ES2318141T3

ES2318141T3 - Compuestos de amida de acido 3-amino-tieno(2,3-b)piridina-2-carboxilico y procedimiento de preparacion y sus usos.

Info

Publication number: ES2318141T3
Application number: ES03736796T
Authority: ES
Inventors: Ch.L. Boehringer Ingelheim Pharm. Inc. CYWIN; Z. Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc CHEN; Jonathan Emeigh; R.W. Boehringer Ingelheim Pharm. Inc. FLECK; M. Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc HAO; E. Boehringer Ingelheim Pharmac. Inc. HICKEY; W. Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. LIU; D.R. Boehringer Ingelheim Pharm. Inc. MARSHALL; Tina M Morwick; P. Boehringer Ingelheim Pharmaceut. Inc. NEMOTO; R.J. Boehringer Ingelheim Pharmaceut. Inc SORCEK; S. Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc SUN; J. Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. WU
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2002-06-06
Filing date: 2003-06-03
Publication date: 2009-05-01
Anticipated expiration: 2023-06-03
Also published as: AR040250A1; HK1080737A1; DE60325051D1; US20050288285A1; EP1513516A1; EP1513516B1; JP2005530816A; PE20040539A1; BR0311605A; EA200401541A1; WO2003103661A1; NO20044599L; EA008706B1; DK1513516T3; TWI296927B; US20040053957A1; KR20050005548A; AU2003237330A1; US7405225B2; CN100386329C

Abstract

Un compuesto de fórmula (I):**ver fórmula** en la cual R1 es (a) fenilo o heteroarilo seleccionado entre furanilo, tienilo, piridilo, pirrolilo, imidazolilo y benzofuranilo, opcionalmente sustituidos con uno a dos R3, (b) R 6(CH 2) mO-, (c) R6OCH2-, (d) R6(CH2)mNH-, (e) R 6(CH 2) p(CH=CH) m-, (f) alquilo C1-6, opcionalmente parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R9, (g) alcoxi C1-8, opcionalmente parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R9, (h) -N(R 4)(R 5), o R2 (a) alquilo C1-6, opcionalmente sustituido con R10, (b) alcoxi C 1-6, opcionalmente sustituido con R 10, (c) alquilamino C1-6, opcionalmente sustituido con R10, (d) heterociclilo, seleccionado entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo, 1-pirrolidinilo, 1,4-diazacicloheptan-1-ilo, 1-azepanilo, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-ilo, oxazepan-4-ilo y 4-tiomorfolino y está opcionalmente sustituido con uno o tres R7, (e) heterociclil-CH 2O- en donde el heterociclilo se selecciona entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo y 1-pirrolidinilo, opcionalmente sustituidos con alquilo C1-6, o (f) -N(R 4)(R 5), R 3 se escoge entre alquilo C 1-6, alcoxi C 1-6, hidroxi-alquilo C 1-6, halógeno, -CN, -CO 2H, -CO 2-alquilo C 1-6, -S(O)n-alquilo C1-6, -NO2, -OH, -CF3, -N(R4)(R5), -NHC(O)NH-alquilo C1-6, -C(O)N(R4)(R5) y fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo C1-6, -CN o alcoxi C1-6; R4 y R5 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1-6, piridilo, bencilo, piperidinilo y feniletilo; R 6 es un grupo fenilo opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados entre Cl, F, alquilo C 1-6, -CN, -CO 2-alquilo C 1-6, -C(O)NR 4R 5, -SO 2NH 2, -NO 2, -OH, -NH 2, -CF 3 y alcoxi C 1-6, o R 6 es cicloalquilo C 3-6, -CH2OH, naftalen-2-ilo, naftalen-1-ilo ó 2-tienilo; R7 se selecciona entre -OH, -CN, oxo, -CO2alquilo C1-6, -CO2H, -C(O)N(R4)(R5), -N(R4)(R5), -CH2N(R4)(R5), -CH2OH, alquilo C1-6, -C(O)-alquil C1-6N(R4)(R5), -NHC(O)N(R4)(R5), -S(O)nalquilo C1-6, H2NCH(R8)C(O)-, HO(CH2)mCH2CH(NH2)C(O)-, HOCH(R6)CH2NH- y -C(O)heterociclilo, en donde dicho heterociclilo se selecciona entre piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo y pirrolidinilo, o R 7 is 2-hidroxietilamino, metilcarbamidoilo, hidroxiimino, hidrazinocarbonilo, sulfamoilo, metanosulfonilamino, metilsulfonilhidrazino, 2-hidroxipropilamino, 2,3-dihidroxipropilamino, 2-hidroxi-1-metiletilamino, carbamoilmetilamino, N''-fenilhidrazinocarbonilo o tolueno-4-sulfonilamino; R8 se selecciona entre alquilo C1-6, -(CH2)1-4NH2, fenilo o bencilo; R9 es -OH; R10 se selecciona entre -OH, -N(R4)(R5), alcoxi C1-6 y heteroarilo, seleccionado entre furanilo, tienilo y piridilo; m es 0 ó 1; n es 0, 1 ó 2; y p es 0, 1, 2 ó 3; y sus sales, ésteres, tautómeros, isómeros individuales y mezclas de isómeros farmacéuticamente aceptables; con la condición de que si R1 es fenilo o heteroarilo, alquilo C1-6, -CF3, entonces R2 no es alquilo C1-6.

Description

Compuestos de amidas de ácido 2-amino-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico y procedimiento de preparación y sus usos.

Esta solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/386.312, presentada el 6 de junio de 2002 y de la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/457.867, presentada el 26 de marzo de 2003.

Campo técnico de la invención

Esta invención se refiere a compuestos de amidas de ácido 3-amino-tieno[2,3-b]piridino-2-carboxílico sustituido útiles como inhibidores de la actividad de quinasa del complejo de quinasa I\kappaB (IKK). Por lo tanto, los compuestos son útiles en el tratamiento de enfermedades mediadas por IKK que incluyen enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias y cáncer. La invención se refiere también a procedimientos para preparar estos compuestos y composiciones farmacéuticas que los comprenden.

Antecedentes de la invención

El NF-\kappaB o factor nuclear \kappaB es un factor de transcripción que induce la expresión de un elevado número de genes pro-inflamatorios y anti-apoptóticos. Estos incluyen citoquinas como IL-1, IL-2, TNF-\alpha e IL-6, quimioquinas que incluyen IL-8 y RANTES, así como otras moléculas pro-inflamatorias que incluyen COX-2 y moléculas de adhesión celular como ICAM-1, VCAM-1 y E-selectina. La familia del NF-\kappaB incluye factores de transcripción homo- y hetero-dímeros compuestos por miembros de la familia Rel (véase, por ejemplo, P.A. Baeurle y D. Baltimore, Cell, 1996, 87, 13). Bajo condiciones de reposo, el NF-\kappaB está presente en el citosol de las células en forma de un complejo con I\kappaB. La familia de I\kappaB de proteínas sirve como inhibidores de NF-\kappaB, interfiriendo con la función de su señal de localización nuclear (véase, por ejemplo, U. Siebenlist et al., Ann. Rev. Cell Biol., 1994, 10, 405). Tras la descomposición del complejo I\kappaB-NF-\kappaB a continuación de la activación celular, el NF-\kappaB se desplaza al núcleo y activa la transcripción génica.
La descomposición del complejo I\kappaB-NF-\kappaB y la posterior activación del NF-\kappaB es iniciada por la degradación de I\kappaB.

Tras la activación celular mediante una diversidad de estímulos pro-inflamatorios que incluyen IL-1, TNF-\alpha y LPS (lipopolisacárido bacteriano), dos residuos específicos de serina de I\kappaB son fosforilados. Tras la fosforilación, el I\kappaB experimenta una poliubiquinación y una posterior degradación por la 26S proteasoma (véase, por ejemplo, V.J. Palombella et al., Cell, 1994, 78, 773), eximiendo al NF-\kappaB de trasladarse al núcleo. La fosforilación de I\kappaB se lleva a cabo por las quinasas de I\kappaB (véase, por ejemplo, un estudio de M. Karin y M. Delhase, Seminars in Immunology, 2000, 12, 85). El complejo de IKK tradicional incluye al menos tres subunidades, IKK\alpha (también denominada IKK-1), IKK\beta (o IKK-2) e IKK\gamma (o NEMO), aunque pueden existir otros complejos relevantes que incluyen IKK\alpha e IKK\beta. Los IKK\alpha e IKK\beta son ambos subunidades catalíticas mientras que el IKK\gamma se cree que es una subunidad reguladora. Tanto el IKK\alpha como el IKK\beta pueden fosforilar el I\kappaB. Para los fines de este documento, los términos IKK o complejo de IKK se refieren a cualquier complejo que tenga actividad de quinasa derivada de las subunidades IKK\alpha y/o IKK\beta.

In vivo, la activación de IKK se produce tras la fosforilación de su subunidad catalítica. Tanto el IKK\alpha como el IKK\beta pueden ser fosforilados sobre residuos de serina, S177 y S188 del bucle de activación en el caso de IKK\beta, y S176 y S180 del bucle de activación de IKK\alpha. Un mutante de IKK\beta que tiene alaninas en lugar de serinas en 177 y 181 evitó la fosforilación de IKK\beta y la posterior activación del complejo de IKK por TNF\alpha, IL-1 y otros activadores aguas arriba. Estos resultados apoyan una función clave para el IKK\beta en la fosforilación de I\betaB a continuación de la estimulación proinflamatoria.

Los estudios en los que la trayectoria de NF-\kappaB ha sido inhibida en células y animales apoyan el concepto de que la inhibición de la fosforilación de I\betaB es una aproximación viable para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, autoinmunes y otras. En estos estudios, la activación de NF-\kappaB se evitó mediante la expresión de una versión no degradable de la proteína I\betaB. La expresión de este inhibidor en células sinoviales derivadas de pacientes con artritis reumatoide redujo la expresión de TNF-\alpha, IL-6, IL-1\beta e IL-8 mientras que las moléculas anti-inflamatorias IL-10, IL-1ra e IL-11 no se vio afectada. Las metaloproteinasas de matriz (MMP1 y MMP3) fueron también infra-reguladas (J. Bonderson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999, 96, 5668). La expresión transgénica del inhibidor de I\kappaB en células T provocó una reducción significativa en la gravedad y aparición de artritis inducida por colágeno en ratones (R. Seetharaman et al., J. Immunol. 1999, 163, 1577). Estos experimentos indican que la supresión del NF-\kappaB en la articulación enferma podría reducir tanto la gravedad como el progreso de RA. En células epiteliales intestinales primarias, el inhibidor de NF-\kappaB bloqueó la expresión de IL-1, IL-8, iNOS y COX-2, mediadores que son sobre-regulados durante el transcurso de la enfermedad de inflamación intestinal (C. Jubin et al., J. Immunol., 1998, 160, 410). La expresión de este inhibidor en ciertas células tumorales aumenta la destrucción de estas células por reactivos quimioterapéuticos (A.A. Beg y D. Baltimore, Science, 1996, 274, 782).

Un análisis de biopsias de pulmones de pacientes con enfermedad de obstrucción pulmonar crónica (COPD) encontró una expresión aumentada de NF-\kappaB que se correlacionaba con la gravedad de la enfermedad (A. Di Stefano et al., Eur. Resp. J. 2002, 1, 437). La inhibición de la activación de NF-\kappaB con inhibidores de IKK-\beta estuvo entre las aproximaciones anti-inflamatorias que se informó que eran potencialmente útiles en el tratamiento de la COPD (P.J. Barnes, Nature Rev. Drug Disc., 2002, 1, 437). Análogamente, la inhibición de la actividad de NF-\kappaB ha sido mencionada como una aproximación terapéutica para el asma (A. Pahl e I. Szelenyi, Infl. Res., 2002, 51, 273).

Un reciente estudio describe la función esencial de los mediadores inflamatorios en el desarrollo de la enfermedad cardiovascular. Los mediadores inflamatorios y las células que reclutan se describe que desempeñan una función clave en el desarrollo de líneas y placas grasas que conducen a la aterosclerosis. Además, se describe que desempeñan una función clave en la posterior degradación del saliente fibroso que se forma sobre la placa, conduciendo a la ruptura y la formación de un coágulo. Si el coágulo crece y se hace suficientemente grande, puede conducir la infarto de miocardio o apoplejía. Por tanto, los fármacos anti-inflamatorios que pueden inhibir la producción de estos mediadores y el posterior reclutamiento y activación de estas células pueden ser ventajosos en el tratamiento de estas enfermedades (L. Libby, Scientific American, 2002, 46).

Un cierto número de estudios indica que la activación de NF-\kappaB desempeña también una función clave en la patogénesis y desarrollo del cáncer (véanse, por ejemplo, los estudios de B. Haefner, Drug Disc.Today, 2002, 7, 653 y M. Karin et al., Nat. Rev. Cancer, 2002, 2, 301). Los estudios han mostrado que las células en las que el NF-\kappaB es constitutivamente activo son resistentes a la apoptosis. Esto puede contribuir a la carcinogénesis previniendo la muerte celular en las células que han experimentado cambios o deterioro cromosomales. Además, las células tumorales con NF-\kappaB constitutivamente activo son resistentes a las terapias anti-cancerígenas, incluidas la quimioterapia y radiación. Unos estudios adicionales han vinculado el NF-\kappaB activado a una diversidad de enfermedades malignas derivadas de células linfoides, mieloides y epiteliales, incluidos leucemia, linfomas y cánceres de pecho, gástrico, colorrectal, de pulmón y pancreático. Por tanto, se sugiere que los inhibidores de NF-\kappaB, incluidos los inhibidores de IKK\alpha e IKK\beta, pueden ser útiles solos o en combinación con otras terapias anti-cancerígenas para tratar el
cáncer.

Colectivamente, los estudios anteriormente descritos proporcionan un apoyo en cuanto a que la inhibición de la función de NF-\kappaB a través de la inhibición de IKK puede ser una aproximación terapéutica útil para el tratamiento de una enfermedad autoinmune e inflamatoria, una enfermedad cadiovascular y el cáncer.

Se han hecho también estudios en ratones con la ruptura dirigida a diana del gen del IKK. La desactivación del gen de IKK\beta dio lugar a una mortalidad embriónica debida a la apoptosis de hepatocitos. Sin embargo, los fibroblastos de las desactivaciones de IKK\beta no experimentaron activación de IKK y NF-\kappaB tras una estimulación con IL-1 o TNF\alpha (Q. Li et al., Science, 1999, 284, 321), apoyando una función clave para el IKK\beta y la activación de NF-\kappaB a continuación de estímulos inflamatorios.

Se generó una desactivación condicional expresando un transgen de I\kappaB\alpha negativo, dominante, inducible y específico para el hígado (I. Lavon et al., Nature Medicine, 2000, 6, 573). Estos ratones fueron viables sin indicios de disfunción hepática incluso después de un año, pero tuvieron la función inmune deteriorada. Este estudio apoya la idea de que la inhibición de IKK\beta puede dar lugar a la supresión inmune sin deterioro del hígado.

Los ratones con desactivación de IKK\alpha murieron poco después de nacer y exhibieron una diversidad de defectos del esqueleto y anormalidades en la piel. Los fibroblastos y timocitos de estos ratones mostraron una activación de IKK normal y degradación de I\kappaB en respuesta a TNF\alpha, IL-1 o LPS (Y. Hu et al., Science, 1999, 284, 316); K. Takeda et al., Science, 1999, 284, 313). Unos estudios recientes con ratones desactivados y activados han puesto de manifiesto las distintas funciones de IKK\alpha en el desarrollo y la señalización celular. En contraste con los estudios con ratones de IKK\alpha desactivado, los ratones que tenían una versión inactiva de quinasa de IKK\alpha activada eran viables y fértiles, indicando que la mortalidad perinatal y las anormalidades observadas en ratones desactivados con IKK\alpha no eran debidas a la falta de actividad de quinasa. Sin embargo, estos ratones tenían defectos en la maduración de células B y el desarrollo de órganos linfoides secundarios (U. Senftleben et al., Science, 2001, 293, 1495). Este fenotipo parece ser debido a un defecto en el tratamiento de la proteína de NF-\kappaB2/p100 para p52, la forma de unión a DNA de este miembro de la familia Rel de factores de transcripción. A su vez, esto conduce a un defecto en la activación de un subconjunto de genes diana de NF-\kappaB en células B. Además, otros estudios con estos mismos ratones han mostrado que la actividad de IKK\alpha-quinasa es necesaria para la activación del NF-\kappaB en el epitelio de los mamíferos durante la preñez (Cao, Y., et al., Cell, 2001, 107, 763). Esta trayectoria es específicamente activada a través del miembro de la familia de receptores de TNF RANK, y requiere la fosforilación del I\kappaB\alpha del sustrato de IKK canónico, y culmina con la inducción del gen regulador del ciclo celular Ciclina D1.

