JPH0135670B2 - - Google Patents
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- JPH0135670B2 JPH0135670B2 JP57048829A JP4882982A JPH0135670B2 JP H0135670 B2 JPH0135670 B2 JP H0135670B2 JP 57048829 A JP57048829 A JP 57048829A JP 4882982 A JP4882982 A JP 4882982A JP H0135670 B2 JPH0135670 B2 JP H0135670B2
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Description
本発明は、担体に被吸着物質と結合可能な官能
部を有する物質を保持させてなる体液浄化用吸着
材およびその製造法に関する。さらに詳しくは、
癌、免疫増殖性症候群、慢性関節リウマチ、全身
性エリテマトーデス、重症筋無力症、アレルギ
ー、臓器移殖時の拒絶反応等の生体免疫機能に関
係した疾患および現象、あるいは腎炎等の腎臓
病、肝炎等の肝臓病などにおいて、血液、血漿等
の体液中に発現し、疾患の原因あるいは進行と密
接な関係をもつていると考えられる悪性物質を、
体液中より吸着、除去する吸着材に関し、特に慢
性関筋リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症
筋無力症等の自己免疫疾患において、体液中に発
生する自己抗体および／または免疫複合体を吸着
除去する吸着材およびその製造法に関する。 従来、体液浄化治療には、主に肝臓病用に人工
肝臓として活性炭あるいは活性炭を親水性高分子
でコートしたものが用いられてきた。しかし、上
記のように幾多の疾患において、疾患の原因ある
いは進行と密接な関係にある種々の悪性物質が知
られるようになり、さらには該悪性物質を体液中
より選択的に除去する要請が高まつてきたが、活
性炭をベースとする吸着材は、その吸着選択性が
低く、本要請に答えられないのが現状である。 本発明者らは、この悪性物質の選択的吸着、除
去の要請に答えるため鋭意研究の結果、担体に被
吸着物質と化学的な選択的相互作用をなす特別な
物質を化学結合により保持させてなる種々の吸着
材を見い出し、先に特許出願した（特願昭56−
7152、特願昭56−76776、特願昭56−159444）。 さらに本発明者らは、ビニルアルコール単位を
主構成々分とする架橋共重合体からなる担体に結
合した疎水性化合物および／または塑水性化合物
を含む重合体、およびブリン塩基またはピリミジ
ン塩基を構成要素として含む低分子量の物質ない
しはその誘導体の少なくとも１種および／または
糖リン酸を構成要素として含む低分子量の物質な
いしはその誘導体の少なくとも１種、ならびに糖
および／またはオリゴ糖が極めて高活性に自己抗
体、免疫複合体を特異的に吸着することを見い出
し、先に特許出願した（特願昭56−112919、特願
昭56−193735、特願昭57−14276）。 本発明は、先の発明に関して担体と被吸着物質
と結合可能な官能部を含有する物質（以下、リガ
ンドと称す。）との結合剤について、より詳細に
検討した結果なされたものであり、体液浄化用吸
着材における結合剤の吸着材の製造法に関する。 従来、本目的を対象として特別に設計された担
体、結合剤は知られていないが、これに近いもの
ではアフイニテイークロマトグラフ用ゲルがあ
る。アフイニテイークロマトグラフ用ゲルは、担
体としてアガロース系、デキストラン系、セルロ
ース系等の天然物多糖類が多く用いられ、その糖
鎖中の水酸基を利用して、各種結合剤を用いて目
的とするリガンドを結合させアフイニテイー吸着
体として用いられている。その際用いられるリガ
ンド結合方法として、ハロゲン化シアン法、ハロ
ゲン化トリアジン法、ブロモアセチルプロミド法
等数多くの方法が知られているが、ハロゲン化シ
アンを用いる方法が、分子内にアミノ基をもつア
ミノ酸、ペプチドおよび蛋白質などの生体成分が
比較的温和な条件下に、一段階の簡単な反応によ
つて固定化できることから、最も一般的に広く用
いられている。水酸基を有する合成高分子からな
る担体も、天然多糖類と同様に水酸基を有するこ
とから、同様にハロゲン化シアンを用いて、アミ
ノ基などの活性基を有するリガンドを結合させる
ことが可能である。 しかしながら、水酸基を有する担体にハロゲン
化シアンを介してリガンドを結合させてなる吸着
材は、体液浄化体外循環等の治療用に用いる時、
以下の欠点を有する。 (1) ハロゲン化シアンを介してリガンドを結合さ
せたものは、担体とリガンドがイソウレア結
合、イミドカルボネート結合、カルバメート結
合等の不特定複数の結合により結ばれていると
言われているが、これらの結果はいずれも、熱
的にも化学的にも比較的不安定であり、高圧蒸
気のような熱滅菌や、放射線滅菌に不適であ
り、また保存安定性も悪いこと。 (2) ハロゲン化シアンそのものは、シアノ化合物
であり毒性が強く、治療用に用いるとき微量の
残留物または分解物の毒性も無視し得ないこ
と。 (3) ハロゲン化シアンは非常に反応性が高く、発
熱を伴い激しく反応することから、反応の制御
が難しく、少量を取り扱う実験室レベルでの使
用には問題はないが、工業的な規模での生産に
は向かないこと。 (4) ハロゲン化シアンと担体の水酸基との反応
は、活性なイミドカルボネート生成反応の他に
副反応も起こり、活性比率を巾広く調節した
り、活性基を高密度に上げることは困難であ
り、また活性基密度を定量することも困難であ
る。その結果、結合させるリガンドの量の調節
が難かしく、高密度にリガンドを結合させるこ
とも難かしい。 (5) ハロゲン化シアンを介して担体をリガンドと
結合させてなる吸着材は、その結合手を構成す
るイソウレア結合、イミドカルボネート結合、
カルバメート結合の影響で血液等体液成分中の
蛋白を非特異的に吸着しやすいこと。 またハロゲン化トリアジンを用いる方法、ブ
ロモアセチルブロミドを用いる方法についても
ほぼハロゲン化シアンと同様な欠点を有してお
り、体液浄化、体外循環等の治療用には不適で
ある。 本発明の目的は、上記の如き従来技術に基づく
担体とリガンドの結合剤の問題点に鑑み、一般的
に普及可能であり、体液中の悪性物質を高活性か
つ特異的に吸着し、非特異吸着が少なく安定な活
性を保持し、安全性があり、滅菌操作も簡易に行
なうことができ、体液浄化あるいは再生用に適し
た吸着材およびその製造法を提供せんとするもの
である。 本発明者らは、上記目的に沿つて研究を進め、
水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体に、
疎水性化合物および／または疎水性化合物を含む
重合体、およびプリン塩基またはピリミジン塩基
を構成要素として含む低分子量の物質ないしはそ
の誘導体の少なくとも１種および／または糖リン
酸を構成要素として含む低分子量の物質ないしは
その誘導体の少なくとも１種、ならびに糖およ
び／またはオリゴ糖などの低分子量リガンドなら
びにプテインＡ、C1q、DNA、RNA、変性γグ
ロブリン、各種抗体等の高分子量リガンドを各種
結合剤を介して結合させ、自己抗体および免疫複
合体に対する結合活性および血漿蛋白の非特異吸
着等、体液浄化用吸着材としての使用可否につい
て評価したところ、水酸基を有する架橋合成高分
子からなる担体に、２−ヒドロキシトリメチレン
基を構成要素として含む結合手を介して、上記の
ような種々のリガンドを結合させてなる吸着材が
上記の問題点を解決することを見い出し、本発明
を完成するに至つた。 すなわち、本発明は、水酸基を有する架橋合成
高分子からなる担体に、２−ヒドロキシトリメチ
レン基を構成要素として含む結合手を介して、被
吸着物質と結合可能な官能部を含有する物質が結
合されていることを特徴とする体液浄化用の吸着
材に係り、また、水酸基を有する架橋合成高分子
からなる担体に、溶液中で担体に結合可能な官能
基とメチルオキシラン基の両者を含有する結合剤
を結合させ、さらに該メチルオキシラン基に被吸
着物と結合可能な官能部を含有する物質を反応さ
せることを特徴とする体液浄化用吸着材の製造法
に係る。 本目的に用いる担体としては、血漿タンパク
の非特異吸着が少ない、補体系、凝固系を活性
化しない等の血漿タンパクとの相互作用特性およ
び吸着特性が要求される。また安全性の面では、
滅菌可能であること、物理的強度があり、担
体のカケやクダケが発生しないこと、担体より
溶出物がないことが要求される。さらに全血用吸
着材として用いる場合には、血球成分との相互作
用、すなわち、血栓形成や血球成分の非特異粘着
残血等が問題になる。デキストラン、アガロー
ス、セルロース等の糖を含む天然高分子系担体
は、血球、血漿成分と相互作用し、補体系の活性
化、凝固系の活性化を起こす。一方、合成高分子
系担体は、比較的これらの問題を起こさせないと
されている。水酸基を有する架橋合成高分子から
なる担体は、以上の問題点を解決するものであ
り、最も好ましいものである。水酸基を有する架
橋合成高分子からなる担体は、その親水性のた
め、血漿中の蛋白質等溶質との相互作用が小さ
く、非特異吸着を最小限に低下させる。また血漿
中の補体系、凝固系と相互作用しない等の極めて
優れた特性を有する。物理的特性の面でも、耐熱
性を有し、熱滅菌を可能ならしめ、さらには合成
高分子の特性である物理的機械的強度に優れてい
る。全血用吸着材の担体として用いる場合にも、
血球成分との相互作用が少なく、血栓形成や血球
成分の非特異粘着、残血等を最小限におさえる等
の極めて優れた特性を併せ持つている。 本発明の架橋合成高分子の水酸基の密度は、高
くなればなるほどその親水性が増加し、血液成分
との相互作用を最小にする上では好都合であり、
また活性化試薬で活性化した場合の活性基密度も
高水準に保持でき好ましいが、一方、架橋密度
（架橋剤含量）との関係で、物理的、機械的強度
が低下する。したがつて、水酸基密度としては１
〜17meq／ｇが好ましく、より好ましくは６〜
15meq／ｇである。 水酸基密度は、担体をピリジン溶媒中で無水酢
酸と反応させて、水酸基と反応して消費した無水
酢酸の量または担体の重量変化を測定し、これか
ら求めることができる。乾燥担体１ｇが１ｍmol
の無水酢酸と反応したときの水酸基密度が
1meq／ｇである。 水酸基を有する架橋合成高分子は、水酸基を有
するモノマーの重合またはポリマーの化学反応に
よる水酸基の導入により合成できる。両者を併用
して合成することもできる。重合方法としては、
ラジカル重合法を用いることができる。架橋剤は
重合時共重合により導入してもよいし、またポリ
マーの化学反応（ポリマー間、ポリマーと架橋
剤）で導入してもよく、両者を併用してもよい。 一例をあげると、ビニル系モノマーとビニル系
またはアリル系架橋剤との共重合により作ること
ができる。この場合のビニル系モノマーとして
は、２−ヒドロキシエチルアクリレート、２−ヒ
ドロキシエチルメタアクリレート等の（メタ）ア
クリレート類、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル
等のカルボン酸のビニルエステル類、メチルビニ
ルエーテル、エチルビニルエーテル等のビニルエ
ーテル類、エチレンカーボネートおよびその誘導
体を例示することができる。 架橋剤としては、トリアリルイソシアヌレー
ト、トリアリルシアヌレート等のアリル化合物
類、エチレングリコールジメタアクリレート、ジ
エチレングリコールジメタアクリレート、ペンタ
エリスリトールジメタアクリレート等のジ（メ
タ）アクリレート類、ブタンジオールジビニルエ
ーテル、ジエチレングリコールジビニルエーテ
ル、テトラビニルグリオキザール等のポリビニル
エーテル類、ジアリリデンペンタエリスリツト、
テトラアリロキシエタンのようなポリアリルエー
テル類、グリシジルメタクリレート等のグリシジ
ルアクリレート類を用いることができる。また必
要に応じて、他のコモノマーを共重合したものも
用いることができる。 また、水酸基を有する親水性架橋高分子の例と
しては、特公昭44−20917、特開昭52−138077、
特開昭53−1087、特開昭55−80406、特開昭55−
104301号に開示された合成方法および担体を用い
ることもできる。２−ヒロキシエチルメタアクリ
レートを主構成々分とする水酸基を有する親水性
架橋高分子の例としては、スフエロン（Spheron
チエコアカデミー製）を用いることができるが、
非特異吸着面で架橋ポリビニルアルコールが好ま
しい。 さらに、カルボン酸のビニルエステルとイソシ
アヌレート環を有するビニル化合物（アリル化合
物）を共重合し、共重合体を加水分解して得られ
るポリビニルアルコールのトリアリルイソシアヌ
レート架橋体が、強度、化学的安定性の面で特に
良好な担体を与える。 以上ビニル系共重合体の場合を例示したが、本
発明は、これに限定されるものではない。 本担体の形状としては、球状、粒状、糸状、中
空糸状、平膜状等いずれも有効に用いられるが、
その担体表面積（吸着材としての吸着能力）およ
び体外循環時の体液の流通面より、球状または粒
状が特に好ましく用いられる。したがつて、担体
の合成法としては、公知の懸濁重合法が特に有効
に用いられる。 球状または粒子状担体の平均粒径は25〜2500μ
ｍのものも利用できるが、その比表面積（吸着材
としての吸着能力）と体液の流通面より、150〜
1500μｍのものが特に好ましい。 本発明においては、好ましくは水酸基を有する
架橋合成高分子の比表面積が少なくとも５m2／ｇ
を保持する硬質架橋合成高分子を用いる。 本発明において硬質架橋合成高分子とは、外力
を加えたときその物性値が一定値以上を保持する
ものをいう。具体的には、架橋合成高分子を直径
10mm、長さ50mmの容器に最密に充填し通水すると
き、容器の入口と出口の圧力差が200mmHgの状態
で、架橋合成高分子の体積減少率が10％以下であ
るものをいう。また、このような架橋合成高分子
は凍結乾燥したとき、その比表面積は５m2／ｇ以
上の値を保持する。 ここで、比表面積とは、乾燥架橋合成高分子単
位重量当りに吸着した窒素ガスが占有する表面で
もつて表示したものである。つまり比表面積は単
位重量の架橋合成高分子を構成する物質が乾燥状
態でいかに有効に表面を形成しているかを表示し
ている。 一般に架橋合成高分子は、その架橋合成高分子
と親和性のある媒体中で膨潤し、乾燥すると収縮
する。膨潤時に媒体が満たされているポアーが架
橋の網目のみで維持されている軟質ゲルの場合
は、乾燥すると網目がつぶれてしまい、ポアーは
ほとんど消失する。この場合の比表面積は、ほと
んど粒子の外側だけの値になるため、一般に１
m2／ｇ以下の低い値を示す従来アフイニテイクロ
マトグラフイ用として知られているアガロースは
軟質ゲルであるため、乾燥によつてポアーが消失
してしまう。したがつて、滅菌操作も容易に行え
ず、さらには、つぶれやすい軟質の網目を持つて
いるため、カラムに充填し体外循環に用いる場合
にも、体液を長時間、高流速で流すことができな
い。 一方、ポアーがしつかりした構造をもち、凍結
乾燥や熱滅菌に耐える硬質架橋合成高分子の場合
には、乾燥した際にポアーは多少収縮するもの
の、膨潤時の状態をほとんど維持する。つまりパ
ーマネントポアーを有し、比表面積は軟質ゲルよ
り高い値を示し、少なくとも５m2／ｇ以上の値を
示す。 本発明の比表面積の測定は、最も一般的な窒素
ガスによるペツト法（BET法）で求めた。また
比表面積測定に用いるサンプルは、十分乾燥して
おかなければならないが、本発明の架橋合成高分
子は乾燥しにくいこともあり、水にぬれた担体を
アセトンで平衡にした後、60℃以下で減圧乾燥し
て測定に供した。 本発明に用いる架橋合成高分子の保水量（以下
WRという）は0.5〜16ｇ／ｇの範囲にあるのが適
当であり、好ましくは1.0〜15.0ｇ／ｇの範囲で
ある。 WRとは、架橋合成高分子を生理食塩水と平衡
にした時、粒子内に含みうる生理食塩水の量を架
橋合成高分子乾燥重量あたりの値として表示した
ものである。つまりWRは架橋合成高分子内の孔
