JPH0156760B2 - - Google Patents
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- JPH0156760B2 JPH0156760B2 JP57141575A JP14157582A JPH0156760B2 JP H0156760 B2 JPH0156760 B2 JP H0156760B2 JP 57141575 A JP57141575 A JP 57141575A JP 14157582 A JP14157582 A JP 14157582A JP H0156760 B2 JPH0156760 B2 JP H0156760B2
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- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
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- C12P41/004—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
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Description
本発明は光学活性オキサゾリジノン誘導体の製
造方法に関するものであり、更に詳しくは、 一般式 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基或いは置換又は未置
換芳香族炭化水素基） で表わされる３−アルキル置換−５−アシロキシ
メチルオキサゾリジン−２−オンラセミ体に、化
合物〔〕を不斉的に加水分解して、 一般式 で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させる立体選択的エステラーゼ活性を有
する微生物又は該微生物より得られた酵素を作用
させる事により化合物〔〕を生成させ、生成し
た化合物〔〕及び有機酸と未反応の一般式 で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを分離し、次いで化合物〔′〕を採取する。
或いは、更に採取した化合物〔′〕を加水分解
し、 一般式 で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させ、採取することを特徴とする光学活
性オキサゾリジノン誘導体〔′〕及び〔′〕を
製造する方法に関する。 化合物〔′〕及び〔′〕は光学活性なβ−受
容体遮断薬の重要な中間体である。 従来、光学活性なβ−受容体遮断薬の製法とし
ては、例えば下記の方法が知られている。 (1) β−受容体遮断薬ラセミ体を光学分割する方
法（特開昭55−149233、米国特許第3655663
号）。 (2) ３−アルキル置換アミノ−１，２−プロパン
ジオールラセミ体を光学分割し、この活性体か
ら誘導していく方法（特開昭51−118711）。 (3) Ｄ−マンニトールよりＤ−グリセロールアセ
トニドを経て誘導していく方法〔ジヤーナル・
オブ・オーガニツク・ケミストリー（J.O.C.）
41（19）、3121〜3124（1976）、ケミカル・アン
ド・フアーマシユテカル・ブレテン
（Chemical＆Pharmaceutical Bulletin）29(12)
3593〜3600（1981）〕。 しかしながら、(1)は最終製品ラセミ体を光学分
割する点でコスト的に不利である。(2)は３−アル
キル置換アミノ−１，２−プロパンジオールが吸
湿性であり、一旦吸湿すると結晶性が悪く、光学
分割法では容易に収率良く高純度の光学活性体を
得られない。また(3)はＤ−マンニトールからＤ−
グリセロールアセトニドに誘導する際、多量の四
酢酸鉛を必要とし、工業的規模で行うには廃棄物
の点で問題がある。以上挙げたいずれの方法も一
長一短があつた。 ところで、光学活性なβ−受容体遮断薬の合理
的な合成経路として下記のような経路が知られて
いる（ケミカル・アンド・フアーマシユテカル・
ブレチン29(12)3593〜3600（1981）津田喜典ら；カ
ナダ特許第965787号）。 そこで本発明者らは化合物〔′〕に着目し、
化合物〔′〕の簡便な新規製造法の開発を目的
として鋭意研究した。 化合物〔′〕の５位にヒドロキシメチル基が
あることに着目し、化合物〔′〕のラセミ体を
エステル化させ、化合物〔〕を合成し、この化
合物〔〕を不斉的に加水分解するエステラーゼ
活性を有する微生物又は酵素を作用させることに
より化合物〔′〕が容易に得られるのではない
かと考え、そのスクリーニング実験を試みた。そ
の結果、化合物〔〕を不斉的に加水分解し、化
合物〔〕を生成させる立体選択的エステラーゼ
活性を有する微生物、及び該微生物より得られた
酵素を見い出し、更に簡単な分離操作により化合
物〔〕と未反応の化合物〔′〕を分離し、目
的物に適う化合物〔′〕を化学的方法で加水分
解することにより化合物〔′〕を採取できるこ
とが判明し、本発明を完成させるに至つた。 即ち本発明は、化合物〔〕を不斉的に加水分
解して化合物〔〕を生成させる立体選択的エス
テラーゼ活性を有する微生物又は該微生物より得
られた酵素を作用させる事により化合物〔〕を
生成させ、次いで化合物〔〕と生成した有機酸
及び未反応の化合物〔′〕を有機溶媒で抽出分
離する方法、或いは反応液を一旦有機溶媒で転溶
するか又はそのまま反応液をカラムクロマトグラ
フイー処理か、分溜操作を行い分離する方法等に
より化合物〔′〕を採取し、或いは、更に採取
した化合物〔′〕を加水分解し、化合物〔′〕
を生成し、採取することを特徴とする光学活性オ
キサゾリジノン誘導体〔′〕及び〔′〕の製造
方法に関するものである。 本発明により、従来法と比べ高純度でかつ安価
な光学活性β−受容体遮断薬の合成が可能となつ
た。 本発明の基質として用いられる一般式 で表わされるオキサゾリジノン誘導体における置
換基Ｘとしては低級アルキル基が用いられる。例
えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロ
ピル基、ブチル基又はｔ−ブチル基等が挙げられ
るが、中でもイソプロピル基又はｔ−ブチル基が
好ましい。一方置換基Ｙとしては、置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基、或いは置換又は未
置換芳香族炭化水素基が挙げられる。更に詳しく
は、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、又
はブチル基の如き未置換アルキル基；例えばクロ
ロメチル基、ジクロロメチル基、トリフルオロメ
チル基、又はβ，β，β−トリクロロエトキシメ
チル基の如きハロゲン基、水酸基、或いはアルコ
キシ基で置換された置換アルキル基；例えばアリ
ル（Allyl）基の如きアルケニル基；例えばフエ
ニル基、ｐ−メチルフエニル基、ｐ−クロロフエ
ニル基、又はｐ−メトキシフエニル基の如き未置
換又はアルキル基、ハロゲン基、水酸基或いはア
ルコキシ基で置換されたアリール（Aryl）基；
例えばベンジル基、ｐ−メチルベンジル基、ｐ−
クロロベンジル基、ｐ−ヒドロキシベンジル基、
又はｐ−メトキシベンジル基の如き未置換又はア
ルキル基、ハロゲン基、水酸基或いはアルコキシ
基で置換されたアラルキル基を例示することがで
きる。 化合物〔〕を不斉的に加水分解し、化合物
〔〕又は〔′〕を生成させる立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物は次のようなスクリー
ニングを行うことにより容易に見い出すことがで
きる。 例えば、その具体的な一例として、基質に３−
ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オンを用いる場合、先づ菌が生育可能な
栄養培地で10ml／大型チユーブ中25〜35℃、１〜
２日間振とう培養により菌体培養を行う。この培
養液に３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオ
キサゾリジン−２−オン（ラセミ体）を２％
（ｗ／ｖ）添加し、更に20〜35℃、PHをNaOH溶
液で５〜７に調整しながら１〜３日間反応させ
る。そして、ガスクロマトグラフイー（充填剤、
Silicone OV−17、１ｍ×3φカラム、温度180℃）
により各反応液の経時変化をとり、３−ｔ−ブチ
ル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−
オンが約50％生成したところで、反応が極端に遅
くなる菌株を１次選抜する。 更にスケールを400mlにかえて、前記同様の培
養及び加水分解反応を行い、終了後、酢酸エチル
400mlで抽出濃縮し、この濃縮液をシリカゲルカ
ラムに負荷し、ヘキサン／アセトン混液で未反応
の３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサ
ゾリジン−２−オンを溶出分離し、３−ｔ−ブチ
ル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−
オン画分を濃縮し、ヘキサンを徐々に加えていく
と結晶が析出してくる。この結晶物を真空乾燥
後、その比旋光度を測定すれば立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物か否か容易に判断でき
る。立体選択的加水分解能を有するエステラーゼ
は珍らしくないが、特にβ−受容体遮断薬の重要
な中間体である（＋）−３−アルキル置換−５−
ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オンの生
産に着目し、スクリーニングを実施し、かつ見い
出したところが本発明の特徴である。 前記と同様のスクリーニングを実施すれば、容
易に化合物〔〕を不斉的に加水分解する立体選
択的エステラーゼ活性を有する微生物を見い出す
ことができる。化合物〔〕を不斉的に加水分解
し、化合物〔〕を生成させる立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物としては、細菌、酵
母、かび又は放線菌等があり、例えばエンテロバ
クター属、クレブシエラ属、ミクロコツカス属、
エスケリチア属、シユードモナス属、スタフイロ
コツカス属、キヤンデイダ属、デバリオマイセス
属、エンドマイセス属、ハンゼヌラ属、ゲオトリ
クム属、クルイベロマイセス属、メトシユニコウ
イア属、ピチア属又はストレプトマイセス属に属
する微生物が挙げられ、特にエンテロバクター・
