JPH0145028B2 - - Google Patents
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- JPH0145028B2 JPH0145028B2 JP20349182A JP20349182A JPH0145028B2 JP H0145028 B2 JPH0145028 B2 JP H0145028B2 JP 20349182 A JP20349182 A JP 20349182A JP 20349182 A JP20349182 A JP 20349182A JP H0145028 B2 JPH0145028 B2 JP H0145028B2
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- latex particles
- particles
- penicillamine
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
本発明は免疫血清学的診断試薬に関する。
従来、ラテツクス粒子を担体とし、抗原又は抗
体を感作させ、血清中の抗体もしくは抗原と特異
的に起る抗原、抗体反応によりラテツクス粒子の
凝集反応を生じさせ、その結果により各種疾患の
診断を行うことが免疫血清学的診断法として臨床
検査の分野において行なわれており、例えばリウ
マチ因子、HBs抗原、HBs抗体、抗ストレプト
リジン−Ｏ（ASO）、Ｃ−反応性蛋白質（CRP）、
α−フエトプロテイン、癌胎児性抗原（CEA）
等の検査にもこのような免疫血清学的診断試薬が
用いられている。 かゝる診断試薬として、例えばポリスチレン粒
子が分散されているラテツクス懸濁液中の、ポリ
スチレン粒子にガンマグロブリンを混合し粒子表
面に吸着させたものが一般に使用されている。こ
のような診断試薬では、ガンマグロブリンは溶液
中でラテツクス粒子に吸着されずに存在するもの
とラテツクス表面上のものとが吸脱着して平衡状
態にある。そしてガンマグロブリンは主体がイム
ノグロブリンＧ（IgG）であり、ガンマグロブリ
ン中の90％以上を占めている。IgGは分子同志が
会合し２量体、３量体等の多量体を形成しやすい
が、かゝる多量体はラテツクス粒子を凝集させる
性質が強く、試薬の経時変化をまねくおそれがあ
る。 このため例えば特開昭54−26327号公報ではラ
テツクス懸濁液中に塩化コリン、サツカロースを
加えることにより経時変化を抑制している。しか
し塩化コリン、サツカロースを添加すると懸濁液
の粘度上昇をきたしラテツクス粒子の凝集反応に
際しての感度の低下、すなわち検出可能な測定対
象物の濃度下限の上昇をきたし、又凝集反応速度
が低下する欠点が新たに生ずる。 本発明はこのような欠点を解消し、ラテツクス
粒子の凝集反応に際しての感度が長期間に亘り高
感度に維持され、長期間の保存によつても自己凝
集が生じない免疫血清学的診断試薬を提供するこ
とを目的とする。 本発明の要旨は、粒径0.08μｍから0.80μｍのラ
テツクス粒子10mg当り、ガンマグロブリンが
250μｇから5000μｇ感作されており、該ラテツク
ス粒子が0.08重量％から2.0重量％含有されてい
るラテツクス懸濁液からなり、該懸濁液中に0.01
重量％から10.0重量％のペニシラミンが添加され
ていることを特徴とする、免疫血清学的診断試薬
に存する。 次に本発明免疫血清学的診断試薬について更に
詳細に説明する。 本発明におけるラテツクス粒子の粒径は、
0.08μｍから0.80μｍの範囲にあるものが使用され
る。これは、ラテツクス粒子に感作されたガンマ
グロブリンが検体中の抗原又は抗体と反応して凝
集反応を生ずるとラテツクス粒子が数個乃至数十
個くつついて凝集像を生ずるが、これをガラス板
上で肉眼判定したり、光学的に散乱光の変化でと
らえたり、透過光の強弱変化でとらえたりするに
適当な粒径範囲である。 ラテツクス粒子は、全粒子が0.08μｍから0.80μ
ｍの範囲に存在するものが好ましいが、凝集像に
影響を与えない程度の少量、望ましくは５％以内
でかゝる粒径から若干外れるものを含むことも許
容される。 ラテツクス粒子としては、例えばポリスチレン
