JP2000500496A - Ｎ，ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミドの製造における新規中間体およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は式（II）：

Description

【発明の詳細な説明】 Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミドの製造における新規中間体およびそ の用途 プロテインキナーゼＣアイソザイムの広在性およびその生理学上の重要な役割 は、高度に選択的なＰＫＣ阻害物質製造の動機を与える。あるアイソザイムの疾 患状態との結び付きを実証する証拠が与えられれば、他のＰＫＣアイソザイムお よび他のプロテインキナーゼと比べて１つまたは２つのプロテインキナーゼＣア イソザイムに対して選択的な阻害化合物が優れた治療薬剤であるとするのは理に かなっている。そのような化合物はその特異性によってより大きな効能およびよ り少ない毒性を示す。 あるクラスのＰＫＣアイソザイムに選択的なＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマ レイミド化合物は１９９５年６月１４日発行のHeathら.,（ＥＰ ０ ６５７ ４５ ８）に開示されている。このＮ，Ｎ’−架橋化合物群において好ましい化合物は 、式Ｉ： （式中、Ｒはアミノ基、アルキルアミノ基またはジアルキルアミノ基である）で 示される化合物を含む。Heathらは以下のように製造されるいくつかのこれらア ミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を例証している。 しかしながら、アミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を 製造するために用いたＯ−メシレート機能が有毒であり、アミノ置換Ｎ，Ｎ’− 架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不純物である ことが見いだされた。Ｏ−メシレート中間体を最終生成物から確実に取り除くた めには高価な精製技術を使用しなければならない。 本発明はアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の合成に おいて鍵となる中間体を提供する。この新規中間体はＯ−メシレート中間体を経 由せずに容易にアミノ置換Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物に変 換される。この中間体はまた劇的に、より反応性が高い。アミノ置換Ｎ，Ｎ’− 架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造の際に、この中間体をできるだけ低 い温度、短い反応時間で用いると、副生成物がより少なくなり収率がより高くな るので、好ましい。これゆえ、この中間体は望ましくない有毒不純物を伴わない 高い収率でＮ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造するのに有用 である。 さらに、特許請求している化合物はアイソザイム選択的ＰＫＣ阻害物質として 有用である。それゆえこの化合物は、糖尿病およびその合併症、虚血、炎症、中 枢神経系障害、心臓血管疾患、皮膚疾患および癌に関連する状態の処置に有用で ある。 本発明は式II：［ここに、Ｒ₁は臭素原子（Ｂｒ）、ヨウ素原子（Ｉ）またはＯ−トシル基であ る］ で示される化合物を与える。 さらに本発明は式IIで示される化合物および製薬的に許容される担体、希釈剤 または賦形剤を含有する医薬製剤に関する。 本発明のもう１つの態様は、式IIの化合物を式Ｉで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造に用いる方法であり、これは式 IIの化合物を非反応性の極性溶媒中でアミン化合物と反応させることを本質とす る。 本明細書に開示し特許請求している本発明の目的のために、以後の用語および 略語を次のように定義する。 用語「Ｃ₁−Ｃ₄アルキル」は１〜４つの炭素原子をもつ環状、直鎖または分岐 鎖状のアルキル基、例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル 基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ− ブチル基などを表す。 用語「アリール」は置換もしくは非置換のベンジル基、フェニル基またはナフ チル基を表す。 用語「アミン化合物」は本明細書に用いている−Ｎ（ＣＦ₃）ＣＨ₃）、−ＮＨ （ＣＦ₃）または−ＮＲ₃Ｒ₄（式中、Ｒ₃およびＲ₄は独立に水素原子、Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはＲ₃およびＲ₄が結合し ている窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６員環を形成す る）を意味する。 上記のように、本発明は式II： （式中、Ｒ１は臭素原子、ヨウ素原子またはＯ−トシル基である） で示される化合物に関する。 式IIの化合物には種々の立体異性体が存在し得ることがわかっている。本発明 の好ましい化合物は式IIａおよびIIｂ： の化合物である。しかしながら、ラセミ体および個々の光学異性体ならびにその 混合物は本発明の一部を構成する。 本発明の化合物は式： で示される化合物から最も容易に製造される。このヒドロキシ置換Ｎ，Ｎ’−架 橋ビスインドリルマレイミド化合物（化合物III）は１９９５年６月１４日発行 のHeathら.，ＥＰ ０ ６５７ ４５８（これは引用によって本明細書に包含され る）に記載の技術によって製造される。 特許請求している化合物は以下のように製造される： （Ｒ₁は前記定義と同意義である）。Ｒ₁は臭素原子またはヨウ素原子であるのが 好ましく、最も好ましいのは臭素原子である。特許請求しているトシレート（ｐ −トルエンスルホニル）化合物は、塩基、例えばピリジンの存在下、ＴＨＦ、エ ーテル、塩化メチレンまたは他の非反応性有機溶媒中でこのアルコール体をｐ− トルエンスルホン酸無水物と反応させることによって製造する。この反応は一般 に窒素の存在下、室温から反応混合物の還流温度で行う。 特許請求しているハロゲン化物はこのアルコール体を臭素源またはヨウ素源と 反応させることによって製造する。臭素源およびヨウ素源はＨＩ、ＨＢｒ、Ｌｉ Ｂｒ、ＣａＢｒ₂、ＰＢｒ₃、Ｒ₅ＰＢｒ₂、Ｎ−ブロモスクシンイミド、ＣＢｒ₄ 、アリール−Ｂｒ、ベンジル−Ｂｒ、ＳＯＢｒ₂（ここに、Ｒ₅はフェニル基、フ ェニルオキシ基、アルキル基またはアリール基である）を含む、当分野において 認められるたくさんの試薬とすることができる。当業者であれば１，１’−カル ボニルジイミダゾールのような種々の活性化試薬を反応に加えることができるの は理解されよう。ヒドロキシ体（III）からハロゲン化物（II）への転換はRicha rd C．Larock，A GUIDE TO FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS，VCH Publishers， p.356-63(1989)(これは引用によって本明細書に包含される)に開示され当分野に おいて認められている技術によって行うことができる。好ましい条件は、ＰＸ₃ 、（フェニル）₃ＰＸ₂または（フェノキシ）₃ＰＸ₂（ここに、Ｘは臭素原子また はヨウ素原子である）のようなハロゲン化リン試薬の存在下に上記臭素源または ヨウ素源を用いる条件である。この反応はＴＨＦ、アセトニトリル、塩化メチレ ン、または当分野において認められている他の非反応性溶媒中で行うのが適切で ある。ＤＭＦおよび他の溶媒もまた、Barluenga J．Synthesis p．426(1985)お よびHodosi G，Carbohydrate Research 230:327-42(1992)に記載のフィルスマイ ヤー型試薬の生成によって有効である。 