CZ86296A3

CZ86296A3 - Novel urethane-containing aministeroidal compounds and pharmaceutical composition containing thereof

Info

Publication number: CZ86296A3
Application number: CZ96862A
Authority: CZ
Inventors: Chia Nien Yu; Gilles Yves Genain; Rachel Boujo
Original assignee: Procter & Gamble
Priority date: 1993-09-24
Filing date: 1994-09-23
Publication date: 1996-12-11
Also published as: EP0720617A1; ATE175205T1; CN1135221A; NO307757B1; AU690926B2; CA2172495A1; HUT74169A; EP0720617B1; KR960704913A; PL313622A1; DK0720617T3; JPH09502984A; HU9600736D0; BR9407654A; DE69415682T2; WO1995008559A1; US5922703A; NO961168L; ES2126155T3; NO961168D0

Description

Oblast techniky

Vynalez se týká nových urethan obsahujících aminosteroidních sloučenin. Vynález se také týká farmaceutických přípravků obsahujících tyto nové sloučeniny a rovněž způsobu léčení městnavého srdečního selhání za použití sloučenin podle vynálezu.

Dosavadní stav techniky

Městnavé srdeční selhání je progresivní nemoc, při které je srdce méně a méně schopné dodávat adekvátní minutový objem srdeční, což je objem krve čerpané srdcem za účelem rozšiřování oxydované krve do periferních tkání. Jestliže srdce selže, zbytek těla kompenzuje ztrátu v minutovém objemu srdečním a výsledkem této kompenzace může být syndrom známý jako městnavé srdeční selhání. Jak tento syndrom postupuje_tdochází k strukturálnímu a hemodynamickému poškození. Toto strukturální poškození se projeví makroskopicky jako ventrikulární hypertrofie v myokardu a mikroskopicky jako intersticiální, perivaskulární a náhradní fibróza v srdeční stěně, sníženou myokardiální kapilární hustotou a myokardiálním úbytkem buněk. Jestliže dojde k fibróze myokardiální tkáně, projeví se tato skutečnost ohrožením funkčnosti srdce, protože zbývající životaschopné myokardiální buňky jsou více zatížené.

Hemodynamicky, při selhání srdce dochází ke snížení kapacity k vyvíjení síly během srdečního stahu (fáze v srdečním cyklu během čerpání krve ze srdeční komory). Tak je třeba větší konečný diastolický objem (během diastolické fáze srdečního cyklu naplňující srdeční komoru), k dosažení jakékoliv úrovně externí činnosti. Při srdečním selhání, vede snížené čerpání, způsobené nevhodným spojením pracovní kapacity a zatížení, ke zvýšení konečného diastolického tlaku a plicního kapilárního tlaku. Často dochází k překrvení plic a k periferním edémům. Jak městnavé srdeční selhání postupuje, u pacienta dochází ke zhoršení symptomů vyčerpání a dusnosti.

Účinná léčba městnavého srdečního selhání vyžaduje stanovení její etiologie, je-li to možné, poněvadž některé etiologie mají svojí vlastní formu léčby. Městnavé srdeční * selhání má řadu etiologií, včetně nemocí myokardu, jako je '

nemoc koronární artérie nebo myokarditida, nemoci chlopní, jako je mitrální prolaps chlopně nebo aortální stenóza, perikardiální nemoci, kongenitální nemoc srdce, nemoc plic, srdeční arytmie, hypertenze a cukrovka. Například, jestliže etologie městnavého srdečního selhání je myokarditida nebo arytmie, potom léčba pacienta antimikrobiálním nebo antiarytmickým činidlem může u pacienta vést k normální funkci srdce.

Nicméně, jestliže etiologie nereagují kladně na jinou léčbu, měly by být vyloučeny a měl by být zahájen jeden nebo více léčebných způsobů z následujících možností: 1) zlepšení kapacity čerpání srdce podáním inotropního činidla, jako je digitális, 2) snížení zátěže srdce odpočinkem a/nebo podáním vasodilatátorů, jako je kaptopril a 3) řízení retence sodíku a vody dietou s nízkým obsahem sodíku nebo podáním diuretika, jako je thiazid. Léčba městnavého srdečního selhání je individuální, závisí na symtomatologii pacientů a snášenlivosti na podávání léků. Například někteří pacienti mají silnou tendenci k rozvíjení toxičnosti digitálisu, zatímco ostatní pacienti s mírnými symptomy mohou mít prospěch z diuretik, která mají větší léčebný index. Navíc běžné zkušenosti uvádějí, že diuretika jsou vhodná pro léčbu městnavého srdečního selhání v první řadě a že léčba diuretiky by měla být následována léčbou vasodilatátory a digitális. Je třeba také poznamenat, že digitális je nejúčinnější u pacientů trpících těžkým městnavým srdečním selháním. Viz Braunwald, Heart Disease: A Textbook of Cardiovascular Medicine, Vol (3. vydání, 1988), Chung, E.K., Quick Reference to Cardiovascular Disease, kapitola 27 (2. vydání, 1983) a Fowler, N.O, Cardiac Diaqnosis and Treatment, kapitola 12 (2. vydání, 1976).

Zatímco digitális je užitečný pro zlepšení symptomů spojených s hemodynamickými problémy charakteristické pro vážné městnavé srdeční selhání, jeho terapeutický index ve skutečnosti omezuje jeho terapeutickou užitečnost. Viz Braunwald, Heart Disease; A Textbook of Cardiovascular Medicine. Vol (3. vydání, 1988), Chung, E.K., Quick Reference to Cardiovascular Disease, kapitola 27 (2. vydání, 1983) a Fowler, N.O, Cardiac Diaqnosis and Treatment, kapitola 12 (2. vydání, 1976) a Goodman a Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, kapitola 34 (8. vydání, 1990).

Problémy s toxicitou, spojené s digitálisem podněcují badatele pokoušet se vyvinout bezpečnější kardioaktivní sloučeniny. Kardioaktivní sloučeniny se steroidním jádrem jsou popsány v řadě patentů; WO 07/0416787/04167, Chiodiní a kol., publikovaná 16. 7. 1987 popisuje aminoglykosidové steroidní deriváty substituované aminocukerným zbytkem ve 3 poloze a acetalovou vazbou ve 14 poloze. Uvádí se, že tyto sloučeniny jsou užitečné pro léčbu hypertenze. Francouzský patent 2 642 973, Guina, publikovaný 17. 8. 1990 popisuje sloučeniny podobné digitálisu, 2,3-dioxymethyl-6-methyl-3»beta-D-glukosa-strofantidin, který obsahuje steroidní jádra substituovaná ve 3-poloze glukósovou částí a v 17 poloze laktonovou částí a ve 14 poloze hydroxylovou skupinou. Uvádí se zde, že tato sloučenina je užitečná na prevenci patologických stavů způsobených srdeční nedostatečností pro kterou je digitális předepsán a pro prevenci patologických stavů způsobených hypertenzí následkem arteriální kalcifikace. Tato sloučenina se také uvádí jako pozitivní inotrop, periferní vasodilatátor a antiarytmické činidlo. WO 87/04168, Chiodini a kol., publikovaný 16. 7. 1987, popisuje aminoglykosidový steroid s alkylsubstituovaným aminocukrem ve 3 poloze, jako je 2-amino nebo 2-alkylamino-2-deoxyhexopyranosyl, 3-amino nebo 3-alkylamino-3-deoxyhexopyranosyl,

3- amino nebo 3-alkylamino-3,6-dideoxyhexopyranosyl, 3-amino nebo 3-alkylamino-2,3,6-trideoxyhexopyranosyl, 4-amino nebo

4- alkylamino-2,4,6-trideoxyhexopyranosylový zbytek a cyklický amid (laktam) v 17 poloze. 14 poloha je substituována s H. 0 sloučeninách se uvádí, že jsou užitečné jako antihypertensiva. WO 91/17176, Kenny a kol., publikovaná 14.

11. 1991 popisuje steroidní glykosidy, užitečné jako činidla na tlak a které mají cukrovou část ve 3 poloze, takovou, jako je pentósa, hexósa nebo jejich kombinace a laktonový kruh v poloze 17, přičemž 14 poloha je substituována OH, H nebo F, Cl, Br nebo NH₂· DD 296 502 A5, Siemann a kol., udělený 5. 12 1991, popisuje steroidní amidy pro léčení srdeční nedostatečnosti, kde 3 poloha je substituována sulfonylaminoskupinou a 17 poloha je substituována 5- nebo 6-členným laktonovým kruhem, 14 poloha je substituována OH.

US patent č. 5 144 017, LaBella, 1. 9. 1992, popisuje steroidní sloučeniny, o kterých se uvádí, že jsou užitečné jako stimulanty srdce, kde 3-poloha je substituována glykosilovým zbytkem, jako je β-D-glukosid, a-L-rhamnosid, tridigitoxosid a 17 poloha je substituována acetoxyskupingu nebo aminoskupinou a ve 14 poloze je OH skupina. US patent č. 5 175 281, McCall, 29. 12. 1992 popisuje pyrimidinylpiperazinylové steroidní sloučeniny, které jsou užitečné při poranění míchy a při poranění hlavy a následně mozkové křeče, čímž se zabrání škodám následujícím kardiopulmonární resuscitaci a srdeční infarkt, kde 3-poloha je substituována OH, CH₃O, COOH nebo benzoxyskupinou, ve 14-poloze se nachází vodík a v 17-poloze heterocyklický amin. DD 256 134 Al, Wunderwald a kol., udělený 17. 4. 1988 popisuje postup přípravy kardioaktivních steroidů, kde 3-poloha steroidního jádra je substituována morfolinoformyloxyskupinou a 17-poloha steroidního jádra je substituována laktonovým kruhem a 14-poloha je substituována H, OH nebo olefinem. 0 uvedených sloučeninách se uvádí, že jsou užitečné pro zvýšení srdeční kontraktility. JP 4-290899, Ichikawa a kol., zveřejněno 15. 10 1992, uvádí kardiotoní steroidní sloučeniny, ve kterých je

3-poloha steroidního jádra substituována oligosacharidera, přičemž uvedený oligosacharid se skládá ze 3 glukopyranosylových částí, 14-poloha je substituována OH skupinou a 17-poloha je substituována laktonovým kruhem. Templeton a kol., 36, J. Med. Chem. 42-45 (1993) popisuje syntézu derivátů 14-hydroxy-21-nor-5β,14p-pregnanu a 5β, 14p-pregnanu C-3 α-rhamnosidů a tris-p-D-digitoxosidů. O uvedených sloučeninách se uvádí, že jsou účinná kardiotonika. Tyto deriváty mající v 0-17β COCH₂OH, CH₂OH, CO₂OH, CO₂Me, CH₂NH₂ nebo CH₂NO₂ skupiny vážou k digitális receptor nezjistitelnou stranou srdečního svalu. Templeton a kol., J. Chem. Sci. Perkin. Trans., popisují syntézu 20a- a 20p-acetamido, amino-, nitro- a hydroxy-3-p-glykosidu (α-L-rhamnopyranosidu a tris-p-D-digitoxosidu) a geninových derivátů 14-hydroxy-5p,14p-pregnanu společně s C-20 oximem, hydrazonem a amidinhydrazonem. Tyto sloučeniny jsou uváděny jako účinná kardiotonika. Adeoti, S. B. a kol., Tetrahedron Letters, 3717-3730 (1989) popisují způsob zavádění 143-amino funkční skupiny do steroidní molekuly. Uvedená metoda umožňuje přípravu kardioaktivního 14p-amino-5p-pregnan-3p,20β diolu.

inhibitoru enzymu konvertující angiotensin (ACEI) se uvádí, že snižují úmrtnost pacientů s městnavým srdečním selháním. Viz Nicklas J. M. a Pitt, B., a kol. (The SOLVD Investigators), Effect of Enalapril on Survival in Patients with Reduced Left Ventricular Ejection Fractions and Congestive Heart Failure, N. Engl. J. Med. 325(5): 293 (1991).

Nicméně 4 miliony lidí dosud trpí méstnavým srdečním selháním. Úmrtnost do pěti let po diagnóze městnavého srdečního selhání činí u mužů 60 %, u žen 45 %. Toto je jasný důvod pro nalezení lepší terapie pro tuto nemoc. Viz Parmley, W.W., Pathophysiology and Current Therapy of Congestive Heart Failure, J. Am. Col. Cardiol. 13: 771-785 (1989); Francis G.S. a kol., Congestive Heart Failure: Pathopsychology and Therapy, Cardiovascular Pharmacology,

3. vydání (1990).

O 14-aminosteroidech se uvádí, že jsou užitečné pro léčení městnavého srdečního selhání zvýšením srdeční kontraktility. Tyto sloučeniny vykazují therapeutický účinek zvýšené srdeční kontraktility bez postranních účinků digitálisu . Tyto 14-aminosteroidy jsou popsány v následujících třech patentech, zde uváděné jako odkaz: US patent č. 4 552 868, Jarreau a kol., vydaný 12. 11. 1985, US patent č. 4 584 289, Jarreau a kol., vydaný 22. 4. 1986 a US patent 4 885 280, Jarreau a kol, vydaný 5. 12. 1989. Tyto 3 patenty popisují 14-aminosteroidní sloučeniny, které vykazují pozitivní inotropní účinnost. Nyní bylo nalezeno, že urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle vynálezu, kde

3-poloha je substituována urethan obsahující částí jsou účinnější inotropy. Uvedené urethan obsahující aminosteroidy jsou více resistentní k metabolismu a proto vykazují delší dobu trvání inotropního účinku než 14-aminosteroidy známé ze stavu techniky.

Podstata vvnálezu

Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny a jejich farmaceuticky použitelné soli nebo estery obecného vzorce

ve kterém

a) R-l znamená (i) C00R₅, kde

R₅ znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s l až 6 atomy uhlíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku obsahující 2 až 6 atomů uhlíku substituovaných aminoskupinou, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu nebo karbocyklický kruh nebo (ii) CHRgOH, kde

R₆ znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo (iii) COR·'», kde R’·' znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, nižší alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku substituovanou aminoskupinu nebo dialkylaminoskupinu nebo (iv) CHRgNHY, kde Y znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (v) 5- nebo 6-členný a- nebo β-nenasycenný laktonový kruh;

b) R₂ znamená (i) -NR₇R₈, kde

R_? nebo Rg, které_jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (ii) OH a

c) R₃ znamená (i) část obsahující urethan,

) II N-C-0 kde R_g, R₁₀, R_llř Rj₂ ^{a R}i2a' ^které jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu nebo (ii) část obsahující urethan

Rl2a

N-C-0

R-10 Rg kde X znamená NR_llz O nebo S a R₉, R_lo, a R^a' které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, R_i;l znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, aryl nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená O nebo S, pak jsou uvedené atomy 0 a S nesubstituovány a (iii) část obsahující urethan

II

R'RNCO kde X znamená O nebo S, R'R'' jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární, rozvětvenou nebo cyklickou nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu, heteroarylaiky1skupinu, arylskupinu, heteroarylskupinu, substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický kruh, substituovaný nebo nesubstituovaný nasycený heterocyklický kruh nebo substituovaný nebo nesubstituovaný aromatický heterocyklický kruh, přičemž uvedené substituenty jsou vybrány ze souboru který zahrnuje hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkoxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, heteroarylskupinu, arylskupinu, nasycený heterocyklický kruh, hydroxyalkylskupinu, alkylaminoalkylskupinu,arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a (iv) část obsahující urethan

kde Rg, R₁₀, R_lx a R₁₂ které jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu a (v) část obsahující urethan

kde X znamená NR₁₀, 0 nebo S a R_g, Rj·^ a R₁₂, které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, R₁₀ znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkyl skupinu, aryl nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená 0 nebo S, pak jsou uvedené atomy 0 a S nesubstituovány a

d) R₄ znamená (i) OH nebo (ii) H nebo (iii) 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a

e) R₁₄ znamená (i) OH nebo (ii) H nebo (iii) 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a

f) Z znamená (i) -CH-, kde a a b znamenají jednoduchou vazbu nebo (ii) =C, kde a nebo b znamenají dvojnou vazbu.

Definice a použité termíny:

aminosteroid znamená steroidní kruhovou sloučeninu, která má aminoskupinu vázanou na steroidní jádro,

Alkyl znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, přímý, cyklický nebo rozvětvený, nasycený uhlovodíkový řetězec obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně, pokud není uvedeno jinak, obsahující 1 až 6 atomy uhlíku. Výhodně alkylové skupiny znamenají, nikoliv však s omezením, methyl, ethyl, propyl, isopropyl a butyl, monovalentní zbytek odvozený od alifatického uhlovodíku odstraněním 1 H, jako je methyl. Nižší alkylskupina obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku,

Heteroalkyl znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, nasycený řetězec obsahující 3 až 8 členů a obsahující atomy uhlíku a jeden nebo dva heteroatomy,

Alkenyl znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec se 2 až 8 atomy uhlíku, výhodně se 2 až 4 atomy atomy uhlíku a který má alespoň jednu olefinickou dvojnou vazbu,

Alkinyl znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec se 2 až 8 atomy uhlíku, výhodně se 2 až 4 atomy atomy uhlíku a který má alespoň jednu trojnou vazbu,

Acetát znamená sůl kyseliny octové obsahující zbytek ch₃coo-,

Acetoxy znamená acetyloxy, zbytek CH₃COO-,

Acetyl znamená zbytek CH₃CO-,

Aglykon znamená složku glykosidu, například rostlinné barvivo, které neznamená cukr,

Karbocyklický kruh” nebo karbocyklus znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, nasycený, nenasycený nebo aromatický uhlovodíkový kruh, obvykle obsahující 3 až 8 atomů, výhodně 5 až 8 atomů,

Heterocyklický kruh nebo heterocyklus znamená nesubstituovaný nebo substituovaný, nasycený nebo nenasycený aromatický kruh obsahující atomy uhlíku a jeden nebo více heteroatomů v kruhu. Heterocyklické kruhy obvykle obsahují 3 až 8, výhodně 5 až 7 atomů. Pokud není uvedeno jinak, heteroatom je vybrán ze skupiny, která zahrnuje dusík, síru a kyslík.

Aryl znamená aromatický karbocyklický kruh. Arylové skupiny zahrnují, nikoliv však s omezením, fenyl, tolyl, xylyl, kumenyl a naftyl, organický zbytek odvozený od aromatického uhlovodíku odstraněním jednoho atomu, například fenyl z benzenu.

Heteroaryl znamená aromatický heterocyklický kruh. Výhodně heteroarylové skupiny zahrnují, nikoliv však s omezením, thienyl, furyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrazinyl, oxazolyl, thiazolyl, chinolinyl, pyrimidinyl a tetrazolyl.

Alkoxy znamená atom kyslíku s uhlovodíkovým řetězcem, kde uhlovodíkový řetězec znamená alkyl nebo alkenyl (například -O-alkyl nebo -O-alkenyl), přičemž zbytek alkoxy je připojen ke zbytku molekuly atomem kyslíku, jako je methoxy. Výhodně alkoxyskupiny zahrnují, nikoliv však s omezením, methoxyskupinu, ethoxyskupinu, propoxyskupinu a alkyloxyskupinu.

Hydroxyalkyl znamená substituovaný uhlovodíkový řetězec obsahující hydroxysubstituent (např. -OH) a který může obsahovat další substituenty. Výhodně hydroxyalkylové skupiny zahrnují, nikoliv však s omezením, hydroxyethyl, hydroxypropyl, fenylhydroxyalkyl.

Karboxyalkyl znamená substituovaný uhlovodíkový řetězec obsahující karboxylový substituent (například -COOH) a který může obsahovat další substituenty. Výhodně karboxyalkylové skupiny zahrnují karboxymethyl, karboxyethyl a jejich kyseliny a estery.

Aminoalkyl znamená uhlovodíkový řetězec (například alkyl) substituovaný aminoskupinou (například NH-alkyl-), jako je dimethylaminoalkyl.

Alkylamino znamená aminoskupinu s jedním nebo dvěma alkylovými substituenty (například -N-alkyl).

Alkenylamino znamená aminoskupinu s jedním nebo dvěma alkenylovými substituenty (například -N-alkenyl).

Alkinylamino znamená aminoskupinu s jedním nebo dvěma alkinylovými substituenty (například -N-alkinyl).

Alkylimino” znamená iminoskupinu s jedním nebo dvěma alkylovými substituenty (například -N=alkyl-).

Arylalkyloxy znamená atom kyslíku obsahující arylalkylový substituent, například fenylmethoxy, fenylmethylenoxy ch₂o

Heteroarylalkoxy znamená atom kyslíku obsahující heteroalkylový substituent, například —

Arylalkyl znamená alkylskupinu substituovanou arylovou skupinou. Výhodné arylalkylové skupiny zahrnují benzyl a fenylethyl.

Heteroarylalkyl'’ znamená alkylovou skupinu substituovanou heteroarylovou skupinou.

Arylamino znamená aminoskupinu substituovanou arylovou skupinou (například -NH-aryl).

Aryloxy znamená atom kyslíku s arylovým substituentem (například -O-aryl).

Acyl nebo karbonyl znamená skupinu vzniklou odstraněním hydroxyskupiny z karboxylové kyseliny (například R—C(=0)—). Výhodné alkylacylové skupiny zahrnují, nikoliv však s omezením, acetyl, propionyl a butanoyl.

Acyloxy znamená atom kyslíku s acylovým substituentem (například -O-acyl), například -O-C(=O)-alkyl.

Acylamino znamená aminoskupinu s acylovým substituentem (například -N-acyl), například -NH-(C=0)-alkyl.

Benzoxy znamená benzoyloxyskupinu.

Benzoyl znamená arylovou skupinu CgHgCO-, odvozenou od benzoové kyseliny.

Benzoyloxy znamená benzoxyskupinu CgHgCOO-, odvozenou od benzoové kyseliny.

Karbamát znamená sůl karbaminové kyseliny, která obsahuje zbytek -NCO₂-, známý ve stavu techniky jako urethan nebo jako ester kyseliny karbaminové.

