ES2243709T3 - Compuestos y procedimientos para inhibir la mrp1. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de **fórmula**, en la que R1 es hidrógeno, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi, (CH2)nC(O)R2, (alquilo C1-C4)NH2, (CH2)nNHC(O)R3, (alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C1-C6, alcoxi C1-C4, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, o heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C1-C6, alcoxi C1-C4, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo ; n es 0, 1 ó 2; p es 0, 1, 2, 3 ó 4; R2 es alcoxi C1-C4, (alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C1-C6, alcoxi C1-C4, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, (CH2)p-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C1- C6, alcoxi C1-C4, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo, NHR4; o una sal farmacéutica del mismo.

Description

Compuestos y procedimientos para inhibir la MRP1.

Junto con la cirugía y la radioterapia, la quimioterapia continúa siendo un tratamiento eficaz para muchos cánceres. De hecho, en la actualidad se considera que varios tipos de cáncer, tal como la enfermedad de Hodgkin, el linfoma de células grandes, la leucemia linfocítica aguda, el cáncer de testículos y el cáncer de mama en etapas precoces, se pueden curar con quimioterapia. Otros cánceres, tales como el cáncer de ovarios, el cáncer pulmonar de células pequeñas y el cáncer de mama en etapas avanzadas, aunque todavía no son curables, están mostrando una respuesta positiva a la quimioterapia de combinación.

Uno de los problemas más importantes todavía no resueltos en el tratamiento del cáncer es la resistencia a los fármacos. Tras la selección según la resistencia a un único fármaco citotóxico, las células pueden mostrar reacciones cruzadas con un amplio abanico de fármacos con estructuras y objetivos celulares diferentes, por ejemplo, agentes alquilantes, antimetabolitos, hormonas, fármacos que contienen platino y productos naturales. Este fenómeno se conoce cono resistencia a múltiples fármacos (RMF). En algunos tipos de células, esta resistencia es inherente, mientras que en otros, tales como el cáncer pulmonar de células pequeñas, normalmente es adquirida.

Se sabe que tal resistencia es multifactorial y la confiere al menos dos proteínas; la glucoproteína P de 170 kDa (MDR1) y la proteína identificada más recientemente de resistencia a múltiples fármacos y de 190 kDa (MRP1). Aunque tanto la MDR1 como la MRP1 pertenecen a la superfamilia de casetes de unión a ATP de transporte de proteínas, son moléculas estructuralmente muy diferentes y comparten menos de un 15% de homología en los ácidos nucleicos. A pesar de la divergencia estructural entre ambas proteínas, en 1994 no se conocían diferencias consistentes en los patrones de resistencia de las líneas celulares con MRD1 y con MEP1. Sin embargo, se conoce la asociación, o su carencia, de MRP1 y la resistencia a oncolíticos concretos. Véase Cole y col., "Pharmacological Characterizations of Multidrug Resistant MRP-transfected Human Tumor Cells", Cancer Research, 54: 5902-5910, 1''94. La doxorubicina, la daunorubicina, la epirubicina, la vincristina, el paclitaxel, la mitoxantrona, el melfalán y el etopósido son sustratos de la MRP1, es decir, la MRP1 se puede unir a estos oncolíticos y redistribuirlos fuera de su sitio de acción, el núcleo, y fuera de la células. Id. y Marquardt, D., y Center, M. S., Cancer Research, 52: 3157, 1992.

La doxorubicina, la daunorubicina y la epirubicina son miembros de la clase de antraciclinas de los oncolíticos. Son aislamientos de varias cepas de Streptomyces y funcionan mediante la inhibición de la síntesis de ácido nucleico. Estos agentes son útiles para tratar neoplasias óseas, de los ovarios, de la vejiga, de la glándula tiroides y, especialmente, de mama. También son útiles en el tratamiento de la leucemia linfoblástica y mieloblástica aguda, el tumor de Wilm, el neuroblastoma, el sarcoma de tejidos blandos, los linfomas de Hodgkin y no Hodgkin y el carcinoma broncogénico.

La vincristina, un miembro de la clase de alcaloides vinca de oncolíticos, es un aislamiento de una planta de flores habitual, la hierba doncella (Vinca rosea Linn). El mecanismo de acción de la vincristina todavía se está investigando, aunque se ha relacionado con la inhibición de la formación de los microtúbulos en el huso mitótico. La vincristina es útil en el tratamiento de la leucemia aguda, la enfermedad de Hodgkin, los linfomas malignos no Hodgkin, el rabdomiosarcoma, el neuroblastoma y el tumor de Wilm.

El etopósido, un miembro de la clase de epipodofilotoxina de oncolíticos, es un derivado semisintético de la podofilotoxina. El etopósido funciona como un inhibidor de la topoisomerasa y es útil en el tratamiento de neoplasias de los testículos y pulmonares.

En la actualidad se desconoce qué determina si una línea celular adquirirá resistencia a través de un mecanismo MDR1 o MRP1. Dada la especificidad tisular de estos transportadores y/o en el caso en el que predomina un mecanismo o es exclusivo, sería útil tener un inhibidor selectivo de uno sobre otro. Además, cuando se administra uno o varios fármacos que son sustratos de cualquiera de las dos proteínas, sería particularmente ventajoso coadministrar un agente que sea un inhibidor selectivo de esa proteína. Por tanto, es deseable proporcionar compuestos que sean inhibidores selectivos de la MDR1 o la MRP1.

La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula I:

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en la que:

R^{1} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido, (CH_{2})_{n}C(O)R^{2}, (alquilo C_{1}-C_{4})NH_{2}, (CH_{2})_{n}NHC(O)R^{3}, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido)-fenilo opcionalmente sustituido, o un heterociclo opcionalmente sustitui-
do;

n es 0, 1 ó 2;

p es 0, 1, 2, 3 ó 4;

R^{2} es un alcoxi C_{1}-C_{4}, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido)-fenilo opcionalmente sustituido, NHR^{4} o (CH_{2})_{p}-O-heterociclo opcionalmente sustituido;

R^{3} es un alcoxi C_{1}-C_{4}, fenilo opcionalmente sustituido, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido)-fenilo opcionalmente sustituido o (CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido;

R^{4} es (CH_{2})_{p}-fenilo opcionalmente sustituido o (CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido; o una sal farmacéutica de los mismos.