式IIで示される化合物は以下のように、式IVで示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ’− 架橋ビスインドリルマレイミド化合物に転換される： ［ここに、Ｒ₁は臭素原子、ヨウ素原子、またはＯ−トシル基であり；Ｒ₂は−Ｎ （ＣＦ₃）ＣＨ₃）、−ＮＨ（ＣＦ₃）、または−ＮＲ₃Ｒ₄（式中、Ｒ₃およびＲ₄ は独立して水素原子、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、 あるいはＲ₃およびＲ₄が結合している窒素と一緒になって、飽和もしくは不飽和 の５または６員環を形成する）である］。好ましくは、Ｒ₂はＮ（ＣＨ₃）。 化合物IIを用いて化合物IVを生成させる方法は化合物IIを式：ＨＮ（ＣＦ₃） ＣＨ₃）、ＨＮＨ（ＣＦ₃）、またはＨＮＲ₃Ｒ₄（ここにＲ₃およびＲ₄は独立して 水素原子、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル基、フェニル基、ベンジル基であるか、あるいはこ れらが結合している窒素原子と一緒になって、飽和もしくは不飽和の５または６ 員環を形成する）で示されるアミン化合物と非反応性の極性非プロトン溶媒中で 反応させることを特徴とする。この反応は温度０℃から反応混合物の還流温度ま での範囲でＤＭＦ、ＴＨＦ：水、またはジメチルアセトアミド中にて行うのが好 ましい。この反応は一般に約１〜２０時間で完了する。好ましくは、室温から５ ０℃で反応を行う。化合物IVは標準的な技術を用いて反応混合物から精製できる が、反応混合物から直接結晶化するのが好ましい。 最も驚くべきは、特許請求している中間体をアミノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインド リルマレイミド化合物の製造に用いると、より高い収率が得られ、有毒不純物の 生成を回避できることである。そして意外にも、本発明の中間体は既知のメシレ ート中間体よりも高い反応性を示した。ＨＮ（ＣＨ₃）₂に対する種々の脱離基の 反応性を表１に示した。当分野において推測される相対的な反応性はCAREY AND SUNDBERG，Part A，3rd Edition，page 291(1990)に記載されている。 表１のデータはトシル基、ブロミドおよびヨウダイドが意外にも反応性が高いこ とを示している（特にブロミドおよびヨウダイドは既知のメシレート中間体より も８〜３６倍も高い反応性を示す）。Ｈ₂ＮＣＨ₃、Ｈ₂Ｎ（ベンジル）を用いて もＭｓＯに比べて高い反応性が見られた。反応性の増大により反応がより低温で より短時間に完了するようになる。さらに本発明の中間体を用いることにより生 成物中の不純物がほとんどなくなる。既知のＯ−メシル中間体を用いると、アミ ノ置換Ｎ，Ｎ’−ビスインドリルマレイミド化合物を生成する反応は、マレイミ ドのカルボニル基での反応から生じる副生成物のために不純度のレベルが１５〜 ３０％となる。本発明の中間体を用いると不純度のレベルは５％より低くなり、 これは実質的な進歩である。 前述のように、アミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製 造するために用いられていたＯ−メシレート機能は有毒であり、またアミノ置換 Ｎ，Ｎ’−架橋ビスインドリルマレイミド化合物の製造において望ましくない不 純物であることが分かった。最終生成物からＯ−メシラート中間体を確実に取り 除くためには高価な精製技術を用いなければならない。それゆえ、本発明の中間 体および本発明の中間体を用いるアミノ置換Ｎ，Ｎ’架橋ビスインドリルマレイ ミド化合物の製造方法のさらなる利点は有毒不純物を取り除くための困難な精製 工程が回避されることである。 本発明の中間体を用いて製造される好ましい化合物は以下の通りである：（Ｓ ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒ ドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロ ー ロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３ （２Ｈ）−ジオン、特にそのメシレート塩として；（Ｓ）−１３−［（モノメチ ルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６， ２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］ ［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン； （Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒ ドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロ ーロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１， ３（２Ｈ）−ジオン一塩酸塩；および（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］ −１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１ Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ−［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オ キサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン。 式IVで示される好ましい一置換アミン化合物は本発明の化合物から直接製造で きる。高い収率の直接的な方法でこれらの化合物を製造するのはメシレート中間 体では不可能である。 式IVで示される化合物は遊離塩基として製造され、好ましくは当分野において 認められている技術によって製薬的に許容される塩に変換する。好ましい塩は塩 酸塩およびメシレート塩をなどである。 以下の実施例および製造例は本発明を単に例示するためのものである。本発明 の範囲は単に以下の実施例のみから構成されるものと理解するべきではない。以 下の実施例および製造例では融点、核磁気共鳴スペクトル、質量スペクトル、シ リカゲルの高圧液体クロマトグラフィー、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、テ トラヒドロフラン、および酢酸エチルはそれぞれＭ．Ｐｔ．、ＮＭＲ、ＭＳ、Ｈ ＰＬＣ、ＤＭＦ、ＴＨＦ、およびＥｔＯＡｃと略記する。記号“ＮＭＲ”および “ＭＳ”はそのスペクトルが所期の構造を満足することを示す。 製造例１ ３−（２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメ トキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート トリチルクロライド（１７５．２ｇ、０．６１６モル）を窒素雰囲気下、ＣＨ₂ Ｃｌ₂５００ｍＬに溶解した。トリエチルアミン（７１．９ｇ、１００ｍＬ、０ ．７１０モル）を加えた後、Ｒ，Ｓ−グリシドール（５０．０ｇ、０．６４８モ ル）を加え、反応溶液を４時間緩やかな還流温度（４２℃）にまで加熱した。こ の反応物を室温にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２５０ｍＬ次いで ブライン（塩水）２５０ｍＬで２回抽出した。水相をＣＨ₂Ｃｌ₂１００ｍＬで逆 抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させて、油状物としてト リチル−グリシドールを得、これをエタノールから再結晶し、固形のトリチル− グリシドール１０４．４ｇ（５４％）を得た。 ビニルマグネシウムブロミド（５０ｍＬ、５０ミリモル、２．０当量）の１Ｍ ＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を加えた （０．２４ｇ、１．２６ミリモル、０．０５当量）。