ES2997190T3 - Heteroaryl amides useful as kif18a inhibitors - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos químicos que tienen una fórmula general (I), como se define en este documento, y a intermedios sintéticos de los mismos, que son capaces de modular la proteína KIF18A, influyendo así en el proceso del ciclo celular y la proliferación celular para tratar el cáncer y las enfermedades relacionadas con el cáncer. La invención también incluye composiciones farmacéuticas, que incluyen los compuestos, y métodos para tratar estados patológicos relacionados con la actividad de KIF18A. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Heteroarilamidas útiles como inhibidores de KIF18A

La invención se refiere al campo de agentes farmacéuticos y, más específicamente, se refiere a compuestos y composiciones útiles para modular KIF18A, y para su uso en métodos para controlar la proliferación celular y para tratar el cáncer. Las referencias a métodos de tratamiento en los posteriores párrafos de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un método de tratamiento del organismo humano (o animal) por terapia (o para diagnóstico).

Antecedentes de la invención

El cáncer es una de las enfermedades más extendidas que afectan a la humanidad y una causa principal de muerte en todo el mundo. En un esfuerzo por hallar un tratamiento eficaz o una cura para uno o más de los muchos diferentes cánceres, durante el último par de décadas, numerosos grupos han invertido una tremenda cantidad de tiempo, esfuerzo y recursos financieros. Sin embargo, hasta la fecha, de los tratamientos y terapias disponibles para el cáncer, solo unos pocos ofrecen algún grado considerable de éxito.

El cáncer se caracteriza a menudo por proliferación celular no regulada. El daño a uno o más genes, responsables de las rutas celulares, que controlan el progreso de la proliferación a través del ciclo celular y el ciclo del centrosoma, puede provocar la pérdida de regulación normal de la proliferación celular. Estos genes desregulados pueden codificar diversas proteínas reguladoras tumorales u oncógenas, que participan en una cascada de acontecimientos, dando lugar a una progresión del ciclo celular y proliferación celular no vigilada. Se han identificado diversas proteínas cinasa y cinesina, que desempeñan funciones clave en el ciclo celular y la regulación mitótica y progresión de las células en división normales y células cancerosas.

JOACHIM BRAUN ET AL., "Synthesis and Biological Evaluation of Optimized Inhibitors of the Mitotic Kinesin Kif18A", ACS CHEMICAL BIOLOGY, (20141126), vol. 10, n.° 2, páginas 554 - 560, divulga la identificación de inhibidores micromoleculares optimizados de la cinesina mitótica Kif18A. Usando BTB-1, el primer inhibidor de Kif18A identificado, como compuesto inicial, y la síntesis de una colección de derivados.

Las cinesinas son motores moleculares que desempeñan funciones importantes en la división celular y el transporte intracelular a la vesícula y los orgánulos. La cinesina mitótica desempeña funciones en varios aspectos de ensamblaje del huso, la segregación de los cromosomas, la separación del centrosoma y la dinámica (revisado en O. Rath y F. Kozielski, Nature Review Cancer, 12:527-39, 2012). Las cinesinas humanas se clasifican en 14 subfamilias en función de la homología de secuencia dentro del denominado "dominio motor", la actividad ATPasa de estos dominios impulsa el movimiento unidireccional a lo largo de los microtúbulos (MT). El dominio no motor de estas proteínas es responsable de la fijación de la carga; una "carga" puede incluir uno cualquiera de una diversidad de diferentes orgánulos con membrana, sistemas estructurales de transducción de señales y cromosomas. Las cinesinas usan la energía de la hidrólisis del ATP para mover la carga a lo largo de microtúbulos polarizados. Por tanto, las cinesinas a menudo se denominan motores dirigidos al "extremo más" o "extremo menos".

El genKIF18Apertenece a la subfamilia de cinesina-8 y es un motor dirigido al extremo más. Se cree que KIF18A influye en la dinámica en el extremo más de los microtúbulos de cinetocoro para controlar la colocación correcta del cromosoma y la tensión del huso. La reducción de KIF18A humana da lugar a husos más largos, oscilación aumentada del cromosoma en metafase y activación del punto de control del ensamblaje del huso mitótico en células de cáncer cervicouterino HeLa (MI Mayret al.,Current Biology 17, 488-98, 2007). Parece que KIF18A es una diana viable para el tratamiento del cáncer. KIF18A se sobreexpresa en diversos tipos de cánceres incluyendo, aunque sin limitación, cáncer de colon, mama, pulmón, páncreas, próstata, vejiga, cabeza, cuello, cuello uterino y ovario. Además, la eliminación o inactivación genética, o la inhibición de KIF18A afecta al aparato del huso mitótico en líneas celulares cancerosas. Particularmente, se ha descubierto que la inhibición de KIF18A induce detención de la célula mitótica, una vulnerabilidad conocida que puede promover la muerte celular en mitosis mediante apoptosis, catástrofe mitótica o letalidad o muerte impulsada por multipolaridad después de un deslizamiento mitótico en interfase. Por consiguiente, ha habido un fuerte interés en hallar inhibidores de proteínas KIF18A.

Por tanto, la inhibición de la actividad ATPasa de KIF18A es una estrategia prometedora para el desarrollo de agentes antineoplásicos novedosos.

Sumario de la invención

La presente invención proporciona una nueva clase de compuestos útiles para modular la proteína KIF18A sola o en un complejo unido con microtúbulos para tratar afecciones y/o enfermedades mediadas por KIF18A, incluyendo cáncer, inflamación o ciliopatologías.

Los compuestos proporcionados por la invención tienen actividad moduladora de KIF18A basada en MT y, en particular, actividad inhibidora de KIF18A. Para este fin, la invención también proporciona el uso de estos compuestos, así como sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la preparación y fabricación de una composición farmacéutica o medicamento para tratamiento terapéutico, profiláctico, agudo o crónico de enfermedades y trastornos mediados por KIF18A incluyendo, sin limitación, el cáncer. Por tanto, los compuestos de la invención son útiles en la fabricación de medicamentos antineoplásicos. La invención también proporciona procesos para preparar compuestos de fórmula I, así como intermedios útiles en dichos procesos.

En la realización 1, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I), un compuesto de fórmula I:

o cualquier sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

X<1>es N o CR<6>;

X<2>es N o CR<7>;

X<3>es N o CR<8>;

X<4>es N o CR<9>;

en donde no más de 3 de X<1>, X<2>, X<3>y X<4>son N;

cuando cualquiera de X<2>, X<3>y X<4>es N; entonces L es -(C=O)-NR<3>- o -NR<3>-(C=O)-;

cuando todos de X<2>, X<3>y X<4>no son N; entonces L es -(C=O)-NR<3>-;

R' es un grupo -Z-R<12>;

en donde Z es -alquilo C0-4-, -NR<11>-, -NR<11>SO2-alquilo C0-4-, -SO2NR<11>-alquilo C0-4-, -NR<11>SO2NR<11>-, -NR<11>SO2NR<11>-C(=O)-O-, -alquilo C<0-4>-S(=O)(=NH)-, alquil C<0-4>-NR<11>-S(=O)(=NH), -alquil C0-4-S-, -alquil C<0-4>-S(=O)-, -alquil C0-4-SO2-, -O-, -P-, -P(=O), -P(=O)2, -(C=O)-, -(C=O)NR<11>- o -NR<11>(C=O); o

el grupo -Z-R<12>es -N=S(=O)-(R<12>)2, en donde el par de dos R<12>puede combinar, como alternativa, con el átomo de azufre fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado o parcialmente saturado de 3, 4, 5 o 6 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S;

R<2>es halo o un grupo -Y-R<13>, en donde Y es -alquilo C0-4-, -N(alquil Cü-1)-alquilo C0-4-, -C(=O)NRaRa(alquilo C1-4)-, -O alquilo C0-4-, -S-, -S=O, -S(=O)2-, -SO2N(alquil C0-1)-alquilo C0-4-, -N(alquil C0-1)-SO2-alquilo C0-4-, -alquil C0-4-S(=O)(=NH)-, -(C=O)-, -alquil C<0-4>-(C=O)-O-; o

el grupo -Y-R<13>es -N=S(=O)-(R<13>)2, en donde el par de dos R<13>puede combinar, como alternativa, con el átomo de azufre fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado o parcialmente saturado de 3, 4, 5 o 6 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S;

R<3>es H, metilo o etilo;

R<4>es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4;

R<5>es H, halo, alquilo C1-8 o haloalquilo C1-4;

R<6>es H, halo, CN, -O-alquilo C0-6-, R6a o R6b;

R<7>es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4;

R<8>es H, halo, alquilo C1-8 o haloalquilo C1-4;

R<9>es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4;

Rx es

cada uno de R10c, R10d, R10e, R10f, R<10>g, R10h, R10i y R10j es H, halo, alquilo C1-6 o haloalquilo C1-4; y cada uno del par de R10a y R10b combina con el átomo de carbono fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado de 3, 4 o 5 miembros espiro al anillo Rx; en donde dicho anillo contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomos seleccionados de O y S; o en donde

cada uno de R10c, R10d, R10e, R10f, R<10>g, R10h, R10i y R10j es H, metilo o etilo; y cada uno del par de R10a y R10b combina con el átomo de carbono fijado a cada uno de ellos para formar un anillo ciclopropilo, ciclobutilo o ciclopentilo espiro al anillo Rx; o

en donde Rx es

R<11>es H o alquilo C i -s ;

R<12>es H, halo, R12a o R12b;

R<13>es R13a o R13b;

R6a, R10k, R12a y R13a se selecciona independientemente, en cada caso, del grupo que consiste en un anillo monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1,2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S, que está sustituido con 0, 1.2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, -ORa, -O-haloalquilo C1-4,

CN, -C(=O)Rb, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -OC(=O)Rb, -OC(=O)NRaRa, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Rb, -S(=O)2Rb, -S(=O)2NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Rb, -N(Ra)C(=O)ORb,-N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Rb, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, -alquil C1-6-NRaRa, -alquil C1-6-ORa, -alquil C1-6-N(Ra)C(=O)Rb, -alquil C1-6-OC(=O)Rb, -alquil C1-6-C(=O)NRaRa, -alquil C 1-6-C(=O)ORa, R<14>y oxo;

R6b, R<1>a, R12b y R13b se selecciona independientemente, en cada caso, del grupo que consiste en alquilo C1-6 sustituido con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -C(=O)ORa, -ORa, -haloalquilo C1-2, -O-haloalquilo C1-4, CN, NH2, NH(CHa) o N(CH<3>)<2>;

R<14>se selecciona del grupo que consiste en un anillo monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1,2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S, que está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-<6>, haloalquilo C1-4, -ORa, -O-haloalquilo C1-4,

CN, -C(=O)Rb, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -OC(=O)Rb, -OC(=O)NRaRa, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Rb, -S(=O)2Rb, -S(=O)2NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Rb, -N(Ra)C(=O)ORb, -N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Rb, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, -alquil C1-6-NRaRa, -alquil C1-6-ORa, -alquil C1-6-N(Ra)C(=O)Rb, -alquil C1-6-OC(=O)Rb, -alquil C1-6-C(=O)NRaRa, -alquil C 1-6-C(=O)ORa y oxo;

Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y

Rb es independientemente, en cada caso, alquilo C1-6, fenilo o bencilo, en donde el alquilo C1-6 está sustituido con 0, 1.2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo,

-OH, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -OC(=O)alquilo C1-4 o -N(alquilo C<1-4>)alquilo C1-4; y el fenilo o bencilo está sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3,

-OH, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -OC(=O)alquilo C1-4 o -N(alquil C<1-4>)alquilo C1-4.

En la realización 2, la presente invención proporciona compuestos en donde L es -NR<3>-(C=O); y X<1>es CR<6>, X<2>es CR<7>, X<3>es N; y X<4>es CR<9>; que tienen la fórmula (Ia):

o en donde L es -(C=O)-NR3-; y X1 es CR6, X2 es CR7, X3 es CR8; y X4 es CR9; que tienen la fórmula (Ic):

o en donde L es -(C=O)-NR3-; y X1 es CR6, X2 es N, X3 es CR8; y X4 es N; que tienen la fórmula (Ie):

En la realización 3, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<3>es H o metilo.

En la realización 4, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde Z está ausente, -NH-, -NHSO2-, -O-, -SO2NH-, -S(=O)(=NH)-, -CH2-S(=O)(=NH)-, -SO2-, -CH2-SO2 o CH<3>(CH)-SO<2>; y

R<12>se selecciona de:

a) H; (b) F; (c) alquilo C1-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -CF3, -C(=O)CH<3>, -OH, -OCH3, -NH2, ciclopropilo, ciclopropilmetanol o 3-(trifluorometil)-3H-diazirinilo; o (d) un anillo monocíclico saturado, parcialmente saturado o insaturado de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomo seleccionado de O y S, que está sustituido con 0, 1,2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, etilo, -CF3, -alquil C1-6-OH, -OH, -OCH3, -NH2 u oxo; o

R12 se selecciona de ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, oxetanilo, azetidinilo, oxazolidinilo, 1,3-dioxolanilo o pirrolidinilo.

En la realización 5, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R2 es un grupo -Y-R13, en donde Y está ausente, -NH- o -NHSO2-; y

R13 es un anillo monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o anillo bicíclico de 8, 9, 10, 11 o 12 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomo seleccionado de O y S, que está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, etilo, CF3, CH2OH, -OH, -OCH3, -NH2, -NH(CH3) y oxo; o;

R13 es alquilo C1-6 sustituido con 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -OH, -O-haloalquilo C1-4 o CN; o en donde R2 es un anillo monocíclico saturado de 5 o 6 miembros, en donde cada anillo contiene 1 o 2 átomos de N y 0 o 1 átomo de O, y en donde cada uno de dichos anillos está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, -OH, -O-haloalquilo C1-4, CN, R14 y oxo; o

en donde R2 es:

(a) F, Br;

(b) un grupo -Y-R13, en donde Y está ausente o es SO2; y R13 es morfolinilo, oxazolidinilo, oxazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, azetidinilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo,

en donde cada uno de dichos anillos está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, etilo, -OH, -OCH3, CH2OH, NH2, NH(CH<3>), u oxo; o

(c) un grupo -Y-R<13>, en donde Y es NH o -SO2NH-; y en donde R<13>es alquilo C1-6 sustituido con 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, CF3 u -OH; o

en donde R<2>es un grupo -Y-R<13>, en donde Y está ausente; y R<13>es morfolinilo, piperidinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, piperazinilo, tetrahidrofuranoílo,

en donde cada uno de dichos anillos está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, CF3, -OH, -OCHF2, CN y oxo; o (c) un grupo -Y-R<13>, en donde Y es NH, -O-, -O-(CH2)-, -O-(CH2)-(CH2)- u -O-(CH2)-(CH2)-(CH2)-, y en donde R<13>es

o R<13>es alquilo C 1-6 sustituido con 0, 1,2, 3, 4 o 5 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, CF3, -OH o CN; o en donde R<2>es

o

en donde R<2>es morfolinilo o piperidinilo sustituido con 0, 1,2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, CF3, -OH, -OCHF2, CN u oxo; o

en donde R<2>es morfolinilo sustituido con 1,2 o 3 grupos metilo; o

en donde R<2>es piperidinilo sustituido con 1,2 o 3 grupos fluoro.

En la realización 6, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<4>es H o halo.

En la realización 7, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<5>es H.

En la realización 8, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<6>es H o F.

En la realización 9, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<7>se selecciona de (a) H; (b) alquilo C1-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -OH, -OCH3 o ciclopropilo; o (c) un anillo monocíclico saturado, parcialmente saturado o insaturado de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene 0, 1,2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomo seleccionado de O y S, que está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, -alquil C1-6-OH, -OH, -OCH3, -NH2 u oxo.

En la realización 10, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<6>es H.

En la realización 11, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<7>es H.

En la realización 12, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R<8>es H.

En la realización 13, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con cualquiera de las realizaciones anteriores, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R9 es H.

En la realización 14, la presente invención proporciona un compuesto, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, seleccionado de:

o cualquier sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En la realización 15, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones 1-14, y un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

En la realización 16, la presente invención proporciona un método de tratamiento de una afección que puede tratarse con inhibidores de KIF18a, comprendiendo el método administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con las realizaciones 1-14, o la composición de acuerdo con la realización 15.

En la realización 17, la presente invención proporciona el método de la realización 16, en donde dicha afección es cáncer seleccionado del grupo que consiste en (a) un tumor sólido o hemático seleccionado de cáncer de vejiga, endometrial, de pulmón escamocelular, de mama, colon, riñón, hígado, pulmón, cáncer pulmonar microcítico, de esófago, vesícula biliar, cerebro, cabeza y cuello, ovario, páncreas, estómago, cuello uterino, tiroides, próstata y piel, (b) un tumor hematopoyético de linaje linfático seleccionado de leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de linfocitos B, linfoma de linfocitos T, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de tricoleucocitos y linfoma de Burkett, (c) un tumor hematopoyético de linaje mielocítico seleccionado de leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica, (d) un tumor de origen mesenquimatoso seleccionado de fibrosarcoma y rabdomiosarcoma, (e) un tumor del sistema nervioso central y periférico seleccionado de astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannoma, o (f) un melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xerodermia pigmentosa, queratoacantoma, cáncer folicular de tiroides o sarcoma de Kaposi.

En una subrealización 17a, la presente invención proporciona el método de la realización 16, en donde dicha afección se cáncer seleccionado del grupo que consiste en melanoma, cáncer de próstata, cáncer cervicouterino, cáncer de mama, cáncer de colon, sarcoma o leucemia. Véase: Zhang C.et al.,"KIF18A is involved in human breast carcinogenesis", Carcinogenesis, 2010 Sep; 31(9): 1676-84. doi: 10.1093/carcin/bgq134. Epub 2010 Jul 1. Véase también: (1) https://www.proteinatlas.org/ENSG00000121621-KIF18A/pathology; (2) Nagahara, M.et al.,''Kinesin 18A expression: clinical relevance to colorectal cancer progression'', Int. J. Cancer: 129, 2543-2552 (2011) VC 2011 UIC; y (3) Yu, Y.et al.,"The Role of Kinesin Family Proteins in Tumorigenesis and Progression - Potential Biomarkers and Molecular Targets for Cancer Therapy", Cancer 2010; 116: 5150-60. VC 2010 American Cancer Society.

En la realización 18, la presente invención proporciona un método de reducción del tamaño de un tumor sólido en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con las realizaciones 1-14, o la composición de acuerdo con la realización 15.

En la realización 19, la presente invención proporciona un método de tratamiento un trastorno de proliferación celular en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con las realizaciones 1-14, o la composición de acuerdo con la realización 15.

La presente invención divulga un método de inhibición de KIF18A en una célula, que comprende poner en contacto la célula con un compuesto, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, de acuerdo con las realizaciones 1-14, o la composición de acuerdo con la realización 15.

La invención divulga un método de preparación de un compuesto de fórmula (I) como se describe en este documento.

También se divulga un compuesto intermedio usado en el método de preparación de un compuesto de fórmula (I) como se describe en este documento.

Descripción detallada de la invención

La presente invención incluye todos los compuestos de la presente invención marcados isotópicamente farmacéuticamente aceptables, en donde uno o más átomos se remplazan por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que predomina en la naturaleza.

Ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos de la invención incluyen, aunque sin limitación, isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbono, tales como 11C, 13C y 14C, cloro, tales como 38Cl, flúor, tales como 18F, yodo, tales como 123I y 125I, nitrógeno, tales como 13N y 15N, oxígeno, tales como 15O, 17O y 18O, fósforo, tales como 32P, y azufre, tales como 35S.

Determinados compuestos de la presente invención marcados isotópicamente, por ejemplo, los que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de distribución en tejidos de fármacos y/o sustratos. Los isótopos radiactivos tritio, es decir, 3H, y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente útiles para este propósito en vista de su facilidad de incorporación y fácil medio de detección.

La sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir, 2H, puede producir determinadas ventajas terapéuticas producidas por una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, semividain vivoaumentada o necesidades de dosificación reducidas y, por tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias.

La sustitución con isótopos emisores de positrones, tales como 11C, 18F, 15O y 13N, puede ser útil en estudios de tomografía por emisión de positrones (PET) para examinar la ocupación de receptores de sustrato.

En general, pueden prepararse compuestos de la presente invención marcados isotópicamente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o mediante procesos análogos a los descritos en los ejemplos y preparaciones adjuntos usando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.

Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen aquellos en donde el disolvente de cristalización puede sustituirse isotópicamente, por ejemplo, D2O, d<6>-acetona, d<6>-DMSO.

Realizaciones específicas de la presente invención incluyen los compuestos ejemplificados en los ejemplos a continuación y sus sales, complejos, solvatos, polimorfos, estereoisómeros, metabolitos, profármacos y otros derivados de los mismos farmacéuticamente aceptables.

Salvo que se especifique de otro modo, las siguientes definiciones se aplican a los términos encontrados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones:

"Alquilo Ca-p" significa un grupo alquilo que comprende un mínimo de a y un máximo de p átomos de carbono en una relación ramificada o lineal o cualquier combinación de los tres, en donde a y p representan números enteros. Los grupos alquilo descritos en esta sección también pueden contener uno o dos dobles o triples enlaces. Una denominación alquilo Co indica un enlace directo. Ejemplos de alquilo C1-6 incluyen, aunque sin limitación, los siguientes:

"Grupo benzo", solo o en combinación, significa el radical divalente C4H4=, del que una representación es -CH=CH-CH=CH-, que cuando está fijado de forma próxima a otro anillo forma un anillo similar a benceno, por ejemplo, tetrahidronaftileno, indol y similares.

Los términos "oxo" y "tioxo" representan los grupos =O (como en carbonilo) y =S (como en tiocarbonilo), respectivamente.

"Halo" o "halógeno" significa un átomo de halógeno seleccionado de F, Cl, Br y I.

"Haloalquilo Ca-p" significa un grupo alquilo, como se describe anteriormente, en donde cualquier número, al menos uno, de los átomos de hidrógeno fijados a la cadena de alquilo se remplazan con F, Cl, Br o I.

El grupo N(Ra)Ra y similares incluyen sustituyentes donde los dos grupos Ra juntos forman un anillo, opcionalmente incluyendo un átomo de N, O o S, e incluyen grupos tales como:

El grupo N(alquil Ca-p)alquilo Ca-p, en donde a y p son como se definen anteriormente, incluyen sustituyentes donde los dos grupos alquilo Ca-p juntos forman un anillo, opcionalmente incluyendo un átomo de N, O o S, e incluyen grupos tales como

"Anillo bicíclico" significa un grupo que presenta dos anillos unidos. Un anillo bicíclico puede ser carbocíclico (todos los átomos en el anillo son carbonos), o heterocíclico (los átomos de los anillos consisten, por ejemplo, en 1, 2 o 3 heteroátomos, tales como N, O, o S, además de los átomos de carbono). Los dos anillos puedes ser tanto alifáticos (por ejemplo, decalina y norbornano), como pueden ser aromáticos (por ejemplo, naftaleno), o una combinación de alifáticos y aromáticos (por ejemplo, tetralina). Los anillos bicíclicos incluyen (a) compuestos espirocíclicos, en donde los dos anillos comparten solamente un solo átomo, el átomo espiro, que normalmente es un carbono cuaternario. Ejemplos de compuesto espirocíclico incluyen, aunque sin limitación:

(b) compuestos bicíclicos condensados, en donde dos anillos comparten dos átomos adyacentes. En otras palabras, los anillos comparten un enlace covalente, es decir, los átomos cabeza de punte están directamente conectados (por ejemplo, a-thujene y decalina). Ejemplos de anillos bicíclicos condensados incluyen, aunque sin limitación:

y (c) compuestos bicíclicos con puente, en donde los dos anillos comparten tres o más átomos, que separan los dos átomos cabeza de puente por un puente que contiene al menos un átomo. Por ejemplo, norbornano, también conocido como biciclo[2.2.1]heptano, puede considerarse como un par de anillos de ciclopentano que comparten cada uno tres de sus cinco átomos de carbono. Ejemplos de anillos bicíclicos con puente incluyen, aunque sin limitación:

"Carbociclo" o "carbocíclico" significa un anillo que comprende en sí mismo o junto con otros términos, representa, salvo que se indique otra cosa, la versión cíclica de "alquilo Ca-p". Ejemplos de carbociclo incluyen ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicloheptilo, ciclobutileno, ciclohexileno y similares.

"Heterociclo" o "heterocíclico" significa un anillo que comprende al menos un átomo de carbono y al menos otro átomo seleccionado de N, O y S. Ejemplos de heterociclos que pueden encontrarse en las reivindicaciones incluyen, aunque sin limitación, los siguientes:

"Sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal preparada por un medio convencional, y es bien conocida por los expertos en la materia. Las "sales farmacológicamente aceptables" incluyen sales básicas de ácidos inorgánicos y orgánicos incluyendo, aunque sin limitación, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido málico, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido maleico, ácido salicílico, ácido benzoico, ácido fenilacético, ácido mandélico y similares. Cuando los compuestos de la invención incluyen una función ácida tal como un grupo carboxi, entonces los pares de cationes farmacéuticamente aceptables adecuados para el grupo carboxi son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen cationes alcalinos, alcalinotérreos, de amonio, amonio cuaternario y similares. Para ejemplos adicionales de "sales farmacológicamente aceptables", véase a continuación y Bergeet al.,J. Pharm. Sci. 66:1 (1977).

"Saturado, parcialmente saturado o insaturado" incluye sustituyentes saturados con hidrógenos, sustituyentes completamente insaturados con hidrógenos y sustituyentes parcialmente saturados con hidrógenos.

"Grupo saliente" en general se refiere a grupos fácilmente desplazables por un nucleófilo, tal como una amina, un tiol o un nucleófilo alcohólico. Dichos grupos salientes son bien conocidos en la técnica. Ejemplos de dichos grupos salientes incluyen, aunque sin limitación, N-hidroxisuccinimida, N-hidroxibenzotriazol, haluros, triflatos, tosilatos y similares. Grupos salientes preferidos se indican en este documento según lo apropiado.

"Grupo protector" en general se refiere a grupos bien conocidos en la técnica que se usan para evitar que grupos reactivos concretos, tales como carboxi, amino, hidroxi, mercapto y similares, experimenten reacciones indeseadas, tales como nucleófilas, electrófilas, oxidación, reducción y similares. Grupos protectores preferidos se indican en este documento según lo apropiado. Ejemplos de grupos protectores de amino incluyen, aunque sin limitación, aralquilo, aralquilo sustituido, cicloalquenilalquilo y cicloalquenil alquilo sustituido, alilo, alilo sustituido, acilo, alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, sililo y similares. Ejemplos de aralquilo incluyen, aunque sin limitación, bencilo, orto-metilbencilo, tritilo y benzhidrilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, nitro, acilamino, acilo y similares, y sales, tales como sales de fosfonio y amonio. Ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo, indanilo, antracenilo, 9-(9-fenilfluorenilo), fenantrenilo, durenilo y similares. Ejemplos de radicales cicloalquenilalquilo o cicloalquilenilalquilo sustituido, preferiblemente tienen 6-10 átomos de carbono, e incluyen, aunque sin limitación, ciclohexenilmetilo y similares. Grupos acilo, alcoxicarbonilo y aralcoxicarbonilo adecuados incluyen benciloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, iso-butoxicarbonilo, benzoílo, benzoílo sustituido, butirilo, acetilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, ftaloílo y similares. Puede usarse una mezcla de grupos protectores para proteger el mismo grupo amino, tal como un grupo amino primario puede protegerse tanto por un grupo aralquilo como un grupo aralcoxicarbonilo. Los grupos protectores de amino también pueden formar un anillo heterocíclico con el nitrógeno al que están fijados, por ejemplo, 1,2-bis(metileno)benceno, ftalimidilo, succinimidilo, maleimidilo y similares y donde estos grupos heterocíclicos pueden incluir además anillos arilo y cicloalquilo contiguos. Además, los grupos heterocíclicos pueden estar mono-, di- o trisustituidos, tales como nitroftalimidilo. Los grupos amino también pueden protegerse frente a reacciones indeseadas, tales como oxidación, a través de la formación de una sal de adición, tal como clorhidrato, ácido toluenosulfónico, ácido trifluoroacético y similares. Muchos de los grupos protectores de amino también son adecuados para proteger grupos carboxi, hidroxi y mercapto. Por ejemplo, grupos aralquilo. Los grupos alquilo también son grupos adecuados para proteger grupos hidroxi y mercapto, tal como terc-butilo.

Los grupos protectores de sililo son átomos de silicio opcionalmente sustituidos con uno o más grupos alquilo, arilo y aralquilo. Los grupos protectores de sililo adecuados incluyen, aunque sin limitación, trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, terc-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1,2-bis(dimetilsilil)benceno, 1,2-bis(dimetilsilil)etano y difenilmetilsililo. La sililación de un grupo amino proporciona grupos mono- o disililamino. La sililación de compuestos de aminoalcohol puede dar lugar a un derivado de N,N,O-trisililo. La eliminación de la función sililo de una función de éter silílico se consigue fácilmente por tratamiento con, por ejemplo, un hidróxido metálico o reactivo de fluoruro de amonio, como una etapa de reacción diferenciada oin situdurante una reacción con el grupo alcohol. Agentes sililantes adecuados son, por ejemplo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de terc-butil-dimetilsililo, cloruro de fenildimetilsililo, cloruro de difenilmetil sililo o sus productos de combinación con imidazol o DMF. Los métodos para la sililación de aminas y eliminación de grupos protectores de sililo son bien conocidos por los expertos en la materia. Los métodos de preparación de estos derivados de amina a partir de aminoácidos correspondientes, amidas de aminoácido o ésteres de aminoácido son bien conocidos por los expertos en la materia de química orgánica, incluyendo química de aminoácido/éster de aminoácido o aminoalcohol.

Los grupos protectores se retiran en condiciones que no afectarán a la parte restante de la molécula. Estos métodos son bien conocidos en la técnica e incluyen hidrólisis ácida, hidrogenólisis y similares. Un método preferido implica la eliminación de un grupo protector, tal como eliminación de un grupo benciloxicarbonilo por hidrogenólisis utilizando paladio sobre carbono en un sistema disolvente adecuado tal como un alcohol, ácido acético y similares o mezclas de los mismos. Un grupo protector de t-butoxicarbonilo puede retirarse utilizando un ácido inorgánico u orgánico, tal como HCl o ácido trifluoroacético, en un sistema disolvente adecuado, tal como dioxano o cloruro de metileno. La sal de amino resultante puede neutralizarse fácilmente para producir la amina libre. El grupo protector de carboxi, tal como metilo, etilo, bencilo, terc-butilo, 4-metoxifenilmetilo y similares, puede retirarse en condiciones de hidrólisis e hidrogenólisis bien conocidas por los expertos en la materia.

Debe apreciarse que los compuestos de la invención pueden contener grupos que pueden existir en formas tautoméricas, tales como grupos amidina y guanidina cíclicos y acíclicos, grupos heteroarilo sustituidos con heteroátomo (Y' = O, S, NR), y similares, que se ilustran en los siguientes ejemplos:

y aunque se nombra, describe presenta y/o reivindica en este documento una forma, se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas de forma inherente en dicho nombre, descripción, presentación y/o reivindicación.

Los profármacos de los compuestos de esta invención también están contemplados por esta invención. Un profármaco es un compuesto activo o inactivo que se modifica químicamente a través de acción fisiológicain vivo,tal como hidrólisis, metabolismo y similares, en un compuesto de esta invención después de la administración del fármaco a un paciente. La idoneidad y técnicas implicas en la preparación y uso de profármacos son bien conocidas por los expertos en la materia. Para un análisis general de profármacos que impliquen ésteres véase Svensson y Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Ejemplos de un anión carboxilato enmascarado incluyen una diversidad de ésteres, tales como alquilo (por ejemplo, metilo, etilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo), aralquilo (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo) y alquilcarboniloxialquilo (por ejemplo, pivaloiloximetilo). Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos con arilcarboniloximetilo que se escinden por esterasasin vivoliberando el fármaco libre y formaldehído (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). Además, los fármacos que contienen un grupo NH ácido, tal como imidazol, imida, indol y similares, se han enmascarado con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Los grupos hidroxi se han enmascarado como ésteres y éteres. El documento EP 039051 (Sloan y Little, 4/11/81) divulga profármacos de ácido hidroxámico con base de Mannich, su preparación y uso.

La memoria descriptiva y las reivindicaciones contienen una lista de especies usando la redacción "seleccionado de ... y..." y "es ... o ..." (a veces denominados grupos de Markush). Cuando se usa esta redacción en esta solicitud, salvo que se indique de otro modo, se entiende que incluye el grupo como un conjunto, o cualquier miembro individual del mismo, o cualquier subgrupo del mismo. El uso de esta redacción es simplemente por abreviar y no se entiende de ninguna manera que limite la eliminación de elementos individuales o subgrupos según lo necesario.

Composiciones farmacéuticas, dosificación y vías de administración

También se proporcionan en este documento composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto como se divulga en este documento, junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable, tal como, por ejemplo, un diluyente o un vehículo. Los compuestos y composiciones farmacéuticas adecuadas para su uso en la presente invención incluyen aquellas en donde el compuesto puede administrarse en una cantidad eficaz para conseguir su propósito pretendido. La administración del compuesto se describe en más detalle a continuación.

Las formulaciones farmacéuticas adecuadas pueden determinarse por los expertos en la materia dependiendo de la vía de administración y la dosificación deseada. Véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 1435-712 (18.a ed., Mack Publishing Co, Easton, Pensilvania, 1990). Las formulaciones pueden influir en el estado físico, estabilidad, tasa de liberaciónin vivoy tasa de eliminaciónin vivode los agentes administrados. Dependiendo de la vía de administración, puede calcularse una dosis adecuada de acuerdo con el peso corporal, las áreas superficiales corporales o el tamaño del órgano. El refinado adicional de los cálculos necesarios para determinar la dosis de tratamiento apropiada se hace de forma rutinaria por los expertos en la materia sin experimentación excesiva, especialmente en vista de la información de dosificación y ensayos divulgados en este documento, así como los datos farmacocinéticos obtenibles a través de ensayos clínicos en animales o seres humanos.

Las expresiones "farmacéuticamente aceptable" o "farmacológicamente aceptable" se refieren a entidades moleculares y composiciones que no producen reacciones adversas, alérgicas u otras indeseadas cuando se administran a un animal o un ser humano. Como se usa en este documento, "farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y similares. El uso de dichos excipientes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Excepto en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con las composiciones terapéuticas, se contempla su uso en composiciones terapéuticas. También pueden incorporarse ingredientes activos complementarios a las composiciones. En realizaciones ejemplares, la formulación puede comprender sólidos de jarabe de maíz, aceite de cártamo alto oleico, aceite de coco, aceite de soja, L-leucina, fosfato de calcio tribásico, L-tirosina, L-prolina, acetato de L-lisina, DATEM (un emulsionante), L-glutamina, L-valina, fosfato de potasio dibásico, L-isoleucina, L-arginina, L-alanina, glicina, L-asparagina monohidrato, L-serina, citrato de potasio, L-treonina, citrato de sodio, cloruro de magnesio, L-histidina, L-metionina, ácido ascórbico, carbonato de calcio, ácido L-glutámico, diclorhidrato de L-cistina, L-triptófano, ácido L-aspártico, cloruro de colina, taurina, m-inositol, sulfato ferroso, palmitato de ascorbilo, sulfato de cinc, L-carnitina, acetato de alfa-tocoferilo, cloruro de sodio, niacinamida, tocoferoles mixtos, pantotenato de calcio, sulfato cúprico, clorhidrato de cloruro de tiamina, palmitato de vitamina A, sulfato de manganeso, riboflavina, clorhidrato de piridoxina, ácido fólico, beta-caroteno, yoduro de potasio, filoquinona, biotina, seleniato de sodio, cloruro de cromo, molibdato de sodio, vitamina D3 y cianocobalamina.

El compuesto puede estar presente en una composición farmacéutica como una sal farmacéuticamente aceptable. Como se usa en este documento, "sales farmacéuticamente aceptables" incluyen, por ejemplo, sales de adición de base y sales de adición de ácido.

Las sales de adición de base farmacéuticamente aceptables pueden formarse con metales o aminas, tales como metales alcalinos y alcalinotérreos o aminas orgánicas. Las sales farmacéuticamente aceptables de compuestos también pueden prepararse con un catión farmacéuticamente aceptable. Los cationes farmacéuticamente aceptables adecuados son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen cationes alcalinos, alcalinotérreos, de amonio y amonio cuaternario. También son posibles carbonatos o hidrogenocarbonatos. Ejemplos de metales usados como cationes son sodio, potasio, magnesio, amonio, calcio o hierro, y similares. Ejemplos de aminas adecuadas incluyen isopropilamina, trimetilamina, histidina, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, diciclohexilamina, etilendiamina, N-metilglucamina y procaína.

Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen sales de ácido inorgánico u orgánico. Ejemplos de sales de ácido adecuados incluyen los clorhidratos, formiatos, acetatos, citratos, salicilatos, nitratos, fosfatos. Otras sales farmacéuticamente aceptables adecuadas son bien conocidas por los expertos en la materia e incluyen, por ejemplo, ácido fórmico, acético, cítrico, oxálico, tartárico o mandélico, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico; con ácido orgánico carboxílico, sulfónico, sulfo- o fosfoácido o ácidos sulfámicos N-sustituidos, por ejemplo, ácido acético, ácido trifluoroacético (TFA), ácido propiónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido metilmaleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido oxálico, ácido glucónico, ácido glucárico, ácido glucurónico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácido 2-fenoxibenzoico, ácido 2-acetoxibenzoico, ácido embónico, ácido nicotínico o ácido isonicotínico; y con aminoácidos, tales como los 20 alfa aminoácidos implicados en la síntesis de proteínas en la naturaleza, por ejemplo, ácido glutámico o ácido aspártico, y también con ácido fenilacético, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido etano 1,2-disulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 4-metilbencenosulfónico, ácido naftaleno 2-sulfónico, ácido naftaleno 1,5-disulfónico, 2- o 3-fosfoglicerato, glucosa 6-fosfato, ácido N-ciclohexilsulfámico (con la formación de ciclamatos), o con otros compuestos orgánicos ácidos, tal como ácido ascórbico.

Las composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos divulgados en este documento pueden fabricarse de manera convencional, por ejemplo, por procesos convencionales de mezcla, disolución, granulación, fabricación de grageas, levigación, emulsión, encapsulación, inclusión o liofilización. La formulación apropiada depende de la vía de administración elegida.

Para administración oral, las composiciones adecuadas pueden formularse fácilmente combinando un compuesto divulgado en este documento con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como vehículos bien conocidos en la técnica. Dichos excipientes y vehículos posibilitan que los presentes compuestos se formulen como comprimidos, píldoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, suspensiones espesas, suspensiones y similares, para ingesta oral por un paciente a tratar. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral pueden obtenerse añadiendo un compuesto como se divulga en este documento con un excipiente sólido, opcionalmente moliendo una mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos, después añadiendo auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de gragea. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, rellenos y preparaciones de celulosa. Si se desea, pueden añadirse agentes disgregantes. Los ingredientes farmacéuticamente aceptables son bien conocidos para los diversos tipos de formulación y pueden ser, por ejemplo, aglutinantes (por ejemplo, polímeros naturales o sintéticos), lubricantes, tensioactivos, agentes edulcorantes y aromatizantes, materiales de recubrimiento, conservantes, tintes, espesantes, adyuvantes, agentes antimicrobianos, antioxidantes y vehículos para los diversos tipos de formulación.

Cuando se administra por vía oral una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto divulgado en este documento, la composición típicamente está en forma de una formulación sólida (por ejemplo, comprimido, cápsula, píldora, polvo o trocisco) o líquida (por ejemplo, suspensión acuosa, solución, elixir o jarabe).

Cuando se administra en forma de comprimido, la composición puede contener adicionalmente un sólido funcional y/o vehículo sólido, tal como gelatina o un adyuvante. El comprimido, cápsula y polvo puede contener de aproximadamente un 1 a aproximadamente un 95 % de compuesto, y preferiblemente de aproximadamente un 15 a aproximadamente un 90 % de compuesto.

Cuando se administra en forma líquida o de suspensión, puede añadirse un líquido funcional y/o un vehículo líquido tal como agua, petróleo o aceites de origen animal o vegetal. La forma líquida de la composición puede contener además solución salina fisiológica, soluciones de alditol, dextrosa u otras soluciones de sacárido, o glicoles. Cuando se administra en forma líquida o de suspensión, la composición puede contener de aproximadamente un 0,5 a aproximadamente un 90 % en peso de un compuesto divulgado en este documento, y preferiblemente de aproximadamente un 1 a aproximadamente un 50 % de un compuesto divulgado en este documento. En una realización contemplada, el vehículo líquido es no acuoso o sustancialmente no acuoso. Para su administración en forma líquida, la composición puede suministrarse como una formulación sólida de rápida disolución para disolución o suspensión inmediatamente antes de su administración.

Cuando se administra una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto divulgado en este documento por inyección intravenosa, cutánea o subcutánea, la composición está en forma de una solución acuosa apirógena, parenteralmente aceptable. La preparación de dichas soluciones parenteralmente aceptables, que tienen debidamente en cuenta el pH, la isotonicidad, la estabilidad y similares, está dentro de las habilidades de la técnica. Una composición preferida para inyección intravenosa, cutánea o subcutánea típicamente contiene, además de un compuesto divulgado en este documento, un vehículo isotónico. Dichas composiciones pueden prepararse para su administración como soluciones de base libre o sales farmacológicamente aceptables en agua mezcladas adecuadamente con un tensioactivo, tal como hidroxipropilcelulosa. También pueden prepararse dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos y mezclas de los mismos y en aceites. En condiciones normales de almacenamiento y uso, estas preparaciones opcionalmente pueden contener un conservante para evitar el crecimiento de microorganismos.

Las composiciones inyectables pueden incluir soluciones, suspensiones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación improvisada de soluciones, suspensiones o dispersiones inyectables estériles. En todas las realizaciones, la forma debe ser estéril y debe ser fluida en la medida que sea fácil de inyectar. Debe ser estable en las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe resistir la acción contaminante de microorganismos, tales como bacterias y hongos, mediante la inclusión opcional de un conservante. El vehículo puede ser un disolvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido, y similares), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales. En una realización contemplada, el vehículo es no acuoso o sustancialmente no acuoso. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento, tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido del compuesto en la realización de dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos puede conseguirse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, tiomersal y similares. En muchas realizaciones, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, glúcidos o cloruro de sodio. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede conseguirse mediante el uso en las composiciones de agentes que retardan la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.

Se preparan soluciones inyectables estériles incorporando los compuestos activos en la cantidad requerida en el disolvente apropiado con los otros diversos ingredientes enumerados anteriormente, según se requiera, seguido de esterilización filtrada. En general, se preparan dispersiones incorporando los diversos ingredientes activos esterilizados en un vehículo estéril que contiene el medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En la realización de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son técnicas de secado al vacío y secado por congelación que producen un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional a partir de una solución previamente filtrada a esterilidad del mismo.

También pueden prepararse formulaciones de liberación lenta o mantenida para conseguir una liberación controlada del compuesto activo en contacto con los líquidos corporales en el tubo GI, y para proporcionar un nivel sustancialmente constante y eficaz del compuesto activo en el plasma sanguíneo. Por ejemplo, la liberación puede controlarse mediante uno o más de disolución, difusión e intercambio iónico. Además, la estrategia de liberación lenta puede potenciar la absorción mediante rutas saturables o limitantes dentro del tubo GI. Por ejemplo, el compuesto puede incluirse para este propósito en una matriz polimérica de un polímero degradable biológico, un polímero soluble en agua o una mezcla de ambos, y opcionalmente tensioactivos adecuados. Incluir puede significar en este contexto la incorporación de micropartículas en una matriz de polímeros. También pueden obtenerse formulaciones de liberación controlada a través de encapsulación de micropartículas dispersadas o microgotas emulsionadas mediante tecnologías conocidas de recubrimiento por dispersión o emulsión.

Para la administración por inhalación, los compuestos de la presente invención se administran convenientemente en forma de una presentación de pulverización en aerosol desde envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado. En la realización de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación puede determinarse proporcionando una válvula para suministrar una cantidad medida. Pueden formularse cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina, para su uso en un inhalador o insuflador, que contienen una mezcla en polvo del compuesto y una base en polvo adecuada tal como lactosa o almidón.

Los compuestos divulgados en este documento pueden formularse para administración parenteral por inyección, (por ejemplo, mediante inyección en embolada o infusión continua). Las formulaciones para inyección pueden presentarse en forma monodosis (por ejemplo, en ampollas o en recipientes multidosis) con un conservante añadido. Las composiciones pueden adoptar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación, tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes.

Las formulaciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos en forma soluble en agua. Además, pueden prepararse suspensiones de los compuestos como suspensiones de inyección oleosas apropiadas. Disolventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos o ésteres de ácidos grasos sintéticos. Las suspensiones de inyección acuosas pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes adecuados o agentes que aumentan la solubilidad de los compuestos y permiten la preparación de soluciones altamente concentradas. Como alternativa, una presente composición puede estar en forma de polvo para su constitución con un vehículo adecuado (por ejemplo, agua apirógena estéril) antes de su uso.

Los compuestos divulgados en este documento también pueden formularse en composiciones rectales, tales como supositorios o enemas de retención (por ejemplo, que contienen bases convencionales de supositorio). Además de las formulaciones descritas previamente, los compuestos también se pueden formular como una preparación de liberación lenta. Dichas formulaciones de acción prolongada pueden administrarse por implante (por ejemplo, subcutáneo o intramuscular) o por inyección intramuscular. Por tanto, por ejemplo, los compuestos pueden formularse con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o como derivados moderadamente solubles, por ejemplo, como una sal moderadamente soluble.

En particular, un compuesto divulgado en este documento puede administrarse por vía oral, bucal o sublingual en forma de comprimidos que contienen excipientes, tales como almidón o lactosa, o en cápsulas u óvulos, en solitario o en mezcla con excipientes, o en forma de elixires o suspensiones que contienen agentes aromatizantes o colorantes. Dichas preparaciones líquidas pueden prepararse con aditivos farmacéuticamente aceptables, tales como agentes de suspensión. Un compuesto también puede inyectarse por vía parenteral, por ejemplo, intravenosa, intramuscular, subcutánea o intracoronaria. Para administración parenteral, el compuesto se usa mejor en forma de una solución acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo, sales, o alditoles, tales como manitol, o glucosa, para hacer que la solución sea isotónica con la sangre.

Para uso veterinario, un compuesto divulgado en este documento se administra como una formulación adecuadamente aceptable de acuerdo con la práctica veterinaria normal. El veterinario puede determinar fácilmente la pauta de dosificación y la vía de administración que es más apropiada para un animal particular.

En algunas realizaciones, todos los componentes necesarios para el tratamiento de un trastorno relacionado con KIF18A usando un compuesto como se divulga en este documento, solo o en combinación con otro agente o intervención tradicionalmente usada para el tratamiento de dicha enfermedad, puede envasarse en un kit. Específicamente, la presente invención proporciona un kit para su uso en la intervención terapéutica de la enfermedad, que comprende un conjunto envasado de medicamentos que incluyen el compuesto divulgado en este documento, así como tampones y otros componentes para preparar formas administrables de dichos medicamentos, y/o dispositivos para administrar dichos medicamentos, y/o cualquier agente que se use en politerapia con el compuesto divulgado en este documento, y/o instrucciones para el tratamiento de la enfermedad, envasadas con los medicamentos. Las instrucciones pueden estar fijas en cualquier medio tangible, tal como papel impreso, o un medio magnético u óptico legible por ordenador, o instrucciones para remitirse a una fuente de datos informáticos remotos tal como una ciberpágina accesible mediante Internet.

Una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad eficaz para tratar o para prevenir el desarrollo de, o para aliviar los síntomas existentes de, el sujeto que se está tratando. La determinación de las cantidades eficaces pertenece a las capacidades de los expertos en la materia, especialmente en vista de la divulgación detallada proporcionada en este documento. En general, una "dosis terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad del compuesto que provoca que se consiga el efecto deseado. Por ejemplo, en una realización preferida, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto divulgado en este documento disminuye la actividad de KIF18A en al menos un 5 %, en comparación con el control, al menos un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 %, al menos un 55 %, al menos un 60 %, al menos un 65 %, al menos un 70 %, al menos un 75 %, al menos un 80 %, al menos un 85 % o al menos un 90 %.

La cantidad de compuesto administrada puede depender del sujeto que se esté tratando, de la edad, salud, sexo y peso del sujeto, el tipo de tratamiento simultáneo (si lo hay), la gravedad de la afección, la naturaleza del efecto deseado, la manera y frecuencia de tratamiento, y el criterio del médico prescriptor. La frecuencia de dosificación también puede depender de los efectos farmacodinámicos sobre las presiones de oxígeno arterial. Aunque las necesidades individuales varían, la determinación de intervalos óptimos de cantidades eficaces del compuesto pertenece a las habilidades de la técnica. Dichas dosis pueden administrarse en una sola dosis, o pueden dividirse en múltiples dosis.

Los términos "cáncer" y "canceroso", cuando se usan en este documento, se refieren a o describen el estado fisiológico en mamíferos que se caracteriza típicamente por crecimiento celular no regulado. Ejemplos de cáncer incluyen, sin limitación, carcinoma, linfoma, sarcoma, blastoma y leucemia. Ejemplos más particulares de dichos cánceres incluyen carcinoma escamocelular, cáncer pulmonar, cáncer pancreático, cáncer cervicouterino, cáncer de vejiga, hepatoma, cáncer de mama, carcinoma de colon y cáncer de cabeza y cuello, cáncer de ovario y cáncer endometrial. Aunque el término "cáncer", como se usa en este documento, no se limita a ninguna forma específica de la enfermedad, se cree que los métodos de la invención serán particularmente eficaces para cánceres que se encuentra que están acompañados por niveles no regulados de KIF18A o dependientes de KIF18A para la segregación apropiada de los cromosomas y la supervivencia en el mamífero.

Los términos "tratar", "tratando" y "tratamiento", como se usan en este documento, se refieren a terapia, incluyendo, sin limitación, terapia curativa, terapia profiláctica y terapia preventiva. El tratamiento profiláctico en general constituye prevenir la aparición de trastornos conjuntamente o retardar la aparición de una fase preclínicamente evidente de trastornos en los individuos.

El término "paciente", "sujeto" o "mamífero", como se usa en este documento, se refiere a cualquier "paciente", "sujeto" o "mamífero", incluyendo seres humanos, vacas, caballos, perros y gatos. En una realización de la invención, el mamífero es un ser humano.

Se entiende que la expresión "que comprende" es abierta, incluyendo el componente o componentes indicados, pero no excluyendo otros elementos.

Los términos "fórmula I" incluyen cualquier subfórmula.

Métodos de uso de inhibidores de KIF18A

La presente divulgación proporciona compuestos que tienen actividad moduladora de KIF18A basada en MT en general, y actividad inhibidora en particular. En una realización de la invención, se proporciona un método de modulación de la proteína KIF18A en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad de dosificación eficaz de un compuesto de fórmula I. Por tanto, los compuestos de la invención pueden usarse para tratar trastornos de proliferación celular, incluyendo crecimiento celular incontrolado, regulación aberrante del ciclo celular, anomalías del centrosoma (estructurales y/o numéricas, fragmentación). Otras enfermedades o trastornos asociados con la acumulación de centrosomas adicionales (>2) incluyen infección por virus del papiloma humano (HPV), incluyendo neoplasias asociadas a HPV. Los compuestos también son útiles para enfermedades relacionadas con cilios, así como anulación de población de células germinales haploides que podría usarse como anticonceptivo masculino.

Además, los compuestos de la invención son útiles para, aunque sin limitación, la prevención o tratamiento del cáncer y otras enfermedades o trastornos mediados por KIF18A. Por ejemplo, compuestos de la invención serían útiles para el tratamiento de diversos tumores sólidos y hemáticos, tales como carcinomas, incluyendo, sin limitación, cáncer de vejiga, mama, colon, riñón, hígado, pulmón (incluyendo cáncer pulmonar escamocelular y microcítico), esófago, vesícula biliar, ovario, páncreas, estómago, cuello uterino, tiroides, próstata y piel (incluyendo carcinoma escamocelular); tumores hematopoyéticos de linaje linfático (incluyendo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de linfocitos B, linfoma de linfocitos T, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma de tricoleucocitos y linfoma de Burkett); tumores hematopoyéticos de linaje mielocítico (incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica); tumores de origen mesenquimático (incluyendo fibrosarcoma y rabdomiosarcoma, y otros sarcomas, por ejemplo, de tejido blando y hueso); tumores del sistema nervioso central y periférico (incluyendo astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannomas); y otros tumores (incluyendo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xerodermia pigmentosa, queratoacantoma, cáncer folicular de tiroides y sarcoma de Kaposi).

Los compuestos de la invención también son útiles en el tratamiento de indicaciones relacionadas con cáncer tales como tumores sólidos, sarcomas (especialmente sarcoma de Ewing y osteosarcoma), retinoblastoma, rabdomiosarcomas, neuroblastoma, neoplasias malignas hematopoyéticas, incluyendo leucemia y linfoma, efusiones pleurales o pericárdicas inducidas por tumor, y ascitis maligna.

En función de la capacidad de modular la cinesina que influye en la angiogénesis, los compuestos de la invención también son útiles en el tratamiento y terapia de enfermedades proliferativas. Particularmente, estos compuestos pueden usarse para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, especialmente de manifestaciones en el aparato locomotor, tal como diversas enfermedades reumatoides inflamatorias, especialmente poliartritis crónica, incluyendo artritis reumatoide, artritis juvenil o artropatía soriásica; síndrome paraneoplásico o enfermedades inflamatorias inducidas por tumor, efusiones turbias, colagenosis, tal como lupus eritematoso diseminado, polimiositis, dermatomiositis, esclerodermia sistémica o colagenosis mixta; artritis posinfecciosa (donde no puede encontrarse organismo patógeno vivo en o dentro de la parte afectada del organismo), espondiloartritis seronegativa, tal como espondilitis anquilosante; vasculitis, sarcoidosis o artrosis; o también cualquier combinación de los mismos.

Los compuestos de la invención también pueden usarse como agentes activos contra patologías tales como artritis, ateroesclerosis, soriasis, hemangiomas, angiogénesis miocárdica, daños colaterales coronarios y cerebrales, angiogénesis de extremidades isquémicas, curación de heridas, enfermedades relacionadas con Helicobacter de úlcera péptica, fracturas, linfadenitis regional, rubeosis, glaucoma neovascular y retinopatías tales como las asociadas con retinopatía diabética o degeneración macular. Además, algunos de estos compuestos pueden usarse como agentes activos contra tumores sólidos, ascitis maligna, cánceres hematopoyéticos y trastornos hiperproliferativos tales como hiperplasia de tiroides (especialmente enfermedad de Grave), y quistes (tal como hipervascularidad del estroma del ovario, característica de síndrome de ovario poliquístico (síndrome de Stein-Leventhal)) ya que dichas enfermedades requieren una proliferación de las células de los vasos sanguíneos para el crecimiento y/o la metástasis.

Además de ser útiles para el tratamiento humano, estos compuestos son útiles para tratamiento veterinario de animales de compañía, animales exóticos y animales de granja, incluyendo mamíferos, roedores y similares. Por ejemplo, animales incluyendo caballos, perros y gatos pueden tratarse con compuestos proporcionados por la invención.

Combinaciones

Aunque los compuestos de la invención pueden dosificarse o administrarse como el único agente agente farmacéutico activo, también pueden usarse en combinación con uno o más compuestos de la invención o junto con otros agentes. Cuando se administran como una combinación, los agentes terapéuticos pueden formularse como composiciones separadas que se administran simultánea o secuencialmente en diferentes momentos, o los agentes terapéuticos pueden administrarse como una sola composición.

La expresión "cotratamiento" (o "politerapia"), en la definición del uso de un compuesto de la presente invención y otro agente farmacéutico, se pretende que abarque la administración de cada agente de una manera secuencial en una pauta que proporcionará efectos beneficiosos de la combinación de fármacos, y se pretende también que abarque la coadministración de estos agentes de una manera sustancialmente simultánea, tal como en una sola cápsula que tiene una relación fija de estos agentes activos o en múltiples cápsulas separadas para cada agente.

Específicamente, la administración de compuestos de la presente invención puede ser junto con tratamientos adicionales conocidos por los expertos en la materia en la prevención o tratamiento del cáncer, tal como con radioterapia, agentes dirigidos micromoleculares (por ejemplo, inhibidores de PARP, inhibidores de cinasa), anticuerpos terapéuticos (por ejemplo, descubiertos y conjugados con fármaco), anticuerpos de inmunoterapia (inhibidores del punto de control, acopladores de linfocitos T biespecíficos) con agentes neoplásicos o citotóxicos.

Si se formulan como una dosis fija, dichos productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro de los intervalos de dosificación aceptados. Los compuestos de fórmula I también pueden administrarse secuencialmente con agentes antineoplásicos o citotóxicos conocidos cuando una formulación de combinación es inapropiada. La invención no está limitada en la secuencia de administración; los compuestos de la invención pueden administrarse antes de, simultáneamente con o después de la administración del agente antineoplásico o citotóxico conocido.

Hay grandes números de agentes antineoplásicos disponibles en uso comercial, en evaluación clínica y en desarrollo preclínico, que se seleccionarían para tratamiento de neoplasia por quimioterapia con fármacos de combinación. Dichos agentes están dentro de varias categorías principales tales como agentes de tipo antibiótico, agentes alquilantes y de tipo alquilante, agentes antimitóticos, agentes micromoleculares dirigidos, agentes antimetabolitos, agentes hormonales, agentes inmunológicos, agentes antiangiogénicos, agentes de tipo interferón y una categoría de agentes variados.

La presente divulgación también proporciona métodos para politerapias en que un agente conocido por modular otras vías, u otros componentes de la misma vía, o incluso conjuntos solapantes de enzimas diana se usan en combinación con un compuesto de la presente divulgación, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En un aspecto, dicho tratamiento incluye, aunque sin limitación, la combinación de uno o más compuestos de la divulgación con agentes quimioterápicos, anticuerpos terapéuticos, agentes micromoleculares dirigidos y radioterapia, para proporcionar un efecto terapéutico sinérgico o aditivo.

Muchos agentes quimioterápicos son actualmente conocidos en la técnica y pueden usarse en combinación con los compuestos de la divulgación. En algunas realizaciones, el agente quimioterápico se selecciona del grupo que consiste en agentes antimitóticos, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos intercalantes, inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores del ciclo celular, enzimas, inhibidores de topoisomerasa, modificadores de la respuesta biológica, antihormonas, inhibidores de la angiogénesis y antiandrógenos. Ejemplos no limitantes son agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos y moléculas pequeñas no peptídicas tales como Gleevec® (mesilato de imatinib), Kyprolis® (carfilzomib), Velcade® (bortezomib), Casodex (bicalutamida), Iressa® (gefitinib) y adriamicina, así como una multitud de agentes quimioterápicos. Ejemplos no limitantes de agentes quimioterápicos incluyen agentes alquilantes, tales como tiotepa y ciclosfosfamida (CYTOXANTM); alquilsulfonatos tales como busulfán, improsulfán y piposulfán; aziridinas tales como benzodopa, carbocuona, meturedopa y uredopa; etileniminas y metilamelaminas incluyendo altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosfaoramida y trimetilolomelamina; mostazas de nitrógeno tales como clorambucilo, clomafazina, ciclofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, clohidrato de óxido de mecloretamina, melfalán, novembichina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, uramustina; nitrosureas tales como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; antibióticos tales como aclacinomicinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, calicheamicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, CasodexTM, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina, epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina; antimetabolitos tales como metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); análogos de ácido fólico tales como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina talescomo fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina tales como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, didesoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, andrógenos tales como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antisuprerrenales tales como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; reponedor de ácido fólico tal como ácido frolínico; aceglatona; glucósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; amsacrina; bestrabucilo; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diazicuona; elfomitina; acetato de eliptinio; etoglúcido; nitrato de galio; hidroxiurea; lentinano; lonidamina; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarrubicina; ácido podofilínico; 2-etilhidrazida; procarbazina; PSK; razoxano; sizofirano; espirogermanio; ácido tenuazónico; triazicuona; 2',2',2"-triclorotrietilamina; uretano; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobromano; gacitosina; arabinósido ("Ara-C"); ciclofosfamida; tiotepa; taxanos, por ejemplo, paclitaxel y doxetaxel, Nab-paclitaxel; ácido retinoico; esperamicinas; capecitabina; y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.

También se incluyen como acondicionadores celulares quimioterápicos adecuados agentes antihormonales que actúan para regular o inhibir la acción de las hormonas sobre tumores, tales como antiestrógenos que incluyen, por ejemplo, tamoxifeno, (NolvadexTM), raloxifeno, 4(5)-imidazoles que inhiben la aromatasa, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY 117018, onapristona y toremifeno (Fareston); y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolida y goserelina; clorambucilo; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platino tales como cisplatino, oxaliplatino, carboplatino; etopósido (VP-16); ifosfamida; mitomicina C; mitoxantrona; vinblastina; vincristina; vinorelbina; navelbina; novantrona; tenipósido; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; topotecán; camptotecina-11 (CPT-11); inhibidor de topoisomerasa RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO).

Cuando se desee, los compuestos o composición farmacéutica de la presente divulgación pueden usarse en combinación con agentes antineoplásicos prescritos normalmente tales como Herceptin®, Avastin®, Erbitux®, Rituxan®, Taxol®, abraxano, Arimidex®, Taxotere®, ABVD, AVICINE, abagovomab, carboxamida de acridina, adecatumumab, 17-N-alilamino-17-demetoxigeldanamicina, Alpharadin, Alvocidib, 3-aminopiridin-2-carboxaldehído tiosemicarbazona, Amonafide, antracenediona, inmunotixinas anti-CD22, Antineoplastic, hierbas antitumorigénicas, apazicuona, Atiprimod, azatioprina, belotecán, bendamustina, BIBW 2992, Biricodar, brostalicina, briostatina, butionina sulfoximina, CBV (quimioterapia), caliculina, agentes antinoepásicos no específicos del ciclo celular, ácido dicloroacético, discodermolida, elsamitrucina, enocitabina, epotilona, eribulina, everólimus, exatecán, Exisulind, ferruginol, forodesina, fosfestrol, pauta quimioterápica de ICE, IT-101, Imexon, imiquimod, indolocarbazol, irofulveno, laniquidar, larotaxel, lenalidomida, lucantona, lurtotecán, mafosfamida, mitozolomida, nafoxidina, nedaplatino, Olaparib, Talazoparib, Niraparib, ortataxel, PAC-1, Pawpaw, pixantrona, inhibidor del proteasoma, rebecamicina, Resiquimod, rubitecán, SN-38, salinosporamida A, sapacitabina, Stanford V, swainsonina, talaporfina, Tariquidar, Tegafur-uracilo, Temodar, tesetaxel, tetranitrato de triplatino, tris(2-cloroetil)amina, troxacitabina, uramustina, vadimezano, vinflunina, ZD6126 o Zosuquidar, inhibidores de CDK4/6 (Palbociclib, Ibrance; Ribociclib, Kisqali; Abemaciclib, Verzenio).

Esta divulgación se refiere además a un método para usar los compuestos o composiciones farmacéuticas proporcionadas en este documento, en combinación con radioterapia para inhibir el crecimiento celular anómalo o tratar el trastorno hiperproliferativo en el mamífero. Las técnicas para administrar radioterapia son conocidas en la técnica, y estas técnicas pueden usarse en la politerapia descrita en este documento. La administración del compuesto de la divulgación en esta politerapia puede determinarse como se describe en este documento.

La radioterapia puede administrarse a través de uno de varios métodos, o una combinación de métodos incluyendo, sin limitación, tratamiento con haz externo, radioterapia interna, radiación con implante, radiocirugía estereotáctica, radioterapia sistémica, radioterapia y braquiterapia intersticial permanente o temporal. El término "braquiterapia", como se usa en este documento, se refiere a radioterapia administrada por un material radiactivo espacialmente confinado insertado en el organismo en o cerca de un tumor u otro sitio de enfermedad proliferativa de tejido. Se pretende que el término, sin limitación, incluya la exposición a isótopos radiactivos (por ejemplo, At-211, I-131, I-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32, e isótopos radiactivos de Lu). Las fuentes de radiación adecuadas para su uso como acondicionador celular de la presente divulgación incluyen tanto sólidos como líquidos. A modo de ejemplo no limitante, la fuente de radiación puede ser un radionúclido, tal como 1-125, 1-131, Yb-169, Ir-192 como una fuente sólida, 1-125 como una fuente sólida, u otros radionúclidos que emiten fotones, partículas beta, radiación gamma u otros rayos terapéuticos. El material radiactivo también puede ser un fluido hecho a partir de cualquier solución de uno o más radionúclidos, por ejemplo, una solución de I-125 o 1-131, o puede producirse un fluido radiactivo usando una suspensión de un fluido adecuado que contiene partículas pequeñas de radionúclidos sólidos, tales como Au-198, Y-90. Además, el o los radionúclidos pueden incluirse en un gel o microesferas radiactivas.

Los compuestos o composiciones farmacéuticas de la divulgación pueden usarse en combinación con una cantidad de una o más sustancias seleccionadas de agentes antiangiogénicos, inhibidores de la transducción de señales, agentes antiproliferativos, inhibidores de la glucólisis o inhibidores de autofagia.

Pueden usarse agentes antiangiogénicos, tales como inhibidores de MMP-2 (metaloproteinasa 2 de matriz), inhibidores de MMP-9 (metaloproteinasa 9 de matriz) e inhibidores de COX-11 (ciclooxigenasa 11), junto con un compuesto de la divulgación y composiciones farmacéuticas descritas en este documento. Los agentes antiangiogénicos incluyen, por ejemplo, rapamicina, temsirólimus (CCI-779), everólimus (RAD001), sorafenib, sunitinib y bevacizumab. Ejemplos de inhibidores de COX-II útiles incluyen alecoxib, valdecoxib y rofecoxib. Ejemplos de inhibidores útiles de metaloproteinasa de matriz se describen en los documentos WO 96/33172, WO 96/27583, publicación de patente europea EP0818442, publicación de patente europea EP1004578, documentos WO 98/07697, WO 98/03516, WO 98/34918, WO 98/34915, WO 98/33768, WO 98/30566, publicación de patente europea 606046, publicación de patente europea 931 788, documentos WO 90/05719, WO 99/52910, WO 99/52889, WO 99/29667, WO1999007675, publicación de patente europea EP1786785, publicación de patente europea n.° EP1181017, publicación de Estados Unidos n.° US20090012085, publicación de Estados Unidos US5863 949, publicación de Estados Unidos US5861 510 y publicación de patente europea EP0780386. Inhibidores preferidos de MMP-2 y MMP-9 son los que tienen poca o ninguna actividad inhibidora de MMP-1. Son más preferidos los que inhiben selectivamente MMP-2 y/o AMP-9 respecto a las otras metaloproteinasas de matriz (es decir, MAP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP- 7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12 y MMP-13). Algunos ejemplos específicos de inhibidores de MMP<útiles en la divulgación son a>G-3340,<RO 32-3555 y RS 13-0830.>

Los presentes compuestos también pueden usarse en cotratamientos con otros agentes antineoplásicos, tales como acemanano, aclarrubicina, aldesleucina, alemtuzumab, alitretinoína, altretamina, amifostina, ácido aminolevulínico, amrubicina, amsacrina, anagrelida, anastrozol, ANCER, ancestim, ARGLABIN, trióxido arsénico, BAM 002 (Novelos), bexaroteno, bicalutamida, broxuridina, capecitabina, celmoleucina, cetrorelix, cladribina, clotrimazol, ocfosfato de citarabina, DA 3030 (Dong-A), daclizumab, denileucina diftitox, deslorelina, dexrazoxano, dilazep, docetaxel, docosanol, doxercalciferol, doxifluridina, doxorrubicina, bromocriptina, carmustina, citarabina, fluorouracilo, diclofenaco HIT, interferón alfa, daunorrubicina, doxorrubicina, tretinoína, edelfosina, edrecolomab, eflomitina, emitefur, epirrubicina, epoetina beta, fosfato de etopósido, exemestano, exisulind, fadrozol, filgrastim, finasterida, fosfato de fludarabina, formestano, fotemustina, nitrato de galio, gemcitabina, gemtuzumab zogamicina, combinación de gimeracil/oteracil/tegafur, glicopina, goserelina, heptaplatino, gonadotropina coriónica humana, fetoporteína alfa fetal humana, ácido ibandrónico, idarrubicina (imiquimod, interferón alfa, interferón alfa, natural, interferón alfa-2, interferón alfa-2a, interferón alfa-2b, interferón alfa-N1, interferón alfa-n3, interferón alfacon-1, interferón alfa, natural, interferón beta, interferón beta-1a, interferón beta-1b, interferón gamma, interferón gamma-1a natural, interferón gamma-1b, interleucina-1 beta, yobenguano, irinotecán, irsogladina, lanreotida, LC 9018 (Yakult), leflunomida, lenograstim, sulfato de lentinano, letrozol, interferón alfa de leucocitos, leuprorelina, levamisol fluorouracilo, liarozol, lobaplatino, lonidamina, lovastatina, masoprocol, melarsoprol, metoclopramida, mifepristona, miltefosina, mirimostim, ARN bicatenario desacoplado, mitoguazona, mitolactol, mitoxantrona, molgramostim, nafarelina, naloxona pentazocina, nartograstim, nedaplatino, nilutamida, noscapina, proteína estimuladora de la eritropoyesis novedosa, octreotida NSC 631570, oprelvecina, osaterona, oxaliplatino, paclitaxel, ácido pamidrónico, pegaspargasa, peginterferón alfa-2b, polisulfato de pentosano sódico, pentostatina, picibanil, pirarrubicina, anticuerpo policlonal antitimocitos de conejo, interferón alfa-2a con polietilenglicol, porfímero sódico, raloxifeno, raltitrexed, rasburiembodiment, etidronato de renio Re 186, retinamida RII, rituximab, romurtida, samario (153 Sm) lexidronam, sargramostim, sizofirano, sobuzoxano, sonermina, cloruro de estroncio-89, suramina, tasonermina, tazaroteno, tegafur, temoporfina, temozolomida, tenipósido, tetraclorodecaóxido, talidomida, timalfasina, tirotropina alfa, topotecán, toremifeno, tositumomab-yodo 131, trastuzumab, treosulfán, tretinoína, trilostano, trimetrexato, triptorelina, factor de necrosis tumoral alfa, natural, ubenimex, vacuna contra cáncer de vejiga, vacuna Maruyama, vacuna de lisado de melanoma, valrubicina, verteporfina, vinorelbina, VIRULIZIN, estimalámero de zinostatina o ácido zoledrónico; abarelix; AE 941 (Aeterna), ambamustina, oligonucleótido de antisentido, bcl-2 (Genta), APC 8015 (Dendreon), cetuximab, decitabina, dexaminoglutetimida, diazicuona, EL 532 (Elan), EM 800 (Endorecherche), eniluracilo, etanidazol, fenretinida, filgrastim SD01 (Amgen), fulvestrant, galocitabina, inmunógeno gastrina 17, genoterapia HLA-B7 (Vical), factor estimulador de colonias de granulocitos-macrófagos, diclorhidrato de histamina, ibritumomab tiuxetano, ilomastat, IM 862 (Cytran), interleucina-2, iproxifeno, LDI 200 (Milkhaus), leridistim, lintuzumab, MAb CA 125 (Biomira), MAb contra el cáncer (Japan Pharmaceutical Development), MAb HER-2 y Fc (Medarex), MAb<105AD7 idiotípico>(<c>R<c Technology), MAb CEA idiotípico (Trilex), MAb LYM-1-yodo 131 (Techniclone), MAb contra>mucina epitelial polimórfica-itrio 90 (Antisoma), marimastat, menogaril, mitumomab, motexafina gadolinio, MX 6 (Galderma), nelarabina, nolatrexed, proteína P 30, pegvisomant, pemetrexed, porfiromicina, prinomastat, RL 0903 (Shire), rubitecán, satraplatino, fenilacetato de sodio, ácido esparfósico, SRL 172 (SR Pharma), SU 5416 (SUGEN), TA 077 (Tanabe), tetratiomolibdato, taliblastina, trombopoyetina, etil etiopurpurina de estaño, tirapazamina, vacuna contra el cáncer (Biomira), vacuna contra el melanoma (New York University), vacuna contra el melanoma (Sloan Kettering Institute), vacuna de oncolisado de melanoma (New York Medical College), vacuna vírica de lisados celulares de melanoma (Royal Newcastle Hospital) o valspodar.

Los compuestos de la invención pueden usarse además con inhibidores de VEGFR. Otros compuestos descritos en las siguientes patentes y solicitudes de patente pueden usarse en politerapia: US 6258812, US 2003/0105091, WO 01/37820, US 6235764, WO 01/32651, US 6630500, US 6515004, US 6713485, US 5521 184, US 5770599, US 5747498, WO 02/68406, WO 02/66470, WO 02/55501, WO 04/05279, WO 04/07481, WO 04/07458, WO 04/09784, WO 02/59110, WO 99/45009, WO 00/59509, WO 99/61422, US 5990 141, WO 00/12089 y WO 00/02871.