La presente invención además se refiere a un procedimiento para inhibir la MRP1 en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero que lo necesite una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéutica del mismo.

En otra forma de realización, la presente invención se refiere a un procedimiento para inhibir una neoplasia resistente, i una neoplasia susceptible a resistencia en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero que lo necesite una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéutica del mismo, en combinación con una cantidad eficaz de un agente oncolítico.

Además, la invención proporciona el uso de un compuesto de Formula I para la fabricación de un medicamento para inhibir la MRP1. Esta invención también proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I para la fabricación de un medicamento para inhibir una neoplasia resistente.

La presente invención también se refiere a una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéutica del mismo, en combinación con uno o más oncolíticos, vehículos, diluyentes o un excipientes farmacéuticos.

La presente invención atañe al descubrimiento de que un grupo selecto de compuestos, los de fórmula I, son inhibidores selectivos de la proteína de resistencia a múltiples fármacos (MRP1) y, por tanto, son útiles en el tratamiento de la resistencia a múltiples fármacos (RMF) conferida por la MRP1 en una neoplasia resistente y una neoplasia susceptible a la resistencia.

Los términos "inhibir" en relación con la MRP1 e "inhibir la MRP1" se refieren a evitar, aliviar, atenuar, detener, contener, retrasar o invertir la progresión, o reducir la misma, de la capacidad de la MRP1 para redistribuir un oncolítico fuera del sitio de acción del "oncolítico", muy a menudo el núcleo de la neoplasia, y fuera de la célula.

Como se usa en la presente memoria descriptiva, el término "cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I" se refiere a una cantidad de un compuesto de la presente invención que es capaz de inhibir la MRP1. el término "cantidad eficaz de un oncolítico" se refiere a una cantidad de oncolítico capaz de inhibir una neoplasia, resistente o no.

El término "inhibir una neoplasia resistente, o una neoplasia susceptible a resistencia" se refiere a evitar, detener, contener, retrasar o invertir la progresión de neoplasias resistentes y/o neoplasias susceptibles a resistencia, reducir su crecimiento o matarlas.

El término "neoplasia resistente" se refiere a una neoplasia que es resistente a la quimioterapia en la que la resistencia viene conferida, en parte o del todo, por la MRP1. Entre tales neoplasias se incluyen, entre otras, neoplasias de la vejiga, óseas, de mama, de pulmón de (células pequeñas), de testículos y de glándula tiroides, y también se incluyen tipos más particulares de cáncer, tales como, entre otros, leucemia linfoblástica y mieloblástica aguda, tumor de Wilm, neuroblastoma, sarcoma de tejidos blandos, linfomas Hodgkin y no Hodgkin y carcinoma broncogénico.

Una neoplasia que es "susceptible a resistencia" es una neoplasia en la que no hay resistencia presente en la actualidad ni ésta es inherente, pero se puede conferir con la MRP1 tras el comienzo de la quimioterapia. Por tanto, los procedimientos de esta invención abarcan una administración profiláctica y terapéutica de un compuesto de fórmula I. El término "quimioterapia" se refiere al uso de uno o más oncolíticos en la que al menos un oncolíticos un sustrato de la MRP1. Un "sustrato de la MRP1" es un oncolítico que se une a la MRP1 y es redistribuido fuera del lugar de acción de los oncolíticos "el núcleo de las neoplasias" y fuera de la célula, haciendo de este modo que el tratamiento sea menos efectivo.

Los términos "tratar" o "en tratamiento" portan su significado habitual, que incluye prevenir, evitar, aliviar, atenuar, detener, contener, retrasar o invertir la progresión, o reducir su gravedad, de la resistencia al fármaco derivada de la MRP1 en un tumor con resistencias a múltiples fármacos.

En las fórmulas generales del presente documento, los términos químicos generales poseen sus significados habituales. Por ejemplo, el término "alquilo C_{1}-C_{4}" se refiere a metilo, etilo, propilo, isopropilo, ciclopropilo, butilo, ciclobutilo, s-butilo y t-butilo. El termino "alquilo C_{1}-C_{6}" se refiere a un hidrocarburo monovalente, lineal, ramificado o saturado cíclico, que contiene de 1 a 6 átomos de carbono e incluye grupos alquilo C_{1}-C_{4}. Además, alquilo C_{1}-C_{6} también incluye, entre otros, ciclopentilo, pentilo, hexilo, ciclohexilo y similares.

El término "alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido" se refiere a un alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi.

Los términos "alcoxi C_{1}-C_{4}" y "alcoxi C_{1}-C_{4}" se refieren a restos de la fórmula O-alquilo c_{1}-C_{4}" y O-("alquilo C_{1}-C_{6}) respectivamente.

El término "halo" o "haluro" se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

EL término "fenilo opcionalmente sustituido" se refiere a un anillo fenilo que opcionalmente se sustituye con 1 ó 3 veces de forma independiente un alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo o un grupo oxo.

El término "heterociclo opcionalmente sustituido" se refiere a un anillo heterociclo opcionalmente sustituido 1 '2 veces de forma independiente con un alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo o un grupo oxo.

El término "grupo protector" (Pg) se refiere a un grupo protector de amino o un grupo protector de hidroxi. Las especies del grupo protector serán evidentes ya sea si el "Pg" protector está unido a un átomo de nitrógeno (grupo protector de amino) o unido a un átomo de nitrógeno (grupo protector de hidroxi).

El término "grupo protector de amino" como se usa en esta descripción se refiere a un o unos sustituyentes de grupo amino que normalmente se emplean para bloquear o proteger la funcionalidad amino al mismo tiempo que reacciona con otros grupos funcionales del compuesto. Entre los ejemplos de dichos grupos protectores de amino se incluyen el grupo formilo, el grupo tritilo, el grupo ftalimido, el grupo acetilo, el grupo tricloroacetilo, los grupos cloroacetilo, bromoacetilo y yodoacetilo, grupos bloqueantes del tipo uretano, tales como benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo ("FMOC") y similares; y grupos protectores similares a amino. La especie de grupo protector de amino empleada no es crucial ya que el grupo amino derivatizado es estable a la condición de una o varias reacciones posteriores en otras posiciones de la molécula y puede eliminarse en el punto adecuado sin alterar al resto de la molécula. En los términos anteriores también se abarcan grupos protectores de amino similares usados en las técnicas de las cefalosporinas, las penicilinas y los péptidos. En T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, Nueva York, NY, 1991, capítulo 7, se describen otros ejemplos de grupos a los que se hace referencia con los términos anteriores. Este libro se denominará en lo sucesivo "Greene". Un grupo protector de amino preferido es t-butiloxicarbonilo.