量の目安になる。WRが大きくなると、水中にお
いて架橋共重合体単位体積あたりの骨格を形成す
る部分、つまり架橋合成高分子そのものの重量が
相対的に低下し、そのため生理食塩水中さらには
体液中において、架橋合成高分子の機械的強度が
低下する。またWRが小さくなると、吸着に単位
重量（または単位体積）あたりの孔量が少なくな
るので吸着能力が低下する。したがつて、WRが
適当な範囲にあることが本目的の担体にとつて好
ましい。 WRは予め十分に乾燥した架橋合成高分子の重
量（W2）を測定した後に、生理食塩水と十分平
衡にした架橋合成高分子を遠心分離器にかけて架
橋合成高分子表面に付着している生理食塩水を除
去した後、その重量（W1）を測定し、次式によ
つて求めることができる。 WR＝W1−W2／W2（ｇ／ｇ） 担体の排除限界分子量（蛋白質）としては、本
発明の目的吸着物質の分子量が15万（IgG）より
免疫複合体特にIgM免疫複合体の場合には1000万
に達するので、15〜1000万が好ましい。本発明の
目的に最も汎用的な排除限界分子量は100〜500万
である。 本目的に用いる担体とリガンドの結合剤とし
は、容易にかつ温和な条件下で担体とリガンド
を結合できること、形成される結合手が化学
的、熱的に安定であり、保存時に容易にその結合
が切れることがなく、滅菌、好ましくは薬剤を全
く用いない熱滅菌により切れることがないこと、
結合剤自体の毒性が低く安全なこと、結合剤
の反応性がおだやかで、工業的に大量に取り扱う
に容易なこと、定量的に担体およびリガンドと
結合し、結合剤の量が調整により容易に結合リガ
ンド密度の調整ができ、かつ高密度の結合が可能
なこと、結合手自体への蛋白質の非特異的吸着
が少ないこと、が要求される。 本発明者らは、これらの要求を満たす担体とリ
ガンドの結合手について検討した結果、エポキシ
系結合剤に由来する２−ヒドロキシトリメチレン
基を構成要素として含む結合手が以上の問題をみ
ごとに解決することを見い出した。 メチルオキシラン誘導体は、そのエポキシ基と
水酸基、アミノ基、チオール基との間で反応し、
それぞれ２−ヒドロキシトリメチレン基とエーテ
ル結合、アルキルアミン結合、チオエーテル結合
で結ばれた化学結合を形成するが、この反応は温
和な条件下で副反応を伴わず進行し、生成する結
合は化学的に非常な安定な結合であり、熱的にも
安定な結合である。また、そのエポキシ基は水中
でも安定であり、反応の際に激しい発熱もなく、
工業的に大量に取扱うにも容易である。また、こ
のエポキシ基は水中で分解された際にはグリコー
ル誘導体となり、毒性の面でも低毒性であり安全
である。メチルオキシラン基が反応して形成され
る２−ヒドロキシトリメチレン基は水酸基を含む
親水性な基であるため、この基への蛋白質の非特
異的吸着も少なく問題にならない。 このようなメチルオキシラン基を含有する結合
剤としては、エピクロルヒドリンで代表されるエ
ピハロヒドリン、グリシジルアクリレートまたは
メタアクリレート、およびビスエポキシド類があ
げられるが、ビスエポキシドの例としては、１，
２−ビス−（２，３−エポキシプロポキシ）−エタ
ン、１，４−ビス−（２，３−エポキシプロポキ
シ−ブタン、１，６−ビス−（２，３−エポキシ
プロポキシ）−ヘキサンなどが挙げられる。２−
ヒドロキシトリメチレン基を含む担体とリガンド
の結合手の例としては、上記のエポキシ系結合剤
が直接担体とリガンドに結合した形のものの他
に、担体にエポキシ系結合剤、例えばエピクロル
ヒドリンを結合させたのち、さらにフロログルシ
ノールのような多官能性化合物を結合させ、さら
にリガンドと共有結合可能な基を有するジビニル
スルホンのごとき化合物を結合させたのち、リガ
ンドを結合させるというように、担体とリガンド
の間にスペーサーを介して結合してもよい。 これらのエポキシ系結合剤の中では、非対称な
構造を有するエピハロヒドリンが、二つの官能基
の反応性の差が大きいことから、担体と結合剤と
の反応の際に、結合剤の二つの官能基が両者とも
反応してしまうことにより起る架橋反応が起りに
くく、より好ましい。 エピクロルヒドリンを例にとつて、ビニルアル
コール単位を主構成々分とする架橋合成高分子か
らなる担体に、リガンドを結合する方法を示す。 先ず担体を担体と同体積ないしは担体の十倍程
度の体積の溶媒中に懸濁させる。溶媒は担体に親
和力のある親水性ないし極性溶媒であればよく、
かつエピクロルヒドリンと反応性を持たないもの
がよい。具体的には、水、非プロトン性極性有機
溶剤、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホ
キシド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトン、ジオ
キサン、テトラヒドロフランなどが挙げられる
が、非プロトン性極性有機溶剤の方が水に比べて
高いエポキシ基結合量が得られ好ましい。これら
の極性有機溶剤に適度の水を混合させて使用する
ことも可能であり、この場合系中の水分量を１ml
の担体当り0.1ml程度以内に保てば、水の影響は
殆んどない。上記の極性有機溶剤の中でも、特に
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ−メ
チルピロリドン等の極性の強い溶媒が、担体を良
く膨潤させ、高いエポキシ基結合量が得られ、よ
り好ましい。 この反応系にエピクロルヒドリンを担体の水酸
基のモル数の0.01倍ないし50倍程度のモル数加え
る。加えるエピクロルヒドリンの量が多くなるに
したがい結合量も増えるが、過剰に加えたエピク
ロルヒドリンは溶媒の役割も果す。反応を進行さ
せるために水酸化ナトリウムのようなアルカリを
加える。加えるアルカリ量は、エピクロルヒドリ
ンのモル数の0.01倍ないし１倍が好ましい。反応
温度は０℃から100℃の間で可能であるが、あま
り低温では反応速度が遅く、100℃を越える高温
では副反応の架橋が起こりやすくなる。実用的に
は室温付近の20℃から50℃の範囲がより好まし
い。反応の時間は、数分ないし10時間程度の時間
を反応温度と希望する結合量に鑑みて選ぶ。この
ように反応させることにより、担体の水酸基にメ
チルオキシラン基がエーテル結合を介して結合さ
れる。 また１，２−ビス−（２，３−エポキシプロポ
キシ）−エタンのようなビスエポキシドを担体に
結合させる場合も、ほぼエピクロルヒドリンの場
合と同様の条件で結合可能であるが、この場合
は、反応系に促進剤として水素化ホウ素ナトリウ
ムのような還元剤を少量加えることもよい。 本発明の結合エポキシ基量は、以下の方法によ
り求められる。エポキシ基を結合した担体を一定
量、例えば２ml測り取り、１，3Mチオ硫酸ナト
リウム水溶液５mlを加える。エポキシ基とチオ硫
酸ナトリウムの反応によつて生じるOH-基をフ
エノールフタレインを指示薬として0.1N塩酸で
滴定する。フエノールフタレインの着色がなくな
るまで滴定を繰り返し、総滴定量よりエポキシ基
の量を求める。 本発明で担体に結合しているエポキシ基の量
は、担体の水酸基密度や反応条件にもよるが、担
体１mlあたり０から500μmolの任意に調節できる
が、本発明の目的には担体１mlあたり0.01〜
300μmolの範囲が好ましく、より好ましくは１〜
200μmol／mlである。また、本発明にはグリシジ
ルメタアクリレートのようなエポキシ基を含むビ
ニルモノマーを用いて、担体製造時エポキシ基を
導入することも含まれる。 このようにエポキシ基を結合させた担体に、ア
ミノ基、水酸基、チオール基などの活性水素を有
する官能基をもつたリガンドを結合させることに
より、本発明の吸着材が製造される。リガンド結
合の条件はリガンドの化学的性質に応じて選ばな
ければならないが、例えば水溶液中、PH７〜13程
度の塩基性条件下で反応させる。PHの調整には、
炭酸、ホウ酸、リン酸等のバツフアーを用いるこ
とができる。反応温度はリガンドの性質により０
〜100℃、好ましくは20〜60℃程度の温度を選び、
反応時間は１〜24時間程度がよい。リガンドの結
合量の測定は、リガンドの種類により方法を選ば
なければならないが、一般的な方法はいわゆる残
存法で、反応液中に残つた未反応のリガンドを分
光々度計などで定量して、仕込量との差より結合
量を求める方法である。担体に結合したエポキシ
基の量がリガンドに比べ過剰にある場合は、この
過剰のエポキシ基は、グリシン、エタノールアミ
ン、トリス−（ヒドロキシメチル）−アミノメタン
等の求核試薬でブロツキングすることができる。
また、本発明において、エポキシ基を含むビニル
モノマーに先にリガンドを結合させ共重合により
吸着材を調製してもよい。 以上のようにして得られる吸着材は、担体とリ
ガンドが、２−ヒドロキシトリメチレン基を含む
結合手により安定な共有結合により結合されてい
るため熱的に安定であり、リガンド自体が安定で
あれば、高圧蒸気滅菌が可能であり、滅菌後のリ
ガンドの溶出ならびにそれに伴う吸着能力の低下
もない。リガンドが熱滅菌に不適な場合でも、乾
燥による担体、および結合手の物理的、化学的変
化が小さいため、乾燥してエチレンオキサイドガ
ス滅菌が可能であり、滅菌に伴う吸着能力の低下
もほとんどない。 本発明で吸着除去の対象とする物質を例示する
と、先ずビリルビン等の血液老廃物、薬物毒物抱
合アルブミン、腎不全における中分子量毒性物
質、Ａ型およびＢ型等の肝炎抗原等の悪性物質、
自己免疫疾患における自己抗体および／または免
疫複合体等が挙げられるが、中でも特に自己抗体
および／または免疫複合体が挙げられ、より詳細
に説明すると、リウマチ因子、抗核抗体、抗
DNA抗体、抗リンパ球抗体、抗赤血球抗体、抗
血小板抗体、アセチルゴリンレセプター抗体、血
清脱随抗体、抗サイログロブリン抗体、抗マイク
ロゾーム抗体、抗大腸抗体、抗平滑筋抗体、抗表
皮細胞間抗体、抗基底膜抗体、抗プロテオグリカ
ン抗体、抗コラーゲン抗体、抗胃内因子抗体、抗
甲状線ミクロソーム抗体、抗マイクロゾーム抗
体、抗大腸抗体、抗動脈抗体等の自己抗体およ
び／またはその免疫複合体が挙げられる。 本発明で水酸基を有する架橋合成高分子からな
る担体に結合するリガンドを例示する。 全身性エリテマト−デス治療用としては、抗核
抗体、抗DNA抗体の吸着除去用に、アデニン、
グアニン、シトシン、ウラシル、チミン等のモ
ノ、ジ、トリヌクレオチドのホモポリマー、また
はコポリマー、天然に存在するDNA、RNA等の
核酸を用いることができる。また血中に存在する
DNA、RNA、ENAの吸着除去用に、抗一本鎖
DNA抗体、抗二本鎖DNA抗体、抗RNA抗体、
抗ENA抗体等の抗核酸抗体、メチル化アルブミ
ン、アクチノマイシンＤ等の塩基性化合物を用い
ることができる。さらに血中の免疫複合体の吸着
除去用には、CIq等の補体成分、プロテインＡ等
の特異蛋白質、抗ヘビ−チエイン不変部第２相抗
体等の免疫複合体に対する抗体を用いることがで
きる。 慢性関筋リウマチ、悪性関筋リウマチ治療用と
しては、尿素、塩酸グアニジン、メルカプトエタ
ノール、界面活性剤、有機溶剤等の化学的変性
（凝集）方法、熱、超音波、ガスバブリング等の
物理的変性（凝集）方法により変性された変性γ
−グロブリン、変性イムノグロブリン、凝集γ−
グロブリン、凝集イムノグロブリン、イムノグロ
ブリンのFc部、イムノグロブリンのヘビ−チエ
イン不変部第２相およびそれらの前記変性方法に
よる変性体等のリウマチ因子に対する抗原様物
質、および抗リウマチ因子抗体を用いることがで
きる。またリウマチの免疫複合体除去用には、
CIq等の補体成分、プロテインＡ等の特異蛋白
質、抗ヘビ−チエイン不変部第２相抗体等の免疫
複合体に対する抗体を用いることができる。 橋本病治療用には、サイログロブリン、甲状線
のミクロソーム分画成分を用いることができる。 重症筋無力症治療用には、神経筋のアセチルコ
リンレセプター分画成分を用いることができる。 糸球体腎炎治療用には、糸球体基底膜成分、特
発性血小板滅少性紫斑病治療用には、血小板膜成
分、血小板顆粒分画成分、クツシング症候群治療
用にはトランスコーチゾン、抗コーチゾン抗体を
用いることができる。 肝炎の予防、治療用には、Ａ型肝炎ウイルス、
Ｂ型肝炎ウイルス等のウイルス表面抗原に対する
抗体を用いることができる。 高血圧治療用には、抗アンジオテンシン抗
体、高脂血症治療用にはヘパリン、抗リポプロテ
イン、抗体を用いることができる。 リンパ球異常に基づく免疫疾患治療用には、抗
Ｂセル抗体、抗サブレツサーＴ抗体、抗ヘルパー
Ｔ抗体等の抗リンパ球抗体を用いることができ
る。 乳ガン等のガン治療用には、プロテインＡ、抗
イムノグロブリン抗体を用いることができる。 本発明では、さらにコングニチニン、コンカナ
バリンＡ、フイトヘマアグルチニン等のレクチ
ン、核酸、アミノ酸、脂質、糖、プロタミン、ヘ
パリン、抗原、抗体、酵素、基質、補酵素等の被
吸着物質と結合可能な公知の物質を用いることも
できる。 また、本発明で特に自己抗体および／または免
疫複合体を吸着除去するために、より好ましい低
分子量リガンドとしては、以下のものが例示され
る。 先ず第一に、疎水性化合物および／または疎水
性化合物を含む低重合体が挙げられるが、担体に
結合した疎水性化合物と自己抗体および／または
免疫複合体とは疎水的相互作用にもとづいて結合
される。 本発明で言う疎水性化合物とは、対生理食塩水
溶解度100ｍmol／dl以下（25℃）、より好ましく
は30ｍmol／dl以下の化合物をいう。対生理食塩
水溶解度が100ｍmol／dlより大きい化合物は、
親水性が高くなりすぎ、自己抗体や免疫複合体に
対する親和力が低下する結果、吸着能が極端に低
下する。また、より親水的なアルブミンに対する
親和力が生じて、アルブミンをも非特異的に吸着
するようになり好ましくない。疎水性化合物の中
では、少なくとも一つの芳香族環を有する化合物
が、特に好ましい結果を与える。芳香族環とは、
芳香族性を持つた環状化合物を意味し、いずれも
有用に用い得るが、ベンゼン、ナフタレン、フエ
ナントレン等のベンゼン系芳香族環、ピリジン、
キノリン、アクリジン、インキノリン、フエナン
トリジン等の含窒素６員環、インドール、カルバ
ゾール、イソインドール、インドリジン、ポルフ
イリン、２，３，2′，3′−ピロロピロール等の含
窒素５員環、ピリダジン、ピリミジン、sym−ト
リアジン、sym−テトラジン、キナゾリン、１，
５−ナフチリジン、プテリジン、フエナジン等の
多価含窒素６員環、ピラゾール、イミナゾール、
１，２，４−トリアゾール、１，２，３−トリア
ゾール、テトラゾール、ベンズイミナゾール、イ
ミダゾール、プリン等の多価含窒素５員環、ノル
ハルマン環、ペリミジン環、ベンゾフラン、イソ
ベンゾフラン、ジベンドフラン等の含酸素芳香族
環、ベンドチオフエン、チエノチオフエン、チエ
ビン等の含イオウ芳香族環、オキサゾール、イソ
オキサゾール、１，２，５−オキサダイアゾー
ル、ベンズオキサゾール等の含酸素複素芳香環、
チアゾール、イソチアゾール、１，３，４−チア
ダイアゾール、ベンゾチアゾール等の含イオウ複
素芳香環などの芳香族環およびその誘導体を少な
くとも一つ有する疎水性低分子有機化合物が好ま
しい結果を与える。中でもトリプタミン等のイン
ドール環を含む化合物は、特に好ましい結果を与
える。これは自己抗体や免疫複合体と該化合物の
結合において、該化合物の疎水性、立体構造と分
子剛直性が有効に作用している結果と解釈できる
ものである。 また、これらの疎水性化合物の中でも、疎水性
アミノ酸およびその誘導体ならびにプリン塩基も
しくはピリミジン塩基を構成要素として含む低分
子量の物質ないしその誘導体は、安全でかつ極め
て高率かつ特異的に自己抗体および／または免疫
複合体を吸着することから実用的に好ましいもの
である。 疎水性アミノ酸およびその誘導体とは、
Tanford、Nozaki（J.Am.Chem.Soc.、184 4240
（1962）、J.Biol.Chem.246 2211（1971）〕〔タンフ
オード、ノザキ（ジヤーナル・オブ・アメリカ
ン・ケミカル・ソサエテイ、184、4240（1962）、
ジヤーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリ
イ246、2211（1971）〕により定義された疎水性尺
