BRPI0708808A2 - Derivados de cromano - Google Patents

Abstract

DERIVADOS DE CROMANO. A presente invenção refere-se a compostos da fórmula (I): ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R^ 1^, R^ 2^, R^ 3^, R^ 4^, R^ 5^, R^ 6^, R^ 7^, R^ 8^ A e B são, cada um, conforme descrito aqui ou um sal farmaceuticamente aceitável e composições contendo tais compostos e o método de tratamento e o uso compreendendo tais compostos para o tratamento de uma condição mediada pela atividade antagonística da bomba de ácido tal como, mas não limitado a, doença gastrintestinal, doença gastroesofageal, doença de refluxo gastroesofageal (GERD), doença de refluxo laringofaringeal, úlcera péptica, úlcera gástrica, úlcera duodenal, úlceras induzidas por NSAID, gastrite, infecção por Helicobacter pylori, dispepsia, dispepsia funcional, síndrome de Zollinger-Ellison, doença de refluxo não-erosiva (NERD), dor visceral, câncer, queimadura solar, náusea, esofagite, disfagia, hiperssalivaçáo, distúrbios das vias aéreas ou asma.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOSDE CROMANO".Antecedentes da Invenção

A presente invenção refere-se a derivados de cromano. Essescompostos têm atividade inibitória da bomba de ácido. A presente invençãotambém refere-se a uma composição farmacêutica, método de tratamento euso, compreendendo os derivados acima para o tratamento de condiçõesdoentias mediadas por atividade de modulação da bomba de ácido; em par-ticular, atividade inibitória da bomba de ácido.

É bem-estabelecido que inibidores da bomba de prótons (PPIs)são pró-fármacos que sofrem uma reestruturação química ácido-catalisadaque permite que os mesmos inibam a HVK+-ATPase através de ligação co-valente a seus resíduos de cisteína (Sachs, G. et al, Digestive Diseases andSciences, 1995, 40, 3S-23S; Sachs et al, Annu Rev Pharmacoi Toxicoi,1995, 35, 277-305). Contudo, diferente dos PPIs, agonistas de bomba deprótons inibem a secreção de ácido via inibição competitiva de potássio re-versível de H7K+-ATPase. SCH28080 é um de tais inibidores reversíveis etem sido estudado extensivamente. Outros agentes mais novos (revaprazan,soraprazan, AZD-0865 e CS-526) entraram em experimento clínico, confir-ando sua eficácia em seres humanos (Pope, A.; Parsons, M., Trends inPharmacoiogicai Sciences, 1993,14, 323-5; Vakil, N., Alimentary Pharmaco-Iogy and Therapeutics, 2004, 19, 1041-1049). Em geral, descobriu-se queantagonistas da bomba de ácido são úteis para o tratamento de uma varie-dade de doenças, incluindo doença gastrintestinal, doença gastroesofageal,doença de refluxo gastroesofageal (GERD), doença de refluxo Iaringofarin-geal, úlcera péptica, úlcera gástrica, úlcera duodenal, úlceras induzidas porfármaco antiinflamatório não-esteroidal (NSAID), gastrite, infecção por Heli-cobacter pylori, dispepsia, dispepsia funcional, síndrome de Zollinger-Ellison,doença de refluxo não-erosiva (NERD), dor visceral, câncer, queimadurasolar, náusea, esofagite, disfagia, hiperssalivação, distúrbios das vias aéreasou asma (aqui depois referidas como "Doenças ΑΡΑ", Kiljander, Toni O,American Journal of Medicine, 2003, 115 (Supl. 3A), 65S-71S; Ki-Baik Hahmet al, J. Clin. Biochem. Nutr., 2006, 38, (1), 1-8).

O W099/55705, W099/55706 e W004/046144 divulgam com-postos reportados como sendo antagonistas da bomba de ácido. Eles refere-sem a determinados compostos tendo estrutura de imidazo[1,2-a]piridina.

Há uma necessidade de proporcionar novos antagonistas dabomba de ácido que são bons candidatos a fármaco e se dirigem à necessi-dades não reunidas por PPIs para tratamento de doenças. Em particular,compostos preferidos se ligarão potentemente à bomba de ácido, ao mesmotempo em que mostram pouca afinidade por outros receptores e mostramatividade funcional como inibidores da secreção de ácido no estômago. Elesdeverão ser bem-absorvidos pelo trato gastrintestinal, ser metabolicamenteestáveis e possuir propriedades farmacocinéticas favoráveis. Eles deverãoser não-tóxicos. Além disso, o candidato a fármaco ideal deverá existir emuma forma física que é estável, não-higroscópica e facilmente formulada.

Sumário da Invenção

Na presente invenção, descobriu-se agora que a nova classe decompostos tendo uma porção de cromano e estrutura de imidazo[1,2-a]piridina substituída por um grupo metila (grupo hidróxi ou uma porção con-versível a um grupo hidróxi in vivo) sobre a posição 3 mostrou atividade inibi-tória da bomba de ácido e propriedades favoráveis como candidatos a fár-maco e, assim, são úteis para o tratamento de condições doentias mediadaspor atividade inibitória da bomba de ácido, tais como Doenças ΑΡΑ.

A presente invenção proporciona um composto da seguinte fór-mula (I):

<formula>formula see original document page 3</formula>

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:-A-B- representa -O-CH2- ou -CH2-O-;

R1 representa um grupo hidróxi ou uma porção conversível a umgrupo hidróxi in vivo;

R2 representa um grupo C1-C6 alquila;R3 e R4 representam, independentemente, um grupo CrC6 alqui-Ia ou um grupo C3-C7 cicloalquila, o referido grupo CrC6 alquila e o referidogrupo C3-C7 cicloalquila sendo não-substituídos ou substituídos por 1 a 3substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em umátomo de halogênio, um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alcóxi e um grupo C3-C7 cicloalquila; ou R3 e R41 tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qualeles estão ligados, formam um grupo heterocíclico de 4 a 7 elementos sendonão-substituído ou substituído por 1 a 3 substituintes selecionados do grupoconsistindo em um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alquila, um grupo CrC6alcóxi e um grupo hidróxi-Ci-C6 alquila; e

R5, R6, R7 e Ra representam, independentemente, um átomo dehidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo CrC6 alquila.

Também, a presente invenção proporciona uma composiçãofarmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, cada um conforme descrito aqui, juntocom um veículo farmaceuticamente aceitável para o referido composto.

Também, a presente invenção proporciona uma composiçãofarmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, cada um conforme descrito aqui, aindacompreendendo outro(s) agente(s) farmacologicamente ativo(s).

Também, a presente invenção proporciona um método para o tra-tamento de uma condição mediada através de atividade de modulação dabomba de ácido em um mamífero, incluindo um ser humano, o qual compreen-de administração, ao mamífero que precisa de tal tratamento, de uma quanti-dade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, cada um conforme descrito aqui.

Exemplos de condições mediadas através de atividade de modu-lação da bomba de ácido incluem, mas não estão limitados a, Doenças ΑΡΑ.

Ainda, a presente invenção proporciona o uso de um compostoa fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, cada umconforme descrito aqui, para a fabricação de um medicamento para o trata-mento de uma condição mediada através de atividade inibitória da bomba deácido.

Ainda, a presente invenção proporciona um composto da fórmu-la (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em medi-cina.

De preferência, a presente invenção também proporciona o usode um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, conforme descrito aqui, para a fabricação de um medicamento parao tratamento de doenças selecionadas de Doenças ΑΡΑ.

Os compostos da presente invenção podem mostrar boa ativida-de inibitória da bomba de ácido, menos toxicidade, boa absorção, boa distri-buição, boa solubilidade, menos afinidade de ligação à outra proteína quenão a bomba de ácido, menos interação fármaco-fármaco e boa estabilidademetabólica.

Descrição Detalhada da Invenção

Nos compostos da presente invenção:onde R2, R3, R4, R5, R6, R7 e R8 são o grupo C1-C6 alquila, essegrupo C1-C6 alquila pode ser um grupo alquila de cadeia reta ou ramificadatendo um a seis átomos de carbono e exemplos incluem, mas não estão limi-tados a, metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila, 1-etilpropila e hexila. Desses, C1-C2 alquila é mais preferido;metila é mais preferido.

Onde R3 e R4 são o grupo C3-C7 cicloalquila, esse representa umgrupo cicloalquila tendo três a sete átomos de carbono e exemplos incluemciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila e cicloeptila. Desses, um grupoC3-C5 cicloalquila é preferido; ciclopropila é mais preferido.

Onde o substituinte de R3 e R4 são o grupo C1-C6 alcóxi, esserepresenta o átomo de oxigênio substituído pelo referido grupo C1-C6 alquilae exemplos incluem, mas não estão limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, iso-propóxi, butóxi, isobutóxi, sec-butóxi, terc-butóxi, pentilóxi e hexilóxi. Desses,um grupo C1-C4 alcóxi é preferido; um grupo C1-C2 alcóxi é preferido; metóxié mais preferido.

Onde R3 e R4, tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qualeles estão ligados, formam um grupo heterocíclico de 4 a 7 elementos, essegrupo heterocíclico de 4 a 7 elementos representa um grupo heterocíclicosaturado tendo três a seis átomos no anel selecionados de um outro átomode carbono, átomo de nitrogênio, átomo de enxofre e átomo de oxigênio quenão o referido átomo de nitrogênio e exemplos incluem, mas não estão limi-tados a, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, piperidila, pipe-razinila, hexaidroazepinila, hexaidrodiazepinila, morfolino, tiomorfolino e ho-momorfolino. Desses, azetidinila, pirrolidinila, morfolino e homomorfolino sãopreferidos; morfolino é mais preferido.

Onde o substituinte do grupo heterocíclico de 4 a 7 elementos é umgrupo hidróxi-Ci-C6 alquila, esse representa o referido grupo CrC6 alquila subs-tituído por um grupo hidróxi e exemplos incluem, mas não estão limitados a,hidroximetila, 2-hidroxietila, 1-hidroxietila 3-hidroxipropila, 2-hidroxipropila, 2-hidróxi-1 -metiletila, 4-hidroxibutila, 3-hidroxibutila, 2-hidroxibutila, 3-hidróxi-2-metilpropila, 3-hidróxi-1-metilpropila, 5-hidroxipentila e 6-hidroxiexila. Desses,hidróxi-CrC3 alquila é preferido; hidroximetila é mais preferido.

Onde R5, R6, R7 e R8 são o átomo de halogênio, eles podem serum átomo de flúor, cromo, bromo ou iodo. Desses, um átomo de flúor e umátomo de cloro são preferidos.

Onde a "porção conversível a um grupo hidróxi in vivo " significauma porção transformável in vivo, por exemplo, através de hidrólise e/ouatravés de uma enzima, por exemplo, uma esterase, em um grupo hidroxila.

Exemplos da porção incluem, mas não estão limitados a, grupos éster e éteros quais podem ser hidrolisados facilmente in vivo. Tais porções são conhe-cidas por aqueles versados na técnica como "pró-porções" conforme descri-to, por exemplo, em "Design of Prodrugs" por H. Bundgaard (Elsevier, 1985).Porções preferidas conversíveis in vivo a um grupo hidroxila são, por exem-plo, um grupo CrC6 alcóxi, um grupo CrC6 alquil-carbonil-óxi e um grupoCrC6 alquil-carbonil-óxi-metil-óxi.

Onde -A-B- é -O-CH2-, -A- corresponde a -O- e -B- correspondea -CH2-.

Onde -A-B- é -CH2-O-, -A- corresponde a -CH2- e -B- correspon-de a -O-.

Os termos "tratar de" e "tratamento", conforme usado aqui, refe-re-sem a tratamento curativo, paliativo e profilático, incluindo reversão, alívio,inibição da progressão de ou prevenção do distúrbio ou condição a qual taistermos se aplicam ou um ou mais sintomas de tal distúrbio ou condição.

Classes preferidas de compostos da presente invenção são aque-les compostos de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável dosmesmos, cada um conforme descrito aqui, nos quais:

(a) -A-B- é -O-CH2- ou -CH2-O-;

(b) -A-B- é -CH2-O-;

(c) R1 é um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alcóxi ou um grupo CrCe alquil-carbonil-óxi;

(d) R1 é um grupo hidróxi;

(e) R2 é um grupo CrC6 alquila;

(f) R2 é um grupo Ci-C2 alquila;

(g) R2 é um grupo metila;

(h) R3 é um grupo CrC6 alquila;

(i) R3 é um grupo CrC2 alquila;

(j) R 3 é um grupo metila;

(k) R4 é um grupo CrC6 alquila sendo não-substituído ou substitu-ído por um substituinte selecionado do grupo consistindo em um grupo hi-dróxi e um grupo C1-C6 alcóxi;

(I) R4 é um grupo CrC2 alquila sendo não-substituído ou substitu-ído por um substituinte selecionado do grupo consistindo em um grupo hi-dróxi e um grupo CrC4 alcóxi;

(m) R4 é um grupo Ci-C2 alquila sendo não-substituído ou substi-tuído por um grupo hidróxi;

(n) R4 é um grupo metila, um grupo etila ou um grupo 2-hidroxietila;

(o) R3 e R4, tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qual elesestão ligados, formam um grupo azetidinila, um grupo pirrolidinila, um grupomorfolino ou um grupo homomorfolino, o referido grupo azetidinila, referidogrupo pirrolidinila, referido grupo morfolino e referido grupo homomorfolinosendo não-substituídos ou substituídos por 1 a 3 substituintes selecionadosdo grupo consistindo em um grupo hidróxi, um grupo Ci-C6 alquila, um grupoCi-C6 alcóxi e um grupo hidróxi-CrC6 alquila;

(p) R3 e R41 tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qual elesestão ligados, formam um grupo pirrolidinila, um grupo morfolino ou um gru-po homomorfolino, referido grupo pirrolidinila, referido grupo morfolino e refe-rido grupo homomorfolino sendo não-substituídos ou substituídos por umsubstituinte selecionado do grupo consistindo em um grupo hidróxi, um gru-po CrC6 alquila, um grupo CrC6 alcóxi e um grupo hidróxi-CrC6 alquila;

(q) R5, R6, R7 e R8 são, independentemente, um átomo de hidro-gênio, um átomo de halogênio ou um grupo CrC6 alquila;

(r) R5, R6, R7 e R8 são, independentemente, um átomo de hidro-gênio, um átomo de halogênio ou um grupo C1-C2 alquila;

(s) R5, R6, R7 e R8 são, independentemente, um átomo de hidro-gênio, um átomo de flúor, um átomo de cloro ou um grupo metila;

(t) R5, R6, R7 e R8 são, independentemente, um átomo de hidro-gênio, um átomo de flúor ou um grupo metila;

(u) R5 é um átomo de hidrogênio, um átomo de flúor ou um grupometila;

(v) R6 é um átomo de hidrogênio;

(w) R7 é um átomo de hidrogênio ou um átomo de flúor; e

(x) R8 é um átomo de hidrogênio;

Dessas classes de compostos, qualquer combinação entre (a) a(x) é também preferida.

Compostos preferidos da presente invenção são aqueles compos-tos de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, cadaum conforme descrito aqui, nos quais:

(A) -A-B- é -O-CH2- ou -CH2-O-; R1 é um grupo hidróxi, um grupoCrC6 alcóxi ou um grupo CrC6 alquil-carbonil-óxi; R2 é um grupo Ci-C6 al-quila; R3 e R4 são, independentemente, um grupo CrC6 alquila ou um grupoC3-C7CiCloaIquiIa, a referida C1-C6 alquila e a referida C3-C7 cicloalquila sen-do não-substituída ou substituída por 1 a 3 substituintes independentementeselecionados do grupo consistindo em um átomo de halogênio, um grupohidróxi, um grupo C1-C6 alcóxi e um grupo C3-C7 cicloalquila; ou R3 e R4, to-mados junto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, formamum grupo azetidinila, um grupo pirrolidinila, um grupo morfolino ou um grupohomomorfolino, o referido grupo azetidinila, referido grupo pirrolidinila, referi-do grupo morfolino e referido grupo homomorfolino sendo não-substituídosou substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados do grupo consistindo emum grupo hidróxi, um grupo C1-C6 alquila, um grupo C1-C6 alcóxi e um grupohidróxi-C1-C6 alquila; e R5, R6, R7 e R8 são, independentemente, um átomode hidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo C1-C6 alquila;

(B) -A-B- é -O-CH2- ou -CH2-O-; R1 é um grupo hidróxi; R2, R3 eR4 são, independentemente, um grupo C1-C6 alquila; ou R3 e R4, tomadosjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, formam um gru-po morfolino; R5 e R7 são, independentemente, um átomo de hidrogênio, umátomo de halogênio ou um grupo C1-C6 alquila; e R6 e R8 são, independen-temente, um átomo de hidrogênio ou um átomo de halogênio;

(C) -A-B- é -CH2-O-; R1 é um grupo hidróxi; R2, R3 e R4 são, inde-pendentemente, um grupo C1-C6 alquila; R5 e R7 são, independentemente,um átomo de hidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo C1-C6 alquila;e R6 e R8 são, independentemente, um átomo de hidrogênio ou um átomode halogênio; e

(D) -A-B- é -CH2-O-; R1 é um grupo hidróxi; R2, R3 e R4 são, cadaum, um grupo metila; R5 e R7 são, independentemente, um átomo de hidro-gênio, um átomo de flúor ou um grupo metila; e R6 e R8 são, independente-mente, um átomo de hidrogênio ou um átomo de flúor.

Os compostos de fórmula (I) contendo um ou mais átomos decarbono assimétricos podem existir como dois ou mais estereoisômeros.

Incluídos dentro do escopo da presente invenção estão todos osestereoisômeros e isômeros geométricos dos compostos de fórmula (I), in-cluindo compostos exibindo mais de um tipo de isomerismo e misturas deum ou mais dos mesmos. Também incluídos são sais de adição de ácido emque o contra-íon é opticamente ativo, por exemplo, D-Iactato ou L-Iisina ouracemato, DL-tartrato ou DL-arginina.

Uma modalidade da invenção proporciona um composto sele-cionado do grupo consistindo em:

(S)-(-)-3-(hidroximetil)-N,N,2-trímetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida;

(+)-8-(3,4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida;

(S)-(-)-8-[(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida; e

(-)-8-[(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazo [1,2-a]piridina-6-carboxamida;

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Sais farmaceuticamente aceitáveis de um composto de fórmula(I) incluem os sais de adição de ácido (incluindo dissais) dos mesmos.

Sais de adição de ácido adequado são formados a partir de áci-dos os quais formam sais não-tóxicos. Exemplos incluem os sais acetato,adipato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sul-fato, borato, cansilato, citrato, ciclamato, edisilato, esilato, formato, fumarato,gluceptato, gluconato, glucuronato, hexaflúorfosfato, hibenzato, hidroclore-to/cloreto, hidrobrometo/brometo, hidroiodeto/iodeto, isetionato, lactato, ma-lato, maleato, malonato, mesilato, metil-sulfato, naftilato, 2-napsilato, nicoti-nato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogen fosfa-to/dihidrogen fosfato, piroglutamato, sacarato, estearato, succinato, tanato,tartrato, tosilato, triflúoracetato e xinofoato.

Para uma revisão sobre sais vide "Handbook of PharmaceuticalSalts: Properties, Selection and Use" por Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Wei-nheim, Alemanha, 2002). Um sal farmaceuticamente aceitável de um com-posto de fórmula (I) pode ser prontamente preparado através de mistura desoluções do composto de fórmula (I) e do ácido ou base desejado, conformeapropriado. O sal pode se precipitar da solução e ser coletado através defiltração ou pode ser recuperado através de evaporação do solvente. O graude ionização no sal pode variar de completamente ionizado e quase não-ionizado.

Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invençãoincluem formas não-solvatadas e solvatadas. O termo "solvato" é usado aquipara descrever um complexo molecular compreendendo um composto dainvenção e uma ou mais moléculas farmaceuticamente aceitáveis, por e-xemplo, etanol. O termo "hidrato" é empregado quando o referido solvente éágua.

Solvatos farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a inven-ção incluem hidratos e solvatos em que o solvente de cristalização pode serisotopicamente substituído, por exemplo, D2O1 cfe-acetona, cfe-DMSO.

Incluídos dentro do escopo da invenção estão complexos, tais co-mo clatratos, complexos de inclusão de fármaco-hospedeiro em que, em con-traste aos solvatos antes mencionados, o fármaco e o hospedeiro estão pre-sentes em quantidades estequiométricas ou não-estequiométricas. Tambémincluídos são complexos do fármaco contendo dois ou mais componentes or-gânicos e/ou inorgânicos os quais podem estar em quantidades estequiométri-cas ou não-estequiométricas. Os complexos resultantes podem ser ionizados,parcialmente ionizados ou não-ionizados. Para uma revisão de tais complexosvide J Pharm Sei. 64 (8), 1269-1288 por Haleblian (Agosto de 1975).

