CZ295640B6 - Ve vodě rozpustný a izolovatelný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze a jeho použití, hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát a jeho použití, biomateriál, způsob syntézy izolovatelného ve vodě rozpustného aktivovaného polymeru a způsob výroby biologicky aktivního konjugátu - Google Patents
Ve vodě rozpustný a izolovatelný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze a jeho použití, hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát a jeho použití, biomateriál, způsob syntézy izolovatelného ve vodě rozpustného aktivovaného polymeru a způsob výroby biologicky aktivního konjugátu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ295640B6 CZ295640B6 CZ19961375A CZ137596A CZ295640B6 CZ 295640 B6 CZ295640 B6 CZ 295640B6 CZ 19961375 A CZ19961375 A CZ 19961375A CZ 137596 A CZ137596 A CZ 137596A CZ 295640 B6 CZ295640 B6 CZ 295640B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- group
- polymer
- sulfone
- peg
- poly
- Prior art date
Links
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title claims abstract description 90
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 24
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 title abstract description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 172
- 125000001174 sulfone group Chemical group 0.000 claims abstract description 65
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 30
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 claims abstract description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 150000002314 glycerols Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 125000002791 glucosyl group Polymers C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims abstract 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 79
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 64
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 64
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 64
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 claims description 62
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical group C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 40
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 23
- MBDUIEKYVPVZJH-UHFFFAOYSA-N 1-ethylsulfonylethane Chemical compound CCS(=O)(=O)CC MBDUIEKYVPVZJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 14
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 14
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 13
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 12
- 150000004820 halides Chemical group 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical class OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 9
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 7
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 7
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 claims description 7
- 229920003169 water-soluble polymer Chemical class 0.000 claims description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GHKCSRZBNZQHKW-UHFFFAOYSA-N 1-sulfanylethanol Chemical group CC(O)S GHKCSRZBNZQHKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 claims description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 3
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 claims 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- -1 poly(propylene glycol) Polymers 0.000 abstract description 21
- 150000002303 glucose derivatives Polymers 0.000 abstract description 2
- FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N Sorbitol Polymers OCC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N 0.000 abstract 1
- 150000002304 glucoses Polymers 0.000 abstract 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 26
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 22
- LUYAMNYBNTVQJG-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-(2-chloroethylsulfonyl)ethane Chemical compound ClCCS(=O)(=O)CCCl LUYAMNYBNTVQJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 15
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 15
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 15
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical class CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 9
- 239000002243 precursor Chemical group 0.000 description 8
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 7
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 6
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 6
- ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N fluorescamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)OC1(C1=O)OC=C1C1=CC=CC=C1 ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 5
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 5
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 5
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012359 Methanesulfonyl chloride Substances 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 4
- QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N methanesulfonyl chloride Chemical compound CS(Cl)(=O)=O QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CMPGARWFYBADJI-UHFFFAOYSA-L tungstic acid Chemical compound O[W](O)(=O)=O CMPGARWFYBADJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 3
- 125000000879 imine group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002473 artificial blood Substances 0.000 description 2
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 2
- XGMDYIYCKWMWLY-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(F)(F)F XGMDYIYCKWMWLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical class S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N [C].[C] Chemical group [C].[C] IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000061 acid fraction Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical class C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 125000002603 chloroethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])Cl 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N cystine group Chemical group C([C@@H](C(=O)O)N)SSC[C@@H](C(=O)O)N LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N formamide Substances NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical class C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 125000004170 methylsulfonyl group Chemical group [H]C([H])([H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- XOVSRHHCHKUFKM-UHFFFAOYSA-N s-methylthiohydroxylamine Chemical compound CSN XOVSRHHCHKUFKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001922 sodium perborate Drugs 0.000 description 1
- YKLJGMBLPUQQOI-UHFFFAOYSA-M sodium;oxidooxy(oxo)borane Chemical compound [Na+].[O-]OB=O YKLJGMBLPUQQOI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 125000004354 sulfur functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005147 toluenesulfonyl group Chemical group C=1(C(=CC=CC1)S(=O)(=O)*)C 0.000 description 1
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N tributylphosphine Chemical compound CCCCP(CCCC)CCCC TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N triethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CC ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
- C08G65/334—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing sulfur
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/321—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds
- C08G65/326—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds containing sulfur
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
- Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
- Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
- Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Polyethers (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Treatments Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Řešení uvádí ve vodě rozpustný a izolovatelný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze, vybraný ze skupiny sestávající z poly(alkylenoxidů), včetně poly(propylenglykolu), polyethylenglykolu, poly(oxyethylovaných polyolů), poly(oxyethylovaného glycerolu), poly(oxyethylovaného sorbitolu) a poly(oxyethylované glukózy) a poly(olefinických alkoholů), včetně poly(vinylalkoholu), a derivátů těchto polymerů, přičemž tyto polymery mají alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu a obecný vzorec R-CH.sub.2.n.-polymer-CH.sub.2.n.-Y, kde -CH.sub.2.n.- skupiny obsahují buď koncové uhlíkové skupiny polymeru nebo koncové uhlíkové skupiny spojovací části polymeru, přičemž tento polymer má od 5 do 3000 monomerních jednotek, a Y znamená alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny -SO.sub.2.n.-CH=CH.sub.2.n. a -SO.sub.2.n.-CH.sub.2.n.-CH.sub.2.n.-X, v níž X znamená atom halogenu, a jejich aktivní sulfonové deriváty, přičemž R znamená stejnou nebo jinou skupinu než Y, a jestliže polymer znamená poly(ethylenglykol), potom má tento polymer obecný vzorec R-CH.sub.2.n.CH.sub.2.n.-(OCH.sub.2.n.CH.sub.2.n.).sub.n.n.-Y a n znamená číslo 5 až 3000. Dále je uvedeno jeho použití, hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát, jeho použití, biomateriál, způsob syntézy izolovatelného ve vodě rozpustného aktivovaného polymeru a způsob výroby biologicky aktivního konjugátu.ŕ
Description
Oblast techniky
Tento vynález se týká ve vodě rozpustného aktivovaného polymeru, který je stabilní proti hydrolýze, aktivovaného polyethylenglykolového derivátu, hydrolyticky stabilního, biologicky aktivního konjugátu, biomateriálu obsahujícího ve vodě rozpustný polymemí derivát a způsobů jejich přípravy. Tento vynález se tedy týká aktivních derivátů polyethylenglykolu a podobných hydrofilních polymerů a způsobů jejich syntézy pro použití pro úpravu vlastností povrchů a molekul.
Dosavadní stav techniky
Polyethylenglykol („PEG“) byl studován pro použití ve farmaceutických prostředcích, u umělých implantátů a při dalších aplikacích, při nichž hraje důležitou roli biokompatibilita. Byly navrženy různé deriváty polyethylenglykolu („PEG-deriváty“), které mají aktivní části umožňující, aby se PEG připojil na farmaceutické prostředky, na implantáty a obecně na molekuly a povrchy pro modifikování fyzikálních nebo chemických vlastností molekuly nebo povrchu.
PEG-deriváty byly navrženy například pro kondenzaci PEG na povrchy pro regulaci smáčivosti, hromadění statické elektřiny a pro připojení dalších typů molekul na povrch, včetně proteinů a zbytků proteinů. Podrobněji - PEG-deriváty byly navrženy pro připojení na povrchy konstantních čoček u umělé hmoty pro snížení hromadění proteinů a kalení zraku. PEG-deriváty byly navrženy pro připojení na umělé krevní cévy kvůli snížení hromadění proteinů a kvůli nebezpečí blokády. PEG-deriváty byly navrženy pro imobilizování proteinů na povrchu, jak je tomu u enzymových katalyzátorů chemických reakcí.
V ještě dalším příkladu byly PEG deriváty navrženy pro napojení na molekuly, včetně proteinů, pro ochranu molekuly před chemickým působením, pro omezení nepříznivých vedlejších účinků molekuly nebo pro zvýšení velikosti molekuly, a tím i pro potenciální získání užitečných látek, které mají některé příznivé účinky v lékařství, ale jinak nejsou nijak užitečné nebo dokonce škodí živému organismu. Malé molekuly, které by se normálně vylučovaly ledvinami, se zadržují v krevním oběhu, jestliže se jejich velikost zvýší připojením biokompatibilního PEG-derivátu. Proteiny a další látky které tvoří imunitní odpověď, jestliže se podají injekčně, se mohou do jistého stupně skrýt před imunitním systémem kondenzací PEG molekuly na protein.
PEG-deriváty byly navrženy také pro afínitní dělení, například enzymů z buněčné masy. Při afinitním dělení PEG-derivát obsahuje funkční skupinu pro reverzibilní navázání na enzym, který je obsažen v buněčné mase. Konjugát PEG a enzymu se od buněčné masy oddělí a potom se enzym oddělí od PEG-derivátu, jestliže je to žádoucí.
Kondenzace PEG-derivátů na proteiny ilustruje některé problémy, se kterými se setkáváme při napojení PEG na povrchy a molekuly. U mnoha povrchů a molekul je počet míst dostupných pro kondenzační reakce s PEG-derivátem do jisté míry omezen. Například proteiny mají typicky omezený počet a různý typ reaktivních míst dostupných pro kondenzaci. Ještě problematičtější je to, že některá reaktivní místa mohou být zodpovědná za proteinovou biologickou aktivitu, jako je tomu tehdy, když enzym katalyzuje některé chemické reakce. PEG-derivát, který je připojen na dostatečný počet těchto míst, by mohl nepříznivě ovlivnit aktivitu proteinu.
Reaktivní místa, která tvoří místo připojení PEG-derivátů na proteiny, jsou dána strukturou proteinů. Proteiny, včetně enzymů, jsou vystavěny z různých sekvencí α-aminokyselin obecného
-1 CZ 295640 B6 vzorce H2N-CHR-COOH. Alfa-aminokyselinový zbytek (H2N-) jedné aminokyseliny se napojuje na karboxylovou skupinu (-COOH) přilehlé aminokyseliny za vzniku amidových vazeb, které lze znázornit jako -(NH-CHR-CO)n-, kde n může znamenat stovky nebo tisíce. Fragment R může obsahovat reaktivní místa pro proteinovou biologickou aktivitu a pro připojení PEGderivátů.
Například u lysinu, který je aminokyselinou tvořící část základního skeletu většina proteinů, skupina -NH2 je přítomna v poloze epsilon stejně jako v poloze alfa. Epsilonová skupina -NH2 je za bazického pH pro reakci volná. Mnoho práce v oblasti techniky směřovalo k vyvinutí PEGderivátů pro napojení epsilonové skupiny -NH2 lysinové frakce proteinu. U všech těchto PEGderivátů je lysinová frakce aminokyselin proteinu typicky inaktivována, což může být nevýhoda, jestliže lysin je důležitý pro aktivitu proteinu.
Zalipsky v patentu US 5 122 614 popisuje, že PEG molekuly aktivované oxykarbonyl-N-dikarboximidovou funkční skupinou mohou být napojeny za vodných bazických podmínek urethanovou vazbou na aminovou skupinu polypeptidů. O aktivovaném PEG-N-sukcinimiduhličitanu se uvádí, že tvoří stabilní, vůči hydrolýze rezistentní urethanové vazby s aminovými skupinami. O aminové skupině se uvádí, že je reaktivnější při bazických pH od 8,0 do 9,5 a že reaktivita ostře klesá při nižším pH. Hydrolýza nekondenzovaného PEG-derivátu se však také ostře zvyšuje při pH 8,0 až 9.5. Zalipsky odchází problém zvýšení rychlosti reakce nekondenzovaného PEG-derivátu s vodou použitím nadbytku PEG-derivátu pro navázání na povrch proteinu. Při použití nadbytku jsou dostatečně reaktivní epsilonová aminová místa navázána na PEG pro modifikování proteinu předtím, než má PEG-derivát příležitost být zhydrolyzován a nereaktivní.
Zalipskyho způsob odpovídá připojení lysinové frakce proteinu na PEG-derivát na jedno aktivní místo PEG-derivátu. Avšak jestliže je rychlost hydrolýzy PEG-derivátu dostatečná, potom může být problematické dosáhnout připojení na více než jedno aktivní místo na PEG molekule, jelikož jednoduchý nadbytek nezpomaluje rychlost hydrolýzy.
Například lineární PEG s aktivními místy na obou koncích se napojí na protein na jednom konci, ale jestliže rychlost hydrolýzy je významná, zreaguje s vodou na druhém konci, takže je spíše ukončen relativně nereaktivní hydroxylovou skupino, která strukturně znamená skupinu -OH, než by se vytvořila molekulární struktura „činky“ s napojenými proteiny nebo jinými žádoucími skupinami na obou koncích. Podobný problém se objevuje tehdy, jestliže je žádoucí kondenzovat molekulu na povrch PEG vázajícím činidlem, protože PEG se nejdříve napojí na povrch nebo nakondenzuje na molekulu a opačný konec PEG-derivátu představuje problém, potom se opačný konec typicky neaktivuje.
V Zalipskyho patentu US 5 122 614 je popsáno také několik jiných PEG-derivátů z předcházejících patentů. O PEG-sukcinoyl-N-hydroxysukcinimidovém esteru se uvádí, že tvoří esterové vazby, které mají ve vodném prostředí omezenou stabilitu, což znamená nežádoucně krátký poločas tohoto derivátu. O PEG-2,4,6-trichlor-l,3,5-triazinu se uvádí, že vykazuje nežádoucí toxicitu a že je nespecifický pro reakci s příslušnými funkčními skupinami na proteinu. PEG2,4,6-trichlor-l,3,5-triazinový derivát může mít tedy nežádoucí vedlejší účinky a může snižovat aktivitu proteinu, protože se připojuje na četné různé typy aminokyselin v různých reaktivních místech. O PEG-fenylkarbonylátu se uvádí, že poskytuje toxické hydrofobní fenolové zbytky, které mají afinitu pro proteiny. O PEG aktivovaném karbonyldiimidazolem se uvádí, že je příliš pomalý při reakci s proteinovými funkčními skupinami, což vyžaduje dlouhé reakční doby pro získání dostatečné modifikace proteinu.
Pro připojení na funkční skupiny aminokyselin jiných než epsilonovou -NH2 lysinu byly navrženy ještě jiné PEG-deriváty. Histidin obsahuje reaktivní iminovou skupinu, která strukturně znamená -N(H)-, ale mnohé deriváty, které reagují s epsilonovou -NH2, reagují také se skupinou -N(H)-. Cystein obsahuje reaktivní thiolovou skupinu -SH, ale PEG-derivát maleimidu, který reaguje s touto skupinou, podléhá hydrolýze.
-2CZ 295640 B6
Jak lze vidět z malého shora uvedeného vzorku, bylo věnováno značné úsilí vyvinutí různých PEG-derivátů pro připojení na skupinu -NH2 lysinové aminokyselinové frakce různých proteinů. Syntéza a použití mnohých těchto derivátů jsou problematické. Některé tvoří nestálé vazby s proteiny, které podléhají hydrolýze, a nevydrží tedy velmi dlouho ve vodných prostředích, jako například v krevním oběhu. Některé tvoří stabilnější vazby, ale dochází u nich k hydrolýze před vytvořením vazby, což znamená, že tato reaktivní skupina PEG-derivátu může být deaktivována předtím, než se protein připojí. Některé jsou poněkud toxické a jsou tedy méně vhodné pro použití in vivo. Některé příliš pomalu reagují na to, aby byly prakticky užitečné. Některé příliš pomalu reagují na to, aby byly prakticky užitečné. Některé vedou ke ztrátě proteinové aktivity připojením na místa odpovědná za proteinovou aktivitu. Některé nejsou specifické v místech, v němž se připojují, což také může vést ke ztrátě žádoucí aktivity a k chybějící reprodukovatelnosti výsledků.
Podstata vynálezu
Tento vynález poskytuje ve vodě rozpustné a hydrolyticky stabilní deriváty polyethylenglykolových polymerů a příbuzných hydrofilních polymerů s jednou nebo více aktivními sulfonovými skupinami. Tyto polymerní deriváty s aktivními sulfonovými skupinami jsou vysoce selektivní pro kondenzaci s thiolovými skupinami místo aminovými skupinami na molekulách a površích, zvláště při pH 9 nebo méně. Sulfonová skupina, vazba mezi polymerem a sulfonovou skupinou a vazba mezi thiolovou skupinou, sulfonovou skupinou nejsou obecně reverzibilní v redukujících prostředcích a jsou po prodlouženou dobu stabilní proti hydrolýze ve vodných prostředcích při pH 11 nebo méně. Důsledkem je to, že fyzikální a chemické vlastnosti rozmanitých látek lze upravit za požadovaných vodných podmínek aktivními sulfonovými polymemími deriváty.
Například podmínky pro modifikaci biologicky aktivních látek mohou být optimalizovány tak, aby se zachoval vysoký stupeň biologické aktivity. Farmaceutické prostředky od aspirinu k penicilinu lze užitečně upravit připojením aktivních sulfonových polymerních derivátů, jestliže jsou tyto farmaceutické prostředky upraveny tak, že obsahují thíolové skupiny. Velké proteiny obsahující cysteinové jednotky, které máji aktivní thiolové skupiny, lze také užitečně modifikovat. Pro zavedení cysteinových skupin do žádoucích míst proteinu lze použít způsobů technologie rekombinantní DNA („genetické inženýrství“). Tyto cysteiny lze kondenzovat na aktivní sulfonové polymerní deriváty. Získají se tak hydrolyticky stabilní vazby na rozmanitých proteinech, které normálně neobsahují cysteinové jednotky.
Specifické sulfonové skupiny pro aktivované polymery podle vynálezu jsou skupiny s alespoň dvěma atomy uhlíku napojenými na sulfonovou skupinu -SO2- a reaktivním místem pro thiol specifické kondenzační reakce na druhém atomu uhlíku od sulfonové skupiny.
Vynález se tedy týká ve vodě rozpustného a izolovatelného aktivovaného polymeru, který je stabilní vůči hydrolýze, vybraný ze skupiny sestávající z poly(alkylenoxidů), včetně poly(propylenglykolu), polyethylenglykolu, poly(oxyethylovaných polyolů), poly(oxyethylovaného glycerolu), poly(oxyethylovaného sorbitolu) a poly(oxyethylované glukózy) a poly(olefinických alkoholů), včetně poly(vinylalkoholu), a derivátů těchto polymerů, přičemž tyto polymery mají alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu s obecný vzorec R-CH2-polymer-CH2-Y, kde -CH2- skupiny obsahují buď koncové uhlíkové skupiny polymeru nebo koncové uhlíkové skupiny spojovací části polymeru, přičemž tento polymer má od 5 do 3000 monomerních jednotek, a Y znamená alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny -SO2CH=CH2 a -SO2-CH2-CH2-X, v níž X znamená atom halogenu, a jejich aktivní sulfonové deriváty, přičemž R znamená stejnou nebo jinou skupinu než Y, a jestliže polymer znamená poly(ethylenglykol), potom má tento polymer obecný vzorec R-CH2CH2-(OCH2CH2)n- Y a n znamená číslo 5 až 3000.
-3CZ 295640 B6
Podrobněji - aktivní sulfonové skupiny obsahují vinylsulfon, aktivní ethylsulfony, včetně halogenethylsulfonů, a thiol-specifícké aktivní deriváty těchto sulfonů. Vinylsulfonová skupina může znamenat skupinu vzorce -SO2-CH=CH2, aktivní ethylsulfonová skupina může znamenat skupinu vzorce -SO2-CH2-CH2-Z, v němž Z může znamenat atom halogenu nebo nějakou odcházející skupinu se schopností být substituována thiolem za vzniku sulfonové a thiolové vazby -SO2CH2-CH2-S-W, kde W znamená biologicky aktivní molekulu, povrch nebo nějakou jinou látku. Mezi deriváty vinyl a ethylsulfonů mohou patřit jiné substituenty, pokud se zachová rozpustnost ve vodě a thiolově specifická reaktivita reakčního místa na druhém atomu uhlíku.
