ES2257871T3

ES2257871T3 - Derivados de mononitrato de isosorbida, utilizacion como agentes vasodilatores con tolerancia reducida.

Info

Publication number: ES2257871T3
Application number: ES99949015T
Authority: ES
Inventors: Jose Repolles Moliner; Francisco Pubill Coy; Lydia Cabeza Llorente; Marcel.Li Carbo Banus; Cristina Negrie Rofes; Juan Antonio Cerda Riudavets; Alicia Ferrer Siso; Marek W. Univ. Alberta Dep. Of Pharm. Radomski; Eduardo Salas Perez-Rasilla; Juan Martinez Bonnin
Original assignee: Lacer SA
Current assignee: Lacer SA
Priority date: 1998-10-07
Filing date: 1999-10-04
Publication date: 2006-08-01
Anticipated expiration: 2019-10-04
Also published as: EE200100207A; CA2346010C; IS5910A; ES2142773B1; CZ20011257A3; KR100641801B1; IS2312B; EA200100422A1; NO328584B1; EA003360B1; IL142391A0; ID29946A; CZ294551B6; JP2002526544A; PE20001083A1; BR9914355A; BG65135B1; NO20011778D0; PA8483901A1; BR9914355B1

Abstract

Se describen nuevos derivados de mononitrato de isosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables, que poseen actividad vasodilatadora con un efecto de tolerancia disminuido, de fórmula general (I) en la que A y B representan indistintamente cualquiera de los grupos -ONO2 y -Z-CO-R, siendo Z un átomo de oxígeno o de azufre, y R un grupo alquilo C1 -C4 , arilo o aralquilo, eventualmente substituido, o el grupo (a), en el que R1 à es hidrógeno o un grupo alquilo C1 -C4 , arilo o aralquilo, eventualmente substituido, de manera que siempre uno de A o B es -ONO2 , pero nunca los dos a la vez, cuando Z es un átomo de azufre R es un grupo alquilo C1 -C4 , arilo o aralquilo, eventualmente substituido, y cuando Z es un átomo de oxígeno R es el grupo (a).

Description

Derivados de mononitrato de isosorbida, utilización como agentes vasodilatadores con tolerancia reducida.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos derivados de mononitrato de isosorbida que poseen actividad vasodilatadora potente y que, al mismo tiempo, tienen una tolerancia sensiblemente reducida.

Técnica fundamental

Los ésteres de ácido nítrico de compuestos orgánicos comúnmente conocidos como compuestos orgánicos nitrados, se conocen y se usan como agentes vasodilatadores. Dentro de ellos, es bien sabida la utilidad de la isosorbida mono- y di-nitrada y, además, han sido descrito compuestos con actividades vascular y coronaria que están basados en reacciones de sustitución del grupo hidroxilo libre del mononitrato de isosorbida. Por ejemplo, la Patente US-A-4.891.373 describe derivados de aminopropanol que corresponden a las fórmulas:

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para el tratamiento de la angina de pecho y de la hipertensión sistémica y pulmonar.

La Patente US-A-5.665.766 describe el 2-acetilsalicilato-5-mononitrato de isosorbida de fórmula

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así como su actividad de anti-agregación plaquetaria.

Uno de los problemas principales de los compuestos orgánicos nitrados antes citados, reside en el hecho de que estos compuestos son bastantes sensibles en lo que respecta al fenómeno conocidos como taquifilaxia o tolerancia, que se refiere a que su efecto sobre el organismo disminuye durante un tratamiento prolongado y es necesario, por tanto, elevar sensiblemente de un modo gradual las dosis administradas o, de otro modo, dar lugar a un fracaso desde el punto de vista farmacológico.

Es sabido también que un modo de reducir la tolerancia de los compuestos orgánicos nitrados consiste en introducir en la molécula un grupo tiol, por ejemplo mediante el uso de aminoácidos que contienen azufre. La Patente Europea EP-B-0362575 describe compuestos orgánicos nitrados con moléculas de cisteína incorporadas y, principalmente, moléculas de metionina.

La Solicitud de Patente WO-A-92/04337 describe derivados orgánicos nitrados del anillo de la tiazolidina con actividad vasodilatadora y tolerancia reducida.

La Solicitud de Patente WO-A-93/03037 describe una cantidad enormemente grande de diferentes compuestos orgánicos nitrados vasodilatadores con tolerancia reducida, de estructuras sumamente variables, dentro de las que están incluidos genéricamente, es decir, sin especificar ni describir un único producto específico, derivados de mononitrato de isosorbida según la estructura que sigue:

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en la que R_{5} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, un grupo fenilo, etc.

El documento EP 0 290 885 describe ésteres 2- y 5-mononitrato de isosorbida con ácidos o diácidos alifáticos, arílicos o cinámicos, o con sustituyentes alquilcarboniloxi y su uso en terapéutica cardiovascular, en la que estos compuestos muestran actividad hipotensora.

Los compuestos orgánicos nitrados descritos en los documentos citados, no resuelven en sí mismos, los problemas originados procedentes de la tolerancia de los compuestos orgánicos nitrados, dado que estos compuestos poseen, todavía, problemas relacionados con baja actividad vasodilatadora, tolerancia alta, etc.. Por consiguiente, aún es necesario desarrollar nuevos compuestos orgánicos nitrados que posean actividad vasodilatadora elevada junto con un nivel de tolerancia más disminuido que se mantenga constantemente.

