ES2327630T3 - Forma galenica para el suministro colico de principios activos. - Google Patents
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Abstract
Forma galénica multiparticulada apta para usar por vía oral y destinada al suministro cólico de principios activos, caracterizada porque comprende perlas de pectina presente en forma de una sal catiónica que comprende el principio activo, estando dicha pectina reticulada con un polímero catiónico elegido del grupo constituido por polietilenimina, polilisina y sus derivados.
Description
Forma galénica para el suministro cólico de
principios activos.
La presente invención se refiere a una forma
galénica de suministro cólico, a su procedimiento de preparación y
a su uso en terapia.
Se ha reconocido que los sistemas de liberación
específica al nivel del colon presentan importantes ventajas
terapéuticas.
Efectivamente, podrían tratarse un gran número
de enfermedades cólicas más eficazmente si el principio activo se
liberara localmente. Este es el caso, entre otras, de la enfermedad
de Crohn, de colitis ulcerosas, de cáncer colorrectal y de
diarrea.
La liberación cólica podría ser también
interesante cuando, desde el punto de vista terapéutico, sea
necesario un retardo de la absorción, particularmente en el
tratamiento de patologías como asma nocturna o angina de pecho
(Kinget R. et al. (1998), "Colonic Drug Targeting",
Journal of Drug Targeting, 6, 129).
La administración de principios activos
polipeptídicos se hace esencialmente por vía parenteral, que es
dolorosa y es el origen de una mala observancia de los
tratamientos. Desde hace algunos años, hay por lo tanto interés por
el uso del colon como sitio de absorción de principios activos
peptídicos (analgésicos, anticonceptivos, vacunas, insulina...). La
absorción de péptidos al nivel del colon parece efectivamente mejor
que al nivel de otros sitios del tubo digestivo, particularmente
con una actividad proteolítica netamente menor que al nivel del
intestino delgado y con ausencia de actividad peptidasa asociada a
la membrana de células epiteliales cólicas.
En la administración de antibióticos por la
boca, estos atraviesan el estómago y después son absorbidos al
nivel del intestino delgado para difundirse por el conjunto del
organismo y tratar el foco infeccioso para el que se han
administrado. Sin embargo, una fracción de los antibióticos
ingeridos (cuya cantidad varía con las características propias de
cada tipo de antibiótico) no es absorbida y continúa su progresión
hasta el colon antes de eliminarse en las heces. Estos antibióticos
residuales se reúnen, al nivel del intestino delgado, con una
fracción de los antibióticos absorbidos pero que se reexcretan al
tubo digestivo mediante la eliminación biliar. Esta fracción es de
una cantidad variable en función del metabolismo y de las vías de
eliminación de cada antibiótico. Por último, para ciertos
antibióticos, una fracción de la dosis absorbida se elimina
directamente por la mucosa intestinal en la luz del tubo digestivo.
Así, tanto si los antibióticos se han administrado por vía oral
como por vía parenteral, se encuentra generalmente una fracción
residual activa al nivel del colon. Esto es cierto, en diversos
grados, para la gran mayoría de las familias de antibióticos usados
en terapia, siendo la única excepción notable la familia de los
aminoglucósidos, para los que la excreción intestinal es
despreciable. Para los demás antibióticos, la excreción intestinal
de una actividad antibiótica residual va a tener diferentes
consecuencias, todas perjudiciales. En efecto, existe al nivel del
colon un ecosistema bacteriano complejo (varios centenares de
especies bacterianas diferentes) y muy denso (más de 10^{11}
bacterias por gramo de contenido cólico) que se va a ver afectado
por la llegada de los residuos activos de antibióticos. Se podrá
observar:
1) un desequilibrio de la flora que sería la
causa principal de las diarreas banales que siguen a veces a la
toma de antibióticos (Bartlett J.G. (2002) "Clinical practice.
Antibiotic associated diarrea", New England Journal of
Medicine, 346, 334). Aunque estas diarreas no sean generalmente
graves y cedan rápidamente, o bien espontáneamente o bien al
detenerse el tratamiento, son de cualquier modo mal apreciadas por
los pacientes y se suman a la incomodidad de la enfermedad de base
para la que se ha prescrito el antibiótico;
2) una perturbación de las funciones de
resistencia a la colonización por bacterias exógenas (o "efecto
barrera") con posibilidades de riesgo aumentado de infección,
por ejemplo, intoxicación alimentaria por Salmonella
(Holmberg S.D. et al. (1984) "Drug resistant Salmonella
from animals fed antimicrobials", New England Journal of
Medicine, 311, 617);
3) la selección de microroganismos resistentes
al antibiótico. Estos últimos pueden ser de diversos tipos:
- a)
- puede tratarse en primer lugar de bacterias patogénicas como, por ejemplo, Clostridium difficile, especie capaz de secretar toxinas causantes de colitis temibles denominadas seudomembranosas (Bartlett J.G. (1997) "Clostridium difficile infection: pathophysiology and diagnosis", Seminar in Gastrointestinal Disease, 8, 12);
- b)
- puede tratarse también de microorganismos relativamente poco patogénicos pero cuya multiplicación puede conducir a una infección de vecindad (candidiasis vaginal o cistitis por Escherichia coli resistente);
- c)
- puede tratarse finalmente de bacterias resistentes comensales no patogénicas pero cuya multiplicación y eliminación fecal va a aumentar la diseminación en el ambiente. Ahora bien, estas bacterias comensales resistentes pueden constituir una fuente importante de mecanismos de resistencia para especies patogénicas. Este riesgo está actualmente considerado como alto a causa del carácter inquietante de la evolución hacia la multirresistencia de numerosas especies patogénicas para el hombre.
Se han considerado por tanto numerosas
estrategias que explotan los diversos parámetros fisiológicos del
tubo digestivo con el objetivo de liberar los principios activos al
nivel del colon. Se han realizado estudios particularmente con la
ayuda de sistemas de administración basados en (1) el uso de
polímeros sensibles a las variaciones del pH, (2) formas
de liberación dependientes del tiempo, (3) profármacos o incluso polímeros degradables por las bacterias de la flora.
de liberación dependientes del tiempo, (3) profármacos o incluso polímeros degradables por las bacterias de la flora.
