JPH01247083A - アスパラガスの組織培養方法 - Google Patents
アスパラガスの組織培養方法Info
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- JPH01247083A JPH01247083A JP63071870A JP7187088A JPH01247083A JP H01247083 A JPH01247083 A JP H01247083A JP 63071870 A JP63071870 A JP 63071870A JP 7187088 A JP7187088 A JP 7187088A JP H01247083 A JPH01247083 A JP H01247083A
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- Japan
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- sucrose
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はアスパラガスの組織培養に関し、特にアスパラ
ガス不定胚生長促進に好適な組織培養方法に関する。
ガス不定胚生長促進に好適な組織培養方法に関する。
アスパラガスの増殖は、従来、播種もしくは株分けによ
って行われてきた。アスパラガスは、雌雄異株であり、
雄株の方が品質や栽培管理の点で良いとされている。さ
らに、遺伝的に変異の大きな作物であるため播種による
増殖は、雌株の混入を招き、又、株毎の収量及び品質の
差異を招き、栽培主著しい問題となっている。また、株
分けによる増殖は多くの人手と長い年月を必要とし、効
率が非常に悪く、ウィルス病などが伝染していく危険性
も非常に高い。
って行われてきた。アスパラガスは、雌雄異株であり、
雄株の方が品質や栽培管理の点で良いとされている。さ
らに、遺伝的に変異の大きな作物であるため播種による
増殖は、雌株の混入を招き、又、株毎の収量及び品質の
差異を招き、栽培主著しい問題となっている。また、株
分けによる増殖は多くの人手と長い年月を必要とし、効
率が非常に悪く、ウィルス病などが伝染していく危険性
も非常に高い。
以上のような問題点を改善する目的で、近年、組織培養
による優良株クローンの大量増殖が注目されている。通
常、アスパラガスの大量増殖は、ＩＪＩ織片を培養し、
多量の苗条（ｓｈｏｏｔ）を増殖させた後、各々を発根
培地に移植し、不定根の分化を経て幼苗となす。しかし
、発根率が一般的に低いために、増殖効率が低いという
問題点がある。また、組繊片を培養し、カルスを形成さ
せたのち、カルスより生じる不定胚を用いて大量増殖の
手法とするための試みがなされている（例えば、昭和６
１年度園芸学会秋季大会研究発表要旨Ｐ２１０〜２１１
、昭和６１．１１．２３〜２５、於流球大学、昭和６２
年度園芸学会研究発表要旨Ｐ２５４〜２５５、昭和６２
．１０．７〜９於九州大学）。不定胚を生長させること
により、発根率が低いという問題は解決するものの、単
離した不定胚はほとんどが培養の途中でカルス化あるい
は奇形化を引き起こすことが問題となっている。
による優良株クローンの大量増殖が注目されている。通
常、アスパラガスの大量増殖は、ＩＪＩ織片を培養し、
多量の苗条（ｓｈｏｏｔ）を増殖させた後、各々を発根
培地に移植し、不定根の分化を経て幼苗となす。しかし
、発根率が一般的に低いために、増殖効率が低いという
問題点がある。また、組繊片を培養し、カルスを形成さ
せたのち、カルスより生じる不定胚を用いて大量増殖の
手法とするための試みがなされている（例えば、昭和６
１年度園芸学会秋季大会研究発表要旨Ｐ２１０〜２１１
、昭和６１．１１．２３〜２５、於流球大学、昭和６２
年度園芸学会研究発表要旨Ｐ２５４〜２５５、昭和６２
．１０．７〜９於九州大学）。不定胚を生長させること
により、発根率が低いという問題は解決するものの、単
離した不定胚はほとんどが培養の途中でカルス化あるい
は奇形化を引き起こすことが問題となっている。
以上のようなことから、効率よく不定胚の正常な生長を
促進する方法の開発が待たれている。
促進する方法の開発が待たれている。
本発明者らは従来のアスパラガスの組織培養方法には前
記した問題点のあることを認知した上で、従来法とは異
なる新規な方法によって組織培養してアスパラガスの種
苗を効率よく増殖する方法について検討した。
記した問題点のあることを認知した上で、従来法とは異
なる新規な方法によって組織培養してアスパラガスの種
苗を効率よく増殖する方法について検討した。
その結果、本発明者らはアスパラガスの不定胚に作用し
て生長を促進させる物質を見出し、これらの知見を基に
してアスパラガスの種苗を効率よく増殖する方法を見出
した。すなわち、本発明によれば、アスパラガスの組織
又は細胞を培養して得られる球状胚を、シュークロース
を０．２Ｍ以上含有する培地を用いて培養してバナナ型
胚を得ることを特徴とするアスパラガスの組織培養方法
、及びアスパラガスの組織又は細胞を培養して得られる
球状胚を、シェークロース０．１ Ｍ以上及びグルコー
ス０．０５Ｍ以上含有する培地を用いて培養してバナナ
型胚を得ることを特徴とするアスパラガスの組織培養方
法が提供される。
て生長を促進させる物質を見出し、これらの知見を基に
してアスパラガスの種苗を効率よく増殖する方法を見出
した。すなわち、本発明によれば、アスパラガスの組織
又は細胞を培養して得られる球状胚を、シュークロース
を０．２Ｍ以上含有する培地を用いて培養してバナナ型
胚を得ることを特徴とするアスパラガスの組織培養方法
