DK170832B1

DK170832B1 - Farmaceutiske produkter til kurering af tumorsygdomme og fremgangsmåde til fremstilling heraf

Info

Publication number: DK170832B1
Application number: DK050094A
Authority: DK
Inventors: Gabor Somlyai
Original assignee: Gabor Somlyai; Hyd Kutato Fejleszto Kft
Priority date: 1991-10-31
Filing date: 1994-05-02
Publication date: 1996-02-05
Also published as: HU208084B; GB9408654D0; KR100253874B1; GB2276086A; AT402692B; KR930007461A; CZ282379B6; NL9220026A; ATA902992A; FI941979A0; ITMI922233A0; FI941979L; NL194664B; US5855921A; JPH08501275A; CA2122612A1; CN1045162C; FI114010B; ES2077530B1; CZ102094A3

Description

DK 170832 B1

Opfindelsen angår farmaceutiske produkter til kurering af tumorsygdomme og en fremgangsmåde til fremstilling heraf.

I vore dage findes en række metoder (kirurgiske ind-5 greb, strålingsterapi, hormonterapi, anvendelse af antitumormidler) til bekæmpelse af maligne tumorer. Alle disse metoder har sammen med nyere resultater indenfor diagnostik givet store fremskridt i de sidste ti år, men trods disse resultater har de anvendte metoder mange ulemper.

10 Hovedårsagen til dette problem er, at da den moleky lære mekanisme for celleproliferation stadigvæk ikke er kendt, er indgreb i sygdomsforløbet ved de tilgængelige metoder temmelig besværligt. Det er af denne grund, at vejen til helbredelse eller i det mindste en forsinkelse i 15 udviklingen af sygdommen ofte involverer fjernelse af visse dele af organer eller ulemper ved den bloddannende proces, når man benytter antitumormidler og lignende.

Et korrekt svar til dette spørgsmål kan kun forventes, når man har fuld kendskab til de (sub)molekylære 20 processer, der spiller en nøglerolle ved initiering af celleproliferation.

På grund af udviklingen i molekylærbiologien er den biologiske videnskab netop ved at finde de afgørende regulerende processer, ved hvilke det vil være muligt at 25 genoprette helbredet hos patienter, der lider af tumorsygdomme .

Hvis man tager hensyn til de seneste resultater indenfor molekylærbiologien, kan man slutte, at en fælles tidlig respons hos eukaryotiske celler til stimuli, der 30 aktiverer proliferation, er en forøgelse i den intracellu-lære pH-værdi på grund af en udveksling af ekstracellulært Na+ med intracellulært H+ tværs over plasmamembranen [P.N.A.S. 79, 7778-7782 (1982)] . Konklusionen at aktivering af Na+/H+ udvekslingssystemet er uomgængelig, når celle-35 vækst skal initieres, er blevet støttet af adskillige eksperimentelle resultater.

Man fandt, at en specifik mutation, der udelukkede DK 170832 B1 2

Na+/H+ udvekslingssystemet, forhindrede vækst af celler ved neutrale og sure pH-værdier [P.N.A.S. 81, 4833-4837 (1984)] .

5 Nyere resultater tyder på, at vækstfaktorer aktiverer

Na+/H+ udvekslingssystemet, og antyder, at Na+/H+ udvekslingen kan virke som en transmembran signaltransducer [Nature 104» 645-648 (1983)].

Forbindelsen mellem det aktiverede Na+/H+ udveks-10 lingssystem og den tumoragtige karakter af cellelinier er også blevet bevist. Man fandt, at pH blev forøget efter transformation af en cellelinie i forhold til den ikke tumorigene forfædrelinie [P.N.A.S. 84, 2766-2770 (1987)]. Man fandt en kraftig korrelation mellem eksprimering af 15 oncogener og forhøjet intracellulært pH, idet indsprøjtning af det protein, der kodes for af Ha-ras, eller eksprimering af V-mos og Ha-ras oncogener i cellen forøgede det intra-cellulære pH ved at aktivere Na+/H+ udvekslingssystemet [Mol. Cell. Biol. 7, 1984-1988 (1987); Gene 54, 147-153 20 (1987)].

Lignende ændringer blev fundet ved aktivering af et andet membranbundet hydrogeniontransportsystem. I dette tilfælde isolerede man et ATPase gen fra gær og benyttede det til at transformere muse- og abecellelinier. Genet blev 25 eksprimeret, og ATPasen bevirkede ved kontinuert at fjerne protoner en vedvarende alkalisering af cytoplasmaet. Det virkelige overraskende resultat af dette eksperiment var, at cellerne, der var transformeret med ATPase-genet fra gæren, erhvervede tumorigene egenskaber [Nature 334. 438-30 440 (1988)].

