DE3873997T2

DE3873997T2 - 1-alkyl-1-sulfonyl-2-alkoxycarbonylsulfenylhydrazine mit anti-neoplasma-wirksamkeit.

Info

Publication number: DE3873997T2
Application number: DE8888305132T
Authority: DE
Inventors: Robert T Hrubiec; Alan C Sartorelli; Krishnamurthy Shyam
Original assignee: Yale University
Current assignee: Yale University
Priority date: 1987-06-04
Filing date: 1988-06-06
Publication date: 1993-01-21
Anticipated expiration: 2008-06-07
Also published as: DE3873997D1; GR3006348T3; JPH01258665A; EP0294238B1; ATE79863T1; CA1304383C; EP0294238A1; US4962114A; JP2686961B2; ES2043820T3

Description

Diese Erfindung bezieht sich auf neuartige Verbindungen mit antineoplastischer Aktivität, d. h. Aktivität zur Hemmung des Wachstums von bösartigen Tumoren. Speziell bezieht sie sich auf Verbindungen der Klasse 1-Alkyl-1-Sulfonyl-2-Alkoxycarbonylsulfonylhydrazine und deren Verwendung bei der Hemmung von bösartigen Tumoren. Diese neuartigen Verbindungen stellen eine neue Klasse von alkylierenden Mitteln dar.
Alkylierende Mittel, die biologische Moleküle methylieren, bilden eine nützliche Gruppe von antineoplastischen Mitteln, wobei Procarbazin, Streptozotozin und Dacarbazin Beispiele von klinisch aktiven Mitteln dieser Art sind.
Die Anmelderin hat ferner eine andere Klasse von N,N'-Bis(Sulfonyl)Hydrazinen entdeckt, die sich für die Hemmung des Wachstums von bösartigen Tumoren eignen. Diese Verbindungen sind in EP 185 387 und dem entsprechenden US-Patent 4 684 747 beschrieben.
Man vergleiche auch Shyam et al., J. Med. Chem., 28, 525 (1985). Die darin beschriebenen Verbindungen haben eine andere Struktur.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, eine neue Klasse von alkylierenden Mitteln mit antineoplastischer Aktivität anzugeben.
Eine weitere Aufgabe ist es, Zusammensetzungen anzugeben, die diese Mittel in einer Form enthalten, die für die Verabreichung an Wirtsorganismen geeignet ist.
Noch eine weitere Aufgabe ist es, ein Verfahren zur Herstellung der neuartigen alkylierenden Mittel anzugeben.
Eine nochmals weitere Aufgabe ist es, neuartige Verbindungen anzugeben, welche eine Aktivität gegen bösartige Tumore entwickeln.
Diese Erfindung bezieht sich auf Verbindungen der nachfolgenden Formel:
wobei R&sub1; ein Alkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen, Benzyl, Phenyl oder Phenyl, substituiert durch Halogen, Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino- oder Carbonylsubstituenten, oder -RN(R')&sub2; ist, wobei R und R' jeweils unabhängig ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sind, wobei R&sub2; ein Heteroaryl-Substituent ist, in welchem das Hetero-Atom Schwefel, Sauerstoff, Stickstoff oder eine Kombination davon ist, wobei jedes A ein Substituent ist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe, welche aus Wasserstoff, Alkyl mit 1-4 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1-4 Kohlenstoffatomen und Halogen besteht, und wobei n gleich 1, 2 oder 3 ist. Die Verbindungen wurden als alkylierende Mittel erkannt, die antineoplastische Aktivitäten zur Verwendung als Wachstumshemmer bei bösartigen Tumoren haben, d. h. eine ausgesprochene Antitumor-Aktivität zeigen. Ferner haben sie voraussichtlich eine geringe Toxizität für Säuger. Die Verbindungen können einem Wirtorganismus zweckmäßigerweise innerlich in Form von üblichen pharmazeutishen Zubereitungen verabreicht werden, zum Beispiel in herkömmlichen, pharmazeutisch akzeptablen enteralen oder parenteralen Arzneistoffträgern.
