JPH0119399B2 - - Google Patents
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- JPH0119399B2 JPH0119399B2 JP57091793A JP9179382A JPH0119399B2 JP H0119399 B2 JPH0119399 B2 JP H0119399B2 JP 57091793 A JP57091793 A JP 57091793A JP 9179382 A JP9179382 A JP 9179382A JP H0119399 B2 JPH0119399 B2 JP H0119399B2
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Description
この発明は、一群の新規なサポニン類、アマチ
ヤヅルより単離された新規サポニン並びにこれら
の製造法を提供するものである。 この発明における“アマチヤヅル”はウリ科の
植物で学名ギノステムマ ペンタフイルルム マ
キノ（Gynostemma pentaphyllum Makino）
並びに植物学的にこれと類縁植物を含む。類縁植
物としては、ギノステムマ ブルマニクム キン
グ エクス チヤクラバーテイ（Gynostemma
burmanicum King ex Chakravarty）、ギノス
テムマ ラクスム コグン（Gynostemma
laxum Cogn.）、ギノステムマ インテグリフオ
リオラ コグン（Gynostemma Integrifoliola
Cogn.）などが挙げられるが、この発明よるサポ
ニン類を多く含有する総サポニンは兵庫県産のア
マチヤヅルから効率的に得られる。 この発明の発明者らは、先にアマチヤヅルから
新規なサポニン類を単離し、その構造を解明する
とともに、これらのサポニン類の加水分解によつ
て一群の新規化合物を得た。さらに研究を進めた
結果、アマチヤヅルから先のサポニン類とはこと
なる一群の新規なサポニン類を単離することに成
功した。 かくしてこの発明によれば、次の一般式
（）： 〔式中R1はβ―グルコピラノシル基、β―グ
ルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル基またはβ―グルコピラノシル（１→２）―α
―アラビノピラノシル基；R2はヒドロキシメチ
ル基またはホルミル基；R3はヒドロキシ基また
は水素原子；R4はβ―グルコピラノシルオキシ
基、α―ラムノピラノシル（１→６）―β―グル
コピラノシルオキシ基、β―キシロピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシルオキシ基、メ
チル基またはヒドロキシ基；R5はメチル基、ヒ
ドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはβ―グル
コピラノシルオキシメチル基；但しR1がβ―グ
ルコピラノシル基である場合R2はヒドロキシメ
チル基でR3は水素原子、R1がβ―グルコピラノ
シル（１→２）―α―アラビノピラノシル基であ
る場合R2はホルミル基でR3は水素原子〕 で表される化合物を提供するものである。 一般式（）で表される化合物はアマチヤヅル
より単離された新規なサポニン類であり、具体名
を列挙すると次のとおりである。 19，21―ジヒドロキシ―3β―０―β―グルコ
ピラノシル―20ξ―０―β―グルコピラノシル―
ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19，20ξ，21―トリヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19，20ξ―ジヒドロキシ―3β―０―β―グルコ
ピラノシル―21―０―β―グルコピラノシル―ダ
ンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―20ξ，21―ジヒドロキシ―3β―０
―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グル
コピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―21―ヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―20ξ―０―〔α―ラムノピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシル〕―ダンマル
―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―21―ヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―20ξ―０―〔β―キシロピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシル〕―ダンマル
―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―3β―０―〔β―グルコピラノシ
ル（１→２）―α―アラビノピラノシル〕―20S
―０―〔α―ラムノピラノシル（１→６）―β―
グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―3β―０―〔β―グルコピラノシ