Sumario de la invención

Un objeto de la invención es un nuevo tipo de compuestos, derivados del mononitrato de isosorbida, capaces de proporcionar un efecto vasodilatador potente y que, a la vez, muestran un efecto de tolerancia pequeño o nulo.

Otro objeto de la presente invención se refiere al uso de los nuevos derivados de mononitrato de isosorbida para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos relacionados con disfunciones del sistema circulatorio, en particular al nivel del sistema coronario.

Descripción detallada de la invención

Los nuevos derivados de mononitrato de isosorbida y sus sales farmacológicamente aceptables que son objeto de la invención, corresponden a la fórmula general (I) que sigue:

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en la que A y B representan, individualmente, cualquiera de los grupos

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en los que Z es un átomo de oxigeno o un átomo de azufre, y R es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo, eventualmente sustituidos, o el grupo:

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en el que R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo, eventualmente sustituidos.

Todos ellos con la estipulación de que:

(a): uno de A o B es siempre -ONO_{2}, pero nunca ambos a la vez;

(b): cuando Z es un átomo de azufre, R es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo, eventualmente sustituidos; y

(c): cuando Z es un átomo de oxígeno, R es el grupo

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en el que R^{1} representa los grupos anteriormente indicados.

Dentro de los nuevos derivados de la invención se prefiere que cuando Z es un átomo de azufre, R es un grupo alquilo de cadena corta, de C_{1}-C_{4,}, y cuando Z es un átomo de oxígeno, R^{1} es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de cadena corta, de C_{1}-C_{4}. Más preferiblemente, dentro de los criterios citados, B es el grupo -ONO_{2}, es decir, los compuestos en los que el éster nitrato está en la posición 5 del sistema de configuración cíclica de la isosor-
bida.

Las preferencias citadas no deben ser consideradas, en modo alguno, como limitaciones del alcance del objeto de la presente invención.

En el caso de que R^{1} es hidrógeno los compuestos de la invención podrían ser representados como cualquiera de sus dos tautómeros.

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y ambas de las estructuras tautómeras han de ser consideradas como dentro del objeto de la invención.

Ejemplos de compuestos específicos dentro del objeto de la invención podrían ser los siguientes:

2-(2'-etiltio)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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5-(2'-etiltio)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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2-(2'-mercapto)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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5-(2'-mercapto)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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5-mononitrato de 2-acetilmercaptoisosorbida, de fórmula

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2-(2'-metiltio)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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5-(2'-metiltio)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida, de fórmula

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así como sus sales farmacéuticamente aceptables, en particular sus hidrocloruros.

Los compuestos 1 y su hidrocloruro y el compuesto 5 son particularmente preferidos.

Los compuestos de la presente invención pueden ser obtenidos mediante técnicas de esterificación empleando productos de partida conocidos o accesibles, descritos en la bibliografía científica básica de la química orgánica, conocidos de los expertos en la materia, por ejemplo las publicaciones del Chemical Abstracts Service, la Enciclopedia de productos orgánicos Beilstein o en cualquier otra publicación apropiada de que se dispone en las bibliotecas universitarias.

Por ejemplo, cuando Z es un átomo de oxígeno los compuestos pueden ser obtenidos a partir de isosorbida o del mononitrato de isosorbida correspondiente, mediante una reacción de esterificación de estos compuestos con el ácido carboxílico correspondiente o uno de sus derivados activados, por ejemplo el cloruro de ácido, un anhídrido de ácido, un éster activo, etc. Si el producto de partida es isosorbida, es necesario terminar con una etapa posterior que consiste en nitrar el grupo hidroxilo libre de la isosorbida, cosa que no es necesaria si se ha empezado partiendo de cualquiera de los mononitratos de isosorbida en posición 5 o en posición 2 de la estructura de configuración cíclica de dicho compuesto.

Cuando R^{1} es hidrógeno, estos compuestos poseen un grupo tiol libre y pueden ser oxidados produciendo dímeros de disulfuro. En este caso los dímeros pueden ser revertidos a los monómeros correspondientes por reacción con trifenilfosfina en agua, según ha sido descrito por R. Humphrey (1964), Analytical Chem., 36, 1812 y L.E. Overman (1974), Synthesis, 59.

Cuando Z es un átomo de azufre la situación es muy similar, ya que es suficiente partir del correspondiente ácido tiocarboxílico, en lugar del ácido carboxílico anteriormente citado, y usar procedimientos bien conocidos por los expertos en la técnica para la formación del enlace tioéster. Por otra parte, si cualquiera de las reacciones implica la epimerización de un centro quiral, puede emplearse como compuesto de partida el enantiómero de la isosorbida adecuado, por ejemplo la isomanida.

Los ensayos efectuados demuestran que los nuevos derivados de mononitrato de isosorbida de la invención ponen de manifiesto una actividad vasodilatadora comparable, como mínimo, a la del propio mononitrato de isosorbida y en algunos casos muy superior. Además, estos derivados manifiestan una tolerancia sensiblemente inferior en comparación con la observada con dicho compuesto y en algunos casos se aproxima a prácticamente nula.

Por consiguiente, los compuestos de la invención pueden ser empleados muy eficazmente para la fabricación de medicamentos con efecto vasodilatador para el tratamiento de disfunciones del sistema circulatorio, en particular a nivel cardiovascular y coronario.

