JPH02128699A - 光学活性１，２−ジオール類の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野］ 本発明は、医薬や農薬の光学活性な生理活性化合物の合
成原料として有用な光学活性１．２−ジオール類の微生
物による新規な製造方法に関するものである。

〔従来技術と問題点〕

光学活性１．２−ジオールの合成法に関しては、Ｉ７−
アラニン等のアミノ酸からα−ヒドロキシ酸を経て（Ｓ
）−１，２−プロパンジオール、（Ｓ）−１，２−ベン
タンジオール、（Ｓ）−１２−ヘキサンジオールを合成
する方法が知られているが、高価な還元剤を必要とし、
工業的な方法とは言い難い（日本化学雑誌、９１巻、２
６５頁、１９７０年）。

一方、微生物を用いた光学活性１，２−ジオル類の製造
法として、クロストリデイウム属の微生物によりグルコ
ース等から（Ｒ）−１，２−プロパンジオールを生産す
る方法〔ドイツ特許ＤＥ３３３６０５１　（１９８５）
、ケミカルアブストラクト；１０５巻、７７５１３頁（
１９８６）　）が知られている。また、ホワイトサイデ
ス等は、セルロモナス属の微生物から得たグリセロール
脱水素酵素を用い、Ｉ−ヒドロキシ−２−プロパノン、
及び１−ヒドロキン２−ブタノンから（Ｒ）体の１．２
−プロパンジオール、１．２−ブタンジオールをそれぞ
れ得たと￥Ｕ告している〔ジャーナル・オブ・オルガニ
ック　ケミストリー（Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、）、
５１巻、２５頁、（１９８６）　）　。

また生化学的立体反転の例として、ラセマーゼによる光
学活性化合物のラセミ化はアミノ酸等の例などでよく知
られているが、これは一方の立体配置を有する化合物の
うち半分を逆の立体配置を有する化合物に変換し、各々
の立体配置をもつ等量の混合物（ラセミ体）を生成する
ものであり、逆にラセミ体から光学活性体を作ることは
できない。

従って、これらはいずれも工業的に実施するには問題が
多く、工業的に存利な光学活性１．　２ジオール類の製
造法の開発が望まれていた。

（問題点を解決するための手段］ 本発明者らはかかる実情に鑑み、光学活性Ｉ２−ジオー
ル類の工業的生産を目指して鋭意研究した結果、ラセミ
体の（Ｒ，５）−１，２−ジオル類を原料に微生物反応
により光学活性（Ｓ）１．２−ジオール類が効率よく生
産しうろことを見出した。そして、ここで利用される微
生物反応としては、（Ｒ）体の１．２−ジオール類の優
先的な代謝分解反応、あるいは（Ｒ）体の１．２ジオー
ル類の立体反転による（Ｓ）体の１，２ジオール類への
変換反応、またはこれらの組合わさった総合反応が挙げ
られるが、これらの区別は特に重要ではなく、ラセミ体
等の（Ｒ）体、（Ｓ）体の１．２−ジオール類混合物又
は（Ｒ）１．２−ジオール類を原料にして、上記微生物
反応で光学活性体（Ｓ）−１，２−ジオール類を選択的
に残存又は増加させ採取することを特徴とする（Ｓ）−
１，２−ジオール類の製造方法を内容とするものである
。

即ち、本発明は一般式（１） （式中、Ｒは置換あるいは未置換のアルキル基、アルケ
ニル基、アリール基又はアラルキル基を表す。） で表される立体配置を有する（Ｒ）−１，２−ジオール
類又は〔１〕と一般式（ｎ） （式中、Ｒは前記と同じ） で表される一般式（１）とは逆の立体配置を有する（Ｓ
）−１，２−ジオールとの混合物に、〔ＩＩを選択的に
代謝する能力及び／又は（１）の立体配置を〔■〕に立
体反転する能力を有する微生物を作用させ、生成Ｍ積す
る（［）を採取することを特徴とする光学活性（Ｓ）−
１□　２−ジオル類の製造方法に関するものである。

以下、本発明を更に詳しく説明する。

本発明にこ使用される基質としては、上記−船人（１）
又は（ｒ）と（ＩＩ）の混合物（いわゆるラセミ体）の
１．２−ジオール類が使用できる。Ｒとしてはエチル基
、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル
基、ペンチル基、ヘキシル基、シクロへキシル基等の無
置換アルキル基；メチルチオメチル基、メトキシメチル
基等の置換アルキル基；ビニル基、アリル基等のアルケ
ニル基；フェニル基、トリル基、メトキンフェニル基等
のアリール基；ヘンシル基、フェネチル基等のアラルキ
ル基等が挙げられる。

