CZ384899A3 - Použití účinných látek a farmaceutický prostředek - Google Patents
Použití účinných látek a farmaceutický prostředek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ384899A3 CZ384899A3 CZ19993848A CZ384899A CZ384899A3 CZ 384899 A3 CZ384899 A3 CZ 384899A3 CZ 19993848 A CZ19993848 A CZ 19993848A CZ 384899 A CZ384899 A CZ 384899A CZ 384899 A3 CZ384899 A3 CZ 384899A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- leptin
- active
- inhibiting
- salts
- fractions
- Prior art date
Links
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims description 16
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 claims abstract description 141
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 claims abstract description 140
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 claims abstract description 140
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 claims abstract description 137
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 72
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 59
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 36
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 36
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 36
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 34
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 32
- 108010019813 leptin receptors Proteins 0.000 claims description 31
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 29
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 27
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 25
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 25
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 25
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 25
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 25
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 claims description 23
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 claims description 23
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 23
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 claims description 22
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 claims description 22
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 21
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 20
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 20
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 17
- 102100025087 Insulin receptor substrate 1 Human genes 0.000 claims description 16
- 101710201824 Insulin receptor substrate 1 Proteins 0.000 claims description 16
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 16
- 102000005861 leptin receptors Human genes 0.000 claims description 15
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 12
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 11
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000008747 mitogenic response Effects 0.000 claims description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 7
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims description 6
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 claims description 2
- 108091005682 Receptor kinases Proteins 0.000 claims description 2
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 claims description 2
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 102100031775 Leptin receptor Human genes 0.000 description 16
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 11
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 11
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- -1 His Chemical compound 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 7
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 7
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 6
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 5
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 5
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 238000003235 crystal violet staining Methods 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009433 Insulin Receptor Substrate Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010034219 Insulin Receptor Substrate Proteins Proteins 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N Asn-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101001063991 Homo sapiens Leptin Proteins 0.000 description 2
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 2
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 2
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- HGCNKOLVKRAVHD-RYUDHWBXSA-N Met-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001400 expression cloning Methods 0.000 description 2
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 2
- 102000049953 human LEP Human genes 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000972 4,5-dimethylthiazol-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C1=C(N=C(*)S1)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- KBIWNQVZKHSHTI-UHFFFAOYSA-N 4-n,4-n-dimethylbenzene-1,4-diamine;oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O.CN(C)C1=CC=C(N)C=C1 KBIWNQVZKHSHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N Ala-Gly Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N Cys-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N Glycyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- WXDRGWBQZIMJDE-ULQDDVLXSA-N Leu-Phe-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O WXDRGWBQZIMJDE-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-ZFWWWQNUSA-N Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ZYTPOUNUXRBYGW-YUMQZZPRSA-N Met-Met Chemical compound CSCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCSC ZYTPOUNUXRBYGW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M N,N,N-Trimethylmethanaminium chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)C OKIZCWYLBDKLSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Natural products OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 1
- 241000157426 Pernis Species 0.000 description 1
- JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N Phe-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- VQBLHWSPVYYZTB-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CO)N VQBLHWSPVYYZTB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 description 1
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- NQIHMZLGCZNZBN-PXNSSMCTSA-N Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)N)C(O)=O)=CNC2=C1 NQIHMZLGCZNZBN-PXNSSMCTSA-N 0.000 description 1
- CGDZGRLRXPNCOC-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CGDZGRLRXPNCOC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N Tyr-Trp Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C([O-])=O)C1=CC=C(O)C=C1 BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001621 anti-mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000010983 breast ductal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001734 carboxylic acid salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003161 choroid Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 229960000587 glutaral Drugs 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003324 growth hormone secretagogue Substances 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 1
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 1
- 229940118526 interleukin-9 Drugs 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 1
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 description 1
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 description 1
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 1
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 108010085203 methionylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108700010839 phage proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000009465 prokaryotic expression Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000012868 site-directed mutagenesis technique Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035924 thermogenesis Effects 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
- 108010045269 tryptophyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/33—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/2264—Obesity-gene products, e.g. leptin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Obesity (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Předložený vynález se vztahuje na leptin, cytokin produkovaný adipocytyj θ ovlivňující různé druhy buněk a tkání. Mnohem podrobnější popis předloženého vynálezu se týká nové aplikace leptinu v oblasti onkologie.
Leptin, od adipocytů odvozený cytokin,. regulující tělesnou hmotnost, byl identifikován pozičním klonováním murinového ob genuj ( Zhang se sp.;; 1994); s bylo prokázáno, že ovlivňuje jak příjem potravy,, tak thermogeneziJ ( Campfield se sp.; 1 995; Collins se sp.J 1996; Halaas se sp.J 1995J Pelleymounter se sp.;, 1995*,- Weigle se sp.J 1995 ).
Vysoká afinita leptinových vazebných paloh byls lokalizována v choroides plexusj ( cévnětka)J expresivním klonováním cD.N& z uvedené tkáně předpokládaným receptorem, ( OB-S); (Tartaglia se sp.; 1995 ).
Známá působení leptinu jsou zprostředkovány jeho receptorem v hypothalamu. Exprese leptinových receptorů se vyskytuje
i. v dalších orgánech,, zejména v ledvinách,, plicích, a játrech; ( Cioffi se sp.J 1996; Lee se sp.; 1996J Tartaglia se sp.;
1995 ). Kromě toho se různý repertoár variací receptorového sestřihu ( receptor -splice),, líšieích se v jejich cytoplazmatické doméně, se u myší projevuje expresí specifickým tkáňovým způsobemj ( Lee se sp.j 1996 ). Proto, kromě kontroly příjmu potravy a tělesné teploty, může leptin vykazovat delší
fyziologické funkce.
I když je leptin produkován adipocyty, nedávné zjištění korelace mezi přebytkem tuku, a vysokými hladinami leptinu v séru,, bylo v rozporu s názorem, že leptin redukuje příjem potravy a tělesnou hmotnostJ( Considin se sp.; 1996; Frederick se sp.J 1995; Lonnquist se sp,; 1995J Msffei se sp,; 1995 )♦ Tato korelace, a spolehlivé doložení vtahů mezi obezitou, a rezistencí vůči inzulínu; ( Felber a GolayJ 1995 ); naznačily,. že leptin může modulovat inzulínem regulované odpovědi.
Ve skutečnosti bylo ale nedávno oznámeno, že leptin signifikantně redukuje bazální a s inzulínem redukovanou tyrosinovou fosforylaci inzulínového receptorového substrétu-1 ( IRSí-1 )»»Toto působení leptinu na IRS-1 fosforylaci bylo spe· cifické, protože tyrosinová fosforylace beta-řetězce inzulino· vého receptorů; (IR), nebyla potlačena·,/ Cohen se sp.; 1996).
Tyrosinová fosforylace IRS-1 s kinázou IR je klíčovým stupněm’ v rámci inzulínové receptořové signální kaskádyř vedoucí ku četným známým působením inzulínu; ( Araki se sp.;
1994rjCheatham a Kahn, 1995J Myers se sp.; 1994; í^yers se sp. 1994· Myers a White; 1993J Rose se sp.J 1994; Tamemoto se sp. 1994J White a Kahn; 1994).
Směr signálního působení IRS-1 je zprostředkován několika asociovanými proteiny, z nichž jeden je GRB-2 ~ protein vá zajíci se na receptor růstového faktoru-2 = growth-factor receptor associated binding protein-r2;( Che8tham a Kahn;1995).
Inzulihový receptor; (IR); je pogažován za metabolický receptor, zprostředkující působení inzulínu na howeostázu glu kosy„ 8 jako takový je vylučován na terminálně odlišných tkáních, jako je na př. adipózní ( tuková) tkáň; játra; a svaly. Četné studie však prokázaly, že IR je silně účinný mitogenický receptor in vitro a in vivo v případě, kdy je vylučován v tumorových buňkách.
- 3····· ·· · · · · · ·· · ···« ···· • · · · · ···* • · ··· ······ • · · · · · · · · ···· ·« ··· 9 9 9 9
Funkční inzulínové receptory byly na příklad identifikovány v několika liniích rakoviny prsu, jak bylo zjištěno tyrosinovou fosforylací inzulínového receptoru, při reakci na léčbu inzulínem* Kromě toho zprostředkovává inzulínový receptor v tědftto buňkách mitogenickou odpověň, jak bylo zjištěno inkorporací /%/4ťt^ymidinu^ ( Milazzo se sp.; 1997J Milazzo se sp.J 1992 ).
Až dosud nebylo popsáno použití leptinu v oblasti onkologie obecně,·, a zejména leptin nebyl popsán jako použitelný pro inhibici proliferace búněk, zejména proliferace rokovinných buněk.
Předmětem předloženého vynálezu je použití leptinu jako inhibitoru buněčné proliferace,. na příklad použití leptinu, jako inhibitoru proliferace rakovinných buněk.
Btelším cílem vynálezu je použití samotného leptinu,, nebo jeho kombinace s dalšími therapeutickými látkami, pro léčbu různých maligních bujení.
BalŠím cílem předloženého vynálezu je použití leptinu; leptinových fúzních proteinů; leptinových^muteinů| agonistů leptinového receptoru, účinných fragmen^voe^iioS-iv ze zmíněných složekj. účinných analog nebo derivátů jakékoliv ze zmíněných složek; a solí,, jakékoliv ze zmíněných složek; a směsí jakékoliv ze zmíněných složek;pro léčbu různých typů maligního bujením »··· ·· · ·· • · · · · · · φ · · · · ·
Dalším předmětem předloženého vynálezu je použití farmaceutických prostředků, obsahujících jeden, nebo více leptinů* leptinových fúzních proteinů; leptinových muteinů, agonistů leptinového receptoru, účinných fregmen^S^gafeíoliv ze zmíněných složek, účinných analog nebo derivátů jakékoliv ze zmíněných složek* a solí jakékoliv ze zmíněných složek;., pro léčbu různých typů maligního bujení.
