JPH0224281B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0224281B2 JPH0224281B2 JP56120822A JP12082281A JPH0224281B2 JP H0224281 B2 JPH0224281 B2 JP H0224281B2 JP 56120822 A JP56120822 A JP 56120822A JP 12082281 A JP12082281 A JP 12082281A JP H0224281 B2 JPH0224281 B2 JP H0224281B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- acid
- glucose
- polysaccharide
- mannose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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- Coloring (AREA)
- Treatments For Attaching Organic Compounds To Fibrous Goods (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
- Emulsifying, Dispersing, Foam-Producing Or Wetting Agents (AREA)
- Paper (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規多糖類さらに詳しくは、エンテロ
バクター属（Enterobacter）に属する細菌から
産生される新規な多糖類に関する。
バクター属（Enterobacter）に属する細菌から
産生される新規な多糖類に関する。
本発明者らは微生物による多糖類の生産につい
て研究を重ねた結果、エンテロバクター属に属す
る細菌が極めて水溶性であり、塩の存在下におい
ても粘度が低下しないという興味のある多糖類を
産生することを見出し、本発明を完成した。
て研究を重ねた結果、エンテロバクター属に属す
る細菌が極めて水溶性であり、塩の存在下におい
ても粘度が低下しないという興味のある多糖類を
産生することを見出し、本発明を完成した。
本発明の多糖類は、たとえば次のような方法で
製造することができる。
製造することができる。
エンテロバクター属に属し、該多糖類を生産す
る能力を有する細菌を栄養培地に培養し、その
液から、生成した多糖類を常法に従つて沈澱、精
製して製造することができる。
る能力を有する細菌を栄養培地に培養し、その
液から、生成した多糖類を常法に従つて沈澱、精
製して製造することができる。
本発明において用いることのできる微生物とし
ては、エンテロバクター・ニチデニイ
（Enterobacter nichidenii）（微工研菌奇第5928
号）が典型的な例として挙げられる。上記の微工
研菌奇第5928号は工業技術院微生物工業技術研究
所の受託番号を表わす。
ては、エンテロバクター・ニチデニイ
（Enterobacter nichidenii）（微工研菌奇第5928
号）が典型的な例として挙げられる。上記の微工
研菌奇第5928号は工業技術院微生物工業技術研究
所の受託番号を表わす。
本菌の菌学的性質は以下のとおりである。
１ 形態的性質
形 態：単桿菌 胞子を形成しない
運動性：あり
大きさ：1.0〜1.5×1.5〜2.0μ
グラム染色：陰性
抗酸性：陰性
鞭 毛：周毛
２ 各培地における生育状態
(1) 肉汁液体培養 白濁する
(2) リトマスミルク 赤変する
(3) 肉汁寒天平板培養 円形、縁辺entire
平滑、少しもり上がる
白色
(4) 肉汁寒天斜面培養 糸状、平滑、白色
(5) グルコース肉汁寒
天培養 円形、平滑、白色
(6) 肉汁ゼラチン穿刺
培養 液化せず
(7) ゼラチン穿刺培養 液化せず
３ 生理学的性質
(1) 最適生育温度 37℃
(2) 生育PH ５〜10 最適生育PH ７〜８
(3) 酸素要求性 通性嫌気的
(4) インドール生成 陰性
(5) 硫化水素生成 陰性
(6) 硫酸塩の還元 陽性
(7) 脱窒反応 陽性
(8) メチルレツド試験 陰性
(9) Ｖ−Ｐ 反応 陽性
(10) でんぷんの分解 陰性