El término "grupo protector de hidroxi" indica un grupo comprendido por un experto en la técnica de química orgánica del tipo descrito en el capítulo 2 de "Greene". Entre los grupos protectores de hidroxi representativos se incluyen, por ejemplo, grupos éter incluidos grupos éter de metilo y sustituidos con metilo tales como éter metílico, éter metoximetílico, éter metiltiometílico, éter terc-butiltiometílico, éter (fenildimetilsilil)metoxi-metílico, éter benciloximetílico, éter p-metoxibenciloxi-metílico y éter terc-butoximetílico.; grupos éter sustituidos con etilo tales como éter etoxietílico, éter 1-(2-cloroetoxi)-etílico, éter 2,2,2-tricloroetoximetílico y éter 2-(trimetilsilil)etílico; grupos éter isopropílico; grupos éter de fenilo y sustituidos con fenilo tales como éter fenílico, éter p-clorofenílico, éter p-metoxifenílico y éter 2,4-dinitrofenílico; grupos éter de bencilo y sustituidos con bencilo tales como éter bencílico, éter p-metoxibencílico, éter o-nitrobencílico y éter 2,6-diclorobencílico; y grupos éter de alquilsililo tales como éteres trimetil-trietílico y triisopropilsilílico; grupos éter de alquilsililo mixtos tales como éter de dimetilisopropilsililo y éter de dietilisopropilsililo; y grupos protectores éster tales como éster de formiato, éster de bencilformiato, ésteres de mono-, di y tricloroacetato, éster de fenoxiacetato y p-clorofenoxiacetato y similares. La especie de grupo protector de hidroxi empleada no es crucial ya que el grupo hidroxi derivatizado es estable a las condiciones de una o varias reacciones posteriores en otras posiciones de la molécula intermedia y puede eliminarse de forma selectiva en el punto adecuado sin alterar al resto de la molécula, incluyendo cualquier otro grupo protector de hidroxi.

En general, el término "farmacéutico", cuando se usa como adjetivo, significa organismos vivos sustancialmente inocuos. Por ejemplo, el término o "sal farmacéutica", como se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a sales de los compuestos de fórmula I que son organismos vivos sustancialmente inocuos. Véase, por ejemplo, Berge, S. M., Bighley, L. D. y Monkhouse, D. C., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66: 1, 1997. Entre las sales farmacéuticas típicas se incluyen las sales preparadas mediante la reacción de los compuestos de fórmula I con un ácido o base inorgánico u orgánico. Dichas sales se conocen como sales de adición de ácido o sales de adición de base respectivamente. Estas sales farmacéuticas con frecuencia tienen características de mayor solubilidad en comparación con el compuesto del que derivan y, por tanto, a menudo son más favorables a la formulación en forma de líquidos o emulsiones.

El término "sal de adición de ácido" se refiere a una sal de un compuesto de fórmula I preparada mediante la reacción de un compuesto de fórmula I con un ácido mineral u orgánico. Para obtener ejemplos de sales farmacéuticas de adición de ácido véase, por ejemplo, Berge, S. M., Bighley, L. D. y Monkhouse, D. C., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66: 1, 1997. Dado que los compuestos de esta invención pueden ser de naturaleza básica, reaccionan en consecuencia con cualquiera de una serie de ácidos inorgánicos y orgánicos para formar las sales farmacéuticas de adición de ácido.

Normalmente, las sales farmacéuticas de adición de ácido de la invención se forman m mediante la reacción de compuesto de fórmula I con una cantidad equimolar o en exceso de ácido. En general, los reactivos se combinan en un disolvente común tal como dietiléter, tetrahidrofurano, metanol, etanol, isopropanol, benceno, y similares. Las sales normalmente precipitan en la solución en aproximadamente una hora a aproximadamente diez días y se pueden aislar mediante filtración u otros procedimientos convencionales.

Los ácidos que se suelen usar para formar sales de adición de ácidos son ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos, tales como ácido p-toluensulfónico, ácido metanosulfónico, ácido oxálico, ácido p-bromofenilsulfónico, ácido carbónico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido acético, y similares. Por tanto, ejemplos de tales sales farmacéuticamente aceptables son las sales sulfato, pirosulfato, bisulfato, sulfito, bisulfito, fosfato, monohidrógenofosfato, dihidrógenofosfato, metafosfato, pirofosfato, cloruro, bromuro, yoduro, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formiato, isobutirato, caproato, heptanoato, propiolato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, maleato, butin-1,4-dioato, hexin-1,6-dioato, benzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilenosulfonato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato, \beta-hidroxibutirato, glicolato, tartrato, metanosulfonato, propanosulfonato, 1,5-naftaleno-disulfonato, naftaleno-1-sulfonato, naftaleno-2-sulfonato, mandelato y similares.

El término "sal de adición de base" se refiere a una sal de un compuesto de fórmula I preparada mediante la reacción de un compuesto de fórmula I con una base mineral u orgánica. Para obtener ejemplos de sales farmacéuticas de adición de base véase, por ejemplo, Berge, S. M., Bighley, L. D. y Monkhouse, D. C., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66: 1, 1997. Esta invención también contempla las sales farmacéuticas de adición de base de compuestos de formula I. El experto en la técnica apreciará que algunos compuestos de fórmula I pueden ser de naturaleza ácida y, en consecuencia, reaccionar con cualquiera de una serie de bases orgánicas e inorgánicas para formar sales farmacéuticas de adición de bases. Ejemplos de sales farmacéuticas de adición de base son las sales de amonio, litio, potasio, sodio, calcio, magnesio, metilamino, dietilamino, etildiamino, ciclohexilamino y etanolamino, y similares, de un compuesto de fórmula I.