Další cíle předloženého vynálezu jsou uvedeny dále* nebo budou snadno petrné z následujícího popisu s
Předložený vynález se týká použití leptinu jako inhibitoru buněčné proliferace. Leptin může být použitelný buč samotný,, nebo v kombinaci s jinými therapeutickými látkami,, nebo postupy, pro léčbu různých typů maligního bujení.
Výhodné provedení vynálezu spočívá v použití leptinu pro inhibici proliferace buněk humánního karcinomu prsu. Proliferace mnohých' typů tumorových buněk je zvýšena za přítomnosti různých růstových faktorů, jako je na příklad inzulín; a IGF-1; ( inzulínu podobný růstový faktor-1 ). Stimulační růstové působení inzulínu a IGF-1 na buňky je zprostředkováno, alespoň zčásti j, prostřednictvím dráhy IRS-1/GRB-2 ( Myers se sp. J 1993 ).
Tato dráha je inhibována s leptinem.
Kromě toho je IKS-1 substrátem pro receptorové kinázy dalších růstových faktorů* a cytokinů,, včetně IL-4J ( interleukin-4); a IL—9J,( interleukin-9); ( Pernis se sp.J 1995J Yih se sp.* 1995J Yin se sp.J 1994 ).
feeptin může tudíž inhibovat mitogenické odpovědi některých, nebo všech zmíněných růstových faktorů a cytokinů*, stejně jako ostatních růstových faktorů, a tedy inhibovat proliferaci různých typů tumorových buněk.
Příklady zahrnují inhibici proliferace indukované s IGF-1;
a s inzulínem indukovanou proliferací buněčných T-47D a MCF7 linií humánní rakoviny prsu.
Předložený vynález ae také týká použití leptinu, leptinových fúzníeh proteinů,, leptinových muteinů, agonistů leptinového receptorů,, nebo účinných fragmentů a frakcí jakékoliv. ze zmíněných složek,, nebo solí jakékoliv ze zmíněných složek,, stejně jako farmaceutických prostředků, obsahujících leptin, leptinové fúzní proteiny,, leptinové muteiny,, agonisty leptinového receptorů,, účinné fragmenty nebo frakce, jakékoliv ze zmíněných složek^ nebo sole· jakékoliv ze zmíněných složek,, pro léčbu různých typů maligního bujení»
Mnohemr specifičtěji se předložený vynález týká použití účinné látky, vybrané ze skupiny obsahující leptin,. leptinové fúzní proteiny,, leptinové muteinym agonisty leptinového receptoru, účinné fragmenty nebo frakce jakékoliv ze zmíněných složek* účinná analóga nebo deriváty jakékoliv ze zmíněných složek,, sole jakékoliv ze zmíněných složek, a směsi jakékoliv ze zmíněných složek,, jako inhibitoru proliferace tumorových buněk-í»
Provedení výše zmíněných aspektů předloženého vynalezu zahrnuje::
H) -Použití účinné látky jako inhibitoru buněčné proliferace pro léčbu maligního bujení u savců
II) Použití účinné látky jako inhibitoru tumorů, závislých na růstovém faktorů
TTTT) Použití účinné látky jako inhibitoru proliferace buněk humánního karcinomu prsu.
IW) Použití účinné látky pro léčbu humánních karcinomu prsu.
- 6, • 0 0 · · · · ·· ··· ·· ··
V) Použití účinné látky jako inhibitoru růstového stimulačního působeni inzulínu; a IGP-1J na tumorové buňky, zprostředkované, alespoň z části, drahou inzulínového receptorového substrátu Ί;( IRS-1/GRB-2 ).
VI) Použití účinné látky jako inhibitoru mitogenních odpovědí v tumorových buňkách, vůči jedné, nebo více receptorových kinázj růstových faktorů; a cytokinů, ze skupiny obsahující IL-4a IL-9J pro všechny,, u kterých IRS-1 je substrátem;, pro léčbu tumorů..
VII) Použití účinné látky jako inhibitoru bazální; s IGF-Ti indukované; a s inzulínem indukované proliferace tumorových buněJž pro léčbu humánních rakovin prsu.
VIII) Použití účinné látky, kde výše zmíněná účinná látky je leptin, a leptin je použit jako inhibitor, nebo pro léčbu.
Podobně se předložený vynález týká také účinné látky, zvo· lené ze skupiny, obsahující leptin^ leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny; agonisty leptinového receptorů; účinné fragmenty, nebo frakce jakékoliv ze zmíněných složekj; účinná analoga nebo deriváty jakékoliv ze zmíněných složek; sole jakékoliv ze zmíněných složek; a směsí jakékoliv ze zmíněných složek, pro použití při výrobě léčiva,určeného pro inhibici proliferace tumorových buněk.
Provedení z tohoto aspektu vynálezu zahrnuje t* • · · · ·
- 7 H) Použití účinné látky pro výrobu léčiva,, určeného pro léčbu maligního bujení u savců*
ΙΕ) Použití účinné látky pro výrobu léčiva, určeného pto inhibici tumorů závislých na růstovém faktoru*
IIE) Použití účinné látky pro výrobu léčiva, určeného pro inhibici proliferace buněk humánního karcinomu prsu*
IV) Použití účinné látky pro výrobu léčiva, určeného pro léčbu humánních karcinomů prsu.
V) Použití účinné látky pro výrobu léčiva,určeného pro inhibici růstového stimulačního působení IGF-1J a inzulínu; na tumorových buňkách, zprostředkovaného alespoň zčásti,, drahou IRS-1/GRB.-2*
VI) Použití účinné látky pro výrobu léčiva, určeného pro inhibici mitogenních odpovědí v tumorových buňkách, vůči jedné, nebo více receptorových kinázj růstových faktorů; a cytokinůj ze skupiny, obsahující IGF-1; IL-4} a IL-9J pro všechny, u kterých je IRS-t substrátem; pro léčbu tumorů,
VII) Použití účinné látky pro výrobu léčiva,, určeného pro inhibici bazálníj a IGF-1 indukované; a s inzulínem indukované,, proliferace tumorových buněk; pro léčbu humánních rakovin prsu*
VIIE) Použití účinné látky, kde účinnásložka je leptin; a leptin je použit pro výrobu výše zmíněného léčiva.
Podobně i z jiného aspektu,, se předložený vynález týká farmaceutického prostředku, obsahujícího jako účinnou složku účinnou látku, a farmaceuticky vhodný nosič, ředidlo, nebo pomocnou látku, určeného pro.inhibici proliferade tumorových buněk.
Z tohoto aspektu provedení vynálezu zahrnuje :
I) (Farmaceutický prostředek určený pro léčbu maligního bujení u savců.
II) Farmaceutický prostředek určený pro inhibici tumorů závislých na růstovém faktoru.
III) Farmaceutický prostředek, určený pro inhibici proliferace buněk humánního karcinomu prsu;, a tudíž i pro léčbu humánního karcinomu prsu.
IV) Farmaceutický prpstředek, určený pro inhibicu růstového stimulačního působení IGF-1J a inzulinuj na tumorových buňkách; a zprostředkovanou alespoň zčásti, drahou IRS-1/ GBR-2.
V) Farmaceutický prostředek, určený pro inhibici mitogenních odpovědí v tumorových buňkách,, vůči jedné nebo více receptorových kinázj růstových faktorů; a cytokinů, ze skupiny,, obsahující IL-4J a IL-9J pro všechny, u kterých je IRS-1 substrátem, a tudíž i pro léčbu tumorů»
VI) Farmaceutický prpstředek, určený pro inhibici bazální, a s IGF-1 indukované a s inzulínem indukované proliferece
- 9 tumorových buněk; a tudíž i pro léčbu humánních rakovin prdu.
VII) Farmaceutický prostředek,, ve kterém účinná složka je leptin.
Předložený vynález se také týká postupu pro léčbu tumorů u savců, nebo pro inhibici proliferace tumorových buněk u savců, zahrnujícího aplikaci fertn&ceutického prostředku pacientovi, dle předloženého vynálezu, jak je poznamenáno výše„ ve vhodné lékové formě;- a vhodnými způsoby aplikace.
Takové lékové.· formy; a způsoby aplikace, jsou obvykle určovány praktickými lékaři; po následném vyšetření pacienta,
Ost8tní aspekty a provedení předloženého vynálezu, jsou vysvětleny, nebo budou snadno patrné z následujícího podrobného popisu vynálezu,.
ία
Obrázek 1 )
Demonstruje závislost proliferace T-47D buněk na inzulínu, jak bylo zjištěno barvením s MTT = (3-/4,5-dimethylthiazol2-yl/-2,3-difenylte trazoliumbromid)j
Obrázek 2)
Demonstruje závislost proliferace T-47D buněk na IGF-1 *t jak bylo zjištěno barvením a MTT.
Obrázek 3)
Demonstruje inhibici s inzulínem indukované proliferace T-47D buněk v 10%ním sáru hovězího zárodkuj( FBS)J murinovým leptinem, jak bylo zjištěno barvením a MTT.
Obrázek 4)
Demonstruje inhibici s inzulínem indukované proliferace T-47D buněk ve 2%ním FBSJ murinovým leptinem, jak bylo zjištěno barvením s krystalovou violetí.Obrázek 5)
Demonstruje inhibici proliferace T-47D buněk ve 10%ním FBSJ murinovým leptinem, jak bylo zjištěno barvením s MTT.
