CA1197247A

CA1197247A - Procede pour la preparation de nouveaux derives d'imidazotetrazinones et les derives ainsi obtenus

Info

Publication number: CA1197247A
Application number: CA000409950A
Authority: CA
Inventors: Edward Lunt; Kenneth R.H. Wooldridge; Malcolm F.G. Stevens; Robert Stone
Original assignee: May and Baker Ltd
Current assignee: May and Baker Ltd
Priority date: 1981-08-24
Filing date: 1982-08-23
Publication date: 1985-11-26
Also published as: FI73434C; NL192739C; LT2436B; SE448543B; FI822921A0; IL66606A0; LV5621A3; CH655114A5; UA5971A1; FI73434B; FR2511679A1; NL990010I1; KR890000094B1; DE3231255A1; SU1447284A3; IE53408B1; IT1152505B; DK161147C; AU571430B2; IT8222938A0

Abstract

L'invention concerne un procédé pour la préparation de nouveaux dérivés de la ¢3H!-imidazo ¢5,1-d! tétrazine -1,2,3,5 one-4 de formule générale (I): < IMG > dans laquelle R1 est alcoyle, ou alcényle (maximum 6C), non substitué ou substitué par 1 à 3 atomes d'halogène ou radicaux alcoxy (maximum 4C) et phényle éventuellement substitué, ou bien R1 est cycloalcoyle (3 à 8 C) et R2 est carbamoyle éventuellement substitué par 1 ou 2 radicaux choisis parmi alcoyle et alcényle (maximum 4C). L'invention concerne également les nouveaux dérivés obtenus, lesdits dérivés étant utiles comme agent anti-cancéreux et immunorégulateurs.

Description

2~

La présente invention concerne de nouvelles _3H7 imidazo /5,1-d7 tétrazine-1,2,3,5 one 4, leur préparation et les médicaments qui les contiennent.
Les composes selon l'invention répondent a la formule générale (I):

I (I) N W Rl ll o dans laquelle Rl représente un radical alcoyle ou alcényle, contenant au ~;m1l~ 6 atomes de carbone en chalne droite ou ramifiée, non substitué ou portant 1 ~ 3 substituants choisis parmi les atomes d'halog~ne, c'est-a-dire brome, iode ou de préférence chlore ou fluor, les radicaux alcoxy contenant au maximum 4 atomes de carbone en cha~ne droite ou ramifiée et les radicaux phényle éventuellement substitués par un radical choisi dans le groupe comprenant les radicaux alcoyloxy ayant de 1 à 4 atomes de carbone, les radicaux alcoyle ayant de 1 a 4 atomes de carbone et le radical nitro, ou R represente un radical cycloalcoyle contenant 3 à 8 atomes de carbone, par exemple cyclohexvle, et R représente un radical carbamoyle qui peut porter sur l'atome d'azote un ou deux radicaux choisis parmi les radicaux alcoyles et alcenyles contenant au maximum 4 atomes de carbone en cha.~ne droite ou ram:ifiee, par exemple méthylcarbamoyle ou diméthyl-carbamoyle.
Lorsque Rl représente un radical alcoyl.e ou alcényle substitue par 2 ou 3 atomes d'halogene, ces atomes peuvent être identiques ou différents.
Lorsque le symbol.e Rl represente un radical alcoyle ou alcényle substitué par un, deux ou trois groupes phény~e~

, ~ J

~ 7Z'~7 eventuellement substituesl le symbole Rl peut representer par un exemple un groupe benzyle ou p.methoxybenzyle. Le groupe cycloalcoyle entrant dans la définition du symboles Rl contient de preférence 6 atomes de carbone.
Les dérivés de la tetrazine de formule generale I
preferés sont ceux pour lesquels le symbole Rl represente un radical alcoyle de 1 à ~ atomes de carbone en chalne droite ou ramifiée eventuellement substituee par un ou deux atomes d'halogène ~de preference chlore, fluor ou brome) ou par un radical alcoxy contenant 1 a 4 atomes de carbone (de préférence méthoxy) ou par un radical phenyle (eventuellement substitué par un ou deux radicaux alcoxy contenant 1 a 4 atomes de carbone, de preference méthoxy) ou le symbole Rl represente un radical alcenyle contenant 2 à 6 atomes de carbone (de preference allyle) ou un radical cyclohexyle.
De preference R represe~te un radical alcoyle conte-nant 1 a 6 atomes de carbone en chalne droite ou ramifiée, et plus specialement 1 à 3 atomes de carbone, non substitue ou substitue par un atome d'halogane, de préférence chlore ou fluor. Plus specialement R represente un radical methyle ou halo-2 alcoyle, par exemple fluoro-2 éthyle ou de prefe-rence chloro-2 ethyle.
De preference le symbole R represente un radical carbamoyle, monoalcoy]carbamoyle ou monoalcenylcarbamoyle, par exemple methylcarbamoyle.
Selon l'invention, CQS produits de formule (I) dans laquelle ~1 et R2 sont deEinis comme ci-avant, sont prépares par action d'un produit de formule génerale (II):

