ES2201661T3 - Tratamiento para cesped. - Google Patents

Abstract

Esta invención se refiere a métodos y composiciones para mejorar la calidad de la hierba de un césped mediante el uso de micorriza VA como retardador del crecimiento de Poa annua. Más particularmente, la invención se refiere a la represión, reducción o eliminación de hierbas indeseables en un césped, especialmente en un césped de gran calidad que consiste principalmente en hierbas gramíneas, como las especies Agrostis stolonifera o Festuca.

Description

Tratamiento para césped.

Esta invención se refiere a métodos y composiciones para mejorar la calidad de la hierba de un césped. Más particularmente, la invención se refiere a la represión, reducción o eliminación de hierbas indeseables en un césped, especialmente en un césped de gran calidad que consiste principalmente en hierbas gramíneas, como las especies Agrostis stolonifera o Festuca.

Poa annua o hierba anual de los prados (AMG) (denominada también hierba anual azul) es la maleza más perjudicial para la hierba que forma un césped en países tan diversos como el Reino Unido, los Estados Unidos de América y Australia. Generalmente se considera que P. annua es indeseable en el sembrado de un césped porque es susceptible de tensión abiótica, particularmente disponibilidad de agua, y sucumbe a una serie de enfermedades fúngicas. Además, si un césped está compuesto de parcelas de AMG y agróstide, la superficie no es tan uniforme como desearían muchos jugadores.

Algunos cuidadores de céspedes intentan reprimir P. annua. El método de represión usado más ampliamente es la aplicación de herbicidas y se han ensayado una serie de compuestos contra esta especie con éxito variable. Sin embargo, la aplicación de plaguicidas puede ser costosa y puede presentar un problema de polución de las aguas subterráneas si se riega bien el césped. Además, se puede asociar con riesgos para la salud de golfistas y personal cuidador del césped. Por lo tanto, si se ha de reprimir AMG en la siembra de un césped, se necesita una solución medioambiental más natural.

El presente inventor había publicado anteriormente que la abundancia de AMG en un campo de golf puede estar relacionada negativamente con la abundancia de hongos en el suelo (A.C. Gange, 1994, "Subterranean insects and fungi: hidden costs and benefits to the greenkeeper", en Science & Golf II, Proceedings of the World Scientific Congress of Golf, edición de A.J. Cochran y M.R. Farrally, 461-466, E. London y F.N. Spoon). Los hongos en cuestión eran micorrizas vesiculares-arbusculares que generalmente son abundantes en comunidades vegetales naturales. Se encontró que los hongos eran muy poco abundantes en campos de golf pero, cuando son comunes en el terreno, hay menos AMG en el césped y viceversa. La explicación original para esta relación fue que como la agróstide es considerablemente más fuertemente micorrícica que la AMG, entonces en céspedes en los que la abundancia de hongos es grande, la agróstide es más resistente y, por lo tanto, capaz de competir con la AMG.

Ahora se ha encontrado que micorrizas VA tienen un efecto directo de represión del crecimiento de Poa annua y, por lo tanto, proporcionan un medio eficaz de represión de P. annua en campos de hierba que tienen proporciones altas de las especies Agrostis o Festuca. Este es un descubrimiento inesperado por dos razones. La primera, en la bibliografía se cita usualmente que P. annua no es micorrícica o, como mucho, débilmente micorrícica. La segunda, aunque ahora se ha encontrado que las micorrizas VA no colonizan raíces de Poa annua, la colonización retarda en lugar de favorecer el crecimiento. Además, se ha encontrado que este efecto es independiente de los niveles de fósforo en el terreno.

Por lo tanto, la presente invención se basa en el descubrimiento de un nuevo efecto técnico de micorrizas VA que lleva a un método de tratamiento de céspedes que no había sido contemplado hasta la fecha. Se ha de entender que la aplicación de micorrizas VA, a praderas o a terreno en preparación para la siembra de hierbas, de acuerdo con esta invención es con la intención específica de suprimir Poa annua, distinto de cualquier otro fin, por ejemplo, estimular el crecimiento o recuperar césped dañado. Las preparaciones para uso de acuerdo con la invención no requieren la presencia de cualesquiera otras bacterias u otros organismos o materiales biológicamente activos aunque, si se desea, no se excluyen estos como secundarios al fin principal de la invención.