Die oben beschriebenen Verbindungen stellen eine neue Klasse von antineoplastischen Mitteln dar. Eine Reihe von diesen wurde synthetisiert und mit nachweisbarer Wirksamkeit gegen die B16-Melanome bzw. an Nager transplantierte L1210 Leukämie-Tumore getestet. Diese Verbindungen sind in der Lage, unter physiologischen Bedingungen eine alkylierende Spezies zu erzeugen. Wie oben gezeigt, haben die Verbindungen die allgemeine Formel:
R&sub1; kann ein Alkyl mit 1-6 Kohlenstoffatomen sein. In dieser Schrift umfaßt der Ausdruck "Alkyl" gerade oder verzweigte Kohlenstoffketten. Vorzugsweise ist R&sub1; Methyl, kann aber auch Ethyl, Isopropyl oder Tert-Butyl sein.
R&sub1; kann auch ein Benzyl oder ein Phenyl-Substituent oder ein Phenyl-Substituent, der mit Halogen substituiert wurde, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino- oder Carbonyl-Substituent sein.
R&sub1; kann auch -RN(R')&sub2; sein, worin R und R' jeweils unabhängig ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sein können, beispielsweise R ist -CH&sub2;CH&sub2; und R' ist CH&sub3;.
R&sub2; ist Heteroaryl, worin das Heteroatom N, O bzw. S ist, so wie die ungesättigten 5-gliedrigen Ringe, exemplifiziert durch Thienyl Isoxazolyl Pyrazolyl
und andere Heteroringe, wie Quinolinyl
Jedes A ist ein Substituent, der Wasserstoff sein kann. Wenn dies der Fall ist, werden die Heteroaryl-Substituenten als nicht-substituiert betrachtet. Andernfalls kann der Heteroaryl-Substituent durch ein A substituiert sein, das ein Alkyl oder Alkoxy mit 1-4 Kohlenstoffatomen ist, einschließlich geraden und verzweigten Kohlenwasserstoffketten oder Halogen. Der Ausdruck "Halogen" soll alle vier Halogene einschließen, namentlich Chlor, Brom, Jod und Fluor. Chlor und Brom sind die bevorzugten Halogene. n ist vorzugsweise 1 oder 2.
Die Verbindungen dieser Erfindung können durch die in Schema I dargestellte Methodik hergestellt werden: Schema I
mit R&sub1;, R&sub2; und A wie zuvor definiert.
Die N-Methyl-N-Sulfonylhydrazide wurden hergestellt, indem man das geeignete Sulfonylchlorid mit Methylhydrazin im Mol-Verhältnis 1:2 in Tetrahydrofuran reagieren ließ, siehe Friedmann, et al., Org. Synth. Coll. Vol. 5, 1055 (1973), deren gesamte Beschreibung hier durch Verweis einbezogen ist. Die geeigneten Sulfonylchloride sind kommerziell erhältlich. Die 1-Methyl-1-Arylsulfonylhydrazine werden beispielsweise durch Reaktion der geeigneten Sulfonylchloride mit Methylhydrazin in Tetrahydrofuran hergestellt. Die Reaktion dieser Zwischenprodukte beispielsweise in Diethyläther mit ungefähr einem Äquivalent Pyridin und einem Äquivalent Alkoxycarbonylsulfonylchlorid erzeugt die hier beanspruchten Produkte. Andere Lösungsmittel können verwendet werden, zum Beispiel Methylenchlorid, Chloroform. Ferner können auch andere organische Basen einbezogen werden, beispielsweise Triethylamin, Lutidin.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden vorzugsweise innerlich in Form von herkömmlichen pharmazeutischen Zubereitungen verabreicht, beispielsweise in herkömmlichen enteralen oder parenteralen pharmazeutisch akzeptabelen Arzneizubereitungen, welche organische bzw. anorganische inerte Träger, wie z. B. Wasser, Gelatine, Laktose, Dimethylacetamid, Stärke, Magnesiumstearat, Talg, Pflanzenöle, Gummiarten, Alkohol, Vaseline oder dergleichen enthalten. Die pharmazeutischen Zubereitungen können in festen Formen sein, beispielsweise Tabletten, Dragees, Suppositoren, Kapseln oder ähnlich, oder in herkömmlichen flüssigen Formen, wie z. B. Suspensionen, Emulsionen oder ähnlich. Falls gewünscht, können sie sterilisiert werden und/oder herkömmliche pharmazeutische Zusätze, wie z. B. Konservierungsmittel, Stabilisatoren, Befeuchtungsmittel, Emulgatoren, Puffer oder Salze für die Einstellung des osmotischen Drucks enthalten. Die pharmazeutischen Zubereitungen können auch andere therapeutisch aktive Materialien enthalten.