Os compostos de fórmula (I) podem existir em uma ou mais for-mas cristalinas. Esses polimorfos, incluindo misturas dos mesmos, tambémsão incluídos dentro do escopo da presente invenção.

Os compostos de fórmula (I) contendo um ou mais átomos decarbono assimétricos podem existir como dois ou mais estereoisômeros.

Incluídos dentro do escopo da presente invenção estão todos osestereoisômeros dos compostos de fórmula (I), incluindo compostos exibindomais de um tipo de isomerismo e misturas de um ou mais dos mesmos.

A presente invenção inclui todos os compostos de fórmula (I)isotopicamente rotulados farmaceuticamente aceitáveis em que um ou maisátomos são substituídos por átomos tendo o mesmo número atômico, masuma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ounúmero atômico usualmente encontrados na natureza.

Exemplos de isótopos adequados para inclusão nos compostosda invenção incluem isótopos de hidrogênio, tais como 2H e 3H1 carbono, taiscomo 11C, 13C e 14C, cloro, tais como 36CI, flúor, tais como 18F, iodo, tais co-mo 123I e 125I, nitrogênio, tais como 13N e 15N, oxigênio, tais como 15O, 17O e18O, fósforo, tal como 32P e enxofre, tal como 35S.

Determinados compostos de fórmula (I) isotopicamente rotula-dos, por exemplo, aqueles incorporando um isótopo radioativo, são úteis emestudos de distribuição tecidual de fármaco e/ou substrato. Os isótopos ra-dioativos trítio, isto é, 3H e carbono-14, isto é, 14C, são particularmente úteispara essa finalidade em vista de sua facilidade de incorporação e prontosmeios de detecção.

Substituição com isótopos mais pesados, tais como deutério, istoé, 2H1 pode proporcionar determinadas vantagens terapêuticas resultante demaior estabilidade metabólica, por exemplo, meia-vida aumentada in vivo ourequisitos de dosagem reduzida e, conseqüentemente, pode ser preferidoem algumas circunstâncias.

Substituição com isótopos que emitem positron, tais como 11C,18F, 15O e 13N, pode ser útil em estudos de Topografia por Emissão de Posi-tron (PET) para examinar a ocupação do receptor de substrato.

Compostos de fórmula (I) isotopicamente rotulados podem ge-ralmente ser preparados através de métodos convencionais conhecidos poraqueles versados na técnica ou através de processos análogos àquelesdescritos nos exemplos e preparados em anexo usando reagentes isotopi-camente-rotulados adequados em lugar do reagente não-rotulado previa-mente empregado.

Todos os compostos da fórmula (I) podem ser preparados atra-vés de procedimentos descritos nos métodos gerais apresentados abaixo ouatravés de métodos específicos descritos na seção exemplos e na seçãopreparados ou através de modificações de rotina dos mesmos. A presenteinvenção também abrange qualquer um ou mais desses processos para opreparo dos compostos de fórmula (I), além de quaisquer novos intermediá-rios usados nos mesmos.

Síntese Geral

Os compostos da presente invenção podem ser preparados atra-vés de uma variedade de processos bem-conhecidos para o preparo de com-postos desse tipo, por exemplo, conforme mostrado no Método A a seguir.

A menos que de outro modo indicado, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R71R8, A e B nos métodos a seguir são conforme definido acima. Todos os ma-teriais nas sínteses gerais a seguir podem estar comercialmente disponíveisou ser obtidos através de métodos convencionais conhecidos por aquelesversados na técnica, tal como no W099/55706 e WO 02/20523 e as divulga-ções dos quais são incorporadas aqui por referência.

Método A

Esse ilustra o preparo de compostos de fórmula (Ia) em que R1 é OH.

Esquema de Reação A

<formula>formula see original document page 13</formula>

No Esquema de Reação A, Ra é um grupo de carbóxi-proteção;Lv é um grupo de condução; e o mesmo se aplicará aqui depois.

O termo "grupo de condução", conforme usado aqui, significa umgrupo capaz de ser substituído por grupos nucleofílicos, tais como um grupohidróxi, aminas ou carboânions e exemplos de tais grupos de condução in-cluem átomos de halogênio, um grupo alquil-sulfonila e um grupo fenil-sulfonila. Desses, um átomo de bromo, um átomo de cloro, um átomo deiodo, um grupo metil-sulfonila, um grupo triflúormetil-sulfonila e um grupo 4-metilfenil-sulfonila são preferidos.

Etapa A1

Nessa etapa, o composto de fórmula (IV) é preparado através desubstituição nucleofílica do composto de fórmula (II), o qual está comercial-mente disponível ou pode ser preparado através dos métodos conformedescrito no W099/55706 e W002/020523 com o composto de fórmula (III), oqual está comercialmente disponível ou pode ser preparado através dos mé-todos conforme descrito no W02000/07851.

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: éteres, tais comotetraidrofurano (THF), dimetil éter de etileno glicol e dioxano; amidas, tais co-mo Λ/,AkJimetiIformamida (DMF), /V,A/-dimetilacetamida (DMA) e A/-metil-2-pirrolidinona (NMP); nitrilas, tal como acetonitrila; cetonas, tal como acetona;álcoois, tais como 2-metil-2-propanol, 1-butanol, 1-propanol, 2-propanol, eta-nol e metanol; e sulfóxido, tal como sulfóxido de dimetila (DMSO). Desses sol-ventes, amidas, cetonas e álcoois são preferidos. Acetona é mais preferida.

A reação pode ser realizada com ou sem uma base. Da mesmaforma, não há restrição particular quanto à natureza das bases usadas equalquer base comumente usada em reações desse tipo pode igualmenteser usada aqui. Exemplos de tais bases incluem: alcóxidos de metal alcalino,tais como metóxido de sódio, etóxido de sódio e terc-butóxido de potássio;carbonatos de metal alcalino, tais como carbonato de lítio, carbonato de só-dio (Na2CO3)1 carbonato de césio e carbonato de potássio (K2CO3); carbona-to de hidrogênios de metal alcalino, tais como carbonato de hidrogênio desódio (NaHCO3) e carbonato de hidrogênio de potássio; e aminas orgânicas,tais como trietilamina, tripropilamina, tributilamina, dicicloexilamina, N,N-diisopropiletilamina, A/-metilpiperidina, A/-metilmorfolina, 1,8-diazabici-clo[5,4,0]undec-7-eno (DBU) e 1,5-diazabiciclo[4,3,0]non-5-eno (DBN). Des-ses, carbonato de potássio é preferido.

A reação pode ser realizada com ou sem um iodeto. Exemplosde tais iodetos incluem: iodeto de sódio, iodeto de potássio e iodeto de cé-sio. Desses, iodeto de sódio e iodeto de potássio são preferidos.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de O0C a cerca de 250°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a reação temperatura e a natureza dos materiais departida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação seja rea-lizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cercade 5 minutos a cerca de 72 horas usualmente será suficiente.

Etapa A2

Nessa etapa, o composto de fórmula (VI) é preparado através de(A2a1) hidrólise do composto de fórmula (IV) preparado conforme descritona Etapa A1, seguido por (A2a2) reação de condensação com o compostode fórmula (V) ou (A2b) reação de substituição do composto de fórmula (IV)com o composto de fórmula (V).

(A2a1) hidrólise

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: éter, tais como te-traidrofurano e dioxano; amidas, tais como A/,/\/-dimetilformamida; álcoois,tais como etanol e metanol; e água; ou solventes misturados dos mesmos.

Desses solventes, metanol, tetraidrofurano e água são preferidos.

A reação é realizada na presença de uma base. Da mesma for-ma, não há restrição particular quanto à natureza das bases usadas e qual-quer base comumente usada em reações desse tipo pode igualmente serusada aqui. Exemplos de tais bases incluem: hidróxidos de metal alcalino,tais como hidróxido de Iftio (LiOH), hidróxido de sódio (NaOH) e hidróxido depotássio (KOH). Desses, hidróxido de sódio é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de 0°C a cerca de 100°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a reação temperatura e a natureza dos materiais departida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação seja rea-lizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cercade 5 minutos a cerca de 12 horas usualmente será suficiente.

(A2a2) reação de condensação

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetoshalogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éte-res, tais como tetraidrofurano e dioxano; amidas, tais como N,N-dimetilfor-mamida e N,N-dimetilacetamida; e nitrilas, tal como acetonitrila. Desses sol-ventes, hidrocarbonetos halogenados e amidas são preferidos. Diclorometa-no e N,N-dimetilformamida são mais preferidos.

A reação é realizada na presença de um agente de condensa-ção. Da mesma forma, não há restrição particular quanto à natureza dos a-gentes de condensação usados e quaisquer agentes de condensação co-mumente usados em reações desse tipo podem igualmente ser usados aqui.Exemplos de tais agentes de condensação incluem: alquil éster inferior-trifenilfosfinas/ácido azodicarboxílico, tal como azodicarboxilato de dietila-trifenilfosfina; haletos de 2-halo-1-alquila inferior piridínio, tais como iodetode 2-cloro-1-metila piridínio e tetraflúorborato de 2-bromo-1-etilpiridínio(BEP); diarilfosforilazidas, tais como difenilfosforilazida (DPPA); cloroforma-tos, tais como cloroformato de etila e cloroformato de isobutila; fosforociani-datos, tal como fosforocianidato de dietila (DEPC); derivados de imidazola,tal como N,N'- carbonildiimidazola (CDI); derivados de carbodiimida, taiscomo N,N-dicicloexilcarbodiimida (DCC) e hidrocloreto de 1-(3-dimetila-minopropil)-3-etilcarbodiimida (EDCI); sais de imínio, tais como hexaflúorfos-fato de 2-(1/-/-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio (HBTU) e hexaflúorfosfato de tetrametil flúorformamidínio (TFFH); e sais de fosfônio, tais comohexaflúorfosfato de benzotriazol-1- ilóxitris(dimetilamino)fosfônio (BOP) ehexaflúorfosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfônio (PyBrop). Desses, EDCI eHBTU são preferidos.

Reagentes, tais como 4-(A/,A/-dimetilamino)piridina (DMAP) e N-hidroxibenztriazola (HOBt), podem ser empregados para essa etapa. Des-ses, HOBt é preferido.

A reação pode ser realizada com ou sem uma base. Da mesmaforma, não há restrição particular quanto à natureza das bases usadas equalquer base comumente usada em reações desse tipo pode igualmenteser usada aqui. Exemplos de tais bases incluem: aminas, tais como N-metilmorfolina, trietilamina, diisopropiletilamina, A/-metilpiperidina e piridina.Desses, trietilamina e /V-metilmorfolina são preferidos.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de O0C a cerca de 80°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a reação temperatura e a natureza dos materiais departida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação seja rea-lizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cercade 5 minutos a cerca de 24 horas usualmente será suficiente.(A2b) reação de substituição

A reação pode ser realizada através de aquecimento dos rea-gentes no composto de amino puro ou em um solvente inerte sob condição-padrão. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a ser em-pregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os reagen-tes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos até al-gum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: éteres, tais como di-metil éter de etileno glicol, tetraidrofurano e dioxano; amidas, tais como N1N-dimetilformamida e /\/,A/-dimetilacetamida; nitrilas, tal como acetonitrila; eálcoois tais como 2-metil-2-propanol, 1-butanol, 1-propanol, 2-propanol, eta-nol e metanol. Desses solventes, éteres e álcoois são preferidos. Tetraidro-furano é mais preferido.

A reação pode ser realizada com ou sem um catalisador. Damesma forma, não há restrição particular quanto à natureza do catalisadorusado e quaisquer catalisadores comumente usados em reações desse tipopodem igualmente ser usados aqui. Exemplos de tais catalisadores incluem:cianeto de sódio ou cianeto de potássio. Desses, cianeto de sódio é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de 40°C a cerca de 200°C. O tempo re-uerido para a reação pode também variar amplamente, dependendo demuitos fatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos ma-teriais de partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a rea-ção seja realizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um perío-do de cerca de 30 minutos a cerca de 24 horas usualmente será suficiente.

Etapa A3

Nessa etapa, o composto desejado de fórmula (Ia) é preparadoatravés de hidroximetilação do composto de fórmula (VI) preparado confor-me descrito na Etapa A2 com formaldeído, paraformaldeído ou 1,3,5-trioxano.

A reação é realizada na presença ou ausência de solvente. Nãohá restrição particular quanto à natureza do solvente a ser empregado, con-tanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os reagentes envolvidose que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos até algum grau. Exem-plos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetos alifáticos, tais comohexano, heptano e éter de petróleo; hidrocarbonetos halogenados, tais comodiclorometano, clorofórmio, tetracloreto de carbono e 1,2-dicloroetano; éte-res, tais como dietil éter, diisopropil éter, tetraidrofurano e dioxano; hidrocar-bonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e nitrobenzeno; amidas,tais como formamida, Λ/,/V-dimetilformamida, /V,/V-dimetilacetamida e triami-da hexametilfosfórica; aminas, tais como /V-metilmorfolina, trietilamina, tri-propilamina, tributilamina, diisopropiletilamina, dicicloexilamina, /V-metilpipe-ridina, piridina, 4-pirrolidinopiridina, Λ/,/V-dimetilanilina e Λ/,/V-dietilanilina; ál-coois, tais como metanol, etanol, propanol, 2-propanol e 1-butanol; nitrilas,tal como acetonitrila e benzonitrila; sulfóxidos, tais como sulfóxido de dimeti-Ia e sulfolano; e água. Desses solventes, acetonitrila e água são preferidos.

A reação é realizada na presença de reagente, tal como um áci-do ou uma base. Da mesma forma, não há restrição particular quanto à natu-reza dos ácidos ou bases usados e qualquer ácido ou base comumente u-sada em reações desse tipo pode igualmente ser usada aqui.

Exemplos de tais ácidos incluem: ácidos carboxílicos, tais comoácido acético e ácido propiônico; ácidos inorgânicos, tais como ácido clorí-drico e ácido sulfúrico; ácidos orgânicos, tais como ácido p-tolueno-sulfônicoe ácido triflúor acético; e ácidos de Lewis, tais como BF3, AICI3, FeCI3, AgCI1Znl2, Fe(NO3)3, CF3SO3Si(CH3)3, Yb(CF3 S03)3 e SnCI4. Desses, ácido acéti-co é preferido.

Exemplos de tais bases incluem: acetatos de metal alcalino, taiscomo acetato de lítio, acetato de sódio, hidróxido de potássio e acetato decésio; hidróxidos de metal alcalino, tais como hidróxido de lítio, hidróxido desódio e hidróxido de potássio; alcóxidos de metal alcalino, tais como metóxi-do de sódio, etóxido de sódio e t-butóxido de potássio; carbonatos de metalalcalino, tais como carbonato de lítio, carbonato de sódio e carbonato de po-tássio; carbonato de hidrogênios de metal alcalino, tais como carbonato dehidrogênio de lítio, carbonato de hidrogênio de sódio e carbonato de hidro-gênio de potássio; e aminas, tais como /V-metilmorfolina, trietilamina, tripropi-lamina, tributilamina, diisopropiletilamina, dicicloexilamina, /V-metilpiperidina,piridina, 4-pirrolidinopiridina, picolina, 4-(/V,/V-dimetilamino)piridina, 2,6-di(f-butil)-4-metilpiridina, quinolina, A/,A/-dimetilanilina, Λ/,/V-dietilanilina, DBN, 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octano (DABCO), imidazola e DBU. Desses, acetato desódio é preferido.A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de O0C a cerca de 250°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a reação temperatura e a natureza dos materiais departida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação seja rea-lizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cercade 5 minutos a cerca de 72 horas usualmente será suficiente.

A ordem da Etapa A2 e Etapa A3 pode ser trocada. Por exem-plo, o composto cuja posição 3 é substituída por hidroximetila no compostoda fórmula (IV) (em que o composto é denominado composto (IVa) ) é pre-parado através de hidroximetilação de composto da fórmula (IV) com formal-deído, paraformaldeído ou 1,3,5-trioxano conforme descrito na Etapa A3 e,então, o composto da fórmula (I) é preparado através de reação do compos-to (IVa) com os compostos de fórmula (V) conforme descrito na Etapa A2.

Método B

Esse ilustra o preparo de compostos de fórmula (Ia).

Esquema de Reação B

<formula>formula see original document page 20</formula>

No Esquema de Reação B, Hal é um átomo de halogênio; e omesmo se aplicará aqui depois.

Etapa B1

Nessa etapa, o composto de fórmula (VIII) é preparado atravésde halogenação do composto de fórmula (VII), o qual está comercialmentedisponível ou pode ser preparado através do método conforme descrito naUS2199839.

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetoshalogenados, tais como diclorometano, clorofórmio, tetracloreto de carbonoe 1,2-dicloroetano; éteres, tais como dietil éter, diisopropil éter, tetraidrofura-no, ciclopentil metil éter e dioxano; hidrocarbonetos aromáticos, tais comobenzeno, tolueno e nitrobenzeno; amidas, tais como A/,A/-dimetilformamida,A/,/V-dimetilacetamida e triamida hexametilfosfórica; nitrilas, tal como acetoni-trila e benzonitrila; e ácido carboxílico, tal como ácido acético; ou solventesmisturados dos mesmos. Desses, ciclopentil metil éter é preferido.

A reação é realizada na presença de um agente de halogena-ção. Da mesma forma, não há restrição particular quanto à natureza dos a-gentes de halogenação usados e qualquer agente de halogenação comu-mente usado em reações desse tipo pode igualmente ser usado aqui. E-xemplos de tais agentes de halogenação incluem: cloro, bromo, A/-cloro-succinimida, /V-bromo-succinimida (NBS), tribrometo de tetra-n-butilamônio e1,3-dibromo-5,5-dimetilidantoína. Desses, A/-bromo-succinimida é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de 0°C a cerca de 80°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos materiaisde partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação sejarealizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cer-ca de 10 minutos a cerca de 8 horas usualmente será suficiente.

Etapa B2

Nessa etapa, o composto de fórmula (X) é preparado através deciclização do composto de fórmula (VIII) e o composto de fórmula (IX), o qualestá comercialmente disponível.

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençaou ausência de solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do sol-vente a ser empregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reaçãoou os reagentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo me-nos até algum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbo-netos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio, tetracloreto de car-bono e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como dietil éter, diisopropil éter, tetraidro-furano e dioxano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno enitrobenzeno; amidas, tais como formamida, A/,A/-dimetilformamida, N1N-dimetilacetamida e triamida hexametilfosfórica; cetonas, tal como acetona e 2-butanona; álcoois, tais como metanol e etanol; ácidos carboxílicos, tal comoácido acético; e nitrilas, tais como acetonitrila e propionitrila; ou solventes mis-turados dos mesmos. Desses, propionitrila é preferido.

A reação pode ser realizada na presença ou ausência de rea-gente, tal como um ácido ou uma base. Da mesma forma, não há restriçãoparticular quanto à natureza dos ácidos ou bases usados e qualquer ácidoou base comumente usada em reações desse tipo pode igualmente ser usa-da aqui. Exemplos de tais ácidos incluem: ácidos, tais como ácido clorídrico,ácido sulfúrico, ácido hidrobrômico e ácido p-tolueno-sulfônico. Desses, áci-do p-tolueno-sulfônico ou a ausência de ácido é preferido. Exemplos de taisbases incluem: carbonato de hidrogênios de metal alcalino, tais como carbo-nato de hidrogênio de sódio e carbonato de hidrogênio de potássio; carbona-tes de metal alcalino, tais como carbonato de sódio e carbonato de potássio;aminas, tais como trietilamina e diisopropiletilamina. Desses, diisopropileti-Iamina ou a ausência de base é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de 20°C a cerca de 150°C. O tempo re-querido para a reação pode também variar amplamente, dependendo demuitos fatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos ma-teriais de partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a rea-ção seja realizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um perío-do de cerca de 3 horas a cerca de 120 horas, usualmente será suficiente.

Etapa B3

Nessa etapa, o composto de fórmula (IV) é preparado através deacoplamento cruzado do composto de fórmula (X) com o composto de fór-mula (XI), o qual pode estar comercialmente disponível ou pode ser prepa-rado através do métodos descritos no Método C a seguir. A reação é reali-zada sob as mesmas condições conforme descrito em J. Am. Chem. Soc.,1996, 118, 7215.

A reação é normalmente realizada na presença ou ausência desolvente. Solventes típicos são hidrocarbonetos aromáticos, tais como ben-zeno e tolueno.

A reação é realizada na presença de uma base. Bases típicassão t-butóxido de sódio, conforme descrito na literatura indicada acima.

