ES2242381T3

ES2242381T3 - Agentes profilacticos o remedios contra los trastornos renales de origen medicamentoso.

Info

Publication number: ES2242381T3
Application number: ES99906500T
Authority: ES
Inventors: Mikio Okamura; Yoshiharu Kanayama; Junichi Yoshikawa; Haruo Shintaku
Original assignee: Daiichi Suntory Pharma Co Ltd
Current assignee: Asubio Pharma Co Ltd
Priority date: 1998-02-27
Filing date: 1999-02-26
Publication date: 2005-11-01
Anticipated expiration: 2019-02-26
Also published as: EP1004308A4; JP4486167B2; ATE295172T1; DE69925225T2; WO1999043324A1; EP1004308B1; EP1004308A1; DE69925225D1; US6288067B1

Abstract

Agentes preventivos o remedios para prevenir eficientemente o mejorar los trastornos renales inducidos por medicamentos que contienen como ingrediente activo representado por la fórmula general (I) o sus sales farmacéuticamente aceptable, donde R1 y R2 representan cada un o hidrógeno, R1 y R2 forman juntos un enlace sencillo; y cuando R1 y R2 representan cada uno hidrógeno, entonces R3 representa CH(OH)CH(OH)CH3, - CH(OCOCH3)CH(OCOCH3)CH3, -CH3, -CH2OH o fenil, y cuando R1 y R2 forman juntos un enlace sencillo, entonces R3 es -COCH(OH)CH3.

Description

Agentes profilácticos o remedios contra los trastornos renales de origen medicamentoso.

Campo de la invención

La presente invención se relaciona con la preparación de composiciones farmacéuticas para prevenir y/o tratar la lesión renal inducida por fármacos utilizando como principio activo un compuesto de la fórmula (I):

1

donde R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno o, tomados conjuntamente, representan un enlace sencillo, mientras que R^{3} representa -CH(OH)CH(OH)CH_{3}, -CH(OCOCH_{3})-CH(OCOCH_{3})CH_{3}, -CH_{3}, -CH_{2}OH o un grupo fenilo cuando R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno, o -COCH(OH)-CH_{3} cuando R^{1} y R^{2} representan conjuntamente un enlace sencillo, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

Técnica anterior

Clínicamente, la lesión renal inducida por fármacos se manifiesta principalmente como síndrome nefrótico (o proteinuria en casos más leves) y disfunción renal. Por ejemplo, la glomerulopatía representada por nefropatía membranosa inducida por fármacos a base de oro se manifiesta como síndrome nefrótico, mientras que el trastorno tubular inducido por agentes nefrotóxicos representados por la cisplatina se manifiesta como fallo renal agudo. El trastorno del transporte que se produce específicamente en los túbulos renales se presenta con condiciones clínicas tales como el síndrome de Fanconi, la acidosis tubular renal, la diabetes insípida renal, etc. La nefritis intersticial aguda inducida por meticilina o similar se manifiesta como disfunción renal. Así, la lesión renal inducida por fármacos se presenta con diversas condiciones clínicas dependientes del tipo del fármaco o del sitio afectado (Medical Practice, Vol. 14, Nº 8, 1997, p. 1273).

Por ejemplo, la ciclosporina A es un agente inmunosupresor comúnmente utilizado durante el trasplante, pero causa lesión renal con una incidencia del 50% o más dependiendo de la concentración en sangre del fármaco debido a su alta nefrotoxicidad. La lesión renal inducida por la ciclosporina A tiene varios fenotipos, incluyendo fallo renal agudo, fallo renal crónico, síndrome urémico hemolítico, microangiopatía trombótica, hipertensión, desequilibrio electrolítico (tal como hipercalemia, acidosis metabólica e hipomagnesemia), etc. El fallo renal agudo debe ser identificado por biopsia renal debido a la dificultad para discriminar la condición del rechazo agudo. Una menor velocidad de filtración glomerular ("GFR") durante la fase inicial de la administración se atribuye a un aumento del sistema renina-angiotensina, a estimulación del sistema nervioso simpático, a una mayor producción de tromboxano A_{2} y al efecto de la endotelina. Por otra parte, los pacientes con trasplantes renales desarrollan con frecuencia fallo renal crónico causado por la administración a largo plazo de ciclosporina, que es difícil y a veces imposible de discriminar del rechazo crónico incluso por biopsia renal. La lesión tisular inducida por la ciclosporina conlleva principalmente un trastorno de las células endoteliales, que va desde la arteria interlobular hasta la arteriola aferente, donde dicha lesión tisular causa principalmente esclerosis renal, invasión de las células intersticiales y fibrosis. Más aún, con frecuencia se produce hipomagnesemia durante la administración de ciclosporina y una extrema hipomagnesemia puede causar un ataque sistémico bajo la influencia de la ciclosporina ("ZINZOUGAKU", Approach from Renal Pathophysiology, ed. Kurokawa, K., Nankodo, pp. 419-428, 1995).