En algunas realizaciones, la combinación comprende una composición de la presente invención en combinación con al menos un agente antiangiogénico. Los agentes incluyen, aunque sin limitación, composiciones químicas preparadas sintéticamentein vitro,anticuerpos, regiones de unión a antígeno, radionúclidos y combinaciones y conjugados de los mismos. Un agente puede ser un agonista, antagonista, modulador alostérico, toxina o, más en general, puede actuar inhibiendo o estimulando su diana (por ejemplo, activación o inhibición del receptor o enzimática), y de ese modo promover la muerte celular o detención del ciclo celular.

Agentes antiangiogénicos ejemplares incluyen ERBITUX™ (IMC-C225), agentes inhibidores de KDR (receptor de dominio cinasa) (por ejemplo, anticuerpos y regiones de unión a antígeno que se unen específicamente al receptor de dominio cinasa), agentes anti-VEGF (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen<específicamente a VEGF, o receptores de>VEG<f soluble o una proteína de unión a ligando de los mismos) tales como>AVASTIN™ o VEGF-TRAP™, y agentes antirreceptor de VEGF (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente al mismo), agentes inhibidores de EGFR (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente al mismo) tales como Vectibix (panitumumab), IRESSA™ (gefitinib), TARCEVA™ (erlotinib), agentes anti-Ang1 y anti-Ang2 (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente al mismo o a sus receptores, por ejemplo, Tie2/Tek), y agentes inhibidores anticinasa Tie2 (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente a la misma). Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden incluir uno o más agentes (por ejemplo, anticuerpos, regiones de unión a antígeno o receptores solubles) que se unen específicamente e inhiben la actividad de los factores de crecimiento, tales como antagonistas del factor de crecimiento de hepatocitos (HGF, también conocido como factor Scatter), y anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente a su receptor "c-met".

Otros agentes antiangiogénicos incluyen Campath, IL-8, B-FGF, antagonistas de Tek (Cerettiet al.,publicación de Estados Unidos n.° 2003/0162712; patente de Estados Unidos n.° 6413932), agentes anti-TWEAK (por ejemplo, anticuerpos que se unen específicamente o regiones de unión a antígeno, o antagonistas del receptor de TWEAK soluble; véase, Wiley, patente de Estados Unidos n.° 6727225), dominio desintegrina ADAM para antagonizar la unión de integrina a sus ligandos (Fanslowet al.,publicación de Estados Unidos n.° 2002/0042368), anticuerpos que se unen específicamente antirreceptor de eph y/o antiefrina o regiones de unión a antígeno (patentes de Estados Unidos n.° 5981 245; 5728813; 5969 110; 6596852; 6232447; 6057 124 y miembros de la familia de patentes de las mismas), y antagonistas anti-PDGF-BB (por ejemplo, anticuerpos que se unen específicamente o regiones de unión a antígeno), así como anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente a ligados de PDGF-BB, y agentes inhibidores de cinasa PDGFR (por ejemplo, anticuerpos o regiones de unión a antígeno que se unen específicamente a la misma).

Agentes antiangiogénicos/antitumorales adicionales incluyen: SD-7784 (Pfizer, EE. UU.); cilengitide (Merck KGaA, Alemania, EPO 770622); pegaptanib octasodio (Gilead Sciences, EE. UU.); alfastatina (BioActa, Reino Unido); M-PGA<(Celgene, EE. UU., US 5712291); ilomastat, (Arriva, EE. UU., US 5892112); emaxanib (Pfizer,>E<e>.<UU., US 5792783);>vatalanib, (Novartis, Suiza); 2-metoxiestradiol (EntreMed, EE. UU.); TLC ELL-12 (Elan, Irlanda); acetato de anecortavo<(Alcon, EE. UU.); Mab alfa-D148 (Amgen, e>E.<UU.); CEP-7055 (Cephalon, EE. UU.); Mab anti-Vn (Crucell, Países>Bajos) DAC:antiangiogénico (ConjuChem, Canadá); angiocidina (InKine Pharmaceutical, EE. UU.); KM-2550 (Kyowa Hakko, Japón); SU-0879, (Pfizer, EE. UU.); CGP-79787, (Novartis, Suiza, EP 970070); ARGENT technology (Ariad, EE. UU.); YIGSR-Stealth (Johnson & Johnson, EE. UU.); fragmento de fibrinógeno-E (BioActa, Reino Unido); inhibidor de la angiogénesis (Trigen, Reino Unido); TBC-1635 (Encysive Pharmaceuticals, EE. UU.); SC-236 (Pfizer, EE. UU.); ABT-567 (Abbott, EE. UU.); metastatina (EntreMed, EE. UU.); inhibidor de la angiogénesis (Tripep, Suecia); maspina<(Sosei, Japón); 2-metoxiestradiol (Oncology Sciences Corporation, EE. UU.); ER-68203-00>(I<v>A<x>,<EE. UU.); benefina>(Lane Labs, EE. UU.); Tz-93 (Tsumura, Japón); TAN-1120 (Takeda, Japón); FR-111142 (Fujisawa, Japón, JP 02233610); factor plaquetario 4 (RepliGen, EE. UU., EP 407122); antagonista de factor de crecimiento del endotelio vascular (Borean, Dinamarca); bevacizumab (pINN) (Genentech, EE. UU.); inhibidores de la angiogénesis (SUGEN,<EE. UU.); XL 784 (Exelixis,>E<e>.<UU.); XL 647 (Exelixis, EE. UU.); MAb, alfa5beta3 integrina, segunda generación>(Applied Molecular Evolution, EE. UU. y MedImmune, EE. UU.); genoterapia, retinopatía (Oxford BioMedica, Reino<Unido); clorhidrato de enzastaurina (USAN) (Lilly, EE. UU.);>C<e>P<7055 (Cephalon, EE. UU. y Sanofi-Synthelabo,>Francia); BC 1 (Genoa Institute of Cancer Research, Italia); inhibidor de la angiogénesis (Alchemia, Australia); antagonistas de VEGF (Regeneron, EE. UU.); rBPI 21 y antiangiogénico derivado de BPI (XOMA, EE. UU.); PI 88 (Progen, Australia); cilengitida (pINN) (Merck KGaA, German; Munich Technical University, Alemania, Scripps Clinic<and Research Foundation, EE. UU.); cetuximab (INN) (Aventis, Francia); AVE 8062 (Ajinomoto, Japón);>A<s 1404>(Cancer Research Laboratory, Nueva Zelanda); SG 292 (Telios, EE. UU.); endostatina (Boston Childrens Hospital, EE. UU.); ATN 161 (Attenuon, EE. UU.); angiostatina (Boston Childrens Hospital, EE. UU.); 2-metoxiestradiol (Boston Childrens Hospital, EE. UU.); ZD 6474 (AstraZeneca, Reino Unido); ZD 6126 (Angiogene Pharmaceuticals, Reino<Unido); PPI 2458 (Praecis, EE. UU.);>A<z>D<9935, (AstraZeneca, Reino Unido); AZD 2171 (AstraZeneca, Reino Unido);>vatalanib (pINN) (Novartis, Suiza y Schering AG, Alemania); inhibidores de la vía del factor tisular (EntreMed, EE. UU.); pegaptanib (Pinn) (Gilead Sciences, EE. UU.); xantorrizol (Yonsei University, Corea del Sur); vacuna, génica, VEGF-<2 (Scripps Clinic and Research Foundation,>E<e>.<UU.); SPV5.2 (Supratek, Canadá); SDX 103 (University of California en San Diego, EE. UU.); PX 478, (ProlX, e>E.<UU.); metastatina (EntreMed, EE. u>U.);<troponina I (Harvard University, EE. UU.); SU 6668 (SUGEN, EE.>U<u>.);<OXI 4503 (OXiGENE, EE. UU.); o-guanidinas, (Dimensional Pharmaceuticals,>EE. UU.); motuporamina C (British Columbia University, Canadá); CDP 791 (Celltech Group, Reino Unido); atiprimod (pINN) (GlaxoSmithKline, Reino Unido); E 7820 (Eisai, Japón); CYC 381 (Harvard University, EE. UU.); AE 941 (Aeterna, Canadá); vacuna, angiogénesis (EntreMed, EE. UU.); inhibidor del activador de plasminógeno urocinasa (Dendreon, EE. UU.); oglufanida (pINN) (Melmotte, EE. UU.); inhibidores de HIF-1 alfa (Xenova, Reino Unido); CEP<5214 (Cephalon, EE. UU.); BAY r>E<s 2622 (Bayer, Alemania); angiocidina (InKine, EE. UU.); A6 (Angstrom, EE. UU.);>KR 31372 (Korea Research Institute of Chemical Technology, Corea del Sur); GW 2286 (GlaxoSmithKline, Reino Unido); EHT 0101 (ExonHit, Francia); CP 868596 (Pfizer, EE. UU.); CP 564959 (OSI, EE. UU.); CP 547632 (Pfizer, EE. UU.); 786034 (GlaxoSmithKline, Reino Unido); KRN 633 (Kirin Brewery, Japón); sistema de aministración de fármacos, intraocular, 2-metoxiestradiol (EntreMed, EE. UU.); anginex (Maastricht University, Países Bajos, y<Minnesota University, EE. UU.); ABT 510 (Abbott, EE. UU.); AAL 993 (Novartis, Suiza); VEGI (ProteomTech, EE. u>U.); inhibidores del factor de necrosis tumoral-alfa (National Institute on Aging, EE. UU.); SU 11248 (Pfizer, EE. UU. y SUGEN EE. UU.); ABT 518 (Abbott, EE. UU.); YH16 (Yantai Rongchang, China); S-3APG (Boston Childrens Hospital, EE. UU. y EntreMed, EE. UU.); MAb, KDR (ImClone Systems, EE. UU.); MAb, alfa5 beta1 (Protein Design, EE. UU.); inhibidor de KDR cinasa (Celltech Group, Reino Unido, y Johnson & Johnson, EE. UU.); GFB 116, (South Florida University, EE. UU. y Yale University, EE. UU.); CS 706, (Sankyo, Japón); profármaco combretastatina A4 (Arizona<State University, EE. UU.); condroitinasa AC>(<i>B<e>X,<Canadá); BAY RES 2690 (Bayer, Alemania); AGM 1470 (Harvard University, EE.>U<u>.,<Takeda, Japón, y TAP,>E<e>.<u>U.);<AG 13925 (Agouron, EE.>U<u>.);<tetratiomolibdato (University of Michigan, EE. UU.); GCS 100 (Wayne State University, EE. UU.), CV 247 (Ivy Medical, Reino Unido);>C<k>D<732 (Chong>Kun Dang, Corea del Sur); MAb, factor de crecimiento del endotelio vascular (Xenova, Reino Unido); irsogladina (INN) (Nippon Shinyaku, Japón); RG 13577 (Aventis, Francia); WX 360 (Wilex, Alemania); escualamina (pINN) (Genaera, EE. UU.); RPI 4610, (Sima, EE. UU.); tratamiento contra el cáncer (Marinova, Australia); inhibidores de heparanasa (InSight, Israel); KL 3106 (Kolon, Corea del Sur); Honokiol, (Emory University, EE. UU.); ZK CDK (Schering AG,<Alemania); ZK Angio (Schering AG, Alemania);>Z<k 229561 (Novartis, Suiza, y Schering AG, Alemania); XMP 300 (XOMA, EE. UU.); v>G<a 1102 (Taisho, Japón); moduladores del receptor de VEGF (Farmacopea, EE. UU.);>antagonistas de VE-cadherina-2 (ImClone Systems, EE. UU.); vasostatina (National Institutes of Health, EE. UU.); vacuna, Flk-1 (ImClone Systems, EE. UU.); TZ 93 (Tsumura, Japón); TumStatin (Beth Israel Hospital, EE. UU.); FLT 1 (receptor 1 del factor de crecimiento del endotelio vascular) soluble truncado (Merck & Co, EE. UU.); ligandos de Tie-2 (Regeneron, EE. UU.); e inhibidor de trombospondina 1 (Allegheny Health, Education and Research Foundation, EE. UU.).

Los inhibidores de autofagia incluyen, aunque sin limitación, cloroquina, 3-metiladenina, hidroxicloroquina (Plaquenil™), bafilomicina A1, ribósido de 5-amino-4-imidazol carboxamida (AICAR), ácido okadaico, toxinas de algas supresoras de autofagia que inhiben las proteína fosfatasas de tipo 2A o de tipo 1, análogos de AMPc, y fármacos que elevan los niveles de AMPc tales como adenosina, LY204002, ribósido de N6-mercaptopurina y vinblastina. Además, también puede usarse antisentido o ARNip que inhibe la expresión de proteínas incluyendo, aunque sin limitación, ATG5 (que están implicadas en autofagia).

Compuestos/agentes farmacéuticamente activos adicionales que pueden usarse en el tratamiento de cánceres y que pueden usarse en combinación con uno o más compuestos de la presente invención incluyen: epoetina alfa;<darbepoetina alfa; panitumumab; pegfilgrastim; palifermina; filgrastim; denosumab; ancestim; a>M<g 102; AMG 386; AMG 479; AMG 655; AMG 745; a>M<g 951; y>A<m>G<706, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.>

En determinadas realizaciones, una composición proporcionada en este documento se administra conjuntamente con un agente quimioterápico. Agentes quimioterápicos adecuados pueden incluir productos naturales tales como alcaloides de la vinca (por ejemplo, vinblastina, vincristina y vinorelbina), paclitaxel, epidipodofilotoxinas (por ejemplo, etopósido y tenipósido), antibióticos (por ejemplo, dactinomicina (actinomicina D), daunorrubicina, doxorrubicina e idarrubicina), antraciclinas, mitoxantrona, bleomicinas, plicamicina (mitramicina), mitomicina, enzimas (por ejemplo, L-asparaginasa que metaboliza sistémicamente L-asparagina y priva a las células que no tienen la capacidad de sintetizar su propia asparagina), agentes antiplaquetarios, agentes alquilantes antiproliferativos/antimitóticos tales como mostazas de nitrógeno (por ejemplo, mecloretamina, ciclofosfamida y análogos, melfalán y clorambucilo), etileniminas y metilmelaminas (por ejemplo, hexaametilmelamina y tiotepa), inhibidores de CDK (por ejemplo, seliciclib, UCN-01, P1446A-05, PD-0332991, dinaciclib, P27-00, AT-7519, RGB286638 y SCH727965), alquilsulfonatos (por ejemplo, busulfán), nitrosoureas (por ejemplo, carmustina (BCNU) y análogos, y estreptozocina), trazenosdacarbazinina (DTIC), antimetabolitos antiproliferativos/antimitóticos tales como análogos de ácido fólico (por ejemplo, metotrexato), análogos de pirimidina (por ejemplo, fluorouracilo, floxuridina y citarabina), análogos de purina e inhibidores relacionados (por ejemplo, mercaptopurina, tioguanina, pentostatina y 2 -clorodesoxiadenosina), inhibidores de aromatasa (por ejemplo, anastrozol, exemestano y letrozol) y complejos de coordinación con platino (por ejemplo, cisplatino y carboplatino), procarbazina, hidroxiurea, mitotano, aminoglutetimida, inhibidores de histona desacetilasa (HDAC) (por ejemplo, tricostatina, butirato de sodio, apicidano, ácido suberoil anilida hidroámico, vorinostat, LBH 589, romidepsina, ACY-1215 y panobinostat), inhibidores de mTor (por ejemplo, temsirólimus, everólimus, ridaforólimus y sirólimus), inhibidores de KSP(Eg5) (por ejemplo, Array 520), agentes de unión a ADN (por ejemplo, Zalypsis), inhibidor de PI3K delta (por ejemplo, GS-1101 y TGR-1202), inhibidor de PI3K delta y gamma (por ejemplo, CAL-130), inhibidor multicinasa (por ejemplo, TG02 y sorafenib), hormonas (por ejemplo, estrógeno) y agonistas de hormonas tales como agonistas de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH) (por ejemplo, goserelina, leuprolida y triptorelina), anticuerpo neutralizante de BAFF (por ejemplo, LY2127399), inhibidores de IKK, inhibidores de p38MAPK, anti-IL-6 (por ejemplo, CNTO328), inhibidores de telomerasa (por ejemplo, GRN 163L), inhibidores de aurora cinasa (por ejemplo, MLN8237, AMG 900, AZD-1152), anticuerpos monoclonales de superficie celular (por ejemplo, anti-CD38 (HUMAX-CD38), anti-CS1 (por ejemplo, elotuzumab), inhibidores de HSP90 (por ejemplo, 17 AAG y KOS 953), inhibidores de P13K / Akt (por ejemplo, perifosina), inhibidor de Akt (por ejemplo, GSK-<2141795), inhibidores de PKC (por ejemplo, enzastaurina), f>T<i (por ejemplo, Zamestra™), anti-CD138 (por ejemplo,>BT062), inhibidor de cinasa específico de Torc1/2 (por ejemplo, INK128), inhibidor de cinasa (por ejemplo, GS-1101), agente dirigido a ER/UPR (por ejemplo, MKC-3946), inhibidor de cFMS (por ejemplo, ARRY-382), inhibidor de JAK1/2 (por ejemplo, CYT387), inhibidor de PARP (por ejemplo, olaparib, Talazoparib, Niraparib veliparib (ABT-888)), antagonista de BCL-2. Otros agentes quimioterápicos pueden incluir mecloretamina, camptotecina, ifosfamida, tamoxifeno, raloxifeno, gemcitabina, navelbina, sorafenib o cualquier variante análoga o derivada de los anteriores.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con radioterapia, hormonoterapia, cirugía e inmunoterapia, que sin terapias bien conocidas por los expertos en la materia.

En determinadas realizaciones, una composición farmacéutica proporcionada en este documento se administra conjuntamente con un esteroide. Esteroides adecuados pueden incluir, aunque sin limitación, 21 -acetoxipregnenolona, alclometasona, algestona, amcinonida, beclometasona, betametasona, budesonida, cloroprednisona, clobetasol, clocortolona, cloprednol, corticosterona, cortisona, cortivazol, deflazacort, desonida, desoximatasona, dexametasona, diflorasona, diflucortolona, difuprednato, enoxolona, fluazacort, flucloronida, flumetasona, flunisolida, fluocinolona acetonida, fluocinonida, fluocortina butilo, fluocortolona, fluorometolona, acetato de fluperolona, acetato de fluprednideno, fluprednisolona, flurandrenolida, propionato de fluticasona, formocortal, halcinonida, propionato de halobetasol, halometasona, hidrocortisona, etabonato de loteprednol, mazipredona, medrisona, meprednisona, metilprednisolona, furoato de mometasona, parametasona, prednicarbato, prednisolona, 25-dietilaminoacetato de prednisolona, fosfato sódico de prednisolona, prednisona, prednival, prednilideno, rimexolona, tixocortol, triamcinolona, acetonida de triamcinolona, benetonida de triamcinolona, hexacetonida de triamcinolona, y sales y/o derivados de los mismos. En una realización particular, los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con agentes activos farmacéuticamente activos adicionales que tratan las náuseas. Ejemplos de agentes que pueden usarse para tratar las náuseas incluyen: dronabinol; granisetrón; metoclopramida; ondansetrón; y proclorperazina; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Los compuestos o composiciones farmacéuticas de la divulgación también pueden usarse en combinación con una cantidad de una o más sustancias seleccionadas de inhibidores de EGFR, inhibidores de MEK, inhibidores de PI3K, inhibidores de AKT, inhibidores de TOR e inmunoterapias, incluyendo agentes anti-PD-1, anti-PDL-1, anti-CTLA4, anti-LAG1 y anti-OX40, agonistas de GITR, CAR-linfocitos T y BiTE.

Inhibidores de EGFR incluyen, aunque sin limitación, antagonistas micromoleculares, inhibidores de anticuerpos o nucleótidos de antisentido específicos o ARNip. Inhibidores de anticuerpos útiles de EGFR incluyen cetuximab (Erbitux), panitumumab (Vectibix), zalutumumab, nimotuzumab y matuzumab. Antagonistas micromoleculares de EGFR incluyen gefitinib, erlotinib (Tarceva) y, muy recientemente, lapatinib (TykerB). Véase, por ejemplo, Yan L,et al.,Pharmacogenetics and Pharmacogenomics In Oncology Therapeutic Antibody Development, BioTechniques 2005; 39(4): 565-8, y Paez J G,et al.,EGFR Mutations In Lung Cancer Correlation With Clinical Response To Gefitinib Therapy, Science 2004; 304(5676): 1497-500.

Ejemplos no limitantes de inhibidores micromoleculares de EGFR incluyen cualquiera de los inhibidores de EGFR descritos en las siguientes publicaciones de patente, y todas las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de dichos inhibidores de EGFR: solicitud de patente europea EP 520722, publicada el 30 de diciembre de 1992; solicitud de patente europea EP 566226, publicada el 20 de octubre de 1993; publicación internacional PCT WO 96/33980, publicada el 31 de octubre de 1996; patente de Estados Unidos n.° 5747498, expedida el 5 de mayo de 1998; publicación internacional PCT WO 96/30347, publicada el 3 de octubre de 1996; solicitud de patente europea EP 787772, publicada el 6 de agosto de 1997; publicación internacional PCT WO 97/30034, publicada el 21 de agosto de 1997; publicación internacional PCT WO 97/30044, publicada el 21 de agosto de 1997; publicación internacional PCT WO 97/38994, publicada el 23 de octubre de 1997; publicación internacional PCT WO 97/49688, publicada el 31 de diciembre de 1997; solicitud de patente europea EP 837063, publicada el 22 de abril de 1998; publicación internacional PCT WO 98/02434, publicada el 22 de enero de 1998; publicación internacional PCT WO 97/38983, publicada el 23 de octubre de 1997; publicación internacional PCT WO 95/19774, publicada el 27 de julio de 1995; publicación<internacional PCT w>O<95/19970, publicada el 27de julio de 1995; publicación internacional PCT WO 97/13771,>publicada el 17 de abril de 1997; publicación internacional PCT WO 98/02437, publicada el 22 de enero de 1998; publicación internacional PCT WO 98/02438, publicada el 22 de enero de 1998; publicación internacional PCT WO 97/32881, publicada el 12 de septiembre de 1997; solicitud alemana DE 19629652, publicada el 29 de enero de 1998; publicación internacional PCT WO 98/33798, publicada el 6 de agosto de 1998; publicación internacional PCT WO 97/32880, publicada el 12 de septiembre de 1997; publicación internacional PCT WO 97/32880 publicada el 12 de septiembre de 1997; solicitud de patente europea EP 682027, publicada el 15 de noviembre de 1995; publicación internacional PCT WO 97/02266, publicada el 23 de enero de 197; publicación internacional PCT WO 97/27199, publicada el 31 de julio de 1997; publicación internacional PCT WO 98/07726, publicada el 26 de febrero de 1998; publicación internacional PCT WO 97/34895, publicada el 25 de septiembre de 1997; publicación internacional PCT<WO 96/31510', publicada el 10 de octubre de 1996; publicación internacional PCT w>O<98/14449, publicada el 9 de>abril de 1998; publicación internacional PCT WO 98/14450, publicada el 9 de abril de 1998; publicación internacional PCT WO 98/14451, publicada el 9 de abril de 1998; publicación internacional PCT WO 95/09847, publicada el 13 de abril de 1995; publicación internacional PCT WO 97/19065, publicada el 29 de mayo 1997; publicación internacional PCT WO 98/17662, publicada el 30 de abril 1998; patente de Estados Unidos n.° 5789427, expedida el 4 de agosto de 1998; patente de Estados Unidos n.° 5650415, expedida el 22 de julio de 1997; patente de Estados Unidos n.° 5 656643, expedida el 12 de agosto de 1997; publicación internacional PCT WO 99/35146, publicada el 15 de julio de 1999; publicación internacional PCT WO 99/35132, publicada el 15 de julio de 1999; publicación internacional PCT<WO 99/07701, publicada el 18 de febrero de 1999; y publicación internacional PCT w>O<92/20642 publicada el 26 de>noviembre de 1992. Ejemplos no limitantes adicionales de inhibidores micromoleculares de EGFR incluyen cualquiera<de los inhibidores de>E<g>FR<descritos en Traxler, P., 1998, Exp. Opin. Ther. Patents 8(12):1599-1625.>

Inhibidores de EGFR basados en anticuerpo incluyen cualquier anticuerpo anti-EGFR o fragmento de anticuerpo que pueda bloquear parcial o completamente la activación de EGFR mediante su ligando natural. Ejemplos no limitantes de inhibidores de EGFR basados en anticuerpo incluyen los descritos en Modjtahedi, H.,et al.,1993, Br. J. Cancer 67:247-253; Teramoto, T.,et al.,1996, Cáncer 77:639-645; Goldsteinet al.,1995, Clin. Cáncer Res. 1:1311-1318; Huang, S. M.,et al.,1999, Cancer Res. 15:59(8): 1935-40; y Yang, X.,et al.,1999, Cancer Res. 59: 1236-1243. Por tanto, el inhibidor de EGFR puede ser anticuerpo monoclonal Mab E7.6.3 (Yang, 1999 supra), o Mab C225 (n.° de acceso de la ATCC HB-8508), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que tiene la especificidad de unión del mismo.

Los inhibidores de MEK incluyen, aunque sin limitación, CI-1040, AZD6244, PD318088, PD98059, PD334581, RDEA119, ARRY-142886, ARRY-438162 y PD-325901.

Los inhibidores de PI3K incluyen, aunque sin limitación, wortmanina, análogos de 17-hidroxiwortmanina descritos en el documento WO 06/044453, 4-[2-(1H-indazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)piperazin-1-il]metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-<iljmorfolina (también conocida como g>D<c 0941 y descrita en las publicaciones PCT n.°>W<o 09/036 082 y WO>09/055730), 2-metil-2-[4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-dihidroimidazo[4,5-c]quinolin-1-il]fenil]propionitrilo (también conocido como BEZ 235 o NVP-BEZ 235, y descrito en la publicación PCT n.° WO 06/122806), (S)-1 -(4-((2-(2-aminopirimidin-5-il)-7-metil-4-morfolinotieno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil)piperazin-1-il)-2-hidroxipropan-1-ona (descrita en la publicación PCT n.° WO 2008/070740), LY294002 (2-(4-morfolinil)-8-fenil-4H-1-benzopiran-4-ona disponible de Axon Medchem), clorhidrato de PI 103 (clorhidrato de 3-[4-(4-morfolinilpirido-[3',2':4,5]furo[3,2-d]pirimidin-2-il]fenol disponible de Axon Medchem), PIK 75 (clorhidrato de N'-[(1E)-(6-bromoimidazo[1,2-a]piridin-3-il)metileno]-N,2-dimetil-5-nitrobencenosulfono-hidrazida disponible de Axon Medchem), PIK 90 (N-(7,8-dimetoxi-2,3-dihidro-imidazo[1,2-c]quinazolin-5-il)-nicotinamida disponible de Axon Medchem), bismesilato de GDC-0941 (bismesilato de 2-(1 H-indazol-4-il)-6-(4-metanosulfonil-piperazin-1 -ilmetil)-4-morfolin-4-il-tieno[3,2-d]pirimidina disponible de Axon Medchem), AS-252424 (5-[1-[5-(4-fluoro-2-hidroxifenil)-furan-2-il]-met-(Z)-ilideno]-tiazolidin-2,4-diona disponible de Axon Medchem) y TGX-221 (7-metil-2-(4-morfolinil)-9-[1-(fenilamino)etil]-4H-pirido-[1,2-a]pirimidin-4-ona disponible de Axon Medchem), XL-765 y XL-147. Otros inhibidores de PI3K incluyen demetoxiviridina, perifosina, CAL101, PX-866, BEZ235, SF1126, INK1117, IPI-145, BKM120, XL147, XL765, Palomid 529, GSK1059615, ZSTK474, PWT33597, IC87114, TG100-115, CAL263, PI-103, GNE-477, CUDC-907 y AEZS-136.

Los inhibidores de AKT incluyen, aunque sin limitación, Akt-1-1 (inhibe Akt1) (Barnettet al.(2005) Biochem. J., 385 (Pt. 2), 399-408); Akt-1-1,2 (inhibe Ak1 y 2) (Barnettet al.(2005) Biochem. J. 385 (Pt. 2), 399-408); API-59CJ-Ome (por ejemplo, Jinet al.(2004) Br. J. Cancer 91, 1808-12); compuestos de 1-H-imidazo[4,5-c]piridinilo (por ejemplo, documento WO05011700); indolo-3-carbinol y derivados del mismo (por ejemplo, patente de Estados Unidos n.° 6 656963; Sarkar y Li (2004) J Nutr. 134(12 supl.), 3493S-3498S); perifosina (por ejemplo, interfiere con la localización en membrana de Akt; Dasmahapatraet al.(2004) Clin. Cancer Res. 10(15), 5242-52, 2004); análogos lipídicos de éter de fosfatidilinositol (por ejemplo, Gills y Dennis (2004) Expert. Opin. Investig. Drugs 13, 787-97); y triciribina (TCN o API-2 o identificador NCI: NSC 154020; Yanget al.(2004) Cancer Res. 64, 4394-9).

Los inhibidores de TOR incluyen, aunque sin limitación, inhibidores que incluyen AP-23573, CCI-779, everólimus, RAD-001, rapamicina, temsirólimus, inhibidores competitivos de ATP de TORC1/TORC2, incluyendo PI-103, PP242, PP30 y Torin 1. Otros inhibidores de TOR en el potenciador FKBP12; rapamicinas y derivados de las mismas, incluyendo: CCI-779 (temsirólimus), RAD001 (everólimus; documento WO 9409010) y AP23573; rapálogos, por ejemplo, como se divulga en los documentos WO 98/02441 y WO 01/14387, por ejemplo, AP23573, AP23464 o AP23841; 40-(2-hidroxietil)rapamicina, 40-[3-hidroxi(hidroximetil)metilpropanoato]-rapamicina (también denominada CC1779), 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada ABT578), 32-desoxorrapamicina, 16-pentiniloxi-32(S)-dihidrorrapamicina, y otros derivados divulgados en el documento WO 05005434; derivados divulgados en la patente de Estados Unidos n.° 5258389, documentos WO 94/090101, WO 92/05179, patente de Estados Unidos n.° 5 118677, patente de Estados Unidos n.° 5118678, patente de Estados Unidos n.° 5100883, patente de Estados Unidos n.° 5151 413, patente de Estados Unidos n.° 5120842, documentos WO 93/111130, WO 94/02136, WO 94/02485, WO 95/14023, WO 94/02136, WO 95/16691, WO 96/41807, WO 96/41807 y patente de Estados Unidos n.2 5 256790; derivados de rapamicina que contiene fósforo (por ejemplo, documento WO 05016252); derivados de 4H-1-benzopiran-4-ona (por ejemplo, solicitud provisional de Estados Unidos n.° 60/528340).

Las inmunoterapias incluyen, aunque sin limitación, agentes anti-PD-1, agentes anti-PDL-1, agentes anti-CTLA-4, agentes anti-LAG1 y agentes anti-OX40. Anticuerpos anti-PD-1 ejemplares y métodos para su uso se describen por Goldberget al.,Blood 110(1 ):186-192 (2007), Thompsonet al.,Clin. Cancer Res. 13(6):1757-1761 (2007), y Kormanet al.,solicitud internacional n.° PCT/JP2006/309606 (publicación n.° WO 2006/121168 A1). Incluyen: Yervoy™ (ipilimumab) o tremelimumab (contra CTLA-4), galiximab (conrta B7.1), BMS-936558 (contra PD-1), MK-3475 (contra PD-1), AMP224 (contra B7DC), BMS-936559 (contra B7-H1), MPDL3280A (contra B7-H1), MEDI-570 (contra ICOS), AMG557 (contra B7H2), MGA271 (contra B7H3), IMP321 (contra LAG-3), BMS-663513 (contra CD137), PF-05082566 (contra CD137), CDX-1127 (contra CD27), anti-OX40 (Providence Health Services), huMAbOX40L (contra OX40L),<Atacicept (contra TACI), c>P-870893<(contra CD40), lucatumumab (contra CD40), dacetuzumab (contra CD40),>muromonab-CD3 (contra CD3), ipilumumab (contra CTLA-4). Las inmunoterapias también incluyen linfocitos T genomanipulados (por ejemplo, CAR-linfocitos T) y anticuerpos biespecíficos (por ejemplo, BiTE).

Los agonistas de GITR incluyen, aunque sin limitación, proteínas de fusión a GITR y anticuerpos anti-GITR (por ejemplo, anticuerpos anti-GITR bivalentes), tales como la proteína de fusión con GITR descrita en la patente de Estados Unidos n.° 6111 090box.c, patente europea n.° 090505B1, patente de Estados Unidos n.° 8586023, publicaciones PCT n.° WO 2010/003118 y 2011/090754, o un anticuerpo anti-GITR descrito, por ejemplo, en la patente de Estados Unidos n.° 7025962, patente europea n.° 1947183B1, patente de Estados Unidos n.° 7812 135, patente de Estados Unidos n.° 8388967, patente de Estados Unidos n.° 8591 886, patente europea n.° EP 1866339, publicación PCT n.2 WO 2011/028683, publicación PCT n.2 WO 2013/039954, publicación PCT n.2 W02005/007190, publicación PCT n.° WO 2007/133822, publicación PCT n.° W02005/055808, publicación PCT n.° WO 99/40196, publicación PCT n.2 WO 2001/03720, publicación PCT n.2 WO99/20758, publicación PCT n.2 WO2006/083289, publicación PCT n.° WO 2005/115451, patente de Estados Unidos n.° 7618632 y publicación PCT n.° WO 2011/051726.

Los compuestos descritos en este documento pueden usarse en combinación con los agentes divulgados en este documento u otros agentes adecuados, dependiendo de la afección que se esté tratando. Por tanto, en algunas realizaciones, el uno o más compuestos de la divulgación se coadministrarán con otros agentes como se describen anteriormente. Cuando se usan en politerapia, los compuestos descritos en este documento se administran con el segundo agente simultáneamente o por separado. Esta administración en combinación puede incluir administración simultánea de los dos agentes en la misma forma farmacéutica, administración simultánea en formas farmacéuticas separadas y administración separada. Es decir, un compuesto descrito en este documento y cualquiera de los agentes descritos anteriormente pueden formularse juntos en la misma forma farmacéutica y administrarse simultáneamente. Como alternativa, un compuesto de la divulgación y cualquiera de los agentes descritos anteriormente pueden administrarse simultáneamente, en donde ambos agentes están presentes en formulaciones separadas. En otra alternativa, un compuesto de la presente divulgación puede administrarse justo seguido de cualquiera de los agentes descritos anteriormente, o viceversa. En algunas realizaciones del protocolo de administración separada, un compuesto de la divulgación y cualquiera de los agentes descritos anteriormente se administran separados unos pocos minutos, o separados unas pocas horas, o separados unos pocos días.

Como un aspecto de la presente invención contempla el tratamiento de la enfermedad/afección con una combinación de compuestos farmacéuticamente activos que pueden administrarse por separado, la invención se refiere además a combinar composiciones farmacéuticas separadas en forma de kit. El kit comprende dos composiciones farmacéuticas separadas: un compuesto de la presente invención, y un segundo compuesto farmacéutico. El kit comprende un recipiente para contener las composiciones separadas, tal como un frasco dividido o un envase de lámina dividida. Ejemplos adicionales de recipientes incluyen jeringas, cajas y bolsas. En algunas realizaciones, el kit comprende directrices para el uso de los componentes separados. La forma de kit es particularmente ventajosa cuando los componentes separados se administran preferiblemente en diferentes formas farmacéuticas (por ejemplo, oral y parenteral), se administran en diferentes intervalos de dosificación, o cuando el profesional sanitario prescriptor desea la valoración de los componentes individuales de la combinación.

Parte experimental

Abreviaturas: Las siguientes abreviaturas pueden usarse en este documento:

Salvo que se indique de otro modo, todos los materiales se obtuvieron de proveedores comerciales y se usaron sin purificación adicional. Todas las partes en peso y temperaturas son en grados Celsius salvo que se indique de otro modo. Todas las reacciones asistidas por microondas se realizaron con un Smith Synthesizer™ de Biotage™ . Todos los compuestos mostraron espectros de RMN coherentes con sus estructuras asignadas. Los puntos de fusión se determinaron en un aparato Buchi y están sin corregir. Los datos espectrales de masas se determinaron por técnica de ionización por electronebulización. Todos los ejemplos se purificaron hasta >90 % de pureza como se determina por cromatografía de líquidos de alto rendimiento. Salvo que se indique de otro modo, las reacciones se desarrollaron a temperatura ambiente.

En la síntesis de compuestos de la presente invención, puede ser deseable usar determinados grupos salientes. La expresión "grupos salientes" (''LG'') se refiere en general a grupos que son desplazables por un nucleófilo. Dichos grupos salientes son conocidos en la técnica. Ejemplos de grupos salientes incluyen, aunque sin limitación, haluros (por ejemplo, I, Br, F, Cl), sulfonatos (por ejemplo, mesilato, tosilato), sulfuros (por ejemplo, SCH3), N-hidroxisuccinimida, N-hidroxibenzotriazol y similares. Ejemplos de nucleófilos incluyen, aunque sin limitación, aminas, tioles, alcoholes, reactivos de Grignard, especies aniónicas (por ejemplo, alcóxidos, amidas, carbaniones) y similares.

