BRPI0811770A2 - Composições e métodos de desinfecção - Google Patents

Description

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS DE DESINFECÇÃO

O presente pedido de patente reivindica o benefício do pedido de patente provisional dos Estados Unidos depositado anteriormente número 60/930.913, depositado em 18 de maio 5 de 2007 e intitulado "Bioactive compositions and use thereof" , o qual é pelo presente incorporado a título de referência na íntegra.

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a métodos novos para a 10 desinfecção de vários substratos, especialmente superfícies de toque; superfícies em contato com água e fluxo de ar; pisos, paredes e tetos e similar de instalações de armazenagem, preparação e processamento médico, de pesquisa, farmacêutico e alimentício; e superfícies de 15 artigos e substratos móveis que são transportes fáceis para bactérias patogênicas de plantas, humanas e animais, fungos, protistas, vírus e outros microorganismos. Especificamente, o método compreende tratar as superfícies com uma solução acídica de íon de metal antimicrobiana nova

2 0 tendo baixos níveis de íon de metal bioativo, individualmente ou preferivelmente em combinação adicional com um ou mais tensoativos capazes de interagir com membranas de parede de célula de microorganismos, especialmente micróbios patogênicos.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Materiais bioativos para exterminar ou inibir o crescimento e/ou proliferação/dispersão de bactérias, fungos e outros microorganismos têm sido procurados há muito tempo e empregados na sociedade. Seu uso data de séculos atrás, se não milhares de anos atrás. As aplicações iniciais variaram de aplicações relacionadas à saúde ou farmacêutica a aplicações de purificação e desinfetante e mais. Aplicações mais recentes incluem uma gama inteira de usos, com o maior uso, por volume visto na indústria agrícola. Talvez um dos materiais bioativos mais iniciais tenha sido prata metálica e, subsequentemente, sais de prata.

Enquanto os agentes bioativos iniciais eram mais frequentemente metais e sais de metal simples, a ciência moderna e síntese química permitiram o desenvolvimento e produção de agentes sintéticos, mais frequentemente agentes orgânicos e organometálicos, para aplicações

antibacteriana, antifúngica e outras similares. Realmente, para muitas aplicações, especialmente aplicações farmacêuticas, os agentes orgânicos têm, na maior parte, ocultado o uso de agentes bioativos inorgânicos. Embora materiais inorgânicos e organometálicos ainda comandem uma fatia significativa do mercado do negócio agroquímico, seu uso é limitado devido a preocupações com saúde e segurança, especialmente de uma perspectiva ambiental.

Apesar do grande sucesso e imenso volume/fatia de mercado comandado por agentes farmacêuticos orgânicos, antibacterianos e agroquímicos, não ocorre sem custo e conseqüências. Em todas as áreas de aplicações, uma tendência acentuada e crescente surgiu: a saber, a manifestação e dispersão de uma resistência a tais agentes orgânicos na maioria, se não em todos os microorganismos. Embora essa resistência não seja universal nem completa, está crescendo e envolve cada vez mais agentes orgânicos. Além disso, à medida que essa resistência cresce, assim o faz também a virulência aparente dos microorganismos afetados bem como sua capacidade de rapidamente adaptar-se a e manifestar resistência a novos agentes bioativos e combinações dos mesmos. Nesse aspecto, os requerentes estão 5 bem cientes da resistência crescente de bactérias, especialmente bactérias patogênicas, a agentes

farmacêuticos tradicionais e desinfetantes e o surgimento subsequentemente do que é comumente mencionado como super insetos; bactérias patogênicas que mostram forte resistência a agentes farmacêuticos e antibacterianos orgânicos tradicionais. Dois patógenos humanos particularmente desconcertantes e exemplares que desenvolveram tendências de resistência à droga são MRSA e resistente à droga e, mais recentemente, M. tuberculosis L5 resistente a múltiplas drogas. A mesma tendência foi vista na indústria agroquímica onde, por exemplo, apesar da grande fanfarra e promessa por trás da introdução de fungicidas de estrobilurina em meados da década de 90, a resistência foi encontrada após apensa alguns canos de uso em certas aplicações.

E, quer uma conseqüência direta ou indireta do surgimento de super insetos e/ou da conscientização crescente da facilidade pela quais as bactérias podem espalhar em combinação com uma preocupação crescente por 25 doenças potencialmente pandêmicas como SARS e Gripe aviária, nós nos tornamos uma população que está cada vez mais preocupada com higiene e limpeza em geral. Consequentemente, tem havido uma imensa proliferação e crescimento exponencial no uso e aplicação difundida e 3 0 indiscriminada de meios de limpeza e desinfetantes que contêm agentes antimicrobianos orgânicos bem como na produção, comercialização e uso de uma gama inteira de produtos de consumidor com um ou mais agentes antimicrobianos incorporados nos mesmos, tudo em um esforço 5 para parar exposição a bactérias, particularmente, bactérias patogênicas. Entretanto esse uso indiscriminado de agentes orgânicos veio, ou pelo menos apresenta a possibilidade de aumento geral em organismos resistentes antimicrobianos. Por erradicar os organismos mais fracos,

os organismos mais fortes e mais frequentemente mais perigosos são deixados.

Tais preocupações, entretanto, não são limitadas ao nosso ambiente de vida, porém se originam também com relação ao nosso suprimento de alimentos e água.

L5 Especificamente, embora a resistência seja certamente uma grande preocupação, talvez uma preocupação ainda maior seja a perda ambiental e humana associada ao uso difundido de agentes antimicrobianos; não apenas antimicrobianos orgânicos e antibióticos, porém inorgânicos, especialmente

metais, também. Por mais de meio século agora, cada vez mais literatura científica surgiu correlacionando exposição de longa duração (direto e indireto), e uso de produtos agroquímicos orgânicos, a várias doenças e conseqüências para a saúde, teratogênicas, mutanogênicas, carcinogênicas,

2 5 e outras, em animais, e mais importante na população

humana. Similarmente, a variedade de antibióticos orgânicos e de outros agentes farmacêuticos no mercado mostrou tendência crescente de efeitos colaterais ou conseqüências indesejáveis e frequentemente, fatais ou quase fatais de

3 0 uso em longo prazo. Conforme os recentes relatórios de notícias indicaram, agentes farmacêuticos, agentes antimicrobianos e agentes agroquímicos todos estão aparecendo cada vez mais como componentes não pretendidos em nossa cadeia alimentar e, mais importante, nos 5 suprimentos de água potável. 0 último resultando de muitas fontes incluindo escoamento de campos onde são aplicados; escoamento de refugos de cercados onde animais domésticos são alimentados e alojados; e tão insignificante quanto possa parecer primeiramente, do simples descarte de agentes 10 farmacêuticos vencidos e não utilizados no vaso sanitário.

Desse modo, há uma necessidade quase esmagadora e demanda por desinfetantes altamente eficazes que podem ser utilizados universalmente ou quase universalmente, sem preocupação ou certamente com preocupação reduzida, para contaminação ambiental e toxicidade.

Similarmente, há uma necessidade quase esmagadora e demanda por desinfetantes que não induzirão ou são menos propensos a induzir resistência em organismos alvo.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

2 0 De acordo com a presente invenção são fornecidos

desinfetantes úteis na desinfecção e/ou inibição do crescimento e proliferação de patógenos humanos, de animais e plantas conhecidos, incluindo bolores, as composições compreendendo a) uma solução de ácido tendo um pH menor do 25 que 6 cuja concentração de ácido é de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10%; b) pelo menos uma fonte de íon de metal antimicrobiano parcialmente ou preferivelmente, totalmente dissolvido ou solúvel no mesmo, c) pelo menos um tensoativo umectante conhecido por aumentar o umedecimento 30 ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas e, opcionalmente embora preferivelmente, pelo menos um tensoativos aniônico, não iônico e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos, especialmente micróbios patogênicos ou a 5 função dos mesmos, cujo tensoativo é igual ou, mais tipicamente, diferente do tensoativo umectante (c) , em que o ácido está presente em um excesso molar em relação aos íons de metal antimicrobiano e o nível total dos íons de metal antimicrobiano na solução é de aproximadamente 20 ppm

a aproximadamente 1000 ppm, preferivelmente de aproximadamente 25 a aproximadamente 500 ppm, mais preferivelmente de aproximadamente 50 a aproximadamente 3 00 ppm. Preferivelmente essas composições terão pelo menos um excesso molar 2x, preferivelmente pelo menos um excesso

L5 molar 5x do ácido em relação ao(s) íon(s) de metal, e um pH de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 5, mais preferivelmente de aproximadamente 2 a aproximadamente 4, e os dois tensoativos ou um único tensoativo que atenda as exigências dos dois tensoativos estão presentes.

2 0 De acordo ainda com outra modalidade da presente

invenção, é fornecido um método de desinfetar e/ou inibir o crescimento e proliferação de patógenos humanos, de animais e de plantas conhecidos, incluindo bolores, em várias superfícies, o método compreendendo as etapas de i) aplicar

2 5 na superfície um desinfetante compreendendo a) uma solução

ácida aquosa ou de base aquosa; b) pelo menos uma fonte de íon de metal antimicrobiano parcialmente ou preferivelmente totalmente dissolvido ou solúvel na mesma, e c) opcionalmente, embora preferivelmente, especialmente onde o

3 0 ácido é diferente de um ácido mineral, A) pelo menos um tensoativo umectante conhecido para aumentar o umedecimento ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas, B) pelo menos um tensoativo aniônico, não iônico e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos, especialmente micróbios patogênicos, ou a função dos mesmos, cujo tensoativo é igual a, ou mais tipicamente, diferente do tensoativo umectante (A) , ou uma combinação de pelo menos um dos tensoativos umectantes (A) e pelo menos um dos tensoativos aniônicos, não iônicos e/ou anfotéricos (B), onde o desinfetante tem um pH menor do que 6 e o ácido está presente em um excesso molar em relação aos íons de metal antimicrobiano e em que o nível total dos íons de metal antimicrobiano na solução é de aproximadamente 2 0 ppm a aproximadamente 1000 ppm, preferivelmente de

aproximadamente 2 5 a aproximadamente 50 0 ppm, mais preferivelmente de aproximadamente 50 a aproximadamente 300 ppm e ii) permitir que o solvente da solução evapore de modo a deixar uma presença antimicrobiana no substrato ou, preferivelmente após um curto período de tempo, limpar a solução em excesso da superfície. Preferivelmente, o método empregará um desinfetante onde a solução de ácido tem uma concentração de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10% em peso, mais preferivelmente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 4,0% em peso, e o ácido está presente pelo menos em um excesso molar 2x, preferivelmente pelo menos um excesso molar 5x, do ácido em relação ao(s) íon(s) de metal, e pelo menos um dos dois tipos de tensoativo (A) e (B) , mais preferivelmente pelo menos um dos dois tipos de tensoativos (A) e (B) ou pelo menos um tensoativo que atenda as duas exigências de tensoativo, está presente. Adicionalmente, o pH pode ser de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 5, preferivelmente de aproximadamente 2 a aproximadamente 4, mais preferivelmente maior do que 2. Em 5 essência, embora o ambiente acídico seja essencial, o ácido e/ou a acidez não deve ser tão forte de modo a afetar adversamente a superfície ou a aparência da superfície à qual se aplica o desinfetante.

DESCRIÇÃO DETALHADA A presente invenção é centrada no uso de um

desinfetante aquoso, ou à base de água, que compreende uma ou mais fontes de íons de metal antimicrobiano, um ácido, e opcionalmente, embora preferivelmente, um ou mais tensoativos capazes de aumentar banho ou umedecimento da L5 superfície sendo tratada com o desinfetante e/ou que é conhecido por impactar e/ou interagir com paredes de células ou membranas de microorganismos, especialmente micróbios patogênicos. Por conveniência, a verdadeira essência do desinfetante, a saber, a solução de ácido tendo

2 0 a fonte de íon de metal antimicrobiano, dissolvida no mesmo é doravante às vezes mencionada como a "solução de ácido bioativa" em que o termo "bioativo" pretende incluir agentes que exterminam ou evitam ou inibem o crescimento e/ou proliferação de bactérias, fungos, vírus, e plantas,

2 5 stramenophile e protistas semelhantes a fungos que são

associados a doenças ou distúrbios humanos, de animais e plantas.

Os ácidos que podem ser utilizados na preparação das soluções desinfetantes da presente invenção são sólidos ou

3 0 líquidos em seu estado natural e são prontamente solúveis ’ I

ou dissolvidos em ou miscíveis com água ou um solvente

baseado em água. Ácidos exemplares incluem os ácidos

orgânicos, especialmente os ácidos carboxílicos como ácido

cítrico, ácido valérico, ácido itacônico, acético, ácido

citricônico, ácido láctico, ácido málico, ácido succínico,

ácido aldárico, ácido malônico, ácido propiônico, ácido

malônico, ácido maléico, ácido salicílico, ácido glutárico,

ácidos tartáricos, ácido benzóico, e similar, bem como os

ácidos minerais como ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido

fosfórico, ácido bórico, e similar. A preferência é por

ácidos mais fracos ou moderados como ácidos aldárico,

cítrico, málico, e láctico ao contrário de ácidos minerais

moderados a fortes como ácidos, bóricos e fosfóricos.

Entretanto, ácidos fortes, especialmente ácidos minerais

L5 fortes como ácido sulfúrico ou nítrico, podem ser

utilizados; entretanto, dependendo da intensidade do ácido,

pode ser preferível taraponar o ácido de modo a evitar

preocupação com sua manipulação e, mais importante, com

relação a afetar adversamente o substrato e/ou a aparência

do substrato ao qual é aplicado. Desse modo, embora eficaz,

é mais preferível evitar ácidos minerais e ácidos fortes e,

em vez disso, empregar ácidos carboxílicos e outros ácidos

fracos. Adicionalmente, embora alguns ácidos apropriados t

estejam compreendidos nessa faixa, é desejável que o pKa (em água @ 25 °C) do ácido seja maior do que 0, preferivelmente maior do que 1, mais preferivelmente maior do que 1,5.

Como observado, a acidez é crítica para a eficácia das soluções desinfetantes da presente invenção. Dito em termos 3 0 gerais, o pH das soluções desinfetantes da presente invenção será menor do que 6, preferivelmente de aproximadamente 1,5 a 5 e mais preferivelmente de aproximadamente 2 a aproximadamente 4, mais preferivelmente maior do que 2.

0 segundo aspecto crítico da concentração de ácido se

refere à equivalência molar em excesso de ácido para os íons de metal antimicrobiano presentes nas soluções desinfetantes. No mínimo, deve haver um excesso molar de 2 vezes, embora preferivelmente haja pelo menos de 5 vezes, e 10 mais preferivelmente pelo menos 10 vezes de ácido em excesso molar. Esses níveis são tipicamente obtidos por formular soluções de ácido bioativas pelo que a concentração de ácido no estado diluído final da composição bioativa é de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10%, L5 preferivelmente de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 4% em peso da solução. Concentrações mais elevadas podem ser também utilizadas, por exemplo, até 20% ou mais, com a condição de que o substrato ao qual a solução desinfetante deva ser aplicada não seja afetado adversamente pelo teor 20 ácido mais elevado e/ou o ácido é um ácido fraco ou fracamente moderado.

O segundo componente crítico das soluções desinfetantes é o íon de metal antimicrobiano: de forma mais apta sua fonte de íon de metal. íons de metal 25 apropriados são selecionados do grupo que consiste em íons de metal de transição antimicrobiana e íons deficientes que mostraram bioeficácia antimicrobiana. íons de metal preferidos são selecionados do grupo que consiste em íons de prata, cobre, zinco, mercúrio, estanho, ferro, ouro,

3 0 chumbo, bismuto, cádmio, cromo e tálio ou combinações de quaisquer dois ou mais do acima, mais preferivelmente prata, cobre, zinco, estanho, ferro, ouro e ferro e combinações dos mesmos. Mais preferivelmente, os íons de metal são selecionados do grupo que consiste em íons de 5 prata, cobre e zinco e combinações de quaisquer dois ou todos os três. Soluções desinfetantes nas quais pelo menos dois e preferivelmente todos os três desses íons mais preferidos estão presentes são especialmente vantajosas e preferidas. Onde múltiplos íons de metal antimicrobiano 10 estão presentes, cada estará presente em uma quantidade molar de 3 a 97 por cento, preferivelmente 9 a 91 por cento, mais preferivelmente 20 a 80 por cento. Em sua modalidade preferida, onde múltiplos íons de metal estão presentes, estarão presentes em uma quantidade igual pelo L5 que nenhum íon de metal é mais do que 2 0 vezes, mais preferivelmente não mais do que 10 vezes do que qualquer outro íon de metal. Resultados especialmente bons foram encontrados onde cada íon de metal antimicrobiano está presente em uma quantidade igual, em peso.

2 0 A fonte de íon de metal é adicionada à solução de

ácido na forma de um composto de fonte, sal ou complexo que prontamente libera os íons ou de outro modo dissocia na solução de ácido ou como uma solução pré-formada da fonte de íon de metal em água ou um solvente baseado em água. 25 Sais exemplares e compostos organometálicos que podem servir apropriadamente como as fontes de íon incluem os respectivos óxidos, sulfetos, carbonatos, nitratos, fosfatos, fosfatos de diidrogênio, sulfatos, oxalatos, quinolinolatos, tiossulfatos, sulfonatos, ftalatos, 30 hidróxidos, glicolatos e similares dos metais antimicrobianos bem como os sais de ácido carboxílico dos mesmos, especialmente os carboxilatos simples, como os citratos, benzoatos, acetatos, lactatos, etc. dos metais antimicrobianos. Outros sais como os sais de haleto e sais de haleto substituídos, como os haletos, hexaflúorantimonatos, tetrafluoroboratos, e percloratos dos metais antimicrobianos podem ser utilizados embora sejam menos desejáveis visto que tendem a ter solubilidade lenta e/ou insuficiente, especialmente em água. Fontes de íon de metal específicas incluem, porém certamente não são limitadas a, nitrato de prata, óxido de prata, acetato de prata, citrato de prata, óxido cúprico, hidróxido de cobre, oxido cuproso, oxicloreto de cobre, acetato cúprico, quinolinoato de cobre, citrato de cobre, óxido de zinco, citrato de zinco, L5 e similar.

Verificou-se também surpreendentemente que certos complexos inorgânicos também podem servir como a fonte de íon de metal. Especificamente, agentes antimicrobianos do tipo de permuta de íons e agentes antimicrobianos de 20 dissolução de vidro podem ser utilizados onde a matriz portadora desses materiais é solúvel no ácido ou ácido diluído. Por exemplo, verificou-se que zeólitos são prontamente solúveis em ácido cítrico concentrado. Aqui a fonte ou fontes de íon de metal são adicionadas ao ácido 25 com mistura até dissolução das partículas. Também se considera que essas fontes de íon de metal podem ser dissolvidas somente parcialmente de modo a fornecer uma fonte de duração mais longa do íon de metal antimicrobiano. Embora essas fontes de íons tendam a dissolver no ácido

3 0 diluído, para acelerar e/ou aumentar a dissolução da fonte de íon de metal, é preferível dissolver as mesmas em uma solução de ácido concentrada, preferivelmente uma de aproximadamente 40% a 80% de concentração.

