CS200223B2 - Method of cultivating basidiomycetes belonging to family coriolus of polyporacae - Google Patents

Description

ZZZZZZ POPIS VYNÁLEZU

REPUBLIKA

K PATENTU

(22) PřihléSeno 30 08 77(21) (PV 5666-77) (32)(31)(33) Právo přednosti od 30 08 76 (102628)Japonsko 200223 (Π) (B2) (51) lnt. Cl? C 12 N 5/00 (40) Zveřejněno 30 11 79

ÚŘAD PRO VYNÁLEZY (45) Vydáno 15 06 83

A OBJEVY

(72) Autor vvnálezu YOSHIKUMI CHIKAO, FUHUSHO TAKAO, MATSUNAGA KENICHI ’ ' a TOYODA NORIYUKI, TOKIO (JAPONSKO) (73) Majitel patentu KUREHA KAGAKU K0GY0 KUBUSHIKI KAISHA, TOKIO (JAPONSKO) (54) Způsob pěstováni stopkovýtrusných hub (Basidiomycetes), patřícíchdo rodu Coriolus z Polyporaceae 1

Vynález se týká způsobu pěstování stopkovýtrusných hub (Basidiomycetes) patřících dorodu Coriolus z Polyporaceae, a zvláětě se týká způsobu pěstování se zřetelem na zlepěenívýtěžku nycelií Basidiomycet za použití prostředí s glukosou a extraktem z kvasnic speci-fického složení,

Polysacharidy získané z Basidiomycet, rodu Coriolus z Polypotaceae, vzbudily v posled-ních letech velký zájem se zřetelem na jejich vynikající protinádorovou účinnost, jakáži na dalěí farmakologické účinky, a zvýěily se požadavky na nalezení způsobů, jak uskuteč-nit s výhodou průmyslovou výrobu těchto látek, nebo přesněji řečeno, jak dosáhnout výsledkůpěstování s vysokým výtěžkem Basidiomycet.

Studovali jsme způsoby pěstování, kdy lze propagovat růst Basidiomycet patřících dorodu Coriolus z Polyporaceae, a to s vysokým výtěžkem, a v důsledku toho jsme dospěli kezjiětění, Že je možno patrným způsobem zvýěit výtěžek mycelií Basidiomycet, jestliže se ty-to houby pěstují na prostředí s obsahem glukosy a extraktu z kvasnic, a to ve vysoké končentraci a se specifikovaným poměrem.

Takže pro pěstování Basidiomycet se obvykle používá prostředí typu jinak používanéhovůbec pro pěstování mikroorganismů, ačkoliv použití glukosy a extraktu z kvasnic v kultivačním prostředí pro Basidiomycety je popsáno například v japonském patentovém spise 51-36322,kdy se 30 g glukosy, 3 g extraktu z kvasnic, dále po 0,3 g hydrogenfosforečnanu draselného,dihydrogenfosforečnanu draselného a heptahydrátu síranu hořečnatého rozpustí spolu s 5 gpeptonu v litru vody a kultivace se provádí za teploty 23 až 25 °C. Výtěžek mycelía byl vSak pouze 1,1 kg na 150 litrů, tj. 7,3 g na 1 litr, a výtěžek 200223 200223 2 polysacharidu činil 51,7 g na 150 litrů kultury, tj. 0,34 g na litr. Podstata tohoto vyná-lezu není zcela patrné z uvedeného, protože kultivační prostředí obsahuje kromě glukosya extraktu z kvasnic ještě jiné složky a koncentrace glukosy se pohybuje vně limitních roz-sahů podle tohoto vynálezu. Závažný rys tohoto vynálezu záleží v použití prostředí s glukosou a extraktem z kvas-nic, obsahujícího glukosu a extrakt z kvasnic v poměru 3 až 15:1, přičemž glukosa se pou-žívá v prostředí v koncentraci 7,5 až 15 %, což je zvláStě výhodné pro pěstování Basidiomy-cet patřících do rodu Coriolus z Folyporaceae. Předmětem tohoto vynálezu je tedy způsob pěstování Basidiomycet z rodu Coriolus z Po-lyporaceae, přičemž způsob umožňuje podstatně zvýšit výtěžek mycelií za použití výše uve-deného prostředí.

Další předměty tohoto vynálezu budou patrné z následujícího podrobného popisu tohotovynálezu.

