aihara, T., Nishimori, K., Jia, X.-C., Bilig5 H., Kowalski, K.I., Perlas, E.A., e Hsueh, A.J.W. (1992). Expression of recombinant human folliciestimulating hormone receptor: Species-specific ligand binding, signal transductíon, e identification of multiple ovarian messenger ribonucleic acid transcripts. Endocrinology 131:799-806.

3. George, S.E., Bungayl, P.J., e Naylor, L.H. (1997). Evaluation of a CRE25 directed luciferase repórter gene assail as an alternative to measuring cAMP accumulatíon. J. Biomol. Screening 2:235- 240.

BIO-ENSAIOS IN VITRO DE AGONISTAS E ANTAGONISTAS PARA O RECEPTOR DE FSH. SELETIVIDADE E DEPENDÊNCIA DE AGONISTAS E ANTAGONISTAS PARA O RECEPTOR DE FSH

Este ensaio foi usado para verificar potência, eficácia, seletividade e dependência de receptor in vitro de "hits" verificados para inibir um repórter acionado por F SH-R-CRE-Iuciferase. MÉTODOS: REAGENTES

COMPOSTO VEÍCULO: Compostos de carga foram solubilizados em 100% de DMSO (Sigma Chemical Co.) em uma concentração de 30 mM. Os compostos foram subseqüentemente diluídos em um meio de ensaio estéril consistindo de Opti-MEM® I (Life Technologies) com 0,1% (p/v) BSA (Sigma), antes do uso no bioensaio. A concentração final de DMSO no ensaio é 0,1%. PREPARAÇÃO DE CÉLULAS CHO-3D2 No dia anterior ao experimento, as células CHO-3D2 (hFSH- R)(l) foram colocadas em placas de cultura de tecido com 96 poços (Faicon) em uma densidade de 30.000 células / poço em um meio DMEM/F12 (Life Technologies) suplementado com 5% de Clone Fetal II ((Hiclone), 2 mM L- glutamina (Life Technologies) e penicilina/estreptomicina (100 U/ml, Life Technologies). As células colocadas em placa são então incubadas a 37°C em uma atmosfera de 5% CO2 / 95% ar.

ENSAIO

No dia do ensaio, as células foram lavadas três vezes com 100 μl/poço de meio de ensaio consistindo de Optí-MEM® I (Life Technologies) com 0,1 % (p/v) BSA (Sigma). O meio foi removido e 100 μΐ de meio de ensaio foram adicionados a cada poço. As placas foram incubadas por um adicional de 30 minutos a 37°C. O meio foi então removido e as células foram desafiadas por 30 minutos a 37°C em 50 μΐ de meio de ensaio contendo veículo, hFSH purificado (> 95% puro; Cortex Biochem, Inc., San Leandro, CA) na presença ou ausência de compostos de teste. As reações foram terminadas pela adição de 50 μΐ de ácido clorídrico 0,2N a cada poço e acumulação cAMP foi medida por radioimunoensaio (RIA) usando um kit comercialmente disponibilizado (Amersham).

GRUPOS EXPERIMENTAIS

Todos os compostos de teste foram avaliados em uma paradigma de resposta de dose variando de cerca de 0,01 a cerca de 30 μΜ. Os controles e compostos de teste foram avaliados em quadruplicata em um formato de 96 poços. As células foram tratadas com veículo, hFSH at EC2O (1,85 ng/mL = 53 pM), ou os compostos na presença ou ausência de hFSH em sua dose de EC2O- A capacidade dos compostos de inibirem a acumulação de cAMP induzida por hFSH foi avaliada por RIA.

Em cada ensaio, a concentração de EC2O foi calculada e somente aqueles experimentos em que as concentrações de EC2Q foram iguais a 1,85 ± 0,4 ng/ml foram aceitos como válidos. No formato de 96 poços, a primeira coluna continha o controle negativo (meio de ensaio + 0,1% de DMSO), a segunda coluna continha o controle positivo, hFSH em sua EC20 + 0,1% de DMSO (1,85 ng/ml ou 53 pM), seguido por seis concentrações do composto variando de cerca de 0,03 - 30 μΜ na presença do hFSH em sua concentração EC2O (1,85 ng/ml ou 53 pM).

Junto com os compostos de teste, FSH foi também corrido como um controle positivo no modo agonista usando concentrações que variam de cerca de 0,1-1000 ng/ml.

ESTUDOS DE SELETIVIDADE

Os ensaios de acumulação de cAMP usando células CHO-25 (hTSH-R) foram realizados como descrito acima para as células de CHO-3D2 com as seguintes exceções: células CHO-25 foram colocadas em placas em uma densidade de 50.000 células/poço (2). Todos os compostos de teste foram avaliados em um paradigma de resposta de dose variando de cerca de 0,01 a 30 μΜ. Os controles e compostos de teste foram avaliados em quadruplicata. As células foram tratadas com veículo, hTSH em EC20 (SnM; hTSH >98% puro, Cortex Biochem, Inc.), ou os compostos na presença ou ausência do hTSH em sua concentração EC20· A capacidade dos compostos de inibirem a acumulação de cAMP induzida por hTSH foi avaliada por RIA.

Junto com os compostos de teste, hTSH foi também corrido como um controle positivo no modo agonista usando concentrações que variam de cerca de 0,01 μΜ - 1000 μΜ.

RESPOSTAS MEDIADAS POR NÃO-RECEPTOR

Os ensaios de acumulação de cAMP usando CHO-Kl (linhagem celular parental) foram realizados como descrito acima para as células de CHO-3D2. Todos os compostos de teste foram avaliados em um paradigma de resposta de dose variando de cerca de 0,01 a cerca de 30 μΜ.

Os controles e compostos de teste foram avaliados em quadruplicata. As células foram tratadas com veículo, 5 μΜ de forscolina que induz a concentração de fmol/ml equivalente de acumulação de cAMP induzida pelo hFSH em sua EC2O (5 μΜ forscolina, Sigma Chemical Co; previamente calculado durante a caracterização dos bio-ensaios), ou os compostos na presença ou ausência da forscolina 5 μΜ. A capacidade dos compostos de inibirem a acumulação de cAMP induzida por hTSH foi avaliada por RIA.