Agentes de permuta de íons apropriados incluem, porém 5 não são limitados a aluminossilicatos, zeólitos, hidroxiapatita, e fosfatos de zircônio, todos os quais são comercialmente disponíveis e/ou totalmente descritos na literatura de patentes. Por exemplo, partículas de hidroxiapatita contendo íon de metal antimicrobiano são 10 descritas, por exemplo, nas patentes US número 5.009.898 e 5.268.174; fosfatos de zircônio contendo íon de metal antimicrobiano são descritos, por exemplo, nas patentes US números 4.025.608; 4.059.679; 5.296.238; 5.441.717 e 5.405.644 bem como no Journal of Antibacterial and L5 Antifungal agentes, vol. 22, no. 10, pág. 595-601, 1994; e aluminossilicatos contendo íon de metal antimicrobiano e zeólitos são descritos, por exemplo, nas patentes US números 4.911.898; 4.911.899; 4.938.955; 4.938.958; 4.906.464; e 4.775.585, todas as patentes acima mencionadas 20 sendo pelo presente incorporadas aqui a titulo de referência na íntegra. Vidros solúveis apropriados incluem aqueles descritos, por exemplo, na patente dos Estados unidos 5.470.585, que também é incorporada aqui a título de referência na íntegra.

2 5 Embora fontes de íon de metal individuais possam ser

utilizadas, também é desejável utilizar combinações de fontes de íon de metal de modo a fornecer uma mistura de íons de metal. Em certos casos, uma única fonte pode fornecer múltiplos íons de metal. Por exemplo, fontes de

3 0 íon de metal do tipo de permuta iônica preferidas incluem AgION AJlOD que contém íons tanto de prata como de zinco e AgION AClOD que contém íons tanto de prata como de cobre. Mais preferivelmente, as fontes de íon de metal são os sais e compostos facilmente solúveis, como mencionado acima, e 5 mais preferivelmente a combinação de tais compostos pelo que as soluções tendo concentrações iguais ou relativamente iguais de cada entre íons de prata, cobre e zinco são preparadas. Combinações apropriadas incluem combinações de citrato de prata, citrato de cobre e citrato de zinco bem 10 como combinações de nitrato de prata, sulfato de cobre e óxido de zinco.

A quantidade da fonte de íon de metal antimicrobiano a ser incorporada no desinfetante é aquela quantidade que é suficiente para fornecer uma concentração de 15 aproximadamente 2 0 ppm a aproximadamente 10 0 0 ppm, preferivelmente de aproximadamente 25 ppm a aproximadamente 500 ppm, mais preferivelmente de aproximadamente 50 ppm a aproximadamente 3 00 ppm, de cada íon de metal antimicrobiano na solução desinfetante. Evidentemente

2 0 níveis mais elevados poderiam ser utilizados, porém não são

necessários para fornecer bioeficácia apropriada e, mais importante, tal uso mais elevado entra em conflito com a intenção desejada de minimizar a adição de metal ao meio ambiente. Desse modo, de acordo com o objetivo, é 25 preferível utilizar a quantidade mínima ou quase mínima possível para a aplicação desejada.

Opcionalmente, embora preferivelmente, especialmente onde o ácido é diferente de um ácido mineral, a solução desinfetante compreende ainda: A) pelo menos um tensoativo

3 0 umectante conhecido por aumentar o umedecimento ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas, e/ou B) pelo menos um tensoativo aniônico, não iônico e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos, especialmente micróbios patogênicos, ou 5 a função dos mesmos, um "tensoativo de impacto." Mais preferivelmente, pelo menos um dos dois tipos de tensoativos está presente, mais preferivelmente uma combinação tanto de um tensoativo de umedecimento como um tensoativo de impacto e/ou pelo menos um tensoativo atua 10 tanto como tensoativo umectante como tensoativo de impacto. Embora boa bioeficácia tenha sido obtida nas soluções de ácido bioativo de ácido fraco e de ácido moderado, sem um tensoativo de impacto, o uso de um tensoativo de impacto, mais preferivelmente uma combinação de tensoativos de L5 impacto, deve ser e é genericamente preferida. Além disso, embora certos ácidos fortes e muito fortes, especialmente ácidos minerais, não garantam a necessidade de tensoativos de impacto, por exemplo, ácido fosfórico, é especialmente desejável e, em alguns casos, necessário, por exemplo, onde 20 se deseja bioeficácia diferente de somente de curta duração, empregar um ou mais tensoativos de impacto.

Tensoativos apropriados para uso nas soluções desinfetantes incluem tensoativos aniônicos, catiônicos, não iônicos e anfotéricos (por exemplo, zwiteriônicos), 25 especialmente aqueles que são total ou substancialmente solúveis em água. Tensoativos de impacto apropriados são tensoativos aniônicos, não iônicos e/ou anfotéricos como os sulfonatos, sulfatos, sulfosuccinatos, sarcosinatos, mono e diglicerídeos, óxidos de amina, carboxilatos de éter, 30 betaínas, sulfobetaínas, glicinatos e similar, porém excluindo tipicamente aqueles tensoativos, especialmente tensoativos não iônicos, tendo unidades de polialquil éter, especialmente unidades de óxido de polietileno, com graus de polimerização da unidade de éter de alquileno maior do

T,

que aproximadamente 6. Tensoativos umectantes apropriados incluem o acima, ou pelo menos uma boa percentagem do mesmo, bem como tensoativos catiônicos e aqueles tensoativos não iônicos tendo unidades de polialquil éter, especialmente unidades de óxido de polietileno, com graus 10 de polimerização da unidade de éter de alquileno maior do que aproximadamente 6. Tensoativos umectantes exemplares adicionais incluem sais de ácido poliacrílico, sais de ácido lignossulfônico, sais de ácido fenol sulfônico ou naftaleno sulfônico, policondensados de óxido de etileno 15 com álcoois graxos ou ácidos graxos ou ésteres graxos ou aminas graxas, fenóis substituídos (em particular alquil fenóis ou aril fenóis) , sais de éster de ácido sulfossuccínico, derivados de taurina (em particular, tauratos de alquila), ésteres fosfóricos de álcoois ou de 20 policondensados de óxido de etileno com fenóis, ésteres de ácido graxo com polióis ou derivados funcionais de sulfato, sulfonato ou fosfato dos compostos acima bem como uma boa percentagem dos tensoativos de impacto acima mencionados.

Dito em termos gerais, cada tipo de tensoativo estará 25 presente em uma quantidade de aproximadamente 0,001% a aproximadamente 3%, preferivelmente de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 0,5% em peso com base no peso total da soiução desinfetante. Não obstante o acima, deve ser reconhecido que a quantidade de tensoativo umectante,

3 0 especialmente em soluções de limpeza e desinfecção, pode ser mais elevada, até 10%, preferivelmente até 5%. Embora cargas mais elevadas ou cada ou os tensoativos combinados pudessem ser utilizados, não é necessário manifestar as propriedades de desinfecção desejadas da presente invenção.

Similarmente, embora cargas mais baixas pudessem ser utilizadas, a manifestação de qualquer desempenho aumentado ou sinérgico devido ao tensoativo de impacto não é provável de ser vista. Genericamente, onde o tensoativo é de natureza básica ou um que hidrolisa em água para formar uma 10 solução básica, a quantidade deve ser minimizada e/ou a quantidade de ácido aumentada de modo a evitar neutralização em demasia da solução de ácido bioativo.

Tensoativos aniônicos exemplares e classes de tensoativos aniônicos apropriados para uso na prática da 15 presente invenção incluem: sulfatos de álcool; sulfatos de éter de álcool; sulfatos de éter de alquil arila; sulfonatos de alquil arila como sulfonatos de alquil benzeno e sulfonatos de alquil naftaleno e sais dos mesmos,sulfonatos de alquila; ésteres mono- ou di-fosfonato de 20 álcoois de alquila polialcoxilado ou alquil fenóis; ésteres mono- ou di-sulfossuccinato de alcanóis Ci2 a Ci5 ou alcanóis Ci2 a Ci5 polialcoxilados; carboxilatos de éter de álcool; carboxilatos de éter fenólico; ésteres de ácido polibásico de polioxialquileno glicóis etoxilados 25 consistindo em oxibutileno ou o resíduo de tetraidrofurano; sulfoalquilamidas e sais dos mesmos como: sal N-metil-Noleoíl taurato; carboxilatos de polioxialquileno alquil fenol; carboxilatos de álcool de polioxialquileno produtos de condensação de anidrido succínico

alquenila/poliglicosídeo de alquila; sulfatos de éster de alquila; sulfonatos de naftaleno; condensados de formaldeído naftaleno; sulfonamidas de alquila; poliésteres alifáticos sulfonados; ésteres de sulfato de alcoxilatos de estiril fenila; e ésteres de sulfonato de alcoxilatos de 5 estiril fenila e seus sais de sódio, potássio, cálcio, magnésio, zinco, amônio, alquil amônio, dietanol amônio ou trietanol amônio correspondentes; sais de ácido ligninsulfônico como o sal de sódio, potássio, magnésio, cálcio ou amônio; sulfatos de polialcóxi éter poliaril 10 fenol e fosfatos de polialcóxi éter poliaril fenol; e etoxilatos de alquil fenol sulfatados e etoxilatos de alquil fenol fosfatados; sulfato de laurila de sódio; sulfato de laureth de sódio; sulfato de laurila de amônio; sulfato de laureth de amônio; taurato de cocoíla de metil 15 de sódio; sarcosinato de lauroila de sódio; sarcosinato de cocoíla de sódio; colágeno hidrolisado de coco de potássio; sulfato de laurila TEA (trietanol amina); sulfato de laureth TEA (trietanol amina); sarcosina de cocoíla ou laurila; sulfossuccinato de oleamida dissódico; 20 sulfossuccinato de laureth dissódico; sulfossuccinato de dioctila dissódico; sulfato de Na N-metil-N-oleoíl taurato, sulfato de tristiril fenol; sulfonato de lignina etoxilado; éster de fosfato nonil fenol etoxilado; sulfonato de alquil benzeno de cálcio; éster de fosfato tridecil álcool 25 etoxilado; sulfossuccinatos de dialquila; ácidos fosfônico de perflúor alquila (C6-Ci8) ; ácidos fosfínicos perflúor alquila (Cs-Ci8) ; ésteres de perflúor alquila (C3-C2o) de ácidos carboxílicos; diglucamidas de ácido succínico de alquenila; alcoxilatos de ácido succínico de alquenila;

3 0 sulfossuccinatos de dialquila de sódio; e alquil poliglicosídeos de ácido succínico de alquenila.

Tensoativos anfotéricos e catiônicos exemplares incluem alquilpoliglicosídeos; betaínas; sulfobetaínas; glicinatos; alcanol amidas de ácidos graxos C8 a Ci8 e 5 polialcoxilatos de amina graxa C8 a Ci8; cloretos de alquildimetil benzilamônio Ci0 a Ci8; ácidos alquildimetil aminoacéticos de coco; ésteres de fosfato de polialcoxilatos de amina graxa C8 a Ci8; alquil poliglicosídeos (APG) obteníveis de uma reação Fischer 10 catalisada por ácido de xaropes de amido ou glicose com álcoois graxos, em particular álcoois C8 a Ci8, especialmente os alquilpoliglicosídeos C8 a Cxo e C12 a Ci4 tendo um grau de polimerização de 1,3 a 1,6, em particular 1,4 ou 1,5.

Tensoativos não iônicos exemplares e classes de

tensoativos não iônicos incluem: éteres de poliaril fenol polietóxi; éteres de polialquil fenol polietóxi; derivados de éter de poliglicol de ácidos graxos saturados; derivados de éter poliglicol de ácidos graxos insaturados; derivados 20 de éter poliglicol de álcoois alifáticos; derivados de éter poliglicol de álcoois cicloalifáticos; ésteres de ácido graxo de sorbitano polioxietileno; óleos vegetais alcoxilados; dióis acetilênicos alcoxilados; alquil fenóis polialcoxilados; alcoxilados de ácido graxo; alcoxilatos de 25 sorbitano; ésteres de sorbitol; poliglicosídeos de alquila ou alquenila C8 a C22, éteres de estiril arila polialcóxi; óxidos de alquilamina; ésteres de copolímero de bloco; glicerídeo graxo polialcoxilado; éteres de polialquileno glicol; poliésteres alifáticos ou aromáticos lineares;

3 0 organo silicones,· polaril fenóis; alcoxilatos de éster de sorbitol; e mono- e diésteres de etileno glicol e misturas dos mesmos; tristiril fenol etoxilado; álcool graxo etoxilado; álcool de laurila etoxilado; óleo de rícino etoxilado; e nonil fenol etoxilado; álcoois alcoxilados, 5 aminas ou ácidos, misturas dos mesmos bem como misturas dos mesmos com diluentes e veículos sólidos, em particular clatratos dos mesmos com uréia. Os álcoois alcoxilados, aminas* ou ácidos são preferivelmente baseados em unidades de alcóxi tendo 2 átomos de carbono, desse modo sendo um 10 etoxilato misturado, ou 2 e 3 átomos de carbono, desse modo sendo um etoxilato misturado/propoxilado, e tendo pelo menos 5 frações de alcóxi, apropriadamente de 5 a 25 frações de alcóxi, preferivelmente 5 a 20, em particular 5 a 15, na cadeia de alcóxi. As frações alifáticas da amina 15 ou de ácido alcoxilado podem ser de cadeia reta ou ramificada de 9 a 24, preferivelmente 12 a 20, átomos de carbono. A fração de álcool dos alcoxilatos de álcool é como regra derivada de um álcool alifático C9-Ci8, que podem ser não ramificado ou ramificado, especialmente mono 20 ramificado. Álcoois preferidos são tipicamente 50% em peso de cadeia reta e 50% em peso de álcoois ramificados.

Como observado acima, os tensoativos acima mencionados podem ser utilizados individualmente ou em combinação. Além disso, embora nem todos os tensoativos mencionados acima 25 forneçam a sinergia desejada dos tensoativos de impacto ou o banho aperfeiçoado dos tensoativos umectantes, podem não obstante ser utilizados em combinação com os tensoativos acima mencionados para sua função pretendida. Por exemplo, certos dos tensoativos acima mencionados podem aumentar a

3 0 dissolução ou solubilidade da fonte de íon de metal ou ácido no solvente ou a dissolução ou dispersão de outros aditivos que podem estar presentes na solução de ácido bioativo. Todos esses materiais tensoativos são bem conhecidos, particularmente como componentes de composições 5 desinfetantes e de limpeza convencionais e comercialmente disponíveis.

No caso de qualquer tensoativo específico dever afetar adversamente a bioeficácia da solução desinfetante, esse tensoativo deve ser evitado ou seu uso minimizado tanto 10 quanto possível. Para neutralizar qualquer impacto adverso, pode ser adicionalmente desejado utilizar, se não já presente, ou aumentar a quantidade do tensoativo de impacto e/ou aumentar o teor de ácido e/ou íon de metal antimicrobiano. A adição de ácido é uma opção especialmente 15 apropriada onde o tensoativo é básico e neutralizará o ácido da solução de ácido bioativa a um ponto onde o pH não mais é menor do que 6, ou qualquer pH menor for desejado.

As soluções desinfetantes da presente invenção podem incluir ainda um ou mais agente bioativo convencional para

2 0 o microorganismo alvejado pretendido. Por exemplo, em agricultura, pode-se desejar adicionar um fungicida ou ativo fungicida a uma solução desinfetante a ser utilizada na desinfecção de equipamentos e implementos de fazenda para desinfetar os equipamentos e implementos de fazenda de

2 5 modo a evitar contaminação cruzada de patógenos de planta

de um campo doente para um campo não doente ou após aplicação de um fungicida ou similar a um campo doente, de tornar a contaminar o campo tratado por reintroduzir uma peça de equipamento ou implemento que tinha sido utilizado

3 0 no campo antes do tratamento. Realmente, como discutido e reivindicado no pedido de patente PCT internacional

copendente e co-depositado número US/PCT2008/ _ e

pedidos de patente norte-americana, correspondentes

_, _ e _, todos intitulados "Bioactive

5 agrichemical compositions and use thereof" todos os quais são pelo presente incorporados aqui a título de referência na íntegra, de tal modo que a combinação das soluções de ácido bioativo da presente invenção e os agentes bioativos convencionais frequentemente fornecem uma sinergia 10 acentuada e inesperada. Consequentemente, essa sinergia pode somente aperfeiçoar a eficácia das composições desinfetantes e métodos da presente invenção. Ativos patogênicos de planta sinérgicos incluem amida, amino ácido de acila, anilida, benzanilida, furanilida, sulfonanilida, 15 benzamida, furamida, fenil sulfamida, sulfonamida, valinamida, antibiótico, estrobilurina, cloroneb, clorotalonil, diclorobenil, dicloran, PCNB, benzimidazol, benzotiazol, difenil ligado, carbamato, benzimidazoí1 carbamato, carbanilato, conazol, imidazol, triazol, cobre, 20 dicarboximida, diclorofenil dicarboximida, ftalimida, dinitrofenol, ditiocarbamato, ditiocarbamato cíclico, ditiocarbamato polimérico, imidazol, mercúrio inorgânico, organomercúrio, morfolina, organofosforoso, organoestanho, oxatiin, oxazol, polissulfeto, pirazol, piridina, 25 pirimidina, pirrol, quinolina, quinona, quinoxalina, tiazol, tiocarbamato, tiofeno, triazina, triazol, uréia, ou fungicidas de borato, especialmente, estrobilurina, diticarbamato e fungicidas de triazol. Evidentemente, esse aspecto da presente invenção não é limitado a fungicidas e 30 outros ativos bioativos podem ser utilizados, e mais provavelmente de forma sinérgica, com as soluções de ácido bioativo na presente invenção.

Alternativamente, ou além do outro agente bioativo, as soluções desinfetantes de acordo com a presente invenção também podem incluir um ou mais aditivos ou componentes compatíveis, preferivelmente aditivos que são total ou substancialmente solúveis em água, típicos de desinfetantes, e soluções de limpeza, incluindo os próprios agentes de limpeza. Por exemplo, como mencionado acima, pode haver tensoativos adicionais que não são tensoativos umectantes ou tensoativos de impacto. Outros aditivos incluem, porém não são limitados a espessantes, agentes tixotrópicos, agentes de penetração, estabilizadores, agentes anticongelantes, agentes desespumantes, agentes de espumação, inibidores de corrosão, corantes ou similares.

