FR2666657A1 - Methode pour determiner le risque d'evolution d'une infection provoquee par hiv et sa mise en óoeuvre. - Google Patents
Methode pour determiner le risque d'evolution d'une infection provoquee par hiv et sa mise en óoeuvre. Download PDFInfo
- Publication number
- FR2666657A1 FR2666657A1 FR9111118A FR9111118A FR2666657A1 FR 2666657 A1 FR2666657 A1 FR 2666657A1 FR 9111118 A FR9111118 A FR 9111118A FR 9111118 A FR9111118 A FR 9111118A FR 2666657 A1 FR2666657 A1 FR 2666657A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- dhea
- amount
- hiv
- sample
- risk
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims description 3
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 claims abstract description 60
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 9
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 6
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 abstract description 10
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 47
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 47
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 20
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 12
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 11
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 7
- CZWCKYRVOZZJNM-UHFFFAOYSA-N Prasterone sodium sulfate Natural products C1C(OS(O)(=O)=O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 CZWCKYRVOZZJNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone sulfate Chemical compound C1[C@@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N 0.000 description 7
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 7
- 229950009829 prasterone sulfate Drugs 0.000 description 7
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 6
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 5
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 5
- 230000000652 homosexual effect Effects 0.000 description 5
- 206010001513 AIDS related complex Diseases 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 108050001427 Avidin/streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 108010027044 HIV Core Protein p24 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010038997 Retroviral infections Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 210000003103 bodily secretion Anatomy 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000005184 men's health Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- -1 rods Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000012206 semi-quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
- G01N33/56988—HIV or HTLV
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/743—Steroid hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
La méthode de détermination d'un risque d'évolution d'une infection provoquée par HIV chez un sujet, qui est indépendante des autres indices de risque d'une telle évolution, comprend la détermination dans un échantillon d'un fluide ou d'une sécrétion corporel prélevé chez ledit sujet d'un taux de DHEA qui est à l'extrémité inférieure de, ou plus petit que la plus faible valeur de la gamme de référence de 180-1250 ng/dl. La méthode peut être utilisée pour déterminer les taux de DHEA chez un sujet, indiquant une prédisposition à, ou confirmant une possibilité de l'évolution d'une infection par HIV, et pouvant être évitée par administration de DHEA ou d'un sel ou d'un conjugué de celle-ci.
Description
METHODE DE DEPISTAGE ET SA MISE EN OEUVRE
La présente invention a pour objet une méthode pour déterminer le risque d'évolution de l'infection provoquée par le Virus d'Immunodéficience Humaine (HIV) chez un sujet, la méthode
étant basée sur les taux d'hormone dans le sérum.
UK-A 2 204 237 décrit l'utilisation de certains 17- cétostéroïdes, comprenant la déhydroépiandrostérone (DHEA), dans la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales, y compris l'infection par HIV, le Syndrome d'Immuno Déficience Acquise (SIDA) et le complexe lié au SIDA (ARC) En particulier, UK-A 2 204 237 décrit l'inhibition de la production d'antigène
HIV p 24 dans les macrophages infectés par HIV.
Bricaire F et al (La Presse Médicale, Sept 1988, 17, n 30) ont déterminé le profil hormonal (hormones sexuelles et cortisol) chez douze personnes atteintes du SIDA et chez vingt huit personnes ayant le ARC Les quarante personnes étaient des hommes homosexuels dont l'âge moyen était de trente sept ans Les taux globaux d'hormones sexuelles, comprenant le sulfate de déhydroépiandrostérone (DHEA-S), se sont révélés être notablement réduits chez les patients ayant le SIDA et le ARC, alors
que les taux de cortisol étaient inchangés.
Jacobson M A et al (Abstracts of the 5th International Conference on AIDS, Montreal, Juin 1989) ont décrit une inhibition à cinquante pourcents de l'expression du macrophage HI Vp 24 à des concentrations de DHEA de 3-30 pg/ml Ils ont également observé que des hommes homosexuels séronégatifs à risque vis-à-vis du HIV ont un taux de DHEA-S dans le sérum nettement supérieur à celui des hommes du même âge HIV- positifs ou à celui des donneurs de sang HIV-négatifs en bonne santé Ils en ont conclu que la DHEA/DHEA-S peut avoir un effet de protection dans
les infections par HIV.