Dette sidstnævnte eksperiment beviser, at induktion af celleproliferation ikke blot står i forbindelse med aktivering af Na+/H+ udvekslingssystemet, men også med aktivering af et andet protonfjernende system, der alment 35 kan fungere som et signal for celleproliferation.

En simpel forklaring for det ovenfor nævnte fænomen kan være, at celleproliferationen initieres ved hjælp af 3 DK 170832 B1 forøgelse i intracellulært pH. Denne forklaring blev imidlertid ikke bekræftet af eksperimenter, hvorved en kunstig forøgelse i det cytoplasmiske pH ikke bevirkede en forhøjelse i celleproliferationsaktiviteten [J. Exp. Biol.

5 124, 359-373 (1986)].

De ovenfor nævnte molekylære processer kan fortolkes, når man undersøger den mulige rolle for hydrogen og deuterium ved kontrol af de ovenfor nævnte processer.

I naturen er forholdet mellem hdyrogen og deuterium 10 omtrent 6000:1. På grund af masseforskellen på 100% viser de to isotoper forskellig opførsel ved kemiske reaktioner.

Det er et alment accepteret synspunkt, at D-bindinger, der deltager i kemiske reaktioner, spaltes med en lavere hastighed på grund af isotopvirkningen, hvorfor de behøver en 15 større aktiveringsenergi [Simonyi Miklos og Fitos Ilona: Hydrogen Isotope Effect in Chemical Reactions. A kémia fijabb eredményei (på ungarsk) ; (Nyere resultater indenfor kemien) 46, 8-129 (1980)]. Ved enzymatiske reaktioner kan man på lignende måde måle, at reaktionshastigheden er mel-2 0 lem 4 og 5 gange højere med hydrogenisotopen med det mindste massetal [Biochem. Phrmacol. 3(), 3089-3094 (1981)].

Virkningerne af deuterium er også blevet grundigt undersøgt i biologiske systemer (Katz, J.J. og Crespi, H.L. : Isotope Effects in Biological Systems (udgivere 25 Collins, C. J. og Bowman, N.S.) A.C.S. Monograph 167, van Nostrand Reinhold, New York, 1971, 286-363] . Et fælles træk ved disse eksperimenter er, at undersøgelsen af virkningerne af deuterium sædvanligt udføres under anvendelse af høje (1-100%) D20 koncentrationer.

30 Det er bredt accepteret, at deuterium har en inhibe- rende aktivitet mod reproduktion og vækst af bakterier, gærarter og planter. Pattedyr kan tolerere D20 i en koncentration, der er så høj som 35%; ved højere koncentrationer har D20 en dødelig virkning.

35 Ved disse eksperimenter benyttede man deuterium i fra 100 til 10000 gange højere koncentrationer end de naturligt forekommende koncentrationer, der blev ignoreret.

DK 170832 B1 4

En verdensomspændende oversigt over hydrogenisotoper i sedimenter viste, at D indholdet dækker et område på 120-160 ppm og hovedsageligt afhænger af indsamlingsstedet. Planter og således også alger, der differentier mellem 5 hydrogenisotoper, er i stand til at foretage berigelse med hydrogen [Schiegl, W.E. og Vogel, J.C., Earth and Planet. Sci. Letters 1_, 307-313 (1970); Ziegler, H. et al., Planta 128. 85-92 (1976)]. Som et resultat af disse processer viser deuteriumindholdet f.eks. hos planteædende dyr varia-10 tioner inden for et smalt område afhængig af, hvilke arter og mængder af planter, de har indtaget. Når det drejer sig om mennesker, er det område, hvor de indtagne planter blev dyrket, en afgørende faktor. Ifølge målinger er deuteriumindholdet af regnfaldet i troperne 155-160 ppm, hvorimod 15 denne værdi kun er 120-150 ppm i de tempererede zoner i verden. Denne forskel blev også synlig i deuteriumindholdet hos planterne med variationer op til 10-20%.

På trods af observationen af de ovenfor nævnte fænomener har eksperterne ikke anset deuteriumindholdet i 20 biologiske systemer for vigtigt.

Opfindelsens formål var at udvikle farmaceutiske produkter, der var egnede til at forhindre cancer eller til at hæmme tumorvækst og på denne måde at kurere cancersygdomme.