Obrázek 6)
Demonstruje inhibici s IGF-1 indukované proliferace T-47D buněk ve 2%ním FBS; purinovým leptinem, jak bylo zjištěno barvením s krystalovou violetí.
Obrázek 7)
Demonstruje inhibici s IGF-1 indukované proliferace T-47D buněk ve 2%ním FBS;, humánním leptinem, jak bylo zjištěno,barvením s krystalovou violetí.
Obrázek 8)
Demonstruje inhibici s inzulínem indukované proliferace MCF7 buněk;, v séru prostém mediu, murinovým leptinem, jak bylo zjiš těno barveném s krystalovou vi&letí,.
Obrázek 9)
Demonstruje inhibici s IGF-1 indukované proliferace MCF7 buněk, v séru prostém mediu, s murinovým leptinem, jak bylo zjiě těno barvením s krystalovou violetí.
Předložený vynález ae týká použití leptinu jako inhibitoru proliferace tumorových buněk.
charakteristické,. Že buněčné linie humánního původu, odvozené od různých typů tumorů, mohou být kultivovány v kulturách za přítomnosti růstového media,doplněného sérem hovězího zárodku;( FBS); v objemové koncentraci cca 10%. Za uvedených podmínek je buněčná proliferace dále definována jako ,,bazální buněčná proliferace”. Růst četných tumorových linií je signifikantně zvýšen v případě, kdy jsou ku výše zmíněnému kultivačnímu mediu,-' doplněném sérem, přidány různé růstové faktory, jako na př. inzulín; epidermélní růstový faktor, nebo IGF-1.
Po přidání leptinu do růstového media v rozmezí nanomolárních koncentrací od 3 do 600; snižuje se bazální buněčná proliferace; a buněčná proliferace’, závislá na růstovém faktoru.
Výsledky pokusů s buněčnými kulturami, uvedeným v rámci příkladů, publikovanými dále, naznačují použitelnost leptinu pro inhibici růstu různých typů tumorů,, a leptin může být tudíž použitelný pro léčbu různých typů maligního bujení..
V rámci výhodného provedenipředloženého vynálezu,, je leptin používán pro inhibici proliferace buněk rakoviny prsu.
V případě, že je leptin přidán ku kulturám T-47D buněk humánního karcinomu mléčných vývodů prsu; ( American Type Cultur Collection; RockvilleJ MDJ kmen číslo ATCC HTB 133 ); je rozsah jejich proliferace potlačen.
Podobně i v případě, kdy je leptin přidán ku kulturám MCF7 buněk humánního adenokarcinomu prsu; ( American Type cultur Collection; Rockville; MD; číslo ATCC HTB 22 ); je rozsah jejich přoliferace redukován. Leptin inhibuje jak bazálnír tak i s IGF-1 indukovanou proliferaci,. tak i s inzulínem indukovanou proliferaci T-47D; a MCF7 buněk.
Leptin může být tedy specificky použitelný pro léčbu karcinomů prsu.
• · • · • · • · ·· • · • 9 • ·
Růstové stimulační působení inzulínu a IGP-1 na buňky, je zprostředkováno alespoň zčásti,, prostřednictvím tyrosinové fosforylace IRS-1J a následnou asociací IRS-1; a GRB-2J která má za následek mitogenní odpověá. Antimitogenní působení leptinu může být důsledkem jeho schopnosti redukovat bazální; inzulínem indukovanou, a s IGP-1 indukovanou, tyrosinovou fosforylaci IRS-1; mající za následek snížení vazeb GRB-2 ku IRS-1Kromě toho je IRS-1 substrátem receptorových kináz,, ostat nich růstových faktorů a cytokinů; včetně IL-4 a IL-9;(Pernis se sp.; 1995J Yin se sp.*, 1995; Yin se sp.*, 1994 )·
Leptin může tudíž inhibovat mítogenické odpovědi některých, nebo všech zmíněných růstových faktorů, a cytokinů; a stejná jako ostatních mitogenů, a tím tedy i inhibovat proliferaci různých typů tumorových buněk.
Předložený vynález se dále vztahuje na leptinové deriváty a analoga, včetně leptinových fúzních proteinů; leptinových muteinůj agonistů leptinového receptorů,, nebo účinných fragmentů nebo frakcí zmíněných složek*,, a solí zmíněných složek,, a farmaceutických prostředků, obsahujících leptin; leptinové fúzní proteiny; leptinové muteiny;, agonisty leptinového receptoru, účinné frakce zmíněných složek,, nebo soievzfeíněných složek, pro léčbu různých typů rakovin.
V předloženém textu používaný výraz ,,muteiny”; se vztahuje na analoga leptinu; ve kterých jeden,, nebo více zbytků aminokyseliny, je nahražen odlišnými zbytky aminokyseliny,, nebo jsou vypuštěny;, nebo jeden, nebo více zbytků aminokyseliny, jsou připojeny ku původní sekvenci leptinu,, aniž dochází ku významné změně účinnosti výsledných produktů, ve srovnání s divokými typy leptinu, nebo jeho účinných fragmentů, nebo frakcíZmíněné muteiny jsou připravovány známými synthetickými postupy, a/nebo polohově směrovanými technikami mutagenéze, ·· 99
9 9
- 14 ·♦·· nebo nějakými jinými, známými vhodnými technikami.,
Jakýkoliv . z těchto muteinů,, má/ výhodnou sekvenci aminokyselin, dostatečně duplicitní k leptinu,, takže v podstatě vykazuje podobné působení jako leptinr nebo jeho účinné fragmenty,, nebo frakce.
Lze tedy pomocí rutinního experimentování posoudit„ zda nějaký určitý mutein( na příklad jednoduchlou metodou buněčné proliferacekterý blokuje buněčnou proliferaci, vykazuje dostatečnót^účinnost leptinu, a proto tedy alespoň jedno? z popfeaných použití. leptinu; a tedy v podstatě i podobnou účinnost.
V rámci výhodného provedení je každý tahový mutein,, alespoň ze 40%*, identický nebo homologický se sekvencí jednoho z leptinů.
Mnohem výhodněji vykazuje alespoň 50,0%; alespoň 60,0%; alespoň 70,0%; alespoň 80,0%; nebo nejvýhodněji alespoň 90,0% identity,, nebo homologie.
Muteiny leptinu,. nebo jeho účinné fragmenty,, nebo frakce mohou být proto použity dle předloženého vynálezu, nebo kódování nukleové kyseliny, včetně konečného uspořádání, odpovídajícího v podstatě sekvencím jako substituce peptidů,, nebo nukleotidů, které mohou být rutině získávány, bez zbytečného experimentování, jedním z běžných postupů v této oblasti, založeném na poznatcích a pokynech, uvedených v předloženém textu.
Podrobnější popis chemie proteinů, a struktur; je uveden v následujících odborných publikacích; citovaných dále v literárních odkazech; t.j. Schulz G.E., se sp.; Principles of Protein Strueture; Springer-Verlag; New York; 1978; a Creighton T.E.; Proteins Strueture and Molecular PropertiesJ W.H. Freeman CO.;, San Francisco, 1983 ), • · ♦· » · · 1 » · · 1
- 15 Popis substitucí sekvencí nukleotidů, jako jsou na př. preference kodónů; viz Ausubel se sp.J paragrafy A. 1.1. - A. 124; ( viz literární odkazy uvedené dále), a Sambrook se sp»< Current Protocols in Molecular BiologyJ Interscience, N.Y.; paragrafy 6.2L a 6.4J ( 1987,, 1992 ); u dodatků Ca®.
Výhodné změny muteinů, týkající se předloženého vynálezu, jsou ty, které jsou známy jako , „konzervativní ’’ substituce. Konzervativní substituce aminokyselin leptinových polypeptidů, nebo prpteinů, nebo jejich účinných fragmentů, nebo frakcí, mohou zahrnovat synonymníaminokyseliny; včetně skupin,, které mají dostatečně podobné fyzikálně-chemické vlastnosti;, takže suhstituce mezi členy skupiny ochrání biologickou funkci molekuly.
GranthamJ Scienoe^ VPl.~185 strany 862-864^/4974/½
Je zřejmé, že zabudování, nebo vypuštění aminokyseliny, m$že být také reaJLizováno ve výše definovaných sekvencích, aniž dochází ku změnám jejich funkce, zejména když zabudování, nebo vypuštění, zahrnuje pouze malý počet aminokyselin; na př. méně než 30J a výhodně méně než 10J a není spojeno s vypuštěním, nebo nahražením aminokyselin.,, které jsou kritické pro funkční konformaci; na příklad zbytky cysteinu.
Anfinsen; ,,Principles That Govern The Folding of Protein Chains; Science; Vol. 181; strany 223 - 230;: ( 1973).
Proteiny,, a muteiny, produkované takovým vypuštěním, nebo zabudováním ; jsou v rámci předloženého vynálezu uvedeny.
Výhodné jsou skupinyjsynonymních aminokyselin, uváděné dále v Tabulce i).
Výhodnější jsou skupiny synonymních aminokyselin, uváděné dále v Tabulce II).
Nejvýhodnější jsou skupiny synonymních aminokyselin, uváděné dále v Tabulce III)..
» er«« tt · ·· φ» • · 9 ···· « « * « • · 9 · · · · » ·
TABULKA 1-55.