、及びアスパラガスの組織又は細胞を培養して得られる
球状胚を、シェークロース０．１ Ｍ以上及びグルコー
ス０．０５Ｍ以上含有する培地を用いて培養してバナナ
型胚を得ることを特徴とするアスパラガスの組織培養方
法が提供される。
本発明の方法が適用できる植物としては、アスパラガス
があげられる。
があげられる。
本発明の組織培養方法はアスパラガスの球状胚段階の不
定胚を用いて行う。具体的には、胚、茎頂、凝集、地下
茎またはその他の組織、細胞あるいはこれらより生じた
カルス由来の球状胚段階の不定胚を例示することができ
る。
定胚を用いて行う。具体的には、胚、茎頂、凝集、地下
茎またはその他の組織、細胞あるいはこれらより生じた
カルス由来の球状胚段階の不定胚を例示することができ
る。
本発明に係わる組織培養方法では、培養基中に特定濃度
のシュークロース又は特定濃度のシュークロースとグル
コースを添加してから組織培養が行われる。
のシュークロース又は特定濃度のシュークロースとグル
コースを添加してから組織培養が行われる。
以下、本発明に係わる組織培養方法について詳述する。
本発明の組織培養法では、シュークロース単独又はシュ
ークロースとグルコースを特定の濃度で培養基中に添加
し、組織培養を行なう。
ークロースとグルコースを特定の濃度で培養基中に添加
し、組織培養を行なう。
培地へ添加される上記化合物の濃度は、シュークロース
単独では０．２Ｍ以上、グルコースとの併用ではシュー
クロース０．１ Ｍ以上、グルコース０゜０５Ｍ以上で
あり、この濃度において前記不定胚の生長が良好である
。
単独では０．２Ｍ以上、グルコースとの併用ではシュー
クロース０．１ Ｍ以上、グルコース０゜０５Ｍ以上で
あり、この濃度において前記不定胚の生長が良好である
。
本発明で使用される培地は、無機成分及び炭素源を必須
成分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加し
、更に必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である。
成分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加し
、更に必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である。
該培地の無機成分としては、窒素、リン、カリウム、ナ
トリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、マ
ンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コ
バルト等の元素を含む無機塩をあげることができ、具体
的には、硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニ
ウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸■水素カ
リウム、リン酸２水素ナトリウム、硫酸マグネシウム、
塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム、硫酸第１鉄、硫酸
第２鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、モリブデン酸ナトリウ
ム、三酸化モリブデン、ヨウ化カリウム、硫酸亜鉛、ホ
ウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示できる。
トリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、マ
ンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コ
バルト等の元素を含む無機塩をあげることができ、具体
的には、硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニ
ウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸■水素カ
リウム、リン酸２水素ナトリウム、硫酸マグネシウム、
塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム、硫酸第１鉄、硫酸
第２鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、モリブデン酸ナトリウ
ム、三酸化モリブデン、ヨウ化カリウム、硫酸亜鉛、ホ
ウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示できる。
該培地の炭素源としては、前記のシュークロースやグル
コース以外に他の炭水化物やその誘導体、脂肪酸などの
有機酸及びエタノール等の１級アルコールなどを添加し
てもよい。
コース以外に他の炭水化物やその誘導体、脂肪酸などの
有機酸及びエタノール等の１級アルコールなどを添加し
てもよい。
該培地の植物ホルモンとしては、例えば、ナフタレン酢
酸（ＮＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）、ｐ−クロロ
フェノキシ酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２
，４−Ｄ）、インドール酪酸（ＩＢＭ）、及びこれらの
誘導体等のオーキシン類及びベンジルアデニン（ＢＡ）
、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン類を例示で
