ES2982836T3 - Composiciones y métodos para alterar la señalización de segundos mensajeros - Google Patents

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Thomas Tuschl
Manuel Ascano
Yang Wu
Yizhou Liu
Winfried Barchet
Gunther Hartmann
Thomas Zillinger
Roger Jones
Barbara L Gaffney
Pu Gao
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Rheinische Friedrich Wilhelms Universitaet Bonn
Rockefeller University
Rutgers State University of New Jersey
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Of Bonn, University of
Rheinische Friedrich Wilhelms Universitaet Bonn
Rockefeller University
Rutgers State University of New Jersey
Memorial Sloan Kettering Cancer Center
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Abstract

La invención se refiere a composiciones, métodos, kits y ensayos relacionados con el uso y/o explotación de isómeros de cGAMP así como a la estructura de la enzima cGAS. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

Aviso:En el plazo de nueve meses a contar desde la f
la mención de concesión de la patente europea,
de Patentes a la patente concedida. La oposició
considerará como formulada una vez que se ha
Convenio sobre Concesión de Patentes Europea<© Número de publicación:>
a de publicación en el Boletín Europeo de Patentes, de lquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea eberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se realizado el pago de la tasa de oposición (art. 99.1 delDES
Composiciones y métodos para alterar la señalización d
Antecedentes de la invención
La importancia de los dinucleótidos cíclicos como segun
reconoce al di-GMP cíclico (c-di-GMP) como un segund
molécula versátil desempeña funciones clave en el ciclo
también en la regulación de la formación y dispersión d
del c-di-GMP con la identificación, caracterización estru
de las enzimas bacterianas responsables de la síntesis
cristalinas de c-di-GMP en estado libre y cuando se un
demostrado que este segundo mensajero puede ad
diméricos. Parece que la formación de c-(3',5')-di-GMP
reacción de dos etapas y la formación de enlaces
subproductos de la reacción de ciclación. Además, se
(3',5')-di-GMP y las diversas formas en que las bacteri
hecho, el campo del estudio de c-di-GMP como se
importantes avances en nuestra comprensión de la fisi
cíclicos bacterianos durante las últimas dos décadas
biointerruptores específicos de c-(3',5')-di-GMP, incluid
por dinucleótidos cíclicos.
Actualmente existe mucho interés en obtener una com
innata de los metazoos superiores que reconocen los á
del interferón tipo I. Un desencadenante de este tipo es
y quizás también el ADN nuclear o mitocondrial despl
reconocimiento propio del ácido nucleico podrían a su
lupus eritematoso sistémico y el síndrome de Sjogren.
sensores de ADN citoplasmático, incluido DAI (activado
(proteína 1 de interacción con repeticiones ricas en le
miembros de la familia HIN-200 (proteínas nucleares
(ausente en el melanoma 2) e IFI16 (proteína 16 inducib
la familia de dominios HIN como se refleja en las estructu
sensores puede ser un reflejo de actividades específica
ADNbc activa el estimulador de genes de interferón (S
eventos al activar primero las cinasas IKK (cinasaIkB
fosforilación y activación del factores de transcripciónN
Estos factores de transcripción fosforilados se traslada
que conducen a la producción de citocinas e interfer
inmunitaria del huésped. Por tanto, existe la necesidad d
y otros componentes relevantes en estas vías. El docum
de diguanosina cíclico y análogos de tiofosfato del mis
de bis-[monofosfato de nucleótido] cíclicos no hidroliz
comprenden".
El documento WO 2014/099824 A1 describe "GMP-A
incluye 2'3-cGAMP, 2'2-cGAMP, 3'2'-cGAMP y 3'3'-GA
Gaffney y otros, Org Lett. 16 de julio de 2010, 12(14): 3
análogos de [Rp, Rp] y [Rp, Sp]tiofosfato".
El documento US 2012/0041057 A1 describe "análogos
diferentes sustituyentes en la posición C8 de guanina".
El documento US 2008/0286296 A1 describe "dinucleó
en composiciones farmacéuticas".
El documento US 2006/0040887 A1 describe "ciclo diel mismo efecto que di-GMP cíclico, estimula o mejora l
la respuesta inmunitaria a una vacuna sirviendo como aIÓN
undos mensajeros
ensajeros bacterianos está bien establecida, y ahora se sajero bacteriano universal. Se ha demostrado que esta iferenciación celular, la motilidad y la virulencia, así como elículas. Han surgido avances en nuestra comprensión y comprensión mecanicista de las actividades catalíticas gradación de este segundo mensajero. Las estructuras nzimas responsables de su síntesis y degradación han plegamientos bis-intercalados ya sea monoméricos o rtir de dos moléculas de GTP se produce mediante una fosfodiéster, con dos moléculas de pirofosfato como entificado múltiples receptores a los que se dirige el cvían señales a través de este segundo mensajero. De mensajero ha crecido enormemente y ha producido y los mecanismos de la señalización de dinucleótidos ia. En estudios paralelos, también se han identificado que participan en el corte y empalme de ARN inducido
ón molecular y funcional de los sensores de inmunidad nucleicos en el citoplasma y desencadenan la inducción bc citoplasmático de origen bacteriano o viral patógeno, tras el estrés celular. Estos eventos que involucran el desencadenar enfermedades autoinmunitarias como el echo, en los últimos años se han identificado muchos endiente de ADN del factor regulador de IFN), LRRFIP1 flightless I), DDX41 (polipéptido 41 de la caja DEAD) y topoyéticas inducibles por interferón) tales como AIM2 interferón). La información molecular está disponible en sus complejos con el ADNbc. La necesidad de múltiples istintos tipos de células. La detección citoplasmática de en el citoplasma, lo que a su vez inicia una cascada de K1 (cinasa 1 de unión a TANK), lo que conduce a la factor nuclearkB)e IRF3 (factor regulador de interferón). úcleo para dirigirse a genes inmunitarios e inflamatorios tipo I, desencadenando de esta manera la respuesta ntes terapéuticos que modulen la inducción de interferón O 2011/003025 A1 describe la "síntesis de monofosfato l documento WO 2009/133560 A1 describe "derivados y permeables y composiciones farmacéuticas que los
lico sintasa (cGAS) y GMP-AMP cíclico (cGAMP), que
71 describe la "síntesis en un matraz de c-di-GMP y los
onofosfato de diguanosina cíclico (c-di-GMP) que tienen
cíclicos y sus conjugados como adyuvantes y sus usos
un análogo de dinucleótido cíclico del mismo que tiene uesta inmunitaria o inflamatoria en un paciente o mejora nte".
Resumen de la invención
La presente invención proporciona, entre otras cosas, n
AMP cíclico (cGAMP) que caen dentro del alcance de la
Estos compuestos y composiciones de cGAMP son, e
investigación, como herramienta de investigación y c
enzimáticos que incluyen agonistas y antagonistas de
cristalográficos para GMP-AMP sintasa cíclico (cGAS)
cómo los compuestos de la presente invención modulan
para diseñar moduladores (agonistas y antagonistas) tale
son útiles en los campos de la investigación, la terapéutic
En una modalidad, la presente invención proporciona un
de Fórmula II:
os análogos, imitadores, miméticos y variantes de GMP-rmula (II) como se describe con más detalle más abajo. e otras cosas, útiles en el diseño de herramientas de o modalidades terapéuticas tales como moduladores AS. La presente descripción también proporciona datos , aunque no se reivindican, son útiles para comprender cGAS. Estos datos cristalográficos proporcionan la base omo compuestos de cGAMP o moléculas pequeñas, que /o el diagnóstico.
omposición farmacéutica que comprende un compuesto
en donde:
El Anillo A se selecciona del grupo que consiste e
El Anillo B se selecciona del grupo que consiste e
cada X1 y X2 es independientemente -CR- o -N-;
X3 es -C(R)<2>-, -O- o -NR-;
Xa y Xb son independientemente -C(R)<2>-, -C(R)=C(
Xa1 y Xb1 son independientemente -C(R)- o -N-;
Xc y Xd, cuando están presentes, son indep
opcionalmente sustituido, un átomo de nitrógeno s -, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)<2>- o -N(R)-;
ientemente oxígeno opcionalmente sustituido, azufre tituido, BH<3>o alifático C<1-12>opcionalmente sustituido;cada Xe y Xf es independientemente -O-, -S- o -N(R)-cada W es P;
cada R1 y R2 se selecciona independientemente del
N(R)<2>, alifático C<1-12>opcionalmente sustituido o alcox
cada R3, R4, R5, R6, R7, R10, y R11 se selecciona in
halógeno, -NO<2>, -CN, -OR, -SR, -N(R)<2>, -C(O)R, -C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC(O)R, -N(R)C(O)R, -N(
N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>,-N(R)SO<2>R, -OC(O)
de alifático C<1-12>, fenilo, un anillo carbocíclico monocí
un anillo carbocíclico bicíclico saturado o parcialme
saturado o parcialmente insaturado de 3-7 m
independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre,
insaturado de 7-10 miembros que tiene 1-3 hetero
oxígeno o azufre, y un anillo heteroarilo de 5-6
independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre;
Ra es un grupo protector de oxígeno o R, en donde
metoxilmetilo (MOM), metiltiometilo (MTM),
benciloximetilo (BOM), p-metoxibenciloximetilo (P
(GUM), t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo (PO
tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimeti bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-m metoxitetrahidrotiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopirani
4-ilo (CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetr
4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-cloroet
metil-1 -benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo,
clorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencil
nitrobencilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cia
picolil N-óxido, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)feni bromofenaciloxifenil)difenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-dicl
4,4',4"-tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1-il)
pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-(9-fen
S,S-dióxido, trimetilsililo (TMS), trietilsililo (Te s ),
dietilisopropilsililo (DEI<p>S), dimetilthexilsililo, t-b
tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetils
benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroac trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacet (etilenditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), piv
benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato (
fluorenilmetilo (Fmoc), carbonato de alquiletilo, carb
(trimetilsilil)etilo (TMSEC), carbonato de 2-(fenilsul
(Peoc), carbonato de alquilisobutilo, carbonato de a
nitrofenilo, carbonato de alquilbencilo, carbonato
dimetoxibencilo, carbonato deo-nitrobencilo, tiocarb
carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonato d
metilpentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-fo (metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benz
(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-di
monosuccinato, (E)-2-metil-2-butenoato, o-(metoxic tetrametilfosforodiamidato, N-fenilcarbamato de alqu
alquilo, sulfato, metanosulfonato (mesilato), bencilsul
R es hidrógeno; y
en donde los sustituyentes monovalentes o un á
sustituido" son independientemente halógeno
4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4SR°; -(
4O(CH2)0-1Ph que puede estar sustituido con R°;
4O(CH2)ü-1-piridilo que puede estar sustituido con
-N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C
N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°;
4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3; -(CH2)0-4OC(O
(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°;-SC(S)S
C(O)CH2C(O)R°;-C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(
S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N
-Op (o )R°<2>; -OP(O)(OR°)<2>; SiR°3; -(alquileno C<1->ramificado)C(O)O-N(R°)<2>,
o que consiste en hidrógeno, halógeno, -ORa, -SR,--alquilo C<1-4>;
dientemente del grupo que consiste en hidrógeno, , -C(O)C(O)R, -C(O)CH<2>C(O)R, -S(O)R,-S(O)<2>R, -R)2,-N(R)C(=NR)N(R)2, -C(=NR)N(R)2, -C=NOR, -o un grupo opcionalmente sustituido seleccionado aturado o parcialmente insaturado de 3-7 miembros, saturado de 7-10 miembros, un anillo heterocíclico os que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados nillo heterocíclico bicíclico saturado o parcialmente s seleccionados independientemente de nitrógeno, bros que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados
rupo protector de oxígeno se selecciona de metilo, ltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo (SMOM), , (4-metoxifenoxi)metilo (p-AOM), guaiacolmetilo siloximetilo, 2-metoxietoximetilo (MEM), 2,2,2-toximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo (THP), 3-iclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo (MTHP), 4-S-dióxido, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidintiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetiltilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1 -metil-1 -benciloxietilo, 1 -etilsililetilo, 2-(fenilselenil)etilo, t-butilo, alilo, petoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, pcilo, p-fenilbencilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metil-2-enzosuberilo, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, po, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-limidofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, ,4"-dimetoxifenil)metilo, 1,1-bis(4-metoxifenil)-1'-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, bencisotiazolilo opropilsililo (TIPS), dimetilisopropilsililo (IPDMS), etilsililo (TBDMS), t-butildifenilsililo (TBDPS), (DPMS), t-butilmetoxifenilsililo (TBMPS), formiato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, ato), carbonato de alquilmetilo, carbonato de 9-de alquil 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbonato de 2-etilo (Psec), carbonato de 2-(trifenilfosfonio) etilo inilo, carbonato de alquilalilo, carbonato de alquilp-alquilp-metoxibencilo, carbonato de alquil 3,4-alquilo, carbonato dep-nitrobencilo, alquil S-bencilo, etilo, 2-iodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-encenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-opil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, il)benzoato, a-naftoato, nitrato, alquilN,N,N',N'-orato, dimetilfosfinotioilo, 2,4-dinitrofenilsulfenato de o o tosilato (Ts);
de carbono adecuado de un grupo "opcionalmente H2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O(CH2)0-4Ro, -O-(CH<2>)<0>-4Ph, que puede estar sustituido con R°; -(CH<2>)<0>-=CHPh, que puede estar sustituido con R°;-(CH<2>)<0>-O<2>; -c N; -N<3>; -(CH2)0-4N(R°)2;-(CH2)0-4N(R°)C(O)R°; °2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-C(O)(CH2)0-4SR-, SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; --4S(O)2R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°;-(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2;-P(O)2R°; -P(O)R°2; al o ramificado)O-N(R°)<2>; o -(alquileno C<1-4>lineal oen donde cada R° puede sustituirse como se def
Ci-6, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph, -CH<2>-(anillo hetero
insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene
nitrógeno, oxígeno o azufre, o, a pesar de la defini
junto con su(s) átomo(s) intermedio(s), forman un
arilo de 3-12 miembros que tiene 0-4 heteroátom
o azufre, que puede sustituirse como se define m
en donde los sustituyentes monovalentes en R° (
de R° junto con sus átomos intermedios), son inde
-(CH<2>)ü-<2>OR-, -(CH<2>)<0>-<2>CH(OR-)<2>; -O(haloR-), -CN
(CH<2>)<0>-<2>SR-, -(CH<2>)<0>-<2>SH, -(CH<2>)<0>-<2>NH<2>, -(CH<2>)<0>
(alquileno C<1-4>lineal o ramificado)C(O)OR^ o -SSR
"halo" está sustituido solo con uno o más halóge
CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph o un anillo saturado, parci
heteroátomos seleccionados independientemente
en donde los sustituyentes divalentes en un átom
en donde los sustituyentes divalentes en un átomo
incluyen los siguientes: =O, =S, =NNR*<2>, =NN
O(C(R*<2>))<2>-<3>O- o -S(C(R*<2>))<2>-<3>S-, en donde cada
alifático C<1-6>que puede sustituirse como se defin
arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene
nitrógeno, oxígeno o azufre;
en donde los sustituyentes divalentes que se
"opcionalmente sustituido" incluyen: -O(CR*2)2-3O-de hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse
insaturado o arilo de 5-6 miembros no
independientemente de nitrógeno, oxígeno o azuf
en donde los sustituyentes en el grupo alifático de
CN, -C(O)OH, -C(O)ORL -NH<2>, -NHRL -NR<^2>o -por "halo" está sustituido solamente con uno o má
-O(CH<2>)<0>-<1>Ph o un anillo saturado, parcialmente in
seleccionados independientemente de nitrógeno,
en donde los sustituyentes en un nitrógeno sustit
NR*<2>, -C(O)Rt, -C(O)ORt, -C(O)C(O)Rt, -C(O)C
N(Rt )S(O)<2>Rt ; en donde cada Rf es independient
se define más abajo, -OPh no sustituido o un anill
no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos selecci
o, a pesar de la definición anterior, dos aparicion
intermedio(s) forman un anillo arilo mono- o bicícli
no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccio
en donde los sustituyentes en el grupo alifático de Rf
-O(haloR^), -CN, -C(O)OH, -C (0 )o Rl -NH<2>, -NHR^, -precedido por "halo" está sustituido solamente con u
CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph o un anillo arilo saturado, par
heteroátomos seleccionados independientemente de
En una modalidad, la presente invención proporciona la
uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad,
enfermedad, trastorno o afección inmunitaria es
(a) una enfermedad, trastorno o afección autoinmu
afección inmunitaria se selecciona del grupo que con
síndrome de Aicardi-Goutiéres;
(b) caracterizada por inflamación;
(c) provocada por, sostenida por o relacionada con la
(d) provocada por, sostenida por o relacionada con la
(e) seleccionada del grupo que consiste en trast
proliferativo es cáncer o neoplasias benignas.
Breve descripción de los dibujos
Figura 1A-H. Estructuras de cGAMP sintasa (cGAS)
2,0 A de cGAS en estado libre. La cadena principal
en gris claro. (B) Estructura cristalina de 2,1 A de cG más abajo y es independientemente hidrógeno, alifático de 5-6 miembros) o un anillo saturado, parcialmente heteroátomos seleccionados independientemente de anterior, dos apariciones independientes de R°, tomados llo mono- o bicíclico saturado, parcialmente insaturado o eleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno bajo;
anillo formado al tomar dos apariciones independientes dientemente halógeno, -(CH<2>)<0>-<2>R>(haloR^), -(CH<2>)<0>-<2>OH,<3>, -(CH<2>)<0>-<2>C(O)RV(CH<2>)0-<2>C(O)OH, -(CH<2>)<0>-<2>C(O)OR -RV(CH<2>)<0>-<2>NR-<2>, -NO<2>, -SiR-3, -OSiR-3, -C(O)SR-, -donde cada R^ no está sustituido o donde precedido por , y se selecciona independientemente de alifático C<1>-<4>, -ente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 nitrógeno, oxígeno o azufre,
carbono saturado de R° incluyen =O y =S;
carbono saturado de un grupo "opcionalmente sustituido" )R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)<2>R*, =NR*, =NOR*, -rición independiente de R* se selecciona de hidrógeno, ás abajo o un anillo saturado, parcialmente insaturado o heteroátomos seleccionados independientemente de
n a los carbonos sustituibles vecinales de un grupo donde cada aparición independiente de R* se selecciona o se define más abajo o un anillo saturado, parcialmente tituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
incluyen halógeno, -RL -(haloR^), -OH, -ORVO(haloR^), -en donde cada R^ no está sustituido o donde precedido lógenos, y es independientemente alifático C<1>-<4>, -CH<2>Ph, rado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos eno o azufre;
e de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -Rf , -(O)Rt -S(O^Rf , -S(O)<2>NR^, -C(S)NRf<2>,-C(NH)NR<f 2>o -nte hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse como turado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros os independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, dependientes de Rt tomados juntos con su(s) átomo(s) aturado, parcialmente saturado o arilo de 3-12 miembros os independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre;
independientemente halógeno, -RL -(haloR^), -OH, -ORL<^2>o -NO<2>, en donde cada R^ no está sustituido o donde más halógenos, y es independientemente alifático C<1>-<4>, -ente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 ógeno, oxígeno o azufre.
posición farmacéutica de la presente invención para su torno o afección inmunitaria, opcionalmente en donde la
ia, opcionalmente en donde la enfermedad, trastorno o en lupus eritematoso sistémico, síndrome de Sjogren y
ivación de cGAS;
ivación de STING; o
s proliferativos, opcionalmente en donde el trastorno
stado libre y unidas al ADNbc. (A) Estructura cristalina de proteína en una representación de cinta está coloreada nida a un dúplex de ADN complementario de 16 pb (conuna base saliente en 5' en cada extremo). La proteína
binario. (C) Un esquema de los enlaces de hidrógen
Estructuras superpuestas de cGAS en estado libre (gr
Grandes cambios dentro de los segmentos de la lámi
cGAS en estado libre (gris claro) al complejo binario co
catalítico en la estructura de cGAS en estado libre, con l
ampliada al bolsillo catalítico en la estructura del compl
Figura 2A-H. Estructura del complejo ternario de cG
complejo ternario de cGAS unido a ADNbc y ATP. La
unido en una representación de relleno de espacio. (B)
ADN y el complejo ternario con ATP añadido. (C, D)
segmentos de la lámina p (panel C) y del bolsillo cat
ADNbc al complejo ternario con ATP añadido. (E, F) Do
el ATP y los residuos del bolsillo catalítico en el comple
los enlaces de hidrógeno se muestran mediante línea
contorneado a 1,2 a (gris claro) y mapa de Fo-Fc conto
y residuos de coordinación en el bolsillo catalítico.
contabilizada (gris oscuro). (H) Vista del ATP unido en
catalítico, con la proteína en una representación electr
Figura 3A-H. Estructura del complejo ternario de cG
pG(2',5')pA. (A) Estructura cristalina de 1,9 A del compl
proteína y el ADN se muestran en una cinta, con 5'-espacio. (B, C) Dos vistas alternativas de contactos int
catalítico en el complejo ternario. Dos cationes se mue
mediante líneas discontinuas. (D) Mapa de densid
pppG(2',5')pG unido en el bolsillo catalítico del comp
representación de relleno de espacio dentro del b
electrostática. (F, G) Dos vistas alternativas de cont
bolsillo catalítico en el complejo ternario de 2,3 A de cG
de 5'-pppG(2',5')pG (gris oscuro) y 5'-pG(2',5')pA (gris
Figura 4A-H. Estructura del complejo ternario de cGAS,
cristalina de 2,3 A del complejo ternario de cGAS unid
el ADN se muestran en una cinta, con el producto uni
espacio. (B, C) Dos vistas alternativas de los contactos
residuos del bolsillo catalítico en el complejo ternario. (
a de c[G(2',5')pA(3',5')p] unido en el bolsillo catalítico d
en una representación de relleno de espacio ubicada h
representación electrostática. (F) Una vista de c[G(2',5'
enlace 3',5' en la etapa ApG. (G) Apilamiento del resid
con cGAS y ADNbc. (H) Apilamiento del residuo A de
cGAS y ADNbc.
Figura 5A-D. Caracterización de la formación
c[G(2',5')pA(3',5')p] y los productos lineales e interme
(TLC) mediante el uso de recombinantes purificado
estudios de cristalización) y cGAS de longitud completa
largas y cortas indican el origen y los frentes de solven
cGAS (x-y) en un tampón de reacción que contenía el
cGAMP sintetizado químicamente que contenía ambos
se indica su migración, visualizada mediante UV (
monocatenario (mc) o bicatenario (bc), ARN, dúplex d
de secuencia similar y la formación de c[G(2',5')pA(3'
usaron adenosina y guanosina mono y difosforiladas
c[G(2',5')pA(3',5')p]. Las especies intermediarias unid
ADNbc con a32p-ATP y GMP (5'-pGpA) o GDP (5'-dependientes de ADNbc se visualizaron mediante el u
migración lenta, correspondientes a pppGpA (carril 1
composición de la fase móvil de TLC. Las especies int
Figura 6A-C. Identificación definitiva de c[G(2',5')
Cromatografías UV a 260 nm de soluciones de reacci
c[G(2',5')pA(3',5')p] y cGAS (rxn, asterisco) del análisi
cGAS se inyectaron solas o con la adición de los estánd el ADN están coloreados en gris oscuro en el complejo termoleculares en el complejo binario cGAS-ADN. (D) claro) y en el complejo cGAS-ADN (gris oscuro). (E, F) p (panel E) y del bolsillo catalítico (panel F) al pasar de DN unido (gris oscuro). (G) Entrada estrecha al bolsillo roteína en una representación electrostática. (H) Entrada binario cGAS-ADN.
, ADNbc y ATP. (A) Estructura cristalina de 2,4 A del teína y el ADNbc se muestran en una cinta, con el ATP structuras superpuestas del complejo binario de cGAS y encia de cambios en la cadena principal dentro de los ico (panel D) al pasar del complejo binario de cGAS y istas alternativas de los contactos intermoleculares entre ernario. Dos cationes se muestran como esferas, donde iscontinuas. (G) Mapa de densidad electrónica 2Fo-Fc ado a 3,0 a (gris oscuro) de ATP unido, par de cationes mapa contiene una densidad de electrones débil no representación de relleno de espacio dentro del bolsillo tica.
, ADNbc con productos unidos 5'-pppG(2',5')pG y 5'-ternario de cGAS unido a ADNbc y 5'-pppG(2',5')pG. La G(2',5')pG unido en una representación de relleno de oleculares entre 5'-pppG(2',5')pG y residuos de bolsillo n como esferas y los enlaces de hidrógeno se muestran electrónica de 2Fo-Fc contorneado a 1,2 a del 5'-ternario. (E) Vista del 5'-pppG(2',5')pG unido en una illo catalítico, con la proteína en una representación os intermoleculares entre 5'-pG(2',5')pA y residuos de , ADNbc y GMP ATP. (H) Superposición de estructuras ro) unidas.
N con producto unido c[G(2',5')pA(3',5')p]. (A) Estructura l ADNbc y al producto c[G(2',5')pA(3',5')p]. La proteína y c[G(2',5')pA(3',5')p] en una representación de relleno de ermoleculares entre el producto c[G(2',5')pA(3',5')p] y los Mapa de densidad electrónica 2Fo-Fc contorneado a 1,2 complejo ternario. (E) Vista de c[G(2',5')pA(3',5')p] unido a el extremo del bolsillo catalítico, con la proteína en una (3',5')p] destacando el enlace 2',5' en la etapa GpA y el G de 5'-pG(2',5')pA en Tyr 421 en su complejo ternario (2',5')pA(3',5')p] en Tyr 421 en su complejo ternario con
c[G(2',5')pA(3',5')p] por cGAS. La generación de rios se analizaron mediante cromatografía en capa fina uncados (panel A, aminoácidos 147-507), usados en aneles B-D, aminoácidos 1-507). Las líneas discontinuas respectivamente. (A) Se incubó un ADNbc de 45 nt con tión divalente indicado (o EDTA) y a32p-ATP y -GTP. El laces 3',5' se detectó conjuntamente en cada muestra y tornos discontinuos). (B) cGAS se incubó con ADN DN/ARN o ADN modificado con 8-oxoguanina (8-O-G) )p] se monitoreó mediante el uso de a32p-ATP. (C) Se o sustratos para determinar el orden de formación de en 2',5' de migración lenta cuando se incuban cGAS y pA). (D) Los intermediarios de reacción de cGAMP de dATP y dGTP 2' o 3'. Las especies intermediarias de pppGpdA (carriles 2 y 3), se observan cambiando la ediarias se confirmaron mediante el uso de Y32p-GTP.
(3',5')p] como producto enzimático de cGAS. (A) de GTP, ATP, c[G(2',5')pA(2',5')p], c[G(3',5')pA(3',5')p], e HPLC de fase inversa. Las muestras de reacción de s de referencia indicados. La región sombreada muestrael tiempo de retención correspondiente a la elución d
análisis HPLC del producto cGAS obtenido a partir de
se coinyecta con el compuesto de referencia c[G
adicionales no identificados en la solución cristalina
cGAMP de referencia se coinyectaron debido a u
c[G(2',5')pA(3',5')p] como resultado de la aplicación d
de RMN de la región del protón H1' del azúcar d
químicamente con cGAS rxn en D<2>O al 99,9 % en ta
RMN del cGAS rxn corresponde al compuesto de refer
9 Hz) cuando el fosfato está unido a la posición 2', per
que refleja los diferentes fruncimientos del anillo de a
fosfato unido grupo.
Figura 7A-D. Análisis funcional de mutantes de c
c[G(2',5')pA(3',5')p. (A) Los niveles de formación de c
mutantes indicados se compararon mediante análisis
origen y los frentes de solvente, respectivamente. (B,
portan mutaciones de alanina únicas y múltiples de re
transfectaron transitoriamente en células HEK 293 junt
de STING y luc de luciérnaga constitutivos. En este co
plásmidos de ADN cotransfectados. Los valores de
transfección, se normalizaron a luc de luciérnaga y s
control (como media ± s.e.m). Los datos de los pa
independientes para cada mutante. (D) Una represen
una generación en dos etapas de c[G(2',5')pA(3',5')p]
la primera etapa implica la formación de un i
c[G(2',5')pA(3',5')p]. Tenga en cuenta también que se
hacia la formación de c[G(2',5')pA(3',5')p].
Figura S1A-C. Alineamiento de secuencia y estructura
humano. (A) Alineamiento de secuencia de cGAS
estructurales) que abarca los aminoácidos 147 a 507 (
recuadros. (B) Dos vistas alternativas de la estructura
se muestra en una representación de cinta y está
superpuestas de cGAS (gris claro) y oligoadenilato si
libre. El r.m.s.d entre las estructuras es de 4,1 A.
Figura S2A-F. Características de reconocimiento
comparación con hOAS1 unido a ARNbc y 2'-Datp. (
ADNbc. Las moléculas de agua se muestran como e
líneas discontinuas. Observamos un enlace de hidr
Arg161 y el carbonilo O2 de T8 como se muestra
conformacionales al pasar de cGAS en estado libre (
observa un desplazamiento de 5,1 A en el segmento
hélice a larga se rompe en dos segmentos, uno de
complejo, incluida la cadena lateral de Arg161, que se
de los segmentos del lazo se desplazan entre 6,7 y 17,
de las estructuras superpuestas de los componentes p
OAS1 en el estado unido a ARNbc más 2'-dATP (neg
ADNbc unido a cGAS y el ARNbc unido a OAS1 se o
Figura S3A-I. Estructura de cGAS con 5'-pppG(2',5')pG
la cristalización con GTP. (A) Estructuras superpuesta
ternario con el producto intermedio 5'-pppG(2',5')pG u
la cadena principal dentro de los segmentos de lám
complejo binario al complejo ternario con 5'-pppG(2',5
unido en el bolsillo catalítico del complejo ternario. L
cuenta que el alineamiento del ligando unido es5'-pp
de densidad electrónica omit de Fo-Fc omit contornea
del complejo ternario. (F) Dos vistas alternativas de la
(gris oscuro) unidos en sus respectivos complejos tern
a identificando dos cationes unidos en la estructura
octaédrica alrededor de los dos cationes unidos en la
Figura S4A-F. Estructura de cGAS y c[G(2',5')pA(3',
formado tras la cristalización con GTP ATP. (A) Estr (2',5')pA(3',5')p]. (B) Cromatografías UV a 260 nm del les disueltos cuando se inyecta solo (traza superior) o pA(2',5')p] (traza media). Estaban presentes picos ta, pero eluyeron más tarde. Los tres compuestos de bio (0,5 segundos) en el tiempo de retención de olución cristalina disuelta a la columna. (C) Espectros compuestos de referencia de cGAMP sintetizados de K<2>HPO<4>-KH<2>PO<4>10 mM (pH 6,6). El espectro de c[G(2',5')pA(3',5')p]. El protón H1' es un doblete (3J<hh>= inglete cuando el fosfato está unido a la posición 3', lo de cinco miembros que dependen de la posición del
y el modelo para la generación en dos etapas de ,5')pA(3',5')p] por cGAS de longitud completa wt y los LC. Las líneas discontinuas largas y cortas indican el os vectores de expresión de cGAS WT murino o que s de unión al ADN (panel B) y catalíticos (panel C), se un informador de IFN-p Gluc, y plásmidos de expresión , el cGAS expresado se acopla al citosol mediante los se determinaron por triplicado, 36 h después de la stran como veces de inducción sobre el plásmido de B y C son representativos de 3 - 5 experimentos esquemática de un modelo propuesto asociado con del bolsillo catalítico único de cGAS. En este modelo, ediario 5'-pppGpA seguido de la formación de ue el ligando unido se somete a dos cambios en la vía
lina de cGAS en estado libre y comparación con OAS1 ratón y humano (constructo usado para estudios mo C). Los residuos catalíticos putativos se indican en AS en estado libre. La cadena principal de la proteína ada en gris claro. (C) Vista estéreo de estructuras sa humana 1 (OAS1) (negro; PDB: 1PX5) en estado
ular en la estructura de cGAS unido a ADNbc y Ejemplos de contactos intermoleculares entre cGAS y s negras, y los enlaces de hidrógeno se indican con específico de secuencia entre la cadena lateral de l panel B. (C, D, E) Ejemplos de desplazamientos laro) al complejo binario con ADNbc unido (gris). Se lámina p en la formación del complejo (panel C). Una uales se mueve hacia el ADNbc en la formación del e 9,2 A (panel D). Varios residuos de Tyr y Lys dentro n la formación del complejo (panel E). (F) Vista estéreo os de cGAS en el estado unido a ADNbc (gris claro) y DB: 4IG8). El r.m.s.d entre estructuras es de 3,2 A. El en la representación para mayor claridad.
l bolsillo catalítico de su complejo ternario formado tras omplejo binario de cGAS con ADN (gris) y el complejo gris oscuro). (B, C) Se observan cambios mínimos en (panel B) y bolsillo catalítico (panel C) al pasar del unido. (D) Dos vistas alternativas del 5'-pppG(2',5')pG tiones de Mg2+ se muestran como esferas. Tenga en)p(2' ,5')pG(ant/).(E) Dos vistas alternativas del mapa ,0 a del 5'-pppG(2',5')pG unido en el bolsillo catalítico ucturas superpuestas de 5'-pppG(2',5')pG (gris) y ATP con cGAS y ADNbc. (G) Omitir el mapa registrado a 4 complejo ternario. (H, I) Geometría de coordinación tura del complejo ternario.
unidos en el bolsillo catalítico del complejo ternario as superpuestas del complejo binario de cGAS y ADN(gris) y el complejo ternario con GTP ATP añadid
obtenido de la cristalización con ATP y GTP. (B, C)
principal dentro de los segmentos de lámina p (panel
al complejo ternario con c[G(2',5')pA(3',5')p] unido. (
bolsillo catalítico del complejo ternario. Tenga en cuen
fosfodiéster 2',5' dentro de la etapa GpA. Basado en la
se muestra con un enlace 3',5' en la etapa ApG. Tanto
enlaces glicosídicos. (E) Dos vistas alternativas del
3,0 a de c[G(2',5')pA(3',5')p] unido en el bolsillo catalít
estructuras superpuestas de c[G(2',5')pA(3',5')p] (gris
ternarios con cGAS y ADNbc.
Figura S5A-C. Condiciones de cromatografía de capa
Los nucleótidos indicados se detectaron en placas d
mediante varios sistemas de solventes y se visualizar
(A y B). El sistema solvente 1 se usó en la mayoría de
mientras que el solvente 2 se usó para una mejor sep
Las líneas discontinuas indican los frentes de solvente
Figura S6A-E. Longitud del ADNbc y requisitos de
longitud completa con cantidades equimolares o n
continuación se analizó la formación de cGAMP. Las lí
origen y los frentes de solvente, respectivamente. (B)
ADNbc de 45 pb en un tampón de reacción que con
actividad, aunque menos que cGAS (fl). Se forma c[
radiomarcaron 2'-dATP o GTP, pero no en absoluto
c[G(2',5')pA(3',5')p], lo que indica que el bloqueo de l
en la guanosina, previno la producción de c[G(2',5')
complementaron con una forma radiomarcada con a
incubó cGAS de longitud completa en un tampón de r
ribonucleótidos y a continuación se analizó mediante
la incubación de a32p-ATP con UTP o a32p-GTP con G
GTP y ATP. El bajo nivel de formación de productos
el UTP puede acomodarse en el sitio de unión de GT
todos los productos son consistentes con la formaci
generación de cGAS dependiente de ADNbc de c[G
reacción de cGAS y las muestras se analizaron med
altamente conservados G198 y S199 se mutaron a al
Los plásmidos de expresión para cGAS mutante y WT
con un informador de IFN-p Gluc y plásmidos de exp
de Glue se determinaron por triplicado, 36 h después
muestran como veces de inducción sobre el plás
representativos de 3 experimentos independientes par
Figura S7. Síntesis de isómeros de cGAMP. Síntesis
ApG (6) (panel superior). Síntesis de cGAMP que conti
central). Síntesis de cGAMP que contiene enlaces 3',5
Figura S8A-D. Asignaciones de resonancia de c[G(
HMBC, COSY y HSQC. (A) Espectro de HMBC que
H1'. (B) Espectro de HMBC que muestra correlaci
correlaciones dentro de la base de guanina están
especifican en los bordes superior e izquierdo para
correlaciones dentro de la base de adenina están
especifican en los bordes inferior y derecho para proton
C-H de 1 enlace no suprimidos se indican mediante lí
(C) Espectro de COSY filtrado cuántico doble. Las corr
y las resonancias están etiquetadas en los picos tran
están conectadas por líneas discontinuas y las reson
de la diagonal. (D) Espectro de HSQC alifático que re
Ver también la Figura 6C y la Tabla S4.
Figura S9. Inducción dependiente de STING de inte
cGAMP. Las actividades biológicas dependientes de
mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a e
endógenas de interferón a murino (m-Ifna) o CXCL10 o producto unido es c[G(2',5')pA(3',5')p] (gris oscuro) produjeron cambios conformacionales en la cadena olsillo catalítico (panel C) al pasar del complejo binario s vistas alternativas del producto unido cGAMP en el e el ligando unido c[G(2',5')pA(3',5')p] reveló un enlace aración por HPLC, la estructura de c[G(2',5')pA(3',5')p] siduos G como los A adoptanantialineaciones en sus de densidad electrónica omit de Fo-Fc contorneado a el complejo ternario. (F) Dos vistas alternativas de las TP (gris oscuro) unidos en sus respectivos complejos
(TLC) para monitorear la formación de Cgamp. (A, B) de gel de sílice de alto rendimiento, se resolvieron ediante UV. Se usaron dos condiciones de fase móvil xperimentos para la detección de c[G(2',5')pA(3',5')p], n de los intermediarios lineales mono y trifosforilados. Valores de Rf calculados.
tidos de la actividad cGAS. (A) Se incubó cGAS de izadas en masa de ADNbc de 16, 36 o 45 nt y a de trazos largos y cortos en los paneles A-C indican el cubó cGAS truncado (tr) y de longitud completa (fl) con los diversos nucleótidos indicados. cGAS (tr) exhibe 5')pA(3',5')p] mediante el uso de 2'-dATP, cuando se do se usó 2'-dGTP. 2'-dATP con 2'-dGTP no produjo siciones 2' OH en la adenosina, y más importante aún ',5')p]. Los asteriscos (*) indican qué nucleótidos se NTP indica el 2'-desoxinucleótido trifosforilado. (C) Se ión que contenía ADNbc y la combinación indicada de Se formaron cantidades trazas de producto cíclico tras TP y UTP. La formación óptima de productos requiere s con UTP y ATP, pero no con ATP solo, sugiere que o reducir su afinidad y/o actividad. Las migraciones de e dinucleótidos cíclicos. (D) Análisis por HPLC de la )pA(3',5')p] a lo largo del tiempo. Se inició una única HPLC en los momentos indicados. (E) Los residuos o G198 a prolina para reducir la flexibilidad estérica. ansfectaron transitoriamente en células HEK 293 junto STING y luc de luciérnaga constitutivos. Los valores transfección, se normalizaron a luc de luciérnaga y se de control (como media ± s.e.m). Los datos son a mutante.
AMP que contiene enlaces 2',5' en las etapas GpA y ',5' en la etapa GpA y 3',5' en la etapa ApG (11) (panel las etapas GpA y ApG (15) (panel inferior).
A(3',5')p] de espectros de RMN bidimensionales de tra correlaciones entre los aromáticos y el azúcar C1'-dentro de los anillos de azúcar. En (A) y (B), las ctadas por líneas continuas y las asignaciones se ones y carbonos respectivamente, mientras que las tadas por líneas discontinuas y las asignaciones se carbonos respectivamente; Los grandes acoplamientos azules que conectan los pares de señales acopladas. nes de guanina están conectadas por líneas continuas ales sobre la diagonal; Las correlaciones de adenina s están etiquetadas en los picos transversales debajo las asignaciones de protones y carbonos del azúcar.
alfa murino y CXCL10 humano por compuestos de sis de los isómeros de cGAMP indicados se midieron s (ELISA), cuantificando la inducción de proteínas na (H-CXCL10). (A-B), los macrófagos derivados de lamédula ósea de ratón (BMDM) se trataron primer
plasmáticas antes de la adición de cGAMP (A) o los
células mediante la adición en medio de cultivo (B). (C
1 humanas. Los datos son representativos de 2 exp
(barras de error, s.e.m). (D), los valores de la concent
en curvas dosis-respuesta sigmoideas de 4 parámetr
del 95 %.
La Figura S10 es un diagrama de bloques ilustrativo d
La Figura S11 es un diagrama de bloques ilustrati
comunicación multicanal consciente del contexto.
Descripción detallada de ciertas modalidades
Se ha demostrado que los genes de VSP-1 (7ma isla pandé
ciclasas, que sintetizan preferentemente una molécula de
manera nuestro horizonte a los dinucleótidos GA cíclico
sintasa cíclica (cGAS, símbolo oficial del gen humano M
que activaba la vía del interferón tipo I mediante la síntes
otros 2013). Se demostró que cGAS es un miembro de la
un cGAMPin vitrode GTP y ATP en presencia de ADNbc
sintetizado químicamente que contiene un par de enlaces
Raw264.7 en concentraciones tan bajas como 10 nM. Los
implicaron sobreexpresión o eliminación de cGAS, que e
resultado la activación del factor de transcripción IRF3 y
otros 2013).
Una suposición crítica en estos estudios sobre cGAS fue
2013; Wu y otros 2013), en línea con los informados ant
describió anteriormente. La presente invención abarca el
asignada por Sun y Wu era incorrecta. Por tanto, un aspe
previamente desconocido de la identificación errónea de
estructuras, químicas, ensayos bioquímicosin vitroy c
segundo mensajero contiene inesperadamente un enlac
{designado c[G(2',5')pA(3',5')p]}, identificando así correct
familia de segundos mensajeros metazoarios que regul
citoplasmático.
En ciertas modalidades, la presente invención proporcio [c[G(2',5')pA(3',5')p]] que contienen un enlace 2',5' (en la
útiles para el estudio de la señalización celular y la vigilan
compuestos son para uso en el tratamiento, diagnóstico
medicina. En algunas modalidades, tales compuestos s
inmunitaria. En algunas modalidades, los compuestos y/o
y/o reactivos de investigación, particularmente en kits y e
La presente descripción también proporciona datos crist
diseño de moduladores de cGAS. En ciertas modalidade
dentro del alcance de la Fórmula (II) que comprende car
con cGAS. En algunas modalidades, tales moduladores
características que forman interacciones de unión apropi
Definiciones
Los compuestos de esta invención incluyen los descrito
clases, subclases y especies descritas en la presente
siguientes definiciones se aplicarán a menos que se indi
invención, los elementos químicos se identifican de acue
Handbook of Chemistry and Physics, 75ta Ed. Adicion
describen en "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, Univ
Organic Chemistry", 5ta Ed., Ed.: Smith, M.B. y March, J.,
Las abreviaturas que se usan en la presente descripció
químicas y biológicas. Las estructuras y fórmulas química
de acuerdo con las reglas estándar de valencia química q n digitonina (Dig) para permeabilizar las membranas meros de cGAMP se administraron pasivamente a las activación de cGAMP también se midió en células THP-ntos independientes, cada uno realizado por triplicado n efectiva media máxima (CE<50>) se estimaron con base se proporcionan rangos de intervalos de confianza (CI)
dispositivo informático y un dispositivo informático móvil.
e un entorno de red para establecer un entorno de
-1 deVibrio)codifican una nueva clase de dinucleótidos -AMP cíclico (denominada cGAMP), ampliando de esta avies y otros 2012). Más recientemente, la GMP-AMP 1) se identificó como un sensor de ADN citoplasmático el segundo mensajero cGAMP (Sun y otros 2013; Wu y ilia de las nucleotidiltransferasas y es capaz de generar ro no ARNbc), mientras que se demostró que el cGAMP ' estimula la producción de interferón en células THP1 y res también demostraron a través de experimentos que AMP sintético se unió y activó STING, lo que dio como sterior inducción de interferón (Sun y otros 2013; Wu y
cGAMP contenía un par de enlaces 3',5' (Sun y otros ente para c-di-GMP en sistemas bacterianos como se nocimiento de que la estructura de cGAMP previamente e la presente invención es la identificación del problema structura de cGAMP. La presente descripción combina resin vivopara establecer inequívocamente que este ,5' en la etapa GpA y un enlace 3',5' en la etapa ApG te y por primera vez al miembro fundador de una nueva la inducción del interferón tipo I en respuesta al ADN
ompuestos que comprenden dinucleótidos GA cíclicos a GpA). En algunas modalidades, tales compuestos son nmunitaria en metazoos. En algunas modalidades, tales rofilaxis de trastornos, enfermedades o afecciones en tiles para modular dianas implicadas en la respuesta posiciones de la invención son útiles como herramientas os para investigación biológica o química.
ráficos que, aunque no se reivindican, son útiles en el invención proporciona moduladores de cGAS que caen rísticas para formar interacciones de unión apropiadas caen dentro del alcance de la Fórmula (II) comprenden con dianas que se unen a cGAMP.
neralmente arriba y se ilustran adicionalmente por las ripción. Como se usa en la presente descripción, las de cualquier otra manera. Para los propósitos de esta con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, nte, los principios generales de química orgánica se Science Books, Sausalito: 1999, y "March's Advanced n Wiley & Sons, Nueva York: 2001.
nen su significado convencional dentro de las técnicas se establecen en la presente descripción se construyen e conocen en las técnicas químicas.
