JP2020519311A5

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Publication number: JP2020519311A5
Application number: JP2020513478A
Authority: JP
Filing date: 2018-10-24
Publication date: 2020-08-13
Anticipated expiration: 2038-10-24

Claims

筋骨格系幹細胞（ＭＳＳＣ，ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌｓｔｅｍｃｅｌｌ）への分化誘導用培地組成物であって、
ノギン（ｎｏｇｇｉｎ）、ＬＩＦ（ｌｅｕｋｅｍｉａｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ）、ｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃＦｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）、Ｗｎｔ信号活性化剤であるＣＨＩＲ９９０２１（９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−６（５Ｈ）−オン）、ＥＲＫ（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ）信号抑制剤であるＰＤ０３２５９０１（Ｎ−［（２Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−ベンズアミド）、及びＴＧＦ−β／アクチビン／ノーダル（ＴＧＦ−β／ａｃｔｉｖｉｎ／ｎｏｄａｌ）信号伝達抑制剤であるＳＢ４３１５４２（４−［４−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−５−（２−ピリジニル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］ベンズアミド）を含み、
前記筋骨格系幹細胞は、骨、軟骨、腱、靭帯、筋肉および脂肪に分化し得ることを特徴とする、分化誘導用培地組成物。
請求項１の筋骨格系幹細胞への分化誘導用培地組成物においてＥＳＣ（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ）又はｉＰＳ（ｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌ）を培養する段階を含む、筋骨格系幹細胞の製造方法。
前記培養は、培地組成の変化無しで５継代以上培養することを特徴とする、請求項２に記載の筋骨格系幹細胞の製造方法。
請求項１の筋骨格系幹細胞への分化誘導用培地組成物を用いて製造された筋骨格系幹細胞。
ＥＳＣ（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ）又はｉＰＳＣ（ｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌ）から分化された筋骨格系幹細胞（ＭＳＳＣ，ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌｓｔｅｍｃｅｌｌ）であって、前記筋骨格系幹細胞は、下記の特徴を有することを特徴とし：
ａ）外胚葉マーカーであるネスチン（Ｎｅｓｔｉｎ，ＮＥＳ）に対して陽性；
ｂ）筋原性衛星マーカー（ｍｙｏｇｅｎｉｃｓａｔｅｌｌｉｔｅｍａｒｋｅｒ）であるＰａｘ７に対して陽性；
ｃ）中胚葉マーカーであるα−ＳＭＡに対して陽性；
ｄ）全分化能マーカーであるＬＩＮ２８に対して陰性；及び
ｆ）中間葉幹細胞マーカーであるＣＤ９０に対して陰性、
前記筋骨格系幹細胞は、骨、軟骨、腱、靭帯、筋肉および脂肪に分化し得ることを特徴とする、筋骨格系幹細胞。
前記筋骨格系幹細胞は中胚葉に分化されるが、外胚葉又は内胚葉には分化されないことを特徴とする、請求項５に記載の筋骨格系幹細胞。
前記筋骨格系幹細胞は、筋肉、骨、軟骨、腱又は靭帯に分化される特性を有することを特徴とする、請求項５に記載の筋骨格系幹細胞。
前記筋骨格系幹細胞は神経には分化されない特性を有することを特徴とする、請求項５に記載の筋骨格系幹細胞。
前記筋骨格系幹細胞は内皮細胞には分化されない特性を有することを特徴とする、請求項５に記載の筋骨格系幹細胞。
前記筋骨格系幹細胞は、韓国細胞株銀行に寄託番号第ＫＣＬＲＦ−ＢＰ−００４６０号で寄託されたことを特徴とする、請求項５に記載の筋骨格系幹細胞。
請求項５の筋骨格系幹細胞を含む筋骨格系疾患の予防又は治療用薬剤学的組成物。
前記筋骨格系疾患は、骨多孔症、骨軟化症、骨形成不全症（ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ
ｉｍｐｅｒｆｅｃｔａ）、骨化石症（ｏｓｔｅｏｐｅｔｒｏｓｉｓ）、骨硬化症（ｏｓｔｅｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、パジェット病（Ｐａｇｅｔ’ｓｄｉｓｅａｓｅ）、骨癌、関節炎、くる病、骨折、歯周疾患、骨部分欠損、骨溶解性骨疾患、原発性及び続発性副甲状腺機能亢進症、過骨症、退行性関節炎、変形性膝関節症、変形性股関節症、変形性足関節症、変形性手関節症、変形性肩関節症、変形性肘関節症、膝蓋軟骨軟化症、単純性膝関節炎、離断性骨軟骨炎、上腕骨外側上顆炎、上腕骨内側上顆炎、ヘバーデン結節、ブシャール結節、変形性母指ＣＭ関節症、半月板損傷、椎間板変性、十字靭帯損傷、上腕二頭筋起始腱損傷、靭帯損傷、腱損傷、五十肩、回旋筋蓋裂傷、石灰化腱炎、肩インピンジメント症候群、再発性脱臼、習慣性脱臼、老化性筋消耗症及び筋異栄養症からなる群から選ばれる１つ又はそれ以上の疾患であることを特徴とする、請求項１１に記載の薬剤学的組成物。
請求項５の筋骨格系幹細胞を含む細胞治療剤。
次の特徴を有する細胞を選別する段階を含む筋骨格系幹細胞のスクリーニング方法：
ａ）外胚葉マーカーであるネスチン（Ｎｅｓｔｉｎ，ＮＥＳ）に対して陽性；
ｂ）筋原性衛星マーカー（ｍｙｏｇｅｎｉｃｓａｔｅｌｌｉｔｅｍａｒｋｅｒ）であるＰａｘ７に対して陽性；
ｃ）中胚葉マーカーであるα−ＳＭＡに対して陽性；
ｄ）全分化能マーカーであるＬＩＮ２８に対して陰性；及び
ｆ）中間葉幹細胞マーカーであるＣＤ９０に対して陰性。