Výhodné skupiny synonymních aminokyselin :
| Aminokyselina: | Sýnonymní | skupina : |
| Ser | Ser, Thr r | Gly, AsnJ |
| Arg | Arg, Gin, | Lys, Glu, His; |
| Leu | lle, Phe, | Tyr,, Met,, Val, LeuJ |
| Pro | Gly, Ale, | Thr, ProJ |
| Thr | Pro, Ser, | Ala, Gly, His, Gin, Thr; |
| Ala | Gly, Thr, | Pro r Ala ; |
| Val | Met, Tyr, | Phe, lle, Leu, Vsi; |
| Gly | Ala, Thr, | Pro, Ser, GlyJ |
| lle | Met, Tyr, | Phe, Val, Leu,, lle |
| Phe | Trp,, Met, | Tyr, lle, Val, Leu, Phe*, |
| Tyr | Trp, Met, | Phe, lle, Val,. Leu,; Tyr; |
| Cys | Ser, Thr, | Cys; |
| His | Glu, Lys, | Gin, Thr, Arg, His; |
| GÍn | Glu, Lys, | Asn, His, Thr, Arg„ Gin; |
| Asn | Gin;, Asp, | Ser, AsnJ |
| Lys | Glu,, Gin, | His, Arg,, LysJ |
| Asp | Glu, Asn, | Asp*, |
| Glu | Asp, Lys, | Asn,, Gin,, His,, Arg, GluJ |
| Met | Phe, lle, | Val, Leu„ Met; |
Trp Trp;
• t · ··
·· ·*··»' • ♦ · · · * · ·1· «0 ·*·
TABULKA IL)
Výhodnější skupiny synonymních aminokyselin; z
| Aminokyselina: | Synonymní skupina :: |
| Ser | |
| Arg | His, Lys, Arg; |
| Ueu | Leu, Ile, Phe, Met; |
| Pro | Ale, Pro; |
| Thr | Thr*, |
| Ala | Val, Met, Ile*, |
| Val | Val, Met, Ile*, |
| Gly | Gly; |
| Ile | Ile, Met, Phe, Val, Leu' |
| Phe | Met, Tyr, Ile, Leu, Phe' |
| Tyr | Phe, TyrJ |
| Cys | Cys,, Ser; |
| His | His, Gin,, Arg; |
| Gin | Glu,; Gin, HisJ |
| Asn | Asp, AsnJ |
| Lys | Lys, Arg*, |
| Asp | Asp,, AsnJ |
| Glu | Glu,, Gin; |
| Met | Met, Phe, Ile,; Vel, Leu |
| Trp | Trpí |
toto·· •to • to • · · «ι • to· · • «to to • «· · • to toto
TABULKA lil)
Nejvýhodnější skupiny synonymních aminokyselin :
Aminokyselina:
Ser
Arg ^eu
Pro
Thr
Ala
Val
Gly
Ile
Phe
Tyr
ČJys
His
Gin
Asn
Lys
Asp
Glu
Met
Trp
Šynonymní skupina
Ser*,
Arg;
Leu, Ile, Met;
ProJ
Thr*,
Ala;
Val;
Gly*,
Ile, Met, LeuJ Phe*,
Tyr;
Cys, Ser; hís;
Gin;
AsnJ
Lys*,
Asp;
giu;
Met,, Ile, Leu; Met*, • · • · • ·
- t9 Příklady provádění substitucí aminokyselin v proteinech, které mohou být použity pro získání muteinů leptinu,, nebo jeho účinných frakcí, v rámci použití předloženého vynálezu,, včetně jakýchkoliv známých metodických kroků, uvedených na př. v US patentech EE 33,653*,, 4,959,314; 4,,588.585; a 4,737.462; (Mark se sp. )J 5,116,943; ( Koths se sp. ); 4,965.195^ ( Namen se sp. )J 4,879,111; ( Ghang se sp. )J a 5,017,691;(Lee se sp. );* θ lysinem substituované proteiny; uvedené v US ρβtentu číslo 4,904,584;( Shaw se sp. ),
V rámci jiného výhodného provedení předloženého vynálezu, má jakýkoliv muteim leptinu„ nebo jeho účinná frakce,, určené pro použití dle předloženého vynálezu, sekvenci aminokyselin, v podstatě odpovídající sekvenci leptinu.
Výraz ,, v podstatě odpovídající je uvažován pro souhrné proteiny, s menšími změnami,, vzhledem ku sekvenci přirozeného proteinu; které neovlivňují základní charakteristiky přirozených proteinů, pokud jejich schopnost inhibovat buněčnou proliferaci,, je zajímavá.
Typ změn, obecně uvažovaných a zahrnutých do výrazového vyjádření ,,, v podstatě odpovídající jsou takové, které by mohly vyplývat z konvenčních technik mutagenéze DNA kódující leptin, a resultUjící do několika mál® modifikací a prozkoumání ( screening) žádané účinnosti způsobem; diskutovaným výše.
Muteiny, v souhlase s předloženým vynálezem, se týkají proteinů Z8kódovvných s nukleovou kyselinou, jako na příklad a DNA;, nebo RNA;, které hybridizují DNA nebo RNA, kódujících za striktních podmínek leptin; v souhlase s předloženým vynálezem. Takový typ nukleové kyseliny by mohl být nejvhodnějším kandidátem pro určení,, zda kóduje polypeptid, který vykazuje dle předloženého vynálezu, funkční účinnost leptinu.
Výraz ,„striktní podmínky, se vztahuje na hybridizaci
á následné podmínky promýván!, které jsou v rámci odborné praxe konvenčně označovány jako , „striktní ♦
Viz také Ansubel ae sp.J Current Protocols in Molecular BiologyJ Interscience„ N.Y.; paragrafy 6.3. a 6.4. J(1987,
1992); a Sambrook se sp.J viz výše.
Bez omezení zahrnují příklady ,,striktních podmínek” podmínky promývání při teplotách 12,0 - 20,0°e; nižších než předpokládaná teplota studovaného hybridu; na př. 2 x SSC; a 0,5%
SDS po dobu 5 minut; 2 x SSC β 0,10% SDS po dobu 15 minut;
0,1 x SSC a 0,5% SDS při teplotě 37,O°C po dobu 30 - 60 minut; a poté 0,1 x SSC a 0,5% SDS při teplotě 68,0°C; po dobu 30 60 minut.
Běžný odborný přístup v této oblasti předpokládá^ že ,,.striktní podmínky záleží také naudéle© sekvence DNA; prób oligo nukleotidů; ( na příklad 10 až 40 baží), nebo smíšených přóbách oligonukleotidů.
V případě použití smíšených prób je výhodné použít tetramethylamoniumchlorid; ( TMAC); místo SSC. Viz také Ausubel; citovaný výše.
Výraz ,, leptinové fúzní proteiny”; nebo jednodušeji ,,fúzní proteiny, se vztahuje na poíypeptid, obsahující leptin,. nebo jeho účinné frakce, nebo muteiny zmíněných složek, zfázované s jiným proteinem, který vykazuje delší dobu zádrže v tělních tekutinách. Leptin, nebo jeho účinné frakce, mohou být fúzovány s jímým proteinem, polypeptidem. nebo podobně.
Výraz ,,sole, uváděný v předloženém textu, se vztahuje jak na sole karboxylových skupin·,' tak kyselé adiční sole aminových skupin leptinu, jeho účinných frakcí;, muteinů; nebo jeho leptinových fúzních proteinů.
Sole karboxylové skupiny áiohou být připraveny pomocí běžně známých postupů v této oblasti;, a zahrnují anorgsnické sole; na příklad sodné;, vápen^W^v^elezité; nebo zinkové sole,, a podobně^ a sole s organickým bázemi; připravovanými na př.
a aminy} jako je na příklad triethenolamin;, arginin; nebo lysin, piperidin; prokainf a podobně.
Kyaelé adiční sole zahrnují na příklad sole s minerálními kyselinami, jako je na příkliad kyselina chlorovodíková, nebo sírová; a sole s organickými kyselinami; jako je na příklad kyselina octová; a oxalová}( ethandiová kyselina).
Všechny takové sole musí vykazovat v podstatě podobnou účinnost jako leptin}, nebo jeho účinné frakce.
,,Funkční deriváty; výraz používaný v předloženém textu,, se vztahuje na deriváty leptinuj nebo jeho účinné fragmenty; nebo frakce; 8 jeho muteiny; a leptinové fúzní proteiny, které mohou být připraveny z funkčních skupin,, které se vyskytují jako vedlejší řetězce na zbytcích} nebo N-J nebo C-} terminálních skupinách, běžně známými postúpy, a jsou zahrnuty do předloženého vynálezu, pokud zpstavají stále farmaceuticky akceptovatelné, což na příklad znamemá, že nenarušují účinnost proteinu, který je v podstatě svou účinností podobný leptinu; a nevykazují ve farmacutickém prostředku, který jej obsahujeT toxické působení.
Tyto deriváty mohou zahrnovat na příklad polyethylanglykolové postranní řetězce,, které mohou maskovat antigenní polohy}, a zvyšovat působení leptinu;, nebo jeho účinných frakcí v tělesných tekutinách.
Jiné deriváty zahrnují alifatické estery karboxylových skupin; amidy karboxylových skupin, získané reakcí s amoniakem; nebo s primárními,, nebo sekundárními aminy.
N-acylové deriváty volných aminoskupin zbytků aminokyselin se připraví s acylovými podíly} ( na př, alkanoylovér nebo karbocyklické aroylové skupiny); nebo O-acylové deriváty volných hydroxylových skupin}( napřáklad serylové}. nebo threonylové zbytky); připravené s acylovými podíly.