Basis for opfindelsen er indsigten i, at et deuteri-25 umindhold på et meget lavt niveau (120-160 ppm) i biologiske systemer er essentielt til opretholdelse af den normale hastighed for celleproliferation, og at mangel på deuterium forøger længden af cellecykluser. Man opdagede nemlig, at deuterium er en komponent i et submolekylært 30 regulerende system, og at processer, der midlertidigt forhøjer koncentrationen for D, vil udløse celleproliferation.

En yderligere basis for opfindelsen er anerkendelsen af, at man ved at indgive vand eller vandige opløsninger, 35 der indeholder deuterium i en mængde, der er mindre end deuteriumindholdet i naturligt vand (f.eks. juice fortyndet med deuteriumberøvet vand), kan formindske deuterium- 5 DK 170832 B1 niveauet i den humane organisme som et resultat af udviklingsprocesser og på den måde kan standse proliferatio-nen af tumorigene celler eller forhindre udviklingen af canceragtige tumorer.

5 I overensstemmelse hermed angår opfindelsen produkter til kurering af tumorsygdomme, hvor produkterne omfatter vand med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm og/eller vandige opløsninger, der er egnede til indtagelse af mennesker og med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm som 10 aktivt middel, eventuelt sammen med bærere og/eller hjælpestoffer, på form af farmaceutiske produkter eller medicinske opløsninger.

Produkterne ifølge opfindelsen er foretrukket farmaceutiske produkter såsom fysiologiske saltopløsninger eller 15 medicinske opløsninger som frugt sirupper, sodavand eller øl med reduceret eller uden alkoholindhold, med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

Yderligere angår opfindelsen en fremgangsmåde til fremstilling af produkter til kurering af tumorsygdomme, 20 hvorved man først ved elektrolyse og/eller destillation fremstiller vand og/eller vandige opløsninger med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm og derefter i næste trin overfører det således producerede vand og/eller vandige opløsning med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm, 25 eventuelt sammen med bærere og hjælpestoffer, til farmaceutiske produkter eller medicinske opløsninger.

En foretrukket udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstiller man fysiologiske saltopløsninger som farmaceutiske produkter med et deuteriumindhold 30 på 0,1 til 110 ppm.

Ved en yderligere foretrukket udførelsesform for fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstiller man frugt-sirupper, sodavand eller øl med reduceret eller uden alkoholindhold som medicinske opløsninger med et deuteriu-35 mindhold på 0,1 til 110 ppm.

Produkterne ifølge opfindelsen formuleres foretrukket som injicerbare opløsninger, infusionsopløsninger og sirup- DK 170832 B1 6 per, juicer eller hydratiserende salver med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

Produkterne ifølge opfindelsen er egnede til kurering af tumorsygdomme. Basis for denne terapeutiske anvendelse 5 er den kendsgerning, at hvis man tilfører deuteriumberøvede opløsninger indeholdende deuterium i en mængde på fra 0,1 til 110 ppm, vil deuteriumniveauet i organismen også falde. Som en konsekvens af denne proces vil væksthastigheden for tumorceller blive sat ned, og disse celler vil derefter 10 nedbrydes, hvorimod sunde celler stadig er i stand til at tolerere faldende deuteriumkoncentrationer.

Egnetheden af fremgangsmåden ifølge opfindelsen til behandling af tumorsygdomme er blevet påvist ved in vitro og in vivo afprøvninger, udført under anvendelse af deu-15 teriumberøvet vand. Forsøgsresultaterne kan ses på figurerne 1 og 2 samt i tabellerne 1 til 4.

På figur 1 illustreres væksten af musefibroblast-celler Lg2g efter synkronisering i fase GI i næringsvæsker fremstillet under anvendelse af vand med nedsat (indhold: 20 30 ppm) eller normalt (indhold: 150 ppm) deuteriumindhold.

På figur 2 illustreres resultaterne opnået ved bestemmelse af de relative mængder musefibroblastceller Lg2g efter dyrkning af disse i dyrkningsmedier indeholdende deuterium i mængder på 30 til 5000 ppm (a: 30; b: 150; c: 25 300; d: 600; e: 1250; f: 5000 ppm D).

