BRPI0618136A2 - análogos de diazonamida a, conjungado, composição farmacêutica, uso e método para sintetizar os mesmos - Google Patents
análogos de diazonamida a, conjungado, composição farmacêutica, uso e método para sintetizar os mesmos Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0618136A2 BRPI0618136A2 BRPI0618136-8A BRPI0618136A BRPI0618136A2 BR PI0618136 A2 BRPI0618136 A2 BR PI0618136A2 BR PI0618136 A BRPI0618136 A BR PI0618136A BR PI0618136 A2 BRPI0618136 A2 BR PI0618136A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- formula
- compound
- added
- original document
- document page
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 title claims description 4
- 229930188453 diazonamide Natural products 0.000 title description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 112
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 30
- -1 activated (S) -2-hydroxy-3-methylbutanoic acid ester Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 4
- NGEWQZIDQIYUNV-UHFFFAOYSA-N L-valinic acid Natural products CC(C)C(O)C(O)=O NGEWQZIDQIYUNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- NGEWQZIDQIYUNV-BYPYZUCNSA-N (S)-2-hydroxy-3-methylbutyric acid Chemical compound CC(C)[C@H](O)C(O)=O NGEWQZIDQIYUNV-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- YKBUODYYSZSEIY-PLSHLZFXSA-N diazonamide a Chemical class N([C@H]([C@]12C=3O4)O5)C6=C2C=CC=C6C(C2=6)=CC=CC=6NC(Cl)=C2C(=C(N=2)Cl)OC=2C=3N=C4[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](O)C(C)C)CC2=CC=C5C1=C2 YKBUODYYSZSEIY-PLSHLZFXSA-N 0.000 abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 37
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 23
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 23
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 23
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 23
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 15
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 14
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 13
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 4
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OALVLUFFPXEHFO-UHFFFAOYSA-N Diazonamide A Natural products O1C=2C34C(O)OC5=C3C=CC=C5C(C3=5)=CC=CC=5NC(Cl)=C3C(=C(N=3)Cl)OC=3C=2N=C1C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(N)C(C)C)CC1=CC=C(O)C4=C1 OALVLUFFPXEHFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 3
- SYZWSSNHPZXGML-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;oxolane Chemical compound ClCCl.C1CCOC1 SYZWSSNHPZXGML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- RDSVSEFWZUWZHW-UHFFFAOYSA-N 7-bromo-1h-indole Chemical compound BrC1=CC=CC2=C1NC=C2 RDSVSEFWZUWZHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N Heroin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)OC(C)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4OC(C)=O GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002927 anti-mitotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000001210 effect on neutrophils Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 125000003808 silyl group Chemical group [H][Si]([H])([H])[*] 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphane oxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)(=O)C1=CC=CC=C1 FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 2
- MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- NDTIXHNCNLKURN-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) trifluoromethanesulfonate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OS(=O)(=O)C(F)(F)F)C=C1 NDTIXHNCNLKURN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORPVVAKYSXQCJI-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-2-nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1Br ORPVVAKYSXQCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZNVUJQVZSTENZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(C#N)=C(C#N)C1=O HZNVUJQVZSTENZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TZHTUVZZNLKONV-UHFFFAOYSA-N 2-acetamido-3-(7-bromo-1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C)C(O)=O)=CNC2=C1Br TZHTUVZZNLKONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIRNGXDEBMGLJR-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-(7-hydroxy-1h-indol-3-yl)ethanone;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2C(C(=O)CN)=CNC2=C1O UIRNGXDEBMGLJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGEWQZIDQIYUNV-UHFFFAOYSA-M 2-hydroxy-3-methylbutyrate Chemical compound CC(C)C(O)C([O-])=O NGEWQZIDQIYUNV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XXYNZSATHOXXBJ-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxyisoindole-1,3-dione Chemical compound OC1=CC=CC2=C1C(=O)NC2=O XXYNZSATHOXXBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical group NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000694440 Colpidium aqueous Species 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 229910003556 H2 SO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 229910013594 LiOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 229910017917 NH4 Cl Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000011794 NU/NU nude mouse Methods 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGUGLOQBLCMITB-UHFFFAOYSA-N [N].C1=CC=C2NCCC2=C1 Chemical compound [N].C1=CC=C2NCCC2=C1 IGUGLOQBLCMITB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000006254 arylation reaction Methods 0.000 description 1
- DCBDOYDVQJVXOH-UHFFFAOYSA-N azane;1h-indole Chemical compound N.C1=CC=C2NC=CC2=C1 DCBDOYDVQJVXOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 1
- 229940045348 brown mixture Drugs 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- NWSBNVVOFKKFNV-UHFFFAOYSA-N chloroform;oxolane Chemical compound ClC(Cl)Cl.C1CCOC1 NWSBNVVOFKKFNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011024 colonic benign neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;ethyl acetate Chemical compound ClCCl.CCOC(C)=O WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hexane Chemical class ClCCl.CCCCCC SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000006323 endo cyclization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical class CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N formamide Substances NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004675 formic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- VHHHONWQHHHLTI-UHFFFAOYSA-N hexachloroethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)C(Cl)(Cl)Cl VHHHONWQHHHLTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- RMGJCSHZTFKPNO-UHFFFAOYSA-M magnesium;ethene;bromide Chemical compound [Mg+2].[Br-].[CH-]=C RMGJCSHZTFKPNO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000002688 maleic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- YYFIGOPUHPDIBO-UHFFFAOYSA-N propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CCC(O)=O YYFIGOPUHPDIBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000005488 sandblasting Methods 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001187 thermosetting polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
<b>ANáLOGOS DE DIAZONAMIDA A, CONJUGADO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, USO E MéTODO PARA SINTETIZAR OS MESMOS<d>. A presente invenção refere-se a um análogo de diazonamida A específico e seus sais e conjugados, que são eficazes no tratamento de doenças proliferativas.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANÁLOGOSDE DIAZONAMIDA A, CONJUGADO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA,USO E MÉTODO PARA SINTETIZAR OS MESMOS".
Campo Técnico
A presente invenção refere-se a um análogo de diazonamida Aque tem atividade antitumor superior. A rotina sintética para este composto étambém descrita.
Técnica Antecedente
A diazonamida A é um agente de rompimento de fuso mitóticoprimeiro isolado do organismo marinho Diazona angulata. Numerosas tenta-tivas foram feitas para sintetizar este composto e seus análogos. PublicaçãoPCT WO 03/106438 descreve uma rotina sintética putativa; entretanto, aestrutura de diazonamida A fornecida naquela publicação é incorreta. A Pa-tente U.S. N0 7.022.720 ('720) corretamente descreve uma estrutura de dia-zonamida A e descreve a síntese de alguns de seus análogos por meio douso combinado de endociclização Heck catalítica, redisposição pinnacol decontração de anel estéreo-controlada, e arilação de indol por meio da trans-ferência de elétron fotoinduzida interna. Estruturas gerais de alguns análo-gos são fornecidas. Um pedido filho reivindicando prioridade desta patentefoi depositado em 31 de outubro de 2005 e é publicado como 2006/0089397e inclui a estrutura do análogo, Composto J5 reivindicado aqui. A patente'720 não descreve especificamente o composto da presente invenção, , quetem atividade antimitótica surpreendentemente potente.
Descrição da Invenção
A presente invenção é direcionada a um composto da fórmula
<formula>formula see original document page 2</formula>
(Composto J) e os sais farmaceuticamente aceitáveis deste. A invenção étambém direcionada às composições farmacêuticas contendo este compostoe/ou seus sais, às formas modificadas deste composto acopladas à agentesde estabilização ou alvejamento, e a métodos de tratar doenças proliferati-vas, em particular cânceres resistentes a Taxol®, usando estes compostos eformulações.