Es especialmente importante que la composición aplicada al césped contenga muy pocos, y preferiblemente que esté exenta, de otros materiales biológicos que pudieran favorecer el crecimiento de P. annua y que, por lo tanto, compiten con la micorriza VA y chocan con los objetivos de la presente invención. Por ejemplo, cuando P. annua es la especie dominante en zonas de aplicación alta de fosfatos, es muy deseable evitar la presencia en la composición de cantidades significativas de bacterias que liberen fósforo de los fosfatos. La adición deliberada de dichas bacterias solubilizantes de fosfatos a la composición está muy contraindicada. Por lo tanto, preferiblemente, aparte de cantidades mínimas de otros organismos que pueden estar presentes debido al uso de condiciones de producción que no son totalmente estériles, los hongos micorrícicos VA usados constituyen el único o principal componente viviente de las composiciones de la presente invención.

La presente invención comprende el uso de una micorriza VA como retardante del crecimiento de Poa annua. En la presente memoria se usa el término "micorriza VA" para abarcar todos los hongos terrestres que forman arbúsculos en asociaciones simbióticas obligadas con plantas terrestres. Ejemplos representativos típicos de hongos vesiculares o arbusculares se encuentran en los géneros Glomus, Acaulospora, Entrophosphora, Gigaspora, Scutellospora y Sclerocytis. Ejemplos de especies son Glomus fasciculatum, Glomus caledonium, Glomus mosseae, Glomus versiforme, Glomus intraradices y Glomus etunicatum. Se pueden usar una o más especies de micorrizas VA, dependiendo de la calidad del césped a tratar. Las especies preferidas son Glomus mosseae, caledonium, fasciculatum y versiforme. Las micorrizas VA son organismos ampliamente disponibles y se pueden obtener, por ejemplo, de la International Culture Collection of VAM fungi (INVAM), Florida, Estados Unidos de América.

Para producir inóculos de micorrizas VA para los fines de la presente invención, se pueden usar todas las estructuras infecciosas de los hongos, incluidas esporas y micelios producidos dentro y fuera de la raíz hospedante. También se pueden usar raíces infectadas y sustratos infectados. El inóculo se puede usar en forma de suspensiones, geles, gránulos, suelo infectado o formulaciones de esporas. Formulaciones especialmente eficaces son las formulaciones con arcilla como vehículo que contienen las cuatro especies preferidas antes indicadas, por ejemplo, las disponibles comercialmente bajo la marca comercial registrada "VAMINOC" (The MicroBio Group Ltd., Whittlesford, Cambridge, Reino Unido), como VAMINOC 8/16, VAMINOC 30/60 y VAMINOC-T. El tamaño de las partículas inoculantes puede ser de hasta 2 ó 4-8 mm. Se pueden seleccionar vehículos alternativos, por ejemplo, de gel de sílice, tierras blanqueantes, piedra pómez, bauxita, atapulgita, vermiculita, montmorillonita calcinada, tierra, turba, arena y cualquier otro material inerte químicamente de modo sustancial y con una estructura porosa adecuada.

La hierba que puede ser tratada de acuerdo con la presente invención puede ser un campo de deportes o de entretenimiento, ya sembrado y que contiene proporciones inaceptables de P. annua. Particularmente adecuado para el tratamiento es un césped que se siega regularmente. Alternativamente, el tratamiento puede ser aplicado a un terreno sobre el que se ha de colocar o sembrar un césped, por ejemplo, un terreno de arena/turba sembrado con agróstide o con una mezcla de agróstide/Festuca.

Deseablemente, la capacidad de infección del inóculo, medida por la técnica del "número más probable" (MPN), corresponde a valores MPN desde por lo menos 200 ó 500 hasta 1.000 propágulos o más por gramo. La aplicación de inóculo en una proporción de por lo menos 5 ó 10 g/m^{2} es eficaz pero, si se prefiere, se pueden usar dosis mayores, por ejemplo, de hasta aproximadamente 100 a 250 g/m^{2}. En ciertas aplicaciones se contemplan dosis aún mayores, por ejemplo, de hasta superiores a 1 kg/m^{2}. El inóculo puede ser chorreado con agua en un césped ya sembrado o ser introducido en la zona de las raíces. No es aconsejable la aplicación en condiciones atmosféricas muy calientes o muy frías. La zona a tratar puede ser un campo de golf, un campo de bolos, un césped o cualquier otra clase de zona de hierbas que requiera ser tratada de acuerdo con la invención. La invención es de particular importancia para mejorar o mantener la calidad de un césped que consiste principalmente en Agrostis spp. o Festuca spp.