粒子の他、フエニル基を有する単量体と陰イオン
性単量体との共重合体粒子が好適である。 共重合体粒子の場合、フエニル基を有する単量
体としては、例えばスチレン、ジビニルベンゼ
ン、エチルスチレン、α−メチルスチレン等が存
し、又陰イオン性の単量体としては、例えばスチ
レンスルホン酸塩、ジビニルベンゼンスルホン酸
塩、エチルスチレンスルホン酸塩、α−メチルス
ルホン酸塩等が存する。 又、前記の共重合体粒子を得るには、例えばフ
エニル基を有する単量体100重量部と陰イオン性
単量体0.1〜70重量部を孔化剤の不存在下に過硫
酸塩を重合開始剤として水中で共重合反応を生じ
させることにより得られる。このようにして得ら
れる共重合体粒子には、共重合成分である陰イオ
ン性単量体に基づくものと重合開始剤の切片の陰
イオンに基づく表面荷電が付与される。共重合体
粒子の表面荷電密度はラテツクス懸濁液における
陰イオンの解離濃度で3.0×10-7モル／m2〜80.0×
10-7モル／m2の範囲内に存するものとされ、かゝ
る範囲内にある場合は、孔化剤が存在しなくとも
共重合体粒子間の自己凝集を防ぎ安定なラテツク
ス懸濁液が得られる。 本発明においてはラテツクス粒子10mg当り、ガ
ンマグロブリンが250μｇから5000μｇ感作され
る。 本発明においてラテツクス粒子が感作されるガ
ンマグロブリンは、ガンマグロブリンそのもので
あつもよいし、又IgG分画であつてもよいし、又
更にはIgGを更に分画して得られる抗原又は抗体
そのものであつてもよい。 例えばCRPを検出する場合において、IgGを更
に分画したＦ（ab′）2が使用されることによりRA
因子の干渉や補体の妨害を除去することができ
る。この場合はＦ（ab′）2の感作量が上記範囲内に
存在するものとされる。 ガンマグロブリンの感作がラテツクス粒子10mg
当り250μｇから5000μｇとされるのは、250μｇよ
りも少量では凝集速度が遅くなるし、凝集反応を
行つた後の凝集像も検出し難くなり、又5000μｇ
より多量では系中に遊離して存在するガンマグロ
ブリンが多く反応するため、結局凝集反応におけ
る感度低下を来たしやすいからである。 ラテツクス懸濁液中に分散されているラテツク
ス粒子の量は0.08重量％から2.0重量％とされる。
ラテツクス粒子の量が上記範囲内に存するように
なされるのは、ラテツクス粒子の量が0.08重量％
よりも少量では凝集反応を行なつた後の凝集像の
検出が困難となり、又2.0重量％よりも多量では
凝集反応により小凝集が多数生じこれがために凝
集像の判定が困難になるからである。 本発明にはラテツクス懸濁液中に0.01重量％か
ら10.0重量％のペニシラミンが添加されている。
ペニシラミンは、次式 で表わされる含硫α−アミノ酸である。 そしてペニシラミンは、IgGの会合を抑制し、
ラテツクス診断試薬の感度低下を防ぐ働きを有す
ることがわかつた。ペニシラミンはＤ体、Ｌ体、
DL体のいずれもが使用できる。ペニシラミンの
添加量は、ラテツクス懸濁液中に0.01重量％から
10.0重量％の範囲とされる。これは0.01重量％よ
りも少量ではIgGの会合抑制や診断試薬として使
用する際の感度低下を防ぐ働きが発現されないお
それがあり、10.0重量％以上含有する場合は薬と
して実際に使用する際試薬表面や試薬の拡がりの
端部が乾燥しやすいがこの場合に溶解度との関係
で結晶を生じやすいものとなるので好ましくない
ことによる。 本発明において診断試薬の感度、凝集反応時間
等を調整するために、ペニシラミンの他に、例え
ば塩化コリン、サツカロース等を添加することも
ありうる。 本発明によれば、ラテツクス粒子の凝集反応に
際しての感度が長期間に亘り高感度に保持される
と共に、長時間の保存によつても自己凝集を生じ
ない免疫血清学的診断試薬が得られる。 実施例 １ (1) Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原検出用ラテツクス
試薬の調整、0.015Mのリン酸食塩緩衝液（PH
7.4）中に、粒径が0.46μｍのポリスチレンラテ
ツクス粒子が2.0重量％含有されるように分散
させたもの（Ａ液）を調製した。HBs抗原を
モルモツトに免疫して得られた抗血清から精製