De acuerdo con ello, los compuestos de la fórmula general (I), así como sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden ser empleados, mediante el uso de técnicas farmacéuticas convencionales, para la fabricación de medicamentos que pueden ser administrados por diferentes vías.

Por ejemplo, estos medicamentos pueden ser administrados por vía oral en forma de preparaciones farmacéuticas tales como comprimidos, cápsulas, jarabes y suspensiones. Por vía parenteral, en forma de soluciones o emulsiones, etc. También pueden ser administrados por vía tópica en forma de cremas, pomadas, bálsamos, etc, y por vía transdérmica, por ejemplo, mediante el uso de parches o vendas. También pueden ser aplicados directamente en el recto como supositorios. Las preparaciones pueden comprender vehículos, excipientes, activadores, agentes quelantes, estabilizantes, etc., fisiológicamente aceptables. En el caso de inyecciones pueden ser incorporados en soluciones tampón, o agentes solubilizantes o isotónicos, fisiológicamente aceptables. La dosis diaria puede variarse dependiendo de los síntomas específicos, la edad, el peso de los pacientes, el modo específico de administración, etc., y la dosis diaria normal para un adulto podría estar entre 1 y 500 mg, y podría administrarse como solamente una dosis o dividirse en varias dosis durante el día.

En los Ejemplos de trabajo que figuran en esta memoria (véase más adelante) se describen con detalle procedimientos adecuados para obtener varios de los compuestos según la fórmula general (I). A la vista de estos Ejemplos, se encuentra dentro del conocimiento general de los expertos en la materia obtener compuestos no ejemplificados explícitamente en esta memoria, mediante modificaciones adecuadas de los Ejemplos de trabajo que aquí figuran.

Por consiguiente, los Ejemplos de trabajo que aquí figuran no deben ser interpretados como limitaciones del alcance de la invención, sino solamente como una explicación detallada adicional, que guíe a la persona experta hacia una comprensión más profunda de la invención.

Ejemplos

Los compuestos obtenidos en los Ejemplos que figuran seguidamente, son identificados mediante sus datos obtenidos en espectroscopía Infrarroja (IR) y espectroscopía de Resonancia Magnética Nuclear del protón (^{1}H-NMR) y del carbono 13 (^{13}C-NMR).

Los espectros IR han sido realizados en película evaporada con CHCl_{3} o en pastillas de KBr, en un aparato PERKIN-ELMER FTIR modelo 1700. La posición de los picos más importantes se indica en cm ^{-1}.

Los espectros de Resonancia Magnética Nuclear han sido realizados en un aparato Varian Gemini-200.

En los espectros de ^{1}H-NMR se indican la frecuencia de trabajo y el disolvente usado para realizar el espectro. La posición de las señales se indica en \delta (ppm), usando como referencia la señal de los protones del disolvente. Los valores de referencia son 7,24 ppm para el cloroformo deuterado y 2,49 ppm para el sulfóxido de dimetilo deuterado. Entre paréntesis se indican el número de protones que corresponden a cada señal, medido por integración electrónica, y el tipo de señal se indica usando las abreviaturas siguientes: s (singlete), d (doblete), t (triplete), dd (doblete de dobletes), sb (señal ancha), sc (señal compleja), d.e. D_{2}O (desaparece durante la realización del espectro después de la adición de algunas gotas de agua deuterada).

En los espectros de ^{13}C-NMR se indican, en cada uno de los espectros, la frecuencia de trabajo y el disolvente. La posición de las señales se indica en \delta (ppm), utilizando como referencia la señal de los protones del disolvente. Los valores de referencia son 77,00 ppm para el cloroformo deuterado y 39,50 ppm para el sulfóxido de dimetilo deuterado.

Además, se han realizado experimentos de resonancia magnética nuclear usando el Attached Proton Test (ensayo de protón unido) (APT).

En la parte experimental de los Ejemplos se emplean las abreviaturas siguientes:

AcOEt: acetato de etilo

DMSO-d_{6}: sulfóxido de dimetilo hexa-deuterado

EtOEt: éter dietílico.

Ejemplo 1 Obtención de hidrocloruro de 2-(2'-etiltio)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida (1)

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Etapa 1

En un matraz de vidrio de 50 ml, provisto de refrigerante de reflujo, cerrado con un tubo de CaCl_{2}, y agitación magnética, se disuelven 4,25 g (23,2 mmol) de ácido 2-etiltionicotínico en 20 ml de cloruro de tionilo (1,64 g/ml; 275,6 mmol). La mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 3,5 horas. Al cabo de este período, la mezcla se enfría y se elimina el exceso de cloruro de tionilo a presión reducida al tiempo que se añaden porciones de tolueno. Después de secar a presión reducida, se obtienen 4,67 g de un sólido amarillento que corresponde al cloruro de ácido de interés. Rendimiento: 100%.

Etapa 2

En un matraz de vidrio de 50 ml provisto de agitador magnético y refrigerante de reflujo, se disuelven en 25 ml de piridina, bajo atmósfera de Ar, 4,67 g (23,2 mmol) del cloruro de ácido obtenido en la etapa anterior. La solución se enfría en un baño de hielo y se añaden 4,44 g (23,2 mmol) de 5-mononitrato de isosorbida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar durante 19 horas. Después de este período se elimina el disolvente a presión reducida. El residuo se disuelve en 50 ml de CHCl_{3} y se lava: primeramente con 50 ml de agua y después con 50 ml de solución acuosa de HCl al 5% y una vez más con 50 ml de agua. La fase orgánica se seca sobre MgSO_{4} anhidro, se filtra y se elimina el disolvente a presión reducida. Después de secar a presión reducida se obtienen 7,25 g del producto de interés. Rendimiento: 88%.