Wisniewski T et al (Abstracts of the 7th International Conference on AIDS, Florence, Juin 1991) ont étudié la relation entre les taux de DHEA et le cortisol, les taux absolus de T 4 et l'état clinique de la maladie d'individus HIV-positifs Quatre vingt dix huit adultes ayant une infection par HIV avaient des taux déterminés de cortisol et de DHEA dans le plasma, soixante sept 1 O parmi eux ayant des taux absolus T 4 simultanés estimés; l'état clinique était déterminé par un examen historique et physique Les auteurs ont trouvé une relation importante entre des taux de DHEA et les taux absolus de T 4, mais pas entre les taux absolus de T 4 et de cortisol ou les rapports cortisol/DHEA Ils en ont conclu qu'une
relation positive existe entre l'état immunitaire et les taux de DHEA.
Mulder J H et al (Abstracts of the 7th International Conference on AIDS, Florence, Juin 1991) ont suivi un groupe d'hommes homosexuels, initialement asymptomatiques, infectés par HIV-1 Les taux de DHEA dans le sérum ont été déterminés chez quarante et un sujets qui ont évolué vers le SIDA pendant une période de cinq années, les mesures initiales étant réalisées sur un échantillon de sérum de 1985 et la mesure finale, sur un échantillon de sérum prélevé quatre mois avant le diagnostic du SIDA Quarante et un sujets infectés par HIV, du même âge, qui sont restés asymptomatiques pendant la période du suivi, ont servi comme témoins Les comptes CD 4 + et l'antigénaemie de HIV p 24 ont également été déterminés Les sujets qui ont évolué vers le SIDA ont montré une diminution notable des taux de DHEA, alors que les témoins ne présentaient pas ce phénomène Les taux de DHEA, les comptes de CD 4 + et l'état d'antigène de HIV p 24 se sont révélés des symptômes de prédiction indépendants de l'évolution de la maladie Les auteurs en ont conclu que chez les sujets ayant une infection par HIV-I, asymptomatiques, une diminution des taux
de DHEA est observée avant le développement du SIDA.
Jacobson M A et al (Journal of Infectious Diseases, sous presse) ont décrit une étude sur les taux de DHEA et de DHEA-S dans le sérum et l'évolution subséquente vers le SIDA chez des hommes homosexuels ayant une infection par HIV, dans le San Francisco Men's Health Study, suivis de façon prospective depuis 1984 Parmi cent huit hommes séropositifs vis-à-vis du HIV au début de l'étude, et ayant un compte de lymphocytes CD 4 dans la gamme de 200-500 cellules/gl, des taux de DHEA inférieurs à la limite inférieure de la normale (< 180 ng/dl) permettent de prévoir l'évolution subséquente vers le SIDA, après contrôle des hématocrites, de l'âge et des nombres absolus de cellules CD 4 Les auteurs ont conclu que la DHEA peut présenter un effet de
1 i O protection dans les infections par HIV.
La DHEA et son sulfate DHEA-S interconvertible ont été décrits comme inhibant l'expression virale et ont été associés avec un risque diminué de cancer (Schwartz A G et al, Toxicologic Pathology, 1986, 14, N O 3) Des taux de DHEA-S accrus ont été associés à une apparition réduite du cancer du sein (Schwartz A G.
et al, Nutrition and Cancer, 1981, 3, N O 1).
Selon la présente invention, il est fourni une méthode pour déterminer le risque d'évolution d'une infection par HIV chez un sujet, qui est indépendante d'autres indices du risque d'une telle évolution, ladite méthode comprenant la détermination dans un échantillon d'un fluide corporel ou d'une sécrétion corporelle dudit sujet du taux de DHEA, qui est à l'extrémité inférieure, ou inférieure à la valeur la plus faible, d'une gamme de référence de
-1250 ng/dl, comme défini ci-après.
La gamme de référence utilisée ci-après pour la DHEA est la gamme de référence du Nichol's Institute, San Francisco, U S A. Il a été déterminé que de faibles taux de DHEA, c'est-à-dire < 180 ng/dl chez des sujets séropositifs pour le HIV, semblent être associés avec une évolution de la maladie indépendamment des facteurs tels que l'âge, le comptage de CD 4 et les hématocrites (Jacobson M A et al (Journal of Infectious Diseases, sous presse)
est inclus ici à titre de référence).