Estos estudios indican que un inhibidor de la actividad de IKK\alpha-quinasa puede ser útil para tratar enfermedades asociadas con una activación inapropiada de células B como lupus (O.T. Chan et al., Immunological Res., 1999, 169, 107) y artritis reumatoide (A. Gause y C. Borek, Biodrugs, 2001, 15, 73). Además, un inhibidor de IKK\alpha puede ser útil en el tratamiento del cáncer de mama, ya que el NF-\kappaB es constitutivamente activo en un cierto número de tumores de mamas y muchos de estos tumores dependen de la ciclina D1 para la proliferación.

Se han descrito algunos inhibidores de IKK\beta. Los documentos WO 01/58890 y WO 03/037886 describen derivados de carboxamidas heteroaromáticas como inhibidores de IKK\beta. El documento WO 01/68648 describe \beta-carbolinas sustituidas que tienen actividad inhibidora de IKK\beta. Se describen indoles sustituidos que tienen actividad inhibidora de IKK\beta en el documento WO 01/30774. El documento WO 01/00610 describe bencimidazoles sustituidos que tienen actividad inhibidora deNF-\kappaB. La aspirina y los salicilatos se ha descrito que se unen a IKK\beta y lo inhiben (M. Yin et al., Nature, 1998, 396, 77).

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Se describen tienopiridinas sustituidas que tienen actividad inhibidora de la adhesión celular en el documento US 2001/0020030 A1 y por A.O. Stewart et al., J. Med. Chem., 2001, 44, 988. Se describen tienopiridinas que exhiben actividad antagonizante de hormonas liberadoras de gonadotropinas en el documento US 6.313.301. Se describen tienopiridinas sustituidas como inhibidores de telomerasa en el documento US 5.656.638.

Se ha descrito un cierto número de amidas de ácido tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico 4,6-disustituidas en la bibliografía química. Ejemplos incluyen amida de ácido 3-amino-4,6-dimetil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, diamida de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico, 3-amino-4-metil-6-fenil-tieno[2,3-b]-piridina-2-carboxamida, amida de ácido 3-amino-6-metil-4-fenil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-6-(4-bromo-fenil)-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-bromo-fenil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, 2-amida-4-butilamida de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico, amida de ácido 3-amino-6-furan-2-il-4-fenil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-6-furan-2-il-4-piridin-3-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-cloro-fenil)-6-fenil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-fluoro-fenil)-6-furan-2-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-cloro-fenil)-6-furan-2-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-bromo-fenil)-6-furan-2-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4,6-bis-(4-cloro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-6-nafth-2-il-4-piridin-3-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, 2-amida-4-(2-hidroxietil)amida de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico, 3-amino-6-metil-4-piperidin-1-il-tieno[2,3-b]-piridina-2-carboxamida y 3-amino-4-metil-6-hidroxi-tieno[2,3-b]-piridina-2-carboxamide descritos como intermedios para la síntesis de heterociclos tricíclicos y evaluados en cuanto a la actividad anti-alérgica (G. Wagner et al., Pharmazie, 1990, 45, 102).

Otros ejemplos incluyen amida de ácido 3-amino-4,6-difenil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (A.M. Shestopalov et al ., J. Org. Chem. USSR, (Traducc. Ingl.) 1984, 20, 1382), amida de ácido 3-amino-6-metil-4-piridin-4-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico y amida de ácido 3-amino-6-metil-4-piridin-3-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (G. Wagner et al., Pharmazie, 1993, 48, 514), amida de ácido 3-amino-4-metoximetil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (E.I. Kaigorodova et al., Chem. Heterocicl. Compd. (Traducc. Ingl.), 1996, 32, 1234), amida de ácido 3-amino-6-fenil-4-tiofen-2-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-furan-2-il-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico, amida de ácido 3-amino-4-(4-cloro-fenil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico y amida de ácido 3-amino-4-furan-2-il-6-fenil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (F.A. Attaby, Phosphorus, Sulfur, Silicon Relat. Elem.,1998, 139, 1), amida de ácido 3-amino-6-(4-cloro-fenil)-4-tiofen-2-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (Y. Sharanin et al., J. Org. Chem. USSR, (Traducc. Ingl.) 1996, 32, 1207), amida de ácido 3-amino-6-fenil-4-piridin-3-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (A. Krauze, Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther., 1999, 34, 301) y amida de ácido 3-amino-6-tiofen-2-il-4-trifluorometil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (M.I. Abdel-Monem et al., Pharmazie, 2001, 56, 41).

En ningún caso se describen estos compuestos por tener la capacidad de inhibir IKK\alpha o IKK\beta.

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Sumario de la invención

Por lo tanto, es un objeto de esta invención proporcionar nuevos compuestos según la siguiente fórmula (I):

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1

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en la que las variables R_{1} y R_{2} se describen en la presente memoria descriptiva que inhiben IKK. Es un objeto adicional de la invención proporcionar métodos para tratar enfermedades y estados patológicos exacerbados por IKK como, pero sin limitación, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias y cáncer. Es todavía un objeto adicional de la invención proporcionar nuevos procedimientos para la preparación de los nuevos compuestos anteriormente mencionados.

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Descripción detallada de la invención

Un primer aspecto de la invención comprende un método para tratar un estado inflamatorio o autoinmune mediante la administración de ciertas moléculas nuevas y conocidas de fórmula (I):

2

en la cual:

R_{1} es

(a): fenilo o heteroarilo seleccionado entre furanilo, tienilo, piridilo, pirrolilo, imidazolilo y benzofuranilo, opcionalmente sustituidos con uno a dos R_{3},

(b): R_{6}(CH_{2})_{m}O-,

(c): R_{6}OCH_{2}-,

(d): R_{6}(CH_{2})_{m}NH-,

(e): R_{6}(CH_{2})_{p}(CH=CH)_{m}-,

(f): alquilo C_{1-6}, opcional, parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R_{9},

(g): alcoxi C_{1-8}, opcional, parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R_{9},

(h): -N(R_{4})(R_{5}), o

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R_{2} es

(a): alquilo C_{1-6} opcionalmente sustituido con R_{10},

(b): alcoxi C_{1-6}, opcionalmente sustituido con R_{10},

(c): alquilamino C_{1-6}, opcionalmente sustituido con R_{10},

(d): heterociclilo, seleccionado entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo, 1-pirrolidinilo, 1,4-diazacicloheptan-1-ilo, 1-azepanilo, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-ilo, oxazepan-4-ilo y 4-tiomorfolino y está opcionalmente sustituido con uno a tres R_{7},

(e): heterociclil-CH_{2}O-, en el que el heterociclilo se selecciona entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo y 1-pirrolidinilo, opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-6}, o

(f): -N(R_{4})(R_{5}),

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\quad: R_{3} se escoge entre alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, halógeno, -CN, -CO_{2}H, -CO_{2}-alquilo C_{1-6}, -S(O)_{n}-alquilo C_{1-6}, -NO_{2}, -OH, -CF_{3}, -N(R_{4})(R_{5}), -NHC(O)NH-alquilo C_{1-6}, -C(O)N(R_{4})(R_{5}) y fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo C_{1-6}, -CN o alcoxi C_{1-6};

\quad: R_{4} y R_{5} se seleccionan independientemente entre H, alquilo C_{1-6}, -C(O)-alquilo C_{1-6}, piridilo, bencilo, piperidinilo y feniletilo;

\quad: R_{6} es un grupo fenilo opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados entre Cl, F, alquilo C_{1-6}, -CN, -CO_{2}-alquilo C_{1-6}, -C(O)NR_{4}R_{5}, -SO_{2}NH_{2}, -NO_{2}, -OH, -NH_{2}, -CF_{3} y alcoxi C_{1-6}, o R_{6} es cicloalquilo C_{3-6}, -CH_{2}OH, naftaleno-2-ilo, naftaleno-1-ilo ó 2-tienilo;

\quad: R_{7} se selecciona entre -OH, -CN, oxo, -CO_{2}alquilo C_{1-6}, -C(O)N(R_{4})(R_{5}), -N(R_{4})(R_{5}), -CH_{2}N(R_{4})(R_{5}), -CH_{2}OH, alquilo C_{1-6}, -C(O) alquil C_{1-6}N(R_{4})(R_{5}), -NHC(O)N(R_{4})(R_{5}), -S(O)_{n}alquilo C_{1-6}, H_{2}NCH(R_{8})C(O)-, HO (CH_{2})_{m}CH_{2}CH(NH_{2})C(O)-, HOCH(R_{6})CH_{2}NH- y -C(O)heterociclilo, en donde dicho heterociclilo se selecciona entre piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo y pirrolidinilo, o R_{7} es 2-hidroxietilamino, metilcarbamimidoilo, hidroxiimino, hidrazinocarbonilo, sulfamoilo, metanosulfonilamino, metilsulfonilhidrazino, 2-hidroxipropilamino, 2,3-dihidroxipropilamino, 2-hidroxi-1-metiletilamino, carbamoilmetilamino, N'-fenilhidrazinocarbonilo o tolueno-4-sulfonilamino;

\quad: R_{8} se selecciona entre alquilo C_{1-6}, -(CH_{2})_{1-4}NH_{2}, fenilo o bencilo;

\quad: R_{9} es -OH;

\quad: R_{10} se selecciona entre -OH, -N(R_{4})(R_{5}), alquilo C_{1-6} y heteroarilo seleccionado entre furanilo, tienilo y piridilo;

\quad: m es 0 ó 1;

\quad: n es 0, 1 ó 2;

\quad: p es 0, 1, 2 ó 3;

y sus sales, ésteres, tautómeros, isómeros individuales y mezclas de isómeros farmacéuticamente aceptables;

con la condición de que si R_{1} es fenilo o heteroarilo, alquilo C_{1-6}, -CF_{3}, entonces R_{2} no es alquilo C_{1-6}. En el primer aspecto de la invención relacionado con un método para tratar un estado inflamatorio o autoinmune con compuestos de fórmula (I), esta condición no se aplica.

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(Tabla pasa a página siguiente)

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En una realización adicional de la invención, se proporcionan los siguientes compuestos:

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y sus sales, ésteres, tautómeros, isómeros individuales y mezclas de isómeros farmacéuticamente aceptables.

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Para todos los compuestos descritos en esta solicitud, en el caso de que la nomenclatura esté en conflicto con la estructura, debe entenderse que el compuesto está definido por la estructura.

En otra realización de la invención, se proporcionan los siguientes compuestos:

Amida de ácido 3-amino-6-(4-oxo-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-4-ciano-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-metanosulfonil-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-metilsulfanil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-((E)-estiril)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-nitro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[1,4]diazepan-1-il-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2,4-diamino-butanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-[(E)-2-(4-metoxi-fenil)-vinil]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(2-aminometil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-trifluorometil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-piperazin-1-il-4-trifluorometil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-((E)-2-p-tolil-vinil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2,3-dihidroxi-propilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-((E)-2-m-tolil-vinil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

éster metílico de ácido 4-[3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-il]-benzoico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2-hidroxi-2-fenil-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-piperidin-4-il-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(2,5-difluoro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-((S)-2-hidroxi-2-fenil-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-((R)-2-hidroxi-2-fenil-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-nitro-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(3-hidroxi-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-hidroxi-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-azepan-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-3-hidroxi-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(2,4-difluoro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-ciano-3-fluoro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-isopropoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-trifluorometil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-amino-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-metoxi-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-cloro-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-(4-metanosulfonil-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

éster metílico de ácido 4-{2-[1-(3-amino-2-carbamoil-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperidin-4-ilamino]-1-hidroxi-etil}-benzoico;

amida de ácido 3-amino-4-(4-ciano-3-fluoro-fenil)-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-etoxi-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-propil-6-(4-ureido-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-((S)-3,4-dihidroxi-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-metilsulfanil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-(3-hidroxi-propil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-carbamoil-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

2-amida-4-piridin-3-ilamida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridin-2,4-dicarboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2-hidroxi-2-naftalen-2-il-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2-hidroxi-2-naftalen-1-il-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

éster metílico de ácido 3-{2-[1-(3-amino-2-carbamoil-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperidin-4-ilamino]-1-hidroxi-etil}-benzoico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-4-metil-piperidin-1-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-metilcarbamoil-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-dimetilcarbamoil-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno
[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-bencilcarbamoil-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(3-carbamoil-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

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La invención incluye los derivados farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I). Un "derivado farmacéuticamente aceptable" se refiere a cualquier ácido, sal o éster farmacéuticamente aceptable de un compuesto de esta invención, y cualquier otro compuesto que, tras ser administrado a un paciente, sea capaz de proporcionar (directa o indirectamente) un compuesto de esta invención o un metabolito farmacológicamente activo o residuo farmacológicamente activo del mismo.

Sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen las derivadas de ácidos y bases inorgánicos y orgánicos farmacéuticamente aceptables. Ejemplos de ácidos adecuados incluyen los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, láctico, salicílico, succínico, tolueno-p-sulfónico, tartárico, acético, cítrico, metanosulfónico, fórmico, benzoico, malónico, naftaleno-2-sulfónico y bencenosulfónico. Otros ácidos, como el ácido oxálico, aunque no son en sí farmacéuticamente aceptables, pueden ser empleados en la preparación de sales útiles como intermedios para obtener los compuestos de esta invención y sus sales por adición de ácidos farmacéuticamente aceptables. Sales derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metales alcalinos (por ejemplo, sodio), metales alcalino-térreos (por ejemplo, magnesio), amonio y N-(alquilo
C_{1}-C_{4})_{4}^{+}.

Además, los compuestos de esta invención incluyen profármacos de compuestos de fórmula (I). Los profármacos incluyen los compuestos que, tras una transformación sencilla, son modificados para producir los compuestos de la invención. Transformaciones químicas sencillas incluyen hidrólisis, oxidación y reducción que se producen de forma enzimática, metabólica o de alguna otra forma. Específicamente, cuando un profármaco de esta invención es administrado a un paciente, el profármaco puede ser transformado en un compuesto de fórmula (I), confiriendo así el efecto farmacológico deseado.

Cualquiera de los compuestos de esta invención que contenga uno o más átomos de carbono asimétricos se puede producir en forma de racematos y mezclas racémicas, enantiómeros individuales, mezclas diastereómeras y diastereómeros individuales. Todas estas formas isométricas de estos compuestos están expresamente incluidas en la presente invención. Cada átomo de carbono estereogénico puede estar en la configuración R o S, o una combinación de las configuraciones.

Algunos de los compuestos de la invención puede existir en más de una forma tautómera. La invención incluye todos estos tautómeros.

Los compuestos de la invención son solamente los que están contemplados que sean "químicamente estables" como se apreciará por los expertos en la técnica. Por ejemplo, un compuesto que tenga una "valencia cambiante" o un "carbanión" no son compuestos contemplados por la invención.

En la presente memoria descriptiva se usan las siguientes abreviaturas:

DMF es dimetilformamida;

DMSO es dimetil-sulfóxido;

EtOAc es acetato de etilo;

EtOH es etanol;

HPLC es cromatografía líquida de alta resolución;

MeOH es metanol;

THF es tetrahidrofurano;

TLC es cromatografía de capa fina.

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Los términos que no estén específicamente definidos en la presente memoria descriptiva deben adoptar los significados que se les daría por un experto en la técnica teniendo en cuenta la descripción y el contexto. Por ejemplo, "alcoxi C_{1-6}" es un alquilo C_{1-6} con un oxígeno terminal, como metoxi, etoxi, propoxi, pentoxi y hexoxi. Todos los grupos alquilo, alquileno o alquinilo debe entenderse que están ramificados o sin ramificar salvo que se especifique otra cosa. Otras definiciones más específicas son como sigue:

El término "alquilo" se refiere a un radical alifático saturado que contiene de uno a diez átomos de carbono o un radical hidrocarbonado alifático mono- o poli-insaturado que contiene de dos a doce átomos de carbono, salvo que se establezca otra cosa. El radical alifático mono- o poli-insaturado contiene al menos un enlace doble o triple, respectivamente. "Alquilo" se refiere a grupos alquilo tanto ramificados como sin ramificar. Ejemplos de "alquilo" incluyen grupos alquilo que son grupos alquilo de cadena lineal que contienen de uno a ocho átomos de carbono y grupos alquilo ramificados que contienen de tres a diez átomos de carbono. Otros ejemplos incluyen grupos alquilo inferior que son grupos alquilo de cadena lineal que contienen de uno a seis átomos de carbono y grupos alquilo ramificados que contienen de tres a seis átomos de carbono. Debe entenderse que cualquier término de combinación que use los prefijos "alk" o "alquilo" se refiere a análogos según la definición anterior de "alquilo". Por ejemplo, términos como "alcoxi", "alquiltio" se refieren a grupos alquilo unidos a un segundo grupo a través de un átomo de oxígeno o azufre. "Alcanoilo" se refiere a un grupo alquilo unido a un grupo carbonilo (C=O). Cada alquilo o análogo de alquilo descrito en la presente memoria descriptiva debe entenderse que está de forma opcional parcial o completamente halogenado.

El término "cicloalquilo" se refiere al análogo cíclico de un grupo alquilo, como se definió anteriormente. Ejemplos de grupos cicloalquilo son grupos cicloalquilo no aromáticos saturados o insaturados que contienen de tres a ocho átomos de carbono, y otros ejemplos incluyen grupos cicloalquilo que tienen tres a seis átomos de carbono.