得られた混合物を−２０℃ で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ４０ｍＬ中のトリチル−グリシドール（７．９ １ｇ、２５．０ミリモル）の溶液を−２０℃で１５分間かけて滴加する。この反 応混合物を−２０℃で３時間撹拌した後、室温にまで戻し、１５分間撹拌した。 この反応混合物を−３０℃に冷却することによって反応を停止し、塩化アンモニ ウムの飽和水溶液１２５ｍＬをゆっくりと加えた。得られた混合物を酢酸エチル ２００ｍＬで抽出した。次いで有機相を脱イオン水１２５ｍＬ中のエチレンジア ミンテトラ酢酸、二ナトリウム塩、二水和物（ＥＤＴＡ）０．９３ｇ（２．５０ ミリモル、０．１当量）の水溶液で抽出し、すべての金属を取り除いた。水相を 酢酸エチル５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン１００ｍＬで洗浄し 、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、油状物を得、これを３／１ヘキサ ン／酢酸エチル１．２Ｌを用いてシリカ（７６ｇ）に通し、濾過した。濾液を減 圧下で蒸発させ、明黄色油状物の１−（トリフェニルメトキシ）−４−ペンテン −２−オール９．０７ｇ（１００％）を得た。 鉱油中の水素化ナトリウム６０％懸濁液（６．１３ｇ、０．１５３モル、１． ５当量）を乾燥ＴＨＦ１７５ｍＬに懸濁し、これは室温で加えた。得られた混合 物を４５℃で１．５時間懸濁した後、新たに蒸留した臭化アリル１７．７ｍＬ（ ０．２０４ミリモル、２．０当量）をシリンジによって加えた。この反応物を４ ５℃で１時間加熱した。この反応はＴＬＣまたはＨＰＬＣによってモニターでき る。この反応混合物を０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ ｍＬをゆっくりと加え、過剰の塩基を失活（クエンチ）する。得られた混合物を 酢酸エチル８００ｍＬで抽出し、有機相を水５００ｍＬで洗浄する。水相を酢酸 エチル１００ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、 乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物の１，１’，１’’−［ ［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］オキシ］メチリジン］ト リス［ベンゼン］４１．５ｇ（＞１００％）を得た。 １，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペンテニル］ オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（３９．３ｇ、０．１０２モル）を無 水メチルアルコール３９０ｍＬおよびＣＨ₂Ｃｌ₂６０ｍＬの溶液に溶解し、粘性 のある反応溶液に窒素気泡を通しながら、−５０℃から−４０℃に冷却した。次 いで−５０℃から−４０℃で８０分間、反応物の色が淡青色に変化するまでオゾ ン気泡を反応混合物に通した。得られた混合物を窒素雰囲気下で０℃にまであた ためた後、反応温度を１０℃以下に保ちながら、エタノール８５ｍＬ／水８５ｍ Ｌ中のホウ水素化ナトリウム（２３．１５ｇ、０．６１２モル、６当量）溶液を ゆっくりと加え、反応を停止した。この反応物を氷浴中で３０分間撹拌し、次い で室温にまで戻し、一晩撹拌した。あたためる温度は３１℃にまで上がった。こ の反応混合物を塩化アンモニウムの飽和水溶液４００ｍＬで希釈し、酢酸エチル ８００ｍＬで抽出した。有機相を水４００ｍＬで洗浄し、水相を酢酸エチル１５ ０ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ、ブライン２００ｍＬで洗浄し、乾燥（Ｍ ｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、濁った油状物を得た。この油状物を２／１ヘ キサン／酢酸エチルから３回再結晶を繰り返し、３−（２−ヒドロキシエトキシ ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブトノール２８．９ｇを得た（７２％ ）。 ３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブト ノール（１４．０ｇ、３５．７ミリモル）をＣＨ₂Ｃｌ₂１４０ｍＬに溶解し、こ れを窒素雰囲気下で０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（１０．８ｇ、１４． ９ｍＬ、０．１０７モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロ ライド（１１．０ｇ、７．４６ｍＬ、９６．４ミリモル、２．７当量）を＜５℃ で滴加した。得られた反応混合物をさらにＣＨ₂Ｃｌ₂（３００ｍＬ）で希釈し、 水２００ｍＬおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。水相 をＣＨ₂Ｃｌ₂５０ｍＬで逆抽出し、有機相をまとめ、ブリン１００ｍＬで洗浄し 、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、白色固形の３−（２−［（メチル スルホニル）オキシ］エトキシ］−４−トリフェニルメトキシ）−１−ブタノー ルメタンスルホネート１８．４ｇ（９４％）を得た。 製造例２ （Ｓ）−トリチルグリシドール トリチルクロライド（２８６６ｇ、１０．３モル）を窒素雰囲気下でＣＨ₂Ｃ ｌ₂７Ｌに溶解した。トリエチルアミン（１１８９ｇ、１６３８ｍＬ、１１．８ モル）を加えた後、ＣＨ₂Ｃｌ₂１Ｌを洗浄液として用いて（Ｒ）−（＋）−グリ シドール（７９５．０ｇ、１０．６モル）を加えた。反応溶液を緩やかな還流温 度（４２℃）にまで３〜４時間加熱した。反応物を室温にまで冷却した後、ブリ ン３Ｌを加えた。有機相を乾燥（６００ｇ Ｎａ₂ＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ 、油状物標題化合物を得、これをエタノールから再結晶し、固形の標題化合物２ ３５４ｇ（７０％）を得た。 製造例３ （Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］−４−（トリ フェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート ビニルマグネシウムブロミド（５．７６Ｌ、５．７６モル、１．９６当量）の １Ｍ ＴＨＦ溶液を窒素雰囲気下で−２０℃にまで冷却し、触媒量のヨウ化銅を 加えた（２８．２ｇ、０．１４８モル、０．０５当量）。得られた混合物を−２ ０℃で５分間撹拌した後、乾燥ＴＨＦ３．２Ｌ中の（Ｓ）−トリチル−グリシド ール（９２９．０ｇ、２．９４モル）の溶液を−２０℃で１．５時間かけて滴加 した。反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を−３０℃にまで冷 却することによって反応を停止し、塩化アンモニウムの飽和水溶液５Ｌをゆっく りと加えた。次いで有機相をエチレンジアミン四酢酸、二ナトリウム塩二水和物 （ＥＤＴＡ）の１０重量％／容量溶液１Ｌで２回抽出し、すべての金属を取り除 いた。有機相をブライン２Ｌで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発さ せ、油状物の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノー ル１０６１ｇ（９６％）を得た。 鉱油中の水素化ナトリウム（２６８．９ｇ、６．７２モル、１．５当量）の６ ０％懸濁液を窒素雰囲気下で乾燥ＴＨＦ２．８Ｌに懸濁し、乾燥ＴＨＦ５．６Ｌ 中の（Ｓ）−１−０−トリフェニルメチル−４−ヒドロキシペンタノール（１５ ４３ｇ、４．４８モル）溶液を室温で加えた。得られた混合物を室温で１．５時 間撹拌した後、新たに蒸留した臭化アリル７７０ｍＬ（８．８９モル、２．０当 量）を２０分間かけて加えた。反応物を１〜２時間４５℃にまで加熱した。