La invención comprende también un método de reprimir o reducir la cantidad de P. annua en un césped, método que comprende aplicar al césped una especie de micorriza VA que inhibe el crecimiento. Preferiblemente, se aplica al césped una composición que contiene propágulos infecciosos, conteniendo la composición propágulos en cantidades suficientes para colonizar eficazmente raíces de plantas. Los propágulos infecciosos se pueden seleccionar, pero sin carácter limitativo, de esporas, micelios e hifas de hongos y fragmentos de raíces infectadas con micorrizas. A continuación se describen experimentos que han comprobado la actividad de micorrizas VA que retrasan el crecimiento y se ilustran en las figuras 1 a 7 de los dibujos adjuntos.

Experimentos iniciales

En julio de 1997, se tomaron tres muestras de terreno, cada una de 1,5 cm de diámetro, de los 18 greens de un campo de golf. Se examinó cada muestra con un microscopio binocular y se contó el número de retoños de cada especie de hierba. Después se lavaron las raíces de las especies de hierbas hasta eliminar la tierra y se colocaron en portaobjetos de microscopio. Se examinaron después bajo un microscopio de epifluorescencia equipado con una lámpara ultravioleta bajo cuyas condiciones autofluorescen los arbúsculos (la única estructura definitiva de la micorriza). Se cuantificaron las micorrizas por el método del campo ocular de hilos reticulados de McGonigle et al., 1990. Las diferencias de abundancia de AMG entre greens se ensayaron por análisis de varianza de un solo factor de Kruskall-Wallis y la relación entre colonización de micorrizas y abundancia de AMG se examinó por regresión lineal.

Experimento de laboratorio

Se llenaron ochenta recipientes, cada uno de 7x7 cm, con una mezcla de 80% de arena y 20% de lodo de pantanos y se sembraron con Agrostis stolonifera en una proporción de 40 g/m^{2}. Se inoculó la mitad de los recipientes con 9,7 g de VAMINOC-T, una mezcla de cuatro especies de hongos micorrícicos (The MicroBio Group Ltd., Whittlesford, Cambridge, Reino Unido), equivalentes a 25 gramos por litro de terreno. Diez recipientes inoculados con micorrizas y diez recipientes no inoculados con micorrizas recibieron 0,2 g de AMG (equivalentes a 157.000 semillas/m^{2}) y diez recipientes de cada tratamiento recibieron 0,6 g de AMG (471.000 semillas/m^{2}). Hubo también diez recipientes de cada tratamiento con micorrizas que no recibieron semillas de AMG. Por lo tanto, en total hubo ocho tratamientos (2 niveles de micorriza x 4 niveles de AMG), con diez replicados en cada uno, totalizando 80 recipientes.

Los recipientes se mantuvieron durante tres meses en una sala acondicionada a 20ºC, en cuyo tiempo desarrollaron un césped espeso. Se redujo gradualmente la altura de corte de la hierba a 8 mm y, en cada corte, los recortes se retiraron y secaron en una estufa hasta peso constante. Se aplicó fertilizante para imitar lo recomendado para un green ya sembrado. Al término del experimento, se calculó la biomasa total producida en cada recipiente. El efecto de añadir AMG y las micorrizas sobre la producción de biomasa se analizó con un análisis de varianza encajada.

Resultados

Hubo un efecto inesperado sobre la biomasa total por la adición de AMG pero no un efecto general por la adición de micorrizas. Sin embargo, hubo una interacción muy significativa entre AMG y micorrizas (F_{3,72} = 4,5; p <0,01). Esto se debe a que, cuando no se añadió AMG a los recipientes, la adición de micorrizas incrementó la biomasa de la agróstide. Sin embargo, en todos los tratamientos con adición de AMG, las micorrizas no incrementaron la biomasa total y, en algunos casos, la redujeron significativamente. Por lo tanto, estos datos implican que las micorrizas tienen un efecto positivo sobre la agróstide, pero un efecto negativo sobre la AMG. Esto se puede ver comparando pares de tratamientos en el experimento. Así, la adición de 0,2 g de AMG a recipientes no inoculados con micorriza causó un incremento del 22% en la biomasa total mientras que la adición de 0,2 g de AMG a recipientes inoculados con micorriza originó una disminución del 3% en la biomasa. Mientras tanto, la adición de 0,6 g de AMG a recipientes no inoculados con micorriza dio un incremento del 45% mientras que la adición de 0,6 g de AMG a recipientes inoculados con micorriza dio sólo un incremento del 25%.