本発明に使用される微生物としては、（Ｒ）１．２−ジ
オールを選択的に代謝できるか、（Ｒ）−１，２−ジオ
ールを（Ｓ）−１，２−ジオールに変換できる微生物あ
るいはこの両方の能ツノをもつ微生物であればいづれを
用いてもよいが、代表例としては以下の微生物が挙げら
れる。即ら、アースロアスカス属、キャンディダ属、デ
バリオマイセス属、エンドマイセス属、グイリアモンデ
ラ属、ハンゼヌラ属、クルイヘロマイセス属、ログロマ
イセス属、ビキャ属、ロードトルラ属、す・７カロルイ
セス属、ステファノアスカス属、トリゴノプシス属、ト
リコスポロン属、セラチア属、クレブシェラ属、エンテ
ロバクタ−属、エルウィニア属、ハフニア属、アクロモ
バクタ−属、アグロハタテリウム属、バチルス属、セル
ロモナス属、シトロバクタ−属、コリネバクテリウム属
、エノシエリキャ属、ミクロバクテリウム属、シュード
モナス属、アマウロアスカス属、アルキエラ属、ハクセ
ラ属、ボトリオティナ属、セファロスポリウム属、シル
シネラ属、デイクラニブイオン属、エメリセロビンス属
、フザリウム属、ジベレラ属、グロエオフォルム属、ラ
エチポルス属、ベスタロティア属、フォリオタ属、プレ
ウロンス属、ゴングラネラ属、リンコラデイニラ属、リ
ゾノブス属、シンセファラスツルム属、チロマイセス属
、チゴスポリウム属に属する微生物等である。これらは
単独又は２Ｍ以上併用される。

上記微生物はいづれも（Ｒ）−１，２−ジオール類を優
先的に代謝するものであるが、その中の例えばアースロ
アスカス属、キャンディダ属、デバリオマイセス属、エ
ンドマイセス属、グイリアモンデラ属、ログロマイセス
属、ピキャ属、ステファノアスカス属、バクセラ属、エ
メリセロビス属、フザリウム属、ジヘレラ蒸、フォリオ
タ属、シンセファラスンルム属、チロマイセス屈、チゴ
スポリウム属、ゴングロネラ属に属する微生物は、顕著
に（Ｒ）−１，２−ジオール類を一般式〔■）で示され
る逆の立体配置を有する（Ｓ）−１２−ジオール類に変
換する能力を有する。