Se sabe que el endotelio vascular juega un importante papel en el tono vascular o en la trombopoyesis y en 1980 se describió por primera vez la presencia del factor de relajación derivado del endotelio ("EDRF"). Se demostró que la entidad del EDRF era óxido nítrico (NO) en 1987. El NO es un radical gaseoso y se ha visto que pasa fácilmente a través de las membranas celulares y que tiene una amplia variedad de efectos, tales como control de la circulación, neurotransmisión, inhibición de la agregación plaquetaria y efecto antibacteriano o anticanceroso. El NO no sólo controla el metabolismo reaccionando con grupos enzimáticos hem o enzimáticos SH, sino que también tiene funciones fisiológicas y actividad patológica interfiriendo con especies de oxígeno activo, tales como el superóxido (O_{2}^{-}), los compuestos SH, el ácido ascórbico o similares. Sin embargo, su entidad molecular in vivo es aún desconocida en muchos sentidos, ya que todas estas moléculas son inestables.

El NO, que tiene una amplia variedad de efectos, como se ha descrito anteriormente, se produce cuando se oxida la L-arginina de N^{G}-hidroxil-L-arginina a L-citrulina y la reacción está catalizada por una enzima llamada NO sintasa (NOS). La NOS tiene isoformas, que incluyen un tipo endotelial vascular, un tipo cerebelar y un tipo inducible. El tipo endotelial vascular existe principalmente en el endotelio vascular y en el riñón, mientras que el tipo cerebelar existe en el sistema nervioso. El tipo inducible existe en macrófagos o similares inducidos durante la inflamación o la lesión tisular. El gen para cada una de estas isoformas ha sido ya clonado y estructuralmente analizado. Como resultado, se vio que el gen para la NOS contenía un sitio de unión para (6R)-L-eritro-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina (a la que en adelante se hará aquí referencia como "BH_{4}"), incluida en los compuestos de fórmula (I) como ingrediente activo de la presente invención, así como para coenzimas tales como la calmodulina (CaM), la flavina y el NADPH. Más aún, se ha sugerido que la BH_{4} está realmente implicada en el control de la función de la NOS.

Por lo tanto, el efecto vasorrelajante del NO y el control de las funciones de la NOS por la BH_{4} son conocidos en alguna medida. Sin embargo, no se ha explicado la relación de los efectos del NO y de la actividad de la NOS con la lesión renal inducida por fármacos y nada se sabe acerca de la relación entre la lesión renal inducida por fármacos y la BH_{4} endógena.

El fin de evitar o de tratar la lesión renal inducida por fármacos no es sólo evitar o tratar la lesión renal, sino también permitir el uso de fármacos responsables de la lesión renal, de tal forma que los pacientes puedan disfrutar de una prolongada y superior calidad de vida. Sin embargo, no se puede esperar actualmente ninguna mejoría en las enfermedades o condiciones de la lesión renal inducida por fármacos, ya que el fallo renal agudo requiere la interrupción de la administración del fármaco para permitir que se recupere la función renal y el fallo renal crónico requiere diálisis o trasplante renal. Por lo tanto, no se ha establecido aún ninguna terapia para la lesión renal inducida por fármacos y tampoco existe ningún fármaco profiláctico o terapéutico para ella actualmente. Como resultado, hay una gran demanda de fármacos que sean completamente satisfactorios en términos de efectos colaterales, seguridad durante el uso a largo plazo y mejora de la CDV (calidad de vida).

Por ello, se necesitan agentes terapéuticos que satisfagan condiciones verdaderamente deseables y también hay una gran demanda del desarrollo de agentes profilácticos que tengan una acción protectora renal.

Los compuestos de la fórmula (I) como principios activos en composiciones farmacéuticas de la presente invención son compuestos conocidos para uso en agentes terapéuticos contra la hiperfenilalaninemia maligna, la depresión, la enfermedad de Parkinson, etc. Por ejemplo, véanse las Descripciones Públicas de Patente Japonesa (KOKAI) Nº 25323/84, 76086/84, 277618/86 y 267781/88.