Los resultados del experimento de laboratorio llevó a las siguientes observaciones. En la situación de "control", en la que no se sembró AMG en los recipientes, la adición de micorriza tuvo un efecto positivo sobre el crecimiento de la agróstide. En recipientes en los que no se añadió micorriza, la adición de semillas de AMG incrementó significativamente la biomasa como era de esperar. Sin embargo, si estaba presente micorriza, la adición de AMG a un nivel de 157.000 semillas/m^{2} no tuvo efecto sobre la biomasa total y originó realmente una ligera disminución. En realidad, incluso al nivel mayor de siembra (471.000 semillas/m^{2}), parece que la micorriza es capaz de mitigar los efectos de esta adición de semillas. Las adiciones de semillas en este experimento se diseñaron para ser realistas en cuanto a las densidades de retoños en el campo. La presencia de hongos micorrícicos puede servir para mantener la AMG a niveles menores que los que ocurrirían si no estuvieran los hongos. Además, este mecanismo puede actuar con densidades de retoños comparables a las existentes en campos de golf.

Estudio en campo

Se encontró de nuevo una relación negativa significativa entre abundancia de AMG y colonización de micorrizas (F_{1,16} = 8,65; p < 0,01; r^{2} = 0,351). La colonización de micorrizas fue muy baja en comparación con zonas naturales, aunque dentro del intervalo (0-11%). El número medio de retoños de AMG por muestra de terreno fue 75,9\pm5,3.

En el estudio realizado, no había virtualmente Agrostis stolonifera. De hecho, 12 de los 18 greens eran exclusivamente de AMG y la proporción media de AMG en el césped era 96,1%. Hubo una diferencia significativa entre greens en cuanto a la densidad de todos los retoños de hierbas (c^{2} = 29,3; p < 0,05) y también en cuanto a la proporción de AMG en el césped (c^{2} = 28,7; p < 0,05). Por lo tanto, los greens no proporcionaron superficies uniformes debido a las cantidades variables de AMG en ellos.

Ensayos en vivero

Experimento 1

Efecto del VAMINOC sobre el crecimiento de Poa annua

Se cargaron 8 bandejas de 1 litro, cada una de 10x15x1 cm, con 800 g de una mezcla de tierra arenosa (barro de Rothansted Experimental Station) y arena (1:1 p/p). Cuatro bandejas se inocularon con 0,7 g de VAMINOC (equivalentes a 20 g/m^{2}), una mezcla de tres especies de hongos micorrícicos (MicroBio Group Ltd., Whittlesford, Cambridge, Reino Unido), y cuatro bandejas no se inocularon. La inoculación de VAM se realizó rastrillando la superficie del terreno antes de la siembra de semillas. Cada bandeja se sembró con 1 g de semillas de Poa annua, equivalente a la proporción recomendada de 35 g/m^{2}, y se mantuvo en un invernadero a una temperatura de 25/20ºC (día/noche).

Se cortaron brotes de hierba 4 y 10 semanas después de la siembra y se determinó el peso fresco de los brotes. Al término del período de crecimiento (10 semanas) se calcularon los pesos totales en cada bandeja, se tiñeron muestras de las raíces y se evaluó visualmente la presencia de colonización de micorrizas VA.

Resultados: Figura 1a y figura 1b (fotografía)

Se observó una reducción significativa de crecimiento de Poa annua en respuesta a la inoculación de VAMINOC con respecto a controles no inoculados. El efecto perjudicial de micorrizas VA sobre Poa se puede ver en la figura 1b, tomada después de 10 semanas de crecimiento, antes de la segunda determinación del peso fresco. Había colonización de micorrizas VA en Poa inoculada pero no en control no inoculado.

Experimento 2

Efecto del VAMINOC sobre Poa annua bajo tres niveles de fósforo

Está bien comprobado que la respuesta de crecimiento de plantas a la infección de micorrizas está influida por la cantidad de fósforo (P) aportado al terreno. Cuando la planta dispone fácilmente de fósforo, también se reduce la respuesta positiva de crecimiento debida a la infección de micorrizas y se ha publicado que niveles altos de fósforo en el terreno reducen el porcentaje de infección en plantas inoculadas con micorrizas.

Como las micorrizas VA tienen un efecto negativo sobre Poa annua, se realizó un experimento para estudiar la relación entre niveles de fósforo del terreno y respuesta de VAM en Poa ensayando el efecto de la inoculación de VAM bajo tres niveles de fósforo.

Los materiales y métodos fueron los indicados en el experimento 1.