A reação é realizada na presença de um catalisador. O catalisa-dor consiste em uma fonte de paládio, tais como tris(dibenzilidenoaceto-na)dipaládio (Pd2(dba)3) e um ligante, tal como tri(o-tolil)fosfina, 1,1'-binafta-leno-2,2'-diilbis(difenilfosfina) (BINAP) e 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno(DPPF). Desses, uma combinação de Pd2(dba)3 e BINAP é preferido de a-20 cordo com a literatura indicada acima.

A reação ocorre, tipicamente, na faixa de 80°C e 100°C. O tem-po requerido para a reação pode variar amplamente, dependendo da tempe-ratura de reação e da natureza dos materiais de partida e do catalisador em-pregado. Contudo, contanto que a reação seja realizada sob as condiçõespreferidas esboçadas acima, um período de cerca de 1 hora a 22 horas usu-almente será suficiente.

Etapa B4

Nessa etapa, o composto de fórmula (VI) é preparado através dehidrólise do composto de fórmula (IV) preparado, seguido por reação de con-densação com o composto de fórmula (V) ou reação de substituição do com-posto de fórmula (IV) com o composto de fórmula (V). A reação pode ser rea-lizada sob a mesma condição conforme descrito na Etapa A2 do Método A.Etapa B5

Nessa etapa, o composto desejado de fórmula (Ia) é preparadoatravés de hidroximetilação do composto de fórmula (VI) preparado confor-me descrito na Etapa B2 com formaldeído, paraformaldeído ou 1,3,5-trioxano. A reação pode ser realizada sob a mesma condição conforme des-crito na Etapa A3 do Método A.

A ordem da Etapa B4 e Etapa B5 pode ser trocada. Por exem-plo, o composto cuja posição 3 é substituída por hidroximetila no compostoda fórmula (IV) (em que o composto é denominado composto (IVa) ) é pre-parado através de hidroximetilação de composto da fórmula (IV) com formal-deído, paraformaldeído ou 1,3,5-trioxano conforme descrito na Etapa A3 doMétodo A e, então, o composto da fórmula (Ia) é preparado através de rea-ção do composto (IVa) com os compostos de fórmula (V) conforme descritona Etapa A2 do Método A.

O composto de fórmula (Ib) onde R1 é outro que não OH podeser preparado através de métodos convencionais conhecidos por aquelesversados na técnica escritos, por exemplo, em "Design of Prodrugs" por H.Bundgaard (Elsevier, 1985).

Método C

Esse ilustra o preparo de compostos de fórmula (XIa) em que Aé CH2.

Esquema de Reação C

No Esquema de Reação C, R5a, R6a e R7a são um átomo de hi-drogênio, um grupo C1-C3 alquila ou um átomo de flúor; R8a é um átomo dehidrogênio ou um átomo de flúor.

Etapa C1

Nessa etapa, o composto de fórmula (XIV) é preparado atravésde reação de adição do composto de fórmula (XII), o qual está comercial-mente disponível, com o composto de fórmula (XIII), o qual está comercial-mente disponível.

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetoshalogenados, tais como diclorometano, clorofórmio, tetracloreto de carbonoe 1,2-dicloroetano; éteres, tais como dietil éter, diisopropil éter, tetraidrofura-no e dioxano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno enitrobenzeno; amidas, tais como formamida, A/,/V-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida e triamida hexametilfosfórica; aminas, tais como N-metilmorfolina, trietilamina, tripropilamina, tributilamina, diisopropiletilamina,N-metilpiperidina, piridina, 4-pirrolidinopiridina, A/,A/-dimetilanilina e N,N-dietilanilina; álcoois, tais como metanol, etanol, propanol, 2-propanol e buta-nol; nitrilas, tal como acetonitrila e benzonitrila; sulfóxidos, tais como sulfóxi-do de dimetila e sulfolano; e cetonas, tal como acetona e dietilcetona.

Desses solventes, acetonitrila e tetraidrofurano são preferidos.

A reação é realizada na presença de uma base. Da mesma for-ma, não há restrição particular quanto à natureza das bases usadas e qual-quer base comumente usada em reações desse tipo pode igualmente serusada aqui. Exemplos de tais bases incluem: hidróxidos de metal alcalino,tais como hidróxido de lítio, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio; hidre-tos de metal alcalino, tais como hidreto de lítio, hidreto de sódio e hidreto depotássio; alcóxidos de metal alcalino, tais como metóxido de sódio, etóxidode sódio e t-butóxido de potássio; carbonatos de metal alcalino, tais comocarbonato de lítio, carbonato de sódio e carbonato de potássio; carbonato dehidrogênios de metal alcalino, tais como carbonato de hidrogênio de lítio,carbonato de hidrogênio de sódio e carbonato de hidrogênio de potássio;aminas, tais como /V-metilmorfolina, trietilamina, tripropilamina, tributilamina,diisopropiletilamina, N-metilpiperidina, piridina, 4-(A/,A/-dimetilamino)piridina eDBU; e fluoretos de tetraalquilamônio, tal como fluoreto de tetra-n-butilamônio (TBAF). Desses, TBAF é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de O0C a cerca de 100°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos materiaisde partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação sejarealizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cer-ca de 5 minutos a cerca de 72 horas usualmente será suficiente.

Etapa C2

Nessa etapa, o composto de fórmula (XV) é preparado atravésde hidrogenação do composto de fórmula (XIV).

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetosaromáticos, tais como tolueno; álcoois, tais como metanol e etanol; e ácidoscarboxílicos, tais como ácido acético. Desses solventes, álcoois e ácidoscarboxílicos são preferidos.

A reação é realizada sob uma atmosfera de nitrogênio e na pre-sença de um catalisador. Da mesma forma, não há restrição particular quan-to à natureza do catalisador usado e quaisquer catalisadores comumenteusados em reação desse tipo pode igualmente ser usado aqui. Exemplos detais catalisadores incluem: paládio sobre carbono, platina e níquel de Raney.

Desses catalisadores, paládio sobre carbono é preferido.

No caso em que hidrodealogenação (de substituinte "Hal" noEsquema de Reação C) é um problema grave, a reação pode ser realizadana presença de um aditivo, o qual reduz a atividade do catalisador emprega-do. O aditivo é selecionado de substâncias conhecidas por mostrar efeito deenvenenamento em algum grau contra o catalisador. Exemplos de tais aditi-vos incluem: uma fonte de íons de haleto, tal como brometo de tetra-n-butilamônio e brometo de sódio; e sulfóxidos, tais como sulfóxido de dimetila.Desses, brometo de sódio é preferido.

A reação pode ocorrer sob uma ampla faixa de pressões e apressão precisa não é crítica para a invenção. A pressão preferida depende-rá de fatores tais como a natureza dos materiais de partida e o solvente.

Contudo, em geral, é conveniente realizar a reação em uma pressão de 1atm a cerca de 10 atm. A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa detemperaturas e a temperatura precisa de reação não é crítica para a inven-ção. A temperatura de reação preferida dependerá de fatores tais como anatureza do solvente e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conve-niente realizar a reação em uma temperatura de cerca de 0°C a cerca de50°C. O tempo requerido para a reação pode também variar amplamente,dependendo de muitos fatores, notavelmente a pressão de hidrogênio, atemperatura de reação e a natureza dos materiais de partida e do solventeempregados. Contudo, contanto que a reação seja realizada sob a condiçãopreferida esboçada acima, um período de cerca de 30 minutos a cerca de 12horas usualmente será suficiente.

Etapa C3

Nessa etapa, o composto de fórmula (XVI) é preparado atravésde ciclização do composto de fórmula (XV).

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade um ácido, o qual funciona como solvente e reagente. Não há restriçãoparticular quanto à natureza do ácido a ser empregado, contanto que nãohaja efeito adverso sobre a reação e que ele possa dissolver o substrato,pelo menos até algum grau. Exemplos de ácidos adequados incluem: ácidosulfúrico e ácido triflúormetano-sulfônico. Desses, ácido triflúormetano-sulfônico é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas e

a temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de O0C a cerca de 150°C. O tempo reque-rido para a reação pode também variar amplamente, dependendo de muitosfatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos materiaisde partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a reação sejarealizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um período de cer-ca de 30 minutos a cerca de 5 horas, usualmente será suficiente.

Etapa C4

Nessa etapa, o composto de fórmula (XVIII) é preparado atravésde aminação redutiva do composto de fórmula (XVI) com o composto defórmula (XVII), o qual está comercialmente disponível. No caso do uso deum composto opticamente ativo de fórmula (XVII), o composto resultante defórmula (XVIII) pode ser obtido como um composto opticamente ativo.

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou os rea-gentes envolvidos e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: hidrocarbonetoshalogenados, tais como diclorometano e 1,2-dicloroetano; éteres, tais comodietil éter, diisopropil éter, tetraidrofurano e dioxano; hidrocarbonetos aromá-ticos, tais como benzeno e tolueno; amidas, tais como formamida, N1N-dimetilformamida, A/,A/-dimetilacetamida e triamida hexametilfosfórica; ami-nas, tais como /V-metilmorfolina, trietilamina, tripropilamina, tributilamina, dii-sopropiletilamina, dicicloexilamina, A/-metilpiperidina, piridina, 4-pirrolidi-nopiridina, A/,A/-dimetilanilina e A/,/V-dietilanilina; e álcoois, tais como meta-nol, etanol, propanol, 2-propanol e butanol. Desses solventes, tetraidrofuranoé preferido.

A reação é realizada na presença ou ausência de um agente dedesidratação. Da mesma forma, não há restrição particular quanto à nature-za dos agentes de desidratação usados e quaisquer agentes de desidrata-ção comumente usados em reações desse tipo pode igualmente ser usadoaqui. Exemplos de tais agentes de desidratação incluem: isopropóxido detitânio(IV), sulfato de magnésio e peneiras moleculares. Desses, isopropóxi-do de titânio(IV) é preferido.

A reação é realizada na presença de um agente de redução. Damesma forma, não há restrição particular quanto à natureza do agente deredução usado e qualquer agente de redução comumente usado em reaçõesdesse tipo pode igualmente ser usado aqui. Exemplos de tais agentes deredução incluem: boroidretos de metal, tais como boroidreto de sódio e cia-noborohidreto de sódio; combinações de um fornecedor de hidrogênio, taiscomo gás hidrogênio e formato de amônio; catalisadores, tais como paládio-carbono, platina e níquel de Raney; uma combinação de metais, tais comozinco e ferro; ácidos, tais como ácido clorídrico, ácido acético e complexo deácido acético-cloreto de amônio; compostos de hidreto, tais como hidreto delítio alumínio, boroidreto de sódio e hidreto de diisobutil alumínio; e reagen-tes de borano, tais como complexo de bora-tetraidrofurano, complexo deboro-sulfeto de dimetila (BMS) e 9-borabiciclo[3,3,1]nonano (9-BBN). Des-ses, boroidreto de sódio é preferido.

A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa de temperaturas ea temperatura precisa de reação não é crítica para a invenção. A temperatu-ra de reação preferida dependerá de fatores tais como a natureza do solven-te e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conveniente realizar a rea-ção em uma temperatura de cerca de -40°C a cerca de 20°C. O tempo re-querido para a reação pode também variar amplamente, dependendo demuitos fatores, notavelmente a temperatura de reação e a natureza dos ma-teriais de partida e do solvente empregados. Contudo, contanto que a rea-ção seja realizada sob as condições preferidas esboçadas acima, um perío-do de cerca de 30 minutos a cerca de 24 horas, usualmente será suficiente.

Etapa C5

Nessa etapa, o composto de fórmula (XIa) é preparado atravésde hidrogenólise do composto de fórmula (XVIII).

A reação é normalmente e de preferência realizada na presençade solvente. Não há restrição particular quanto à natureza do solvente a serempregado, contanto que não haja efeito adverso sobre a reação ou o cata-Lisador envolvido e que ele possa dissolver os reagentes, pelo menos atéalgum grau. Exemplos de solventes adequados incluem: éteres, tais comodietil éter, diisopropil éter, tetraidrofurano e dioxano; hidrocarbonetos aromá-ticos, tais como benzeno e tolueno; álcoois, tais como metanol, etanol, pro-panol, 2-propanol e butanol; e ácidos carboxílicos, tal como ácido acético; ousolventes misturados dos mesmos. Desses, metanol é preferido.

A reação é realizada na presença de um fornecedor de hidrogê-nio e um catalisador. Da mesma forma, não há restrição particular quanto ànatureza dos fornecedores de hidrogênio e os catalisadores usados e quais-quer fornecedores de hidrogênio e catalisadores comumente usados em re-ações desse tipo podem igualmente ser usados aqui. Exemplos de tais for-necedores de hidrogênio incluem gás hidrogênio e formato de amônio. Des-ses, gás hidrogênio é preferido. Exemplos de tais catalisadores incluem: pa-ládio sobre carbono, hidróxido de paládio e cloreto de paládio. Desses, palá-dio sobre carbono é preferido.

A reação pode ocorrer sob uma ampla faixa de pressões e apressão precisa não é crítica para a invenção. A pressão preferida depende-rá de fatores tais como a natureza dos materiais de partida e o solvente.Contudo, em geral, é conveniente realizar a reação em uma pressão de 1atm a cerca de 10 atm. A reação pode ocorrer sobre uma ampla faixa detemperaturas e a temperatura precisa de reação não é crítica para a inven-ção. A temperatura de reação preferida dependerá de fatores tais como anatureza do solvente e os materiais de partida. Contudo, em geral, é conve-niente realizar a reação em uma temperatura de cerca de 20°C a cerca de 100°C. O tempo requerido para a reação pode também variar amplamente,dependendo de muitos fatores, notavelmente a pressão de hidrogênio, atemperatura de reação e a natureza dos materiais de partida e do solventeempregados. Contudo, contanto que a reação seja realizada sob a condiçãopreferida esboçada acima, um período de cerca de 30 minutos a cerca de 12 horas usualmente será suficiente.

O preparação/isolamento de enantiômeros individuais pode serfeito através de técnicas convencionais, tais como síntese quiral a partir deum precursor opticamente puro adequado o qual pode ser preparado de a-cordo com o Método C ou decomposição do racemato (ou o racemato de umsal ou derivado) usando, por exemplo, cromatografia de líquido em altapressão quiral (HPLC).

Alternativamente, um método de decomposição óptica de umracemato (ou precursor racêmico) pode ser apropriadamente selecionado apartir de procedimentos convencionais, por exemplo, cristalização preferen-cial ou decomposição de sais diastereoméricos entre uma porção básica docomposto de fórmula (I) e um ácido opticamente ativo adequado, tal comoácido tartárico.

Os compostos de fórmula (I) e os intermediários nos métodos depreparo acima mencionados podem ser isolados e purificados através deprocedimentos convencionais, tais como destilação, recristalização ou purifi-cação cromatográfica.

Compostos da invenção destinados a uso farmacêutico podemser administrados como produtos cristalinos ou amorfos. Eles podem serobtidos, por exemplo, como tampões sólidos, pós ou filmes através de méto-dos tais como precipitação, cristalização, liofilização, secagem por pulveriza-ção ou secagem evaporativa. Secagem com microondas ou rádio freqüênciapode ser usada para essa finalidade.

Eles podem ser administrados sozinhos ou em combinação comum ou mais de outros compostos da invenção ou em combinação com umou mais de outros fármacos (ou como qualquer combinação dos mesmos).

Geralmente, eles serão administrados como uma composição ou formulaçãofarmacêutica em associação com um ou mais veículos ou excipientes. Otermo "veículo" ou "excipiente" é usado aqui para descrever qualquer outroingrediente que não o(s) composto(s) da invenção. A escolha do veículo ouexcipiente dependerá, até grande ponto, de fatores tais como o modo deadministração em particular, o efeito do excipiente sobre a solubilidade e es-tabilidade e a natureza da forma de dosagem.

Composições farmacêuticas adequadas para a distribuição decompostos da presente invenção e métodos para seu preparo serão pronta-mente evidentes para aqueles versados na técnica. Tais composições e méto-dos para seu preparo podem ser encontrados, por exemplo, em 'Remington'sPharmaceutical Sciences', 19ã Edição (Mack Publishing Company, 1995).

ADMINISTRAÇÃO ORAL

Os compostos da invenção podem ser administrados oralmente.

Administração oral pode envolver o ato de engolir, de modo que o compostoentra no trato gastrintestinal ou administração bucal ou sublingual pode serempregada, pela qual o composto entre na corrente sangüínea diretamentea partir da boca.

Formulações adequadas para administração oral incluem formu-lações sólidas tais como, por exemplo, tabletes, cápsulas contendo partícu-las, líquidos ou pós, comprimidos (incluindo cheios de líquido), gomas, multi-e nanopartículas, géis, solução sólida, lipossoma, filmes (incluindo muco-adesivos), óvulos, sprays e formulações líquidas.

Formulações líquidas incluem, por exemplo, suspensões, solu-ções, xaropes e elixires. Tais formulações podem ser empregadas como en-chedores em cápsulas duras ou moles e, tipicamente, compreendem umveículo, por exemplo, água, etanol, polietileno glicol, propileno glicol, metilce-Lulose ou um óleo adequado e um ou mais agentes de emulsificação e/ouagentes de suspensão. Formulações líquidas também podem ser prepara-das através de reconstituição de um sólido, por exemplo, a partir de um sa-che.

Os compostos da invenção podem também ser usados em for-mas de dosagem de dissolução rápida, desintegração rápida, tais como a-quelas descritas em Expert Opinion in Therapeutic Patents, H (6), 981-986por Liang e Chen (2001).

Para formas de dosagem em tablete, dependendo da dose, ofármaco pode compor de cerca de 1% em peso a cerca de 80% em peso daforma de dosagem, mais tipicamente de cerca de 5% em peso a cerca de60% em peso da forma de dosagem. Além do fármaco, tabletes geralmentecontêm um desintegrante. Exemplos de desintegrantes incluem amido glico-Lato de sódio, carbóxi metil celulose de sódio, carbóximetil celulose de cálcio,croscarmelose de sódio, crospovidona, polivinilpirrolidona, metil celulose,celulose microcristalina, hidroxipropil celulose alquila inferior-substituída, a-mido, amido pré-gelatinizado e alginato de sódio. Geralmente, o desintegran-te compreenderá de cerca de 1% em peso a cerca de 25% em peso, de pre-ferência de cerca de 5% em peso a cerca de 20% em peso da forma de dosagem.

Aglutinantes são, geralmente, usados para conferir qualidadesde coesão a uma formulação de tablete. Aglutinantes adequados incluemcelulose microcristalina, gelatina, açúcares, polietileno glicol, gomas naturaise sintéticas, polivinilpirrolidona, amido pré-gelatinizado, hidroxipropil celulosee hidroxipropil metilcelulose. Tabletes podem também conter diluentes, taiscomo Iactose (monoidrato, monoidrato liofilizado, anídrico e similares), mani-tol, xilitol, dextrose, sacarose, sorbitol, celulose microcristalina, amido e dii-drato de fosfato de cálcio dibásico.

Tabletes também podem compreender, opcionalmente, agentessuperfície-ativos, tais como Iauril sulfato de sódio e polisorbato 80 e glidan-tes, tais como dióxido de silício e talco. Quando presentes, os agentes su-perfície-ativos podem compreender de cerca de 0,2% em peso a cerca de5% em peso do tablete e glidantes podem compreender de cerca de 0,2%em peso a cerca de 1% em peso do tablete.

Tabletes também contêm, geralmente, lubrificantes tais comoestearato de magnésio, estearato de cálcio, estearato de zinco, estearil fu-marato de sódio e misturas de estearato de magnésio com Iauril sulfato desódio. Lubrificantes geralmente compreendem de cerca de 0,25% em peso acerca de 10% em peso, de preferência de cerca de 0,5% em peso a cercade 3% em peso do tablete.

Outros possíveis ingredientes incluem antioxidantes, colorantes,agentes de flavorização, conservantes e agentes para disfarce do sabor.

Tabletes exemplificativos contêm até cerca de 80% de fármaco,de cerca de 10% em peso a cerca de 90% em peso de aglutinante, de cercade 0% em peso a cerca de 85% em peso de diluente, de cerca de 2% empeso a cerca de 10% em peso de desintegrante e de cerca de 0,25% empeso a cerca de 10% em peso.

Misturas para tablete podem ser comprimidas diretamente ouatravés de um rolo para formar tabletes. Misturas de tabletes ou porções dasmisturas podem, alternativamente, ser granuladas a úmido, seco ou por fu-são, congeladas por fusão ou extrudadas antes de formação de tabletes. Aformulação final pode compreender uma ou mais camadas e pode ser reves-tida ou não-revestida; ela pode mesmo ser encapsulada.

A formulação de tabletes é discutida em "Pharmaceutical Dosa-ge Forms: Tablets, Voi 1", por H. Lieberman e L. Lachman1 Mareei Dekker,N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X).

