DK171097B1

DK171097B1 - Metalkomplekser af di- og tri(carboxymethyl)-tri- og -tetra(azabicykloalkan)-derivater og salte deraf, farmaceutiske midler, der indeholder disse forbindelser, anvendelse af forbindelserne til fremstilling af midler til NMR-røntgen- eller radiodiagnostik eller til radio- eller stråleterapi samt fremmgangsmåde til fremstilling af forbindelserne

Info

Publication number: DK171097B1
Application number: DK358889A
Authority: DK
Inventors: Johannes Platzek; Bernd Raduechel; Heinz Gries; Hans-Joachim Weinmann; Ulrich Speck
Original assignee: Schering Ag
Priority date: 1988-07-20
Filing date: 1989-07-19
Publication date: 1996-06-03
Also published as: IL91046A0; NO179104B; AU637052B2; GR3015162T3; EP0352218A2; DK358889A; PT91211A; CA1341035C; ZA895543B; JPH02104588A; ES2068908T3; ATE118775T1; NZ229996A; DE3825040A1; AU3827589A; JP2877844B2; IE66693B1; FI893509A7; EP0352218A3; IL91046A

Description

DK 171097 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte metalkomplekser af di- og tri(carboxymethyl)-tri- og -tetra(azabi-cykloalkan)-derivater og salte deraf med den nedenfor viste almene formel I, farmaceutiske midler, der indeholder mindst 5 én fysiologisk acceptabel forbindelse valgt blandt metalkomplekser af di- og tri(carboxymethyl)-tri- og -tetra(azabicyk-loalkan)-derivater med den almene formel I ifølge krav 1 samt 3,6,9,12,18-pentaazabicyklo[12.3.1]octadeca-1 (18) ,14,16-trien-N-tetraeddikesyre og 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9.3.1]-10 pentadeca-1(15),11,13-trien-N-trieddikesyre og deres Cu-, Pb-, Co- og Sr-komplekser, eventuelt sammen med fra den galenis-ke farmaci kendte sædvanlige additiver, samt anvendelsen af forbindelserne med formlen I og de ovennævnte forbindelser til fremstilling af midler til NMR-, røntgen- eller radio-15 diagnostik eller til radio- og stråleterapi. Endvidere angår opfindelsen en fremgangsmåde til fremstilling af de hidtil ukendte forbindelser med formlen I.

De ovennævnte nært beslægtede forbindelser kendes fra tidsskriftet "Tetrahedron", bind 37, side 769-770, 1981. De 20 drejer sig om forbindelserne 3,6,9,12,18-pentaazabicyklo-[12.3.1]octadeca-1(18),14,16-trien-N-tetraeddikesyre og 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9.3.1]pentadeca-1(15),11,13-trien-N-trieddikesyre og disses Cu-, Pb-, Co- og Sr-komplekser.

Metalkomplekser er allerede taget i betragtning i begyndelsen 25 af 1950'erne som kontrastmidler til radiologi. De dengang anvendte forbindelser var imidlertid toksiske på en sådan måde, at en anvendelse hos mennesker ikke kom i betragtning. Det var derfor helt overraskende, at bestemte komplekssalte efterfølgende viste sig at kunne tåles i tilstrækkeligt 30 omfang til, at man kunne tage en rutinemæssig anvendelse hos mennesker til diagnostiske formål under overvejelse. Som første repræsentant for denne stofklasse har det i den offentliggjorte europæiske patentansøgning nr. 71564 beskrevne dimegluminsalt af Gd-DTPA (gadolinium-III-kompleks 35 af diethylentriaminpentaeddikesyre) hidtil vist sig at være yderst velegnet ved klinisk afprøvning på over 7.000 2 DK 171097 B1 patienter til anvendelse som kontrastmiddel for kernespinto-mografi. Tyngdepunktet for anvendelsen ligger ved sygdomme i centralnervesystemet.

En væsentlig grund til, at Gd-DTPA kan tåles så godt ved den 5 kliniske anvendelse, ligger i den høje virkning ved kernespintomografi, især ved mange hjernetumorer. På grund af dets gode virkning kan Gd-DTPA anvendes i en meget lavere dosis, nemlig 0,1 mmol/kg legemsvægt, f.eks. ved anvendelse som røntgenkontrastmiddel ved mange røntgenundersøgelser.

10 Som en yderligere repræsentant for komplekssaltene har det i den tyske patentansøgning nr. 34 01 052 beskrevne meglumin-salt af Gd-DOTA (gadolinium-III-kompleks af 1,4,7,10-tetra-azacyklododecan-tetraeddikesyre) vist sig velegnet til diagnostiske formål.

15 Der består imidlertid et ønske om også at anvende chelater i højere doser. Dette er især tilfældet til påvisning af bestemte sygdomme uden for centralnervesystemet ved hjælp af kernespintomografi (NMR-diagnostik), men især ved anvendelse af chelater som røntgenkontrastmiddel.

20 For herved at kunne holde legemets rumfangsbelastning så lav som mulig er det nødvendigt at anvende højkoncentrerede chelatopløsninger. De hidtil kendte chelater er, navnlig på . grund af deres for høje osmolalitet, mindre egnede dertil.

Der foreligger således et behov for chelater, der har en 25 lavere osmolalitet end de tidligere kendte chelater. Samtidigt må dog forudsætningerne for anvendelsen af disse forbindelser hos mennesker være opfyldt med hensyn til afstanden mellem den virksomme dosis og den ved dyreforsøg påviste toksiske dosis (den terapeutiske bredde), organ-30 specificiteten, stabiliteten, den kontrastforstærkende virkning, den grad, hvori de tåles, samt kompleksforbindelsernes opløselighed. Det er således formålet med den foreliggende opfindelse at stille sådanne forbindelser og midler til rådighed samt at tilvejebringe en så enkel frem-35 gangsmåde som muligt til fremstilling deraf.

3 DK 171097 B1

Denne opgave løses med den foreliggende opfindelse.

Kompleksforbindelserne ifølge opfindelsen og de deraf tilberedte opløsninger opfylder de nævnte fordringer på en overraskende måde. De har en nedsat osmolalitet samt en 5 gunstigere terapeutisk bredde og/eller stabilitet og lagringsdygtighed for opløsningens kemiske bestanddele og/eller organspecificitet og/eller kontrastforstærkende virkning (f.eks. relaxivitet), og/eller de tåles bedre (f.eks. mindre cardiovaskulære eller allergiagtige bivirknin-10 ger) end de hidtil anvendte diagnostika.

Forbindelser, som er nært beslægtede med forbindelserne ifølge opfindelsen med den almene formel I, kendes fra EP offentliggørelsesskrift nr. 232 751. Disse kendte forbindelser har samme nyttige virkninger som forbindelserne 15 ifølge opfindelsen og kan anvendes til NMR-, røntgen- eller radiodiagnostik eller til radio- eller stråleterapi. Forbindelserne ifølge opfindelsen har imidlertid en virkning, der er overraskende meget bedre end virkningen af de fra EP offentliggørelsesskriftet kendte forbindelser, idet de 20 udviser overraskende høje relaxiviteter i forhold til de kendte forbindelser.

Selv uden specifikke foranstaltninger giver forbindelserne farmakokinetisk mulighed for forbedring af diagnosen for talrige sygdomme. Komplekserne udskilles igen for størstedelens 25 vedkommende uforandret og hurtigt, således at der selv i tilfælde af, at der anvendes forholdsvis toksiske metalioner, ikke iagttages skadelige virkninger til trods for en højere dosering.

Den praktiske anvendelse af de nye komplekser og kompleksdan-30 nere lettes også på grund af deres gunstige kemiske stabilitet .

» 4 DK 171097 B1

En yderligere væsentlig fordel ved de beskrevne komplekser og kompleksdannere er deres overordentlige kemiske mangesidighed. Udover centralatomet kan egenskaberne tilpasses efter fordringerne med hensyn til virkning, farma-5 kokinetik, tålelighed, opløselighed, håndterbarhed osv. ved valget af mange forskellige substituenter i makrocyklens 5-eller 6-leddede ring og/eller saltdanneren. Således kan der f.eks. opnås en ved diagnostik og terapi meget ønsket specificitet hos forbindelserne overfor strukturer i 10 organismen, bestemte biokemiske substanser, stofskifteprocesser, vævstilstande eller legemsvæsker.

Opfindelsen angår således makrocykliske forbindelser, som er ejendommelige ved, at de har den almene formel rOh

Z-N N-Z

i 1 '''Νν-βγ z hvor 15 . . .. er en enkelt- eller dobbeltbinding, A og B, der er ens eller forskellige, hver er en ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med 2 til 6 carbonatomer, D er en af grupperne R3 R3

20 I I

-CH- eller =C- , E er et nitrogenatom eller et oxygenatom, F er (-CH2-)n eller (=CH-)n, Z er et hydrogenatom eller gruppen -CH2COOY, hvor Y er et 25 hydrogenatom og/eller en metalionækvivalent af et grundstof DK 171097 B1 s med atomnummer 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 eller 57-83, R3 er et hydrogenatom, et halogenatom eller en gruppe OR5, hvor R5 er en C^-Cg-alkylgruppe, der eventuelt er substitueret med 1-3 hydroxygrupper, og 5 n er 0 eller l, samt deres salte med uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller aminosyreamider, under de forudsætninger, at mindst to af substituenterne Z står for gruppen -CH2C00Y, og at den almene formel I ikke repræsenterer 3,6,9,12,18-penta-10 azabicyklo[12.3.l] octadeca-1(18) , 14,16-trien-N-tetra-eddikesyre eller 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9.3.1]pentadeca-1(15) , 11,13-trien-N-trieddikesyre eller deres Cu-, Pb-, Co-og Sr-komplekser.

Hvis n står for tallet 0 og skal den således dannede 5-ring 15 være umættet, er dobbeltbindingen mellem 5-ringens stillinger 2,3 og 4,5.

Forbindelser med den almene formel I, hvori Y er et hydrogenatom, betegnes som kompleksdannere, og forbindelser, hvor mindst to af subst i tuenterne Y er en metalionækvivalent, 20 betegnes som metalkomplekser.

Grundstoffet med det ovennævnte atomnummer, der danner centralionen i det fysiologisk tålelige komplekssalt, kan til det ønskede anvendelsesformål for det diagnostiske middel ifølge opfindelsen naturligvis også være radioaktivt.

25 Hvis midlet ifølge opfindelsen er bestemt til anvendelse ved NMR-diagnostik, må komplekssaltets centralion være paramag-netisk. Dette er især divalente og trivalente ioner af grundstoffer med atomnumrene 21-29, 42, 44 og 58-70. Egnede ioner er f.eks. ionerne chrom(III), mangan(II), jern(II), 30 cobalt(II), nikkel (II), kobber(II), praseodym(III) , neodym(III), samarium(III) og ytterbium (III). På grund af deres meget kraftige magnetiske moment foretrækkes især ionerne gadolinium (III), terbium(III), dysprosium(III), 6 DK 171097 B1 holmium(III), erbium(III) og jern(III).

Til anvendelse af midlet ifølge opfindelsen indenfor nuklearmedicinen må centralionen være radioaktiv. Egnede er f.eks. radioaktive isotoper af grundstofferne kobber, cobalt, 5 gallium, germanium, yttrium, strontium, technetium, indium, ytterbium, gadolinium, samarium og iridium.

Hvis midlet ifølge opfindelsen er bestemt til anvendelse indenfor røntgendiagnostikken, må centralionen være afledt af et grundstof med et højere atomtal, for at man kan opnå til-10 strækkelig absorption af røntgenstrålerne. Det har vist sig, at til dette formål egner sig et diagnostisk middel, der indeholder et fysiologisk acceptabelt komplekssalt med centralioner af grundstoffer med atomnumre 21-29, 42, 44 eller 57-83; disse er f.eks. lanthan(III)-ionen og de 15 ovennævnte ioner af lånthanidrækken.

Som halogenatomer omfattet af skal nævnes fluor, chlor, brom og iod.

Som alkylengrupper A og B kommer ligekædede eller forgrenede kæder med 2 til 6 carbonatomer, fortrinsvis ethylen, 20 methylethylen og propylen, på tale.

Når ikke alle de sure hydrogenatomer er substitueret med centralionen kan et, flere eller alle tilbageværende hydrogenatomer være erstattet med kationer af uorganiske og/eller organiske baser eller aminosyrer. Egnede uorganiske kationer 25 er f.eks. lithiumionen, kaliumionen, calciumionen, magnesiumionen og navnlig natriumionen. Egnede kationer af organiske baser er blandt andre sådanne af primære, sekundære eller tertiære aminer som f.eks. ethanolamin, diethanolamin, morpholin, glucamin, N,N-dimethylglucamin og navnlig N-30 methylglucamin. Egnede kationer af aminosyrer er f.eks. kationer af lysin, arginin og ornithin.

7 DK 171097 B1

Fremstillingen af metalkomplekserne ifølge opfindelsen med den almene formel I sker ved, at man på i og for sig kendt måde alkylerer forbindelser med den almene formel I'

η-n N-H

I / (D,

Av / i N-a i I f hvor X er

eller en 5- eller 6-leddet ring, der kan omdannes til den 5 ønskede ring, og hvor A og B har de ovenfor angivne betydninger, med en halogenforbindelse med formlen III

ÅalCH2C00Y' (III) s, / hvor Hal er chlor, brom eller iod, og Y' er et hydrogenatom eller en syrede sk^rtt el sesgruppe, og derefter, eventuelt efter 10 omdannelse af X til den i slutproduktet ønskede 5- eller 6-leddede ring og i givet fald efter fraspaltning af beskyttelsesgruppen Y', om ønsket omsætter den således opnåede kompleksdanner med den almene formel I, hvor Y har betydningen hydrogen, på i og for sig kendt måde med mindst 15 ét metaloxid eller metalsalt af et grundstof med atomnummer 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 eller 57-83, hvorefter man om ønsket substituerer endnu tilstedeværende sure hydrogenatomer med kationer af uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller aminosyreamider.

20 Som beskyttelsesgrupper Y' kommer lavere alkyl-, aryl- og aralkyl grupper, f?. eks. methyl, ethyl, propyl, n-butyl, t-butyl, phenyl, benzyl, diphenylmethyl, triphenylmethyl, bis-(p-nitrophenyl)-methyl samt trialkylsilylgrupper på tale. Fraspaltningen af beskyttelsesgrupperne Y', som kan 25 gennemføres før eller efter omdannelse af X til den i 8 DK 171097 B1 slutproduktet ønskede 5- eller 6-leddede ring, sker efter for fagmanden kendte fremgangsmåder, f.eks. ved hydrolyse, hydrogenolyse, alkalisk forsæbning af esteren med alkali i en vandig-alkoholisk opløsning ved tempearturer fra 0 til 50°C 5 eller, i tilfælde af f.eks. t-butylestere, ved hjælp af tri-fluoreddikesyre.

Alkyleringen af addukterne 1' med halogenforbindelserne med den almene formel III sker i polære aprotiske opløsningsmidler som f.eks. dimethylformamid, acetonitril, dimethyl-10 sulfoxid, vandig tetrahydrofuran eller hexamethylphosphor-syretriamid i nærværelse af et syrebindende middel, som f.eks. en tertiær amin, f.eks. triethylamin, trimethylamin, N,N-dimethylaminopyridin, 1,1-diazabicyklo[4,3,0]nonen-5[DBN] 1,5-diazabicyklo[5,4,0]undecen-5 (DBU), et alkalimetal-, 15 jordalkalimetalcarbonat, -hydrogenearbonat eller -hydroxid (f.eks. natrium-, magnesium-, barium- eller kaliumcarbonat, -hydroxid eller -hydrogencarbonat) ved temperaturer mellem -10°C og 120°C, fortrinsvis mellem 0°C og 50°C.