Se eligieron tres niveles de fósforo del terreno: 0 (sin adición de fósforo), 152 y 208 mg de superfosfato triple (TSP) por bandeja (equivalente a 0, 100 y 240 kg/ha respectivamente).

Por lo tanto, hubo seis tratamientos (2 niveles de micorriza x 3 niveles de TSP), con 4 replicados en cada uno, dando un total de 24 bandejas.

En cada bandeja se determinó el peso fresco de los brotes 4 y 9 semanas después de la siembra. Los pesos totales calculados después de 9 semanas se analizaron usando un ANOVA bidireccional.

Al término del experimento, se tiñeron muestras de las raíces y se comprobó la colonización de hongos VAM. Los resultados se muestran en la figura 2. Como se esperaba, los pesos totales en bandejas de Poa annua no inoculadas con VAMINOC fueron mayores que los de las bandejas inoculadas (F_{1,18} = 57,37; p < 0,01). Hubo también una diferencia en los pesos totales para los diferentes niveles de TSP (F_{2,18} = 5,97; p = 0,01).

Las respuestas de crecimiento de Poa a los tres niveles de TSP fueron diferentes en bandejas inoculadas que en bandejas no inoculadas (F_{2,18} = 8,87; p = 0,002). En bandejas inoculadas, el efecto retardador del crecimiento del VAMINOC se observó a todos los niveles de fósforo ensayados.

Al término del experimento, se observó colonización de VAM en raíces de todas las Poa inoculadas, frente a ausencia de colonización en los controles no inoculados. Algunos hongos micorrícicos fueron afectados perjudicialmente por niveles altos de fósforo del terreno. Cuando abunda fósforo en el terreno, algunas especies de hongos crecen muy mal y también se reduce la respuesta de las plantas. Sin embargo, una característica importante del efecto antes descrito es que el efecto antagonista sobre Poa annua se ha encontrado a niveles de fósforo del terreno bajos, medios y altos. En este experimento, el nivel "alto" de fósforo corresponde al que hay en terrenos típicos sembrados con césped en los que los niveles de fósforo son invariablemente altos. Así, el efecto antagonista de los hongos sobre Poa annua ocurre en situaciones reales, como las que hay en campos de golf.

Ejemplo 1

Para el experimento se usó un césped sembrado. Este estaba compuesto de una mezcla de Agrostis spp. y Poa annua, con pequeñas cantidades de Festuca spp. El experimento duró 6-7 meses desde finales de junio en adelante. Se seleccionaron del césped veinticuatro trozos, cada uno de 0,5x0,5 m, y cada trozo se sometió a uno de los cuatro tratamientos siguientes:

- adición de semillas de Agrostis, como siembra adicional, 4 gramos por trozo,

- adición de VAMINOC-T, 5 gramos por trozo,

- adición de semilla e inóculo,

- ninguna adición ("control").

Los trozos estaban dispuestos al azar en el césped, con seis replicados en cada tratamiento. La abundancia de hierba se muestreó no destructivamente por el método del cuadrante puntual. Veinte agujas metálicas de 3 mm de diámetro se colocaron al azar en cada trozo de modo que la punta de cada aguja permaneciera sobre la superficie del terreno. Se contó el número total de contactos de cada especie de hierba sobre cada aguja y ascendieron a 20 agujas en cada trozo. Los trozos se muestrearon en cinco ocasiones durante un período de seis meses después haberse aplicado los tratamientos. Después se calculó en cada fecha el valor medio de los seis replicados de cada tratamiento. Las medias se presentan en las figuras adjuntas.

Resultados (véanse las figuras 3, 4 y 5)

Al comienzo del experimento, la cantidad total de hierba en cada tratamiento era similar. La adición de semillas no tuvo efecto sobre la cantidad total de hierba ni sobre la de las dos especies más comunes, Agrostis y Poa. Sin embargo, al término del estudio, los tratamientos que habían aplicado VAMINOC T y micorriza tenían significativamente más contactos totales con hierba (Figura 3). Por lo tanto, la adición de los hongos tuvo un efecto estimulador sobre el crecimiento del césped, habiendo más hojas de hierba en contacto con las 20 agujas. Sin embargo, el efecto sobre las dos especies de hierbas dominantes no fue el mismo. Los tratamientos en los que se aplicó VAMINOC-T tuvieron más contactos con Agrostis al término del período de seis meses, como muestran las rectas marcadas con triángulos en la figura 4. Por lo tanto, los hongos fueron muchos más eficaces que la adición de semillas en incrementar la abundancia de esta hierba.