Em outro aspecto, a invenção é direcionada a métodos para sin-tetizar o Composto J e seus sais.Breve Descrição dos Desenhos
Figura 1 mostra a capacidade do Composto J inibir o crescimen-to de várias linhagens de célula de câncer em comparação à diazonamida A,uma forma hidroxilada de Composto J., paclitaxel, e vinblastina.
Figura 2 mostra um plote de fração de sobrevivência contra aconcentração de fármaco com respeito às linhagens de célula de câncer o-variano de PTX10 para o Composto J e paclitaxel.
Figura 3 é um gráfico mostrando os farmcocinéticos de Compos-toJ.
Figuras 4 A e 4B motram o efeito do Composto J quando compa-rado ao paclitaxel sobre xenoenxertos de células HCT116 e PC-3.
Figuras 5A e 5B mostram que o Composto J não tem nenhumefeito sobre a proliferação de neutrófilo ou contagens celulares in vivo.
Modos de Realizar a Invenção
O Composto J foi mostrado, como descrito nos nos exemplosabaixo, ter potente atividade antimitótica com respeito a certos cânceres, emparticular cânceres que são resistentes ao Taxol®. O Composto J pode serfornecido em sua forma de base livre, ou pode ser fornecido como um salfarmaceuticamente aceitável, ou como uma mistura da forma representada eo correspondente sal. Os sais adequados incluem aqueles de ácidos inorgâ-nicos tais como cloridratos, bromidratos, sulfatos, hidrossulfatos, e os simila-res, ou sais de adição de ácido orgânico tais como os acetatos, formiatos,maleatos, e similares.
Além disso, o Composto J pode ser acoplado à porções tais co-mo agentes de alvejamento. Entre tais agentes de alvejamento estão os an-ticorpos ou fragmentos imunologicamente ativos destes, incluindo formas deanticorpo de cadeia única direcionadas contra antígenos de tumor ou contrareceptores ou integrinas associadas com tumores, peptidomiméticos direcio-nados contra estas porções, e similares. Além disso, o Composto J pode seracoplado a um excipiente tal como polietileno glicol para alterar farmacociné-ticos.
As formulações úteis nã invenção incluem formulações padrãotais como aquelas mencionadas em Remington1S Pharmaceutical Sciences,última edição, Mack Publishing Co., Easton, PA, incorporada aqui por refe-rência. Tais formulações incluem aquelas designadas para liberação ~oral,liberação lenta, administração tópica, administração parenteral, ou qualqueroutra rotina adequada como determinado por um médico atendente ou vete-rinário. Desse modo a administração pode ser sistêmica ou local. Veículosadequados ou excipientes incluem lipossomas, micelas, nanopartículas, ma-trizes poliméricas, tampões, e a faixa total de formulações conhecidas dosmédicos.
O Composto J é particularmente útil no tratamento de doençasproliferativas, em particular, tumores e malignidades associadas com mama,ovário, pulmão, cólon, próstata, melanoma, cólon, pâncreas, glioma, carci-noma, e similares.
As formulações que incluem o Composto J e/ou seus sais e/our seus conjugados podem também ser usados em combinação com outros* "fármacos, tais como agentes antitumor adicionais ou outros compostos pale-ativos tais como compostos que ajudam em nutrição ou saúde geral.
Composto J é convenientemente sintetizado para tratar o pre-cursor de amino livre com S-2,5-dioxopirrolidin-l-il-2-hidróxi-3-metilbutanoato.Isto converte a amina livre no 3-metil-2-hidroxibutilato.
Aqueles versados na técnica apreciarão que esta reação de a -coplamento possa também ser realizada com outros ésteres ativados do 2-hidróxi-3-metilbutanoato, tal como a título de exemplo apenas éster de N-hidroxibenzotriazol, éster de perfluorofenila, ésteres de N-hidroxiftalimida,ésteres ativados gerados pela reação do ácido carboxílico com uma carbodi-imida, e outros ésteres ativados convencionalmente usados para acilação deuma amina para formar ligações de amida; desse modo, a invenção forneceum método de preparar o Composto J acoplando um derivado de 2-hidróxi-3-metilbutanoato ativado, que pode opcionalmente ser protegido na 2-hidroxila, com a amina descrita acima. A amina pode também opcionalmenteser em forma protegida, isto é, ela pode ter grupos de proteção em qualquerdos dois ou ambos o nitrogênio de indol e o nitrogênio de indolina. Os gru-pos de proteção para uso na hidroxila incluem grupos acila, grupos silila,acetais de pirano, e similares. Os grupos de proteção adequados para usonos átomos de nitrogênio de anel do composto de amina, que não pretende-se que reajam com o éster ativado de hidroxibutanoato, podem incluir gruposacila tais como carbamatos ou triiluoroacetato, bem como grupos silila. Gru-pos de proteção adequados e métodos para incorporar e removê-los sãobem conhecidos na técnica, e são descritos, por exemplo, em T.H. Greene1PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, 2a edição.Os seguintes exemplos são oferecidos para ilustrar, porém não
limitar, a invenção. Os Exemplos 1-16 descrevem a síntese de Composto J.Os Exemplos 17-20 descrevem sua atividade biológica.Exemplo 17-Bromoindol
2-Bromonitrobenzeno (1,10 kg, 5,45 mois) foi dissolvido em te-
traidrofurano (10 L) em temperatura ambiente. Esta soluçãõ resfriada comagitação em um banho mantido a -78°C. Quando a temperatura interna atin-giu -40°C, brometo de vinilmagnésio (16,3 L, 16,3 mois) foi adicionado emuma tal taxa a fim de manter a temperatura interna a -40°C durante a adição.Sob completa adição, a reação foi removida do banho e deixada aquecerlentamente para -30°C durante o curso de 45 minutos. Isto requereu resfria-mento ocasional. A solução reacional a -30°C foi resfriada bruscamente pelaadição rápida de uma solução ligeiramente fria (~10°C) de NH4CI aquososaturado (10 L). Ligeira espumação ocorreu. (Resfriamento brusco inversona solução de cloreto de amônio é também satisfatório.) Isto resultou emuma mistura bifásica com alguns sais de magnésio não dissolvidos na formade um gel. A mistura foi agitada durante 30 minutos e separada. A camadaaquosa foi novamente extraída com tetraidrofurano (10 L). As camadas or-gânicas combinadas foram evaporadas em pressão reduzida com uma tem-peratur de banho de 35°C e o óleo escuro resultante foi absorvido em cloretode metileno (5 L) e secado com Na2SO4. A mistura foi filtrada e concentrada.
O material resultante foi cromatografado, eluindo com 2% acetato de etila -hexanos para fornecer 7-bromoindol (557 g, 52% de produção) como umsólido não totalmente branco. 1H RMN (CDCl3): consistente com a estruturaproposta.
Exemplo 2 -
Ácido 2-acetamido-3 -(7-bromo-1H-indol-3-il)propanóico.
A um frasco de base redonda de 3 gargalos, de 5 litros, equipa-do com barra agitadora, atmosfera de nitrogênio, termelemento e condensa-dor, foi adicionado o composto do título de Exemplo 1 (252,1 g , 1,29 mol)seguido por ácido acético (1,5 L) e anidrido acético (760 mL, 8,04 mols). L-serina (266,9 g, 2,53 mols) foi carregada após agitação durante 20 minutos.Esta mistura foi agitada durante 4 horas antes dela ser ,aquecida para 40°C.Após a maior parte dos sólidos ter se dissolvido, a reação foi aquecida para90°C, seguida por uma excursão para 110°C. A reação foi então resfriadapara 80°C, agitada nesta temperatura, e o progresso da reação foi monitora-do por HPLC. Após 5 horas a reação foi completada como julgado pela au-sência de 7-bromoindol no cromatograrfíâ Ό aquecimento foi removido, e areação foi deixada continuar agitando durante a noite em temperatura ambi-ente.