(11) カタラーゼ 陽性
(12) オキシダーゼ 陰性
(13) クエン酸の利用 陽性
(14) 無機窒素源の利用 （NH4）2SO4，NaNO3
を利用する (15) ウレアーゼ 陽性 (16) Ｏ−Ｆテスト 醗酵的 (17) 色素の生成 キングＡ培地で色素生成せず キングＢ培地で蛍光色素生成せず (18) 炭素化合物の利用 マンノース（＋）、ラム
ノース（＋）、ソルビツト（＋）、フラ
クトース（＋）、マルトース（＋）、ラ
フイノース（＋）、グリセリン（＋）、
キシロース（＋）、でんぷん（＋）、ガ
ラクトース（＋）、アラビノース
（＋）、グルコース（＋）、リボース
（＋）、シヨ糖（＋）、乳糖（＋）、マン
ニツト（−）、マロン酸（＋）、イノシ
ツト（＋）、トレハロース（＋）、
（＋：生育する、酸・ガス発生する、
−：生育せず） (19) フエニルアラニン脱アミン反応 陰性 (20) KCN存在下の生育 陰性 （以上の菌学的諸性質をもとにして、バージー
のマニユアル・オブ・デイタミネテイブ・バクテ
リオロジー（Bergey′s Manual of
determinative bacteriology）第８版により検索
した。） 本菌株はグラム陰性桿菌、発酵的、カタラーゼ
陽性、オキシダーゼ陰性、硝酸塩の還元陽性より
エンテロバクテリアシー科
（Enterobacteriaceae）に属する。
を利用する (15) ウレアーゼ 陽性 (16) Ｏ−Ｆテスト 醗酵的 (17) 色素の生成 キングＡ培地で色素生成せず キングＢ培地で蛍光色素生成せず (18) 炭素化合物の利用 マンノース（＋）、ラム
ノース（＋）、ソルビツト（＋）、フラ
クトース（＋）、マルトース（＋）、ラ
フイノース（＋）、グリセリン（＋）、
キシロース（＋）、でんぷん（＋）、ガ
ラクトース（＋）、アラビノース
（＋）、グルコース（＋）、リボース
（＋）、シヨ糖（＋）、乳糖（＋）、マン
ニツト（−）、マロン酸（＋）、イノシ
ツト（＋）、トレハロース（＋）、
（＋：生育する、酸・ガス発生する、
−：生育せず） (19) フエニルアラニン脱アミン反応 陰性 (20) KCN存在下の生育 陰性 （以上の菌学的諸性質をもとにして、バージー
のマニユアル・オブ・デイタミネテイブ・バクテ
リオロジー（Bergey′s Manual of
determinative bacteriology）第８版により検索
した。） 本菌株はグラム陰性桿菌、発酵的、カタラーゼ
陽性、オキシダーゼ陰性、硝酸塩の還元陽性より
エンテロバクテリアシー科
（Enterobacteriaceae）に属する。
さらにメチルレツド陰性、Ｖ−Ｐ反応陽性、フ
エニルアラニン脱アミノ反応陰性、硝酸塩の還元
陽性、ウレアーゼ陽性、最適生育温度37℃、
KCN存在下の生育陰性、である特徴を有する。
これらの特徴をすべて満足する族はないがKCN
存在下の生育を除き、族クレブシラエ
（Klebsielleae）に合致する。本菌が族に包含
されるものとして検索を行なうと、本菌ともつと
も近い性質を有する属は、運動性あり、ソルビツ
ト利用陽性、赤色色素の生成陰性などの性質から
エンテロバクター属と考えられる。
エニルアラニン脱アミノ反応陰性、硝酸塩の還元
陽性、ウレアーゼ陽性、最適生育温度37℃、
KCN存在下の生育陰性、である特徴を有する。
これらの特徴をすべて満足する族はないがKCN
存在下の生育を除き、族クレブシラエ
（Klebsielleae）に合致する。本菌が族に包含
されるものとして検索を行なうと、本菌ともつと
も近い性質を有する属は、運動性あり、ソルビツ
ト利用陽性、赤色色素の生成陰性などの性質から
エンテロバクター属と考えられる。
以上述べた通り、本菌はエンテロバクター属の
既知種およびその他の既知種とも重要な細菌学的
性質において異なる。よつて本菌はエンテロバク
ター属の新種として認めることが妥当であり、ニ
チデニイ（Nichidenii）という種形容名を与え
る。
既知種およびその他の既知種とも重要な細菌学的
性質において異なる。よつて本菌はエンテロバク
ター属の新種として認めることが妥当であり、ニ
チデニイ（Nichidenii）という種形容名を与え
る。
本菌を培養する場合、栄養培地の炭素源として
は一般に用いられている物質（たとえばグルコー
ス、シヨ糖、でん粉分解物など）を約20〜100
ｇ／、窒素源としては、酵母エキス、ペプト
ン、デイステイラーズソルブル、硫酸アンモニウ