Juntamente com os compostos de teste, forscolina foi também corrida como um controle positivo em modo agonista usando concentrações que variam de cerca de 0,01 μΜ a 1000 μΜ.

ANÁLISE DE RESULTADOS

A acumulação de cAMP é expressada como fmol/ml. A acumulação de cAMP no modo agonista, ou a capacidade do composto de inibir a acumulação de cAMP induzida por hFSH-, hTSH-, ou forscolina no modo antagonista, foi comparada com os controles negativo e positivo apropriados. Os dados foram analisados por uma análise de uma forma de variância e diferenças significativas entre os tratamentos e controle determinadas pelo teste de Least Significant Difference. COMPOSTOS DE REFERÊNCIA

Os compostos de teste foram comparados com o efeito de FSH humano purificado. No paradigma, hFSH induziu um aumento dependente da concentração em acumulação de cAMP, com EC50=22.55 ng/ml, EC50=6.03 ng/ml e EC50= 1.85 ng/ml aparente, calculada usando uma equação de logística com quatro parâmetros. A mesma comparação foi realizada com hTSH e forscolina.

ATIVIDADE BIOLÓGICA

Com base nos resultados obtidos nos procedimentos de teste farmacológico padrão, os compostos da presente invenção foram verificados bloquear a função celular de F SH, in vitro, incluindo a produção de segundo cAMP mensageiro e estradiol em células granulosas de ovário de rato. Os compostos representantes da presente invenção foram verificados interagir seletivamente com o receptor de F SH, mas não antagonizam a ligação de FSH ao seu receptor (Tabela 1).

Como tal, os compostos da presente invenção podem ser úteis como agentes contraceptivos de fêmeas.

TABELA 1

<table>table see original document page 60</column></row><table>

EXEMPLOS

EXEMPLO 1

2,2,2-Tricloro-1 - {10-[(2'-metoxi-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H- pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3-il} etanona

Cloreto de Tricloroacetil (2,.63 mL, 23,6 mmol) foi vagarosamente adicionado durante 5 minutos a uma solução de (2'-metoxi- bifenil-4-il)-(5H,llH-pirrol[2,lc][l,4]benzodiazepin-10-il)-metanona (3,0 g, 7.60 mmol) e Ν,Ν-diisopropiletil amina (2,65 mL, 15,2 mmol) in diclorometano (60 mL). A reação foi agitada sob nitrogênio à temperatura ambiente durante a noite e então resfriada com água. A camada orgânica foi lavada com 0,1 N ácido clorídrico e água, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada até um óleo. O óleo foi purificado por cromatografia por vaporização instantânea sobre sílica gel Merck-60 usando a 0-5% gradiente de acetato de etila em diclorometano para dar te composto do título (2,34 g) como uma espuma amarela.

MS [(+)ESI, m/z]: 539 [M+H]+ Anal. Cale. para C28H2ICi3N2O3 + 0,2 C4H8O2: C 62,05, H 4,09, N 5,03. Encontrado: C 62,28, H 4,47, N 4,86

EXEMPLO 2

10-[(2'-Metoxi-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-N-[( 1 -metil-1 H-pirrol-2-il)metil]-- 10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

A uma suspensão de 2,2,2-tricloro-l-{10-[(2'-metoxi-l,r- bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3- iljetanona do Exemplo 1 (1,175 g, 2,17 mmol) em acetonitrila (15 mL) foi adicionada (1-metil-lH-pirrol-2-il)metilamina (0,263 g, 2,38 mmol) seguida por dimetilsulfóxido (0,710 g, 9,06 mmol) e trietilamina (0,400 g, 4 mmol). A mistura foi aquecida sob nitrogênio a 80°C por 4 horas. O solvente foi removido in vácuo, e o resíduo foi cromatografado por vaporização instantânea em sílica Merck-60 usando um gradiente de 0-25% de acetato de etila em diclorometano, para fornecer uma espuma amarela que produz um sólido (0,464 g) no tratamento com acetato de etila e hexano, pf 148-150°C.

MS [(+)ESI) m/z]: 531,16 [M+H]+ Anal. Cale. para C33H30N4Oy C 74,70, H 5,70, N 10,56. Verificado: C 74,56, H 6,15, N 10,20.

EXEMPLO 3

ETAPA A. Metil éster do ácido 2,2',6'-Trimetil-bifenil-4-carboxílico

Acido 2,6-Dimetil borônico (13,7 g, 91 mmol) e metil éster do ácido 3-metil benzóico (20,9 g, 91 mmol) foram dissolvidos em tolueno (425 mL). Então, etanol (250 mL) e água (250 mL) foram adicionados, seguidos por carbonato de sódio (38,7 g, 365 mmol). O sistema foi purgado com nitrogênio e então catalisador de tetracis trifenilfosfina paládio (0) (10,5 g, 9 mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida sob nitrogênio for 21 horas e filtrada através de celite. A torta foi lavada com uma grande quantidade de acetato de etila, o filtrado combinado foi lavado com água e salmoura, seco sobre sulfato de magnésio anidro, e concentrado para dar um sólido. Cromatografia por vaporização instantânea do resíduo sobre sílica gel Merck- 60 usando um gradiente de 0-20% de acetato de etila em hexano como o eluente deu o composto do título como um sólido branco (19,2 g, 83%),

Anal. Calc.. para CnHi6O2: C 80,28; H 7,13, Verificado: C 80,37; H 7,21

ETAPA B Ácido 2,2',6'-trimetil-bifenil-4-carboxílico

Uma solução de metil éster do ácido 2,2',6'-trimetil-bifenil-4- carboxílico da ETAPA A (18,5 g, 75,4 mmol) em tetraidrofurano foi tratada com hidróxido de sódio IN (250 ml) e aquecida a 90°C por 20 horas. A mistura foi acidificada até pH ~1 com ácido clorídrico concentrado, extraída com diclorometano, seca sobre sulfato de magnésio anidro, e concentrada para dar o composto do título como um pó branco (15,83 g). A recristalização do etanol aquoso forneceu placas brancas, m.p. 172-173 °C.