0 aditivo específico ou combinação de aditivos, a quantidade dos mesmos, etc., a ser empregado nas soluções desinfetantes da presente invenção dependem, em parte, do microorganismo alvejado, se há um microorganismo alvejado 20 específico; a superfície ou substrato a ser tratado, por exemplo, espessantes e/ou tixotropias, podem ser especialmente desejáveis para uso em desinfetantes a serem aplicados em paredes e tetos ou artigos tendo superfícies verticais onde há preocupação com escoamento prematuro; a 25 natureza e ambiente nos quais a superfície ou artigo a ser tratado está localizado ou utilizado, por exemplo, dispositivos médicos em um hospital versus implementos em uma fábrica que industrializa carcaças animais ou uma mesa de exame no consultório médico versus uma superfície de

3 0 processamento de alimentos, etc. A quantidade de cada ingrediente ou aditivo adicionado será compatível com seu uso convencional.

Como observado acima, é desejável especialmente engrossar as soluções desinfetantes onde há preocupação de 5 que a composição rapidamente escoará ou escorrerá pelo substrato ou superfície na qual é aplicado, particularmente onde se desejada e pretende que o desinfetante seja permitido permanecer na superfície ou substrato por qualquer período de tempo após aplicação. Espessantes 10 apropriados incluem polímeros solúveis em água que apresentam propriedades pseudoplásticas e/ou tixotrópicas em um meio aquoso como goma arábica, goma caraia, goma tragacanto, goma guar, goma de alfarroba, goma xantana, carragenana, sal de alginato, caseína, dextrano, pectina, L5 agar, amido de 2-hidróxi etila, amido de 2-aminoetila, 2- hidróxi etil celulose, metil celulose, sal de carbóxi metil celulose, sal de sulfato de celulose, poliacrilamida, sais de metal alcalino dos copolímeros de anidrido maléico, sais de metal alcalino de poli(met)acrilato e similar. Como

2 0 cargas de espessamento apropriadas, incluindo tixotropes,

podem ser mencionados também argila do tipo atapulgita, sílica, sílica defumada, carragenana, croscarmelose sódio, furceleran, glicerol, hidrõxi propil metil celulose, poliestireno, copolímero de bloco de vinil

pirrolidona/estireno, hidróxi propil celulose, goma guar hidroxi propila e carbóxi metil celulose de sódio.

No caso de desinfetantes que são ou podem estar sujeitos a congelamento durante armazenagem ou uso, é desejável adicionar aditivos anticongelamento. Exemplos

3 0 específicos de anticongelamentos apropriados incluem etanol, etileno glicol, 1,2-propileno glicol, 1,3-propileno glicol, 1,2-butanodiol, 1,3-butanodiol, 1,4-butanodiol, 1,4-pentanodiol, 3-metil-l,5-pentanodiol, 2,3-dimetil-2,3- butanodiol, trimetilol propano, manitol, sorbitol, 5 glicerol, pentaeritritol, 1,4-cicloexanodimetanol, xilenol, bisfenóis como bisfenol A ou similar. Além disso, álcoois de éter como dietileno glicol, trietileno glicol, tetraetileno glicol, polioxietileno ou polioxipropileno glicóis de peso molecular até aproximadamente 4000, 10 monometil éter de dietileno glicol, monoetil éter de dietileno glicol, monometil éter de trietileno glicol, butóxi etanol, monobutil éter de butileno glicol,dipentaeritritol, tripentaeritritol,

tetrapenteritritol, diglicerol, triglicerol, tetraglicerol, pentaglicerol, hexaglicerol, heptaglicerol, octaglicerol e similar. Como subconjunto específico de materiais anticongelantes apropriados podem ser mencionados etanol, etileno glicol, propileno glicol e glicerina.

As soluções desinfetantes também podem conter corantes

2 0 como pigmentos inorgânicos, como, por exemplo: óxidos de

ferro, óxidos de titânio, azul de Prússia; corantes orgânicos, como aqueles do tipo alizarin, azo ou metal ftalocianina; ou de elementos residuais como sais de ferro, manganês, boro, cobre, cobalto, molibdênio ou zinco. O uso 25 de tais corantes permite que se determinem quais áreas e substratos foram tratados com a composição bioativa. Tal marcação é especialmente importante para instalações médicas, de biotecnologia e pesquisa, especialmente aquelas que empregam ou têm exposição à patógenos humanos, onde se

3 0 deve ter certeza de que todas as áreas, superfícies, artigos, etc. que foram ou são possivelmente expostas a um patógeno humano, tenham sido tratadas com o desinfetante. Preferivelmente, o corante é um que é facilmente retirado por lavagem de modo que pode ser removido após conclusão da desinfecção.

Aqueles versados na técnica, particularmente na técnica de limpeza e desinfecção, reconhecerão certamente e imediatamente identificarão agentes de limpeza e outros aditivos e ingredientes que seriam ou deveriam ser utilizados para sua aplicação.

Como observado acima, é importante evitar o uso de ativos bioativos convencionais, tensoativos, aditivos e similares, que interferem na ou afetam adversamente a bioeficácia das composições de acordo com a presente 15 invenção. Mais especialmente, é importante evitar o uso de materiais ou compostos que são conhecidos como ou provavelmente seqüestram irreversível ou fortemente, ligam, ou complexam com os íons de metal antimicrobiano em solução. A seguir, não pretendendo ser limitado por teoria, 20 acredita-se que a retenção da carga iônica de metal antimicrobiano é importante para manter a bioeficácia. Por exemplo, é melhor evitar o uso de sais de amônio como sulfato de amônio, cloreto de amônio, citrato de amônio, fosfato de amônio. Até o ponto em que quaisquer tais 25 materiais estejam presentes ou a serem utilizados, seu uso ou mais precisamente, a quantidade dos mesmos, deve ser minimizada e/ou a concentração de íon de metal aumentada para compensar a perda de íons livres em compostos de solução.

3 0 As soluções desinfetantes da presente invenção podem ser feitas por qualquer método conhecido para formular composições desinfetantes. Por exemplo, soluções de suprimento concentradas de cada componente, ou uma combinação de quaisquer dois ou mais componentes, podem ser 5 preparadas e então as soluções de suprimento, combinadas em proporção apropriada e a mistura baixam com solvente adicional até a concentração final. Alternativamente, podese dissolver seqüencialmente cada componente no mesmo solvente/solução. Aqui se deve dissolver primeiramente o 10 componente que aumenta ou tem o menor efeito negativo sobre a solubilidade dos componentes restantes a serem adicionados. Ainda alternativa é preparar uma pré-mistura de quaisquer dois ou mais ou todos os componentes e adicionar ao solvente.

Até certo ponto, a seqüência de adição dos componentes

para o solvente e/ou as soluções e/ou se um pré-concentrado de um ou mais componentes é formado depende da solubilidade dos próprios sólidos. Onde a solubilidade é melhor ou mais rápida no solvente puro, então cada componente ou aqueles 20 componentes são individualmente dissolvidos no solvente. Por outro lado, onde a solubilidade, ou a taxa da mesma, de qualquer um ou mais dos componentes da composição desinfetante é aumentada por, por exemplo, um solvente mais acídico, uma solução concentrada do ácido é primeiramente 25 preparada e então o componente, ou componentes, são seqüencial ou simultaneamente adicionados e dissolvem na solução de ácido concentrada. Esse método é especialmente

vantajoso para aquelas fontes de íon de metal antimicrobiano, como as fontes de íon de metal 3 0 antimicrobiano do tipo de permuta de íons acima mencionadas, que são prontamente e dissolvidas melhor em uma solução de ácido.

Naqueles casos onde a solubilidade de um componente é aumentada pela solução de ácido concentrada, porém a outra 5 não, pode-se simplesmente fazer a solução de ácido concentrada, dissolver o componente favoravelmente solúvel e então diluir a solução antes de adicionar o componente final. Similarmente, como necessário ou apropriado, as soluções/solvente podem ser aquecidas e são preferivelmente 10 agitadas para aumentar a solubilidade/acelerar a dissolução dos sólidos no sistema líquido. Além disso, embora a dissolução de fonte ou fontes de íon de metal antimicrobiano seja talvez o método mais eficaz em termos de custo e mais simples da preparação das soluções de ácido 15 bioativo, essas soluções de ácido bioativo também podem ser preparadas, por exemplo, por eletroliticamente gerar o íon de metal em soluções de ácido como visto em Arata e outros (US 6.197.814; US 2003/0198689A1, US 2003/0178374A1; US2 0 05/024 56 05A1 e US2006/011544OAl, todos os quais são

2 0 incorporados aqui a título de referência na íntegra) ou por pressão e temperatura elevadas como visto em Cummins e outros (US 7.192.618, incorporada aqui a título de referência).

Surpreendentemente, as soluções desinfetantes mostram

2 5 uma bioeficácia acentuada mesmo nos níveis extremamente

baixos de íons de metal antimicrobiano como reivindicado. Isso é especialmente desejável visto que reduz muito a quantidade de metais liberada para o meio ambiente. Esse benefício adquiriu nova importância à luz das recentes

3 0 investigações de pureza de água mostrando níveis detectãveis de vários agentes farmacêuticos em suprimentos de água potável presumivelmente resultando da eliminação indiscriminada de remédios vencidos por consumidores em seus drenos. Certamente, o uso de agentes antimicrobianos 5 ambientalmente tóxicos, incluindo biocidas orgânicos bem como metais pesados, deve ser fatorado como um contribuinte para sua própria presença em suprimentos de água também. Desse modo, a presente invenção, embora não eliminando totalmente tais preocupações em relação aos metais

antimicrobianos, reduz muito as mesmas. Além disso, a confiança em metais antimicrobianos, ao contrário de agentes antimicrobianos orgânicos tradicionais, assegura adicionalmente contra ou diminui a probabilidade da manifestação de bio-resistência nos organismos alvejados

um acontecimento crescente com agentes orgânicos que, embora incômodo atualmente, poderia levar a resultados catastróficos se não verificado.

A taxa de aplicação das soluções desinfetantes é igual para desinfetantes convencionais. Dito em termos gerais, a

2 0 quantidade a ser aplicada será aquela quantidade necessária

para revestir totalmente ou umedecer o substrato a ser tratado. A aplicação pode ser por meio de pulverização, escovação, revestimentos, esfregação, etc. a solução desinfetante na superfície ou substrato a ser desinfetado.

Alternativamente, especialmente no caso de artigos, os artigos podem ser mergulhados em um banho da solução desinfetante. Adicionalmente, especialmente onde há preocupação por patógenos carregados por ar e desinfecção de vias de fluxo aéreo, é possível aplicar o desinfetante

3 0 como um aerossol na atmosfera, preferivelmente, um ambiente controlado ou encerrado ou no fluxo de ar, respectivamente.

As soluções desinfetantes podem ser empregadas para exterminar ou inibir o crescimento e proliferação de patógenos humanos, de animais e plantas, conhecidos. Em 5 particular, essas soluções são apropriadas como agentes bioativos no combate, incluindo bolores. Podem ser utilizados para desinfetar quaisquer superfícies e substratos nos quais o patógeno está ou é provável ou pode estar presente. Podem ser aplicadas nos pisos, paredes, 10 tetos, portas, janelas, etc. de edifícios; em quaisquer dispositivos de encanamento, aparelhos e sistemas incluindo drenos, torneiras e elementos relacionados, torneiras de água; em quaisquer vias de vapor de refugo e componentes, especialmente em fábricas que industrializam carcaças 15 animais e instalações de processamento de alimento; nos elementos de via de fluxo aéreo de qualquer aparelho de ar condicionado ou sistema de fluxo de ar, aparelho, ou equipamento; em quaisquer superfícies de trabalho, especialmente mesas de exame, balcões ou mesas de

2 0 processamento de alimentos, e similar; em quaisquer

superfícies de toque incluindo maçanetas de portas, interruptores de luz, alavancas de descarga, telefones, cabos de aparelhos, controles remotos, etc.; ferramentas, equipamentos, aparelhos e implementos associados a 25 indústrias de higiene pessoal, médica, dental, funerária, veterinária, farmacêutica, pesquisa e desenvolvimento, agrícola, biotecnológica, processamento de alimentos, fermentação, embalagem de carne, etc.; recipientes de armazenagem, recipientes, navios-tanque, navios, aviões,

3 0 trens, caminhões, carros, tratores, etc. utilizados em qualquer indústria onde contaminação de microorganismo e/ou contaminação cruzada é uma preocupação; etc.

A quantificação ou definição de bioeficácia das soluções desinfetantes não é absoluta e variará dependendo de quando, como e por que o desinfetante é utilizado. Por exemplo, no ambiente agrícola, um método desinfetante que resulta finalmente em rendimentos aperfeiçoados e/ou incidência reduzida de ou grau de gravidade de doenças de plantas é aceitável, e consequentemente eficaz. Similarmente, na indústria de manipulação e processamento de alimentos, um método desinfetante que resulta no início retardado de deterioração ou manifestação de envelhecimento de um alimento, especialmente em frutas e legumes é de benefício econômico e é consequentemente eficaz. Por outro lado, onde a preocupação são patógenos humanos e de animais, mais especialmente patógenos humanos, a eficácia tem um padrão muito mais elevado e tipicamente deseja extermínio do organismo alvo em uma escala logarítmica, tipicamente pelo menos uma taxa de extermínio de 95%, preferivelmente pelo menos uma taxa de extermínio de 99%, mais preferivelmente 99,9%, em um período de tempo especificado. Por outro lado, onde o patógeno não é ameaça à vida ou é menos preocupante, como com bolores em edifícios, uma taxa de extermínio menor, embora não desejável, é não obstante eficaz.

Como observado acima, em certas situações, particularmente onde patógenos humanos e de animais, especialmente humanos, são uma preocupação, bioeficácia tem tipicamente um segundo parâmetro, tempo. Especificamente, esperar-se-ia tipicamente ver as taxas de extermínio acima mencionadas ou bioeficácia em um período de tempo relativamente curto, especialmente onde o desinfetante deve ser removido, total ou em parte. Genericamente, esperar-seia que o desinfetante obtenha sua taxa de extermínio 5 pretendida em meia hora ou aproximadamente meia hora, preferivelmente em quinze minutos, mais preferivelmente em alguns minutos ou menos. A seguir, espera-se tipicamente que o desinfetante seja permitido ficar no substrato ou superfície tratada por pelo menos quinze minutos ou

aproximadamente, talvez tão curto quanto cinco minutos: embora períodos de tempo mais curtos sejam previstos; embora possa sacrificar o grau de bioeficácia obtido.

Por outro lado, taxas de extermínio ou tempos não são tão importantes ou certamente de menos importância com

patógenos não humanos, especialmente no caso de patógenos de plantas. Além disso, o tempo para obter o extermínio desejado não é importante onde se pretende que o desinfetante, ou uma porção do mesmo, seja deixado no substrato. Certamente, embora, uma pessoa poderia querer

2 0 ver uma taxa de extermínio detectável ou inibição em

algumas horas, preferivelmente em uma hora ou aproximadamente e que esse efeito ou uma porção substancial do efeito permaneça por algum período de tempo, especialmente onde o desinfetante permanece no lugar.

Os seguintes exemplos são apresentados como

demonstrando a bioeficácia das soluções desinfetantes de acordo com a presente invenção bem como a sinergia inesperada resultando do uso de certos tensoativos e/ou outros ativos bioativos convencionais e ativos formulados.

3 0 Esses exemplos são meramente ilustrativos da invenção e não devem ser considerados limitando a mesma. Aqueles versados na técnica reconhecerão muitas variações que estão compreendidas no espírito da invenção e escopo das reivindicações.

Estudos de Saccharomycetes Cerevisiae

Uma série de experimentos (Exemplos 1 - 269 abaixo) foi realizada para avaliar o desempenho dos componentes individuais das composições bioativas reivindicadas bem como várias combinações das mesmas, incluindo as próprias 10 composições reivindicadas, na supressão do crescimento de Saccharomycetes Cerevisiae (fermento Fleishmann).

Saccharomycetees Ceriviiae foi selecionado como organismo de teste visto que é genericamente aceito na indústria como organismo substituto ou indicador para uma ampla variedade 15 de bolores e fungos. Em cada um desses experimentos, o mesmo procedimento geral foi seguido a menos que de outro modo i nd i c ado.

Detalhe experimental: um meio de crescimento foi preparado por adição de 10 gramas de meio nutriente (caldo

2 0 de dextrose Difco Sabouraud de BD de Franklin Lakes, NJ,

EUA) a 3 00 ml de água destilada. 0 fermento Fleishmann foi então adicionado ao meio de crescimento enquanto mistura utilizando um agitador magnético até obtenção de uma dispersão uniforme tendo uma turbidez inicial entre 25 aproximadamente 50 e 100 NTU como medido utilizando um Medidor de Turbidez HF Instruments DRT 100B. Após obtenção da dispersão apropriada, alíquotas de 20 ml foram então dispensadas, com mistura contínua, em 4 0 ml de frascos de vidro de borossilicato com tampas revestidas de teflon (VRW

3 0 International no. Do cat. 1590—004). 0 sistema/componente a ser avaliado foi então adicionado ao frasco e intimamente agitado para assegurar uma mistura substancialmente homogênea, boa. A turbidez de cada mistura foi então determinada e o frasco transferido para um incubador a 5 30°C. Cada frasco foi periodicamente removido do incubador e a mistura nos frascos avaliada para turbidez: o timing específico para tal avaliação foi como exposto na discussão dos experimentos e nas tabelas em anexo.

Em cada experimento, a menos que de outro modo 10 especificado, uma solução aquosa de 2 ml contendo o sistema bioativo especificado ou componente do mesmo foi adicionada a 20 ml de suspensão de fermento e misturada completamente. Tipicamente, os tensoativos foram adicionados separadamente em uma solução concentrada em água; entretanto, o volume 15 adicionado era desprezível; uma fração de um ml. Por conveniência na compreensão de níveis de eficácia, as quantidades ou concentrações dos vários componentes apresentados em cada uma das tabelas e experimentos a seguir são do material diluído no frasco de teste; não do 20 concentrado adicionado ao frasco de teste. Além disso, as concentrações apresentadas são com base em um volume total de 20 ml, não o volume efetivo de 22+ ml. A multiplicação de cada uma das concentrações listadas por 0,9 (ou 0,95 com aquelas composições utilizando soluções aquosas de 1 ml) 25 fornecerá uma avaliação mais precisa das concentrações dos vários componentes avaliados, isto é, uma concentração de 5 ppm de prata é na realidade mais próxima a 4,5 ppm. Finalmente, para aqueles frascos nos quais nenhum sistema ou componente bioativo do mesmo foi adicionado (os

3 0 controles) ou que somente continham os tensoativos, 2 ml de meio de crescimento adicional foram adicionados para assegurar diluições equivalentes relativas do fermento.