Karboxy znamená karboxylovou skupinu.

Ester'· znamená organickou sůl vzniklou z alkoholu (báze) a organické kyseliny elimminací vody; funkční deriváty karboxylových kyselin jsou sloučeniny, které jsou přeměněny na karboxylové kyseliny hydrolýzou. Nejznámější jsou estery, kde hydroxylové skupina je nahrazena alkoxyskupinou

RC-OR

Glykosid znamená přírodní sloučeninu cukru s jinou substancí, která se hydrolyzuje na cukr a zásadu (například koniferin dává glukosu a koniferylalkohol jako zásadu, glukosidy dávají glukosu, fruktosidy dávají fruktosu, galaktosidy dávají galaktosu atd; cyklický acetal cukru.

Halo, halogen nebo halid znamená atom chloru, bromu, fluoru nebo jodu. Výhodné jsou atomy chloru, bromu a jodu.

Lakton znamená vnitřní ester hydroxykarboxylové

- 17 kyseliny vzniklý odštěpením molekuly vody z hydroxyskupiny a karboxylové skupiny kyseliny, který obsahuje karbonyloxyskupinu -0C0- v kruhu a klasifikovaný podle polohy hydroxyskupiny v základní kyselině, tj. cyklický ester.

“Farmaceuticky použitelná sůl znamená kationtovou sůl tvořenou jakoukoliv kyselou (například karboxylovou) skupinou nebo aniontovou sůl tvořenou jakoukoliv bázickou (například aminovou) skupinou. Řada těchto solí je známá ve stavu techniky a je popsána veWorld Patent Publication 87/05297, Johnston a kol., publikována 11. září 1987, uváděná zde jako odkaz. Výhodné kationtové soli zahrnují sole alkalických kovů (například sodné nebo draselné), soli kovů alkalických zemin (například hořečnaté nebo vápenaté). Výhodné aniontové soli jsou sole halogenidů, jako jsou chloridy.

Soli jsou substance vzniklé reakcí mezi kyselinami a bázemi, skupinou sloučeniny kovu (positivní) a nekovu (negativní): MOH (báze) + HX (kyselina) = MX (sůl) + H₂O (voda).

Steroidní jádro znamená generický výraz pro lipidní sloučeniny zahrnující steroly, žlučové kyseliny, srdeční glykosidy, saponiny a sexuální hormony.

Substituent znamená jakoukoliv skupinu nahrazující vodík základní sloučeniny.

Substituce znamená nahrazení části skupiny ve sloučenině substituentem.

•'Substituovaný se týká sloučeniny která se substituuje.

Substituce znamená reakci, při které se atom nebo skupina atomů v (obvykle organické) molekule mění za jinou.

Substituenty samotné mohou být substituovány. Tato substituce může být jedním nebo více substituenty. Tyto substituenty zahrnují, nikoliv však s omezením, takové substituenty uvedené v C. Hansch a A. Leo, Substituent Constants for Correlation Analvsis in Chemistrv and Biology (1979), zde uváděné jako odkaz. Výhodné substituenty zahrnují, nikoliv však s omezením, alkylskupinu, v

alkenylskupinu, alkoxyskupinu, hydroxyskupinu, oxoskupinu, aminoskupinu, aminoalkylskupinu (například aminomethylskupinu, atd.), kyanoskupinu, halogen, karboxyskupinu, alkoxyacetylskupinu (například karboethoxy atd.), thiol, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, heterocykloalkyl (například piperidinyl, morfolinyl, piperazinyl, pyrrolidinyl atd.), iminoskupinu, thioxoskupinu, hydroxyalkylskupinu, aryloxyskupinu, arylalkylskupinu a jejich kombinace.

monosacharid je jednoduchá cukrová část například hexosa, 2-deoxyglukosa, 6-deoxyhexosa, 2,6-dideoxyhexosa, atd, rhamnosa, glukosa, arabinosa, digitoxosa, fruktosa, galaktosa, rhamnopyranosa, hexopyranosa, 6-deoxyglukosa,

4,6-dideoxyglykopyranosa, mannosa, cymarosa, xylosa, lyxosa, ribosa, digitalosa, 4-amino-2,4,6-trideoxylyxohexopyranosa,

4-amino-4,6-dideoxyglukopyranosa, 2,3-dideoxyrhamnopyranosa,

4-methoxy-4,6-dideoxyrhamnopyranosa.

Monosacharidový zbytek může být vyjádřen graficky židličkovou nebo kruhovou konfigurací. Například glukosa (monosacharid) je vyjádřena následovně:

CH.OH

HO

OH

H

HO'

H

H kruh židle

Vynález zahrnuje urethan obsahující aminosteroidové sloučeniny, způsob jejich přípravy, farmaceutické přípravky je obsahující a způsob léčení při využití uvedených urethan obsahujících aminosteroidních sloučenin a jejich přípravků pro léčení mšstnavého srdečního selhání u lidí a ostatních savců. Specifické sloučeniny a přípravky podle vynálezu musí být farmaceuticky použitelné. Farmaceuticky použitelná složka je taková složka, která je vhodná pro použití pro lidi a/nebo pro jiné savce bez postranních efektů (jako je toxicita, podráždění a alergická odezva), odpovídající přijatelným poměrům rizika a užitku.

Urethan obsahující 14-aminosteroidní sloučeniny a jejích farmaceuticky použitelné soli nebo estery mají obecný vzorec:

ve kterém

a) Rj znamená (i) COOR₅, kde

Rg znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku obsahujících 2 až 6 atomů uhlíku substituovaných aminoskupinou, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu nebo karbocyklický kruh nebo (ii) CHRgOH, kde

Rg znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (iii) COR''', kde R'’' znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku substituovanou aminoskupinou nebo dialkylaminoskupinou nebo (iv) CHRgNHY, kde Y znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (v) 5- nebo 6-členný a- nebo β-nenasycenný laktonový kruh;

b) R₂ znamená (i) —NR^Rg, kde *

R₇ nebo R_g, které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (ii) OH a

c) R₃ znamená (i) část obsahující urethan,

kde R_g, R₁₀, Rji, R12 ^{a R}12a' ^kter® jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu nebo (ii) část obsahující urethan

RlO ^9 kde X znamená NR_llř O nebo S a R₉, R₁₀, a R_12a, které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s l až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, R_1;l znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyaklky1skupinu, aryl nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená 0 nebo S, pak jsou uvedené atomy 0 a s nesubstituovány a (iii) část obsahující urethan

X

II

R'RNCO kde X znamená O nebo S, R’R*’ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární, rozvětvenou nebo cyklickou nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, arylskupinu, heteroarylskupinu, substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický kruh, substituovaný nebo nesubstituovaný nasycený heterocyklický kruh nebo substituovaný nebo nesubstituovaný aromatický heterocyklický kruh, přičemž uvedené substituenty jsou vybrány ze souboru který zahrnuje hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkoxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, heteroarylskupinu, arylskupinu, nasycený heterocyklický kruh, hydroxyalkylskupinu, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a (iv) část obsahující urethan

kde R_g, ^Rio' ^Rn ^{a r}12 které jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu a (v) část obsahující urethan

kde X znamená NR₁₀, O nebo S a Rg, a R₁₂, které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, Rjq znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, aryl nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená 0 nebo S, pak jsou uvedené atomy 0 a S nesubstituovány a

d) R₄ znamená (i) OH nebo (ií) H nebo (iii) 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a

Symbol ^w-^w zde znamená, že stereochemie není definována a že substituenty na steroidním jádře mohou být v konfiguraci a nebo β.

Nové urethan obsahující sloučeniny podle vynálezu zahrnují steroidní jádra, kde jsou uvedená steroidní jádra různě substituována.

Rj substituent je v poloze 17 steroidního jádra.

Existuje pět (5) možných substituentů Rj_. R^ může být COOR₅, kde R₅ znamená vodík, nižší alkylskupinu obsahující l až 6 atomů uhlíku, nižší alkylskupinu obsahující 2 až 6 atomů uhlíku substituovanou aminoskupinou, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu nebo karbocyklický kruh.

Výhodně R₅ znamená nižší alkylskupinu s l až 6 atomy uhlíku, arylalkylovou skupinu nebo karbocyklický kruh, zvlášť výhodně znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a nejvýhodněji R₅ znamená methylskupinu, tj. R-j^ znamená COOCH₃(karboxymethylester).

R^ může také znamenat CHR_gOH, kde Rg znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, výhodně R_g znamená H nebo methyl, tj. R_x znamená CH₂OH nebo CH(CH₃)OH.

R-j_ může také znamenat COR’ ' ', kde R’ ' ' znamená vodík, nižší alkylskupinu, methylaminoskupinu, aminoskupinu nebo dialkylaminoskupinu. Výhodně R'¹’ znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo methylaminoskupinu. Zvlášť výhodně R''' znamená methylaminoskupinu, tj. CONHCH₃.

R₃ může také znamenat CHR_gNHY, kde Y znamená vodík nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Výhodně Y znamená H a výhodně R_g znamená H, tj. R-^ znamená CH₂NH₂.

Konečně, Rj^ může znamenat 5- nebo 6-členný a nebo β nenasycený laktonový kruh. Výhodně laktonový kruh znamená β nenasycený 5-členný kruh substituovaný v β-poloze.

Výhodně R_x znamená COR*’', kde R''’ znamená aminoskupinu. Zvlášť výhodně znamená R^ substituent COOR₅, kde R₅ znamená methyl, tj. zvlášť výhodně R_x znamená karboxymethylester (COOCH₃).

Substituent R₂ je ve 14 poloze steroidního jádra. Jsou dva (2) možné substituenty R₃. R₂ může být -NRyRg, kde R_? a R₈, které mohou být stejné nebo různé, znamenají atomy vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Výhodně R₇ a Rg znamenají H, tj. R₂ znamená NH₂. R₂ může také být hydroxyskupina. Výhodně R₂ znamená NH₂ skupinu.

Substituent R₃ je ve 3 poloze steroidního jádra. Je pět (5) možných substítuentů R₃. R₃ může být urethan obsahující část mající následující strukturu:

K II N-C-0

Uvedená urethan obsahující část zahrnuje piperidinový kruh, který je různě substituován substituenty R_g, R₁₀, R_i;l, R₁₂ a R_12a. Substituenty R_g, R₁₀, R_X1, R₁₂ a R_12a, ^které jsou stejné nebo různé znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu.

Odborník v oboru organické chemie zná, že každý atom uhlíku v pieridinovém kruhu má dvě zbývající polohy pro vázání substítuentů. Tak může být každý atom uhlíku v piperidinovém kruhu monosubstituovaný nebo disubstituovaný.

Výhodně substituenty R_g znamenají vodík, nižší

- 27 alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a hydroxyskupinu. Zvlášť výhodně znamenají substituenty R_g vodík a methylskupinu. Výhodně substituenty R₁₀ znamenají acetoxyskupinu, hydroxyskupinu, vodík a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituenty R₁₀ znamenají vodík, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu a methylskupinu.

Výhodně substituenty R-^ znamenají vodík, aminoskupinu, hydroxyskupinu a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituenty R_1;L znamenají vodík, hydroxyethylskupinu a aminoskupinu. Výhodně substituenty ^R12 znamenají vodík, hydroxyskupinu, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a acetoxyskupinu. Výhodně substituenty R_12aznamenají vodík, hydroxyskupinu a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

R₃ znamená také urethan obsahující část mající následující strukturu:

Uvedená urethan obsahující část zahrnuje 6-členný heterocyklický kruh, kde uvedený heteroatom (X) v uvedeném heterocyklickém kruhu znamená NR_1;L, 0 nebo S a kde uvedený heterocyklický kruh je různě substituován substituenty R_g,

R₁₀, ^Rll' ^R12 ^R12a* Substituenty R_g, R^q, ^r12^{z R}12a^z které jsou stejné nebo různé znamenají vodík, nižší alkylskupinu s až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu a Rjj znamená vodík, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu. Dále, pokud heteroatom (X) znamená kyslík nebo síru, pak uvedený 0 nebo S není substituován. Výhodně 6-členný heterocyklický kruh znamená piperazinový kruh.

Odborník v oboru organické chemie zná, že každý atom uhlíku v piperazinovém kruhu má dvě zbývající polohy pro vázání substituentů. Tak může být každý atom uhlíku v piperazinovém kruhu monosubstituovaný nebo disubstituovaný. Výhodně substituenty R_g znamenají vodík nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituent R_g znamená vodík.

Substituenty R₁₀ výhodně znamenají vodík a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituent R₁₀ znamená vodík.

Substituenty R_1;L znamenají výhodně nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyalkylskupinu a arylalkylskupinu. Zvlášť výhodně substituenty Rjj znamenají hydroxyethylskupinu a arylalkylskupinu.

Substituenty R₁₂ znamenají výhodně vodík a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituenty R₁₂ znamenají vodík.

Substituenty R_12a znamenají výhodně vodík a nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituenty R_12a znamenají vodík.

Substituent R₃ znamená také urethan obsahující část následující struktury:

X

II

R'RNCO kde X znamená O nebo S, R'R’' jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnující vodík, substituovanou nebo nesubstituovanou lineární, rozvětvenou nebo cyklickou nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, heteroarylskupinu, arylskupinu, substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický kruh, substituovaný nebo nesubstituovaný nasycený heterocyklický kruh nebo substituovaný nebo nesubstituovaný aromatický heterocyklický kruh, kde uvedené substituenty jsou vybrány ze souboru který zahrnuje hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkoxyskupinu, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylskupinu, heteroarylskupinu, nasycené heterocyklické kruhy, hydroxyalkylskupinu, alkylaminoalkylskupinu, aminoskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu. Dále, jestliže R₃ znamená

X

R'RNCO pak substituenty R* nebo R'' jsou vázány k atomu N nebo O. Výhodný atom pro připojení substituentů R' nebo R’’ je atom dusíku.

Tak jestliže R₃ znamená

X

R'RNC0 pak R₃ může být například substituovaná aminokarbonyloxyskupina (tj. X=O)

II

R'R''NCO nebo substituovaná aminothiokarbonyloxyskupina (tj. X=S) s

II

R'RNCO kde substituenty R’ a R’’ jsou substituenty na aminokarbonyloxyskupině nebo aminothiokarbonyloxyskupině.

Výhodně X znamená 0. Výhodně substituenty R'’ znamenají vodík a nižší alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku. Zvlášť výhodně substituenty R'' znamenají vodík nebo methyl.

Substituenty R' znamenají výhodně substituovanou nebo nesubstituovanou nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylskupinu a arylalkylskupinu. Zvlášť výhodně, substituent R' znamená substituovanou nebo nesubstituovanou lineární nebo rozvětvenou nižší alkylskupinu, kde uvedená nižší alkylskupina s 1 až 6 atomy uhlíku je substituována skupinami OH, NH₂, alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinou nebo fenylskupinou nebo alkylaminoskupinou.

Substituent R₃ také znamená urethan obsahující část mající následující strukturu:

Uvedená urethanová část zahrnuje pyrrolidinylový kruh, který je různě substituován substituenty Rg, R₁₀, R^l a R₁₂/ které jsou stejné nebo různé a které znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu a konečně R₃ také může být urethan obsahující část mající následující strukturu

Uvedená urethan obsahující část zahrnuje 5-členný heterocyklický kruh, kde uvedený heteroatom (X) v uvedeném heterocyklickém kruhu znamená NRjq, O nebo S a kde uvedený heterocyklický kruh je různě substituován substituenty R_g, R₁₀, ^Rll' ^{a R}12’ ^Sulostituenty Rg, R10, a ^Ri2' které jsou stejné nebo různé znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu a R10 znamená vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu. Dále, pokud heteroatom (X) znamená kyslík nebo síru, pak uvedený O nebo S není substituován. Výhodně 5-členný heterocyklický kruh znamená thiazolidinový kruh.

Substituent R₄ je ve 12 poloze steroidního jádra. R₄znamená OH, H nebo 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu. Výhodně R₄znamená H nebo 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový zbytek. Uvedený sacharidový zbytek je vybrán ze skupiny zahrnující hexosu, 2-deoxyglukosu, 6-deoxyhexosu, 2,6-dideoxyhexosu, rhamnosu, glukosu, arabinosu, digitoxosu, fruktosu, galaktosu, rhamnopyranosu, hexopyranosu, 6-deoxyglukosu,

4,6-dideoxyglykopyranosu, mannosu, cymarosu, xylosu, lyxosu, ribosu, digitalosu, glukosamin, 4-amino-2,4,6-trideoxylyxohexopyranosu, 4-amino-4,6-dideoxyglukopyranosu,

2,3-dideoxyrhamnopyranosu, 4-methoxy-4,6-dideoxyrhamnopyranosu, výhodně jejich β-D nebo α-L anomery. Zvlášť výhodně substituent R₄ znamená H.

Substituent R₁₄ je v 11 poloze steroidního jádra. R₁₄znamená OH, H nebo 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu. Výhodně R₄ znamená hydroxyskupinu nebo acetoxyskupinu.

Z znamená -CH-, kde a a b znamenají jednoduchou vazbu nebo =C, kde a nebo b znamenají dvojnou vazbu. Výhodně Z znamená -CH-, kde a a b znamenají jednoduchou vazbu.

Výhodné urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle vynálezu jsou:

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[2-(acetyloxy)1-methylpropy1]amino]karbony1]oxy]14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-[[ [ 3- (acetyloxy)1-piperidinyl]karbony1]oxy]-14-aminoN-methylandrostan-17-karboxamidu

Hydrochlorid methylesteru (3β(δ),5β,Ι4β,17β)-14-amino-3-[[(3-hydroxy)1-piperidinyl)karbony!]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3p(R) ,5β,14β,17β)-14-&ιηϊηο-3-[ [ (3-hydroxy 1-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid (3β(S),5β,14β,17β)-3-[[[[2-(acetyloxy)1-fenylethyl]amino]karbonyl]oxy]-14-aminoN-methylandrostan-17-karboxamidú

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[4-(fenylmethyl)~ 1-pipera ziny1]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-ΐ4-3ΐηΓηο-3-[ [ (3-hydroxy-1piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan17-karboxamidu

Hydrochlorid (3β (S) ,5β,14β,17β)-14-amino-3-[ [ [(2-hydroxy-lfenylethyl)amino]karbony1]oxy]-N-methylandrostan 17-karboxamidu

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[ 2-acetyloxy3-(1-piperidiny1)propyl]amino]karbony1]oxy]14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methlesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[(3-acetyloxy)l-piperidinylj karbonyl]oxy]14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

•HCI

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(3-hydroxy1-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylove kyseliny

•2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(4-piperidinyl) amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

•2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3-[ [ (4-amino1-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

2HC

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηϊηο-3-[ [ [ [ (3-(dipropy lamino)· 2-hydroxypropyl]ámino]karbony1]oxy]-androstan-l7karboxylové kyseliny

HCl

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(2-hydroxy1-methylpropy1)amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

HCl

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(1-hydroxymethy1 2-methylpropy1)amino]thioxomethyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(S) ,5β,14β,Ι7β)-14-amino-3-[ [ [(2-hydroxy

1-fenylethy1)amino]karbonyl]oxy]androstan™

17-karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β, 5β,14β,17β)-l4-amino-3-[ [ [ (3-amino2-hydroxypropyl)amino]karbony1]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-l4-amino-3-[[ [ [ (i-fenylmethyl)4-piperidinyl}amino]karbony1]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[(3-[bis(2-methylpropy1)amino]-2-hydroxypropy1]amino]karbony1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

•2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[3-(dibutylamino)-2-hydroxypropy1]amino]karbony1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3 β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[2-hydroxy(l-fenylmethy1)ethyl]amino]karbonyl]oxy ] androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(δ),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[(1-hydroxy methyl)-3-methylbutyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(4-aminofeny1)amino]karbonyl]oxy]androstan-i7karboxylové kyseliny

HCl

Hydrochlorid methylesteru (3 β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(2-hydroxyethyl )methylamino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[2-(diethylamino)~ ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

• 2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ [ [3-(diethylamino)~ propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-βιηίηο-3-[ [ [ [ (l-hydroxymethyl)-2-methylpropyl]amino]karbony1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[(1-hydroxymethyl) butyl]amino]karbonyl]oxy]-androstaň-17karboxylové kyseliny

Trihydrochlorid methylesteru (3β, 5β, 14β, 17β)- 14-amino-3-[ [ [ [ 2-[( 2-hydroxyethyl) amino]ethyl]amino]karbony1]oxy]-androstan-17karboxylové kyseliny

Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-ΒΠΐΐηο-3-[ [ [ [2-hydroxy3-(1-piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14—amino-3—[[[(3-diethylamino 2-hydroxypropyl)amino]karbony1]oxy ] androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[(1-(hydroxymethyl)-2-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l-(hydro xymethyl)propyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(R),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l-(hydro xymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(R) , 5β,14β,17β)—14—amino—3—[ [ [ [l-(hydroxymethy 1 )ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylová kyseliny

•2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(4-methyl-lpiperazinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-Ηΐηϊηο-3-[ [ [ (2-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karbo xylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηϊηο-3-[ [ [ [4-hydroxy2-(hydroxymethyl)butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14—amino-3—[[[(2,3dihydroxypropyl)amino]karbonyl]oxo]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ [ [1(hydroxymethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxo] androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3 β,5β,14 β,17β)-14-amino-3-[[[4—(2-hydroxyethyl)-1-piperidinyl]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[1(hydroxymethyl)propy1]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(3-methyl1-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

HCCH2CH2N

2HCI

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl]karbonyl]oxy]androstan-17 karboxýlové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[ [ [(3-methoxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

•HCl

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(4-hydroxy1-piperidinyl)karbony1joxyJandrostan-17karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)—14-amino-3-[[(3-hydroxy1-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

•HCl

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-l4-amino-3-[[[(3-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Methylester 14β-βιαΐηο-3β-[ (1 ·-piperidinyl)karbonyloxy]-5 β-androstan-17 β-karboxylové kyseliny