A menos que se indique de cualquier otra manera, las e
pretenden incluir todas las formas isoméricas (por eje conformacionales)) de la estructura; por ejemplo, las conf
de doble enlace Z y E, y los isómeros conformacionales Z
así como también las mezclas enantioméricas, diastereo
compuestos están dentro del alcance de la invención. A
formas tautoméricas de los compuestos de la invención
menos que se indique de cualquier otra manera, las est
pretenden incluir los compuestos que difieren solo en pr
Por ejemplo, los compuestos que tienen las estructuras
tritio o la sustitución de un carbono por un carbono enriqu
Tales compuestos son útiles, por ejemplo, como herramie
agentes terapéuticos de acuerdo con la presente invenci
Los compuestos proporcionados pueden comprender un
cualquier otra manera, tanto las configuraciones D como
A menos que se especifique de cualquier otra manera, la
p, y mezclas de las mismas.
Si se desea, por ejemplo, un enantiómero particular de
mediante síntesis asimétrica o mediante cromatografía q
donde la mezcla diastereomérica resultante se separ
enantiómeros puros deseados. Alternativamente, cuand
amino o un grupo funcional ácido, tal como carboxilo, l
ópticamente activos apropiados, seguido por la resolució
fraccional o medios cromatográficos bien conocidos en la
El término "acilo", como se usa en la presente descripció
un grupo haloalquilo), como se define en la presente des
de un grupo carbonilo, como se define en la presente
carboxialdehído), acetilo, propionilo y butanoilo. Los grup
11 o de 1 a 21 carbonos. En algunas modalidades, el grup
como se describe en la presente descripción.
El término "alifático" o "grupo alifático", como se usa en la
o una cadena de hidrocarburo ramificada, sustituida o no
una o más unidades de insaturación o un hidrocarburo
saturado o que contiene una o más unidades de insat
presente descripción como "carbociclo”, "cicloalifático" o
la molécula. A menos que se especifique de cualquier
carbono alifáticos. En algunas modalidades, los grupos
algunas modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-4
grupos alifáticos contienen 1-3 átomos de carbono alif
contienen 1-2 átomos de carbono alifáticos. En algunas
refiere a un hidrocarburo C<3>-C<6>monocíclico que está com
insaturación, pero que no es aromático, que tiene un punt
adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo
sustituidos y sus híbridos tales como (cicloalquil)alquilo, (
El término "heteroátomo" significa uno o más de oxígen
forma oxidada de nitrógeno, azufre, fósforo o silicio; la for
sustituible de un anillo heterocíclico, por ejemplo N (com
(como en pirrolidinilo N-sustituido)).
El término "insaturado ", como se usa en la presente,
insaturación.
El término "alquilo", como se usa en la presente descrip
cadena lineal o ramificada, derivados de un resto alifático
la eliminación de un único átomo de hidrógeno. A meno
alquilo contienen 1-12 átomos de carbono. En ciertas
carbono. En ciertas modalidades, los grupos alquilo conti
grupos alquilo contienen 1-5 átomos de carbono, en algu
carbono, en algunas modalidades los grupos alquilo cont
grupos alquilo contienen 1-2 átomos de carbono. Los ej cturas representadas en la presente descripción también lo, enantioméricas, diastereoméricas, y geométricas (o raciones R y S para cada centro asimétrico, los isómeros E. Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos individuales icas y geométricas (o conformacionales) de los presentes enos que se indique de cualquier otra manera, todas las án dentro del alcance de la invención. Adicionalmente, a turas representadas en la presente descripción también ncia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. sentes incluyen la sustitución de hidrógeno por deuterio o ido 13C- o 14C están dentro del alcance de esta invención. s analíticas, como sondas en ensayos biológicos o como
más restos de sacáridos. A menos que se especifique de y sus mezclas, están dentro del alcance de la invención. esente invención contempla modalidades con enlaces a y
compuesto de la presente invención puede prepararse l o mediante derivación con un compuesto auxiliar quiral, y el grupo auxiliar se escinde para proporcionar los molécula contiene un grupo funcional básico, tal como sales diastereoméricas se forman con un ácido o base e los diastereómeros así formados mediante cristalización nica, y posterior recuperación de los enantiómeros puros.
representa un hidrógeno o un grupo alquilo (por ejemplo, ción, que está unido al grupo molecular original a través cripción, y se ejemplifica por formilo (es decir, un grupo acilo no sustituidos ilustrativos incluyen de 1 a 7, de 1 a lquilo está además sustituido con 1,2, 3 o 4 sustituyentes
sente, significa una cadena lineal (es decir, no ramificada) stituida que está completamente saturada o que contiene ocíclico o hidrocarburo bicíclico que está completamente ción, pero que no es aromático (referido además en la loalquilo"), que tiene un punto único de unión al resto de manera, los grupos alifáticos contienen 1-6 átomos de lifáticos contienen 1-5 átomos de carbono alifáticos. En omos de carbono alifáticos. En algunas modalidades, los cos, y aún en otras modalidades, los grupos alifáticos alidades, "cicloalifático" (o "carbociclo" o "cicloalquilo") se tamente saturado o que contiene una o más unidades de nico de unión al resto de la molécula. Los grupos alifáticos lquenilo, alquinilo lineales o ramificados, sustituidos o no loalquenil)alquilo o (cicloalquil)alquenilo.
azufre, nitrógeno, fósforo o silicio (que incluye, cualquier cuaternizada de cualquier nitrógeno básico o; un nitrógeno n 3,4-dihidro-2H-pirrolil), NH (como en pirrolidinilo) o NR+
ignifica que una porción tiene una o más unidades de
n, se refiere a radicales hidrocarbonados saturados, de e contiene entre uno y seis átomos de carbono mediante ue se especifique de cualquier otra manera, los grupos dalidades, los grupos alquilo contienen 1-8 átomos de en 1-6 átomos de carbono. En algunas modalidades, los modalidades, los grupos alquilo contienen 1-4 átomos de en 1-3 átomos de carbono y en algunas modalidades los plos de radicales alquilo incluyen, pero no se limitan a,metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo,
neopentilo, n-hexilo, sec-hexilo, n-heptilo, n-octilo, n-deci
El término "alquenilo", como se usa en la presente desc
alifático de cadena lineal o ramificada que tiene al meno
de un único átomo de hidrógeno. A menos que se especifi
2-12 átomos de carbono. En ciertas modalidades, los gr
modalidades, los grupos alquenilo contienen 2-6 átomos
contienen 2-5 átomos de carbono, en algunas modalida
en algunas modalidades los grupos alquenilo contienen
alquenilo contienen 2 átomos de carbono. Los grupos al
metil-2-buten-1-ilo.
El término "alquinilo" como se usa en la presente descrip
alifático de cadena lineal o ramificada que tienen al men
de un único átomo de hidrógeno. A menos que se especif
2-12 átomos de carbono. En ciertas modalidades, los gr
modalidades, los grupos alquinilo contienen 2-6 átomos
contienen 2-5 átomos de carbono, en algunas modalidad
algunas modalidades los grupos alquinilo contienen 2-3
alquinilo contienen 2 átomos de carbono. Los grupos alq
propinilo (propargilo) y 1 -propinilo.
El término "alquileno" se refiere a un grupo alquilo bivale
decir, -(CH<2>)n-, en donde n es un número entero positivo,
2 a 3. Una cadena de alquileno sustituido es un grupo
metileno se reemplazan con un sustituyente. Los sustitu
para un grupo alifático sustituido.
El término "alquenileno" se refiere a un grupo alquenilo
polimetileno que contiene al menos un doble enlace en el
sustituyente. Los sustituyentes adecuados incluyen aque
El término "halo", como se usa en la presente, represent
El término "halógeno" significa F, Cl, Br o I.
El término "haloalcoxi", como se usa en la presente, r
descripción, sustituido por un grupo halógeno (es decir,
dos, tres o, en el caso de grupos alquilo de dos carbon
perfluoroalcoxis (por ejemplo, -OCF<3>), -OCHF<2>, -OC
OCHICH<3>. En algunas modalidades, el grupo haloalco
sustituyentes como se describe en la presente descripció
El término "haloalquilo", como se usa en la presente, r
descripción, sustituido por un grupo halógeno (es decir,
dos, tres o, en el caso de grupos alquilo de dos carbono
perfluoroalquilos (por ejemplo, -CF<3>), -CHF<2>, -CH<2>F, -algunas modalidades, el grupo haloalquilo puede estar a
se describe en la presente descripción para grupos alquil
El término "arilo" usado solo o como parte de una porción
se refiere a sistemas de anillos bicíclicos o monocíclico
donde al menos un anillo en el sistema es aromático
miembros de anillo. El término "arilo" puede usarse en f
modalidades, un grupo arilo bicíclico de 8-10 miembr
modalidades de la presente invención, "arilo" se refiere
limita a, fenilo, bifenilo, naftilo, y antracilo, que pueden p
alcance del término "arilo," como se usa en la presente d
a uno o más anillos no aromáticos, tales como indanilo, f
Los términos "heteroarilo" y "heteroar-," usado solo
"heteroaralquilo," o "heteroaralcoxi," se refieren a grupos
átomos de anillo; que tienen 6, 10 o 14 electrones n co
átomos de carbono, de uno a cinco heteroátomos. Los
pirrolilo, imadazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxaz c-butilo, sec-pentilo, iso-pentilo, terc-butilo, n-pentilo, n-undecilo y dodecilo.
ión, denota un grupo monovalente derivado de un resto n doble enlace carbono-carbono mediante la eliminación de cualquier otra manera, los grupos alquenilo contienen s alquenilo contienen 2-8 átomos de carbono. En ciertas carbono. En algunas modalidades, los grupos alquenilo , los grupos alquenilo contienen 2-4 átomos de carbono, átomos de carbono y en algunas modalidades los grupos nilo incluyen, por ejemplo, etenilo, propenilo, butenilo y 1-
, se refiere a un grupo monovalente derivado de un resto un triple enlace carbono-carbono mediante la eliminación e de cualquier otra manera, los grupos alquinilo contienen s alquinilo contienen 2-8 átomos de carbono. En ciertas carbono. En algunas modalidades, los grupos alquinilo los grupos alquinilo contienen 2-4 átomos de carbono, en omos de carbono y en algunas modalidades los grupos lo representativos incluyen, pero sin limitarse a, etinilo, 2-
. Una "cadena de alquileno" es un grupo polimetileno, es eferentemente de 1 a 6, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2 o de imetileno en el que uno o más átomos de hidrógeno del tes adecuados incluyen aquellos descritos a continuación
alente. A cadena de alquenileno sustituida es un grupo al uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan con un descritos más abajo.
halógeno seleccionado de bromo, cloro, yodo o flúor.
esenta un grupo alcoxi, como se define en la presente Cl, Br o I). Un haloalcoxi puede estar sustituido con uno, más, cuatro halógenos. Los grupos haloalcoxi incluyen -OCCla, -OCH<2>CH<2>Br, -OCH<2>CH(CH<2>CH<2>Br)CH3, y -uede estar además sustituido con 1, 2, 3 o 4 grupos ara grupos alquilo.
esenta un grupo alquilo, como se define en la presente l, Br o I). Un haloalquilo puede estar sustituido con uno, más, cuatro halógenos. Los grupos haloalquilo incluyen l3, -CH<2>CH<2>Br, -CH2CH(CH2CH2Br)CH3, y -CHICH<3>. En ás sustituido con 1, 2, 3 o 4 grupos sustituyentes como
s grande como en "aralquilo", "aralcoxi" o "ariloxialquilo", ue tienen un total de cinco a 10 miembros de anillo, en donde cada anillo en el sistema contiene tres a siete a intercambiable con el término "anillo arilo". En algunas s un anillo naftilo opcionalmente sustituido. En ciertas n sistema de anillos aromáticos que incluye, pero no se r uno o más sustituyentes. También se incluye dentro del ripción, un grupo en el cual un anillo aromático se fusiona idilo, naftimidilo, fenantridinilo o tetrahidronaftilo.
como parte de un resto más grande, por ejemplo, tienen 5 a 10 átomos de anillo, preferentemente 5, 6 o 9 rtidos en un arreglo cíclico; y que tienen, en adición a los pos heteroarilos incluyen, sin limitación, tienilo, furanilo, , isoxazolilo, oxadiazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tiadiazolilo,piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, p
"heteroar-", como se usa en la presente, también incluye
a uno o más anillos arilo, cicloalifático o heterocicli
heteroaromático. Los ejemplos no limitantes incluyen in
indazolilo, bencimidazolilo, benztiazolilo, quinolilo, isoq
quinolizinilo, carbazolilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinil
pirido[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Un grupo heteroarilo
usarse de manera intercambiable con los términos "a
cualquiera de estos términos incluye anillos que están op
a un grupo alquilo sustituido por un heteroarilo, en dond
opcionalmente sustituidos.
Como se usan en la presente, los términos "heterociclo
se usan indistintamente y se refieren a un anillo de 5, 6
manera, que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroátom
en nitrógeno, oxígeno y azufre. El anillo de 5 miembro
miembros tienen de cero a tres dobles enlaces. Los gru
ejemplo, 1 a 11, 1 a 10, 1 a 9, 2 a 12, 2 a 11, 2 a 10 o
un compuesto heterocíclico que tiene una estructura
heteroátomos unen dos miembros no adyacentes de u
término "heterociclilo" incluye grupos bicíclicos, tricíc
heterocíclicos anteriores está fusionado con uno, dos o t
de ciclohexano, un anillo de ciclohexeno, un anillo de cic
monocíclico, tal como indolilo, quinolilo, isoquinolilo,
heterociclilos fusionados incluyen tropanos y 1,2,3,5,8
pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinil
homopiperidinilo, pirazinilo, piperazinilo, pirimidinilo, pi
tiomorfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazoli dihidroquinoxalinilo, quinazolinilo, cinnolinilo, ftal
benzotiadiazolilo, furilo, tienilo, tiazolidinilo, isotiazoli
oxadiazolilo), purinilo, tiadiazolilo (por ejemplo, 1,2,3-ti
dihidrotienilo, dihidroindolilo, dihidroquinolilo, tetrahidr
dihidropiranilo, ditiazolilo, benzofuranilo, isobenzofuranil
las mismas, donde uno o más dobles enlaces se reduc
ilustrativos incluyen: 2,3,4,5-tetrahidro-2-oxo-oxazolilo;
pirazolilo (por ejemplo, 2,3,4,5-tetrahidro-2-fenil-5-oxoejemplo, 2,3,4,5-tetrahidro-2,4-dioxo-5-metil-5-fenil-1H-i
2,3-dihidro-2-tioxo-5-fenil-1,3,4-oxadiazolil); 4,5-dihidrooxo-1H-triazolil); 1,2,3,4-tetrahidro-2,4-dioxopiridinilo (p
dioxo-piperidinilo (por ejemplo, 2,6-dioxo-3-etil-3-f
oxopirimidinilo (por ejemplo, 2-(metiltio)-1,6-dihidro-4-ox
(por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidro-2,4-dioxo-3-etilpirimidini
oxo-3-etilpiridazinil); 1,6-dihidro-6-oxo-1,2,4-triazinilo (p
dihidro-2-oxo-1H-indolilo (por ejemplo, 3,3-dimetil-2,3-di
1H-indol-1-il); 1,3-dihidro-1-oxo-2H-iso-indolilo; 1,3-dihi
1-(etoxicarbonil)- 1H-benzopirazolil); 2,3-dihidro-2-oxobencimidazolil); 2,3-dihidro-2-oxo-benzoxazolilo (por ej
oxo-benzoxazolilo; 2-oxo-2H-benzopiranilo; 1,4-ben
benzotiazinilo; 3,4-dihidro-4-oxo-3H-quinazolinilo (por
tetrahidro-2,4-dioxo-3H-quinazolilo (por ejemplo, 1-etil-2,6-dioxo-7H-purinilo (por ejemplo, 1,2,3,6-tetrahidro-1 H-purinilo (por ejemplo, 1,2,3,6-tetrahidro-3,7-dimetil
naft[1,8-c,d]isotiazolilo; y 1,8-naftilenodicarboxamido. Lo
pirrolo[3,4-b]pirrol-(2H)-ilo y 2,5-diazabiciclo[2.2.1]hept
ditiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, oxepanilo, tiepani
Como se usa en la presente, el término "parcialmente
menos un doble o triple enlace. El término "parcialmen
sitios de insaturación, pero no pretende incluir porcio
descripción.
Como se describe en la presente descripción, los compu
porciones "opcionalmente sustituidas". En general, el tér
no, significa que uno o más hidrógenos de la porción
menos que se indique de otra forma, un grupo opcion
cada posición sustituible del grupo, y cuando más de u , naftiridinilo, y pteridinilo. Los términos "heteroarilo" y rupos en los cuales un anillo heteroaromático se fusiona onde el radical o punto de unión está en el anillo isoindolilo, benzotienilo, benzofuranilo, dibenzofuranilo, , cinnolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 4H-oxazinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, y e ser mono- o bicíclico. El término "heteroarilo" puede e heteroarilo", "grupo heteroarilo" o "heteroaromático", lmente sustituidos. El término "heteroaralquilo" se refiere porciones alquilo y heteroarilo independientemente son
terociclilo", "radical heterocíclico" y "anillo heterocíclico" iembros, a menos que se especifique de cualquier otra leccionados independientemente del grupo que consiste e de cero a dos dobles enlaces, y los anillos de 6 y 7 eterociclilo no sustituidos ilustrativos son de 1 a 12 (por carbonos. El término "heterociclilo" también representa íclica con puente en la que uno o más carbonos y/o llo monocíclico, por ejemplo, un grupo quinuclidinilo. El y tetracíclicos en los que cualquiera de los anillos nillos carbocíclicos, por ejemplo, un anillo arilo, un anillo tano, un anillo de ciclopenteno u otro anillo heterocíclico idroquinolilo, benzofurilo y benzotienilo. Ejemplos de exahidroindolizina. Los heterocíclicos incluyen pirrolilo, azolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, piperidinilo, nilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, indolilo, indazolilo, quinolilo, isoquinolilo, quinoxalinilo, , bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, iazolilo, tetrazolilo, oxadiazolilo (por ejemplo, 1,2,3-lilo), tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, lilo, tetrahidroisoquinolilo, dihidroisoquinolilo, piranilo, enzotienilo, incluidas las formas dihidro y tetrahidro de se reemplazan con hidrógenos. Aún otros heterociclilos hidro-2-oxo-1H-imidazolilo; 2,3,4,5-tetrahidro-5-oxo-1H-razolil); 2,3,4,5-tetrahidro-2,4-dioxo-1H-imidazolilo (por olil); 2,3-dihidro-2-tioxo-1,3,4-oxadiazolilo (por ejemplo, -1H-triazolilo (por ejemplo, 4,5-dihidro-3-metil-4-amino 5-mplo, 1,2,3,4-tetrahidro-2,4-dioxo-3,3-dietilpiridinil); 2,6-eridinil); 1,6-dihidro-6-oxopiridiminilo; 1,6-dihidro-4-etilpirimidin-1-il); 1,2,3,4-tetrahidro-2,4-dioxopirimidinilo 6-dihidro-6-oxo-piridazinilo (por ejemplo, 1,6-dihidro-6-emplo, 1,6-dihidro-5-isopropil-6-oxo-1,2,4-triazinil); 2,3-2-oxo-1H-indolilo y 2,3-dihidro-2-oxo-3,3'-spiropropano-3-dioxo-2H-isoindolilo; 1H-benzopirazolilo (por ejemplo, ncimidazolilo (por ejemplo, 3-etil-2,3-dihidro-2-oxo-1H-, 5-cloro-2,3-dihidro-2-oxo-benzoxazolil); 2,3-dihidro-2-anilo; 1,3-benzodioxanilo; 2,3-dihidro-3-oxo,4H-1,3-plo, 2-metil-3,4-dihidro-4-oxo-3H-quinazolinil); 1,2,3,4-4-tetrahidro-2,4-dioxo-3H-quinazolil); 1,2,3,6-tetrahidroetil-2,6-dioxo-7 H-purinil); 1,2,3,6-tetrahidro-2,6-dioxoioxo-1 H-purinil); 2-oxobenz[c,d]indolilo; 1,1-dioxo-2H-rocíclicos adicionales incluyen 3,3a,4,5,6,6a-hexahidroo, homopiperazinilo (o diazepanilo), tetrahidropiranilo, ocanilo, oxecanilo y tiocanilo.
rado" se refiere a una porción de anillo que incluye al aturado" pretende abarcar anillos que tienen múltiples e arilo o heteroarilo, como se define en la presente
de la invención pueden, cuando se especifica, contener "sustituido," precedido por el término "opcionalmente" o nada se reemplazan con un sustituyente adecuado. A te sustituido puede tener un sustituyente adecuado en sición en una estructura dada puede ser sustituida conmás de un sustituyente seleccionado de un grupo espe
posición. Las combinaciones de los sustituyentes consid
que resultan en la formación de compuestos estables o
la presente, se refiere a compuestos que no se alter
permitan su producción, detección, y, en algunas moda
de los propósitos descritos en la presente descripción.
Los sustituyentes monovalentes adecuados en un átomo
son independientemente halógeno; -(CH2)0-4R°; -(CH2)0
-(CH2)0-4SR°; -(CH2)0-4Ph, que puede estar sustituido co
-CH=CHPh, que puede estar sustituido con R°; -(CH2)0
CN; -N<3>; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)R°; -N(R
4N(R°)C(O)OR0-N(R0)N(R0)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)N
4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3;
4SC(O)R0; -(CH2)0-4C(O)NR02; -C(S)NR02;-C(S)SR0; -SC
C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR0)R0; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4
(CH2)0-4S(O)R0; -N(R0)S(O)2NR02; -N(R0)S(O)2R0;-N(
OP(O)(OR0)2; SiR03; -(alquileno C1-4 lineal o ramificado)
en donde cada R<0>puede sustituirse como se define m
CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-iPh, -CH<2>-(anillo heteroarilo de 5-6 mi
de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccion
pesar de la definición anterior, dos apariciones independi
forman un anillo mono- o bicíclico saturado, parcial
heteroátomos seleccionados independientemente de
define más abajo.
Los sustituyentes monovalentes adecuados en R0 (o el
junto con sus átomos intermedios), son independiente
<2>O R -(CH<2>)<0-2>CH(OR-)<2>; -O(haloR-), -CN, -N<3>, -(CH<2>)<0>
(CH<2>)<0-2>SH, -(CH<2>)<0-2>NH<2>, -(CH<2>)<0-2>NHR^, -(CH<2>)<0-2>NR ramificado)C(O)OR* o -SSR^ en donde cada R^ no está
solamente con uno o más halógenos, y se selecciona i
un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo d
independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre. Lo
saturado de R<0>incluyen =O y =S.
Los sustituyentes divalentes adecuados en un átomo
incluyen los siguientes: =O, =S, =NNR*<2>, =NNHC(O)R*
<3>O- o -S(C(R*2))2-3S-, en donde cada aparición independi
sustituirse como se define más abajo o un anillo sat
sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
sustituyentes divalentes adecuados que se unen a los
sustituido" incluyen: -O(CR*2)2-3O-, en donde cada apari
C<1-6>que puede sustituirse como se define más abajo
miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos sele
Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R*
-C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, -NR<^2>o -NO<2>, en do
está sustituido solamente con uno o más halógenos, y
un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo d
independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre.
Los sustituyentes adecuados en un nitrógeno sustituible
C(O)Rt -C(O)ORt -C(O)C(O)Rt -C(O)CH<2>C(O)Rt -S(
en donde cada Rt es independientemente hidrógeno, al
OPh no sustituido o un anillo saturado, parcialmente in
heteroátomos seleccionados independientemente de nit
dos apariciones independientes de Rt , tomados juntos
bicíclico saturado, parcialmente saturado o arilo de
seleccionados independientemente de nitrógeno, oxíge
Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de Rt
-O(haloR^), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, -precedido por "halo" está sustituido solamente con un
CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph o un anillo saturado, parcialmente i
seleccionados independientemente de nitrógeno, oxíge el sustituyente puede ser el mismo o diferente en cada s por esta invención preferentemente son solamente las icamente factibles. El término “estable”, como se usa en stancialmente cuando se someten a condiciones que s, su recuperación, purificación, y uso para una o más
rbono sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" ; -O(CH2)0-4R°, -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4O(CH2)0-iPh que puede estar sustituido con R°; H2)0-i-piridilo que puede estar sustituido con R°; -NO<2>; -)R°; -(CH2)0-4N(R')C(O)NR'2; -N(R°)C(S)NR°<2>; -(CH<2>)<ü>-N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°;-C(S)R°; -(CH2)<ü>-)0-4OC(O)R°;-OC(O)(CH2)0-4SR-, SC(S)SR°; -(CH2)0-0, -(CH2)0-4OC(O)NR02; -C(O)N(OR0)R0; -C(O)C(O)R0;-R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°;-(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -0; -C(NH)NR02; -P(O)2R0; -P(O)R02; -OP(O)R02; -0)2; o -(alquileno C1-4 lineal o ramificado)C(O)O-N(R0)2, ajo y es independientemente hidrógeno, alifático C<1-6>, -os) o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo ndependientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, o, a de R<0>, tomados juntos con su(s) átomo(s) intermedio(s), insaturado o arilo de 3-12 miembros que tiene 0-4 no, oxígeno o azufre, que puede sustituirse como se
formado tomando dos apariciones independientes de R0 halógeno, -(CH<2>)ü<-2>R^ , -(haloR^), -(CH<2>)<0-2>OH, -(CH<2>)ü-)R-, -(CH<2>)<0-2>C(O)OH, -(CH<2>)<0-2>C(O)ORV(CH<2>)<0-2>S R -O<2>, -S¡RVOS¡R-3, -C(O)SR -(alquilo C<1-4>lineal o ituido o donde esté precedido por "halo" está sustituido ndientemente de alifático C<1-4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph o miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados ituyentes divalentes adecuados en un átomo de carbono
bono saturado de un grupo "opcionalmente sustituido" HC(O)OR*, =NNHS(O)<2>R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R*<2>))<2>-e R se selecciona de hidrógeno, alifático C<1-6>que puede parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros no pendientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre. Los nos sustituibles vecinales de un grupo "opcionalmente dependiente de R* se selecciona de hidrógeno, alifático anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 dos independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre.
yen halógeno, -R^ , -(haloR^), -OH,-OR^, -O(haloR^), -CN, ada R^ no está sustituido o donde precedido por "halo" ependientemente alifático C<1-4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph o miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -Rt -NR<f 2>, -t -S(O)<2>NRVC(S)NR<f 2>, -C(NH)NR<f 2>o -N(Rt )S(O)<2>Rt ; C<1-6>que puede sustituirse como se define más abajo, -do o arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene 0-4 o, oxígeno o azufre, o, a pesar de la definición anterior, su(s) átomo(s) intermedio(s) forman un anillo mono- o miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos zufre.
ndependientemente halógeno, -R^ , -(haloR^), -OH, -OR ,^ -NO<2>, en donde cada R^ no está sustituido o donde ás halógenos, y es independientemente alifático C<1-4>, -rado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos zufre.
En otro aspecto, la presente invención proporciona comp
una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más
formuladas junto con uno o más portadores farmacéutica
en detalle, las composiciones farmacéuticas de la prese
administración en forma sólida o líquida, incluyendo aq
ejemplo, enjuagues (soluciones o suspensiones acuosa
absorción bucal, sublingual, y sistémica, bolos, polvos,
parenteral, por ejemplo, mediante inyección subcutánea, i
solución o suspensión estéril o una formulación de liber
crema, ungüento o un parche de liberación controlada o
vía intravaginal o intrarrectal, por ejemplo, como un pesa
vía transdérmica; o por vía nasal, pulmonar u otras muco
La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea en la
materiales, composiciones, y/o formas de dosificación qu
para su uso en contacto con los tejidos de seres huma
alérgica, u otro problema o complicación, proporcional co
La frase "portador farmacéuticamente aceptable" como
vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como una
encapsulación de solvente, implicado en portar o transport
del cuerpo, a otro órgano o porción del cuerpo. Cada po
con los otros ingredientes de la formulación y no dañino p
servir como portadores farmacéuticamente aceptables i
almidones, tales como almidón de maíz y almidón de pap
de sodio, etil celulosa y acetato de celulosa; tragacant
manteca de cacao y ceras para supositorio; aceites, tale
de cártamo, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de m
tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol;
agentes tamponantes, tales como hidróxido de magne
pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer;
policarbonatos y/o polianhídridos; y otras sustancia
farmacéuticas.
Como se usa en la presente, la expresión "sal farmacéut
del alcance del buen juicio médico, son adecuadas par
animales inferiores sin toxicidad indebida, irritación, respu
beneficio/riesgo razonable. Las sales farmacéuticamente
S. M. Berge y otros, describen sales farmacéuticamente
66, 1-19. Las sales aceptables farmacéuticamente de los
bases y ácidos orgánicos e inorgánicos adecuados. Los farmacéuticamente son las sales de un grupo amino for
ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido
ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico,
métodos usados en la técnica tal como el intercambio ióni
de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenos
alcanforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, diglu
glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemisulfato, he
lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato,
nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato,
propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiociana
Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen sal
N+(alquilo C1-4)4. Las sales metálicas alcalinas o alcalinot
magnesio. Las sales aceptables farmacéuticamente in
cuaternario, cationes de amina formados mediante el u
sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquil inferior y aril su
En ciertas modalidades, las formas neutras de los compu
o ácido y aislar el compuesto original de la manera co
compuesto difiere de las diversas formas de sal en ciert
polares.
Un experto en la técnica apreciará que los métodos sint
aunque no se reivindican, son útiles para comprender có ciones "farmacéuticamente aceptables", que comprenden los compuestos descritos en la presente descripción, te aceptables (aditivos) y/o diluyentes. Como se describe invención pueden ser formuladas especialmente para la las adaptadas para lo siguiente: administración oral, por no acuosas), tabletas,por ejemplo,las dirigidas para la nulos, pastas para aplicación a la lengua; administración amuscular, intravenosa o epidural como, por ejemplo, una ión sostenida; aplicación tópica, por ejemplo, como una mizador aplicado a la piel, pulmones o cavidad oral; por , crema o espuma; por vía sublingual; por vía ocular; por .
esente descripción para referirse a aquellos compuestos, on, dentro del alcance del buen juicio médico, adecuados y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta na relación de beneficio/riesgo razonable.
usa en la presente significa un material, composición o ga líquida o sólida, diluyente, excipiente o material de el compuesto objeto del mismo desde un órgano o porción dor debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible el paciente. Algunos ejemplos de materiales que pueden yen: azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; elulosa, y sus derivados, tales como carboximetil celulosa n polvo; malta; gelatina; talco; excipientes, tales como omo aceite de maní, aceite de semilla de algodón, aceite y aceite de soja; glicoles, tal como propilenglicol; polioles, eres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agua libre de ohol etílico; soluciones tamponantes de pH; poliésteres, compatibles no tóxicas empleadas en formulaciones
mente aceptable" se refiere a aquellas sales que, dentro u uso en contacto con los tejidos de seres humanos y a alérgica y similares, y se corresponden con una relación eptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, eptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, mpuestos de esta invención incluyen las derivadas de las jemplos de sales de adición ácida no tóxicas aceptables do con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, rclórico o con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ido succínico o ácido malónico o mediante el uso de otros Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales nato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, camforato, ato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, noato, hexanoato, hidroyoduro, 2-hidroxi-etanosulfonato, ato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, ectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, pivalato, p-toluenosulfonato, undecanoato y valerato.
de metales alcalinos, metales alcalinotérreos, amonio y eas representativas incluyen sodio, litio, potasio, calcio y en, cuando sea apropiado, amonio no tóxico, amonio de contraiones tales como haluro, hidróxido, carboxilato, nato.
os se regeneran al poner en contacto la sal con una base ncional. En algunas modalidades, la forma parental del propiedades físicas, tal como la solubilidad en solventes
os, como se describen en la presente descripción (que, preparar los compuestos de la presente invención) utilizanuna variedad de grupos protectores. Por el término "gru
una porción particular funcional,por ejemplo,O, S o N, s
cabo una reacción de manera selectiva en otro sitio react
adecuados se conocen bien en la técnica e incluyen aq
Synthesis, T. W. Greene y P. G. M. Wuts, 3ra edición, Jo
reacciona de manera selectiva con buen rendimiento para
reacciones pretendidas; el grupo protector es preferent
fácilmente disponibles, preferentemente no tóxicos que
forma un derivado separable (con mayor preferencia sin l
protector tendrá preferentemente un mínimo de funcionali
Como se detalla en la presente descripción pueden u
carbono. Por medio de ejemplo no limitante, los grupos p
metiltiometilo (MTM), t-butiltiometilo, (fenildimetilsil metoxibenciloximetilo (PMBM), (4-metoxifenoxi)metilo
penteniloximetilo (POM), siloximetilo, 2-metoxietoximetil (trimetilsilil)etoximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo ( metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo (MTHP), 4-dióxido, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-i tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-cloroetoxi)etilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1 -metil-1 -benciloxi
trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)etilo, í-butilo, alilo, pmetoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitro
fenilbencilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metil-2-picolilo W-óx
trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetil bromofenaciloxifenil)difenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-diclorofta tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1 -il)bis(4',4" -di
antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-(9-fenil-10-oxo)antrilo, 1,3-(TMS), trietilsililo (TES), triisopropilsililo (TIPS), di
dimetiltexilsililo, í-butildimetilsililo (TBDMS), í-butildifenil
difenilmetilsililo (DPMS), t-butilmetoxifenilsililo (TBM
dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato,
clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (
pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, b
carbonato de alquilmetilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo
tricloroetilo (Troc), carbonato de 2-(trimetilsilil)etilo (TMS
2-(trifenilfosfonio) etilo (Peoc), carbonato de alquiliso
carbonato de alquil p-nitrofenilo, carbonato de alquilbenci
3,4-dimetoxibencilo, carbonato de alquil o-nitrobencilo,
bencilo, carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonat
metilpentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-for (metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)fen
(E)-2-metil-2-butenoato, o-(metoxicarbonil)benzoato, aalquilo, W-fenilcarbamato de alquilo, borato, dimetilf
metanosulfonato (mesilato), bencilsulfonato y tosilato (T
incluyen metileno acetal, etilideno acetal, 1 -í-butiletiliden
2,2,2-tricloroetilideno acetal, acetónido, ciclopentilideno c
acetal, p-metoxibencilideno acetal, 3,4-dimetoxibencilide
etoximetileno acetal, a-metoxibencilideno orto és oxaciclopentilideno orto éster, grupo di-t-butilsilileno (DT
(TIPDS), carbonatos cíclicos, boronatos cíclicos, etil boro
grupos protectores ilustrativos, sin embargo, se apreciar
grupos protectores; más bien, puede identificarse fáci
adicionales mediante el uso de los criterios anteriore
Adicionalmente, una variedad de grupos protectores se d
El símbolo excepto cuando se usa como enlace
denota el punto de unión de un resto químico al resto de
Como se usa en la presente descripción, el término "ai
separado de al menos algunos de los componentes con
en la naturaleza y/o en un entorno experimental), y/o (2)
acción del hombre. Las sustancias y/o entidades a
aproximadamente 20 %, aproximadamente 30 %, aproxi
60 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 8
aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproxi protector," como se usa en la presente, se entiende que nmascara o bloquea, lo que permite, si se desea, llevar a en un compuesto multifuncional. Los grupos protectores los descritos en detalle en Protecting Groups in Organic Wiley & Sons, 1999. En ciertos casos, un grupo protector r lugar a un sustrato protegido que es estable frente a las ente de manera selectiva removible mediante reactivos atacan los otros grupos funcionales; el grupo protector eneración de nuevos centros estereogénicos); y el grupo des adicionales para evitar sitios adicionales de reacción. se grupos protectores de oxígeno, azufre, nitrógeno, y ectores de hidroxilo incluyen metilo, metoximetilo (MOM), etoximetilo (SMOM), benciloximetilo (BOM), p-(p-AOM), guaiacolmetilo (GUM), t-butoximetilo, 4-EM), 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-P), 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-toxitetrahidrotiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo S,S-(CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, etil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-o, 1-metil-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-rofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencilo, pcilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, p-, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosuberilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-idofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, 4,4',4"-xifenil)metilo, 1,1 -bis(4-metoxifenil)-1'-pirenilmetilo, 9-zoditiolan-2-ilo, bencisotiazolilo S,S-dióxido, trimetilsililo tilisopropilsililo (IPDMS), dietilisopropilsililo (DEIPS), lo (T<b>D<p>S), tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, ), formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, toxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, pulinato), 4,4-(etilenditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), oato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato (mesitoato), moc), carbonato de alquiletilo, carbonato de alquil 2,2,2-), carbonato de 2-(fenilsulfonil) etilo (Psec), carbonato de ilo, carbonato de alquilvinilo, carbonato de alquilalilo, carbonato de alquil p-metoxibencilo, carbonato de alquil bonato de alquil p-nitrobencilo, tiocarbonato de alquil S-de metilo, 2-iodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-encenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-cetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monosuccinato, ftoato, nitrato, W,W,W,W-tetrametilfosforodiamidato de inotioilo, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquilo, sulfato, Para proteger 1,2- o 1,3-dioles, los grupos protectores etal, 1-feniletilideno cetal, (4-metoxifenil)etilideno acetal, l, ciclohexilideno cetal, cicloheptilideno cetal, bencilideno acetal, 2-nitrobencilideno acetal, metoximetileno acetal, derivado de a-(W,W-dimetilamino)bencilideno, 2-), derivado de 1,3-(1, 1,3,3-tetraisopropildisiloxaniloideno) to y fenil boronato. En la presente descripción se detallan ue la presente descripción no pretende limitarse a estos ente una variedad de grupos protectores equivalentes y utilizarse en el método de la presente descripción. cribe por Greene y Wuts(más arriba).
a representar una estereoquímica mixta o desconocida, a molécula o fórmula química.
o" se refiere a una sustancia y/o entidad que (1) se ha que se asociaba cuando se produjo inicialmente (ya sea ha diseñado, producido, preparado, y/o fabricado por la das pueden separarse de aproximadamente 10 %, amente 40 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente , aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, amente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %,
los otros componentes con los que se asociaron inici
aproximadamente 80 %, aproximadamente 85 %, aproxi
92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente
aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, apro
Como se usa en la presente, una sustancia es "pura" si
modalidades, como comprenderán los expertos en la
incluso "pura", después de haberse combinado con otro
más portadores o excipientes (por ejemplo, tampón, sol
aislamiento o pureza de la sustancia se calcula sin incl
aislamiento implica o requiere la interrupción de enlaces
de un polipéptido más largo y/o para aislar un element
nucleico más largo).
El término "modulador" se usa para referirse a una enti
actividad de interés se correlaciona con un cambio en e
la observada en condiciones de cualquier otra manera
modalidades, un modulador es un activador o agonista,
comparación con la observada en condiciones de cu
ausente. En algunas modalidades, un modulador es un
reduce en su presencia en comparación con condicione
está ausente. En algunas modalidades, un modulador i
es de interés. En algunas modalidades, un modulador in
intermedio que interactúa con la entidad diana) con
modalidades, un modulador afecta el nivel de una entid
en algunas modalidades, un modulador afecta la activi
entidad diana. En algunas modalidades, un modulador a
diana, de modo que una diferencia observada en la act
diferencia observada en el nivel. Como se usa en la pre
una molécula, compuesto, célula, tejido u órgano. Tales
las moléculas de cGAS de la presente descripción pued
enzimática.
El término "ácido nucleico", en su sentido más amplio (q
invención) incluye cualquier compuesto y/o sustancia qu
denominan frecuentemente polinucleótidos. Los ácido
incluyen, pero sin limitarse a, ácidos ribonucleicos (A
treosa (TNA), ácidos nucleicos de glicol (GNA), ácidos n
incluyendo LNA que tiene una configuración p- D-ribo,
de LNA), 2'-amino-LNA que tiene una funcionalización
amino) o híbridos de los mismos.
La presente descripción proporciona nucleósidos y n
descripción, "nucleósido" se define como un compues
pentosa o ribosa) o un derivado de la misma en com
pirimidina) o un derivado de la misma (también deno
describe en la presente descripción, "nucleótido" se d
nucleótidos modificados pueden sintetizarse mediant
descripción (por ejemplo, química, enzimática o recom
o no naturales).
El emparejamiento de bases de nucleótidos modificados
adenosina-uracilo o guanosina-citosina, sino también
modificados que comprenden bases no estándar o mod
de hidrógeno y los aceptores de enlaces de hidrógeno p
no estándar y una base estándar o entre dos estructur
emparejamiento de bases no estándar es el emparej
adenina, citosina o uracilo.