本発明に使用できる微生物の具体的な例としては、アー
スロアスカス・ジャバネンソス（Ａｒｔｈｒｏ−ａｓｃ
ｕｓ　ｊａｖａｎｅｎｓｉｓ）　ＩＦｏ　１８４８、キ
ャンデイダ・バラピンロンス（Ｃａｎｄｉｄａ　ｐａｒ
ａｐｓｉｌｏｓｉｓ）　ＩＦＯ０５８５、キャンディダ
・マルトーザ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｍａｌｔｏｓａ）＾Ｔ
ＣＣ２０２７５、デバリオマイセス・ハンゼンニ（Ｄｅ
ｂ−ａｒｙｏｍｙｃｅｓ　ｈａｎｓｅｎｉｉ）　ＩＦＯ
０５６４、エンドマイセス・テトラスペルマ（Ｅｎｄｏ
ｍｙｃｅｓ　ｔｅｔｒａｓｐｅｒｍａ）　Ｃ［１Ｓ７６
５．７０、グイリアモンデラ・セレノスポラ（Ｇｕｉｌ
ｌ−ｉｅｒｍｏｎｄｅｌｌａ　５ｅｌｅｎｏｓｐｏｒａ
）　ＩＦｏ　１８５０　、ハンゼヌラ・ホルスティ（ｌ
ｌａｎｓｅｎｕｌａ　ｈｏｌｓｔｉｉ）　ＩＦＯ０９８
０、タルイベロマイセス　フラジリス（Ｋｌｕｙｖｅｒ
ｏｍｙｃｅｓｆｒ＋ｇｉｌｉｓ）　ＩＦＯ０２８８、ロ
グロマイセス・エロンギスボルス（Ｌｏｄｄｅｒｏｍｙ
ｃｅｓ　ｅｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｓ）　ＩＦＯ１６７６
、ピキャ・トレタナ（Ｐｉｃｈｉａ　ｔｏｌｅｔａｎａ
）　ＩＦＯ０９５０、ロードトルラ・ミヌタ（Ｒｈｏｄ
ｏｔｏｒｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ）ＩＦＯ０３８７、サツ
カロマイセス・ベイ９−（Ｓａｃｃｈ−ａｒｏｍｙｃｅ
ｓ　ｂａｉｌｉｉ）　ＩＦＯ０４６８、ステファノアス
カス・シフェリイ（Ｓｔｅｐｈａｎｏａｓｃｕｓ　ｃｉ
ｆｅｒｒｉｉ）　ＩＦＯ１８５４、）リゴノプシス・パ
リアビリス（Ｔｒｉｇｏｎｏｐｓ−ｉｓ　ｖａｒｉａｂ
ｉｌｉｓ）　ＩＦＯ０６７１、トリコスポロン・フタニ
ウム（Ｔｒｉｃｔｒｏｓｐｏｒｏｎ　ｃｕｔａｎｅｕｍ
）　ＴＦＯ０５９８、セラチア・マルセサンス（Ｓｅｒ
ｒａｔｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）　ＩＦＯ１２６４
８、クレプシエア・ニューモニアエ（Ｋｌｅｂ−ｓｉｅ
ｌａ　ｐｎｅｗｍｏｎｉａｅ）　ＩＦＯ３３１９、エン
テロバクタ−クロアカニ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｃｒ　
ｃｌｏａｃａｅ）　ＩＦＯ１２９３７、エルウィニア・
ヘルビコラ（Ｅｒｗｉｎｉａ　ｈｅｒｂｉｃ−ｏｌａ）
　ＩＦｏ　１２６８６、ハフニア・アルヘイ　（ｌ（ａ
ｆｎｉａ　ａ−１ｖｅｉ）　ＩＦＯ３７３１、アクロモ
バクタ−・キセロシス（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ　
ｘｅｒｏｓｉｓ）　ＩＦＯ１２６６８、アグロバクテリ
ウム・ラディオバクタ−（ＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕＩ
Ｉ＋　ｒ−ａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）　ＩＦＯ１３２５９
、バチルス・プミルス（８−ａｃｉｌｌｕｓ　ｐｕｍｉ
ｌｕｓ）　ＩＦｏ　３８１３　、セルロモナス・フラビ
ジエナ（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ　ｆｌａｖｉｇｅｎ
ａ）　ＩＦｏ　３７４８、シトＯバクター・フロインデ
イ（ＣｉｔｒｏｂａｃＬｅｒ　ｒ−ｒｅｕｎｄｉｉ）　
ＩＦＯ１２６８１、コリネバクテリウム・キセロシス（
Ｃｏｒｙｎａｂａｃｔｅｒｉｕ＋ｗ　ｘｅｒｏｓｉｓ）
　ＩＦＯ１２６８４、エソシエリキャ・コリイ（Ｅｓｃ
ｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）　ＩＦＯ３３０１、ミク
ロバクテリウム・ラクテクム（旧ｃｒｏ−ｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ　Ｉａｃｔｉｃｕｌｌ）　ＩＦＯ１４１３５、シ
ュードモナス°クロロラフイス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ　ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）ＩＦＯ３９０４、アマ
ウロアスカス・レティクラタス（Ａｍａｕｒｏａｓｃｕ
ｓ　ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｓ）　ＩＦＯ９１９６、アル
キエラ・テレストリス（Ａｒｘｉｅｌｌａ　ｔｅｒｒｅ
ｓｔｒｉｓ）　ＩＦＯ３０２０３・バクセラ・シルシナ
（Ｂａｃｋｕｓｅｌｌａ　ｃｉｒｃｉｎａ）ＩＦＯ９２
３１、ボトリオティナ・フケリアナ（Ｂｏ　ｔｒｙｏｔ
ｉｎｉａ　ｆｕｃｋｅｌｉａｎａ）　ＩＦＯ９７６０、
セファロスポリウム°ボトロニイ（Ｃｅｐｈａｌｏｓｐ
ｏｒｉｕｍ　ｐｏｔｒｏｎｉｉ）　ＩＦｏ　４０１９、
シルシネラ・ムコロイデス（（：ｉｒ（ｉｎｅｌｌａｍ
ｕｃｏｒｏｉｄｅｓ）　ＩＦＯ４４５３、デクラニデイ
オン・フランジ（Ｄｉｃｒａｎｉｄｉｏｎ　ｆｒａｇｉ
ｌｅ）　［ＦＯ６８８６、エメリセロビス・グラベラ（
Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌｏｐｓｉｓ　ｇｌａｂｒａ）　ＩＦ
Ｏ９０３１、フザリウム・アングイオイデス（Ｆｕｓａ
ｒｉｕｌＩｌａｎｇｕｉｏｉｄｅｓ）　ＩＦＯ４４６７
、ジベレラ・フジクロイ（Ｃ−ｉｂｂｅｒｅｌｌａ　ｒ
ｕｊｉｋｕｒｏｉ）　ＩＦＯ６６０７、グロエオフイル
ム・ストリアトム（Ｇｌｏｅｏｐｈｙｌｌｕｍ　５ｔｒ
ｉａｔｕｎ＋）　ＩＦｏ　６５０６、ラエチポルス・ス
ルフレウス（Ｌａｅｔｉｐｏｒｕ　−ｓ　５ｕｌｐｈｕ
ｒｅｕｓ）　ＩＰＯ６４３２、ペスタロテイア・コニゲ
ナ（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａ　ｃｏｎｉｇｅｎａ）　ｒＦ
ｏ　３０３１５　、フオリオタ・ナメコ（Ｐｈｏｌｉｏ
ｔａ　ｎａｍｅｋｏ）　ＩＦＯ６１４１、プレウロノス
・オストレアツス（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ　ｏｓｔｒｅａ
ｔｕｓ）　ＩＦＯ６５１５、リンコラデイエラ・アンセ
ブス（Ｒ−ｈｉｎｃｏｌａｄｉｅｌｌａ　ａｎｃｅｐｓ
）　ＩＦＯ９４４８、ゴングラネラ・ブテレリ（Ｇｏｎ
ｇｒａｎｅｌｌａ　ｂｕｔｌｅｒｉ）　ＩＰｏ　８０８
０、リヅノブス・ストロニフエル（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　
５ｔｏｌｏｎｉｆｅ−ｒ）　ＩＦＯ４７８１、シンセフ
ァラスツルム・ニグリカンス（Ｓｙｎｃｅｐｈａｌａｓ
ｔｒｕｍ　ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）　）ｌｔｌＴ　１２９
９、チロマイセス・パルストリス（Ｔｙｒｏｍｙｃｅｓ
　ｐａｌｕｓｔｒｉ−ｓ）　［ＦＯ３０３３９、チゴス
ポリウム・マソニイ（ｚｙｇ−ｏｓｐｏｒｉｕ＋ｍ　ｍ
ａｓｏｎｉｉ）　ＩＰｏ　３０２１４等が挙げられる。