アエロゲネス（Enterobacter aerogenes）
IFO12010、IFO13534；エンテロバクター・クロ
アカエ（Enterobacter cloacae）IFO3320、
IFO12935；クレブシエラ・ニユーモニエ
（Klebsiella pneumoniae）IFO3318、IFO3321；
ミクロコツカス・ルテウス（Micrococcus
luteus）IFO3064、IFO3066；エスケリチア・コ
リ（Escherichia coli）IFO3366；シユードモナ
ス・クルシヴイエ（Pseudomonas cruciviae）
IFO12047；シユードモナス・フルオレツセンス
（Pseudomonas fluorescens）IFO3081；スタフ
イロコツカス・アウレウス（Staphylococcus
aureus）IFO3761；キヤンデイダ・シユードトロ
ピカリス（Candida pseudotropicalis）
IFO0432；キヤンデイダ・ケフイル（Candida
kefyr）IFO0008；デバリオマイセス・ハンゼニ
ー（Debaryomyces hansenii）IFO0017、
IFO0034；エンドマイセス・ゲオトリクム
（Endomyces geotrichum）CBS 178.71；ハンゼ
ヌラ・アノマラ（Hansenula anomala）
IFO0144；ハンゼヌラ・ミヌタ（Hansenula
minuta）IFO0975；ゲオトリクム・キヤンデイ
ドウム（Geotrichum candidum）CBS187.67；
クルイベロマイセス・フラギリス
（Kluyveromyces fragilis）IFO0288、
IFO0541；メトシユニコウイア・プルチエリマ
（Metschnikowia pulcherrima）IFO0561；ピチ
ア・フアリノサ（Pichia farinosa）IFO0459；
ピチア・メンブラナエフアシエンス（Pichia
membranaefaciens）IFO0186；ストレプトマイ
セス・フラボビレンス（Streptomyces
flavovirens）IFO3412；ストレプトマイセス・
アウレウス（Streptomyces aureus）IFO3175が
ある。 これら微生物の培養源は、通常資化しうる有機
及び無機の炭素源、窒素源及びビタミン・ミネラ
ル等を適宜配合したものを用い、培養温度は20〜
40℃、PH３〜11、好ましくはPH４〜８の範囲が用
いられる。又通気撹拌により微生物の生育を促進
させることもできる。 化合物〔〕の不斉加水分解反応においては、
培養の開始時に培地中に基質即ち化合物〔〕を
添加し、培養と並行して加水分解を行う方法、或
いは前記のようにして培養液菌体を化合物〔〕
と接触させ加水分解を行う方法とがある。望まし
くは、菌体を遠心分離等で濃縮後、高濃度菌体液
とし、このものに化合物〔〕を添加する方法が
反応後の生産物の回収の立場から好ましい。 一方、前記該微生物より得られた酵素として
は、例えば前記該微生物の培養液を遠心分離して
菌体を得、この菌体をリン酸緩衝液で均一になる
よう懸濁させ、次いで氷冷下、ブラウンホモジナ
イザーで破砕し、遠心分離して得た無細胞抽出酵
素液か或いは更にこの無細胞抽出液を30〜70％の
硫安分画処理を行い、塩析した画分をリン酸緩衝
液に溶解させ、一昼夜冷所透析して得た部分精製
酵素液が用いられ、これら酵素液に化合物〔〕
を接触させ、加水分解反応を行うことができる。
或いは、又微生物より精製した加水分解酵素、例
えばリポプロテインリパーゼ（E.C.3.1.1.3.）を接
触させ、加水分解反応を行うこともできる。更に
これら微生物又は該微生物より得られた酵素を用
いて、例えば固定化させることにより、不斉加水
分解反応を繰り返し行うこともできる。 化合物〔〕の反応液中での濃度は0.1％から
30％程度の高濃度まで用いることができる。 又、化合物〔〕の水に対する溶解度は一般に
低いが、撹拌等により、混合を行うことにより、
菌体又は酵素との接触を充分保つようにすれば、
本反応にとつて支障とはならない。 又、アセトン等の親水性溶剤や界面活性剤等を
反応に支障とならない程度加えても良い。 加水分解反応を行う際のPHは４〜８の範囲が好
ましい。化合物〔〕を高濃度で反応させる場
合、加水分解された有機酸が次第に反応液中に蓄
積し、PHが低下してくるので適当な中和剤例えば
NaOH溶液等で最適PHを保持するのが好ましい。 加水分解反応は通常10〜50℃の範囲が用いられ
るが、使用する菌株又は酵素に適した温度が採用
される。 未反応の化合物〔′〕を生成する有機酸及び
化合物〔〕から分離し、採取する方法として
は、一般的精製方法を用いれば良い。 例えば、反応液より遠心分離処理によつて、菌
体等の不溶性物質を除去した後、一般によく使用
される有機溶媒、例えばヘキサン、シクロヘキサ
ン、エーテル、酢酸ブチル、クロロホルム、ジク
ロロメタン、ベンゼン又はトルエン等で未反応の
化合物〔′〕を抽出、次いで減圧濃縮すること
により採取することができる。 又化合物〔′〕の種類例えば置換基Ｙがメチ
ル基、エチル基又はプロピル基等の低級アルキル
基の場合、前記有機溶媒抽出分離操作では完全に
分離しがたい。この場合には、前記と同様不溶性
物質を除去した後、減圧濃縮し、そのままカラム
クロマトグラフイー処理を行うか、或いは一旦有
機溶媒例えば酢酸エチル等で転溶、減圧濃縮後、
カラムクロマトグラフイー処理を行えば簡単に分
離し、化合物〔′〕を採取することができる。
カラムクロマトグラフイーとしては、通常よく使
われるシリカゲル、アルミナ又はフロリジル等の
担体を用いることができる。一方、又、化合物
〔′〕の種類により、化合物〔′〕と生成した
化合物〔〕の沸点に差がある場合には、分溜操
作により容易に分離し、化合物〔′〕を採取す
ることもできる。 化合物〔′〕を更に加水分解し、化合物
〔′〕を生成し、採取する方法としては、例えば
化合物〔′〕を室温下、数日間PH８〜13の範囲
に調整しながら放置しておけば化学的に加水分解
が進行し、化合物〔′〕が生成する。又化合物
〔′〕を20〜40℃、PH４〜８の範囲に調整しなが
ら、不斉炭素を識別しない加水分解酵素例えばリ
パーゼ（ステアプシン）、エステラーゼ（豚レバ
ー）等を作用させて、化合物〔′〕を生成させ
ることもできる。次いで生成した化合物〔′〕
を有機溶媒例えば酢酸エチル等で抽出し、減圧濃
縮すれば化合物〔′〕の結晶物を採取すること
ができる。 以下、実施例により、本発明を具体的に説明す
るが、本発明はこれらの実施例のみに限定される
ものではない。 実施例 １ 下記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２
坂口フラスコに400mlずつ分注後、120℃、15分
殺菌した。 〔培地組成〕 グルコース４％、イーストエキス0.3％、肉エ
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸二アンモニウ
ム0.2％、リン酸一カリウム0.1％、（PH7.0） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010の種
菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時間
振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液計
４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集
めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−アセ
トキシメチルオキサゾリジン−２−オン
造方法に関するものであり、更に詳しくは、 一般式 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基或いは置換又は未置
換芳香族炭化水素基） で表わされる３−アルキル置換−５−アシロキシ
メチルオキサゾリジン−２−オンラセミ体に、化
合物〔〕を不斉的に加水分解して、 一般式 で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させる立体選択的エステラーゼ活性を有
する微生物又は該微生物より得られた酵素を作用
させる事により化合物〔〕を生成させ、生成し
た化合物〔〕及び有機酸と未反応の一般式 で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを分離し、次いで化合物〔′〕を採取する。
或いは、更に採取した化合物〔′〕を加水分解
し、 一般式 で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させ、採取することを特徴とする光学活
性オキサゾリジノン誘導体〔′〕及び〔′〕を
製造する方法に関する。 化合物〔′〕及び〔′〕は光学活性なβ−受
容体遮断薬の重要な中間体である。 従来、光学活性なβ−受容体遮断薬の製法とし
ては、例えば下記の方法が知られている。 (1) β−受容体遮断薬ラセミ体を光学分割する方
法（特開昭55−149233、米国特許第3655663
号）。 (2) ３−アルキル置換アミノ−１，２−プロパン
ジオールラセミ体を光学分割し、この活性体か
ら誘導していく方法（特開昭51−118711）。 (3) Ｄ−マンニトールよりＤ−グリセロールアセ
トニドを経て誘導していく方法〔ジヤーナル・
オブ・オーガニツク・ケミストリー（J.O.C.）
41（19）、3121〜3124（1976）、ケミカル・アン
ド・フアーマシユテカル・ブレテン
（Chemical＆Pharmaceutical Bulletin）29(12)
3593〜3600（1981）〕。 しかしながら、(1)は最終製品ラセミ体を光学分
割する点でコスト的に不利である。(2)は３−アル
キル置換アミノ−１，２−プロパンジオールが吸
湿性であり、一旦吸湿すると結晶性が悪く、光学
分割法では容易に収率良く高純度の光学活性体を
得られない。また(3)はＤ−マンニトールからＤ−
グリセロールアセトニドに誘導する際、多量の四
酢酸鉛を必要とし、工業的規模で行うには廃棄物
の点で問題がある。以上挙げたいずれの方法も一
長一短があつた。 ところで、光学活性なβ−受容体遮断薬の合理
的な合成経路として下記のような経路が知られて
いる（ケミカル・アンド・フアーマシユテカル・
ブレチン29(12)3593〜3600（1981）津田喜典ら；カ
ナダ特許第965787号）。 そこで本発明者らは化合物〔′〕に着目し、
化合物〔′〕の簡便な新規製造法の開発を目的
として鋭意研究した。 化合物〔′〕の５位にヒドロキシメチル基が
あることに着目し、化合物〔′〕のラセミ体を