Metanol (450 mL) foi adicionado e a reação foi concentrada emvácuo a -50°C para um alcatrão preto, espesso. Metanol (3 L) foi adicionadoao resíduo e após vigorosa agitação a maior parte do resíduo entrou em so-lução, deixando para trás um fino precipitado. A esta mistura foi adicionadoH2SO4 (52,5 mL), e a reação foi agitada ao refluxo durante a noite. A reaçãofoi resfriada para a temperatura ambiente e diluída com tetraidrofurano (3 L).A solução foi carregada em um funil separador de 12 L contendo NaHCO3aquoso saturado (4 L). Esta mistura foi extraída com metil t-butil éter (3x4L). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura e se-cadas em Na2S04, em seguida concentradas em vácuo para fornecer umamistura de sólido marrom e óleo marrom. Cloreto de metileno (500 mL) foiadicionado ao produto bruto, e um pouco de sólidos branco permaneceu nãodissolvido. Estes cristais foram filtrados para fornecer -10 g de produto. Cris-tais semente foram adicionados ao filtrado, e após 30 minutos, um sólidomarrom precipitou-se. A nova mistura foi filtrada, e mais cristais sementeforam adicionados para produzir uma terceira colheita de precipitado, e estaterceira mistura foi também filtrada. Adição de cristais semente ao filtradonão produziu nenhum produto adicional. O filtrado foi concentrado em vácuopara fornecer uma espuma marrom, que foi redissolvida em cloreto de meti-leno (600 mL). Metil t-butil éter (MTBE) (1,250 mL) foi lentamente adicionadoà solução, que precipitou um sólido marrom. Uma mistura foi filtrada, e o fil-trado foi adicionado à outras amostras impuras, em seguida purificado porcromatografia de coluna, eluindo com cloreto de metileno - hexanos. Ne-nhuma das frações contendo o produto foi muito pura (faixa: 50% - 75%),então todas foram recristalizadas com MTBE para fornecer pós amarelo pá-lido. Estas amostras foram combinadas com as amostras de recristalizaçãopara fornecer o composto do título (139 g, 33% de produção, 75% de pure-za). 1H RMN (CDCI3): consistente com a estrutura proposta.
Exemplo 3
Cloridrato de 2-amino-3Í(7-bromo-1H-indol-3-il)propanoato de metila
H2SO4 (340 mL) foi adicionado lentamente em uma mistura agi-tada do composto do título de Exemplo 2 (342 g, 1,05 mol) em metanol (3,4L). A mistura marrom escuro resultante foi aquecida ao refluxo durante 16horas, tempo no qual análise de HPLC indicou conclusão da reação. A rea-ção foi resfriada para a temperatura ambiente e resfriada bruscamente len-tamente em uma mistura agitada de água (4,8 L), bicarbonato de sódio (342 g)e cloreto de metileno (4,8 L). A agitação foi continuada durante 1,5 hora. Ascamadas foram separadas e a camada aquosa foi novamente extraída duasvezes com cloreto de metileno (3,0 L). Os extratos combinados foram seca-dos com sulfato de sódio e concentrados em um alcatrão preto. O materialfoi dissolvido em cloreto de metileno (3,0 L). 1N de HCI em dietil éter (1,1 L)foi adicionado lentamente com resfriamento externo. A suspensão foi resfri-ada para temperatura de banho de gelo e filtrada. Os sólidos foram lavadosduas vezes com cloreto de metileno (500 mL) e três vezes com hexanos(500 mL). Os sólidos foram secados para massa constante em um forno avácuo a 32°C para fornecer o composto do título (267,4 g, 76% de produ-ção). 1H RMN (CDCI3): consistente com a estrutura proposta.
Exemplo 42-((S)-2-benziloxicarbonilamino)-3-metilbutanamido)-3-(7-bromo-1H-indol-3-- il)oxazol-4-propanoato de metila.
O composto do título de Exemplo 3 (256,6 g, 770 mmols), TBTU(296,4 g, 1,2 eq) e Cbz-L-valinâ (212,7 g, 1,1 eq) foram dissolvidos em dime-tilformamida (DMF, anidro, 2.700 mL) e resfriados para O0C durante 30 minu-tos. Diisopropiletilamina (DIEA, 268 mL) foi adicionado lentamente e a solu-ção foi deixada aquecer para a temperatura ambiente. A agitação foi conti-nuada durante 4 horas tempo no qual HPLC indicou conclusão da reação. Areação foi diluída com acetato de etila (11 L) e água (7,5 L). A mistura foiagitada durante 1 hora e deixada separar. A camada orgânica foi lavadauma vez com água (7,5 L), duas vezes com salmoura (7,5 L) e duas vezescom NaHC03 saturado (7,5 L). O material foi secado com sulfato de sódio econcentrado para sólido preto marrom. O material foi apreendido em cloretode iTréfiteno (7,5 L) e combinado com 22,2 g de outro lote de material dequalidade similar e sílica gel (400 g). O solvente foi removido para sustentaro composto bruto sobre sílica. Este material foi dividido na metade e cadametade foi cromatografada em uma coluna de gravidade de sílica de 0,15 mχ 1,21 m (6 polegadas χ 4 pés). Cada qual foi eluída com cloreto de metileno(20 L) seguido por acetona a 5% em cloreto de metileno (20 L) seguido poracetona 8% em cloreto de metileno (30 L) para fornecer o composto do título(383 g, 89% de produção). 1H RMN (CDCI3): consistente com a estruturaproposta.
Exemplo 5
2-((S)-1-(benziloxicarbonilamino)-2-metilpropil)-5-(7-bromo-1H-indol-3-inoxazol-4-carboxilato de metila.Diclorodicianoquinona (340,8 g, 1.500 mmols) foi adicionado auma solução agitada do composto do título de Exemplo 4 (361,4 g, 681mmols) dissolvido em tetraidrofurano (15 L) e aquecido até o refluxo durante6 horas, tempo no qual HPLC indicou completa reação. A reação foi concen-trada para Va de seu volume e diluída com acetato de etila (12 L). A soluçãopreta resultante foi lavada três vezes com NaHC03 aquoso saturado (5,5 L).A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio e concentrada parafornecer o composto do título como um sólido preto (392 g, 100% de produ-ção). 1H RMN (CDCI3): consistente com a estrutura proposta. ~
Exemplo 6
Bromidrato de 2-((S)-1 -amino-2-metilpropil)-5-(7-bromo-lH-indol-3-il)oxazol-4-carboxilato de metila.
A HBr a 33% em ácido acético (1,33 L) foi adicionado o compos-to do título de Exemplo 5 (403,4 g, 766 mmols) e a mistura vigorosamenteagitada durante 1 hora e 20 minutos. A mistura foi lentamente e cuidadosa-mente adicionada a MTBE (12 L) com resfriamento externo e forte agitação.A mistura foi agitada durante 1 hora a 0°C e filtrada sob N2. Os sólidos hi-groscópicos foram lavados com MTBE (1 L) e secados para massa constan-te em um forno a vácuo para produzir o composto do título (277,5 g, 76,5%)como um sólido marrom fino. 1H RMN (CDCI3): consistente com a estruturaproposta.
Exemplo 7
2-((S)-1-((S)-2-(benziloxicarbonilamino)-3-(4-hidroxifenil)propanamido)-2-metilpropil)-5-(7-bromo-IH-indol-3-il)oxazol-4-carboxilato de metila.