N~ ~ N (II) R2 N~

r~

(dans laquelle R2 a la déEinition correspondante) sur un isocyanate de formule générale:
R NCO (III) dans laquelle R représentè un radical alcoyle, ou alcényle portant éventuellement 1 à 3 su~stituants choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux alcoxy et les radicaux phenyle é~entuellement substitués , comme définis ci-avant pour R .
La réaction peut s'effectuer en l'absence ou en présence d'un solvant organique anhydre, par exemple un haloalcane Itel que le dichlorométhane), l'acétate d'ethyle, l'acétonitrile, la N-méthylpyrrolidone ou de préférence l'hexaméthylphosphorotriamide, à une température de 0 à 70C, par exemple a la tempt?rature amhiante (environ 20C). La reaction peut se poursuivre pendant une periode pouvant aller jusqu'à 30 jours. De préférence le mélange réaction-nel doit être protégé de la lumière.
Les composés de formule générale (II) peuvent etre preparés par application ou adaptation de méthodes connues en soi, par exemple les méthodes décrites par S~IEALY Y.F., STRUCK R.F., HOLUM L.B. et MONTGOMERY J.A., J. Org. Chem.
(1961), 26~ 2396.
Les composés de formule (III), peuvent etre prépa-rés par des méthodes connues ou par analogie avec de telles méthodes. Par " méthodes connuesen soi" on entend toute met~ode dejs ut.~llsee OU de~ri~
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. :?

- ~ -Les nouveaux composés de formule générale (I) possèdent une acti~ité anticancéreuse intéressante, par exemple contre carcino-mes, mélanomes, sarcomes, lymphomes et leucémies. Ils se sont montrés particulierement actifs chez la souris, à des doses journalières de 0,5 à ~6 mg/kg i.p., contre le lymphome TLX5 (S) selon la méthode de GESC}IER et al., Biochem. Pharmacol. (1981), 30, 89, et ADJ/PC
6A et ~ 5076 (réticulo sarcome). Contre les leucé~ies L ~2~0 greffée par voie intrapéritonéale, intracérébrale et intraveineuse, et P 388, selon la méthode décrite dans "Methods of Development of New Anticancer Drugs" (NCI Monograph 45, mars 1977, pages 147-149, National Cancer Institute, Bethesda, Etats-Unis) les produits ont été trouvés actifs à de; doses comprises entre 2,5 et 10 mg/kg i.p~ et p.o. Avec une même posologie on a obtenu l'inhibition de la t~meur primaire et des métastases du carcinome pulmonaire de Lewis. Oontre le mélanome B 16 et la tumeur C 38 de la souris (NCI ~lonograph 45 précité) les produits ont été trouvés actifs à
des doses comprises entre 6,25 et 25 mg/kg i.p.
Les produits selon l'invention po~sèdent également une activité immunomodulatrice interessante et de ce *ait ils sont utiles à l'occasion de gre~fes d'organes ou de peau et pour le traitement de désordres immunologiques.
Parmi les produits de ~ormule (I) on peut citer :
A - carbamoyl-8 méthyl-3 ~3}1~-imidazo ~5~1-dJ tétrazine-1,2~3,5 one -4;
25 B - carbamoyl-8 n-propyl-3 ~3}1~-imidazo ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 ;
C ~ carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 ~3}lJ-imidazo ~5,1-d~ tétrazine-~,2,3,5 one-4 ;
D - (chloro-2 éthyl)-3 méthylcarbamoyl-8 ~H~-imidazo fi,1-d~
tétrazine-1,2,3,5 one-l~ ;
E - carbamoyl-8 (chloro-3 propyl)-3 ~3}~-imidazo ~5,1-d~ tetrazine-1,2,3,5 one-4 ;

7;~

F - carbamoyl-8 (dichloro-2,3 propyl)-3 ~3H~-imidazo ~5,1-d~
tetrazine-1,2,3,5 one-4 ;
G - allyl-3 carbamoyl-8 ~3}1J-imidazo ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 ;
H - (chloro-2 éthyl)-3 diméthylcarbamoyl-8 ~3H~-imidazo ~5,1-d~
tetrazine-1,2,3,5 one-4 ;
I - (bromo-2 éthyl)-3 carbamoyl-8 ~3H~-imidazo ~5,1-d~ tétrazine 1,2,3,5 one-4 ;
J - benzyl-3 carbamoyl-8 ~3H~~imidazo ~5,1_d~ tétrazine-1,2,3,5 ~ ~ne-4 ;
K - carbamoyl-8 (méthoxy-2 éthyl)-3 ~3H~-imidazo ~5,1-d~ tetrazine-1,2,3,5 one-4 ;
L - carbamoyl 8 cyclohexyl-3 ~3}1J-imidazo ~5,1-dJ tétrazine-1,?,3,5 one-4 ;
M - carbamoyl-8 (p. méthoxybenzyl)-3 ~3H~ imidazo ~5,1-dJ tétrazine-1,2,3,5 one-4.
- N-allylcarbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 [3H] imidazo [5,1-d]
tétrazine~1,2,3,5 one-4 Les produits A, D et plus spécîalement C sont de parti-culiere importance.
Les lettres A à ~ attribuees aux produits permettront de s'y référer plus aisément dans la suite de la description.
Lss exemples ci-après illustrent la prépar~tion de produits de formule générale (I) selon l'invention, et les exemples de référence illustrent la préparation des intermédiaires.