Vynález dále zahrnuje hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát, vybraný ze skupiny, která obsahuje:
- biologicky aktivní molekulu s reaktivní thiolovou skupinou a ve vodě rozpustný polymerní derivát s aktivní sulfonovou skupinou podle nároku 1, tvořící vazbu s thiolovou skupinou,
- dvě biologicky aktivní části, které mohou být stejné nebo různé, přičemž alespoň jedna biologicky aktivní část má reaktivní thiolovou skupinu, a ve vodě rozpustný činkovitý aktivovaný polymer podle nároku 1 nebo 2, který má reaktivní skupinu na obou koncích, kde alespoň jedna skupina má aktivní sulfonovou skupinu, a tvoří vazbu s thiolovou skupinou alespoň jedné biologicky aktivní části, přičemž druhá biologicky aktivní část tvoří vazbu s jinými reaktivními částmi na polymeru, a první protein s thiolovou skupinou, druhý protein s aminovou skupinou a aktivovaný ve vodě rozpustný polymer podle nároku 1 nebo 2, který má alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu, která je selektivní pro reakci s thiolovými skupinami, a alespoň jednu další skupinu, která je selektivní pro reakci s aminovými skupinami, přičemž thiolová skupina tvoří hydrolyticky stabilní vazbu se sulfonovou skupinou na uvedeném polymeru a aminová část tvoří hydrolyticky stabilní vazbu s další reaktivní částí na polymeru.
Tento vynález zahrnuje hydrolyticky stabilní konjugáty látek s thiolovými skupinami s uvedenými polymemími deriváty s aktivními sulfonovými skupinami. Například ve vodě rozpustný sulfonanovou skupinou aktivovaný PEG polymer se může nakondenzovat na biologicky aktivní molekulu v místě reaktivního thiolu. Vazba, kterou jsou PEG a biologicky aktivní molekula spojeny, zahrnuje sulfonovou skupinu napojenou na thiolovou skupinu obecného vzorce PEGSO2-CH2-CH2-S-W, v němž W znamená biologicky aktivní molekulu, ať sulfonová skupina před napojením na PEG znamenala vinylsulfon nebo aktivní ethylsulfon.
Dále tento vynález zahrnuje hydrolyticky aktivní, biologicky aktivní konjugát, v němž jsou biologicky aktivní molekuly vybrány ze skupiny sestávající z protein, farmaceutických látek, buněk, vitaminů a jejich kombinací.
Dalším provedením tohoto vynálezu je hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát, v němž aktivní sulfonová část znamená vinylsulfon nebo halogenethylsulfon a další reaktivní část je selektivní pro reakci s aminovými skupinami.
Vynález také zahrnuje použití tohoto hydrolyticky stabilního, biologicky aktivního konjugátu, pro přípravu farmaceutického prostředku.
Tento vynález zahrnuje také biomateriály obsahující povrch s jedním nebo více reaktivními thiolovými místy a jedním nebo více ve vodě rozpustnými sulfonem aktivovanými výše uvedenými polymery podle vynálezu napojenými na povrch sulfonovou a thiolovou vazbu. Biomateriály a další látky mohou být napojeny také na sulfonem aktivované polymerní deriváty jinou vazbou než je sulfonová a thiolová vazba, jako je konvenční aminová vazba. Získá se tak hydrolyticky stabilnější aktivující skupina, sulfonová skupina dostupná pro následující reakce.
Tento vynález zahrnuje způsob syntetizování výše uvedených aktivovaných polymerů podle vynálezu. Skupina obsahující síru se naváže přímo na atom polymeru a pak se převede na aktivní sulfonovou skupinu. Nebo se sulfonová skupina může připravit připojením vazebného činidla,
-4CZ 295640 B6 které má sulfonovou skupinu na jednom konci, na konvenční aktivovaný polymer tak, že výsledný polymer má na svém konci sulfonovou skupinu.
Podrobněji - ve vodě rozpustný polymer s alespoň jednou aktivní hydroxylovou skupinou podléhá reakci za vzniku substituovaného polymeru, který má reaktivnější skupinu. Výsledný substituovaný polymer podléhá reakci, kterou se substituuje reaktivnější skupina síru obsahující skupinou s alespoň dvěma atomy uhlíku, kde síra v síru obsahující skupině je navázána přímo na atom uhlíku polymeru. Síru obsahující skupina potom podléhá reakcím, při kterých se síra, -S-, oxiduje na sulfon, -SO2- Získá se tak dostatečně reaktivní místo na druhém atomu uhlíku sulfonu obsahující skupinu pro vytvoření vazeb se skupinami obsahujícími thiol.
Ještě podrobněji - způsob syntézy aktivovaných polymerů podle vynálezu spočívá v tom, že se polyethylenglykol nechá zreagovat s derivátem obsahujícím atom halogenu, čímž se získá PEG se pak nechá zreagovat s merkaptoethanolem, přičemž se etherová skupina nebo halogen substituuje merkaptoethanolovou skupinou. Síra v merkaptoethanolové skupině se oxiduje na sulfon. Ethanolsulfon se aktivuje buď aktivací hydroxylové skupiny nebo substituováním hydroxylové skupiny aktivnější skupinou než je atom halogenu. Aktivní ethylsulfon PEGu se pak převede na vinylsulfon, jestliže je to žádoucí, štěpení aktivované hydroxylové skupiny nebo jiné aktivní skupiny a zavedením dvojné vazby mezi atomy uhlíku přilehlé ksulfonové skupině -SO2~.
Tento vynález zahrnuje také způsob přípravy konjugátu látky s polymemím derivátem, který má aktivní sulfonovou skupinu. Tento způsob zahrnuje stupeň vytvoření vazby mezi polymemím derivátem a látkou. Tato vazba může znamenat vazbu mezi sulfonovou skupinou a thiolovou skupinou.
Vynález dále zahrnuje způsob výroby biologicky aktivního konjugátu látky a ve vodě rozpustného izolovatelného aktivovaného polymeru, přičemž látka, kterou je biologicky aktivní molekula mající reaktivní thiolovou skupinu se nechá reagovat s aktivovaným polymerem, který má alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu, a který je vybrán ze skupiny sestávající zpoly(alkylenoxidů), poly(oxyethylovaných polyolů) a poly(olefínických alkoholů), přičemž se vytvoří vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou.
Výhodně je uveden způsob výroby biologicky aktivního konjugátu látky kde látka, kterou je biologicky aktivní molekula obecného vzorce W-SH, v němž W znamená biologicky aktivní část a SH znamená aktivní thiolovou skupinu, se nechá reagovat s polyethylenglykolovým derivátem obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, v němž n znamená číslo 5 až 3000, Y znamená skupinu vzorce -SO2- CH=CH2 a R znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z HO-, H3CO-, X-CH2-CH2-SO2, kde X znamená atom halogenu, a CH2=CH-SO2~, a vytvoří se vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou poly(ethylenglykol)ového derivátu.
Výhodně je dále uveden způsob výroby biologicky aktivního konjugátu kdy látka, kterou je protein s aktivní thiolovou skupinou, se nechá reagovat s polyethylenglykolovým derivátem obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, v němž n znamená číslo 5 až 3000, Y znamená skupinu -SO2-CH=CH2 a R znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z HO-, H3CO-, X-CH2CH2-SO2- kde X znamená atom halogenu, a CH2=CH-SO2-, a vytvoří se vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou poly(ethylenglykol)ového derivátu.
Výhodně je dále uveden způsob výroby biologicky aktivního konjugátu, kde vyrobený konjugát je vybrán ze skupiny sestávající z:
konjugátu obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S-W, v němž n znamená číslo 5 až 3000 a R znamená skupinu, která je vybrána ze skupiny sestávající zHO- a H3CO-, konjugátu obecného vzorce W-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S-W, v němž n znamení číslo 5 až 3000,
-5CZ 295640 B6 konjugátu obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S-protein, v němž n znamená číslo 5 až 3000 a R znamená skupinu, která je vybrána ze skupiny sestávající z HO- a H3COkonjugátu obecného vzorce protein-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2S-protein, v němž n znamená číslo 5 až 3000.
Tento vynález tedy poskytuje aktivované polymery, které jsou specifické ve své aktivitě, stabilní ve vodě, stabilní v redukujících prostředích a tvoří stabilnější vazby s povrchy a molekulami, včetně biologicky aktivních molekul, než dříve získané vazby. Aktivovaný polymer se může použít k modifikaci vlastností povrchů a molekul, jejichž biokompatibilita je důležitá. Jelikož aktivovaný polymer je stabilní za vodných podmínek a tvoří stabilní vazby s thiolovými skupinami, pro zachování aktivity biologicky aktivních látek a pro optimalizování rychlosti reakce při navazování polymeru lze zvolit nejvýhodnější reakční podmínky.
Syntetická cesta použití pro přípravu aktivních sulfonů polyethylenglykolu a příbuzných polymerů obsahuje alespoň čtyři stupně, v nichž atom síry je navázán na polymemí molekulu a potom převeden řadou reakcí na aktivní sulfonovou funkční skupinu. Výchozí PEG polymemí molekula má alespoň jednu hydroxylovou skupinu, -OH, která je dostupná pro participaci v chemických reakcích a která je považována za „aktivní“ hydroxylovou skupinu. PEG molekula může být více aktivních hydroxylových skupin dostupných pro chemické reakce, jak je vysvětleno níže. Tyto aktivní hydroxylové skupiny jsou ve skutečnosti relativně nereaktivní. Prvním stupněm při syntéze je připravit PEG s reaktivnějšími skupinami.
Reaktivnější skupina se typicky tvoří podle jednoho ze dvou způsobů, aktivací nebo substitucí hydroxylu. Jsou dostupné další způsoby, jak je zřejmé odborníkům z oblasti techniky, ale aktivace a substituce hydroxylu jsou dva nejčastěji používané způsoby. Při aktivaci hydroxylu se atom vodíku na hydroxylové skupině nahradí aktivnější skupinou. Typicky se kyselina nebo derivát kyseliny, jako je halogenid kyseliny, nechá reagovat s PEG za vzniku reaktivního esteru, v němž jsou PEG a zbytek kyseliny navázány esterovou vazbou. Kyselinová část je obecně reaktivnější než hydroxylová část. Typickými estery jsou síran, uhličitan a fosforečnan.
Mezi halogenidy sulfonylových kyselin, které jsou vhodné pro použití v praxi podle vynálezu, patří methansulfonylchlorid a p-toluensulfonylchlorid. Methansulfonylchlorid je sloučenina vzorce CH3SO2C1, která je známa jako mesylchlorid. methansulfonylestery se někdy označují jako mesyláty. p-Toluensulfonylchlorid je sloučenina vzorce CH3C6H4SO4C1, která je známa jako tosylchlorid. Toluensulfonylestery se někdy označují jako tosyláty.
V substituční reakci se celá -OH skupina na PEG substituuje reaktivnější skupinou, typicky halogenidem. Například thionylchlorid vzorce SOC12 může reagovat s PEG za vzniku reaktivnějšího PEG substituovaného atomem chloru. Substituce hydroxylové skupiny jinou skupinou se někdy v oblasti techniky označuje jako aktivace hydroxylu. Pojem „aktivace hydroxylu“ by zde měl být interpretován tak, že znamená substituci stejně jako esterifíkaci a další způsoby aktivace hydroxylové skupiny.
Pojmy „skupina“, „funkční skupina“, „část, „aktivní část“, „reaktivní místo“ a „radikál“ jsou v oblasti chemie do jisté míry synonyma. V oblasti techniky a zde se používají pro označení různých daných definovaných poloh nebo jednotek molekuly a jednotek, které vykonávají jistou funkci nebo aktivitu a jsou reaktivní s jinými molekulami nebo částmi molekul. V tomto smyslu lze protein nebo zbytek proteinu považovat za molekulu nebo funkční skupinu nebo část, jestliže se kondenzuje s polymerem.
Pojem „PEG“ je v oblasti techniky a zde používán k popisu jakéhokoliv z několika kondenzačních polymerů ethylenglykolu obecného vzorce H(OCH2CH2)nOH, který může znamenat také HO-CH2CH2-(OCH2CH2)n-OH. PEG je znám také jako polyoxyethylen, polyethylenoxid, poly
-6CZ 295640 B6 glykol a polyetherglykol. PEG lez připravit jako kopolymery ethylenoxidu a mnoha dalších monomerů.
Polyethylenglykol se používá v biologických aplikacích, protože má vlastnosti, které jsou vysoce žádoucí, a je obecně schválen pro biologické nebo biotechnologické aplikace. PEG je typický čirý, bezbarvý, bez vůně, rozpustný ve vodě, stabilní vůči teplu, inertní k mnoha chemickým činidlům, nehydrolyzuje se ani nerozkládá a není toxický. Polyethylenglykol je považován za bioslučitelný, což znamená, že PEG je schopen koexistovat společně s živými tkáněmi nebo organismy bez toho, aby jim škodil. Podrobněji - PEG není imunogenní, což znamená, že PEG nemá tendenci produkovat imunitní odpověď těla. Jestliže se připojí na skupinu, která má v těle žádoucí funkci, PEG má tendenci maskovat tuto část a může snižovat nebo odstraňovat jakoukoliv imunitní odpověď, takže organismus může tolerovat přítomnost této skupiny. Sulfonem aktivované PEGy podle vynálezu by tedy měly být v podstatě netoxické a neměly by mít tendenci v podstatě produkovat imunitní odpověď nebo způsobovat srážení nebo jiné nežádoucí účinky.
Druhým stupněm syntézy je navázání síry přímo na atom uhlíku v polymeru a ve formě, která může být převedena na ethylsulfon nebo ethylsulfonový derivát s podobnými reaktivními vlastnostmi. „Ethyl“ zde znamená skupinu s identifikovatelnou skupinou dvou atomů uhlíku spolu spojených. Aktivní sulfonový PEG-derivát vyžaduje, aby druhý atom uhlíku v řetězci od sulfonové skupiny poskytoval reaktivní místo pro navázání thiolových skupin se sulfonem. Tohoto výsledku lze dosáhnout reagováním aktivní skupiny připravené ve shora uvedeném prvním stupni, kterou typicky bude esterem nebo halogenidem substituovaný PEG, v substituční reakci s alkoholem, který obsahuje také reaktivní thiolovou skupinu připojenou na ethylovou skupinu, thioethanolovou skupinu. Thiolová skupina se oxiduje na sulfon a druhý atom uhlíku od sulfonu na ethylové skupině se převede na reaktivní místo.
Sloučeniny obsahující thiolové skupiny -SH jsou organické sloučeniny, které připomínají alkoholy, které obsahují hydroxylovou skupinu -OH s výjimkou thiolů, v nichž je atom kyslíku alespoň jedné hydroxylové skupiny nahrazen atomem síry. Aktivující část na PEG-derivátu z první reakce, která je typicky buď halogenidem nebo kyselinovou částí esteru, se odštěpí od polymeru a nahradí se alkoholovou skupinou thioethanolové sloučeniny. Atom síry v thiolové skupině alkoholu se napojí přímo na atom uhlíku polymeru.
Alkoholem by měl být takový alkohol, který poskytuje thioethanolovou část pro napojení přímo na atom uhlíku polymerního řetězce nebo který lze snadno převést na thioethanolovou skupinu nebo substituovanou skupinu podobných reaktivních vlastností. Příkladem takového alkoholu je merkaptoethanol vzorce HSCH2CH2OH, který se někdy nazývá thioethanol.
Ve třetím stupni syntézy se pro převedení atomu síry, který je napojen na atom uhlíku, na sulfonovou skupinu -SO2 použije oxidační činidlo. Existuje mnoho oxidačních činidel, včetně peroxidu vodíku a perboritanu sodného. Užitečným může být takový katalyzátor, jako je kyselina wolframová. Sulfon, který se vytvoří, však není ve formě aktivní pro reakci selektivní pro thiolovou skupinu. Je nutné odstranit relativně nereaktivní hydroxylovou skupinu alkoholu, která byla přidána v substituční reakci druhého stupně.
Ve čtvrtém stupni se hydroxylová část alkoholu, která byla přidána ve druhém stupni, převede na reaktivnější formu, buď aktivací hydroxylové skupiny nebo substitucí hydroxylové skupiny reaktivnější skupinou, podobně jako v prvním stupni reakční řady. Substituce se typicky provádí halogenidem. Získá se halogenethylsulfon nebo jeho derivát s reaktivním místem na druhém atomu uhlíku od sulfonové skupiny. Druhý atom uhlíku na ethylové skupině se typicky aktivuje chlorovodíkem nebo bromovodíkem. Aktivace hydroxylu by měla poskytnout místo podobné reaktivity jako je sulfonátový ester. Vhodnými reakčními činidly jsou kyseliny, halogenidy kyselin a další sloučeniny shora uvedené v souvislosti s prvním stupněm reakce, zvláště thionylchlorid pro substituci hydroxylové skupiny atomem chloru.
-7CZ 295640 B6
Výsledný polymerní aktivovaný ethylsulfon je stabilní, izolovatelný a vhodný pro kondenzační reakce selektivní pro thiolovou skupinu. Jak je uvedeno v příkladech, PEG-chlorethylsulfon je stabilní ve vodě při pH 7 a menším, nicméně se s výhodou může používat pro kondenzační reakce selektivní pro thiolovou skupinu při bazickém pH až do pH alespoň 9.
U thiolové kondenzační reakce je možné, že thiolová skupina nahradí chlorid, jak je to uvedeno v následující reakci:
PEG-SO2-CH2-CH2-C1 + W-S-H -> PEG-SO2-CH2-CH2-S-W, v níž W znamená skupinu, na kterou je navázána thiolová skupina SH, a může znamenat biologicky aktivní molekulu, povrch nebo některé jiné látky. Bez ohledu na teorii se předpokládá, na základě pozorovatelných reakčních kinetik, jak je uvedeno v příkladu 3, že chlorethyl a jiné aktivované ethylsulfony a reaktivní deriváty jsou převedeny na PEG-vinylsulfon a že to je PEGvinylsulfon nebo jeho derivát, který se ve skutečnosti váže na thiolovou skupinu. Nicméně, výsledná sulfonová nebo thiolová vazba není rozlišitelná v tom, zda je z aktivního PEG ethylsulfonu nebo z PEG-vinyl vinylsulfonu, takže pro navázání na thiolové skupiny se při pH nad 7 může použít aktivní ethylsulfon.
PEG-vinylsulfon je také stabilní a izolovatelný a může tvořit hydrolyticky stabilní vazby selektivní pro thiol, typicky za mnohem kratší dobu než halogenethylsulfon nebo jiný aktivovaný ethylsulfon, jak dále vysvětleno.
V pátém stupni, který může být přidán k syntéze, se aktivovaný ethylsulfon nechá zreagovat s jakoukoliv z rozmanitých bází, jako je hydroxid sodný nebo thiethylamin. Vznikne PEG-vinylsulfon nebo jeden z jeho aktivních derivátů pro použití v kondenzačních reakcích selektivních pro thiol.
Jak je níže uvedeno v příkladech, zvláště v příkladu 3, PEG-vinylsulfon reaguje rychle s thiolovými skupinami a je stabilní proti hydrolýze ve vodě při Ph menší než 11 po dobu alespoň několika dnů. Reakci lze znázornit takto:
PEG-SO2-CH=CH2 + W-S-H -> PEG-SO2-CH2-CH2-S-W.
O thiolové části se uvádí, že se aduje „na dvojnou vazbu“. W-S skupina se aduje na koncovou CH2 skupinu dvojné vazby, která je druhým atomem uhlíku od sulfonové skupiny SO2. Atom vodíku se aduje na CH dvojné vazby. Při pH nad 9 je však selektivita sulfonové skupiny pro thiol snížena a sulfonová skupina začíná poněkud více reagovat s aminovými skupinami.
Alternativně ke shora uvedené syntéze se sulfonem aktivované PEG-deriváty mohou připravovat připojením vazebného činidla se sulfonovou částí ne PEG aktivovaný různými funkčními skupinami. Například aminovou skupinou aktivovaný PEG, PEG-NH2, se nechá zreagovat za vhodných podmínek při pH 9 nebo méně s malou molekulou, která má sukcinimidylovou aktivní esterovou část NHS-OOC- na jednom konci a sulfonovou část, vinylsulfon vzorce -SO2-CH=CH2, na druhém konci. Aminovou skupinou aktivované PEG formy tvoří stabilní vazbu se sukcinimidylovým esterem. Výsledný PEG je na konci aktivován vinylsulfonovou částí a je hydrolyticky stabilní. Reakce a výsledný vinylsulfonem aktivovaný PEG jsou strukturně reprezentovány následující rovnicí:
peg-nh2+NHS-O2C-CH2-CH2-SO2-CH=CH2 ->PEG-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH=CH2.