Los nucleósidos y nucleótidos modificados pueden incl
encontradas en el ARN incluyen, pero sin limitarse a, ade
encontradas en el ADN incluyen, pero sin limitarse a, ad
Como será evidente a partir del contexto, en algunas
nucleico individuales (porejemplo,nucleótidos y/o nucl
a una cadena de oligonucleótido que comprende residu roximadamente 99 % o más de aproximadamente 99 % de ente. En algunas modalidades, los agentes aislados son damente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, adamente 99 % o más de aproximadamente 99 % puros. tá sustancialmente libre de otros componentes. En algunas nica, una sustancia aún puede considerarse "aislada" o eterminados componentes tales como, por ejemplo, uno o te, agua, etcétera); en tales modalidades, el por ciento de ales portadores o excipientes. En algunas modalidades, el valentes (por ejemplo, para aislar un dominio polipeptídico e secuencia de nucleótidos de un oligonucleótido o ácido
d cuya presencia en un sistema en el que se observa una ivel y/o la naturaleza de esa actividad en comparación con mparables cuando el modulador está ausente. En algunas el sentido de que la actividad aumenta en su presencia en ier otra manera comparables cuando el modulador está hibidor o antagonista, en el sentido de que la actividad se e cualquier otra manera comparables cuando el modulador ractúa directamente con una entidad diana cuya actividad actúa indirectamente (es decir, directamente con un agente entidad diana cuya actividad es de interés. En algunas diana de interés diana; alternativamente o adicionalmente, de una entidad de interés diana sin afectar el nivel de la ta tanto el nivel como la actividad de una entidad de interés ad no se explica completamente ni es proporcional a una te, una "actividad" es cualquier proceso llevado a cabo por ocesos pueden ser catalíticos o no catalíticos. Por ejemplo, actuar como enzimas y como tales pueden tener actividad
aunque no se reivindica es útil para comprender la presente omprenda un polímero de nucleótidos. Estos polímeros se nucleicos o polinucleótidos ilustrativos de la descripción , ácidos desoxirribonucleicos (ADN), ácidos nucleicos de eicos peptídicos (PNA), ácidos nucleicos bloqueados (LNA, NA que tiene una configuración a-L-ribo (un diastereómero mino, y 2'-amino- a-LNA que tiene una funcionalización 2'-
leótidos modificados. Como se describe en la presente que contiene una molécula de azúcar (por ejemplo, una ación con una base orgánica (por ejemplo, una purina o ado en la presente descripción "nucleobase"). Como se e como un nucleósido que incluye un grupo fosfato. Los ualquier método útil, como se describe en la presente ntemente para incluir uno o más nucleósidos modificados
arca no sólo los pares de bases estándar adenosina-timina, res de bases formados entre nucleótidos y/o nucleótidos adas, en donde la disposición de los donantes de enlaces iten la formación de enlaces de hidrógeno entre una base de bases complementarias no estándar. Un ejemplo de tal iento de bases entre el nucleótido modificado inosina y
una nucleobase modificada. Los ejemplos de nucleobases a, guanina, citosina y uracilo. Los ejemplos de nucleobases ina, guanina, citosina y timina.
dalidades, "ácido nucleico" se refiere a residuos de ácido idos); en algunas modalidades, "ácido nucleico" se refiere de ácido nucleico individuales. En algunos casos, un "ácidonucleico" es o comprende ARN; en algunos casos, un "
ácido nucleico es, comprende o consiste en uno o más
ácido nucleico es, comprende o consiste en uno o más
ácido nucleico difiere de un ácido nucleico en el hecho
ejemplo, en algunos casos, un ácido nucleico es, compr
que se conocen en la técnica y tienen enlaces peptídico
considerados dentro del alcance de la presente descripci
ácido nucleico tiene uno o más enlaces fosforotioato y/o
casos, un ácido nucleico es, comprende o consiste en
timidina, guanosina, citidina, uridina, desoxiadenosina, d
casos, un ácido nucleico es, comprende o consiste
aminoadenosina, 2-tiotimidina, inosina, pirrolo-pirimidin
propinil-uridina, 2-aminoadenosina, C5-bromouridina,
propinil-citidina, C5-metilcitidina, 2-aminoadenosina,
oxoguanosina, O(<6>)-metilguanina, 2-tiocitidina, bases m
casos, un ácido nucleico comprende uno o más azú
desoxirribosa, arabinosa y hexosa) en comparación con
nucleico tiene una secuencia de nucleótidos que codific
En algunos casos, un ácido nucleico incluye uno o más
mediante uno o más de aislamiento a partir de una fuent
en una plantilla complementaria(in vivooin vitro),rep
química. En algunos casos, un ácido nucleico es de al m
20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90,
250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 6
4500, 5000 o más residuos de longitud.
El término "polipéptido", como se usa en la presente (que
invención) generalmente tiene su significado reconocido
unidos entre sí mediante enlaces peptídicos. En alguno
específicas de polipéptidos, tales como, por ejemplo,
estructurales, polipéptidos autoantígenos, polipépti
aloantígenos, etc. Para cada una de tales clases, la pre
de aminoácidos de polipéptidos ilustrativos conocidos
conocidos son polipéptidos de referencia para la clase
aproximadamente 50 aminoácidos y el polipéptido se
tendrá al menos aproximadamente 2, 3, 4 o al meno
polipéptidos incluyen productos génicos, polipéptidos de
parálogos, fragmentos y otros equivalentes, variantes y a
molécula o puede ser un complejo multimolecular ta
comprender polipéptidos monocatenarios o multicate
asociados o unidos. Los enlaces disulfuro más común
polipéptido también puede aplicarse a polímeros de ami
un análogo químico artificial de un aminoácido de
"polipéptido" se refiere a cualquier miembro de la cl
significativa con un polipéptido de referencia relevante.
significativa con el polipéptido de referencia. Por ejemplo
de homología o identidad de secuencia general con un p
30-40 %, y frecuentemente es mayor que aproximadam
95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % o más y/o incluye al me
frecuentemente un elemento de secuencia caracterí
frecuentemente mayor que 90 % o incluso 95 %, 96 %,
al menos 3-4 y frecuentemente hasta 20 o más amino
menos un tramo de al menos 2, 3, 4, 5,<6>, 7,<8>, 9, 10,
casos, un polipéptido útil como se describe en la presen
de un polipéptido original. En algunos casos, un polipé
comprender o consistir en una pluralidad de fragmentos,
original en una disposición espacial diferente entre sí q
fragmentos que están unidos directamente en el origina
interés o viceversa, y/o los fragmentos pueden estar pre
en el original), de manera que el polipéptido de interés e
La expresión "variante polipeptídica" se refiere a molé
secuencia nativa o de referencia. Las variantes de
deleciones, y/o inserciones en ciertas posiciones dent
secuencia nativa o de referencia. Normalmente, las v
identidad (homología) con una secuencia nativa o de ref nucleico" es o comprende ADN. En algunos casos, un duos de ácido nucleico naturales. En algunos casos, un gos de ácido nucleico. En algunos casos, un análogo de que no utiliza una cadena principal de fosfodiéster. Por o consiste en uno o más "ácidos nucleicos peptídicos", lugar de enlaces fosfodiéster en la cadena principal, son Alternativamente o adicionalmente, en algunos casos, un osforamidita en lugar de enlaces fosfodiéster. En algunos o más nucleósidos naturales (por ejemplo, adenosina, itimidina, desoxi guanosina y desoxicitidina). En algunos no o más análogos de nucleósidos (por ejemplo,<2>-etil adenosina, 5-metilcitidina, C-5 propinil-citidina, C-5 fluorouridina, C5-yodouridina, C5-propinil-uridina, C5-zaadenosina, 7-deazaguanosina,<8>-oxoadenosina,<8>-as, bases intercaladas y sus combinaciones). En algunos modificados (por ejemplo,<2>'-fluororribosa, ribosa,<2>'-e ácidos nucleicos naturales. En algunos casos, un ácido producto génico funcional tal como un ARN o proteína. nes. En algunos casos, los ácidos nucleicos se preparan ural, síntesis enzimática mediante polimerización basada cción en una célula o sistema recombinante y síntesis 2 (dinucleótido o dinucleósido), 3, 4, 5,<6>, 7,<8>, 9, 10, 15, 00, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 20, 225, 00, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000,
que no se reivindica, es útil para comprender la presente la técnica de un polímero de al menos tres aminoácidos, os, el término se usa para referirse a clases funcionales ptores, enzimas, proteínas de señalización, proteínas receptores nicotínicos de acetilcolina, polipéptidos descripción proporciona varios ejemplos de secuencias tro de la clase; en algunos casos, tales polipéptidos algunos casos, el polipéptido codificado es menor que mina entonces péptido. Si el polipéptido es un péptido, residuos de aminoácidos de longitud. Por lo tanto, los en natural, polipéptidos sintéticos, homólogos, ortólogos, gos de los anteriores. Un polipéptido puede ser una única mo un dímero, trímero o tetrámero. También pueden s tales como anticuerpos o insulina y pueden estar se encuentran en polipéptidos multicadena. El término idos en los que uno o más residuos de aminoácidos son natural correspondiente. En tales casos, el término ue muestra una homología o identidad de secuencia muchos casos, tal miembro también comparte actividad algunos casos, un polipéptido miembro muestra un grado ptido de referencia que es de al menos aproximadamente 50 %, 60 %, 70 %,<80>%, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, na región (es decir, una región conservada, que incluye que muestra una identidad de secuencia muy alta, 98 % o 99 %. Tal región conservada usualmente abarca s; en algunos casos, una región conservada abarca al 2, 13, 14, 15 o más aminoácidos contiguos. En algunos scripción puede comprender o consistir en un fragmento útil como se describe en la presente descripción puede uno de los cuales se encuentra en el mismo polipéptido encuentra en el polipéptido de interés (por ejemplo, los den estar espacialmente separados en el polipéptido de es en un orden diferente en el polipéptido de interés que derivado de su polipéptido original.
que difieren en su secuencia de aminoácidos de una uencia de aminoácidos pueden poseer sustituciones, e la secuencia de aminoácido en comparación con la tes poseerán al menos aproximadamente un 50 % de ia, y preferentemente, serán al menos aproximadamenteun 80 %, con mayor preferencia al menos aproximadam
de referencia.
En algunos casos se proporcionan "variantes imitadoras
es una que contiene uno o más aminoácidos que imitar
servir como imitador de la fosforotreonina y/o la fosforo
como resultado la desactivación o un producto inactivad
actuar como una sustitución inactivante de la tirosina; o
la serina.
"Homología" cuando se aplica a las secuencias de a
secuencia de aminoácidos candidata que es idéntico
segunda secuencia después de alinear las dos secuen
máximo porcentaje de homología. Los métodos y progr
técnica. Se entiende que la homología depende de un
debido a lagunas y penalizaciones introducidas en el cá
Por "homólogos" cuando se aplica a secuencias polipe
especies que tienen identidad sustancial con una segun
"Análogos" en el contexto de polipéptidos pretende i
alteraciones de aminoácidos, por ejemplo, sustituciones
aún mantienen una o más de las propiedades del polipé
Como se usa en la presente, el término "proteína" se re
aminoácidos unidos entre sí mediante enlaces pep
aminoácidos(por ejemplo,pueden ser glicoproteínas,
cualquier otra manera. Los expertos en la técnica aprec
completa producida por una célula (con o sin una secuen
Los expertos apreciarán que una proteína a veces pued
por uno o más enlaces disulfuro o asociada por otros
aminoácidos o ambos y pueden contener cualquiera de
conocidos en la técnica. Las modificaciones útiles inclu
etc. En algunos casos, las proteínas pueden comp
aminoácidos sintéticos y sus combinaciones. El término
que tiene una longitud de menos de aproximadamente 1
menos de 20 aminoácidos o menos de 10 aminoácidos.
de anticuerpos, porciones biológicamente activas de los
Las frases "administración parenteral" y "administrado p
de administración distintos a la administración entérica
inyección intravenosa, intramuscular, intraarterial, intr
intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular
intrasternal e infusión.
Las frases "administración sistémica", "administrado por
vía periférica" como se usan en la presente significan la
no sea directamente en el sistema nervioso central, de
está sujeto al metabolismo y otros procesos similares, p
El término "paliativo" se refiere a un tratamiento que se
efectos secundarios de un régimen terapéutico, pero qu
La expresión "agente terapéutico" o "modalidad terapéu
a un sujeto, tiene un efecto terapéutico, diagnóstico y/o
deseado.
Como se usa en la presente, la expresión "cantidad tera
(por ejemplo,un agente terapéutico, composición y/o
cuando se administra como parte de un régimen terapéu
efectiva de una sustancia es una cantidad que es suf
susceptible a una enfermedad, trastorno y/o afección
apreciarán los expertos en esta técnica, la cantidad efect
tales como el criterio de valoración biológico deseado,
ejemplo, la cantidad efectiva de compuesto en una form
la cantidad que alivia, mejora, alivia, inhibe, previene, re te un 90 % idénticas (homologas) a una secuencia nativa o
omo se usa en la presente, el término "variante imitadora" una secuencia activada. Por ejemplo, el glutamato puede ina. Alternativamente, las variantes imitadoras pueden dar ue contenga el imitador, por ejemplo, la fenilalanina puede alanina puede actuar como una sustitución inactivadora de
oácidos se define como el porcentaje de residuos en la los residuos en una secuencia de aminoácidos de una e introducir interrupciones, si es necesario, para lograr el as informáticos para el alineamiento se conocen bien en la culo del por ciento de identidad pero puede diferir en valor lo.
dicas, se entiende la secuencia correspondiente de otras secuencia de una segunda especie.
uir variantes de polipéptidos que difieren en una o más diciones o eliminaciones de residuos de aminoácidos que do original o de partida.
re a un polipéptido(es decir,una cadena de al menos dos cos). Las proteínas pueden incluir restos distintos de teoglicanos, etc.) y/o pueden procesarse o modificarse de án que una "proteína" puede ser una cadena polipeptídica señal) o puede ser una porción característica de la misma. incluir más de una cadena polipeptídica, por ejemplo unida ios. Los polipéptidos pueden contener L-aminoácidos, D-a variedad de modificaciones o análogos de aminoácidos ,por ejemplo,acetilación terminal, amidación, metilación, der aminoácidos naturales, aminoácidos no naturales, ptido" se usa generalmente para referirse a un polipéptido aminoácidos, menos de aproximadamente 50 aminoácidos, algunos casos, las proteínas son anticuerpos, fragmentos ismos y/o porciones características de los mismos.
vía parenteral" como se usa en la presente significa modos tópica, usualmente por inyección, e incluye, sin limitación, al, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, e
sistémica", "administración periférica" y "administrado por ministración de un compuesto, fármaco u otro material que anera que entre en el sistema del paciente y, por lo tanto, ejemplo, la administración subcutánea.
tra en el alivio de los síntomas de una enfermedad y/o los o es curativo.
a" se refiere a cualquier agente que, cuando se administra ofiláctico y/o provoca un efecto biológico y/o farmacológico
ticamente efectiva" significa una cantidad de una sustancia mulación) que provoca una respuesta biológica deseada . En algunas modalidades, una cantidad terapéuticamente nte, cuando se administra a un sujeto que padece o es ara tratar la enfermedad, trastorno y/o afección. Como de una sustancia puede variar en dependencia de factores sustancia a suministrar, la célula o tejido diana,etc.Por ción para tratar una enfermedad, trastorno y/o afección es sa la aparición, reduce la gravedad y/o reduce la incidenciade uno o más síntomas o características de la enferme
cantidad terapéuticamente efectiva se administra en una
dosis unitarias para suministrar una cantidad terapéutica
Como se usa en la presente, el término “tratar”, “tratami
de manera parcial o completa aliviar, mejorar, mitigar, inhi
y/o reducir la incidencia de uno o más síntomas o car
tratamiento puede administrarse a un sujeto que no mu
algunas modalidades, el tratamiento puede administrars
que solo exhibe signos tempranos de la enfermedad, tras
desarrollar la patología asociada con la enfermedad, trast
La expresión "dosis unitaria" como se usa en la pres
formulación apropiada para un sujeto a tratar. Se entend
de la presentes inventores se decidirá por el médico qu
específico de dosis efectiva para cualquier sujeto u organi
que incluyen el trastorno a tratar y la gravedad del trast
composición específica empleada; edad, peso corpo
administración, y velocidad de excreción del compuesto
fármacos y/o terapias adicionales usadas en combinaci
empleado(s), y factores similares bien conocidos en la m
no una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente t
Como se usa en la presente, el término "paciente" o "sujet
ratón, rata, conejo, perro, gato, ganado, cerdo, oveja, cab
modalidades, un paciente es un ser humano. Un ser h
modalidades, un paciente es un ser humano que se prese
de una enfermedad, trastorno o afección. En algunas
características de una enfermedad, trastorno o afección
síntoma o característica de una enfermedad, trastorno o
con una o más características de susceptibilidad o riesgo
Como se usa en la presente, el término "muestra" o "m
células o partes componentes (por ejemplo, fluidos corpor
linfático, líquido sinovial, líquido cefalorraquídeo, saliva, l
vaginal y semen). Una muestra puede incluir además un
organismo completo o un subconjunto de sus tejidos, c
mismo, incluyendo, pero sin limitarse a, por ejemplo,
secciones externas de la piel, tracto respiratorio, intestinal
tumores, órganos. Una muestra se refiere además a un
componentes celulares, tales como proteínas o molécula
Como se usa en la presente, "estable" se refiere a un c
sobrevivir al aislamiento hasta un grado útil de pureza
formularse en un agente terapéutico eficaz. Alternativame
si es lo suficientemente robusto como para resistir c
degradación sustancial antes de un momento, evento o l
Como se usa en la presente, el término "estabilizar", "esta
estable.
Un individuo que "padece" una enfermedad, trastorno y
síntomas de la enfermedad, trastorno y/o afección.
Un individuo que es "susceptible" a una enfermedad, t
enfermedad, trastorno y/o afección. En algunas modali
trastorno y/o afección puede presentar síntomas de la e
un individuo que es susceptible a una enfermedad, tr
enfermedad, trastorno y/o afección. En algunas modali
trastorno y/o afección desarrollará la enfermedad, trastor
es susceptible a una enfermedad, trastorno y/o afección
El término "medio legible por computadora", como se usa
y/o memoria de datos de computadora no volátil (es deci
incluso cuando no está encendido. Ejemplos de medios l
duro, disquete, memoria flash (es decir, memoria d, trastorno y/o afección. En algunas modalidades, una sis única; en algunas modalidades, se requieren múltiples nte efectiva.
o” o “que trata” se refiere a cualquier método usado para , prevenir, retardar la aparición de, reducir la gravedad de erísticas de una enfermedad, trastorno y/o afección. El ra signos de una enfermedad, trastorno y/o afección. En un sujeto que no exhibe signos de una enfermedad y/o no y/o afección con el propósito de disminuir el riesgo de o y/o afección.
e se refiere a una unidad físicamente discreta de una , sin embargo, que el uso diario total de una formulación o atiende dentro del alcance del criterio médico. El nivel o particular puede depender de una variedad de factores, o; la actividad del agente activo específico empleado; la salud general, sexo y dieta del sujeto; tiempo de tivo específico empleado; la duración del tratamiento; los o en coincidencia con el(los) compuesto(s) específico(s) ria médica. Una dosis unitaria particular puede contener o péutico.
se refiere a un animal humano o no humano (por ejemplo, o o primate) al que se le administra la terapia. En muchas ano incluye las formas prenatal y posnatal. En algunas a un proveedor médico para el diagnóstico o tratamiento dalidades, un paciente muestra uno o más síntomas o n algunas modalidades, un paciente no muestra ningún ección. En algunas modalidades, un paciente es alguien una enfermedad, trastorno o afección.
tra biológica" se refiere a un subconjunto de sus tejidos, s, que incluyen, pero sin limitarse a, sangre, moco, líquido ido amniótico, sangre del cordón amniótico, orina, fluido mogeneizado, lisado o extracto preparado a partir de un las o partes componentes o una fracción o porción del ma, suero, líquido cefalorraquídeo, líquido linfático, las enitourinario, lágrimas, saliva, leche, células sanguíneas, io, tal como un caldo o gel nutritivo, que puede contener e ácido nucleico.
puesto o molécula que es suficientemente robusto para una mezcla de reacción, y preferentemente capaz de , puede decirse que un compuesto o molécula es estable lquier tratamiento, agresión o utilización sin sufrir una lización seleccionados.
zado", "región estabilizada" significa estabilizar o volverse
afección ha sido diagnosticado y/o muestra uno o más
torno y/o afección no ha sido diagnosticado con dicha es, un individuo que es susceptible a una enfermedad, rmedad, trastorno y/o afección. En algunas modalidades, orno y/o afección puede no presentar síntomas de la es, un individuo que es susceptible a una enfermedad, y/o afección. En algunas modalidades, un individuo que desarrollará la enfermedad, trastorno y/o afección.
la presente descripción, se refiere a un almacenamiento almacenamiento secundario) para retener datos digitales bles por computadora incluyen, pero sin limitarse a, disco estado sólido), RAM ferroeléctrica (F-RAM), RAMmagnetorresistiva (MRAM), disco óptico, discos RAM
holográfica.
El término "sistema informático" o "computadora", como
informático que puede usarse para implementar las técn
ilustrativo 2500 y un dispositivo informático móvil se mu
Como se usa en la presente, el término "estructura cri
computadora en el que se almacena una represen
coordenadas) para los átomos de la composición.
Como se usa en la presente, el término "acoplamiento"
el bolsillo, dominio, molécula o complejo molecular de
distancia o la energía. El acoplamiento puede realizarse
conjuntos de átomos de una entidad química que coinci
molécula o complejo molecular de unión o porción de la
Los centros de esfera se generan proporcionando u
(excluyendo los átomos de hidrógeno) en el bolsillo, do
mismo. Cálculos de energía de interacción en tiempo r
rígido (Gschwend y otros, J. Mol. Recognition 9:175-1
química para facilitar el acoplamiento. Por ejemplo, pue
seguir el camino de menor resistencia. Si el usuario en un
para aumentar la energía, el sistema resistirá ese movi
disminuir la energía, el sistema favorecerá ese movimie
Med. Chem. 33:889-894 (1990)). El acoplamiento tambi
Monte Carlo con una evaluación rápida de energía medi
y Olson, Proteins: Structure, Function and Genetics 8:1
funciones de acoplamiento incluyen, pero sin limitarse
MOLFIT (Redington, Comput. Chem. 16: 217 (1992)) y
Como se usa en la presente, el término "diseñado" se re
la mano del hombre; (ii) que se produzca mediante un
distinto de sustancias naturales y otros agentes conocid
Como se usa en la presente, la expresión "entorno de al
almacenamiento secundario, es decir, almacenamiento
almacenamiento comprende un medio legible por com
comprende un entorno de red para establecer un ento
decir, computación en la nube). Por ejemplo, la Figura
establecer un entorno de comunicación multicanal cons
Como se usa en la presente, el término "sustancialment
0 grado total o casi total de una característica o propieda
que los fenómenos biológicos y químicos casi nunca,
completamiento o alcanzan o evitan un resultado abso
presente descripción para capturar la posible ausencia d
y químicos.
Compuestos y composiciones de la invención
Sorprendentemente se ha descubierto, contrariamente
una familia de segundos mensajeros de dinucleótidos cí
1 en respuesta al ADN citoplasmático comprende
conocimientos ahora brindan la oportunidad de diseñar
y de usar aún más la molécula o moléculas originales dis
en investigación y desarrollo.
Análogos, imitadores, miméticos y modificaciones de cG
La familia de segundos mensajeros, denominada cGAM
definidas por tener al menos un nucleótido de guanina
cíclica. Los enlaces entre los dos nucleótidos implican l
Existen cuatro miembros originales principales de [c[G(2',5')pA(2',5')p]], [c[G(3',5')pA(2',5')p]], [c[G(3',5')pA
puede adoptar cualquiera de las orientaciones de torsió pendientes, unidades ZIP, cinta magnética y memoria
sa en la presente descripción, se refiere a un dispositivo descritas en esta descripción. Un dispositivo informático en la Figura S11.
a" de una composición significará un medio legible por de información posicional tridimensional (es decir,
fiere a orientar, rotar y trasladar una entidad química en o porción del mismo con base en la geometría de la iante métodos de geometría a distancia que encuentran con conjuntos de centros de esfera del bolsillo, dominio, a. Ver Meng y otros J. Comp. Chem. 4: 505-524 (1992). io adicional de longitud dada a partir de los átomos , molécula o complejo molecular de unión o porción del minimizaciones de energía o minimizaciones de cuerpo 996)) se puede realizar mientras se orienta la entidad iseñarse experimentos de acoplamiento interactivo para rimento de acoplamiento interactivo hace un movimiento . Sin embargo, si ese usuario hace un movimiento para n una mayor capacidad de respuesta. (Cohen y otros, J. ede realizarse combinando una técnica de búsqueda de l uso de potenciales de afinidad molecular. Ver Goodsell 2 (1990). Los programas de software que llevan a cabo TCHMOL (Cory y otros, J. Mol. Graphics 2: 39 (1984); (Meng y otros, más arriba).
a un agente (i) cuya estructura es o fue seleccionada por eso que requiera la mano del hombre; y/o (iii) que sea
namiento" comprende cualquier entorno que comprenda istente a largo plazo. En algunos casos, un entorno de ora. En algunos casos, un entorno de almacenamiento e comunicación multicanal consciente del contexto (es es un diagrama de bloques de un entorno de red para del contexto.
refiere a la condición cualitativa de mostrar una medida interés. Un experto en las técnicas biológicas entenderá lguna vez, llegan a completarse y/o avanzan hasta su Por lo tanto el término "sustancialmente" se usa en la pletamiento inherente en muchos fenómenos biológicos
descripciones en la técnica, que el miembro fundador de de metazoos que regulan la inducción de interferón tipo cterísticas únicas no conocidas hasta ahora. Estos os, imitadores y/o miméticos de la molécula identificada as en función de la estructura de las moléculas originales
AMP cíclico, incluye una o más de las estructuras cíclicas un nucleótido de adenina (A) y estar unidas de forma ación de enlaces entre el azúcar y la cadena principal. amilia cGAMP. Estos incluyen [c[G(2',5')pA(3',5')p]], p]]. Además, cada uno de los nucleótidos de los pares oantiglicosídicas.
Como se usa en la presente, el término "cGAMP" se refi
como también a cualquiera de las posibles orientacio
individuales de la familia por su forma de enlace entr
mensajero recientemente descubierto, [c[G(2',5')pA(3'
referencia a la posición en el anillo de azúcar que for
pueden denominarse igualmente. Colectivamente, los c
imitadores, miméticos o versiones modificadas de la fa
Con las enseñanzas proporcionadas en la presente des
o modificaciones de cualquiera de las moléculas ori
antagonista, de la enzima cGAS y, en última instancia, c
con señalización de interferón. Las versiones lineales
inhibidores competitivos de cGAS o eventos de señali
cGAS o la señalización del interferón.
Como se usa en la presente, se entiende que un "anál
alteraciones, por ejemplo, sustituciones, adiciones o eli
de la molécula original o inicial. Los análogos típicam
actividad (SAR) como las que se describen en la presen
Proteínas cGAS, variantes, derivados y mutantes
Teniendo ahora a mano varias estructuras cristalinas de
explotar estas estructuras de proteínas al diseñar variant
de la enzima cGAS, incluidas sus variantes, derivados y
cómo los compuestos de la presente invención modulan
herramientas de investigación, por ejemplo en kits o ens
fin, también pueden usarse fragmentos o porciones del
antígenos para la producción de anticuerpos o donde el
actividad, ya sea de unión, catálisis o transporte como
ADNbc. En conjunto, las variantes, derivados o muta
"moléculas de cGAS". Las moléculas de cGAS pueden
de cGAS o pueden comprender dominios mixtos o fr
estructuras según lo definido por las estructuras cristalin
Los polipéptidos que codifican cGAS que contienen
modificaciones covalentes con respecto a secuencias
descritas en la presente descripción, no se reivindican,
presente invención modulan cGAS. Por ejemplo, puede
una o más lisinas, a las secuencias peptídicas de la desc
Las etiquetas de secuencia pueden usarse para la purifi
aumentar la solubilidad del péptido o para permitir la
ubicados en las regiones carboxi y amino terminales de l
eliminarse opcionalmente al proporcionar secuencias
terminal o N-terminal) pueden eliminarse alternativament
la expresión de la secuencia como parte de una secuen
"Variantes de sustitución" cuando se hace referencia a
aminoácido en una secuencia nativa o inicial eliminado
posición. Las sustituciones pueden ser únicas, cuando
ser múltiples, cuando se han sustituido dos o más amin
Como se usa en la presente, la expresión "sustitución c
aminoácido que normalmente está presente en la secue
similar. Ejemplos de sustituciones conservadoras incluy
isoleucina, valina y leucina por otro residuo no polar. Igu
la sustitución de un residuo polar (hidrófilo) por otro, com
glicina y serina. Además, la sustitución de un residuo b
de un residuo ácido como ácido aspártico o ácido gl
sustituciones conservadoras. Ejemplos de sustitucione
aminoácido no polar (hidrófobo) tal como isoleucina, vali
tal como cisteína, glutamina, ácido glutámico o lisina y/o
"Variantes de inserción" cuando se hace referencia a pol
inmediatamente adyacentes a un aminoácido en u a cualquiera de las moléculas originales de la familia, así s de torsión. Puede hacerse referencia a los miembros el azúcar y la cadena principal; por ejemplo, el segundo )p]], puede denominarse isómero "2-prima-3'prima", en el enlace azúcar-cadena principal. Los demás isómeros puestos de la invención que son de tipo silvestre, análogos, cGAMP, se denominan el grupo de "compuestos cGMP".
ción, un experto puede ahora diseñar análogos, imitadores ales para su uso como modulador, ya sea agonista o o modulador de eventos fisiológicos posteriores asociados bién pueden diseñarse como agonistas, antagonistas o ión aguas abajo asociados con la actividad de la enzima
" incluye variantes de cGAMP que difieren en una o más aciones que aún mantienen una o más de las propiedades te se diseñan mediante el uso de relaciones estructuradescripción.
oteínas en estados de unión nativos y variables, es posible derivados o mutantes de la enzima cGAS. Los polipéptidos tantes, no se reivindican, pero son útiles para comprender AS. Estas variantes, derivados y mutantes son útiles como os o como fuente de una modalidad terapéutica. Para este lipéptido cGAS o las variantes, derivados y mutantes como gmento mantiene un elemento estructural asociado con la ulador de la propia enzima o como sustituto de la unión del s de cGAS de tipo silvestre se denominan el grupo de mprender cualquier porción o fragmento de una molécula entos de moléculas de cGAS que surgen de diferentes descritas en la presente descripción.
ustituciones, inserciones y/o adiciones, eliminaciones y referencia, en particular las secuencias de polipéptidos ro son útiles para comprender cómo los compuestos de la ñadirse etiquetas de secuencia o aminoácidos, tales como ción (por ejemplo, en los extremos N-terminal o C-terminal). ión o localización de péptidos. Pueden usarse lisinas para tinilación. Alternativamente, los residuos de aminoácidos ecuencia de aminoácidos de un péptido o proteína pueden ncadas. Ciertos aminoácidos (por ejemplo, residuos C-n dependencia del uso de la secuencia, como por ejemplo, más grande que es soluble o unida a un soporte sólido.
lipéptidos son aquellas que tienen al menos un residuo de n aminoácido diferente insertado en su lugar en la misma o se ha sustituido un aminoácido en la molécula o pueden idos en la misma molécula.
ervadora de aminoácidos" se refiere a la sustitución de un por un aminoácido diferente de tamaño, carga o polaridad la sustitución de un residuo no polar (hidrófobo) tal como ente, los ejemplos de sustituciones conservadoras incluyen ntre arginina y lisina, entre glutamina y asparagina, y entre co como lisina, arginina o histidina por otro o la sustitución ico por otro residuo ácido son ejemplos adicionales de o conservadoras incluyen la sustitución de un residuo de , leucina, alanina, metionina por un residuo polar (hidrófilo) residuo polar por un residuo no polar.
ptidos son aquellas con uno o más aminoácidos insertados posición particular en una secuencia nativa o inicial.
"Inmediatamente adyacente" a un aminoácido significa
aminoácido.
Las "variantes por eliminación" cuando se hace referenci
uno o más aminoácidos en la secuencia de aminoácidos
tendrán uno o más aminoácidos eliminados en una regió
"Derivados covalentes" cuando se refiere a polipéptidos
con un agente derivatizante orgánico proteico o no proteic
covalentes se introducen tradicionalmente al hacer reacci
un agente derivatizante orgánico que es capaz de
seleccionados o aprovechando mecanismos de modifica
recombinantes seleccionadas. Los derivados covalentes
residuos importantes para la actividad biológica, par
antiproteínas para la purificación por inmunoafinidad de
dentro de los conocimientos habituales en la técnica y se
Ciertas modificaciones postraduccionales son el resultad
polipéptido expresado. Los residuos de glutaminilo y aspa
a los correspondientes residuos de glutamilo y aspa
condiciones ligeramente ácidas. Cualquier forma de
producidos de acuerdo con la presente descripción.
Otras modificaciones postraduccionales incluyen la hidro
de residuos serilo o treonilo, la metilación de los grupos
(T. E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Pro
(1983)).
Las "características" cuando se hace referencia a poli
molécula basados en secuencias de aminoácidos. Las
presente descripción incluyen manifestaciones superfi
semilazos, dominios, semidominios, sitios, extremos o cu
Como se usa en la presente cuando se hace referencia a
a un componente basado en polipéptido de una proteína
Como se usa en la presente cuando se hace referenci
significa una manifestación estructural basada en polipép
definible de la proteína.
Como se usa en la presente cuando se hace referenc
conformación resultante de una secuencia de aminoáci
plegamiento en el nivel secundario o terciario del proceso
incluyen láminas beta y hélices alfa. Ejemplos de pleg
debido a la agregación o separación de fuerzas energéti
hidrófobas e hidrófilas.
Como se usa en la presente, el término "giro" en lo que se
que altera la dirección de la cadena principal de un péptid
de aminoácidos.
Como se usa en la presente cuando se hace referencia a
estructural de un polipéptido que puede servir para in
polipéptido. Cuando el lazo se encuentra en un polipépt
comprender cuatro o más residuos de aminoácidos. Oli
proteínas (J. Mol Biol 266 (4): 814-830; 1997). Los lazos
"cíclicos" pueden comprender 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o
puente pueden comprender un puente de cisteína-cisteí
disulfuro o, alternativamente, los restos puente pueden
dibromozililo usados en la presente descripción.
Como se usa en la presente cuando se hace referencia a
de un lazo identificado que tiene al menos la mitad del
deriva. Se entiende que es posible que los lazos no siem
Por lo tanto, en aquellos casos en los que un lazo co
aminoácidos, un medio lazo del lazo impar comprenderá l nectado al grupo funcional alfa-carboxi o alfa-amino del
polipéptidos son aquellas a las que se les ha eliminado tiva o inicial. Normalmente, las variantes por eliminación articular de la molécula.
luyen modificaciones de una proteína nativa o de partida y/o modificaciones postraduccionales. Las modificaciones ar residuos de aminoácidos específicos de la proteína con ccionar con cadenas laterales o residuos terminales nes postraduccionales que funcionan en células huésped sultantes son útiles en programas dirigidos a identificar nmunoensayos o para la preparación de anticuerpos glicoproteína recombinante. Tales modificaciones están alizan sin experimentación indebida.
de la acción de células huésped recombinantes sobre el inilo frecuentemente se desamidan postraduccionalmente . Alternativamente, estos residuos se desamidan en os residuos puede estar presente en los polipéptidos
ción de prolina y lisina, la fosforilación de grupos hidroxilo -amino de lisina, arginina y cadenas laterales de histidina ties, W.H. Freeman & Co., San Francisco, págs. 79-86
ptidos se definen como componentes distintos de una acterísticas de los polipéptidos cGAS codificados por la les, forma conformacional local, plegamientos, lazos, uiera de sus combinaciones.
lipéptidos, el término "manifestación superficial" se refiere e aparece en una superficie más externa.
polipéptidos, la expresión "forma conformacional local" os de una proteína que está situada dentro de un espacio
a polipéptidos, el término "plegamiento" se refiere a la tras la minimización de energía. Puede producirse un plegado. Ejemplos de plegamientos de nivel secundario ientos terciarios incluyen dominios y regiones formadas . Las regiones formadas de esta manera incluyen bolsas
iere a la conformación de proteínas significa una curvatura polipéptido y puede implicar uno, dos, tres o más residuos
lipéptidos, el término "lazo" se refiere a una característica tir la dirección de la cadena principal de un péptido o y solo altera la dirección de la cadena principal, puede y otros han identificado al menos 5 clases de lazos de den estar abiertos o cerrados. Los lazos cerrados o lazos aminoácidos entre los restos de puente. Tales restos de (Cys-Cys) típico de los polipéptidos que tienen puentes estar basados en proteínas, tales como los agentes de
lipéptidos, el término "medio lazo" se refiere a una porción mero de aminoácidos que residen en el lazo del que se contengan un número par de residuos de aminoácidos. ne o se identifica que comprende un número impar de orción de número entero o la siguiente porción de númeroentero del lazo (número de aminoácidos del lazo/2+/-0,5
de 7 aminoácidos podría producir medios lazos de 3 am
Como se usa en la presente cuando se hace referencia
un polipéptido que tiene una o más características o
ejemplo, capacidad de unión, que sirve como un sitio pa
Como se usa en la presente cuando se hace referenci
porción de un dominio identificado que tiene al menos la
del que se deriva. Se entiende que es posible que los d
aminoácidos. Por lo tanto, en aquellos casos en los que
impar de aminoácidos, un medio dominio del dominio c
la siguiente porción de número entero del dominio (nú
ejemplo, un dominio identificado como un dominio
aminoácidos o 4 aminoácidos (7/2=3,5+/-0,5 siendo
identificarse dentro de dominios o semidominios, pose
estructurales o funcionales identificadas en los dominios
que los aminoácidos que comprenden cualquiera de los
contiguos a lo largo de la cadena principal del polipéptid
estructuralmente para producir un dominio, medio domi
Como se usa en la presente cuando se hace referen
modalidades basadas en aminoácidos se usan como
aminoácido". Un sitio representa una posición dentro de
alterarse, derivatizarse o variarse dentro de las molécul
Como se usan en la presente, los términos "terminal" o "
extremo de un péptido o polipéptido. Tal extremo no se l
que puede incluir aminoácidos adicionales en las regio
presente descripción pueden caracterizarse por tener ta
amino libre (NH2)) como un extremo C (terminado po
proteínas de la descripción están formadas en algunos c
disulfuro o por fuerzas no covalentes (multímeros, oligó
C. Alternativamente, los extremos de los polipéptidos pu
sea el caso, con un resto no basado en polipéptido tal c
Una vez que cualquiera de las características se ha i
polipéptido de la descripción, cualquiera de varias manip
realizarse mediante movimiento, intercambio, inversi
entiende que la manipulación de características puede
de las moléculas de la descripción. Por ejemplo, una m
como resultado la alteración de la longitud de una mol
para codificar menos que una molécula de longitud com
Las modificaciones y manipulaciones pueden lograrse m
limitarse a, mutagénesis dirigida al sitio. Las molécul
determinar su actividad mediante el uso de ensayos
descripción o cualquier otro ensayo de detección adecu
De acuerdo con la presente descripción, los polipépt
descubre mediante rondas de experimentación. Como
secuencia única que representa una población colectiv
sitios.
Como reconocen los expertos en la técnica, los fragme
proteínas homólogas también se consideran polipéptido
descripción se proporciona cualquier fragmento de prot
residuo de aminoácido más corto que una secuencia p
proteína de referencia 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90,
cualquier proteína que incluya una extensión de aproxi
aproximadamente 50 o aproximadamente 100 aminoáci
aproximadamente 60 %, aproximadamente 70 %, aproxi
95 % o aproximadamente 100 % idénticas a cualquiera
utilizarse de acuerdo con la descripción. En ciertos casos
2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más mutaciones como se mu
que se hace referencia en la presente descripción.
oácidos). Por ejemplo, un lazo identificado como un lazo idos o 4 aminoácidos (7/2=3,5+/-0,5 siendo 3 o 4).
lipéptidos, el término "dominio" se refiere a un motivo de iedades estructurales o funcionales identificables (por teracciones proteína-proteína).
olipéptidos, la expresión "medio dominio" significa una d del número de aminoácidos que residen en el dominio os no siempre contengan un número par de residuos de minio contiene o se identifica que comprende un número mero impar comprenderá la porción de número entero o de aminoácidos del dominio/2+/-0,5 aminoácidos). Por aminoácidos podría producir medios dominios de 3 ). También se entiende que los subdominios pueden estos subdominios menos que todas las propiedades idominios de los que se derivaron. También se entiende de dominio de la presente descripción no necesitan ser decir, los aminoácidos no adyacentes pueden plegarse subdominio).
polipéptidos, los términos "sitio" en lo que respecta a imos de "residuo de aminoácido" y "cadena lateral de ptido o polipéptido que puede modificarse, manipularse, sadas en polipéptidos de la presente descripción.
nales" cuando se refieren a polipéptidos se refieren a un sólo al primer o último sitio del péptido o polipéptido sino rminales. Las moléculas basadas en polipéptidos de la n extremo N (terminado por un aminoácido con un grupo aminoácido con un grupo carboxilo libre (COOH)). Las por múltiples cadenas polipeptídicas unidas por enlaces ). Este tipo de proteínas tendrán múltiples extremos N y modificarse de manera que comiencen o terminen, según un conjugado orgánico.
icado o definido como un componente deseado de un ones y/o modificaciones de estas características pueden liminación, aleatorización o duplicación. Además, se omo resultado el mismo resultado que una modificación lación que implicara la eliminación de un dominio daría tal como lo haría la modificación de un ácido nucleico
te métodos conocidos en la técnica tales como, pero sin odificadas resultantes pueden entonces probarse paratrooen vivotales como los descritos en la presente onocido en la técnica.
pueden comprender una secuencia consenso que se usa en la presente, una secuencia "consenso" es una secuencias que permiten la variabilidad en uno o más
e proteínas, los dominios de proteínas funcionales y las interés de esta descripción. Por ejemplo, en la presente (es decir, una secuencia polipeptídica con al menos un tídica de referencia pero por lo demás idéntica) de una o más de 100 aminoácidos de longitud. En otro ejemplo, mente 20, aproximadamente 30, aproximadamente 40, ue son aproximadamente 40 %, aproximadamente 50 %, mente 80 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente secuencias descritas en la presente descripción puede olipéptido a utilizar de acuerdo con la descripción incluye en cualquiera de las secuencias proporcionadas o a lasAnticuerpos
En algunas modalidades, los compuestos cGAMP de la p
Como se usa en la presente, el término "anticuerpo" i
longitud completa que tienen una región Fc de inmuno
poliepitópica, anticuerpos multiespecíficos (por ejemplo, a
sencilla), así como también fragmentos de anticuerpos
descripción de manera intercambiable con "anticuerpo"
monoclonal" se refiere a un anticuerpo obtenido de una
decir, los anticuerpos individuales que comprenden la p
origen natural y/o modificaciones postraduccionales (por
presentes en cantidades menores. Los anticuerpos mono
un único sitio antigénico.
Los anticuerpos monoclonales en la presente descri (inmunoglobulinas) en los que una porción de la cadena
correspondientes en anticuerpos derivados de una espe
anticuerpo particular, mientras que el resto de la(s) cad
correspondientes en anticuerpos derivados de otra espe
como también fragmentos de tales anticuerpos, siempre q
quiméricos de interés en la presente descripción inclu
comprenden secuencias de unión al antígeno del domini
mono del viejo mundo, simio, etcétera) y secuencias de l
Un "fragmento de anticuerpo" comprende una porción de
de unión a antígeno del anticuerpo intacto. Los ejemplo
fragmentos Fv; diacuerpos; anticuerpos lineales; nanocue
multiespecíficos formados a partir de fragmentos de antic
Los compuestos o moléculas de la invención pueden gen
IgD, IgE, IgG e IgM, incluidas las cadenas pesadas deno
Si bien no se desea limitarse a ninguna teoría, se cre
compuestos de cGAMP de la presente invención darán c
Los anticuerpos pueden utilizarse para tratar afecciones
pero sin limitarse a, sangre, cardiovascular, SNC,
endocrinología, gastrointestinal, imágenes médicas,
respiratorio, sensorial y antiinfeccioso.
En una modalidad, las variantes de anticuerpos también
sustitución conservadora de aminoácidos, variantes por i
Vacunas
Como se usa en la presente, una "vacuna" es una prepa
o agente infeccioso particular. De acuerdo con la present
se cree que la utilización de los compuestos de cGAMP d
de vacuna.
Las vacunas de la invención pueden utilizarse para trata
tales como, pero sin limitarse a, cardiovascular, SNC
autoinmunidad, inflamación, respiratoria y antiinfecciosa.
Compuestos de la presente invención
En algunas modalidades, la presente invención proporcio
tiene una estructura como se define en las reivindicacione
a la siguiente estructura A -----L ------B que no se reivindic
A -----L ------B
en donde:
A es o comprende un resto que encaja en el sitio de ente invención pueden usarse para generar anticuerpos. ye anticuerpos monoclonales (incluidos anticuerpos de ulina), composiciones de anticuerpos con especificidad cuerpos biespecíficos, diacuerpos y moléculas de cadena l término "inmunoglobulina" (Ig) se usa en la presente Como se usa en la presente, la expresión "anticuerpo blación de anticuerpos sustancialmente homogéneos, es ación son idénticos excepto por posibles mutaciones de emplo, isomerizaciones, amidaciones) que pueden estar nales son altamente específicos, ya que se dirigen contra
ón incluyen específicamente anticuerpos "quiméricos" sada y/o ligera es idéntica u homóloga a las secuencias particular o que pertenecen a una clase o subclase de a(s) es(son) idéntica(s) u homóloga(s) a las secuencias o pertenecen a otra clase o subclase de anticuerpo, así muestren la actividad biológica deseada. Los anticuerpos n, pero sin limitarse a, anticuerpos “primatizados” que ariable derivadas de un primate no humano (por ejemplo, región constante humana.
anticuerpo intacto, preferentemente la región variable o e fragmentos de anticuerpo incluyen Fab, Fab', F(ab')<2>y s; moléculas de anticuerpo de cadena única y anticuerpos rpos.
r cualquiera de las cinco clases de inmunoglobulinas, IgA, adas alfa, delta, épsilon, gamma y mu, respectivamente.
que los anticuerpos generados mediante el uso de los o resultado una eficacia terapéutica mejorada.
nfermedades en muchas áreas terapéuticas tales como, nvenenamiento (incluidos antivenenos), dermatología, sculoesquelético, oncología, inmunología, inflamación,
den incluir, pero sin limitarse a, variantes por sustitución, rción, variantes por eliminación y/o derivados covalentes.
ión biológica que mejora la inmunidad a una enfermedad vención y aunque no se desea limitarse a ninguna teoría, invención puede usarse como vacuna o como adyuvante
fecciones o enfermedades en muchas áreas terapéuticas ermatología, endocrinología, oncología, inmunología y
un modulador de un polipéptido que se une a cGAMP que stos compuestos pueden entenderse haciendo referencia comprende las siguientes características:
n de adenosina cGAS;
B es o comprende un resto que encaja en el sitio de
opcionalmente, L es un resto enlazador que enlaz
interacciones apropiadas para unirse a cGAS.