A diisopropiletilamina (225 mL, 1.290 mmols) agitada a O°C foiadicionado uma solução do composto do título de Exemplo 6 (277,5 g, 586,5mmols), Cbz-L-tirosina (194,2 g 615,9 mmols) e TBTU (207,2 g, 1,1 eq) emdimetilformamida (anidro, 2,77 L). A reação foi deixada aquecer para a tem-peratura ambiente e agitada durante 16 horas, tempo no qual HPLC indicouconclusão da reação. A solução reacional foi lentamente vertida em NaHC03aquoso saturado (12,0 L) e agitada durante 30 minutos. O precipitado foifiltrado e a massa filtrante foi cuidadosamente lavada com água. O materialmarrom resultante foi secado para massa constante em um forno a vácuo a40°C para produzir o composto do título (435 g). O composto do título foitambém purificado por recristalização. O composto do título foi dissolvido emisopropanol (9,0 L) a 70°C. O material insolúvel foi removido por filtração e o filtrado foi aquecido, ao mesmo tempo que lentamente adicionando hexanos(9,0 L). A suspensão foi deixada resfriar para a temperatura ambiente tempo,no qual um banho de gelo foi aplicado. Uma vez resfriada, a mistura foi agi-tada em temperatura de banho de gelo durante 30 minutos e filtrada. O sóli-do foi lavado com hexanos e secado para massa constante a 40°C em um forno a vácuo fornecendo o composto do título puro (264 g, 61% de produ-ção). 1H RMN (CDCI3): consistente com a estrutura proposta.Exemplo 8
vido em tetraidrofurano (325 mL) e foi adicionado rapidamente a uma solu- ção a -20°C de PhI(OAc)2 (20 g, 62 mmols) e LiOAc (12,7 g, 196 mmols)em 2,2,2-trifluoroetanol (13,0 L). A solução foi agifàtía a -20°C durante 25minutos, tempo no qual NaHCOa sólido (117,5 g) foi lavado. O banho frio roiremovido e a agitação foi continuada durante mais 30 minutos. A misturafoi filtrada a 10°C e o filtrado foi concentrado. O resíduo, 94,6 g, foi apre- endido em CHCI3-tetraidrofurano (3:1, 300 mL) e sonicado durante 10 minu-tos. O diastereômero indesejado precipitado foi removido por filtração e ofiltrado foi concentrado para fornecer o composto do título bruto. As opera-ções acima foram realizadas um total de 3 vezes para fornecer um totalcombindo de 223,6 g de composto do título bruto. O composto do título bruto foi inicialmente purificado por filtração em tampão de sílica eluindo com ace-tato de etila a 100%. Isto resultou em 179,9 g de material que foi tambémpurificado por cromatografia de coluna múltipla. Uma primeira coluna foi elu-
O composto do título de Exemplo 7 (45,0 g, 65 mmols) foi dissol-ida usado 6:1 cloreto de metileno -tetraidrofurano. Isto resultou em 71,1 gde material, que foram apreendidos em 6:1 cloreto de metileno - tetraidrofu-rano (200 mL) e refrigerados durante a noite. O diastereômero indesejadoprecipitado foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para forne-cer 66,6 g de composto. Este material foi cromatografado durante mais duasvezes eluindo com 15:1 cloreto de metileno - tetraidrofurano para fornecer ocomposto do título em duas frações: (16,8 g e 9,3 g). 1H RMN (DMSOd-6):consistente com a estrutura proposta. Espectro de massa (ESI) m/z: 687(M+l).
Exemplo 9
<formula>formula see original document page 11</formula>
A um frasco contendo o composto sintetizado no Exemplo 8(102 mg, 0,148 mmol) foi adicionado metanol (3,6 mL). A solução foi resfria-da em banho de água gelada durante 15 minutos. Uma solução de matéria-prima de LiOH em água (35,4 mg/076 mL, 1,48 mmol) foi adicionada gota agota a 0°C. A mistura foi aquecida para a temperatura ambiente (todo o pre-cipitado dissolveu-se) e agitada durante 4 horas. Menos do que 1% do mate-rial de partida permaneceu após checagem por LCMS. Cerca de 10 g degelo foram adicionados a uma mistura reacional e a temperatura foi diminuí-da para 0°C. HCI aquoso (1N, 1,6 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C paraajustar o pH de uma mistura reacional para entre 2 e 3. Acetato de etila (2 χ20 mL) foi usado para extrair o ácido desejado. As camadas orgânicas com-binadas foram lavadas com água (10 mL), salmoura (10 mL) e secadas so-bre Na2S04. A solução foi concentrada para fornecer 100 mg do compostodo título que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN(DMSOd-6): consistente com a estrutura proposta.<formula>formula see original document page 12</formula>
A um frasco seco contendo o composto sintetizado no Exemplo9 (100 mg) foi adicionado cloridrato de 2-amino-l-(7-hidróxi-IH-indol-3-il) eta-nona (50,3 mg, 0,222 mmol) e DMF anidroso (0,5 mL). Trietilamina (31 μΙ,0,222 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente sob N2. Uma soluçãoamarela pré-preparada de DHOBt (8,45 mg, 0,0518 mmol), EDC HCI (42,6mg, 0,222 mmol) e trietilamina (31 μΙ, 0,222 mmol) em DMF anidroso (2,0mL) foi adicionada a uma solução em temperatura ambiente. A mistura foiagitada a 41 a 42°C sob N2 durante 6 horas. A mistura reacional foi diluídacom acetato de etila (30 mL) seguido por lavagem com água (10 mL), NaH-SO4 a 10% aquoso (10 mL), água (2 χ 10 mL), NaHC03 aquoso saturado(10 mL), água (2x10 mL), e salmoura (10 mL). Uma solução foi secada so-bre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer o composto do título (130mg). 1H RMN (DMSOd-6): consistente com a estrutura proposta.Exemplo 11
<formula>formula see original document page 12</formula>
A um frasco seco contendo o composto sintetizado no Exemplofoi adicionado tetraidrofurano anidroso (0,9 mL) e CH2CI2 (2,7 mL). A so-lução resultante foi resfriada em banho de água gelada durante 15 minutos.Anidrido acético (42 ul, 0,444 mmol) e piridina (18 ul, 0,222 mmol) foram adi-cionados a 0°C. Em seguida a mistura foi aquecida para a temperatura am-biente e agitada durante 3,5 horas sob N2. A reação foi monitorada por meiode LCMS. A solução reaciona! foi diluída com acetato de etila (30 ml_) segui-do por lavagem com água (10 mL) e salmoura (10 mL) e secagem sobreNa2SO4. Após concentração, 136 mg de produto bruto foram obtidos. Cro-matografia instantânea, eluindo com acetato de etila /CH2Cl2, 30/70 ~ 35/65)forneceu o composto do título (80 mg, 61% de produção total durante as úl-timas três etapas). 1H RMN (DMSOd-6): consistente com a estrutura propos-ta.