El término "heterocicloalquilo" se refiere a un radical heterocíclico estable monocíclico de 4-8 miembros (pero preferentemente de 5 ó 6 miembros) o bicíclico de 8-11 miembros, que puede estar saturado o insaturado, y que es no aromático. Cada heterociclo consiste en átomos de carbono y de 1 a 4 heteroátomos escogidos entre nitrógeno, oxígeno y azufre. El heterociclo puede estar unido por cualquier átomo del ciclo que de lugar a la creación de una estructura estable. Ejemplos de "heterocicloalquilo" incluyen radicales como pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, azetidinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidrofuranilo, hexahidropirimidinilo, hexahidropiridazinilo, dihidro-oxazolilo, 1,2-tiazinanil-1,1-dióxido, 1,2,6-tiadiazinanil-1,1-dióxido, isotiazolidinil-1,1-dióxido e imidazolidinil-2,4-diona.

El término "halógeno" se refiere a bromo, cloro, flúor o yodo.

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El término "arilo" debe entenderse que significa un carbociclo aromático de 6-12 miembros, que puede ser un anillo único o puede ser de múltiples anillos conjuntamente condensados o unidos covalentemente. El término "arilo" incluye, por ejemplo, fenilo y naftilo; y otros términos que comprenden "arilo" tendrán la misma definición para el componente de arilo, y ejemplos de estos restos incluyen: arilalquilo, ariloxi o ariltio.

El término "heteroarilo" se refiere a un radical heterocíclico aromático estable monocíclico de 5-8 miembros (pero preferentemente de 5 ó 6 miembros) o bicíclico de 8-11 miembros. Cada heterociclo consiste en átomos de carbono y de 1 a 4 heteroátomos escogidos entre nitrógeno, oxígeno y azufre. El grupo heteroarilo puede estar unido por cualquier átomo del anillo que dé lugar a la creación de una estructura estable. Ejemplos de "heteroarilo" incluyen radicales como furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo, benzofuranilo, benzotienilo, indazolilo, bencimidazolilo, benztiazolilo, benzoxazolilo, purinilo, quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo, pteridinilo, carbazolilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo y fenoxazinilo.

Los términos "opcional" u "opcionalmente" significan que el acontecimiento o circunstancias posteriormente descritos pueden ocurrir o no ocurrir, y que la descripción incluye los casos en que el acontecimiento o circunstancia se produce y los casos en que no se produce. Por ejemplo, "arilo opcionalmente sustituido" significa que el radical arilo puede estar o no estar sustituido y que la descripción incluye tanto los radicales arilo sustituidos como los radicales arilo que no tienen ninguna sustitución.

El término "sustituido" significa que uno o más átomos de hidrógeno o un átomo de un grupo o resto, tanto si se designa específicamente como si no, está sustituido con una selección del grupo de sustituyentes indicado, con la condición de que la valencia normal de los átomos no se sobrepasa y que la sustitución dé lugar a un compuesto estable. Si un enlace a un sustituyente es mostrado de forma que cruza el enlace que conecta dos átomos en un anillo, entonces cada sustituyente puede estar unido a cualquier átomo en el anillo. Cuando un sustituyente es citado sin indicar el átomo a través del cual este sustituyente está unido al resto del compuesto, entonces este sustituyente puede estar unido a través de cualquier átomo en este sustituyente. Por ejemplo, cuando el sustituyente es piperazinilo, piperidinilo o tetrazolilo, salvo que se especifique otra cosa, este grupo piperazinilo, piperidinilo o tetrazolilo puede estar unido al resto del compuesto de la invención a través de cualquier átomo en este grupo piperazinilo, piperidinilo o tetrazolilo. Generalmente, cuando cualquier sustituyente o grupo se produce más de una vez en cualquier constituyente o compuesto, su definición en cada aparición es independiente de su definición en cualquier otra aparición. Por tanto, por ejemplo, si un grupo se muestra que está sustituido con 0 a 2 R, entonces este grupo está opcionalmente sustituido con hasta dos grupos R y R en cada aparición se selecciona independientemente entre la lista definida de posibles R. Estas combinaciones de sustituyentes y/o variables, sin embargo, es permisible sólo si estas combinaciones dan lugar a compuestos estables.

Como se usan en la presente memoria descriptiva con anterioridad y en toda esta solicitud, "nitrógeno" y "azufre" incluyen cualquier forma oxidada de nitrógeno y azufre y la forma cuaternizada de cualquier nitrógeno básico.

Métodos de uso terapéutico

De acuerdo con la invención, se proporcionan nuevos métodos para usar los compuestos de fórmula (I). Los compuestos de la invención son eficaces para inhibir la actividad de IKK\beta y/o IKK\alpha. En particular, estos compuestos son útiles para bloquear procesos de enfermedades exacerbados por la activación de NF-\kappaB mediada por IKK\beta y la activación de IKK\alpha de la actividad de células B o el gen regulador del ciclo celular Ciclina D1. En el bloqueo de la activación de NF-\kappaB, los compuestos de la invención bloquean eficazmente la transcripción de genes que codifican citoquinas inflamatorias que incluyen IL-1, IL-2, IL-6, IL-8, TNF\alpha, quimioquinas que incluyen IL-8 y RANTES así como otras moléculas pro-inflamatorias que incluyen COX-2 y moléculas de adhesión celular como ICAM-1, VCAM-1 y E-selectina. Estos mediadores desempeñan una función clave en la etiología de trastornos inflamatorios, autoinmunes y cardiovasculares y del cáncer. La prevención de la producción de estos mediadores es un medio deseable para tratar estos trastornos. Por tanto, se proporcionan métodos para tratar estos estados usando los compuestos de la invención. Estos estados inflamatorios y autoinmunes incluyen, pero sin limitación, osteoartritis, herida de reperfusión, asma, enfermedad de obstrucción pulmonar crónica (COPD), esclerosis múltiple, síndrome de Guillain-Barre, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, psoriasis, enfermedad de injerto frente a hospedante, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Alzheimer, síndrome de choque tóxico, diabetes mellitus dependiente de insulina, dolor agudo y crónico, herida térmica, síndrome de angustia respiratoria en adultos (ARDS), herida múltiple de órganos secundaria por trauma, glomerulonefritis aguda, dermatosis con componentes inflamatorios agudos, meningitis purulenta aguda y otros trastornos del sistema nervioso central, enfermedad de Grave, miastenia grave, escleroderma y dermatitis atópica. Estos trastornos cardiovasculares incluyen, pero sin limitación, aterosclerosis, infarto de miocardio y apoplejía. Estos cánceres incluyen, pero sin limitación, enfermedades malignas de derivación linfoide, mieloide y epitelial que incluyen leucemia, linfomas y cánceres de mamas, gástrico, colorrectal, de pulmón y pancreático. Los compuestos de la invención pueden ser usados también para tratar otros trastornos asociados con la activación de IKK de NF-\kappaB o relacionados con los anteriormente citados o expuestos en el apartado de Antecedentes de la Invención. Por ejemplo, los compuestos de la invención pueden ser útiles también en el tratamiento del cáncer, aumentando la eficacia de los agentes quimioterapéuticos. Por lo tanto, la invención proporciona también métodos para tratar enfermedades inflamatorias y autoinmunes, y otras enfermedades que incluyen cáncer, que comprende administrar a un paciente que necesita este tratamiento una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto según la invención.

Para un uso terapéutico, los compuestos de la invención pueden ser administrados en cualquier forma de dosificación convencional y de cualquier manera convencional. Las vías de administración incluyen, pero sin limitación, las vías intravenosa, intramuscular, subcutánea, intrasinovial, por infusión, sublingual, transdermal, oral, tópica o por inhalación. Los modos preferidos de administración son el oral e intravenoso. Las composiciones que comprenden los compuestos de la invención para cada una de las vías de administración anteriormente mencionadas serán evidentes para el experto en la técnica. La invención proporciona también composiciones farmacéuticas que incluyen una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos según la invención. Estas composiciones farmacéuticas incluirán los vehículos y adyuvantes farmacéuticamente aceptables como se describe en detalle con posterioridad.

Los compuestos de esta invención pueden ser administrados solos o en combinación con adyuvantes que aumenten la estabilidad de los inhibidores, faciliten la administración de las composiciones farmacéuticas que los contienen en ciertas realizaciones, proporcionen una disolución o dispersión aumentada, aumenten la actividad inhibidora, proporcionen una terapia auxiliar y similares, que incluyen otros ingredientes activos. Ventajosamente, estas terapias de combinación utilizan dosificaciones inferiores de los agentes terapéuticos convencionales, evitando así la posible toxicidad y efectos secundarios adversos que se producen cuando los agentes se usan en forma de monoterapias. Los compuestos de la invención se pueden combinar físicamente con los agentes terapéuticos convencionales u otros adyuvantes en forma de una única composición farmacéutica. Ventajosamente, los compuestos pueden ser seguidamente administrados conjuntamente en una única forma de dosificación. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden estas combinaciones de compuestos contienen al menos aproximadamente 15%, pero más preferentemente al menos aproximadamente 20% de un compuesto de la invención (p/p) o una combinación de los mismos. Alternativamente, los compuestos pueden ser administrados separadamente (en serie o en paralelo). Las dosificaciones separadas permiten una mayor flexibilidad en el régimen de dosificación.

Como se mencionó anteriormente, las formas de dosificación de los compuestos de esta invención incluyen vehículos y adyuvantes farmacéuticamente aceptables conocidos por los expertos ordinarios en la técnica. Estos vehículos y adyuvantes incluyen, por ejemplo, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, sustancias tamponantes, agua, sales o electrolitos y sustancias basadas en celulosa. Formas de dosificación preferidas incluyen comprimidos, cápsulas, grageas, líquidos, soluciones, suspensiones, emulsiones, pastillas, jarabes, polvos reconstituibles, gránulos, supositorios y parches transdermales. Métodos para preparar estas formas de dosificación son conocidos (véase, por ejemplo, H.C. Ansel y N. G. Popovish, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 5ª ed., Lea y Febiger (1990)). Los niveles de dosificación y los requisitos están bien reconocidos en la técnica y pueden ser seleccionados por un experto ordinario en la técnica a partir de métodos y técnicas disponibles adecuados para un paciente particular. En algunas realizaciones, los niveles de dosificación varían en el intervalo de aproximadamente 10-1000 mg/dosis para un paciente de 70 kg. Aunque una dosis por día puede ser suficiente, se pueden proporcionar hasta 5 dosis por día. Para dosis orales, pueden ser requeridos hasta 2000 mg/día. Como apreciará el experto en la técnica, pueden ser necesarias dosis inferiores o superiores dependiendo de los factores particulares. Por ejemplo, los régimenes específicos de dosificación y tratamiento dependerán de factores como el perfil sanitario general del paciente, la gravedad y transcurso del trastorno del paciente o su disposición respecto al mismo, y el criterio del facultativo encargado.

Métodos de síntesis

La invención proporciona adicionalmente métodos para preparar los compuestos de fórmula (I). Los compuestos de la invención pueden ser preparados mediante los métodos y ejemplos generales presentados a continuación, y los métodos conocidos por un experto ordinario en la técnica. Las condiciones de la reacción y los tiempos de reacción óptimos pueden variar dependiendo de los reactantes particulares usados. Salvo que se especifique otra cosa, los disolventes, temperaturas, presiones y otras condiciones de la reacción se pueden seleccionar fácilmente por un experto ordinario en la técnica. Procedimientos específicos se proporcionan en la sección de Ejemplos de Síntesis. El progreso de la reacción puede ser verificado por métodos convencionales como cromatografía de capa fina (TLC). Los intermedios y productos pueden ser purificados por métodos conocidos en la técnica que incluyen cromatografía de columna, HPLC o recristalización.

Como se ilustra en el Esquema I, los compuestos de fórmula (I) pueden ser preparados partiendo de una 1,3-diona que porta los sustituyentes R_{1} y R_{2} (II). La reacción de (II) con cianotioacetamida (III) en un disolvente adecuado como EtOH, en presencia de una base adecuada como trietilamina, proporciona el 2-mercaptonicotinonitrilo sustituido IV. La reacción de IV con cloro- o bromo-acetamida (V) en un disolvente adecuado como DMF, THF o EtOH en presencia de una base adecuada como carbonato de sodio, hidróxido de sodio o etóxido de sodio, proporciona el compuesto deseado de fórmula (I). Los sustituyentes R_{1} y R_{2} pueden ser adicionalmente modificados por métodos conocidos en la técnica para producir compuestos adicionales de la invención.

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Esquema I

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Por ejemplo, como se ilustra en el Esquema II, partiendo de un diceto-éster VI y usando el procedimiento anteriormente indicado, se obtiene el éster I (R_{1} = CO_{2}R', en donde R' es un grupo alquilo como metilo o etilo). Usando métodos conocidos en la técnica, R_{1} puede ser modificado para preparar otro R_{1} deseado. Por ejemplo, la hidrólisis proporciona el ácido carboxílico I (R_{1} = CO_{2}H) y la reacción del ácido carboxílico con una amina R''NH_{2} bajo condiciones estándar de acoplamiento proporciona la amida I (R_{1} = C(O)NHR''). Alternativamente, la reducción del éster a través de un agente reductor adecuado como hidruro de litio-aluminio proporciona un alcohol I (R_{1} = CH_{2}OH). La reacción del alcohol con un fenol ArOH bajo condiciones de Mitsunobu proporciona el aril-éter I (R_{1} = CH_{2}OAr). Estas y otras modificaciones se describen en la sección de Ejemplos de Síntesis.

Esquema II

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En una modificación del procedimiento anterior para preparar VII, se parte de un éster de ácido 2-cloro- ó 2-bromo-3-ciano-isonicotínico (VIII, Esquema III). El grupo 2-halo puede ser seguidamente convertido en un grupo 2-mercapto por métodos conocidos en la técnica, por ejemplo por reacción con tiourea en un disolvente adecuado como EtOH que proporcione el intermedio de éster VII.

Esquema III

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El Esquema IV ilustra un procedimiento mediante el cual se pueden obtener compuestos de fórmula (I) que tengan una amina en R_{1}. El 2-bromo-4-hidroxi-nicotinotrilo (IX) es tratado con cloruro de 4-metoxibencilo en presencia de una base adecuada como hidruro de sodio en un disolvente adecuado como DMF para proporcionar el 4-metoxibencil-éter X. Este puede ser seguidamente convertido en el compuesto de 2-mercapto como se describió anteriormente en el Esquema III. El compuesto de mercapto resultante se puede hacer reaccionar seguidamente con una haloacetamida como se describe en los Esquemas I y II para proporcionar I (R_{1} = 4-metoxibencil-éter). Alternativamente, se puede hacer reaccionar X con mercaptoacetamida en presencia de una base adecuada como hidruro de sodio en un disolvente adecuado como DMF para proporcionar I (R_{1} = 4-metoxibencil-éter) directamente. El tratamiento del éter con ácido trifluoroacético proporciona la sal XI. La reacción de XI con N-feniltrifluorometanosulfinimida en presencia de una base adecuada como diisopropiletilamina en un disolvente adecuado como dioxano proporciona el trifluorometanosulfonato XII. La reacción de XII con una amina R'R''NH en un disolvente adecuado como dioxano proporciona I (R_{1} = NR'R''). La reacción puede ser opcionalmente calentada para obtener aminas menos reactivas como aril-aminas.

Esquema IV

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En el Esquema V se ilustra un procedimiento que puede ser usado para introducir una diversidad de grupos arilo o arilalquenilo en R_{1} y grupos nucleófilos como aminas en R_{2}. El ácido de Meldrum (XIII) es tratado con disulfuro de carbono, yoduro de metilo y una base adecuada como trietilamina, en un disolvente adecuado como DMSO, para proporcionar la bis-metilsulfanilmetileno-diona (XIV). El tratamiento de XIV con 2-cianotioacetamida bajo condiciones alcalinas adecuadas como con étoxido de sodio en etanol proporciona el nitrilo XVa. La reacción de XVa con 2-cloro- ó 2-bromo-acetamida en presencia de una base adecuada como hidruro de sodio en un disolvente adecuado como DMF proporciona XVIa. La ciclación del intermedio de triflato XVIIa se puede conseguir haciendo reaccionar XVI con N-feniltrifluorometano-sulfonimida en presencia de una base adecuada como hidruro de sodio en un disolvente adecuado como DMF. La reacción de XVIIa con el ácido aril-borónico o ácido arilalquenil-borónico deseado en presencia de un catalizador de paladio adecuado, preferentemente un aducto de tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0)-cloroformo, un ligando de fosfina, preferentemente tri-2-furilfosfina y una sal de cobre, preferentemente tiofeno-2-carboxilato de cobre (I), en un disolvente adecuado como THF, proporciona el intermedio de arilo o arilalquenilo XVIII deseado. La reacción de XVIII con el nucleófilo deseado como una amina R'R''NH como se muestra, en un disolvente adecuado como dioxano, proporciona el compuesto deseado de fórmula (I). Los alcoholes (R'OH) o tioles (R'SH) en presencia de una base adecuada podrían ser usados en lugar de una amina para obtener éteres o tioéteres, respectivamente, en R_{2}.