この 反応混合物を１５〜２０℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌを ゆっくりと加え、過剰の塩基をクエンチした。得られた混合物を酢酸エチル１Ｌ および水１Ｌで希釈し、有機相を単離した。水相を酢酸エチル５００ｍＬで逆抽 出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、黄色油状物 の（Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペン テニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］１８６７ｇ（９８％）を得た 。 （Ｓ）−１，１’，１’’−［［［２−（２−プロペニルオキシ）−４−ペン テニル］オキシ］メチリジン］トリス［ベンゼン］（１２８１ｇ、３．３３モル ）を無水メチルアルコール４ＬおよびＣＨ₂Ｃｌ₂３．６Ｌの溶液に溶解し、粘性 のある反応溶液に窒素気泡を通しながら−５０℃から−４０℃にまで冷却した。 スーダンIII指示薬をこの反応物に加え、−５０℃〜−３５℃で１３時間、反応 物が桃色から明緑／黄色に変化するまでオゾン気泡を反応混合物に通した。得ら れた反応混合物を窒素雰囲気下で０℃にまで戻した後、これをエタノール２．５ Ｌ／水２．５Ｌ中のホウ水素化ナトリウム（７５４ｇ、１９．９モル、６当量） の溶 液に反応温度を３０℃以下に保ちながら４０分間かけてゆっくりと加えた。次い でこの反応物を室温で一晩撹拌した。反応はＨＰＬＣによってモニターできる。 この反応混合物を１０〜１５℃にまで冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液４ Ｌへ＜２０℃でゆっくりと加えた。次いで反応停止した混合物を濾過し、固形物 をＣＨ₂Ｃｌ₂３Ｌで洗浄した。有機相を単離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液 ３Ｌで洗浄し、水相をＣＨ₂Ｃｌ₂１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（Ｍ ｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、油状物の（Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエト キシ）−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノール１３６１ｇ（＞１００ ％）を得た。 （Ｓ）−３−（２−ヒドロキシエトキシ）−４−（トリフェニルメトキシ）− １−ブタノール（５００ｇ、１．２７モル）をＣＨ₂Ｃｌ₂４．８Ｌに溶解し、こ れを窒素雰囲気下、０℃にまで冷却し、トリエチルアミン（３８６．４ｇ、５３ ２ｍＬ、３．８１モル、３．０当量）を加えた。次いでメタンスルホニルクロラ イド（３９６．３ｇ、２６８ｍＬ、３．４６モル、２．７当量）を＜５℃で３０ 分間かけて滴加した。得られた反応混合物を０〜５℃で１〜２時間撹拌し、反応 をＨＰＬＣによってモニターした。この反応混合物をさらにＣＨ₂Ｃｌ₂２Ｌで希 釈し、水２Ｌおよび塩化アンモニウムの飽和水溶液２Ｌで２回洗浄した。水相を ＣＨ₂Ｃｌ₂１Ｌで逆抽出し、有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で 蒸発させ、粗製の固形物を得、これを１／１ヘプタン／酢酸エチルから再結晶３ 回し、固形の（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル）オキシ］エトキシ］− ４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタンスルホネート６１５ｇ（ ８８％）を得た。ＮＭＲ。ＭＳ。 製造例４ （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル ）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロー ロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（ ２Ｈ）−ジオン ２，３−ビス−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−メチルマレイミド（１ １４．７ｇ、０．３３６モル）および（Ｓ）−３−［２−［（メチルスルホニル ）オキシ］エトキシ］−４−（トリフェニルメトキシ）−１−ブタノールメタン スルホネート（２２０．０ｇ、０．４０１モル、１．２当量）をＤＭＦ４．３Ｌ に溶解した。次いでこの試薬溶液をＤＭＦ７Ｌ中の炭酸セシウム（４３７．８ｇ 、１．３４モル、４．０当量）の５０℃スラリーに７０時間かけてゆっくりと加 えた（約１ｍＬ／分）。７０〜７２時間後、この反応物を冷却し、濾過し、ＤＭ Ｆを減圧下で取り除き、残留物を得、これをＣＨ₂Ｃｌ₂４．６ｍＬに溶解した。 有機相を１Ｎ ＨＣｌ水溶液１．１５Ｌ次いでブライン４．６Ｌで抽出した。水 相をまとめて、ＣＨ₂Ｃｌ₂１．１Ｌで逆抽出した。有機相をまとめ、乾燥（Ｎａ₂ ＳＯ₄）し、濾過した。溶媒のほとんどを減圧下で取り除き、得られた溶液をさ らにＣＨ₂Ｃｌ₂４〜５ガロンを用い、シリカゲル２Ｋｇに通して濾過し、ベース ライン（基線）物質を取り除いた。溶媒を減圧下で取り除き、得られた紫色固形 物をアセトニトリル７容量（粗製の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒ ドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６ ，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］ ［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオンの 重さを基準として）中にトリチュレートし、乾燥後、（Ｓ）−１０，１１，１４ ，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロー ロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（ ２Ｈ）−ジオン１５０．２ｇ（５７％）を得た（ＨＰＬＣによると標品に対して ８９％純度）。 （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−２−メチル−１３−［（ト リフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ −ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシ クロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３２．７ｇ、４６．９ミリモル） をエタノール１．６Ｌおよび１０Ｎ ＫＯＨ水溶液１．６Ｌ中に懸濁した。得ら れた混合物を緩やかな還流温度（７８℃）にまで１９時間加熱した。還流温度に 達すると固形物のほとんどが溶解した。反応溶液を１０〜１５℃にまで冷却し、 １０Ｎ ＨＣｌ水溶液（１.２Ｌ）を＜１５℃でゆっくりと加え、酸度をｐＨ＝１ に調節した。酸性にすると赤色のスラリーが生成した。この反応混合物をＣＨ₂ Ｃｌ₂５００ｍＬで希釈し、２０分間撹拌し、濾過し、ほとんどの塩を取り出し た。この塩をさらにＣＨ₂Ｃｌ₂（１．５Ｌ）で洗浄し、濾液を水１Ｌで２回抽出 した。水相をまとめ、ＣＨ₂Ｃｌ₂１Ｌで逆抽出し、有機相を乾燥（ＭｇＳＯ₄） した。溶媒を減圧下で取り除き、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５− テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９：１６，２ １−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３ ］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３−ジオン３６．