Nas tabelas abaixo, os resultados são apresentados como as leituras de turbidez efetiva (NTU) com uma tabela 5 secundária que apresenta a alteração ou delta em valores NTU. Dada a natureza do sistema, alterações em turbidez são reflexos da bioeficácia/desempenho relativo dos sistemas bioativos e seus componentes. Em certos casos, um alto nível de material bioativo, especialmente o componente de 10 metal, causou um aumento imediato e relativamente acentuado em densidade óptica ou turbidez. Acreditou-se que isso teve um resultado de lisar pelo menos uma porção nas próprias células de fermento. Consequentemente, especialmente naqueles exemplos tendo um nível elevado de bioativo, é 15 igualmente, se não mais importante olhar a alteração em turbidez a partir dos resultados de turbidez de meia hora ou uma hora, se apresentados, para frente, não a partir do tempo zero.

Exemplos 1-21 - Concentração De Ácido

2 0 Uma primeira série de experimentos foi realizada para

avaliar o desempenho de vários metais antimicrobianos e combinações de tais metais, com e sem ácido cítrico e com e sem tensoativo aniônico de sarcosinato de lauroíla de sódio. Cada um dos metais foi adicionado na forma de uma 25 solução aquosa de seus sais de citrato, a saber, citrato de prata, citrato de cobre e citrato de zinco, ou, no caso dos Exemplos 16-19, como uma mistura de todos os três sais de citrato (Mll). As formulações específicas avaliadas e os resultados do estudo de crescimento de fermento resultantes

3 0 são mostrados nas Tabelas I e IA. TABELA I

Exem¬ íon de Ácido plo metal . e cítri¬ Sarcosi¬ Turbidez (NTU) quant i- co (% nato de dade em lauroíla Tempo Tempo T 18 T 24 T 96 (ppm) peso) de Na (% zero 1 h horas horas horas em 0 CQ CU a 1 Ag 5 ppm 0 44 . 5 59.6 890 932 995 2 Ag 5 ppm 1 47. 5 64 882 902 1044 3 Ag 5 ppm 2 50 . 9 68 .4 881 950 1025 4 Ag 5 ppm 0 0 . 005 46 . 8 51. 5 596 677 673 Ag 5 ppm 1 0 . 005 59. 4 68 .4 85 130 854 6 Ag 5 ppm 2 0 . 005 70 . 9 75 85 120 880 7 Zn 5 ppm 0 43 . 8 64 . 5 992 993 1051 8 Zn 5 ppm 1 46 . 6 66 . 5 934 962 1027 g Zn 5 ppm 2 49 . 5 71 936 1038 1063 Zn 5 ppm 0 0 . 005 45 . 9 63 656 747 712 11 Zn 5 ppm 1 0 . 005 57 71 160 223 744 12 Zn 5 ppm 2 0 . 005 73 76 . 5 105 119 466 13 Cu 5 ppm 0 45 . 6 68 940 1021 1100 14 Cu 5 ppm 1 49 72 940 1018 1102 Cu 5 ppm 2 49 74 900 973 1100 16 MIl 0 0 . 005 39 44 . 5 449 575 658 17 MIl 1 0 . 005 73 . 9 87 100 105 732 18 MIl 2 0 . 005 132 137 137 137 690 19 MIl 1 0 . 01 74 . 5 74 . 8 87 89 116 Controle 53 . 2 69 .4 1031 1085 1122 (sem biocida) 21 Controle 53 . 2 78 1101 1093 1128 (sem biocida) *M11 uma solução de ácido cítrico a 4% contendo 5 0 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml fornecendo ~5 ppm de cada no frasco de teste

TABELA IA

Exem

plo

Ion de metal e quant idade (ppm)

Acido cítrico (% em

peso)

Sarcosinato de lauroíla de Na (% em peso)

Mudança em Turbidez from T0 (delta NTU)

Tempo

zero

T 18 horas

T 24 horas

T 96 horas

1 Ag 5 ppm 0 15 . 1 845 . 5 887 . 5 950 . . 5 2 Ag 5 ppm 1 16 . 5 834 . 5 854 . 5 996 . . 5 3 Ag 5 ppm 2 17 . 5 830.1 899 . 1 974 . . 1 4 Ag 5 ppm 0 0 . 005 4 . 7 549 . 2 630 . 2 626 , . 2 Ag 5 ppm 1 0 . 005 9 25 . 6 70 . 6 794 . . 6 6 Ag 5 ppm 2 0 . 005 4 . 1 14 . 1 49 . 1 809 , . 1 7 Zn 5 ppm 0 20 . 7 948 . 2 949.2 1007.2 8 Zn 5 ppm 1 19 . 9 887 . 4 915.4 980 . 4 9 Zn 5 ppm 2 21. 5 886 . 5 988 . 5 1013 . 5 Zn 5 ppm 0 0 . .005 17 . 1 610 . 1 701. 1 666 . 1 11 Zn 5 ppm 1 0 . .005 14 103 166 687 12 Zn 5 ppm 2 0 . . 005 3 . 5 32 46 393 13 Cu 5 ppm 0 22 . 4 894 . 4 975 . 4 1054 . 4 14 Cu 5 ppm 1 23 891 969 1053 Cu 5 ppm 2 25 851 924 1051 16 MIl 0 0 . . 005 5 . 5 410 536 619 17 MIl 1 0 , . 005 13 . 1 26 . 1 31.1 658 . 1 18 MIl 2 0 . . 005 5 5 5 558 19 MIl 1 0 , . 01 0.3 12 . 5 14 . 5 41. 5 Controle 16 . 2 977 . 8 1031.8 1068 . 8 (sem biocida) 21 Controle 24 . 8 1047 . 8 1039.8 1074 . 8 (sem biocida) *M11 uma solução de ácido cítrico a 4% contendo 50 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml fornecendo -5 ppm de cada no frasco de teste

Como visto nas tabelas I e IA, aquelas formulações que 5 têm tanto o ácido como o tensoativo aniônico forneceram inibição ^de crescimento de fermento acentuada através pelo menos do período das primeiras 24 horas, mesmo com o nível baixo de tensoativo aniônico. Aquelas amostras apenas com o íon de metal ou o íon de metal em combinação com o ácido 10 não tiveram efeito apreciável sobre o crescimento de fermento. Embora alguma inibição fosse também observada naquelas amostras onde somente o(s) metal(is) e tensoativo estavam presentes, a inibição não foi apreciável. Em vez disso, como observado, a presença adicional de ácido em 15 excesso forneceu um nível de aperfeiçoamento inesperado e acentuado. Finalmente, aquela formulação; tendo todos os três íons de metal antimicrobiano, mais o ácido e o tensoativo, fornecidos; continuou a mostrar excelente inibição de crescimento de fermento mesmo no limite de teste de 96 horas.

Exemplos 22 - 42 - Avaliação De Tensoativo Uma série similar de experimentos foi realizada novamente para avaliar o desempenho de várias combinações 5 dos componentes das composições bioativas da presente invenção bem como demonstrar outros tensoativos aniônicos e combinações de tensoativos. As formulações específicas avaliadas e os resultados de crescimento de fermento são apresentados nas tabelas 2 e 2A.

Novamente, a importância de todos os três

constituintes foi evidente a partir dos resultados mostrados nas Tabelas 2 e 2A. Esses resultados confirmam ainda que mesmo um teor de ácido em excesso baixo, aqui 0,4%, provê excelente inibição em crescimento de fermento através de 96 horas. Os resultados de certo modo menores do que o ideal, mostrados nos exemplos 2 6 e 2 9 sugerem alguma variação entre tensoativos aniônicos, pelo menos com sulfato de laurila de sódio (SLS) com íons de cobre e zinco. Entretanto, os resultados ainda são significativamente melhores do que sem tensoativo e sugerem uma possível sinergia com dois. Além disso, devido à solubilidade mais fácil do SLS, em comparação com o sarcosinato de lauroíla de sódio (NaLS), a presença do SLS ajuda a melhorar e/ou aumentar a solubilidade do NaLS sob condições ácidas.

Exemplos 43 - 57 - Avaliação De Concentração Baixa Uma série de experimentos foi realizada novamente para avaliar o desempenho de várias combinações dos componentes das composições bioativas da presente invenção, dessa vez focalizando no impacto das concentrações baixas dos componentes e suas combinações. Nesse conjunto de experimentos, soluções aquosas de 1 ml dos componentes de ácido cítrico/bioativo foram adicionadas aos frascos de 20 ml. As formulações específicas avaliadas e os resultados de 5 crescimento de fermento são apresentados nas Tabelas 3 e 3A.

Como visto nas Tabelas 3 e 3A, novamente a combinação de íons de metal bioativo, de ácido cítrico e de tensoativo aniônico demonstrou uma inibição acentuada em crescimento 10 de fermento em comparação com os componentes individuais, mesmo nas baixas concentrações de ácido e tensoativo em excesso. Embora, novamente, os tensoativos pareciam ter um efeito inibidor marginal, em comparação com os controles, sozinhos, a inibição era desprezível em comparação com 15 aquela dos sistemas de acordo com a presente invenção.

TABELA 2

Exemplo Citratos de Tensoativo* Turbidez (NTU)

metal (ppm) a (% em peso) Tempo Tl T18 T24 T96 0,4% de ácido zero horas horas horas horas cítrico 22 Cobre 5 ppm 103 114 410 463 588 23 Zinco 5 ppm 103 118 475 488 589 24 Prata 5 ppm 155 168 181 190 670 Cobre 5 ppm 0 . 005 NaLS 145 146 157 160 149 26 Cobre 5 ppm 0 . 005 SLS 119 128 252 326 502 27 Cobre 5 ppm 0 . 005 NaLS: 145 144 156 154 157 0 . 005 SLS 28 Zinco 5 ppm 0 . 005 NaLS 148 156 157 157 157 29 Zinco 5 ppm 0 . 005 SLS 126 134 217 234 539 Zinco 5 ppm 0 . 005 NaLS: 155 155 157 157 158 0 . 005 SLS 31 Prata 5 ppm 0 . 005 NaLS 170 170 184 184 180 32 Prata 5 ppm 0 . 005 SLS 177 177 193 196 196 33 Prata 5 ppm 0 . 005 NaLS : 193 190 198 199 199 0 . 005 SLS 34 Cobre 2 . 5 ppm: 99 109 498 510 614 Zinco 2 . 5 ppm Cobre 2 . 5 ppm: 128 152 424 530 727 Prata 2.5 ppm

36 Zinco 2.5 ppm: 128 151 541 621 720 Prata 2.5 ppm 37 Controle 1 91 114 560 580 754 (sem biocida) 38 Controle 2 91 114 563 584 726 (sem biocida) 39 Cobre 2.5 ppm: 0 . . 005 NaLS : 192 180 193 193 193 Zinco 2.5 ppm 0 . . 005 SLS 40 Cobre 2.5 ppm: 0 . . 005 NaLS: 181 204 205 206 206 Prata 2.5 ppm 0 . . 005 SLS 41 Zinco 2.5 ppm: 0 . . 005 NaLS: 194 193 212 212 212 Prata 2.5 ppm 0 . . 005 SLS 42 Cobre 2.5ppm: 0 . . 005 NaLS : 193 193 199 200 205 Prata 2.5 ppm: 0.005 SLS Zinco 2.5 ppm

*NaLS - sarcosinato de lauroíla de sódio, SLS - sulfato de laurila de sódio

TABELA 2A

Citratos de Tensoativo* Turbidez (NTU)

Exemplo metal (ppm) a (% em peso)

Tl T 18 T 24 T 96

0 ,4% de ácido hora horas horas horas cítrico 22 Cobre 5 ppm 11 307 360 485 23 Zinco 5 ppm 15 372 385 486 24 Prata 5 ppm 13 26 35 515 Cobre 5 ppm 0 . . 005 NaLS 1 12 15 4 26 Cobre 5 ppm 0. . 005 SLS 9 133 207 383 27 Cobre 5 ppm 0 , . 005 NaLS -1 11 9 12 0. . 005 SLS 28 Zinco 5 ppm 0 . . 005 NaLS 8 9 9 9 29 Zinco 5 ppm 0 . . 005 SLS 8 91 108 413 Zinco 5 ppm 0. . 005 NaLS 0 2 2 3 0 . . 005 SLS 31 Prata 5 ppm 0 . . 005 NaLS 0 14 14 10 32 Prata 5 ppm 0 . . 005 SLS 0 16 19 19 33 Prata 5 ppm 0 . . 005 NaLS -3 5 6 6 0 . . 005 SLS 34 Cobre 2 . 5 ppm 10 399 411 515 Zinco 2 . 5 ppm Cobre 2 . 5 ppm 24 296 402 599 Prata 2 . 5 ppm 36 Zinco 2 . 5 ppm: 23 413 493 592 Prata 2 . 5 ppm 37 Controle 1 23 469 489 663 (sem biocida) 38 Controle 2 23 472 493 635 (sem biocida) 39 Cobre 2 . 5 ppm 0 . . 005 NaLS -12 1 1 1 Zinco 2 . 5 ppm 0 . . 005 SLS 40 Cobre 2 , . 5 ppm 0 . .005 NaLS 23 24 25 25 Prata 2 , . 5 ppm 0 . . 005 SLS 41 Zinco 2 . . 5 ppm: 0 . .005 NaLS -1 18 18 18 Prata 2 , . 5 ppm 0 . .005 SLS 42 Cobre 2 . .5ppm: 0 . .005 NaLS 0 6 7 12 Prata 2 . .5 ppm: 0 . .005 SLS Zinco 2 . . 5 ppm TABELA 3 Exemplo Metal Ácido Cítrico Tensoativo** OD OD OD OD OD Bioativo* (% em peso) (% em peso) (To) (Tlh) (T18) (T24) (T48) 43 0. .01 NaLS 43 45 550 613 521 44 0 . .02 NaLS 43 40 460 524 624 45 0 . .01 SLS 43 47 675 728 758 46 0 . .02 SLS 37 42 495 610 605 47 0 . .01 NaLS/0.01 SLS 40 41 370 466 580 48 0 . .005 NaLS/0.005 SLS 43 47 630 696 726 49 0. . 05 42 46 835 920 878 50 0. . 1 38 44 780 864 852 51 MIl 0 . .2 50 62 809 891 915 52 MIl 0 . .2 0 . .01 NaLS 64 63 67 68 69 53 MIl 0 . .2 0 . ,01 SLS 61 65 300 569 1039 54 MIl 0 . .2 0 . .005 NaLS/0.005 SLS 60 63 62 63 73 55 MIl 0 . .2 0 . .01 NaLS/0.01 SLS 85 76 76 79 79 56 Controle 1 43 51 960 997 939 57 Controle 2 43 51 890 986 887 *Mll uma solução de ácido cítrico a 4% contendo 50 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml fornecendo (@ 1 ml) - 5 ppm de cada no frasco de teste

**NaLS - sarcosinato de lauroíla de sódio, SLS - sulfato de laurila de sódio

TABELA 3A

Exemplo Metal Ácido Cítrico Tensoativo** Mudança em Turbidez a partir de TO

Bioativo* (% em peso) (% em peso)

(delta NTU)

OD OD OD OD (Tlh) (T18) (T24) (T4 8) 43 0 . . 01 NaLS 2 507 570 478 44 0 , . 02 NaLS -3 417 481 581 45 0 . , 01 SLS 4 632 685 715 46 0. .02 SLS 5 458 573 568 47 0 . , 01 NaLS/0.01 SLS 1 330 426 540 LZ/Z^ 48 0 . .005 NaLS/0.005 SLS 4 587 653 683 49 0, 05 4 793 878 836 50 0,1 6 742 826 814 51 MIl 0,2 12 759 841 865 52 MIl 0,2 0 . .01 NaLS -1 3 4 5 53 MIl 0,2 0. .01 SLS 4 239 508 978 54 MIl 0,2 0 . .005 NaLS/0.005 SLS 3 2 3 13 55 MIl 0,2 0 . .01 NaLS/0.01 SLS -9 -9 -6 -6 56 Controle 1 8 917 954 896 57 Controle 2 8 847 943 844 uma solução de ácido cítrico a 4% contendo 50 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml fornecen ml) - 5 ppm de cada no frasco de teste

**NaLS - sarcosinato de lauroíla de sódio, SLS - sulfato de laurila de sódio

43/87 Exemplos 58 - 71 - Fonte De fon De Metal De Permuta De

íons

Uma solução de citrato de metal foi preparada por adicionar aproximadamente 4 gramas de ácido cítrico a aproximadamente 8 gramas de água e misturada até totalmente dissolvida. Posteriormente, 0,1 grama cada de dois agentes antimicrobianos do tipo de permuta de íons, AgION AClOD e AgION AKlOD da AgION Technologies de Wakefield, MA, EUA, foram adicionados à solução de ácido cítrico concentrada com agitação até dissolução total dos agentes antimicrobianos. Aproximadamente 92 gramas de água foram então adicionados para fornecer uma solução de ácido cítrico a 4% tendo dissolvido na mesma 0,1% em peso de AClOD e 0,1% em peso de AKlOD. AgION AKlOD contém aproximadamente 5,0% em peso de prata e aproximadamente 13% em peso de zinco e AgION AClOD contém aproximadamente 6,0% em peso de cobre e aproximadamente 3,5% em peso de prata. Várias quantidades da solução de ácido cítrico assim formada foram então adicionadas a frascos de teste de modo a fornecer um teor de prata nos frascos de teste de aproximadamente 1,25 ppm, 2,5 ppm, 5,0 ppm e 10 ppm. Adicionalmente, tensoativo diferente e combinações de tensoativo foram adicionados a certos frascos para demonstrar o efeito de diferentes teores de ácido e metal sobre a bioeficácia com e sem tensoativos. As formulações específicas avaliadas e os resultados de crescimento de fermento são apresentados nas Tabelas 4 e 4A.