度でみて、1500cal／mol以上のアミノ酸および
その誘導体で、対生理食塩水溶解度100ｍmol／
dl以下の化合物を意味する。例えば、リジン、バ
リン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、
イソロイシン、トリプトフアンおよびその誘導体
等である。これらの疎水性アミノ酸およびその誘
導体の中では、トリプトフアン、フエニルアラニ
ン、チロシン等の芳香族アミノ酸およびそれらの
誘導体が特に良好な結果を与える。また、アミノ
酸はｌ、ｄの立体配座を特に限定することなく使
用することができる。 本発明で言う低重合体および低分子量の物質と
は、分子量１万以下の、より好ましくは分子量
1000以下の物質である。これによりプロテインＡ
（分子量42000）のような天然高分子に比較して固
定化時の取扱い、固定化後の保存も容易に行える
ものである。また、当該物質が担体から溶出した
場合にも、分子量１万以下の物質は、生体に対す
る抗原性が無視できるほど小さく安全であり、滅
菌操作も容易に行えるものである。低重合体は、
疎水性化合物モノマー単独または他の化合物との
共重合により得られる。疎水性化合物モノマーと
しては、例えばトリブタミン等のインドール環を
含む化合物のビニル誘導体、トリプトフアン等の
疎水性アミノ酸を用いることができる。 プリン塩基およびピリミジン塩基を構成する低
分子物質とは、アデニン、シトシン、グアニン、
ウラシル、チミン、ヒポキサンチン、キサンチン
などの塩基、アデノシン、シチジン、グアノシ
ン、ウリジン、イノシン、キサントシン、デオキ
シアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグア
ノシン、デオキシウリジン、チミンジンなどのヌ
クレオシド、アデノシン5′−リン酸、シチジン
5′−リン酸、グアノシン5′−リン酸、イノシン
5′−リン酸、ウリジン5′−リン酸、およびこれら
のリボースがデオキシリボースになつたもの、お
よび二リン酸、三リン酸、また、2′位、3′位にリ
ン酸がついたものなどのヌクレオチド、ヌクレオ
チドにグルコース、マンノース等の糖が結合した
もの、ヌクレオチド数10以下のオリゴヌクレオチ
ド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド
（NAD）、フラビンアデニンジヌクレオチド
（FAD）、コエンザイムＡ、コエンザイムB12など
のヌクレオチド補酵素、およびこれらすべての誘
導体をさす。このうち特に、塩基、ヌクレオシ
ド、ヌクレオチドが好ましく、さらには塩基が良
く、その中でもプリン塩基のアデニン、グアニン
がより好ましい。これらを単に一つだけ固定する
のではなく、複数の種類を担体に固定してもよ
い。 また、本発明で特に自己抗体および／または免
疫複合体の吸着除去に適したリガンドの第２とし
て、糖リン酸を構成要素として含む低分子量の物
質ないしはその誘導体が挙げられる。これらのリ
ガンドは抗DNA抗体、抗核抗体等の自己抗体お
よび／またはその免疫複合体を特異的に結合可能
なものである。 本発明で言う糖リン酸を構成要素として含む低
分子量の物質とは、エリトロース、トレオース等
のテトロース類、アラビノース、キシロース、リ
キソース、リボース等のアルドペントース類、キ
シルロース、ペンツロース、リブロース等のケト
ペントース類、ガラクトース、グルコール、タロ
ース、マンノース等のアルドヘキソース類、ソル
ボース、タガトース、プシコース、フルクトース
等のケトヘキソース類、Ｎ−アセチル−グルコサ
ミン等ヘキソサミン類、アルドヘプトース、ケト
ヘプトース、ケトオクトース、ケトノノース等の
多単糖類、２−デオキシペントース、６−デオキ
シヘキソース、２−デオキシヘキソース、２，６
−ジデオキシヘキソース、３，６−ジデオキシヘ
キソース等のデオキシ糖類、糖アルコール無水物
類、ウロン酸、ケトアルトン酸、アスコルビン酸
等の酸性糖類、糖メチルエーテル類、分岐糖類、
アミノ糖類、シアル酸類のモノまたはジ正リン酸
エステル、モノまたはジピロリン酸エステル、ト
リフオスフエート等がある。これらの糖はＤ、Ｌ
体、スレオ、エリスロ体にかゝわりなく用いるこ
とができる。また、重合度10以下のホモまたはヘ
テロオリゴ糖に正リン酸、ビロリン酸、トリフオ
スフエート基が結合したものも用いるこができ
る。さらに、重合度10以下の糖リン酸のホモまた
はヘテロ重合体も用いることができる。これらす
べての誘導体も用いることができる。このうち特
に、ルボース、デオキシリボースのリン酸エステ
ルが好ましく、さらに、デオキシリボースの３，
５ジ正リン酸およびそのオリゴマーがより好まし
い。 本発明で特に自己抗体および／または免疫複合
体除去に適したリガンドの第３としては糖および
またはオリゴ糖が挙げられる。これらのリガンド
の結合対象とする自己抗体は、体組織、体細胞等
の体内で固相にある抗原に対する自己抗体であ
る。これらの固相抗原においては、糖タンパク
質、糖脂質、プロテオグリカン等に含まれる糖が
重要な免疫学的機能と抗原性を有することが多
い。また、肺炎球菌等細菌性の外来抗原の場合に
も、その糖鎖が主たる抗原であり、その抗体が体
内で産生されるものである。 糖鎖はタンパク質等の他の生体高分子と異なり
分子鎖の自由度が小さく、比較的複雑な高次構造
をとりにくい。また、各種の単糖の立体構造もア
ミノ酸に比し、基本骨格において大きな相違がな
く、事実溶連菌感染後のリウマチ熱、リウマチ性
心疾患において、心内膜とＡ型溶連菌多糖体は交
叉反応性抗原として作用することから、抗糖鎖抗
体は交叉反応をおこしやすく、逆に糖またはその
誘導体は糖鎖を抗原とする各種自己抗体と反応す
るものである。 本発明でいう糖および／またはオリゴ糖とは、
体組織および体細胞、表層の糖脂質、糖タンパク
質、プロテオグリカン等を構成している単糖およ
びその誘導体である。単糖としては、ピラノース
またはフラノース構造を持つたＮ−アセチル−Ｄ
−グルコサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミン等のヘキソサミン、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−
マントース、Ｄ−グルコース等のヘキソース、Ｌ
−フコース、Ｌ−ラムノース等の６−デオキシヘ
キソース、Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース等
のペントース、Ｎ−アセチルノイラミン酸、Ｎ−
グリコリルノイラミン酸等のシアル酸が用いられ
る。これらはα型、β型いずれの異性体も特に限
定なく用いることができる。 オリゴ糖としては、上記単糖の単独または２種
以上のオリゴマーを直鎖状、分枝状に係りなく用
いることができる。特に２量体から12量体までが
良好な結果を与える。 また、本発明は上記糖または／およびオリゴ糖
を脂質、タンパク質、ポリペプチド、アミノ酸核
酸、核酸塩基等の他の物質に結合した状態で担体
に結合させて作用させても何らさしつかえない。 本発明においては、必要に応じて、担体に２種
以上のリガンドを結合させて用いることもでき
る。 本発明で担体に結合しているリガンドの量は、
一種類のリガンドにつき担体１ml当り0.01〜
200μmolの範囲が好ましい。より好ましくは0.05
〜100μmol／mlの範囲である。 本発明の体液浄化用吸着材は、体液浄化用吸着
装置として、体液の導出入口を備えた容器内に充
填保持させて使用することができる。 第１図において、１は本発明の吸着装置の１例
を示すものであり、円筒２の一端開口部に、内側
にフイルター３を張つたパツキング４を介して体
液導入口５を有するキヤツプ６をネジ嵌合し、円
筒２の他端開口部に内側にフイルター３′を張つ
たパツキング４′を介して体液導出口７を有する
キヤツプ８をネジ嵌合して容器を形成し、フイル
ター３および３′の間隙に吸着材を充填保持させ
て吸着材層９を形成してなるものである。 吸着材層９には、本発明の該吸着材を単独で充
填してもよく、他の吸着材と混合もしくは積層し
てもよい。他の吸着材としては、例えば幅広い吸
着能を有する活性炭等を用いることができる。こ
れにより吸着材の相乗効果によるより広範な臨床
効果が期待できる。吸着材層９の容積は、体外循
環に用いる場合、50〜400ml程度が適当である。 この装置を体外循環で用いる場合には、大略次
の二通りの方法がある。一つには、体内から取り
出した血液を遠心分離器もしくは膜型血漿分離器
を使用して、血漿成分と血球成分とに分離した
後、血漿成分を該装置に通過させ、浄化した後、
血球成分と合わせて体内にもどす方法であり、他
の一つは体内から取り出した血液を直接該装置に
通過させ、浄化する方法である。 また、血液もしくは血漿の通過速度について
は、該吸着材の吸着能率が非常に高いため、吸着
材の粒度を粗くすることができ、また充填度を低
くできるので、吸着材層の形状の如何にかゝわり
なく、高い通過速度を与えることができる。その
ため多量の体液処理をすることができる。 体液の通液方法としては、臨床上の必要に応
じ、あるいは設備の装置状況に応じて、連続的に
通液してもよいし、また断続的に通液使用しても
よい。 本発明の吸着材は、以上述べてきたように、体
液中の悪性物質を高率かつ特異的に吸着除去し、
非常にコンパクトであると共に簡便かつ安全であ
る。 水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体を
用い、担体とリガンドの結合には２−ヒドロキシ
トリメチレン基を含む結合手を用いているため、
血漿タンパクの非特異吸着が少なく、補体系、凝
固系との相互作用も小さいという極めて優れた特
性を有する上に、物理的、機械的強度に優れ、吸
着材の調製、取扱いによるカケ、クダケが極めて
少ない。また硬質であるため高流速で体液を流す
ことができる。その上、担体が耐熱性を有すると
共に、担体とリガンドを結ぶ結合手も耐熱性を有
するため、通常の滅菌法（エチレンオキサイドガ
ス滅菌、高圧蒸気等熱滅菌、γ線滅菌等）も容易
に、かつ確実に実施できるという効果を併せもつ
ている。さらには全血用吸着材として用いる場合
にも、血球成分との相互作用が小さいため、血栓
形成や血球成分の非特異粘着、残血等を最小限に
おさえられるメリツトを有する。 本発明は、自己血漿等の体液を浄化、再生する
一般的な用法に適用可能であり、生体免疫機能に
関係した疾患の安全で確実な治療、特に慢性関筋
リウマチ、全身性エリテマト−デス等の自己免疫
疾患の治療に有効である。 また、本発明の吸着材は、装置に充填して治療
器として用いられるにとゞまらず、自己抗体、免
疫複合体の分離、精製用吸着材およびこれらの測
定用基材としても極めて有効に利用できる。 以下実施例により、本発明の実施の態様をより
詳細に説明する。 実施例 １ 酢酸ビニル1000ｇ、トリアリルイソシアヌレー
ト414ｇ（Ｘ＝0.30）、酢酸エチル1000ｇ、ヘプタ
ン1000ｇ、ポリ酢酸ビニル（重合度500）70ｇお
よび２，2′−アゾビスイソブチロニトリル36ｇよ
りなる均一混合液と、ポリビニルアルコール１重
量％、リン酸二水素ナトリウム二水和物0.05重量
％およびリン酸水素二ナトリウム十二水和物1.5
重量％を溶解した水４とをフラスコに入れ、十
分撹拌した後、65℃で18時間、さらに75℃で５時
間加熱撹拌して懸濁重合を行い、粒状共重合体を
得た。過、水洗、ついでアセトン抽出後、カセ
イソーダ465ｇおよびメタノール20よりなる溶
液中で、40℃で18時間、共重合体のエステル交換
反応を行つた。得られた粒子の平均粒径は150μ
ｍであつた。前記方法で水酸基密度（qOH）を
求めたところ、7.5meq／ｇであつた。 このゲルを内径7.5mm、長さ25cmのステンレス
製カラムに充填して、種々の分子量を持つデキス
トランやポリエチレングリコールの水溶液および
アルブミン、イムノグロブリンＧ、イムノグロブ
リンＭ、β−リボプロテインのリン酸緩衝塩溶液
を測定したところ、それぞれ分子量の大きい順に
溶出された。デキストランの排除限界分子量は約
６×105、タンパク質の排除限界分子量は約20×
106であつた。また0.3M塩化ナトリウムおよび
0.1Mリン酸ナトリウムを含む水溶液を溶媒とし
て、ヒト−γ−グロブリン、ヒト−アルブミンの
溶液を流したところ、ほとんど100％の回収率で
回収され、ゲルの非特異的吸着は非常に少なかつ
た。サンプルの測定はすべて流速１ml／minで実
施した。 つぎにエステル交換され、水で十分に洗浄し、
乾燥したゲル150ｇをジメチルスルホキシド1800
mlおよびエピクロルヒドリン1200mlからなる溶液
中に懸濁し、30％水酸化ナトリウム水溶液150ml
を加え、30℃にて５時間撹拌下反応させる。反応
終了後ガラスフイルターで過し、３のジメチ
ルスルホキシド、ついで20の水で洗浄してエポ
キシ基結合ゲルを得た。 該ゲルのエポキシ基結合量は１mlにつき0.11ｍ
molであつた。該エポキシ基結合ゲルを用い、疎
水性化合物をリガンドとして結合させて吸着材を
作成した。疎水性化合物として、ｌ−フエニルア
ラニン、ｌ−トリプトフアン、ｌ−トリプトフア
ンエチルエステル、トリプタミンを用い、それぞ
れをPH9.8の炭酸バツフアー中に0.05mol／の濃
度になるように溶かした。該エポキシ結合ゲル各
200mlに各リガンド液を300mlずつ加え、50℃で16
時間反応し結合せしめた後、過剰のエポキシ基を
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
0.1mol／溶液で50℃、５時間反応させブロツ
キングした。リガンドの固定量は反応液中に残存
するリガンド量を、ｌ−フエニルアラニンについ
ては260nｍの吸着、他の三つのインドール誘導
体については280nｍの吸収より求め算出した。 ブロツキング後の吸着材を多量の水で繰り返し
洗浄後、生理食塩水で洗浄、水切りして実験に供
した。ｌ−トリプトフアンを結合させた吸着材に
ついては、121℃で20分間の高圧蒸気滅菌の操作
を加えたものも吸着実験を行つた。 吸着実験は、ヒト慢性関筋リウマチ患者血漿３
容と吸着材１容を混合し、37℃、２時間インキユ
ベートし、その後吸着材と血漿を分離し、吸着後
の血漿を分析し各種成分の吸着量を算出した。 グロブリン、アルブミン吸着量はＡ／Ｇテスト
キツト〔Ａ／GBテスト ワコー、和光純薬工業
(株)製〕にて測定した。慢性関筋リウマチの悪性物
質としては、リウマチ因子（自己抗体）、免疫複
合体の吸着除去能を測定した。リウマチ因子の測
定は、ラテツクス凝集テスト、受身感作血球凝集
テストにて行つた。 ラテツクス凝集テストは、ポリスチレンラテツ
クス粒子にヒト−γ−グロブリンを吸着させたも
のに、リウマチ因子を含む患者血漿を作用させる
と、ラテツクス粒子が凝集する性質を検出法とし
て測定するものであり、通常血漿の希釈系列を作
成して、ラテツクス粒子が凝集しなくなる血漿希
釈倍率でリウマチ因子濃度を評価するものであ
る。リウマチ因子を高濃度に含む血漿は、陰性に
なる希釈倍率が高くなり、低濃度の血漿は逆に低
くなる。 受身感作血球凝集テストは、ヒツジ赤血球にウ
サギ−γ−グロブリンを吸着させたものであり、
他はラテツクス凝集テストと同じである。一般
に、受身感作血球凝集テストの方がラテツクス凝
集テストよりリウマチ因子特異性が高いとされて
いる。 グリシン食塩緩衝液で希釈系列を作成して、ラ
テツクス凝集テストにてリウマチ因子の陰性にな
る希釈倍率を求めた。ラテツクス凝集テストは、
日本凍結乾燥研究所のキツトを用いて行つた。同
様に受身感作血球凝集テスト〔RAHAテスト、
富士臓器製薬(株)製〕にて評価した。結果は陽性を
示す最も高い希釈倍率の倍数をタイターとして表
わす。 また、免疫複合体の測定は、ポリエチレングリ
コール、補体溶血法によつた。この方法はポリエ
チレングリコールで沈降分取した免疫複合体を、
ヒト健康人血清中の補体と反応させ、残余の補体
量を、抗体を結合した赤血球の溶血量で測定する
ことにより、免疫複合体量を評価するものであ
る。 (1) 検体0.3mlを分離管に注ぐ。0.2M EDTA50μ
を加え撹拌する。ほう酸バツフア（PBS）