尚、本発明を実施する際に、（Ｓ）−１，２−ジオール
類の代謝をｂｌｏｃｋ　した変異株を使用すれば、より
効率よ＜　　（Ｓ）−１，２−ジオール類を生産するこ
とができる。

これら微生物を培養するための培地組成としては、通常
これらの微生物が生育しうる培地なら特に制限されず、
例えば炭素源としてグルコース、シュクロース等の糖類
；乳酸、酢酸等のを機成；エタノール、グリセロール等
のアルコール類又はこれらの混合物；窒素源として硫酸
アンモニウム、リン酸アンモニウム、尿素、イーストエ
キス、肉エキス、ペプトン、大豆類等が使用しうる。更
に無機塩、ビタミン類等、通常微生物の培養に用いられ
る栄養源を必要に応じ適宜混合して用いることができる
。

微生物の培養は常法によれば良く、例えばｐＨを４．０
〜９．５、培養温度を１５〜４５℃の範囲で好気的に１
０〜９６時間培養するのが好ましい。

−船人（１）に示す（Ｒ）−１，２−ジオール類あるい
はその立体巽性体（ＩＩ）との混合物、例えばラセミ体
の１．２−ジオール化合物に微生物を作用させ、光学活
性な−ｍ式（ｎ）の１．２−ジオール類を得る方法とし
ては、前記の如く培養した培養液、あるいは培養液から
遠心分離、濾過等により菌体を得、これを適当な緩衝液
等に懸濁した菌体懸濁液に原料の１．２−ジオール類を
添加する方法、あるいは培地に培養開始時から添加して
おく方法等がある０反応に際してはグルコース、グリセ
ロール、エタノール等の炭素源を添加することにより反
応速度の向上がみられる。反応条件は（Ｒ）体のみを選
択的に代謝させる場合、又（Ｒ）体を変換する場合も反
応液のｐＨは４．０〜１０．０の範囲で、温度は１５〜
４０°Ｃの範囲で行うのが好ましい。反応中の１．２−
ジオール類の添加濃度は微生物の酵素活性により種々の
濃度（０，１〜２０％Ｗ／Ｖｌが用いられるが、その添
加は反応開始時に一括して加えても良いし、分割添加し
ても良い。反応は通常振盪あるいは攪拌しながら行い、
反応時間は基質濃度、酵素活性、その他の条件によって
変わるが、１０〜１２０時間行う。ｌ、２−ジオール類
の定量は例えば島原ＦＡＬ−Ｍ６％（シマライトＴＰＡ
）５０ｃ＋ａカラム、カラム温度１６０〜１８０℃、Ｎ
２ガス２０−／ｍｉｎを用いるガスクロマトグラフィー
（ＧＬＣ）により行うことができる。また光学純度の測
定は１．２−ジオールの種類に応し、それに適した方法
、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）や
ガスクロマトグラフィー（ＧＬＣ）、場合によっては単
離精製して比旋光度を測定する等により行うことができ
る。