JP-A-63-267781 se relaciona con un agente terapéutico para el tratamiento de tumores malignos y de trastornos metabólicos de aminoácidos asociados a enfermedades infecciosas víricas graves, que contiene tetrahidrobiopterina y un derivado de la misma como componente efectivo.

EP-A-0.209.689 se relaciona con una composición farmacéutica para el tratamiento del autismo infantil, que contiene tetrahidrobiopterina o un derivado de la misma como componente efectivo principal y 5-hidrotriptófano y/o L-DOPA como componente efectivo auxiliar eventual.

EP-A-0.108.890 se relaciona con derivados de pteridina farmacéuticamente activos y con formulaciones farmacéuticas que los contienen. Las pteridinas descritas son análogos de tetrahidrobiopterina y son agentes efectivos en el tratamiento del Parkinsonismo y de otras enfermedades causadas por una deficiencia de catecolaminas en el cerebro y el sistema nervioso periférico, así como en el tratamiento de fenilcetonurias deficientes en tetrahidrobiopterina.

EE.UU. 4.758.571 describe derivados de pterina, es decir, L-eritro-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina, L-sepiapterina, 1',2'-diacetil-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina y 6-metil-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina y su uso para el tratamiento de pacientes que sufren de la enfermedad de Parkinson o de depresión.

A.J. Bune y col., Exp. Nephrol., 4, 43-47 (1996), describen que la inhibición de la síntesis de tetrahidrobiopterina (BH_{4}) reduce la producción de óxido nítrico por los glomérulos aislados en la glomerulonefritis compleja inmune. Con más detalle, se describe que se produce NO por la oxidación enzimática de L-arginina con óxido nítrico sintasa (NOS) y que la actividad de la NOS depende del suministro de BH_{4}, que actúa como cofactor. Suponiendo dos rutas que conducen a la formación de BH_{4}, es decir, una ruta sintética de novo que parte de trifosfato de guanosina ("GTP") como precursor y una ruta salvaje que parte de hidropterinas preexistentes, se ha visto que la inhibición de la formación de BH_{4} por cualquiera de las rutas da lugar a la reducción de la síntesis de NO.

M.P. Gardner y col., Transplantation, 61, 1506-1512 (1996) describe que la nefrotoxicidad de la ciclosporina (CsA), acompañada del uso de CsA como inmunosupresor para el trasplante de órganos y enfermedades autoinmunes refractarias graves, aumenta por bloqueo simultáneo. A partir de los resultados experimentales, se supone que la ruta del NO endotelial permanece intacta durante el tratamiento con CsA, es decir, que el propio tratamiento con CsA no influye en el metabolismo del NO. Por otra parte, en base a la observación de que la nefrotoxicidad aguda de la CsA puede aumentar por un bloqueo simultáneo de NO, se ha concluido que el NO tiene una función protectora que se opone a un efecto vasoconstrictor mostrado por la CsA, que se considera un factor patofisiológico mayor en la nefrotoxicidad crónica inducida por CsA.

A.J. Bune y col., Biochemical and Biophysical Research Communications 220, 13-19 (1996), describen que la inhibición de la síntesis de tetrahidrobiopterina reduce la producción de óxido nítrico in vivo en el shock endotóxico experimental. Se ve que la administración de 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina (DAHP) in vivo inhibe el aumento en los niveles tisulares de BH_{4} causado por lipopolisacáridos, reduce la síntesis de NO y mejora la hipotensión.

WO92/07566 describe el uso de ciertos derivados hemorreológicos de metilxantina y su uso como agente activo para el tratamiento de la infección fúngica sistémica, tal como la candidiasis. Se describe además que estos derivados pueden ser usados, en general, para tratar un animal con objeto de inhibir el desarrollo de, o aliviar, la disfunción renal manifestada por reducciones en el flujo sanguíneo renal y en las velocidades de filtración glomerular con una mayor resistencia vascular.

EP-A-0.908.182 se relaciona con agentes terapéuticos efectivos en la prevención o en el mejoramiento de enfermedades inducidas por hipofunción de la óxido nítrico sintasa (NOS). Los compuestos descritos en este documento son los mismos que los que aquí se definen.

JP-A-6.056.669 describe una preparación que tiene actividades depuradoras de oxígeno activo, que contiene, como substancia principal, derivados específicos de pterina. Se dice que estos compuestos son efectivos en el tratamiento de una variedad de trastornos, incluyendo enfermedades renales.