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El pH al nivel del estómago es del orden de 1 a
3, pero aumenta en el intestino delgado y el colon para alcanzar
valores cercanos a 7 (Hovgaard L. et al. (1996) "Current
Applications of Polysaccharides in Colon Targeting", Critical
Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 13, 285). Para que
un principio activo llegue al colon sin sufrir estas variaciones de
pH, es posible administrarlo en forma de comprimidos, de cápsulas
duras o de esferoides recubiertos con un polímero dependiente del
pH, insoluble a pH ácido pero soluble a pH neutros o alcalinos
(Kinget et al. ya citado). Los polímeros más habitualmente
usados son derivados del ácido metacrílico, Eudragit® L y S
(Ashford M. et al. (1993), "An in vivo investigation
into the suitability of pH-dependent polymers for
colonic targeting", International Journal of
Pharmaceutics, 95, 193 y 95, 241; y David A. et al.
(1997) "Acrylic polymers for colon-specific drug
delivery", S.T.P. Pharma Sciences, 7, 546).
Dada la importante variabilidad inter- e
intraindividual de los valores de pH existentes al nivel del tracto
gastrointestinal, los polímeros dependientes del pH no representan
el mejor medio para obtener una liberación específica al nivel del
colon (Ashford M. et al., ya citado).
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La formulación de estos sistemas es tal que
permite una liberación de principios activos después de un intervalo
de tiempo predefinido. Con el fin de liberar el principio activo al
nivel del colon, estas formas deben a la vez resistir el entorno
ácido del estómago y entrar en una fase silenciosa de un tiempo
predeterminado antes de liberar el principio activo,
correspondiente al tiempo de tránsito de la boca al íleon terminal
(Gazzaniga A. et al. (1995)
"Time-dependent oral delivery systems for colon
targeting", S.T.P. Pharma Sciences, 5, 83 y 108, 77; Liu
P. et al. (1999)
"Alginate/Pectin/Poly-L-lysine
particulate as a potential controlled release formulation",
J. Pharm. Pharmacol., 51, 141; Pozzi F. et al. (1994)
"The Time Clock system: a new oral dosage form for fast and
complete release of drug after predetermined lag time",
Journal of Controlled Release, 31, 99).
La Pulsincap® de Scherer estuvo entre las
primeras formulaciones de este tipo (solicitud internacional WO
90/
09168). Tiene la apariencia de una cápsula dura cuyo cuerpo es insoluble en agua. El principio activo se mantiene en el cuerpo mediante un tapón de hidrogel dispuesto al nivel de la cabeza de la cápsula dura hidrosoluble. Está todo recubierto con una película gastrorresistente. Después de la disolución de la cabeza al nivel de intestino delgado, el tapón se hincha en contacto con los líquidos digestivos. Cuando este último alcanza un umbral de hinchamiento crítico, se expulsa, permitiendo así la liberación del principio activo. El tiempo de expulsión está controlado por las propiedades del hidrogel que compone el tapón.
09168). Tiene la apariencia de una cápsula dura cuyo cuerpo es insoluble en agua. El principio activo se mantiene en el cuerpo mediante un tapón de hidrogel dispuesto al nivel de la cabeza de la cápsula dura hidrosoluble. Está todo recubierto con una película gastrorresistente. Después de la disolución de la cabeza al nivel de intestino delgado, el tapón se hincha en contacto con los líquidos digestivos. Cuando este último alcanza un umbral de hinchamiento crítico, se expulsa, permitiendo así la liberación del principio activo. El tiempo de expulsión está controlado por las propiedades del hidrogel que compone el tapón.
Los sistemas basados en el tiempo de tránsito
presentan sin embargo numerosos inconvenientes (variabilidades de
los tiempos de vaciado gástrico y de tránsito, fenómenos de
retención al nivel de la válvula ileocecal (Kinget R., ya citado),
proporcionando falta de especificidad e impidiendo llegar a una
validación de estos últimos como sistemas de liberación específica
al nivel del colon. Por último, la producción a gran escala de este
tipo de sistemas es difícilmente factible, puesto que necesitaría
una adaptación importante y costosa de las tecnologías
industriales.
Recientemente se ha desarrollado una nueva forma
para orientación cólica, la "cápsula de suministro orientada a
colon" (CTDC en inglés) (Ishibashi T. et al. (1998)
"Design and evaluation of a new capsule-type
dosage form for colon-targeted delivery of
drugs", International Journal of Pharmaceutics, 168, 31 y
57, 45). La CTDC es un sistema que asocia a la vez el factor
dependiente del pH y el factor dependiente del tiempo. Se presenta
en forma de una cápsula dura clásica que comprende el principio
activo y un ácido orgánico (ácido succínico) recubierta con 3
capas.
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Los profármacos se han estudiado mucho para la
orientación cólica de diversos principios activos (antiinflamatorios
no esteroideos y esteroideos, espasmolíticos...). Estos sistemas
están basados en la capacidad que tienen las enzimas producidas por
la flora cólica de degradar los profármacos con el fin de liberar la
forma activa del principio activo.
Se han desarrollado particularmente numerosos
profármacos basados en la acción de las azoreductasas bacterianas
con el objetivo de liberar al nivel del colon principios activos
tales como ácido 5-aminosalicílico
(5-ASA) usado en el tratamiento de patologías
locales como enfermedad de Crohn o colitis ulcerosas (Peppercorn
M.A. et al. (1972) "The role of intestinal bacteria in the
metabolism of salicylazosulfapyridine", The Journal of
Pharmacology and Expérimental Therapeutics, 181, 555 y 64,
240).
Otro enfoque consiste en explotar las hidrolasas
bacterianas como las glucosidasas y las polisacaridasas (Friend
D.R. (1995) "Glycoside prodrugs: novel pharmacotherapy for colonic
diseases", S. T. P. Pharma Sciences, 5, 70; Friend D.R.
et al. (1984) "A colon-specific
drug-delivery system based on drug glycosides and
the glycosidases of colonic bacteria", Journal of Medicinal
Chemistry, 27, 261; Friend D.R. et al. (1985) "Drug
glycosides: potential prodrugs for colon-specific
drug delivery", Journal of Medicinal Chemistry, 28, 51 y
Friend D.R. et al. (1992) "Drug glycosides in oral
colon-specific drug delivery", Journal of
Controlled Release, 19, 109). Se han desarrollado así
profármacos que acoplan, por ejemplo, esteroides a azúcares
(glucosa, galactosa, celobiosa, dextrano (solicitud internacional
WO 90/09168)), ciclodextrinas (Hirayama F. et al. (1996)
"In vitro evaluation of Biphenylyl Acetic
Acid-\beta-Cyclodextrin conjugates
as colon-targeting prodrugs: drug release behavior
in rat biological media", Journal of Pharmacy and
Pharmacology, 48, 27).