50μを加え撹拌する。12.5％PEG（ポリエチレン
グリコール）（Mw7500）を0.1ml加え撹拌し、
４℃90min静置する。 (2) ４℃、1700ｇ10min遠心し、得られた沈澱を
2.5％PEG1.0mlで洗う。1700ｇ15min遠心し、
上清を排出する。 (3) 37℃のGVB++（２価陽イオンを含むゼラチン
ベロナールバツフアー）30μを加え、沈澱を
溶解する。補体源としてプール健康人血清10μ
加える。37℃、30min、免疫複合体と補体と
を反応させる。 (4) 1.5×108／mlEA（抗体感作赤血球）1.0mlを加
え、37℃60min振盪させて、残存補体による溶
血反応を促進させる。 (5) 反応後、４℃の生食水6.5mlを加えて遠心し、
上清の吸光度（OD414）を測定する。 (6) 対照（健康人血清）に対する溶血の阻止率を
算出し、単位をPEG−cc％とする。 〔阻止率＝対照−検体吸光度／対照吸光度×100〕 〔除去率＝未処理−処理血漿阻止率／未処理血漿阻止
率×100〕 なお、EAは日本凍結乾燥研究所製の補体価測
定用感作赤血球（KW）を用いた。 結果を各成分の除去率で表１に示した。
部を有する物質を保持させてなる体液浄化用吸着
材およびその製造法に関する。さらに詳しくは、
癌、免疫増殖性症候群、慢性関節リウマチ、全身
性エリテマトーデス、重症筋無力症、アレルギ
ー、臓器移殖時の拒絶反応等の生体免疫機能に関
係した疾患および現象、あるいは腎炎等の腎臓
病、肝炎等の肝臓病などにおいて、血液、血漿等
の体液中に発現し、疾患の原因あるいは進行と密
接な関係をもつていると考えられる悪性物質を、
体液中より吸着、除去する吸着材に関し、特に慢
性関筋リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症
筋無力症等の自己免疫疾患において、体液中に発
生する自己抗体および／または免疫複合体を吸着
除去する吸着材およびその製造法に関する。 従来、体液浄化治療には、主に肝臓病用に人工
肝臓として活性炭あるいは活性炭を親水性高分子
でコートしたものが用いられてきた。しかし、上
記のように幾多の疾患において、疾患の原因ある
いは進行と密接な関係にある種々の悪性物質が知
られるようになり、さらには該悪性物質を体液中
より選択的に除去する要請が高まつてきたが、活
性炭をベースとする吸着材は、その吸着選択性が
低く、本要請に答えられないのが現状である。 本発明者らは、この悪性物質の選択的吸着、除
去の要請に答えるため鋭意研究の結果、担体に被
吸着物質と化学的な選択的相互作用をなす特別な
物質を化学結合により保持させてなる種々の吸着
材を見い出し、先に特許出願した（特願昭56−
7152、特願昭56−76776、特願昭56−159444）。 さらに本発明者らは、ビニルアルコール単位を
主構成々分とする架橋共重合体からなる担体に結
合した疎水性化合物および／または塑水性化合物
を含む重合体、およびブリン塩基またはピリミジ
ン塩基を構成要素として含む低分子量の物質ない
しはその誘導体の少なくとも１種および／または
糖リン酸を構成要素として含む低分子量の物質な
いしはその誘導体の少なくとも１種、ならびに糖
および／またはオリゴ糖が極めて高活性に自己抗
体、免疫複合体を特異的に吸着することを見い出
し、先に特許出願した（特願昭56−112919、特願
昭56−193735、特願昭57−14276）。 本発明は、先の発明に関して担体と被吸着物質
と結合可能な官能部を含有する物質（以下、リガ
ンドと称す。）との結合剤について、より詳細に
検討した結果なされたものであり、体液浄化用吸
着材における結合剤の吸着材の製造法に関する。 従来、本目的を対象として特別に設計された担
体、結合剤は知られていないが、これに近いもの
ではアフイニテイークロマトグラフ用ゲルがあ
る。アフイニテイークロマトグラフ用ゲルは、担
体としてアガロース系、デキストラン系、セルロ
ース系等の天然物多糖類が多く用いられ、その糖
鎖中の水酸基を利用して、各種結合剤を用いて目
的とするリガンドを結合させアフイニテイー吸着
体として用いられている。その際用いられるリガ
ンド結合方法として、ハロゲン化シアン法、ハロ
ゲン化トリアジン法、ブロモアセチルプロミド法
等数多くの方法が知られているが、ハロゲン化シ
アンを用いる方法が、分子内にアミノ基をもつア
ミノ酸、ペプチドおよび蛋白質などの生体成分が
比較的温和な条件下に、一段階の簡単な反応によ
つて固定化できることから、最も一般的に広く用
いられている。水酸基を有する合成高分子からな
る担体も、天然多糖類と同様に水酸基を有するこ
とから、同様にハロゲン化シアンを用いて、アミ
ノ基などの活性基を有するリガンドを結合させる
ことが可能である。 しかしながら、水酸基を有する担体にハロゲン
化シアンを介してリガンドを結合させてなる吸着
材は、体液浄化体外循環等の治療用に用いる時、
以下の欠点を有する。 (1) ハロゲン化シアンを介してリガンドを結合さ
せたものは、担体とリガンドがイソウレア結
合、イミドカルボネート結合、カルバメート結
合等の不特定複数の結合により結ばれていると
言われているが、これらの結果はいずれも、熱
的にも化学的にも比較的不安定であり、高圧蒸
気のような熱滅菌や、放射線滅菌に不適であ
り、また保存安定性も悪いこと。 (2) ハロゲン化シアンそのものは、シアノ化合物
であり毒性が強く、治療用に用いるとき微量の
残留物または分解物の毒性も無視し得ないこ
と。 (3) ハロゲン化シアンは非常に反応性が高く、発
熱を伴い激しく反応することから、反応の制御
が難しく、少量を取り扱う実験室レベルでの使
用には問題はないが、工業的な規模での生産に
は向かないこと。 (4) ハロゲン化シアンと担体の水酸基との反応
は、活性なイミドカルボネート生成反応の他に
副反応も起こり、活性比率を巾広く調節した
り、活性基を高密度に上げることは困難であ
り、また活性基密度を定量することも困難であ
る。その結果、結合させるリガンドの量の調節
が難かしく、高密度にリガンドを結合させるこ
とも難かしい。 (5) ハロゲン化シアンを介して担体をリガンドと
結合させてなる吸着材は、その結合手を構成す
るイソウレア結合、イミドカルボネート結合、
カルバメート結合の影響で血液等体液成分中の
蛋白を非特異的に吸着しやすいこと。 またハロゲン化トリアジンを用いる方法、ブ
ロモアセチルブロミドを用いる方法についても
ほぼハロゲン化シアンと同様な欠点を有してお
り、体液浄化、体外循環等の治療用には不適で
ある。 本発明の目的は、上記の如き従来技術に基づく
担体とリガンドの結合剤の問題点に鑑み、一般的
に普及可能であり、体液中の悪性物質を高活性か
つ特異的に吸着し、非特異吸着が少なく安定な活
性を保持し、安全性があり、滅菌操作も簡易に行
なうことができ、体液浄化あるいは再生用に適し
た吸着材およびその製造法を提供せんとするもの
である。 本発明者らは、上記目的に沿つて研究を進め、
水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体に、
疎水性化合物および／または疎水性化合物を含む
重合体、およびプリン塩基またはピリミジン塩基
を構成要素として含む低分子量の物質ないしはそ
の誘導体の少なくとも１種および／または糖リン
酸を構成要素として含む低分子量の物質ないしは
その誘導体の少なくとも１種、ならびに糖およ
び／またはオリゴ糖などの低分子量リガンドなら
びにプテインＡ、C1q、DNA、RNA、変性γグ
ロブリン、各種抗体等の高分子量リガンドを各種
結合剤を介して結合させ、自己抗体および免疫複
合体に対する結合活性および血漿蛋白の非特異吸
着等、体液浄化用吸着材としての使用可否につい
て評価したところ、水酸基を有する架橋合成高分
子からなる担体に、２−ヒドロキシトリメチレン
基を構成要素として含む結合手を介して、上記の
ような種々のリガンドを結合させてなる吸着材が
上記の問題点を解決することを見い出し、本発明
を完成するに至つた。 すなわち、本発明は、水酸基を有する架橋合成
高分子からなる担体に、２−ヒドロキシトリメチ
レン基を構成要素として含む結合手を介して、被
吸着物質と結合可能な官能部を含有する物質が結
合されていることを特徴とする体液浄化用の吸着
材に係り、また、水酸基を有する架橋合成高分子
からなる担体に、溶液中で担体に結合可能な官能
基とメチルオキシラン基の両者を含有する結合剤
を結合させ、さらに該メチルオキシラン基に被吸
着物と結合可能な官能部を含有する物質を反応さ
せることを特徴とする体液浄化用吸着材の製造法
に係る。 本目的に用いる担体としては、血漿タンパク
の非特異吸着が少ない、補体系、凝固系を活性
化しない等の血漿タンパクとの相互作用特性およ
び吸着特性が要求される。また安全性の面では、
滅菌可能であること、物理的強度があり、担
体のカケやクダケが発生しないこと、担体より
溶出物がないことが要求される。さらに全血用吸
着材として用いる場合には、血球成分との相互作
用、すなわち、血栓形成や血球成分の非特異粘着
残血等が問題になる。デキストラン、アガロー
ス、セルロース等の糖を含む天然高分子系担体
は、血球、血漿成分と相互作用し、補体系の活性
化、凝固系の活性化を起こす。一方、合成高分子
系担体は、比較的これらの問題を起こさせないと
されている。水酸基を有する架橋合成高分子から
なる担体は、以上の問題点を解決するものであ
り、最も好ましいものである。水酸基を有する架
橋合成高分子からなる担体は、その親水性のた
め、血漿中の蛋白質等溶質との相互作用が小さ
く、非特異吸着を最小限に低下させる。また血漿
中の補体系、凝固系と相互作用しない等の極めて
優れた特性を有する。物理的特性の面でも、耐熱
性を有し、熱滅菌を可能ならしめ、さらには合成
高分子の特性である物理的機械的強度に優れてい
る。全血用吸着材の担体として用いる場合にも、
血球成分との相互作用が少なく、血栓形成や血球
成分の非特異粘着、残血等を最小限におさえる等
の極めて優れた特性を併せ持つている。 本発明の架橋合成高分子の水酸基の密度は、高
くなればなるほどその親水性が増加し、血液成分
との相互作用を最小にする上では好都合であり、
また活性化試薬で活性化した場合の活性基密度も
高水準に保持でき好ましいが、一方、架橋密度
（架橋剤含量）との関係で、物理的、機械的強度
が低下する。したがつて、水酸基密度としては１
〜17meq／ｇが好ましく、より好ましくは６〜
15meq／ｇである。 水酸基密度は、担体をピリジン溶媒中で無水酢
酸と反応させて、水酸基と反応して消費した無水
酢酸の量または担体の重量変化を測定し、これか
ら求めることができる。乾燥担体１ｇが１ｍmol
の無水酢酸と反応したときの水酸基密度が
1meq／ｇである。 水酸基を有する架橋合成高分子は、水酸基を有
するモノマーの重合またはポリマーの化学反応に
よる水酸基の導入により合成できる。両者を併用
して合成することもできる。重合方法としては、
ラジカル重合法を用いることができる。架橋剤は
重合時共重合により導入してもよいし、またポリ
マーの化学反応（ポリマー間、ポリマーと架橋
剤）で導入してもよく、両者を併用してもよい。 一例をあげると、ビニル系モノマーとビニル系
またはアリル系架橋剤との共重合により作ること
ができる。この場合のビニル系モノマーとして
は、２−ヒドロキシエチルアクリレート、２−ヒ
ドロキシエチルメタアクリレート等の（メタ）ア
クリレート類、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル
等のカルボン酸のビニルエステル類、メチルビニ
ルエーテル、エチルビニルエーテル等のビニルエ
ーテル類、エチレンカーボネートおよびその誘導
体を例示することができる。 架橋剤としては、トリアリルイソシアヌレー
ト、トリアリルシアヌレート等のアリル化合物
類、エチレングリコールジメタアクリレート、ジ
エチレングリコールジメタアクリレート、ペンタ
エリスリトールジメタアクリレート等のジ（メ
タ）アクリレート類、ブタンジオールジビニルエ
ーテル、ジエチレングリコールジビニルエーテ
ル、テトラビニルグリオキザール等のポリビニル
エーテル類、ジアリリデンペンタエリスリツト、
テトラアリロキシエタンのようなポリアリルエー
テル類、グリシジルメタクリレート等のグリシジ
ルアクリレート類を用いることができる。また必
要に応じて、他のコモノマーを共重合したものも
用いることができる。 また、水酸基を有する親水性架橋高分子の例と
しては、特公昭44−20917、特開昭52−138077、
特開昭53−1087、特開昭55−80406、特開昭55−
104301号に開示された合成方法および担体を用い
ることもできる。２−ヒロキシエチルメタアクリ
レートを主構成々分とする水酸基を有する親水性
架橋高分子の例としては、スフエロン（Spheron
チエコアカデミー製）を用いることができるが、
非特異吸着面で架橋ポリビニルアルコールが好ま
しい。 さらに、カルボン酸のビニルエステルとイソシ
アヌレート環を有するビニル化合物（アリル化合
物）を共重合し、共重合体を加水分解して得られ
るポリビニルアルコールのトリアリルイソシアヌ
レート架橋体が、強度、化学的安定性の面で特に
良好な担体を与える。 以上ビニル系共重合体の場合を例示したが、本
発明は、これに限定されるものではない。 本担体の形状としては、球状、粒状、糸状、中
空糸状、平膜状等いずれも有効に用いられるが、
その担体表面積（吸着材としての吸着能力）およ
び体外循環時の体液の流通面より、球状または粒
状が特に好ましく用いられる。したがつて、担体
の合成法としては、公知の懸濁重合法が特に有効
に用いられる。 球状または粒子状担体の平均粒径は25〜2500μ
ｍのものも利用できるが、その比表面積（吸着材
としての吸着能力）と体液の流通面より、150〜
1500μｍのものが特に好ましい。 本発明においては、好ましくは水酸基を有する
架橋合成高分子の比表面積が少なくとも５m2／ｇ
を保持する硬質架橋合成高分子を用いる。 本発明において硬質架橋合成高分子とは、外力
を加えたときその物性値が一定値以上を保持する
ものをいう。具体的には、架橋合成高分子を直径
10mm、長さ50mmの容器に最密に充填し通水すると
き、容器の入口と出口の圧力差が200mmHgの状態
で、架橋合成高分子の体積減少率が10％以下であ
るものをいう。また、このような架橋合成高分子
は凍結乾燥したとき、その比表面積は５m2／ｇ以
上の値を保持する。 ここで、比表面積とは、乾燥架橋合成高分子単
位重量当りに吸着した窒素ガスが占有する表面で
もつて表示したものである。つまり比表面積は単
位重量の架橋合成高分子を構成する物質が乾燥状
態でいかに有効に表面を形成しているかを表示し
ている。 一般に架橋合成高分子は、その架橋合成高分子
と親和性のある媒体中で膨潤し、乾燥すると収縮
する。膨潤時に媒体が満たされているポアーが架
橋の網目のみで維持されている軟質ゲルの場合
は、乾燥すると網目がつぶれてしまい、ポアーは
ほとんど消失する。この場合の比表面積は、ほと
んど粒子の外側だけの値になるため、一般に１
m2／ｇ以下の低い値を示す従来アフイニテイクロ
マトグラフイ用として知られているアガロースは
軟質ゲルであるため、乾燥によつてポアーが消失
してしまう。したがつて、滅菌操作も容易に行え
ず、さらには、つぶれやすい軟質の網目を持つて
いるため、カラムに充填し体外循環に用いる場合
にも、体液を長時間、高流速で流すことができな
い。 一方、ポアーがしつかりした構造をもち、凍結
乾燥や熱滅菌に耐える硬質架橋合成高分子の場合
には、乾燥した際にポアーは多少収縮するもの
の、膨潤時の状態をほとんど維持する。つまりパ
ーマネントポアーを有し、比表面積は軟質ゲルよ
り高い値を示し、少なくとも５m2／ｇ以上の値を
示す。 本発明の比表面積の測定は、最も一般的な窒素
ガスによるペツト法（BET法）で求めた。また
比表面積測定に用いるサンプルは、十分乾燥して
おかなければならないが、本発明の架橋合成高分
子は乾燥しにくいこともあり、水にぬれた担体を
アセトンで平衡にした後、60℃以下で減圧乾燥し
て測定に供した。 本発明に用いる架橋合成高分子の保水量（以下
WRという）は0.5〜16ｇ／ｇの範囲にあるのが適