En algunas modalidades, el polipéptido que se une a cG
se une a cGAMP es STING.
En algunas modalidades, A es el Anillo A como se define
descripción, tanto individualmente como en combinación
más interacciones con cGAS en uno o más sitios selecci
Glu211, Asp213, Asp307, Tyr421, Arg364 y sus combin
una o más interacciones con cGAS en uno o más sitios
Asp307, Arg364 y sus combinaciones.
En algunas modalidades, B es el Anillo B como se define
descripción, tanto individualmente como en combinación
más interacciones con cGAS en uno o más sitios selecci
Ser368, Arg364 y sus combinaciones.
En algunos casos, un resto enlazador es un conector ad
B adoptar interacciones apropiadas para unirse a cGAS.
un nucleósido que contiene opcionalmente uno o más gr
B comprende un dinucleósido cíclico que contiene opcion
un modulador es un análogo de GMP-AMP cíclico que ca
En algunos casos, un resto enlazador comprende uno o
ribosa y fosfato, junto con el Anillo A o B, forman un ribo
dentro del alcance de la Fórmula (II) comprende uno
modificados son bien conocidos en la técnica e incluyen
de bases de nucleótidos y sus combinaciones. La presen
modificados para moduladores y compuestos descritos
modificaciones mejoran la estabilidad del compuestoin
la resiliencia del compuesto a las fosfodiesterasas.
En algunos casos, un enlazador comprende un grupo fosf
la técnica e incluyen, sin modificación, la sustitución d
fosforoditioatos, fosfotriéster, aminoalquilfosfotriéster,
fosfonatos, 5'-alquileno fosfonatos y fosfonatos quirales, f
y aminoalquilfosforamidatos, tionofosforamidatos, tio
boranofoafatos y sus combinaciones. En algunas moda
fosforamidatos adecuados incluyen, sin li www.glenresearch.com/Reference/StructureListing.php.
En algunos casos, un enlazador no incluye fósforo.
internucleósidos de alquilo o cicloalquilo de cadena c
cicloalquilo mixtos o uno o más enlaces internucleósid
incluyen aquellos que tienen enlaces morfolino (formados
restos de siloxano; restos de sulfuro, sulfóxido y sulfona;
restos de metileno formacetilo y tioformacetilo; restos
sulfamato; restos de metileneimino y metilenhidrazino; re
tengan partes de componentes N, O, S y CH<2>mezclados.
Además, puede modificarse un enlazador fosfodiéster p
ciertos casos el enlace P=O se cambia a un enlace P=S
vivo. En ciertos casos, el grupo hidroxilo C-2 del resto d
heteroalquilo. Esta modificación hace que el oligonucleóti
Las modificaciones de fosfodiéster adicionales se descr
Octubre de 2004; Capítulo 4: Unidad 4; Marshall y otros
Un resto enlazador también puede comprender uno o
enlazador comprende una ribosa modificada en uno de l
O-, S- o N-alquenilo; O-, S- o N-alquinilo; o O-alquil-O-a
alquilo C<1>a C<10>o alquenilo y alquinilo C<2>a C<10>sustituido
2' o 3' incluyen: 2'-O-Me, 2 '-O-m Oe , 2'-O-alilo, 2'-O-dinitro
algunos casos, las modificaciones de 2' o 3' incluyen: n de guanosina cGAS; y
A y B de una manera que permite a A y B adoptar
P es cGAS. En algunas modalidades, el polipéptido que
s abajo y se describe en clases y subclases en la presente n algunas modalidades, A opcionalmente realiza una o ados del grupo que consiste en Ser199, Ser420, Lys402, ones. En algunas modalidades, A opcionalmente realiza leccionados del grupo que consiste en Tyr421, Asp213,
s abajo y se describe en clases y subclases en la presente n algunas modalidades, B opcionalmente realiza una o ados del grupo que consiste en Tyr421, Thr197, Ser366,
ado para unir covalentemente A y B y que permite a A y algunos casos, un enlazador junto con A y/o B comprende os fosfato. En algunos casos, un enlazador junto con A y ente uno o más grupos fosfato. En algunas modalidades, entro del alcance de la Fórmula (II).
s grupos ribosa o fosfato. En algunos casos, tales grupos leótido. En algunas modalidades, un modulador que cae más ribonucleótidos modificados. Los ribonucleótidos ificaciones en un grupo fosfato, un grupo ribosa, un grupo descripción contempla todos los posibles ribonucleótidos la presente descripción. En algunas modalidades, estas.En algunas modalidades, las modificaciones aumentan
iéster modificado. Tales modificaciones con conocidas en osfodiésteres con fosforotioatos, fosforotioatos quirales, til y otros alquil fosfonatos que incluyen 3'-alquileno natos, fosforamidatos que incluyen 3-aminofosforamidato lquilfosfonatos, tionoalquilfosfotriéster, selenofosfatos, ades, un fosfodiéster se modifica a fosforamidatos. Los ción, aquellos enumerados disponibles en
n algunos casos, un enlazador comprende enlaces , enlaces internucleósidos de heteroátomo y alquilo o heteroatómicos o heterocíclicos de cadena corta. Estos parte a partir de la porción de azúcar de un nucleósido); stos de amidas, carboxilatos, formacetilo y tioformacetilo; riboacetilo; restos que contienen alquenos; restos de de sulfonato y sulfonamida; restos de amida; y otros que
mejorar la estabilidad del compuesto. Por ejemplo, en no es tan susceptible a la degradación por nucleasas in zúcar de un nucleótido se convierte en un éter alquilo o sea menos propenso a la degradación nucleolítica.
n en Dellinger y otros Curr Protoc Nucleic Acid Chem. nce. 12 de marzo de 1993;259(5101):1564-70.
s restos de ribosa modificados. En algunos casos, un iguientes en la posición 2' o 3': OH; F; O-, S- o N-alquilo; ilo, en donde el alquilo, alquenilo y alquinilo pueden ser no sustituidos. En algunos casos, las modificaciones de fato, 2'-fluoro, 2'-tio, 2-aminoetilo, 2'-guanidinopropilo. En H2)nO]mCH3, O(CH2)nOCH3, O(CH<2>)nNH<2>, O(CH2)nCH3,O(CH<2>)nONH<2>, y O(CH2)nON[(CH2)CH3]2, donde n y
enlazador comprende una ribosa modificada en la posici
alquenilo, alquinilo, alcarilo, aralquilo, O-alcarilo u O-SO<2>CH<3>, ONO<2>, NO<2>, N<3>, NH<2>, heterocicloalquilo,
sustituido, un grupo de escisión de ARN, un grupo infor
farmacocinéticas de un oligonucleótido o un grupo
oligonucleótido y otros sustituyentes que tienen propied
O-metoxietil (<2>-O-CH<2>CH<2>OCH<3>, también conocido com
Helv. Chim. Acta, 1995, 78, 486-504), es decir, un grup dimetilaminooxietoxi, es decir, un grupo O(CH2)2ON(C
etoxietoxi (también conocido en la técnica como 2'-O-CH2-N(CH3)2. Otras modificaciones a un enlazador d OCH<2>CH<2>CH<2>NH<2>), 2'-alilo (2'-CH2-CH=CH2). 2'-O-alilo
estar en la posición arabino (arriba) o ribo (abajo). En al
También pueden hacerse modificaciones similares e
posición 3' del azúcar en el nucleótido 3' terminal y la po
de azúcar como porciones de ciclobutilo en lugar del az
En algunos casos, un enlazador de ribosa se modifica
hidroxilo está enlazado al átomo de carbono 3' o 4' del
bicíclico. El enlace es preferentemente un grupo n metil
átomo de carbono 4' en donde n es 1 o 2. Los LNA y s
internacionales núms. WO 98/39352 y WO 99/14226,
referencia. En algunos casos, el LNA forma un resto: n de 1 a aproximadamente 10. En algunos casos, un o 3' con: alquilo inferior C<1>a C<10>, alquilo inferior sustituido, ilo, SH, SCH<3>, OCN, Cl, Br, CN, CF<3>, OCF<3>, SOCH<3>, rocicloalcarilo, aminoalquilamino, polialquilamino, sililo r, un intercalador, un grupo para mejorar las propiedades a mejorar las propiedades farmacodinámicas de un similares. En algunos casos, una modificación incluye 2'--(2-metoxietil) o 2'-metoxietoxi o 2'-MOE) (Martin y otros, xialcoxi. Una modificación preferida adicional incluye 2'-también conocido como 2'-DMAOE, y 2'-dimetilaminoilamino-etoxi-etilo o 2'-DMAEOE), es decir,<2>-O-CH<2>-O-osa incluyen 2'-metoxi (<2>-O-CH<3>), 2'-aminopropoxi (2'-CH2-CH=CH2) y 2'-fluoro (2'-F). La modificación 2' puede s casos, una modificación 2'-arabino es 2'-F.
s posiciones en el oligonucleótido, particularmente la 5'. Los oligonucleótidos también pueden tener miméticos de pentofuranosilo.
idos nucleicos bloqueados (LNA) en los que el grupo 2'-de azúcar, formando de esta manera un resto de azúcar -CH<2>-) que forma puente con el átomo de oxígeno 2' y el paración se describen en las publicaciones de patentes contenido completo se incorpora en la presente como
En ciertos casos, un enlazador comprende un resto de
En ciertos casos, el resto de azúcar ribosa se reemplaza
En algunos casos, la fracción de azúcar ribosa se reem
ribosa se analiza en Engels, New Biotechnology, Vol. 30
como referencia.
En algunas modalidades, A o B es una nucleobase natu
(G), y las bases pirimidínicas, citosina (C) y uracilo (U).
Las nucleobases modificadas son bien conocidas en l
naturales tales como 5-metilcitosina (5-me-C), 5- hidrox
y otros derivados alquilo de adenina y guanina, 2-propil
2-tiotimina y 2-tiocitosina, 5-halouracilo y citosina, 5-prop
de bases pirimidínicas, 6-azo uracilo, citosina y timina,
8-tioalquilo, 8-hidroxilo y otras adeninas y guaninas s
trifluorometilo y otros uracilos y citosinas sustituidas en l
amino-adenina, 8-azaguanina y 8-azaadenina, 7-d
deazaadenina. Otras nucleobases modificadas incluy
pirimido[5,4-b][1,4]benzoxazin-2(3H)-ona), fenotiazin
abrazaderas G tales como una fenoxazina citidin
b][1,4]benzoxazin-2(3H)-ona), carbazol citidina pirido[3',2':4,5]pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ona). Las nucleo
la base purina o pirimidina se reemplaza con otros het
2-aminopiridina y 2-piridona. Las nucleobases adicional
núm. 3,687,808, aquellas descritas en The Concise Enc
859, Kroschwitz, J. I., ed. John Wiley & Sons, 1990, a
Edición Internacional, 1991, 30, 613, y aquellos descrit
Applications, páginas 289-302, Crooke, S. T. y Leble
nucleobase no natural es difluorotolilo, nitropirrolilo o
natural es 7-desazaadenina, 3-desazaadenina, N1-me
piridinona, 5-propinil-uridina, imidazol-4- carboxamida, 5 sa. En algunos casos, la hexosa es glucosa o manosa. un grupo ciclohexenilo o un anillo heteroalquilo policíclico. con un grupo morfolino. La modificación adicional de la . 302 (2013), cuyo contenido se incorpora en la presente
no modificada seleccionada entre adenina (A) y guanina unas modalidades, A o B es una nucleobase modificada. nica e incluyen, sin limitación, nucleobases sintéticas y l citosina, xantina, hipoxantina, 2-amincadenina, 6-metilo tros derivados alquilo de adenina y guanina, 2-tiouracilo, C=C-CH3) uracilo y citosina y otros derivados de alquinilo cilo (pseudouracilo), 4-tiouracilo, 8-halo, 8- amino, 8-tiol, idas en posición 8, 5-halo particularmente 5-bromo, 5-ición 5, 7-metilguanina y 7-metiladenina, 2-F-adenida, 2-guanina y 7-deazaadenina y 3-deazaguanina y 3-irimidinas tricíclicas tales como fenoxazina citidina(1H-citidina (1H-pirimido[5,4-b][1,4]benzotiazin-2(3H)-ona), stituida (por ejemplo, 9-(2-aminoetoxi)-H-pirimido[5,4-irimido[4,5-b]indol-2-ona), piridoindol citidina (H-modificadas también pueden incluir aquellas en las que los, por ejemplo 7-desazaadenina, 7-desazaguanosina, luyen aquellas descritas en la patente de Estados Unidos edia Of Polymer Science And Engineering, páginas 858 os descritos por Englisch y otros, Angewandte Chemie, or Sanghvi, Y. S., Capítulo 15, Antisense Research and ed., CRC Press, 1993. En algunas modalidades, una midazolilo. En ciertas modalidades, una nucleobase no anosina, 6-tioguanosina, 2-pirimidinona, 4-tiouridina, 2-indol, 3-nitropirrol, 2-aminopurina, 5-metil-2-pirimidinona,N3-tioetiltimidina, 6-tiopurina, 5-yodouridina, 8-azidoa
bromouracilo, diaminopurina, 2-tiouracilo, 4-tiouracilo, ps
modificadas adicionales incluyen aquellas encontradas www.thermoscientificbio.com/rnapricing-and-modificatio
y otros Annu. Rev. Biochem. 1998. 67:99-134.
En algunos casos, un resto enlazador comprende un gru
ribosa de un ribonucleótido. Uno de dichos enlazado
compuestos de PNA, la cadena principal del azúcar c
principal que contiene amida, por ejemplo una cadena p
unen directamente o indirectamente a los átomos de nitr
patentes de Estados Unidos representativas que enseñ
limitarse a, patente de Estados Unidos núms. 5,5
enseñanzas sobre compuestos de PNA en Nielsen y ot
Soc. Rev., 1997,26, 73-78; Shakeel y otros, Journal of
6, Junio de 2006, págs. 892-899(8); Nielsen, CHEMIST
Estos y otros enlazadores adecuados se anal
365,058, 8,101,348, 8,088,902, 7,579,451,7,582,744, 8,
En algunas modalidades, la presente invención proporci sina, 5-mercaptouridina o aquellos derivados del 5-uracilo, difluorotolueno y dihidrouracilo. Las nucleobases ww.glenresearch.com/Reference/StructureListing.php y as modificaciones adicionales son analizadas en Verma
ue reemplaza tanto un grupo fosfodiéster como un grupo se denomina ácido nucleico peptídico (PNA). En los de un oligonucleótido se reemplaza con una cadena al de aminoetilglicina. Las nucleobases se retienen y se o aza de la porción de amida de la cadena principal. Las preparación de compuestos de PNA incluyen, pero sin 2; 5,714,331; y 5,719,262. Pueden encontrarse más Science, 1991, 254, 1497-1500; Nielsen y otros, Chem. ical Technology & Biotechnology, Volumen 81, Número BIODIVERSITY - Vol. 7 (2010), p. 786.
en la patente de Estados Unidos núms. 7, 73, 8,017,762, 7,919,612, 7,812,149, y 7,723,508.
un compuesto de la Fórmula II:
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
y un portador farmacéuticamente aceptable,
en donde:
El Anillo A se selecciona del grupo que consiste
El Anillo B se selecciona del grupo que consiste
cada X1 y X2 es independientemente -CR- o -N-;X3 es -C(R)<2>-, -O- o -NR-;
Xa y Xb son independientemente -C(R)<2>-, -C(R)=C(R)-Xa1 y Xb1 son independientemente -C(R)- o -N-;
Xc y Xd, cuando están presentes, son independ
opcionalmente sustituido, un átomo de nitrógeno sust
cada Xe y Xf es independientemente -O-, -S- o -N(R)-;
cada W es P;
cada R1 y R2 se seleccionan independientemente del
N(R)<2>, y alifático C<1-12>o alcoxi C1-4-alquilo C<1-4>opcion
cada R3, R4, R5, R6, R7, R10, y R11 se selecciona in
halógeno, -NO<2>, -CN, -OR, -SR, -N(R)<2>, -C(O)R, -C
C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC(O)R, -N(R)C(O)R, -N(R
<n>(<r>)<c>(<o>)<n>(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, - N(R)S<o 2>R, -OC(O)
de alifático C<1-12>, fenilo, un anillo carbocíclico monocícl
un anillo carbocíclico bicíclico saturado o parcialmen
saturado o parcialmente insaturado de 3-7 mi independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre,
insaturado de 7-10 miembros que tiene de 1-3 hetero
oxígeno o azufre, y un anillo heteroarilo de 5-6 mi independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre;
Ra es un grupo protector de oxígeno o R, en donde
metoxilmetilo (MOM), metiltiometilo (MTM), t
benciloximetilo (BOM), p-metoxibenciloximetilo (P
(GUM), t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo (POM
tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimetil bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-met metoxitetrahidrotiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranil
4-ilo (CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetra
4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-cloroet
metil-1-benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trim
p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencilo, p-metoxiben
halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, p-fen
difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosub metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)feni bromofenaciloxifenil)difenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-diclo
4,4',4"-tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1-il)
pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-(9-feni
S,S-dióxido, trimetilsililo (TMS), trietilsililo (T<e s>),
dietilisopropilsililo (DEIPS), dimetiltexilsililo, t-butildime
trip-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo (DPMS), tacetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetat
fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, (levulinoilditioacetal), pivaloato, adamantoato, croton
trimetilbenzoato (mesitoato), carbonato de aquil meti
alquil etilo, carbonato de alquil 2,2,2-tricloroetilo (Troc)
2-(fenilsulfonil) etilo (Psec), carbonato de 2-(trifenilfosf
de alquil vinilo, carbonato de alquil alilo, carbonato de
de alquil p-metoxibencilo, carbonato de alquil 3,4-dim
de alquil p-nitrobencilo, tiocarbonato de alquil S-bencil
2-yodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-formilbencenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-(me
dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1 dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, iso (metoxicarbonil)benzoato, a-naftoato, nitrato, W,W,W,
de alquilo, borato, dimetilfosfinotioilo, 2,4-dinitrofenils
bencilsulfonato o tosilato (Ts);
R es hidrógeno; y
en donde los sustituyentes monovalentes en un á
sustituido" son independientemente halógeno;
4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4SR°; -(C
4O(CH2)0-1Ph que puede estar sustituido con R°;
4o(cH2)ü-1-piridilo que puede estar sustituido
4N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C( N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(
4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR° , -S-, -S(O)-, -S(O)<2>- o -N(R)-;
mente oxígeno opcionalmente sustituido, azufre , BH<3>o alifático C<1-12>opcionalmente sustituido;
o que consiste en hidrógeno, halógeno, -ORa, -SR, -nte sustituido;
ndientemente del grupo que consiste en hidrógeno, -C(O)C(O)R, -C(O)CH<2>C(O)R, -S(O)R, - S(O)<2>R, -)2, - N(R)C(=NR)N(R)2, -C(=NR)N(R)2, -C=NOR, -)<2>o un grupo opcionalmente sustituido seleccionado aturado o parcialmente insaturado de 3-7 miembros, saturado de 7-10 miembros, un anillo heterocíclico os que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados nillo heterocíclico bicíclico saturado o parcialmente os seleccionados independientemente de nitrógeno, ros que tiene de 1-3 heteroátomos seleccionados
rupo protector de oxígeno se selecciona de metilo, ltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo (SMOM), , (4-metoxifenoxi)metilo (p-AOM), guaiacolmetilo siloximetilo, 2-metoxietoximetilo (MEM), 2,2,2-toximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo (THP), 3-iclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo (MTHP), 4-S-dióxido, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidintiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetiltilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1 -metil-1 -benciloxietilo, 1-liletilo, 2-(fenilselenil)etilo, t-butilo, alilo, p-clorofenilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo,p-cilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metil-2-picolilo W-óxido, , trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, pilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-limidofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, '4"-dimetoxifenil)metilo, 1,1-bis(4-metoxifenil)-1'-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, bencisotiazolilo opropilsililo (TIPS), dimetilisopropilsililo (IPDMS), lo (TBDMS), t-butildifenilsililo (TBDPS), tribencilsililo, etoxifenilsililo (TBMPS), formiato, benzoilformiato, ifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, opentanoato (levulinato), 4,4-(etilenditio)pentanoato 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-arbonato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), carbonato de bonato de 2-(trimetilsilil)etilo (TMSEC), carbonato de ) etilo (Peoc), carbonato de alquil isobutilo, carbonato il p-nitrofenilo, carbonato de alquil bencilo, carbonato encilo, carbonato de alquil o-nitrobencilo, carbonato rbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonato de metilo, pentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-etoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2,6-3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-to, monosuccinato, (E)-2-metil-2-butenoato, otrametilfosforodiamidato de alquilo, W-fenilcarbamato ato de alquilo, sulfato, metanosulfonato (mesilato),
de carbono sustituible de un grupo "opcionalmente H2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O(CH2)0-4R°, -O-(CH<2>)<0>-4Ph, que puede estar sustituido con R°; -(CH<2>)<0>-CHPh, que puede estar sustituido con R°; - (CH<2>)<0>-R°; -NO<2>; -CN; -N<3>; -(CHz)a-aN(R°)z; - ( ^<2>)<0>-°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)<ü>-CH2)0-4OC(O)R°; - OC(O)(CH2)0-4SR-, SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)N
C(O)N(OR0)R0; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R
4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R0; - S(O)2NR°2; -(C
-C(NH)NR°<2>; - P(O)<2>R°; -P(O)R°<2>; -OP(O)R°<2>; -N(R°)<2>; o -(alquileno C<1-4>lineal o ramificado)C(
en donde cada R° puede sustituirse como se def
C<1>-<6>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph, -CH<2>-(anillo hetero
insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene
nitrógeno, oxígeno o azufre, o, a pesar de la
tomados junto con su(s) átomo(s) intermedio(s)
insaturado o arilo de 3-12 miembros que tiene
nitrógeno, oxígeno o azufre, que puede sustituir
en donde los sustituyentes monovalentes en
independientes de R° junto con sus átomos inte
(haloR^), -(CH<2>)<0>-<2>OH, -(CH<2>)<ü>-<2>OR^, -(CH<2>)0-<2>C
<2>C(O)OH, -(CH<2>)<ü>-<2>C(O)OR^, -(CH<2>)<ü>-<2>SR^, -(CH
-SiR^j, -OSiR^s, -C(O)S<r>,^ -(alquileno C<1-4>line
sustituido o cuando está precedido por "halo"
selecciona independientemente de alifático C<1>-insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene
nitrógeno, oxígeno o azufre,
en donde los sustituyentes divalentes en un áto
en donde los sustituyentes divalentes en un
sustituido" incluyen los siguientes: =O, =S, =N
=NOR*, -O(C(R*2))2-3O- o -S(C(R*2))2-3S-, en do
hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse c
insaturado o arilo de 5-6 miembros no
independientemente de nitrógeno, oxígeno o az
en donde los sustituyentes divalentes que se
"opcionalmente sustituido" incluyen: -O(CR*2)2
selecciona de hidrógeno, alifático C<1-6>que pued
parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembr
independientemente de nitrógeno, oxígeno o az
en donde los sustituyentes en el grupo alifáti
O(haloR^), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -N
cuando está precedido por "halo" está su
independientemente alifático C<1>-<4>, -CH<2>Ph, -O(
o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 hetero
oxígeno o azufre;
en donde los sustituyentes en un nitrógeno sust
-NR*2, -C(O)Rt -C(O)ORt -C(O)C(O)Rt -C(O)
o -N(Rt )S(O)<2>Rt ; en donde cada Rt es indepen
como se define más abajo, -OPh no sustituido
miembros no sustituido que tiene 0-4 hetero
oxígeno o azufre, o, a pesar de la definición ant
juntos con su(s) átomo(s) intermedio(s) form
insaturado o arilo de 3-12 miembros no
independientemente de nitrógeno, oxígeno o az
en donde los sustituyentes en el grupo alifático de Rt
OR^, -O(haloR^), -c N, -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -N
cuando está precedido por "halo" está sustituido sola
alifático C<1>-<4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph o un anillo, satur
tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientem
En algunas modalidades, el Anillo A es
-C(S)SR°; - SC(S)SR°, -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4S(O)2R°; -(CH2)0-S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; )(OR°)<2>; SiR°3; -(alquileno C<1-4>lineal o ramificado)O-(R°)<2>,
ás abajo y es independientemente hidrógeno, alifático de 5-6 miembros) o un anillo saturado, parcialmente heteroátomos seleccionados independientemente de ción anterior, dos apariciones independientes de R°, an un anillo mono- o bicíclico saturado, parcialmente heteroátomos seleccionados independientemente de mo se define más abajo;
el anillo formado tomando dos o más apariciones ios), son independientemente halógeno, -(CH<2>)ü-<2>R ,^ -R^<2>; -O(haloR^), -CN, -N<3>, -(CH<2>)<ü>-<2>C(O)R^, - (CH<2>)<0>-H, -(CH<2>)<0>-<2>NH<2>, -(CH<2>)<0>-<2>NHR^, - (CH<2>)<0>-<2>NR^<2>, -NO<2>, amificado)C(O)OR^ o - SSR^ en donde cada R êstá sustituido solamente con uno o más halógenos, y se<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-<1>Ph o un anillo saturado, parcialmente heteroátomos seleccionados independientemente de
e carbono saturado de R° incluyen =O y =S;
de carbono saturado de un grupo "opcionalmente , =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)<2>R*, =NR*, ada aparición independiente de R* se selecciona de e define más abajo o un anillo saturado, parcialmente uido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
a los carbonos sustituibles vecinales de un grupo en donde cada aparición independiente de R* se tituirse como se define más abajo o un anillo saturado, sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
R* incluyen halógeno, -R^, -(haloR^), -OH, -OR^, --NR<^2>o -NO<2>, en donde cada R ^ no está sustituido o o solamente con uno o más halógenos, y es<1>Ph o un anillo arilo saturado, parcialmente insaturado os seleccionados independientemente de nitrógeno,
de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -Rf , (O)Rt -S(O)2Rt , -S(O)2NR^, -C(S)NR^, - C(NH)NRf2 emente hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse nillo, saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 s seleccionados independientemente de nitrógeno, dos o más apariciones independientes de Rt , tomados un anillo mono- o bicíclico saturado, parcialmente tuido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados
independientemente halógeno, -R^, -(haloR^), -OH, -NR<^2>o -NO<2>, en donde cada R ^ no está sustituido o con uno o más halógenos, y es independientemente arcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que de nitrógeno, oxígeno o azufre.
En algunas modalidades, el Anillo A es
En algunas modalidades, el Anillo A es
En algunas modalidades, el Anillo B es
En algunas modalidades, el Anillo B es
En algunas modalidades, X1 es -CR-. En algunas modalidades algunas modalidades, X2 es -N-. En algunas modalidades, X3
algunas modalidades, X3 es -NR-.
En ciertas modalidades, Xa es -C(R)<2>-. En ciertas modalidades,
. En ciertas modalidades, Xa es -S-. En ciertas modalidades, Xa
En ciertas modalidades, Xa es -S(O)<2>-. En ciertas modalid
En ciertas modalidades, Xb es -C(R)<2>-. En ciertas modalid
. En ciertas modalidades, Xb es -S-. En ciertas modalidades, X
ciertas modalidades, Xb es -NR-.
En ciertas modalidades, Xa1 es -C(R)-. En ciertas modalidades,
ciertas modalidades, Xb1 es -N-.
En algunas modalidades, Xc es oxígeno. En algunas moda modalidades donde Xc es oxígeno o azufre, el átomo de oxíge
En algunas modalidades, Xc es un átomo de nitrógeno sustituido independientemente con hidrógeno o grupos alifáticos C<1-12>o
es alifático C<1-12>opcionalmente sustituido.
En algunas modalidades, Xd es oxígeno. En algunas moda modalidades cuando Xd es oxígeno o azufre, el átomo de oxíg
En algunas modalidades, Xd es un átomo de nitrógeno sustituid independientemente con hidrógeno o grupos alifáticos C<1-12>op
es alifático C<1-12>opcionalmente sustituido.
En algunas modalidades, Xe es -O-. En algunas modalidades,
En algunas modalidades, Xf es -O-. En algunas modalidades, X 1 es -N-. En algunas modalidades, X2 es -CR-. En
- C(R)<2>-. En algunas modalidades, X3 es -O-. En
es -C(R)=C(R)-. En ciertas modalidades, Xa es -O
-S(O)-.
es, Xa es -NR-.
es, Xb es -C(R)=C(R)-. En ciertas modalidades, Xb es s -S(O)-. En ciertas modalidades, Xb es -S(O)<2>-. En
a1 es -N-. En ciertas modalidades, Xb1 es -C(R)-. En
des, Xc es azufre. Se apreciará que en ciertas
o azufre puede poseer una carga formal negativa.
n algunas modalidades, el nitrógeno está sustituido nalmente sustituidos. En algunas modalidades, Xc
des, Xd es azufre. Se apreciará que en ciertas
o azufre puede poseer una carga formal negativa.
n algunas modalidades, el nitrógeno está sustituido nalmente sustituidos. En algunas modalidades, Xd
s -S-. En algunas modalidades, Xe es -N(R)-.
s -S-. En algunas modalidades, Xf es -N(R)-.
En algunas modalidades, W es P.
En algunas modalidades, R1 es hidrógeno, halógeno, -ORa, -opcionalmente sustituido. En algunas modalidades, R1 es hidró
algunas modalidades, R1 es -ORa. En algunas modalidades,
algunas modalidades, R1 es alifático C<1-12>. En algunas modali
R1 es alifático C<1-3>.
En algunas modalidades, R1 es metilo. En algunas modali modalidades, R1 es metoxi-etilo.
En algunas modalidades, R2 es hidrógeno, halógeno, -ORa, -opcionalmente sustituido. En algunas modalidades, R2 es hidró
algunas modalidades, R2 es -ORa. En algunas modalidades,
algunas modalidades, R2 es alifático C<1-12>. En algunas modali
R2 es alifático C<1-3>. En algunas modalidades, R2 es metilo. En al
algunas modalidades, R2 es metoxi-etilo.
En algunas modalidades, R3 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC( C(=NR)N(R)<2>, -C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, - N(
sustituido. En ciertas modalidades, R3 es hidrógeno. En modalidades, R3 es -NO<2>. En algunas modalidades, R3 es -C modalidades, R3 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R3
En algunas modalidades, R4 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC( C(=NR)N(R)<2>, -C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, - N(
sustituido. En ciertas modalidades, R4 es hidrógeno. En al modalidades, R4 es -NO<2>. En algunas modalidades, R4 es -C modalidades, R4 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R4
En algunas modalidades, R5 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC( C(=NR)N(R)<2>, -C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, - N(
sustituido. En ciertas modalidades, R5 es hidrógeno. En modalidades, R5 es -NO<2>. En algunas modalidades, R5 es -C modalidades, R5 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R5
En algunas modalidades, R6 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC C(=NR)N(R)<2>, - C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, -N(
sustituido. En ciertas modalidades, R6 es hidrógeno.
modalidades, R6 es -NO<2>. En algunas modalidades, R6 es -C modalidades, R6 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R6
En algunas modalidades, R7 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC C(=NR)N(R)<2>, - C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, -N(
sustituido. En ciertas modalidades, R7 es hidrógeno.
modalidades, R7 es -NO<2>. En algunas modalidades, R7 es -C modalidades, R7 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R7
En algunas modalidades, R10 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC C(=NR)N(R)<2>, - C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, -N(
sustituido. En algunas modalidades, R10 es fenilo opcionalmente
o parcialmente insaturado de 3-7 miembros, un anillo heter
miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independi
heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos selecci
azufre. En ciertas modalidades, R10 es hidrógeno. En algunas mo
R10 es alifático C<1-12>. En algunas modalidades, R10 es alifático C
En algunas modalidades, R11 es hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -C C(O)CH2C(O)R, -S(O)R, -S(O)2R, - C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC C(=NR)N(R)<2>, - C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, -N( -N(R)<2>, y alifático C<1-12>o alcoxi C1-4-alquilo C<1-4>
no. En algunas modalidades, R1 es halógeno. En
s -OH. En algunas modalidades, R1 es flúor. En
es, R1 es alifático C<1-6>. En algunas modalidades,
des, R1 es alcoxi C1-4-alquilo C<1-4>. En algunas
-N(R)<2>, y alifático C<1-12>o alcoxi C1-4-alquilo C<1-4>
no. En algunas modalidades, R2 es halógeno. En
s -OH. En algunas modalidades, R2 es flúor. En
es, R2 es alifático C<1-6>. En algunas modalidades,
nas modalidades, R2 es alcoxi C1-4-alquilo C<1-4>. En
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, - N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente
nas modalidades, R3 es halógeno. En ciertas
En ciertas modalidades, R3 es -OR. En algunas
alifático C<1-6>.
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, - N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente
nas modalidades, R4 es halógeno. En ciertas
En ciertas modalidades, R4 es -OR. En algunas
alifático C<1-6>.
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, - N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente
nas modalidades, R5 es halógeno. En ciertas
En ciertas modalidades, R5 es -OR. En algunas
alifático C<1-6>.
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, -N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente
algunas modalidades, R6 es halógeno. En ciertas En ciertas modalidades, R6 es -OR. En algunas
alifático C<1-6>.
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, -N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente
algunas modalidades, R7 es halógeno. En ciertas En ciertas modalidades, R7 es -OR. En algunas
alifático C<1-6>.
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, -N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmente stituido, un anillo carbocíclico monocíclico saturado
lico saturado o parcialmente insaturado de 3-7
emente de nitrógeno, oxígeno o azufre o un anillo
ados independientemente de nitrógeno, oxígeno o
lidades, R10 es halógeno. En algunas modalidades,
-OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, -N(R)C(=NR)N(R)2, -O<2>R, -OC(O)N(R)<2>o alifático C<1-12>opcionalmentesustituido. En algunas modalidades, R11 es fenilo opcional
o parcialmente insaturado de 3-7 miembros, un anillo
miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados ind
heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos
azufre. En ciertas modalidades, R11 es hidrógeno. En algu
R11 es alifático C<1>-<12>. En algunas modalidades, R11 es alif
Se apreciará que para los compuestos representados
cargados negativamente, la invención contempla formas t
de los mismos. En algunas modalidades, un compuesto p
que equilibran la carga de un fosfato libre.
En algunas modalidades, un compuesto proporcionado e nte sustituido, un anillo carbocíclico monocíclico saturado terocíclico saturado o parcialmente insaturado de 3-7 endientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre o un anillo leccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o modalidades, R11 es halógeno. En algunas modalidades, o C<1>-<6>.
la presente descripción, donde se muestran fosfatos to libres como salinas de tales compuestos, y tautómeros orcionado puede tener uno o más nitrógenos protonados
iferente de:
En algunas modalidades, un compuesto proporcionado ti la fórmula X, XI, XII, XIII, XIV, XV o XVI:
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
en donde cada uno del Anillo A, Xc, Xd, Xe, Xf, R1, R2, R6,
en las clases y subclases en la presente descripción, ta , X2, y X3 es como se define anteriormente y se describe individualmente como en combinación.
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
en donde cada uno del Anillo A, Xc, Xd, Xe, Xf, R1, R2,
en las clases y subclases en la presente descripción,
En algunas modalidades, un compuesto proporcionado s R7, X2, y X3 es como se define anteriormente y se describe to individualmente como en combinación.
elecciona de:
o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
Se apreciará que los compuestos representados en el pá
uso de otras convenciones. Por ejemplo, los dos comp
química y estereoquímica:
fo inmediatamente anterior pueden dibujarse mediante el tos siguientes se consideran equivalentes en estructura
En algunas modalidades, los compuestos proporciona
compuestos proporcionados son puros.
Composiciones Farmacéuticas
Las composiciones farmacéuticas proporcionadas puede
dosificación oral, cremas tópicas, parches tópicos, for
nasales, gotas para los ojos, formas de inyección intra
inyectables e infusibles. Los métodos para preparar com
Las composiciones farmacéuticas típicamente contienen
cantidad efectiva para lograr el efecto terapéutico dese
secundarios adversos. En la presente descripción se
aceptables del agente activo y se conocen bien en la té
elige convenientemente la cantidad administrada que
secundario adverso. La cantidad de composición terapéu
enfermedad, trastorno o afección particular depende de l
diana, el peso del sujeto, las dietas especiales que sigue
administración y otros factores que son reconocidos p
dosificación de acuerdo con factores convencionales t
parámetros del sujeto. Las dosis efectivas pueden extrap
sistemas de prueba de modelosin vitroo en animales (p
y Servicios Humanos de Estados Unidos, Administració
Investigación de Medicamentos en "Guidance for Industr
Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers", Phar
Se conocen varios sistemas de suministro y pueden usar
descripción o una composición farmacéutica que lo comp
Las composiciones farmacéuticas descritas en la pre
adecuada que incluye, pero sin limitarse a, entérica, gas
intracerebral (en el cerebro), intracerebroventricular (en
piel), intradérmica (en la propia piel), subcutánea (deb
intravenosa (en una vena), intraarterial (en una arteria), i
infusión intraósea (en la médula ósea), intratecal (en el
peritoneo), infusión intravesical, intravítrea (a través d
administración intravaginal, intrauterina, administración
intacta para distribución sistémica), transmucosa (difusión
sublingual, sublabial, enema, gotas para los ojos (en la co
las composiciones pueden administrarse de una manera
vascular u otra barrera epitelial. Pueden usarse otros si
suministro de las composiciones farmacéuticas descritas
acuosas, encapsulación en micropartículas o microcá
invención puede suministrarse además en un sistema de l
polimérico (ver, por ejemplo, Smolen y Ball, Controlled
1984, John Wiley & Sons; Ranade y Hollinger, Drug Deliv
edición, CRRC Press). Alternativamente, puede usarse u
Las composiciones descritas en la presente descripci están en forma aislada. En algunas modalidades, los
estar en una variedad de formas que incluyen formas de de iontoforesis, supositorios, aerosoles e inhaladores ular, formas de depósito, así como también soluciones iciones farmacéuticas se conocen bien en la técnica.
agente activo descrito en la presente descripción en una o evitando o minimizando al mismo tiempo los efectos roporcionan preparaciones y sales farmacéuticamente ca. Para la administración de moduladores de cGAS, se a terapéuticamente eficaz con pocos o ningún efecto o farmacéutica que es efectiva en el tratamiento de una aturaleza y gravedad de la enfermedad, el sitio de acción ujeto, medicamentos concurrentes que se usan, la vía de los expertos en la técnica. El médico puede adaptar la como la extensión de la enfermedad y los diferentes rse a partir de curvas de respuesta a dosis derivadas de jemplo, como se describió por el Departamento de Salud e Alimentos y Medicamentos y Centro de Evaluación e Estimating Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical cology and Toxicology, Julio de 2005).
para administrar el agente activo descrito en la presente da.
te descripción pueden administrarse por cualquier vía enteral, epidural, oral, transdérmica, epidural (peridural), ventrículos cerebrales), epicutánea (aplicación sobre la de la piel), administración nasal (a través de la nariz), muscular (en un músculo), intracardíaca (en el corazón), nal espinal), intraperitoneal, (infusión o inyección en el ojo), inyección intracavernosa, (en la base del pene), traamniótica, transdérmica (difusión a través de la piel través de una membrana mucosa), insuflación (resoplido), ntiva) o gotas para los oídos. En modalidades específicas, les permita cruzar la barrera hematoencefálica, la barrera mas de suministro bien conocidos en la técnica para el la presente descripción, por ejemplo mediante soluciones las. Las composiciones farmacéuticas de la presente ración controlada. Por ejemplo, puede usarse un material g Bioavailability, Drug product design and performance, Systems, pharmacology and toxicology series, 2003, 2da bomba (Saudek y otros, N. Engl. J. Med. 321:574 (1989)). también pueden acoplarse a una clase de polímerosbiodegradables útiles para lograr la liberación controlad
hidrogeles y copolímeros de bloques anfipáticos reticula
Como se describió anteriormente, las composicione
farmacéuticamente aceptable. El término portador se refi
que se administran los moduladores. Tales portadores
aceites que incluyen aceite mineral, aceite vegetal (por
aceite de origen sintético. También pueden emplearse s
soluciones salinas, como portadores líquidos de las c
elección del portador depende de factores bien recon
derivado peptídico o peptidomimético, su solubilidad y ot
de suministro y aplicación. Los ejemplos de portadores
Science and Practice of Pharmacy por Alfonso R. Genna
se conocen en la técnica portadores adecuados para ad
de Estados Unidos núms. 6,086,918, 6,673,574, 6,960,3
Otros materiales farmacéuticamente adecuados que pu
potenciadores de la absorción, incluidos aquellos desti
tampones del pH, ajustadores de la osmolaridad, c
espesantes, emolientes, agentes dispersantes, agentes
Los ejemplos de excipientes farmacéuticos adecuados
monoestearato de glicerol, gelatina, harina de almidón (p
cloruro de sodio. Las composiciones farmacéuticas q
soluciones, cápsulas, tabletas, cremas, geles, polvos y f
formularse como un supositorio, con aglutinantes y portad
The Science and Practice of Pharmacy por Alfonso R. G
Tales composiciones contienen una cantidad terapéutica
cantidad adecuada de portador para proporcionar la for
están diseñadas para adaptarse al modo de administraci
célula en particular).
Las composiciones farmacéuticas que comprenden el
incluyen composiciones formuladas como formas neutras
aquellas que se forman con grupos amino libres y aquell
tóxicas de metales alcalinos, metales alcalinotérreos y
incluyen sales de sodio, potasio, litio, calcio, magnesio,
métodos bien conocidos en la técnica. También se inclu
se preparan haciendo reaccionar los compuestos de
adecuados. Las sales representativas incluyen las sales
borato, benzoato, sulfato, bisulfato, acetato, fosfato, tisol
Los ejemplos de rellenos o aglutinantes que pueden us
ácido algínico, fosfato cálcico (dibásico), carboximet hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, dextrina,
de calcio, amilosa, glicina, bentonita, maltosa, sorbitol,
pirosulfito de disodio, alcohol polivinílico, gelatina, gluco
de aluminio y magnesio, maltodextrina, óxido de polietil
microcristalina de tragacanto, almidón y zeína. En c
microcristalina.
Los ejemplos de agentes desintegrantes que pued carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilcelulosa (poco s
de silicio coloidal, croscarmelosa sódica, crospovidona,
glicolato de almidón de sodio, almidón, disulfito de disodio
reticuladas de etilendiaminotetraacetato de disodio
carboximetil de sodio almidón, celulosa microcristalina.