Tento vynález je řízen - jak to bylo již uvedeno výše - na pěstování Basidiomycetpatřících do rodu Coriolus Polyporacei za použití prostředí s glukosou a extraktem z kvas-nic, kde poměr glukosy k extraktu 2 kvasnic se pohybuje v rozmezí 3 až 15:1, přičemž obsahglukosy v prostředí činí 7,5 až 15 %· Je třeba poznamenat, že pokud je poměr glukosyk extraktu z kvasnic v prostředí v uvedeném rozmezí 3 až 15:1, nedosáhne se podstatnéhovzrůstu výtěžku mycelií, pokud obsah glukosy v prostředí je nižší než 7,5 %. Také se výtě-žek jen nepatrně změní, přestoupí-li obsah glukosy 15 %, takže použití glukosy v množstvínad 15 % není ekonomicky zdůvodnitelné.

Jestliže se Basidiomycety patřící do rodu Coriolus pěstuji za použití prostředí s glu-kosou a extraktem z kvasnic specifického složení, jak je to uvedeno zde výše v souladus tímto vynálezem, dosáhne se dvojnásobného až pětinásobného výtěžku mycelií ve srovnánís pěstováním Basidiomycet na obvyklém živném prostředí, například na takovém prostředí,jako je peptonové prostředí nebo jeho modifikace se sladovým výtažkem, dále prostředís extraktem z kukuřice nebo.prostředí s vývarem z kukuřice, nebo jako jsou umělá prostředí,například Pfefferovo, Sabouraudovo nebo Uéyerovo prostředí.

Rovněž se za použití způsobu podle tohoto vynálezu dosáhne dvakrát až čtyřikrát vyšší-ho výtěžku mycelií, než použije-li se kteréhokoli z prostředí s obsahem glukosy a extraktuz kvasnic, jehož složení je mimo specifický rozsah podle tohoto vynálezu. Se zřetelem nasložení prostředí s glukosou a extraktem z kvasnic, jak se používá podle tohoto vynálezu,je pro nejvyšší výtěžek nejvýhodnějši používat prostředí, kde obsah glukosy je v rozmezí10 až 15 % a poměr glukosy k extraktu z kvasnic leží v rozmezí č až 10:1. K prostředí používanému podle tohoto vynálezu se může přidat nejméně jeden anorganic-ký materiál s obsahem fosforu, manganu, hořčíku, vápníku, železa a podobně, ve formě odpo-vídajících soli, jakož i živné zdroje, jako jsou vitamíny.

Co se týká podmínek pěstování podle tohoto vynálezu, kultivování se provádí obvykleza teploty 25 - 3 °C po dobu 3 až 10 dnů v případě submersní kultury, za provzdušňovánía protřepávání a 20 až 30 dnů v případě nepohyblivé kultury.

Basidiomycety z rodu Coriolus Polyporacei, jak se používají podle tohoto vynálezu,jsou známé, a jejich mykologické vlastnosti jsou popsány v "Colored Illustration of Fungiof Japan", R. Imazeki a T. Hongo, svazek I (1975) a II (1974). Z těchto Basidiomycet jsou následující druhy uchovány ve Fermentation Research Insti-tute, Agency of Industrial Science and Technology (Chiba-shi, Japan). japonské vlády: 3 200223

Druh č. depositáře datum deponováni Coriolus versicolor(fr.) Quél. CM-103 FERM-P, č. 2 414 25. XII. 1973 Coriolus consors(Berk.) Imaz. CM-166 FERN-P, č. 988 24. VI. 1971 Coriolus hlrsutus(Fr.) Quél. CM-151 FEHM-P, č. 2 711 6. IX. 1974 Coriolus pargamenus (Fr.) Pat. CM-161 FEHM-P, ě. 2 712 6. IX. 1974 Z uvedených Basidiomycet je třeba pokládat za nejvýhodnější rod Coriolus (Fr) Quél.

Mycelia získané pěstováním kterýchkoli z výše uvedených Basidiomycet, patřících dorodu Coriolus, se extrahují vodným rozpouštědlem, jako je voda, nebo zředěný alkalickýroztok, a získaný extrakěni roztok se rafinuje tak, aby se odstranily frakce o nízké mo-lekulové kmotnosti, zbytek se dále suěí a získá se tím látka složená z polysacharidů. Tak-to získané polysacharidy obsahují dusík v molekule a vyznačují se vynikající protivředovouúčinnosti. Podává-li se tato látka myším, vyznačuje se vynikající protivředovou účinnostinejen při intraperitoneálním podávání, ale rovněž při orálním podáváni. 0 protivředovéúčinnosti této látky jsou již velmi četná sdělení. Použití této látky není omezeno na proti-vředové aplikace; z výsledků testů je patrný vynikající vliv na zpětné získáni imunitynapadeného, byla pozorována prevence vedlejších účinků v chemoterapii a prevence poklesufyzického stavu pacienta po operaci nebo dalších příčinách.