Når man brændte hydrogen opnået ved elektrolyse af vand til dannelse af vand ifølge eksempel l, fremstillede man vand med indhold af deuterium i en mængde på 30-40 ppm. Vand indeholdende deuterium i højere koncentrationer end 30 naturligt forekommende vand blev fremstillet ved at sætte 99,78 vægt% D20 til normalt vand. Man fremstillede dyrkningsmedier, der var egnede til opretholdelse af forskellige dyriske cellelinier in vitro, ud fra de således fremstillede vandtyper med forskellige indhold af deuterium 35 ved at opløse 10 g af en kommerciel fremstillet dehydrati-seret blanding af aminosyrer, vitaminer, salte og baser [Dulbecco's modificerede Eagle's medium (D'MEM), kodenum- 7 DK 170832 B1 mer: 074-01600; Sigma, St. Louis, USA] ill vand. Man satte 110 ml kvægserum til de således fremstillede opløsninger. Det således opnåede væskemedium indeholdt alle forbindelser, der var nødvendige til opretholdelse af 5 celler.

Væksten af musefibroblastceller L92g blev f®rst undersøgt under in vitro betingelser i dyrkningsmedier indeholdende deuterium i forskellige mængder (30-5000 ppm) . Ved disse eksperimenter fulgte man delingen af omtrent 400 10 enkelte celler. Eksperimenterne viste, at cellevæksthastigheden i et medium fremstillet med D-berøvet vand blev reduceret med 15-20%.

Derefter undersøgte man, om deuteriumkoncentrationen i væskemedierne påvirkede længden af den tid, der var nød-15 vendig for cellerne til at indtræde i S-fasen fra den såkaldte Gl-fase efter synkronisering (figur 1). Det kan ses fra figur 1, at væksten af cellerne efter synkroniseringen begyndte 6-8 timer senere og at væksthastigheden var lavere i dyrkningsmedier fremstillet med D-berøvet vand (indhold: 20 30 ppm) end i vand med normalt deuteriumindhold (indhold: 150 ppm).

Man benyttede en fremgangsmåde, der i den seneste tid har været alment accepteret til at bestemme antallet af celler, ved at inkubere cellerne sammen med 2,3-bis(2-25 methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazoliumhydroxid (XTT) , hvilken forbindelse reduceres af cellerne. Den reducerede form af denne forbindelse viser et absorptionsmaksimum ved 450 nm, hvorfor mængden af den kan måles fotometrisk; således kan man bestemme det rela-30 tive celleantal ud fra værdier for optisk densitet (OD) [Cancer Research 48, 4827-4833 (1988)]. Ved denne måde kan virkning af deuteriumkoncentrationer, der er lavere (30 ppm) og højere (300-5000 ppm) end det naturlige niveau på celleproliferation også undersøges (figur 2) . Det blev 35 påvist ved eksperimenterne, at væksthastigheden blev nedsat i dyrkningsmedier fremstillet med deuteriumberøvet vand. Ifølge disse eksperimenter udøver deuteriumkon- DK 170832 B1 8 centrationer, der er 2 til 4 gange højere end den naturlige (300 og 600 ppm), en stimulerende virkning på celleproli-feration. [Ved en yderligere vækst af deuteriumkoncentrationen (1250 og 5000 ppm) vil hæmningen fra isotopvirk-5 ningen blive dominerende] . Hvis man gentog forsøgene med yderligere fire andre cellelinier, opnåede man lignende resultater.

Ved det første in vivo eksperiment undersøgte man, hvordan væksten af tumorer blev påvirket ved nedsættelse af 10 deuteriumindholdet i drikkevand hos mus. Humane brysttumorer MDA-MB-231 og MCF-7 blev transplanteret til to grupper, der hver bestod af 14 CBS/Ca mus. Dyrene i kontrolgruppen indtog normalt vand, hvorimod dyrene i behandlingsgrupperne fra dagen efter transplantationen fik D-15 berøvet vand fremstillet ifølge opfindelsen. Resultaterne er opregnet i tabel 1.

Tabel 1

Virkning af deuteriumberøvet vand på væksten af brysttu-20 morer hos mus.

Cellelinie MDA-MB-231 MCF-7

Dage Kontrol behandlet Kontrol Behandlet 25 _ 20 5/5 9/9 6/6 8/8 50 5/5 5/9 6/6 5/8 65 1/1 4/8 2/2 4/7 71 0/0 3/8 1/2 2/7 30 80 0/0 2/7 0/1 0/5 87 0/0 1/6 0/1 0/5

Antallet i behandlingsgrupperne og kontrolgrupperne 35 svarer til antallene af dyr med tumorer/alle dyr.