Podobný aktivovaný PEG by se mohl získat reakcí aminovou skupinou aktivovaného PEG, jako je sukcinimidylovou skupinou aktivní ester PEG, PEG-CO2-NHS, s malou molekulou, která má aminovou skupinu na jednom konci a vinylsulfonovou skupinu na druhém konci. Sukcinimidylový ester tvoří stabilní vazbu s aminovou skupinou:
PEG-CO2-NHS + NH2-CH2-CH2-SO2-CH=CH2 -> PEG-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH=CH2.
-8CZ 295640 B6
Aktivní PEG sulfony podle vynálezu mohou mít jakoukoliv molekulovou hmotnost, mohou být lineární nebo větvené se stovky ramének. PEG může být substituován nebo není substituován, pokud pro substituci sulfonovými skupinami existuje alespoň jedno reaktivní místo. PEG má typicky průměrné molekulové hmotnosti od 200 do 100 000 a jeho biologické vlastnosti se mění podle molekulové hmotnosti a podle stupně větvení a substituce, takže ne všechny tyto deriváty musí být užitečné pro biologické a biotechnologické aplikace. Pro většinu biologických a biotechnologických aplikací s bude používat PEG-vinylsulfon, bisvinylsulfon nebo aktivovaný ethylsulfon s v podstatě lineárním přímým řetězcem, v podstatě nesubstituovaný, s výjimkou vinylsulfonové nebo ethylsulfonové části, a, jestliže je to žádoucí, s dalšími funkčními skupinami. Pro mnoho biologických a biotechnologických aplikací by měly substituenty znamenat typicky nereaktivní skupiny, jak je atom vodíku -H a methylová skupina -CH3 („m-PEG“).
PEG může mít připojenu více než jednu vinylsulfonovou nebo prekurzorovou skupinu nebo může být PEG ukončen na jednom konci relativně nereaktivní skupinou, jako je methylová skupina, -CH3. Ukončená forma může být užitečná, například tehdy, jestliže je žádoucí jednoduše připojit polymemí řetězce na různá thiolová místa podél proteinového řetězce. Připojení PEG molekul k biologicky aktivní molekule, jako je protein nebo jiný farmaceutický prostředek, nebo na povrch se někdy nazývá jako „PEGylace“.
Lineární PEG s aktivními hydroxylovými skupinami na koncích se může aktivovat na obou koncích vinylsulfonem, jeho prekurzorem nebo derivátem podobné reaktivity tak, že se stane bifunkční. Tato bifunkční struktura, například PEG-bisvinylsulfon, se někdy označuje jako činkovitá struktura a může se používat například jako linker - spojující člen nebo spacer (raménko) pro připojení na biologicky aktivní molekuly, na povrch nebo pro připojení více než jedné této biologicky aktivní molekuly na PEG molekulu. Stabilita sulfonové části vůči hydrolýze způsobuje, že je zvláště užitečný pro bifunkční nebo heterobifunkční aplikace.
Jinou aplikací PEG-vinylsulfonu a jeho prekurzorů je dendriticky aktivovaný PEG, v němž je mnoho ramének PEG připojeno na centrální jadernou strukturu. Dendritické PEG struktury mohou být vysoce větvené a jsou obvykle nazývány „hvězdovité“ molekuly. Hvězdicovité molekuly jsou obecně popsány Merrillem v patentu US 5 171 264, jehož obsah je zde zahrnut jako citace. Sulfonové skupiny se mohou používat pro získání aktivní funkční skupiny na konci PEG řetězce vycházejícího z jádra a jako linker pro napojení funkční skupina na raménka hvězdicové molekuly.
PEG-vinylsulfony a jeho prekurzory a deriváty se mohou používat pro napojení přímo na povrchy a molekuly s thiolovou částí. Typičtěji však heterobifunkční PEG-deriváty se sulfonovou částí na jednom konci a jinou funkční skupinu na opačném konci bude připojen různými skupinami a povrch nebo molekulu. Jestliže je substituován jednou jinou aktivní skupinou, může se heterobifunkční PEG činkovitá struktura používat například pro nesení proteinu nebo jiné biologicky aktivní molekuly sulfonovými vazbami na jednom konci a jinou vazbou na jiném konci, jako je aminová vazba. Získá se tak molekula s dvěma různými aktivitami. Heterobifunkční PEG se sulfonovou částí na jednom konci a aminově specifickou částí na jiném konci by se mohl připojit jak na cystainové, tak lysinové frakci protein. Lze získat stabilní aminovou vazbu a potom hydrolyticky stabilní nereaktivní sulfonová skupina je dostupná pro následné reakce specifické pro thiolovou skupinu, podle potřeby.
Z mnoha různých sloučenin lze vybrat jiné aktivní skupiny pro heterobifunkční sulfonem aktivované PEG-y. Pro biologické a biotechnologické aplikace se substituenty typicky vyberou z reaktivních skupin typicky používaných v PEG chemii pro aktivování PEG, jako jsou aldehydy, trifluorethylsulfonát, který je někdy nazýván tresylát, N-hydroxylsukcinimidový ester, 2,4,6-trichlor-l,3,5-triazin, fluorderivát předcházející sloučeniny, acylazid, sukcinát, p-diazo-benzylová skupina, 3-(p-diazofenyloxy)-2-hydroxy-propyloxyskupina a další.
-9CZ 295640 B6
Příklady aktivních částí jiných než sulfon jsou uvedeny Davisem v patentu US 4 179 337, Leem a spol. v patentech US 4 296 097 a US 4 430 260, Iwasakim a spol. v patentu US 4 670 417, Katreem a spol. v patentech US 4 766 106, US 4 917 888 a US 4 931 544, Nakagawou a spol. v patentu US 4 791 192, Niteckim a spol. v patentu 4 902 502 a US 5 089 261, Saiferem v patentu US 5 080 891, Zalipsky v patentu US 5 122 614, Shadlem a spol. v patentu US 5 135 265, Rheem a spol. v patentu US 5 162 430, v evropské patentové přihlášce EP 0 247 860 a v PCT mezinárodních přihláškách č. WO 87/00056, WO 90/04606, WO 90/04384, WO 90/04650, WO 90/15628, WO 91/07190, WO 92/04384, WO 92/13095 a WO 92/16555, jejichž obsahy jsou zde zahrnuty jako citace.
Zručnému odborníkovi z oblasti techniky by mělo být zřejmé, že shora diskutované činkovité struktury by mohly být použity pro získání různých substituentů a kombinace substituentů. Mohly by tak být modifikovány farmaceutické prostředky, jako je aspirin, vitaminy, penicilín a další, příliš četné na to, aby zde byly uvedeny, polypeptidy nebo proteiny a fragmenty peptidů s různými funkcemi a molekulovými hmotnostmi, různé typy buněk, povrchy pro biomateriály, téměř jakákoliv látka. Pojem „protein“ tak, jak je zde používán, by měl být chápán tak, že zahrnuje peptidy a polypeptidy, které jsou polymery aminokyselin. Pojem „biomateriál“ znamená takový materiál, typicky syntetický, někdy vyrobený z umělých hmot, který je vhodný pro implantování do živého těla, aby se tak opravily poškozené nebo nemocné části. Příkladem biomateriálu jsou umělé krevní cévy.
Jeden PEG-derivát s přímým řetězcem podle vynálezu pro biologické a biotechnologické aplikace má základní strukturu vzorce R-CH2CH2-(OCH2CH2)n-Y. PEG monomer OCH2CH2 je s výhodou v podstatě nesubstituovaný a nevětvený podél polymemího základního skeletu. Index „n“ může znamenat číslo od 5 do 3000, typičtějším rozmezí je 5 až 2200, což odpovídá molekulové hmotnosti 220 až 100 000. Ještě typičtějším rozmezím je rozmezí od 34 do 1100, což odpovídá molekulovým hmotnostem od 1500 do 50000. Většina aplikací se provádí s molekulovými hmotnostmi od 2000 do 5000, což odpovídá hodnotě indexu n od 45 do 110.
Ve shora uvedeném vzorci Y znamená skupinu -SO2-CH=CH2 nebo -SO2-CH2-CH2-X, v němž X znamená atom halogenu. R znamená skupinu, která může být stejná jako Y nebo může být jiná než Y. R může znamenat HO-, H3CO-, CH2=CH-SO2-, C1-CH2-CH2-SO2- nebo polymer aktivující skupinu jinou než CH2=CH-SO2-, C1-CH2-CH2-SO2- tak, jak je to uvedeno ve shora uvedených patentech a publikovaných patentových přihláškách.
Aktivní polymemí deriváty jsou ve vodě rozpustné a hydrolyticky stabilní a poskytují ve vodě rozpustné a hydrolyticky stabilní vazby s thiolovými skupinami. Tyto deriváty jsou považovány za nekonečně rozpustné ve vodě nebo přibližující se této rozpustnosti a mohou umožňovat jinak nerozpustným molekulám vcházet do roztoku, jestliže jsou konjugovány stímto derivátem.
Hydrolyticky stabilní derivát znamená, že vazba mezi polymemí a sulfonovou částí je stabilní ve vodě a že vinylsulfonová skupiny nereaguje s vodou při pH menším než 11 po delší dobu alespoň několika dnů a potenciálně nekonečně, jak je uvedeno níže v příkladu 3. Aktivovaný ethylsulfon může být převeden na vinylsulfon za podmínek bazického pH se stejnou výslednou stabilitou. Hydrolytická stabilita thiolové vazby znamená, že konjugáty aktivovaného polymeru a látky nesoucí thiolovou skupinu jsou stabilní na vazbě sulfon-thiol po prodlouženou dobu ve vodných prostředcích při pH pod 11.0 většině proteinů lze očekávat, že ztratí svoji aktivitu při bazickém pH 11 nebo vyšším pH, takže by mělo být zručnému odborníkovi z oblasti techniky zřejmé, že mnohé aplikace pro aktivní sulfonové PEG-deriváty se budou provádět při pH menším než 11, bez ohledu na stabilitu sulfonové části při vyšších pH.
Aby byly užitečné pro modifikaci proteinů a dalších látek je pouze nutné, by sulfon byl stabilní po dobu dostatečnou pro to, aby sulfon mohl zreagovat s reaktivní thiolovou skupinou na proteinu nebo jiné látce. Rychlost reakce sulfonové skupiny s thiolem se mění podle pH, jak je uvedeno níže v příkladu 2, od 2 do 30 minut, což je mnohem rychlejší než rychlost hydrolýzy, pokud k ní
-10CZ 295640 B6 dochází. O vinylsulfonu lze očekávat, že reaguje s thiolem v mnohem širším rozmezí reakčních časů, jelikož je stabilní delší dobu. Za podmínek bazického pH chlorethylsulfon není hydrolyzován, jak je také uvedeno níže v příkladu 3, ale je převeden na vinylsulfon, který zůstává stabilní několik dnů a je dokonce reaktivnější s thiolovými skupinami. Pro účely modifikování vlastností sloučenin je možné tedy aktivní ethylsulfony považovat za hydrolyticky stabilní po prodlouženou dobu v širším rozmezí pH.
O jiných ve vodě rozpustných polymerech než PEG se předpokládá, že jsou vhodné pro podobné modifikace a aktivace aktivní sulfonovou částí. Mezi tyto další polymery patří polyvinylalkohol („PVA“), jiné polyalkylenoxidy, jako je polypropylenglykol („PPG“) a podobné, polyoxyethylované polyoly, jako je polyoxyethylenovaný glycerol, polyoxyethylenovaný sorbitol a polyoxyethylenovaná glukóza, a podobné. Tyto polymery mohou znamenat homopolymery nebo náhodné nebo blokové kopolymery a terpolymery odvozené do monomerů shora uvedených polymerů s přímým řetězcem nebo s rozvětveným řetězcem nebo substituované neb nesubstituované podobně jako PEG, ale s alespoň jedním aktivním místem dostupným pro reakci, při níž se tvoří sulfonová část.
Následující příklad 1 ukazuje syntézu, izolaci a charakterizaci polyethylenglykol-chlorethylsulfonu po přípravě polyethylenglykoGvinylsulfonu z chlorethylsulfonu. Příprava jiných polymerních sulfonů s reakčním místem na druhém atomu uhlíku od sulfonové skupiny je podobná a stupně této přípravy by měly být zřejmé odborníkům z oblasti techniky na základě níže uvedeného příkladu 1 a shora uvedeného seznamu polymerů.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza
Reakční stupně lze ilustrovat následujícími reakcemi:
(1) PEG-OH + CH3SO2CI -> PEG-OSO2CH3 (2) PEG-OSO2CH3 + HSCH2CH2OH -> PEG-SCH2CH2OH (3) PEG-SCH2CH2OH + H2O2 -> PEG-SO2CH2CH2PH (4) PEG-SO2CH2CH2OH + SOC12 PEG-SO2CH2CH2C1 (5) PEG-SO2CH2CH2C1 + NaOH -> PEG-SO2-CH=CH2 + HC1
Každá ze shora uvedených reakcí je podobně popsána níže.
Reakce 1
Reakce 1 znamená přípravu methansulfonylesteru polyethylenglykolu, který se také nazývá methansulfonát nebo mesylát polyethylenglykolu. Tosylát a halogenidy se mohou připravovat podobnými postupy, o kterých se předpokládá, že jsou známy odborníkům zoblasti techniky.
Při přípravě mesylátu se azeotropickou destilací ve 150 ml toluenu vysuší 25 g PEG o molekulové hmotnosti 3400. Při sušení PEG se přibližně polovina toluenu oddestiluje. K toluenu a PEG roztoku se přidá 40 ml suchého dichlormethanu a směs se ochladí v ledové lázni. K ochlazenému roztoku se přidá 1,230 ml destilovaného methansulfonylchloridu, což je 1,06 ekvivalentu vzhledem kPEG hydroxylovým skupinám, a 2,664 ml suchého triethylaminu, což je 1,3 ekvivalentu vzhledem kPEG hydroxylovým skupinám. „Ekvivalent“ tak, jak se zde používá, znamená množství sloučeniny, které reaguje s ekvivalentním množstvím PEG hydroxylových skupin.
Reakce se nechá stát přes noc. Během této doby se ohřeje na teplotu místnosti. Vysráží se triethylamoniumhydrochlorid a sraženina se odstraní odfiltrováním. Potom se objem sníží na
-11 CZ 295640 B6 rotačním odpařováku na 20 ml. Přidáním 100 ml ochlazeného suchého ethyletheru se vysráží mesylát. NMR analýza ukázala 100% konverzi hydroxylových skupin na mesylátové skupiny.
Reakce 2
Reakce znamená tvorbu polyethylenglykol-merkaptoethanolu reakcí mesylátu s merkaptoethanolem. Tato reakce způsobí, že methylsulfonátová skupina je vytěsněna z PEG. Síra v merkaptoethanolové skupině je napojena přímo na atom uhlíku v základním skeletu atom uhlíku-atom uhlíku PEG.
Dvacet gramů mesylátu z reakce 1 se rozpustí ve 150 ml destilované vody. Roztok mesylátu a vody se ochladí ponořením do ledové lázně. K ochlazenému roztoku se přidá 2,366 ml merkaptoethanolu, což jsou 3 ekvivalenty vzhledem k PEG hydroxylovým skupinám. Přidá se také 16,86 ml 2N báze NaOH. Tato reakce se vaří pod zpětným chladičem 3 h, což znamená, že páry z reakce se kontinuálně kondenzují a nechají se stékat zpět do reakce.
Polyethylenglykol-merkaptoethanolový produkt se extrahuje třikrát po 25 ml dichlormethanu. Organické frakce se spojí a vysuší se nad bezvodým síranem hořečnatým. Objem se sníží na 20 ml a produkt se vysráží přidáním 150ml studeného suchého etheru.
NMR analýza vd6-DMSO (dimethylsulfoxid) poskytla pro PEG-SCH2CH2OH následující maxima: 2,57 ppm, triplet, -CH2-S~, 2,65 ppm, triplet, -S-CH2-, 3,5 ppm singlet základního skeletu a 4,76 ppm, triplet, -OH. Hydroxylové maximum při 4,76 ppm ukazuje na 81% substituci. Avšak maximum u 2,65 ppm pro -S-CH2- ukazuje na 100% substituci. Bylo pozorování, že hydroxylová maxima často dávají nižší čísla procent substituce a tak maximum u 2,65 ppm pro -S-CH2- je považováno za odůvodněnější a potvrzuje 100% substituci.
Reakce 3
Reakce 3 znamená peroxidovou oxidaci polyethylenglykol-merkaptoethanolového produktu, při níž se síra převádí na sulfon. Získá se tak PEG-ethansulfon.
Dvacet gramů PEG-SCH2CH2OH se rozpustí ve 30 ml 0,123M roztoku kyseliny wolframové a roztok se ochladí v ledové lázni. Roztok kyseliny wolframové se připraví rozpuštěním kyseliny v roztoku hydroxidu sodného o pH 11,5 a následnou úpravou pH ledovou kyselinou octovou na hodnotu 5,6. K roztoku kyseliny wolframové a polyethylenglykol-merkaptoethanolu se přidá 20 ml destilované vody a 2,876 ml 30% (hmotn.) peroxidu vodíku. Reakce se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc.
Oxidovaný produkt byl třikrát extrahován 25ml dávkami dichlormethanu. Spojené organické frakce se promyjí zředěným vodným hydrogenuhličitanem sodným a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Objem se zredukuje na 20 ml PEG-ethanolsulfonový produkt se vysráží přidáním do ochlazeného suchého ethyletheru.
NMR analýza vd6-DMSO (dimethylsulfoxid) poskytla pro PEG-SO2CH2CH2OH následující maxima: 3,25 ppm, triplet, -CH2-SO2-, 3,37 ppm, triplet, -SO2-CH2-, 3,50 ppm, singlet základního skeletu, 3,77 ppm, triplet, -CH2OH a 5,04 ppm, triplet, -OH. Hydroxylové maximum při 5,04 ppm ukazuje na 85% substituci. Avšak maximum u 3,37 ppm pro -SO2-CH2- ukazuje na 100% substituci. Toto maximum je považováno za odůvodněnější.
Reakce 4
Reakce 4 znamená konečný stupeň syntézy, izolaci a charakterizaci polyethylenglykol-chlorethyl-sulfonu.
-12CZ 295640 B6
Pro syntézu produktu se 20 g PEG-SO2CH2CH2OH rozpustí ve 100 ml čerstvě předestilovaného trionylchloridu. Tento roztok se vaří pod zpětným chladiče přes noc. Thionylchlorid byl předestilován přes chinolin. Nadbytek thionylchloridu se odstraní destilací. Přidá se 50 ml toluenu a 50 ml dichlormethanu a odstraní se oddestilováním.
Pro izolaci produktu se PEG-chlorethylsulfon rozpustí ve 20 ml dichlormethanu a vysráží se přidáním ke 100 ml ochlazeného suchého ethyletheru. Produkt se izoluje překrystalováním sraženiny z 50 ml ethylacetátu.
Pro charakterizaci produktu se použije NMR. NMR analýza v d6-DMSO (dimethylsulfoxid) poskytla pro PEG-SO2CH2CH2C1 následující maxima: 3,50 ppm, základní skelet, 3,64 ppm, triplet, -CH2SO2-, 3,80, triplet, -SO2-CH2-. U 3,94 ppm se nachází triplet malé hydroxylové nečistoty. Výpočet procent substituce z tohoto spektra byl obtížný vzhledem k blízkosti důležitých maxim a velkého maxima základního skeletu.
Reakce 5
Reakce 5 znamená převedení polyethylenglykol-chlorethylsulfony z reakčního stupně 4 na polyethylenglykol-vinylsulfon a izolaci a charakterizaci vinylsulfonového produktu.