Aunque todos los compuestos de la presente invención son útiles, ciertos compuestos son de particular interés y son preferidos. La siguiente lista establece varios grupos de compuestos preferidos. Debe entenderse que cada una de las listas pueden combinarse con otras listas para crear grupos adicionales de formas de realización preferidas.

a) R^{1} es (CH_{2})_{n}C(O)R^{2}

b) n es 0;

c) R^{2} es NHR^{4}, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido)-fenilo opcionalmente sustituido o (CH_{2})_{p}-O-heterociclo opcionalmente sustituido

d) p es 3;

e) El compuesto es una sal farmacéutica;

f) El compuesto es una sal clorhidrato;

g) Los compuestos de la sección Ejemplos;

h) El procedimiento en el que el mamífero es un ser humano;

i) El procedimiento en el que el o los oncolíticos se seleccionan de: doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, vincristina y etopósido;

j) El procedimiento en el que la neoplasia es del tipo de Wilm, de vejiga, ósea, de mama, pulmonar de células pequeñas, de testículos o de glándula tiroides, o la neoplasia está asociada con leucemia linfoblástica o mieloblástica aguda, neuroblastoma, sarcoma de tejidos blandos, linfomas Hodgkin y no Hodgkin o carcinoma broncogénico;

k) La formulación en la que el o los oncolíticos se seleccionan del grupo: doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, vincristina y etopósido.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante una variedad de procedimientos, algunos de los cuales se ilustran en los siguientes esquemas. El orden concreto de las etapas requeridas para producir los compuestos de fórmula I depende del compuesto concreto que se está sintetizando, el compuesto de partida y la labilidad relativa de los restos sustituidos.

Se pueden preparar compuestos de fórmula I a partir de compuestos de fórmula II como se ilustra a continuación en el Esquema 1 como se ha descrito anteriormente.

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Esquema 1

2

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Los compuestos de fórmula I se pueden preparar mediante la disolución o la suspensión de un compuesto de fórmula II en un disolvente adecuado, preferentemente dimetilformamida, y la adición de una base adecuada, incluidos metóxido potásico, terc-butóxido potásico, bis(trimetilsilil)amida de potasio, carbonato potásico, hexametildisilazano sódico y hexametildisilazano potásico. Normalmente, la base se emplea en una proporción de uno a uno. Sin embargo, como el experto en la técnica apreciará, es aceptable un ligero exceso molar, normalmente un exceso molar de una proporción de aproximadamente 1,1 a aproximadamente el triple en relación con el compuesto de fórmula II.

Normalmente, los reactivos se combinan a una temperatura de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 100ºC. Preferentemente, los reactivos se combinan a temperatura ambiente, y la solución resultante se mezcla habitualmente durante aproximadamente 5 minutos a aproximadamente 18 horas, preferentemente durante aproximadamente 5 minutos a aproximadamente 1 hora.

Como se indica en Greene, cualquier grupo protector que quede en el compuesto ciclado de fórmula I puede eliminarse para proporcionar compuestos adicionales de fórmula I. Elecciones preferidas de grupos protectores y procedimientos para su eliminación se pueden encontrar en las secciones de Preparaciones y Ejemplos, más adelante.

Cuando R1 es como se ha descrito anteriormente, se pueden preparar compuestos de fórmula II de acuerdo con el Esquema 2.

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Esquema 2

3

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Los compuestos de fórmula V se pueden convertir en el correspondiente haluro ácido mediante procedimientos bien conocidos para un experto en la técnica. Los compuestos de fórmula OO se pueden preparar mediante la disolución o suspensión de un haluro ácido de un compuesto de fórmula V en un disolvente adecuado y la adición de un compuesto de fórmula IV en un disolvente adecuado. Trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, diclorometano, dimetilformamida y mezclas de los mismos son disolventes adecuados. Esta reacción de formación de amida también se lleva a cabo preferentemente en presencia de 4-dimetilaminopiridina (DMAP). Preferentemente, el compuesto de fórmula V es el correspondiente ácido carboxílico y se emplea en una cantidad equimolar en relación con el compuesto de fórmula IV pero un ligero exceso (un exceso molar de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 0,15) es aceptable. La DMAP se emplea de forma catalizadora. Por ejemplo, normalmente se emplea un porcentaje de aproximadamente 5 molar a un porcentaje de aproximadamente 15 molar, en reacción con el compuesto de fórmula IV. Normalmente se prefiere un porcentaje 10 molar.

Los compuestos de fórmula IV y V son bien conocidos en la técnica y, dado que no están disponibles comercialmente, se sintetizan con facilidad mediante procedimientos estándar empleados de forma habitual en la técnica, véase, por ejemplo, la sección Preparación.

Debe reconocerse que el contraion concreto que forma parte de cualquier sal de esta invención no es de naturaleza crucial, ya que la sal, como un todo, es farmacológicamente aceptable y siempre que el contraion no contribuya a proporcionar a la sal como un todo cualidades no deseadas.

El tiempo óptimo para realizar las reacciones de los Esquemas 1-2 se puede determinar mediante el control del progreso de la reacción a través de técnicas cromatográficas convencionales. Además, se prefiere llevar a cabo las reacciones de la invención en atmósfera inerte, tal como, por ejemplo, argón o, en particular, nitrógeno. En general, la elección del disolvente no es crucial, ya que el disolvente empleado es inerte en la reacción en curso y solubiliza los reactivos lo bastante como para efectuar la reacción deseada. Preferentemente, los compuestos se aíslan y purifican antes de su uso en reacciones posteriores. Algunos compuestos pueden cristalizar en la solución de la reacción durante su formación y pueden recogerse después mediante filtración, o el disolvente de la reacción puede eliminarse mediante extracción, evaporación o decantación. Los productos intermedios y finales de fórmula I pueden purificarse más, si se desea, mediante técnicas habituales, tales como recristalización o cromatografía en soportes sólidos tales como gel de sílice o alúmina.

El experto en la técnica apreciará que no todos los sustituyentes son compatibles con las condiciones de la reacción. Estos compuestos pueden protegerse o modificarse en un punto conveniente en la síntesis mediante procedimientos bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, el sustituyente R^{1} de los compuestos de fórmula IV puede ser un grupo protector, que puede eliminarse durante la síntesis de los compuestos de fórmula I en cualquier punto conveniente. El grupo protector se puede eliminar mediante procedimientos bien conocidos en la técnica, véase, por ejemplo, Greene, y R^{1}, R^{2} y R^{3} pueden añadirse por medio de técnicas químicas estándar, véase, por ejemplo, Larock, Comprehensive Organic Transformations, páginas 785-820, 1640-1641, 1941-1949 y 1973-1976, VCH Publishers, Nueva York, NY, 1999; y March J, Advanced Organic Chemistry, 1985, 3ª edición, página 377-378.