ム、硝酸ナトリウムなどを窒素源として約１〜10
ｇ／、さらに、無機塩類としてリン酸塩源約
0.3〜２ｇ／、マグネシウム源約0.1〜２ｇ／
、カリウム源約0.3〜２ｇ／、カルシウム源
約0.05〜10ｇ／、硫酸塩源約0.1〜２ｇ／、
を処方する。これらの無機塩類の例としては
KH2PO4，K2HPO4，MgSO4，CaCO3などが挙
げられる。これら成分を水道水に加えてなる培地
に上記微生物を接種し、常法により好気的に震盪
培養する。
は一般に用いられている物質（たとえばグルコー
ス、シヨ糖、でん粉分解物など）を約20〜100
ｇ／、窒素源としては、酵母エキス、ペプト
ン、デイステイラーズソルブル、硫酸アンモニウ
ム、硝酸ナトリウムなどを窒素源として約１〜10
ｇ／、さらに、無機塩類としてリン酸塩源約
0.3〜２ｇ／、マグネシウム源約0.1〜２ｇ／
、カリウム源約0.3〜２ｇ／、カルシウム源
約0.05〜10ｇ／、硫酸塩源約0.1〜２ｇ／、
を処方する。これらの無機塩類の例としては
KH2PO4，K2HPO4，MgSO4，CaCO3などが挙
げられる。これら成分を水道水に加えてなる培地
に上記微生物を接種し、常法により好気的に震盪
培養する。
培養終了後、蓄積された多糖類は使用目的によ
り種々の方法で採取することができる。例えば、
培養液を過あるいは遠心分離などして菌体を分
離し、その液からイソプロパノールのようなア
ルコール添加により生成した多糖類を沈澱させ、
これを水に溶解後、第４級アンモニウム塩による
再沈澱、イオン交換樹脂による吸着のような方法
で精製して目的とする多糖類を得る。
り種々の方法で採取することができる。例えば、
培養液を過あるいは遠心分離などして菌体を分
離し、その液からイソプロパノールのようなア
ルコール添加により生成した多糖類を沈澱させ、
これを水に溶解後、第４級アンモニウム塩による
再沈澱、イオン交換樹脂による吸着のような方法
で精製して目的とする多糖類を得る。
エンテロバクテリアシー科に属するいくつかの
細菌が多糖類を産生することが知られており、渡
辺敏幸・瀬口正晴等（昭和45年日本農芸化学会大
会要旨集（1970）281頁）は、エシエリヒア
（Esherichia）がグルコース：マンノース：ラム
ノース＝５：３：２（モル比）からなる多糖類を
産生することを報告している。また三崎旭等（生
化学、39巻（1967年）542頁）はアエロバクター
（Aerobacter）がガラクトース：グルクロン酸：
マンノース＝2.5：0.8：１（モル比）からなる多
糖類を産生することを報告している。
細菌が多糖類を産生することが知られており、渡
辺敏幸・瀬口正晴等（昭和45年日本農芸化学会大
会要旨集（1970）281頁）は、エシエリヒア
（Esherichia）がグルコース：マンノース：ラム
ノース＝５：３：２（モル比）からなる多糖類を
産生することを報告している。また三崎旭等（生
化学、39巻（1967年）542頁）はアエロバクター
（Aerobacter）がガラクトース：グルクロン酸：
マンノース＝2.5：0.8：１（モル比）からなる多
糖類を産生することを報告している。
本発明の多糖類は構成糖、化学的物理的性質に
おいて、これら公知の多糖類と異なりつぎの特徴
を有する。
おいて、これら公知の多糖類と異なりつぎの特徴
を有する。
(1) 構成糖はグルコース、マンノースおよびガラ
クチユロン酸で、その組成比（モル比）はグル
コース：マンノース：ガラクチユロン酸＝１：
0.5〜1.0：0.3〜0.8である。
クチユロン酸で、その組成比（モル比）はグル
コース：マンノース：ガラクチユロン酸＝１：
0.5〜1.0：0.3〜0.8である。
(2) アセチル化度約０〜1.0でアセチル化されて
おり、加水分解物のエーテル抽出物をガスクロ
マトグラフイーに付して有機酸の分析を行うと
酢酸が検出される。
おり、加水分解物のエーテル抽出物をガスクロ
マトグラフイーに付して有機酸の分析を行うと
酢酸が検出される。
(3) ゲル過法による分子量測定で103〜107の分
子量を示す。
子量を示す。
(4) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す。
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す。
(5) メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルなどの有機溶媒には不溶、水には可溶（この