Formulações sólidas para administração oral podem ser formu-ladas para terem liberação imediata e/ou modificada. Formulações com libe-ração modificada incluem liberação retardada, sustentada, pulsada, contro-lada, objetivada e programada.

Formulações com liberação modificada adequadas para fins dainvenção são descritas na Patente US N°. 6.106.864. Detalhes de outrastecnologias de liberação adequadas, tais como dispersões de alta energia epartículas revestidas, podem ser encontrados em Verma et al, Pharmaceuti-cal Technology On-line. 25(2), 1-14 (2001). O uso de goma de mascar paraobter liberação controlada é descrito no WOOO/35298.

ADMINISTRAÇÃO PARENTERAL

Os compostos da invenção podem também ser administradosdiretamente na corrente sangüínea, no músculo ou em um órgão interno.Meios adequados para administração parenteral incluem administração in-travenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intra-uretral, intra-esternal, intracraniana, intramuscular e subeutânea. Dispositi-vos adequados para administração parenteral incluem injetores com agulha(incluindo microagulha), injetores sem agulha e técnicas de infusão.

Formulações parenterais são, tipicamente, soluções aquosas asquais contêm excipientes, tais como sais, carboidratos e agentes de tampo-namento (de preferência para um pH de cerca de 3 a cerca de 9) mas, paraalgumas aplicações, elas podem ser mais adequadamente formuladas comouma solução não aquosa estéril ou como uma forma seca a ser usada emconjunto com um veículo adequado, tal como água estéril, isenta de pirogênio.

O preparo de formulações parenterais sob condições estéreis,por exemplo, através de liofilização, pode ser prontamente realizado usandométodos farmacêuticos padrões bem-conhecidos por aqueles versados natécnica.

A solubilidade dos compostos de fórmula (I) usados no preparode soluções parenterais pode ser aumentada através do uso de uma técnicade formulação apropriada, tal como a incorporação de agentes que intensifi-cam a solubilidade.

Formulações para administração parenteral podem ser formula-das para terem liberação imediata e/ou modificada. Formulações com libera-ção modificada incluem liberação retardada, sustentada, pulsada, controla-da, objetivada e programada. Assim, compostos da invenção podem serformuladas como um sólido, semi-sólido ou líquido tixotrópico para adminis-tração como um depósito implantado que proporciona liberação modificadado composto ativo. Exemplos de tais formulações incluem stents revestidoscom fármaco e microesferas de PGLA.

ADMINISTRAÇÃO TÓPICA

Os compostos da invenção podem também ser administradostopicamente à pele ou mucosa, isto é, dérmica ou transdermicamente. For-mulações típicas para essa finalidade incluem géis, hidrogéis, loções, solu-ções, cremes, pomadas, pós para polvilhar, curativos, espumas, filmes, em-plastros para a pele, wafers, implantes, esponjas, fibras, bandagens e mi-croemulsões. Lipossomas também podem ser usados. Veículos típicos in-cluem álcool, água, óleo mineral, petrolato líquido, petrolato branco, gliceri-na, polietileno glicol e propileno glicol. Intensificadores de penetração podemser incorporados - vide, por exemplo, J Pharm Sei, 88 (10), 955-958 porFinnin e Morgan (Outubro de 1999).

Outros meios de administração tópica incluem a distribuição a-través de eletroporação, iontoforese, fonoforese, sonoforese e injeção commicroagulha ou sem agulha (por exemplo, Powderject™, Bioject™, etc.).

Formulações para administração tópica podem ser formuladaspara ter liberação imediata e/ou modificada. Formulações com liberação mo-dificada incluem liberação retardada, sustentada, pulsada, controlada, objeti-vada e programada.

ADMINISTRAÇÃO INALADA/1 NTRANASAL

Os compostos da invenção podem também ser administradosintranasalmente ou através de inalação, tipicamente na forma de um pó seco(quer sozinhos, como uma mistura, por exemplo, em uma mistura seca comLactose ou como uma partícula de componente misturada, por exemplo, mis-turada com fosfolipídios, tal como fosfatidilcolina) a partir de um inalador depó seco ou como um spray em aerossol a partir de um recipiente pressuriza-do, bomba, spray, atomizador (de preferência um atomizador usando eletro-drodinâmica para produzir uma névoa fina) ou nebulizador, com ou sem ouso de um propelente adequado, tal como 1,1,1,2-tetraflúoretano ou1,1,1,2,3,3,3-heptaflúorpropano. Para uso intranasal, o pó pode compreen-der um agente bioadesivo, por exemplo, quitosan ou ciclodextrina.

O recipiente pressurizado, bomba, spray, atomizador ou nebuli-zador contém uma solução ou suspensão do(s) composto(s) da invençãocompreendendo, por exemplo, etanol, etanol aquoso ou um agente alternati-vo adequado para dispersão, solubilização ou prolongar a liberação do ativo,(um) propelente(s) como solvente e um tensoativo opcional, tal como triolea-to de sorbitan, ácido oléico ou um ácido oligoláctico.

Antes de uso em uma formulação em pó seco ou suspensão, oproduto de fármaco é micronizado para um tamanho adequado para distribu-ição através de inalação (tipicamente menos de 5 mícrons). Isso é obtidoatravés de qualquer método de trituração apropriado, tal como trituração ajato em espiral, trituração a jato em leito fluido, processamento de fluido su-percrítico para formar nanopartículas, homogeneização em alta pressão ousecagem por pulverização.

Cápsulas (feitas, por exemplo, de gelatina ou HPMC), bolhas ecartuchos para uso em um inalador ou insuflador podem ser formuladas paraconter uma mistura em pó do composto da invenção, uma base em pó ade-quada, tal como Iactose ou amido e um modificador de desempenho, tal co-mo /-leucina, manitol ou estearato de magnésio. A Iactose pode ser anídricaou estar na forma do monoidrato, de preferência o último. Outros excipientesadequados incluem dextrana, glicose, maltose, sorbitol, xilitol, frutose, saca-rose e trealose.

Uma formulação de solução adequada para uso em um atomi-zador usando eletrodrodinâmica para produzir uma névoa fina pode conterde cerca de 1 μg a cerca de 20 mg do composto da invenção por aciona-mento e o volume de acionamento pode variar de cerca de 1 μΙ a cerca de100 μΙ. Uma formulação típica pode compreender um composto de fórmula(I), propileno glicol, água estéril, etanol e cloreto de sódio. Solventes alterna-tivos os quais podem ser usados ao invés de propileno glicol incluem glicerole polietileno glicol.

Aromas adequados, tais como mentol e Ievomentol ou adoçan-tes, tais como sacarina ou sacarina sódica, podem ser adicionados a essasformulações da invenção destinadas à administração inalada/intranasal.Formulações para administração inalada/intranasal podem ser formuladaspara terem liberação imediata e/ou modificada usando, por exemplo, ácidopoli(DL-láctico-co-glicólico (PGLA). Formulações com liberação modificadaincluem liberação retardada, sustentada, pulsada, controlada, objetivada eprogramada.

No caso de inaladores de pó seco e aerossóis, a unidade de do-sagem é determinada por meio de uma válvula a qual distribui uma quanti-dade medida. Unidades de acordo com a invenção são, tipicamente, dispos-tas para distribuir uma quantidade medida. Unidades de acordo com a in-venção são, tipicamente, dispostas para administrar uma dose medida ou"baforada" contendo de cerca de 1 a cerca de 100 μg do composto da fórmu-la (I). A dose diária global estará, tipicamente, na faixa de cerca de 50 μg acerca de 20 μg a qual pode ser administrada em uma única dose ou, maisusualmente, como doses divididas ao longo do dia.

ADMINISTRAÇÃO RETAL/INTRAVAGINALOs compostos da invenção podem ser administrados retal ouvaginalmente, por exemplo, na forma de um supositório, pessário ou enema.Manteiga de cacau é uma base para supositório tradicional, mas várias al-ternativas podem ser usadas, conforme apropriado.

Formulações para administração retal/vaginal podem ser formu-ladas para ter liberação imediata e/ou modificada. Formulações com libera-ção modificada incluem liberação retardada, sustentada, pulsada, controla-da, objetivada e programada.

OUTRAS TECNOLOGIAS

Os compostos da invenção podem ser combinados com entida-des macromoleculares solúveis, tais como ciclodextrina e derivados adequa-dos da mesma ou polímeros contendo polietileno glicol, de forma a melhorarsua solubilidade, taxa de dissolução, disfarçar o sabor, biodisponibilidadee/ou estabilidade para uso em qualquer um dos modos de administraçãoantes mencionados.

Descobriu-se que complexos de fármaco-ciclodextrina, por e-xemplo, são geralmente úteis para a maioria das formas de dosagem e viasde administração. Complexos de inclusão e não-inclusão podem ser usados.

Como uma alternativa à formação de complexo direta com o fármaco, a ci-clodextrina pode ser usada como um aditivo auxiliar, isto é, como um veícu-lo, diluente ou solubilizante. Mais comumente usado para essas finalidadessão alfa-, beta- e gama-ciclodextrinas, exemplos das quais podem ser en-contrados no W091/11172, W094/02518 e W098/55148.

KIT-DE-PARTES

Na medida em que pode ser desejável administrar uma combi-nação de compostos ativos, por exemplo, para fins de tratamento de umadoença ou condição em particular, está dentro do escopo da presente inven-ção que duas ou mais composições farmacêuticas, pelo menos uma dasquais contém um composto de acordo com a invenção podem, convenien-temente, ser combinadas na forma de um kit adequado para co-administração das composições.

Assim, o kit da invenção compreende duas ou mais composi-ções farmacêuticas distintas, pelo menos uma das quais contém um com-posto de fórmula (I) de acordo com a invenção e significa reter separada-mente as referidas composições, tal como um recipiente, garrafa dividida oupacote de folha dividido. Um exemplo de tal kit é uma embalagem de bolhafamiliar usada para o acondicionamento de tabletes, cápsulas e similares.

O kit da invenção é particularmente adequado para administra-ção de diferentes formas de dosagem, por exemplo, oral e parenteral, paraadministração das composições separadas em diferentes intervalos de do-sagem ou para titulação das composições separadas umas contra as outras.Para auxiliar na conformidade, o kit compreende tipicamente orientaçõespara administração e pode ser fornecido com um assim denominado auxiliarde memória.

DOSAGEM

Para administração a pacientes humanos, a dose diária total doscompostos da invenção está, tipicamente, na faixa de cerca de 0,05 mg acerca de 500 mg dependendo, naturalmente, do modo de administração, depreferência na faixa de cerca de 0,1 mg a cerca de 400 mg e, mais preferi-velmente, na faixa de cerca de 0,5 mg a cerca de 300 mg. Por exemplo, ad-ministração oral pode requerer uma dose diária total de cerca de 1 mg a cer-ca de 300 mg, enquanto que uma dose intravenosa pode requerer apenasde 0,5 mg a cerca de 100 mg. A dose diária total pode ser administrada emuma única ou em doses divididas.

Essas dosagens são baseadas em um ser humano médio tendoum peso de cerca de 65 kg a cerca de 70 kg. O médico será prontamentecapaz de determinar as doses para indivíduos cujo peso cai fora dessa faixa,tais como bebês e idosos.

COMBINAÇÕES

Conforme discutido acima, um composto da invenção exibe ati-vidade inibitória da bomba de ácido. Um antagonista da bomba de ácido dapresente invenção pode ser combinado de modo útil com outro compostofarmacologicamente ativo ou com dois ou mais compostos farmacologica-mente ativos, particularmente no tratamento de doença de refluxo gastroeso-fageal. Por exemplo, um antagonista da bomba de ácido, particularmente umcomposto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,conforme definido acima, pode ser administrado simultânea, seqüencial ouseparadamente em combinação com um ou mais agentes selecionados de:

(i) antagonistas do receptor H2 de histamina, por exemplo, raniti-dina, lafutidina, nizatidina, cimetidina, famotidina e roxatidina;

(ii) inibidores da bomba de prótons, por exemplo, omeprazola,esomeprazola, pantoprazola, rabeprazola, tenatoprazola, ilaprazola e Ianso-prazola;

(iii) misturas de antiácidos orais, por exemplo, Maalox®, Aludrox®e Gaviscon®;

(iv) agentes protetores mucosais, por exemplo, polaprezinc, e-cabet sódico, rebamipida, teprenona, cetraxato, sucralfato, clorofilina-cobre eplaunotol;

(v) agentes antigástricos, por exemplo, vacina anti-gastrina, itri-glumida e Z-360;

(vi) antagonistas de 5-HT3, por exemplo, dolasetron, palonose-tron, alosetron, azasetron, ramosetron, mitrazapina, granisetron, tropisetron,E-3620, ondansetron e indisetron;

(vii) agonistas de 5-HT4, por exemplo, tegaserod, mosaprida,cinitaprida e oxtriptano;

(viii) laxantes, por exemplo, Trifyba®, Fybogel®, Konsyl®, Isogel®,Regulan®, Celevac® e Normacol®;

(ix) agonistas de GABAb, por exemplo, baclofen e AZD-3355;

(x) antagonistas de GABAb, por exemplo, GAS-360 e SGS-742;

(xi) bloqueadores do canal de cálcio, por exemplo, aranidipina,lacidipina, falodipina, azelnidipina, clinidipina, lomerizina, diltiazem, galopa-mil, efonidipina, nisoldipina, amlodipina, lercanidipina, bevantolol, nicardipi-na, isradipina, benidipina, verapamil, nitrendipina, barnidipina, propafenona,manidipina, bepridil, nifedipina, nilvadipina, nimodipina e fasudil;

(xii) antagonistas de dopamina, por exemplo, metoclopramida,domperidona e levosulpirida;(xiii) antagonistas de taquiquinina (NK)1 particularmente antago-nistas de NK-3, NK-2 e NK-1, por exemplo, nepadutant, saredutant, talne-tant, (aR.gR)-7-[3,5-bis(triflúormetil)benzil]-8,9,10,11-tetrahidro-9-metil-5- (4-metilfenil)-7H-[1,4]diazocino[2,1-g][1,7]naftridina-6-13-diona (TAK-637), 5-[[(2R,3S)-2- [(1 R)-1-[3,5-bis(triflúormetil)fenil]etóxi-3-(4-flúorfenil)-4-morfoli-nil]metil]-1,2-diidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona (MK-869), lanepitant, dapitant e 3-[[2-metóxi-5-(triflúormetóxi)fenil] metilamino]-2-fenil-piperidina (2S,3S);

(xiv) agentes antiinfecção por Helicobacter pylori, por exemplo,claritromicina, roxitromicina, roquitamicina, fluritromicina, telitromicina, amo-xicilina, ampicilina, temocilina, bacampicilina, aspoxicilina, sultamicilina, pipe-racilina, lenampicilina, tetraciclina, metronidazola, citrato de bismuto e subsa-licilato de bismuto;

(xv) inibidores de sintase de oxido nítrico, por exemplo, GW-274150, tilarginina, P54, dissulfeto de guanidioetila e nitroflurbiprofen;

(xvi) antatonistas do receptor 1 de vanilóide, por exemplo, AMG-517 e GW-705498;

(xvii) antagonistas do receptor muscarínico, por exemplo, trós-pio, solifenacina, tolterodina, tiotrópio, cimetrópio, oxitrópio, ipratrópio, tiqui-zium, dalifenacina e imidafenacina;

(xviii) antagonistas de calmodulina, por exemplo, esqualamina eDY-9760;

(xix) agonistas do canal de potássio, por exemplo, pinacidil, tili-solol, nicorandil, NS-8 e retigabina;

(xx) beta-1 agonistas, por exemplo, dobutamina, denopamina,xamoterol, denopamina, docarpamina e xamoterol;

(xxi) beta-2 agonistas, por exemplo, salbutamol; terbutalina, ar-formoterol, meluadrina, mabuterol, ritodrina, fenoterol, cienbuterol, formote-rol, procaterol, tulobuterol, pirbuterol, bambuterol, tulobuterol, dopexamina elevosalbutamol;

(xxii) beta-agonistas, por exemplo, isoproterenol e terbutalina;

(xxiii) alfa 2 agonistas, por exemplo, clonidina, medetomidina,lofexidina, moxonidina, tizanidina, guanfacina, guanabenz, talipexola e dex-medetomidina;

(xxiv) antagonistas de endotelina A, por exemplo, bonsetan, a-trasentan, ambrisentan, clazosentan, sitaxsentan, fandosentan e darusentan;

(xxv) α agonistas de opióide, por exemplo, morfina, fentanila eloperamida;

(xxvi) β agonistas de opióide, por exemplo, naloxona, buprenor-fina e alvimopan;

(xxvii) agonistas de motilina, por exemplo, eritromicina, mitemci-nal, SLV-305 e atilmotina;

(xxviii) agonistas de grelina, por exemplo, capromorelina e TZP-101;

(xxix) estimulantes da liberação de AchE, por exemplo, Z-338 eKW-5092;

(xxx) antagonistas de CCK-B, por exemplo, YF-476 e S-0509;

(xxxi) antagonistas de glucagon, por exemplo, NN-2501 e A-770077;

(xxxii) piperacilina, lenampicilina, tetraciclina, metronidazola, ci-trato de bismuto e subsalicilato de bismuto;

(xxxiii) antagonistas do peptídeo-1 similar ao glucagon (GLP-1),por exemplo, PNU-126814;

(xxxiv) antagonistas do canal de potássio 3 ativado por cálcio depequena condutância (SK-3), por exemplo, apamina, dequalínio, atracúrio,pancurônio e tubocurarina;

(xxxv) antagonistas de mGluR5, por exemplo, ADX-10059 e AFQ-056;

(xxxvi) agonistas de 5-HT3, por exemplo, pumosetrag (DDP733);

(xxxvii) agonistas de mGluR8, por exemplo, (S)-3,4-DCPG e m-GluR8-A.

Método para avaliação de atividades biológicas:

A atividade inibitória da bomba de ácido e outras atividades bio-lógicas dos compostos da presente invenção foi determinada através dosprocedimentos a seguir. Os símbolos têm seus significados usuais: ml_ (mili-litro(s)), μΙ_ (microlitro(s)), Kg (quilograma(s)), g (grama(s)), mg (miligra-ma(s)), μg (micrograma(s)), pmol (pico(s) molar(es)), mmol (milimolar(es)), M(massa molar (m3/mol)), mM (massa milimolar), μΜ (massa micromolar),quant. (rendimento quantitativo), nm (nanômetro(s)), min. (minuto(s)), Cat#(número de catálogo), mV (milivolt(s)), ms (mili-segundo(s)), i.p. (intraperito-neal).

Preparo de vesículas gástricas de estômagos de suíno fresco

As vesículas gástricas de suíno para ensaios de inibição deH+/K+-ATPase gástrica suína foram preparadas a partir da membrana muco-sa em estômagos suínos frescos através de homogeneização com um ho-mogeneizador de politetraflúoretileno adaptado hermeticamente (Teflone®)em sacarose a 0,25 M a 4eC. A pelota crua foi removida com centrifugação a20.000 g durante 30 min.. Então, o sobrenadante foi centrifugado a 100.000g durante 30 min.. A pelota resultante foi ressuspensa em sacarose a 0,25 Me, então, submetida à centrifugação em gradiente de densidade a 132.000 gdurante 90 min.. As vesículas gástricas foram coletadas da interface sobreuma camada de sacarose a 0,25 M contendo Ficoll™ PM400 a 7% (Amer-sham Biosciences). Esse procedimento foi realizado em temperatura gelada.

Inibição de H+ZK+-ATPase gástrica em suíno com vazamento de íonsInibição de H+/K+-ATPase gástrica em suíno com vazamento de

íons foi medida de acordo com o método modificado descrito em Biochemi-cal Pharmacology, 1988, 37, 2231 -2236.

As vesículas isoladas foram Iiofilizadas e, então, mantidas emcongelamento profundo até uso. Para o ensaio enzimático, as vesículas Iiofi-Lizadas foram reconstituídas com MgSO4 a 3 mM contendo Bis-tris a 40 mM(pH de 6,4 a 37?C).

A reação enzimática é realizada incubando KCI a 5 mM, Na2ATPa 3 mM, MgSO4 a 3 mM e 1,0 μg de vesículas reconstituídas durante 30 mi-nutos a 37QC em 60 μΙ de mistura de reação final (Bis-tris a 40 mM, pH de6,4) com ou sem o composto de teste. A reação enzimática foi cessada atra-vés da adição de dodecil sulfato de sódio a 10% (SDS). Fosfato orgânicoliberado de ATP foi detectado através de incubação com mistura de 1 partede tetraidrato de molibdato de amônio a 35 mM em hidrato de acetato dezinco a 15 mM e 4 partes de ácido ascórbico a 10% (pH de 5,0), resultandoem fosfomolibdato, o qual tem densidade óptica a 750 nm. Todos os com-postos exemplificativos mostraram atividade inibitória potente.