Omdannelsen af en forstadieforbindelse til slutproduktet, som 20 indeholder den ønskede 5- eller 6-leddede ring, sker ved hjælp af for fagmanden kendte metoder. F.eks. skal nævnes hydrogenering af f.eks. ringene pyridin [Advan. Catal. 14, 203 (1963)], pyrrol [M. Freifelder, Practical Catalytic

Hydrogenation, 577, Wiley-Interscience, New York-London-25 Sydney-Toronto 1971], furan [US patentskrift nr. 3.194.818], pyrimidin [J. Med. Chem. 23., 291 (1972)], deoxygenering af nitroxid [E. Klingsberg, The Chemistry of Heterocyclic Compounds, bind 14, del 2, Interscience Publishers New York, 9 DK 171097 B1 side 120 (1961) ] , omdannelse og indføring af funktionelle grupper i 5- eller 6-ringen, f.eks. frigørelse af phenoliske hydroxygrupper [J. Org. Chem. .53, 5, (1988)], indføring af halogensubstituenter [E. Klingsberg, The Chemistry of 5 Heterocyclic Compounds, bind 14, del 2, Interscience Publishers New York, side 341 (1961), Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, bind V/3, 651 (1962)] eller udbytning af heteroatomer, f.eks. omdannelse af en furan til en pyrrol (US patentskrift nr. 2.478.456).

10 Funktionaliseringen af 4-chlorpyridinderivater (f.eks. azidudbytning) ved faseoverføringsmetoder under anvendelse af 18-krone-6 eller tetrabutylammoniumbromid som katalysator er beskrevet i "Phase Transfer Reactions" (Fluka Compendium bind 2; Walter E. Keller, Georg Thieme Verlag Stuttgart, New 15 York).

Den efterfølgende fjernelse af beskyttelsesgrupperne er problemløs og kan f.eks. ske ved behandling med en sur ionbytter i vandig-ethanolisk opløsning.

10 DK 171097 B1

Syntesen af addukterne med den almene formel I', som skal al-kyleres, sker ved ringslutning af to reaktanter, hvoraf den ene indeholder substituenten X, dvs. slutproduktets ønskede 5-eller 6-leddede ring, eller et forstadie der kan omdannes her-5 til.

Ringslutningen gennemføres ved fra litteraturen kendte metoder (f.eks. Org. Synth. 5jJ,, 86 ( 1978), Makrocyclic Polyether Syntheses, Springer Verlag Berlin, Heidelberg, New York 1982, 10 Coord. Chem. Rev. 3,3 ( 1968 ), Ann. Chem. 197 6, 916, J. Org. Chem. 4_9, 110 [1984]); den ene af de to reaktanter bærer ved kædeenden to afgående grupper, den anden to nitrogenatomer, der nukleofilt fortrænger disse afgående grupper. Som eksempel kan nævnes omsætningen af dichlor-, dibrom-, dimesyloxy-, di-15 tosyloxy- eller di a 1koxycarbony1 a 1ky1enforbi ndel ser , som endestillet indeholder substituenten X og eventuelt 1 til 5 nitrogenatomer, med endest i Ilede diazaalkylenforbindelser, der eventuelt indeholder 1 til 5 yderligere nitrogenatomer i al -kylenkæden. Substituenten X kan i stedet også være indeholdt i 20 den anden reaktant, dvs. den med endestillede nukleofile nitrogenatomer. Nitrogenatomerne er eventuelt beskyttede, f.eks. som tosylater eller trif1uoracetater og frigøres forud for den efterfølgende alkyleringsreaktion ved hjælp af fra litteraturen kendte fremgangsmåder (tosylaterne f.eks. med mineralsy-25 rer, a 1ka1 imeta11 er i flydende ammoniak, hydrogenbromidsyre og phenol, RedAl®, 1 ithiuma1uminiumhydrid, natriumamalgam, jvf. f.eks. Liebigs Ann. Chem. 1977, 1344, Tetrahedron Letters 1976, 3477; trif1uoracetaterne f.eks. med mineralsyrer eller ammoniak i methanol, jvf. f.eks. Tetrahedron Letters 1967, 30 289).

Til fremstilling af på nitrogenatomerne forskelligt (hydrogen eller gruppen CH2COOY) substituerede makrocykler kan disse atomer i addukterne være forsynet med forskellige beskyttel-3® sesgrupper, f.eks. med tosylat- og benzylgrupper. Sidstnævnte fjernes da ligeledes ved fra litteraturen kendte metoder (fortrinsvis ved hydrering, f.eks. EP patentansøgning nr. 232751).

Hvis der anvendes diestereved r i ngs 1 u t n i ngsr eakt i onen( må de således opnåede diketoforbindelser reduceres ved hjælp af for fagfolk kendte metoder, f.eks. med diboran.

DK Ί 71097 B1 5 Endvidere kan tilsvarende substituerede endestillede bisaldehyder ringsluttes med de i det påkommende tilfælde ønskede endestillede bisaminer; reduktionen af de således opnåede Schiffske baser sker ved fra litteraturen kendte metoder, f.eks. ved katalystisk hydrogenering [Helv. Chim. Acta 61, 10 1376 (1978)].

Fremstillingen af de som udgangsforbindelser til ringslutningen nødvendige aminer sker i analogi med fra litteraturen kendte metoder.

15

Ved at gå ud fra en N-beskyttet aminosyre opnår man en tri-amin ved omsætning med en partielt beskyttet diamin (f.eks. ved carbodi imidmetoden) , fraspaltning af beskyttelsesgruppen og diboranredukti on.

20

Omsætning af en ud fra aminosyrer opnåelig diamin (Eur. J.

Med. Chem.-Chim. Ther. 2X > 333 (1986)) med den dobbelte molære mængde N-beskyttet ω-aminosyre giver en tetramin efter en passende oparbejdning.

25

De ønskede diaminer kan også fremstilles ved Gabriel-reduktion ud fra f.eks. de tilsvarende tosylater eller halogenider [jvf. f.eks. Inorg. Chem. 2jj, 4781 ( 1986)].

30 I begge tilfælde kan antallet af carbonatomer mellem N-atomerne bestemmes ud fra arten af de som koblingspartnere anvendte diaminer eller aminosyrer.

De således opnåede forbindelser med den almene formel I, hvori hvert 35 y betegner et hydrogenatom, udgør kompleksdannere. De kan isoleres og renses eller uden isolering omdannes til metalkomplekser med den almene formel 1^ hvor mindst to af isubsti-tuetnerne Y betegner en metalionækvivalent.

12 DK 171097 B1

Fremstilling af metalkomplekserne ifølge opfindelsen sker på den måde, der er offentliggjort i DE offentliggørelsesskrift nr. 34 01 052, idet man opløser eller suspenderer metaloxidet eller et metalsalt (f.eks. nitratet, acetatet, carbonatet, 5 chloridet eller sulfatet) af et grundstof med atomnummer 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 eller 57-83 i' vand og/eller i en lavere alkohol (såsom methanol, ethanol eller isopropanol) og omsætter opløsningen eller suspensionen med den ækvivalente mængde af en kompleksdannende syre med den almene formel I, hvori 10 Y har betydningen et hydrogenatom, fortrinsvis ved temperaturer mellem 40 og 100°C, og derefter om ønsket substituerer tilstedeværende sure hydrogenatomer på syregrupperne med kationer af uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller am inosyreami der .

15

Neutralisationen sker her ved hjælp af uorganiske baser (f.eks. hydroxider, carbonater eller bicarbonater) af f.eks. natrium, kalium, lithium, magnesium eller calcium og/eller organiske base^ herunder primære, sekundære og tertiære 20 aminer som f.eks. ethanolamin, morpholin, glucamin, N-methyl-og N,N-di methy1 g 1ucamin , såvel som basiske aminosyrer, som f.eks. lysin, arginin og ornithin.

Til fremstilling af neutrale kompleksforbindelser kan man 25 f.eks. til de sure komplekssalte i vandig opløsning eller suspension tilsætte så meget af de ønskede baser, at neutralpunktet nås. Den opnåede opløsning kan derefter inddampes til tørhed under vakuum. Det er hyppigt en fordel at udfælde de dannede neutralsalte ved tilsætning af med vand blandbare op-30 løsningsmidler, som f.eks. alkoholer (methanol, ethanol, isopropanol og andre), lavere ketoner (acetone og andre) eller polære ethere (tetrahydrofuran, dioxan, 1,2-dimethoxyethan og andre) og på denne måde opnå krysta 11 i sater, der er lette at isolere og lette at rense. Det har vist sig at være særligt fordelag-35 tigt at sætte den ønskede base til reaktionsblandingen allerede under kompleksdannelsen og derved spare et fremgangs-mådetr i n.

13 DK 171097 B1

Hvis de sure kompleksforbindelser indeholder flere frie syregrupper, er det ofte hensigtsmæssigt at fremstille neutrale blandingssalte, der indeholder såvel uorganiske som organiske kationer som modioner.

5

Dette kan f.eks. ske ved, at man omsætter den kompleksdannende syre i vandig suspension eller opløsning med oxidet eller saltet af det grundstof, der leverer eentra 1 ionen, og halvdelen af den til neutralisation nødvendige mængde af en organisk 10 base, hvorefter man isolerer det dannede komplekssalt op om ønsket renser og derefter tilsætter den nødvendige mængde uorganisk base til fuldstændig neutralisation. Rækkefølgen for basetilsætningen kan pgså være omvendt.

15 Dersom der anvendes kompleksforbindelser, der indeholder radioaktive isotoper, kan fremstillingen : foretages ifølge de metoder, der er beskrevet i "Radiotracers for Medical Applications", bind 1 CRC-Press, Boca Raton, Florida.

20 Fremstillingen af det farmaceutiske middel ifølge opfindelsen sker ligeledes på i og for sig kendt måde, idet kompleksforbindelserne ifølge opfi ndelsen; eventuelt under tilsætning af fra den galeniske teknik sædvanlige tilsætninger suspenderes eller opløses i et vandigt medium, hvorefter suspensionen eller 25 opløsningen eventuelt steriliseres. Egnede tilsætninger er f.eks. fysiologisk acceptable puffere (som f.eks. t rometha-min), mindre tilsætninger af komp1eksdannere (som f.eks. di-ethylentriaminpentaeddikesyre) eller om nødvendigt elektrolytter, som f.eks. natriumch1 or id, eller antioxi- 30 danter, som f.eks. ascorbinsyre.

Hvis der til den enterale indgift eller andre formål ønskes suspensioner eller opløsninger af midlet ifølge opfindelsen i vand eller i en fysiologisk saltopløsning, blandes disse med et eller 35 flere fra den galeniske teknik sædvanlige hjælpestoffer (f.eks. methyl cel 1ulose, lactose, mannitol) og/eller tensider (som f.eks. lecithin, Tween®, Myrj®) og/eller aromastoffer til smagskorrektion (f.eks. æteriske olier).

14 DK 171097 B1

Principielt er det også muligt at fremstille de farmaceutiske midler ifølge opfindelsen uden isolering af komplekssaltene. I hvert enkelt tilfælde må der drages omsorg for, at man foretager chelat-dannelsen på en sådan måde, at saltene og saltopløsningerne 5 ifølge opfindelsen praktisk talt er fri for ikke-komp1eks-bundne, toksisk virkende metalioner.

Dette kan f.eks. realiseres ved hjælp af farveindikatorer såsom xylenolorange ved kontro 11itrer i nger under fremstil-10 lingsprocessen. Opfindelsen angår således også fremgangsmåder til fremstilling af kompleksforbindelserne og deres salte. Som sidste sikkerhed kan man foretage en rensning af diet isolerede komplekssalt.

15 De farmaceutiske midler ifølge opfindelsen indeholder fortrinsvis 1 pmol - 1 mol/1 komplekssalt og doseres som regel i mængder fra 0,001 til 5 mmol/kg. De er bestemt til enteral og parenteral administration. Komp1eksforbi nde1serne ifølge opfindelsen kommer til anvendelse 20 1. til NMR- og røntgen-diagnostik i form af deres komplekser med ioner af grundstoffer med atomnumrene 21-29, 42, 44 og 57-83 ; 2. til radiodiagnostik og radioterapi i form af deres komplek- 25 ser med radioaktive isotoper af grundstoffer med atomnum rene 27, 29, 31, 32, 37-39, 43, 49, 62, 64, 70 og 77.

Midlerne ifølge opfindelsen opfylder de mangfoldige forudsætninger for egnethed som kontrastmiddel til kernespintomografi.

30 Således er de fremragende egnede til efter oral eller parenteral indgift ved forøgelse af signalintensiteten at forbedre det ved hjælp af kernespintomografer opnåede billede med hensyn til de med billedet opnåelige oplysninger. Desuden udviser de den høje virkning, der er nødvendig fo^ at man bela-35 ster legemet med så få mængder som muligt af fremmede stoffer, og den gode tålbarhed, som er nødvendig for at opretholde undersøgelsernes ikke-invasive karakter.

DK 171097 B1 15

Den gode vandopløselighed og lave osmolalitet hos midlerne ifølge opfindelsen gør det muligt at fremstille højkoncentrerede opløsninger, hvormed kredsløbets volumenbelastning kan holdes inden for forsvarlige grænser, og hvormed fortyndingen som 5 følge af legemsvæsker kan udlignes, dvs."NMR-diagnostika^må være 100 til 1000 gange mere vandopløselige: end t’l NMR-spek-troskopi. Desuden udviser midlerne ifølge opfindelsen ikke blot en høj stabilitet in vitroy men også en overraskende høj stabilitet in vivo, således at der kun yderst langsomt sker 10 en frigivelse eller en udbytning af de i komplekserne ikke-covalent bundne - i sig selv giftige - ioner inden for den tid, hvorunder de nye kontrastmidler igen udskilles fuldstændigt.

I5 I almindelighed doseres midlerne ifølge opfindelsen til anvendelse som NMR-di agnost ika i mængder fra 0,001 til 5 mmol/ kg, fortrinsvis 0,005-0,5 mmol/kg. Detaljer vedrørende anvendelsen omtales f.eks. i H. J. Weinmann et al., Am. J. of Roentgenology 142, 619 (1984).

20 Særligt lave doseringer (under 1 mg/kg legemsvægt) af organspecifikke NMR-di agnost ika kan f.eks. anvendes til påvisning af tumorer og hjerte i nf arkt.

25 Endvidere kan komp1eksforbinde1 serne ifølge opfindelsen med fordel anvendes som susceptibi 1 itetsreagenser og shift-reagen-ser til NMR-spektroskop i in vivo.

Midlerne ifølge opfindelsen er på grund af deres gunstige ra-3 0 di oak ti ve egenskaber og den gode stabilitet af de deri indeholdte kompleksforbindelser} også egnede som rad i od i agnost i ka . Detaljer vedrørende anvendelsen og doseringen er beskrevet f.eks. i "Rådd iotracers for Medical Applications", CRC-Press, Boca

Raton, Florida.

En yderligere bi 11edgi vende metode med radioaktive isotoper er pos itron-emissi ons-tomograf i , hvor der anvendes positronemit- 35 16 DK 171097 B1 terende isotoper som f.eks. ^^Sc, ^4Sc, 82Fe, 55q0 0g 68q3 (w.

D. Heiss, Μ. E. Phelps, Positron Emission Tomography of Brain, Springer Verlag Berlin, Heidelberg, New York 1983).

5 Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også anvendes inden for radioimmun- eller stråleterapi. Sådanne terapier adskiller sig kun fra den tilsvarende diagnostik ved mængden og arten af den anvendte isotop. Målet er her ødelæggelse af tumorceller ved hjælp af energirig kortbølget stråling med en så lille række-10 vidde som muligt. Egnede β-emitterende ioner er f.eks. 46Sc, 47Sc, 48Sc, 72Ga og 73Ga. Egnede α-emitterende ioner med lave halveringstider er f.eks. ^11b i, 2l2Bi, 213 b i og 2l^Bi, hvoraf 212 B i foretrækkes. En egnet proton- og elektron-emitterende ion er l58Gd, der kan opnås ud fra l57Gd ved neutronindfang-15 n i n g .