MS [(-)ES, m/z]: 239,1 [M-H]+

Anal. Calc.. para Ci6Hi6O2: C 79,97; H 6,71. Verificado: C 79,71; H 6,70

ETAPA C: (5H,10)-[(2,2',6'-Trimetil-1,1'-bifenil-4-il) carbonil]-10,11-diidro- 5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina

O ácido 2,2',6'-trimetil-bifenil-4-carboxílico da ETAPA B (11,4 g, 47,4 mmol) foi agitado com 35 mL (479 mmol) de cloreto de tionila, e aquecido até 70°C por 3 horas. O cloreto de tionila em excesso foi removido sob vácuo com o auxílio de tolueno. O cloreto de ácido bruto foi dissolvido em diclorometano (100 ml) e uma solução de 10,1 l-diidro-5H-pirrol[2,l- c][l,4]benzodiazepina (12,23 g, 47,4 mmol) em diclorometanol (50 ml) foi adicionada em gotas. Após agitação durante a noite à temperatura ambiente, a mistura foi lavada com água, ácido clorídrico 1 N, bicarbonato de sódio aquoso saturado, e salmoura, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada. Cromatografia por vaporização instantânea do resíduo em sílica gel Merck 60 usando um gradiente de 1:1 a 4:1 de diclorometano em hexano deu o composto puro do título que foi recristalizado a partir de etanol aquoso como placas translúcidas finas. m.p. 170-171 °C.

MS [(+)ES, m/]: 407,2 [M+H]+

Anal. Cale. para C28H26N2O - 0,15 H2O: C 82,18, H 6,48, N 6,85. Verificado: C 82,28, H 6,32, N 6,76,

ETAPA D: 2,2,2-Tricloro-l-{ lO-P^^Ó^-trimetil-Ur-bifeniM-iOcarbonil]- 10,1 l-diidro-5H-pirrol[2,l-c][l,4]benzodiazepin-3-il}etanona 0,15 água

A uma solução de (5H, 10)-[(2,2',6'-trimetil-l,l'-bifenil-4- il)carbonil]-10,l l-diidro-5H-pirrol[2,l-c][l,4]benzodiazepina da ETAPA C (7,934 g, 19,5 mmol,) em diclorometano (160 mL) foi adicionado cloreto de tricloroacetil (11 g, 60,5 mmol, 3,1 eq,), Ν,Ν-diisopropiletil amina (5,54g, 43 mmol, 2,2 eq) e 4-(dimetilamino) piridina (10 mol %). A mistura foi agitada por 16,5 horas à temperatura ambiente, então resfriada bruscamente com água (100 ml) e agitada por 1 hora. A camada orgânica foi lavada com ácido clorídrico IN e salmoura, seca sobre sulfato de magnésio anidro, e concentrada até uma espuma amarela.

MS [(+)ES, mlz]: 551,1 [M+H]+

Anal, Calc.. para, C30H25Ci3N2O2 - H20: C 64,97, N 4,60, H, 5,05. Verificado: C 64,79, H 4,97, H 4,58.

EXEMPLO 4

N- [(5 -Metilisoxazol-3 -il)metil] -10-[(2,2',6'-trimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]- 10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 2 começando de 2,2,2-tricloro-l-{10-[(2,2',6'- trimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11 diidro-5H-pirrol[2,1 - c][l,4]benzodiazepin-3-il}etanona do Exemplo 3 (1,8 g, 3,26 mmol), (5- metil-3-isoxazolil)metilamina (0,305 g, 2,7 mmol), dimetilsulfóxido (1,06 g, 13,6 mmol), e trietilamina (0,605 g, 6 mmol) em 20 ml de acetonitrila. O resíduo foi cromatografado por vaporização instantânea em sílica Merck-60 usando um gradiente de 0 a 35% de acetato de etila em diclorometano, para fornecer uma espuma laranj a-amarela. Recristalização a partir de acetato de etila / diclorometanol / hexano deu um pó branco (0,334 g). m.p. 233-234 C. MS [(+)ESI, m/z]: 545,2 [M+H]+

Anal. Calc.. para C34H32N4O3 .0,15 C6Hi0O2: C 74,49, H 6,00, N 10,04. Verificado: C 74,46, H 6,11, N 10,06.

EXEMPLO 5

10- [(2'-Metoxi-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil] -N- [(5 -metilisoxazol-3 -il)metil] - 10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 2 começando de 2,2,2-tricloro-l-{10-[(2'-metoxi-

I,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3- iljetanona do Exemplo 1 (1,483 g, 2,75 mmol), (5-metil-3- isoxazolil)metilamina (0,256 g 1,0 eq), dimetilsulfóxido (5,0 eq,0,896 g,

II,45 mmol), e trietilamina (2,2 eq , 0,510 g, 5 mmol) em 20 mL de acetonitrila. O resíduo foi absorvido em sílica gel Merck-60 e cromatografado por vaporização instantânea usando um gradiente de 0 a 20% de acetato de etila em diclorometano, para fornecer uma espuma (0,460 g) que produziu um sólido branco sujo no tratamento com acetato de etila/ hexano. m.p. 111- 113°C

MS [(+)ESI, m/z]: 533,12 [M+H]+

Anal. Cale. para C32H28N4O4: C 72,17, H 5,30, N 10,52, Verificado: C 71,85, H 5,27, N 10,25. EXEMPLO 6

N- [(2,5 -Dimetil-3 -furil)metil] -10-[(2'-metoxi-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11- diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 2, começando de 2,5-dimetil-3-furil)metilamina (0,264 g, 2,1 mmol), 2,2,2-ίπΰ1θΓθ1-{10-[(2'^6ίοχΐ-1,1'-Ηί6ηί1-4- il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3-il} etanona do Exemplo 1 (1,138 g, 2,1 mmol), trietilamina (0,470 g, 2,2 eq, 4,6 mmol) e dimetilsulfóxido (l,lg, 5,0 eq, 10,5 mmol) em 20 mL de acetonitrila. Cromatografia por vaporização instantânea do resíduo em sílica Merck-60 usando uma eluição de gradiente de 30 a 45% acetato de etila em hexano deu um pó branco (0,453 g). Outra purificação foi alcançada por HPLC prep, Primesfere Q8, coluna 2 X 25 cm, 68% acetonitrila em água contendo ácido trifluoroacético, 100 ml/min, detecção 254 nm. As frações puras foram neutralizadas com hidróxido de amônio e evaporadas até um sólido amorfo (0,153 g).