Esquema V

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En el Esquema VI se ilustra una modificación del procedimiento anterior que proporcionará un grupo alquilo en R_{1}. Un éster de alquinoato, como el éster metílico mostrado, se hace reaccionar con 2-cianotioacetamida en presencia de una base adecuada como morfolina en un disolvente adecuado como etanol, para proporcionar XVb. El tratamiento de XVb como se describe para la conversión de XVa en XVIa en el Esquema V anterior proporciona XVIb. La reacción de XVIb con un reactivo de sulfonación adecuado como N-feniltrifluorometano-sulfonimida en presencia de una base adecuada como diisopropiletilamina en un disolvente adecuado como dioxano proporciona el éster de sulfonilo XVIIb (R' = CF_{3} en este caso). La reacción de XVIIb con el nucleófilo deseado, como una amina en presencia de una base adecuada como tri-etilamina, mientras se calienta opcionalmente de 50ºC a 100ºC, da lugar al desplazamiento del éster de sulfonilo por el nucleófilo. La ciclación in situ se puede conseguir añadiendo una segunda base adecuada como carbonato de sodio acuoso seguido de calentamiento continuado para proporcionar el compuesto deseado de fórmula (I).

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Esquema VI

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Otro procedimiento que proporcionará grupos arilo o arilalquenilo en R_{1} y una diversidad de grupos como arilo y alquilo en R_{2} se ilustra en el Esquema VII. Como se ilustran en el Esquema VII, un cloruro de ácido que porta R_{2} se hace reaccionar con cloruro de vinilideno en presencia de un ácido de Lewis como AlCl_{3}, en un disolvente adecuado como cloruro de metileno, seguido de tratamiento con una base adecuada como trietilamina para proporcionar XIX. La reacción de XIX con tiometóxido de sodio proporciona XX. El tratamiento de XX con 2-cianotioacetamida en presencia de una base adecuada como isopropóxido de sodio proporciona XXI. La reacción de XXI con 2-bromo- ó 2-cloro-acetamida como se describe en el Esquema I proporciona XXII. El tratamiento de XXII con un ácido arilborónico o un ácido arilalquenilborónico como se describe en el Esquema V proporciona el compuesto deseado de
fórmula (I).

Esquema VII

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Un procedimiento adicional que puede ser usado para preparar compuestos de fórmula (I) se ilustra en el Esquema VIII. Un aldehído que porta R_{1} se hace reaccionar con un trifenilfosforanilideno que porta R_{2} (XXIII) en presencia de un ácido adecuado como ácido acético, en un disolvente adecuado como tolueno, para proporcionar la cetona XXIV alfa,beta-insaturada. El tratamiento de XXIV con 2-cianotioacetamida en presencia de una base adecuada como t-butóxido de sodio proporciona IV. Este se convierte en I como se describió en el Esquema I.

Esquema VIII

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Ejemplos de síntesis Ejemplo 1 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-piperazin-1-il-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico

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A una solución de 2-hexinoato de metilo (15 g, 0,119 moles) en EtOH (40 mL) se añadió morfolina (10,5 g, 0,120 moles) gota a gota a temperatura ambiente. La solución se calentó seguidamente a 45ºC durante 4 h bajo nitrógeno. Seguidamente se añadió NCFH_{2}C(S)NH_{2} sólido (12,1 g, 0,120 moles) en pequeñas porciones. Después de agitar a 45ºC durante 30 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El precipitado amarillo se recogió por filtración, proporcionando 10,9 g de la mercaptopiridona deseada en forma de un complejo con 1 molécula de morfolina.

Una mezcla de la mercaptopiridona anterior (5,25 g, 18,68 mmoles), 2-bromoacetamida (2,58 g, 18,68 mmol) y K_{2}CO_{3} (2,58 g, 18,68 mmol) en DMF seca (50 mL) se calentó bajo Ar a 70ºC durante 4 h. La mezcla se enfrió seguidamente a 0ºC y se acidificó a pH \sim 2 con HCl 6 N (\sim 3 ml). La mezcla se mantuvo a 0ºC durante 2 h y el precipitado blanco resultante se recogió por filtración. El producto se lavó con agua fría para proporcionar 5,5 g de la mercaptoacetamida deseada.

A una mezcla de la mercaptoacetamida anterior (4,15 g, 16,54 mmol) e iPr_{2}NEt (4,6 mL, 32,82 mmol) en dioxano seco (40 mL) se añadió en pequeñas porciones N-feniltrifluorometano-sulfonimida (5,91 g, 16,54 mmol). La mezcla se agitó bajo nitrógeno durante 16 h, se concentró y se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con 50-80% de EtOAc-hexano (gradiente) para proporcionar 4,7 g de la 2-(3-ciano-4-n-propil-6-trifluorometanosulfonilpiridin-2-ilmercapto)acetamida deseada.

A una solución de 600 mg (1,57 mmol) de la acetamida anterior se añadieron 542,4 mg (2,86 mmol) de 1-Boc-piperazina y 379,8 microL (2,72 mmol) de trietilamina. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 100ºC. Seguidamente se añadió una solución 2 M (4 mL) de carbonato de sodio. La agitación se continuó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se diluyó seguidamente con EtOAc, se secó con sulfato de sodio y se concentró. El producto en bruto se cromatografió (TLC preparativa sobre gel de sílice eluyendo con 10% de MeOH/diclorometano, rf = 0,75) para proporcionar 408,4 mg (62,2%) del intermedio de N-Boc-piperazina deseado.

A una suspensión de 408,4 mg (0,97 mmol) del intermedio de N-Boc anterior en 9 mL de EtOAc se añadieron 6 mL de una solución 6 M de HCl en MeOH. La mezcla resultante se agitó durante 4 h a temperatura ambiente. El disolvente se separó seguidamente a vacío, el residuo se puso en suspensión en diclorometano, se agitó durante 10 min y se filtró. El producto se lavó con cloruro de metileno dos veces. El sólido se secó a vacío para proporcionar 295 mg del compuesto del título.

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Ejemplo 2 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-dimetilamino-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se mezclaron 2-(3-ciano-4-metil-6-trifluorometano-sulfonilpiridin-2-ilmercapto)acetamida (30,0 mg, 0,08 mmol) (preparado como se describió en el Ejemplo 1 para el análogo de n-propilo, pero usando 2-butinoato de metilo) y dimetilamina (170,0 microL, 0,34 mmol) en 1,4-dioxano (0,5 mL) en un tubo a presión y se calentó a 80ºC durante 1 h. Se añadió carbonato de sodio acuoso (520 \muL, 1,04 mmol) y la reacción se calentó a 100ºC durante 6 h y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se vertió en cloruro de amonio acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a vacío para proporcionar 23,0 mg del producto en bruto. Este se purificó por medio de cromatografía de sílice rápida automatizada (columna de gel de sílice de 4 g, 30-100% de EtOAc/hexanos) para proporcionar 9,0 mg (0,02 mmol, 45% de rendimiento) del compuesto del título.

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Los siguientes compuestos se prepararon también usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 2 y la amina apropiada:

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Amida de ácido 3-amino-4-metil-6-morfolin-4-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-6-(2-hidroxi-etilamino)-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-4-metil-6-piperidin-1-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Ejemplo 3 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se disolvieron 400 mg (1,04 mmol) de intermedio de piridina-triflato (véase el Ejemplo 1) en 1,4-dioxano (10 mL) y se colocaron en un tubo seco a presión con una barra agitadora magnética y bajo atmósfera de Ar. Se añadió 4-N-Boc-aminopiperidina (640 mg, 3,13 mmol) y el tubo se selló. La reacción se agitó mientras se calentaba a 80ºC durante 35 minutos. Una TLC indicó la desaparición completa del triflato de partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió una solución acuosa 2,0 M de carbonato de sodio (4,0 mL, 8,00 mmol). La reacción se calentó a 100ºC, se agitó durante 20 h y después de esto se enfrió a temperatura ambiente.

La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se recogió en acetona/MeOH (aproximadamente 50:50). La mezcla resultante se filtró y el filtrado se concentró a vacío. El material fue pre-absorbido en tierra de diatomeas y se purificó primero a través de cromatografía de gel de sílice rápida automatizada (columna de 10 g de gel de sílice, gradiente de 30-70% de EtOAc/hexanos con barrido de EtOAc) para proporcionar 274 mg de producto ligeramente en bruto. Este se purificó adicionalmente a través de cromatografía rápida regular sobre gel de sílice (columna de 30 mm de diámetro por 10,16 cm de altura) eluyendo con un gradiente por etapas de 33%-50% de EtOAC/hexanos, seguidamente un barrido con EtOAc, para proporcionar 249,3 mg (55% de rendimiento) de éster terc-butílico de ácido 3-amino-2-carbamoil-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperidin-4-il]-carbámico.

Se pusieron en suspensión 249,3 mg (0,57 mmol) del compuesto anterior en 10,0 mL de EtOAc. El material se disolvió completamente mediante la adición de metanol (2,0 mL) y diclorometano (2,0 mL). A esto se añadieron 5,0 mL (30,0 mmol) de una solución 6 M de ácido clorhídrico en metanol. Esta mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente mientras un sólido amarillo se separó lentamente por precipitación de la solución. Una TLC mostró la desaparición completa del material de partida, por lo que la reacción se concentró a vacío. El residuo se separó por lavado de las paredes del matraz con una pequeña cantidad de metanol y seguidamente se trituró con acetato de etilo. El sólido amarillo se recogió por medio de filtración con succión y se lavó sucesivamente con acetato de etilo, diclorometano y acetona. El sólido se secó a vacío para proporcionar 191,4 mg del compuesto del título (83% de rendimiento).

Ejemplo 4 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-metil-6-(piridin-4-ilmetoxi)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se combinó hidrocloruro de 4-clorometilpiridina (57,0 mg, 0,34 mmol) con 50 mg de intermedio de 4-metil-mercaptopiridona (preparado de forma análoga al Ejemplo 1) (0,22 mmol) y carbonato de potasio (95,0 mg, 0,68 mmol) en DMF (1,0 mL) en un tubo a presión secado a la llama) bajo Ar. El tubo se selló y se calentó a 70ºC durante 45 minutos. Una TLC mostró la desaparición completa del material de partida y la formación de una nueva mancha. La reacción se enfrió a 0ºC y se añadió hidruro de sodio (9,0 mg, 0,23 mmol). La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min, después de lo cual se enfrió en un baño con hielo y se inactivó con bicarbonato de sodio acuoso (saturado). La mezcla resultante se extrajo dos veces con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na_{2}SO_{4}), se filtraron y se concentraron a vacío para proporcionar 65,8 mg del producto en bruto que se purificó por medio de sílice rápida automatizada para proporcionar 41,8 mg (0,13 mmol, 59% de rendimiento) del compuesto del título.

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Ejemplo 5 Síntesis de éster metílico de ácido 3-amino-2-carbamoil-4-metil-tieno[2,3-b]piridin-6-iloxi)-acético

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A una mezcla del intermedio de 4-metil-mercaptopiridona (preparado de forma análoga al Ejemplo 1) (62 mg) y K_{2}CO_{3} (70 mg) en DMF (1 ml) se añadió bromoacetato de metilo (50 ml). La mezcla se calentó bajo Ar a 70ºC durante 2 h. Después de enfriar a 0ºC, la mezcla se trató con NaH (60%, 10 mg) y se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se vertió seguidamente en una mezcla de hielo-NH_{4}Cl, se extrajo con EtOAc, se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por TLC preparativa, proporcionando 5 mg del compuesto del título (sólido blanco).

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Ejemplo 6 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(1-metil-pirrolidin-2-ilmetoxi)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Una mezcla de intermedio de piridina-triflato (véase el Ejemplo 1) (10 mg) y N-metil-L-prolinol (40 mg) en dioxano se calentó bajo Ar a 90ºC durante 3 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se añadió Na_{2}CO_{3} (2 M, 0,2 mL). La mezcla se calentó a 100ºC bajo Ar durante 10 h, se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (1 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc, se secó con Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice preparativa para proporcionar 6 mg del compuesto del título en forma de un sólido blanco.

Ejemplo 7 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-imidazol-1-il-4-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico

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A una solución de 20 mg (0,067 mmol) de intermedio de triflato de 4-metilpiridina de partida (véase el Ejemplo 2) en 1,2 mL de 1,4-dioxano se añadieron 9,2 mg de imidazol. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80ºC. Después de ese tiempo se añadieron 0,5 mL de solución 2 M de carbonato de sodio. La agitación se continuó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se enfrió seguidamente a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc, se secó con sulfato de sodio y se concentró. El producto en bruto se cromatografió (TLC preparativa sobre gel de sílice eluyendo con 10% de MeOH/cloruro de metileno, rf = 0,56) para proporcionar 3,7 mg de producto, que se purificó adicionalmente por HPLC (fase inversa-sistema disolvente:isocrático 60% de agua/acetonitrilo) proporcionando 2,7 mg (14,7%) del compuesto del título.

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Ejemplo 8 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-isobutil-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A una solución agitada de cianotioacetamida (2,20 g, 22 mmol) y 6-metil-2,4-heptanodiona (3,12 g, 22 mmol) en EtOAc anhidro (40 mL) se añadió trietilamina (0,4 mL) y la reacción se calentó a 50ºC durante 1 h antes de que se dejara enfriar a temperatura ambiente. Una filtración y lavado de los precipitados con EtOH proporcionó 6-isobutil-2-mercapto-4-metilnicotinonitrilo en forma de un sólido amarillo (2,8 g, 61%).

Una mezcla del nitrilo anterior (1,00 g, 4,85 mmol), bromoacetatamida (0,67 g, 4,85 mmol) y etóxido de sodio (0,68 g, 10 mmol) en DMF (20 mL) se calentó a 70ºC durante 1 h antes de que se dejara enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua, se filtró y los precipitados se lavaron con EtOH proporcionando el compuesto del título (0,5 g, 39%).

Ejemplo 9 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-metil-6-pentil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A una solución agitada de 2-cianotioacetamida (1,4 g, 14 mmol) y 2,4-nonanodiona (2,0 g, 13 mmol) en EtOH anhidro (40 mL) se añadió trietilamina (0,5 mL) y la reacción se calentó a 50ºC durante 1 h y seguidamente se dejó enfriar a temperatura ambiente. Una filtración y lavado de los precipitados con EtOH proporcionó 6-pentil-2-mercapto-4-metil-nicotinotrilo en forma de un sólido amarillo (1,84 g, 62,1%).

Una mezcla del nicotinotrilo anterior (1,84 g, 6,7 mmol), 2-cloroacetamida (0,63 g, 6,7 mmol) y etóxido de sodio (0,91 g, 13,4 mmol) en MeOH (35 mL) se calentó a 75ºC durante 2 h y seguidamente se dejó enfriar a temperatura ambiente. Una filtración y lavado de los precipitados con EtOH proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido (1,31 g, 71,2%).

Ejemplo 10 Síntesis de 2-amida-4-fenilamida de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico

46

A una solución agitada de 2-cianotioacetamida (3,52 g, 35 mmol) y 2,4-dioxovalerato de etilo (5,0 g, 32 mmol) en EtOH anhidro (75 mL) a temperatura ambiente se añadió trietilamina (0,5 mL) y la reacción se agitó durante una noche. Una filtración y lavado de los precipitados con EtOH proporcionó éster etílico de ácido 3-ciano-2-mercapto-6-metil-isonicotínico en forma de un sólido amarillo (4,54 g, 64,5%). Una mezcla de este éster (3,54 g, 16 mmol), bromoacetamida (2,15 g, 16 mmol) y etóxido de sodio (2,18 g, 32 mmol) en MeOH se calentó a reflujo durante una noche. Seguidamente se dejó enfriar a temperatura ambiente. Una filtración y lavado de los precipitados con EtOH proporcionó éster etílico de ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-4-carboxílico en forma de un sólido (0,94 g, 21,1%).

Una mezcla del éster anterior (0,94 g, 3,4 mmol) e hidróxido de litio (0,11 g, 4,7 mmol) en MeOH/H_{2}O (100 mL, MeOH:H_{2}O = 3:1) se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se neutralizó con HCl 2 M y se concentró a vacío para proporcionar ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridino-2-carboxílico en forma de un sólido color naranja (0,78 g, 63,2%). Una mezcla de este ácido (0,3 g, 1,2 mmol), anilina (0,56 g, 6,0 mmol) y PyBop (0,63 g, 1,4 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó seguidamente con agua, se filtró y el sólido resultante se lavó con EtOH, proporcionando el compuesto del titulo en forma de un sólido (0,27 g, 73,6%).

Ejemplo 11 Amida de ácido 3-amino-6-metil-4-(morfolin-4-carbonil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

47

Una mezcla de ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-4-carboxílico (véase el Ejemplo 10) (0,5 g, 2,0 mmol), morfolina (0,87 g, 10 mmol) y PyBop (0,88 g, 2,0 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se diluyó con agua y se extrajo con cloruro de metileno (50 mL). Una concentración de la fase orgánica proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido color naranja (0,45 g, 70,3%).