Ved anvendelsen af de terapeutiske midler ifølge opfindelsen in vivo kan disse indgives sammen med en egnet bærer, som f.eks. serum eller en fysiologisk kogsaltopløsning, og sammen med 20 et andet protein, som f.eks. human serumalbumin. Doseringen afhænger her af arten af cellulær ødelæggelse, den benyttede metalion og arten af den bi 11 eddannende metode.

De terapeutiske midler ifølge opfindelsen indgives parente-28 ralt, fortrinsvis intravenøst.

Detaljer vedrørende anvendelsen af rad i oterapeut ika omtales f.eks. i R. W. Kozak et al., TIBTEC. Oktober 1986, 262.

30 Midlerne ifølge opfindelsen egner sig fremragende som røntgenkon trastmid 1 er, hvor det særligt skal fremhæves, at der med disse ikke kan erkendes nogen tegn på de fra iodholdige kontrastmidler kendte anafylaksi-agtige reaktioner ved biokemiskfarmakologiske undersøgelser. De er særligt værdifulde på 35 grund af de gunstige absorptionsegenskaber i områder med højere rørspændinger til digitale substraktionsteknikker.

17 DK 171097 B1 I almindelighed indgives midlerne ifølge opfindelsen til anvendelse som røntgenkontrastmidde1 i analogi med f.eks. meglu-min-diatrizoat i mænger på 0,1 - 5 mmol/kg, fortrinsvis 0,25 - 1 mmol/kg.

5

Detaljer vedrørende anvendelsen som røntgenkontrastmidl er omtales f.eks. i Barke, Rontgenkontrastmittel, G. Thieme, Leipzig (1970) og P. Thurn, E. Biicheler - "EinfUhrung in die Rontgendiagnosik", G. Thieme, Stuttgart, New York (1977).

10

Det er alt i alt lykkedes at syntetisere nye kompleksdannere, metalkomplekser og metalkomplekssalte, der åbner for nye muligheder inden for den diagnostiske og terapeutiske medicin. Navnlig udviklingen af nye bi 11 eddannende fremgangsmåder inden 15 for den medicinske diagnostik gør denne udvikling ønskelig.

De efterfølgende eksempler tjener til nærmere illustration af den foreliggende opfindelse .

20 Eksempel 1 a) 3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,-l]pentadeca-l(15),11,13-trien 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Til 121,9 g (200 mol) N,N*,N"-tris-(p-tolylsulfonyl)-diethy- 2 1 entri amin-N,N"-di natriumsa11 i 1600 ml di methy1formam id sæt 3 tes dråbevis i løbet af 3 timer ved 100eC en opløsning af 35,2 4 g (200 mol) 2,6-bis-(chlormethyl )-pyrid in (opløst i 700 ml di 5 methyl formamid) . Der omrøres natten over ved 100eC. Til den 6 varme opløsning sættes dråbevis 2 1 vand, og der afkøles til 7 0°C. Bundfaldet afsuges og vaskes med vand. Efter tørring un 8 der vakuum (60eC) omkrystalliseres fra acetonitril. Der opnås 9 92,3 g (69% af det teoretiske) af den i overskriften angivne 10 forbindelse som et farveløst pulver.

11

Analyse:

Beregnet: C 57,46, H 5,43, N 8,38, 0 14,35, S 14,38 Fundet: C 57,39, H 5,48, N 8,35 S 14,34 18 DK 171097 B1 b) 3,6,9,15-tetraazibicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-tri-en-tetrahydrosul fat 90,3 g (135 mmol) af den i overskriften til eksempel la angiv-5 ne forbindelse indføres i 270 ml koncentreret svovlsyre og der omrøres i 48 timer ved 100eC. Der afkøles til 0eC og tilsættes dråbevis 1,35 1 absolut ether. Bundfaldet afsuges og udrøres i 800 ml methanol. Efter filtrering og inddampning tørres der under vakuum ved 50eC.

10

Udbytte: 42,6 g (52,7% af det teoretiske) af et fast stof, der flyder ud i luft.

Analyse: Beregnet: C 22,07, H 4,38, N 9,36, 0 42,76, S 21,43 15 Fundet: C 22,10, H 4,42, N 9,31, S 21,40 c) 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien 40.0 g (66,8 mmol) af den i titlen til eksempel lb angivne 20 forbindelse opløses i 100 ml vand og indstilles med 32% natriumhydroxid på pH 11. Der ekstraheres 8 gange med 150 ml methy-lenchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Efter inddampning under vakuum opnås 9,79 g (71% af det teoretiske) i form af et gulligt pulver .

25

Analyse: Beregnet: C 64,04, H 8,79, N 27,16

Fundet: C 63,91, H 8,85, N 26,98 d) 3,6,9-tris-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]- 30 pentadeca-1(15),11,13-trien 33.1 g (55,1 mmol) af den i overskriften til eksempel lc angivne forbindelse indstilles i 150 ml vand til pH 8,5 med 6N kaliumhydroxid. Til denne opløsning sættes 20,84 g (220,5 35 mmol) chloreddikesyre, hvorefter der indstilles til pH 9,5 med en 6N kaliumhydroxidopløsning og opvarmes til 45°C. Der omrøres i 12 timer ved denne temperatur og pH-værdien holdes mellem 9,5 og 10 ved 19 DK 171097 B1 tilsætning af 6N kaliumhydroxid. Efter afkøling til stuetemperatur indstilles der til pH 2 med koncentreret saltsyre/og der inddampes til tørhed. Remanensen ekstraheres med 300 ml etha-nol/50 ml acetone, det faste stof frafi 11reres, og filtratet 5 inddampes under vakuum. Remanensen opløses i en smule vand og sættes på en kat ionbyttersøj1e (IR 120). Efter skylning med vand elueres liganden med en 0,5 N vandig anmoniakopløsning. Fraktionerne inddampes, optages i lidt vand og føres over en an ionbyttersøjle (IRA 67). Der vaskes først med vand, hvoref-10 ter der elueres med 0,5 N myresyre. Der inddampes under vakuum og remanensen opløses i varm ethanol. Ved forsigtig tilsætning af acetone og køling på isbad udkrystalliserer den i overskriften angivne forbindelse.

15 Udbytte: 12,37 g (59% af det teoretiske) af en kraftigt hygroskopisk forbindelse.

Analyse: Beregnet: C 53,67, H 6,36, N 14,73, 0 25,24 Fundet: C 53,55, H 6,43, N 14,65.

20 e) Gadolinium-komp1eks af 3,6,9-tris-(carboxymethy1)- 3,6,9,15-tetraazabi cyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-tr i en 25 5,0 g (13,14 mmol) af den i overskriften til eksempel ld an givne forbindelse opløses i 20 ml afioniseret vand, og der tilsættes 2,38 g (6,57 mmol) gado1 i niumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90eC. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres .

30

Udbytte: 7,74 g (100% af det teoretiske) af et hvidt amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 9,31% vand.

Analyse: 35 Beregnet: C 38,19, H 3,96, N 10,46, 0 17,98, Gd 29,41 Fundet: C 38,11, H 4,05, N 10,38, Gd 29,32 DK 171097 B1 20

Der måltes følgende relaxivitet i plasma (målingerne af re-laxat i onstider T ^ skete i et Minispec p20 (Bruker) ved 0,46 Tesla ( = 2OMHz) ved 40eC):

Ti-re1axivitet: 7,64 (1/mmol.sek) 5 Til sammenligning: Di meglumi nsaltet af gadolini umkomp1 ekset af diethylentriaminpentaeddikesyre (Gd-DTPA): T^-relaxivitet: 4,95 (1/mmol.sek)

Osmolalitet af en 0,5 molær opløsning ved 37*C: 0,55 (osml/kg vand) 10 Til sammen 1igning dimegluminsalt af Gd-DTPA: 1,1 (osml/kg vand) .

På analog måde opnår man med jern-III-oxid, Fe203, jern-III-komplekset af 3,6,9-1ri s-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraazabi -15 cyk1 o[9,3,1]pentadeca-1(15),11,13-1ri en som et brunt pulver.

Analyse (beregnet på vandfrit stof):

Beregnet: C 47,13, H 4,89, N 12,83, Fe 12,89

Fundet: C 47,04, H 4,96, N 12,84, Fe 12,81 20 Ti-re1axivitet (1/mmol.sek), 40°C, vand, 20 MHz: 0,49.

f) Dyspros ium-kompleks af 3,6 , 9-1ri s-( carboxymethy1)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 25 Hvis man i stedet for gado 1 i n i umox i d i eksempel le anvender dyspros iumoxid, opnår man den i overskriften anførte forbindelse praktisk talt i kvantitativt udbytte.

Analyse: 30 Beregnet: C 37,82, H 3,92, N 10,38, 0 17,78, Dy 30,10

Fundet: C 37,87, H 3,98, N 10,24, Dy 30,02 35 21 DK 171097 B1 g) Ytterbium-komp1eks af 3,6,9-tris-(carboxymethyl)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien

Hvis man i stedet for gado1 iniumoxid i eksempel le anvender 5 ytterbiumoxid, opnår man den i overskriften anførte forbindelse praktisk talt i kvantitativt udbytte.

Analyse:

Beregnet: C 37,09, H 3,85, N 10,18, 0 17,44, Yb 31,44 10 Fundet: C 37,13, H 3,94, N 10,09, Yb 31,37 h) Megluminsalt af mangan-II-komplekset af 3,6,9-tris-(carboxy-methyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(l5), - 11,13-trien 15 3,0 g (7,89 mmol) af den i overskriften til eksempel ld nævnte forbindelse opløses i 20 ml afioniseret vand og der tilsættes 907 mg (7,89 mmol) mangan-II-carbonat. Der omrøres i 2 timer ved 80°C. Opløsningen filtreres/ og filtratet indstil-20 les på pH 7,2 med en 1 molær N-methylglucaminopløsning. Derefter frysetørres.

Udbytte: 5,56 g (100% af det teoretiske) af et lysrosa, skinnende, amorft pu1 ver som ifølge analyse indeholder 12,2% 25 vand.

Analyse:

Beregnet: C 45,86, H 6,25, N 11,14, 0 28,00, Mn 8,74 Fundet: C 45,98, H 6,21, N 11,08, Mn 8,68 30 35 DK 171097 B1

Eksempel 2 22 a) 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l] pentadecan .

5 6,0 g (15,77 mmol) af den i overskriften til eksempel ld angivne forbindelse opløses i 200 ml 5% saltsyre og hydrogeneres i en autoklav over en rhodium-katalysator (5% Rh/C) ved 30 bar og 45 ° C. Efter 4 timer filtreres katalysatoren fra og 10 der inddampes under vakuum. Remanensen renses på den i eksempel ld beskrevne måde på ionbyttere. Krystallisation fra methanol /acetone giver 4,75 g (78% af det teoretiske) af en ekstremt hygroskopisk forbindelse.

15 Analyse: Beregnet: C 52,83, H 7,83, N 14,50, 0 24,84

Fundet: C 52,94, H 7,89, N 14,37.

b) Gadolinium-kompleks af 3,6,9-tris-(carboxymethy1)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,1]pentadecan 20

Til 4,3 g (11,13 mmol) af den i overskriften til eksempel 2a angivne forbindelse i 20 ml af ioniseret vand sættes 2,02 g (5,57 mmol) gado1 iniumoxid og der omrøres i 3 timer ved 90°C. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres. Der opnås 6,5 25 g (100% af det teoretiske) af et hvidt, fnugget pulver, som ifølge analyse indeholder 10,3% vand.

Analyse:

Beregnet: C 37,76, H 5,03, N 10,36, 0 17,76, Gd 29,08 30 Fundet: C 37,63, H 5,12, N 10,33, Gd 28,97.

35 23 DK 171097 B1

Eksempel 3 a) 3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]penta-deca-l(15) ,11,13-trien 5 15,8 g (76,6 mmol) af den i overskriften til eksempel lc angivne forbindelse, 42,7 ml triethylamin (306,4 mmol) og 50 mg dimethy1 aminopyridin (DMAP) opløses i 300 ml absolut methylen-chlorid. Der tilsættes 28,9 ml (306,4 mmol) eddikesyreanhy-10 drid og omrøres natten over ved stuetemperatur. Opløsningen inddampes under vakuum og remanensen optages i 200 ml 3% natri umcarbonatopløsning . Der ekstraheres 2 gange med 150 ml methylenchlorid. Efter tørring af den organiske fase over magnesiumsulfat inddampes der under vakuum. Remanensen omkrystal-15 li seres fra ether/ethylacetat. Der opnås 23,93 g (94% af det teoretiske) af den i overskr i ften anførte forbindelse i form af hvide :flager.

Analyse: Beregnet: C 61,42, H 7,28, N 16,86, 0 14,44 20 Fundet: C 61,48, H 7,37, N 16,80 b) 3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]penta-deca-l(15),ll,13-trien-15-N-oxid 1 2 3 4 5 6 22,5 g (67,7 mmol) af den i overskriften til eksempel 3a an 2 givne forbindelse opløses i 100 ml iseddike. Der tilføjes 7,7 3 ml af en 30% hydrogenper oxidopløsning og opvarmes i 4 timer 4 til 70eC. Derefter tilsættes yderligere 3,9 ml 30% hydrogen- 5 perox i dop 1 øsn i ng, og der omrøres i yderligere 1 time ved 70°C.

6

Der inddampes under vakuum til en tredjedel rumfang og tilsættes forsigtigt en nrsttet natriumcarbonatoplosning indtil alkalisk reaktion. Der ekstraheres 2 gange med 250 ml methylen-chlorid^og derefter tørres de organiske faser over magnesiumsulfat. Efter inddampning under vakuum og krystallisation fra ether/ethylacetat opnås 18,63 g (79% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et krystallinsk pulver.

24 DK 171097 B1

Analyse: Beregnet: C 58,60, H 6,94, N 16,08, 0 16,07 Fundet: C 58,47, H 6,88, N 16,14 c) 13-nitro-3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-tet raazabi cyk- 5 lo[9,3,1 ] pentadeca-1 (15),ll,13-trien-15-N-oxid 17 g (48,8 mmol) af den i overskriften til eksempel 3b angivne forbindelse opløses i 40 ml 90% svovlsyre og opvarmes til 60°C. Til denne opløsning sættes dråbevist 14 ml koncentre-10 ret salpetersyre (d=l,36) og der omrøres i 3 timer ved 60* C.

Der udhældes på is, og bundfaldet frafiltreres og vaskes med rigeligt vand. Efter tørring under vakuum opnås et orangefarvet pulver, der omkrystalliseres fra acetone.

Udbytte: 9,2 g (48% af det teoretiske) i form af gule rhomber.

15

Analyse: Beregnet: C 51,90, H 5,89, N 17,80, 0 24,40 Fundet: C 52,01, H 5,76, N 17,64.

d) 13,13’-ethylendioxy-bis-[3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-te- 20 traazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien-15-N-oxid]

En frisk tilberedt opløsning af ethylenglycol-dinatrium i dimethyl formamid (fremstillet ud fra 620 mg ethandiol og 600 mg natriumhydrid [80% suspension i paraffinolie] i 15 ml vandfrit 25 dimethylformamid) sættes i løbet af 30 minutter dråbevis til en 50eC varm opløsning af 8 g (20,34 mmol) af den i overskriften til eksempel 3c angivne forbi ndel se^ og der omrøres natten over ved denne temperatur. Der tilsættes 10 ml vand og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silica-30 gel (elueringsmiddel: methanol/32% vandig ammoniakopløsning = 10/1). Efter krystallisation fra ether/ethylacetat opnås 3/15 g (41% af det teoretiske) af et gulligt krystallinsk pulver.

Analyse: Beregnet: C 57,28, H 6,68, N 14,85, 0 21,19 35 Fundet: C 57,40, H 6,61, N 14,79.