De plus, de préférence, l'échantillon de fluide ou de sécrétion corporel est prélevé chez un sujet ayant un nombre de lymphocytes
CD 4 de 200-500 cellules/il.
De plus, de préférence, l'échantillon utilisé pour la
détermination de la DHEA selon l'invention est un fluide corporel.
Le fluide corporel est de préférence le sang ou une fraction du sang.
La fraction du sang est de préférence le plasma ou le sérum.
La quantité de DHEA peut être mesurée de différentes façons secundem artem Ainsi, la DHEA peut être mesurée par chromatographie en phase gazeuse liquide (GLC). Toutefois, les laboratoires cliniques ou les praticiens de chirurgie ne sont généralement pas équipés des appareils nécessaires pour réaliser un test GLC Ainsi, de préférence, la détermination de DHEA selon la présente invention est réalisée par
un dosage immunologique.
En conséquence, la DHEA peut être déterminée par un dosage radioimmunologique ou un dosage enzymoimmunologique Comme pour la GLC, les laboratoires cliniques peuvent ne pas être équipés et il est peu probable que les praticiens chirurgiens aient les équipements et les moyens pour réaliser des dosages radioimmunologiques. Ainsi, le dosage immunologique pour la détermination de la DHEA selon l'invention est réalisé de préférence par un dosage
enzymoimmunolo gique.
Ainsi, selon un mode de réalisation de la présente invention, il est fourni une méthode de dosage immunologique pour la détermination du composant antigène DHEA de la réaction antigène DHEA-anticorps qui comprend: a) l'addition d'un échantillon d'un fluide ou sécrétion corporel, contenant de la DHEA, à une quantité d'anti-DHEA sous une forme insolubilisée; b) le déroulement de la réaction immunochimique; et c) l'estimation de la quantité de DHEA liée audit anti-DHEA insolubilisé. La quantité de DHEA liée peut être déterminée par Western
Blotting d'une manière connue en soi.
Toutefois, la quantité de DHEA liée peut être également
déterminée par voie enzymatique d'une manière connue en soi.
Ainsi, une méthode de dosage immunologique selon l'invention peut comprendre: a) l'addition d'un échantillon d'un fluide ou sécrétion corporel contenant de la DHEA à une quantité d'anti-DHEA sous une forme insolubilisée; b) le déroulement de la réaction immunochimique, tout en ajoutant simultanément ou subséquemment une quantité 1 i O prédéterminée d'anti-DHEA marqué; et c) l'estimation de la quantité de DHEA par détermination de la quantité d'anti-DHEA marqué libre ou lié, d'une manière
connue en soi.
L'anti-DHEA lié peut être mis en contact avec de l'immunoglobuline antimammifère avant la détermination enzymatique. L'anticorps insolubilisé peut être un anticorps polyclonal ou
un anticorps monoclonal.
Lorsqu'on utilise l'anticorps monoclonal, ce peut être de préférence un anticorps monoclonal humain, de souris ou de rat, préparé par des méthodes classiques comprenant les méthodes existant généralement pour la production d'anticorps monoclonaux à l'échelle industrielle, d'anticorps ou de fragments d'anticorps monoclonaux préparés par génie génétique ou d'anticorps produits
par immunisation in vitro de cellules appropriées.
De préférence, l'anticorps monoclonal est de la classe Ig G. Les méthodes de dosage immunologique selon la présente invention peuvent être réalisées en utilisant un format connu quelconque, par exemple des billes, des tiges, des membranes, des particules, des plaques, des batonnets, des bandes, etc Par exemple, l'anticorps insolubilisé ou en phase solide tel qu'utilisé selon la présente invention est lié de préférence à une bille, une tige, une membrane, une particule, une plaque, un batonnet, une bande, un tube, une alvéole, ou autres, en matière plastique ou en verre, d'une manière connue en soi Les billes en latex, en nylon ou en un autre matériau approprié peuvent être utilisées selon des méthodes
connues en soi.