Ejemplo 12 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-metil-4-fenoximetil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

48

Se añadió tiourea (339 mg, 4,46 mmol) a una solución de éster etílico de ácido 2-cloro-3-ciano-6-metil-isonicotínico (500 mg, 2,23 mmol) en EtOH (25 mL) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a reflujo durante 24 h. La mezcla se enfrió (la cristalización comenzó tras enfriar) a temperatura ambiente. El sólido se recogió por filtración a vacío proporcionando éster etílico de ácido 3-ciano-2-mercapto-6-metil-isonicotínico (250 mg, 50%) en forma de un sólido color amarillo-naranja.

\newpage

Se añadió NaH (39 mg, 0,95 mmol) a una solución del éster anterior (210 mg, 0,95 mmol) en THF (15 mL) a temperatura ambiente. Después de agitar durante 5 min, se añadieron \alpha-bromoacetamida (134 mg, 0,97 mmol) y n-Bu_{4}NI (10 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y seguidamente se añadió NaH (39 mg, 0,95 mmol) y la mezcla se agitó durante 0,5 h adicional. La reacción se inactivó mediante la adición de NH_{4}Cl acuoso saturado, se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró para proporcionar un sólido color naranja. El residuo en bruto se recristalizó en MeOH proporcionando éster etílico de ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-4-carboxílico (160 mg, 60%), p.f. 205-208ºC.

Se añadió LiBH_{4} (62 mg, 2,04 mmol) a una solución de éster etílico de ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridino-4-carboxílico (205 mg, 0,73 mmol) en 10:1 de THF:MeOH (15 mL) a temperatura ambiente. Después de agitar durante 2 h, la reacción se inactivó mediante la adición de HCl 1 M. La mezcla se tamponó a pH \sim 7, se diluyó con EtOAc, se lavó secuencialmente con H_{2}O, salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró y se trituró con 50% de EtOAc/hexano, proporcionando amida de ácido 3-amino-4-hidroximetil-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico (123 mg, 71%) en forma de un sólido amarillo, p.f. >210ºC.

Se añadió azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD) (14 mg, 0,069 mmol) a una solución de amida de ácido 3-amino-4-hidroximetil-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico (15 mg, 0,063 mmol), fenol (6 mg, 0,069 mmol) y Ph_{3}P (18 mg, 0,069 mmol) en THF (1,5 mL) a 0ºC. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 24 h. La mezcla de reacción se concentró y se fraccionó por TLC preparativa (10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}), proporcionando el compuesto del título (12 mg, 61%) en forma de un sólido color naranja, p.f. 194-196ºC.

Ejemplo 13 Síntesis de amida de ácido amino-4-(4-carbamoil-fenoximetil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

49

Se añadió DIAD (23 mg, 0,116 mmol) a una solución de amida de ácido 3-amino-4-hidroximetil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (véase el Ejemplo 12) (25 mg, 0,105 mmol), 4-hidroxi-benzamida (15 mg, 0,116 mmol) y Ph_{3}P (30 mg, 0,116 mmol) en THF (2,5 mL) a 0ºC. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 24 h. La mezcla de reacción se concentró y se trituró con 2:1 de EtOAc:MeOH proporcionando el compuesto del título (7 mg, 19%) en forma de un sólido color naranja, p.f. >250ºC.

Ejemplo 14 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4,6-dimetil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

50

Se añadió \alpha-bromoacetamida (388 mg, 2,81 mmol) a una solución de 2-mercapto-4,6-dimetil-nicotinonitrilo (420 mg, 2,56 mmol) en MeOH (25 mL) a temperatura ambiente. Esto estuvo seguido de la adición de metóxido de sodio (1,76 ml, 25% de NaOMe en MeOH, 7,7 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo. El calentamiento a reflujo se continuó durante una noche, después de lo cual la mezcla de reacción se enfrió y se filtró. El producto se secó durante una noche proporcionando 450 mg (80%) del compuesto del título, p.f. 238-40ºC.

Ejemplo 15 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(1-hidroxi-etil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

51

A una solución de 0,80 g de ácido 3-amino-2-carbamoil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-4-carboxílico y 0,37 g de hidrocloruro de N,O-dimetilhidroxilamina en DMF se añadieron 1,8 mL de diisopropiletilamina y 1,23 g de tetrafluoroborato de O-benzotriazol-1-il-N,N,N',N'-tetrametiluronio. La solución se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se vertió en NH_{4}Cl acuoso, se extrajo 4 veces con EtOAc, se lavó 4 veces con agua y Na_{2}CO_{3} acuoso, se secó y se concentró a vacío hasta 0,74 g. La fase acuosa se volivó a extraer 4 veces con n-butanol, se lavó con Na_{2}CO_{3} acuoso, se concentró a vacío y se sometió 3 veces a destilación azeotrópica con tolueno para conseguir 0,71 g más de producto. La fase acuosa se hizo básica con Na_{2}CO_{3}, se volvió a extraer 4 veces con n-butanol, se lavó con agua, se concentró a vacío y se sometió 3 veces a destilación azeotrópica con tolueno para proporcionar un tercer cultivo de 0,52 g. Los tres cultivos se combinaron y se sometieron a cromatografía rápida sobre gel de sílice eluyendo con 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 0,62 g de 2-amida-4-(metoxi-metil-amida) de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico en forma de un sólido amarillo.

A 100 mg de 2-amida-4-(metoxi-metil-amida) de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico en 3 mL de THF seco en un baño de hielo se añadieron 0,68 mL de bromuro de metil-magnesio 3 M y la reacción se agitó 1 h en el baño enfriado y a temperatura ambiente durante una noche bajo argón. Se añadió NH_{4}Cl acuoso y el producto se extrajo 4 veces con EtOAc, se secó y se concentró a vacío. Una purificación en una placa de preparación de gel de sílice de 2 mm en 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2} proporcionó 12,2 mg de amida de ácido 4-acetil-3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico.

Se añadió la punta de una espátula de NaBH_{4} a una solución de 9,9 mg de amida de ácido 4-acetil-3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico en 1 mL de MeOH. Después de 0,5 h, la reacción se concentró a vacío, se inactivo con NH_{4}Cl acuoso, se extrajo 4 veces con EtOAc, se concentró a vacío, se disolvió en MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtró, se concentró y se secó a vacío a 60ºC para proporcionar 8,1 mg del compuesto del título en forma de un sólido color beige.

Ejemplo 16 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(hidroxi-fenil-metil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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52

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Se añadió LiAlH_{4} (0,31 g) a una suspensión de 0,60 g de 2-amida-4-(metoxi-metil-amida) de ácido 3-amino-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico (véase el Ejemplo 15) en 15 mL de THF seco a -10ºC y se agitó 1 h bajo Ar. Se añadió lentamente NH_{4}Cl acuoso y la mezcla se filtró a través de tierra de diatomeas, lavando con H_{2}O y EtOAc. La fase acuosa se separó y se extrajo 3 veces más con EtOAc y las partes orgánicas combinadas se concentraron a vacío hasta dar una resina que se sometió a cromatografía rápida eluyendo con 30% de acetona-éter de petróleo para proporcionar 163 mg de amida de ácido 3-amino-4-formil-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico en forma de una resina oscura.

A una suspensión de 314 mg de CeCl_{3} en 3 mL de THF seco a -78ºC se añadieron 0,425 mL de bromuro de fenilmagnesio 3 M y la reacción se agitó 1,5 h bajo Ar. Seguidamente se añadió amida de ácido 3-amino-4-formil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico y la reacción se agitó 5 h en frío y seguidamente se dejó calentar a temperatura ambiente durante 0,5 h. Se añadió NH_{4}Cl acuoso y la reacción se filtró a través de tierra de diatomeas, lavando con EtOAc, y la fase acuosa se separó y se extrajo 3 veces más con EtOAc. Las partes orgánicas combinadas se secaron y se concentraron a vacío, y el producto se purificó en una placa preparativa desarrollada con 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}. La impureza del material de partida se separó disolviendo el producto en EtOAc con una traza de MeOH y lavando 3 veces con NaHSO_{3} acuoso. Las partes orgánicas se secaron, se concentraron a vacío, se volvieron a disolver en MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtraron, se concentraron y se secaron a vacío a 60ºC para proporcionar 8,2 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.

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Ejemplo 17 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(1-hidroxi-2-fenil-etil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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53

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A una suspensión de 344 mg de CeCl_{3} en 3 mL de THF seco a -78ºC se añadieron 0,70 mL de cloruro de bencilmagnesio 2 M y la reacción se agitó 1,5 h bajo Ar. Seguidamente se añadieron 41 mg de amida de ácido 3-amino-4-formil-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (véase el Ejemplo 16) y la reacción se agitó 3,5 h en frío y seguidamente se dejó calentar a temperatura ambiente durante 0,5 h. Se añadió NH_{4}Cl acuoso y la reacción se filtró a través de tierra de diatomeas, lavando con EtOAc, y la fase acuosa se separó y se extrajo 3 veces más con EtOAc. Las partes orgánicas combinadas se secaron, se concentraron a vacío y se volvieron a disolver en EtOAc con una traza de MeOH y se lavaron 3 veces con NaHSO_{3} acuoso. Esto se secó, se concentró a vacío y el producto se purificó en una placa preparatoria desarrollada con MeOH-CH_{2}Cl_{2}. El producto se volvió a disolver en MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtró, se concentró y se secó a vacío a 60ºC, proporcionando 16,3 mg del compuesto del título en forma de un sólido color naranja.

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Ejemplo 18 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(4-metoxi-benciloxi)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

54

Se puso en suspensión 2-cloro-4-metoxi-nicotinonitrilo (M. Mittelbach et al., Arch.Pharm.(Weinheim Alemania); 1985, GE, 318, 6, 481-486) (6,92 g) en 70 mL de HBr al 30% en ácido acético en un recipiente a presión y se calentó con agitación a 100ºC durante 2 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró, lavando bien con H_{2}O y se secó a vacío durante una noche a 50ºC proporcionando 4,85 g de 2-bromo-4-hidroxi-nicotinitrilo en forma de un sólido blanco. Una RMN protónica (DMSO) indicó que el producto era una mezcla de 69% de compuesto de bromo con 31% de análogo de cloro de partida.

A una solución de 5,85 g de la mezcla anterior en 30 mL de DMF seca se añadieron 1,52 g de NaH al 60% en aceite mineral por partes y la reacción parda se agitó 15 min a temperatura ambiente bajo Ar. Se añadió cloruro de 4-metoxibencilo (5,16 mL) y la reacción se calentó a 60ºC durante 2,5 h y seguidamente se inactivó con NH_{4}Cl acuoso. Una extracción en EtOAc, seguida de lavado con H_{2}O, proporcionó la precipitación de un producto secundario sólido blanco en un embudo separador que se separó por filtración. El filtrado se secó y se eliminó hasta dar 9,4 g de un semisólido que se trituró en CH_{2}Cl_{2} y se filtró para proporcionar 730 mg de más producto secundario. El filtrado se concentró y se sometió a cromatografía rápida sobre gel de sílice eluyendo con CH_{2}Cl_{2}, proporcionando 4,80 g de un sólido céreo blanco. Una RMN protónica (DMSO) indicó que el producto era una mezcla 2:1 de 2-bromo-4-(4-metoxi-benciloxi)-nicotinotrilo con su análogo de 2-cloro.

Una solución de mercaptoacetamida de MeOH (6,80 mL) se concentró a vacío proporcionando 928 mg y 2,75 g de la mezcla 2:1 anterior y se añadió y disolvió en 14 mL de DMF bajo una purga de N_{2}. Se añadió una suspensión de NaH al 60% en aceite mineral (723 mg) y se agitó a 60ºC durante una noche bajo Ar. Se añadió NH_{4}Cl acuoso y el producto se filtró, se lavó con H_{2}O y se secó a vacío a 50ºC, proporcionando 1,97 g de producto en bruto que se recristalizó en MeOH para proporcionar 1,25 g del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.

Los siguientes compuestos se prepararon de la manera anteriormente descrita a partir de 2-bromo-4-hidroxi-nicotinonitrilo y el haluro de alquilo apropiado. En el caso de los alquil-éteres, se usó bromuro o yoduro de alquilo. En el caso de bencil-éteres se usó cloruro o bromuro de bencilo.

Amida de ácido 3-amino-4-metoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 4-amino-4-propoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-4-isopropoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

58

Amida de ácido 3-amino-4-benciloxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

59

Ejemplo 19 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-fenilamino-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

60

Una solución de 2,43 g de amida de ácido 3-amino-4-(4-metoxi-benciloxi)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (Ejemplo 18) se agitó 6 h en 20 mL de ácido trifluoroacético con un tubo de secado. La reacción se concentró a vacío y seguidamente se evaporó conjuntamente 3 veces con tolueno y 2 veces con CH_{2}Cl_{2} para proporcionar una resina amarilla. Ésta se trituró en EtOAc y se filtró para proporcionar 1,88 g de sal de ácido trifluoroacético de amida de ácido 3-amino-4-oxo-4,7-dihidro-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico en forma de un sólido amarillo.

Una mezcla de 1,0 g de sal de ácido trifluoroacético de amida de ácido 3-amino-4-oxo-4,7-dihidro-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico y 2,76 g de N-feniltrifluoro-metanosulfonimida y 1,35 mL de diisopropiletilamina se agitó en 10 mL de dioxano a temperatura ambiente bajo Ar durante una noche. Se añadió EtOAc y la mezcla se lavó con H_{2}O, dos veces con NH_{4}Cl acuoso y una vez con Na_{2}CO_{3} acuoso. La solución de EtOAc se secó y se concentró a vacío hasta dar 3,63 g de un sólido amarillo. Una cromatografía rápida, eluyendo con acetona-éter de petróleo, proporcionó 1,05 g de éster 3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridino-4-ílico de ácido trifluorometanosulfónico en forma de un sólido amarillo.

Una solución de 20 mg de éster 3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-ílico de ácido trifluorometanosulfónico y 27 microL de anilina en 1 mL de THF se calentó a 55ºC durante una noche bajo Ar. La reacción se aplicó a una placa preparativa de gel de sílice de 2 mm que se desarrolló dos veces con 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}. La banda se eluyó con 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 18 mg. Estos se disolvieron en 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtraron, se concentraron y se secaron a vacío a 60ºC durante una noche para proporcionar 10,5 mg del compuesto del título en forma de un sólido amarillo-verde.

Ejemplo 20 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(4-nitro-fenilamino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

61

Una solución de 20 mg de éster 3-amino-4-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-ílico de ácido trifluorometanosulfónico (véase el Ejemplo 19) y 40,5 mg de 4-nitroanilina en 1 mL de dioxano seco se calentó a 95ºC durante una noche bajo N_{2}. La reacción se concentró y se aplicó a una placa preparativa de gel de sílice de 2 mm que se desarrolló dos veces en 7,5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}. La banda se eluyó con 20% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se concentró a vacío, se volvió a disolver en 5% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtró, se concentró y se secó a vacío a 60ºC durante una noche para proporcionar 2,2 mg del compuesto del título en forma de un sólido color naranja.

Ejemplo 21 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(4-bencil-piperazin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

62

Una mezcla de 20 mg de éster 3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-ílico de ácido trifluorometanosulfónico y 50 microL de N-bencilpiperazina en 1 mL de dioxano seco se purgó con N_{2} y se tapó y dejó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con EtOAc, se lavó cuatro veces con agua, se secó y se concentró hasta sequedad a vacío. El producto se purificó en una placa preparativa de gel de sílice de 2 mm, desarrollando y eluyendo la banda con mezclas de MeOH-CH_{2}Cl_{2} y concentrando seguidamente hasta sequedad. El producto se volvió a disolver en 5-10% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtró para separar gel de sílice, se concentró y se secó a vacío a 60ºC durante una noche para proporcionar 7,9 mg del compuesto del título en forma de un sólido color beis.

Los siguientes compuestos se prepararon usando el mismo procedimiento descrito en el ejemplo anterior. Si la amina secundaria intermedia era un sólido, se usaron 50 equivalentes molares en lugar de 50 microL. En algunos casos, si el producto se creía que tenía una solubilidad apreciable en agua, la mezcla de reacción se concentró sin extracción y el residuo se purificó por TLC preparativa como anteriormente. Se apreciaron otras ligeras modificaciones para compuestos particulares.