DK 171097 B1 25 e) 13,13'-ethylendioxy-bis~[3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien] 3 g (3,97 mmol) af den i overskriften til eksempel 3d angivne 5 forbindelse opløses i 100 ml ethanol, hvorefter der tilsættes'1 ml koncentreret saltsyre og hydrogeneres over Pd/C. Katalysatoren filtreres fra, der inddampes under vakuum, og remanensen optages i 50 ml 3% natriumcarbonatopløsning. Der ekstraheres 2 gange med 100 ml methylenchlorid. Efter tørring af de organ i-10 ske faser over magnesiumsulfat skilles opløsningsmidlet fra under vakuum, og der krystalliseres fra ether/ethylacetat.

Udbytte: 2,87 g (87% af det teoretiske) i form af hvide flager.

15 Analyse: Beregnet: C 59,81, H 6,97, N 15,50, 0 17,71 Fundet: C 59,70, H 6,91, N 15,39 f) lSjlS'-ethylendioxy-bis-tSjejBjlS-tetraazabicyklotgjS,!]-pentadeca-l(15),11,13-trien] 20 2,5 g (3,46 mmol) af den i overskriften til eksempel 3e angivne forbindelse og 4,66 g (41,5 mmol) kalium-t-butylat opløses i 40 ml dioxan under nitrogen og opvarmes natten over til kogning under tilbagesvaling. Der inddampes under vakuum, rema-25 nensen optages i 50 ml vand og bringes til pH 10 med 2N natriumhydroxid. Efter ekstraktion 6 gange med 80 ml methylenchlorid hver gang tørres der over magnes i umsul f at7 og opløsningsmidlet fjernes under vakuum.

Udbytte: 1,55 g (95% af det teoretiske) af en bleggul olie, 30 der krystalliserer ved henstand.

Analyse: Beregnet: C 61,25, H 8,14, N 23,81, 0 6,80 Fundet: C 61,17, H 8,20, N 23,93 35 DK 171097 B1 26 g) 13,13'-ethylendioxy-bis-[3,6,9-tris-(carboxymethyl ) - 3,6,9,15-tetraazabi cykl o[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien] 5 1,4 g (2,97 mmol) af den i overskriften til eksempel 3f angivne forbindelse opløses i 20 ml vand og der tilsættes 2,25 g (23,8 mmol ) chloreddikesyre^ hvorefter pH indstilles på 9,5 med 6 N kaliumhydroxid. Der omrøres i 12 timer ved 45eC og pH-værdien holdes mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6 N kalium-1° hydroxid. Der indstilles til pH 2 med koncentreret saltsyre og renses på ionbyttere som beskrevet i eksempel ld. Krystallisation fra ethanol/acetone giver 1,3 g (57% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse som et kraftigt hygroskopisk fast stof.

15

Analyse: Beregnet: C 52,80, H 6,16, N 13,69, 0 27,35 Fundet: C 52,67, H 6,07, N 13,75 h) Gadoliniumkompleks af 13,13'-ethylendioxy-bis-[3,6,9-tris- 20 (carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca- 1(15),11,13-trien] 1,2 g (1,47 mmol) af den i overskriften til eksempel 3g angivne forbindelse opløses i 8 ml afioniseret vand/og der til-25 sættes 533 mg (1,47 mmol) gado1 iniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90eC. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres .

Udbytte: 1,85 g (100% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 11,3% vand.

30

Analyse: Beregnet: C 38,45, H 3,93, N 9,94, 0 19,87, Gd 27,90 Fundet: C 38,60, H 3,98, N 10,03, Gd 27,79 35 27 DK 171097 B1

Eksempel 4 a) 13-ethynyl-3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,l5-tetraazabicyklo[9, 3,1]pentadeca-l(15) , 11, 13-trien-15N-oxid 5 10 g {25,42 mmol) af den i overskriften til eksempel 3c angivne forbindelse opløses i 200 ml dimethoxyethan (DME) under nitrogen. Der tilsættes 1,22 g (25,42 mmol) natriumacety1 id (18% suspension i xylen/let mineralolie) og omrøres natten 10 over ved stuetemperatur. Der tilsættes 10 ml vand og inddampes til tørhed. Remanensen kromatograferes på silicagel (elu-eringsmiddel: methano1/acetone = 1:1). Krystallisation fra ether/ethylacetat giver 5,02 g (53% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse som et lysegult pulver.

15

Analyse: Beregnet: C 61,27, H 6,49, N 15,05, 0 17,19 Fundet: C 61,31, H 6,55, N 14,94 b) 13,13'-(l,3-butadiyn-l,4-diyl)-bis-([3,6,9-tris-(acetyl)- 20 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-tri- en]-15N-oxid) 4,75 g (12,75 mmol) af den i overskriften til eksempel 3a angivne forbindelse opløses i 200 ml pyridin^og der tilsættes 2® 2,52 g (25,5 mmol) kobber-1-chlor id. Opløsningen mættes med oxygen og omrøres de efterfølgende 2 dage ved stuetemperatur.

Det må herunder sikres, at der stadig opretholdes en oxygenatmosfære. Efter inddampning af opløsningen under vakuum kro-matograferes remanensen på kiselgel (elueringsmiddel: 30 methano 1 /acetone = 1/2). Krystallisation fra et her /ethylacetat giver 2,7g o (57% af det teoretiske) af et svagt gulligt pulver.

Analyse: Beregnet: C 61,27, H 6,49, N 15,05, 0 17,19 35 Fundet: C 61,31, H 6,55, N 14,94 28 DK 171097 B1 c) 13,13(1,3-butadiyn-l, 4-di y1)-b i s-[3,6,9-tris-(acetyl)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-tri-en] 5 2,5 g (3,37 mmol) af den i overskriften til eksempel 4b angivne forbindelse opløses i 50 ml iseddike og opvarmes til 60°C. Der tilsættes 1,88 g (33,65 mmol) jernpulver og omrøres i 2 timer ved 60°C. Det faste stof filtreres fratog filtratet inddampes til tørhed. Remanensen optages i 100 ml 3% natrium-10 carbonatopløsning og ekstraheres 3 gange med 100 ml chloroform. Efter tørring over magnesiumsulfat fjernes opløsningsmidlet under vakuum/ og der krystalliseres fra ether/ace-tone.

Udbytte: 2,08 g (87% af det teoretiske) i form af et 1® farveløst pulver.

Analyse: Beregnet: C 64,21, H6,52, N 15,77, 0 13,51 Fundet: C 64,31, H 6,60, N 15,68 20 d) 13,13'-(l,3-butadiyn-l,4-diyl)-bis-[3,5,9,15-tetraazabi-cyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien] 1,9 g (2,67 mmol) af den i overskriften til eksempel 4c angivne forbindelse opløses i 20 ml dioxan under nitrogen. Der 23 tilsættes 2,4 g (21,38 mmol) kalium-t-butylat og koges natten over under tilbagesvaling. Opløsni ngsmidle-t fjernes under vakuum og remanensen optages i 20 ml vand. Der indstilles til pH 10 med 2 N natriumhydroxid og ekstraheres 6 gange med 60 ml methylenchlorid. Efter tørring af de organiske faser 30 over magnesiumsulfat inddampes under vakuum.

Udbytte: 1,09 g (89% af det teoretiske) i form af en bleg gul olie.

Analyse: Beregnet: C 68,09, H 7,47, N 24,44 35 Fundet: C 68,18, H 7,54, N 24,51.

DK 171097 B1 29 e) 13,13'-(l,3-butadiyn-l,4-diyl)-bis-[3,6,9-tris-(carboxy-methyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15), 11,13-trien] 5 1,0 g (2,18 mmol) af den i overskriften til eksempel 4d an givne forbindelse opløses i 15 ml vand, og der tilsættes 1,65 g (17,44 mmol) chloreddikesyre. Der indstilles til pH 9,5 med 6N kaliumhydroxid og omrøres i 12 timer ved 45eC. Herunder holdes pH-værdien mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6N ka-10 1 iumhydroxid. Efter syrning med koncentreret saltsyre renses som beskrevet i eksempel ld pé ionbyttere. Krystallisation fra methanol/acetone giver 1,07 g (61% af det teoretiske) af et kraftigt hygroskopisk fast stof.

15 Analyse: Beregnet: C 56,57, H 5,75, N 13,89, 0 23,79 Fundet: C 56,64, H 5,81, N 13,79.

f) Gadoliniumkompleks af 13,13'-(l,3-butadiyn-l,4-diyl)-bis-[3,6,9-tris-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraazabicyklo- 20 [9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien] 900 mg (1,116 mmol) af den i overskriften til eksempel 4e angivne forbindelse opløses i 8 ml vand, og der tilsættes 404 mg (1,116 mmol) gadoliniumoxid. Efter omrøring i 3 timer ved 25 90*C filtreres opløsningen og filtratet frysetørres.

Udbytte: 1,35 g (100% af det teoretiske) i form af et hvidt amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 8,9% vand.

Analyse: 30 Beregnet: C 40,92, H 3,62, N 10,05, 0 17,22, Gd 28,20 Fundet: C 40,81, H 3,65, N 10,18, Gd 28,11 35

Eksempel 5 30 DK 171097 B1 a) 13-chlor-3,6,9-tris-(acetyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo- [9.3.1] pentadeca-l(15),ll,13-trien-15-N-oxid 5 7,3 g (18,56 mmol) af den i overskriften til eksempel 3c angivne forbindelse opvarmes i 50 ml acetylchlorid i 4 timer til 50eC. Der inddampes under vakuum^ og remanensen optages i 200 ml 3% natriumcarbonatopløsning. Der ekstraheres tre gan-10 ge med 100 ml chloroform og tørres over magnesiumsulfat. Efter fjernelse af opløsningsmidlet under vakuum omkrystalliseres fra ether/ethylacetat.

Udbytte: 6,18 g (87% af det teoretiske) i form af et farve løst krystallinsk pulver.

15

Analyse:

Beregnet: C 53,33, H 6,05, N 14,64, 0 16,72, Cl 9,26

Fundet: C 53,48, H 5,98, N 14,71, Cl 9,20 20 b) 13-ch1or-3,6,9-1ri s-(acety1)-3,6,9,15-tetraazabi cyklo- [9.3.1] pentadeca-l(15),ll,13-trien 6,0 g (15,67 mmol) af den i overskriften til eksempel 5a angivne forbindelse opløses i 300 ml ethanol. Der tilsættes 1 25 ml koncentreret saltsyre og hydrogeneres over Pd/C. Efter afsluttet hydrogenoptagelse filtreres katalysatoren fra, og der inddampes under vakuum. Remanensen optages i 100 ml 3% natri-umcarbonatopløsning og ekstraheres to gange med 100 ml chloroform. De organiske faser tørres over magnesiumsulfat og 30 inddampes under vakuum. Krystallisation af remanensen fra ether/ethylacetat giver 5,34 g (93% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et farveløst pulver.

35 Analyse:

Beregnet: C 55,66, H 6,32, N 15,27, 0 13,08, Cl 9,66

Fundet: C 55,57, H 6,38, N 15,31, Cl 9,59 DK 171097 B1 31 c) 13-chlor-3,6,9,15-tetraazabicylo[9,3,l]pentadeca-l(15),- 11,13-trien 5,1 g (13,9 mmol) af den i overskriften til eksempel 5b an-5 givne forbindelse opløses i 50 ml dioxan under nitrogen. Der tilsættes 6,24 g (55,6 mmol) kalium-t-buty1 at og koges natten over under tilbagesvaling. Der oparbejdes som beskrevet i eksempel 4d.

Udbytte: 3,01 g (9 0% af det teoretiske) af en lys gullig 1° olie, som efter kort tid krystalliserer.

Analyse: Beregnet: C 54,88, H 7,12, N 23,28, Cl 14,73

Fundet: C 54,93, H 7,06, N 23,41, Cl 14,81 I5 d) 13-chlor-3,6,9-1ri s-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraazabi-cyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 2,38 g (11,65 mmol) af den i overskriften til eksempel 5c angivne forbindelse opløses i 30 ml vand, og der tilsættes 4,4 2 0 g (46,6 mmol) chloreddikesyre. Der indstilles på pH 9,5 med 6N kaliumhydroxid. Der omrøres i 12 timer ved 45°C og pH-vær- dien holdes mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid. Efter oparbejdning som beskrevet i eksempel ld og krystallisation fra methanol/acetone opnås 3,23 g (67% af det 25 teoretiske) af den i overskriften angivne forbindelse som et fast stof, der løber ud i luft.

Analyse:

Beregnet: C 49,22, H 5,59, N 13,51, O 23,14, Cl 8,55 30 Fundet: C 49,31, H 5,65, N 13,60, Cl 8,49 35 DK 171097 B1 32 e) Gadoliniumkompleks af 13-chlor-3,6,9-tris-(carboxymethyl)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 3,23 g (7,78 mmol) af den i overskriften til eksempel 5d an-5 givne forbindelse opløses i 20 ml afioniseret vand, og der tilsættes 1,41 g (3,89 mmol) gadoli niumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90°C. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres.

Udbytte: 4,9 g (100% af det teoretiske) af et hvidt amorft 1° pulver, som ifølge analyse indeholder 11,9% vand.

Analyse :

Beregnet: C 35,88, H 3,54, N 9,85, 0 16,87, Cl 6,23, Gd 27,53

Fundet: C 35,94, H 3,57, N 10,01, Cl 6,17, Gd 27,56 -relaxivitet (Ι/mmol · sek.), 40°C, vand, 20 MHz: 5,44.

Eksempel 6 a) 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-tri-20 en-15-N-oxid 4,5 g (12,9 mmol) af den i overskriften til eksempel 3b angivne forbindelse opløses i 40 ml dioxan under nitrogen. Der tilføjes 5,8 g (51,7 mmol) ka1 ium-t-butylat og koges natten 25 over under tilbagesvaling. Efter oparbejdning som beskrevet i eksempel 3f opnås 2,61 g (91% af det teoretiske) af en lysegul olie, som krystalliserer ved henstand.

Analyse: Beregnet: C 59,43, H 8,16, N 25,20, 0 7,20 30 Fundet: C 59,37, H 8,21, N 25,13 35 33 DK 171097 B1 b) 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,1]-pentadeca-l(15) ,11 ,13-trien-15-N-oxid 2,4 g (10,77 mmol) af den i overskriften til eksempel 6a an-5 givne forbindelse opløses i 30 ml vand, og der tilsættes 4,1 g (43,4 mmol) ch1 oreddikesyre. Der indstilles til pH 9,5 med 6N kaliumhydroxid. Der omrøres i 12 timer ved 45°C og pH-vær-dien holdes mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid. Efter oparbejdning som beskrevet i eksempel ld giver 10 krystallisation fra ethanol/acetone 2,7 g (63% af det teoretiske) af et kraftigt hygroskopisk pulver.

Analyse·. Beregnet: C 51,51, H 6,10, N 14,14, 0 28,26 Fundet: C 51,63, H 6,01, N 14,08 15 c) Gadoliniumkompleks af 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien-15-N-oxi d 20 2,1 g (5,3 mmol) af den i overskriften til eksempel 3b anfør te forbindelse opløses i 15 ml afioniseret vand og der tilsættes 935 mg (2,65 mmol) gadoli niumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90eC. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres .

25 Udbytte: 3,2 g (100% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 10,7% vand.

Analyse:

Beregnet: C 37,08, H 3,84, N 10,18, 0 20,34, Gd 28,56 30 Fundet: C 37,18, H 3,79, N 10,21, Gd 28,48 35 34 DK 171097 B1

Eksempel 7 a) 3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-3,6,9-triaza-14-oxa-bicyklo- [9,2,l]tetradeca-l(13),Il-di en 5

Til 121,9 g (200 mmol) N , N ' ,N"-1ri s-(p-toly1su1fony 1)-diethy-lentriamin-N,N"-dinatriumsalt i 1600 ml dimethy1formamid sættes dråbevis ved 100eC en opløsning af 33 g (200 mmol) 2,5-bi s-(ch1 ormethy1)-furan i 700 ml di methy1formamid i løbet af 1° 3 timer. Der omrøres natten over ved 100°C. Til den varme op løsning sættes dråbevis 2 1 vand. Der afkøles til 0eC. Bundfaldet vaskes med rigeligt vand og tørres under vakuum (60°C). Efter krystallisation fra acetonitril opnås 88,14 g (67% af det teoretiske) af et hvidt pulver.