この様にして得られた光学活性１．２−ジオルを反応液
から採取するには、一般的なグリコール類を採取する方
法を用いることができる。例えば、遠心分離等で菌体を
除いた後、上澄を適当に濃縮し、酢酸エチルなどの溶媒
で抽出する。抽出液を芒硝等で脱水後、減圧下で溶媒を
除去した後、減圧蒸留あるいはシリカゲルクロマトグラ
フィ等により精製することにより、純度良く、光学活性
１．２−ジオール類が得られる。

〔実施例〕

以下、実施例をもって本発明の詳細な説明するが、これ
らは例示であって本発明を限定するものではない。尚、
「％」は特に断らない限り「重量％」を意味する。

実施例１ （Ａ）酵母用培地 グルコース４％、（ＮＩｌ、）ＩＨＰＯ４１，３％、に
Ｈ，ＰＯ，０゜７％、　Ｍｇ５Ｏａ　　−７Ｈ！０　８
００ｐｐｍ、　　Ｚｎ５Ｏａ　　・７Ｈｚ０　６０ｐｐ
ｍ、Ｐｅ５０ｍ　−ＩＨｚｏ　９０ｐｐｍ　、　Ｃｕ５
Ｏａ　−５Ｈｚ０５ｐｐｍ、Ｍｎ５Ｏａ　・４１ｈ０１
０ｐｐｍ　５ＮａＣ１１１００ｐｐ　、イーストエキス
０．３％、ｐＨ１，０ （Ｂ）細菌、カビ用培地 グルコース２％、肉エキス０．５％、ペプトン０゜５％
、イーストエキス０．３％、ｐＩ（７，０からなる培地
を水道水で調製し０．２β坂ロフラスコに５００−ずつ
分注し、オートクレーブにより１２０℃で２０分間殺菌
した。

上記培地（Ａ）には第１表に示した微生物を、培地（Ｂ
）には、第２表、第３表に示した微生物をそれぞれ接種
し、３０℃で２４〜４８時間振盪培養を行い、培養液１
．５７！を得た。この培養液を遠心分離又は濾過により
菌体を集め、水洗後、菌体を０，１Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６，５）　　５００ｍｌに懸濁した液に、（Ｒ，５）
−１，２−ベンタンジオールを５．０ｇ添加し、２１坂
ロフラスコに分注後３０℃で２４〜１２０時間振盪反応
を行い、添加した基質を５０％以上分解（ＣＬＣ分析に
よる）した時点で反応を停止した。反応終了後、遠心分
離、濾過により除菌し、上澄液を５０−まで減圧ｌ層線
して、１５０−の酢酸エチルで３回抽出した。

この抽出液を無水硫酸ソーダで脱水後、減圧上溶媒を除
去し、更に蒸留（９８〜ｂ Ｈｇ）　Ｌ、無色透明のオイル状の１．２−ベンタンジ
オールを得た（〔α〕６°−１２．８’〜−１６．８”
　　（Ｃ＝Ｌメタノール））。

この１．２−ベンタンジオールの一部を塩化メチレン中
ピリジン存在下でｐ−）ルエンスルホニルクロライドと
反応させて、２−ヒドロキシペンチルｐ−）ルエンスル
ホネートを合成し、これをキラルセルＯＤ（日本分光製
）を用いるＨ　Ｐ　Ｌ　Ｃにて分析（ｉ８離液ヘキサン
−イソプロパツール（９７：３）、流速０．７龍／ｗｉ
ｎ、検出２５４ｎｍ、（Ｓ）体は５０分、（Ｒ）体は４
５分に溶出される）し、（Ｓ）−１，２−ベンタンジオ
ールの光学純度［（（８体の面積）−（Ｒ体の面積））
／ｉ（８体の面積）＋（Ｒ体の面積））Ｘ１００］を測
定した結果、第１表〜第３表の通り、ラセミ体の（Ｒ，
５）−１，２−ペンクンジオールから光学活性体（Ｓｌ
−１，２−ペンクンジオールが収率よく得られた。