Methylester 4'-amino-bis[ (14β-3ηιΐηο-3β-( (1 ’ piperidinyl)karbonyloxy)-5β-3ηάΓθ3ΐ3η-17βkarboxylové kyseliny]

14p-hydroxy-3p-[(4'-hydroxy-1'-piperidinyl)] karbonyloxy)karden-20(22)-olid

143-hydroxy-33-[(4’-amino-1'-piperidinyl)]karbonyloxy)karden-20(22)-olid

14β-ϊιγάΓθχγ-3β - [(1' -piper idinyl) karbonyloxy]karden-20(22)-olid

Methylester 14β-Ηπιΐηο-3β-[ (4'-amino-1 piperidinyl)-karbonyloxy]-4-etienové kyseliny

β—[(1'-piperidinyl)-karbonyloxy]-ll-oacetylouabaigenin

Methylester 14p-amino-3p-(2-N-oxo-3’-hexa hydroazepinyl-propylaminokarbonyloxy)-4etienové kyseliny

p-amino-3 β-[(4'-hydroxy-1'-piperidinyl) karbnyloxy]-20 β-hydroxy-pregnan

14β-3ΐαίηο-3β-[ (4»-hydroxy-1 ’ -piperidinyl) karbonyloxy]-20a-hydroxy-pregnan

Dihydrochlorid 14p-amino-3p-[(4’-hydroxy-1’piperidinyl)-karobnyloxy]-20p-hydroxy-pregnan

Dihydrochlorid 14p-amino-3p-[(4'-hydroxy-1'piperidinyl)-karbonyloxy]-20a-hydroxy-pregnan

β-0-(piperidinoformyl)-ouabaigenin

Hydrochlorid methylesteru

14β-3ΐηίηο-Ν-ιηβ^γ1-3β-[ (R)-l ’ -hydroxymethy1 propylaminoformyloxy)]-5β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru

143-amino-N-methyl-3p-[(S)-1'-hydroxymethyl propylaminoformyloxy)]-5p-androstan-17pkarboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru

14p-amino-N-methyl-3p-[(Z)-l'-hydroxymethyl propyloxyformylamino) ] - 5 β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru

14p-amino-12p-hydroxy-3p-[(4’-amino-1’piperidinyl)karbonyloxy]-5p-androstan-17pkarboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru

14p-amino-12p-hydroxy-3p-(1'-hydroxymethyl(S)-propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan-17 β karboxylové kyseliny

Methylester

14p-amino-12p-hydroxy-3p-(l’-hydroxymethyl(R)-propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan-17 β karboxylové kyseliny

Cl

Hydrochlorid methylesteru

14β-3ΐηΐηο-12β-1ιγάΓθχγ-3β-( 1' -hydroxyraethyl(S) -me thjylaminokarbony loxy) - 5 β -andros tan-17 β karboxylové kyseliny

Cl

Hydrochlorid methylesteru β-amino-12 β-hydroxy-3 β-(1'-hydroxymethy1(R)-2¹-methylpropylaminokarbonyloxy)-5βandrostan-17β-karboxylové kyseliny

14β-ίιγάΓθχγ-17β-3ΐηΐηοιηβ^γ1-3β- (l' -hydroxymethyl- (S) r-propylaminokarbonyloxy) - 5βandrostan

p-hydroxy-17p-aminomethyl-3p-(1¹-hydroxymethyl-(R)-propylaminokarbonyloxy) -5βandrostan

Methylester β-amino-3 β-(1’-acetoxymethyl-(S)propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny

Dihydrochlorid methylesteru β-amino-3 β-(1’-aminomethy1-(S)propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny

Cl

Dihydrochlorid methylesteru β-amino-3 β-(1’-aminomethy1-(R)propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny ch₃cooch₃

HCl

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(3-thiazolyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3—[ [ (4-morfolinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Příklady provedení vvnálezu

Příprava sloučenin u většiny příkladů se provádí následovně; Aminosteroid aglykon se rozpustí ve vhodném rozpouštědle při teplotě místnosti nebo při zahřívání pod dusíkem. Ve většině případů je jako rozpouštědlo vybrán methylenchlorid. Potom se přidá 10% přebytek

1,1·-karbonyldiimidazolu nebo thiokarbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při okolní teplotě dokud se nestanoví žádný aglykon (stanovení se provádí TLC, obvykle 2 dny). Potom se přidá 3 až 5 ekvivalentů vhodného aminu a roztok se míchá při okolní teplotě dokud TLC nestanoví žádný postup reakce. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku a zbytek se sebere čerstvým methylenchloridem. Roztok se potom promyje vodou do neutrální reakce promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní za sníženého tlaku rozpouštědlo a zbytek se znovu rozpustí v minimálním množství rozpouštědla a čistí se na silikagelu (Merck, stupeň 60, 230-240 mesh) sloupcovou chromatografií. Příslušné frakce se seberou, spojí a koncentrují se za sníženého tlaku, přičemž se získá volná báze. Zpracováním volné báze ethanolickým roztokem HCl se získá hydrochloridová sůl.

Sloučeniny podle vynálezu se připraví podle následujících ilustrativních příkladů, které v žádném případě rozsah vynálezu neomezují.

Příklad 1

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(3hydroxypropyl)amino]karbony1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 0,7 g (0,002 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 25 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂ a za míchání přidá 0,36 g (0,0022 mol) l,l'-karbonyldiimidazolu.

Po úplné formaci imidazolového meziproduktu (stanoveno TLC, hodin) se přidá 0,75 g (0,01 mol) l-amino-3-propanolu a roztok se míchá 4 dny. Roztok se koncentruje a zbytek se sebere do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou až do neutrální reakce promývací vody. Po vysušení přes MgSO₄ se za sníženého tlaku odpaří CH₂C1₂ a získá se 680 mg pevné, lepkavé hmoty.

Tato hmota se rozpustí v 7 ml CH₂C1₂ a čistí se na silikagelové koloně (přibližně 3 x 20 cm), nejprve s 5% MeOH/CH₂Cl₂ (s přibližně 7 ml konc. NH₄OH) a potom s 10% MeOH/CH₂Cl₂ (10 ml konc. NH₄OH). Frakce se seberou, spojí a koncentrují se. Zbytek se zpracuje ethanolickou HCl a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[-(3-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 2

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[(3™ hydroxypiperidinokarbonyl)oxy]androstan-l7-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)~

14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂ a za míchání přidá v průběhu 1/2 hodiny 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá 2,02 g (0,02 mol) (viz poznámku 1)

3-hydroxypiperidinu. Po 48 hodinách (viz poznámku 2) se získaný slabě zakalený roztok filtruje a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý, lepkavý pevný produkt (viz poznámku 3). Tento bílý pevný zbytek se znovu rozpustí v čerstvém CH₂C1₂ (do 40 ml) a promyje se destilovanou vodou dokud promývací kapalina není neutrální (5

- 74 χ 30 ml). Po sušení přes MgSO₄ se CH₂C1₂ odpaří za sníženého tlaku a získá se 1,77 g pevného produktu, TLC (CHCl₃:MeOH =

9/1 nebo 8/2) vykazuje 2 spoty. Pevná látka se čistí mžikovou chromatografií (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH) a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-[(3-hydroxypiperidinokarbonyl)oxy]androstan-17karboxylové kyseliny.

Poznámka 1: Množství použitého aminu může být sníženo 3x.

Poznámka 2: Délka reakční doby se mění od 2 do 7 dnů, reakce by měla být kontrolována TLC.

Poznámka 3: Tento stupeň může být vynechán.

Příklad 3

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐαϊηο-3-[[ [ (3methoxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazol (Aldrich). Směs se míchá pod N₂ 43 hodiny a potom se přidá 1,78 g (0,02 mol) 3-methoxypropylaminu. Směs se míchá pod N₂při okolní teplotě 4 dny. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá viskózní kapalný zbytek. Tento kapalný zbytek se znovu rozpustí v čerstvém CH₂C1₂ a roztok se promyje destilovanou vodou do neutrální reakce. Po vysušení přes MgSO₄ se odpaří rozpouštědlo a získá se 1,65 g bílého pevného produktu. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií za použití silikagelu (Merck, stupeň 60,

230-240 mesh) a 5% MeOH/C^C^ s 10 ml konc. NH₄OH jako eluentu. Frakce se seberou a frakce obsahující produkt se spojí a po odpaření se získá celkem 1,15 g lepkavého pevného produktu. Tento produkt se rozpustí v SDA-32 a zpracuje se EtOH/HCl. Po míchání po krátkou dobu se odpaří rozpouštědlo a získá se viskózní kapalina. Přidá se čerstvější SDA-32 a znovu se odpaří. Potom se přidá CH₂C1₂ a po odpaření se získá bílá pevná látka. Tento postup se zopakuje a po vysušení pevné látky při teplotě 70 · se získá konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-[[[(3-methoxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny.

Příklad 4

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14~amino-3-[[[[1(hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxy lové kyseliny

Směs 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,Ι4β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připravené podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH₂C1₂ se míchá pod atmosférou N₂ 0,5 hodiny a pak se přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1’-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při okolní teplotě pod N₂ po dobu 45 hodin a potom se přidá 1,78 g (0,02 mol) 2-amino-l-butanolu. Směs se míchá a po 4 dnech se roztok koncentruje za sníženého tlaku a zbytek v čerstém CH₂C1₂ se dobře promyje destilovanou vodou až do neutrálního pH. Po vysušení přes MgSO₄ se odpaří CH₂C1₂ a získá se 1,75 g bílého, lepkavého pevného produktu. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií. Frakce se spojí, koncentrují se a zbytek se zpracuje EtOH/HCl. Po odpaření ethanolu se zbytek znovu rozpustí v EtOH, opět se koncentruje a pevný zbytek se znovu rozpustí v CH₂C1₂ a koncentruje se. Tento postup se opakuje ještě jednou a zbylý bílý pevný produkt se potom suší při 70 · a získá se analyticky čistý konečný produkt,

- 76 hydrochlorid methylesteru (3p,53,14jJ,17P)-14-amino-3-[ [ [ [1(hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny.

Příklad 5

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-Βπιΐηο-3-[[[[4hydroxy-2-(hydroxymethyl)butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Směs 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připravená podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, a 0,72 g (0,0044 mol) 1,1’-karbonyldiimidazolu v 40 ml CH₂C1₂ se míchá při okolní teplotě pod N₂ po dobu 42 hodin. Potom se přidá 2,38 g (0,02 mol)

4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)butylaminu (0,02 mol). Reakční směs se míchá pod N₂ po dobu 5 dnů. Vrchní olejová vrstva se oddělí od vrstvy CH₂C1₂. Rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku a získá se 3,46 g husté kapaliny. Tato kapalina se zředí CH₂C1₂ a potom se promyje H₂O až do neutrálního pH promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se odpaří rozpouštědlo a získá se 1,48 g bílého, pevného produktu. Tento pevný produkt se čistí mžikovou chromatografií za použití 5% MeOH/CH₂Cl₂ s 10 ml konc. NH^OH (vil rozpouštědla) jako eluentu. Frakce se seberou, spojí, koncentrují a novou chromatografií se získá konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[4hydroxy-2-(hydroxymethyl)butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny.

Příklad 6

Hydrochlorid methylesteru (3β(Ρ),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[1 (hydroxymethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá při teplotě místnosti po 1/2 hod. 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání se přidá 1,50 g (0,02 mol) (R)-alaninolu. Roztok se míchá 5 dnů a potom se koncentruje za sníženého tlaku. Zbylá kapalina se zředí čerstvým CH₂C1₂ a potom se promyje destilovanou H₂0 až do neutrálního pH promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se odpaří rozpouštědlo a získá se 1,7 g bílého, lepkavého pevného produktu. Tento pevný produkt se *

čistí mžikovou chromatografií za použití 5% MeOH/CH₂Cl₂ (s 10 ml konc. NH₄0H vil rozpouštědla) jako eluentu. Frakce obsahující 1 spot se seberou, spojí, koncentrují za sníženého tlaku a získá se 1,15 g bílého produktu. Zpracováním s ethanolickou HC1 a koncentrací rozpouštědla a následujícím promytím SDA a 2x CH₂C1₂ se získá konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(R),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l-(hydroxy methyl)ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 7

Hydrochlorid methylesteru (3β(Ε) ,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ [ [1™ (hydroxymethyl) propyl ] amino ] karbonyl ] oxy ] androstan-17 -karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá při teplotě místnosti během 1/2 hod. 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání se přidá 1,78 g (0,02 mol) (R)-2-amino-l-butanolu a roztok se míchá. Po 5 dnech se roztok zpracuje stejným postupem, jak je uvedeno v příkladu 6. Výtěžek surové volné báze je 1,7 g. Pevný produkt se čistí gravitační sloupcovou chromatografii (silikagel, 230-240 mesh, 5% MeOH/CH^C^

NH₄0H) a získá se 1,15 g bílého pevného produktu. Po zpracování EtOH/HCl a způsobem uvedeným v příkladu 6 se získá konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3 β (R), 5β, 14β, 17 β) 14-amino-3-[[[[1-(hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 8

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l (hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxy1ové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1’-karbonyldiimidazol Po 48 hodinovém míchání se přidá 1,78 g (0,02 mol) (S)-2-amino 1-butanolu. Po 4 dnech míchání se roztok zpracuje stejným postupem, jak je uvedeno v příkladu 7. Výtěžek volné báze po mžikové chromatografii činí 1,15 g. Po převodu na HCl sůl obvyklým způsobem se získá hydrochlorid methylesteru(3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l-(hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 9

Hydrochlorid methylesteru (3β(Ιϊ),5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[[1(hydroxymethy1)-2-methylpropy1]amino]karbony1]oxy]androstan-17 karboxylová kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny

- 79 připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂Cl2 se pod atmosférou N₂a za mícháni přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání se přidá 2,06 g (0,02 mol) (R)-(-)-2amino-1-butanolu. Po 5 denním míchání pod N₂ a při teplotě místnosti se roztok zpracuje stejným postupem, jak je uvedeno v příkladu 8. Čištěním mžikovou chromatografií (5%

MeOH/CH₂Cl₂, NH^OH) se získá 1,0 g lepkavého pevného produktu. Tento produkt se převede na hydrochloridovou sůl zpracováním s ethanolickou HCl a poté se promyje SDA-32 a CH₂C1₂. Získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[l-(hydroxymethyl) 2-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 10

Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[[(3-diethylamino-2-hydroxypropyl)]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxy1ové kyse1iny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, ve 40 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá při teplotě místnosti 0,72 g (0,0044 mol) 1,1’-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání se přidá 2,92 g (0,02 mol) l-amino-3-diethylamino-2-propanolu. Roztok se zakalí. Po 3 dnech míchání pod N₂ při teplotě místnosti se směs zpracuje stejným postupem, jak je popsáno v příkladu 8. Pevný produkt (1,8 g) se čistí mžikovou chromatografií (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH) a získá se lepkavý pevný produkt. Ten se zpracuje ethanolickou HCl a získá se konečný produkt, dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-ηιηϊηο-3[[[(3-diethylamino-2-hydroxypropyl)]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 11

Hydrochlorid methylesteru (3β(δ),5β, 14β,17β)-14-amino-3-[[[[i (hydroxymethyl)-2-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,ΐ4β,ΐ7β) 14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá během 1/2 hodiny 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání při telotě místnosti se přidá 1,05 g (0,02 mol) (S)-(-)-2-amino-3-methyl1-butanolu. Po 3 dnech míchání se pomocí TLC stanoví přítomnost imidazolového meziproduktu. Přidá se dalších 1,05 g aminu a směs se míchá dále. Po dalších 5 dnech se reakční roztok koncentruje a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou až do neutrální reakce promývací kapaliny.

Po sušení přes MgSO₄ odstraní CH₂C1₂ za sníženého tlaku a získá se 1,6 g surové volné báze, která se čistí mžikovou chromatografií za použití 5% MeOH/CH₂Cl₂ (NH^OH). Frakce obsahující hlavní produkt se spojí a koncentrují se za sníženého tlaku a získaná volná báze se převede na svojí hydrchloridovou sůl zpracování ethanolickou HCI a po vysušení při 70 ’ se získá analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(ε) ,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ [ [1(hydroxymethyl) -2-methylpropyl ] amino ] karbonyl ] oxy ] androstan-17 karboxylové kyseliny.

Příklad 12

Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[3(diethylamino) propyl ] amino ] karbonyl ] oxy ] androstan-17 -karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za mícháni přidá při teplotě místnosti 0,72 g (0,0044 mol) l,l'-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá 2,6 g (0,02 mol) 3-diethylaminopropylaminu. Roztok se míchá při teplotě místnosti, potom se koncentruje a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou až do neutrální reakce promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se za sníženého tlaku odstraní CH₂C1₂ a získá se 1,68 g surového lepkavého produktu. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií 2x a získá se volná báze. Zpracováním ethanolickou HCl se získá konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-ΐ4-3ΐηίηο-3-[ [ [ [3-(diethylamino)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 13

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[2(diethylamino)ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyse1iny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1¹-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání se přidá 2,24 g (0,02 mol) N,Ndiethylethylendiaminu. Roztok se míchá 48 hodin a potom se koncentruje a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou až do neutrální reakce promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se za sníženého tlaku odstraní CH₂C1₂a získá se 1,55 g surové lepkavé báze. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií za použití nejprve 3% MeOH/CH₂Cl₂ (NH₄OH), potom 4% a nakonec 7% MeOH/CH₂Cl₂ a získá se volná báze. Zpracováním s ethanolickou HCl se získá analyticky čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3P,5P,14P,178)-14-amino-3-[[[[2-(diethylamino)ethyl]amino]karbonylJoxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 14

Hydrochlorid methylesteru (3β(β),5p,143,17P)-14-amino-3-[[[[(1hydroxymethyl)-3-methylbutyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku í,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)

14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1·-karbonyldiimidazolu Po 48 hodinovém míchání se přidá 2,34 g (0,02 mol) (S)-(+)leucinolu. Roztok se míchá 4 dny a potom se zahřívá při refluxu přes noc. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou až do neutrální reakce promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄se za sníženého tlaku odstraní CH₂C1₂ a získá se surová volná báze. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií a po zpracování s ethanolickou HCl se získá analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)14-amino-3-[[[[(1-hydroxymethyl)-3-methyl-butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 15

Hydrochlorid methylesteru (3β(8),5β,14β,17β)-14-3ΐαΐηο-3-[[[[2hydroxy-l-(fenylmethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH2CI2 se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu Po 48 hodinovém míchání se přidá 1,8 g (0,012 mol) (S)-2amino-3-fenyl-l-propanolu. Po 3 dnech se přidá dalších 0,6 g (0,004 mol) aminu a roztok se zahřívá k varu po dobu 2 dnů.

Po ochlazení na teplotu místnosti se roztok míchá dalších 10 dnů. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂. Roztok se promyje vodou až do neutrální reakce promývači kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄se odstraní CH₂C1₂ za sníženého tlaku a pevný zbytek se zpracuje mžikovou chromatografii (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH).

Frakce se spojí a koncentrací se získá volná báze, která se zpracuje ethanolickou HC1 a získá se konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(β),5p,14P,17P)-14-amino-3-[[[[2hydroxy-l-(fenylmethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny.

Příklad 16

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[(3-amino-2-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 40 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá 2 dny a potom se přidá 1,8 g (0,020 mol) l,3-diamino-2-hydroxypropanu v 25 ml CH₂C1₂. Směs se zahřívá při refluxu 3 dny, filtruje se a filtrát se dobře promyje vodou až do neutrální reakce promývači kapaliny (přibližně 20x). Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní za sníženého tlaku CH₂C1₂ a získá se 1,15 g bílého pevného produktu. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografii za použití 10%

MeOH/CH₂Cl₂ (NH^OH). Frakce se spojí a koncentrují se do viskozní kapaliny. Zpracováním s ethanolickým HCl se získá analyticky čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βιηίηο-3-[[[(3-amino-2-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 17

Hydrochlorid methylesteru (3β(β) , 5β,14β,17β)-14-3πιίηο-3[[[(2-hydroxy-l-fenylethyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,72 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazo3,u. Roztok se míchá 2 dny a potom se přidá 2,74 g (0,02 mol) S-2fenylglycinolu rozpuštěného v minimálním množství CH₂C1₂.

Reakční směs se zahřívá při refluxu 4 dny a přidá se dalších 0,54 g (0,004 mol) (S)-2-fenylglycinolu. Směs se potom zahřívá při refluxu 6 dnů. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku, přenese se do CH₂C1₂ a dobře se promyje vodou až do neutrální reakce prmývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní za sníženého tlaku CH₂C1₂ a získá se surová volná báze. Pevný produkt se čistí mžikovou chromatografií (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH) a potom se převede na jeho hydrochloridovou sůl působením ethanolické HCl, čímž se získá konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(3),5β,ΐ4β,17β)14-amino-3-[[[(2-hydroxy-l-fenylethyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 18

Hydrochlorid methylesteru (3β(3),5β,14β,17β)-14-amino-3[[[(l-hydroxymethyl-2-methylpropyl)amino]thioxomethyl]oxy]85 androstan-17-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,40 g (0,004 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveném podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz, v 50 ml CH₂C1₂ se pod atmosférou N₂a za míchání přidá 0,78 g (0,0044 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu Po 2 denním míchání při teplotě místnosti se roztok zahřívá při refluxu přes noc a potom se přidá dalších 0,16 g (0,0009 mol) l,l’-thiokarbonyldiimidazolu. Roztok se míchá dále při teplotě místnosti 3 dny a do reakční směsi se přidá 2,06 g (0,02 mol) (S)-2-amino-3-methyl-l-butanolu. Roztok se míchá další 3 dny a potom se odstraní rozpouštědlo za sníženého tlaku. Zbytek se přenese do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se vodou do neutrální reakce promývací kapaliny. Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní za sníženého tlaku CH₂C1₂ a získá se surová volná báze. Tento produkt se čistí mžikovou chromatografií a potom se převede v hydrochloridovou sůl působením ethanolické HCl a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(ε) , δβ,^β,^β^^-Βπΰ,ηοΟ-Ο [[(l-hydroxymethyl-2-methylpropyl)amino]thioxomethyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 19

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-lpiperidinyl]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny /

Roztok 1,0 g (0,002 mol) volné báze hydrochloridu methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[(3-]ΊνάΓθχγρίρβΓίάίηοkarbonyl)oxy]androstan-1-karboxylové kyseliny v 30 ml CH₂C1₂, ml acetanhydridu a několika kapkách ledové kyseliny octové se zahřívá při refluxu po dobu 4 dnů. Roztok se nechá stát při teplotě místnosti další den a potom se koncentruje za sníženého tlaku a získá se 0,95 g pevného produktu. Tento

-'^6 produkt se čistí mžikovou chromatografií (5% MeOH/CH₂Cl₂,

NH₄OH) a získá se volná báze která se převede ethanolickou HCl na hydrochloridovou sůl a získá se konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-ipiperidinyl]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 20

Hydrochlorid (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(2-hydroxy-1fenylethyl)amino]karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamidu

K roztoku 800 mg (0,0023 mol) hydrochloridu (3β,5β,14β,17β) 14-amino-3-hydroxy-N-methylandrostan-17-karboxamidu, volné báze, ve 100 ml CH₂C1₂ pod N₂ a za míchání se přidá 0,41 g (0,0025 mol) 1,1’-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá dokud není přítomna žádná výchozí látka, což se stanovuje pomocí TLC. Potom se přidá 1,58 g (0,012 mol) (S)-fenylglycinolu.