当であり、好ましくは1.0〜15.0ｇ／ｇの範囲で
ある。 WRとは、架橋合成高分子を生理食塩水と平衡
にした時、粒子内に含みうる生理食塩水の量を架
橋合成高分子乾燥重量あたりの値として表示した
ものである。つまりWRは架橋合成高分子内の孔
量の目安になる。WRが大きくなると、水中にお
いて架橋共重合体単位体積あたりの骨格を形成す
る部分、つまり架橋合成高分子そのものの重量が
相対的に低下し、そのため生理食塩水中さらには
体液中において、架橋合成高分子の機械的強度が
低下する。またWRが小さくなると、吸着に単位
重量（または単位体積）あたりの孔量が少なくな
るので吸着能力が低下する。したがつて、WRが
適当な範囲にあることが本目的の担体にとつて好
ましい。 WRは予め十分に乾燥した架橋合成高分子の重
量（W2）を測定した後に、生理食塩水と十分平
衡にした架橋合成高分子を遠心分離器にかけて架
橋合成高分子表面に付着している生理食塩水を除
去した後、その重量（W1）を測定し、次式によ
つて求めることができる。 WR＝W1−W2／W2（ｇ／ｇ） 担体の排除限界分子量（蛋白質）としては、本
発明の目的吸着物質の分子量が15万（IgG）より
免疫複合体特にIgM免疫複合体の場合には1000万
に達するので、15〜1000万が好ましい。本発明の
目的に最も汎用的な排除限界分子量は100〜500万
である。 本目的に用いる担体とリガンドの結合剤とし
は、容易にかつ温和な条件下で担体とリガンド
を結合できること、形成される結合手が化学
的、熱的に安定であり、保存時に容易にその結合
が切れることがなく、滅菌、好ましくは薬剤を全
く用いない熱滅菌により切れることがないこと、
結合剤自体の毒性が低く安全なこと、結合剤
の反応性がおだやかで、工業的に大量に取り扱う
に容易なこと、定量的に担体およびリガンドと
結合し、結合剤の量が調整により容易に結合リガ
ンド密度の調整ができ、かつ高密度の結合が可能
なこと、結合手自体への蛋白質の非特異的吸着
が少ないこと、が要求される。 本発明者らは、これらの要求を満たす担体とリ
ガンドの結合手について検討した結果、エポキシ
系結合剤に由来する２−ヒドロキシトリメチレン
基を構成要素として含む結合手が以上の問題をみ
ごとに解決することを見い出した。 メチルオキシラン誘導体は、そのエポキシ基と
水酸基、アミノ基、チオール基との間で反応し、
それぞれ２−ヒドロキシトリメチレン基とエーテ
ル結合、アルキルアミン結合、チオエーテル結合
で結ばれた化学結合を形成するが、この反応は温
和な条件下で副反応を伴わず進行し、生成する結
合は化学的に非常な安定な結合であり、熱的にも
安定な結合である。また、そのエポキシ基は水中
でも安定であり、反応の際に激しい発熱もなく、
工業的に大量に取扱うにも容易である。また、こ
のエポキシ基は水中で分解された際にはグリコー
ル誘導体となり、毒性の面でも低毒性であり安全
である。メチルオキシラン基が反応して形成され
る２−ヒドロキシトリメチレン基は水酸基を含む
親水性な基であるため、この基への蛋白質の非特
異的吸着も少なく問題にならない。 このようなメチルオキシラン基を含有する結合
剤としては、エピクロルヒドリンで代表されるエ
ピハロヒドリン、グリシジルアクリレートまたは
メタアクリレート、およびビスエポキシド類があ
げられるが、ビスエポキシドの例としては、１，
２−ビス−（２，３−エポキシプロポキシ）−エタ
ン、１，４−ビス−（２，３−エポキシプロポキ
シ−ブタン、１，６−ビス−（２，３−エポキシ
プロポキシ）−ヘキサンなどが挙げられる。２−
ヒドロキシトリメチレン基を含む担体とリガンド
の結合手の例としては、上記のエポキシ系結合剤
が直接担体とリガンドに結合した形のものの他
に、担体にエポキシ系結合剤、例えばエピクロル
ヒドリンを結合させたのち、さらにフロログルシ
ノールのような多官能性化合物を結合させ、さら
にリガンドと共有結合可能な基を有するジビニル
スルホンのごとき化合物を結合させたのち、リガ
ンドを結合させるというように、担体とリガンド
の間にスペーサーを介して結合してもよい。 これらのエポキシ系結合剤の中では、非対称な
構造を有するエピハロヒドリンが、二つの官能基
の反応性の差が大きいことから、担体と結合剤と
の反応の際に、結合剤の二つの官能基が両者とも
反応してしまうことにより起る架橋反応が起りに
くく、より好ましい。 エピクロルヒドリンを例にとつて、ビニルアル
コール単位を主構成々分とする架橋合成高分子か
らなる担体に、リガンドを結合する方法を示す。 先ず担体を担体と同体積ないしは担体の十倍程
度の体積の溶媒中に懸濁させる。溶媒は担体に親
和力のある親水性ないし極性溶媒であればよく、
かつエピクロルヒドリンと反応性を持たないもの
がよい。具体的には、水、非プロトン性極性有機
溶剤、例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホ
キシド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトン、ジオ
キサン、テトラヒドロフランなどが挙げられる
が、非プロトン性極性有機溶剤の方が水に比べて
高いエポキシ基結合量が得られ好ましい。これら
の極性有機溶剤に適度の水を混合させて使用する
ことも可能であり、この場合系中の水分量を１ml
の担体当り0.1ml程度以内に保てば、水の影響は
殆んどない。上記の極性有機溶剤の中でも、特に
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ−メ
チルピロリドン等の極性の強い溶媒が、担体を良
く膨潤させ、高いエポキシ基結合量が得られ、よ
り好ましい。 この反応系にエピクロルヒドリンを担体の水酸
基のモル数の0.01倍ないし50倍程度のモル数加え
る。加えるエピクロルヒドリンの量が多くなるに
したがい結合量も増えるが、過剰に加えたエピク
ロルヒドリンは溶媒の役割も果す。反応を進行さ
せるために水酸化ナトリウムのようなアルカリを
加える。加えるアルカリ量は、エピクロルヒドリ
ンのモル数の0.01倍ないし１倍が好ましい。反応
温度は０℃から100℃の間で可能であるが、あま
り低温では反応速度が遅く、100℃を越える高温
では副反応の架橋が起こりやすくなる。実用的に
は室温付近の20℃から50℃の範囲がより好まし
い。反応の時間は、数分ないし10時間程度の時間
を反応温度と希望する結合量に鑑みて選ぶ。この
ように反応させることにより、担体の水酸基にメ
チルオキシラン基がエーテル結合を介して結合さ
れる。 また１，２−ビス−（２，３−エポキシプロポ
キシ）−エタンのようなビスエポキシドを担体に
結合させる場合も、ほぼエピクロルヒドリンの場
合と同様の条件で結合可能であるが、この場合
は、反応系に促進剤として水素化ホウ素ナトリウ
ムのような還元剤を少量加えることもよい。 本発明の結合エポキシ基量は、以下の方法によ
り求められる。エポキシ基を結合した担体を一定
量、例えば２ml測り取り、１，3Mチオ硫酸ナト
リウム水溶液５mlを加える。エポキシ基とチオ硫
酸ナトリウムの反応によつて生じるOH-基をフ
エノールフタレインを指示薬として0.1N塩酸で
滴定する。フエノールフタレインの着色がなくな
るまで滴定を繰り返し、総滴定量よりエポキシ基
の量を求める。 本発明で担体に結合しているエポキシ基の量
は、担体の水酸基密度や反応条件にもよるが、担
体１mlあたり０から500μmolの任意に調節できる
が、本発明の目的には担体１mlあたり0.01〜
300μmolの範囲が好ましく、より好ましくは１〜
200μmol／mlである。また、本発明にはグリシジ
ルメタアクリレートのようなエポキシ基を含むビ
ニルモノマーを用いて、担体製造時エポキシ基を
導入することも含まれる。 このようにエポキシ基を結合させた担体に、ア
ミノ基、水酸基、チオール基などの活性水素を有
する官能基をもつたリガンドを結合させることに
より、本発明の吸着材が製造される。リガンド結
合の条件はリガンドの化学的性質に応じて選ばな
ければならないが、例えば水溶液中、PH７〜13程
度の塩基性条件下で反応させる。PHの調整には、
炭酸、ホウ酸、リン酸等のバツフアーを用いるこ
とができる。反応温度はリガンドの性質により０
〜100℃、好ましくは20〜60℃程度の温度を選び、
反応時間は１〜24時間程度がよい。リガンドの結
合量の測定は、リガンドの種類により方法を選ば
なければならないが、一般的な方法はいわゆる残
存法で、反応液中に残つた未反応のリガンドを分
光々度計などで定量して、仕込量との差より結合
量を求める方法である。担体に結合したエポキシ
基の量がリガンドに比べ過剰にある場合は、この
過剰のエポキシ基は、グリシン、エタノールアミ
ン、トリス−（ヒドロキシメチル）−アミノメタン
等の求核試薬でブロツキングすることができる。
また、本発明において、エポキシ基を含むビニル
モノマーに先にリガンドを結合させ共重合により
吸着材を調製してもよい。 以上のようにして得られる吸着材は、担体とリ
ガンドが、２−ヒドロキシトリメチレン基を含む
結合手により安定な共有結合により結合されてい
るため熱的に安定であり、リガンド自体が安定で
あれば、高圧蒸気滅菌が可能であり、滅菌後のリ
ガンドの溶出ならびにそれに伴う吸着能力の低下
もない。リガンドが熱滅菌に不適な場合でも、乾
燥による担体、および結合手の物理的、化学的変
化が小さいため、乾燥してエチレンオキサイドガ
ス滅菌が可能であり、滅菌に伴う吸着能力の低下
もほとんどない。 本発明で吸着除去の対象とする物質を例示する
と、先ずビリルビン等の血液老廃物、薬物毒物抱
合アルブミン、腎不全における中分子量毒性物
質、Ａ型およびＢ型等の肝炎抗原等の悪性物質、
自己免疫疾患における自己抗体および／または免
疫複合体等が挙げられるが、中でも特に自己抗体
および／または免疫複合体が挙げられ、より詳細
に説明すると、リウマチ因子、抗核抗体、抗
DNA抗体、抗リンパ球抗体、抗赤血球抗体、抗
血小板抗体、アセチルゴリンレセプター抗体、血
清脱随抗体、抗サイログロブリン抗体、抗マイク
ロゾーム抗体、抗大腸抗体、抗平滑筋抗体、抗表
皮細胞間抗体、抗基底膜抗体、抗プロテオグリカ
ン抗体、抗コラーゲン抗体、抗胃内因子抗体、抗
甲状線ミクロソーム抗体、抗マイクロゾーム抗
体、抗大腸抗体、抗動脈抗体等の自己抗体およ
び／またはその免疫複合体が挙げられる。 本発明で水酸基を有する架橋合成高分子からな
る担体に結合するリガンドを例示する。 全身性エリテマト−デス治療用としては、抗核
抗体、抗DNA抗体の吸着除去用に、アデニン、
グアニン、シトシン、ウラシル、チミン等のモ
ノ、ジ、トリヌクレオチドのホモポリマー、また
はコポリマー、天然に存在するDNA、RNA等の
核酸を用いることができる。また血中に存在する
DNA、RNA、ENAの吸着除去用に、抗一本鎖
DNA抗体、抗二本鎖DNA抗体、抗RNA抗体、
抗ENA抗体等の抗核酸抗体、メチル化アルブミ
ン、アクチノマイシンＤ等の塩基性化合物を用い
ることができる。さらに血中の免疫複合体の吸着
除去用には、CIq等の補体成分、プロテインＡ等
の特異蛋白質、抗ヘビ−チエイン不変部第２相抗
体等の免疫複合体に対する抗体を用いることがで
きる。 慢性関筋リウマチ、悪性関筋リウマチ治療用と
しては、尿素、塩酸グアニジン、メルカプトエタ
ノール、界面活性剤、有機溶剤等の化学的変性
（凝集）方法、熱、超音波、ガスバブリング等の
物理的変性（凝集）方法により変性された変性γ
−グロブリン、変性イムノグロブリン、凝集γ−
グロブリン、凝集イムノグロブリン、イムノグロ
ブリンのFc部、イムノグロブリンのヘビ−チエ
イン不変部第２相およびそれらの前記変性方法に
よる変性体等のリウマチ因子に対する抗原様物
質、および抗リウマチ因子抗体を用いることがで
きる。またリウマチの免疫複合体除去用には、
CIq等の補体成分、プロテインＡ等の特異蛋白
質、抗ヘビ−チエイン不変部第２相抗体等の免疫
複合体に対する抗体を用いることができる。 橋本病治療用には、サイログロブリン、甲状線
のミクロソーム分画成分を用いることができる。 重症筋無力症治療用には、神経筋のアセチルコ
リンレセプター分画成分を用いることができる。 糸球体腎炎治療用には、糸球体基底膜成分、特
発性血小板滅少性紫斑病治療用には、血小板膜成
分、血小板顆粒分画成分、クツシング症候群治療
用にはトランスコーチゾン、抗コーチゾン抗体を
用いることができる。 肝炎の予防、治療用には、Ａ型肝炎ウイルス、
Ｂ型肝炎ウイルス等のウイルス表面抗原に対する
抗体を用いることができる。 高血圧治療用には、抗アンジオテンシン抗
体、高脂血症治療用にはヘパリン、抗リポプロテ
イン、抗体を用いることができる。 リンパ球異常に基づく免疫疾患治療用には、抗
Ｂセル抗体、抗サブレツサーＴ抗体、抗ヘルパー
Ｔ抗体等の抗リンパ球抗体を用いることができ
る。 乳ガン等のガン治療用には、プロテインＡ、抗
イムノグロブリン抗体を用いることができる。 本発明では、さらにコングニチニン、コンカナ
バリンＡ、フイトヘマアグルチニン等のレクチ
ン、核酸、アミノ酸、脂質、糖、プロタミン、ヘ
パリン、抗原、抗体、酵素、基質、補酵素等の被
吸着物質と結合可能な公知の物質を用いることも
できる。 また、本発明で特に自己抗体および／または免
疫複合体を吸着除去するために、より好ましい低
分子量リガンドとしては、以下のものが例示され
る。 先ず第一に、疎水性化合物および／または疎水
性化合物を含む低重合体が挙げられるが、担体に
結合した疎水性化合物と自己抗体および／または
免疫複合体とは疎水的相互作用にもとづいて結合
される。 本発明で言う疎水性化合物とは、対生理食塩水
溶解度100ｍmol／dl以下（25℃）、より好ましく
は30ｍmol／dl以下の化合物をいう。対生理食塩
水溶解度が100ｍmol／dlより大きい化合物は、
親水性が高くなりすぎ、自己抗体や免疫複合体に
対する親和力が低下する結果、吸着能が極端に低
下する。また、より親水的なアルブミンに対する
親和力が生じて、アルブミンをも非特異的に吸着
するようになり好ましくない。疎水性化合物の中
では、少なくとも一つの芳香族環を有する化合物
が、特に好ましい結果を与える。芳香族環とは、
芳香族性を持つた環状化合物を意味し、いずれも
有用に用い得るが、ベンゼン、ナフタレン、フエ
ナントレン等のベンゼン系芳香族環、ピリジン、
キノリン、アクリジン、インキノリン、フエナン
トリジン等の含窒素６員環、インドール、カルバ
ゾール、イソインドール、インドリジン、ポルフ
イリン、２，３，2′，3′−ピロロピロール等の含
窒素５員環、ピリダジン、ピリミジン、sym−ト
リアジン、sym−テトラジン、キナゾリン、１，
５−ナフチリジン、プテリジン、フエナジン等の
多価含窒素６員環、ピラゾール、イミナゾール、
１，２，４−トリアゾール、１，２，３−トリア
ゾール、テトラゾール、ベンズイミナゾール、イ
ミダゾール、プリン等の多価含窒素５員環、ノル
ハルマン環、ペリミジン環、ベンゾフラン、イソ
ベンゾフラン、ジベンドフラン等の含酸素芳香族
環、ベンドチオフエン、チエノチオフエン、チエ
ビン等の含イオウ芳香族環、オキサゾール、イソ
オキサゾール、１，２，５−オキサダイアゾー
ル、ベンズオキサゾール等の含酸素複素芳香環、
チアゾール、イソチアゾール、１，３，４−チア
ダイアゾール、ベンゾチアゾール等の含イオウ複
素芳香環などの芳香族環およびその誘導体を少な
くとも一つ有する疎水性低分子有機化合物が好ま
しい結果を与える。中でもトリプタミン等のイン
ドール環を含む化合物は、特に好ましい結果を与
える。これは自己抗体や免疫複合体と該化合物の
結合において、該化合物の疎水性、立体構造と分
子剛直性が有効に作用している結果と解釈できる
ものである。 また、これらの疎水性化合物の中でも、疎水性
アミノ酸およびその誘導体ならびにプリン塩基も
しくはピリミジン塩基を構成要素として含む低分
子量の物質ないしその誘導体は、安全でかつ極め
て高率かつ特異的に自己抗体および／または免疫
複合体を吸着することから実用的に好ましいもの
である。 疎水性アミノ酸およびその誘導体とは、
Tanford、Nozaki（J.Am.Chem.Soc.、184 4240
（1962）、J.Biol.Chem.246 2211（1971）〕〔タンフ