ル（１→２）―α―アラビノピラノシル〕―20S
―０―〔β―キシロピラノシル（１→６）―β―
グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 12β，19，20S―トリヒドロキシ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコ
ピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 12β，19，20R―トリヒドロキシ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコ
ピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―12β，20R―ジヒドロキシ―3β―
０―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グ
ルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドＬと称する； 19，20R―ジヒドロキシ―3β―０―〔β―グル
コピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドLIと称する。 これらは、例えば次の方法によつて抽出し、各
成分に分離される。 先ず初めに、アマチヤヅルを水または含水低級
アルコールで抽出する。含水低級アルコールとし
ては50v／ｖ％程度以下の含水メタノール、含水
エタノール等が例示される。この抽出は加温また
は加熱下に行うのが好ましい。なお、原料のアマ
チヤヅルは、抽出に先立つて予め細切し、あるい
は常法により脱脂したものを用いてもよい。また
抽出溶媒として含水低級アルコールを用いた場合
には抽出液を濃縮してアルコール分を除去したの
ち、適量の水を加えて次の非イオン性吸着樹脂で
の処理に付すのが好ましい。 非イオン性吸着樹脂としては、スチレン―ジビ
ニルベンゼン共重合体からなるハイポーラスなも
のが好ましく、具体的にはアンバーライトXAD
−２（米国ロームアンドハース社製）などが用い
られる。この処理は、吸着樹脂を充填したカラム
に上記で得られた抽出液を通液して行うのが便利
である。この操作によりサポニンが樹脂に吸着さ
れる。 次いで樹脂に吸着されたサポニンを低級アルコ
ールで溶出する。溶出溶媒として用いられる低級
アルコールとしてはメタノール（98％以上）、エ
タノール（95％以上）等が好ましい。なお、溶出
に先立つて予めカラムを水あるいは20v／ｖ％程
度の含水低級アルコールで洗浄するのが好まし
い。 上記で得られた低級アルコール溶出液を次いで
アルミナで処理する。この処理も、アルミナを充
填したカラムを用いて行えば簡便である。この処
理により、サポニンはアルミナに吸着される。な
お、このアルミナでの処理に先立つて上記の低級
アルコール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよ
い。 アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級ア
ルコールまたは含水低級アルコールで、好ましく
は50v／ｖ％程度の含水低級アルコールで溶出す
る。この溶出液を濃縮することにより、ギペノシ
ド類の混合物（総サポニン）が得られる。 上記のようにして得られる総サポニンは今まで
に知られていない新規なサポニン類を含有し、こ
れらの各成分は例えば次の方法により分離精製さ
れる。 すなわち、総サポニンを水に溶解し、この水溶
液をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム
（Servachrom）XAD−２〔サーバ（Serva）社
製〕で処理し、被吸着物質をメタノールで溶出す
る。溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理す
る。 シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロ
ロホルム・低級アルコール・水で好ましくはクロ
ロホルム・メタノール・水（65：35：10）の下層
で溶出し、薄層クロマトグラフイ（TLC）を指
標とし、溶出液をフラクシヨン１〜６に分画す
る。 フラクシヨン１〜６をそれぞれシリカゲルカラ
ムで処理し、次いでシリカゲルに吸着されたサポ
ニンをクロロホルム・低級アルコール・酢酸エチ
ル・水で好ましくはクロロホルム・メタノール・
酢酸エチル・水（２：２：４：１）の下層で分画
溶出する。 上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらに
TLCの結果を指標にして前記のシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイまたは高速液体クロマトグラ
フイを行い、これらのギペノシド類を各個別に分
離精製すると、先にこの発明の発明者らが見出し
たギペノシド類が得られる。すなわちフラクシヨ
ン１からギペノシド及びがフラクシ
ヨン２からギペノシドが、フラクシヨン３
からギペノシド及びが、フラクシヨ
ン４からギペノシドが、フラクシヨン５か
らギペノシドが、フラクシヨン６からギペ
ノシドがそれぞれ得られる。 次に上記のフラクシヨン２，３，４，６の各残
液を濃縮し、これらをそれぞれヌクレオシル