Resumen de la invención

Es un objeto de la presente invención proporcionar una composición farmacéutica segura para la lesión renal inducida por fármacos sin efectos colaterales, que mejora la circulación y las funciones orgánicas controlando las funciones de las células endoteliales, que retrasa el progreso de las complicaciones y que mejora la calidad de vida de los pacientes.

Los inventores hemos hallado funciones anormales de la NOS en ratas con lesión renal inducida por ciclosporina preparadas como modelo de lesión renal inducida por fármacos. Los inventores hamos hallado también un mayor nivel de actividad NOS y un mayor nivel de BH_{4} en dichas ratas con lesión renal inducida por ciclosporina. Como resultado de diversos estudios, vimos inesperadamente que la administración de BH_{4} recupera las funciones de las células endoteliales y normaliza las funciones de la NOS para dar efectos protectores renales fisiológicamente muy naturales y excelentes y, de este modo, realizamos la presente invención. En consecuencia, la presente invención se relaciona con la prevención o el tratamiento efectivos con preparaciones de BH_{4} para la lesión renal inducida por fármacos.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se relaciona con el uso de un compuesto de fórmula (I):

2

donde R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno o, tomados conjuntamente, representan un enlace sencillo, mientras que R^{3} representa -CH(OH)CH(OH)CH_{3}, -CH(OCOCH_{3})-CH(OCOCH_{3})CH_{3}, -CH_{3}, -CH_{2}OH o un grupo fenilo cuando R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno, o -COCH(OH)-CH_{3} cuando R^{1} y R^{2} representan conjuntamente un enlace sencillo, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para la preparación de una composición farmacéutica para la prevención o el tratamiento de la lesión renal inducida por fármacos.

Tal como se usa aquí, el término lesión renal inducida por fármacos incluye estados patológicos del riñón asociados a lesiones causadas por fármacos. Clínicamente, la lesión renal inducida por fármacos se manifiesta principalmente como síndrome nefrótico (o proteinuria en casos más leves) y disfunción renal. La lesión renal inducida por fármacos tal como se usa aquí incluye las causadas por una función renal disminuida, las agravadas por una función renal disminuida, aquéllas para las cuales la curación está retardada por una función renal disminuida, etc. Los estados clínicos de la lesión renal inducida por fármacos se clasifican principalmente en fallo renal agudo, tal como fallo renal agudo pre-renal, fallo renal agudo intrínseco y fallo renal agudo post-renal, y el fallo renal crónico o fallo renal en fase terminal con disfunción renal progresiva. El fallo renal agudo intrínseco puede inducir enfermedades tales como angiitis, lesión glomerular, glomerulonefritis aguda, glomerulonefritis rápidamente progresiva, síndrome urémico hemolítico, hipertensión maligna, necrosis cortical renal, coagulación intravascular diseminada, esclerodermia, nefritis intersticial aguda, síndrome nefrótico o pielonefritis aguda. Se observan diferentes lesiones tisulares dependiendo del sitio afectado. Por ejemplo, las arteriolas resultan implicadas por la arterioloestenosis, el trastorno endotelial y la arteriolotrombosis; los glomérulos resultan implicados por la neuropatía membranosa; los túbulos y las regiones intersticiales resultan implicados por la necrosis tubular, la disfunción tubular, la nefritis intersticial aguda y la enfraxis tubular.

Los fármacos que pueden inducir lesión renal inducida por fármacos no están específicamente limitados aquí. Cualquier fármaco puede inducir lesión renal, incluyendo, aunque sin limitación, antibióticos (por ejemplo, penicilina, mitomicina, ciclosporina, anfotericina B, meticilina, cefalosporina y aminoglicósido), fármacos antiinflamatorios no esteroideos (FAINE), agentes antitumorales (por ejemplo, cisplatina, ifosfamid y metotrexato), fármacos de oro, metales pesados (mercurio), medios de contraste y agentes químicos agrícolas (por ejemplo, Paracort).

Cuando se administra a pacientes con lesión renal inducida por fármacos, la BH_{4} puede prevenir o tratar estas enfermedades recuperando la función disminuida de las células endoteliales para normalizar las funciones de la NOS.

Los compuestos de la fórmula (I) como principios activos de la presente invención incluyen los siguientes y sus sales farmacéuticamente aceptables:

(6R)-L-eritro-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina (BH_{4})

3

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(6R,S)-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina,

1',2'-diacetil-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina

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4

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sepiapterina

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5

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6-metil-5,6,7,8-tetrahidropterina

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6

\newpage

6-hidroximetil-5,6,7,8-tetrahidropterina

7

6-fenil-5,6,7,8-tetrahidropterina

8

Entre los compuestos antes mencionados, son preferibles las 5,6,7,8-tetrahidrobiopterinas o sus sales y los más preferibles son la BH_{4} o sus sales.