Resultaterne i tabel 1 viser, at man kun iagttog spontan tumorregression hos et dyr af de 11 dyr med tumorer 9 DK 170832 B1 1 de to kontrolgrupper (5+6), de andre døde på henholdsvis den 71. og 80. dag efter transplantationen. I de to behandlingsgrupper veg tumoren tværtimod tilbage efter at have vokset, hvorefter den forsvandt hos 10 dyr (59%) af de 5 17 dyr med tumorer (9-8) og et af dyrene med tumorer, der ikke er vist i tabel 1, overlevede i 30 dage det dyr, der senest døde i kontrolgruppen. Disse dyr fik drikkevand, der indeholdt 30 ppm deuterium i 3 uger og derefter vand med indhold af 110-120 ppm deuterium indtil afslutningen af 10 eksperimentet.

I et andet forsøg transplanterede man humane pro-statatumorceller PC-3 til mus af 44 CBS/Ca typen. Behandlingen begyndte på dag 32 efter transplantationen, idet man indgav dyrene vand indeholdende 94 ± 5 ppm deuterium at 15 drikke. På dette tidspunkt var middeltumordiameteren 10,4 mm og 10,2 mm i henholdsvis kontrolgruppen og behandlingsgruppen. (Hvis man tager forholdet mellem kropsmasse og tumormasse i betragtning, svarer behandling af musene på dette trin til at begynde at kurere et menneske med 70 kg 20 kropsvægt og med en tumor, der vejer 3,5 kg.) Således påbegyndte man behandlingen med tumorer i et meget fremskredet stadium, og dette var grunden til, at behandlingen ikke var så effektiv som ved det første eksperiment. Tallene i tabel 2 giver antallet af dyr med tumorer/alle dyr og ændringen 25 i middeltumorstørrelse i løbet af behandlingen.

DK 170832 B1 10

Tabel 2

Virkning af deuteriumberøvet vand på PC-3 prostatatumorer hos mus.

5 _

Dage Dyr med tumorer/alle dyr Middeltumordiameter (mm) Kontrol behandlet Kontrol behandlet 32 22/22 22/22 10,4 10,2 10 39 17/17 19/20 14,6 11,1 46 13/13 17/19 22,4 17,5 53 9/9 11/14 21,7 15,0 60 6/7 10/13 23,8 15,0 67 3/4 10/13 16,7 18,0 15 74 3/4 7/10 24,0 18,1 81 3/4 5/8 28,6 18,0 88 2/3 5/8 37,0 16,6 20 Resultaterne i tabel 2 viser, at kun 3 dyr (13%) ud af 22 i kontrolgruppen overlevede den 87. dag efter transplantationen af tumorcellerne, hvorimod 8 dyr (36%) ud af 22 i behandlingsgruppen stadig var levende på dag 88. På dette tidspunkt var to dyr (9%) og fem dyr (23%) levende i 25 henholdsvis kontrolgruppen og behandlingsgruppen. I 3 dyr i behandlingsgruppen kunne man observere tumorregression.

En signifikant forskel mellem behandlingsgruppen og kontrolgruppen bekræftes også af data for middeltumordiame-teren.

30 På basis af data i tabel 2 opregnes data for kumula tiv dødelighed i tabel 3.

11 DK 170832 B1

Tabel 3

Data for kumulativ dødelighed med PC-3 prostatatumorer.

5 Dage Kontrol Behandlet 32 0 0 39 5 2 46 9 3 10 53 13 8 60 15 9 67 18 9 74 18 12 81 18 14 15 88 19 14

Resultaterne i tabel 3 viser, at antallet af dyr, der døde i behandlingsgruppen, på alle trin af forsøget var 20 mindre end sådanne i kontrolgruppen. Det er værd at understrege, at kun 9 dyr på dag 67 efter transplantationen var døde i behandlingsgruppen, hvorimod dobbelt så mange dyr var døde i kontrolgruppen. Betydningen af denne forskel understreges af den kendsgerning, at en udviklingsperiode 25 for tumorer på en uge hos mus svarer til en periode på 200-300 dage hos mennesker. Således viser data i tabel 3, at overlevelsesperioden hos mennesker kan forlænges med år, selv om den medicinske behandling påbegyndes på et fremskredet stadium af sygdommen.

30 Ved et tredje forsøg transplanterede man HT-29 colon tumorceller til mus. Behandlingen, hvorved dyrene fik drikkevand indeholdende 94 ± 5 ppm deuterium, begyndte på dag 24 efter transplantationen. Middeltumorrumfang kan ses i tabel 4. Kontrolgruppen bestod af 13 dyr og behandlings-35 gruppen af 16 dyr. Det ses i tabel 4, at i løbet af behandlingsperioden på 90 dage var middeltumorrumfanget betydeligt lavere i behandlingsgruppen end i kontrolgruppen.