30C18（nucleocil30C18，30±4μ、西独、エム・ナ
ーゲル社製）カラム７mm×61cm×２本で処理し、
次いでカラムに吸着されたサポニンを35〜45％エ
タノールで溶離することによつてこの発明のギペ
ノシド類を得た。すなわちフラクシヨン２からギ
ペノシド，，ＬおよびLIを、
フラクシヨン３からギペノシド，
，およびを、フラクシヨン４
からギペノシドおよびを、フラ
クシヨン６からギペノシドおよび
が得られた。 またこの発明のギペノシドが、公知のギペノシ
ドを酵素加水分解反応に付して得られることが見
出された。すなわちギペノシド，お
よびをセルラーゼ酵素で加水分解すること
によつて、それぞれからこの発明のギペノシド
，およびが得られた。 かくして得られた一般式（）の化合物を酵素
と接触させることによつて加水分解を行いその30
位、20位および21位の糖の置換分から少なくとも
１個の糖分子を脱離さすことができる。これを３
位の置換分を例にして説明すると、グルコピラノ
シル−グルコピラノシル基又はグルコピラノシル
―アラビノピラノシル基をグルコピラノシル基、
アラビノピラノシル基又は水素原子にそれぞれ加
水分解することができる。20位及び21位について
も同様である。使用する酵素は、Ｏ―グルコシド
結合を切断し得る能力を有する加水分解酵素から
選択利用される。好ましい例としては、ヘスペリ
ジナーゼ、マルターゼ、セルラーゼ、タカジアス
ターゼなどが挙げられる。更にナリンギナーゼ、
ペクチナーゼ、アミラーゼ、エムルシン等を挙げ
ることができる。これらの酵素は、精製品である
必要はなく、粗製であつてもよい。 酵素の使用量は、酵素の種類によつて異なる
が、例えばセルラーゼを用いる場合、式（）の
化合物１ｇ当り約600〜1000単位を使用すればよ
い。 反応は酸性条件下で行うことが好ましく、例え
ばPH４程度の緩衝液中で行うと効果的である。こ
の酸性条件は、酵素の種類によつて多少変えるこ
とが好ましい場合がある。 反応温度は、室温ないし若干高められた温度で
行うのが好ましい。一般に30〜40℃で行われる。
しかしながら、特に限定はない。反応時間は、酵
素の種類と精製度合、反応温度、所望する加水分
解の程度等によつて異なる。一般には２，３時間
から１週間位の反応時間が用いられる。 この発明によれば適宜条件を選定することによ
り、１個の糖分子を選択的に脱離さすことができ
る。勿論１個以上の糖分子が残存するように加水
分解を止めるのが好ましい。 なお、加水分解生成物が複数得られた場合は、
前述のアマチヤヅルの抽出物を精製、分離する際
に用いられたと同様の技法を採用すれば各生成物
に分離することができる。 更にこの発明では、場合により一般式（）の
化合物を混合物として使用してもよい。 この発明における一般式（）の化合物は抗潰
瘍作用、殊に消化器系潰瘍に対する作用を有し、
医薬として有望な新規物質である。 次に実施例にてこの発明を説明する。 実施例 １ 総サポニン画分の製造 兵庫県三原群で採集したアマチヤヅル（地上
部）1.2tを４倍量の水で熱時２回抽出した。再抽
出液を合し（約9.6t）、適当量まで濃縮後、噴霧
乾燥して約25Kgの淡黄褐色粉末エキスを得た。こ
れの200ｇを水２に溶解し、スチレン系吸着樹
脂サーバクロムXAD−２（100〜200μm、サーバ
社製）500mlを充填したカラムに通導した。吸着
部を水４、次いで20％メタノール４で洗浄し
たのち、メタノール２で溶出し、メタノール溶
出液を減圧下に濃縮乾固して黄褐色粉末13.5ｇを
得た。この方法を繰り返して得られた黄褐色粉末
30ｇをメタノール１に溶かし、アルミナ〔70〜
290メツシユ、中性、ウオルム（Woelm）社製〕
500ｇを充填したカラムに通導した。吸着部を50
％メタノール約20で溶出した。溶出液を減圧下
に濃縮乾固し、淡黄色粉末として総サポニン画分
14.2ｇを得た。得られた総サポニンの一般性状は
次の通りであつた。 (i) 黄白色から褐色のやや苦味を有する無臭の粉
末で、メタノール及び希メタノールに易溶、水
及びエタノールに可溶、ベンゼン、クロロホル
ム、エーテル、ヘキサン及び石油エーテルに不
溶、 (ii) １％水溶液は中性、 (iii) 赤外線吸収スペクトル〔IR（KBr）νmax〕
では3370，1650，1070及び1040cm-1の波数、 (iv) 核磁気共鳴スペクトル（PMR，C5D5N）で
は4.0（ブロード）、1.6（ブロード）、1.2（ブロー
ド）及び0.9（ブロード）ppmのシグナル、 (v) 水に添加して振盪すると持続性の小泡を発
生、 (vi) リーベルマン反応及びザルコウスキー反応が
陽性及び (vii) 下記条件下で薄層クロマトグラフイに付すと
き第１図のような紅紫色のスポツトを発現す
る。 プレート：シリカゲル60F254（厚さ0.25mm、メ
ルク社製） 展開溶媒：クロロホルム・メタノール・水（容
量比65：35：10）下層 展開距離：10cm 検 出：１％硫酸セリウム／10％硫酸混合溶液
を噴霧後105℃で５分間加熱 総サポニン画分30ｇを最小量のメタノールに溶
解し、シリカゲル60ｇとよく混和し、溶剤を減圧
下に蒸発乾固したのちシリカゲル（230〜400メツ
シユASTM、メルク社製）500ｇを乾式で充填し
たカラム上に層積し、クロロホルム・メタノー
ル・水（65：35：10）の下層を用いて展開溶出し
た。溶出液を適時TLC〔吸着剤：シリカゲル、溶