,,Aktivní fragmenty nebo frakce leptinuj leptinových • · • ·
- 22 muteinů, fúzních proteinů; uváděných v předloženém vynálezu, sé^týkají jakéhokoliv fieagmentu,, nebo prekurzorů polypetidového řetězce leptinu,, nebo fúzních proteinů, obsahujících takový fragment samotného leptinu, nebo s asociovanými tyolekulamí^zbytků, spojených s výše zmíněnými složkami; jako jsou na příklad cukerné,, nebo fosfátové zbytky; nebo shluky, jakéhokoliv ze zmíněných drivátů; za předpokladu,, že frakce vykazuje významně podobnou účinnost a leptinem.
Předložený vynález se dále týká přirozených a synthetických agonistů leptinového receptorů, které jsou z hledisek svých vlastností schopné inhibovat buněčnou proliferaci, významně podobnou leptinu.. Takový typ agonistů může být vybrán z knihovny peptidů; knihovny analog peptidů; nebo knihovny náhodných organických molekul». Výběr se provádí postupy, běžně známými odborníkům v příslušné oblasti; hlavně na základě vybraných agonistů vázat se ku leptinovému receptorů..
Na příklad knihovna náhodných peptidů může být připravena jako prokaryotická exprese plasmidů,, vykazujících kódování DNA u náhodných peptidů, připojených ku proteinu-nosiči.
Další příklad zahrnuje fágový rozvinutý systém, ve kterém expresivní systém představuje fág, obsahující DNA' kódující náhodný- peptlá;, zabudovaný do jednoho z fágových proteinů. Kódované fágy pro agonisty fúzních peptidů:, nebo antagonistů, jsou izolovány; z knihovny fágů; t.j.panorámováním nad povrchy obalenými s leptinovými receptory. Vázané fágy jsou izolovány’, a poté amplifikovány v bakteriích.· ^ěkolik sérií panorámovaní-amplifikací je obvykle zepotře· bí pro získání fágů vylučujících fúzní peptidy, které mají vysokou afinitu pro leptinové receptory. Izolovaný fág je poté amplifikaván,, a je určena sekvence kódující DNA pro peptid..
Alternativně lze běžnými postupy, známými odborníkům; v
I « · · · · ··
- 23 příslušné oblasti, připravit knihovny náhodných peptidů,, nebo knihovny jiných molekul,, synthesou pevné fáze na polymerních perličkách. Perličky s peptidem,, nebo jinou molekulou, vykazující afinitu pro leptinový receptor,, jsou vybrány z knihovnyJ na příklad vazbou značeného leptinového receptorů; na příklad fluorescencí značeného leptinovho receptorů.
Kladně reagující perličky jsou shromážděny;, a je určena struktura peptidů, nebo jiné molekuly, zachycených na perličce.. V případě,, že perlička je nosičem peptidur je stanovena sekvence peptidů analysou sekvence proteinu.
V případě, že perlička je typická pro náhodné organické molekuly z knihovny, potom je molekula z perličky odštěpena, a její struktura je určena běžnými postupy, známými odborníkům v příslušné oblasti, jako je například hmotnostní spektrometrie; nukleární magnetická rezonance; a podobně»
Pro další studie jsou potom uvažovány peptidy, identifikované na základě jejich afinity ku leptinovému receptorů; a poté jsou dále tříděny na základě schopností inhibovat proliferace už výše zmíněným způsobem.
' Keptin, jeho účinné frakce;, leptinové muteiny;, leptinové fúzní proteiny; agonisté leptinového receptorů; a jejich sole; funkční deriváty; a účinné fragmenty nebo frakce zmíněných sloučenin, indikovaný pro léčbu různých typů maligního bujení, jsou proto výhodné pro léčbu tumorů závislých na růstovém faktoru; a ještě výhodnější pro léčbu karcinomu prsu»
Předložený vynález se dále vztahuje na použití farmaceutických prostředků,, obsahujících farmaceuticky vhodný nosič a leptin,. zahrnutý do vynálezu,, nebo jeho účinné muteiny, fúzní proteiny,, agonisty leptinového receptorů, a jejich sole·,, funkční deriváty; nebo jejich účinné frakce»
Farmaceutické prostředky,, týkající se vynálezu,, lze pro • · · ·
léčebnou aplikaci připravit smíšením leptinu,, nebo jeho derivátů, nebo agonistů leptinového receptorů; s fyziologicky vhodnými nosičií a/nebo stabilizátory^ a/nebo pomĎcnými látkami,, a připravenými v lékové formě; na příklad lyofilizaci v ampulce..
Způsob?. aplikace může být realizován bučí jakýmkoliv akceptovatelným postupem aplikace u podobných látek;, a bude záležet na podmínkách léčby; na příklad intravenózně;, subkuténěj, lokální injekcí; nebo povrchovou aplikací;, nebo kontimuální infúzí; atd.
Množství účinné sloučeniny, která má být aplikována; záleží na způsobu.^aplikace; nemoci, která má být léčena,, a stavu pacienta.
Na příklad lokální injekce vyžaduje, na základě tělesné hmotnosti, menší množství proteinu;, než intravenózní infúze. Typická účinná množství leptinu, která msjí být aplikována injekčněj se pohybují v rozmezí 0,1 - 1000 mikrogramů/ kg tělesné hmotnosti;, a výhodně v rozmezí od 1,0 do 10,0 mikrogr8mů/kg
Účinná množství derivátů leptinu a agonistů leptinového receptorů mohou být na molární bázi v podstatě stejná; jako u leptinu..
Leptin může být aplikován pacientům trpících rakovinou, na příklad injekčně; 8 to buá samotný,, nebo v kombinaci s ostatními therapeutickými látkami; nebo v kombinaci s ostatními therapeutickými postupy»
Vynález může být také demonstrován následujícími, neomezujícími Příklady, publikovanými na dalších stranách» • · · ·
- 25; ___2-S-.2-S_®_É-£-S_í___Y_y_2_á_l_e_z_u
Příklad 1 )
Stanovení buněčné proliferace barvením s MTT.
R'-. e a g e ni s ::
MTT zásobní roztok :
(3-/4,ř5-dime thyIthia zol-2-yl/-2,5-difenylte tra zolium bromid J 5,0 mg/mlJ ve fosfátem pufrovaném fyziologickém roztoku,který je uchováván před použitím při teplotě minus 20,0°C.
Rozpouštědlo :
Koncentrovaná kyselina chlorovodíková;( 450 mikrolitrů; ve 100,0 mlj 2-propanolu.
Postup::
Kultura rostoucích buněk na destičkách opatřených 96 jamkami; za přítomnosti růstových stimulátorů; a růstových inhibitorů.
V požadovaném čase se přidá do každé z jamek destičky 10 mikrolitrů roztoku MTT; a inkubuje se 2,5 až 3,0 hodiny; při teplotě 37,0°C.
Po odsátí supernatantu za vakua, pomocí čisté kalibrované jehlyj se přidá 100,0 mikrolitrů rozpouštědla;( jehož příprava je popsána teýše)J a odečte se absorbance pomocí odečítacího zařízení destiček; při použití filtru 570 nmj a po ode čtení pozadí při 630 nm.
Příklad 2)
Stanovení buněčné proliferace barvením a krystalovou violetí.
P o a t u p i:
Kultura rostoucích buněk v destičkách opatřených 96 jamkami, za přítomnosti různých růstových stimulátorů; a růstových inhibitorů.
V požadovaném čase se přidá do každé jednotlivé jamky destiček 40 mikrolitrů 1 2,5% glutar aldehydu;;.·( .40 mikrolitrů), a destičky se inkubují po dobu 30,0 minut, při teplotě místnosti.
Poté byla destička promyta s vodou,, vysušena a bylo přidáno 0,10 mlj 0,1%ního roztoku ( vodného) krystalové violeti. Mikrodestička byla poté dále inkubována po dobu 30,0 minut; promyta s vodou, a odečtěna při 540 nm; s odečtěným pozadím při 630 nm.
Příklad 3)
Stanovení na' inzulínu závislé proliferaci T47D buněk
Humánní buňky T-47D ( Americká sbírka typových kultur = American Type Culture Collection; Rockville;, MDJ kmen číslo ATCC HTB 133 ); byly naočkovány do 96 jamek destiček v koncentraci 3 x 10^ buněk/ml; v DMEM; e 10% séra hovězího zárodku (FBS); v množství 0,1 ml; v každé j^raky..
Poté, co byl do různých jamek přidán ve zvyšujících se koncentracích humánní inzulín; byly destičky inkubovány po
- 27 9· • 9 9· dobu 72 hodin;, a počty buněk byly poté stanoveny barvením s MTTJ ( viz Obrázek 1)J publikovaný dále ).
Výsledky jsou propočteny z průměrů 8 replikací. Na základě rozsahu buněčné proliferace, jak je demonstrováno dále na Obrázku 1)J byla pro další studie použita koncentrace 50 nřá/ml IGF-I»
P ř í k 1 a d 4)
Stanovení na IGF-1 závislé proliferace T-47D buněk
Do destiček, opatřených 96 jamkami,, byly naočkovány hu* 5 mánní T-47D buňky v koncentraci 3 x 10 buněk/ml v DMEM, a 10% séra hovězího zárodkuj( FBS),, v množství 0,1 ml v každé jamce.
Poté, co byl do různých jamek přidán ve zvyšujících ae koncentracích IGF-I , byly destičky inkubovány po dobu 3 dnůj a počet buněk byl stanoven barvením s MTT,( Viz také Obrázek
2), publikovaný dále).
Výsledky jsou propočteny z průměru 8 replikací. Na základě rozsahu buněčné proliferace; jak je demonstrováno dále na Obrázku 2)*, byla pro další studie použita koncentrace 50 ng/ml.