きる。
酸（ＮＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）、ｐ−クロロ
フェノキシ酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２
，４−Ｄ）、インドール酪酸（ＩＢＭ）、及びこれらの
誘導体等のオーキシン類及びベンジルアデニン（ＢＡ）
、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン類を例示で
きる。
該培地のビタミン類としては、ビオチン、チアミン（ビ
タミンＢ、）、ピリドキシン（ビタミンＢ６）、ピリド
キサール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、
アスコルビン酸（ビタミンＣ）、イノシトール、ニコチ
ン酸、ニコチン酸アミド及びリボフラビン（ビタミンＢ
、）などを例示できる。
タミンＢ、）、ピリドキシン（ビタミンＢ６）、ピリド
キサール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、
アスコルビン酸（ビタミンＣ）、イノシトール、ニコチ
ン酸、ニコチン酸アミド及びリボフラビン（ビタミンＢ
、）などを例示できる。
該培地のアミノ酸類としては、例えばグリシン、アラニ
ン、グルタミン、システィン、フェニルアラニン及びリ
ジンなどを例示できる。
ン、グルタミン、システィン、フェニルアラニン及びリ
ジンなどを例示できる。
本発明の前記培地は、通常は、前記無機成分を約０．１
μＨないし約１００ｍＭ 、前記植物ホルモン類を約０
．０１■／ｌないし約１５０ｍｇ／ｊ！及び前記アミノ
酸類を０ないし約１０００■／Ｉ！、含ませて使用され
ることが望ましい。
μＨないし約１００ｍＭ 、前記植物ホルモン類を約０
．０１■／ｌないし約１５０ｍｇ／ｊ！及び前記アミノ
酸類を０ないし約１０００■／Ｉ！、含ませて使用され
ることが望ましい。
本発明に係わる組織培養に用いられる前記培地として具
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’６２
） ［Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋｏｏｇ］の培地、
リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５） ［Ｌｉ
ｎｓｍａｉｅｒ＆ Ｓｋｏｏｇ］の培地、ホワイト （
’６３） ［Ｗｈｉｔｅ］の培地、ガンボルグ［Ｇａｍ
ｂｏｒｇ］の８−５培地、三片の門−９培地、−１−７
チ・エッチの培地［Ｎ１ｔｃｈ ＆ Ｎ１ｔｃｈ］等に
前記した炭素源及び植物ホルモンを添加し、更に必要に
応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加して調整
された培地を例示できるが本発明ではこの中でも特にエ
ッチ・エッチ、リンスマイヤー・スクーグ、ムラシゲ・
スクーグの培地を用いて調整される培地が好ましい。上
記した従来公知の培地の組成に視しては、例えば、行内
、中込、古谷著の「新植物組織培養ｊ ｐ３８６〜ｐ３
９１、朝倉書店、１９７９年に記載されている。本発明
で使用できる前記培地は液体培地又は例えば寒天やゲル
ライトなどのゲル化剤を通常０．１〜２％含有させた固
形培地である。
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’６２
） ［Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋｏｏｇ］の培地、
リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５） ［Ｌｉ
ｎｓｍａｉｅｒ＆ Ｓｋｏｏｇ］の培地、ホワイト （
’６３） ［Ｗｈｉｔｅ］の培地、ガンボルグ［Ｇａｍ
ｂｏｒｇ］の８−５培地、三片の門−９培地、−１−７
チ・エッチの培地［Ｎ１ｔｃｈ ＆ Ｎ１ｔｃｈ］等に
前記した炭素源及び植物ホルモンを添加し、更に必要に
応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加して調整
された培地を例示できるが本発明ではこの中でも特にエ
ッチ・エッチ、リンスマイヤー・スクーグ、ムラシゲ・
スクーグの培地を用いて調整される培地が好ましい。上
記した従来公知の培地の組成に視しては、例えば、行内
、中込、古谷著の「新植物組織培養ｊ ｐ３８６〜ｐ３
９１、朝倉書店、１９７９年に記載されている。本発明
で使用できる前記培地は液体培地又は例えば寒天やゲル
ライトなどのゲル化剤を通常０．１〜２％含有させた固
形培地である。
本発明によれば、アスパラガスの不定胚を効率よく生長
させ、球状胚の段階からバナナ型胚へと移行させること
ができる。尚、本発明で得られた゛植物は、通常の栽培
を行うと、性質が一定で健全な植物体に生長させること
ができるため、アスパラガスの種苗を効率よく増殖する
ことができる。
させ、球状胚の段階からバナナ型胚へと移行させること
ができる。尚、本発明で得られた゛植物は、通常の栽培
を行うと、性質が一定で健全な植物体に生長させること
ができるため、アスパラガスの種苗を効率よく増殖する
ことができる。
実施例１〜２
アスパラガスカルスより実体顕微鏡下で球状胚に相当す
る不定胚を採取し、得られた不定胚を窒素源を２にした
ＭＳ培地を基本とし、シュークロース０．２又は０．３
Ｍ、 ビオチン０．０５■／２、葉酸０．５■／ｌ、