Exemplo 12
<formula>formula see original document page 13</formula>
Trifenilfosfina (474 mg, 1,81 mmol) e hexacloroetano (428 mg,1,81 mmol) foram adicionados a um frasco seco equipado com barra agita-dora. CH2Cl2 anidroso (18,5 mL) foi adicionado e a solução resultante foi res-inada bem em banho de água gelada sob N2. Trietilamina (351 ul, 2,52 mmols)foi adicionada lentamente à solução, seguido por agitação durante 10 minu-tos a 0°C. A solução do composto sintetizado no Exemplo 11 (160 mg, 0,180mmol) em CH2Cl2 anidroso (9,5 mL) foi adicionado gota a gota e a tempera-tura foi mantida a 0°C a 2°C. Após adição, a mistura reacional foi agitada a0°C durante 10 minutos (o tempo total deve ser menor do que 15 minutos).Água (34 μL) foi adicionada para saciar a reação. Todo o solvente foi evapo-rado a 15°C sob pressão reduzida. Acetato de etila (5 mL) foi adicionado aoóxido de trifenilfosfina precipitado. Após filtragem, o filtrado foi concentradonovamente e o procedimento acima foi repetido duas vezes para removeróxido de trifenilfosfina adicional. O filtrado foi concentrado seguido por purifi-cação por meio de cromatografia instantânea eluindo com acetato de etila -tolueno (60:40) para produzir o composto do título (110 mg, 70% de produ-ção.) 1H RMN (DMS Od-6): consistente com a estrutura proposta.
Exemplo 13
<formula>formula see original document page 14</formula>
A solução do composto sintetizado no Exemplo 12 em acetonitri-la(10,0 mg/4 mL) foi adicionada a um tubo de teste de quartzo seguido porpulverização com N2 durante 30 minutos. Uma solução desgaseificada dematéria-prima de LiOH em H2O (0,596 mg/0,60 mL) foi adicionado gota agota. A solução reacional tornou-se amarelo escuro e foi desgaseificada comN2 durante 30 minutos. O tubo de teste de quartzo foi colocado em fotorrea-tor iluminado com bulbos de luz de 300 nm. A solução reacional foi irradiadadurante 45 minutos e pulverizada com N2. Esta reação foi repetida 12 vezes.As misturas reacionais combinadas foram diluídas com acetato de etila (200mL) seguido por lavagem com NH4CI saurado (50 mL), H2O (50 mL), sal-moura (50 mL) e secagem sobre Na2SO4 para fornecer o compbáto do título.
Exemplo 14
<formula>formula see original document page 14</formula>
A um frasco seco contendo o composto sintetizado no Exemplo13 (0,150 mmol) foi adicionado K2CO3 seco (61 mg) e DMF anidroso (4 mL).Uma solução de trifluorometanossulfonato de 4-nitrofenila em DMF anidroso(61 mg/1,3 mL) foi adicionado à mistura reacional em temperatura ambiente.A solução amarelo-marrom resultante foi agitada em temperatura ambientesob N2 durante 1 hora. Em seguida a mistura foi diluída com acetato de etila(100 mL) seguido por lavagem com NH4CI aquoso saturado (2 χ 20 mL), H2O(5 χ 20 mL), salmoura (2 χ 20 mL) e secada sobre Na2SO4. Após concentra-ção, o produto foi purificado por meio de cromatografia instantânea, eluindocom acetato de etila -CH2Cl2 (30:70) para fornecer o composto do título (50mg, 38% de produção total durante as últimas duas etapas). 1H RMN (DM-SOd-6): consistente com a estrutura proposta.
Exemplo 15
<formula>formula see original document page 15</formula>
A um frasco contendo o composto sintetizado no Exemplo 14(50 mg, 0,057 mmol) foi adicionado MeOH (5 mL) e trietilamina (29 μl, 0,205mmol) seguido por purga com N2. Em seguida Pd(OH)2/C (95 mg) foi adicio-nado sob N2. Um balão carregado com gás de hidrogênio foi adicionado i-mediatamente e o frasco foi purgado com hidrogênio 4 vezes. A reação foideixada prosseguir durante 3 horas. A mistura foi filtrada através de umaalmofada de Celite e o resíduo foi lavado por MeOH (2x10 mL). O filtradofoi concentrado e diluído com acetato de etila (50 mL). A solução foi lavadacom H2O (3 χ 10 mL) e salmoura (10 mL), e secada sobre Na2SO4. Apósconcentração, o composto do título foi obtido (33 mg); ele foi usado na etapaseguinte sem outra purificação.
Exemplo 16<formula>formula see original document page 16</formula>
Para sintetizar o Composto J de fórmula (1) mostrado acima, aum frasco seco contendo o composto sintetizado no Exemplo 15 (2 mg,"0,0469 mmol) foi adicionado tetraidrofurano anidroso (1,1 mL). Uma soluçãode (S)-2,5-dioxopirrolidin-l-il-2-hidróxi-3-metilbutanoato (11,1 mg, 0,0516mmol) em tetraidrof urano anidroso (0,3 mL) foi adicionada a uma misturareacional em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em tem-peratura ambiente sob N2 durante 2 horas. A mistura reacional foi diluídacom CH2CI2 (50 mL) seguido por lavagem com NaHCO3 saturado (2x 5 mL),H2O (5 mL) e salmoura (5 mL), e secagem sobre Na2SO4. Após concentra-ção, o produto final foi purificado por meio de cromatografia instantânea, elu-indo com MeOH-CH2CI2 (3:9) para fornecer o composto do título (19 mg,58% de produção). Espectro de massa (ESI) m/z: 697,2 (M+l). 1H RMN(DMSOd-6): consistente com a estrutura proposta.
Exemplo 17
Inibição de Várias Linhagens Celulares pelo Composto J
Diversas linhagens de célula de tumor representando câncer demama, pulmão, cólon, ovário e próstata bem como melanoma foram ensaia-das sob condições de desenvolvimento padrão na presença de quantidadesvariáveis de diazonamida A, uma forma hidroxilada de Composto J, Com-posto J1 paclitaxel e vinblastina. Os resultados são representados como aconcentração que diminui o crescimento por um fator de dois (GI50) na figura1. Na caixa mostrada na figura 1, AB-4 é a forma hidroxilada de Composto Je AB-5 é Composto J. Como mostrado, todos os fármacos testados tiveramconcentrações GI5O muito baixas na linhagem de célula de tumor de mamaMDA-MB-435, porém diazonamida A, Composto J e vinblastina foram maiseficazes do que os fármacos restantes com respeito a MDA-MB-231. Empulmão e cólon, a forma hidroxilada de Composto J foi menos eficaz do queos fármacos restantes. Todos os fármacos testados tiveram GIso5S (únicodígito nM) muito baixas na linhagem de célula de ovário 0VCAR3, porém opaclitaxel foi significantemente menos eficaz do que o restante para quatrofármacos contra as linhagens de célula de ovário IGR-OVI e SKMEL-2. Emmelanoma, Composto J e sua forma hidroxilada foram menos eficazes doque os fármacos restantes, porém nas linhagens de célula da próstata PC-3e LnCAP, todos os fármacos funcionaram bem. (A forma hidroxilada deComposto J foi menos ativa contra PC-3.)
Experimentos adicionais testando o efeito de Composto J e pa-clitaxel sobre a sobrevivência de linhagem de célula de tumor ovarianoPTX10 são mostrados na figura 2. Plotados contra a concentração adiciona-da, estes resultados mostram que o Composto J é mais eficaz do que o pa-clitaxel na redução da percentagem de sobrevivência de células. Na figura 2,os círculos representam o Composto J e os diamantes representam paclitaxel.
Exemplo 18
Farmacocinéticos
O Composto J foi injetado intravenosamente em camundongoscontendo crescimento de tumores de xenoenxerto de células de câncer demama MDA-MB-435. A concentração intratumoral de Composto J foi avalia-da como uma função de tempo. Os resultados são mostrados na figura 3.Como sumariado, a meia-vida terminal deste composto é de 297,6 minutos,a área sob a curva é de 3010224 min* ng/ml e o volume de distribuição é de2,9 l/kg.