En particulier, la forme insolubilisé de l'anticorps comprend ledit anticorps adsorbé à la surface adaptée pour l'adsorption de protéines Ladite surface peut être une bille, un liposome, une membrane, une particule, une plaque, un batonnet, un tube, une
alvéole, ou autres, et en un matériau tel que spécifié ci-dessus.
Dans les conditions de laboratoire appropriées, la surface comprend une plaque ou une bande de microtitrage en matière I O plastique, adaptée pour l'adsorption de protéines, dans laquelle la réaction immunochimique et l'estimation de la DHEA peuvent avoir lieu Les plaques de microtitrage sont de préférence des plaques de microtitrage en polystyrène comportant des alvéoles plates, commercialisées par Dynatech sous le nom commercial de MICROELISA Des exemples de bandes sont des bandes commercialisées par Dynatech sous le nom commercial de
REMOVAWELL.
La surface concernée peut être revêtue directement avec une dilution optimale de l'anticorps polyclonal préparé par séparation de la fraction d'immunoglobuline concernée de l'antisérum ou selon
une variante, de l'anticorps monoclonal.
L'estimation de la DHEA liée dans l'échantillon peut être réalisée par un dosage enzymatique, fluorométrique, luminométrique ou radiométrique, en utilisant des enzymes, des fluorochromes, des échantillons émetteurs de lumière ou des marqueurs radioactifs, respectivement dans les dosages qualitatifs et semiquantitatifs L'estimation peut être réalisée visuellement, par exemple lorsque le dosage implique l'utilisation de billes colorées ou autres, d'une manière connue en soi, comme la méthode
décrite dans EP-A O 154 749.
Les agents marqués destinés à l'utilisation dans les dosages selon l'invention sont préparés de manière classique ou sont achetés chez les fournisseurs appropriés Ces agents marqués sont généralement sous la forme conjuguée tels que les anticorps marqués par enzyme, destinés à l'utilisation dans les dosages de liaison par compétition L'agent marqué peut être un anticorps lié par covalence à un marqueur radioactif utilisable dans un dosage radiométrique, lorsque les dosages sont réalisés dans les conditions de laboratoire fournissant l'équipement et le savoir-faire nécessaire. Dans des conditions de laboratoire, l'estimation de la DHEA liée peut être réalisée par un dosage enzymoimmunologique, par exemple en utilisant un anticorps approprié marqué à la peroxydase ou un autre conjugué de peroxydase approprié Une peroxydase appropriée est la peroxydase de raifort Un autre conjugué de peroxydase approprié est un complexe de peroxydase
avidine-biotine, qui peut être utilisé avec un conjugué anticorps-
biotine pour renforcer le dosage enzymoimmunologique d'une manière classique Dans un dosage enzymoimmunologique de ce type, l'antigène insolubilisé sur l'anticorps en phase solide se lie au complexe anticorps-biotine qui à son tour se lie au complexe de peroxydase avidine/streptavidine-biotine, ce qui permet de
mesurer l'activité peroxydase.
Les méthodes décrites ci-dessus peuvent être utilisées pour déterminer les taux de DHEA chez un sujet, indiquant une prédisposition à, ou confirmant une probabilité d'évolution de l'infection par HIV et pouvant être évitée par administration de
DHEA ou d'un sel ou d'un conjugué de celle-ci.
L'invention fournit également différents kits ou boîtes de test contenant les composants/ingrédients nécessaires pour réaliser les méthodes de diagnostic selon l'invention Un tel kit ou boîte de test peut contenir des tubes revêtus d'anticorps contenant tous les composants nécessaires pour la mise en oeuvre des méthodes de diagnostic selon l'invention lorsqu'on y ajoute un échantillon d'un
fluide corporel.
Il est également possible de fournir une bande contenant tous les composants/ingrédients nécessaires pour réaliser un dosage rapide, en une étape, selon la présente invention, en déposant
dessus un fluide corporel d'une manière connue en soi.
La base théorique de l'invention est l'étude suivante, décrite par Jacobson et al (Journal of Infectious Diseases, In Press)
mentionnée plus haut.