Como visto nas Tabelas 4 e 4A, as composições de acordo com a presente invenção forneceram inibição acentuada em crescimento de fermento. Embora o Exemplo 61 contendo a concentração mais elevada de íons de metal (10 ppm de prata, 7 ppm de cobre e 15,3 ppm de zinco), mostrasse boa inibição de crescimento de fermento, o grau mais elevado de eficácia vem com o aumento concomitante na liberação desses metais no ambiente. Isso se torna especialmente importante onde os materiais bioativos devem ser utilizados em ou próximo de aplicações marítimas e/ou agrícolas. Desse modo, embora concentrações de metal elevadas, especialmente de prata, forneçam melhor bioeficácia, também aceleram o impacto sobre os ambientes aquáticos. Por outro lado, como mostrado naqueles exemplos que empregam as soluções de ácido contendo metal antimicrobiano com o tensoativo aniônico, especialmente sarcosinato de lauroíla de sódio, sozinho ou em combinação com sulfato de laurila de sódio, inibição de fermento igual e mesmo melhor é realizada com menos da metade, até mesmo menos de um quarto, das concentrações de íon de metal. Além disso, esses resultados mostram que por ajustar o nível de tensoativo, pode-se reduzir o nível de íon de metal ainda mais enquanto ainda fornece inibição acentuada dos fungos.

f TABELA 4 Exemplo Concentração

Tensoativo*

Turbidez (NTU) de (% em peso) OD OD OD OD OD OD Ag ppm T zero T(Ih) T(18h) T(24h) T (44h) T(120h) 58 1.25 108 128 913 880 954 1136 59 2.5 127 157 865 890 941 1024 60 5 176 199 229 227 234 721 61 10 168 173 191 191 190 180 62 1.25 0. . 005 NaLS 143 158 240 560 843 708 63 2.5 0 . , 005 NaLS 180 179 204 210 729 843 64 5 0 . . 005 NaLS 194 201 222 221 227 227 65 1.25 0 . , 005 SLS 136 167 953 93 0 973 1132 66 2.5 0 . . 005 SLS 201 212 880 880 967 1145 67 5 0 . . 005 SLS 248 247 272 272 296 297 68 1.25 0 . . 0025 NaLS /0.0025 SLS 166 180 343 730 957 986 69 2.5 0 , . 0025 NaLS /0.0025 SLS 215 217 235 239 759 940 70 5 0 . . 0025 NaLS /0.0025 SLS 235 235 257 255 259 268 71 Controle 101 125 1050 1050 1040 1183 *NaLS - sarcosinato de lauroíla de sódio, SLS - sulfato de laurila de sódio TABELA 4A

Exemplo Concentraçao de Ag ppm Tensoativo* (% em peso) Mudança em Turbidez (delta NTU) OD(Tlh) OD(T18h) OD(T24 h) OD(T44 h) OD(T120h) 58 1.25 20 805 772 846 1028 59 2 . 5 30 738 763 814 897 60 5 23 53 51 58 545 61 10 5 23 23 22 12 62 1.25 0.005 NaLS 15 97 417 700 565 63 2.5 0.005 NaLS -1 24 30 549 663 64 5 0.005 NaLS 7 28 27 33 33 65 1. .25 0. ,005 SLS 66 2. .5 0. .005 SLS 67 5 0 , .005 SLS 68 1. .25 0. .0025 NaLS/0. . 0025 SLS 69 2. .5 0. .0025 NaLS/0. . 0025 SLS 70 5 0. .0025 NaLS/0. . 0025 SLS 71 Controle

*NaLS - sarcosinato de lauroíla de sódio, SLS

31 817 794 837 996 11 679 679 766 944 -1 24 24 48 49 14 177 564 791 820 2 20 24 544 725 0 22 20 24 33 24 949 949 939 1082 sulfato de laurila de sódio

Δ8/Lt Também surpreendente sobre esse exemplo é a descoberta de que ácido cítrico poderia dissolver as partículas de zeólito antimicrobianas. Essa descoberta apresenta outro meio pelo qual as composições inventivas podem ser feitas 5 bem como um número de aplicações alternativas para tais materiais não possíveis de outro modo com os zeólitos em sua forma sólida.

Exemplos 72-79 Concentração De Metal

Para esse estudo um sistema bioativo concentrado (M12) foi preparado compreendendo uma solução de ácido cítrico aquosa a 16% tendo dissolvido na mesma citrato de prata, citrato de cobre e citrato de zinco, cada adicionada em uma quantidade para fornecer 200 ppm de cada metal, juntamente com 0,25% de sarcosinato de lauroíla de sódio e 0,32% de sulfato de laurila de sódio. Várias quantidades desse sistema foram adicionadas aos frascos de teste para avaliar adicionalmente o impacto de inibição de fermento de concentração de metal. Um exemplo adicional foi preparado incluindo ainda um tensoativo não iônico, Tween 20 (monolaurato de sorbitano polioxietileno (20)), um emulsificante para avaliar seu impacto sobre o desempenho. As formulações específicas avaliadas e os resultados são apresentados nas Tabelas 5 e 5A.

Como visto nas Tabelas 5 e 5A, as concentrações

2 5 elevadas de metais inibiram dramaticamente, se não pararam

totalmente, o crescimento de fermento. As soluções dos Exemplos 76, 77 e 78 contendo teor de metal ultra-elevado pareciam destruir as células de fermento, mostrando o que pareceu ser uma desnaturação rápida do fermento na adição

3 0 do material bioativo aos frascos de teste. É provável que a turbidez elevada inicial refletisse tanto aquele que se origina da adição dos próprios materiais bioativos como a destruição das células de fermento.

Independentemente, os resultados mostram que a inibição acentuada também é obtida em concentrações muito

mais baixas do metal na presença do ácido em excesso e

tensoativo. Realmente, apenas 15 ppm de metais (5 ppm de cada) fornecem excelente inibição por 82 horas e além. TABELA 5 Exemplo MI2* Concentração TO T18 Turbidez (NTU) T82 adicionado de cada metal T22 T24 T64 (ml) (ppm) 72 0 0 63 920 980 964 1020 1050 73 0 .1 1 81 608 722 820 1077 1062 74 ; 0.25 2 . 5 111 126 142 160 752 810 75 0 . 5 5 145 198 208 208 205 203 76 1. 0 10 483 410 395 369 320 300 77 2 . 0 20 1295 820 714 660 399 264 78 3 . 0 30 1435 766 620 555 340 340 79 0 .5 + 5 141 249 405 600 1116 1129 *M12 uma solução de ácido c ítrico a 16% contendo 2 00 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml *essa formulação também continha 0,1% em peso de Tween 2 0 um tensoativo não iônico.

TABELA 5A

Exemplo MI2 * Concentração adicionado de cada metal Mudança em Turbidez (delta NTU) (ml) (ppm) T18-T0 T22-T0 T24-T0 T64-T0 T82-T0 72 0 0 857 917 901 957 987 73 0 .1 1 527 641 739 996 981 74 0.25 2 . 5 15 31 49 641 699 75 0 . 5 5 53 63 63 60 58 76 1. 0 10 -73 -88 -114 -163 -183 77 2 . 0 20 -475 -581 -635 -896 -1031 78 3 . 0 30 -669 -815 -880 -1095 -1095 79 0 . 5 + 5 108 264 459 975 988 *M12 uma solução de ácido cítrico a 16% contendo 200 ppm cada de Ag, Cu e Zn por ml

*essa formulação também continha 0,1% em peso de Tween 20 um tensoativo não iônico.

Finalmente, a adição de tensoativo Tween 20 pareceu 5 ser antagonista à ação dos sistemas bioativos da presente invenção resultando em uma redução no nível de inibição de fermento. Ainda, essa composição (exemplo 79) manifestou inibição moderada de fermento por 24 horas. Dependendo da aplicação de uso final específica considerada, é evidente 10 que avaliações preliminares de rotina devem ser realizadas antes de formular com vários aditivos para determinar seu impacto sobre os sistemas inventivos da presente invenção.

Exemplos 80-95 - Sinergia De Bioativos

Uma série de experimentos foi realizada na qual as 15 possíveis sinergias foram avaliadas entre as composições inventivas e outros materiais bioativos bem como entre tais outros materiais bioativos incluindo um fungicida, um agente antimicrobiano e um desinfetante. O sistema bioativo inventivo empregado nesse conjunto de experimentos (M13) 20 era uma solução de ácido cítrico aquosa a 4% contendo 50 ppm de prata, 5 0 ppm de cobre e 5 0 ppm de zinco.

O fungicida avaliado foi Mancozeb Flowable with Zinc da Bonide Products, Inc. de Oniskany, NY, EUA, um fungicida formulado comercial contendo 3 7% em peso de mancozeb. 25 Embora a formulação específica do produto Mancozeb seja de propriedade, como formulação comercial também conteria certos tensoativos para permitir sua aplicação em plantas para eficácia. Mancozeb é um pó que pode ser disperso, insolúvel que aumenta a turbidez dos líquidos aos quais é

3 0 adicionado. Não obstante, em uma avaliação separada, não reproduzida aqui, verificou-se que Mancozeb era capaz de controlar ou inibir crescimento de fermento em uma concentração de aproximadamente 1,23 x IO'3. O rótulo indica sua taxa de uso a 2,6xl0~3.

O ativo antimicrobiano avaliado foi AgION AClOD, um

aditivo de zeólito antimicrobiano avaliado da AgION Technologies, Inc., de Wakefield, MA, EUA, que, como observado acima, contém 6,0% em peso de cobre e 3,5% de prata. Em uma avaliação de diluição separada, não 10 reproduzida aqui, verificou-se que uma suspensão aquosa de AC10D mostrou algum controle ou inibição de fermento em uma concentração de aproximadamente 6,2 5xl0~4.

Finalmente, o desinfetante avaliado foi AgION SilverClene 24, um material desinfetante baseado em uma 15 solução aquosa de citrato de prata eletroliticamente gerado (~ 3Oppm de prata), também distribuído por AgION Technologies, Inc. Embora de propriedade, acredita-se que esse produto e sua fabricação sejam revelados em Arata - US 6.583.17 6, que é incorporada aqui a título de referência na 2 0 íntegra.

Os materiais acima mencionados bem como várias combinações dos mesmos foram avaliados para determinar sua eficácia em parar ou inibir o crescimento de fermento. As formulações específicas testadas e os resultados de 25 inibição de fermento obtidos com as mesmas são apresentados nas Tabelas 6 e 6A. TABELA 6 Exemplo Quant. Mancozeb AgION AC10D SilverClene Tensoativo Turbidez (NTU) MI3 (% em 24 \ % em peso) peso) (ml) (% em peso) (ml) OD T T(1 T (18 T (24 pH zero hora) horas) horas) 80 9 .4 OE-05 262 293 1023 1030 3 .07 81 1 9 .4 0E-O5 276 276 309 522 2 . 91 82 2 9 .40E-05 301 301 308 312 2 55 83 2 t .88E-04 0 . . 05 NaLS/0.05 SLS 350 362 362 362 84 2 3 .75E-04 658 640 1001 1170 2.4 85 1 9 .40E-05 0.05 SLS 331 321 328 330 2.48 86 para pH 6 3 .75E-04 0. . 05 NaLS/0.05 SLS 609 605 625 968 4 . 91 87 1 .88E-04 7 . 81E-05 0.05 NaLS 410 385 443 511 88 2 1 .88E-04 7 .81E-05 0. , 05 NaLS/0.05 SLS 521 435 435 440 2 . 68 89 9 .4 OE-05 1 258 276 970 962 2 . 67 90 1 .88E-04 2 365 364 782 1048 91 3 .90E-05 128 151 862 800 3 .23 92 2 3 .90E-05 0.05 SLS 154 156 172 175 2.54 93 2 1 .56E-04 0. . 05 NaLS/0.05 SLS 190 143 146 156 2 . 66 94 2 0 . . 05 NaLS/0.05 SLS 157 67 199 195 2 .51 95 Controle 73 96 886 856 3 .25 TABELA 6A

Exemplo Quant. Mancozeb AgION AC10D SilverClene Tensoativo Mudança em Turbidez (delta NTU) MI3 (% em (% em peso) 24 {% em peso) (ml) peso) (ml) 1 18 1-18 24 1-24 hora horas horas horas horas 80 9.40E-05 31 761 730 768 737 81 1 9.40E-05 0 33 33 246 246 62 2 9.4 OE-05 0 7 7 11 11 83 2 1.88E-04 0.05 NaLS/0.05 SLS 12 12 0 12 0 84 2 3.75E-04 -16 345 361 514 530 85 I 9.4 OE-05 86 para pH 6 3.75E-04

87 1.88E-04 7.81 E-05

88 2 1.88E-04 7.81 E-05

89 9.40E-05 1

90 1.88E-04 2

91 3.90E-05

92 2 3.90E-05

93 2 1.56E-04

94 2

95 Controle

0.05 SLS -10 -3 7 -1 9 0.05 NaLS/0.05 SLS -4 215 220 359 363 0.05 NaLS -25 33 58 101 126 0.05 NaLS/0.05 SLS -86 -86 0 -81 5 18 712 694 704 68S -1 417 416 683 682 23 734 711 672 649 0.05 SLS 2 18 16 21 19 0.05 NaLS/0.05 SLS -47 -42 5 -34 13 0.05 NaLS/0.05 SLS -90 32 122 38 128 25 825 800 783 758 53/87 Os resultados apresentados nas Tabelas 6 e 6A demonstram uma sinergia acentuada entre as composições inventivas de acordo com a presente invenção e fungicidas comerciais e agentes antimicrobianos. Especificamente, por 5 exemplo, uma comparação dos resultados para os Exemplos 80, 81 e 8 2 demonstra que a combinação de baixas quantidades dos íons de metal, ácido cítrico e fungicida forneceu excelente desempenho antifúngico. Embora seja observado que essas formulações não tiveram tensoativo adicional, o 10 próprio fungicida comercial continha tensoativos que trabalharam em combinação com os íons de metal e ácido cítrico para fornecer os benefícios devido àquela combinação como agora reivindicado. Esses resultados mostram que excelente atividade antifúngica, como medido 15 por inibição de crescimento de fermento, pode ser obtida com menos de 10% da quantidade de fungicida necessário para inibir crescimento de fermento pela simples adição de baixos níveis de íons de metal e ácido. Como visto a partir dos exemplos 91, 92 e 93, uma sinergia similar é mostrada

2 0 para as composições inventivas em combinação com um agente antimicrobiano inorgânico convencional. Aqui também, menos de 10% daquela quantidade do agente antimicrobiano necessário quando utilizado individualmente, forneceu bom desempenho antimicrobiano quando em combinação com baixos 25 níveis de composição bioativa de acordo com a presente invenção. Entretanto, a substituição do SilverClene 24 pela composição inventiva da presente invenção, Exemplos 8 9 e 90, não forneceu benefício evidente a pesar do teor de prata relativamente elevado.

Finalmente, no Exemplo 86, amônia foi adicionada a uma porção da solução M13 até que a solução atingiu um pH de 6.

2 ml dessa solução tamponada foram então empregados no experimento. Esse exemplo indica a importância do pH baixo das composições de acordo com a presente invenção para fornecer desempenho desejável.

Exemplos 96 - 107 - Sinergia Immunox

Um estudo similar foi realizado para determinar a sinergia entre as composições bioativas de acordo com a presente invenção e um segundo fungicida, Immunox, um 10 fungicida comercial contendo 1,55% de miclobutanil, disponível da Spectrum Brands Division da United Industries de Madison, WI, EUA. Como formulação comercial, espera-se também que essa tenha algum teor de tensoativos. A composição bioativa empregada nesse experimento era o 15 sistema bioativo concentrado (M12) produzido nos Exemplos 72 - 79 acima. As diluições específicas de cada e os resultados obtidos desse modo são apresentados na tabela 7.

TABELA 7

Razão de Diluição

Exemplo Immunox MI2 T zero Tl.5 OD T18 T6 8 OD Delta 68 96 1: 80 150 152 832 682 97 1:200 106 112 980 874 98 1 .-64 97 107 1043 99 1 : 128 111 119 1126 100 1 : 256 84 131 1170 1086 101 1 : 512 81 140 1240 1159 102 1: 256 1 : 80 138 141 268 130 103 1: 256 1:200 102 114 1037 935 104 1: 512 1:80 138 140 292 154 105 1: 512 1:200 97 110 1031 934 106 Controle 1 86 175 754 668 107 Controle 2 87 176 1180 1093 Como indicado na Tabela 7, nenhum dos frascos de teste

contendo os baixos níveis de cada das composições bioativas ou a diluição de Immunox forneceu atividade antifúngica durante todo o período de 96 horas de teste. Além disso, nem a diluição de 1:128 (Exemplo 99) nem a diluição de 1:64 (Exemplo 98) de Immunox forneceu qualquer medição de eficácia, mesmo no período de teste mais curto de 18 horas, 5 apesar do fato de que o fabricante recomenda genericamente uma diluição de 1:64. Similarmente, os exemplos 103 e 105 tendo uma diluição de 1:200 da composição bioativa (~1 ppm de cada metal, 0,08% de ácido cítrico, 0,00125 NaLS e 0,0016 SLS) em combinação com as duas diluições do Immunox 10 falharam em demonstrar bioeficácia ao passo que as combinações das duas diluições do Immunox com um nível de certo modo mais elevado, diluição 1:80, da composição bioativa (-2,5 ppm de cada metal, 0,2% de ácido cítrico, 0,003 NaLS e 0,004 SLS) demonstraram bioeficácia. Isso 15 demonstra uma sinergia entre as duas composições visto que a diluição de 1:80 por si só falhou em mostrar bioeficácia durante o período total de teste.

Exemplos 108 - 126 - Fontes De Metal

Uma série de experimentos foi realizada utilizando 20 sais de metal diferentes como as fontes de íon de metal. Aqui, quantidades suficientes de nitrato de prata, sulfato de cobre e óxido de zinco foram adicionadas a uma solução de ácido cítrico aquosa de 5% para fornecer 31,75 ppm de prata, 12,5 ppm de cobre e 4 0,17 ppm de zinco. Quantidades 25 diferentes dessa solução concentrada de suprimento (M14) foram adicionadas aos frascos de teste para determinar eficácia. As formulações específicas, incluindo o ppm resultante de cada metal no frasco de teste, bem como os resultados das mesmas na inibição de crescimento de

3 0 fermento foram como apresentado nas Tabelas 8 e 8A. Os resultados mostrados nas Tabelas 8 e 8A demonstram que a seleção da fonte de íon de metal não é crítica desde que seja facilmente solúvel e seja solúvel até o ponto necessário para fornecer o nível desejado de concentração de íon de metal na solução. Além disso, os resultados demonstram a bioeficácia mesmo em teores de ácido e metal extremamente baixos. Embora a eficácia seja de vida relativamente curta nas concentrações mais baixas, verifica-se bioeficácia de longa duração somente com pequenos ajustes na concentração relativa dos componentes necessários. Além disso, dependendo da aplicação de uso final, tal eficácia antifúngica de curta duração pode ser suficiente; desse modo, permitindo que se minimize qualquer contaminação ambiental a partir da aplicação gral desses materiais.

Os resultados também sugerem que sulfato de laurila de sódio pode ser ineficaz sozinho na promoção da bioeficácia das composições bioativas da presente invenção. Não obstante, sua presença pode ser desejável onde o tensoativo 20 eficaz não é facilmente solúvel no sistema aquoso. Por outro lado, sua presença ou a presença de tensoativos similares pode não ser importante onde a intenção é produzir sistemas não aquosos. Por exemplo, sistemas a serem aplicados como emulsão em água ou como um óleo que se

2 5 espalhará em um meio aquoso ao qual é aplicado, por

exemplo, um arrozal, podem atender tensoativos que são menos hidrofílicos e mais lipofílicos.