PEG-vinylsulfon se snadno připraví rozpuštěním pevného PEG-chlorethylsulfonu vdichlormethanovém rozpouštědle a následující přidáním dvou ekvivalentů báze NaOH. Roztok se zfiltruje, aby se odstranila báze, a rozpouštědlo se odpaří, aby se izoloval konečný produkt PEG-SO2-CH=CH2, PEG-vinylsulfon.
PEG-vinylsulfon byl charakterizován NMR analýzou vd6-DMSO (dimethylsulfoxid). NMR analýza ukazovala následující maxima: 3,50 ppm, základní skelet, 3,73 ppm, triplet, -CH2-SO2-, 6,21 ppm, triplet, =CH2, 6,97 ppm, dublet dubletů, -SO2-CH2- Maximum u 6,97 pro -SO2-CHukazovalo na 84% substituci. Maximum u 6,21 ppm pro =CH2 ukazovalo na 94% substituci. Titrace merkaptoethanolem a 2,2'-dithiodipyridinem ukazovala na 95% substituci.
Příklad 2
Reaktivita selektivní pro thiol
Příklad 2 ukazuje, že PEG-vinylsulfon a jeho prekurzor PEG-chlorethylsulfon jsou významně reaktivnější s thiolovými skupinami (-SH) než s aminovými (-NH2) nebo iminovými skupinami (-NH-). Sloučeniny obsahující thiolové skupiny jsou organické sloučeniny, které připomínají alkoholy a které obsahují hydroxylovou skupinu s tím, že v thiolech je atom kyslíku hydroxylové skupiny nahrazen atomem síry. Thioly se někdy nazývají také sulfhydrily nebo merkaptany. PEG-vinylsulfon obsahuje vinylsulfonovou skupinu -SO2-CH=CH2- PEG-chlorethylsulfon obsahuje chlorethylsulfonovou skupinu -SO2CH2CH2C1.
Selektivita na thioly je důležitá u modifikace proteinu, protože znamená, že cysteinové jednotky (obsahující -SH) budou modifikovány s výhodou před lysinovými jednotkami (obsahujícími -NH2) a histidinovými jednotkami (obsahujícími (-NH-). Selektivita PEG-vinylsulfonu pro thioly znamená, že PEG může být selektivně připojen na cysteinové jednotky, čímž chrání proteinovou aktivitu specifických proteinů a reguluje počet molekul PEG připojených na protein.
Relativní reaktivita PEG-vinylsulfonu s thiolovými a aminovými skupinami se stanoví měřením rychlosti reakce PEG-vinylsulfonu s methylesterem Ν-α-acetylysinu a s merkaptoethanolem. Methylester Ν-α-acetylysinu je lysinový model obsahující aminovou skupinu, zkráceně se označuje Lys-NH2. Merkaptoethanol slouží jako cysteinový model obsahující thiolovou skupinu a zkracuje se Cys-SH. Relativní reaktivita PEG-chlorethylsulfonu se stanovuje podobným způso
-13 CZ 295640 B6 bem. Tato molekula může sloužit jako „ochranná“ forma vinylsulfonu, protože je stálá v kyselině, ale přidáním báze přechází na PEG-vinylsulfon.
Reaktivita na PEG-vinylsulfon a PEG-chlorethylsulfonový prekurzor byla studována při pH 8,0, pH 9,0 a pH 9,5. Pufry pro úpravu pH byly: 0,lM fosforečnan pro pH 8,0 a 0,lM boritan pro pH 9,0 a 9,5. Pro měření merkaptoethanolové reaktivity se k oběma pufrům přidá 5 mM ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA), aby se zabránilo konverzi thiolu na disulfíd.
Pro reakci PEG-derivátů podle vynálezu s Lys-NH2 se 3mM roztok PEG-derivátu přidá za míchání k 0,3mM roztoku Lys-NH2 v příslušném pufru pro každé ze tří hodnot bazického pH. Reakce se sleduje přidáním fluoreskaminu k reakčnímu roztoku, čímž se získá fluorescenční derivát z reakce se zbývajícími aminovými skupinami. Stupeň sledování se provádí přidáním 50 μΐ reakční směsi k 1,950 ml fosforečnanového pufru o pH 8,0, následuje přidání 1,0 ml roztoku fluoreskaminu za intenzivního míchání. Roztok fluoreskaminu obsahuje 0,3 ml fluoreskaminu na ml acetonu.
Fluorescence se měří 10 minut po smíchání. Excitace se uvádí při vlnové délce 390 nm. K emisi světla dochází při 475 nm. Během 24 h nebyla pozorována žádná reakce ani pro PEG-vinylsulfon ani pro PEG-chlorethylsulfon při pH 8,0. Při pH 9,5 byla reakce pomalá, ale všechny aminokyseliny zreagovaly po několika dnech.
Pro reakci PEG-vinylsulfonu a PEG-chlorethylsulfonového prekurzoru s Cys-NH2 se 2mM roztok PEG-derivátu přidá k 0,2mM roztoku Cys-SH v příslušném pufru pro každou ze tří hodnot pH. Reakce se sleduje přidáním 4-dithiopyridinu k reakčnímu roztoku. 4-Dithiopyridinová sloučenina reaguje s Cys-SH. získá se tak 4-thiopyridon, který obsahuje ultrafialové světlo.
Stupeň sledování se provádí přidáním 50 μΐ reakční směsi k 0,950 ml 0,lM fosforečnanového pufru při pH 8,0, obsahujícího 5mM EDTA s následujícím přidáním 1 ml 2mM 4-dithiopyridinu ve stejném pufru.
Absorbance 4-thiopyridonu se měří při 324 nm. Jak PEG-vinylsulfon tak PEG-chlorethylsulfon vykazovaly reaktivitu na Cys-SH, přičemž PEG-vinylsulfon vykazuje větší reaktivitu. Při pH 9,0 je reakce ukončena během 2 minut použitím vinylsulfonu a během 15 minut použitím chlorethylsulfonu. Tyto reakce však byly příliš rychlé pro stanovení přesných rychlostních konstant. Při pH 8,0 byly reakce pomalejší, ale stále ještě úplné během 1 h s vinylsulfonem a 3 h s chlorethylsulfonem. Konverze chlorethylsulfonu na vinylsulfon je významně pomalejší než reakce vinylsulfonu s Cys-SH. Reakční rychlost chlorethylsulfonu s Cys-SH se zdá být závislá na rychlosti konverze chlorethylsulfonu na vinylsulfon. Nicméně tyto reakční rychlosti byly ještě stále mnohem rychlejší než iychlosti s Lys-NH2.
Shora uvedené kinetické studie ukazují na následující. PEG-vinylsulfon je mnohem reaktivnější s thiolovými skupinami než s aminovými skupinami, což ukazuje na to, že připojení PEG-vinylsulfonu na protein obsahující jak cysteinovou tak lysinou skupinu probíhá primárně reakcí s cysteinem. Jelikož reaktivita aminových skupin je podobná reaktivitě iminových skupin, reaktivita histidinových jednotek bude také mnohem nižší než reaktivita s cysteinovými podjednotkami. Selektivita na thiolové skupiny je také zdůrazněna při nižších hodnotách pH pro PEGchlorethylsulfon a PEG-vinylsulfon, i když reakce PEG-chlorethylsulfonu je poněkud pomalejší.
Užitečnost mnoha PEG-derivátů je omezena, protože reagují rychle s vodou, což interferuje s pokusy připojit tento derivát na molekuly a povrchy ve vodném prostředí. Následující příklad 3 ukazuje, že PEG-vinylsulfon a PEG-chlorethylsulfon jsou stabilní ve vodě.
-14CZ 295640 B6
Příklad 3
Hydrolytická stabilita
PEG-vinylsulfon byl rozpuštěn v těžké vodě, D2O, a sledován NMR. K reakci nedošlo. Roztok PEG-chlorethylsulfonu poskytl PEG-vinylsulfon v těžké vodě, která byla pufrována boritanem na pH 9,0. Monitorování NMR ukázalo, že PEG-vinylsulfon, jakmile je jednou vyroben, je stabilní 3 dny v těžké vodě.
PEG-chlorethylsulfon je stabilní ve vodě dokud se roztok nestane bazickým, pak se převede na vinylsulfon. Konverze na vinylsulfon byla demonstrována rozpuštěním PEG-chlorethylsulfonú ve vodě při pH 7 a v boritanovém pufru při pH 9. PEG-derivát se extrahuje do methylenchloridu. Odstranění methylenchloridu sledované NMR analýzou ukázalo, že PEG-chlorethylsulfon je stabilní při neutrálním pH 7,0 a reaguje s bází na PEG-vinylsulfon.
Vinylsulfon je stabilní po dobu několika dnů ve vodě, dokonce i při bazickém pH. Značná hydrolytická stabilita a reaktivita specifická k thiolu PEG-vinylsulfonu znamená, že PEG-vinylsulfon a jeho prekurzor jsou užitečnými pro modifikaci molekul a povrchů ve vodném prostředí, jak je uvedeno v následujícím příkladu 4.
Příklad 4
Konjugace proteinů
Modifikace proteinů byla demonstrována připojením PEG-derivátu na hovězí sérový albumin (BSA) dvěma různými způsoby. BSA je protein. Přírodní nemodifikovaný BSA obsahuje cystainové skupiny, které neobsahují thiolové skupiny. Tyto cystinové jednotky jsou svázány disulfidovými můstky S-S.
Podle prvního způsobu se m-PEG-vinylsulfon o molekulové hmotnosti 5000 nechá reagovat s nemodifikovaným BSA 24 h v 0,lM boritanovém pufru při pH 9,5 za teploty místnosti. Tento roztok obsahoval 1 mg BSA a 1 mg m-PEG-vinylsulfonu o molekulové hmotnosti 5000 na ml roztoku. Výsledky modelové sloučeniny z příkladu 2 ukázaly, že lysinové podjednotky (a možná histidinové podjednotky) by byly modifikovány za těchto relativně bazických podmínek a v nepřítomnosti volných thiolových skupin dostupných pro tuto reakci.
Připojení na lysinové podjednotky bylo demonstrováno dvěma způsoby. Za prvé, vylučování chromatografie ukázala, že molekulová hmotnost proteinu byla zvýšena o přibližně 50 %, což ukazuje připojení přibližně 10 PEG na protein. Za druhé, fluoreskaminová analýza ukázala, že počet lysinových skupin v BSA molekule byl přibližně desetkrát zmenšen.
Podle druhého způsobu se BSA nechá zreagovat s tributylfosfinem. Zredukují se tak disulfidové vazby S-S na thiolové skupiny -SH, které jsou dostupné pro reakci. Modifikovaný BSA se pak nechá reagovat s PEG-chlorethylsulfonem při pH 8,0 v 0,lM fosforečnanovém pufru za teploty místnosti 1 h. Tento roztok obsahoval 1 mg modifikovaného BSA a 1 mg m-PEG-chlorethylsulfonu s molekulovou hmotností 5000 na ml roztoku. Tyto výsledky ukázaly, že lysinové skupiny nebyly za těchto podmínek reaktivní. Thiolové skupiny však byly reaktivní.
Připojení PEG k proteinu bylo prokázáno vylučovací chromatografíí, která ukázala zvýšení molekulové hmotnosti proteinu o asi 25 %. Fluoreskaminová analýza neukázala žádnou změnu v počtu lysinových podjednotek v proteinu, což potvrzuje, že k připojení PEG nedochází na lysinových podjednotkách. Substituce na thiolových skupinách byla tedy potvrzena.
Vynález zde nárokovaný je popsán na zvláštních provedeních. Předcházející popis však není zamýšlen jako omezení vynálezu na provedení uvedená v příkladech. Zručný odborník z oblasti techniky by měl rozpoznat různé variace, které lze udělat v duchu a rozsahu tohoto vynálezu, jak
-15CZ 295640 B6 je popsáno v předcházejícím spisu. A naopak, tento vynález zahrnuje všechny alternativy, modifikace a ekvivalenty, které spadají do pravdivého ducha a rozsahu tohoto vynálezu tak, jak je definován v připojených nárocích.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (15)
1. Ve vodě rozpustný a izolovaný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze, vybraný ze skupiny sestávající z poly(alkylenoxidů), včetně poly(propylenglykolu), polyethylenglykolu, poly(oxyethylenovaných polyolů), poly(oxyethylovaného glycerolu), poly(oxyethylovaného sorbitolu) a poly(oxyethylované glukózy) a poly(olefinických alkoholů), včetně poly(vinylalkoholu), a derivátů těchto polymerů, přičemž tyto polymery mají alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu a obecný vzorec R-CH2-polymer-CH2-Y, kde -CH2- skupiny obsahující buď koncové uhlíkové skupiny polymeru nebo koncové uhlíkové skupiny spojovací části polymeru, přičemž tento polymer má od 5 do 3000 monomerních jednotek, a Y znamená alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny -SOr-CH=CH2 a -SO^OH^-CHt-X, v níž X znamená atom halogenu, a jejich aktivní sulfonové deriváty, přičemž R znamená stejnou nebo jinou skupinu než Y, a jestliže polymer znamená poly(ethylenglykol), potom má tento polymer obecný vzorec R-CH2CH2-(OCH2CH2)n-Y a n znamená číslo 5 až 3000.
2. Ve vodě rozpustný a izolovatelný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze podle nároku 1, přičemž polymer je vybrán ze skupiny sestávající zaktivovaných polymerů s činkovitou strukturou, kde R znamená skupinu, která je vybrána ze skupiny sestávající ze skupiny HO-, H3CO-, CH2CH=SO2-, X-CH2-CH2-SO2- a jejich derivátů, nebo aktivující skupiny jiné než CH2=CH-SO2- nebo X-CH2-CH2-SO2- a jejich derivátů.
3. Použití ve vodě rozpustného a izolovatelného aktivovaného polymeru, který je stabilní vůči hydrolýze definovaného v nároku 1 nebo 2, pro výrobu farmaceutického prostředku.
4. Hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát, vybraný ze skupiny, která obsahuje:
- biologicky aktivní molekulu s reaktivní thiolovou skupinou a ve vodě rozpustný polymemí derivát s aktivní sulfonovou skupinou podle nároku 1, tvořící vazbu s thiolovou skupinou,
- dvě biologicky aktivní části, které mohou být stejné nebo různé, přičemž alespoň jedna biologicky aktivní část má reaktivní thiolovou skupinu, a ve vodě rozpustný činkovitý aktivovaný polymer podle nároku 1 nebo 2, který má reaktivní skupinu na obou koncích, kde alespoň jedna skupina má aktivní sulfonovou skupinu, a tvoří vazbu s thiolovou skupinou alespoň jedné biologicky aktivní části, přičemž druhá biologicky aktivní část tvoří vazbu s jinými reaktivními částmi na polymeru, a
- první protein s thiolovou skupinou, druhý protein s aminovou skupinou a aktivovaný ve vodě rozpustný polymer podle nároku 1 nebo 2, který má alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu, která je selektivní pro reakci s thiolovými skupinami, a alespoň jednu další skupinu, která je selektivní pro reakci s aminovými skupinami, přičemž thiolová skupina tvoří hydrolyticky stabilní vazbu na sulfonovou skupinu na uvedeném polymeru a aminová část tvoří hydrolyticky stabilní vazbu s další reaktivní částí na polymeru.
5. Hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát podle nároku 4, který je vybrán ze skupiny sestávající z:
konjugátů, v nichž biologicky aktivní molekula znamená protein a reaktivní thiolová skupina je obsažena v cysteinová části proteinu,
-16CZ 295640 B6 konjugátu, v nichž polymemí derivát je hydrolyticky stabilní a je vybrán ze skupiny sestávající z poly(alkylenoxidů), poly(oxyethylovaných polyolů) a poly(olefmických alkoholů), konjugátů obecného vzorce PEG-SO2-CH2-CH2-S-W, v němž W znamenají biologicky aktivní molekuly, které mohou být stejné nebo různé.
6. Hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát podle nároku 4, v němž jsou biologicky aktivní molekuly vybrány ze skupiny sestávající z proteinů, farmaceutických látek, buněk, vitaminů a jejich kombinací.
7. Hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát podle nároku 4, v němž aktivní sulfonová část znamená vinylsulfon nebo halogenethylsulfon a další reaktivní část je selektivní pro reakci s aminovými skupinami.
8. Použití hydrolyticky stabilního, biologicky aktivního konjugátu podle nároků 4 až 7, pro přípravu farmaceutického prostředku.
9. Biomateriál, vyznačující se tím, že obsahuje povrch s alespoň jednou reaktivní thiolovou skupinou a alespoň jeden ve voděrozpustný aktivovaný polymer podle nároku 1 nebo 2 mají aktivní sulfonovou skupinu, napojený k tomuto povrchu sulfonovou a thiolovou vazbou.
10. Způsob syntézy izolovatelného ve vodě rozpustného aktivovaného organického polymeru podle nároku 1, přičemž vstupním polymerem je polyethylenglykol, vyznačující se tím, že zahrnuje kroky:
(a) reakci polyethylenglykolu majícího alespoň jednu aktivní hydroxylovou skupinu se sloučeninou vytvářející esterem nebo halogenidem substituovaný polyethylenglykol;
(b) reakci esterem nebo halogenidem substituovaného polyethylenglykolu získaného z kroku (a) s merkaptoethanolem k nahrazení esterové nebo halogenidové skupiny merkaptoethanolovým radikálem;
(c) reakci merkaptoethanolem substituovaného polyethylenglykolu získaného v kroku (b) s oxidačním činidlem k oxidaci síry v merkaptoethanolové skupině na sulfonovou skupinu;
(d) reakce sulfonové skupiny z kroku (c) se sloučeninou převádějící hydroxylovou část merkaptoethanolové skupiny na chloridovou skupinu;
(e) izolaci PEG-chlorethylsulfonu rozpouštěním v dichlormethanu, srážením v ethyletheru a rekrystalizaci z ethylacetátu;
(f) reakci ethylsulfonu z kroku (e) s bází za tvorby PEG-vinylsulfonu.
11. Způsob výroby biologicky aktivního konjugátu látky podle nároku 4 a ve vodě rozpustného izolovatelného aktivovaného polymeru, vyznačující se tím, že látka, kterou je biologicky aktivní molekula mající reaktivní thiolovou skupinu se nechá reagovat s aktivovaným polymerem, který má alespoň jednu aktivní sulfonovou skupinu, a který je vybrán ze skupiny sestávající z poly(alkylenoxidů), poly(oxyethylovaných polyolů) a poly(olefínických alkoholů), přičemž se vytvoří vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou.
12. Způsob výroby konjugátu podle nároku 11, vy z n a č uj í c í se tím, že poly(olefmickým alkoholem) je polyethylenglykolový derivát.
13. Způsob výroby konjugátu látky podle nároku 11 nebo 12, vyznačující se tím, že látka, kterou je biologicky aktivní molekula obecného vzorce W-SH, v němž W znamená biologicky aktivní část a SH znamená aktivní thiolovou skupinu, se nechá reagovat s polyethylenglykolovým derivátem obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, v němž n znamená
-17CZ 295640 B6 číslo 5 až 3000, Y znamená skupinu vzorce -SO2-CH=CH2 a R znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající zHO-, H3CO~, X-CH2-CH2-SO2, kde X znamená atom halogenu, a CH2=CH-SO2-, a vytvoří se vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou poly(ethylenglykol)ového derivátu.
14. Způsob výroby konjugátu látky podle kteréhokoliv z nároků 11 až 13, vyznačující se tím, že látka, kterou je protein s reaktivní thiolovou skupinou, se nechá reagovat s polyethylenglykolovým derivátem obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, v němž n znamená číslo 5 až 3000, Y znamená skupinu -SO2-CH=CH2 a R znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z HO-, H3CO, X-CH2-CH2-SO2-, kde X znamená atom halogenu, a CH2=CH-SO2-, a vytvoří se vazba mezi thiolovou skupinou a alespoň jednou aktivní sulfonovou skupinou poly(ethylenglykol)ového derivátu.