MS [(+)ESI, m/z]: 546,2 [M+H]+

MS [(-)ESI, m/z]: 544,2 [M-H]"

EXEMPLO 7

N-[(4-Benzilmorfolin-2-il)metil]-1 0-[(2'-metoxi-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]- 10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 2 começando de 2,2,2-tricloro-l-{10-[(2'-metoxi- 1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3- il}etanona de Exemplo 1 (0,619 g, 1,15 mmol ), (4-benzil-l,4-oxazinan-2-il)- metilamina (01,97 g, 0,955 mmol), dimetilsulfóxido (0,374 g, 4,8 mmol), e trietilamina (0,213 g, 2,1 mmol) em 15 mL de acetonitrila. O resíduo foi adsorvido em sílica Merck-60 e purificado por cromatografia por vaporização instantânea (0-75% acetato de etila em diclorometano) para fornecer um sólido branco sujo (0,241 g). m.p. 180-182 °C.

MS [(+)ESI, m/z]: 627,19 [M+H]+

Anal. Cale. para C39H38N4O4: 0,35 C5Hi0O2: C 73,79, H 6,25, N 8,52. Verificado: C 73,62, H 6,07, N 8,55.

EXEMPLO 8

N-[(1 -Metil-1 H-pirrol-2-il)metil]-10-[(2,2',6,-trimetil-1,1 '-bifenil-4- il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida O composto do título foi preparado de acordo com o procedimento do Exemplo 2 começando de 2,2,2-tricloro-1 -{10-[(2,2',6'- trimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,11 diidro-5H-pirrol[2,1 - c][l,4]benzodiazepin-3-il}etanona do Exemplo 3 (1,4 g, 2,5' mmol), (1-metil- 1 H-pirrol-2-il)metilamina (0,234 g, 2,1 mmol), dimetilsulfóxido (0,822 g, 10,5 mmol) e trietil amina ( 0,470 g, 4,6 mmol) em 15 mL de acetonitrila. Cromatografia por vaporização instantânea do resíduo em sílica gel Merck-60 (025% acetato de etila em diclorometano) deu uma espuma (0,924 g) que solidificou no tratamento com acetato de etila/hexano/diclorometano, mp, 222-224 °C.

MS [(+)ESI, m/z]: 543,3 [M+H]+ ; [(-)ESI, mz]: 541,3 [M-H]-

EXEMPLO 9

2,2,2-Tricloro-1 - {10-[(2,2,-dimetil-1,1 ,-bifenil-4-il)carbonil] -10,11 -diidro- 5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3-il} etanona

ETAPA A. 2,2-dimetil-1,1 '-bifenil-4-carboxilato de metil

Uma mistura de 4-bromo-3-metilbenzoato de metil (25,0 g, 110 mmol), ácido o-tolilborônico (16,5 g, 120 mmol) e carbonato de potássio (50 g, 360 mmol) em dioxano : água (300 mL : 200 mL) foi purgada com nitrogênio por 1 hora, [1,1' - bis (Difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio [II] (4,5 g, 5,5 mmol) foi adicionado e a mistura de reação aquecida até 100 0C com agitação vigorosa por 3,5 horas. A mistura de reação resfriada foi filtrada através de Celite e a torta lavada com acetato de etila (500 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com hidróxido de sódio aquoso 1 M (500 mL) e salmoura (500 mL), secas sobre carbonato de potássio anidro, filtradas e concentradas ín vácuo para produzir um óleo escuro (28,6 g). Purificação por cromatografia por vaporização instantânea usando 2 % acetato de etila em hexanos como solvente forneceu o composto do título (24,7 g) como um óleo amarelo pálido.

HRMS. Cale. para C16H17O2: 241,12231. Verificado [(+)ESI, m/z]: 241,12205. Anal. Cale. para Cj6H16O2: C 79,97, H 6,71, Verificado: C 79,67, H, 6,61.

ETAPA B. Acido 2,2'-Dimetil-bifenil-4-carboxílico

A uma solução de 2,2'-dimetil-l,r-bifenil-4-earboxilato de metil da ETAPA A (24,7 g, 103 mmol) em 5 : 1 tetraidrofurano : metanol (200 mL) foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 1 M (108 mL, 108 mmol). A mistura de reação aquecida em refluxo por 1 hora, resfriada e então concentrada in vácuo para remover solventes orgânicos. A solução aquosa resultante foi resfriada até 0 0C e ácido clorídrico aquoso 2 M (60 mL, 120 mmol) adicionado vagarosamente, seguido por água (60 mL) para facilitar a agitação do produto precipitado. A suspensão foi agitada por 1 h a 0 °C, depois filtrada para produzir o composto do título (22,6 g) como um sólido branco, m. p. 140-143 °C.

MS [(+)ESI, m/z]: 225 [M-H]". ETAPA C. (10,11 -Diidro-5H-pirrolo[2,1 -c] [ 1,4] benzodiazepin-10-il)-(2,2'- dimetilbifenil-4-il)-metanona

A uma suspensão de ácido 2,2'-dimetil-bifenil-4-carboxílico da ETAPA B (22,4 g, 99,0 mmol) em diclorometano seco (500 mL) à temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada N, N-dimetilformamida seca (5 mL) seguida pela adição em gotas solução 2,0 M de cloreto de oxalila em diclorometano (60 mL, 120 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas, depois concentrada in vácuo, e o resíduo redissolvido em diclorometano seco (200 mL). A solução foi concentrada in vácuo para produzir o cloreto de ácido bruto como um óleo marrom. O cloreto de ácido foi dissolvido em diclorometano (500 mL), 10,ll-diidro-5H- pirrol[2,lc][l,4]benzodiazepina (21,9 g, 119 mmol) foi adicionada, seguida por N,N-diisopropiletilamina (87 mL, 500 mmol) e a mistura de reação agitada à temperatura ambiente sob nitrogênio for 16 horas. A mistura de reação foi então lavada com ácido clorídrico aquoso 1 M (5 χ 1 L), 10% hidróxido de sódio aquoso (1 L) e salmoura (500 mL), seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada in vácuo para dar uma espuma escura. Purificação por cromatografia por vaporização instantânea usando um gradiente de solvente de 2,5 a 40% acetato de etila em hexano deu um sólido queimado que foi recristalizado a partir de acetato de etila/hexano para produzir o composto do título (12,4 g) como um sólido laranja pálido. A purificação dos licores-mãe por cromatografia por vaporização instantânea produziu composto do título adicional (11,5 g) como um sólido branco, m.p. 145-148°C.