Las siguientes Preparaciones y Ejemplos se proporcionan para aclarar mejor la práctica de la presente invención y no deberán interpretarse de ningún modo como limitantes del alcance de la misma. Los expertos en la técnica reconocen que se pueden realizar varias modificaciones sin desviarse del espíritu y el alcance de la invención. Todas las publicaciones mencionadas en la descripción son indicativas del nivel de los expertos en la técnica a la que se refiere esta invención. El término y las abreviaturas usados en las presentes Preparaciones y Ejemplos tienen sus significados normales, a menos que se designe otra cosa. Por ejemplo, "ºC", "N", "mmol", "g", "ml", "M", "HPLC", "IR", "EM(FD)", "EM(IS)", "EM(FIA)", "EM(FAB)", "EM(EI)", "UV" y "RMN ^{1}H" se refieren a grados centígrados, normal o normalidad, milimol o milimoles, gramo o gramos, mililitro o mililitros, molar o molaridad, cromatografía líquida de alto rendimiento, espectrometría de infrarrojos, espectrometría de masas por desorción de campo, espectrometría de masas pulverización iónica, espectrometría de masas por análisis de inyección de flujo, espectrometría de masas por bombardeo rápido de átomos, espectrometría de masas por impacto de electrones, espectrometría de masas por ultravioleta y espectrometría por resonancia magnética nuclear de protones, respectivamente. Además, los máximos de absorción enumerados para los espectros de IR son los únicos de interés y no todos los máximos observados.

Preparaciones

Preparación 1

Éster etílico de ácido (6-{[3-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-metil-isoxazol-4-carbonil]-amino}-piridin-2- il)-acético

A una solución de 2-(2-aminopiridin-6-il)acetato de etilo (para consultar la preparación, véase Goto, Jiro; Sakane, Kazuo; Nakai, Yoshiharu; Teraji, Tsutomu; Kamiya, Takshi. J. Antibiot. (1984), 37(5), 532-45) (0,6 g, 3,33 mmol) y cloruro de 3-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-5-metil-isoxazol-4-carbonilo (0,694 g, 2,53 mmol) en diclorometano (7 ml) añadir Et_{3}N (0,7 ml, 5,06 mmol) y agitar durante la noche. Diluir la reacción con diclorometano, lavar (H_{2}O y después salmuera), secar (MgSO_{4}), filtrar y concentrar. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de hexanos/EtOAc) proporciona el compuesto del título (0,81 g, 77%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 418,2 [M+1]

Ejemplos Ejemplo 1 Éster etílico de ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-acético

A una solución de éster etílico de ácido (6-{[3-(2-cloro-6-fluorofenil)-5-metil-isoxazol-4-carbonil]-amino}-piridin-2- il)-acético (0,5 g, 1,2 mmol) en DMF (20 ml) en N2 y agitada durante la noche añadir K_{2}CO_{3} en polvo (0,661 g, 4,8 mmol). Diluir con EtOAc, lavar (H_{2}O y después salmuera), secar (MgSO_{4}), filtrar y concentrar. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de hexanos/EtOAc) proporciona el compuesto del título (0,376 g, 79%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 398,1 [M+1]

Ejemplo 2 Ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2- il]-acético

Calentar el éster etílico de ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-acético (0,359 g, 0,9 mmol), MeOH (4,5 ml), THF (0,5 ml) y NaOH 1N (1,8 ml, 1,8 mmol) a 50ºC durante 2 h. Enfriar hasta la temperatura ambiente, diluir con H2O y acidificar (HCl conc.) hasta un pH inferior a 3. Extraer con EtOAc dos veces y lavar los extractos combinados (H^{2}O y después salmuera), secar (MgSO_{4}), filtrar y concentrar, dando el compuesto del título (0,338 g, 100%). Usar este material sin más purificación. Espectro de masas (FIA) (m/z) 370,0 [M+1]

Ejemplo 3 2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N- (3,4,5-trimetoxifenil)-acetamida

A una solución de ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-acético (0,02 g, 0,05 mmol) en diclorometano (1,25 ml) y DMF (0,5 ml) añadir EDCI (0,016 g, 0,08 mmol), 3,4,5-trimetoxianilina (0,014 g, 0,75 mmol) y DMAP (0,001 g, 0,01 mmol). Agitar durante la noche. Diluir con diclorometano, lavar (HCl 1,0N, H_{2}O, salmuera), secar (MgSO_{4}), filtrar y concentrar. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de acetona/diclorometano) proporciona el compuesto del título (0,024 g, 90%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 535,2 [M+1]

Ejemplo 4 2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N- (2-metoxi-5-nitrofenil)-acetamida

Los compuestos ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)- piridin-2-il]-acético (0,075 g, 0,2 mmol), EDCI (0,055 g, 0,3 mmol, 2-nitro-5-metoxianilina (0,044 g, 0,26 mmol), DMAP (0,005 g, 0,04 mmol) en diclorometano (4,5 ml) y DMF (0,75 ml) reaccionan durante 5 horas de un modo similar al del Ejemplo 3. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de acetona/diclorometano) proporciona el compuesto del título (0,012 g, 12%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 520,2 [M+1]

Ejemplo 5 2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N- (3-metoxifenil)-acetamida

Los compuestos ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-acético (0,075 g, 0,2 mmol), EDCI (0,055 g, 0,3 mmol, 3-metoxianilina (0,03 ml, 0,26 mmol), DMAP (0,005 g, 0,04 mmol) en diclorometano (4,5 ml) y DMF (0,75 ml) reaccionan durante 5,5 horas de un modo similar al del Ejemplo 3. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de acetona/diclorometano) proporciona el compuesto del título (0,05 g, 53%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 473,1 [M+1]

Ejemplo 6 2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N- (3-nitrofenil)-acetamida

Los compuestos ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-acético (0,075 g, 0,2 mmol), EDCI (0,055 g, 0,3 mmol, 3-nitroanilina (0,036 ml, 0,26 mmol), DMAP (0,005 g, 0,04 mmol) en diclorometano (4,5 ml) y DMF (0,75 ml) reaccionan durante 5,5 horas de un modo similar al del Ejemplo 3. La cromatografía en columna (en gel de sílice, gradiente de acetona/diclorometano) proporciona el compuesto del título (0,024 g, 24%). Espectro de masas (FIA) (m/z) 488,1 [M+1]

Los compuestos de la invención son inhibidores de la MRP1. Por tanto, los compuestos de la invención se pueden usar para inhibir cualquier neoplasia que tenga resistencia intrínseca y/o adquirida, conferida en parte o del todo por la MRP1, a un oncolítico o a varios oncolíticos. En otras palabras, el tratamiento de dicha neoplasia con una cantidad eficaz de un compuesto de esta invención hará que la neoplasia sea más sensible a la quimioterapia que la MRP1 hizo menos eficaz.