DK 170832 B1 12

Tabel 4

Virkning af D-berøvet vand på humane HT-29 tumorcolonceller i mus 5 _

Middeltumorrumfang, cm3

Dage Kontrol Behandling 1 0,16 0,16 10 20 0,81 0,45 35 2,28 1,88 55 5,82 4,85 70 8,09 6,80 85 19,48 10,96 15 90 20,74 12,35

Som et resume af resultaterne af dyreforsøgene kan man fastslå, at ved at benytte de farmaceutiske produkter 20 ifølge opfindelse til kurering af tumorsygdomme kan man i et tidligt trin nå en helbredelsesgrad på omtrent 50% og overlevelsesperioden kan forøges med 20-30% i et fremskredet trin af sygdommen. Disse resultater kan yderligere forbedres, hvis man benytter vand, der indeholder endnu 25 mindre deuterium.

Produkterne ifølge opfindelsen kan benyttes til terapeutiske formål på former, der indeholder den aktive ingrediens sammen med inerte fysiologiske acceptable bærere og/eller hjælpestoffer. Den aktive ingrediens kan omdannes 30 til præparater til oral indgivelse (f.eks. opløsninger, emulsioner, suspensioner etc.), parenteral indgivelse (f.eks. injicerbare opløsninger) eller til rektal indgivelse (opløsninger til rektal infusion). Den aktive ingrediens kan også indgives eksternt, eksempelvis på form 35 af salver.

De farmaceutiske produkter ifølge opfindelsen kan fremstilles ved kendte metoder, der konventionelt benyttes 13 DK 170832 B1 i den farmaceutiske industri, dvs. ved at blande det aktive middel og de inerte uorganiske eller organiske bærere, og derefter bearbejde blandingen til galeniske præparater.

Vand eller ethanol kan foretrukket benyttes som 5 væskeformig bærer.

De farmaceutiske produkter kan endvidere indeholde yderligere hjælpestoffer, der konventionelt benyttes i den farmaceutiske industri, f.eks. befugtningsmidler, sødemidler, duftmidler, puffere etc.

10 De medicinske opløsninger ifølge opfindelsen kan fremstilles ved at benytte kendte metoder, der sædvanligvis benyttes i fødevareindustrien til fremstilling af frugtjui-ce og sirupper, sodavand og øltyper, dvs. ved at blande det aktive middel med udgangsmaterialer fra sodavandsindustrien 15 og ølindustrien såsom frugtjuicer, juicekoncentrater, aromastoffer, sødestoffer, duftstoffer, essentielle olier samt andre additiver og hjælpestoffer, der sædvanligvis benyttes ved fremstilling af sodavand og øl.

Den daglige dosis af de farmaceutiske produkter 20 ifølge opfindelsen kan varieres inden for brede grænser afhængig af adskillige faktorer, f.eks. aktiviteten af den aktive ingrediens, tilstand og alder af patienten, tumortypen, dens grad af malignitet etc. Når det drejer sig om en patient med en kropsvægt på 70 kg, er den orale daglige 25 dosis 1-2 1 deuteriumberøvet væske indeholdende deuterium i et koncentrationsområde på fra 0,1 ppm til 110 ppm.

Det D-berøvede vand kan f.eks. indeholde 30-50 g carbonhydrater og andre aromastoffer eller smagsstoffer for at give de farmaceutiske produkter en bedre smag.

30 Når det drejer sig om injicerbare opløsninger, kan den daglige dosis være op til 2-6 1 og deuteriumkoncentrationen i vandet kan ændre sig mellem brede grænser (0,1-110 ppm). Almindeligvis bør deuteriumkoncentrationen i vandet i patientens krop formindskes med mindst 0,5 ppm om dagen 35 for at opnå den ønskede terapeutiske virkning. Disse doser er kun af informativ art, og den anvendte dosis skal altid fastlægges af den tilstedeværende læge.

DK 170832 B1 14

De vigtigste fordele ved produktet og fremgangsmåden ifølge opfindelsen er som følger: a) Fremgangsmåden giver en mulighed for på naturlig 5 måde at gribe direkte ind i reguleringsmekanismen for cel- leproliferation.

b) Tumorsygdomme kan forhindres og kureres ved anvendelse af de farmaceutiske produkter ifølge opfindelsen.

c) Komponenterne i produktet har ingen toksiske 10 bivirkninger.

d) Der frembringes ved fremstillingsprocessen ingen affaldsstoffer, der er skadelige for miljøet.

e) Processen kan udføres på en teknologisk simpel måde.