MS [(+)ESI, m/z]: 393 [M+H]+,

Anal. Cale. para C27H24N2O: C 82,62, H 6,16, N 7,14, Verificado: C 82,26, H 5,83, N 6,50.

ETAPA D. 2,2,2-Tricloro-1 - {10-[(2,2'-dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]- 10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepin-3-il} etanona

A uma solução de (10,1 l-diidro-5H-pirrol[2,1- c] [ 1,4]benzodiazepina-10-il)-(2,2'-dimetil-bifenil-4-il)-metanona da ETAPA C (8,38 mmol) e trietilamina (16,76 mmol) em diclorometano (30 mL) a -5 C foi adicionado, rapidamente em gotas, cloreto de tricloroacetil (25 mmol). A mistura foi deixada agitar e aquecer até a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi lavada com ácido clorídrico 0,1 N e salmoura diluída, depois seca sobre sulfato de sódio anidro, e evaporada para deixar um óleo verde claro. O composto foi purificado por filtração sobre um tampão de sílica gel 60 da Merck eluindo com diclorometano e depois tratado com acetato de etila / hexano quente (3/1) para produzir um sólido cristalino amarelo claro, m.p. 212-214 °C.

MS [(+)(ESI, m/z]: 537 [M+H]+

Anal. Cale. para C29H23C13N2O2: C 64,76, H 4,31, N 5,21,

Verificado: C 64,70, H 4,35, N 4,96.

EXEMPLO 10 10-[(2,2'-Dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-N- {[5-(4-metoxifenil)-1,2,4-- oxadiazol-3 -il]metil} -10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [1,4]benzodiazepina-3- carboxamida

ETAPA A. [5-(4-Metoxifenil)-l,2,4-oxadiazol-3-il] metilamina

A uma solução de 3-clorometil-5-(4-metoxi-fenil)-[ 1,2,4]- oxadiazol (8,90 mmol) em N,N-dimetilformamida (10 mL) foi adicionada azida de sódio (17,8 mmol). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 horas. A mistura de reação foi despejada em água (30 mL) e extraída com diclorometano (3x). Os extratos orgânicos combinados foram combinados e lavados com água (2x), secos sobre sulfato de sódio anidro, e evaporados. Depois, um resíduo oleoso claro foi colocado sob alto vácuo e gentilmente aquecido por 18 horas. No resfriamento, o material solidificou. Este sólido foi dissolvido em tetraidrofurano (15 mL) e tratado com trifenilfosfina (9,0 mmol). Borbulhamento foi imediatamente evidente. Esta mistura foi agitada por 16 horas e então tratada com água (3,0 mL). Esta foi aquecida em um banho de óleo a 45 0C por 3 horas. O produto foi purificado por cromatografia por vaporização instantânea (sílica gel; 2:1 éter/diclorometano). m.p. 66-68 °C.

MS [(+)(ESI, m/z]: 206 [M+H]+

Anal. Cale. para C10HnN3O2, C 58,53, H 5,40, N 20,48, Verificado: C 58,5, H 5,38, N 20,59.

ETAPA Β. 10-[(2,2'-Dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-N-{[5-(4-metoxifenil)- 1,2,4-oxadiazol-3-il]metil} -10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina- 3-carboxamida

Uma mistura de 2,2,2-tricloro-1 - {10-[(2,2'-dimetil-1,1 '-bifenil- 4-il)carbonil] 10,1 l-diidro-5H-pirrol[2,l-c][l,4]benzodiazepin-3-il}etanona do Exemplo 9 (0,26 mmol), dimetilsulfóxido (100 uL) e [5-(4-metoxifenil)-1,2,4- oxadiazol-3-il]metilamina da ETAPA A (0,546 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi aquecida a 85°C por 16 horas. Após o resfriamento, o solvente foi evaporado, e o resíduo foi tomado em diclorometano (10 ml). Este foi lavado com água (2x), seco sobre sulfato de sódio anidro, e evaporado. O resíduo foi purificado por HPLC (fase Normal, enchimento ligado a Luna CN) e cristalizado a partir de acetato de etila/hexano. m.p. 133-135 °C.

MS [(+) ESI5 m/z]: 622 [M+H]+

Anal. Cale. para C38H33N5O4: C 73,18, H 5,33, N 11,23, Verificado: C 71,95, H 5,64, N 11,52.

EXEMPLO 11

N- {[2-(4-Clorofenil)-1,3-tiazol-4-il]metil} -10-[(2,2'-dimetil-1,1 '-bifenil-4- il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol [2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

ETAPA A. 2-(4-Clorofenil)-l,3-tiazol-4-il]metilamina

O composto do título foi preparado a partir de 4-clorometil-2- (4-cloro-fenil) tiazol de acordo com o procedimento do Exemplo 10, ETAPA

A. m.p. 61-64 °C.

MS [(+)ESI, m/z]: 225 [M+H]+

Anal. Cale. para Ci0H8ClN2S: C 53,45, H 4,04, N 12,47,

Verificado: C 53,57, H 4,05, N 12,45.