PRODUIT A
On met en suspension 500 m~ de diazo-l~5~-imidazole carboxamide 5 ~ dans 3,0 cm3 d`isocyanate de méthyle et on agite à l'obscurité à température ambiante pendant 21 jours. Le mélange réactionnel est alors dilué avec de l'éther dié-thylique anhydre et filtré. Le résidu est alors lavé rapidement avec du méthanol anhydre puis de l'éther éthylique et séché à l'air, à l'obscurité, à température ambiante. On obtient 198 mg de carbamoyl-8 méthyl-3 ~3H~-imidazo ~5,1-d~ tétrazine-~,2,3,5 one-~ sous forme d'un solide microcrista-llin brun clair.~F ~ Z10C ~avec effervescence et brunis-sement de 160 à 210~C).

~7'~7' Analyse élémentaire :C % H %N %
Calculé (pour C6H6N602) 37,1 3,09 l~3,3 Trouvé 36,8 3,10 44,2 PRODUXT B
On met en suspension 300 mg de diazo-4 ~5~-imidazole carboxamide-5 ~ dans 10 cm3 de dichlorométhane anhydre et on ajoute un Pxcès d'isocyanate de n. propyle. On agite le mélange réactionnel à l'obscurité à température ambiante pendant 30 jours.
On filtre alors le mélange, on lave rapidement le résidu avec de l'éther éthylique anhydre et on sèche à l'air à l'obscurité à
température ambiante. On obtient 102 mg de carbamoyl-8 n~propyl-3 ~3H~-imidazo ~5,1-d~ tétrazine~1~2,3~5 one-~ sous forme de poudre rose pale, E = 167C (effervescence).

15 Analyse élémentaire :C % H %N %
Calculé (pour C8H1oN602) 43,24,53 37,8 Trouvé 43-4 4~5738,0 PRODUIT C
On met en suspension 300 mg de diazo-4f5J-imidaæole carboxamide-5~ dans 10 cm3 de dichlorométhane ar~.tydre et on a~oute 1,0 cm3 d'isocyanate de chloro-2 éthyle. On agite le mélange dans l'obscurité à température ambiante pendant 30 Jours. On filtre la suspensior de couleur crème ninsi obtenue, on lave le résidu rapidement avec de l'éther éthylique anhydre et on sèche à l'air à l'obscurité..On obtient 483 mg de carbamoyle-8 (chloro-2 éthyl)~3 ~ 3H~-imida20 ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous forme de poudre de co~lleur crème, ~ = 158C (avec décomposition vive).

2~

~ 7._ Analyse élémentaire C ~ H % N
Calculé (pour C7H7ClN62) 34'7 2,91 34,7 Trouvé 3~7 3,01 34,9 La répétition de cette opération a également donné le produit C sous une autre forme polymorphe, E = 16~-165DC (déc.).

PRODUIT A
On traite en suspension de 1,37 g de diazo-4~5~-imida-~ole carboxamide-5 ~ dans 20 cm3 d'acétate d'éthyle par 7,0 g ~0 d'isocyanate de méthyle et on agite en vase clos à l'obscurité
.pendant 3 semaines à température ambiante. Le solide obtenu est séparé ~ur filtre et lavé à l'éther. On obtient 1,9 g de carbamoyl-8 méthyl-3 f3HJ-imidazo ~5,1-d~ tétrazine-~,2,3,5 one-4 sous forme d'un solide de couleur crème, F = 212C (effervescence).
~5 On a recristallisé ce produit dans 3 systèmes solvants différents, et obtenu trois produits distincts, différant légèrement par leurs spectres IR. Ces trois produits sont vraisemblablement tous polymorphes du produit A :
(i) à partir du mélange acétone/eau 3/1 (vol) on obtient des aiguilles incolores,~ ma~ 3410, 3205, 1758, 1730 et 1678 cm , ~ = 212C
(effervescence).
~ii) à partir du mélange acétone/eau 1/3 (vol) on obtient des micro-cristaux blnncs,~ max 3430, 3200, 1740 et 1675 CM , ~ = 210C
(effervescenc~).
(iii) à partir d'eau chaude on obtient un solide granulaire,~ max 3450~ 3380, 3200, 1742, 1688 et 1640 cm , F = 215C (effervescence) (noircissant a p~rtir de 200C).

PRODUIT B
On traite une suspension de 1~37 9 de diazo-~5~-imida-zole carboxamide-5 ~J dans 20 cm3 d'acétonitrile par 6,5 g d'isocya-nate de n. propyle et on agite en vase clos à l'obscurité pendant

3 semaines à température ambiante.

~r~
'~,~

~L~97~

Le solide rose obtenu est separé sur filtre, lavé à 1réther et recristallisé dans un mélange eau/acétone ~/4 (vol). On obtient 1,6 9 de carbamo~ 8 n. propyl-3 ~3H~-imidazo ~5,1_d~ tétrazine-1, 2,3,5 one-4, E = 170-172C (effervescence).
Par concentration de la liqueur même de recristallisation, on récupère encore 0,2 9 du rnême produit.