Les sujets participant à une étude de santé de San Francisco (San Francisco Health Study) ayant débuté en 1984, ont été évalués à des intervalles de six mois, appelés des cycles, par prélèvement d'échantillons de sérum qui ont été congelés à -70 'C Les sérums prélevés chez 108 individus de sexe masculin, homosexuels, HIV- séropositifs, participant à cette étude, ont été testés pour déterminer l'association entre les taux de DHEA et l'évolution du SIDA Au cinquième cycle d'étude, lorsque chacun des sujets avait un compte de CD 4 dans la gamme de 200-500 cellules/g 11, les taux de DHEA ont été déterminés par dosage radioimmunologique Les taux de DHEA ont été ainsi mesurés à chaque cycle de suivi et les sujets ont été divisés en deux groupes selon que leurs taux de DHEA dans le plasma étaient de (i) < 180 ng/dl ou (ii) 2 180 ng/dl Les deux groupes ont été ensuite subdivisés selon que les sujets ont complètement développé le SIDA ou non Pendant une période intermédiaire de suivi de 37 mois, 16 individus sur 27, ayant des 1 5 taux de DHEA inférieurs à la normale (< 180 ng/dl) ont évolué jusqu'au stade du SIDA, par rapport à 22 individus sur 81 ayant
des taux de DHEA normaux.
L'étude de suivi a démontré qu'il existe une relation entre les faibles taux de DHEA chez des sujets impliqués dans l'étude et l'évolution vers un SIDA complètement développé, indépendamment de l'âge, du nombre de CD 4 et des hématocrites
du sujet, comme on le démontre ci-après.
Lors de l'évaluation des données, on a ajusté une série de modèles de régression de risque proportionnel Cox pour estimer le risque relatif de développement du SIDA associé au taux de DHEA inférieur à la normale, aussi bien seul qu'ajusté au taux des autres
facteurs covariables.
Les risques relatifs de développement du SIDA associés aux taux de DIHEA inférieurs à la normale, seuls et ajustés à l'influence 3 O d'autres facteurs covariables, mesurés pendant le cinquième cycle,
sont rassemblés dans le tableau 1.
TABLEAU 1
RISQUES RELATIFS DE DEVELOPPEMENT DU SIDA
Agent de prévision Risque valeur-p relatif DHEA < 180 (seule) 2,38 < 0,01 DHEA < 180 (ajustée) 2,34 0,02 Age/10 2,18 < 0,01 Hématocrites < 40 4,57 < 0,01 Cellules de CD 4/10 0,99 0,71 La présente invention s'appuie donc sur les analyses ci-dessus qui confirment une association notable entre les taux de DHEA < 180 ng/dl et un risque accru d'évolution vers le SIDA Cette association s'est révélée persister même après l'ajustement au nombre d'hématocrites et de lymphocytes CD 4, qui sont connus comme étant des agents de prévision indépendants pour l'évolution
des maladies provoquées par le HIV.
Claims (9)
1 Méthode de détermination du risque d'évolution d'une infection provoquée par le HIV chez un sujet, indépendante des autres indices du risque d'une telle évolution, ladite méthode étant caractérisée en ce qu'elle comprend la détermination dans un échantillon d'un fluide corporel ou d'une sécrétion corporelle prélevé chez ledit sujet, du taux de DHEA qui est à l'extrémité inférieure, ou plus faible que la valeur inférieure, d'une gamme de
référence de 180-1250 ng/dl.
2 Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'échantillon de fluide ou de sécrétion corporel est prélevé chez un sujet ayant un compte de lymphocytes CD 4 de
-500 cellules/4 l.
3 Méthode selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en
ce que le taux de DHEA est < 180 ng/dl.
4 Méthode selon l'une quelconque des revendications 1
à 3, caractérisée en ce que le fluide corporel est le plasma ou le sérum.
5 Méthode selon l'une quelconque des revendications
précédentes, caractérisée en ce que la DHEA est déterminée par
chromatographie liquide gazeuse.
6 Méthode selon l'une quelconque des revendications 1
à 4, caractérisée en ce que la détermination de la DHEA est réalisée
par dosage immunologique.
7 Méthode de dosage immunologique pour la
détermination de l'antigène DIEA de la réaction antigène DHEA-
anticorps, qui comprend: 1 1 a) l'addition d'un échantillon d'un fluide ou d'une sécrétion corporel contenant de la DHEA à une quantité d'anti-DHEA sous une forme insolubilisée; b) le déroulement de la réaction immunochimique; et c) I'estimation de la quantité de DHEA liée audit anti-DHEA insolubilisé.