Exemplos 127 - 143 - Ácido Láctico

Uma série de experimentos foi realizada similar à

3 0 anterior com a exceção de que ácido láctico foi substituído no lugar de ácido cítrico. Consequentemente, a composição

bioativa (M15) compreendia quantidades suficientes de

nitrato de prata, sulfato de cobre e óxido de zinco

dissolvidas em uma solução de ácido láctico aquosa a 5% t

para fornecer 31,75 ppm de prata, 12,5 ppm de cobre e 40,17 ppm de zinco. As formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas foram como apresentado nas Tabelas 9 e 9A. 109

110

111

112

113

114

115

116

117

118

119

120

121

122

123

124

125

126

Exei

108

109

110

111

TABELA 8

Volume MI4 Concentração de Tensoativo(peso/peso)% adicionado Metais

ppm ppmCu ppm Zn NaLS SDS Ag 0.5 0. 79 0.31 1.00 1 1.59 0 . 63 2.01 2 3 .18 1.25 4 .02 3 4 . 76 1. 88 6.03 0.5 0.79 0 . 31 1.00 0 . 005 1 1.59 0.63 2 .01 0.005 2 3 . 18 1.25 4 .02 0. 005 3 4 . 76 1.88 6 .03 0. 005 0.5 0 . 79 0 . 31 1.00 0.005 1 1.59 0 . 63 2 .01 0.005 2 3 .18 1.25 4 .02 0.005 3 4 . 76 1. 88 6.03 0 . 005 0.5 0.79 0.31 1. 00 0.0025 0.0025 1 1.59 0 . 63 2 . 01 0.0025 0.0025 2 3.18 1.25 4 . 02 0.0025 0.0025 3 4 . 76 1. 88 6 . 03 0 .0025 0.0025 2 318 1.25 4 . 02 0.01 0.86 137 0 . 54 1.73 0 .01 TABELA 8A

Concentração de Tensoativo(peso/peso)

Metais

ppm Ag ppmCu ppm Zn 0 . 5 0.79 0.31 100 1 159 0.63 201 2 318 1.25 402 3 4 . 76 1.88 603 Volume MI4 adicionado

Turbidez (NTU)

zero T2 T18 T26 T44 T4 8 T68 81 129 950 1046 1046 1046 1054 85 136 950 997 1055 990 1023 112 158 916 930 960 930 970 126 158 760 799 810 830 844 140 143 179 307 919 936 980 140 137 143 152 279 306 468 180 174 174 177 244 252 282 187 185 184 184 184 184 272 83 132 948 1054 1066 1078 1097 97 136 911 1003 1100 1060 1075 116 14 7 746 907 970 1001 1006 124 156 504 701 840 868 916 140 14 0 250 640 1065 1088 1133 149 14 9 160 256 930 901 1014 164 177 174 174 291 459 804 176 179 177 181 320 445 736 162 162 162 163 163 164 164 150 14 0 140 140 186 208 254 78 113 877 866 878 865 898 Mudança em Turbidez (delta NTU) Delta T2 DT18-T0 DT26- D T44- DT4 8-T0 DT68- TO TO TO TO 48 869 965 965 965 973 51 865 912 970 905 938 48 804 818 848 818 858 32 624 673 684 704 718 59/87 328

102

85

1014

978

890

792

993

865

640

560

2

104

820

Τ44

1001

1016

1014

990

923

292

228

227

1079

1110

1080

1180

1170

1110

730

475

1170

0.79 0 . .31 1. 00 0 . 005 3 39 167 779 796 1.59 0 . .63 201 0 . 005 -3 3 12 139 166 3 .18 1, .25 4 . 02 0 . 005 -8 -6 -3 64 72 4 . 76 1. .88 603 0 . 005 -2 -3 -3 -3 -3 0.79 0 , .31 1. 00 0005 49 865 971 983 995 1.59 0 , .63 201 0005 39 814 906 1003 963 3 .18 1. .25 402 C 1. 005 31 630 791 854 885 4 . 76 1. .88 603 0005 32 380 577 716 744 0.79 0 , .31 1.00 0.0025 0 .0025 0 110 500 925 948 1.59 0 . .63 2 . 01 0.0025 0 . 0025 0 11 107 781 752 3 .18 1. .25 4 . 02 0.0025 0 . 0025 13 10 10 127 295 4 . 76 1, .88 6 . 03 0.0025 0 . 0025 3 1 5 144 269 3 . 18 1. .25 4.02 0.01 0 0 1 1 2 1.37 0 , .54 1.73 0 . 01 -10 -10 -10 36 58 35 799 788 800 787 TABELA 9 Concentração de Metais Tensoativo Turbidez (NTU) (peso/peso)% ppm Ag ppmCu ppmZn NaLS SDS T zero Tl T18 T24 0 . 79 0 . 31 1. . 00 107 130 1000 1111 1. 59 0 . 63 2 . . 01 109 130 1006 1021 3 . 18 1. 25 4 . . 02 148 154 970 995 4 . 76 1. 88 6. .03 178 202 914 925 0 . 79 0 . 31 1. . 00 0 . 005 134 170 300 454 1. 59 0 . 63 2 . . 01 0 . 005 153 169 200 227 3 . 18 1. 25 4 . .02 0.005 218 217 207 204 4 . 76 1. 88 6. .03 0 . 005 222 223 222 215 0. 79 0 . 31 1. . 00 0.005 120 145 1074 1111 1. 59 0 . 63 2 . . 01 0 .005 140 156 1050 1092 3 . 18 1. 25 4 . . 02 0.005 179 193 945 1031 4 . 76 1. 88 6. . 03 0 .005 223 239 690 977 0. 79 0 . 31 1. . 00 0.0025 0.0025 143 151 884 968 1. 59 0 . 63 2 , . 01 0.0025 0.0025 175 175 237 330 3 . 18 1. 25 4 . . 02 0.0025 0.0025 210 214 207 223 4 . 76 1. 88 6. . 03 0.0025 0 . 0025 240 240 228 228 100 139 1175 1163 128

129

130

131

132

133

134

135

136

137

138

139

140

141

142

143

Volume MI5 Concentração de

adicionado

ppmAg ppmCu 0 . 5 0. .79 0 . .31 1 1. . 59 0 , .63 2 3 . . 18 1. .25 3 4 . .76 1. .88 0.5 0 . .79 0. . 31 1 1. .59 0 . .63 2 3 . . 18 1, .25 3 4 . . 76 1. .88 0.5 0. .79 0 , .31 1 1. .59 0 , . 63 2 3 . . 18 1. .25 3 4 . .76 1. . 88 0 . 5 0 . . 79 0 . .31 1 1. .59 0 . . 63 2 3 . .18 1. .25 3 4 . . 76 1, .88 controle TABELA 9A

Metais Tensoativo

(peso/peso)% ppmZn NaLS SDS

1.00 2.01 4 . 02 6.03

1.00 0.005

2.01 0.005

4.02 0.005

6.03 0.005

1.00 0.005

2.01 0.005

4.02 0.005

6.03 0.005

1.00 0.0025 0.0025

2.01 0.0025 0.0025

4.02 0.0025 0.0025

6.03 0.0025 0.0025

Mudança em Turbidez (delta NTU)

DT1-T0 DT18-T10 DT24-T0 DT44-T0 23 893 1004 894 21 897 912 907 8 822 847 866 24 736 747 812 36 166 320 789 16 47 74 139 -1 -11 -14 10 1 0 -7 5 25 954 991 959 16 910 952 970 14 766 852 901 16 467 754 957 8 741 825 1027 0 62 155 935 4 -3 13 520 0 -12 -12 235 39 1075 1063 1070 61/87 Os resultados, como mostrado nas Tabelas 9 e 9A, simulam aqueles encontrados no conjunto anterior de experimentos indicando que a invenção é vertida para ácidos de características similares.

Exemplos 144 - 156 - Ácido Fosfórico

Duas soluções de suprimento foram preparadas para avaliação em que o ácido empregado foi ácido fosfórico. Na primeira, citrato de prata, citrato de cobre e citrato de zinco foram adicionados a uma solução de ácido fosfórico 10 aquosa a 16% para fornecer 2 00 ppm de cada metal. Uma segunda solução de suprimento foi preparada utilizando nitrato de prata, sulfato de cobre e óxido de zinco, novamente na solução de ácido fosfórico a 16% para fornecer 200 ppm de cada metal. As duas composições continham ainda 15 0,32% de tensoativo, como tensoativo individual ou como uma mistura de 50:50. As formulações específicas e os resultados de sua eficácia no controle de crescimento de fermento foram como apresentado nas Tabelas 10 e 10A.

Os resultados, como mostrado nas Tabelas 10 e 10A, sugerem que o tensoativo pode não ser crítico naquelas composições onde o ácido em excesso é ácido forte a modero, como ácido fosfórico.

Exemplos 157 - 166 - Ácido Nítrico

Para demonstrar adicionalmente a amplitude das 25 composições bioativas, um ácido mineral relativamente forte, ácido nítrico, foi empregado como o componente de ácido. Uma solução de suprimento foi preparada combinando 78,7 mg de nitrato de prata, 62,6 mg de óxido de zinco e 200 mg de sulfato de cobre com 20 ml de água purificada e 30 1,6 g de ácido nítrico concentrado (68%) sob agitação constante. Após dissolução dos sólidos, água purificada adicional foi adicionada para compor um volume de 250. Como preparado, essa mistura continha aproximadamente 200 ppm de cada metal, como calculado. O pH foi medido e verificado 5 ser 1,66. A mistura foi então dividida em três alíquotas de volume aproximadamente igual. Uma alíquota foi separada e as outras duas foram submetidas a ajuste de pH com hidróxido de amônia. A quantidade de hidróxido de amônia foi adicionada foi aquela necessária para colocar o pH da 10 primeira alíquota até 2,55 e a segunda alíquota até 3,63.

Cada solução foi então avaliada, com e sem tensoativos, para determinar sua bioeficácia na inibição do crescimento de fermento. A quantidade de cada uma das três alíquotas adicionada ao frasco de 2 0 ml da suspensão de 15 fermento é exposta na tabela 11 juntamente com a quantidade de tensoativo adicionado, onde indicado. O tensoativo empregado foi uma mistura 50:50 de sulfato de laurila de sódio e sarcosinato de lauroíla de sódio. As formulações específicas testadas e os resultados das mesmas são 20 apresentados na tabela 11. Como pode ser visto na tabela

11, a combinação de metal e ácido não forneceu nenhuma inibição nos níveis testados. Entretanto, quando o tensoativo foi adicionado, a bioeficácia foi manifestada mesmo na concentração mais baixa de ácido/metal. TABELA 10 Exemplo Fonte de Metal Metal Tensoativos Turbidez (NTU)

(ppm) (peso/peso) T zero T 1 T18 T 24 T 42 T4 8 T72 T96 hora 144 Sais de Citrato* 2 . 5 123 134 300 400 1046 1094 1146 1106 145 Sais de Citrato* 5 199 180 166 166 160 163 . 162 154 146 Sais de Citrato* 10 211 193 176 176 172 177 172 169 147 AgNO3, CuS04,ZnO 2.5 168 166 179 179 172 174 778 1162 148 AgNO3, CuS04,ZnO 5 209 193 180 180 175 174 170 168 149 AgN03, CuS04,ZnO 10 228 219 197 197 196 204 199 194 150 Sais de Citrato* 5 0. . 05 SLS 226 218 200 200 193 203 192 186 151 Sais de Citrato* 5 0. . 05 NaLS 258 254 216 216 200 205 197 185 152 Sais de Citrato* 5 0. . 05 SLS/ 0 .05 NaLS 253 237 200 200 204 208 201 188 153 AgN03, CuS04,ZnO 5 0. . 05 SLS 285 263 229 229 223 229 214 206 154 AgNO3, CuS04,ZnO 5 0. . 05 NaLS 280 273 226 222 216 213 208 184 155 AgNO3, CuS04,ZnO 5 0. , 05 SLS/0 . 05 NaLS 283 272 250 247 232 238 232 215 156 Controle 52 53 437 599 938 913 877 886 *citrato de Agf, citrato de Cu e citrato de Zn, cada no nível designado

TABELA 10A

Exemplo Fonte de Metal Metal Tensoativos Mudança em Turbidez (delta NTU) (ppm) (peso/peso) T1-T0 T18-T1 T24-T1 T42-T1 T48-T1 T72-T1 T96-T 144 Sais de Citrato* 2.5 11 166 266 912 960 1012 972 145 Sais de Citrato* 5 -19 -14 -14 -20 -17 -18 -26 146 Sais de Citrato* 10 -18 -17 -17 -21 -16 -21 -24 147 AgNO3, CuS04,ZnO 2.5 -2 13 13 6 8 612 996 148 AgNO3, CuS04,ZnO 5 -16 -13 -13 -18 -19 -23 -25 149 AgNO3, CuS04,ZnO 10 -9 -22 -22 -23 -15 -20 -25 150 Sais de Citrato* 5 0.05 SLS -8 -18 -18 -25 -15 -26 -32 151 Sais de Citrato* 5 0.05 NaLS -4 -38 -38 -54 -49 -57 -69 152 Sais de Citrato* 5 0.05 SLS/0.05 NaLS -16 -37 -37 -33 -29 -36 -49 153 AgNO3, CuS04,ZnO 5 0.05 SLS -22 -34 -34 -40 -34 -49 -57 154 AgN03, CuS04,ZnO 5 0.05 NaLS -7 -47 -51 -57 -60 -65 -89 155 AgN03, CuS04,ZnO 5 0.05 SLS/0.05 NaLS -11 -22 -25 -40 -34 -40 -57 156 Controle 1 384 546 885 860 824 833 65/87 TABELA 11

Exemplo Vol. MI6 Metais Tensoativo pH Turbidez/alteração em turbidez Adicionado (ppm) (peso/peso)% TO T18 T18-T0 T42 T42-T0 157 0 . 5 5 1. 66 69 1243 1174 1133 1064 158 0 . 5 5 2 . 55 67 1245 1178 1133 1066 159 0 . 5 5 3 . 63 69 1243 1174 1150 1081 160 1 10 1. 66 65 976 911 1162 1097 161 1 10 2 . 55 66 1012 946 1186 1120 162 1 10 3 . 63 67 1036 969 1166 1099 163 0 . 5 5 0 . 05 1. 66 61 55 -6 58 -3 164 0 . 5 5 0 . 05 2 . 55 62 53 -9 55 -7 165 0 . 5 5 0 . 05 3 . 63 60 57 -3 52 -8 166 0 67 1255 1188 1212 1145 Exemplos 167 - 22 2 Avaliação De Tensoat ivo Uma série de experimentos foi realizada para selecionar vários tensoativos em relação à eficácia de acordo com a presente invenção. Os tensoativos foram avaliados como um aditivo puro (0 ppm de metais) ou em combinação com 1 ml ou 2 ml de uma solução de ácido cítrico a 4% contendo 5 0 ppm cada de cobre, prata e zinco. Com a adição de 1 ml da solução de ácido cítrico, o frasco de teste da suspensão de fermento terá aproximadamente 0,2% de ácido cítrico e aproximadamente 2,5 ppm de cada metal. Com a adição de 2 ml da solução de ácido cítrico, o ácido é aproximadamente 0,4% e os metais são individualmente presentes em aproximadamente 5 ppm nos frascos de teste. Cada tensoativo foi avaliado em uma concentração de aproximadamente 0,05% em peso. Os controles foram também avaliados com e sem os metais.

Os tensoativos específicos avaliados bem como as formulações de cada composição de teste juntamente com os resultados da mesma são expostos na tabela 12 . Como visto na Tabela 12, os benefícios da presente invenção são realizados com um amplo conjunto de materiais de tensoativo. Tensoativos especialmente preferidos são aqueles que são livres ou substancialmente livres de unidades de óxido de etileno de repetição e/ou têm pesos moleculares de moderados a inferiores. Apesar do acima, 5 observa-se que bons resultados foram obtidos com o Pluronic L62, um tensoativo contendo óxido de polietileno, quando utilizado em combinação com o nível mais baixo de ácido e metais. Pensa-se que o nível de ácido mais elevado pode ter afetado a estabilidade desse material, e possivelmente 10 materiais similares. Exemplo Tensoativo 167 Plutonic L62

168

169

170 Harapopsyl L95

171

172

173 Sulfato de laurila de sódio

174

175

176 Witco

177

178

179 Jeenteric CAPB

180

181

182 Manckinate LOlOO DLSS

183

184

185 Amraonyx LO

186

187

188 Haraposyl C30

189

190

191 Haraposyl M30

192

193

194 Hampshire TL Glutaraate

195

Química de tensoativo Fonte

Copolimero de bloco BASF

EO-PO

Na N-Sarcosinato de Hampshire

lauroíla Chemical

Sulfato de laurila de VWR Scientific sódio

Sulfato de laurila éter de sódio (2 mol EO)

Witeo Chemical

Betaína de CocaraidopropiIa

Jeen

International

Corp

Sulfossuccinato de dilaurila

Mackintire

Chemical

Óxido de dimetil Stepan Chemical

amina de laurila

Na N-Sarcosinato de Hampshire

cocoíla Chemical

Na N-Sarcosinato de Hampshire

miristoíla Chemical

Glutamato de lauroíla Hampshire TEA Chemical

TABELA

Tipo Não iônico

Aniônico

Aniônico

Aniônico

Amfotérico

Amfotérico Não iônico Aniônico Aniônico Aniônico

12 Metal TO T18 T48 T72 ppm O 47 1088 1113 1142 2.5 343 376 362 364 118 1127 1138 1175 O 47 42 390 884 2.5 70 909 999 1037 407 444 442 440 O 48 495 658 642 2.5 88 90 88 88 231 244 233 238 O 48 1060 1021 957 2.5 73 619 1415 1436 140 143 446 870 O 48 645 657 882 2.5 93 90 91 90 204 204 202 202 O 95 1020 866 817 2.5 118 97 106 1165 251 239 232 224 O 44 28 35 45 2 . 5 972 390 118 115 652 314 252 227 O 44 207 1043 1041 2.5 699 677 657 673 510 554 576 589 O 46 28 152 1205 2.5 588 564 1372 1385 583 586 1299 1382 O 66 946 977 927 2.5 182 410 1143 1189 218 618 1104 1129 T98 T18-T0 T48-T0 T72-T0 T96-TI 1156 1041 1066 1095 1109 340 33 19 2 -24 1146 1009 1020 1057 1028 878 -5 343 837 831 983 839 929 967 913 440 37 35 33 33 639 447 610 594 591 87 2 0 0 -1 232 13 2 7 1 923 1012 973 909 875 1447 746 1342 1363 1374 915 3 306 730 775 462 597 609 834 414 88 -3 -2 -3 -5 202 0 -2 •2 -2 788 925 771 722 693 1317 -21 -12 1047 1199 215 -12 -19 -27 -36 28 -16 -9 1 -16 105 -582 -854 -857 -867 180 -338 -400 -425 -472 1037 163 999 997 993 1115 -22 -42 -26 416 593 44 66 79 83 1184 -18 106 1159 1138 1389 -24 784 797 801 1383 3 716 799 800 905 880 911 861 839 1178 228 961 1007 996 1162 400 886 911 944 68/87 198