Los ejemplos presentados a continuación ilustran realizaciones específicas de la presente invención. Se entiende que estos ejemplos son representativos y no se pretende que limiten el alcance de las reivindicaciones de ninguna manera.

Se aprecia que, cuando se usa un porcentaje (%) con respecto a un líquido, es un porcentaje en volumen con respecto a la solución. Cuando se usa con un sólido, es el porcentaje con respecto a la composición sólida. Los materiales obtenidos de proveedores comerciales se usaron típicamente sin purificación adicional. Las reacciones que implican reactivos sensibles al aire o a la humedad se realizaron típicamente en una atmósfera de nitrógeno o argón. La pureza se midió usando sistema de cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC) con detección UV a 254 nm y 215 nm (sistema A: Agilent Zorbax Eclipse XDB-C84,6 x 150 mm, 5 gm, de 5 a 100 % de CH3CN en H2O con un 0,1 % de TFA durante 15 min a 1,5 ml/min; sistema B: Zorbax SB-C8, 4,6 x 75 mm, de 10 a 90 % de CH3CN en H2O con ácido fórmico al 0,1 % durante 12 min a 1,0 ml/min) (Agilent Technologies, Santa Clara, CA). La cromatografía en gel de sílice se realizó en general con cartuchos precompactados de gel de sílice (Biotage, Uppsala, Suecia o Teledyne-Isco, Lincoln, NE). Los espectros de RMN de 1H se registraron en un espectrómetro Bruker AV-400 (400 MHz) (Bruker Corporation, Madison, WI) o un espectrómetro Varian (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) de 400 MHz a temperatura ambiente. Todos los protones observados se presentan como partes por millón (ppm) campo abajo de tetrametilsilano (TMS) u otra referencia interna en el disolvente apropiado indicado. Los datos se presentan como sigue: desplazamiento químico, multiplicidad (s = singulete, d = doblete, t = triplete, c = cuadruplete, a = ancho, m = multiplete), constantes de acoplamiento y número de protones. Los datos espectrales de masas (MS) de baja resolución se determinaron en un LC/MS Agilent 1100 Series (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) con detección UV a 254 nm y 215 nm y un modo de electronebulización de baja resonancia (ESI).

Esquema sintético general

Salvo que se indique de otro modo, los materiales de partida y reactivos usados en la preparación de estos compuestos están disponibles de proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wis.), Bachem (Torrance, Calif.), o Sigma (St. Louis, Mo.) o se preparan por métodos conocidos por los expertos en la materia siguiendo procedimientos expuestos en referencias tales como Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, volúmenes 1-17 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, volúmenes 1-5 y suplementos (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions, volúmenes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991), March's Advanced Organic Chemistry (John Wiley and Sons, 4.a edición) y Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989). Estos esquemas son simplemente ilustrativos de algunos métodos por los que los compuestos de esta invención pueden sintetizarse, y pueden hacerse diversas modificaciones a estos esquemas y se les sugerirá a los expertos en la materia que se remitan a esta divulgación. Los materiales de partida y los intermedios, y los productos finales de la reacción pueden aislarse y purificarse si se desea usando técnicas convencionales incluyendo, aunque sin limitación, filtración, destilación, cristalización, cromatografía y similares. Dichos materiales pueden caracterizarse usando medios convencionales, incluyendo constantes físicas y datos espectrales.

Salvo que se especifique lo contrario, las reacciones descritas en este documento tienen lugar a presión atmosférica sobre un intervalo de temperatura de aproximadamente -78 °C a aproximadamente 150 °C, más preferiblemente de aproximadamente 0 °C a aproximadamente 125 °C y mucho más preferiblemente a aproximadamente temperatura ambiente (o ambiental), por ejemplo, aproximadamente 20 °C.

Por motivos de claridad en esta sección de síntesis general, los compuestos de fórmula (I) pueden dibujarse esquemáticamente para que contengan anillo Ar1 y anillo Ar2 como sigue:

en donde el grupo L es un conector como se define en el sumario de la invención, es decir, -NR3-(C=O)- o -(C=O)-NR3; el anillo Ar1 está ubicado a la izquierda del conector, y el anillo Ar2 está ubicado a la derecha del conector.

En general, los compuestos de fórmula (I), pueden sintetizarse mediante tres etapas general como sigue:

Etapa 1: Preparación de compuesto de anillo Ar1.

Etapa 2: Preparación de compuesto de anillo Ar2.

Etapa 3: Acoplamiento de compuesto de anillo Ar1 al compuesto de anillo Ar2.

Se entiende que los esquemas genéricos a continuación proporcionan directrices a los químicos sintéticos expertos en la materia, que apreciarán fácilmente que el disolvente, la concentración, el reactivo, el grupo protector, el orden de las etapas sintéticas, el tiempo, la temperatura y similares pueden modificarse según lo necesario, acorde a las habilidades y criterio de los expertos en la materia.

Esquema A

En una realización, un compuesto de fórmula (I) tiene la siguiente formula (la):

Un ejemplo de un compuesto de fórmula (1a) incluye, aunque sin limitación

Etapa 1a: Preparación de compuesto de anillo Ar1: una realización de compuestos de anillo Ar1 incluye compuesto A-1, que tiene la fórmula:

en donde los grupos R<4>y R<5>son independientemente H; que está disponible en el mercado o puede prepararse de acuerdo con métodos y reactivos conocidos por los expertos en la materia. Por ejemplo, los compuestos de fórmula A-1 en donde R<2>es Z-R<12>, en donde Z es -alquilo C0-4-, -NR<11>- o -NR<11>SO2-alquilo C0-4- y R<12>es como se define en el sumario de la invención pueden prepararse a partir de materiales de partida apropiados como sigue:

Etapa 2a: Preparación de compuesto de anillo Ar2:

El compuesto A-2, en donde cada W 1 es un halógeno, por ejemplo fluoro o cloro, puede convertirse en cloruro de ácido (mediante SOCb), después hacerse reaccionar con un alcohol PG'OH para formar un éster metílico o éster bencílico, en un disolvente orgánico adecuado tal como acetonitrilo, tetrahidrofurano, cloruro de metileno y similares, para formar compuesto A-3. El compuesto A-3 entonces puede hacerse reaccionar con 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona, en presencia de una base, tal como tBuOK, en un disolvente orgánico adecuado tal como tetrahidrofurano, DMF, dioxano y similares, para formar compuesto A-4, en donde W 1 es como se define en compuesto A-2. El compuesto A-4 entonces puede hacerse reaccionar con un reactivo Rx, tal como (1) 6-azaespiro[2.5]octano, (2) 4,4-dimetilpiperidina, (3) clorhidrato de 3,4,4-trimetilpiperidina, (4) 4-metil-6-azaespiro[2.5]octano o (5) 7-azaespiro[3.5]nonano, en un disolvente orgánico adecuado tal como NMP, acetonitrilo, tetrahidrofurano, DMF, cloruro de metileno y similares, para formar compuesto A-5, que entonces puede hacerse reaccionar con un agente de desprotección adecuado, tal como Pd/C en presencia de gas hidrógeno, para formar compuesto A-6.

Etapa 3a: Acoplamiento de compuesto de anillo Ar1 al compuesto de anillo Ar2.

El compuesto A-6 entonces puede hacerse reaccionar con un agente de activación tal como cloruro de ácido (COCl)2 o SOCl2, en un disolvente orgánico adecuado tal como tetrahidrofurano, cloruro de metileno y similares, para formar un derivado de cloruro de ácido, que entonces puede hacerse reaccionar con compuesto A-1 para formar compuesto A-7. Como alternativa, el compuesto A-6 puede acoplarse directamente con compuesto A-1 en presencia de T3P o HATU o TATU para proporcionar compuesto A-7. El compuesto A-7 entonces puede tratarse con una base, tal como NaOH, para producir compuesto (la).

Esquema B

De acuerdo con el esquema B, en otra realización de la invención, un compuesto de fórmula (I) como se divulga en este documento, que tiene las siguientes estructuras (Ib) y (Ic):

puede sintetizarse como sigue

En otra realización, un compuesto de fórmula (I) que tiene las siguientes fórmulas (Ib) o

como se define en este documento puede sintetizarse de acuerdo con el esquema B. Un ejemplo de un compuesto de fórmulas (Ib) o (Ic) incluye, aunque sin limitación:

Etapa 1 a: Preparación de compuesto de anillo Ar1: como en el esquema A, el compuesto 1, que está disponible en el mercado o puede prepararse de acuerdo con métodos y reactivos conocidos por los expertos en la materia, puede usarse como un ejemplo de compuesto de anillo Ar1.

Etapa 2b: Preparación de compuesto de anillo Ar2:

En la etapa 2b, el compuesto B-1, en donde cada uno de W3 y W4 es independientemente un halógeno, por ejemplo, fluoro, cloro, bromo o yodo, puede hacerse reaccionar con un grupo protector de ácido carboxílico apropiado (reactivo PG1), tal como yoduro de metilo en presencia de una base tal como carbonato de potasio, para formar un éster metílico, u otro grupo protector apropiado para formar otro éster tal como éster bencílico, en un disolvente orgánico adecuado tal como NMP, acetonitrilo, tetrahidrofurano, DMF, cloruro de metileno y similares, seguido de reacción con un reactivo Rx, tal como (1) 6-azaespiro[2.5]octano, (2) 4,4-dimetilpiperidina, (3) 3,4,4-trimetilpiperidina, (4) 4-metil-6-azaespiro[2.5]octano o (5) 7-azaespiro[3.5]nonano, en un disolvente orgánico adecuado tal como NMP, acetonitrilo, tetrahidrofurano, DMF, cloruro de metileno y similares, para formar compuesto B-2, en donde W4 es como se define en el compuesto B-1. Ejemplos de compuesto B-1 incluyen ácido 4,6-dicloronicotínico o ácido 4,6-difluoronicotínico. El compuesto B-2 entonces puede hacerse reaccionar con un agente de desprotección, que puede ser una base, tal como hidróxido de litio, seguido de pretratamiento con un ácido tal como HCl, para formar compuesto B-3, en donde W4 es como se define en el compuesto B-2.

Etapa 3b: Acoplamiento de compuesto de anillo Ar1 al compuesto de anillo Ar2.

En la etapa 3b, el compuesto B-3 entonces puede hacerse reaccionar con compuesto A-1, en presencia de un agente de activación tal como anhídrido 1 -propanofosfónico (T3P) o HATU o TATU, y en presencia de DIPEA, en un disolvente orgánico adecuado tal como EtOAc, DMF, cloruro de metileno, DCE y similares, para formar compuesto B-4, en donde W4 es como se define en el compuesto B-3. El compuesto B-4 entonces puede hacerse reaccionar con 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona, en presencia de un catalizador, tal como Xantphos y Pd2(dba)3, en un disolvente orgánico adecuado tal como tetrahidrofurano, DMF, dioxano y similares, para formar compuesto B-5, que puede hacerse reaccionar con una base, tal como hidróxido de sodio, para formar compuesto (Ib).

Etapa 3b-1: Acoplamiento de compuesto de anillo Ar1 al compuesto de anillo Ar2.

Como alternativa, en otra realización, el compuesto B-4 obtenido en la etapa 3b anterior puede hacerse reaccionar además con 2-hidroxietano-1-sulfonamida en presencia de un catalizador metálico tal como CuI, una base (tal como K3PO4), y un ligando tal como (1 R,2R)-N1 ,N2-dimetilciclohexano-1,2-diamina, para formar un compuesto de fórmula (Ic).

Esquema C

En otra realización, un compuesto de fórmula (I) que tiene la siguiente formula (Id)

como se define en este documento puede sintetizarse de acuerdo con el esquema C. Un ejemplo de un compuesto de fórmulas (Id) incluye, aunque sin limitación:

Etapa 1c: Preparación de compuesto de anillo Ar1: una realización de compuestos de anillo Ar1 incluye compuesto C-1, que tiene la fórmula:

en donde los grupos R4 y R5 son independientemente H, y W5 es un halógeno, por ejemplo, fluoro, cloro, bromo o yodo, preferiblemente fluoro, que está disponible en el mercado o puede prepararse de acuerdo con métodos y reactivos conocidos por los expertos en la materia.

Etapa 2b: Preparación de compuesto de anillo Ar2:

En la etapa 2b, el compuesto C-2, en donde cada uno de W6 y W7 es independientemente un halógeno, por ejemplo, fluoro, cloro, bromo o yodo, puede hacerse reaccionar con un reactivo Rx, tal como (1) 6-azaespiro[2.5]octano, (2) 4,4-dimetilpiperidina, (3) 3,4,4-trimetilpiperidina, (4) 4-metil-6-azaespiro[2.5]octano o (5) 7-azaespiro[3.5]nonano, en un disolvente orgánico adecuado tal como NMP, acetonitrilo, tetrahidrofurano, DMF, cloruro de metileno y similares, seguido de nitrorreducción, para formar compuesto C-3, en donde W7 es como se define en el compuesto C-2. Ejemplo de compuesto C-2 incluye, aunque sin limitación, 4-bromo-2-fluoro-1-nitrobenceno.

Etapa 3b: Acoplamiento de compuesto de anillo Ar1 al compuesto de anillo Ar2.

En la etapa 3b, el compuesto C-3 entonces puede hacerse reaccionar con compuesto C-1, en presencia de un agente de activación tal como T3P o HATU o TATU, y en presencia de DIPEA, en un disolvente orgánico adecuado tal como acetonitrilo, tetrahidrofurano, DMF, cloruro de metileno y similares, para formar compuesto C-4, en donde W7 es como se define en el compuesto C-3. El compuesto C-4 entonces puede hacerse reaccionar con un reactivo R2 a elevada temperatura, en presencia de una base adecuada, en un disolvente orgánico adecuado tal como NMP, dioxano, acetonitrilo, DMSO, DMF y similares, para formar compuesto C-4, que entonces puede hacerse reaccionar con 2-hidroxietano-1-sulfonamida en presencia de un catalizador tal como CuI, un ligando tal como dimetilglicina, y una base tal como fosfato de potasio, para formar un compuesto de fórmula (Id).

Ejemplos

Preparación de intermedios de anillo Ar1

Intermedio 1: (S)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina.

Un vial de microondas se cargó con 2-amino-6-fluoropiridina (0,20 g, 1,78 mmol), (S)-2-metil-morfolina (0,50 ml, 4,40 mmol) y agua (0,5 ml). El vial se cerró herméticamente y se calentó en microondas a 205 °C durante 30 min. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica separada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró y después se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 40 % de EtOAc en heptano) para producir (S)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (1, 0,26 g, 1,32 mmol, 74 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,25 (d,J= 6,26 Hz, 3 H), 2,51 (dd,J= 12,52, 10,37 Hz, 1 H), 2,87 (td,J= 12,28, 3,42 Hz, 1 H), 3,61 - 3,76 (m, 2 H), 3,88 - 4,08 (m, 3 H), 4,20 (s a, 2 H), 5,91 (d,J= 7,63 Hz, 1 H), 5,99 (d,J= 8,22 Hz, 1 H), 7,27 - 7,33 (m, 1 H).m/z(ESI): 194,0 (M+H)+.

Tabla 1: Los intermedios 2-30, 70-72 se prepararon de una manera similar al intermedio 1.

Intermedio 31: 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida.

Etapa 1. A una solución helada de cloruro de 6-bromop¡rid¡n-2-sulfon¡lo (0,50 g, 1,95 mmol, Suzhou Sibian, P. R. China) en DCM (10 ml) se le añadió trietilamina (0,54 ml, 3,90 mmol) seguida de terc-butilamina (0,31 ml, 2,92 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1,5 h y después se trató con agua (10 ml). Se extrajo con diclorometano (3 x 15 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (15 ml) y se secaron sobre Na2SÜ4 anhidro. La solución se filtró y se concentró a presión reducida para dar el material en bruto como un aceite amarillo claro. El material en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 17 % a 22 % de acetato de etilo en éter de petróleo) para proporcionar 6-bromo-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (31A, 0,35 g, 1,19 mmol, 61 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d) 57,98 (dd,J= 7,6, 0,9 Hz, 1H), 7,75 (t,J= 7,8 Hz, 1H), 7,65 (dd,J= 8,0, 0,9 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), y 1,27 (s, 9H).

Etapa 2. Una mezcla de 6-bromo-W-(ferc-butil)piridin-2-sulfonamida (31A, 14,50 g, 49,50 mmol), N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (0,44 g, 4,95 mmol), K2CO3 (1,36 g, 9,89 mmol), yoduro de cobre (I) (0,47 g, 2,473 mmol), amoniaco acuoso (100 ml de solución al 21 % en peso, 970 mmol), y etilenglicol (100 ml) en un tubo cerrado herméticamente de 500 ml se agitó a 60 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con agua (150 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron a presión reducida para dar el material en bruto como un aceite amarillo claro. El material en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 5 % a 6 % de metanol en cloroformo) para proporcionar 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (31,6,94 g, 30,3 mmol, 61 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-ds) 57,54 (ddd,J =8,4, 7,2, 1,3 Hz, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,03 (dt,J =7,3, 0,9 Hz, 1H), 6,59 (dt,J= 8,4, 1,0 Hz, 1H), 6,33 (s, 2H), y 1,12 (d,J= 1,3 Hz, 9H).m/z(ESI): 230,1 (M+H)+.

Intermedio 32: 4-met¡l-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-2-am¡na.

A un tubo de presión de 250 ml se le añadió 6-fluoro-4-metilpiridin-2-amina (10,0 g, 79 mmol, Suzhou Sibian chemicals, PR China), morfolina (8,3 g, 95 mmol) y DIPEA (41,5 ml, 238 mmol). El tubo se cerró herméticamente y se calentó a 150 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua (100 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (200 ml), se secó sobre Na2SO4, y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 1 % a 15 % de EtOAc en hexanos) para dar el compuesto del título (32, 8,5 g, 44 mmol, 56 % de rendimiento) como un sólido amorfo pardo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 5,75 (s, 1H), 5,67 (s, 1H), 5,44 (s, 2H), 3,65 (t,J= 8,4 Hz, 4H), 3,30 (t,J= 8,4 Hz, 4H), 2,06 (s, 3H).m/z(ESI): 194,2 (M+H)+.

Intermed¡o 33: (fí)-1-(6-amino-4-metilpiridin-2-il)piperidin-3-ol.

Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el intermedio 32. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d 5 ppm 1,50 - 1,70 m, 3 H, 1,81 - 1,88 m, 2 H, 2,15 s, 3 H, 3,34 - 3,56 m, 3 H, 3,61 -

Intermed¡o 34: (fí)-5-fluoro-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina.

Una mezcla de 6-bromo-5-fluoropiridin-2-amina (0,90 g, 4,71 mmol), (R)-2-metilmorfolina (0,48 g, 4,71 mmol), acetato de potasio (0,92 g, 9,42 mmol) y polvo de cobre (30 mg, 0,471 mmol) en dimetilsulfóxido (8,10 ml) se calentó a 110 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con agua (ml), y se extrajo con EtOAc (2 x10 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío para dar el material en bruto como un sólido amarillo. El material en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 10 % de EtOAc en hexano) para proporcionar (R)-5-fluoro-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (34, 0,510 g, 2,41 mmol, 51 % de rendimiento) como un aceite amarillo.m/z(ESI): 212,0 (M+H)+.

Intermedio 35: 6-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)piridin-2-amina.

Un vial de presión se cargó con 6-bromopiridin-2-amina (0,30 g, 1,73 mmol, Aldrich), 2-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,73 g, 3,47 mmol, Pharma Core), cloruro de 1,1-bis[(di-t-butil-pmetilaminofeniljpaladio (II) (0,12 g, 0,17 mmol, Aldrich) y fosfato de potasio (1,10 g, 5,20 mmol). El vial se purgó con N2 durante 3 min. Se añadieron 1,4-dioxano (3,0 ml) y agua (0,9 ml). El vial se cerró herméticamente y se calentó en un baño de aceite a 90 °C durante 1 h. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica separada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró, y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 50 % de EtOAc en heptano) para producir 6-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)piridin-2-amina (35, 0,13 g, 0,73 mmol, 42 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 2,52 - 2,60 (m, 2 H) 3,91 (t,J= 5,48 Hz, 2 H) 4,32 - 4,43 (m, 4 H) 6,39 (d,J= 8,02 Hz, 1 H) 6,66 (tt,J= 2,89, 1,52 Hz, 1 H) 6,71 (d,J= 7,43 Hz, 1 H) 7,41 (t,J= 7,83 Hz, 1 H).m/z(ESI): 177,0 (M+H)+.

Intermedio 36: 1-(6-aminopiridin-2-il)pirrolidin-2-ona.

Una mezcla de 2-amino-6-bromopiridina (402 mg, 2,32 mmol), yoduro de cobre (I) (22 mg, 0,116 mmol), carbonato de cesio (1514 mg, 4,65 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (0,025 ml, 0,232 mmol) y 2-pirrolidinona (0,265 ml, 3,49 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) se calentó en un baño de aceite a 110 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se filtró a través de una capa de celite, y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 40 % de EtOAc en heptano) para proporcionar 1-(6-aminopiridin-2-il)pirrolidin-2-ona (36, 49 mg, 0,28 mmol, 12 % de rendimiento) como un sólido blanco.m/z(ESI): 178,0 (M+H)+.

Intermedio 37: 1-(6-aminopiridin-2-il)-4,4-dimetilpirrolidin-2-ona.

Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el intermedio 36.m/z(ESI): 206,0 (M+H)+.

1-ilsulfonil)piridin-2-amina.

Etapa 1. A una solución de cloruro de 6-bromo-piridin-2-sulfonilo (519 mg, 2,023 mmol, J & W Pharmlab, LLC) y DCM (20 ml) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,70 ml, 4,05 mmol) y piperidina (0,20 ml, 2,02 mmol, Aldrich). La solución se agitó a TA durante 15 h, después se cargó sobre una columna de gel de sílice y se eluyó con de 0 % a 50 % de EtOAc en heptano para proporcionar 2-bromo-6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridina (37A, 585 mg, 1,92 mmol, 95 % de rendimiento) como un sólido blanco.m/z(ESI): 305,0, 307,0 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de 2-bromo-6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridina (37A, 580 mg, 1,90 mmol) y 1,4-dioxano (20 ml) se le añadió 4-metoxibencilamina (0,248 ml, 1,900 mmol, Aldrich) y N,N-diisopropiletilamina (0,36 ml, 2,09 mmol). La solución se calentó en un baño de aceite a 100 °C durante 4 d. Se enfrió hasta TA y se cargó sobre una columna de gel de sílice (de 0 % a 50 % de EtOAc en heptano) para proporcionar N-(4-metoxibencil)-6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-amina (486 mg, 1,34 mmol, 70 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,67 (t,J= 5,9 Hz, 1 H), 7,57 (dd,J= 8,4, 7,2 Hz, 1 H), 7,22 (m,J= 8,6 Hz, 2 H), 6,94 (d,J= 7,0 Hz, 1 H), 6,85 - 6,89 (m, 2 H), 6,75 (d,J= 8,4 Hz, 1 H), 4,41 (d,J= 5,9 Hz, 2 H), 3,71 (s, 3 H), 2,88 - 2,96 (m, 4 H), 1,35 - 1,46 (m, 4 H), 1,22 - 1,31 (m, 2 H).m/z(ESI): 362,1 (M+H)+.

Etapa 3. A un RBF cargado con N-(4-metoxibencil)-6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-amina (486 mg, 1,34 mmol) se le añadió TFA (1 ml, 12,98 mmol). La solución se agitó a 80 °C. Después de 1,5 h, la mezcla de reacción se enfrió hasta TA y se concentró al vacío. La mezcla se destiló azeotrópicamente con tolueno (20 ml) una vez, después se recogió en EtOAc y se lavó con NaHCO3 saturado. La capa de EtOAc se concentró al vacío y se adsorbió en un lecho de gel de sílice y se cromatografió a través de una columna Redi-Sep® precompactada de gel de sílice (Gold, 4 g), eluyendo con de 0 % a 50 % de EtOAc en heptano, para proporcionar 6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-amina (38, 315 mg, 1,31<mmol, 97 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro.>R<m>N<de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 7,57 (dd, J = 8,2,>7,4 Hz, 1 H), 6,94 (d,J= 7,0 Hz, 1 H), 6,63 (d,J= 8,2 Hz, 1 H), 6,52 (s, 2 H), 3,07 - 3,15 (m, 4 H), 1,47 - 1,55 (m, 4 H), 1,43 (d a,J= 4,5 Hz, 2 H).m/z(ESI): 242,0 (M+H)+.

Intermedio 39: 6-amino-N-(terc-butil)-4-metilpiridin-2-sulfonamida.

Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita para 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (intermedio 31).m /z(ESI): 244,0 (M+H)+.

Intermedio 40: 2-am ino-6-morfolinoisonicotinonitrilo.

4-Cloro-6-morfolinopiridin-2-amina (0,5 g, 2,34 mmol, Aldrich), polvo de cinc (0,061 g, 0,936 mmol, Aldrich), 2-(di-tbutilfosfino)-1,1 '-binaftilo racémico (0,187 g, 0,468 mmol, Strem), cianuro de cinc (0,330 g, 2,81 mmol, Aldrich), trifluoroacetato de paladio (II) (78 mg, 0,234 mmol, Aldrich) y DMF (4,68 ml) se añadieron a un vial de 20 ml. El vial se evacuó y se rellenó con nitrógeno 3 veces con agitación. La mezcla se calentó a 120 °C durante 15 h. La mezcla se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g, 0-100 % de EA en heptano) para proporcionar 2-amino-6-morfolinoisonicotinonitrilo (intermedio 40, 0,24 g, 1,17 mmol, 50 % de rendimiento).m/zESI 205,1 (M+H)+.

Intermedio 73: 4-ciclopropil-6-morfolinopiridin-2-amina.

4-Cloro-6-morfolinopiridin-2-amina (0,52 g, 2,43 mmol), {1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno} dicloropaladio (II) (0,356 g, 0,487 mmol), ácido ciclopropilborónico (0,042 g, 0,489 mmol) y carbonato de potasio (0,673 g, 4,87 mmol) se disolvieron en dioxano-agua 8:1 (4,87 ml) en un vial de 20 ml. La solución se desgasificó con 3 purgas de vacío/Nz, el vial se cerró herméticamente y se calentó a 80 °C durante 24 h para conseguir -50 % de conversión. La mezcla de reacción se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g, de 0 % a 100 % de EA en heptano) para proporcionar 4-ciclopropil-6-morfolinopiridin-2-amina (0,30 g, 1,36 mmol, 56 % de rendimiento).m/zESI 220,1 (M+H)+.

Preparación de intermedios de anillo Ar2

Intermedio 41: ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotínico.

Etapa 1. Una mezcla de 2,6-dicloronicotinato de metilo (5,0 g, 24,3 mmol, Combi-Blocks), N,N-di¡soprop¡let¡lamina (4,7 ml, 26,7 mmol), y 6-azaespiro[2.5]octano (2,70 g, 24,27 mmol, AstaTech, Inc.) en acetonitrilo (50 ml) se agitó a TA durante 24 h. La mezcla se concentró, y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 30 % de EtOAc en heptano) para dar 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (41A, 4,34 g, 15,46 mmol, 64 % de rendimiento).m/z(ESI): 281,0 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (41A, 4,10 g, 14,60 mmol), tributil(1-etoxivinil)estaño (5,80 g, 16,06 mmol, Aldrich), y bis-(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio (II) (0,41 g, 0,58 mmol, Aldrich) en tolueno (30 ml) se agitó a 90 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA y se trató con HCl (4 M en dioxano, 18,25 ml, 73,00 mmol) y se agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró entonces a través de una capa de Celite y se lavó con EtOAc. El filtrado se lavó con NaHCOs acuoso saturado, se secó, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por ISCO (de 0 % a 30 % de EtOAc en heptano) para dar 6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (41B, 2,75 g, 9,54 mmol, 65 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8,02 (d,J= 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d,J= 7,6 Hz, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,38-3,51 (m, 4 H), 2,57 (s, 3 H), 1,33-1,53 (m, 4 H), 0,35 (s, 4 H).

Etapa 3. A una solución agitada de 6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (41B, 2,50 g, 8,67 mmol) en tetrahidrofurano (1 ml) se le añadió (trifluorometil)trimetilsilano (1,54 ml, 10,40 mmol, Aldrich) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 2 h. El sólido se retiró por filtración y se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró y se adsorbió en un lecho de gel de sílice y se cromatografió a través de una columna Redi-Sep® precompactada de gel de sílice (Gold, 12 g), eluyendo con de 0 % a 30 % de EtOAc en heptano, para proporcionar 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotinato de metilo (41C, 2,87 g, 8,01 mmol, 92 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,05 (d,J= 7,8 Hz, 1 H), 6,85 (d,J= 7,8 Hz, 1 H), 6,01 (s, 1 H), 3,91 (s, 3 H), 3,39-3,56 (m, 4 H), 1,69 (s, 3 H), 1,45-1,53 (m, 4 H), 0,38 (s, 4 H).m/z(ESI): 359,0 (M+H)+.

Etapa 4. A una solución agitada de 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotinato de metilo (41C, 2,87 g, 8,01 mmol) en MeOH (20 ml) a TA se le añadió NaOH acuoso (8,0 ml de solución 5 M, 40,0 mmol). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 3 d. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con H2O, se acidificó con HCl acuoso 5 N (hasta pH ~4). El sólido precipitado se recogió, se lavó con H2O, y se secó para dar ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotínico (41, 2,70 g, 98 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 13,23 (s a, 1 H), 7,97 (d,J= 7,8 Hz, 1 h ), 7,15 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 3,36-3,43 (m, 4 H), 1,65 (s, 3 H), 1,33-1,44 (m, 4 H), 0,33 (s, 4 H).m/z(ESI): 345,0 (M+H)+.

Intermedio 42: ácido 3-cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxílico.

Etapa 1. A una solución de ácido 3,5-dicloropirazin-2-carboxílico (3,25 g, 16,84 mmol, Frontier Scientific, Inc.) y MeOH (20 ml) se le añadió 10 gotas de ácido sulfúrico concentrado. La reacción se agitó a reflujo. Después de 16 h, la LC-MS sugiere conversión completa. La reacción se enfrió hasta TA y se concentró al vacío. El material se recogió en EtOAc (25 ml) y se lavó con NaHCOs saturado (20 ml). La capa acuosa se volvió a extraer con EtOAc (2 x 20 ml). Las capas de EtOAc combinadas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío para dar 3,5-dicloropirazin-2-carboxilato de metilo en bruto (42A, 3,15 g, 15,22 mmol, 90 % de rendimiento) como un sólido pardo. El material se llevó directamente sin purificación adicional. r Mn de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,58 (s, 1 H), 4,04 (s, 3 H).

Etapa 2. A una solución de 3,5-dicloropirazin-2-carboxilato de metilo (42A, 2,02 g, 9,78 mmol) y DSMO (40 ml) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (3,41 ml, 19,56 mmol) y 2-amino-2-metil-1 -propanol (0,934 ml, 9,78 mmol, Aldrich). La solución se agitó a TA durante 4 d, después se trató con agua (150 ml) y se extrajo con EtOAc (5 x 20 ml). Las capas de EtOAc combinadas se concentraron al vacío y se adsorbieron sobre un lecho de gel de sílice y se cromatografiaron a través de una columna Redi-Sep® precompactada de gel de sílice (Gold, 40 g), eluyendo con de 0 % a 75 % de EtOAc en heptano, para proporcionar 3-cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxilato de metil (42B, 1,463 g, 5,63 mmol, 57,6 % de rendimiento) como un sólido naranja. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,94 (s, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 4,84 (t,J= 5,9 Hz, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,55 (d,J= 5,9 Hz, 2 H), 1,31 (s, 6 H).m/z(ESI): 260,0 (M+H)+. También se aisló 5-cloro-3-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxilato de metilo (42C, 0,563 g, 2,168 mmol, 22,16 % de rendimiento) como un sólido naranja. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,42 (s, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 5,09 (t,J= 5,5 Hz, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,49 (d,J= 5,5 Hz, 2 H), 1,36 (s, 6 H).m/z(ESI): 260,0 (M+H)+.

Etapa 3. A una solución de 3-cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxilato de metilo (42B, 1,46 g, 5,62 mmol) en THF (40 ml) y MeOH (13 ml) se le añadió LiOH (20 ml de solución acuosa 1 M, 20,00 mmol). La solución parda oscura resultante se agitó a TA durante 16 h, después se concentró al vacío para retirar los disolventes orgánicos. La solución acuosa se neutralizó con HCl 2 N hasta ~pH 7, después se extrajo con EtOAc hasta que no se observó producto significativo (m/z (ESI): 246,0 (M+H)+) por LCMS. Las capas orgánicas combinadas se concentraron al vacío para dar ácido 3-cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxílico (42, 1,15 g, 4,68 mmol, 83 % de rendimiento) como un sólido amarillo.m/z(ESI): 246,1 (M+H)+.

Intermedio 43: ácido 3-cloro-5-((1-(hidroximetil)ciclopropil)amino)pirazin-2-carboxílico.m/z(ESI): 244,1 (M+H)+. Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el intermedio 42.

Intermedio 44: ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilico.

Etapa 1. Una mezcla de ácido 3,5-dicloropirazin-2-carboxílico (17,0 g, 88 mmol) en cloruro de tionilo (50 ml, 820 mmol) se calentó en un baño de aceite a 90 °C durante 16 h. La solución oscura se evaporó a sequedad a presión reducida. El aceite en bruto se disolvió en tolueno (120 ml) y se evaporó a sequedad una vez más antes de poner el cloruro de ácido en bruto en vacío doméstico. Se disolvió alcohol bencílico (10 ml, 96 mmol) y trietilamina (25 ml, 178 mmol) en tetrahidrofurano seco (100 ml) y se enfrió en un baño de hielo. El cloruro de ácido en bruto se añadió lentamente manteniendo la temperatura interna <35 °C. Una vez se completó la adición, la mezcla se retiró del baño de refrigeración y se agitó durante otros 10 min. Se añadió cloruro de amonio saturado (75 ml), agua (100 ml) y acetato de etilo (200 ml) y las fases se mezclaron y separaron. La capa orgánica se evaporó a sequedad a presión reducida y se purificó en una columna de gel de sílice (de 10 % a 40 % de acetato de etilo en heptano) para dar 3,5-dicloropirazin-2- carboxilato de bencilo (44A, 22,4 g, 79 mmol, 90 % de rendimiento).m/z(ESI): 304,8 (M+Na)+.

Etapa 2. Se disolvió 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona (4,1 g, 35,6 mmol) en dimetilformamida (80 ml) en un reactor encamisado. La temperatura se estableció a 15 °C. Se añadió solución de terc-butóxido de potasio (1,0 M en THF, 35,5 ml, 35,5 mmol) y la mezcla se volvió un gel espeso. Se añadió una solución de 3,5-dicloropirazin-2-carboxilato de bencilo (44A, 10,0 g, 35,3 mmol) en dimetilformamida (50 ml) en una porción. La mezcla de reacción se volvió parda rojiza. La tasa de agitación se aumentó hasta 400 rpm para ayudar a homogeneizar la mezcla. El gel se incorporó lentamente en la reacción. Se añadió agua (100 ml), cloruro de amonio saturado (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) y la mezcla se agitó durante 5 min. La capa acuoso se dejó sedimentar, después se drenó. La capa orgánica se lavó con agua (100 ml), después se secó sobre Na2SO4 y se evaporó a sequedad a presión reducida. La purificación en una columna de gel de sílice (de 0 % a 100 % de acetato de etilo en heptano) dio 3-cloro-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3- il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (44B, 10,7 g, 29,6 mmol, 84 % de rendimiento) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 362,3 (M+H)+.

Etapa 3. Se combinaron 3-cloro-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (10,7 g, 29,6 mmol), 6-azaespiro[2.5]octano (44B, 3,5 g, 31,5 mmol) y carbonato de cesio (12 g, 36,8 mmol) en DMF (75 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó a TA durante 16 h. Se añadieron agua (200 ml) y acetato de etilo (200 ml) y las fases se mezclaron y se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (200 ml), después se evaporó a sequedad a presión reducida. El material en bruto se suspendió en éter metil terc-butílico (50 ml) y se agitó durante 10 min. Se añadió lentamente heptano (50 ml) y la mezcla se agitó durante otros 10 min. Se filtró a través de una frita de vidrio sinterizada y el sólido se lavó con heptano:éter metil terc-butílico 2:1 (10 ml). El sólido se secó a vacío doméstico para dar 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (44C, 12,2 g, 27,9 mmol, 95 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. El filtrado se evaporó a sequedad a presión reducida para dar un aceite amarillo (0,7 g). La purificación usando ISCO (gradiente de heptano a acetato de etilo) dio otros 0,5 g de intermedio 44C.m/z(ESI): 437,2 (M+H)+.