8 Méthode selon la revendication 7, qui comprend: a) l'addition d'un échantillon d'un fluide ou d'une sécrétion corporel contenant de la DHEA à une quantité d'anti-DHEA sous une forme insolubilisée b) la réalisation de la réaction immunochimique, tout en ajoutant simultanément ou subséquemment une quantité prédéterminée d'anti-DHEA marqué; et c) l'estimation de la quantité de DHEA par détermination de la quantité d'anti-DHEA marqué libre ou lié, d'une manière
connue en sol.
9 Kit de test contenant un ou plusieurs composant(s), destiné à la mise en oeuvre de la méthode selon l'une quelconque
des revendications 1 à 8.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IE326690A IE63418B1 (en) | 1990-09-10 | 1990-09-10 | Progression risk of HIV by assay of dehydroepiandrosterone in body fluid |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR2666657A1 true FR2666657A1 (fr) | 1992-03-13 |
| FR2666657B1 FR2666657B1 (fr) | 1997-02-21 |
Family
ID=11038235
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR9111118A Granted FR2666657A1 (fr) | 1990-09-10 | 1991-09-09 | Methode pour determiner le risque d'evolution d'une infection provoquee par hiv et sa mise en óoeuvre. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04351964A (fr) |
| DE (1) | DE4129932A1 (fr) |
| FR (1) | FR2666657A1 (fr) |
| GB (1) | GB2249833B (fr) |
| IE (1) | IE63418B1 (fr) |
| IT (1) | IT1255009B (fr) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4230684A (en) * | 1978-03-16 | 1980-10-28 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for determining steroids in human body liquids |
| DE3812595A1 (de) * | 1987-04-16 | 1988-10-27 | Colthurst Ltd | Arzneimittel zur prophylaxe und therapie von retrovirus-infektionen |
| WO1990008959A1 (fr) * | 1989-02-01 | 1990-08-09 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | ANALYSES DE p17 POUR LA DETECTION D'UNE INFECTION PAR LE VIRUS D'IMMUNO-DEFICIENCE HUMAINE EN VUE DE CONTROLER LE DEVELOPPEMENT DU SIDA |
| EP0383313A2 (fr) * | 1989-02-15 | 1990-08-22 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Réactif d'essai immunologique et kit le contenant |
-
1990
- 1990-09-10 IE IE326690A patent/IE63418B1/en not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-09-09 IT ITMI912378A patent/IT1255009B/it active IP Right Grant
- 1991-09-09 JP JP3307281A patent/JPH04351964A/ja active Pending
- 1991-09-09 GB GB9119256A patent/GB2249833B/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-09 DE DE4129932A patent/DE4129932A1/de not_active Withdrawn
- 1991-09-09 FR FR9111118A patent/FR2666657A1/fr active Granted
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4230684A (en) * | 1978-03-16 | 1980-10-28 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for determining steroids in human body liquids |
| DE3812595A1 (de) * | 1987-04-16 | 1988-10-27 | Colthurst Ltd | Arzneimittel zur prophylaxe und therapie von retrovirus-infektionen |
| WO1990008959A1 (fr) * | 1989-02-01 | 1990-08-09 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | ANALYSES DE p17 POUR LA DETECTION D'UNE INFECTION PAR LE VIRUS D'IMMUNO-DEFICIENCE HUMAINE EN VUE DE CONTROLER LE DEVELOPPEMENT DU SIDA |
| EP0383313A2 (fr) * | 1989-02-15 | 1990-08-22 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Réactif d'essai immunologique et kit le contenant |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| KALIMI ET AL. 'The biologic role of dehydroepiandrosterone (DHEA)' 1990 , DE GRUYTER , BERLIN Merril et al.: 'Reduced plasma dehydroepiandrosterone concentrations in HIV infection and Alzheimer's disease' * |
| LA PRESSE MéDICALE vol. 30, 10 Septembre 1988, PARIS page 1540 BRICAIRE ET AL. 'Taux des hormones sexuelles et du cortisol chez les malades .....' * |