Los ejemplos de lubricantes incluyen estearato de calcio,
hidrogenado (tipo I), óxido de magnesio, estearato de
sulfato de sodio, estearato fumarato de sodio, ácido
laurilsulfato de magnesio, ácido bórico, benzoato de sodi
combinación), DL-leucina.
el fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poliortoésteres, , ácido polihidroxibutírico y polidihidropiranos.
farmacéuticas convenientemente incluyen un portador a diluyentes, adyuvantes, excipientes o vehículos con los macéuticos incluyen líquidos estériles tales como agua y emplo, aceite de soja o aceite de maíz), aceite animal o ciones acuosas de glicerol y dextrosa, así como también posiciones farmacéuticas de la presente invención. La os en la técnica, tales como la naturaleza del péptido, propiedades fisiológicas, así como también el sitio diana macéuticos adecuados se describen en Remington: The 2003, 21ra edición, Mack Publishing Company. Además, istración oral y se describen, por ejemplo, en las patentes y 7,351,741 y en el documento WO2007/131286.
n incorporarse en preparaciones farmacéuticas incluyen dos a aumentar la absorción paracelular, reguladores y servantes, estabilizadores, antioxidantes, tensioactivos, matizantes, agentes colorantes y agentes humectantes.
cluyen agua, glucosa, sacarosa, lactosa, glicol, etanol, ejemplo, harina de arroz), tiza, estearato de sodio, malta y comprenden moduladores pueden tomar la forma de ulaciones de liberación sostenida. La composición puede s tradicionales tales como los triglicéridos (ver Remington: aro, 2003, 21 ra edición, Mack Publishing Company).
nte efectiva de la composición terapéutica, junto con una de administración adecuada al sujeto. Las formulaciones y al sitio de acción diana (por ejemplo, un órgano o tipo de
ente activo descrito en la presente descripción también salinas. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen que reaccionan con grupos carboxilo libres. Las sales no onio comúnmente usadas en la industria farmacéutica rio, amonio y protamina-cinc, que se preparan mediante sales de adición de ácidos no tóxicas, que generalmente presente invención con ácidos orgánicos o inorgánicos omhidrato, clorhidrato, valerato, oxalato, oleato, laureato, , citrato, maleato, fumarato, tartrato, succinato y napsilato.
e de acuerdo con la presente invención incluyen acacia, lulosa, carboximetilcelulosa sódica, hidroxietilcelulosa, xtratos, sacarosa, tilosa, almidón pregelatinizado, sulfato celulosa, hidrogenofosfato de disodio, fosfato de disodio, goma guar, glucosa líquida, azúcar comprimible, silicato o, polimetacrilatos, povidona, alginato de sodio, celulosa tas modalidades, un relleno o aglutinante es celulosa
usarse incluyen ácido algínico, carboximetilcelulosa, tituida), celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dióxido lcelulosa, polacrilina potásica, povidona, alginato de sodio, datamil de disodio, edetato de disodio, polivinilpirrolidonas DTA), almidón pregelatinizado, carboximetil almidón,
eite de canola, palmitoestearato de glicerilo, aceite vegetal gnesio, aceite mineral, poloxámero, polietilenglicol, lauril eárico, talco y estearato de zinc, behapato de glicerilo, acetato de sodio, benzoato de sodio/acetato de sodio (enLos ejemplos de acondicionadores del flujo de sílice incl
y goma guar. Otro acondicionador de flujo de sílice más
Los ejemplos de agentes estabilizantes incluyen acacia,
de dicalcio, carboximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa,
glicerilo, hidroxipropil metilcelulosa, trisilicato de magne
propilenglicol, alginato de sodio, cera de carnaúba
monoglicérido esteárico y alcohol estearílico.
En algunas modalidades, la presente invención cont
descrito en la presente descripción. Por ejemplo, las com
pueden incluir una ciclodextrina o un derivado de ciclode
o más unidades de a-D-glucopiranósido unidas1->4.
monómeros de glucosa que varían de seis a ocho unida
molécula de anillo de azúcar de seis miembros, p-ciclo
ciclodextrina: molécula de anillo de azúcar de ocho
ilustrativos se describen en la patente de Estados U
2010/0196452, y publicación de Estados Unidos núm,
ciclodextrina de acuerdo con la presente invención es u
una ciclodextrina acilada. En algunas modalidades, una
derivados de ciclodextrina ilustrativas en Szejtli, J. Chem
Drug Delivery Reviews, 36 (1999) 17-28. Los ejemplos
(por ejemplo, RAMEB; p-ciclodextrina metilada aleat
ciclodextrina e hidroxipropil Y-ciclodextrina); ciclodextrin
(clorotriazinil p-ciclodextrina); y ciclodextrinas ramificad
acetil-p-ciclodextrina, sulfobutil-p-ciclodextrina, a-, p- y
hidroxipropil p-ciclodextrina.
Dosificación
Típicamente, se administra al sujeto el agente activo de
0,001 a 100 mg/kg/día. Por ejemplo, en algunas modalid
a aproximadamente 25 mg/kg/día, aproximadamente 1
aproximadamente 10 mg/día. kg/día, aproximadame
aproximadamente 1 mg/kg/día a aproximadamente 100
en la presente descripción se administra al sujeto en u
100 pg/kg/día, 200 pg/kg/día, 300 pg/kg/día, 400 pg/kg/d
900 pg/kg/día o 1000 pg/kg/día.
En algunas modalidades, el compuesto se administra
pg/kg/día (por ejemplo, que varía de aproximadament
pg/kg/día, 1-500 pg/kg/día, 1-400 pg/kg/día, 1-300 pg/k
pg/kg/día, 1-70 pg/kg/día, 1-60 pg/kg/día, 1-50 pg /k
pg/kg/día). En algunas modalidades, el compuesto se a
1-500 pg/kg/día. En algunas modalidades, el comp
aproximadamente 1-100 pg/kg/día. En algunas modali
varía de aproximadamente 1-60 pg/kg/día. En algunas
seleccionada de aproximadamente 1, 2, 4, 6, 8, 10, 15,
400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900,
En algunas modalidades, una cantidad terapéuticament
de aproximadamente 10-1000 mg (por ejemplo, aproxi
mg, 50 mg - 1000 mg, 60 mg - 1000 mg, 70 mg - 1000
900 mg, 10-800 mg, 10-700 mg, 10-600 mg, 10-500 m
600 mg, 100-500 mg, 100-400 mg, 100-300 mg, 200-1
200-500 mg, 200-400 mg, 300-1000 mg, 300-900 mg, 3
1000 mg, 500 mg - 1000 mg, 100 mg - 900 mg, 200 mg
mg). En algunas modalidades, un compuesto está pres
mg, 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg,
700 mg, 750 mg, 800 mg. En algunas modalidades, u
aproximadamente 1000 mg, 950 mg, 900 mg, 850 mg,
450 mg, 400 mg, 350 mg, 300 mg, 250 mg, 200 mg
terapéuticamente efectiva descrita en la presente descri
la cantidad terapéuticamente efectiva descrita en la pre ióxido de silicio coloidal, silicato de magnesio y aluminio rido consiste en dióxido de silicio.
ina, alcohol polivinílico, ácido algínico, bentonita, fosfato do de silicio coloidal, ciclodextrinas, monoestearato de licato de magnesio y aluminio, propilenglicol, alginato de ma xantana, almidón, estearato(s), ácido esteárico,
formulaciones orales que contienen el agente activo iones farmacéuticas descritas en la presente descripción . Las ciclodextrinas generalmente se componen de cinco amente, las ciclodextrinas contienen una cantidad de n un anillo, creando una forma de cono (a-ciclodextrina: na: molécula de anillo de azúcar de siete miembros, Y-bros). Las ciclodextrinas y derivados de ciclodextrina núm. 7,723,304, publicación de Estados Unidos núm. /0144624. Por ejemplo, en algunas modalidades, una lodextrina alquilada, una ciclodextrina hidroxialquilada o extrina es una hidroxipropil-p-ciclodextrina. Se describen (1998), 98, 1743-1753; y Szente, L y Szejtli, J., Advance ivados de ciclodextrina incluyen ciclodextrinas metiladas ente); ciclodextrinas hidroxialquiladas (hidroxipropil-petiladas (acetil-Y-ciclodextrina); ciclodextrinas reactivas lucosil- y maltosil p-ciclodextrina); acetil-Y-ciclodextrina; lodextrinas sulfatadas; ciclodextrinas sulfoalquiladas; e
en la presente descripción en una cantidad que varía de se administra al sujeto aproximadamente 0,01 mg/kg/día /día a aproximadamente 20 mg/kg/día, 0,2 mg/kg/día a ,02 mg/kg/día a aproximadamente 0,1 mg/kg/día o /día. En algunas modalidades, el agente activo descrito ntidad de aproximadamente 10 pg/kg/día, 50 pg/kg/día, 0 pg/kg/día, 600 pg/kg/día, 700 pg/kg/día, 800 pg/kg/día,
dosis efectiva que varía de aproximadamente 1-1000 00 pg/kg/día, 1-800 pg/kg/día, 1-700 pg/kg/día, 1-600 1-200 pg/kg/día, 1-100 pg/kg/día, 1-90 pg/kg/día, 1-80 1-40 pg/kg/día, 1-30 pg/kg/día, 1-20 pg/kg/día, 1-10 stra a una dosis efectiva que varía de aproximadamente se administra a una dosis efectiva que varía de , el compuesto se administra a una dosis efectiva que idades, el compuesto se administra a una dosis efectiva 5, 30, 35, 40, 45, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 1000 ug/kg/día.
tiva de un compuesto puede ser una cantidad que varía ente 20 mg - 1000 mg, 30 mg - 1000 mg, 40 mg - 1000 mg - 1000 mg, 90 mg - 1000 mg, aproximadamente 10 -1000 mg, 100-900 mg, 100-800 mg, 100-700 mg, 100 g, 200-900 mg, 200-800 mg, 200-700 mg, 200-600 mg, 0 mg, 300-700 mg, 300-600 mg, 300-500 mg, 400 mg -mg, 300 mg - 700 mg, 400 mg - 700 mg, y 500 mg - 600 n una cantidad igual o mayor que aproximadamente 10 g, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, puesto está presente en una cantidad de o menor que g, 750 mg, 700 mg, 650 mg, 600 mg, 550 mg, 500 mg, mg o 100 mg. En algunas modalidades, la cantidad se proporciona en una dosis. En algunas modalidades, descripción se proporciona en un día.
En otras modalidades, una cantidad terapéuticamente ef
de peso a 500 mg/kg de peso, por ejemplo, de aproxi
aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 300 mg/kg de
de peso, de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 1
a 90 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,001 mg/k
mg/kg de peso a 70 mg/kg de peso, de aproxima
aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 50 mg/kg de
de peso, de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 3
a 25 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,001 mg/k
mg/kg de peso a 15 mg/kg de peso, de aproximadam
modalidades, la cantidad terapéuticamente efectiva des
En algunas modalidades, la cantidad terapéuticamente
un día.
Aún en otras modalidades, una cantidad terapéuticamen
mg/kg de peso a 0,1 mg/kg de peso, por ejemplo, de ap
de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,08 mg/k
mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de p
de peso a 0,05 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0
de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,03 mg/k
mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de
mg/kg de peso a 0,018 mg/kg de peso, de aproximad
aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,016 mg/kg
mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de
mg/kg de peso a 0,013 mg/kg de peso, de aproximad
aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,011 mg/kg
mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de
mg/kg de peso a 0,008 mg/kg de peso, de aproximad
aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,006 mg/kg
mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de
mg/kg de peso a 0,003 mg/kg de peso, de aproximadame
modalidades, la dosis terapéuticamente efectiva puede
mg/kg de peso, 0,0004 mg/kg de peso, 0,0005 mg/kg de
mg/kg de peso, 0,0009 mg/kg de peso, 0,001 mg/kg de p
de peso, 0,005 mg/kg de peso, 0,006 mg/kg de peso,
peso, 0,01 mg/kg de peso, 0,02 mg/kg de peso, 0,03 m
mg/kg de peso, 0,07 mg/kg de peso, 0,08 mg/kg de pes
para un individuo particular puede variarse (por ejemplo,
las necesidades del individuo. En algunas modalidades,
descripción se proporciona en una dosis. En algunas m
la presente descripción se proporciona en un día.
En algunas modalidades, una formulación que compren
se administra como una dosis única. En algunas modali
se describe en la presente descripción se administra a i
se usa en la presente descripción, indica que la cantida
diferencia de una dosis única). El intervalo puede det
modalidades, una formulación que comprende un co
administra bimestralmente, mensualmente, dos veces al
dos veces por semana, tres veces por semana, diaria
administración para un solo individuo no necesita ser
dependencia de las necesidades del individuo.
Como se usa en la presente descripción, el término "bim
(es decir,una vez cada dos meses); el término "mensu
"tres veces por semana" significa administración una ve
el término "quincenalmente" significa administración una
el término "semanalmente" significa administración
administración una vez al día.
En algunas modalidades, una formulación que compren
se administra a intervalos regulares de forma indefinida.
compuesto como se describe en la presente descripci
definido. En algunas modalidades, una formulación que
descripción se administra a intervalos regulares durante a puede ser, por ejemplo, aproximadamente 0,001 mg/kg mente 0,001 mg/kg de peso a 400 mg/kg de peso, de , de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 200 mg/kg g/kg de peso, de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso peso a 80 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,001 nte 0,001 mg/kg de peso a 60 mg/kg de peso, de , de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso a 40 mg/kg /kg de peso, de aproximadamente 0,001 mg/kg de peso peso a 20 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,001 0,001 mg/kg de peso a 10 mg/kg de peso. En algunas en la presente descripción se proporciona en una dosis. iva descrita en la presente descripción se proporciona en
ectiva puede ser, por ejemplo, aproximadamente 0,0001 adamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,09 mg/kg de peso, peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,07 0,06 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg mg/kg de peso a aproximadamente 0,04 mg/kg de peso, peso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,02 o a 0,019 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 nte 0,0001 mg/kg de peso a 0,017 mg/kg de peso, de eso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,015 o a 0,014 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 nte 0,0001 mg/kg de peso a 0,012 mg/kg de peso, de eso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,01 o a 0,009 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 nte 0,0001 mg/kg de peso a 0,007 mg/kg de peso, de eso, de aproximadamente 0,0001 mg/kg de peso a 0,005 o a 0,004 mg/kg de peso, de aproximadamente 0,0001 ,0001 mg/kg de peso a 0,002 mg/kg de peso. En algunas 0,0001 mg/kg de peso, 0,0002 mg/kg de peso, 0,0003 o, 0,0006 mg/kg de peso, 0,0007 mg/kg de peso, 0,0008 0,002 mg/kg de peso, 0,003 mg/kg de peso, 0,004 mg/kg mg/kg de peso, 0,008 mg/kg de peso, 0,009 mg/kg de de peso, 0,04 mg/kg de peso, 0,05 mg/kg de peso, 0,06 9 mg/kg de peso o 0,1 mg/kg de peso. La dosis efectiva entarse o disminuirse) con el tiempo, en dependencia de ntidad terapéuticamente efectiva descrita en la presente dades, la cantidad terapéuticamente efectiva descrita en
compuesto como se describe en la presente descripción s, una formulación que comprende un compuesto como alos regulares. La administración en un "intervalo", como apéuticamente efectiva se administra periódicamente (a narse mediante técnicas clínicas estándar. En algunas sto como se describe en la presente descripción se tres veces por semana, quincenalmente, semanalmente, te, dos veces al día o cada seis horas. El intervalo de intervalo fijo, sino que puede variar con el tiempo, en
lmente" significa administración una vez cada dos meses nte" significa administración una vez al mes; el término da tres semanas(es decir,una vez cada tres semanas); ada dos semanas(es decir,una vez cada dos semanas); vez por semana; y el término "diariamente" significa
compuesto como se describe en la presente descripción lgunas modalidades, una formulación que comprende un e administra a intervalos regulares durante un período prende un compuesto como se describe en la presente os, 4 años, 3 años, 2 años, 1 año, 11 meses, 10 meses,9 meses, 8 meses, 7 meses, 6 meses, 5 meses, 4 mese
semana, 6 días, 5 días, 4 días, 3 días, 2 días o un día.
Usos Médicos
En ciertas modalidades, los compuestos proporcionados
algunas modalidades, los compuestos proporcionados d
enfermedades, trastornos o afecciones inmunitarias. En
composición farmacéutica de la presente invención para s
enfermedad, trastorno o afección inmunitaria que compr
farmacéutica.
En algunas modalidades, una enfermedad, trastorno o af
autoinmunitaria. En ciertas modalidades, la enfermedad, t
consiste en cualquiera de una variedad de enfermedade
a, uno o más de los siguientes: trastornos autoinmunitario
artritis reumatoide); trastornos inflamatorios(por ejempl
infecciosas(por ejemplo,infecciones virales(por ejemplo
hongos, sepsis); trastornos neurológicos(porejemplo,enf
distrofia muscular de Duchenne); trastornos cardiovas
trombosis, trastornos de la coagulación, trastornos an
proliferativos(por ejemplo,cáncer, neoplasias benignas);
obstructiva crónica); trastornos digestivos(por ejemplmusculoesqueléticos (por ejemplo, fibromialgia, artritis)
ejemplo,diabetes, osteoporosis); trastornos urológicos(
ejemplo, depresión, esquizofrenia); trastornos de la piel
linfáticos(por ejemplo,anemia, hemofilia);etc..En al
inmunitaria se caracteriza por inflamación. En algunas m
es causada, sostenida o relacionada con la activación de
afección inmunitaria es provocada, sostenida o relaciona
En algunas modalidades, el trastorno o enfermedad
diseminada (ADEM), enfermedad de Addison, agamma
(también enfermedad de Lou Gehrig; enfermedad de
antifosfolípido, síndrome antisintetasa, alergia atópic
miocardiopatía autoinmunitaria, enteropatía autoinm
autoinmunitaria, enfermedad autoinmunitaria del oído int
periférica autoinmunitaria, pancreatitis autoinmunitaria,
progesterona autoinmunitaria, Púrpura trombocitopé
autoinmunitaria, enfermedad de Balo/esclerosis concéntri
encefalitis de Bickerstaff, síndrome de Blau, pénfigo a
Enfermedad de Chagas, polineuropatía desmielinizant
crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, sín
Cogan, enfermedad por aglutininas frías, deficiencia de
arteritis craneal, síndrome CREST, enfermedad de Cr
síndrome de Cushing, angeítis leucocitoclástica cu
dermatomiositis, diabetes mellitus tipo 1, esclerosis sisté
por fármacos, lupus eritematoso discoide, eccema, endom
gastroenteritis eosinofílica, epidermólisis ampollosa adqu
mixta esencial, síndrome de Evans, fibrodisplasia prog
idiopática), gastritis, Pénfigo gastrointestinal, glomerulon
síndrome de Guillain-Barré (SGB), encefalopatía de Hashi
Herpes gestationis también conocido como pénfigo gesta hipogammaglobulinemia, enfermedades desmielinizant
púrpura trombocitopénica idiopática, nefropatía por IgA,
inflamatoria crónica, cistitis intersticial, artritis idiopática
enfermedad de Kawasaki, síndrome de Lambert-Eaton
escleroso, enfermedad por IgA lineal (LAD), hepatitis lup
eritematoso, síndrome de Majeed, enfermedad de Mé
enfermedad mixta del tejido conectivo, morfea, enfermed
liquenoide y varioliforme aguda, esclerosis múltiple,
(también enfermedad de Devic), neuromiotonía, pénfigo
de Ord, reumatismo palindrómico, PANDAS (trastornos n
estreptococos), degeneración cerebelar paraneoplásica,
Parry Romberg, síndrome de Parsonage-Turner, pars
perivenosa, síndrome de POEMS, poliarteritis nodosa, 3 meses, 2 meses, un mes, 3 semanas, 2 semanas, una
la presente invención son para su uso en la medicina. En presente invención son para su uso en el tratamiento de nas modalidades, la presente invención proporciona una so en un método para el tratamiento o prevención de una e administrar a un sujeto que lo necesita la composición
ción inmunitaria es una enfermedad, trastorno o afección storno o afección inmunitaria se selecciona del grupo que rastornos y/o afecciones, que incluyen, pero sin limitarse orejemplo,diabetes, lupus, esclerosis múltiple, psoriasis, artritis, enfermedad inflamatoria pélvica); enfermedades IH, VHC, RSV), infecciones bacterianas, infecciones por edad de Alzheimer, enfermedad de Huntington; autismo; lares(por ejemplo,aterosclerosis, hipercolesterolemia, génicos tal como la degeneración macular); trastornos stornos respiratorios(por ejemplo,enfermedad pulmonar enfermedad inflamatoria intestinal, úlceras); trastornos rastornos endocrinos, metabólicos y nutricionales (por ejemplo,enfermedad renal); trastornos psicológicos(por or ejemplo, heridas, eczema); trastornos sanguíneos y nas modalidades, la enfermedad, trastorno o afección alidades, la enfermedad, trastorno o afección inmunitaria AS. En algunas modalidades, la enfermedad, trastorno o con la activación de STING.
toinmunitaria se selecciona de encefalomielitis aguda bulinemia, alopecia areata, esclerosis lateral amiotrófica euronas motoras), espondilitis anquilosante, síndrome dermatitis atópica, anemia aplásica autoinmunitaria, itaria, anemia hemolítica autoinmunitaria, hepatitis o, síndrome linfoproliferativo autoinmunitario, neuropatía índrome poliendocrino autoinmunitario, dermatitis por a autoinmunitaria, Urticaria autoinmunitaria, uveítis de Balo, enfermedad de Behget, enfermedad de Berger, olloso, enfermedad de Castleman, enfermedad celíaca, inflamatoria crónica, osteomielitis multifocal recurrente me de Churg-Strauss, pénfigo cicatricial, síndrome de omponente 2 del complemento, dermatitis de contacto, n (enfermedad inflamatoria intestinal idiopática "IBD"), ea, enfermedad de Dego, dermatitis herpetiforme, ca cutánea difusa, síndrome de Dressler, lupus inducido iosis, artritis relacionada con entesitis, fascitis eosinofílica, a, eritema nodoso, eritroblastosis fetal, crioglobulinemia iva osificante, alveolitis fibrosante (o fibrosis pulmonar itis, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Graves, to, tiroiditis de Hashimoto, púrpura de Henoch-Schonlein, nal, hidradenitis supurativa, síndrome de Hughes-Stovin, inflamatorias idiopáticas, fibrosis pulmonar idiopática, ositis por inclusión, neuropatía periférica desmielinizante enil también conocida como artritis reumatoide juvenil, sténico, vasculitis leucocitoclástica, liquen plano, liquen e también conocida como hepatitis autoinmunitaria, lupus re, poliangitis microscópica, síndrome de Miller-Fisher, de Mucha-Habermann también conocida como pitiriasis tenia gravis, miositis, narcolepsia, neuromielitis óptica atricial ocular, síndrome de opsoclono-mioclonía, tiroiditis opsiquiátricos autoinmunitarios pediátricos asociados con emoglobinuria paroxística nocturna (HPN), síndrome de nitis, pénfigo vulgar, anemia perniciosa, encefalomielitis limialgia reumática, polimiositis, cirrosis biliar primaria,colangitis esclerosante primaria, neuropatía inflamat
gangrenoso, aplasia pura de células rojas, encefalitis de
recurrente, síndrome de Reiter, síndrome de piernas i
reumática, sarcoidosis, esquizofrenia, síndrome de Sch
reacción al suero, síndrome de Sjogren, espondiloartrop
(EBS), síndrome de Susac, síndrome de Sweet, Corea de
sistémico, arteritis de Takayasu, arteritis temporal (t
trombocitopenia, síndrome de Tolosa-Hunt, mielitis trans
inflamatoria intestinal idiopática "IBD"), enfermedad del
mixta del tejido conectivo, espondiloartropatía indiferenci
de Wegener.
En ciertas modalidades, la administración de un compu
disminución de la actividad de cGAS. En algunas modalid
lo necesita da como resultado una disminución de la acti
En algunas modalidades, los compuestos de la presente
síntesis química.
En ciertas modalidades, la presente invención proporcion
contacto cGAS con un compuesto proporcionado de la
invención proporciona un compuesto de la presente inv
paciente que comprende administrar a un paciente el
proporciona un método para inhibir STING que comprend
de la presente invención. En algunas modalidades, la pr
invención para su uso en un método para inhibir STING
compuesto.
En ciertas modalidades, la presente invención proporcio
cGAS, el método comprende poner en contacto el poli
invención, cuyo agente modulador no es un modulador,
el agente modulador es un compuesto proporcionados d
Kits
La descripción proporciona una variedad de kits que, a
llevar a cabo de manera conveniente y/o efectiva la presen
y/o números suficientes de componentes para permitir
sujetos y/o realizar múltiples experimentos.
En un aspecto, la presente descripción proporciona kits q
como se describe anteriormente) de la invención. En un
fragmentos funcionales de los mismos.
Los kits de la descripción pueden comprender una o más
o variante de las mismas. Los kits también pueden comp
cGAS descritos en la presente descripción. El kit puede c
de suministro para formar una composición de formulaci
salina, una solución tamponada, un lípido o cualquier age
En un caso, la solución tampón puede incluir cloruro de
solución tampón puede incluir, pero no se limita a, soluci
sacarosa al 5 % con calcio 2 mM, manitol al 5 %, manitol
cloruro de sodio con calcio 2 mM y manosa (ver, por ejem
otro caso, las soluciones tampón pueden precipitarse o l
para permitir formulaciones de solución salina o tampón s
Los componentes también pueden variarse para aument
tampón durante un período de tiempo y/o bajo una varie
proporciona kits para aplicaciones de investigación relacio
proporcionados en una cantidad efectiva para estudiar la
en una célula diana. Los kits pueden comprender ademá
la presente descripción. Tales segundas o adicionales
proceso inflamatorio o comprender una o más molécula
polipéptido cGAS y al menos una molécula de cGAMP.
empaque e instrucciones.
progresiva, psoriasis, artritis psoriásica, pioderma asmussen, fenómeno de Raynaud, condritis policondritis ietas, fibrosis retroperitoneal, artritis reumatoide, fiebre , síndrome de Schnitzler, escleritis, esclerosis sistémica, , enfermedad de Still, endocarditis bacteriana subaguda denham y PANDAS, oftalmía simpática, lupus eritematoso bién conocida como "arteritis de células gigantes"), sa, colitis ulcerosa (uno de los dos tipos de enfermedad ido conectivo indiferenciada diferente de la enfermedad a, vasculitis urticarial, vasculitis, vitiligo y granulomatosis
o a un paciente que lo necesita da como resultado una es, la administración de un compuesto a un paciente que d de STING.
ención para su uso en los métodos se preparan mediante
un método para inhibir el cGAS que comprende poner en esente invención. En algunas modalidades, la presente ión para su uso en un método para inhibir cGAS en un puesto. En ciertas modalidades, la presente invención oner en contacto STING con un compuesto proporcionado nte invención proporciona un compuesto de la presente un paciente que comprende administrar a un paciente el
un método para modular la actividad de un polipéptido tido cGAS con un modulador de cGAS de la presente trato o producto conocido de cGAS. En las modalidades, presente invención.
ue no se reivindican, son útiles para comprender cómo invención. Típicamente, los kits comprenderán cantidades n usuario realizar múltiples tratamientos de uno o varios
comprenden las moléculas (compuestos y composiciones o, el kit comprende uno o más anticuerpos funcionales o
léculas originales de cGAMP o cualquier imitador, análogo der cualquiera de las variantes, derivados o mutantes de prender además empaque e instrucciones y/o un agente El agente de suministro puede comprender una solución de suministro descrito en la presente descripción.
dio, cloruro de calcio, fosfato y/o EDTA. En otro caso, la salina, solución salina con calcio 2 mM, sacarosa al 5 %, 5 % con calcio 2 mM, lactato de Ringer, cloruro de sodio, , publicación de Estados Unidos núm. 20120258046). En lizarse. La cantidad de cada componente puede variarse ple de mayor concentración consistentes y reproducibles. a estabilidad del compuesto o composición en la solución de condiciones. En un aspecto, la presente descripción das con la actividad de cGAS o la señalización de cGAMP, ías de señalización concomitantes cuando se introducen n segundo o más compuesto o composición descritos en oléculas pueden modular la respuesta inmunitaria o un erapéuticas. En un caso, un kit comprende al menos un un caso, los kits de la presente descripción comprendenEstructuras cristalinas de cGAS
Entre otras cosas, la presente descripción proporciona un
cristal) o cristalizable que comprende un polipéptido cGA
Gao y otros Cell 153, 1094-1107 (2013), incluidos materi
para comprender las composiciones farmacéuticas de
proporcionada consiste o consiste esencialmente en el
composición "consiste en" polipéptido cGAS si incluye sól
y/o metales. En algunos casos, tal composición proporci
o más polipéptidos (por ejemplo, uno o más polipéptidos
reales) y/o uno o más agentes de interacción (por ejempl
La presente descripción también proporciona información
conjuntos de los mismos. En algunos casos, tal inform
difracción y/o coordenadas, así como también cualquier
gráficas de los mismos o generados a partir de ellos. En al
por ejemplo, modelos de relleno de espacio, representa
límites, modelos de cintas, modelos de barras; y/o sus co
En algunos casos, la información proporcionada es o com
entre sí en presencia o ausencia de una o más parejas
información proporcionada es o comprende diferencias ob
o ausencia de una o más parejas de unión y/o uno o más
En algunos casos, tal información estructural y/o análisi
ejemplo, un medio legible por computadora) o un entorn
proporciona casos tangibles de información de la estructu
por ejemplo, por o con un sistema informático, en cualquie
casos, puede accederse a tal información estructural y/o
otra manera mediante un sistema informático o programa
Diseño de fármacos basado en estructuras
En algunos casos, la presente descripción proporciona sis
que, aunque no se reivindican, son útiles para comprend
cGAS. En algunos casos, la presente descripción proporc
cGAS que comprende las etapas de:
a) proporcionar una imagen de un cristal de cGAS q
b) acoplar en la imagen al menos un resto que es u
c) evaluar una o más características de una interacció
En algunos casos, el al menos un sitio de interacción po
en Ser199, Ser420, Lys402, Glu211, Asp213, Asp307,
menos un sitio de interacción potencial incluye un sitio sel
Ser368, Arg364 y sus combinaciones. En ciertos casos,
seleccionado del grupo que consiste en Tyr421, Asp213,
menos un sitio de interacción potencial incluye Arg161. E
la presente descripción.
En algunos casos, la una o más características incluye
consiste en: separación espacial entre el resto y el sitio
resto y el sitio de interacción potencial, y/o sus combinaci
En algunos casos, un método comprende además una et
potencial que comprende el resto acoplado a la imagen d
además una etapa de comparar la imagen con la de un cri
conocido unido.
Sistemas informáticos
Como apreciarán los expertos en la técnica, al leer l
descripción es idealmente adecuada para su uso en des
se reivindican, son útiles para comprender cómo los com omposición cristalina (es decir, que contiene al menos un omo se describe en la presente descripción (ver también s complementarios) que, aunque no se reivindica, es útil presente invención. En algunos casos, tal composición ipéptido cGAS. En algunos casos, se considera que una l polipéptido, uno o más solventes y, opcionalmente, sales da incluye uno o más agentes diferentes tales como uno cidos nucleicos asociados de unión a cGAS potenciales o equeñas moléculas).
tructural y/o análisis de cristales de polipéptido cGAS y/o n estructural incluye, pero son limitarse a, patrones de junto de datos, imágenes, modelos y/o representaciones nos casos, tales representaciones gráficas pueden incluir, nes de superficies moleculares, modelos de conchas o inaciones.
nde diferencias observadas entre estructuras que difieren unión y/o agentes de interacción. En algunos casos, la rvadas entre estructuras que difieren entre sí en presencia oduladores.
pueden llevarse a la práctica en un medio tangible (por e almacenamiento. Por lo tanto, la presente descripción cristalina del polipéptido cGAS, así como también su uso, de una variedad de aplicaciones. Por ejemplo, en algunos lisis, transportarlos hacia o desde, y/o utilizar de cualquier e se ejecuta en el mismo.
as para identificar y/o caracterizar moduladores de cGAS cómo los compuestos de la presente invención modulan a un método para diseñar o caracterizar un modulador de
incluye al menos un sitio de interacción potencial;
lemento estructural potencial modulador de cGAS; y
ntre el resto y el sitio de interacción potencial.
cial incluye un sitio seleccionado del grupo que consiste 421, Arg364 y sus combinaciones. En ciertos casos, al ionado del grupo que consiste en Tyr421, Thr197, Ser366, menos un sitio de interacción potencial incluye un sitio p307, Arg364 y sus combinaciones. En algunos casos, al lgunos casos, el modulador es un compuesto descrito en
l menos una característica seleccionada del grupo que interacción potencial; energía de la interacción entre el s.
a de proporcionar una imagen de un modulador de cGAS ristal de cGAS. En algunos casos, un método comprende l de cGAS que incluye un modulador, sustrato o producto
resente descripción, en algunos aspectos, la presente ciones implementadas por computadora que, aunque no estos de la presente invención modulan cGAS. Como semuestra en la Figura S10, se muestra y describe una
ilustrativo. El entorno informático en la nube 2400 pue
2402c (colectivamente, 2402). Cada proveedor de rec
implementaciones, los recursos informáticos pueden i
datos. Por ejemplo, los recursos informáticos pueden i
programas informáticos y/o aplicaciones informáticas
ilustrativos pueden incluir servidores de aplicaciones
recuperación. Cada proveedor de recursos 2402 puede
en el entorno informático en la nube 2400. En algunas i
estar conectados a través de una red informática 2408.
uno o más dispositivos informáticos 2404a, 2404b, 240
El entorno informático en la nube 2400 puede incluir un
2406 puede estar conectado a los proveedores de rec
red informática 2408. En algunas implementaciones, el
de recursos informáticos por parte de uno o más provee
2404. El administrador de recursos 2406 puede recibir
informático particular 2404. El administrador de recurso
2402 capaces de proporcionar el recurso informático sol
recursos 2406 puede seleccionar un proveedor de r
administrador de recursos 2406 puede facilitar una co
informático particular 2404. En algunas implementacion
conexión entre un proveedor de recursos particular 2
implementaciones, el administrador de recursos 2406
proveedor de recursos particular 2402 con el recurso in
La Figura S11 muestra un ejemplo de un dispositivo i
pueden usarse para implementar las técnicas descritas
representar varias formas de ordenadores digitales, ta
estaciones de trabajo, asistentes digitales personales, s
apropiados. El dispositivo informático móvil 2550 preten
como asistentes digitales personales, teléfonos celula
dispositivos informáticos similares. Los componentes
pretenden ser solo ejemplos, y no pretenden ser limitant
El dispositivo informático 2500 incluye un procesador
2506, una interfaz de alta velocidad 2508 que se con
velocidad 2510, y una interfaz de baja velocidad 2512
2514 y el dispositivo de almacenamiento 2506. Cada u
de almacenamiento 2506, la interfaz de alta velocidad
interfaz de baja velocidad 2512, están interconectados
placa base común o de otras maneras según correspon
ejecución dentro del dispositivo informático 2500, incluid
dispositivo de almacenamiento 2506 para mostrar inf
entrada/salida, tal como una pantalla 2516 acoplada a l
pueden usarse múltiples procesadores y/o buses múltip
de memoria. Además, pueden conectarse múltiples di
porciones de las operaciones necesarias (por ejemplo,
un sistema multiprocesador).
La memoria 2504 almacena información dentro del di
memoria 2504 es una unidad o unidades de memoria v
unidad o unidades de memoria no volátil. La memori
ordenador, como un disco magnético u óptico.
El dispositivo de almacenamiento 2506 es capaz d
informático 2500. En algunas implementaciones, el di
medio legible por ordenador, como un dispositivo de di
óptico o un dispositivo de cinta, una memoria flash u otr
de dispositivos, que incluyen los dispositivos en una r
instrucciones pueden almacenarse en un portador de in
o más dispositivos de procesamiento (por ejemplo, el p
descritos anteriormente. Las instrucciones también
almacenamiento tales como medios legibles por comput
de almacenamiento 2506 o la memoria en el procesado mentación de un entorno informático en la nube 2400 luir uno o más proveedores de recursos 2402a, 2402b, 2402 puede incluir recursos informáticos. En algunas cualquier hardware y/o software usado para procesar hardware y/o software capaces de ejecutar algoritmos, algunas implementaciones, los recursos informáticos ases de datos con capacidades de almacenamiento y conectado a cualquier otro proveedor de recursos 2402 mentaciones, los proveedores de recursos 2402 pueden a proveedor de recursos 2402 puede estar conectado a lectivamente, 2404), a través de la red informática 2408.
nistrador de recursos 2406. El administrador de recursos 2402 y los dispositivos informáticos 2404 a través de la inistrador de recursos 2406 puede facilitar el suministro de recursos 2402 a uno o más dispositivos informáticos solicitud de un recurso informático desde un dispositivo 6 puede identificar uno o más proveedores de recursos o por el dispositivo informático 2404. El administrador de os 2402 para proporcionar el recurso informático. El n entre el proveedor de recursos 2402 y un dispositivo l administrador de recursos 2406 puede establecer una un dispositivo informático particular 2404. En algunas redirigir un dispositivo informático particular 2404 a un tico solicitado.
ático 2500 y un dispositivo informático móvil 2550 que sta descripción. El dispositivo informático 2500 pretende omo ordenadores portátiles, ordenadores de escritorio, ores, servidores blade, mainframes, y otros ordenadores presentar diversas formas de dispositivos móviles, tales teléfonos inteligentes, ordenadores de tabletas y otros dos aquí, sus conexiones y relaciones, y sus funciones,
una memoria 2504, un dispositivo de almacenamiento a la memoria 2504 y los puertos de expansión de alta se conecta a un puerto de expansión de baja velocidad los procesadores 2502, la memoria 2504, el dispositivo , los puertos de expansión de alta velocidad 2510 y la iante el uso de varios buses y pueden montarse en un l procesador 2502 puede procesar instrucciones para la s instrucciones almacenadas en la memoria 2504 o en el ión gráfica para una GUI en un dispositivo externo de rfaz de alta velocidad 2508. En otras implementaciones, egún corresponda, junto con múltiples memorias y tipos itivos informáticos, donde cada dispositivo proporciona un banco de servidores, un grupo de servidores blade o
ivo informático 2500. En algunas implementaciones, la En algunas implementaciones, la memoria 2504 es una 4 también puede ser otra forma de medio legible por
porcionar almacenamiento masivo para el dispositivo ivo de almacenamiento 2506 puede ser o contener un te, un dispositivo de disco duro, un dispositivo de disco positivo de memoria de estado sólido similar o una serie área de almacenamiento u otras configuraciones. Las ción. Las instrucciones, cuando son ejecutadas por uno ador 2502), realizan uno o más métodos, tales como los n almacenarse mediante uno o más dispositivos de o máquina (por ejemplo, la memoria 2504, el dispositivo 2).
La interfaz de alta velocidad 2508 gestiona operacione
informático 2500, mientras que la interfaz de baja veloci
de banda inferior. Tal asignación de funciones es solo d
velocidad 2508 se acopla a la memoria 2504, la pantal
acelerador), y a los puertos de expansión de alta velocida
mostradas). En la implementación, la interfaz de baja velo
y al puerto de expansión de baja velocidad 2514. El pu
varios puertos de comunicación (por ejemplo, USB, Blue
uno o más dispositivos de entrada/salida, tal como un te
de red tal como un interruptor o enrutador, por ejemplo,
El dispositivo informático 2500 puede implementarse en
ejemplo, puede implementarse como un servidor están
Además, puede implementarse en un ordenador personal
además, como parte de un sistema de servidor en basti
informático 2500 pueden combinarse con otros compo
dispositivo informático móvil 2550. Cada uno de tales disp
2500 y el dispositivo informático móvil 2550, y un si
informáticos que se comunican entre sí.
El dispositivo informático móvil 2550 incluye un procesad
tal como una pantalla 2554, una interfaz de comunicaci
dispositivo informático móvil 2550 puede proveerse, ad
microunidad u otro dispositivo, para proporcionar alm
memoria 2564, la pantalla 2554, la interfaz de comunica
uso de varios buses, y numerosos de los componente
maneras, según corresponda.
El procesador 2552 puede ejecutar instrucciones dentro
almacenadas en la memoria 2564. El procesador 2552 p
procesadores analógicos y digitales separados y múltipl
coordinación de los otros componentes del dispositivo i
usuario, aplicaciones ejecutadas por el dispositivo infor
dispositivo informático móvil 2550.
El procesador 2552 puede comunicarse con un usuario
visualización 2556 acoplada a la pantalla 2554. La panta
de cristal líquido con transistor de película delgada) o
tecnología de visualización apropiada. La interfaz de pant
que la pantalla 2554 presente información gráfica y de ot
comandos de un usuario y convertirlos para enviarlos al p
externa 2562 en comunicación con el procesador 2552,
2550 con otros dispositivos. La interfaz externa 2562 p
algunas implementaciones o comunicación inalámbric
múltiples interfaces.
La memoria 2564 almacena información dentro del di
implementarse como uno o más medio o medios legibles
una unidad o unidades de memoria no volátil. La memo
además, al dispositivo informático móvil 2550 a través
ejemplo, una interfaz de tarjeta SIMM (módulo de memori
proporcionar espacio de almacenamiento adicional par
además, aplicaciones u otra información para el disposit
expansión 2574 puede incluir instrucciones para llevar a
y puede incluir, además, información segura. Así, por ej
como un módulo de seguridad para el dispositivo informá
permitan el uso seguro del dispositivo informático móvil
a través de las tarjetas SIMM, junto con información adici
SIMM de manera no pirateable.
La memoria puede incluir, por ejemplo, memoria flash y/
como se analiza más abajo. En algunas implementac
información, y las instrucciones, cuando son ejecutadas
procesador 2552), realizan uno o más métodos, tales c
pueden almacenarse mediante uno o más dispositivos d
computadora o máquina (por ejemplo, la memoria 2564, l uso intensivo de ancho de banda para el dispositivo 2512 gestiona operaciones con uso intensivo de ancho mplo. En algunas implementaciones, la interfaz de alta 16 (por ejemplo, a través de un procesador gráfico o 10, que pueden aceptar varias tarjetas de expansión (no d 2512 se acopla al dispositivo de almacenamiento 2506 e expansión de baja velocidad 2514, que puede incluir ®, Ethernet o Ethernet inalámbrico) puede acoplarse a , un dispositivo señalador, un escáner o un dispositivo és de un adaptador de red.
s formas diferentes, como se muestra en la figura. Por 2520 o varias veces en un grupo de tales servidores. como un ordenador portátil 2522. Puede implementarse, 524. Alternativamente, los componentes del dispositivo s en un dispositivo móvil (no mostrado), tal como un os puede contener uno o más del dispositivo informático completo puede formarse por múltiples dispositivos
52, una memoria 2564, un dispositivo de entrada/salida 66 y un transceptor 2568, entre otros componentes. El , de un dispositivo de almacenamiento, tal como una miento adicional. Cada uno del procesador 2552, la 566 y el transceptor 2568 se interconectan mediante el eden montarse en una placa base común o de otras
ispositivo informático móvil 2550, incluidas instrucciones implementarse como un conjunto de chips que incluyen l procesador 2552 puede proporcionar, por ejemplo, la ático móvil 2550, tales como control de interfaces de o móvil 2550 y comunicación inalámbrica mediante el
avés de una interfaz de control 2558 y una interfaz de 554 puede ser, por ejemplo, una pantalla TFT (Pantalla pantalla OLED (Diodo emisor de luz orgánico), u otra 556 puede comprender circuitos apropiados para hacer o a un usuario. La interfaz de control 2558 puede recibir sador 2552. Además, puede proporcionarse una interfaz permitir la comunicación de área cercana del dispositivo proporcionar, por ejemplo, comunicación por cable en otras implementaciones, y pueden usarse, además,
itivo informático móvil 2550. La memoria 2564 puede ordenador, una unidad o unidades de memoria volátil o e expansión 2574 puede proporcionarse y conectarse, na interfaz de expansión 2572, que puede incluir, por línea individual). Tal memoria de expansión 2574 puede dispositivo informático móvil 2550 o puede almacenar, nformático móvil 2550. Específicamente, la memoria de o complementar los procesos descritos anteriormente, , la memoria de expansión 2574 puede proporcionarse móvil 2550, y puede programarse con instrucciones que . Además, pueden proporcionarse aplicaciones seguras como colocar información de identificación en la tarjeta
moria NVRAM (memoria de acceso aleatorio no volátil), , las instrucciones se almacenan en un portador de no o más dispositivos de procesamiento (por ejemplo, el los descritos anteriormente. Las instrucciones también acenamiento, tales como uno o más medios legibles por moria de expansión 2574 o la memoria en el procesador2552). En algunas implementaciones, las instrucciones
través del transceptor 2568 o la interfaz externa 2562.