Das pharmazeutische Präparat sollte eine bestimmte Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung enthalten, die für die antineoplastische Aktivität ausreicht. Die tatsächliche Dosierung hängt von der antineoplastischen Aktivität und der Toxizität der jeweils verwendeten Verbindung ab und es liegt in der Hand des Fachmanns, eine Dosierung für den jeweiligen Säuger- oder anderen Wirtsorganismus zu bestimmen. Für Menschen kann beispielsweise der Bereich von 2 - 15 mg/kg zweckmäßig sein
Typische nicht-heteroaryle Verbindungen werden beschrieben im Journal Medicinal Chemistry, Vol. 29, Nr. 9, September 1986, Seite 1777 - 1779. Diese schließen ein:
1) 1-Benzolsulfonyl-2-Methoxycarbonylsulfonyl-1- Methylhydrazin
2) 2-Methoxycarbonylsulfonyl-1-Methyl-1-(4- Methylbenzolsulfonyl)Hydrazin
3) 1-(4-Methoxybenzolsulfonyl)-2-Methoxycarbonylsulfonyl- 1-Methylhydrazin
4) 1-(4-Bromobenzolsulfonyl)-2-Methoxycarbonylsulfonyl-1- Methylhydrazin
5) 2-Methoxycarbonylsulfonyl-1-Methyl-1-(Toluolsulfonyl)Hydrazin
6) 2-Methoxycarbonylsulfonyl-1-Methyl-1-(2- Naphtalinsulfonyl)Hydrazin
Es wurde gefunden, daß die oben genannten nicht-heteroarylen Verbindungen mit den heteroarylen Verbindungen dieser Erfindung vergleichbar sind. Typische Verbindungen der vorliegenden Erfindung schließen ein:
7) 1-(2-Thienyl)Sulfonyl-1-Methyl-2- Methoxycarbonylsulfonylhydrazin
8) 1-(3,5-Dimethylisoxazolyl)Sulfonyl-1-Methyl-2- Methoxycarbonylsulfonylhydrazin
9) 1-(5-Chloro-1,3-Dimethylpyrazolyl)Sulfonyl-1-Methyl-2- Methoxycarbonylsulfonylhydrazin
10) 1-(8-Quinolinyl)Sulfonyl-1-Methyl-2- Methoxycarbonylsulfonylhydrazin
Das folgende ist ein theoretischer Mechanismus, durch den die Verbindungen dieser Erfindung aktiviert werden, basierend auf den hier vorgestellten Beispielen und früheren Arbeiten.
Wie oben gezeigt, hat sich eine Vielzahl von 1-Methyl-1,2-bis(Arenosulfonyl)Hydrazinen (siehe U.S.-Patentanmeldung Serial-Nr. 06/683,852, eingereicht am 20. Dezember 1984, und deren Continuation-in-part U.S. Serial-Nr. 06/810,644, eingereicht am 18. Dezember 1985, jetzt U.S. Patent Nr. 4 684 747, und Shyam, Cosby und Sartorelli, J. Med. Chem., 28, 525 (1985)) als wirksam erwiesen gegen die L1210-Leukämie und B16-Melanome bei Mäusen. Diese Verbindungen haben die folgende Formel:
bei welcher Ar und Ar' aromatische Substituenten sind.
Die Verbindungen zerfallen unter physiologischen Bedingungen, um die mutmaßlich alkylierende Spezies zu erzeugen, welche die Formel hat:
ArSO&sub2;-N=N-CH&sub3; III
Dies wurde als Hypothese angenommen, um der beobachteten biologischen Aktivität dieser Verbindungen Rechnung zu tragen.
Ersetzen der 2-Arenosulfonyl-Gruppe in der Verbindung nach Formel II durch einen Methoxycarbonylsulfonyl-Anteil zur Bildung eines 1-Methyl-1-Arenosulfonyl-2-Alkoxycarbonylsulfonylhydrazins mit der folgenden Formel (ein erfindungsgemäßes Beispiel):
Liefert eine Verbindung, die nach demselben Mechanismus zerfallen kann wie die Verbindungen der Formel II, um die methylierende Spezies, die unten dargestellt ist, zu erzeugen:
CH&sub3;O- -S-N=N-CH&sub3; V
Die hier beanspruchten Verbindungen besitzen ebenfalls die Fähigkeit, direkt mit dem Schwefelatom von biologischen Nukleophilen wie Glutathion oder verschiedenen schwefelhaltigen Proteinen zu reagieren, wobei Methyldiazon entsteht, die postulierte alkylierende Spezies, welche von Procarbazin abgeleitet ist (siehe Reed, "Procarbazin" in Antineoplastic and Immuno-suppressive Agents, Teil II, herausgegeben von Sartorelli and Johns. Berlin: Springer-Verlag, 1975, Seiten. 747-765), welche eine weitere homolytische Abspaltung durchmachen können, um das Methylradikal, Wasserstoffradikal und Stickstoff zu erzeugen.
Ein Beispiel ist im Schema II dargestellt. Schema II

