JPH0229075B2

JPH0229075B2 - Toriputofuannoshosekiho

Info

Publication number: JPH0229075B2
Application number: JP11223083A
Authority: JP
Inventors: Tetsuya Kaneko; Toshio Kitahara
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1983-06-22
Filing date: 1983-06-22
Publication date: 1990-06-27
Anticipated expiration: 2003-06-22
Also published as: JPS604168A

Description

【発明の詳細な説明】本発明はトリプトフアンをアルカリ水溶液とし
て、酢酸又は酢酸の水溶液中に添加することによ
りトリプトフアンを晶析する方法に関するもので
ある。

トリプトフアンは、必須アミノ酸の一つであ
り、人体又は家畜の栄養源として有用である。こ
れらに用いるトリプトフアンは品質のより高いも
のが要望されている。

製造法としては化学合成法、酵素法、発酵法等
が行われている。これらの製造過程におけるトリ
プトフアンの分離精製法としては、金属塩を添加
してセラミ体の複塩を形成する方法（特公昭50−
11914）、陰イオンおよび陽イオン交換樹脂を用い
る方法（特開昭53−111061）、或いは吸着樹脂と
限外過膜を組合せた方法（特開昭58−895）等
がある。

しかしながら、トリプトフアンは着色物質と共
に樹脂に吸、脱着する傾向が強いので、これらの
不純物を除くためには複雑な工程および操作が必
要とされる。また、晶析中に着色物質等の不純物
がトリプトフアン結晶に吸着、混入し易い。これ
ら不純物の混入を防ぐためにアルコールなどの有
機溶媒を用いて晶析する方法もあるが溶媒の回収
など工程が煩雑になる。

このようにトリプトフアンの吸着親和性が大な
るために、着色物質等の不純物を容易に除去する
手段がない。

本発明者らは、着色物質等の不純物を晶析によ
つて除去する検討を重ねた結果、トリプトフアン
のアルカリ水溶液を酢酸又は30％以上の酢酸水溶
液中に添加して中和晶析することにより、極端に
品質が向上することを見い出した。

すなわち、トリプトフアンのアルカリ水溶液を
酢酸又は30％以上の酢酸水溶液中に徐々に添加し
ながら中和晶析を行うと、添加の進行にともなつ
てトリプトフアンの起晶と結晶成長が除々に進行
し、光沢のある六角板状の大きな結晶が得られ
る。

これは中和晶析によるトリプトフアンの起晶と
結晶成長の過程において高濃度の酢酸の存在が不
純物による起晶および結晶成長の阻害作用を抑制
しているものと考えられる。これに対して、トリ
プトフアンのアルカリ水溶液中に酢酸又は酢酸水
溶液を徐々に添加しながら中和晶析を行うと、微
細な結晶の集合晶になり着色物質等の不純物混入
が多い。

中和晶析に用いるトリプトフアンのアルカリ水
溶液のアルカリはNaOH，KOH，LiOH，
NH₄OH等いずれでもよく、その量はトリプトフ
アンを溶解するのに十分な量があればよい。

トリプトフアンのアルカリ水溶液のトリプトフ
アン濃度は約５〜40％程度でよい。これより濃度
が高いと粘性が増して添加晶析がやりにくい。濃
度が低すぎると晶析液量が多くなつてトリプトフ
アンの晶析率が下るのみならず、晶析液中の酢酸
濃度が低下するために不純物の淘汰性が悪くな
る。

酢酸又は30％以上の酢酸水溶液の量は多いほど
トリプトフアン結晶の品質は向上するが、晶析率
が下ることと酢酸消費量が増す点においてあまり
得策ではない。酢酸水溶液の酢酸濃度は高いほど
よい。30％より低くなるとトリプトフアンは微細
な結晶になり品質が低下する。また、酢酸又はそ
の水溶液の所要量は、添加するべきトリプトフア
ンのアルカリ水溶液の量とアルカリ濃度とによつ
て決まるものであり、その目安としては中和晶析
終了時のPHが２〜６程度がよい。

トリプトフアンのアルカリ水溶液を添加して中
和晶析を行うときの温度は高い方が結晶性状はよ
いが、あまり高温になると晶析液の着色が増加す
る傾向がみられるので好ましくは30〜60℃程度が
よい。