Los compuestos de fórmula (I) usados como principios activos en la presente invención son compuestos conocidos. Por ejemplo, véanse las Descripciones Públicas de Patente Japonesa (KOKAI) Nº 25323/84, 76086/84, 277618/86 y 267781/88. Estos compuestos pueden ser usados como sales apropiadas con ácidos no tóxicos desde el punto de vista farmacológico, incluyendo ácidos minerales, tales como ácido clorhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido bórico, y ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido fórmico, ácido maleico, ácido fumárico y ácido mesílico.

Las composiciones farmacéuticas son efectivas frente a las enfermedades mencionadas anteriormente. A saber, son ampliamente aplicadas a estados patológicos del riñón con lesiones causadas por fármacos.

Las composiciones farmacéuticas son preparadas formulando un compuesto de fórmula (I) con un vehículo farmacéuticamente común por procedimientos convencionales en una forma de dosificación adecuada para administración oral, rectal o parenteral (incluyendo la administración en vena y fluido cerebroespinal).

El vehículo usado para estas formulaciones farmacéuticas incluye generalmente excipientes, ligantes, desintegrantes, etc., dependiendo de la forma de dosificación elegida.

Como ejemplos típicos de excipientes, se incluyen almidón, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y celulosa y, como ejemplos de ligantes, se incluyen polivinilpirrolidona, almidón, sacarosa, hidroxipropilcelulosa y goma arábiga. Como ejemplos de desintegrantes, se incluyen almidón, agar, polvo de gelatina, celulosa y CMC, pero se puede usar también cualquier otro excipiente, ligante y desintegrante convencional.

Además de dichos vehículos, las composiciones farmacéuticas pueden contener también antioxidantes para estabilizar principios activos. Los antioxidantes pueden ser apropiadamente seleccionados entre los comúnmente utilizados para preparaciones farmacéuticas, tales como ácido ascórbico, N-acetilcisteína. L-cisteína, dl-\alpha-tocoferol, tocoferol natural, etc. Son utilizados en una cantidad que estabilice (uno o más) principios activos y, en general, se utilizan preferiblemente en la proporción de 0,2 a 2,0 partes en peso por 1 parte en peso del(de los) principio(s) activo(s).

Las formulaciones adecuadas para administración oral pueden ser presentadas en forma de tabletas, tabletas sublinguales, cápsulas, polvos, gránulos o gránulos finos o suspensiones en un líquido no acuoso, tal como emulsiones, pociones o jarabes, que contenga la cantidad prescrita de (uno o más) principios activos.

Por ejemplo, se preparan gránulos por mezcla homogénea de (uno o más) principios activos con uno o más ingredientes auxiliares, tales como vehículos y antioxidantes, según se ha mencionado anteriormente, seguido de granulación y criba para obtener un tamaño de grano uniforme. Las tabletas pueden ser preparadas compactando o moldeando (uno o más) principios activos eventualmente con uno o más ingredientes auxiliares. Las cápsulas son preparadas introduciendo polvo o gránulos de (uno o más) principios activos eventualmente mezclados homogéneamente con uno o más ingredientes auxiliares en cápsulas apropiadas usando una máquina de rellenado de cápsulas o similar. Las formulaciones para administración renal pueden ser presentadas como supositorios usando vehículos convencionales, tales como manteca de cacao. Se pueden presentar formulaciones parenterales como sólidos secos de (uno o más) ingredientes activos sellados en un recipiente esterilizado lleno de nitrógeno. Dichas preparaciones sólidas secas pueden ser administradas a pacientes dispersándolas o disolviéndolas en una cantidad determinada de agua esterilizada justo antes de la administración.

Estas formulaciones pueden ser preferiblemente preparadas incorporando antioxidantes como se ha indicado anteriormente eventualmente con uno o más ingredientes auxiliares seleccionados entre tampones, saborizantes, surfactantes, espesantes, lubricantes, etc. además de los principios activos y de los vehículos ordinarios.

La dosificación de principios activos, es decir, de compuestos de la fórmula (I), puede variar de forma natural con la vía de administración, el síntoma que se haya de tratar y el paciente en particular y puede ser en último lugar determinada por el médico asistente.

Por ejemplo, una dosificación apropiada para tratar la lesión renal inducida por fármacos depende del fin de la administración, de la edad, del peso, de la condición del paciente, etc., pero varía entre 0,1 y 50 mg/kg (peso corporal)/día, típicamente entre 0,5 y 10 mg/kg (peso corporal)/día, para administración oral.