Exemplo 19
Atividade in vivo
Como mostrado nas figuras 4A e 4B, o Composto J é compará-vel ao paclitaxel na inibição de crescimento de xenoenxertos de HCT116 exenoenxertos de PC-3.
Detalhes da preparação de modelos de murino contendo xeno-enxertos de células HCT 116 ou células PC-3 são descritos na seção se-guindo estes exemplos. Após os tumores serem desenvolvidos, terapia utili-zando o Composto J ou paclitaxel foi iniciada. Como mostrado na figura 4A,20 mg/kg de Composto J administrado IV torna mais lento o crescimento detumor de uma maneira similar ao paclitaxel na mesma concentração. Na fi-gura 4 A, o *'s representam camundongos de controle, os quadrados repre-sentam 5 mg/kg de Composto J; ós diamantes representam 20 mg/kg deComposto J; e a linha inclinada representa 20 mg/kg de paclitaxel. Comoobservado, paclitaxel e Composto J em concentrações similares fornecemcurvas similares de inibição de crescimentOr Além disso, quatro de 10 ani-mais usados no estudo ficaram livres de tumores durante mais de cinco me-ses e não experimentaram nenhuma perda de peso.
De um modo similar usando células PC-3 como o xenoenxerto,novamente 20 mg/kg de Composto J ou paclitaxel significantemente inibiramo crescimento de tumor. Na figura 4B, os quadrados são o controle, os círcu-los escuros são os pontos de dados pára o Composto J e os diamantes cla-ros são os pontos de dados para o paclitaxel.
Exemplo 20
Efeito sobre a Proliferação de Neutrófilo e Contagens Celulares
Como mostrado na figura 5, embora o paclitaxel resulte em umaredução de contagens de neutrófilo em medula óssea e em sangue periféri-co em dosagens de 5 mg/kg e 20 mg/kg, o Composto J nestas concentrã-ções não tem nenhum efeito sobre estas contagens celulares.
Além da avaliação do efeito sobre tumores, o efeito de paclitaxele Composto J sobre os neutrófilos em medula óssea e sangue foram obti-dos. Como mostrado na figura 5A, embora o paclitaxel em 20 mg/kg signifi-cantemente reduza as contagens e neutrófilo em medula óssea, uma dosecomparável de Composto J não teve nenhum efeito. Os dados são forneci-dos como o número de células GR1+ em um fêmur.
Na figura 5B, similarmente, a contagem de neutrófilo em sangueperiférico é enormemente reduzida tanto por 5 mg/kg quanto 20 mg/kg depaclitaxel, porém nnão é significantemene afetada por quantidades similaresde Composto J. Estes dados são tabulados como ANC (célula/ml).Os dados obtidos para inibição de crescimento em xenoenxertospara o Composto J quando comparado ao paclitãxel são mostrados abaixo.Tabela 1
SUMARIO DE DADOS DE EFICACIA DO COMPOSTO J
<table>table see original document page 20</column></row><table>Os detalhes do protocolo para os Exemplos 19 e 20 são comosegue:
Materiais Requeridos:
• Células de tumor de próstata PC3 e células de tumor de có-lon HCT116 (adquiridas do repositório de tumor Division of Câncer Treat-ment e Diagnosis (DCTD)) do NCI
• Meios de RPMI Completo
-RPMI (Cat N2 11875-085, Invitrogen)
-10% de Soro Bovino Fetal inativadó por calor(30'
-56°C) (Cat N5 100-106, Gemini Bio-Products).
-2 mM L-glutamina (Cat N5 25030-081, Invitrogen)
-0,1 mM de MEM Solução de Aminoácidos Não-Essenciais (Cat N511140-050, Invitrogen)
-10 U/ml de Penicilina / 10 μg / ml de Estreptomicina(Cat NQ15140-122, Invitrogen)
-1 mM de Piruvato de Sódio (Cat Ns11360-070)
• Tripsina-EDTA (Cat Ne25300-054, Invitrogen)
• Salina Tamponada por Fosfato livre de Ca2+/Mg2+, dextrose a5% em água
• Prato de Cultua Celular de 150 mm X 25 mm (Cat Ns430599, Corning, Inc.)
• Pipetas de 10 e 25 ml, auxiliar de pipeta padrão, pontas depipeta p200 e p1000 e pipetador padrão
• Camundongos nus NCr-nu/nu atímicos em 6-12 semanas deidade, ou sexo (código de linhagem: 01B74, NCI Frederick Animal Producti-on Program - fornecedores incluem Charles River Labs e Taconic Farms).Camundongos fêmea de aproximadamente 7 semanas de idade foram utili-zados para experimentos existentes.
• Seringa de tuberculina de 1 c3 padrão, agulhas 30G1/2 e25G5/8 (Becton Dickinson)
• Tubos de 5 ml Falcon (Cat N9352054)
• Tubos cônicos plásticos descartáveis de 50 e 15 ml (Falconou vendedor similar)
• Solução Azul Tripano (0,4%) (Cat NeTei54, Sigma)
• Hemacitômetro de contraste de fase Hausser (Cat Nq 02-671-54, Fisher)
Balde de gelo
• Balança para pesar camundongos (precisa até 0,2 g)
• Compassos de calibre Vernier
• Facilidade de vivário livre de patógenos (camundongos nusdevem ser alojados em isolamento de cartiundongosconvencionais se pos-sível - salas separadas ou gaiolas micro-isoladoras equipadas com fluxo dear individual; alojamento, leito, água de todos os animais devem ser autocla-vados antes do uso; ração de camundongo irradiada padrão deve ser usada;os animais devem ser trocados de gaiolas dentro coifa de fluxo laminar; in-vestigadores que manipulam os camundongos devem ser adequadamentetrajados com roupão, touca, butim, luvas, máscara)
• Composto AB-5 (Composto J)
• Álcool etílico, 200 provas (Aaper, MFD 041205)
• Cremaphor (Cat Ns C5135, Sigma)
• Paclitaxel (Cat N9ANP0010, Polymed Therapeutics)
Procedimento:
1) Rapidamente descongelar células PC3 ou HCT116 (se neces-sário) em banho de água a 37°C. Transferir os conteúdos para 9 ml de mei-os de RPMI completos. Giro 5' a 1200 rpm (240Xg). Descartar os meios eressuspender o pélete em 8 ml meios de RPMI completos. Semear em pra-tos de cultura celular de 100 mm X 25 mm em C02 a 5%, incubador umidifi-cado a 37°C.
2) Permitir o crescimento durante 5-10 dias, dividir (aspirar osmeios, lavar com 3-5 ml de PBS, adicionar 1 ml de tripsina-EDTA, incubar 3-5' a 37°C, adicionar meios em volume desejado e transferir para múltiplasplacas) 1:8 a 1:10 a cada 3-4 dias quando necessário para permitir as célu-las entrarem na fase de crescimento logarítmico.
3) Quando as células estiverem bem-desenvolvidas, começar aexpandir para pratos de 150 mm X 25 mm. Usa-se 20 ml de meios em umprato de 150 mm e usa-se 2 ml de tripsina para divisão. Quando quase con-fluente, deve existir 2X107 células/150 mm do prato.
4) Planejar à frente para a chegada do momento de camundon-gos nu/nu de modo que eles possam aclimatar-se à facilidade animal duran-te 1 semana antes da injeção de células de tumor. Durante este tempo, rótu-lo de orelha ou máscara de acordo com a prática padrão para Vivarium).