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En este caso, la orientación cólica se hace
mediante recubrimiento de la forma farmacéutica con un polímero
específicamente degradado por las enzimas producidas por la
microflora, aprovechando la presencia de azoreductasas o
glucosidasas bacterianas.
Se han utilizado numerosos polímeros que
comprenden enlaces azoaromáticos para recubrir un principio activo.
Saffran et al. ("Oral insulin in diabetic dogs",
Journal of Endocrinology (1991), 131, 267 y "A new approach
to the oral administration of insulin and other peptide drugs",
Science (1986), 233, 1081) han descrito así la liberación de
insulina y vasopresina en el colon de ratas y perros a partir de
formas orales recubiertas con copolímeros de estireno y metacrilato
de hidroxietilo (HEMA) ligados por enlaces azoaromáticos. Este
recubrimiento se degrada en el colon mediante las azoreductasas
bacterianas, ocasionando así la liberación de la sustancia
activa.
La ventaja de los azopolímeros es que permite
una selectividad cólica muy buena para la liberación de principios
activos. El inconveniente ligado a su uso es la falta de
conocimientos sobre su eventual toxicidad.
Para evitar este inconveniente, otros estudios
se han dirigido más bien al uso de una película de recubrimiento
basada en sustancias naturales como polisacáridos, particularmente
películas de recubrimiento basadas en amilosa/etilcelulosa
(Milojevic S. et al. (1996) "Amylose as a coating for drug
delivery to the colon: preparation and in vitro evaluation
using 5-aminosalicylic acid pellets", Journal
of Controlled Release, 38, 75), basadas en un éster de dextrano
(Bauer K.H. et al. (1995) "Novel pharmaceutical excipients
for colon targeting", S.T.P. Pharma Sciences, 5, 54) o de
pectina.
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Otro enfoque de sistemas de liberación
específica al nivel del colon consiste en la elaboración de matrices
mediante compresión de una mezcla de principio activo y polímeros
biodegradables como sulfato de condroitina (Rubinstein A. et
al. (1992b) "Chondroitin sulfate: a potential biodégradable
carrier for colon-specific drug delivery",
International Journal of Pharmaceutics, 84, 141 y Rubinstein
A. et al. (1992a) "Colonic drug delivery: enhanced release
of Indomethacin from cross-linked chondroitin matrix
in rat cecal content", Pharmaceutical Research, 9, 276),
goma guar (Krishnaiah Y.S.R. y col. (1998) "Evaluation of guar gum
as a compression coat for drug targeting to colon",
International Journal of Pharmaceutics, 171, 137), quitosano
(Tozaki H. et al. (1997) "Chitosan capsules for
colon-specific drug delivery: improvement of insulin
absorption from the rat colon", Journal of Pharmaceutical
Sciences, 86, 1016) o pectina (Rubinstein A. et al.
(1993) In vitro evaluation of calcium pectinate: a potential
colon-specific drug delivery carrier,
Pharmaceutical Research, 10, 258).
Los sistemas basados en la actividad enzimática
de la flora microbiana son probablemente los que presentan más
especificidad cólica para la liberación de principios activos.
Constituyen por tanto una vía de futuro para la orientación
cólica.
El interés de los polisacáridos en la
preparación de sistemas para administración cólica reside en el
hecho de que son de origen natural, poco tóxicos y se degradan
específicamente mediante enzimas bacterianas de la flora
cólica.
Así, la pectina es un polisacárido aislado de
las paredes celulares de vegetales superiores, muy usada en la
industria agroalimentaria (como gelificante o espesante de
mermeladas, helados...) y farmacéutica. Es polimolecular y
polidispersa. Su composición varía según la fuente, las condiciones
de extracción y los factores ambientales.
Las pectinas están compuestas principalmente por
concatenaciones lineales de ácidos
\beta-1,4-(D)-galacturónicos a
veces interrumpidas por unidades de ramnosa. Los agrupamientos
carboxílicos de ácidos galacturónicos pueden estar parcialmente
esterificados para dar pectinas metiladas. Se distinguen dos tipos
de pectina según su grado de metilación (DM: número de
agrupamientos metoxi por 100 unidades de ácido galacturónico):
- -
- la pectina altamente metilada (HM: rica en metoxi) cuyo grado de metilación varía entre 50 y 80%. Es poco soluble en agua y forma geles en medio ácido (pH< 3,6) o en presencia de azúcares;
- -
- la pectina débilmente metilada (LM: baja en metoxi), con un grado de metilación que va de 25 a 50%. Más soluble en agua que la pectina HM, da geles en presencia de cationes divalentes como los iones Ca^{2+}. Efectivamente, los iones Ca^{2+} forman "puentes" entre los agrupamientos carboxilo libres de los ácidos galacturónicos. La red así formada se ha descrito por Grant et al. con el nombre de "modelo de caja de huevos" (Grant G.T. et al. (1973) "Biological interactions between polysaccharides and divalent cations: the egg-box model", FEBS Letters, 32, 195).
Existen también pectinas amidadas. Mediante el
tratamiento de la pectina con amoniaco, pueden transformarse
ciertos agrupamientos carboxilato de metilo (-COOCH_{3}) en
agrupamientos carboxamida (-CONH_{2}). Esta amidación confiere
nuevas propiedades a las pectinas, particularmente una mejor
resistencia a las variaciones del pH.
La pectina se degrada mediante enzimas
procedentes de vegetales superiores y de diversos microorganismos
(champiñones, bacterias) entre los que se encuentran las bacterias
de la flora cólica humana. Las enzimas producidas por la microflora
están compuestas por un conjunto de polisacaridadasas, de
glucosidasas y de esterasas.
El recubrimiento de una forma galénica con
pectina se efectúa o bien por compresión (Ashford M. et al.
(1993b), "An evaluation of pectin as a carrier for drug targeting
to the colon", Journal of Controlled Release, 26, 213), o
bien por pulverización. El recubrimiento por compresión se realiza
generalmente con la pectina sola, mientras que el de pulverización
necesita el empleo de un polímero filmogénico además de pectina
(Milojevic S. et al. (1996) "Amylose as a coating for drug
delivery to the colon: preparation and in vitro evaluation
using 5-aminosalicylic acid pellets", Journal
of Controlled Release, 38, 75; Wakerly Z. et al. (1996)
"Pectin/ethycellulose film coating formulations for colonic drug
delivery", Pharmaceutical Research, 13, 1210).