15

Analyse: Beregnet: C 56,60, H 5,36, N 6,39, 0 17,03, S 14,62 Fundet: C 56,52, H 5,42, N 6,30, S 14,60 b) 3,6,9-triaza-14-oxa-bicyklo[9,2,l]tetradeca-l(13),11-dien 20 30 g (45,61 mmol) af den i overskriften til eksempel 7a angivne forbindelse suspenderes i 500 ml flydende ammoniak ved -40eC. Derefter tilsættes i løbet af 30 minutter 10,49 g (456,1 mmol) natrium/ og der omrøres i 3 timer ved -40°C.

25 Overskuddet af natrium, destrueres ved forsigtig tilsætning af ethanol (affarvning), og man lader ammoniakken afdampe. Remanensen optages i 100 ml vand og indstilles på pH 11 med 6N natriumhydroxid. Derefter ekstraheres seks gange med 150 ml methylenchlorid.og den organiske fase tørres over magnesium-30 sulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel (e1ueringsmiddel : acetonitri 1/vand/3 2% ammoniak opløsning = 10/3/1).

Udbytte: 3,95 g (45% af det teoretiske) i form af en bleggul olie.

Analyse: Beregnet: C 61,51, H 8,78, N 21,52, 0 8,19

Fundet: C 61,43, H 8,85, N 21,47 35 35 DK 171097 B1 c) 3,6,9-tris-(ethoxycarbony1methy1)-3,6,9-triaza-14-oxa-bi-cyklo[9,2,l]tetradeca-l(13),ll-dien

Til en blanding af 3,7 g (18,95 mmol) af den i overskriften 5 til eksempel 7b angivne forbindelse og 6,03 g (56,85 mmol) vandfrit natriumcarbonat i 150 ml dimethyl formamid sættes dråbevis ved 50eC i løbet af 10 minutter 7 ml (62,5 mmol) bromeddikesyreethylester. Der omrøres i 4 timer ved 50® C. Opløsningsmidlet fjernes under vakuum, og remanensen udrø-res i 200 ml methylenchlorid. Det faste stof filtreres fra og filtratet inddampes. Den tilbageværende olie kromatograferes på silicagel (elueringsmiddel: methy1ench1 or id/ethano 1 = 12/1) .

Udbytte: 6,1 g (71% af det teoretiske) af en gullig olie, der langsomt størkner.

Analyse: Beregnet: C 58,26, H 7,78, N 9,27, 0 24,69 Fundet: C 58,17, H 7,88, N 9,19 20 d) Gadoliniumkompleks af 3,6,9-tri s-(carboxymethyl)-3,6,9-triaza-14-oxa-bicyklo[9,2,l]tetradeca-l(13),Il-di en 5,0 g (11,02 mmol) af den i overskriften til eksempel 7c angivne forbindelse opløses i 80 ml ethanol og ved 60eC tilsæt-25 ges langsomt dråbevis 36 ml IN natriumhydroxid. Der opvarmes i 30 minutter til kogning under tilbagesvaling. Der inddampes til tørhed og optages i 20 ml vand, og pH bringes forsigtiqt til en værdi på 6,5 med 2N saltsyre. Efter tilsætning af 2,0 g (5,57 mmol) gadoliniumoxid omrøres der i 3 timer ved 90°C.

50 Opløsningen filtreres/ og filtratet føres først over en kort kat ionbyttersøjle (IR-120) og derefter over en kort anionbyt-tersøjle (IRA-67). Eluatet frysetørres.

Udbytte: 4,9 g (78% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 9,7% vand.

Analyse: Beregnet: C 36,70, H 3,85, N 8,03, 0 21,39, Gd 30,03

Fundet: C 36,51, H 3,81, N 8,11, Gd 29,91 35 36 DK 171097 B1

Eksempel 8

Gadoliniumkompleks af 3,6,9-tri s-(carboxymethyΊ)-3,6,9,14-te-traaza-bicyklo[9,2,l]tetradeca-l(l3),ll-dien 5 10,0 g (22,04 mmol) af den i overskriften til eksempel 7c angivne forbindelse opløses i 150 ml ethanolf og ved 60eC til-dryppes 8 ml IN natriumhydroxid. Der koges en time under tilbagesvaling og inddampes derefter til tørhed. Remanensen 10 overføres til en rysteautoklav, og der tilsættes 3,54 g (66,12 mmol) ammoniumch1 or id. Efter tilsætning af en vanadium-oxid-katalysator (US patentskrift nr. 2.478.456, Chem. Abstr.

44, 665 (1950)) indkondenseres 100 ml ammoniak. Der opvarmes i 12 timer til 20 0°C. Efter afdampning af ammoniak kromato-I5 graferes remanensen på silicagel (e1ueringsmidde1: dioxan/ vand/32% vandig ammoniakopløsning = 6/2/1). Inddampning giver ca. 5,19 g (56% af det teoretiske) af det ekstremt hygroskopiske ammoniumsalt, som straks omsættes videre . Der opløses i 25 ml afioniseret vand og indstilles til pH 6,5 med 2N salt-20 syre. Der tilsættes 2,24 g (6,17 mmol) gado1 iniumoxid og omrøres i 3 timer ved 90eC under nitrogen. Der tilsættes 1 g aktivt kul og omrøres i yderligere en time ved 90eC. Opløsningen filtreres/og filtratet føres først over en kort kati-onbyttersøjle (IR—120) og derefter over en kort anionbytter-25 søjle (IRA-67). Eluatet frysetørres.

Udbytte: 6,0 g (47% af det teoretiske regnet ud fra den i overskriften til eksempel 7c angivne forbindelse) i form af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 11,1% vand. 1 35

Analyse:

Beregnet: C 36,84, H 3,87, N 10,74, 0 18,40, Gd 30,15 Fundet: C 36,75, H 3,91, N 10,68, Gd 30,04 37 DK 171097 B1

Eksempel 9 a) 15-methoxy-3,6,9-tris-(p-tolylsulfony1)-3,6,9-triaza-b i - cyk!o[9,3,l]pentadeca-(1(15), 11,13-trien 5 182,85 g (300 mmol) N,N'N"-tris-(p-tolylsulfonyl)-diethylen-tri am in-N,N"-di natriumsa11 opløses i 2,4 1 di methy1formamid og opvarmes til 100eC. Hertil sættes dråbevis i løbet af 3 timer en opløsning af 88,2 g (300 mmol) 2,6-bi s-(brommethy1}-1° phenolmethylether i 1 1 di methylformamid. Der omrøres natten over 100°C. Til den varme opløsning sættes dråbevis 3 1 vand og der afkøles til 0eC. Bundfaldet vaskes med rigeligt vand og tørres under vakuum (60°C). Krystallisation fra acetoni-tril giver 119,3 g (57% af det teoretiske) af den i over-l5 skriften anførte forbindelse som et lyst cremefarvet pulver.

Analyse: Beregnet: C 58,51, H 5,63, N 6,02, 0 16,05, S 13,78 Fundet: C 58,41, H 5,68, N 6,13, S 13,70 20 b) 15-hydroxy-3,6,9-1riazabi cykl o[9,3,1]pentadeca-1(15),11,-13-tr i en

Til 100 g (143,3 mmol) af den i overskriften til eksempel 9a anførte forbindelse i 1 1 dibutylether sættes forsigtigt 25 21,75 g (573,2 mmol) lithiumaluminiumhydrid og der opvarmes til kogning natten over under tilbagesvaling. Der afkøles på isbad/og overskud af lithiumaluminiumhydrid sønderdeles med ethanol og derefter med vand. Der inddampes til tørhed, hvorefter remanensen optages i 1 1 2N natriumhydroxid og ekstraheres 10 30 gange med 200 ml chloroform. Efter tørring over magnesiumsulfat inddampes under vakuum/ og remanensen kromatograferes på silicagel (e1ueringsmiddel: methanol/32% vandig ammoniakop løsning = 10/1) .

Udbytte: 8,56 g (27% af det teoretiske) af en gullig olie.

Analyse: Beregnet: C 65,13, H 8,65, N 18,99, 0 7,23

Fundet: C 65,18, H 8,60, N 19,10 35 38 DK 171097 B1 c) 15-hydroxy-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylmethyl)-3,6,9-tri-azabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 8,3 g (37,5 mmol ) af den i overskriften til eksempel 9b an-5 givne forbindelse opløses i 250 ml d i methyl formami d, og der til sættes 15,55 g (112,5 mmol) vandfrit kaliumcarbonat. Hertil sættes dråbevis i løbet af 30 minutter 16,3 ml (112,5 mmol) bromeddikesyre-t-butylester og der omrøres natten over ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet afdampes indtil tørhed, og 1° remanensen optages i 300 ml vand og ekstraheres 3 gange med 150 ml methylenchlorid. De organiske faser tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Den tilbageværende olie kromatograferes på silicagel (e1ueringsmidde1 : methy1ench1o- rid/methanol = 15/1).

15 Udbytte: 13,32 g (63% af det teoretiske) af den i overskr i f-ten anførte forbindelse i form af en farveløs olie.

Analyse: Beregnet: C 63,91, H 8,76, N 7,45, 0 19,87 Fundet: C 63,83, H 8,85, N 7,49 20 d) 15-hydroxy-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9-triazabicyk-1 o [9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien 13,0 g (23,06 mmol) af den i overskriften til eksempel 9c an-25 givne forbindelse opløses i 150 ml trifluoreddikesyre og omrøres natten over ved stuetemperatur. Der inddampes under vakuum. Remanensen optages i en smule vand og renses med ionbyttere som beskrevet i eksempel ld. Krystallisation fra methanol /acetone giver 6,5 g (71% af det teoretiske) af den i 30 overskriften anførte forbindelse som et pulver, der flyder ud i luft.

Analyse: Beregnet: C 54,67, H 6,37, N 10,63, 0 28,33

Fundet: C 54,51, H 6,30, N 10,57 35 39 DK 171097 B1 e) Gado1 iniumkomp 1 eks af 15-hydroxy-3,6,9-tris-(carboxyme-thy1)-3,6,9-triazabicyklo[9,3,1] pentadeca-l(15), 11,13-t r i en 5 4,0 g (10,1 mmol) af den i overskriften til eksempel 9d angivne forbindelse opløses i 25 ml afioniseret vand; og der tilsættes 1,84 g (5,05 mmol) gado1 iniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90°C, tilsættes 1 g aktivt kul og omrøres i yderligere 1 time ved denne temperatur. Opløsningen filtreres og 10 filtratet frysetørres. Der opnås 6,04 g (96% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 13,5% vand.

Analyse: 15 Beregnet: C 39,33, H 4,04, N 7,65, 0 20,38, Gd 28,61

Fundet: C 39,41, H 4,10, N 7,58, Gd 28,51

Eksempel 10 20 a) 6-benzyl-3,9-bis-(p-tolylsulfonyl)-3,6,9,15-tetraazabicyk-lo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien

Til 109,12 g (200 mmol) N,N"-bi s-(p-to 1y1 sulfony1)-N’-benzy1 -diethylentriamin-N,N"-dinatriumsa1t i 1500 ml dimethylform-25 amid sættes dråbevis ved 100°C i løbet af 3 timer en opløsning af 35,2 g (200 mmol) 2,6-bi s-(ch1 ormethy1)-pyridin (opløst i 700 ml dimethylformamid). Der omrøres videre natten over ved 100°C. Til den varme opløsning sættes dråbevis 2 1 vand, og der afkøles til 0eC. Bundfaldet vaskes flere gange 30 med vand og tørres under vakuum (60eC). Krystallisation fra acetonitri 1/ether giver 78,6 g (65% af det teoretiske) af et cremefarvet pulver.

Analyse: Beregnet: C 63,55, H 6,00, N 9,26, 0 10,58, S 10,60 35 Fundet: C 63,48, H 5,94, N 9,18, S 10,63 40 DK 171097 B1 b) 6-benzyl-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15), - 11,13-trien

Til 75 g (124 mmol) af den i overskriften til eksempel 10a 5 angivne forbindelse i 1,5 1 dibutylether sættes forsigtigt 9,41 g (248 mmol) 1 i thi umal umi ni umhydr id^ og der opvarmes til kogning under tilbagesvaling natten over. Efter afkøling på isbad sønderdeles overskuddet af lithiumaluminiumhydrid med ethanol og vand. Der inddampes til tørhed og optages i 500 ml 10 vand og pH indstilles på 11 med 5N kaliumhydroxid. Der eks-traheres 6 gange med 100 ml chloroform, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Kromatografi på silicagel (e1ueringsmidde 1 : ethanol/32% vandig ammoniakopløsning = 12/ 1) giver 22,4 g (61% af det teoretiske) af en gullig olie, IS som størkner glasagtigt.

Analyse: Beregnet: C 72,94, H 8,16, N 18,90 Fundet: C 72,75, H 8,23, N 18,81 20 c) 6-benzyl-3,9-bis-(ethoxycarbonylmethyl)-3,6,9,15-tetraaza-bicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15) ,11,13-trien 1

Analyse: Beregnet: C 66,64, H 7,74, N 11,96, 0 13,66

Fundet: C 66,51, H 7,81, N 11,88 35 g (33,74 mmol) af den i overskriften til eksempel 10b anførte forbindelse opløses i 300 ml di methyl formam id. Der t i 1 -25 sættes 7,13 g (67,48 mmol) vandfrit natriumcarbonat og opvarmes til 50eC. Derpå tilsættes dråbevis i løbet af 15 minutter 8,3 ml (74,2 mmol) bromeddikesyreethy 1 ester; og der omrøres videre natten over ved 50eC. Opløsningsmidlet afdampes under vakuum, hvorefter remanensen udrøres to gange i 350 ml methylen-30 chlorid, filtreres og inddampes. Den tilbageværende olie kro-matograferes på silicagel (elueringsmiddel: methylenchlorid/ ethanol = 10/1).

Udbytte: 13,12 g (83% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse som en farveløs olie.

41 DK 171097 B1 d) 3,9-bis-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]-pentadeca-1(15),11,13-tri en 12 g (25,6 mmol) af den i overskriften til eksempel 10c an-5 førte forbindelse opløses i 100 ml ethanol og opvarmes til 60*C. Til denne opløsning sættes dråbevis 32 ml 2N natriumhydroxid og der koges i 1 time under tilbagesvaling. Der inddampes til tørhed og remanensen opløses i 200 ml 5% eddikesyre. Der hydrogeneres over Pd/C. Efter afsluttet hydrogenop-10 tagelse filtreres katalysatoren fra, hvorefter der inddampes under vakuum og renses på ionbyttere som beskrevet i eksempel Id. Krystallisation fra ethano 1/acetone giver 6,52 g (79% af det teoretiske) af et kraftigt hygroskopisk fast stof.

I·5 Analyse: Beregnet: C 55,88, H 6,88, N 17,38, 0 19,85 Fundet: C 55,79, H 6,94, N 17,27 e) Mangan-11-komp1eks af 3,9-bi s-(carboxymethy1)-3,6,9,15-te-taazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 20 4 g (12,4 mmol) af den i overskriften til eksempel lOd anførte forbindelse opløses i 20 ml afioniseret vand/og der tilsættes 1,43 g (12,4 mmol) mangan(II)carbonat Der opvarmes i 2 timer til 80eC. Opløsningen føres først over en kort kat-25 ionbyttersøj1e (1R-120) og derefter over en kort anionbytter-søjle (IRA- 67) . Eluatet koges med 1 g aktivt kul i 1 time under tilbagesvaling, hvorefter der filtreres. Filtratet frysetørres. Oer opnås 4,4 g (87% af det teoretiske) af et lysrosa, svagt skinnende, amorft pulver.