オード、ノザキ（ジヤーナル・オブ・アメリカ
ン・ケミカル・ソサエテイ、184、4240（1962）、
ジヤーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリ
イ246、2211（1971）〕により定義された疎水性尺
度でみて、1500cal／mol以上のアミノ酸および
その誘導体で、対生理食塩水溶解度100ｍmol／
dl以下の化合物を意味する。例えば、リジン、バ
リン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、
イソロイシン、トリプトフアンおよびその誘導体
等である。これらの疎水性アミノ酸およびその誘
導体の中では、トリプトフアン、フエニルアラニ
ン、チロシン等の芳香族アミノ酸およびそれらの
誘導体が特に良好な結果を与える。また、アミノ
酸はｌ、ｄの立体配座を特に限定することなく使
用することができる。 本発明で言う低重合体および低分子量の物質と
は、分子量１万以下の、より好ましくは分子量
1000以下の物質である。これによりプロテインＡ
（分子量42000）のような天然高分子に比較して固
定化時の取扱い、固定化後の保存も容易に行える
ものである。また、当該物質が担体から溶出した
場合にも、分子量１万以下の物質は、生体に対す
る抗原性が無視できるほど小さく安全であり、滅
菌操作も容易に行えるものである。低重合体は、
疎水性化合物モノマー単独または他の化合物との
共重合により得られる。疎水性化合物モノマーと
しては、例えばトリブタミン等のインドール環を
含む化合物のビニル誘導体、トリプトフアン等の
疎水性アミノ酸を用いることができる。 プリン塩基およびピリミジン塩基を構成する低
分子物質とは、アデニン、シトシン、グアニン、
ウラシル、チミン、ヒポキサンチン、キサンチン
などの塩基、アデノシン、シチジン、グアノシ
ン、ウリジン、イノシン、キサントシン、デオキ
シアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグア
ノシン、デオキシウリジン、チミンジンなどのヌ
クレオシド、アデノシン5′−リン酸、シチジン
5′−リン酸、グアノシン5′−リン酸、イノシン
5′−リン酸、ウリジン5′−リン酸、およびこれら
のリボースがデオキシリボースになつたもの、お
よび二リン酸、三リン酸、また、2′位、3′位にリ
ン酸がついたものなどのヌクレオチド、ヌクレオ
チドにグルコース、マンノース等の糖が結合した
もの、ヌクレオチド数10以下のオリゴヌクレオチ
ド、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド
（NAD）、フラビンアデニンジヌクレオチド
（FAD）、コエンザイムＡ、コエンザイムB12など
のヌクレオチド補酵素、およびこれらすべての誘
導体をさす。このうち特に、塩基、ヌクレオシ
ド、ヌクレオチドが好ましく、さらには塩基が良
く、その中でもプリン塩基のアデニン、グアニン
がより好ましい。これらを単に一つだけ固定する
のではなく、複数の種類を担体に固定してもよ
い。 また、本発明で特に自己抗体および／または免
疫複合体の吸着除去に適したリガンドの第２とし
て、糖リン酸を構成要素として含む低分子量の物
質ないしはその誘導体が挙げられる。これらのリ
ガンドは抗DNA抗体、抗核抗体等の自己抗体お
よび／またはその免疫複合体を特異的に結合可能
なものである。 本発明で言う糖リン酸を構成要素として含む低
分子量の物質とは、エリトロース、トレオース等
のテトロース類、アラビノース、キシロース、リ
キソース、リボース等のアルドペントース類、キ
シルロース、ペンツロース、リブロース等のケト
ペントース類、ガラクトース、グルコール、タロ
ース、マンノース等のアルドヘキソース類、ソル
ボース、タガトース、プシコース、フルクトース
等のケトヘキソース類、Ｎ−アセチル−グルコサ
ミン等ヘキソサミン類、アルドヘプトース、ケト
ヘプトース、ケトオクトース、ケトノノース等の
多単糖類、２−デオキシペントース、６−デオキ
シヘキソース、２−デオキシヘキソース、２，６
−ジデオキシヘキソース、３，６−ジデオキシヘ
キソース等のデオキシ糖類、糖アルコール無水物
類、ウロン酸、ケトアルトン酸、アスコルビン酸
等の酸性糖類、糖メチルエーテル類、分岐糖類、
アミノ糖類、シアル酸類のモノまたはジ正リン酸
エステル、モノまたはジピロリン酸エステル、ト
リフオスフエート等がある。これらの糖はＤ、Ｌ
体、スレオ、エリスロ体にかゝわりなく用いるこ
とができる。また、重合度10以下のホモまたはヘ
テロオリゴ糖に正リン酸、ビロリン酸、トリフオ
スフエート基が結合したものも用いるこができ
る。さらに、重合度10以下の糖リン酸のホモまた
はヘテロ重合体も用いることができる。これらす
べての誘導体も用いることができる。このうち特
に、ルボース、デオキシリボースのリン酸エステ
ルが好ましく、さらに、デオキシリボースの３，
５ジ正リン酸およびそのオリゴマーがより好まし
い。 本発明で特に自己抗体および／または免疫複合
体除去に適したリガンドの第３としては糖および
またはオリゴ糖が挙げられる。これらのリガンド
の結合対象とする自己抗体は、体組織、体細胞等
の体内で固相にある抗原に対する自己抗体であ
る。これらの固相抗原においては、糖タンパク
質、糖脂質、プロテオグリカン等に含まれる糖が
重要な免疫学的機能と抗原性を有することが多
い。また、肺炎球菌等細菌性の外来抗原の場合に
も、その糖鎖が主たる抗原であり、その抗体が体
内で産生されるものである。 糖鎖はタンパク質等の他の生体高分子と異なり
分子鎖の自由度が小さく、比較的複雑な高次構造
をとりにくい。また、各種の単糖の立体構造もア
ミノ酸に比し、基本骨格において大きな相違がな
く、事実溶連菌感染後のリウマチ熱、リウマチ性
心疾患において、心内膜とＡ型溶連菌多糖体は交
叉反応性抗原として作用することから、抗糖鎖抗
体は交叉反応をおこしやすく、逆に糖またはその
誘導体は糖鎖を抗原とする各種自己抗体と反応す
るものである。 本発明でいう糖および／またはオリゴ糖とは、
体組織および体細胞、表層の糖脂質、糖タンパク
質、プロテオグリカン等を構成している単糖およ
びその誘導体である。単糖としては、ピラノース
またはフラノース構造を持つたＮ−アセチル−Ｄ
−グルコサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサ
ミン等のヘキソサミン、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−
マントース、Ｄ−グルコース等のヘキソース、Ｌ
−フコース、Ｌ−ラムノース等の６−デオキシヘ
キソース、Ｄ−キシロース、Ｄ−アラビノース等
のペントース、Ｎ−アセチルノイラミン酸、Ｎ−
グリコリルノイラミン酸等のシアル酸が用いられ
る。これらはα型、β型いずれの異性体も特に限
定なく用いることができる。 オリゴ糖としては、上記単糖の単独または２種
以上のオリゴマーを直鎖状、分枝状に係りなく用
いることができる。特に２量体から12量体までが
良好な結果を与える。 また、本発明は上記糖または／およびオリゴ糖
を脂質、タンパク質、ポリペプチド、アミノ酸核
酸、核酸塩基等の他の物質に結合した状態で担体
に結合させて作用させても何らさしつかえない。 本発明においては、必要に応じて、担体に２種
以上のリガンドを結合させて用いることもでき
る。 本発明で担体に結合しているリガンドの量は、
一種類のリガンドにつき担体１ml当り0.01〜
200μmolの範囲が好ましい。より好ましくは0.05
〜100μmol／mlの範囲である。 本発明の体液浄化用吸着材は、体液浄化用吸着
装置として、体液の導出入口を備えた容器内に充
填保持させて使用することができる。 第１図において、１は本発明の吸着装置の１例
を示すものであり、円筒２の一端開口部に、内側
にフイルター３を張つたパツキング４を介して体
液導入口５を有するキヤツプ６をネジ嵌合し、円
筒２の他端開口部に内側にフイルター３′を張つ
たパツキング４′を介して体液導出口７を有する
キヤツプ８をネジ嵌合して容器を形成し、フイル
ター３および３′の間隙に吸着材を充填保持させ
て吸着材層９を形成してなるものである。 吸着材層９には、本発明の該吸着材を単独で充
填してもよく、他の吸着材と混合もしくは積層し
てもよい。他の吸着材としては、例えば幅広い吸
着能を有する活性炭等を用いることができる。こ
れにより吸着材の相乗効果によるより広範な臨床
効果が期待できる。吸着材層９の容積は、体外循
環に用いる場合、50〜400ml程度が適当である。 この装置を体外循環で用いる場合には、大略次
の二通りの方法がある。一つには、体内から取り
出した血液を遠心分離器もしくは膜型血漿分離器
を使用して、血漿成分と血球成分とに分離した
後、血漿成分を該装置に通過させ、浄化した後、
血球成分と合わせて体内にもどす方法であり、他
の一つは体内から取り出した血液を直接該装置に
通過させ、浄化する方法である。 また、血液もしくは血漿の通過速度について
は、該吸着材の吸着能率が非常に高いため、吸着
材の粒度を粗くすることができ、また充填度を低
くできるので、吸着材層の形状の如何にかゝわり
なく、高い通過速度を与えることができる。その
ため多量の体液処理をすることができる。 体液の通液方法としては、臨床上の必要に応
じ、あるいは設備の装置状況に応じて、連続的に
通液してもよいし、また断続的に通液使用しても
よい。 本発明の吸着材は、以上述べてきたように、体
液中の悪性物質を高率かつ特異的に吸着除去し、
非常にコンパクトであると共に簡便かつ安全であ
る。 水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体を
用い、担体とリガンドの結合には２−ヒドロキシ
トリメチレン基を含む結合手を用いているため、
血漿タンパクの非特異吸着が少なく、補体系、凝
固系との相互作用も小さいという極めて優れた特
性を有する上に、物理的、機械的強度に優れ、吸
着材の調製、取扱いによるカケ、クダケが極めて
少ない。また硬質であるため高流速で体液を流す
ことができる。その上、担体が耐熱性を有すると
共に、担体とリガンドを結ぶ結合手も耐熱性を有
するため、通常の滅菌法（エチレンオキサイドガ
ス滅菌、高圧蒸気等熱滅菌、γ線滅菌等）も容易
に、かつ確実に実施できるという効果を併せもつ
ている。さらには全血用吸着材として用いる場合
にも、血球成分との相互作用が小さいため、血栓
形成や血球成分の非特異粘着、残血等を最小限に
おさえられるメリツトを有する。 本発明は、自己血漿等の体液を浄化、再生する
一般的な用法に適用可能であり、生体免疫機能に
関係した疾患の安全で確実な治療、特に慢性関筋
リウマチ、全身性エリテマト−デス等の自己免疫
疾患の治療に有効である。 また、本発明の吸着材は、装置に充填して治療
器として用いられるにとゞまらず、自己抗体、免
疫複合体の分離、精製用吸着材およびこれらの測
定用基材としても極めて有効に利用できる。 以下実施例により、本発明の実施の態様をより
詳細に説明する。 実施例 １ 酢酸ビニル1000ｇ、トリアリルイソシアヌレー
ト414ｇ（Ｘ＝0.30）、酢酸エチル1000ｇ、ヘプタ
ン1000ｇ、ポリ酢酸ビニル（重合度500）70ｇお
よび２，2′−アゾビスイソブチロニトリル36ｇよ
りなる均一混合液と、ポリビニルアルコール１重
量％、リン酸二水素ナトリウム二水和物0.05重量
％およびリン酸水素二ナトリウム十二水和物1.5
重量％を溶解した水４とをフラスコに入れ、十
分撹拌した後、65℃で18時間、さらに75℃で５時
間加熱撹拌して懸濁重合を行い、粒状共重合体を
得た。過、水洗、ついでアセトン抽出後、カセ
イソーダ465ｇおよびメタノール20よりなる溶
液中で、40℃で18時間、共重合体のエステル交換
反応を行つた。得られた粒子の平均粒径は150μ
ｍであつた。前記方法で水酸基密度（qOH）を
求めたところ、7.5meq／ｇであつた。 このゲルを内径7.5mm、長さ25cmのステンレス
製カラムに充填して、種々の分子量を持つデキス
トランやポリエチレングリコールの水溶液および
アルブミン、イムノグロブリンＧ、イムノグロブ
リンＭ、β−リボプロテインのリン酸緩衝塩溶液
を測定したところ、それぞれ分子量の大きい順に
溶出された。デキストランの排除限界分子量は約
６×105、タンパク質の排除限界分子量は約20×
106であつた。また0.3M塩化ナトリウムおよび
0.1Mリン酸ナトリウムを含む水溶液を溶媒とし
て、ヒト−γ−グロブリン、ヒト−アルブミンの
溶液を流したところ、ほとんど100％の回収率で
回収され、ゲルの非特異的吸着は非常に少なかつ
た。サンプルの測定はすべて流速１ml／minで実
施した。 つぎにエステル交換され、水で十分に洗浄し、
乾燥したゲル150ｇをジメチルスルホキシド1800
mlおよびエピクロルヒドリン1200mlからなる溶液
中に懸濁し、30％水酸化ナトリウム水溶液150ml
を加え、30℃にて５時間撹拌下反応させる。反応
終了後ガラスフイルターで過し、３のジメチ
ルスルホキシド、ついで20の水で洗浄してエポ
キシ基結合ゲルを得た。 該ゲルのエポキシ基結合量は１mlにつき0.11ｍ
molであつた。該エポキシ基結合ゲルを用い、疎
水性化合物をリガンドとして結合させて吸着材を
作成した。疎水性化合物として、ｌ−フエニルア
ラニン、ｌ−トリプトフアン、ｌ−トリプトフア
ンエチルエステル、トリプタミンを用い、それぞ
れをPH9.8の炭酸バツフアー中に0.05mol／の濃
度になるように溶かした。該エポキシ結合ゲル各
200mlに各リガンド液を300mlずつ加え、50℃で16
時間反応し結合せしめた後、過剰のエポキシ基を
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン
0.1mol／溶液で50℃、５時間反応させブロツ
キングした。リガンドの固定量は反応液中に残存
するリガンド量を、ｌ−フエニルアラニンについ
ては260nｍの吸着、他の三つのインドール誘導
体については280nｍの吸収より求め算出した。 ブロツキング後の吸着材を多量の水で繰り返し
洗浄後、生理食塩水で洗浄、水切りして実験に供
した。ｌ−トリプトフアンを結合させた吸着材に
ついては、121℃で20分間の高圧蒸気滅菌の操作
を加えたものも吸着実験を行つた。 吸着実験は、ヒト慢性関筋リウマチ患者血漿３
容と吸着材１容を混合し、37℃、２時間インキユ
ベートし、その後吸着材と血漿を分離し、吸着後
の血漿を分析し各種成分の吸着量を算出した。 グロブリン、アルブミン吸着量はＡ／Ｇテスト
キツト〔Ａ／GBテスト ワコー、和光純薬工業
(株)製〕にて測定した。慢性関筋リウマチの悪性物
質としては、リウマチ因子（自己抗体）、免疫複
合体の吸着除去能を測定した。リウマチ因子の測
定は、ラテツクス凝集テスト、受身感作血球凝集
テストにて行つた。 ラテツクス凝集テストは、ポリスチレンラテツ
クス粒子にヒト−γ−グロブリンを吸着させたも
のに、リウマチ因子を含む患者血漿を作用させる
と、ラテツクス粒子が凝集する性質を検出法とし
て測定するものであり、通常血漿の希釈系列を作
成して、ラテツクス粒子が凝集しなくなる血漿希
釈倍率でリウマチ因子濃度を評価するものであ
る。リウマチ因子を高濃度に含む血漿は、陰性に
なる希釈倍率が高くなり、低濃度の血漿は逆に低
くなる。 受身感作血球凝集テストは、ヒツジ赤血球にウ
サギ−γ−グロブリンを吸着させたものであり、
他はラテツクス凝集テストと同じである。一般
に、受身感作血球凝集テストの方がラテツクス凝
集テストよりリウマチ因子特異性が高いとされて
いる。 グリシン食塩緩衝液で希釈系列を作成して、ラ
テツクス凝集テストにてリウマチ因子の陰性にな
る希釈倍率を求めた。ラテツクス凝集テストは、
日本凍結乾燥研究所のキツトを用いて行つた。同
様に受身感作血球凝集テスト〔RAHAテスト、
富士臓器製薬(株)製〕にて評価した。結果は陽性を
示す最も高い希釈倍率の倍数をタイターとして表
わす。 また、免疫複合体の測定は、ポリエチレングリ
コール、補体溶血法によつた。この方法はポリエ
チレングリコールで沈降分取した免疫複合体を、
ヒト健康人血清中の補体と反応させ、残余の補体