Etapa 4. Se disolvió 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (44C, 12,2 g, 27,9 mmol) en una mezcla 1:1 de diclorometano:etanol (120 ml). Se añadió paladio sobre carbono (50 % en peso de agua, 5 % en peso (base seca) de Pd (0,350 g, 0,082 mmol) y la suspensión se hidrogenó a 275,79 kPa (40 psi). Después de 1 h la captación de hidrógeno pareció haber cesado y la LC/MS encontró que el material de partida se había consumido. La suspensión se filtró a través de una capa de celite y el sólido se lavó con diclorometano (10 ml). El filtrado se evaporó a sequedad a presión reducida para dar ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (44, 9,17 g, 26,5 mmol, 95 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 10,1 (a, 1 H) 8,60 - 8,78 (m, 1 H) 4,06 - 4,26 (m, 2 H) 3,49 -3,63 (m, 4 H) 1,65 - 1,81 (m, 6 H) 1,49 - 1,61 (m, 4 H) 0,34 - 0,50 (m, 4 H).m/z(ESI): 347,1 (M+H)+.

Intermedio 45: ácido 5-(5-oxo-6-oxa-4-azaespiro[2.4]heptan-4-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico.m/z(ESI): 345,2 (M+H)+. Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el intermedio 44.

Intermedio 46: acido 3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxilico.

Etapa 1. Una mezcla de 3,5-dicloropirazin-2-carboxilato de bencilo (44A, 3,03 g, 10,70 mmol), tributil(1-etoxivinil)estaño (4,25 g, 11,77 mmol, Aldrich), y bis-(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio (ii) (0,30 g, 0,42 mmol) en tolueno (1 ml) se calentó a 80 °C en 2 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA y se trató con 15 ml de solución de KF 1 M y se agitó durante 30 min. La mezcla se diluyó con éter t-butil metílico; el sólido precipitado se retiró por filtración y se lavó con heptano. El filtrado se separó. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó en una columna de gel de sílice (10 % de EtOAc/heptano) para dar 46A (3,03 g) que contenía una mezcla de 3-cloro-5-(1-etoxivinil)pirazin-2-carboxilato de bencilo y 5-cloro-3-(1-etoxivinil)pirazin-2-carboxilato de bencilo.m/z(ESI): 319,5 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de 46A (2,81 g, 8,82 mmol), DIPEA (4,62 ml, 26,4 mmol) y 6-azaespiro[2.5]octano (1,176 g, 10,58 mmol, Wuxi) en DMSO (10 ml) se calentó a 70 °C en 3 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos se concentraron, y el residuo se purificó en columna ISCO (de 0 % a 20 % de EtOAc/heptano) para dar 2 compuestos conm/z(ESI): 394,1 (M+H)+. El 1.er eluyente fue 3-(1-etoxivinil)-5-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46B, 1,428 g, 3,63 mmol, 41 % de rendimiento): RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 8,06 (s, 1H), 7,44 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,29-7,39 (m, 3H), 5,36 (s, 2H), 4,81 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,72-3,82 (m, 6H), 1,46 (dd, J = 6,5, 4,7 Hz, 4H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,40 (s, 4H). El 2.° eluyente fue 5-(1-etoxivinil)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46C, 1,33 g, 3,40 mmol, 38 % de rendimiento): RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 8,30 (s, 1H), 7,45-7,51 (m, 2H), 7,31-7,40 (m, 3H), 5,42 (s, 2H), 5,40 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,96 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,41 3,47 (m, 4H), 1,43 (t, J = 6,9 Hz, 3H), 1,38 (dd, J = 6,5, 4,7 Hz, 4H), 0,33 (s, 4H).

Etapa 3. A una solución agitada de 5-(1-etoxivinil)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46C, 1,33 g, 3,38 mmol) en THF (15 ml) se le añadió HCl 5 N (3,38 ml, 16,90 mmol). Después de la adición, la mezcla se agitó a TA durante 3 h. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se neutralizó lentamente con NaHCO3 acuoso saturado. La capa orgánica se separó, se secó sobre MgSÜ4 y se concentró para proporcionar 46D. RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 8,51 (s, 1H), 7,46-7,50 (m, 2H), 7,31-7,41 (m, 3H), 5,44 (s, 2H), 3,42-3,52 (m, 4H), 2,62 (s, 3H), 1,33-1,41 (m, 4H), 0,36 (s, 4H).m/z(ESI): 366,1 (M+H)+.

Etapa 4. A una mezcla agitada de 5-acetil-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46D, 1,21 g, 3,31 mmol) y fluoruro de cesio (2,01 g, 13,23 mmol) en THF (2 ml) se le añadió trimetil(trifluorometil)silano (0,59 ml, 3,97 mmol, Aldrich). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se concentró y el residuo se purificó en una columna de gel de sílice (de 0 % a 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46E, 1,21 g, 2,78 mmol, 84 % de rendimiento). RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 8,10 (s, 1H), 7,49 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 2H), 7,37 (dd, J = 7,5, 1,9 Hz, 3H), 5,44 (s, 2H), 5,21 (s, 1H), 3,40-3,47 (m, 4H), 1,74 (s, 3H), 1,39 (dd, J = 6,5, 4,7 Hz, 4H), 0,36 (s, 4H).m/z(ESI): 436,3 (M+H)+.

Etapa 5. Una solución de 3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (46E, 1,2 g, 2,76 mmol) en etanol (15 ml) se hidrogenó a 344,34 kPa (50 psi) en presencia de Pd/C (0,293 g de 10 % en peso, 0,276 mmol) durante 2 h. El catalizador se retiró por filtración a través de una capa de Celite y el sólido se aclaró con EtOH. El filtrado se concentró para producir ácido 3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxílico (46, 904 mg, 95 % de rendimiento) como un sólido amarillo.m/z(ESI): 346,3 (M+H)+.

Intermedio 47. Ácido 5-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico.

Etapa 1. Un vial de centelleo de 20 ml se cargó con 3,5-dicloropirazin-2-carboxilato de bencilo (44A, 0,209 g, 0,738 mmol), carbamato de 1,1 -dimetiletilo (0,107 g, 0,917 mmol), Xantphos (0,044 g, 0,077 mmol), Pd2(dba)3 (0,035 g, 0,038 mmol), carbonato de cesio (0,482 g, 1,479 mmol) y 1,4-dioxano (2 ml). La mezcla se desgasificó burbujeando argón a través de la mezcla de reacción durante 5 min. El vial se tapó y la mezcla se agitó a 80 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se repartió entre agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (20 ml), después se concentraron. El residuo pardo se cargó en una columna de gel de sílice, después se eluyó con EtOAc en heptano (de 5 % a 50 %) para producir 47A (0,138 g, 51 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 m Hz,CLOROFORMO-d) 5ppm 9,26 (1 H, s), 7,50 (2 H, m), 7,37 (4 H, m), 5,45 (2 H, s), 1,55 (9 H, s).m/z(ESI): 364,1 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de 5-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-cloropirazin-2-carboxilato de bencilo (47A, 0,138 g, 0,379 mmol) y DMSO (1 ml) se le añadió 6-azaespiro[2.5]octano (0,060 ml, 0,455 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,165 ml, 0,948 mmol). La solución se agitó a 60 °C durante 4 h, después se enfrió hasta TA y se repartió entre agua (8 ml) y EtOAc (8 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (8 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 8 ml) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por Biotage (SNAP25, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano de 5 % a 60 %) para producir 5-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (47B, 0,153 g) como una espuma blanca. RMN de 1H (400 MHz,cLOROFORMO-d) 5ppm 8,59 (1 H, s), 7,47 (2 H, d,J= 6,8 Hz), 7,29 - 7,39 (3 H, m), 6,97 (1 H, s), 5,41 (2 H, s), 3,33 - 3,43 (4 H, m), 1,54 (9 H, s), 1,32 - 1,40 (4 H, m), 0,32 (4 H, s).

Etapa 3. Un vial de centelleo de 20 ml se cargó con 5-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (47B, 0,153 g, 0,349 mmol) y DCM (2 ml). Se añadió TFA (1 ml, 12,98 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 45 min. La mezcla se concentró al vacío y la pasta amarilla resultante se disolvió en 50 ml de DCM y se lavó con 3 ml de NaOH 1 N. La solución orgánica se concentró para dar 5-amino-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-¡l)pirazin-2-carbox¡lato de bencilo (m/z (ESI): 339,1 (M+H)+) como un aceite amarillo pegajoso que se usó en bruto. El aceite amarillo pegajoso se recogió en DCM (2 ml). Se añadió cloruro de metanosulfonilo (0,030 ml, 0,384 mmol) seguido de DIPEA (0,305 ml, 1,745 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 30 min, después se trató con cloruro de metanosulfonilo (0,030 ml, 0,384 mmol) y DIPEA (0,305 ml, 1,745 mmol). Después de 18 h, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (de 5 % a 70 % de EtOAc en heptano) para producir 5-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (47C, 0,112 g) como un sólido naranja. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d)5 ppm 7,89 (1 H, s), 7,48 (2 H, dd,J= 7,8, 1,3 Hz), 7,34 - 7,41 (3 H, m), 5,43 (2 H, s), 3,56 (6 H, s), 3,39 - 3,44 (4 H, m), 1,35 - 1,40 (4 H, m), 0,35 (4 H, s).m/z(ESI): 495,3 (M+H)+.

Etapa 4. Una mezcla de 5-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (47C, 0,112 g, 0,226 mmol) y P/C (al 10 % en peso, 10 mg), 3:1 de EtOAc/EtOH (4,5 ml) se hidrogenó a 206,84 kPa (30 PSI) de H2 durante 1 h. La mezcla se filtró mediante una capa de Celite y el sólido se aclaró con 2 x 5 ml de EtOAc. La concentración del filtrado dio ácido 5-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (47, 0,088 g) como un sólido amarillo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,17 (1 H, s), 3,68 (6 H, s), 3,48 - 3,54 (5 H, m), 1,39 - 1,46 (4 H, m), 0,36 (4 H, s).m/z(ESI): 405,1 (M+H)+.

Intermedio 48: ácido 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Un matraz con fondo redondo de 250 ml se cargó con ácido 2,6-difluoronicotínico (5,0 g, 31,5 mmol), 6-azaespiro[2.5]octano (3,8 g, 34,6 mmol) y 1,4-dioxano (60 ml). Se añadió base de Hunig (6,6 ml, 37,9 mmol) y la solución parda clara se agitó a TA durante 18 h. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con EtOAc (80 ml), después se lavó con agua (2 x 10 ml) seguida de salmuera (10 ml). La fase orgánica se redujo hasta ~50 ml y empezó a aparecer algo de sólido. La suspensión se dejó reposar durante 18 h. El sólido se recogió para producir el compuesto del título (2,35 g) como un sólido amarillo. Las aguas madre se concentraron y se añadió una cantidad mínima de EtOAc para disolver todo el residuo. El volumen se redujo hasta ~20 ml y se recogió un segundo cultivo para producir el compuesto del título (2,23 g) como un sólido amarillo. Este procedimiento se repitió para producir el tercer cultivo del compuesto del título (1,10 g). Los 3 lotes se combinaron para dar ácido 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (48, 5,68 g, 72 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 10,50 (s, 1H), 8,68 (t,J= 8,2 Hz, 1H), 7,00 (dd,J= 3,1,8,4 Hz, 1H), 3,19 (t,J= 5,6 Hz, 4H), 1,69 (s a, 4H), 0,47 (s, 4H).m/z(ESI): 251,0 (M+H)+.

Intermedio 49: ácido 6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1,3-dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Etapa 1. Se añadió cloruro de oxalilo (solución 2 M en DCM, 13,0 ml, 26,0 mmol) y 1 gota de DMF a una mezcla de ácido 2,6-dicloropiridin-3-carboxílico (4,0 g, 20,8 mmol, Aldrich) en DCM (50 ml). La mezcla se agitó durante 2 h, después el disolvente se retiró al vacío para proporcionar el cloruro de ácido como un aceite amarillo. El aceite se disolvió en THF (50 ml) y se añadieron alcohol bencílico (2,2 ml, 20,8 mmol, Combi-Blocks, Inc.) y trietilamina (11,7 ml, 83,0 mmol). Esta mezcla se agitó durante 1 h, después se añadieron EtOAc y agua. La mezcla bifásica resultante se separó, y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 2,6-dicloronicotinato de bencilo (49A, 6,01 g, 21,3 mmol, 102 % de rendimiento) como un aceite pardo.m/z(ESI): 282,0 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de 2,6-dicloronicotinato de bencilo (49A, 1,0 g, 3,54 mmol), 6-azaespiro[2.5]octano (0,43 g, 3,90 mmol, Wuxi AppTech) y DIPEA (0,74 ml, 4,25 mmol) en THF (10 ml) se agitó a TA durante 16 h, después se añadieron EtOAc y H2O. La mezcla bifásica resultante se separó, y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite. Este aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 20 % de EtOAc/heptano, para proporcionar 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (49B, 0,63 g, 1,76 mmol, 49,6 % de rendimiento) como un aceite incoloro. Rm N de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,89 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 7,32 - 7,44 (m, 5 H) 6,62 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 5,31 (s, 2 H) 3,40 - 3,46 (m, 4 H) 1,25 - 1,44 (m, 4 H) 0,33 (s, 4 H).m/z(ESI): 357,0 (M+H)+.

Etapa 3. Una mezcla de 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (49B, 0,55 g, 1,54 mmol), carbonato de sodio (2 N acuoso, 2,31 ml, 4,62 mmol), tetraquistrifenilfosfina paladio (0) (89 mg, 0,077 mmol) y 4,4,6-trimetil-2-(3,3,3-trifluoroprop-1 -en-2-il)-1,3,2-dioxaborinano (684 mg, 3,08 mmol, Frontier Scientific) se recogió en dioxano (6 ml) en un tubo de microondas, el disolvente se roció con argón durante 5 min y después el tubo se cerró herméticamente. Después, la mezcla se calentó hasta 110 °C en un microondas durante 90 min, después se enfrió hasta TA. Se añadieron EtOAc y H2O, y la mezcla bifásica resultante se separó. El material orgánico se condensó en gel de sílice y el material se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc/heptano, para proporcionar 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(3,3,3-trifluoroprop-1 -en-2-il)nicotinato de bencilo (49C, 0,47 g, 1,13 mmol, 73,2 % de rendimiento) como un aceite amarillo. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,98 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 7,31 - 7,45 (m, 5 H) 6,87 (d, J = 7,43 Hz, 1 H) 6,57 (s, 1 H) 6,10 (s, 1 H) 5,33 (s, 2 H) 3,42 - 3,48 (m, 4 H) 1,38 - 1,45 (m, 4 H) 0,32 (s, 4 H). RMN de 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm - 63,77 (s, 3 F). m/z (ESI): 417,2 (M+H)+.

Etapa 4. Una mezcla de 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(3,3,3-trifluoroprop-1-en-2-il)nicotinato de bencilo (49C, 0,47 g, 1,13 mmol), 4-metilmorfolina-N-óxido (50 % en peso en agua, 0,46 ml, 1,98 mmol) y solución de tetróxido de osmio (0,059 ml, 1,129 mmol) en acetona (5 ml) y agua (2 ml) se agitó durante 3 d a TA. Se añadieron EtOAc y H2O, y la mezcla bifásica resultante se separó. La capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc/heptano) para proporcionar 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2,3-dihidroxipropan-2-il)nicotinato de bencilo (49D, 0,43 g, 0,96 mmol, 85 % de rendimiento) como un aceite. RMN de 1H (400<m>H<z>, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,08 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 7,33 - 7,45 (m, 5 H) 6,89 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 6,15 (s, 1 H) 5,34 (s, 2 H) 4,11 (d a, J = 4,69 Hz, 1 H) 3,93 - 4,06 (m, 1 H) 3,41 - 3,47 (m, 4 H) 1,96 - 2,08 (m, 1 H) 1,39 - 1,47 (m, 4 H) 0,34 (s, 4 H). RMN de 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -77,34 (s, 3 F).m/z(ESI): 451,1 (M+H)+.

Etapa 5. Una mezcla de 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2,3-dihidroxipropan-2-il)nicotinato de bencilo (49D, 0,43 g, 0,96 mmol), 2,2-dimetoxipropano (0,35 ml, 2,88 mmol, Aldrich) y ácido p-toluenosulfónico monohidrato (18 mg, 0,096 mmol) en THF (5 ml) se calentó hasta 60 °C durante 4 h, después se enfrió hasta TA. Se añadieron EtOAc y NaHCOs acuoso saturado, la mezcla bifásica resultante se separó y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar 6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1,3-dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (0,47 g, 0,96 mmol, 99 % de rendimiento) como un aceite. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,98 (d,J= 7,83 Hz, 1 H) 7,32 - 7,46 (m, 5 H) 7,06 (d,J= 7,83 Hz, 1 H) 5,33 (s, 2 H) 4,56 (s, 2 H) 3,41 (dd,J= 6,55, 3,62 Hz, 4 H) 1,55 (s, 6 H) 1,35 - 1,41 (m, 4 H) 0,32 (s, 4 H). RMN de 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -77,35 (s, 3 F).m/z(ESI): 491,1 (M+H)+. Una mezcla de 6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1.3- dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (0,47 g, 0,96 mmol), paladio (10 % en peso sobre carbono activado, 477 mg, 3,76 mmol) y formiato de amonio (0,60 g, 9,6 mmol) en EtOH (5 ml) se calentó hasta 60 °C durante 20 min, después se enfrió hasta TA. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El sólido resultante se repartió entre EtOAc y agua, la mezcla bifásica resultante se separó y la capa orgánica se lavó con agua, se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar ácido 6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1.3- dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (49, 0,36 g, 0,90 mmol, 94 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 8,57 - 8,69 (m, 1 H) 7,75 - 7,89 (m, 1 H) 4,57 - 4,70 (m, 2 H) 3,19 (s a, 4 H) 1,32 - 1,38 (m, 4 H) 0,45 (s a, 4 H) 0,00 (s, 6 H). RMN de 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -77,25 (s, 3 F).m/z(ESI): 401,1 (M+H)+.

Intermedio 50: ácido 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Etapa 1. Ácido 2,6-difluoronicotínico (10,6 g, 66,6 mmol) y cloruro de tionilo (35 ml, 480 mmol) se combinaron en atmósfera de nitrógeno y se calentaron a reflujo suave durante 2 h. La solución se concentró a sequedad a presión reducida. Se añadió tolueno (100 ml) al material en bruto y se evaporó a sequedad una vez más. El cloruro de ácido en bruto se disolvió en DCM (50 ml) en atmósfera de nitrógeno y se enfrió en un baño de hielo. Una mezcla de trietilamina (25 ml, 180 mmol) y alcohol bencílico (7,25 ml, 70,1 mmol) en DCM (50 ml) se añadió gota a gota durante 10 min. Se añadió HCl 0,1 N (100 ml) y las fases se mezclaron y separaron. La capa orgánica se secó con sulfato de magnesio y se evaporó a sequedad a presión reducida para proporcionar 2,6-difluoronicotinato de bencilo (50A) que se usó sin purificación.m/z(ESI): 250,0 (M+H)+.

Etapa 2. Se disolvió 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona (0,80 g, 6,95 mmol) en THF (15 ml) en atmósfera de nitrógeno. Se añadió t-butóxido de potasio (0,750 g, 6,68 mmol) y la suspensión se agitó a TA durante 5 min. La mezcla se convirtió en un gel espeso. Una solución de 2,6-difluoronicotinato de bencilo (50A, 1,60 g, 6,42 mmol) en N,N-dimetilacetamida (40 ml) se añadió y la mezcla se agitó a TA durante 10 min cuando la LC/MS encontró que el material de partida se había consumido esencialmente y se encontraron dos picos con la masa deseada (m/z (ESI): 345,0 (M+H)+). Se añadieron agua (75 ml), acetato de etilo (150 ml) y cloruro de amonio saturado (25 ml) y las fases se mezclaron y separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml) y se evaporó a sequedad a presión reducida. La purificación usando ISCO (gradiente de heptano a acetato de etilo) dio 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-fluoronicotinato de bencilo (50B, 1,82 g, 5,29 mmol, 82 % de rendimiento) como un sólido blanco. Este material fue aproximadamente un 92 % puro; el resto fue 2-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-6-fluoronicotinato de bencilo.

Etapa 3. Se disolvió 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-fluoronicotinato de bencilo (50B, 1,81 g, 5,23 mmol) en NMP (20 ml). Se añadieron carbonato de cesio (2,00 g, 6,14 mmol) y 6-azaespiro[2.5]octano (0,60 g, 5,40 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 18 h. Se añadieron agua (100 ml) y acetato de etilo (150 ml) y las fases se mezclaron y separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y se evaporó a sequedad a presión reducida. La purificación usando ISCO (de 0 % a 40 % de acetato de etilo en heptano) dio 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (50C, 1,77 g, 4,06 mmol, 78 % de rendimiento) como un aceite lechoso.m/z(ESI): 436,1 (M+H)+.

Etapa 4. Se disolvió 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (50C, 1,77 g, 4,06 mmol) en acetato de etilo (30 ml) y se transfirió a un vaso de presión. Se añadió etanol (60 ml) seguido de un 5 % de paladio sobre carbono (peso seco, 50 % de agua, 0,250 g, 0,117 mmol). La suspensión se agitó a 275,79 kPa (40 psi) de hidrógeno durante 15 min. La mezcla se filtró a través de una capa de celite y el sólido se lavó con acetato de etilo (50 ml). El filtrado combinado se evaporó a sequedad a presión reducida para dar ácido 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 50, 1,15 g, 3,33 mmol, 82 % de rendimiento) como un sólido blanco.m/z(ESI): 346,0 (M+H)+.

Intermedio 51: ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(2,2,4-trimetil-1,3-dioxolan-4-il)nicotínico.

Etapas 1-3. Se preparó 6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (intermedio 51C) en una secuencia de 3 etapas análoga a la descrita para 5-acetil-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxilato de bencilo (intermedio 46D). RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d):58,04 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,39 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,54 (t,J= 5,2 Hz, 4H), 2,66 (s, 3H), 1,51 (t,J= 5,2 Hz, 4H), 0,40 (s, 4H).m/z(ESI): 289,0 (M+H)+.

Etapa 4. A una solución de yoduro de trimetil sulfoxonio (4,62 g, 20,98 mmol) en DMSO (55,0 ml) se le añadióterc-butóxido de potasio (2,14 g, 19,07 mmol) y se agitó a TA durante 15 min. Una solución de 6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (51C, 5,5 g, 19,07 mmol) en DMSO (55,0 ml) se añadió gota a gota a TA y la mezcla de reacción se agitó durante 3 h. La reacción se interrumpió con agua fría (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 75 ml). La capa orgánica se lavó con agua (50 ml) seguida de salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida a través de Isolera-One (SNAP 100 g) usando un 6 % de acetato de etilo en hexanos para dar 6-(2-metiloxiran-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (51D, 4,6 g, 15,2 mmol, 80 % de rendimiento) como un aceite amarillo. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d) 57,94 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 6,72 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,49 (t,J= 5,4 Hz, 4H), 3,00 (d,J= 5,6 Hz, 1H), 2,93 (d,J= 5,6 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,50 (t,J= 5,4 Hz, 4H), 0,37 (s, 4H).m/z(ESI): 303,0 (M+H)+.

Etapa 5. A una solución de 6-(2-metiloxiran-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (51D, 4,60 g, 15,21 mmol) en 1,4-dioxano (30 ml) y agua (30 ml) se le añadió HCl conc. (3,0 ml) a TA y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (4 x 100 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener un residuo en bruto que se purificó por cromatografía ultrarrápida a través de Isolera-One (SNAP 100 g) usando un gradiente de 25-30 % de acetato de etilo en hexanos para dar 6-(1,2-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (51E, 3,1 g, 9,68 mmol, 64 % de rendimiento) como un aceite amarillo.m/z(ESI): 321,0 (M+H)+.

Etapa 6. A una solución de 6-(1,2-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (51E, 3,1 g, 9,68 mmol) en acetona (62,0 ml) se le añadió 2,2-dimetoxipropano (3,02 g, 29,0 mmol) y ácido p-toluenosulfónico monohidrato (0,184 g, 0,968 mmol) y se agitó a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró, y el residuo se diluyó con solución acuosa al 5 % de NaHCO3 y se extrajo con acetato de etilo (2 x 75 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (40 ml) y salmuera (40 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida para producir 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(2,2,4-trimetil-1,3-dioxolan-4-il)nicotinato de metilo (3,0 g, 8,33 mmol, 86 % de rendimiento) como un aceite amarillo.m/z(ESI): 361,2 (M+H)+. El aceite amarillo se recogió en metanol (30,0 ml), después se trató con hidróxido de sodio (solución acuosa 2,5 M) (16,65 ml, 41,6 mmol), después se agitó a TA durante 24 h. La mezcla de reacción se concentró a la mitad de su volumen, después se acidificó hasta pH ~5-6 con solución de ácido cítrico al 10 %. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml) y la capa orgánica combinada se lavó con agua (40 ml) seguida de salmuera (40 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida para producir ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(2,2,4-trimetil-1,3-dioxolan-4-il)nicotínico (intermedio 51,2,6 g, 7,5 mmol, 90 % de rendimiento) como una goma amarilla pálida que solidificó tras reposar para formar un sólido amarillo pálido. El material en bruto se usó sin purificación adicional. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-J) 510,5 (a, 1H), 8,58 (dd,J= 8,0, 0,9 Hz, 1H), 7,76 (dd,J= 8,0, 0,9 Hz, 1H), 4,48 - 4,40 (m, 1H), 4,12 (dd,J= 8,6, 0,9 Hz, 1H), 3,22 (t,J= 5,7 Hz, 4H), 1,63 (s, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,42 (s, 3H), 1,40 - 1,20 (b s, 4H), 0,50 (s, 4H).m/z(ESI): 347,0 (M+H)+.

Intermedio 52: ácido 6-(2-fluoro-1,3-dimetoxi-1,3-dioxopropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Etapa 1. A un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añadieron 2,6-difluoronicotinato de bencilo (50A, 1,00 g, 4,01 mmol), 6-azaespiro[2.5]octano (0,47 g, 4,21 mmol) y DIPEA (1,40 ml, 8,03 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a Ta durante 16 h. El material en bruto se absorbió en un lecho de gel de sílice y se purificó por cromatografía, eluyendo con de 5 % a 10 % de EtOAc en hexano, para proporcionar 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (52A, 900 mg, 2,64 mmol, 66 % de rendimiento) como un líquido gomoso incoloro.m/z(ESI): 341,0 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (52A, 8,6 g, 25,3 mmol), malonato de dimetilo (28,9 ml, 253 mmol) y carbonato de cesio (20,58 g, 63,2 mmol) en NMP (50 ml) se agitó a 60 °C durante 24 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA. Se añadieron agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa orgánica se concentró. El residuo se purificó por ISCO (de 0 % a 20 % de EtOAc/heptano) para dar 2-(5-((benciloxi)carbonil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)malonato de dimetilo (52B, 8,23 g, 18,19 mmol, 72 % de rendimiento). RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 7,97 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,41-7,46 (m, 2H), 7,31-7,40 (m, 3H), 6,74 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,81 (s, 1H), 3,78 (s, 6H), 3,40-3,44 (m, 4H), 1,35-1,43 (m, 4H), 0,31 (s, 4H).m/z(ESI): 453,0 (M+H)+.

Etapa 3. Se añadió hidruro de sodio (0,318 g de un 60 % en peso, 7,96 mmol) a una solución de 2-(5-((benciloxi)carbonil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)malonato de dimetilo (52B, 3,0 g, 6,63 mmol) en THF (15 ml). Después de agitar a TA durante 20 min, se añadió reactivo de fluoración selectfluor (3,05 g, 8,62 mmol, Aldrich) y la mezcla estuvo a TA durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y se trató con H2SO4 al 5 % (30 ml), se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos se secaron sobre MgSO4 y se concentraron para dar 2-(5-((benciloxi)carbonil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)-2-fluoromalonato de dimetilo (52C, 3,5 g, 7,44 mmol, 112 % de rendimiento) que se usó en bruto en la siguiente etapa.m/z(ESI): 471,0 (M+H)+.

Etapa 4. Una mezcla de 2-(5-((benciloxi)carbonil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)-2-fluoromalonato de dimetilo (52C, 3,5 g, 7,44 mmol) y Pd/C (1,6 g de un 10 % en peso, 1,48 mmol) en etanol (40 ml) se hidrogenó a 344,74 kPa (50 psi) de hidrógeno durante 2 h. El catalizador se retiró por filtración a través de una capa de Celite, se aclaró con EtOAc, el filtrado se concentró para dar ácido 6-(2-fluoro-1,3-dimetoxi-1,3-dioxopropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 52, 2,63 g, 93 % de rendimiento). El material en bruto se usó sin purificación adicional. RMN de 1H (DMSO-d6) 5: 7,74 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 3,59 (s, 6H), 3,12 3,15 (m, 4H), 1,11-1,17 (m, 4H), 0,09 (s, 4H). No se observó pico de -CO2H.m/z(ESI): 381,0 (M+H)+.

Intermedio 53: ácido 6-((1-metoxi-2-metilpropan-2-M)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-M)nicotínico.

Etapa 1. Una mezcla de 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (52A, 1,20 g, 3,53 mmol), 1 -metoxi-<2-metilpropan-2-amina (0,54 g, 5,29 mmol) y>DIP<e>A<(1,84 ml, 10,58 mmol) en DMSO (5 ml) se agitó a 100 °C durante>36 h. Se enfrió hasta TA y se repartió entre agua (10 ml) y EtOAc (50 ml). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se purificó por ISCO (de 0 % a 30 % de EtOAc en heptano) para dar 6-((1-metoxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (53A, 0,42 g, 1,00 mmol, 28 % de rendimiento). RMN de 1H (CLOROFORMO-d) 5: 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,40-7,45 (m, 2H), 7,29-7,38 (m, 3H), 5,76 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,79 (s, 1H), 3,46 (s, 2H), 3,39-3,43 (m, 4H), 3,37 (s, 3H), 1,46 (d a, J = 5,4 Hz, 4H), 1,44 (s, 6H), 0,32 (s, 4H).m/z(ESI): 424,1 (M+H)+.

Etapa 2. Se hidrogenó 6-((1-metoxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de bencilo (53A, 0,42 g, 1,00 mmol) usando los procedimientos descritos para el intermedio 52, dando ácido 6-((1-metoxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 53, 298 mg, 0,89 mmol, 89 % de rendimiento).m/z(ESI): 334,0 (M+H)+.

Intermedio 54: ácido 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Una mezcla de ácido 2,6-dicloronicotínico (4,2 g, 21,9 mmol), 6-azaespiro[2.5]octano (2,4 g, 21,9 mmol) y 1,4-dioxano (40 ml). Se añadió base de Hunig (7,7 ml, 44,1 mmol) y la solución parda se agitó a 60 °C durante 18 h. La mezcla se diluyó con EtOAc (80 ml) y se lavó con agua (2 x 10 ml) seguida de salmuera (5 ml). La fase orgánica se concentró y el residuo se purificó en una columna de gel de sílice (0,25 % de AcOH medió de 50 % a 100 % de EtOAc/hexanos) hasta el compuesto del título (54, 2,60 g, 44 % de rendimiento) como un sólido castaño. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 8,52 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 7,40 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 3,21 (t,J= 5,4 Hz, 4H), 1,69 (s a, 4H), 0,47 (s, 4H). No se observó -CO2H.m/z(ESI): 267,0 (M+H)+.

Intermedio 55: ácido 6-((metilsulfonil)metil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico.

Una mezcla de 2-cloro-6-metilnicotinato de metilo (5,0 g, 26,9 mmol), AIBN (4,4 g, 26,9 mmol) y 1 -bromopirrolidin-2,5-diona (4,78 g, 26,9 mmol) en tetracloruro de carbono (50 ml) se calentó a 70 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). El extracto orgánico se concentró al vacío. El aceite amarillo resultante [m/z (ESI): 264,0 /266,0 (M+H)+] se recogió en 50 ml de DMF y se trató con metanosulfinato de sodio (2,73 g, 26,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 1 h, después se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. El material en bruto se absorbió en un lecho de gel de sílice y se purificó por cromatografía a través de una columna Redi-Sep precompactada de gel de sílice (120 g), eluyendo con un gradiente de 1 % a 50 % de EtOAc en hexanos, para proporcionar 2-cloro-6-((metilsulfonil)metil)nicotinato de metilo (55A, 4,0 g) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 264,0 (M+H)+.

Una mezcla de 2-cloro-6-((metilsulfonil)metil)nicotinato de metilo (55A, 2,0 g, 7,58 mmol) y 6-azaespiro[2.5]octano (1,012 g, 9,10 mmol) en dimetilsulfóxido (10 ml) se calentó en un microondas a 140 °C durante 60 min. La mezcla de reacción se cargó en una columna de gel de sílice (120 g), eluyendo con un gradiente de 1 % a 20 % de EtOAc en hexanos, para proporcionar 6-((metilsulfonil)metil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (1,4 g, 4,14 mmol, 55 % de rendimiento) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 339,0 (M+H)+. 6-((Metilsulfonil)metil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (55A, 1,4 g, 4,14 mmol) en etanol (10 ml) y agua (10 ml) se trató con hidróxido de sodio (0,49 g, 12,41 mmol). Después de 3 h, la mezcla se concentró al vacío para retirar el etanol. La capa acuosa se neutralizó hasta pH 7 usando HCl 1,5 N, después se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para dar el material en bruto como un sólido amarillo claro. El material en bruto se absorbió en un lecho de gel de sílice y se purificó por cromatografía a través de una columna Redi-Sep precompactada de gel de sílice (80 g), eluyendo con un gradiente de 1 % a 6 % de MeOH en DCM para dar ácido 6-((metilsulfonil)metil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 55, 680 mg, 2,10 mmol, 51 % de rendimiento) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 325,0 (M+H)+.

Preparación de los ejemplos 100 a 248

Ejemplo 100: 5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Etapa 1. A una solución de ácido 3-cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)pirazin-2-carboxílico (intermedio 42, 118 mg, 0,48 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,17 ml, 0,976 mmol) y 6-(piperidin-1 -ilsulfonil)piridin-2-amina (intermedio 38, 120 mg, 0,50 mmol). La solución se agitó a TA durante 3 min, después se trató con HATU (183 mg, 0,48 mmol, Aldrich). La reacción se calentó hasta 50 °C durante 4 d. Se añadieron intermedio 42 adicional (50 mg) y HATU (100 mg) y la mezcla se calentó durante otros 2 d. La mezcla se diluyó con agua (50 ml) y se agitó durante 30 min. El sólido se filtró, se lavó con agua (2 x 10 ml), se cargó en una columna de gel de sílice y se eluyó con de 10 % a 100 % de EtOAc en heptano para proporcionar 3 -cloro-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(piperidin-1 -ilsulfonil)piridin-2-il)pirazin-2-carboxamida (100A, 55 mg, 0,11 mmol, 24 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. Rm N de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 10,42 (s, 1 H), 8,42 (d,J= 8,4 Hz, 1 H), 8,13 (t,J= 7,9 Hz, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,63 (d,J= 7,6 Hz, 1 H), 4,88 (t,J= 5,9 Hz, 1 H), 3,58 (d,J= 5,7 Hz, 2 H), 3,10 - 3,19 (m, 4 H), 1,47 - 1,56 (m, 4 H), 1,43 (d a,J= 6,8 Hz, 2 H), 1,34 (s, 6 H).m/z(ESI): 469,1 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de 3-cloro-5-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(piperidin-1 -ilsulfonil)piridin-2-il)pirazin-2-carboxamida (intermedio 100A, 53 mg, 0,113 mmol) y 6-azaespiro[2.5]octano (19 mg, 0,170 mmol, AstaTech, Inc.) en DMSO (2 ml) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,04 ml, 0,230 mmol). La solución se agitó a TA durante 16 h, después se diluyó con agua (20 ml) y se agitó durante 20 min. El sólido precipitado se filtró y se lavó con agua (2 x 5 ml). El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 80 % de EtOAc en heptano) para proporcionar una mezcla de material de partida y producto. El cloruro de partida eluyó justo encima de las fracciones deseadas y solo 4 mg de producto deseado (m/z (ESI): 544,2 (M+H)+) se obtuvieron puros. Las fracciones mixtas restantes se concentraron al vacío y se recogieron en DMSO (1 ml) y se trataron con 6-azaespiro[2.5]octano (20 mg). Después de agitar durante 3 d a TA, la reacción se diluyó con agua, se agitó durante 1 h y se filtró. El sólido se recogió en EtOAc (15 ml) y se lavó con salmuera (2 x 40 ml), después se concentró al vacío para dar 5-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 100, 40 mg, 0,074 mmol, 65 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 10,30 (s, 1 H), 8,59 (d,J= 8,4 Hz, 1 H), 7,86 (t,J= 8,0 Hz, 1 H), 7,59 (d,J= 7,4 Hz, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 4,93 (s, 1 H), 3,77 (d,J= 5,7 Hz, 2 H), 3,60 - 3,67 (m, 1 H), 3,49 - 3,58 (m, 4 H), 3,23 - 3,31 (m, 4 H), 1,65 (quin,J= 5,6 Hz, 4 H), 1,57 - 1,59 (m, 2 H, ocultado por el pico de agua), 1,48 - 1,53 (m, 2 H), 1,46 (s, 6<h>), 0,79 - 0,88 (m, 2 H), 0,38 (s, 4 H).m/z(ESI): 544,2 (M+H)+.