Se han estudiado igualmente numerosas formas
matriciales basadas en pectina. Están constituidas generalmente o
bien por pectina pura o bien por su complejo con iones Ca^{2+}
débilmente hidrosoluble, el pectinato de calcio. Se ha descrito
particularmente una matriz de pectinato de calcio que contiene
indometacina por Rubinstein et al. (1992a) "Colonic drug
delivery: enhanced release of Indomethacin from
cross-linked chondroitin matrix in rat cecal
content", Pharmaceutical Research, 9, 276), que muestra
una mejor estabilidad del pectinato de calcio que de la pectina
sola en los medios digestivos, permaneciendo sensible a la acción de
las enzimas pectinolíticas.
Se han estudiado también las pectinas amidadas,
más tolerantes a las variaciones de pH, para la elaboración de
comprimidos matriciales de fin cólico (Wakerly Z. et al.
(1997) "Studies on amidated pectins as potential carriers in
colonia drug delivery", Journal of Pharmacy and
Pharmacologyl. 49, 622).
Aydin y col. ((1996) "Preparation and
evaluation of pectin beads", International Journal of
Pharmaceutics, 137, 133) han sido los primeros en formular
perlas de pectina según el procedimiento de gelificación iónica de
Bodmeier et al. ((1989) "Preparation and evaluation of
drug-containing chitosan vedas", Drug
Development and Industrial Pharmacy, 15, 1475 y "Spherical
agglomerates of water-insoluble drugs",
Journal of Pharmaceutical Sciences, 78, 964), quienes habían
puesto a punto perlas de alginato y quitosano. Su objetivo era
incorporar a las perlas dos principios activos diferentes, uno
catiónico (atenolol) y uno aniónico (piroxicam) con el fin de
caracterizar las eventuales interacciones con la pectina. Han
mostrado también que era posible formar perlas con los dos tipos de
principios activos y que las condiciones operativas tenían una
influencia importante sobre las propiedades de las perlas
obtenidas.
Sriamornsak se ha servido de perlas de pectinato
de calcio con el fin de establecer un sistema para la liberación
específica de proteínas al nivel del colon utilizando seroalbúmina
bovina (BSA) de un peso molecular de 66.400 Da como proteína modelo
(Sriamornsak P. (1998) "Investigation on pectin as a carrier for
oral delivery of proteins using calcium pectinate gel beads",
International Journal of Pharmaceutics, 169, 213 y (1999)
"Effect of calcium concentration, hardening agent and drying
condition on release characteristics of oral proteins from calcium
pectinate gel beads", European Journal of Pharmaceutical
Sciences, 8, 221). Ha estudiado la influencia de diferentes
factores de formulación sobre las propiedades de las perlas
obtenidas, como su forma, tamaño, tasa de encapsulación de la BSA y
cinética de liberación específica de proteínas al nivel del colon.
Sriamornsak ha demostrado por tanto que las perlas de pectinato de
Ca podrían emplearse para la liberación específica de proteínas al
nivel del colon. La obtención de un perfil de cinética de liberación
adecuado depende principalmente de la elección de la formulación y
de las condiciones operativas para la preparación de perlas. No se
ha establecido ninguna correlación in vitro/in vivo de los
perfiles de liberación de los principios activos encapsulados.
Con el fin de aumentar la estabilidad de las
partículas a lo largo del tracto digestivo y de evitar cualquier
liberación prematura del principio activo encapsulado, es posible
reforzar las perlas de pectina reticulándolas con un polímero
catiónico.
Munjeri et al. ((1997) "Hydrogel beads
based on amidated pectins for colon-specific drug
delivery: the role of chitosan in modifying drug release",
Journal of Controlled Release, 46, 273) han reticulado perlas
de pectina amidada con quitosano. Han mostrado entonces, comparando
las cinéticas de disolución de formas reticuladas y de formas no
reticuladas, que el quitosano permitía minimizar la liberación de
principios activos insolubles pero no modificaba significativamente
la liberación de los principios activos hidrosolubles. La pérdida
de principio activo en condiciones que imitan las del estómago y el
intestino delgado puede estar limitada por tanto por la formación
de un complejo entre el quitosano y la pectina amidada;
permaneciendo las perlas de pectina reticuladas sensibles a la
acción de las enzimas pectinolíticas cólicas.
Se ha ensayado otro agente reticulante, la
polilisina, en presencia de perlas de alginato/pectina (Liu P.
et al. (1999)
"Alginate/Pectin/Poly-L-lysine
particulate as a potential controlled release formulation",
J. Pharm. Pharmacol., 51,141). Las perlas reticuladas con
polilisina parecen liberar menos principio activo en medio ácido
(HCl 0,1 N) que las perlas no reticuladas, salvo en presencia de
principios activos muy hidrosolubles. Se encuentra el mismo tipo de
efecto en medio alcalino (tampón fosfato a pH 7,5) pero es netamente
menos marcado que en medio ácido.
La solicitud de patente internacional WO
88/07865 sugiere administrar al nivel del colon bacterias
productoras de \beta-lactamasas con el fin de
hidrolizar los antibióticos residuales. Los microorganismos usados
son bacterias de metabolismo anaeróbico estricto cuya producción y
liofilización en cantidad suficiente para elaborar un medicamento
son difíciles. Además, son portadoras de genes de resistencia a
antibióticos codificados por las
\beta-lactamasas, que generan así un riesgo de
diseminación de estos genes dentro del ecosistema cólico y en el
ambiente.
La solicitud de patente internacional WO
93/13795 propone una forma galénica oral que contiene
\beta-lactamasas. Puede estar compuesta por
partículas de sacarosa de 1 a 2,5 mm de diámetro que contienen
\beta-lactamasas o amidasas y eventualmente un
inhibidor de tripsina, estando recubiertas dichas partículas por un
polímero gastrorresistente. Estas partículas tendrían la
posibilidad de liberar la enzima al nivel de diferentes segmentos
del tubo digestivo para que su actividad se ejerciera según las
necesidades al nivel deseado del intestino.
Ninguno de los ejemplos implica datos
experimentales que muestren que la formulación galénica propuesta es
efectivamente capaz de suministrar la enzima en forma activa al
nivel deseado del intestino. Además, ninguno aporta pruebas de la
capacidad de la preparación galénica de hidrolizar efectivamente el
antibiótico in vivo, ni siquiera in vitro en un medio
que reproduzca las características del medio intestinal.
Por todas estas razones, es altamente deseable
disponer de un sistema destinado a reducir la cantidad de
antibióticos residuales que llegan al colon después de terapia
antibiótica oral o parenteral, o capaz de suministrar un principio
activo directamente al nivel del colon.
Así, la presente invención tiene por tanto como
objeto formas galénicas multiparticuladas aptas para usarse por vía
oral y destinadas al suministro cólico de principios activos.