15 f) Der dannes ikke mutante celler under den terapeu tiske behandling, da den aktive ingrediens ikke er mutage-nisk. (De fleste af de indtil nu anvendte cytostatika har en kraftig mutagenisk virkning og frembringer derfor ofte nye tumorer).

20 g) Anvendelse af de farmaceutiske produkter ifølge opfindelsen medfører helbredelse og ikke blot forsinkelse af udvikling af sygdommen.

Produktet og fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres mere detaljeret i de følgende eksempler uden 25 herved at begrænse omfanget som defineret i kravene.

Eksempel 1

Produktion af D-berøvet vand ved elektrolyse.

30 Man elektrolyserer en vandig 15-20% vægt/volumen KOH

opløsning ved jævnstrøm og et potential på 2-5 V med en katode og en anode, der er skilt fra hinanden. Det ved katoden udviklede hydrogen, der indeholder deuterium i en formindsket koncentration brændes, og den herved dannede 35 vanddamp kondenseres og opsamles for sig selv. Der herved opnåede vand har et deuteriumindhold på 30-40 ppm, der kan nedsættes til 6-20 ppm ved en yderligere elektrolyse.

15 DK 170832 B1

Det således opnåede produkt kan benyttes til at stille væskebehovet hos patienter, der lider af tumorsygdomme og som udgangsmateriale til fremstilling af forbindelser med formindsket deuteriumindhold.

5 Slutproduktet ved processen er destilleret vand, hvorfor det foretrækkes at tilsætte essentielle salte, før dette benyttes til indtagelse af mennesker. Slutproduktet kan med fordel supplementeres med en saltblanding indeholdende 1000 mg natrium, 200 mg kalium, 160 mg calcium, 88 10 mg magnesium, 650 mg phosphor og 600 mg chlor i forhold til 1 1.

Eksempel 2

Produktion af D-berøvet vand ved destillation.

15

Vandet destilleres på en fraktionskolonne med 30-50 bunde under et tryk på 50-60 millibar og en temperatur på 45 til 50°C. Tilbagesvalingsværdien holdes på mellem 12 og 13 i løbet af destillationen. For at holde D-koncentratio-20 nen på et lavt niveau benytter man en ti gange fortynding ved bunden under destillationen. Hvis man benytter disse parametre, er koncentrationen af deuterium i produktet fra kolonnehovedet 20-30 ppm. Deuteriumindholdet af vandet kan sænkes til 1-10 ppm ved en yderligere forøgelse af bunde 25 og/eller ved at gentage destillationsprocessen. Slutproduktet fra processen er destilleret vand, hvorfor det er gavnligt at tilsætte essentielle salte før anvendelse til indtagelse af mennesker. Man kan med fordel benytte saltblandingen fra eksempel 1 til dette formål.

30

Eksempel 3

Produktion af D-berøvet fysiologisk saltopløsning.

Man satte 8,5 g NaCl til 1 1 destilleret vand 35 fremstillet ifølge eksempel 1 eller 2. En sådan fysiologisk saltopløsning indgives sædvanligvis som en infusionsopløsning efter udførelse af en sædvanlig sterilisationsproces.

DK 170832 B1 16

Hvis man benytter produktet på denne form, kan den daglige dosis forøges til 2-6 1 i alvorlige tilfælde.

Eksempel 4 5 Produktion af D-berøvede frugtjuicer.

Man blander destilleret vand fremstillet ifølge eksempel 1 eller 2 og med indhold af 20-30 ppm deuterium med vand og frugtjuicekoncentrat på følgende måde: 10 a) 0,8 rumfangsdele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium +0,2 rumfangsdele frugtjuicekoncentrat (slutkon-centrationen af deuterium er omtrent 45-50 ppm) ; b) 0,5 rumfangsdele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium + 0,2 rumfangsdele frugtkoncentrat + 0,3 rura- 15 fangsdele normalt vand, (slutkoncentrationen af deuterium er omtrent 85-90 ppm); c) 0,3 rumfangsdele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium + 0,2 rumfangsdele frugtjuicekoncentrat + 0,5 rumfangsdele normalt vand (slutkoncentrationen af deuterium 20 er omtrent 105-110 ppm).

Hvis man udgår fra vand, der indeholder en lavere koncentration af deuterium, kan man fremstille frugtjuicer med en endnu lavere deuteriumkoncentration.

25 Eksempel 5

Produkton af D-berøvede sodavandstyper med et indhold af kulsyre.