El dispositivo informático móvil 2550 puede comunicarse
2566, que puede incluir circuitos de procesamiento d
comunicación 2566 puede proporcionar comunicaciones
GSM (Sistema global para comunicaciones móviles), SMS
mejorado) o mensajería MMS (Servicio de mensajería
TDMA (Acceso múltiple por división de tiempo),<p>D<c>(Cel
de código de banda ancha), CDMA2000 o GPRS (S
comunicación puede ocurrir, por ejemplo, a través del tr
Además, puede producirse una comunicación de corto al
transceptor tal (no mostrado). Además, un módulo recept
proporcionar datos inalámbricos adicionales relacionado
móvil 2550, que pueden usarse según corresponda por l
móvil 2550.
El dispositivo informático móvil 2550 puede comunicars
audio 2560, que puede recibir información hablada de u
usar. El códec de audio 2560 puede generar, igualmente,
altavoz, por ejemplo en un mango del dispositivo informá
telefónicas de voz, puede incluir sonido grabado (por ejem
incluir, además, sonido generado por aplicaciones que o
El dispositivo informático móvil 2550 puede implementars
Por ejemplo, puede implementarse como un teléfono cel
teléfono inteligente 2582, un asistente digital personal u
Pueden realizarse diversas implementaciones de los si
digitales, circuitos integrados, ASIC (circuitos integrado
hardware de ordenador, microprograma, software, y/o su
incluir la implementación en uno o más programas de ord
programable que incluye al menos un procesador progr
acoplado para recibir datos e instrucciones de, y p
almacenamiento, al menos un dispositivo de entrada, y al
Estos programas de ordenador (conocidos, además, co
incluyen instrucciones de máquina para un procesador
programación de alto nivel orientado a objetos y/o proc
usa en la presente, los términos medio legible por máq
producto, aparato y/o dispositivo de programa informátic
y dispositivos lógicos programables (PLD)) usados par
procesador programable, incluido un medio legible por
señal legible por la máquina. El término señal legible por
instrucciones de la máquina y/o datos a un procesador pr
Para proporcionar interacción con un usuario, los siste
ordenador que tenga un dispositivo de pantalla (por ejemp
de cristal líquido) para mostrar información al usuario y u
una bola de seguimiento) mediante el cual el usuario
además, otros tipos de dispositivos para proporcion
retroalimentación proporcionada al usuario puede ser c
retroalimentación visual, retroalimentación auditiva o retr
en cualquier forma, incluida la entrada acústica, hablada
Los sistemas y técnicas descritos aquí pueden implemen
de usuario final (por ejemplo, como un servidor de datos
ejemplo, un servidor de aplicaciones) o que incluye un
cliente que tiene una interfaz del usuario gráfica o un na
con una implementación de los sistemas y técnicas descr
usuario final, de software intermedio o de usuario inici
mediante cualquier forma o medio de comunicación de
ejemplos de redes de comunicación incluyen una red de á
El sistema informático puede incluir clientes y servidores.
sí y típicamente interactúan a través de una red de comu eden recibirse en una señal propagada, por ejemplo, a
forma inalámbrica a través de la interfaz de comunicación eñales digitales cuando sea necesario. La interfaz de o varios modos o protocolos, tales como llamadas de voz ervicio de mensajes cortos), EMS (Servicio de mensajería imedia), CDMA (Acceso múltiple por división de código), r Personal digital), WCDMA (Acceso múltiple por división icio general de radio por paquetes), entre otros. Tal ceptor 2568 mediante el uso de una frecuencia de radio. nce, tal como con el uso de un Bluetooth®, Wi-Fi™, u otro de GPS (Sistema de posicionamiento global) 2570 puede on la navegación y la ubicación al dispositivo informático aplicaciones que se ejecutan en el dispositivo informático
demás, de forma audible mediante el uso del códec de suario y convertirla en información digital que se puede sonido audible para un usuario, tal como a través de un móvil 2550. Tal sonido puede incluir sonido de llamadas , mensajes de voz, archivos de música, etcétera) y puede an en el dispositivo informático móvil 2550.
n varias formas diferentes, como se muestra en la figura.
2580. Puede implementarse, además, como parte de un dispositivo móvil similar.
mas y técnicas descritos aquí en circuitos electrónicos ara aplicaciones específicas) especialmente diseñados, ombinaciones. Estas diversas implementaciones pueden ador que son ejecutables y/o interpretables en un sistema able, que puede tener un propósito especial o general, transmitir datos e instrucciones para un sistema de enos un dispositivo de salida.
programas, software, aplicaciones de software o código) ogramable, y pueden implementarse en un lenguaje de ientos o en idioma de ensamblador/máquina. Como se a y medio legible por ordenador se refieren a cualquier or ejemplo, discos magnéticos, discos ópticos, memoria, roporcionar instrucciones y/o datos de la máquina a un quina que recibe instrucciones de la máquina como una uina se refiere a cualquier señal usada para proporcionar ramable.
y técnicas descritos aquí pueden implementarse en un un monitor CRT (tubo de rayos catódicos) o LCD (pantalla clado y un dispositivo señalador (por ejemplo, un ratón o de proporcionar entrada al ordenador. Pueden usarse, interacción con un usuario también; por ejemplo, la quier forma de retroalimentación sensorial (por ejemplo, imentación táctil); y la entrada del usuario puede recibirse ctil.
se en un sistema informático que incluye un componente que incluye un componente de software intermedio (por mponente de usuario inicial (por ejemplo, un ordenador ador web a través del cual un usuario puede interactuar s aquí) o cualquier combinación de tales componentes de Los componentes del sistema pueden interconectarse os digitales (por ejemplo, una red de comunicación). Los local (LAN), una red de área amplia (WAN), y la Internet.
n cliente y un servidor generalmente están remotos entre ación. La relación del cliente y el servidor surge en virtudde los programas informáticos que se ejecutan en los
servidor entre sí.
En ciertos casos, la presente descripción proporciona un
por computadora en el que se incrusta y/o se muestra un
En algunos casos, la presente descripción proporciona
cGAS, cuyo método que comprende las etapas de:
(i) usar un sistema proporcionado para evaluar
cGAS; y
(ii) realizar uno o más ensayosin vitro, in vivoo b
En algunos casos, el método comprende además la e
modulador de cGAS y un modulador, sustrato o producto
además la etapa de definir la forma tridimensional del inh
En algunos casos, la presente descripción proporciona un
para realizar un diseño o caracterización de un inhibidor
una unidad de pantalla, el conjunto de información compr
(i) lógica para introducir información relativa a la
une a la proteína cGAS;
(ii) lógica para diseñar un inhibidor de cGAS candi
sabe que se une a la proteína cGAS;
(iii) lógica para determinar una información relati
candidato; y
(iv) lógica para llegar a una conclusión con respe
cGAS candidato con base en la determinación de
En algunos casos, la presente descripción proporciona
contiene un conjunto de información para una computa
comprende una unidad de pantalla, el conjunto de inform
(i) lógica para introducir información relativa a la u
sabe que se une a la proteína cGAS;
(ii) lógica para diseñar un inhibidor de cGAS candi
química que se sabe que se une a la proteína cG
(iii) lógica para determinar una información relat
candidato; y
(iv) lógica para llegar a una conclusión con respe
cGAS candidato con base en la etapa de determin
En algunos casos, la presente descripción proporciona un
de internet entre ordenadores que comprenden un conj
tiene una interfaz del usuario que comprende una unidad
de almacenamiento legible por computadora que contien
general que tiene una interfaz del usuario que compr
comprende:
(i) lógica para introducir una información relativa a
se sabe que se une a la proteína cGAS;
(ii) lógica para diseñar un inhibidor de cGAS candi
química que se sabe que se une a la proteína cG
(iii) lógica para determinar una información relat
candidato; y
enadores respectivos y que tienen una relación cliente-
ema que comprende una computadora o un medio legible structura cristalina de cGAS o sus coordenadas. método para diseñar y/o caracterizar un modulador de
a o más características estructurales del modulador de
dos en células para caracterizar el modulador de cGAS. a de realizar un experimento de competencia entre el cGAS conocido. En algunos casos, el método comprende or.
tema informático que contiene un conjunto de información cGAS que tiene una interfaz del usuario que comprende de:
ión de una proteína cGAS a un resto que se sabe que se
to basado en la unión de la proteína cGAS al resto que se
a la unión de la proteína cGAS al inhibidor de cGAS
a las propiedades inhibidoras de cGAS del inhibidor de etapa (iii).
medio de almacenamiento legible por computadora que a de uso general que tiene una interfaz del usuario que ón comprende:
n de una proteína cGAS a una sustancia química que se
to basado en la unión de la proteína cGAS a la sustancia
a la unión de la proteína cGAS al inhibidor de cGAS
a las propiedades inhibidoras de cGAS del inhibidor de ión de la etapa (iii).
eñal electrónica u onda portadora que se propaga a través o de información para un ordenador de uso general que pantalla, el conjunto de información comprende un medio n conjunto de información para una computadora de uso e una unidad de pantalla, el conjunto de información
unión de una proteína cGAS a una sustancia química que
to basado en la unión de la proteína cGAS a la sustancia
a la unión de la proteína cGAS al inhibidor de cGAS(iv) lógica para llegar a una conclusión con resp
cGAS candidato con base en la determinación de
Ejemplos
Cualquiera de los compuestos que no estén dentro del
presente invención y, en cambio, es compuesto de refere
invención: c[G(2',5')pA(3',5')p]. Los siguientes compuest
cGAMP), c[G(2',5')pA(2',5')p] (2',5'-cGAMP), cAMP 3',5' y
Las siguientes coordenadas se han depositado en el Ban
familiarizado, y corresponden a las Tablas 1-7 a las que
Gao y otros Cell 153, 1094-1107 (2013), incluidos m
siguientes Figuras 1-4, 7 y S1-S4, los datos se presenta
Estados Unidos núm. 61/819,369, presentada el 3 de ma
Ta a las propiedades inhibidoras de cGAS del inhibidor de apa (iii).
nce de las reivindicaciones no son compuestos de la El siguiente compuesto es un compuesto de la presente on compuestos de referencia: c[G(3',5')pA(3',5')p](3',5'-ducto cíclico 5'-pG(anti)(2',5')A(anti).
datos de proteínas RCSB, con el que el experto estará ace referencia en la presente descripción. Ver también les complementarios. Además, en el contexto de las las Tablas 1-7 de la solicitud de patente provisional de e 2013.
1
Ejemplo 1
Estructuras cristalinas
Expresión y purificación de proteínas
El gen que codifica cGAS de ratón se adquirió de Open Bi
completa y los residuos 147-507 de cGAS se insertaron
cGAS se separó de la etiqueta His6-SUMO precedente m
(ULP1). Las secuencias genéticas se confirmaron subsec
se expresaron en la cepa de células RIL BL21 (DE3). La
aprox. 0,6. A continuación, se cambió la temperatura a 18
p-D-1-tiogalactopiranósido (IPTG) al medio de cultivo a u
las células se cultivaron durante la noche. La proteína de
etiqueta de His6-SUMO se eliminó mediante escisión de
HCl 40 mM, NaCl 0,3 M, DTT 1 mM, pH 7,5. Después de l
en una columna de heparina, seguido de filtración en gel
cGAS (completa) y cgAs (147-507) contenía aproximada
1 mM, pH 7,5. La proteína sustituida con Se-metionina se
se purificó mediante el uso del mismo protocolo usado
clonaron y purificaron mediante el uso del mismo protoco
Cristalización
Para la cristalización de cGAS (147-507) en estado libre,
y a continuación, se mezcló con una solución de depósit
al 20 %, pH 7,6) a 4 °C mediante el uso del método de di
Para el complejo binario cGAS (147-507)-ADNbc, la mu
ADN de 16 pb (saliente de 1 nt 5' en cada extremo: hebr TTTCGTCTTCGGCAATT-3') en una relación molar de
difusión de vapor en gota colgante a 20 °C, a partir de g
de solución de depósito (MES 0,1 M, MPD al 8 %, pH 6,
507) en complejo con ADNbc se cultivaron en las misma tems Inc. Las secuencias correspondientes a la longitud n vector pRSFDuet-1 modificado (Novagen), en el que te un sitio de escisión de proteasa similar a la ubiquitina mente mediante secuenciación. Las proteínas de fusión lulas se cultivaron a 37 °C hasta que la DO600 alcanzó las células se indujeron mediante la adición de isopropil oncentración final de 0,3 mM. Después de la inducción, n se purificó en una columna de afinidad de Ni-NTA. La durante la diálisis contra un tampón que contenía Trislisis, la muestra de proteína se fraccionó adicionalmente na columna Superdex G200 16/60. La muestra final de te 30 mg/ml de proteína, Tris 20 mM, NaCl 300 mM, DTT resó en medio M9 que contenía Se-metionina (Sigma) y a la proteína de tipo silvestre. Todos los mutantes se ado para la preparación de la proteína de tipo silvestre.
ero se diluyó la proteína en aproximadamente 15 mg/ml igual volumen (HEPES 0,1 M, MgAc<2>0,1 M, PEG3350 n de vapor en gota colgante.
se preparó al mezclar directamente la proteína con un perior 5'-AAATTGCCGAAGACGAA-3'; hebra inferior 5'-2. Los cristales se generaron mediante el método de mezcladas con 1 pl de solución de cGAS-ADNbc y 1 pl os cristales de cGAS sustituido con Se-metionina (147 diciones.
Los complejos ternarios cGAS (147-507)-ADNbc-ATP,
dGTP se prepararon al mezclar la proteína con ADNbc
presencia de ATP/GTP/3'-dGTP (5 mM) y MgCh (10 m
complejo cGAS (147-507)-ADNbc-ATP se generaron
20 °C, a partir de gotas mezcladas con 1 pl de solución
0,1 M), CaAc<2>0,2 M, PEG300 al 20 %, pH 7,7). Para lo
ADNbc-3'-dGTP, los cristales se generaron mediante e
mezclar una solución de depósito de igual volumen (para
0,1 M, MPD al 12 %, pH 5,2) con las muestras.
Los complejos ternarios cGAS (147-507)-ADNbc-GMP
mezclar la proteína con ADNbc en una relación molar
ATP (5 mM) y MgCl<2>(10 mM) durante 0,5 h a temperatu
ADNbc-GMP+ATP se generaron mediante el método de
mezcladas con una solución de cGAS-ADNbc-GMP+AT
MPD al 40 %, pH 6,0). Los cristales para el complejo
semanas mediante el método de difusión de vapor en g
igual volumen (HEPES 0,1 M, MgCl<2>0,2 M, PEG300 al
Determinación de la estructura
El cristal derivado de átomo pesado del estado libre
timerosal 5 mM durante 24 h. Los conjuntos de datos de
como derivado de Hg) y estado unido al ADN (tanto n
Nacional Brookhaven. Los conjuntos de datos para todo
Avanzada (APS) en el Laboratorio Nacional Argonne.
mediante el uso del programa HKL2000 (Otwinowski y
507) en estado libre y del cGAS sustituido con Se (147-método de dispersión anómala de longitud de onda ún
2010). La construcción del modelo se llevó a cabo med
refinamiento estructural se realizó mediante el uso del p
la recogida y el refinamiento de datos para estructuras
de todos los complejos ternarios se resolvieron media
(McCoy y otros, 2007) mediante el uso de la estructur
modelo se realizó mediante el uso del programa COOT
mediante el uso del programa PHENlX (Adams y otros,
datos se muestran en las Tablas S2 y S3.
T
Estadísticas de recogida y refinamiento de datos p
Cristal
Línea de haz
Longitud de onda
Grupo espacial
Celda unitaria
a, b, c (A)
a, P, Y (°)
Resolución (A)
Rmezcla
I/ a (I)
Completamiento (%)
Redundancia
Número de reflejos únicos
Rtrabajo/Rlibre (%)
Número de átomos distintos de H
Proteína/ADN
Agua
Ion
Factores B promedio (A2)
Proteína
ADN
Agua
Ion
Desviaciones r.m.s.
Longitudes de enlace (A)
Ángulos de enlace (°)
a La capa de mayor resolución (en A) se muestra (147-507)-ADNbc-GTP y cGAS (147-507)-ADNbc-3'-na relación molar 1:1,2 y a continuación, se incubó en ante 0,5 h a temperatura ambiente. Los cristales para el te el método de difusión de vapor en gota colgante a AS-ADNbc-ATP y 1 pl de solución de depósito (HEPES plejos cGAS (147-507)-ADNbc-GTP y cGAS (147-507)-odo de difusión de vapor en gota colgante a 20 °C, al : NaAc 0,1 M, MPD al 10 %, pH 5,0 para 3'-dGTP: NaAc
y cGAS (147-507)-ADNbc-GTP+ATP se prepararon al y a continuación, se incubaron con GMP/GTP (5 mM), biente. Los cristales para el complejo cGAS (147-507)-ión de vapor en gota colgante a 20 °C, a partir de gotas una solución de depósito de igual volumen (MES 0,1 M, (147-507)-ADN-GTP+ATP se generaron durante dos entada a 20 °C, al mezclar una solución de depósito de pH 7,5) con la muestra.
neró sumergiéndolo en una solución de depósito con cción para cGAS (147-507) en estado libre (tanto nativo como derivado de Se) se recopilaron en el Laboratorio omplejos ternarios se recopilaron en Fuente de Fotones atos de difracción se indexaron, integraron y escalaron 1997). La estructura del cGAS sustituido con Hg (147 en estado unido al ADN se resolvió mediante el uso del plementado en el programa PHENIX (Adams y otros, el uso del programa COOT (Emsley y otros, 2010) y el ma PHENlX (Adams y otros, 2010). Las estadísticas de as y libres se muestran en la Tabla S1. Las estructuras uso del método de reemplazo molecular en PHASER ria como el modelo de búsqueda. La construcción del ley y otros, 2010) y el refinamiento estructural se realizó ). Las estadísticas de la recogida y el refinamiento de
1
structuras de cGAS en estado libre y unido al ADN
AS cGAS ADN
LS-29X NSLS-29X
790 0,9790
1C2
,6, 84,1, 124,7 181,9, 93,8, 75,5
,0, 92,7, 90,0 90,0, 97,7, 90,0
-2,0 (2,07-2,00)a 50-2,1 (2,18-2,10)a
79 (0,493) 0,089 (0,511)
,7(3,6) 15,8(3,1)
,3 (98,6) 99,8 (100)
(7,7) 5,5 (5,3)
8611 74352
,5 / 20,8 20,2 / 22,6
957 7257
57 722
2
,01 40,90
68,30
,56 43,80
,80 56,96
10 0,003
07 0,947
paréntesis.
T
Recogida de datos y estadísticas de refinamient ____________________________________ GTP
Cristal cGAS ADN AT
Línea de haz APS-24ID-C
Longitud de onda 0,9823
Grupo espacial 1222
Celda unitaria
a, b, c (A) 86,2, 99,4, 131,5
a, P, Y (°)90,0, 90,0, 90,0
Resolución (A) 50-2,4 (2,54-2,41 )a
Rmezcla 0,079 (0,577)
I/ a (I) 14,2 (2,4)
Completamiento (%) 99,6 (97,8)
Redundancia 6,3 (6,3)
Número de reflejos únicos 22099
Rtrabajo/Rlibre (%) 19,3/23,6
Número de átomos
distintos de H
Proteína/ADN 3492
Agua 147
Ion 3
Otros ligandos 31
Factores B promedio (A2)
Proteína 51,83
ADN 83,79
Agua 44,70
Ion 35,56
Otros ligandos 58,44
Desviaciones r.m.s.
Longitudes de enlace (A) 0,007
Ángulos de enlace (°) 1,190
a La capa de mayor resolución (en A) se muestra
T
Recogida de datos y estadísticas de refinamiento _____________________________________ATP y
Cristal cGAS A _________________________________ pG(2',5')p
Línea de haz APS-24ID-Longitud de onda 0,9795
Grupo espacial 1222
Celda unitaria
a, b, c (A) 85,4, 98,0,
a, P, Y (°) 90,0, 90,0,
Resolución (A) 50-2,3 (2,3
Rmezcla 0,059 (0,3
I/ a (I) 31,5(4,8)
Completamiento (%) 98,3 (89,2)
Redundancia 12,1 (5,5)
Número de reflejos únicos 25590
Rtrabajo/Rlibre (%) 16,8/21,0
Número de átomos distintos de H
Proteína/ADN 3521
Agua 209
Ion 1
Otros ligandos 46
Factores B promedio (A2)
Proteína 43,30
ADN 74,18
Agua 43,86
Ion 30,20
Otros ligandos 54,77
Desviaciones r.m.s.
Longitudes de enlace (A) 0,005
2
complejos ternarios de cGAS y ADNbc con ATP, GTP____________________________________ AS ADN GTP cGAS ADN 3'-dGTP '-pppG(2',5')pG] [5'-pppdG(2',5')pdG] S-24ID-E APS-24ID-E
9792 0,9792
22 1222
,4, 97,9, 133,5 85,1, 97,6, 131,4
,0, 90,0, 90,0 90,0, 90,0, 90,0
-1,9 (2,04-1,94)a 50-2,0 (2,05-1,95)a 067 (0,643) 0,079 (0,700)
,5 (2,2) 17,5 (2,3)
,9 (93,5) 100 (100)
(5,6) 10,7 (10,7)
225 40199
,7/19,9 17,6/21,2
21 3521
3 318
3
53
,77 38,17
,04 64,83
,68 40,78
,95 35,32
,66 43,53
018 0,008
183 1,718
paréntesis.
3.
omplejos ternarios de cGAS y ADNbc con GMP ATP_____________________________________ MP ATP [5'- cGAS ADN GTP ATP ______________ c[G(2',5')pA(3',5')p1___________
APS-24ID-E
0,9792
1222
85,3, 98,3, 130,0
90,0, 90,0, 90,0
6)a 50-2,3 (2,38-2,26)
0,084 (0,904)
17,6(2,4)
100 (100)
9,7 (9,9)
25950
17,6/21,8
3518
189
1
45
48,35
71,50
43,94
25,89
89,75
0,010
Ángulos de enlace (°)______________ 1,433______
a La capa de mayor resolución (en A) se muestra en
Estructura de la GMP-AMP sintasa cíclica (cGAS)
Hemos resuelto la estructura cristalina de 2,0 A de cGAS
1A y S1B). La proteína adopta una estructura bilobal con t
Tabla S1) característica de los miembros de la superfamili
ILF2/NF45, que contiene un plegamiento de nucleotidiltra
que más se parece al plegamiento de cGAS, con una pun
libre de la oligoadenilato sintetasa humana 1 (OAS1) (PD
de 13,3 y un r.m.s.d de 4,1 A (comparación de cGAS y O
Estructura del complejo binario de cGAS con ADNbc unid
Hemos cocristalizado cGAS unido a un ADNbc compleme
y resolvimos la estructura del complejo binario con una re
La estructura del complejo binario se muestra en la Figu
complejo binario cGAS-ADNbc (resumidos en la Figura 1C
fosfato del ADN (Figura S2A, B), con solo un contacto esp
de cGAS en los estados libre (gris claro) y unido a ADNb
cambios conformacionales en la formación del complejo
segmento de lámina p que contiene residuos catalíticos G
de lazo y helicoidales dentro del bolsillo catalítico que c
lámina p se desplaza 5,1 A en la formación del compl
reconocimiento específico de bases en 9,2 A (Figura S2D),
de lazo en hasta 17,6 A (Figura S2E). Igualmente importa
para cGAS en estado libre (Figura 1G), mientras que es
binario con ADN (Figura 1H). El plegamiento de cGA
recientemente para OAS1 en el estado unido a ARNbc más
de proteínas en complejos en estéreo en la Figura S2
plegamientos de proteínas).
Estructura del complejo ternario de cGAS con ADNbc y A
Cocristalizamos cGAS unido a ADNbc y ATP y resolvimo
2,4 A. El ATP está unido a el bolsillo catalítico ubicada e
Existe una estrecha superposición del complejo binario de
unido como se muestra en la Figura 2B, con cambios conf
lámina p que transporta los residuos ácidos catalíticos (Fi
bolsillo catalítico (Figura 2D) en la formación de complejo
cadena lateral de Glu211 hacia los otros dos residuos áci
del ATP está unido por enlaces de hidrógeno a cadenas
dos cationes unidos (asignados provisionalmente a Mg2+)
y las cadenas laterales de los residuos ácidos catalíticos
de adenina del ATP unido se apila sobre Tyr421 en una di
en la otra dirección (Figura 2F).
Se debe señalar que observamos una densidad de elect
Figura 2G) que no se tiene en cuenta en este momento e
adicional podría ser moléculas de agua o una molécula d
se muestra una vista del ATP unido mirando hacia el bolsi
Estructura del complejo ternario de cGAS con ADNbc y 5'-
Cocristalizamos cGAS unido a ADNbc y GTP y resolvimo
1,9 A. La estructura del complejo ternario se muestra en
particular, se ha producido la formación de enlaces fosfodi
5'-pppGpG (que se muestra colocado en el bolsillo catalíti
3A). Es importante destacar que se produjeron cambios
complejo ternario con 5'-pppGpG unido (Figura S3A-C).
Sorprendentemente, el enlace GpG de 5'-pppGpG es 2',5'
adoptan además orientaciones de torsión glicosídicassin
5'-pppG(2',5')pG está coordinado con dos cationes (Figur
segundo G usa su borde Watson-Crick para formar enla _______________1,933________________________ paréntesis.__________________________________
onstructo 147-507) (Figura S1A) en estado libre (Figura logía mixta a/p (Figura 1A; estadísticas de rayos X en la de nucleotidiltransferasas. Una búsqueda DALl identificó ferasa (PDB: 4AT8) (Wolkowicz y Cook, 2012), como el ción Z de 15,1 y un r.m.s.d de 3,8 A. Además, el estado PX5) (Hartmann y otros 2003) exhibió una puntuación Z en estado libre en estéreo en la Figura S1C).
rio de 16 pb (más un saliente de 1 nt 5' en cada extremo) lución de 2,1 A (estadísticas de rayos X en la Tabla S1).
1B. La mayoría de los contactos intermoleculares en el encuentran entre cGAS y la cadena principal de azúcarfico de base (Figura S2B). Las estructuras superpuestas gris oscuro) se muestran en la Figura 1D. Hay grandes nario de ADNbc, como puede observarse dentro de un 11, Asp213 y Asp307 (Figura 1E), así como segmentos iene Ser199 (Figura 1F). Por lo tanto, un segmento de (Figura S2C), al igual que la Arg161 implicada en el igual que los residuos Tyr y Lys dentro de los segmentos , una entrada muy estrecha conduce al bolsillo catalítico entrada se ensanchó significativamente en el complejo en el estado unido a ADNbc es similar al informado -dATP (PDB: 4IG8) (Donovan y otros 2013) (comparación untuación Z de 18,2 y r.m.s.d de 3,2 A entre los dos
unido
estructura del complejo ternario con una resolución de l interior del cGAS en el complejo ternario (Figura 2A). AS y ADNbc con el complejo ternario que contiene ATP acionales esencialmente mínimos en el segmento de la ra 2C) o en el lazo y segmentos de hélice que forman el rnarios. El único cambio notable es el movimiento de la s en el complejo ternario (Figura 2C). El grupo trifosfato erales polares (Ser199, Ser420 y Lys402), mientras que en como puente para las interacciones entre el trifosfato lu211, Asp213 y Asp307) (Figura 2E). Además, el anillo ción y parcialmente sobre el grupo guanidinio de Arg364
es débil adicional (contornos de color gris oscuro en la a estructura de 2,4 A del complejo ternario. La densidad MP con una ocupación modesta (30 %). En la Figura 2H catalítico del complejo ternario.
pG(2',5')pG unido
a estructura del complejo ternario con una resolución de Figura 3A (estadísticas de rayos X en la Tabla S2). En er en el bolsillo catalítico, lo que produce el ligando unido en una representación de relleno de espacio en la Figura formacionales mínimos al pasar del complejo binario al
lugar del 3',5' previsto, y el primer y segundo residuos Gnti,respectivamente (Figura S3D). El grupo trifosfato de B), con el primer G apilado en Tyr421, mientras que el s de hidrógeno con cadenas laterales polares (Thr197,Ser366 y Ser368) y su borde Hoogsteen para formar un pppG(s/n)(2',5')pG(ant/) observada puede rastrearse c
observada para este intermediario de la reacción en la
Figura 3D, con dos vistas del mapa omit de Fo-Fc most
del 5'-pppG(2',5')pG unido mirando hacia el bolsillo catalí
de 5'-pppG(2',5')pG (gris) y ATP (gris oscuro) unidos e
observamos que la primera G del 5'-pppG(2',5')pG unid
cationes unidos han sido asignados provisionalmente a
octaédrica alrededor de cada catión (Figura S3H, I).
También cultivamos cristales del complejo ternario co
pppdG(2',5')pdG relacionado (no puede formar un enlac
de rayos X en la Tabla S2).
Estructura del complejo ternario de cGAS con ADNbc y
También cocristalizamos cGAS en presencia de ADNb
una resolución de 2,3 A (estadísticas estructurales en
atrapar el intermediario posterior a la formación del pri
lineal unido de5'-pG(s/n)(2',5')pA(ant/)(Figura 3F, G).
trifosfato en el producto. En particular, los intentos d
produjeron cristales que difractaban muy mal (resoluci
intermediarios 5'-pppG(s/n)(2',5')pG(ant/) (en gris oscuro
la Figura 3H.
Estructura del complejo ternario de cGAS con ADNbc y
Cocristalizamos cGAS con ADNbc, GTP y ATP y resolv
Estos cristales tardaron dos semanas en crecer, a di
crecieron en unos pocos días. La estructura del complej
en la Tabla S3). Lo más inesperado es que el pequeño
espacio en la Figura 4A es un dinucleótido cíclico. En p
del complejo binario al complejo ternario con el dinucleót
orientaciones idénticas (Figura S4A-C).
Es importante destacar que podemos rastrear la etapa
rastrearse el 3'-OH de G) y establecer que este enlace
en el dinucleótido cíclico unido podría ser 2',5' o 3',5' se
basándose únicamente en la estructura. Hemos llevad
según la evidencia que se describe más adelante y pre
la etapa GpA y un enlace 3',5' en la etapa ApG. Podem
grupo 2-amino de G, y observar que ambos ado {c[G(2',5')pA(3',5')p]} (Figura S4D). El residuo A del c[
mientras que el residuo G del c[G(2',5')pA(3',5')p] unido
cadenas laterales de Asp213, Asp307 y Arg364 (Figur
entre sí. La densidad de electrones 2Fo-Fc para el c[G(
omit se muestran en la Figura S4E. En la Figura 4E se
el bolsillo catalítico del complejo ternario, con el c[G(2',
observamos cationes unidos, dado que c[G(2',5')pA(
directamente con Asp213 y Asp307 (Figura 4C). Hemo
ATP en sus respectivos complejos ternarios con cGAS
coloca en el plano del ATP unido (Figura S4F).
En la Figura 4F se muestra una vista de c[G(2',5')pA(3'
3',5' en la etapa ApG. Observamos que en el complejo t
se apila en Tyr421 (Figura 3G y 4G), mientras que en el
A que se apila en Tyr421 (Figura 4C, H). Por lo tanto,
alineamientos dentro del bolsillo catalítico.
Ejemplo 2
Caracterización bioquímica de la actividad de cGAS
Para validar los resultados estructurales, establecimos
capa fina (Figura S5) y monitoreamos la formación de
mediante el uso de proteínas cGAS recombinantes pu e de hidrógeno con Arg364 (Figura 3C). La topología 5'-alto grado de confianza debido a la clara densidad tura de 1,9 A del complejo ternario (mapa 2Fo-Fc en la n la Figura S3E). En la Figura 3E se muestra una vista el complejo ternario. Hemos superpuesto las estructuras respectivos complejos ternarios con cGAS y ADNbc, y oloca en el plano del ATP unido (Figura S3F). Los dos asado en los mapas omit (Figura S3G) y la coordinación
GTP y observamos la formación del intermediario 5'-) en la estructura de 2,1 A de este complejo (estadísticas
(2',5')pA unido
P y ATP y resolvimos la estructura de un complejo con bla S3). Al usar GMP en lugar de GTP, esperábamos nlace fosfodiéster y, de hecho, observamos el producto e observaron cationes Mg2+ en ausencia de un resto ristalización de cGAS con ADNbc, GTP y AMP solo 12 A). Observamos una buena superposición de los pG(s/n)(2',5')pA(ant/)(en gris claro) como se muestra en
',5')pA(3',5')p] unido
la estructura del complejo con una resolución de 2,3 A. ia de otros cristales mencionados anteriormente, que ario se muestra en la Figura 4A (estadísticas de rayos X o unido mostrado en una representación de relleno de r, no se produjeron cambios conformacionales al pasar clico unido, e incluso la cadena lateral de Glu211 adoptó
en el dinucleótido cíclico unido sin ambigüedad (puede ' (Figura S4D). Por otro lado, el enlace en la etapa ApG densidad observada y no puede asignarse con certeza bo el refinamiento con un enlace 3',5' en la etapa ApG os los dibujos en la Figura 4 y S4 con un enlace 2',5' en tinguir G de A basado en la densidad observada para el alineamientosant/en el dinucleótido cíclico unido ')pA(3',5')p] unido se apila en Tyr421 (Figura 4B, C), nclado en su lugar mediante enlaces de hidrógeno a las ). Además, los residuos A y G se apilan parcialmente A(3',5')p] unido se muestra en la Figura 4D, y los mapas ra una vista del c[G(2',5')pA(3',5')p] unido mirando hacia ',5')p] unido hacia un extremo de la abertura. Tampoco ] no contiene trifosfatos, y la base G se coordina erpuesto las estructuras de c[G(2',5')pA(3',5')p] unido y Nbc, y observamos que la A de c[G (2',5')pA(3',5')p] se
destacando el enlace 2',5' en la etapa GpA y el enlace o con producto lineal 5'-pG(2',5')pA, es la base G la que ejo ternario con producto c[G(2',5')pA(3',5')p], es la base ucto lineal y el producto final cíclico adoptan diferentes
sayo de actividad mediante el uso de cromatografía de ótido cíclico c[G(2',5')pA(3',5')p] a partir de ATP y GTP as de longitud completa y truncadas. cGAS requirió lapresencia de ADNbc y Mg2+ o Mn2+ para la actividad (Fi
función de la longitud del ADNbc y encontramos que el
16 pb usado para la cristalografía provocó cierta activida
ADN o ARN monocatenario no estimularon la formació
c[G(2',5')pA(3',5')p] detectada para el ADNmc específi complementariedad de secuencia y a la sustitución de
su interacción prevista y eliminar la actividad residual
ADNbc no alteró la actividad de cGAS.
Cuantificamos la actividad de cGAS para producir c[G(
78 % (s.d. /- 2,6 %, n=5) del ATP y GTP originales prop
lo que condujo a una constante de velocidad observad
molécula de enzima.
Para determinar el orden de formación de intermediari
Ambos compuestos condujeron a la formación del pr
ppG(2',5')pA, y solo 5'-ppG(2',5')pA podría reaccionar m
La sustitución de ATP por ADP o AMP no produjo ning
GTP) condujo a la generación de niveles reducidos de c
Para determinar la participación de los grupos 2'
c[G(2',5')pA(3',5')p], probamos trifosfato de 2'- y 3'-des
sustratos para cGAS (Figura 5D y S6B). El 2'-dGTP no
lo que indica que se requería el 2'-OH de la guanosina
de la adenosina. Por el contrario, tanto 2'- como 3'-dAT
dinucleótidos cíclicos, aunque 2'-dATP GTP produjo
acumulación de intermediarios de reacción 5'-pppG(2',5'
rápido que todo el intermediario de ribosa (5'-pppG(2',5')
Ejemplo 3
Identificación de c[G(2',5)pA(3',5')p] como producto form
La síntesis y purificación de las tres moléculas isoméric
GpA y ApG) 6, c[G(2',5')pA(3',5')p] (2',5' en la etapa Gp
etapas GpA y ApG) 15 mostradas en la Figura S7
previamente informados por el laboratorio Jones (Gaffn
tres moléculas isoméricas de cGAMP 6, 11 y 15 (Fig
mediante el uso de conectividades de enlace directo. L
describen en la Figura S8, con los desplazamientos quím
de GMP enumeradas en la Tabla S4.
Analizamos el producto generado por la actividad de cG
líquida de alto rendimiento (HPLc ) de fase inversa
c[G(3',5')pA(3',5')p], c[G(2',5')pA(2',5')p] y c[G(2',5')pA(3
prominente eluyó consistentemente del sistema HPLC
elución de c[G(2',5')pA(3',5')p]. La coinyección con c[G(3
de reacción de cGAS no coeluye, a diferencia de la coin
Para demostrar que el dinucleótido cíclico prod cristalográficamente, analizamos mediante HPLC lo
conjuntamente con ADN, ATP y GTP (Figura 6B). Se o
de la molécula de referencia c[G(2',5')pA(2',5')p] coinye
no identificados de tiempos de retención más prolongad
se originan del tampón de cristalización y/o los aditivos
antes del análisis por HPLC.
Además, el c[G(2',5')pA(3',5')p] generado por cGAS s
unidimensional. Su espectro de RMN en la región H1
sintetizado químicamente y distinto de los c[G(2',5')pA(2'
6C). Por tanto, tanto la HPLC (Figura 6A) como la R
generado por cGAS es c[G(2',5')pA(3',5')p].
Ejemplo 4
Análisis funcional de proteínas mutantes cGAS
5A-B). Probamos la formación de c[G(2',5')pA(3',5')p] en c de 36 pb o más era óptimo, sin embargo, el ADNbc de gura S6A). El ARN bicatenario, un dúplex ADN/ARN o el dinucleótidos cíclicos (Figura 5B). La cantidad traza de ado en este experimento fue atribuible a un tramo de -oxoguanina (8-oxoG) fue suficiente para desestabilizar AS. La sustitución de guanina por 8-oxoG dentro del
A(3',5')p] en múltiples condiciones de rotación. Más del nados se convirtió en c[G(2',5')pA(3',5')p] en 40 minutos, imada de 0,19 mim1 e implica más de 750 cambios por
rimero sustituimos GTP por GMP o GDP (Figura 5C). o 5'-pG(2',5')pA respectivo y de los intermediarios 5'-a producir una cantidad reducida del dinucleótido cíclico. ormación de producto o intermediario, y solo ADP (con ,5')pA(3',5')p].
hidroxilo (OH) de GTP y ATP en la formación de nosina y trifosfato de 2' y 3' de desoxiadenosina como formar un dinucleótido cíclico, a diferencia del 3'-dGTP, la formación del enlace con el a-fosfato en la posición 5' dujeron a una formación notablemente reducida de GA-emente más producto. En ambos casos, observamos la (Figura 5D, carriles 2 y 3), que migraron ligeramente más arril 1).
por la actividad de cGAS dependiente de ADNbc
cGAMP, c[G(2',5')pA(2',5')p](enlaces 2',5' en las etapas 5' en la etapa ApG) 11, y c[G(3',5')pA(3',5')p](3',5' en las varon a cabo mediante el uso de los procedimientos otros 2010; Gaffney y Jones, 2012). La identidad de las ) se validó a partir de análisis de RMN heteronuclear tos de RMN experimentales para c[G(2',5')pA(3',5')p] se e protones y carbono para las tres moléculas isoméricas
ependiente de ADNbc mediante el uso de cromatografía mparamos su perfil de elución con los compuestos sintetizados químicamente (Figura 6A y S6D). Un pico amente a los 23,5 min, lo que correspondía al perfil de A(3',5')p] o c[G(2',5')pA(2',5')p] demostró que el producto ón con c[G(2',5')pA(3',5')p] sintetizado químicamente.
in vitrocoincidía con la molécula determinada tales de cGAS disueltos que se habían incubado un pico correspondiente a c[G(2',5')pA(3',5')p], distinto como antes. También se observaron picos adicionales resumiblemente, estos compuestos no identificados que e eliminaron por completo a pesar de lavar los cristales
ificó mediante HPLC y se sometió a análisis de RMN azúcar es idéntico al del c[G(2',5')pA(3',5')p] estándar y c[G(3',5')pA(3',5')p] sintetizados químicamente (Figura igura 6C) validan independientemente que el productoA continuación analizamos las consecuencias bioquímic
para formar c[G(2',5')pA(3',5')p]in vitroy estimular la vía
sustitución de alanina correspondientes a residuos de
estaban implicados en la unión del ADNbc o la activida
generamos y purificamos seis formas de cGAS mutantes
ADNbc y dos proteínas mutantes puntuales se sustituye
La incubación de ADN con proteínas cGAS mutantes con
todos los mutantes excepto dos (R161A, S199A, Figura
Para evaluar el impacto sobre la función de cGAS en las
para su expresión en células de mamíferos. Los mutante
de luciferasa IFN-p se expresaron transitoriamente en c
plásmidos de ADN cotransfectados, y la expresión de c
15 veces mayor en comparación con un plásmido de co
unión al ADN, incluido Arg161, responsable de la única in
para alterar la actividad de cGAS. Sin embargo, la a
consecutivos en cualquiera de las hebras de ADN (Figu
completamente anulada (Figura 7B). En el sitio catalítico,
la unión de cationes divalentes (Figura 2E, 3B) dieron
anulación de la actividad de cGAS requirió la mutación d
de ATP (o GTP) gamma fosfato (Lys402, Ser420; Figur
Figura<2>F) o (iii) el apilamiento de bases de ATP y c[G(2
mutantes únicos de estos residuos solo alteraron ligera
residuos altamente conservados que sufren cambios co
1F, 2D). Sin embargo, las mutaciones únicas G198A y
doble mutante de estas posiciones no fue funcional (
altamente móvil en prolina estéricamente restringida anu
Ejemplo 5
Estudios sobre transiciones conformacionales, formación
Transiciones conformacionales en cGAS en la formación
Nuestros estudios estructurales resaltan el hecho de que
al ADNbc (Figura 1D), de manera que reposiciona los res
Ser199 (Figura 1E, F), mientras que al mismo tiempo a
cGAS adopta una conformación catalíticamente compet
papel como sensor de ADNbc citosólico. Por el contrari
están restringidos a la cadena lateral de Glu211 cuando
ternario con ATP (Figura 2B-D) y GTP (donde el bolsillo c
S3A-C), sin que se observen cambios incluso para la ca
con ATP GTP (donde el bolsillo contiene el producto c[
Formación de enlaces fosfodiéster en el bolsillo catalítico
Tanto los experimentos estructurales como los funciona
bolsillo catalítico después de la unión del ADNbc al cG
estructurales sobre cGAS en presencia de ADNbc y GT
lineal 5'-pppG(2',5')pG (Figura 3B,C), mientras que en
producto de reacción lineal 5'-pG(2',5')pA. Si bien no des
que el primer intermediario está fuera de la vía y por lo
fosfodiéster para formar un producto cíclico, dado que la
OH) de la segunda G y el a-fosfato del resto trifosfato. Si
formación de c[G(2',5')pA(3',5')p] se produzca de mane
secuenciales para producir el producto dinucleótido cíclic
presencia de ADNbc, GTP y ATP dieron como resulta
acumulación de un intermediario y consistente con una re
fosfodiéster secuenciales.