０ｇ（＞１００％） を得た（ＨＰＬＣ領域で８０％純度）。 （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメ トキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ ］フロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１， ３−ジオン（３６．０ｇ、推定４６．９ミリモル）を窒素雰囲気下で乾燥ＤＭＦ ３２０ｍＬに溶解し、前もって混合しておいた１，１，１，３，３，３−ヘキサ メチルジシラザン（９９ｍＬ、７５．７ｇ、０．４６９モル、１０当量）および メタノール（９．５ｍＬ、７．５１ｇ、０．２３５モル、５当量）の溶液で処理 した。得られた溶液を４５℃で７時間加熱した。この反応はＨＰＬＣによってモ ニターできる。ほとんどのＤＭＦを減圧下で取り除き、得られた残留物を酢酸エ チル２００ｍＬで抽出し、水２００ｍＬで洗浄し、５％ＬｉＣｌ水溶液１００ｍ Ｌで２回洗浄した。水相を酢酸エチル１００ｍＬで逆抽出した。有機相をまとめ 、塩化アンモニウムの飽和水溶液２００ｍＬで洗浄した。有機相をまとめ、乾燥 （ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で蒸発させ、粗製の紫色固形（Ｓ）−１０，１１，１ ４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメトキシ）メチル］−４，９ ：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４ −Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジ オン３ ５．９ｇ（＞１００％）を得た。 （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［（トリフェニルメ トキシ）メチル］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ；１３Ｈ−ジベンゾ［ Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデ シン−１，３（２Ｈ）−ジオン（３４．０、推定４６．８ミリモル）をＣＨ₂Ｃ ｌ₂３５０ｍＬに溶解し、窒素雰囲気下で−２５℃にまで冷却する。＜０℃で約 １〜２分間無水塩酸ガスを反応溶液へ導入した。得られたスラリーを室温にまで 戻し、１時間撹拌した。この反応はＨＰＬＣによってモニターできる。このスラ リーを濾過し、固形物をＣＨ₂Ｃｌ₂２００ｍＬで洗浄した。この固形物を減圧オ ーブン中、５０℃で乾燥し、紫色固形の（Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テト ラヒドロ−１３−（ヒドロキシメチル）−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサ ジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン１８．６ｇ（９０％）を得 た（ＨＰＬＣ領域で９３％純度）。 実施例１ （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル） ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ−［Ｅ，Ｋ］ピロ ーロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３ （２Ｈ）−ジオン 臭素（２．０当量）およびピリジン（０．１当量）を塩化メチレン（１０容量 ）へ加え、この溶液を−５℃にまで冷却した。この臭素をトリフェニルホスファ イト（２．０当量）で滴定した。すべての臭素が消費されると溶液は黄色から透 明に変化した。２番目の反応容器へ塩化メチレン（１０容量）中の（Ｓ）−１０ ，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシ（メチル）］−４，９ ：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４ −Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジ オン（１．０当量）を加えた。このスラリーを−５℃にまで冷却した。次いでト リ フェニルホスファイトジブロミド溶液をピローロジオンのスラリーへ加え、この 反応物を室温にまで戻し、１２〜１６時間撹拌し、反応を完了させた。（ＨＰＬ Ｃによると＜０．４％化合物III）。このスラリーを減圧下に室温で２時間かけ て濃縮し、次いで脱イオン水１容量でクエンチし、１５分間撹拌した。トルエン （４０容量）をこの反応物のスラリーへ加え、生成物を沈殿させた。１０℃で１ 時間撹拌した後、生成物を濾別し、トルエン（５容量）で２回、脱イオン水（５ 容量）、最後にトルエン５容量で洗浄した。標題ブロミド化合物を減圧乾燥機中 、５０℃で乾燥した。収率８５〜９０％（不純物１〜２％）。 さらに不純物のレベルを下げるために、生成物をアセトン：水、メタノール： 水、イソプロパノール：水、または酢酸エチルのような溶媒系中へ再びスラリー 化する。生成物は比１：１から５：１のＴＨＦ：水中へ再スラリー化するのが好 ましい。 実施例２ （Ｓ）−１３−［（ジメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テ トラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン− １，３（２Ｈ）−ジオン Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７容量）中の（Ｓ）−１０，１１，１４， １５−テトラヒドロ−１３−［ブロモ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメ テノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１ ３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン（１．０当量） 溶液へジメチルアミン（１０．７３Ｋｇ、１２当量）を加えた。反応容器を密閉 し、４５℃で９時間加熱した。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、１２〜１ ６時間撹拌した。ＮａＯＨ（１２Ｎ、１．１当量）をこの反応物に加え、遊離塩 基とした。この溶液をさらに２時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを 減圧下で５〜７容量にまで取り除いた後、６０℃のＭｅＯＨ（３０容量）を同温 度で１時間かけてこの反応物に加えた。次いでこの反応物を室温にまで冷却し、 一晩撹拌した後、さらに０〜１０℃にまで冷却した。得られた生成物を濾別し、 ＭｅＯＨ（３容量）で洗浄した。この物質を減圧乾燥機中、５０℃で恒量になる まで乾燥した。収率８５〜９２％。この反応で使用した他の溶媒はＴＨＦ／水お よびジメチルアセトアミドであるが、出発物質および生成物の溶解度が低いため 、反応は極性非プロトン溶媒中で行うべきである。ｉｎ ｓｉｔｕで臭酸塩を遊 離させるのに他の塩基を試した（以下参照）が、最も効果的な塩基は６Ｎ Ｎａ ＯＨ、１２Ｎ ＮａＯＨおよびＫ₂ＣＯ₃であった。 実施例３ （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヨード（メチル） ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロー ロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３（ ２Ｈ）−ジオン （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［メタンスルホニロ キシ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピ ローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１， ３（２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、１．