添加速度は結晶成長に見合つた程度が望まし
く、１〜５時間程度でよい。

中和を終了したら徐々に冷却晶析を行い常温附
近で熟成したのち分離する。

本発明の方法は、トリプトフアンを含有する水
溶液からトリプトフアン結晶を取得する際に広く
適用できるが、特に着色物質を含む発酵液、酵素
反応液由来の不純物を除去する効果が大きい。

このような例として、発酵液、酵素反応液、及
びそれらの除菌液、或いはそれらをイオン交換樹
脂、非イオン系樹脂、限外過、逆浸透過等で
精製処理した液、これらの液からトリプトフアン
を晶析分離した母液又はその結晶（粗結晶）の溶
解液等、さらに合成液、ラセミ化液、DL体を分
割した後の光学活性体の晶析分離等を挙げること
ができる。

取得した結晶中の酢酸を除去するには、分離結
晶を水洗浄したのち60〜80℃で約10〜20時間程度
の減圧乾燥すればよい。

また、本発明の方法は、別法で得られたトリプ
トフアンの結晶であつても、その晶癖が微細な結
晶の集合晶であるなど望ましくないものであると
きは、その晶癖の改良に利用できることは容易に
理解されよう。

以下実施例によつて具体的に述べる。

実施例１Ｌ―トリプトフアン発酵液（特開昭56−92796）
を強酸性陽イオン交換樹脂に通してＬ―トリプト
フアンを吸着させたのち、水で樹脂をよく洗浄し
てから2N NaOH溶液で溶離した。この溶離液を
濃縮して、トリプトフアンのアルカリ水溶液（ト
リプトフアン含量30.3％、PH12.2）を得た。

この濃縮液150ｇをとり、50ml酢酸中へ添加す
ることにより45℃で２時間かけて中和晶析（終了
PH3.4）したのち25℃まで冷却した。

析出結晶を遠心分離した後その結晶上に水50ml
を噴霧して洗浄した。これを70℃で減圧乾燥して
Ｌ―トリプトフアン結晶43.6ｇ（純度98.8％、収
率94.7％）を得た。

この結晶の透過率は77.5％であつた（Ｃ＝１、
水、430nm）。

比較例１実施例１で得た濃縮液450ｇ中へ、酢酸150mlを
添加することにより45℃で２時間かけて中和晶析
（終了PH3.3）した。そののち25℃まで冷却してか
ら遠心分離した結晶上に水150mlを噴霧して洗浄
した。これを70℃で減圧乾燥してＬ―トリプトフ
アン結晶133ｇ（純度97.6％、収率95.2％）を得
た。

この結晶の透過率は58.3％であつた。（実施例
１と同様にして測定）。

実施例２比較例１で得た結晶40ｇとKOH11ｇを水200ml
に溶解してから過したトリプトフアンのアルカ
リ水溶液を、50％酢酸水溶液100ml中へ添加する
ことにより30℃、５時間で中和晶析したのち20℃
まで冷却した。

析出した結晶を遠心分離してから結晶上に50％
酢酸水溶液20mlを噴霧してから更に水50mlで洗浄
した。これを70℃で減圧乾燥してＬ―トリプトフ
アン結晶36.2ｇ（純度99.5％、収率92.3％）を得
た。

この結晶の透過率は98.1％であつた（実施例１
と同様にして測定）。

実施例３Ｌ―トリプトフアン（純度98.5％、透過率87.2
％）10ｇとNaOH4ｇを水50mlに溶解し、200℃、
２時間加熱してラセミ化した。

このラセミ化液を過してから、酢酸20ml中へ
添加することにより、30℃、３時間で中和晶析し
た。

これを過し、結晶を酢酸５ml、更に水10mlで
洗浄したのち70℃で減圧乾燥してDL―トリプト
フアン結晶8.3ｇ（純度99.3％、収率83.7％）を得
た。

この結晶の透過率は92.6％であつた（Ｃ＝１、
1N HCl、430nm）。

また比旋光度は０であつた（Ｃ＝１、2N
HCl）。

Claims

【特許請求の範囲】

１トリプトフアンを含むアルカリ水溶液を、酢
酸又は30％以上の酢酸水溶液中に添加することを
特徴とするトリプトフアンの晶析法。