Příklad 5)
Inhibice inzulínem indukované proliferace T-47D buněk leptinem .* * ···· ·♦«· . · .·· ···· • . *·· ······ ** .······
... · ·· ··· ·· ··
- 28 Buňky T-47HJ ( 3 x 10^ buněk/ ml ); v DMEM; doplněném 10% séra hovězího zárodku, ( FBS); byly naočkovány do dešti-;· ček opatřených 96 jamkami; ( 0„1 ml v každé jednotlivé jamce). Poté byly buňky smíchány s inzulínem; ( 50 ntí);: buá za přítomnosti, nebo absence určených koncentrací murinového leptinu. Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,O°o; v atmosféře 5%niho oxidu uhličitého; po dobu 48 hodin.
Poté byly buňky obarveny s MTT. Údaje jsou vyjádřeny s průměrnou standardní + chybouJ( SEJ n - 8 ).
Z výsledků vyplývá, že leptin signifikantně inhifeoval s in zulinem indukovanou proliferaci.
Viz Obrázek 3); publikovaný dále.
Buňky T-47H; ( 3 x 10^ buněk/ml ); v DMEM,. doplněném s 10% séra hovězího zárodku;( FBS); byly naočkovány do destiček, opatřených 96 jamkami; (0,1 ml v každé jednotlivé jamce).
Po uplynutí jednoho dne bylo medium nahrazeno s DMEM; dodoplněném s 2% séra hovězího zárodku;( FBS); a po uplynutí dal· šího dne, byly buňky smíchány s inzulínem;( 50 ntt)J buá za přítomnpsti,, nebo absence určených koncentrací murihového leptinu,’ ve směsi DMEMJ a 2% séra hovězího zárodkuí FBS).
Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,O°C; v atmosféře 5%ního oxidu uhličitého*, po dobu 48 hodin. Buňky byly poté obarveny s krystalovou violetí. Údaje jsou vyjádřeny s průměrnou;’standardní + chybou( + SE, n = 8 ).
Z výsledků vyplývá, že leptin signifikantně inhiboval s inzulínem indukovanou buněčnou proliferaci.
Viz Obrázek 4); publikovaný dále.
Příklad 6) • · · ·
Inhibice s IGF-I indukované proliferace T-47D buněk leptineá.
Buňl^r T-47DJ, ( 3 x 10^ buněk/ml );v DMEMJ doplněném s 10% séra hovězího zárodku;(FBS)\ byly naočkovány do destiček, opatřených 96 jamkamiJ v množství 0,1 ml v každé jednotlivé jamce,, a poté byly smíchány a 50 ng/mi; IGF-I, za příromnosti nebo absence určených koncentrací murinového leptinu. Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,θ°0· v atmosféře 5% oxidu uhličitého, po dobu 48 $odin.
Poté byly buňky obarveny s ΜΤΤ» Údaje jsou vyjádřeny s průměrnou standardní chybou + SEJ( n = 8 ).
Z výsledků vyplývá, že leptin signifikantně inhiboval s IGF-I indukovanou proliferaci buněk.
Viz Obrázek 5); publikovaný dále.
Buňky T-47D.; ( 3 x 10^ buněk/ml ); v DMEMJ doplněném s 10% séra hovězího zárodku (FBS); byly naočkovány do destiček, opatřených 96 jamkami* v množství 0,1 ml v každé jednotlivé jamce»
Po uplynutí jednoho dne, bylo medium nahrazeno a DMEMJ doplněném s 2% FBS, a po uplynhtí dalšího dne,, byly buňky smíchány s 50,0 ng/ml IGE-IJ bučí za přítomnosti,, nebo absence určených koncentrací murinového leptinu* ve směsi DMEM s 2% séra hovězího zárodku;( FBS).
Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,0°C,, v atmosféře 5%ního oxidu uhličitého, po dobu 48 hodin. Poté byly buňky obarveny s krystalickou violetí» Údaje jsou vyjádřeny s průměrnou standardní + chybou ( SEJ n = 8 ).
Z výsledků vyplývá,, že leptin signifikantně inhiboval s IGF-I indukovanou buněčnou proliferaci.
Viz Obrázek 6), publikovaný dále.
- • fc
Buňky T-47DJ ( 3 x 10^ buněk/ml )J v DMEM; doplněném s 10% séra hovězího zárodkuj(FBS), byly naočkovány do destiček, opatřených 96 jamkami; v množství 0,1 ml v každé jednotlivé jamce.
Po uplynutí jednoho dne, bylo medium nahraženo s DMEMJ doplněném s 2% séra FBSJ a po uplynuti dalšího dne, byly buňky smíchány s 50 ng/ml IGF-IJ za přítomnosti; nebo absence určených koncentrací humánního leptinu; ve směsi DMEM 2% FBS.
Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,0°G v atmosféře 5% ního oxidu uhličitého, po dobu 48 hodin. Poté byly buňky obarveny s krystalovou violetí. Údaje jsou vyjádřeny s průměrnou standardní chybou + SE ( n = 8 )..
Z výsledků vyplývá,, že leptin signifikantně inhibovel s IGF-I indukovanou buněčnou proliferaci»
Viz Obrázek 7), publikovaný dále.
Příklad 8)
Inhibice s inzulínem indukované proliferace MCF-7 buněk leptinem
Buňky· MÓF7 humánního adenokarcinomi^prsu^. ( 3 x 10^ buněk/ml )j ( Americká sbírka typových kultur = American Type Culture Collectionj RockvilleJ MDJ kmen číslo HTB 22 )J doplněné a 6%
FBSJ byly naočkovány do destiček, opatřených s 96 jamkami',, v množství 0,1 ml; v každé jednotlivé jamce..
Po uplynutí jednoho dne bylo medium nahraženo s DMEM; za absence séra. Po uplynutí dalšího dne byly buňky smíchány s 50 nM inzulínu, bučí zs přítomnosti, nebo absence určených koncentrací murinového leptinu,v séru prostém mediu»
Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,O°C v atmosféře 5%ního oxidu uhličitého; po dobu ¢8 hodin.* Poté byly
- 31 buňky obarveny s krystalovou violetí. Údaje jsou vyjádřeny a průměrnou standardní chybou + SEJ( n = 8 ).
Z výsledků vyplývá,, že leptin signifikantně inhiboval s inzulínem indukovanou buněčnou proliferaci.
Viz Obrázek.8); publikovaný dále.
Příklad 9)
Inhibice IGF-I indukované proliferace MCF7 buněk s leptinem.
Buňky MCF-7 humánního' adenokarcinomu Prsu; v DMEM; doplněném s 10% séra hovězího zárodku;( F^S)J byly naočkovány do destiček opatřených 96 jamkami; ( 3 x 10'buněk /mi; v množství 0,1 ml v každé jednotlivé jamce..
Po uplynutí jednoho dne bylo medium nahraženo sérum prostým mediem; a po uplynutí dalšího dne, byly buňky smíchány s 50 ng/mi; IGF-IJ buá za přítomnosti, nebo absence určených koncentrací murinového leptinu; v séru prostém mediu.
Poté byly destičky inkubovány při teplotě 37,0°c; v atmosféře 5%ního oxidu uhličitého, po dobu 96 hodin. Poté byly buňky obarveny s krystalovou viletí. Údaje jsou vyjádřeny s poměrnou standardní chybou +SE;(n=8).
Z výsledků vyplývá, že leptin signifikantně inhiboval s inzulínem indukovanou buněčnou proliferaci.
Viz Obrázek 9), publikovaný dále.
« ··* • · · · • · · · • · · · * • · ♦ · ·« ··
Haag- B.;
- 32 Odkazy na odbonnou literaturu ::
1) Araki E.J Lipas M.A.; Patti M.E.J Bruning J.C r.J Johnson R.S.J a Kahn C.R,
Alternativě pathway ůf insulin signaling in mice with tsrgeted disruption of the IRS-1 gene.(viz komentář). Nátuře, 372; strana 186 - 19OJ/1994/.
2) Ausubel F.M. se sp..
Edice Current Protocols in Molecular Biology
3) ©ampfield I.A.; Smith F.J.J Guisez Y,J Devos R; a Burn P, Recombinant mouše OB protein. Evidence for a peripheral signál linking adiposity and centrál neural networks. Science, 169, 546 - 549‘„/1 995/.·
4) Cheatham B. a Kahn C.R.
Insulin section and insulin signaling network.
Enóocr. *ev.; 16J strana 1 17 - 142*,/1995/.
5( Cioffi J.A.; Shafer A.W.; Zupancic T.J.; Smith-Gbur J.J Mikhail A.; Platika D.J a Snodgrass H.R.
Novel B219/0B receptor informs,. Possible role of leptin in hematopoiesis and reproduction.
Nátuře MedicineJ 2*, 585 - 589;/1996/„
6) Cohen B.J, Novick D. a Rubinstein M.
Modulation of insulin activities by leptin.
Science; 274J 1185 - 1188; /1996/.
7) Collins S.J Kuhn C.M.; Petro A.E.; Swick A.G.; Chrunyk B.A.; a Surwit R.S.
Role of leptin in fat regulation.
^ature*, 380; 677;/1996/.
- 33 8) Cinsidine R.V.J Sinhe M.K.; Heimman M.L.J Kriaucinas A.; Stephens T.W.; Nyce M.R.; Ohannesian J.P.\ Marco C.C.; Mckee L.J.J, Bauer T.L.\ a Caro J.P.
Sérum immunoreactive leptin concentrations in normalweight and obese humans.
N.Engl.J.Med.; 334*, 292 - 295; /1996/.