199

200

201

202

203

204

205

206

207

208

209

210

211

212

213

214

215

216

217

218

219

220

221

222

Tergitol 15S3 Etoxilato de Álcool Dow Chemical Não iônico

Secundário

TergitoM5S7 Etoxilato de Álcool Dow Chemical Não iônico

Secundário

Tergitol TMN6 Etoxilato de Álcool Dow Chemical Não iônico

Secundário Ramificado

Tergitol TMN3 Etoxilato de Álcool Dow Chemical Não iônico

Secundário Ramificado

Sulfonic TDA3B Álcool Etoxilado Cl- Huntsman Não iônico

C14 Chemical

Tween 20

monolaurato de sorbitano

polioxietileno (20)

Nao íomco

Plantaren 2000

Poliglicosídeo de alquila

Cognis

Nao íomco

Controle Controle (2.5 ppm)

Controle (5 ppm)

Metais Controle Metais Controle

188 1140 1178 969 880 952 990 781 692 180 340 1247 1227 1134 160 1067 1047 954 317 818 1350 1297 1289 501 1033 980 972 48 865 1077 766 577 817 1029 718 529 91 117 1152 1087 917 26 1061 996 826 197 408 1291 1224 1217 211 1094 1027 1020 50 940 1128 784 614 890 1078 734 564 106 132 1184 1140 1048 26 1078 1034 942 215 480 1300 1275 1266 265 1085 1060 1051 49 314 1015 700 541 265 966 651 492 92 94 1054 1014 876 2 962 922 784 189 247 1100 1128 1128 58 911 939 939 206 1163 1183 948 809 957 977 742 603 260 372 1296 1248 1192 112 1036 988 932 359 725 1369 1366 1319 366 1010 1007 960 57 1077 1118 1087 730 1020 1061 1030 673 92 932 1116 867 719 840 1024 775 627 169 1080 1144 1105 1048 911 975 936 879 56 346 906 782 642 290 850 726 586 102 410 660 1104 1323 308 558 1002 1221 229 235 232 232 237 6 3 3 8 58 1171 1152 1168 1177 1113 1094 1110 1119 94 968 1073 1180 1041 874 979 1086 947 132 1196 1185 1228 1233 1064 1053 1098 1101 93 1001 1080 1128 962 908 987 1035 869 152 1160 1186 1228 1193 1008 1034 1076 1041 Exemplos 223 - 236 - Composição De Estrobilurina Uma série de experimentos foi realizada para avaliar o desempenho comparativo das composições bioativas da presente invenção e de vários fungicidas comerciais baseados em estrobilurina. Duas formulações bioativas foram utilizadas. A primeira, M12, compreendia uma solução de ácido cítrica aquosa a 16% tendo dissolvido na mesma citrato de prata, citrato de cobre e citrato de zinco, cada um sendo adicionado em uma quantidade para fornecer 200 ppm de cada metal, juntamente com 0,25% de sarcosinato de lauroíla de sódio a 0,25% e sulfato de laurila de sódio a

0,32%, como observado acima. O segundo, M17, compreendia uma diluição 160:1 de uma solução de ácido fosfórico aquosa a 16% tendo dissolvido na mesma citrato de prata, citrato 15 de cobre e citrato de zinco, cada um sendo adicionado em uma quantidade para fornecer 2 00 ppm de cada metal na solução de ácido fosfórico. Cada fungicida foi avaliado em níveis diferentes. As formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas são apresentados nas 20 tabelas 13 e 13A.

Como visto nas Tabelas 13 e 13A, as composições bioativas da presente invenção forneceram inibição acentuada de crescimento de fermento, mesmo nas concentrações mais baixas, ~5 ppm de cada íon de metal. Por

2 5 outro lado, todas exceto duas das formulações fungicidas

baseadas em estrobilurina testadas falharam em demonstrar qualquer bioeficácia significativa contra fermento durante o período de tempo testado. As duas formulações que forneceram boa inibição estavam em cargas comparativamente

3 0 elevadas. Exemplos 237 - 250 - Sinergia De Estrobilurina A luz do desempenho ruim acima das estrobilurinas em geral, uma série de experimentos foi conduzida para avaliar a sinergia em potencial entre as composições bioativas da 5 presente invenção e os fungicidas à base de estrobilurina comerciais, acima. As composições empregadas eram iguais às utilizadas no conjunto anterior de exemplos. As formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas são apresentados nas Tabelas 14 e 14A.

Como visto nas Tabelas 14 e 14A, a combinação das

composições bioativas da presente invenção com os produtos de estrobilurina produziu uma sinergia pelo que mesmo os níveis mais baixos dos produtos de estrobilurina testados produziram uma inibição significativa em crescimento de 15 fermento, embora esses produtos pareçam aumentar o crescimento de fermento quando utilizados isoladamente, como mostrado nas tabelas, 13 e 13A.

TABELA 13

Turbidez(NTU)

Exemplo Fungicida volume TO Tl T18 T26 T50 Adicionado 223 Quadrisa 1 384 393 1066 1139 1134 224 2 767 772 1264 1311 1315 225 5 1332 1332 1364 1377 1376 226 Flintb 1 418 424 1115 1208 1234 227 2 718 708 1141 1299 1327 228 5 1210 1210 1270 1265 1245 229 Headlinec 1 232 225 961 1114 1137 230 2 387 391 1066 1134 1199 231 5 717 747 1178 1222 1241 232 MI2 0 . 5 128 129 154 177 174 233 MI2 1 414 384 366 366 352 234 MI7 0 . 5 249 244 248 248 242 235 MI7 1 311 302 283 283 277 236 Controle 67 68 793 871 904 a - fungicida Quadris da Syngenta Crop Protections, Inc. de 2 0 Greensboro, NC, EUA

b - fungicida Flint da Bayer CropScience LP de Research Triangle Park, NC, EUA

c - Headline da BASF Corporation de Research Triangle Park, NC, EUA

TABELA 13A

Exemplo Fungicida volume Mudança em Turbidez (delta NTU) Adicionado T18-T1 T26-T1 T50-T1 223 Quadrisa 1 673 746 741 224 2 492 539 543 225 5 32 45 44 226 Flintb 1 691 784 810 227 2 433 591 619 228 5 60 55 35 229 Headlinec 1 736 889 912 230 2 675 743 808 231 5 431 475 494 232 MI2 O . 5 25 48 45 233 MI2 1 -18 -18 -32 234 MI7 O . 5 4 4 -2 235 MI7 1 -19 -19 -25 236 Controle 725 803 836 a - fungicida Quadris da Syngenta Crop Protections, Inc. Greensboro, NC, EUA

b - fungicida Flint da Bayer CropScience LP de Research Triangle Park, NC, EUA c- Headline da BASF Corporation de Research Triangle Park, NC, EUA

TABELA 14

Turbidez (NTU)

Exemplo Bioativo Volume Fungicidaa Vol . TO Tl T18 T24 T96 Adicionado Adicionado 237 MI2 0 .25 Q 1 552 554 544 670 1315 238 MI2 0 .25 Q 2 896 894 868 891 1470 239 MI2 0 . 5 Q 1 588 578 564 564 608 240 MI2 0.25 F 1 578 599 568 568 1320 241 MI2 0.25 F 2 900 900 886 886 1330 242 MI2 0.25 H 1 436 433 454 454 1312 243 MI2 0 .25 H 2 611 637 667 632 1302 244 MI7 0 .25 Q 1 558 574 640 668 1273 245 MI7 0 .25 F 1 517 560 990 1197 1396 246 MI7 0.25 H 1 465 476 605 587 1290 247 Controle - 93 101 901 986 1075 248 MI2 0.5 499 440 390 390 373 249 MI2 0 .25 182 179 175 176 1122 250 MI2 0 . 5 262 260 260 275 275 a Q - fungicida Quadris da Syngenta Crop Protections, Inc. de Greensboro, NC, EUA

F - fungicida Flint da Bayer CropScience LP de Research

Triangle Park, NC, EUA

H - Headline da BASF Corporation de Research Triangle Park, NC, EUA TABELA 14A Metais Controle (delta NTU) Exemplo Bioativo Vol. Fungicidaa Vol Tl 8- T24-T1 T96-T1 Adicionado Adicionado Tl 237 MI2 0 . 25 Q 1 -10 116 761 238 MI2 0 . 25 Q 2 -26 -3 576 239 MI2 0 . 5 Q 1 -14 -14 30 240 MI2 0 . 25 F 1 -31 -31 721 241 MI2 0 .25 F 2 -14 -14 430 242 MI2 0 .25 H 1 21 21 879 243 MI2 0 .25 H 2 30 -5 665 244 MI7 0 .25 Q 1 66 94 699 245 MI7 0 .25 F 1 430 637 836 246 MI7 0 .25 H 1 129 111 814 247 Controle - 800 885 974 248 MI2 0 . 5 -50 -50 -67 249 MI2 0 .25 -4 -3 943 250 MI2 0 . 5 0 15 15 a Q - fungicida Quadris da Syngenta Crop Protections , Inc. de Greensboro, NC, EUA

F - fungicida Flint da Bayer CropScience LP de Research Triangle Park, NC, EUA

H - Headline da BASF Corporation de Research Triangle Park, NC, EUA

15

Exemplos 251 - 259 - Estudo De Zinco/Cobre Uma série de experimentos foi realizada para demonstrar a bioeficácia de sistemas de metal binário em comparação com o sistema ternário utilizado na maioria dos outros exemplos. Aqui uma solução de M12 foi comparada com uma composição similar contendo 3 00 ppm de cobre e 3 00 ppm de zinco (isto é, uma solução de ácido cítrico aquosa a 16% tendo dissolvido na mesma citrato de cobre e citrato de zinco, cada sendo adicionado em uma quantidade para fornecer 3 00 ppm de cada metal, juntamente com sarcosinato 5 de lauroíla de sódio a 0,25% e sulfato de laurila de sódio a 0,32%). As duas composições bioativas foram avaliadas em cargas diferentes para determinar sua bioeficácia. As formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas são apresentados nas Tabelas 15 e 15A.

Como visto nas Tabelas 15 e 15A, as composições

bioativas antimicrobianas, tanto binária (cobre zinco Cu/Zn) como de prata/cobre/zinco M12 demonstraram bioeficácia comparável na inibição do crescimento de fermento.

TABELA 15

Exemplo Composição(gm)

Cu/Zn MI2 TO Tl Tl 8 T24 T46 251 1 776 586 468 463 436 252 0.5 292 269 250 250 245 253 CN 147 162 772 1055 1075 O 254 0 .1 93 125 1076 1070 1036 255 Controle 66 127 1020 1012 1137 256 1 830 633 547 522 500 257 0 . 5 335 320 292 302 284 258 0.2 152 178 512 1064 1098 259 0 . 1 90 136 1083 1087 1067 Composição

Cu/Zn

(gm)

MI2

TABELA 15A T1-T0

T18-T0

T24-T0

T46-T0

251

252

253

254

255

256

257

258

259

1 0 . 5 0 . 2 0 . 1 Controle

1 0 . 5 0.2 0 .1

-190

-23

15

32

61

-197

-15

26

46

-118

-19

610

951

893

-86

-28

334

947

-5

0

283

-6

-8

-25

10

552

4

-27

-5

20

-34

125

-22

-18

34

-20 Exemplos 260 - 269 - Sinergia De Mancozeb Uma série adicional de experimentos foi realizada para determinar a bioeficácia, especialmente a sinergia, da 5 composição agriquímica bioativa contendo Mancozeb (um bisditiocarbamato de etileno) e a solução de ácido bioativa M12 (M12). As formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas são apresentados na Tabela

16 e 16A.

TABELA 16 cemplo Composição (gm) Mancozeb MI2 TO T2 T18 T24 T4 4 260 0.5 934 976 1220 1095 1091 261 0.4 780 859 1021 982 1052 262 0 . 3 624 717 1209 1067 1113 263 0 . 2 392 489 1035 933 1073 264 0 . 2 57 55 54 72 756 265 0 . 5 0 . 2 930 897 864 839 788 266 0.4 0 . 2 727 709 684 664 591 267 0 . 3 0 . 2 537 555 535 509 460 268 0 . 2 0 . 2 370 369 370 343 331 269 Controle 23 106 935 824 917 TABELA 16A cemplo Composição (gm) Mancozeb MI2 T2-T0 T18-T0 T24 - TO T44-T0 260 0 . 5 42 286 161 157 261 0.4 79 241 202 272 262 0 . 3 93 585 443 489 263 0 . 2 97 643 541 681 264 0 . 2 -2 -3 15 699 265 0 . 5 0.2 -33 -66 -91 -142 266 0.4 0 . 2 -18 Λ3 -63 -136 267 0 . 3 0 . 2 18 -2 -28 -77 268 0.2 0 . 2 -1 0 -27 -39 269 Controle 83 912 801 894 Como visto nas Tabelas 16 e 16A, o mancozeb por si só era ineficaz em todos os níveis testados. A solução de ácido bioativo por si só forneceu bioeficácia modesta, apesar do nível muito baixo de íons de metal antimicrobiano; entretanto, a bioeficácia apropriada pareceu ter sido perdida após 44 horas. Em contraste 5 acentuado, a combinação dos dois, em todos os níveis do mancozeb, demonstrou excelente bioeficácia, mesmo após 44 horas.

Exemplos 270 - 293 - Estudo De Tensoativo De Óxido De

Amina

Uma série de experimentos foi realizada para

demonstrar a bioeficácia de tensoativos de óxido de amina, especificamente, óxido de amina de dimetil laurila (LDAO), individualmente e em combinação com sarcosinato de lauroíla de sódio (NaLS) e/ou sulfato de laurila de sódio (SLS). 15 Nesse caso foi empregada uma solução de ácido de metal antimicrobiano, muito diluída: 0,08% de ácido cítrico e 1 ppm cada de prata, cobre e zinco. Os tensoativos foram empregados em níveis diferentes para determinar a concentração mais baixa na qual sinergia é realizada. As

2 0 formulações específicas testadas e os resultados obtidos com as mesmas são apresentados na Tabela 17.

Como visto na Tabela 17, mesmo em tal concentração baixa de ácido e metal, a adição somente de 0,0025% de tensoativo de óxido de amina dimetil de laurila mostrou 25 bioeficácia, com modesta bioeficácia no nível de 0,00125% com sarcosinato de lauroíla de sódio ou a combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio e/ou sulfato de laurila de sódio. Em 0,0025% de óxido de amina de dimetil laurila, bioeficácia acentuada foi verificada com adição de 30 sarcosinato de lauroíla de sódio e bioeficácia superior verificada com adição tanto de sarcosinato de lauroíla de sódio e sulfato de laurila de sódio. TABELA 17 Exemplo LDAO NaLS SLS AG.Cu.Zn (peso/peso)% (peso/peso)% (peso/peso)% 270 0.00025 271 0.00125 272 0.0025 273 0.00025 1 274 0.00125 1 275 0.0025 1 276 in 0.00025 0.00025 278 0.00125 0.00125 279 0.0025 0 . 0025 280 0.00025 0.00025 1 281 0.00125 0.00125 1 282 0.0025 0.0025 1 283 0.00025 284 0.00125 285 0.0025 286 1 287 288 0.00025 0.00025 0.00025 289 0.00125 0.00125 0.00125 290 0.0025 0.0025 0.0025 291 0.00025 0.00025 0.00025 1 292 0.00125 0.00125 0.00125 1 293 0.0025 0. 0025 0.0025 1 T zero Tl

132 219 141 211 161 196 142 209 144 208 156 208 144 239 144 217 136 169 136 136 150 216 165 186 174 184 149 248 142 202 147 207 153 242 165 270 178 272 167 242 224 212 171 252 260 258 264 257 T4 2 T66

1145 1133 1120 1039 862 814 1108 1138 1080 1076 963 969 1232 1216 1084 1042 860 784 562 543 1032 1021 872 852 181 295 1138 1165 1019 1018 1034 1007 1167 1178 1223 1207 1094 1006 800 686 605 550 1039 1010 862 872 242 242 T42-Tl T66- Tl

926 914 909 828 666 618 899 929 872 868 755 761 993 977 867 825 691 615 426 407 816 805 686 666 -3 111 890 917 817 816 827 800 925 936 953 937 822 734 558 444 393 338 787 758 604 614 -15 -15 78/87 Estudo antibacteriano - Exemplos 294-325 Uma serie de experimentos foi realizada para avaliar o desempenho dos componentes individuais das composições bioativas reivindicadas bem como várias combinações dos mesmos, incluindo, as próprias composições reivindicadas, na supressão do crescimento de várias bactérias. Escherichia coli (E. coli), Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) e Staphylococcus aureus (S. aureus) foram selecionados como organismos de teste visto que são genericamente aceitos na indústria como organismos indicadores para uma ampla variedade de bactérias. Duas metodologias de teste diferentes foram avaliadas, uma testando a eficácia em um meio de caldo de crescimento e a outra testando inibição em meio de crescimento revestido.

Exemplos 294-3 05

No primeiro conjunto de experimentos um meio de crescimento foi preparado por adicionar 10 gramas de meio nutriente (caldo de dextrose Difeo Sabouraud de 8D de Franklin Lakes, NJ, EUA) a 300 ml de água destilada. As 20 alíquotas de 20 ml do meio de crescimento foram dispensadas em frascos de vidro de borossilicato de 40 ml esterilizados com tampas revestidas de Teflon (VWR International no. De cat. 15900-004). Os frascos foram inoculados com as bactérias utilizando um circuito completo estéril e os 25 frascos então incubados a 37°C. Uma composição bioativa de acordo com a invenção foi então adicionada a certos frascos, a composição bioativa era (M12) como descrito acima, compreendendo uma solução de ácido cítrico aquosa a 16% tendo dissolvido na mesma citrato de prata, citrato de

3 0 cobre e citrato de zinco, cada adicionada em uma quantidade para fornecer 200 ppm de cada metal, juntamente com 0,25% de sarcosinato de lauroíla de sódio e 0,32% de sulfato de laurila de sódio. A turbidez de cada mistura foi então determinada e o frasco transferido para um incubado a 30°C.

Medições de turbidez foram realizadas como nos estudos de fermento acima mencionados. Cada frasco foi periodicamente removido do incubador e a mistura nos frascos avaliada em relação à turbidez. As formulações específicas testadas, a temporização para cada avaliação de turbidez, e os 10 resultados assim obtidos, foram como expostos na tabela 18.

Como com o estudo de fermento, a concentração dos metais se refere à quantidade aproximada de cada metal, cobre, prata e zinco. As concentrações não consideram o volume de M12 adicionado; desse modo, as concentrações apresentadas são com base em um volume total de 20 ml.

Como visto na Tabela 18, houve aumento em curto prazo em turbidez. Uma vez que não foi previsto que qualquer crescimento significativo teria se manifestado em tal período de tempo curto, acredita-se que o aumento inicial 2 0 em turbidez resultou de uma desnaturação de proteínas no caldo e/ou proteínas bacterianas. Independentemente, os resultados de prazo mais longo mostram excelente inibição bacteriana com as composições de acordo com a presente invenção.