量を、抗体を結合した赤血球の溶血量で測定する
ことにより、免疫複合体量を評価するものであ
る。 (1) 検体0.3mlを分離管に注ぐ。0.2M EDTA50μ
を加え撹拌する。ほう酸バツフア（PBS）
50μを加え撹拌する。12.5％PEG（ポリエチレン
グリコール）（Mw7500）を0.1ml加え撹拌し、
４℃90min静置する。 (2) ４℃、1700ｇ10min遠心し、得られた沈澱を
2.5％PEG1.0mlで洗う。1700ｇ15min遠心し、
上清を排出する。 (3) 37℃のGVB++（２価陽イオンを含むゼラチン
ベロナールバツフアー）30μを加え、沈澱を
溶解する。補体源としてプール健康人血清10μ
加える。37℃、30min、免疫複合体と補体と
を反応させる。 (4) 1.5×108／mlEA（抗体感作赤血球）1.0mlを加
え、37℃60min振盪させて、残存補体による溶
血反応を促進させる。 (5) 反応後、４℃の生食水6.5mlを加えて遠心し、
上清の吸光度（OD414）を測定する。 (6) 対照（健康人血清）に対する溶血の阻止率を
算出し、単位をPEG−cc％とする。 〔阻止率＝対照−検体吸光度／対照吸光度×100〕 〔除去率＝未処理−処理血漿阻止率／未処理血漿阻止
率×100〕 なお、EAは日本凍結乾燥研究所製の補体価測
定用感作赤血球（KW）を用いた。 結果を各成分の除去率で表１に示した。
【表】
【表】
これより、本発明の水酸基を有する架橋合成高
分子からなる担体に２−ヒドロキシトリメチレン
基を介して結合したｌ−フエニルアラニン、ｌ−
トリプトフアン、ｌ−トリプトフアンエチルエス
テル、トリプタミンが血漿中のリウマチ因子効率
良く吸着し、かつ、アルブミンの非特異吸着も少
ないことが明らかである。また、熱滅菌による吸
着能力の低下も認められない。また、吸着前後の
補体価を測定したが、いずれもその減少は僅かで
あつた。 比較例 １ 実施例１に用いた担体５ｇを200mlの水に懸濁
し、2N水酸化ナトリウム水溶液を用いてPHを10
〜11に調整し、３ｇの臭化シアンを加え、氷冷下
８分間撹拌する。反応終了後、すみやかにガラス
フイルターで過し、ついで水２で洗浄して、
臭化シアン活性化担体を得た。該活性化担体20ml
にｌ−トリプトフアン0.05mol／、PH8.4炭酸バ
ツフアー溶液30mlを加え、室温で４時間反応させ
た後、４℃に一晩放置した。過剰の活性基をトリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノメタン0.1mol／
溶液で、室温下４時間反応させてブロツキング
した。ブロツキング後の吸着材を多量の水で繰り
返し洗浄後、生理食塩水で洗浄、水切りして実験
に供した。上記の吸着材について、滅菌していな
いものと、121℃で20分間高圧蒸気滅菌したもの
との両者につき、実施例１と同様の吸着実験を行
い、吸着能力を評価した。結果を表２に示す。
分子からなる担体に２−ヒドロキシトリメチレン
基を介して結合したｌ−フエニルアラニン、ｌ−
トリプトフアン、ｌ−トリプトフアンエチルエス
テル、トリプタミンが血漿中のリウマチ因子効率
良く吸着し、かつ、アルブミンの非特異吸着も少
ないことが明らかである。また、熱滅菌による吸
着能力の低下も認められない。また、吸着前後の
補体価を測定したが、いずれもその減少は僅かで
あつた。 比較例 １ 実施例１に用いた担体５ｇを200mlの水に懸濁
し、2N水酸化ナトリウム水溶液を用いてPHを10
〜11に調整し、３ｇの臭化シアンを加え、氷冷下
８分間撹拌する。反応終了後、すみやかにガラス
フイルターで過し、ついで水２で洗浄して、
臭化シアン活性化担体を得た。該活性化担体20ml
にｌ−トリプトフアン0.05mol／、PH8.4炭酸バ
ツフアー溶液30mlを加え、室温で４時間反応させ
た後、４℃に一晩放置した。過剰の活性基をトリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノメタン0.1mol／
溶液で、室温下４時間反応させてブロツキング
した。ブロツキング後の吸着材を多量の水で繰り
返し洗浄後、生理食塩水で洗浄、水切りして実験
に供した。上記の吸着材について、滅菌していな
いものと、121℃で20分間高圧蒸気滅菌したもの
との両者につき、実施例１と同様の吸着実験を行
い、吸着能力を評価した。結果を表２に示す。
【表】
この比較例の結果から臭化シアンを結合剤とし
て用いた吸着材は、エピクロルヒドリンを結合剤
として用いた吸着剤に比べ、リウマチ因子や免疫
複合体に対する吸着能力でやや劣り、また熱滅菌
により吸着能力がやや低下することから、熱滅菌
によりリガンドの一部が切断されていることが示
唆される。 実施例 ２ 酢酸ビニル100ｇ、トリアリルイソシアヌレー
ト32.3ｇ（Ｘ＝0.25）、酢酸エチル100ｇ、ヘプタ
ン100ｇ、ポリ酢酸ビニル6.6ｇおよび２，2′−ア
ゾビスイソブチロニトリル3.3ｇよりなる均一混
合液を懸濁重合し、得られた粒子のエステル交換
反応を行なつた。得られたゲルの平均粒径は
200μｍ、qOH＝11meq／ｇであつた。このゲルの
デキストラン排除限界分子量は６×105であつた。 実施例１と同様の条件でエピクロルヒドリンを
用いて、上記ゲルにエポキシ基を結合させたとこ
ろ、得られたエポキシ基活性化ゲルのエポキシ結
合量は120μmol／mlであつた。 この活性化ゲルにｌ−トリプトフアンを種々の
濃度で仕込んで結合させ、種々のトリプトフアン
保持量を有する吸着材を作成した。実施例１と同
様の条件でリウマチ患者血漿を用い、吸着実験を
行つた。結果を表３に示す。
て用いた吸着材は、エピクロルヒドリンを結合剤
として用いた吸着剤に比べ、リウマチ因子や免疫
複合体に対する吸着能力でやや劣り、また熱滅菌
により吸着能力がやや低下することから、熱滅菌
によりリガンドの一部が切断されていることが示
唆される。 実施例 ２ 酢酸ビニル100ｇ、トリアリルイソシアヌレー
ト32.3ｇ（Ｘ＝0.25）、酢酸エチル100ｇ、ヘプタ
ン100ｇ、ポリ酢酸ビニル6.6ｇおよび２，2′−ア
ゾビスイソブチロニトリル3.3ｇよりなる均一混
合液を懸濁重合し、得られた粒子のエステル交換
反応を行なつた。得られたゲルの平均粒径は
200μｍ、qOH＝11meq／ｇであつた。このゲルの
デキストラン排除限界分子量は６×105であつた。 実施例１と同様の条件でエピクロルヒドリンを
用いて、上記ゲルにエポキシ基を結合させたとこ
ろ、得られたエポキシ基活性化ゲルのエポキシ結
合量は120μmol／mlであつた。 この活性化ゲルにｌ−トリプトフアンを種々の
濃度で仕込んで結合させ、種々のトリプトフアン
保持量を有する吸着材を作成した。実施例１と同
様の条件でリウマチ患者血漿を用い、吸着実験を
行つた。結果を表３に示す。
【表】
これより水酸基を有する架橋合成高分子よりな
る担体とリガンドの結合剤にエピクロルヒドリン
を使用することにより、リガンド結合量を自由に
調節することが容易にでき、リガンドの結合量の
多いものは特に優れたリウマチ因子および免疫複
合体の除去能を有していることが明らかである。 実施例 ３ ペンタエリスリトールジメタアクリレート100
ｇ、２−ヒドロキシエチルメタアクレート100ｇ、
酢酸エチル124ｇ、ヘプタノール124ｇ、ポリ酢酸
ビニル（重合度500）3.1ｇおよび２，2′−アゾビ
スイソブチロニトリル3.1ｇよりなる均一混合液
を懸濁重合し、粒状共重合体を得た。つぎに水で
十分に洗浄し、乾燥したゲル10ｇをジメチルスル
ホキシド150mlおよびエピクロルヒドリン100mlか
らなる溶液中に懸濁し、30％水酸化ナトリウム水
溶液100mlを加え、25℃にて３時間反応させる。
ジメチルスルホキシド、次いで十分の水で洗浄し
てエポキシ基結合ゲルを得た。該ゲルに実施例１
と同様の条件でリガンドとしてｌ−フエニルアラ
ーンを結合させてリウマチ患者血漿を用いて吸着
実験を行つた。また、121℃、20分の条件で高圧
蒸気滅菌したものについても同じ吸着実験を行い
比較した。結果を表４に示す。
る担体とリガンドの結合剤にエピクロルヒドリン
を使用することにより、リガンド結合量を自由に
調節することが容易にでき、リガンドの結合量の
多いものは特に優れたリウマチ因子および免疫複
合体の除去能を有していることが明らかである。 実施例 ３ ペンタエリスリトールジメタアクリレート100
ｇ、２−ヒドロキシエチルメタアクレート100ｇ、
酢酸エチル124ｇ、ヘプタノール124ｇ、ポリ酢酸
ビニル（重合度500）3.1ｇおよび２，2′−アゾビ
スイソブチロニトリル3.1ｇよりなる均一混合液
を懸濁重合し、粒状共重合体を得た。つぎに水で
十分に洗浄し、乾燥したゲル10ｇをジメチルスル
ホキシド150mlおよびエピクロルヒドリン100mlか
らなる溶液中に懸濁し、30％水酸化ナトリウム水
溶液100mlを加え、25℃にて３時間反応させる。
ジメチルスルホキシド、次いで十分の水で洗浄し
てエポキシ基結合ゲルを得た。該ゲルに実施例１
と同様の条件でリガンドとしてｌ−フエニルアラ
ーンを結合させてリウマチ患者血漿を用いて吸着
実験を行つた。また、121℃、20分の条件で高圧
蒸気滅菌したものについても同じ吸着実験を行い
比較した。結果を表４に示す。
【表】
これより水酸基を有する架橋合成高分子からな
る担体に、２−ヒドロキシトリメチレン基を介し
て結合したｌ−フエニルアラニンが血漿中のリウ
マチ因子を効率良く吸着し、また熱滅菌による吸
着能力の低下も認められない。 参考例 １ 実施例１のｌ−トリブトフアンを結合させた吸
着材50mlを第１図の如き容器内に収納し、自己抗
体および免疫複合体の除去装置を作成した。該吸
着装置を121℃で20分間高圧蒸気滅菌した後、第
２図に示す実験系を用いてリウマチ因子および免
疫複合体の吸着実験を行つた。 すなわち、容器１０にリウマチ患者血漿
（ACD添加）１１を250ml入れ、ポンプ１２によ
り毎分５mlの流速で汲み出し、該吸着装置１に送
り、ドリツプチヤンバー１５およびサンプリング
口１３を経て、容器１０に返送されるようにチユ
ーブ１４を配設した。 上記装置により、患者血漿を１時間循環させた
後、該患者血漿をサンプリングし、血漿中のリウ
マチ因子および免疫複合体量を測定した。結果を
表５に示した。 いずれの場合も、循環の前後で補体の減少は比
較的少なかつた。
る担体に、２−ヒドロキシトリメチレン基を介し
て結合したｌ−フエニルアラニンが血漿中のリウ
マチ因子を効率良く吸着し、また熱滅菌による吸
着能力の低下も認められない。 参考例 １ 実施例１のｌ−トリブトフアンを結合させた吸
着材50mlを第１図の如き容器内に収納し、自己抗
体および免疫複合体の除去装置を作成した。該吸
着装置を121℃で20分間高圧蒸気滅菌した後、第
２図に示す実験系を用いてリウマチ因子および免
疫複合体の吸着実験を行つた。 すなわち、容器１０にリウマチ患者血漿
（ACD添加）１１を250ml入れ、ポンプ１２によ
り毎分５mlの流速で汲み出し、該吸着装置１に送
り、ドリツプチヤンバー１５およびサンプリング
口１３を経て、容器１０に返送されるようにチユ
ーブ１４を配設した。 上記装置により、患者血漿を１時間循環させた
後、該患者血漿をサンプリングし、血漿中のリウ
マチ因子および免疫複合体量を測定した。結果を
表５に示した。 いずれの場合も、循環の前後で補体の減少は比
較的少なかつた。
【表】
実施例 ４
酢酸ビニル100ｇ、トリアリルイソシアヌレー
ト24.1ｇ（Ｘ＝0.20）、酢酸エチル124ｇ、ヘプタ
ン124ｇ、ポリ酢酸ビニル（重合度500）3.1ｇお
よび２，2′−アゾビスイソブチロニトリル3.1ｇ
よりなる均一混合液と、ポリビニルアルコール１
重量％、リン酸二水素ナトリウム二水和物0.05重
量およびリン酸水素ナトリウム十二水和物1.5重
量％を溶解した水400mlとをフラスコに入れ、十
分撹拌した後、65℃で18時間、さらに75℃で５時
間加熱撹拌して懸濁重合を行い、粒状共重合体を
得た。過、水洗、ついでアセトン抽出後、水酸
化ナトリウム46.5ｇおよびメタノール２よりな
る溶液中で、40℃で18時間、共重合体のエステル
交換反応を行つた。得られた粒子の平均粒径は
150μｍであつた。前記方法で水酸基密度（qOH）
を求めたところ、13meq／ｇであつた。 ついで上記ゲル50mlを水で十分に洗浄し、100
mgの水素化ホウ素ナトリウムを含む0.5M水酸化
ナトリウム水溶液50ml中に懸濁させ、１，４−ビ
ス−（２，３−エポキシプロポキシ）−ブタン50ml
を加え、撹拌する。反応終了後ガラスフイルター
で過し、ついで２の水で洗浄してエポキシ基
結合体を得た。該ゲルのエポキシ基結合量は１ml
のゲルにつき35μmolであつた。該エポキシ結合
ゲルを用い、アデニンを結合させて吸着材を作成
した。アデニンを0.025mol／になるようにPH
9.8の炭酸バツフアに溶かした溶液を調製し、該
エポキシ結合ゲル20mlに40mlの割合で加え、50℃
で２時間反応させた。過剰の活性基は0.1mol／
のグリシンでブロツキングした。アデニンの固
定量は、反応液中に残存するアデニンの260nｍ
の吸収から算出した。該吸着材のアデニン結合量
は31μmol／mlであつた。吸着材は十分に水洗し
た後、生理食塩水で洗浄、脱水して実験に供し
た。また、耐熱性を見るため121℃で20分間高圧
蒸気滅菌した吸着材も同様に吸着実験に供した。 吸着実験験は全身性エリテマトーデス患者血漿
３容と吸着材１容を混合し、37℃、２時間インキ
ユベーシヨンにより行つた。 抗DNA抗体価は、ホルマリン固定鶏血球に
DNAを感作したものと、処理または未処理の患
者血漿の段階希釈液との混和によつて生じる凝集
反応（室温）の有無により、陽性か陰かを判断
し、陽性を示す最高希釈倍数をもつて抗体価を求
めた。測定には「DNAテスト」〔富士臓器製薬(株)
製〕のキツトを用いた。 抗核抗体価は、細胞を塗抹したスライドガラス
に段階希釈した検体（一次抗体）を滴下し、抗原
−抗体反応を行い。ベルオキシダーゼ標識抗ヒト
免疫グロブリン抗体（二次抗体）を滴下し、酵素
の呈色反応を光学顕微鏡で観察した。測定には、
「エンザイムANAテスト」〔(株)医学生物学研究所
製〕のキツトを用いた。陽性を示す最高希釈倍数
をもつて抗体価を表示した。 免疫複合体量の測定は実施例１に示した方法で
行つた。 アルブミン量はブロムクレゾールグリーン
（BCG）を用いるアルブミン測定法を利用し、試
薬は〔Ａ／Ｇ Ｂ−テスト ワコー、和光純薬工
業(株)製〕を用いた。結果を表６に示す。
ト24.1ｇ（Ｘ＝0.20）、酢酸エチル124ｇ、ヘプタ
ン124ｇ、ポリ酢酸ビニル（重合度500）3.1ｇお
よび２，2′−アゾビスイソブチロニトリル3.1ｇ
よりなる均一混合液と、ポリビニルアルコール１
重量％、リン酸二水素ナトリウム二水和物0.05重
量およびリン酸水素ナトリウム十二水和物1.5重
量％を溶解した水400mlとをフラスコに入れ、十
分撹拌した後、65℃で18時間、さらに75℃で５時
間加熱撹拌して懸濁重合を行い、粒状共重合体を
得た。過、水洗、ついでアセトン抽出後、水酸
化ナトリウム46.5ｇおよびメタノール２よりな
る溶液中で、40℃で18時間、共重合体のエステル
交換反応を行つた。得られた粒子の平均粒径は
150μｍであつた。前記方法で水酸基密度（qOH）
を求めたところ、13meq／ｇであつた。 ついで上記ゲル50mlを水で十分に洗浄し、100
mgの水素化ホウ素ナトリウムを含む0.5M水酸化
ナトリウム水溶液50ml中に懸濁させ、１，４−ビ
ス−（２，３−エポキシプロポキシ）−ブタン50ml
を加え、撹拌する。反応終了後ガラスフイルター
で過し、ついで２の水で洗浄してエポキシ基
結合体を得た。該ゲルのエポキシ基結合量は１ml
のゲルにつき35μmolであつた。該エポキシ結合
ゲルを用い、アデニンを結合させて吸着材を作成
した。アデニンを0.025mol／になるようにPH
9.8の炭酸バツフアに溶かした溶液を調製し、該
エポキシ結合ゲル20mlに40mlの割合で加え、50℃
で２時間反応させた。過剰の活性基は0.1mol／
のグリシンでブロツキングした。アデニンの固
定量は、反応液中に残存するアデニンの260nｍ
の吸収から算出した。該吸着材のアデニン結合量