エステル化させ、化合物〔〕を合成し、この化
合物〔〕を不斉的に加水分解するエステラーゼ
活性を有する微生物又は酵素を作用させることに
より化合物〔′〕が容易に得られるのではない
かと考え、そのスクリーニング実験を試みた。そ
の結果、化合物〔〕を不斉的に加水分解し、化
合物〔〕を生成させる立体選択的エステラーゼ
活性を有する微生物、及び該微生物より得られた
酵素を見い出し、更に簡単な分離操作により化合
物〔〕と未反応の化合物〔′〕を分離し、目
的物に適う化合物〔′〕を化学的方法で加水分
解することにより化合物〔′〕を採取できるこ
とが判明し、本発明を完成させるに至つた。 即ち本発明は、化合物〔〕を不斉的に加水分
解して化合物〔〕を生成させる立体選択的エス
テラーゼ活性を有する微生物又は該微生物より得
られた酵素を作用させる事により化合物〔〕を
生成させ、次いで化合物〔〕と生成した有機酸
及び未反応の化合物〔′〕を有機溶媒で抽出分
離する方法、或いは反応液を一旦有機溶媒で転溶
するか又はそのまま反応液をカラムクロマトグラ
フイー処理か、分溜操作を行い分離する方法等に
より化合物〔′〕を採取し、或いは、更に採取
した化合物〔′〕を加水分解し、化合物〔′〕
を生成し、採取することを特徴とする光学活性オ
キサゾリジノン誘導体〔′〕及び〔′〕の製造
方法に関するものである。 本発明により、従来法と比べ高純度でかつ安価
な光学活性β−受容体遮断薬の合成が可能となつ
た。 本発明の基質として用いられる一般式 で表わされるオキサゾリジノン誘導体における置
換基Ｘとしては低級アルキル基が用いられる。例
えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロ
ピル基、ブチル基又はｔ−ブチル基等が挙げられ
るが、中でもイソプロピル基又はｔ−ブチル基が
好ましい。一方置換基Ｙとしては、置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基、或いは置換又は未
置換芳香族炭化水素基が挙げられる。更に詳しく
は、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、又
はブチル基の如き未置換アルキル基；例えばクロ
ロメチル基、ジクロロメチル基、トリフルオロメ
チル基、又はβ，β，β−トリクロロエトキシメ
チル基の如きハロゲン基、水酸基、或いはアルコ
キシ基で置換された置換アルキル基；例えばアリ
ル（Allyl）基の如きアルケニル基；例えばフエ
ニル基、ｐ−メチルフエニル基、ｐ−クロロフエ
ニル基、又はｐ−メトキシフエニル基の如き未置
換又はアルキル基、ハロゲン基、水酸基或いはア
ルコキシ基で置換されたアリール（Aryl）基；
例えばベンジル基、ｐ−メチルベンジル基、ｐ−
クロロベンジル基、ｐ−ヒドロキシベンジル基、
又はｐ−メトキシベンジル基の如き未置換又はア
ルキル基、ハロゲン基、水酸基或いはアルコキシ
基で置換されたアラルキル基を例示することがで
きる。 化合物〔〕を不斉的に加水分解し、化合物
〔〕又は〔′〕を生成させる立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物は次のようなスクリー
ニングを行うことにより容易に見い出すことがで
きる。 例えば、その具体的な一例として、基質に３−
ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オンを用いる場合、先づ菌が生育可能な
栄養培地で10ml／大型チユーブ中25〜35℃、１〜
２日間振とう培養により菌体培養を行う。この培
養液に３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオ
キサゾリジン−２−オン（ラセミ体）を２％
（ｗ／ｖ）添加し、更に20〜35℃、PHをNaOH溶
液で５〜７に調整しながら１〜３日間反応させ
る。そして、ガスクロマトグラフイー（充填剤、
Silicone OV−17、１ｍ×3φカラム、温度180℃）
により各反応液の経時変化をとり、３−ｔ−ブチ
ル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−
オンが約50％生成したところで、反応が極端に遅
くなる菌株を１次選抜する。 更にスケールを400mlにかえて、前記同様の培
養及び加水分解反応を行い、終了後、酢酸エチル
400mlで抽出濃縮し、この濃縮液をシリカゲルカ
ラムに負荷し、ヘキサン／アセトン混液で未反応
の３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサ
ゾリジン−２−オンを溶出分離し、３−ｔ−ブチ
ル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−
オン画分を濃縮し、ヘキサンを徐々に加えていく
と結晶が析出してくる。この結晶物を真空乾燥
後、その比旋光度を測定すれば立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物か否か容易に判断でき
る。立体選択的加水分解能を有するエステラーゼ
は珍らしくないが、特にβ−受容体遮断薬の重要
な中間体である（＋）−３−アルキル置換−５−
ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オンの生
産に着目し、スクリーニングを実施し、かつ見い
出したところが本発明の特徴である。 前記と同様のスクリーニングを実施すれば、容
易に化合物〔〕を不斉的に加水分解する立体選
択的エステラーゼ活性を有する微生物を見い出す
ことができる。化合物〔〕を不斉的に加水分解
し、化合物〔〕を生成させる立体選択的エステ
ラーゼ活性を有する微生物としては、細菌、酵
母、かび又は放線菌等があり、例えばエンテロバ
クター属、クレブシエラ属、ミクロコツカス属、
エスケリチア属、シユードモナス属、スタフイロ
コツカス属、キヤンデイダ属、デバリオマイセス
属、エンドマイセス属、ハンゼヌラ属、ゲオトリ
クム属、クルイベロマイセス属、メトシユニコウ
イア属、ピチア属又はストレプトマイセス属に属
する微生物が挙げられ、特にエンテロバクター・
アエロゲネス（Enterobacter aerogenes）
IFO12010、IFO13534；エンテロバクター・クロ
アカエ（Enterobacter cloacae）IFO3320、
IFO12935；クレブシエラ・ニユーモニエ
（Klebsiella pneumoniae）IFO3318、IFO3321；
ミクロコツカス・ルテウス（Micrococcus
luteus）IFO3064、IFO3066；エスケリチア・コ
リ（Escherichia coli）IFO3366；シユードモナ
ス・クルシヴイエ（Pseudomonas cruciviae）
IFO12047；シユードモナス・フルオレツセンス
（Pseudomonas fluorescens）IFO3081；スタフ
イロコツカス・アウレウス（Staphylococcus
aureus）IFO3761；キヤンデイダ・シユードトロ
ピカリス（Candida pseudotropicalis）
IFO0432；キヤンデイダ・ケフイル（Candida
kefyr）IFO0008；デバリオマイセス・ハンゼニ
ー（Debaryomyces hansenii）IFO0017、
IFO0034；エンドマイセス・ゲオトリクム
（Endomyces geotrichum）CBS 178.71；ハンゼ
ヌラ・アノマラ（Hansenula anomala）
IFO0144；ハンゼヌラ・ミヌタ（Hansenula
minuta）IFO0975；ゲオトリクム・キヤンデイ
ドウム（Geotrichum candidum）CBS187.67；
クルイベロマイセス・フラギリス
（Kluyveromyces fragilis）IFO0288、
IFO0541；メトシユニコウイア・プルチエリマ
（Metschnikowia pulcherrima）IFO0561；ピチ
ア・フアリノサ（Pichia farinosa）IFO0459；
ピチア・メンブラナエフアシエンス（Pichia
membranaefaciens）IFO0186；ストレプトマイ
セス・フラボビレンス（Streptomyces
flavovirens）IFO3412；ストレプトマイセス・
アウレウス（Streptomyces aureus）IFO3175が
ある。 これら微生物の培養源は、通常資化しうる有機
及び無機の炭素源、窒素源及びビタミン・ミネラ
ル等を適宜配合したものを用い、培養温度は20〜
40℃、PH３〜11、好ましくはPH４〜８の範囲が用
いられる。又通気撹拌により微生物の生育を促進
させることもできる。 化合物〔〕の不斉加水分解反応においては、
培養の開始時に培地中に基質即ち化合物〔〕を
添加し、培養と並行して加水分解を行う方法、或
いは前記のようにして培養液菌体を化合物〔〕
と接触させ加水分解を行う方法とがある。望まし
くは、菌体を遠心分離等で濃縮後、高濃度菌体液
とし、このものに化合物〔〕を添加する方法が
反応後の生産物の回収の立場から好ましい。 一方、前記該微生物より得られた酵素として
は、例えば前記該微生物の培養液を遠心分離して
菌体を得、この菌体をリン酸緩衝液で均一になる
よう懸濁させ、次いで氷冷下、ブラウンホモジナ
イザーで破砕し、遠心分離して得た無細胞抽出酵
素液か或いは更にこの無細胞抽出液を30〜70％の
硫安分画処理を行い、塩析した画分をリン酸緩衝
液に溶解させ、一昼夜冷所透析して得た部分精製
酵素液が用いられ、これら酵素液に化合物〔〕
を接触させ、加水分解反応を行うことができる。
或いは、又微生物より精製した加水分解酵素、例
えばリポプロテインリパーゼ（E.C.3.1.1.3.）を接
触させ、加水分解反応を行うこともできる。更に
これら微生物又は該微生物より得られた酵素を用
いて、例えば固定化させることにより、不斉加水
分解反応を繰り返し行うこともできる。 化合物〔〕の反応液中での濃度は0.1％から
30％程度の高濃度まで用いることができる。 又、化合物〔〕の水に対する溶解度は一般に
低いが、撹拌等により、混合を行うことにより、
菌体又は酵素との接触を充分保つようにすれば、
本反応にとつて支障とはならない。 又、アセトン等の親水性溶剤や界面活性剤等を
反応に支障とならない程度加えても良い。 加水分解反応を行う際のPHは４〜８の範囲が好
ましい。化合物〔〕を高濃度で反応させる場
合、加水分解された有機酸が次第に反応液中に蓄
積し、PHが低下してくるので適当な中和剤例えば
NaOH溶液等で最適PHを保持するのが好ましい。 加水分解反応は通常10〜50℃の範囲が用いられ
るが、使用する菌株又は酵素に適した温度が採用