９４ミリモル）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホ ルムアミド２０ｍＬ（２０容量）中に取った。この溶液にヨウ化ナトリウム（３ ．０ｇ、１９．４ミリモル、１０．０当量）を加え、この反応物を撹拌し、５０ ℃で３６時間加熱した。この反応物を環境温度にまで冷却し、水（５０ｍＬ、５ ０容量）を加えることによって生成物を単離した。析出した紫色固形生成物を５ ：１ＴＨＦ：水から再結晶して標題化合物０．８７ｇ（８１％）を得た。 実施例４ （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ｐ−トルエンスル ホニルオキシ（メチル）］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジ ベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロ ヘキサデシン−１，３（２Ｈ）−ジオン （Ｓ）−１０，１１，１４，１５−テトラヒドロ−１３−［ヒドロキシメチル ］−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロー ロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサ−ジアザシクロヘキサデシン−１，３ （２Ｈ）−ジオン（１．０ｇ、２．２７ミリモル）をジクロロメタン２０ｍＬ（ ２０容量）中に取った。この溶液へ無水トルエンスルホン酸（２．２２ｇ、６． ８０ミリモル、３．０当量）およびピリジン（０．７２ｇ、９．０８ミリモル、 ４．０当量）を加え、反応物を撹拌し、４２℃で２時間加熱還流した。この反応 物を環境温度にまで冷却し、ジクロロメタン４０ｍＬで希釈した。有機相を１Ｎ 塩酸５０ｍＬおよびブライン５０ｍＬで洗浄した。水相をジクロロメタン３０ｍ Ｌで逆抽出し、有機相をまとめ、溶媒を塩化メチレンからエタノールに交換した 。析出した紫色固形生成物を濾過し、標題化合物１．２５ｇ（９３％収率）を得 た。 実施例５（Ｓ）−１３−［（モノメチルアミノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テ トラヒドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ ］ピローロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン− １，３（２Ｈ）−ジオン メチルアミン（３７．１ｇ、１．１９モル、２０当量）を、温度を２３℃以下 に保持しつつＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド６００ｍｌに溶解した。この溶液に 実施例１の化合物（３０ｇ、０．０５９５モル）を加えた。得られた反応物を密 閉容器内にて環境温度で２４時間撹拌した。この反応中に生成されるＨＢｒを、 トリエチルアミン（８．３ｍｌ、０．０５９５モル、１当量）を加えて除去し、 得られた反応物をさらに３０分撹拌した後、４℃に冷却し、反応温度を２５℃以 下に保持しつつ水４５０ｍｌをゆっくりと加えた。水を加えるとスラリーが形成 され、それを１時間撹拌し、濾過し、得られた濾過固形物を水２００ｍｌをさら に用いて洗浄した。この固形物を５０℃の減圧オーブン中で乾燥し、標題化合物 ２５．０３ｇ（９３％）を得た。 実施例６（Ｓ）−１３−［（ピロリジノ）メチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒ ドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロ ーロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３ （２Ｈ）−ジオン一塩酸塩 実施例１の化合物（１．０ｇ、１．０当量）をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド ５ｍｌ中に取り、ピロリジン（１．６ｍｌ、１０当量）を加えた。得られた反応 物を４５℃に９時間加熱し、次いで室温にまで冷却した。この赤色スラリーに１ ２Ｎ ＮａＯＨ（０．１７ｍｌ、１．０当量）を加え、混合物を室温にて２時間 撹拌し、赤色の溶液を得た。溶媒を減圧下に除去し、得られた油状物質を塩化メ チレン（１００ｍｌ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム（１００ｍｌ）および５ ％ＬｉＣｌ溶液（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。減圧下に塩化メチレンを除去 し、油状物質を得、これにメチルｔ−ブチルエーテルを加えて赤色固形物として 標題化合物を沈殿させた。濾過してこの固形物を単離し、５０℃にて減圧オーブ ン内で一晩乾燥し、生成物０．８ｇ（８１％）を得た。 実施例７（Ｓ）−１３−［ベンジルアミノメチル］−１０，１１，１４，１５−テトラヒ ドロ−４，９：１６，２１−ジメテノ−１Ｈ，１３Ｈ−ジベンゾ［Ｅ，Ｋ］ピロ ーロ［３，４−Ｈ］［１，４，１３］オキサジアザシクロヘキサデシン−１，３ （２Ｈ）−ジオン 実施例１の化合物をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド２０容量中に取り、ベンジ ルアミン（６当量）を一回で加えた。得られた反応物を密閉容器内で撹拌し、８ ０℃に２４時間加熱した。その反応物を環境室温にまで冷却し、トリエチルアミ ン（１当量）を加えてＨＢｒを除去し、得られた反応物をさらに３０分撹拌した 。酢酸エチルを加え、有機層を塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄した。この溶液 の酢酸エチルをエタノールに溶媒変換して赤色スラリーを得、これを濾過し、赤 色固形物として標題化合物を得た（収率７９％）。 実施例８ 動力学試験 動力学試験のため、ジメチルアミン２モル濃度のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミ ド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ａ（０．２５ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化 合物Ｂ（０．２２９ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、化合物Ｃ（０．２０９ｇ、０．４ ５ｍｍｏｌ）、化合物Ｄ（０．２３６ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）および化合物Ｅ（ ０．２７１ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）をそれぞれＤＭＡ（〜２０ｍｌ／ｇ、４−６ ｍｌ）に溶解し、ジメチルアミン２モル濃度のＤＭＡ溶液（４．５ｍｌ、９．０ ｍｍｏｌ、２０当量）を各反応物に加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃ にて撹拌し、ＨＰＬＣ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック (isocratic)な５０／５０ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ ／分の移動相および２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍｘ ２５ｃｍゾルバックスＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ａ＝１０．