9) Pelber J.P.; a Golay A*
Regulation of nutrient metabolism and energy expenditure. Metabolism; 44', Suppl. 2J str. 5 - 9J/1995/.
10) Frederich R.C.J. Hamann A.J, Anderson S.; Lollmann B.;
LowelJ B.B.; a Flier J.S.
Leptin levels reflect body lipid csntent in mice. Evidence for diet-induced resistance to leptin eetion.
Nátuře Med,; 1; 1311 - 1314J/1995/.
11) Halaas J.L.; Gajiwala K.S.; Maffei M.; Cohen S.L.; Chait B.T.; Rabinowitz DůJ Lallone R.L.J Burley S.K.J a Friedman J.M.
Weight-reducing effects of the plasma protein encoded by the obese gene. Viz komentář.
Scinece;. 269J strana 543 - 546J/1995/.
12) Lee G.H.; Proenca R.; Montez J.M.* Carroll K.M.;, Darvishzadeh J.G.\ Lee J.I.; a Friedman J.M.
Abnormal splicing of the leptin receptor in diabetic moce. NatureJ 379; 632 - 635J /1996/.
13) Lonnquist F.; Arner P.J Nordfors I., a Schalling M, Overexpression of the obese (ob) gene in adipose tissue of humen obese subjects.
Nátuře Med.’, 1J 950 - 953J/1995/.
• ·
14) Meffei M.J Halaas J.J Ravussin E.J Pratley R.E.J Lee G.H,J Zhang Y.J Fei H.J Kim S.J Lallone R.J Ranganathan S.JKern P.A. a Friedman J.M.,
Leptin levela in human and rodent. Messurement of plasma leptin and ob RNA in obese and weight-reduces subjeets. Nsture Med.J 1J 1155 - 1161J/1995/.
15) Milazzo G.J, Sciatta L, J Papa V.J Goldfine I.D. a Vignari S, ASPB-10 insulin induction of increaseé mitogenic responses and phenotypic changes in humen breast epithelial cella: Evidence for enhanced ínteraction with the insulinlike growth factor-1 receptor.
16) Milazzo G.J Giorgino F.J Damante G.J Sung C.J Stampfer M.R.J Vigneri R.J Goldfine I.J a Belfiore A.
Insulin receptor expression in human breast cancer cell lineš.
Cancer, 52, 3924 - 393OJ/1992/.
17) Myers M.G.Jr.J Sun X.J.J Cheetham B.J Jachna B.R.J Glasheen E.M.J Backer J.M.J a White M.F.
IRS-1 is a eommon element in insulin and insulin like growth fector-1 signaling to the phosphatidylinositol
3- kiněse.
EndocrinologyJ 132J strana 1421 - 1430^/1993/.
18) Myers M.G.Jr.J Sun X.J.J a White M.F.
The IRS-1 signaling systém.
Trends Biochem Sci.J 19J strana 289 - 293J /1994/.
19) Myers M.G.JJr.J Wang L.M.J Sun X.J.J Zhang Y.J Yenush L.J Schlessinger J.J Pierce J.,H.J a White M.F.
Role of IRS-1/GRB-2 complexes in insulin signaling.
Mol.uell Biol.J 14J, strana 3577 - 3587J/1994/.
- 35 20) Myers M..G.- Jr.J a White M.F,
The new elements of insulin signaling. Insulin receptor substráte-1 and proteine with SH2 domains.
Diabetes 42j strans 43 - 5O;/1993/.
21) Pelleymounter M.A.; Culleň M.J.; Baker M.B.; Heeht R.; Winters D.;, Boone T, a Collins F.
Effects of the obese gene product on body weight regulation in ob/ob mice.( Viz komentář ).
Science; 269J strana 540 - 543J/1995/.
22) Permis A.J Witthuhn B.; Keegan A.D.J Nelms K.J Garfein E.J Ihle J.N.J Paul W.E.J Pierce J.H.J a Rothman P.
Interleukin 4 signals through two related pathways.
Proč.Nati.Acad.Sci. USA;92J 7971 - 7975J/1995/.
23) Rose D.W.; Saltiel A.R.J Mejumd8r M. J Decker S.J.J a Olefsky J.M.
Insulin receptor substrate-1 is required for insulinmeóieted mitogenic signál transduction.
Proč.Nati.Acad.Sci. USA;91J strana 797 - 801J/1994/.
24) Sambrook se sp.
Molecular cloning: A Eaborstory M8nU8ij Cold Spring HarborJ N.Y.
25) Tamemoto H. J Kadowaki T.J Tobě K.J Yagi T.J Sekura H.J Hayakawa T.J Terauehi Y.J Uaki K.; Aburagi Y.J Satoh S. se sp.
Insulin resistsnce and growth ietardation in mice lacking insulin receptor substrate-1 ,.( Viz komentář ).
^aturej 372J strana 182 - 186;/1994/.
- 36 26) Tartaglia L.A.; Dembski M.;, Weng X,J Deng N.H.J Culpepper J.J, Devos R.J Richarda G.J.; Campfield L.A.; Clark F.T.; Deeds J.; Muir C.J Sanker S,; Moriarty A.J Moore K.J.; Smutko J.S.J Mays G.G.; Woolf E.A.; Monroe C.A. a Tepper
R.I.
Identification and expression cloning of leptin receptor. OB-R.
CellJ 83J 1263 - 1271',/1995/.
27) Weigle D.S.J Bukowski T.R. J, Foster D.C.J Holderman S.J Kramer J.M.; Lasser G.J Loftonday C.E.J Prunkard D.E.; Raymond C. a Kuijper J.L.
Recombinant ob protein reduces feeding and body weight in the ob/ob mouše·
J.Clin.Invest.J96J 2065 - 2O7O;/1995/.
28) White M.F, a Kahn C.R.
The insulin signaling systém.
J.Biol.Chem.; 269; strana 1 - 4J/1994/.
29) Yin T.G,; Keller S.R.J Quelle F.W.J Witthuhn B.A.; Tseng M.L.S.J Lienhard G.E.J Ihle J.N.; a Yang Y.C. Interleukin-9 induces tyrosine phosphorylstion on insulin receptor substrate-1 via JAK tyrosine kinases. J.Biol.Chem.; 270J 20497 - 2O5O3J/1995/.
30) Yin T.G.; Tsang M.L.S.J a Yang Y.C.
JAK-1 kinase forms complexes with interleukin-4 receptor and 4PS/insulin receptor substrate-1-like protein and is activeted by interleukin-4 and interleukin-9 in T-lvmphocytes.
J.Biol.Chem.; 269J 26614 - 26617/1994/.
31) Zhang Y.; Proence R.J Maffei M.; Barone M.\ Leopold L.;
. a Friedman J.M.
Positional cloning of the mouše obese gene and its human homologue.
NatureJ 372J 425 - 432J/1994/.
Claims (17)
1. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici proliferace nádorových buněk.
2. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro léčbu maligního bujení u savců.
3. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici nádorů, závislých na růstovém faktoru.
4. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici proliferace buněk humánního karcinomu prsu.
5. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro léčbu humánního karcinomu prsu.
• ··· · • 9 ··· ·
6. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici růstového stimulačního působení insulinu na nádorové buňky, zprostředkovaného alespoň zčásti drahou IRS-1/GBR-2.
7. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici mitogenních odpovědí nádorových buněk na jednu nebo větší počet receptorových kináz růstových faktorů a cytokinů ze skupiny IGF-1, IL-4 a IL-9, pro něž je substrátem IRS-1.
8. Použití účinných látek ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi pro výrobu farmaceutických prostředků pro inhibici bazální a insulinem indukované proliferace nádorových buněk při léčení humánních zhoubných nádorů prsu.
9. Použití podle nároků 1 až 8, při němž je účinnou látkou leptin.
10. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje účinnou látku ze skupiny leptin, leptinové fúzní proteiny, leptinové muteiny, agonisté leptinového receptorů, účinné fragmenty a frakce těchto látek, jejich účinné analogy nebo deriváty, jejich soli a jejich směsi spolu s farmaceutickým nosičem, ředidlem a pomocnými látkami a je určen pro inhibici proliferace nádorových buněk.
11. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, v y z n a č u j i c i se t i m, že je určen pro léčbu maligního bujení u savců.
I
- 39
12. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 nebo 11, v y z n a č u j í c í se t í m, že je určen pro inhibici nádorů, závislých na růstovém faktoru.
13. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 až 12, vyznačující se t í m, že je určen pro inhibici proliferace buněk humánního karcinomu prsu při léčení tohoto karcinomu.
14. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 nebo 12, vyznačuj í c í se t í m, že je určen pro inhibici růstového stimulačního působení insulinu na nádorové buňky, zprostředkovaného alespoň zčásti drahou IRS-1/GBR-2.
15. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 nebo 12, vyznačuj í c í se t í m, že je určen pro inhibici mitogenních odpovědí nádorových buněk na jednu nebo větší počet receptorových kináz, růstových faktorů a cytokinů ze skupiny IGF-1, IL-4 a IL-9, pro něž je IRS-1 substrátem.
16. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 až 15, v y z n ač u j í c í se t í m, že je určen pro inhibici bazální a insulinem indukované proliferace nádorových buněk při léčení humánních zhoubných nádorů prsu.