尚、これらの使用菌はいずれも、上記条件ではグルコー
ス等の炭素源から直接（Ｒ）−及び（Ｓ）−１，２−ベ
ンタンジオールを合成する能力をもだないことも確認し
た。

実施例２ 培地（Ａ）酵母用 グルコース４％、（Ｎｌ（４）　２）ＩＰＯ４１，３％
、ＫＨｚＰＯ４ｏ。

７％、ＭｇＳＯ４４ｔ（ｚｏ　８００ｐｐｍ、　ＺｎＳ
Ｏ４−７Ｈｔ０６０ｐｐｍＦｅＳ０４−７１１２０９０
ｐｐｍ　、、ＣｕＳ０ｍ　−５Ｈｚ０５ｐｐｍ、　Ｍｎ
５０ｍ　−４１１２０１０ｐｐｍ　、　ＮａＣ１１１０
０ｐｐ　、イーストエキス０．３ 培地ＣＢ）カビ用 グルコース２％、肉エキス０．５％、ペプトン０゜５％
、イーストエキス０．３％からなる培地を水道水で作製
しくｐＨ７，０）　、５００−坂ロフラスコに５３＋＋
＋１ずつ分注し、１２０℃で２０分間殺菌した。

上記培地（Ａ）には第４表に示した微生物を、培地（Ｂ
）には第５表に示した微生物をそれぞれ接種し、３０℃
で２４〜４８時間培養した。この培養液に、基質として
ラセミ体の（Ｒ，Ｓ）−１゜２−ベンタンジオールを５
００■添加し、ｐＨを６゜５に調整した後グルコースを
１．０％添加して３０℃で４８時間振盪反応した。

その後硫安飽和下で酢酸エチル５０ｍ１で３回抽出し、
この抽出液を前述のＧＬＣで分析して１２−ベンタンジ
オール量を測定した。次に無水硫酸ソーダで脱水後、脱
溶剤をし、褐色油状の１２−ベンタンジオールを得た。

これを塩化メチレン中ヒリシン存在下ｐ−）ルエンスル
ホニルクロライドと反応させて、２−ヒドロキシペンチ
ルｐトルエンスルホネートを合成し、これをキラルセル
ＯＤ（日本分光型）を用いるＨＰＬＣにて分析（溶離液
ヘキサン−イソプロパツール（９７：３）、流速０．７
　ｒｄ　／　ｍｉｎ　、検出２５４ｎｍ、Ｓ体は５０分
、Ｒ体は４５分に溶出される）し、（Ｓ）１．２〜ベン
タンジオールの光学純度［（（Ｓ体の面積）−（Ｒ体の
面積）　ｌ　／　（（Ｓ体の面積）＋（Ｒ体の面積））
×１００］を測定した結果、第４．５表の通り、（Ｒ，
Ｓ）　−１，２−ベンタンジオールより　（Ｓ）−１，
２−ベンタンジオールが高収率で得られた。

尚、これらの使用菌はいずれも、上記条件ではグルコー
ス等の炭素源から直接（Ｒ）−及び（Ｓ）−１，２−ベ
ンタンジオールを合成する能力をもだないことも確認し
た。

実施例３ 実施例２と同一条件で第６．７表の微生物を培養し、基
質として（Ｒ）　−１，２−ベンタンジオール（１００
％ｅ、ｅ　）を２５０■添加し、ｐＨ６，５に調整し、
振盪しながら３０°Ｃで３６時間反応させた。その後は
実施例２と同様に抽出分析し第６．７表の結果を得、い
ずれの菌株においても明らかな立体反転が観察された。

尚、これらの使用菌はいずれも、上記条件ではグルコー
ス等の炭素源より直接（Ｒ）−及び（Ｓ）−１，２−ベ
ンタンジオールを合成する能力をもたないことも確認し
た。

実施例４ 実施例１と同し培地（Ａ）でキャンディダ・バラピンロ
ソスＩＰ００５８５　、ログロマイセス・工ロンギスポ
ルスＩＦＯ１６７６を２４時間３０℃で振盪培養し、こ
れに（Ｒ，５）−１，２−ブタンジオール、（Ｔｅ１．
　　Ｓ）　−１，２−ヘキサンジオール、（Ｒ，Ｓ）　
−１，２−へブタンジオール、を各々５００＋ｎｇずつ
添加し、ｐｉｆを６．５に合わせた後、３Ｑ　’Ｃで下
記の時間振りしながら反応させた。そして、実施例２と
同様に抽出、分析を行い、第８表の結果を得た。