30

Analyse:

Beregnet: C 48,00, H 5,37, N 14,93, 0 17,05, Mn 14,64

Fundet: C 47,93, H 5,41, N 14,87, Mn 14,58 35 42 DK 171097 B1

Eksempel 11 a) 3,6-bis-(p-tolylsulfony1)-3,6,12-1r i azabicyklo[6,3,1]dode-ca-l(12),8,10-trien 5

Til 82,48 g (0,2 mol) N,N'-bis-(p-tolylsulfonyl)-ethylendia-m i n-di natriumsalt i 1600 ml dimethylformamid sættes dråbevi s i løbet af 3 timer ved 100eC en opløsning af 35,2 g (0,2 mol) 2,6-bi s-(ch1 ormethy 1)-pyridin (opløst i 700 ml dimethylform-10 amid). Der omrøres videre natten over ved 110°C. Til den varme opløsning sættes dråbevis 2 1 vand, hvorefter bundfaldet afsuges oq vaskes med rigeligt vand. Efter tørring under vakuum (60“C) omkrystalliseres fra acetonitril.

Udbytte: 67,9 g (72% af det teoretiske) af et cremefarvet 15 pulver.

Analyse: Beregnet: C 58,58, H 5,34, N 8,91, 0 13,57, S 13,60 Fundet: C 58,41, H 5,37, N 8,85, S 13,53 20 b) 3,6,12-triazabicyklo[6,3,l]dodeca-l(12),8,10-trien-trihy-drosulfat 67,0 g (142 mmol) af den i overskriften til eksempel 11a anførte forbindelse indføres i 200 ml koncentreret svovlsyre og 25 omrøres i 48 timer ved 100°C. Der afkøles til 0ο0, hvorefter* der dråbevis tilsættes 1 1 absolut ether. Bundfaldet afsuqes oq udrøres i 600 ml methanol. Der filtreres og inddampes derefter til tørhed. Tørring under vakuum (60eC) giver 44,17 g (68% af det teoretiske) af den i overskri ften anførte forbindelse i form 3® af et krystallinsk fast stof.

Analyse: Beregnet: C 23,63, H 4,19, N 9,19, 0 41,97, S 21,03

Fundet: C 23,57, H 4,24, N 9,11, S 20,96 35 43 DK 171097 B1 c) 3,6,12-triazabicyklo[6,3,l]dodeca-l(12),8,10-trien

42.0 g (91,8 mmol) af den i overskriften til eksempel 11b anførte forbindelse opløses i 100 ml vand/ og der indstilles til pH

5 11 med 32% natriumhydroxid. Der ekstraheres 6 gange med 200 ml methylenchlorid/ og de forenede faser tørres over magneium-sulfat. Efter inddampning under vakuum opnås 11,24 g (75% af det teoretiske) af en lys gul olie.

10 Analyse: Beregnet: C 66,23, H 8,03, N 25,74 Fundet: C 66,17, H 8,09, N 25,67 d) 3,6-bis-(carboxymethyl)-3,6,12-triazabicyklo[6,3,l]dode-c a-1(12 ) ,8,10-trien 15 10 g (61,27 mmol) af den i overskriften til eksempel 11c anførte forbindelse opløses i 100 ml vand og der tilsættes 17,37 g (183,8 mmol) chloreddikesyre. Ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid indstilles til pH 9,5 og der opvarmes til 20 45eC. Der omrøres i 12 timer ved denne temperatur, idet pH- værdien ved tilsætning af 6N kalumhydroxid holdes mellem 9,5 og 10. Der afkøles og renses på ionbyttere som beskrevet i eksempel ld. Krystallisation.fra ethanol/acetone giver 11,47 g (57% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbin-25 delse i form af et krystallinsk fast stof.

Analyse: Beregnet: C 55,90, H 6,14, N 15,05, 0 22,92 Fundet: C 55,81, H 6,19, N 14,94 30 e) Mangankompleks af 3,6-bis-(carboxymethyl)-3,6,12-triazabi-cyklo[6,3,l]dodeca-l(12),8,10-trien 10.0 g (35,8 mmol) af den i overskriften til eksempel lid anførte forbindelse opløses i 40 ml afioniseret vand og der 35 tilsættes 4,12 g (35,8 mmol) mangan tøfl carbonat. Der omrøres i 2 timer ved 80°C. Opløsningen føres over en kort anionbyt-tersøjle og kat ionbyttersøj 1e, og eulatet omrøres i 1 time 44 DK 171097 B1 med 1 g aktivt kul ved 80°C. Der filtreres og filtratet frysetørres.

Udbytte: 12,7 g (96% af det teoretiske) af den i overskrif ten anførte forbindelse i form af et amorft pulver, som i f ø 1 -5 ge analyse indeholder 11,3% vand.

Analyse:

Beregnet: C 47,00, H 4,55, N 12,65, 0 19,26, Mn 16,54

Fundet: C 46,95, H 4,61, N 12,58, Mn 16,48 10

Eksempel 12

Fremstilling af en opløsning af gadoliniumkomplekset af 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]-15 pentadeca-1(15),11,13-1ri en 534,63 g (1 mol) af den i eksempel le beskrevne forbindelse opløses i 1200 ml vand til injektion (p.i.). Efter tilsætning af 24,62 g (50 mmol ) af monohydratet af calcium-trinatriumsaltet 20 af DTPA, CaNa3DTPA, opfyldes med vand p.i. til 2000 ml. Derefter ultrafiltreres opløsningen, den fyldes på ampuller og varmester i 1 i seres og er brugsfærdig til parenteral anvendelse.

25 Eksempel 13

Fremstilling af en opløsning af megluminsaltet af mangan(II)-komplekset af 3,6,9-1ri s-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraazabi- cyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 30 34,92 g (50 mmol) af en i eksempel lh beskrevne forbindelse (vandindhold 12,29%) opløses i 65 ml vand (p.i.). Efter tilsætning af 492 mg (1 mmol) af monohydratet af calcium-trinatriumsaltet af DTPA, CaNa3DTPA, opfyldes til 100 ml med vand p.i.

35 Opløsningen bliver derefter ultraf i 1 treret, fyldt på ampuller og varmester i 1 i seret og er brugsfærdig til parenteral anvendelse.

45 DK 171097 B1

Eksempel 14

Sammensætning af et pulver til fremstilling af en suspension til oral i ndg i ft: 5 4,000 g af det i eksempel le beskrevne gadoliniumkompleks 3,895 g mannitol 0,100 g polyoxyethy1enpo1yoxypropylen-polymer 0,005 g aromastoffer 10 8,000 g

Eksempel 15

Fremstilling af en opløsning af indium-lll-komplekset af 15 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,1]-pentadecan

En opløsning af 100 μ g af den i eksempel 2a beskrevne forbindelse i 5 ml af en blanding af en 150 mmolær kogsalt·*— og en 20 i5o mmolær natriumacetatopløsning (pH 5,8) får tilsat en opløsning af 5 ml i nd i um-111-chl or id i 1 ml N-saltsyre. Ved tilsætning af 0,1 N natriumhydroxid bringes pH-værdien til 7,2, den steri 1fi 1 trerede opløsning fyldes i mu 11ihætteg 1 as og frysetørres. Remanensen optages i en fysiologisk kogsaltop-25 løsning og udgør da et præparat egnet til radiodiagnostik.

på analog måde opnår man med y11rium-90-ch1 or id et til radioterapi egnet præparat.

30 Eksempel 16 a) 3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-14-oxa-3,6,9 -1riazabicyklo-[9,2,1]tet radecan 1

Til en opløsning af 28,19 g (64 mmol) 2,5-bi s-(p-tosy1oxyme-thyl)-tetrahydrofuran i 500 ml di methy1formamid sættes dråbevis i løbet af 2 timer ved 100°C 39,01 g (64 mmol) Ν,Ν',Ν"- 46 DK 171097 B1 t r i s-(p-tolylsulfonyl)-diethylentriam i n-N,N"-di natriumsalt opløst i 210 ml dimethyl formamid, og der omrøres i 5 timer ved 120eC. Til den varme opløsning sættes dråbevis 700 ml vand, og der afkøles til 0°C. Bundfaldet afsuges, vaskes med vand og 5 tørres under vakuum ved 50°C. Efter omkrystalli sat ion fra acetone opnås 33,5 g af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt pulver med smeltepunkt 175-178*0.

Aanlyse: Beregnet: C 56,26, H 5,94, N 6,35, S 14,53 10 Fundet: C 56,01, H 5,99, N 6,28, 14,29 b) 14-oxa-3,6,9-triazabicyklo[9,2,l]tetradecan 30 g (45,3 mmol) af den i overskriften til eksempel 16a an-15 førte forbindelse indføres i 90 ml koncentreret svovlsyre, og der omrøres i 24 timer ved 90eC. Derefter afkøles til 0*0, og der tilsættes dråbevis 350 ml tør ether. Det dannede bundfald afsuges og opløses i 50 ml 40% natriumhydroxid og opløsningen ekstraheres 10 gange med 50 ml dichlormethan hver 20 gang. Den organiske fase tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Der opnås 6,23 g (69% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt pulver.

25 Analyse: Beregnet: C 60,27, H 10,62, N 21,08 Fundet: C 60,04, H 10,75, N 20,95 c) 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-14-oxa-3,6,9-triazabicyklo[9, 2,1]tetradecan 30 6 g (30,1 mmol) af den i overskriften til eksempel 16b anførte forbindelse opløses i 35 ml vand, og der tilsættes 11,38 g (120,4 mmol) chl oredd i kesy re, hvorefter denne opløsning indstilles på pH 9,5 med 6N kaliumhydroxid. Der opvarmes i 12 timer til 35 45*C, i hvilket tidsrum pH-værdien holdes i området fra 9,5 til 10 ved tilsætning af yderligere kaliumhydroxid. Derefter afkøles der til stuetemperatur, og der tilsættes langsomt 47 DK 171097 B1 koncentreret saltsyre indtil pH 2 og inddampes under vakuum. Remanensen opløses i 100 ml vand og denne opløsning føres på en kat ionbyttersøj1e (IR 120). Søjlen vaskes først med rigeligt vand. Derefter elueres det ønskede stof med 0,5N ammo-5 niakopløsning, og der inddampes, hvorefter remanensen opløses i 100 ml vand og opløsningen føres på en an ionbyttersøj1e (IRA 67).

Der vaskes først med vand, og derefter elueres med 0,5N myresyre. De sure fraktioner inddampes, og remanensen opløses i methanol. Efter tilsætning af acetone udkrystalliserer den i 10 overskriften anførte forbindelse (5,74 g, 51% af det teoretiske) .

Analyse: Beregnet: C 51,47, H 7,29, N 11,25 Fundet: C 51,60, H 7,21, N 11,38 15 d) Gadoli niumkompleks af 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-14-oxa- 3,6,9-triazabicyklo[9,2,l]tetradecan 3,73 g (10 mmol) af den i overskriften til eksempel 16c 2° anførte forbindelse opløses i 15 ml vand og omrøres i 3 timer med 1,81 g (5 mmol) gadoliniumoxid ved 80eC. Den opnåede opløsning filtreres og udrøres i rækkefølge med først 0,5 g kationbytter (IR 120) og derefter med 0,5 g anionbytter (IRA 67), hvorefter opløsningen påny filtreres og underkastes fry-25 setørring. Der opnås 5,07 g (91% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse som et hvidt amorft pulver med et vandindhold på 5,4%.

Analyse: Beregnet: C 36,42, H 4,59, N 7,95, Gd 29,80 30 Fundet: C 36,30, H 4,61, N 7,82, Gd 29,59 (Korrigeret for vandindhold) 35 48 DK 171097 B1

Eksempel 17 a) 3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-14-thia-3,6,9-triazabicyklo- [9,2,1]tetradeca-1(13),11-dien 5 60,97 g (100 mmol) N,N',N"-1ri s-(p-toly1 sulfony1)-di ethy1en-tri amin-N,N"-di natriumsa11 opløses i 800 ml di methy1formam id og ved 50°C tilsættes dråbevis i løbet af 90 minutter 19,9 g (110 mmol) 2 , 5-bi s-ch1 ormethy11hiophen opl øst i 330 ml dime- 10 thylformamid. Der omrøres i yderligere 90 minutter ved 50eC, hvorefter der dråbevis tilsættes 1 1 vand og det dannede bundfald afsuges og vaskes med vand. Remanensen vaskes ved; . _· 50°C i et vakuumtørreskab og omkrystalliseres fra dioxan. Der opnås 47,1 g (70% af det teoretiske) af den i overskriften 15 anførte forbindelse i form af et lysegult pulver med smeltepunkt 265-268°C. ,

Analyse: Beregnet: C 55,25, H 5,24, N 6,24, S 19,03 Fundet: C 55,38, H 5,44, N 6,10, S 19,01 20 b) 14-thia-3,6,9-triazabi cykl o[9,2,l]tetradeca-l(13),11-dien

45 g (66,8 mmol) af den i overskriften til eksempel 17a anførte forbindelse indføres i 130 ml koncentreret svovlsyre,og 25 der omrøres i 24 timer ved 90-95*C. Efter afkøling til 0eC

tilsættes dråbevis 500 ml ether, hvorefter det.· danaederiburxafaW:.af suges og bundfaldet opløses i 70 ml 40% natriumhydroxid. Opløsningen ekstraheres 5 gange med 100 ml dichlormethan hver gang, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Rema-30 nensen omkrystalliseres fra ether/hexan (3:1) og der opnås 7,8 g (55% af det teroretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt pulver.

Analyse: Beregnet: C 56,83, H 8,11, N 19,88, S 15,17 35 Fundet: C 56,59, H 8,02, N 20,12, S 15,00 49 DK 171097 B1 c) 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-14-thia-3,6,9-triazabicyklo-[9,2 ,1 ] tetradeca-1(13),11-dien 7,5 g (35,5 mmol) af den i overskriften til eksempel 17b an-5 førte forbindelse opløses i 45 ml vand og der tilsættes 13,42 g (142 mmol) ch 1 oredd i kesy re, hvorefter pH-værdien indstilles på 9,5 med 6N kaliumhydroxid. Derefter opvarmes der i 12 timer til 45-50eC, idet man i dette tidsrum holder pH-værdien på 9,5 til 10 ved tilsætning af yderligere kaliumhydroxid. Efter af -1° køling til 10° C tilsættes koncentreret saltsyre indtil pH 2.

Det derved dannede bundfald isoleres ved afsuqning og opløses i 100 ml vand^ og opløsningen adsorberes på en kation-byttersøjle (IR 120)* Søjlen vaskes med 2 1 vand og derefter med 0,5N ammoniakopløsning. Ammoniakfraktionen inddampes un-15 der vakuum, remanensen opløses i 100 ml vand og opløsningen bindes til en anionbytter (IRA 67). Anionbytteren elueres med vand og 0,5N myresyre. Fra de sure fraktioner opnår man den i overskriften anførte forbindelse ved inddampning under vakuum. Til yderligere rensning opløser man i methanol og t i 1 -20 sætter netop så meget acetone, at der danner sig et bundfald.

Der afkøles til 0°C, bundfaldet afsuges, og der opnås 7,7 g (56,3% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et lysegult pulver.

25 Analyse: Beregnet: C 49,86, H 6,01, N 10,90, S 8,32

Fundet: C 49,71, H 5,85, N 10,80, S 8,07 d) Gadoliniumkompleks af 3,6,9-tris-(carboxymethyl)-14-thia- 3,6,9-triazabicyklo[9,2,l]tetradeca-l(13),ll-dien 30 2 g (5,19 mmol) af den i overskriften til eksempel 17c anførte forbindelse opvarmes sammen med 941 mg (2,60 mmol) gadoli-niumoxid i 20 ml vand i 4 timer til 85-90eC. Den opnåede opløsning filtreres og udrøres med henholdsvis 0,26 g kat-35 ionbytter (IR 120) og 0,26 g anionbytter (IRA 67), gen filtreres påny og frysetørres. Der opnås 2,66 g (95% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt amorft pulver med et vandindhold på 5,7%.