４ 分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝９．３分、Ｒｔ 化合物Ｃ＝９．０分、Ｒｔ 化合物Ｄ＝６ ．２分、Ｒｔ 化合物Ｅ＝１０．６分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌの濃度に対して対応す る応答領域）から各化合物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測 定した。ＨＰＬＣ分析の前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ ｍｌに希釈し、得られた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に 変換した。化合物Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの濃度で割ったジメチルアミン濃度の 常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得られた直線の傾きを、 最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で割り、二次速度定数（ 単位：ＬＭ^-1Ｈｒ^-1）を得た。得られた結果を表Ｉに示す。 実施例９メシレート対ブロミドとジメチルアミン、メチルアミンおよびベンジルアミンと の比較速度試験 動力学試験に使用するため、メチルアミンおよびジメチルアミンの２モル濃度 Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）溶液を調製した。化合物Ｄ（１．０３ ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）および化合物Ｂ（１．００ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）をＮ ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（メチルアミンおよびジメチルアミン反応について は２０ｍｌ／ｇ、ベンジルアミン反応については３６ｍｌ／ｇ）中にて一緒にし 、メチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９．７ｍｍｏｌ、２ ０当量）またはジメチルアミンの２モル濃度ＤＭＡ溶液（１９．８ｍｌ、３９． ７ｍｍｏｌ、２０当量）またはベンジルアミン（４．２５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ 、２０当量）を加えた。これらの反応溶液を封栓し、２３℃にて撹拌し、ＨＰＬ Ｃ分析用に経時的にサンプリングした。アイソクラティック(isocratic)な４５ ／５５ＴＨＦ／０．１％トリフルオロ酢酸緩衝化水の１ｍｌ／分の移動相および ２３３ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いて４．６ｍｍ ｘ ２５ｃｍゾルバック スＳＢ−ＣＮカラムを利用した（Ｒｔ 化合物Ｄ＝１１．４分、Ｒｔ 化合物Ｂ＝ １９．９分）。３点検量線の一次方程式（０．１ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍ ｌおよび０．０２５ｍｇ／ｍｌ の濃度に対して対応する応答領域）から各化合 物について応答係数を得、その係数から反応物濃度を測定した。ＨＰＬＣ分析を 行う前に反応物試料（０．１ｍｌ）を計量フラスコ中で２５ｍｌに希釈し、得ら れた濃度（ｍｇ／ｍｌ）をモル濃度（ｍｍｏｌ／ｍｌ）に変換した。化合物濃度 で割ったアミン濃度の常用対数を時間に対してプロットした。各プロットから得 られた直線の傾きを、最初のアミン濃度から最初の化合物濃度を差し引いた差で 割 り、二次速度定数（単位：ＬＭ^-1Ｈｒ^-1）を得た。これにより、特許請求してい るブロミド中間体から直接、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘導体が高収率 で調製された。メシレート中間体からは、メチルアミノおよびベンジルアミノ誘 導体が直接、高収率には得られなかった。 このように、本発明の化合物はさらに、選択的プロテインキナーゼＣインヒビ ターとして活性を示す。この化合物の活性は、カルシウムカルモジュリン依存性 プロテインキナーゼ検定、カゼインプロテインキナーゼII検定、ｃＡＭＰ依存性 プロテインキナーゼ触媒サブユニット検定および１９９５年６月１４日発行のＥ Ｐ０ ６５７ ４５８［Ｈｅａｔｈら］（これは引用によって本明細書に包含され る）に記載されているタンパク−チロシンキナーゼ検定によって測定した。特許 請求している化合物は１０μＭ以下のＩＣ₅₀値を有しており、これらの検定にお いて活性でありアイソザイム選択的である。 この証明された薬理活性を有している化合物はプロテインキナーゼＣが病因と なっていると示されている状態の処置に有用である。当業界にて認められている 状態には、糖尿病およびその合併症（特に微小血管性糖尿病合併症、網膜症、腎 症および神経障害）、虚血、炎症、中枢神経系障害、心臓血管疾患、アルツハイ マー病、皮膚疾患および癌などがある。 式：IIで示される化合物は好ましくは投与前に製剤化する。従って、本発明の もうひとつの態様は式：IIで示される化合物および１つまたはそれ以上の製薬的 に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬組成物に関する。 本発明の医薬組成物は周知かつ容易に入手可能な成分を用いて既知の手法によ って調製される。本発明の組成物を作製するには、活性成分を通常、担体と混合 し、または担体で希釈し、またはカプセル、サシエ、ペーパーもしくは他のコン テナの形態にできる担体内に充填する。担体を希釈剤として利用する際には、担 体は固形物、半固形物または、活性成分のビヒクル、賦形剤もしくは媒質として 有用な液状物質であることができる。従って、本発明の組成物は錠剤、ピル剤、 粉末剤、トローチ剤、サシエ剤（sachet）、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、 乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアロゾル剤（固体として、または液状媒質中）、 ゼラチン軟および硬カプセル剤、坐剤、滅菌注射液剤および滅菌密封粉末剤など の剤形とすることができる。 適当な担体、賦形剤および希釈剤を幾つか例示すれば、ラクトース、デキスト ロース、シュクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム 、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカントゴム、ゼラチン、珪酸カルシ ウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水性シロップ（ water syrup）、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチルおよびプロピル 、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油が挙げられる。本発明の製剤は さらに、滑沢剤、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、保存剤、甘味料または香料を含 むことができる。本発明の組成物は、患者に投与した後、活性成分を即時に、持 続して、または徐放して放出するよう製剤化することができる。 化合物の医薬的有効量は哺乳動物においてＰＫＣ活性を阻害できる量である。 通常の１日投与量は活性化合物約０．０１ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇであ る。本発明の組成物は好ましくは、それぞれが約１から約５００ｍｇを、より普 通には約５から約３００ｍｇを含有する単位投与剤形の形態に製剤化する。