15. Způsob výroby konjugátu látky a ve vodě rozpustného izolovatelného aktivovaného polymer ru podle kteréhokoliv z nároků 11 až 14, vyznačující se tím, že vyrobený konjugát je vybrán ze skupiny sestávající z: konjugátu obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2CH2-CH2-S-W, v němž n znamená číslo 5 až 3000 a R znamená skupinu, která je vybrána ze skupiny sestávající z HO- a H3CO- konjugátu obecného vzorce W-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S-W, v němž n znamená číslo 5 až 3000, konjugátu obecného vzorce R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-S02-CH2-CH2-S-protein, v němž n znamená číslo 5 až 3000 a R znamená skupinu, která je vybrána ze skupiny sestávající z HO- a H3CO-, a konjugátu obecného vzorce protein-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2S-protein, v němž n znamená číslo 5 až 3000.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/151,481 US5446090A (en) | 1993-11-12 | 1993-11-12 | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ137596A3 CZ137596A3 (en) | 1996-10-16 |
| CZ295640B6 true CZ295640B6 (cs) | 2005-09-14 |
Family
ID=22538958
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19961375A CZ295640B6 (cs) | 1993-11-12 | 1994-11-14 | Ve vodě rozpustný a izolovatelný aktivovaný polymer, který je stabilní vůči hydrolýze a jeho použití, hydrolyticky stabilní, biologicky aktivní konjugát a jeho použití, biomateriál, způsob syntézy izolovatelného ve vodě rozpustného aktivovaného polymeru a způsob výroby biologicky aktivního konjugátu |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (6) | US5446090A (cs) |
| EP (2) | EP0728155B1 (cs) |
| JP (1) | JP3114998B2 (cs) |
| KR (1) | KR100225746B1 (cs) |
| CN (1) | CN1085689C (cs) |
| AT (1) | ATE215577T1 (cs) |
| AU (1) | AU687937B2 (cs) |
| BG (1) | BG63399B1 (cs) |
| BR (1) | BR9408048A (cs) |
| CA (1) | CA2176203C (cs) |
| CZ (1) | CZ295640B6 (cs) |
| DE (1) | DE69430317T2 (cs) |
| DK (1) | DK0728155T3 (cs) |
| EE (1) | EE03448B1 (cs) |
| ES (1) | ES2173943T3 (cs) |
| FI (1) | FI117441B (cs) |
| HK (1) | HK1042312A1 (cs) |
| HU (1) | HU225649B1 (cs) |
| NO (1) | NO315377B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ276313A (cs) |
| PL (1) | PL180149B1 (cs) |
| RO (2) | RO118434B1 (cs) |
| RU (1) | RU2176253C2 (cs) |
| SK (1) | SK284527B6 (cs) |
| UA (1) | UA58481C2 (cs) |
| WO (1) | WO1995013312A1 (cs) |
Families Citing this family (459)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6143866A (en) * | 1989-07-18 | 2000-11-07 | Amgen, Inc. | Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same |
| US6552170B1 (en) * | 1990-04-06 | 2003-04-22 | Amgen Inc. | PEGylation reagents and compounds formed therewith |
| US6057287A (en) | 1994-01-11 | 2000-05-02 | Dyax Corp. | Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof |
| US20010055581A1 (en) | 1994-03-18 | 2001-12-27 | Lawrence Tamarkin | Composition and method for delivery of biologically-active factors |
| US5583114A (en) | 1994-07-27 | 1996-12-10 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Adhesive sealant composition |
| USRE38827E1 (en) | 1994-07-27 | 2005-10-11 | 3M Innovative Properties Company | Adhesive sealant composition |
| US5672662A (en) * | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
| CA2244664C (en) | 1996-02-09 | 2008-06-03 | Amgen Inc. | Composition comprising interleukin-1 inhibitor and controlled release polymer |
| US5747639A (en) * | 1996-03-06 | 1998-05-05 | Amgen Boulder Inc. | Use of hydrophobic interaction chromatography to purify polyethylene glycols |
| TW555765B (en) * | 1996-07-09 | 2003-10-01 | Amgen Inc | Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins |
| AU4648697A (en) * | 1996-09-23 | 1998-04-14 | Chandrashekar Pathak | Methods and devices for preparing protein concentrates |
| US6566406B1 (en) | 1998-12-04 | 2003-05-20 | Incept, Llc | Biocompatible crosslinked polymers |
| US8003705B2 (en) * | 1996-09-23 | 2011-08-23 | Incept Llc | Biocompatible hydrogels made with small molecule precursors |
| EP0946198B1 (en) | 1996-10-15 | 2002-06-19 | Medical Analysis Systems, Inc. | Method of stabilizing troponin I (cTnI) via conjugation with an active polymer |
| DK0942740T3 (da) | 1996-12-06 | 2003-12-15 | Amgen Inc | Kombinationsterapi under anvendelse af et TFN-bindende protein til behandling af TFN-medierede sygdomme |
| CA2273852C (en) | 1996-12-06 | 2009-09-29 | Amgen Inc. | Combination therapy using an il-1 inhibitor for treating il-1 mediated diseases |
| US6743248B2 (en) | 1996-12-18 | 2004-06-01 | Neomend, Inc. | Pretreatment method for enhancing tissue adhesion |
| US20030191496A1 (en) * | 1997-03-12 | 2003-10-09 | Neomend, Inc. | Vascular sealing device with microwave antenna |
| US6371975B2 (en) | 1998-11-06 | 2002-04-16 | Neomend, Inc. | Compositions, systems, and methods for creating in situ, chemically cross-linked, mechanical barriers |
| US20040176801A1 (en) * | 1997-03-12 | 2004-09-09 | Neomend, Inc. | Pretreatment method for enhancing tissue adhesion |
| WO1998051336A1 (en) * | 1997-05-15 | 1998-11-19 | Theratech, Inc. | Targeted delivery to t lymphocytes |
| US6284246B1 (en) | 1997-07-30 | 2001-09-04 | The Procter & Gamble Co. | Modified polypeptides with high activity and reduced allergenicity |
| US6251866B1 (en) | 1997-08-05 | 2001-06-26 | Watson Laboratories, Inc. | Conjugates targeted to the interleukin-2 receptor |
| US6168784B1 (en) * | 1997-09-03 | 2001-01-02 | Gryphon Sciences | N-terminal modifications of RANTES and methods of use |
| US6129928A (en) * | 1997-09-05 | 2000-10-10 | Icet, Inc. | Biomimetic calcium phosphate implant coatings and methods for making the same |
| US6407218B1 (en) * | 1997-11-10 | 2002-06-18 | Cytimmune Sciences, Inc. | Method and compositions for enhancing immune response and for the production of in vitro mabs |
| US7229841B2 (en) * | 2001-04-30 | 2007-06-12 | Cytimmune Sciences, Inc. | Colloidal metal compositions and methods |
| US6066673A (en) * | 1998-03-12 | 2000-05-23 | The Procter & Gamble Company | Enzyme inhibitors |
| US6362254B2 (en) * | 1998-03-12 | 2002-03-26 | Shearwater Corporation | Poly(ethylene glycol) derivatives with proximal reactive groups |
| US6495136B1 (en) | 1998-03-26 | 2002-12-17 | The Procter & Gamble Company | Proteases having modified amino acid sequences conjugated to addition moieties |
| BR9909130A (pt) | 1998-03-26 | 2000-12-19 | Procter & Gamble | Variantes de protease de serina tendo substituições de amino-ácido |
| US6908757B1 (en) | 1998-03-26 | 2005-06-21 | The Procter & Gamble Company | Serine protease variants having amino acid deletions and substitutions |
| US6632457B1 (en) * | 1998-08-14 | 2003-10-14 | Incept Llc | Composite hydrogel drug delivery systems |
| US6458147B1 (en) | 1998-11-06 | 2002-10-01 | Neomend, Inc. | Compositions, systems, and methods for arresting or controlling bleeding or fluid leakage in body tissue |
| US6994686B2 (en) | 1998-08-26 | 2006-02-07 | Neomend, Inc. | Systems for applying cross-linked mechanical barriers |
| HK1043801A1 (zh) * | 1998-08-28 | 2002-09-27 | 格莱风科学公司 | 精确长度的聚酰胺链、其制备方法和其与蛋白质的缀合物 |
| US6551613B1 (en) * | 1998-09-08 | 2003-04-22 | Alza Corporation | Dosage form comprising therapeutic formulation |
| AU743363B2 (en) | 1998-09-22 | 2002-01-24 | Procter & Gamble Company, The | Personal care compositions containing active proteins tethered to a water insoluble substrate |
| US6660843B1 (en) * | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
| US6899889B1 (en) * | 1998-11-06 | 2005-05-31 | Neomend, Inc. | Biocompatible material composition adaptable to diverse therapeutic indications |
| US6949114B2 (en) | 1998-11-06 | 2005-09-27 | Neomend, Inc. | Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites |
| US6830756B2 (en) | 1998-11-06 | 2004-12-14 | Neomend, Inc. | Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites |
| US7279001B2 (en) * | 1998-11-06 | 2007-10-09 | Neomend, Inc. | Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites |
| CA2359318C (en) | 1999-02-01 | 2009-06-30 | Universitat Zurich | Biomaterials formed by nucleophilic addition reaction to conjugated unsaturated groups |
| US6958212B1 (en) * | 1999-02-01 | 2005-10-25 | Eidgenossische Technische Hochschule Zurich | Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds |
| WO2000078285A1 (en) * | 1999-06-18 | 2000-12-28 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Controlled release of therapeutics by in-situ entrapment by matrix cross-linking |
| BR0012694A (pt) | 1999-07-22 | 2002-04-09 | Procter & Gamble | Conjugado de protease, composição de limpeza e composição de tratamento pessoal |
| US6946128B1 (en) | 1999-07-22 | 2005-09-20 | The Procter & Gamble Company | Protease conjugates having sterically protected epitope regions |
| CA2376045A1 (en) | 1999-07-22 | 2001-02-01 | The Procter & Gamble Company | Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions |
| KR20020021397A (ko) | 1999-07-22 | 2002-03-20 | 데이비드 엠 모이어 | 규정된 에피토프 영역에 아미노산 결실 및 치환을 갖는서브틸리신 프로테아제 변이체 |
| US7008635B1 (en) * | 1999-09-10 | 2006-03-07 | Genzyme Corporation | Hydrogels for orthopedic repair |
| US6303119B1 (en) | 1999-09-22 | 2001-10-16 | The Procter & Gamble Company | Personal care compositions containing subtilisin enzymes bound to water insoluble substrates |
| US7074878B1 (en) * | 1999-12-10 | 2006-07-11 | Harris J Milton | Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom |
| US6348558B1 (en) | 1999-12-10 | 2002-02-19 | Shearwater Corporation | Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom |
| CA2395713C (en) | 2000-01-10 | 2012-04-10 | Maxygen, Inc. | G-csf conjugates |
| EP1982732A3 (en) | 2000-02-11 | 2011-06-08 | Bayer HealthCare LLC | Factor VII or VIIA-like conjugates |
| JP2003533681A (ja) | 2000-05-15 | 2003-11-11 | テカン・トレーディング・アクチェンゲゼルシャフト | ミクロ流体装置および細胞ベースの分析を実行する方法 |
| IL152804A0 (en) * | 2000-05-16 | 2003-06-24 | Bolder Biotechnology Inc | Methods for refolding proteins containing free cysteine residues |
| US7291673B2 (en) * | 2000-06-02 | 2007-11-06 | Eidgenossiche Technische Hochschule Zurich | Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds |
| EP1299415A4 (en) * | 2000-07-12 | 2005-01-19 | Gryphon Therapeutics Inc | MODULATORS OF CHEMOKIN RECEPTORS, THEIR PREPARATION AND USE |
| US7118737B2 (en) * | 2000-09-08 | 2006-10-10 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Polymer-modified synthetic proteins |
| ATE500838T1 (de) * | 2000-09-08 | 2011-03-15 | Amylin Pharmaceuticals Inc | ßPSEUDOß-NATIVE CHEMISCHE LIGATION |
| EP1355965B1 (en) * | 2000-10-19 | 2012-09-19 | Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) | Method of synthesizing block copolymers for multifunctional self-assembled systems |
| AU2000202A (en) | 2000-10-31 | 2002-05-15 | Pr Pharmaceuticals Inc | Methods and compositions for enhanced delivery of bioactive molecules |
| US7053150B2 (en) * | 2000-12-18 | 2006-05-30 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Segmented polymers and their conjugates |
| TW593427B (en) * | 2000-12-18 | 2004-06-21 | Nektar Therapeutics Al Corp | Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives |
| PL367154A1 (en) | 2001-02-27 | 2005-02-21 | Maxygen Aps | New interferon beta-like molecules |
| US20030044468A1 (en) * | 2001-03-20 | 2003-03-06 | Francesco Cellesi | Two-phase processing of thermosensitive polymers for use as biomaterials |
| US6538104B2 (en) * | 2001-04-27 | 2003-03-25 | Medical Analysis Systems, Inc. | Stabilization of cardiac troponin I subunits and complexes |
| US20040077835A1 (en) * | 2001-07-12 | 2004-04-22 | Robin Offord | Chemokine receptor modulators, production and use |
| DE60223047T2 (de) * | 2001-08-22 | 2008-07-24 | Bioartificial Gel Technologies Inc., Montreal | Verfahren zur herstellung von aktivierten polyethylenglykolen |
| US7214660B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-05-08 | Neose Technologies, Inc. | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
| EP2042196B1 (en) | 2001-10-10 | 2016-07-13 | ratiopharm GmbH | Remodelling and glycoconjugation of Granulocyte Colony Stimulating Factor (G-CSF) |
| US7795210B2 (en) | 2001-10-10 | 2010-09-14 | Novo Nordisk A/S | Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods |
| US7173003B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-02-06 | Neose Technologies, Inc. | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
| US7157277B2 (en) | 2001-11-28 | 2007-01-02 | Neose Technologies, Inc. | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
| US8008252B2 (en) | 2001-10-10 | 2011-08-30 | Novo Nordisk A/S | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII |
| EP2236161A1 (en) | 2001-10-18 | 2010-10-06 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of opioid antagonists |
| WO2003044231A1 (en) * | 2001-11-23 | 2003-05-30 | Simon Fredriksson | Method and kit for proximity probing with multivalent proximity probes |
| DK3025726T3 (da) | 2002-01-18 | 2019-12-09 | Biogen Ma Inc | Polyalkylenpolymerforbindelser og anvendelser deraf |
| US20030179692A1 (en) * | 2002-03-19 | 2003-09-25 | Yoshitaka Ohotomo | Storage medium |
| US8282912B2 (en) * | 2002-03-22 | 2012-10-09 | Kuros Biosurgery, AG | Compositions for tissue augmentation |
| DK2311432T3 (en) | 2002-06-07 | 2015-02-02 | Dyax Corp | Modified Kunitz domain polypeptides and their use in reducing ischemia or the onset of a systemic inflammatory response associated with a surgical procedure |
| US7153829B2 (en) | 2002-06-07 | 2006-12-26 | Dyax Corp. | Kallikrein-inhibitor therapies |
| BR0311978A (pt) * | 2002-06-21 | 2005-03-22 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Preparação, método para preparar a mesma, formulação farmacêutica, métodos para tratar de uma sìndrome responsiva ao fator vii, para prevenir hemorragias indesejáveis, para prevenir coagulação sanguìnea indesejável e para prevenir as reações mediadas pelo fator tecidual, e, uso de uma preparação |
| MXPA04012496A (es) | 2002-06-21 | 2005-09-12 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Glicoformos del factor vii pegilados. |
| US7034127B2 (en) * | 2002-07-02 | 2006-04-25 | Genzyme Corporation | Hydrophilic biopolymer-drug conjugates, their preparation and use |
| US20040136956A1 (en) * | 2002-09-05 | 2004-07-15 | Barker Nicholas P. | Asialo-interferons and the treatment of liver cancer |
| US20040136955A1 (en) * | 2002-09-05 | 2004-07-15 | Barker Nicholas P | Modified asialo-interferons and uses thereof |
| AU2003270555B2 (en) | 2002-09-09 | 2009-01-29 | Nektar Therapeutics | Method for preparing water-soluble polymer derivatives bearing a terminal carboxylic acid |
| CN1312279C (zh) * | 2002-11-07 | 2007-04-25 | 连云港新阳医药有限公司 | 聚乙二醇修饰门冬酰胺酶的制备方法 |
| AU2003303636B2 (en) * | 2002-12-26 | 2010-08-05 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity |
| CN102319437B (zh) * | 2002-12-26 | 2017-10-13 | 山景医药公司 | 具有增强的生物学效用的干扰素‑β的聚合物缀合物 |
| WO2004061094A1 (en) | 2002-12-30 | 2004-07-22 | Gryphon Therapeutics, Inc. | Water-soluble thioester and selenoester compounds and methods for making and using the same |
| US7553930B2 (en) * | 2003-01-06 | 2009-06-30 | Xencor, Inc. | BAFF variants and methods thereof |
| US20060014248A1 (en) * | 2003-01-06 | 2006-01-19 | Xencor, Inc. | TNF super family members with altered immunogenicity |
| US20050221443A1 (en) * | 2003-01-06 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Tumor necrosis factor super family agonists |
| AU2004204136B2 (en) | 2003-01-06 | 2008-10-09 | Nektar Therapeutics | Thiol-selective water-soluble polmer derivatives |
| US20050130892A1 (en) * | 2003-03-07 | 2005-06-16 | Xencor, Inc. | BAFF variants and methods thereof |
| ES2352337T5 (es) * | 2003-01-06 | 2017-08-11 | Nektar Therapeutics | Derivados tiol-selectivos de un polimero soluble en agua |
| WO2004075923A2 (en) | 2003-02-26 | 2004-09-10 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polymer-factor viii moiety conjugates |
| US7871607B2 (en) | 2003-03-05 | 2011-01-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases |
| US20090123367A1 (en) * | 2003-03-05 | 2009-05-14 | Delfmems | Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases |
| US20060104968A1 (en) | 2003-03-05 | 2006-05-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases |
| US7767429B2 (en) | 2003-03-05 | 2010-08-03 | Halozyme, Inc. | Soluble hyaluronidase glycoprotein (sHASEGP), process for preparing the same, uses and pharmaceutical compositions comprising thereof |
| JP2006523211A (ja) | 2003-03-14 | 2006-10-12 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | 分岐水溶性ポリマーとその複合物 |
| US7642340B2 (en) | 2003-03-31 | 2010-01-05 | Xencor, Inc. | PEGylated TNF-α variant proteins |
| US7610156B2 (en) * | 2003-03-31 | 2009-10-27 | Xencor, Inc. | Methods for rational pegylation of proteins |
| EP1610825A2 (en) * | 2003-03-31 | 2006-01-04 | Xencor, Inc. | Methods for rational pegylation of proteins |
| NZ542586A (en) | 2003-04-09 | 2009-11-27 | Biogenerix Ag | Method of forming a covalent conjugate between a G-CSF peptide and PEG |
| WO2006127896A2 (en) * | 2005-05-25 | 2006-11-30 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor ix |
| US8791070B2 (en) | 2003-04-09 | 2014-07-29 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated factor IX |
| BRPI0409322B8 (pt) | 2003-04-11 | 2021-05-25 | Antriabio Inc | método para preparar um conjugado de insulina-polímero |
| TW200510454A (en) | 2003-04-15 | 2005-03-16 | Smithkline Beecham Corp | Conjugates comprising human IL-18 and substitution mutants thereof |
| AU2004240553A1 (en) | 2003-05-09 | 2004-12-02 | Neose Technologies, Inc. | Compositions and methods for the preparation of human growth hormone glycosylation mutants |
| US20040249119A1 (en) * | 2003-06-05 | 2004-12-09 | Fox Martin Edward | Novel mPEG propionaldehyde precursor |
| GB0316294D0 (en) | 2003-07-11 | 2003-08-13 | Polytherics Ltd | Conjugated biological molecules and their preparation |
| ATE460451T1 (de) * | 2003-07-22 | 2010-03-15 | Nektar Therapeutics | Verfahren zur herstellung von funktionalisierten polymeren aus polymeralkoholen |
| US9005625B2 (en) | 2003-07-25 | 2015-04-14 | Novo Nordisk A/S | Antibody toxin conjugates |