Inibição de HVK+-ATPase gástrica em suíno hermético a íons

Inibição de H+/K+-ATPase gástrica em suíno hermético a íons foimedida de acordo com o método modificado descrito em Biochemical Phar-macology, 1988, 37, 2231-2236.

As vesículas isoladas foram mantidas em congelamento profun-do até uso. Para o ensaio enzimático, as vesículas foram diluídas com Mg-SO4 a 3 mM contendo Tris a 5 mM (pH de 7,4 a 379C).

A reação enzimática foi realizada incubando KCI a 150 mM,Na2ATP a 3 mM, MgSO4 a 3 mM, valinomicina a 15 μΜ e 3,0 ug de vesículasdurante 30 minutos a 379C em 60 μΙ de mistura de reação final (Tris a 5 mM,pH de 7,4) com ou sem o composto de teste. A reação enzimática foi cessa-da através da adição de SDS a 10%. Fosfato inorgânico liberado de ATP foidetectado através de incubação com uma mistura de 1 parte de tetraidratode molibdato de amônio a 35 mM em hidrato de acetato de zinco a 15 mM e4 partes de ácido ascórbico a 10% (pH de 5,0), resultando em fosfomolibda-to, o qual tem uma densidade óptica a 750 nm.

Os resultados de valores de IC5o da atividade inibitória para oscompostos dos exemplos a seguir são mostrados na Tabela 1.

Tabela 1

<table>table see original document page 44</column></row><table><table>table see original document page 45</column></row><table>

Todos os compostos testados mostraram atividade antagonísticada bomba de ácido.

Inibição de NaVK+-ATPase em rim canino

A Na+/K+-ATPase de rim canino em pó (Sigma) foi reconstituídacom MgSO4 a 3 mM contendo Tris a 40 mM (pH de 7,4 a 37-C). A reaçãoenzimática foi realizada com incubação de NaCI a 100 mM, KCI a 2 mM,Na2ATP a 3 mM, MgSO4 a 3 mM e 12 μg de enzima durante 30 minutos a379C em 60 μΙ de mistura de reação final (Tris a 40 mM, pH de 7,4) com ousem o composto de teste. A reação enzimática foi cessada através da adi-ção de SDS a 10%. Fosfato inorgânico liberado de ATP foi detectado atravésde incubação com uma mistura de 1 parte de tetraidrato de molibdato deamônio a 35 mM em hidrato de acetato de zinco a 15 mM e 4 partes de áci-do ascórbico a 10% (pH de 5,0), resultando em fosfomolibdato, o qual temdensidade óptica a 750 nm.

Inibição da secrecão de ácido no rato com lúmen gástrico perfundido

A secreção de ácido no rato com lúmen gástrico perfundido foimedida de acordo com Watanabe et al [Watanabe K et al, J. Physiol. (Paris)2000; 94: 111-116].

Ratos machos Sprague-Dawley, 8 semanas de idade, privadosde alimento durante 18 horas antes do experimento com acesso livre à águaforam anestesiados com uretano (1,4 g/kg, i.p.) e traqueotomizados. Apósuma incisão abdominal mediana, uma cânula dupla de polietileno foi inseridano rúmen e o estômago foi perfundido com solução salina (37 -C, pH de 5,0)em uma taxa de 1 ml/min.. A produção de ácido no perfusato foi determinadaem intervalos de 5 minutos através de titulação com NaOH a 0,02 M para umpH de 5,0. Após a determinação da secreção de ácido basal durante 30min., a secreção de ácido foi estimulada através de uma infusão contínua depentagastrina (16 μ^ς/Ιι). Os compostos de teste foram administrados a-través de uma injeção de bolo intravenosa ou administração intraduodenalapós a secreção de ácido estimulada atingir uma fase de platô. A secreçãode ácido foi monitorada após a administração.

A atividade foi avaliada como inibição da secreção de ácido totalde O hora a 1,5 ou 3,5 horas após administração ou a inibição máxima apósadministração.

O composto dos Exemplos 1-9 mostrou uma boa atividade inibi-tória.

Inibição de secreção de ácido gástrico no cão com quisto de Heidenhain

Cães machos Beagle pesando 7 - 15 kg com quisto de Heide-nhain [Heidenhain R: Arch Ges Physiol. 1879; 19: 148-167] foram usados.Os animais foram deixados se recuperar da cirurgia durante pelo menos trêssemanas antes dos experimentos. Os animais foram mantidos em um ritmode claro-escuro de 12 horas, alojados unicamente. Eles receberam ração- padrão uma vez ao dia as 11:00 da manhã e água corrente e foram subme-tidos a jejum durante a noite antes do experimento, com acesso livre à água.Amostras do suco gástrico foram coletadas por todo o experimento atravésde drenagem por gravidade a cada 15 min.. A acidez no suco gástrico foimedida através de titulação ao ponto final de um pH de 7,0. A secreção deácido foi estimulada por uma infusão contínua de histamina (80 μg/kg/h).Administração oral ou em bolo intravenoso dos compostos de teste foi feita90 minutos após início da infusão de histamina. A secreção de ácido foi mo-nitorada após administração. A atividade foi avaliada através da inibição má-xima com relação ao valor de controle correspondente.

Ligação à dofetilida humana

Células HEK293S transfectadas com gene relacionado ao étera-go-go humano (HERG) foram preparadas e crescidas em casa. A pasta decélulas de células HEK-293 expressando o produto HERG pode ser suspen-sa em um volume de 10 vezes de tampão de Tris a 50 mM ajustado para umpH de 7,5 a 25°C com HCI a 2 M contendo MgCI2 a 1 mM, KCI a 10 mM. Ascélulas foram homogeneizadas usando um homogeneizador Polytron (naenergia máxima durante 20 segundos) e centrifugadas a 48.000 g durante20 minutos a 4°C. A pelota foi ressuspensa, homogeneizada e centrifugadamais uma vez da mesma maneira. O sobrenadante resultante foi descartadoe a pelota final foi ressuspensa (volume de 10 vezes de tampão de Tris a 50mM) e homogeneizada na energia máxima durante 20 segundos. O homo-genato de membrana foi transformado em alíquotas e armazenado a -80°Caté uso. Uma alíquota foi usada para determinação da concentração de pro-teína usando um Protein Assay Rapid Kit (Wako) e um leitor para lâminasSpectra max (Wallac). Toda a manipulação, solução de estoque e equivalen-te foram mantidos sobre gelo todo o tempo. Para ensaios de saturação, osexperimentos foram conduzidos em um volume total de 200 μΙ. A saturaçãofoi determinada através de incubação de 36 μΙ de [3H]-dofetilida e 160 μΙ dehomogenatos de membrana (20-30 μg de proteína por cavidade) durante 60minutos em temperatura ambiente na ausência ou presença de dofetilida a10 μΜ em concentrações finais (4 μΙ) para ligação total ou não específica,respectivamente. Todas as incubações foram terminadas através de filtraçãoa vácuo rápida sobre papéis filtro de fibra de vidro embebidos com PEI u-sando um coletor de células Skatron1 seguido por duas lavagens com tam-pão de Tris a 50 mM (pH de 7,4 a 25°C). A radioatividade receptor-ligada foiquantificada através de contagem de cintilação de líquido usando um conta-dor Packard LS.

Para o ensaio de competição, compostos foram diluídos em lâ-minas de polipropileno com 96 cavidades como diluições em 4 pontos noformato semi-log. Todas as diluições foram realizadas em DMSO primeiro e,então, transferidas para tampão de Tris a 50 mM (pH de 7,4 a 25°C) conten-do MgCI2 a 1 mM, KCI a 10 mM, de modo que a concentração final de DM-SO se tornasse igual a 1%. Compostos foram distribuídos em triplicata emlâminas de ensaio (4 μΙ). As cavidades com ligação total e ligação não espe-cífica foram ajustadas em 6 cavidades como veículo e dofetilida a 10 μΜ emuma concentração final, respectivamente. O radioligante foi preparado emuma concentração final de 5,6x e essa solução foi adicionada a cada cavi-dade (36 μΙ). O ensaio foi iniciado através da adição de glóbulos de SPA po-Iilisina YSi (50 μΙ, 1 mg/cavidade) e membranas (110 μΙ, 20 μg/cavidade). Aincubação foi continuada durante 60 minutos em temperatura ambiente. Aslâminas foram incubadas durante mais 3 horas em temperatura ambientepara que os glóbulos assentassem. A radioatividade receptor-ligada foiquantificada através de contagem em um contador para lâminas Wallac Mi-croBeta.

Permeabilidade em Caco-2

A permeabilidade em Caco-2 foi medida de acordo com o méto-do descrito em Shiyin Yee, Pharmaceutical Research, 763 (1997).

Células Caco-2 foram crescidas sobre suportes de filtro (sistemade inserção com múltiplas cavidades Falcon HTS) durante 14 dias. O meiode cultura foi removido dos compartimentos apical e basolateral e as mono-camadas foram pré-incubadas com 0,3 ml de tampão apical e 1,0 ml de tam-pão basolateral preaquecidos durante 0,5 horas a 37°C em um banho deágua em agitação a 50 ciclos/min.. O tampão apical consistia em SoluçãoSalina Equilibrada de Hanks1 monoidrato de D-glicose a 25 mM, TampãoBiológico de ácido 2-morfolinoetano-sulfônico (MES) a 20 mM, CaCI2 a 1,25mM e MgCI2 a 0,5 mM (pH de 6,5). O tampão basolateral consistia em Solu-ção Salina Equilibrada de Hanks, monoidrato de D-glicose a 25 mM, TampãoBiológico de ácido 2-[4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil]etano-sulfônico (HEPES) a20 mM, CaCI2 a 1,25 mM e MgCI2 a 0,5 mM (pH de 7,4). Ao final da pré-incubação, os meios foram removidos e solução de composto de teste (10μΜ) em tampão foi adicionada ao compartimento apical. As inserções forammovidas para cavidades contendo tampão basolateral fresco a 1 hora. Aconcentração de fármaco no tampão foi medida através de análise porLC/EM.

A taxa de fluxo (F, massa/tempo) foi calculada a partir do declí-nio do aparecimento cumulativo de substrato sobre o lado receptor e o coefi-ciente de permeabilidade aparente (Papp) foi calculado a partir da seguinteequação:

Papp (cm/seg) = (F χ VD)/(SA χ MD)onde SA é a área de superfície para transporte (0,3 cm2), VD é o volume dedoador (0,3 ml), MD é a quantidade total do fármaco sobre o lado doador a t= 0. Todos os dados representam a média de 2 inserções. A integridade damonocamada foi determinada através de transporte de Amarelo Lúcifer.Meia-vida em microssomas de fígado humano (HLM)

Compostos de teste (1 μΜ) foram incubados com MgCI2 a 3,3 mM e 0,78 mg/mL de HLM (HL101) em tampão de fosfato de potássio a 100mM (pH de 7,4) a 37°C sobre a lâmina com 96 cavidades profundas. A mis-tura de reação foi dividida em dois grupos, um grupo não-P450 e a P450.NADPH foi adicionado apenas à mistura de reação do grupo P450. Uma alí-quota de amostras do grupo P450 foi coletada nos pontos de tempo de 0,10, 30 e 60 minutos, onde o ponto de tempo 0 minuto indicava o tempoquando NADPH foi adicionado à mistura de reação do grupo P450. Uma alí-quota de amostras do grupo não-P450 foi coletada no ponto de tempo de -10e 65 minutos. As alíquotas coletadas foram extraídas com solução de aceto-nitrila contendo um padrão interno. A proteína precipitada foi centrifugada em uma centrífuga (2000 rpm, 15 min.). A concentração de composto nosobrenadante foi medida através de um sistema de LC/EM/EM.

O valor de meia-vida foi obtido através de plotagem do Iogaritmonatural da proporção da área de pico de compostos/padrão interno versus otempo. O declínio da linha da melhor adaptação através dos pontos propor-ciona a taxa de metabolismo (k). Essa foi convertida ao valor de meia-vidausando a seguinte equação:

Meia-vida = In 2/kEnsaio "patch clamp" de hERG

Para determinar o potencial de compostos de inibir o canal dehERG, a contraparte clonada da corrente de potássio retificadora retardadade inativação rápida (IKr).

Células HEK293 expressando estavelmente o canal de hERGforam usadas em estudos de eletrofisiologia "patch clamp" com célula inteiraem temperatura ambiente (26,5-28,5°C). A metodologia para transfecçãoestável desse canal em células HEK293 pode ser encontrada em qualquerparte (Zhou et al, 1998, Biophysical Journal, 74, páginas 230-241). As solu-ções usadas para experimentação eram solução extracelular padrão da se-guinte composição (mM); NaCI, 137; KCI, 4; CaCI2, 1,8; MgCI2, 1; Glicose,10; HEPES, 10; pH de 7,4 ± 0,05 com NaOH/HCI; e solução intracelular pa-drão da seguinte composição (mM); KCI, 130; MgCI2, 1; HEPES, 10; EGTA,5; MgATP1 5; pH de 7,2 ± 0,05 com KOH. O protocolo de tensão foi projeta-do para ativar o canal de hERG e permitir a medição de bloqueio do canalpelo fármaco e é como segue. Primeiro, o potencial da membrana foi eleva-do de um potencial de manutenção de -80mV para +30mV durante 1s. Issofoi seguido por uma elevação de tensão descendente em uma taxa de 0,5mV/ms de volta para o potencial de manutenção de -80 mV e a corrente ex-15 terna de pico observada durante a elevação de repolarização foi medida.Esse protocolo foi realizado repetidamente a cada 4 segundos (0,25 Hz).

Após estabilização de um período de linha de base estável na presença deveículo (DMSO a 0,1% v/v), quatro concentrações crescentes de compostode teste foram, então, aplicadas através de um banho seqüencialmente coma resposta obtida em estado uniforme ou 10 minutos (o que ocorresse pri-meiro). 10 micromols/L de dofetilida foram usados ao final de cada experi-mento como um controle positivo interno e para definir o bloqueio máximo.

Biodisponibilidade em rato

Ratos adultos do gênero Sprague-Dawley foram usados. Um adois dias antes dos experimentos, todos os ratos foram preparados atravésde inserção de uma cânula na veia jugular direita sob anestesia. A cânula foiexteriorizada na parte anterior do pescoço. Amostras de sangue (0,2-0,3 ml_)foram coletadas da veia jugular em intervalos de até 24 horas após adminis-trações intravenosas ou orais do composto de teste. As amostras foramcongeladas até análise. A biodisponibilidade foi avaliada calculando-se oquociente entre a área sob a curva de concentração no plasma (AUC) apósadministração oral ou administração intravenosa.Biodisponibilidade em cão

Cães Beagle adultos foram usados. Amostras de sangue (0,2-0,5 ml_) foram coletadas da veia cefálica em intervalos de até 24 horas apósadministrações intravenosas ou orais do composto de teste. As amostrasforam congeladas até análise. A biodisponibilidade foi avaliada calculando-se o quociente entre a área sob a curva de concentração no plasma (AUC)após administração oral ou administração intravenosa.

Ligação à proteína no plasma

A ligação à proteína no plasma do composto de teste (1 μΜ) foimedida através do método de diálise em equilíbrio usando um equipado dotipo lâmina com 96 cavidades. Membranas de celulose regeneradas Spec-tra-Por® (corte de peso molecular de 12.000-14.000, 22 mm χ 120 mm) fo-ram embebidas durante a noite em água destilada, então, durante 20 minu-tos em etanol a 30% e, finalmente, durante 15 minutos em tampão de diálise(solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco, pH de 7,4). Plasmacongelado de ser humano, ratos Sprague-Dawley e cães Beagle foi usado.O equipamento de diálise foi montado e 150 μΙ_ de plasma fortificado comcomposto adicionados a um lado de cada cavidade e 150 μL de tampão dediálise ao outro lado de cada cavidade. Após 4 horas de incubação a 37 0Cdurante 150 r.p.m, alíquotas de plasma e tampão foram coletadas. O com-posto no plasma e tampão foi extraído com 300 μΙ_ de acetonitrila contendocompostos de padrão interno para análise. A concentração do composto foideterminada através de análise por LC/EM/EM.

A fração do composto não ligado foi calculada através da se-guinte equação:

fu = 1 -{([plasma]eq - [tampão]eq )/([plasma]eq)}em que [plasma]eq e [tampão]eq são as concentrações do composto no plas-ma e tampão, respectivamente.Solubilidade Aquosa

A solubilidade aquosa nos meios (a)-(c) foi determinada atravésdo seguinte método:

Câmaras Whatman mini-UniPrep (Clifton, NJ, EUA) contendomais de 0,5 mg de composto e 0,5 mL de cada meio foram agitadas durantea noite (mais de 8 horas) em temperatura ambiente. Todas as amostras fo-ram filtradas através de uma membrana de Difluoreto de Polivinilideno(PVDF) de 0,45 μηι no êmbolo da Whatman mini-UniPrep antes de análise.

Os filtrados foram analisados através de HPLC.

<Meios>

(a) Fluido gástrico simulado sem enzima (SGN) em um pH de1,2: dissolver 2,0 g de NaCI em 7,0 mL de HCI a 10 M e água suficiente paracompor 1000 mL; (b) Solução salina tamponada com fosfato (PBS) em umpH de 6,5: dissolver 6,35 g de KH2PO4, 2,84 g de Na2HPO4 e 5,50 g de NaCIem água suficiente para compor 1000 mL, ajustar o pH para 6,5; (c) 3,94 mgde taurocolato de sódio (NaTC) e 1,06 mg de 1-palmitoil-2-oleil-L-fosfatidilcolina (POPC) em 1 mL de PBS (pH de 6,5).

Estimativa da duração hepática usando a estabilidade metabólica em hepa-tócitos humanos

Compostos testados (1 μΜ) foram incubados estaticamente comhepatócitos de seres humanos a 37°C em 95% de ar/ 5% de CO2 com umadensidade celular alvo de 0,5 χ 106 células/ml e um volume total de 50 μί. Aincubação foi cessada em cada ponto de tempo através da adição de aceto-nitrila gelada (ACN). Alíquotas das amostras foram misturadas com ACN a10% contendo um padrão interno para análise por LC/EM/EM. Após as a-mostras serem submetidas a ultra-som durante 10 minutos, as amostras fo-ram centrifugadas a 2.000 rpm durante 15 minutos e, então, o sobrenadantefoi transferido para outras lâminas para análise. As concentrações de com-postos no sobrenadante foram medidas através do sistema de LC/EM/EM.

As taxas de desaparecimento dos compostos testados foramobtidas através de plotagem do Iogaritmo comum da proporção da área depico de compostos/padrão interno versus o tempo. O declínio da linha damelhor adaptação através dos pontos proporcionou a taxa de metabolismo(ke). Esse valor foi escalonado para levar em conta a hepatocelularidade,peso do fígado e corporal a fim de proporcionar um valor de clearance intrín-seco (CLint) em ml/min./kg, conforme ilustrado na Equação 1. A clearancehepática (CLh) foi prevista a partir desse valor de clearance intrínseco usan-do o modelo de tubo paralelo, conforme mostrado na Equação 2. A clearan-ce prevista dividido pelo fluxo sangüíneo hepático (Qh) proporcionou a pro-porção de extração (Eh) (Equação 3).

Equação 1: ke χ (g de fígado/kg de peso corporal) χ (ml de incu-bação/número de células em incubação) χ (células/g de fígado)

Equação 2: CLh = Qh χ { 1 - exp (-CLint/Qh)}

Equação 3: Eh = CLhZQh

em que, "g de peso do fígado /kg de peso corporal" é 21, "Célu-las/g de fígado" é 1,2 χ 108, "ml de incubação/número de células em incuba-ção" é 2,0 χ 10'6 e Qh é 20 ml/min./kg.

Supondo que o metabolismo terapêutico é a principal via de eli-minação de fármaco, exposição sistêmica (AUCpo) após administração oral écalculada usando a Equação 4.