しか し、投与する治療学的用量は処置する症状、投与する化合物の種類および選択す る投与経路などの関連する状況を勘案して医師によって決定されるので、上記の 投与量の範囲はいかなる意味においても本発明の範囲の限定を意図していないこ とは理解されよう。「単位投与剤形」なる用語は、ヒト対象および他の哺乳動物 に対する単一投与に適した物理的に別個の単位を意味しており、各単位それぞれ は所望の治療効果を得るよう計算された活性成分の予め決められた量を適当な製 薬学的担体とともに含有している。 以下に製剤例を挙げるが、これは単なる例示であり、いかなる意味においても 本発明の範囲を限定するものではない。 製剤例１ ゼラチン硬カプセル剤を以下の成分を使用して調製する： 用量 （ｍｇ／カプセル剤） 活性成分 ５ 乾燥デンプン １８５ ステアリン酸マグネシウム １０ 総量 ２００ｍｇ 上記成分を混合し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充填する。 製剤例２ 以下の成分を使用して錠剤を調製する： 用量 （ｍｇ／カプセル剤） 活性成分 ２０ 徴結晶セルロース ４００ フュームド二酸化珪素 １０ ステアリン酸 ５ 総量 ４３５ｍｇ 上記成分を混合し、圧縮して各４３５ｍｇ重量の錠剤を成形する。 製剤例３ 活性成分１０ｍｇを含有する各錠剤を以下のようにして調製する： 用量 （ｍｇ／カプセル剤） 活性成分 １０ｍｇ デンプン ４５ｍｇ 微結晶セルロース ３５ｍｇ ポリビニルピロリドン（１０％水溶液として） ４ｍｇ カルボキシメチルデンプン・ナトリウム ４．５ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ０．５ｍｇ タルク １ｍｇ 総量 １００ｍｇ 活性成分、デンプンおよびセルロースをＮｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し 、充分に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液をこの粉末と混合し、次いでＮ ｏ．１４メッシュ米国ふるいに通す。このようにして調製した顆粒を５０℃で乾 燥し、Ｎｏ．１８メッシュ米国ゆるいに通す。この顆粒に、前もってＮｏ．６０ メッシュ米国ふるいに通しておいたカルボキシメチルデンプン・ナトリウム、ス テアリン酸マグネシウムおよびタルクを加え、混合した後、錠剤成形装置にて圧 縮し、各１００ｍｇ重量の錠剤を作成する。 製剤例４ 活性成分４０ｍｇを含有するカプセル剤を以下のようにして調製する： 用量 （ｍｇ／カプセル剤） 活性成分 ４０ｍｇ デンプン ５９ｍｇ 微結晶セルロース ５９ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ 総量 ２００ｍｇ 活性成分、セルロース、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、 Ｎｏ．４５メッシュ米国ふるいに通し、２００ｍｇ量のゼラチン硬カプセルに充 填する。 本明細書において本発明の基本、好ましい態様および操作手順を説明してきた 。しかし、ここに保護を求めようとする発明は、本明細書に開示した特定の形態 が制限的なものでなく例示と見なされるべきものであるので、開示の形態には限 定されないと解釈すべきである。当業者ならば、本発明の精神を逸脱することな く、 修飾および改変が可能である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｋ 31/00 ６２５Ｂ 25/28 ６２６Ｎ 29/00 ６２９ 35/00 ６３５ Ａ６１Ｋ 31/407 31/40 ６０９ (81)指定国 ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ， ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，Ｔ Ｄ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ )，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ， ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，Ｇ Ｅ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ， ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 ウィネロスキー，レナード・エル・ジュニ ア アメリカ合衆国46142インディアナ州 グ リーンウッド、カバード・ブリッジ・ロー ド 557番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 式： ［式中、Ｒ₁はＢｒ、ＩまたはＯ−トシルである］ で示される化合物。 ２． 式： で示される請求項１記載の化合物。 ３． Ｒ₁がＢｒまたはＩである請求項１または２記載の化合物。 ４． 請求項１から３までのいずれかに記載の化合物、および１つまたはそれ 以上の製薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含有する医薬製剤。 ５． 請求項１から３までのいずれかに記載の化合物を非反応性の極性溶媒中 にてアミン化合物と反応させることを特徴とする、式：［式中、Ｒ₂は−Ｎ（ＣＦ₃）ＣＨ₃、−ＮＨ（ＣＦ₃）、または−ＮＲ₃Ｒ₄（ここ に、Ｒ₃およびＲ₄はそれぞれ独立して水素、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、フェニル、ベン ジルであるか、またはこれらが結合している窒素と一緒になって飽和もしくは不 飽和５または６員環を形成する）である］ で示されるアミノ置換Ｎ，Ｎ'−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造す る方法。 ６． 出発化合物が式： ［式中、Ｒ₁はＢｒまたはＩである］ で示される化合物である、請求項５記載の方法。 ７． アミン化合物がＨＮ（ＣＨ₃）₂またはＨ₂Ｎ（ＣＨ₃）である、請求項６ 記載の方法。 ８． 式（Ｖ）：で示されるＮ，Ｎ'−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造する方法であ って、式： ［式中、Ｒ₁はＢｒまたはＩである］ で示される化合物を非反応性の極性溶媒中でＨＮ（ＣＨ₃）₂と反応させることを 特徴とする方法。 ９． 請求項１から３までのいずれかに記載の化合物を製造する方法であって 、式： で示される化合物を請求項１から３までのいずれかに記載の化合物に変換するこ とを特徴とする方法。 １０． ＰＸ₃、（フェニル）₃ＰＸ₂または（フェノキシ）₃ＰＸ₂［ここに、 Ｘはブロモまたはヨードである］の存在下に反応を行う、請求項９記載の方法。 １１． （フェノキシ）₃ＰＢｒ₂の存在下に反応を行う、請求項１０記載の方 法。 １２． 式（Ｖ）： で示される化合物を製造する方法であって、 （ａ）式（IIIａ）： で示される化合物をＰＸ₃、（フェニル）₃ＰＸ₂または（フェノキシ）₃ＰＸ₂［ ここに、Ｘはブロモまたはヨードである］と反応させ、式（IIａ）： ［式中、Ｒ₁はＢｒまたはＩ］ で示される化合物を製造し、 （ｂ）式（IIａ）の化合物を非反応性の極性溶媒中でＨＮ（ＣＨ₃）₂と反応させ る、ことを特徴とする方法。 １３． Ｒ₁がＢｒである請求項１２記載の方法。 １４． さらに式（Ｖ）の化合物をＣＨ₃ＳＯ₃Ｈと反応させる、請求項１３記 載の方法。 １５． 請求項５から８および１２から１４までのいずれかに記載の方法によ って製造されるＮ，Ｎ'−架橋ビスインドリルマレイミド化合物。 １６． 請求項９から１１までのいずれかに記載の方法によって製造される式 ： ［Ｒ₁はＢｒ、ＩまたはＯ−トシル］ で示される化合物。 １７． 明細書中実施例のいずれかに実質的に記載しているようにしてＮ，Ｎ '−架橋ビスインドリルマレイミド化合物を製造する方法。 １８． 明細書中実施例のいずれかに記載しているＮ，Ｎ'−架橋ビスインド リルマレイミド化合物。