Beispiele von Verbindungen

Allgemeines Verfahren für die Erzeugung von 1-Methyl-1-Sulfonyl-2-Alkoxycarbonylsulfonylhydrazinen.

Methoxycarbonylsulfonylchlorid (6,0 mmol) wurde langsam tropfenweise einer eiskalten Suspension des geeigneten 1-Methyl-1-Sulfonylhydrazid (6,0 mmol) (siehe den oben genannten Friedmann et al) in wasserfreiem Diethyläther (50 ml) und Pyridin (6,0 mmol) zugegeben, während die Temperatur unter 10 Grad C gehalten wurde. Nach Rühren bei einer Temperatur zwischen 0 - 5 Grad C während 15 Minuten wurde die Mischung gefiltert und die Äther-Lösung zweimal mit eiskalter verdünnter Hydrochlorsäure (Mengen 25 ml; 1:1, v/v) gespült, gefolgt von drei Spülvorgängen mit Salzlösungen (Mengen 25 ml). Die organische Phase wurde getrocknet (MgSO&sub4;) und der Diethyl-Äther in Vakuum verdampft, worauf ein Öl entstand, das nach Trituration mit leichtem Petroleumäther erstarrte. Die Rekristallisierung aus warmem Ethanol (50 Grad C) ergab die reine Verbindung. Die NMR-Spektraldaten waren wie erwartet. Tabelle I Physikalische Konstanten für 1-Methyl-1-Sulfonyl-2-Methoxycarbonylsulfonylhydrazin. (R&sub2;-An)ArSO&sub2;N(CH&sub3;)NHS OCH&sub3; Ausbeute Mp, Grad C, Verbdg. (unberichtigt) Formel Phenyl p-Tolyl p-Methoxyphenyl p-Bromophenyl Benzyl 2-Naphtyl 2-Thienyl 3,5-Dimethylisoxazolyl 5-Chloro-1,3-Dimethylpyrazolyl 8-Quinolinyl