Amida de ácido 3-amino-4-(4-metil-piperazin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

63

Amida de ácido 3-amino-4-piperidin-1-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

64

Amida de ácido 3-amino-4-morfolin-4-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

65

Amida de ácido 3-amino-4-[metil-(2-piridin-2-il-etil)-amino]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

66

Amida de ácido 3-amino-4-[4-(isopropilcarbamoil-metil)-piperazin-1-il]-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico

67

Amida de ácido 3-amino-4-(4-fenil-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

68

Amida de ácido 3-amino-4-(4-hidroxi-4-fenil-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

69

Amida de ácido 3-amino-4-(4-fenil-piperazin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

70

Amida de ácido 3-amino-4-(4-oxo-1-fenil-1,3,8-triaza-spiro[4.5]dec-8-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

71

Amida de ácido 3-amino-4-[1,4']bipiperidinil-1'-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

72

Amida de ácido 3-amino-4-(bencil-metil-amino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

73

Amida de ácido 3-amino-4-(metil-fenetil-amino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

74

Amida de ácido 3-amino-4-(4-bencil-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

75

Amida de ácido 3-amino-4-[(2-hidroxi-2-fenil-etil)-metil-amino]-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico

76

Éster bencílico de ácido 4-(3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-il)-piperazina-1-carboxílico

77

Éster terc-butílico de ácido 4-(3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-il)-piperazin-1-carboxílico

78

Amida de ácido 3-amino-4-[4-(2-oxo-2,3-dihidro-benzoimidazol-1-il)-piperidin-1-il]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

79

Amida de ácido 3-amino-4-[4-(furan-2-carbonil)-piperazin-1-il]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

80

Amida de ácido 3-amino-4-(4-bencenosulfonil-piperazin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

81

Amida de ácido 3-amino-4-(etil-metil-amino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

82

Amida de ácido 3-amino-4-(metil-propil-amino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

83

Amida de ácido 3-amino-4-(butil-metil-amino)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

84

Amida de ácido 3-amino-4-pirrolidin-1-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

85

Amida de ácido 3-amino-4-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

Este producto se purificó después de la placa preparativa por HPLC en una columna C8 eluyendo con 75% de H_{2}O-25% de acetonitrilo.

86

Amida de ácido 3-amino-4-(3-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

Este producto se purificó después de la placa preparativa por HPLC en una columna C8 eluyendo con 65% de H_{2}O-35% de acetonitrilo.

87

Amida de ácido 3-amino-4-piperazin-1-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

88

Una solución de 18 mg de éster terc-butílico de ácido 4-(3-amino-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-il)-piperazin-1-carboxílico en 1 mL de CH_{2}Cl_{2} + 1 mL de ácido trifluoroacético se agitó con un tubo de secado durante 4 h a temperatura ambiente. La reacción se concentró a vacío y se desarrolló en una placa preparativa en 25% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}-2% de NH_{4}OH y la banda se eluyó con 50% de MeOH-CH_{2}Cl_{2} para proporcionar un aceite que se volvió a disolver en 10% de MeOH-CH_{2}Cl_{2}, se filtró, se concentró y se secó a vacío a 60ºC para proporcionar 4,6 mg del producto en forma de un sólido amarillo.

Ejemplo 22 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-((E)-estiril)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se añadieron 30 mL de THF seco a un matraz sellable y se hizo burbuajer una corriente de Ar a través del disolvente durante 5 min. Se añadieron aducto de tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0)-cloroformo (76,1 mg, 73,5 \mumol), tris-2-furilfosfina (121,9 mg, 0,5 mmol), tiofeno-2-carboxilato de cobre(I) (541,2 mg, 2,7 mmol), ácido trans-2-fenilvinilborónico (621,4 mg, 4,2 mmol) y amida de ácido 3-amino-4-metiltio-6-trifluorometilsuflonil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (800,0 mg, 2,1 mmol) y el matraz sellado se calentó a 40ºC durante 20 h. La solución se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y la fase orgánica se extrajo con solución saturada de NaHCO_{3}. La fase acuosa se extrajo dos veces con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó. El residuo se cromatografió sobre gel de sílice usando un gradiente (0-2,5% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} durante 50 min). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, se evaporaron y se purificaron por TLC preparativa (10% de acetona/éter) para producir 415 mg (45%) del intermedio de 4-(E)-estirilo.

El intermedio anterior se disolvió en dioxano (20 mL), se añadió 4-N-Boc-aminopiperidina (382,6 mg, 1,9 mmol) y la mezcla se agitó durante 8 h a 100ºC. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se añadió solución saturada de NH_{4}Cl. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, El compuesto se purificó adicionalmente por TLC preparativa (5% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}) para producir 220 mg (48%) de producto.

El carbamato anterior se disolvió en dioxano (10 mL) y se añadió una solución 4 N de HCl-dioxano (5 mL). La suspensión se agitó durante 3 h después de lo cual se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por TLC preparativa (10% de NH_{4} 4 N en MeOH/90% de CH_{2}Cl_{2}) para producir 115 mg (65%) del compuesto del título.

Ejemplo 23 Síntesis de amida de ácido 3-amino-4-(4-metanosulfonil-fenil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se suspendió cloruro de aluminio (4,2 g, 32 mmol) en cloruro de metileno (5 mL) y se añadió gota a gota cloruro de acetilo (2,44 mL, 34 mmol) durante 30 min, mientras la temperatura interna se mantenía por debajo de 30ºC. Se continuó la agitación durante 15 min, después de lo cual se añadió cloruro de vinilideno durante 10 min a 30ºC. Después de agitar durante otros 90 min a temperatura ambiente, la mezcla se vertió sobre hielo triturado. La mezcla se agitó durante 20 min y la fase acuosa se extrajo dos veces con cloruro de metileno. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua. La solución de cloruro de metileno se enfrió seguidamente a 0ºC y se añadió trietilamina (4,21 mL, 30 mmol) mientras se agitaba la solución. Después de 30 min se añadió HCl al 10% y la fase orgánica se lavó con HCl al 5%, agua y salmuera. Los componentes volátiles se evaporaron y el residuo se destiló sobre un aparato de destilación de trayectoria pequeña para producir 3,28 g (78%) de la diclorovinil-cetona deseada.

Se suspendió tiometóxido de sodio (1,40 g, 20 mmol) en éter (20 mL) y se añadió gota a gota la diclorovinil-cetona anterior (10 mmol) disuelta en éter (10 mL). La solución resultante se llevó a reflujo durante 1 h, se filtró y el precipitado se lavó con agua. Los filtrados combinados se evaporaron para producir 1,4 g (87%) de la dimetiltiovinil-cetona deseada.

Se disolvió sodio (533 mg, 23,2 mmol) en isopropanol (50 mL) bajo calentamiento. Se añadió 2-cianotioacetamida (2,1 g, 21 mmol) y la solución se agitó durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se añadió la dimetiltiovinil-cetona anterior (3,4 g, 21 mmol) a la mezcla de reacción y la solución se llevó a reflujo hasta que el material de partida desapareció (\sim 30 h). El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en agua. La solución acuosa se filtró, se acidificó a pH 3 y el precipitado se separó por filtración. El precipitado se lavó con éter y seguidamente con hexano para proporcionar 3,9 g (95%) de la tiopiridina deseada.

Se disolvió metóxido de sodio (2,16 g, 40 mmol) en MeOH (60 mL) y se añadió la tiopiridina anterior (3,9 g, 20 mmol). Después de 5 min se añadió 2-bromoacetamida (2,76 g, 20 mmol) y la solución se llevó a reflujo durante 2 h. El MeOH se evaporó parcialmente y el residuo se diluyó con solución acuosa de bicarbonato de sodio. La fase acuosa se extrajo varias veces con 10% de MeOH/cloruro de metileno y los extractos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice para proporcionar 2,1 g (41%) del intermedio de tieno[2,3-b]piridina deseado.

Se añadió THF seco (3 mL) a un tubo sellable y se hizo burbujear una corriente de Ar a través del disolvente durante 5 min. Se añadieron el ácido 4-metanosulfonilfenilborónico anterior (48 mg, 0,24 mmol), aducto de tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0)-cloroformo (4 mg, 4 \mumol), tri-2-furilfosfina (7,5 mg, 32 \mumol) y tiofeno-2-carboxilato de cobre (I) (50 mg, 0,26 mmol). El tubo se selló y seguidamente se calentó a 65ºC durante 24 h. La solución se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y la fase orgánica se extrajo con solución acuosa de bicarbonato de sodio. La fase acuosa se extrajo dos veces con CH_{2}Cl_{2} y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía de columna. Todas las fracciones que contenían el producto se combinaron, se evaporaron y se volvieron a purificar por TLC preparativa para proporcionar 23 mg (32%) del compuesto del título.

Ejemplo 24 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-metil-4-(1-metil-1H-pirrol-2-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se disolvió 1-metil-2-pirrolocarboxaldehído (500 mg, 4,58 mmol) en 10 mL de tolueno y seguidamente se añadió 1-trifenilfosforanilideno-2-propanona (1,53 g, 4,81 mmol) y 10 gotas de ácido acético. La mezcla de reacción se calentó a 120ºC en un tubo sellado durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se evaporó. El residuo se disolvió en EtOAc y la fase orgánica se lavó con solución saturada de NaHCO_{3} y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice para producir 565 mg (82,7%) de la vinil-cetona.

A un tubo sellado se añadió 2-cianotioacetamida (70,6 mg, 0,71 mmol) y t-butóxido de sodio (71 mg, 0,74 mmol) en 2-propanol (4 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 min y seguidamente se añadió la vinil-cetona anterior (100 mg, 0,67 mmol). La mezcla se calentó a 80ºC durante 16 h. La solución se concentró y el residuo se disolvió en agua. Se añadió HCl diluido para ajustar el pH a 6. El sólido que se formó durante la acidificación se filtró y se lavó con agua. El sólido se secó bajo alto vacío para proporcionar 70 mg (45,5%) del intermedio de tiopiridina deseado.

El intermedio de tiopiridina anterior (70 mg, 0,31 mmol) se puso en suspensión en 2 mL de MeOH y seguidamente se añadieron 2-bromoacetamida (42 mg, 0,3 mmol) y 1,22 mL de solución 0,5 N de metóxido de sodio en MeOH. La mezcla se calentó en un tubo sellado a 70ºC durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice para producir 36 mg (41%) del compuesto del título.

Ejemplo 25 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-{[(2-carbamoil-fenilcarbamoil)-metil]-amino}-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A una solución de 2-aminobenzamida (2,00 g, 14,4 mmol) y trietilamina (2,4 mL, 17 mmol) en dioxano seco (20 mL) se añadió bromuro de bromoacetilo (1,33 mL, 15,0 mmol). Esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y seguidamente se vertió en agua. El sólido resultante se recogió por filtración y se recristalizó en MeOH para proporcionar el intermedio de diamida en forma de un sólido pardo (2,02 g).

El intermedio anterior (70 mg, 0,21 mmol) y la amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (65 mg, 0,25 mmol), junto con trietilamina (0,05 mL, 0,36 mmol) se agitaron en 1 mL de DMF durante 2 h. El disolvente se separó a vacío. El residuo se trituró con agua. El sólido resultante se recogió por filtración y se recristalizó en acetonitrilo para proporcionar el compuesto del título (37 mg) en forma de un sólido color pálido.

Ejemplo 26 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-{4-[3-(4-carbamoil-fenoxi)-2-hidroxi-propilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A un tubo sellado se añadieron 4-hidroxibenzamida (200 mg, 1,458 mmol), epiclorhidrina (135 mg, 1,458 mmol) y carbonato de potasio (403 mg, 2,916 mmol) en 7 mL de DMF seca. La mezcla de reacción se agitó a 70ºC durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía rápida, eluyendo con 0-5% de NH_{3} 2 M en MeOH/CH_{2}Cl_{2}. Las fracciones de producto se recogieron y se concentraron para suministrar 80 mg de 4-oxiranilmetoxi-benzamida en forma de un sólido blanco.

Se disolvió 4-oxiranilmetoxi-benzamida (76 mg, 0,393 mmol) en 8 mL de DMF seca y seguidamente se añadió 4-amino-1-N-Boc-piperidina (178 mg, 0,889 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80ºC durante 48 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía rápida eluyendo con 0-5% de NH_{3} 2 M en MeOH/CH_{2}Cl_{2}. Las fracciones de producto se recogieron y se concentraron para proporcionar 62 mg de éster terc-butílico de ácido 4-[3-(4-carbamoil-fenoxi)-2-hidroxi-propilamino]-piperidin-1-carboxílico en forma de un aceite incoloro.

A un matraz de fondo redondo se añadió el éster anterior (62 mg, 0,158 mmol) en 5 mL de HCl 4,0 M en 1,4-dioxano y 2 mL de MeOH. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró por medio de una bomba de alto vacío para proporcionar 57 mg de la sal de cloruro de hidrógeno de 4-[2-hidroxi-3-(piperidin-4-ilamino)-propoxi]-benzamida, en forma de un producto sólido vítreo color blanco.

A un tubo sellado se añadió éster 6-(2-carbamoil-etil)-5-ciano-4-propil-piridin-2-ílico de ácido trifluoro-metanosulfónico (54,2 mg, 0,141 mmol) en 5 mL de DMF seca y seguidamente se añadió la sal de hidrocloruro anterior (57 mg, 0,156 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (91,4 mg, 0,707 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 70ºC durante 2 h. La reacción se concentró y al residuo se añadió metóxido de sodio, solución 0,5 M en MeOH (1,41 mL, 0,707 mmol) y 2 mL de MeOH. La mezcla de reacción se calentó a 70ºC durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía rápida eluyendo con 0-10% de NH_{3} 2 M en MeOH/CH_{2}Cl_{2}. Las fracciones de producto se recogieron y se concentraron para proporcionar 42 mg (56,4%) del compuesto del título en forma de un sólido cristalino color amarillo luminoso.

Ejemplo 27 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-((S)-3-hidroxi-4-metanosulfonilamino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Una mezcla del éster terc-butílico de ácido 7-oxa-3-aza-biciclo[4.1.0]heptano-3-carboxílico (830 mg, 4,2 mmol), metilsulfonamida (1,2 g, 12,5 mmol), carbonato de potasio (829 mg, 12,5 mmol), sulfato de magnesio (1,5 g, 12,5 mmol) en MeOH (15 mL) se calentó bajo Ar en un tubo a presión a 90ºC durante una noche. La mezcla se enfrió seguidamente a temperatura ambiente, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (10 mL), se filtró a través de tierra de diatomeas y se concentró. El producto en bruto se purificó adicionalmente por cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc como eluyente para proporcionar 504 mg del intermedio de hidroxipiperidina deseado.

El intermedio anterior (118 mg, 0,4 mmol) se disolvió en MeOH (1 mL). A esta solución se añadió HCl 4 M (0,2 mL en dioxano) gota a gota. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche y se concentró. El producto así obtenido se disolvió en dioxano, se basificó con 300 microL de trietilamina y se hizo reaccionar con 144 mg (0,376 mmol) de 2-(3-ciano-4-n-propil-6-trifluorometanosulfonilpiridin-2-ilmercapto)acetamida, mediante el procedimiento descrito en el Ejemplo 26, para proporcionar 73 mg del compuesto del título.

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(Tabla pasa a página siguiente)

Ejemplo 28 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-hidrazinocarbonil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A una solución de fosgeno (solución al 20% en tolueno) a 0ºC se añadió éster bencílico de ácido piperazino-1-carboxílico (0,385 mlL 1,996 mmol) y diisopropiletil-amina (0,383 mL, 4,397 mmol) en 5 mL de CH_{2}Cl_{2} gota a gota. La mezcla amarilla pálida resultante se agitó 2 h calentando a temperatura ambiente bajo Ar. La solución de fosgeno se separó por destilación a vacío. Se añadieron 20 mL de CH_{2}Cl_{2} anhidro. El recipiente de la reacción se enfrió a 0ºC y se añadieron en una porción éster terc-butílico de ácido hidrazinocarboxílico y diisopropiletil-amina (0,383 mL, 4,397 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. La reacción se inactivó con 10 mL de NaHCO_{3} saturado, se diluyó con 30 mL de EtOAc y seguidamente se lavó con 2 x 30 mL de solución saturada de NH_{4}Cl y 30 mL de salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró para proporcionar 720 mg de éster bencílico de ácido 4-(N-terc-butoxicarbonil-hidrazinocarbonil)-piperazin-1-carboxílico en forma de un sólido blanco.

El éster bencílico anterior (720 mg, 1,913 mmol) se disolvió en 10 mL de EtOH y se colocó en un matraz de fondo redondo. Se añadió 10% de Pd/C (300 mg) y la reacción se colocó bajo 1 atm de H_{2} en un balón. La reacción se dejó agitar durante una noche y seguidamente se filtró a través de un cartucho de tierra de diatomeas y se concentró para proporcionar 465 mg de 4-(N-terc-butoxicarbonil-hidrazinocarbonil)-piperazina en forma de un sólido blanco pálido.

Se preparó éster terc-butílico de ácido N'-[4-(3-amino-2-carbamoil-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperazin-1-carbonil]-hidrazinacarboxílico a partir del intermedio anterior como se describió en el Ejemplo 26. La separación del grupo protector t-Boc mediante disolución en EtOAc/CH_{2}Cl_{2} y tratamiento en HCl 4 N en dioxano proporcionó el compuesto del título.