50 DK 171097 B1

Analyse: Beregnet: C 35,61, H 3,74, Gd 29,14, N 7,79 S 5,94 Fundet: C 35,50, H 3,51, Gd 29,02, N 7,98, S 6,18 (Der er ved beregningen taget højde for vandindholdet) 5 Eksempel 18 a) 13-methoxy-3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-3,6,9,15-tetraaza-bicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 10 60,97 g (100 mmol) N, N',N"-tris-(p-tolylsulfonyl)-diethylen- triamin-N,N"-di natriumsalt opløses i 800 ml dimethylformamid^ og der tilsættes dråbevis ved 50°C i løbet af 90 minutter 47,76 g (100 mmol) 2,6-bis-(p-toly1 sulfony 1oxymethy1)-4-metho-xy-pyridin opløst i 400 ml di methy1formamid . Der omrøres i 15 yderligere 5 timer ved 90°C, og tilsættes dråbevis 1,1 1 vand, hvorefter det dannede bundfald afsuges, og vaskes med vand. Produktet tørres i et vakuumtørreskab og omkrystalliseres fra isopropylal-kohol . Der opnås 43,3 g (62% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt pulver.

20

Analyse: Beregnet: C 56,71, H 5,48, N 8,016, S 13,76 Fundet: C 56,90, H 5,31, N 8,00, S 13,59 b) 13-methoxy-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15), 2 5 11,13-trien 30 g (42,9 mmol) af den i overskriften til eksempel 18a anførte forbindelse omrøres med 100 ml koncentreret svovlsyre i 24 timer ved 95°C. Efter afkøling til 0°C tilsættes dråbevis 100 30 ml ether, hvorefter det dannede bundfald afsuges og opløses i 60 ml 40% natriumhydroxid. Opløsningen ekstraheres 5 gange med 75 ml di-chlormethan hver gang, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen omkrystalliseres fra diisopropyl-ether^ og der opnås 6,59 g (65% af det teoretiske) af den i 35 overskriften angivne forbindelse i form af et hvidt pulver.

Analyse: Beregnet: C 60,99, H 8,53, N 23,71 Fundet: C 61,15, H 8,40, N 23,52 DK 171097 B1 51 c) 13-methoxy-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabi-cyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 6,2 g (26,2 mmol) af den i overskriften til eksempel 18b an- 5 førte forbindelse opløses i 40 ml vand og der tilsættes 9,90 g (104,8 mmol) chloreddikesyre. Ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid indstilles pH-værdien på 9,5, og der opvarmes i 8 timer til 45-50°C. I løbet af denne tid holdes pH-værdien på 9,5-10 ved tilsætning af yderligere kaliumhydroxid. Der afkøles der-1° efter på isbad og tilsættes koncentreret saltsyre, indtil en pH-værdi på 2. Der dannes et bundfald^som afsuges, remanensen opløses under let opvarmning i 80 ml vand og opløsningen ad-sorberes på en kationbyttersøjle (IR 120). Der elueres først med rigeligt vand og derefter med 0,5N ammoniakopløsning. Det 15 basiske eluat opsamles og inddampes under vakuum. Remanensen opløses i 80 ml vand/og opløsningen adsorberes på en anionbyt-tersøjle (IRA 67). Der elueres først med vand og derefter med 0,5N myresyre. Den sure fraktion inddampes under vakuum, remanensen opløses i methanol/ og ved tilsætning af acetone ud-20 fældes den i overskriften anførte forbindelse. Der opnås 7,42 g (59% af det teoretiske) i form af et hvidt pulver.

Analyse: Beregnet: C 52,68, H 6,39, N 13,65

Fundet: C 52,81, H 6,22, N 13,80 25 d) Gado1 iniumkompleks af 13-methoxy-3,6,9-1ri s-(carboxymethy1)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 5 g (12,18 mmol) af den i overskriften til eksempel 18c anfør-30 te forbindelse opvarmes med 2,21 g (6,09 mmol) gadoli n i umoxi d i 60 ml vand i 4 timer til 85-90°C. Opløsningen filtreres og frysetørres. Der opnås 6,74 g (98%) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt amorft pulver med et vandindhold på 4,1%.

Analyse: Beregnet: C 38,29, H 4,10, Gd 27,85, N 9,92 Fundet: C 38,41, H 3,92, Gd 27,60, N 9,99 (Ved beregningen er der taget højde for vandindholdet) 35 52 DK 171097 B1

Eksempel 19 a) 13-chlor-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylmethyl )-3,6,9,15-te-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 5

Til 7 g (29,08 mmol) af den i overskriften til eksempel 5c anførte forbindelse og 10,17 g (95,96 mmol) natriumcarbonat i 200 ml acetonitril sættes 18,72 g (95,96 mmol) bromeddikesyre- t-butyl ester og der omrøres i 24 timer ved stuetemperatur.

10

Der inddampes under vakuum, remanensen optages i 300 ml vand og der ekstraheres 3 gange med 200 ml methylenchlor id. Efter tørring af de organiske faser over' magnesiumsulfat inddampes der under vakuum, og den tilbageværende olie kromatograferes på 15 silicagel (elueringsmiddel: methy1ench1 or id/ethano 1 = 15/1).

Udbytte: 14,08 g (83% af det teoretiske) i form af en farve løs olie.

Analyse: Beregnet: C 59,73, H 8,12, N 9,61, 0 16,46, Cl 6,08 20 Fundet: C 59,67, H 8,25, N 9,58, Cl 6,01 b) 13-(N-pyrrolidino)-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylmethyl) - 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 1

Til 13,5 g (23,15 mmol) af den i overskriften til eksempel 19a anførte forbindelse, 3,94 g (46,3 mmol) pyrrol id i non og 612 mg (2,32 mmol) 18-krone-6 i 200 ml vandfrit di methy1 formamid sættes forsigtigt 1,11 g (46,3 mmol) natriumhydrid (i forvejen vasket med pentan). Der omrøres i 72 timer ved 70eC under nitrogen. Opløsningen afkøles til stuetemperatur og udhældes i 1,2 liter isvand. Derefter ekstraheres 3 gange med 250 ml eddikeester. Den organiske fase tørres over magnesiumsulfat og inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på silicagel (e1ueringsmidde1: methy1ench1 or id/metha no 1: 35 13/1).

Udbytte: 5,7 g (39% af det teoretiske) i form af en farveløs olie, som krysta 11 i serer ved henstand.

DK 171097 B1 53

Analyse: Beregnet: C 62,73, H 8,46, N 11,08, 0 17,73 Fundet: C 62,68, H 8,54, N 11,01 c) 13-(N-pyrrolidino)-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-te- 5 traazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 5,1 g (8,07 mmol) af den i overskriften til eksempel 19b anførte forbindelse opløses i 50 ml trif1uoreddikesyre og omrøres i 6 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet 10 fjernes under vakuum, og der renses son beskrevet i eksempel ld på en an i onbytter.

Krystallisation fra MeOH/acetone giver 2,88 g (77¾ af det teoretiske) af et kraftigt hygroskopisk stof.

15

Analyse: Beregnet: C 54,42, H 6,31, N 15,11, 0 24,17 Fundet: C 54,37, H 6,42, N 15,05.

d) Gadoli niumkompleks af 13-(N-pyrro 1 idi no)-3,6,9-1ri s-(car- 20 boxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca- l(15),ll,13-trien 2,5 g (5,4 mmol) af den i overskriften til eksempel 19c anførte forbindelse opløses i 20 ml af i on i seret vand, og der 25 tilsættes 978 mg (2,7 mmol) gadoliniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90°C. Opløsningen filtreres/og filtratet frysetør res .

Udbytte: 3,32 g (100% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 13,2% vand.

30

Analyse:

Beregnet: C 40,83, H 4,24, N 11,34, 0 18,13, Gd 25,46

Fundet: C 40,74, H 4,37, N 11,28, Gd 25,41 35 54 DK 171097 B1

Eksempel 20 a) 13-azido-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylmethyl)-3,6,9,15-te- traazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 5 21 g (36,01 mmol) af den i overskriften til eksempel 19a angivne forbindelse opløses i 200 ml dimethylformamid og der tilsættes 7,02 g (108 mmol) natriumazid samt 951 mg (3,6 mmol) 18-krone-6. Der omrøres i 48 timer ved 90°C.

10

Efter afkøling til stuetemperatur udhælder man i 1,5 1 is vand og ekstraherer tre gange med 200 ml eddikeester. Efter tørring af den organiske fase over magnesiumsulfat inddampes og den tilbageværende olie kromatograferes på kiselgel (elu-15 eringsmiddel: methy 1ench1 or id/ethano1 = 15/1).

Udbytte: 10,83 g (51% af det teoretiske) i form af en bleg gul olie.

Analyse: Beregnet: C 59,06, H 8,03, N 16,63, 0 16,28 20 Fundet: C 59,17, H 8,05, N 16,51 b) 13-amino-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylmethyl)-3,6,9,15-te-traazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 1 2 3 4 5 6

Analyse: Beregnet: C 61,78, H 8,76, N 12,42, 0 17,03 35 Fundet: C 61,67, H 8,91, N 12,35 10 g (16,96 mmol) af den i overskriften til eksempel 20a an 2 førte forbindelse opløses i 400 ml ethanol^og der tilsættes 1 3 g Pearlman-katalysator (20% palladiumhydroxid på kul). Efter 4 hydrogenering i 24 timer ved normalt tryk afsuges katalysa 5 toren og der inddampes under vakuum. Den tilbageværende olie 6 kromatograferes på silicagel (elueringsmiddel : methylenchlo- rid/methanol/triethylamin = 10/1/0,05). Der opnås 8,89 g (93% af det teoretiske) af en lys gullig olie.

DK 171097 B1 55 c) 13-amino-3,6,9-tris-(carboxymethyl )-3,6,9,15-tetrazabicyk-lo[9,3,l]pentadeca-l(i5),ll,13-trien 8,2 g (14,55 mmol) af den i overskriften til eksempel 20b 5 anførte forbindelse opløses i 100 ml trif1uoreddikesyre og omrøres i 6 timer ved stuetemperatur. Efter afdampning af opløsningsmidlet under vakuum opløses remanensen i 100 ml vand og overføres til en søjle fyldt med poly-(4-vinvlpyridin). Efter inddampning under vakuum og krystallisation fra methanol/ace-10 tone opnås 5,24 g (91% af det teoretiske) i form af et kraftigt hygroskopisk fast stof.

Analyse: Beregnet: C 51,64, H 6,37, N 17,51, 0 24,28 Fundet: C 51,74, H 6,31, N 17,63 15 d) Gado1 iniumkompleks af 13-amino-3,6,9-tri s-(carboxymethy1)- 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(l5),ll,13-trien 4,8 g (12,14 mmol) af den i overskriften til eksempel 20c an- 20 førte forbindelse opløses i 35 ml af ioniseret vand og der tilsættes 2,2 g (6,07 mmol) gado1 iniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90°C, og pH-værdien holdes på 5,5 ved tilsætning af eddikesyre. Opløsningen filtreres og føres over en søjle fyldt med poly-(4-vinylpyridin). Efter behandling med aktivt 25 kul filtreres påny/og der frysetørres.

Udbytte: 6,07 g (91% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 12,1% vand.

Analyse: 30 Beregnet: C 37,15, H 4,06, N 12,74, 0 17,47, Gd 28,61

Fundet: C 37,08, H 4,17, N 12,68, Gd 28,54 35

Eksempel 21 56 DK 171097 B1 a) 13-(hydroxyacetamido)-3,6,9-tris-(t-butoxycarbonylme-thyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll, 5 13-trien 5,8 g (10,28 mmol) af den i overskriften til eksempel 20b anførte forbindelse, 861 mg (11,31 mmol) glycolsyre og 1,53 g (11,32 mmol) 1-hydroxy-lH-benzotriazolhydrat opløses i 20 ml 10 absolut di methyl formam id og afkøles til 0eC. Der tilsættes 2,36 g (11,32 mmol) di cyklohexylcarbodii mid og omrøres 1 time ved 0e C; derefter natten over ved stuetemperatur. Opløsningen udhældes i 150 ml isvand og ekstraheres tre gange med 150 ml eddikeester. Efter tørring af den organiske fase over magis nesiumsulfat inddampes under vakuum. Remanensen kromatograferes på kiselgel (elueringsmiddel: methy1ench1 or id/methano1 = 10/1) .

Udbytte: 2,88 g (45¾ af det teoretiske) i form af et farve løst fast stof.

20

Analyse: Beregnet: C 59,88, H 8,27, N 11,26, 0 20,59 Fundet: C 59,76, H 8,35, N 11,31 b) 13-(hydroxyacetamido)-3,6,9-tri s-(carboxymethy1)-3,6,9,15- 25 tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien 2,7 g (4,34 mmol) af den i overskriften til eksempel 21a nævnte forbindelse opløses i 40 ml trif1uoreddikesyre og omrøres i 6 timer ved stuetemperatur. Der inddampes under vaku-um, og remanensen renses som beskrevet i eksempel ld på en an i onbytter.

Krystallisation fra isopropanol giver 1,56 g (79% af det teoretiske) af et hvidt pulver.

Analyse: Beregnet: C 50,32, H 6,00, N 15,45, 0 28,23

Fundet: C 50,24, H 6,07, N 15,49 35 57 DK 171097 B1 c) Gadoliniumkompleks af 13-(hydroxyacetamido)-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentade-ca-1(15),11,13-trien 5 1,45 g (3,2 mmol) af den i overskriften til eksempel 21b nævnte forbindelse opløses i 10 ml afioniseret vand og der tilsættes 580 mg (1,6 mmol) gado1 iniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 9 0°C. Opløsningen filtreres og filtratet frysetørres .

10 Udbytte: 1,94 g (100% af det teoretiske) af et amorft pulver, som ifølge analyse indeholder 11,5% vand.

Analyse:

Beregnet: C 37,55, H 3,98, N 11,53, 0 21,06, Gd 25,88 15 Fundet: C 37,48, H 4,11, N 11,48, Gd 25,79

Eksempel 22 a) 13-chlor-3,6,9-tris-(p-tolylsulfonyl)-3,6,9-triazabicyk-20 lo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien 182,85 g (300 mmol) N , N ' ,N"-1ri s-(p-to 1y1su1fony 1)-diethy1en-tri amin-N,N"-di natriumsa11 opløses i 2,4 1 di methy 1formamid og opvarmes til 100eC. Hertil sættes dråbevis i løbet af 3 25 timer en opløsning af 63,15 g (300 mmol) 4-ch1or-2,6-bis-(ch1 ormethy1)-pyridin ill dimethyl formamid. Der omrøres natten over ved 100eC.

Til den endnu varme opløsning sættes dråbevis 3 1 vand og der 30 afkøles til stuetemperatur. Bundfaldet vaskes i rigeligt vand og tørres under vakuum (60°C). Krystallisation fra acetoni-tril giver 128,7 g (51% af det teoretiske) af den i overskriften nævnte forbindelse i form af et farveløst pulver.

35 Analyse:

Beregnet: C 54,65, H 5,02, N 7,97, 0 13,65, S 13,68, Cl 5,04

Fundet: C 54,61, H 5,13, N 7,91, S 13,65, Cl 5,09 58 DK 171097 B1 b) 13-(N-morpholino)-3,6,9-tris-(p-tolylsulfony1)-3,6,9-tri-azabi cykl o[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 126 g (179 mmol) af den i overskriften til eksempel 22a nævn-5 te forbindelse opløses i 500 ml dimethy1su1foxid,og der tilsættes 87,12 g (1 mol) morpholin. Opløsningen omrøres i en autoklav i 48 timer ved 140eC og 10 bar. Der afkøles, °9 udhældes i 3 1 isvand/ hvorefter bundfaldet afsuges. Efter tørring under vakuum ved 60eC omkrystalliseres fra acetone. Der opnås 87,72 10 g (65% af det teoretiske) i form af et cremefarvet pulver.