Ejemplo 101: 5-((1-(hidroximetil)ciclopropil)amino)-N-(6-(piperidin-1-ilsulfonil)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.m/z(ESI): 542,2 (<m>+H)+. Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el ejemplo 100.

Etapa 1. A una solución de ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (44, 17,0 g, 49,1 mmol) en DMF (100 ml) se le añadió 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (31, 13,5 g, 58,9 mmol), H<a>T<u>(28,0 g, 73,6 mmol) y DIPEA (16,14 ml, 98,2 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA y se inactivó con agua (200 ml). El sólido precipitado se filtró, se lavó con agua (200 ml) seguido de metanol (50 ml) y se secó al vacío para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 119, 13,5 g, 50 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d):510,36 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,56 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,90 (d,J= 8,3, 8,0 Hz, 1H), 7,74 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 5,03 (s, 1H), 4,18 (s, 2H), 3,65 - 3,57 (m, 4H), 1,75 (s, 6H), 1,56 (s a, 4H), 1,26 (s, 9H), 0,41 (s, 4H).m/z(ESI): 558,2 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 119, 13,5 g, 24,17 mmol) en etanol (250 ml) se le añadió NaOH (24,17 ml de solución 2 N, 48,3 mmol) y la mezcla resultante se agitó a TA durante 4 h. La mezcla de reacción se acidificó con solución acuosa 1,5 N de HCl hasta pH ~6. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (3 x 1000 ml) y se lavó con agua (1000 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 40 % de acetato de etilo en hexanos) seguida de recristalización en acetonitrilo (50 ml) y metanol (50 ml) para dar N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 102, 8,4 g, 84 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe):510,22 (s, 1H), 8,39 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 8,02 (dd,J= 8,0, 7,5 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,60 (d,J= 7,5 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 4,81 (t,J= 5,7 Hz, 1H), 3,58 (d,J= 5,7 Hz, 2H), 3,44 (td,J= 6,7, 3,8 Hz, 4H), 1,46 (t,J= 6,7, 3,9 Hz, 4H), 1,34 (s, 6H), 1,11 (s, 9H), 0,34 (s, 4H).m/z(ESI): 532,3 (M+H)+.

Tabla 2. Los siguientes 17 ejemplos se prepararon de una manera similar a los ejemplos 119 y 102.

Ejemplos 103 y 104.

Etapa 1. A una solución de ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (intermedio 44, 0,100 g, 0,289 mmol) en DCM (3,0 ml) se le añadió solución de cloruro de oxalilo (2,0 M en DCM, 0,217 ml, 0,433 mmol) seguida de 2 gotas de DMF. La reacción se agitó a TA durante 20 min, después se concentró. El residuo se disolvió en DCM (3,0 ml) y se enfrió hasta 0 °C y se trató con (R)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (56 mg, 0,289 mmol) seguida de base de Hunig (0,151 ml, 0,866 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 3 h, después se concentró y se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 35 % de EtOAc/heptano) para proporcionar (R)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 103, 0,106 g, 0,203 mmol, 70 % de rendimiento) como un sólido amarillo. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d)5 ppm 0,38 (s, 4 H) 1,27 (d,J= 6,26 Hz, 3 H) 1,50 - 1,54 (m, 4 H) 1,71 (s, 6 H) 2,57 (dd,J= 12,52, 10,37 Hz, 1 H) 2,93 (td,J= 12,37, 3,62 Hz, 1 H) 3,53 - 3,60 (m, 4 H) 3,63 - 3,77 (m, 2 H) 3,95 - 4,03 (m, 2 H) 4,09 (d a,J= 12,13 Hz, 1 H) 4,14 (s, 2 H) 6,37 (d,J= 8,22 Hz, 1 H) 7,53 (t,J= 8,02 Hz, 1 H) 7,68 (d,J= 7,82 Hz, 1 H) 8,67 (s, 1 H) 9,87 (s, 1 H).m/z(ESI): 522,2 (M+H)+.

Etapa 2. A una suspensión de (R)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 103, 0,097 g, 0,186 mmol) en metanol (5,0 ml) se le añadió hidróxido de sodio (solución 5,0 N, 0,5 ml, 2,5 mmol). La mezcla se calentó a 70 °C durante 2 h hasta que se completó la conversión. La mezcla se neutralizó con HCl 2 N y después se concentró a sequedad. El residuo se diluyó con EtOAc y agua. La capa orgánica separada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 40 % de EtOAc:EtOH (3: 1)/heptano) para producir (R)-5-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 104, 0,070 g, 0,141 mmol, 76 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 0,37 (s, 4 H) 1,27 (d,J= 6,26 Hz, 3 H) 1,44 (s, 6 H) 1,57 - 1,62 (m, 4 H) 2,57 (dd,J= 12,52, 10,37 Hz, 1 H) 2,92 (td,J= 12,32, 3,52 Hz, 1 H) 3,45 - 3,52 (m, 4 H) 3,62 - 3,73 (m, 2 H) 3,76 (d,J= 5,28 Hz, 2 H) 3,84 - 3,92 (m, 1 H) 3,96 - 4,04 (m, 2 H) 4,08 (d a,J= 12,72 Hz, 1 H) 4,84 (s, 1 H) 6,35 (d,J= 8,22 Hz, 1 H) 7,36 (s, 1 H) 7,53 (t,J= 8,02 Hz, 1 H) 7,72 (d,J= 8,02 Hz, 1 H) 10,01 (s, 1 H).m/z(ESI): 496,3 (M+H)+.

Tabla 3. Los siguientes 41 ejemplos se prepararon de una manera similar a los ejemplos 103 y 104.

Ejemplo 108: N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-((1,3-dihidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-3-(6azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

TBDM I

Etapa 1. Un matraz con fondo redondo de 250 ml se cargó con 2-amino-2-metil-1,3-propanodiol (1,00 g, 9,56 mmol) y DMF (30 ml). Se añadió cloruro de íerc-butildimetilsilano (7,11 ml, 38,2 mmol) seguido de imidazol (3,52 ml, 57,4 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 21 h, después se diluyó con NaHCOs saturado y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con agua (150 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar 5,24 g de aceite transparente. El producto en bruto se purificó por Biotage (SNAP50, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano de 10 % a 90 %) para dar 2,2,3,3,6,9,9,10,10-nonametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-6-amina (108A, 2,86 g, 90 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 53,35-3,45 (m, 4H), 0,99 (s, 3H), 0,90 (s, 18H), 0,05 (s, 12H).

Etapa 2. A una solución de ácido 3,5-dicloropirazin-2-carboxílico (1,01 g, 5,23 mmol) y tolueno (10 ml) se le añadió cloruro de tionilo (0,57 ml, 7,81 mmol). La solución se agitó a reflujo durante 1,5 h, la reacción se dejó enfriar hasta TA y se concentró al vacío, después se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 10 ml). El residuo se recogió en DCM (10 ml) y se trató con 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (31, 1,08 g, 4,71 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,82 ml, 10,47 mmol). Después de 4 h, la reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con agua (30 ml). La capa acuosa se volvió a extraer con DCM (20 ml). Las capas combinadas de DCM se concentraron a 1/2 del volumen y los sólidos se filtraron y se aclararon con DCM adicional para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-3,5-dicloropirazin-2-carboxamida (108B, 1,61 g, 3,99 mmol, 76 % de rendimiento) como un sólido blanco.

Etapa 3. A una solución de 2,2,3,3,6,9,9,10,10-nonametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-6-amina (108A, 1,00 g, 3,00 mmol) y DMSO (8 ml) se le añadió N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-3,5-dicloropirazin-2-carboxamida (108B, 1,01 g, 2,49 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,30 ml, 7,49 mmol). La solución se agitó a 60 °C durante 23 h, después se enfrió hasta TA y se diluyó con agua (60 ml) y se agitó durante 5 min. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas combinadas de EtOAc se lavaron con agua (2 x 50 ml) y se concentraron. El producto en bruto se purificó por Biotage (SNAP50, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano 0 % - 30 %) para obtener 2 compuestos que teníanm/z(ESI): 702,0 (<m>+H)+. El 1.er eluyente fue 108C (0,457 g de sólido amarillo pálido): RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 10.22 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,28 (d,J= 8,41 Hz, 1H), 8,15 (t,J= 8,12 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,70-7,81 (m, 2H), 3,85 (d, J = 9,59 Hz, 2H), 3,74 (d,J= 9,59 Hz, 2H), 1,39 (s, 3H), 1,11 (s, 9H), 0,86-0,89 (m, 18H), 0,04 (d,J= 8,22 Hz, 12H). El 2.° eluyente fue 108D (0,5451 g de sólido amarillo): R<m>N de 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 10,27 (s, 1H), 8,37 (d,J= 8.22 Hz, 1H), 8,11 (d,J= 8,02 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,64-7,73 (m, 2H), 3,88 (d,J= 9,59 Hz, 2H), 3,77 (d,J= 9,59 Hz, 2H), 1,32 (s, 3H), 1,12 (s, 9H), 0,84 (s, 18H), -0,02 (d,J= 3,52 Hz, 12H).

Etapa 4. A una solución de 6-azaespiro[2.5]octano (91 mg, 0,82 mmol) y DMSO (4 ml) se le añadió N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-3-cloro-5-((2,2,3,3,6,9,9,10,10-nonametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-6-il)amino)pirazin-2carboxamida (108D, 540 mg, 0,77 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,33 ml, 1,92 mmol). La solución se agitó a 60 °C durante 4 h. La reacción se dejó enfriar hasta TA y se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron al vacío para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-((2,2,3,3,6,9,9,10,10-nonametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-6-il)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida en bruto (0,61 g) como un aceite amarillo oscuro. Suponiendo un 100 % de conversión, este material se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional.

Etapa 5. Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargó con N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-((2,2,3,3,6,9,9,10,10-nonametil-4,8-dioxa-3,9-disilaundecan-6-il)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (0,60 g, 0,77 mmol) y THF (10 ml). Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (2,31 ml de 1 M en THF, 2,31 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 30 min. La mezcla de reacción se repartió entre agua (30 ml) y EtOAc (20 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml); las capas orgánicas se secaron y se concentraron. El producto en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (EtOAc en heptano 30 % - 100 %) para producir N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-5-((1,3-dihidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 108, 0,19 g) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400<m>H<z>, DMSO-ds) 5 10,23 (s, 1H), 8,39 (d,J= 8,41 Hz, 1H), 8,02 (t,J= 8,02 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,60 (d,J= 7,43 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 4,68 (t,J= 5,67 Hz, 2H), 3,59-3,71 (m, 4H), 3,39-3,48 (m, 4H), 1,47 (d a, J = 4,50 Hz, 4H), 1,30 (s, 3H), 1,11 (s, 9H), 0,35 (s, 4H).m/z(ESI): 548,5 (M+H)+.

Ejemplo 110: N-(6-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)p¡r¡din-2-¡l)-3-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-5-(1,1,1-tr¡fluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxamida.

A una mezcla agitada de ácido 3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxílico (intermedio 46, 200 mg, 0,58 mmol), 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (intermedio 31, 159 mg,<0,69 mmol) y DIPEA (0,15 ml, 0,86 mmol) en>D<m>F<(3 ml) se le añadió HATU (286 mg, 0,75 mmol). La mezcla de>reacción se calentó hasta 65 °C durante 6 h. Se enfrió hasta TA y se trató con agua (3 ml). El sólido se filtró y se purificó en una columna de gel de sílice (0 % a 30 % de EtOAc/EtOH (3/1) en heptano) para dar N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-5-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 110, 123 mg, 0,22 mmol, 38 % de rendimiento).

RMN de 1H (DMSO-ds) 5: 10,89 (s, 1H), 8,33 (d a, J = 8,0 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,11 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 3,50-3,59 (m, 4H), 1,69 (s, 3H), 1,36-1,44 (m, 4H), 1,14 (s, 9H), 0,33 (s, 4H).m/z(ESI): 557,2 (M+H)+.

Ejemplo 113: W-(4-Cloro-6-morfol¡nop¡rid¡n-2-¡l)-5-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Etapa 1. A una solución de ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (intermedio 44, 0,10 g, 0,29 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió tetrafluoroborato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (TATU, 0,12 g, 0,38 mmol, FSSI), 3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-ol (HOAt, 0,05 g, 0,38 mmol, Chempep), 4-cloro-6-morfolinopiridin-2-amina (0,07 g, 0,34 mmol, Aurum) y diisopropiletilamina (0,23 ml, 1,33 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 45 min, después a 80 °C durante 2,5 h. La reacción se interrumpió con metanol y la mezcla en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (24 g) eluyendo con de 0 % a 80 % de EA en heptano para dar W-(4-cloro-6-morfolinopiridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (113A, 0,166 g, no puro).m/zESI 542,2 (M+H)+.

Etapa 2. W-(4-Cloro-6-morfolinopiridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (113A, 0,040 g, 0,074 mmol) se trató con 2 ml de una solución de metanol/NaOH (5 ml de metanol, 33 ul de NaOH 1 N) durante 2,5 h a 70 °C. Se añadió DMSO (0,5 ml) y el calentamiento se continuó durante 2 h. La mezcla se filtró en un vial de tomamuestras automático Agilent y se purificó por HPLC prep con 5-95 % de ACN en agua (0,1 % de TFA) durante 14 min, 40 ml/min, X-Bridge C18 10 um 18 x 100 mm. Las fracciones puras se combinaron y liofilizaron para proporcionar W-(4-cloro-6-morfolinopiridin-2-il)-5-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 113, 0,0226 g, 0,044 mmol, 59 % de rendimiento) como un polvo amarillo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 0,34 (s, 4 H) 1,34 (s, 6 H) 1,42 - 1,51 (m, 5 H) 3,36 - 3,40 (m, 4 H) 3,43 - 3,49 (m, 4 H) 3,58 (s, 2 H) 3,64 - 3,70 (m, 4 H) 6,60 (s, 1 H) 7,22 (s a, 1 H) 7,45 - 7,48 (m, 1 H) 7,57 (s, 1 H) 10,05 - 10,09 (m, 1 H).m/z(ESI): 516,2 (M+H)+.

Ejemplo 116: 5-((1-H¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-W-(4-metox¡-6-morfol¡nopir¡d¡n-2-¡l)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Etapa 1. A una solución de ácido 5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (intermedio 44, 0,10 g, 0,29 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió tetrafluoroborato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (TATU, 0,124 g, 0,384 mmol, FSSI), 3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-ol (HOAt, 0,052 g, 0,384 mmol, Chempep), 2-amino-6-cloro-4-metoxipiridina (0,055 ml, 0,346 mmol, Oxchem) y diisopropiletilamina (0,231 ml, 1,33 mmol). La mezcla se agitó 15 min, después se calentó hasta 80 °C durante 3 h. La mezcla se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g, de 0 % a 100 % de EA en heptano) para proporcionar W-(6-cloro-4-metoxipiridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (116A, 0,068 g) como un aceite amarillo.m/zESI 487,1 (M+H)+.

Etapa 2. W-(6-Cloro-4-metoxipiridin-2-il)-5-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (116A, 0,034 g, 0,070 mmol) se disolvió en morfolina (1,08 ml, 12,2 mmol) en un tubo cerrado herméticamente y se calentó hasta 160 °C en un microondas durante 1 h, después hasta 180 °C durante 1 h y después hasta 200 °C durante 1 h. La mezcla se evaporó y el residuo se trató con 5 ml de metanol y 0,13 ml de NaOH 1 N y se calentó a 70 °C durante 1 h. El pH se neutralizó con 0,13 ml de HCl 1 N y la mezcla se evaporó. El producto en bruto se purificó por HPLC (Kinetex EVO 100 C18 150 x 21,1 mm x 5 pm, 30 ml/min, 5-95 % de ACN en agua (con TFA al 0,1 %) durante 13 min). Las fracciones puras se combinaron y se liofilizaron para proporcionar 5-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-W-(4-metoxi-6-morfolinopiridin-2-il)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida (ejemplo 116, 0,003 g, 5,86 pmol, 9 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, METANOL-a4) 5 ppm 0,24 (s, 4 H) 1,22 - 1,30 (m, 6 H) 1,32 - 1,40 (m, 4 H) 3,34 - 3,44 (m, 8 H) 3,63 (s, 2 H) 3,66 - 3,74 (m, 4 H) 3,80 (s, 3 H) 6,08 (d,J= 1,76 Hz, 1 H) 6,54 (s a, 1 H) 7,26 - 7,40 (m, 1<h>), 2 protones ocultos, 1 protón intercambiado.m/zESl 512,1 (M+H)+.

Ejemplo 117: N (4-c¡ano-6-morfol¡nopir¡d¡n-2-¡l)-5-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Este compuesto se preparó usando el procedimiento descrito para el ejemplo 113.

RMN de 1H (400 MHz, METANOL-a4) 5 ppm 0,52 (s, 4 H) 1,47 (s, 6 H) 1,67 - 1,86 (m, 4 H) 3,50 - 3,63 (m, 8 H) 3,73 -3,88 (m, 6 H) 6,89 (s, 1 H) 7,81 (s, 2 H). 2 protones están ocultos, 1 protón se intercambió.m/zESl 507,2 (M+H)+.

Ejemplo 118: 3-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-N-(4-c¡cloprop¡l-6-(4-morfol¡n¡l)-2-p¡r¡d¡n¡l)-5-((1-h¡drox¡-2-met¡l-2-propanil)amino)-2-pirazincarboxamida. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-a4) 5 ppm 0,39 (s, 4 H) 0,89 - 0,97 (m, 2 H) 1,14 - 1,20 (m, 2 H) 1,41 (s, 6 H) 1,43 - 1,52 (m, 1 H) 1,55 (s a, 4 H) 1,94 - 2,01 (m, 1 H) 3,46 (s, 1 H) 3,53 (t,J= 4,99 Hz, 8 H) 3,74 - 3,87 (m, 4 H) 6,50 (s, 1 H) 6,71 (s a, 1 H) 7,50 (s, 1 H).m/zESI 522,3 (M+H)+.

Este compuesto se preparó usando el procedimiento descrito para el ejemplo 113.

Ejemplo 121: (R)-N-(6-(2-metilmorfol¡no)p¡r¡d¡n-2-¡l)-5-(met¡lsulfonam¡do)-3-(6-azaesp¡ro [2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Un vial de centelleo de 20 ml se cargó con ácido 5-(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)-3-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxílico (47, 85 mg, 0,21 mmol), (R)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (12, 44 mg, 0,228 mmol) y DMF (1 ml). Se añadió DIPEA (0,073 ml, 0,420 mmol) seguido de TATU (81 mg, 0,252 mmol). La mezcla parda se agitó a TA durante 4 h. Se añadió carbonato de sodio (23 mg, 0,218 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (5 ml) y se lavó con agua (3 x 5 ml). La fase acuosa se saturó con NaCl y se extrajo adicionalmente con EtOAc ( 2 x 20 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por Biotage (SNAP25, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano 20 % -100 %) para producir el compuesto del título (ejemplo 121, 10 mg, 10 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 9,67 (1 H, s), 7,74 (1 H, s), 7,67 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,55 (1 H, t,J= 8,0 Hz), 6,39 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 4,08 (1 H, d a,J= 12,2 Hz), 3,95 - 4,05 (2 H, m), 3,65 - 3,78 (2 H, m), 3,58 - 3,65 (5 H, m), 3,33 (3 H, s), 2,94 (1 H, td,J= 12,3, 3,5 Hz), 2,54 - 2,66 (1 H, m), 1,51 - 1,54 (4 H, m), 1,28 (3 H, d,J= 6,2 Hz), 0,39 (4 H, s).m/z(ESI): 502,3 (M+H)+.

Ejemplo 122: (R)-N-(6-(2-metilmorfol¡no)p¡r¡d¡n-2-¡l)-5-(met¡lsulfonam¡do)-3-(6-azaesp¡ro [2.5]octan-6-il)pirazin-2-carboxamida.

Se preparó N-(6-bromopiridin-2-il)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (122A) de una manera similar a la descrita para el ejemplo 103.m/z(ESI): 500/502 (M+H)+.

Una mezcla de N-(6-bromopiridin-2-il)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (122A, 0,085 g, 0,170 mmol), Pd(PPh3)4 (0,020 g, 0,017 mmol) y 2-(tri-n-butilestanil)oxazol (0,053 ml, 0,255 mmol) en 1,4-dioxano (2,0 ml) se calentó en un baño de aceite a 120 °C durante 24 h. La mezcla se filtró a través de una capa de celite y el sólido se aclaró con 2 x 5 ml de EtOAc. El filtrado se concentró y después se purificó por HPLC Shimadzu para producir 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(oxazol-2-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (0,043 g, 0,088 mmol, 52 % de rendimiento) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 489,2 (M+H)+. La pureza fue de aproximadamente un 83 %. A una solución de 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(oxazol-2-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (0,043 g, 0,073 mmol) en metanol (2,0 ml) se le añadió hidróxido de sodio (0,073 ml de solución 5 N, 0,365 mmol). La mezcla se calentó a 70 °C durante 2,5 h. La mezcla de reacción se concentró y después se purificó por cromatografía en gel de sílice (0 % a 50 % de EtOAc : EtOH(3:1) / heptano) para producir 6-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(oxazol-2-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 122, 0,021 g, 0,045 mmol, 62 % de rendimiento) como un sólido blanco. r Mn de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,41 (s, 4 H) 1,45 (s, 6 H) 1,82 (s a, 4 H) 3,24 (t,J= 5,38 Hz, 4 H) 3,76 (d,J= 5,48 Hz, 2 H) 4,74 (s, 1 H) 5,27 (t,J= 5,77 Hz, 1 H) 6,26 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 7,31 (s, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 7,81 - 7,90 (m, 2 H) 8,21 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 8,42 (dd,J= 7,83, 1,37 Hz, 1 H) 12,53 (s, 1 H).m/z(ESI): 463,3 (M+H)+.

Ejemplo 134: 6-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-N-(6-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-il)p¡r¡d¡n-2-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Se preparó 6-fluoro-N-(6-(2-oxopirrolidin-1-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (134A) de una manera similar a la descrita para el ejemplo 103.m/z(ESI): 438,1 (M+H)+.

A un vial de reacción de 15 ml se le añadió N-(6-(4,4-dimetil-2-oxopirrolidin-1-il)piridin-2-il)-6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (134A, 49 mg, 0,11 mmol), DIPEA (0,06 ml, 0,33 mmol), 2-amino-2-metil-1-propanol (20 mg, 0,22 mmol) y DMSO (2 ml). El vial se cerró y la mezcla de reacción se agitó a 120 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA, después se diluyó con agua (4 ml) y se extrajo con EtOAc (5 ml). El extracto orgánico se lavó con agua (3 ml), se secó sobre Na2SO, se filtró y se concentró al vacío para dar el material en bruto como un sólido blanco. El sólido blanco se agitó en 2 ml de heptano, se filtró y se secó para dar N-(6-(4,4-dimetil-2-oxopirrolidin-1-il)piridin-2-il)-6-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 134, 51 mg, 0,101 mmol, 90 % de rendimiento). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 12,80 (s, 1H), 7,96-8,02 (m, 3H), 7,80 (t,J= 8,02 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,47 (d,J= 8,80 Hz, 1H), 4,82 (t,J= 5,67 Hz, 1H), 3,81 (s, 2H), 3,62 (d,J= 5,67 Hz, 2H), 3,08 (t a, J = 5,28 Hz, 4H), 2,49 (s, 2H), 1,76 (s a, 4H), 1,38 (s, 6H), 1,20 (m, 2H), 0,40 (s, 4H).m/z(ESI): 479,2 (M+H)+.

Ejemplo 135: N-(6-(4,4-d¡met¡l-2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)pir¡d¡n-2-¡l)-6-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.m/z(ESI): 507,0 (M+H)+.

Este compuesto se preparó de acuerdo con el método descrito anteriormente para el ejemplo 134.

Ejemplos 140, 141 y 142.

Estos compuestos se prepararon de una manera similar a la descrita a continuación para los ejemplos 143, 153 y 154.m/z(ESI): 506,1 (M+H)+.

A una mezcla agitada de ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotínico (intermedio 41,350 mg, 1,01 mmol), 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (intermedio 31,256 mg, 1,11 mmol), N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,23 ml, 1,32 mmol) en N,N-dimetilformamida (5 ml) se le añadió hexafluorofosfato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (V) (464 mg, 1,22 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 2 h, después a 60 °C durante 24 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, después se repartió entre agua (5 ml) y EtOAc (50 ml). La capa orgánica se concentró, y el residuo se purificó en ISCO (0 % a 40 % de EtOAc/EtOH (3/1) en heptano) para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotinamida (ejemplo 143, 402 mg, 0,723 mmol, 71 % de rendimiento) como un sólido amarillo. RMN de 1H (DMSO-d6) 5: 11,36 (s, 1H), 8,37 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00-8,18 (m, 2H), 7,71 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,39 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,72 (s, 1H) 3,30 (m, 4H), 1,70 (s, 3H), 1,42-1,49 (m, 4H), 1,18 (s, 9H), 0,29 (s, 4H).m/z(ESI): 556,2 (M+H)+. La muestra racémica se sometió a SFC quiral para dar enantiómeros puros. El pico 1 se asignó arbitrariamente como (R)-N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotinamida (ejemplo 153, 42 mg, >99 % ee) como un sólido amarillo.m/z(ESI): 556,2 (M+H)+. El pico 2 se asignó arbitrariamente como (S)-N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1 -trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)nicotinamida (ejemplo 154, 42 mg, >99 % ee) como un sólido amarillo.m/z(ESI): 556,2 (M+H)+.

Ejemplo 146: 6-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-il)am¡no)-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-N-(6-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)piridin-2-il)nicotinamida.

Una mezcla de N-(6-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)piridin-2-il)-6-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 138, 0,023 g, 0,048 mmol) y paladio (23 mg, 10 % en peso sobre carbono activado, 0,022 mmol) en EtOAc (4 ml) y EtOH (2 ml) se hidrogenó a 344,74 kPa (50 psi) durante 4 h. El filtrado se concentró y se secó para producir el compuesto del título (ejemplo 146, 22 mg, 95 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 0,39 (s, 4 H) 1,44 (s, 6 H) 1,72 - 2,07 (m, 8 H) 2,86 (tt,J= 11,52, 3,84 Hz, 1 H) 3,21 (t a,J= 4,79 Hz, 4 H) 3,55 (td,J= 11,79, 2,05 Hz, 2 H) 3,74 (s a, 2 H) 4,05 -4,14 (m, 2 H) 4,70 (s a, 1 H) 5,43 (s a, 1 H) 6,25 (d,J= 8,41 Hz, 1 H) 6,87 (d, J = 7,43 Hz, 1 H) 7,63 (t,J= 7,82 Hz, 1 H) 8,18 (d,J= 8,22 Hz, 1 H) 8,23 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 12,42 (s a, 1 H).m/z(ESI): 480,3 (M+H)+.

Ejemplo 147: (R)-6-((1,3-d¡h¡drox¡-2-metilpropan-2-¡l)am¡no)-N-(6-(2-met¡lmorfol¡no)p¡r¡d¡n-2-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Etapa 1. A una solución de ácido 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 48, 26,0 g, 104,1 mmol) en DCM (650 ml) se le añadió cloruro de oxalilo (13,64 ml, 156,2 mmol) seguido de DMF (2 gotas). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 30 min, después se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (500 ml) y se trató con (R)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (intermedio 12, 20,08 g, 104 mmol) seguida de DIPEA (54,40 ml, 312 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h, después se concentró a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (malla 60-120) usando de 0 % a 15 % de acetato de etilo en hexanos como eluyente para dar (R)-6-fluoro-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (147A, 26 g, 59 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 11,22 (s, 1H), 8,38 - 8,10 (m, 1H), 7,60 (t,J= 8,0 Hz, 1H), 7,50 (d,J= 7,7 Hz, 1H), 6,89 - 6,79 (m, 1H), 6,60 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 4,19 (d,J= 12,7 Hz, 1H), 4,01 (d,J= 12,7 Hz, 1H) 3,91 (d,J= 11,2 Hz, 1H), 3,55 (t,J= 11,3 Hz, 3H), 3,22 (s a, 4H), 2,82 (t,J= 11,9 Hz, 1H), 1,58 (s a, 4H), 1,16 (d,J= 6,2 Hz, 3H), 0,34 (s, 4H).m/z(ESI): 426,2 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de 147A (20,0 g, 47,0 mmol), 2-amino-2-metilpropano-1,3-diol (9,88 g, 94 mmol) y fosfato de potasio (19,95 g, 94 mmol) en DMSO (400 ml) se calentó a 135 °C durante 15 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se inactivó vertiendo en agua (1500 ml) y se extrajo con acetato de etilo (1500 ml). La capa orgánica se lavó con agua (1000 ml) seguida de salmuera (1000 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (malla 60-120) usando acetato de etilo en hexanos (40 % a 65 %) como eluyente para dar (R)-6-((1,3-dihidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 147, 15 g, 63 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d) 5 12,05 (s, 1H), 8,23 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 7,72 (d,J= 7,8 Hz, 1H), 7,55 (t,J= 8,0 Hz, 1H), 6,39 (d,J= 8,2 Hz, 1H), 6,33 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 5,24 (s, 1H), 3,42 - 3,87 (m, 5H), 3,84 - 3,63 (m, 6H), 3,18 (t,J= 5,3 Hz, 4H), 2,95 (td,J= 12,2, 3,6 Hz, 1H), 2,69 - 2,54 (m, 1H), 1,90 - 1,63 (m, 4H), 1,38 (s, 3H), 1,28 (d,J= 6,2 Hz, 3H), 0,39 (s, 4H).m/z(ESI): 511,3 (M+H)+.

Tabla 4. Los ejemplos 148, 149, 164, 174 y 184 se prepararon de una manera similar a la descrita anteriormente para el ejemplo 147.

Ejemplo 156: N-(4-c¡ano-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-2-¡l)-6-((1-hidrox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una mezcla de N-(4-cloro-6-morfolinopiridin-2-il)-6-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 152, 18,6 mg, 0,036 mmol), polvo de cinc (1,1 mg, 0,014 mmol, Aldrich), 2-(di-t-butilfosfino)-1, 1 '-binaftilo racémico (2,9 mg, 0,007 mmol, Strem), cianuro de cinc (5,1 mg, 0,043 mmol, Aldrich), trifluoroacetato de paladio (II) (2,2 mg, 0,004 mmol, Aldrich) en DMF (1,0 ml) se calentó a 120 °C durante 15 h. La mezcla de reacción se cargó directamente en una columna RediSep Gold de 12 g y se eluyó con de 0 % a 50 % (3:1 = EtOAc:EtOH) en heptano para proporcionar un material que conteníam/z(ESI): 506,3 (M+H)+, pero no era puro. El material se recogió en 1 ml de DMSO y se purificó en HPLC de fase inversa para producir N-(4-ciano-6-morfolinopiridin-2-il)-6-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 156, 4,8 mg, 9,49 pmol, 26 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, METAn Ol -o4) 5 ppm 0,37 - 0,52 (m, 4 H) 0,91 (d a,J= 6,06 Hz, 1 H) 1,14 - 1,40 (m, 2 H) 1,44 (s, 6 H) 1,50 - 1,55 (m, 1 H) 1,57 - 1,83 (m, 4 H) 1,94 (s, 1 H) 2,03 (s, 1 H) 3,48 (dd a,J= 6,26, 4,70 Hz, 1 H) 3,54 - 3,64 (m, 4 H) 3,74 - 3,83 (m, 6 H) 6,54 (d a,J= 8,22 Hz, 1 H) 6,85 (s, 1 H) 7,75 (s, 1 H) 8,08 (d,J= 8,80 Hz, 1 H).m/z(ESI): 506,3 (M+H)+.

Ejemplo 158: 2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-6-((1-hidrox¡-2-met¡l-2-propan¡l)am¡no)-N-(4-metox¡-6-(4-morfol¡n¡l)-2-piridinil)-3-piridincarboxamida. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-o4) 5 ppm 0,33 (s, 4 H) 1,34 (s, 6 H) 1,56 - 1,80 (m, 4 H) 3,16 (s a, 4 H) 3,43 - 3,47 (m, 4 H) 3,66 - 3,77 (m, 6 H) 3,82 (s, 3 H) 6,09 (s, 1 H) 6,34 (d a,J= 9,00 Hz, 1 H) 6,70 (s a, 1 H) 7,90 (d,J= 8,80 Hz, 1 H).m/z(ESI): 511,3 (M+H)+. Este compuesto se preparó de manera análoga a la descrita para el ejemplo 116.

Ejemplo 159: N-(6-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-6-(3-h¡drox¡-3-met¡lazet¡d¡n-1-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una mezcla de N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 173, 0,040 g, 0,087 mmol), 3-metilazetidin-3-ol (0,017 g, 0,200 mmol) y DI<p>E<a>(0,061 ml, 0,347 mmol) en<d>MS<o>(0,8 ml). La mezcla se agitó a 90 °C durante 24 h. La mezcla se enfrió hasta TA y se trató con agua (3 ml). El sólido se recogió y se purificó en una columna de gel de sílice (30 % a 100 % de EtOAc en heptano) para producir N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(3-hidroxi-3-metilazetidin-1-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 159, 43 mg, 93 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, CLoRoFORMO-d) 5 12,63 (s, 1H), 8,55 (d,J= 8,41 Hz, 1H), 8,24 (d,J= 8,61 Hz, 1H), 7,86 (t,J= 8,02 Hz, 1H), 7,70 (d,J= 7,43 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 8,61 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,00-4,08 (m, 4H), 3,20 (t,J= 5,38 Hz, 4H), 2,33 (s a, 1H), 1,71 (s a, 4H), 1,63 (s, 3H), 1,27 (s, 9H), 0,40 (s, 4H).m/z(ESI): 529,2 (M+H)+.

Ejemplo 160: 2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-N-(4-c¡cloprop¡l-6-(4-morfolin¡l)-2-p¡r¡d¡n¡l)-6-((1-h¡drox¡-2-met¡l-2-propanil)amino)-3-piridincarboxamida. RMN de 1H (400 MHz, m Et ANOL-o4) 5 ppm 0,43 (s, 4 H) 0,84 - 0,95 (m, 2 H) 1,08 - 1,20 (m, 2 H) 1,42 (s, 6 H) 1,69 (s, 4 H) 1,94 - 2,05 (m, 1 H) 3,27 (m, 4 H) 3,50 - 3,54 (m, 4 H) 3,75 - 3,85 (m, 6 H) 6,38 - 6,54 (m, 2 H) 6,73 (s a, 1 H) 7,99 (d,J= 9,00 Hz, 1 H).m/z(ESI): 521,3 (M+H)+.

Este compuesto se preparó de manera análoga a la descrita para el ejemplo 113.

Etapa 1. A una solución de ácido 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (50, 1,92 g, 5,56 mmol) en DCM (50 ml) se le añadió solución de cloruro de oxalilo (2,0 M en DCM, 4,17 ml, 8,34 mmol) seguido de 3 gotas de DMF. La mezcla se agitó a TA durante 2 h, después se concentró. El sólido amarillo resultante se disolvió en DCM (50 ml) y se trató con 6-bromopiridin-2-amina (0,96 g, 5,56 mmol) seguida de base de Hunig (2,91 ml, 16,68 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 15 h, después se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 35 % de EtOAc/heptano) para proporcionar N-(6-bromopiridin-2-il)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (161A, 2,75 g, 5,50 mmol, 99 % de rendimiento) como un sólido amarillo.m/z(ESI): 500 / 502 (M+H)+.