した、抗HBs抗原抗体を含むIgG分画成分を、
0.015Mのリン酸食塩緩衝液（PH7.4）に対して
500μｇ／mlとなるように溶解させたもの（Ｂ
液）を調整した。 このＡ液、Ｂ液を体積比で１：１に混合し、
ポリスチレンラテツクス粒子10mg当り、前記
IgG分画を250μｇ感作し37℃で120分間加熱し
た。 このラテツクス懸濁液に更にペニシラミン、
防腐剤としてアジ化ナトリウムを加え、最終的
にポリスチレンラテツクス粒子が1.0重量％、
ペニシラミン0.5重量％、アジ化ナトリウム0.1
重量％を含有する診断試薬を得た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬50μ
と、精製HBs抗原を正常人プール血清で希釈
した検体50μとを凝集判定用スライドグラス
上で混合し３分後の凝集像を肉眼で観察し感度
を判定した。又、診断試薬を調整した直後のも
のと４℃で１年間保存したものについて感度を
比較し保存安定性を評価した。
体を感作させ、血清中の抗体もしくは抗原と特異
的に起る抗原、抗体反応によりラテツクス粒子の
凝集反応を生じさせ、その結果により各種疾患の
診断を行うことが免疫血清学的診断法として臨床
検査の分野において行なわれており、例えばリウ
マチ因子、HBs抗原、HBs抗体、抗ストレプト
リジン−Ｏ（ASO）、Ｃ−反応性蛋白質（CRP）、
α−フエトプロテイン、癌胎児性抗原（CEA）
等の検査にもこのような免疫血清学的診断試薬が
用いられている。 かゝる診断試薬として、例えばポリスチレン粒
子が分散されているラテツクス懸濁液中の、ポリ
スチレン粒子にガンマグロブリンを混合し粒子表
面に吸着させたものが一般に使用されている。こ
のような診断試薬では、ガンマグロブリンは溶液
中でラテツクス粒子に吸着されずに存在するもの
とラテツクス表面上のものとが吸脱着して平衡状
態にある。そしてガンマグロブリンは主体がイム
ノグロブリンＧ（IgG）であり、ガンマグロブリ
ン中の90％以上を占めている。IgGは分子同志が
会合し２量体、３量体等の多量体を形成しやすい
が、かゝる多量体はラテツクス粒子を凝集させる
性質が強く、試薬の経時変化をまねくおそれがあ
る。 このため例えば特開昭54−26327号公報ではラ
テツクス懸濁液中に塩化コリン、サツカロースを
加えることにより経時変化を抑制している。しか
し塩化コリン、サツカロースを添加すると懸濁液
の粘度上昇をきたしラテツクス粒子の凝集反応に
際しての感度の低下、すなわち検出可能な測定対
象物の濃度下限の上昇をきたし、又凝集反応速度
が低下する欠点が新たに生ずる。 本発明はこのような欠点を解消し、ラテツクス
粒子の凝集反応に際しての感度が長期間に亘り高
感度に維持され、長期間の保存によつても自己凝
集が生じない免疫血清学的診断試薬を提供するこ
とを目的とする。 本発明の要旨は、粒径0.08μｍから0.80μｍのラ
テツクス粒子10mg当り、ガンマグロブリンが
250μｇから5000μｇ感作されており、該ラテツク
ス粒子が0.08重量％から2.0重量％含有されてい
るラテツクス懸濁液からなり、該懸濁液中に0.01
重量％から10.0重量％のペニシラミンが添加され
ていることを特徴とする、免疫血清学的診断試薬
に存する。 次に本発明免疫血清学的診断試薬について更に
詳細に説明する。 本発明におけるラテツクス粒子の粒径は、
0.08μｍから0.80μｍの範囲にあるものが使用され
る。これは、ラテツクス粒子に感作されたガンマ
グロブリンが検体中の抗原又は抗体と反応して凝
集反応を生ずるとラテツクス粒子が数個乃至数十
個くつついて凝集像を生ずるが、これをガラス板
上で肉眼判定したり、光学的に散乱光の変化でと
らえたり、透過光の強弱変化でとらえたりするに
適当な粒径範囲である。 ラテツクス粒子は、全粒子が0.08μｍから0.80μ
ｍの範囲に存在するものが好ましいが、凝集像に
影響を与えない程度の少量、望ましくは５％以内
でかゝる粒径から若干外れるものを含むことも許
容される。 ラテツクス粒子としては、例えばポリスチレン
粒子の他、フエニル基を有する単量体と陰イオン
性単量体との共重合体粒子が好適である。 共重合体粒子の場合、フエニル基を有する単量