Una dosificación deseada de dichos principios activos puede ser administrada una vez al día o puede ser administrada en dosis divididas de dos a cuatro veces al día a intervalos apropiados.

Los principios activos pueden ser administrados solos sin mezclarlos con otros ingredientes o en combinación con formulaciones farmacéuticas que contengan otros principios activos adecuados para la enfermedad que se esté tratando, con objeto de facilitar el control de la dosificación, por ejemplo.

Además de los compuestos de fórmula (I) como principios activos, las formulaciones pueden contener un principio activo auxiliar seleccionado entre el grupo consistente en substratos o coenzimas o cofactores para la NOS, tales como L-arginina, flavinas (por ejemplo, FAD, FMN, etc.) y calcio. Se pueden esperar efectos terapéuticos más excelentes cuando se mezclan los compuestos de la fórmula (I) con estos principios activos que cuando se usan solos. La proporción de cada uno de dichos principios activos auxiliares en las formulaciones no está específicamente limitada. Por ejemplo, la proporción de pesos de al menos uno seleccionado entre L-arginina, flavinas y calcio con respecto a 1 parte en peso de los compuestos de fórmula (I) puede estar en el rango de 0,1 a 10, preferiblemente de 0,5 a 2.

Por ejemplo, una dosificación apropiada de dichas formulaciones mixtas para tratar la lesión renal inducida por fármacos depende del fin de la administración, de la edad, del peso, de la condición del paciente, etc., pero varía entre 0,1 y 50 mg/kg (peso corporal)/día, preferiblemente entre 0,5 y 10 mg/kg (peso corporal)/día, en términos de la cantidad total de principios activos para administración oral.

Un médico puede seleccionar apropiadamente formulaciones que contengan los compuestos de fórmula (I) solos o en combinación con otros principios activos, dependiendo de la edad, la condición u otros factores del paciente.

Los principios activos más preferibles usados en la presente invención son (6R)-L-eritro-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina (BH_{4}) y sus sales, pero también se pueden usar sus análogos, tales como (6R,S)-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina, 1',2'-diacetil-5,6,7,8-tetrahidro-biopterina, sepiapterina, 6-metil-5,6,7,8-tetrahidropterina, 6-hidroximetil-5,6,7,8-tetrahidropterina ó 6-fenil-5,6,7,8-tetrahidropterina y sus sales. No hace falta decir, sin embargo, que es preferible el componente natural BH_{4} en los organismos vivos. El diclorhidrato de BH_{4} exhibe poca toxicidad en ratas, según muestra la toxicidad aguda de 2 g/kg (peso corporal) o más por la vía oral. Un análogo ópticamente inactivo, la (6R,S)-5,6,7,8-tetrahidrobiopterina, es también sólo ligeramente tóxico, según se describe en la Descripción Pública de Patente Japonesa Nº 25323/84, para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, de tal forma que también puede ser usado para la terapia según la presente invención. Otros compuestos de la fórmula (I) también exhiben poca o ninguna toxicidad aguda.

Los siguientes ejemplos ilustran además la presente invención con detalle.

Ejemplos Ejemplo 1 Gránulos y gránulos finos

A 1 parte (en peso) de polivinilpirrolidona (Kollidon 30) disuelta en agua purificada esterilizada, se añadieron 10 partes de ácido ascórbico y 5 partes de clorhidrato de L-cisteína para obtener una solución homogénea y se añadieron entonces 10 partes de diclorhidrato de BH_{4} para preparar una solución homogénea.

Se añadió esta solución a 59 partes de un excipiente (manitol o lactosa) y 15 partes de un desintegrante [almidón de maíz o hidroxipropilcelulosa (LH-22)] y se amasó, granuló, secó y cribó después la mezcla.

Ejemplo 2 Tabletas

Se mezcló la solución homogénea de un principio activo preparado en el Ejemplo 1 con 58 partes de lactosa y 15 partes de celulosa microcristalina y luego con 1 parte de estearato de magnesio y se prepararon tabletas.

Ejemplo 3 Cápsulas

Se introdujo la forma de dosificación preparada en el Ejemplo 1 en cápsulas. Sin embargo, la formulación contenía además un 0,2% de estearato de magnesio como lubricante.