Beispiele von Antitumoraktivität

Das B16-Melanom wurde als fester Tumor in C57B1-Mäuse verpflanzt. Die Transplantation wurde durchgeführt, indem man Tumoren von Spendermäusen, welche 14 Tage alte subkutane Tumorwucherungen hatten, verwendete. Das Gewebe wurde fragmentiert, um eine gut verteilte Zellsuspension zu erzielen, und mit Fischer's Medium ohne Serum verdünnt, so daß ein Gramm des Gewebes in 5 ml Lösung suspendiert war. Ein Teil (0,2 ml) der resultierenden Zellsuspension wurde intraperitonal in jedes Empfängertier eingespritzt. Die Bauchwassersuchtzellform der L1210-Leukämie wurde in CDF-1-Mäuse eingepflanzt. Die Transplantation wurde ausgeführt, indem man Spendermäuse verwendete, die 7 Tage alte Tumorwucherungen hatten; Versuchseinzelheiten sind beschrieben in Agrawal et al., J. Med. Chem., 11, 700, 1968, die hier durch Verweis einbezogen sind. Die Dosierungsmengen aller Verbindungen wurden über einen Bereich von 12,5 bis 50 mg/kg durch intraperitonale Injektion verabreicht, die 24 Stunden nach der Tumorimplantation begann und einmal täglich während 6 aufeinanderfolgenden Tagen vorgenommen wurde. Die Testverbindungen wurden als feine Suspensionen nach Homogenisierung in 2 bis 3 Tropfen von 20 % wässrigem Tween 80 und dann mit isotonischer Salzlösung auf das Volumen gebracht, injiziert. Alle Präparate wurden intraperitonal mit einem Volumen von 0,5 ml verabreicht und für die Versuche wurden die Tiere in Gruppen von fünf Mäusen mit vergleichbarem Gewicht eingeteilt und während des Verlaufs des Versuchs mit Laborfutterpellets und Wasser ad libitum unterhalten. Tumor-tragende Kontrolltiere, denen Injektionen vergleichbarer Volumina der Trägersubstanz gegeben wurden, waren in jedem Experiment eingeschlossen. Die Mäuse wurden während des Verlaufs der Versuche gewogen und die Prozentänderung im Körpergewicht vom Beginn bis zum Ende der Therapie wurde als ein Indikator der Medikamenttoxizität verwendet. Die Bestimmung der Empfindlichkeit von Neoplasmen gegenüber diesen Mitteln erfolgte auf der Basis der Verlängerung der Lebenszeit, die durch die Medikamentenbehandlungen erzielt wurde. Die Tabellen II und III enthalten Vergleichsdaten, welche die Ergebnisse darstellen, die bei der Verwendung von nicht-heteroarylen Verbindungen erzielt wurden. Tabelle II (Vergleichsbeispiele) Auswirkungen von 1-Methyl-1-Arenosulfonyl-2-Methoxycarbonylsulfonyl-Hydrazine auf die Überlebenszeit von Mäusen mit B16-Melanomen Verbdg. Tägliche Dosis (mg/kg)a Durchschnittliche Gewichtsveränderung (%)b
a Verabreicht einmal täglich an sechs aufeinanderfolgenden Tagen, beginnend 24 Stunden nach der Tumortransplantation, mit 5 Tieren pro Gruppe.
b Durchschnittliche Änderung des Körpergewichtes vom Beginn bis zum Ende der Therapie.
c % T/C = durchschnittliche Überlebenszeit von behandelten/Kontrolltieren x 100.
d Jeder Wert stellt den Durchschnitt von zwei Experimenten mit 5 Mäusen/Gruppe dar.
e Ergebnisse von einem Experiment.
Verbindung C ist Tabelle III (Vergleichsbeispiele) Auswirkungen von 1-Methyl-1-Arenosulfonyl-2-Methoxycarbonylsulfonyl-Hydrazine auf die Überlebenszeit von Mäusen mit L1210-Leukämie Verbdg. Tägliche Dosis (mg/kg)a Durchschnittliche Gewichtsveränderung (%)b a, b, c, d Siehe entsprechende Fußnoten in Tabelle II. Tabelle IV Auswirkungen von 1-Heteroaryl-1-Methyl-2-Methoxycarbonylsulfonyl-Hydrazinen auf die Überlebenszeit von Mäusen mit B16-Melanomen
HetSO&sub2;N(CH&sub3;)NHS OCH&sub3; Verbdg. Het Tägl. Dosis (mg/kg)a Durchschnttl. Gew.-Verändrg. (%)b 2-Thienyl 3,5-Dimethylisoxazolyl 5-Chloro-1,3-Dimethylpyrazolyl 8-Quinolinyl a, b, c Siehe entsprechende Fußnoten in Tabelle II. Tabelle V Auswirkungen von 1-Heteroaryl-1-Methyl-2-Methoxycarbonylsulfonylhydrazinen auf die Überlebenszeit von Mäusen mit L1210 Leukämie HetSO&sub2;N(CH&sub3;)NHS OCH&sub3; Verbdg. Het Tägl. Dosis (mg/kg)a Durchschnttl. Gew.-Verändrg. (%)b 2-Thienyl 3,5-Dimethylisoxazolyl 5-Chloro-1,3-Dimethylpyrazolyl 8-Quinolinyl a, b, c Siehe entsprechende Fußnoten in Tabelle II.

Beispiel für die Bestimmung der Alkylierungsfähigkeit von Verbindungen

Eine Lösung der Testprobe (12 Mikromol) in Dimethylsulfoxid (1 ml), destilliertes Wasser (2 ml), Tris-HCl-Pufferlösung (pH 7,4; 1 ml) wurde mit 4-(4-Nitrobenzyl)Pyridin (148 Mikromol in 0,4 ml Azeton) bei 37 Grad C für 1 Stunde im Brutschrank gehalten. Nach Zugabe von Azeton (2 ml) und 0,25 M Natriumhydroxidlösung (1,5 ml) wurde das Material mit Ethylazetat (5 ml) extrahiert und die Extinktion bei 540 nm bestimmt Tabelle VI Vergleich des Alkylierungsgrades von 4-(4-Nitrobenzyl)Pyridin und antineoplastische Aktivität von 1-Methyl-1-Arenosulfonyl-2-Methoxycarbonylsulfonylhydrazinen Verb. Alkylierungsfähigkeit a (Extinktion 540 nm) Antineoplastische Aktivität (max. % T/C aus Tabelle II) a Je größer der Extinktionswert, desto größer der Grad der Alkylierung.