Roztok se zahřívá při refluxu 6 dnů, CH₂C1₂ se oddestiluje a přidá se 35 ml benzenu. Roztok se zahřívá při teplotě varu 1 hodinu a pak se nechá vychladnout. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂. Roztok CH₂C1₂ se promyje vodou až do neutrální reakce použité prací kapaliny.

Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní CH₂C1₂ za sníženého tlaku a získá se béžové zbarvený pevný produkt (0,66 g), který se čistí sloupcovou chromatografií. Frakce se spojí a po koncentraci se získá celkem 470 mg pevného produktu. Část tohoto produktu se převede na hydrochloridovou sůl zpracováním ethanolickou HCl. Pevný produkt se suší ve vakuu při teplotě 77 · po dobu 5 dnů a získá se konečný produkt, hydrochlorid (3β(β),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[2-(hydroxy)-1fenylethyl)amino]karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamidu.

Příklad 21

Hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-14-ηιηΐηο-3-[ [ (3-hydroxy-lpiperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamidu

Směs 2,08 g (0,006 mol) volné báze hydrochloridu (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(3-hydroxy-N-methylandrostan17-karboxamidu, uváděného zde jako odkaz, v 750 ml CH₂C1₂ se zahřívá při refluxu 6 hodin. Nerozpustný materiál se odfiltruje. K filtrátu se pod N₂ a za míchání přidá 0,98 g (0,006 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Roztok se nechá stát při teplotě místnosti přes noc a potom se objem roztoku sníží na jednu polovinu destilací. Zbývající roztok se zahřívá při refluxu po dobu 2 dnů a přidá se dalších 0,54 g (0,004 mol) l,l’-karbonyldiimidazolu. Po dalším 7 hodinovém zahřívání, TLC vykazuje jeden spot. Potom se přidá 2,78 g (0,03 mol) 3-hydroxypiperidinu a roztok se zahřívá při refluxu po dobu 4 dnů. Viskózní olej vytvořený na povrchu a vrstvy se rozdělí. Vrstva CH₂C1₂ se dobře promyje vodou dokud není reakce promývací kapaliny neutrální. Po vysušení přes MgSO₄ se odstraní za sníženého tlaku CH₂C1₂ a získá se 320 mg pevného produktu, (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(3-hydroxy-N-methylandrostan-17-karboxamidu. Tato pevná látka se převede na svoji hydrochloridovou sůl zpracováním ethanolickou HCl. Olejová vrstva se zředí vodou a extrahuje se CH₂C1₂. Extrakt CH₂C1₂se také suší přes MgSO₄ a koncentruje se za sníženého tlaku a získá se hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karbox“ amidu.

Příklad 22

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βιηίηο-3-[[(4™ hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,03 g, 2,95 mmol) v 25 ml CH₂Cl2 se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,58 g, 3,55 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se meziprodukt imidazolu. Reakční meziprodukt se neizoluje, zpracuje se přímo s 4-hydroxypiperidinem (1,49 g, 14,75 mmol).

Reakce pokračuje mícháním při teplotě místnosti pod dusíkem další 1 den. Reakční směs se filtruje a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se chromatógrafuje na silikagelové koloně se 7%

MeOH/93% CH₂C1₂ obsahující 1% NH^OH a získá se čistý produkt jako volná báze. Produkt se připraví rozpuštěním volné báze v absolutním alkoholu a potom přidáním nasyceného ethanolického roztoku HC1 za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se zpracuje mžikovou chromatografií s 4 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[(4-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl ]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 23

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[4(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,03 g, 2,95 mmol) v 25 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1‘-karbonyldiimidazolem (0,58 g, 3,55 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 24 hodin a potom se zpracuje 4-hydroxyethylpiperazinem (1,92 g, 14,75 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti přes noc. Reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a zbytek se převede d CH2CI2. Roztok CH₂C1₂ se promyje 4 x 25 ml vody. Organická vrstva se suší přes bezvodý Na₂SO₄ a filtruje se. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek o hmotnosti 0,94 g. Surová báze se čistí chromatografií na silikagelové koloně naplněné eluentem 5% MeOH/95% CH₂C1₂ obsahující 1% NH₄0H.

Čistá báze se rozpustí v absolutním alkoholu a potom se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl a získá se konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino3—[[[4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 24

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ (3methyl-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methyl-androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίη©“-3-= hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,03 g, 2,95 mmol) v 25 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,58 g, 3,55 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a potom se zpracuje imidazolovým meziproduktem. Reakční produkt se neizoluje, hned se zpracuje 3-methylpiperidinem (1,46 g, 14,75 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti 1 den. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se převede do čerstvého CH₂Cl2 a promyje se 4 x 50 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (1,81 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelové koloně naplněné 5% MeOH/95%CH₂Cl₂, obsahující 0,7 % NH₄0H k získání volné báze. Volná báze se rozpustí v absolutním alkoholu a potom se zpracuje ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok ze koncentruje za sníženého tlaku a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[(3-methyl-l-piperidinyl)-karbonyl]oxy]-N-methyl-androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 25

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3-[[[4(2-hydroxyethyl)-1-piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-ηπιίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a potom se zpracuje 2-hydroxyethylpiperidinem (2,86 g, 22,13 mmol). Potom se roztok míchá při teplotě místnosti pod dusíkem přes noc a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku, přičemž vznikne olejovítý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 30 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý pevný zbytek (2,09 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% ΟΗ₂Ο1₂ obsahující 1% NH^OH a získá se 1,55 g volné báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 3 x 50 ml

CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[4(2-hydroxyethyl)-1-piperidinyl]karbonyl]oxy]-N-methylandrostan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 26

Hydrochlorid methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[1(hydroxymethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxo]androstan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s L-2-amino-l-propanolem (1,66 g, 22,13 mmol). Směs se míchá 3 dny při teplotě místnosti a potom se reakční roztok koncentruje za sníženého tlaku, přičemž vznikne olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 75 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se chromátografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CH₂C1₂ obsahující 1% NH₄0H a získá se 1,55 g volné báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(θ),5β,14β,17β)-14amino-3-[[[1-(hydroxymethyl)ethyl]amino]karbonyl]oxo]androstan 17-karboxylové kyseliny.

Příklad 27

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[(2,3dihydroxypropyl)amino]karbonyl]oxo]androstan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηθ“392 hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti přes noc a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s 2,3-dihydroxy-l-propylaminem (2,02 g, 22,13 mmol). Reakční směs se potom zpracuje DMF a získá se roztok. Ten se míchá 5 dnů pod dusíkem při teplotě místnosti a potom se reakční roztok koncentruje za sníženého tlaku, přičemž vznikne olejovítý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 75 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (1,28 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu se 7% MeOH/93% CH₂C1₂ obsahující 1% NH₄0H a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)—14-amino—3—[[[(2,3-dihydroxypropyl)amino]karbonyl ]oxo]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 28

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-αιηίηο-3-[[[(2hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s DL-l-amino-2-propanolem (1,66 g, 22,13 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 75 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek (1,40 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu se 5% MeOH/95% CH₂C1₂obsahující 0,7% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[(2-hydroxypropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 29

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[ [ (4methyl-l-piperazinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3πά.ηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s 4methyl-l-piperazinem (2,22 g, 22,13 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 30 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý tuhý zbytek (1,82 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu se 3% MeOH/97% CH₂C1₂ obsahující 0,7% NH₄0H a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂Cl2 a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο3—[ [(4-methyl-l-piperazinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny.

Příklad 30

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηϊηο-3-[[[2hydroxy-3-(1-piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Míchaný ro z tok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-ΐ4-amino-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,48 g, 4,25 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje l,l'-karbonyldiimidazolem (0,83 g, 5,12 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s aminomethyl-2-piperidinylethanolem (3,36 g, 21,25 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 50 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CH₂C1₂obsahující 0,7% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se polotuhý zbytek. Zbytek se promyje 3 x 70 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βιηίηο-3-[[[2hydroxy-3-(1-piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan95

17-karboxylové kyseliny.

Příklad 31

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[2[ (2-hydroxyethyl) amino ] ethyl ] amino ] karbonyl ] oxy ] androstan17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxyIové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,83 g, 5,12 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s aminomethyl-2-(2-aminoethylamino) ethanolem (2,30 g, 22,13 mmol). Směs se míchá při teplotě' místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 75 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý pevný zbytek (1,08 g). Zbytek se rozpustí v absolutním ethanolu a za míchání se přidá nasycený ethanolický HCl. Alkoholická směs se filtruje a filtrát se zpracuje celitem Darco. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se surový produkt. Tento surový produkt se chromatografuje na silikagelu s 20% MeOH/80%CHCl₃ a potom 30% MeOH/70%CHCl₃ a získá se čistý, konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[2[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny.

Příklad 32

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[[1(hydroxymethyl)butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-1796 karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3χηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,31 g, 3,75 mmol) v 31,8 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,74 g, 4,56 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s L-norvolinolem (1,94 g, 18,83 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 50 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (1,75 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 7% MeOH/93% CH₂C1₂ obsahující 1% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[1-(hydroxymethyl )butyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 33

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[(2hydroxyethyl)methyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá

- 97 při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s 2-methylaminoethanolem (1,66 g, 22,13 mmol). Směs se m při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 50 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý tuhý zbytek (1,54 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 7% MeOH/93% CH₂C1₂ obsahující 0,7% NH₄0H a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCI za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂C1₂a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(2-hydroxyethyl)methyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

íchá

Příklad 34

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3[[[(4-aminofenyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

A. Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14^ιηΐηο-3“ hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny

Methylester (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-hydroxyandrostan17-karboxylové kyseliny připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (0,90 g, 0,026 mol) se rozpustí v methanolu (5 ml). Po kapkách se přidá methanolická kyselina chlorovodíková až do dosažení pH 1 a roztok se míchá při okolní teplotě 10 minut. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku na olej. Rozetřením oleje s bezvodým ethyletherem se vytvoří pevná látka, která se sebere filtrací a po vysušení na vzduchu se získá 1,00 g (100%) hydrochloridové soli. Sloučenina se použije v dalším stupni.

B. Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3” [ [ [ (4-nitrofenyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

K suspenzi 1. (1,0 g, 0,0026 mol) v bezvodém methylenchloridu (250 ml) se přidá 4-nitrofenylisokyanát (1,2 g, 0,0073 mol, 2,8 ekv.). Směs se zahřívá při refluxu 20 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí se reakční směs koncentruje za sníženého tlaku a získá se žlutá pevná látka. Pevná látka se čistí chromatografií na siiikageiu (230-400 mesh), za použití elučního činidla nejprve 100% methylenchloridu k odstranění nepolárních nečistot a potom směsi methylenchloridu a methanolu 9:1 k eluování produktu. Frakce obsahující produkt se spojí a koncentrují se za sníženého tlaku a získá se pevná látka, která se suší ve vakuu po dobu 2 hodin.s výtěžkem 0,72 g (51 %) karbamátu.

Tato sloučenina se použije v dalším kroku.

C. Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-Βπάηο-3[[[(4-aminofenyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Sloučenina 2. (0,72 g, 0,0013 mol) se rozpustí v methanolu (100 ml). K roztoku se přidá 10% palladium na aktivním uhlí (0,1 g) a směs se hydrogenuje na Parrově aparatuře 2 hodiny. Reakční směs se potom filtruje na celitu a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku, přičemž se získá pevná látka. Tato látka se chromatografuje na silikagelu (230-400 mesh) za použití směsi methylenchloridu a methanolu 9:1 jako eluentu. Frakce obsahující čistý produkt se spojí a koncentrují se za sníženého tlaku za vzniku pevné látky. Tato pevná látka se rozpustí v methanolu (2 ml) a okyselí se methanolickou chlorovodíkovou kyselinou na pH 1. Po přidání bezvodého ethylesteru se získá sraženina. Pevná látka se sebere filtrací a suší se ve vakuu při 100 C po dobu 24 hodin, přičemž se získá konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(4-aminofenyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 35

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β ,14β,17β)-14^ιηίηο-3[[[3-(dibutylamino)-2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

A. l-(Di-n-butylamino)-2,3-epoxypropan

K míchanému roztoku epichlorhydrinu (20,0 g, 0,22 mol) se přidává po kapkách během 1 hodiny di-n-butylamin (29,73 g, 0,23 mol) a směs se potom míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se promyje 20% K₂CO₃ (50 ml). Organická vrstva se míchá se 40% NaOH po dobu 1 hodiny a

100 potom se extrahuje 3 x 100 ml etheru. Etherové extrakty se spojí a promyjí vodou (100 ml). Organická vrstva se suší přes bezvodý Na₂SO₄ a filtruje se. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se surový produkt (I) o hmotnosti 39,42 g. Surový produkt se destiluje při 52 °/Q,15 mmHg a získá se 8,24 g (20,2 %) čistého produktu, který se použije jako meziprodukt v části B.

B. 3- (Dibutylamino) -2-hydroxypropylamin

Roztok nasyceného methanolického aminu obsahující I (4,07 g, 0,02 mol) se umístí do tlakové nádoby a nádoba se zahřívá na 100 ’ po dobu 2 dnů. Reakční roztok se odstraní a koncentruje se za sníženého tlaku při 90 ’/0,3 mmHg a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se filtruje a filtrát II (4,27 g) se použije bez čištění jako meziprodukt v části C.

C. Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[3—(dibutylamino)-2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐαϊηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s II (4,27 g, 21,12 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 3 x 75 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (4,78 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CH₂C1₂ obsahující 0,7% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním

101 ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂a získá se analyticky čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[3-(dibutylamino)2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 36

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βιηίηο-3[[[3-[bis(2-methylpropyl)amino]-2-hydroxypropyl]amino]karbonyl] oxy] andros tan- 17 -karboxylové kyseliny

A. l-(Diisobutylamino)-2,3-epoxypropan

K míchanému roztoku epichlorhydrinu (21,0 g, 0,23 mol) se přidává po kapkách během 1 hodiny diisobutylamin (31,14 g, 0,24 mol) a směs se potom míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se promyje 20% K₂CO₃ (50 ml).

Organická vrstva se míchá se 40% NaOH po dobu 1 hodiny a potom se extrahuje 3 x 100 ml etheru. Etherové extrakty se spojí a promyjí vodou (100 ml). Organická vrstva se suší přes bezvodý Na₂SO₄ a filtruje se. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se surový produkt. Surový produkt se destiluje při 68 ’/0,l mmHg a získá se 15,83 g (37,14 %) čistého produktu, který se použije jako meziprodukt v části B.

B. 3-(Diisobutylamino)-2-hydroxypropylamin

Roztok nasyceného methanolického aminu obsahující χ (4,86 g, 0,02 mol) se umístí do tlakové nádoby a nádoba se zahřívá na 100 “ po dobu 2 dnů. Reakční roztok se odstraní a koncentruje se za sníženého tlaku při 90 */0,3 mmHg a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se rozetře a filtruje. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitá látka (3,56 g, 80,1 %), II. která se použije bez čištění jako

102 meziprodukt v části C.

C. Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[ [ [ 3-[bis(2-methylpropyl)amino]-2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1’-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se , přímo s II (3,56 g, 17,62 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 10 x 100 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (3,96 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CH₂C1₂ obsahující 0,7% NH₄0H a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂a získá se analyticky čistý konečný produkt, dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3-[[[3-[bis(2-methylpropyl)amino]-2-hydroxypropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny.

Příklad 37

C. Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-Βΐηΐηο-3[[[[l-(fenylmethyl)-4-piperidinyl]amino]karbonyl]oxy]androstan· 17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3103 hydroxyandrostan-17-karboxýlové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (4,0 g, 11,44 mmol) v 97,1 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (2,25 g, 13,88 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s 4-amino-l-benzylpiperidinem (10,90 g, 57,28 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ (300 ml) a promyje se 6 x 300 ml vody do neutrálního pH. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se pevný zbytek (2,06 g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 10% MeOH/90% CH₂C1₂obsahující 0,7% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanólu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 3 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, :: dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[[1(fenylmethyl)-4-piperidinyl]amino]-2-hydroxypropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 38

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[[(2-hydroxy-l-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

A. Nasycený roztok 2-hydroxy-l-methylpropylamin trans-2,3epoxybutanu (5,0 g, 0,08 mol) v methanolu se umístí do nerezavějící tlakové nádoby. Tato nádoba se zahřívá na teplotu 100 · po dobu 3 dnů. Reakční roztok se pak koncentruje ve vakuu a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se destiluje za sníženého tlaku (27 ’, 0,2 mmHg) a získá se žlutý meziprodukt aminu χ, který se použije v části

104

Β (1,4 g, 21 %).

Β. Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,ί4β,17β)-14-3ΐηΐηο-3[[[(2-hydroxy-l-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βιηϊηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s X (1,40 g, 15,70 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční směs se filtruje a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 6 x 300 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se pevný zbytek (2,09

g). Zbytek se chromatografuje na silikagelu s 10% MeOH/90% CH₂C1₂ obsahující 0,7% NH₄OH a získá se volná báze. Volná báze v absolutním ethanolu se zpracuje nasyceným ethanolickým HCl za míchání. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3 [[[(2-hydroxy-l-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny.

Příklad 39

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[3-(dipropylamino)-2-hydroxypropyl]karbonylJoxy]androstan17-karboxylové kyseliny

A. l-(Dipropylamino)-2,3-epoxypropan

105

K míchanému roztoku epichlorhydrinu (20,0 g, 0,22 mol) se přidává po kapkách během 1 hodiny dipropylamin (23,14 g, 0,23 mol) a směs se potom míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se promyje 20% K₂CO₃ (50 ml). Organická vrstva se míchá se 40% NaOH po dobu 1 hodiny. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 3 x 100 ml etheru. Etherové extrakty se spojí a promyjí vodou (100 ml). Organická vrstva se suší přes bezvodý Na₂SO₄a filtruje se. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se surový produkt (I) o hmotnosti 35,3 g. Surový produkt se destiluje při 34 */0,1 mmHg a získá se 7,23 g (21,0 %) čistého produktu, který se použije jako meziprodukt v části B.

B. 3-(Dipropylamino)-2-hydroxypropylamin

Roztok nasyceného methanolického aminu obsahující I (3,46 g, 0,02 mol) se umístí do tlakové nádoby a nádoba, se zahřívá na 100 * po dobu 2 dnů. Reakční roztok se odstraní a koncentruje se za sníženého tlaku přičemž se získá olejovitý zbytek. Zbytek se filtruje a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se produkt II. Čistý produkt se získá destilací při 63 * a při 0,2 mmHg (2,33 g, 22 %). Produkt se použije jako meziprodukt v části C.

C. Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-ΐ4-3ΐηίηο-3[ [ [3-(dipropylamino)-2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový

106 meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s II (2,33 g, 15,4 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se pak zahřívá pod refluxem 8 hodin. Reakční roztok se potom koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 16 x 110 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek (2,8 g). Zbytek se zpracuje za míchání v absolutním ethanolu nasyceným ethanolickým HCI. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 4 x 25 ml CH₂C1₂a získá se analyticky čistý konečný produkt, dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-ηιηίηο-3-[[[3-(dipropylamino)- < 2-hydroxypropyl]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Příklad 40

Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[(4-amino-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan- 17karboxylové kyseliny

A. 4-aminopiperidin

Míchaný roztok ethyl 4-amino-l-piperidin karboxylátu (5,0 g, 0,003 mol) ve 100 ml 20% NaOH se zahřívá při refluxu po dobu 8 hodin. Reakční roztok se extrahuje 3 x 150 ml CH₂C1₂ a extrakty se spojí. Extrakty se suší přes bezvodý Na₂SO₄ a potom se filtrují. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se 4-aminopiperidin I. (3,06 g). i se použije bez dalšího čištění jako meziprodukt v části B.

B. Dihydrochiorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3[[(4-amino-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-ΐ4-3ΐηΐηο-3107 hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s X (3,06 g, 30,6 mmol). Reakce pokračuje za míchání při teplotě místnosti pod dusíkem 2 dny a reakční roztok se pak filtruje a koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 4 x 50 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý, pevný zbytek (2,03 g). Zbytek se zpracuje za míchání v absolutním ethanolu nasyceným ethanolickým HCl. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Zbytek se promyje 2 x 75 ml CH₂C1₂ a získá se surový produkt jako bílá pevná látka, 2,14 g. Tato látka se chromatografuje na silikagelu s 20% MeOH/80% CHC1₃ a získá se čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-ΐΑamino-3-[[(4-amino-l-piperidinyl]karbonyl]oxy]androstan—17karboxylové kyseliny.