体としては、例えばスチレン、ジビニルベンゼ
ン、エチルスチレン、α−メチルスチレン等が存
し、又陰イオン性の単量体としては、例えばスチ
レンスルホン酸塩、ジビニルベンゼンスルホン酸
塩、エチルスチレンスルホン酸塩、α−メチルス
ルホン酸塩等が存する。 又、前記の共重合体粒子を得るには、例えばフ
エニル基を有する単量体100重量部と陰イオン性
単量体0.1〜70重量部を孔化剤の不存在下に過硫
酸塩を重合開始剤として水中で共重合反応を生じ
させることにより得られる。このようにして得ら
れる共重合体粒子には、共重合成分である陰イオ
ン性単量体に基づくものと重合開始剤の切片の陰
イオンに基づく表面荷電が付与される。共重合体
粒子の表面荷電密度はラテツクス懸濁液における
陰イオンの解離濃度で3.0×10-7モル／m2〜80.0×
10-7モル／m2の範囲内に存するものとされ、かゝ
る範囲内にある場合は、孔化剤が存在しなくとも
共重合体粒子間の自己凝集を防ぎ安定なラテツク
ス懸濁液が得られる。 本発明においてはラテツクス粒子10mg当り、ガ
ンマグロブリンが250μｇから5000μｇ感作され
る。 本発明においてラテツクス粒子が感作されるガ
ンマグロブリンは、ガンマグロブリンそのもので
あつもよいし、又IgG分画であつてもよいし、又
更にはIgGを更に分画して得られる抗原又は抗体
そのものであつてもよい。 例えばCRPを検出する場合において、IgGを更
に分画したＦ（ab′）2が使用されることによりRA
因子の干渉や補体の妨害を除去することができ
る。この場合はＦ（ab′）2の感作量が上記範囲内に
存在するものとされる。 ガンマグロブリンの感作がラテツクス粒子10mg
当り250μｇから5000μｇとされるのは、250μｇよ
りも少量では凝集速度が遅くなるし、凝集反応を
行つた後の凝集像も検出し難くなり、又5000μｇ
より多量では系中に遊離して存在するガンマグロ
ブリンが多く反応するため、結局凝集反応におけ
る感度低下を来たしやすいからである。 ラテツクス懸濁液中に分散されているラテツク
ス粒子の量は0.08重量％から2.0重量％とされる。
ラテツクス粒子の量が上記範囲内に存するように
なされるのは、ラテツクス粒子の量が0.08重量％
よりも少量では凝集反応を行なつた後の凝集像の
検出が困難となり、又2.0重量％よりも多量では
凝集反応により小凝集が多数生じこれがために凝
集像の判定が困難になるからである。 本発明にはラテツクス懸濁液中に0.01重量％か
ら10.0重量％のペニシラミンが添加されている。
ペニシラミンは、次式 で表わされる含硫α−アミノ酸である。 そしてペニシラミンは、IgGの会合を抑制し、
ラテツクス診断試薬の感度低下を防ぐ働きを有す
ることがわかつた。ペニシラミンはＤ体、Ｌ体、
DL体のいずれもが使用できる。ペニシラミンの
添加量は、ラテツクス懸濁液中に0.01重量％から
10.0重量％の範囲とされる。これは0.01重量％よ
りも少量ではIgGの会合抑制や診断試薬として使
用する際の感度低下を防ぐ働きが発現されないお
それがあり、10.0重量％以上含有する場合は薬と
して実際に使用する際試薬表面や試薬の拡がりの
端部が乾燥しやすいがこの場合に溶解度との関係
で結晶を生じやすいものとなるので好ましくない
ことによる。 本発明において診断試薬の感度、凝集反応時間
等を調整するために、ペニシラミンの他に、例え
ば塩化コリン、サツカロース等を添加することも
ありうる。 本発明によれば、ラテツクス粒子の凝集反応に
際しての感度が長期間に亘り高感度に保持される
と共に、長時間の保存によつても自己凝集を生じ
ない免疫血清学的診断試薬が得られる。 実施例 １ (1) Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原検出用ラテツクス
試薬の調整、0.015Mのリン酸食塩緩衝液（PH
7.4）中に、粒径が0.46μｍのポリスチレンラテ
ツクス粒子が2.0重量％含有されるように分散
させたもの（Ａ液）を調製した。HBs抗原を
モルモツトに免疫して得られた抗血清から精製
した、抗HBs抗原抗体を含むIgG分画成分を、
0.015Mのリン酸食塩緩衝液（PH7.4）に対して