Diskussion der Ergebnisse der Beispiele

Die tumorhemmenden Eigenschaften der Verbindungen 1-10 wurden durch Messung ihrer Auswirkungen auf die Überlebenszeit von Mäusen mit B16-Melanomen bestimmt. Die Ergebnisse der durchgeführten Tests sind in den Tabellen II und IV zusammengestellt. Alle synthetisierten Verbindungen zeigten eine signifikante Aktivität gegen B16-Melanome mit Verbesserungen der Überlebenszeit von Tieren mit Tumoren zwischen 40 % und 150 %. Obwohl die Verbindung 10 etwas aktiver als die anderen Derivate war, war keine klare Korrelation zu erkennen zwischen der Fähigkeit der Restgruppe mit Areno- oder Heteroarenosulfonyl-Substitution, d. h. -SO2R2-A, und der antineoplastischen Aktivität in diesem System. Damit sind im wesentlichen die Heteroareno-Derivate genauso aktiv wie die Areno-Derivate. Der einzige Unterschied zwischen diesen Verbindungen lag in der Variation der vorgeschlagenen Restgruppe und dies schien deren Aktivität nicht signifikant zu ändern.
Die Verbindungen 1 bis 5 und 7 bis 10 wurden ebenfalls auf die krebshemmende Aktivität bei Mäusen mit L1210-Leukämie bewertet und die Ergebnisse in den Tabellen III und V zusammengefaßt. Alle diese Verbindungen stellten sich als inaktiv gegen diesen Tumor heraus mit Ausnahme der Verbindungen 3 und 10, die nur eine begrenzte Aktivität aufwiesen. Diese Erkenntnis steht im Gegensatz zu früheren Ergebnissen mit 1-Methyl-1,2-bis(Arenosulfonyl)Hydrazinen, die eine signifikante Aktivität gegen die L1210-Leukämie zeigten (siehe U.S.-Patentanmeldung Serial-Nr. 06/683,852, angemeldet am 20. Dezember 1984, und deren Continuation-in-part, U.S. Serial-Nr. 810, 644, angemeldet am 18. Dezember 1985, jetzt U.S. Patent Nr. 4 684 747, sowie Shyam et al., J. Med. Chem., 28, 525 (1985)). Dies läßt vermuten, daß diese Verbindungen sich in vivo zersetzen und eine andere reaktive Spezies bilden als die, die für die 1-Methyl-1,2-bis(Arenosulfonyl)Hydrazine vorgeschlagen wird, und daß die 1-Methyl-1-Sulfonyl-2-Alkoxycarbonylsulfonylhydrazine eine andere Klasse von Verbindungen mit potentieller klinischer Aktivität darstellen.
Eine Änderung der Methode von Wheeler and Chumley (J. Med. Chem., 10, 259 (1967)) wurde vorgenommen, um zu prüfen, ob die aromatischen Derivate dieses Verbindungstyps alkylisierende Eigenschaften besaßen. Diese Methode maß die Extinktion des alkylierten Produkts von 4-(4-Nitrobenzol)Pyridin bei 540 nm. Es wurde festgestellt, daß die Alkylierungsfähigkeit und die krebshemmende Aktivität gegen die B16-Melanome gekoppelt sind, so daß die Verbindungen, die eine tumorhemmende Aktivität gegen die B16-Melanome aufwiesen, unter den verwendeten Bedingungen eine signifikante Alkylierungsfähigkeit zeigten. Die Verbindungen 7 bis 10 sollten daher unter diesen Bedingungen ebenfalls Alkylierungsfähigkeiten zeigen. Ferner wies die Verbindung 10, die keine reaktive Methylierungsspezies erzeugen kann, in diesem Versuch im wesentlichen keine alkylierende Aktivität auf und war gegen das B16-Melanom inaktiv.
Tabelle VI zeigt die Ergebnisse für die nicht-heteroarylen Verbindungen, die nicht Teil der vorliegenden Erfindung sind.
Die Daten in Tabelle VI unterstützen den hier beschriebenen hypothetischen Mechanismus, aber die Fähigkeit, ein reaktives Zwischenprodukt zu erzeugen durch direkten Angriff eines Nukleophilen, wie hier gezeigt, kann nicht ausgeschlossen werden. Es erscheint wahrscheinlich, daß die Fähigkeit dieser Verbindungen, als antineoplastisches Mittel zu wirken, komplexe Wirkungsmechanismen einschließt, weil zwei Arten der Aktivierung möglich sind und miteinander in Konkurrenz treten können. Ferner kann man nicht den Einfluß von pharmakodynamischen Mechanismen auf die Antitumormessungen ausschließen.