PRODUIT C
On traite une suspension de 1,0 9 de diP~o-4~5~-imida-zole carboxamide-5 ~ ~ dans 30 cm3 d'acétate d'éthyle par 3,3 cm3 d'isocyanate de chloro-2 éthyle, et on agite à l'obscurite pendant 6 jours a température ambiante. On dilue avec de l'éther et isole le solide par filtration. On obtient 1,6 g de carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 ~3H~-imidazole ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous forme d'un solide incolore, E = 164-165 (déc.) Analyse élémentaire C % H % N ~ Cl %
Calculé pour C7H7ClN62 34~65 2,91 34,65 14,61 Trouvé 34-5 2,88 34,5 ~4,6 P~ODUIT C
On traite une suspension de 5~0 g de diazo-4~5J imidazole carbo~amide-5~4J dans un mélange de 158 cm3 de dichlorométhene et 8,3 cm3 de N-méthylpyrrolidone par q6,7 cm3 d'isocyanate de chloro-2 éthyle~ et on a~ite le mélange a l'obscurité pendant 14 jours à
température ambiante. On dilue alors avec de l~éther anhydre, on isole le solide par filtration et lave avec de l'éther. On obtient 6,3 g de carb~moyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 f3~-imida~o ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3~5 one-4 sous forme d'un solidc de teinte violette, F = 164-165C
(déc.) 30 Analyse élémentaire C % H % N ~ Cl ~
Calculé pour C7H7ClN602 34~65 2,91 34,65 ~4,61 Trouvé 34,7 2,95 34,5 14,4 `:
., ~g7247 PRODUIT C
On traite une suspension de lk5 9 de diazo-4~5J-imida-~ole carboxamide-5~4J dans 2175 cm3 d'acétate d'éthyle par 478,5 cm3 d'isocyanate de chloro-2 éthyle et on agite à 30C à l'abri dP la lumière pendant 2 jours. On filtre et obtient 250 9 de carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl~-3 ~3HJ-imidazo ~5,~-d~ tétraæine-i,2,3,5 one-4 sous forme d'un solide de couleur p~che, F = 166C.

PRODUIT A
On traite une suspension agitée de 2,2 g de diazo-4~5 imidazole carboxamide-5 ~J dans un mélange de 70 cm3 de dichloro-méthane et 3,5 cm3 de N-méthylpyrrolidone par 7,0 cm3 d'isocyanate de méthyle et on agite pendant 4 semaines à température ambiante.
On dilue avec de l'éther éthylique et sépare le solide sur filtre.
On obtient 2,38 g de carbamoyl-8 méthyl-3 ~3 ~ -imidazo ~5,l-d~
tétrazine--~,2,3,5 one-4 sous ~orme d'un solide violet pâle, F = 202-203C (déc.).
Analyse élémentaire C % H % N %
Calculé pour C6H6N602 37~1~ 31~4 43-3 Trouvé 36,8 2,94 43,l On obtie~t une forme polymorphe de la carbamoyl-8 méthyl-3 ~3H~-imida~ ~5,1-d~ tétrazine-~,2,3,5 one-4 par dissolution dans l'acétonitrile, filtration, concentration à sec et trituration du résidu dans l'~ther. Le produit se présente sous ~orme d'un solide de teinte orangée, F voisin de 200C (déc.).
Analyse él~msntaire : C = 37,4 ~ H = 3,26 % N = 43,5 %
Son spectre de RMN (DMSO-D6) est identique à celui du produit violet p~le, mais son spectre IR (comprimé KBr) montre quelques différences.

2~7 PRODUIT D
On refroidit à 5-10C une solution agitée de o,64 g de nitrite de sodium dans 4,6 cm3 d'eau et on ajoute goutte à goutte à cette température, en 5 minutes, une solution de 1,00 9 d'amino-5 méthylcarbamoyl-4 ;mi~z~l~ dans 14,3 cm3 de solution aqueuse d'acide acétique lM. On agite encore à 5-10C pendant 5 minutes. On extrait la solution rouge foncé avec 4 fois 35 cm3 d'acétate d'éth~le et on sèche les extraits réunis sur sulfate de magnés;um. La solution contient du diazo-4~5~ méthylcarbamoyl-5~J-imidazole brut, qui est instable et s'utilise immédiatement dans l'étape sui~ante sans autre purification.
On traite cette solution par 4,3 cm3 d'isocyanate de chloro-Z éthyle et on laisse à l'obscurité pendant 1 jour. On évapore le solvant sous pression réduite tlO mm Hg ; 1,33 KPa) à
400C et triture le résidu avec de l'éther de pétrole (~b 40-600C).
On obtient 4,23 9 d'une gomme orangée. On traite cette gomme avec 50 cm3 d'écétate d'éthyle, filtre et évapore le solvant (10 mm Hg ; 1,33 KPa) à 40C. On obtient 2,9l~ g d'une gomme orangée, que l'on purifie sur gel de silice dans une colonne à moyenne pression, en éluant a~ec un mélange acétate d'éthyle~acétonitrile 4/1 (vol).
On obtient 0~8~ g de (chloro-2 éthyl)-3 méthylcarbamoyl-8 ~3H~
imidazo ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3~5 one-4 sous forme d'un solide violet~ F = l20-122C (dec.).
25 Analyse élém~7rlt~ireC % H o~ N
Calculé pour C8H9ClN~02 37,43,53 32~7 Trouvé 37,3 3,5831,9 PRODVIT E
A une suspension de 1,0 g de diazo-4~5;'-imidazole carboxamide-5 ~ dans 50 cm3 d'acétate d'éthyle (séché sur carbonate de potassium anhydre) on ajoute 4,o6 g d'isocyanate de chloro-3 propyle et on agite à température ambiante pendant 3 jours.