は31μmol／mlであつた。吸着材は十分に水洗し
た後、生理食塩水で洗浄、脱水して実験に供し
た。また、耐熱性を見るため121℃で20分間高圧
蒸気滅菌した吸着材も同様に吸着実験に供した。 吸着実験験は全身性エリテマトーデス患者血漿
３容と吸着材１容を混合し、37℃、２時間インキ
ユベーシヨンにより行つた。 抗DNA抗体価は、ホルマリン固定鶏血球に
DNAを感作したものと、処理または未処理の患
者血漿の段階希釈液との混和によつて生じる凝集
反応（室温）の有無により、陽性か陰かを判断
し、陽性を示す最高希釈倍数をもつて抗体価を求
めた。測定には「DNAテスト」〔富士臓器製薬(株)
製〕のキツトを用いた。 抗核抗体価は、細胞を塗抹したスライドガラス
に段階希釈した検体（一次抗体）を滴下し、抗原
−抗体反応を行い。ベルオキシダーゼ標識抗ヒト
免疫グロブリン抗体（二次抗体）を滴下し、酵素
の呈色反応を光学顕微鏡で観察した。測定には、
「エンザイムANAテスト」〔(株)医学生物学研究所
製〕のキツトを用いた。陽性を示す最高希釈倍数
をもつて抗体価を表示した。 免疫複合体量の測定は実施例１に示した方法で
行つた。 アルブミン量はブロムクレゾールグリーン
（BCG）を用いるアルブミン測定法を利用し、試
薬は〔Ａ／Ｇ Ｂ−テスト ワコー、和光純薬工
業(株)製〕を用いた。結果を表６に示す。
【表】
表６より、本発明のビニルアルコール単位を主
構成々分とする架橋共重合体からなる担体に、２
−ヒドロキシトリメチレン基を含む結合手を介し
て結合したアデニンが特異的かつ高率に抗DNA
抗体、抗核抗体、免疫複合体を吸着し、かつ該吸
着材は熱滅菌によりその吸着能力が低下しないこ
とが明らかである。 実施例 ５ 実施例１の活性化ゲルに、実施例５と同様の方
法によつてデオキシリボース３，５−ジリン酸を
結合せしめ、過剰の活性基をトリス（ビドロキシ
メチル）アミノメタンでブロツキングした。保持
量は20μmol／mlであつた。吸着材は生理食塩水
で充分に洗浄した後、脱水して実験に供した。抗
ダブルストランド−DNA抗体価はクリチデア・
ルシリア（crithidia luciliae）を用いる螢光抗体
間接法を用いた。他は参考例１と同様に行つた。
結果を表７に示した。
構成々分とする架橋共重合体からなる担体に、２
−ヒドロキシトリメチレン基を含む結合手を介し
て結合したアデニンが特異的かつ高率に抗DNA
抗体、抗核抗体、免疫複合体を吸着し、かつ該吸
着材は熱滅菌によりその吸着能力が低下しないこ
とが明らかである。 実施例 ５ 実施例１の活性化ゲルに、実施例５と同様の方
法によつてデオキシリボース３，５−ジリン酸を
結合せしめ、過剰の活性基をトリス（ビドロキシ
メチル）アミノメタンでブロツキングした。保持
量は20μmol／mlであつた。吸着材は生理食塩水
で充分に洗浄した後、脱水して実験に供した。抗
ダブルストランド−DNA抗体価はクリチデア・
ルシリア（crithidia luciliae）を用いる螢光抗体
間接法を用いた。他は参考例１と同様に行つた。
結果を表７に示した。
【表】
表７より、水酸基を有する架橋合成高分子から
なる担体に結合したデオキシリボース３，５−ジ
リン酸が、特異的かつ高率に抗ダブルストランド
DNA抗体、抗核抗体、免疫複合体を吸着するこ
とが明らかである。また吸着前後の補体価を測定
したが、その減少はわずかであつた。 実施例 ６ 実施例１の活性化ゲルに、実施例４と同様の方
法によつて、β−（ｐ−アミノフエニル）−エチル
化Ｄ−（＋）−ガラクトースを結合せしめ、過剰の
活性基をトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ンでブロツキングした。保持量は25μmol／mlで
あつた。吸着材は生理食塩水で十分に洗浄した
後、脱水して実験に供した。 吸着実験は全身性エリテマトーデス患者血漿３
容と吸着材１容を混合し、２時間インキユベート
した。吸着後の血漿中の抗Ｔ細胞抗体量を、正常
Ｔ細胞をデイテクターとする螢光抗体法にて測定
した。測定操作、条件は以下のようである。 １ 健康人末梢血より比重遠心法にてリンパ球を
分離し、ナイロンウールカラム法にてＴ細胞を
分取する〔“リンパ球機能検索法”中外医学社、
p15、p51（1980）〕。 ２ 分離した健康人Ｔ細胞１×106個に吸着実験
後の血漿0.1mlを加えて、４℃、１時間処理す
る。 ３ 洗浄後FITC標識抗ヒトイムノグロブリン家
兎抗血清を作用させ、螢光陽性細胞を計数す
る。 ４ これを螢光陽性細胞の百分率で表示する。 結果は、吸着前の患者血漿が24.4％、本吸着材
で処理した血漿が0.3％であつた。また、各血漿
のグロブリン、アルブミン量をＡ／Ｇテスト
（Ａ／Ｇ Ｂテスト、和光純薬）で測定したが、
大きな相違はなかつた。また、補体（C3、C4）
を単純免疫拡散法で測定したが、大きな変動はな
かつた。これよりＤ−（＋）−ガラクトースを結合
した吸着材が全身性エリテマトーデスの抗リンパ
球抗体を特異的に吸着することは明らかである。 また本吸着材を121℃で20分間高圧蒸気滅菌し、
吸着実験に供したが、滅菌による吸着活性の低下
はみられなかつた。 実施例 ７ 実施例１で用いた担体（Ｘ＝0.30）を用い、各
種結合剤を用いてｌ−フエニルアラニンを結合さ
せた吸着材を作成し、その吸着性能をオートクレ
ーブ滅菌前後について調べた。吸着材１は実施例
１にて、結合剤としてエピクロルヒドリンを用
い、ジメチルスルホキシド溶媒中で担体に結合剤
を結合させた後、ｌ−フエニルアラニンを結合さ
せたもの、吸着材２は吸着材１の製法において、
溶媒をジメチルスルホキシドのかわりに水を用い
て、他は同様にしてｌ−フエニルアラニンを結合
させたもの、吸着材３は実施例４に準じて、結合
剤として１，４−ビス−（２，３−エポキシプロ
ポキシ）−ブタンを用い、ｌ−フエニルアラニン
を結合させた吸着材、吸着材４は、吸着材３の結
合剤に替えて、１，２−ビス−（２，３−エポキ
シプロポキシ）−エタンを用い、ｌ−フエニルア
ラニンを結合させたものである。吸着材５は、比
較例１に準じて結合剤として臭化シアンを用い
て、ｌ−フエニルアラニンを結合させたものであ
る。吸着実験は実施例１と同様に行つた。結果を
表８に示す。
なる担体に結合したデオキシリボース３，５−ジ
リン酸が、特異的かつ高率に抗ダブルストランド
DNA抗体、抗核抗体、免疫複合体を吸着するこ
とが明らかである。また吸着前後の補体価を測定
したが、その減少はわずかであつた。 実施例 ６ 実施例１の活性化ゲルに、実施例４と同様の方
法によつて、β−（ｐ−アミノフエニル）−エチル
化Ｄ−（＋）−ガラクトースを結合せしめ、過剰の
活性基をトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタ
ンでブロツキングした。保持量は25μmol／mlで
あつた。吸着材は生理食塩水で十分に洗浄した
後、脱水して実験に供した。 吸着実験は全身性エリテマトーデス患者血漿３
容と吸着材１容を混合し、２時間インキユベート
した。吸着後の血漿中の抗Ｔ細胞抗体量を、正常
Ｔ細胞をデイテクターとする螢光抗体法にて測定
した。測定操作、条件は以下のようである。 １ 健康人末梢血より比重遠心法にてリンパ球を
分離し、ナイロンウールカラム法にてＴ細胞を
分取する〔“リンパ球機能検索法”中外医学社、
p15、p51（1980）〕。 ２ 分離した健康人Ｔ細胞１×106個に吸着実験
後の血漿0.1mlを加えて、４℃、１時間処理す
る。 ３ 洗浄後FITC標識抗ヒトイムノグロブリン家
兎抗血清を作用させ、螢光陽性細胞を計数す
る。 ４ これを螢光陽性細胞の百分率で表示する。 結果は、吸着前の患者血漿が24.4％、本吸着材
で処理した血漿が0.3％であつた。また、各血漿
のグロブリン、アルブミン量をＡ／Ｇテスト
（Ａ／Ｇ Ｂテスト、和光純薬）で測定したが、
大きな相違はなかつた。また、補体（C3、C4）
を単純免疫拡散法で測定したが、大きな変動はな
かつた。これよりＤ−（＋）−ガラクトースを結合
した吸着材が全身性エリテマトーデスの抗リンパ
球抗体を特異的に吸着することは明らかである。 また本吸着材を121℃で20分間高圧蒸気滅菌し、
吸着実験に供したが、滅菌による吸着活性の低下
はみられなかつた。 実施例 ７ 実施例１で用いた担体（Ｘ＝0.30）を用い、各
種結合剤を用いてｌ−フエニルアラニンを結合さ
せた吸着材を作成し、その吸着性能をオートクレ
ーブ滅菌前後について調べた。吸着材１は実施例
１にて、結合剤としてエピクロルヒドリンを用
い、ジメチルスルホキシド溶媒中で担体に結合剤
を結合させた後、ｌ−フエニルアラニンを結合さ
せたもの、吸着材２は吸着材１の製法において、
溶媒をジメチルスルホキシドのかわりに水を用い
て、他は同様にしてｌ−フエニルアラニンを結合
させたもの、吸着材３は実施例４に準じて、結合
剤として１，４−ビス−（２，３−エポキシプロ
ポキシ）−ブタンを用い、ｌ−フエニルアラニン
を結合させた吸着材、吸着材４は、吸着材３の結
合剤に替えて、１，２−ビス−（２，３−エポキ
シプロポキシ）−エタンを用い、ｌ−フエニルア
ラニンを結合させたものである。吸着材５は、比
較例１に準じて結合剤として臭化シアンを用い
て、ｌ−フエニルアラニンを結合させたものであ
る。吸着実験は実施例１と同様に行つた。結果を
表８に示す。
【表】
表８より、本発明の２−ヒドロキシトリメチレ
ン基を含有する結合手を介して担体にｌ−フエニ
ルアラニンを結合させた吸着材は、アルブミンの
非特異吸着が少なく、熱滅菌による性能低下も殆
んど認められない安定性に優れた吸着材であるこ
とがわかる。
ン基を含有する結合手を介して担体にｌ−フエニ
ルアラニンを結合させた吸着材は、アルブミンの
非特異吸着が少なく、熱滅菌による性能低下も殆
んど認められない安定性に優れた吸着材であるこ
とがわかる。
第１図は本発明の体液浄化用吸着材を使用した
の吸着装置の１例を示す断面図、第２図は参考例
１におけるモデル実験説明図である。 １……吸着装置、２……円筒、３，３′……フ
イルター、４，４′……パツキング、５……体液
導入口、６……キヤツプ、７……体液導出口、８
……キヤツプ、９……吸着材、１０……容器、１
１……血漿、１２……ポンプ、１３……サンプリ
ング口、１４……チユーブ、１５……ドリツプチ
ヤンバー。
の吸着装置の１例を示す断面図、第２図は参考例
１におけるモデル実験説明図である。 １……吸着装置、２……円筒、３，３′……フ
イルター、４，４′……パツキング、５……体液
導入口、６……キヤツプ、７……体液導出口、８
……キヤツプ、９……吸着材、１０……容器、１
１……血漿、１２……ポンプ、１３……サンプリ
ング口、１４……チユーブ、１５……ドリツプチ
ヤンバー。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体
に、２−ヒドロキシトリメチレン基を構成要素と
して含む結合手を介して、被吸着物質と結合可能
な官能部を含有する物質が結合されていることを
特徴とする体液浄化用吸着材。 ２ ２−ヒドロキシトリメチレン基を構成要素と
して含む結合手が、２−ヒドロキシトリメチレン
基または構造式 において、ｎの数が１ないし３で示される基であ
る特許請求の範囲第１項記載の吸着材。 ３ 架橋合成高分子がビニルアルコール単位を主
構成々分とする架橋共重合体である特許請求の範
囲第１項記載の吸着材。 ４ 水酸基を有する架橋合成高分子からなる担体
に、溶液中で担体に結合可能な官能基とメチルオ
キシラン基の両者を含有する結合剤を結合させ、
さらに該メチルオキシラン基に被吸着物質と結合
可能な官能部を含有する物質を反応させることを
特徴とする体液浄化用吸着材の製造法。 ５ 担体に結合可能な官能基とメチルオキシラン
基の両者を含有する結合剤がエピハロヒドリンで
ある特許請求の範囲第４項記載の吸着材の製造
法。 ６ 溶液が極性有機溶媒である特許請求の範囲第
５項記載の吸着材の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57048829A JPS58165859A (ja) | 1982-03-29 | 1982-03-29 | 体液浄化用吸着材およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57048829A JPS58165859A (ja) | 1982-03-29 | 1982-03-29 | 体液浄化用吸着材およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58165859A JPS58165859A (ja) | 1983-09-30 |
| JPH0135670B2 true JPH0135670B2 (ja) | 1989-07-26 |
Family
ID=12814115
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57048829A Granted JPS58165859A (ja) | 1982-03-29 | 1982-03-29 | 体液浄化用吸着材およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58165859A (ja) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5949773A (ja) * | 1982-08-12 | 1984-03-22 | 鐘淵化学工業株式会社 | 生物特異性重合物 |
| JPS60114340A (ja) * | 1983-11-25 | 1985-06-20 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 低比重リポ蛋白質吸着用の吸着材 |
| JPS61189300A (ja) * | 1985-02-18 | 1986-08-22 | Tokuyama Soda Co Ltd | 親水性重合体粒子の製造方法 |
| EP0197521B1 (en) * | 1985-04-09 | 1989-08-02 | TERUMO KABUSHIKI KAISHA trading as TERUMO CORPORATION | Immunoglobulin adsorbent and adsorption apparatus |
| JPH04218772A (ja) * | 1991-03-30 | 1992-08-10 | Tokuyama Soda Co Ltd | 診断用試薬 |
| JP3235671B2 (ja) * | 1992-02-24 | 2001-12-04 | 東洋紡績株式会社 | 生理活性物質固定化担体 |
| JP2000262895A (ja) * | 1999-03-17 | 2000-09-26 | P Sharuma Chandora | 免疫吸着剤マトリックスの製法および免疫吸着剤カラム |
| JP4942034B2 (ja) * | 2007-02-14 | 2012-05-30 | 旭化成クラレメディカル株式会社 | 自己抗体吸着材及び体外循環モジュール |
| US12582754B2 (en) | 2020-05-07 | 2026-03-24 | Glycoprobe Ab | Kit and method for reduction of components in a blood-related medium |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5748831A (en) * | 1980-09-08 | 1982-03-20 | Pioneer Electronic Corp | Power-on reset signal generating circuit |
-
1982
- 1982-03-29 JP JP57048829A patent/JPS58165859A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58165859A (ja) | 1983-09-30 |
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