| AU2004268145B2 (en) * | 2003-08-29 | 2010-09-16 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Poly-PEGylated protease inhibitors |
| CN1852740B (zh) | 2003-09-17 | 2011-05-11 | 耐科塔医药公司 | 多支链聚合物的药物前体 |
| SG176455A1 (en) * | 2003-10-09 | 2011-12-29 | Ambrx Inc | Polymer derivatives |
| US7524813B2 (en) * | 2003-10-10 | 2009-04-28 | Novo Nordisk Health Care Ag | Selectively conjugated peptides and methods of making the same |
| EP2263684A1 (en) | 2003-10-10 | 2010-12-22 | Novo Nordisk A/S | IL-21 derivatives |
| CA2542353A1 (en) | 2003-10-10 | 2005-04-21 | Xencor, Inc. | Protein based tnf-alpha variants for the treatment of tnf-alpha related disorders |
| ES2428358T3 (es) | 2003-10-17 | 2013-11-07 | Novo Nordisk A/S | Terapia de combinación |
| WO2005044836A2 (de) | 2003-11-05 | 2005-05-19 | Genovoxx Gmbh | Makromolekulare nukleotidverbindungen und methoden zu deren anwendung |
| US8633157B2 (en) | 2003-11-24 | 2014-01-21 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated erythropoietin |
| US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
| US7405198B2 (en) * | 2003-11-24 | 2008-07-29 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
| AU2004311630A1 (en) | 2003-12-02 | 2005-07-21 | Cytimmune Sciences, Inc. | Methods and compositions for the production of monoclonal antibodies |
| US20060040856A1 (en) * | 2003-12-03 | 2006-02-23 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor IX |
| US7956032B2 (en) | 2003-12-03 | 2011-06-07 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
| US7338933B2 (en) | 2004-01-08 | 2008-03-04 | Neose Technologies, Inc. | O-linked glycosylation of peptides |
| AU2005209318B2 (en) * | 2004-01-28 | 2010-02-11 | Cytimmune Sciences, Inc. | Functionalized colloidal metal compositions and methods |
| AU2005319099B2 (en) * | 2004-02-02 | 2010-09-16 | Ambrx, Inc. | Modified human growth hormone |
| CN103755800B (zh) | 2004-02-02 | 2016-02-24 | Ambrx公司 | 经修饰的人类生长激素多肽与其用途 |
| KR100580644B1 (ko) * | 2004-02-16 | 2006-05-16 | 삼성전자주식회사 | 생물분자를 고체 기판상에 비공유적으로 고정화 하는 방법및 그에 의하여 제조되는 마이크로어레이 |
| US7351787B2 (en) * | 2004-03-05 | 2008-04-01 | Bioartificial Gel Technologies, Inc. | Process for the preparation of activated polyethylene glycols |
| WO2005089805A2 (en) * | 2004-03-15 | 2005-09-29 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Polymer-based compositions and conjugates of hiv entry inhibitors |
| WO2005091944A2 (en) * | 2004-03-17 | 2005-10-06 | Eli Lilly And Company | Glycol linked fgf-21 compounds |
| JP2008505853A (ja) | 2004-04-13 | 2008-02-28 | クインテセンス バイオサイエンシーズ インコーポレーティッド | 細胞傷害性薬剤としての非天然のリボヌクレアーゼ複合体 |
| CN102532321B (zh) | 2004-06-18 | 2018-10-12 | Ambrx公司 | 新颖抗原结合多肽和其用途 |
| WO2006010143A2 (en) | 2004-07-13 | 2006-01-26 | Neose Technologies, Inc. | Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1] |
| CA2573720A1 (en) | 2004-07-14 | 2006-02-23 | University Of Utah Research Foundation | Netrin-related compositions and uses |
| US7638299B2 (en) * | 2004-07-21 | 2009-12-29 | Ambrx, Inc. | Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids |
| EP1799249A2 (en) | 2004-09-10 | 2007-06-27 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated interferon alpha |
| CA2581423A1 (en) | 2004-09-23 | 2006-03-30 | Vasgene Therapeutics, Inc. | Polipeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth |
| US7235530B2 (en) | 2004-09-27 | 2007-06-26 | Dyax Corporation | Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof |
| JP4920593B2 (ja) * | 2004-10-25 | 2012-04-18 | インテザイン テクノロジーズ， インコーポレイテッド | ヘテロ二官能性ポリ（エチレングリコール）およびそれらの使用 |
| EP3061461A1 (en) | 2004-10-29 | 2016-08-31 | ratiopharm GmbH | Remodeling and glycopegylation of fibroblast growth factor (fgf) |
| KR101320936B1 (ko) | 2004-12-21 | 2013-10-23 | 넥타르 테라퓨틱스 | 안정화된 중합체성 티올 시약 |
| AU2005323106B2 (en) | 2004-12-22 | 2010-07-29 | Ambrx, Inc. | Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone |
| US7385028B2 (en) | 2004-12-22 | 2008-06-10 | Ambrx, Inc | Derivatization of non-natural amino acids and polypeptides |
| NZ555425A (en) | 2004-12-22 | 2010-04-30 | Ambrx Inc | Compositions of aminoacyl-tRNA synthetase and uses thereof |
| KR101224781B1 (ko) * | 2004-12-22 | 2013-01-21 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 비천연적으로 코딩된 아미노산을 포함하는 인간 성장호르몬의 조제물 |
| US9029331B2 (en) | 2005-01-10 | 2015-05-12 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
| US7402730B1 (en) | 2005-02-03 | 2008-07-22 | Lexicon Pharmaceuticals, Inc. | Knockout animals manifesting hyperlipidemia |
| US7365127B2 (en) * | 2005-02-04 | 2008-04-29 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Process for the preparation of polymer conjugates |
| JP2008530305A (ja) * | 2005-02-09 | 2008-08-07 | タイコ ヘルスケア グループ エルピー | 合成封止剤 |
| EP2314320A2 (en) | 2005-04-05 | 2011-04-27 | Istituto di Richerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.A. | Method for shielding functional sites or epitopes on proteins |
| EP1871795A4 (en) | 2005-04-08 | 2010-03-31 | Biogenerix Ag | COMPOSITIONS AND METHOD FOR PRODUCING GLYCOSYLATION MUTANTS OF A PROTEASE-RESISTANT HUMAN GROWTH HORMONE |
| EP1885403B1 (en) | 2005-04-12 | 2013-05-08 | Nektar Therapeutics | Poly(ethyleneglycol) conjugates of Lysostaphin |
| MX2007012887A (es) | 2005-04-18 | 2007-12-10 | Novo Nordisk As | Variantes il-21. |
| US7833979B2 (en) * | 2005-04-22 | 2010-11-16 | Amgen Inc. | Toxin peptide therapeutic agents |
| CN101166545B (zh) | 2005-05-13 | 2011-06-15 | 伊莱利利公司 | Glp-1聚乙二醇化的化合物 |
| WO2006127910A2 (en) | 2005-05-25 | 2006-11-30 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin formulations |
| JP5329949B2 (ja) * | 2005-05-31 | 2013-10-30 | エコーレ ポリテクニーク フェデラーレ デ ローザンヌ | 遺伝子に基づいた薬物の細胞質送達のためのトリブロックコポリマー |
| WO2006133088A2 (en) * | 2005-06-03 | 2006-12-14 | Ambrx, Inc. | Improved human interferon molecules and their uses |
| US20060281712A1 (en) | 2005-06-14 | 2006-12-14 | Chi-Feng Yen | Pyrimidine compounds |
| US8193206B2 (en) | 2005-06-14 | 2012-06-05 | Taigen Biotechnology Co., Ltd. | Pyrimidine compounds |
| WO2006134173A2 (en) | 2005-06-17 | 2006-12-21 | Novo Nordisk Health Care Ag | Selective reduction and derivatization of engineered proteins comprising at least one non-native cysteine |
| US8568705B2 (en) | 2005-07-18 | 2013-10-29 | Nektar Therapeutics | Method for preparing branched functionalized polymers using branched polyol cores |
| US8008453B2 (en) | 2005-08-12 | 2011-08-30 | Amgen Inc. | Modified Fc molecules |
| CA2618878C (en) * | 2005-08-18 | 2016-06-28 | Ambrx, Inc. | Compositions of trna and uses thereof |
| US20070105755A1 (en) | 2005-10-26 | 2007-05-10 | Neose Technologies, Inc. | One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides |
| WO2007056191A2 (en) | 2005-11-03 | 2007-05-18 | Neose Technologies, Inc. | Nucleotide sugar purification using membranes |
| SI1954710T1 (sl) * | 2005-11-08 | 2011-08-31 | Ambrx Inc | Pospeĺ evala za modifikacijo nenaravnih aminokislin in nenaravnih peptidov aminokislin |
| EP1951890A4 (en) * | 2005-11-16 | 2009-06-24 | Ambrx Inc | PROCESSES AND COMPOSITIONS WITH NON-NATURAL AMINO ACIDS |
| KR101423898B1 (ko) * | 2005-12-14 | 2014-07-28 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 함유하는 조성물, 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드를 포함하는 방법, 및 비-천연 아미노산 및 폴리펩티드의 용도 |
| EP2364735A3 (en) | 2005-12-16 | 2012-04-11 | Nektar Therapeutics | Branched PEG conjugates of GLP-1 |
| US7743730B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-06-29 | Lam Research Corporation | Apparatus for an optimized plasma chamber grounded electrode assembly |
| JP5738516B2 (ja) | 2005-12-30 | 2015-06-24 | ゼンサン （シャンハイ） サイエンス アンド テクノロジー リミテッド | 心機能改善のためのニューレグリンの徐放 |
| AU2007207618B2 (en) * | 2006-01-18 | 2011-03-24 | Foresee Pharmaceuticals Co., Ltd. | Pharmaceutical compositions with enhanced stability |
| MX2008010841A (es) | 2006-02-21 | 2008-10-27 | Nektar Therapeutics Al Corp | Polimeros degradables segmentados y conjugados hechos de los mismos. |
| WO2007117685A2 (en) | 2006-04-07 | 2007-10-18 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Conjugates of an anti-tnf-alpha antibody |
| AU2007240313B2 (en) | 2006-04-20 | 2012-02-02 | Amgen Inc. | GLP-1 compounds |
| WO2007127473A2 (en) * | 2006-04-27 | 2007-11-08 | Intezyne Technologies, Inc. | Poly (ethylene glycol) containing chemically disparate endgroups |
| US20090252720A1 (en) | 2006-05-24 | 2009-10-08 | Novo Nordisk Health Care Ag | Prolonged FIX Analogues and Derivatives |
| US8840882B2 (en) * | 2006-06-23 | 2014-09-23 | Quintessence Biosciences, Inc. | Modified ribonucleases |
| WO2008002482A2 (en) * | 2006-06-23 | 2008-01-03 | Surmodics, Inc. | Hydrogel-based joint repair system and method |
| US8298801B2 (en) | 2006-07-17 | 2012-10-30 | Quintessence Biosciences, Inc. | Methods and compositions for the treatment of cancer |
| US20080242607A1 (en) | 2006-07-21 | 2008-10-02 | Neose Technologies, Inc. | Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences |
| PT2064333E (pt) * | 2006-09-08 | 2014-06-09 | Ambrx Inc | Supressor híbrido arnt para células de vertebrados |
| WO2008030558A2 (en) * | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Ambrx, Inc. | Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses |
| ES2457527T3 (es) * | 2006-09-08 | 2014-04-28 | Ambrx, Inc. | ARNt Supresor hibrido en células de vertebrados |
| US7985783B2 (en) | 2006-09-21 | 2011-07-26 | The Regents Of The University Of California | Aldehyde tags, uses thereof in site-specific protein modification |
| US8969532B2 (en) | 2006-10-03 | 2015-03-03 | Novo Nordisk A/S | Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography |
| BRPI0717505B8 (pt) | 2006-10-04 | 2021-05-25 | Novo Nordisk As | conjugado de peptídeo e formulação farmacêutica |
| AR063384A1 (es) | 2006-10-25 | 2009-01-28 | Amgen Inc | Agentes terapeuticos a base de peptidos derivados de toxinas |
| WO2008049920A2 (en) | 2006-10-26 | 2008-05-02 | Novo Nordisk A/S | Il-21 variants |
| JP5537946B2 (ja) | 2006-11-22 | 2014-07-02 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | Ｉｇｆ−ｉｒを含むチロシンキナーゼ受容体に対する改変タンパク質に基づく標的治療薬 |
| WO2008066902A2 (en) | 2006-11-30 | 2008-06-05 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Method for preparing a polymer conjugate |
| WO2008073300A2 (en) | 2006-12-08 | 2008-06-19 | Lexicon Pharmaceuticals, Inc. | Monoclonal antibodies against angptl3 |
| US8617531B2 (en) | 2006-12-14 | 2013-12-31 | Bolder Biotechnology, Inc. | Methods of making proteins and peptides containing a single free cysteine |
| WO2008075192A2 (en) * | 2006-12-19 | 2008-06-26 | Bracco International Bv | Targeting and therapeutic compounds and gas-filled microvesicles comprising said com ounds |
| EP2097140B1 (en) | 2006-12-20 | 2012-09-26 | Arkema Inc. | Polymer encapsulation and/or binding |
| CA2675847C (en) | 2007-01-18 | 2014-12-30 | Eli Lilly And Company | Pegylated a.beta. fab |
| PL2118123T3 (pl) | 2007-01-31 | 2016-06-30 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Stabilizowane peptydy p53 i ich zastosowania |
| US20100144599A1 (en) | 2007-02-02 | 2010-06-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Vegf pathway blockade |
| US20090227689A1 (en) * | 2007-03-05 | 2009-09-10 | Bennett Steven L | Low-Swelling Biocompatible Hydrogels |
| US20090227981A1 (en) * | 2007-03-05 | 2009-09-10 | Bennett Steven L | Low-Swelling Biocompatible Hydrogels |
| KR101476472B1 (ko) * | 2007-03-30 | 2015-01-05 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 변형된 ｆｇｆ-21 폴리펩티드 및 그 용도 |
| CN101796063B (zh) | 2007-04-03 | 2017-03-22 | 拉蒂奥法姆有限责任公司 | 使用糖聚乙二醇化g‑csf的治疗方法 |
| EP2136850B1 (en) * | 2007-04-13 | 2012-02-01 | Kuros Biosurgery AG | Polymeric tissue sealant |
| KR20100019467A (ko) * | 2007-05-02 | 2010-02-18 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 변형된 인터페론 베타 폴리펩티드 및 그의 용도 |
| EP2738257A1 (en) | 2007-05-22 | 2014-06-04 | Amgen Inc. | Compositions and methods for producing bioactive fusion proteins |
| US9493499B2 (en) | 2007-06-12 | 2016-11-15 | Novo Nordisk A/S | Process for the production of purified cytidinemonophosphate-sialic acid-polyalkylene oxide (CMP-SA-PEG) as modified nucleotide sugars via anion exchange chromatography |
| US7968811B2 (en) * | 2007-06-29 | 2011-06-28 | Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. | Integrated ignition and key switch |
| US9125807B2 (en) | 2007-07-09 | 2015-09-08 | Incept Llc | Adhesive hydrogels for ophthalmic drug delivery |
| CN101361968B (zh) | 2007-08-06 | 2011-08-03 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用 |
| WO2009020093A1 (ja) * | 2007-08-09 | 2009-02-12 | Daiichi Sankyo Company, Limited | デスドメイン含有受容体発現細胞にアポトーシスを誘導するイムノリポソーム |
| US8067028B2 (en) * | 2007-08-13 | 2011-11-29 | Confluent Surgical Inc. | Drug delivery device |
| WO2009026334A2 (en) * | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Genzyme Corporation | Treatment with kallikrein inhibitors |
| US8207112B2 (en) | 2007-08-29 | 2012-06-26 | Biogenerix Ag | Liquid formulation of G-CSF conjugate |
| JP2011520769A (ja) * | 2007-09-21 | 2011-07-21 | サイトイミューン サイエンシズ インコーポレイテッド | ナノ治療コロイド金属組成物および方法 |
| US20110014118A1 (en) * | 2007-09-21 | 2011-01-20 | Lawrence Tamarkin | Nanotherapeutic colloidal metal compositions and methods |
| JP2010540681A (ja) * | 2007-10-08 | 2010-12-24 | クインテッセンス バイオサイエンシズ，インコーポレーテッド | リボヌクレアーゼに基づく治療のための組成物及び方法 |
| WO2009055014A2 (en) | 2007-10-23 | 2009-04-30 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Hydroxyapatite-targeting multiarm polymers and conjugates made therefrom |
| CA2706700A1 (en) * | 2007-11-08 | 2009-05-14 | Cytimmune Sciences, Inc. | Compositions and methods for generating antibodies |
| CA2705521A1 (en) * | 2007-11-12 | 2009-05-22 | Intradigm Corporation | Heterobifunctional polyethylene glycol reagents |
| US20090123519A1 (en) * | 2007-11-12 | 2009-05-14 | Surmodics, Inc. | Swellable hydrogel matrix and methods |
| ES2632504T3 (es) | 2007-11-20 | 2017-09-13 | Ambrx, Inc. | Polipéptidos de insulina modificados y sus usos |
| NZ602170A (en) | 2008-02-08 | 2014-03-28 | Ambrx Inc | Modified leptin polypeptides and their uses |
| DK2257311T3 (da) | 2008-02-27 | 2014-06-30 | Novo Nordisk As | Konjugerede Faktor VIII-Molekyler |
| TWI395593B (zh) | 2008-03-06 | 2013-05-11 | Halozyme Inc | 可活化的基質降解酵素之活體內暫時性控制 |
| US20090226531A1 (en) * | 2008-03-07 | 2009-09-10 | Allergan, Inc. | Methods and composition for intraocular delivery of therapeutic sirna |
| EP2662090A1 (en) | 2008-04-14 | 2013-11-13 | Halozyme, Inc. | Modified hyaluronidases and uses in treating hyaluronan-associated diseases and conditions |
| EP2268635B1 (en) | 2008-04-21 | 2015-06-10 | Taigen Biotechnology Co., Ltd. | Heterocyclic compounds |
| TWI394580B (zh) | 2008-04-28 | 2013-05-01 | Halozyme Inc | 超快起作用胰島素組成物 |
| CA2723821C (en) * | 2008-05-16 | 2017-05-02 | Nektar Therapeutics | Conjugates of a cholinesterase moiety and a polymer |
| PE20091931A1 (es) | 2008-05-22 | 2009-12-31 | Bristol Myers Squibb Co | Proteinas de dominio de armazon basadas en fibronectina multivalentes |
| WO2010010324A1 (en) * | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Polytherics Limited | Novel reagents and method for conjugating biological molecules |
| MX2011000859A (es) | 2008-07-23 | 2011-02-24 | Ambrx Inc | Polipeptidos g-csf bovinos modificados y sus usos. |
| US8637466B2 (en) | 2008-08-11 | 2014-01-28 | Nektar Therapeutics | Multi-arm polymeric alkanoate conjugates |
| US20110165112A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-07-07 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of c-peptides |
| WO2010033216A1 (en) * | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of nesiritide peptides |
| EP2340045B1 (en) | 2008-09-19 | 2017-04-12 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of protegrin peptides |
| WO2010033222A2 (en) * | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Netkar Therapeutics | Polymer conjugates of ziconotide peptides |
| WO2010033205A1 (en) * | 2008-09-19 | 2010-03-25 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of v681-like peptides |
| US20110171166A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-07-14 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of osteocalcin peptides |
| EP2340047A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-07-06 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of kiss1 peptides |
| EP2898900B1 (en) | 2008-09-19 | 2017-11-15 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of ziconotide |
| US20110171162A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-07-14 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of thymosin alpha 1 peptides |
| US20110237524A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-09-29 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of aod-like peptides |
| EP2337585A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-06-29 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of glp-2-like peptides |
| EP2344200A2 (en) * | 2008-09-19 | 2011-07-20 | Nektar Therapeutics | Modified therapeutics peptides, methods of their preparation and use |
| EP2334337A1 (en) * | 2008-09-19 | 2011-06-22 | Nektar Therapeutics | Polymer conjugates of opioid growth factor peptides |
| PL2342223T3 (pl) | 2008-09-26 | 2017-09-29 | Ambrx, Inc. | Zmodyfikowane polipeptydy zwierzęcej erytropoetyny i ich zastosowania |
| NO2337846T3 (cs) | 2008-09-26 | 2018-06-16 | ||
| CN102227443B (zh) | 2008-10-01 | 2014-05-14 | 昆特森斯生物科学公司 | 治疗性核糖核酸酶 |
| TW201021855A (en) | 2008-11-13 | 2010-06-16 | Taigen Biotechnology Co Ltd | Lyophilization formulation |
| WO2010068432A1 (en) | 2008-11-25 | 2010-06-17 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Block copolymers and uses thereof |
| EA036569B1 (ru) | 2008-12-09 | 2020-11-24 | Галозим, Инк. | Способ получения полипептида гиалуронидазы ph20 |
| GB0823309D0 (en) * | 2008-12-19 | 2009-01-28 | Univ Bath | Functionalising reagents and their uses |
| US8637454B2 (en) * | 2009-01-06 | 2014-01-28 | Dyax Corp. | Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors |
| WO2010080720A2 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-15 | Nektar Therapeutics | Conjugates of a lysosomal enzyme moiety and a water soluble polymer |
| JP5890182B2 (ja) | 2009-02-12 | 2016-03-22 | インセプト エルエルシー | ヒドロゲルプラグによる薬物送達 |
| US9005598B2 (en) | 2009-03-04 | 2015-04-14 | Polytherics Limited | Conjugated proteins and peptides |
| US8067201B2 (en) * | 2009-04-17 | 2011-11-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods for protein refolding |
| LT2440239T (lt) | 2009-06-09 | 2017-12-11 | Prolong Pharmaceuticals, LLC | Hemoglobino kompozicijos |
| AU2010280688A1 (en) | 2009-08-05 | 2012-02-23 | Allergan, Inc. | Controlled release formulations of lipocalin muteins |
| CN102655853B (zh) | 2009-09-17 | 2015-07-29 | 巴克斯特卫生保健有限公司 | 透明质酸酶和免疫球蛋白的稳定的复合制剂及其使用方法 |
| EP2494073B1 (de) | 2009-10-26 | 2017-11-29 | AGCT GmbH | Konjugate von nukleotiden und methoden zu deren anwendung |
| BR112012009801A8 (pt) | 2009-10-30 | 2016-08-30 | Cns Therapeutics Inc | Polipeptídeo neurturina e variante de neurturina |
| EP2516455A4 (en) | 2009-12-21 | 2013-05-22 | Ambrx Inc | MODIFIED SWINE SOMATOTROPIN POLYPEPTIDES AND THEIR USES |
| NZ600361A (en) | 2009-12-21 | 2014-06-27 | Ambrx Inc | Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses |
| JO2976B1 (en) | 2009-12-22 | 2016-03-15 | ايلي ليلي اند كومباني | Axentomodulin polypeptide |
| AR079344A1 (es) | 2009-12-22 | 2012-01-18 | Lilly Co Eli | Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad |
| ES2688093T3 (es) * | 2010-01-06 | 2018-10-30 | Dyax Corp. | Proteínas de unión a calicreína plasmática |
| CN102161754B (zh) * | 2010-02-13 | 2012-06-13 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | 枝化状聚乙二醇衍生物的功能化修饰方法 |
| US9815876B2 (en) | 2010-03-05 | 2017-11-14 | Omeros Corporation | Chimeric inhibitor molecules of complement activation |
| AU2011248625B2 (en) | 2010-04-26 | 2017-01-05 | Pangu Biopharma Limited | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of cysteinyl-tRNA synthetase |
| JP6294074B2 (ja) | 2010-04-27 | 2018-03-14 | エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド | イソロイシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見 |
| CN103097524B (zh) | 2010-04-28 | 2016-08-03 | Atyr医药公司 | 与丙氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现 |
| CA2797374C (en) | 2010-04-29 | 2021-02-16 | Pangu Biopharma Limited | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of asparaginyl trna synthetases |
| WO2011150279A2 (en) | 2010-05-27 | 2011-12-01 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glutaminyl-trna synthetases |
| AU2011248457B2 (en) | 2010-04-29 | 2017-02-16 | Pangu Biopharma Limited | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl tRNA synthetases |
| WO2011140135A2 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-10 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of methionyl-trna synthetases |
| WO2011139986A2 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-10 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of arginyl-trna synthetases |
| CA2797977C (en) | 2010-05-03 | 2019-08-20 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-trna synthetases |
| CA2798139C (en) | 2010-05-04 | 2019-09-24 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of p38 multi-trna synthetase complex |
| US20120135912A1 (en) | 2010-05-10 | 2012-05-31 | Perseid Therapeutics Llc | Polypeptide inhibitors of vla4 |
| CN103200953B (zh) | 2010-05-14 | 2017-02-15 | Atyr 医药公司 | 与苯丙氨酰‑β‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现 |
| CN103096914B (zh) | 2010-05-17 | 2015-08-12 | Atyr医药公司 | 与亮氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现 |
| NZ603399A (en) | 2010-05-17 | 2014-09-26 | Cebix Inc | Pegylated c-peptide |
| US9562089B2 (en) | 2010-05-26 | 2017-02-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Fibronectin based scaffold proteins having improved stability |
| CA2800281C (en) | 2010-06-01 | 2021-01-12 | Atyr Pharma, Inc. | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of lysyl-trna synthetases |
| AU2011289831C1 (en) | 2010-07-12 | 2017-06-15 | Pangu Biopharma Limited | Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glycyl-tRNA synthetases |
| MX348420B (es) | 2010-07-20 | 2017-06-12 | Halozyme Inc | Efectos secundarios adversos asociados con la administracion de agentes anti-hialuronano y metodos para mejorar o prevenir los efectos secundarios. |
| ES2980213T3 (es) | 2010-07-30 | 2024-09-30 | Alcon Inc | Lentes de hidrogel de silicona con superficies ricas en agua |
| SMT201900495T1 (it) | 2010-08-17 | 2019-11-13 | Ambrx Inc | Polipeptidi di relaxina modificati e loro usi |
| US9567386B2 (en) | 2010-08-17 | 2017-02-14 | Ambrx, Inc. | Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides |
| CN103108650A (zh) | 2010-08-25 | 2013-05-15 | Atyr医药公司 | 与酪氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现 |
| US8961501B2 (en) | 2010-09-17 | 2015-02-24 | Incept, Llc | Method for applying flowable hydrogels to a cornea |
| TWI480288B (zh) | 2010-09-23 | 2015-04-11 | Lilly Co Eli | 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物 |
| RU2441036C1 (ru) * | 2010-09-30 | 2012-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Перспектива" (ООО НПО "Перспектива") | Способ получения активированного полиэтиленоксида |
| WO2012054822A1 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Nektar Therapeutics | Pharmacologically active polymer-glp-1 conjugates |
| KR102591732B1 (ko) | 2010-11-12 | 2023-10-19 | 넥타르 테라퓨틱스 | Ｉｌ-2 부분 및 중합체의 접합체 |
| JP2014502152A (ja) | 2010-11-12 | 2014-01-30 | ダナ ファーバー キャンサー インスティテュート，インコーポレイテッド | 癌の治療及び診断 |
| RU2013123793A (ru) | 2010-11-24 | 2014-12-27 | Лексикон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела, связывающиеся с notum пектинацетилэстеразой |
| WO2012083197A1 (en) | 2010-12-17 | 2012-06-21 | Nektar Therapeutics | Water-soluble polymer conjugates of topotecan |
| WO2012088282A1 (en) | 2010-12-21 | 2012-06-28 | Nektar Therapeutics | Multi-arm polymeric prodrug conjugates of pemetrexed-based compounds |
| US10894087B2 (en) | 2010-12-22 | 2021-01-19 | Nektar Therapeutics | Multi-arm polymeric prodrug conjugates of cabazitaxel-based compounds |
| US20130331443A1 (en) | 2010-12-22 | 2013-12-12 | Nektar Therapeutics | Multi-arm polymeric prodrug conjugates of taxane-based compounds |
| IL269565B2 (en) | 2011-01-06 | 2024-06-01 | Dyax Corp | Plasma kallikrein binding proteins |
| ES2634669T3 (es) | 2011-02-08 | 2017-09-28 | Halozyme, Inc. | Composición y formulación lipídica de una enzima de degradación de hialuronano y uso de la misma para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata |
| US9340590B2 (en) | 2011-03-16 | 2016-05-17 | Amgen Inc. | Potent and selective inhibitors of NaV1.3 and NaV1.7 |
| US20140187488A1 (en) | 2011-05-17 | 2014-07-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods for maintaining pegylation of polypeptides |
| WO2012166555A1 (en) | 2011-05-27 | 2012-12-06 | Nektar Therapeutics | Water - soluble polymer - linked binding moiety and drug compounds |
| CN103687622A (zh) | 2011-06-16 | 2014-03-26 | 香港科技大学 | 含有多个乙烯砜的分子 |
| MX341448B (es) | 2011-06-17 | 2016-08-19 | Halozyme Inc | Metodos de infusion de insulina subcutanea continua con una enzima que degrada a hialuronano. |
| US9993529B2 (en) | 2011-06-17 | 2018-06-12 | Halozyme, Inc. | Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme |
| WO2012174478A2 (en) | 2011-06-17 | 2012-12-20 | Halozyme, Inc. | Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme |
| US9382305B2 (en) | 2011-07-01 | 2016-07-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Relaxin fusion polypeptides and uses thereof |
| PT2717917T (pt) | 2011-07-05 | 2016-07-27 | Bioasis Technologies Inc | Conjugados de anticorpos p97 |
| WO2013020079A2 (en) | 2011-08-04 | 2013-02-07 | Nektar Therapeutics | Conjugates of an il-11 moiety and a polymer |
| WO2013040501A1 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | Pharmathene, Inc. | Compositions and combinations of organophosphorus bioscavengers and hyaluronan-degrading enzymes, and uses thereof |
| US10226417B2 (en) | 2011-09-16 | 2019-03-12 | Peter Jarrett | Drug delivery systems and applications |
| AU2012328880B2 (en) | 2011-10-24 | 2017-02-23 | Halozyme, Inc. | Companion diagnostic for anti-hyaluronan agent therapy and methods of use thereof |
| JP2015504038A (ja) | 2011-10-31 | 2015-02-05 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | 低減した免疫原性を有するフィブロネクチン結合ドメイン |
| WO2013075117A2 (en) | 2011-11-17 | 2013-05-23 | John Wahren | Pegylated c-peptide |
| US9205150B2 (en) | 2011-12-05 | 2015-12-08 | Incept, Llc | Medical organogel processes and compositions |
| HK1208039A1 (en) | 2011-12-29 | 2016-02-19 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized antiviral fusion helices |
| WO2013102144A2 (en) | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Halozyme, Inc. | Ph20 polypeptede variants, formulations and uses thereof |
| IN2014MN01642A (cs) | 2012-02-16 | 2015-07-03 | Atyr Pharma Inc | |
| AU2013237894B2 (en) | 2012-03-30 | 2018-06-21 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | High molecular weight heparosan polymers and methods of production and use thereof |
| EP2838577B1 (en) | 2012-04-02 | 2019-02-27 | SurModics, Inc. | Hydrophilic polymeric coatings for medical articles with visualization moiety |
| NZ700073A (en) | 2012-04-04 | 2016-08-26 | Halozyme Inc | Combination therapy with an anti - hyaluronan agent and a tumor - targeted taxane |
| US9844582B2 (en) | 2012-05-22 | 2017-12-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Synergistic tumor treatment with extended-PK IL-2 and therapeutic agents |
| AU2013267161A1 (en) | 2012-05-31 | 2014-11-20 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antigen binding proteins that bind PD-L1 |
| JP6498600B2 (ja) | 2012-06-08 | 2019-04-10 | ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド | 部位特異的な非天然アミノ酸残基を含む抗体、その調製方法、及びその使用方法 |
| JP6429771B2 (ja) | 2012-06-21 | 2018-11-28 | ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＳｏｒｒｅｎｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． | ｃ−Ｍｅｔに結合する抗原結合タンパク質 |
| WO2013192596A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | Sorrento Therapeutics Inc. | Antigen binding proteins that bind ccr2 |
| EP2863955B1 (en) | 2012-06-26 | 2016-11-23 | Sutro Biopharma, Inc. | Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use |
| US9932565B2 (en) | 2012-07-31 | 2018-04-03 | Bioasis Technologies, Inc. | Dephosphorylated lysosomal storage disease proteins and methods of use thereof |
| US9395468B2 (en) | 2012-08-27 | 2016-07-19 | Ocular Dynamics, Llc | Contact lens with a hydrophilic layer |
| DK2890402T3 (da) | 2012-08-31 | 2019-07-15 | Sutro Biopharma Inc | Modificerede aminosyrer omfattende en azidogruppe |
| US9278124B2 (en) | 2012-10-16 | 2016-03-08 | Halozyme, Inc. | Hypoxia and hyaluronan and markers thereof for diagnosis and monitoring of diseases and conditions and related methods |
| WO2014074218A1 (en) | 2012-11-12 | 2014-05-15 | Redwood Bioscience, Inc. | Compounds and methods for producing a conjugate |
| EP2920148B1 (en) | 2012-11-16 | 2019-06-12 | The Regents of the University of California | Pictet-spengler ligation for protein chemical modification |
| US9310374B2 (en) | 2012-11-16 | 2016-04-12 | Redwood Bioscience, Inc. | Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate |
| US9383357B2 (en) | 2012-12-07 | 2016-07-05 | Northwestern University | Biomarker for replicative senescence |
| JP6426107B2 (ja) | 2012-12-20 | 2018-11-21 | アムジエン・インコーポレーテツド | Ａｐｊ受容体アゴニストおよびその使用 |
| WO2014120891A2 (en) | 2013-02-01 | 2014-08-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Fibronectin based scaffold proteins |
| WO2014165277A2 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-09 | Amgen Inc. | POTENT AND SELECTIVE INHIBITORS OF Nav1.7 |
| EP2970433B1 (en) | 2013-03-13 | 2019-09-18 | Bioasis Technologies Inc. | Fragments of p97 and uses thereof |
| US10087215B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-10-02 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized SOS1 peptides |
| WO2014151369A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized ezh2 peptides |
| WO2014144768A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Bh4 stabilized peptides and uses thereof |
| US9676853B2 (en) | 2013-05-31 | 2017-06-13 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antigen binding proteins that bind PD-1 |
| TW201534726A (zh) | 2013-07-03 | 2015-09-16 | Halozyme Inc | 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途 |
| WO2015006555A2 (en) | 2013-07-10 | 2015-01-15 | Sutro Biopharma, Inc. | Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use |
| US10711106B2 (en) | 2013-07-25 | 2020-07-14 | The University Of Chicago | High aspect ratio nanofibril materials |
| EP3038657A2 (en) | 2013-08-28 | 2016-07-06 | Bioasis Technologies Inc. | Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof |
| US9840493B2 (en) | 2013-10-11 | 2017-12-12 | Sutro Biopharma, Inc. | Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use |
| CN104623637A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用 |
| AU2014348502B2 (en) | 2013-11-15 | 2019-08-15 | Tangible Science, Inc. | Contact lens with a hydrophilic layer |
| CN105744935B (zh) | 2013-11-27 | 2022-09-30 | 雷德伍德生物科技股份有限公司 | 肼基-吡咯并化合物及用于生成缀合物的方法 |
| CN112043835B (zh) | 2013-12-06 | 2022-10-21 | 韩捷 | 用于含氮和羟基的药物的生物可逆引入基团 |
| EP3122782A4 (en) | 2014-03-27 | 2017-09-13 | Dyax Corp. | Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema |
| MA39711A (fr) | 2014-04-03 | 2015-10-08 | Nektar Therapeutics | Conjugués d'une fraction d'il-15 et d'un polymère |
| EP3143137A4 (en) | 2014-05-14 | 2017-11-15 | Trustees of Dartmouth College | Deimmunized lysostaphin and methods of use |
| EP3155002B1 (en) | 2014-06-10 | 2019-11-27 | Amgen Inc. | Apelin polypeptides |
| WO2016025647A1 (en) | 2014-08-12 | 2016-02-18 | Massachusetts Institute Of Technology | Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine |
| WO2016025642A1 (en) | 2014-08-12 | 2016-02-18 | Massachusetts Institute Of Technology | Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein |
| EP3183000A4 (en) | 2014-08-22 | 2018-04-25 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antigen binding proteins that bind cxcr3 |
| EP3186281B1 (en) | 2014-08-28 | 2019-04-10 | Halozyme, Inc. | Combination therapy with a hyaluronan-degrading enzyme and an immune checkpoint inhibitor |
| WO2016059377A1 (en) | 2014-10-14 | 2016-04-21 | Polytherics Limited | Process for the conjugation of a peptide or protein with a reagent comprising a leaving group including a portion of peg |
| BR112017007765B1 (pt) | 2014-10-14 | 2023-10-03 | Halozyme, Inc | Composições de adenosina deaminase-2 (ada2), variantes do mesmo e métodos de usar o mesmo |
| BR112017008157A2 (pt) | 2014-10-24 | 2017-12-19 | Bristol Myers Squibb Co | polipeptídeos de fgf-21 modificados e usos dos mesmos |
| ES2960741T3 (es) * | 2014-10-24 | 2024-03-06 | Abzena Uk Ltd | Conjugados y reactivos de conjugación |
| GB201419108D0 (en) | 2014-10-27 | 2014-12-10 | Glythera Ltd | Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates |
| EP3229851A4 (en) | 2014-12-09 | 2018-08-01 | Tangible Science LLC | Medical device coating with a biocompatible layer |
| US11142554B2 (en) | 2015-03-18 | 2021-10-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Selective Mcl-1 binding peptides |
| CA2989311A1 (en) | 2015-07-02 | 2017-01-05 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized anti-microbial peptides |
| US20190002506A1 (en) | 2015-08-28 | 2019-01-03 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized peptides for covalent binding to target protein |
| EP3341008B1 (en) | 2015-08-28 | 2026-04-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Peptides binding to bfl-1 |
| MA47290A (fr) | 2015-10-08 | 2019-11-27 | Nektar Therapeutics | Combinaison d'un agoniste sélectif de l'il-2rbeta et d'un agoniste de l'il-15 à action prolongée |
| ES2908470T3 (es) | 2015-11-09 | 2022-04-29 | Scherer Technologies Llc R P | Conjugados de anticuerpo anti-CD22-maitansina y métodos de uso de los mismos |
| BR112018011622A2 (pt) | 2015-12-11 | 2018-11-27 | Dyax Corp | método para tratar ataque de angioedema hereditário (hae) ou reduzir a taxa de ataque de hae |
| KR102927822B1 (ko) | 2016-01-29 | 2026-02-13 | 주식회사유한양행 | Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질 |
| CN109069578A (zh) | 2016-02-29 | 2018-12-21 | 达纳-法伯癌症研究所股份有限公司 | 用于治疗感染的钉合的细胞内靶向抗微生物肽 |
| US10421785B2 (en) | 2016-04-11 | 2019-09-24 | Bar-Ilan University | Delta receptor agonist peptides and use thereof |
| ES3046711T3 (en) | 2016-04-15 | 2025-12-02 | Beckman Coulter Inc | Photoactive macromolecules and uses thereof |
| ES2930351T3 (es) | 2016-04-15 | 2022-12-09 | Evive Biotechnology Shanghai Ltd | Un dímero de IL-22 para su uso en el tratamiento de enterocolitis necrosante |
| US11198715B2 (en) | 2016-07-22 | 2021-12-14 | Massachusetts Institute Of Technology | Selective Bfl-1 peptides |
| EP3496750A2 (en) | 2016-08-09 | 2019-06-19 | Eli Lilly and Company | Combination therapy |
| AU2017315447B2 (en) | 2016-08-26 | 2023-04-27 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Bcl-w polypeptides and mimetics for treating or preventing chemotherapy-induced peripheral neuropathy and hearing loss |
| EP3551213A4 (en) | 2016-12-07 | 2020-11-04 | The University of Chicago | FOX3 INHIBITION COMPOSITIONS AND METHODS |
| EP3551703A4 (en) | 2016-12-12 | 2021-01-20 | Becton, Dickinson and Company | WATER-SOLUBLE POLYMERIC DYES |
| US10266578B2 (en) | 2017-02-08 | 2019-04-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof |
| WO2018170299A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Inhibitors of prokaryotic gene transcription and uses thereof |
| WO2018172503A2 (en) | 2017-03-24 | 2018-09-27 | Basf Se | Liquid laundry detergent comprising modified saccharide or polysaccharide |
| CN111093688B (zh) | 2017-05-15 | 2025-09-16 | 尼克塔治疗公司 | 长效白细胞介素-15受体激动剂以及相关免疫治疗组合物和方法 |
| AU2018290281B2 (en) | 2017-06-22 | 2021-12-16 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modified membrane type serine protease 1 (MTSP-1) polypeptides and methods of use |