Bylo rovněž pozorováno, že při testech orálního podávání popsané látky se zvyšuje chutk jídlu, upraví se nesnáze zažívacího traktu a podporuje se vyměšování moči.

Vynález bude dále podrobně popsán provedením postupu, ale rozsah vynálezu není tímtopopisem pochopitelně jakkoli omezován. Údaje v procentech v přikladu jsou míněny hmotnostně. Příklad 20 ml každého z prostředí, jejichž složení jsou uvedena v následující tabulce, sevnese do kuželovité baňky objemu 100 ml, a každé z těchto prostředí se očkuje kulturouCoriolus versicolor (Fr.) Quél. CM-103 (FEEM-P, č. 2 414), načež se kultura pěstuje bezpohybu 28 dní za teploty 25 až 28 °C. Po skončeném pěstování se zjistí výtěžek myceliav každé baňce, výsledky jsou rovněž uvedeny v tabulce. Tamže jsou též výsledky srovnávacíchpříkladů, kde bylo kultivování prováděno za stejných podmínek, jak je to popsáno zde výše,ale s tím rozdílem, že se použilo živného prostředí s glukosou a extraktem z kvasnic sesložením mimo specifický rozsah podle tohoto vynálezu.

Claims (3)

1. 200223 4 Složení kultivačního prostředí Glukosa, hmot.% Extrakt z kvasnichmot.% Poměrglukosy k extraktu z kvasnic Výtěžekmyceliíg/1 kul-tivačníhoprostředí Zbylá glukosahmot.% na kul-tivační prostře-dí Výtěžek polysachari-du +/ g/1 kultivač-ního prostředí 15 1,0 15 28,7 9,7 2,0 15 1,25 12 33,0 9,0 2,3 15 1,5 10 39,1 8,3 2,7 12,5 1,0 12,5 34,2 6,4 2,4 12,5 1,25 10 39,2 5,0 2,7 12,5 1,5 8,3 42,9 3,5 3,7 10 0,75 13,3 30,7 4,5 2,2 10 1,0 10 35,4 3,5 2,5 10 1,25 8 41,2 1,4 2,9 10 1,5 6,7 40,6 1,5 2,8 7,5 0,5 15 27,6 2,5 2,0 7,5 0,75 10 33,7 1,0 2,4 7,5 1,0 7,5 32,2 0,5 2,3 7,5 1,25 6 30,3 0,5 2,1 2,5 0,25 10 11,0 0 0,7 5,0 0,5 10 23,3 0,4 1,6 5,0 0,6 8,3 20,1 0,4 1,4 7,5 0,25 30 18,8 2,5 1,3 10 0,5 20 23,1 6,0 1,6 12,5 0,5 25 15,9 9,0 1,1 15 0,75 20 22,8 11,0 1,5 2,5 1,25 2 5,8 0 0,4 +y/Výtěžek polysacharidu byl vyhodnocen použitím postupu popsaného v příkladu 22, sloupec28, amerického patentového spisu 4 051 314· Lze vyčíst z výše uvedené tabulky, že se výtěžek mycelia při použití kultivačníhopostupu podle tohoto vynálezu patrným způsobem zlepší ve srovnání s příklady mimo rámectohoto vynálezu. PŘEDMĚT VYNÁLEZU

   1, Způsob pěstování stopkovýtrusných hub Basidiomycet, patřících do roduCoriolusz Polyporaceae, vyznačený tím, že se Basidiomycety pěstují na kultivačním prostředí, jímžje pouze glukosa, extrakt z kvasnic a voda a které obsahují hmotnostně 7,5 až 15 % glukosy,přičemž poměr glukosy k extraktu z kvasnic činí 3 až 15:1 a kultivace se provádí za teploty25 - 3 °C a za pH 4 až 5 po dobu 3 až 30 dnů. 5 200223
2. 2. Způsob pěstováni podle bodu 1, vyznačený tim, že se používá poměr glukosy k extraktu z kvasnic v rozmezí 6 až 10:1. 3· Způsob pěstování podle bodu 1, vyznačený tim, že obsah glukosy v prostředí jev rozmezí hmotnostně 10 až 15
3. 4. Způsob pěstováni podle bodu 1 , vyznačený tím, že se z řečených Basidiomycet použí-vá Coriolus versicolor (Fr.) Quél. Severografie. n. p., závod 7, Most