される。 未反応の化合物〔′〕を生成する有機酸及び
化合物〔〕から分離し、採取する方法として
は、一般的精製方法を用いれば良い。 例えば、反応液より遠心分離処理によつて、菌
体等の不溶性物質を除去した後、一般によく使用
される有機溶媒、例えばヘキサン、シクロヘキサ
ン、エーテル、酢酸ブチル、クロロホルム、ジク
ロロメタン、ベンゼン又はトルエン等で未反応の
化合物〔′〕を抽出、次いで減圧濃縮すること
により採取することができる。 又化合物〔′〕の種類例えば置換基Ｙがメチ
ル基、エチル基又はプロピル基等の低級アルキル
基の場合、前記有機溶媒抽出分離操作では完全に
分離しがたい。この場合には、前記と同様不溶性
物質を除去した後、減圧濃縮し、そのままカラム
クロマトグラフイー処理を行うか、或いは一旦有
機溶媒例えば酢酸エチル等で転溶、減圧濃縮後、
カラムクロマトグラフイー処理を行えば簡単に分
離し、化合物〔′〕を採取することができる。
カラムクロマトグラフイーとしては、通常よく使
われるシリカゲル、アルミナ又はフロリジル等の
担体を用いることができる。一方、又、化合物
〔′〕の種類により、化合物〔′〕と生成した
化合物〔〕の沸点に差がある場合には、分溜操
作により容易に分離し、化合物〔′〕を採取す
ることもできる。 化合物〔′〕を更に加水分解し、化合物
〔′〕を生成し、採取する方法としては、例えば
化合物〔′〕を室温下、数日間PH８〜13の範囲
に調整しながら放置しておけば化学的に加水分解
が進行し、化合物〔′〕が生成する。又化合物
〔′〕を20〜40℃、PH４〜８の範囲に調整しなが
ら、不斉炭素を識別しない加水分解酵素例えばリ
パーゼ（ステアプシン）、エステラーゼ（豚レバ
ー）等を作用させて、化合物〔′〕を生成させ
ることもできる。次いで生成した化合物〔′〕
を有機溶媒例えば酢酸エチル等で抽出し、減圧濃
縮すれば化合物〔′〕の結晶物を採取すること
ができる。 以下、実施例により、本発明を具体的に説明す
るが、本発明はこれらの実施例のみに限定される
ものではない。 実施例 １ 下記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２
坂口フラスコに400mlずつ分注後、120℃、15分
殺菌した。 〔培地組成〕 グルコース４％、イーストエキス0.3％、肉エ
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸二アンモニウ
ム0.2％、リン酸一カリウム0.1％、（PH7.0） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010の種
菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時間
振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液計
４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集
めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−アセ
トキシメチルオキサゾリジン−２−オン
【式】40ｇを添加した。
これを１容器内で撹拌下、NaOH溶液でPHを
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。 反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルカラムに負荷し、ヘキ
サン／アセトン（３：１）混液で溶出される３−
ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オン画分を集め減圧濃縮し、溶媒を除去
すると、無色の油状物18.5ｇが得られた。比旋光
度は、〔α〕16 D＋36.3゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）で
あり、NMR測定値は以下の通りであつた。 NMR（90MHz） δCDCl31.4（9H、ｓ、Ｃ（CH3）3） 2.1（3H、ｓ、
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。 反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルカラムに負荷し、ヘキ
サン／アセトン（３：１）混液で溶出される３−
ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オン画分を集め減圧濃縮し、溶媒を除去
すると、無色の油状物18.5ｇが得られた。比旋光
度は、〔α〕16 D＋36.3゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）で
あり、NMR測定値は以下の通りであつた。 NMR（90MHz） δCDCl31.4（9H、ｓ、Ｃ（CH3）3） 2.1（3H、ｓ、
【式】）
3.3−3.8（2H、ｍ、−CH2N−）
4.1−4.25（2H、ｍ、−CH2O−）
4.4−4.7（1H、ｍ、−CH2CＨ（Ｏ−）CH2−）
次いで、得られた（＋）−３−ｔ−ブチル−５
−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加えてPH10〜
12に調整しながら、室温下、２日間加水分解反応
を行つた。 酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後、減圧
濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加えて
いくと、無色の結晶が析出しだし、これを集めて
真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋46.0゜
（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−
ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オン12.9ｇを得た。NMR測定値は以下
の通りであつた。 NMR（90MHz） δCDCl31.4（9H、ｓ、Ｃ（CH3）3） 3.4−3.95（5H、−CH2N−、−CH2O−、−OH） 4.3−4.6（1H、ｍ、−CH2CＨ（Ｏ−）CH2−） 実施例 ２〜12 菌株をかえて、実施例１と同様の操作を行い、
表１の結果を得た。
−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加えてPH10〜
12に調整しながら、室温下、２日間加水分解反応
を行つた。 酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後、減圧
濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加えて
いくと、無色の結晶が析出しだし、これを集めて
真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋46.0゜
（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−
ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジ
ン−２−オン12.9ｇを得た。NMR測定値は以下
の通りであつた。 NMR（90MHz） δCDCl31.4（9H、ｓ、Ｃ（CH3）3） 3.4−3.95（5H、−CH2N−、−CH2O−、−OH） 4.3−4.6（1H、ｍ、−CH2CＨ（Ｏ−）CH2−） 実施例 ２〜12 菌株をかえて、実施例１と同様の操作を行い、
表１の結果を得た。
【表】
実施例 13〜24
菌株及び基質を３−イソプロピル−５−アセト
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例１と同様の操作を行い、表２の結果を得
た。
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例１と同様の操作を行い、表２の結果を得
た。
【表】
グルコース２％、イーストエキス0.3％、リン
酸ニアンモニウム1.3％、リン酸−カリウム0.7
％、塩化ナトリウム0.1％、硫酸亜鉛0.006％、硫
酸第一鉄0.009％、（PH6.5） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
キヤンデイダ・シユードトロピカリスIFO0432の
種菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時
間振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液
計４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を
集めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−アセ
トキシメチルオキサゾリジン−２−オン
酸ニアンモニウム1.3％、リン酸−カリウム0.7
％、塩化ナトリウム0.1％、硫酸亜鉛0.006％、硫
酸第一鉄0.009％、（PH6.5） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
キヤンデイダ・シユードトロピカリスIFO0432の
種菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時
間振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液
計４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を
集めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−アセ
トキシメチルオキサゾリジン−２−オン
【式】40ｇを添加した。
これを１容器内で撹拌下、NaOH溶液でPHを
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルカラムに負荷し、ヘキ
サン／アセトン（３：１）混液で溶出される。３
−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリ
ジン−２−オン画分を集め、減圧濃縮し、溶媒を
除去すると、無色の油状物17.5ｇが得られた。比
旋光度は〔α〕16 D＋24.5゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）