媒系：クロロホルム・メタノール・水（65：35：
100）下層、検出：30％硫酸〕で検討を行い、フ
ラクシヨン１〜６に分画し、それぞれ減圧下に濃
縮乾固し、収量はフラクシヨン１が8.6ｇ、フラ
クシヨン２が5.6ｇ、フラクシヨン３が5.1ｇ、フ
ラクシヨン４が5.4ｇ、フラクシヨン５が2.8ｇ及
びフラクシヨン６が2.2ｇであつた。 各フラクシヨンは再度、上記シリカゲルカラム
クロマトグラフに準じて、それぞれ最少量のメタ
ノールに溶解し、倍量のシリカゲルとよく混和
し、溶剤を減圧下に蒸発乾固したのち、50倍量の
シリカゲルを乾式充填したカラムに層積した。ク
ロロホルム・メタノール・水（70：30：10）の下
層で展開溶出し、溶出物をさらに同様の操作を行
い、クロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水
（２：２：４：１）の下層で展開溶出した。この
シリカゲルカラムクロマトグラフイによる精製操
作を各フラクシヨン毎に再度繰り返し、フラクシ
ヨン１からギペノシド120mgと粗ギペノシ
ド1.5ｇ、フラクシヨン２からギペノシド
1.2ｇ、フラクシヨン３からギペノシド
80mgとギペノシド350mg、フラクシヨ
ン４からギペノシド850mg、フラクシヨン
５からギペノシド250mg、フラクシヨン６
から粗ギペノシド3000mgをそれぞれ得た。 次に上記のフラクシヨン２，３，４，６の各溶
液を蒸発乾固し、得られた固体のそれぞれ0.5〜
1.0ｇを30％エタノールに溶解し、この溶液をヌ
クレオシル30C18（30±4μ）カラム７mm×61cm×２
本に注入し35〜45％エタノールで展開溶出した。
その結果フラクシヨン２の残液からギペノシド
、、ＬおよびLIがそれぞれ40
mg、40mg、45mg、30mg得られ、フラクシヨン３の
残液からギペノシド，，
およびがそれぞれ45mg、300mg、25mg、
30mg得られ、フラクシヨン４の残液からはギペノ
シドおよびがそれぞれ30mg、35
mg得られ、フラクシヨン６の残液からはギペノシ
ドおよびをそれぞれ40mg、35mg
得た。 得られたギペノシド類の物性を表１、表2a、
表2bに示した。
ヤヅルより単離された新規サポニン並びにこれら
の製造法を提供するものである。 この発明における“アマチヤヅル”はウリ科の
植物で学名ギノステムマ ペンタフイルルム マ
キノ（Gynostemma pentaphyllum Makino）
並びに植物学的にこれと類縁植物を含む。類縁植
物としては、ギノステムマ ブルマニクム キン
グ エクス チヤクラバーテイ（Gynostemma
burmanicum King ex Chakravarty）、ギノス
テムマ ラクスム コグン（Gynostemma
laxum Cogn.）、ギノステムマ インテグリフオ
リオラ コグン（Gynostemma Integrifoliola
Cogn.）などが挙げられるが、この発明よるサポ
ニン類を多く含有する総サポニンは兵庫県産のア
マチヤヅルから効率的に得られる。 この発明の発明者らは、先にアマチヤヅルから
新規なサポニン類を単離し、その構造を解明する
とともに、これらのサポニン類の加水分解によつ
て一群の新規化合物を得た。さらに研究を進めた
結果、アマチヤヅルから先のサポニン類とはこと
なる一群の新規なサポニン類を単離することに成
功した。 かくしてこの発明によれば、次の一般式
（）： 〔式中R1はβ―グルコピラノシル基、β―グ
ルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル基またはβ―グルコピラノシル（１→２）―α
―アラビノピラノシル基；R2はヒドロキシメチ
ル基またはホルミル基；R3はヒドロキシ基また
は水素原子；R4はβ―グルコピラノシルオキシ
基、α―ラムノピラノシル（１→６）―β―グル
コピラノシルオキシ基、β―キシロピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシルオキシ基、メ
チル基またはヒドロキシ基；R5はメチル基、ヒ
ドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはβ―グル
コピラノシルオキシメチル基；但しR1がβ―グ
ルコピラノシル基である場合R2はヒドロキシメ
チル基でR3は水素原子、R1がβ―グルコピラノ
シル（１→２）―α―アラビノピラノシル基であ
る場合R2はホルミル基でR3は水素原子〕 で表される化合物を提供するものである。 一般式（）で表される化合物はアマチヤヅル
より単離された新規なサポニン類であり、具体名
を列挙すると次のとおりである。 19，21―ジヒドロキシ―3β―０―β―グルコ
ピラノシル―20ξ―０―β―グルコピラノシル―
ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19，20ξ，21―トリヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19，20ξ―ジヒドロキシ―3β―０―β―グルコ
ピラノシル―21―０―β―グルコピラノシル―ダ
ンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―20ξ，21―ジヒドロキシ―3β―０
―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グル
コピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―21―ヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―20ξ―０―〔α―ラムノピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシル〕―ダンマル
―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―21―ヒドロキシ―3β―０―〔β
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル〕―20ξ―０―〔β―キシロピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシル〕―ダンマル
―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―3β―０―〔β―グルコピラノシ
ル（１→２）―α―アラビノピラノシル〕―20S
―０―〔α―ラムノピラノシル（１→６）―β―
グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―3β―０―〔β―グルコピラノシ
ル（１→２）―α―アラビノピラノシル〕―20S
―０―〔β―キシロピラノシル（１→６）―β―
グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 12β，19，20S―トリヒドロキシ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコ
ピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 12β，19，20R―トリヒドロキシ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコ
ピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドと称する； 19―オキソ―12β，20R―ジヒドロキシ―3β―
０―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グ
ルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドＬと称する； 19，20R―ジヒドロキシ―3β―０―〔β―グル
コピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル〕―ダンマル―24―エン 以下ギペノシドLIと称する。 これらは、例えば次の方法によつて抽出し、各
成分に分離される。 先ず初めに、アマチヤヅルを水または含水低級
アルコールで抽出する。含水低級アルコールとし
ては50v／ｖ％程度以下の含水メタノール、含水
エタノール等が例示される。この抽出は加温また
は加熱下に行うのが好ましい。なお、原料のアマ
チヤヅルは、抽出に先立つて予め細切し、あるい
は常法により脱脂したものを用いてもよい。また
抽出溶媒として含水低級アルコールを用いた場合
には抽出液を濃縮してアルコール分を除去したの
ち、適量の水を加えて次の非イオン性吸着樹脂で
の処理に付すのが好ましい。 非イオン性吸着樹脂としては、スチレン―ジビ
ニルベンゼン共重合体からなるハイポーラスなも
のが好ましく、具体的にはアンバーライトXAD
−２（米国ロームアンドハース社製）などが用い
られる。この処理は、吸着樹脂を充填したカラム
に上記で得られた抽出液を通液して行うのが便利
である。この操作によりサポニンが樹脂に吸着さ
れる。 次いで樹脂に吸着されたサポニンを低級アルコ
ールで溶出する。溶出溶媒として用いられる低級
アルコールとしてはメタノール（98％以上）、エ
タノール（95％以上）等が好ましい。なお、溶出
に先立つて予めカラムを水あるいは20v／ｖ％程
度の含水低級アルコールで洗浄するのが好まし
い。 上記で得られた低級アルコール溶出液を次いで
アルミナで処理する。この処理も、アルミナを充
填したカラムを用いて行えば簡便である。この処
理により、サポニンはアルミナに吸着される。な
お、このアルミナでの処理に先立つて上記の低級
アルコール溶出液を予め適宜濃縮しておいてもよ
い。 アルミナに吸着されたサポニンを次いで低級ア
ルコールまたは含水低級アルコールで、好ましく
は50v／ｖ％程度の含水低級アルコールで溶出す
る。この溶出液を濃縮することにより、ギペノシ
ド類の混合物（総サポニン）が得られる。 上記のようにして得られる総サポニンは今まで
に知られていない新規なサポニン類を含有し、こ
れらの各成分は例えば次の方法により分離精製さ
れる。 すなわち、総サポニンを水に溶解し、この水溶
液をスチレン系吸着樹脂、例えばサーバクロム
（Servachrom）XAD−２〔サーバ（Serva）社
製〕で処理し、被吸着物質をメタノールで溶出す
る。溶出液を濃縮後シリカゲルカラムで処理す
る。 シリカゲルに吸着されたサポニンを次いでクロ
ロホルム・低級アルコール・水で好ましくはクロ
ロホルム・メタノール・水（65：35：10）の下層
で溶出し、薄層クロマトグラフイ（TLC）を指
標とし、溶出液をフラクシヨン１〜６に分画す
る。 フラクシヨン１〜６をそれぞれシリカゲルカラ
ムで処理し、次いでシリカゲルに吸着されたサポ