En el sentido de la presente invención, se
entiende por principio activo una sustancia o composición que sea
apta para usarse en terapia o diagnóstico y pueda incorporarse a la
forma galénica según la invención.
El principio activo puede ser un antiinfeccioso,
por ejemplo antibióticos, compuestos antiinflamatorios,
antihistamínicos, anticolinérgicos, antivíricos, antimicóticos,
péptidos, proteínas, genes, oligonucleótidos no codificantes,
agentes de diagnóstico y/o agentes inmunosupresores o bacterias.
Entre los principios activos particularmente
ventajosos, se encuentran agentes antiinflamatorios, agentes
antitumorales, oligonucleótidos no codificantes y enzimas capaces de
inactivar los antibióticos al nivel del colon, particularmente
\beta-lactamasas o enzimas capaces de inactivar
macrólidos y similares como la eritromicina esterasa descrita por
Andremont A. et al. ((1985) "Plasmid mediated
susceptibility to intestinal microbial antagonisms in
Escherichia coli", Infect. Immun. 49 (3), 751) o
capaces de inactivar quinolonas como los descritos por Chen Y et
al. ((1997) "Microbicidal models of soil metabolisms
biotransformations of danofloxacin". Journal of Industrial
Microbiology and Biotechnology 19, 378).
Los principios activos pueden ser hidrosolubles
o liposolubles.
La invención se refiere a formas galénicas
multiparticuladas aptas para usarse por vía oral y destinadas al
suministro cólico de principios activos que comprenden perlas de
pectina presentes en forma de una sal catiónica que contiene el
principio activo, estando reticulada dicha pectina con un polímero
catiónico.
Según la invención, el polímero catiónico que
permite la reticulación de la pectina se elige del grupo compuesto
por polietilenimina, polilisina y sus derivados.
Más ventajosamente, el peso molecular de estos
polímeros catiónicos está comprendido entre 10.000 y 100.000 D,
preferiblemente entre 20.000 y 50.000 Da.
En otro modo ventajoso de la invención, la sal
catiónica de pectina usada es el pectinato de calcio.
En el sentido de la presente invención, se
entiende por pectina tanto la pectina metilada como no metilada,
amidada o no amidada.
Las formas galénicas según la invención pueden
administrarse en cualquier forma oral, particularmente en forma de
cápsula dura y cápsula.
Estas cápsulas duras y estas cápsulas pueden
administrarse simultánea o sucesivamente con otros principios
activos, particularmente cuando las cápsulas duras o cápsulas
contienen enzimas capaces de inactivar los antibióticos, pueden
administrarse simultánea o sucesivamente con la preparación de
antibióticos correspondientes.
Los principios activos administrados
conjuntamente con las cápsulas duras y cápsulas que contienen las
formas galénicas según la invención se administran por vía oral o
cualquier otra vía.
Las formas galénicas según la invención pueden
prepararse mediante procedimientos conocidos por el experto en la
técnica o mediante procedimientos nuevos que forman igualmente parte
de la invención.
Así, la presente invención tiene igualmente como
objeto un procedimiento de preparación de formas galénicas
multiparticuladas caracterizado porque se introduce gota a gota una
solución acuosa de pectina que contiene el principio activo a una
concentración de 0,5 a 5% (v/v) en una solución de cloruro de calcio
para formar perlas de pectinato de calcio, después se recuperan las
perlas de pectinato de calcio así obtenidas y se introducen en una
solución acuosa del polímero catiónico.
En un modo de realización ventajoso del
procedimiento, la solución de pectina es de 4 a 10% (m/v),
preferiblemente de 4 a 7%, la solución de cloruro de calcio de 2 a
10% (m/v) y la solución de polímero catiónico de 0,5 a 2% (m/v),
siendo preferiblemente dicha solución de polímero catiónico una
solución de polietilenimina.
En un modo aún más ventajoso de realización de
la invención, se preparan las formas galénicas a partir de una
solución de pectina al 6% (m/v), una solución de cloruro de calcio
al 6% (m/v) y una solución de polietilenimina al 1% o al 0,6%.
Se mantienen las perlas en el cloruro de calcio
con agitación lenta durante 10 min a 1 hora, preferiblemente
durante 20 min.
La etapa de reticulación por el polímero
catiónico se realiza con agitación lenta durante 15 a 40 min,
preferiblemente durante 20 min.
Después de la recuperación de las perlas de
pectinato, se secan las perlas a una temperatura comprendida entre
20 y 40ºC durante 30 min a 10 horas, preferiblemente a 37ºC durante
2 horas.
El diámetro de las partículas según la invención
está comprendido entre 800 y 1.500 \mum, preferiblemente entre
1.000 y 1.200 \mum.
Los rendimientos de encapsulación están
comprendidos entre 50 y 90%, o sea 3-6 UI/perla de
\beta-lactamasa, actividad expresada en el
sustrato bencilpenicilina, esté amidada la pectina o no.
La estabilidad en medio gástrico es superior a
10 horas y es igualmente muy buena en medio intestinal USP XXIV
puesto que es superior a 7 horas (la duración de estabilidad de las
perlas de pectina no reticuladas no supera 1 hora) y esto
cualquiera que sea el tipo de pectina usada.
Los ejemplos 1 a 7 y las figuras 1 a 8
siguientes ilustran la invención.
La Figura 1 representa el efecto de la
reticulación con diferentes concentraciones de PEI (0,6; 0,7; 0,8;
0,9 y 1%) sobre los tiempos de desagregación de las perlas de
pectina amidada dispuestas en tres medios diferentes: PBS, 0,01 M,
pH a 7,4; medio intestinal a un pH de 6,8 \pm 0,1 UPS XXIV; medio
gástrico a un pH de 1,1 USP XXIV.
La Figura 2 ilustra la estructura de las perlas
que contienen \beta-lactamasas a razón de 4,4
UI/perla y reticuladas durante 20 minutos con PEI al 1% y
observadas mediante microscopía electrónica de barrido.
La Figura 3 ilustra la liberación de
\beta-lactamasas in vitro a partir de
perlas de pectina amidada reticuladas preparadas según el ejemplo 1
con concentraciones de PEI de 0,6 y 0,7% y que contienen
aproximadamente 5 UI/perla, dispuestas en medio intestinal USP XXIV
y después en medio cólico (tampón HEPES a pH 6 + enzimas
pectinolíticas).
La Figura 4 ilustra la evolución de la actividad
\beta-lactamasa en las heces de ratón en función
del tiempo después de la administración oral de perlas de pectina
reticuladas con PEI preparadas según el ejemplo 1 y que contienen
4,4 UI/perla.