Equação 4: AUCpo = Dose χ (1 -Eh)/CLh

Exemplos

Os exemplos a seguir são proporcionados para fins de ilustraçãoadicional apenas e não se destinam a limitar a invenção divulgada. A menosque de outro modo estabelecido nos exemplos a seguir, condições experi-mentais gerais são como segue: todas as operações foram realizadas emtemperatura ambiente, isto é, na faixa de 18-25 9C; evaporação de solventefoi realizada usando um evaporador giratório sob pressão reduzida com umatemperatura do banho de até 60 -C; as reações foram monitoradas atravésde cromatografia em camada fina (TLC) e os tempos de reação são forneci-dos para ilustração apenas; os pontos de fusão (p.f.) fornecidos são não-corrigidos (polimorfismo pode resultar em diferentes pontos de fusão); a es-trutura e pureza de todos os compostos isolados foram asseguradas atravésde pelo menos uma das seguintes técnicas: TLC (lâminas de TLC pré-revestidas com sílica-gel Merck 60 F254 ou lâminas de TLC pré-revestidascom gel de NH2 Merck (um sílica-gel revestido com amina) F254s), espectro-metria de massa, espectros de ressonância magnética nuclear (RMN), es-pectros de absorção de infravermelho (IR) ou microanálise. Os rendimentossão fornecidos para fins ilustrativos apenas. Cromatografia instantânea emcoluna foi realizada usando Biotage KP-SIL (40-63 μιτι), Biotage KP-NH (umsílica-gel revestido com amina) (40-75 μΜ) ou lâminas de sílica-gel Wako300HG (40-60 μΜ). TLC preparativa foi realizada usando lâminas de TLCpré-revestidas com sílica-gel Merck 60 F254 (espessura de 0,5 ou 1,0 mm).Todos os dados de massa foram obtidos em dados espectrais de massa embaixa resolução (ESI) usando um espectrômetro de massa ZMD™ ou ZQ™(Waters). Os dados de RMN foram determinados a 270 MHz (espectrômetroJEOL JNM-LA 270) ou 300 MHz (espectrômetro JEOL JNM-LA300) usandoclorofórmio deuterado (99,8%) ou sulfóxido de dimetila (99,9%) como solven-te, a menos que de outro modo indicado, com relação ao tetrametil-silano(TMS) como padrão interno em partes por milhão (ppm); abreviações con-vencionais usadas são: s = simples, d = dupla, m = múltiplo, dd = dupla deduplas, sep = septeto, br.s = simples amplo, br.d = dupla ampla, etc. Os es-pectros de IR foram medidos através de um espectrofotômetro de infraver-melho com transformação de Fourier (Shimazu FTIR-8300). Rotações ópti-cas foram medidas usando um Polarímetro Digital P-1020 (Japan Spectros-copic CO, Ltda.). O padrão de difração de pó por raios X (PXRD) foi deter-minado usando um difractrômetro de pó por raios X Rigaku RINT-TTR adap-tado com um aparelho de troca automático, um goniômetro 2 teta-teta, divi-sões de divergência de feixe, um aparelho monocromático secundário e umcontador de cintilação. A amostra foi preparada acondicionando o pó sobreum contentor de amostra de alumínio. O espécime foi girado a 60.00 rpm eexplorado a 47min. em temperatura ambiente com radiação Cu-ka.

Exemplo 1

3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetil-8-r(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)aminolimidazo[1,2-alpiridina-6-carboxamida

<formula>formula see original document page 54</formula>

ETAPA 1:

4-Cloro-5-metilcromanoUma solução de cloreto de tionila (81 mL, 1,1 mol) em dietil éter(370 mL) foi adicionada a uma mistura de 5-metilcroman-4-ol (61 g, 370mmols, Tetrahedron Asym., 1997, 8, 3059) e piridina (1,4 mL) em dietil éter(80 mL) e clorofórmio (200 mL) a 0°C. A mistura de reação foi agitada emtemperatura ambiente durante 13 horas. Após a mistura ser evaporada invácuo, o resíduo foi entornado em água gelada e extraído com acetato deetila (500 mL χ 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura,secos sobre sulfato de magnésio e concentrados in vácuo para proporcionaro composto do título como um óleo amarelo (68 g, rendimento quantitativo).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,21-7,04 (m, 1H), 6,86-6,62 (m,2H), 5,36-5,17 (m, 1H), 4,59-4,43 (m, 1H), 4,43-4,30 (m, 1H), 2,41 (s, 3H),2,57-2,24 (m, 2H) ppm.

ETAPA 2:

8-amino-2-metilimidazo[1,2-a1piridina-6-carboxilato de isopropila

A uma solução de 5,6-diaminonicotinato de isopropila (65 g, 333mmols) em ciclohexanona (500 mL) foi adicionada bromoacetona (51 g, 333mmols) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 95°Cdurante 2 horas. Após a mistura ser esfriada para 0°C, o precipitado foi fil-trado e lavado com /7-hexano (500 mL) e diisopropiléter (500 mL). Os sólidosforam dissolvidos em diclorometano (1000 mL) e solução saturada de bicar-bonato de sódio (800 mL). A camada orgânica foi separada, seca sobre sul-fato de magnésio e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado através decromatografia em coluna sobre sílica-gel (diclorometano/acetato de etila =1/1 como eluente) para proporcionar o composto do título como um xaropemarrom (43 g, 55%).

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 8,30 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,33 (s,1H), 6,84 (d, J= 1,3 Hz, 1H), 5,35-5,15 (m, 1H), 4,60-4,39 (m, 2H), 2,45 (s,3H), 1,37 (d, J = 6,0 Hz, 6H) ppm.

EM (ESI) m/z: 234 (M+H)+.

ETAPA 3:

2-metil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1imidazoí1,2-alpiridina-6-carboxilato de isopropilaA uma mistura de 8-amino-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (43 g, 183 mmols, ETAPA 2), iodeto de sódio (14 g,91 mmols) e carbonato de potássio (88 g, 640 mmols) em acetona (480 mL)foi adicionada uma solução de 4-cloro-5-metilcromano (50 g, 274 mmols,ETAPA 1) em acetona (80 mL) a 45°C e a mistura foi agitada a 56°C durante15 horas. Após esfriar para a temperatura ambiente, a mistura foi resfriadarapidamente com água (300 mL) e extraída com diclorometano (500 mL χ 2).Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio e evapora-dos in vácuo. O resíduo foi lavado com n-hexano (300 mL), 2-propanol/diisopropiléter (20mL/200 mL) e metanol (80 mL) para proporcionaro composto do título como um sólido amarelo (30 g, 43%).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,26 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,12 (t, J= 8,1 Hz, 1H), 6,85-6,68 (m, 3H), 5,36-5,21 (m, 2H), 4,78-4,67 (m, 1H), 4,33-4,15 (m, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,35-2,00 (m, 5H), 1,40 (d, J= 5,9 Hz, 6H) ppm.

EM (ESI) m/z: 380 (M+H)+.

ETAPA 4:

Ácido_2-Metil-8-[(5-metil-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1imidazo[1,2-alpiridina-6-carboxílico

Uma mistura de 2-metil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a] piridina-6-carboxilato de isopropila (8,6 g, 23 mmols,ETAPA 3) e solução a 2M de hidróxido de sódio (34 mL) em metanol (15 mL)e tetraidrofurano (15 mL) foi agitada a 60°C durante 0,5 horas. Após esfriarpara a temperatura ambiente, a mistura foi neutralizada com ácido clorídricoa 2M (34 mL). O precipitado resultante foi coletado através de filtração e se-co para proporcionar o composto do título como um sólido branco (7,5 g, 98%).

1H RMN (DMSO-Gf6, 270 MHz) δ: 8,52 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,13(t, J= 7,9 Hz, 1H), 6,83-6,66 (m, 3H), 5,71-5,62 (m, 1H), 4,86-4,75 (m, 1H),4,30-4,06 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,20-1,85 (m, 5H) ppm. (-COOH não foi ob-servado)

EM (ESI) m/z: 338 (M+H)+, 336 (M-H)-.

ETAPA 5:N,N,2-Trimetil-8-r(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazol[1,2-a]piridina-6- carboxamida

A uma mistura agitada de ácido 2-metil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a] piridina-6-carboxílico (7,5 g, 22 mmols,ETAPA 4), hidrocloreto de N-metilmetanamina (2,7 g, 33 mmols), hidrato de1-hidroxibenzotriazola (HOBt) (4,1 g, 27 mmols) e trietilamina (9,3 mL, 67mmols) em diclorometano (110 mL) foi adicionado hidrocloreto de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDCI) (5,1 g, 27 mmols) a 0°C e amistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 dia. À mis-tura de reação foi adicionada água e extraída com diclorometano. O extratofoi lavado com salmoura, seco sobre sulfato de sódio e evaporado in vácuo.O resíduo foi purificado através de cromatografia em coluna sobre sílica-gel(diclorometano/acetato de etila = 1/2 a 1/3 como eluente) para proporcionaro composto do título como um sólido branco (8,1 g, rendimento quantitativo).

1H RMN (CDCI3,300 MHz) δ: 7,63 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,12 (t, J= 8,1 Hz, 1H), 6,75 (t, J= 8,1 Hz, 2H), 6,26 (s, 1H), 5,36 (d, J = 6,6 Hz, 1H),4,69-4,61 (m, 1H), 4,31-4,17 (m, 2H), 3,13 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,32-2,15(m, 4H), 2,12-1,95 (m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 365 (M+H)+, 363 (M-H)".

ETAPA 6:

3-(hidroximetil)-N.N.2-trimetil-8-í(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-iDaminolimidazo f1,2-alpiridina-6-carboxamida (exemplo 1-1)

Uma mistura de N,N,2-trimetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a] piridina-6-carboxamida (8,1 g, 22 mmols, ETAPA5), formaldeído a 37% em peso em água (18 g, 222 mmols), ácido acético(3,2 mL, 56 mmols) e acetato de sódio (4,6 g, 56 mmols) em acetonitrila (220mL) foi aquecida a 80°C durante 1,3 horas. Após esfriar para a temperaturaambiente, solução saturada de bicarbonato de sódio (200 mL) foi adicionadaà mistura de reação e extraída com acetato de etila (200mL χ 2). Os extratoscombinados foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio eevaporados in vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia emcoluna sobre sílica-gel (diclorometano/metanol = 20/1 como eluente) paraproporcionar o composto do título como um sólido branco (8,4 g, 95%).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,77 (s, 1H), 7,12 (t, J = 8,1 Hz,1H), 6,75 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 6,35 (s, 1H), 5,38 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,88 (s,2H), 4,72-4,62 (m, 1H), 4,33-4,16 (m, 2H), 3,13 (s, 6H), 2,37 (s, 3H), 2,31-2,14 (m,4H), 2,14-1,98 (m, 1H), 1,88-1,78 (m, 1H)ppm.

EM (ESI) m/z: 395 (M+H)+, 393 (M-H)-.

ETAPA 7:

(S)-(-)-3-(hidroximetil)-A/./V.2-trimetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-iDaminol imidazoM .2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-1) e(/?)-(+)-3-(hidroximetil)-A/,/V,2-trimetil-8-í(5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-iPaminolimidazoíl ,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-2)

A fração-1 (2,46 g) e a fração-2 (2,39 g) foram preparadas a par-tir de 3-(hidroximetil)- /V,A/,2-trimetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida racêmica (5,9 g) através deHPLC como segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® OD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)

Fase móvel: n-Hexano/Etanol/Dietilamina (85/15/0,1)

Taxa de fluxo: 18,9 mL/min.

(S)-(-)-3-(hidroximetil)-/V./V.2-trimetil-8-r(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1imidazof1,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-1) (exemplo 1-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [cc]D22 = -5,3° (C = 1,03, Metanol) tempo de retenção: 8 min.(R)-(+)-3-( hidroximetil)-/V./V,2-trimetil-8-r(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1imidazoí1,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-2) (exemplo 1-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D21 = +6,0 ° (C = 1,08, Metanol)tempo de retenção: 14 min.

Exemplo 2

8-(3,4-DIIDRO-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-A/.A/.2-trimetilimidazon .2-alpiridina-6-carboxamida<formula>formula see original document page 59</formula>

ETAPA 1:

8-(3^-diidro-2H-cromen-4-ilamino)-2-metilimidazori.2-a1piridina-6-carboxilato de isopropila

O composto do título foi preparado em um rendimento de 93%(10,2 g, óleo) a partir de 4-clorocromano (7,6 g, 45 mmols, Indian Journal ofChemistry, Seção B, 1981, 20B(12), 1063) e 8-amino-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (7,0 g, 30 mmols, ETAPA 2 do Exemplo1) através da mesma maneira conforme na ETAPA 3 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,26 (s, 1H), 7,37-7,17 (m, 3H),6,98-6,82 (m, 2H), 6,77 (s, 1H), 5,47-5,38 (m, 1H), 5,35-5,21 (m, 1H), 4,87-4,76 (m, 1H), 4,33-4,23 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,30-1,95 (m, 2H), 1,39 (d, J =5,9 Hz, 6H) ppm.

EM (ESI) m/z: 366 (M+H)+.

ETAPA 2:

8-(3,4-diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-2-metilimidazof1.2-alpiridina-6-carboxilato de isopropila

O composto do título foi preparado em um rendimento de 63%(7,0 g, um sólido branco) a partir de 8-(3,4-diidro-2H-cromen-4-ilamino)-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (10,2 g, 27,9 mmols,ETAPA 1) através da mesma maneira conforme na ETAPA 6 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,37 (s, 1H), 7,40-7,14 (m, 2H),6,95-6,81 (m, 3H), 5,44-5,37 (m, 1H), 5,36-5,22 (m, 1H), 4,97 (d, J= 5,1 Hz,2H), 4,88-4,79 (m, 1H), 4,33-4,24 (m, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,30-2,20 (m, 2H),1,40 (d, J= 6,6 Hz, 6H) ppm. (-OH não foi observado)

EM (ESI) m/z: 396 (M+H)+.

ETAPA 3:

8-(3,4-Diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-2-metilimidazon.2-alpiridina-6-ácido carboxílico

O composto do título foi preparado em rendimento quantitativo(4,8 g, um sólido amarelo) a partir de 8-(3,4-diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (5,1 g,12,9 mmols, ETAPA 2) através da mesma maneira conforme na ETAPA 4 doExemplo 1.

1H RMN (DMSO-Gfe, 300 MHz) (: 13,2-12,9 (m, 1H), 8,35 (s, 1H),7,31-7,07 (m, 2H), 6,93-6,68 (m, 3H), 6,20-5,90 (m, 1H), 5,30-5,13 (m, 1H),5,08-4,90 (m, 1H), 4,84-4,66 (m, 2H), 4,36-4,13 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,24-2,01 (m, 2H) ppm.

EM (ESI) m/z: 354 (M+H)+, 352 (M-H)-.

ETAPA 4:

8-(3.4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-N.N.2-trimetilimidazoí1.2-alpiridina-6-carboxamida (exemplo 2-1)

A uma mistura agitada de ácido 8-(3,4-diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-2- metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (760 mg,ETAPA 3) e hidrocloreto de /V-metilmetanamina (370 mg, 4,5 mmols) e trieti-lamina (0,84 mL, 6,0 mmols) em dimetilformamida (15 ml_) foi adicionadohexaflúorfosfato de O-benzotriazol-1-IL-A/,Λ/,Λ/',Λ/'-tetrametilurônio (HBTU)(1,1 g, 3,0 mmols) a 0°C. A mistura de reação foi agitada em temperaturaambiente durante 3 horas. À mistura de reação foi adicionada água e a mis-tura foi extraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com salmoura,seco sobre sulfato de sódio e evaporado in vácuo. O resíduo foi purificadoatravés de cromatografia em coluna sobre sílica-gel (metanol/diclorometano= 1/20 como eluente) para proporcionar o composto do título como um sólidobranco (344 mg).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,75 (s, 1H), 7,34-7,16 (m, 2H),6,94-6,82 (m, 2H), 6,30 (s, 1H), 5,52 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 4,93-4,82 (m, 2H),4,81-4,72 (m, 1H), 4,33-4,22 (m, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,46-2,10 (m, 5H) ppm. (-OH não foi observado)

EM (ESI) m/z: 381 (M+H)+, 379 (M-H)".

ETAPA 5:

(+)-8-(3,4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazoH ,2-al piridina-6-carboxamida (fracão-1) e(-)-8-(3,4-Diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-/V.A/.2-trimetilimidazon .2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-2)

A fração-1 (132 mg) e a fração-2 (130 mg) foram preparadas apartir de 8-(3,4-diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-/\/,/\/,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida racêmica (335 mg) através deHPLC como segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® OD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)Fase móvel: n-Hexano/Etanol/Dietilamina (85/15/0,1)Taxa de fluxo: 18,9 mL/min.

(+)-8-(3,4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-/V,A/.2-trimetilimidazori.2-alpiridina-6-carboxamida (fracão-1) (exemplo 2-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D21 = +12,3 ° (C = 0,20, Metanol)tempo de retenção: 8 min.

(-)-8-(3.4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-A/.A/.2-trimetilimidazoH .2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-2) (exemplo 2-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a ]D21 = -10,0° (C = 0,27, Metanol) tempo de retenção: 13min.

Exemplo 3

8-í(5.7-Diflúor-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-/\/.A/.2-trimetilimidazof1.2-alpiridina-6-carboxamida

ETAPA 1:

5.7-Diflúorcroman-4-ol

A uma solução agitada de 5,7-diflúor-2,3-diidro-4H-cromen-4-ona (2,0 g, 11 mmols, US 2005038032) em metanol (30 mL) foi adicionadoboroidreto de sódio (0,49 g, 13 mmols) a 0°C e a mistura foi agitada em tem-peratura ambiente durante 20 horas. Após a mistura ser evaporada in vácuo,o resíduo foi tratado com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (30mL χ 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos sobresulfato de magnésio e concentrados in vácuo para proporcionar o compostodo título como um sólido branco (2,0 g, 97%).

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 6,50-6,33 (m, 2H), 5,07-4,95 (m,1H), 4,36-4,18 (m, 2H), 2,16-1,94 (m, 2H) ppm. (-OH não foi observado)

ETAPA 2:

4-Cloro-5,7-diflúorcromano

O composto do título foi preparado em rendimento quantitativo(2,1 g, óleo amarelo) a partir de 5,7-diflúorcroman-4-ol (2,0 g, 11 mmols,ETAPA 1) através da mesma maneira conforme na ETAPA 1 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 6,56-6,30 (m, 2H), 5,45-5,25 (m,1H), 4,62-4,33 (m, 2H), 2,53-2,20 (m, 2H) ppm.

ETAPA 3:

8-r(5.7-diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metilimidazoí1.2-a1piridina -6-carboxilato de isopropila

O composto do título foi preparado em um rendimento de 82%(2,8 g, um sólido amarelo) a partir de 8-amino-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (1,6 g, 7,0 mmols, ETAPA 2 do Exemplo 1) e 4-cloro-5,7-diflúorcromano (2,1 g, 11 mmols, ETAPA 2) através da mesmamaneira conforme na ETAPA 3 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,28 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,78 (s,1H), 6,48-6,34 (m, 2H), 5,37-5,20 (m, 2H), 4,98-4,89 (m, 1H), 4,38-4,23 (m,2H), 2,41 (s, 3H), 2,36-2,24 (m, 1H), 2,21-2,01 (m, 1H), 1,39 (d, J= 6,6 Hz,6H)ppm.

EM (ESI) m/z: 402 (M+H)+.

ETAPA 4:

8-f(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metilimidazof1,2-alpiridina-6-ácido carboxílico

O composto do título foi preparado em um rendimento de 64%(1,5 g, um sólido amarelo) a partir de 8-[(5,7-diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (2,8 g, 6,8mmols, ETAPA 3) através da mesma maneira conforme na ETAPA 4 do E-xemplo 1.1H RMN (DMSO-afe. 300 MHz) δ: 8,37 (s, 1 Η), 7,66 (s, 1H), 6,83-6,67 (m, 2H), 6,67-6,48 (m, 1H), 6,02 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,99-4,86 (m, 1H),4,37-4,15 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,17-1,83 (m, 2H) ppm. (-COOH não foi ob-servado)

EM (ESI) m/z: 360 (M+H)+.

ETAPA 5:

8-f(5 J-Diflúor-3^-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-/V,A/.2-trimetilimidazori ,2-alpiridina-6- carboxamida

O composto do título foi preparado em um rendimento de 92%(0,79 g, um sólido branco) a partir de ácido 8-[(5,7-diflúor- 3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (0,80 g, 2,2mmols, ETAPA 4) através da mesma maneira conforme na ETAPA 5 do E-xemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,64 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,50-6,33 (m, 2H), 6,26 (s, 1H), 6,35 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,91 -4,80 (m, 1H), 4,36-4,25 (m, 2H), 3,12 (s, 6H), 2,40 (s, 3H), 2,34-2,20 (m, 1H), 2,08-1,91 (m, 1H)ppm.

EM (ESI) m/z: 387 (M+H)+.

ETAPA 6:

8-r(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetin-A/./V.2-trimetilimidazo Γ1.2-a1piridina-6-carboxamida (exemplo 3-1)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 94%(0,79 g, um sólido branco) a partir de 8-[(5,7-diflúor-3,4- diidro-2H-cromen-4-il)amino]-/V,A/,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida (0,79 g, 2,0mmols, ETAPA 5) através da mesma maneira conforme na ETAPA 6 do E-xemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 7,76 (s, 1H),.6,52-6,25 (m, 3H),5,40 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,97-4,76 (m, 3H), 4,41-4,18 (m, 2H), 3,12 (s, 6H),2,34 (s, 3H), 2,32-2,12 (m, 2H), 2,11-1,91 (m, 1H) ppm.EM (ESI) m/z: 417 (M+H)+.