ニンをクロロホルム・低級アルコール・酢酸エチ
ル・水で好ましくはクロロホルム・メタノール・
酢酸エチル・水（２：２：４：１）の下層で分画
溶出する。 上記で得られた各分画溶出液を濃縮し、さらに
TLCの結果を指標にして前記のシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイまたは高速液体クロマトグラ
フイを行い、これらのギペノシド類を各個別に分
離精製すると、先にこの発明の発明者らが見出し
たギペノシド類が得られる。すなわちフラクシヨ
ン１からギペノシド及びがフラクシ
ヨン２からギペノシドが、フラクシヨン３
からギペノシド及びが、フラクシヨ
ン４からギペノシドが、フラクシヨン５か
らギペノシドが、フラクシヨン６からギペ
ノシドがそれぞれ得られる。 次に上記のフラクシヨン２，３，４，６の各残
液を濃縮し、これらをそれぞれヌクレオシル
30C18（nucleocil30C18，30±4μ、西独、エム・ナ
ーゲル社製）カラム７mm×61cm×２本で処理し、
次いでカラムに吸着されたサポニンを35〜45％エ
タノールで溶離することによつてこの発明のギペ
ノシド類を得た。すなわちフラクシヨン２からギ
ペノシド，，ＬおよびLIを、
フラクシヨン３からギペノシド，
，およびを、フラクシヨン４
からギペノシドおよびを、フラ
クシヨン６からギペノシドおよび
が得られた。 またこの発明のギペノシドが、公知のギペノシ
ドを酵素加水分解反応に付して得られることが見
出された。すなわちギペノシド，お
よびをセルラーゼ酵素で加水分解すること
によつて、それぞれからこの発明のギペノシド
，およびが得られた。 かくして得られた一般式（）の化合物を酵素
と接触させることによつて加水分解を行いその30
位、20位および21位の糖の置換分から少なくとも
１個の糖分子を脱離さすことができる。これを３
位の置換分を例にして説明すると、グルコピラノ
シル−グルコピラノシル基又はグルコピラノシル
―アラビノピラノシル基をグルコピラノシル基、
アラビノピラノシル基又は水素原子にそれぞれ加
水分解することができる。20位及び21位について
も同様である。使用する酵素は、Ｏ―グルコシド
結合を切断し得る能力を有する加水分解酵素から
選択利用される。好ましい例としては、ヘスペリ
ジナーゼ、マルターゼ、セルラーゼ、タカジアス
ターゼなどが挙げられる。更にナリンギナーゼ、
ペクチナーゼ、アミラーゼ、エムルシン等を挙げ
ることができる。これらの酵素は、精製品である
必要はなく、粗製であつてもよい。 酵素の使用量は、酵素の種類によつて異なる
が、例えばセルラーゼを用いる場合、式（）の
化合物１ｇ当り約600〜1000単位を使用すればよ
い。 反応は酸性条件下で行うことが好ましく、例え
ばPH４程度の緩衝液中で行うと効果的である。こ
の酸性条件は、酵素の種類によつて多少変えるこ
とが好ましい場合がある。 反応温度は、室温ないし若干高められた温度で
行うのが好ましい。一般に30〜40℃で行われる。
しかしながら、特に限定はない。反応時間は、酵
素の種類と精製度合、反応温度、所望する加水分
解の程度等によつて異なる。一般には２，３時間
から１週間位の反応時間が用いられる。 この発明によれば適宜条件を選定することによ
り、１個の糖分子を選択的に脱離さすことができ
る。勿論１個以上の糖分子が残存するように加水
分解を止めるのが好ましい。 なお、加水分解生成物が複数得られた場合は、
前述のアマチヤヅルの抽出物を精製、分離する際
に用いられたと同様の技法を採用すれば各生成物
に分離することができる。 更にこの発明では、場合により一般式（）の
化合物を混合物として使用してもよい。 この発明における一般式（）の化合物は抗潰
瘍作用、殊に消化器系潰瘍に対する作用を有し、
医薬として有望な新規物質である。 次に実施例にてこの発明を説明する。 実施例 １ 総サポニン画分の製造 兵庫県三原群で採集したアマチヤヅル（地上
部）1.2tを４倍量の水で熱時２回抽出した。再抽
出液を合し（約9.6t）、適当量まで濃縮後、噴霧
乾燥して約25Kgの淡黄褐色粉末エキスを得た。こ
れの200ｇを水２に溶解し、スチレン系吸着樹
脂サーバクロムXAD−２（100〜200μm、サーバ
社製）500mlを充填したカラムに通導した。吸着
部を水４、次いで20％メタノール４で洗浄し
たのち、メタノール２で溶出し、メタノール溶
出液を減圧下に濃縮乾固して黄褐色粉末13.5ｇを
得た。この方法を繰り返して得られた黄褐色粉末
30ｇをメタノール１に溶かし、アルミナ〔70〜
290メツシユ、中性、ウオルム（Woelm）社製〕
500ｇを充填したカラムに通導した。吸着部を50
％メタノール約20で溶出した。溶出液を減圧下
に濃縮乾固し、淡黄色粉末として総サポニン画分
14.2ｇを得た。得られた総サポニンの一般性状は
次の通りであつた。 (i) 黄白色から褐色のやや苦味を有する無臭の粉
末で、メタノール及び希メタノールに易溶、水
及びエタノールに可溶、ベンゼン、クロロホル
ム、エーテル、ヘキサン及び石油エーテルに不
溶、 (ii) １％水溶液は中性、 (iii) 赤外線吸収スペクトル〔IR（KBr）νmax〕
では3370，1650，1070及び1040cm-1の波数、 (iv) 核磁気共鳴スペクトル（PMR，C5D5N）で
は4.0（ブロード）、1.6（ブロード）、1.2（ブロー
ド）及び0.9（ブロード）ppmのシグナル、 (v) 水に添加して振盪すると持続性の小泡を発