500μｇ／mlとなるように溶解させたもの（Ｂ
液）を調整した。 このＡ液、Ｂ液を体積比で１：１に混合し、
ポリスチレンラテツクス粒子10mg当り、前記
IgG分画を250μｇ感作し37℃で120分間加熱し
た。 このラテツクス懸濁液に更にペニシラミン、
防腐剤としてアジ化ナトリウムを加え、最終的
にポリスチレンラテツクス粒子が1.0重量％、
ペニシラミン0.5重量％、アジ化ナトリウム0.1
重量％を含有する診断試薬を得た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬50μ
と、精製HBs抗原を正常人プール血清で希釈
した検体50μとを凝集判定用スライドグラス
上で混合し３分後の凝集像を肉眼で観察し感度
を判定した。又、診断試薬を調整した直後のも
のと４℃で１年間保存したものについて感度を
比較し保存安定性を評価した。
【表】
【表】
第１表から明らかなように、診断試薬を調整
直後のものと、調整後４℃で１年保存後のもの
とでは凝集像の感度に変化がなく、保存安定性
がすぐれていることが確認された。 比較例 １ 実施例１との比較の為に、実施例１においてペ
ニシラミンが使用されないものについて同様に試
験を行つた結果では４℃で６ケ月後経過後に精製
HBs抗原濃度が10- 2μｇ／mlの場合に＋に判定さ
れた。 この場合のラテツクス試薬は陰性コントロール
（HBs抗原を含まない正常人血清）に対しても＋
に判定されるおそれがあり、診断試薬として使用
できないものであつた。 実施例 ２ (1) リウマチ因子検出用ラテツクス試薬の調整 粒径が0.20μｍのポリスチレンラテツクス粒
子をグリシン−カセイソーダ緩衝液に分散させ
たラテツクス懸濁液における、ポリスチレンラ
テツクス粒子10mg当り3000μｇのヒトガンマグ
ロブリンを感作し４℃で１夜放置した。このラ
テツクス懸濁液にペニシラミン、牛血清アルブ
ミン、を加え、更に防腐剤としてアジ化ナトリ
ウムを加え、最終的にポリスチレンラテツクス
粒子0.5重量％、ペニシラミン10.0重量％、牛
血清アルブミン1.0重量％、アジ化ナトリウム
0.1重量％が夫々含有されている診断試薬を得
た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 10個の血清検体について実施例１におけると
同様にして感度判定及び保存安定性試験を行つ
た結果を第２表に示す。
直後のものと、調整後４℃で１年保存後のもの
とでは凝集像の感度に変化がなく、保存安定性
がすぐれていることが確認された。 比較例 １ 実施例１との比較の為に、実施例１においてペ
ニシラミンが使用されないものについて同様に試
験を行つた結果では４℃で６ケ月後経過後に精製
HBs抗原濃度が10- 2μｇ／mlの場合に＋に判定さ
れた。 この場合のラテツクス試薬は陰性コントロール
（HBs抗原を含まない正常人血清）に対しても＋
に判定されるおそれがあり、診断試薬として使用
できないものであつた。 実施例 ２ (1) リウマチ因子検出用ラテツクス試薬の調整 粒径が0.20μｍのポリスチレンラテツクス粒
子をグリシン−カセイソーダ緩衝液に分散させ
たラテツクス懸濁液における、ポリスチレンラ
テツクス粒子10mg当り3000μｇのヒトガンマグ
ロブリンを感作し４℃で１夜放置した。このラ
テツクス懸濁液にペニシラミン、牛血清アルブ
ミン、を加え、更に防腐剤としてアジ化ナトリ
ウムを加え、最終的にポリスチレンラテツクス
粒子0.5重量％、ペニシラミン10.0重量％、牛
血清アルブミン1.0重量％、アジ化ナトリウム
0.1重量％が夫々含有されている診断試薬を得
た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 10個の血清検体について実施例１におけると
同様にして感度判定及び保存安定性試験を行つ
た結果を第２表に示す。
【表】
第２表から明らかなように、診断試薬を調整
直後のものと調整後４℃で１年間保存後のもの
とでは凝集像の感度に変化がなく、保存安定性
がすぐれていることが確認された。 実施例 ３ (1) CRP検出用ラテツクス試薬の調整 粒径が0.12μｍのポリスチレンラテツクス粒
子をグリシン−カセイソーダ緩衝液（PH8.6）