実施例５ 実施例２と同し培地でキャンディダ・バラビシロンスＩ
Ｆ００５８５　、ログロマイセス・エロンギスポルスＩ
Ｆ０１６７６を３０℃２４時間培養し、これに１．５）
−１−フェニル−１，２−エタンジオール、（Ｒ，Ｓ）
　−３−フェニル−１，２−プロパンジオール、（Ｒ，
５）−４−フェニル−１゜２−ブタンジオールをそれぞ
れ２５０ｍｇずつ添加し、ρ１１を６．５に合わせた後
、３０℃で４８時間振盪しながら反応させた。その後、
遠心分離により除菌後、酢酸エチル５０−で３回抽出し
、ＧＬＣで生成量を分析すると共に、この濃縮物をキラ
ルセルＯＢ（日本分光製）を用いたＨＰＬＣにて分析（
溶離液、ヘキサン−イソプロパツール（３０：　１）　
、流速１．３　ｗｒｌ　／ｗｉｎ　、検出２５４ｎｍ。

（Ｒ）体は４０分、（Ｓ）体は５２分付近に溶出される
）し、第９表に示す如く、（Ｓｌ−１−フェニル−１，
２−エタンジオール、（Ｓ）　−３フェニル−１，２−
プロパンジオール、（Ｓ）４−フェニル−１，２−ブタ
ンジオールがそれぞれ収率よ（得られた。