であつた。次いで得られた（＋）−３−ｔ−ブチ
ル−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−
オンを100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加え
て、PH10〜12に調整しながら、室温下、２日間加
水分解反応を行つた。 酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後減圧濃
縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加えてい
くと、無色の結晶が析出しだし、これを集めて真
空乾燥したところ比旋光度〔α〕16 D＋31.1゜（Ｃ、
1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−ｔ−ブ
チル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２
−オン11.5ｇへを得た。 実施例 26〜37 菌株をかえて、実施例25と同様の操作を行い、
表３の結果を得た。
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルカラムに負荷し、ヘキ
サン／アセトン（３：１）混液で溶出される。３
−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキサゾリ
ジン−２−オン画分を集め、減圧濃縮し、溶媒を
除去すると、無色の油状物17.5ｇが得られた。比
旋光度は〔α〕16 D＋24.5゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）
であつた。次いで得られた（＋）−３−ｔ−ブチ
ル−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−
オンを100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加え
て、PH10〜12に調整しながら、室温下、２日間加
水分解反応を行つた。 酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後減圧濃
縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加えてい
くと、無色の結晶が析出しだし、これを集めて真
空乾燥したところ比旋光度〔α〕16 D＋31.1゜（Ｃ、
1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−ｔ−ブ
チル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２
−オン11.5ｇへを得た。 実施例 26〜37 菌株をかえて、実施例25と同様の操作を行い、
表３の結果を得た。
【表】
実施例 38〜50
菌株及び基質を３−イソプロピル−５−アセト
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例25と同様の操作を行い、表４の結果を得
た。
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例25と同様の操作を行い、表４の結果を得
た。
【表】
グルコース２％、グリセリン２％、エスサンミ
ート３％、イーストエキス0.3％、ビタミン
B121ppm、（PH7.2） これとは別に同じ組成の培地にて、前培養をし
たストレプトマイセス・フラボビレンスIFO3412
の種菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、48
時間振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養
液計４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体
を集めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH
7.0）400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−
アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オン
ート３％、イーストエキス0.3％、ビタミン
B121ppm、（PH7.2） これとは別に同じ組成の培地にて、前培養をし
たストレプトマイセス・フラボビレンスIFO3412
の種菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、48
時間振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養
液計４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体
を集めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH
7.0）400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−
アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オン
【式】40ｇを添加した。
これを１容器内で撹拌下、NaOH溶液でPHを
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルに負荷し、ヘキサン／
アセトン（３：１）混液で溶出される３−ｔ−ブ
チル−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２
−オン画分を集め減圧濃縮し、溶媒を除去する
と、無色の油状物16.9ｇが得られた。比旋光度は
〔α〕16 D＋22.6゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）であつ
た。 次いで得られた（＋）−３−ｔ−ブチル−５−
アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加えてPH10〜
12に調整しながら、室温下、２日間加水分解反応
を行つた。 次いで酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後
減圧濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加
えていくと、無色の結晶が析出しだし、これを集
めて真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋
28.7゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−
３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾ
リジン−２−オン11.1ｇを得た。 実施例 52 菌株をかえて、実施例51と同様の操作を行い、
表５の結果を得た。
５〜７に調整しながら、30℃、18時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル
400mlで２回抽出し、減圧濃縮した。 この濃縮物をシリカゲルに負荷し、ヘキサン／
アセトン（３：１）混液で溶出される３−ｔ−ブ
チル−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２
−オン画分を集め減圧濃縮し、溶媒を除去する
と、無色の油状物16.9ｇが得られた。比旋光度は
〔α〕16 D＋22.6゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）であつ
た。 次いで得られた（＋）−３−ｔ−ブチル−５−
アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
100mlの水に懸濁し、NaOH溶液を加えてPH10〜
12に調整しながら、室温下、２日間加水分解反応
を行つた。 次いで酢酸エチル200mlで抽出し、脱水処理後
減圧濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加
えていくと、無色の結晶が析出しだし、これを集
めて真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋
28.7゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−
３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾ
リジン−２−オン11.1ｇを得た。 実施例 52 菌株をかえて、実施例51と同様の操作を行い、
表５の結果を得た。
【表】
実施例 53〜54
菌株及び基質を３−イソプロピル−５−ヒドロ
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例51と同様の操作を行い、表６の結果を得
た。
キシメチルオキサゾリジン−２−オンにかえて、
実施例51と同様の操作を行い、表６の結果を得
た。
グルコース４％、イーストエキス0.3％、肉エ
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸ニアンモニウ
ム0.2％、リン酸−カリウム0.1％、（PH7.0） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010の種
菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時間
振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液計
４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集
めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−ベン
ゾイロキシメチルオキサゾリジン−２−オン
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸ニアンモニウ
ム0.2％、リン酸−カリウム0.1％、（PH7.0） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をした
エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010の種
菌液10mlを前記培養培地に接種し、30℃、24時間
振とう培養を行つた。合計10本培養し、培養液計
４を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集
めた。この菌体をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）
400mlに懸濁し、基質３−ｔ−ブチル−５−ベン
ゾイロキシメチルオキサゾリジン−２−オン
【式】40ｇを添
加した。これを１容器内で撹拌下、NaOH溶
液でPHを５〜７に調整しながら、30℃、40時間反
応させた。反応後、遠心分離して得た上清をトル
エン400mlで未反応の３−ｔ−ブチル−５−ベン
ゾイロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを抽
出し、減圧濃縮した。 次に、この濃縮物を200mlのＭ／10リン酸緩衝
液に懸濁し、リパーゼ（ステアプシン）２ｇを添
加、撹拌下30℃、NaOH溶液でPHを５〜７に調
整しながら加水分解反応を18時間行つた。 次いで酢酸エチル400mlで抽出し、脱水処理後
減圧濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加
えていくと、無色の結晶が析出しだし、これを集
めて真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋
46.1゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−
３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾ
リジン−２−オン12.8ｇを得た。 実施例 56〜70 菌株及び基質をかえて、実施例55と同様の操作
を行い、表７の結果を得た。
液でPHを５〜７に調整しながら、30℃、40時間反
応させた。反応後、遠心分離して得た上清をトル
エン400mlで未反応の３−ｔ−ブチル−５−ベン
ゾイロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを抽
出し、減圧濃縮した。 次に、この濃縮物を200mlのＭ／10リン酸緩衝
液に懸濁し、リパーゼ（ステアプシン）２ｇを添
加、撹拌下30℃、NaOH溶液でPHを５〜７に調
整しながら加水分解反応を18時間行つた。 次いで酢酸エチル400mlで抽出し、脱水処理後
減圧濃縮した。この濃縮物にヘキサンを徐々に加
えていくと、無色の結晶が析出しだし、これを集
めて真空乾燥したところ、比旋光度〔α〕16 D＋
46.1゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する（＋）−
３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキサゾ
リジン−２−オン12.8ｇを得た。 実施例 56〜70 菌株及び基質をかえて、実施例55と同様の操作
を行い、表７の結果を得た。
【表】
実施例 71
エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010を
用いて前記実施例１と同様の培養を行い、培養液
400mlを得た。この培養液に基質３−ｔ−ブチル
−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ン
用いて前記実施例１と同様の培養を行い、培養液
400mlを得た。この培養液に基質３−ｔ−ブチル
−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ン
【式】4.0ｇを添加し
た。これを１容器内で通気撹拌下、NaOH溶
液でPHを５〜７に調整しながら、30℃、18時間反
応させた。以下実施例１と同様の操作を行い、比
旋光度〔α〕16 D＋43.9゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）
を有する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキ
シメチルオキサゾリジン−２−オン1.03ｇを得
た。 実施例 72〜74 菌株及び基質をかえて、実施例71と同様の操作
を行い、表８の結果を得た。
液でPHを５〜７に調整しながら、30℃、18時間反
応させた。以下実施例１と同様の操作を行い、比
旋光度〔α〕16 D＋43.9゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）
を有する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキ
シメチルオキサゾリジン−２−オン1.03ｇを得
た。 実施例 72〜74 菌株及び基質をかえて、実施例71と同様の操作
を行い、表８の結果を得た。
【表】
＊ 表７と同じ
実施例 75 グルコース７％、イーストエキス0.3％、肉エ
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸ニアンモニウ
ム0.2％、リン酸−カリウム0.1％（PH7.0）含有す
る培地10mlにエンテロバクター・アエロゲネス
IFO12010を植菌し、30℃、24時間振とう培養を
行つた。 次に前記培養培地400mlに前培養液を接種し、
同時に基質３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチ
ルオキサゾリジン−２−オン
実施例 75 グルコース７％、イーストエキス0.3％、肉エ
キス0.3％、ペプトン0.3％、リン酸ニアンモニウ
ム0.2％、リン酸−カリウム0.1％（PH7.0）含有す
る培地10mlにエンテロバクター・アエロゲネス
IFO12010を植菌し、30℃、24時間振とう培養を
行つた。 次に前記培養培地400mlに前培養液を接種し、
同時に基質３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチ
ルオキサゾリジン−２−オン
【式】4.0ｇを添加し、30
℃、48時間培養及び反応を並行して行つた。
以下実施例１と同様の操作を行い、比旋光度
〔α〕16 D＋41.5゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する
（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオ
キサゾリジン−２−オン0.82ｇを得た。 実施例 76〜78 菌株及び基質をかえて、実施例75と同様の操作
を行い、表９の結果を得た。
〔α〕16 D＋41.5゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有する
（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメチルオ
キサゾリジン−２−オン0.82ｇを得た。 実施例 76〜78 菌株及び基質をかえて、実施例75と同様の操作
を行い、表９の結果を得た。
【表】
＊ 表７と同じ
実施例 79 エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010を
用いて前記実施例１と同様にして得た培養液４
を遠心分離し、菌体を集めた。この菌体をＭ／10
リン酸緩衝液（PH7.0）400mlに懸濁し水冷しなが
ら、ブラウンホモジナイザーで菌体破砕し、遠心
分離して無細胞抽出酵素液を得た。この酵素液に
基質３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキ
サゾリジン−２−オンを4.0ｇ添加し、撹拌下、
PHをNaOH溶液で５〜７に調整しながら、30℃、
18時間反応を行つた。この反応液を減圧濃縮し、
シリカゲルカラムに負荷し、以下、実施例１と同
様の操作を行い、比旋光度〔α〕16 D＋46.3゜（Ｃ、
1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−ｔ−ブ
チル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２
−オン1.07ｇを得た。 実施例 80〜86 菌株及び基質をかえて、実施例79と同様の操作
を行い、表10の結果を得た。
実施例 79 エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010を
用いて前記実施例１と同様にして得た培養液４
を遠心分離し、菌体を集めた。この菌体をＭ／10
リン酸緩衝液（PH7.0）400mlに懸濁し水冷しなが
ら、ブラウンホモジナイザーで菌体破砕し、遠心
分離して無細胞抽出酵素液を得た。この酵素液に
基質３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメチルオキ
サゾリジン−２−オンを4.0ｇ添加し、撹拌下、
PHをNaOH溶液で５〜７に調整しながら、30℃、
18時間反応を行つた。この反応液を減圧濃縮し、
シリカゲルカラムに負荷し、以下、実施例１と同
様の操作を行い、比旋光度〔α〕16 D＋46.3゜（Ｃ、
1.0、クロロホルム）を有する（＋）−３−ｔ−ブ
チル−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２
−オン1.07ｇを得た。 実施例 80〜86 菌株及び基質をかえて、実施例79と同様の操作
を行い、表10の結果を得た。
【表】
＊ 表７と同じ
実施例 87 エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010を
用いて前記実施例１と同様にして得た培養液４
を遠心分離し、菌体を集めた。この菌体をＭ／10
リン酸緩衝液（PH7.0）400mlに懸濁し、氷冷しな
がらブラウン・ホモジナイザーで破砕し、遠心分
離して無細胞抽出液を得た。 次いで硫安分画を行い、30〜70％濃度で塩析し
た画分をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）40mlに懸
濁させ、一昼夜冷所で透析して部分精製した酵素
液を得た。この酵素液に基質３−ｔ−ブチル−５
−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
4.0ｇ添加し、撹拌下、NaOH溶液でPHを５〜７
に調整しながら、30℃、18時間反応を行つた。反
応液は以下実施例１と同様の操作を行い、比旋光