に分散させたラテツクス懸濁液における、ポリ
スチレンラテツクス粒子10mg当り、ヤギ産生の
抗ヒトCRP抗血清から精製分離したIgG分画
500μｇを感作した。 次いでこのラテツクス懸濁液にペニシラミ
ン、サツカロース、牛血清アルブミン、塩化コ
リン、アジ化ナトリウムを夫々加え、最終的に
ポリスチレンラテツクス粒子0.8重量％、ペニ
シラミン0.01重量％、サツカロース1.0重量％、
牛血清アルブミン1.0重量％、塩化コリン2.5重
量％、アジ化ナトリウム0.1重量％が夫々含有
されている診断試薬を得た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬につい
て、精製CRPの含有濃度の異なる血清検体に
ついて、実施例１と同様にして感度判定及び保
存安定性試験を行つた結果、第３表に示すよう
に保存安定性にすぐれていることが確認され
た。
直後のものと調整後４℃で１年間保存後のもの
とでは凝集像の感度に変化がなく、保存安定性
がすぐれていることが確認された。 実施例 ３ (1) CRP検出用ラテツクス試薬の調整 粒径が0.12μｍのポリスチレンラテツクス粒
子をグリシン−カセイソーダ緩衝液（PH8.6）
に分散させたラテツクス懸濁液における、ポリ
スチレンラテツクス粒子10mg当り、ヤギ産生の
抗ヒトCRP抗血清から精製分離したIgG分画
500μｇを感作した。 次いでこのラテツクス懸濁液にペニシラミ
ン、サツカロース、牛血清アルブミン、塩化コ
リン、アジ化ナトリウムを夫々加え、最終的に
ポリスチレンラテツクス粒子0.8重量％、ペニ
シラミン0.01重量％、サツカロース1.0重量％、
牛血清アルブミン1.0重量％、塩化コリン2.5重
量％、アジ化ナトリウム0.1重量％が夫々含有
されている診断試薬を得た。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬につい
て、精製CRPの含有濃度の異なる血清検体に
ついて、実施例１と同様にして感度判定及び保
存安定性試験を行つた結果、第３表に示すよう
に保存安定性にすぐれていることが確認され
た。
【表】
比較例 ３
実施例３との比較の為に、実施例３においてペ
ニシラミンが除かれている試薬を調整し、実施例
３と同様に感度判定及び保存安定性試験を行つた
結果第４表に示すように保存安定性の低下を来た
すことが認められた。
ニシラミンが除かれている試薬を調整し、実施例
３と同様に感度判定及び保存安定性試験を行つた
結果第４表に示すように保存安定性の低下を来た
すことが認められた。
【表】
実施例 ４
(1) CRP検出用ラテツクス試薬の調整
粒径が0.12μのスチレン−スチレンスルホン
酸ソーダ共重合体ラテツクス粒子が5.0重量％
（50mg／ml）含有されるように、前記共重合体
ラテツクス粒子をリン酸食塩緩衝液（PH6.5）
に分散させたもの（Ａ液）を調整した。 ヤギ産生の抗ヒトCRP抗血清から精製分離
したIgG分画をリン酸食塩緩衝液（PH6.5）に
5000μｇ／ml溶解したもの（Ｂ液）を調整し
た。 前記Ａ液、Ｂ液を体積比で１：１に混合し、
37℃で180分間撹拌し、前記共重合体ラテツク
ス粒子10mg当りIgG分画1000μｇを感作させた。
更にペニシラミン、アジ化ナトリウムをリン酸
食塩緩衝液（PH6.5）の溶液として加え、最終
的に前記共重合体ラテツクス粒子が1.0重量％、
ペニシラミン5.0重量％、アジ化ナトリウム0.1
重量％を含有する診断試薬を得た。尚ラテツク
ス粒子の表面荷電密度はラテツクス懸濁液にお
ける陰イオンの解離濃度で16.4×10-7モル／m2
であつた。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬につい
て、精製CRPの含有濃度の異なる血清検体に
ついて、実施例１と同様にして感度判定及び保
存安定性試験を行つたところ、第５表に示すよ
うに保存安定性にすぐれていることが確認され
た。
酸ソーダ共重合体ラテツクス粒子が5.0重量％
（50mg／ml）含有されるように、前記共重合体
ラテツクス粒子をリン酸食塩緩衝液（PH6.5）
に分散させたもの（Ａ液）を調整した。 ヤギ産生の抗ヒトCRP抗血清から精製分離