TABELA 18

MI2 Metais Tempo (horas) Exemplo Bactéria (ml) ppm TO T 0.5 T 18 T 24 T 96 294 E.coli 0 0 15.3 16 119 136 264 295 0 . 5 5 131 135 . 3 165 162 162 296 1 10 445 454 481 480 480 297 2 20 1039 1080 1135 1140 1009 298 p. .aeruginosa 0 0 35.8 37.8 158 383 436 299 0 . 5 5 197 207 250 262 261 300 1 10 705 735 782 808 807 301 2 20 1011 1057 1121 1159 1146 302 S.aureus 0 0 46 45 148 184 406 303 0 . 5 5 215 163 173 183 184 304 1 10 643 494 326 309 276 305 2 20 1203 1032 595 525 281 Exemplo 306

Nesse experimento, seis lamínulas estéreis de 25 mm foram colocados em pratos Petri estéreis de 100x15 mm separados e dois de cada inoculados com 100 μΐ de um de três caldos TSB: cada caldo contendo um entre E. coli, P. aeruginosa e S. aureus que tinha sido permitido incubar por

4 8 - 54 horas. Para afixar o inóculo às lamínulas, os pratos Petri foram colocados em uma placa quente de baixa temperatura pro aproximadamente 5 minutos. Um de cada dos pratos Petri inoculados foi separado como controle positivo. 0 outro foi pulverizado com 4 pulverizações de uma diluição de 4:1 das composições bioativas M12. Após 2-3 minutos os lamínulas e conteúdo líquido de cada prato Petri foi assepticamente transferido para frascos separados contendo 20 ml de TSB e incubados a 37°C por 24 horas. Controles negativos foram preparados mediante colocação de lamínulas estéreis não inoculados no TSB de 2 0 ml e incubar também. Após 24 horas, não se observou qualquer crescimento 2 0 com os controles negativos; ou com aquelas lamínulas inoculadas, que tinham sido pulverizadas com a composição bioativa da presente invenção. Crescimento visual foi observado em dois dos controles positivos (isto é, aqueles frascos contendo as lamínulas inoculadas que não tinham sido pulverizados): o controle positivo para p. aeruginosa falhou em mostrar crescimento visual. Acredita-se que a falha do último em mostrar crescimento resultou de superaquecimento do inóculo durante a etapa de fixação.

Exemplo 3 07

Nesse experimento, duas placas de agar de soja Tripticase (TSA) foram inoculadas com 500 μΐ de um de três 5 caldos TSB para um total de 6 placas inoculadas: cada caldo continha um entre E. coli, P. aeruginosa e S. aureus que tinha sido permitido incubar por 48 - 54 horas. 0 inóculo foi uniformemente espalhado através da superfície da placa com um circuito completo estéril. Um disco de filtro de 10 papel com 15 mm de diâmetro que tinha sido mergulhado em uma diluição de 4:1 da composição bioativa M12 foi colocado no centro de um de cada conjunto de placas inoculadas e todas as placas foram colocadas em um incubador a 370C por

24 horas. Placas de controle não inoculadas foram também L5 colocadas no incubador.

Após 24 horas, crescimento visual foi observado. Nenhum crescimento bacteriano foi visto nas placas não inoculadas. O crescimento foi observado em todas as placas inoculadas; entretanto, naquelas placas onde o filtro de 20 papel tratado tinha sido colocado, nenhum crescimento foi visto em ou próximo ao filtro de papel. Cada disco de filtro de papel tratado manifestou uma zona de inibição clara de crescimento bacteriano.

Exemplo 3 08

2 5 Nesse experimento, duas placas de agar de soja

Tripticase (TSA) foram inoculadas com 500 μΐ de um de três caldos TSB para um total de 6 placas inoculadas: cada caldo continha um entre E. coli, P. aeruginosa e S. aureus que tinha sido permitido incubar por 48 - 54 horas. 0 inóculo foi uniformemente espalhado através da superfície da placa com ura circuito completo estéril. Uma de cada placa inoculada foi então pulverizada, aproximadamente 24 vezes, com a diluição 4:1 da composição bioativa M12. As placas inoculadas mais um conjunto de placas de controle não 5 inoculadas foram colocadas em um incubador a 370C por 24 horas.

Após 24 horas, o crescimento visual foi observado em placas inoculadas, porém não tratadas ao passo que nenhum crescimento bacteriano foi visto nas placas não inoculadas ou naquelas placas inoculadas que tinham sido pulverizadas com a composição bioativa diluída.

Exemplo 3 09 - Estudo Mic Bacteriano

Um estudo foi realizado para determinar concentração inibidora mínima (MIC) da solução de ácido M12, isto é, 200 ppm de cada entre prata, cobre e metal de zinco (vide os exemplos 72-79). Três bactérias diferentes foram avaliadas, Clavibacter michiganese, Pseudomonas syringae e Erwinia amylovora, cada em um meio de crescimento diferente apropriado para aquela bactéria, a saber, caldo/agar de infusão de cérebro, caldo/agar de nutriente, e caldo/agar de glicose nutriente, respectivamente. Ao realizar o teste, três conjuntos de 10 tubos de teste foram preparados, um conjunto para cada bactéria, e rotulados 1 a 10. 0,5 ml do caldo apropriado foram colocados em cada um dos tubos de teste 2 até 10. Então 0,5 ml da solução M12 foram adicionadas a cada um dos tubos de teste 1 e 2. 0,5 ml do conteúdo do tubo de teste 2 foram então transferidos para o tubo de teste 3 e então 0,5 ml do tubo de teste 3 para o tubo de teste 4 e assim por diante até o tubo de teste 9. 0,5 ml do tubo de teste 9 foram descartados. Uma suspensão de 0,5 ml de cada bactéria a ser testada foi então adicionada a cada um dos dez tubos para aquela série e os tubos incubados por 24 horas a 2 6 °C. Como a solução de ácido causou opacidade considerável dos tubos aos quais foi 5 adicionada, a avaliação macroscópica não foi possível. Em vez disso, cada tubo foi subcultivado em placas agar correspondentes. O crescimento observado foi como indicado na Tabela 19 (um "+" indica crescimento visual e um sem

crescimento)

10

TABELA 19

Tubo de Teste 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Metais 200 50 25 12 . 5 6.75 3 . 125 1.56 0 .782 0 . 391 0 .195 concentração* (ppm) C. michiganese - - - - - - + + + + P. syringae - - - - - + + + + + E. amylovora - - - - - - + + + + * - concentração de cada metal, o teor total de metal é 3 vezes o número apresentado

Com base nos resultados apresentados na Tabela 19, o MIC de M12 é 3,125 ppm para C. michiganese e para E. 15 amylovora e 6,7 5 ppm para P. syringae. A bioeficácia de tais níveis baixos é prevista para mostrar sinergia quando combinado com bactericidas/fungicidas convencionais para esses organismos alvos.

Exemplo 326 - Estudo De Mycobacterium Três séries de estudos bacterianos foram realizadas

para ?avaliar e comparar o desempenho das soluções desinfetantes da presente invenção com desinfetantes comerciais no extermínio de Mycobacterium terrae (M. terrae ATCC 15755). M. terrae foi escolhido, pois é um substituto genericamente aceito, ou um indicador para Mycobacterium tuberculosis, uma micobactéria que é visada hã séculos, ainda assim persiste, em parte, devido ao aparecimento de

I

cepas resistentes a droga na década de 80, e mais recentemente, o aparecimento de cepas resistentes a múltiplas drogas. Desse modo, qualquer agente antibacteriano que seria eficaz contra M. tuberculosis ou 10 sua bactéria relacionada especialmente sem ou com a diminuição de desenvolvimento de resistência, seria de tremendo benefício e valor.

Os materiais desinfetantes testados foram a solução M12 de acordo com a presente invenção, SilverClene 24 da 15 Agion Technologies de Wakefield, MA, EUA, e Calvicide, um desinfetante bem conhecido e amplamente disponível. A metodologia de teste era uma versão levemente modificada dos métodos empregados em Taylor e outros, US 6.616.922 e US 6.107.261, ambos são incorporados aqui na íntegra a 20 título de referência. Uma suspensão de teste de IO8 CFU/ml de M. terrae foi preparada por suspender M. terrae em Tampão de Butterfield com 0,5% de Tween 80 e girando bem. Amostras de teste de 100 ml de amostras diluídas (1:1 peso/água deionizada) e não diluídas de cada desinfetante

2 5 foram inoculadas com 1,0 ml da suspensão de teste. Uma amostra de teste de controle de água deionizada de 10 0 ml foi também inoculada. Uma alíquota de 1,0 ml de cada amostra de teste foi tirada após certos períodos de tempo especificados, como apresentado nas Tabelas 20-22, diluída 30 1:1000 em água deionizada e então submetida a uma diluição em série e todas as diluições revestidas em agar Middlebrook 7H10 com enriquecimento OADC e incubadas a 3 70C com ~10 % de CO2 por 14-28 dias e avaliadas para crescimento.

Os resultados de cada série de teste são mostrados nas tabelas 20-22: Tabelas 20 e 21 apresentando os resultados para os desinfetantes diluídos e a Tabela 23 para os desinfetantes não diluídos. Como visto, as soluções da presente invenção provaram ser um excelente bactericida para M. terrae com aperfeiçoamento genericamente acentuado em extermínio e taxa de extermínio em comparação com produtos comerciais convencionais no estado tanto diluído como não diluído. Realmente, resultados excelentes foram mostrados com somente 3 0 segundos de exposição, com bons resultados em apenas 10 segundos de exposição, ao passo que os produtos comerciais exigiam 5 minutos ou mais de exposição para mostrar taxas de extermínio de dois logaritmos.

TABELA 2 0

Tempo de Controle Calvicide CFU/ml % de CFU/ml % de CFU/ml % de redução redução redução 120 1.21E5 - 8 . 8E4 27.27 4 . 1E5 n/r 300 1.33E5 n/r 7 . 1E4 46 . 62 3 . 2E4 75 . 94 600 1.31E5 n/r 6 . 4E4 51. 15 4 . 2E3 96 . 79 900 1.36E5 n/r 4 . 9E4 63 . 97 2 . 3E3 99. 83 1200 1.44E5 n/r 5 . 3E4 36.81 7 . 0E2 99. 51 1500 1.46E5 n/r 2 . 9E4 80 . 14 1 . 3E3 99 . 11 1800 1.55E5 n/r 2 . 9E4 81 .29 4 . 0E2 99. 74 TABELA 21

Tempo de Controle SilverClene 24 CFU/ml % de CFU/ml % de CFU/ml % de redução redução redução 10 3 . 5E4 - 1.6E4 54 .29 5 . 0E2 98 . 57 30 4.3 E4 n/r 1.15E4 73 .26 2 . 9E2 99.53 60 3 . 6E4 n/r 6 . 7E3 81.39 1 . 0E2 99 . 72 180 3 . 0E4 14 . 29 6 . 5E3 78 . 33 1. 0E2 99.67 300 3 . 4E4 2 .86 6 . 1E3 82 . 06 3 . 0E2 99.12 600 3 8E4 n/r 5 9E3 84 47 1 2E3 96 . 84 1800 3 3E4 5 . 71 2 2E3 93 33 1 0E2 99 . 7 TABELA 2 2

Tempo de Controle Calvicide CFU/ml % de CFU/ml % de CFU/ml % de redução redução redução 10 3 . 5E4 - 2 . 0E4 42 . 86 3 . 1E3 91.14 30 3 . 0E4 14 . 29 7 . 7E3 74 .33 2 . 0E2 99 .33 60 2 . 9E4 17 . 14 6 . 9E3 76.21 1. 0E2 99 . 67 180 3 . 1E4 11. 43 4 . 0E2 98 . 71 1.0E2 99. 68 300 * 3 . 2E4 8 . 57 <100 99 . 69 <100 99 . 69 600 3 . 4E4 2 .86 <100 99.71 <100 99. 71 1800 3 . 0E4 14 .29 <100 99. 97 <100 99. 97 Embora a presente invenção tenha sido descrita com relação a modalidades específicas e exemplos acima, deve 5 ser reconhecido que outras modalidades que utilizam o conceito da presente invenção são possíveis sem se afastar do escopo da invenção. A presente invenção é definida pelos elementos reivindicados e todas e quaisquer modificações, variações ou equivalentes que estejam compreendidos no 10 espírito e escopo dos princípios subjacentes.

Claims (24)

1. Solução desinfetante caracterizada pelo fato de compreender a) uma solução de ácido tendo um pH menor do que 6 cuja concentração de ácido é de aproximadamente 0,01% 5 a aproximadamente 10%; e b) pelo menos uma fonte de Ion de metal antimicrobiano parcialmente ou totalmente dissolvido na solução de ácido, em que o ácido está presente em um excesso molar em relação aos Ions de metal antimicrobiano, os íons de metal antimicrobiano são selecionados de uma combinação de íons de prata e cobre, uma combinação de íons de prata e zinco, uma combinação de íons de cobre e zinco e uma combinação de íons de prata, cobre e zinco e o nível total dos íons de metal antimicrobiano na solução é de aproximadamente 2 0 ppm a aproximadamente 10 0 0 ppm. i ,

2. Solução desinfetante, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de compreender ainda c) um sistema tensoativo contendo A) pelo menos um tensoativo umectante conhecido por aumentar o umedecimento ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas, B) pelo menos um tensoativo de impacto aniônico, não iônico e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos ou (C) uma combinação de pelo menos um do tensoativo umectante (A) e pelo menos um tensoativo de impacto (B).

3 . Solução desinfetante caracterizada pelo fato de compreender a) uma solução de ácido tendo um pH menor do que 6 cuja concentração de ácido é de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10%; b) pelo menos uma fonte de íon de metal antimicrobiano total ou parcialmente dissolvida na solução de ácido, e c) um sistema tensoativo contendo A) pelo menos um tensoativo umectante conhecido por aumentar o umedecimento ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas, B) pelo menos um tensoativo de impacto aniônico, não iônico e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos ou (C) uma combinação de pelo menos um entre tensoativo umectante (A) e pelo menos um tensoativo de impacto (B) , em que o ácido está presente em um excesso molar relativo aos íons de metal antimicrobiano e o nível total dos íons de metal antimicrobiano na solução é de aproximadamente 2 0 ppm a aproximadamente 10 0 0 ppm.

4. Composição, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que os íons de metal antimicrobiano são selecionados do grupo que consiste em íons de prata, íons de cobre, íons de zinco, uma combinação de íons de prata e cobre, uma combinação de íons de prata e zinco, uma combinação de íons de cobre e zinco e uma combinação de íons de prata, cobre e zinco.

5. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3 ou 4, caracterizada pelo fato de que a concentração de íons de metal antimicrobiano é de aproximadamente 2 5 a aproximadamente 500 ppm.

6. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3 ou 4, caracterizada pelo fato de que a concentração dos íons de metal antimicrobiano é de aproximadamente 5 0 a aproximadamente 300 ppm.

7. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizada pelo fato de que o pH é de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 5.

8. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, caracterizada pelo fato de que o pH é de aproximadamente 2 a aproximadamente

9. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, caracterizada pelo fato de que o excesso molar de ácido em relação a íons de metal antimicrobiano é pelo menos 2 vezes o excesso molar.

10. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, caracterizada pelo fato de que o excesso molar de ácido em relação a íons de metal antimicrobiano é pelo menos 5 vezes o excesso molar.

11. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10, caracterizada pelo fato de que a concentração do ácido é de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 4 por cento em peso.

12. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é sarcosinato de lauroíla de sódio, sulfato de laurila de sódio, óxido de amina dimetil laurila, uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio e sulfato de laurila de sódio, uma combinação de sulfato de laurila de sódio e óxido de amina dimetil laurila, uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio e óxido de amina dimetil laurila, ou uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio, sulfato de laurila de sódio e óxido de amina dimetil laurila.

13. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12, caracterizada pelo fato de que o tensoativo atua tanto como tensoativo de impacto como tensoativo umectante.

14. Método de desinfetar substratos, o referido método caracterizado pelo fato de compreender as etapas de: i) aplicar na superfície um desinfetante compreendendo a) uma solução ácida tendo um pH menor do que 6 cuja concentração de ácido é de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 10%; b) pelo menos uma fonte de íon de metal antimicrobiano 10 parcialmente ou totalmente dissolvido na solução de ácido, e c) um sistema tensoativo contendo A) pelo menos um tensoativo umectante conhecido para aumentar o umedecimento ou banho de superfícies de substrato com soluções aquosas, B) pelo menos um tensoativo de impacto aniônico, não iônico 15 e/ou anfotérico que impacta ou interage com membranas de parede de célula de microorganismos ou (C) uma combinação de pelo menos um do tensoativo umectante (A) e pelo menos um tensoativo de impacto (B) , em que o ácido está presente em um excesso molar relativo a íons de metal antimicrobiano e o nível total dos íons de metal antimicrobiano na solução é de aproximadamente 20 ppm a aproximadamente 10 0 0 ppm, e ii) permitir que o solvente da solução evapore de modo a deixar uma presença antimicrobiana no substrato ou, após um curto período de tempo, limpar a solução em excesso da superfície.

15. Composição, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que os íons de metal antimicrobiano são selecionados do grupo que consiste em íons de prata, íons de cobre, íons de zinco, uma combinação de íons de prata e cobre, uma combinação de íons de prata e zinco, uma combinação de íons de cobre e zinco e uma combinação de íons de prata, cobre e zinco.

16. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 ou 15, caracterizada pelo fato de que a concentração de íons de metal antimicrobiano é de aproximadamente 25 a aproximadamente 500 ppm.

17. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 ou 15, caracterizada pelo fato de que a concentração dos íons de metal antimicrobiano é de aproximadamente 50 a aproximadamente 300 ppm.

18. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16 ou 17, caracterizada pelo fato de que o pH é de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 5.

19. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16 ou 17, caracterizada pelo fato de que o pH é de aproximadamente 2 a aproximadamente 4.

20. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16, 17, 18 ou 19, caracterizada pelo fato de que o excesso molar de ácido em relação a íons de metal antimicrobiano é pelo menos 2 vezes o excesso molar.

21. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16, 17, 18 ou 19, caracterizada pelo fato de que o excesso molar de ácido em relação a íons de metal antimicrobiano é pelo menos 5 vezes o excesso molar.

22. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ou 21, caracterizada pelo fato de que a concentração do ácido é de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 4 por cento em peso.

23. Solução desinfetante, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 ou 22, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é sarcosinato de lauroíla de sódio, sulfato de laurila de sódio, óxido de amina dimetil laurila, uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio e sulfato de laurila de sódio, uma combinação de sulfato de laurila de sódio e óxido de amina dimetil laurila, uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio e óxido de amina dimetil laurila, ou uma combinação de sarcosinato de lauroíla de sódio, sulfato de laurila de sódio e óxido de amina dimetil laurila.

24. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 ou 23, caracterizado pelo fato de que o microorganismo alvejado do desinfetante é M. tuberculosis.