〔作用・効果〕

叙上の通り、 本発明によれば光学活性 （Ｓ） ■ ジオール類を経済的に有利に生産できる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式〔 I 〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I 〕 （式中、Ｒは置換あるいは未置換のアルキル基、アルケ
   ニル基、アリール基又はアラルキル基を表す。） で表される立体配置を有する（Ｒ）−１，２−ジオール
   類又は一般式〔 I 〕のジオール類と、一般式〔II〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔II〕 （式中、Ｒは前記と同じ） で表される、一般式〔 I 〕とは逆の立体配置を有する
   （Ｓ）−１，２−ジオール類との混合物に、〔 I 〕の
   ジオール類を選択的に代謝する能力及び／又は〔 I 〕
   のジオール類の立体配置を〔II〕のジオール類に立体反
   転する能力を有する微生物を作用させ、生成蓄積する〔
   II〕のジオール類を採取することを特徴とする光学活性
   （Ｓ）−１，２−ジオール類の製造方法。 ２、一般式〔 I 〕のジオール類を選択的に代謝する能
   力を有する微生物がアースロアスカス属、キャンディダ
   属、デバリオマイセス属、エンドマイセス属、グィリア
   モンデラ属、ハンゼヌラ属、クルイベロマイセス属、ロ
   ダロマイセス属、ピキヤ属、ロードトルラ属、サッカロ
   マイセス属、ステファノアスカス属、トリゴノプシス属
   、トリコスポロン属、セラチア属、クレブシェラ属、エ
   ンテロバクター属、エルウィニア属、ハフニア属、アク
   ロモバクター属、アグロバクテリウム属、バチルス属、
   セルロモナス属、シトロバクター属、コリネバクテリウ
   ム属、エッシェリキヤ属、ミクロバクテリウム属、シュ
   ードモナス属、アマウロアスカス属、アルキエラ属、バ
   クセラ属、ボトリオティナ属、セファロスポリウム属、
   シルシネラ属、ディクラニディオン属、エメリセロピシ
   ス属、フザリウム属、ジベレラ属、グロエオフォルム属
   、ラエテポルス属、ベスタロティア属、フォリオタ属、
   プレウロッス属、ゴングラネラ属、リンコラディエラ属
   、リゾップス属、シンセファラスツルム属、チロマイセ
   ス属及びチゴスポリウム属に属する微生物から選択され
   る請求項１記載の製造方法。 ３、一般式〔 I 〕のジオール類を選択的に代謝する能
   力を有する微生物がアースロアスカス・ジャバネンシス
   、キャンディダ・パラピシロシス、キャンディダ・マル
   トーザ、デバリオマイセス・ハンゼンニ、エンドマイセ
   ス・テトラスペルマ、グィリアモンデラ・セレノスポラ
   、ハンゼヌラ・ホルスティ、クルイベロルイセス・フラ
   ジリス、ロダロマイセス・エロンギスポルス、ピキヤ・
   トレタナ、ロードトルラ・ミヌタ、サッカロルイセス・
   ベイリー、ステファノアスカス・シフェリイ、トリゴノ
   プシス・バリアビリス、トリコスポロン・クタニウム、
   セラチア・マルセサンス、クレブシェラ・ニューモニア
   エ、エンテロバクター・クロアカエ、エルウィニア・ヘ
   ルビコラ、ハフニア・アルベイ、アクロモバクター・キ
   セロシス、アグロバクテリウム・ラディオバクター、バ
   チルス・プミルス、セルロモナス・フラビジエナ、シト
   ロバクター・フロインディ、コリネバクテリウム・キセ
   ロシス、エッシェリキヤ・コリイ、ミクロバクテリウム
   ・ラクテクム、シュードモナス・クロロラフィス、アマ
   ウロアスカス・レティクラタス、アルキエラ・テレスト
   リス、バクセラ・シルシナ、ボトリオティナ・フケリア
   ナ、セファロスポリウム・ポトロニイ、シルシネラ・ム
   コロィデス、デクラニディオン・フラジレ、エメリセロ
   ピス・グラベラ、フザリウム・アングィオイデス、ジベ
   レラ・フジクロイ、グロエオフィルム・ストリアトム、
   ラエテポルス・スルフレウス、ペスタロティア・コニゲ
   ナ、フォリオタ・ナメコ、プレウロッス・オストレアッ
   ス、リンコラディエラ・アンセプス、ゴングロネラ・ブ
   テレリ、リゾップス・ストロニフェル、シンセファラス
   ツルム・ニグリカンス、チロマイセス・パルストリス及
   びチゴスポリウム・マソニイから選択される請求項２記
   載の製造方法。 ４、一般式〔 I 〕のジオール類を一般式〔II〕のジオ
   ール類に立体反転する能力を有する微生物がアースロア
   スカス属、キャンディダ属、デバリオマイセス属、エン
   ドマイセス属、グィリアモンデラ属、ロダロマイセス属
   、ピキヤ属、ステファノアスカス属、バクセラ属、エメ
   リセロピシス属、フザリウム属、ジベレラ属、フォリオ
   タ属、シンセファラスツルム属、チロマイセス属、チゴ
   スポリウム属及びゴングロネラ属に属する微生物から選
   択される請求項１記載の製造方法。 ５、一般式〔 I 〕のジオール類を一般式〔II〕のジオ
   ール類に立体反転する能力を有する微生物がアースロア
   スカス・ジャバネンシス、キャンディダ・パラプシロシ
   ス、キャンディダ・マルトーザ、デバリオマイセス・ハ
   ンゼンニ、エンドマイセス・テトラスペルマ、グィリア
   モンデラ・セレノスポラ、ロダロマイセス・エロンギス
   ポルス、ピキヤ・ボビス、ステファノアスカス・シフェ
   リイ、バクセラ・シルシナ、エメリセロピシス・グラベ
   ラ、フザリウム・アングィオイデス、ジベレラ・フジク
   ロイ、フォリオタ・ナメコ、ゴングロネラ・ブテレリ、
   シンセファラスツルム・ニグリカンス、チロマイセス・
   パルストリス及びチゴスポリウム・マソニイから選択さ
   れる請求項４記載の製造方法。 ６、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−１，２−ブ
   タンジオールであり、一般式〔II〕の化合物が（Ｓ）−
   １，２−ブタンジオールである請求項１乃至５の各項記
   載の製造方法。 ７、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−１，２−ペ
   ンタンジオールであり、一般式〔II〕の化合物が（Ｓ）
   −１，２−ペンタンジオールである請求項１乃至５の各
   項記載の製造方法。 ８、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−１，２−ヘ
   キサンジオールであり、一般式〔II〕の化合物が（Ｓ）
   −１，２−ヘキサンジオールである請求項１乃至５の各
   項記載の製造方法。 ９、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−１，２−ヘ
   プタンジオールであり、一般式〔II〕の化合物が（Ｓ）
   −１，２−ヘプタンジオールである請求項１乃至５の各
   項記載の製造方法。 １０、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−１−フェ
   ニル−１，２−エタンジオールであり、一般式〔II〕の
   化合物が（Ｓ）−１−フェニル−１，２−エタンジオー
   ルである請求項１乃至５の各項記載の製造方法。 １１、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−３−フェ
   ニル−１，２−プロパンジオールであり、一般式〔II〕
   の化合物が（Ｓ）−３−フェニル−１，２−プロパンジ
   オールである請求項１乃至５の各項記載の製造方法。 １２、一般式〔 I 〕の化合物が（Ｒ，Ｓ）−４−フェ
   ニル−１，２−ブタンジオールであり、一般式〔II〕の
   化合物が（Ｓ）−４−フェニル−１，２−ブタンジオー
   ルである請求項１乃至５の各項記載の製造方法。