Etapa 3

En un matraz de vidrio de tres bocas de 250 ml, provisto de refrigerante de reflujo tapado con un tubo de CaCl_{2}, agitador magnético y un embudo de adición de presión compensada, se disuelven en 150 ml de EtOEt 6,0 g (16,85 mmol) del producto obtenido en la etapa anterior. La solución se agita a temperatura ambiente y se añaden, gota a gota, 30 ml de solución de EtOEt saturada con HCl (solución preparada haciendo burbujear HCl gaseoso, directamente, en EtOEt hasta saturación), obteniendo un precipitado sólido, blanco. Se filtra el sólido, se lava con exceso de EtOEt y se seca a presión reducida. Se obtienen 6,55 g del producto de interés. Rendimiento: 99%.

^{1}H-NMR (200 MHz, DMSO-d_{6}): 10,26 (1H, s, d.e. D_{2}O, HCl), 8,60 (1H, dd, J=5 Hz, J=1,8 Hz, CH_{ar}), 8,20 (1H, dd, J=7,7 Hz, J=2 Hz, CH_{ar}), 7,22 (1H, dd, J=3 Hz, J=8 Hz, CH_{ar}), 5,43 (1H, sc, CH-ONO_{2}), 5,30 (1H, d, J=3 Hz, CH-O-CO), 5,05 (1H, t, J=5,5 Hz, CH), 4,65 (1H, d, J=5 Hz, CH), 4,20-3,80 (4H, sc, CH_{2}), 3,17 (2H, q, J=7,6 Hz, CH_{2}-S), 1,23 (3H, t, J=7,6 Hz, CH_{3}).

^{13}C-NMR (50 MHz, DMSO-d_{6}): 164,06 (C=O), 161,34 (C_{ar}-COO), 152,88 (CH_{ar}), 139,63 (CH_{ar}), 122,48 (C_{ar}-S), 119,13 (CH_{ar}), 86,19 (CH-ONO_{2}), 82,64 (CH), 81,78 (CH), 78,10 (CH-O-CO), 72,90 (CH_{2}), 69,33 (CH_{2}), 23,84 (CH_{2}-S), 14,31 (CH_{3}).

Ejemplo 2 Obtención de hidrocloruro de 5-(2'-etiltio)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida. (2)

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Etapa 1

Se emplea el mismo método que en la Etapa 2 del Ejemplo 1, utilizando como producto de partida el 2-mononitrato de isosorbida. Se obtiene el producto de interés con un rendimiento químico del 88%.

Etapa 2

En un matraz de vidrio de tres bocas, de 500 ml, provisto de refrigerante de reflujo tapado con un tubo de CaCl_{2}, agitador magnético y embudo de adición de presión compensada, se disuelven en una mezcla de 200 ml de EtOEt + 100 ml de CH_{2}Cl_{2}, 7,0 g (19,66 mmol) del producto obtenido en la etapa anterior. La solución se agita a temperatura ambiente y se añaden gota a gota, 300 ml de solución de EtOEt saturada con HCl (solución anterior preparada haciendo burbujear HCl gaseoso directamente en el EtOEt hasta saturación), produciéndose un precipitado sólido blanco.

Se filtra el sólido, se lava con un exceso de EtOEt y se seca a presión reducida. Se obtienen 7,05 g del producto de interés. Rendimiento: 91%.

^{1}H-NMR (200 MHz, DMSO-d_{6}): 8,63 (1H, dd, J= 5 Hz, J= 1,8 Hz, CH_{ar}), 8,33 (1H, sb, d.e. D_{2}O, HCl), 8,23 (1H, dd, J=8 Hz, J=1,8 Hz, CH_{ar}), 7,24 (1H, dd, J=3 Hz, J=7,8 Hz, CH_{ar}), 5,44 (1H, d, J=3,2 Hz, CH-O-CO), 5,33 (1H, sc, CHONO_{2}), 4,91 (1H, t, J=5,6 Hz, CH), 4,67 (1H, d, J=5,4 Hz, CH), 4,20-3,80 (4H, sc, CH_{2}), 3,08 (2H, q, J=7,2 Hz, CH_{2}-s), 1,20 (3H, t, J=7,2 Hz, CH_{3}).

^{13}C-NMR (50 MHz, DMSO-d_{6}): 163,74 (C=O), 161,53 (C_{ar}-COO), 152,77 (CH_{ar}), 139,24 (CH_{ar}), 122,05 (C_{ar}-S), 119,01 (CH_{ar} ), 86,65 (CH-ONO_{2}), 84,13 (CH), 80,79 (CH), 74,48 (CH-O-CO), 70,78 (CH_{2}-O), 70,70 (CH_{2}-O), 23,67 (CH_{2}), 14,14 (CH_{3}).

