JPH0218069B2 - - Google Patents

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JPH0218069B2
JPH0218069B2 JP56215724A JP21572481A JPH0218069B2 JP H0218069 B2 JPH0218069 B2 JP H0218069B2 JP 56215724 A JP56215724 A JP 56215724A JP 21572481 A JP21572481 A JP 21572481A JP H0218069 B2 JPH0218069 B2 JP H0218069B2
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JP
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serratiopeptidase
freeze
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lactose
enzyme
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Masaru Ikeda
Shoichi Nagahiro
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Takeda Pharmaceutical Co Ltd
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Takeda Chemical Industries Ltd
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    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/98—Preparation of granular or free-flowing enzyme compositions
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    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
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Description

【発明の詳細な説明】
本発明は、セラチオペプチダーゼ〔登録商標。
このものの国際一般的名称（INN：
International Nonproprietary Name）はセラ
ペプターゼ（Serrapeptase）である。〕の安定化
法に関する。 セラチオペプチダーゼは、たとえばセラチア・
エスピーE15を培地に培養することによつて製造
され、消炎作用を有する酵素である。 このセラチオペプチダーゼは、熱に比較的不安
定で、その粉末を製造する際の凍結乾燥時に酵素
活性を失うという欠点がある。 本発明者らは、上記の事情に鑑み、酵素力の安
定なセラチオペプチダーゼ粉末を得るべく研究し
たところ、セラチオペプチダーゼを含有する溶液
に、乳糖を溶液状態で添加後凍結乾燥することに
より、酵素力を安定化できることを見い出し、こ
れに基づいてさらに研究した結果、本発明を完成
した。 本発明は、セラチオペプチダーゼを含有する溶
液に乳糖を添加して溶解または懸濁後凍結乾燥す
ることを特徴とするセラチオペプチダーゼの安定
化法である。 セラチオペプチダーゼは、たとえばセラチア・
エスピーE15を培地に培養することによつて得る
ことができる（特公昭41−10193号公報参照）。上
記セラチア・エスピーE15は、ジ・アメリカン・
タイプ・カルチヤー・コレクシヨン（The
American TyPe Culture Collection）に西暦
1967年５月15日に受託番号ATCC 21074として寄
託され、該コレクシヨンのカタログ・オブ・スト
レインズ 第14版1980年（The American
TyPe Culture Collection Catalogue of
Strains Ｉ Fourteenth Edition 1980）に掲載
されている。 セラチオペプチダーゼを含有する溶液として
は、水溶液、またはアセトン、低級アルコール
（例、メチルアルコール、エチルアルコール、イ
ソプロピルアルコール）等の有機溶媒を含む水溶
液などが挙げられる。 該溶液に溶解させるセラチオペプチダーゼは、
特公昭41−10193号公報に示された方法において、
セラチア・エスピーE15の培養によつて得られた
プロテアーゼ含有液の精製工程における凍結乾燥
操作前のものを用いてもよいし、またいつたん凍
結乾燥したものを用いてもよい。 該溶液中のセラチオペプチダーゼの濃度は、酵
素の力価が約5000PU／mgとして、約50ないし200
mg／mlが好ましい（「PU」については特公昭41−
10193号公報参照。）。 該溶液中のPHは、約6.5ないし7.5が好ましい。 セラチオペプチダーゼを含有する溶液に乳糖等
を添加する方法としては、たとえば乳糖等を水、
またはアセトン、低級アルコール（例、メチルア
ルコール、エチルアルコール）等を含有する水溶
液に溶解または懸濁して、これを上記セラチオペ
プチダーゼを含有する溶液に添加する方法が挙げ
られる。添加した後は、溶解した状態でもよく、
あるいは懸濁した状態でもよい。添加する乳糖等
の量は、セラチオペプチダーゼの量の約0.5ない
し1.5倍量（重量比）が適当である。凍結乾燥す
る直前の溶液または懸濁液中のセラチオペプチダ
ーゼの濃度は、酵素の力価が約5000PU／mgとし
て、約70ないし150mg／mlが適当である。 本発明方法で採用される凍結乾燥法は、通常用
いられる条件の下に行なわれ、特に制限はない
が、たとえば温度としては約−50゜ないし＋60℃
が、圧力としては約10-3ないし10-1mmHgが、時
間としては約24ないし36時間がそれぞれ適宜採用
される。 このようにして得られたセラチオペプチダーゼ
の凍結乾燥品は、酵素力が極めて安定化されたも
のである。該凍結乾燥品は、酵素活性がほとんど
失なわれていない粉末であり、これを用いて錠剤
とした場合も、酵素活性の残存率の高いものが得
られる。 以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明す
るが、本発明はこれらに限定されるべきものでは
ない。酵素は、その力価が約5000PU／mgのもの
を用いた。 実施例 １ 10W／Ｖ％のセラチオペプチダーゼ水溶液に、
15W／Ｖ％乳糖水溶液を下記処方で混合し、当初
温度−55℃、圧力10-3mmHg，27時間後の最終温
度＋60℃、圧力10-1mmHgの条件下で凍結乾燥し
た。
【表】 凍結乾燥品の酵素活性を測定した。その結果を
以下に示す。
【表】 打錠仕込力価
本発明の凍結乾燥品の酵素は、安定であること
が分かる。 打錠処方 本発明で得られたセラチオペプチダーゼを下記
処方で混合、練合、乾燥、整粒し、７mmφ、5R
の杵を用いて重量130mg、圧力1.3ton／cm2で打錠
した。
【表】 実施例 ２ 7.5W／Ｖ％のセラチオペプチダーゼ、5W／Ｖ
％アセトン水溶液に、10W／Ｖ％乳糖水溶液を下
記処方で混合し、当初温度−55℃、圧力10-3mm
Hg、27時間後の最終温度＋60℃、圧力10-1mmHg
の条件下で凍結乾燥した。
【表】 凍結乾燥品の酵素活性を測定した。結果を以下
に示す。
【表】
【表】 意義を表わす。
本発明の凍結乾燥品の酵素は安定であることが
分かる。 実施例 ３ 10W／Ｖ％のセラチオペプチダーゼ水溶液に、
15W／Ｖ％の乳糖等の水溶液を下記処方で混合
し、当初温度−55℃、圧力10-3mmHg、27時間後
の最終温度＋60℃、圧力10-1mmHgの条件下で凍
結乾燥した。
【表】 凍結乾燥品の酵素活性を測定した。結果を以下
に示す。
【表】 本発明の凍結乾燥品の酵素は安定であることが
分かる。 なお、区分Ｂ，Ｃ，ＤおよびＥは、参考として
記載したものである。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ セラチオペプチダーゼを含有する溶液に乳糖
    を添加して溶解または懸濁後凍結乾燥することを
    特徴とするセラチオペプチダーゼの安定化法。 ２ 乳糖の量がセラチオペプチダーゼ量の約0.5
    ないし1.5倍量（重量比）である特許請求の範囲
    第１項記載のセラチオペプチダーゼの安定化法。
JP56215724A 1981-12-28 1981-12-28 セラチオペプチタ−ゼの安定化法 Granted JPS58134991A (ja)

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JP56215724A JPS58134991A (ja) 1981-12-28 1981-12-28 セラチオペプチタ−ゼの安定化法
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GR70166A GR78417B (ja) 1981-12-28 1982-12-23
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PT76042B (en) 1986-01-27
PT76042A (en) 1983-01-01
KR870000237B1 (ko) 1987-02-18
IT8268523A1 (it) 1984-06-27
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IT1157994B (it) 1987-02-18
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