Ejemplo 4 Inyección

Diclorhidrato de BH_{4}	1,5 g
Ácido ascórbico	1,5 g
Clorhidrato de L-cisteína	0,5 g
Manitol	6,5 g

Se disolvieron los anteriores ingredientes en agua purificada esterilizada para preparar 100 ml y se esterilizaron y se dispensó cada una de una alícuota de 1 ml o de 2 ml en un vial o ampolla y se liofilizó y selló después.

Ejemplo 5 Inyección

Se esterilizó una solución de 2,0 g de diclorhidrato de BH_{4} disuelto en agua purificada esterilizada para preparar 100 ml bajo una atmósfera anaerobia y se selló del mismo modo que en el Ejemplo 4.

Ejemplo 6 Supositorios

Diclorhidrato de BH_{4}	150 partes
Ácido ascórbico	150 partes
Clorhidrato de L-cisteína	50 partes

Se trituraron homogéneamente los anteriores ingredientes y se dispersaron en 9.950 partes de manteca de cacao.

Ejemplo 7 Gránulos

Diclorhidrato de BH_{4}	5 partes
Ácido ascórbico	5 partes
Clorhidrato de L-cisteína	2 partes

Se usaron los anteriores ingredientes para preparar una solución homogénea.

Se añadió esta solución a una mezcla homogénea de 55 partes de manitol, 1 parte de polivinilpirrolidona, 14 partes de hidroxipropilcelulosa y 5 partes de L-arginina o calcio y se amasó, granuló, secó y cribó después la mezcla.

Ejemplo 8 Gránulos

Diclorhidrato de BH_{4}	5 partes
Ácido ascórbico	5 partes
Clorhidrato de L-cisteína	5 partes
Manitol	52 partes
Polivinilpirrolidona (Kollidon 30)	1 parte
Hidroxipropilcelulosa (LH-22)	12 partes
L-arginina o calcio	10 partes

Se granularon los ingredientes anteriores y se cribaron del mismo modo que en el Ejemplo 7.

Ejemplo 9 Gránulos

Se usaron los ingredientes anteriores para preparar una solución homogénea.

Se añadió esta solución a una mezcla homogénea de 10 partes L-arginina o calcio, 50 partes de manitol, 1 parte de polivinilpirrolidona (Kollidon 30) y 9 partes de hidroxipropilcelulosa (LH-22) y se amasó, granuló, secó y cribó después la mezcla.

Ejemplo 10

Se dividieron ratas Sprague-Dawley de una edad de 8 a 10 semanas (suministradas por Charles River) (300 g) en los siguientes tres grupos experimentales y se examinaron comparativamente. Se hizo crecer a los animales con un alimento bajo en sal (0,05%) durante el período experimental de 6 semanas y se les trató durante 5 semanas desde la segunda hasta la última semana del experimento como sigue.

1) Grupo CyA

Ciclosporina, a 15 mg/kg (peso corporal)/día (administrados subcutáneamente en mezcla con aceite de oliva), n = 8.

2) Grupo BH_{4}

Ciclosporina, a 15 mg/kg (peso corporal)/día (administrados subcutáneamente en mezcla con aceite de oliva), + diclorhidrato de BH_{4}, a 10 mg/kg (peso corporal/día (administrados oralmente), n = 8.

3) Grupo control

Aceite de oliva solo, n = 6.

Se observó cada grupo durante el período experimental de 6 semanas. Se determinaron la presión sanguínea, la actividad NOS cortical renal y el nivel de BP por los procedimientos descritos a continuación. Después de 6 semanas, se recogió sangre de la aorta abdominal bajo anestesia con fenobarbital y se perfundió entonces el riñón con suero fisiológico, se extrajo luego y se examinó histológicamente en cuanto a los efectos de la administración de BH_{4} sobre la lesión renal inducida por ciclosporina.

Medición de la presión sanguínea

Se midió la presión sanguínea por el método del manguito caudal al comienzo del experimento y después de 2, 4 y 6 semanas.

Medición de la actividad NOS cortical renal

Se determinó la actividad NOS midiendo la ^{3}H-citrulina producida por la NOS del tejido renal usando ^{3}H-arginina.

Medición de la BP en sangre

Al final de la observación, se llevó a cabo un análisis de HPLC según el procedimiento de Fukushima y Nixon (Anal. Biochem. 102: 176-188, 1980) para medir biopterina (BP), un metabolito de la BH_{4}. Se examinan los efectos de la administración de BH_{4} en base al nivel de BP en sangre.

Histoquímica renal

Se prepararon secciones de tejidos renales congelados y se tiñeron con NADPH-diaforasa para evaluar la actividad NOS en los tejidos. También se tiñeron los tejidos con un anticuerpo monoclonal contra el antígeno de la membrana celular de macrófagos ED-1 para examinar la isoforma NOS.