Entretanto, al término del experimento, los trozos que recibieron VAMINOC-T tuvieron menos contactos con Poa annua que los trozos en los que no se aplicó tratamiento (Figura 5). Esta fue una situación totalmente contraria a la del comienzo del experimento, cuando los trozos de "control" tenían el recuento más bajo de Poa.

Por lo tanto, la aplicación de VAMINOC-T a un campo de golf originó una reducción de la abundancia de Poa annua, un incremento de la abundancia de Agrostis y un incremento de la abundancia de las hierbas totales.

Ejemplo 2 Eficacia de VAM en campo

Para el fin de esta demostración, se seleccionaron dos greens US PGA construidos de un campo popular grande de golf en Cambridgeshire (Reino Unido). Los greens fueron sembrados aproximadamente tres años antes y estuvieron cuidados según la práctica estándar. Gran parte de los greens estaba compuesto de Agrostis spp., con un nivel bajo de Festuca spp. También había Poa annua en gran parte de los dos greens seleccionados.

Cada green de 500 m^{2} se dividió en dos trozos iguales. Los greens se excavaron antes del tratamiento. Se aplicó VAMINOC-G en una proporción de 20 g/m^{2} a una mitad de cada green mientras que la otra mitad quedó sin tratar. Se regó ligeramente cada green durante 8 horas después de la aplicación de VAMINOC-G. En cada green se valoró visualmente la incidencia de Poa annua antes de la aplicación de VAMINOC-G y de nuevo aproximadamente 3 meses después de la aplicación.

Durante el ensayo, los greens fueron cuidados según la práctica estándar.

Resultados

En las figuras 6 y 7 adjuntas se indica la relación entre la aplicación de VAMINOC-G y la incidencia de Poa annua en los dos greens. Es evidente que, aunque la incidencia de Poa annua disminuye generalmente en los greens durante el período de evaluación según lo esperado, el porcentaje de reducción total en las zonas tratadas con VAMINOC-G es mucho mayor que el observado en las zonas no tratadas (96 y 84% frente a 59 y 34% para los greens 1 y 18 respectivamente).

Claims (15)

1. El uso de micorriza VA como retardador del crecimiento de Poa annua.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, usando una o más especies de micorrizas VA seleccionadas de los géneros Glomus, Acaulospora, Entrophosphora, Gigaspora, Scutellospora y Sclerocytis.

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, usando una o más especies del grupo formado por Glomus fasciculatum, Glomus caledonium, Glomus mosseae, Glomus versiforme, Glomues intraradices y Glomus etunicatum.

4. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, 2 ó 3, aplicado a un césped.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que césped es un campo de golf.

6. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el césped es un campo de entretenimiento.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, 5 ó 6, en el que el césped consiste principalmente en Agrostis spp. y/o Festuca spp.

8. Un método de reprimir o reducir el crecimiento de Poa annua en un césped, que comprende aplicar al césped una o más especies de micorrizas VA que reprimen el crecimiento de Poa annua.

9. Un método de acuerdo con la reivindicación 8, en el que la una o más especies de micorrizas VA se seleccionan del grupo citado en la reivindicación 2 ó 3.

10. Un método de acuerdo con la reivindicación 8 ó 9, en el que la micorriza VA se aplica al terreno en forma de producto formulado en el que las micorrizas VA constituyen el componente principal que tiene actividad biológica sobre el crecimiento o el césped.

11. Un método de acuerdo con la reivindicación 10, en el que el inóculo tiene un MPN de 200 a 1.000 o más propágulos por gramo.

12. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11, en el que la micorriza está formulada con una arcilla u otro vehículo sólido.

13. Un método de acuerdo con la reivindicación 11 ó 12, en el que la cantidad de producto formulado aplicado al césped es de 5 g/m^{2} a 1 kg/m^{2}.

14. Un método de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 13, en el que los propágulos infecciosos se seleccionan de esporas, micelios e hifas de hongos y fragmentos o raíces infectadas con micorrizas.

15. Un método de represión del crecimiento de Poa annua en el césped de un campo de deportes o de entretenimiento o en otra zona de hierbas que necesite dicha represión o en una zona en la que se ha de colocar o sembrar un césped de gran calidad, método que comprende aplicar al césped o a otra zona una composición que contiene una o más especies de micorrizas VA y que está exenta sustancialmente de cualquier agente biológico que tenga actividad promotora del crecimiento de Poa annua.