Příklad 41

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βπιϊηο-3[[C(4-piperidinyl]amino]karbonyl]oxy]-androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaná směs suchého Pearlmanova katalyzátoru (2,27 g) v 54 ml suchého methanolu pod N₂ se zpracuje formiátem amonným (1,71 g, 0,03 mol) tak, aby se reakční teplota udržovala na 40 *. Reakce se dále zahřívá na teplotu 40 ’ po dobu 20 minut a potom se přidá dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)14-amino-3-[[[[(1-fenylmethyl)-4-piperidinyl]amino]karbonyl]oxy]androstaň-17-karboxylové kyseliny (0,83 g, 1,30 mmol) v 50 ml suchého methanolu. Během přidávání se uvolňuje oxid

108 uhličitý. Reakční směs se míchá při teplotě 40 ° po dobu 1,5 hodiny a potom se filtruje a pevná látka se promyje methanolem. Filtráty se spojí a koncentrují se za sníženého tlaku. Zbytek se zpracuje 2% NaOH a extrahuje se 4 x 100 ml CH₂C1₂. Extrakty CH₂C1₂ se spojí a promyjí se solankou a suší se přes bezvodý Na₂SO₄. Sušidlo se odstraní a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý pevný produkt, jako volná báze (0,37 g). Tato báze v absolutním ethanolu se zpracuje za míchání nasyceným alkoholickým HCl. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý, konečný produkt dihydrochlorid methylesteru (3P,5P,14P,17P)-14-amino-3-[[[(4-piperidinyl)amino]karbonyl]- > oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 42

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3[[[(3-hydroxy-1-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

A. 3-aminobutanol

Míchaný roztok borohydridu litného (4,10 g, 0,19 mol) v suchém THF (100 ml) se pod dusíkem zpracuje po kapkách s trimethylsilylchloridem (40,56 g, 0,37 mol). Reakční se udržuje na teplotě 25-30 · na ledové lázni. Reakční směs se potom po částech zpracuje s DL-3-aminobutanovou kyselinou (9,69 g, 0,09 mol). Reakci je nutné provádět opatrně, probíhá za vývoje pěny. Potom se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti a opatrně se přidá suchý MeOH (140 ml). Reakční roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se hustý olejovitý zbytek. Zbytek se opatrně zpracuje 20% NaOH (250 ml) a potom se extrahuje 3 x 250 ml CH₂C1₂. Extrakty se spojí a suší se přes bezvodý Na₂SO₄. Sušidlo se odstraní a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se surový

109 produkt (i). Produkt se destiluje při 50 · a 0,5 mmHg a získá se 2,3 g (28,7 %) materiálu, který se použije jako meziprodukt v části B.

B. Hydrochlorid methylesteru (3p,5p,14p,17P)-14-amino-3[[[(3-hydroxy-l-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1 g, 2,86 mmol) v 24,35 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje karbonyldiimidazolem (0,52 g, 3,48 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s X (1,53 g, 17,23 mmol). Reakční směs se zahřívá při refluxu pod dusíkem 6 dnů. Reakční roztok se pak koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovítý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 6 x 100 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se bílý, pevný zbytek (1,2 g). Zbytek se se chromátografuje na siiikagelu s 10% MeOH/90% CHC1₃ obsahující 0,7 % NH₄OH a získá se volná báze. Tato báze v absolutním ethanolu se zpracuje za míchání nasyceným ethanolickým HCl. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se promyje 4 x 50 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(3-hydroxy-1-methylpropyl)amino]karbony1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 43

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[2acetyloxy-3-(1-piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]-14aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

110

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[2hydroxy-3-(1-piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]17-karboxylové kyseliny (0,12 g, 0,2 mmol) se rozpustí v bezvodém acetanhydridu (5 ml). Přidá se bezvodý pyridin (47 ml) a reakční směs se koncentruje za sníženého tlaku na olej, který se chromatografuje na silikagelu (230-400 mesh), za použití směsi methylenchloridu a methanolu 9:1 jako eluentu. Frakce obsahující čistý produkt se spojí a koncentrují se za sníženého tlaku na pevnou látku. Pevná látka se rozpustí v methanolu (1 ml) a po kapkách se přidá ethanolická kyselina chlorovodíková do pH 1. Roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olej. Rozetřením oleje s bezvodým ethyletherem se získá hydrochloridová sůl, jako pevná látka, která se sebere filtrací a suší se ve vakuu při 77 ·, přičemž se získá konečná látka, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[2-2-acetyloxy-3-(1piperidinyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17karboxylové kyseliny.

Příklad 44

Dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-απιϊηο-3[[[4-(fenylmethyl)-1-piperazinyl]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

Míchaný roztok methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny, připravený podle postupu popsaném v US patentu č. 4 885 280, uváděný zde jako odkaz (1,55 g, 4,42 mmol) v 37,5 ml CH₂C1₂ se pod N₂ zpracuje 1,1'-karbonyldiimidazolem (0,87 g, 5,37 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a získá se imidazolový meziprodukt. Tento meziprodukt se neizoluje, ale zpracuje se přímo s l-benzylpiperazinem (3,90 g, 22,1 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny a potom se roztok koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Tento zbytek se převede do čerstvého CH₂C1₂ a promyje se 12

111 v

x 100 ml vody. Organická vrstva se koncentruje za sníženého tlaku a získá se čirý, olejovitý zbytek (3,91 g). Zbytek se se chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CHC1₃obsahující 2 % NH₄OH a získá se volná báze. Tato báze v absolutním ethanolu se zpracuje za míchání nasyceným ethanolickým HCl. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se pevný zbytek. Tento zbytek se promyje 4 x 100 ml ΟΗ₂Ο1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο3-[[[4-fenylmethyl)-l-piperazinyl]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny.

Příklad 45

Hydrochlorid (3 β(S),5β,14 β,17 β)-3-[[[[2-(acetyloxy)-1fenylethyl]amino]karbonyl]oxy]-l4-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu

Hydrochlorid (3β(S),5β,14β,17β)-3-[[[(2-hydroxy-1-. fenylethyl)amino]karbonyl]oxyJ-14-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu (0,45 g, 0,82 mmol) se suspenduje v bezvodém acetanhydridu (25 ml). K reakční směsi se přidá bezvodý pyridin (66 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti 20 hodin. Reakční směs se zředí bezvodým ethyletherem (200 ml) a vysrazí se bílá pevná látka. Tato látka se sebere filtrací a suší se při 77 · po dobu 24 hodin, přičemž se získá konečný produkt, hydrochlorid (3p(S),5β,14β,17β)-3-[[[[2-(acetyloxy)-1 fenylethyl]amino]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu.

Příklad 46

Hydrochlorid methylesteru (3β(Η) ,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

112

A) Fenylmethylester 3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny

Do 1 litrové tříhrdlé baňky s kulatým dnem, opatřené mechanickým míchadlem a dvěma dělícími nálevkami se vloží 30 g (0,2966 mol) 3-hydroxypiperidinu a 300 ml vody. Vzniklý roztok se míchá a ochladí se v ledové solné lázni na teplotu -0 ’C. Z dělící nálevky se pomalu po kapkách přidá benzylchlorformiát (51 ml, 0,356 mol) a 2N NaOH (178 ml), z druhé dělící nálevky, přičemž se teplota udržuje na -0 C. Po skončení přidávání se směs míchá za chladu 2 hodiny a potom při teplotě místnosti přes noc. Potom se olejovitý zbytek oddělí z reakčního roztoku. K reakční směsi se přidá ethylacetát (250 ml) a směs se míchá 1/2 hodiny. Fáze se , oddělí a vodná fáze se extrahuje ještě jednou EtOAc (250 ml). Všechny organické fáze se spojí, promyjí 1 x 150 ml nasyceného NaHC0₃, 1 x 150 ml H₂O, 1 x 150 ml 10% HCl, 1 x 150 ml H₂0 a suší se přes MgSO₄. Směs se filtruje a koncetruje na rotační odpařovačce za sníženého tlaku a získá se viskózní olej, který se uchová za sníženého tlaku, aby se zbavil zbytků rozpouštědla a získá se fenylmethylester 3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny, jako čistý olej.

B) Fenylmethylester 3-[[(1-fenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny

S(-)-1-fenylethyisokyanát (14,33 ml, 0,1 mol) se přidá k zelené heterogenní směsi fenylmethylesteru 3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny (23,53 g, 0,1 mol), CuCl reakční kvality (9,9 g, 0,1 mol) a suchému DMF (500 ml) v jednolitrové baňce s jedním hrdlem a s kulatým dnem, opatřené magnetickým míchadlem a sušící trubkou. Směs se míchá při teplotě místnosti dokud reakce není kompletní, což se zjišťuje TLC (4 až 6 hodin). Reakční směs se zředí Et₂O (250 ml) a H₂0 (250 ml) a potom se míchá po dobu 1/2 hodiny. Fáze se oddělí.

K fázi voda/DMF se přidá dalších 250 ml Et₂O a 250 ml H₂0 a

113 směs se míchá 1/2 hodiny. Fáze Et₂O se uschová. Obě Et₂0 fáze se spojí, promyjí se 1 x 230 ml solanky, suší se přes MgSO₄ a filtrují. Filtrát se koncentruje na rotační odparce za sníženého tlaku a získá se polotuhý zbytek fenyImethylesteru 3 [[(1-fenylethyl)amino]karbonyloxy]-piperidin-l-karboxylové kyseliny, jako směs žádaných diastereoisomerů. Rozetření fenyImethylesteru 3-[[(1-fenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny s EtOAc indukuje krystalizaci 3S isomerů, a po rekrystalizaci z EtOAc se získá analyticky čistý 3S isomer fenyImethylesteru 3-[[(lfenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny, vhodné pro difrakci rentgenového záření, ve výtěžku 7,64 g (59 %).

Čištěním matečného louhu (po roztírání) se preparativní HPLC za použití s mobilní fází 35% EtOAc/hexany získá analyticky čistý 3R isomer fenyImethylesteru 3-[[(l-fenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny ve výtěžku 9,9 g (43 %).

C) Fenylmethylester R-(-)-3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny

K roztoku karbamátu (9,94 g, 0,026 mol) a triethylaminu (7,25 ml, 0,052 mol) ve 150 ml suchého toluenu se pod dusíkem přidá po kapkách (10 minut) roztok trichlorsilanu (5,25 ml, 0,052 mol) v 50 ml suchého toluenu. Po přidání sílánu se míchaný roztok zahřívá pod refluxem 16 hodin. Alternativně může být reakce prováděna při teplotě místnosti delší časovou periodu (24 až 48 hodin). Reakční směs se zpracuje dále odstraněním všech solí filtrací, koncentrací na rotační odpařovačce se odstraní všechna rozpouštědla a zbytek se znovu rozpustí v ethylacetátu. Organická vrstva se promyje 2x 50 ml nasyceného vodného roztoku NH₄C1 a suší se přes bezvodý MgSO₄. Karbinoly se izolují kapalnou chromatografií, za použití mobilní fáze 15% EtOAc/CH₂Cl₂ při 100 ml/min.

114

Frakce vykazující jeden spot (R_f = 0,72) (10% MeOH/CH₂Cl₂se spojí a koncentrují se na rotační odpařovačce za sníženého tlaku a získá se 3,9 g jantarového oleje, fenylmethylesteru R-(-)-3-hydroxy-1-piperidinkarboxylové kyseliny.

D) (R)”(+)~3-hydroxypiperidin

Chráněný amin fenylmethylesteru R-(-)-3-hydroxy-1piperidinkarboxylové kyseliny (3,5 g, 0,0149 mol), MeOH (suchý - 50 ml) a 350 mg 5% Pd/C (vlhký) se v 500 ml skleněné hydrogenační nádobě hydrogenuje v Parrově aparatuře po dobu 24 hodin. ,

Reakční směs se filtruje přes celitový polštářek, čímž se odstraní katalyzátor. Filtrát se kontroluje na dokončení pomocí TLC a potom se koncentruje na rotační odpařovačce za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek - 1,6 g. Po čištění mžikovou chromatografií za použití mobilní fáze 35% MeOH/CH₂CI₂ + 10 ml NH^OH se získá pevná látka, která sublimuje (0,1 mmHg při 55 °C) a získá se bílá pevná látka (R)-(+)-3-hydroxypiperidinu ve výtěžku 1,1 g (73 %).

E) Hydrochlorid methylesteru (3P(R),5β,14β,17β)-14-amino3-([(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,04 g (0,003 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny v 40 ml CH₂C1₂ se pod N₂ a za míchání přidá během 1/2 hodiny 0,54 g (0,0033 mol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá 0,9 g (0,009 mol) R-(+)-3-hydroxypiperidinu. Po 48 hodinách (poznámka 1) se slabě zakalený roztok filtruje a filtrát se promyje destilovanou vodou do neutrální reakce promývací vody (5 x 30 ml). Po sušení přes MgSO₄ se odpaří CH₂C1₂ za sníženého tlaku a získá se 1,47 g pevné bílé látky. TLC

115 (CHCl₃:MeOH = 9/1 nebo 8/2) ukazuje 2 spoty. Pevná látka se čistí mžikovou chromatografií (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH) a potom se rozpustí v 40 ml EtOH, přidají se 4 ml EtOH/HCl a roztok se míchá 4 hodiny. Pevná látka se koncentruje na rotační odpařovačce a získá se polotuhý zbytek, který še podrobí azeotropní destilaci s 50 ml CH₂C1₂ a potom rekrystalizuje z acetonitrilu a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3p(R),5p,14p,17p)-14-amino-3-[[(3hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny.

Poznámka 1: Délka reakční doby se mění v intervalu od 2 do 7 dnů a měla by být monitorována TLC.

Příklad 47

Hydrochlorid methylesteru (3P(S),5β,14β,17β)-3-[[(3-hydroxy-lpiperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

A) FenyImethylester 3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny

Do 1 litrové tříhrdlé baňky s kulatým dnem, opatřené mechanickým míchadlem a dvěma dělícími nálevkami se vloží 30 g (0,2966 mol) 3-hydroxypiperidinu a 300 ml vody. Vzniklý roztok se míchá a ochladí se v ledové solné lázni na teplotu -0 *C. Z dělící nálevky se pomalu po kapkách přidá benzylchlorformiát (51 ml, 0,356 mol) a 2N NaOH (178 ml), z druhé dělící nálevky, přičemž se teplota udržuje na -0 *C. Po skončení přidávání se směs míchá za chladu 2 hodiny a potom při teplotě místnosti přes noc. Potom se olejovítý zbytek oddělí z reakčního roztoku. K reakční směsi se přidá ethylacetát (250 ml) a směs se míchá 1/2 hodiny. Fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje ještě jednou EtOAc (250 ml). Všechny organické fáze se spojí, promyjí 1 x 150 ml nasyceného NaHC0₃, 1 x 150 ml H₂0, 1 x 150 ml 10% HCl, 1 x 150 ml H₂0 a suší se přes MgSO^. Směs se filtruje

116 a koncetruje na rotační odpařovačce za sníženého tlaku a získá se viskózní olej, který se uchová za sníženého tlaku, aby se zbavil zbytků rozpouštědel a získá se fenylmethylester 3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny, jako čistý olej.

S(-)-1-fenylethyisokyanát (14,33 ml, 0,1 mol) se přidá k zelené heterogenní směsi fenylmethylesteru 3-hydroxy-l-pipe· ridinkarboxylové kyseliny (23,53 g, 0,1 mol), CuCl reakční kvality (9,9 g, 0,1 mol) a suchému DMF (500 ml) v <

jednolitrové baňce s jedním hrdlem a s kulatým dnem, opatřené magnetickým míchadlem a sušící trubkou. Směs se míchá při teplotě místnosti dokud reakce není kompletní, což se zjišfuje TLC (4 až 6 hodin). Reakční směs se zředí Et₂O (250 ml) a H₂O (250 ml) a potom se míchá po dobu 1/2 hodiny. Fáze se oddělí a fáze Et₂O se uschová. K fázi voda/DMF se přidá dalších 250 ml Et₂O a 250 ml H₂O a směs se míchá 1/2 hodiny. Fáze Et₂O se uschová. Obě Et₂0 fáze se spojí, promyjí se .1 x 230 ml solanky, suší se přes MgSO₄ a filtrují. Filtrát se koncentruje na rotační odparce za sníženého tlaku a získá se polotuhý zbytek fenylmethylesteru 3-[[(1-fenylethyl)amino]karbonyloxy]-piperidin-l-karboxylové kyseliny, jako směs žádaných diastereoisomerů. Rozetření fenylmethylesteru 3-[[(i-fenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny s EtOAc indukuje krystalizaci 3S isomeru, a po rekrystalizaci z EtOAc se získá analyticky čistý 3S. isomer fenylmethylesteru 3-[[(1-fenylethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny, vhodné pro difrakci rentgenového záření, ve výtěžku 7,64 g (59 %).

Čištěním matečného louhu (po roztírání) se preparitivní HPLC za použití mobilní fáze 35% EtOAc/hexany se získá analyticky čistý 3R isomer fenylmethylesteru 3-[[(1-fenyl117 ethyl)amino]karbonyloxy]piperidin-l-karboxylové kyseliny ve výtěžku 9,9 g (43 %). TLC: Rf 0,23 (35 % EtOAc/hexany).

C) Fenylmethylester S-(+)-3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny

K roztoku karbamátu (7,64 g, 0,02 mol) a triethylaminu (5,58 ml, 0,04 mol) v 150 ml suchého toluenu se pod dusíkem přidá po kapkách (10 minut) roztok trichlorsilanu (4,04 ml, 0,04 mol) v 50 ml toluenu. Po přidání silanu se míchaný roztok zahřívá pod refluxem 16 hodin. Alternativně může být reakce prováděna při teplotě místnosti delší časovou periodu (24 až 48 hodin). Reakční směs se zpracuje dále odstraněním všech solí filtrací, koncentrací na rotační odpařovačce se odstraní všechna rozpouštědla a zbytek se znova rozpustí v ethylacetátu. Organická vrstva se promyje 50 ml nasyceného vodného roztoku NH₄C1 a suší se přes bezvodý MgSO₄. Karbinoly se izolují kapalnou chromatografií, za použití mobilní fáze 20% EtOAc/CH₂Cl₂ při 100 ml/min. '

Frakce vykazující jeden spot (Rf = 0,72) (10% MeOH/CH₂Cl₂) se spojí a koncentrují se na rotační odpařovačce za sníženého tlaku a získá se 3,0 g bílé tuhé látky, fenylmethylesteru S-(+)-3-hydroxy-l-piperidinkarboxylové kyseliny (64 %).

D) (S)-(-)-3-hydroxypiperidin

Chráněný amin fenylmethylesteru S-(+)-3-hydroxy-lpiperidinkarboxylové kyseliny (3,0 g, 0,0128 mol), MeOH (suchý - 50 ml) a 350 mg 5% Pd/C (vlhký) v 500 ml skleněné hydrogenační nádobě se hydrogenuje v Parrově aparatuře po dobu 24 hodin.

Reakční směs se filtruje přes celitový polštářek, čímž se odstraní katalyzátor. Filtrát se kontroluje na dokončení pomocí TLC a potom se koncentruje na rotační odpařovačce za

118 sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek - 1,6 g. Po čištění mžikovou chromatografii za použití mobilní fáze 35% MeOH/CH₂Cl₂ + 10 ml NH₄OH se získá hustý olej (S)-(-)-3hydroxypiperidinu, 1,1 g, (83 %).

E) Hydrochlorid methylesteru (3 β(S),5β,14β,17β)-14-amino™

3-[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny

K roztoku 1,04 g (0,003 mol) methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3-hydroxyandrostan-17-karboxylové kyseliny připraveného podle postupu popsaném v US patentu č.

885 280, uváděný zde jako odkaz v 40 ml CH₂C1₂ se pod N₂a za míchání přidá během 1/2 hodiny 0,54 g (0,0033 mol)

1,1’-karbonyldiimidazolu. Po 48 hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá 0,9 g (0,009 mol) S-(-)-3hydroxypiperidinu. Po 48 hodinách (poznámka 1) se slabě zakalený roztok filtruje a filtrát se promyje destilovanou vodou do neutrální reakce promývací vody (5 x 30 ml). Po sušení přes MgSO₄ se odpaří CH₂C1₂ za sníženého tlaku a získá se 1,27 g pevné bílé látky. TLC (CHCl₃:MeOH = 9/1 nebo 8/2) ukazuje 2 spoty. Pevná látka se čistí mžikovou chromatografii (5% MeOH/CH₂Cl₂, NH₄OH) a potom se rozpustí v 40 ml EtOH, přidají se 4 ml EtOH/HCl a roztok se míchá 4 hodiny. Pevná látka se koncentruje na rotační odpařovačce a získá se polotuhý zbytek, který se podrobí azeotropní destilaci s 50 ml CH₂C1₂ a potom se rekrystalizuje z acetonitrilu a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-androstan-17karboxylové kyseliny.

119

Příklad 48

Hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-[[[(acetyloxy)-l-piperidinyl]karbony1]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17-karboxamidu

Míchaná směs hydrochloridu (3β,5β,14β,17β)-14-3πΰηο-3[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]-N-methylandrostan17-karboxamidu (0,59 g, 1,14 mmol) v 100 ml anhydridu kyseliny octové se pod N₂ zpracuje pyridinem (0,2 ml, 2,47 mmol). Reakční směs se zahřívá na 70 * po dobu 2 hodin a potom se filtruje. Filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a získá se pevný bílý zbytek (0,50 g). Reakční zbytek se chromatografuje na silikagelu s 10 % MeOH/90 % CH₂C1₂obsahující 1 % NH₄OH a získá se olejovitý zbytek jako volná báze. Volná báze v absolutním alkoholu se zpracuje za míchání nasyceným ethanolickým HC1. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje 4 x 25 ml CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-:

[[[(acetyloxy)-l-piperidinyl]karbonyl]oxy]-14-amino-Nmethylandrostan-17-karboxamidu.