Ejemplo 3 Obtención de 2-(2'-mercapto)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida (3)

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Etapa 1

En un matraz de vidrio de 100 ml, provisto de refrigerante de reflujo tapado con un tubo de CaCl_{2} y agitador magnético, se suspenden en 30 ml de cloruro de tionilo (1,64 g/ml; 413,4 mmol), 3,0 g (19,35 mmol) de ácido 2-mercaptonicotínico. La mezcla se deja a reflujo durante 2 horas observando la disolución del sólido durante este período. Se enfría la mezcla y se elimina el exceso de cloruro de tionilo a presión reducida mientras se añaden porciones de tolueno. Después de secar a presión reducida, se obtienen 3,35 g de un sólido de color amarillo anaranjado que corresponde al cloruro de ácido de interés. Rendimiento: 100%.

Etapa 2

En un matraz de vidrio de 250 ml, provisto de refrigerante de reflujo y agitador magnético, se suspenden 3,0 g (17,29 mmol) del cloruro de ácido obtenido en la etapa anterior, bajo atmósfera de Ar, en 75 ml de piridina. La suspensión se enfría en un baño de hielo y se añaden 3,30 g (17,29 mmol) de 5-mononitrato de isosorbida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar durante 19 horas, un período de tiempo en el que la mezcla se hace oscura. Una vez terminada la reacción, se elimina el disolvente a presión reducida. El residuo se disuelve en 250 ml de CHCl_{3} y se lava: en primer lugar con 250 ml de agua y después con 250 ml de solución acuosa de HCl al 5% y, una vez más, con 250 ml de agua. Se seca la fase orgánica sobre MgSO_{4} anhidro, se filtra y se elimina el disolvente a presión reducida. Se obtienen 5,45 g de un sólido amarillo, que se recristaliza en isopropanol obteniendo 4,83 g de un sólido blanco que se hace reaccionar en medio ácido durante 20 minutos con trifenilfosfina (1:1,25 molar) en metanol, con un 10% de agua. Se elimina el disolvente a presión reducida y el residuo se disuelve en AcOEt, lavando la solución con algo de agua. La fase orgánica se seca y se elimina el disolvente a presión reducida, recogiendo el producto de interés mediante cromatografía preparativa. Rendimiento: 35,7%.

^{1}H-NMR (200 MHz, CD_{3}COCD_{3}): 7,90 (1H, dd, J=6,1 Hz, J=1,6 Hz, CH_{ar} ), 7,70 (1H, dd, J=7,2 Hz, J=1,6 Hz, CH_{ar}), 6,97 (1H, dd, J=6,4 Hz, J=7,2 Hz, CH_{ar}), 5,63-5,55 (1H, sc, CH-ONO_{2}), 5,38 (1H, d, J=3,4 Hz, CH-O-CO), 5,09 (1H, t, J=5,1 Hz, CH), 4,75 (1H, d, J=4,8 Hz, CH), 4,20-3,85 (4H, sc, CH_{2}).

IR (KBr): 3438, 2925, 1735, 1639, 1571, 1281, 1095.

Ejemplo 4 Obtención de 5-(2'-mercapto)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida (4)

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En un matraz de vidrio de 250 ml, provisto de refrigerante de reflujo y agitador magnético, se suspenden, bajo atmósfera de Ar, 3,0 g (17,29 mmol) del cloruro de ácido obtenido en la Etapa 1 del Ejemplo 3, en una mezcla de 50 ml de piridina y 25 ml de CHCl_{3}. Se enfría la suspensión en un baño de hielo y se añaden 3,30 g (17,29 mmol) de 2-mononitrato de isosorbida. La mezcla de reacción se deja en agitación a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar, durante 19 horas, un período de tiempo en el que la mezcla se hace oscura. Una vez terminada la reacción se elimina el disolvente a presión reducida. El residuo se disuelve en 300 ml de CHCl_{3} y se lava, primeramente con 300 ml de agua, en segundo lugar con 300 ml de solución acuosa de HCl al 5% y, una vez más, con 300 ml de agua. Se seca la fase orgánica sobre MgSO_{4} anhidro, se filtra y se elimina el disolvente a presión reducida. Después de secar a presión reducida se obtienen 5,10 g de un sólido de color blanco amarillento, que se recristaliza en isopopanol obteniendo 4,55 g de un sólido blanco que se hace reaccionar en medio ácido, durante 20 minutos, con trifenilfosfina (1:1,25 molar) en metanol con un 10% de agua. Se elimina el disolvente a presión reducida y el residuo se disuelve en AcOEt, lavando la solución con algo de agua. Se seca la fase orgánica y se elimina el disolvente a presión reducida, recuperando el producto de interés mediante cromatografía preparativa. Rendimiento: 37,6%.

^{1}H-NMR (200 MHz, CD_{3}COCD_{3}): 7,98 (1H, dd, J=4,2 Hz, J=1,0 Hz, CH_{ar}), 7,76 (1H, dd, J=4,9 Hz, J=1,0 Hz, CH_{ar}), 7,34 (1H, dd, J=4,5 Hz, J=4,8 Hz, CH_{ar}), 5,50-5,36 (2H, sc, CH-ONO_{2}+CH-O-CO), 5,02 (1H, t, J=3,7 Hz, CH), 4,74 (1H, d, J=3,4 Hz, CH), 4,20-3,90 (4H, sc, CH_{2}).

IR (KBr): 3395, 2876, 1727, 1653, 1631, 1593, 1291, 1276.