Posicionamiento de residuos G y A de c[G(2',5)pA(3',5')p
Los residuos G y A de c[G(2',5')pA(3',5')p] adoptan posici
y ADNbc. El residuo A del c[G(2',5')pA(3',5')p] unido se
adenina en el complejo de ATP (Figura 2F) y la primer
pG(2',5')pA (Figura 3G). El residuo A de c[G(2',5')pA(3', uncionales de las mutaciones en cGAS en su capacidad interferón tipo I en las células. Generamos mutantes de oácidos que las estructuras cocristalinas revelaron que cGAS. Para los ensayos de actividad de cGASin vitrombinantes; se predijo que cuatro eliminarían la unión al or alanina en residuos catalíticos potencialmente clave. a poca o ninguna formación de c[G(2',5')pA(3',5')p] para
s, generamos mutantes de alanina adicionales de cGAS AS de longitud completa junto con STING y un indicador s HEK 293. En este ensayo, cGAS es activado por los WT dio como resultado una actividad de luciferasa casi (Figura 7B). Las mutaciones únicas de los residuos de ción directa con una base del ADN, no fueron suficientes n de las interacciones con dos o tres fosfodiésteres , S2B-C) dio como una función de cGAS disminuida o utantes únicos Glu211, Asp213 o Asp307 que afectaron resultado cGAS no funcional (Figura 7C). Además, la bos residuos de aminoácidos implicados en (i) la unión , 3B), (ii) la unión de ATP adenosina (Glu371, Lys424; A(3',5')p] (Arg364, Tyr 421; Figura 2F, 4B), mientras los la función de cGAS (Figura 7C). Gly198 y Ser199 son acionales significativos tras la unión del ligando (Figura A no afectaron gravemente la función de cGAS, pero el a S6E). De manera similar, la conversión del Gly198 actividad cGAS (Figura S6E).
nlaces e intermediarios.
omplejos
S sufre un cambio conformacional pronunciado al unirse s catalíticos Glu211, Asp213, Asp307, así como también acceso al bolsillo catalítico (Figura 1G, H). En esencia, sólo cuando interactúa con el ADNbc, lo que explica su lo se observan cambios conformacionales mínimos que asa del complejo binario de cGAS y ADNbc al complejo ne el intermediario 5'-pppG(2',5')G fuera de la vía; Figura lateral de Glu211 en la formación del complejo ternario ,5')pA(3',5')p]; Figura S4A-C).
stablecieron la formación de enlaces fosfodiéster en el n ausencia de componentes adicionales. Los estudios ntificaron la acumulación del intermediario de reacción encia de GMP y ATP identificaron la acumulación de os quedar ligados a ninguna teoría en particular, se cree o está impedido para la formación del segundo enlace era G essin,y la distancia es larga entre el 2'-OH (o 3'-bargo, estos resultados sugieren que es probable que la adual, implicando la formación de enlaces fosfodiéster or el contrario, los estudios estructurales sobre cGAS en a formación de c[G(2',5')pA(3',5')p] (Figura 4B, C), sin n en la vía que implica la formación de un par de enlaces
do
distintas en la estructura del complejo ternario con cGAS en Tyr421 (Figura 4B) y ocupa la posición del anillo de se en los complejos 5'-pppG(2',5')pG (Figura 3C) y 5'-unido no está implicado en ningún enlace de hidrógenointermolecular y, por lo tanto, podría ser reemplazado in
residuo G de c[G(2',5')pA(3',5')p] unido, que está parcia
de hidrógeno intermoleculares que implican sus bordes
ser reemplazados por ninguna de las otras tres bases
elementos de reconocimiento distintos que distinguen e
en una orientación única.
De acuerdo con los datos cristalográficos, los result
consistente con las elaboradas interacciones de aminoá
incubación de cGAS con GTP solo, así como también
dinucleótidos cíclicos (Figura S6C). Si bien el ATP por
incubación con UTP da como resultado alguna formaci
puede sustituir al GTP, aunque a una velocidad de reacci
que cGAS tiene requisitos más relajados para el segund
Comparación estructural del producto 5'-pG(2',5')pA line
Observamos una sorprendente diferencia en el alinepG(sin)(2',5')pA(anti)lineal fuera de la vía (Figura 3F,
En el primer caso, es la base G la que se apila sobre Ty
que se apila sobre Tyr421 (Figura 4C). Los dos alinea
se muestra en la Figura 4G y el c[G(2',5')pA(3',5')p] cíc
tener que reorganizar su orientación mediante un giro
ciclación. Esto puede no ser demasiado sorprendente
Asp213 y Asp307) y uno polar (Ser199) que recubren
catalíticos y, por lo tanto, después de la formación del pr
que realinearse para facilitar la formación del segundo e
Enlaces fosfodiéster
Una suposición clara en los estudios anteriores que con
mensajero generado por el sensor citoplasmático de AD
enlaces fosfodiéster eran de naturaleza 3',5'. Estos enl
segundo mensajero bacteriano c-di-GMP unido a ambo
otros 2012; Shu y otros 2012) y biointerruptores (Smith
espectroscópico de masas utilizado (Wu y otros 2013) n
enlaces fosfodiéster del GAMP cíclico.
El primer indicio de un enlace 2',5' surgió de la estructur
formado en el bolsillo catalítico exhibió un enlace 5'-ppp
la estructura de cGAS, ADNbc y GMP ATP (Figura 3F
para la etapa GpA del producto c[G(2',5')pA(3',5')p] uni
GTP ATP (Figura 4B, C).
Nuestros análisis bioquímicos iniciales indicaron que
ciclación de la adenosina a guanosina. Esta evidencia fu
de 2'-dATP con 2'-dGTP no pudo reaccionar para for
segundo etapa, la formación de un dinucleótido cíclico a
cuando la otra posición está bloqueada mediante la
observable por la utilización de 2'-dATP. La producción
lo que sugiere que ambas posiciones pueden participar
y ciclación eficientes de fosfato. Este resultado desconc
conexión de la adenosina a la guanosina, nos llevó a e
por generar un enlace 2',5' o 3',5' para la ciclación.
Observamos un único pico de HPLC, distinto de dos mol
enlaces 2',5' o ambos 3',5') y coincidente con c[G(2'
dependiente de ADNbc (Figura 6A). Esta conclusión fue
6C). Si bien la producción biológica de dinucleótidos c
hasta eucariotas, su formación basada en enlaces q
c[G(2',5')pA(3',5')p] parece similar a los oligoadenilato
dinucleótidos 3',5' creados por ciclasas bacterianas (Sa
2013).
Beneficios potenciales de los enlaces 2',5' (etapa GA) y por un residuo de pirimidina (C o U). Por el contrario, el te apilado sobre el residuo A, forma una red de enlaces atson-Crick y de Hoogsteen (Figura 4B, C) y no pueden A y U). Por lo tanto, el bolsillo de unión a cGAS tiene G y A y, por lo tanto, puede unirse a c[G(2',5')pA(3',5')p]
bioquímicos indican una fuerte preferencia por GTP, observadas en la estructura entre cGAS y esta base. La TP más CTP o UTP, puede conducir a la formación de olo no produce ningún producto cíclico o intermedio, la productos cíclicos, lo que sugiere que el UTP también ucho más reducida. En conjunto, estos hallazgos indican cleótido en comparación con la primera guanosina.
[G(2',5')pA(3',5')p] cíclico
nto dentro del bolsillo catalítico entre el producto 5'-l producto5'-pG(anti)(2',5')A(anti)cíclico (Figura 4B, C). (Figura 3G), mientras que en el segundo es la base A la s se comparan en estéreo donde el 5'-pG(2',5')pA lineal n la Figura 4H. Esto implica que el intermediario puede leto dentro del bolsillo catalítico antes de la reacción de ue, a juzgar por los tres aminoácidos básicos (Glu211, lsillo catalítico, solo hay un conjunto único de residuos enlace fosfodiéster, es posible que el intermediario tenga fosfodiéster para completar la ciclación.
on a la identificación del GAMP cíclico como un segundo GAS (Sun y otros 2013; Wu y otros 2013) fue que ambos 3',5' se han observado previamente en estructuras del ING (Yin y otros 2010; Ouygang y otros 2012; Huang y s 2009; Kulshina y otros 2009). Sin embargo, el enfoque de distinguir entre enlaces 3',5' y 2',5' para uno o ambos
cGAS, ADNbc y GTP, donde un producto fuera de la vía ')pG (Figura 3B, C). Además, se observó pG(2',5')pA en Más importante aún, también se observó un enlace 2',5' el bolsillo catalítico en la estructura de cGAS, ADNbc y
ace 2',5' entre GTP y ATP ocurre primero, antes de la ortada aún más por la observación de que la incubación ningún producto de reacción cíclico (Figura S6). En la s del OH 2' o 3' de la adenosina puede continuar incluso ación de oxígeno, aunque se observó una preferencia a de dinucleótidos en cualquier caso fue muy ineficiente, formación de un estado de transición para una hidrólisis te, combinado con datos estructurales ternarios sobre la nar más a fondo si cGAS tendría finalmente preferencia
s de referencia de dinucleótido GA cíclico (ya sea ambos (3',5')p], como el producto de la actividad de cGAS ada a partir de un estudio de RMN independiente (Figura s parece conservada evolutivamente desde procariotas os es distinta. En el caso de cGAS, la formación de ' generados por OAS pero también a los enlaces de y Williams, 2008; Kodym y otros 2009; Donovan y otros
(etapa AG) en c[G(2',5)pA(3',5')p]
No está claro por qué cGAS prefiere generar un GA-dinu
Un enlace fosfodiéster 2',5' es poco común y se conoce
y otros 2004). Sin desear estar ligado a ninguna teoría
estabilidad en las células para permitir la transducción
facilitar su descomposición por numerosas endonuclea
interferón. En conjunto, nuestros estudios estructural
cGAMP de metazoos, destacando el papel de los enla
interferón tipo I.
Implicaciones de los mutantes de unión al ADNbc de c
Los estudios estructurales han identificado contactos in
cGAS-ADNbc (Figura 1C). Dado que estos son p
reconocimiento no específico de la cadena principal fo
mutantes triples, donde los ensayosin vitro(Figura 7
actividad y capacidad para estimular la producción de in
mutante N196A, Y200A, K372A y el triple mutante R15
mutante S165A, N172A, Y200A. Esto refuerza la import
la actividad catalítica de cGAS.
Implicaciones de los mutantes de bolsillo catalíticos de
Los estudios estructurales de complejos ternarios de
Asp213, Asp307 como residuos catalíticos importantes
ácidos catalíticos están funcionalmente muertos al ser
ensayosin vitro(Figura 7A; Glu211A) o celulares (Figu
S199A conservó una actividad sustancial. Tyr421 partici
está unido por puentes de hidrógeno con G en el comp
Y421A, R364A da como resultado la pérdida de la may
Papel de los cationes divalentes
Los estudios estructurales de complejos ternarios de
restos trifosfato de ATP (Figura 2E, F) y 5'-pppG(2',5')
(asignados provisionalmente a Mg2+). De hecho, los est
divalentes para la formación de enlaces fosfodiéster. L
la formación de c[G(2',5')pA(3',5')p], mientras que el Mg
Comparación con el sensor citoplasmático de ARNbc O
En un estudio paralelo a nuestra contribución, se ha
bioquímicos sobre la caracterización del sensor de AR
ATP en oligoadenilato lineal unido en 2',5' (Donova
inequívocamente transiciones conformacionales en O
complejo ternario con ARNbc y 2'-dATP unidos (Donova
por nosotros en este estudio para la formación de compl
residuos catalíticos de Glu de OAS1 se acercan en la fo
de esta manera la geometría de coordinación para la
similar a lo que observamos para el sistema cGAS. D
(Hartmann y otros 2003) y su complejo ternario con AR
estaban en condiciones de determinar cómo se dividí
conversión de OAS1 libre al complejo binario con ARNb
presencia de 2'-dATP. Nuestros resultados en el se
conformacional principal probablemente estará restringi
libre al complejo de unión a ARNbc, con cambios mínim
Además de las similitudes mencionadas anteriormente, t
de proteínas y ácidos nucleicos entre el sensor de A
(Donovan y otros 2013), en el sentido de que cGAS se d
de un segmento central del dúplex de ADNbc (Figura
azúcar-fosfato del ARNbc al poner en contacto dos se
otros 2013). Los parámetros helicoidales de ARNbc y
reconocimiento en los complejos proteína-ARNbc (revi
Huffman y Brennan, 2002). Sin embargo, se utilizan prin
crítico, que a su vez combina el reconocimiento del ácid ido cíclico tanto 2',5' (etapa GpA) como 3',5' (etapa ApG). as nucleasas capaces de hidrolizar dicho enlace (Kubota articular, los enlaces 2',5' podrían promover una mayor tiva del segundo mensajero, pero el enlace 3',5' puede convencionales para evitar una prolongada respuesta al funcionales han identificado la naturaleza química del 2',5' en los segundos mensajeros que activan la vía del
leculares de proteína-ADN en la formación del complejo almente de naturaleza electrostática e implican un iéster del ADN, se han clasificado en tres conjuntos de elulares (Figura 7B) establecen la pérdida completa de rón para el triple mutante S165A, N172A, K372A, el triple 161A, K395A y pérdida parcial de actividad para el triple de la formación de complejos entre cGAS y ADNbc para
y ADNbc con NTP unidos han identificado a Glu211, la formación de enlaces fosfodiéster. Los tres residuos plazados por Ala, como se observa en cualquiera de los , los tres residuos catalíticos), mientras que la mutación interacciones de apilamiento con A, mientras que Arg364 ernario de cGAMP (Figura 4B, C). La mutación doble de rte de la actividad en los ensayos celulares (Figura 7C).
unido a ADNbc con ligandos han demostrado que los Figura 3B, C) están coordinados en un par de cationes funcionales han resaltado la importancia de los cationes sión de cationes divalentes o el uso de EDTA impidieron n2+ promovió la actividad de cGAS (Figura 5A).
rmado recientemente estudios estructurales y ensayos ligoadenilato sintetasa humano 1 (OAS1) que polimeriza tros 2013). Los estudios cristalográficos demostraron al pasar del estado libre (Hartmann y otros 2003) al tros 2013), que siguen un patrón similar a los observados de cGAS con ADNbc y ligandos unidos. Por lo tanto, tres ión del complejo ternario con ARNbc y 2'-dATP, creando de dos iones Mg2+ y 2'-dATP (Donovan y otros 2013), que las únicas estructuras disponibles eran OAS1 libre ligando unido (Donovan y otros 2013), estos autores no transición conformacional entre etapas que reflejan la a conversión del complejo binario al complejo ternario en de ADNbc citosólico cGAS sugieren que la transición ra la etapa que implica la conversión de OAS1 del estado l añadir 2'-dATP para formar el complejo ternario.
én existen diferencias en los principios de reconocimiento cGAS (nuestro estudio) y el sensor de ARNbc OAS 1 a la cadena principal de azúcar-fosfato del ADNbc dentro mientras que OAS1 se dirige a la cadena principal de tos de ranura menores separados por 30 A (Donovan y bc son muy distintos, y se usan diferentes principios de en Lunde y otros 2007) y proteína-ADNbc (revisado en s comunes para generar la arquitectura del sitio catalítico cleico (ARNbc o ADNbc en el citoplasma) con la cascadade eventos aguas abajo que conducen a un estado ant
activación de RNasa L (OAS1).
Además, la formación de iso-ARN unido en 2',5' li c[G(2',5')pA(3',5')p] que contiene un enlace 2',5' en la
anterior exclusivo en los enlaces 3',5' como se observó a
(revisado en Romling y otros 2013), destacamos que el
enlaces mixtos que implican 2',5' en la etapa GpA y 3',5'
cGAS contiene un único sitio activo para la formación gr
Estudios anteriores han establecido que la diguanilato
formar un centro de reacción en su interfaz, de modo q
vía para formar c-di-GMP (Chan y otros 2004). Por el co
de cGAS, ADNbc y ligandos unidos, no observamos evid
en el cristal. Además, el bolsillo de unión al ligando en nu
y no está ubicado en la superficie, como ocurre en PleD
De hecho, cGAS contiene un único sitio activo para las e
característica bastante notable dado que los ligandos s
2'-5' y el enlace ApG que se forma en segundo lu c[G(2',5')pA(3',5')p]. Sin desear quedar ligados a ninguna
de c[G(2',5')pA(3',5')p] a partir de GTP y ATP dentro del
7D. En este modelo, la primera etapa implica la formació
por la formación de c[G(2',5')pA(3',5')p]. Tenga en cuent
cambios en la vía hacia la formación de c[G(2',5')pA(3',5
Implicaciones para la dinucleótido ciclasa Dnc V
En un estudio anterior, se demostró que la dinucleótido
(Davies y otros 2012). Este primer informe sobre la f
naturaleza del par de enlaces fosfodiéster en este siste
Ejemplo 6
Análisis espectral de RMN de isómeros de enlace cGA
Los isómeros de enlace de cGAMP liofilizados se disolvi
(pH 6,6). Todos los experimentos de RMN se realizan a
de Biología Estructural de Nueva York. Las asignacion
reciclaje de 2 s, tiempo de adquisición de 1H de 0,8 s,
insensible a la fase y detección de 1H antifase con proce
cuanto (retardo de reciclaje de 2 s, tiempo de adquisició
y experimentos HSQC (retardo de reciclaje de 1 s, tiem
13C de 20 ms). Los espectros de protones 1D con pres
estándares de isómeros de enlace cGAMP sintetizad bioenzimáticamente.
Ejemplo 7
Análisis de cromatografía en capa fina (TLC)
Preparación de oligonucleótidos para ensayos de TLC
Los oligonucleótidos usados para ensayos bioquímicos
en la Tabla S6. Los oligodesoxinucleótidos se sintetizar
3400 (Applied Biosystems), los oligorribonucleótidos
ADN/ARN bicatenarios se hibridaron en Tris-HCl 70
equimolares mediante incubación iniciada a 95 °C segui
termociclador Peltier (MJ Research), y verificada para l
de su uso.
Análisis de TLC de la formación de c[G(2',5')pA(3',5')p]
Se incubaron cGAS murinos recombinantes purificados
aminoácidos 147-507), incluidas las versiones mutantes l que incluye la respuesta al interferón tipo I (cGAS) y la
l mediada por OAS1 es paralela a la formación de a GpA por cGAS. Por lo tanto, a diferencia del énfasis iormente para el segundo mensajero bacteriano c-di-GMP undo mensajero de metazoos c[G(2',5')pA(3',5')p] utiliza la etapa ApG.
al de enlaces fosfodiéster
asa PleD forma un homodímero de cabeza a cola para l intermediario no tiene que cambiar su orientación en la rio, en nuestros estudios actuales de complejos ternarios a de formación de dímeros u oligómeros de orden superior as estructuras está enterrado dentro de la topología cGAS an y otros 2004).
s secuenciales de formación del enlace fosfodiéster, una TP y ATP y que el enlace GpA que se forma primero es es 3',5', lo que da como resultado la generación de ría en particular, esbozamos un modelo para la formación co bolsillo catalítico de cGAS unido a ADNbc en la Figura un intermediario 5'-pppGpA seguido en la segunda etapa mbién que se cree que el ligando unido se somete a dos
asa bacteriana DncV genera GMP-AMP cíclico (cGAMP) ación de cGAMP plantea la interesante cuestión de la acteriano.
intetizados
en D<2>O al 99,9 % en tampón de K<2>HPO<4>-KH<2>PO<4>10 mm °C en un espectrómetro Bruker de 900 MHz en el Centro e resonancia se realizan basado en HMBC (retardo de po de adquisición de 13C de 20 ms, adquisición de 13C iento en modo de valor absoluto), COSY filtrado de doble irecta de 0,8 s, tiempo de adquisición indirecta de 12 ms) e adquisición de 1H de 48 ms, tiempo de adquisición de ación de agua se acumulan en 8 exploraciones para los y 128 exploraciones para la reacción cGAS producida
actividad de la nucleotidiltransferasa cGAS se enumeran internamente mediante el uso de un sintetizador de ADN compraron (Dharmacon). Los dúplex de ADN, ARN y pH 7,6, MgCh 10 mM, DTT 5 mM, en concentraciones de una disminución de 0,1 °C por segundo a 25 °C en un ridación mediante electroforesis en gel de agarosa antes
longitud completa (fl, aminoácidos 1-507) y truncados (tr, cadas 1-6, en reacciones de 20 pl que contenían: GASc1 |jM, ADNbc 3,3 j M, MgCb 5 mM, NaCI 150 mM, Trisde cada uno de los nucleótidos (típicamente ATP y G
durante 40 min. Las reacciones se detuvieron mediant
solución de reacción en placas de TLC de alto rendimie
1.05628.0001, EMD Millipore) y los productos se s
M:30 %:70 %], p:v:v) o 2 (NH4HCO3:C2HsOH:H2O [0,02
reacción se visualizaron mediante UV (254 nm) e imá
imágenes se procesaron mediante el uso de Adobe Ph
basaron en gran medida en un protocolo establecido pa
Ejemplo 8
Cuantificación de productos de reacción de cGAS.
El rendimiento de c[G(2',5')pA(3',5')p] generado se calcu
mediante el uso de FIJI (ImageJ 1.47i) o espectrofotom
de la purificación por HPLC. Para análisis de densitomet
a32P sobre la radiactividad total por carril (c[G(2',5')pA(3'
Ejemplo 9
Preparación de productos de reacción de cGAS para an
Los productos de reacción c[G(2',5')pA(3',5')p] genera
trataron con 25 unidades de Benzonasa (Novagen, cat.
por calor durante 10 min a 95 °C y a continuación, se ce
Thermo Scientific); el sobrenadante se usó para análisi
de todo el cGAMP 3',5' químicamente sintetizado, todo el
se sometieron a análisis de HPLC de fase inversa (AK
C18 (25 cm x 4,5 mm, poro 5 j M, Supelco Analytical).
usó un gradiente lineal de dos etapas de 0-10 % de s
(volumen de 2 columnas); solvente A (acetato de trietil (metanol:acetonitrilo:H<2>O [45 %:45 %:10:], v:v:v).
Preparación del producto de reacción de cGAS para an
Se trató con benzonasa y calor 100 jl del producto de
antes del fraccionamiento por HPLC. Se realizaron tres
de 20 jl), y el pico correspondiente a c[G(2',5')pA(3',5')
total). La eliminación del solvente se realizó mediante
temperatura ambiente hasta que se secó por completo.
Ejemplo 10
Ensayos celulares
Generación de mutantes puntuales de cGAS
El cGAS CDS murino se insertó en un vector de clon
mutagénesis dirigida a sitio se realizó mediante el uso d
uso de la ADN polimerasa Pfu Ultra Hot Start (Agilen
Alemania). El s T iNG CDS murino y la luciferasa Firef
expresión pLenti6 modificado con el promotor EF1 (Invi
obtuvo de Brian Monks (Institute of Innate Immunity, Univ
por secuenciación del CDS.
Ensayo de luciferasa
Se transfectaron de forma inversa por triplicado 3*10
IFNbeta-Gluc (50 ng), pLenti-EF1-Fluc (25 ng), pLenti-E
pMAX-cGAS WT o mutantes) o plásmido de control pM
Madison, WI). Después de 36 h, las células se lisaron
luciérnaga y gaussia se determinaron en un lector En
sustratos respectivos D-luciferina y coelenterazina (PJK
Gluc se normalizaron a los valores constitutivos de lu
relación con el plásmido de control pMAX-GFP.
mM, pH 7,5 a 25 °C, DTT 1 mM, glicerol al 10 %, 1 mM NTP o dNTP radiomarcados con a32P o y32P a 37 °C dición de 20 jl de EDTA 50 mM. Se colocaron 2 jl de el de sílice HPTLC, poros de 60 A, F<254>, 10*10 cm, cat # ron con el Solvente 1 (NH4HCÜ3:C2H5OH:H5O [0,2 0 %:70 %], p:v:v) a 25 °C durante 1 h. Los productos de de fósforo (Typhoon FLA 9500, GE Healthcare). Las p e Illustrator CS5. Las condiciones de TLC usadas se arar AMPc 3',5' (Higashida y otros, 2012).
diante análisis densitométrico de experimentos de TLC, ente (absorbancia a 260 nm, E260=25,4 * 103) después e calculó la fracción de c[G(2',5')pA(3',5')p] marcada con más ATP o GTP marcado con a32P restante).
de cromatografía líquida de alta resolución
v itroo los cristales de cGAS lavados y disueltos, se 46, Pureza > 90 %) durante 30 min a 37 °C, se inactivó ó a 21 000 g durante 15 min (Sorvall Legend Micro 21R, HPLC. Los productos de reacción, con o sin 3-8 nmoles MP 2',5' o c[G(2',5')pA(3',5')p] sintetizados químicamente rifier, GE Healthcare) mediante el uso de una columna nalitos se monitorearon mediante UV 260 y 280 nm. Se te B (volumen de 2 columnas), 10-50 % de solvente B o:acetonitrilo:H<2>O [0,1 M:3 %:97 %], p:v:v) y solvente B
de RMN 1D.
ción c[G(2',5')pA(3',5')p] generadoin v itrocomo antes, as de HPLC (dos inyecciones de reacción de 40 jl y una recogió en un tubo Falcon de 15 ml (aprox. 4,5 ml en ífuga al vacío (Vacufuge, Eppendorf) durante 3 días a
de pMAX modificado (Amaxa, Colonia, Alemania). La todo Quikchange (Agilent, Santa Clara, CA) mediante el la ADN polimerasa KOD Hot Start (Merck, Darmstadt, omega, Madison, WI) se clonaron en un plásmido de n, Carlsbad, CA). El informador pGL3 IFN-beta Gluc se of Bonn, Alemania). Todos los constructos se verificaron
las HEK293 por 96 pocillos con una mezcla de pGL3-STING (25 ng) y plásmido de expresión de cGAS (25 ng, P (Amaxa) mediante el uso de Trans-IT LT1 (MirusBio, mpón de lisis pasiva. Las actividades de luciferasa de (Perkin Elmer, Waltham, MA) mediante el uso de los H, Kleinblittersdorf, Alemania). Los valores de IFNbetaa de luciérnaga y se calculó la inducción de veces enEjemplo 11
Síntesis de dinucleótidos GA cíclicos
Preparación de todos los 2',5'-cGAMP (6, Figura S7), c[
Figura S7) se llevaron a cabo mediante el uso del pr
(Gaffney y otros 2010; Gaffney y Jones 2012). A fosfora
5 ml de CH<3>CN y agua (0,028 ml, 1,6 mmol, 2 equiv) s
equiv). Después de 1 min, se añadió 6 ml de terc-BuN
residuo disuelto en 10 ml de CH<2>Cl<2>se añadió H<2>O
dicloroacético al 6 % (DCA, 7,5 mmol) en CH<2>Cl<2>. Despu
de piridina (1,2 ml, 15 mmol, 2 equiv en relación con
disolvió en 7 ml de CH3CN y se concentró nuevamente.
Este proceso se repitió dos veces más, la última vez d
añadió una solución seca de amidita G, 3 o 12 (1,00
minutos, se añadió hidroperóxido de terc-butilo anhidro
min, se añadió 0,20 g de NaHSO3 disuelto en 0,5 ml d
concentró. El aceite residual se disolvió en 14 ml de C
equiv) y a continuación, 14 ml de DCA al 6 % (9,8 mmol
9 ml de piridina. La mezcla se concentró hasta un volum
se concentró nuevamente, dejando el dímero lineal, 4,
2-cloro-1,3,2-dioxafosfinano (DMOCP, 0,54 g de reacti
reacción se desactivó mediante la adición de H<2>O (0,50
inmediatamente I<2>(0,26 g, 1,0 mmol, 1,3 equiv). Despué
0,17 g de NaHSO3. Después de 5 min de agitación, se
más de agitación, la solución acuosa que contenía el sóli
separada, se repartió a continuación con 35 ml adiciona
Las capas orgánicas que contenían 5, 10 o 14 se com
aceite se disolvió en 5 ml de CH<3>CN y el grupo cianoetilo
10 min. El residuo se purificó en una columna de SiO<2>de
en CH<2>Cl<2>más de 50 min. 5 y 10 se purificaron directa
el residuo después de la purificación se trató con 21 ml
equiv en relación con los grupos protectores amino). De
hasta obtener un sólido, al que se le añadieron 3 ml de
un aceite y este proceso se repitió dos veces más par
añadió 1 ml de piridina y el matraz se colocó en un bañ
ml) y Et3N^3HF (2,6 ml, 48 mmol F-, 30 eq en relación co
retiró el matraz del baño de aceite y se añadió lentamen
Después de 10 minutos, el sólido se recogió mediante f
se secó en un desecador sobre KOH durante la noche.
columna Prep Nova-Pak C18 de 19*300 mm mediante
0,1 M.
La HPLC analítica de fase inversa se llevó a cabo en un
mediante el uso de una columna Atlantis C18, 100 A, 4
tampón acetato de trietilamonio 0,1 M (pH 6,8) con un r
adquirió de forma rutinaria mediante el uso de un siste
6, 11 y 15 mostró m/z (MH) 673 (calculado para C<20>H<23>
Ejemplo 12
Inducción dependiente de STING de interferón alfa muri
Condiciones de ensayo y cultivo de THP-1
Las células THP-1 se cultivaron en RPMI1640 con FBS
Life Technologies). Se sembraron en placas 8x104 célul
2 h a 37 °C/5 % de CO2. Para generar células similares
la noche con 10 ng/ml de PMA (Sigma), se cambió el m
de la estimulación.
Condiciones de cultivo y ensayo de BMDM
')pA(3',5')p](11, Figura S7) y todos los 3',5'-cGAMP (15, iento informado previamente por el laboratorio Jones de adenosina, 1 o 7, (0,784 g, 0,793 mmol) disuelta en dió trifluoroacetato de piridinio (0,184 g, 0,95 mmol, 1,2 spués de otros 10 minutos, la mezcla se concentró. Al ml, 7,9 mmol, 10 equiv), seguido de 10 ml de ácido 10 minutos, la reacción se desactivó mediante la adición A continuación, la mezcla se concentró y el residuo se
el A H-fosfonato, 2 u 8, en 2 ml. A esta solución se le 3 mmol, 1,3 equiv) en 3 ml de CH<3>CN. Después de 2 en decano (0,43 ml, 2,4 mmol, 3 equiv). Después de 30 . La mezcla se agitó por 5 minutos y a continuación se , seguido de la adición de H<2>O (0,15 ml, 8,5 mmol, 10 H<2>Cl<2>. Después de 10 min, la reacción se desactivó con queño, se añadieron 25 ml más de piridina y la solución , en 17 ml. A esta solución se añadió 5,5-dimetil-2-oxo-95 %, 2,8 mmol, 3,5 equiv). Después de 10 minutos, la 8 mmol, 10 equiv en relación con DMOCP) y se añadió min, la mezcla se vertió en 120 ml de H<2>O que contenía ió lentamente 3,4 g de NaHCO3. Después de 5 minutos repartió con 135 ml de EtOAc:Et<2>O 1:1. La capa acuosa EtOAc:Et<2>O 1:1.
on y concentraron hasta obtener un aceite. Para 14, el iminó mediante la adición de 5 ml de terc-BuNH<2>durante mediante el uso de un gradiente de 0 a 25 % de CH<3>OH en SiO<2>sin tratamiento con terc-BuNH<2>. En cada caso, H<3>NH<2>en EtOH anhidro (33 % en peso, 168 mmol, 212 de 4 h a temperatura ambiente, la mezcla se concentró a y 1 ml de Et3N. La mezcla se concentró hasta obtener vertir el terc-BuNH3+ a la sal de Et3NH+. Al aceite se le ceite a 55 °C. Se añadieron simultáneamente Et3N (7,5 a TBS). La mezcla se agitó a 55 °C. Después de 3 h, se tona de calidad para HPLC (70 ml) a la mezcla agitada. n, se lavó 5 veces con porciones de 3 ml de acetona y proceso dio 15 puro, pero 6 y 11 se purificaron en una o de un gradiente de 2 a 20 % de CH<3>CN en NH<4>HCO<3>
a Waters 2965 con un detector de matriz de fotodiodos, * 50 mm, 3,0 pm. Se usaron gradientes de CH<3>CN y n de flujo de 1,0 ml/min. ESI-MS de baja resolución se Z de cuadrupolo único de Waters Micromass. LCMS de P<2>': 673).
XCL10 humano por compuestos de cGAMP.
%, piruvato de sodio y penicilina/estreptomicina (Gibco, 96 pocillos en 100 pl de medio y se equilibraron durante crófagos, se diferenciaron 8x104 células THP-1 durante las células se incubaron durante 24 h adicionales antesSe purgaron células de macrófagos derivadas de la mé
eritrocitos (PharmLyse, BD Biosciences) y se incubaron
piruvato de sodio y penicilina/estreptomicina (Gibco, Lif
días. Las células se cosecharon con PBS EDTA 2 mM y
96 pocillos. Los BMDM se permeabilizaron con di
concentraciones de cGAMP indicadas durante 30 min
Los sobrenadantes se tomaron después de 18 h y las ci
Permeabilización/estimulación celular
La permeabilización celular para la administración de din
(Woodward y otros, 2010). Brevemente, se eliminó el s
Perm (HEPES 50 mM, pH 7,0, KCl 100 mM, MgCb 3 m
BSA 0,2 %) /- 10 pg/ml de digitonina y diluciones seria
minutos a 37 °C. A continuación, se eliminó el tampón
precalentado. La viabilidad de las células permeabiliza
monitoreó mediante microscopía óptica y Cell Titer Blue
Los sobrenadantes se recogieron 16 h después de la e
bioensayo de IFN-a/p HEK-Blue™, respectivamente.
ELISA
El CXCL-10 humano se determinó mediante ELISA
recomendaciones del fabricante. El Ifna murino se deter
monoclonal (clon RMMA-1) como anticuerpo de captura
de conejo contra Ifna para la detección (todos de p Bl In
anti-HRP de conejo (Bio-Rad).
Ajuste de curvas de respuesta a la dosis
Las curvas sigmoideas de respuesta a la dosis de 4 pa
Prism (Graph Pad Software, La Jolla CA, Estados Unido
Tabla S4. Desplazamientos químicos de protones y c sea (BMDM) de fémures de ratones C57BL/6. Se lisaron 7 células por placa de Petri en DMEM con FBS al 10 %, hnologies) con sobrenadante de L929 al 30 % durante 7 mbraron en placas a una densidad de 1x105 células por na o se trataron como control en presencia de las a continuación, se complementaron con medio nuevo. as se determinaron mediante ELISA.
tidos cíclicos se realizó como se describió anteriormente nadante y las células se cubrieron con 50 pl de tampón TP 1 mM, GTP 0,1 mM, DTT 0,1 mM, sacarosa 85 mM, e isómeros de cGAMP, seguido de una incubación de 30 anente y las células se cubrieron con 100 pl de medio e >50 % en comparación con las no tratadas, según se he).
lación y las citocinas se determinaron mediante ELISA y
Opteia human IP-10 ELISA-Set) de acuerdo con las mediante ELISA tipo sándwich: Se usó anti-Ifna de rata usó Ifna recombinante como estándar y suero policlonal on Source, Piscataway NJ, Estados Unidos), seguido de
tros y los valores de CE50 se analizaron con Graph Pad
o para cGAMP Lista de desplazamientos químicos de
Lista de desplazamientos uímicos de carbono
Los nucleótidos en negrita y subrayados representan
generados por separado. Los oligonucleótidos se sinteti
Biosystems) o se compraron (Dharmacon).
Referencias
Adams, P.D., Afonine, P.V., Bunkoczi, G., Chen, V.
G.J., Grosse-Kunstleve, R.W., y otros (2010). PHENI
structure solution. Acta Crystallogr. D Biol. Crystallog
Burckstummer, T., Baumann, C., Blumi, S., Dixit, E.,
J. , Bennet, K.L. y otros (2009). An orthogonal prot
sensor for the inflammasome. Nat. Immunol. 10, 266-Chan, C., Paul, R., Samoray, D., Amiot, N.C., Giese,
and allosteric control of diguanylate cyclase. Proc. N
Davies, B.W., Bogard, R.W., Young, T.S., y Mekalan
elements produces cyclic di-nucleotides for V. choler
Donovan, J., Dufner, M., y Korennykh, A. (2013). Str
by human oligoadenylate synthetase 1. Proc. Natl. A
Egli, M., Gessner, R.V., Williams, L.D., Quigley, G.J.
C.A. (1990). Atomic-resolution structure of the cellulo
Sci. USA 87, 3235-3239.
Emsley, P., Lohkamp, B., Scott, W.G., y Cowtan, K.
D Biol. Crystallogr. 66, 486-501.
Fernandes-Alnemri, T., Yu, J.W., Datta, P., Wu, J., y
cell death in response to cytoplasmic DNA. Nature 4
Gaffney, B.L., y Jones, R.A. (2012). One-flask synthe
Protocols in Nucleic Acid Chemistry 14, 14.18.11-14.
Gaffney, B.L., Veliath, E., Zhao, J., y Jones, R.A. (2 [Rp,Sp]thiophosphate analogues. Org Lett 12, 3269-Hartmann, R., Justesen, J., Sarkar, S.N., Sen, G.C.
double-stranded RNA-activated interferon-induced a
1173-1185.
Higashida, H., Hossain, K.Z., Takahagi, H., y Noda,
cyclic AMP on silica gel thin-layer chromatography. A
Hornung, V., Ablasser, A., Charrel-Dennis, M., Baue
K. A. (2009). AIM2 recognizes cytosolic dsDNA and
458, 514-518.
Hornung, V., y Latz, E. (2010). Intracellular DNA reco
Huang, Y.H., Liu, X.Y., Du, X.X., Jiang, Z.F., y Su, X.
cyclic di-GMP by STING. Nat Struct Mol Biol 19, 728-Huffman, J.L. y Brennan, R.G. (2002). Prokaryotic tra
12, 98-106.
Ishikawa, H., y Barber, G.N. (2008). STING is an e
signalling. Nature 455, 674-678.
Jin, L., Waterman, P.M., Jonscher, K.R., Short, C.
membrane tetraspanner, is associated with major his
apoptotic signals. Mol. Cell Biol. 28, 5014-5026.
oguanosinas que se utilizaron en oligos modificados internamente en el sintetizador de ADN 3400 (Applied
vis, I.W., Echols, N., Headd, J.J., Hung, L.W., Kapral, mprehensive Python-based system for macromolecular 213-221.
erger, G., Jahn, H., Planyavsky, M., Bilban, M., Colinge, -genomic screen identifies AIM2 as a cytoplasmic DNA
nal, U. y Schirmer, T. (2004). Structural basis of activity ad. Scis. USA. 101, 17084-17089.
J. (2012). Coordinated regulation of accessory genetic lence. Cell 149, 358-370.
l basis for cytosolic double-stranded RNA surveillance ci. USA 110, 1652-1657.
der Marel, G.A., van Boom, J.H., Rich, A., y Frederick, thase regulator cyclic diguanylic acid. Proc. Natl. Acad.
). Features and development of Coot. Acta Crystallogr.
ri, E.S. (2009). AIM2 activates the inflammasome and 9-513.
cyclic diguanosine monophosphate (c-di-GMP). Current
One-flask syntheses of c-di-GMP and the [Rp,Rp]and
e, V.C. (2003). Crystal structure of the 2'-specific and l protein 2'-5'-oligoadenylate synthetase. Mol. Cell 12,
002). Measurement of adenylyl cyclase by separating iochem. 308, 106-111.
d, F., Horvath, G., Caffrey, D.R., Latz, E., y Fitzgerald, a caspase-1-activating inflammasome with ASC. Nature
n. Nat. Rev. Immunol. 10, 123-130.
12). The structural basis for the sensing and binding of
tion regulators: more than just the helix-turn-helix motif.
asmic reticulum adaptor that facilitates innate immune
isdorph, N.A., y Cambier, J.C. (2008). MPYS, a novel patibility complex class II and mediates transduction ofJin, T., Perry, A., Jiang, J., Smith, P., Curry, J.A.,
Johnstone, R.W., y otros (2012). Structures of the HIN d
mechanisms of the AIM2 inflammasome and IFI16 rece
Keating, S.E., Baran, M., y Bowie, A.G. (2011). Cytosolic
Immunol. 32, 574-581.
Kerur, N., Veettil, M.V., Sharma-Walia, N., Bottero, V.,
acts as a nuclear pathogen sensor to induce the inf
herpesvirus infection. Cell Host Microbe 9, 363-375.
Kodym, R., Kodym, E., y Story, M.D. (2009). 2'-5'-Ol
sequence motif. Biochem. Biophys. Res. Commun. 388,
Krasteva, P.V., Giglio, K.M., y Sondermann, H. (2012)
signal through c-di-GMP. Protein Sci. 21, 929-948.
Kubota, K., Nakahara, K., Ohtsuka, T., Yoshida, S., Ka
Furukawa, H. y otros Identification of 2'-phophodiesteras
J. Biol. Chem, 279, 37832-37841.
Kulshina, N., Baird, N.J., y Ferre-D'Amare, A.R. (200
diguanylate by its cognate riboswitch. Nat. Struct. Mol.
Lee, E.R., Baker, J.L., Weinberg, Z., Sudarsan, N., y
triggered by a bacterial second messenger. Science 32
Lunde, B.M., Moore, C. y Varani, G. (2007). RNA-bindi
Mol Cell. Biol. 8, 479-490.
McCoy, A.J., Grosse-Kunstleve, R.W., Adams, P.D.,
crystallographic software. J. Appl. Crystallogr. 40, 658-6
O'Neill, L.A. (2013). Inmunology Sensing the dark side
Otwinowski, Z., y Minor, W. (1997). Processing of X-ray
Enzymology 276, 307-326.
Ouyang, S., Song, X., Wang, Y., Ru, H., Shaw, N., Jiang
Structural analysis of the STING adaptor protein reveals
binding. Immunity 36, 1073-1086.
Romling, U., Galperin, M.Y., y Gomelsky, M. (2013).
Second Messenger. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 77, 1-52.
Ross, P., Weinhouse, H., Aloni, Y., Michaeli, D., Weinb
der Marel, G.A., van Boom, J.H., y otros (1987). Regula
diguanylic acid. Nature 325, 279-281.
Sadler, A.J., y Williams, B.R. (2008). Interferon-inducibl
Schirmer, T., y Jenal, U. (2009). Structural and mec
Microbiol. 7, 724-735.
Shu, C., Yi, G., Watts, T., Kao, C.C., y Li, P. (2012).
mechanism of cyclic dinucleotide recognition by the im
Smith, K.D., Lipchock, S.V., Ames, T.D., Wang, J., Brea
binding by a c-di-GMP riboswitch. Nat. Struct. Mol. Biol.
Sudarsan, N., Lee, E.R., Weinberg, Z., Moy, R.H., Kim,
eubacteria sense the second messenger cyclic di-GMP.
Sun, L., Wu, J., Du, F., Chen, X., y Chen, Z.J. (2013).
activates the type I interferon pathway. Science 339, 78 rholzner, L., Jiang, Z., Horvath, G., Rathinam, V.A., in:DNA complexes reveal ligand binding and activation . Immunity 36, 561-571.
A sensors regulating type I interferon induction. Trends
agopan, S., Otageri, P., y Chandran, B. (2011). IFI16 masome in response to Kaposi Sarcoma-associated
denylate synthetase is activated by a specific RNA 7-322.
nsing the messenger: the diverse ways that bacteria
uchi, J., Fujita, Y., Ozeki, Y., Hara, A., Yoshimura, C., hich plays a role in 2-5A system reulated by interferon.
ecognition of the bacterial second messenger cyclic 16, 1212-1217.
aker, R.R. (2010). An allosteric self-splicing ribozyme 5-848.
roteins: modular design for efficient function. Nat. Rev.
n, M.D., Storoni, L.C., y Read, R.J. (2007). Phaser
NA. Science 339, 763-764.
raction Data Collected in Oscillation Mode. Methods in
Niu, F., Zhu, Y., Qiu, W., Parvatiyar, K., y otros (2012). ydrophobic dimer interface and mode of cyclic di-GMP
c di-GMP: the First 25 Years of a Universal Bacterial
r-Ohana, P., Mayer, R., Braun, S., de Vroom, E., van of cellulose synthesis in Acetobacter xylinum by cyclic
tiviral effectors. Nat. Rev. Immunol. 8, 559-568.
istic determinants of c-di-GMP signalling. Nat. Rev. ucture of STING bound to cyclic di-GMP reveals the system. Nat. Struct. Mol. Biol. 19, 722-724.
R.R., y Strobel, S.A. (2009). Structural basis of ligand 1218-1223.
., Link, K.H., y Breaker, R.R. (2008). Riboswitches in ence 321, 411-413.
lic GMP-AMP synthase is a cytosolic DNA sensor that 1.
Sun, W., Li, Y., Chen, L., Chen, H., You, F., Zhou, X
endoplasmic reticulum IFN stimulator, activates inna
Sci. USA 106, 8653-8658.