17. Farmaceutický prostředek podle nároku 10 až 16, v y z n a č u j í c í se t í m, že jako účinnou složku obsahuje leptin.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL12073397A IL120733A0 (en) | 1997-04-29 | 1997-04-29 | Leptin as an inhibitor of cell proliferation |
| PCT/IL1998/000196 WO1998048831A1 (en) | 1997-04-29 | 1998-04-26 | Leptin as an inhibitor of tumor cell proliferation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ384899A3 true CZ384899A3 (cs) | 2000-06-14 |
| CZ299872B6 CZ299872B6 (cs) | 2008-12-17 |
Family
ID=11070075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0384899A CZ299872B6 (cs) | 1997-04-29 | 1998-04-26 | Farmaceutický prostredek |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7109159B1 (cs) |
| EP (1) | EP0981365B1 (cs) |
| JP (1) | JP4330662B2 (cs) |
| KR (1) | KR100507731B1 (cs) |
| CN (1) | CN1168497C (cs) |
| AR (1) | AR012626A1 (cs) |
| AT (1) | ATE283702T1 (cs) |
| AU (1) | AU742927B2 (cs) |
| BG (1) | BG63490B1 (cs) |
| CA (1) | CA2288238A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ299872B6 (cs) |
| DE (1) | DE69827942T2 (cs) |
| EA (1) | EA002353B1 (cs) |
| EE (1) | EE04801B1 (cs) |
| ES (1) | ES2232944T3 (cs) |
| HU (1) | HUP0002427A3 (cs) |
| IL (2) | IL120733A0 (cs) |
| NO (1) | NO322304B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ500589A (cs) |
| PL (1) | PL195275B1 (cs) |
| PT (1) | PT981365E (cs) |
| SK (1) | SK284848B6 (cs) |
| UA (1) | UA66793C2 (cs) |
| WO (1) | WO1998048831A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA983608B (cs) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7208572B2 (en) | 1998-08-21 | 2007-04-24 | Albany Medical College | Leptin-related peptides |
| US6777388B1 (en) | 1998-08-21 | 2004-08-17 | Clf Medical Technology Acceleration Program, Inc. | Leptin-related peptides |
| US20050272652A1 (en) | 1999-03-29 | 2005-12-08 | Gault Victor A | Peptide analogues of GIP for treatment of diabetes, insulin resistance and obesity |
| IL132312A0 (en) * | 1999-09-05 | 2001-03-19 | Yeda Res & Dev | Use of leptin in inhibition of endothelial cell proliferation |
| US8076288B2 (en) | 2004-02-11 | 2011-12-13 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides having glucose lowering activity |
| NZ579621A (en) | 2004-02-11 | 2011-03-31 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Hybrid polypeptides with selectable properties |
| US7863240B2 (en) * | 2004-10-08 | 2011-01-04 | Enzo Therapeutics, Inc. | Methods and uses of leptin in hepatocellular carcinoma |
| US8969291B2 (en) | 2004-10-08 | 2015-03-03 | Enzo Therapeutics, Inc. | Methods for decreasing leptin levels or activity for treating inflammation |
| KR20070115947A (ko) | 2005-02-11 | 2007-12-06 | 아밀린 파마슈티칼스, 인크. | 선택가능한 특성들을 가지는 ｇｉｐ 유사체 및 하이브리드폴리펩타이드 |
| WO2007022123A2 (en) | 2005-08-11 | 2007-02-22 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides with selectable properties |
| US8263545B2 (en) | 2005-02-11 | 2012-09-11 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | GIP analog and hybrid polypeptides with selectable properties |
| EP2330125A3 (en) | 2005-08-11 | 2012-12-12 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid polypeptides with selectable properties |
| US8716220B2 (en) * | 2005-09-07 | 2014-05-06 | Nikolaos Tezapsidis | Leptin compositions and methods for treating progressive cognitive function disorders resulting from accumulation of neurofibrillary tangles and amyloid beta |
| US8227408B2 (en) * | 2005-09-07 | 2012-07-24 | Neurotez, Inc. | Leptin as an anti-amyloidogenic biologic and methods for delaying the onset and reducing Alzheimer's disease-like pathology |
| US8497240B2 (en) | 2006-08-17 | 2013-07-30 | Amylin Pharmaceuticals, Llc | DPP-IV resistant GIP hybrid polypeptides with selectable properties |
| MX344166B (es) * | 2008-02-08 | 2016-12-07 | Ambrx Inc | Leptina-polipeptidos modificados y sus usos. |
| CA2725143A1 (en) * | 2008-05-21 | 2009-11-26 | Neurotez, Inc. | Methods for treating progressive cognitive disorders related to neurofibrillary tangles |
| US20100316639A1 (en) | 2009-06-16 | 2010-12-16 | Genentech, Inc. | Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy |
| TW202417497A (zh) | 2015-10-12 | 2024-05-01 | 美商再生元醫藥公司 | 活化瘦素受體的抗原結合蛋白 |
| LT3538554T (lt) | 2016-11-08 | 2025-10-10 | Antigeną surišantys baltymai, antagonizuojantys leptino receptorius | |
| SG11202005146VA (en) | 2017-12-18 | 2020-06-29 | Regeneron Pharma | Bispecific antigen binding molecules that bind leptin receptor and/or gp130, and methods of use thereof |
| PT3773713T (pt) | 2018-04-06 | 2025-07-29 | Regeneron Pharma | Anticorpo agonista do recetor de leptina para usar no aumento da massa óssea num sujeito que sofre de disfunção metabólica ou de hipoleptinemia |
| CN120629571B (zh) * | 2025-06-13 | 2026-03-27 | 蚌埠医学院第一附属医院（蚌埠医学院附属肿瘤医院） | Lepr基因或蛋白作为靶标在制备胆管细胞癌治疗产品中的用途 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HUP9802609A2 (hu) * | 1995-06-30 | 1999-03-29 | Eli Lilly And Co. | A diabetes kezelésére szolgáló eljárás |
| EP0764722A2 (en) * | 1995-09-19 | 1997-03-26 | Eli Lilly And Company | DNA encoding primate leptins as medicinal proteins |
| WO1997027286A1 (en) * | 1996-01-23 | 1997-07-31 | Progenitor, Inc. | Methods for using the obese gene and its gene product to stimulate hematopoietic development |
-
1997
- 1997-04-29 IL IL12073397A patent/IL120733A0/xx unknown
-
1998
- 1998-04-26 ES ES98917580T patent/ES2232944T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-26 EA EA199900981A patent/EA002353B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-04-26 JP JP54678798A patent/JP4330662B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-26 KR KR10-1999-7009705A patent/KR100507731B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-26 HU HU0002427A patent/HUP0002427A3/hu unknown
- 1998-04-26 AT AT98917580T patent/ATE283702T1/de active
- 1998-04-26 CA CA002288238A patent/CA2288238A1/en not_active Abandoned
- 1998-04-26 CN CNB988066920A patent/CN1168497C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-26 DE DE69827942T patent/DE69827942T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-26 WO PCT/IL1998/000196 patent/WO1998048831A1/en not_active Ceased
- 1998-04-26 PT PT98917580T patent/PT981365E/pt unknown
- 1998-04-26 CZ CZ0384899A patent/CZ299872B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-04-26 UA UA99116415A patent/UA66793C2/uk unknown
- 1998-04-26 NZ NZ500589A patent/NZ500589A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-26 US US09/403,897 patent/US7109159B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-04-26 SK SK1471-99A patent/SK284848B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-04-26 EP EP98917580A patent/EP0981365B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-26 AU AU70762/98A patent/AU742927B2/en not_active Ceased
- 1998-04-26 EE EEP199900510A patent/EE04801B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-26 PL PL98336582A patent/PL195275B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1998-04-29 ZA ZA983608A patent/ZA983608B/xx unknown
- 1998-04-29 AR ARP980102003A patent/AR012626A1/es unknown
-
1999
- 1999-10-25 BG BG103832A patent/BG63490B1/bg unknown
- 1999-10-28 IL IL132633A patent/IL132633A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-10-28 NO NO19995267A patent/NO322304B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ384899A3 (cs) | Použití účinných látek a farmaceutický prostředek | |
| JP5290966B2 (ja) | 安定化されたインスリン様増殖因子ポリペプチド | |
| CN101678084B (zh) | 未酰基化的生长素释放肽作为治疗代谢紊乱中的治疗剂 | |
| CN101466399B (zh) | 稳定的胰岛素样生长因子多肽 | |
| KR20120082909A (ko) | 합성 마이오스타틴 펩티드 길항제 | |
| KR20010033297A (ko) | 긴 펜트락신 ｐｔｘ3를 포함하는 약제학적 조성물 | |
| BRPI0615538A2 (pt) | proteìna de fusão, ácido nucléico isolado, vetor, célula hospedeira, método de produção de um polipeptìdio, composição farmacêutica, composição alimentar, método para a redução do peso corpóreo, método para o tratamento de diabetes, método para aumentar a vida média de um peptìdio ou uma proteìna terapêutica recombinante em um indivìduo, método para aumentar a eficácia de um peptìdio ou proteìna terapêutica, método para o tratamento de diabetes ou redução do peso corpóreo | |
| JPWO2003078460A1 (ja) | ペプチド、該ペプチドを含有する医薬組成物及び癌治療用医薬組成物 | |
| WO2012151476A1 (en) | Glial cell line derived neurotrophic factor, obesity, and obesity-related diseases and conditions | |
| US20160136242A1 (en) | Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor, Obesity, and Obesity-Related Diseases and Conditions | |
| JP2008526875A (ja) | 新規使用 | |
| MXPA99009972A (en) | Leptin as an inhibitor of tumor cell proliferation | |
| JP4583763B2 (ja) | 切断型２４ｋＤａ塩基性線維芽細胞成長因子 | |
| CN115957301A (zh) | 一种促进心梗心肌修复的细胞分泌因子及应用 | |
| HK1028350B (en) | Leptin as an inhibitor of tumor cell proliferation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20130426 |