l~g~7;~

On dilue ~vec de l'éther a~ dre, on sépare le solide par filtration et on le lave soigneusement avec de l'éther anhydre.
On obtient 1,05 g de carbamoyl~8 (chloro-3 propyl)-3 ~3H~-imida~o ~5~l-dJ tétrazine-1~2,3,5 one-4 sous forme d'un solide rose, F =
153-154C (déc.).
Analyse élémentaire C % H % N % Cl Calculé pour C8HgC~N602 37,43,53 32,8 13,8 Trouvé 37,1 3,4232,7 ~3,8 PRODUIT F
En opérant comme à l'exemple 11 mais en remplacant l'isocyanate de chloro-3 propyle par la quantité appropriée d'iso-cyanate de dichloro-2,3 propyle on obtient la carbamoyl-8 (dichloro-2,3 propyl)-3 ~3H~-imidazo ~5,1-dJ tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous 15 forme d'un solide blanchâtre, F = 153-155C (déc.).
Analyse é7émentaire C % H %N % Cl Calculé pour C8H8C12N~02 33~2,77 28,9 24,4 Trouvé 32,7 2,51 28,7 24,1 PRODUIT G
Dans ~,5 cm3 d'isocyanate d'allyle (redistillé juste avant utilisation) on ajoute 90US agitation 1,0 g de diazo-4~5~
imidazole ca~boxamide-5~l~ puis 20 cm3 d'hexaméthylphosphorotriamide.
On agite à température ambiante et dans l'obscurité pendant 18 heures, puis on dilue avec de l'éther éthylique et on filtre. On lave le solide incolore avec de l'éther anhydre et obtient 1,6 g d'allyl-3 carbamoyl-8 ~3H~-imidazo ~ ,1-d~ tetrazine-~,2,3,5 one-4 sous forme d'un solide incolore, F = 149-150C, ~ max (comprimé
KBr) : i730 et 1675 cm RMN (DM50-d6) : singulets à 8,75, 7,67 et 30 7,60 ~ ; double double ~triplet à 6l02 ~(J=5,5, 8 et lO Hz), double doublet à 5,35 (J= 1,5 et 8 Hz) et 5720 ~(J= 1l5 et 10 Hz) et doublet à ~,88 ~ (J= 5;5).

z~

PRODUIT H
A une solution de 1,59 g de diazo-4~r5 7 diméthylcarba-moyl-5~7 imidazole (préparé selon l'exemple de référencel) dans 57 cm3 d'acétate d'éthyle anhydre on ajoute 6,36 g d'isocyanate de chloro-2 éthyle et on agite à l'obscurité, à température ambiante, pendant 2~ heures On élimine l'excès d`isocyanate de chloro-2 éthyle par évaporation sous vide à 35C en *erminant sous 0,~ mm Hg (~3 Pa). On purifie le liquide résiduel par chromatographie sur gel de silice en colonne moyenne pression, en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/acétonitrile (4/1 en volumes). On obtient 0,82 g de (chloro-2 éthyl)-3 diméthylcarbamoyl-8 ~r3H7-imidazo f5,~-d7 tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous forme de cristaux incolores, F -114-~:160C.
15 Analyse élémentaire C % H % N %
Calculé pour C9H11C3N60239~9 4,10 31,0 Trouvé 39,7 3,95 30,8 EXEMPLE 15 _ PRODUIT
A une suspension agitée de 1,0 g de diazo-4~5~ imida-zole carboxamide-5~l~J dans 4 cm3 d'hexaméthylphosphorotriamide on ajoute 4,5 cm3 d'isocyanate de bromo-2 éthyle et on agite à l'obscu-rité pendant 2 jours à température ambiante. On dilue le mélange réactionnel avec de l'éther éthylique, on sépare le solide par ~iltration e1; on le lave avec de l'éther éthylique. On obtient 1,~7 g de (bromo-2 éthyl)-3 carbaTnoyl-8 ~3HJ-imida~o ~5,~-d7 tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous lorme d'un solide incolore, F = 156-'157~C (déc. ! -Analyse élémentaire C %H % N % Br 96 30 Calculé pour C7H7BrN602 29,3 2,~6 29,3 27,8 Trouvé 29,5 2,36 2~,1 27,3 PRODUIT J

En opérant comme décrit à l'exemple 15 mais en rempla-çant l'isocyanate de bromo-2 éthyle par la quantité appropriée d'isocyanate de benzyle on prépare 0,83 g de benzyl-3 carbamoyl-8, f3~-imidazo ~5,~-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous la forme -d'un solide de couleur chamois, ~ = 176-177C (déc.).
Analyse élémentaire C % H %N %
Calculé pour C12H1oN602 53,33'73 31,1 Trouvé 53,6 3,6631,0 PRODUIT K
A une suspension de 0,3 g de diazo-4~5~-imidazole carboxamide-5~4~ dans 5 cm3 d'acétonitrile on ajoute 0,5 g d'iso-cyanate de méthoxy-2 éthyle et on agite à l'obscurité pendant 24 heures entre 45 et 470C. Le solide obtenu est séparé par filtra-tion et lavé avec de l'éther éthylique. On obtient 0,45 g de carbamoyl-8 (méthoxy-2 éthyl)-3 ~3~ -imidazo ~5,1-d~ tétrazine-1, 2,3,5 one-4, F = 145-147C (déc.).
Le produit est purifié par recristallisation dans l'acétone aqueuse (on obtient des touffes de cristaux roses) ou dans le diméthylsulfoxyde (on obtient des a;guilles incolores), ~ = 164-~65~, tdéc.).
Analyse élém~3ntaire C % H %N %
Calculé pour C8H~oN603 40,34 l~20 35,2 Trouvé 40,1~ 4,2035,2 EXEMPLE ~8 -PRODUIT L
A une suspension de 0,30 9 de diazo-4 ~ -imidazole-carboxamide-5~ dans 10 cm3 d'acétonitrile on ajoute 1,0 g d'isocyanate de cyclohe~le et on agite à l'obscurité pendant 3 jours à 600C.