水溶液は無色透明である）である。
ルなどの有機溶媒には不溶、水には可溶（この
水溶液は無色透明である）である。
(6) 赤外線吸収スペクトルは下記のピークを有す
る。
る。
790cm-1、860cm-1、1250cm-1、1400cm-1、
1600cm-1、1710cm-1 (7) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した場合、102〜
105cpである。
1600cm-1、1710cm-1 (7) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した場合、102〜
105cpである。
(8) 10％ｗ／ｖ塩化ナトリウム、又は10％ｗ／ｖ
塩化カルシウム水溶液の存在下において、粘度
は低下しない。粘度計および測定条件は(7)のも
のと同じである。
塩化カルシウム水溶液の存在下において、粘度
は低下しない。粘度計および測定条件は(7)のも
のと同じである。
本発明の多糖類は各種の食品および工業分野に
おいて、増粘剤、賦型剤、ゲル化剤、エマルジヨ
ン安定剤、捺染用糊剤、サイジング用糊剤、凝集
剤などとして広く利用することができる。
おいて、増粘剤、賦型剤、ゲル化剤、エマルジヨ
ン安定剤、捺染用糊剤、サイジング用糊剤、凝集
剤などとして広く利用することができる。
つぎに実施例を挙げて、本発明をさらに詳しく
説明する。
説明する。
実施例 １
培地１当りグルコース50ｇ、酵母エキス５
ｇ、K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO310ｇを含む液体培地（PH7.0
オートクレブ中、120℃20分間滅菌）100mlを入れ
た500ml坂口フラスコにエンテロバクターニチデ
ニイ（微工研菌奇第5928号）を１白金耳接種し、
軌道シエーカー上、200r.p.m.で震盪し、30℃で
96時間培養した。培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去しこれにイソプロパノールを加え
て沈でんを生じさせた。沈澱を取し、105℃で
24時間乾燥して、多糖８ｇ／を得た。
ｇ、K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO310ｇを含む液体培地（PH7.0
オートクレブ中、120℃20分間滅菌）100mlを入れ
た500ml坂口フラスコにエンテロバクターニチデ
ニイ（微工研菌奇第5928号）を１白金耳接種し、
軌道シエーカー上、200r.p.m.で震盪し、30℃で
96時間培養した。培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去しこれにイソプロパノールを加え
て沈でんを生じさせた。沈澱を取し、105℃で
24時間乾燥して、多糖８ｇ／を得た。
上記多糖類を、90％ギ酸にて100℃16時間加水
分解し、さらに2Nトリフルオロ酢酸にて100℃５
時間加水分解して得た糖をペーパクロマトグラフ
イーおよびガスクロマトグラフイーに付したとこ
ろ、そのRf値および保持時間から、構成糖はグ
ルコース：マンノース：ガラクチユロン酸＝１：
0.56：0.72であつた。またアセチル化度は０、ゲ
ル過法による分子量は103であつた。
分解し、さらに2Nトリフルオロ酢酸にて100℃５
時間加水分解して得た糖をペーパクロマトグラフ
イーおよびガスクロマトグラフイーに付したとこ
ろ、そのRf値および保持時間から、構成糖はグ
ルコース：マンノース：ガラクチユロン酸＝１：
0.56：0.72であつた。またアセチル化度は０、ゲ
ル過法による分子量は103であつた。
実施例 ２
エンテロバクター・ニチデニイ（微工研菌奇第
5928号）を培地１当りグルコース50ｇ、ポリペ
プトン２ｇ、K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、
MgSO4・7H2O0.3ｇ、CaCO310ｇを含む液体培
地（PH7.0オートクレーブ中120℃20分間滅菌）
100mlを入れた500ml坂口フラスコに、１白金耳接
種し、実施例１と同様に培養した。培養中、培地
のPHを1NNaOHの添加によつて7.0に保持した。
培養後、実施例１と同様にして多糖20ｇ／を得
た。
5928号）を培地１当りグルコース50ｇ、ポリペ