Takaoka, A., Wang, Z., Choi, M.K., Yanai, H., Negishi
otros (2007). DAI (DLM-1/ZBP1) is a cytosolic DNA
448, 501-505.
Unterholzner, L., Keating, S.E., Baran, M., Horan, K.
Xiao, T.S., y otros (2010). IFI16 is an innate immune
Wolkowicz, U.M., y Cook, A.G. (2012). NF45 dimeriz
a nucleotidyltransferase fold. Nucleic Acids Res. 40,
Woodward, J.J., Iavarone, A.T., y Portnoy, D.A. (2010
Activates a Host Type I Interferon Response. Science
Wu, J., Sun, L., Chen, X., Du, F., Shi, H., Chen, C., y
messenger in innate immune signaling by cytosolic D
Yang, P., An, H., Liu, X., Wen, M., Zheng, Y., Rui, Y.,
mediates the production of type I interferon via a beta
Yin, Q., Tian, Y., Kabaleeswaran, V., Jiang, X., Tu,
sensing via the innate immune signaling protein STIN
Zhang, Z., Yuan, B., Bao, M., Lu, N., Kim, T., y Liu,
mediated by the adaptor STING in dendritic cells. Nat
Zhong, B., Yang, Y., Li, S., Wang, Y.Y., Li, Y., Diao,
adaptor protein MITA links virus-sensing receptors to
Equivalentes y alcance
Los expertos en la técnica reconocerán o podrán dete
habitual, muchos equivalentes a las modalidades espe
descripción. El alcance de la presente invención no pret
en las reivindicaciones adjuntas.
En las reivindicaciones, artículos tal como "un", "un" y "el"
lo contrario o se desprenda de cualquier otra manera del
"o" entre uno o más miembros de un grupo se consider
grupo están presentes, se emplean o son relevantes de
a menos que se indique lo contrario o sea evidente de cu
modalidades en las que exactamente un miembro del gru
manera en un determinado producto o proceso. La inv
miembros del grupo están presentes, se emplean o s
producto o proceso.
También se observa que el término "que comprende" pr
elementos o etapas adicionales. Cuando el término "qu
"que consiste de" también queda abarcado y descrito.
Cuando se dan intervalos, se incluyen los valores extre
de otra forma o sea evidente de cualquier otra manera d
valores que se expresan como intervalos pueden asu
intervalos establecidos en diferentes modalidades de l
intervalo, a menos que el contexto indique claramente d
Además, debe entenderse que cualquier modalidad part
estado de la técnica puede quedar explícitamente exclui
que se considera que tales modalidades son conocidos
exclusión no se establece explícitamente en la pre
composiciones de la invención (porejemplo,cualquier á
método de producción; cualquier método de uso;etc.)p
motivo, esté o no relacionado con la existencia del estad hou, Y., Zhai, Z., Chen, D., y Jiang, Z. (2009). ERIS, an mune signaling through dimerization. Proc. Natl. Acad.
, Ban, T., Lu, Y., Miyagishi, M., Kodama, T., Honda, K., y sor and an activator of innate immune response. Nature
Jensen, S.B., Sharma, S., Sirois, C.M., Jin, T., Latz, E., or for intracellular DNA. Nat. Immunol. 11, 997-1004.
ith NF90, Zfr and SPNR via a conserved domain that has -9368.
di-AMP Secreted by Intracellular Listeria monocytogenes eva York, N.Y 328, 1703-1705.
, Z.J. (2013). Cyclic GMP-AMP is an endogenous second Science 339, 826-830.
ao, X. (2010). The cytosolic nucleic acid sensor LRRFIP1 enin-dependent pathway. Nat. Immunol. 11, 487-494.
Eck, M.J., Chen, Z.J., y Wu, H. (2012). Cyclic di-GMP ol. Cell 46, 735-745.
. (2011). The helicase DDX41 senses intracellular DNA munol. 12, 959-965.
Lei, C., He, X., Zhang, L., Tien, P., y otros (2008). The 3 transcription factor activation. Immunity 29, 538-550.
ar mediante el uso de no más que la experimentación as de acuerdo con la invención descrita en la presente e limitarse a la Descripción anterior, sino que se expone
den significar uno o más de uno, a menos que se indique texto. Las reivindicaciones o descripciones que incluyen atisfechos si uno, más de uno o todos los miembros del quier otra manera en un determinado producto o proceso ier otra manera a partir del contexto. La invención incluye stá presente, se emplea o es relevante de cualquier otra n incluye modalidades en que más de uno o todos los levantes de cualquier otra manera en un determinado
de ser abierto y permite pero no requiere la inclusión de mprende" se usa en la presente descripción, el término
Además, debe entenderse que a menos que se indique ntexto y la comprensión de un experto en la técnica, los cualquier valor específico o subintervalo dentro de los ención, a la décima de la unidad del límite inferior del alquier otra manera.
ar de la presente invención que se encuentre dentro del e una cualquiera o más de las reivindicaciones. Debido a un experto en la técnica, pueden excluirse incluso si la e descripción. Cualquier modalidad particular de las nucleico o proteína codificada de esta manera; cualquier e excluirse de una o más reivindicaciones, por cualquier la técnica.

Claims (1)

  1. En caso de declaraciones contradictorias de una fuente ci presente solicitud. Los títulos de las secciones y tablas no pretenden ser lim a y la presente solicitud, prevalecerá la declaración en la tes. REIVINDICACIONES Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula II:
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable, en donde: El Anillo A se selecciona del grupo que consiste en:
    El Anillo B se selecciona del grupo que consiste en:
    cada X1 y X2 es independientemente -CR- o -N-; X3 es -C(R)<2>-, -O- o -NR-; Xa y Xb son independientemente -C(R)<2>-, -C(R)=C(R)-, -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)<2>- o -N(R)-; Xa1 y Xb1 son independientemente -C(R)- o -N-; Xc y Xd, cuando están presentes, son independientemente oxígeno opcionalmente sustituido, azufre opcionalmente sustituido, un átomo de nitrógeno sustituido, BH<3>o alifático C<1-12>opcionalmente sustituido; cada Xe y Xf es independientemente -O-, -S- o -N(R)-; cada W es P; cada R1 y R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, -ORa, -SR, -N(R)<2>, y alifático C<1-12>opcionalmente sustituido o alcoxi C<1-4>-alquilo C<1-4>; cada R3, R4, R5, R6, R7, R10, y R11 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, -NO<2>, -CN, -OR, -SR, - N(R)<2>, -C(O)R, -CO<2>R, -C(O)C(O)R, -C(O)CH<2>C(O)R, -S(O)R, -S(O)<2>R, -C(O)N(R)2, -SO2N(R)2, -OC(O)R, -N(R)C(O)R, -N(R)N(R)2, - N(R)C(=NR)N(R)2, -C(=NR)N(R)2, -C=NOR, -N(R)C(O)N(R)<2>, -N(R)SO<2>N(R)<2>, - N(R)SO<2>R, -OC(O)N(R)<2>o un grupo opcionalmente sustituido seleccionado de alifático C<1-12>, fenilo, un anillo carbocíclico monocíclico saturado o parcialmente insaturado de 3-7 miembros, un anillo carbocíclico bicíclico saturado o parcialmente insaturado de 7-10 miembros, un anillo heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 3-7 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, un anillo heterocíclico bicíclico saturado 0 parcialmente insaturado de 7-10 miembros que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, y un anillo heteroarilo de 5-6 miembros que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre; Ra es un grupo protector de oxígeno o R, en donde el grupo protector de oxígeno se selecciona de metilo, metoxilmetilo (MOM), metiltiometilo (MTM), t-butiltiometilo, (fenildimetilsilil)metoximetilo (SMOM), benciloximetilo (BOM), p-metoxibenciloximetilo (PMBM), (4-metoxifenoxi)metilo (p-AOM), guaiacolmetilo (GUM), t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo (POM), siloximetilo, 2-metoxietoximetilo (MEM), 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)metilo, 2-(trimetilsilil)etoximetilo (SEMOR), tetrahidropiranilo (THP), 3-bromotetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, 1-metoxiciclohexilo, 4-metoxitetrahidropiranilo (MTHP), 4-metoxitetrahidrotiopiranilo, 4-metoxitetrahidrotiopiranilo S,S-dióxido, 1-[(2-cloro-4-metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-ilo (CTMP), 1,4-dioxan-2-ilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofuranilo, 2,3,3a,4,5,6,7,7aoctahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ilo, 1-etoxietilo, 1-(2-cloroetoxi)etilo, 1-metil-1-metoxietilo, 1 -metil-1 -benciloxietilo, 1 -metil-1 -benciloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)etilo, t-butilo, alilo, p--clorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, bencilo, p-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, o-nitrobencilo, p-nitrobencilo, p-halobencilo, 2,6-diclorobencilo, p-cianobencilo, pfenilbencilo, 2-picolilo, 4-picolilo, 3-metil-2-picolil N-óxido, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzhidrilo, 5-dibenzosuberilo, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di(p-metoxifenil)fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)metilo, 4-(4'-bromofenaciloxifenil)difenilmetilo, 4,4',4"-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)metilo, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil)metilo, 4,4',4"-tris(benzoiloxifenil)metilo, 3-(imidazol-1-il)bis(4',4"-dimetoxifenil)metilo, 1, 1 -bis(4-metoxifenil)-1 '-pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9-(9-fenil-10-oxo)antrilo, 1,3-benzoditiolan-2-ilo, bencisotiazolilo S,S-dióxido, trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), triisopropilsililo (TIPS), dimetilisopropilsililo (IPDMS), dietilisopropilsililo (DEIPS), dimetilthexilsililo, tbutildimetilsililo (TBDMS), t-butildifenilsililo (TBDPS), tribencilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo (DPMS), t-butilmetoxifenilsililo (TBMPS), formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, 3-fenilpropionato, 4-oxopentanoato (levulinato), 4,4-(etilenditio)pentanoato (levulinoilditioacetal), pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato (mesitoato), carbonato de alquilmetilo, carbonato de 9-fluorenilmetilo (Fmoc), carbonato de alquiletilo, carbonato de alquil 2,2,2-tricloroetilo (Troc), carbonato de 2-(trimetilsilil)etilo (TMSEC), carbonato de 2-(fenilsulfonil) etilo (Psec), carbonato de 2-(trifenilfosfonio) etilo (Peoc), carbonato de alquilisobutilo, carbonato de alquilvinilo, carbonato de alquilalilo, carbonato de alquil p-nitrofenilo, carbonato de alquilbencilo, carbonato de alquil pmetoxibencilo, carbonato de alquil 3,4-dimetoxibencilo, carbonato de alquil o-nitrobencilo, carbonato de alquil p--nitrobencilo, tiocarbonato de S-bencilo, carbonato de 4-etoxi-1-naftilo, ditiocarbonato de metilo, 2-yodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometil)benzoato, 2-formilbencenosulfonato, 2-(metiltiometoxi)etilo, 4-(metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1, 1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(1, 1 -dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato, isobutirato, monosuccinato, (E)-2-metil-2-butenoato, o-(metoxicarbonil)benzoato, a-naftoato, nitrato, N,N,N'N-tetrametilfosforodiamidato de alquilo, N-fenilcarbamato de alquilo, borato, dimetilfosfinotioilo, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquilo, sulfato, metanosulfonato (mesilato), bencilsulfonato o tosilato (Ts); R es hidrógeno; y en donde los sustituyentes monovalentes en un átomo de carbono sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" son independientemente halógeno; -(CH2)0-4R°; -(CH2)0-40R°; - O(CH2)0-4R°, -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4SR°; -(CH2)0-4Ph, que puede estar sustituido con R°; -(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph que puede estar sustituido con R°; -CH=CHPh, que puede estar sustituido con R°; -(CH2)0-4O(CH2)0-1-piridilo que puede estar sustituido con R°; -NO<2>; -CN; -N3; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH<2>)<0>-4N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)<ü>-4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3; - (CH2)0-4OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-4SR-, SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; - C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4S(O)2R°; -(CH2)ü-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°<2>; -P(O)<2>R°; -P(O)R°<2>; -OP(O)R°<2>; -OP(O)(OR°)<2>; SiR°3; -(alquileno C1-4 de cadena lineal o ramificada)O-N(R°)<2>; o -(alquileno C1-4 lineal o ramificado)C(O)O-N(R°)<2>, en donde cada R° puede sustituirse como se define más abajo y es independientemente hidrógeno, alifático C<1-6>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph, -CH<2>-(anillo heteroarilo de 5-6 miembros) o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, o, a pesar de la definición anterior, dos apariciones independientes de R°, tomados junto con su(s) átomo(s) intermedio(s), forman un anillo mono- o bicíclico saturado, parcialmente insaturado o arilo de 3-12 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, que puede sustituirse como se define más abajo; en donde los sustituyentes monovalentes en R° (o el anillo formado al tomar dos apariciones independientes de R° junto con sus átomos intermedios), son independientemente halógeno, -(CH<2>)<q><2>R ,^ -(haloR^), -(CH<2>)<0-2>OH, -(CH<2>)<0-2>OR^, -(CH<2>)<0-2>CH(OR^<2>; -O(haloR^), -CN, -N<3>, -(CH<2>)<0-2>C(O)R^, -(CH2)0-2C(O)OH, -(CH2)0-2C(O)OR^, -(CH2)0-2SR^, -(CH2)0-2SH, -(CH2)0-2NH2, -(CH2)0-2NHR^, -(CH2)0-<2>NR^<2>, -NO<2>, -SiR^i, -o S íR^b, -C(O)SR^, -(alquileno C<1-4>lineal o ramificado)C(O)OR^ o -SSR^ en donde cada R ^ no está sustituido o cuando esté precedido por "halo" está sustituido solamente con uno o más halógenos, y se selecciona independientemente de alifático C<1-4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0>-iPh o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente nitrógeno, oxígeno o azufre, en donde los sustituyentes divalentes en un átomo de carbono saturado de R° incluyen =0 y =S; en donde los sustituyentes divalentes en un átomo de carbono saturado de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen los siguientes: =O, =S, =NNR*<2>, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)<2>R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R*2))2-3O- o -S(C(R*2))2-3S-, en donde cada aparición independiente de R* se selecciona de hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse como se define más abajo o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre; en donde los sustituyentes divalentes que se unen a los carbonos sustituibles vecinales de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen: -O(CR*2)2-3O-, en donde cada aparición independiente de R* se selecciona de hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse como se define más abajo o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre; en donde los sustituyentes en el grupo alifático de R* incluyen halógeno, - R ,^ -(haloR^), -OH, -OR^, -O(haloR^), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, - NR^<2>o -NO<2>, en donde cada R ^no está sustituido o cuando está precedido por "halo" está sustituido solamente con uno o más halógenos, y es independientemente alifático C<1-4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre; en donde los sustituyentes en un nitrógeno sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -Rt -NR*2, -C(O)Rt -C(O)ORt -C(O)C(O)Rt -C(O)CH2C(O)Rt - S(O)2Rt -S(O)2NR^, -C(S)NRf2, -C(NH)NR<f 2>o -N(Rt )S(O)<2>Rt ; en donde cada Rt es independientemente hidrógeno, alifático C<1-6>que puede sustituirse como se define más abajo, -OPh no sustituido o un anillo, saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros no sustituido que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, o, a pesar de la definición anterior, dos o más apariciones independientes de R t, tomados juntos con su(s) átomo(s) intermedio(s) forman un anillo mono- o bicíclico saturado, parcialmente insaturado o arilo de 3-12 miembros no sustituido que tiene 0 4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre; en donde los sustituyentes en el grupo alifático de Rt son independientemente halógeno, - R ,^ -(haloR^), -OH, -OR^, -O(haloR^), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR^, -NH<2>, -NHR^, - NR^<2>o -NO<2>, en donde cada R ^ no está sustituido o cuando está precedido por "halo" está sustituido solamente con uno o más halógenos, y es independientemente alifático C<1-4>, -CH<2>Ph, -O(CH<2>)<0-1>Ph o un anillo saturado, parcialmente insaturado o arilo de 5-6 miembros que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde Xc y Xd son independientemente oxígeno, azufre o un átomo de nitrógeno sustituido. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde: (a) cada X1 es -N-, y/o (b) cada X2 es -N-, y/o (c) X3 es -NR-, y/o (d) Xa es -O-, y/o (e) Xb es -O-, y/o (f) Xc y Xd son ambos oxígeno. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde: (a) el Anillo A es
    y/o (b) el Anillo B es
    o (c) el Anillo B es
    La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde: (a) R1 es -OH, y/o (b) R2 es -OH, y/o (c) cada R3, R5, y R7 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno y alifático C<1-6>opcionalmente sustituido, opcionalmente en donde cada uno de R3, R5, y R7 es hidrógeno, y/o (d) cada uno de R4 y R6 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno y -N(R)<2>, opcionalmente en donde R4 y R6 son cada uno -NH<2>, y/o (e) R10 y R11 son hidrógeno. La composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde el compuesto es de (a) fórmula Il-a:
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o (b) de fórmula X, XI, XII, XIII, XIV, XV o XVI:
    o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. 7. La composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde Xc y Xd, son independientemente oxígeno o azufre, opcionalmente en donde Xc y Xd son ambos azufre. 8. La composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el Anillo B es
    9. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el compuesto es:
    10. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el compuesto es:
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Families Citing this family (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104507538B (zh) 2012-06-08 2018-04-06 艾杜罗生物科技公司 癌症免疫疗法的组合物和方法
PL2931738T3 (pl) 2012-12-13 2019-07-31 Aduro Biotech, Inc. Kompozycje zawierające cykliczne dinukleotydy purynowe o zdefiniowanej stereochemii i sposoby ich otrzymywania i zastosowania
PT2934598T (pt) * 2012-12-19 2018-07-24 Univ Texas Focalização farmacêutica de uma trajetória de sinalização de dinucleótido cíclico de mamífero
WO2014179335A1 (en) * 2013-04-29 2014-11-06 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Compositions and methods for altering second messenger signaling
WO2014179760A1 (en) * 2013-05-03 2014-11-06 The Regents Of The University Of California Cyclic di-nucleotide induction of type i interferon
US9549944B2 (en) 2013-05-18 2017-01-24 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”—dependent signalling
RS59500B1 (sr) * 2013-05-18 2019-12-31 Aduro Biotech Inc Sastavi i metode za aktiviranje signaliziranja koje je zavisno od „stimulatora gena za interferon“
EP3027227A4 (en) * 2013-07-31 2018-05-23 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Sting crystals and modulators
PE20170198A1 (es) 2014-06-04 2017-04-08 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Dinucleotidos ciclicos como moduladores de sting
US10010607B2 (en) 2014-09-16 2018-07-03 Institut Curie Method for preparing viral particles with cyclic dinucleotide and use of said particles for inducing immune response
CA2961894C (en) * 2014-09-19 2023-12-12 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods for treating brain metastatis using gap junction inhibitors
EP3546473B1 (en) * 2014-12-16 2025-12-10 Kayla Therapeutics Fluorinated cyclic [(2',5')p(3',5')p]-dinucleotides for cytokine induction
WO2016100261A2 (en) * 2014-12-17 2016-06-23 Lipogen Llc Method of treating cancer with cgamp or cgasmp
GB201501462D0 (en) * 2015-01-29 2015-03-18 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
HK1248603A1 (zh) * 2015-03-10 2018-10-19 Aduro Biotech, Inc. 用於活化"干扰素基因的刺激剂"依懒性信号传导的组合物和方法
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
CR20180101A (es) 2015-08-13 2018-04-12 Merck Sharp & Dohme Compuestos di-nucleóticos cíclicos como agonistas de sting
CA3002236A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene"-dependent signalling
TWI704154B (zh) 2015-12-03 2020-09-11 英商葛蘭素史克智慧財產發展有限公司 新穎化合物
WO2017123657A1 (en) * 2016-01-11 2017-07-20 Gary Glick Cyclic dinucleotides for treating conditions associated with sting activity such as cancer
RS67188B1 (sr) * 2016-01-11 2025-10-31 Innate Tumor Immunity Inc Ciklični dinukleotidi za lečenje stanja povezanih sa aktivnošću sting kao što je kancer
SG10201912074PA (en) 2016-03-18 2020-02-27 Immune Sensor Llc Cyclic di-nucleotide compounds and methods of use
DK3439667T3 (da) 2016-04-05 2024-04-02 Immune Sensor Llc Cgas antagonist forbindelser
WO2017186711A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 Invivogen Novel complexes of immunostimulatory compounds, and uses thereof
US10696985B1 (en) 2016-06-06 2020-06-30 Vanderbilt University Reversibly crosslinked endosomolytic polymer vesicles for cytosolic drug delivery
US20190161754A1 (en) * 2016-06-13 2019-05-30 The Regents Of The University Of California Fluorescent biosensor for 2', 3'-cgamp
WO2018009466A1 (en) * 2016-07-05 2018-01-11 Aduro Biotech, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
NL2017267B1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Aduro Biotech Holdings Europe B V Anti-pd-1 antibodies
NL2017270B1 (en) 2016-08-02 2018-02-09 Aduro Biotech Holdings Europe B V New anti-hCTLA-4 antibodies
FI3922279T3 (fi) 2016-08-30 2025-02-04 Dana Farber Cancer Inst Inc Lääkkeenantokoostumuksia ja niiden käyttötapoja
US20190345191A1 (en) * 2016-08-31 2019-11-14 Innate Tumor Immunity, Inc. Cyclic dinucleotide analogs for treating conditions associated with sting (stimulator of interferon genes) activity
EP3523314A1 (de) * 2016-10-07 2019-08-14 Biolog Life Science Institute Forschungslabor Und Biochemica-Vertrieb GmbH Benzimidazolhaltige cyclische dinukleotide, verfahren zu deren herstellung und ihre verwendung zur aktivierung von stimulator von interferongenen (sting)-abhängigen signalwegen
JOP20170188A1 (ar) * 2016-11-25 2019-01-30 Janssen Biotech Inc ثنائي النوكليوتيدات الحلقية كمنبهات ستينغ (sting)
JP2018090562A (ja) * 2016-12-01 2018-06-14 武田薬品工業株式会社 環状ジヌクレオチド
WO2018100558A2 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Cyclic dinucleotide
US11021511B2 (en) 2017-01-27 2021-06-01 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as sting agonists
US11492367B2 (en) 2017-01-27 2022-11-08 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as sting agonists
JP2020514321A (ja) 2017-02-01 2020-05-21 モデルナティーエックス， インコーポレイテッド 活性化がん遺伝子変異ペプチドをコードする免疫調節治療ｍＲＮＡ組成物
US20200055883A1 (en) * 2017-02-17 2020-02-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Cyclic di-nucleotides derivative for the treatment of cancer
CA3053568A1 (en) 2017-02-21 2018-08-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Cyclic dinucleotides as agonists of stimulator of interferon gene dependent signalling
CN118267470A (zh) 2017-04-13 2024-07-02 赛罗帕私人有限公司 抗SIRPα抗体
MX2019012295A (es) 2017-04-14 2020-02-07 Tollnine Inc Polinucleotidos inmunomoduladores, conjugados de anticuerpos de los mismos y metodos para su uso.
AR113224A1 (es) 2017-04-28 2020-02-19 Novartis Ag Conjugados de anticuerpo que comprenden un agonista de sting
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
US11312772B2 (en) 2017-08-04 2022-04-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Combinations of PD-1 antagonists and benzo [b] thiophene STING agonists for cancer treatment
WO2019043634A2 (en) 2017-08-30 2019-03-07 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. CYCLIC DI-NUCLEOTIDES AS STIMULATORS OF INTERFERON GENE MODULATORS
ES2904317T3 (es) * 2017-08-31 2022-04-04 Bristol Myers Squibb Co Dinucleótidos cíclicos como agentes anticancerosos
US11667663B2 (en) * 2017-08-31 2023-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US10947263B2 (en) * 2017-08-31 2021-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP7195317B2 (ja) 2017-11-10 2022-12-23 武田薬品工業株式会社 Ｓｔｉｎｇ調節剤化合物、ならびに製造及び使用する方法
EA038805B1 (ru) * 2017-11-21 2021-10-21 Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед Циклические динуклеотиды в качестве агонистов sting (стимулятор генов интерферона)
WO2019118839A1 (en) * 2017-12-15 2019-06-20 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as sting agonists
US10966999B2 (en) * 2017-12-20 2021-04-06 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
CN111511754B (zh) * 2017-12-20 2023-09-12 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 活化sting转接蛋白的具有膦酸酯键的2’3’环状二核苷酸
EP3727401A4 (en) 2017-12-20 2022-04-06 Merck Sharp & Dohme Corp. CYCLIC DI-NUCLEOTIDE COMPOUNDS AS STING AGONISTS
SG11202008636YA (en) 2018-03-23 2020-10-29 Codiak Biosciences Inc Extracellular vesicles comprising sting-agonist
US11702430B2 (en) 2018-04-03 2023-07-18 Merck Sharp & Dohme Llc Aza-benzothiophene compounds as STING agonists
TWI833744B (zh) * 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
US11541105B2 (en) 2018-06-01 2023-01-03 The Research Foundation For The State University Of New York Compositions and methods for disrupting biofilm formation and maintenance
WO2020006038A1 (en) * 2018-06-29 2020-01-02 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structure of the human cgas-dna complex and uses thereof
EP3820477A4 (en) 2018-07-10 2022-07-13 Sperovie Biosciences, Inc. COMPOUNDS, COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATMENT OF DISEASES
MX2020013322A (es) * 2018-08-16 2021-02-22 Eisai R&D Man Co Ltd Sales de compuestos y cristales de los mismos.
EP3841112A1 (en) 2018-08-24 2021-06-30 Codiak BioSciences, Inc. Extracellular vesicles targeting dendritic cells and uses thereof
KR102567590B1 (ko) 2018-09-06 2023-08-17 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 신규 고리형 디뉴클레오티드 유도체 및 그 항체 약물 콘쥬게이트
MX2021003295A (es) 2018-09-27 2021-07-16 Pf Medicament Enlazadores basados en sulfomaleimida y sus correspondientes conjugados.
US11110106B2 (en) 2018-10-29 2021-09-07 Venenum Biodesign, LLC Sting agonists for treating bladder cancer and solid tumors
AU2019371206A1 (en) 2018-10-29 2021-05-27 Venenum Biodesign, LLC Novel sting agonists
WO2020092633A1 (en) 2018-10-30 2020-05-07 Vanderbilt University Graft copolymers, methods of forming graft copolymers, and methods of use thereof
WO2020092617A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novartis Ag Dc-sign antibody conjugates comprising sting agonists
WO2020087126A1 (en) * 2018-11-02 2020-05-07 The Walter And Eliza Hall Institute Of Medical Research Methods of treatment, prevention and diagnosis
CN114080232A (zh) 2019-03-21 2022-02-22 科迪亚克生物科学公司 用于疫苗递送的细胞外囊泡
KR20210141554A (ko) 2019-03-21 2021-11-23 코디악 바이오사이언시즈, 인크. 세포외 소포 접합체 및 이의 용도
WO2020191369A1 (en) 2019-03-21 2020-09-24 Codiak Biosciences, Inc. Process for preparing extracellular vesicles
WO2020205323A1 (en) * 2019-03-29 2020-10-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Stable formulations of cyclic dinucleotide sting agonist compounds and methods of use thereof
JP7621974B2 (ja) 2019-05-09 2025-01-27 アリゴス セラピューティクス インコーポレイテッド Ｓｔｉｎｇモジュレータとしての修飾環状ジヌクレオシド化合物
US20220251200A1 (en) 2019-07-03 2022-08-11 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicles targeting t cells and uses thereof
KR20220061977A (ko) 2019-08-12 2022-05-13 퓨리노미아 바이오테크, 아이엔씨. Cd39 발현 세포의 adcc 표적화를 통해 t 세포 매개 면역 반응을 촉진 및 강화하기 위한 방법 및 조성물
US20220395465A1 (en) 2019-09-25 2022-12-15 Codiak Biosciences, Inc. Sting agonist comprising exosomes combined with il-12 displaying exosomes for treating a tumour
CA3152478A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle compositions
EP4034247A1 (en) 2019-09-25 2022-08-03 Codiak BioSciences, Inc. Sting agonist comprising exosomes for treating neuroimmunological disorders
US20230103726A1 (en) 2019-09-25 2023-04-06 Codiak Biosciences, Inc. Methods of producing extracellular vesicles
WO2021074695A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Avacta Life Sciences Limited PD-L1 INHIBITOR - TGFβ INHIBITOR BISPECIFIC DRUG MOIETIES.
US20230203532A1 (en) * 2019-11-28 2023-06-29 Mcmaster University Recombinant polypeptides for programming extracellular vesicles
BR112022017136A2 (pt) 2020-02-28 2022-10-11 Tallac Therapeutics Inc Conjugação mediada por transglutaminase
CA3168368A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Masayuki Ishizaki Antibody-drug conjugate including novel cyclic dinucleotide derivative
WO2021184017A1 (en) 2020-03-13 2021-09-16 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicles for treating neurological disorders
JP2023518414A (ja) 2020-03-20 2023-05-01 コディアック バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 治療のための細胞外小胞
CN111243668B (zh) * 2020-04-09 2020-08-07 腾讯科技（深圳）有限公司 分子结合位点检测方法、装置、电子设备及存储介质
WO2021216572A1 (en) 2020-04-20 2021-10-28 Massachusetts Institute Of Technology Lipid compositions for delivery of sting agonist compounds and uses thereof
JP2023533111A (ja) 2020-05-15 2023-08-02 イミューンセンサー セラピューティクス、インコーポレイテッド 免疫チェックポイント阻害剤とのｓｔｉｎｇアゴニスト併用治療
WO2021237100A1 (en) 2020-05-21 2021-11-25 Codiak Biosciences, Inc. Methods of targeting extracellular vesicles to lung
TW202227479A (zh) 2020-09-02 2022-07-16 日商第一三共股份有限公司 新穎內－β－Ｎ－乙醯葡萄糖胺苷酶
CA3191593A1 (en) 2020-09-08 2022-03-17 Jinming Gao Polyvalent sting activating compositions and uses thereof
US20230366794A1 (en) 2020-09-23 2023-11-16 Codiak Biosciences, Inc. Process for preparing extracellular vesicles
WO2022066883A1 (en) 2020-09-23 2022-03-31 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicles comprising kras antigens and uses thereof
WO2022066898A2 (en) 2020-09-23 2022-03-31 Codiak Biosciences, Inc. Methods of producing extracellular vesicles
US20240241020A1 (en) 2020-09-23 2024-07-18 Lonza Sales Ag Process for preparing extracellular vesicles
JP7397996B2 (ja) 2020-11-09 2023-12-13 武田薬品工業株式会社 抗体薬物コンジュゲート
TW202241516A (zh) 2020-12-17 2022-11-01 美商杜夫特學院信託管理公司 經fap活化之放射性治療診斷(radiotheranostics)，與其相關用途
US12404261B2 (en) * 2020-12-22 2025-09-02 Novartis Ag Compounds and compositions for treating conditions associated with cGAS
WO2022234003A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Avacta Life Sciences Limited Cd33 binding polypeptides with stefin a protein
CN113265435A (zh) * 2021-06-16 2021-08-17 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种细菌第二信使分子环二核苷酸的制备方法
AU2022315305A1 (en) 2021-07-23 2024-02-01 Immunesensor Therapeutics, Inc. Sting agonist combination treatments with cytokines
CN113569876A (zh) * 2021-08-31 2021-10-29 东软睿驰汽车技术（沈阳）有限公司 图像特征提取方法、装置和电子设备
WO2023056468A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Codiak Biosciences, Inc. Extracellular vesicle comprising cholesterol tagged sting-agonist
TW202334196A (zh) 2021-10-07 2023-09-01 英商阿法克塔生命科學有限公司 Pd-l1結合多肽
US20250207169A1 (en) 2022-03-02 2025-06-26 Daiichi Sankyo Company, Limited METHOD FOR PRODUCING Fc-CONTAINING MOLECULE
WO2023218243A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Avacta Life Sciences Limited Lag-3/pd-l1 binding fusion proteins
AU2023336004A1 (en) 2022-08-29 2025-03-06 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate including mutant fc region
GB202304385D0 (en) 2023-03-24 2023-05-10 Prostate Cancer Res Combinatorial IL-15 therapy
CN116253766B (zh) * 2023-03-27 2024-08-27 瑞阳（上海）新药研发有限公司 一种环二核苷酸2’,3’-cGAMP的制备方法
WO2026027944A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Sairopa B.V. Anti-sirp alpha antibody formulations and uses thereof

Family Cites Families (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
GB9110808D0 (en) 1991-05-17 1991-07-10 Retroscreen Ltd Aids vaccine and method for its production
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
GB2257704B (en) 1991-07-18 1995-03-01 Erba Carlo Spa Cyclic oligonucleotides phosphorothioates
US5904920A (en) 1991-10-04 1999-05-18 Whitehead Institute For Biomedical Research Regulation of systemic immune responses utilizing cytokines and antigens
US5637483A (en) 1991-10-04 1997-06-10 Whitehead Institute For Biomedical Research Irradiated tumor cell vaccine engineered to express GM-CSF
IT1262895B (it) 1992-03-02 1996-07-22 Proteina estratta da ceppi citotossici di helicobacter pylori, gene che la esprime, uso della proteina come vaccino o diagnostico.
US5635160A (en) * 1995-06-07 1997-06-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Dinucleotides useful for the treatment of cystic fibrosis and for hydrating mucus secretions
US6033674A (en) 1995-12-28 2000-03-07 Johns Hopkins University School Of Medicine Method of treating cancer with a tumor cell line having modified cytokine expression
US5912014A (en) 1996-03-15 1999-06-15 Unigene Laboratories, Inc. Oral salmon calcitonin pharmaceutical products
SI9720025A (sl) 1996-03-29 1999-08-31 Emishphere Technologies, Inc. Spojine in sestavki za prenos aktivne snovi
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US6277368B1 (en) 1996-07-25 2001-08-21 The Regents Of The University Of California Cancer immunotherapy using autologous tumor cells combined with cells expressing a membrane cytokine
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
US6183121B1 (en) 1997-08-14 2001-02-06 Vertex Pharmaceuticals Inc. Hepatitis C virus helicase crystals and coordinates that define helicase binding pockets
AU9063398A (en) 1997-09-12 1999-04-05 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
WO1999038954A1 (en) 1998-02-02 1999-08-05 Johns Hopkins University School Of Medicine A universal immunomodulatory cytokine-expressing bystander cell line and related compositions and methods of manufacture and use
DE60021354T2 (de) 1999-02-15 2006-04-27 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Polynukleotide mit gekürzter kette und verfahren zu ihrer herstellung
US6558670B1 (en) 1999-04-19 2003-05-06 Smithkline Beechman Biologicals S.A. Vaccine adjuvants
JP4638098B2 (ja) 1999-06-14 2011-02-23 キャンサー・リサーチ・テクノロジー・リミテッド 癌治療
JP2004521857A (ja) 2000-06-29 2004-07-22 エミスフェアー・テクノロジーズ・インク 活性剤の送達のための化合物及び組成物
JP2004511527A (ja) 2000-10-18 2004-04-15 グラクソスミスクライン　バイオロジカルズ　ソシエテ　アノニム ワクチン
US6673574B2 (en) 2000-11-30 2004-01-06 Unigene Laboratories Inc. Oral delivery of peptides using enzyme-cleavable membrane translocators
WO2002059575A2 (en) 2001-01-23 2002-08-01 The Trustees Of Princeton University, Princeton University Method and apparatus for analysis of biological solutions
US7259150B2 (en) 2001-08-07 2007-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of apolipoprotein (a) expression
BRPI0105509B8 (pt) 2001-11-05 2021-05-25 Univ Minas Gerais formulações do peptídeo angiotensina-(1-7) usando as ciclodextrinas, lipossomas e o polímero plga
TW200303759A (en) 2001-11-27 2003-09-16 Schering Corp Methods for treating cancer
WO2004007718A2 (en) 2002-07-10 2004-01-22 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Rna-interference by single-stranded rna molecules
AR040996A1 (es) 2002-08-19 2005-04-27 Coley Pharm Group Inc Acidos nucleicos inmunoestimuladores
US8017762B2 (en) 2003-04-17 2011-09-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified iRNA agents
AU2004275696B2 (en) 2003-07-28 2010-02-18 Karagen Pharmaceuticals, Inc. Method for attenuating virulence of microbial pathogens and for inhibiting microbial biofilm formation
JP2007533647A (ja) 2003-10-24 2007-11-22 アルザ・コーポレーシヨン 脂質粒子の調製
US7592326B2 (en) 2004-03-15 2009-09-22 Karaolis David K R Method for stimulating the immune, inflammatory or neuroprotective response
EP1729781B1 (en) 2004-03-15 2012-10-24 Karaolis, David K. R. A method for inhibiting cancer cell proliferation or increasing cancer cell apoptosis
US8088902B2 (en) 2004-04-05 2012-01-03 The Rockefeller University DNA virus microRNA and methods for inhibiting same
US7365058B2 (en) 2004-04-13 2008-04-29 The Rockefeller University MicroRNA and methods for inhibiting same
EP2399924B1 (en) 2004-05-27 2015-01-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Nuclease resistant double-stranded ribonucleic acid
AU2005328382C1 (en) 2004-07-21 2013-01-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides comprising a modified or non-natural nucleobase
EP1791567B1 (en) 2004-08-10 2015-07-29 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Chemically modified oligonucleotides
CA2607579A1 (en) 2005-05-06 2006-11-23 The Regents Of The University Of California Microfluidic system for identifying or sizing individual particles passing through a channel
WO2007016539A2 (en) 2005-07-29 2007-02-08 Children's Hospital Medical Center Gtpase inhibitors and methods of use and crystal structure of rac-1 gtpase
US20070059683A1 (en) 2005-09-15 2007-03-15 Tom Barber Veterinary diagnostic system
EP1782826A1 (en) 2005-11-08 2007-05-09 GBF Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH PQS and c-diGMP and its conjugates as adjuvants and their uses in pharmaceutical compositions
EP1971371B1 (en) 2005-12-01 2015-08-05 Pronai Therapeutics, Inc. Cancer therapies and pharmaceutical compositions used therein
WO2007131286A1 (en) 2006-05-16 2007-11-22 Apollo Life Sciences Limited Nanostructures suitable for delivery of agents
EP2049665A2 (en) 2006-07-28 2009-04-22 Applera Corporation Dinucleotide mrna cap analogs
AU2007292302A1 (en) 2006-09-05 2008-03-13 Bipar Sciences, Inc. Methods for designing PARP inhibitors and uses thereof
WO2008052295A1 (en) 2006-10-30 2008-05-08 Universidade Federal De Minas Gerais Process for the preparation of compounds of at1 receptor antagonists with angiotensin-(1-7), analogues thereof and/or mixtures of these systems, pharmaceutical compositions thereof and use of their derivative products
WO2008089532A1 (en) 2007-01-26 2008-07-31 Universidade Federal De Minas Gerais - Ufmg Pharmaceutical compositions and methods for treating erectile dysfunction
WO2009133560A1 (en) 2008-04-29 2009-11-05 Smart Assays Non-hydrolyzable and permeable cyclic bis-[nucleotide monophosphate] derivatives and uses thereof
EP2324044A4 (en) 2008-08-04 2012-04-25 Univ Miami STING (STIMULATOR OF INTERFERON GENES) AS A REGULATOR OF BORROWING IMMUNE REACTIONS
US8840881B2 (en) 2008-08-28 2014-09-23 Aduro Gvax Inc. Methods and compositions for treating prostate cancer or inducing a humoral immune response against prostate cancer
HUE027823T2 (hu) 2008-12-09 2016-11-28 Coley Pharm Group Inc Immunstimuláló oligonukleotidok
WO2010104883A1 (en) 2009-03-09 2010-09-16 Molecular Express, Inc. Methods and compositions for liposomal formulation of antigens and uses thereof
CN102481312B (zh) 2009-06-05 2015-07-15 传染性疾病研究院 合成的吡喃葡萄糖脂佐剂
US20120178710A1 (en) 2009-07-01 2012-07-12 Rutgers, The State University Of New Jersey Synthesis of cyclic diguanosine monophosphate and thiophosphate analogs thereof
US8771933B2 (en) 2009-10-06 2014-07-08 Massachusetts Institute Of Technology Continuous-flow deformability-based cell separation
WO2011069529A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids
US20110293558A1 (en) 2010-03-22 2011-12-01 Massachusetts Institute Of Technology Material properties of t cells and related methods and compositions
CN102199183B (zh) * 2010-03-26 2013-12-18 北京大学 环二鸟苷酸及其类似物和制备方法
BR112012027745A2 (pt) 2010-04-27 2017-01-10 Univ Johns Hopkins método e composição imunogênica para tratamento de neoplásia
US8450293B2 (en) * 2010-08-10 2013-05-28 Rutgers, The State University Of New Jersey Synthesis and characterization of C8 analogs of c-di-GMP
US9061048B2 (en) 2010-12-15 2015-06-23 The Regents Of The University Of California Cyclic di-AMP induction of type I interferon
AU2011349278C1 (en) 2010-12-22 2017-01-19 Alios Biopharma, Inc. Cyclic nucleotide analogs
AU2012243396A1 (en) 2011-04-15 2013-10-31 The University Of British Columbia Method and apparatus for separation of particles
WO2013086331A1 (en) 2011-12-07 2013-06-13 President And Fellows Of Harvard College High efficiency di-nucleotide cyclase
JP2015516989A (ja) 2012-04-30 2015-06-18 バーバー, グレン, エヌ.BARBER, Glen, N. 免疫反応の変調
CN104507538B (zh) 2012-06-08 2018-04-06 艾杜罗生物科技公司 癌症免疫疗法的组合物和方法
US9090646B2 (en) 2012-12-05 2015-07-28 Rutgers, The State University Of New Jersey Biotinylated compounds
PL2931738T3 (pl) 2012-12-13 2019-07-31 Aduro Biotech, Inc. Kompozycje zawierające cykliczne dinukleotydy purynowe o zdefiniowanej stereochemii i sposoby ich otrzymywania i zastosowania
PT2934598T (pt) * 2012-12-19 2018-07-24 Univ Texas Focalização farmacêutica de uma trajetória de sinalização de dinucleótido cíclico de mamífero
WO2014179335A1 (en) 2013-04-29 2014-11-06 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Compositions and methods for altering second messenger signaling
WO2014179760A1 (en) * 2013-05-03 2014-11-06 The Regents Of The University Of California Cyclic di-nucleotide induction of type i interferon
EP2996472B1 (en) * 2013-05-18 2019-03-27 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for inhibiting "stimulator of interferon gene" dependent signalling
RS59500B1 (sr) 2013-05-18 2019-12-31 Aduro Biotech Inc Sastavi i metode za aktiviranje signaliziranja koje je zavisno od „stimulatora gena za interferon“
US9549944B2 (en) 2013-05-18 2017-01-24 Aduro Biotech, Inc. Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”—dependent signalling
EP3027227A4 (en) 2013-07-31 2018-05-23 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Sting crystals and modulators
CN109394752A (zh) 2013-10-21 2019-03-01 德雷克塞尔大学 治疗慢性乙型肝炎病毒感染的sting激动剂的用途
JP2016538344A (ja) 2013-11-19 2016-12-08 ザ・ユニバーシティ・オブ・シカゴＴｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｃｈｉｃａｇｏ 癌処置としてのｓｔｉｎｇアゴニストの使用
US10092644B2 (en) 2013-11-22 2018-10-09 Brock University Use of fluorinated cyclic dinucleotides as oral vaccine adjuvants
US10421971B2 (en) 2014-01-15 2019-09-24 The University Of Chicago Anti-tumor therapy
PE20170198A1 (es) 2014-06-04 2017-04-08 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Dinucleotidos ciclicos como moduladores de sting
EP3546473B1 (en) 2014-12-16 2025-12-10 Kayla Therapeutics Fluorinated cyclic [(2',5')p(3',5')p]-dinucleotides for cytokine induction
GB201501462D0 (en) 2015-01-29 2015-03-18 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
CR20180101A (es) * 2015-08-13 2018-04-12 Merck Sharp & Dohme Compuestos di-nucleóticos cíclicos como agonistas de sting
TWI704154B (zh) 2015-12-03 2020-09-11 英商葛蘭素史克智慧財產發展有限公司 新穎化合物

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