Le solide obtenu est séparé par filtration et la~é
avec 20 cm3 d'un mélange (100/0,5 V/V) d'éthanol et d'ammoniaque (d = o,88) pendant une mi.nu~e. On obtient 0,015 9 de carb~moyl-8 cyclohexyl-3 ~3H~-imida~.o ~5,1- ~ tétra~ine-~,Z,3,5 on~-4, F = 196C
~effervescence).

PRODUIT J
A une suspension de 0,4 9 de diazo-4~5~ imidazolecarbo-xamide-5 ~J dans 10 cm3 d'acétonitrile on ajoute o,6 g d'isocyanate de benzyle et on agite à l'obscurité pendant une nuit à 600C. Apres refroidissement et filtration on obtient 0,75 g de benzyl.3 carbamoyl-8 ~3H~-imidazo ~5~1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4 sous fo~me d'un ~olide rose pâle~ F = ~87-~88~C (effervescence)~

PRODUIT M
Une suspension de 0,1 9 de diazo-4~5~ imidazole carbo-xamide-5 ~J et de 0~ g d'isocyanate de p. méthoxybenzyle dans 5 cm3 d'acétonitrile est ~gitée à 60C dan~ l'obscurité pendant 4 heures.
L2 solide de couleur rose pâle obte~u est séparé p~r ~iltration et lavé plusieurs fois avec de l'éther éthylique. On obtient 0,23 9 de (p. méthoxybenzyl)-3 carbamoyl-8~3H~-imidazo ~5,~- ~ tétrazine-1,2 3,5 one-4, F = 180-182C (effervescence).
EXEMP~E 21 -PRODUI~ N
~n opérant comme décrit précédemment mais ~ partir du N-allyl diazo-4[5] imidazolecarboxamide-5C4], on obtient le N-allyloarbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 C3H] imidazo [5,1-d] tétra-zine-1,2,3,5 one-4 dont les caractéristiques physico-chimiques sont les suivantes :
~ max 1750 om 1 ; R.M.N~ (DMSO-d6) : mul-tiplets à 3,96, 5,06 et 5~84a 7 triplets à 4,60 et 6,2~ et singulet à 8,78 Le N-allyl diazo-4[5] imidazolecarboxamide-5[4] peut être obtenu par diazotation du ~-allyl amino-4[5] imidazolecarbo-..... ~ xamide-5[4].
~ ~ , 3~7Z~L~7 ~ ~e ~-allyl amino-4[ 5~ imidazolecarboxamide-5[4] p~ut ê-tre obtenu pa~ réduction au moyen du chlorure d~ titane du ~-allyl nitro-4~5] imidazolecarboxamide-5[4~ fondant à 218-220~Co (a) On agite pendant 1 heure en chauffant au bain d'huile (120C) un mélange intime de 2,0 9 d'acide nitro-5 imidazole-carboxylique-4 et de 2,67 g de pentachlorure de phosphore. La bouillie Jaune obtenue est concentrée sous vide (0,1 mmHg ; 13 Pa) à 600C pendant 30 minutes. On obtient 1,90 g de dinitro-1,6-5H, lOH-diimidazo ~ ,5-a : 1~,5'-dJ pyrazinedione-5,10 sous forme d'un solide jaune, E = 249-25~oC (déc.) ; ~ max 1750 cm (comprimé KBr) ;
m/e 278 (M ).
En utilisant la meme méthode, WINDAUX, Ler., 1923, 56, 684 et GIREVA, Chem. Abs. 59, q622e décrivent leurs produits comme ~Ichlorure de nitro-5 imidazolecarbonyle-4~.

(b) On refroidit 60 cm3 de solution aq~euse de diméthyl-amine à 25 ~ (P~) entre O et 5C et on ajoute par portions, en agitant, 6,o g de dinitro-1,6-5H,lOH-diimidazo ~ ,5-a : 1',5'_d~
pyrazinedione-5,10 en maintenant la température dans cet intervalle.
La solution obtenue, violet Eoncé, est agitée pendant 2 heures. On évapore à 50~C sous 10 mmHg (~,33 kPa) et acidifie avec de l'acide clllorhydrique concentré. On obtient une solution orangée, qu'on extrait av~:c 7 fois 200 cm3 d'acétate d'éthyle. Les extraits réunis sont séchés sur sulfate de magnésium et évaporés. On obtient 6,6 g d'un solide jaune. On triture ce solide avec 50 cm3 de toluene~
recristallIqe dans l~acetate d'éthyle et obtient 2,53 g cle nitro-5 diméthylcarbamoyl-4~5~ imidazole sous forme de cristaux jaunes, ~ ~ 193-195C.
Anal~se élémentaireC % H %N %
Calculé pollr C6H8N~03 39,14,38 3,~
Trouvé 38,9 4,2330,4 !;