Ejemplo 5 Obtención de 5-mononitrato de 2-acetilmercaptoisosorbida (5)

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Etapa 1

En un matraz de vidrio de 1 litro provisto de refrigerante de reflujo, embudo de adición de presión compensada y agitador magnético, se mezclan 60 g (411 mmol) de isomanida, 88 g (461 mmol) de cloruro de paratoluenosulfonilo, 296 ml de CCl_{4} y 247 ml de H_{2}O. Se prepara una atmósfera de Ar y se añade, gota a gota, una solución de 29,9 g (453 mmol) de KOH de 85%, mientras se mantiene la temperatura de reacción en 5ºC. El período de tiempo de la adición es 1 hora 20 minutos. La mezcla resultante se agita a 5ºC durante 7 horas. Se filtra el sólido y se lava con 2 porciones de 125 ml de H_{2}O y se seca a presión reducida.

El sólido obtenido se recristaliza en 1200 ml de CCl_{4}, se filtra en caliente y el filtrado se deja enfriar. Se filtran los cristales obtenidos y se lavan, obteniendo 54,5 g de una fracción, A, del producto de interés, monotosilato de isomanida.

El sólido obtenido en la filtración se recristaliza en 1000 ml de CCl_{4} obteniendo 29,5 g de una fracción, B, del producto de interés.

Etapa 2

En un matraz de vidrio de 500 ml provisto de refrigerante de reflujo y agitador magnético, se mezclan en 113 ml de n-butanol, 13,0 g (113 mmol) de tioacetato potásico. Se prepara una atmósfera de Ar y la mezcla de reacción se calienta a reflujo durante 1 hora. Se enfría la mezcla, se filtra, se lava con 200 ml de etanol, y se elimina el disolvente a presión reducida. Se obtienen 20 g de un sólido.

Un análisis por cromatografía en capa fina con una muestra independiente muestra que el producto de interés no es la parte principal del crudo.

El crudo obtenido se trata con 300 ml de n-butanol y 40 ml de ácido tioacético y se calienta a reflujo durante 1 hora. Se deja enfriar la mezcla y se filtra sobre una capa de SiO_{2}. Los disolventes del filtrado se evaporan a presión reducida obteniéndose un crudo que se somete a cromatografía súbita.

Para la separación cromatográfica se emplea como eluyente una mezcla de CHCl_{3}/AcOEt (4:1). Se obtiene una fracción de 4,14 g de 2-acetilmercaptoisosorbida, suficientemente pura para ser utilizada en la etapa de síntesis siguiente. Se obtienen varias fracciones de producto de interés con bastante cantidad de impurezas. Estas últimas fracciones se someten a cromatografía preparativa de fase invertida consiguiendo la purificación del producto deseado.

Etapa 3

Se prepara una mezcla de nitración añadiendo lenta y cuidadosamente 2,4 ml de HNO_{3} de 60% a una mezcla de 10 ml de anhídrido acético y 10 ml de ácido acético. La mezcla se prepara a 0ºC.

En un matraz de vidrio de 100 ml provisto de refrigerante de reflujo y agitación magnética, se disuelven 2,51 g (12,3 mmol) del producto obtenido en la etapa anterior, a 0ºC, en 14,5 ml de ácido acético y, después de agitar, se añade gota a gota la mezcla nitrada anteriormente obtenida, durante 20 minutos, al tiempo que se mantiene la temperatura en 0ºC. La mezla de reacción se agita durante 2 horas a 0ºC, se vierte el crudo en 200 ml de agua, y la mezcla que resulta se extrae con 3 porciones de 200 ml de AcOEt. Cada una de las tres porciones se lava por separado con 2 porciones de 220 ml de una solución saturada de NaHCO_{3} y 200 ml de agua. La solución obtenida se seca sobre Na_{2}SO_{4}, se filtra y el disolvente se elimina a presión reducida. Se obtienen 2,4 g de crudo que se someten a cromatografía súbita usando una mezcla de CHCl_{3}/AcOEt (25:1) como eluyente. Se obtienen 2,08 g del producto de interés. Rendimiento: 68%.

^{1}H-NMR (200 MHz, CDCl_{3}): 5,36-5,24 (1H, sc, CH-O-NO_{2}), 4,90-4,80 (1H, sc, CH), 4,44-4,37 (1H, sc, CH), 4,22-4,10 (1H, sc, CH), 4,10-3,98 (2H, sc, CH_{2}), 3,92-3,78 (2H, sc, CH_{2}), 2,33 (3H, s, CH_{3}).

^{13}C-NMR (50 MHz, CDCl_{3}): 194,48 (=O), 86,50 (CH-ONO_{2}), 81,44 (CH), 81,22 (CH), 78,48 (CH_{2}), 69,25 (CH_{2}), 45,92 (CH-S), 30,48 (CH_{3}).

IR (cm^{-1}): 300-2800, 1700, 1650, 1630, 1280, 1080, 960.

Ejemplo 6 Obtención de 2-(2'-metiltio)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida (6)

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En un matraz de vidrio de 50 ml, provisto de agitación magnética y refrigerante de reflujo se suspenden en 12 ml de piridina, bajo atmósfera de Ar, 2,00 g (10,7 mmol) de cloruro del ácido 2-metiltionicotínico. Se enfría la mezcla en un baño de hielo y se añaden 2,04 g (10,7 mmol) de 5-mononitrato de isosorbida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar durante 15 horas. Después de este período se elimina el disolvente a presión reducida. El residuo se disuelve en 50 ml de CHCl_{3} y se lava, primeramente con 50 ml de agua, después con 50 ml de solución acuosa de HCl al 5% y una vez más con 50 ml de agua. Se seca la fase orgánica sobre MgSO_{4} anhidro, se filtra y se elimina el disolvente a presión reducida. Después de secar a presión reducida se obtienen 2,80 g del producto de interés. Rendimiento: 77%.