Příklad 49

Hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[[2-(acetyloxy)-1-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy)-14aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

Míchaný roztok hydrochloridu methylesteru (3β,5β,14β,Χ7β) 14-amino-3-[[[(2-hydroxy-1-methylpropy1)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny (190 mg, 0,38 mmol) v 50 ml anhydridu kyseliny octové se zpracuje 3 kapkami ledové kyseliny octové a potom se směs zahřívá na teplotu 50 · po dobu 4 hodin. Reakční směs se potom zahřívá na teplotu 70 * po dobu 11 hodin. Reakční směs se ochladí a koncentruje se za sníženého tlaku na olejovitý zbytek o hmotnosti 230 mg.

120

Reakční zbytek se potom chromatografuje na silikagelu s 5% MeOH/95% CH₂C1₂ obsahující 0,6% NH₄0H a získá se volná báze. Tato volná báze v absolutním alkoholu se zpracuje za míchání nasyceným ethanolickým HCl. Alkoholický roztok se koncentruje za sníženého tlaku a získá se olejovitý zbytek. Olejovitý zbytek se promyje CH₂C1₂ a získá se analyticky čistý konečný produkt, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3 [C[[2-(acetyloxy)-l-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy)-l4aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny.

Příklad 50

14β-hydroxy-3β-((4'-amino-1'-piperidinyl))karbonyloxy]karden-20(22)-olid g digitoxigeninu se rozpustí v 25 ml pyridinu a roztok se udržuje při teplotě 60 · na olejové lázni. Potom se přidá 2,42 g 4-nitrofenylchlorformiátu a reakční směs se zahřívá po dobu 90 minut. Přidá se opět 0,5 g 4-nitrofenylchlorformiátu pokračuje se v zahřívání po dobu 1 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, extrahuje se toluenem a promyje se roztokem uhličitanu sodného. Sraženina uhličitanu se filtruje a filtrát se odpaří do sucha (1,3 g). Po čištění chromatografií na silikagelové koloně a eluování směsí methylenchloridu a methylalkoholu (99:1) se získá 1,2 g 14β^γάΓθχγ-3β-[(4'-nitrofenyloxy)karbonyloxy]karden-20(22)olidu. Výše uvedený produkt se použije k reakci s

4-benzyliminopiperidinem připraveném následovně.

1,4 g 4-aminobenzylpiperidinu se přidá k suspenzi palladiových sazí ve směsi s kyselinou mravenčí (4,4 %) a methylakoholem (95,6 %). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, katalyzátor se odfiltruje a roztok se odpaří. Zbytek se rozpustí v 20 ml ethylalkoholu a přidá se 0,8 ml benzaldehydu a směs se míchá při teplotě místnosti 24 hodin. Roztok se odpaří do sucha a zbytek

4-benzyliminopiperidinu se použije v dalším stupni.

121

4-benzyliminopyperidin připravený podle postupu popsaném výše se rozpustí v 5,5 ml dimethylformamidu a přidá se 0,6 g 14p-hydroxy-3-p-[(4'-nitrofenyloxy)karbonyloxy]karden-20(22)olidu a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Směs se extrahuje ethylacetátem, promyje zředěným roztokem uhličitanu sodného, odpaří a zbytek se rozpustí v 20 mí alkoholu v přítomnosti 5,5 ml 2N kyseliny chlorovodíkové a směs se míchá 1 hodinu, přidá se destilovaná voda a báze se extrahuje 10% vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Roztok se neutralizuje amoniakem a promyje se ethylacetátem. Získaný produkt se čistí HPLC chromatografií, eluuje se směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (90:10:1) a získá se konečný produkt, 14β-hydroxy-3 β-((4’-amino-1'-piperidinyl)) karbonyloxy]karden-20(22)-olid.

Příklad 51

14β-hydroxy-3β-(1'-piperidinyl)karbonyloxy]karden-20(22)olid

K suspenzi 400 mg 14β-hydroxy-3β-[(4¹-nitrofenyloxy)karbonyloxy]karden-20(22)-olidu, získaném podle postupu popsaném v příkladu 50, v 4 ml dimethylformamidu se přidá 70 mg piperidinu. Reakční směs se míchá 1 hodinu, extrahuje se ethylacetátem, promyje vodným roztokem uhličitanu sodného a potom destilovanou vodou. Po odpaření do sucha se zbytek čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití elučního činidla směsi methylenchloridu a methylalkoholu (97:3) a získá se čistý 14β-Ι^Γθχγ-3β-[ (1' -piperidinyl)-karbonyloxy]karden-20(22)-olid. Po krystalizaci ze směsi ethylacetátu a ethylalkoholu se získá konečný produkt, 14β-hydroxy-3β-(l⁸piperidinyl)karbonyloxy]karden-20(22)-olid jako amorfní prášek.

122

Příklad 52

Methylester 14p-amino-3p-[(1'-piperidinyl)karbonyloxy)]-5βandrostan-173-karboxylové kyseliny

620 mg methylesteru 14β-azido-3β-hydroxy-5β-androstan17β-karboxylové kyseliny se rozpustí za zahřívání na 60 · na olejové lázni v 3,1 ml bezvodého pyridinu. Potom se přidá 333 mg 4-nitrofenylchlorformiátu a reakční směs se zahřívá po dobu 60 minut za míchání. Přidá se opět 166 mg

4-nitrofenylchlorformiátu a reakce pokračuje další hodinu.

Po ochlazení se extrahuje toluenem, promyje zředěným vodným roztokem uhličitanu sodného a potom destilovanou vodou. Toluen se odpaří a zbytek se čistí chromatografií za použití elučního činidla směsi methylenchloridu a heptanu (80:20) a methylester získá se 14β-3ζίάο-3β-[(4’-nitrofenyloxy) karbonyloxy]-5 β-androstan-17 β-karboxylové kyseliny, která krystaluje ze směsi ethylacetátu a heptanu (1:3). Připraví se suspenze výše uvedeného derivátu ve 2 ml dimethylformamidu.

Při teplotě místnosti a za míchání se přidá 0,05 ml piperidinu dokud se všechen 14-azidokarbonát nerozpustí.

Po extrakci ethylacetátem, promytí zředěným vodným roztokem uhličitanu sodného a potom destilovanou vodou, vysušení a odpaření do sucha se získá 180 mg zbytku, který odpovídá methylesteru 14β-azido-3β-(piperidinokarbonyloxy)5β-androstan-17β-karboxylové kyseliny. Výše uvedená sloučenina (180 mg) se rozpustí ve 20 ml horkého ethylalkoholu a tento roztok se přidá pod argonem do 26 ml ethylalkoholu obsahujícího 123 mg telurového prášku a 91 mg borohydridu sodného. Reakce pak pokračuje 5 hodin za míchání při teplotě místnosti.

Reakční směs se neutralizuje 10% roztokem kyseliny octové v ethylalkoholu (pH 7), filtruje se přes celit a celit se opláchne směsí methylenchloridu a ethylalkoholu (1:1) a filtrát se odpaří. Zbytek se rozpustí v toluenu, promyje se 10% vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodná kyselá

123 fáze se alkalizuje amoniakem. Po extrakci a chromatografií na silikagelu za použití elučního činidla směsi methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (95,6:4:0,4) a krystalizaci v ethylacetátu se získají bezbarvé krystaly konečného produktu, methylesteru 14p-amino-3p-[(1*-piperidinyl) karbonyloxy)]-5p-androstan-17p-karboxylové kyseliny.

Příklad 53

Hydrochlorid methylesteru 14p-amino-N-methyl-3p-[(R)-l'hydroxymethylpropylaminoformyloxy)]-5 β-androstan-17 βkarboxylové kyseliny

0,4 g směsi (1:1) 2-methylamino-l-n-butylalkoholu a 2-dimethylamino-l-n-butylalkoholu se přidá k roztoku 0,68 g methylesteru 14β-3ζίάο-3β-[(4’-nitrofenyloxy)karbonyloxy]-5βandrostan-17β-karboxylové kyseliny, připraveném jak je popsáno v příkladu 52, v 7,5 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 3 hodiny a potom sě zředí 60 ml vody.

Po extrakci ethylacetátem, promytí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom vodou a nasyceným roztokem NaCl se organická fáze suší a odpaří se do sucha. Získá se 0,7 g methylesteru 14β-azido-N-methyl-3β-[(R)-l'hydroxymethylpropylaminoformyloxy)]-5β-androstan-17βkarboxylové kyseliny. K roztoku 0,7 g výše uvedeného

14-azidoderivátu v 72 ml měthylalkoholového roztoku hydrazinu se pod atmosférou dusíku přidá 0,7 g hydroxidu paladnatého a reakční směs se refluxuje 7 hodin a přes noc při teplotě místnosti.

Po filtraci přes celit se filtrát odpaří do sucha a získá se 0,9 g surového produktu, který se čistí chromatografií na silikagelu, eluuje se směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (97:3:0,3), potom se rozpustí ve vodě, přidá se 1,2N kyselina chlorovodíková do pH 1, extrahuje se ethylacetátem a promyje se vodou a nasyceným roztokem NaCl.

124

Část výchozího produktu zůstává v organických fázích, vodná fáze se alkalizuje hydrogenuhličitaném sodným a extrahuje se směsí methylenchloridu a methylalkoholu (80:20) a získá se 0,32 g konečného produktu, methylesteru 14β-aminoN-methyl-3p-[(R)-l'-hydroxymethylpropylaminoformyloxy)]-5βandrostan-17β-karboxylové kyseliny. Hydrochloridová sůl konečného produktu se připraví přidáním 0,2N kyseliny chlorovodíkové v methylalkoholovém roztoku.

Příklad 54

Methylester 14β-3ΐηίηο-3β-[ (4' -amino-1 *-piperidinyl) ]karbonyloxy]-4-ethienové kyseliny mg tellurového prášku a 44 mg borohydridu sodného se přidá k methylalkoholovému roztoku, který byl odplyněn argonem. Směs se refluxuje za míchání 2 hodiny a potom se nechá ochladit a přidá se 80 mg methylesteru 14β-azido-3βhydroxy-4-etienové kyseliny a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 3 hodin.

Po filtraci, promytí ethylalkoholem, extrakci methylenchloridem a následném promytí vodou, hydrogenuhliči taném sodným a nasyceným roztokem NaCl se zbytek čistí chromatografií na silikagelu, eluováním směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (95:5:0,5) a získá se 60 mg methylesteru 14p-amino-3p-hydroxy-4-ethienové kyseliny.

Výše uvedený 14-aminoderivát se rozpustí v methylenchloridu pod atmosférou argonu, přičemž se roztok míchá, v přítomnosti dibutylmočoviny a molekulárních sít (4 A). Během dvouhodinového intervalu se přidají 2 části p-nitrofenylchlorformiátu a třetí část se přidá o pět hodin později. Reakce pokračuje přes noc při teplotě místnosti.

Tak se získá methylester 14β-3ΐηίηο-3β-[ (4’-nitrofenyl)karbonyloxy]-4-etienové kyseliny, který se nechá reagovat s 4-aminopipoeridinem v dimethylformamidu. Reakce se provádí 20

125 hodin při teplotě 0 · a za míchání.

Po extrakci ethylacetátem a promytí obvyklými způsoby se zbytek filtruje a čistí se chromatografií na silikagelu eluováním směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (95:5:0,5) se získá konečný produkt, methylester 14p-amino3β—[(4'-amino-1'-piperidinyl)]-karbonyloxy]-4-ethienové kyseliny.

Příklad 55

Dihydrochlorid methylesteru 14β-3ΐηίηο-12β-1ιγάΓθχγ-3β-[ (4 · amino-1’-piperidinyl)karbonyloxy]-5β-androstan-17βkarboxylové kyseliny

Tento produkt se připraví stejným postupem, jak je popsáno v příkladu 52, s tím, že se jako výchozí sloučenina použije methylester 14β-azido-3β,12β-dihydroxy-5β-androstan17β-karboxýlové kyseliny. Dihydrochlorid se připraví z odpovídající báze přidáním kyseliny chlorovodíkové v methyalkoholovém roztoku.

Příklad 56

Methylester 14 β-amino-3 β-(1 *-acetoxymethyl-(S)-propylaminokarbonyloxy)-5β-androstan-17β-karboxylové kyseliny g methylesteru 14β-amino-3β-hydroxy-5β-androstan-17βkarboxylové kyseliny se rozpustí pod atmosférou argonu v 30 ml methylenchloridu. Přidá se 0,9 g karbonyldiimidazolu a reakční směs se míchá 6 hodin při teplotě místnosti.

Přidá se 1,35 ml (S) 2-amino-l-butylalkoholu a roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 dnů. Reakce je sledována chromatografií v tenké vrstvě. Rozpouštědlo se zkoncentruje na 10 ml a směs se udržuje při míchání po dobu 2 dnů a potom se zředí vodou a extrahuje se methylenchloridem. Organické fáze se promyjí vodou a nasyceným roztokem NaCl,

126 suší se přes síran sodný a odpaří se do sucha.

Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu eluováním směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (96:4:0,4) a získá se 0,7 g čistého methylesteru 143-azido-33-[(1·hydroxymethyl-(S)-propylaminokarbonyl)oxy]-5p-androstan-17 βkarboxylové kyseliny.

0,5 g výše uvedeného derivátu se rozpustí v 5 ml methylenchloridu a při teplotě 0 ° se přidá 130 mg dimethylaminopyridinu a 0,16 ml anhydridu kyseliny octové.

Reakční směs se míchá při teplotě 0 ° po dobu 10 minut a potom se alkalizuje amoniakem (28% roztok) a míchá se ještě další hodinu.

Po extrakci methylenchloridem se organická fáze promyje ^Jvodou a nasyceným roztokem NaCl, suší na síranu sodném a odpařením do sucha se získá konečný produkt, methylester 14 β-amino-3 β-(1’-acetoxymethyl-(S)-propylaminokarbonyloxy)5β-androstan-17β-karboxylové kyseliny.

Příklad 57 β-hydroxy-17 p-aminomethyl-3 β-(1'-hydroxymethyl-(R)propylaminokarbonyloxy)-5β-androstan

Roztok 6 ml methylenchloridu obsahující 100 mg 3β,143-dihydroxy-20-N-dibenzylamino-21-norpregnanu se přidá pod atmosférou argonu k 60 mg karbonyldiimidazolu a reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny.

Přidá se 95 ml (R) 2-amino-l-butylalkohol a směs se míchá při teplotě místnosti 5 dnů.

Po odpařeni do sucha se zbytek zpracuje methylenchloridem. Organické fáze se promyjí vodou (třikrát), suší se přes síran sodný a odpaří se do sucha.

Surový zbytek se čistí chromatografií na silikagelu, eluováním směsí methylenchloridu a methylalkoholu (98:2) a získá se 0,12 g čistého 14β-hydroxy-3β-[(1*-hydroxymethyl“ (R)-propylaminokarbonyl)oxy]-5β-21-norpregnanú.

127

0,54 g Pd(OH)₃ se přidá pod atmosférou dusíku k roztoku 54 ml hydrazinu obsahujícího 0,7 g výše uvedeného norpregnanového derivátu a reakční směs se refluxuje jednu hodinu a potom se filtruje na celitu a promyje se methylalkoholem. Filtrát se odpaří do sucha a surový produkt takto získaný se čistí chromatografií na silikagelu eluováním směsí methylenchloridu, methylalkoholu a amoniaku (90:10:1) a získá se konečný produkt, 14p-hydroxy-17p-aminomethyl-3p-(l hydroxymethyl-(R)-propylaminokarbonyloxy)-5 β-androstan.

Příklad 58

3β-O-(piperidinoformyl)ouabaigenin

3,5 g di-O-acetyloubaigeninu se rozpustí v 210 ml methanolu a k takto vzniklému roztoku se přidá 8 ml IN vodného roztoku uhličitanu sodného. Směs se míchá při teplotě místnosti 1 hodinu, přidá se 3,7 ml stejného vodného roztoku uhličitanu sodného, směs se míchá další 2 hodiny, přidá se 0,6 ml vodného roztoku uhličitanu sodného a směs se míohá další hodinu.

Surový zbytek se extrahuje methylenchloridem a čistí se chromatografií eluováním směsí methylenchloridu a methylalkoholu (95:5) a získá se 0,5 g methylesteru kyseliny isodigitoxigeninové a 2 g 11-O-acetyl-l,19-0-isopropylidenouabaigeninu.

11-0-acetyl-l,19-0-isopropylidenouabaigenin získaný postupem uvedeným výše (1,2 g) se rozpustí v 11 ml bezvodého « pyridinu při teplotě místnosti. Pomalu a postupně se během 6 hodin přidá 0,8 g p-nitrofenylchlorforraiátu a reakční směs se extrahuje ethylacetátem, promyje se zředěným vodným roztokem uhličitanu sodného a potom destilovanou vodou a nasyceným roztokem NaCl.

Po odpaření se zbytek převede do toluenu za účelem odstranění zbývajícího pyridinu a po čištění sloupcovou chromatografií na silikagelu eluováním směsí methylenchloridu

128 a methylalkoholu (95:5) se získá 1 g 3-0-(4-nitrofenyloxy)acetyl-1,19-0-isopropylidenouabaigeninu.

Výše uvedený uhličitan (350 mg) se rozpustí v 3,5 ml dimethylformamidu a přidá se 56 μΐ piperidinu. Potom se míchá roztok 1 hodinu, extrahuje se ethylacetátem, promyje zředěným vodným roztokem hydrogenuhličitanu, vodou a po vysušení se získá 325 mg surového krystalického zbytku, který je identifikován jako 3p-0-(piperidinoformyl)-ll-0-acetyl-l,19O-isopropylidenouabaigenin.

Připraví se suspenze 325 mg výše uvedeného acetonidu v

1,8 ml kyseliny octové (60% vodný roztok) a tato suspenze se míchá 24 hodin při teplotě místnosti, čímž se získá homogenní suspenze.

Přidá se toluen a směs se odpaří (dvakrát). Zbytek se čistí chromatografií na siiikagelu na Lichroprepově koloně, eluováním směsí methylenchloridu a methylalkoholu (93:7) a získá se 224 mg 3p-0-(piperidinformyl)-ll-0-acetyl-ouabaigeninu.

Výše uvedený acetylovaný derivát (110 mg) se rozpustí v 1 ml methylalkoholu. K roztoku se přidá 0,8 ml triethylaminu a 76 μΐ vody a reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 dny.

Po odpaření do sucha a čištění chromatografií na Dynamexově silikagelové koloně eluováním směsí methylenchloridu a methylalkoholu (93:7) a po krystalizaci z ethylacetátu se získá čistý 3p-0-(piperidinoformyl)-ouabaigenin.

Stanovení farmakologické účinnosti

Prohlašuje se, že positivní inotropní účinek kardiotonické steroidní sloučeniny je způsoben jejím účinkem na pohyb Na⁺, K⁺ v buněčné membráně svalových vláken srdečních svalových buněk. Kardiotonické steroidy inhibují adenosintrifosfatásu, aktivovanou Na⁺ a K⁺, což opačně vede ke

129 zvýšení nitrobuněčného kalcia. Následkem toho dochází k aktivaci kontraktivního mechanismu. Viz obecně Goodman a Gilman, The Pharroacolocfical Basis of Therapeutics. kapitola 34 (8. vydání, 1990).

Positivní inotropní účinek nové chemické sloučeniny se stanoví jak v izolovaných srdečních tkáních, tak v celých živočišných modelech. Pomocí izolované tkáně lze provádět přímé měření inotropního potenciálu sloučeniny, protože systém je prakticky bez metabolických, neurohormonálních a absorpčních interferencí, které ovlivňují reakci tkáně. Zkoušky in vivo umožní provést stanovení, které bere v úvahu ty fyziologické parametry, nedostávající se ve zkoušce izolované tkáně.

Ve zkoušce inotropní účinnosti se používají papilární svalové proužky ze srdcí morčat. Ačkoliv papilární sval vykonává převážně funkci srdeční chlopně, základní kontraktivní odezva projevovaná tímto svalem je podobná ventrikulárnímu svalu. Ve zkoušce se segment papilárního svalu vyřezaný ze srdce morčete suspenduje v ústrojné lázni, která zajistí podmínky pro řízení teploty a vodné prostředí obsahující substráty nezbytné pro buněčnou funkci. Po připojení silového elektromechanického měniče k volnému konci svalového pásku tak, že sval je zavěšen mezi pevný bod a elektromechanický měnič a použitím elektrických stimulů je možné měřit zkrácení nebo kontrakci jako reakci na různé koncentrace testovaných sloučenin. Při obvyklých podmínkách je positivní inotropie definována jako zvýšení kontraktilní síly vyvolané neznámým činidlem a data označují obvykle koncentraci léčiva nezbytného ke způsobení 50% zvýšení kontraktilní síly od základu (EC₅₀).

Určení positivní inotropie in vivo se provede dvěma způsoby. První způsob je velmi podobný měření popsanému pro způsob in vitro, ve kterém se přímé měřidlo přišije k vnějšku

130 srdce, aby se stanovila kontraktilní síla. Ve druhém protokolu se silový měnič vloží do levé srdeční komory ke stanovení změn tlaku. Myokardiální kontraktilní síla je korelována k rychlosti změny tlaku v levé komoře a je vyjádřena vztahem +dP/dt. V každém případě, data vyjadřují množství léčiva nutného k dosažení úrovně účinku 30% zvýšení v kontraktilitě nebo +dP/dt (tj. ED₃₀) a jsou vyjádřena jako mg léčiva/kg hmotnosti živočicha.

Farmaceutické prostředky

Nové urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle vynálezu se podávají lidem nebo ostatním savcům různými cestami, zahrnujícími, nikoliv však s omezením, orální dávkové formy a injekce (intravenózní, intramuskulární, intraperitoneální a subkutánní). Odborníkem v oboru může být formulována řada dalších dávkových forem obsahujících nové urethan obsahujících aminosteroidy podle vynálezu, za použití vhodných farmaceutických excipientů jak je uvedeno dále. Se zřetelem na pacienta jsou zejména výhodné orální dávkové formy.