ETAPA B. N-{[2-(4-Clorofenil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-10-[(2,2'-dimetil-1,1'- bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [1,4]benzodiazepina-3~ carboxamida

O composto do título foi sintetizado de 2,2,2-tricloro-l-{10- [(2,2'-dimetil-1,1 'bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 - c] [ 1,4]benzodiazepin-3-il} etanona do Exemplo 9 e 2-(4-cloro-fenil)-tiazol-4- il]-metilamina da ETAPA A de acordo com o procedimento do Exemplo 10,

ETAPA B. m.p. 198-201 °C,

MS [(+)ESI, m/z]: 641 [M+H]+

EXEMPLO 12

10-[(2,2'-Dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-N-(piperidin-3-ilmetil)-10,11- diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida ETAPA Α. 3- {[( {10-[(2,2'-dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil]-10,1 diidro-5H- pirrol [2,1 -c] [ 1,4] benzodiazepin-3 -il} carbonil)amino]metil} piperidina-1 - carboxilato de terc-Butil

A uma suspensão de 2,2,2-tricloro-l-{10-[(2,2'-dimetil-l,r- bifenil-4-il)carbonil]-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1-c] [ 1,4] benzodiazepin-3 -

il}etanona do Exemplo 9 (0,54 g, 1,0 mmol) e terc-butil éster do ácido 3- aminometil-piperidina-l-carboxílico (0,43 g, 2,0 mmol) em acetonitrila seca (5 mL) foi adicionado dimetilsulfóxido (0,35 mL, 4,9 mmol) e a mistura de reação aquecida até 80°C sob nitrogênio por 3 dias. A mistura resfriada de reação foi diluída com diclorometano (25 mL), lavada com água (2 χ 25 mL) e salmoura (25 mL), seca sobre carbonato de potássio anidro, filtrada e concentrada in vácuo para produzir um óleo marrom (0,819). Purificação por cromatografia por vaporização instantânea usando um gradiente de solvente de 3 a 20% de acetato de etil em diclorometano deu o composto do título (0,45 g) como uma espuma branca. HRMS. Cale. para C39H45N4O4: 633.34354, Verificado [(+)ESI, m/z]: 633,34262.

ETAPA B. 10-[(2,2'-Dimetil-1,1 '-bifenil-4-il)carbonil[]-N-(piperidin-3- ilmetil)-10,11 -diidro-5H-pirrol[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepina-3-carboxamida

A uma solução de 3-{[({10-[(2,2'-dimetil-l,l'-bifenil-4- il)carbonil] 10,1 rdiidro-5H-pirrol[2,l-c][l,4]benzodiazepin-3-il}carbonil) amino]metil}piperidina-l-carboxilato de terc-butil da ETAPA A (0,42 g, 0,66 mmol) em diclorometano seco (3 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,51 mL, 6,6 mmol) e a mistura de reação agitada à temperatura ambiente sob nitrogênio for 20 horas. A mistura de reação foi então diluída com diclorometano (50 mL), lavada com hidróxido de sódio 1 M (50 mL) e salmoura (50 mL), seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada in vácuo para produzir um vidro rosa. Purificação por cromatografia por vaporização instantânea usando um gradiente de solvente de 2,5 a 10% metanol saturado com amônio em diclorometano deu um óleo amarelo pálido (0,31 g).

Cristalização de dietil éter (2 mL) produziu o composto do título (0,19 g) como uma um sólido amarelo pálido.

HRMS. Cale. for C34H37N4O2. 533,29111. Verificado [(+)ESI, m/z]: 533,29102.

Todas as referências, incluindo, mas não limitadas a, artigos, textos, patentes, pedidos de patente, e livros, citadas aqui, são incorporadas aqui como referência.

Claims

1. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser da fórmula I: <formula>formula see original document page 73</formula> em que R1 e R2 são independentemente selecionados de hidrogênio, (C1-C6) alquil, halogênio, ciano, trifluorometila, hidroxila, (C1-C6) alcoxi, - OCF3, carboxi, (C1-C6 alcoxi)carbonil, -CONH2, -CONH[(C1-C6) alquil], - CONf(C1-C6) alquil]2, amino, (C1-C6) alquilamino ou -NHCO[(C1-C6) alquil]; R3 é um substituinte selecionado de hidrogênio, (C1-C6) alquil, (C1-C6) alcoxi, hidroxi, amino, (C1-C6) alquilamino, -C(0)(C1-C6)alquil, ou halogênio; Bé <formula>formula see original document page 73</formula> onde Q é <formula>formula see original document page 73</formula> em que R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são independentemente selecionados do grupo que consiste de hidrogênio, alquil, (C1-C6)alquil, alcoxi, (C1-C6) alcoxi, hidroxialquil, hidroxi(C1-C6) alquil, alquiloxialquil, (C1- C6)alcoxi(C1-C6)alquil, (C2-C7) aciloxi (C1-C6)alquil, (CrC6alquil) carbonil, (C2-C6) alquenil, (C2-C6) alquinil, (C3-C8) cicloalquil, formil, (C3- C8)cicloalquilcarbonil, carboxi, (C1-C6)alcoxicarbonil, (C3C8-Cicloalquil) oxicarbonil, aril(Ci-C6)alquiloxicarbonil, carbamoil,-O-CH2- CH=CH2, (C1- C6)alquil substituído com 1-3 átomos de halogênio, trihalometil, trifluorometila, halogênio, OCF3, tioalquil, tio(C1-C6) alquil, -C(O) alquil, - C(0)aril opcionalmente substituído com alquil; hidroxi, -CH(OH)alquil, - CH(alcoxi)alquil, nitro, -S02alquil, (C1-C6) alquilsulfonil, aminosulfonil, (C1- C6) alquilaminosulfonil, -SO2NHRii, -SO2N(Rn)2, - OC (O) N [(Cf C6)alquil]2, -CONH [(C1-C6) alquil], -CON [(C1-C6) alquil]2,-(CH2)pCN, (C1- C6) alquilamino, di-(C1-C6) alquilamino, (C1-C6) alquil di-(C1-C6) alquilamino, -(CH2)pNR13Ri4, -(CH2)pCONR13R14, -(CH2)pCOOR12, - CH=NOH, -CH=NO-(C1-C6) alquil, trifluorometiltio, <formula>formula see original document page 74</formula> R11 e R12 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-C8 cicloalquil, ou (C1-C6) alquil; R13 e R14 são, cada um, independentemente, hidrogênio, C3-C8 cicloalquil, ou (C1-C6) alquil, ou R13 e R14 podem ser tomados juntamente com o nitrogênio ao qual eles estão ligados para formar um anel saturado com de 4 a 6 membros contendo O, S ou N; ρ é O ou 1; R é a parte <formula>formula see original document page 74</formula> R15 é hidrogênio ou (C1-C6) alquil; Z tem a fórmula -L-M; L tem a fórmula <formula>formula see original document page 74</formula> em que t é um número inteiro de 1 a 2; R16 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ou (C1- C6) alquil, M é selecionado do grupo que consiste de <formula>formula see original document page 75</formula> em que R17 e R18 são, independentemente, um aril opcionalmente substituído; R19, R20, R21 e R22 são, cada um, independentemente, (C1-C6) alquil; R23 é alquil, C1-C6 alquil, ou um (C6-C20) aralquil opcionalmente substituído.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R15 e R16 são, cada um, hidrogênio; e t é 1.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que M é selecionado do grupo que consiste de

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que M é selecionado do grupo que consiste de <formula>formula see original document page 75</formula>

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que B tem a fórmula: <formula>formula see original document page 76</formula>

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 5, caracterizado pelo fato de que R1, R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a Fórmula: <formula>formula see original document page 76</formula> ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que R5 é selecionado dentre H, e C1-C3 alquil.