La vincristina, la epirubicina, la daunorubicina, la doxorubicina y el etopósido son ejemplos de oncolíticos que son sustratos de la MRP1. Véase Cole y col., "Pharmacological Characterization of Multidrug Resistant MRP-transfected human Tumor Cells", Cancer Research, 54: 5902-5910, 1994. Dado que la MRP1 es ubicua en mamíferos, particularmente en seres humanos, Nooter, K. y col., "Expression of the Multidrug Resistance-Associated Protein (MRP) Gene in Human Cancers", Clin. Can. Res., 1:1301-1310, (1995), la quimioterapia cuyo objetivo es inhibir una neoplasia empleando cualquiera de esos agentes tiene el potencial de convertirse en menos eficaz por la acción de la MRP1. Por tanto, las neoplasias de la vejiga, óseas, de mama, pulmonar de células pequeñas, de testículos y de glándula tiroides, y tipos de cáncer más específicos, tales como la leucemia linfoblástica y mieloblástica aguda, el tumor de Wilm, el neuroblastoma, el sarcoma de tejidos blandos, los linfomas de Hodgkin y no Hodgkin y el carcinoma broncogénico, pueden inhibirse con una combinación de uno o más de los oncolíticos anteriores y un compuesto de esta invención.

La actividad biológica de los compuestos de la presente invención se evaluó empleando un análisis de detección selectiva inicial, que midió con rapidez y de forma precisa la actividad de los compuestos analizados en la inhibición de MRP1 y MDR1. Los análisis útiles para evaluar esta capacidad de inversión sin bien conocidos en la técnica. Véase, por ejemplo, McGrath, y col., Biochemical Pharmacology, 38:3611, 1989; D. Marquardt y M. S. Center, Cancer Research, 52: 3157, 19192; D. Marquardt y col., Cancer Research, 50: 1426, 1990; y Cole y col., Cancer Research, 54: 5902-5910, 1994.

Análisis para determinar la inversión de la resistencia a la doxorubicina mediada por MRP1 y la resistencia a la vincristina mediada por MDR1: HL60/ADR y HL60/VCR son líneas celulares continuas que se seleccionaron según la resistencia a doxorubicina y a vincristina respectivamente mediante el cultivo de HL60, una línea celular de leucemia mieloblástica agua humana, en concentraciones crecientes de doxorubicina o vincristina hasta que se consiguió una variante altamente resistente.

Se cultivaron las células HL60/ADR y HL60/VCR en medio RPMI 1640 (Gibco) con 10% de suero bovino fetal (FBS) y 250 \mug/ml de GENTAMICINA™ (Sigma). Se recogieron las células; se lavaron dos veces con medio de ensayo (el mismo que el medio de cultivo); se contaron y se diluyeron a 2 x 10^{5} células/ml en medio de ensayo. Cincuenta microlitros de células se alicuotaron en pocillos de una placa de cultivo tisular de 96 pocillos. Una columna de cada placa de 96 pocillos sirvió como control negativo y recibió medio de ensayo sin células.

Los compuestos de prueba y los compuestos de referencia ase disolvieron en dimetilsulfóxido (DMSO) a una concentración de 5 mM. Las muestras se diluyeron a 20 \muM en medio de ensayo y 25 \mul de cada compuesto de prueba se añadieron a 6 pocillos. Los patrones del ensayo se procesaron por cuadruplicado. Como disolvente control se añadieron veinticinco microlitros de DMSO al 0,4% a cuatro pocillos. A todos los pocillos se añadió medio de ensayo hasta alcanzar un volumen final de 100 \mul por pocillo.

Las placas se incubaron a 37ºC durante 72 horas en un incubador humidificado con una atmósfera del 5% de dióxido de carbono. La viabilidad y la vitalidad de las células se midieron mediante oxidación de una sal de tetrazolio en condiciones estándar. Las placas se incubaron durante 3 horas a 37ºC. La absorbancia se determinó a 490 nm usando un lector de placas de microtitulación.

La capacidad de un compuesto de prueba para invertir la resistencia de las células HL60/ADR y HL60/VCR a la doxorubicina se determinó mediante comparación de la absorbancia de los pocillos que contenían un compuesto de prueba además del oncolítico (doxorubicina) con la absorbancia de los pocillos que contenían el oncolítico sin el compuesto de prueba. Los controles se usaron para eliminar la estructura y garantizar que los resultados no se debían a artefactos. Los resultados del ensayo se expresan como el porcentaje de inhibición de crecimiento celular. A la concentración analizada, el oncolítico solo normalmente no inhibe el crecimiento de las células HL60/ADR y HL60/VCR.

Se demostró que compuestos representativos de fórmula I tenían un efecto significativo sobre la inversión de la resistencia a múltiples fármacos por MRP1. Se ha mostrado que muchos de los compuestos presentaban una potenciación muy significativa de la actividad en combinación con el agente oncolítico frente a lo que ocurría con el agente oncolítico solo. Además, una gran mayoría de los compuestos analizados mostraron un grado significativo de inhibición selectiva de la línea celular HL60/ADR sobre la línea celular HL60/VCR.

Cuando se administra un oncolítico en la práctica de los procedimientos de esta invención, la cantidad de oncolítico empleado será variable. Debe entenderse que la cantidad de oncolítico administrada en realidad será determinada por n médico, a la luz de las circunstancias de importancia, incluidos la afección que se va a tratar, la vía de administración elegida, el oncolítico real administrado, la edad, el peso y la respuesta de cada paciente individual (mamífero) y la gravedad de los síntomas del paciente. Por supuesto, el médico del paciente deberá decidir y controlar estrechamente la cantidad de oncolítico administrada. Tras decidir acerca del o los oncolíticos a emplear, el "Physician's Desk Reference®", publicado por la Medical Economics Company en Montvale, NJ 07645-1742, es un recurso útil para ayudar al médico a decidir qué cantidades de oncolítico administrar y se actualiza anualmente.