Destilleret vand fremstillet ifølge eksempel 1 eller 30 2 og med indhold af 20-30 ppm deuterium blandes med et sodavandskoncentrat indeholdende 50 g/1 sukker, 5 volumen% orange juice, 6 g/1 kulsyre, 1 g/1 citronsyre, 500 ml/1 ascorbinsyre og 500 mg/1 naturlige aromastoffer på følgende måde: 35 a) 0,8 volumendele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium + 0,2 volumendele sodavandskoncentrat (slutkoncentrat ion af deuterium er omtrent 45-50 ppm) ; 17 DK 170832 B1 b) 0,5 volumendele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium + 0,3 volumendele normalt vand + 0,2 volumendele sodavandskoncentrat (slutkoncent rat ion af deuterium omtrent 85-90 ppm); 5 c) 0,3 volumendele vand indeholdende 20-30 ppm deuterium + 0,5 volumendele normalt vand + 0,2 volumendele sodavandskoncentrat (slutkoncentration af deuterium er omtrent 105-110 ppm).

Hvis man udgår fra vand indeholdende deuterium i en 10 lavere koncentration, kan man endvidere fremstille sodavandsdrikke indeholdende deuterium i en lavere koncentration.

Eksempel 6 15 Produktion af øl med formindsket deuteriumindhold.

Byg opblødes først i vand med et indhold på 0,1 til 110 ppm deuterium til fremstilling af malt og undergår derefter spiring ved en temperatur på 5-15°C i et lag med en 20 tykkelse på 5-15 cm og under god beluftning.

Den spirede byg dehydratiseres ved en temperatur på mellem 56°C og 75°C, skilles fra resterne af spirerødderne og formales derefter. Den formalede malt blandes med en passende mængde vand med et deuteriumindhold på 0,1-110 25 ppm. Blandingen opvarmes til en temperatur mellem 50°C og 75°C, filtreres og brygges med humle. Det humlede øl filtreres, afkøles og inokuleres derefter med præpropageret Saccharomyces cerevisiae. Den primære fermenteringsproces ved 5-6°C varer 10 til 14 dage. Den sekundære fermentering 30 udføres i forseglede tromler ved 0°C i nogle uger, hvorefter det således fremstillede øl filtreres, fyldes på flasker og pasteuriseres.

Deuteriumindholdet af øl fremstillet ifølge dette eksempel afhænger af deuteriumindholdet af det anvendte 35 vand, som også påvirker deuteriumindholdet af ethanolen og de andre komponenter.

DK 170832 B1 18

Eksempel 7

Fremstilling af en hydratiserende salve med formindsket deuteriumindhold.

5

Den hydratiserende salve produceres på konventionel måde, idet man anvender D-berøvet vand. Sammensætningen af en alment anvendelig hydratiserende salve er beregnet på 100 g af produktet: 10 Unguentum hydrosum 550 g

Unguentum stearini 150 g

Aqua destillata, med et deuteriumindhold på 30-40 ppm 300 g

Claims

1. Produkter til kurering af tumorsygdomme, kendetegnet ved, at produkterne omfatter vand med et 5 deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm og/eller vandige opløsninger, der er egnede til indtagelse af mennesker og med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm som aktivt middel, eventuelt sammen med bærere og/eller hjælpestoffer, på form af farmaceutiske produkter eller medicinske opløsninger.

2. Farmaceutisk produkt ifølge krav 1, kende tegnet ved, at det er på form af en fysiologisk saltopløsning med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

3. Medicinsk opløsning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er på form af en frugtsirup, so- 15 davand eller øl med reduceret eller uden alkoholindhold og med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

4. Fremgangsmåde til fremstilling af produkter ifølge krav 1 til kurering af tumorsygdomme, kendetegnet ved, at man først ved elektrolyse og/eller destil- 2. lat ion fremstiller vand og/eller vandige opløsninger med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm og derefter i næste trin overfører det således producerede vand og/eller vandige opløsning med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm, eventuelt sammen med bærere og hjælpestoffer, til farmaceu- 25 tiske produkter eller medicinske opløsninger.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at man som farmaceutiske produkter fremstiller fysiologiske saltopløsninger med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendeteg net ved, at man som medicinske opløsninger fremstiller frugtsirupper, sodavand eller øl med reduceret eller uden alkoholindhold og med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.

7. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendeteg net ved, at man formulerer produktet på form af en in-jicerbar opløsning, en infusionsopløsning, en juice, en DK 170832 B1 sirup eller en hydratiserende salve med et deuteriumindhold på 0,1 til 110 ppm.