度〔α〕16 D＋46.2゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有
する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメ
チルオキサゾリジン−２−オン1.10ｇを得た。 実施例 88〜94 菌株及び基質をかえて、実施例87と同様の操作
を行い、表11の結果を得た。
実施例 87 エンテロバクター・アエロゲネスIFO12010を
用いて前記実施例１と同様にして得た培養液４
を遠心分離し、菌体を集めた。この菌体をＭ／10
リン酸緩衝液（PH7.0）400mlに懸濁し、氷冷しな
がらブラウン・ホモジナイザーで破砕し、遠心分
離して無細胞抽出液を得た。 次いで硫安分画を行い、30〜70％濃度で塩析し
た画分をＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）40mlに懸
濁させ、一昼夜冷所で透析して部分精製した酵素
液を得た。この酵素液に基質３−ｔ−ブチル−５
−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オンを
4.0ｇ添加し、撹拌下、NaOH溶液でPHを５〜７
に調整しながら、30℃、18時間反応を行つた。反
応液は以下実施例１と同様の操作を行い、比旋光
度〔α〕16 D＋46.2゜（Ｃ、1.0、クロロホルム）を有
する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシメ
チルオキサゾリジン−２−オン1.10ｇを得た。 実施例 88〜94 菌株及び基質をかえて、実施例87と同様の操作
を行い、表11の結果を得た。
【表】
＊ 表７と同じ
実施例 95 40mlのＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）に、リポ
プロテインリパーゼ（E.C.3.1.1.3.、シユードモナ
ス、天野製薬L.P.L.）1.0ｇ及び３−ｔ−ブチル
−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ン4.0ｇを添加し、NaOH溶液でPHを５〜７に調
整しながら、撹拌下、30℃、18時間加水分解反応
を行つた。この反応液は以下実施例１と同様の操
作を行い、〔α〕16 D＋42.8゜（Ｃ、1.0、クロロホル
ム）を有する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒド
ロキシメチルオキサゾリジン−２−オン1.1ｇを
得た。 実施例 96 基質を３−イソプロピル−５−アセトキシメチ
ルオキサゾリジン−２−オンにかえて実施例95と
同様の操作を行い、表12の結果を得た。
実施例 95 40mlのＭ／10リン酸緩衝液（PH7.0）に、リポ
プロテインリパーゼ（E.C.3.1.1.3.、シユードモナ
ス、天野製薬L.P.L.）1.0ｇ及び３−ｔ−ブチル
−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ン4.0ｇを添加し、NaOH溶液でPHを５〜７に調
整しながら、撹拌下、30℃、18時間加水分解反応
を行つた。この反応液は以下実施例１と同様の操
作を行い、〔α〕16 D＋42.8゜（Ｃ、1.0、クロロホル
ム）を有する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒド
ロキシメチルオキサゾリジン−２−オン1.1ｇを
得た。 実施例 96 基質を３−イソプロピル−５−アセトキシメチ
ルオキサゾリジン−２−オンにかえて実施例95と
同様の操作を行い、表12の結果を得た。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 一般式 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基或いは置換又は未置
換芳香族炭化水素基、＊は不斉炭素を表わす） で表わされるラセミ体の３−アルキル置換−５−
アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オンに、
エンテロバクター属、クレブシエラ属、ミクロコ
ツカス属、エスケリチア属、シユードモナス属、
スタフイロコツカス属、キヤンデイダ属、デバリ
オマイセス属、エンドマイセス属、ハンゼヌラ
属、ゲオトリクム属、クルイベロマイセス属、メ
トシユニコウイア属、ピチア属又はストレプトマ
イセス属に属し、化合物〔〕を不斉的に加水分
解して、一般式 （式中、Ｘ及び＊は前記と同じ） で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させる立体選択的エステラーゼ活性を有
する微生物又は該微生物より得られた酵素を作用
させる事により化合物〔〕を生成させ、生成し
た化合物〔〕及び有機酸と未反応の一般式 （式中、Ｘ、Ｙ及び＊は前記と同じ） で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを分離し、次いで化合物〔′〕を採取するこ
とを特徴とする光学活性（＋）−３−アルキル置
換−５−アシロキシメチルオキサゾリジン−２−
オンの製造方法。 ２ 化合物〔〕の式中Ｘがｔ−ブチル基又はイ
ソプロピル基である特許請求の範囲第１項記載の
製造方法。 ３ 化合物〔〕の式中Ｙの置換又は未置換芳香
族炭化水素基がアリール基（aryl）、置換アリー
ル基、アラルキル基又は置換アラルキル基である
特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ４ 微生物がエンテロバクター・アエロゲネス、
エンテロバクター・クロアカエ、クレブシエラ・
ニユーモニエ、ミクロコツカス・ルテウス、エス
ケリチア・コリ、シユードモナス・クルシヴイ
エ、シユードモナス・フルオレツセンス、スタフ
イロコツカス・アウレウス、キヤンデイダ・シユ
ードトロピカリス、キヤンデイダ・ケフイル、デ
バリオマイセス・ハンゼニー、エンドマイセス・
ゲオトリクム、ハンゼヌラ・アノマラ、ハンゼヌ
ラ・ミヌタ、ゲオトリクム・キヤンデイドウム、
クルイベロマイセス・フラギリス、メトシユニコ
ウイア・プルチエリマ、ピチア・フアリノサ、ピ
チア・メンブラナエフアシエンス、ストレプトマ
イセス・フラボビレンス又はストレプトマイセ
ス・アウレウスである特許請求の範囲第１項記載
の製造方法。 ５ 酵素が微生物菌体を破砕処理して得た無細胞
抽出液の酵素或いは更にこの無細胞抽出液を硫安
分画処理して得た部分精製された酵素である特許
請求の範囲第１項記載の製造方法。 ６ 化合物〔〕を添加した培地で、PH４〜８の
範囲で微生物を培養し、作用させる特許請求の範
囲第１項記載の製造方法。 ７ 微生物を栄養培地で培養して得た培養液、又
はこの培養液から微生物菌体を分離して菌体懸濁
液を調製し、それを化合物〔〕に作用させる特
許請求の範囲第１項記載の製造方法。 ８ 微生物の培養をPH３〜11の範囲で行い、培養
液又は菌体懸濁液と化合物〔〕との反応をPH４
〜８の範囲で行う特許請求の範囲第７項記載の製
造方法。 ９ 酵素と化合物〔〕との反応を10〜50℃、PH
４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第１項又は第
５項記載の製造方法。 １０ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、有機溶媒で抽
出分離する特許請求の範囲第１項記載の製造方
法。 １１ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、反応液を一旦
有機溶媒で転溶するか、又はそのまま反応液をカ
ラムクロマトグラフイー処理で分離する特許請求
の範囲第１項記載の製造方法。 １２ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、反応液を一旦
有機溶媒で転溶するか、又はそのまま反応液を分
溜操作により分離する特許請求の範囲第１項記載
の製造方法。 １３ 一般式 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置
換アルキル基、アルケニル基或いは置換又は未置
換芳香族炭化水素基、＊は不斉炭素を表わす） で表わされるラセミ体の３−アルキル置換−５−
アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オンに、
エンテロバクター属、クレブシエラ属、ミクロコ
ツカス属、エスケリチア属、シユードモナス属、
スタフイロコツカス属、キヤンデイダ属、デバリ
オマイセス属、エンドマイセス属、ハンゼヌラ
属、ゲオトリクム属、クルイベロマイセス属、メ
トシユニコウイア属、ピチア属又はストレプトマ
イセス属に属し、化合物〔〕を不斉的に加水分
解して、一般式 （式中、Ｘ及び＊は前記と同じ） で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させる立体選択的エステラーゼ活性を有
する微生物又は該微生物より得られた酵素を作用
させる事により化合物〔〕を生成させ、生成し
た化合物〔〕及び有機酸と未反応の一般式 （式中、Ｘ、Ｙ及び＊は前記と同じ） で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを分離後、化合物〔′〕を採取し、次いで採
取した化合物〔′〕を化学的にもしくは酵素ス
テアプシンを用いて加水分解し、一般式 （式中、Ｘ及び＊は前記と同じ） で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換
−５−ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オ
ンを生成させ、採取することを特徴とする光学活
性（＋）−３−アルキル置換−５−ヒドロキシメ
チルオキサゾリジン−２−オンの製造方法。 １４ 化合物〔〕の式中Ｘがｔ−ブチル基又は
イソプロピル基である特許請求の範囲第１３項記
載の製造方法。 １５ 化合物〔〕の式中Ｙの置換又は未置換芳
香族炭化水素基がアリール基（aryl）、置換アリ
ール基、アラルキル基又は置換アラルキル基であ
る特許請求の範囲第１３項記載の製造方法。 １６ 微生物がエンテロバクター・アエロゲネ
ス、エンテロバクター・クロアカエ、クレブシエ
ラ・ニユーモニエ、ミクロコツカス・ルテウス、
エスケリチア・コリ、シユードモナス・クルシヴ
イエ、シユードモナス・フルオレツセンス、スタ
フイロコツカス・アウレウス、キヤンデイダ・シ
ユードトロピカリス、キヤンデイダ・ケフイル、