Las formulaciones preferidas, y los procedimientos de esta invención que emplean dichas formulaciones, son aquéllas que no contienen un oncolítico. Por tanto, se prefiere administrar los compuestos de esta invención y el oncolítico por separado. Los oncolíticos mencionados en esta descripción están disponibles en el mercado y pueden obtenerse en formas preformuladas adecuadas para los procedimientos de esta invención.

Los compuestos de fórmula I solos, u opcionalmente en combinación con un oncolítico, normalmente se administran en forma de formulaciones farmacéuticas. Estas formulaciones se pueden administrar por una variedad de vías, incluidas las vías oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular e intranasal. Tales formulaciones se preparan de forma bien conocida en la técnica farmacéutica y comprenden al menos un compuesto activo de fórmula I.

La presente invención también incluye procedimientos que emplean formulaciones farmacéuticas, que contienen, como ingrediente activo, los compuestos de fórmula I, y opcionalmente un oncolítico, asociados con portadores farmacéuticos. Al preparar las formulaciones de la presente invención, el o los ingredientes activos normalmente se mezclan con un excipiente, se diluyen con un excipiente o se introducen en dicho portador que puede ser en forma de cápsula, sello, papel u otro envase. Cuando el excipiente funciona como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como vehículo, portador o medio para el ingrediente activo. Por tanto, las formulaciones pueden estar en forma de comprimidos, píldoras, pastillas, polvos, sellos, CAPSULAS, elixires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (en un medio sólido o líquido), ungüentos que contienen, por ejemplo, hasta un 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina dura y blanda, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos envasados estériles.

Al preparar una formulación puede ser necesario triturar el o los compuestos activos para proporcionar el tamaño de partícula adecuado antes de combinar con los otros ingredientes. Si el o los compuestos activos son sustancialmente insolubles, normalmente se trituran a un tamaño de partícula inferior a 200 mesh. Si el o los compuestos activos son sustancialmente hidrosolubles, el tamaño de partícula normalmente se ajusta mediante trituración para proporciona una distribución sustancialmente uniforme en la formulación, por ejemplo de aproximadamente 40 mesh.

Entre algunos ejemplos de excipientes adecuados se incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma arábiga, fosfato cálcico, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato cálcico, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe y metilcelulosa. Las formulaciones pueden además incluir: agentes lubricantes tales como talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsionantes y de suspensión; agentes conservantes tales como metil- y propilhidroxibenzoatos; agentes edulcorantes y agentes aromatizantes. Las formulaciones de la invención se pueden formular de forma que proporcionen una liberación rápida, sostenida o retrasada del ingrediente activo tras la administración al paciente mediante procedimientos conocidos en la técnica.

Preferentemente, las formulaciones se pueden formular en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada forma de dosificación de aproximadamente 5 a aproximadamente 100 mg, más normalmente de aproximadamente 10 a aproximadamente 30 mg, de cada ingrediente activo. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente distintas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, en las que cada unidad contiene Una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado. En asociación con un excipiente farmacéutico adecuado.

Los compuestos de fórmula I son eficaces en un amplio abanico de dosificación. Por ejemplo, las dosificaciones diarias normalmente entrena dentro del intervalo de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal. En el tratamiento de seres humanos adultos, se prefiere especialmente el intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 15 mg/kg, en dosis únicas o divididas. Sin embargo, debe entenderse que la cantidad de compuesto administrada en realizada la determinará el médico, a la luz de las circunstancias de importancia, incluidos la afección que se va a tratar, la vía de administración elegida, el oncolítico real administrado, la edad, el peso y la respuesta de cada paciente individual (mamífero) y la gravedad de los síntomas del paciente, y, por tanto, con los intervalos de dosificación anteriores no se pretende limitar el alcance de la invención de ningún modo. En algunos casos, niveles de dosificación por debajo de límite inferior del intervalo citado antes pueden ser más que adecuados, sin embargo, en otros casos, se pueden emplear dosis todavía más elevadas sin causar ningún efecto secundario perjudicial, siempre que dichas dosis más elevadas se dividan primero en varias dosis más pequeñas para su administración durante el día.

Para preparar formulaciones sólidas tales como comprimidos, el o los ingredientes activos principales se mezclan con un excipiente farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a estas composiciones de preformulación como homogéneas, se quiere decir que el o los ingredientes activos están dispersos de forma uniforme por toda la formulación de forma que la formulación puede subdividirse con facilidad en formas de dosificación unitaria igualmente eficaces tales como comprimidos, píldoras y cápsulas. Esta preformulación sólida se subdivide después en formas de dosificación unitaria del tipo descrito antes que contiene de 0,1 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo de la presente invención.

Los comprimidos o píldoras de la presente invención pueden recubrirse o mezclarse para proporcionar una forma de dosificación que proporcione la ventaja de una acción prolongada. Por ejemplo, el comprimido o la píldora puede comprender un componente de dosificación interno y un componente de dosificación externo, estando este último en forma de una cubierta sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirve para resistir la disgregación en el estómago y permitir que el componente interno pase intacto al duodeno o se retrase su liberación. Para dichas capas o recubrimientos entéricos se pueden usar varios materiales, incluidos numerosos ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como laca, alcohol cetílico y acetato de celulosa.

Las formulaciones nuevas que son formas líquidas pueden incorporarse para la administración por vía oral o mediante inyección e incluyen soluciones acuosas, jarabes aromatizados de forma adecuada, suspensiones acuosas u oleosas y emulsiones aromatizadas con aceites comestibles tales como aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de coco o aceite de cacahuete, así como elixires y vehículos farmacéuticos similares.