生、 (vi) リーベルマン反応及びザルコウスキー反応が
陽性及び (vii) 下記条件下で薄層クロマトグラフイに付すと
き第１図のような紅紫色のスポツトを発現す
る。 プレート：シリカゲル60F254（厚さ0.25mm、メ
ルク社製） 展開溶媒：クロロホルム・メタノール・水（容
量比65：35：10）下層 展開距離：10cm 検 出：１％硫酸セリウム／10％硫酸混合溶液
を噴霧後105℃で５分間加熱 総サポニン画分30ｇを最小量のメタノールに溶
解し、シリカゲル60ｇとよく混和し、溶剤を減圧
下に蒸発乾固したのちシリカゲル（230〜400メツ
シユASTM、メルク社製）500ｇを乾式で充填し
たカラム上に層積し、クロロホルム・メタノー
ル・水（65：35：10）の下層を用いて展開溶出し
た。溶出液を適時TLC〔吸着剤：シリカゲル、溶
媒系：クロロホルム・メタノール・水（65：35：
100）下層、検出：30％硫酸〕で検討を行い、フ
ラクシヨン１〜６に分画し、それぞれ減圧下に濃
縮乾固し、収量はフラクシヨン１が8.6ｇ、フラ
クシヨン２が5.6ｇ、フラクシヨン３が5.1ｇ、フ
ラクシヨン４が5.4ｇ、フラクシヨン５が2.8ｇ及
びフラクシヨン６が2.2ｇであつた。 各フラクシヨンは再度、上記シリカゲルカラム
クロマトグラフに準じて、それぞれ最少量のメタ
ノールに溶解し、倍量のシリカゲルとよく混和
し、溶剤を減圧下に蒸発乾固したのち、50倍量の
シリカゲルを乾式充填したカラムに層積した。ク
ロロホルム・メタノール・水（70：30：10）の下
層で展開溶出し、溶出物をさらに同様の操作を行
い、クロロホルム・メタノール・酢酸エチル・水
（２：２：４：１）の下層で展開溶出した。この
シリカゲルカラムクロマトグラフイによる精製操
作を各フラクシヨン毎に再度繰り返し、フラクシ
ヨン１からギペノシド120mgと粗ギペノシ
ド1.5ｇ、フラクシヨン２からギペノシド
1.2ｇ、フラクシヨン３からギペノシド
80mgとギペノシド350mg、フラクシヨ
ン４からギペノシド850mg、フラクシヨン
５からギペノシド250mg、フラクシヨン６
から粗ギペノシド3000mgをそれぞれ得た。 次に上記のフラクシヨン２，３，４，６の各溶
液を蒸発乾固し、得られた固体のそれぞれ0.5〜
1.0ｇを30％エタノールに溶解し、この溶液をヌ
クレオシル30C18（30±4μ）カラム７mm×61cm×２
本に注入し35〜45％エタノールで展開溶出した。
その結果フラクシヨン２の残液からギペノシド
、、ＬおよびLIがそれぞれ40
mg、40mg、45mg、30mg得られ、フラクシヨン３の
残液からギペノシド，，
およびがそれぞれ45mg、300mg、25mg、
30mg得られ、フラクシヨン４の残液からはギペノ
シドおよびがそれぞれ30mg、35
mg得られ、フラクシヨン６の残液からはギペノシ
ドおよびをそれぞれ40mg、35mg
得た。 得られたギペノシド類の物性を表１、表2a、
表2bに示した。
【表】
＊ ピリジン使用
【表】
【表】
実施例 ２
ギペノシドの酵素加水分解
ギペノシド2000mgを0.005M−NaH2PO4
液（PH4.0）30mlに溶かしセルラーゼ（practical
grade type Ｉ、シグマ社製）200mgを加え37〜
38℃で２時間撹拌した。次いで反応液をサーバク
ロムXAD−２（30ml）カラムに通導し、水500ml
次いで20％メタノール１で洗浄後メタノール
200mlで溶出した。溶出液を減圧濃縮し約160mgの
加水分解物を得た。これを最少量のメタノールに
溶かし、シリカゲル300mgとよく混和し、溶剤を
減圧下に蒸発乾固したのち、シリカゲル10ｇを乾
式充填したカラムに層積し、クロロホルム・メタ
ノール・酢酸エチル・水（２：２：４：１）の下
層で展開溶出した。溶出液を適時TLCで検討し、
ギペノシド画分を分画し、それぞれ減圧
濃縮乾固し、ギペノシド35mgを得た。 実施例 ３ ギペノシドおよびの酵素加水分解
ギペノシドおよびそれぞれ200mgを
実施例２と同様に処理してギペノシドから
ギペノシド25mgを、ギペノシドから
ギペノシド45mgを得た。
液（PH4.0）30mlに溶かしセルラーゼ（practical
grade type Ｉ、シグマ社製）200mgを加え37〜
38℃で２時間撹拌した。次いで反応液をサーバク
ロムXAD−２（30ml）カラムに通導し、水500ml
次いで20％メタノール１で洗浄後メタノール
200mlで溶出した。溶出液を減圧濃縮し約160mgの
加水分解物を得た。これを最少量のメタノールに
溶かし、シリカゲル300mgとよく混和し、溶剤を
減圧下に蒸発乾固したのち、シリカゲル10ｇを乾
式充填したカラムに層積し、クロロホルム・メタ
ノール・酢酸エチル・水（２：２：４：１）の下
層で展開溶出した。溶出液を適時TLCで検討し、
ギペノシド画分を分画し、それぞれ減圧
濃縮乾固し、ギペノシド35mgを得た。 実施例 ３ ギペノシドおよびの酵素加水分解
ギペノシドおよびそれぞれ200mgを
実施例２と同様に処理してギペノシドから
ギペノシド25mgを、ギペノシドから
ギペノシド45mgを得た。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 一般式（） 〔式中R1はβ―グルコピラノシル基、β―グ
ルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル基またはβ―グルコピラノシル（１→２）―α