Termín farmaceutický prostředek zde znamená kombinaci zahrnující bezpečné a účinné množství aktivní složky na bází urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny nebo jejich směsí a farmaceuticky použitelných excipientů.

Fráze bezpečné a účinné množství zde znamená množství sloučeniny nebo prostředku dostatečné k tomu, aby byly v podstatné míře positivně modifikovány symptomy a/nebo stavy, které mají být léčeny, ale tak malé, aby nebyly vyvolány vážné postranní účinky (při racionálním poměru užitek/riziko). Bezpečné a účinné množství aktivní složky pro použití ve farmaceutickém prostředku které se použije ve způsobu podle vynálezu záleží na konkrétním stavu který se má léčit, věku a fyzickém stavu pacienta, který se má léčit, na

131 vážnosti stavu, na době trvání léčby, druhu dalších nemocí, konkrétní použité aktivní složce, konkrétních použitých farmaceuticky účinných excipientech a podobných faktorech.

Termín farmaceuticky použitelný excipient zde znamená jakýkoliv fyziologicky inertní, farmakologicky inaktivní materiál známý odborníkům v oboru, který je kompatibilní s fyzikálními a chemickými charakteristikami aktivní složky na bázi urethan obsahujících aminosteroidních sloučenin vybraných pro použiti podle vynálezu. Farmaceuticky použitelné excipienty zahrnují, nikoliv však s omezením, polymery, pryskyřice, plastifikátory, plniva, pojivá, mazadla, kluzné prostředky, dezintegrační činidla, rozpouštědla, spolurozpouštědla, pufry, povrchově aktivní látky, konzervační prostředky, sladidla, aromatizační prostředky, barviva nebo pigmenty a viskozitní činidla.

Termín orální dávková forma zde znamená farmaceutický prostředek, který je určen k systematickému podání jedinci zavedením uvedeného prostředku do gastrointestinálního traktu jedinci ústy uvedeného jedince. Pro účely tohoto vynálezu forma použitá pro zavedení může být tableta povlečená nebo nepovlečená, roztok, suspenze nebo kapsle, povlečené nebo nepovlečené.

Termín injekce zde znamená jakýkoliv farmaceutický prostředek určený k systematickému podání člověku nebo jinému savci, kdy se dodá roztok nebo emulze obsahující aktivní složku propíchnutím kůže uvedeného jedince za účelem zavedení uvedeného roztoku nebo emulze do cirkulačního systému jedince bud intravenózní, intramuskulární, intraperitoneální nebo subkutánní injekcí.

Rychlost systémového zavedení se může uspokojivě kontrolovat odborníkem v oboru úpravou kterékoliv z následujících veličin:

132 (a) vlastní aktivní složky, (b) farmaceuticky použitelných excipientů; pokud různorodost neruší účinnost vybrané konkrétní aktivní složky, (c) typem excipientů a vhodnou hustotou a permeabilitou (bobtnací vlastnosti) uvedených excipientů, (d) časově závislých podmínek excipientů samotného a/nebo s jinými excipienty, (e) velikostí částice granulované aktivní složky a (f) podmínek závislých na pH excipientů.

Farmaceuticky použitelné excipienty zahrnují, nikoliv však s omezením, pryskyřice, pojivá, plniva, mazadla, rozpouštědla, kluzné prostředky, dezintegrační činidla, spolurozpouštědla, povrchvě aktivní činidla, konzervační činidla, sladidla, aromatizační prostředky, pufry, barviva nebo pigmenty a viskozitní činidla.

Výhodným rozpouštědlem je voda.

Jako aromatizační činidla se používají činidla popsaná v Remington's Pharmaceutical Sciences. 18. vydání, Mack Publishing Company, 1990, str. 1288-1300, uvedené zde jako odkaz. Farmaceutické prostředky vhodné pro použití obvykle obsahují 0-2 % aroamtizačních činidel.

Jako barviva a pigmenty se používají činidla popsaná v Handbook of Pharmaceutical Excipients. str. 81-90, 1986, American Pharmaceutical Association & the Pharmaceutical Society of Great Britain, uváděné zde jako odkaz. Farmaceutické prostředky vhodné pro použití obvykle obsahují 0-2 % barviv nebo pigmentů.

Výhodná spolurozpouštědla zahrnují, nikoliv však s omezením, ethanol, glycerin, propylenglykol, polyethylenglykoly. Farmaceutické prostředky podle vynálezu

133 zahrnují 0-50 % spolurozpouštědel.

Výhodné pufry zahrnují, nikoliv však s omezením, kyselinu octovou, boritou, uhličitou, fosforečnou, jantarovou, maleinovou, vinnou, citrónovou, benzoovou, mléčnou, glycerovou, glukonovou, glutarovou, glutamovou a jejich sodné, draselné a amonné soli. Zvlášt výhodné jsou kyselina fosforečná, vinná, citrónová a octová a jejich soli. Farmaceutický prostředek podle vynálezu obvykle obsahuje 0-5 % pufru.

Výhodná povrchově aktivní činidla zahrnují, nikoliv však s omezením, estery mastných kyselin a polyoxyethylensorbitolu polyoxyethylenmonoalkyletery, monoestery sacharózy, estery a ethery lanolinu, alkylsulfátové soli, sodné, draselné a amonné soli mastných kyselin. Farmaceutické prostředky podle vynálezu obsahují 0-2 % povrchově aktivních látek.

Výhodná konzervační činidla zahrnují, nikoliv však s omezením, fenol, alkylestery parahydroxybenzoové kyseliny, o-fenylfenolbenzoovou kyselinu a jejich soli, kyselinu boritou a její soli, kyselinu sorbovou a její soli, chlorbutanol, benzylalkohol, thimerosal, fenylmercuricacetát a nitrát, nitromersol, benzalkoniumchlorid, cetylpyridiniumchlorid, methylparaben a propylparaben. Zvlášt výhodné jsou soli kyseliny benzoové, cetlpyridiniumchlorid, methylparaben a propylparaben. Prostředky podle vynálezu obvykle obsahují 0-2 % konzervačních činidel.

Výhodná sladidla zahrnují, nikoliv však s omezením, sacharózu, glukózu, sorbitol, manitol a aspartam. Zvlášt výhodně se používá sacharóza a sacharin. Farmaceutické prostředky podle vynálezu zahrnují 0-5 % sladidel.

Výhodná viskozitní činidla zahrnuji, nikoliv však s omezením, methylcelulózu, karboxymethylcelulózu sodnou,

134 hydroxypropylmethylcelulózu, hydroxypropylcelulózu, alginát sodný, karbomer, povidon, arabskou gumu, guarovou gumu, xanthanovou gumu a tragankant. Zvlášť výhodně se používá . methylcelulóza, karbomer, xanthanová guma, guarová guma, povidon, karboxymethylcelulóza sodná a křemičitan hořečnatohlinitý. Prostředky podle vynálezu zahrnují 0-5 % viskozitních činidel.

Výhodná plniva zahrnují, nikoliv však s omezením, laktózu, mannitol, sorbitol, trojsytný fosforečnan vápenatý, dvojsytný fosforečnan vápenatý, slisovatelný cukr, škrob, síran vápenatý, dextro a mikrokrystalickou celulózu. Přípravky podle vynálezu obsahují 0-75 % plniv.

Výhodná mazadla zahrnují, nikoliv však s omezením, stearát hořečnatý, kyselinu stearovou a talek. Farmaceutické prostředky podle vynálezu zahrnují 0,5-2 % mazadel.

Výhodná kluzná činidla zahrnují, nikoliv však s omezením, talek a koloidní oxid křemičitý. Prostředky podle vynálezu zahrnují 1-5 % kluzných činidel.

Výhodná dezintegrační činidla zahrnují, nikoliv však s omezením škrob, sodný glykolát škrobu, crospovidon, croscarmelosu sodnou a mikrokrystalickou celulózu. Farmaceutické prostředky podle vynálezu zahrnují 4-15 % dezintegračních činidel.

Výhodná pojivá zahrnují, nikoliv však s omezením akacii, tragakant, hydroxypropylcelulózu, předgelatinizovaný škrob, želatinu, povidon, hydroxypropylcelulózu, hydroxypropylmethylcelulózu, methylcelulózu, roztoky cukru, jako je sacharóza nebo sorbitol a ethylcelulózu. Prostředky podle vynálezu obsahují 0-10 % pojiv.

Sloučeniny podle vynálezu zahrnují 0,1 až 99,9 hmot. %

135 farmaceutických prostředků podle vynálezu. Výhodně sloučeniny podle vynálezu zahrnují 20 až 80 hmot. % farmaceutických prostředků podle vynálezu.

Podle toho farmaceutické prostředky podle vynálezu zahrnují 15-95 % aktivní složky na bázi urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny nebo směs aminosteroidních sloučenin, 0-2 % aromatizačních činidel, 0-50 % spolurozpouštědel, 0-5 % pufru, 0-2 % povrchově aktivních činidel, 0-2 % konzervačních činidel, 0-5 % sladidel, 0-5 % viskozitních činidel, 0-75 % plniv, 0,5-2 % mazadel, 1-5 % kluzných činidel, 4-15 % dezintegračních činidel a 1-10 % pojiv.

Výběr farmaceuticky použitelného excipientu, který se použije ve spojení s urethan obsahujícími aminosteroidními sloučeninami podle vynálezu je určen způsobem, kterým má být sloučenina podána. Jestliže má být sloučenina podána ve formě injekce, použije se jako farmaceutický nosič výhodně fyziologický roztok, jehož pH je upraveno na hodnotu 7,4. Vhodné farmaceuticky použitelné nosiče pro topické podání zahrnují ty, jež jsou vhodné pro použití v krémech, gelech, náplastích a pod.

Výhodný způsob podání urethan obsahujících aminosteroidních sloučenin je orální podání. Výhodné jednotkové dávkové formy zahrnují tablety, kapsle a pod., obsahující bezpečné a účinné množství množství urethan obshujíci aminosteroidní sloučeniny podle vynálezu. Farmaceuticky použitelné nosiče vhodné pro přípravu jednotkových dávkových forem pro orální podání jsou známé v oboru. Jejich výběr bude záviset na sekundárních činitelích, jako je chuť, cena a stabilita, které nejsou kritické pro účely tohoto vynálezu.

Pro orální podání se používají různé dávkové formy,

136 zahrnující pevné dávkové formy, jako jsou tablety, kapsle, granule a sypané prášky. Tyto orální dávkové formy obsahují bezpečné a účinné množství, výhodně 0,25 mg až 5 mg urethan obsahujícího aminosteroidu. Zvlášf výhodně tyto orální dávkové formy obsahují 0,5 až 1,0 mg urethan obsahujícího aminosteroidu. Tablety mohou být stlačené, rozmělňované, potažené střívkem, potažené cukrem, potažené filmem nebo násobně stlačené, obsahující vhodná pojivá, mazadla, ředidla, desintegrační činidla, činidla ovlivňující tekutost a tavná činidla. Kapalné orální dávkové formy zahrnují vodné roztoky, emulze, suspenze, roztoky a/nebo suspenze rekonstituované z neeffervescentních granulí a effervescentní přípravky rekonstituované z effervescentních granulí, obsahující vhodná ’ rozpouštědla, konzervační činidla, emulgační činidla, suspenzační činidla, ředidla, sladidla, tavná činidla, zbarvující činidla a aromatizační činidla. Výhodné nosiče pro orální podání zahrnují želatinu, propylenglykol, bavlníkový olej a sezamový olej.

Prostředky podle vynálezu se také mohou podat subjektu lokálně, tj. položením nebo rozprostřením přípravku na epidermální nebo epitheliální tkáň subjektu. Takové přípravky zahrnují např. masti, krémy, roztoky, gely a pevné látky.

Tyto lokální přípravky obsahují bezpečné a účinné množství, výhodně 0,5 mg až 2,0 mg urethan obsahujícího aminosteroidu. Vhodné nosiče pro lokální podání výhodně zůstávají na místě kůže jako kontinuální film a ochranná látka se odstraní pocením nebo ponořením do vody. Obvykle je nosič látka organické povahy, která je schopná dispergovat nebo rozpouštět v sobě urethan obsahující aminosteroid. Nosič může také zahrnovat farmaceuticky použitelná změkčovadla, emulgátory, zahušůovadla a rozpouštědla.

Přípravky podle vynálezu mohou být také podávány formou inhalace. Takové přípravky se připraví ve formě obsahující rozpouštědlo, jako je voda nebo glykol, konzervační

137 prostředky, jako je methyl nebo propylparaben a hnací činidla, jako je dusík nebo oxid uhličitý.

Konečně, přípravky podle vynálezu mohou být podávány subkutánní implantací tvořenou silikonovým elastomerem, kopolymery ethylen-vinylacetát nebo koplymery kyseliny mléčné a kyseliny glykolové.

Pro ilustraci jsou dále uvedeny způsoby přípravy farmaceutických prostředků obsahujících nové urethan obsahující 14-aminosteroidní sloučeniny podle vynálezu, které však v žádném případě rozsah vynálezu neomezuji.

Příklady farmaceutických přípravků

Příklad 1

Standartní orální dávková forma (tablety) obsahující hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[2-(acetýloxy)1-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17karboxylovou kyselinu má následující složení

Aktivní složka_Množství hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)- 1,0 mg ³“[[[[2-(acetyloxy)-1-methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17-karboxylové kyseliny

Excipientv

mikrokrystalická celulóza	28,5 mg
laktóza obsahující vodu	67,2 mg
krospovidon	3,0 mg
stearát hořečnatý	0,3 mg

Postup přípravy: (pro 10 000 tablet)

138

1) 10,0 g léčiva, 285,0 g mikrokrystalické celulózy, 672,0 g laktózy a 30,0 g krospovidonu se smíchá v Patterson-Kelleyově (PK) nebo jiném vhodném mísiči,

2) výše uvedená směs se smíchá se 3,0 g stearátu hořečnatého v PK nebo jiném vhodném mísiči,

3) výše uvedená finální směs se slisuje do 100,0 mg tablet na vhodném tabletovacím zařízení.

Příklad 2

Paranterální dávková forma obsahující hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-1-piperidinyl]karbonyl]“ oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17-karboxamidu a vhodná pro použití jako intravenozní injekce má následující složení:

Aktivní složka_Množství hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3- 1,0 mg (acetyloxy)-1-piperidinyl ]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu

Excipíentv mannitol kyselina citronová/citrát sodný

200,0 mg množství dostatečné k úpravě pH na 5,5 až 6,5

Postup přípravy: (pro 1 000 lahviček)

1) 1,0 g léčiva, 200,0 g mannitolu a dostatečné množství citrátu sodného a kyseliny citrónové se rozpustí v 1 200,0 ml sterilní, demineralizované vody pro injekce,

2) výše uvedený roztok se filtruje přes 0,22 mikronový

139 sterilní membránový filtr,

3) 2,2 ml výše uvedeného sterilního roztoku se naplní do skleněných lahviček Typ I a potom se liofylizuje ve vhodném lyofilizéru,

4) lahvičky se po lyofilizaci uzavřou brombutylovou nebo jinou vhodnou zátkou a utěsní se. Lyofilizovaný produkt se rekonstituuje 2,0 ml sterilní vody pro injekce okamžitě před použitím.

Příklad 3

Orální dávková forma s postupným uvolňováním (tablety) obsahující hydrochlorid methylesteru (3β(ε),5β,14β,17β)-14amino-3-[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny má následující složení:

Aktivní složka__Množství hydrochlorid methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)- 5,0 mg

14-amino-3-[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny

Excipientv

hydroxypropylmethylcelulóza	120,0 mg
laktóza obsahující vodu	120,0 mg
stearát hořečnatý	12,0 mg
koloidní oxid křemičitý	4,0 mg

Postup přípravy: (pro 10 000 tablet)

1) 50 g léčiva, 1,2 kg hydroxypropylmethylcelulózy a 1,2 kg laktózy se smíchá dokonale v Patterson-Keleyově nebo jiném vhodném mixéru se dvěma plášti,

2) k výše uvedená směsi se přidá 120 g stearátu hořečnatého a 40 g koloidního oxidu křemičitého a směs se smíchá ve vhodném

't

140 mixéru,

3) výše uvedená směs se lisuje do tablet hmotnosti 261,o mg na vhodném tabletovacím lisu.

Kromě tří výše uvedených příkladů může být léčivá aktivní složka formulována do řady různých dávkových forem:

1) farmaceutický aerosol obsahující rozpouštědlo (např. vodu, glykoly), konzervační činidla (methyl nebo propylparabeny) a hnací činidla (dusík, oxid uhličitý) nebo ostatní vhodné excipienty,

2) rektální čípek obsahující kakaové máslo nebo polyethylenglykoly,

3) subkutánní implantát obsahující silikonové elastomery, ethylen-vinyl aoetátové polymery, kopolymery kyseliny mléčné a kyseliny glykolové a hydrogely nebo ostatní vhodné polymery,

4) obchodně dostupná implantovatelná zařízení,

5) transdermální systém obsahující silikonovou kapalinu v membráně z kopolymeru ethylen-vinylacetát nebo ostatní vhodné ingredienty pro dodávání s nebo bez pomoci iontoforézy,

6) bukální mukoadhezivní náplasti obsahující hydrokoloidní polymery (hydroxyěthylcelulóza, hydroxypropylcelulóza, povidon) a ostatní vhodné polymery.

Způsoby léčby

Termín městnavé srdeční selhání” zde znamená postupující nemoc, při které je hemodynamická kapacita a strukturální integrita samotného srdce více a více a nevratně

141 ohrožena. Postupující městnavé srdeční selhání je podle symptomů pacienta klasifikováno podle New York Heart Association (NYHA) do 4 tříd.

Z. Pacienti s nemocí srdce ale bez omezení tělesné činnosti. Obvyklá tělesná činnost nezpůsobuje nepřiměřenou únavu, bušení srdce nebo angínovou bolest.

II. Pacienti s nemocí srdce, která vede ke slabě omezené tělesné činnosti. Jsou bez potíží v klidu. Obvyklá tělesná činnost vede k únavě, bušení srdce, dušnosti nebo k angínové bolesti.

III. Pacienti s nemocí srdce, která vede ke značnému omezení tělesné činnosti. Jsou bez potíži v klidu. Malá tělesná činnost způsobuje únavu, bušení srdce, dušnost nebo angínovou bolest.

IV. Pacienti s nemocí srdce, která vede k neschopnosti provádět jakoukoliv tělesnou činnost bez problémů. Syndromy srdeční nedostatečnosti a anginální syndrom se dostavují i při odpočinku. Jestliže pacient koná jakoukoliv tělesnou činnost, problémy se zvyšují. NYHA III. a IV. třídy jsou také počítány jako městnavé srdeční selhání a jsou často léčeny podáním sloučenin, které zvyšují srdeční kontraktilitu uplatněním positivního inotropního účinku. Základní sloučenina pro zvýšení srdeční kontraktility je digoxin, podávaný orálně. Léčení symptomů zjevného městnavého srdečního selháni podáním inotropů ke zvýšení minutového oběhu srdečního splní metabolické potřeby těla a může zlepšit životni podmínky pacienta s městnavým srdečním selháním, protože srdce může lépe zásobovat metabolickou potřebu těla. Konvenční znalost nicméně indikuje, že inotrop, jako je digitális, může zvýšit úmrtnost, protože inotropní působení způsobuje přílišnou zátěž srdce. Navíc, digitális,má nízký poměr mezi terapeutickou a toxickou dávkou a podávání

142 digitális ve funkčních klasifikacích NYHA předcházejících

III. třídu nemusí být rozumné.

Navíc, o bypiridinovém inotropu, Milrinonu se uvádí, že zhoršuje ventrikulární arytmii a může zvýšit úmrtnost. Viz DiBianco, R. a kol. A Comparsion of Oral Milrinone, Digoxin and Their Combination in the Treatment of Patients with Chronic Heart Failure, N. Engl. J. Med. 320:677 (1989).

Termín hemodynamický’· se zde používá pro mechanickou zůsobilost srdce. Počáteční hemodynamický následek srdečního selhání spočívá ve snížení tepového objemu, který určuje množství krve vytlačované každým úderem srdce. Srdce potom toto vyrovnává zvýšením minutového objemu srdečního, aby se udržel průtok k vitálním orgánům. Jak se srdeční selhání zvyšuje, nitrosrdeční plnící tlaky se zvýší, stejně tak jako plicní a žilní tlaky. Srdce je stále méně a méně schopné zajišťovat požadovaný minutový objem srdeční.

Termín strukturální poškození se zde používá pro mikroskopické a makroskopické změny v srdci osoby trpící městnavým srdečním selháním. Strukturálně, na mikroskopické úrovni dochází k následujícím změnám: Raný stupeň srdeční hypertrofie je charakterizován morfologicky zvýšením velikosti miofibril a mytochondrie a rovněž zvětšením mitochondrie a jádra. Svalové buňky jsou větší než normálně, ale buněčné uspořádání je z velké části uchováno. S postupující hypertrofií, preferenční zvýšení velikosti řady „ specifických organel jako je mytochondrie a rovněž nepravidelný přídavek nových kontraktilních prvků v

- lokalizovaných oblastech buňky vedou k lehkým abnormalitám buněčného uspořádání a tvaru. Sousední buňky se mohou lišit ve stupni zvětšení.