Las formulaciones para inhalación e insuflación incluyen soluciones y suspensiones en disolventes farmacéuticos, acuosos u orgánicos, o mezclas de los mismos, y polvos. Las formulaciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticos adecuados como se ha descrito anteriormente. Preferentemente, las formulaciones se administran por la vía respiratoria oral o nasal para su efecto local o sistémico. Las composiciones preferentemente en disolventes farmacéuticos pueden nebulizarse mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas se pueden aspirar directamente desde el dispositivo de nebulización o el dispositivo de nebulización puede estar unido a una mascarilla facial, tienda o una máquina de respiración con presión positiva intermitente. Las formulaciones en solución, suspensión o polvo pueden administrarse, preferentemente por vías oral o nasal, a partir de dispositivos que liberen la formulación de un modo adecuado.

Los siguientes ejemplos de formulación sólo son ilustrativos y con ellos no se pretende limitar el alcance de la invención de ningún modo. "ingrediente o ingredientes activos" quiere decir un compuesto según la fórmula I o una sal farmacéutica del mismo opcionalmente con uno o más oncolíticos.

Otra formulación preferida empleada en los procedimientos de la presente invención utiliza dispositivos de liberación transdérmica ("parches"). Tales parches transdérmicos pueden usarse para proporcionar una infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y uso de los parches transdérmicos para la liberación de agentes farmacéuticos se conocen bien en la técnica. Véase, por ejemplo, la patente de EE.UU. 5.023.252, expedida el 11 de junio de 1991, incorporada en la presente memoria descriptiva como referencia. Tales parches pueden construirse para la liberación continua, en pulsos o a demanda de agentes farmacéuticos.

Con frecuencia será deseable o necesario introducir la formulación farmacéutica en el cerebro, directa o indirectamente. Las técnicas directas suelen implicar la colocación de un catéter de liberación de fármacos en el sistema ventricular del huésped para sortear la barrera hematoencefálica. U sistema de liberación implantable tal, usado para el transporte de factores biológicos a regiones anatómicas específicas del cuerpo, se describe en la patente de EE.UU. 5.011.472, expedida el 30 de abril de 1991, que se incorpora en la presente memoria descriptiva como referencia.

Las técnicas indirectas, que por lo general son las preferidas, normalmente implican la formulación de composiciones que proporcionen latencia a los fármacos mediante la conversión de fármacos hidrófilos en fármacos o profármacos liposolubles. La latencia generalmente se alcanza mediante el bloqueo de los grupos hidroxi, carbonilo, sulfato y amina primara presentes en el fármaco para convertir al fármaco en más liposoluble y favorable a su transporte a través de la barrera hematoencefálica. Como alternativa, la liberación de fármacos hidrófilos puede potenciarse mediante la infusión intraarterial de soluciones hipertónicas, que pueden abrir temporalmente la barrera hematoencefálica.

Claims (14)

1. Un compuesto de fórmula I:

4

en la que:

R^{1} es

hidrógeno,

\quad

alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi,

\quad

(CH_{2})_{n}C(O)R^{2},

\quad

(alquilo C_{1}-C_{4})NH_{2},

\quad

(CH_{2})_{n}NHC(O)R^{3},

\quad

(alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, o

\quad

heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo;

n es

0, 1 ó 2;

p es

0, 1, 2, 3 ó 4;

R^{2} es

alcoxi C_{1}-C_{4}, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo,

\quad

(CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo,

\quad

NHR^{4}, o

\quad

(CH_{2})_{p}-O-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo;

R^{3} es

alcoxi C_{1}-C_{4},

\quad

fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo,

\quad

(alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, o

\quad

(CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo, o

R^{4} es

(CH_{2})_{p}-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, o

\quad

(CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo;

\quad

o una sal farmacéutica del mismo

\quad

o un compuesto seleccionado de ácido [6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]- acético;

\quad

2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N-(2- metoxi-5-nitrofenil)-acetamida; y

\quad

2-[6-(9-cloro-3-metil-4-oxo-5H-isoxazol[4,3-c]quinolin-5-il)-piridin-2-il]-N- (3-nitrofenil)-acetamida; o una sal farmacéutica del mismo.

2. Un compuesto o sal farmacéutica según la reivindicación 1, en el que R^{1} es (CH_{2})_{n}C(O)R^{2}.

3. Un compuesto o sal farmacéutica según la reivindicación 1 ó 2, en el que n es 0.

4. Un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{2} es NHR^{4}, (alquilo C_{1}-C_{4} opcionalmente sustituido 1 vez con un grupo hidroxi)-fenilo opcionalmente sustituido 1 ó 3 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometoxi u oxo, o (CH_{2})_{p}-heterociclo opcionalmente sustituido 1 ó 2 veces independientemente con un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{4}, halo, bencilo, fenilo, trifluorometilo u oxo.

5. Un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que p es 3.

6. Un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para usar en un procedimiento de tratamiento terapéutico del cuerpo de un ser humano o de una animal.

7. Uso de un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la fabricación de un medicamento para tratar la resistencia a múltiples fármacos (RMF) conferida por la MRP1 en una neoplasia resistente o una neoplasia susceptible a resistencia.

8. Uso de un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la fabricación de un medicamento para inhibir una neoplasia resistente o una neoplasia susceptible a resistencia en un mamífero, en el que dicha inhibición comprende administrar una cantidad eficaz de dicho compuesto de fórmula I en combinación con una cantidad eficaz de uno o más agentes oncolíticos.

9. Uso según la reivindicación 8, en el que el oncolítico u oncolíticos se seleccionan de: doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, vincristina y etopósido.

10. Uso según la reivindicación 8 ó 9, en el que el mamífero es un ser humano.

11. Uso según una cualquiera de las reivindicaciones 7-10, en el que la neoplasia es del tipo de tipo de Wilm, de vejiga, ósea, de mama, pulmonar (de células pequeñas), de testículos o tiroides, o la neoplasia está asociada con leucemia linfoblástica o mieloblástica aguda, neuroblastoma, sarcoma de tejidos blandos, linfomas Hodgkin y no Hodgkin y carcinoma broncogénico.

12. Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto o sal farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en combinación con uno o más portadores, diluyentes o recipientes farmacéuticos para el mismo.

13. Una formulación farmacéutica que comprende:

(a)

un compuesto de fórmula I o sal farmacéutica del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5;

(b)

uno o más agentes oncolíticos; y

(c)

uno o más portadores, diluyentes o recipientes farmacéuticos para el mismo.

14. Una formulación farmacéutica según la reivindicación 13, en la que el oncolíticos u oncolíticos se seleccionan de: doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, vincristina y etopósido.