Ejemplo 29 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-[4-(1-imino-etil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se colocaron tioacetamida (326,0 mg, 4,339 mmol) y 2-bromometil-naftaleno (959,0 mg, 4,337 mmol) en un matraz de fondo redondo de 50 mL. Se añadieron 20 mL de CHCl_{3} y la mezcla se llevó a reflujo durante 3 h, momento en el que se formó un precipitado blanco. La mezcla se enfrió y el precipitado se recogió. El precipitado se lavó con 20 mL de CH_{2}Cl_{2} y se colocó bajo vacío para secar y producir 1,01 g de sal de hidrocromuro de éster naftaleno-2-ilmetílico de ácido tioacetimídico en forma de un polvo blanco fino.

La sal de hidrobromuro anterior (850,0 mg, 2,869 mmol) se colocó en un matraz de fondo redondo de 25 mL. A éste se añadieron 10 mL de EtOH dando lugar a una suspensión. El matraz se colocó en un baño con hielo y se añadió en una porción éster terc-butílico de ácido piperazino-1-carboxílico (534,4 mg, 2,869 mmol). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó 3 h adicionales. La solución heterogénea se diluyó con 40 mL de EtOAc y se lavó con 2 x 30 mL de H_{2}O. La fase acuosa se concentró casi hasta sequedad, se sometió a destilación azeotrópica con 2 x 20 mL de tolueno para proporcionar un sólido blanco. El sólido se puso en suspensión en CH_{2}Cl_{2}/hexano y se concentró hasta sequedad. El material se coloró bajo vacío durante una noche suministrando 769 mg de sal de hirobromuro de éster terc-butílico de ácido 4-(1-imino-etil)-piperazin-1-carboxílico en forma de un
sólido blanco.

El grupo protector t-Boc del intermedio anterior se separó como se describió en el Ejemplo 28 y el intermedio resultante se hizo reaccionar adicionalmente como se describió en el Ejemplo 26 para proporcionar el compuesto del título.

Ejemplo 30 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-(3-hidroxi-propil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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A una solución de 7,98 g (40,2 mmol) de t-butil-dimetil-pent-4-iniloxi-silano (J.A. Marshall y B.S. DeHoff, J. Org. Chem., 1986, 51, 863) en THF (100 mL) enfriada a -78ºC se añadió una solución de n-butil-litio en hexanos (28,0 mL de una solución 1,6 M). La mezcla se agitó a -78ºC durante 1 h y seguidamente se transfirió, a través de una cánula, a un matraz que contenía una solución de 4,5 mL (58 mmol) de cloroformiato de metilo en THF (100 mL) enfriada a -78ºC. La reacción se agitó a -78ºC durante 2 h y seguidamente la base en exceso se consumió mediante la adición de una solución acuosa saturada de NH_{4}Cl. La mezcla se diluyó con H_{2}O y se lavó con Et_{2}O. La fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía de gel de sílice rápida usando una solución al 5% de EtOAc en hexanos como eluyente para proporcionar, después de concentrar el disolvente, 6,18 g (60%) del éster deseado en forma de un aceite transparente.

A una solución de 6,18 g (24,1 mmol) del éster anterior en EtOH (120 mL) se añadieron 2,2 mL (25 mmol) de morfolina. La mezcla se calentó a 60ºC durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron 2,5 g (25 mmol) de 2-cianoacetamida en forma de un sólido en una porción. La mezcla de reacción se calentó seguidamente a 60ºC durante 15 h y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se puso en suspensión en Et_{2}O y se lavó con H_{2}O. La fase acuosa combinada se volvió a extraer con Et_{2}O. La fase acuosa se liofilizó para proporcionar 3,5 g (30,8%) de sal de morfolina de 4-[3-(t-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-3-ciano-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-2-tiolato; en forma de un polvo amarillo.

A una solución de 0,940 g (2,28 mmol) de la sal de morfolina anterior en THF (15 mL), enfriada a 0ºC, se añadieron 0,315 g (0,280 mmol) de 2-bromoacetamida en forma de un sólido en una porción. La mezcla se agitó y se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente durante un período de 2 h, tiempo durante el cual precipitaron sales de la solución. La mezcla se filtró a través de tierra de diatomeas para separar los sólidos y el cartucho de filtración se lavó con EtOAc. La mezcla se concentró bajo presión reducida para proporcionar 0,385 g (44%) de 2-{4-[3-(t-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-3-ciano-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-2-ilsulfanil}-acetamida en forma de una espuma
naranja.

A una solución de 2,32 g (6,08 mmol) de la acetamida anterior en THF (25 mL), enfriada a 0ºC, se añadieron 2,2 g (6,2 mmol) de N-feniltrifluorometanosulfonimida y 1,2 mL (6,7 mmol) de N,N-diisopropiletilamina. La mezcla se agitó durante 3 h a medida que se calentaba lentamente a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en H_{2}O y se lavó con EtOAc. La fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía rápida sobre gel de sílice usando 0-50% de gradiente de A (MeOH al 10% en CH_{2}Cl_{2}) a B (CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar, después de concentrar el eluyente, 0,832 g (26%) del éster de trifluorometanosulfonilo deseado en forma de un aceite color naranja.

A una solución de 0,832 g (1,62 mmol) del éster de trifluorometanosulfonilo anterior en 1,4-dioxano (30 mL) se añadieron 0,175 g (1,73 mmol) de 4-hidroxipiperidina y 0,32 mL (1,79 mmol) de N,N-diisopropiletilamina. La mezcla se calentó a 80ºC durante 5 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió una solución acuosa de Na_{2}CO_{3} (8,0 mL de una solución 2,0 M). La mezcla se calentó a 100ºC durante 3 días y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con H_{2}O. La mezcla se lavó con CH_{2}Cl_{2} y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía rápida de gel de sílice usando un gradiente de 0-50% de A (MeOH al 10% en CH_{2}Cl_{2}) a B (CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar, después de concentrar el eluyente, 0,232 g (31%) de amida de ácido 3-amino-4-[3-(t-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico en forma de un polvo amarillo.

A una solución de 0,23 g (0,49 mmol) de la amida anterior en una mezcla 1:1 de THF:H_{2}O (1,0 mL) se añadieron 0,50 mL (8,7 mmol) de ácido acético glacial. La mezcla se calentó a 50ºC durante 15 h y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida, lo que provocó que precipitara un sólido de la solución. El material se recogió por filtración y se lavó con H_{2}O y CH_{2}Cl_{2} y seguidamente se secó bajo vacío para proporcionar 0,106 g (61%) del compuesto del título en forma de un sólido blanco.

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Ejemplo 31 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-3,3-dimetil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (5)

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Una mezcla de 0,10 g (0,46 mol) de 1-bencil-3,3-dimetil-piperidin-4-ona, 0,055 mL (0,50 mmol) de bencil-amina y 0,19 mL (0,64 mol) de isopropóxido de titanio se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con EtOH (1 mL), lo que provocó que la solución amarilla se volviera turbia. A la reacción se añadieron 0,031 g (0,49 mmol) de cianoborohidruro de sodio y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. La mezla se diluyó con H_{2}O (1 mL) y seguidamente se filtró a través de tierra de diatomeas para separar los precipitados. El cartucho de filtración se lavó con MeOH y la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía rápida sobre gel de sílice usando un gradiente de 0-40% de A (MeOH al 10% en CH_{2}Cl_{2}) a B (CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar, después de concentrar el eluyente, 0,069 g (44%) de la bencil-amina deseada en forma de un aceite transparente.

A una solución de 0,069 g (0,22 mmol) de la bencil-amina anterior en MeOH (5 mL) colocada en un recipiente a presión de paredes gruesas se añadieron 0,049 g (0,046 mmol) de paladio sobre carbono y 0,050 mL (0,60 mmol) de HCl concentrado. La mezcla se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno y se agitó durante 24 h. La mezcla se filtró a través de un cartucho de tierra de diatomeas y la torta de filtración se lavó con MeOH. La fase orgánica se concentró bajo presión reducida para proporcionar 0,041 g (91%) de la sal de di-HCl de 4-amino-3,3-dimetilpiperidina deseada en forma de un sólido blanco.

A una solución de 0,075 g (0,20 mmol) de éster 6-carbamoilmetilsulfanil-5-ciano-4-propil-piridin-2-ílico de ácido trifluorometanosulfónico en 1,4-dioxano (5 mL) se añadieron 0,041 g (0,20 mmol) de la sal de di-HCl anterior y 0,11 mL (0,61 mmol) de N,N-diisopropiletilamina. La mezcla se calentó a 60ºC durante 15 h y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente y se añadió una solución acuosa de Na_{2}CO_{3} (0,5 mL de una solución 2 M). La mezcla se calentó seguidamente a 100ºC durante 3 h y seguidamente se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con H_{2}O y se lavó con CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía rápida sobre gel de sílice usando un gradiente de 0-50ºC de A (10% de MeOH en CH_{2}Cl_{2}) a B (CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar, después de concentrar el eluyente, 0,019 g (27%) del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.

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Ejemplo 32 Síntesis de dihidrocloruro de amida de ácido 3-amino-6-piperidin-4-il-4-propil-3a,7a-dihidro-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se calentó a reflujo durante 3 h ácido 1-Boc-piperidino-4-carboxílico (4,4 g, 19,2 mmol) en cloruro de oxalilo (50 mL) y seguidamente se concentró y se secó a vacío para proporcionar el cloruro de ácido, éster-butílico de ácido 4-clorocarbonil-piperidino-1-carboxílico.

A una solución agitada de LDA (1,8 M en THF/heptano/etil-benceno, 21,3 mL, 38,4 mmol) en THF seco (50 mL) a -50ºC se añadió 2-pentanona (4,1 mL, 38,4 mmol) y después de 10 min se añadió una solución del cloruro de ácido anterior en THF seco (50 mL). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. Se diluyó con HCl 1 N (500 mL), se extrajo con diclorometano, se lavó con bicarbonato de sodio saturado y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. Se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc/diclorometano = 1/10) para proporcionar el intermedio de dicetona deseado: éster terc-butílico de ácido 4-(3-oxo-hexanoil)-piperidin-1-carboxílico (2,1 g).

Una mezcla agitada de la dicetona (2,1 g, 7,1 mmol) y 2-cianotioacetamida (1,42 g, 14,2 mmol) en EtOH (30 mL) se calentó a 70ºC durante una noche. Se concentró y una cromatografía sobre gel de sílice (MeOH/diclorometano = 1/10) proporcionó 1,8 g de éster terc-butílico de ácido 5-ciano-6-mercapto-4-propil-3',4',5',6'-tetrahidro-2'H-[2,4']bipiridinil-1'-carboxílico.

Una mezcla agitada del éster terc-butílico anterior (0,9 g, 2,49 mmol) y bromoacetamida (0,38 g, 2,75 mmol) en dioxano seco (20 mL) se calentó a 80ºC durante 2 h. Se añadió una solución de carbonato de sodio (400 mg) en agua (7 mL) y la reacción se calentó a reflujo durante una noche. Se diluyó con agua (100 mL) y los precipitados se filtraron y se secaron para proporcionar 0,85 g de éster terc-butílico de ácido 4-(3-amino-2-carbamoil-4-propil-3a,7a-dihidro-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperidin-1-carboxílico.

A una solución agitada del éster terc-butílico anterior (600 mg, 1,43 mmol) en diclorometano seco (35 mL) se añadió HCl/dioxano (4 N, 2 mL). Aparecieron inmediatamente precipitados. Se concentró y se secó a vacío para proporcionar el compuesto del título en forma de la sal de dihidrocloruro (570 mg).

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Ejemplo 33 Aminación reductora en fase sólida

El siguiente procedimiento general describe el método mediante el cual se prepararon diversos compuestos de amida de ácido 3-amino-6-(4-sustituido-amino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico:

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A la amida de ácido 3-amino-6-(4-oxo-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico se añadieron 1,5-3,00 equivalentes de la amina deseada, 1,42 de cianoborohidruro en soporte sólido y 8-9 equivalentes de ácido acético en THF. La mezcla de reacción se agitó en un agitador orbital durante 15-72 h. Seguidamente, la reacción se filtró, el cianoborohidruro en soporte sólido se agitó con MeOH durante 5-15 minutos y seguidamente se filtró. A los filtrados combinados se añadió NH_{3} 5 M en MeOH y la mezcla resultante se concentró a vacío. Una purificación a través de TLC preparatoria (5-10% de (NH_{3}/MeOH 5 M)/EtOAc como eluyente) o a través de cromatografía rápida sobre sílice (2,5-10% de (NH_{3}/MeOH 5 M)/CH_{2}Cl_{2} como eluyente) proporcionó los compuestos descritos en la tabla
siguiente:

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102

Ejemplo 34 Aminación reductora en fase sólida

El siguiente procedimiento general describe el método mediante el cual se prepararon diversos intermedios de aminas para ser usados en la preparación de compuestos de amida de ácido 3-amino-6-(4-amino sustituido-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico usando el método del Ejemplo anterior:

103

El aldehído de arilo deseado se disolvió en éter y se hizo reaccionar con cianuro de trimetilsililo (1-2 eq) a 0ºC usando Montmorillonita K 10 (0,1-0,2 eq.) como catalizador ácido. La reacción se agitó 1-3 h y seguidamente se filtró, y el filtrado se concentró a vacío para proporcionar el correspondiente trimetilsilil-éter. El éter se disolvió en THF y se añadió a una solución de borano/THF a 0ºC. La reacción se agitó durante 17-24 h mientras se agotaba el baño frío. La reacción se volvió a enfriar hasta 0ºC y se inactivo con MeOH, y seguidamente se concentró a vacío. El residuo se recogió en EtOAc/CH_{2}Cl_{2} y se añadió HCl/MeOH o HCl/dioxano. El sólido blanco que resultó se aisló mediante filtración con succión o por concentración a vacío para proporcionar las correspondientes sales de HCl de hidroxil-amina. Estas sales de HCl se hicieron reaccionar seguidamente y se purificaron según el método descrito en el Ejemplo 33 para proporcionar los compuestos 34a-34e mostrados en la siguiente tabla:

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Ejemplo 35 Síntesis 2-amida-4-piridin-3-ilamida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico

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Se añadió en porciones alcohol 4-metoxibencílico (11,0 g, 79,7 mmol) a una suspensión de 6,38 g de NaH al 60% en 110 mL de THF a 40ºC y la reacción se agitó 30 min bajo Ar. Se hizo gotear a 40ºC una solución de 10,00 g de 4-cloroacetoacetato de metilo en 40 mL de THF y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió NH_{4}Cl acuoso y el producto se extrajo en EtOAc, se lavó con NH_{4}Cl acuoso y salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró para dar 18,5 g de un aceite. Éste se sometió a cromatografía rápida eluyendo con 15% de acetona/éter de petróleo para proporcionar una fracción de 2,99 g de un aceite que se mostró por RMN (CDCl_{3}) que contenía 80% de éster metílico de ácido 4-(4-metoxi-benciloxi)-3-oxo-butírico puro. Se obtuvo una segunda fracción de 12,01 g de aceite que contenía 55% de éster metílico de ácido 4-(4-metoxi-benciloxi)-3-oxo-butírico por RMN, y el resto era principalmente material de partida sin reaccionar.

Se convirtió éster metílico de ácido 4-(4-metoxi-benciloxi)-3-oxo-butírico en 2-[3-ciano-6-trifluoro-metanosulfoniloxi-4-(4-metoxi-benciloximetil)-piridin-2-ilsulfanil]-acetamida mediante los procedimientos anteriormente descritos en los Ejemplos 8 y 30.

El intermedio anterior (9,00 g) se disolvió en 171 mL de CH_{2}Cl_{2} y 9 mL de agua. Se añadió 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ) (12,47 g) y la suspensión oscura se agitó durante 6 h y seguidamente se añadieron otros 4,16 g de DDQ y la reacción se agitó durante una noche. La reacción se sometió a decantación y el precipitado rojo gomoso restante se trituró 2 veces con CH_{2}Cl_{2} y se sometió a decantación. El precipitado se disolvió en EtOAC, se lavó con agua (4 veces) y NaHCO_{3} acuoso, se secó y se concentró hasta dar un sólido pardo. Éste se trituró en CH_{2}Cl_{2}, se filtró y se secó para proporcionar 4,61 g (68%) del intermedio de hidroximetilpiridina deseado en forma de un sólido color castaño.

Se añadió cloruro de terc-butildimetilsililo (8,94 g) a una solución de 5,00 g de 4-hidroxipiperidina en 25 mL de DMF y la reacción exotérmica se colocó en un baño con hielo durante 10 min y seguidamente se añadieron 10,10 g de imidazol y la reacción se agitó a temperatura ambiente bajo Ar durante una noche. Una TLC mostró principalmente el material de partida. Se añadieron 4-dimetilaminopiridina (0,60 g) y 7,45 g de más cloruro de terc-butildimetilsililo y la reacción se agitó durante una noche. Esta se vertió en Na_{2}CO_{3} acuoso, se extrajo con EtOAc (3 veces), se lavó con agua (4 veces), se secó y se concentró hasta dar 15,3 g de un aceite amarillo. Este se sometió a cromatografía rápida eluyendo con 0-10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar varias fracciones de pureza variable. La mejor contenía 2,9 g de aceite amarillo que se determinó por RMN (CDCl_{3}) que contenía 55% en moles de 4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidina:45% en moles de cloruro de terc-butil-dimetilsililo.