Etapa 2. Un vial de presión se cargó con N-(6-bromopiridin-2-il)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (161A, 0,184 g, 0,368 mmol), 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona (0,085 g, 0,735 mmol), yoduro de cobre(i) (0,035 g, 0,184 mmol), carbonato de potasio (0,102 g, 0,735 mmol) y (1r,2r)-(-)-n,n"-dimetilciclohexano-1,2-diamina (0,052 g, 0,368 mmol). El vial se purgó con N2 durante 5 min. Se añadió dioxano (1,5 ml). El vial se cerró herméticamente y se calentó a 120 °C durante 2 h. La mezcla se concentró, y el residuo se repartió entre DCM y NH4Cl saturado. La capa orgánica separada se lavó con NH4Cl saturado seguido de salmuera y se concentró. La purificación por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 45 % de EtOAc/heptano) produjo 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 161, 0,098 g, 0,183 mmol, 50 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d)5 ppm 0,38 (s, 4 H) 1,64 - 1,72 (m, 4 H) 1,75 (s, 6 H) 1,77 (s, 6 H) 3,23 (t,J= 5,48 Hz, 4 H) 4,12 (d,J= 6,46 Hz, 4 H) 7,57 (d,J= 8,22 Hz, 1 H) 7,76 (t,J= 8,12 Hz, 1 H) 7,82 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 8,25 (d,J= 7,82 Hz, 1 H) 8,46 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 11,26 (s, 1 H).m/z(ESI): 535,2 (M+H)+.

Etapa 3. A una solución de 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-N-(6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 161, 0,090 g, 0,168 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadió hidróxido de sodio (0,7 ml de solución 5 N, 3,50 mmol). La mezcla se calentó a 70 °C durante 6. La mezcla se enfrió hasta TA y se neutralizó con HCl 2 N. La mezcla resultante se concentró para retirar el MeOH. El residuo acuoso se extrajo con DCM. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se filtraron. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 50 % de EtOAc:EtOH (3:1)/heptano) para producir 6-(1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-N-(6-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 162, 0,073 g, 0,151 mmol, 90 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 0,34 (s, 4 H) 1,41 (s, 6 H) 1,43 (s, 6 H) 1,65 - 1,76 (m, 4 H) 3,23 (t,J= 5,38 Hz, 4 H) 3,73 (d a,J= 2,93 Hz, 4 H) 4,31 (s a, 1 H) 4,71 (s, 1 H) 4,99 - 5,06 (m, 1 H) 5,20 (t a,J= 4,89 Hz, 1 H) 6,14 (d,J= 8,02 Hz, 1 H) 6,17 (d,J= 8,41 Hz, 1 H) 7,40 (t,J= 8,02 Hz, 1 H) 7,69 (d,J= 7,83 Hz, 1 H) 8,09 (d,J= 8,61 Hz, 1 H) 10,86 (s, 1 H).miz(ESI): 483,2 (M+H)+.

Los ejemplos 166, 167 y 168 se prepararon de manera análoga a la descrita para los ejemplos 169, 177 y 178.m/z(ESI): 482,2 (M+H)+.

Ejemplos 170: 2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-6-((1-h¡drox¡-2-met¡l-2-propanil)am¡no)-N-(6-((1-h¡drox¡-2-met¡l-2-propanil)amino)-4-metil-2-piridinil)-3-piridincarboxamida.m/z(ESI): 497,3 (M+H)+.

Este compuesto se preparó de manera análoga a la descrita para el ejemplo 162.

Etapa 1. Se añadieron cloruro de oxalilo (solución 2,0 M en DCM, 0,62 ml, 1,24 mmol) y 1 gota de DMF a una solución de ácido 6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1,3-dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 49, 0,33 g, 0,82 mmol) en DCM (4 ml). Esta mezcla se agitó durante 2 h, después los volátiles se retiraron al vacío para dar un sólido amarillo. Se añadieron 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (intermedio 31, 0,18 g, 0,79 mmol) y DIPEA (0,14 ml, 0,80 mmol) y THF (3 ml) a la mezcla preparada anteriormente y la mezcla se agitó durante 1 h a TA, momento en que se añadió otra porción de DIPEA (0,10 ml). La mezcla se agitó durante 1 h, después se añadió otra porción de intermedio 31 (0,18 g) y la mezcla se agitó durante una noche a TA. Se añadieron EtOAc y H2O, la mezcla bifásica resultante se separó y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 60 % de EtOAc/heptano, para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1,3-dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 171, 0,49 g, 0,33 mmol, 41 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 12,03 (s, 1 H) 8,55 (d, J = 8,08 Hz, 1 H) 8,48 (d, J = 8,02 Hz, 1 H) 7,92 (t, J = 7,92 Hz, 1 H) 7,77 (d, J = 7,33 Hz, 1 H) 7,60 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 4,72 (s, 1 H) 4,66 (s, 2 H) 3,29 (t, J = 5,48 Hz, 4 H) 1,70 (d a, J = 5,09 Hz, 4 H) 1,56 (s, 3 H) 1,33 - 1,40 (m, 3 H) 1,27 (s, 9 H) 0,41 (s, 4 H).m/z(ESI): 612,2 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoii)piridin-2-il)-6-(2,2-dimetil-4-(trifluorometil)-1,3-dioxolan-4-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 171, 195 mg, 0,32 mmol) y ácido clorhídrico (acuoso 1 N, 2,5 ml, 2,5 mmol) en dioxano (5 ml) se calentó hasta 80 °C durante 3 h, después se enfrió hasta TA. Se añadieron EtOAc y NaHCOs saturado, la mezcla bifásica resultante se separó, y los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío para dar un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc/heptano, para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2,3-dihidroxipropan-2-il)nicotinamida (ejemplo 172, 114 mg) como un sólido blanco. m/z (ESI): 572,3 (M+H)+.

Etapa 3. Los enantiómeros se separaron entre sí por SFC preparativa usando una columna Whelk-01 (SS) (250 x 21 mm, 5 □m) con una fase móvil de 80 % de CO2 líquido y 20 % de MeOH con amoniaco usando un caudal de 80 ml/min. El pico 1 se asignó arbitrariamente como (R)-N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2,3-dihidroxipropan-2-il)nicotinamida (ejemplo 175, 40 mg, >99 %ee).R<m>N de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 11,59 (s, 1 H) 8,53 (dd,J= 8,02, 4,50 Hz, 2 H) 7,93 (t,J= 7,92 Hz, 1 H) 7,79 (d,J= 7,43 Hz, 1 H) 7,43 (d,J= 7,82 Hz, 1 H) 5,96 (s, 1 H) 4,79 (s, 1 H) 4,09 - 4,23 (m, 2 H) 3,32 - 3,39 (m, 4 H) 2,18 (dd,J= 9,19, 4,89 Hz, 1 H) 1,66 - 1,77 (m, 4 H) 1,27 (s, 9 H) 0,42 (s, 4 H). RMN de 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -77,39 (s, 3 F).m/z(ESI): 572,3 (<m>+H)+. El pico 2 se asignó arbitrariamente como (S)-N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2,3-dihidroxipropan-2-il)nicotinamida<( e j e m p l o>176<, 4>2 H ) 7 , 93 ( t ,J= 4 , 23 ( m , 1 H ) 4 H ) . R M N d e 19 F

Tabla 5.<L o s e j e m p l o s 1 8 0 , 1 8 1 , 1 8 2 , 2 0 1 , 2 0 2 , 2 0 6 , 2 0 7 y 2 4 2 s e p r e p a r a r o n d e u n a m a n e r a s i m i l a r a l a d e s c r i t a>a n t e r i o r m e n t e p a r a l o s c o m p u e s t o s r a c é m i c o s 171 y 172 , y l o s e n a n t i ó m e r o s 175 y 176.

Ejemplo 173: N-(6-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)-6-fluoro-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)n¡cot¡nam¡da.

A una mezcla agitada de 6-amino-N-(terc-butil)piridin-2-sulfonamida (intermedio 31, 1,28 g, 5,59 mmol), ácido 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 48, 1,40 g, 5,59 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (1,29 ml, 7,27 mmol) en D<m>F (15 ml) se le añadió tetrafluoroborato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisouronio (2,16 g, 6,71 mmol, Aldrich). La mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 16 h, después se enfrió hasta TA y se trató con 20 ml de agua. La mezcla se extrajo con 3 x 25 ml de EtOAc. La solución de EtOAc combinada se concentró. El residuo se purificó por ISCO (de 0 % a 50 % de EtOAc en heptano) para dar N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 173, 0,54 g, 1,17 mmol, 21 % de rendimiento) como un sólido amarillo:m/z(ESI): 462,2 (M+H)+. También se aisló 6-fluoro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de 3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-ilo (173a , 0,89 g, 2,41 mmol, 43 % de rendimiento) como un sólido amarillo:m/z(ESI): 369,1 (M+H)+.

Ejemplos 169, 177 y 178.

Etapa 1. A una solución de ácido 2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(2,2,4-trimetil-1,3-dioxolan-4-il)nicotínico (¡ntermed¡o 51, 1,95 g, 5,63 mmol) en DMF (27,0 ml) se le añadió diisopropiletilamina (2,95 ml, 16,89 mmol), HATU (3,21 g, 8,44 mmol) y 6-amino-N-(terc-butil)piridina-2-sulfonamida (¡ntermed¡o 31, 1,42 g, 6,19 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 24 h. Se enfrió hasta TA y se inactivó con agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 75 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por Isolera-One (SNAP 25 g) usando un gradiente de 10 % a 15 % de acetato de etilo en éter de petróleo para producir ¡ntermed¡o 169a (0,7 g, 22 % de rendimiento) como una goma transparente. RMN de 1H (400 MHz, cloroformo-d) 512,35 (s, 1H), 8,58 (dd,J= 8,4, 0,8 Hz, 1H), 8,49 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,94 (dd,J= 8,4, 7,5 Hz, 1H), 7,79 (dd,J= 7,5, 0,8 Hz, 1H), 7,60 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,48 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 4,11 (d,J= 8,6 Hz, 1H), 3,34 (t,J= 5,5 Hz, 4H), 1,77 (s a, 4H), 1,64 (s, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,29 (s, 9H), 0,45 (s, 4H).m/z(ESI): 558,2 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de intermedio 169A (1,3 g, 2,331 mmol) en 1,4-dioxano (10,0 ml) se le añadió solución acuosa 1,5 N de HCl (15,54 ml, 23,31 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 3 h, después se basificó con solución acuosa al 10 % de NaHCÜ3, se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SÜ4 anhidro y se concentró a presión reducida para producir N-(6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(1,2-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 169, 1,20 g, 2,32 mmol, 99 % de rendimiento) como una goma incolora. R<m>N de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 511,55 (s, 1H), 8,41 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 8,17 - 8,03 (m, 2H), 7,72 (dd,J= 7,6, 1,4 Hz, 1H), 7,60 - 7,47 (m, 1H), 7,39 (dd,J= 7,9, 1,6 Hz, 1H), 5,14 (d,J= 1,5 Hz, 1H), 4,62 (td,J= 6,1, 1,6 Hz, 1H), 3,58 (cd,J= 6,4, 5,9, 4,4 Hz, 2H), 3,24 (s, 4H), 1,52 (t,J= 5,3 Hz, 4H), 1,39 (d,J= 1,6 Hz, 3H), 1,19 (d,J= 1,5 Hz, 9H), 0,31 (d,J= 1,5 Hz, 4H).m/z(ESI): 518,2 (M+H)+.

Etapa 3. Los enantiómeros se separaron entre sí por SFC preparativa usando una columna Chiralpak IC (250 x 30mm, 5 gm) con una fase móvil de 65 % de CO2 líquido y 35 % de EtOH usando un caudal de 100 ml/min. El pico se asignó arbitrariamente como (S)-N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(1,2-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 177, 460 mg, >99 % ee):m/z(ESI): 518,2 (M+H)+. El pico 2 se asignó arbitrariamente como (R)-N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(1,2-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 178, 450 mg, >99 % ee):m/z(ESI): 518,2 (m H)+.

Ejemplos 193, 194 y 195.

Etapa 1. Una mezcla de ácido 6-(2-fluoro-1,3-dimetoxi-1,3-dioxopropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 52, 513 mg, 1,35 mmol), 6-amino-N-(terc-butil)piridina-2-sulfonamida (intermedio 31, 371 mg, 1,62 mmol), DIPEA (0,35 ml, 2,02 mmol) y HATU (667 mg, 1,753 mmol) en DMF (5 ml) se agitó a 60 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA y se repartió entre agua (10 ml) y EtOAc. (75 ml). Las capas se separaron y la solución orgánica se concentró. El residuo se purificó por ISCO (40 % de EtOAc/heptano) para dar 2-(5-((6-(N-(tercbutil)sulfamoil)piridin-2-il)carbamoil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)-2-fluoromalonato de dimetilo (ejemplo 193, 183 mg, 0,31 mmol, 23 % de rendimiento). RMN de 1H (DMSO-ds) 5: 11,05 (s, 1H), 8,09 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,85 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,82 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 3,61 (s, 6H), 3,10 (s a, 4H), 1,11-1,16 (m, 4H), 0,93 (s, 9H), 0,04 (s, 4H).m/z(ESI): 592,3 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución agitada de 2-(5-((6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)carbamoil)-6-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-2-il)-2-fluoromalonato de dimetilo (ejemplo 193, 175 mg, 0,30 mmol) a 0 °C en<t>H<f>(5 ml) y metanol (0,12 ml, 2,96 mmol) se le añadió borohidruro de litio (1,48 ml de 2 M en THF, 2,96 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h (la LC-MS indicó la formación de 2 productos:m/z(ESI): 536,0 (M+H)+ ym/z(ESI): 506,0 (M+H)+), después se inactivó con NH4Cl saturado y se extrajo con DCM (3x). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (10-90 % de TFA al 0,1 % en MeCN en TFA al 0,1 % en agua). Las fracciones puras se neutralizaron con NaHCO3 saturado y se extrajeron con EtOAc. Se obtuvieron dos compuestos. El 1.er eluyente fue N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(2-fluoro-1,3-dihidroxipropan-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 194, 8,5 mg, 0,016 mmol, 5 % de rendimiento). RMN de 1H (DMSO-ds) 5: 11,39 (s, 1H), 8,40 (d a, J = 8,3 Hz, 1H), 8,04-8,17 (m, 2H), 7,72 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,20 (d a, J = 6,6 Hz, 1H), 4,87-4,97 (m, 2H), 3,81-3,96 (m, 4H), 3,42-3,53 (m, 4H), 1,49 (s a, 4H), 1,19 (s, 9H), 0,31 (s, 4H).m/z(ESI): 536,0 (M+H)+. El 2.° eluyente fue N-(6-(N-(terc-butil)sulfamoil)piridin-2-il)-6-(1 -fluoro-2-hidroxietil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 195, 33 mg, 0,065 mmol, 22 % de rendimiento). RMN de 1H (D<m>S<o>^ 6, 400 MHz) 5 11,41 (s a, 1H), 8,39 (d, 1H,J= 7,0 Hz), 8,0-8,2 (m, 2H), 7,72 (d, 1H,J= 7,0 Hz), 7,51 (s a, 1H), 7,14 (d, 1H,J= 6,6 Hz), 5,40-5,53 (m, 1H), 3,8-4,1 (m, 4H), 3,24 (m, 3H), 1,47 (s, 4H), 1,18 (s, 9H), 0,30 (s, 4H).m/z(ESI): 506,0 (M+H)+.

Ejemplos 196 y 197

Estos compuestos se sintetizaron de una manera similar a la descrita anteriormente para los ejemplos 194 y 195. R)-6-(2-Fluoro-1,3-dihidroxipropan-2-il)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (196):m/z(ESI): 500,0 (M+H)+.

6-(1-Fluoro-2-hidroxietil)-N-(6-((R)-2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (197):m/z(ESI): 470,0 (M+H)+.

Ejemplo 198: (6-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-5-((6-((2R)-2-met¡l-4-morfol¡n¡l)-2-p¡r¡d¡n¡l)carbamo¡l)-2-piridinil)(fluoro)propanodioato de d¡met¡lo.

Este compuesto se sintetizó de una manera similar a la descrita para los ejemplos 193.m/z(ESI): 556,2 (M+H)+.

Ejemplo 208: 6-(2-am¡no-3,3,3-tr¡fluoro-2-(h¡droximet¡l)propox¡)-N-(4-met¡l-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-2-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una mezcla de 6-fluoro-N-(4-metil-6-morfolinopiridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (208A, 0,030 g, 0,071 mmol) (preparada de una manera similar a la descrita para el intermedio 147A), clorhidrato de 2-amino-2-(trifluorometil)propano-1,3-diol (0,028 g, 0,141 mmol, FCH Group), fosfato de potasio (0,045 g, 0,212 mmol) en DMSO (1 ml) se calentó a 135 °C durante 18 h. La mezcla se enfrió hasta TA y después se filtró. El sólido se aclaró con 2 x 1 ml de MeOH. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa para producir 6-(2-amino-3,3,3-trifluoro-2-(hidroximetil)propoxi)-N-(4-metil-6-morfolinopiridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (208, 17,6 mg, 0,031 mmol, 44 % de rendimiento) como un sólido castaño. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,37 (s, 4 H) 1,76 (s a, 4 H) 2,32 (s, 3 H) 3,21 (t,J= 5,39 Hz, 4 H) 3,47 - 3,56 (m, 4 H) 3,73 - 3,81 (m, 2 H) 3,81 - 3,87 (m, 4 H) 4,48 - 4,72 (m, 2 H) 6,24 (s, 1 H) 6,63 (d,J= 8,50 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H) 8,42 (d,J= 8,50 Hz, 1 H) 11,88 (s, 1 H).m/z(ESI): 565,2 (M+H)+.

Ejemplo 209: 6-(2-am¡no-3,3,3-tr¡fluoro-2-(h¡droximet¡l)propox¡)-N-(4-met¡l-6-morfol¡nop¡r¡d¡n-2-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una mezcla de (R)-6-cloro-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (209A, 0,100 g, 0,226 mmol), 3-amino-3-metil-butan-1 -ol (0,047 g, 0,453 mmol) (preparado de una manera similar a la descrita para el intermedio 147A), fosfato de potasio (0,144 g, 0,679 mmol) y DMs O (1 ml) se calentó a 135 °C durante 18 h.

La mezcla se enfrió hasta TA y después se filtró. El sólido se aclaró con 2 x 1 ml de MeOH. El filtrado se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa para producir (R)-6-(3-amino-3-metilbutoxi)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 209, 9 mg, 7 % de rendimiento) como un sólido castaño. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,37 (s, 4 H) 1,27 (d,J= 6,22 Hz, 3 H) 1,45 (s, 6 H) 1,73 (s a, 4 H) 2,13 (t a,J= 6,32 Hz, 2 H) 2,60 (dd,J= 12,54, 10,26 Hz, 1 H) 2,90 - 3,00 (m, 1 H) 3,21 (t,J= 5,39 Hz, 4 H) 3,63 - 3,77 (m, 2 H) 4,01 (dd,J= 11,20, 2,28 Hz, 2 H) 4,11 (d a,J= 12,02 Hz, 1 H) 4,54 (t,J= 6,32 Hz, 2 H) 6,38 (d,J= 8,09 Hz, 1 H) 6,65 (d,J= 8,50 Hz, 1 H) 7,54 (t,J= 8,09 Hz, 1 H) 7,71 (d,J= 7,88 Hz, 1 H) 8,37 (d,J= 8,50 Hz, 1 H) 11,90 (s, 1 H).m/z(ESI): 509,3 (M+H)+.

Ejemplo 210: (S)-6-((4-h¡drox¡-2-met¡lbutan-2-¡l)am¡no)-N-(6-(2-(h¡drox¡met¡l)morfol¡no)p¡rid¡n-2-¡l)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una solución de (S)-6-fluoro-N-(6-(2-(hidroximetil)morfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (210A, 100 mg) (preparada de una manera similar a la descrita para el ejemplo 173), 3-amino-3-metilbutan-1-ol (40 mg, Tyger Scientific) y base de Hunig (0,100 ml, 0,571 mmol) en DMSO (1 ml) se calentó a 145 °C durante 6 h. La mezcla se enfrió hasta TA y después se purificó por HPLC de fase inversa para producir (S)-6-((4-hidroxi-2-metilbutan-2-il)amino)-N-(6-(2-(hidroximetil)morfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 210, 0,037 g, 0,071 mmol, 37 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. Rm N de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,38 (s, 4 H) 1,51 (s, 6 H) 1,67 - 1,81 (m, 4 H) 2,10 (t,J= 6,22 Hz, 2 H) 2,77 (dd a,J= 12,34, 10,06 Hz, 1 H) 2,98 (td,J= 12,23, 3,32 Hz, 1 H) 3,17 (t a,J= 4,98 Hz, 4 H) 3,66 - 3,80 (m, 4 H) 3,84 (t,J= 6,22 Hz, 2 H) 4,01 - 4,14 (m, 3 H) 6,18 (d,J= 8,50 Hz, 1 H) 6,37 (d,J= 8,29 Hz, 1 H) 7,53 (t,J= 8,09 Hz, 1 H) 7,75 (d,J= 7,88 Hz, 1 H) 8,16 (d,J= 8,71 Hz, 1 H) 12,15 (s a, 1 H).m/z(ESI): 525,2 (M+H)+.

Tabla 6. Los ejemplos 211-214, 217 y 222 se prepararon de manera análoga a la descrita anteriormente para el ejemplo 210.

Ejemplo 218: (R)-N-(6-(2-met¡lmorfol¡no)p¡r¡d¡n-2-¡l)-6-(metilsulfonam¡do)-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Etapa 1. Una mezcla de (R)-2,6-dibromo-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)nicotinamida (218A, 0,300 g, 0,658 mmol) (preparada de una manera similar a la descrita para el ejemplo 173), 6-azaespiro[2.5]octano (0,090 ml, 0,688 mmol), DiPEA (0,138 ml, 0,789 mmol) y DMSO (2 ml) se calentó a 60 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se repartió entre agua (10 ml) y EtOAc (50 ml). La fase orgánica se concentró y el producto en bruto se purificó por Biotage (SNAP25, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano 10 % - 60 %) para producir (R)-6-bromo-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (218B, 0,123 g, 39 % de rendimiento) como un sólido blanco.<r>M<n>de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,39 (s, 4 H) 1,28 (d,J= 6,22 Hz, 3 H) 1,74 (s a, 4 H) 2,62 (dd,J= 12,44, 10,57 Hz, 1 H) 2,97 (td,J= 12,28, 3,63 Hz, 1 H) 3,28 (t,J= 5,39 Hz, 4 H) 3,65 - 3,78 (m, 2 H) 3,97 - 4,06 (m, 2 H) 4,13 (d a,J= 12,44 Hz, 1 H) 6,43 (d,J= 8,09 Hz, 1 H) 7,34 (d,J= 8,09 Hz, 1 H) 7,53 - 7,61 (m, 1 H) 7,69 (d,J= 7,88 Hz, 1 H) 8,29 (d,J= 8,09 Hz, 1 H) 11,58 (s, 1 H). m/z (ESI): 486/488 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de (R)-6-bromo-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (218B, 0,120 g, 0,247 mmol), metanosulfonamida (0,029 g, 0,306 mmol), yoduro de cobre(i) (0,016 g, 0,086 mmol) y fosfato de potasio (0,141 g, 0,667 mmol) en un vial de vidrio se purgó con argón durante 3 min. Se añadió DMF (1 ml) seguida de (1R,2R)-(-)-N,N"-dimetilciclohexano-1,2-diamina (0,027 ml, 0,173 mmol). El vial se tapó y la mezcla se agitó a 100 °C durante 3 h. La mezcla se diluyó con EtOAc (4 ml) y se filtró a través de una capa de celite y se aclaró con 10 ml de EtOAc. El filtrado se lavó con agua ( 2 x 5 ml) y se concentró. El producto en bruto se purificó por Biotage (SNAP25, Ultra, eluyente: EtOAc en heptano 10 % - 80 %) para producir (R)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-6-(metilsulfonamido)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 218, 59 mg, 96 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-ds) 5 = 11,66 (s a, 1H), 10,96 (s a, 1H), 8,21 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 7,63 -7,49 (m, 2H), 6,70 (d,J= 8,3 Hz, 1H), 6,58 (d,J= 8,1 Hz, 1H), 4,18 (d a,J= 12,2 Hz, 1H), 4,03 (d a,J= 12,6 Hz, 1H), 3,91 (dd a,J= 2,2, 11,5 Hz, 1H), 3,63 - 3,52 (m, 2H), 3,42 (s, 3H), 3,16 (t a,J= 5,1 Hz, 4H), 2,83 (dt,J= 2,9, 12,1 Hz, 1H), 2,54 - 2,51 (m, 1H), 1,67 (d a,J= 2,7 Hz, 4H), 1,17 (d,J= 6,2 Hz, 3H), 0,35 (s, 4H). m/z (ESI): 501,1 (M+H)+.

Ejemplos 223-225.

A una solución de (R)-6-bromo-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (218B, 0,245 g, 0,503 mmol) en THF (1 ml) a -78 °C se le añadió n-Buli (2,5 M en hexanos, 0,423 ml, 1,057 mmol) durante 5 min y la mezcla se agitó durante 15 min. Se añadió cloruro de cinc (1,9 M en 2-metiltetrahidrofurano, 0,265 ml, 0,503 mmol) durante 5 min. El baño frío se retiró y la mezcla se agitó a TA durante 1 h, después se enfrió con un baño de hielo. Se añadió sulfoclorato de 2,4,6-triclorofenilo (0,149 g, 0,503 mmol) durante 5 min. La mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min, después a TA durante 1,5 h. Se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con agua (5 ml) seguida de salmuera (5 ml). La capa orgánica se concentró y el residuo se purificó en una columna de gel de sílice (25-75 % de EtOAc en heptano) para dar intermedio 223A (76 mg, 22 % rendimiento) como un sólido pardo. m/z (ESI): 667,1 (M+H)+.

Una solución de 223A (70 mg, 0,11 mmol) y DIPEA (0,10 ml, 0,12 mmol) en 3 ml de THF se dividió en 3 porciones iguales y se pusieron en 3 viales de vidrio. Cada vial se trató con 0,1 ml de MeNH2 o NH4OH o tBuNH2, se cerró herméticamente y se calentó a 60 °C durante 18 h. Los viales se enfriaron hasta TA y los contenidos se purificaron por cromatografía en gel de sílice para dar los ejemplos 223 (2 mg), 224 (2 mg) y 225 (3 mg).

2-(6-Azaespiro[2.5]octan-6-il)-N-(6-((2R)-2-metil-4-morfolinil)-2-piridinil)-6-(metilsulfamoil)-3-piridincarboxamida

(223): RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 11,16 (1 H, s), 8,59 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,78 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,66 - 7,71 (1 H, m), 7,55 - 7,62 (1 H, m), 6,45 (1 H, d,J= 8,1 Hz), 4,70 (1 H, c,J= 5,4 Hz), 4,12 (1 H, d a,J= 12,4 Hz), 3,97 - 4,07 (2 H, m), 3,65 - 3,77 (2 H, m), 3,34 (4 H, t,J= 5,5 Hz), 2,98 (1 H, td,J= 12,3, 3,5 Hz), 2,86 (3 H, d,J= 5,4 Hz), 2,62 (1 H, dd,J= 12,5, 10,5 Hz), 1,74 (4 H, d a,J= 2,1 Hz), 1,28 (3 H, d,J= 6,2 Hz), 0,40 (4 H, s). m/z (ESI): 501,1 (M+H)+.

2-(6-Azaespiro[2.5]octan-6-il)-N-(6-((2R)-2-metil-4-morfolinil)-2-piridinil)-6-sulfamoil-3-piridincarboxamida (224): m/z (ESI): RMN de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 11,11 (1 H, s), 8,59 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,79 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,65 - 7,70 (1 H, m), 7,55 - 7,62 (1 H, m), 6,45 (1 H, d,J= 8,1 Hz), 4,98 (2 H, s a), 4,12 (1 H, d a,J= 12,9 Hz), 3,96 - 4,06 (2 H, m), 3,66 - 3,78 (2 H, m), 3,35 (4 H, t,J= 5,5 Hz), 2,98 (1 H, td,J= 12,3, 3,6 Hz), 2,62 (1 H, dd,J= 12,6, 10,6 Hz), 1,74 (4 H, d a,J= 2,3 Hz), 1,29 (3 H, d,J= 6,2 Hz), 0,40 (4 H, s). 487,1 (M+H)+.

2-(6-Azaespiro[2.5]octan-6-il)-N-(6-((2R)-2-metil-4-morfolinil)-2-piridinil)-6-((2-metil-2-propanil)sulfamoil)-3-piridincarboxamida (225):<r>M<n>de 1H (400 MHz,CLOROFORMO-d) 5ppm 11,35 (1 H, s), 8,60 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,82 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,69 (1 H, d,J= 7,9 Hz), 7,55 - 7,62 (1 H, m), 6,45 (1 H, d,J= 8,3 Hz), 4,82 (1 H, s), 4,13 (1 H, d a,J =12,4 Hz), 3,97 - 4,06 (2 H, m), 3,65 - 3,78 (2 H, m), 3,33 (4 H, t,J =5,4 Hz), 2,98 (1 H, td,J =12,3, 3,7 Hz), 2,63 (1 H, dd,J= 12,5, 10,5 Hz), 1,75 (4 H, d a,J= 1,9 Hz), 1,29 (3 H, s), 1,27 (9 H, s), 0,41 (4 H, s). m/z (ESI): 543,1 (M+H)+.

Ejemplo 232 y 233.

Etapa 1. A una solución de ácido 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (intermedio 50, 1,00 g, 2,90 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C se le añadió cloruro de oxalilo (2,17 ml de 2 M en DCM, 4,34 mmol) seguido de 2 gotas de DMF. La mezcla se agitó a TA durante 1 h, después se concentró. El residuo se disolvió en DCM (10 ml), se enfrió hasta 0 °C y después se trató con 6-fluoro-piridin-2-ilamina (0,422 g, 3,76 mmol) seguida de diisopropiletilamina (1,52 ml, 8,69 mmol). La mezcla se agitó 3,75 h a TA, después se inactivó con metanol y se evaporó. El residuo se recogió en acetato de etilo (40 ml), se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó en gel de sílice. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g, 0 % a 70 % de acetato de etilo en heptano) para proporcionar 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-W-(6-fluoropiridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (232A, 0,753 g, 1,71 mmol, 59 % de rendimiento).m/zESI 440,1.

Etapa 2. Se disolvió 6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-W-(6-fluoropiridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (232A, 0,100 g, 0,228 mmol) en DMSO (1 ml) y se añadió diisopropiletilamina (0,200 ml, 1,14 mmol) y W-(3-piperidinil)carbamato de ferc-butilo (0,092 g, 0,456 mmol). La mezcla se calentó a 200 °C durante 60 min en un microondas. La mezcla se enfrió, se diluyó con acetato de etilo (40 ml), se lavó con salmuera (2 x 40 ml), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó para dar 232B que se llevó adelante sin purificación.m/zESI 634,2 (M+H)+.

Etapa 3. Se disolvió (1-(6-(6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamido)piridin-2-il)piperidin-3-il)(metil)carbamato de ferc-butilo (232B) en metanol (0,6 ml). Se añadieron 2 ml de NaOH 5 N y la mezcla se evaporó en una corriente de nitrógeno. El residuo se recogió en metanol (4 ml) y la mezcla se calentó a 70 °C durante 8 h. La mezcla se enfrió y se purificó por HPLC con un 0,1 % de NH4OH en H2O (A) y ACN (B) como fase móvil, columna XBridge (19 x 100 mm, 10 um) para proporcionar (1-(6-(6-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamido)piridin-2-il)piperidin-3-il)(metil)carbamato de ferc-butilo (ejemplo 232, 17 mg, 0,027 mmol, 25 %). RMN de 1H (500 MHz, DMSO-dfc) 5 ppm 0,30 - 0,37 (m, 4 H) 1,33 - 1,41 (m, 16 H) 1,59 - 1,79 (m, 5 H) 2,69 - 2,79 (m, 4 H) 2,89 - 3,09 (m, 5 H) 3,16 (d,J= 5,32 Hz, 1 H) 3,59 (d,J= 5,71 Hz, 3 H) 4,09 - 4,20 (m, 2 H) 4,31 (s a, 1 H) 4,83 (t,J= 5,77 Hz, 1 H) 6,41 (d,J= 8,69 Hz, 1 H) 6,50 - 6,55 (m, 1 H) 6,80 (s, 1 H) 7,51 (d,J= 4,15 Hz, 2 H) 7,93 (d,J= 8,69 Hz, 1 H) 12,23 (s, 1 H).m/zESI 608,2 (M+H)+.

Etapa 4. Se disolvió (1-(6-(6-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamido)piridin-2-il)piperidin-3-il)(metil)carbamato de ferc-butilo (ejemplo 232, 10,5 mg, 0,017 mmol) en 1 ml de DCM y se añadió 0,1 ml de TFA y la mezcla se agitó durante 30 min. La mezcla se evaporó y se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 1 % a 5 % de NH32 M en MeOH en DCM ) para proporcionar (1-(6-(6-((1-hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamido)piridin-2-il)piperidin-3-il)(metil)carbamato de ferc-butilo (ejemplo 233, 8,4 mg, 16,5 mmol, 96 %). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 0,38 (s, 4 H) 1,37 - 1,49 (m, 8 H) 1,52 - 1,71 (m, 3 H) 1,71 - 1,88 (m, 4 H) 1,90 - 2,10 (m, 1 H) 2,51 (s, 3 H) 2,58 - 2,67 (m, 1 H) 2,95 (dd,J= 12,65, 8,71 Hz, 1 H) 3,07 (ddd,J= 13,06, 10,06, 3,21 Hz, 1 H) 3,20 (t,J= 5,39 Hz, 4 H) 3,73 (s, 2 H) 4,00 - 4,12 (m, 2 H) 4,68 (s, 1 H) 6,23 (m, J = 8,71 Hz, 1 H) 6,42 (d,J= 8,29 Hz, 1 H) 7,49 (t,J= 7,98 Hz, 1 H) 7,65 (d,J= 7,88 Hz, 1 H) 8,22 (m,J= 8,71 Hz, 1 H) 11,94 (s, 1 H).m/zESI 508,1 (M+H)+.

Tabla 7. Los ejemplos 234 a 236 se prepararon de manera análoga a la descrita anteriormente para el ejemplo 233.

Ejemplo 237: (R)-6-((2-h¡drox¡et¡l)sulfonam¡do)-N-(6-(2-met¡lmorfol¡no)pir¡d¡n-2-¡l)-4-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Etapa 1. A una solución de ácido 4,6-dicloronicotínico (10,0 g, 52,1 mmol) en DMF (100 ml) se le añadieron carbonato de potasio (14,4 g, 104 mmol) y yodometano (7,4 g, 52,1 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h antes de que se inactivara con agua. El sólido obtenido se filtró y se secó para producir 4,6-dicloronicotinato de metilo (237A, 7,0 g, 34,0 mmol, 65 % de rendimiento) como un sólido blanco. m/z (ESl): 206,1 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de 4,6-dicloronicotinato de metilo (237A, 7,0 g, 34,0 mmol) en DMF (70 ml) se le añadió K2CO3 (4,7 g, 34,0 mmol) y 6-azaespiro[2.5]octano (3,8 g, 34,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 55 °C durante 16 h. Después, la mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida usando un gradiente de 1 % a 35 % de EtOAc en éter de petróleo para proporcionar 6-cloro-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (237B, 6,1 g, 21,7 mmol, 64 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 8,29 (d,J= 1,4 Hz, 1 H), 7,02 (d,J= 1,4 Hz, 1 H), 3,82 (d,J= 1,3 Hz, 3 H), 3,18 - 3,28 (m, 4 H), 1,37 - 1,47 (m, 4 H), 0,32 - 0,38 (m, 4 H). m/z (ESl): 281,1 (M+H)+.

Etapa 3. A una solución de 6-cloro-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinato de metilo (237B, 5,0 g, 17,8 mmol) en agua (35 ml) y tetrahidrofurano (15 ml) se le añadió LiOH (1,3 g, 53,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 5 h. Después, la mezcla de reacción se inactivó con HCl 3 N a 0 °C y el sólido obtenido de este modo se filtró y se secó para producir ácido 6-cloro-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (237C, 5,0 g, 105 %) como un sólido blanco que se usó directamente en la siguiente etapa. R<m>N de 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 13,19 (s, 1 H), 8,29 (s, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 3,23 - 3,30 (m, 4 H), 1,40 - 1,47 (m, 4 H), 0,35 (s, 4 H). m/z (ESI): 267,1 (M+H)+.

Etapa 4. A una solución de ácido 6-cloro-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotínico (237C, 1,5 g, 5,6 mmol) en diclorometano (15 ml) se le añadieron DIPEA (4,9 ml 28,1 mmol), (R)-6-(2-metilmorfolino)piridin-2-amina (12, 1,3 g, 6,7 mmol) y T3P (14,31 g de un 50 % en peso en acetato de etilo, 22,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 h. Después, la mezcla de reacción se diluyó con agua (30 ml) y se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (30 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida usando un gradiente de 1 % a 30 % de EtOAc en éter de petróleo para proporcionar (R)-6-cloro-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (237D, 0,65 g, 1,47 mmol, 26 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro.m/z(ESI): 442,1 (M+H)+.