5) Coletar células PC3 ou HCTI 16 quando você prognosticar játer células suficientes para o número total de camundongos em estudo (Nú-mero total de camundongos = 7 camundongos/grupo X total N9 grupos - gru-pos sugeridos: controle de veículo, Paclitaxel controle positivo, AB-5 + até 5camundongos adicionais para prover variação em taxa de retirada de xeno-enxerto; isto é, 26 camundongos). Planejar injetar 10 milhões de célu-las/camundongo e prover a perda de células/volume durante o processo deinjeção. Isto é, se 30 camundongos devem ser injetados, planejar coletarcélulas suficientes para pelo menos 35 injeções - 35 X 10 milhões de células= 3,5 X 108 células. No experimento de HCTI 16 existente, 7,5 células X106foram injetadas por camundongo. Cinco camundongos por grupo form utili-zados para tratamento de AB-5 e quatro camundongos por grupo foram utili-zados para o controle e tratamentos com paclitaxel. No experimento de PC3existente, 107 células foram injetadas. Seis camundongos por grupo foramutilizados para o tratamento de controle e cinco camundongos por grupo fo-ram utilizados para os tratamentos com AB-5 e paclitaxel. Tamanhos de gru-po menores foram necessários devido à limitações em disponibilidade deAB-5.
6) Coletar células como para dividir nas etapas 2 e 3 acima. Éproveitoso coletar apenas 10 placas em um momento e colocar as célulascoletadas sobre gelo quando alguém necessitar processar um grande núme-ro de placas para um único experimento. Lavar as placas com veículos adi-cionais 1 -2 vezes além dos veículos usados para diluir tripsina e coletar célu-las inicialmente. As células de 10 placas com lavagens associadas conforta-velmente ajustar-se-ão em um cônico de 50 ml. Todas as etapas devem serconduzidas usando células e técnicas assépticas e a centrífuga deve sermantida fria em todo o procedimento.
7) Uma vez que todas as células foram coletadas, girar 5' 1200rpm (240Xg). Ressuspender os péletes em 5-10 ml de RPMI simples (livrede soro e aditivo). Agrupar os péletes e em seguida contar a população decélulas agrupadas diluída em concentração adequada para contagem. Con-tar 50 μl + 50 μl de azul tripano em um hemacitômetro padrão. Girar as célu-las como antes e repetir a lavagem livre de soro mais duas vezes para asse-gurar completa remoção do soro. Pode ser proveitoso dividir as células no-vãmente em múltiplos tubos cônicos de 50 ml para contagem e lavagens,porém estar seguro de agrupar novamente em um único tubo para giro final.
8) Ressuspender o pélete celular, levando em consideração ovolume do pélete sozinho, em 4 X 107/ml em meios livres de soro. Pipeta-gem ou suave centrifugação é aceitável.
9) Empregar as células sobre gelo para vivário onde os camun-dongos devem estar já em gaiolas prontas para injeção.
10) Extrair 0,8-0,9 ml de células para dentro de seringa de tuber-culina gelada. Acoplar agula de 25G e cuidadosamente rebentar as bolhasde modo que 0,7 ml de células permaneça na serinja pronta para injetar.Deixar as células restantes sobre gelo.
11) Manualmente reprimir os camundõngos com a mão esquer-da, mantendo o rabo e a pele atrás da cabeça firmes de modo que o camun-dongo não possa mover-se, porém seja ainda capaz de respirar. Esfregar apele a ser injetada com com esfregão com álcool e puxar uma área de pelesolta. Biselar sobre a agulha, suavemente inserir a seringa e a agulha con-tendo as células exatamente sob a pele do camundongo e lentamente injeta0,2 ml de células (1 X 107 células). Área de injeção deve formar um área au-mentada sob a pele. Substituir os camundongos em gaiolas.
12) Iniciar as medições de tamanho de tumor com compassosde calibre Vernier (medir o comprimento e largura e calcular o volume como(L X W2)/2 três dias após a injeção. Também medir o peso do camundongo.Em geral, os pesos do camundongo devem ser medidos ao mesmo tempotodos os dias (dentro de 1-2 horas) para evitar a flutuação diária esperada.Medir o volume do tumor pelo menos mais uma vez em intervalos de 2-3dias para estar seguro de que o volume do tumor etá crescendo. A terapiapode ser iniciada quando o volume do tumor estiver entre 150-250 mm3.
Este ponto deve ser atingido dentro de 5-10 dias de injeção deinicial. Não usar camundongos cujos tumores estão significantemente foradesta faixa. A terapia foi iniciada 5 dias após a injeção de tumor para o expe-rimento de PCS existente e 8 dias após a injeção de tumor para o experi--rnento de HCT116 existente.
13) Antes do primeiro dia de terapia, aliquotar os compostos pa-clitaxel e ΑΒ-5/Composto J em alíquotas de dose individual. Deve ser possí-vel estimar o peso de camundongos no primeiro de terapia com base nospesos medidos durante o período de crescimento de tumor inicial. Aliquotarsuficiente composto por tubo para o número de camundongos em grupo detratamento + 1,5-2 doses extras. Tanto o paclitaxel quanto o Composto J sãodados a 20 mg/kg. Minimizar a perda de composto e maximizar a precisão,pesou-se 20-30 mg de composto e dissolve-se em etanol. Alíquotas dequantidade de composto desejadas são então pipetadas em tubos individu-ais e secadas sob vácuo. As alíquotas são armazenadas dessecadas a -20°C em Teflon ou tubos de vidro.
14) No primeiro díarde terapia, aleatorizar os camundongos dogrupo, de modo que o volume de tumor médio por grupo é consistente. Seusar machos, pode ser necessário utilizar gaiolas múltiplas visto que é desa-conselhável reagrupar camundongos nu/nu machos com camundongosnu/nu novos por causa de briga.
15) Preparar uma solução de matéria-prima de 1:1 cremafor:etanol. Preparar o Composto J e paclitaxel para injeção primeiro dissolvendoem 20 μΙ/dose de cremafor: etanol com vigorosa centrifugação ou sonicação,como necessário. Diluir em dextrose a 5%, tal que a concentração final decremafor:etanol seja de 10% (isto é, adicionar 180 μΙ de dextrose a 5% pordose). Centrifugar para misturar. A solução será ligeiramente viscoso. Pacli-taxel pode requerer concentração ligeiramente mais elevada de excipientepara permanecer em solução (até 20% final). Nos experimentos de HCTI 16e PC3 existentes, 20% de excipiente foi utilizado para a formulação de pacli-taxel e 10% para a formulação AB-5.
16) Aquecer o rabo usando uma lâmpada quente de 150W. Es-colheu-se aquecer apenas o rabo, porém técnicas padrão usadas por viváriosão finas. Colocar o camundongo em um Tailveiner. Esfregar a veia comesfregão com álcool e lentamente injetar 0,2 ml durante 5 segundos.
17) Seis doses devem ser administradas em um intervalo de diasim dia não (q2dX6). Nos experimentos de HCTI 16 e PC3 existentes, asdoses foram dadas Segunda/Quarta/Sexta durante duas semanas (q2-3dX6).
18) Camundongos devem ser pesados e a dose recalculada pa-ra cada dose.
19) Volume de tumor e peso deve ser medido a cada 3-4 dias(Segunda/Sexta) durante diversos meses após a injeção de tumor. Os ca-mundongos de controle devem atingir 20 mm em maior diâmetro (ponto ne-cessitando sacrifício em nossa facilidade) dentro de 30-40 dias. Tanto o pa-clitaxel quanto o Composto J devem causar significante regressão com cu-ras em 40 - 80% dos camundongos.
Claims (8)
1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula<formula>formula see original document page 27</formula>ou os sais farmaceuticamente aceitaveis ou conjugados do mesmo.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lo fato de que é na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.
3. Conjugado de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o composto de fórmula 1 é acoplado a um agente de alve-jamento.
4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende como ingrediente ativo o composto como definido na reivindica-ção 1, e também inclui um excipiente farmaceuticamente aceitável.