La Figura 5 ilustra la estructura de perlas que
contienen \beta-lactamasas a razón de 4,44
UI/perla 30 minutos después de la administración in vivo.
Las perlas están entonces en el estómago. A y B representan las
perlas enteras y C y D las perlas cortadas.
La Figura 6 ilustra la estructura de perlas que
contienen \beta-lactamasas a razón de 4,4 UI/perla
2 horas después de la administración in vivo. Las perlas
están entonces en el intestino delgado. A y B representan las
perlas enteras y C y D las perlas cortadas.
La Figura 7 ilustra la estructura de perlas que
contienen \beta-lactamasas a razón de 4,4 UI/perla
4 horas después de la administración in vivo. Las perlas
están entonces en el colon. A y B representan las perlas enteras y
C y D las perlas cortadas.
\global\parskip0.950000\baselineskip
La Figura 8 ilustra la encapsulación en perlas
de pectina de ADN de plásmido libre o complejado con lípidos
catiónicos (lipoplexo) o con un polímero catiónico (poliplexo).
\vskip1.000000\baselineskip
Se introduce gota a gota una solución acuosa de
pectina al 6% (OF 400 o OG 175C Unipectine® de Degussa) en una
solución de cloruro de calcio al 6% (m/v). Se introduce la solución
de pectina en la solución de cloruro de calcio gracias a un
conducto Tygon® conectado a una bomba peristáltica (Microperpex®
LKB Bromma). Se pasa la solución a través de una aguja de 0,8 mm de
diámetro (21G, Nedus Terumo) para formar gotas de pectina que, en
contacto con el cloruro de calcio (40 ml), gelifican
instantáneamente y dan perlas de pectinato de calcio. Se mantienen
las perlas en el cloruro de calcio con agitación lenta durante 20
minutos.
Las perlas blancas que no contienen principio
activo (\beta-lactamasas) se obtienen partiendo de
una solución de pectina amidada (OG 175C) o no amidada (OF 400) al
6%. Para la preparación de perlas cargadas, se mezcla el principio
activo (\beta-lactamasas, penicilinasas de tipo A
extraídas de Bacillus cereus de Sigma) con la solución de
pectina a una relación de 3% (v_{pa}/v_{pectina}).
Las perlas de pectinato de calcio así obtenidas
se recuperan a continuación mediante filtración, se aclaran con
agua destilada, se disponen en una placa Petri y se secan en estufa
a 37ºC durante 2 horas.
Para la reticulación con polietilenimina, se
introducen las perlas no secadas, recuperadas de la solución de
CaCl_{2} mediante filtración, en una solución acuosa de
polietilenimina (PEI) al 1% y se mantienen allí durante 20 minutos
con agitación ligera.
Las perlas preparadas a partir de la pectina no
amidada OF 400 contienen de 1 a 2,5 UI/perlas y las perlas
preparadas a partir de la pectina amidada OG 175C contienen de 1 a 5
UI/perla.
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparan las perlas según el ejemplo 1 con o
sin etapa de reticulación; la duración de la reticulación en la PEI
es de 20 minutos en soluciones de concentración que va de 0,6 a
1%.
Se disponen las perlas o bien en un tampón
fosfato (PBS 0,01 M, pH 7,4) o bien en medios que simulan los medios
digestivos (gástrico e intestinal USP XXIV) y se observa el tiempo
de desagregación.
\vskip1.000000\baselineskip
Se dan en la Figura 1.
Las perlas reticuladas o no son estables en PBS
y en medio gástrico. En contraposición, las perlas no reticuladas
son inestables en el medio intestinal, mientras que las perlas según
la invención son estables más de 7 horas.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ilustran en las Figuras 2A a 2D. Se observa
en los cortes que el centro de las perlas está lleno y denso. La
cubierta en superficie corresponde a la PEI. El interior y el
exterior tienen estructuras diferentes.
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparan perlas reticuladas con dos
concentraciones diferentes de PEI (0,6 y 0,7%) según el ejemplo 1 a
partir de pectina amidada y que contiene 5 UI/perla. Se dejan
durante 5 horas en un medio intestinal USP XXIV a pH 6,8, se
introducen después en medio cólico sintético a pH 6 que contiene
enzimas pectinolíticas (Pectinex® Ultra SPL).
\global\parskip1.000000\baselineskip
Se mide la actividad
\beta-lactamasa residual en las perlas a lo largo
del tiempo mediante espectrofotometría en presencia de
nitrocefina.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ilustran en la Figura 3.
Después de 5 horas de incubación de las perlas
en medio intestinal (T_{5H}), se libera menos del 25% de la
actividad \beta-lactamasa que contienen. La
liberación se vuelve importante en medio cólico con la acción de
enzimas pectinolíticas (T_{10H}) para las perlas reticuladas con
0,6% de PEI, mientras que el blanco sin enzimas pectinolíticas
(control T_{10H}) no presenta modificaciones significativas de la
actividad \beta-lactamasa. Por el contrario, las
perlas reticuladas con 0,7% de PEI no ven disminuir su actividad
después de 5 h en medio cólico. Así, la concentración de PEI
modifica la resistencia de las perlas y actúa sobre el tiempo de
liberación de los principios activos en medio cólico.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ha realizado este ensayo con ratones macho
CD1. Las perlas contienen 4 UI/perla.
Se administran por vía oral a ratones cápsulas
duras que contienen 10 perlas. Se recuperan las heces en los
tiempos 0, 2H, 3H, 4H, 5H, 6H, 7H y 8H y se detecta la dosificación
de \beta-lactamasa en estas heces (ensayo
realizado con 5 animales para cada tiempo). Además, se sacrifica un
ratón a tiempo 30 min, 2 h y 4 h con el fin de recuperar las perlas
de su tubo digestivo y de observar sus modificaciones morfológicas
mediante microscopía electrónica de
barrido.
barrido.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ilustran en las Figuras 4 a 7.
Las perlas llegan intactas al colon
aproximadamente después de 3 horas de tránsito.
La tasa de \beta-lactamasa
liberada directamente en las heces de ratón recogidas a diferentes
tiempos después de la absorción de las perlas por vía oral muestra
que la actividad \beta-lactamasa de base es baja
al inicio. 2 a 4 horas después de la administración, hay un aumento
neto de esta actividad, lo que corresponde bien al tránsito de las
perlas (Figura 4).
Las fotos tomadas por microscopio electrónico de
barrido muestran la integridad de la perla en diferentes lugares
del tubo digestivo.