したIgG分画をリン酸食塩緩衝液（PH6.5）に
5000μｇ／ml溶解したもの（Ｂ液）を調整し
た。 前記Ａ液、Ｂ液を体積比で１：１に混合し、
37℃で180分間撹拌し、前記共重合体ラテツク
ス粒子10mg当りIgG分画1000μｇを感作させた。
更にペニシラミン、アジ化ナトリウムをリン酸
食塩緩衝液（PH6.5）の溶液として加え、最終
的に前記共重合体ラテツクス粒子が1.0重量％、
ペニシラミン5.0重量％、アジ化ナトリウム0.1
重量％を含有する診断試薬を得た。尚ラテツク
ス粒子の表面荷電密度はラテツクス懸濁液にお
ける陰イオンの解離濃度で16.4×10-7モル／m2
であつた。 (2) 感度判定及び保存安定性試験 上記のようにして得られた診断試薬につい
て、精製CRPの含有濃度の異なる血清検体に
ついて、実施例１と同様にして感度判定及び保
存安定性試験を行つたところ、第５表に示すよ
うに保存安定性にすぐれていることが確認され
た。
Claims (1)
- １ 粒径0.08μｍから0.80μｍのラテツクス粒子10
mg当り、ガンマグロブリンが250μｇから5000μｇ
感作されており、該ラテツクス粒子が0.08重量％
から2.0重量％含有されているラテツクス懸濁液
からなり、該懸濁液中に0.01重量％から10.0重量
％のペニシラミンが添加されていることを特徴と
する免疫血清学的診断試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20349182A JPS5992354A (ja) | 1982-11-18 | 1982-11-18 | 免疫血清学的診断試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20349182A JPS5992354A (ja) | 1982-11-18 | 1982-11-18 | 免疫血清学的診断試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5992354A JPS5992354A (ja) | 1984-05-28 |
| JPH0145028B2 true JPH0145028B2 (ja) | 1989-10-02 |
Family
ID=16475032
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20349182A Granted JPS5992354A (ja) | 1982-11-18 | 1982-11-18 | 免疫血清学的診断試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5992354A (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62218864A (ja) * | 1986-03-20 | 1987-09-26 | Hitachi Chem Co Ltd | ヒトｃ反応性タンパクの定量法 |
| JPS62218866A (ja) * | 1986-03-20 | 1987-09-26 | Hitachi Chem Co Ltd | ヒトｃ反応性タンパク定量用試薬 |
| JPH0833382B2 (ja) * | 1986-03-28 | 1996-03-29 | エスエイ・テキサコ・ベルジヤン・エヌヴイ | プローブ |
| JP2534067B2 (ja) * | 1987-07-09 | 1996-09-11 | 日水製薬株式会社 | Ｃ反応性タンパクの定量法 |
| JP6224217B1 (ja) * | 2016-12-27 | 2017-11-01 | Jsr株式会社 | ラテックス粒子分散液の保管方法 |
-
1982
- 1982-11-18 JP JP20349182A patent/JPS5992354A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5992354A (ja) | 1984-05-28 |
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