Analyse:

Beregnet: C 57,35, H 5,75, N 9,29, 0 14,86, S 12,76 Fundet: C 57,32, H 5,84, N 9,18, S 12,82 15 c) 13-(N-morpholi no)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentade-ca-1(15),11,13-trien 86 g (114 mmol) af den i overskriften til eksempel 22b nævn-20 te forbindelse indføres i 270 ml koncentreret svovlsyre og omrøres i 48 timer ved 100eC. Der afkøles til 0eC og tilsættes dråbevis 1,35 1 absolut ether. Bundfaldet afsuges og suspenderes i 100 ml vandigt natriumhydroxid (pH 12). Der eks-traheres 7 gange med 150 ml chloroform, og de forenede orga-25 niske faser tørres over magnesiumsulfat. Efter inddampning under vakuum opnås 22,26 g (67% af det teoretiske) produkt i form af en gullig olie, som krystalliserer ved henstand.

Analyse: Beregnet: C 61,82, H 8,65, N 24,04, 0 5,49 30 Fundet: C 61,89, H 8,59, N 24,13 d) 13-(N-morpholino)-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-te-traazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 1

g (34,3 mmol) af den i overskriften til eksempel 22c nævnte forbindelse opløses i 150 ml vand og der tilsættes 12,85 g (136 mmol) ch1oreddikesyre. Der indstilles til pH 9,5 med 6N

59 DK 171097 B1 kaliumhydroxid. Der omrores i 12 timer ved 45eC, idet pH-vær-dien holdes mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid. Der indstilles med koncentreret saltsyre til pH 2 og renses på ionbyttere som beskrevet i eksempel ld. Krystalli-5 sat i on fra methanol/acetone giver 9,9 g (62% af det teoretiske) af den i overskriften nævnte forbindelse i form af et kraftigt hygroskopisk fast stof.

Analyse: Beregnet: C 54,18, H 6,71, N 15,05, 0 24,06 10 Fundet: C 54,09, H 6,82, N 15,01 e) Gadoliniumkompleks af 13-(N-morpholino)-3,6,9-tris-(carbo-xymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),- 11,13-trien 15 9 g (19,33 mmol) af den i overskriften til eksempel 22d nævnte forbindelse opløses i 60 ml afioniseret vand og der tilsættes 3,5 g (9,67 mmol) gado1 iniumoxid. Der omrøres i 3 timer ved 90eC og pH-værdien holdes ved tilsætning af eddikesy-20 re på 5,5. Opløsningen filtreres og føres over en søjle fyldt med po1y-(4-vi ny 1-pyridin). Efter behandling med aktivt kul bliver der påny filtreret og frysetørret.

Udbytte: 10,9 g (91% af det teoretiske) i form af et amorft pulver, der ifølge analyse indeholder 9,87% vand.

25

Analyse:

Beregnet: C 40,70, H 4,55, N 11,30, 0 18,07, Gd 25,37 Fundet: C 40,63, H 4,64, N 11,25, Gd 25,28 30 Eksempel 23 a) 13-chlor-3,6,9-tris-(benzyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo-[9,3,1]pentadeca-l(15),11,13-trien 1 9,3 g (38,62 mmol) af den i overskriften til eksempel 5c nævnte forbindelse og 21,36 g (154,5 mmol) kaliumcarbonat opløses i 200 ml di methy1formamid og opvarmes til 70°C. Inden 60 DK 171097 B1 for 30 minutter tilsættes der dråbevis 26,43 g (154,5 mmol) benzylbromid og der omrøres i 24 timer ved 70eC.

Opløsningsmidlet fjernes under vakuum,og remanensen optages 5 i 250 ml 3N natriumhydroxid. Der ekstraheres 5 gange med 150 ml methylenchlorid, og de organiske faser tørres over magnesiumsulfat. Efter inddampning under vakuum kromatograferes der på kiselgel (elueringsmiddel: isopropanol/triethylamin = 20:1).

10 Udbytte: 17,97 g (91% af det teoretiske) i form af en svagt gul olie.

Analyse: Beregnet: C 75,20, H 6,90, N 10,97, Cl 6,93

Fundet: C 75,11, H 6,98, N 10,85, Cl 7,06 15 b) 13-carboxy-3,6,9-tris-(benzyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo-[9,3,1]pentadeca-l(15),11,13-trien

Til 1,95 g (79,44 mmol) magnesiumspåner sættes dråbevis en 2° opløsning af 17,5 g (34,24 mmol) af den i overskriften til eksempel 23a nævnte forbindelse i 80 ml 1,2-dimethoxyethan og der opvarmes til kogning. Der tilsættes hertil i løbet af et tidsrum på 12 timer en opløsning af 6,43 g (34,24 mmol) 1,2-dibrommethan i 40 ml 1,2-dimethoxyethan. Oer afkøles på is-25 bad og opløsningen rystes forsigtigt på 10 g tøris. Efter 3 timers omrøring ved stuetemperatur tilsættes forsigtigt 200 ml vand, og de r indstilles til pH 4 med saltsyre. Der inddampes til tørhed, og remanensen udkoges med 200 ml ethanol. Efter frafi 11rering af magnesiumsalte inddampes der påny til tørhed, 3° og remanensen kromatograferes på kiselgel (elueringsmiddel: chloroform/methanol/triethylamin = 20/15/1).

Udbytte: 5,16 g (29% af det teoretiske) i form af et gulligt fast stof.

35 Analyse: Beregnet: C 76,27, H 6,79, N 10,10, = 6,16

Fundet: C 76,19, H 6,88, N 10,71 61 DK 171097 B1 c) 13-(morpholinocarbony)-3,6,9-tris-(benzyl)-3,6,9,15-tetra-azabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),11,13-trien 5,0 g (9,62 mmol) af den i overskriften til eksempel 23b nævn-5 te forbindelse, 922 mg (10,58 mmol) morpholin og 1,43 g (10,58 mmol) 1-hydroxy-lH-benzotriazol-hydrat opløses i 10 ml absolut dimethylformamid og afkøles til 0®C. Der til sættes 2,18 g (10,58 mmol) dicyk1ohexy1 carbod i imid og omrøres i 1 time ved 0eC og derefter natten over ved stuetemperatur. Opløsningen 10 ud hældes på 180 ml isvand og ekstraheres 3 gange med 150 ml chloroform. Efter tørring af den organiske fase over magnesiumsulfat inddampes der under vakuum. Remanensen kromatografe-res på silicagel (e1ueringsmidde1 : chloroform/methanol/tri- ethylamin = 20/5/1).

15

Der opnås 4,22 g (88% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af en farveløs olie.

Analyse: Beregnet: C 75,48, H 7,19, N 11,90, 0 5,44 20 Fundet: C 75,37, H 7,27, N 11,83 d) 13-(morpholinocarbonyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pen-tadeca-l(15),11,13-trien 25 4,1 g (6,96 mmol) af den i overskriften til eksempel 23c nævn te forbindelse opløses i 250 ml ethanol og der tilsættes 0,5 g Pear 1man-katalysator (20% palladiumhydroxid på kul). Efter hydrogenering i 24 timer i autoklav (5 0e C og 3 bar hydrogent ryk) afsuges katalysatoren^ og der inddampes under vakuum. Remanen-30 sen omkrystalliseres fra 30 ml tetrahydrofuran.

Udbytte: 1,85 g (83% af det teoretiske) af den i overskriften anførte forbindelse i form af et hvidt krystallinsk pulver.

Analyse: Beregnet: C 60,16, H 7,89, N 21,93, 0 10,02 35 Fundet: C 60,08, H 7,97, N 21,81 62 DK 171097 B1 e) 13-(morpholinocarbonyl)-3,6,9-tris-(carboxymethyl)-3,6,9,- 15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca-l(15),ll,13-trien 1,6 g (5,0 mmol) af den i overskriften til eksempel 23d nævn-5 te forbindelse opløses i 25 ml vand/ og der tilsættes 1,89 g (20 mmol) chloreddikesyre. pH indstilles til 9,5 med 6N kaliumhydroxid. Der omrøres i 12 timer ved 45°C, idet pH-værdien holdes mellem 9,5 og 10 ved tilsætning af 6N kaliumhydroxid.

10 Efter oparbejdning på ionbyttere som beskrevet i eksempel ld opnås efter krystallisation fra methano1/acetone 1,66 g (67% af det teoretiske) i form af et kraftigt hygroskopisk fast stof.

I5 Analyse: Beregnet: C 53,54, H 6,33, N 14,19, 0 25,94 Fundet: C 53,41, H 6,47, N 14,08 f) Gado1 iniumkomp1eks af 13 - (morpho1 inocarbony1)-3,6,9-1ris-(carboxymethyl)-3,6,9,15-tetraazabicyklo[9,3,l]pentadeca- 20 l(15),ll,13-trien 1,5 g (30,4 mmol) af den i overskriften til eksempel 23e nævnte forbindelse opløses i 10 ml afioniseret vandlog der tilsættes 551 mg (1,52 mmol) gadolini umox id. Der omrøres i 3 timer 25 vec| 90eC. Opløsningen filtreres^og filtratet frysetørres.

Udbytte: 1,97 g (100% af det teoretiske) i form af et hvidt amorft pulver, der ifølge analyse indeholder 10,1% vand.

Analyse: 30 Beregnet: C 40,79, H 4,36, N 10,81, 0 19,76, Gd 24,28 Fundet: C 40,71, H 4,44, N 10,89, Gd 24,17

Ekseapel på NMR-diagnostik in vivo 35 En hunlig nøgenmus Balb/c nu/nu, 20 g, med subkutan HT 29 Co-loncarcinom fik efter foroptagelse i kernespintomograf (fremstiller: General Electric, 2 Tesia) indgivet 0,1 mmol gadoli- 63 DK 171097 B1 niumkompleks af 3,6,9-1ri s-(carboxymethy1)-3,6,9,15-tetraaza-bicyklo[9,3,1]pentadeca-1(15),11,13-trien (eksempel le) pr. kg i.v. i en caudalvene. Stoffet var opløst i dobbeltdestilieret vand (pH 7,2). Der blev foretaget optagelseer i Spin-Echo-Sequenz 5 Tr = 400 msek, Tg = 30 msek.

Optagelserne blev taget før såvel som 1, 23 og 43 minutter efter indgift af kontrastmidlet i leverens og tumorens område.

10 Det kunne vises, at signalintensiteten ved tumoren steg og ikke faldt igen inden for iagttagelsestidsrummet.

Resultaterne fremgår af følgende afbildning.

30

Afbildningen viser en nøgenmus Balb/c nu/nu med HT 29 Colon-carcinom i transversaltsnit før og efter i.v. indgift af kontrastmiddel. Optagelserne blev foretaget i Spin-Echo-Sequenz IL =

K

400 msek, = 30 msek.

Foroven til venstre vises musen før indgift af kontrastmiddel. Optagelserne viser leveren og den subkutane tumor. De yderligere optagelser blev taget 1, 23 og 43 minutter efter indgift.

35

Claims

64 DK 171097 B1
1. Metalkomplekser af di- og tri(carboxymethyl)-tri- og -tetra(azabicykloalkan)-derivater med den almene formel I !F rv^
2-N N-Z ‘X J Z 5 hvor . . . . er en enkelt- eller dobbeltbinding, A og B, der er ens eller forskellige, hver er en ligekaedet eller forgrenet alkylengruppe med 2 til 6 carbonatomer, D er en af grupperne
10 R3 R3 I I -CH- eller =C- , E er et nitrogenatom eller et oxygenatom, F er (-CH2-)n eller (=CH-)n, 15. er et hydrogenatom eller gruppen -CH2COOY, hvor Y er et hydrogenatom og/eller en metalionækvivalent af et grundstof med atomnummer 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 eller 57-83, R3 er et hydrogenatom, et halogenatom eller en gruppe OR5, hvor R5 er en C1-Cg-alkylgruppe, der eventuelt er substi-20 tueret med 1-3 hydroxygrupper, og n er 0 eller 1, samt deres salte med uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller aminosyreamider, under de forudsætninger, at mindst to af subs ti tuenterne Z står for gruppen -CH2COOY, og 65 DK 171097 B1 at den almene formel I ikke repræsenterer 3,6,9,12,18-penta-a z ab i cyklo [12.3.1]octadeca-1(18) ,14,16-trien-N-tetra-eddikesyre eller 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9.3.1]pentadeca-1(15),11,13-trien-N-trieddikesyre eller deres Cu-, Pb-, Co-5 og Sr-komplekser.
2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at Y er hydrogenatomer.
3. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at mindst to af substituenterne Y er metalionækvivalenter af 10 mindst ét grundstof med atomtal 21-29, 42, 44 eller 57-83 eller mindst en radioaktiv kerne af et grundstof med atomtallet 27, 29, 31, 32, 37-39, 43, 49, 62, 64, 70 eller 77.
4. Farmaceutiske midler, kendetegnet ved, at de 15 indeholder mindst én fysiologisk acceptabel forbindelse valgt blandt metalkomplekser af di- og tri(carboxymethyl)-tri- og -tetra(azabicykloalkan)-derivater med den almene formel I ifølge krav 1 samt 3,6,9,12,18-pentaazabicyklo[12.3.1]octadeca-1 (18),14,16-trien-N-tetraeddikesyre og 3,6,9,15-tetra-2 0 azabicyklo [9.3.1] pentadeca-1 (15) ,11,13 - trien-N-trieddikesyre og deres Cu-, Pb-, Co- og Sr-komplekser, eventuelt sammen med fra den galeniske farmaci kendte sædvanlige additiver.
5. Anvendelse af mindst én fysiologisk acceptabel forbindelse valgt blandt metalkomplekser af di- og tri(carboxy- 25 methyl)-tri- og -tetra(azabicykloalkan)-derivater med den almene formel I ifølge krav 1 samt 3,6,9,12,18-pentaazabicyklo-[12.3.1]octadeca-1(18),14,16-trien-N-tetraeddikesyre og 3,6,9,15-tetraazabicyklo[9.3.1]pentadeca-1(15) ,11,13-trien-N-trieddikesyre og deres Cu-, Pb-, Co- og Sr-komplekser til 30 fremstilling af midler til NMR-, røntgen- eller radiodiagnostik eller til radio- eller stråleterapi. 66 DK 171097 B1
6. Fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med den almene formel I ifølge krav 1 og salte deraf med uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller aminosyreamider under de forudsætninger, at mindst to af substituent erne Z 5 står for gruppen -CH2COOY, og at den almene formel I ikke repræsenterer 3,6,9,12,18-pentaazabicyklo[12.3.1]octadeca-1(18),14,16-trien-N-tetraeddikesyre eller 3,6,9,15-tetrazabi-cyklo[9.3.1]pentadeca-1(15),11,13-trien-N-trieddikesyre eller deres Cu-, Pb-, Co- og Sr-komplekser, kendetegnet 10 ved, at man på i og for sig kendt måde alkylerer forbindelser med den almene formel' 1—x—I H-N N-H J ( Γ) , · Nn-b) /'N " hvor X står for j ;f eller en til den ønskede ring omdannelig 5- eller 6-leddet ring, og hvor A og B har de i krav 1 angivne betydninger, med en halogenforbindelse med formlen
15 HalCH2COOY' (III) , hvor Hal står for chlor, brom eller iod, og Y' er et hydrogenatom eller en syrebeskyttelsesgruppe, og derefter, eventuelt efter omdannelse af X til den i slutproduktet ønskede 5- eller 6-leddede ring samt i givet 20 fald efter fraspaltning af beskyttelsesgruppen Y', om ønsket omsætter den således opnåede kompleksdanner med den almene formel I, hvor Y har betydningen hydrogen, på i og for sig kendt måde med mindst ét metaloxid eller metalsalt af et 67 DK 171097 B1 grundstof med atomnummer 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 eller 57-83, hvorefter man om ønsket substituerer endnu tilstedeværende sure hydrogenatomer med kationer af uorganiske og/eller organiske baser, aminosyrer eller 5 aminosyreamider.