^{1}H-NMR (200 MHz, DMSO-d_{6}): 8,68 (1H, dd, J=5 Hz, J=1,8 Hz, CH_{ar}), 8,22 (1H, dd, J=7,7 Hz, J=2 Hz, CH_{ar}), 7,26 (1H, d, J=3 Hz, J=8 Hz, CH_{ar}), 5,54 (1H, td, J=2 Hz, J=6 Hz, CH-ONO_{2}), 5,34 (1H, d, J=3 Hz, CH-O-CO), 5,06 (1H, t, J=5,5 Hz, CH), 4,58 (1H, d, J=5 Hz, CH), 4,18-3,82 (4H, sc, CH_{2}), 2,45 (3H, s, CH_{3}-S).

^{13}C-NMR (50 MHz, DMSO-d_{6}): 163,91 (C=O), 161,64 (C_{ar}-COO), 152,80 (CH_{a-r}), 139,27 (CH_{ar}), 122,20 (C_{ar}-S), 118,83 (CH_{ar}), 85,97 (CH-ONO_{2}), 82,41 (CH), 81,53 (CH), 77,87 (CH-O-CO), 72,67 (CH_{2}), 69,07 (CH_{2}), 13,34 (CH_{3}).

Ejemplo 7 Obtención de 5-(2'-metiltio)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida (7)

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En un matraz de vidrio de 50 ml, provisto de agitador magnético y refrigerante de reflujo, se suspenden en 12 ml de piridina, bajo atmósfera de Ar, 2,00 g (10,7 mmol) de cloruro del ácido 2-metiltionicotínico. Se enfría la mezcla en un baño de hielo y se añaden 2,04 g (10,7 mmol) de 2-mononitrato de isosorbida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de Ar durante 15 horas. Al cabo de este período se elimina el disolvente a presión reducida. El residuo se disuelve en 50 ml de CHCl_{3} y se lava, primeramente con 50 ml de de agua, después con 50 ml de solución acuosa de HCl al 5% y una vez más con 50 ml de agua. Se seca la fase orgánica sobre MgSO_{4} anhidro, se filtra y se elimina el disolvente a presión reducida. Después de secar a presión reducida, se obtienen 2,75 g del producto de interés. Rendimiento: 75%.

^{1}H-NMR (200 MHz, DMSO-d_{6}): 8,90 (1H, dd, J=5 Hz, J=1,8 Hz, CH_{ar}), 8,27 (1H, dd, J=7,7 Hz, J=2 Hz, CH_{ar}), 7,27 (1H, dd, J=3 Hz, J=7,8 Hz, CH_{ar}), 5,42-5,31 (1H, sc, J=2 Hz, J=6 Hz, CH-ONO_{2}), 5,60 (1H, d, J=3,2 Hz, CH-O-CO), 5,06 (1H, t, J=5,5 Hz, CH), 4,92 (1H, d, J=5,6 Hz, CH), 4,10-3,88 (4H, sc, CH_{2}), 1,24 (3H, s, CH_{3}-S).

^{13}C-NMR (50 MHz, DMSO-d_{6}): 163,71 (C=O), 161,89 (C_{ar}-COO), 152,77 (CH_{ar}), 139,04 (CH_{ar}), 121,92 (C_{ar}-S), 118,87 (CH_{ar}), 86,56 (CH-ONO_{2}), 84,05 (CH), 80,69 (CH), 74,41 (CH-O-CO), 70,69 (CH_{2}), 13,37 (CH_{3}).

Ejemplo 8 Ensayo de vasodilatación

El método utilizado en los ensayos es sustancialmente el mismo que se describe en las referencias bibliográficas siguientes:

\text{*}: Furchgot, R.F. "Methods in nitric oxide research". Feelisch and Stamler eds. John Wiley and Sons, Chichester, Inglaterra, pp. 567-581.

\text{*}: Trongvanichnam, K, et al., Jpn J. Pharmacol. 1996; 71:167-173.

\text{*}: Salas, E., et al., Eur. J. Pharmacol. 1994; 258:47-55.

Los diferentes compuestos se ensayan en 5 concentraciones diferentes, en un intervalo de concentraciones desde 0,001 a 10 mM, usando desde 6 a 9 anillos arteriales para cada compuesto. Los resultados obtenidos se comparan con los obtenidos con el 5-mononitrato de isosorbida, que se utiliza como producto de referencia.

Los resultados se exponen en la Tabla 1 que figura a continuación y se proporcionan como CE_{50} (concentración efectiva 50), que es la concentración de cada uno de los compuestos ensayados con la que se produce una vasodilatación de 50% del anillo arterial, previamente contraído con 1 \muM de norepinefrina.