~7Z~

(c~ A une solution de 1,62 9 de nitro-5 ~ diméthyl-carbamoyl-4f5~ imidazole dans 32 cm3 de diméthylformamide anhydre on ajoute 0,32 g d'oxyde de platine et on agite sous hydrogène à
pression atmospherique et température ambiante. Après 3 heures l'absorption d'hydrogène est complète (710 cm3). On traite le mélange au noir et on filtre sur terre de diatomées. Le filtrat brun-noir est évaporé à 50~C sous 0,1 mmHg (13 Pa) et on triture le résidu avec de l'éther éthylique. On obtient 1,75 g d'amino-5 ~J diméthylcarbamoyl-4~5~ imidazole sous forme d'un solide cris-tallin brun-noir, F = ~7C~-181C ~ ~ max 1595 cm (comprimé KBr~ ;
RMN (DMSO d6) : singulets à 3,2 et 7,0 ~J qui est encore contaminé
par du platine colloldal et qui peut être utilisé sans autre puri-fication pour l'étape suivante.
(d) On refroidit entre 5 et lO~C une solution agitée de 0,79 g de nitrite de sodium dans 5,7 cm3 d'eau et on ajoute goutte à goutte en 5 minutes, dans le même intervalle de température, une solution de 1,75 g d'amino-5~ diméthylcarbamoyl 4f5~ imidazole dans 17,6 cm3 d'acide acétique aqueux l~. On extrait la solution obtenue avec 4 fois 40 cm3 d'acétate d'éthyle, sèche les extraits réunis sur sulfate de magnésium, évapore à 30C sous 10 mmHg (1,33 kPa) et obtient ~,59 g de diazo-4~5~ dimèthylcarbamoyl-5 imidazole sous lorme de cristaux orancjés, ~ = 101-103C (déc.).
Analyse élémentaire C % H % N ~
Calculé pour C6H7N50 43,~ 4,27 42,4 Trouvé 42,6 4,17 _ 41~4 La présente invention permet la-rea~i~s-atin de composi-tions pharmaceutiques qui contiennent, comme ingrédient actif, au moins un produit de formule générale (I) avec un diluant ou unenroba~e pharmaceutique. En clinique les produits de formNle qenerale (I) s'~ trent nmrm~ nt par v~ie orale, rectale, vaqinale ou parentercale, par exemple intrave.ineuse ou mtraperitoneale.

Z'~7 Les modes de présentation des produits pharmacot~
quement actifs sont bien connus et lem~ ;n ou le pharmacien sont en mesure de choisir un véhicule approprié en fonction de facteurs tels que l'effet recherché, la taill0, l'age, le sexe et l'état g~néral du patient ou les propriétés du produit actif Les compo-sitions peuvent également contenir, selon la pratique usuelle, des ingrédients tels que des diluants solides ou liquides, des mouil-lants, agents de conservation, parfums, colorants et autres.
Parmi les compositions solides pour administration orale on peut citer les comprimés, pilules, poudres dispersables, et granuléS.

Dans ces compositions solides on trouve un ou plusieurs produits actifs en mélange avec au moins un diluant inerte comme carbonate de calcium, ~écule de pomme de terre, acide alginique ou lactose. Ces Compositions peuvent encore contenir des additifs autres que les diluants inertes, par exemple des lubrifiants tels que le stéarate de magnésium.
Parmi les compositions liquides pour administration orale on peut citer les émulsions, solutions, suspensions pharmaceu-tiquement acceptables, sirops et élixirs contenant des diluants inertes d'usage courant tels que l'eau et l'huile de vaseline. Outre les diluants inertes, ces compositions peuvent encore contenir des adjuvants t~ls que mouillants, agents de suspension tpar exemple poly-vinylpyrroiidone), édulcorants, aromatisants, parfums et agents de ~conservation.
Parmi les compositions pour administra*ion orale on peut encore citer les capsules en matériau absorbable tel que la gélatine qui contiennent un ou plusieurs produits actifs avec ou sans addition de diluants ou autres excipients.
Parmi les compositions pour ~dministration vaginale on peut citer les pessaires formulés de la manière habituelle et con-tenant un ou plusieurs produits actifs.