Hallazgos histopatológicos

Después de recoger orina y de medir la presión sanguínea a la 6ª semana, se hizo una incisión abdominal en los animales bajo anestesia, se les sangró por la aorta abdominal y se les perfundió con suero fisiológico a través de este sitio. Se fijó el riñón extraído en una solución de formaldehído al 10%, se embebió en parafina y se cortó luego mediante un microtomo para obtener muestras de tejido renal de 4 \mum. Se tiñeron las muestras con hematoxilina/eosina (HE) y ácido peryódico-Schiff. Las incidencias de hallazgos patológicos, es decir, la arteriopatía en las muestras de tejido renal de rata, fueron examinadas comparativamente.

Estadística

Se hicieron análisis estadísticos entre grupos por medio de un ANOVA de dos colas. En los siguientes análisis, el nivel de significación era de p < 0,05.

Resultados

La presión sanguínea se mantuvo en un nivel normal tanto en el grupo CyA como en el grupo BH_{4}, de forma similar al grupo control, hasta el final de la observación.

En cuanto a la actividad NOS cortical renal, el grupo CyA mostró un aumento significativo de 260.814 mmol/día (media) en comparación con el grupo control. Mientras que el grupo BH_{4} mostró un aumento de 140.600 mmol/día (media) en comparación con el grupo control.

En cuanto al nivel de BP en sangre, el grupo CyA mostró un aumento significativo (de 0,006 nmol (media) en comparación con el grupo control). Sin embargo, el grupo BH_{4} mostró una disminución (de 0,002 nmol (media) en comparación con el grupo CyA).

La histoquímica renal mostró una reducida tinción con NADPH-diaforasa y muchas invasiones de células positivas a ED-1 en el grupo CyA. Sin embargo, el grupo BH_{4} recuperó la tinción con NADPH-diaforasa y normalizó las funciones de la NOS endotelial vascular, según muestra una reducción en las invasiones de células positivas a ED-1.

Las incidencias de hallazgos histopatológicos en muestras de tejido renal son mostradas en la Tabla 1. El grupo BH_{4} inhibía significativamente (p < 0,0001) la arteriolopatía, que aparecía significativamente (p < 0,0001) en el grupo CyA.

TABLA 1 Porcentaje (%) de incidencia de hallazgos patológicos en tejidos renales

Arteriolopatía
Grupo control	0,00 \pm 0,00
Grupo CyA	74,300 \pm 1,767 (SE)
Grupo BH_{4}	36,814 \pm 2,093 (SE)

En conclusión, se observaron hallazgos histopatológicos de arteriolopatía en el grupo CyA de dichas ratas modelo. El mismo grupo también mostró un aumento en el nivel de actividad NOS inducible derivada de macrófagos. Sin embargo, la BH_{4} administrada oralmente mejoró notablemente los hallazgos histopatológicos y aumentó el nivel de actividad NOS endotelial vascular, mostrando que la BH_{4} es útil para el tratamiento de la lesión renal inducida por macrófagos mediante recuperación de las funciones de las células endoteliales para normalizar las funciones de la NOS.

Como se ha explicado, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que previenen y/o mejoran de manera efectiva la lesión renal inducida por fármacos. Además, los ingredientes activos de las composiciones farmacéuticas no presentan peligro de efectos colaterales o similares incluso con el uso a largo plazo, ya que se producen inherentemente en organismos vivos.

Claims

1. Uso de un compuesto de la fórmula (I):

9

donde R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno o, tomados conjuntamente, representan un enlace sencillo, mientras que R^{3} representa -CH(OH)CH(OH)CH_{3}, -CH(OCOCH_{3})-CH(OCOCH_{3})CH_{3}, -CH_{3}, -CH_{2}OH o un grupo fenilo cuando R^{1} y R^{2} representan cada uno un átomo de hidrógeno, o -COCH(OH)-CH_{3} cuando R^{1} y R^{2} representan conjuntamente un enlace sencillo, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, para la preparación de una composición farmacéutica para prevenir o tratar la lesión renal inducida por fármacos.

2. El uso de la reivindicación 1, donde R^{3} es L-eritro-CH(OH)CH(OH)CH_{3}.

3. El uso de la reivindicación 1 ó 2, donde la lesión renal inducida por fármacos es el fallo renal agudo.

4. El uso de la reivindicación 1 ó 2, donde la lesión renal inducida por fármacos es el fallo renal crónico.