ETAPA 7:

(ff)-(+)-8-í(5,7-Diflúor-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-N,N,2- trimetilimidazoí1,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-1) e(S)-(-)-8-í(5.7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-iltetrimetilimidazoH .2-alpiridina-6-carboxamida (fracão-2)

A fração-1 (0,25 g)ea fração-2 (0,26 g) foram preparadas a par-tir de 8-[(5,7-diflúor-3,4- diidro-2H-cromen-4-il)amino]-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida racêmica (0,78 g) através deHPLC como segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® AD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)Fase móvel: n-Hexano/2-Propanol/Dietilamina ( 90/10/0,1 )taxa de fluxo: 18,9 mL/min.

(R)-(+)-8-[(5,7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetin-N,N,2-trimetilimidazon,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-1) (exemplo 3-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D24 = +48,7° (c = 1,01, Metanol) tempo de re-tenção: 13 min.

(S)-(-)-8-r(5.7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazoH ,2-a1piridina-6-carboxamida (fracão-2) (exemplo 3-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D24 = -49,9° (c = 1,01, Metanol)tempo de retenção: 18 min.p.f.: 186°C

ângulo padrão por PXRD (2-Teta°): 10,6, 13,0, 14,4, 16,7, 19,7,22,6, 26,5

Exemplo 4

8-f(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazoí1.2-a1piridina-6-carboxamida

<formula>formula see original document page 64</formula>

ETAPA 1:

5-Flúorcroman-4-ol

O composto do título foi preparado como um óleo preto em ren-dimento quantitativo a partir de 5-flúor-2,3-diidro-4/-/-cromen-4-ona (GB2355264) através da mesma maneira conforme na ETAPA 1 do Exemplo 3.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,25-7,11 (m, 1H), 6,75-6,60 (m,2H), 5,13-5,02 (m, 1H), 4,40-4,18 (m, 2H), 2,25-1,95 (m, 3H) ppm.

ETAPA 2:

4-Cloro-5-flúorcromano

O composto do título foi preparado em rendimento quantitativo(15 g, óleo laranja) a partir de 5-flúorcroman-4-ol (13 g, 77 mmols, ETAPA 1)através da mesma maneira conforme na ETAPA 1 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 7,24-7,10 (m, 1H), 6,71-6,56 (m,2H), 5,43-5,33 (m, 1H), 4,58-4,32 (m, 2H), 2,50-2,19 (m, 2H) ppm.

ETAPA 3:

8-r(5-flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metilimidazof1,2-alDiridina-6-carboxilato de isopropila

O composto do título foi preparado em um rendimento de 61%(12 g, um sólido amarelo) a partir de 4-cloro-5-flúorcromano (14 g, 77 mmols,ETAPA 2 do Exemplo 4) e 8-amino-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (2,2 g, 7,1 mmols, ETAPA 2 do Exemplo 1) atravésda mesma maneira conforme na ETAPA 3 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 8,27 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,24-7,10 (m, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,74-6,57 (m, 2H), 5,40-5,21 (m, 2H), 5,04-4,93(m, 1H), 4,36-4,25 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,36-2,23 (m, 1H), 2,19-1,97 (m,1H), 1,39 (d, J = 5,9 Hz, 6H) ppm.

EM (ESI) m/z: 384 (M+H)+.

ETAPA 4:

8-[(5-Flúor-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-2-metilimidazo[1.2-alpiridina-6-ácido carboxílico

O composto do título foi preparado em um rendimento de 98%(9,5 g, um sólido branco) a partir de 8-[(5-flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (11 g, 28mmols, ETAPA 3) através da mesma maneira conforme na ETAPA 4 do E-xemplo 1.1H RMN (DMSO-Cfe, 300 MHz) δ: 8,51 (s, 1Η), 7,72 (s, 1 Η), 7,32-7,16 (m, 1 Η), 6,78-6,64 (m, 3Η), 6,12 (d, J = 7,3 Hz, 1Η), 5,06-4,94 (m, 1Η),4,35-4,15 (m, 2Η), 2,29 (s, 3H), 2,16-1,93 (m, 2H) ppm. (-COOH não foi ob-servado)

ETAPA 5:

8-r(5-Flúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-A/,A/.2-trimetilimidazori,2-alpiridina-6- carboxamida

O composto do título foi preparado em um rendimento de 99%(0,67 g, um sólido branco) a partir de ácido 8-[(5-flúor-3,4- diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (0,64 g, 1,9 mmols,ETAPA 4) através da mesma maneira conforme na ETAPA 5 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 7,63 (s, 1H), 7,33-7,23 (m, 1H),7,24-7,10 (m, 1H), 6,76-6,55 (m, 2H), 6,27 (s, 1H), 5,43 (d, J = 5,8 Hz, 1H),4,97-4,84 (m,1H), 4,36-4,23 (m, 2H), 3,12 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,32-2,22(m, 1H), 2,11-1,93 (m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 369 (M+H)+.

ETAPA 6:

8-r(5-Flúor-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-/\/,/\/.2-trimetilimidazori.2-alpiridina-6- carboxamida (fracão-1) e (fracão-2)

A fração-1 (0,25 g) e a fração-2 (0,25 g) foram preparadas a par-tir de 8-[(5-flúor-3,4 -diidro-2H-cromen-4-il)amino]-/\/,A/,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida racêmica (0,66 g) através de HPLC como segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® OD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)

Fase móvel: /i-Hexano/EtOH/Dietilamina ( 80/20/0,1 )taxa de fluxo: 20 mL/min.

8-r(5-Flúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-A/,A/.2-trimetilimidazon,2-alpiridina-6-carboxamida (fracão-1)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematotempo de retenção: 7 min.

EM (ESI) m/z: 369 (M+H)+.

8-[(5-Flúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-inamino1-A/.A/.2-trimetilimidazon.2-alpiridina-6-carboxamida (fração-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racemato

Tempo de retenção: 11 min.

EM (ESI) m/z: 369 (M+H)+.

ETAPA 7:

(-)-8-[(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-A/./V.2-trimetilimidazo Γ1,2-a1piridina-6-carboxamida (exemplo 4-2)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 93%(0,13 g, um sólido branco) a partir de 8-[(5-flúor- 3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-N,N,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida (0,13 g, 0,35mmols, fração-1 da ETAPA 6) através da mesma maneira conforme na ETAPA 6 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,78 (s, 1H), 7,25-7,12 (m, 1H),6,73-6,55 (m, 2H), 6,36 (s, 1H), 5,42 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,97-4,82 (m, 3H),4,36-4,20 (m, 2H), 3,13 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,32-2,20 (m, 1H), 2,12-1,92(m, 1H), 1,80-1,65 (m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 399 (M+H)+.

rotação óptica: [a]D23 = -49,7 ° (c = 1,01, Metanol)

ETAPA 8:

(+)-8-í(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-3-(hidroximetil)-N,N.2-trimetilimidazo [1,2-a]piridina-6-carboxamida (exemplo 4-3)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 94%(0,13 g, um sólido branco) a partir de 8-[(5-flúor-3,4- diidro-2H-cromen-4-il)amino]-N,N,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida (0,13 g, 0,35mmols, fração-2 da ETAPA 6) através da mesma maneira conforme na ETAPA 6 do Exemplo 1.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,78 (s, 1H), 7,24-7,10 (m, 1H),6,73-6,56 (m, 2H), 6,36 (s, 1H), 5,42 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,97-4,83 (m, 3H),4,36-4,19 (m, 2H), 3,13 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,34-2,21 (m, 1H), 2,12-1,92(m, 1H), 1,69-1,53 (m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 399 (M+H)+.

rotação óptica: [a]D24 = +54,3 ° (c = 1,01, Metanol)Exemplo 5

(S)-3-(hidroximetil)-/V,A/.2-trimetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1imidazof1,2-a1piridina-6-carboxamida

<formula>formula see original document page 68</formula>

ETAPA 1:

3-(2-cloro-5-metilfenóxi)acrilato de metila

Uma solução de 2-cloro-5-metilfenol (10,0 g, 70,1 mmols) e pro-piolato de metila (5,95 mL, 71,5 mmols) em acetonitrila (30 mL) foi adiciona-da a uma solução agitada de TBAF em THF (solução comercial a 1,0 M, 14mL, 14 mmols) em temperatura ambiente durante um período de 1 hora. A-pós completar a adição da solução, agitação foi continuada durante 1 hora. Amistura de reação foi diluída com tolueno (50 mL) e lavada duas vezes comágua (50 mL + 25 mL). A camada orgânica separada foi concentrada sobpressão reduzida para proporcionar o composto do título como um óleo mar-rom (17,2 g, >99%, mistura a 6 : 4 de c/s- e trans- isômeros com aproxima-damente 105 em peso de tolueno), a qual foi usada na próxima etapa semoutra purificação.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz,) δ: 7,71 (d, J = 12,5 Hz, 0,4H), 7,30(m, 1H), 6,98-6,93 (m, 2H), 6,74 (d, J = 7,3 Hz, 0,6H), 5,47 (d, J = 12,5 Hz10,4H), 5,20 (d, J= 7,3 Hz, 0,6H), 2,77 (s, 1,8H), 3,73 (s, 1,3H), 2,34-2,33(dois simples, 3H) ppm.

ETAPA 2:

3-(2-cloro-5-metilfenóxi)propanoato de metila

Uma mistura de 3-(2-cloro-5-metilfenóxi)acrilato de metila (1,00g, 4,41 mmols, ETAPA 1), brometo de sódio (10 mg, 0,097 mmols) e paládiosobre carbono a 10% (50 mg) em metanol (5 mL) foi agitada durante a noitesob H2 (1 atm) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi filtradaatravés de uma almofada de Celite® e o catalisador foi enxaguado com tolu-eno (10 mL). O filtrado combinado foi lavado com água (5 mL) e concentradosob pressão reduzida para proporcionar o composto do título (963 mg, 95%)como um óleo laranja, o qual foi usado na próxima etapa sem outra purificação.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,21 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,78 (br.s,1H), 6,73 (br.d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,86 (t,J = 6,6 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H) ppm.

ETAPA 3:

8-Cloro-5-metil-2,3-diidro-4/-/-cromen-4-one

Uma mistura de 3-(2-cloro-5-metilfenóxi)propanoato de metila(430 mg, 1,88 mmol, ETAPA 2) e ácido triflúormetano-sulfônico (0,86 mL, 2mL/g de substrato) foi agitada a 80°C durante 40 minutos. Após esfriar paraa temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com água e o produ-to foi extraído com tolueno. A camada orgânica foi sucessivamente lavadacom uma solução aquosa de K2CO3 e água e concentrada sob pressão re-duzida para proporcionar o composto do título (355 mg, 96%) como um sóli-do marrom claro, o qual foi usado na próxima etapa sem outra purificação.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,41 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 6,76 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 4,61 (t, J= 6,6 Hz, 2H), 2,85 (t, J= 6,6 Hz, 2H), 2,61 (s, 3H) ppm.

ETAPA 4:

(4S)-8-Cloro-5-metil-A/-r(1 S)-1 -feniletincroman-4-amina 4-metilbenzeno-sulfonato

A uma solução de 8-cloro-5-metil-2,3-diidro-4H-cromen-4-ona(1,97 g, 10 mmols, ETAPA 3) em tetraidrofurano (4 mL) foram adicionados(S)-1-feniletilamina (1,64 mL, 13 mmols) e isopropóxido de titânio(IV) (4,44mL, 15 mmols) a 22°C. A solução amarela foi agitada a 22°C durante 18 ho-ras. Após término da reação (verificado através de 1H-RMN), a mistura foidiluída com metanol (20 mL) e esfriada para aproximadamente —30°C. A es-sa solução, foi adicionada solução a 2,0 M de boroidreto de sódio em triglima(2,5 mL, 5 mmols) durante 30 minutos (temperatura interna foi mantida entre30 -20 e -25°C) sob nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a -20°C durantemin. e, então, uma solução aquosa a 10% p/v de citrato de sódio (35 mL)foi adicionada. Essa mistura amarela foi agitada vigorosamente a 22°C du-rante 5 minutos e, então, acetato de etila (60 mL) foi adicionado. A misturaresultante foi agitada a 22°C durante 15 horas e duas camadas foram sepa-radas. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa a 5% p/v decloreto de sódio (20 mL) e concentrada. O produto bruto (69,8% através deHPLC) foi dissolvido em metanol (65 mL) e a solução foi aquecida para 70°C(temperatura externa). A essa solução amarela foi adicionada gota a gotauma solução aquosa de monoidrato de ácido 4-metilbenzeno-sulfônico (2,47g, 13 mmols em 15 mL de água) durante 10 minutos. Mais água (45 mL) foiadicionada e a mistura foi lentamente esfriada para 22°C e agitada durante anoite (12 horas) a 22°C. Após filtração, o sólido branco foi lavado com aceta-to de etila (20 mL) e, então, seco em um forno a vácuo a 50°C durante 2 ho-ras para proporcionar o composto do título (2,82 g, 59%, 99,3% de) comoum sólido branco.

1H RMN (DMSO-de, 300 MHz) δ: 8,98 (br.s, 1H), 8,71 (br.s, 1H),7,65 (d, J= 6,6 Hz, 2H), 7,49-7,46 (m, 5H), 7,39 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,12 (d,J= 7,3 Hz, 2H), 6,87 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 4,72-4,68 (m, 2H), 4,42-4,32 (m,2H), 2,40 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13-2,00 (m, 2H), 1,69 (d, J= 5,8 Hz, 3H) PPm.

Condições analíticas (HPLC)

Coluna: Xterra EM C18 3,5 μηι (D.l. de 2,1 mm χ 150 mm, Waters).

Temperatura: 40°C

Detecção: UV (230 nm)

Fase móvel: CH3CN (A), 10 mM CH3COONH4 (Β). A tabela degradiente é fornecida abaixo.

<table>table see original document page 70</column></row><table>

Tempo de retenção

Fração 1: 21,8 min. (diastereômero indesejado)

Fração 2: 22,6 min. (diastereômero desejado)

ETAPA 5:Hidrocloreto de (4S)-5-Metilchroman-4-amina

A uma suspensão de 4-metilbenzeno-sulfonato de (4S)-8-cloro-5-metil-A/-[(1S)-1-feniletil]croman-4-amina (2,37 g, 5,0 mmols, ETAPA 4) emacetato de etila (19 mL) foi adicionada solução aquosa a 1M de hidróxido desódio (10 mL) a 22°C. A suspensão foi agitada vigorosamente a 22°C duran-te 10 minutos. Duas camadas foram separadas. A camada orgânica foi lava-da com água (5 mL) e concentrada para proporcionar a amina livre como umóleo incolor. A amina livre foi dissolvida em metanol (20 mL) e a solução so-freu hidrogenólise na presença de 10% paládio sobre carbono (31 mg) a50°C durante 3 horas sob hidrogênio (1 atm). Após a mistura de reação seresfriada para 22°C, o catalisador foi filtrado através de uma almofada de Ce-lite® e lavada com metanol. O filtrado foi concentrado para proporcionar ocomposto do título (1,00 g, 100%, 99,4% ee) como um sólido branco.

1H RMN (DMSO-Gf6, 300 MHz) δ: 8,52 (br.s, 3H), 7,17 (t, J = 8,0Hz, 1H), 6,79 (d, J = 7,0 Hz1 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,55 (s, 1H), 4,32(d, J = 10,3 Hz, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,30 (d, J= 14,7 Hz1 1H), 2,05-2,20 (m,1H)ppm.

Condições analíticas (HPLC)Coluna: CHIRALPAK® AD-HTemperatura: 40°C

Detecção: UV (230 nm)

Fase móvel: n-Hexano/Etanol/Dietilamina ( 90/10/0,1 )Taxa de fluxo: 1,0 mL/min.Tempo de retenção

Fração 1: 8,0 min. (fl-isômero)

Fração 2: 9,6 min. (S-isômero)

ETAPA 6:

2-metil-8-(í(4S)-5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il1amino) imidazoM .2-alpiridi-na- 6-carboxilato de isopropila

ETAPA 6-1:

6-amino-5-bromonicotinato de isopropila

A um frasco de 500 mL com 3 gargalos contendo uma suspen-são de 6-aminonicotinato de isopropila (14,9 g, 82,5 mmols) em ciclopentil-metiléter (CPME) (150 mL) foi adicionado NBS em sete porções (2,93 g χ 7,116 mmols como um todo) com intervalos de 10 minutos a 22°C. Após 15minutos de agitação, a reação foi resfriada rapidamente com solução aquosaa 3% de tiossulfato de sódio (Na2S2O3) (150 mL) e solução aquosa a 5% deNaHCO3 (150 mL). A essa mistura foi adicionado tolueno (300 mL) e a mis-tura foi agitada durante 10 minutos. A camada orgânica separada foi concen-trada sob pressão reduzida e o solvente foi trocado por 2-propanol (90 mLx2) e parcialmente concentrado para 75 mL. A mistura foi agitada em tempe- ratura ambiente durante 15 horas, então, a 0°C durante 5 horas. O sólidoresultante foi filtrado e foi lavado duas vezes com 2-propanol gelado (30 mL)para proporcionar o composto do título (16,4 g, 63,3 mmols, 77%) como umsólido marrom amarelado.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,66 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 5,40(br.s, 2H), 5,22 (sep, J = 6,6 Hz, 1H), 1,35 (d, J = 6,6 Hz, 6H) ppm.

ETAPA 6-2:

8-bromo-2-metilimidazo[1,2-alpiridina-6-carboxilato de isopropila

Uma mistura de 6-amino-5-bromonicotinato de isopropila (15,0 g,57,9 mmols, ETAPA 6-1), cloroacetona (14,0 mL, 174 mmols) e propionitrila(150 mL) foi agitada a 100°C. Após 71 horas de agitação, cloroacetona (4,7mL, 58 mmols) foi adicionada e agitação foi continuada durante 24 horas namesma temperatura. Então, outra porção de cloroacetona (4,7 mL, 58mmols) e propionitrila (60 mL) foi adicionada. Após agitação durante 9 horas,a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente e, então, res- friada rapidamente com solução de NaOH a 0,5 M (116 mL) e água (34 mL).A essa mistura foi adicionado tolueno (150 mL) e a mistura foi agitada duran-te 15 minutos. A camada orgânica separada foi concentrada sob pressãoreduzida e o solvente foi trocado por um solvente misturado (heptano : ace-tato de etila = 1 : 1, 50 mL x2). O resíduo foi diluído com uma mistura a 1 : 1de heptano e acetato de etila (300 mL) e sílica-gel (30 g) foi adicionado. A-pós agitação durante 10 minutos, a mistura foi filtrada e lavada com umamistura a 1 : 1 de heptano e acetato de etila (150 mL x2). O filtrado foi con-centrado sob pressão reduzida. O solvente foi trocado por 2-propanol (150ml_ x2) e parcialmente concentrado para aproximadamente 20 ml_. Heptano(70 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente du-rante 1 hora e, então, a 0°C durante 3 horas. O sólido resultante foi filtrado elavado duas vezes com uma mistura a 19 : 1 de heptano e 2-propanol (30mL) para proporcionar o composto do título (8,3 g, 28 mmols, 48%) como umsólido marrom Ieitoso claro.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,78 (d, J= 1,4 Hz, 1H), 7,96 (s,1H), 7,50 (s, J = 8 Hz, 1H), 5,28 (sep, J = 5,8 Hz, 1H), 2,52 (s, 3H), 1,39 (d, J= 5,8 Hz, 6H) ppm.

ETAPA 6-3:

2-metil-8-(r(4S)-5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-inamino) imidazofl ,2-al piri-dina-6-carboxilato de isopropila

O frasco de fundo redondo com dois gargalos (20 mL) equipadocom um condensador de refluxo foi carregado com Pd2(dba)3 (3,7 mg, 0,004mmol) e BINAP (5,6 mg, 0,009 mmol) e purgado com nitrogênio. Tolueno (1mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 22°C durante 5 minutos, resul-tante em uma solução púrpura homogênea. Hidrocloreto de (4S)-5-Metilcroman-4-amina (80 mg, 0,4 mmol, ETAPA 5), terc-butóxido de sódio(85 mg, 0,88 mmol) e tolueno (1 mL) foram adicionados e a mistura foi agita-da a 60°C durante 5 minutos. 8-bromo-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de isopropila (119 mg, 0,4 mmol, ETAPA 6-2) e tolueno (1 mL)foram adicionados e, então, a mistura foi agitada a 80°C durante 5 horas. Amistura de reação foi deixada esfriar para 22°C e, então, diluída com diiso-propil éter (3 mL).