Buňky podrobené dlouhotrvající hypertrofií ukazují zřetelné trhliny v buněčné organizaci, jako je výrazné

143 zvětšení jádra s vysoce laločnatými membránami, které přemisťují miofibrily a dochází k poruše registrace normálních pásů Z. Dřívější preferenční zvýšení v mitochondrii je nahrazeno převahou objemu miofibril. Poslední stupeň hypertrofie je charakterizován smrtí buněk a ztrátou kontraktilních prvků s výraznou trhlinou vazeb Z, značným roztažením normálního paralelního uspořádání sarkomérů, rozšířením a zvýšením zvlnění kanálků T a nahrazením kontraktilních prvků fibrózní tkání. Viz Braunwald, Heart Disease: A Textbook of Cardiovascular Medicine. Vol. 1 (3. vyd., 1988). Tyto mikroskopické změny se projeví na makroskopické úrovni srdeční hypertrofii nebo zvětšením srdce. Hypertrofní srdce se stává méně účinným následkem mikroskopických změn způsobujících ztrátu kontraktilních prvků ukládáním vláken a pacientovy klinické symptomy se zhoršují jak pacient postupuje každou NYHA klasifikací.

Sloučeniny podle vynálezu zvyšují srdeční kontraktilitu. Dávky obsahují v průměru 0,25 mg až 5 mg za den, jak stanoví ošetřující lékař, podle způsobu podání, síly městnového srdečního selhání a trvání léčby.

Pro ilustraci užitečnosti nových urethan obsahujících aminosteroidních sloučenin pro léčbu městnavého srdečního selháni jsou uvedeny následující příklady, které rozsah vynálezu v žádném případě neomezují.

Klinické příklady

Příklad 1

Obézní, 65 let stará žena s bílou pletí s 20ti letou anamnézou cukrovky bez závislosti na inzulínu a hypertenzí a srdečním infarktem před 2 lety byla přijata na koronární jednotku po 12 hodinách příznaků akutního dolního infarktu myokardu. Její pobyt v nemocnici je komplikován akutním

144 plicním edémem, který se projevuje výraznou dušností i v klidu, ortopnií, jugulární venózní distensií a bilaterálními šelesty; roztažené srdce a bilaterální infiltráty na CXR. Její plicní kapilární tlak je 35 mm Hg.

Byla léčena morfinem, kyslíkem, intravenózně nitroglycerinem, diuretikem a intravenózně 0,25 mg hydrochloridu (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-1-piperidinyl]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17-karboxamidu, který se podával každé 4 hodiny po dobu 3 dnů a potom 0,25 mg hydrochloridu (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-1piperidinyl]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu podávaným orálně jedenkrát za den. Po tomto režimu se její stav natolik zlepšil, že mohla být po 10 dnech propuštěna s mírnou dušností na námahu (mírné městnavé srdeční selhání), poté následovala ambulantní léčba diuretiky, inhibitorem ACE, nitroglycerinem a orálně 0,25 mg hydrochloridu (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3-(acetyloxy)-lpiperidinyl]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan-17karboxamidu denně.

Příklad 2 letý pacient tmavé pleti s anamnézou dlouhotrvající nekontrolované hypertenze a jednoroční anamnézou mírného (NYHA třída III) městnavého srdečního selhání s několika záchvaty s přechodným bezvědomím během přechodných 2 týdnů. Také si stěžuje na námahu a dusnost při oblékání. Použitá léčiva zahrnují digoxin (0,25 mg/den), lasix a inhibitor ACE. Pacient má srdeční rytmus S3, otok kotníku, levou ventrikulární hypertrofii a příležitostné PVC na EKG. Dodatečný rozvoj ukázal četnou multifokální ventrikulární ektopii a sled nestálé ventrikulární tachykardie na Holterově zařízení, frakční ejekci 30 % radionuklidovou ventrikulografií a úroveň digoxinu v seru 2,2 ng/ml. Arytmie a přechodné bezvědomí jsou pokládány za výsledek toxicity digitálisu a léčivo je vysazeno. Orálně se podává denně 0,25

145 g hydrochloridu methylesteru (3P(S),5p,14p,173)-14-amino-3[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny. Vzhledem k přetrvávání únavy a dušnosti, je dávka na příštích 6 týdnů zvýšena na 1 mg denně bez dalších záchvatů bezvědomí, sníží se PVC a nedochází k nestálé ventrikulární tachykardii při opakované zkoušce na Holtarově zařízení a zvýší se funkční ejekce na 38 %. Jeho dušnost při oblékání se vyřešila a pacient je schopen pracovat na zahradě s občasným výskytem dušnosti (NYHA, třída II). Po jednom roce se podmínky nezměnily.

Příklad 3 létá, předtím zdravá čínská žena s dvouměsíční anamnézou dušnosti spojenou s námahou. Neexistuje žádná anamnéza na srdeční nemoc v rodině, je nekuřačka, nepije alkohol. Tělesný stav je normální s výjimkou tachykardie a laterálně přesunutého bodu maximálního impulsu. Srdeční frekvence 105 a nespecifické, zploštěné T-vlny jsou pozorovány na EKG a CXR ukazuje zvětšené srdce.

Echokardiogram ukazuje biventrikulární zvětšení s globální hypokinezií, ejekční frakce je 40 %. Chlopeň normální, ischemie nezjištěna. Stanovena diagnóza idiopatické rozšířené kardiomyopatie, NYHA, třída I. Počáteční léčba s inhibitorem ACE způsobuje nesnesitelný kašel a je proto přerušena. Orálně se podává 1 mg hydrochloridu methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)14-amino-3-[[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-: karboxylové kyseliny dvakrát denně a během příštího měsíce se schopnost cvičit zlepšila. Také došlo ke zvýšení ejekční frakce (echokardiogramem) na 55 % a ke zvýšení času, po který mohla pacientka cvičit.

7Příklad 4 letý muž bílé pleti s anamnézou dvou předchozích srdečních infarktů a jehož otec náhle zemřel ve věku 50 let je léčen isosorbid dinitrátem a beta blokátorem s trvalou

146 angínou po 2 roky. V předešlém měsíci u něho došlo k dušnosti když kráčel do schodů, k edému kotníku a k příležitostné záchvatové noční dušnosti.

Puls 90, 1+ edém kotníku, srdeční rytmus S 3, zvětšené srdce, Kerlyho B čára na CXR. Diagnóza stanovila slabé (NYHA II. třída) městnavé srdeční selhání následkem ischemické srdeční nemoci. Jeho beta blokátor je přerušen postupným snížením, je podán inhibitor ACE a diuretika, městnavé srdeční selhání se však v tomto režimu zhoršilo. Orálně se začal podávat hydrochlorid methylesteru (3 β(S),5β,14β,17β)3-[[C[2-(acetyloxy)-l-fenylethyl]amino]karbonyl]oxy]-14amin-N-methyloandrostan-17-karboxamidu ve 4 mg dávce jedenkrát denně. Dušnost a edém se ztratily (NYHA I. třída), srdeční frekvence se snížila na 75, S 3 zmizel, velikost srdce se snížila a překrvení na CXR se ztratilo. Čas, po který mohl pacient cvičit se zvýšil ve zkoušce provedené o měsíc později na 170 vteřin. Během dvou let nedošlo k žádnému zhoršení.

Příklad 5 létá žena tmavé pleti s anamnézou 3 infarktů myokardu a výsledným těžkým (NYHA IV. třída) městnavým srdečním selháním byla v průběhu minulých šesti týdnů čtyřikrát hospitalizována pro akutní dekompenzaci, navzdory léčbě s maximálně tolerovanými dávkami lasixu, isosorbid dinitrátu, digoxinu a inhibitoru ACE. Její symptomy zahrnují edém, dušnost v klidu, ortopnii, značnou únavu a mentální zmatenost. Bylo rozhodnuto přerušit digoxin a zavést léčbu hydrochloridem methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηΐηο-3[[[(2-hydroxy-l-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan“ 17-karboxylové kyseliny. Počáteční dávka (3β,5β,14β,17β)-14amino-3-[[[(2-hydroxy-l-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny byla 0,5 mg a byla podávána orálně jedenkrát denně, ale pak se zvýšila, na 2 mg třikrát

147 denně a byla podávána po dobu dvou měsíců, aby se dosáhlo přiměřené regulace jejích symptomů. Ke konci dvouměsíční periody se ortopnie, zmatenost a edém ztratily. Pacientka měla zlepšenou schopnost k denním činnostem, jako je oblékání, bez dušnosti (NYHA III. třída, mírné městnavé srdeční selhání). Její ejekční frakce se zvýšila z 20 na 35. Její stav zůstal během následujících 3 měsíců stabilní.

Příklad 6

Nedávno (před dvěma měsíci) byl přijat do nemocnice střízlivý, šedesátiletý muž bílé pleti, alkoholik, 30 let kouřící, s tříměsíční anamnézou progresivně se zhoršující dušnosti při námaze, únavou, ortopnoí, edémem a záchvatovou noční dušnosti. Má dušnost i při čištění zubů. Fyzický stav ukazuje na sešlého muže, s mírnou úzkostí, s dýchací frekvencí 30 za minutu a srdečním pulsem 110, tlakem krve 90/50, srdečním rytmem S 3, edémem kolen, jugulární venózní distenzií, zvětšenými játry, břišní vodnátostí, bibasilámím šelestem a zvětšeným srdcem. Rozsáhlé vyšetření ukázalo alkoholika se zánětem jater, chronickou plicní nemocí a mírným (NYHA III. třída) městnavým srdečním selháním následkem toxické (alkoholické) kardiomyopatie. Léčba začala hydrochlorthiažidem, inhibitorem ACE a hydrochloridem methylesteru (3β(S),5β,14β,17β)-14-amino-3-[[[(1-hydroxymethyl-2-methylpropyl)amino]thioxomethyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny, který byl podáván orálně v dávce 0,25 g denně. Jeho stav se rychle zlepšil a během týdne mohl být propuštěn. Po ztrátě 9 kg byl schopný s malou dušnosti (NYHA II. třída) dojít k poštovní schránce. Frekvence dýchání 20, puls 90, S 3 není slyšitelný, edém a šelest zmizely. Zvětšení jater zůstává nezměněno ale břišní vodnatost je slabě snížena, ejekční frakce zvýšena z 32 % na 45 I, velikost srdce snížena.

Příklad 7

148

70ti létá žena bílé pleti se sedavým způsobem života se zvětšeným srdcem na CXR (zjištěno při předchozí léčbě šedého zákalu). Neuvádí jakoukoliv bolest v hrudníku, dušnost, hypertenzi, cukrovku nebo srdeční nemoc. EKG ukazuje na nespecifické změny vln ST-T; standartní klinické laboratorní vyšetření je normální. Zkouška na fyzickou zdatnost je ukončena v důsledku únavy bez stop srdeční nemoci.

Echokardiogram ukazuje biventrikulární zvětšení, chlopně normální, ejekční frakce 30 %. Preventivně dostává hydrochlorid methylesteru (3β(β),5p,14p,17p)-14-amino3-[[C(2-hydroxy-l-fenylethyl)amino]karbonyl]oxy]androstan17-karboxylové kyseliny v dávce obsahující 0,25 mg podávané orálně jedenkrát denně. Její ejekční frakce se zvýšila na 40 % a je bez příznaků v době hospitalizace na chirurgii pro operaci očního zákalu o 5 let později.

- 149

PATENTOVÉ

> ο “5g ϊϋ?

o <= O —4

ZJ rm *** □:

Claims

NÁROKY

Ní nj <o>

σ>

1. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny a jejich farmaceuticky použitelné soli nebo estery obecného vzorce ve kterém

a) R^ znamená (i) COOR₅, kde R₅ znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku obsahující 2 až 6 atomů uhlíku substituovaných aminoskupinou, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu nebo karbocyklický kruh nebo (ii) CHRgOH, kde Rg znamená atom uhlíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo (iii) COR”', kde R'” znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, nižší alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku substituovanou aminoskupinu, nebo dialkylaminoskupinu nebo

150 (iv) CHRgNHY, kde Y znamená atom vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo (v) 5- nebo 6-členný a- nebo β-nenasycenný laktonový kruh, výhodně COOR₅,

b) R₂ znamená (i) -NRyRg, kde Ry nebo R_g, které jsou stejné nebo různé a znamenají atom_vodíku nebo nižší alkylskupinu s 1 .< až 6 atomy uhlíku nebo (ii) OH a

c) R₃ znamená (i) část obsahující urethan, kde R_g, R₁₀, ^Rll' ^Ri2 ^{a R}12a' jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu nebo

151 (ii) část obsahující urethan kde X znamená NR_llz O nebo S, výhodně 0 a R_g, R₁₀, ^R11 ^{a R}12a' které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, R·^ znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, aryl nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená O nebo S, pak jsou uvedené atomy O a S nesubstituovány a (iii) část obsahující urethan kde X znamená 0 nebo S, R’R*’ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární, rozvětvenou nebo cyklickou nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu,

152 heteroarylalkylskupinu, arylskupinu, heteroarylskupinu, substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický kruh, substituovaný nebo nesubstituovaný nasycený heterocyklický kruh nebo substituovaný nebo nesubstituovaný aromatický heterocyklický kruh, přičemž uvedené substituenty jsou vybrány ze souboru který zahrnuje hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkoxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, výhodně vodík nebo rozvětvenou alkylskupinu š 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, heteroarylskupinu, arylskupinu, nasycený heterocyklický kruh, hydroxyalkylskupinu, alkylaminoalkylskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a (iv) část obsahující urethan kde Rg, R_lo, R_i;l a R₁₂ které jsou stejné nebo různé a které znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu, výhodně atom vodíku, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu a fenylskupinu nebo

153 (v) část obsahující urethan kde X znamená NR₁₀, O nebo S a R₉, R·^ a R₁₂z které jsou stejné nebo různé a znamenají atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu; aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu, R₁₀ znamená atom vodíku, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, aryl nebo heteroarylskupinu, výhodně atom vodíku, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu a fenylskupinu a kde dále, jestliže X znamená O nebo S, pak jsou uvedené atomy 0 a S nesubstituovány a

d) R₄ znamená (i) OH nebo (ii) H nebo (iii) 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu

e) R₁₄ znamená

154 (i) OH nebo (ii) H nebo (iii) 0R₁₃, kde R₁₃ znamená monosacharidový cukrový zbytek, acetoxyskupinu, benzoxyskupinu, arylalkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu a

f) Z znamená (i) -CH-, kde a a b znamenají jednoduchou vazbu nebo (ii) =C, kde a nebo b znamenají dvojnou vazbu.
2. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároku 1, kde Rjl znamená C00R₅ a R₅ znamená nižší alkylskupinu s l až 6 atomy uhlíku, R₂ znamená NH₂, R₃ znamená urethan obsahující část obecného vzorce kde Rg, R₁₀, Rn# R₁₂ ^{a R}12a' ^které jsou stejné nebo různé a znamenají vodík, nižší alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu.
3. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 2, kde Rg znamená vodík, R₁₀ znamená vodík, hydroxy nebo acetoxyskupinu, R_X1 a R₁₂ a R_12a znamenají vodík.

155
4. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároku 2, kde Rg znamená vodík, Rj₀ znamená vodík, R·^ znamená vodík, hydroxyalkylskupinu nebo aminoskupinu a R₁₂ znamená nižší alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku nebo vodík a R_12a znamená vodík. ^{J e}
5. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 4, kde R_x znamená COOR₅ a R₅ znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, R₂ znamená NH₂, R₃ znamená urethan obsahující část obecného^vzorce , _

Rn-x

Ř10 kde X znamená ΝΗ_1Χ, O nebo S a R_g, R₁₀, ^R12 ^{a R}12a' ^kter® jsou stejné nebo různé a znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu a R₁₃. znamená vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, arylskupinu a heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená 0 nebo S, pak je uvedený atom 0 nebo S nesubstituovaný.
6. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 5, kde Rg znamená vodík, R₁₀ znamená vodík, R_1;L znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylskupinu nebo

156 hydroxyalkylskupinu a R₁₂ ^{a R}i2a ^znamenaíí vodík.
7. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 6, kde Rj znamená COORg a R₅ znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, R₂ znamená NH₂, R₃ znamená urethan obsahující část obecného vzorce

X rttnÍo * ;-'·......////-.-/ , ,:/ . . r kde X znamená 0 nebo S, R’R’’ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární nebo rozvětvenou nebo cyklickou nižší alkylskupinu, alkylaminoalkylskupinu, substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický kruh, substituovaný nebo nesubstituovaný nasycený heterocyklický kruh nebo substituovaný nebo nesubstituovaný aromatický heterocyklický kruh, kde uvedené substituenty jsou vybrány ze souboru který zahrnuje hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkoxyskupinu, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, arylskupinu, heteroarylskupinu, nasycené heterocyklické kruhy, hydroxyalkylskupinu, aminoskupinu, alkylaminoalkylskupinu, aralkyl nebo heteroarylalkylskupinu.
8. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároku

7, kde X znamená O, R'· znamená vodík, R’ znamená substituovanou nebo nesubstituovanou, rozvětvenou *

nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, výhodně kde R’je substituován hydroxyskupinou, alkoxyskupinou nebo 5 arylalkylskupinou.
9. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků

1 až 8, kde R_x znamená C00R₅ a R₅ znamená nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a R₂ znamená NH₂, R₃ znamená urethan obsahující část obecného vzorce

157 kde R_g, R₁₀, Rj£ a R₁₂, které jsou stejné nebo různé a znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, berizoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu, alkylaminoskupinu nebo arylalkylaminoskupinu.
10. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároku 1, kde R₃ znamená COOR₅íaiRg znamená nižší alkylskupinu.s 1 až 6 atomy uhlíku, R₂ znamená NH₂, R₃ znamená urethan obsahující část obecného vzorce_ kde X znamená NR₁₀, O nebo S a R_g, R_i;l a R^' které jsou stejné nebo různé a znamenají vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, benzoxyskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, acetoxyskupinu, aminoskupinu, fenylskupinu nebo alkylaminoskupinu a R₁₀ znamená vodík, nižší alkylskupinu s 1

158 až 6 atomy uhlíku, arylalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu a kde dále, jestliže X znamená O nebo s, pak jsou uvedené atomy O a S nesubstituované.
11. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 10, které jsou vybrány ze souboru, který zahrnuje: hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-3-[[[[2-(acetyloxy)l-.methylpropyl]amino]karbonyl]oxy]-14-aminoandrostan-17karboxylovou kyselinu, hydrochlorid (3β,5β,14β,17β)-3-[[[3(acetyloxy)-lpiperidinyljkarbonyl]oxy]-14-amino-N-methyíandrostan-17karboxamidu, · hydrochlorid methylesteru (3β(δ).,5β,-14β,17β')-14-βιαίηο-3— [[(3-hydroxy-l-piperidinyl)karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β(ΙΙ) ,5β,14β,17β)--14-3ΐηίηο-3[[(3-hydroxy-l-piperidinylJkarbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny, hydrochlorid (3β(β);5β/14β,17β)-3-[[[[2-(acetyloxy)-lfenylethyl]amino]karbonyl]oxy]-14-amino-N-methylandrostan17-karboxamidu, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[[[(2-hydroxy-l-methylpropyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β(β),5β,14β,17β)-14-αιηίηο-3[[[(1-hydroxymethy1-2-methylpropyl)amino]thioxomethy1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β(δ) ,δβ,^β,^βί-^-βιηίηο^Ε [ E (2-hydroxy-l-f enylethyl) amino jkarbonyl] oxy] androstan-17-karboxylové kyseliny, dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ΐηίηο-3[[[(4-aminofenyl)amino]karbonyl]oxy]androstan-17karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-ηιηίηο-3[ [ [ (2-hydroxyethyl)methylamino]karbonyl]oxy]aňdrostan-17- .Ša.

karboxylové kysel, • '-,CAO';'(''?í -^2..-τϊ ,---- .·>-φ^ίε^!'^::·· ;-. *·..'·_**-·.VI’“.-ίτ · · · ',-· .v',.. --?· . ^i;'. ί?. ':

dihydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-amino-3[ [ [ [ 2-hydroxy-3- (1-piperidinyl)propyl ]amino ]karbonyl ]oxy ] androstan-17-karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β ,5β,14β,17β)-14-amino-3[ [ [ [ 1-( hydroxymethyl )-2-methylpropyl] amino ]karbonyl] oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny, hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-βχηίηο-3[ [ [[l-(hydroxymethyl)propyl]amino]karbonyl]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny, dihydrochlorid methylesteru^;?(3β, 5β, 14β ,17β )-14-amino-3[[(4-( 2-hydroxyethyl) -l-piperazinyl ] karbonyl ] oxy ] -„; * androstan-17-karbóxylové kyseliny, ^f hydrochlorid methylesteru (3β,5β,14β,17β)-14-3ηΰηο-3[ [ (3-hydroxy-l-piperidinyl]karbonyl]oxy]androstan-l7karboxylové kyseliny, dihydrochlorid 14p-amino-3p-[(4'-hydroxy-1'-piperidinyl)karbonyloxy]-20β-hydroxypregnan,

14 β-hydroxy-a β- [ (4’-amino-1’-piperidinyl) -karbonyloxy ] karden-20 (22) -olid,+ .31 NIS VIA úH3AmsÁW.gya avyo: í .xi ? o oi§oa 2 δ B Č 9 Q
12β, 14p-dihydroxy-3f - [ (4 ’ -amino-1 ’ -piperidinyl) -karbonyloxylj karden-20(22)-olid. I •Γ·α

12. Farmaceutický prostředek, v y z na č u j ící s e tím, že obsahujebezpečné a účinné množství, v rozsahu 15 až 95 % sloučeniny podle nároků 1 až 11 nebo směs těchto sloučenin a 5 až 85 % farmaceuticky použitelných excipientů, vybraných ze skupiny zahrnující 0 až 2 % aro^nytizačních činidel, 0 až 50 % spolurozpouštědel, 0 až 5 % pufru, 0 až 2 % povrchově aktivních látek, 0 až 2 % konzervačních činidel,

0 až 5 % sladidel, 0 až 5 viskozitních činidel, 0 až 75 % plniv, 0,5 až 2 % mazadel, 1 až 5 % kluzných prostředků, 4 až 15 dezintegračních činidel a 1 až 10 % pojiv.
13. Urethan obsahující aminosteroidní sloučeniny podle nároků 1 až 11 pro výrobu léčiva k léčení lidí nebo ostatních savců postižených aaěstnavý» srdečním selháním.