9. Composto de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que Rg e Rg são independentemente selecionados dentre H, C1-C3 alquil, e CrC3 alcoxi.

10. Composto de acordo com a reivindicação 1, 2 ou qualquer uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 76</formula> em que R17 é um aril opcionalmente substituído.

11. Composto de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que R17 é um fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi e halogênio.

12. Composto de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o dito C1-C3 alcoxi do dito R17 é metoxi.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado ou qualquer uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 77</formula>

14. Composto da Formula 1 de acordo com a reivindicacao 1, 2 ou qualquer uma das reivindicacoes 5 a 9, caracterizado pelo de que M e <formula>formula see original document page 77</formula> em que R19 é um aril opcionalmente substituído; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que R18 é um fenil, opcionalmente substituído com de 1 a 3 substituintes selecionados dentre C1-C3 alquil, C1-C3 alcoxi e halogênio.

16. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o dito halogênio é cloro.

17. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela fato de que tem a seguinte formula: <formula>formula see original document page 78</formula>

18. Composto de acordo com a reivindicacao 1, 2 ou qualquer uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 78</formula> em que R19 é um C1-C6 alquil; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Composto de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que Ri 9 é metil.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula: <formula>formula see original document page 78</formula>

21. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 79</formula>

22. Composto de acordo com a reivindicação 1,2 ou qualquer uma das reivindicaçãos 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M e em que R20 é um C1-C6 alquil; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

23. Composto de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que R20 é metil.

24. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula:

25. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte formula: <formula>formula see original document page 80</formula>

26. Composto de acordo com a reivindicacao 1, 2 ou qualquer uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 80</formula> em que R-21 e R22 são, cada um, independentemente, um C1-C6 alquil;

27. Composto de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que R21 e R22 são iguais.

28. Composto de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que R21 e R22 são, cada um, metil.

29. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula: <formula>formula see original document page 81</formula>

30. Composto de acordo com a reivindicacao 1,2 ou qualquer uma das reivindicacoes 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 81</formula>

31. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte formula: <formula>formula see original document page 81</formula>

32. Composto de acordo com a reivindicacao 1, 2 ou qualquer uma das reivindicacoes 5 a 9, caracterizado pelo fato de que M é <formula>formula see original document page 81</formula> em que R23 é um C7-C20 aralquil opcionalmente substituído.

33. Composto de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que R23 é benzil.

34. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte formula: <formula>formula see original document page 82</formula>

35. Metodo para a preperacao de um composto como definido na reivindicacao 1,caracterizado pelo fato de que compreende: reagir um composto de tricloroacetil da fórmula (2) <formula>formula see original document page 82</formula> em uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) <formula>formula see original document page 82</formula> sob condições suficientes para produzir um composto da Fórmula (I).

36. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de 1,4-dioxano, dimetilsulfóxido ou ambos.

37. Método de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica.

38. Método de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é uma amina terciária.

39. Método de acordo com a reivindicação 38, caracterizado pelo fato de que a dita amina terciária é trietil amina ou N5N- diisopropiletilamina.

40. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações -27 a 39, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada em um solvente.

41. Método de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de que o dito solvente é acetonitrila.

42. Método de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada em uma temperatura de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente.

43. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o dito composto de tricloroacetil da fórmula (2) é preparado pela: reação de uma azepina tricíclica da fórmula (1) <formula>formula see original document page 83</formula> com um halogeneto de per-haloalcanoil sob condições suficientes para fornecer o composto de tricloroacetil da fórmula (2).

44. Método de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que o dito halogeneto de per-haloalcanoil é cloreto de tricloroacetil.

45. Método de acordo com a reivindicação 43 ou 44, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica em um solvente orgânico aprótico.

46. Método de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é Ν,Ν-diisopropiletil amina.

47. Método de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o dito solvente orgânico aprótico é diclorometano ou 1,4- dioxano.

48. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 45 a 47, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada em uma temperatura de cerca de -10°C até a temperatura ambiente.

49. Método para a preparação de um composto da Fórmula I como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende: acoplar um composto da Fórmula (4) <formula>formula see original document page 84</formula> onde W é OH ou halogênio; com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) <formula>formula see original document page 84</formula> sob condições suficientes para produzir um composto da Fórmula (I) como definido na reivindicação 1.

50. Método de acordo com a reivindicação 49, caracterizado pelo fato de que W é Cl ou Br.

51. Método de acordo com a reivindicação 50, caracterizado pelo fato de que o acoplamento do halogeneto de acila da fórmula (4) com a amina substituída da fórmula (3) é realizada na presença de uma amina terciária em um solvente aprótico.

52. Método de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que o dito solvente aprótico é diclorometano, Ν,Ν- dimetilformamida, ou tetraidrofurano; e a amina terciária é N5N- diisopropiletilamina.

53. Método de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que o acoplamento do halogeneto de acila da fórmula (4) com a amina substituída da fórmula (3) é realizado em uma temperatura de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente.

54. Método de acordo com a reivindicação 49, caracterizado pelo fato de que W é OH.

55. Método de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que o dito acoplamento compreende: reagir o dito ácido carboxílico (4) com uma amina primária ou secundária da fórmula (3) na presença de pelo menos um dentre um reagente de ativação ou um reagente de acoplamento sob condições suficientes para produzir um composto da fórmula (I).