Etapa 5. Una mezcla de (R)-6-cloro-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (237D, 650 mg, 1,47 mmol), 2-hidroxietano-1 -sulfonamida (221 mg, 1,76 mmol), K3PO4 (905 mg, 4,27 mmol),(1R,2R)-N1,N2-dimetilciclohexano-1,2-diamina (105 mg, 0,73 mmol) y yoduro de cobre (I) (280 mg, 1,47 mmol) en DMF (8 ml) se calentó a 105 °C durante 16 h. Después, la mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de celite y la torta de filtro se aclaró con 2 x 50 ml de EtOAc. El filtrado se lavó con agua seguida de salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El concentrado se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para proporcionar (R)-6-((2-hidroxietil)sulfonamido)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 237, 20 mg, 0,38 mmol, 26 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 10,90 (s, 1 H), 8,37 (s, 1 H), 7,59 (t,J= 8,0 Hz, 1 H), 7,49 (d,J= 8,1 Hz, 1 H), 6,75 (s, 1 H), 6,60 (d,J= 8,2 Hz, 1 H), 4,87 (s a, 1 H), 4,19 (d,J= 13,2 Hz, 1 H), 4,02 (d,J= 12,7 Hz, 2 H), 3,83 - 3,99 (m, 2 H), 3,26 - 3,58 (m, 6 H), 3,09 (m, 4 H) 2,82 (dd,J= 14,2, 10,5 Hz, 1 H), 1,63 (s, 4 H), 1,17 (d,J= 6,1 Hz, 3 H), 0,35 (s, 4 H).m/z(ESI): 531,2 (M+H)+.

Ejemplo 238: (R)-N-(6-(2-met¡lmorfol¡no)p¡r¡d¡n-2-¡l)-6-(met¡lsulfon¡l)-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Una mezcla de (R)-6-fluoro-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (147A, 100 mg, 0,23 mmol) y metanosulfinato de sodio (48 mg, 0,47 mmol) en DMF (2 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera (10 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. El material en bruto se absorbió en un lecho de gel de sílice y se purificó por cromatografía a través de una columna Redi-Sep precompactada de gel de sílice (12 g), eluyendo con un gradiente de 1 % a 40 % de EtOAc en hexano, para proporcionar (R)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-6-(metilsulfonil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 238, 70 mg, 0,14 mmol, 61 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro.m/zESI 486,3 (M+H)+.

Tabla 8. Los ejemplos 239-241 se prepararon de manera análoga a la descritas para el ejemplo 110.

Ejemplo 243: (R)-6-((1-h¡drox¡-2-met¡lpropan-2-¡l)am¡no)-N-(6-(2-met¡lmorfol¡no)p¡rid¡n-2-¡l)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

Etapa 1. Una mezcla de (R)-6-cloro-W-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (237D, 100 mg, 0,22 mmol), 4,4-dimetiloxazolidin-2-ona (26 mg, 0,22 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml), Cs2CO3 (74 mg, 0,22 mmol), Xantphos (131 mg, 0,22 mmol) y Pd2(dba)3 (207 mg, 0,22 mmol) se calentó a 100 °C durante 16 h. Después, la mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de celite y la torta de filtro se aclaró con 2 x 25 ml de EtOAc. El filtrado se lavó con agua seguida de salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El concentrado se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida eluyendo con un gradiente de 15 % a 40 % de EtOAc en éter de petróleo para proporcionar (R)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-W-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (243A, 35 mg, 0,067 mmol, 30 % de rendimiento) como un sólido blanco.m/z(ESI): 521,2 (M+H)+.

Etapa 2. A una solución de (R)-6-(4,4-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-W-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (243A, 35 mg, 0,067 mmol) en metanol (0,3 ml) y agua (0,3 ml) se le añadió solución al 10 % de NaOH (0,3 ml, 0,13 mmol) en una porción y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 4 h. Después, la mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El concentrado se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida eluyendo con un gradiente de 0 % a 40 % de EtOAc en éter de petróleo para proporcionar (R)-6-((1 -hidroxi-2-metilpropan-2-il)amino)-W-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-4-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 243, 25 mg, 0,051 mmol, 75 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 11,60 (s, 1 H), 8,50 (s, 1 H), 7,45 - 7,64 (m, 2 H), 6,73 (s, 1 H), 6,51 -6,59 (m, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 5,22 (t,J= 5,6 Hz, 1 H), 4,11 - 4,22 (m, 1 H), 4,01 (d,J= 12,8 Hz, 1 H), 3,90 (dt,J= 11,0, 2,0 Hz, 1 H), 3,45 - 3,71 (m, 5 H), 2,93 (t,J= 5,4 Hz, 4 H), 2,80 (td,J= 12,4, 3,5 Hz, 1 H), 1,67 (s, 4 H), 1,27 (s, 6 H), 1,16 (d,J= 6,2 Hz, 3 H), 0,34 (s, 4 H).m/z(ESI): 495,3 (M+H)+.

Ejemplo 244: N-(6-((R)-2-met¡lmorfolino)p¡r¡d¡n-2-¡l)-6-(1-(met¡lsulfon¡l)et¡l)-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-il)nicotinamida.

A una mezcla de (R)-N-(6-(2-metilmorfolino)piridin-2-il)-6-((metilsulfonil)metil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 239, 0,55 g, 1,10 mmol) y terc-butóxido de potasio (0,18 g, 1,65 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C se le añadió yoduro de metilo (0,10 ml, 1,65 mmol). Después de agitar a 0 °C durante 1 h, la reacción se interrumpió con agua helada (10 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La solución orgánica se concentró a presión reducida. El material en bruto se absorbió en un lecho de gel de sílice de malla 60-120 y se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 10 % de EtOAc en DCM) para proporcionar N-(6-((R)-2-metilmorfolino)piridin-2-il)-6-(1-(metilsulfonil)etil)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)nicotinamida (ejemplo 244, 50 mg, 9 % de rendimiento) como un sólido esponjoso blanco.m/zESI 514,3.

Ejemplo 245: N-(2-(6-azaespiro[2.5]oct-6-il)-3-piridinil)-6-(4-morfolinil)-2-piridincarboxamida.

Etapa 1. Se añadió 6-azaespiro[2.5]octano (0,58 g, 5,18 mmol, Wuxi AppTech) a una solución de 2,6-dicloro-3-nitropiridina (1,0 g, 5,18 mmol, Aldrich) y DIPEA (1,00 ml, 5,70 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C. Esta mezcla se agitó durante 2 h, después se añadieron EtOAc y agua. La mezcla bifásica resultante se separó y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite. El aceite se condensó en gel de sílice y se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 20 % de EtOAc/heptano, para proporcionar 6-(6-cloro-3-nitropiridin-2-il)-6-azaespiro[2.5]octano (245A, 1,16 g, 4,33 mmol, 84 % de rendimiento) como un sólido amarillo. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,27 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 6,87 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 3,36 - 3,43 (m, 4 H) 1,41 - 1,47 (m, 4 H) 0,38 (s, 4 H).m/z(ESI): 268,1 (M+H)+.

Etapa 2. Se añadió gota a gota HCl concentrado (2 ml) a una mezcla de 6-(6-cloro-3-nitropiridin-2-il)-6-azaespiro[2.5]octano (245A, 1,16 g, 4,33 mmol) y hierro (0,97 g, 17,3 mmol) en EtOH (15 ml) y agua (3 ml). La mezcla se calentó hasta 80 °C durante 4 h, después se enfrió hasta TA. La suspensión resultante se filtró a través de celite y el filtrado se repartió entre EtOAc y NaHCO3 acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2x), se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar un aceite rojo. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con gradiente de 0 % a 50 % de EtOAc/heptano, para proporcionar 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-amina (245B, 0,76 g, 3,21 mmol, 74 % de rendimiento) como un sólido rojo. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 6,90 (d, J = 8,02 Hz, 1 H) 6,81 (d, J = 8,02 Hz, 1 H) 3,76 (s a, 2 H) 3,11 (t, J = 5,48 Hz, 4 H) 1,51 (s a, 4 H) 0,34 (s, 4 H).m/z(ESI): 238,1 (M+H)+.

Etapa 3. Una mezcla de 6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-amina (245B, 0,89 g, 3,75 mmol), ácido 6-morfolinopicolínico (0,78 g, 3,75 mmol, Apollo Scientific), DIPeA (1,96 ml, 11,2 mmol) y Ha TU (4,27 g, 11,2 mmol) en DMA (10 ml) se calentó hasta 60 °C durante 16 h, después se enfrió hasta TA. Se añadió EtOAc y la mezcla se lavó con agua dos veces, después se concentró al vacío para dar un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice, eluyendo con 50 % de EtOAc/heptano, para proporcionar N-(6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3il)-6-morfolinopicolinamida (245C, 0,58 g, 1,35 mmol, 35,9 % de rendimiento) como un sólido blanquecino.m/z(ESI): 428,1 (M+H)+.

Etapa 4. Una mezcla de N-(6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (245C, 50 mg, 0,12 mmol), paladio (10 % en peso sobre carbono activado, 50 mg, 0,047 mmol) y formiato de amonio (74 mg, 1,17 mmol) en EtOH (2 ml) en atmósfera de argón se calentó hasta 60 °C durante 30 min, después se enfrió hasta TA. La mezcla se filtró a través de celite y después el filtrado se diluyó con EtOAc y agua. La mezcla bifásica resultante se separó, la capa orgánica se lavó con agua (1x), se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar N-(6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (ejemplo 245, 45 mg, 0,11 mmol, 98 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 10,57 (s a, 1 H) 8,82 (dd,J= 8,12, 1,66 Hz, 1 H) 8,12 (dd,J= 4,79, 1,66 Hz, 1 H) 7,68 - 7,75 (m, 2 H) 7,09 (dd,J= 8,02, 4,89 Hz, 1 H) 6,84 (d,J= 7,63 Hz, 1 H) 3,88 - 3,94 (m, 4 H) 3,67 - 3,74 (m, 4 H) 3,10 (t,J= 5,38 Hz, 4 H) 1,57 (s, 4 H) 0,39 (s, 4 H).m/z(ESI): 394,1 (M+H)+.

Ejemplo 246: N-(2-(6-Azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-6-(1,1,1-tr¡fluoro-2-h¡drox¡propan-2-¡l)p¡rid¡n-3-¡l)-6-m orfolinopicolinamida.

Etapa 1. Una mezcla de N-(6-cloro-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (245C, 0,28 g, 0,65 mmol), bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio (II) (92 mg, 0,130 mmol) y tributil(1-etoxivinil)estanano (0,35 g, 0,98 mmol) en tolueno (3 ml) se calentó en atmósfera de argón a 90 °C durante 16 h, después se enfrió hasta TA. Se añadió HCl 4 N en dioxano (0,75 ml) y la mezcla se agitó durante 2 h. Se añadieron EtOAc y NaHCO3 acuoso saturado y la mezcla bifásica resultante se separó. La capa orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice (de 0 % a 100 % de EtOAc/heptano ) para proporcionar N-(6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (246A, 103 mg, 0,24 mmol, 36 % de rendimiento) como un sólido naranja. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 10,70 (s, 1 H) 8,92 (m,J= 8,41 Hz, 1 H) 7,87 (m,J= 8,22 Hz, 1 H) 7,67 - 7,76 (m, 2 H) 6,86 (dd,J= 8,22, 0,98 Hz, 1 H) 3,88 - 3,95 (m, 4 H) 3,64 - 3,77 (m, 4 H) 3,14 (t,J= 5,48 Hz, 4 H) 2,68 (s, 3 H) 1,49 - 1,70 (m, 4 H) 0,42 (s, 4 H).m/z(ESI): 436,2 (M+H)+.

Etapa 2. Una mezcla de N-(6-acetil-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (246A, 103 mg, 0,24 mmol), fluoruro de tetrametilamonio (33 mg, 0,36 mmol) y trimetil(trifluorometil)silano (0,052 ml, 0,355 mmol) en THF (1,5 ml) se agitó durante 16 h a TA. El disolvente se retiró al vacío y el aceite resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 % de EtOAc/heptano), para proporcionar N-(2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)-6-(1,1,1-trifluoro-2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-6-morfolinopicolinamida (246A, 8,5 mg, 0,017 mmol, 7 % de rendimiento) como un aceite amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 10,49 (s, 1 H) 8,90 (d,J= 8,22 Hz, 1 H) 7,64 - 7,76 (m, 2 H) 7,24-7,26 (m, 1H) 6,79 - 6,89 (m, 1 H) 6,08 (s, 1 H) 3,82 -3,96 (m, 4 H) 3,58 - 3,74 (m, 4 H) 3,05 - 3,22 (m, 4 H) 1,73 (s, 3 H) 1,58 (s, 4 H) 0,36 - 0,45 (m, 4 H)m/z(ESI): 506,3 (M+H)+.

Ejemplo 247: 2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-¡l)-N-(5-fluoro-6-((2R)-2-metil-4-morfol¡n¡l)-2-p¡r¡d¡n¡l)-6-((1-h¡drox¡-2-metil-2-propanil)amino)-3-piridincarboxamida.

Este compuesto se preparó de una manera similar a la descrita anteriormente para el ejemplo 104.

RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 12,51 (s, 1 H), 7,95 (d,J= 8,7 Hz, 1 H), 7,72 (dd,J= 8,5, 2,4 Hz, 1H), 7,53 (dd,J= 12,8, 8,5 Hz, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 6,44 (d,J= 8,7 Hz, 1 H), 4,82 (t,J= 5,7 Hz, 1 H), 3,79 - 3,94 (m, 3 H), 3,62 -3,73 (m, 2 H), 3,60 (d,J= 5,7 Hz, 2 H), 3,05 (t,J= 5,5 Hz, 4 H), 2,91 - 2,99 (m, 1 H), 2,60 - 2,70 (m, 1 H), 1,70 (s, 4 H), 1,36 (s, 6 H), 1,16 (d,J =6,2 Hz, 3 H), 0,37 (s, 4 H).m/z(ESI): 513,3 (M+H)+.

Ejemplo 248: 6-(4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-il)-N-(4-((2-h¡drox¡et¡l)sulfonam¡do)-2-(6-azaesp¡ro[2.5]octan-6-il)fenil)picolinamida.

Etapa 1. Una mezcla de 4-bromo-2-fluoro-1-nitrobenceno (3,17 g, 14,41 mmol, Combi-blocks), clorhidrato de 6-azaespiro[2.5]octano (2,447 g, 16,57 mmol, AstaTech) y carbonato de potasio (5,97 g, 43,2 mmol, Aldrich) en 12 ml de DMSO se calentó en un baño de aceite a 60 °C durante 10 min, después a 90 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió hasta TA, se trató con 20 ml de agua y se extrajo con 2 x 50 ml de EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con 2 x 5 ml de agua y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de gel de sílice (de 15 % a 45 % de EtOAc en heptano) para dar 6-(5-bromo-2-nitrofenil)-6-azaespiro[2.5]octano (4,26 g, 13,69 mmol, 95 % de rendimiento) como un sólido naranja.m/z(ESI): 311,0/313,0 (M+H)+.

Etapa 2. A una mezcla de 6-(5-bromo-2-nitrofenil)-6-azaespiro[2.5]octano (2,91 g, 9,35 mmol) y cloruro de amonio (1,50 g, 28,1 mmol, Aldrich) en EtOH (16 ml) y agua (4,00 ml) se le añadió polvo de hierro (3,13 g, 56,1 mmol, Aldrich). La mezcla heterogénea se calentó en un baño de aceite a 85 °C durante 2 h. La mezcla oscura se diluyó con 50 ml de MeOH y se filtró a través de una capa de celite. La torta de filtro se aclaró con 2 x 5 ml de MeOH. El filtrado se concentró. El residuo se repartió entre 10 ml de agua y 75 ml de agua. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para producir 4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)anilina (248A, 2,23 g, 7,95 mmol, 85 % de rendimiento) como un aceite pardo. El material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d4) 56,87 (d,J= 2,28 Hz, 1H), 6,77 (dd,J= 2,18, 8,40 Hz, 1H), 6,48 (d,J= 8,50 Hz, 1H), 4,65 (s, 4H), 1,23-1,50 (s a, 4H), 0,18 (s, 4H).m/z(ESI): 281,0 /283,0 (M+H)+.

Etapa 3. A una solución de ácido 6-fluoropicolínico (242 mg, 1,71 mmol, Aldrich), 4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)anilina (248A, 455 mg, 1,61 mmol) y DIPEA (565 pl, 3,24 mmol) en 12 ml de D<c>M a 0 °C se le añadió T3P (50 % en peso en acetato de etilo, 1,44 ml, 2,43 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 1 h, después se diluyó con 50 ml de DCM y se lavó con 10 ml de agua seguida de 10 ml de NaOH 0,5 N. La solución orgánica se concentró, y el residuo se purificó en una columna de gel de sílice (de 10 % a 25 % de EtOAc en heptano) para dar N-(4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)-6-fluoropicolinamida (248B, 539 mg, 1,33 mmol, 82 % de rendimiento) como un sólido pardo.m/z(ESI): 404/406 (M+H)+.

Etapa 4. Una solución de clorhidrato de 4,4-difluoropiperidina (136 mg, 0,86 mmol, Matrix Scientific), N-(4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)-6-fluoropicolinamida (248B, 290 mg, 0,72 mmol) y DIPEA (0,37 ml, 2,15) en 3 ml de DMSO se calentó en un microondas a 185 °C durante 2,5 h, después a 200 °C durante 0,5 h. La mezcla se enfrió hasta TA y se repartió entre agua (10 ml) y EtOAc (50 ml). Las capas se separaron, y la capa orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró. El residuo se purificó por ISCO (de 0 % a 30 % de EtOAc en heptano) para dar 310 mg de sólido pardo como una mezcla de N-(4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)-6-(4,4-difluoropiperidin-1il)picolinamida (248C, aproximadamente 65 %, miz (ESI): 505/507 (M+H)+) y N-(4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)-6-fluoropicolinamida (248B, aproximadamente 35 %,miz(ESI): 404/406 (M+H)+). La mezcla se usó sin purificación adicional.

Etapa 5. Una mezcla de N-(4-bromo-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)-6-(4,4-difluoropiperidin-1-il)picolinamida (248C, 155 mg, aproximadamente un 65 % pura), 2-hidroxietano-1-sulfonamida (89 mg, 0,71 mmol, Enamine), fosfato de potasio (377 mg, 1,77 mmol, Aldrich), dimetilglicina (36,6 mg, 0,355 mmol, Oakwood), yoduro de cobre (I) (34 mg, 0,18 mmol, Strem) en 4 ml de DMF se desgasificó durante 3 min. La mezcla se calentó a 130 °C durante 6 h, después se enfrió hasta TA y se repartió entre 5 ml de agua y 50 ml de EtOAc. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con 3 ml de salmuera y se concentró. El residuo se purificó en una HPLC de fase inversa (de 10 % a 90 % de (0,1 % de TFA en CH3CN) en (0,1 % de TFA en agua) para dar bis(2,2,2-trifluoroacetato) de 6-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-N-(4-((2-hidroxietil)sulfonamido)-2-(6-azaespiro[2.5]octan-6-il)fenil)picolinamida (248, 25 mg) como un sólido pardo. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,14-8,27 (m, 1H), 7,68 (t,J= 7,93 Hz, 1H), 7,48 (d,J= 7,26 Hz, 1H), 7,11-7,24 (m, 1H), 6,95-7,09 (m, 2H), 4,74 (s, 14H), 4,65 (t a,J= 5,70 Hz, 1H), 3,84 (m, 6H), 3,18 (m, 2H), 2,90 (s, 4H), 1,93-2,12 (m, 4H), 1,42-1,69 (m, 4H), 0,33 (s, 4H). RMN de 19F (376 MHz, METANOL<U) 5 -77,72 (s, 6F), -99,15 (s, 2F).miz(ESI): 550,2 (M+H)+.

Ejemplo 249:

Los siguientes compuestos que tienen las siguientes fórmulas:

Ejemplos biológicos

Los siguientes ensayos se usaron en el ensayo de los compuestos ejemplares de la invención. Los datos para esos ejemplos ensayados de acuerdo con los procedimientos descritos a continuación se presentan en la tabla A a continuación.

Ensayo de enzima KIF18A: Se usa el ensayo de actividad ATPasa estimulada por microtúbulos para medir la actividad de la enzima KIF18A después de tratamiento con el compuesto. Los compuestos se diluyeron en serie en factor 2 en DMSO (Sigma Inc) sobre un intervalo de concentración de 22 puntos. Se expresó proteína KIF18A humana recombinante (con marca 1 -467 His) usando un sistema de baculovirus y se purificó por cromatografía de afinidad por Amgen Inc. Las concentraciones de proteína KIF18A, los microtúbulos (MT) y ATP en la reacción se optimizaron para ensayo de enzima homogénea estandarizado usando el kit de ensayo de cinasa/ATPasa ADP-Glo™ (Promega Inc). El ensayo mide el ADP formado a partir de la reacción de ATPasa. Se prepara tampón de reacción [(Tris 15 mM, pH 7,5 (Teknova Inc), MgCl210 mM (jT Baker Inc), Pluronic F-68 al 0,01 % (Life Technologies Inc), Taxol 1 pM (Cytoskeleton Inc) y 30 pg/ml de microtúbulos de cerdo (Cytoskeleton Inc)]. Se añade compuesto y proteína KIF18A (30 nM) al tampón de reacción preparado y se incuba durante 15 minutos a temperatura ambiente, a continuación se añade ATP (a Km 75 pM) a la mezcla de reacción y se incuba durante 15 minutos adicionales a temperatura ambiente. Se mezclan 5 pl de reactivo ADP-Glo™ y 2,5 pl de la mezcla de reacción y se incuban durante 40 minutos a temperatura ambiente. Se añaden 10 pl de reactivo de detección ADP-Glo™ y se incuban durante 40 minutos a temperatura ambiente. Se lee la luminiscencia usando lector de microplacas EnVision con módulos de ultraluminiscencia (Perkin Elmer Inc). Se realizó ajuste a la curva de concentración-respuesta y determinación de la CI50 usando el programa informático Genedata Screener (Standard 15.0.1, Genedata Inc) con un modelo de ajuste de regresión logística de cuatro parámetros.

La tabla A proporciona datos para compuestos ejemplificados en la presente solicitud y el documento de prioridad de la misma, como compuestos representativos de la presente invención, como sigue: nombre químico (como se denomina por el programa informático ACD o ChemDraw (Professional 15.0)) y datos biológicos (CI50 en pM). Ej. n.° se refiere al n.° de ejemplo.

Tabla A: Actividad enzimática de los compuestos

La invención anterior se ha descrito en cierto detalle a modo de ilustración y ejemplo, por motivos de claridad y comprensión. Los expertos en la materia entienden que pueden ponerse en práctica cambios y modificaciones dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas. Por lo tanto, debe entenderse que la descripción anterior pretende ser ilustrativa y no restrictiva. El alcance de la invención, por lo tanto, no debe determinarse con referencia a la descripción anterior, sino que, en su lugar, debe determinarse con referencia a las siguientes reivindicaciones adjuntas.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula I:

   o cualquier sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: X1 es N o CR6; X2 es N o CR7; X3 es N o CR8; X4 es N o CR9; en donde no más de 3 de X1, X2, X3 y X4 son N; cuando cualquiera de X2, X3 y X4 es N; entonces L es -(C=O)-NR3- o -NR3-(C=O)-; cuando todos de X2, X3 y X4 no son N; entonces L es -(C=O)-NR3-; R1 es un grupo -Z-R12; en donde Z es -alquilo C0-4-, -NR11-, -NR11SO2-alquilo C0-4-, -SO2NR11-alquilo C0-4-, -NR11SO2NR11-, -NR11SO2NR11-C(=O)-O-, -alquilo C0-4-S(=O)(=NH)-, alquil C0-4-NR11-S(=O)(=NH), -alquil C0-4-S-, -alquil C0-4-S(=O)-, -alquil C0-4-SO2-, -O-, -P-, -P(=O), -P(=O)2, -(C=O)-, -(C=O)NR11- o -NR11(C=O); o el grupo -Z-R12 es -N=S(=O)-(R12)2, en donde el par de dos R12 puede combinar, como alternativa, con el átomo de azufre fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado o parcialmente saturado de 3, 4, 5 o 6 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S; R2 es halo o un grupo -Y-R13, en donde Y es -alquilo C0-4-, -N(alquil Cü-1)-alquilo C0-4-, -C(=O)NRaRa(alquilo C1-4)-, -O alquilo C0-4-, -S-, -S=O, -S(=O)2-, -SO2N(alquil C0-1)-alquilo C0-4-, -N(alquil C0-1)-SO2-alquilo C0-4-, -alquil C0-4-S(=O)(=NH)-, -(C=O)-, -alquil C0-4-(C=O)-O-; o el grupo -Y-R13 es -N=S(=O)-(R13)2, en donde el par de dos R13 puede combinar, como alternativa, con el átomo de azufre fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado o parcialmente saturado de 3, 4, 5 o 6 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S; R3 es H, metilo o etilo; R4 es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4; R5 es H, halo, alquilo C1-8 o haloalquilo C1-4; R6 es H, halo, CN, -O-alquilo C0-6-, R6a o R6b; R7 es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4 R8 es H, halo, alquilo C1-8 o haloalquilo C1-4 R9 es H, halo, alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4 Rx es

   cada uno de R10c, R10d, R10e, R10f, R10 g, R10h, R10i y R10j es H, halo, alquilo C1-6 o haloalquilo C1-4; y cada uno del par de R10a y R10b combina con el átomo de carbono fijado a cada uno de ellos para formar un anillo monocíclico saturado de 3, 4 o 5 miembros espiro al anillo Rx; en donde dicho anillo contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomos seleccionados de O y S; o en donde cada uno de R10c, R10d, R10e, R10f, R10 g, R10h, R10i y R10j es H, metilo o etilo; y cada uno del par de R10a y R10b combina con el átomo de carbono fijado a cada uno de ellos para formar un anillo ciclopropilo, ciclobutilo o ciclopentilo espiro al anillo Rx; o en donde Rx es

   R11 es H o alquilo C1-8; R12 es H, halo, R12a o R12b; R13 es R13a o R13b; R6a, R10k, R12a y R13a se selecciona independientemente, en cada caso, del grupo que consiste en un anillo monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1,2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S, que está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, -ORa, -O-haloalquilo C1-4, CN, -C(=O)Rb, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -OC(=O)Rb, -OC(=O)NRaRa, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Rb, -S(=O)2Rb, -S(=O)2NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Rb, -N(Ra)C(=O)ORb,-N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Rb, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, -alquil C1-6-NRaRa, -alquil C1-6-ORa, -alquil C1-6-N(Ra)C(=O)Rb, -alquil C1-6-OC(=O)Rb, -alquil C1-6-C(=O)NRaRa, -alquil C1-6-C(=O)ORa, R14 y oxo; R6b, R1a, R12b y R13b se selecciona independientemente, en cada caso, del grupo que consiste en alquilo C1-6 sustituido con 0, 1, 2, 3, 4 o 5 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -C(=O)ORa, -ORa, -haloalquilo C1-2, -O-haloalquilo C1-4, CN, NH2, NH(CHa) o N(CH3)2; R14 se selecciona del grupo que consiste en un anillo monocíclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1,2 o 3 átomos de N y 0, 1 o 2 átomos seleccionados de O y S, que está sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, alquilo C1-6, haloalquilo C1-4, -ORa, -O-haloalquilo C1-4, CN, -C(=O)Rb, -C(=O)ORa, -C(=O)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -OC(=O)Rb, -OC(=O)NRaRa, -O-alquil C2-6-NRaRa, -O-alquil C2-6-ORa, -SRa, -S(=O)Rb, -S(=O)2Rb, -S(=O)2NRaRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=O)Rb, -N(Ra)C(=O)ORb,-N(Ra)C(=O)NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N(Ra)S(=O)2Rb, -N(Ra)S(=O)2NRaRa, -NRa-alquil C2-6-NRaRa, -NRa-alquil C2-6-ORa, -alquil C1-6-NRaRa, -alquil C1-6-ORa, -alquil C1-6-N(Ra)C(=O)Rb, -alquil C1-6-OC(=O)Rb, -alquil C1-6-C(=O)NRaRa, -alquil C1-6-C(=O)ORa y oxo; Ra es independientemente, en cada caso, H o Rb; y Rb es independientemente, en cada caso, alquilo C1-6, fenilo o bencilo, en donde el alquilo C1-6 está sustituido con 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, -OH, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -OC(=O)alquilo C1-4 o -N(alquil C1-4)alquilo C1-4; y el fenilo o bencilo está sustituido con 0, 1,2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alquilo C1-4, haloalquilo C1-3, -OH, -O-alquilo C1-4, -NH2, -NH-alquilo C1-4, -OC(=O)alquilo C1-4 o -N(alquil C1-4)alquilo C1-4. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde L es -NR3-(C=O); y X1 es CR6, X2 es CR7, X3 es N; y X4 es CR9; que tiene la fórmula (Ia):

   o en donde L es -(C=O)-NR3-; y X1 es CR6, X2 es CR7, X3 es CR8; y X4 es CR9; que tienen la fórmula (Ic):

   o en donde L es -(C=O)-NR3-; y X1 es CR6, X2 es N, X3 es CR8; y X4 es N; que tienen la fórmula (Ie):

   3. El compuesto una cualquiera de las reivindicaciones 1 -2, en donde R3 es H o metilo. 4. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde Z está ausente, es -NH-, -NHSO2-, -O-, -SO2NH-, -S(=O)(=NH)-, -CH2-S(=O)(=NH)-, -SO2-, -CH2-SO2 o CH3(CH)-SO2; y R12 se selecciona de: a) H; (b) F; (c) alquilo C1-6 sustituido con 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, -CF3, -C(=O)CH3, -OH, -OCH3, -NH2, ciclopropilo, ciclopropilmetanol o 3-(trifluorometil)-3H-diazirinilo; o (d) un anillo monocíclico saturado, parcialmente saturado o insaturado de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene 0, 1, 2 o 3 átomos de N y 0 o 1 átomo seleccionado de O y S, que está sustituido con 0, 1,2 o 3 grupos seleccionados de F, Cl, Br, metilo, etilo, -CF3, -alquil C1-6-OH, -OH, -OCH3, -NH2 u oxo; o R12 se selecciona de ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, oxetanilo, azetidinilo, oxazolidinilo, 1,3-dioxolanilo o p i r r o l i d i n i l o . <5 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 4 , e n d o n d e R>2<e s u n g r u p o - Y - R>13<, e n d o n d e Y e s t á a u s e n t e , e s - N H - o - N H S O>2<- ; y> <R>13<e s u n a n i l l o m o n o c í c l i c o d e 3 , 4 , 5 , 6 o 7 m i e m b r o s o a n i l l o b i c í c l i c o d e 8 , 9 , 10 , 11 o 12 m i e m b r o s s a t u r a d o ,>p a r c i a l m e n t e s a t u r a d o o i n s a t u r a d o q u e c o n t i e n e 0 , 1 , 2 o 3 á t o m o s d e N y 0 o 1 á t o m o s e l e c c i o n a d o d e O y S , q u e<e s t á s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , e t i l o , C F>3<, C H>2<O H , - O H , - O C H>3<, - N H>2<, -N H ( C H>3<) y o x o ; o ;> <R>13<e s a l q u i l o C>1-6<s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 , 3 , 4 o 5 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , - O H , - O - h a l o a l q u i l o C>1-4<o C N ; o e n d o n d e R>2<e s u n a n i l l o m o n o c í c l i c o s a t u r a d o d e 5 o 6 m i e m b r o s , e n d o n d e c a d a a n i l l o c o n t i e n e 1 o 2 á t o m o s d e N>y 0 o 1 á t o m o d e O , y e n d o n d e c a d a u n o d e d i c h o s a n i l l o s e s t á s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F ,<C l , B r , a l q u i l o C>1-6<, h a l o a l q u i l o C>1-4<, - O H , - O - h a l o a l q u i l o C>1-4<, C N , R>14<y o x o ; o> <e n d o n d e R>2<e s :> ( a ) F , B r ; <( b ) u n g r u p o - Y - R>13<, e n d o n d e Y e s t á a u s e n t e o e s S O>2<; y R>13<e s m o r f o l i n i l o , o x a z o l i d i n i l o , o x a z o l i l o , p i r r o l i d i n i l o ,>p i p e r i d i n i l o , a z e t i d i n i l o , d i h i d r o p i r a n i l o , d i h i d r o p i r i d i n i l o , p i p e r a z i n i l o , t e t r a h i d r o p i r a n i l o ,

   e n d o n d e c a d a u n o d e d i c h o s a n i l l o s e s t á s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , e t i l o , -<O H , - O C H>3<, C H>2<O H , N H>2<, N H ( C H>a<) , u o x o ; o> <( c ) u n g r u p o - Y - R>13<, e n d o n d e Y e s N H o - S O>2<N H - ; y e n d o n d e R>13<e s a l q u i l o C>1-6<s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 , 3 , 4 o 5 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , C F>3<u - O H ; o> <e n d o n d e R>2<e s u n g r u p o - Y - R>13<, e n d o n d e Y e s t á a u s e n t e ; y R>13<e s m o r f o l i n i l o , p i p e r i d i n i l o , a z e t i d i n i l o , p i r r o l i d i n i l o ,>c i c l o p r o p i l o , c i c l o b u t i l o , c i c l o p e n t i l o , c i c l o h e x i l o , p i p e r a z i n i l o , t e t r a h i d r o f u r a n o í l o ,

   <e n d o n d e c a d a u n o d e d i c h o s a n i l l o s e s t á s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , C F>3<, -O H , - O C H F>2<, C N y o x o ; o ( c ) u n g r u p o - Y - R>13<, e n d o n d e Y e s N H , - O - , - O - ( C H>2<) - , - O - ( C H>2<) - ( C H>2<) - u - O - ( C H>2<) - ( C H>2<) -><( C H>2<) - , y e n d o n d e R>13<e s>

   <o R>13<e s a l q u i l o C>1-6<s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 , 3 , 4 o 5 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , C F>3<, - O H o C N ; o e n d o n d e R>2<e s>

   o o <e n d o n d e R>2<e s m o r f o l i n i l o o p i p e r i d i n i l o s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , m e t i l o , C F>3<, - O H , - O C H F>2<, C N u o x o ; o> <e n d o n d e R>2<e s m o r f o l i n i l o s u s t i t u i d o c o n 1 , 2 o 3 g r u p o s m e t i l o ; o> <e n d o n d e R>2<e s p i p e r i d i n i l o s u s t i t u i d o c o n 1 , 2 o 3 g r u p o s f l u o r o .>

   <9 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 8 , e n d o n d e R>7<s e s e l e c c i o n a d e ( a ) H ; ( b ) a l q u i l o C>1-6<s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , - O H , - O C H>3<o c i c l o p r o p i l o ; o ( c ) u n a n i l l o m o n o c í c l i c o>s a t u r a d o , p a r c i a l m e n t e s a t u r a d o o i n s a t u r a d o d e 3 , 4 , 5 , 6 o 7 m i e m b r o s q u e c o n t i e n e 0 , 1 , 2 o 3 á t o m o s d e N y 0 o 1<á t o m o s e l e c c i o n a d o d e O y S , q u e e s t á s u s t i t u i d o c o n 0 , 1 , 2 o 3 g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e F , C l , B r , a l q u i l o C>1-6<, h a l o a l q u i l o C>1-4<, - a l q u i l C>1-6<- O H , - O H , - O C H>3<, - N H>2<u o x o .> <10 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 9 , e n d o n d e R>6<e s H .> <11 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 1 0 , e n d o n d e R>7<e s H .> <12 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 1 1 , e n d o n d e R>8<e s H .> <13 . E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 1 2 , e n d o n d e R>9<e s H .> 14. E l c o m p u e s t o d e la r e i v i n d i c a c i ó n 1 , s e l e c c i o n a d o d e :

   ; o c u a l q u i e r s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e l o s m i s m o s . 15. E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 14 p a r a s u u s o c o m o m e d i c a m e n t o . 16. U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a q u e c o m p r e n d e e l c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e la s r e i v i n d i c a c i o n e s p r e v i a s o l a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e l m i s m o , y u n d i l u y e n t e o v e h í c u l o f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e .

   18. E l c o m p u e s t o d e u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 - 14 o l a c o m p o s i c i ó n q u e c o m p r e n d e e l c o m p u e s t o d e la r e i v i n d i c a c i ó n 16 p a r a s u u s o e n u n m é t o d o d e r e d u c c i ó n d e l t a m a ñ o d e u n t u m o r s ó l i d o e n u n s u j e t o ; o u n m é t o d o d e t r a t a m i e n t o d e u n t r a s t o r n o d e p r o l i f e r a c i ó n c e l u l a r e n u n s u j e t o .