プトン２ｇ、K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、
MgSO4・7H2O0.3ｇ、CaCO310ｇを含む液体培
地（PH7.0オートクレーブ中120℃20分間滅菌）
100mlを入れた500ml坂口フラスコに、１白金耳接
種し、実施例１と同様に培養した。培養中、培地
のPHを1NNaOHの添加によつて7.0に保持した。
培養後、実施例１と同様にして多糖20ｇ／を得
た。
上記多糖類を実施例１と同様にして加水分解し
て得た糖をペーパークロマトグラフイー、および
ガスクロマトグラフイーに付したところ、その構
成糖はグルコース：マンノース：ガラクチユロン
酸＝１：0.92：0.34であつた。またアセチル化度
は0.86、分子量は107であつた。
て得た糖をペーパークロマトグラフイー、および
ガスクロマトグラフイーに付したところ、その構
成糖はグルコース：マンノース：ガラクチユロン
酸＝１：0.92：0.34であつた。またアセチル化度
は0.86、分子量は107であつた。
第１図は本発明の多糖類の赤外線吸収スペクト
ルである。
ルである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記の性質を有する多糖類。 (イ) 構成糖がグルコース、マンノースおよびガラ
クチユロン酸で、そのモル比がグルコース：マ
ンノース：ガラクチユロン酸＝１：0.5〜1.0：
0.3〜0.8である、 (ロ) アセチル化度が０〜1.0である、 (ハ) ゲル濾過法による分子量測定で103〜107の分
子量を示す、 (ニ) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す、 (ホ) メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルなどの有機溶媒に不溶、水には可溶である。 (ヘ) 赤外線吸収スペクトルは下記にピークを有す
る、 790cm-1、860cm-1、1250cm-1、1400cm-1、
1600cm-1、1710cm-1 (ト) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した場合、102〜
105cpである。 (チ) 10％ｗ／ｖ塩化ナトリウム、または10％ｗ／
ｖ塩化カルシウウムの水溶液の存在下におい
て、粘度は低下しない。粘度計および測定条件
は(ト)と同条件である。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56120822A JPS5821401A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56120822A JPS5821401A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5821401A JPS5821401A (ja) | 1983-02-08 |
| JPH0224281B2 true JPH0224281B2 (ja) | 1990-05-29 |
Family
ID=14795815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56120822A Granted JPS5821401A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5821401A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3558805B2 (ja) * | 1996-12-27 | 2004-08-25 | 三栄源エフ・エフ・アイ株式会社 | 紙 |
| JP2024013167A (ja) * | 2022-07-19 | 2024-01-31 | 国立大学法人 琉球大学 | 多糖の製造方法 |
-
1981
- 1981-08-01 JP JP56120822A patent/JPS5821401A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5821401A (ja) | 1983-02-08 |
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