La 4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidina en bruto se acopló con el intermedio de 4-hidroximetilpiridina que antecede mediante el procedimiento descrito en el Ejemplo 30 para proporcionar amida de ácido 3-amino-6-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-4-hidroximetil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico.

Una mezcla de 400 mg de la amida anterior, 298 mg de KCN, 1,59 g de MnO_{2} y 157 microL de ácido acético se puso en suspensión en 16 mL de MeOH y la reacción se tapó y se agitó durante 2 días. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas, se concentró y se sometió a cromatografía rápida eluyendo con 5% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 254 mg (60%) de éster metílico de ácido 3-amino-6-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-carboxílico según se determinó por RMN (DMDO). Una elución adicional con 25% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}/1% de HOAc produjo 151 mg (36%) del correspondiente ácido carboxílico según se determinó por RMN (DMDO).

Se añadieron 81 mg de hidrocloruro de 1-[dimetilaminopropil]-3-etilcarbodiimida a una solución de 9,5 mg del ácido carboxílico anterior en 0,5 mL de DMF seca a 0ºC. Después de 15 min se añadieron 99 mg de 3-aminopiridina y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Esta se diluyó con EtOAc, se lavó con agua (4 veces) y NH_{4}Cl acuoso (3 veces), se secó, se concentró y se purificó por TLC preparativa en 7,5% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}/0,5% de NH_{4}OH. La banda principal se eluyó con 50% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 12,8 mg de aceite que se mostró que era una mezcla de 2-amida-4-piridin-3-ilamida de ácido 3-amino-6-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-tieno[2,3-b]piridin-2,4-dicarboxílico y material de partida sin reaccionar por RMN (CD_{3}OD). La mezcla se disolvió en 0,5 mL de CH_{2}Cl_{2} y se añadieron 50 microL de complejo de HF-piridina y la reacción se agitó durante una noche. La solución transparente se separó por decantación y el precipitado gomoso se lavó y se separó por decantación 2 veces más con CH_{2}Cl_{2}. El precipitado se disolvió en 10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}, se neutralizó con una gota de NH_{4}OH concentrado, se aplicó a una placa de TLC preparativa y se desarrolló dos veces en 10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}/1% de NH_{4}OH. La banda se eluyó con 50% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 2,0 mg (23%) del compuesto del título.

2-amida-4-metilamida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2,4-dicarboxílico:

Este compuesto se preparó a partir del éster metílico de ácido 3-amino-6-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-2-carbamoil-tieno[2,3-b]piridin-4-carboxílico anterior combinando 10 mg del éster en 1 mL de CH_{2}Cl_{2} con 0,5 mL añadidos de metil- amina 2 M en THF. La reacción se tapó y se agitó 2 días. La reacción se concentró para proporcionar 2-amida-4-metilamida de ácido 3-amino-6-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-piperidin-1-il]-tieno[2,3-b]piridin-2,4-dicarboxílico en forma de un sólido amarillo. Éste se disolvió en 0,5 mL de 10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} y se añadieron 50 microL de complejo HF-piridina y la reacción se tapó y se agitó durante una noche. La reacción fue barrida con N_{2}, se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO_{3} acuoso y NH_{4}Cl acuoso, se secó, se concentró y se purificó por TLC preparativa eluyendo con 10% de MeOH/CH_{2}Cl_{2}. La banda se eluyó con 25% de MEOH/CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 2,7 mg (35%) del compuesto del título en forma de un sólido amarillo.

Ejemplo 36 Síntesis de amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Se disolvió éster 3-amino-2-carbamoil-4-metilsulfanil-tieno[2,3-b]piridin-6-ílico de ácido trifluorometanosulfónico (500 mg, 1,29 mmol) en MeOH (10 mL), enfriado a 0ºC, y se añadió peroximonosulfato de potasio (950 mg, 1,55 mmol) disuelto en agua (15 mL). La mezcla se agitó durante 18 h, después de lo cual se filtró para proporcionar el éster 3-amino-2-carbamoil-4-metilsulfinil-tieno[2,3-b]piridin-6-ílico de ácido trifluorometanosulfónico con un rendimiento de 86%.

El éster anterior (100 mg, 0,25 mmol) se dislvió en dioxano (5 mL), se añadió 4-hidroxipiperidina (100 mg, 1,0 mmol) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con solución saturada de cloruro de amonio y la fase acuosa se extrajo con diclorometano varias veces. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4} y se evaporaron. El producto se purificó finalmente por cromatografía de columna para producir 43 mg de amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-metanosulfinil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico (49%).

El producto anterior se disolvió en EtOH y se añadieron 235 microL de una solución 2,7 M de etóxido de sodio en EtOH. La solución se calentó a 80ºC durante 6 h. La mezcla se vertió en una solución acuosa de NH_{4}Cl y la fase acuosa se extrajo tres veces con diclorometano. Las fases combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se evaporaron. El producto se purificó por cromatografía de columna para producir 23 mg del compuesto del tíulo (54%).

Los siguientes compuestos se prepararon en la manera anteriormente descrita:

Amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

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Amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-4-metil-piperidin-1-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico:

108

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Amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-isopropoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico

109

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Amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-isopropoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico:

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Amida de ácido 3-amino-6-(1,1-dioxo-1-tiomorfolin-4-il)-4-etoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico:

111

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Valoración de las propiedades biológicas

La inhibición de IKK\alpha e IKK\beta por los compuestos de la presente invención se determinó con el siguiente ensayo que mide la fosforilación del sustrato I\kappaB\alpha por las respectivas quinasas. Las enzimas usadas en este ensayo fueron versiones con etiquetas marcadoras en el N terminal de IKK\beta o IKK\alpha humanos y el sustrato fue una proteína de fusión GST con I\kappaB\alpha (aminoácidos 1-54).

Las mezclas de reacción (60 \mul) contenían HEPES 20 mM, pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, MnCl_{2} 2 mM, NaCl 100 mM, Na_{3}VO_{4} 100 \muM, \beta-glicerofosfato 20 mM, DTT 1 mM, 2% de DMSO, ATP 250 nM [^{33}P]ATP 0,4 nM (actividad específica, 3000 Ci/mmol), sustrato I\kappaB\alpha, enzima IKK y compuesto del ensayo. Las mezclas de reacción contenían 3,6 \mug/ml de IKK\alpha y 245 \mug/ml de IKK\alpha ó 0,9 \mug/ml de IKK\beta y 53 \mug/ml de I\kappaB\alpha.

Las reacciones se iniciaron añadiendo una solución de sustrato I\kappaB\alpha y ATP a placas de polipropileno que contenían enzima IKK que fue previamente incubada durante 5 minutos con compuesto del ensayo. Seguidamente las mezclas de la reacción se incubaron durante 1 hora a 25ºC, se colocaron sobre hielo y se inactivaron mediante la adición de 150 \mul de ácido tricloroacético al 10% y pirofosfato de disodio al 5%. Después de mezclar, el contenido completo de las mezclas de reacción inactivadas se transfirió a una placa de filtración Packard UniFilter previamente humedecida, se aspiró y se lavó 6 veces con 250 \mul de ddH_{2}O usando el dispositivo de recolección Packard Filtermater Harvester. Seguidamente las placas de filtración se secaron con aire, se complementaron con 40 \mul de fluido de escintilación Microscint 20 y los productos de reacción marcados con ^{33}P se cuantificaron usando el contador de escintilación Packard TopCount.

Los compuestos se ensayaron en diluciones en serie de tres veces y las concentraciones de inhibidor para conseguir una inhibición de 50% de la actividad enzimática (es decir, IC_{50}) se derivaron a partir de curvas de respuesta a la dosis usando un software SAS (SAS Institute, Cary NC). Se aplicó un análisis de regresión no lineal basado en la ecuación de Hill al porcentaje de la inhibición frente a los datos de concentración. En todos los casos, las concentraciones del compuesto se verificaron por HPLC.

Los compuestos en las Tablas en la sección de la Descripción Detallada de la Ivención se evaluaron todos en el ensayo en cuanto a la inhibición de IKK\beta y tenían valores de IC_{50} de 10 \muM o por debajo. Los compuestos citados a continuación tenían valores de IC_{50} por debajo de 1 \muM en este ensayo:

Amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-[(E)-2-(4-cloro-fenil)-vinil]-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-imidazol-1-il-4-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-metil-6-piperazin-1-il-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-carbamoil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2- carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-piperazin-1-il-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metanosulfonil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-hidroxi-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(3-amino-propanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-(4-hidroxi-4-fenil-piperidin-1-il)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2-amino-etanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-carbamoil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-((S)-3-amino-pirrolidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-((R)-3-amino-pirrolidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-dimetilamino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

éster metílico de ácido 4-(3-amino-2-carbamoil-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-6-il)-piperazin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(4-amino-butanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-((R)-2-amino-propanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-((S)-2-amino-propanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 6-(4-acetilamino-piperidin-1-il)-3-amino-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(piperidin-4-ilamino)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-4-metil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metilamino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-[(E)-2-(4-cloro-fenil)-vinil]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-fenetil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-aminometil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-fenil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-[(E)-2-(2-cloro-fenil)-vinil]-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-fluoro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-metoxi-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(1-piperidin-4-il-metanoil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metil-[1,4]diazepan-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(3-nitro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-amino-propilamino)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-carbamoil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(3-metil-ureido)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 6-(4-acetil-[1,4]diazepan-1-il)-3-amino-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-carbamoil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-amino-perhidro-azepin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(3-aminometil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-piperazin-1-il-4-trifluorometil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico; y

amida de ácido 3-amino-6-(2-hidroximetil-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico.

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Los compuestos seleccionados a partir de la Tabla en la sección de la Descripción Detallada de la Invención se evaluaron en cuanto a la inhibición de IKK\alpha. Los compuestos citados tenian valores de IC_{50} de 10 \muM o por debajo en este ensayo:

Amida de ácido 3-amino-4-furan-2-il-6-metil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-isopropoxi-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-metil-4-(4-nitro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-metil-4-((E)-estiril)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-(4-metanosulfonil-fenil)-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-4-[(E)-2-(4-fluoro-fenil)-vinil]-6-metil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metil-piperazin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-((E)-estiril)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico; y

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-(4-nitro-fenil)-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I):

112

en la cual:

R_{1} es

(b): R_{6}(CH_{2})_{m}O-,

(c): R_{6}OCH_{2}-,

(d): R_{6}(CH_{2})_{m}NH-,

(e): R_{6}(CH_{2})_{p}(CH=CH)_{m}-,

(f): alquilo C_{1-6}, opcionalmente parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R_{9},

(g): alcoxi C_{1-8}, opcionalmente parcial o completamente halogenado y opcionalmente sustituido con uno a dos R_{9},

(h): -N(R_{4})(R_{5}), o

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R_{2} es

(a): alquilo C_{1-6}, opcionalmente sustituido con R_{10},

(b): alcoxi C_{1-6}, opcionalmente sustituido con R_{10},

(c): alquilamino C_{1-6}, opcionalmente sustituido con R_{10},

(d): heterociclilo, seleccionado entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo, 1-pirrolidinilo, 1,4-diazacicloheptan-1-ilo, 1-azepanilo, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-ilo, oxazepan-4-ilo y 4-tiomorfolino y está opcionalmente sustituido con uno o tres R_{7},

(e): heterociclil-CH_{2}O- en donde el heterociclilo se selecciona entre 1-piperidinilo, 1-piperazinilo, 4-morfolinilo y 1-pirrolidinilo, opcionalmente sustituidos con alquilo C_{1-6}, o

(f): -N(R_{4})(R_{5}),

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\quad: R_{6} es un grupo fenilo opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados entre Cl, F, alquilo C_{1-6}, -CN, -CO_{2}-alquilo C_{1-6}, -C(O)NR_{4}R_{5}, -SO_{2}NH_{2}, -NO_{2}, -OH, -NH_{2}, -CF_{3} y alcoxi C_{1-6}, o R_{6} es cicloalquilo C_{3-6}, -CH_{2}OH, naftalen-2-ilo, naftalen-1-ilo ó 2-tienilo;

\quad: R_{7} se selecciona entre -OH, -CN, oxo, -CO_{2}alquilo C_{1-6}, -CO_{2}H, -C(O)N(R_{4})(R_{5}), -N(R_{4})(R_{5}), -CH_{2}N(R_{4})(R_{5}), -CH_{2}OH, alquilo C_{1-6}, -C(O)-alquil C_{1-6}N(R_{4})(R_{5}), -NHC(O)N(R_{4})(R_{5}), -S(O)_{n}alquilo C_{1-6}, H_{2}NCH(R_{8})C(O)-, HO(CH_{2})_{m}CH_{2}CH(NH_{2})C(O)-, HOCH(R_{6})CH_{2}NH- y -C(O)heterociclilo, en donde dicho heterociclilo se selecciona entre piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo y pirrolidinilo, o R_{7} is 2-hidroxietilamino, metilcarbamidoilo, hidroxiimino, hidrazinocarbonilo, sulfamoilo, metanosulfonilamino, metilsulfonilhidrazino, 2-hidroxipropilamino, 2,3-dihidroxipropilamino, 2-hidroxi-1-metiletilamino, carbamoilmetilamino, N'-fenilhidrazinocarbonilo o tolueno-4-sulfonilamino;

\quad: R_{9} es -OH;

\quad: R_{10} se selecciona entre -OH, -N(R_{4})(R_{5}), alcoxi C_{1-6} y heteroarilo, seleccionado entre furanilo, tienilo y piridilo;

\quad: m es 0 ó 1;

\quad: n es 0, 1 ó 2; y

\quad: p es 0, 1, 2 ó 3;

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con la condición de que si R_{1} es fenilo o heteroarilo, alquilo C_{1-6}, -CF_{3}, entonces R_{2} no es alquilo C_{1-6}.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionado entre el grupo que consiste en:

amida de ácido 3-amino-6-(4-amino-piperidin-1-il)-4-[(E)-2-(4-metoxi-fenil)-vinil]-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(2-hidroxi-etilamino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-metanosulfonilamino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(N'-fenil-hidrazinocarbonil)-piperazin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-nitro-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-hidroxi-2-(4-hidroxi-fenil)-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-4-(4-metanosulfonil-fenil)-tieno[2,3-b]piridin-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-((S)-3-hidroxi-4-metanosulfonilamino-piperidin-1-il)-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-[4-(N'-metilsulfonil-hidrazino)-piperidin-1-il]-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

amida de ácido 3-amino-6-{4-[2-(4-bencilcarbamoil-fenil)-2-hidroxi-etilamino]-piperidin-1-il}-4-propil-tieno[2,3-b]piridina-2-carboxílico;

y sus sales, ésteres, tautómeros, isómeros individuales y mezclas farmacéuticamente aceptables.

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3. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2.

4. Uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, para el tratamiento de estados de enfermedad inflamatoria o autoinmune.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad o estado inflamatorio o autoinmune se selecciona entre la lista que consiste en osteoartritis, herida de reperfusión, asma, esclerosis múltiple, síndrome de Guillain-Barre, enfermedad de Crohn, colitis ulcerativa, psoriasis, enfermedad de injerto frente a hospedante, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Alzheimer, síndrome de choque tóxico, diabetes mellitus dependiente de insulina, dolor agudo y crónico, herida térmica, síndrome de angustia respiratoria en adultos (ARDS), enfermedad de obstrucción pulmonar crónica (COPD), herida múltiple de órganos secundaria por trauma, glomerulonefritis aguda, dermatosis con componentes inflamatorios agudos, meningitis purulenta aguda y otros trastornos del sistema nervioso central, enfermedad de Grave, miastenia grave, escleroderma y dermatitis atópica.

6. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad inflamatoria o autoinmune se selecciona entre osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad de Chrohn, colitis ulcerativa, asma, síndrome de angustia respiratoria en adultos (ARDS) y enfermedad de obstrucción pulmonar crónica (COPD).

7. Uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la aterosclerosis, infarto de miocardio o apoplejía.

8. Uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cáncer seleccionado entre enfermedades malignas de derivación linfoide, mieloide y epitelial, leucemia, linfomas, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer colorrectal, cáncer de pulmón y cáncer pancreático.

9. Un método para preparar un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, método que comprende:

\newpage

(a): hacer reaccionar un compuesto de fórmula (XVb) con 2-cloro- ó 2-bromo-acetamida en presencia de una base adecuada, en un disolvente adecuado, para formar el intermedio de fórmula (XVIb)

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(b): hacer reaccionar el intermedio de fórmula (XVIb) con un reactivo sulfonante adecuado en presencia de una base adecuada en un disolvente adecuado para formar el éster de sulfonilo de fórmula (XVIIb)

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114

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(c): hacer reaccionar el intermedio de fórmula (XVIIb) con el nucelófilo deseado, como la amina, para introducir R_{2} en presencia de una base adecuada como trietilamina, seguido de la adición de una segunda base adecuada y una reacción adicional para formar el compuesto deseado de fórmula (I)

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