| THE JOURNAL OF CLINICAL ENDOCRINOLOGY & METABOLISM vol. 70, no. 3, Mars 1990, PHILADELPHIA, PA pages 572 - 577 VILLETTE ET AL. 'Circadian variations in plasma levels of hypophyseal, adrenocortical ........' * |
| THE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES vol. 164, no. 5, Novembre 1991, CHICAGO, ILL. pages 864 - 868 JACOBSON ET AL. 'Decreased serum dehydroepiandosterone is associated with an increased progression .......' * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT1255009B (it) | 1995-10-11 |
| FR2666657B1 (fr) | 1997-02-21 |
| ITMI912378A0 (it) | 1991-09-09 |
| GB9119256D0 (en) | 1991-10-23 |
| GB2249833B (en) | 1994-09-07 |
| IE63418B1 (en) | 1995-04-19 |
| JPH04351964A (ja) | 1992-12-07 |
| GB2249833A (en) | 1992-05-20 |
| DE4129932A1 (de) | 1992-03-12 |
| ITMI912378A1 (it) | 1993-03-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Smith et al. | C4d fixing, luminex binding antibodies—a new tool for prediction of graft failure after heart transplantation | |
| Rao et al. | An avidin-biotin microELISA for rapid measurement of total and allergen-specific human IgE | |
| EP0399024A1 (fr) | ANTICORPS MONOCLONAUX ANTI-INTERLEUKINES 1$g(a) ET 1$g(b), LEUR PROCEDE DE PRODUCTION ET APPLICATIONS DESDITS ANTICORPS A LA DETECTION DES INTERLEUKINES 1$g(a) et 1$g(b) ET EN THERAPEUTIQUE | |
| Maddison et al. | The relationship of race, sex, and age to concentrations of serum immunoglobulins expressed in international units in healthy adults in the USA | |
| EP0311492B1 (fr) | Trousse et méthode de dosage immunométrique applicables à des cellules entières | |
| WO1993003381A1 (fr) | Analyse de constituant secretoire libre et procede de controle d'un rejet d'organe | |
| EP1336109A1 (fr) | Trousse et procede de detection de la proteine esm-1 | |
| Beutner et al. | Sensitivity and specificity of IgA-class antiendomysial antibodies for dermatitis herpetiformis and findings relevant to their pathogenic significance | |
| WO1992008983A1 (fr) | Marqueur de l'hiv/vaccin contre le sida | |
| JP2000501931A (ja) | Ｈｉｖ感染を早期に検出する方法 | |
| FI90801C (fi) | Menetelmä anti-HIV:n määrittämiseksi, tarvikkeet sitä varten ja niiden käyttö tässä menetelmässä | |
| JPS63159762A (ja) | 口内微生物の評価方法 | |
| CA2721049C (fr) | Procede de diagnostic d'une hypertension arterielle pulmonaire | |
| DK173838B1 (da) | Fremgangsmåde til påvisning af tilstedeværelsen af et blodpladecelleoverfladeantigen | |
| FR2666657A1 (fr) | Methode pour determiner le risque d'evolution d'une infection provoquee par hiv et sa mise en óoeuvre. | |
| CA2152166C (fr) | Detection de la mucoviscidose ou d'une mutation du gene cftr | |
| EP0801744B1 (fr) | Reactif peptidique permettant de detecter une infection primaire a virus d'epstein-barr par recherche des anticorps correspondants, et procede d'utilisation de ce reactif | |
| JP4274693B2 (ja) | クローン病の検査方法及び検査用キット | |
| CA2148268A1 (fr) | Methode d'immunodosage specifique de la glutathion peroxydase plasmatique humaine | |
| US8901282B2 (en) | Reagents and methods for detecting a polymorphic protein | |
| Knapp et al. | Serum lipoprotein (a) levels in elderly black and white men in the Charleston Heart Study | |
| JP3499875B2 (ja) | 解離性大動脈瘤を検出するための抗体試薬及びその用途 | |
| EP0920628B1 (fr) | NOUVELLE METHODE D'ANALYSE DES RECEPTEURS PLAQUETTAIRES GPIIb/IIIa | |
| Drouet et al. | Quantification and molecular analysis of plasmatic HLA‐BCw molecules with a locus B and Cw HLA specific mAb (B1. 23.2 mAb) | |
| FR2652163A1 (fr) | Procede de detection d'une substance biologique a l'aide de ligands. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TP | Transmission of property |