La estructura está ligeramente fragilizada al
nivel del intestino delgado y el interior está completamente
destruido al nivel cólico, en que las perlas aparecen portando una
cavidad.
Las partículas ilustradas en la Figura 5, que
han residido en el estómago, tienen un aspecto muy cercano al de
aquellas no han sufrido ningún tratamiento (Figura 2).
Efectivamente, la superficie tiene el mismo aspecto rugoso e
irregular (Figuras 5A y 5B) debido a la presencia de
polietilenimina, y el corte de las perlas parece uniforme y denso
(Figuras 5C y 5D).
Al cabo de 2 h, se ve aparecer una ligera
deformación de las perlas (Figura 6A), pero las partículas siguen
teniendo el mismo aspecto superficial (Figura 6B) y un corte denso
(Figura 6C), aunque un poco fragilizado por la estancia en el
intestino delgado (Figura 6D).
Al final del tránsito, es decir 4 h después de
la administración, las perlas se encuentran en el colon; el aspecto
externo de las partículas está intacto (Figura 7A), con las mismas
irregularidades de superficie debidas a la polietilenimina (Figura
7B). En contraposición, el corte de las perlas está hueco (Figuras
7C y 7D) a causa de la degradación de la red central de pectinato
de calcio por las enzimas pectinolíticas cólicas. Al final, sólo
queda la "cubierta" externa formada por polietilenimina.
\global\parskip0.930000\baselineskip
Se realiza el cultivo a partir de la cepa de
E. coli C600 pIP1100 del Instituto Pasteur. Las condiciones
de cultivo son las siguientes: siembra de medio
Mueller-Hinton al 0,5% a partir de un precultivo de
aproximadamente 20 h, volúmenes de cultivo de 200 o 400 ml en
matraz Erlenmeyer, agitación fijada a 150 rpm y temperatura de
37ºC.
Un ensayo GOTS ha permitido establecer que la
cepa produce bien eritromicina esterasa.
Se han concentrado 3,6 l de cultivo de E.
coli C600 pIP1100 según el protocolo siguiente:
- \bullet
- centrifugación durante 15 min a 3.400 g,
- \bullet
- recogida del sedimento en tampón fosfato de potasio 5 mM, pH 7,5, volumen final 70 ml,
- \bullet
- segunda centrifugación de sobrenadante de 15 min a 3.400 g,
- \bullet
- recogida del sedimento en 20 ml de tampón fosfato de potasio 5 mM, pH 7,5,
- \bullet
- combinación de los sedimentos de las dos centrifugaciones (aproximadamente 100 ml),
- \bullet
- lavado de los sedimentos y centrifugación (10 min a 12.000 g),
- \bullet
- segunda centrifugación del sobrenadante (10 min a 12.000 g),
- \bullet
- volumen final de los sedimentos recogidos en tampón fosfato de potasio: 100 ml.
La eritromicina esterasa es una enzima
intracelular. Esto es por lo que su solubilización requiere la
rotura de las células. Esta operación se ha efectuado mediante
sonicación de los sedimentos de centrifugación recogidos en tampón
fosfato de potasio 5 mM, pH 7,5 según el protocolo descrito a
continuación.
- \bullet
- adición de Tritón X100 al 1% (v/v),
- \bullet
- enfriamiento a 5ºC
- \bullet
- 7 ciclos de sonicación de 1 min, temperatura inicial 5ºC, temperatura máxima 15ºC, potencia 100% (500 W, 20 kHz); temperatura llevada a 5ºC después de cada ciclo,
- \bullet
- centrifugación de 10 min a 12.000 g,
- \bullet
- recogida del sedimento en 10 ml de tampón fosfato de potasio 5 mM, pH 7,5,
- \bullet
- recuperación y congelación del sobrenadante (91 ml)= solución A.
Se evalúa la actividad eritromicina esterasa
mediante la dosificación microbiológica en el sobrenadante y en las
fracciones insolubles (desechos celulares) según técnicas conocidas
por el experto en la técnica.
Se presentan los resultados en la Tabla 2
Se evalúa la actividad eritromicina esterasa a
partir del diámetro de inhibición.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Este es de 2 U/ml para el sobrenadante de
sonicación y de 1,5 U/ml para el sedimento de sonicación (1
unidad
(U) = 1 \mug de eritromicina degradada por min).
(U) = 1 \mug de eritromicina degradada por min).
El resto de recuperación de la actividad
eritromicina esterasa se presenta en la Tabla 3 a continuación.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Los resultados muestran claramente que el
elemento esencial de la actividad eritromicina esterasa presente se
ha solubilizado bien en el medio de sonicación.
\vskip1.000000\baselineskip
Se realiza la encapsulación a partir de la
fracción soluble no purificada obtenida después de la rotura de las
células (solución A) según el protocolo siguiente.
- \bullet
- Solubilización de 0,5 g de pectina en los 10 ml de solución A con el fin de obtener una concentración final de pectina del 5% (solución B). Se añade la pectina muy progresivamente con agitación magnética con el fin de no causar variaciones demasiados bruscas de pH. Se mantiene el pH aproximadamente a 7 mediante la adición de varias gotas de sosa 1 M.
- \bullet
- Dispersión de la solución de pectina (solución B) gota a gota con la ayuda de una bomba peristáltica en 40 ml de CaCl_{2} al 6%. Se mantienen las perlas así formadas en CaCl_{2} durante 20 minutos, se recuperan mediante filtración en Büchner y después se aclaran con agua desmineralizada.
- \bullet
- Reticulación de perlas mediante baño en una solución de PEI al 0,6% durante 20 min con agitación magnética.
- \bullet
- Recuperación de las perlas reticuladas mediante filtración.
- \bullet
- Secado de las perlas a temperatura ambiente (20ºC). Se han preparado 567 perlas en un total de 6,1 ml de mezcla de pectina/solución A, para una actividad de 12,2 U.
- \bullet
- Desagregación de las perlas secadas en un tampón HEPES/NaCl/1% de EDTA.
\vskip1.000000\baselineskip
Se dosifican la actividad eritromicina esterasa
presente en la solución inicial de pectina y la liberada en el
medio de desagregación según el mismo protocolo que
anteriormente.
Se presentan los resultados de la dosificación
microbiológica en las Tablas 4 y 5.
\vskip1.000000\baselineskip
Los resultados muestran que la actividad medida
en presencia de pectina (solución B) es de 2,4 U, mientras que la
actividad teórica presente debería ser de aproximadamente 12 U (6,1
ml a 2 U/ml, según la dosificación de eritromicina esterasa en el
sobrenadante de sonicación (Tabla 3).