―アラビノピラノシル基；R2はヒドロキシメチ
ル基またはホルミル基；R3はヒドロキシ基また
は水素原子；R4はβ―グルコピラノシルオキシ
基、α―ラムノピラノシル（１→６）―β―グル
コピラノシルオキシ基、β―キシロピラノシル
（１→６）―β―グルコピラノシルオキシ基、メ
チル基またはヒドロキシ基；R5はメチル基、ヒ
ドロキシ基、ヒドロキシメチル基またはβ―グル
コピラノシルオキシメチル基；但しR1がβ―グ
ルコピラノシル基である場合R2はヒドロキシメ
チル基でR3は水素原子、R1がβ―グルコピラノ
シル（１→２）―α―アラビノピラノシル基であ
る場合R2はホルミル基でR3は水素原子、R1がβ
―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラ
ノシル基、R2がホルミル基かつR3が水素原子の
場合R4はα―ラムノピラノシル（１→６）―β
―グルコピラノニルオキシ基、β―キシロピラノ
シル（１→６）―β―グルコピラノシルオキシ基
またはメチル基〕で表される化合物。 ２ 一般式（）で表される化合物が19，21―ジ
ヒドロキシ―3β―０―β―グルコピラノシル―
20ξ―０―β―グルコピラノシル―ダンマル―24
―エン；19，20ξ，21―トリヒドロキシ―3β―０
―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グル
コピラノシル〕―ダンマル―24―エン；19，20ξ
―ジヒドロキシ―3β―０―β―グルコピラノシ
ル―21―０―β―グルコピラノシル―ダンマル―
24―エン；19―オキソ―21―ヒドロキシ―3β―
０―〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グ
ルコピラノシル〕―20ξ―０―〔α―ラムノピラ
ノシル（１→６）―β―グコピラノシル〕―ダン
マル―24―エン；19―オキソ―21―ヒドロキシ―
3β―０―〔β―グルコピラノシル（１→２）―
β―グルコピラノシル〕―20ξ―０―〔β―キシ
ロピラノシル（１→６）―β―グルコピラノシ
ル〕―ダンマル―24―エン；19―オキソ―3β―
０―〔β―グルコピラノシル（１→２）―α―ア
ラビノピラノシル〕―20S―０―〔α―ラムノピ
ラノシル（１→６）―β―グルコピラノシル〕―
ダンマル―24―エン；19―オキソ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―α―アラビ
ノピラノシル〕―20S―０―〔β―キシロピラノ
シル（１→６）―β―グルコピラノシル〕―ダン
マル―24―エン；12β，19，20S―トリヒドロキ
シ―3β―０―〔β―グルコピラノシル（１→２）
―β―グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エ
ン；12β，19，20R―トリヒドロキシ―3β―０―
〔β―グルコピラノシル（１→２）―β―グルコ
ピラノシル〕―ダンマル―24―エン；19―オキソ
―12β，20R―ジヒドロキシ―3β―０―〔β―グ
ルコピラノシル（１→２）―β―グルコピラノシ
ル〕―ダンマル―24―エン19，20R―ジヒドロキ
シ―3β―０―〔β―グルコピラノシル（１→２）
―β―グルコピラノシル〕―ダンマル―24―エン
のいずれかである特許請求の範囲第１項に記載の
化合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9179382A JPS58208300A (ja) | 1982-05-28 | 1982-05-28 | ギペノシド類 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9179382A JPS58208300A (ja) | 1982-05-28 | 1982-05-28 | ギペノシド類 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58208300A JPS58208300A (ja) | 1983-12-03 |
| JPH0119399B2 true JPH0119399B2 (ja) | 1989-04-11 |
Family
ID=14036484
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9179382A Granted JPS58208300A (ja) | 1982-05-28 | 1982-05-28 | ギペノシド類 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58208300A (ja) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5857398A (ja) * | 1981-10-01 | 1983-04-05 | Nippon Shoji Kk | ギペノシド類 |
-
1982
- 1982-05-28 JP JP9179382A patent/JPS58208300A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58208300A (ja) | 1983-12-03 |
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