TABLA 1

Ensayo de vasodilatación
Compuesto	CE_{50} mM (media \pm SEM)*
5-mononitrato de isosorbida	0,92 \pm 0,2
Producto obtenido en el Ejemplo 5 (5)	0,95 \pm 0,1
Producto obtenido en el Ejemplo 1 (1)	0,13 \pm 0,01
* Error estándar de la media

Como puede observarse en la Tabla, los dos compuestos ensayados poseen una actividad vasodilatadora potente, al menos similar a la del compuesto de referencia, y el compuesto 1 posee una actividad vasodilatadora superior a la del compuesto de referencia.

Ejemplo 9 Ensayo de tolerancia

Los diferentes compuestos ensayados se administran subcutáneamente a ratas en una dosis de 10 mg/kg, durante tres días, cada ocho horas, y el ensayo se lleva a cabo después ex vivo para ensayar la capacidad para vasodilatar los segmentos arteriales de las ratas después de la administración subcutánea del compuesto.

El método seguido es sustancialmente el mismo que se describe en las referencias bibliográficas siguientes:

\text{*}: De Garavilla, L., et al., Eur. J. Pharmacol. 1996, 313:89-96.

\text{*}: Keith, R.A., et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1982; 221:525-531.

Los diferentes compuestos se ensayan en 5 concentraciones diferentes, en un intervalo de concentraciones desde 0,001 a 10 mM, usando desde 6 a 9 anillos arteriales para cada compuesto. Los resultados obtenidos se comparan con los obtenidos con el 5-mononitrato de isosorbida, que se utiliza como producto de referencia, y con los obtenidos con los animales a los que no se ha administrado compuesto alguno.

Los resultados obtenidos, indicados también como CE_{50}, se exponen en la Tabla 2.

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TABLA 2

Ensayo de tolerancia
Compuesto	Animales sin administrar compuesto	Animales con compuesto administrado
	alguno durante tres días (Grupo A)	durante tres días (Grupo B) CE_{50}
	CE_{50} mM (media \pm SEM)	mM (media \pm SEM)
5-mononitrato de isosorbida	0,92 \pm 0,2	6,5 \pm 1,5
Producto obtenido en el	0,95 \pm 0,1	0,99 \pm 0,1
Ejemplo 5 (5)
Producto obtenido en el	0,13 \pm 0,01	0,59 \pm 0,1
Ejemplo 1 (1)

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Ha de entenderse que un compuesto desarrolla tolerancia cuando la CE_{50} del producto en los anillos vasculares de los animales que han sido sometidos a la administración del compuesto, según se ha especificado anteriormente, es superior a la CE_{50} del compuesto en los anillos vasculares de los animales que no han sido sometidos a la administración del compuesto.

\newpage

La CE_{50} del 5-mononitrato de isosorbida en el grupo de animales a los que se administró dicho compuesto, fue siete veces superior en comparación con la de los animales sin tratar.

\frac{CE_{50} \ Grupo \ B}{CE_{50} \ Grupo \ A} = 7,

lo que indica un desarrollo fuerte de tolerancia para el producto de referencia. Por el contrario, para los dos compuestos ensayados, 1 y 5, que forman parte del objeto de la invención, las CE_{50} obtenidas para ambos de ellos son significativamente inferiores, lo que indica un desarrollo de menos tolerancia en comparación con el producto de referencia; ha de hacerse notar que para el compuesto 5 el desarrollo de tolerancia es prácticamente nulo en estas condiciones de ensayo.

Claims

1. Compuestos que son derivados del mononitrato de isosorbida, y sus sales farmacéuticamente aceptables, que corresponden a la fórmula general (I) que sigue

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en la que A y B representan, individualmente, cualquiera de los grupos

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en los que Z es un átomo de oxígeno o un átomo de azufre, y R es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo, o el grupo

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en el que R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo;

con la estipulación de que

(a): uno de A o B es siempre -ONO_{2}, pero nunca ambos de ellos al mismo tiempo;

(b): cuando Z es un átomo de azufre, R es un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo arilo o un grupo aralquilo; y

(c): cuando Z es un átomo de oxígeno, R es el grupo

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en el que R^{1} representa los grupos anteriormente indicados.

2. Compuestos según la reivindicación 1, caracterizados porque cuando Z es un átomo de azufre, R es un grupo alquilo de cadena corta de C_{1}-C_{4} y cuando Z es un átomo de oxígeno, R^{1} es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de cadena corta de C_{1}-C_{4}.

3. Compuestos según las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizados porque B es el grupo -ONO_{2}.

4. El compuesto 2-(2'-etilto)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables.

5. El compuesto 5-(2'-etiltio)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables.

6. El compuesto 2-(2'-mercapto)nicotinato-5-mononitrato de isosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables.

7. El compuesto 5-(2'-mercapto)nicotinato-2-mononitrato de isosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables.

8. El compuesto 5-mononitrato de 2-acetilmercaptoisosorbida y sus sales farmacéuticamente aceptables.

9. Una composición farmacéutica que comprende, como ingrediente activo, uno o más de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o sus sales farmacéuticamente aceptables, junto, opcionalmente, con vehículos, excipientes, activadores, agentes quelantes y/o estabilizantes, fisiológicamente aceptables.

10. El uso de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o sus sales farmacéuticamente aceptables, para fabricar un medicamento con efecto vasodilatador, para el tratamiento de disfunciones del sistema circulatorio.

11. El uso, según la reivindicación 10, de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o sus sales farmacéuticamente aceptables, para fabricar un medicamento para el tratamiento de disfunciones cardiovasculares y coronarias.