グルタミン２ｍＭ、寒天７ｇ ／ｌを含有スるｐＨ５，
６の無菌のムラシゲスクーグの固形培地を調整し、これ
に先のアスパラガスの不定胚を２０個置床して、２５°
Ｃ２暗黒下で２週間培養したところ、球状胚からバナナ
型胚に成長した割合（不定胚成長率）として表１に示す
結果を得た。
る不定胚を採取し、得られた不定胚を窒素源を２にした
ＭＳ培地を基本とし、シュークロース０．２又は０．３
Ｍ、 ビオチン０．０５■／２、葉酸０．５■／ｌ、
グルタミン２ｍＭ、寒天７ｇ ／ｌを含有スるｐＨ５，
６の無菌のムラシゲスクーグの固形培地を調整し、これ
に先のアスパラガスの不定胚を２０個置床して、２５°
Ｃ２暗黒下で２週間培養したところ、球状胚からバナナ
型胚に成長した割合（不定胚成長率）として表１に示す
結果を得た。
シュークロース０．２又は０．３ Ｍを添加した培地は
、不定胚の生長率はどちらも比較例１に比べて増加した
。
、不定胚の生長率はどちらも比較例１に比べて増加した
。
実施例３
実施例１において、シュークロース０．１Ｍ及びグルコ
ース０．１Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
ース０．１Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
実施例４
実施例１において、シュークロース０．２Ｍ及びグルコ
ース０．１Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
ース０．１Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
実施例５
実施例１において、シュークロース０．１Ｍ及びグルコ
ース０．２Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
ース０．２Ｍを添加する以外は該実施例１と同様にして
アスパラガス不定胚を培養した結果、表１に示す結果を
得た。このとき、不定胚の生長率は比較例１に比べて増
加した。
比較例１
実施例１において、シェークロース０．１Ｍを添加する
こと以外は実施例１と同様にしてアスパラガス不定胚を
培養した。
こと以外は実施例１と同様にしてアスパラガス不定胚を
培養した。
（木頁以下余白）
〔発明の効果〕
本発明に係わるアスパラガスの組織培養方法を用いれば
、アスパラガス不定胚がカルス化及び奇形化せずにバナ
ナ型胚へと成長する正常な発育が著しく促進されるので
、これを経由して種苗を大量に増殖することができる。
、アスパラガス不定胚がカルス化及び奇形化せずにバナ
ナ型胚へと成長する正常な発育が著しく促進されるので
、これを経由して種苗を大量に増殖することができる。
従って、本発明方法によれば、アスパラガスの組織から
従来法に比べて効率よく高品質の植物体を大量に培養す
ることができ、種苗を大量に増殖することができる。
従来法に比べて効率よく高品質の植物体を大量に培養す
ることができ、種苗を大量に増殖することができる。
出願人 三井石油化学工業株式会社
代理人 弁理士 平 木 祐 輔
Claims (2)
- （１）アスパラガスの組織又は細胞を培養して得られる
球状胚を、シュークロースを０．２Ｍ以上含有する培地
を用いて培養してバナナ型胚を得ることを特徴とするア
スパラガスの組織培養方法。 - （２）アスパラガスの組織又は細胞を培養して得られる
球状胚を、シュークロース０．１Ｍ以上及びグルコース
０．０５Ｍ以上含有する培地を用いて培養してバナナ型
胚を得ることを特徴とするアスパラガスの組織培養方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63071870A JPH01247083A (ja) | 1988-03-28 | 1988-03-28 | アスパラガスの組織培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63071870A JPH01247083A (ja) | 1988-03-28 | 1988-03-28 | アスパラガスの組織培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01247083A true JPH01247083A (ja) | 1989-10-02 |
Family
ID=13472983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63071870A Pending JPH01247083A (ja) | 1988-03-28 | 1988-03-28 | アスパラガスの組織培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01247083A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0646840A (ja) * | 1992-08-04 | 1994-02-22 | Nippon Zenyaku Kogyo Kk | 細胞凍結保存液 |
-
1988
- 1988-03-28 JP JP63071870A patent/JPH01247083A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0646840A (ja) * | 1992-08-04 | 1994-02-22 | Nippon Zenyaku Kogyo Kk | 細胞凍結保存液 |
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