5. Uso do composto como definido na reivindicação 1, ou umacomposição farmacêutica do mesmo, caracterizado pelo fato de ser no pre-paro de um medicamento para o tratamento de doenças proliferativas em umindivíduo.
6. Método para sintetizar um composto de fórmula:<formula>formula see original document page 27</formula>caracterizado pelo fato de que compreende um composto de fórmula:<formula>formula see original document page 27</formula>ou uma forma protegida do mesmo, tendo um grupo de proteção em lugar deum hidrogênio em pelo menos um nitrogênio de anel, com um éster ativadode ácido (S)-2-hidróxi-3-metilbutanóico ou uma forma protegida do mesmo,tendo um grupo de proteção no grupo 2-hidroxila; seguido por remoção dequaisquer grupos de proteção que estavam presentes no grupo amina ouhidroxila.
7. Método de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelofato de que o éster ativado de ácido (S)-2-hidróxi-3-metilbutanóico é o ésterde N-hidroxissucinimida de ácido (S)-2-hidróxi-3-metilbutanóico, que é trata-do com um composto de fórmula:<formula>formula see original document page 28</formula>para fornecer o produto de fórmula:<formula>formula see original document page 28</formula>
8. Composicao para o tratamento de doencas proliferativas emum indivíduo, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidadeeficaz do composto como definido na reivindicação 1 ou uma composiçãofarmacêutica do mesmo.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US11/264,502 | 2005-10-31 | ||
| US11/264,502 US7517895B2 (en) | 2001-08-24 | 2005-10-31 | Synthetic diazonamides |
| US81465106P | 2006-06-16 | 2006-06-16 | |
| US60/814,651 | 2006-06-16 | ||
| PCT/US2006/042565 WO2007053650A2 (en) | 2005-10-31 | 2006-10-31 | Diazonamide a analog |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0618136A2 true BRPI0618136A2 (pt) | 2011-08-16 |
Family
ID=38006479
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0618136-8A BRPI0618136A2 (pt) | 2005-10-31 | 2006-10-31 | análogos de diazonamida a, conjungado, composição farmacêutica, uso e método para sintetizar os mesmos |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7538129B2 (pt) |
| EP (1) | EP1948169A4 (pt) |
| JP (1) | JP2009513710A (pt) |
| AU (1) | AU2006308849A1 (pt) |
| BR (1) | BRPI0618136A2 (pt) |
| CR (1) | CR10038A (pt) |
| EA (1) | EA013692B1 (pt) |
| WO (1) | WO2007053650A2 (pt) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008154441A1 (en) * | 2007-06-07 | 2008-12-18 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Methods for preparing diazonamides |
| WO2009086170A1 (en) * | 2007-12-21 | 2009-07-09 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Diazonamide analogs with improved solubility |
| AU2009243056B2 (en) * | 2008-04-29 | 2015-05-14 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Indoline anti-cancer agents |
| WO2009143485A1 (en) * | 2008-05-22 | 2009-11-26 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Diazonamide analogs |
| HRP20171930T1 (hr) | 2011-04-22 | 2018-02-09 | Joyant Pharmaceuticals, Inc. | Analozi diazonamida |
| US10353032B2 (en) * | 2015-10-27 | 2019-07-16 | Halliburton Energy Services, Inc. | Viscosity determination apparatus, systems, and methods |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7022720B2 (en) * | 2001-08-24 | 2006-04-04 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Synthetic diazonamides as novel anti-mitotic agents |
| US7517895B2 (en) * | 2001-08-24 | 2009-04-14 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Synthetic diazonamides |
-
2006
- 2006-10-31 US US11/591,016 patent/US7538129B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-10-31 JP JP2008538978A patent/JP2009513710A/ja not_active Withdrawn
- 2006-10-31 WO PCT/US2006/042565 patent/WO2007053650A2/en not_active Ceased
- 2006-10-31 AU AU2006308849A patent/AU2006308849A1/en not_active Withdrawn
- 2006-10-31 EA EA200801238A patent/EA013692B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-10-31 EP EP06827230A patent/EP1948169A4/en not_active Withdrawn
- 2006-10-31 BR BRPI0618136-8A patent/BRPI0618136A2/pt not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-05-30 CR CR10038A patent/CR10038A/es not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA013692B1 (ru) | 2010-06-30 |
| EA200801238A1 (ru) | 2008-12-30 |
| EP1948169A2 (en) | 2008-07-30 |
| AU2006308849A1 (en) | 2007-05-10 |
| US20070149583A1 (en) | 2007-06-28 |
| CR10038A (es) | 2008-09-12 |
| JP2009513710A (ja) | 2009-04-02 |
| WO2007053650A2 (en) | 2007-05-10 |
| EP1948169A4 (en) | 2009-11-04 |
| US7538129B2 (en) | 2009-05-26 |
| WO2007053650A3 (en) | 2007-11-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2435799T3 (es) | Un método de inhibición del virus de la hepatitis C mediante combinación de una 5,6-dihidro-1H-piridin-2-ona y de uno o más compuestos antivirales adicionales | |
| ES2253208T3 (es) | Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos. | |
| ES2416136T3 (es) | Conjugados de anticuerpo-fármaco y su uso | |
| ES2488466T3 (es) | Análogos de ciclopamina | |
| ES2426599T3 (es) | Formulación oral anticáncer | |
| ES2582472T3 (es) | Nuevos derivados de ciclohexilamina que tienen actividad como agonistas adrenérgicos beta2 y como antagonistas muscarínicos M3 | |
| ES2760503T3 (es) | Forma cristalina de 3-etil-4-{3-isopropil-4-(4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-imidazol-1-il)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-1- il}benzamida | |
| BRPI0712167A2 (pt) | compostos de aziridinil-epotilona | |
| ES2310860T3 (es) | Profarmaco amida de gemcitabina, composiciones y uso del mismo. | |
| KR20190133190A (ko) | Mdm2-p53 상호작용의 아이소인돌린온 저해제 및 이를 제조하는 방법 | |
| ES2441115T3 (es) | Derivados de CBI sujetos a activación reductora | |
| CN109071456A (zh) | 作为myc调节剂的max结合剂及其用途 | |
| BRPI0618136A2 (pt) | análogos de diazonamida a, conjungado, composição farmacêutica, uso e método para sintetizar os mesmos | |
| ES2671608T3 (es) | Formas sólidas de 3-(4-nitro-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona | |
| EP1785421A1 (en) | Tropan compound | |
| ES2446092T3 (es) | Formas cristalinas del profármaco amida gemcitabina, composiciones y uso de las mismas | |
| WO2008092335A1 (en) | Novel vinblastine derivatives, their preparation, use and pharmaceutical compositions comprising the said derivatives | |
| CN101340907A (zh) | 二氢氧茚吲哚a类似物 | |
| CN104557909A (zh) | 3-酰氧基取代右旋去氧娃儿藤宁衍生物、其制法和药物组合物与用途 | |
| ES2277138T3 (es) | Compuestos esteroideos con actividad antitumoral. | |
| JP2000502351A (ja) | 医薬化合物 | |
| CN103980148B (zh) | 硬脂酰氨基酸盐及其制备方法和应用 | |
| TW201922690A (zh) | 環－amp反應元素結合蛋白的抑制劑 | |
| AU2012298567A1 (en) | New ligands for targeting of S1P receptors for in vivo imaging and treatment of diseases | |
| CA2628026A1 (en) | Diazonamide a analog |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B08F | Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE A 5A ANUIDADE. |
|
| B08K | Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE AO DESPACHO 8.6 PUBLICADO NA RPI 2161 DE 05/06/2012. |