Claims

1. Eine Verbindung mit der Formel:

wobei R&sub1; ein Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Benzyl-, Phenyl- oder Phenyl-, substituiert durch Halogen, Alkoxy- mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkyl- mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino- oder Carbonyl-Substituent, oder -RN(R')&sub2; ist, worin R und R' jeweils unabhängig ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sind, und wobei R2 ein heteroaryler Substituent ist, in dem das Heteroatom Schwefel, Sauerstoff, Stickstoff oder eine Kombination davon ist;

jedes A ist ein Substituent, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe, die aus Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und Halogen besteht; und

n ist 1, 2 oder 5.

2. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R1 ein Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist; R&sub2; ist ein aromatischer Heteroring und jedes A ist ein heterozykler Substituent, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe, die aus Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und Halogen besteht; und

n ist 1, 2 oder 3.

3. Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, wobei R&sub2; ein 5-gliedriger ungesättigter Ring ist.

4. Verbindung nach Anspruch 3, wobei R&sub2; aus Thienyl, Isoxazolyl und Pyrazolyl ausgewählt ist.

5. Verbindung nach Anspruch 2, wobei R&sub2; Quinolinyl ist.

6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei A ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist.

7. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei n gleich 2, das eine A ein Halogen und das andere A ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist.

8. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R&sub1; Methyl ist.

9. Verbindung nach Anspruch 8, wobei R&sub2;An ausgewählt ist aus 2-Thienyl, 3,5-Dimethylisoxazolyl, 5-Chloro-1,3-Dimethylpyrazolyl und 8-Quinolinyl.

10. Verfahren zum Herstellen einer Verbindung nach der Formel:

wobei R&sub1; ein Alkyl mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, Benzyl, Phenyl oder Phenyl, substituiert durch Halogen, Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino oder Carbonyl-Substituent oder -RN(R')&sub2;, worin R und R' jeweils unabhängig ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sind ist, und R&sub2; ein heteroaryler Substituent ist, vorzugsweise ein aromatischer Heteroring, in welchem das Heteroatom Schwefel, Sauerstoff, Stickstoff oder eine Kombination davon ist, jedes A ein Substituent ist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe, die aus Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und Halogen besteht, und n gleich 1, 2 oder 3 ist, wobei ein N-Methyl-N-Sulfonylhydrazin der Formel

AnR&sub2;SO&sub2;- H&sub2;

mit A, R&sub2; und n wie oben definiert, mit einer Verbindung der Formel:

ClS- -OR&sub1;

in Reaktion gebracht wird, mit R1 wie oben definiert, vorzugsweise in Anwesenheit einer organischen Base und eines Lösungsmittels, und in welchem die Reagenzien vorzugsweise in etwa äquimolaren Anteilen zur Reaktion gebracht werden.

11. Verfahren nach Anspruch 10, in dem das N-Methyl-N-Sulfonylhydrazin zunächst durch die Reaktion von Sulfonylchlorid der Formel:

AnR&sub2;SO&sub2;Cl

mit A, R2 und n wie in Anspruch 10 definiert, mit Methylhydrazin erzeugt wird, vorzugsweise in einem organischen Lösungsmittel, z. B. Tetrahydrofuran, wobei das Sulfonylchlorid und das Methylhydrazin vorzugsweise in einem Molverhältnis von etwa 1:2 zugegeben werden.

12. Verfahren nach einem der Ansprüche 10 und 11, in welchem das Produkt eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9 ist.

13. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 bei der Herstellung einer Zusammensetzung zur Verwendung bei einem Behandlungsverfahren, vorzugsweise zur Hemmung des Tumorwachstums.

14. Antineoplastische Zusammensetzung, welche eine antineoplastisch wirksame Menge einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9 und einen pharmazeutisch akzeptablen Trägerstoff umfaßt.