La dosificación de actividad enzimática de las
perlas después de desagregación se ha estimado en 2,2 U; representa
un 90% de la actividad inicial introducida en las perlas.
Estos resultados permiten establecer sin
ambigüedad la presencia de actividad eritromicina esterasa en la
fracción final después de encapsulación de la enzima y desagregación
de las perlas.
\vskip1.000000\baselineskip
El principio activo encapsulado aquí es un
plásmido radiomarcado con fósforo 33. El radiomarcaje se hace con
la ayuda del "Nick Translation Kit" N5500 de Amersham
Biosciences según el protocolo descrito por el proveedor.
\vskip1.000000\baselineskip
El ADN encapsulado está o bien en forma libre o
bien complejado con lípidos catiónicos (lipoplexo) o con un
polímero catiónico (poliplexo) según el modo de operación descrito
en el ejemplo 1.
Para el ADN libre, se introducen aproximadamente
5 \mug de ADN radiomarcado en solución de 750 \mul de agua
MilliQ en 0,75 g de una solución de pectina, amidada o no, al 10%
con el fin de obtener una concentración final de pectina del 5%. En
el caso de lipoplexos, se mezclan 375 \mul de una solución acuosa
de ADN radiomarcado con 375 \mul de una suspensión de liposomas
catiónicos (relación N/P de 10). Los 750 \mul de lipoplexos así
obtenidos se mezclan a continuación con 0,75 g de solución de
pectina al 10% con el fin de obtener una concentración final de
pectina del 5%.
En el caso de los poliplexos, se mezclan 375
\mul de una solución acuosa de ADN radiomarcado con 375 \mul de
una solución acuosa de PEI 4 mM. Se mezclan a continuación 375
\mul de la suspensión de poliplexos así obtenidos con 0,75 g de
solución de pectina al 10% con el fin de obtener una concentración
final de pectina del 5%.
Se preparan a continuación perlas de pectinato
de calcio que encapsulan ADN libre o complejado a partir de
soluciones obtenidas anteriormente según el procedimiento descrito
en el ejemplo 1. La concentración de cloruro de calcio usada aquí
es del 5% y la de PEI para reticulación es del 0,6%.
\vskip1.000000\baselineskip
Se ilustran en la Figura 8, que muestra los
rendimientos de encapsulación de un ADN de plásmido en perlas de
pectina amidada o no amidada.
El ADN encapsulado está o bien en forma libre o
bien complejado con lípidos catiónicos (lipoplexo) o un polímero
catiónico (poliplexo).
Los rendimientos de encapsulación de ADN varían
entre 60 y 90% según el tipo de pectina usada. Son generalmente
mayores con la pectina amidada. La complejación con lípidos o con un
polímero catónico no causa modificaciones significativas de estos
rendimientos, que permanecen relativamente elevados.
Claims (14)
1. Forma galénica multiparticulada apta para
usar por vía oral y destinada al suministro cólico de principios
activos, caracterizada porque comprende perlas de pectina
presente en forma de una sal catiónica que comprende el principio
activo, estando dicha pectina reticulada con un polímero catiónico
elegido del grupo constituido por polietilenimina, polilisina y sus
derivados.
2. Forma galénica según la reivindicación 1,
caracterizada porque el polímero catiónico es
polietilenimina.
3. Forma galénica según la reivindicación 1 ó 2,
caracterizada porque el polímero catiónico tiene un peso
molecular comprendido entre 10.000 y 100.000 Daltons,
preferiblemente entre 20.000 y 50.000 Daltons.
4. Forma galénica según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la sal de
pectina es un pectinato de calcio preparado a partir de una pectina
amidada o no amidada.
5. Forma galénica según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque se prepara a
partir de una solución de pectina al 4-10% (m/v),
ventajosamente de 4 a 7% (m/v), de una solución de cloruro de calcio
al 2-10% (m/v) y de una solución de polietilenimina
al 0,5-2% (m/v).
6. Forma galénica según la reivindicación 5,
caracterizada porque la solución de pectina es al 6%, la
solución de cloruro de calcio al 6% y la solución de
polietilenimina al 1 ó 0,6%.
7. Procedimiento de preparación de una forma
galénica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6,
caracterizado porque comprende las etapas siguientes:
a) preparación de una solución acuosa de pectina
que contiene el principio activo,
b) adición de la solución obtenida en la etapa
a) a una solución acuosa de una sal catiónica divalente, de manera
que se obtengan perlas de pectina en forma de una sal catiónica que
comprende el principio activo, y
c) reticulación de dichas perlas mediante
introducción en una solución acuosa del polímero catiónico.
8. Procedimiento de preparación de una forma
galénica según la reivindicación 7, caracterizado porque
comprende las etapas siguientes:
a) preparación de una solución de pectina al
4-10% (m/v), ventajosamente de 4 a 7% (m/v), que
contiene el principio activo,
b) adición de la solución obtenida en la etapa
a) a una solución de cloruro de calcio al 2-10%
(m/v), y
c) reticulación por una solución de
polietilenimina al 0,5-2% (w/v).
9. Procedimiento según la reivindicación 8,
caracterizado porque la solución de pectina es al 6%, la
solución de cloruro de calcio al 6% y la solución de
polietilenimina al 1% ó 0,6%.
10. Forma galénica multiparticulada apta para
usar por vía oral y destinada al suministro cólico de principios
activos, caracterizada porque puede obtenerse mediante un
procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 7 a
9.
11. Forma galénica según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6 y 10, caracterizada porque el
principio activo se elige entre antibióticos, compuestos
antiinflamatorios, antihistamínicos, anticolinérgicos, antivíricos,
antimitóticos, péptidos, proteínas, genes, oligonucleótidos no
codificantes, agentes de diagnóstico, agentes inmunosupresores y/o
bacterias, preferentemente entre agentes antitumorales y enzimas
capaces de inactivar los antibióticos al nivel del colon.
12. Forma galénica según la reivindicación 11,
caracterizada porque las enzimas se eligen del grupo
constituido por \beta-lactamasas, enzimas capaces
de inactivar macrólidos y similares, y enzimas capaces de inactivar
quinolonas.
13. Forma galénica según la reivindicación 11,
caracterizada porque la enzima es la eritromicina
esterasa.
14. Composición farmacéutica que comprende una
forma galénica según una cualquiera de las reivindicaciones 11 a
13, que comprende una enzima capaz de inactivar un antibiótico,
administrada en combinación con el antibiótico correspondiente para
un uso simultáneo o sucesivo en terapia antibiótica.
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