A suspensão resultante foi filtrada através de uma almofada deCelite® e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto foipurificado através de cromatografia em coluna de sílica-gel (heptano : aceta-to de etila = 4:1) para proporcionar o composto do título (118 mg, 78%) co-mo um pó rosa claro.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 8,26 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,12 (t, J= 8,1 Hz, 1H), 6,78-6,72 (m, 3H), 5,32-5,24 (m, 2H), 4,73 (br., 1H), 4,27-4,19(m, 2Η), 2,39 (s, 3Η), 2,29 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 2,14-2,09 (m,1H), 1,40 (d, J= 5,8 Hz, 6H) ppm.

ETAPA 7:

2-Metil-8-(r(4S)-5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il1amino)imidazori.2-alpiridina-6-ácido carboxílico

O composto do título é preparado a partir de 2-metil-8-{[(4S)-5-metil-3,4-diidro-2/-/ -cromen -4-il]amino} imidazo[1,2-a]piridina- 6-carboxilatode isopropila (ETAPA 6-3) através da mesma maneira conforme na ETAPA 4do Exemplo 1.

ETAPA 8:

N,N,2-Trimetil-8-(r(4S)-5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il1amino)imidazon.2-alpiridina-6- carboxamida

O composto do título é preparado a partir de ácido 2-metil-8-{[(4S)-5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il]amino}imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (ETAPA 7) através da mesma maneira conforme na ETAPA 5 doExemplo 1.

ETAPA 9:

3-(hidroximetil)-/V./V,2-trimetil-8-(r(4S)-5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-illamino) imidazoH .2-alpiridina-6-carboxamida

O composto do título é preparado a partir de N,N,2-trimetil-8-{[(4S)-5-metil-3,4-diidro- 2/-/-cromen- 4-il]amino}imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida (ETAPA 8) através da mesma maneira conforme na ETAPA 6do Exemplo 1.

Exemplo 6

[2-Metil-8-r(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-alpiridin-3-il1metanol

<formula>formula see original document page 74</formula>

ETAPA 1:

2-Metil-A/-(5-metil-3.4-diidro-2A7-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1.2-a1piridin-8- amina

A uma mistura agitada de ácido 2-metil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2Hcromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a] piridina-6-carboxílico (0,60 g, 1,8 mmol,ETAPA 4 do Exemplo 1) e morfolina (0,31 g, 3,6 mmols) em diclorometano(8,0 ml_) foram adicionados hidrato de 1-hidroxibenzotriazola (HOBt) (0,36 g,2,7 mmols) e hidrocloreto de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida(EDCI) (0,51 g, 2,7 mmols) a 0°C e a mistura de reação foi agitada em tem-peratura ambiente durante 20 horas. A mistura de reação foi resfriada rapi-damente com solução saturada de carbonato de hidrogênio de sódio e extra-ída com diclorometano (30 ml_ x2). Os extratos combinados foram lavadoscom salmoura, secos sobre sulfato de sódio e evaporados in vácuo. O resí-duo foi purificado através de cromatografia em coluna sobre sílica-gel (hexa-no/acetato de etila = 1/2 como eluente) para proporcionar o composto dotítulo como um sólido branco (0,73 g, rendimento quantitativo).

1H RMN (CDCI3,300 MHz) δ: 7,64 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,18-7,07(m, 1H), 6,80-6,69 (m, 2H), 6,21 (s, 1H), 5,41 (d, J= 5,8 Hz, 1H), 4,70-4,60(m, 1H), 4,34-4,17 (m, 2H), 3,81-3,61 (m, 8H), 2,38 (s, 3H), 2,22 (s, 3H),2,31-1,95 (m, 2H) ppm.

EM (ESI) m/z: 407 (M+H)+.

ETAPA 2:

2-Metil-A/-(5-metil-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoí1.2-a1piridin-8-amina (fracão-1 e a fracão-2)

A fração-1 (0,27 g) e a fração-2 (0,28 g) foram preparadas a par-tir de 2-metil-/V-(5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imi-dazo[1,2-a]piridin-8-amina racêmica (0,72 g) através de HPLC como segue.Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® OJ-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)

Fase móvel: n-Hexano/Etanol/Dietilamina (65/35/0,1)Taxa de fluxo: 20 mL/min.

2-Metil-/\/-(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-alpiridin-8-amina (fracão-1)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racemato

EM (ESI) m/z: 407 (M+H)+. tempo de retenção: 8 min.2-Metil-A/-(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarboniDimidazo[1,2-alpiridin-S-amina (fracão-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematoEM (ESI) m/z: 407 (M+H)+.

tempo de retenção: 14 min.

ETAPA 3:

(-)-r2-Metil-8-r(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-6-(morfolin-4-ilcarboniOimidazoH .2-alpiridin-3-il1metanol (exemplo 6-2)

Uma mistura de 2-metil-/V-(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo [1,2-a]piridin-8-amina (0,22 g, 0,55 mmol, fra-ão-1 de ETAPA 2), formaldeído a 37% em peso em água (0,45 g, 5,5mmols), ácido acético (0,78 mL, 1,4 mmol) e acetato de sódio (0,11 g, 1,4mmol) em acetonitrila (5 mL) foi aquecida a 70°C durante 3 horas. Após es-friar para a temperatura ambiente, a mistura de reação foi resfriada rapida-mente com solução de hidróxido de sódio a 1M e extraída com acetato deetila (20 mL χ 2). Os extratos combinados foram lavados com salmoura, se-cos sobre sulfato de sódio e evaporados in vácuo. O resíduo foi lavado comsalmoura, seco sobre sulfato de sódio e evaporado in vácuo. O resíduo foipurificado através de cromatografia em coluna sobre sílica-gel (diclorometa-no/metanol = 15/1 como eluente) e gel NH (acetato de etila como eluente)para proporcionar o composto do título como um sólido branco (0,18 g, 76%).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,76 (s, 1H), 7,13 (t, J = 8,1 Hz,1H), 6,81-6,69 (m, 2H), 6,30 (s, 1H), 5,46 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 4,91-4,78 (m,2H), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,33-4,17 (m, 2H), 3,87-3,60 (m, 8H), 2,49-2,38 (m,1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,29-2,15 (m, 1H), 2,15-1,97 (m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 437 (M+H)+.

rotação óptica: [a]D23= -12,0 ° (c =1,01, Metanol)

ETAPA 4:

(+)-f2-Metil-8-í(5-metil-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-6-(morfolin-4-ilcarboniDimidazoH .2-al piridin-3-inmetanol (exemplo 6-3)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 73%(0,18 g, um sólido branco) a partir de 2-metil-A/-(5-metil-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-8- amina (0,23 g,0,56 mmol, fração-2 de ETAPA 2) através da mesma maneira conforme naETAPA 3 do Exemplo 6.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,76 (s, 1H), 7,13 (t, J = 8,1 Hz,1H), 6,81-6,69 (m, 2H), 6,30 (s, 1H), 5,46 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,91-4,78 (m,2H), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,33-4,17 (m, 2H), 3,87-3,60 (m, 8H), 2,81-2,64 (m,1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,29-2,15 (m, 1H), 2,15-1,97 (m, 1H) ppm.EM (ESI) m/z: 437 (M+H)+.rotação óptica: [oc]D24 = +11,8 ° (c =1,01, Metanol)

Exemplo 7

f8-(3,4-Diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imida-zo[1,2-a1piridin-3-il1metanol

ETAPA 1:

r8-(3.4-Diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imida- zo[1,2-a1piridin-3-inmetanol (exemplo 7-1)

<formula>formula see original document page 77</formula>

Auma mistura agitada de ácido 8-(3,4-diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-2- metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (2,4 g,6,9 mmols, ETAPA 3 do Exemplo 2), morfolina (1,8 g, 21 mmols) e trietilami-na (1,44 mL, 10 mmols) em dimetilformamida (70 ml_) foi adicionado hexa-flúorfosfato de O-benzotriazol-1-IL-N,N,N',N'-tetrametilurônio (HBTU) (3,9 g,10 mmols) a O0C. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambien-te durante 3 horas. À mistura de reação foi adicionada água e a mistura foiextraída com acetato de etila. O extrato foi lavado com salmoura, seco sobresulfato de sódio e evaporado in vácuo. O resíduo foi purificado através decromatografia em coluna sobre sílica-gel (acetato de etila /metanol = 20/1como eluente) para proporcionar o composto do título como um sólido bran-co (1,6 g, 53%).

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,78 (s, 1H), 7,33-7,16 (m, 2H),6,94-6,82 (m, 2H), 6,25 (s, 1H), 5,57-5,50 (m, 1H), 4,94-4,86 (m, 2H), 4,80-4,70 (m, 1H), 4,32-4,23 (m, 2H), 3,80-3,60 (m, 8H), 2,40 (s, 3H), 2,30-2,15(m, 2Η) ppm. (-OH não foi observado)

EM (ESI) m/z: 423 (M+H)+, 421 (M-H)-.

ETAPA 2:

(-)-r8-(3^-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imida-zo[1,2-alpiridin-3-il1metanol (fracão-1) e

(+)-r8-(3.4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-2-mζοΓ1.2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-2)

A fração-1 (570 mg) e a fração-2 (570 mg) foram preparadas apartir de [8-(3,4-diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbo-nil)imidazo[1,2-a]piridin-3-il]metanol racêmico (1,4 g) através de HPLC comosegue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® AD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)Fase móvel: n-Hexano/2-Propanol/Dietilamina (85/15/0,1)

Taxa de fluxo: 18,9 mL/min.

(-)-í8-(3,4-Diidro-2/-/-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imida-zof1,2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-1) (exemplo 7-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [oc]D24 = -3,21 0 (C = 1,00, Metanol)tempo de retenção: 16 min.

(+)-r8-(3.4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imida-ζοΓ1.2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-2) (exemplo 7-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [oc]D25 = +4,21° (C = 0,91, Metanol) tempo de retenção: 19min.

Exemplo 8

r8-r(5.7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)aminol-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoH,2-a1piridin-3-inmetanol

ETAPA 1:N-(57-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarboniDimidazoH ,2-a1piridin-8-amina

O composto do título foi preparado em um rendimento de 75%(4,49 g, um sólido branco) a partir de ácido 8-[(5,7-diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (5,00 g, 13,9mmols, ETAPA 4 do Exemplo 3) através da mesma maneira conforme naETAPA 1 do Exemplo 6.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,64 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,27 (s,1H), 6,47-6,36 (m, 2H), 6,22 (s, 1H), 5,40 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 4,95 (m, 1H),4,35-4,23 (m, 2H), 3,71 (m, 8H), 2,39 (s, 3H), 2,30-2,22 (m, 1H), 2,09-1,95(m, 1H) ppm.

EM (ESI) m/z: 429 (M+H)+.

ETAPA 2:

[8-[(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoí[,2-a]piridin-3-il]metanol (exemplo 8-1)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 97%(4,68 g, um sólido branco) a partir de N-(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-8-amina (4,49 g, 10,5mmols, ETAPA 1) através da mesma maneira conforme na ETAPA 3 do E-xemplo 6.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,76 (s, 1H), 6,45-6,35 (m, 2H),6,30 (s, 1H), 5,48 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,86 (s, 3H), 4,92-4,85 (m, 1H), 4,38-4,22 (m, 2H), 3,71 (m, 8H), 2,33 (s, 3H), 2,33 (m, 1H), 2,10-1,95 (m, 1H)ppm.

EM (ESI) m/z: 459 (M+H)+.

ETAPA 3:

(+)-[8-[(5.7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-3-il1metanol (fracão-1) e

(-)-[8-[(5,7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarboniDimidazo[1,2-a]piridin-3-inmetanol (fracão-2)

A fração-1 (0,49 g) e a fração-2 (0,48 g) foram preparadas a par-tir de [8-[(5,7-diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-3-il]metanol racêmico (1,50 g) através de H-PLC como segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® AD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)

Fase móvel: n-Hexano/Etanol/Dietilamina (85/15/0,1)

taxa de fluxo: 18,9 mL/min.(+)-í8-r(5.7-Diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoí1,2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-1) (exemplo 8-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [cc]D23 = +54,2 ° (c = 1,20, Metanol)tempo de retenção: 11 min.

(-)-r8-r(5.7-Diflúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarboniOimidazon ,2-a1piridin-3-inmetanol (fracão-2) (exemplo 8-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D24 = -51,2 ° (c = 1,34, Metanol)tempo de retenção: 18 min.

Exemplo 9

í8-í(5-Flúor-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazon.2-a1piridin-3-il1metanol

ETAPA 1:

N-(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazori,2-a1piridin-8-amina

O composto do título foi preparado em um rendimento de 96%(4,5 g, um sólido marrom claro) a partir de ácido 8-[(5-flúor-3,4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino]-2-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxílico (3,9 g, 11mmols, ETAPA 4 do Exemplo 4) através da mesma maneira conforme naETAPA 1 do Exemplo 6.

1H RMN (CDCI3, 300 MHz) δ: 7,64 (s, 1H), 7,35-7,10 (m, 2H),6,78-6,57 (m, 2H), 6,29 (s, 1H), 5,80-5,68 (m, 1H), 5,00-4,85 (m, 1H), 4,40-4,27 (m, 2Η), 3,88-3,61 (m, 8Η), 2,39 (s, 3Η), 2,33-1,84 (m, 2Η) ppm.EM (ESI) m/z: 411 (M+H)+.

ETAPA 2:

r8-r(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)aminol-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarboniDimidazoM .2-al piridin-3-inmetanol (exemplo 9-1)

O composto do título foi preparado em um rendimento de 93%(4,4 g, um sólido branco) a partir de A/-(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-8-amina (4,5 g, 11 mmols,

1H RMN (CDCI3, 270 MHz) δ: 7,77 (s, 1H), 7,24-7,12 (m, 1H),6,72-6,57 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,50-5,45 (m, 1H), 4,94-4,84 (m, 3H), 4,37-4,22 (m, 2H), 3,81-3,61 (m, 8H), 2,35 (s, 3H), 2,30-2,20 (m, 1H), 2,12-1,98(m, 1H) ppm. (-OH não foi observado)

EM (ESI) m/z: 441 (M+H)+.

ETAPA 3:

(+)-r8-í(5-Flúor-3.4-diidro-2/-/-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoH.2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-1) e (-)-r8-í(5-Flúor-3.4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazon.2-alpiridin-3-illmetanol (fracão-2)

A fração-1 (0,59 g) e a fração-2 (0,61 g) foram preparadas a par-tir de [8-[(5-flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1,2-a]piridin-3-il]metanol (1,5 g) racêmico através de HPLCcomo segue.

Condição de isolamento

Coluna: CHIRALPAK® AD-H (D.l. de 20 mm χ 250 mm, DAICEL)

Fase móvel: n-Hexano/2-Propanol/Dietilamina (80/20/0,1 )taxa de fluxo: 20 mL/min.

(+)-r8-r(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazoH.2-a1piridin-3-il1metanol (fracão-1) (exemplo 9-2)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D24= +51,7 0 (c = 1,04, Metanol)tempo de retenção: 7 min.(-)-[8-[(5-Flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino1-2-metil-6-(morfolin-4-ilcarbonil)imidazo[1.2-a1piridin-3-inmetanol (fracão-2) (exemplo 9-3)

RMN: os dados de espectro eram idênticos àqueles do racematorotação óptica: [a]D24= -53,1 ° (c = 1,04, Metanol)

tempo de retenção: 10 min.

Todas as publicações incluindo, mas não limitado a, patentesemitidas, pedidos de patente e artigos de jornal citados no presente pedidosão cada um aqui incorporados por referência em sua totalidade.

Embora a invenção tenha sido descrita acima com referência àsmodalidades divulgadas, aqueles versados na técnica apreciarão pronta-mente que os experimentos específicos detalhados são apenas ilustrativosda invenção. Deverá ser compreendido que várias modificações poderão serfeitas sem se desviar do espírito da invenção.

Claims (10)

1. Composto da fórmula (I):<formula>formula see original document page 83</formula>ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:-A-B- representa -O-CH2- ou -CH2-O-;R1 representa um grupo hidróxi ou uma porção conversível a umgrupo hidróxi in vivo;R2 representa um grupo C1-C6 alquila;R3 e R4 representam, independentemente, um grupo C1-C6 alqui-la ou um grupo C3-C7 cicloalquila, a referida C1-C6 alquila e a referida C3-C7cicloalquila sendo não-substituídas ou substituídas por 1 a 3 substituintesindependentemente selecionados do grupo consistindo em um átomo dehalogênio, um grupo hidróxi, um grupo C1-C6 alcóxi e um grupo C3-C7 ciclo-alquila; ou R3 e R4, tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qual elesestão ligados, formam um grupo heterocíclico de 4 a 7 elementos sendonão-substituído ou substituído por 1 a 3 substituintes selecionados do grupoconsistindo em um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alquila, um grupo C1-C6 alcóxi e um grupo hidróxi-Ci-C6 alquila; eR5, R6, R7 e R8 representam, independentemente, um átomo dehidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo C1-C6 alquila.

2. Composto ou o sal farmaceuticamente aceitável de acordocom a reivindicação 1 em que:R1 é um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alcóxi ou um grupo C1-C6alquil-carbonil-óxi; eR3 e R4 são, independentemente, um grupo CrC6 alquila ou umgrupo C3-C7 cicloalquila, a referida CrC6 alquila e a referida C3-C7 cicloalqui-la sendo não-substituídas ou substituída por 1 a 3 substituintes independen-temente selecionados do grupo consistindo em um átomo de halogênio, umgrupo hidróxi, um grupo C1-C6 alcóxi e um grupo C3-C7 cicloalquila; ou R3 eR4, tomados junto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados,formam um grupo azetidinila, um grupo pirrolidinila, um grupo morfolino ouum grupo homomorfolino, o referido grupo azetidinila, referido grupo pirroli-dinila, referido grupo morfolino e referido grupo homomorfolino sendo não-substituídos ou substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados do grupoconsistindo em um grupo hidróxi, um grupo CrC6 alquila, um grupo CrC6alcóxi e um grupo hidróxi-Ci-C6 alquila.

3. Composto ou o sal farmaceuticamente aceitável de acordocom a reivindicação 1 em que:-A-B- é -CH2-O-;R1 é um grupo hidróxi;R2, R3 e R4 são, independentemente, um grupo CrC6 alquila;R5 e R7 são, independentemente, um átomo de hidrogênio, umátomo de halogênio ou um grupo CrC6 alquila; eR6 e R8 são, independentemente, um átomo de hidrogênio ouum átomo de halogênio.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 o qual selecionado de:(S)-(-)-3-(hidroximetil)-A/,/\/,2-trimetil-8-[(5-metil-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida;(+)-8-(3,4-Diidro-2H-cromen-4-ilamino)-3-(hidroximetil)-A/,A/,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida;(S)-(-)-8-[(5,7-diflúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-3-(hidroximetil)-/V,/V,2-trimetilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida; e(-)-8-[(5-flúor-3,4-diidro-2H-cromen-4-il)amino]-3-(hidroximetil)-N,N,2-trimetilimidazo [1,2-a] piridina-6-carboxamida;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composição farmacêutica compreendendo o composto ou osal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer umadas reivindicações 1 a 4 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

6. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 5,ainda compreendendo outro(s) agente(s) farmacologicamente ativo(s).

7. Método para o tratamento de uma condição mediada atravésde atividade inibitória da bomba de ácido em um mamífero, incluindo um serhumano, o qual compreende administração, ao mamífero que precisa de taltratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou dosal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer umadas reivindicações 1 a 4.

8. Método de acordo com a reivindicação 7, em que a referidacondição é doença gastrintestinal, doença gastroesofageal, doença de reflu-xo gastroesofageal (GERD), doença de refluxo laringofaringeal, úlcera pépti-ca, úlcera gástrica, úlcera duodenal, úlceras induzidas por NSAID, gastrite,infecção por Helicobacter pylori, dispepsia, dispepsia funcional, síndrome deZollinger-Ellison, doença de refluxo não-erosiva (NERD), dor visceral, cân-cer, queimadura solar, náusea, esofagite, disfagia, hiperssalivação, distúr-bios das vias aéreas ou asma.

9. Uso do composto da fórmula (I) ou do sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4,para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condiçãomediada através de atividade inibitória da bomba de ácido.

10. Uso de acordo com a reivindicação 9, em que a referida con-dição é doença gastrintestinal, doença gastroesofageal, doença de refluxogastroesofageal (GERD), doença de refluxo laringofaringeal, úlcera péptica,úlcera gástrica, úlcera duodenal, úlceras induzidas por NSAID, gastrite, in-fecção por Helicobacter pylori, dispepsia, dispepsia funcional, síndrome deZollinger-Ellison, doença de refluxo não-erosiva (NERD), dor visceral, cân-cer, queimadura solar, náusea, esofagite, disfagia, hiperssalivação, distúr-bios das vias aéreas ou asma.