~ ~724';~

18 ~

Parmi les compositions pour administration rectale on peut citer les suppositoires formulés de la manière habituelle et contenant au moins un produit actif.
Des compositions selon l'invention pour administration p ~entérale comprenant des solutions, suspensions ou f~Ulsl~r~s steriles, aqueuses ou non aqueuses. Comme exemples de solvants ou véh~cules non aqueux on peut citer : propylène glycol, polyéthylène-glycols, diméthylsulfoxyde, huiles végétales (par exemple huile d'olive) ou esters organiques injectables (par exemple oléate d'éthyle).
Ces compositions peuvent également con-tenir des adjuvants tels que conservateurs, mouillants, émulsifiants et dispersants.
Elles peuvent être stérilisées par exemple par filtra-tion aseptisante, addition d'agents stérilisants ou irradiation.
15 On peut également les préparer sous forme de compositions solides stériles qui seront dissoutes ou dispersées, au moment de leur emploi, dans de l'eau ou tout autre milieu injectable stérile.
La proportion de produit actif dans les compositions selon l'invention peut varier, dans le mesure où elle permet ~ d'obtenir un dosage convenant à l'effet thérapeutique désiré.
Naturellement on peut administrer simultanément plusieurs doses unitaires~ En cJénéral les compositions administrables par injection contiennent au moins 0,025 ~ en poids de matière active, et les cc,mpositions pour voie orale en contiennent au moins O,l %. La 25 dose e~ployée dépend de l'effet désiré, de la voie d'administration et de la durée clu traitement.
Les composés de formule générale (I) sont utiles dans le traitement de néoplasmes malins teis que ~c~rcinomesl~nélanomes~
sarcomes, lymphomes et leucérnies, à des doses généralement comprises ~ entre 0,1 et 200 (et de préférence entre l et 20) mg/kg par jour.
Les exemples suivants illustrent des compositions selon l'invention~

~1~9~Z~7 EXF,MPLE DE COMPOS ITION
On prépare une solution con~enant à l'administration parentérale à partir des ingrédients suivants :
Carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 f3H~-imidazo ~5,1_dJ
tétrazine-1,2,3,5 one-~ 1,0 g Diméth~rlsulfoxyde 10 cm3 . Huile d'arachide 90 cm3 en dissolvant la carbamoyl-o (chloro-2 éthyl)-3 ~3H~-imidazo f5, ~ -d~
tétrazine-1,2,3,5 one-4 dans le diméthylsulfoxyde et en ajoutant ~0 l'huile. La solution obtenue est répartie aseptiquement dans 10 ampoules, à raison de 10 cm3 par ampoule. On scelle les ampoules, qui contiennent chacune 100 mg de carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 ~3H~ imidazo ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-4.
_ . ~
On peut préparer des ampoules si~ilaires convenant à
l'administration parentérale en opérant de la même manière à partir d'u~ autre composé de formule générale (I).

On prépare des capsules convenant à l'administration orale en déposant de la carbamoyl-8 (chloro-2 éthyl)-3 ~3HJ-imidazo 20 ~5,1-d~ tétrazine-1,2,3,5 one-lL dans des capsules de gélatine de calibre 2 à raison de 10 mg par capsule.
On peut préparer des capsules similaires en utilisant un autre produit de ~`ormule générale (I) ou d'autres capsules de calibre adé~uat.

,~ ~

Claims

Les réalisations de l'invention, au sujet desquel-les un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit:

1. Procédé pour la préparation d'un dérivé de la [3H] imidazo [5,1-d] tétrazine-1,2,3,5 one-4 de formule générale (I):

(I) dans laquelle R1 représente un radical alcoyle ou alcényle, contenant au maximum 6 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, non-substitué ou portant 1 à 3 substituants choisis parmi les atome d'halogène, les radicaux alcoxy conte-nant au maximum 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée et les radicaux phényle non-substitués ou substitués par un radical choisi dans le groupe compre-nant les radicaux alcoyloxy ayant de 1 à 4 atomes de carbone, les radicaux alcoyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone et le radical nitro, ou R1 représente un radical cycloalcoyle contenant 3 à 8 atomes de carbone, et R2 représente un radical carbamoyle qui peut porter sur l'atome d'azote un ou deux radicaux choisis parmi les radicaux alcoyles et alcényles contenant au maximum 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, caracté-risé en ce que l'on fait réagir un composé de formule générale:

.

dans laquelle R2 a la signification précitée sur un iso-cyanate de formule générale:

dans laquelle R3 représente un radical alcoyle ou alcényle contenant au maximum 6 atomes de carbone, non-substitué ou portant 1 à 3 substituants choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux alcoxy contenant au maximum 4 atomes de carbone, et les radicaux phényle non-substitués ou substitués par un radical choisi dans le groupe compre-nant les radicaux alcoyloxy ayant de 1 à 4 atomes de carbone, les radicaux alcoyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone et le radical nitro, ou bien R3 représente un radical cyclo-alcoyle contenant 3 à 8 atomes de carbone,et obtient le dérivé cherché.

2. Dérivé de la [3H] imidazo [5,1-d] tétrazine-1,2,3,5 one-4, caractérisé en ce qu'il répond à la formule générale (I):

(I) dans laquelle R1 représente un radical alcoyle ou alcényle contenant au maximum 6 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, non-substitué ou portant 1 à 3 substituants choisis parmi les atomes d'halogène, les radicaux alcoxy contenant au maximum 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée et les radicaux phényle non-substitués ou substitués par un radical choisi dans le groupe comprenant les radicaux alcoyloxy ayant de 1 à 4 atomes de carbone, les radicaux alcoyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone et le radical nitro, ou R1 représente un radical cycloalcoyle contenant

3 à 8 atomes de carbone, et R2 représente un radical carbamoyle qui peut porter sur l'atome d'azote un ou deux radicaux choisis parmi les radicaux alcoyles et alcényles contenant au maximum 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée,chaque fois qu'il est obtenu par le procédé
de la revendication 1 ou ses équivalents chimiques mani-festes.