| JP7305614B2 (ja) | 2017-07-19 | 2023-07-10 | デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド | 抗生物質耐性細菌感染症の処置のための安定化抗菌ペプチド |
| US11485781B2 (en) | 2017-08-17 | 2022-11-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Multiple specificity binders of CXC chemokines |
| EP3688007B1 (en) | 2017-09-27 | 2024-07-31 | The University of York | Bioconjugation of polypeptides |
| PH12020550661A1 (en) | 2017-11-21 | 2021-04-19 | Univ Leland Stanford Junior | Partial agonists of interleukin-2 |
| WO2019118893A1 (en) | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized peptide-mediated targeted protein degradation |
| AU2018383633B2 (en) | 2017-12-15 | 2024-05-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Selective targeting of apoptosis proteins by structurally-stabilized and/or cysteine-reactive NOXA peptides |
| WO2019133399A1 (en) | 2017-12-26 | 2019-07-04 | Becton, Dickinson And Company | Deep ultraviolet-excitable water-solvated polymeric dyes |
| WO2019157131A1 (en) | 2018-02-07 | 2019-08-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Cell-permeable stapled peptide modules for cellular delivery |
| US20200408746A1 (en) | 2018-03-14 | 2020-12-31 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized Peptides for Biomarker Detection |
| CN119242071A (zh) | 2018-03-30 | 2025-01-03 | 贝克顿·迪金森公司 | 含侧基发色团的水溶性聚合染料 |
| US20190351031A1 (en) | 2018-05-16 | 2019-11-21 | Halozyme, Inc. | Methods of selecting subjects for combination cancer therapy with a polymer-conjugated soluble ph20 |
| KR102167755B1 (ko) | 2018-05-23 | 2020-10-19 | 주식회사 큐어바이오 | 단편화된 grs 폴리펩타이드, 이의 변이체 및 이들의 용도 |
| US20220162336A1 (en) | 2018-07-22 | 2022-05-26 | Bioasis Technologies, Inc. | Treatment of lymphatic metastases |
| KR20210063351A (ko) | 2018-08-28 | 2021-06-01 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 항-cd3 항체 폴레이트 생체접합체 및 이들의 용도 |
| MX2021002575A (es) | 2018-09-11 | 2021-06-08 | Ambrx Inc | Conjugados de polipeptidos de interleucina-2 y sus usos. |
| WO2020060975A1 (en) | 2018-09-17 | 2020-03-26 | Massachusetts Institute Of Technology | Peptides selective for bcl-2 family proteins |
| AU2019361206A1 (en) | 2018-10-19 | 2021-06-03 | Ambrx, Inc. | Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses |
| US12441776B2 (en) | 2018-11-30 | 2025-10-14 | Eirgen Pharma Ltd. | Oxyntomodulin peptide analog formulations |
| WO2020131871A1 (en) * | 2018-12-19 | 2020-06-25 | Tangible Science, Inc. | Systems and methods of treating a hydrogel-coated medical device |
| WO2020140101A1 (en) | 2018-12-28 | 2020-07-02 | Catalyst Biosciences, Inc. | Modified urokinase-type plasminogen activator polypeptides and methods of use |
| US11613744B2 (en) | 2018-12-28 | 2023-03-28 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Modified urokinase-type plasminogen activator polypeptides and methods of use |
| WO2020154032A1 (en) | 2019-01-23 | 2020-07-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade |
| CN119455003A (zh) | 2019-02-12 | 2025-02-18 | Ambrx公司 | 包含抗体-tlr激动剂缀合物的组合物、方法和用途 |
| EP3962933A1 (en) | 2019-04-18 | 2022-03-09 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Selective targeting of ubiquitin- and ubiquitin-like e1-activating enzymes by structurally-stabilized peptides |
| CN113747948B (zh) | 2019-04-26 | 2023-12-15 | 宝洁公司 | 减少来源于阳离子抗微生物剂的牙齿变色 |
| EP4077361A1 (en) | 2019-12-16 | 2022-10-26 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Structurally-stabilized oncolytic peptides and uses thereof |
| AU2020408070A1 (en) | 2019-12-20 | 2022-06-09 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Structurally-stabilized glucagon-like peptide 1 peptides and uses thereof |
| CA3167336A1 (en) | 2020-01-13 | 2021-07-22 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating pediatric hereditary angioedema attack |
| EP4090674A4 (en) | 2020-01-14 | 2024-01-24 | Synthekine, Inc. | Biased il2 muteins methods and compositions |
| WO2021164744A1 (en) | 2020-02-19 | 2021-08-26 | Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd | Methods for treating graft versus host disease |
| WO2021173889A1 (en) | 2020-02-26 | 2021-09-02 | Ambrx, Inc. | Uses of anti-cd3 antibody folate bioconjugates |
| EP4114431A2 (en) | 2020-03-04 | 2023-01-11 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Antiviral structurally-stabilized sars-cov-2 peptides and uses thereof |
| WO2021183832A1 (en) | 2020-03-11 | 2021-09-16 | Ambrx, Inc. | Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof |
| WO2021216845A1 (en) | 2020-04-22 | 2021-10-28 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Antiviral structurally-stabilized ace2 helix 1 peptides and uses thereof |
| EP4142766A2 (en) | 2020-04-27 | 2023-03-08 | Dana Farber Cancer Institute, Inc. | Structurally-stabilized and hdmx-selective p53 peptides and uses thereof |
| US20210355468A1 (en) | 2020-05-18 | 2021-11-18 | Bioasis Technologies, Inc. | Compositions and methods for treating lewy body dementia |
| US20210393787A1 (en) | 2020-06-17 | 2021-12-23 | Bioasis Technologies, Inc. | Compositions and methods for treating frontotemporal dementia |
| AU2021327396A1 (en) | 2020-08-20 | 2023-03-23 | Ambrx, Inc. | Antibody-TLR agonist conjugates, methods and uses thereof |
| AU2021360898A1 (en) | 2020-10-14 | 2023-03-23 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Chimeric conjugates for degradation of viral and host proteins and methods of use |
| EP4240395A1 (en) | 2020-11-05 | 2023-09-13 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Antiviral structurally-stabilized ebolavirus peptides and uses thereof |
| US12552834B2 (en) | 2021-01-25 | 2026-02-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Selective MENA binding peptides |
| MX2023011480A (es) | 2021-04-03 | 2023-12-06 | Ambrx Inc | Conjugados anticuerpo anti-her2-fármaco y usos de estos. |
| WO2023039474A1 (en) | 2021-09-08 | 2023-03-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Antiviral structurally-stapled sars-cov-2 peptide- cholesterol conjugates and uses thereof |
| EP4155349A1 (en) | 2021-09-24 | 2023-03-29 | Becton, Dickinson and Company | Water-soluble yellow green absorbing dyes |
| EP4518900A1 (en) | 2022-05-04 | 2025-03-12 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Ebolavirus surface glycoprotein peptides, conjugates, and uses thereof |
| AU2023298234A1 (en) | 2022-07-01 | 2025-01-16 | Beckman Coulter, Inc. | Novel fluorescent dyes and polymers from dihydrophenanthrene derivatives |
| WO2024044327A1 (en) | 2022-08-26 | 2024-02-29 | Beckman Coulter, Inc. | Dhnt monomers and polymer dyes with modified photophysical properties |
| WO2024196805A1 (en) | 2023-03-17 | 2024-09-26 | Beckman Coulter, Inc. | Benzothienopyrrole cyanine dyes |
| AR131133A1 (es) | 2023-05-24 | 2025-02-19 | Ambrx Inc | INTERFERÓN l BOVINO PEGILADO Y MÉTODOS DE USO DEL MISMO |
| CN121866309A (zh) | 2023-09-21 | 2026-04-14 | 贝克曼库尔特有限公司 | 用于流式细胞术的二氢菲（dhp）桥接染料 |
| WO2025227129A2 (en) | 2024-04-25 | 2025-10-30 | Starrock Pharma Llc | Delivery vehicles comprising proglucagon derived polypeptides and anabolic polypeptides and uses thereof |
| US20250341516A1 (en) | 2024-05-01 | 2025-11-06 | BioLegend, Inc. | Compositions for use with multiple fluorophores and methods of using |
| WO2026043823A2 (en) | 2024-08-19 | 2026-02-26 | Sutro Biopharma, Inc. | Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of preparation and uses thereof |
Family Cites Families (58)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3784524A (en) * | 1971-06-25 | 1974-01-08 | Grace W R & Co | Urethane/thioether-containing polyene composition and the reaction product thereof |
| US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| US4134887A (en) * | 1973-10-17 | 1979-01-16 | Hoechst Aktiengesellschaft | Phenyl-azo-phenyl dyestuffs |
| CH586739A5 (cs) * | 1973-10-17 | 1977-04-15 | Hoechst Ag | |
| US4179387A (en) * | 1974-03-12 | 1979-12-18 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Process for producing magnetic FE oxide |
| IL47468A (en) * | 1975-06-12 | 1979-05-31 | Rehovot Res Prod | Process for the cross-linking of proteins using water soluble cross-linking agents |
| US4002531A (en) * | 1976-01-22 | 1977-01-11 | Pierce Chemical Company | Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby |
| DE2607766C3 (de) * | 1976-02-26 | 1978-12-07 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur Herstellung von trägergebundenen biologisch aktiven Substanzen |
| US4228019A (en) * | 1978-06-19 | 1980-10-14 | Texaco Development Corp. | Secondary recovery process |
| US4473693A (en) * | 1978-08-04 | 1984-09-25 | Stewart Walter W | Aminonaphthalimide dyes for intracellular labelling |
| DE2850058A1 (de) * | 1978-11-18 | 1980-05-29 | Bayer Ag | Polyaether-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
| US4356166A (en) * | 1978-12-08 | 1982-10-26 | University Of Utah | Time-release chemical delivery system |
| US4430260A (en) * | 1979-02-27 | 1984-02-07 | Lee Weng Y | Penicillin-polyvinyl alcohol conjugate and process of preparation |
| US4296097A (en) * | 1979-02-27 | 1981-10-20 | Lee Weng Y | Suppression of reaginic antibodies to drugs employing polyvinyl alcohol as carrier therefor |
| US4241199A (en) * | 1979-09-18 | 1980-12-23 | Union Carbide Corporation | Novel polyester diols |
| US4280979A (en) * | 1979-09-18 | 1981-07-28 | Union Carbide Corporation | Copolymers, compositions, and articles, and methods for making same |
| JPS585320A (ja) * | 1981-07-01 | 1983-01-12 | Toray Ind Inc | グラフト共重合体 |
| US4973493A (en) * | 1982-09-29 | 1990-11-27 | Bio-Metric Systems, Inc. | Method of improving the biocompatibility of solid surfaces |
| JPS59204144A (ja) * | 1983-04-12 | 1984-11-19 | Daikin Ind Ltd | 新規含フッ素化合物およびその製法 |
| SE470099B (sv) * | 1984-05-17 | 1993-11-08 | Jerker Porath | Sulfonaktiverade tioeteradsorbenter för separation av t ex protein |
| SE454885B (sv) * | 1984-10-19 | 1988-06-06 | Exploaterings Ab Tbf | Polymerbelagda partiklar med immobiliserade metalljoner pa sin yta jemte forfarande for framstellning derav |
| US4616644A (en) * | 1985-06-14 | 1986-10-14 | Johnson & Johnson Products, Inc. | Hemostatic adhesive bandage |
| DE3675588D1 (de) * | 1985-06-19 | 1990-12-20 | Ajinomoto Kk | Haemoglobin, das an ein poly(alkenylenoxid) gebunden ist. |
| US4766106A (en) * | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| DE3676670D1 (de) * | 1985-06-26 | 1991-02-07 | Cetus Corp | Solubilisierung von proteinen fuer pharmazeutische zusammensetzungen mittels polymerkonjugierung. |
| US4917888A (en) * | 1985-06-26 | 1990-04-17 | Cetus Corporation | Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
| US4883864A (en) * | 1985-09-06 | 1989-11-28 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Modified collagen compound and method of preparation |
| US4983494A (en) * | 1985-10-16 | 1991-01-08 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Image forming process including heating step |
| CA1283046C (en) * | 1986-05-29 | 1991-04-16 | Nandini Katre | Tumor necrosis factor formulation |
| US4791192A (en) * | 1986-06-26 | 1988-12-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein with polyethyleneglycol |
| US4871785A (en) * | 1986-08-13 | 1989-10-03 | Michael Froix | Clouding-resistant contact lens compositions |
| DE3628717A1 (de) * | 1986-08-23 | 1988-02-25 | Agfa Gevaert Ag | Haertungsmittel fuer proteine, eine damit gehaertete bindemittelschicht und eine solche schicht enthaltendes fotografisches aufzeichnungsmaterial |
| US4931544A (en) * | 1986-09-04 | 1990-06-05 | Cetus Corporation | Succinylated interleukin-2 for pharmaceutical compositions |
| DE3634525A1 (de) * | 1986-10-10 | 1988-04-21 | Miles Lab | Testmittel und indikatoren zum nachweis von thiolgruppen und verfahren zu deren herstellung |
| US5080891A (en) * | 1987-08-03 | 1992-01-14 | Ddi Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols |
| US5153265A (en) * | 1988-01-20 | 1992-10-06 | Cetus Corporation | Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1 |
| NL8800577A (nl) * | 1988-03-08 | 1989-10-02 | Stichting Tech Wetenschapp | Werkwijze voor het aanbrengen van een bloedcompatibele bekleding op polyetherurethaanvormstukken. |
| GB8824591D0 (en) * | 1988-10-20 | 1988-11-23 | Royal Free Hosp School Med | Fractionation process |
| GB8824592D0 (en) * | 1988-10-20 | 1988-11-23 | Royal Free Hosp School Med | Purification process |
| GB8824593D0 (en) * | 1988-10-20 | 1988-11-23 | Royal Free Hosp School Med | Liposomes |
| US5162430A (en) * | 1988-11-21 | 1992-11-10 | Collagen Corporation | Collagen-polymer conjugates |
| US4902502A (en) * | 1989-01-23 | 1990-02-20 | Cetus Corporation | Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate |
| US5089261A (en) * | 1989-01-23 | 1992-02-18 | Cetus Corporation | Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate |
| US5122614A (en) * | 1989-04-19 | 1992-06-16 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
| WO1990015628A1 (en) * | 1989-06-14 | 1990-12-27 | Cetus Corporation | Polymer/antibiotic conjugate |
| US5234903A (en) * | 1989-11-22 | 1993-08-10 | Enzon, Inc. | Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute |
| US5171264A (en) * | 1990-02-28 | 1992-12-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Immobilized polyethylene oxide star molecules for bioapplications |
| DE69133235T2 (de) * | 1990-08-31 | 2003-11-20 | The Regents Of The University Of Minnesota, Minneapolis | Verfahren zur Herstellung von Harzen für die Feststoff-Peptidsynthese |
| US5380536A (en) * | 1990-10-15 | 1995-01-10 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Biocompatible microcapsules |
| SE467308B (sv) * | 1990-10-22 | 1992-06-29 | Berol Nobel Ab | Fast yta belagd med ett hydrofilt ytterskikt med kovalent bundna biopolymerer, saett att framstaella en saadan yta och ett konjugat daerfoer |
| AU1235692A (en) * | 1991-01-18 | 1992-08-27 | Synergen, Inc. | Methods for treating tumor necrosis factor mediated diseases |
| GEP20033082B (en) * | 1991-03-15 | 2003-10-27 | Amgen Inc | Pegylation of Polypeptides |
| WO1992016555A1 (en) * | 1991-03-18 | 1992-10-01 | Enzon, Inc. | Hydrazine containing conjugates of polypeptides and glycopolypeptides with polymers |
| DK52791D0 (da) * | 1991-03-22 | 1991-03-22 | Kem En Tec As | Adsorptionsmatricer |
| DK130991D0 (da) * | 1991-07-04 | 1991-07-04 | Immunodex K S | Polymere konjugater |
| DK0594772T3 (cs) * | 1991-07-04 | 1997-02-24 | Immunodex K S | |
| US5414135A (en) | 1991-12-30 | 1995-05-09 | Sterling Winthrop Inc. | Vinyl sulfone coupling of polyoxyalkylenes to proteins |
| EP0622394A1 (en) * | 1993-04-30 | 1994-11-02 | S.A. Laboratoires S.M.B. | Reversible modification of sulfur-containing molecules with polyalkylene glycol derivatives and their use |
-
1993
- 1993-11-12 US US08/151,481 patent/US5446090A/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-11-14 AU AU10548/95A patent/AU687937B2/en not_active Ceased
- 1994-11-14 UA UA96062250A patent/UA58481C2/uk unknown
- 1994-11-14 ES ES95901226T patent/ES2173943T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-11-14 KR KR1019960702507A patent/KR100225746B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1994-11-14 HU HU9601253A patent/HU225649B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 JP JP07514031A patent/JP3114998B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-11-14 BR BR9408048A patent/BR9408048A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-11-14 WO PCT/US1994/013013 patent/WO1995013312A1/en not_active Ceased
- 1994-11-14 EE EE9600128A patent/EE03448B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 AT AT95901226T patent/ATE215577T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 CA CA002176203A patent/CA2176203C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-11-14 SK SK608-96A patent/SK284527B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 EP EP95901226A patent/EP0728155B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-11-14 RU RU96113123/04A patent/RU2176253C2/ru active
- 1994-11-14 DK DK95901226T patent/DK0728155T3/da active
- 1994-11-14 NZ NZ276313A patent/NZ276313A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 CZ CZ19961375A patent/CZ295640B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 RO RO96-00959A patent/RO118434B1/ro unknown
- 1994-11-14 PL PL94314298A patent/PL180149B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-11-14 DE DE69430317T patent/DE69430317T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-11-14 EP EP01122161A patent/EP1176160A3/en not_active Withdrawn
- 1994-11-14 RO ROA200000307A patent/RO121855B1/ro unknown
- 1994-11-14 CN CN94194460A patent/CN1085689C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-06-07 US US08/473,734 patent/US5739208A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-05-06 BG BG100568A patent/BG63399B1/bg unknown
- 1996-05-10 NO NO19961918A patent/NO315377B1/no not_active IP Right Cessation
- 1996-05-10 FI FI962004A patent/FI117441B/fi not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-02-23 US US09/027,679 patent/US5900461A/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-04-19 US US09/294,188 patent/US6610281B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-05-30 HK HK02104035.7A patent/HK1042312A1/en unknown
-
2003
- 2003-08-25 US US10/647,621 patent/US6894025B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-04-22 US US11/112,118 patent/US7214366B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2176253C2 (ru) | Водорастворимый гидролитически стабильный активированный полимер, способ получения активированного полиэтиленгликоля (варианты), биологически активный конъюгат | |
| JP5095061B2 (ja) | ポリ（エチレングリコール）の１−ベンゾトリアゾリル炭酸エステルの調製のための方法 | |
| KR100807141B1 (ko) | 고분자량 비펩티드성 중합체 유도체의 합성 | |
| US8003742B2 (en) | Polymer derivatives with proximal reactive groups | |
| EP1259562B1 (en) | Sterically hindered derivatives of water soluble polymers | |
| JP5681605B2 (ja) | アジドまたはアセチレン末端水溶性ポリマー | |
| HK1132001A (en) | Method for the preparation of 1-benzotriazolyl carbonate esters of poly(ethylene glycol) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20061114 |