56. Método de acordo com a reivindicação 55, caracterizado pelo fato de que o dito agente de ativação é selecionado de: trifosgênio em um solvente aprótico N,N,dicloroexilcarbodiimida ou hidrocloreto de l-etil-3-(3- dimetilamino-propil)carbodiimida na presença de 1-hidroxi benzotriazol; ou Ν,Ν'-carbonildiimidazol em um solvente aprótico.

57. Método de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica.

58. Método de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é uma amina terciária.

59. Método de acordo com a reivindicação 57, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é N,N-diisopropiletilamina.

60. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações -57 a 59, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada na presença de um catalisador.

61. Método de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que o dito catalisador é 4-(dimetilamino)piridina.

62. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 55 a 61, caracterizado pelo fato de que o dito reagente de acoplamento é selecionado dentre hidroxibenzotriazol tetrametilurônio hexafluorofosfato, difenilfosforil azida, dietil ciano fosfonato, ou benzotriazol-l-il-oxi-tris- (dimetilamino) fosfônio hexafluorofosfato.

63. Método de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que o dito composto da Fórmula 4, em que W é Cl ou Br, é preparado pela conversão de um composto da Fórmula 4, em que W é OH.

64. Método de acordo com a reivindicação 54, caracterizado pelo fato de que a dita conversão compreende: reagir o dito composto da Fórmula 4, em que W é OH com halogeneto de tionila ou um halogeneto de oxalila.

65. Método de acordo com a reivindicação 64, caracterizado pelo fato de que a dita conversão ocorre na presença de pelo menos uma base inorgânica e de uma base orgânica em um solvente aprótico.

66. Método de acordo com a reivindicação 65, caracterizado pelo fato de que a dita base inorgânica é carbonato de potássio.

67. Método de acordo com a reivindicação 65, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é piridina, 4-(dimetilamino)piridina, ou uma amina terciária.

68. Método de acordo com a reivindicação 67, caracterizado pelo fato de que a dita amina terciária é trietilamina.

69. Método de acordo com a reivindicação 65, caracterizado pelo fato de que o dito solvente aprótico é diclorometano, N,N- dimetilformamida ou tetraidrofurano.

70. Método de acordo com a reivindicação 65, caracterizado pelo fato de que a dita conversão é realizada em uma temperatura de cerca de -5°C a cerca de 50°C.

71. Método para a preparação de um composto da Fórmula I como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende: reagir uma diazepina tricíclica da fórmula (1) <formula>formula see original document page 87</formula> com um difosgênio e uma amina primária ou secundária da fórmula (3) <formula>formula see original document page 87</formula> em um solvente aprótico sob condições suficientes para produzir um composto da Fórmula (I).

72. Método de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que o dito solvente é diclorometano.

73. Método de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica.

74. Método de acordo com a reivindicação 73, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é trietilamina.

75. Método de a preparação de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende: eagir um composto de tricloroacetil da fórmula (26) <formula>formula see original document page 88</formula> onde Pg é um grupo de proteção, com uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) sob condições suficientes para produzir uma amida intermediária da Fórmula (27) <formula>formula see original document page 88</formula>

76. Método de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que Pg é selecionado do grupo que consiste de um fluorenil alcoxi carbonil e um alcoxi carbonil.

77. Método de acordo com a reivindicação 76, caracterizado pelo fato de que Pg é fluorenil metiloxi carbonil.

78. Método de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que Pg é terc-butiloxi carbonil.

79. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações -75 a 78, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de -1,4-dioxano, dimetilsulfóxido, ou ambos.

80. Método de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica.

81. Método de acordo com a reivindicação 80, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é uma amina terciária.

82. Método de acordo com a reivindicação 81, caracterizado pelo fato de que a dita amina terciária é trietilamina ou N,N- diisopropiletilamina.

83. Método de acordo com a reivindicação 80, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada em um solvente.

84. Método de acordo com a reivindicação 83, caracterizado pelo fato de que o dito solvente é acetonitrila.

85. Método de acordo com a reivindicação 84, caracterizado pelo fato de que a reação é realizada em uma temperatura de cerca da temperatura ambiente até a temperatura de refluxo do solvente.

86. Método de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que também compreende desproteger a amida intermediária da fórmula (27) sob condições suficientes para produzir um intermediário da fórmula (28) <formula>formula see original document page 89</formula>

87. Método de acordo com a reivindicação 88, caracterizado pelo fato de que também compreende a acilação do intermediário da fórmula (28) sob condições suficientes para produzir um composto da fórmula I.

88. Método de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que o dito composto de tricloroacetil da fórmula (26) é preparado por: reação de uma azepina tricíclica da fórmula (1) <formula>formula see original document page 90</formula> onde Pg é um grupo de proteção, com halogeneto de per- haloalcanoil sob condições suficientes para fornecer o composto de tricloroacetil desejado da fórmula (26).

89. Método de acordo com a reivindicação 88, caracterizado pelo fato de que o dito halogeneto de per-haloalcanoil é cloreto de tricloroacetil.

90. Método de acordo com a reivindicação 88 ou 89, caracterizado pelo fato de que a dita reação ocorre na presença de uma base orgânica em um solvente orgânico aprótico.

91. Método de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que a dita base orgânica é Ν,Ν-diisopropiletil amina.

92. Método de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que o dito solvente aprótico é diclorometano ou 1,4-dioxano.

93. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 88 a 92, caracterizado pelo fato de que a dita reação é realizada em temperaturas de cerca de -10°C até a temperatura ambiente.

94. Método para a preparação de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende: a reação de um composto da fórmula (28) <formula>formula see original document page 91</formula> onde Pg é um grupo de proteção, com uma base aquosa, e remoção de Pg para produzir um intermediário da fórmula (29) <formula>formula see original document page 91</formula>

95. Método de acordo com a reivindicação 94, caracterizado pelo fato de que também compreende tratar o intermediário da fórmula (29) com um agente de ativação e uma amina primária ou secundária apropriadamente substituída da fórmula (3) RH (3) sob condições suficientes para produzir um intermediário da Fórmula (28) <formula>formula see original document page 91</formula>

96. Método de acordo com a reivindicação 95, caracterizado pelo fato de que também compreende acilar o intermediário da fórmula (28) sob condições suficientes para produzir um composto da fórmula I.