デバリオマイセス・ハンゼニー、エンドマイセ
ス・ゲオトリクム、ハンゼヌラ・アノマラ、ハン
ゼヌラ・ミヌタ、ゲオトリクム・キヤンデイドウ
ム、クルイベロマイセス・フラギリス、メトシユ
ニコウイア・プルチエリマ、ピチア・フアリノ
サ、ピチア・メンブラナエフアシエンス、ストレ
プトマイセス・フラボビレンス又はストレプトマ
イセス・アウレウスである特許請求の範囲第１３
項記載の製造方法。 １７ 酵素が微生物菌体を破砕処理して得た無細
胞抽出液の酵素、或いは更に硫安分画処理して得
た部分精製された酵素である特許請求の範囲第１
３項記載の製造方法。 １８ 化合物〔〕を添加した培地で、PH４〜８
の範囲で微生物を培養し、作用させる特許請求の
範囲第１３項記載の製造方法。 １９ 微生物を栄養培地で培養して得た培養液、
又はこの培養液から微生物菌体を分離して菌体懸
濁液を調製し、それを化合物〔〕に作用させる
特許請求の範囲第１３項記載の製造方法。 ２０ 微生物の培養をPH３〜11の範囲で行い、培
養液又は菌体懸濁液と化合物〔〕との反応をPH
４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第１９項記載
の製造方法。 ２１ 酵素と化合物〔〕との反応を10〜50℃、
PH４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第１３項又
は第１７項記載の製造方法。 ２２ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、有機溶媒で抽
出分離する特許請求の範囲第１３項記載の製造方
法。 ２３ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、反応液を一旦
有機溶媒で転溶するか、又はそのまま反応液をカ
ラムクロマトグラフイー処理で分離する特許請求
の範囲第１３項記載の製造方法。 ２４ 化合物〔′〕と生成する化合物〔〕及
び有機酸を分離する方法において、反応液を一旦
有機溶媒で転溶するか、又はそのまま反応液を分
溜操作により分離する特許請求の範囲第１３項記
載の製造方法。 ２５ 化合物〔′〕を加水分解する方法におい
て、PH８〜13の範囲に保持し、化学的に加水分解
反応を行う特許請求の範囲第１３項記載の製造方
法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57141575A JPS5931693A (ja) | 1982-08-13 | 1982-08-13 | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
| DE8383107962T DE3378834D1 (en) | 1982-08-13 | 1983-08-11 | Process for production of optically active oxazolidinone derivative |
| EP19830107962 EP0101076B1 (en) | 1982-08-13 | 1983-08-11 | Process for production of optically active oxazolidinone derivative |
| US06/522,687 US4588694A (en) | 1982-08-13 | 1983-08-12 | Process for production of optically active oxazolidinone derivative |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57141575A JPS5931693A (ja) | 1982-08-13 | 1982-08-13 | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5931693A JPS5931693A (ja) | 1984-02-20 |
| JPH0156760B2 true JPH0156760B2 (ja) | 1989-12-01 |
Family
ID=15295163
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57141575A Granted JPS5931693A (ja) | 1982-08-13 | 1982-08-13 | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4588694A (ja) |
| JP (1) | JPS5931693A (ja) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60241893A (ja) * | 1984-05-15 | 1985-11-30 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
| US4870169A (en) * | 1985-07-17 | 1989-09-26 | President And Fellows Of Harvard College | Intermediates for beta-lactam antibiotics |
| JP2503994B2 (ja) * | 1986-09-02 | 1996-06-05 | 味の素株式会社 | オキサゾリンカルボン酸誘導体及びその製造法 |
| US5099026A (en) * | 1986-09-12 | 1992-03-24 | Crater Davis H | Fluorochemical oxazolidinones |
| CA1323370C (en) * | 1986-09-12 | 1993-10-19 | Davis H. Crater | Fluorochemical oxazolidinones |
| IT1198266B (it) * | 1986-12-30 | 1988-12-21 | Montedison Spa | Processo per la separazione enzimatica degli isomeri ottici di derivati ossazolidinonici racemi |
| DE3921593A1 (de) * | 1989-06-28 | 1991-01-10 | Schering Ag | Verfahren zur racemattrennung von 4-aryl-2-oxo-pyrrolidin-3-carbonsaeure-ester |
| EP1008590B1 (en) * | 1998-12-07 | 2006-10-11 | Takasago International Corporation | Process for preparing optically active oxazolidinone derivatives |
| DE10134366A1 (de) * | 2001-07-14 | 2003-01-23 | Aventis Pharma Gmbh | Verfahren zur Herstellung der enantiomeren Formen von 2-substituierten 2-(2,5-Dioxoimidazolidin-l-yl)-essigsäure- Derivaten |
| CN110628743A (zh) * | 2019-08-20 | 2019-12-31 | 浙江工业大学 | 一种立体选择性酯酶、编码基因、载体、工程菌与应用 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3607651A (en) * | 1968-12-11 | 1971-09-21 | Takasago Perfumery Co Ltd | Method for the biochemical isolation of l-menthol |
| AR207554A1 (es) * | 1972-12-02 | 1976-10-15 | Otsuka Pharma Co Ltd | Procedimiento para producir derivados de 3-alquil-5-((3,4-dihidro-5-carbostiril)oximetil)-oxazolidinona-(2) |
| SE435499B (sv) * | 1974-12-13 | 1984-10-01 | Merck & Co Inc | Diastereomert salt av s-1-t-butylamino-2,3-dihydroxipropan |
| IT1113029B (it) * | 1979-03-01 | 1986-01-20 | Simes | Processo per la separazione dei due isomeri ottici del moprololo e composizioni farmaceutiche dell'antipodo levogiro |
| IT1125486B (it) * | 1979-10-17 | 1986-05-14 | Anic Spa | Processo per la preparazione di carbamil derivati di alfa-idrossiacidi e dei corrispondenti alfa-idrossiacidi |
| JPS5713000A (en) * | 1980-06-24 | 1982-01-22 | Ube Ind Ltd | Preparation of optical active tryptophane |
| US4461835A (en) * | 1982-07-02 | 1984-07-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Process for preparing optically-active isoprenoid intermediates |
-
1982
- 1982-08-13 JP JP57141575A patent/JPS5931693A/ja active Granted
-
1983
- 1983-08-12 US US06/522,687 patent/US4588694A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5931693A (ja) | 1984-02-20 |
| US4588694A (en) | 1986-05-13 |
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